特開 2024-32004 イムノクロマトテストストリップ、ならびに、それを用いる検査対象物検出方法およびイムノクロマトテストキット

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公開特許公報(A)

(11)【公開番号】P2024032004

(43)【公開日】2024-03-08

(54)【発明の名称】イムノクロマトテストストリップ、ならびに、それを用いる検査対象物検出方法およびイムノクロマトテストキット

(51)【国際特許分類】

   G01N 33/543 20060101AFI20240301BHJP

【ＦＩ】

G01N33/543 521

G01N33/543 525W

【審査請求】未請求

【請求項の数】15

【出願形態】ＯＬ

(21)【出願番号】P 2022135446

(22)【出願日】2022-08-27

【公序良俗違反の表示】

（特許庁注：以下のものは登録商標）

１．ＴＷＥＥＮ

(71)【出願人】

【識別番号】520374612

【氏名又は名称】ＮａｎｏＳｕｉｔ株式会社

(74)【代理人】

【識別番号】100190067

【弁理士】

【氏名又は名称】續 成朗

(72)【発明者】

【氏名】松田 直人

(72)【発明者】

【氏名】針山 孝彦

(72)【発明者】

【氏名】妹尾 千代

(57)【要約】

【課題】検査対象試料中の微量成分を検出し得る、簡易かつ高感度な検査対象物検出方法およびそれに用いられる新規なイムノクロマトテストストリップの形態を提供する。
【解決手段】少なくともａ）検査対象物を含む可能性のある検査対象液を受容する検査対象液導入部、ｂ）検査対象液導入部が受容した検査対象液を長さ方向に展開または流動させる展開部、ｃ）展開部の所定の場所に位置し、検査対象物を捕捉する分子であって、標識物質として金属微粒子または蛍光色素を含む微粒子が担持された標識分子、およびｄ）展開部の標識分子が位置する部分よりも下流側に設けられ、検査対象物と標識分子の複合体を捕捉する分子を含む判定部を備えるイムノクロマトテストストリップにおいて、展開部は、幅方向の大きさが２ミリメートル以下であり、専ら標識物質を検出可能な検査装置によって判定部の状態が検査されることを特徴とする。
【選択図】図１

【特許請求の範囲】

【請求項1】

少なくとも以下のａ～ｄ：
ａ）検査対象物を含む可能性のある検査対象液を受容する検査対象液導入部、
ｂ）前記検査対象液導入部が受容した検査対象液を長さ方向に展開または流動させる展開部、
ｃ）前記展開部の所定の場所に位置し、検査対象物を捕捉する分子であって、標識物質として金属微粒子または蛍光色素を含む微粒子が担持された標識分子、および
ｄ）前記展開部の前記標識分子が位置する部分よりも下流側に設けられ、検査対象物と標識分子の複合体を捕捉する分子を含む判定部
を備えるイムノクロマトテストストリップにおいて、
前記展開部は、幅方向の大きさが２ミリメートル以下であり、
専ら前記標識物質を検出可能な検査装置によって前記判定部の状態が検査されることを特徴とするイムノクロマトテストストリップ。

【請求項2】

前記展開部は、シート状のメンブレンで構成されている、請求項１に記載のイムノクロマトテストストリップ。

【請求項3】

前記展開部は、複数本の糸が撚糸された撚糸体で構成されている、請求項１に記載のイムノクロマトテストストリップ。

【請求項4】

前記展開部は、複数本の糸が互いに並行に配置された並置体で構成されており、前記並置体の空隙を検査対象液が移動可能に構成されている、請求項１に記載のイムノクロマトテストストリップ。

【請求項5】

前記展開部は、支持体に形成されたマイクロ流路で構成されており、前記マイクロ流路の底面または側面の一部または全部が表面処理されており、前記表面処理された部分の水の接触角が５０度以下である、請求項１に記載のイムノクロマトテストストリップ。

【請求項6】

前記展開部は、支持体に形成されたマイクロ流路で構成されており、前記マイクロ流路に、当該マイクロ流路の幅方向の大きさに対して１／３以下の直径を有する微粒子が充填されているか、または前記マイクロ流路の底面に複数の凸部が設けられており、前記微粒子の表面、または前記凸部の表面を伝って検査対象液が移動可能に構成されている、請求項１に記載のイムノクロマトテストストリップ。

【請求項7】

請求項２に記載のイムノクロマトテストストリップの少なくとも展開部が、支持体に形成されたマイクロ流路内に収容されてなる、イムノクロマトテストストリップ。

【請求項8】

請求項３に記載のイムノクロマトテストストリップの少なくとも展開部が、支持体に形成されたマイクロ流路内に収容されてなる、イムノクロマトテストストリップ。

【請求項9】

請求項４に記載のイムノクロマトテストストリップの少なくとも展開部が、支持体に形成されたマイクロ流路内に収容されてなる、イムノクロマトテストストリップ。

【請求項10】

請求項１～９のいずれか一項に記載のイムノクロマトテストストリップを用い、走査型電子顕微鏡の原理を用いた検査装置または蛍光顕微鏡の原理を用いた検査装置によって前記判定部の状態を検査することを含む、イムノクロマトグラフ法による検査対象物検出方法。

【請求項11】

前記イムノクロマトテストストリップの判定部の状態を検査する前に、検査用補助液を適用することをさらに含み、前記補助液は、
必須成分として、グリセリンおよびグリセリン代替物；ポリソルベート２０、ポリソルベート４０、ポリソルベート６０、ポリソルベート６５、ポリソルベート８０、ポリソルベート８５などのポリソルベート類、および、ポリソルベート類代替物から選ばれる少なくとも１種の化合物を含み、
任意成分として、単糖類、二糖類、塩類、および、緩衝液から選ばれる少なくとも１種の化合物を含んでなる、請求項１０に記載のイムノクロマトグラフ法による検査対象物検出方法。

【請求項12】

前記イムノクロマトテストストリップの検査対象液導入部に、検査対象液と前記補助液を同時に適用する、請求項１１に記載のイムノクロマトグラフ法による検査対象物検出方法。

【請求項13】

検査対象液を少なくとも前記イムノクロマトテストストリップの判定部まで展開または流動させた後に、前記補助液を前記判定部に適用する、請求項１１または１２に記載のイムノクロマトグラフ法による検査対象物検出方法。

【請求項14】

請求項１～９のいずれか一項に記載のイムノクロマトテストストリップを構成要素に含んでなるイムノクロマトテストキット。

【請求項15】

さらに検査用補助液を含んでなり、前記補助液は、
必須成分として、グリセリンおよびグリセリン代替物；ポリソルベート２０、ポリソルベート４０、ポリソルベート６０、ポリソルベート６５、ポリソルベート８０、ポリソルベート８５などのポリソルベート類、および、ポリソルベート類代替物から選ばれる少なくとも１種の化合物を含み、
任意成分として、単糖類、二糖類、塩類、および、緩衝液から選ばれる少なくとも１種の化合物を含んでなる、請求項１４に記載のイムノクロマトテストキット。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、イムノクロマトテストストリップ、ならびに、それを用いる検査対象物検出方法およびイムノクロマトテストキットに関し、より具体的には、検査装置で結果を読み取ることを前提とし、目視（肉眼観察）による読み取りが極めて困難な、微量の検査対象物の検出に適したイムノクロマトテストストリップの構成ならびにイムノクロマトグラフ法に関する。

【背景技術】

【0002】

簡易抗原検査法の一つであるイムノクロマトグラフ法では、抗原抗体反応を利用して、ウイルスや細菌が産生する抗原などを検出することが可能である。イムノクロマトグラフ法は、その簡便さ・有効性ゆえに、広く医療現場で使用されているが、検査対象液（検体）中に一定量の検査対象物が存在していないと検出が難しい、すなわち、感度がやや低いという欠点がある。

【0003】

一般に目視または光学測定によるイムノクロマトグラフ法の検出限界は、約１００ｐｇ／ｍＬとされている。例えば、尿中のクレアチニンは通常５０μｇ／ｍＬ以上程度であって、イムノクロマトグラフ法での検査がなされている（例えば、株式会社テクノメディカ製；ＩＣＲ－００１）。また、タカラバイオ株式会社からは、主として細胞を培養した際の培養上清中のインターロイキン２やインターフェロンガンマの検出用にイムノクロマトグラフ法が提供されており、その説明によると、検出濃度は２．０ｎｇ／ｍＬ（２０００ｐｇ／ｍＬ）以上となっている。一方、こうしたタンパク質はサイトカインと総称されるが、血中のサイトカイン濃度は、培養上清中よりも低い。例えば、住化分析センターの技術広報誌（ＳＣＡＳ ＮＥＷＳ）２０２１－ＩＩ号（Ｖｏｌ．５４）『サイトカイン測定の意義とその留意点』の文中には、「サイトカイン類は一般にその血中濃度が数十ｐｇ／ｍＬ以下と低いことから，市販の汎用キットではしばしば検出限界以下となる。」と記載されている（４ サイトカイン測定の実際，4.1 測定方法，4.1.2 超高感度測定法）。つまり、健常者では血中濃度が数１０ｐｇ／ｍＬレベルであるサイトカイン（例えば、インターロイキン２，６，８，１０、ＴＧＦ－β、ＴＮＦ―α、インターフェロンγなど）のイムノクロマトグラフ法による検査は困難である。これらサイトカインのモニタリングは、例えば、ＣＯＶＩＤ－１９の重症化に伴うサイトカインストームの監視の点でも有用であり、簡易なイムノクロマトグラフ法で検査ができるようになることは望ましい。

