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特開2024-31642可視光によりリボフラビンの生理作用を増強するための美容方法
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公開特許公報(A)
(11)【公開番号】P2024031642
(43)【公開日】2024-03-07
(54)【発明の名称】可視光によりリボフラビンの生理作用を増強するための美容方法
(51)【国際特許分類】
A61K 8/49 20060101AFI20240229BHJP
A61Q 19/00 20060101ALI20240229BHJP
A61K 8/27 20060101ALI20240229BHJP
A61K 31/525 20060101ALI20240229BHJP
A61K 47/02 20060101ALI20240229BHJP
A61P 17/00 20060101ALI20240229BHJP
A61Q 19/08 20060101ALI20240229BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20240229BHJP
【ＦＩ】
A61K8/49
A61Q19/00
A61K8/27
A61K31/525
A61K47/02
A61P17/00
A61Q19/08
A61P43/00 111
【審査請求】未請求
【請求項の数】8
【出願形態】ＯＬ
(21)【出願番号】P 2022135313
(22)【出願日】2022-08-26
(71)【出願人】
【識別番号】000001959
【氏名又は名称】株式会社 資生堂
(74)【代理人】
【識別番号】100099759
【弁理士】
【氏名又は名称】青木 篤
(74)【代理人】
【識別番号】100123582
【弁理士】
【氏名又は名称】三橋 真二
(74)【代理人】
【識別番号】100117019
【弁理士】
【氏名又は名称】渡辺 陽一
(74)【代理人】
【識別番号】100141977
【弁理士】
【氏名又は名称】中島 勝
(74)【代理人】
【識別番号】100138210
【弁理士】
【氏名又は名称】池田 達則
(74)【代理人】
【識別番号】100166165
【弁理士】
【氏名又は名称】津田 英直
(72)【発明者】
【氏名】仲西 城太郎
(72)【発明者】
【氏名】宮沢 和之
【テーマコード（参考）】
4C076
4C083
4C086
【Ｆターム（参考）】
4C076BB31
4C076CC18
4C076DD29
4C076FF70
4C083AB211
4C083AC851
4C083AC852
4C083BB51
4C083CC03
4C083EE12
4C083EE13
4C086AA01
4C086AA02
4C086CB09
4C086MA01
4C086MA02
4C086MA04
4C086MA05
4C086MA63
4C086NA14
4C086ZA89
4C086ZC20
4C086ZC41
(57)【要約】 （修正有）
【課題】可視光の照射により、薬効が増大する成分を取得することを課題とする。
【解決手段】紫外線は、マトリクスプロテイナーゼ及び／又は炎症性サイトカインの発現を促進する。リボフラビンはこうして亢進された発現を抑制する生理作用を発揮する。一方、可視光下におかれることで、リボフラビンの生理作用が増強され、マトリクスプロテイナーゼ及び／又は炎症性サイトカインの発現はさらに抑制されることを見出した。これにより、リボフラビンを含む皮膚外用剤を適用し、可視光を照射することを含む、リボフラビンの生理作用を増強するための美容方法、紫外線を可視光へと変換する波長変換物質と、リボフラビンとを含む、皮膚外用組成物、リボフラビンを含む皮膚外用剤と、可視光域の波長で、1000～10000Luｘの可視光を照射する美容照射器とを含む、美容キットを提供する。
【選択図】図１Ａ－Ｂ
