知財求人 - 知財ポータルサイト「IP Force」
▶ ユーリカ セラピューティックス， インコーポレイテッドの特許一覧
特開2024-38039キメラ活性化受容体及びキメラ刺激受容体を発現する細胞並びにその使用
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公開特許公報(A)
(11)【公開番号】P2024038039
(43)【公開日】2024-03-19
(54)【発明の名称】キメラ活性化受容体及びキメラ刺激受容体を発現する細胞並びにその使用
(51)【国際特許分類】
C12N 5/0783 20100101AFI20240312BHJP
C12N 5/10 20060101ALI20240312BHJP
C12N 15/62 20060101ALN20240312BHJP
C12N 15/13 20060101ALN20240312BHJP
C12N 15/12 20060101ALN20240312BHJP
【ＦＩ】
C12N5/0783
C12N5/10
C12N15/62 Z ZNA
C12N15/13
C12N15/12
【審査請求】有
【請求項の数】1
【出願形態】ＯＬ
【外国語出願】
(21)【出願番号】P 2023216495
(22)【出願日】2023-12-22
(62)【分割の表示】P 2019558623の分割
【原出願日】2018-04-24
(31)【優先権主張番号】62/490,576
(32)【優先日】2017-04-26
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】62/490,578
(32)【優先日】2017-04-26
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】62/490,580
(32)【優先日】2017-04-26
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(71)【出願人】
【識別番号】321002949
【氏名又は名称】ユーリカ セラピューティックス， インコーポレイテッド
(74)【代理人】
【識別番号】110002077
【氏名又は名称】園田・小林弁理士法人
(72)【発明者】
【氏名】リュー， ホン
(72)【発明者】
【氏名】ジャン， ペンボー
(72)【発明者】
【氏名】ホラン， ルーカス
(72)【発明者】
【氏名】シュー， イーヤン
(72)【発明者】
【氏名】ステイリー， ビナズ ケー．
(72)【発明者】
【氏名】リュー， リャンシン
(72)【発明者】
【氏名】ユン， ホンルオ
(57)【要約】 （修正有）
【課題】キメラ抗体－Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）構築物（ｃａＴＣＲ）及びキメラシグナル伝達受容体（ＣＳＲ）構築物を含む免疫細胞（Ｔ細胞など）を提供する。
【解決手段】ｃａＴＣＲは、標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールと、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することができるＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）とを含み、ＣＳＲは、標的リガンドに特異的に結合するリガンド結合ドメインと、免疫細胞に刺激シグナルを提供することができる共刺激シグナル伝達ドメインと、を含む。これらの細胞を作製及び使用する方法も提供される。
【選択図】なし
【解決手段】ｃａＴＣＲは、標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールと、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することができるＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）とを含み、ＣＳＲは、標的リガンドに特異的に結合するリガンド結合ドメインと、免疫細胞に刺激シグナルを提供することができる共刺激シグナル伝達ドメインと、を含む。これらの細胞を作製及び使用する方法も提供される。
【選択図】なし
【特許請求の範囲】
【請求項1】
免疫細胞であって、
ａ）キメラ抗体－Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）構築物（ｃａＴＣＲ）であって、
ｉ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュール、並びに
ｉｉ）第１のＴＣＲ膜貫通ドメイン（ＴＣＲ－ＴＭ）を含む第１のＴＣＲドメイン（
ＴＣＲＤ）、及び第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを含むＴ細胞受容体モジュー
ル（ＴＣＲＭ）を含み、
前記ＴＣＲＭが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を促進する、キ
メラ抗体－Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）構築物（ｃａＴＣＲ）と、
ｂ）キメラシグナル伝達受容体（ＣＳＲ）であって、
ｉ）標的リガンドに結合又は相互作用することができるリガンド結合モジュール、
ｉｉ）膜貫通モジュール、及び
ｉｉｉ）前記免疫細胞に共刺激シグナルを提供することができる共刺激免疫細胞シグ
ナル伝達モジュールを含み、
前記リガンド結合モジュール及び前記共刺激免疫細胞シグナル伝達モジュールが同一の
分子に由来せず、前記ＣＳＲが機能的な一次免疫細胞シグナル伝達ドメインを欠く、キメ
ラシグナル伝達受容体（ＣＳＲ）と、
を含む、免疫細胞。
ａ）キメラ抗体－Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）構築物（ｃａＴＣＲ）であって、
ｉ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュール、並びに
ｉｉ）第１のＴＣＲ膜貫通ドメイン（ＴＣＲ－ＴＭ）を含む第１のＴＣＲドメイン（
ＴＣＲＤ）、及び第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを含むＴ細胞受容体モジュー
ル（ＴＣＲＭ）を含み、
前記ＴＣＲＭが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を促進する、キ
メラ抗体－Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）構築物（ｃａＴＣＲ）と、
ｂ）キメラシグナル伝達受容体（ＣＳＲ）であって、
ｉ）標的リガンドに結合又は相互作用することができるリガンド結合モジュール、
ｉｉ）膜貫通モジュール、及び
ｉｉｉ）前記免疫細胞に共刺激シグナルを提供することができる共刺激免疫細胞シグ
ナル伝達モジュールを含み、
前記リガンド結合モジュール及び前記共刺激免疫細胞シグナル伝達モジュールが同一の
分子に由来せず、前記ＣＳＲが機能的な一次免疫細胞シグナル伝達ドメインを欠く、キメ
ラシグナル伝達受容体（ＣＳＲ）と、
を含む、免疫細胞。
【請求項2】
前記ＣＳＲが、いずれの一次免疫細胞シグナル伝達配列も欠く、請求項１に記載の免疫
細胞。
細胞。
【請求項3】
前記標的抗原が細胞表面抗原である、請求項１又は２に記載の免疫細胞。
【請求項4】
前記標的抗原が、ペプチド及び主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）タンパク質を含む
複合体である、請求項１又は２に記載の免疫細胞。
複合体である、請求項１又は２に記載の免疫細胞。
【請求項5】
前記第１のＴＣＲ－ＴＭが、第１のＴ細胞受容体の膜貫通ドメインのうちの１つに由来
し、前記第２のＴＣＲ－ＴＭが、前記第１のＴ細胞受容体の他の膜貫通ドメインに由来す
る、請求項１～４のいずれか一項に記載の免疫細胞。
し、前記第２のＴＣＲ－ＴＭが、前記第１のＴ細胞受容体の他の膜貫通ドメインに由来す
る、請求項１～４のいずれか一項に記載の免疫細胞。
【請求項6】
前記ＴＣＲ－ＴＭのうちの少なくとも１つが天然に存在しないものである、請求項５に
記載の免疫細胞。
記載の免疫細胞。
【請求項7】
前記第１のＴ細胞受容体がγ／δ Ｔ細胞受容体である、請求項５又は６に記載の免疫
細胞。
細胞。
【請求項8】
前記抗原結合モジュールが多重特異性である、請求項１～７のいずれか一項に記載の免
疫細胞。
疫細胞。
【請求項9】
前記ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインを含む安定化モジ
ュールを更に含み、前記第１及び第２の安定化ドメインが、前記ｃａＴＣＲを安定化させ
る、互いの結合親和性を有する、請求項１～８のいずれか一項に記載の免疫細胞。
ュールを更に含み、前記第１及び第２の安定化ドメインが、前記ｃａＴＣＲを安定化させ
る、互いの結合親和性を有する、請求項１～８のいずれか一項に記載の免疫細胞。
【請求項10】
前記安定化モジュールが、ＣＨ１－ＣＬモジュール、ＣＨ２－ＣＨ２モジュール、ＣＨ
３－ＣＨ３モジュール、及びＣＨ４－ＣＨ４モジュールからなる群から選択される、請求
項９に記載の免疫細胞。
３－ＣＨ３モジュール、及びＣＨ４－ＣＨ４モジュールからなる群から選択される、請求
項９に記載の免疫細胞。
【請求項11】
前記標的抗原と前記標的リガンドが同一である、請求項１～１０のいずれか一項に記載
の免疫細胞。
の免疫細胞。
【請求項12】
前記標的抗原と前記標的リガンドが異なる、請求項１～１０のいずれか一項に記載の免
疫細胞。
疫細胞。
【請求項13】
前記標的リガンドが、前記標的抗原を提示する細胞の表面に発現するリガンドである、
請求項１２に記載の免疫細胞。
請求項１２に記載の免疫細胞。
【請求項14】
前記標的リガンドが、疾患関連リガンドである、請求項１～１３のいずれか一項に記載
の免疫細胞。
の免疫細胞。
【請求項15】
前記標的リガンドが、がん関連リガンドである、請求項１４に記載の免疫細胞。
【請求項16】
前記標的リガンドがウイルス関連リガンドである、請求項１４に記載の免疫細胞。
【請求項17】
前記標的リガンドが免疫調節分子である、請求項１～１３のいずれか一項に記載の免疫
細胞。
細胞。
【請求項18】
前記免疫調節分子が免疫抑制受容体であり、前記ＣＳＲが前記免疫抑制受容体のアンタ
ゴニストである、請求項１７に記載の免疫細胞。
ゴニストである、請求項１７に記載の免疫細胞。
【請求項19】
前記免疫調節分子が免疫刺激受容体であり、前記ＣＳＲが前記免疫刺激受容体のアゴニ
ストである、請求項１７に記載の免疫細胞。
ストである、請求項１７に記載の免疫細胞。
【請求項20】
前記標的リガンドが免疫チェックポイント分子である、請求項１７に記載の免疫細胞。
【請求項21】
前記標的リガンドが阻害性サイトカインである、請求項１７に記載の免疫細胞。
【請求項22】
前記標的リガンドがアポトーシス分子である、請求項１～１３のいずれか一項に記載の
免疫細胞。
免疫細胞。
【請求項23】
前記リガンド結合モジュールが抗体部分である、請求項１～２２のいずれか一項に記載
の免疫細胞。
の免疫細胞。
【請求項24】
前記リガンド結合モジュールが、受容体の細胞外ドメインに由来する、請求項１～２２
のいずれか一項に記載の免疫細胞。
のいずれか一項に記載の免疫細胞。
【請求項25】
前記ＣＳＲの前記膜貫通モジュールが、ＣＤ２８、ＣＤ３ε、ＣＤ３ζ、ＣＤ４５、Ｃ
Ｄ４、ＣＤ５、ＣＤ８、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、
ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、又はＣＤ１５４に由来する膜貫通ドメイ
ンを含む、請求項１～２４のいずれか一項に記載の免疫細胞。
Ｄ４、ＣＤ５、ＣＤ８、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、
ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、又はＣＤ１５４に由来する膜貫通ドメイ
ンを含む、請求項１～２４のいずれか一項に記載の免疫細胞。
【請求項26】
前記共刺激免疫細胞シグナル伝達モジュールが、ＴＣＲの共刺激受容体の細胞内ドメイ
ンに由来する、請求項１～２５のいずれか一項に記載の免疫細胞。
ンに由来する、請求項１～２５のいずれか一項に記載の免疫細胞。
【請求項27】
前記共刺激受容体が、ＣＤ２８、４－１ＢＢ、ＯＸ４０、ＩＣＯＳ、ＣＤ２７、及びＣ
Ｄ４０からなる群から選択される、請求項２６に記載の免疫細胞。
Ｄ４０からなる群から選択される、請求項２６に記載の免疫細胞。
【請求項28】
前記ＣＳＲの発現が誘導可能である、請求項１～２７のいずれか一項に記載の免疫細胞
。
。
【請求項29】
前記ＣＳＲの発現が、前記免疫細胞の活性化の際に誘導可能である、請求項２８に記載
の免疫細胞。
の免疫細胞。
【請求項30】
前記ｃａＴＣＲの前記抗原結合モジュールが、ＣＤ１９に結合する抗体部分を含み、前
記ＣＳＲの前記リガンド結合モジュールがＣＤ１９に結合するｓｃＦｖを含み、前記膜貫
通モジュール及び共刺激免疫細胞シグナル伝達モジュールは両方ともＣＤ２８に由来する
、請求項１～２９のいずれか一項に記載の免疫細胞。
記ＣＳＲの前記リガンド結合モジュールがＣＤ１９に結合するｓｃＦｖを含み、前記膜貫
通モジュール及び共刺激免疫細胞シグナル伝達モジュールは両方ともＣＤ２８に由来する
、請求項１～２９のいずれか一項に記載の免疫細胞。
【請求項31】
前記ｃａＴＣＲの前記抗原結合モジュールが、ＡＦＰに結合する抗体部分を含み、前記
ＣＳＲの前記リガンド結合モジュールがＧＰＣ３に結合するｓｃＦｖを含み、前記膜貫通
モジュール及び共刺激免疫細胞シグナル伝達モジュールは両方ともＣＤ２８に由来する、
請求項１～２９のいずれか一項に記載の免疫細胞。
ＣＳＲの前記リガンド結合モジュールがＧＰＣ３に結合するｓｃＦｖを含み、前記膜貫通
モジュール及び共刺激免疫細胞シグナル伝達モジュールは両方ともＣＤ２８に由来する、
請求項１～２９のいずれか一項に記載の免疫細胞。
【請求項32】
前記ｃａＴＣＲの前記抗原結合モジュールが、ＣＤ１９に結合する抗体部分を含み、前
記ＣＳＲの前記リガンド結合モジュールがＣＤ２０に結合するｓｃＦｖを含み、前記膜貫
通モジュール及び共刺激免疫細胞シグナル伝達モジュールは両方ともＣＤ２８に由来する
、請求項１～２９のいずれか一項に記載の免疫細胞。
記ＣＳＲの前記リガンド結合モジュールがＣＤ２０に結合するｓｃＦｖを含み、前記膜貫
通モジュール及び共刺激免疫細胞シグナル伝達モジュールは両方ともＣＤ２８に由来する
、請求項１～２９のいずれか一項に記載の免疫細胞。
【請求項33】
請求項１～３２のいずれか一項に記載のｃａＴＣＲ及びＣＳＲをコードしている１つ以
上の核酸であって、前記ｃａＴＣＲ及びＣＳＲがそれぞれ、前記１つ以上の核酸によりコ
ードされる１つ以上のポリペプチド鎖からなる、１つ以上の核酸。
上の核酸であって、前記ｃａＴＣＲ及びＣＳＲがそれぞれ、前記１つ以上の核酸によりコ
ードされる１つ以上のポリペプチド鎖からなる、１つ以上の核酸。
【請求項34】
請求項３３に記載の１つ以上の核酸を含む、１つ以上のベクター。
【請求項35】
請求項３３に記載の１つ以上の核酸、請求項３４に記載の１つ以上のベクターを含む、
免疫細胞。
免疫細胞。
【請求項36】
前記免疫細胞が、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、及び
サプレッサーＴ細胞からなる群から選択される、請求項１～３２のいずれか一項に記載の
免疫細胞。
サプレッサーＴ細胞からなる群から選択される、請求項１～３２のいずれか一項に記載の
免疫細胞。
【請求項37】
請求項１～３２のいずれか一項に記載の免疫細胞と、医薬的に許容される担体と、を含
む、医薬組成物。
む、医薬組成物。
【請求項38】
標的抗原を提示する標的細胞を殺傷する（又は標的抗原関連疾患を治療する）方法であ
って、前記標的細胞を請求項１～３２のいずれか一項に記載の免疫細胞と接触させること
を含む、方法。
って、前記標的細胞を請求項１～３２のいずれか一項に記載の免疫細胞と接触させること
を含む、方法。
【請求項39】
標的抗原関連疾患の治療を必要とする個体において標的抗原関連疾患を治療する方法で
あって、有効量の請求項３７に記載の医薬組成物を前記個体に投与することを含む、方法
。
あって、有効量の請求項３７に記載の医薬組成物を前記個体に投与することを含む、方法
。
【請求項40】
ｃａＴＣＲを含むか、又はｃａＴＣＲをコードする核酸で形質導入された免疫細胞に共
刺激シグナルを提供する方法であって、請求項３３に記載の１つ以上の核酸又は請求項３
４に記載の１つ以上のベクターを前記細胞に導入することを含む、方法。
刺激シグナルを提供する方法であって、請求項３３に記載の１つ以上の核酸又は請求項３
４に記載の１つ以上のベクターを前記細胞に導入することを含む、方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
［関連出願の相互参照］
本出願は、２０１７年４月２６日出願の米国特許仮出願第６２／４９０，５７６号、２
０１７年４月２６日出願の米国特許仮出願第６２／４９０，５７８号、及び、２０１７年
４月２６日出願の米国特許仮出願第６２／４９０，５８０号に対する優先権を主張するも
のであり、それらの内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
［ＡＳＣＩＩテキストファイルでの配列表の提出］
本出願は、２０１７年４月２６日出願の米国特許仮出願第６２／４９０，５７６号、２
０１７年４月２６日出願の米国特許仮出願第６２／４９０，５７８号、及び、２０１７年
４月２６日出願の米国特許仮出願第６２／４９０，５８０号に対する優先権を主張するも
のであり、それらの内容は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
［ＡＳＣＩＩテキストファイルでの配列表の提出］
【0002】
ＡＳＣＩＩテキストファイルでの以下の提出物の内容は、参照によりその全体が本明細
書に組み込まれる：コンピュータ可読形態（ＣＲＦ）の配列表（ファイル名：７５００４
２００１０４０ＳＥＱＬＩＳＴ．ｔｘｔ、記録日：２０１８年４月２４日、サイズ：１０
７ＫＢ）。
書に組み込まれる：コンピュータ可読形態（ＣＲＦ）の配列表（ファイル名：７５００４
２００１０４０ＳＥＱＬＩＳＴ．ｔｘｔ、記録日：２０１８年４月２４日、サイズ：１０
７ＫＢ）。
【0003】
本発明は、キメラ抗体－Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）構築物（ｃａＴＣＲ）及びキメラシグ
ナル伝達受容体（ＣＳＲ）構築物を含む免疫細胞（Ｔ細胞など）に関する。ＣａＴＣＲは
、標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールと、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグ
ナル伝達分子を動員することができるＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）とを含み、Ｃ
ＳＲは、標的リガンドに特異的に結合するリガンド結合ドメインと、免疫細胞に刺激シグ
ナルを提供することができる共刺激シグナル伝達ドメインと、を含む。
ナル伝達受容体（ＣＳＲ）構築物を含む免疫細胞（Ｔ細胞など）に関する。ＣａＴＣＲは
、標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールと、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグ
ナル伝達分子を動員することができるＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）とを含み、Ｃ
ＳＲは、標的リガンドに特異的に結合するリガンド結合ドメインと、免疫細胞に刺激シグ
ナルを提供することができる共刺激シグナル伝達ドメインと、を含む。
【背景技術】
【0004】
Ｔ細胞媒介性免疫は、ウイルス、細菌、寄生虫感染、又は悪性細胞を排除するために抗
原（Ａｇ）特異的Ｔリンパ球を発現する適応過程である。それはまた、自己抗原の異常認
識を伴い、自己免疫炎症性疾患をもたらす。Ｔリンパ球のＡｇ特異性は、Ａｇ提示細胞（
ＡＰＣ）上の主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）分子により提示される固有の抗原ペプ
チドのＴ細胞受容体（ＴＣＲ）を通じた認識に基づく（Ｂｒｏｅｒｅ，ｅｔ ａｌ．，Ｐ
ｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２０１１）。各Ｔ
リンパ球は、胸腺における成熟時の発生選択の結果として、細胞表面に固有のＴＣＲを発
現する。ＴＣＲは、αβヘテロ二量体又はγδヘテロ二量体のいずれかとして２つの形態
で生じる。Ｔ細胞は、細胞表面にαβ形態又はγδ形態のいずれかのＴＣＲを発現する。
４つの鎖、α／β／γ／δは全て、高多型「免疫グロブリン可変領域」様のＮ末端ドメイ
ン及び「免疫グロブリン定常領域」様の第２のドメインからなる特徴的な細胞外構造を有
する。これらのドメインのそれぞれが、特徴的なドメイン内ジスルフィド架橋を有する。
定常領域は、細胞膜の近位にあり、連結ペプチド、膜貫通領域、及び短い細胞質尾部が続
く。ヘテロ二量体ＴＣＲの２つの鎖間の共有結合は、細胞外定常ドメインと膜貫通領域と
を架橋する短い連結ペプチド配列内に位置するシステイン残基によって形成され、それは
対応する位置で対になったＴＣＲ鎖システイン残基とジスルフィド結合を形成する（Ｔｈ
ｅ Ｔ ｃｅｌｌ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｆａｃｔｓｂｏｏｋ，２００１）。
原（Ａｇ）特異的Ｔリンパ球を発現する適応過程である。それはまた、自己抗原の異常認
識を伴い、自己免疫炎症性疾患をもたらす。Ｔリンパ球のＡｇ特異性は、Ａｇ提示細胞（
ＡＰＣ）上の主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）分子により提示される固有の抗原ペプ
チドのＴ細胞受容体（ＴＣＲ）を通じた認識に基づく（Ｂｒｏｅｒｅ，ｅｔ ａｌ．，Ｐ
ｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２０１１）。各Ｔ
リンパ球は、胸腺における成熟時の発生選択の結果として、細胞表面に固有のＴＣＲを発
現する。ＴＣＲは、αβヘテロ二量体又はγδヘテロ二量体のいずれかとして２つの形態
で生じる。Ｔ細胞は、細胞表面にαβ形態又はγδ形態のいずれかのＴＣＲを発現する。
４つの鎖、α／β／γ／δは全て、高多型「免疫グロブリン可変領域」様のＮ末端ドメイ
ン及び「免疫グロブリン定常領域」様の第２のドメインからなる特徴的な細胞外構造を有
する。これらのドメインのそれぞれが、特徴的なドメイン内ジスルフィド架橋を有する。
定常領域は、細胞膜の近位にあり、連結ペプチド、膜貫通領域、及び短い細胞質尾部が続
く。ヘテロ二量体ＴＣＲの２つの鎖間の共有結合は、細胞外定常ドメインと膜貫通領域と
を架橋する短い連結ペプチド配列内に位置するシステイン残基によって形成され、それは
対応する位置で対になったＴＣＲ鎖システイン残基とジスルフィド結合を形成する（Ｔｈ
ｅ Ｔ ｃｅｌｌ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｆａｃｔｓｂｏｏｋ，２００１）。
【0005】
Αβ及びγδのＴＣＲは、非多型膜結合ＣＤ３タンパク質に関連して、ＴＣＲヘテロ二
量体及び３つの二量体シグナル伝達分子、ＣＤ３δ／ε、ＣＤ３γ／ε、及びＣＤ３ζ／
ζ又はζ／ηからなる、機能性八量体ＴＣＲ－ＣＤ３複合体を形成する。各サブユニット
の膜貫通ドメイン内のイオン化可能な残基は、複合体を一緒に保持する相互作用の極性ネ
ットワークを形成する。Ｔ細胞活性化のために、ＴＣＲのＮ末端可変領域は、標的細胞の
表面に提示されるペプチド／ＭＨＣ複合体を認識し、一方、ＣＤ３タンパク質は、シグナ
ル伝達に関与する（Ｃａｌｌ ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｌｌ．１１１（７）：９６７－７９，
２００２；Ｔｈｅ Ｔ ｃｅｌｌ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｆａｃｔｓｂｏｏｋ，２００１）
。
量体及び３つの二量体シグナル伝達分子、ＣＤ３δ／ε、ＣＤ３γ／ε、及びＣＤ３ζ／
ζ又はζ／ηからなる、機能性八量体ＴＣＲ－ＣＤ３複合体を形成する。各サブユニット
の膜貫通ドメイン内のイオン化可能な残基は、複合体を一緒に保持する相互作用の極性ネ
ットワークを形成する。Ｔ細胞活性化のために、ＴＣＲのＮ末端可変領域は、標的細胞の
表面に提示されるペプチド／ＭＨＣ複合体を認識し、一方、ＣＤ３タンパク質は、シグナ
ル伝達に関与する（Ｃａｌｌ ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｌｌ．１１１（７）：９６７－７９，
２００２；Ｔｈｅ Ｔ ｃｅｌｌ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｆａｃｔｓｂｏｏｋ，２００１）
。
【0006】
通常型ＴＣＲとも呼ばれるαβのＴＣＲは、ほとんどのリンパ球で発現し、グリコシル
化多型α及びβ鎖からなる。異なるαβのＴＣＲｓは、寸法及び形状が比較的一定である
、ＭＨＣ ＩＩ（主にＡＰＣ細胞表面で発現）とＭＨＣ Ｉ（全ての有核細胞で発現され
る）の分子の表面に埋め込まれた異なるペプチドを区別することができる。αβのＴＣＲ
と構造的に類似しているが、γδのＴＣＲは、ＭＨＣ提示とは独立した様式で、炭水化物
、ヌクレオチド、又はリン含有抗原を認識する（Ｔｈｅ Ｔ ｃｅｌｌ Ｒｅｃｅｐｔｏ
ｒ Ｆａｃｔｓｂｏｏｋ，２００１、Ｇｉｒａｒｄｉ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ
．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．１２６（１）：２５－３１，２００６、Ｈａｙｅｓ ｅｔ ａｌ．
，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ．１６（６）：８２７－３８，２００２）。
化多型α及びβ鎖からなる。異なるαβのＴＣＲｓは、寸法及び形状が比較的一定である
、ＭＨＣ ＩＩ（主にＡＰＣ細胞表面で発現）とＭＨＣ Ｉ（全ての有核細胞で発現され
る）の分子の表面に埋め込まれた異なるペプチドを区別することができる。αβのＴＣＲ
と構造的に類似しているが、γδのＴＣＲは、ＭＨＣ提示とは独立した様式で、炭水化物
、ヌクレオチド、又はリン含有抗原を認識する（Ｔｈｅ Ｔ ｃｅｌｌ Ｒｅｃｅｐｔｏ
ｒ Ｆａｃｔｓｂｏｏｋ，２００１、Ｇｉｒａｒｄｉ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ
．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．１２６（１）：２５－３１，２００６、Ｈａｙｅｓ ｅｔ ａｌ．
，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ．１６（６）：８２７－３８，２００２）。
【0007】
過去２０年間、免疫学と腫瘍生物学の基礎的な進展は、多数の腫瘍抗原の同定と相まっ
て、細胞ベースの免疫療法の分野で大きな進歩をもたらした。Ｔ細胞療法は、細胞ベース
の免疫療法の分野において大きな部分を占め、自家性及びエクスビボで増殖したＴ細胞を
患者に移植することによってがんを治療することを目的とし、いくつかの顕著な抗腫瘍応
答をもたらした（Ｂｌａｔｔｍａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ．３０５（５６８１
）：２００－５，２００４）。例えば、エクスビボで増幅した天然に存在する腫瘍浸潤リ
ンパ球（ＴＩＬ）の投与は、肝臓、肺、軟組織、及び脳を含む複数の部位における嵩高な
浸潤性腫瘍を含む、黒色腫患者において、５０～７０％の範囲の客観的応答率を媒介する
（Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｃａｎｃｅｒ．８（４）：２９
９－３０８，２００８；Ｄｕｄｌｅｙ ＭＥ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ
．２３（１０）：２３４６－５７，２００５）。
て、細胞ベースの免疫療法の分野で大きな進歩をもたらした。Ｔ細胞療法は、細胞ベース
の免疫療法の分野において大きな部分を占め、自家性及びエクスビボで増殖したＴ細胞を
患者に移植することによってがんを治療することを目的とし、いくつかの顕著な抗腫瘍応
答をもたらした（Ｂｌａｔｔｍａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ．３０５（５６８１
）：２００－５，２００４）。例えば、エクスビボで増幅した天然に存在する腫瘍浸潤リ
ンパ球（ＴＩＬ）の投与は、肝臓、肺、軟組織、及び脳を含む複数の部位における嵩高な
浸潤性腫瘍を含む、黒色腫患者において、５０～７０％の範囲の客観的応答率を媒介する
（Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｃａｎｃｅｒ．８（４）：２９
９－３０８，２００８；Ｄｕｄｌｅｙ ＭＥ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ
．２３（１０）：２３４６－５７，２００５）。
【0008】
ＴＩＬ療法の広範な適用に対する主な制限は、抗腫瘍可能性を有するヒトＴ細胞の生成
における困難である。代替的なアプローチとして、外因性高親和性ＴＣＲを、Ｔ細胞遺伝
子操作を通じて患者の正常な自家性Ｔ細胞に導入することができる。リンパ球枯渇患者へ
のこれらの細胞の養子移入は、黒色腫、大腸直腸癌、及び滑膜肉腫などのがんにおけるが
ん退縮を媒介することが示されている（Ｋｕｎｅｒｔ Ｒ ｅｔ ａｌ．，Ｆｒｏｎｔ．
Ｉｍｍｕｎｏｌ．４：３６３，２０１３）。滑膜肉腫に対する抗ＮＹ－ＥＳＯ－１ ＴＣ
Ｒを使用する最近の第Ｉ相臨床試験は、６６％の全体の応答率を報告し、Ｔ細胞療法を受
けている患者のうちの１人において完全な応答が達成された（Ｒｏｂｂｉｎｓ ＰＦ ｅ
ｔ ａｌ．，Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．２１（５）：１０１９－２７，２０１５
）。
における困難である。代替的なアプローチとして、外因性高親和性ＴＣＲを、Ｔ細胞遺伝
子操作を通じて患者の正常な自家性Ｔ細胞に導入することができる。リンパ球枯渇患者へ
のこれらの細胞の養子移入は、黒色腫、大腸直腸癌、及び滑膜肉腫などのがんにおけるが
ん退縮を媒介することが示されている（Ｋｕｎｅｒｔ Ｒ ｅｔ ａｌ．，Ｆｒｏｎｔ．
Ｉｍｍｕｎｏｌ．４：３６３，２０１３）。滑膜肉腫に対する抗ＮＹ－ＥＳＯ－１ ＴＣ
Ｒを使用する最近の第Ｉ相臨床試験は、６６％の全体の応答率を報告し、Ｔ細胞療法を受
けている患者のうちの１人において完全な応答が達成された（Ｒｏｂｂｉｎｓ ＰＦ ｅ
ｔ ａｌ．，Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．２１（５）：１０１９－２７，２０１５
）。
【0009】
ＴＣＲ遺伝子操作Ｔ細胞療法の利点の１つは、ＭＨＣ提示を通して細胞表面に加工及び
送達される潜在的な細胞内腫瘍特異的タンパク質のアレイ全体を標的とすることができる
ことである。更に、ＴＣＲは高感度であり、ごく少数の抗原ペプチド／ＭＨＣ分子によっ
て活性化することができ、ひいては、サイトカイン分泌、Ｔ細胞増殖、及び明確に定義さ
れた標的細胞の細胞溶解を含む、細胞溶解性Ｔ細胞応答を誘起することができる。したが
って、抗体療法又は小分子療法と比較して、ＴＣＲ遺伝子操作Ｔ細胞は、標的細胞内抗原
の非常に少数のコピーによって標的細胞を殺傷する能力にとって特に有用である（Ｋｕｎ
ｅｒｔ Ｒ ｅｔ ａｌ．，Ｆｒｏｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．４：３６３，２０１３）。
送達される潜在的な細胞内腫瘍特異的タンパク質のアレイ全体を標的とすることができる
ことである。更に、ＴＣＲは高感度であり、ごく少数の抗原ペプチド／ＭＨＣ分子によっ
て活性化することができ、ひいては、サイトカイン分泌、Ｔ細胞増殖、及び明確に定義さ
れた標的細胞の細胞溶解を含む、細胞溶解性Ｔ細胞応答を誘起することができる。したが
って、抗体療法又は小分子療法と比較して、ＴＣＲ遺伝子操作Ｔ細胞は、標的細胞内抗原
の非常に少数のコピーによって標的細胞を殺傷する能力にとって特に有用である（Ｋｕｎ
ｅｒｔ Ｒ ｅｔ ａｌ．，Ｆｒｏｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．４：３６３，２０１３）。
【0010】
しかしながら、大部分がハイブリドーマ又はディスプレイ技術によって発見される治療
抗体とは異なり、標的特異的ＴＣＲの同定は、患者Ｔ細胞からの標的ペプチド／ＭＨＣ特
異的ＴＣＲクローンの確立と、最適な標的抗原結合親和性を有する正しいα－β鎖の組み
合わせのスクリーニングとを必要とする。非常に多くの場合、ファージ／酵母ディスプレ
イは、ＴＣＲの標的結合親和性を更に向上させるために、患者Ｔ細胞からのＴＣＲのクロ
ーニング後に使用される。プロセス全体は、多くの領域において専門知識を必要とし、時
間がかかる（Ｋｏｂａｙａｓｈｉ Ｅ ｅｔ ａｌ．，Ｏｎｃｏｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．
３（１）：ｅ２７２５８，２０１４）。ＴＣＲ発見プロセスにおける困難は、ＴＣＲ遺伝
子操作されたＴ細胞療法の広範な適用を大きく妨げる。これはまた、治療関連毒性、特に
、腫瘍細胞上で過剰発現するが健康な細胞にも発現する抗原に対するＴＣＲによって、又
は、オフ標的ペプチド／ＭＨＣ複合体を認識するＴＣＲによっても妨害されている（Ｒｏ
ｓｅｎｂｅｒｇ ＳＡ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ．３４８（６２３０）：６２－８
，２０１５）。
抗体とは異なり、標的特異的ＴＣＲの同定は、患者Ｔ細胞からの標的ペプチド／ＭＨＣ特
異的ＴＣＲクローンの確立と、最適な標的抗原結合親和性を有する正しいα－β鎖の組み
合わせのスクリーニングとを必要とする。非常に多くの場合、ファージ／酵母ディスプレ
イは、ＴＣＲの標的結合親和性を更に向上させるために、患者Ｔ細胞からのＴＣＲのクロ
ーニング後に使用される。プロセス全体は、多くの領域において専門知識を必要とし、時
間がかかる（Ｋｏｂａｙａｓｈｉ Ｅ ｅｔ ａｌ．，Ｏｎｃｏｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．
３（１）：ｅ２７２５８，２０１４）。ＴＣＲ発見プロセスにおける困難は、ＴＣＲ遺伝
子操作されたＴ細胞療法の広範な適用を大きく妨げる。これはまた、治療関連毒性、特に
、腫瘍細胞上で過剰発現するが健康な細胞にも発現する抗原に対するＴＣＲによって、又
は、オフ標的ペプチド／ＭＨＣ複合体を認識するＴＣＲによっても妨害されている（Ｒｏ
ｓｅｎｂｅｒｇ ＳＡ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ．３４８（６２３０）：６２－８
，２０１５）。
【0011】
標的化がん免疫療法のためにＴ細胞を利用するために、近年、異なるアプローチが開発
されてきた。この新規のアプローチは、キメラ抗原受容体Ｔ細胞療法（ＣＡＲ－Ｔ）と呼
ばれる。それは、モノクローナル抗体の絶妙な標的特異性を、細胞傷害性Ｔ細胞によって
提供される強力な細胞傷害性及び長期持続性と融合させる。ＣＡＲは、細胞表面抗原を認
識する細胞外ドメイン、膜貫通領域、及び細胞内シグナル伝達ドメインから構成される。
細胞外ドメインは、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）に融合されるモノクローナル抗体の重鎖及
び軽鎖からの抗原結合可変領域からなる。細胞内シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３ζ又は
ＦｃＲγからのものなどの免疫受容体活性化チロシンモチーフ（ＩＴＡＭ）、及びＣＤ２
８、４－１ＢＢ又はＯＸ４０からのものなどの１つ以上の共刺激シグナル伝達ドメインを
含む（Ｂａｒｒｅｔｔ ＤＭ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｍｅｄ．６５：３３３
－４７，２０１４；Ｄａｖｉｌａ ＭＬ ｅｔ ａｌ．，Ｏｎｃｏｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ
．１（９）：１５７７－１５８３，２０１２）。Ｔ細胞表面上に移植されたＣＡＲによる
標的抗原の結合は、Ｔ細胞エフェクター機能を、ＴＣＲ－ペプチド／ＭＨＣ複合体相互作
用と独立して誘起することができる。したがって、ＣＡＲを含むＴ細胞は、Ｔ細胞上のＴ
ＣＲのＭＨＣタイプと一致しないが標的細胞表面抗原を発現するものを含む、多様な細胞
を攻撃するように再指向され得る。このアプローチは、ＭＨＣ拘束ＴＣＲ認識の制約を克
服し、抗原提示又はＭＨＣ分子発現における機能障害を介する腫瘍回避を避ける。臨床試
験は、神経芽細胞腫（Ｌｏｕｉｓ ＣＵ ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ．１１８（２３）：
６０５０－６０５６，２０１１）、Ｂ－ＡＬＬ（Ｍａｕｄｅ，ＳＬ，ｅｔ ａｌ．，Ｎｅ
ｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ３７１：１６：１５０
７－１５１７，２０１４）、ＣＬＬ（Ｂｒｅｎｔｊｅｎｓ，ＲＪ，ｅｔ ａｌ．Ｂｌｏｏ
ｄ １１８：１８：４８１７－４８２８，２０１１）、及びＢリンパ腫（Ｋｏｃｈｅｎｄ
ｅｒｆｅｒ，ＪＮ，ｅｔ ａｌ．Ｂｌｏｏｄ １１６：２０：４０９９－４１０２，２０
１０）におけるＣＡＲ－Ｔ療法の臨床的に有意な抗腫瘍活性を示している。１つの研究で
は、ＣＤ１９－ＣＡＲ Ｔ療法で治療したＢ－ＡＬＬを有する３０人の患者における９０
％の完全寛解率を報告した（Ｍａｕｄｅ，ＳＬ，ｅｔ ａｌ．、前出）。
されてきた。この新規のアプローチは、キメラ抗原受容体Ｔ細胞療法（ＣＡＲ－Ｔ）と呼
ばれる。それは、モノクローナル抗体の絶妙な標的特異性を、細胞傷害性Ｔ細胞によって
提供される強力な細胞傷害性及び長期持続性と融合させる。ＣＡＲは、細胞表面抗原を認
識する細胞外ドメイン、膜貫通領域、及び細胞内シグナル伝達ドメインから構成される。
細胞外ドメインは、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）に融合されるモノクローナル抗体の重鎖及
び軽鎖からの抗原結合可変領域からなる。細胞内シグナル伝達ドメインは、ＣＤ３ζ又は
ＦｃＲγからのものなどの免疫受容体活性化チロシンモチーフ（ＩＴＡＭ）、及びＣＤ２
８、４－１ＢＢ又はＯＸ４０からのものなどの１つ以上の共刺激シグナル伝達ドメインを
含む（Ｂａｒｒｅｔｔ ＤＭ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｍｅｄ．６５：３３３
－４７，２０１４；Ｄａｖｉｌａ ＭＬ ｅｔ ａｌ．，Ｏｎｃｏｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ
．１（９）：１５７７－１５８３，２０１２）。Ｔ細胞表面上に移植されたＣＡＲによる
標的抗原の結合は、Ｔ細胞エフェクター機能を、ＴＣＲ－ペプチド／ＭＨＣ複合体相互作
用と独立して誘起することができる。したがって、ＣＡＲを含むＴ細胞は、Ｔ細胞上のＴ
ＣＲのＭＨＣタイプと一致しないが標的細胞表面抗原を発現するものを含む、多様な細胞
を攻撃するように再指向され得る。このアプローチは、ＭＨＣ拘束ＴＣＲ認識の制約を克
服し、抗原提示又はＭＨＣ分子発現における機能障害を介する腫瘍回避を避ける。臨床試
験は、神経芽細胞腫（Ｌｏｕｉｓ ＣＵ ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ．１１８（２３）：
６０５０－６０５６，２０１１）、Ｂ－ＡＬＬ（Ｍａｕｄｅ，ＳＬ，ｅｔ ａｌ．，Ｎｅ
ｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ３７１：１６：１５０
７－１５１７，２０１４）、ＣＬＬ（Ｂｒｅｎｔｊｅｎｓ，ＲＪ，ｅｔ ａｌ．Ｂｌｏｏ
ｄ １１８：１８：４８１７－４８２８，２０１１）、及びＢリンパ腫（Ｋｏｃｈｅｎｄ
ｅｒｆｅｒ，ＪＮ，ｅｔ ａｌ．Ｂｌｏｏｄ １１６：２０：４０９９－４１０２，２０
１０）におけるＣＡＲ－Ｔ療法の臨床的に有意な抗腫瘍活性を示している。１つの研究で
は、ＣＤ１９－ＣＡＲ Ｔ療法で治療したＢ－ＡＬＬを有する３０人の患者における９０
％の完全寛解率を報告した（Ｍａｕｄｅ，ＳＬ，ｅｔ ａｌ．、前出）。
【0012】
これまでに研究された全てのＣＡＲは、高い細胞表面発現を有する腫瘍抗原を対象とし
てきた。全ての既知の腫瘍特異的抗原の９５％を表す低コピー数細胞表面腫瘍抗原及び細
胞内腫瘍抗原を標的とするために、より強力かつ有効な遺伝子操作された細胞療法を開発
する必要がある（Ｃｈｅｅｖｅｒ，ｅｔ ａｌ．，Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．１
５（１７）：５３２３－３７，２００９）。
Ｔ細胞受容体エフェクター機能に特異的な抗体を有するキメラ受容体分子を遺伝子操作
するためのいくつかの試みがなされてきた。例えば、Ｋｕｗａｎａ，Ｙ，ｅｔ ａｌ．，
Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．１４９（３）：９６０－９６
８，１９８７、Ｇｒｏｓｓ，Ｇ，ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ
．ＵＳＡ．８６：１００２４－１００２８，１９８９、Ｇｒｏｓｓ，Ｇ ＆ Ｅｓｈｈａ
ｒ，Ｚ，ＦＡＳＥＢ Ｊ．６（１５）：３３７０－３３７８，１９９２、及び米国特許第
７，７４１，４６５号を参照されたい。今日まで、これらのキメラ受容体はいずれも臨床
使用のために採用されておらず、ヒトＴ細胞における発現及び機能性が改善された抗体－
ＴＣＲキメラ受容体の新規な設計が必要とされている。
本明細書で参照した全ての出版物、特許、特許出願、及び特許出願公開の開示内容は、
参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。ＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＵＳ２０１６／
０５８３０５は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
てきた。全ての既知の腫瘍特異的抗原の９５％を表す低コピー数細胞表面腫瘍抗原及び細
胞内腫瘍抗原を標的とするために、より強力かつ有効な遺伝子操作された細胞療法を開発
する必要がある（Ｃｈｅｅｖｅｒ，ｅｔ ａｌ．，Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．１
５（１７）：５３２３－３７，２００９）。
Ｔ細胞受容体エフェクター機能に特異的な抗体を有するキメラ受容体分子を遺伝子操作
するためのいくつかの試みがなされてきた。例えば、Ｋｕｗａｎａ，Ｙ，ｅｔ ａｌ．，
Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．１４９（３）：９６０－９６
８，１９８７、Ｇｒｏｓｓ，Ｇ，ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ
．ＵＳＡ．８６：１００２４－１００２８，１９８９、Ｇｒｏｓｓ，Ｇ ＆ Ｅｓｈｈａ
ｒ，Ｚ，ＦＡＳＥＢ Ｊ．６（１５）：３３７０－３３７８，１９９２、及び米国特許第
７，７４１，４６５号を参照されたい。今日まで、これらのキメラ受容体はいずれも臨床
使用のために採用されておらず、ヒトＴ細胞における発現及び機能性が改善された抗体－
ＴＣＲキメラ受容体の新規な設計が必要とされている。
本明細書で参照した全ての出版物、特許、特許出願、及び特許出願公開の開示内容は、
参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。ＰＣＴ出願番号ＰＣＴ／ＵＳ２０１６／
０５８３０５は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0013】
【特許文献1】米国特許第７７４１４６５号明細書
【非特許文献】
【0014】
【非特許文献1】Ｂｒｏｅｒｅ，ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２０１１
【非特許文献2】Ｔｈｅ Ｔ ｃｅｌｌ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｆａｃｔｓｂｏｏｋ，２００１
【非特許文献3】Ｃａｌｌ ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｌｌ．１１１（７）：９６７－７９，２００２；Ｔｈｅ Ｔ ｃｅｌｌ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｆａｃｔｓｂｏｏｋ，２００１
【非特許文献4】Ｇｉｒａｒｄｉ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｎｖｅｓｔ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．１２６（１）：２５－３１，２００６
【非特許文献5】Ｈａｙｅｓ ｅｔ ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ．１６（６）：８２７－３８，２００２
【非特許文献6】Ｂｌａｔｔｍａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ．３０５（５６８１）：２００－５，２００４
【非特許文献7】Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｃａｎｃｅｒ．８（４）：２９９－３０８，２００８
【非特許文献8】Ｄｕｄｌｅｙ ＭＥ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．２３（１０）：２３４６－５７，２００５
【非特許文献9】Ｋｕｎｅｒｔ Ｒ ｅｔ ａｌ．，Ｆｒｏｎｔ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．４：３６３，２０１３
【非特許文献10】Ｒｏｂｂｉｎｓ ＰＦ ｅｔ ａｌ．，Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．２１（５）：１０１９－２７，２０１５
【非特許文献11】Ｋｏｂａｙａｓｈｉ Ｅ ｅｔ ａｌ．，Ｏｎｃｏｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．３（１）：ｅ２７２５８，２０１４
【非特許文献12】Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ ＳＡ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ．３４８（６２３０）：６２－８，２０１５
【非特許文献13】Ｂａｒｒｅｔｔ ＤＭ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｍｅｄ．６５：３３３－４７，２０１４
【非特許文献14】Ｄａｖｉｌａ ＭＬ ｅｔ ａｌ．，Ｏｎｃｏｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．１（９）：１５７７－１５８３，２０１２
【非特許文献15】Ｌｏｕｉｓ ＣＵ ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ．１１８（２３）：６０５０－６０５６，２０１１
【非特許文献16】Ｍａｕｄｅ，ＳＬ，ｅｔ ａｌ．，Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ３７１：１６：１５０７－１５１７，２０１４
【非特許文献17】Ｂｒｅｎｔｊｅｎｓ，ＲＪ，ｅｔ ａｌ．Ｂｌｏｏｄ １１８：１８：４８１７－４８２８，２０１１
【非特許文献18】Ｋｏｃｈｅｎｄｅｒｆｅｒ，ＪＮ，ｅｔ ａｌ．Ｂｌｏｏｄ １１６：２０：４０９９－４１０２，２０１０
【非特許文献19】Ｃｈｅｅｖｅｒ，ｅｔ ａｌ．，Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．１５（１７）：５３２３－３７，２００９
【非特許文献20】Ｋｕｗａｎａ，Ｙ，ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．１４９（３）：９６０－９６８，１９８７
【非特許文献21】Ｇｒｏｓｓ，Ｇ，ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ．８６：１００２４－１００２８，１９８９
【非特許文献22】Ｇｒｏｓｓ，Ｇ ＆ Ｅｓｈｈａｒ，Ｚ，ＦＡＳＥＢ Ｊ．６（１５）：３３７０－３３７８，１９９２
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【0015】
一態様では本出願は、キメラ抗体－Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）構築物（ｃａＴＣＲ）及び
キメラシグナル伝達受容体（ＣＳＲ）構築物を含む免疫細胞（Ｔ細胞など）に関する。Ｃ
ａＴＣＲは、標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールと、少なくとも１つのＴＣ
Ｒ関連シグナル伝達分子を動員することができるＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）と
を含み、ＣＳＲは、標的リガンドに特異的に結合するリガンド結合ドメインと、免疫細胞
に刺激シグナルを提供することができる共刺激シグナル伝達ドメインと、を含む。
キメラシグナル伝達受容体（ＣＳＲ）構築物を含む免疫細胞（Ｔ細胞など）に関する。Ｃ
ａＴＣＲは、標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールと、少なくとも１つのＴＣ
Ｒ関連シグナル伝達分子を動員することができるＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）と
を含み、ＣＳＲは、標的リガンドに特異的に結合するリガンド結合ドメインと、免疫細胞
に刺激シグナルを提供することができる共刺激シグナル伝達ドメインと、を含む。
【0016】
いくつかの実施形態では、ａ）キメラ抗体－Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）構築物（ｃａＴＣ
Ｒ）であって、ｉ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュール、並びにｉｉ）第１
のＴＣＲ膜貫通ドメイン（ＴＣＲ－ＴＭ）を含む第１のＴＣＲドメイン（ＴＣＲＤ）及び
第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを含み、Ｔ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）
が、少なくとも１つのＴＣＲ－関連シグナル伝達分子の動員を促進するＴ細胞受容体モジ
ュール（ＴＣＲＭ）を含む、キメラ抗体－Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）構築物（ｃａＴＣＲ）
と、ｂ）キメラシグナル伝達受容体（ＣＳＲ）であって、ｉ）標的リガンドに結合又は相
互作用することができるリガンド結合モジュール、ｉｉ）膜貫通モジュール、並びにｉｉ
ｉ）免疫細胞に共刺激シグナルを提供することができる共刺激免疫細胞シグナル伝達モジ
ュールを含み、リガンド結合モジュール及び共刺激免疫細胞シグナル伝達モジュールは、
同一の分子から誘導されない、キメラシグナル伝達受容体（ＣＳＲ）と、を含み、ＣＳＲ
が機能的な一次免疫細胞シグナル伝達ドメインを欠いている、免疫細胞が提供される。
Ｒ）であって、ｉ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュール、並びにｉｉ）第１
のＴＣＲ膜貫通ドメイン（ＴＣＲ－ＴＭ）を含む第１のＴＣＲドメイン（ＴＣＲＤ）及び
第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを含み、Ｔ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）
が、少なくとも１つのＴＣＲ－関連シグナル伝達分子の動員を促進するＴ細胞受容体モジ
ュール（ＴＣＲＭ）を含む、キメラ抗体－Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）構築物（ｃａＴＣＲ）
と、ｂ）キメラシグナル伝達受容体（ＣＳＲ）であって、ｉ）標的リガンドに結合又は相
互作用することができるリガンド結合モジュール、ｉｉ）膜貫通モジュール、並びにｉｉ
ｉ）免疫細胞に共刺激シグナルを提供することができる共刺激免疫細胞シグナル伝達モジ
ュールを含み、リガンド結合モジュール及び共刺激免疫細胞シグナル伝達モジュールは、
同一の分子から誘導されない、キメラシグナル伝達受容体（ＣＳＲ）と、を含み、ＣＳＲ
が機能的な一次免疫細胞シグナル伝達ドメインを欠いている、免疫細胞が提供される。
【0017】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるｃａＴＣＲ及びＣＳＲをコードする１
つ以上の核酸が提供され、ｃａＴＣＲ及びＣＳＲはそれぞれ、１つ以上の核酸によりコー
ドされる１つ以上のポリペプチド鎖からなる。
つ以上の核酸が提供され、ｃａＴＣＲ及びＣＳＲはそれぞれ、１つ以上の核酸によりコー
ドされる１つ以上のポリペプチド鎖からなる。
【0018】
いくつかの実施形態では、ａ）キメラ抗体－Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）構築物（ｃａＴＣ
Ｒ）であって、ｉ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュール、並びにｉｉ）第１
のＴＣＲ膜貫通ドメイン（ＴＣＲ－ＴＭ）を含む第１のＴＣＲドメイン（ＴＣＲＤ）及び
第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを含み、Ｔ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）
が、少なくとも１つのＴＣＲ－関連シグナル伝達分子の動員を促進するＴ細胞受容体モジ
ュール（ＴＣＲＭ）を含み、ｃａＴＣＲが１つ以上のポリペプチド鎖からなる、キメラ抗
体－Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）構築物（ｃａＴＣＲ）と、ｂ）キメラシグナル伝達受容体（
ＣＳＲ）であって、ｉ）標的リガンドに結合又は相互作用することができるリガンド結合
モジュール、ｉｉ）膜貫通モジュール、並びにｉｉｉ）免疫細胞に共刺激シグナルを提供
することができる共刺激免疫細胞シグナル伝達モジュールを含み、リガンド結合モジュー
ル及び共刺激免疫細胞シグナル伝達モジュールは、同一の分子から誘導されない、キメラ
シグナル伝達受容体（ＣＳＲ）と、をコードし、ＣＳＲが機能的な一次免疫細胞シグナル
伝達ドメインを欠き、ＣＳＲが１つ以上のポリペプチド鎖からなる、１つ以上の核酸が提
供される。
Ｒ）であって、ｉ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュール、並びにｉｉ）第１
のＴＣＲ膜貫通ドメイン（ＴＣＲ－ＴＭ）を含む第１のＴＣＲドメイン（ＴＣＲＤ）及び
第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを含み、Ｔ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）
が、少なくとも１つのＴＣＲ－関連シグナル伝達分子の動員を促進するＴ細胞受容体モジ
ュール（ＴＣＲＭ）を含み、ｃａＴＣＲが１つ以上のポリペプチド鎖からなる、キメラ抗
体－Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）構築物（ｃａＴＣＲ）と、ｂ）キメラシグナル伝達受容体（
ＣＳＲ）であって、ｉ）標的リガンドに結合又は相互作用することができるリガンド結合
モジュール、ｉｉ）膜貫通モジュール、並びにｉｉｉ）免疫細胞に共刺激シグナルを提供
することができる共刺激免疫細胞シグナル伝達モジュールを含み、リガンド結合モジュー
ル及び共刺激免疫細胞シグナル伝達モジュールは、同一の分子から誘導されない、キメラ
シグナル伝達受容体（ＣＳＲ）と、をコードし、ＣＳＲが機能的な一次免疫細胞シグナル
伝達ドメインを欠き、ＣＳＲが１つ以上のポリペプチド鎖からなる、１つ以上の核酸が提
供される。