【0004】

こうしたイムノクロマトグラフ法の感度向上という潜在的課題に対して、本発明者らは、走査型電子顕微鏡によってイムノクロマトテストストリップ中の標識物質である金属微粒子を検出することを考え、イムノクロマトテストストリップに走査型電子顕微鏡での観察を補助する補助液を適用すると、良好に走査型電子顕微鏡で金属微粒子を検出し得ることを見出し、非特許文献１において報告している。非特許文献１には、走査型電子顕微鏡を用いてイムノクロマトテストストリップ中の標識物質である金属微粒子を検出することにより、実質的にＰＣＲ法と同等の検出感度でインフルエンザウイルスを検出できることが記載されている。非特許文献１に記載の方法によれば、目視に対して１００倍～数１００倍の高感度化が可能である。つまり、検出すべき対象タンパク質濃度として、約１．０ｐｇ／ｍＬまでが本方法で検出し得ると見込める。

【0005】

近年、医療分野における診断技術の進歩に伴って、微量に採取される細胞群または個々の細胞中に存在するタンパク質の解析などが試みられるようになってきている。例えば、がんの病態解析や診断技術、治療技術の分野では、検体試料からサーキュレーティング・チューモアー・セル（Circulating Tumor Cell；ＣＴＣ)を分取して、そこに含まれる遺伝子やタンパク質を解析しようとする試みがある。現状では、ＣＴＣに含まれるタンパク質の検出は質量分析計によってなされることが多いが、質量分析計は装置が高価であって、汎用的に用いる、とりわけ診断目的で用いるには利便性が十分でない。また、ＣＴＣは、採取される細胞数が少ないことも課題である。例えば、株式会社日本遺伝子研究所のウェブサイトによれば、血液１ｍＬあたりにＣＴＣは数個から数１０個しか含まれないとされている。

【0006】

また昨今、細胞外小胞とりわけエクソソームに含まれる遺伝子やタンパク質を解析する試みも盛んである。この分野においても、そもそもエクソソームは直径１００ナノメートル程度と細胞に比べさらに小さい小胞であるため、解析対象であるタンパク質の量はさらに少なく、質量分析による以外に既存の手法では検出が困難である。

【0007】

細胞一つの重量は約１ｎｇとされている。うちタンパク質が占める割合は１５パーセント程度であるので、単純計算では、細胞一つに含まれるタンパク質は１５０ｐｇとなる。ヒトを構成するタンパク質は約１００，０００種類とされているので、単純計算で、タンパク質１種類あたりでは、０．００１５ｐｇとなる。すなわち、一つの細胞の全量をイムノクロマトテストストリップに展開し、上述のように走査型電子顕微鏡で観察しても未だ１００倍程度感度が足りないことになる。ＣＴＣを解析し、そこに含まれるタンパク質を解析することを想定し、数１０個のＣＴＣから得られる検体をイムノクロマトテストストリップに展開すると仮定すると、約０．０１ｐｇのタンパク質を検知できるシステムがあれば実用上使用可能となることが期待できる。すなわち、本発明者らが非特許文献１で示した方法論に対してさらに１０倍以上イムノクロマトグラフ法を高感度化すれば、例えばＣＴＣのタンパク質の測定を簡易に行うことができたり、エクソソームに含まれるタンパク質の解析を簡易に行うことができたりするなど、先端的な生命解析の分野や医療診断の分野での利用が期待できる。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0008】

【特許文献1】国際公開第２０２１／２２０７５５号

【特許文献2】特開２０１５－１５２３０６号公報

【非特許文献】

【0009】

【非特許文献1】H. Kawasaki et al., Combination of the NanoSuit method and gold/platinum particle-based lateral flow assay for quantitative and highly sensitive diagnosis using a desktop scanning electron microscope, Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 196 (2021) 113924.

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0010】

しかしながら、元々は目視による読み取りを主たる検査手段として設計された既存のイムノクロマトテストストリップでは、非特許文献１に記載の走査型電子顕微鏡を用いる金属微粒子の検出によって可能となる高感度化の効果を十分に得られない。なぜなら、図８に模式的に示すような従来技術に係るイムノクロマトテストストリップＰにおいて、メンブレンｐ３の幅ｙはおよそ３ミリメートル～７ミリメートル程度であり、メンブレンｐ３において検査対象液が展開する距離（サンプルパッドｐ１の右端から判定ラインｔの右端までの距離）ｚはおよそ２センチメートル～４センチメートルであり、検査対象液を展開するメンブレンｐ３の厚み（図８の紙面貫通方向の大きさ）は数１０ミクロンメートル～数１００ミクロンメートルであって、検査対象液はこの大きさ（図８において、長さｘ×幅ｙ×厚みで計算される体積）のメンブレンｐ３中に拡散されるため、検査対象液に含まれる検査対象物の全てが、検査対象物を捕捉するための抗体が固定されている判定ラインｔの範囲を首尾よく通過できない状況を必然的に生じるからである。

【0011】

また、従来技術に係るイムノクロマトテストストリップにおいて、判定ラインｔの幅は、目視による読み取りを想定し、通常は０．３ミリメートル～１ミリメートル程度とされているが、走査型電子顕微鏡による観察では、例えば１，５００倍での観察では、一つの視野の一辺はおよそ４０ミクロンメートルであるので、その視野に対して上述した判定ラインの幅は広すぎ、そのことは、検査のたびに走査型電子顕微鏡による観察に適した視野を選択しなければならないという煩雑さを招く場合があった。

【0012】

本発明者らは、特許文献１において、電子顕微鏡による測定専用の検出部のみを備えるイムノクロマトテストストリップを提案し、コントロール部も電子顕微鏡による測定専用とすることによって、標識物質の集積による発色の有無を目視確認するステップを省略し、検出部およびコントロール部の両方を電子顕微鏡による測定に供することで、イムノクロマトグラフィーの結果を迅速かつより簡便に定量化することを提案している。また、特許文献１には、電子顕微鏡による標識物質の識別を行うことを利用して、検出部およびコントロール部の範囲を小さくすることができること、および、これによりイムノクロマトテストストリップの小型化が可能となることが記載されている。一方で、特許文献１に記載の発明の完成時点および特許文献１の出願時点において、当該検出部およびコントロール部の範囲を具体的にどの程度小さくすることができるのか、あるいは、実際にそのようにして小さくした範囲の検出部および／またはコントロール部を備えるイムノクロマトテストストリップを用いて、検査対象液に含まれる微量成分の検出が可能であるかどうかについては必ずしも十分な実証実験はなされておらず、検討の余地が残されていた。

【0013】

そのため、特許文献１の出願時点では走査型電子顕微鏡による読み取りを前提とした場合でも十分な高感度化のポテンシャルを引き出せておらず、検出部およびコントロール部の小型化は着想を得ていたものの具体的なイムノクロマトテストストリップの設計を見出すには至っておらず、かつ高感度化の効果も具体的な実験結果を伴って確認することはできていなかった。すなわち、急速に進む各細胞レベルあるいは細胞外小胞（例えばＣＴＣやエクソソーム）に含まれるタンパク質のような微量のタンパク質に適用し得る新たなイムノクロマトテストストリップの形態は依然提案がなされておらず、解決が望まれており、また、それにより高感度に検査対象物を検出することができるイムノクロマトグラフ法を提供することが望まれていた。すなわち、上述したＣＴＣやエクソソームに含まれるタンパク質のような微量成分を検出し得る、簡易かつ高感度な検査対象物検出方法に対するニーズが依然として存在する。

【0014】

従って、本発明の目的は、主として走査型電子顕微鏡の原理を用いた検査装置で結果を読み取ることを前提とした、新規なイムノクロマトテストストリップの形態を提供することであり、それにより従来のイムノクロマトテストストリップを用いるイムノクロマトグラフ法では検出が困難であった微量の検査対象物の検出に道を拓くことである。