【解決手段】紫外線は、マトリクスプロテイナーゼ及び／又は炎症性サイトカインの発現を促進する。リボフラビンはこうして亢進された発現を抑制する生理作用を発揮する。一方、可視光下におかれることで、リボフラビンの生理作用が増強され、マトリクスプロテイナーゼ及び／又は炎症性サイトカインの発現はさらに抑制されることを見出した。これにより、リボフラビンを含む皮膚外用剤を適用し、可視光を照射することを含む、リボフラビンの生理作用を増強するための美容方法、紫外線を可視光へと変換する波長変換物質と、リボフラビンとを含む、皮膚外用組成物、リボフラビンを含む皮膚外用剤と、可視光域の波長で、1000～10000Luｘの可視光を照射する美容照射器とを含む、美容キットを提供する。
【選択図】図１Ａ－Ｂ
【特許請求の範囲】
【請求項1】
リボフラビンを含む皮膚外用剤を適用し、可視光下におくことを含む、リボフラビンの生理作用を増強するための美容方法。
【請求項2】
リボフラビンの生理作用の増強により、肌荒れ、シワ、又はしみを抑制するか、或いは美白又は抗老化をもたらす、請求項１に記載の美容方法。
【請求項3】
リボフラビンの生理作用が、ケラチノサイトにおけるマトリクスプロテイナーゼ又は炎症性サイトカインの発現抑制である、請求項１に記載の美容方法。
【請求項4】
紫外線を可視光へと変換する波長変換剤と、リボフラビンとを含む、皮膚外用組成物。
【請求項5】
前記波長変換剤が、紫外線から可視光へ波長を変換し、可視光がリボフラビンの生理作用を増強する、請求項４に記載の皮膚外用組成物。
【請求項6】
前記波長変換剤が、紫外線を、４５０～７００ｎｍにピーク波長を有する可視光へと変換する、請求項５に記載の皮膚外用組成物。
【請求項7】
前記波長変換剤が、酸化亜鉛蛍光体である、請求項５に記載の皮膚外用組成物。
【請求項8】
リボフラビンを含む皮膚外用剤と、可視光域の波長で、１０００～１００００Ｌｕｘの可視光を照射する美容照射器とを含む、美容キット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、リボフラビンを含む皮膚外用剤を適用し、可視光下におくことを含む、リボフラビンの生理作用を増強するための美容方法、紫外線を可視光へと変換する波長変換物質とリボフラビンとを含む、皮膚外用組成物、並びにリボフラビンを含む皮膚外用剤と、可視光を照射する照射器とを含む、美容キットにも関する。
【背景技術】
【0002】
自然光は、主に紫外線、可視光、及び赤外線に大別される。紫外線は、皮膚癌、光老化、しみ、しわ、炎症といった悪影響を皮膚に及ぼすことが知られており、健康や美容の観点からも好ましくない。紫外線からから肌を防御するための方策が数多く取られている。例えば、日焼け止め剤の使用や、日光に当たらないような屋内での活動、ＵＶカット加工された帽子や衣類、紫外線カットフィルムの使用などが挙げられる。一方で、可視光には、細胞を活性化する効果を有することが報告されており、特定波長を有する可視光を照射する美容方法や美容機器が開発されている。一例として６３０ｎｍ程度の赤色光は、皮膚深部へと到達し、マクロファージの働きを向上すること、真皮細胞を活性化することなどが報告されている。より短い波長の黄色光や緑色光では、表皮細胞が活性化され、メラニン産生抑制などの作用や、角層ターンオーバーの向上などの効能が期待されている。紫外線を避けつつ、可視光の細胞作用を利用することを目的として、照射された紫外線の波長を吸収し、そしてより長い波長の光を放出する波長変換物質を利用した美容方法や化粧品の開発が進められている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0003】
【特許文献1】特許第6424656号公報
【特許文献2】特許第6361416号公報
【特許文献3】国際公開第2018/004006号
【特許文献4】特開2018-131422号公報
【特許文献5】特開平5-117127号公報
【特許文献6】特許第4048420号公報
【特許文献7】特許第4677250号公報