【0019】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の１つ以上の核酸を含む１つ以上のベクター
が提供される。
が提供される。
【0020】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の１つ以上の核酸又は１つ以上のベクターを
含む組成物が提供される。
含む組成物が提供される。
【0021】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の１つ以上の核酸又は１つ以上のベクターを
含む免疫細胞が提供される。
含む免疫細胞が提供される。
【0022】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載される免疫細胞と、薬学的に許容される担体
と、を含む医薬組成物が提供される。
と、を含む医薬組成物が提供される。
【0023】
いくつかの実施形態では、標的抗原を提示する標的細胞を殺傷する方法であって、標的
細胞を本明細書に記載される免疫細胞と接触させることを含む、方法が提供される。
細胞を本明細書に記載される免疫細胞と接触させることを含む、方法が提供される。
【0024】
いくつかの実施形態では、標的抗原関連疾患の治療を必要とする個体において標的抗原
関連疾患を治療する方法であって、有効量の本明細書に記載される医薬組成物を個体に投
与することを含む、方法が提供される。
関連疾患を治療する方法であって、有効量の本明細書に記載される医薬組成物を個体に投
与することを含む、方法が提供される。
【0025】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲを含むか、又はｃａＴＣＲをコードする核酸で形
質導入された免疫細胞に共刺激シグナルを提供する方法であって、本明細書に記載される
、１つ以上の核酸又は１つ以上のベクターを上記細胞に導入することを含む、方法が提供
される。
質導入された免疫細胞に共刺激シグナルを提供する方法であって、本明細書に記載される
、１つ以上の核酸又は１つ以上のベクターを上記細胞に導入することを含む、方法が提供
される。
【図面の簡単な説明】
【0026】
【図1】異なる抗原結合モジュールを有するいくつかのｃａＴＣＲ分子の概略図を示す。
【0027】
【図2】抗ＣＤ１９ ｃａＴＣＲ－１－０単独、抗ＣＤ１９ ＣＳＲ単独、又は抗ＣＤ１９ ｃａＴＣＲ（１－０及び１－ＴＭ５）＋抗ＣＤ１９ ＣＳＲで形質導入されたＴ細胞によって媒介される、がん細胞株ＮＡＬＭ６（ＣＤ１９＋）の殺傷による特異的溶解パーセントを示す。
【0028】
【図3】抗ＣＤ１９ ｃａＴＣＲ－１－０単独、抗ＣＤ１９ ＣＳＲ単独、又は抗ＣＤ１９ ｃａＴＣＲ（１－０及び１－ＴＭ５）＋抗ＣＤ１９ ＣＳＲで形質導入されたＴ細胞によって媒介される、がん細胞株ＮＡＬＭ６のインビトロ殺傷後の上清中に見出されるサイトカイン（ＩＬ－２、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＦＮ－γ、及びＴＮＦ－α）の濃度を示す。
【0029】
【図4】がん細胞株ＮＡＬＭ６による刺激後の、抗ＣＤ１９ ｃａＴＣＲ－１－０単独、抗ＣＤ１９ ＣＳＲ単独、又は抗ＣＤ１９ ｃａＴＣＲ（１－０及び１－ＴＭ５）＋抗ＣＤ１９ ＣＳＲで形質導入されたＴ細胞における脱顆粒活性（ＣＤ１０７ａ発現により決定される）を示す。
【0030】
【図5】がん細胞株ＢＶ１７３又はＮＡＬＭ６による刺激後の、抗ＣＤ１９ ｃａＴＣＲ－１－０単独又は抗ＣＤ１９ ｃａＴＣＲ（１－０及び１－ＴＭ５）＋抗ＣＤ１９ ＣＳＲで形質導入されたＴ細胞の増殖（ＣＦＳＥ色素希釈により決定される）を示す。
【0031】
【図6】抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊２：０１ ｃａＴＣＲ－１－０単独、抗ＧＰＣ３ ＣＳＲ単独、又は抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊２：０１ ｃａＴＣＲ（１－０及び１－ＴＭ５）＋抗ＧＰＣ３ ＣＳＲで形質導入されたＴ細胞によって媒介される、がん細胞株ＨｅｐＧ２（ＡＦＰ＋／ＧＰＣ３＋）及びＨｅｐＧ２－ＧＰＣ３．ｋｏ（ＡＦＰ＋／ＧＰＣ３－）の殺傷による特異的溶解パーセントを示す。
【0032】
【図7】抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊２：０１ ｃａＴＣＲ－１－０単独、抗ＧＰＣ３ ＣＳＲ単独、又は抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊２：０１ ｃａＴＣＲ（１－０及び１－ＴＭ５）＋抗ＧＰＣ３ ＣＳＲで形質導入されたＴ細胞によって媒介される、がん細胞株ＨｅｐＧ２及びＨｅｐＧ２－ＧＰＣ３．ｋｏのインビトロ殺傷後の上清中に見出されるサイトカイン（ＩＬ－２、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＦＮ－γ、及びＴＮＦ－α）の濃度を示す。
【0033】
【図8】がん細胞株ＨｅｐＧ２によって刺激された後の、抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊２：０１ ｃａＴＣＲ－１－０単独、抗ＧＰＣ３ ＣＳＲ単独、又は抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊２：０１ ｃａＴＣＲ（１－０及び１－ＴＭ５）＋抗ＧＰＣ３ ＣＳＲで形質導入されたＴ細胞における脱顆粒活性（ＣＤ１０７ａ発現により決定される）を示す。
【0034】
【図9】がん細胞株ＨｅｐＧ２によって刺激された後の、抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊２：０１ ｃａＴＣＲ－１－０単独、抗ＧＰＣ３ ＣＳＲ単独、又は抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊２：０１ ｃａＴＣＲ（１－０及び１－ＴＭ５）＋抗ＧＰＣ３ ＣＳＲで形質導入されたＴ細胞の増殖（ＣＦＳＥ色素希釈により決定される）を示す。
【0035】
【図10】抗ＣＤ１９ ｃａＴＣＲ（１－０及び１－ＴＭ５）＋抗ＣＤ２０ ＣＳＲで形質導入されたＴ細胞によって媒介される、がん細胞株Ｒａｊｉ、ＢＶ１７３、ＮＡＬＭ６、及びＪｅｋｏ－１（各々、ＣＤ１９＋／ＣＤ２０＋）の殺傷による特異的溶解率を示す。
【0036】
【図11】抗ＣＤ１９ ｃａＴＣＲ－１－０単独、又は抗ＣＤ１９ ｃａＴＣＲ（１－０及び１－ＴＭ５）＋抗ＣＤ２０ ＣＳＲで形質導入されたＴ細胞によって媒介される、がん細胞株Ｒａｊｉのインビトロ殺傷後の上清中に見出されるサイトカイン（ＩＬ－２、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＦＮ－γ、及びＴＮＦ－α）の濃度を示す。
【0037】
【図12】がん細胞株Ｒａｊｉによって刺激された後の、抗ＣＤ２０ ｃａＴＣＲ－１－０単独、抗ＣＤ２０ ＣＳＲ単独、又は抗ＣＤ１９ ｃａＴＣＲ（１－０及び１－ＴＭ５）＋抗ＣＤ１９ ＣＳＲで形質導入されたＴ細胞における脱顆粒活性（ＣＤ１０７ａ発現により決定される）を示す。
【0038】
【図13A】例示的な二重特異性ｃａＴＣＲ分子の概略構造を示す。
【図13B】例示的な二重特異性ｃａＴＣＲ分子の概略構造を示す。
【図13C】例示的な二重特異性ｃａＴＣＲ分子の概略構造を示す。
【図13D】例示的な二重特異性ｃａＴＣＲ分子の概略構造を示す。
【図13E】例示的な二重特異性ｃａＴＣＲ分子の概略構造を示す。
【0039】
【図14】がん細胞株ＮＡＬＭ６による刺激後の、抗ＣＤ１９ ｃａＴＣＲ－１－０及び抗ＣＤ１９ ＣＳＲを発現するＴ細胞の増殖（ＣＦＳＥ色素希釈により決定される）を示す。
【図15】がん細胞株ＮＡＬＭ６による刺激後の、抗ＣＤ１９ ｃａＴＣＲ－１－０及び抗ＣＤ１９ ＣＳＲを発現するＴ細胞の増殖（ＣＦＳＥ色素希釈により決定される）を示す。
【0040】
【図16】モック処理、又は抗ＣＤ１９ ｃａＴＣＲ－１、若しくは抗ＣＤ１９ ＣＳＲ－１と組み合わせて抗ＣＤ１９ ｃａＴＣＲ－１を発現するＴ細胞の単回の腫瘍内注射を伴う、ＮＡＬＭ６の皮下マウスモデルにおける腫瘍増殖を示す。
【0041】
【図17】抗ＣＤ１９ ＣＡＲを発現するＴ細胞、又は抗ＣＤ１９ ｃａＴＣＲ－１及び抗ＣＤ１９ ＣＳＲ－１の両方を発現するＴ細胞により処理したマウスにおける血清サイトカインレベルを示す。スチューデントｔ検定を使用して、２つの群における血清サイトカインレベルの統計的有意性を分析する（＊＊Ｐ＜０．０１、＊＊＊Ｐ＜０．００１、＊＊＊＊Ｐ＜０．０００１）。
【0042】
【図18】モック処理、又は抗ＡＦＰ ＣＡＲ、若しくは抗ＧＰＣ３ ＣＳＲと組み合わせて抗ＡＦＰ ＣＡＲを発現するＴ細胞の単回の腫瘍内注射を伴う、ＨｅｐＧ２の皮下マウスモデルにおける腫瘍増殖を示す。
【発明を実施するための形態】
【0043】
本出願は、キメラ抗体－Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）構築物（ｃａＴＣＲ）及びキメラシグ
ナル伝達受容体（ＣＳＲ）構築物を含む免疫細胞（Ｔ細胞など）に関する。ｃａＴＣＲは
、標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールと、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグ
ナル伝達分子を動員することができるＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）と、を含む。
ＣＳＲは、標的リガンドに特異的に結合するリガンド結合ドメインと、免疫細胞に刺激シ
グナルを提供することが可能な共刺激免疫細胞シグナル伝達ドメインと、を含み、機能的
な一次免疫細胞シグナル伝達配列を含まない。標的抗原及び標的リガンドは、疾患細胞表
面上のＭＨＣ提示疾患関連抗原ペプチドなどの、細胞表面に発現するタンパク質、又はペ
プチド及びＭＨＣタンパク質を含む複合体（本明細書では「ｐＭＨＣ複合体」若しくは「
ｐＭＨＣ」と呼ばれる）であり得る。ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞受容体活性化を制御する天然
に存在する機構によって調節され、ＣＳＲを介したシグナル伝達は、ｃａＴＣＲによって
媒介される免疫応答を増強することができる。
ナル伝達受容体（ＣＳＲ）構築物を含む免疫細胞（Ｔ細胞など）に関する。ｃａＴＣＲは
、標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールと、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグ
ナル伝達分子を動員することができるＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）と、を含む。
ＣＳＲは、標的リガンドに特異的に結合するリガンド結合ドメインと、免疫細胞に刺激シ
グナルを提供することが可能な共刺激免疫細胞シグナル伝達ドメインと、を含み、機能的
な一次免疫細胞シグナル伝達配列を含まない。標的抗原及び標的リガンドは、疾患細胞表
面上のＭＨＣ提示疾患関連抗原ペプチドなどの、細胞表面に発現するタンパク質、又はペ
プチド及びＭＨＣタンパク質を含む複合体（本明細書では「ｐＭＨＣ複合体」若しくは「
ｐＭＨＣ」と呼ばれる）であり得る。ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞受容体活性化を制御する天然
に存在する機構によって調節され、ＣＳＲを介したシグナル伝達は、ｃａＴＣＲによって
媒介される免疫応答を増強することができる。
【0044】
本発明者らは、ｃａＴＣＲ及びＣＳＲ構築物を含む一連の新規Ｔ細胞を開発した。これ
らは、標的細胞結合に応答して、ＣＳＲの非存在下でｃａＴＣＲのみを発現する細胞と比
較して増加したサイトカイン発現を伴って標的を持つ腫瘍細胞に対する強力な細胞傷害性
を示した。これらの細胞内にＣＳＲを含めることにより、ｃａＴＣＲのみを発現する細胞
と比較して、脱顆粒、増殖、及び生存率を更に向上させる。
らは、標的細胞結合に応答して、ＣＳＲの非存在下でｃａＴＣＲのみを発現する細胞と比
較して増加したサイトカイン発現を伴って標的を持つ腫瘍細胞に対する強力な細胞傷害性
を示した。これらの細胞内にＣＳＲを含めることにより、ｃａＴＣＲのみを発現する細胞
と比較して、脱顆粒、増殖、及び生存率を更に向上させる。
【0045】
したがって、本出願は、標的抗原に特異的なｃａＴＣＲと標的リガンドに特異的なＣＳ
Ｒとを含む免疫細胞を提供し、このｃａＴＣＲは、標的抗原に特異的に結合する抗原結合
モジュールと、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することができるＴ
細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）と、を含み、ＣＳＲは、ａ）標的リガンドに特異的に
結合するリガンド結合ドメインと、免疫細胞に刺激シグナルを提供することができる共刺
激免疫細胞シグナル伝達ドメインとを含み、ｂ）機能的な一次免疫細胞シグナル伝達配列
を含まない。ｃａＴＣＲは、抗原結合モジュール及び／又はＴＣＲＭの変動を有する多数
のフォーマットのうちのいずれかをとることができる。例えば、ｃａＴＣＲは、Ｆａｂ、
Ｆａｂ’、ａ（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、及びｓｃＦｖからなる群から選択される部分を含む
抗原結合モジュールと、膜貫通ドメイン、連結ペプチド、及び細胞内ドメインのうちの１
つ以上における変異型を含む、α／β又はγ／δのＴＣＲに由来する１つ以上の配列を含
むＴＣＲＭとを含むことができる。図１を参照されたい。いくつかの実施形態では、抗原
結合モジュールは、多重特異性（二重特異性など）である。ＣＳＲは同様に、Ｆａｂ、Ｆ
ａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、及びｓｃＦｖからなる群から選択される部分を含むリガ
ンド結合モジュールを有することができる。いくつかの実施形態では、標的抗原と標的リ
ガンドは同一である。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲの抗原結合モジュール及びＣ
ＳＲのリガンド結合モジュールは同一であるか、又はＣＤＲ若しくは可変ドメインなどの
抗原特異性を付与する同一の配列を含む。いくつかの実施形態では、標的抗原と標的リガ
ンドは異なる。
Ｒとを含む免疫細胞を提供し、このｃａＴＣＲは、標的抗原に特異的に結合する抗原結合
モジュールと、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することができるＴ
細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）と、を含み、ＣＳＲは、ａ）標的リガンドに特異的に
結合するリガンド結合ドメインと、免疫細胞に刺激シグナルを提供することができる共刺
激免疫細胞シグナル伝達ドメインとを含み、ｂ）機能的な一次免疫細胞シグナル伝達配列
を含まない。ｃａＴＣＲは、抗原結合モジュール及び／又はＴＣＲＭの変動を有する多数
のフォーマットのうちのいずれかをとることができる。例えば、ｃａＴＣＲは、Ｆａｂ、
Ｆａｂ’、ａ（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、及びｓｃＦｖからなる群から選択される部分を含む
抗原結合モジュールと、膜貫通ドメイン、連結ペプチド、及び細胞内ドメインのうちの１
つ以上における変異型を含む、α／β又はγ／δのＴＣＲに由来する１つ以上の配列を含
むＴＣＲＭとを含むことができる。図１を参照されたい。いくつかの実施形態では、抗原
結合モジュールは、多重特異性（二重特異性など）である。ＣＳＲは同様に、Ｆａｂ、Ｆ
ａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、及びｓｃＦｖからなる群から選択される部分を含むリガ
ンド結合モジュールを有することができる。いくつかの実施形態では、標的抗原と標的リ
ガンドは同一である。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲの抗原結合モジュール及びＣ
ＳＲのリガンド結合モジュールは同一であるか、又はＣＤＲ若しくは可変ドメインなどの
抗原特異性を付与する同一の配列を含む。いくつかの実施形態では、標的抗原と標的リガ
ンドは異なる。
【0046】
更に他の態様では、ａ）ｃａＴＣＲ及びＣＳＲをコードしている１つ以上の核酸、ｂ）
ｃａＴＣＲ及びＣＳＲをコードする１つ以上の核酸を含む免疫細胞、並びにｃ）ｉ）ｃａ
ＴＣＲ及びＣＳＲを含むか、又はｉｉ）ｃａＴＣＲ及びＣＳＲをコードする１つ以上の核
酸を含む免疫細胞を含む組成物が提供される。組成物は、医薬組成物であり得る。
ｃａＴＣＲ及びＣＳＲをコードする１つ以上の核酸を含む免疫細胞、並びにｃ）ｉ）ｃａ
ＴＣＲ及びＣＳＲを含むか、又はｉｉ）ｃａＴＣＲ及びＣＳＲをコードする１つ以上の核
酸を含む免疫細胞を含む組成物が提供される。組成物は、医薬組成物であり得る。
【0047】
また、治療目的のためにｃａＴＣＲ及びＣＳＲを含む免疫細胞を作製及び使用する方法
、並びにそのような方法に有用なキット及び製品も提供される。ＣａＴＣＲ及びＣＳＲを
含む免疫細胞を使用して疾患を治療する方法が更に提供される。
定義
、並びにそのような方法に有用なキット及び製品も提供される。ＣａＴＣＲ及びＣＳＲを
含む免疫細胞を使用して疾患を治療する方法が更に提供される。
定義
【0048】
「抗体」又は「抗体部分」という用語は、完全長抗体及びその抗原結合断片を含む。完
全長抗体は、２つの重鎖及び２つの軽鎖を含む。軽鎖及び重鎖の可変領域は、抗原結合に
関与する。両方の鎖の可変領域は、一般に、相補性決定領域（ＣＤＲ）と呼ばれる３つの
高度に可変のループ（ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２、及びＬＣ－ＣＤＲ３を含む軽鎖
（ＬＣ）ＣＤＲ、ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、及びＨＣ－ＣＤＲ３を含む重鎖（Ｈ
Ｃ）ＣＤＲ）を含む。本明細書に開示される抗体及び抗原結合断片のＣＤＲの境界は、Ｋ
ａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ、又はＡｌ－Ｌａｚｉｋａｎｉ（Ａｌ－Ｌａｚｉｋａｎｉ １
９９７、Ｃｈｏｔｈｉａ １９８５、Ｃｈｏｔｈｉａ １９８７、Ｃｈｏｔｈｉａ １９
８９、Ｋａｂａｔ １９８７、Ｋａｂａｔ １９９１）の慣例によって定義又は同定する
ことができる。重鎖又は軽鎖の３つのＣＤＲは、フレームワーク領域（ＦＲ）として知ら
れる隣接する区間の間に介在し、ＣＤＲよりも高度に保存され、超可変ループを支持する
足場を形成する。重鎖及び軽鎖の定常領域は、抗原結合に関与しないが、様々なエフェク
ター機能を示す。抗体は、それらの重鎖の定常領域のアミノ酸配列に基づいてクラスに割
り当てられる。抗体の５つの主要なクラス又はアイソタイプは、それぞれα、δ、ε、γ
、及びμ重鎖の存在によって特徴付けられるＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、及びＩｇ
Ｍである。いくつかの主要な抗体のクラスは、ｌｇＧ１（γ１重鎖）、ｌｇＧ２（γ２重
鎖）、ｌｇＧ３（γ３重鎖）、ｌｇＧ４（γ４重鎖）、ｌｇＡ１（α１重鎖）、又はｌｇ
Ａ２（α２重鎖）などのサブクラスに分類される。
全長抗体は、２つの重鎖及び２つの軽鎖を含む。軽鎖及び重鎖の可変領域は、抗原結合に
関与する。両方の鎖の可変領域は、一般に、相補性決定領域（ＣＤＲ）と呼ばれる３つの
高度に可変のループ（ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２、及びＬＣ－ＣＤＲ３を含む軽鎖
（ＬＣ）ＣＤＲ、ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２、及びＨＣ－ＣＤＲ３を含む重鎖（Ｈ
Ｃ）ＣＤＲ）を含む。本明細書に開示される抗体及び抗原結合断片のＣＤＲの境界は、Ｋ
ａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ、又はＡｌ－Ｌａｚｉｋａｎｉ（Ａｌ－Ｌａｚｉｋａｎｉ １
９９７、Ｃｈｏｔｈｉａ １９８５、Ｃｈｏｔｈｉａ １９８７、Ｃｈｏｔｈｉａ １９
８９、Ｋａｂａｔ １９８７、Ｋａｂａｔ １９９１）の慣例によって定義又は同定する
ことができる。重鎖又は軽鎖の３つのＣＤＲは、フレームワーク領域（ＦＲ）として知ら
れる隣接する区間の間に介在し、ＣＤＲよりも高度に保存され、超可変ループを支持する
足場を形成する。重鎖及び軽鎖の定常領域は、抗原結合に関与しないが、様々なエフェク
ター機能を示す。抗体は、それらの重鎖の定常領域のアミノ酸配列に基づいてクラスに割
り当てられる。抗体の５つの主要なクラス又はアイソタイプは、それぞれα、δ、ε、γ
、及びμ重鎖の存在によって特徴付けられるＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、及びＩｇ
Ｍである。いくつかの主要な抗体のクラスは、ｌｇＧ１（γ１重鎖）、ｌｇＧ２（γ２重
鎖）、ｌｇＧ３（γ３重鎖）、ｌｇＧ４（γ４重鎖）、ｌｇＡ１（α１重鎖）、又はｌｇ
Ａ２（α２重鎖）などのサブクラスに分類される。
【0049】
本明細書で使用するとき、「抗原結合断片」という用語は、例えば、ダイアボディ、Ｆ
ａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ断片、ジスルフィド安定化Ｆｖ断片（ｄｓＦｖ）
、（ｄｓＦｖ）２、二重特異性ｄｓＦｖ（ｄｓＦｖ－ｄｓＦｖ’）、ジスルフィド安定化
ダイアボディ（ｄｓ ｄｉａｂｏｄｙ）、一本鎖抗体分子（ｓｃＦｖ）、ｓｃＦｖ二量体
（二価ダイアボディ）、１つ以上のＣＤＲを含む抗体の一部から形成される多重特異性抗
体、ラクダ化単一ドメイン抗体、ナノボディ、ドメイン抗体、二価ドメイン抗体、又は抗
原に結合するが完全な抗体構造を含まない任意の他の抗体断片を含む、抗体断片を指す。
抗原結合断片は、親抗体又は親抗体断片（例えば、親ｓｃＦｖ）が結合するのと同一の抗
原に結合することができる。いくつかの実施形態では、抗原結合断片は、１つ以上の異な
るヒト抗体からフレームワーク領域に移植された特定のヒト抗体からの１つ以上のＣＤＲ
を含み得る。
ａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ断片、ジスルフィド安定化Ｆｖ断片（ｄｓＦｖ）
、（ｄｓＦｖ）２、二重特異性ｄｓＦｖ（ｄｓＦｖ－ｄｓＦｖ’）、ジスルフィド安定化
ダイアボディ（ｄｓ ｄｉａｂｏｄｙ）、一本鎖抗体分子（ｓｃＦｖ）、ｓｃＦｖ二量体
（二価ダイアボディ）、１つ以上のＣＤＲを含む抗体の一部から形成される多重特異性抗
体、ラクダ化単一ドメイン抗体、ナノボディ、ドメイン抗体、二価ドメイン抗体、又は抗
原に結合するが完全な抗体構造を含まない任意の他の抗体断片を含む、抗体断片を指す。
抗原結合断片は、親抗体又は親抗体断片（例えば、親ｓｃＦｖ）が結合するのと同一の抗
原に結合することができる。いくつかの実施形態では、抗原結合断片は、１つ以上の異な
るヒト抗体からフレームワーク領域に移植された特定のヒト抗体からの１つ以上のＣＤＲ
を含み得る。
【0050】
本明細書で使用するとき、第１の抗体部分が第２の抗体部分の標的抗原結合を、第１の
抗体部分の等モル濃度の存在下で、又はその逆で、少なくとも約５０％（少なくとも約５
５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９８％、又
は９９％のいずれかなど）阻害するとき、第１の抗体部分は、標的抗原との結合について
、第２の抗体部分と「競合する」。それらの交差競合に基づく抗体を「ビニング」するた
めのハイスループットプロセスは、ＰＣＴ公開ＷＯ０３／４８７３１に記載されている。
抗体部分の等モル濃度の存在下で、又はその逆で、少なくとも約５０％（少なくとも約５
５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９８％、又
は９９％のいずれかなど）阻害するとき、第１の抗体部分は、標的抗原との結合について
、第２の抗体部分と「競合する」。それらの交差競合に基づく抗体を「ビニング」するた
めのハイスループットプロセスは、ＰＣＴ公開ＷＯ０３／４８７３１に記載されている。
【0051】
本明細書で使用するとき、用語「特異的に結合する」又は「～に特異的である」は、標
的と抗体又は抗体部分との間の結合などの、測定可能かつ再現性のある相互作用を指し、
これは、生物分子を含む分子の異種集団の存在下での、標的の存在を判定する。例えば、
標的（エピトープであり得る）に特異的に結合する抗体部分は、他の標的に対するその結
合よりも、この標的に、より高い親和性で、より強い結合活性で、より容易に、及び／又
はより長時間結合する抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗原に特異的に結合す
る抗体部分は、抗原の１つ以上の抗原決定基（例えば、細胞表面抗原又はペプチド／ＭＨ
Ｃタンパク質複合体）と、他の標的に対する結合親和性の少なくとも約１０倍である結合
親和性で反応する。
的と抗体又は抗体部分との間の結合などの、測定可能かつ再現性のある相互作用を指し、
これは、生物分子を含む分子の異種集団の存在下での、標的の存在を判定する。例えば、
標的（エピトープであり得る）に特異的に結合する抗体部分は、他の標的に対するその結
合よりも、この標的に、より高い親和性で、より強い結合活性で、より容易に、及び／又
はより長時間結合する抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗原に特異的に結合す
る抗体部分は、抗原の１つ以上の抗原決定基（例えば、細胞表面抗原又はペプチド／ＭＨ
Ｃタンパク質複合体）と、他の標的に対する結合親和性の少なくとも約１０倍である結合
親和性で反応する。
【0052】
「Ｔ細胞受容体」又は「ＴＣＲ」という用語は、Ｔ細胞の表面上で対をなすαβ鎖又は
γδ鎖から構成されるヘテロ二量体受容体を指す。各α、β、γ、及びδ鎖は、相補性決
定領域（ＣＤＲ）を介して抗原認識を付与する可変ドメイン（Ｖ）である２つのＩｇ様ド
メインと、後に続く、連結ペプチド及び膜貫通（ＴＭ）領域によって細胞膜に固定される
定常ドメイン（Ｃ）とで構成される。ＴＭ領域は、ＣＤ３シグナル伝達器の不変サブユニ
ットと結合する。Ｖドメインのそれぞれは、３つのＣＤＲを有する。これらのＣＤＲは、
主要組織適合複合体（ｐＭＨＣ）によりコードされるタンパク質に結合する抗原ペプチド
間の複合体と相互作用する（Ｄａｖｉｓ ａｎｄ Ｂｊｏｒｋｍａｎ（１９８８）Ｎａｔ
ｕｒｅ，３３４，３９５－４０２、Ｄａｖｉｓ ｅｔ ａｌ．（１９９８）Ａｎｎｕ Ｒ
ｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ，１６，５２３－５４４、Ｍｕｒｐｈｙ（２０１２），ｘｉｘ，８
６８ ｐ．）。
γδ鎖から構成されるヘテロ二量体受容体を指す。各α、β、γ、及びδ鎖は、相補性決
定領域（ＣＤＲ）を介して抗原認識を付与する可変ドメイン（Ｖ）である２つのＩｇ様ド
メインと、後に続く、連結ペプチド及び膜貫通（ＴＭ）領域によって細胞膜に固定される
定常ドメイン（Ｃ）とで構成される。ＴＭ領域は、ＣＤ３シグナル伝達器の不変サブユニ
ットと結合する。Ｖドメインのそれぞれは、３つのＣＤＲを有する。これらのＣＤＲは、
主要組織適合複合体（ｐＭＨＣ）によりコードされるタンパク質に結合する抗原ペプチド
間の複合体と相互作用する（Ｄａｖｉｓ ａｎｄ Ｂｊｏｒｋｍａｎ（１９８８）Ｎａｔ
ｕｒｅ，３３４，３９５－４０２、Ｄａｖｉｓ ｅｔ ａｌ．（１９９８）Ａｎｎｕ Ｒ
ｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ，１６，５２３－５４４、Ｍｕｒｐｈｙ（２０１２），ｘｉｘ，８
６８ ｐ．）。
【0053】
「ＴＣＲ関連シグナル伝達分子」という用語は、ＴＣＲ－ＣＤ３複合体の一部である細
胞質の免疫受容体活性化チロシンモチーフ（ＩＴＡＭ）を有する分子を指す。ＴＣＲ関連
シグナル伝達分子には、ＣＤ３γε、ＣＤ３δε、及びζζ（ＣＤ３ζ又はＣＤ３ζζと
しても知られる）が含まれる。
胞質の免疫受容体活性化チロシンモチーフ（ＩＴＡＭ）を有する分子を指す。ＴＣＲ関連
シグナル伝達分子には、ＣＤ３γε、ＣＤ３δε、及びζζ（ＣＤ３ζ又はＣＤ３ζζと
しても知られる）が含まれる。
【0054】
ＣＤ３を発現する細胞に関して本明細書で使用するとき、「活性化」は、細胞増殖及び
サイトカイン産生を含むがこれらに限定されない、ＣＤ３シグナル伝達経路の下流のエフ
ェクター機能の検出可能な増加を誘導するのに十分に刺激されている細胞の状態を指す。
サイトカイン産生を含むがこれらに限定されない、ＣＤ３シグナル伝達経路の下流のエフ
ェクター機能の検出可能な増加を誘導するのに十分に刺激されている細胞の状態を指す。
【0055】
タンパク質の一部を指すとき、「モジュール」という用語は、タンパク質を構成する１
つ以上のポリペプチドの構造的及び／又は機能的に関連する部分を含むことを意味する。
例えば、二量体受容体の膜貫通モジュールは、膜にまたがる受容体の各ポリペプチド鎖の
部分を指し得る。モジュールはまた、単一のポリペプチド鎖の関連部分を指すことができ
る。例えば、単量体受容体の膜貫通モジュールは、膜にまたがる受容体の単一のポリペプ
チド鎖の部分を指し得る。モジュールはまた、ポリペプチドの単一部分のみを含んでもよ
い。
つ以上のポリペプチドの構造的及び／又は機能的に関連する部分を含むことを意味する。
例えば、二量体受容体の膜貫通モジュールは、膜にまたがる受容体の各ポリペプチド鎖の
部分を指し得る。モジュールはまた、単一のポリペプチド鎖の関連部分を指すことができ
る。例えば、単量体受容体の膜貫通モジュールは、膜にまたがる受容体の単一のポリペプ
チド鎖の部分を指し得る。モジュールはまた、ポリペプチドの単一部分のみを含んでもよ
い。
【0056】
本明細書で使用するとき、「単離された核酸」という用語は、ゲノム、ｃＤＮＡ、若し
くは合成起源の核酸、又はこれらのいくつかの組み合わせを意味することを意図し、「単
離された核酸」は、その起源のために、（１）「単離された核酸」が天然に見出されるポ
リヌクレオチドの全て又は一部とは関連していないか、（２）天然では連結していないポ
リヌクレオチドに作動可能に連結されているか、又は（３）より大きい配列の一部として
天然では発生しない。
くは合成起源の核酸、又はこれらのいくつかの組み合わせを意味することを意図し、「単
離された核酸」は、その起源のために、（１）「単離された核酸」が天然に見出されるポ
リヌクレオチドの全て又は一部とは関連していないか、（２）天然では連結していないポ
リヌクレオチドに作動可能に連結されているか、又は（３）より大きい配列の一部として
天然では発生しない。
【0057】
本明細書で使用されるとき、「ＣＤＲ」又は「相補性決定領域」という用語は、重鎖ポ
リペプチドと軽鎖ポリペプチドの両方の可変領域内で見られる非連続抗原結合部位を意味
することを意図する。これらの特定の領域は、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ
．Ｃｈｅｍ．２５２：６６０９－６６１６（１９７７）、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｕ
．Ｓ．Ｄｅｐｔ．ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，「Ｓｅ
ｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｎｔ
ｅｒｅｓｔ」（１９９１）、Ｃｈｏｔｈｉａ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１
９６：９０１－９１７（１９８７）、Ａｌ－Ｌａｚｉｋａｎｉ Ｂ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ．
Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２７３：９２７－９４８（１９９７）、ＭａｃＣａｌｌｕｍ ｅｔ
ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２６２：７３２－７４５（１９９６）、Ａｂｈｉｎａ
ｎｄａｎ ａｎｄ Ｍａｒｔｉｎ，Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，４５：３８３２－３８３
９（２００８）、Ｌｅｆｒａｎｃ Ｍ．Ｐ．ｅｔ ａｌ．，Ｄｅｖ．Ｃｏｍｐ．Ｉｍｍｕ
ｎｏｌ．，２７：５５－７７（２００３）、及びＨｏｎｅｇｇｅｒ ａｎｄ Ｐｌｕｃｋ
ｔｈｕｎ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，３０９：６５７－６７０（２００１）に記載されて
おり、定義は、互いに比較したときにアミノ酸残基の重複又はサブセットを含む。それに
もかかわらず、抗体のＣＤＲ又はその移植された抗体若しくは変異型を指すためのいずれ
かの定義の適用は、本明細書で定義され使用される用語の範囲内にあることが意図されて
いる。上に引用した参考文献の各々によって定義されるＣＤＲを包含するアミノ酸残基は
、比較として以下の表１に記述されている。ＣＤＲ予測アルゴリズム及びインターフェー
スは、当該技術分野で公知であり、例えば、Ａｂｈｉｎａｎｄａｎ ａｎｄ Ｍａｒｔｉ
ｎ，Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，４５：３８３２－３８３９（２００８）、Ｅｈｒｅｎｍ
ａｎｎ Ｆ．ｅｔ ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．，３８：Ｄ３０１－
Ｄ３０７（２０１０）、及びＡｄｏｌｆ－Ｂｒｙｆｏｇｌｅ Ｊ．ｅｔ ａｌ．，Ｎｕｃ
ｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．，４３：Ｄ４３２－Ｄ４３８（２０１５）を含む。本段
落で引用される参考文献の内容は、本発明で使用するためにその全体が参照により本明細
書に組み込まれ、本特許請求の範囲の請求項の１つ以上に包含可能である。
１残基の付番は、前出のＫａｂａｔらの命名法に従う。
２残基の付番は、前出のＣｈｏｔｈｉａらの命名法に従う。
３残基の付番は、前出のＭａｃＣａｌｌｕｍらの命名法に従う。
４残基の付番は、前出のＬｅｆｒａｎｃらの命名法に従う。
５残基の付番は、前出のＨｏｎｅｇｇｅｒ及びＰｌｕｃｋｔｈｕｎの命名法に従う。
リペプチドと軽鎖ポリペプチドの両方の可変領域内で見られる非連続抗原結合部位を意味
することを意図する。これらの特定の領域は、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ
．Ｃｈｅｍ．２５２：６６０９－６６１６（１９７７）、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｕ
．Ｓ．Ｄｅｐｔ．ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，「Ｓｅ
ｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｎｔ
ｅｒｅｓｔ」（１９９１）、Ｃｈｏｔｈｉａ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１
９６：９０１－９１７（１９８７）、Ａｌ－Ｌａｚｉｋａｎｉ Ｂ．ｅｔ ａｌ．，Ｊ．
Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２７３：９２７－９４８（１９９７）、ＭａｃＣａｌｌｕｍ ｅｔ
ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２６２：７３２－７４５（１９９６）、Ａｂｈｉｎａ
ｎｄａｎ ａｎｄ Ｍａｒｔｉｎ，Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，４５：３８３２－３８３
９（２００８）、Ｌｅｆｒａｎｃ Ｍ．Ｐ．ｅｔ ａｌ．，Ｄｅｖ．Ｃｏｍｐ．Ｉｍｍｕ
ｎｏｌ．，２７：５５－７７（２００３）、及びＨｏｎｅｇｇｅｒ ａｎｄ Ｐｌｕｃｋ
ｔｈｕｎ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，３０９：６５７－６７０（２００１）に記載されて
おり、定義は、互いに比較したときにアミノ酸残基の重複又はサブセットを含む。それに
もかかわらず、抗体のＣＤＲ又はその移植された抗体若しくは変異型を指すためのいずれ
かの定義の適用は、本明細書で定義され使用される用語の範囲内にあることが意図されて
いる。上に引用した参考文献の各々によって定義されるＣＤＲを包含するアミノ酸残基は
、比較として以下の表１に記述されている。ＣＤＲ予測アルゴリズム及びインターフェー
スは、当該技術分野で公知であり、例えば、Ａｂｈｉｎａｎｄａｎ ａｎｄ Ｍａｒｔｉ
ｎ，Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，４５：３８３２－３８３９（２００８）、Ｅｈｒｅｎｍ
ａｎｎ Ｆ．ｅｔ ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．，３８：Ｄ３０１－
Ｄ３０７（２０１０）、及びＡｄｏｌｆ－Ｂｒｙｆｏｇｌｅ Ｊ．ｅｔ ａｌ．，Ｎｕｃ
ｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．，４３：Ｄ４３２－Ｄ４３８（２０１５）を含む。本段
落で引用される参考文献の内容は、本発明で使用するためにその全体が参照により本明細
書に組み込まれ、本特許請求の範囲の請求項の１つ以上に包含可能である。
【表1】
２残基の付番は、前出のＣｈｏｔｈｉａらの命名法に従う。
３残基の付番は、前出のＭａｃＣａｌｌｕｍらの命名法に従う。
４残基の付番は、前出のＬｅｆｒａｎｃらの命名法に従う。
５残基の付番は、前出のＨｏｎｅｇｇｅｒ及びＰｌｕｃｋｔｈｕｎの命名法に従う。
【0058】
「キメラ抗体」という用語は、重鎖及び／又は軽鎖の一部分が、特定の種由来の抗体中
又は特定の抗体クラス若しくはサブクラスに属する抗体中の対応する配列と同一であるか
又は相同であり、鎖の残余の部分が、別の種由来の抗体中又は別の抗体クラス若しくはサ
ブクラスに属する抗体中の対応する配列と同一であるか又は相同である抗体を指し、また
、本発明の生物活性を示す限り、そのような抗体の断片を指す（米国特許第４８１６５６
７号、及びＭｏｒｒｉｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．
ＵＳＡ，８１：６８５１－６８５５（１９８４）を参照されたい）。
又は特定の抗体クラス若しくはサブクラスに属する抗体中の対応する配列と同一であるか
又は相同であり、鎖の残余の部分が、別の種由来の抗体中又は別の抗体クラス若しくはサ
ブクラスに属する抗体中の対応する配列と同一であるか又は相同である抗体を指し、また
、本発明の生物活性を示す限り、そのような抗体の断片を指す（米国特許第４８１６５６
７号、及びＭｏｒｒｉｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．
ＵＳＡ，８１：６８５１－６８５５（１９８４）を参照されたい）。
【0059】
抗体又は抗体部分に関する「半合成」という用語は、抗体又は抗体部分が、１つ以上の
天然に存在する配列及び１つ以上の天然に存在しない（すなわち、合成の）配列を有する
ことを意味する。
天然に存在する配列及び１つ以上の天然に存在しない（すなわち、合成の）配列を有する
ことを意味する。
【0060】
抗体又は抗体部分に関する「完全合成」という用語は、抗体又は抗体部分が、固定され
た天然に存在するＶＨ／ＶＬフレームワークの対を有するが、重鎖及び軽鎖の両方の６つ
全てのＣＤＲの天然に存在しない（すなわち、合成の）配列を有することを意味する。
た天然に存在するＶＨ／ＶＬフレームワークの対を有するが、重鎖及び軽鎖の両方の６つ
全てのＣＤＲの天然に存在しない（すなわち、合成の）配列を有することを意味する。
【0061】
非ヒト（例えばげっ歯動物）抗体の「ヒト化」形態は、非ヒト抗体に由来する最小限の
配列を含むキメラ抗体である。ほとんどの部分において、ヒト化抗体は、ヒト免疫グロブ
リン（レシピエント抗体）であり、レシピエントの超可変領域（ＨＶＲ）由来の残基が、
所望の抗体の特異性、親和性、及び能力を有する、マウス、ラット、ウサギ、又は非ヒト
霊長類などの非ヒト種（ドナー抗体）の超可変領域由来の残基と置き換えられている。場
合によっては、ヒト免疫グロブリンのフレームワーク領域（ＦＲ）の残基が、対応する非
ヒト残基で置換されている。更に、ヒト化抗体は、レシピエント抗体又はドナー抗体内に
ない残基を含み得る。これらの改変は、抗体の性能を更に改良するためになされる。一般
的に、ヒト化抗体は、少なくとも１つの可変領域の実質的に全て、典型的には２つの可変
領域を含み、全て又は実質的に全ての超可変ループは非ヒト免疫グロブリンのものに対応
し、全て又は実質的に全てのＦＲは、ヒト免疫グロブリン配列のものである。ヒト化抗体
はまた、所望により、免疫グロブリンの定常領域（Ｆｃ）の少なくとも一部を、典型的に
はヒト免疫グロブリンのそれを含む。更なる詳細については、Ｊｏｎｅｓ ｅｔ ａｌ．
，Ｎａｔｕｒｅ ３２１：５２２－５２５（１９８６）、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａ
ｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３３２：３２３－３２９（１９８８）、及びＰｒｅｓｔａ，Ｃｕｒ
ｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．２：５９３－５９６（１９９２）を参照されたい。
配列を含むキメラ抗体である。ほとんどの部分において、ヒト化抗体は、ヒト免疫グロブ
リン（レシピエント抗体）であり、レシピエントの超可変領域（ＨＶＲ）由来の残基が、
所望の抗体の特異性、親和性、及び能力を有する、マウス、ラット、ウサギ、又は非ヒト
霊長類などの非ヒト種（ドナー抗体）の超可変領域由来の残基と置き換えられている。場
合によっては、ヒト免疫グロブリンのフレームワーク領域（ＦＲ）の残基が、対応する非
ヒト残基で置換されている。更に、ヒト化抗体は、レシピエント抗体又はドナー抗体内に
ない残基を含み得る。これらの改変は、抗体の性能を更に改良するためになされる。一般
的に、ヒト化抗体は、少なくとも１つの可変領域の実質的に全て、典型的には２つの可変
領域を含み、全て又は実質的に全ての超可変ループは非ヒト免疫グロブリンのものに対応
し、全て又は実質的に全てのＦＲは、ヒト免疫グロブリン配列のものである。ヒト化抗体
はまた、所望により、免疫グロブリンの定常領域（Ｆｃ）の少なくとも一部を、典型的に
はヒト免疫グロブリンのそれを含む。更なる詳細については、Ｊｏｎｅｓ ｅｔ ａｌ．
，Ｎａｔｕｒｅ ３２１：５２２－５２５（１９８６）、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａ
ｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３３２：３２３－３２９（１９８８）、及びＰｒｅｓｔａ，Ｃｕｒ
ｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．２：５９３－５９６（１９９２）を参照されたい。
【0062】
「相同性」は、２つのポリペプチド間又は２つの核酸分子間の配列類似性又は配列同一
性を指す。２つの比較された配列の両方の位置が、同一の塩基又はアミノ酸の単量体のサ
ブユニットによって占められているとき、例えば、２つのＤＮＡ分子のそれぞれの位置が
アデニンによって占められている場合、分子は、その位置において「相同」である。２つ
の配列間の「相同性パーセント」又は「配列同一性パーセント」は、配列同一性の一部と
して任意の保存的置換を考慮して、２つの配列によって共有される一致するか又は相同で
ある位置の数を比較された位置の数で割り１００を乗じた関数である。例えば、２つの配
列中の位置の１０個のうち６個が一致又は相同である場合、２つの配列は６０％相同であ
る。例として、ＤＮＡ配列ＡＴＴＧＣＣ及びＴＡＴＧＧＣは、５０％の相同性を共有する
。一般に、２つの配列がアライメントされて最大相同性を与えるときに比較が実施される
。アミノ酸配列同一性パーセントを決定する目的のためのアライメントは、例えばＢＬＡ
ＳＴ、ＢＬＡＳＴ－２、ＡＬＩＧＮ、Ｍｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）、又はＭＵＳ
ＣＬＥソフトウェアなどの公けに入手可能なコンピューターソフトウェアを使用して、当
該技術分野の範囲内にある様々な方法で達成できる。当業者は、比較されている配列の全
長にわたって最大のアライメントを得るのに必要な任意のアルゴリズムを含む、アライメ
ント測定用の適切なパラメーターを決定することができる。しかしながら、本明細書の目
的のために、配列比較コンピュータプログラムＭＵＳＣＬＥを使用してアミノ酸配列同一
性％の値が生成される（Ｅｄｇａｒ，Ｒ．Ｃ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓｅ
ａｒｃｈ ３２（５）：１７９２－１７９７，２００４、Ｅｄｇａｒ，Ｒ．Ｃ．，ＢＭＣ
Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ ５（１）：１１３，２００４）。
性を指す。２つの比較された配列の両方の位置が、同一の塩基又はアミノ酸の単量体のサ
ブユニットによって占められているとき、例えば、２つのＤＮＡ分子のそれぞれの位置が
アデニンによって占められている場合、分子は、その位置において「相同」である。２つ
の配列間の「相同性パーセント」又は「配列同一性パーセント」は、配列同一性の一部と
して任意の保存的置換を考慮して、２つの配列によって共有される一致するか又は相同で
ある位置の数を比較された位置の数で割り１００を乗じた関数である。例えば、２つの配
列中の位置の１０個のうち６個が一致又は相同である場合、２つの配列は６０％相同であ
る。例として、ＤＮＡ配列ＡＴＴＧＣＣ及びＴＡＴＧＧＣは、５０％の相同性を共有する
。一般に、２つの配列がアライメントされて最大相同性を与えるときに比較が実施される
。アミノ酸配列同一性パーセントを決定する目的のためのアライメントは、例えばＢＬＡ
ＳＴ、ＢＬＡＳＴ－２、ＡＬＩＧＮ、Ｍｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）、又はＭＵＳ
ＣＬＥソフトウェアなどの公けに入手可能なコンピューターソフトウェアを使用して、当
該技術分野の範囲内にある様々な方法で達成できる。当業者は、比較されている配列の全
長にわたって最大のアライメントを得るのに必要な任意のアルゴリズムを含む、アライメ
ント測定用の適切なパラメーターを決定することができる。しかしながら、本明細書の目
的のために、配列比較コンピュータプログラムＭＵＳＣＬＥを使用してアミノ酸配列同一
性％の値が生成される（Ｅｄｇａｒ，Ｒ．Ｃ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓｅ
ａｒｃｈ ３２（５）：１７９２－１７９７，２００４、Ｅｄｇａｒ，Ｒ．Ｃ．，ＢＭＣ
Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ ５（１）：１１３，２００４）。
【0063】
ヒトＩｇＧ Ｆｃ領域の「ＣＨ１ドメイン」（「Ｈ１」ドメインの「Ｃ１」とも呼ばれ
る）は、通常、アミノ酸約１１８～アミノ酸約２１５（ＥＵ付番システム）まで延びてい
る。
る）は、通常、アミノ酸約１１８～アミノ酸約２１５（ＥＵ付番システム）まで延びてい
る。
【0064】
別段の定めがない限り、「アミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列」は、互いに縮
重したバージョンである、同一のアミノ酸配列をコードする、全てのヌクレオチド配列を
含む。タンパク質又はＲＮＡをコードするヌクレオチド配列という語句はまた、タンパク
質をコードするヌクレオチド配列がいくつかのバージョンではイントロン（複数可）を含
み得る程度まで、イントロンを含んでもよい。
重したバージョンである、同一のアミノ酸配列をコードする、全てのヌクレオチド配列を
含む。タンパク質又はＲＮＡをコードするヌクレオチド配列という語句はまた、タンパク
質をコードするヌクレオチド配列がいくつかのバージョンではイントロン（複数可）を含
み得る程度まで、イントロンを含んでもよい。
【0065】
「作動可能に連結された」という用語は、制御配列と異種核酸配列との間の機能的結合
を指し、後者の発現をもたらす。例えば、第１の核酸配列が第２の核酸配列と機能的な関
係を有して配置されるとき、第１の核酸配列は第２の核酸配列と作動可能に連結されてい
る。例えば、プロモーターがコード配列の転写又は発現に影響を及ぼす場合、プロモータ
ーは、コード配列に作動可能に連結されている。一般に、作動可能に連結されたＤＮＡ配
列は連続しており、必要に応じて２つのタンパク質コード領域を結合するために、同一の
リーディングフレーム内にある。
を指し、後者の発現をもたらす。例えば、第１の核酸配列が第２の核酸配列と機能的な関
係を有して配置されるとき、第１の核酸配列は第２の核酸配列と作動可能に連結されてい
る。例えば、プロモーターがコード配列の転写又は発現に影響を及ぼす場合、プロモータ
ーは、コード配列に作動可能に連結されている。一般に、作動可能に連結されたＤＮＡ配
列は連続しており、必要に応じて２つのタンパク質コード領域を結合するために、同一の
リーディングフレーム内にある。
【0066】
「誘導可能なプロモーター」という用語は、１つ以上の特定のシグナルを付加又は除去
することによって活性を調節することができるプロモーターを指す。例えば、誘導可能な
プロモーターは、特定の条件のセット、例えば、プロモーターを活性化させる及び／又は
プロモーターの抑制を緩和する誘導剤又は条件の存在下で、作動可能に連結された核酸の
転写を活性化し得る。
することによって活性を調節することができるプロモーターを指す。例えば、誘導可能な
プロモーターは、特定の条件のセット、例えば、プロモーターを活性化させる及び／又は
プロモーターの抑制を緩和する誘導剤又は条件の存在下で、作動可能に連結された核酸の
転写を活性化し得る。
【0067】
本明細書で使用するとき、「治療」又は「治療する」は、臨床結果を含めて有益な又は
所望の結果を得るための方法である。本発明の目的のために、有益な又は所望の臨床結果
には、以下のうちの１つ以上が含まれるが、これらに限定されない：疾患がもたらす１つ
以上の症状を軽減すること、疾患の範囲を縮小させること、疾患を安定させること（例え
ば、疾患の悪化を防止する若しくは遅らせること）、疾患の拡散（例えば、転移）を防止
する若しくは遅らせること、疾患の再発を防止する若しくは遅らせること、疾患の進行を
遅らせる若しくは減速させること、疾患状態を寛解させること、疾患の寛解（部分又は完
全）をもたらすこと、疾患を治療するために必要な１つ以上の他の投薬の用量を減らすこ
と、疾患の進行を遅らせること、生活の質を向上若しくは改善させること、体重増加を向
上すること、及び／又は生存期間を延ばすこと。また、「治療」に包含されるのは、疾患
の病理学的結果の低減である（例えば、がんにおける腫瘍体積など）。本発明の方法は、
治療のこれらの態様のうちのいずれか１つ以上を企図する。
所望の結果を得るための方法である。本発明の目的のために、有益な又は所望の臨床結果
には、以下のうちの１つ以上が含まれるが、これらに限定されない：疾患がもたらす１つ
以上の症状を軽減すること、疾患の範囲を縮小させること、疾患を安定させること（例え
ば、疾患の悪化を防止する若しくは遅らせること）、疾患の拡散（例えば、転移）を防止
する若しくは遅らせること、疾患の再発を防止する若しくは遅らせること、疾患の進行を
遅らせる若しくは減速させること、疾患状態を寛解させること、疾患の寛解（部分又は完
全）をもたらすこと、疾患を治療するために必要な１つ以上の他の投薬の用量を減らすこ
と、疾患の進行を遅らせること、生活の質を向上若しくは改善させること、体重増加を向
上すること、及び／又は生存期間を延ばすこと。また、「治療」に包含されるのは、疾患
の病理学的結果の低減である（例えば、がんにおける腫瘍体積など）。本発明の方法は、
治療のこれらの態様のうちのいずれか１つ以上を企図する。
【0068】
「再発（recurrence）」、「再発する（relapse）」、又は「再発した（relapsed）」
という用語は、疾患の消失の臨床評価後のがん又は疾患の再発を指す。遠位の転移又は局
所的再発の診断は、再発と見なすことができる。
という用語は、疾患の消失の臨床評価後のがん又は疾患の再発を指す。遠位の転移又は局
所的再発の診断は、再発と見なすことができる。
【0069】
「難治性」又は「耐性」という用語は、治療に応答していないがん又は疾患を指す。
【0070】
本明細書に開示されるとき、ｃａＴＣＲ又はｃａＴＣＲを含む組成物の「有効量」は、
具体的に記載された目的を実行するのに十分な量である。「有効量」は、経験的に、及び
記載された目的に関連する既知の方法によって決定することができる。
具体的に記載された目的を実行するのに十分な量である。「有効量」は、経験的に、及び
記載された目的に関連する既知の方法によって決定することができる。
【0071】
「治療有効量」という用語は、本明細書に開示されるｃａＴＣＲを含むｃａＴＣＲ又は
組成物の、個体における疾患又は障害を「治療する」ために有効である量を指す。がんの
場合、本明細書に開示される治療有効量のｃａＴＣＲ又はｃａＴＣＲを含む組成物は、が
ん細胞の数を低減することができ、腫瘍のサイズ又は重量を低減することができ、末梢臓
器へのがん細胞浸潤を阻害する（すなわち、ある程度遅延させ、好ましくは停止させる）
ことができ、腫瘍転移を阻害する（すなわち、ある程度遅延させ、好ましくは停止させる
）ことができ、ある程度、腫瘍増殖を阻害することができ、及び／又はがんに関連する症
状のうちの１つ以上をある程度緩和することができる。本明細書に開示されるｃａＴＣＲ
又はｃａＴＣＲを含む組成物は、存在するがん細胞の増殖を防止、及び／又は存在するが
ん細胞を殺傷し得る程度で、細胞増殖抑制性及び／又は細胞傷害性であり得る。いくつか
の実施形態では、治療有効量は、増殖抑制量である。いくつかの実施形態では、治療有効
量は、患者の無増悪生存率を改善する量である。ウイルス感染などの感染性疾患の場合、
本明細書に開示される治療有効量のｃａＴＣＲ又はｃａＴＣＲを含む組成物は、病原体に
よって感染された細胞の数を低減することができ、病原体由来抗原の産生又は放出を低減
することができ、病原体の未感染細胞への拡散を阻害する（すなわち、ある程度遅らせ、
好ましくは停止する）ことができ、及び／又は感染に関連する１つ以上の症状をある程度
緩和することができる。いくつかの実施形態では、治療有効量は、患者の生存期間を延長
する量である。
組成物の、個体における疾患又は障害を「治療する」ために有効である量を指す。がんの
場合、本明細書に開示される治療有効量のｃａＴＣＲ又はｃａＴＣＲを含む組成物は、が
ん細胞の数を低減することができ、腫瘍のサイズ又は重量を低減することができ、末梢臓
器へのがん細胞浸潤を阻害する（すなわち、ある程度遅延させ、好ましくは停止させる）
ことができ、腫瘍転移を阻害する（すなわち、ある程度遅延させ、好ましくは停止させる
）ことができ、ある程度、腫瘍増殖を阻害することができ、及び／又はがんに関連する症
状のうちの１つ以上をある程度緩和することができる。本明細書に開示されるｃａＴＣＲ
又はｃａＴＣＲを含む組成物は、存在するがん細胞の増殖を防止、及び／又は存在するが
ん細胞を殺傷し得る程度で、細胞増殖抑制性及び／又は細胞傷害性であり得る。いくつか
の実施形態では、治療有効量は、増殖抑制量である。いくつかの実施形態では、治療有効
量は、患者の無増悪生存率を改善する量である。ウイルス感染などの感染性疾患の場合、
本明細書に開示される治療有効量のｃａＴＣＲ又はｃａＴＣＲを含む組成物は、病原体に
よって感染された細胞の数を低減することができ、病原体由来抗原の産生又は放出を低減
することができ、病原体の未感染細胞への拡散を阻害する（すなわち、ある程度遅らせ、
好ましくは停止する）ことができ、及び／又は感染に関連する１つ以上の症状をある程度
緩和することができる。いくつかの実施形態では、治療有効量は、患者の生存期間を延長
する量である。
【0072】
本明細書で使用されるとき、「医薬的に許容される」又は「薬理的に適合される」は、
生物学的又は非生物学的に望ましくないものではない物質を意味し、例えば、その物質を
、望ましくない生物学的影響をほとんど起こさずに、又は、それが含有される組成物の他
の任意の構成成分と悪い相互作用をせずに、患者に投与される医薬組成物中に組み込むこ
とができる。医薬的に許容される担体又は賦形剤は、好ましくは、必要な毒性学的及び製
造的検査基準を満たしており、並びに／又は、Ｕ．Ｓ．Ｆｏｏｄ ａｎｄ Ｄｒｕｇ ａ
ｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎが作成したＩｎａｃｔｉｖｅ Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ Ｇｕ