【課題を解決するための手段】

【0015】

本発明者らが鋭意検討した結果、上記課題は、以下の態様を有するイムノクロマトテストストリップによって解決され得ることを見出した。

【0016】

（１）少なくとも以下のａ～ｄ：
ａ）検査対象物を含む可能性のある検査対象液を受容する検査対象液導入部、
ｂ）前記検査対象液導入部が受容した検査対象液を長さ方向に展開または流動させる展開部、
ｃ）前記展開部の所定の場所に位置し、検査対象物を捕捉する分子であって、標識物質として金属微粒子または蛍光色素を含む微粒子が担持された標識分子、および
ｄ）前記展開部の前記標識分子が位置する部分よりも下流側に設けられ、検査対象物と標識分子の複合体を捕捉する分子を含む判定部
を備えるイムノクロマトテストストリップにおいて、
前記展開部は、幅方向の大きさが２ミリメートル以下であり、
専ら前記標識物質を検出可能な検査装置によって前記判定部の状態が検査されることを特徴とするイムノクロマトテストストリップ。
（２）前記展開部は、シート状のメンブレンで構成されている、（１）に記載のイムノクロマトテストストリップ。
（３）前記展開部は、複数本の糸が撚糸された撚糸体で構成されている、（１）に記載のイムノクロマトテストストリップ。
（４）前記展開部は、複数本の糸が互いに並行に配置された並置体で構成されており、前記並置体の空隙を検査対象液が移動可能に構成されている、（１）に記載のイムノクロマトテストストリップ。
（５）前記展開部は、支持体に形成されたマイクロ流路で構成されており、前記マイクロ流路の底面または側面の一部または全部が表面処理されており、前記表面処理された部分の水の接触角が５０度以下である、（１）に記載のイムノクロマトテストストリップ。
（６）前記展開部は、支持体に形成されたマイクロ流路で構成されており、前記マイクロ流路に、当該マイクロ流路の幅方向の大きさに対して１／３以下の直径を有する微粒子が充填されているか、または前記マイクロ流路の底面に複数の凸部が設けられており、前記微粒子の表面、または前記凸部の表面を伝って検査対象液が移動可能に構成されている、（１）に記載のイムノクロマトテストストリップ。
（７）（２）に記載のイムノクロマトテストストリップの少なくとも展開部が、支持体に形成されたマイクロ流路内に収容されてなる、イムノクロマトテストストリップ。
（８）（３）に記載のイムノクロマトテストストリップの少なくとも展開部が、支持体に形成されたマイクロ流路内に収容されてなる、イムノクロマトテストストリップ。
（９）（４）に記載のイムノクロマトテストストリップの少なくとも展開部が、支持体に形成されたマイクロ流路内に収容されてなる、イムノクロマトテストストリップ。
（１０）（１）～（９）のいずれかに記載のイムノクロマトテストストリップを用い、走査型電子顕微鏡の原理を用いた検査装置または蛍光顕微鏡の原理を用いた検査装置によって前記判定部の状態を検査することを含む、イムノクロマトグラフ法による検査対象物検出方法。
（１１）前記イムノクロマトテストストリップの判定部の状態を検査する前に、検査用補助液を適用することをさらに含み、前記補助液は、必須成分として、グリセリンおよびグリセリン代替物；ポリソルベート２０、ポリソルベート４０、ポリソルベート６０、ポリソルベート６５、ポリソルベート８０、ポリソルベート８５などのポリソルベート類、および、ポリソルベート類代替物から選ばれる少なくとも１種の化合物を含み、任意成分として、単糖類、二糖類、塩類、および、緩衝液から選ばれる少なくとも１種の化合物を含んでなる、（１０）に記載のイムノクロマトグラフ法による検査対象物検出方法。
（１２）前記イムノクロマトテストストリップの検査対象液導入部に、検査対象液と前記補助液を同時に適用する、（１１）に記載のイムノクロマトグラフ法による検査対象物検出方法。
（１３）検査対象液を少なくとも前記イムノクロマトテストストリップの判定部まで展開または流動させた後に、前記補助液を前記判定部に適用する、（１１）または（１２）に記載のイムノクロマトグラフ法による検査対象物検出方法。
（１４）（１）～（９）のいずれかに記載のイムノクロマトテストストリップを構成要素に含んでなるイムノクロマトテストキット。
（１５）さらに検査用補助液を含んでなり、前記補助液は、必須成分として、グリセリンおよびグリセリン代替物；ポリソルベート２０、ポリソルベート４０、ポリソルベート６０、ポリソルベート６５、ポリソルベート８０、ポリソルベート８５などのポリソルベート類、および、ポリソルベート類代替物から選ばれる少なくとも１種の化合物を含み、任意成分として、単糖類、二糖類、塩類、および、緩衝液から選ばれる少なくとも１種の化合物を含んでなる、（１４）に記載のイムノクロマトテストキット。

【発明の効果】

【0017】

本発明によれば、目視に依らず検査装置による検査に好適なイムノクロマトテストストリップが提供される。本発明のイムノクロマトテストストリップにおいては、検査対象液が展開または流動する展開部の幅が従来のものよりも極めて小さいため、検査対象液に含まれる検査対象物を効率よく判定部（当該展開部に設けられた、検査対象物と標識分子の複合体を捕捉する分子を含む部分）に導くことができる。また、本発明のイムノクロマトテストストリップにおいては、当該判定部の大きさ（検査対象液が展開または流動する方向の大きさ）を従来のものよりも極めて小さくすることも可能であり、走査型電子顕微鏡や蛍光顕微鏡などの検査装置の視野との適合性を改善することも容易である。そのため、本発明のイムノクロマトテストストリップを用い、走査型電子顕微鏡の原理を用いた検査装置または蛍光顕微鏡の原理を用いた検査装置によって判定部の状態を検査することを含むイムノクロマトグラフ法によって、従来は検出が難しかった微量の検査対象物を簡易かつ高感度に検出することができる。加えて、本発明によれば、本発明のイムノクロマトテストストリップを構成要素に含んでなるイムノクロマトテストキットが提供され、これにより本発明のイムノクロマトグラフ法を簡便に実施することができる。

【図面の簡単な説明】

【0018】

【図1】実施態様１の展開部を備える本発明の第１の実施形態に係るイムノクロマトテストストリップの構成を示す模式平面図。

【図2】実施態様２の展開部を備える本発明の第２の実施形態に係るイムノクロマトテストストリップの構成を示す模式平面図。

【図3】実施態様３の展開部を備える本発明の第３の実施形態に係るイムノクロマトテストストリップの構成を示す模式平面図。

【図4】実施態様４の展開部を備える本発明の第４の実施形態に係るイムノクロマトテストストリップの構成を示す模式斜視図。

【図5A】実施態様５の展開部を備える本発明の第５の実施形態に係るイムノクロマトテストストリップの構成の一例を示す模式斜視図。

【図5B】実施態様５の展開部を備える本発明の第５の実施形態に係るイムノクロマトテストストリップの構成の別の例を示す模式斜視図。

【図6A】実施態様６の展開部を備える本発明の第６の実施形態に係るイムノクロマトテストストリップの構成の一例を示す模式斜視図。

【図6B】実施態様６の展開部を備える本発明の第６の実施形態に係るイムノクロマトテストストリップの構成の別の例を示す模式斜視図。

【図7】本発明の第１の実施形態に係るイムノクロマトテストストリップにおいて、判定部を展開部の複数箇所に設けることで、複数種類の検査対象物を１つのイムノクロマトテストストリップを用いて検出可能に構成した例を示す模式平面図。

【図8】従来技術に係るイムノクロマトテストストリップの構成を示す模式平面図

【図9】（ａ）市販のイムノクロマトテストストリップを用いてそばタンパク質を検出した結果を示す写真画像、（ｂ）（ａ）の判定ライン部分を走査型電子顕微鏡を用いて観察した結果を示す写真画像（観察倍率：５０００倍）。

【図10】（ａ）市販のイムノクロマトテストストリップを用いて、図９（ａ）の写真画像を得た条件（上段）と、検査対象液を２０００倍に希釈した条件（下段）とで、そばタンパク質を検出した結果を示す写真画像、（ｂ）（ａ）の判定ライン部分を走査型電子顕微鏡を用いて観察した結果を示す写真画像（観察倍率：５０００倍）。

【図11】（ａ）実施例の試料１のテストストリップの外観を示す写真画像、（ｂ）試料１のテストストリップを用いて、検査対象液を２０００倍に希釈した条件で、そばタンパク質を検出した結果を示す写真画像（観察倍率：５０００倍）。

【発明を実施するための形態】

【0019】

以下、本発明の実施の形態について説明する。

【0020】

［イムノクロマトテストストリップ］
本発明のイムノクロマトテストストリップは、少なくとも以下のａ～ｄ：
ａ）検査対象物を含む可能性のある検査対象液を受容する検査対象液導入部、
ｂ）前記検査対象液導入部が受容した検査対象液を長さ方向に展開または流動させる展開部、
ｃ）前記展開部の所定の場所に位置し、検査対象物を捕捉する分子であって、標識物質として金属微粒子または蛍光色素を含む微粒子が担持された標識分子、および
ｄ）前記展開部の前記標識分子が位置する部分よりも下流側に設けられ、検査対象物と標識分子の複合体を捕捉する分子を含む判定部
を備え、専ら前記標識物質を検出可能な検査装置によって前記判定部の状態が検査されることを特徴とする。

【0021】

ここで、本発明のイムノクロマトテストストリップにおいては、展開部の幅方向の大きさ、すなわち、検査対象液が展開または流動する方向に直交する方向の大きさが、従来のイムノクロマトテストストリップに比較して極めて小さいことを特徴の一つとしている。展開部の幅を狭くすることで、検査対象液の拡散範囲が小さくなり、検査対象液に含まれる検査対象物を効率よく判定部を通過させることができ、微量の検査対象物を高感度に検出することが可能になる。展開部の幅方向の大きさは２ミリメートル以下であり、好ましくは１ミリメートル以下であり、より好ましくは５００ミクロンメートル以下であり、３００ミクロンメートル以下が最も好ましい。

【0022】

展開部の構成としては、例えば、従来のイムノクロマトテストストリップで用いられるニトロセルロースなどのメンブレンであってもよい。あるいは、本発明のイムノクロマトテストストリップにおいては、上述したメンブレンや繊維などの材料を用いずに、任意の支持体に検査対象液が通液可能な流路が形成された態様で、展開部が構成されていてもよい。この場合には、支持体に形成された展開部（すなわち流路）の一部に上記判定部が形成されていれば、上記標識物質を検出可能な検査装置によって当該判定部の状態を検査することができる。このような流路を備える従来のイムノクロマトテストストリップとしては、例えば特許文献２に開示がある。特許文献２には、０．０１ミクロンメートル～１０００ミクロンメートルの幅を有するマイクロ流路をポリジメチルシロキサン支持体上に形成したキャピラリー型のイムノクロマトテストストリップの構成が記載されている。

【0023】

しかしながら、特許文献２に記載されるような形態では、流路幅が比較的広い場合（例えば１ミリメートル以上の場合）は、流路を検査対象液で充たした上で当該検査対象液に含まれる検査対象物を判定ラインまで到達させるには、検査対象液の液量として相当程度必要であるため、微量の検査対象物、とりわけ微量の検査対象液に含まれる微量の検査対象物の検出には不向きである。例えば、上述のように細胞１個の重量が約１ｎｇであるとすると、数１０個のＣＴＣを一度に取り扱うとしても重量は５０ｎｇ程度に過ぎず、検出対象タンパク質は０．０１ｐｇ程度かそれ以下と微量である。これを例えば幅１ミリメートル、深さ１ミリメートル、長さ２センチメートルの流路に満たし、かつ大半の成分を判定ラインを通過させようとすると、溶液量は少なくとも２０マイクロリットルの２倍、すなわち４０マイクロリットルに希釈する必要を生じる。これでは結果的に検出対象物の液中濃度を下げてしまう。