【特許文献8】特許第3303942号公報
【特許文献9】特開2017-88719号公報
【特許文献10】国際公開第2018/117117号
【非特許文献】
【0004】
【非特許文献1】PLoS One. 2016 Sep 20;11(9):e0161580. doi: 10.1371
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0005】
本発明の課題は、可視光により、薬効が増大する成分を取得することに関する。
【課題を解決するための手段】
【0006】
本発明者らは、薬効を有する成分のうち、可視光によりその薬効が増大する成分を見出だすため、スクリーニングを行ったところ、水溶性ビタミンの１種であるリボフラビンが可視光によりその薬効を増大可能な成分であることが見いだされた。より具体的に、リボフラビンは、炎症性サイトカインの発現抑制及びマトリクスプロテイナーゼ発現抑制という薬効を有しており、紫外線により亢進された発現を抑制することができるが、紫外線照射に加えて、可視光を照射することにより、炎症性サイトカイン及びマトリクスプロテイナーゼの発現がさらに抑制されることを見出し、本発明に至った。
そこで本願は、以下の発明を提供する。
［１］ リボフラビンを含む皮膚外用剤を適用し、可視光下におくことを含む、リボフラビンの生理作用を増強するための美容方法。
［２］ リボフラビンの生理作用の増強により、肌荒れ、シワ、又はしみを抑制するか、或いは美白又は抗老化をもたらす、項目１に記載の美容方法。
［３］ リボフラビンの生理作用が、ケラチノサイトにおけるマトリクスプロテイナーゼ又は炎症性サイトカインの発現抑制である、項目１に記載の美容方法。
［４］ 紫外線を可視光へと変換する波長変換剤と、リボフラビンとを含む、皮膚外用組成物。
［５］ 前記波長変換剤が、紫外線から可視光へ波長を変換し、可視光がリボフラビンの生理作用を増強する、項目４に記載の皮膚外用組成物。
［６］ 前記波長変換剤が、紫外線を、４５０～７００ｎｍ、４５０～６００ｎｍ、又は５００～５５０ｎｍにピーク波長を有する可視光へと変換する、項目５に記載の皮膚外用組成物。
［７］ 前記波長変換剤が、酸化亜鉛蛍光体である、項目５に記載の皮膚外用組成物。
［８］ リボフラビンを含む皮膚外用剤と、可視光域の波長で、１０００～１００００Ｌｕｘの可視光を照射する美容照射器とを含む、美容キット。
そこで本願は、以下の発明を提供する。
［１］ リボフラビンを含む皮膚外用剤を適用し、可視光下におくことを含む、リボフラビンの生理作用を増強するための美容方法。
［２］ リボフラビンの生理作用の増強により、肌荒れ、シワ、又はしみを抑制するか、或いは美白又は抗老化をもたらす、項目１に記載の美容方法。
［３］ リボフラビンの生理作用が、ケラチノサイトにおけるマトリクスプロテイナーゼ又は炎症性サイトカインの発現抑制である、項目１に記載の美容方法。
［４］ 紫外線を可視光へと変換する波長変換剤と、リボフラビンとを含む、皮膚外用組成物。
［５］ 前記波長変換剤が、紫外線から可視光へ波長を変換し、可視光がリボフラビンの生理作用を増強する、項目４に記載の皮膚外用組成物。
［６］ 前記波長変換剤が、紫外線を、４５０～７００ｎｍ、４５０～６００ｎｍ、又は５００～５５０ｎｍにピーク波長を有する可視光へと変換する、項目５に記載の皮膚外用組成物。
［７］ 前記波長変換剤が、酸化亜鉛蛍光体である、項目５に記載の皮膚外用組成物。
［８］ リボフラビンを含む皮膚外用剤と、可視光域の波長で、１０００～１００００Ｌｕｘの可視光を照射する美容照射器とを含む、美容キット。
【発明の効果】
【0007】
本発明は、リボフラビンを含む皮膚外用剤を皮膚に適用後に、可視光下におくことにより、リボフラビンの生理作用が増強される。
【図面の簡単な説明】
【0008】
【発明を実施するための形態】
【0009】
本発明は、リボフラビンを含む皮膚外用剤を適用し、可視光下におくことを含む、リボフラビンの生理作用を増強するための美容方法に関する。