ｉｄｅに含まれている。
生物学的又は非生物学的に望ましくないものではない物質を意味し、例えば、その物質を
、望ましくない生物学的影響をほとんど起こさずに、又は、それが含有される組成物の他
の任意の構成成分と悪い相互作用をせずに、患者に投与される医薬組成物中に組み込むこ
とができる。医薬的に許容される担体又は賦形剤は、好ましくは、必要な毒性学的及び製
造的検査基準を満たしており、並びに／又は、Ｕ．Ｓ．Ｆｏｏｄ ａｎｄ Ｄｒｕｇ ａ
ｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎが作成したＩｎａｃｔｉｖｅ Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ Ｇｕ
ｉｄｅに含まれている。
【0073】
本明細書に記載の本発明の実施形態は、実施形態「からなる」及び／又は「から本質的
になる」を含むことを理解されたい。
になる」を含むことを理解されたい。
【0074】
本明細書に記載の「約」のついた値又はパラメーターへの言及は、値又はパラメーター
自体を対象とする変化を含む（及び記載する）。例えば、「約Ｘ」に言及する記載は、「
Ｘ」の記載を含む。
自体を対象とする変化を含む（及び記載する）。例えば、「約Ｘ」に言及する記載は、「
Ｘ」の記載を含む。
【0075】
本明細書で使用するとき、「～されない」などの否定（not）を伴うある値又はパラメ
ーターへの言及は、その値又はパラメーター「以外」が肯定されることを一般に意味し、
記載する。例えば、「方法は、タイプＸの癌を治療するのに使用されない」は、「方法は
、Ｘ以外のタイプの癌を治療するのに使用される」を意味する。
ーターへの言及は、その値又はパラメーター「以外」が肯定されることを一般に意味し、
記載する。例えば、「方法は、タイプＸの癌を治療するのに使用されない」は、「方法は
、Ｘ以外のタイプの癌を治療するのに使用される」を意味する。
【0076】
本明細書及び添付の「特許請求の範囲」で使用するとき、単数形の「ａ」、「ｏｒ」、
及び「ｔｈｅ」は、文脈から単数であることが明確に読み取れる場合を除き、対象の複数
形も含まれるものとする。
ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞
及び「ｔｈｅ」は、文脈から単数であることが明確に読み取れる場合を除き、対象の複数
形も含まれるものとする。
ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞
【0077】
本発明は、本明細書に記載されるｃａＴＣＲ及びＣＳＲのいずれかによるｃａＴＣＲ及
びＣＳＲを表面に提示する免疫細胞（Ｔ細胞など）を提供する（そのような免疫細胞は、
本明細書において「ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞」とも呼ばれる）。いくつかの実施形態
では、免疫細胞は、ｃａＴＣＲ及びＣＳＲをコードする核酸を含み、ｃａＴＣＲ及びＣＳ
Ｒは、核酸から発現し、免疫細胞表面に局在化する。いくつかの実施形態では、免疫細胞
はＴ細胞である。いくつかの実施形態では、免疫細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ
細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、及びサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。い
くつかの実施形態では、免疫細胞は、ｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサブユ
ニットを発現しない。例えば、いくつかの実施形態では、免疫細胞はαβ Ｔ細胞であり
、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲ δ及びγ鎖に由来する配列を含み、
又は、Ｔ細胞は、γδ Ｔ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲ
α及びβ鎖に由来する配列を含む。いくつかの実施形態では、免疫細胞は、免疫細胞の
内因性のＴＣＲサブユニットのうちの１つ又は両方の発現を遮断又は減少させるように改
変される。例えば、いくつかの実施形態では、免疫細胞は、ＴＣＲ α及び／又はβ鎖の
発現を遮断又は減少させるように改変されたαβ Ｔ細胞であるか、又は免疫細胞は、Ｔ
ＣＲ γ及び／又はδ鎖の発現を遮断又は減少させるように改変されたγδ Ｔ細胞であ
る。遺伝子発現を破壊する細胞の改変としては、例えば、ＲＮＡ干渉（例えば、ｓｉＲＮ
Ａ、ｓｈＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ）、遺伝子編集（例えば、ＣＲＩＳＰＲ又はＴＡＬＥＮ系遺
伝子ノックアウト）などを含む、当該技術分野において既知の任意のそのような技術が挙
げられる。
びＣＳＲを表面に提示する免疫細胞（Ｔ細胞など）を提供する（そのような免疫細胞は、
本明細書において「ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞」とも呼ばれる）。いくつかの実施形態
では、免疫細胞は、ｃａＴＣＲ及びＣＳＲをコードする核酸を含み、ｃａＴＣＲ及びＣＳ
Ｒは、核酸から発現し、免疫細胞表面に局在化する。いくつかの実施形態では、免疫細胞
はＴ細胞である。いくつかの実施形態では、免疫細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ
細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、及びサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。い
くつかの実施形態では、免疫細胞は、ｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサブユ
ニットを発現しない。例えば、いくつかの実施形態では、免疫細胞はαβ Ｔ細胞であり
、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲ δ及びγ鎖に由来する配列を含み、
又は、Ｔ細胞は、γδ Ｔ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲ
α及びβ鎖に由来する配列を含む。いくつかの実施形態では、免疫細胞は、免疫細胞の
内因性のＴＣＲサブユニットのうちの１つ又は両方の発現を遮断又は減少させるように改
変される。例えば、いくつかの実施形態では、免疫細胞は、ＴＣＲ α及び／又はβ鎖の
発現を遮断又は減少させるように改変されたαβ Ｔ細胞であるか、又は免疫細胞は、Ｔ
ＣＲ γ及び／又はδ鎖の発現を遮断又は減少させるように改変されたγδ Ｔ細胞であ
る。遺伝子発現を破壊する細胞の改変としては、例えば、ＲＮＡ干渉（例えば、ｓｉＲＮ
Ａ、ｓｈＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ）、遺伝子編集（例えば、ＣＲＩＳＰＲ又はＴＡＬＥＮ系遺
伝子ノックアウト）などを含む、当該技術分野において既知の任意のそのような技術が挙
げられる。
【0078】
例えば、いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるｃａＴＣＲのいずれかによる
ｃａＴＣＲをコードする核酸と、本明細書に記載されるＣＳＲのいずれかによるＣＳＲと
を含む免疫細胞（Ｔ細胞など）が提供され、ｃａＴＣＲ及びＣＳＲは、核酸から発現し、
免疫細胞表面に局在化する。いくつかの実施形態では、核酸は、ｃａＴＣＲの第１のｃａ
ＴＣＲポリペプチド鎖をコードする第１のｃａＴＣＲ核酸配列と、ｃａＴＣＲの第２のｃ
ａＴＣＲポリペプチド鎖をコードする第２のｃａＴＣＲ核酸配列と、ＣＳＲのＣＳＲポリ
ペプチド鎖をコードするＣＳＲ核酸配列とを含む。いくつかの実施形態では、第１及び第
２のｃａＴＣＲ核酸配列並びにＣＳＲ核酸配列はそれぞれ、異なるベクターに含まれる。
いくつかの実施形態では、核酸配列の一部又は全ては、同一のベクターに含まれる。ベク
ターは、例えば、哺乳類発現ベクター、並びにウイルスベクター（レトロウイルス、アデ
ノウイルス、アデノ随伴ウイルス、ヘルペスウイルス、及びレンチウイルス由来のものな
ど）からなる群から選択され得る。いくつかの実施形態では、ベクターのうちの１つ以上
は、免疫細胞の宿主ゲノムに組み込まれる。いくつかの実施形態では、第１及び第２のｃ
ａＴＣＲ核酸配列並びにＣＳＲ核酸配列はそれぞれ、異なるプロモーターの制御下にある
。いくつかの実施形態では、プロモーターの一部又は全ては、同一の配列を有する。いく
つかの実施形態では、プロモーターの一部又は全ては、異なる配列を有する。いくつかの
実施形態では、核酸配列の一部又は全ては、単一のプロモーターの制御下にある。いくつ
かの実施形態では、プロモーターの一部又は全ては誘導可能である。いくつかの実施形態
では、免疫細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、及び
サプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
ｃａＴＣＲをコードする核酸と、本明細書に記載されるＣＳＲのいずれかによるＣＳＲと
を含む免疫細胞（Ｔ細胞など）が提供され、ｃａＴＣＲ及びＣＳＲは、核酸から発現し、
免疫細胞表面に局在化する。いくつかの実施形態では、核酸は、ｃａＴＣＲの第１のｃａ
ＴＣＲポリペプチド鎖をコードする第１のｃａＴＣＲ核酸配列と、ｃａＴＣＲの第２のｃ
ａＴＣＲポリペプチド鎖をコードする第２のｃａＴＣＲ核酸配列と、ＣＳＲのＣＳＲポリ
ペプチド鎖をコードするＣＳＲ核酸配列とを含む。いくつかの実施形態では、第１及び第
２のｃａＴＣＲ核酸配列並びにＣＳＲ核酸配列はそれぞれ、異なるベクターに含まれる。
いくつかの実施形態では、核酸配列の一部又は全ては、同一のベクターに含まれる。ベク
ターは、例えば、哺乳類発現ベクター、並びにウイルスベクター（レトロウイルス、アデ
ノウイルス、アデノ随伴ウイルス、ヘルペスウイルス、及びレンチウイルス由来のものな
ど）からなる群から選択され得る。いくつかの実施形態では、ベクターのうちの１つ以上
は、免疫細胞の宿主ゲノムに組み込まれる。いくつかの実施形態では、第１及び第２のｃ
ａＴＣＲ核酸配列並びにＣＳＲ核酸配列はそれぞれ、異なるプロモーターの制御下にある
。いくつかの実施形態では、プロモーターの一部又は全ては、同一の配列を有する。いく
つかの実施形態では、プロモーターの一部又は全ては、異なる配列を有する。いくつかの
実施形態では、核酸配列の一部又は全ては、単一のプロモーターの制御下にある。いくつ
かの実施形態では、プロモーターの一部又は全ては誘導可能である。いくつかの実施形態
では、免疫細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、及び
サプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
【0079】
したがって、いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲのいずれかによる
ｃａＴＣＲと本明細書に記載のＣＳＲのいずれかによるＣＳＲとを発現する、ｃａＴＣＲ
＋ＣＳＲ免疫細胞（Ｔ細胞など）が提供され、このｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞は、ａ）
ｃａＴＣＲの第１のｃａＴＣＲポリペプチド鎖をコードする第１のｃａＴＣＲ核酸配列と
、ｂ）ｃａＴＣＲの第２のｃａＴＣＲポリペプチド鎖をコードする第２のｃａＴＣＲ核酸
配列と、ｃ）ＣＳＲのＣＳＲポリペプチド鎖をコードするＣＳＲ核酸配列とを含み、第１
及び第２のｃａＴＣＲポリペプチド鎖が、第１及び第２のｃａＴＣＲ核酸配列から発現し
てｃａＴＣＲを形成し、ＣＳＲポリペプチド鎖が、ＣＳＲ核酸から発現してＣＳＲを形成
し、ｃａＴＣＲ及びＣＳＲは、免疫細胞の表面に局在化する。いくつかの実施形態では、
第１のｃａＴＣＲ核酸配列は、第１のベクター（レンチウイルスベクターなど）に含まれ
、第２のｃａＴＣＲ核酸配列は、第２のベクター（レンチウイルスベクターなど）に含ま
れ、ＣＳＲ核酸配列は、第３のベクター（レンチウイルスベクターなど）に含まれる。い
くつかの実施形態では、第１及び第２のｃａＴＣＲ核酸配列並びにＣＳＲ核酸配列の一部
又は全ては、同一のベクター（レンチウイルスベクターなど）に含まれる。いくつかの実
施形態では、第１及び第２のｃａＴＣＲ核酸配列並びにＣＳＲ核酸配列のそれぞれは、個
別に、プロモーターに作動可能に連結される。いくつかの実施形態では、核酸配列の一部
又は全ては、単一のプロモーターの制御下にある。いくつかの実施形態では、プロモータ
ーの一部又は全ては、同一の配列を有する。いくつかの実施形態では、プロモーターの一
部又は全ては、異なる配列を有する。いくつかの実施形態では、プロモーターの一部又は
全ては誘導可能である。いくつかの実施形態では、ベクターの一部又は全ては、ウイルス
ベクター（レンチウイルスベクターなど）である。いくつかの実施形態では、免疫細胞は
、ｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサブユニットを発現しない。例えば、いく
つかの実施形態では、免疫細胞はαβ Ｔ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲ－
ＴＭは、ＴＣＲ δ及びγ鎖に由来する配列を含み、又は、免疫細胞は、γδ Ｔ細胞で
あり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲ α及びβ鎖に由来する配列を含
む。いくつかの実施形態では、免疫細胞は、その内因性のＴＣＲサブユニットのうちの１
つ又は両方の発現を遮断又は減少させるように改変される。例えば、いくつかの実施形態
では、免疫細胞は、ＴＣＲ α及び／又はβ鎖の発現を遮断又は減少させるように改変さ
れたαβ Ｔ細胞であるか、又は免疫細胞は、ＴＣＲ γ及び／又はδ鎖の発現を遮断又
は減少させるように改変されたγδ Ｔ細胞である。いくつかの実施形態では、免疫細胞
は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、及びサプレッサーＴ
細胞からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ベクターの一部又は全ては、
免疫細胞の宿主ゲノムに組み込まれたウイルスベクター（レンチウイルスベクターなど）
である。
ｃａＴＣＲと本明細書に記載のＣＳＲのいずれかによるＣＳＲとを発現する、ｃａＴＣＲ
＋ＣＳＲ免疫細胞（Ｔ細胞など）が提供され、このｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞は、ａ）
ｃａＴＣＲの第１のｃａＴＣＲポリペプチド鎖をコードする第１のｃａＴＣＲ核酸配列と
、ｂ）ｃａＴＣＲの第２のｃａＴＣＲポリペプチド鎖をコードする第２のｃａＴＣＲ核酸
配列と、ｃ）ＣＳＲのＣＳＲポリペプチド鎖をコードするＣＳＲ核酸配列とを含み、第１
及び第２のｃａＴＣＲポリペプチド鎖が、第１及び第２のｃａＴＣＲ核酸配列から発現し
てｃａＴＣＲを形成し、ＣＳＲポリペプチド鎖が、ＣＳＲ核酸から発現してＣＳＲを形成
し、ｃａＴＣＲ及びＣＳＲは、免疫細胞の表面に局在化する。いくつかの実施形態では、
第１のｃａＴＣＲ核酸配列は、第１のベクター（レンチウイルスベクターなど）に含まれ
、第２のｃａＴＣＲ核酸配列は、第２のベクター（レンチウイルスベクターなど）に含ま
れ、ＣＳＲ核酸配列は、第３のベクター（レンチウイルスベクターなど）に含まれる。い
くつかの実施形態では、第１及び第２のｃａＴＣＲ核酸配列並びにＣＳＲ核酸配列の一部
又は全ては、同一のベクター（レンチウイルスベクターなど）に含まれる。いくつかの実
施形態では、第１及び第２のｃａＴＣＲ核酸配列並びにＣＳＲ核酸配列のそれぞれは、個
別に、プロモーターに作動可能に連結される。いくつかの実施形態では、核酸配列の一部
又は全ては、単一のプロモーターの制御下にある。いくつかの実施形態では、プロモータ
ーの一部又は全ては、同一の配列を有する。いくつかの実施形態では、プロモーターの一
部又は全ては、異なる配列を有する。いくつかの実施形態では、プロモーターの一部又は
全ては誘導可能である。いくつかの実施形態では、ベクターの一部又は全ては、ウイルス
ベクター（レンチウイルスベクターなど）である。いくつかの実施形態では、免疫細胞は
、ｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサブユニットを発現しない。例えば、いく
つかの実施形態では、免疫細胞はαβ Ｔ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲ－
ＴＭは、ＴＣＲ δ及びγ鎖に由来する配列を含み、又は、免疫細胞は、γδ Ｔ細胞で
あり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲ α及びβ鎖に由来する配列を含
む。いくつかの実施形態では、免疫細胞は、その内因性のＴＣＲサブユニットのうちの１
つ又は両方の発現を遮断又は減少させるように改変される。例えば、いくつかの実施形態
では、免疫細胞は、ＴＣＲ α及び／又はβ鎖の発現を遮断又は減少させるように改変さ
れたαβ Ｔ細胞であるか、又は免疫細胞は、ＴＣＲ γ及び／又はδ鎖の発現を遮断又
は減少させるように改変されたγδ Ｔ細胞である。いくつかの実施形態では、免疫細胞
は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、及びサプレッサーＴ
細胞からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ベクターの一部又は全ては、
免疫細胞の宿主ゲノムに組み込まれたウイルスベクター（レンチウイルスベクターなど）
である。
【0080】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲのいずれかによるｃａＴＣＲと
本明細書に記載のＣＳＲのいずれかによるＣＳＲとを表面に発現する、ｃａＴＣＲ＋ＣＳ
Ｒ免疫細胞（Ｔ細胞など）が提供され、このｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞は、ａ）ｃａＴ
ＣＲの第１のｃａＴＣＲポリペプチド鎖をコードする第１のｃａＴＣＲ核酸配列に作動可
能に連結された第１のプロモーターを含む第１のベクターと、ｂ）ｃａＴＣＲの第２のｃ
ａＴＣＲポリペプチド鎖をコードする第２のｃａＴＣＲ核酸配列に作動可能に連結された
第２のプロモーターを含む第２のベクターと、ｃ）ＣＳＲのＣＳＲポリペプチド鎖をコー
ドするＣＳＲ核酸配列に作動可能に連結された第３のプロモーターを含む第３のベクター
とを含み、第１及び第２のｃａＴＣＲポリペプチド鎖が、第１及び第２のｃａＴＣＲ核酸
配列から発現してｃａＴＣＲを形成し、ＣＳＲポリペプチド鎖が、ＣＳＲ核酸配列から発
現してＣＳＲを形成し、ｃａＴＣＲ及びＣＳＲは、免疫細胞の表面に局在化する。いくつ
かの実施形態では、プロモーターの一部又は全ては、同一の配列を有する。いくつかの実
施形態では、プロモーターの一部又は全ては、異なる配列を有する。いくつかの実施形態
では、プロモーターの一部又は全ては誘導可能である。いくつかの実施形態では、免疫細
胞は、ｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサブユニットを発現しない。例えば、
いくつかの実施形態では、免疫細胞はαβ Ｔ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣ
Ｒ－ＴＭは、ＴＣＲ δ及びγ鎖に由来する配列を含み、又は、免疫細胞は、γδ Ｔ細
胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲ α及びβ鎖に由来する配列
を含む。いくつかの実施形態では、免疫細胞は、その内因性のＴＣＲサブユニットのうち
の１つ又は両方の発現を遮断又は減少させるように改変される。例えば、いくつかの実施
形態では、免疫細胞は、ＴＣＲ α及び／又はβ鎖の発現を遮断又は減少させるように改
変されたαβ Ｔ細胞であるか、又は免疫細胞は、ＴＣＲ γ及び／又はδ鎖の発現を遮
断又は減少させるように改変されたγδ Ｔ細胞である。いくつかの実施形態では、免疫
細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、及びサプレッサ
ーＴ細胞からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、第１及び第２のベクター
は、免疫細胞の宿主ゲノムに組み込まれたウイルスベクター（レンチウイルスベクターな
ど）である。
本明細書に記載のＣＳＲのいずれかによるＣＳＲとを表面に発現する、ｃａＴＣＲ＋ＣＳ
Ｒ免疫細胞（Ｔ細胞など）が提供され、このｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞は、ａ）ｃａＴ
ＣＲの第１のｃａＴＣＲポリペプチド鎖をコードする第１のｃａＴＣＲ核酸配列に作動可
能に連結された第１のプロモーターを含む第１のベクターと、ｂ）ｃａＴＣＲの第２のｃ
ａＴＣＲポリペプチド鎖をコードする第２のｃａＴＣＲ核酸配列に作動可能に連結された
第２のプロモーターを含む第２のベクターと、ｃ）ＣＳＲのＣＳＲポリペプチド鎖をコー
ドするＣＳＲ核酸配列に作動可能に連結された第３のプロモーターを含む第３のベクター
とを含み、第１及び第２のｃａＴＣＲポリペプチド鎖が、第１及び第２のｃａＴＣＲ核酸
配列から発現してｃａＴＣＲを形成し、ＣＳＲポリペプチド鎖が、ＣＳＲ核酸配列から発
現してＣＳＲを形成し、ｃａＴＣＲ及びＣＳＲは、免疫細胞の表面に局在化する。いくつ
かの実施形態では、プロモーターの一部又は全ては、同一の配列を有する。いくつかの実
施形態では、プロモーターの一部又は全ては、異なる配列を有する。いくつかの実施形態
では、プロモーターの一部又は全ては誘導可能である。いくつかの実施形態では、免疫細
胞は、ｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサブユニットを発現しない。例えば、
いくつかの実施形態では、免疫細胞はαβ Ｔ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣ
Ｒ－ＴＭは、ＴＣＲ δ及びγ鎖に由来する配列を含み、又は、免疫細胞は、γδ Ｔ細
胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲ α及びβ鎖に由来する配列
を含む。いくつかの実施形態では、免疫細胞は、その内因性のＴＣＲサブユニットのうち
の１つ又は両方の発現を遮断又は減少させるように改変される。例えば、いくつかの実施
形態では、免疫細胞は、ＴＣＲ α及び／又はβ鎖の発現を遮断又は減少させるように改
変されたαβ Ｔ細胞であるか、又は免疫細胞は、ＴＣＲ γ及び／又はδ鎖の発現を遮
断又は減少させるように改変されたγδ Ｔ細胞である。いくつかの実施形態では、免疫
細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、及びサプレッサ
ーＴ細胞からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、第１及び第２のベクター
は、免疫細胞の宿主ゲノムに組み込まれたウイルスベクター（レンチウイルスベクターな
ど）である。
【0081】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるｃａＴＣＲのいずれかによるｃａＴＣ
Ｒ及び本明細書に記載されるＣＳＲのいずれかによるＣＳＲを表面に発現する、ｃａＴＣ
Ｒ＋ＣＳＲ免疫細胞（Ｔ細胞など）であって、ａ）ｉ）ｃａＴＣＲの第１のｃａＴＣＲポ
リペプチド鎖をコードする第１のｃａＴＣＲ核酸配列に作動可能に連結された第１のプロ
モーター、及びｉｉ）ｃａＴＣＲの第２のｃａＴＣＲポリペプチド鎖をコードする第２の
ｃａＴＣＲ核酸配列に作動可能に連結された第２プロモーターを含む、第１のベクターと
、ｂ）ＣＳＲのＣＳＲポリペプチド鎖をコードするＣＳＲ核酸配列に作動可能に連結され
た第３のプロモーターを含む第２のベクターと、を含み、第１及び第２のｃａＴＣＲポリ
ペプチド鎖が、第１及び第２のｃａＴＣＲ核酸配列から発現して、ｃａＴＣＲを形成し、
ＣＳＲポリペプチド鎖がＣＳＲ核酸配列から発現してＣＳＲを形成し、ｃａＴＣＲが免疫
細胞の表面に局在化する、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞（Ｔ細胞など）が提供される。い
くつかの実施形態では、プロモーターの一部又は全ては、同じ配列を有する。いくつかの
実施形態では、プロモーターの一部又は全ては、異なる配列を有する。いくつかの実施形
態では、プロモーターの一部又は全ては誘導可能である。いくつかの実施形態では、免疫
細胞は、ｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサブユニットを発現しない。例えば
、いくつかの実施形態では、免疫細胞はαβ Ｔ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴ
ＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲ δ及びγ鎖に由来する配列を含み、又は、免疫細胞は、γδ Ｔ
細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲ α及びβ鎖に由来する配
列を含む。いくつかの実施形態では、免疫細胞は、その内因性のＴＣＲサブユニットのう
ちの１つ又は両方の発現を遮断又は減少させるように改変される。例えば、いくつかの実
施形態では、免疫細胞は、ＴＣＲ α及び／又はβ鎖の発現を遮断又は減少させるように
改変されたαβ Ｔ細胞であるか、又は免疫細胞は、ＴＣＲ γ及び／又はδ鎖の発現を
遮断又は減少させるように改変されたγδ Ｔ細胞である。いくつかの実施形態では、免
疫細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、及びサプレッ
サーＴ細胞からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、第１及び第２のベクタ
ーは、免疫細胞の宿主ゲノムに組み込まれたウイルスベクター（レンチウイルスベクター
など）である。第１又は第２のｃａＴＣＲ核酸配列がＣＳＲ核酸配列と交換される場合な
ど、核酸配列のいずれかが交換される実施形態も想到されることを理解されたい。
Ｒ及び本明細書に記載されるＣＳＲのいずれかによるＣＳＲを表面に発現する、ｃａＴＣ
Ｒ＋ＣＳＲ免疫細胞（Ｔ細胞など）であって、ａ）ｉ）ｃａＴＣＲの第１のｃａＴＣＲポ
リペプチド鎖をコードする第１のｃａＴＣＲ核酸配列に作動可能に連結された第１のプロ
モーター、及びｉｉ）ｃａＴＣＲの第２のｃａＴＣＲポリペプチド鎖をコードする第２の
ｃａＴＣＲ核酸配列に作動可能に連結された第２プロモーターを含む、第１のベクターと
、ｂ）ＣＳＲのＣＳＲポリペプチド鎖をコードするＣＳＲ核酸配列に作動可能に連結され
た第３のプロモーターを含む第２のベクターと、を含み、第１及び第２のｃａＴＣＲポリ
ペプチド鎖が、第１及び第２のｃａＴＣＲ核酸配列から発現して、ｃａＴＣＲを形成し、
ＣＳＲポリペプチド鎖がＣＳＲ核酸配列から発現してＣＳＲを形成し、ｃａＴＣＲが免疫
細胞の表面に局在化する、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞（Ｔ細胞など）が提供される。い
くつかの実施形態では、プロモーターの一部又は全ては、同じ配列を有する。いくつかの
実施形態では、プロモーターの一部又は全ては、異なる配列を有する。いくつかの実施形
態では、プロモーターの一部又は全ては誘導可能である。いくつかの実施形態では、免疫
細胞は、ｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサブユニットを発現しない。例えば
、いくつかの実施形態では、免疫細胞はαβ Ｔ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴ
ＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲ δ及びγ鎖に由来する配列を含み、又は、免疫細胞は、γδ Ｔ
細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲ α及びβ鎖に由来する配
列を含む。いくつかの実施形態では、免疫細胞は、その内因性のＴＣＲサブユニットのう
ちの１つ又は両方の発現を遮断又は減少させるように改変される。例えば、いくつかの実
施形態では、免疫細胞は、ＴＣＲ α及び／又はβ鎖の発現を遮断又は減少させるように
改変されたαβ Ｔ細胞であるか、又は免疫細胞は、ＴＣＲ γ及び／又はδ鎖の発現を
遮断又は減少させるように改変されたγδ Ｔ細胞である。いくつかの実施形態では、免
疫細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、及びサプレッ
サーＴ細胞からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、第１及び第２のベクタ
ーは、免疫細胞の宿主ゲノムに組み込まれたウイルスベクター（レンチウイルスベクター
など）である。第１又は第２のｃａＴＣＲ核酸配列がＣＳＲ核酸配列と交換される場合な
ど、核酸配列のいずれかが交換される実施形態も想到されることを理解されたい。
【0082】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるｃａＴＣＲのいずれかによるｃａＴＣ
Ｒ及び本明細書に記載されるＣＳＲのいずれかによるＣＳＲを表面に発現する、ｃａＴＣ
Ｒ＋ＣＳＲ免疫細胞（Ｔ細胞など）であって、ａ）ｉ）ｃａＴＣＲの第１のｃａＴＣＲポ
リペプチド鎖をコードする第１のｃａＴＣＲ核酸配列及び、ｉｉ）ｃａＴＣＲの第２のｃ
ａＴＣＲポリペプチド鎖をコードする第２のｃａＴＣＲ核酸配列を含む第１のベクターで
あって、第１及び第２のｃａＴＣＲ核酸配列が第１のプロモーターの制御化にある、第１
のベクターと、ｂ）ＣＳＲのＣＳＲポリペプチド鎖をコードするＣＳＲ核酸配列に作動可
能に連結された第２プロモーターを含む第２のベクターと、を含み、第１及び第２のｃａ
ＴＣＲポリペプチド鎖が第１及び第２のｃａＴＣＲ核酸配列から発現してｃａＴＣＲを形
成し、ＣＳＲポリペプチド鎖がＣＳＲ核酸配列から発現してＣＳＲを形成し、ｃａＴＣＲ
及びＣＳＲが、免疫細胞の表面に局在化する、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞が提供される
。いくつかの実施形態では、第１のプロモーターは、第１のｃａＴＣＲ核酸配列の５’末
端に作動可能に連結され、第１のｃａＴＣＲ核酸配列の３’末端を第２のｃａＴＣＲ核酸
配列の５’末端に連結させる、内部リボソーム侵入部位（ＩＲＥＳ）、自己切断２Ａペプ
チド（Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２Ａ、又はＦ２Ａなど）をコードする核酸からなる群から選択
される核酸リンカーが存在し、第１のｃａＴＣＲ核酸配列及び第２のｃａＴＣＲ核酸配列
は、プロモーターの制御下で単一ＲＮＡとして転写される。いくつかの実施形態では、第
１のプロモーターは、第２のｃａＴＣＲ核酸配列の５’末端に作動可能に連結され、第２
のｃａＴＣＲ核酸配列の３’末端を第１のｃａＴＣＲ核酸配列の５’末端に連結させる、
内部リボソーム侵入部位（ＩＲＥＳ）、自己切断２Ａペプチド（Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２Ａ
、又はＦ２Ａなど）をコードする核酸からなる群から選択される核酸リンカーが存在し、
第１のｃａＴＣＲ核酸配列及び第２のｃａＴＣＲ核酸配列は、プロモーターの制御下で単
一ＲＮＡとして転写される。いくつかの実施形態では、第１及び／又は第２のプロモータ
ーは同じ配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び／又は第２のプロモーターは
、異なる配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び／又は第２のプロモーターは
誘導可能である。いくつかの実施形態では、免疫細胞は、ｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭが由
来するＴＣＲサブユニットを発現しない。例えば、いくつかの実施形態では、免疫細胞は
αβ Ｔ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲ δ及びγ鎖に由
来する配列を含み、又は、免疫細胞は、γδ Ｔ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴ
ＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲ α及びβ鎖に由来する配列を含む。いくつかの実施形態では、免
疫細胞は、その内因性のＴＣＲサブユニットのうちの１つ又は両方の発現を遮断又は減少
させるように改変される。例えば、いくつかの実施形態では、免疫細胞は、ＴＣＲ α及
び／又はβ鎖の発現を遮断又は減少させるように改変されたαβ Ｔ細胞であるか、又は
免疫細胞は、ＴＣＲ γ及び／又はδ鎖の発現を遮断又は減少させるように改変されたγ
δ Ｔ細胞である。いくつかの実施形態では、免疫細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパー
Ｔ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、及びサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
いくつかの実施形態では、ベクターは、免疫細胞の宿主ゲノムに組み込まれたウイルスベ
クター（レンチウイルスベクターなど）である。第１又は第２のｃａＴＣＲ核酸配列がＣ
ＳＲ核酸配列と交換される場合など、核酸配列のいずれかが交換される実施形態も想到さ
れることを理解されたい。
Ｒ及び本明細書に記載されるＣＳＲのいずれかによるＣＳＲを表面に発現する、ｃａＴＣ
Ｒ＋ＣＳＲ免疫細胞（Ｔ細胞など）であって、ａ）ｉ）ｃａＴＣＲの第１のｃａＴＣＲポ
リペプチド鎖をコードする第１のｃａＴＣＲ核酸配列及び、ｉｉ）ｃａＴＣＲの第２のｃ
ａＴＣＲポリペプチド鎖をコードする第２のｃａＴＣＲ核酸配列を含む第１のベクターで
あって、第１及び第２のｃａＴＣＲ核酸配列が第１のプロモーターの制御化にある、第１
のベクターと、ｂ）ＣＳＲのＣＳＲポリペプチド鎖をコードするＣＳＲ核酸配列に作動可
能に連結された第２プロモーターを含む第２のベクターと、を含み、第１及び第２のｃａ
ＴＣＲポリペプチド鎖が第１及び第２のｃａＴＣＲ核酸配列から発現してｃａＴＣＲを形
成し、ＣＳＲポリペプチド鎖がＣＳＲ核酸配列から発現してＣＳＲを形成し、ｃａＴＣＲ
及びＣＳＲが、免疫細胞の表面に局在化する、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞が提供される
。いくつかの実施形態では、第１のプロモーターは、第１のｃａＴＣＲ核酸配列の５’末
端に作動可能に連結され、第１のｃａＴＣＲ核酸配列の３’末端を第２のｃａＴＣＲ核酸
配列の５’末端に連結させる、内部リボソーム侵入部位（ＩＲＥＳ）、自己切断２Ａペプ
チド（Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２Ａ、又はＦ２Ａなど）をコードする核酸からなる群から選択
される核酸リンカーが存在し、第１のｃａＴＣＲ核酸配列及び第２のｃａＴＣＲ核酸配列
は、プロモーターの制御下で単一ＲＮＡとして転写される。いくつかの実施形態では、第
１のプロモーターは、第２のｃａＴＣＲ核酸配列の５’末端に作動可能に連結され、第２
のｃａＴＣＲ核酸配列の３’末端を第１のｃａＴＣＲ核酸配列の５’末端に連結させる、
内部リボソーム侵入部位（ＩＲＥＳ）、自己切断２Ａペプチド（Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２Ａ
、又はＦ２Ａなど）をコードする核酸からなる群から選択される核酸リンカーが存在し、
第１のｃａＴＣＲ核酸配列及び第２のｃａＴＣＲ核酸配列は、プロモーターの制御下で単
一ＲＮＡとして転写される。いくつかの実施形態では、第１及び／又は第２のプロモータ
ーは同じ配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び／又は第２のプロモーターは
、異なる配列を有する。いくつかの実施形態では、第１及び／又は第２のプロモーターは
誘導可能である。いくつかの実施形態では、免疫細胞は、ｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭが由
来するＴＣＲサブユニットを発現しない。例えば、いくつかの実施形態では、免疫細胞は
αβ Ｔ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲ δ及びγ鎖に由
来する配列を含み、又は、免疫細胞は、γδ Ｔ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴ
ＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲ α及びβ鎖に由来する配列を含む。いくつかの実施形態では、免
疫細胞は、その内因性のＴＣＲサブユニットのうちの１つ又は両方の発現を遮断又は減少
させるように改変される。例えば、いくつかの実施形態では、免疫細胞は、ＴＣＲ α及
び／又はβ鎖の発現を遮断又は減少させるように改変されたαβ Ｔ細胞であるか、又は
免疫細胞は、ＴＣＲ γ及び／又はδ鎖の発現を遮断又は減少させるように改変されたγ
δ Ｔ細胞である。いくつかの実施形態では、免疫細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパー
Ｔ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、及びサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
いくつかの実施形態では、ベクターは、免疫細胞の宿主ゲノムに組み込まれたウイルスベ
クター（レンチウイルスベクターなど）である。第１又は第２のｃａＴＣＲ核酸配列がＣ
ＳＲ核酸配列と交換される場合など、核酸配列のいずれかが交換される実施形態も想到さ
れることを理解されたい。
【0083】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲのいずれかによるｃａＴＣＲと
本明細書に記載のＣＳＲのいずれかによるＣＳＲとを表面に発現するｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ
免疫細胞（Ｔ細胞など）が提供され、このｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞は、ａ）ｃａＴＣ
Ｒの第１のｃａＴＣＲポリペプチド鎖をコードする第１のｃａＴＣＲ核酸配列と、ｂ）ｃ
ａＴＣＲの第２のｃａＴＣＲポリペプチド鎖をコードする第２のｃａＴＣＲ核酸配列と、
ｃ）ＣＳＲのＣＳＲポリペプチド鎖をコードするＣＳＲ核酸配列と、を含むベクターを含
み、第１及び第２のｃａＴＣＲ核酸配列並びにＣＳＲ核酸配列が、単一のプロモーターの
制御下にあり、第１及び第２のｃａＴＣＲポリペプチド鎖が、第１及び第２のｃａＴＣＲ
核酸配列から発現してｃａＴＣＲを形成し、ＣＳＲポリペプチド鎖が、ＣＳＲ核酸配列か
ら発現してＣＳＲを形成し、ｃａＴＣＲ及びＣＳＲは、免疫細胞の表面に局在化する。い
くつかの実施形態では、プロモーターは、個々に内部リボソーム侵入部位（ＩＲＥＳ）、
自己切断２Ａペプチド（Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２Ａ、又はＦ２Ａなど）をコードする核酸か
らなる群から選択される核酸リンカーによって他の核酸配列に連結される核酸配列のうち
の１つに作動可能に連結され、第１及び第２のｃａＴＣＲ核酸配列並びにＣＳＲ核酸配列
が、プロモーターの制御下で単一ＲＮＡとして転写されるようにされる。いくつかの実施
形態では、プロモーターは、誘導可能である。いくつかの実施形態では、免疫細胞は、ｃ
ａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサブユニットを発現しない。例えば、いくつか
の実施形態では、免疫細胞はαβ Ｔ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭ
は、ＴＣＲ δ及びγ鎖に由来する配列を含み、又は、免疫細胞は、γδ Ｔ細胞であり
、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲ α及びβ鎖に由来する配列を含む。
いくつかの実施形態では、免疫細胞は、その内因性のＴＣＲサブユニットのうちの１つ又
は両方の発現を遮断又は減少させるように改変される。例えば、いくつかの実施形態では
、免疫細胞は、ＴＣＲ α及び／又はβ鎖の発現を遮断又は減少させるように改変された
αβ Ｔ細胞であるか、又は免疫細胞は、ＴＣＲ γ及び／又はδ鎖の発現を遮断又は減
少させるように改変されたγδ Ｔ細胞である。いくつかの実施形態では、免疫細胞は、
細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、及びサプレッサーＴ細胞
からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ベクターは、免疫細胞の宿主ゲノ
ムに組み込まれたウイルスベクター（レンチウイルスベクターなど）である。
キメラ抗体／Ｔ細胞受容体（ｃａＴＣＲ）構築物
本明細書に記載のＣＳＲのいずれかによるＣＳＲとを表面に発現するｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ
免疫細胞（Ｔ細胞など）が提供され、このｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞は、ａ）ｃａＴＣ
Ｒの第１のｃａＴＣＲポリペプチド鎖をコードする第１のｃａＴＣＲ核酸配列と、ｂ）ｃ
ａＴＣＲの第２のｃａＴＣＲポリペプチド鎖をコードする第２のｃａＴＣＲ核酸配列と、
ｃ）ＣＳＲのＣＳＲポリペプチド鎖をコードするＣＳＲ核酸配列と、を含むベクターを含
み、第１及び第２のｃａＴＣＲ核酸配列並びにＣＳＲ核酸配列が、単一のプロモーターの
制御下にあり、第１及び第２のｃａＴＣＲポリペプチド鎖が、第１及び第２のｃａＴＣＲ
核酸配列から発現してｃａＴＣＲを形成し、ＣＳＲポリペプチド鎖が、ＣＳＲ核酸配列か
ら発現してＣＳＲを形成し、ｃａＴＣＲ及びＣＳＲは、免疫細胞の表面に局在化する。い
くつかの実施形態では、プロモーターは、個々に内部リボソーム侵入部位（ＩＲＥＳ）、
自己切断２Ａペプチド（Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２Ａ、又はＦ２Ａなど）をコードする核酸か
らなる群から選択される核酸リンカーによって他の核酸配列に連結される核酸配列のうち
の１つに作動可能に連結され、第１及び第２のｃａＴＣＲ核酸配列並びにＣＳＲ核酸配列
が、プロモーターの制御下で単一ＲＮＡとして転写されるようにされる。いくつかの実施
形態では、プロモーターは、誘導可能である。いくつかの実施形態では、免疫細胞は、ｃ
ａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサブユニットを発現しない。例えば、いくつか
の実施形態では、免疫細胞はαβ Ｔ細胞であり、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭ
は、ＴＣＲ δ及びγ鎖に由来する配列を含み、又は、免疫細胞は、γδ Ｔ細胞であり
、導入されたｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲ α及びβ鎖に由来する配列を含む。
いくつかの実施形態では、免疫細胞は、その内因性のＴＣＲサブユニットのうちの１つ又
は両方の発現を遮断又は減少させるように改変される。例えば、いくつかの実施形態では
、免疫細胞は、ＴＣＲ α及び／又はβ鎖の発現を遮断又は減少させるように改変された
αβ Ｔ細胞であるか、又は免疫細胞は、ＴＣＲ γ及び／又はδ鎖の発現を遮断又は減
少させるように改変されたγδ Ｔ細胞である。いくつかの実施形態では、免疫細胞は、
細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、及びサプレッサーＴ細胞
からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ベクターは、免疫細胞の宿主ゲノ
ムに組み込まれたウイルスベクター（レンチウイルスベクターなど）である。
キメラ抗体／Ｔ細胞受容体（ｃａＴＣＲ）構築物
【0084】
一態様では、本明細書に記載される標的抗原特異的キメラ抗体／Ｔ細胞受容体（ｃａＴ
ＣＲ）は、標的抗原（細胞表面抗原又はペプチド／ＭＨＣ複合体など）に特異的に結合し
、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子（ＣＤ３δε、ＣＤ３γε、及び／又は
ζζなど）を動員することができる。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、天然に存
在するＴＣＲドメインを含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、少なくとも１つ
の天然に存在しないＴＣＲドメインを含む。ｃａＴＣＲは、抗原特異性を提供する抗原結
合モジュールと、ＣＤ３動員及びシグナル伝達を可能にするＴ細胞受容体モジュール（Ｔ
ＣＲＭ）と、を含む。抗原結合モジュールは、天然に存在するＴ細胞受容体抗原結合部分
ではない。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、ＴＣＲＭ中のポリペプチド
鎖のアミノ末端に連結される。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、抗体部
分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、
Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュール
は、多重特異性（二重特異性など）である。ＴＣＲＭは、αβ及び／又はγδ ＴＣＲな
どの１つ以上のＴＣＲ（ＴＣＲ－ＴＭ）の膜貫通ドメインに由来する膜貫通モジュールを
含み、所望により、ＴＣＲ及び／又は１つ以上のＴＣＲ細胞内ドメイン又はその断片の連
結ペプチド若しくはその断片のうちの１つ又は両方を更に含む。いくつかの実施形態では
、ＴＣＲＭは、２つのポリペプチド鎖を含み、各ポリペプチド鎖は、アミノ末端からカル
ボキシ末端へ向けて、連結ペプチド、膜貫通ドメイン、及び必要に応じてＴＣＲ細胞内ド
メインを含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、１つ以上の天然に存在しないＴＣ
Ｒドメインを含む。例えば、いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、１つ又は２つの天然
に存在しないＴＣＲ膜貫通ドメインを含む。天然に存在しないＴＣＲドメインは、１つ以
上のアミノ酸の置換によって、及び／又は対応するドメインの一部を、別のＴＣＲと類似
のドメインの一部と置換することによって改変された天然に存在するＴＣＲの対応するド
メインであってもよい。ｃａＴＣＲは、第１のポリペプチド鎖及び第２のポリペプチド鎖
を含んでもよく、第１及び第２のポリペプチド鎖は共に、抗原結合モジュール及びＴＣＲ
Ｍを形成する。いくつかの実施形態では、第１及び第２のポリペプチド鎖は、別個のポリ
ペプチド鎖であり、ｃａＴＣＲは二量体などの多量体である。いくつかの実施形態では、
第１及び第２のポリペプチド鎖は、ペプチド結合、又はジスルフィド結合などの別の化学
結合によって共有結合されている。いくつかの実施形態では、第１のポリペプチド鎖及び
第２のポリペプチド鎖は、少なくとも１つのジスルフィド結合によって連結される。いく
つかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、１つ以上のＴ細胞共刺激シグナル伝達配列を更に含
む。１つ以上の共刺激シグナル伝達配列は、個別に、例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－
１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗
原－１（ＬＦＡ－１）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤ８
３と特異的に結合するリガンドなどを含む共刺激分子の細胞内ドメインの全て又は一部で
あり得る。いくつかの実施形態では、１つ以上の共刺激シグナル伝達配列は、第１のＴＣ
Ｒ－ＴＭと第１のＴＣＲ細胞内ドメインとの間、及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭと第２の
ＴＣＲ細胞内ドメインとの間にある。いくつかの実施形態では、１つ以上の共刺激シグナ
ル伝達配列は、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤに対してカルボキシ末端側にあ
る。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲはＴ細胞共刺激シグナル伝達配列を欠いている
。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメ
インを含む安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲ
を安定化させる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、安定化モジュー
ルは、抗原結合モジュールとＴＣＲＭとの間に位置する。いくつかの実施形態では、ｃａ
ＴＣＲは、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール又はドメイン間のスペーサモジュールを更
に含む。いくつかの実施形態では、スペーサモジュールは、２つのｃａＴＣＲモジュール
又はドメインを連結する１つ以上のペプチドリンカーを含む。
ＣＲ）は、標的抗原（細胞表面抗原又はペプチド／ＭＨＣ複合体など）に特異的に結合し
、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子（ＣＤ３δε、ＣＤ３γε、及び／又は
ζζなど）を動員することができる。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、天然に存
在するＴＣＲドメインを含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、少なくとも１つ
の天然に存在しないＴＣＲドメインを含む。ｃａＴＣＲは、抗原特異性を提供する抗原結
合モジュールと、ＣＤ３動員及びシグナル伝達を可能にするＴ細胞受容体モジュール（Ｔ
ＣＲＭ）と、を含む。抗原結合モジュールは、天然に存在するＴ細胞受容体抗原結合部分
ではない。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、ＴＣＲＭ中のポリペプチド
鎖のアミノ末端に連結される。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、抗体部
分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、
Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュール
は、多重特異性（二重特異性など）である。ＴＣＲＭは、αβ及び／又はγδ ＴＣＲな
どの１つ以上のＴＣＲ（ＴＣＲ－ＴＭ）の膜貫通ドメインに由来する膜貫通モジュールを
含み、所望により、ＴＣＲ及び／又は１つ以上のＴＣＲ細胞内ドメイン又はその断片の連
結ペプチド若しくはその断片のうちの１つ又は両方を更に含む。いくつかの実施形態では
、ＴＣＲＭは、２つのポリペプチド鎖を含み、各ポリペプチド鎖は、アミノ末端からカル
ボキシ末端へ向けて、連結ペプチド、膜貫通ドメイン、及び必要に応じてＴＣＲ細胞内ド
メインを含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、１つ以上の天然に存在しないＴＣ
Ｒドメインを含む。例えば、いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、１つ又は２つの天然
に存在しないＴＣＲ膜貫通ドメインを含む。天然に存在しないＴＣＲドメインは、１つ以
上のアミノ酸の置換によって、及び／又は対応するドメインの一部を、別のＴＣＲと類似
のドメインの一部と置換することによって改変された天然に存在するＴＣＲの対応するド
メインであってもよい。ｃａＴＣＲは、第１のポリペプチド鎖及び第２のポリペプチド鎖
を含んでもよく、第１及び第２のポリペプチド鎖は共に、抗原結合モジュール及びＴＣＲ
Ｍを形成する。いくつかの実施形態では、第１及び第２のポリペプチド鎖は、別個のポリ
ペプチド鎖であり、ｃａＴＣＲは二量体などの多量体である。いくつかの実施形態では、
第１及び第２のポリペプチド鎖は、ペプチド結合、又はジスルフィド結合などの別の化学
結合によって共有結合されている。いくつかの実施形態では、第１のポリペプチド鎖及び
第２のポリペプチド鎖は、少なくとも１つのジスルフィド結合によって連結される。いく
つかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、１つ以上のＴ細胞共刺激シグナル伝達配列を更に含
む。１つ以上の共刺激シグナル伝達配列は、個別に、例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－
１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗
原－１（ＬＦＡ－１）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤ８
３と特異的に結合するリガンドなどを含む共刺激分子の細胞内ドメインの全て又は一部で
あり得る。いくつかの実施形態では、１つ以上の共刺激シグナル伝達配列は、第１のＴＣ
Ｒ－ＴＭと第１のＴＣＲ細胞内ドメインとの間、及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭと第２の
ＴＣＲ細胞内ドメインとの間にある。いくつかの実施形態では、１つ以上の共刺激シグナ
ル伝達配列は、第１のＴＣＲＤ及び／又は第２のＴＣＲＤに対してカルボキシ末端側にあ
る。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲはＴ細胞共刺激シグナル伝達配列を欠いている
。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメ
インを含む安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲ
を安定化させる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、安定化モジュー
ルは、抗原結合モジュールとＴＣＲＭとの間に位置する。いくつかの実施形態では、ｃａ
ＴＣＲは、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール又はドメイン間のスペーサモジュールを更
に含む。いくつかの実施形態では、スペーサモジュールは、２つのｃａＴＣＲモジュール
又はドメインを連結する１つ以上のペプチドリンカーを含む。
【0085】
本明細書に記載されるｃａＴＣＲは、このセクションに記載される１つ以上の特徴を有
してもよい。本明細書に記載されるｃａＴＣＲ（例えば、抗原結合モジュール、ＴＣＲＤ
、ＴＣＲ－ＴＭ、スペーサモジュール、安定化モジュール、Ｔ細胞共刺激配列、及び様々
なリンカーなど）の各構成要素のための特徴のいずれかを、各及び全ての組み合わせが個
別に記載されるかのように、ＣＳＲの特徴のいずれかと、及びＳＳＥの特徴のいずれかと
互いに組み合わせることができることが意図される。
してもよい。本明細書に記載されるｃａＴＣＲ（例えば、抗原結合モジュール、ＴＣＲＤ
、ＴＣＲ－ＴＭ、スペーサモジュール、安定化モジュール、Ｔ細胞共刺激配列、及び様々
なリンカーなど）の各構成要素のための特徴のいずれかを、各及び全ての組み合わせが個
別に記載されるかのように、ＣＳＲの特徴のいずれかと、及びＳＳＥの特徴のいずれかと
互いに組み合わせることができることが意図される。
【0086】
いくつかの実施形態では、抗原結合モジュール（抗体部分など）は、ａ）他の分子に対