【0024】

そのため、イムノクロマトグラフ法において検査対象液が展開する部分の幅を狭くし、それによって微量の検査対象液に含まれる微量の検査対象物を検出しようとする場合、単に微小なマイクロ流路を形成することのみでは所望の結果を得ることは難しく、毛細管現象によって実質的に検査対象液が展開される部分の容積を小さくするためのメンブレンや繊維を用いた構成であるか、あるいは、多くの場合水溶液である検査対象液の展開を助ける（促進する）ための表面処理が施されたマイクロ流路型の構成であるか、または流路内に毛細管現象を起こさせるための微細構造を有するマイクロ流路型の構成であることが好ましいことを、本発明者らは着想した。

【0025】

すなわち、本発明のイムノクロマトテストストリップにおいて、上記展開部の具体的な実施態様としては、以下のものを例示することができる。但し、展開部の態様としては、これらに限定されない点に留意されたい。
実施態様１：ニトロセルロース等からなるシート状のメンブレンであって、幅方向の大きさが２ミリメートル以下であるもの
実施態様２：ニトロセルロース等の糸が２本～１００本程度撚糸されたもの
実施態様３：ニトロセルロース等の糸が少なくとも２本以上互いに並行に配置され、その空隙を検査対象液が移動可能に構成されたもの
実施態様４：ポリジメチルシロキサン、ポリシクロオレフィン、またはアルミニウム等からなる支持体に形成されたマイクロ流路であって、当該マイクロ流路の底面または側面の一部または全部が表面処理されており、当該表面処理された部分の水の接触角が５０度以下であるもの
実施態様５：実施態様４と同様に形成されたマイクロ流路（但し表面処理は必須ではない）に、実施態様１～３のいずれかの展開部が収容されているもの
実施態様６：実施態様４と同様に形成されたマイクロ流路（但し表面処理は必須ではない）であって、当該マイクロ流路に、当該マイクロ流路の幅方向の大きさに対して１／３以下の直径を有する微粒子が充填されているか、または当該マイクロ流路の底面に複数の凸部が設けられており、当該微粒子の表面、または当該凸部の表面を伝って検査対象液が移動可能に構成されたもの。

【0026】

以下、各実施態様の展開部を備える本発明のイムノクロマトテストストリップについて添付の図面を参照して説明する。

【0027】

＜第１の実施形態＞
図１は、実施態様１の展開部を備える本発明の第１の実施形態に係るイムノクロマトテストストリップの構成を示す模式平面図である。

【0028】

図１に示すイムノクロマトテストストリップ１００は、検査対象液の展開方向（図１において矢印Ｄで示す方向）の上流から下流に向かって、検査対象液導入部１１０、展開部１２０、および吸収パッド１３０を備える。

【0029】

（検査対象液導入部）
検査対象液導入部１１０は、検査対象物を含む可能性のある検査対象液を受容する。また、検査対象液導入部１１０は、そこで受容した検査対象液を展開部１２０に安定に導入する役割を果たす。検査対象液導入部１１０は、セルロース誘導体等の繊維マトリックス、濾紙、ガラス繊維、布、綿等により、好ましく形成される。

【0030】

検査対象液導入部１１０の大きさは、１回にアプライする検査対象液の量に合わせて自由に設計することができる。本発明において１回にアプライする検査対象液は、０．１マイクロリットルから１００マイクロリットルが好ましく、より好ましくは０．１マイクロリットルから１０マイクロリットルである。

【0031】

（展開部）
展開部１２０は、検査対象液導入部１１０が受容した検査対象液を長さ方向に展開または流動させる。展開部１２０は、シート状のメンブレン１２２で構成されており、幅方向の大きさｗが２ミリメートル以下である。展開部１２０の長さ方向の大きさＬは特に限定されないが、Ｌの値を過剰に大きくすると、必要となる検査対象液の液量が多くなるため、好ましくない。一方で、検査対象液が全血などであり、夾雑物が多く含まれる可能性がある場合は、想定される検査対象液の液量に対してＬの値を大きめに設定することで、検査対象物の検出精度を担保するようにしても良い。

【0032】

ここで、展開部１２０において、検査対象液が展開または流動する距離（検査対象液の移動距離）、すなわち、展開部１２０の左端（検査対象液導入部１１０の右端）から後述する判定部の右端までの距離ｍは、３センチメートル以下が好ましく、より好ましくは２センチメートル以下である。加えて、検査対象液が全血、未処理の唾液、未処理の尿を除く何らかの前処理がなされたものである場合、または予め血液や尿などから分取されたエクソソームやＣＴＣを分散した液体である場合は、距離ｍは、１センチメートル以下とすることが好ましく、より好ましくは７ミリメートル以下である。なお、ｍの下限値は特に制限されないが、２ミリメートル以上であることが好ましい。

【0033】

展開部１２０の厚さ方向（図１の紙面貫通方向）の大きさは、２００ミクロンメートル以下が好ましく、より好ましくは１００ミクロンメートル以下であり、最も好ましくは５０ミクロンメートル以下である。展開部１２０の厚みが薄いほど、検査対象液が拡散する範囲が小さくなり、検査対象液に含まれる検査対象物を効率よく判定部に導くことができ、かつ検査装置による検査の際に標識物質（金属微粒子など）がメンブレン１２２に隠れてしまう（実際には判定部に存在している標識物質を検出することができなくなる）頻度が減少するので好ましい。

【0034】

展開部１２０を構成するメンブレンの材料としては、従来のイムノクロマトテストストリップに使用できるとされたものであれば、特に制限無く使用することができる。当該材料としては、例えば、綿、麻、絹、セルロース、ロックウール、獣毛、ニトロセルロース、セルロースアセテート、ガラス繊維、カーボン繊維、ボロン繊維、ポリアミド、アラミド、ポリビニルアルコール、ポリビニルアセテート、レーヨン、ポリエステル、ポリアクリル酸、ポリアクリル酸エステル、ポリプロピレン、ポリエチレン、ポリ塩化ビニルおよびポリ塩化ビニリデンなどが挙げられる。このうち、ニトロセルトース、セルロースアセテート、ガラス繊維、ポリエステルが望ましい。

【0035】

（標識分子）
展開部１２０には、所定の場所に、標識分子１４０が配置されている。標識分子１４０が位置する場所は、通常、展開部１２０の上流側であって、検査対象液導入部１１０との境界に近い領域である。標識分子１４０は、検査対象液導入部１１０から展開部１２０に導入された検査対象液に含まれ得る検査対象物を捕捉する分子であって、標識物質として金属微粒子または蛍光色素を含む微粒子が担持されている。具体的には、検査対象物が抗原である場合、標識分子１４０はマーカー抗体である。

【0036】

マーカー抗体は、検査対象物である抗原の第１部分（第１エピトープ）を特異的に認識してこれと結合する抗体と、標識物質との結合体である。当該抗体は、検査対象物に応じて任意に選択され得る。標識物質は、従来のイムノクロマトグラフ法に用いられる標識物質から任意に選択され得る。標識物質は、例えば、金属微粒子（金属ナノ粒子）、ラテックス微粒子、有機高分子微粒子、無機微粒子、および蛍光色素を含む微粒子（発色剤を内包したリポソームなど）からなる群から選択される少なくとも１つを含む。上記金属ナノ粒子としては、例えば、金ナノ粒子、白金ナノ粒子、白金－金ナノ粒子、銀ナノ粒子などの貴金属ナノ粒子、チタンナノ粒子、鉄ナノ粒子、ニッケルナノ粒子、およびカドミウムナノ粒子が挙げられる。上記金属ナノ粒子は、粒径が１ｎｍ以上２００ｎｍ以下のコロイド状の金属ナノ粒子であり、好ましくは２０ｎｍ以上１００ｎｍ以下であり、より好ましくは４０ｎｍ以上１００ｎｍ以下である。また、粒子形状は球状のものが一般的であるが、ロッド状、平板状であっても良い。

【0037】

特に、検査装置として電子顕微鏡を使用する態様では、標識分子１４０としては、電子顕微鏡での観察に適する金属ナノ粒子を標識物質として担持するマーカー抗体が望ましい。

【0038】

（判定部）
展開部１２０には、標識分子１４０が位置する部分よりも下流側に、検査対象物と標識分子１４０の複合体を捕捉する分子（捕捉分子）を含む判定部１５０が設けられている。具体的には、検査対象物が抗原である場合、判定部１５０には、当該抗原と上述したマーカー抗体の複合体を捕捉する抗体（捕捉抗体）が固定されている。そして、イムノクロマトテストストリップ１００は、専ら標識物質１４０を検出可能な検査装置によって判定部１５０の状態が検査される。

【0039】

捕捉抗体は、検査対象物である抗原のうち上記第１部分とは異なる第２部分（第２エピトープ）を特異的に認識してこれと結合する抗体である。異なる観点から言えば、捕捉抗体は、標識物質と結合している検査対象物と結合する性質を有する。捕捉抗体は、検出対象物に応じて任意に選択され得る。