【0010】
本発明において、リボフラビンを含む皮膚外用剤が適用された皮膚が、可視光下におかれることで、リボフラビンの生理作用が亢進する。可視光は、照射器を用いて直接照射されてもよいし、波長変換物質を介して放出された光により間接的に照射されてもよい。可視光の照射とともに、紫外線が照射されてもよい。紫外線は、皮膚に対して有害な生理作用を引き起こしうる。一例として、活性酸素種の増大や、マトリクスプロテイナーゼの活性化、ＤＮＡ損傷の誘導などが挙げられる。また、紫外線は、マトリクスプロテイナーゼ及び／又は炎症性サイトカインの発現を亢進し、こうして亢進された発現を、リボフラビンは抑制する生理作用を発揮する。一方、可視光下におかれることで、リボフラビンの生理作用が増強され、マトリクスプロテイナーゼ及び／又は炎症性サイトカインの発現はさらに抑制される（図１）。可視光下におかれるとは、日常生活における電灯や太陽光への曝露であってもよいし、照射器を用いた可視光の照射であってもよい。太陽光に暴露される場合、太陽光に含まれる紫外線の影響を和らげるために、波長変換物質及び/又は紫外線吸収物質が併用されることが好ましい。本発明の美容方法は、例えば美容サロンなどで、医師以外の美容施術者により、特定の波長の可視光を照射可能な照射器を用いて行われうる。
【0011】
本発明において照射される可視光は、特にフラボノイドの生理作用を促進する観点から、４５０ｎｍ～７００ｎｍにピーク波長を有する可視光が使用され、可視光のピークはさらに４５０～６００ｎｍ、特に５００～５５０ｎｍに存在することが好ましい。赤色光を照射する観点では可視光のピーク範囲は６００～７００ｎｍが好ましく、黄色光を照射する観点では可視光のピーク範囲は５５０～６００ｎｍが好ましく、緑色光を照射する観点では可視光のピーク範囲は５００～５５０ｎｍが好ましい。可視光の強度は、適宜選択することができるが、１０００～１００００Ｌｕｘの間で適宜選択することができる。このような可視光の波長及び強度は、本技術分野に周知の照射器を用いることで照射することが可能である。所定のピーク範囲には単一のピークが存在することが好ましいが、２つ又は複数のピークが存在してもよい。ピークが重なることで、ピークの判別が難しくなっていてもよい。単一ピークの可視光を照射する観点から、照射器としてはＬＥＤを用いることが好ましい。また、発光体にたいしフィルムなどを用いてピーク範囲を絞ることもできる。
【0012】
本発明の皮膚外用剤は、リボフラビンを含んでいれば任意の皮膚外用剤であってもよく、リボフラビン含有エキスを含む皮膚外用剤であってもよい。このような皮膚外用剤は、医薬品、医薬部外品、化粧品等であってもよい。本発明の美容方法において用いる皮膚外用剤の剤型、塗布法、投与回数等は任意に決定できる。例えば、化粧水、スプレー、オイル、クリーム、乳液、ゲル、サンスクリーン剤、サンタン剤、といった形態であってもよい。本発明の美容方法における可視光照射前に、皮膚外用剤を１回又は複数回塗布し、その後すぐに、又は一定期間、例えば１０分～数時間あけて、可視光を照射してもよい。可視光の照射に代えて、屋外又は点灯された屋内で活動することで、可視光を照射されてもよい。
【0013】
リボフラビンは、ビタミンＢ２としても知られており、生体内では、脂肪、炭水化物、及びタンパク質の代謝や呼吸、赤血球の形成に寄与することが知られている。リボフラビンは、皮膚、爪、頭髪をはじめとした健康維持に不可欠であり、不足することで、口内炎、皮膚炎、角膜炎、脱毛、充血などの症状が引き起こされる。皮膚機能を正常に保つ観点から、化粧料や医薬品に配合されうる。リボフラビンの皮膚における作用として、ＵＶ誘導性の炎症性サイトカイン（ＩＬ－１α、ＧＭ－ＣＳＦ）のｍＲＮＡ発現抑制作用が示された（非特許文献１：PLoS One. 2016 Sep 20;11(9):e0161580. doi: 10.1371）。また、同文献では、リボフラビンの皮膚における作用として、ＵＶ誘導性のＭＭＰ１のｍＲＮＡ発現抑制作用が示された一方、ＭＭＰ１のタンパク質量は変化しないことが示されているた。