する結合親和性の少なくとも約１０倍（例えば、少なくとも約１０、２０、３０、４０、
５０、７５、１００、２００、３００、４００、５００、７５０、１０００、若しくはそ
れ以上のうちのいずれかを含む）の親和性で、又はｂ）他の分子に結合するためのＫｄの
約１／１０倍以下（例えば、約１／１０、１／２０、１／３０、１／４０、１／５０、１
／７５、１／１００、１／２００、１／３００、１／４００、１／５００、１／７５０、
１／１０００、若しくはそれ以下など）のＫｄで標的抗原に特異的に結合する。結合親和
性は、ＥＬＩＳＡ、蛍光標識細胞分取（ＦＡＣＳ）分析、又は放射線免疫沈降アッセイ（
ＲＩＡ）などの当該技術分野において既知の方法によって決定することができる。Ｋｄは
、例えば、Ｂｉａｃｏｒｅ機器を利用する表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）アッセイ、又は
例えばＳａｐｉｄｙｎｅ機器を利用する動的排除アッセイ（ＫｉｎＥｘＡ）などの当該技
術分野において既知の方法によって決定することができる。
する結合親和性の少なくとも約１０倍（例えば、少なくとも約１０、２０、３０、４０、
５０、７５、１００、２００、３００、４００、５００、７５０、１０００、若しくはそ
れ以上のうちのいずれかを含む）の親和性で、又はｂ）他の分子に結合するためのＫｄの
約１／１０倍以下（例えば、約１／１０、１／２０、１／３０、１／４０、１／５０、１
／７５、１／１００、１／２００、１／３００、１／４００、１／５００、１／７５０、
１／１０００、若しくはそれ以下など）のＫｄで標的抗原に特異的に結合する。結合親和
性は、ＥＬＩＳＡ、蛍光標識細胞分取（ＦＡＣＳ）分析、又は放射線免疫沈降アッセイ（
ＲＩＡ）などの当該技術分野において既知の方法によって決定することができる。Ｋｄは
、例えば、Ｂｉａｃｏｒｅ機器を利用する表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）アッセイ、又は
例えばＳａｐｉｄｙｎｅ機器を利用する動的排除アッセイ（ＫｉｎＥｘＡ）などの当該技
術分野において既知の方法によって決定することができる。
【0087】
安定化ドメインの例としては、Ｆｃ領域、ヒンジ領域、ＣＨ３ドメイン、ＣＨ４ドメイ
ン、ＣＨ１又はＣＬドメイン、ロイシンジッパードメイン（例えば、ｊｕｎ／ｆｏｓロイ
シンジッパードメイン、例えば、Ｋｏｓｔｅｌｎｅｙ ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ
，１４８：１５４７－１５５３，１９９２を参照されたい、若しくは酵母ＧＣＮ４ロイシ
ンジッパードメイン）、イソロイシンジッパードメイン、二量体化細胞表面受容体の二量
体化領域（例えば、インターロイキン－８受容体（ＩＬ－８ Ｒ）；又はＬＦＡ－１若し
くはＧＰＩＩＩｂ／ＩＩＩａなどのインテグリンヘテロ二量体）、分泌型二量体化リガン
ド（例えば、神経成長因子（ＮＧＦ）、ニューロトロフィン－３（ＮＴ－３）、インター
ロイキン－８（ＩＬ－８）、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）、若しくは脳由来神経栄養因
子（ＢＤＮＦ）の二量体化領域；例えば、Ａｒａｋａｗａ ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ｂｉｏｌ．
Ｃｈｅｍ．２６９：２７８３３－２７８３９，１９９４，及びＲａｄｚｉｅｊｅｗｓｋｉ
ｅｔ ａｌ，Ｂｉｏｃｈｅｍ．３２：１３５０，１９９３を参照されたい）；コイルド
コイル二量化ドメイン（例えば、ＷＯ２０１４１５２８７８、Ｆｌｅｔｃｈｅｒ ｅｔ
ａｌ，ＡＣＳ Ｓｙｎｔｈ．Ｂｉｏｌ．１：２４０－２５０，２０１２；及びＴｈｏｍａ
ｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１３５（１３）：５１６１－５１６６
、２０１３を参照されたい）、並びに、少なくとも１つのシステイン残基（例えば、約１
、２、又は３～約１０のシステイン残基）を含むポリペプチドであって、ジスルフィド結
合がポリペプチドと少なくとも１つのシステイン残基を含む第２のポリペプチドとの間に
形成するようにできるポリペプチドが挙げられる。
ン、ＣＨ１又はＣＬドメイン、ロイシンジッパードメイン（例えば、ｊｕｎ／ｆｏｓロイ
シンジッパードメイン、例えば、Ｋｏｓｔｅｌｎｅｙ ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ
，１４８：１５４７－１５５３，１９９２を参照されたい、若しくは酵母ＧＣＮ４ロイシ
ンジッパードメイン）、イソロイシンジッパードメイン、二量体化細胞表面受容体の二量
体化領域（例えば、インターロイキン－８受容体（ＩＬ－８ Ｒ）；又はＬＦＡ－１若し
くはＧＰＩＩＩｂ／ＩＩＩａなどのインテグリンヘテロ二量体）、分泌型二量体化リガン
ド（例えば、神経成長因子（ＮＧＦ）、ニューロトロフィン－３（ＮＴ－３）、インター
ロイキン－８（ＩＬ－８）、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）、若しくは脳由来神経栄養因
子（ＢＤＮＦ）の二量体化領域；例えば、Ａｒａｋａｗａ ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ｂｉｏｌ．
Ｃｈｅｍ．２６９：２７８３３－２７８３９，１９９４，及びＲａｄｚｉｅｊｅｗｓｋｉ
ｅｔ ａｌ，Ｂｉｏｃｈｅｍ．３２：１３５０，１９９３を参照されたい）；コイルド
コイル二量化ドメイン（例えば、ＷＯ２０１４１５２８７８、Ｆｌｅｔｃｈｅｒ ｅｔ
ａｌ，ＡＣＳ Ｓｙｎｔｈ．Ｂｉｏｌ．１：２４０－２５０，２０１２；及びＴｈｏｍａ
ｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．１３５（１３）：５１６１－５１６６
、２０１３を参照されたい）、並びに、少なくとも１つのシステイン残基（例えば、約１
、２、又は３～約１０のシステイン残基）を含むポリペプチドであって、ジスルフィド結
合がポリペプチドと少なくとも１つのシステイン残基を含む第２のポリペプチドとの間に
形成するようにできるポリペプチドが挙げられる。
【0088】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＴＣＲＭは、ａ）第１のＴＣＲ膜貫通ドメ
イン（ＴＣＲ－ＴＭ）を含む第１のＴ細胞受容体ドメイン（ＴＣＲＤ）と、ｂ）第２のＴ
ＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤと、を含み、ＴＣＲＭは、少なくとも１つのＴＣＲ関連
シグナル伝達分子の動員を促進する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭの両方が天
然に存在する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのうちの少なくとも１つは、天然
に存在しない。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭの両方が天然に存在しない。いく
つかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭは、Ｔ細胞受容体（αβ ＴＣＲ又はγδ Ｔ
ＣＲなど）の膜貫通ドメインのうちの１つに由来し、第２のＴＣＲ－ＴＭは、Ｔ細胞受容
体の他の膜貫通ドメインに由来する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、Ｔ細胞受容
体の膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝
達分子の動員を強化することができる。ＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員は、ＴＣＲ－
ＣＤ３複合体表面発現のＦＡＣＳ分析、又はＣＤ３サブユニットとｃａＴＣＲとの同時免
疫沈降などの、当該技術分野において既知の方法によって決定することができる。
イン（ＴＣＲ－ＴＭ）を含む第１のＴ細胞受容体ドメイン（ＴＣＲＤ）と、ｂ）第２のＴ
ＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤと、を含み、ＴＣＲＭは、少なくとも１つのＴＣＲ関連
シグナル伝達分子の動員を促進する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭの両方が天
然に存在する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのうちの少なくとも１つは、天然
に存在しない。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭの両方が天然に存在しない。いく
つかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭは、Ｔ細胞受容体（αβ ＴＣＲ又はγδ Ｔ
ＣＲなど）の膜貫通ドメインのうちの１つに由来し、第２のＴＣＲ－ＴＭは、Ｔ細胞受容
体の他の膜貫通ドメインに由来する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、Ｔ細胞受容
体の膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝
達分子の動員を強化することができる。ＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員は、ＴＣＲ－
ＣＤ３複合体表面発現のＦＡＣＳ分析、又はＣＤ３サブユニットとｃａＴＣＲとの同時免
疫沈降などの、当該技術分野において既知の方法によって決定することができる。
【0089】
例えば、いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるＴＣＲＭの第１のＴＣＲ－Ｔ
Ｍは、ＴＣＲ α鎖（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＣＣＩ７３８９５）の膜貫通ドメ
イン又はその変異型を含むか、それから本質的になるか、又はそれからなり、ＴＣＲＭの
第２のＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲ β鎖（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＣＣＩ７３８９
３）の膜貫通ドメイン又はその変異体を含むか、それから本質的になるか、又はそれから
なる。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲ δ鎖（例えば、Ｇｅｎ
Ｂａｎｋ受託番号ＡＡＱ５７２７２）の膜貫通ドメイン又はその変異型を含むか、それか
ら本質的になるか、又はそれからなり、第２のＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲ γ鎖（例えば、
ＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＡＧＥ９１７８８）の膜貫通ドメイン又はその変異体を含むか、
それから本質的になるか、又はそれからなる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載
のＴＣＲＭの第１及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ、ＴＣＲ α鎖定常ドメイン（例
えば、配列番号１）の膜貫通ドメイン、又はその変異型、及びＴＣＲ β鎖定常ドメイン
（例えば、配列番号２）の膜貫通ドメイン、又はその変異型を含むか、それから本質的に
なるか、又はそれからなる。いくつかの実施形態では、第１及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、
それぞれ、ＴＣＲ δ鎖定常ドメイン（例えば、配列番号３）の膜貫通ドメイン、又はそ
の変異型、及びＴＣＲ γ鎖定常ドメイン（例えば、配列番号４）の膜貫通ドメイン、又
はその変異型を含むか、それから本質的になるか、又はそれからなる。いくつかの実施形
態では、第１及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ配列番号５及び６のアミノ酸配列、又
はその変異型を含むか、それから本質的になるか、又はそれからなる。いくつかの実施形
態では、第１及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ配列番号７及び８のアミノ酸配列、又
はその変異型を含むか、それから本質的になるか、又はそれからなる。膜貫通ドメインの
変異型としては、参照配列と比較して１つ以上のアミノ酸置換を有する膜貫通ドメインが
挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、変異型膜貫通ドメイン
は、参照配列と比較して、５個以下のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、第
１のＴＣＲＤは、膜貫通ドメインに対してアミノ末端側の第１の連結ペプチドを更に含み
、及び／又は第２のＴＣＲＤは、膜貫通ドメインに対してアミノ末端側の第２の連結ペプ
チドを更に含む。いくつかの実施形態では、第１の連結ペプチドは、第１のＴＣＲ－ＴＭ
が由来するＴＣＲサブユニットの連結ペプチドの全て若しくは一部、又はその変異型を含
み、及び／又は第２の連結ペプチドは、第２のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサブユニッ
トの連結ペプチドの全て若しくは一部、又はこれらの変異型を含む。いくつかの実施形態
では、第１及び／又は第２の連結ペプチドは、それぞれ、ＴＣＲ α鎖定常ドメイン（例
えば、配列番号１）の連結ペプチドの全て又は一部、又はその変異型、及びＴＣＲ β鎖
定常ドメイン（例えば、配列番号２）の連結ペプチドの全て又は一部、又はその変異型を
含むか、それから本質的になるか、又はそれからなる。いくつかの実施形態では、第１及
び／又は第２の連結ペプチドは、それぞれ、配列番号２７若しくは２８の連結ペプチド又
はその変異型の全て又は一部、及び配列番号２９若しくは３０の連結ペプチド又はその変
異型の全て又は一部を含むか、それから本質的になるか、又はそれからなる。いくつかの
実施形態では、第１及び／又は第２の連結ペプチドは、それぞれ、ＴＣＲ δ鎖定常ドメ
イン（例えば、配列番号３）の連結ペプチドの全て又は一部、又はその変異型、及びＴＣ
Ｒ γ鎖定常ドメイン（例えば、配列番号４）の連結ペプチドの全て又は一部、又はその
変異型を含むか、それから本質的になるか、又はそれからなる。いくつかの実施形態では
、第１及び／又は第２の連結ペプチドは、それぞれ、配列番号３１若しくは３２の連結ペ
プチド又はその変異型の全て又は一部、及び配列番号３３若しくは３４の連結ペプチド又
はその変異型の全て又は一部を含むか、それから本質的になるか、又はそれからなる。い
くつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ－ＴＭに対してカルボキシ末端
側の第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣ
Ｒ－ＴＭに対してカルボキシ末端側の第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつか
の実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメインは、第１のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲ
サブユニットの細胞内ドメイン若しくはその変異型の全て若しくは一部を含み、及び／又
は第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、第２のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサブユニットの
細胞内ドメイン若しくはその変異型の全て若しくは一部を含む。いくつかの実施形態では
、第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、配列番号３５－３６又はその変異型のアミノ酸配列の
うちのいずれか１つを含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、天然に存在す
るＴＣＲ又はその変異型の１つの鎖の断片であり、及び／又は第２のＴＣＲＤは、天然に
存在するＴＣＲ又はその変異型のうちの他の鎖の断片である。いくつかの実施形態では、
ＴＣＲＤのうちの少なくとも１つは、天然に存在しない。いくつかの実施形態では、第１
及び第２のＴＣＲＤは、ジスルフィド結合によって連結されている。いくつかの実施形態
では、第１及び第２のＴＣＲＤは、第１の連結ペプチド中の残基と第２の連結ペプチド中
の残基との間のジスルフィド結合によって連結されている。いくつかの実施形態では、Ｔ
ＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε、及びζζからなる群から選択される少なくとも１つ
のＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣ
ＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε、及びζζのそれぞれを動員して、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３
複合体を形成することができる（すなわち、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する）
。
Ｍは、ＴＣＲ α鎖（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＣＣＩ７３８９５）の膜貫通ドメ
イン又はその変異型を含むか、それから本質的になるか、又はそれからなり、ＴＣＲＭの
第２のＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲ β鎖（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＣＣＩ７３８９
３）の膜貫通ドメイン又はその変異体を含むか、それから本質的になるか、又はそれから
なる。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲ δ鎖（例えば、Ｇｅｎ
Ｂａｎｋ受託番号ＡＡＱ５７２７２）の膜貫通ドメイン又はその変異型を含むか、それか
ら本質的になるか、又はそれからなり、第２のＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲ γ鎖（例えば、
ＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＡＧＥ９１７８８）の膜貫通ドメイン又はその変異体を含むか、
それから本質的になるか、又はそれからなる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載
のＴＣＲＭの第１及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ、ＴＣＲ α鎖定常ドメイン（例
えば、配列番号１）の膜貫通ドメイン、又はその変異型、及びＴＣＲ β鎖定常ドメイン
（例えば、配列番号２）の膜貫通ドメイン、又はその変異型を含むか、それから本質的に
なるか、又はそれからなる。いくつかの実施形態では、第１及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、
それぞれ、ＴＣＲ δ鎖定常ドメイン（例えば、配列番号３）の膜貫通ドメイン、又はそ
の変異型、及びＴＣＲ γ鎖定常ドメイン（例えば、配列番号４）の膜貫通ドメイン、又
はその変異型を含むか、それから本質的になるか、又はそれからなる。いくつかの実施形
態では、第１及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ配列番号５及び６のアミノ酸配列、又
はその変異型を含むか、それから本質的になるか、又はそれからなる。いくつかの実施形
態では、第１及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ配列番号７及び８のアミノ酸配列、又
はその変異型を含むか、それから本質的になるか、又はそれからなる。膜貫通ドメインの
変異型としては、参照配列と比較して１つ以上のアミノ酸置換を有する膜貫通ドメインが
挙げられるが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、変異型膜貫通ドメイン
は、参照配列と比較して、５個以下のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、第
１のＴＣＲＤは、膜貫通ドメインに対してアミノ末端側の第１の連結ペプチドを更に含み
、及び／又は第２のＴＣＲＤは、膜貫通ドメインに対してアミノ末端側の第２の連結ペプ
チドを更に含む。いくつかの実施形態では、第１の連結ペプチドは、第１のＴＣＲ－ＴＭ
が由来するＴＣＲサブユニットの連結ペプチドの全て若しくは一部、又はその変異型を含
み、及び／又は第２の連結ペプチドは、第２のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサブユニッ
トの連結ペプチドの全て若しくは一部、又はこれらの変異型を含む。いくつかの実施形態
では、第１及び／又は第２の連結ペプチドは、それぞれ、ＴＣＲ α鎖定常ドメイン（例
えば、配列番号１）の連結ペプチドの全て又は一部、又はその変異型、及びＴＣＲ β鎖
定常ドメイン（例えば、配列番号２）の連結ペプチドの全て又は一部、又はその変異型を
含むか、それから本質的になるか、又はそれからなる。いくつかの実施形態では、第１及
び／又は第２の連結ペプチドは、それぞれ、配列番号２７若しくは２８の連結ペプチド又
はその変異型の全て又は一部、及び配列番号２９若しくは３０の連結ペプチド又はその変
異型の全て又は一部を含むか、それから本質的になるか、又はそれからなる。いくつかの
実施形態では、第１及び／又は第２の連結ペプチドは、それぞれ、ＴＣＲ δ鎖定常ドメ
イン（例えば、配列番号３）の連結ペプチドの全て又は一部、又はその変異型、及びＴＣ
Ｒ γ鎖定常ドメイン（例えば、配列番号４）の連結ペプチドの全て又は一部、又はその
変異型を含むか、それから本質的になるか、又はそれからなる。いくつかの実施形態では
、第１及び／又は第２の連結ペプチドは、それぞれ、配列番号３１若しくは３２の連結ペ
プチド又はその変異型の全て又は一部、及び配列番号３３若しくは３４の連結ペプチド又
はその変異型の全て又は一部を含むか、それから本質的になるか、又はそれからなる。い
くつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ－ＴＭに対してカルボキシ末端
側の第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣ
Ｒ－ＴＭに対してカルボキシ末端側の第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつか
の実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメインは、第１のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲ
サブユニットの細胞内ドメイン若しくはその変異型の全て若しくは一部を含み、及び／又
は第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、第２のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサブユニットの
細胞内ドメイン若しくはその変異型の全て若しくは一部を含む。いくつかの実施形態では
、第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、配列番号３５－３６又はその変異型のアミノ酸配列の
うちのいずれか１つを含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、天然に存在す
るＴＣＲ又はその変異型の１つの鎖の断片であり、及び／又は第２のＴＣＲＤは、天然に
存在するＴＣＲ又はその変異型のうちの他の鎖の断片である。いくつかの実施形態では、
ＴＣＲＤのうちの少なくとも１つは、天然に存在しない。いくつかの実施形態では、第１
及び第２のＴＣＲＤは、ジスルフィド結合によって連結されている。いくつかの実施形態
では、第１及び第２のＴＣＲＤは、第１の連結ペプチド中の残基と第２の連結ペプチド中
の残基との間のジスルフィド結合によって連結されている。いくつかの実施形態では、Ｔ
ＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε、及びζζからなる群から選択される少なくとも１つ
のＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣ
ＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε、及びζζのそれぞれを動員して、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３
複合体を形成することができる（すなわち、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する）
。
【0090】
想到されるｃａＴＣＲ構築物としては、例えば、細胞表面抗原に特異的に結合するｃａ
ＴＣＲ、細胞表面提示ペプチド／ＭＨＣ複合体に特異的に結合するｃａＴＣＲ、及び細胞
表面抗原及び細胞表面提示ペプチド／ＭＨＣ複合体の両方に特異的に結合するｃａＴＣＲ
が挙げられる。
ＴＣＲ、細胞表面提示ペプチド／ＭＨＣ複合体に特異的に結合するｃａＴＣＲ、及び細胞
表面抗原及び細胞表面提示ペプチド／ＭＨＣ複合体の両方に特異的に結合するｃａＴＣＲ
が挙げられる。
【0091】
いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２
、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）からなる群から選択される抗体部分である。いくつか
の実施形態では、抗体部分は単特異性である。いくつかの実施形態では、抗体部分は多重
特異性である。いくつかの実施形態では、抗体部分は二重特異性である。いくつかの実施
形態では、抗体部分は、タンデムｓｃＦｖ、ダイアボディ（Ｄｂ）、単鎖ダイアボディ（
ｓｃＤｂ）、二重親和性再標的化（ＤＡＲＴ）抗体、二重可変ドメイン（ＤＶＤ）抗体、
化学的に架橋された抗体、ヘテロ多量体抗体、又はヘテロコンジュゲート抗体である。い
くつかの実施形態では、抗体部分は、ペプチドリンカーによって連結された２つのｓｃＦ
ｖｓを含むタンデムｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、抗体部分は、直接結合し
ていない２つのｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、抗体部分は、完全ヒト、ヒト
抗体フレームワーク領域を有する半合成、又はヒト化したものである。
、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）からなる群から選択される抗体部分である。いくつか
の実施形態では、抗体部分は単特異性である。いくつかの実施形態では、抗体部分は多重
特異性である。いくつかの実施形態では、抗体部分は二重特異性である。いくつかの実施
形態では、抗体部分は、タンデムｓｃＦｖ、ダイアボディ（Ｄｂ）、単鎖ダイアボディ（
ｓｃＤｂ）、二重親和性再標的化（ＤＡＲＴ）抗体、二重可変ドメイン（ＤＶＤ）抗体、
化学的に架橋された抗体、ヘテロ多量体抗体、又はヘテロコンジュゲート抗体である。い
くつかの実施形態では、抗体部分は、ペプチドリンカーによって連結された２つのｓｃＦ
ｖｓを含むタンデムｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、抗体部分は、直接結合し
ていない２つのｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、抗体部分は、完全ヒト、ヒト
抗体フレームワーク領域を有する半合成、又はヒト化したものである。
【0092】
いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、ＶＨ抗体ドメインを含む第１の抗原
結合ドメインと、ＶＬ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインとを含む。いくつかの
実施形態では、ＶＨ抗体ドメイン及びＶＬ抗体ドメインＣＤＲは、同じ抗体部分に由来す
る。いくつかの実施形態では、ＶＨ抗体ドメイン及びＶＬ抗体ドメインＣＤＲの一部は、
異なる抗体部分に由来する。いくつかの実施形態では、ＶＨ抗体ドメイン及び／又はＶＬ
抗体ドメインは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成、又は完全合成である。
結合ドメインと、ＶＬ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインとを含む。いくつかの
実施形態では、ＶＨ抗体ドメイン及びＶＬ抗体ドメインＣＤＲは、同じ抗体部分に由来す
る。いくつかの実施形態では、ＶＨ抗体ドメイン及びＶＬ抗体ドメインＣＤＲの一部は、
異なる抗体部分に由来する。いくつかの実施形態では、ＶＨ抗体ドメイン及び／又はＶＬ
抗体ドメインは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成、又は完全合成である。
【0093】
いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、完全ヒト配列及び１つ以上の合成領
域を含む半合成である抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは
、完全ヒトＶＬと、完全ヒトＦＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＨＣ－ＣＤＲ２、ＦＲ３
、及びＦＲ４領域及び合成ＨＣ－ＣＤＲ３を含む半合成ＶＨと、を含む半合成抗体部分で
ある。いくつかの実施形態では、半合成ＶＨは、約５～約２５（約５、６、７、８、９、
１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２
３、２４、又は２５のいずれかなど）の長さのアミノ酸の配列を有する完全合成ＨＣ－Ｃ
ＤＲ３を含む。いくつかの実施形態では、半合成ＶＨ又は合成ＨＣ－ＣＤＲ３は、約５～
約２５（約５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１
８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、又は２５のいずれかなど）の長さのアミノ酸
の配列を有する完全合成ＨＣ－ＣＤＲ３領域を含む半合成ライブラリー（半合成ヒトライ
ブラリーなど）から得られ、配列中の各アミノ酸は、互いに独立して、システインを除く
標準的なヒトアミノ酸からランダムに選択される。いくつかの実施形態では、合成ＨＣ－
ＣＤＲ３は、約１０～約１９（約１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１
８又は１９のいずれかなど）の長さのアミノ酸である。いくつかの実施形態では、抗原結
合モジュールは、半合成ＶＬ及び半合成ＶＨを含む半合成抗体部分である。いくつかの実
施形態では、抗原結合モジュールは、固定ヒトＶＨ／ＶＬフレームワークペアを含む完全
合成抗体部分であるが、重鎖及び軽鎖の両方の６つのＣＤＲ全てについてランダム化及び
合成配列である。
域を含む半合成である抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは
、完全ヒトＶＬと、完全ヒトＦＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＨＣ－ＣＤＲ２、ＦＲ３
、及びＦＲ４領域及び合成ＨＣ－ＣＤＲ３を含む半合成ＶＨと、を含む半合成抗体部分で
ある。いくつかの実施形態では、半合成ＶＨは、約５～約２５（約５、６、７、８、９、
１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２
３、２４、又は２５のいずれかなど）の長さのアミノ酸の配列を有する完全合成ＨＣ－Ｃ
ＤＲ３を含む。いくつかの実施形態では、半合成ＶＨ又は合成ＨＣ－ＣＤＲ３は、約５～
約２５（約５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１
８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、又は２５のいずれかなど）の長さのアミノ酸
の配列を有する完全合成ＨＣ－ＣＤＲ３領域を含む半合成ライブラリー（半合成ヒトライ
ブラリーなど）から得られ、配列中の各アミノ酸は、互いに独立して、システインを除く
標準的なヒトアミノ酸からランダムに選択される。いくつかの実施形態では、合成ＨＣ－
ＣＤＲ３は、約１０～約１９（約１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１
８又は１９のいずれかなど）の長さのアミノ酸である。いくつかの実施形態では、抗原結
合モジュールは、半合成ＶＬ及び半合成ＶＨを含む半合成抗体部分である。いくつかの実
施形態では、抗原結合モジュールは、固定ヒトＶＨ／ＶＬフレームワークペアを含む完全
合成抗体部分であるが、重鎖及び軽鎖の両方の６つのＣＤＲ全てについてランダム化及び
合成配列である。
【0094】
いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、１つ以上の抗体部分（モノクローナ
ル抗体など）に由来する特異的ＣＤＲ配列、又は１つ以上のアミノ酸置換を含むそのよう
な配列の特定の変異型を含む抗体部分である。いくつかの実施形態では、変異型配列中の
アミノ酸置換は、抗原結合モジュールが標的抗原に結合する能力を実質的に低下させない
。標的抗原結合親和性を実質的に改善するか、又は標的抗原の関連変異型との特異性及び
／又は交差反応性などのいくつかの他の特性に影響を及ぼす変更も想到される。
ル抗体など）に由来する特異的ＣＤＲ配列、又は１つ以上のアミノ酸置換を含むそのよう
な配列の特定の変異型を含む抗体部分である。いくつかの実施形態では、変異型配列中の
アミノ酸置換は、抗原結合モジュールが標的抗原に結合する能力を実質的に低下させない
。標的抗原結合親和性を実質的に改善するか、又は標的抗原の関連変異型との特異性及び
／又は交差反応性などのいくつかの他の特性に影響を及ぼす変更も想到される。
【0095】
いくつかの実施形態では、安定化モジュールは、抗体部分から誘導される。例えば、い
くつかの実施形態では、安定化モジュールは、ＣＨ１抗体ドメイン又はその変異型を含む
第１の安定化ドメインと、ＣＬ抗体ドメイン又はその変異型を含む第２の安定化ドメイン
と、を含む。別の実施形態では、安定化モジュールは、ＣＨ３抗体ドメイン又はその変異
型を含む第１の安定化ドメインと、ＣＨ３抗体ドメイン又はその変異型を含む第２の安定
化ドメインと、を含む。いくつかの実施形態では、安定化モジュールに含まれる抗体重鎖
定常ドメイン（例えば、ＣＨ１又はＣＨ３）は、ＩｇＧ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、
ＩｇＧ３、又はＩｇＧ４）、ＩｇＡ（例えば、ＩｇＡ１又はＩｇＡ２）、ＩｇＤ、ＩｇＭ
、又はＩｇＥ重鎖、所望によりヒトに由来する。いくつかの実施形態では、安定化モジュ
ールに含まれる抗体重鎖定常ドメイン（例えば、ＣＨ１又はＣＨ３）は、それが由来する
配列と比較して、１つ以上の改変（例えば、アミノ酸置換、挿入、及び／又は欠失）を含
む変異型である。いくつかの実施形態では、安定化モジュールに含まれる抗体軽鎖定常ド
メイン（ＣＬ）は、カッパ又はラムダ軽鎖、所望によりヒトに由来する。いくつかの実施
形態では、安定化モジュールに含まれる抗体軽鎖定常ドメイン（ＣＬ）は、それが由来す
る配列と比較して、１つ以上の改変（例えば、アミノ酸置換、挿入、及び／又は欠失）を
含む変異型である。いくつかの実施形態では、第１及び／又は第２の安定化ドメインは、
互いに結合親和性を実質的に変化させない１つ以上の改変を含む。いくつかの実施形態で
は、第１及び／又は第２の安定化ドメインは、互いに結合親和性を増加させ、及び／又は
天然に存在しないジスルフィド結合を導入する１つ以上の改変を含む。いくつかの実施形
態では、安定化モジュールは、ｋｎｏｂ－ｉｎｔｏ－ｈｏｌｅ改変（例えば、Ｃａｒｔｅ
ｒ Ｐ．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｍｅｔｈｏｄｓ．２４８：７－１５，２００１を参照され
たい）を含む。例えば、いくつかの実施形態では、安定化モジュールは、ｋｎｏｂ－ｉｎ
ｔｏ－ｈｏｌｅ改変を含む抗体定常ドメイン領域（例えば、ＣＨ３ドメイン）を含む。い
くつかの実施形態では、安定化モジュールは、それらの結合を増強するための静電的ステ
アリングによって改変された抗体定常ドメイン領域（例えば、ＣＨ３ドメイン）を含む（
例えば、ＷＯ２００６１０６９０５及びＧｕｎａｓｅｋａｒａｎ Ｋ，ｅｔ ａｌ．Ｊ
Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ．２８５：１９６３７－４６，２０１０を参照されたい）。いくつか
の実施形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって連結され
る。
くつかの実施形態では、安定化モジュールは、ＣＨ１抗体ドメイン又はその変異型を含む
第１の安定化ドメインと、ＣＬ抗体ドメイン又はその変異型を含む第２の安定化ドメイン
と、を含む。別の実施形態では、安定化モジュールは、ＣＨ３抗体ドメイン又はその変異
型を含む第１の安定化ドメインと、ＣＨ３抗体ドメイン又はその変異型を含む第２の安定
化ドメインと、を含む。いくつかの実施形態では、安定化モジュールに含まれる抗体重鎖
定常ドメイン（例えば、ＣＨ１又はＣＨ３）は、ＩｇＧ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、
ＩｇＧ３、又はＩｇＧ４）、ＩｇＡ（例えば、ＩｇＡ１又はＩｇＡ２）、ＩｇＤ、ＩｇＭ
、又はＩｇＥ重鎖、所望によりヒトに由来する。いくつかの実施形態では、安定化モジュ
ールに含まれる抗体重鎖定常ドメイン（例えば、ＣＨ１又はＣＨ３）は、それが由来する
配列と比較して、１つ以上の改変（例えば、アミノ酸置換、挿入、及び／又は欠失）を含
む変異型である。いくつかの実施形態では、安定化モジュールに含まれる抗体軽鎖定常ド
メイン（ＣＬ）は、カッパ又はラムダ軽鎖、所望によりヒトに由来する。いくつかの実施
形態では、安定化モジュールに含まれる抗体軽鎖定常ドメイン（ＣＬ）は、それが由来す
る配列と比較して、１つ以上の改変（例えば、アミノ酸置換、挿入、及び／又は欠失）を
含む変異型である。いくつかの実施形態では、第１及び／又は第２の安定化ドメインは、
互いに結合親和性を実質的に変化させない１つ以上の改変を含む。いくつかの実施形態で
は、第１及び／又は第２の安定化ドメインは、互いに結合親和性を増加させ、及び／又は
天然に存在しないジスルフィド結合を導入する１つ以上の改変を含む。いくつかの実施形
態では、安定化モジュールは、ｋｎｏｂ－ｉｎｔｏ－ｈｏｌｅ改変（例えば、Ｃａｒｔｅ
ｒ Ｐ．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｍｅｔｈｏｄｓ．２４８：７－１５，２００１を参照され
たい）を含む。例えば、いくつかの実施形態では、安定化モジュールは、ｋｎｏｂ－ｉｎ
ｔｏ－ｈｏｌｅ改変を含む抗体定常ドメイン領域（例えば、ＣＨ３ドメイン）を含む。い
くつかの実施形態では、安定化モジュールは、それらの結合を増強するための静電的ステ
アリングによって改変された抗体定常ドメイン領域（例えば、ＣＨ３ドメイン）を含む（
例えば、ＷＯ２００６１０６９０５及びＧｕｎａｓｅｋａｒａｎ Ｋ，ｅｔ ａｌ．Ｊ
Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ．２８５：１９６３７－４６，２０１０を参照されたい）。いくつか
の実施形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって連結され
る。
【0096】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、所望により安定化モジュールを含む、本明細
書に記載のＴＣＲＭに連結された本明細書に記載の抗原結合モジュールを含む。例えば、
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、ＴＣＲＤの一方又は両方のＮ末端に連結された
抗原結合モジュールを含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、ＴＣＲＭと抗原結
合モジュールとの間の安定化モジュールを含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは
、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール又はドメイン間のスペーサモジュールを更に含む。
いくつかの実施形態では、スペーサモジュールは、約５～約７０（約５、１０、１５、２
０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、又は７０のいずれかなど
、これらの値間の任意の範囲を含む）の長さのアミノ酸の１つ以上のペプチドリンカーを
含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、１つ以上のアクセサリー細胞内ドメイン
を更に含む。いくつかの実施形態では、１つ以上のアクセサリー細胞内ドメインは、第１
及び／又は第２のＴＣＲＤに対してカルボキシ末端側である。いくつかの実施形態では、
１つ以上のアクセサリー細胞内ドメインは、第１のＴＣＲ－ＴＭと第１のＴＣＲ細胞内ド
メインとの間、及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭと第２のＴＣＲ細胞内ドメインとの間にあ
る。いくつかの実施形態では、１つ以上のアクセサリー細胞内ドメインは、個々に、ＴＣ
Ｒ共刺激ドメインを含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ共刺激ドメインは、免疫共刺
激分子（ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４
０、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原－１（ＬＦＡ－１）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ
、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤ８３と特異的に結合するリガンドなど）の細胞内ドメイ
ンの全て又は一部を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ共刺激ドメインは、配列番号
５１～５６、又はその変異型のいずれか１つのアミノ酸配列の全て又は一部を含む。
書に記載のＴＣＲＭに連結された本明細書に記載の抗原結合モジュールを含む。例えば、
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、ＴＣＲＤの一方又は両方のＮ末端に連結された
抗原結合モジュールを含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、ＴＣＲＭと抗原結
合モジュールとの間の安定化モジュールを含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは
、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール又はドメイン間のスペーサモジュールを更に含む。
いくつかの実施形態では、スペーサモジュールは、約５～約７０（約５、１０、１５、２
０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、又は７０のいずれかなど
、これらの値間の任意の範囲を含む）の長さのアミノ酸の１つ以上のペプチドリンカーを
含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、１つ以上のアクセサリー細胞内ドメイン
を更に含む。いくつかの実施形態では、１つ以上のアクセサリー細胞内ドメインは、第１
及び／又は第２のＴＣＲＤに対してカルボキシ末端側である。いくつかの実施形態では、
１つ以上のアクセサリー細胞内ドメインは、第１のＴＣＲ－ＴＭと第１のＴＣＲ細胞内ド
メインとの間、及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭと第２のＴＣＲ細胞内ドメインとの間にあ
る。いくつかの実施形態では、１つ以上のアクセサリー細胞内ドメインは、個々に、ＴＣ
Ｒ共刺激ドメインを含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ共刺激ドメインは、免疫共刺
激分子（ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４
０、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原－１（ＬＦＡ－１）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ
、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤ８３と特異的に結合するリガンドなど）の細胞内ドメイ
ンの全て又は一部を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ共刺激ドメインは、配列番号
５１～５６、又はその変異型のいずれか１つのアミノ酸配列の全て又は一部を含む。
【0097】
いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、細胞表面抗原に特異的に結合する。
いくつかの実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水化物、及び脂質からなる群
から選択される。いくつかの実施形態では、細胞表面抗原は、疾患細胞において発現する
疾患関連抗原である。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、ペプチド及びＭ
ＨＣタンパク質を含む複合体に特異的に結合する。ペプチド／ＭＨＣ複合体としては、例
えば、疾患細胞で発現する疾患関連抗原に由来するペプチド及びＭＨＣタンパク質を含む
表面提示複合体が挙げられる。いくつかの実施形態では、完全長疾患関連抗原は、疾患細
胞の表面に通常発現しない（例えば、疾患関連抗原は、細胞内又は分泌タンパク質である
）。いくつかの実施形態では、疾患はがんであり、疾患関連抗原は、がん細胞において発
現する腫瘍関連抗原である。いくつかの実施形態では、腫瘍関連抗原は、腫瘍性タンパク
質である。いくつかの実施形態では、腫瘍性タンパク質は、がん原遺伝子における変異の
結果であり、腫瘍性タンパク質は、変異を含むネオエピトープを含む。例えば、いくつか
の実施形態では、抗原結合モジュールは、細胞表面腫瘍関連抗原（例えば、ネオエピトー
プを含む腫瘍性タンパク質）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗原結合モ
ジュールは、がん細胞表面では通常発現しない（例えば、細胞内又は分泌の腫瘍関連抗原
）腫瘍関連抗原（例えば、ネオエピトープを含む腫瘍性タンパク質）に由来するペプチド
及びＭＨＣタンパク質を含む複合体に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、疾患
はウイルス感染であり、疾患関連抗原は、感染細胞において発現するウイルス関連抗原で
ある。例えば、いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、細胞表面のウイルス関
連抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、ウイルス
感染細胞の表面に通常発現しないウイルス関連抗原（例えば、細胞内又は分泌のウイルス
関連抗原）に由来するペプチド及びＭＨＣタンパク質を含む複合体に特異的に結合する。
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ構築物は、約０．１ｐＭ～約５００ｎＭ（約０．１
ｐＭ、１．０ｐＭ、１０ｐＭ、５０ｐＭ、１００ｐＭ、５００ｐＭ、１ｎＭ、１０ｎＭ、
５０ｎＭ、１００ｎＭ、又は５００ｎＭのいずれかなど、これらの値間の任意の範囲を含
む）のＫｄで標的抗原に結合する。
いくつかの実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水化物、及び脂質からなる群
から選択される。いくつかの実施形態では、細胞表面抗原は、疾患細胞において発現する
疾患関連抗原である。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、ペプチド及びＭ
ＨＣタンパク質を含む複合体に特異的に結合する。ペプチド／ＭＨＣ複合体としては、例
えば、疾患細胞で発現する疾患関連抗原に由来するペプチド及びＭＨＣタンパク質を含む
表面提示複合体が挙げられる。いくつかの実施形態では、完全長疾患関連抗原は、疾患細
胞の表面に通常発現しない（例えば、疾患関連抗原は、細胞内又は分泌タンパク質である
）。いくつかの実施形態では、疾患はがんであり、疾患関連抗原は、がん細胞において発
現する腫瘍関連抗原である。いくつかの実施形態では、腫瘍関連抗原は、腫瘍性タンパク
質である。いくつかの実施形態では、腫瘍性タンパク質は、がん原遺伝子における変異の
結果であり、腫瘍性タンパク質は、変異を含むネオエピトープを含む。例えば、いくつか
の実施形態では、抗原結合モジュールは、細胞表面腫瘍関連抗原（例えば、ネオエピトー
プを含む腫瘍性タンパク質）に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗原結合モ
ジュールは、がん細胞表面では通常発現しない（例えば、細胞内又は分泌の腫瘍関連抗原
）腫瘍関連抗原（例えば、ネオエピトープを含む腫瘍性タンパク質）に由来するペプチド
及びＭＨＣタンパク質を含む複合体に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、疾患
はウイルス感染であり、疾患関連抗原は、感染細胞において発現するウイルス関連抗原で
ある。例えば、いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、細胞表面のウイルス関
連抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、ウイルス
感染細胞の表面に通常発現しないウイルス関連抗原（例えば、細胞内又は分泌のウイルス
関連抗原）に由来するペプチド及びＭＨＣタンパク質を含む複合体に特異的に結合する。
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ構築物は、約０．１ｐＭ～約５００ｎＭ（約０．１
ｐＭ、１．０ｐＭ、１０ｐＭ、５０ｐＭ、１００ｐＭ、５００ｐＭ、１ｎＭ、１０ｎＭ、
５０ｎＭ、１００ｎＭ、又は５００ｎＭのいずれかなど、これらの値間の任意の範囲を含
む）のＫｄで標的抗原に結合する。
【0098】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、細胞表面抗原に特異的に結合する抗原結合モ
ジュールを含み、細胞表面抗原は、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－
３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ、又はＦＣＲＬ５、その変異型又は変
異体を含むものである。完全な抗原、例えば、細胞表面抗原への特異的結合は、しばしば
、「非ＭＨＣ拘束結合」と呼ばれる。
ジュールを含み、細胞表面抗原は、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－
３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ、又はＦＣＲＬ５、その変異型又は変
異体を含むものである。完全な抗原、例えば、細胞表面抗原への特異的結合は、しばしば
、「非ＭＨＣ拘束結合」と呼ばれる。
【0099】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、ペプチド及びＭＨＣタンパク質を含む複合体
に特異的に結合する抗原結合モジュールを含み、ペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ
１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡ
Ｓ、ヒストンＨ３．３、及びＰＳＡ、その変異型又は変異体を含むものからなる群から選
択されるタンパク質に由来する。ペプチド及びＭＨＣタンパク質を含む複合体への特異的
結合は、しばしば「ＭＨＣ拘束結合」と呼ばれる。
に特異的に結合する抗原結合モジュールを含み、ペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ
１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡ
Ｓ、ヒストンＨ３．３、及びＰＳＡ、その変異型又は変異体を含むものからなる群から選
択されるタンパク質に由来する。ペプチド及びＭＨＣタンパク質を含む複合体への特異的
結合は、しばしば「ＭＨＣ拘束結合」と呼ばれる。
【0100】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、疾患関連抗原（腫瘍関連抗原又はウイルスコ
ード抗原など）及びＭＨＣクラスＩタンパク質に由来するペプチドを含む複合体に特異的
に結合する抗原結合モジュールを含み、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ、ＨＬ
Ａ－Ｂ、ＨＬＡ－Ｃ、ＨＬＡ－Ｅ、ＨＬＡ－Ｆ、又はＨＬＡ－Ｇである。いくつかの実施
形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ、ＨＬＡ－Ｂ、又はＨＬＡ－Ｃであ
る。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。いくつ
かの実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ｂである。いくつかの実施形
態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ｃである。いくつかの実施形態では、Ｍ
ＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ０１、ＨＬＡ－Ａ０２、ＨＬＡ－Ａ０３、ＨＬＡ
－Ａ０９、ＨＬＡ－Ａ１０、ＨＬＡ－Ａ１１、ＨＬＡ－Ａ１９、ＨＬＡ－Ａ２３、ＨＬＡ
－Ａ２４、ＨＬＡ－Ａ２５、ＨＬＡ－Ａ２６、ＨＬＡ－Ａ２８、ＨＬＡ－Ａ２９、ＨＬＡ
－Ａ３０、ＨＬＡ－Ａ３１、ＨＬＡ－Ａ３２、ＨＬＡ－Ａ３３、ＨＬＡ－Ａ３４、ＨＬＡ
－Ａ３６、ＨＬＡ－Ａ４３、ＨＬＡ－Ａ６６、ＨＬＡ－Ａ６８、ＨＬＡ－Ａ６９、ＨＬＡ
－Ａ７４、又はＨＬＡ－Ａ８０である。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパ
ク質は、ＨＬＡ－Ａ０２である。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は
、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１－５５５、例えばＨＬＡ－Ａ＊０２：０１、ＨＬＡ－Ａ＊０２
：０２、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０３、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０４、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０５、
ＨＬＡ－Ａ＊０２：０６、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０７、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０８、ＨＬＡ－