【0040】

判定部１５０は、検査対象液が展開または流動する方向の大きさが５００ミクロンメートル以下であることが好ましく、より好ましくは、２００ミクロンメートル以下である。言い換えると、判定部１５０は、展開部１２０の長さ方向に５００ミクロンメートル以下、幅方向に２ミリメートル以下の範囲に上記捕捉分子（捕捉抗体）を含んで形成されていることが好ましく、当該範囲は、展開部１２０の長さ方向に２００ミクロンメートル以下、幅方向に２ミリメートル以下であることがより好ましい。イムノクロマトテストストリップ１００において、判定部１５０が、展開部１２０と同様に従来のものよりも極めて小さい幅を有し、かつ長さ方向の大きさも小さくすることで、走査型電子顕微鏡や蛍光顕微鏡などの検査装置の視野との適合性に優れたテストストリップとなる。目視による読み取りを想定した従来のイムノクロマトテストストリップでは、判定ラインの視認性を確保するために一定の幅（０．３ミリメートル～１ミリメートル程度）が要求されているが、本発明者らの経験上、検査対象液を展開した後の判定ラインの状態は一様ではなく、上流側の方が標識物質に起因する発色度合いが強い傾向にあった。つまり、判定ラインに固定されている捕捉抗体の全てが意図された役割を果たしている訳では無く、より上流側に位置する捕捉抗体が、検査対象物である抗原との特異的結合を形成していると推測できる。従って、イムノクロマトテストストリップ上での抗原抗体反応においては、従来の判定ラインよりも狭い範囲に、従来と同程度の濃度（単位面積あたりの量）で捕捉抗体（捕捉分子）を固定することでも、検査精度を確保することは十分に可能であると言える。加えて、本発明で使用する検査装置との関係においては、判定部１５０の範囲が従来よりも狭いことで、当該装置による検査の際の視野の選択をより容易にすることができる。

【0041】

図１に示すイムノクロマトテストストリップ１００では、判定部１５０は１箇所であり、判定部１５０には、１種類の捕捉分子が固定されていることが意図される。また、標識分子１４０としても１種類の標識分子が配置されていることが意図される。この場合には、イムノクロマトテストストリップ１００は、目的とする１種類の検査対象物を検出するのに適した構成となる。一方、本発明のイムノクロマトテストストリップの実施形態としてはこれに限定されず、判定部１５０を展開部１２０の複数箇所に設けることで、複数種類の検査対象物を１つのイムノクロマトテストストリップを用いて検出可能に構成することもできる。図７は、当該実施形態の具体的な構成例を示す模式平面図である。図７に示すイムノクロマトテストストリップ１０２においては、３つの判定部（第１の判定部１５１、第２の判定部１５２、第３の判定部１５３）から構成される判定部１５０が、展開部１２０に設けられている。

【0042】

図１に示すイムノクロマトテストストリップ１００の展開部１２０は、一般的には、上述した材料を用いて、所望の展開部の大きさよりも大きいシート状のメンブレンを製造し、その一部に、上記捕捉分子（捕捉抗体）を含む溶液を、上記幅を有して一定の長さに延びるように（例えばライン状に）塗布することで上記判定部（判定ライン）を形成し、続いて当該判定部の長さ方向と直交する方向に、目的の幅ｗとなるようにメンブレンを細断することによって、得ることができる。なお、長さ方向の大きさについては、最初にシート状のメンブレンを製造する段階で、目的の長さＬに合わせてシートを製造しても良いし、上記細断する際に目的の長さＬとなるようにメンブレンを切断しても良い。また、厚さ方向の大きさについては、上記細断した後のメンブレンの厚みが、上述した大きさとなるようにすれば良い。

【0043】

（吸収パッド）
吸収パッド１３０は、展開部１２０に対し検査対象液導入部１１０と反対側、すなわち展開部１２０を流れる検査対象液の下流側に位置する。吸収パッド１３０を設けることにより、展開部１２０における検査対象液の展開または流動が円滑になり、また、余剰な検査対象液を吸収パッド１３０で吸収することができる。但し、本発明のイムノクロマトテストストリップにおいて、吸収パッドは必須の構成要素ではなく、その設置は任意である。

【0044】

吸収パッド１３０の材質としては、毛細管現象によって検査対象液を吸収し得るものであればいかなるものでもよく、例えば、パルプ、コットンリンター、架橋セルロース繊維などのセルロース繊維、レーヨン、アセテート、綿、羊毛、ガラス繊維等が挙げられる。

【0045】

（コントロール部）
図１に示すイムノクロマトテストストリップ１００では、展開部１２０において、判定部１５０よりも下流側に、コントロール部１６０が設けられている。コントロール部１６０には、標識分子１４０を捕捉する分子が固定されている。具体的には、検査対象物が抗原であり、標識分子１４０がマーカー抗体である場合、コントロール部１６０に固定される分子は、当該マーカー抗体を特異的に認識する抗体（コントロール抗体とも呼ばれる。）である。当該コントロール抗体は、マーカー抗体に応じて任意に選択され得る。但し、本発明のイムノクロマトテストストリップは、専ら標識物質を検出可能な検査装置によって判定部の状態が検査されるため、コントロール部は必須の構成要素ではなく、その設置は任意である。つまり、従来の目視読み取り用のイムノクロマトテストストリップにおいては、検査が正しく実施されたことを確認するためにコントロール部（コントロールライン）の設置は必須であるが、本発明のイムノクロマトテストストリップにおいては、検査装置による読み取りの際に、検査の実施の正確性も評価することが可能であり得るため、コントロール部の設置は任意としても差し支えない。もちろん、従来のイムノクロマトテストストリップと同様にコントロール部を設けても良い。

【0046】

加えて、図１には示されていないが、本発明のイムノクロマトテストストリップの任意的な構成要素としては、以下のものが挙げられる。

【0047】

（コンジュゲートパッド）
コンジュゲートパッドは、検査対象液が検査対象液導入部１１０から展開部１２０へ導入される部分に配置され得る。予めコンジュゲートパッドに上述した標識分子を固定し、当該コンジュゲートパッドを展開部１２０の所定の場所に配置することで、展開部１２０に導入された検査対象液中に含まれる検査対象物（抗原）と標識分子（マーカー抗体）を反応させることができる。コンジュゲートパッドの材質としては特に制限されないが、例えば、セルロース誘導体等の繊維マトリックス、濾紙、ガラス繊維、布、綿等が好ましい。

【0048】

（導電テープ）
上述したように、本実施形態に係るイムノクロマトテストストリップ１００は、専ら標識物質１４０を検出可能な検査装置によって判定部１５０の状態が検査される。本実施形態において、好ましく用いられる検査装置は、走査型電子顕微鏡または走査型電子顕微鏡の原理を用いた検査装置である。そのような検査装置を用いてイムノクロマトテストストリップ１００の判定部１５０を観察し、標識分子１４０に担持された金属ナノ粒子等の金属コロイド粒子の画像をより鮮明に得るためには、当該検査装置（走査型電子顕微鏡）から照射される電子線による観察対象物における静電蓄積（チャージアップと呼ばれる。）による画像の乱れを低減することが望ましい。そのため、展開部１２０、とりわけ判定部１５０から静電気を逃す機構を有することが望ましく、そのような機構としては、上述したイムノクロマトテストストリップ１００の少なくとも１つの構成要素（好ましくは展開部１２０）と接した状態で導電テープを配置することが挙げられる。予めイムノクロマトテストストリップ１００に導電テープを配置しておき、検査装置によって判定部１５０の状態を検査する際に当該導電テープの一端を直接または後述するハウジングを介して検査装置を構成する金属部分に接するようにすることで、上述したチャージアップの低減効果を得ることができる。導電テープとしては、アルミニウムや金、白金、銅などの金属箔またはカーボンテープを用いることができる。

【0049】

（ハウジング）
イムノクロマトテストストリップ１００のハンドリング性を良好にするために、イムノクロマトテストストリップ１００の全体または一部分を収容するハウジング（筐体）を設けても良い。ハウジングは、従来の目視読み取り用のイムノクロマトテストストリップと同様に設計することができる。具体的には、例えば、イムノクロマトテストストリップ１００の全体を収容する構造体であって、平面視において、検査対象液導入部１１０の少なくとも一部分を露出する開口部と、判定部１５０の少なくとも一部分を露出する開口部とを有するものが挙げられる。ハウジングを構成する材料としてはいかなるものでも良い。例えば、ポリプロピレン、ポリスチレン、ポリ塩化ビニルなどのプラスチックであっても良く、ガラスであっても良く、またはアルミニウムやステンレスなどの金属であっても良い。上述したチャージアップの低減効果を得る観点からは、上記導電テープを介して、あるいはハウジングを導電性材料で構成して展開部１２０と直接接するようにして、展開部１２０（特に判定部１５０）から静電気を逃すことができるようにすることが好ましい。

【0050】

＜第２の実施形態＞
図２は、実施態様２の展開部を備える本発明の第２の実施形態に係るイムノクロマトテストストリップの構成を示す模式平面図である。

【0051】

図２に示すイムノクロマトテストストリップ２００は、検査対象液の展開方向（図２において矢印Ｄで示す方向）の上流から下流に向かって、検査対象液導入部２１０、展開部２２０、および吸収パッド２３０を備える。ここで、検査対象液導入部２１０および吸収パッド２３０としては、図１を参照して説明した第１の実施形態に係るイムノクロマトテストストリップ１００の検査対象液導入部１１０および吸収パッド１３０と同様の構成を採用することができるため、詳細な説明を省略する。

【0052】

展開部２２０は、２本～１００本程度の糸が撚糸されたもの（撚糸体）２２４で構成されており、幅方向の大きさｗが２ミリメートル以下である。展開部２２０を構成する糸の材料としては、上述した展開部１２０と同様の材料を使用することができる。当該糸の太さ（すなわち、撚糸される前の１本の糸の太さ）は、直径５０ミクロンメートル以下が好ましく、より好ましくは３０ミクロン以下であり、最も好ましくは１０ミクロン以下である。