【0014】
炎症性サイトカインは、物理、化学、または生物的刺激を受けた細胞が放出し、炎症を誘発するサイトカインである。炎症性サイトカインが放出されると、炎症性サイトカイン放出部位への免疫細胞の集積を誘発し、また免疫細胞の活性化及び増殖を促進する。炎症性サイトカインとしては、ＩＬ－８、ＩＬ－６、ＩＬ－１β、ＩＬ－１α、ＩＬ－１０、ＩＮＦ－γ、ＴＮＦ－α、及びＧＭ－ＣＳＦが挙げられる。なかでも、ケラチノサイトで発現する観点から、炎症性サイトカインとしてＩＬ－８、ＴＮＦ－αが好ましい。炎症性サイトカイン発現が異常に亢進されることにより、肌荒れや、アトピー性皮膚炎、乾癬などの炎症性疾患の原因となり、またメラノサイトを活性化し肌色（スキントーン）の変調を引き起こしうる。したがって、炎症性サイトカインの発現を抑制することで、肌荒れ、しみを予防、軽減、治療又は抑制することができ、また抗老化作用及び美白作用を発揮することができる。
【0015】
マトリクスプロテイナーゼとしては、マトリクスメタロプロテイナーゼファミリーに属する任意のマトリクスプロテイナーゼであってよいが、特に皮膚において発現する観点から、ＭＭＰ１、ＭＭＰ２、ＭＭＰ９、及び／又はＭＭＰ１３が好ましい。マトリクスプロテイナーゼは、コラーゲン、プロテオグリカン、エラスチンなどからなる細胞外マトリクスを分解する。紫外線照射により皮膚、特に表皮及び／又は真皮においてマトリクスプロテイナーゼの発現が亢進し、細胞外マトリクスが分解され、シワやたるみの原因となる。また、分解物がシグナルとなり、種々の生理現象を引き起こしうる。したがって、マトリクスプロテイナーゼの発現を抑制することにより、シワを予防、軽減、治療又は抑制するか、或いは抗老化作用を発揮することができる。
【0016】
リボフラビンが、皮膚、特に表皮細胞における生理作用としては、炎症性サイトカイン及び／又はマトリクスプロテイナーゼ発現抑制作用が挙げられる。理論に限定されることを意図するものではないが、リボフラビンによりケラチノサイトにおいて炎症性サイトカイン及び／又はマトリクスプロテイナーゼ発現抑制し（図１）、それによりシワ、又はしみを抑制するか、或いは美白又は抗老化をもたらしうる。
【0017】
リボフラビンにより発揮される生理作用を発揮させるために、リボフラビンに代えて、リボフラビンを含むエキスを含む皮膚外用剤使用してもよい。このようなエキスとしては、リボフラビン、特にリボフラビンを含む原料から取得されたエキスが使用可能であり、一例として酵母エキス、キノコエキス、肉エキス、魚エキス、肝油などが使用されうる。
【0018】
本明細書に記載されるエキスは常法により得ることができ、例えばその起源となる植物を抽出溶媒とともに常温又は加熱して浸漬または加熱還流した後、濾過し、濃縮して得ることができる。抽出溶媒としては、通常抽出に用いられる溶媒であれば任意に用いることができ、例えば、水性溶媒、例えば水、生理食塩水、リン酸緩衝液、ホウ酸緩衝液、あるいは有機溶媒、例えばエタノール、プロピレングリコール、１,３－ブチレングリコール、グリセリン等のアルコール類、含水アルコール類、クロロホルム、ジクロルエタン、四塩化炭素、アセトン、酢酸エチル、ヘキサン等を、それぞれ単独あるいは組み合わせて用いることができる。好ましくは、溶媒として水とアルコール、例えば１,３－ブチレングリコールの混合溶媒が使用される。上記溶媒で抽出して得られた抽出物をそのまま、あるいは例えば凍結乾燥などにより濃縮したエキスを使用でき、また必要であれば吸着法、例えばイオン交換樹脂を用いて不純物を除去したものや、ポーラスポリマー（例えばアンバーライトＸＡＤ－２）のカラムにて吸着させた後、所望の溶媒で溶出し、さらに濃縮したものも使用することができる。
【0019】