Ａ＊０２：０９、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１０、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１１、ＨＬＡ－Ａ＊０２
：１２、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１３、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１４、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１５、
ＨＬＡ－Ａ＊０２：１６、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１７、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１８、ＨＬＡ－
Ａ＊０２：１９、ＨＬＡ－Ａ＊０２：２０、ＨＬＡ－Ａ＊０２：２１、ＨＬＡ－Ａ＊０２
：２２、又はＨＬＡ－Ａ＊０２：２４のうちのいずれか１つである。いくつかの実施形態
では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１である。
ード抗原など）及びＭＨＣクラスＩタンパク質に由来するペプチドを含む複合体に特異的
に結合する抗原結合モジュールを含み、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ、ＨＬ
Ａ－Ｂ、ＨＬＡ－Ｃ、ＨＬＡ－Ｅ、ＨＬＡ－Ｆ、又はＨＬＡ－Ｇである。いくつかの実施
形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ、ＨＬＡ－Ｂ、又はＨＬＡ－Ｃであ
る。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。いくつ
かの実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ｂである。いくつかの実施形
態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ｃである。いくつかの実施形態では、Ｍ
ＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ０１、ＨＬＡ－Ａ０２、ＨＬＡ－Ａ０３、ＨＬＡ
－Ａ０９、ＨＬＡ－Ａ１０、ＨＬＡ－Ａ１１、ＨＬＡ－Ａ１９、ＨＬＡ－Ａ２３、ＨＬＡ
－Ａ２４、ＨＬＡ－Ａ２５、ＨＬＡ－Ａ２６、ＨＬＡ－Ａ２８、ＨＬＡ－Ａ２９、ＨＬＡ
－Ａ３０、ＨＬＡ－Ａ３１、ＨＬＡ－Ａ３２、ＨＬＡ－Ａ３３、ＨＬＡ－Ａ３４、ＨＬＡ
－Ａ３６、ＨＬＡ－Ａ４３、ＨＬＡ－Ａ６６、ＨＬＡ－Ａ６８、ＨＬＡ－Ａ６９、ＨＬＡ
－Ａ７４、又はＨＬＡ－Ａ８０である。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパ
ク質は、ＨＬＡ－Ａ０２である。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は
、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１－５５５、例えばＨＬＡ－Ａ＊０２：０１、ＨＬＡ－Ａ＊０２
：０２、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０３、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０４、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０５、
ＨＬＡ－Ａ＊０２：０６、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０７、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０８、ＨＬＡ－
Ａ＊０２：０９、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１０、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１１、ＨＬＡ－Ａ＊０２
：１２、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１３、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１４、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１５、
ＨＬＡ－Ａ＊０２：１６、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１７、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１８、ＨＬＡ－
Ａ＊０２：１９、ＨＬＡ－Ａ＊０２：２０、ＨＬＡ－Ａ＊０２：２１、ＨＬＡ－Ａ＊０２
：２２、又はＨＬＡ－Ａ＊０２：２４のうちのいずれか１つである。いくつかの実施形態
では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１である。
【0101】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、疾患関連抗原（腫瘍関連抗原又はウイルスコ
ード抗原など）に由来するペプチド及びＭＨＣクラスＩＩタンパク質を含む複合体に特異
的に結合する抗原結合モジュールを含み、ＭＨＣクラスＩＩタンパク質は、ＨＬＡ－ＤＰ
、ＨＬＡ－ＤＱ、又はＨＬＡ－ＤＲである。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩＩ
タンパク質は、ＨＬＡ－ＤＰである。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩＩタンパ
ク質は、ＨＬＡ－ＤＱである。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩＩタンパク質は
、ＨＬＡ－ＤＲである。
ード抗原など）に由来するペプチド及びＭＨＣクラスＩＩタンパク質を含む複合体に特異
的に結合する抗原結合モジュールを含み、ＭＨＣクラスＩＩタンパク質は、ＨＬＡ－ＤＰ
、ＨＬＡ－ＤＱ、又はＨＬＡ－ＤＲである。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩＩ
タンパク質は、ＨＬＡ－ＤＰである。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩＩタンパ
ク質は、ＨＬＡ－ＤＱである。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩＩタンパク質は
、ＨＬＡ－ＤＲである。
【0102】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲは、ａ）標的抗原に特異的に結
合する抗原結合モジュールと、ｂ）ＴＣＲ（αβＴＣＲ又はγδＴＣＲなど）の膜貫通ド
メインに由来する第１及び第２のＴＣＲ－ＴＭを含むＴＣＲＭとを含み、ＴＣＲＭは、少
なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することができる。いくつかの実施形
態では、抗原結合モジュールは、ＴＣＲＭ中の１つ以上のポリペプチド鎖のアミノ末端に
連結する。例えば、いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、２つのポリペプチド鎖を含み
、抗原結合モジュールは、ＴＣＲＭポリペプチド鎖の一方又は両方のアミノ末端に連結さ
れる。いくつかの実施形態では、第１及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、天然に存在する。いく
つかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのうちの少なくとも１つは、天然に存在しない。いく
つかの実施形態では、第１及び第２のＴＣＲ－ＴＭは天然に存在しない。いくつかの実施
形態では、ＴＣＲＭは、ＴＣＲ－ＴＭに対してアミノ末端側のＴＣＲの少なくとも１つの
連結ペプチド又はその断片を更に含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＴＣＲ－
ＴＭに対してカルボキシ末端側のＴＣＲの細胞内ドメイン由来の配列を含む、少なくとも
１つのＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＴＣＲ
鎖の断片に由来するＴＣＲＤを含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＤのうちの少なく
とも１つは、天然に存在しない。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、ＴＣＲ－ＴＭ
に対してカルボキシ末端側のＴ細胞共刺激シグナル伝達配列（ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－
１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、又はＣＤ４０由来など）を含む、少なくと
も１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ
は共刺激シグナル伝達配列を欠いている。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュール
は、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＶＨ抗体ドメイン及びＶＬ
抗体ドメインを含む。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ヒト、ヒト化、キメラ、半
合成、又は完全合成である。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメ
イン及び第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安定
化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化させる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実施
形態では、安定化モジュールは、安定化ドメインを連結する少なくとも１つのジスルフィ
ド結合を含む。いくつかの実施形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及び
ＣＬ抗体ドメインなどの抗体ドメイン、又はその変異型を含む。いくつかの実施形態では
、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε、及びζζからなる群から選択される少なくとも
１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することができる。いくつかの実施形態では、
ＴＣＲＭは、Ｔ細胞受容体の膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つ
のＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化することができる。いくつかの実施形態では
、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。いくつかの実施形態では、任
意の２つのｃａＴＣＲモジュール間又はドメイン間にスペーサモジュールが存在する。い
くつかの実施形態では、ｃａＴＣＲはヘテロ二量体などのヘテロ多量体である。例えば、
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１のＴＣＲＤを含む第１のポリペプチド鎖と
、第２のＴＣＲＤを含む第２のポリペプチド鎖とを含むヘテロ二量体であり、抗原結合モ
ジュールは、第１及び／又は第２のポリペプチド鎖に連結される。いくつかの実施形態で
は、抗原結合モジュールは、多重特異性（二重特異性など）である。
合する抗原結合モジュールと、ｂ）ＴＣＲ（αβＴＣＲ又はγδＴＣＲなど）の膜貫通ド
メインに由来する第１及び第２のＴＣＲ－ＴＭを含むＴＣＲＭとを含み、ＴＣＲＭは、少
なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することができる。いくつかの実施形
態では、抗原結合モジュールは、ＴＣＲＭ中の１つ以上のポリペプチド鎖のアミノ末端に
連結する。例えば、いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、２つのポリペプチド鎖を含み
、抗原結合モジュールは、ＴＣＲＭポリペプチド鎖の一方又は両方のアミノ末端に連結さ
れる。いくつかの実施形態では、第１及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、天然に存在する。いく
つかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのうちの少なくとも１つは、天然に存在しない。いく
つかの実施形態では、第１及び第２のＴＣＲ－ＴＭは天然に存在しない。いくつかの実施
形態では、ＴＣＲＭは、ＴＣＲ－ＴＭに対してアミノ末端側のＴＣＲの少なくとも１つの
連結ペプチド又はその断片を更に含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＴＣＲ－
ＴＭに対してカルボキシ末端側のＴＣＲの細胞内ドメイン由来の配列を含む、少なくとも
１つのＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＴＣＲ
鎖の断片に由来するＴＣＲＤを含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＤのうちの少なく
とも１つは、天然に存在しない。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、ＴＣＲ－ＴＭ
に対してカルボキシ末端側のＴ細胞共刺激シグナル伝達配列（ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－
１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、又はＣＤ４０由来など）を含む、少なくと
も１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ
は共刺激シグナル伝達配列を欠いている。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュール
は、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＶＨ抗体ドメイン及びＶＬ
抗体ドメインを含む。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ヒト、ヒト化、キメラ、半
合成、又は完全合成である。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメ
イン及び第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安定
化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化させる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実施
形態では、安定化モジュールは、安定化ドメインを連結する少なくとも１つのジスルフィ
ド結合を含む。いくつかの実施形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及び
ＣＬ抗体ドメインなどの抗体ドメイン、又はその変異型を含む。いくつかの実施形態では
、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε、及びζζからなる群から選択される少なくとも
１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することができる。いくつかの実施形態では、
ＴＣＲＭは、Ｔ細胞受容体の膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つ
のＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化することができる。いくつかの実施形態では
、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。いくつかの実施形態では、任
意の２つのｃａＴＣＲモジュール間又はドメイン間にスペーサモジュールが存在する。い
くつかの実施形態では、ｃａＴＣＲはヘテロ二量体などのヘテロ多量体である。例えば、
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１のＴＣＲＤを含む第１のポリペプチド鎖と
、第２のＴＣＲＤを含む第２のポリペプチド鎖とを含むヘテロ二量体であり、抗原結合モ
ジュールは、第１及び／又は第２のポリペプチド鎖に連結される。いくつかの実施形態で
は、抗原結合モジュールは、多重特異性（二重特異性など）である。
【0103】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲは、標的抗原に特異的に結合し
、ａ）ＴＣＲの膜貫通ドメインのうちの１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１の
ＴＣＲＤ、及びＴＣＲの他の膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２の
ＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールと、を含み、第１及び
第２のＴＣＲＤは、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することのでき
るＴＣＲＭを形成し、抗原結合モジュールは、第１及び／又は第２のＴＣＲＤに連結する
。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭの両方が天然に存在する。いくつかの実施形態
では、ＴＣＲ－ＴＭのうちの少なくとも１つは、天然に存在しない。いくつかの実施形態
では、ＴＣＲはαβ ＴＣＲであり、第１及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲ α及びβ
サブユニット膜貫通ドメインに由来する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲはγδ ＴＣ
Ｒであり、第１及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲ γ及びδサブユニット膜貫通ドメイ
ンに由来する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ連結ペプチド
又はその断片を更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ連結ペプチド又は
その断片を更に含む。いくつかの実施形態では、第１の連結ペプチドは、第１のＴＣＲ－
ＴＭが由来するＴＣＲサブユニットの連結ペプチドの全て若しくは一部、又はその変異型
を含み、及び／又は第２の連結ペプチドは、第２のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサブユ
ニットの連結ペプチドの全て若しくは一部、又はこれらの変異型を含む。いくつかの実施
形態では、第１及び第２の連結ペプチドは、ジスルフィド結合によって連結される。いく
つかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び
／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態
では、第１のＴＣＲ細胞内ドメインは、第１のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサブユニッ
トの細胞内ドメイン由来の配列を含み、及び／又は第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、第２
のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサブユニットの細胞内ドメイン由来の配列を含む。いく
つかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサブユニ
ットの断片であり、及び／又は、第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣ
Ｒサブユニットの断片である。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シ
グナル伝達配列（ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０
、又はＣＤ４０由来など）を含む、少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に
含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化
ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴ
ＣＲを安定化させる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第
２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって連結される。いくつかの実施形態では
、第１及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体ドメイン、
又はその変異型を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε
、及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動
員することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、Ｔ細胞受容体の膜貫通ドメ
インを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を
強化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合
体形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール間又は
ドメイン間にスペーサモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュ
ールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（
Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、抗原
結合モジュールは、多重特異性（二重特異性など）である。
、ａ）ＴＣＲの膜貫通ドメインのうちの１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１の
ＴＣＲＤ、及びＴＣＲの他の膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２の
ＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールと、を含み、第１及び
第２のＴＣＲＤは、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することのでき
るＴＣＲＭを形成し、抗原結合モジュールは、第１及び／又は第２のＴＣＲＤに連結する
。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭの両方が天然に存在する。いくつかの実施形態
では、ＴＣＲ－ＴＭのうちの少なくとも１つは、天然に存在しない。いくつかの実施形態
では、ＴＣＲはαβ ＴＣＲであり、第１及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲ α及びβ
サブユニット膜貫通ドメインに由来する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲはγδ ＴＣ
Ｒであり、第１及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲ γ及びδサブユニット膜貫通ドメイ
ンに由来する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ連結ペプチド
又はその断片を更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ連結ペプチド又は
その断片を更に含む。いくつかの実施形態では、第１の連結ペプチドは、第１のＴＣＲ－
ＴＭが由来するＴＣＲサブユニットの連結ペプチドの全て若しくは一部、又はその変異型
を含み、及び／又は第２の連結ペプチドは、第２のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサブユ
ニットの連結ペプチドの全て若しくは一部、又はこれらの変異型を含む。いくつかの実施
形態では、第１及び第２の連結ペプチドは、ジスルフィド結合によって連結される。いく
つかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び
／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態
では、第１のＴＣＲ細胞内ドメインは、第１のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサブユニッ
トの細胞内ドメイン由来の配列を含み、及び／又は第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、第２
のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサブユニットの細胞内ドメイン由来の配列を含む。いく
つかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサブユニ
ットの断片であり、及び／又は、第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣ
Ｒサブユニットの断片である。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シ
グナル伝達配列（ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０
、又はＣＤ４０由来など）を含む、少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に
含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化
ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴ
ＣＲを安定化させる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第
２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって連結される。いくつかの実施形態では
、第１及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体ドメイン、
又はその変異型を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε
、及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動
員することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、Ｔ細胞受容体の膜貫通ドメ
インを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を
強化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合
体形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール間又は
ドメイン間にスペーサモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュ
ールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（
Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、抗原
結合モジュールは、多重特異性（二重特異性など）である。
【0104】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲは、標的抗原に特異的に結合し
、ａ）天然に存在するαβ ＴＣＲの膜貫通ドメインのうちの１つに由来する第１のＴＣ
Ｒ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及び天然に存在するαβ ＴＣＲの他の膜貫通ドメイン
に由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に特異的に結合す
る抗原結合モジュールと、を含み、第１及び第２のＴＣＲＤは、少なくとも１つのＴＣＲ
関連シグナル伝達分子を動員することのできるＴＣＲＭを形成し、抗原結合モジュールは
、第１及び／又は第２のＴＣＲＤに連結する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭの
両方が天然に存在する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのうちの少なくとも１つ
は、天然に存在しない。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ連結
ペプチド又はその断片を更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ連結ペプ
チド又はその断片を更に含む。いくつかの実施形態では、第１の連結ペプチドは、第１の
ＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサブユニットの連結ペプチドの全て若しくは一部、又はそ
の変異型を含み、及び／又は第２の連結ペプチドは、第２のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣ
Ｒサブユニットの連結ペプチドの全て若しくは一部、又はこれらの変異型を含む。いくつ
かの実施形態では、第１及び第２の連結ペプチドは、ジスルフィド結合によって連結され
る。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含
み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの
実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメインは、第１のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサ
ブユニットの細胞内ドメイン由来の配列を含み、及び／又は第２のＴＣＲ細胞内ドメイン
は、第２のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサブユニットの細胞内ドメイン由来の配列を含
む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲ
サブユニットの断片であり、及び／又は、第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ－ＴＭが由来
するＴＣＲサブユニットの断片である。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞
共刺激シグナル伝達配列（ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、
ＣＤ３０、又はＣＤ４０由来など）を含む、少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメイ
ンを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメイン及び第２
の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安定化ドメインが
、ｃａＴＣＲを安定化させる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第
１及び第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって連結される。いくつかの実施
形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体ド
メイン、又はその変異型を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、Ｃ
Ｄ３γε、及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達
分子を動員することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、天然に存在するα
β Ｔ細胞受容体の膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ
関連シグナル伝達分子の動員を強化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ
Ｍは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つ
のｃａＴＣＲモジュール間又はドメイン間にスペーサモジュールが存在する。いくつかの
実施形態では、抗原結合モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体
部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。
いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、多重特異性（二重特異性など）である
。
、ａ）天然に存在するαβ ＴＣＲの膜貫通ドメインのうちの１つに由来する第１のＴＣ
Ｒ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及び天然に存在するαβ ＴＣＲの他の膜貫通ドメイン
に由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に特異的に結合す
る抗原結合モジュールと、を含み、第１及び第２のＴＣＲＤは、少なくとも１つのＴＣＲ
関連シグナル伝達分子を動員することのできるＴＣＲＭを形成し、抗原結合モジュールは
、第１及び／又は第２のＴＣＲＤに連結する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭの
両方が天然に存在する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのうちの少なくとも１つ
は、天然に存在しない。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ連結
ペプチド又はその断片を更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ連結ペプ
チド又はその断片を更に含む。いくつかの実施形態では、第１の連結ペプチドは、第１の
ＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサブユニットの連結ペプチドの全て若しくは一部、又はそ
の変異型を含み、及び／又は第２の連結ペプチドは、第２のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣ
Ｒサブユニットの連結ペプチドの全て若しくは一部、又はこれらの変異型を含む。いくつ
かの実施形態では、第１及び第２の連結ペプチドは、ジスルフィド結合によって連結され
る。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含
み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの
実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメインは、第１のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサ
ブユニットの細胞内ドメイン由来の配列を含み、及び／又は第２のＴＣＲ細胞内ドメイン
は、第２のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサブユニットの細胞内ドメイン由来の配列を含
む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲ
サブユニットの断片であり、及び／又は、第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ－ＴＭが由来
するＴＣＲサブユニットの断片である。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞
共刺激シグナル伝達配列（ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、
ＣＤ３０、又はＣＤ４０由来など）を含む、少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメイ
ンを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメイン及び第２
の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安定化ドメインが
、ｃａＴＣＲを安定化させる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第
１及び第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって連結される。いくつかの実施
形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体ド
メイン、又はその変異型を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、Ｃ
Ｄ３γε、及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達
分子を動員することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、天然に存在するα
β Ｔ細胞受容体の膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ
関連シグナル伝達分子の動員を強化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ
Ｍは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つ
のｃａＴＣＲモジュール間又はドメイン間にスペーサモジュールが存在する。いくつかの
実施形態では、抗原結合モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体
部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。
いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、多重特異性（二重特異性など）である
。
【0105】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲは、標的抗原に特異的に結合し
、ａ）天然に存在するγδ ＴＣＲの膜貫通ドメインのうちの１つに由来する第１のＴＣ
Ｒ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及び天然に存在するγδ ＴＣＲの他の膜貫通ドメイン
に由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に特異的に結合す
る抗原結合モジュールと、を含み、第１及び第２のＴＣＲＤは、少なくとも１つのＴＣＲ
関連シグナル伝達分子を動員することのできるＴＣＲＭを形成し、抗原結合モジュールは
、第１及び／又は第２のＴＣＲＤに連結する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭの
両方が天然に存在する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのうちの少なくとも１つ
は、天然に存在しない。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ連結
ペプチド又はその断片を更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ連結ペプ
チド又はその断片を更に含む。いくつかの実施形態では、第１の連結ペプチドは、第１の
ＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサブユニットの連結ペプチドの全て若しくは一部、又はそ
の変異型を含み、及び／又は第２の連結ペプチドは、第２のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣ
Ｒサブユニットの連結ペプチドの全て若しくは一部、又はこれらの変異型を含む。いくつ
かの実施形態では、第１及び第２の連結ペプチドは、ジスルフィド結合によって連結され
る。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含
み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの
実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメインは、第１のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサ
ブユニットの細胞内ドメイン由来の配列を含み、及び／又は第２のＴＣＲ細胞内ドメイン
は、第２のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサブユニットの細胞内ドメイン由来の配列を含
む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲ
サブユニットの断片であり、及び／又は、第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ－ＴＭが由来
するＴＣＲサブユニットの断片である。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞
共刺激シグナル伝達配列（ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、
ＣＤ３０、又はＣＤ４０由来など）を含む、少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメイ
ンを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメイン及び第２
の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安定化ドメインが
、ｃａＴＣＲを安定化させる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第
１及び第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって連結される。いくつかの実施
形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体ド
メイン、又はその変異型を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、Ｃ
Ｄ３γε、及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達
分子を動員することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、天然に存在するγ
δ Ｔ細胞受容体の膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ
関連シグナル伝達分子の動員を強化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ
Ｍは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つ
のｃａＴＣＲモジュール間又はドメイン間にスペーサモジュールが存在する。いくつかの
実施形態では、抗原結合モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体
部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。
いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、多重特異性（二重特異性など）である
。
、ａ）天然に存在するγδ ＴＣＲの膜貫通ドメインのうちの１つに由来する第１のＴＣ
Ｒ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及び天然に存在するγδ ＴＣＲの他の膜貫通ドメイン
に由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に特異的に結合す
る抗原結合モジュールと、を含み、第１及び第２のＴＣＲＤは、少なくとも１つのＴＣＲ
関連シグナル伝達分子を動員することのできるＴＣＲＭを形成し、抗原結合モジュールは
、第１及び／又は第２のＴＣＲＤに連結する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭの
両方が天然に存在する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのうちの少なくとも１つ
は、天然に存在しない。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ連結
ペプチド又はその断片を更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ連結ペプ
チド又はその断片を更に含む。いくつかの実施形態では、第１の連結ペプチドは、第１の
ＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサブユニットの連結ペプチドの全て若しくは一部、又はそ
の変異型を含み、及び／又は第２の連結ペプチドは、第２のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣ
Ｒサブユニットの連結ペプチドの全て若しくは一部、又はこれらの変異型を含む。いくつ
かの実施形態では、第１及び第２の連結ペプチドは、ジスルフィド結合によって連結され
る。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含
み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの
実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメインは、第１のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサ
ブユニットの細胞内ドメイン由来の配列を含み、及び／又は第２のＴＣＲ細胞内ドメイン
は、第２のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサブユニットの細胞内ドメイン由来の配列を含
む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲ
サブユニットの断片であり、及び／又は、第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ－ＴＭが由来
するＴＣＲサブユニットの断片である。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞
共刺激シグナル伝達配列（ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、
ＣＤ３０、又はＣＤ４０由来など）を含む、少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメイ
ンを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメイン及び第２
の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安定化ドメインが
、ｃａＴＣＲを安定化させる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第
１及び第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって連結される。いくつかの実施
形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体ド
メイン、又はその変異型を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、Ｃ
Ｄ３γε、及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達
分子を動員することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、天然に存在するγ
δ Ｔ細胞受容体の膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ
関連シグナル伝達分子の動員を強化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ
Ｍは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つ
のｃａＴＣＲモジュール間又はドメイン間にスペーサモジュールが存在する。いくつかの
実施形態では、抗原結合モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体
部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。
いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、多重特異性（二重特異性など）である
。
【0106】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲは、標的抗原に特異的に結合し
、ａ）配列番号１及び配列番号２のアミノ酸配列のうちの１つに含まれる膜貫通ドメイン
に由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及び他のアミノ酸配列に含まれる
膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に
特異的に結合する抗原結合モジュールと、を含み、第１及び第２のＴＣＲＤは、少なくと
も１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することのできるＴＣＲＭを形成し、抗原結
合モジュールは、第１及び／又は第２のＴＣＲＤに連結する。いくつかの実施形態では、
ＴＣＲ－ＴＭの両方が天然に存在する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのうちの
少なくとも１つは、天然に存在しない。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第
１のＴＣＲ連結ペプチド又はその断片を更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２の
ＴＣＲ連結ペプチド又はその断片を更に含む。いくつかの実施形態では、第１の連結ペプ
チド及び第２の連結ペプチドはそれぞれ、互いに独立して、配列番号１～４のアミノ酸配
列又はその変異型のいずれか１つに含まれる連結ペプチドのアミノ酸配列を含む。いくつ
かの実施形態では、第１の連結ペプチド及び第２の連結ペプチドはそれぞれ、互いに独立
して、配列番号２７～３４又はその変異型のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつ
かの実施形態では、第１及び第２の連結ペプチドは、ジスルフィド結合によって連結され
る。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含
み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの
実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインはそれぞれ
、互いに独立して、配列番号１～４のアミノ酸配列又はその変異型のいずれか１つに含ま
れる細胞内ドメインのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞
内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインはそれぞれ、互いに独立して、配列番号３５
若しくは３６又はその変異型のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣ
Ｒは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）
、ＯＸ４０、ＣＤ３０、又はＣＤ４０由来など）を含む、少なくとも１つのアクセサリー
細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメ
イン及び第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安定
化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化させる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実施
形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって連結される。い
くつかの実施形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメイン
などの抗体ドメイン、又はその変異型を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、Ｃ
Ｄ３δε、ＣＤ３γε、及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連
シグナル伝達分子を動員することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配列
番号１及び２に含まれる膜貫通ドメインの配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含
むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化する
ことができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を
促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール間又はドメイン
間にスペーサモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、
抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’