【0053】

図２に示すイムノクロマトテストストリップ２００では、標識分子２４０は、撚糸された状態の糸（撚糸体２２４）に対して、標識分子（マーカー抗体）を含む溶液を所定の位置に塗布することで配置することができる。また、判定部２５０も同様に、撚糸体２２４に対して、捕捉分子（捕捉抗体）を含む溶液を所定の位置に塗布することで形成することができる。

【0054】

なお、上記以外の、展開部２２０、標識分子２４０、および判定部２５０に関する特徴については、第１の実施形態に係るイムノクロマトテストストリップ１００の展開部１２０、標識分子１４０、および判定部１５０と同様であるので、詳細な説明を省略する。

【0055】

また、吸収パッド２３０を含め、その他の任意的な構成要素については、第１の実施形態に係るイムノクロマトテストストリップ１００について上述したのと同様である。図２に示すイムノクロマトテストストリップ２００は、展開部２２０において、判定部２５０よりも下流側に、コントロール部２６０が設けられている態様であり、その形成法としては、判定部２５０と同様に、撚糸体２２４に対して、標識分子２４０を捕捉する分子（コントロール抗体）を含む溶液を所定の位置に塗布すれば良い。

【0056】

＜第３の実施形態＞
図３は、実施態様３の展開部を備える本発明の第３の実施形態に係るイムノクロマトテストストリップの構成を示す模式平面図である。

【0057】

図３に示すイムノクロマトテストストリップ３００は、検査対象液の展開方向（図３において矢印Ｄで示す方向）の上流から下流に向かって、検査対象液導入部３１０、展開部３２０、および吸収パッド３３０を備える。ここで、検査対象液導入部３１０および吸収パッド３３０としては、図１を参照して説明した第１の実施形態に係るイムノクロマトテストストリップ１００の検査対象液導入部１１０および吸収パッド１３０と同様の構成を採用することができるため、詳細な説明を省略する。

【0058】

展開部３２０は、少なくとも２本以上の糸が互いに並行に配置され、その空隙を検査対象液が移動可能に構成されたもの（複数本の糸の並置体）３２６で構成されており、幅方向の大きさｗが２ミリメートル以下である。展開部３２０を構成する糸の材料としては、上述した第２の実施形態に係るイムノクロマトテストストリップ２００の展開部２２０と同様の材料を使用することができる。但し、本実施形態に係るイムノクロマトテストストリップ３００では、糸を撚糸するのではなく、複数本の糸を互いに並行に配置して展開部３２０を構成する。そのため、当該糸の太さ（すなわち、並置体を形成する前の１本の糸の太さ）は、直径２００ミクロンメートル以下が好ましく、より好ましくは１００ミクロンメートル以下である。

【0059】

図３に示すイムノクロマトテストストリップ３００では、標識分子３４０は、並置された状態の糸（並置体３２６）に対して、標識分子（マーカー抗体）を含む溶液を所定の位置に塗布することで配置することができる。また、判定部３５０も同様に、並置体３２６に対して、捕捉分子（捕捉抗体）を含む溶液を所定の位置に塗布することで形成することができる。

【0060】

なお、上記以外の、展開部３２０、標識分子３４０、および判定部３５０に関する特徴については、第１の実施形態に係るイムノクロマトテストストリップ１００の展開部１２０、標識分子１４０、および判定部１５０と同様であるので、詳細な説明を省略する。

【0061】

また、吸収パッド３３０を含め、その他の任意的な構成要素については、第１の実施形態に係るイムノクロマトテストストリップ１００について上述したのと同様である。図３に示すイムノクロマトテストストリップ３００は、展開部３２０において、判定部３５０よりも下流側に、コントロール部３６０が設けられている態様であり、その形成法としては、判定部３５０と同様に、並置体３２６に対して、標識分子３４０を捕捉する分子（コントロール抗体）を含む溶液を所定の位置に塗布すれば良い。

【0062】

＜第４の実施形態＞
図４は、実施態様４の展開部を備える本発明の第４の実施形態に係るイムノクロマトテストストリップの構成を示す模式斜視図である。

【0063】

図４に示すイムノクロマトテストストリップ４００は、支持体４７０に形成されたマイクロ流路４８０を備え、マイクロ流路４８０内において、検査対象液の展開方向（図４において矢印Ｄで示す方向）の上流から下流に向かって、検査対象液導入部４１０、展開部４２０、および吸収パッド４３０を備える。ここで、検査対象液導入部４１０および吸収パッド４３０としては、図１を参照して説明した第１の実施形態に係るイムノクロマトテストストリップ１００の検査対象液導入部１１０および吸収パッド１３０と同様の構成を採用することができるため、詳細な説明を省略する。

【0064】

支持体４７０の材料としては、金属（アルミニウム、銅、ステンレスなどの合金）、ガラス、プラスチック（ポリシクロオレフィン、ポリスチレン、ポリプロピレン、ポリ塩化ビニルなど）、およびポリジメチルシロキサンなどの含ケイ素ポリマーを使用することができ、好ましくは金属、ガラス、ポリシクロオレフィン、ポリプロピレン、ポリジメチルシロキサンである。

【0065】

支持体４７０にマイクロ流路４８０を形成する方法としてはいかなるものでも良い。例えば、マイクロ流路４８０は、切削によって形成されていても良く、型押し（インプリント）で形成されていても良く、エッチングによって形成されていても良い。

【0066】

マイクロ流路４８０の幅方向（検査対象液の展開方向Ｄに直交する方向）の大きさ、および、深さ（支持体４７０の上面からマイクロ流路４８０の底面までの距離）は、１ミリメートル以下であり、好ましくは５００ミクロンメートル以下であり、より好ましくは２００ミクロンメートル以下であり、最も好ましくは１００ミクロンメートル以下である。

【0067】

マイクロ流路４８０は、その底面または側面の一部または全部が表面処理されており、当該表面処理された部分の水の接触角が５０度以下とされている。当該表面処理の方法はいかなるものでも良い。例えば、マイクロ流路４８０の所要の部分に大気圧プラズマ処理（コロナ放電やグロー放電も含む）を行うことで、当該処理が施された部分の水の接触角を低下させ、５０度以下となるようにすることができる。別の方法としては、マイクロ流路４８０の所要の部分に、支持体４７０とは異なる材料（化合物）を塗布することで、当該材料を塗布した部分の水の接触角を低下させ、５０度以下となるようにすることができる。後者の場合において、塗布する材料としては、例えば、エステル部分にヒドロキシル基、アルコキシ基、メトキシエトキシ基などのアルコキシアルコキシ基、アンモニウム基、スルホニル基、ホルホリル基などを有するポリアクリル酸またはポリメタクリル酸を挙げることができる。具体的には、例えば、２－メタクリロイルオキシエチルホスホリルコリン、ポリメトキシエトキシアクリレート、ポリエトキシメトキシアクリレートなどである。あるいは、国際公開第２０１４／０３８６７４号に記載されるように、様々な界面活性剤やアルコール類、糖類をマイクロ流路４８０の所要の部分に塗布したうえで、大気圧プラズマまたは電子線の照射によってそれらを重合させることで、当該部分の水の接触角を低下させ、５０度以下となるようにすることも可能である。さらには、上述したようなアクリル酸またはメタクリル酸のポリマー材料を塗布することに代えて、マイクロ流路４８０の所要の部分にモノマー材料を適用し、グラフト重合させることによって当該アクリル酸またはメタクリル酸のポリマーを当該部分に形成（成膜）させる方法を採用することも可能である。

【0068】

展開部４２０は、マイクロ流路４８０の一部分で構成されており、幅方向の大きさｗは、上述したマイクロ流路４８０の幅の大きさと等しいことが意図される。すなわち、図４に示すイムノクロマトテストストリップ４００では、展開部４２０の幅方向の大きさｗは、１ミリメートル以下である。

【0069】

図４に示すイムノクロマトテストストリップ４００では、標識分子４４０は、展開部４２０を構成するマイクロ流路４８０に対して、標識分子（マーカー抗体）を含む溶液を所定の位置に塗布することで配置することができる。また、判定部４５０も同様に、展開部４２０を構成するマイクロ流路４８０に対して、捕捉分子（捕捉抗体）を含む溶液を所定の位置に塗布することで形成することができる。

【0070】

なお、吸収パッド４３０を含め、その他の任意的な構成要素については、第１の実施形態に係るイムノクロマトテストストリップ１００について上述したのと同様である。図４に示すイムノクロマトテストストリップ４００は、展開部４２０において、判定部４５０よりも下流側に、コントロール部４６０が設けられている態様であり、その形成法としては、判定部４５０と同様に、展開部４２０を構成するマイクロ流路４８０に対して、標識分子４４０を捕捉する分子（コントロール抗体）を含む溶液を所定の位置に塗布すれば良い。

【0071】

＜第５の実施形態＞
図５Ａおよび図５Ｂは、それぞれ、実施態様５の展開部を備える本発明の第５の実施形態に係るイムノクロマトテストストリップの構成例を示す模式斜視図である。

【0072】

図５Ａに示すイムノクロマトテストストリップ５００は、支持体５７０に形成されたマイクロ流路５８０を備え、マイクロ流路５８０内に、図１を参照して説明した第１の実施形態に係るイムノクロマトテストストリップ１００と同様の構成を有する構造体が収容されている。一方、図５Ｂに示すイムノクロマトテストストリップ５０２は、支持体５７０に形成されたマイクロ流路５８０を備え、マイクロ流路５８０内に、図２を参照して説明した第２の実施形態に係るイムノクロマトテストストリップ２００と同様の構成を有する構造体が収容されている。なお、本実施形態のマイクロ流路５８０内に、図３を参照して説明した第３の実施形態に係るイムノクロマトテストストリップ３００と同様の構成を有する構造体が収容されている構成例については、図示を省略した。