本発明において波長変換物質は、特定の波長の入射光を吸収し、入射光よりも長い波長の出射光を放出する物質をいう。本発明の波長変換物質が吸収する入射光は、紫外線が好ましい。紫外線は、ＵＶＡ、ＵＶＢ、ＵＶＣ等を含んでもよい。ある実施形態では、紫外線は、２００ｎｍ～４００ｎｍにピーク波長を有する光である。また、例えば太陽光といった入射光に紫外線が含まれていてもよい。あるいは、入射光が紫外線であってもよく、人工的に生成された紫外線を用いてもよい。
【0020】
波長変換物質により放出される出射光は、紫外線よりも波長が長く、好ましくは４５０ｎｍ～７００ｎｍ、例えば５００ｎｍ～７００ｎｍ又は４５０～６００ｎｍ、さらに好ましくは５００～５５０ｎｍにピーク波長を有する。出射光は、例えば、限定されないものの、４５０ｎｍ、４６０ｎｍ、４７０ｎｍ、４８０ｎｍ、４９０ｎｍ、５００ｎｍ、５１０ｎｍ、５２０ｎｍ、５３０ｎｍ、５４０ｎｍ、５５０ｎｍ、５６０ｎｍ、５７０ｎｍ、５８０ｎｍ、５９０ｎｍ、６００ｎｍ、６１０ｎｍ、６２０ｎｍ、６３０ｎｍ、６４０ｎｍ、６５０ｎｍ、６６０ｎｍ、６７０ｎｍ、６８０ｎｍ、６９０ｎｍ、７００ｎｍ、あるいはこれらの数値の任意の範囲内に１又は複数のピークを有してもよいし、あるいは、赤色光、橙色光、緑色光、青色光等であってもよい。ある実施形態では、波長変換物質は、２００ｎｍ～４００ｎｍの励起光で励起した際に発する光の主波長が４５０ｎｍ～７００ｎｍ、例えば５００ｎｍ～７００ｎｍ又は４５０～６００ｎｍ、さらに好ましくは５００～５５０ｎｍを示す。
【0021】
波長変換物質の例として、以下の成分が挙げられる：アロフィコシアニン、Ｃ－フィコシアニン、Ｒ－フィコシアニン、フィコエリスロシアニン、Ｂ－フィコエリスリン、ｂ－フィコエリスリン、Ｃ－フィコエリスリン、Ｒ－フィコエリスリンなどのフィコビリ蛋白；ビタミンＡ、βカロテン、ビタミンＫ、ビタミンＢ１、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２、葉酸、ナイアシン、リコピン、クチナシ、ベニバナ、ウコン、コチニール、シソ、赤キャベツ、フラボノイド、カロテノイド、キノイド、ポルフィリン類、アントシアニン類、ポリフェノール類などの天然由来又は合成成分；赤色４０１号、赤色２２７号、赤色５０４号、赤色２１８号、橙色２０５号Ｐ、黄色４号、黄色５号、緑色２０１号、ピラニンコンク、青色１号、塩酸２、４－ジアミノフェノキシエタノール、アリズリンパープルＳＳ、紫色４０１号、黒色４０１号、へリンドンピンク、黄色４０１号、ベンチジンエローＧ、青色４０４号、赤色１０４号、メタアミノフェノールなどの色素；無機化合物にドープし蛍光を持たせた蛍光体、例えば、特許第6424656号に記載の非晶質シリカ粒子と、セリウムと、リン及び／又はマグネシウムとを含む青色蛍光体および特許第6361416号に記載のアルカリ土類金属硫化物とガリウム化合物との混晶物にユーロピウムを賦活した化合物を含む赤色蛍光体、国際公開第2018/004006号に記載の酸化亜鉛蛍光体、特開2018-131422号に記載の酸化亜鉛蛍光体；特開平5-117127号に記載の無機蛍光体;等が挙げられる。ある実施形態では、無機蛍光体は、ＺｎＯ：Ｚｎ、Ｚｎ1+z、ＺｎＯ1-xのように表すことができる酸化亜鉛を国際公開第２０１８／００４００６号に記載の、例えば硫化亜鉛、硫酸亜鉛等の硫化塩及び／又は硫酸塩といった硫黄含有化合物でドープした蛍光体、ＭｇＴｉＯ3、Ｍｇ2ＴｉＯ4といったチタン酸マグネシウムをマンガンでドープしたチタン酸マグネシウム蛍光体、及びＣａ（Ｈ2ＰＯ4）2、ＣａＨＰＯ4、Ｃａ3（ＰＯ4）2といったリン酸カルシウムをセリウムでドープしたリン酸カルシウム蛍光体から選択される１種又は複数種の蛍光体である。別の例では、酸化亜鉛蛍光体は、酸化亜鉛を還元焼成することで得られ、酸素欠陥を有しており、平均組成式はＺｎ1+zＯ又はＺｎＯ1-xで表されると考えられているものである。
【0022】