）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、抗原結合モジ
ュールは、多重特異性（二重特異性など）である。
、ａ）配列番号１及び配列番号２のアミノ酸配列のうちの１つに含まれる膜貫通ドメイン
に由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及び他のアミノ酸配列に含まれる
膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に
特異的に結合する抗原結合モジュールと、を含み、第１及び第２のＴＣＲＤは、少なくと
も１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することのできるＴＣＲＭを形成し、抗原結
合モジュールは、第１及び／又は第２のＴＣＲＤに連結する。いくつかの実施形態では、
ＴＣＲ－ＴＭの両方が天然に存在する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのうちの
少なくとも１つは、天然に存在しない。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第
１のＴＣＲ連結ペプチド又はその断片を更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２の
ＴＣＲ連結ペプチド又はその断片を更に含む。いくつかの実施形態では、第１の連結ペプ
チド及び第２の連結ペプチドはそれぞれ、互いに独立して、配列番号１～４のアミノ酸配
列又はその変異型のいずれか１つに含まれる連結ペプチドのアミノ酸配列を含む。いくつ
かの実施形態では、第１の連結ペプチド及び第２の連結ペプチドはそれぞれ、互いに独立
して、配列番号２７～３４又はその変異型のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつ
かの実施形態では、第１及び第２の連結ペプチドは、ジスルフィド結合によって連結され
る。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含
み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの
実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインはそれぞれ
、互いに独立して、配列番号１～４のアミノ酸配列又はその変異型のいずれか１つに含ま
れる細胞内ドメインのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞
内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインはそれぞれ、互いに独立して、配列番号３５
若しくは３６又はその変異型のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣ
Ｒは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）
、ＯＸ４０、ＣＤ３０、又はＣＤ４０由来など）を含む、少なくとも１つのアクセサリー
細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメ
イン及び第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安定
化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化させる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実施
形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって連結される。い
くつかの実施形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメイン
などの抗体ドメイン、又はその変異型を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、Ｃ
Ｄ３δε、ＣＤ３γε、及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連
シグナル伝達分子を動員することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配列
番号１及び２に含まれる膜貫通ドメインの配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含
むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化する
ことができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を
促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール間又はドメイン
間にスペーサモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、
抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’
）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、抗原結合モジ
ュールは、多重特異性（二重特異性など）である。
【0107】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲは、標的抗原に特異的に結合し
、ａ）配列番号１及び配列番号２のアミノ酸配列のうちの１つに含まれる膜貫通ドメイン
に由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及び他のアミノ酸配列に含まれる
膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に
特異的に結合する抗原結合モジュールと、を含み、ＴＣＲ－ＴＭの少なくとも１つは、そ
れが由来するアミノ酸配列と比較して、１つ以上（２、３、４、５、又はそれ以上など）
のアミノ酸置換を含み、第１及び第２のＴＣＲＤは、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナ
ル伝達分子を動員することのできるＴＣＲＭを形成し、抗原結合モジュールは、第１及び
／又は第２のＴＣＲＤに連結する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのそれぞれは
、互いに独立して、それが由来するアミノ酸配列と比較して、１つ以上（２、３、４、５
、又はそれ以上など）のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－
ＴＭ及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭはそれぞれ、互いに独立して、それらが由来するアミ
ノ酸配列と比較して、５個以下のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ
－ＴＭのうちの少なくとも１つは、それが由来するアミノ酸配列と比較して、単一のアミ
ノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのそれぞれは、それが由来する
アミノ酸配列と比較して、単一のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、第１の
ＴＣＲ－ＴＭ中の置換アミノ酸のうちの少なくとも１つは、ｃａＴＣＲにおいて、第２の
ＴＣＲ－ＴＭ中の置換アミノ酸のうちの少なくとも１つと相互作用することができるよう
に配置される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ連結ペプチド
又はその断片を更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ連結ペプチド又は
その断片を更に含む。いくつかの実施形態では、第１の連結ペプチド及び第２の連結ペプ
チドはそれぞれ、互いに独立して、配列番号１～４のアミノ酸配列又はその変異型のいず
れか１つに含まれる連結ペプチドのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１
の連結ペプチド及び第２の連結ペプチドはそれぞれ、互いに独立して、配列番号２７～３
４又はその変異型のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１
及び第２の連結ペプチドは、ジスルフィド結合によって連結される。いくつかの実施形態
では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴ
ＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴ
ＣＲ細胞内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインはそれぞれ、互いに独立して、配列
番号１～４のアミノ酸配列又はその変異型のいずれか１つに含まれる細胞内ドメインのア
ミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び第２のＴ
ＣＲ細胞内ドメインはそれぞれ、互いに独立して、配列番号３５若しくは３６又はその変
異型のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグ
ナル伝達配列（ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、
又はＣＤ４０由来など）を含む、少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含
む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ド
メインを含む安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣ
Ｒを安定化させる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２
の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって連結される。いくつかの実施形態では、
第１及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体ドメイン、又
はその変異型を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε、
及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員
することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号１及び２に含まれる
膜貫通ドメインの配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、
少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化することができる。いくつか
の実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。いくつかの実
施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール間又はドメイン間にスペーサモジュール
が存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、抗体部分である。いくつ
かの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆ
ｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、多重特異性（
二重特異性など）である。
、ａ）配列番号１及び配列番号２のアミノ酸配列のうちの１つに含まれる膜貫通ドメイン
に由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及び他のアミノ酸配列に含まれる
膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に
特異的に結合する抗原結合モジュールと、を含み、ＴＣＲ－ＴＭの少なくとも１つは、そ
れが由来するアミノ酸配列と比較して、１つ以上（２、３、４、５、又はそれ以上など）
のアミノ酸置換を含み、第１及び第２のＴＣＲＤは、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナ
ル伝達分子を動員することのできるＴＣＲＭを形成し、抗原結合モジュールは、第１及び
／又は第２のＴＣＲＤに連結する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのそれぞれは
、互いに独立して、それが由来するアミノ酸配列と比較して、１つ以上（２、３、４、５
、又はそれ以上など）のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－
ＴＭ及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭはそれぞれ、互いに独立して、それらが由来するアミ
ノ酸配列と比較して、５個以下のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ
－ＴＭのうちの少なくとも１つは、それが由来するアミノ酸配列と比較して、単一のアミ
ノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのそれぞれは、それが由来する
アミノ酸配列と比較して、単一のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、第１の
ＴＣＲ－ＴＭ中の置換アミノ酸のうちの少なくとも１つは、ｃａＴＣＲにおいて、第２の
ＴＣＲ－ＴＭ中の置換アミノ酸のうちの少なくとも１つと相互作用することができるよう
に配置される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ連結ペプチド
又はその断片を更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ連結ペプチド又は
その断片を更に含む。いくつかの実施形態では、第１の連結ペプチド及び第２の連結ペプ
チドはそれぞれ、互いに独立して、配列番号１～４のアミノ酸配列又はその変異型のいず
れか１つに含まれる連結ペプチドのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１
の連結ペプチド及び第２の連結ペプチドはそれぞれ、互いに独立して、配列番号２７～３
４又はその変異型のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１
及び第２の連結ペプチドは、ジスルフィド結合によって連結される。いくつかの実施形態
では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴ
ＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴ
ＣＲ細胞内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインはそれぞれ、互いに独立して、配列
番号１～４のアミノ酸配列又はその変異型のいずれか１つに含まれる細胞内ドメインのア
ミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び第２のＴ
ＣＲ細胞内ドメインはそれぞれ、互いに独立して、配列番号３５若しくは３６又はその変
異型のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグ
ナル伝達配列（ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、
又はＣＤ４０由来など）を含む、少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含
む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ド
メインを含む安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣ
Ｒを安定化させる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２
の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって連結される。いくつかの実施形態では、
第１及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体ドメイン、又
はその変異型を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε、
及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員
することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号１及び２に含まれる
膜貫通ドメインの配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、
少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化することができる。いくつか
の実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。いくつかの実
施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール間又はドメイン間にスペーサモジュール
が存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、抗体部分である。いくつ
かの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆ
ｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、多重特異性（
二重特異性など）である。
【0108】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲは、標的抗原に特異的に結合し
、ａ）配列番号１及び配列番号２のアミノ酸配列のうちの１つに含まれる膜貫通ドメイン
に由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及び他のアミノ酸配列に含まれる
膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に
特異的に結合する抗原結合モジュールと、を含み、ＴＣＲ－ＴＭの少なくとも１つは、配
列番号３又は４に含まれる膜貫通ドメイン由来の連続したアミノ酸の一部を含むキメラ配
列を含み、第１及び第２のＴＣＲＤは、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を
動員することのできるＴＣＲＭを形成し、抗原結合モジュールは、第１及び／又は第２の
ＴＣＲＤに連結する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのそれぞれは、互いに独立
して、配列番号３又は４に含まれる膜貫通ドメイン由来の連続するアミノ酸の一部を含む
キメラ配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又は第２のＴＣ
Ｒ－ＴＭはそれぞれ、互いに独立して、配列番号３又は４に含まれる膜貫通ドメイン由来
の約１０以下（約９、８、７、６、５、又はそれ以下など）の連続するアミノ酸の一部を
含むキメラ配列を含む。いくつかの実施形態では、第１又は第２のＴＣＲ－ＴＭ中のキメ
ラ配列は、配列番号３に含まれる膜貫通ドメイン由来であり、他のＴＣＲ－ＴＭ中のキメ
ラ配列は、配列番号４に含まれる膜貫通ドメイン由来である。いくつかの実施形態では、
第１のＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列は、それが第２のＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列と相互
作用することができるように配置される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、
第１のＴＣＲ連結ペプチド又はその断片を更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２
のＴＣＲ連結ペプチド又はその断片を更に含む。いくつかの実施形態では、第１の連結ペ
プチド及び第２の連結ペプチドはそれぞれ、互いに独立して、配列番号１～４のアミノ酸
配列又はその変異型のいずれか１つに含まれる連結ペプチドのアミノ酸配列を含む。いく
つかの実施形態では、第１の連結ペプチド及び第２の連結ペプチドはそれぞれ、互いに独
立して、配列番号２７～３４又はその変異型のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いく
つかの実施形態では、第１及び第２の連結ペプチドは、ジスルフィド結合によって連結さ
れる。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に
含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつか
の実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインはそれぞ
れ、互いに独立して、配列番号１～４のアミノ酸配列又はその変異型のいずれか１つに含
まれる細胞内ドメインのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細
胞内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインはそれぞれ、互いに独立して、配列番号３
５若しくは３６又はその変異型のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴ
ＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７
）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、又はＣＤ４０由来など）を含む、少なくとも１つのアクセサリ
ー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ド
メイン及び第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安
定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化させる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実
施形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって連結される。
いくつかの実施形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメイ
ンなどの抗体ドメイン、又はその変異型を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、
ＣＤ３δε、ＣＤ３γε、及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関
連シグナル伝達分子を動員することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配
列番号１及び２に含まれる膜貫通ドメインの配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを
含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化す
ることができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成
を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール間又はドメイ
ン間にスペーサモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは
、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ
’）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、抗原結合モ
ジュールは、多重特異性（二重特異性など）である。
、ａ）配列番号１及び配列番号２のアミノ酸配列のうちの１つに含まれる膜貫通ドメイン
に由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及び他のアミノ酸配列に含まれる
膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に
特異的に結合する抗原結合モジュールと、を含み、ＴＣＲ－ＴＭの少なくとも１つは、配
列番号３又は４に含まれる膜貫通ドメイン由来の連続したアミノ酸の一部を含むキメラ配
列を含み、第１及び第２のＴＣＲＤは、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を
動員することのできるＴＣＲＭを形成し、抗原結合モジュールは、第１及び／又は第２の
ＴＣＲＤに連結する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのそれぞれは、互いに独立
して、配列番号３又は４に含まれる膜貫通ドメイン由来の連続するアミノ酸の一部を含む
キメラ配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又は第２のＴＣ
Ｒ－ＴＭはそれぞれ、互いに独立して、配列番号３又は４に含まれる膜貫通ドメイン由来
の約１０以下（約９、８、７、６、５、又はそれ以下など）の連続するアミノ酸の一部を
含むキメラ配列を含む。いくつかの実施形態では、第１又は第２のＴＣＲ－ＴＭ中のキメ
ラ配列は、配列番号３に含まれる膜貫通ドメイン由来であり、他のＴＣＲ－ＴＭ中のキメ
ラ配列は、配列番号４に含まれる膜貫通ドメイン由来である。いくつかの実施形態では、
第１のＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列は、それが第２のＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列と相互
作用することができるように配置される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、
第１のＴＣＲ連結ペプチド又はその断片を更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２
のＴＣＲ連結ペプチド又はその断片を更に含む。いくつかの実施形態では、第１の連結ペ
プチド及び第２の連結ペプチドはそれぞれ、互いに独立して、配列番号１～４のアミノ酸
配列又はその変異型のいずれか１つに含まれる連結ペプチドのアミノ酸配列を含む。いく
つかの実施形態では、第１の連結ペプチド及び第２の連結ペプチドはそれぞれ、互いに独
立して、配列番号２７～３４又はその変異型のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いく
つかの実施形態では、第１及び第２の連結ペプチドは、ジスルフィド結合によって連結さ
れる。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に
含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつか
の実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインはそれぞ
れ、互いに独立して、配列番号１～４のアミノ酸配列又はその変異型のいずれか１つに含
まれる細胞内ドメインのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細
胞内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインはそれぞれ、互いに独立して、配列番号３
５若しくは３６又はその変異型のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴ
ＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７
）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、又はＣＤ４０由来など）を含む、少なくとも１つのアクセサリ
ー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ド
メイン及び第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安
定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化させる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実
施形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって連結される。
いくつかの実施形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメイ
ンなどの抗体ドメイン、又はその変異型を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、
ＣＤ３δε、ＣＤ３γε、及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関
連シグナル伝達分子を動員することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配
列番号１及び２に含まれる膜貫通ドメインの配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを
含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化す
ることができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成
を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール間又はドメイ
ン間にスペーサモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは
、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ
’）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、抗原結合モ
ジュールは、多重特異性（二重特異性など）である。
【0109】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲは、標的抗原に特異的に結合し
、ａ）配列番号３及び配列番号４のアミノ酸配列のうちの１つに含まれる膜貫通ドメイン
に由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及び他のアミノ酸配列に含まれる
膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に
特異的に結合する抗原結合モジュールと、を含み、第１及び第２のＴＣＲＤは、少なくと
も１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することのできるＴＣＲＭを形成し、抗原結
合モジュールは、第１及び／又は第２のＴＣＲＤに連結する。いくつかの実施形態では、
ＴＣＲ－ＴＭの両方が天然に存在する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのうちの
少なくとも１つは、天然に存在しない。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第
１のＴＣＲ連結ペプチド又はその断片を更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２の
ＴＣＲ連結ペプチド又はその断片を更に含む。いくつかの実施形態では、第１の連結ペプ
チド及び第２の連結ペプチドはそれぞれ、互いに独立して、配列番号１～４のアミノ酸配
列又はその変異型のいずれか１つに含まれる連結ペプチドのアミノ酸配列を含む。いくつ
かの実施形態では、第１の連結ペプチド及び第２の連結ペプチドはそれぞれ、互いに独立
して、配列番号２７～３４又はその変異型のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつ
かの実施形態では、第１及び第２の連結ペプチドは、ジスルフィド結合によって連結され
る。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含
み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの
実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインはそれぞれ
、互いに独立して、配列番号１～４のアミノ酸配列又はその変異型のいずれか１つに含ま
れる細胞内ドメインのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞
内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインはそれぞれ、互いに独立して、配列番号３５
若しくは３６又はその変異型のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣ
Ｒは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）
、ＯＸ４０、ＣＤ３０、又はＣＤ４０由来など）を含む、少なくとも１つのアクセサリー
細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメ
イン及び第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安定
化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化させる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実施
形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって連結される。い
くつかの実施形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメイン
などの抗体ドメイン、又はその変異型を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、Ｃ
Ｄ３δε、ＣＤ３γε、及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連
シグナル伝達分子を動員することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配列
番号３及び４に含まれる膜貫通ドメインの配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含
むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化する
ことができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を
促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール間又はドメイン
間にスペーサモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、
抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’
）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、抗原結合モジ
ュールは、多重特異性（二重特異性など）である。
、ａ）配列番号３及び配列番号４のアミノ酸配列のうちの１つに含まれる膜貫通ドメイン
に由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及び他のアミノ酸配列に含まれる
膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に
特異的に結合する抗原結合モジュールと、を含み、第１及び第２のＴＣＲＤは、少なくと
も１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することのできるＴＣＲＭを形成し、抗原結
合モジュールは、第１及び／又は第２のＴＣＲＤに連結する。いくつかの実施形態では、
ＴＣＲ－ＴＭの両方が天然に存在する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのうちの
少なくとも１つは、天然に存在しない。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第
１のＴＣＲ連結ペプチド又はその断片を更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２の
ＴＣＲ連結ペプチド又はその断片を更に含む。いくつかの実施形態では、第１の連結ペプ
チド及び第２の連結ペプチドはそれぞれ、互いに独立して、配列番号１～４のアミノ酸配
列又はその変異型のいずれか１つに含まれる連結ペプチドのアミノ酸配列を含む。いくつ
かの実施形態では、第１の連結ペプチド及び第２の連結ペプチドはそれぞれ、互いに独立
して、配列番号２７～３４又はその変異型のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつ
かの実施形態では、第１及び第２の連結ペプチドは、ジスルフィド結合によって連結され
る。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含
み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの
実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインはそれぞれ
、互いに独立して、配列番号１～４のアミノ酸配列又はその変異型のいずれか１つに含ま
れる細胞内ドメインのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞
内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインはそれぞれ、互いに独立して、配列番号３５
若しくは３６又はその変異型のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣ
Ｒは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）
、ＯＸ４０、ＣＤ３０、又はＣＤ４０由来など）を含む、少なくとも１つのアクセサリー
細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメ
イン及び第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安定
化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化させる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実施
形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって連結される。い
くつかの実施形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメイン
などの抗体ドメイン、又はその変異型を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、Ｃ
Ｄ３δε、ＣＤ３γε、及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連
シグナル伝達分子を動員することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配列
番号３及び４に含まれる膜貫通ドメインの配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含
むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化する
ことができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を
促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール間又はドメイン
間にスペーサモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、
抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’
）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、抗原結合モジ
ュールは、多重特異性（二重特異性など）である。
【0110】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲは、標的抗原に特異的に結合し
、ａ）配列番号３及び配列番号４のアミノ酸配列のうちの１つに含まれる膜貫通ドメイン
に由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及び他のアミノ酸配列に含まれる
膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に
特異的に結合する抗原結合モジュールと、を含み、ＴＣＲ－ＴＭの少なくとも１つは、そ
れが由来するアミノ酸配列と比較して、１つ以上（２、３、４、５、又はそれ以上など）
のアミノ酸置換を含み、第１及び第２のＴＣＲＤは、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナ
ル伝達分子を動員することのできるＴＣＲＭを形成し、抗原結合モジュールは、第１及び
／又は第２のＴＣＲＤに連結する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのそれぞれは
、互いに独立して、それが由来するアミノ酸配列と比較して、１つ以上（２、３、４、５
、又はそれ以上など）のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－
ＴＭ及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭはそれぞれ、互いに独立して、それらが由来するアミ
ノ酸配列と比較して、５個以下のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ
－ＴＭのうちの少なくとも１つは、それが由来するアミノ酸配列と比較して、単一のアミ
ノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのそれぞれは、それが由来する
アミノ酸配列と比較して、単一のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、第１の
ＴＣＲ－ＴＭ中の置換アミノ酸のうちの少なくとも１つは、ｃａＴＣＲにおいて、第２の
ＴＣＲ－ＴＭ中の置換アミノ酸のうちの少なくとも１つと相互作用することができるよう
に配置される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ連結ペプチド
又はその断片を更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ連結ペプチド又は
その断片を更に含む。いくつかの実施形態では、第１の連結ペプチド及び第２の連結ペプ
チドはそれぞれ、互いに独立して、配列番号１～４のアミノ酸配列又はその変異型のいず
れか１つに含まれる連結ペプチドのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１
の連結ペプチド及び第２の連結ペプチドはそれぞれ、互いに独立して、配列番号２７～３
４又はその変異型のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１
及び第２の連結ペプチドは、ジスルフィド結合によって連結される。いくつかの実施形態
では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴ
ＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴ
ＣＲ細胞内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインはそれぞれ、互いに独立して、配列
番号１～４のアミノ酸配列又はその変異型のいずれか１つに含まれる細胞内ドメインのア
ミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び第２のＴ
ＣＲ細胞内ドメインはそれぞれ、互いに独立して、配列番号３５若しくは３６又はその変
異型のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグ
ナル伝達配列（ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、
又はＣＤ４０由来など）を含む、少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含
む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ド
メインを含む安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣ
Ｒを安定化させる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２
の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって連結される。いくつかの実施形態では、
第１及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体ドメイン、又
はその変異型を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε、
及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員
することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号３及び４に含まれる
膜貫通ドメインの配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、
少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化することができる。いくつか
の実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。いくつかの実
施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール間又はドメイン間にスペーサモジュール
が存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、抗体部分である。いくつ
かの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆ
ｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、多重特異性（
二重特異性など）である。
、ａ）配列番号３及び配列番号４のアミノ酸配列のうちの１つに含まれる膜貫通ドメイン
に由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及び他のアミノ酸配列に含まれる
膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に
特異的に結合する抗原結合モジュールと、を含み、ＴＣＲ－ＴＭの少なくとも１つは、そ
れが由来するアミノ酸配列と比較して、１つ以上（２、３、４、５、又はそれ以上など）
のアミノ酸置換を含み、第１及び第２のＴＣＲＤは、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナ
ル伝達分子を動員することのできるＴＣＲＭを形成し、抗原結合モジュールは、第１及び
／又は第２のＴＣＲＤに連結する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのそれぞれは
、互いに独立して、それが由来するアミノ酸配列と比較して、１つ以上（２、３、４、５
、又はそれ以上など）のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－
ＴＭ及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭはそれぞれ、互いに独立して、それらが由来するアミ
ノ酸配列と比較して、５個以下のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ
－ＴＭのうちの少なくとも１つは、それが由来するアミノ酸配列と比較して、単一のアミ
ノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのそれぞれは、それが由来する
アミノ酸配列と比較して、単一のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、第１の
ＴＣＲ－ＴＭ中の置換アミノ酸のうちの少なくとも１つは、ｃａＴＣＲにおいて、第２の
ＴＣＲ－ＴＭ中の置換アミノ酸のうちの少なくとも１つと相互作用することができるよう
に配置される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ連結ペプチド
又はその断片を更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ連結ペプチド又は
その断片を更に含む。いくつかの実施形態では、第１の連結ペプチド及び第２の連結ペプ
チドはそれぞれ、互いに独立して、配列番号１～４のアミノ酸配列又はその変異型のいず
れか１つに含まれる連結ペプチドのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１
の連結ペプチド及び第２の連結ペプチドはそれぞれ、互いに独立して、配列番号２７～３
４又はその変異型のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１
及び第２の連結ペプチドは、ジスルフィド結合によって連結される。いくつかの実施形態
では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴ
ＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴ
ＣＲ細胞内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインはそれぞれ、互いに独立して、配列
番号１～４のアミノ酸配列又はその変異型のいずれか１つに含まれる細胞内ドメインのア
ミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び第２のＴ
ＣＲ細胞内ドメインはそれぞれ、互いに独立して、配列番号３５若しくは３６又はその変
異型のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグ
ナル伝達配列（ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、
又はＣＤ４０由来など）を含む、少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含
む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ド
メインを含む安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣ
Ｒを安定化させる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２
の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって連結される。いくつかの実施形態では、
第１及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体ドメイン、又
はその変異型を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε、
及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員
することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号３及び４に含まれる
膜貫通ドメインの配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、
少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化することができる。いくつか
の実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。いくつかの実
施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール間又はドメイン間にスペーサモジュール
が存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、抗体部分である。いくつ
かの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆ
ｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、多重特異性（
二重特異性など）である。
【0111】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲは、標的抗原に特異的に結合し
、ａ）配列番号３及び配列番号４のアミノ酸配列のうちの１つに含まれる膜貫通ドメイン
に由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及び他のアミノ酸配列に含まれる
膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に
特異的に結合する抗原結合モジュールと、を含み、ＴＣＲ－ＴＭの少なくとも１つは、配
列番号１又は２に含まれる膜貫通ドメイン由来の連続したアミノ酸の一部を含むキメラ配
列を含み、第１及び第２のＴＣＲＤは、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を
動員することのできるＴＣＲＭを形成し、抗原結合モジュールは、第１及び／又は第２の
ＴＣＲＤに連結する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのそれぞれは、互いに独立
して、配列番号１又は２に含まれる膜貫通ドメイン由来の連続するアミノ酸の一部を含む
キメラ配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又は第２のＴＣ
Ｒ－ＴＭはそれぞれ、互いに独立して、配列番号１又は２に含まれる膜貫通ドメイン由来
の約１０以下（約９、８、７、６、５、又はそれ以下など）の連続するアミノ酸の一部を
含むキメラ配列を含む。いくつかの実施形態では、第１又は第２のＴＣＲ－ＴＭ中のキメ
ラ配列は、配列番号１に含まれる膜貫通ドメイン由来であり、他のＴＣＲ－ＴＭ中のキメ
ラ配列は、配列番号２に含まれる膜貫通ドメイン由来である。いくつかの実施形態では、