【0073】

ここで、支持体５７０およびマイクロ流路５８０としては、図４を参照して説明した第４の実施形態に係るイムノクロマトテストストリップ４００の支持体４７０およびマイクロ流路４８０と同様の構成を採用することができる。但し、本実施形態においては、第４の実施形態に関して説明した表面処理は必須ではない点に留意されたい。第４の実施形態とは異なり、本実施形態のマイクロ流路５８０は、上述した実施態様１～３のいずれかの展開部を有する構造体（すなわち、イムノクロマトテストストリップ１００、２００、３００のいずれか）が収容される収容器としての役割を果たし、当該収容された構造体における展開部（すなわち、展開部１２０、２２０、３２０のいずれか）が、本実施形態に係るイムノクロマトテストストリップの展開部５２０として機能するからである。そのため、支持体５７０にマイクロ流路５８０を形成する際には、収容する構造体の大きさを考慮して、マイクロ流路５８０全体の大きさを設定する。

【0074】

第１～第３の実施形態に係るイムノクロマトテストストリップ１００、２００、３００は、実用において、テストストリップ全体の物理的強度に劣る場合があり得るが、本実施形態のイムノクロマトテストストリップの構成を採用することにより、テストストリップ全体の物理的強度を確保することができる。また、上述した任意的な構成要素としてのハウジングを設けることが好ましくないような場合には、本実施形態のイムノクロマトテストストリップの構成を採用することにより、テストストリップ全体のハンドリング性を高めることもできる。加えて、本実施形態のイムノクロマトテストストリップでは、マイクロ流路５８０の上面（支持体５７０においてマイクロ流路５８０が形成されている面）を開放可能にすることも容易であるので、テストストリップの用途に応じて、マイクロ流路５８０に収容する構造体を交換可能とする、すなわち、１つの支持体５７０を用いて複数の構造体に関する検査を行うことも可能である。

【0075】

＜第６の実施形態＞
図６Ａおよび図６Ｂは、それぞれ、実施態様６の展開部を備える本発明の第６の実施形態に係るイムノクロマトテストストリップの構成例を示す模式斜視図である。

【0076】

図６Ａに示すイムノクロマトテストストリップ６００は、支持体６７０に形成されたマイクロ流路６８０を備え、マイクロ流路６８０内に、微粒子６９０が充填されている。これにより、イムノクロマトテストストリップ６００では、微粒子６９０の表面を伝って検査対象液が移動可能に構成されている。これに対して、図６Ｂに示すイムノクロマトテストストリップ６０２は、支持体６７０に形成されたマイクロ流路６８０を備え、マイクロ流路６８０の底面に、複数の凸部６９２が設けられている。これにより、イムノクロマトテストストリップ６０２では、凸部６９２の表面を伝って検査対象液が移動可能に構成されている。

【0077】

ここで、支持体６７０およびマイクロ流路６８０としては、図４を参照して説明した第４の実施形態に係るイムノクロマトテストストリップ４００の支持体４７０およびマイクロ流路４８０と同様の構成を採用することができる。但し、本実施形態においては、第４の実施形態に関して説明した表面処理は必須ではない点に留意されたい。第４の実施形態とは異なり、図６Ａに示すイムノクロマトテストストリップ６００では、マイクロ流路６８０は、微粒子６９０が収容（充填）される収容器としての役割を果たし、検査対象液は、主として微粒子６９０の表面を伝って展開または流動し、そのような展開または流動が生じ得る微粒子６９０の一群が、本実施形態に係るイムノクロマトテストストリップの展開部６２０の要部として機能するからである。また、図６Ｂに示すイムノクロマトテストストリップ６０２では、マイクロ流路６８０は、その底面に複数の凸部６９２が設けられており、検査対象液は、主として凸部６９２の表面を伝って展開または流動し、そのような展開または流動が生じ得る凸部６９２の一群が、本実施形態に係るイムノクロマトテストストリップの展開部６２０の要部として機能するからである。もちろん、イムノクロマトテストストリップ６００，６０２において、マイクロ流路６８０の底面または側面と微粒子６９０の表面または凸部６９２の表面を伝って検査対象液が展開または流動することも可能であるので、必要に応じて上述した表面処理を行っても良い。

【0078】

微粒子６９０としては、シリカゲル、アルミナ、あるいは有機ポリマービーズ等の微粒子を好ましく用いることができる。微粒子６９０のサイズは、マイクロ流路６８０の幅方向（検査対象液の展開方向Ｄに直交する方向）の大きさの１／３以下が好ましい。具体的には、微粒子６９０の直径が３０ミクロンメートル以下であることが好ましく、より好ましくは１０ミクロンメートル以下である。微粒子６９０の表面には、検査対象液の展開または流動を促すため、または検査対象物の種類に応じてタンパク質の非特異吸着を低減するための表面処理が施されていても良い。

【0079】

凸部６９２の形状としては特に限定されず、図６Ｂに示すような側面視（検査対象液の展開方向Ｄに直交する方向から見た場合）で略円形（略楕円形）の形状であっても良く、略長方形、または略円錐形の形状であっても良い。また、凸部６９２の数、および間隔なども、適宜設計することができる。なお、国際公開第２０１５／０６２２３３号に開示されているようなブレード構造を採用することも、好ましい態様の一例として挙げられる。

【0080】

［イムノクロマトグラフ法による検査対象物検出方法］
次に、本発明のイムノクロマトテストストリップを用いる、イムノクロマトグラフ法による検査対象物検出方法について説明する。

【0081】

上述したように、本発明のイムノクロマトテストストリップは、専ら標識物質を検出可能な検査装置によって判定部の状態が検査される。すなわち、本発明に係るイムノクロマトグラフ法による検査対象物検出方法は、目視による読み取りを検査手段として想定せず、目視に依らず検査対象物を検出する方法である。具体的には、本発明に係るイムノクロマトグラフ法による検査対象物検出方法は、走査型電子顕微鏡の原理を用いた検査装置または蛍光顕微鏡の原理を用いた検査装置によって本発明のイムノクロマトテストストリップの判定部の状態を検査することを含む。

【0082】

走査型電子顕微鏡の原理を用いた検査装置による検査としては、例えば、検査装置に備えられた電子銃から発せられた電子線をイムノクロマトテストストリップの判定部に照射し、そこで発生する反射電子または二次電子をディテクターで検知することにより、画像情報として、標識分子（マーカー抗体）に担持された標識物質（この場合には金属微粒子が意図される）を観測することが挙げられる。このような検査手法は、非特許文献１に記載の手法を参照することができる。

【0083】

蛍光顕微鏡の原理を用いた検査装置による検査としては、例えば、標識物質として蛍光色素を含む微粒子が担持された標識分子（マーカー抗体）を用いる態様において、検査装置に備えられた光照射手段等から発せられたレーザー光などをイムノクロマトテストストリップの判定部に照射し、そこで発生する蛍光を光学ディテクターで検知することが挙げられる。但し、当該態様で用いる蛍光色素が金属元素（好ましくは周期律表においてカルシウムよりも原子番号が大きいもの）である場合には、蛍光顕微鏡の原理を用いた検査装置に代えて、もしくはそれと併用して、走査型電子顕微鏡の原理を用いた検査装置による検査を行うことも好ましい。

【0084】

本発明に係るイムノクロマトグラフ法による検査対象物検出方法においては、検査装置（例えば、上述した走査型電子顕微鏡の原理を用いた検査装置）によって取得される画像の鮮明さを向上させる目的で、検査用補助液を適用することも好ましい。この場合、当該補助液は、検査装置によってイムノクロマトテストストリップの判定部の状態を検査する前に適用される。具体的には、イムノクロマトテストストリップの検査対象液導入部に、検査対象液と当該補助液を同時に適用することでも良いし、検査対象液を少なくともイムノクロマトテストストリップの判定部まで展開または流動させた後に、当該補助液を判定部に適用することでも良いし、これらを組み合わせても良い。

【0085】

検査用補助液は、グリセリンおよびグリセリン代替物；ポリソルベート２０、ポリソルベート４０、ポリソルベート６０、ポリソルベート６５、ポリソルベート８０、ポリソルベート８５などのポリソルベート類、および、ポリソルベート類代替物から選ばれる少なくとも１種の界面活性性化合物を含むものであることが好ましい。また、単糖類、二糖類、塩類、および、緩衝液から選ばれる少なくとも１種の化合物を含んでなるものが好ましい。

【0086】

グリセリンは３価のアルコール（いわゆる多価アルコール）であり、水酸基を分子内に有し、低蒸気圧物質である。また、グリセリンは粘性を有している。これらの特徴を有する物質は、グリセリンの代替成分として上記補助液に含めることができる。具体的には、グリセリン代替物としては、例えば、ポリエチレングリコール、ポリビニルアルコール、トリグリセリド、ポリレゾルシノール、ポリフェノール、タンニン酸、ウルシオール、サポニンなどが挙げられる。グリセリンおよびグリセリン代替物は、１種を単独で用いても良く、２種以上を併用しても良い。

【0087】

本明細書において、「ポリソルベート類」とは、ソルビタン脂肪酸エステル（非イオン性界面活性剤）にエチレンオキシドを反応させて作製されたものを意図する。現在一般に入手可能なポリソルベート類としては、ポリソルベート２０（Ｔｗｅｅｎ ２０）、ポリソルベート４０（Ｔｗｅｅｎ ４０）、ポリソルベート６０（Ｔｗｅｅｎ ６０）、ポリソルベート６５（Ｔｗｅｅｎ ６５）、ポリソルベート８０（Ｔｗｅｅｎ ８０）、ポリソルベート８５（Ｔｗｅｅｎ ８５）が挙げられるが、上記補助液に含めることができるポリソルベート類はこれらに限定されない。また、ポリソルベート類と同様に非イオン性界面活性剤に分類される物質は、ポリソルベート類の代替成分として上記補助液に含めることができる。具体的には、ポリソルベート類代替物としては、例えば、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレン硬化ひまし油、ポリオキシエチレンモノ脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、アルキルポリグリコシド、Ｎ－メチルアルキルグルカミドなどが挙げられる。ポリソルベート類およびポリソルベート類代替物は、１種を単独で用いても良く、２種以上を併用しても良い。