波長変換物質は、動物、植物、藻類等の天然物から抽出などの方法により得ても、化学的な合成といった人工的な方法により得てもよい。例えば、フィコビリ蛋白は、スピルリナ（Spirulina platensis）などの藍藻類、チノリモ（Porphyridium purpureum）などの紅藻類といった藻類を、例えば特許第4048420号、特許第4677250号、特許第3303942号等に記載の方法で抽出することにより調製してもよい。酸化亜鉛蛍光体は、例えば国際公開第2018/004006号、特開2018-131422号、特開平5-117127号に記載の方法により製造してもよい。チタン酸マグネシウム蛍光体は、特開2017-88719号に記載の方法により製造してもよい。リン酸カルシウム蛍光体は、国際公開第2018/117117号に記載の方法により製造してもよい。なかでも、変換後の波長が５００～５５０ｎｍである観点から、酸化亜鉛蛍光体が好ましい。
【0023】
これらの波長変換物質は、本発明の波長変換効果を損なわない限り、上で例示した成分から構成されてもよく、含まれていてもよく、単体で使用しても複数種を混合してもよい。例えば、上記フィコビリ蛋白や無機物蛍光体に他の波長変換物質、例えば、ビタミンＢ（ビタミンＢ１、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２等）を混合し相乗的な効果を目指してもよい。しかしながら、これらの成分は例示であり本発明の波長変換効果を奏するいかなる物質も使用可能である。
【0024】
本発明の別の態様は、紫外線を可視光へと変換する波長変換物質と、リボフラビンとを含む、皮膚外用組成物に関する。かかる皮膚外用組成物には、波長変換物質が、リボフラビンの生理作用増強剤として配合される。これにより、皮膚外用組成物を皮膚に適用し、光照射下におかれた場合に、波長変換物質が、紫外線から可視光へ波長を変換し、可視光がリボフラビンの生理作用を増強することができる。リボフラビンの生理作用を増強することにより、特に炎症性サイトカイン及び／又はマトリクスプロテイナーゼ発現抑制作用を亢進し、それにより肌荒れ、シワ、シミ、たるみ、皮膚老化（特に光老化）、紅斑、日焼けなどの炎症を抑制する作用を発揮することができる。したがって、本発明の皮膚外用組成物は、抗酸化酵素発現促進剤であってもよいし、肌荒れ、シワ、シミ、たるみ、皮膚老化の抑制剤、紅斑、日焼けなどの炎症抑制剤、或いは美白又は抗老化剤であってもよい。本発明に係る皮膚外用組成物は、定期的又は不定期的に、例えば、朝、昼、夕方など１日１回～数回、外出、野外活動、マリンスポーツ、スキーなど日差しを浴びることが予想される前などにその都度、皮膚に塗布するものであってよい。
【0025】
また、本発明の皮膚外用剤又は皮膚外用組成物は、必要に応じて、例えば、賦形剤、保存剤、増粘剤、結合剤、崩壊剤、分散剤、安定化剤、ゲル化剤、酸化防止剤、界面活性剤、保存剤、油分、粉末、水、アルコール類、増粘剤、キレート剤、シリコーン類、酸化防止剤、保湿剤、香料、各種薬効成分、防腐剤、pH調整剤、中和剤等の添加剤を任意に選択し併用することができる。さらに、本発明の効果を高めるために、他の細胞賦活化剤等を併用してもよい。
【0026】
本発明のさらなる態様では、本発明は、リボフラビンを含む皮膚外用剤と、可視光域の波長、特に４５０～７００ｎｍ、４５０～６００ｎｍ、又は５００～５５０ｎｍの波長で、１０００～１００００Ｌｕｘの可視光を照射する照射器とを含む、美容キットに関していてもよい。かかる美容キットは、購入者により使用されてもよいし、美容施術者により使用されてもよい。可視光を照射する照射器は、本技術分野に周知の照射器を用いることで照射することが可能である。所定のピーク範囲の可視光を照射する観点から、ＬＥＤを用いることが好ましい。
【実施例0027】
次に実施例によって本発明を更に詳細に説明する。なお、本発明はこれにより限定されるものではない。
【0028】
実験１：細胞培養
１．正常ヒト表皮角化細胞（KK-4109 クラボウ社）をHuMedia-KG2培地（KK-2150S クラボウ）を用いて培養した。
２．細胞が約５０％コンフルエントに達した後にEpiLife培地（MEPI500CA ThermoFisher社）に培地交換した。
３．２４時間後にリボフラビン添加群にはリボフラビン（R4500 Sigma-Ardrich社）を終濃度5μMになるように添加した。
４．リボフラビン添加24時間後、光照射に先立ち培地をHanks’Balanced Salt Solution（HBSS）に交換した。
５．紫外線（ＵＶＢ）照射群には、ＴＬ２０Ｗ／１２ＲＳランプ（PHILIPS）とＵＧ１１フィルター（SCHOTT社）を用いて１０ｍＪ／ｃｍ２照射した。
６．紫外線と可視光の両方を照射する群には、紫外線照射後にソーラシミュレータ（91192-1000 Newport社）とＫＧ１およびＧＧ４２０フィルター（SCHOTT社）を用いて可視光を照射した（波長４００ｎｍから８００ｎｍの積算照射量は５０Ｊ／ｃｍ２）。
７．光照射終了後に培地をHBSSからEpiLife培地に交換し、さらに２４時間培養した。リボフラビン添加群にはリボフラビンを終濃度５μＭになるように添加した。
１．正常ヒト表皮角化細胞（KK-4109 クラボウ社）をHuMedia-KG2培地（KK-2150S クラボウ）を用いて培養した。
２．細胞が約５０％コンフルエントに達した後にEpiLife培地（MEPI500CA ThermoFisher社）に培地交換した。
３．２４時間後にリボフラビン添加群にはリボフラビン（R4500 Sigma-Ardrich社）を終濃度5μMになるように添加した。
４．リボフラビン添加24時間後、光照射に先立ち培地をHanks’Balanced Salt Solution（HBSS）に交換した。
５．紫外線（ＵＶＢ）照射群には、ＴＬ２０Ｗ／１２ＲＳランプ（PHILIPS）とＵＧ１１フィルター（SCHOTT社）を用いて１０ｍＪ／ｃｍ２照射した。
６．紫外線と可視光の両方を照射する群には、紫外線照射後にソーラシミュレータ（91192-1000 Newport社）とＫＧ１およびＧＧ４２０フィルター（SCHOTT社）を用いて可視光を照射した（波長４００ｎｍから８００ｎｍの積算照射量は５０Ｊ／ｃｍ２）。
７．光照射終了後に培地をHBSSからEpiLife培地に交換し、さらに２４時間培養した。リボフラビン添加群にはリボフラビンを終濃度５μＭになるように添加した。
【0029】
実験２：ＲＴ－ＰＣＲ
１．実験１終了後直ちに、RNeasy Mini Kit（QIAGEN社）を製品説明書に沿って使用しRNAを抽出した。
２．各検体より抽出したＲＮＡサンプルについて、QuantiTect SYBR Green RT-PCR Kit（204243, QIAGEN）およびライトサイクラー（Roche社）を用いて製品説明書に従ってＲＴ－ＰＣＲ反応を行ない、ＩＬ８、ＴＮＦα、ＭＭＰ１、ＭＭＰ９および内部標準としてグリセルアルデヒド－３－リン酸デヒドロゲナーゼ（ＧＡＰＤＨ）のｍＲＮＡ量を定量した。実験に用いたプライマーの配列を以下に示す。
３．各サンプルのＧＡＰＤＨ発現量に対するＩＬ８、ＴＮＦα、ＭＭＰ１、ＭＭＰ９の相対発現量を求め、比較検討した。
１．実験１終了後直ちに、RNeasy Mini Kit（QIAGEN社）を製品説明書に沿って使用しRNAを抽出した。
２．各検体より抽出したＲＮＡサンプルについて、QuantiTect SYBR Green RT-PCR Kit（204243, QIAGEN）およびライトサイクラー（Roche社）を用いて製品説明書に従ってＲＴ－ＰＣＲ反応を行ない、ＩＬ８、ＴＮＦα、ＭＭＰ１、ＭＭＰ９および内部標準としてグリセルアルデヒド－３－リン酸デヒドロゲナーゼ（ＧＡＰＤＨ）のｍＲＮＡ量を定量した。実験に用いたプライマーの配列を以下に示す。
【表1】
３．各サンプルのＧＡＰＤＨ発現量に対するＩＬ８、ＴＮＦα、ＭＭＰ１、ＭＭＰ９の相対発現量を求め、比較検討した。
【0030】
以上、本発明の実施の形態について説明してきた。しかしながら、本発明はこれらに限定されるものではなく、化粧料、医薬品組成物等、発明の趣旨を逸脱しない範囲で適宜変更可能である。
【図1A-B】
【図1C-D】
【配列表】