【0088】

単糖類としては、例えば、グルコース、フルクトースなどが挙げられる。
二糖類としては、例えば、スクロース、トレハロースなどが挙げられる。
塩類としては、例えば、例えば、イミダゾリウム塩類、ピリジニウム塩類、ピペリジニウム塩類、ピロリジニウム塩類、四級アンモニウム塩類などが挙げられる。
緩衝液としては、例えば、酢酸緩衝液（酢酸・酢酸ナトリウム緩衝液）、リン酸緩衝液（リン酸・リン酸ナトリウム緩衝液）、クエン酸緩衝液（クエン酸・クエン酸ナトリウム緩衝液)、クエン酸リン酸緩衝液（クエン酸・リン酸ナトリウム緩衝液)、ホウ酸緩衝液、酒石酸緩衝液、トリス緩衝液などが挙げられる。
これらの単糖類、二糖類、塩類、および、緩衝液は、１種を単独で用いても良く、２種以上を併用しても良い。

【0089】

グリセリン、グリセリン代替物、ポリソルベート類、および、ポリソルベート類代替物から選ばれる少なくとも１種の化合物からなる必須成分は、上記補助液中に０．０１重量パーセントから１０重量パーセント含む態様が好ましく、０．０１重量パーセントから２重量パーセント含む態様がより好ましい。

【0090】

［イムノクロマトテストキット］
本発明のイムノクロマトテストキットは、上述した本発明のイムノクロマトテストストリップを構成要素に含んでなる。

【0091】

本発明のイムノクロマトテストキットは、上記イムノクロマトテストストリップに加え、上述した検査用補助液をさらに構成要素に含んでいてもよい。なお、当該補助液の特徴および具体的な組成などについては上述した通りであるので、詳細な説明は省略する。

【0092】

また、本発明のイムノクロマトテストキットは、上記補助液とは別個に、検査対象液を調製するための液体（抽出液）などを構成要素に含んでいてもよい。加えて、本発明のイムノクロマトテストキットは、上記イムノクロマトテストストリップ、検査用補助液などを使用するための使用説明書を構成要素に含んでいてもよい。当該使用説明書は、パッケージ挿入物、パッケージラベルを含み、特に限定されないが、例えば、添付文書、処方情報（Prescribing Information）、および、リーフレット（Leaflet）などが挙げられる。当該使用説明書は、紙媒体で提供されてもよく、電子媒体（例えば、インターネットで提供されるホームページ、電子メール）のような形態でも提供され得る。

【実施例0093】

以下、本発明の実施例について説明するが、本発明は、以下の実施例の範囲に制限されるものではない。

【0094】

［実施例１］
（試料の準備）
市販のイムノクロマトテストストリップ「アレルゲンアイ イムノクロマト（そば）」（プリマハム株式会社製、以下では便宜的に「アレルゲンアイ」とも称する。）を、メンブレンの幅が１ミリメートルになるように細断して、本発明の第１の実施形態の構成を具備するイムノクロマトテストストリップ（以下、「試料１のテストストリップ」と称する。）を得た。また、検査対象液（陽性コントロール液）として、市販の乾麺そばを微量粉砕して純水に懸濁させた溶液を調製した。

【0095】

（比較実験）
比較試料として、上記テストストリップ「アレルゲンアイ」を、そのままの形態で使用し、１００マイクロリットルの検査対象液をサンプルパッドに滴下して展開させたところ、目視により判定ラインに赤紫色の着色が生じたことから、このテストストリップを用いてそばタンパク質を検査対象物とする検査ができることが確認された（図９（ａ）の写真画像参照）。

【0096】

また、上記の赤紫色の着色が生じた判定ライン部分のうち上流側の任意の場所を走査型電子顕微鏡（株式会社日立ハイテク製；卓上電子顕微鏡ＴＭ－４０００）を用いて観察したところ、標識物質である金属ナノ粒子を確認することができた（図９（ｂ）の写真画像参照。観察倍率は５０００倍であった。）。さらに、この写真画像に対して画像処理ソフトウエア（Multi image tool、株式会社システムインフロンティア製）を用いて画像中の金属ナノ粒子を抽出し、個数を数えたところ、３８８個との結果が得られた。

【0097】

これに対して、検査対象液を２０００倍に希釈して、上記と同様に、そのままの形態でテストストリップ「アレルゲンアイ」にて展開させたところ、判定ラインの目視による読み取りは困難であり、陽性判定することはできなかった（図１０（ａ）の写真画像参照）。ここで、図１０（ａ）において、上段の写真画像は、図９（ａ）の写真画像を得た条件で得られたものであり、下段の写真画像は、検査対象液を２０００倍に希釈した条件で得られたものである。

【0098】

また、検査対象液を２０００倍に希釈した条件で得られた判定ライン部分のうち上流側の任意の場所を、上記と同様に、走査型電子顕微鏡で観察した（図１０（ｂ）の写真画像参照。観察倍率は５０００倍であった。）。さらに、この写真画像に対して、上記と同様に、画像処理ソフトウエアを用いて画像中の金属ナノ粒子を抽出し、個数を数えたところ、１６個との結果が得られた。

【0099】

次に、試料１のテストストリップを用いて、上記検査対象液を２０００倍に希釈した条件で、そばタンパク質を検査対象物とする検査を行った。

【0100】

図１１（ａ）は、本実施例で作製した試料１のテストストリップの外観を示す写真画像である。図１１（ａ）に示すように、比較試料のメンブレン（幅方向の大きさｙ：６ミリメートル）のうち、サンプルパッドの右端からコントロールラインの右端までの範囲において、幅方向の両端から内側にそれぞれ２．５ミリメートルの部分を切り取ることで、１ミリメートルの幅ｗを有する展開部を備えたテストストリップを得た。ここで、作製した試料１のテストストリップの平面視での寸法（符号は図１を参照。）は以下の通りであった。
・全長（検査対象液導入部１１０の左端から吸収パッド１３０の右端までの長さ）：１１０ミリメートル
・検査対象液導入部１１０および吸収パッド１３０の幅：６ミリメートル
・展開部１２０の幅ｗ：１ミリメートル
・検査対象液が展開または流動する距離ｍ：１１ミリメートル
・判定部１５０の幅：１ミリメートル

【0101】

上記検査対象液の２０００倍希釈液から、１００マイクロリットルを試料１のテストストリップの検査対象液導入部（サンプルパッド）に滴下して展開部（メンブレン）を展開させ、判定部（判定ライン部分）のうち上流側の任意の場所を上記と同様に走査型電子顕微鏡を用いて観察した。その結果、図１１（ｂ）に示すように、標識物質である金属ナノ粒子をはっきりと確認することができた（観察倍率は５０００倍であった。）。さらに、この写真画像に対して、上記と同様に、画像処理ソフトウエアを用いて画像中の金属ナノ粒子を抽出し、個数を数えたところ、９３個との結果が得られ、上記比較試料を用いた場合よりも有意な感度向上効果が確認された。つまり、試料１と比較試料とで、走査型電子顕微鏡による観察時の倍率は同じであり、観察に供した場所（判定ラインの上流側の場所）にある捕捉抗体の数はほぼ同じであると言えるところ、同じ組成を有する検査対象液を展開させたときに、試料１のテストストリップの方が、当該検査対象液に含まれる微量の検査対象物（そばタンパク質）が効率よく判定ラインに導かれる結果、当該そばタンパク質と捕捉抗体との特異的結合が効果的に生じ、標識物質である金属ナノ粒子の検出数が増加したと考えられる。

【符号の説明】

【0102】

１００、１０２、２００、３００ イムノクロマトテストストリップ
１１０、２１０、３１０ 検査対象液導入部
１２０、２２０、３２０ 展開部
１２２ メンブレン
２２４ （複数本の糸の）撚糸体
３２６ （複数本の糸の）並置体
１３０、２３０、３３０ 吸収パッド
１４０、２４０、３４０ 標識分子
１５０、２５０、３５０ 判定部
１５１ 第１の判定部
１５２ 第２の判定部
１５３ 第３の判定部
１６０、２６０、３６０ コントロール部
４００、５００、５０２、６００、６０２ イムノクロマトテストストリップ
４１０、５１０、６１０ 検査対象液導入部
４２０、５２０、６２０ 展開部
５２２ メンブレン
５２４ （複数本の糸の）撚糸体
４３０、５３０、６３０ 吸収パッド
４４０、５４０、６４０ 標識分子
４５０、５５０、６５０ 判定部
４６０、５６０、６６０ コントロール部
４７０、５７０、６７０ 支持体
４８０、５８０、６８０ マイクロ流路
６９０ 微粒子
６９２ 凸部
Ｌ 展開部の長さ
ｗ 展開部の幅
ｍ 検査対象液が展開または流動する距離
Ｄ 検査対象液の展開方向
Ｐ 従来技術に係るイムノクロマトテストストリップ
ｐ１ サンプルパッド
ｐ２ コンジュゲートパッド
ｐ３ メンブレン
ｐ４ 吸収パッド
ｔ 判定ライン
ｃ コントロールライン
ｘ メンブレンの長さ
ｙ メンブレンの幅
ｚ 検査対象液が展開する距離

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5A】

【図5B】

【図6A】

【図6B】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】