第１のＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列は、それが第２のＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列と相互
作用することができるように配置される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、
第１のＴＣＲ連結ペプチド又はその断片を更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２
のＴＣＲ連結ペプチド又はその断片を更に含む。いくつかの実施形態では、第１の連結ペ
プチド及び第２の連結ペプチドはそれぞれ、互いに独立して、配列番号１～４のアミノ酸
配列又はその変異型のいずれか１つに含まれる連結ペプチドのアミノ酸配列を含む。いく
つかの実施形態では、第１の連結ペプチド及び第２の連結ペプチドはそれぞれ、互いに独
立して、配列番号２７～３４又はその変異型のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いく
つかの実施形態では、第１及び第２の連結ペプチドは、ジスルフィド結合によって連結さ
れる。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に
含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつか
の実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインはそれぞ
れ、互いに独立して、配列番号１～４のアミノ酸配列又はその変異型のいずれか１つに含
まれる細胞内ドメインのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細
胞内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインはそれぞれ、互いに独立して、配列番号３
５若しくは３６又はその変異型のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴ
ＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７
）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、又はＣＤ４０由来など）を含む、少なくとも１つのアクセサリ
ー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ド
メイン及び第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安
定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化させる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実
施形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって連結される。
いくつかの実施形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメイ
ンなどの抗体ドメイン、又はその変異型を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、
ＣＤ３δε、ＣＤ３γε、及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関
連シグナル伝達分子を動員することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配
列番号３及び４に含まれる膜貫通ドメインの配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを
含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化す
ることができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成
を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール間又はドメイ
ン間にスペーサモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは
、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ
’）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、抗原結合モ
ジュールは、多重特異性（二重特異性など）である。
、ａ）配列番号３及び配列番号４のアミノ酸配列のうちの１つに含まれる膜貫通ドメイン
に由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及び他のアミノ酸配列に含まれる
膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に
特異的に結合する抗原結合モジュールと、を含み、ＴＣＲ－ＴＭの少なくとも１つは、配
列番号１又は２に含まれる膜貫通ドメイン由来の連続したアミノ酸の一部を含むキメラ配
列を含み、第１及び第２のＴＣＲＤは、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を
動員することのできるＴＣＲＭを形成し、抗原結合モジュールは、第１及び／又は第２の
ＴＣＲＤに連結する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのそれぞれは、互いに独立
して、配列番号１又は２に含まれる膜貫通ドメイン由来の連続するアミノ酸の一部を含む
キメラ配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又は第２のＴＣ
Ｒ－ＴＭはそれぞれ、互いに独立して、配列番号１又は２に含まれる膜貫通ドメイン由来
の約１０以下（約９、８、７、６、５、又はそれ以下など）の連続するアミノ酸の一部を
含むキメラ配列を含む。いくつかの実施形態では、第１又は第２のＴＣＲ－ＴＭ中のキメ
ラ配列は、配列番号１に含まれる膜貫通ドメイン由来であり、他のＴＣＲ－ＴＭ中のキメ
ラ配列は、配列番号２に含まれる膜貫通ドメイン由来である。いくつかの実施形態では、
第１のＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列は、それが第２のＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列と相互
作用することができるように配置される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、
第１のＴＣＲ連結ペプチド又はその断片を更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２
のＴＣＲ連結ペプチド又はその断片を更に含む。いくつかの実施形態では、第１の連結ペ
プチド及び第２の連結ペプチドはそれぞれ、互いに独立して、配列番号１～４のアミノ酸
配列又はその変異型のいずれか１つに含まれる連結ペプチドのアミノ酸配列を含む。いく
つかの実施形態では、第１の連結ペプチド及び第２の連結ペプチドはそれぞれ、互いに独
立して、配列番号２７～３４又はその変異型のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いく
つかの実施形態では、第１及び第２の連結ペプチドは、ジスルフィド結合によって連結さ
れる。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に
含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつか
の実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインはそれぞ
れ、互いに独立して、配列番号１～４のアミノ酸配列又はその変異型のいずれか１つに含
まれる細胞内ドメインのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細
胞内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインはそれぞれ、互いに独立して、配列番号３
５若しくは３６又はその変異型のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴ
ＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７
）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、又はＣＤ４０由来など）を含む、少なくとも１つのアクセサリ
ー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ド
メイン及び第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安
定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化させる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実
施形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって連結される。
いくつかの実施形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメイ
ンなどの抗体ドメイン、又はその変異型を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、
ＣＤ３δε、ＣＤ３γε、及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関
連シグナル伝達分子を動員することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配
列番号３及び４に含まれる膜貫通ドメインの配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを
含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化す
ることができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成
を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール間又はドメイ
ン間にスペーサモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは
、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ
’）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、抗原結合モ
ジュールは、多重特異性（二重特異性など）である。
【0112】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲは、標的抗原に特異的に結合し
、ａ）配列番号５及び配列番号６のアミノ酸配列のうちの１つに由来する第１のＴＣＲ－
ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及び他のアミノ酸配列に由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む
第２のＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールと、を含み、第
１及び第２のＴＣＲＤは、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員すること
のできるＴＣＲＭを形成し、抗原結合モジュールは、第１及び／又は第２のＴＣＲＤに連
結する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭの両方が天然に存在する。いくつかの実
施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのうちの少なくとも１つは、天然に存在しない。いくつかの実
施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ連結ペプチド又はその断片を更に含み、及
び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ連結ペプチド又はその断片を更に含む。いくつ
かの実施形態では、第１の連結ペプチド及び第２の連結ペプチドはそれぞれ、互いに独立
して、配列番号２７～３４又はその変異型のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつ
かの実施形態では、第１及び第２の連結ペプチドは、ジスルフィド結合によって連結され
る。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含
み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの
実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインはそれぞれ
、互いに独立して、配列番号３５若しくは３６又はその変異型のアミノ酸配列を含む。い
くつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（ＣＤ２７、ＣＤ
２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、又はＣＤ４０由来など）を含む
、少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、
ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインを含む安定化モジュール
を更に含み、第１及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化させる、互いの結合
親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ジスルフ
ィド結合によって連結される。いくつかの実施形態では、第１及び第２の安定化ドメイン
は、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体ドメイン、又はその変異型を含む。いくつか
の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε、及びζζからなる群から選択さ
れる少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することができる。いくつかの
実施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号５及び６の配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメイ
ンを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強
化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体
形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール間又はド
メイン間にスペーサモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュー
ルは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆ
ａｂ’）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、抗原結
合モジュールは、多重特異性（二重特異性など）である。
、ａ）配列番号５及び配列番号６のアミノ酸配列のうちの１つに由来する第１のＴＣＲ－
ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及び他のアミノ酸配列に由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む
第２のＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールと、を含み、第
１及び第２のＴＣＲＤは、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員すること
のできるＴＣＲＭを形成し、抗原結合モジュールは、第１及び／又は第２のＴＣＲＤに連
結する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭの両方が天然に存在する。いくつかの実
施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのうちの少なくとも１つは、天然に存在しない。いくつかの実
施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ連結ペプチド又はその断片を更に含み、及
び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ連結ペプチド又はその断片を更に含む。いくつ
かの実施形態では、第１の連結ペプチド及び第２の連結ペプチドはそれぞれ、互いに独立
して、配列番号２７～３４又はその変異型のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつ
かの実施形態では、第１及び第２の連結ペプチドは、ジスルフィド結合によって連結され
る。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含
み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの
実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインはそれぞれ
、互いに独立して、配列番号３５若しくは３６又はその変異型のアミノ酸配列を含む。い
くつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（ＣＤ２７、ＣＤ
２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、又はＣＤ４０由来など）を含む
、少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、
ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインを含む安定化モジュール
を更に含み、第１及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化させる、互いの結合
親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ジスルフ
ィド結合によって連結される。いくつかの実施形態では、第１及び第２の安定化ドメイン
は、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体ドメイン、又はその変異型を含む。いくつか
の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε、及びζζからなる群から選択さ
れる少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することができる。いくつかの
実施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号５及び６の配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメイ
ンを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強
化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体
形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール間又はド
メイン間にスペーサモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュー
ルは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆ
ａｂ’）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、抗原結
合モジュールは、多重特異性（二重特異性など）である。
【0113】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲは、標的抗原に特異的に結合し
、ａ）配列番号５及び配列番号６のアミノ酸配列のうちの１つに由来する第１のＴＣＲ－
ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及び他のアミノ酸配列に由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む
第２のＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールと、を含み、Ｔ
ＣＲ－ＴＭの少なくとも１つは、それが由来するアミノ酸配列と比較して、１つ以上（２
、３、４、５、又はそれ以上など）のアミノ酸置換を含み、第１及び第２のＴＣＲＤは、
少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することのできるＴＣＲＭを形成し
、抗原結合モジュールは、第１及び／又は第２のＴＣＲＤに連結する。いくつかの実施形
態では、ＴＣＲ－ＴＭのそれぞれは、互いに独立して、それが由来するアミノ酸配列と比
較して、１つ以上（２、３、４、５、又はそれ以上など）のアミノ酸置換を含む。いくつ
かの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭはそれぞれ、互い
に独立して、それらが由来するアミノ酸配列と比較して、５個以下のアミノ酸置換を含む
。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのうちの少なくとも１つは、それが由来するア
ミノ酸配列と比較して、単一のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－
ＴＭのそれぞれは、それが由来するアミノ酸配列と比較して、単一のアミノ酸置換を含む
。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ中の置換アミノ酸のうちの少なくとも１
つは、ｃａＴＣＲにおいて、第２のＴＣＲ－ＴＭ中の置換アミノ酸のうちの少なくとも１
つと相互作用することができるように配置される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣ
ＲＤは、第１のＴＣＲ連結ペプチド又はその断片を更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤ
は、第２のＴＣＲ連結ペプチド又はその断片を更に含む。いくつかの実施形態では、第１
の連結ペプチド及び第２の連結ペプチドはそれぞれ、互いに独立して、配列番号２７～３
４又はその変異型のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１
及び第２の連結ペプチドは、ジスルフィド結合によって連結される。いくつかの実施形態
では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴ
ＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴ
ＣＲ細胞内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインはそれぞれ、互いに独立して、配列
番号３５若しくは３６又はその変異型のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、
ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ
１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、又はＣＤ４０由来など）を含む、少なくとも１つのアク
セサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安
定化ドメイン及び第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１及び第
２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化させる、互いの結合親和性を有する。いくつ
かの実施形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって連結さ
れる。いくつかの実施形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体
ドメインなどの抗体ドメイン、又はその変異型を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ
Ｍは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε、及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴ
ＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭ
は、配列番号５及び６の配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較
して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化することができる。い
くつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。いくつ
かの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール間又はドメイン間にスペーサモジ
ュールが存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、抗体部分である。
いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、又は
単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、多重特
異性（二重特異性など）である。
、ａ）配列番号５及び配列番号６のアミノ酸配列のうちの１つに由来する第１のＴＣＲ－
ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及び他のアミノ酸配列に由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む
第２のＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールと、を含み、Ｔ
ＣＲ－ＴＭの少なくとも１つは、それが由来するアミノ酸配列と比較して、１つ以上（２
、３、４、５、又はそれ以上など）のアミノ酸置換を含み、第１及び第２のＴＣＲＤは、
少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することのできるＴＣＲＭを形成し
、抗原結合モジュールは、第１及び／又は第２のＴＣＲＤに連結する。いくつかの実施形
態では、ＴＣＲ－ＴＭのそれぞれは、互いに独立して、それが由来するアミノ酸配列と比
較して、１つ以上（２、３、４、５、又はそれ以上など）のアミノ酸置換を含む。いくつ
かの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭはそれぞれ、互い
に独立して、それらが由来するアミノ酸配列と比較して、５個以下のアミノ酸置換を含む
。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのうちの少なくとも１つは、それが由来するア
ミノ酸配列と比較して、単一のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－
ＴＭのそれぞれは、それが由来するアミノ酸配列と比較して、単一のアミノ酸置換を含む
。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ中の置換アミノ酸のうちの少なくとも１
つは、ｃａＴＣＲにおいて、第２のＴＣＲ－ＴＭ中の置換アミノ酸のうちの少なくとも１
つと相互作用することができるように配置される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣ
ＲＤは、第１のＴＣＲ連結ペプチド又はその断片を更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤ
は、第２のＴＣＲ連結ペプチド又はその断片を更に含む。いくつかの実施形態では、第１
の連結ペプチド及び第２の連結ペプチドはそれぞれ、互いに独立して、配列番号２７～３
４又はその変異型のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１
及び第２の連結ペプチドは、ジスルフィド結合によって連結される。いくつかの実施形態
では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴ
ＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴ
ＣＲ細胞内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインはそれぞれ、互いに独立して、配列
番号３５若しくは３６又はその変異型のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、
ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ
１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、又はＣＤ４０由来など）を含む、少なくとも１つのアク
セサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安
定化ドメイン及び第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１及び第
２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化させる、互いの結合親和性を有する。いくつ
かの実施形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって連結さ
れる。いくつかの実施形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体
ドメインなどの抗体ドメイン、又はその変異型を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ
Ｍは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε、及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴ
ＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭ
は、配列番号５及び６の配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較
して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化することができる。い
くつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。いくつ
かの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール間又はドメイン間にスペーサモジ
ュールが存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、抗体部分である。
いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、又は
単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、多重特
異性（二重特異性など）である。
【0114】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲは、標的抗原に特異的に結合し
、ａ）配列番号５及び配列番号６のアミノ酸配列のうちの１つに由来する第１のＴＣＲ－
ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及び他のアミノ酸配列に由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む
第２のＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールと、を含み、Ｔ
ＣＲ－ＴＭの少なくとも１つは、配列番号７又は８由来の連続したアミノ酸の一部を含む
キメラ配列を含み、第１及び第２のＴＣＲＤは、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝
達分子を動員することのできるＴＣＲＭを形成し、抗原結合モジュールは、第１及び／又
は第２のＴＣＲＤに連結する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのそれぞれは、互
いに独立して、配列番号７又は８由来の連続するアミノ酸の一部を含むキメラ配列を含む
。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭはそれぞ
れ、互いに独立して、配列番号７又は８由来の約１０以下（約９、８、７、６、５、又は
それ以下など）の連続するアミノ酸の一部を含むキメラ配列を含む。いくつかの実施形態
では、第１又は第２のＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列は、配列番号７由来であり、他のＴＣ
Ｒ－ＴＭ中のキメラ配列は、配列番号８由来である。いくつかの実施形態では、第１のＴ
ＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列は、それが第２のＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列と相互作用する
ことができるように配置される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴ
ＣＲ連結ペプチド又はその断片を更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ
連結ペプチド又はその断片を更に含む。いくつかの実施形態では、第１の連結ペプチド及
び第２の連結ペプチドはそれぞれ、互いに独立して、配列番号２７～３４又はその変異型
のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１及び第２の連結ペ
プチドは、ジスルフィド結合によって連結される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣ
ＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２の
ＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイ
ン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインはそれぞれ、互いに独立して、配列番号３５若しくは
３６又はその変異型のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ
細胞共刺激シグナル伝達配列（ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４
０、ＣＤ３０、又はＣＤ４０由来など）を含む、少なくとも１つのアクセサリー細胞内ド
メインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメイン及び
第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安定化ドメイ
ンが、ｃａＴＣＲを安定化させる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実施形態では
、第１及び第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって連結される。いくつかの
実施形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗
体ドメイン、又はその変異型を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε
、ＣＤ３γε、及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル
伝達分子を動員することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号５及
び６の配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも
１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化することができる。いくつかの実施形態
では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。いくつかの実施形態では
、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール間又はドメイン間にスペーサモジュールが存在する
。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形
態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦ
ｖ）である。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、多重特異性（二重特異性
など）である。
、ａ）配列番号５及び配列番号６のアミノ酸配列のうちの１つに由来する第１のＴＣＲ－
ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及び他のアミノ酸配列に由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む
第２のＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールと、を含み、Ｔ
ＣＲ－ＴＭの少なくとも１つは、配列番号７又は８由来の連続したアミノ酸の一部を含む
キメラ配列を含み、第１及び第２のＴＣＲＤは、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝
達分子を動員することのできるＴＣＲＭを形成し、抗原結合モジュールは、第１及び／又
は第２のＴＣＲＤに連結する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのそれぞれは、互
いに独立して、配列番号７又は８由来の連続するアミノ酸の一部を含むキメラ配列を含む
。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭはそれぞ
れ、互いに独立して、配列番号７又は８由来の約１０以下（約９、８、７、６、５、又は
それ以下など）の連続するアミノ酸の一部を含むキメラ配列を含む。いくつかの実施形態
では、第１又は第２のＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列は、配列番号７由来であり、他のＴＣ
Ｒ－ＴＭ中のキメラ配列は、配列番号８由来である。いくつかの実施形態では、第１のＴ
ＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列は、それが第２のＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列と相互作用する
ことができるように配置される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴ
ＣＲ連結ペプチド又はその断片を更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ
連結ペプチド又はその断片を更に含む。いくつかの実施形態では、第１の連結ペプチド及
び第２の連結ペプチドはそれぞれ、互いに独立して、配列番号２７～３４又はその変異型
のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１及び第２の連結ペ
プチドは、ジスルフィド結合によって連結される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣ
ＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２の
ＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイ
ン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインはそれぞれ、互いに独立して、配列番号３５若しくは
３６又はその変異型のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ
細胞共刺激シグナル伝達配列（ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４
０、ＣＤ３０、又はＣＤ４０由来など）を含む、少なくとも１つのアクセサリー細胞内ド
メインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメイン及び
第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安定化ドメイ
ンが、ｃａＴＣＲを安定化させる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実施形態では
、第１及び第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって連結される。いくつかの
実施形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗
体ドメイン、又はその変異型を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε
、ＣＤ３γε、及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル
伝達分子を動員することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号５及
び６の配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも
１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化することができる。いくつかの実施形態
では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。いくつかの実施形態では
、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール間又はドメイン間にスペーサモジュールが存在する
。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形
態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦ
ｖ）である。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、多重特異性（二重特異性
など）である。
【0115】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲは、標的抗原に特異的に結合し
、ａ）配列番号７及び配列番号８のアミノ酸配列のうちの１つに由来する第１のＴＣＲ－
ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及び他のアミノ酸配列に由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む
第２のＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールと、を含み、第
１及び第２のＴＣＲＤは、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員すること
のできるＴＣＲＭを形成し、抗原結合モジュールは、第１及び／又は第２のＴＣＲＤに連
結する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭの両方が天然に存在する。いくつかの実
施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのうちの少なくとも１つは、天然に存在しない。いくつかの実
施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ連結ペプチド又はその断片を更に含み、及
び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ連結ペプチド又はその断片を更に含む。いくつ
かの実施形態では、第１の連結ペプチド及び第２の連結ペプチドはそれぞれ、互いに独立
して、配列番号２７～３４又はその変異型のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつ
かの実施形態では、第１及び第２の連結ペプチドは、ジスルフィド結合によって連結され
る。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含
み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの
実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインはそれぞれ
、互いに独立して、配列番号３５若しくは３６又はその変異型のアミノ酸配列を含む。い
くつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（ＣＤ２７、ＣＤ
２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、又はＣＤ４０由来など）を含む
、少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、
ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインを含む安定化モジュール
を更に含み、第１及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化させる、互いの結合
親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ジスルフ
ィド結合によって連結される。いくつかの実施形態では、第１及び第２の安定化ドメイン
は、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体ドメイン、又はその変異型を含む。いくつか
の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε、及びζζからなる群から選択さ
れる少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することができる。いくつかの
実施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号７及び８の配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメイ
ンを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強
化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体
形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール間又はド
メイン間にスペーサモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュー
ルは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆ
ａｂ’）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、抗原結
合モジュールは、多重特異性（二重特異性など）である。
、ａ）配列番号７及び配列番号８のアミノ酸配列のうちの１つに由来する第１のＴＣＲ－
ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及び他のアミノ酸配列に由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む
第２のＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールと、を含み、第
１及び第２のＴＣＲＤは、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員すること
のできるＴＣＲＭを形成し、抗原結合モジュールは、第１及び／又は第２のＴＣＲＤに連
結する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭの両方が天然に存在する。いくつかの実
施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのうちの少なくとも１つは、天然に存在しない。いくつかの実
施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ連結ペプチド又はその断片を更に含み、及
び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ連結ペプチド又はその断片を更に含む。いくつ
かの実施形態では、第１の連結ペプチド及び第２の連結ペプチドはそれぞれ、互いに独立
して、配列番号２７～３４又はその変異型のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつ
かの実施形態では、第１及び第２の連結ペプチドは、ジスルフィド結合によって連結され
る。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含
み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの
実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインはそれぞれ
、互いに独立して、配列番号３５若しくは３６又はその変異型のアミノ酸配列を含む。い
くつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（ＣＤ２７、ＣＤ
２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、又はＣＤ４０由来など）を含む
、少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、
ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインを含む安定化モジュール
を更に含み、第１及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化させる、互いの結合
親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ジスルフ
ィド結合によって連結される。いくつかの実施形態では、第１及び第２の安定化ドメイン
は、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体ドメイン、又はその変異型を含む。いくつか
の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε、及びζζからなる群から選択さ
れる少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することができる。いくつかの
実施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号７及び８の配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメイ
ンを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強
化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体
形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール間又はド
メイン間にスペーサモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュー
ルは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆ
ａｂ’）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、抗原結
合モジュールは、多重特異性（二重特異性など）である。
【0116】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲは、標的抗原に特異的に結合し
、ａ）配列番号７及び配列番号８のアミノ酸配列のうちの１つに由来する第１のＴＣＲ－
ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及び他のアミノ酸配列に由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む
第２のＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールと、を含み、Ｔ
ＣＲ－ＴＭの少なくとも１つは、それが由来するアミノ酸配列と比較して、１つ以上（２
、３、４、５、又はそれ以上など）のアミノ酸置換を含み、第１及び第２のＴＣＲＤは、
少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することのできるＴＣＲＭを形成し
、抗原結合モジュールは、第１及び／又は第２のＴＣＲＤに連結する。いくつかの実施形
態では、ＴＣＲ－ＴＭのそれぞれは、互いに独立して、それが由来するアミノ酸配列と比
較して、１つ以上（２、３、４、５、又はそれ以上など）のアミノ酸置換を含む。いくつ
かの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭはそれぞれ、互い
に独立して、それらが由来するアミノ酸配列と比較して、５個以下のアミノ酸置換を含む
。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのうちの少なくとも１つは、それが由来するア
ミノ酸配列と比較して、単一のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－
ＴＭのそれぞれは、それが由来するアミノ酸配列と比較して、単一のアミノ酸置換を含む
。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ中の置換アミノ酸のうちの少なくとも１
つは、ｃａＴＣＲにおいて、第２のＴＣＲ－ＴＭ中の置換アミノ酸のうちの少なくとも１
つと相互作用することができるように配置される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣ
ＲＤは、第１のＴＣＲ連結ペプチド又はその断片を更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤ
は、第２のＴＣＲ連結ペプチド又はその断片を更に含む。いくつかの実施形態では、第１
の連結ペプチド及び第２の連結ペプチドはそれぞれ、互いに独立して、配列番号２７～３
４又はその変異型のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１
及び第２の連結ペプチドは、ジスルフィド結合によって連結される。いくつかの実施形態
では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴ
ＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴ
ＣＲ細胞内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインはそれぞれ、互いに独立して、配列
番号３５若しくは３６又はその変異型のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、
ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ
１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、又はＣＤ４０由来など）を含む、少なくとも１つのアク
セサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安
定化ドメイン及び第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１及び第
２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化させる、互いの結合親和性を有する。いくつ
かの実施形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって連結さ
れる。いくつかの実施形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体
ドメインなどの抗体ドメイン、又はその変異型を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ
Ｍは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε、及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴ
ＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭ
は、配列番号７及び８の配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較
して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化することができる。い
くつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。いくつ
かの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール間又はドメイン間にスペーサモジ
ュールが存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、抗体部分である。
いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、又は
単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、多重特
異性（二重特異性など）である。
、ａ）配列番号７及び配列番号８のアミノ酸配列のうちの１つに由来する第１のＴＣＲ－
ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及び他のアミノ酸配列に由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む
第２のＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールと、を含み、Ｔ
ＣＲ－ＴＭの少なくとも１つは、それが由来するアミノ酸配列と比較して、１つ以上（２
、３、４、５、又はそれ以上など）のアミノ酸置換を含み、第１及び第２のＴＣＲＤは、
少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することのできるＴＣＲＭを形成し
、抗原結合モジュールは、第１及び／又は第２のＴＣＲＤに連結する。いくつかの実施形
態では、ＴＣＲ－ＴＭのそれぞれは、互いに独立して、それが由来するアミノ酸配列と比
較して、１つ以上（２、３、４、５、又はそれ以上など）のアミノ酸置換を含む。いくつ
かの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭはそれぞれ、互い
に独立して、それらが由来するアミノ酸配列と比較して、５個以下のアミノ酸置換を含む
。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのうちの少なくとも１つは、それが由来するア
ミノ酸配列と比較して、単一のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－
ＴＭのそれぞれは、それが由来するアミノ酸配列と比較して、単一のアミノ酸置換を含む
。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ中の置換アミノ酸のうちの少なくとも１
つは、ｃａＴＣＲにおいて、第２のＴＣＲ－ＴＭ中の置換アミノ酸のうちの少なくとも１
つと相互作用することができるように配置される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣ
ＲＤは、第１のＴＣＲ連結ペプチド又はその断片を更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤ
は、第２のＴＣＲ連結ペプチド又はその断片を更に含む。いくつかの実施形態では、第１
の連結ペプチド及び第２の連結ペプチドはそれぞれ、互いに独立して、配列番号２７～３
４又はその変異型のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１
及び第２の連結ペプチドは、ジスルフィド結合によって連結される。いくつかの実施形態
では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴ
ＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴ
ＣＲ細胞内ドメイン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインはそれぞれ、互いに独立して、配列
番号３５若しくは３６又はその変異型のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、
ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ
１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、又はＣＤ４０由来など）を含む、少なくとも１つのアク
セサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安
定化ドメイン及び第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１及び第
２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化させる、互いの結合親和性を有する。いくつ
かの実施形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって連結さ
れる。いくつかの実施形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体
ドメインなどの抗体ドメイン、又はその変異型を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ
Ｍは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε、及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴ
ＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭ
は、配列番号７及び８の配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較
して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化することができる。い
くつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。いくつ
かの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール間又はドメイン間にスペーサモジ
ュールが存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、抗体部分である。
いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、又は
単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、多重特
異性（二重特異性など）である。
【0117】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲは、標的抗原に特異的に結合し
、ａ）配列番号７及び配列番号８のアミノ酸配列のうちの１つに由来する第１のＴＣＲ－
ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及び他のアミノ酸配列に由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む
第２のＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールと、を含み、Ｔ
ＣＲ－ＴＭの少なくとも１つは、配列番号５又は６由来の連続したアミノ酸の一部を含む
キメラ配列を含み、第１及び第２のＴＣＲＤは、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝
達分子を動員することのできるＴＣＲＭを形成し、抗原結合モジュールは、第１及び／又
は第２のＴＣＲＤに連結する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのそれぞれは、互
いに独立して、配列番号５又は６由来の連続するアミノ酸の一部を含むキメラ配列を含む
。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭはそれぞ
れ、互いに独立して、配列番号５又は６由来の約１０以下（約９、８、７、６、５、又は
それ以下など）の連続するアミノ酸の一部を含むキメラ配列を含む。いくつかの実施形態
では、第１又は第２のＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列は、配列番号５由来であり、他のＴＣ
Ｒ－ＴＭ中のキメラ配列は、配列番号６由来である。いくつかの実施形態では、第１のＴ
ＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列は、それが第２のＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列と相互作用する
ことができるように配置される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴ
ＣＲ連結ペプチド又はその断片を更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ
連結ペプチド又はその断片を更に含む。いくつかの実施形態では、第１の連結ペプチド及
び第２の連結ペプチドはそれぞれ、互いに独立して、配列番号２７～３４又はその変異型
のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１及び第２の連結ペ
プチドは、ジスルフィド結合によって連結される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣ
ＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２の
ＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイ
ン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインはそれぞれ、互いに独立して、配列番号３５若しくは
３６又はその変異型のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ
細胞共刺激シグナル伝達配列（ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４
０、ＣＤ３０、又はＣＤ４０由来など）を含む、少なくとも１つのアクセサリー細胞内ド
メインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメイン及び
第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安定化ドメイ
ンが、ｃａＴＣＲを安定化させる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実施形態では
、第１及び第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって連結される。いくつかの
実施形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗
体ドメイン、又はその変異型を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε
、ＣＤ３γε、及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル
伝達分子を動員することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号７及
び８の配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも
１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化することができる。いくつかの実施形態
では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。いくつかの実施形態では
、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール間又はドメイン間にスペーサモジュールが存在する
。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形
態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦ
ｖ）である。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、多重特異性（二重特異性
など）である。
、ａ）配列番号７及び配列番号８のアミノ酸配列のうちの１つに由来する第１のＴＣＲ－
ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及び他のアミノ酸配列に由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む
第２のＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールと、を含み、Ｔ
ＣＲ－ＴＭの少なくとも１つは、配列番号５又は６由来の連続したアミノ酸の一部を含む
キメラ配列を含み、第１及び第２のＴＣＲＤは、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝
達分子を動員することのできるＴＣＲＭを形成し、抗原結合モジュールは、第１及び／又
は第２のＴＣＲＤに連結する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのそれぞれは、互
いに独立して、配列番号５又は６由来の連続するアミノ酸の一部を含むキメラ配列を含む
。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又は第２のＴＣＲ－ＴＭはそれぞ
れ、互いに独立して、配列番号５又は６由来の約１０以下（約９、８、７、６、５、又は
それ以下など）の連続するアミノ酸の一部を含むキメラ配列を含む。いくつかの実施形態
では、第１又は第２のＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列は、配列番号５由来であり、他のＴＣ
Ｒ－ＴＭ中のキメラ配列は、配列番号６由来である。いくつかの実施形態では、第１のＴ
ＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列は、それが第２のＴＣＲ－ＴＭ中のキメラ配列と相互作用する
ことができるように配置される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴ
ＣＲ連結ペプチド又はその断片を更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ
連結ペプチド又はその断片を更に含む。いくつかの実施形態では、第１の連結ペプチド及
び第２の連結ペプチドはそれぞれ、互いに独立して、配列番号２７～３４又はその変異型
のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１及び第２の連結ペ
プチドは、ジスルフィド結合によって連結される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣ
ＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２の
ＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメイ
ン及び第２のＴＣＲ細胞内ドメインはそれぞれ、互いに独立して、配列番号３５若しくは
３６又はその変異型のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ
細胞共刺激シグナル伝達配列（ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４
０、ＣＤ３０、又はＣＤ４０由来など）を含む、少なくとも１つのアクセサリー細胞内ド
メインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメイン及び
第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安定化ドメイ
ンが、ｃａＴＣＲを安定化させる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実施形態では
、第１及び第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって連結される。いくつかの
実施形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗
体ドメイン、又はその変異型を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε
、ＣＤ３γε、及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル
伝達分子を動員することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号７及
び８の配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも
１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化することができる。いくつかの実施形態
では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。いくつかの実施形態では
、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール間又はドメイン間にスペーサモジュールが存在する
。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形
態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦ
ｖ）である。いくつかの実施形態では、抗原結合モジュールは、多重特異性（二重特異性
など）である。
【0118】
異なる態様は、以下の様々なセクションで更に詳細に論じられる。
ＴＣＲ－ＴＭ変異型
ＴＣＲ－ＴＭ変異型
【0119】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲのＴＣＲ－ＴＭはＴ細胞受容体に由来し、ＴＣＲ
－ＴＭのうちの少なくとも１つは天然に存在しない。Ｔ細胞受容体に由来する天然に存在
しないＴＣＲ－ＴＭは、１つ以上のアミノ酸の置換によって改変されたＴ細胞受容体由来
の膜貫通ドメインを含む。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のうちの少なくとも１
つは、対応する非置換残基よりも疎水性の残基で置換される。いくつかの実施形態では、
置換アミノ酸のそれぞれは、対応する非置換残基よりも疎水性の残基で置換される。いく
つかの実施形態では、置換アミノ酸のうちの少なくとも１つは、結合ＣＤ３に含まれるＴ
ＣＲＭ中のアミノ酸に対して近位（一次配列中又は空間的のいずれか）にある。例えば、
いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のうちの少なくとも１つは、結合ＣＤ３に含まれ
るＴＣＲＭ中のアミノ酸から３個以下（０、１、２、又は３など）のアミノ酸で離れてい
る。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のうちの少なくとも１つは、結合ＣＤ３に含
まれるＴＣＲＭ中のアミノ酸から約１５Å以下（約１４、１２、１０、８、６、４、２Å
、又は１Åのいずれか以下など）で離れている。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸
のそれぞれは、結合ＣＤ３に含まれるＴＣＲＭ中のアミノ酸の近位にある。
－ＴＭのうちの少なくとも１つは天然に存在しない。Ｔ細胞受容体に由来する天然に存在
しないＴＣＲ－ＴＭは、１つ以上のアミノ酸の置換によって改変されたＴ細胞受容体由来
の膜貫通ドメインを含む。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のうちの少なくとも１
つは、対応する非置換残基よりも疎水性の残基で置換される。いくつかの実施形態では、
置換アミノ酸のそれぞれは、対応する非置換残基よりも疎水性の残基で置換される。いく
つかの実施形態では、置換アミノ酸のうちの少なくとも１つは、結合ＣＤ３に含まれるＴ
ＣＲＭ中のアミノ酸に対して近位（一次配列中又は空間的のいずれか）にある。例えば、
いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のうちの少なくとも１つは、結合ＣＤ３に含まれ
るＴＣＲＭ中のアミノ酸から３個以下（０、１、２、又は３など）のアミノ酸で離れてい
る。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のうちの少なくとも１つは、結合ＣＤ３に含
まれるＴＣＲＭ中のアミノ酸から約１５Å以下（約１４、１２、１０、８、６、４、２Å
、又は１Åのいずれか以下など）で離れている。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸
のそれぞれは、結合ＣＤ３に含まれるＴＣＲＭ中のアミノ酸の近位にある。
【0120】
例えば、いくつかの実施形態では、Ｔ細胞受容体に由来する天然に存在しないＴＣＲ－
ＴＭは、１つ以上のアミノ酸残基の置換によって改変されたα、β、γ、又はδ ＴＣＲ
サブユニットの膜貫通ドメインを含むか、それから本質的になるか、又はそれからなる。
いくつかの実施形態では、ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、５個以下のアミノ酸
残基の置換によって改変される。いくつかの実施形態では、ＴＣＲサブユニットの膜貫通
ドメインは、単一のアミノ酸残基の置換によって改変される。いくつかの実施形態では、
置換アミノ酸のうちの少なくとも１つは、対応する非置換残基よりも疎水性の残基で置換
される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のそれぞれは、対応する非置換残基より
も疎水性の残基で置換される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のうちの少なくと
も１つは、結合ＣＤ３に含まれるＴＣＲＭ中のアミノ酸の近位にある。いくつかの実施形
態では、置換アミノ酸のそれぞれは、結合ＣＤ３に含まれるＴＣＲＭ中のアミノ酸の近位
にある。
ＴＭは、１つ以上のアミノ酸残基の置換によって改変されたα、β、γ、又はδ ＴＣＲ
サブユニットの膜貫通ドメインを含むか、それから本質的になるか、又はそれからなる。
いくつかの実施形態では、ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、５個以下のアミノ酸
残基の置換によって改変される。いくつかの実施形態では、ＴＣＲサブユニットの膜貫通
ドメインは、単一のアミノ酸残基の置換によって改変される。いくつかの実施形態では、
置換アミノ酸のうちの少なくとも１つは、対応する非置換残基よりも疎水性の残基で置換
される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のそれぞれは、対応する非置換残基より
も疎水性の残基で置換される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のうちの少なくと
も１つは、結合ＣＤ３に含まれるＴＣＲＭ中のアミノ酸の近位にある。いくつかの実施形
態では、置換アミノ酸のそれぞれは、結合ＣＤ３に含まれるＴＣＲＭ中のアミノ酸の近位
にある。
【0121】
したがって、いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＴ細胞受容体に由来する天然
に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、１つ以上のアミノ酸残基の置換によって改変された、配列
番号１に含まれる膜貫通ドメイン（例えば、配列番号５）のアミノ酸配列を含むα ＴＣ
Ｒサブユニットの膜貫通ドメインを含むか、それから本質的になるか、又はそれからなる
。いくつかの実施形態では、α ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、配列番号１に
含まれる膜貫通ドメインの５個以下のアミノ酸残基の置換によって改変される。いくつか
の実施形態では、α ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、配列番号１に含まれる膜
貫通ドメインの単一のアミノ酸残基の置換によって改変される。いくつかの実施形態では
、置換アミノ酸のうちの少なくとも１つは、対応する非置換残基よりも疎水性の残基で置
換される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のそれぞれは、対応する非置換残基よ
りも疎水性の残基で置換される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のうちの少なく
とも１つは、結合ＣＤ３に含まれるＴＣＲＭ中のアミノ酸の近位にある。いくつかの実施
形態では、置換アミノ酸のそれぞれは、結合ＣＤ３に含まれるＴＣＲＭ中のアミノ酸の近
位にある。
に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、１つ以上のアミノ酸残基の置換によって改変された、配列
番号１に含まれる膜貫通ドメイン（例えば、配列番号５）のアミノ酸配列を含むα ＴＣ
Ｒサブユニットの膜貫通ドメインを含むか、それから本質的になるか、又はそれからなる
。いくつかの実施形態では、α ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、配列番号１に
含まれる膜貫通ドメインの５個以下のアミノ酸残基の置換によって改変される。いくつか
の実施形態では、α ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、配列番号１に含まれる膜
貫通ドメインの単一のアミノ酸残基の置換によって改変される。いくつかの実施形態では
、置換アミノ酸のうちの少なくとも１つは、対応する非置換残基よりも疎水性の残基で置
換される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のそれぞれは、対応する非置換残基よ
りも疎水性の残基で置換される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のうちの少なく
とも１つは、結合ＣＤ３に含まれるＴＣＲＭ中のアミノ酸の近位にある。いくつかの実施
形態では、置換アミノ酸のそれぞれは、結合ＣＤ３に含まれるＴＣＲＭ中のアミノ酸の近
位にある。
【0122】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＴ細胞受容体に由来する天然に存在しない
ＴＣＲ－ＴＭは、１つ以上のアミノ酸残基の置換によって改変された、配列番号５のアミ
ノ酸配列を含むα ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含むか、それから本質的にな
るか、又はそれからなる。いくつかの実施形態では、α ＴＣＲサブユニットの膜貫通ド
メインは、配列番号５中の５個以下のアミノ酸残基の置換によって改変される。いくつか
の実施形態では、α ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、配列番号５中の単一のア
ミノ酸残基の置換によって改変される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のうちの
少なくとも１つは、対応する非置換残基よりも疎水性の残基で置換される。いくつかの実
施形態では、置換アミノ酸のそれぞれは、対応する非置換残基よりも疎水性の残基で置換
される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のうちの少なくとも１つは、結合ＣＤ３
に含まれるＴＣＲＭ中のアミノ酸の近位にある。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸
のそれぞれは、結合ＣＤ３に含まれるＴＣＲＭ中のアミノ酸の近位にある。
ＴＣＲ－ＴＭは、１つ以上のアミノ酸残基の置換によって改変された、配列番号５のアミ
ノ酸配列を含むα ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含むか、それから本質的にな
るか、又はそれからなる。いくつかの実施形態では、α ＴＣＲサブユニットの膜貫通ド
メインは、配列番号５中の５個以下のアミノ酸残基の置換によって改変される。いくつか
の実施形態では、α ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、配列番号５中の単一のア
ミノ酸残基の置換によって改変される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のうちの
少なくとも１つは、対応する非置換残基よりも疎水性の残基で置換される。いくつかの実
施形態では、置換アミノ酸のそれぞれは、対応する非置換残基よりも疎水性の残基で置換
される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のうちの少なくとも１つは、結合ＣＤ３
に含まれるＴＣＲＭ中のアミノ酸の近位にある。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸
のそれぞれは、結合ＣＤ３に含まれるＴＣＲＭ中のアミノ酸の近位にある。
【0123】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＴ細胞受容体に由来する天然に存在しない
ＴＣＲ－ＴＭは、１つ以上のアミノ酸残基の置換によって改変された、配列番号２に含ま
れる膜貫通ドメイン（例えば、配列番号６）のアミノ酸配列を含むβ ＴＣＲサブユニッ
トの膜貫通ドメインを含むか、それから本質的になるか、又はそれからなる。いくつかの
実施形態では、β ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、配列番号２に含まれる膜貫
通ドメインの５個以下のアミノ酸残基の置換によって改変される。いくつかの実施形態で
は、β ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、配列番号２に含まれる膜貫通ドメイン
の単一のアミノ酸残基の置換によって改変される。いくつかの実施形態では、置換アミノ
酸のうちの少なくとも１つは、対応する非置換残基よりも疎水性の残基で置換される。い
くつかの実施形態では、置換アミノ酸のそれぞれは、対応する非置換残基よりも疎水性の
残基で置換される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のうちの少なくとも１つは、
結合ＣＤ３に含まれるＴＣＲＭ中のアミノ酸の近位にある。いくつかの実施形態では、置
換アミノ酸のそれぞれは、結合ＣＤ３に含まれるＴＣＲＭ中のアミノ酸の近位にある。
ＴＣＲ－ＴＭは、１つ以上のアミノ酸残基の置換によって改変された、配列番号２に含ま
れる膜貫通ドメイン（例えば、配列番号６）のアミノ酸配列を含むβ ＴＣＲサブユニッ
トの膜貫通ドメインを含むか、それから本質的になるか、又はそれからなる。いくつかの
実施形態では、β ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、配列番号２に含まれる膜貫
通ドメインの５個以下のアミノ酸残基の置換によって改変される。いくつかの実施形態で
は、β ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、配列番号２に含まれる膜貫通ドメイン
の単一のアミノ酸残基の置換によって改変される。いくつかの実施形態では、置換アミノ
酸のうちの少なくとも１つは、対応する非置換残基よりも疎水性の残基で置換される。い
くつかの実施形態では、置換アミノ酸のそれぞれは、対応する非置換残基よりも疎水性の
残基で置換される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のうちの少なくとも１つは、
結合ＣＤ３に含まれるＴＣＲＭ中のアミノ酸の近位にある。いくつかの実施形態では、置
換アミノ酸のそれぞれは、結合ＣＤ３に含まれるＴＣＲＭ中のアミノ酸の近位にある。
【0124】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＴ細胞受容体に由来する天然に存在しない
ＴＣＲ－ＴＭは、１つ以上のアミノ酸残基の置換によって改変された、配列番号６のアミ
ノ酸配列を含むβ ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含むか、それから本質的にな
るか、又はそれからなる。いくつかの実施形態では、β ＴＣＲサブユニットの膜貫通ド
メインは、配列番号６中の５個以下のアミノ酸残基の置換によって改変される。いくつか
の実施形態では、β ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、配列番号６中の単一のア
ミノ酸残基の置換によって改変される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のうちの
少なくとも１つは、対応する非置換残基よりも疎水性の残基で置換される。いくつかの実
施形態では、置換アミノ酸のそれぞれは、対応する非置換残基よりも疎水性の残基で置換
される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のうちの少なくとも１つは、結合ＣＤ３
に含まれるＴＣＲＭ中のアミノ酸の近位にある。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸
のそれぞれは、結合ＣＤ３に含まれるＴＣＲＭ中のアミノ酸の近位にある。
ＴＣＲ－ＴＭは、１つ以上のアミノ酸残基の置換によって改変された、配列番号６のアミ
ノ酸配列を含むβ ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含むか、それから本質的にな
るか、又はそれからなる。いくつかの実施形態では、β ＴＣＲサブユニットの膜貫通ド
メインは、配列番号６中の５個以下のアミノ酸残基の置換によって改変される。いくつか
の実施形態では、β ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、配列番号６中の単一のア
ミノ酸残基の置換によって改変される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のうちの
少なくとも１つは、対応する非置換残基よりも疎水性の残基で置換される。いくつかの実
施形態では、置換アミノ酸のそれぞれは、対応する非置換残基よりも疎水性の残基で置換
される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のうちの少なくとも１つは、結合ＣＤ３
に含まれるＴＣＲＭ中のアミノ酸の近位にある。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸
のそれぞれは、結合ＣＤ３に含まれるＴＣＲＭ中のアミノ酸の近位にある。
【0125】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＴ細胞受容体に由来する天然に存在しない
ＴＣＲ－ＴＭは、１つ以上のアミノ酸残基の置換によって改変された、配列番号３に含ま
れる膜貫通ドメイン（例えば、配列番号７）のアミノ酸配列を含むδ ＴＣＲサブユニッ
トの膜貫通ドメインを含むか、それから本質的になるか、又はそれからなる。いくつかの
実施形態では、δ ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、配列番号３に含まれる膜貫
通ドメインの５個以下のアミノ酸残基の置換によって改変される。いくつかの実施形態で
は、δ ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、配列番号３に含まれる膜貫通ドメイン
の単一のアミノ酸残基の置換によって改変される。いくつかの実施形態では、置換アミノ
酸のうちの少なくとも１つは、対応する非置換残基よりも疎水性の残基で置換される。い
くつかの実施形態では、置換アミノ酸のそれぞれは、対応する非置換残基よりも疎水性の
残基で置換される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のうちの少なくとも１つは、
結合ＣＤ３に含まれるＴＣＲＭ中のアミノ酸の近位にある。いくつかの実施形態では、置
換アミノ酸のそれぞれは、結合ＣＤ３に含まれるＴＣＲＭ中のアミノ酸の近位にある。
ＴＣＲ－ＴＭは、１つ以上のアミノ酸残基の置換によって改変された、配列番号３に含ま
れる膜貫通ドメイン（例えば、配列番号７）のアミノ酸配列を含むδ ＴＣＲサブユニッ
トの膜貫通ドメインを含むか、それから本質的になるか、又はそれからなる。いくつかの
実施形態では、δ ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、配列番号３に含まれる膜貫
通ドメインの５個以下のアミノ酸残基の置換によって改変される。いくつかの実施形態で
は、δ ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、配列番号３に含まれる膜貫通ドメイン
の単一のアミノ酸残基の置換によって改変される。いくつかの実施形態では、置換アミノ
酸のうちの少なくとも１つは、対応する非置換残基よりも疎水性の残基で置換される。い
くつかの実施形態では、置換アミノ酸のそれぞれは、対応する非置換残基よりも疎水性の
残基で置換される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のうちの少なくとも１つは、
結合ＣＤ３に含まれるＴＣＲＭ中のアミノ酸の近位にある。いくつかの実施形態では、置
換アミノ酸のそれぞれは、結合ＣＤ３に含まれるＴＣＲＭ中のアミノ酸の近位にある。
【0126】
いくつかの実施形態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号３に含まれる膜
貫通ドメイン（例えば、配列番号７）のアミノ酸配列を含み、配列番号７中の以下のアミ
ノ酸、Ｌ４、Ｍ６、Ｖ１２、Ｎ１５、Ｆ２４５、及びＬ２５に対応するアミノ酸における
１つ以上の置換（より疎水性の残基による置換など）によって改変される。いくつかの実
施形態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号３に含まれる膜貫通ドメインの
アミノ酸配列を含み、配列番号７中のＶ１２及びＮ１５に対応するアミノ酸における置換
（より疎水性の残基による置換など）によって改変される。いくつかの実施形態では、天
然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号３に含まれる膜貫通ドメインのアミノ酸配列を
含み、配列番号７中の以下の置換、Ｌ４Ｃ、Ｍ６Ｖ、Ｖ１２Ｆ、Ｎ１５Ｓ、Ｆ２４５Ｓ、
及びＬ２５Ｓに対応する１つ以上の置換によって改変される。いくつかの実施形態では、
天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号３に含まれる膜貫通ドメインのアミノ酸配列
を含み、配列番号７中のＶ１２Ｆ及びＮ１５Ｓの置換に対応する置換によって改変される
。いくつかの実施形態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号９～１３のいず
れか１つのアミノ酸配列を含む。
貫通ドメイン（例えば、配列番号７）のアミノ酸配列を含み、配列番号７中の以下のアミ
ノ酸、Ｌ４、Ｍ６、Ｖ１２、Ｎ１５、Ｆ２４５、及びＬ２５に対応するアミノ酸における
１つ以上の置換（より疎水性の残基による置換など）によって改変される。いくつかの実
施形態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号３に含まれる膜貫通ドメインの
アミノ酸配列を含み、配列番号７中のＶ１２及びＮ１５に対応するアミノ酸における置換
（より疎水性の残基による置換など）によって改変される。いくつかの実施形態では、天
然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号３に含まれる膜貫通ドメインのアミノ酸配列を
含み、配列番号７中の以下の置換、Ｌ４Ｃ、Ｍ６Ｖ、Ｖ１２Ｆ、Ｎ１５Ｓ、Ｆ２４５Ｓ、
及びＬ２５Ｓに対応する１つ以上の置換によって改変される。いくつかの実施形態では、
天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号３に含まれる膜貫通ドメインのアミノ酸配列
を含み、配列番号７中のＶ１２Ｆ及びＮ１５Ｓの置換に対応する置換によって改変される
。いくつかの実施形態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号９～１３のいず
れか１つのアミノ酸配列を含む。
【0127】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＴ細胞受容体に由来する天然に存在しない
ＴＣＲ－ＴＭは、１つ以上のアミノ酸残基の置換によって改変された、配列番号７のアミ
ノ酸配列を含むδ ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含むか、それから本質的にな
るか、又はそれからなる。いくつかの実施形態では、δ ＴＣＲサブユニットの膜貫通ド
メインは、配列番号７中の５個以下のアミノ酸残基の置換によって改変される。いくつか
の実施形態では、δ ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、配列番号７中の単一のア
ミノ酸残基の置換によって改変される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のうちの
少なくとも１つは、対応する非置換残基よりも疎水性の残基で置換される。いくつかの実
施形態では、置換アミノ酸のそれぞれは、対応する非置換残基よりも疎水性の残基で置換
される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のうちの少なくとも１つは、結合ＣＤ３
に含まれるＴＣＲＭ中のアミノ酸の近位にある。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸
のそれぞれは、結合ＣＤ３に含まれるＴＣＲＭ中のアミノ酸の近位にある。
ＴＣＲ－ＴＭは、１つ以上のアミノ酸残基の置換によって改変された、配列番号７のアミ
ノ酸配列を含むδ ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含むか、それから本質的にな
るか、又はそれからなる。いくつかの実施形態では、δ ＴＣＲサブユニットの膜貫通ド
メインは、配列番号７中の５個以下のアミノ酸残基の置換によって改変される。いくつか
の実施形態では、δ ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、配列番号７中の単一のア
ミノ酸残基の置換によって改変される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のうちの
少なくとも１つは、対応する非置換残基よりも疎水性の残基で置換される。いくつかの実
施形態では、置換アミノ酸のそれぞれは、対応する非置換残基よりも疎水性の残基で置換
される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のうちの少なくとも１つは、結合ＣＤ３
に含まれるＴＣＲＭ中のアミノ酸の近位にある。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸
のそれぞれは、結合ＣＤ３に含まれるＴＣＲＭ中のアミノ酸の近位にある。
【0128】
いくつかの実施形態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号７のアミノ酸配
列を含み、配列番号７中の以下のアミノ酸、Ｌ４、Ｍ６、Ｖ１２、Ｎ１５、Ｆ２４５、及
びＬ２５に対応するアミノ酸における１つ以上の置換（より疎水性の残基による置換など
）によって改変される。いくつかの実施形態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配
列番号７のアミノ酸配列を含み、配列番号７のアミノ酸、Ｖ１２及びＮ１５に対応するア
ミノ酸における置換（より疎水性の残基による置換など）によって改変される。いくつか
の実施形態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号７のアミノ酸配列を含み、
配列番号７中の以下の置換、Ｌ４Ｃ、Ｍ６Ｖ、Ｖ１２Ｆ、Ｎ１５Ｓ、Ｆ２４５Ｓ、及びＬ
２５Ｓに対応する１つ以上の置換によって改変される。いくつかの実施形態では、天然に
存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号７のアミノ酸配列を含み、配列番号７中のＶ１２Ｆ
及びＮ１５Ｓの置換に対応する置換によって改変される。いくつかの実施形態では、天然
に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号９～１３のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。
列を含み、配列番号７中の以下のアミノ酸、Ｌ４、Ｍ６、Ｖ１２、Ｎ１５、Ｆ２４５、及
びＬ２５に対応するアミノ酸における１つ以上の置換（より疎水性の残基による置換など
）によって改変される。いくつかの実施形態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配
列番号７のアミノ酸配列を含み、配列番号７のアミノ酸、Ｖ１２及びＮ１５に対応するア
ミノ酸における置換（より疎水性の残基による置換など）によって改変される。いくつか
の実施形態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号７のアミノ酸配列を含み、
配列番号７中の以下の置換、Ｌ４Ｃ、Ｍ６Ｖ、Ｖ１２Ｆ、Ｎ１５Ｓ、Ｆ２４５Ｓ、及びＬ
２５Ｓに対応する１つ以上の置換によって改変される。いくつかの実施形態では、天然に
存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号７のアミノ酸配列を含み、配列番号７中のＶ１２Ｆ
及びＮ１５Ｓの置換に対応する置換によって改変される。いくつかの実施形態では、天然
に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号９～１３のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。
【0129】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＴ細胞受容体に由来する天然に存在しない
ＴＣＲ－ＴＭは、１つ以上のアミノ酸残基の置換によって改変された、配列番号４に含ま
れる膜貫通ドメイン（例えば、配列番号８）のアミノ酸配列を含むγ ＴＣＲサブユニッ
トの膜貫通ドメインを含むか、それから本質的になるか、又はそれからなる。いくつかの
実施形態では、γ ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、配列番号４に含まれる膜貫
通ドメインの５個以下のアミノ酸残基の置換によって改変される。いくつかの実施形態で
は、γ ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、配列番号４に含まれる膜貫通ドメイン
の単一のアミノ酸残基の置換によって改変される。いくつかの実施形態では、置換アミノ
酸のうちの少なくとも１つは、対応する非置換残基よりも疎水性の残基で置換される。い
くつかの実施形態では、置換アミノ酸のそれぞれは、対応する非置換残基よりも疎水性の
残基で置換される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のうちの少なくとも１つは、
結合ＣＤ３に含まれるＴＣＲＭ中のアミノ酸の近位にある。いくつかの実施形態では、置
換アミノ酸のそれぞれは、結合ＣＤ３に含まれるＴＣＲＭ中のアミノ酸の近位にある。
ＴＣＲ－ＴＭは、１つ以上のアミノ酸残基の置換によって改変された、配列番号４に含ま
れる膜貫通ドメイン（例えば、配列番号８）のアミノ酸配列を含むγ ＴＣＲサブユニッ
トの膜貫通ドメインを含むか、それから本質的になるか、又はそれからなる。いくつかの
実施形態では、γ ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、配列番号４に含まれる膜貫
通ドメインの５個以下のアミノ酸残基の置換によって改変される。いくつかの実施形態で
は、γ ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、配列番号４に含まれる膜貫通ドメイン
の単一のアミノ酸残基の置換によって改変される。いくつかの実施形態では、置換アミノ
酸のうちの少なくとも１つは、対応する非置換残基よりも疎水性の残基で置換される。い
くつかの実施形態では、置換アミノ酸のそれぞれは、対応する非置換残基よりも疎水性の
残基で置換される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のうちの少なくとも１つは、
結合ＣＤ３に含まれるＴＣＲＭ中のアミノ酸の近位にある。いくつかの実施形態では、置
換アミノ酸のそれぞれは、結合ＣＤ３に含まれるＴＣＲＭ中のアミノ酸の近位にある。
【0130】
いくつかの実施形態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号４に含まれる膜
貫通ドメイン（例えば、配列番号８）のアミノ酸配列を含み、配列番号８中の以下のアミ
ノ酸、Ｙ１、Ｙ２、Ｍ３、Ｌ５、Ｌ８、Ｖ１２、Ｖ１３、Ｆ１５、Ａ１６、Ｉ１８、Ｃ１
９、Ｃ２０、及びＣ２１に対応するアミノ酸における１つ以上の置換（より疎水性の残基
による置換など）によって改変される。いくつかの実施形態では、天然に存在しないＴＣ
Ｒ－ＴＭは、配列番号４に含まれる膜貫通ドメインのアミノ酸配列を含み、配列番号８の
アミノ酸、Ｙ２、Ｍ３、Ａ１６、及びＩ１８に対応するアミノ酸における置換（より疎水
性の残基による置換など）によって改変される。いくつかの実施形態では、天然に存在し
ないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号４に含まれる膜貫通ドメインのアミノ酸配列を含み、配列
番号８中の、Ｌ８、Ｖ１２、及びＦ１５に対応するアミノ酸における置換（より疎水性の
残基による置換など）によって改変される。いくつかの実施形態では、天然に存在しない
ＴＣＲ－ＴＭは、配列番号４に含まれる膜貫通ドメインのアミノ酸配列を含み、配列番号
８中の以下の置換、Ｙ１Ｑ、Ｙ２Ｌ、Ｙ２Ｉ、Ｍ３Ｖ、Ｍ３Ｉ、Ｌ５Ｃ、Ｌ８Ｆ、Ｖ１２
Ｆ、Ｖ１３Ｙ、Ｆ１５Ｓ、Ａ１６Ｖ、Ａ１６Ｉ、Ｉ１８Ｖ、Ｉ１８Ｌ、Ｃ１９Ｍ、Ｃ２０
Ｍ、及びＣ２１Ｇに対応する１つ以上の置換によって改変される。いくつかの実施形態で
は、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号４に含まれる膜貫通ドメインのアミノ酸
配列を含み、配列番号８のＹ２Ｌ、Ｍ３Ｖ、Ａ１６Ｖ、及びＩ１８Ｖの置換に対応する置
換によって改変される。いくつかの実施形態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配
列番号４に含まれる膜貫通ドメインのアミノ酸配列を含み、配列番号８のＹ２Ｉ、Ｍ３Ｉ
、Ａ１６Ｉ、及びＩ１８Ｌの置換に対応する置換によって改変される。いくつかの実施形
態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号４に含まれる膜貫通ドメインのアミ
ノ酸配列を含み、配列番号８のＬ８Ｆ、Ｖ１２Ｆ、及びＦ１５Ｓの置換に対応する置換に
よって改変される。いくつかの実施形態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番
号１４～２６のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。
貫通ドメイン（例えば、配列番号８）のアミノ酸配列を含み、配列番号８中の以下のアミ
ノ酸、Ｙ１、Ｙ２、Ｍ３、Ｌ５、Ｌ８、Ｖ１２、Ｖ１３、Ｆ１５、Ａ１６、Ｉ１８、Ｃ１
９、Ｃ２０、及びＣ２１に対応するアミノ酸における１つ以上の置換（より疎水性の残基
による置換など）によって改変される。いくつかの実施形態では、天然に存在しないＴＣ
Ｒ－ＴＭは、配列番号４に含まれる膜貫通ドメインのアミノ酸配列を含み、配列番号８の
アミノ酸、Ｙ２、Ｍ３、Ａ１６、及びＩ１８に対応するアミノ酸における置換（より疎水
性の残基による置換など）によって改変される。いくつかの実施形態では、天然に存在し
ないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号４に含まれる膜貫通ドメインのアミノ酸配列を含み、配列
番号８中の、Ｌ８、Ｖ１２、及びＦ１５に対応するアミノ酸における置換（より疎水性の
残基による置換など）によって改変される。いくつかの実施形態では、天然に存在しない
ＴＣＲ－ＴＭは、配列番号４に含まれる膜貫通ドメインのアミノ酸配列を含み、配列番号
８中の以下の置換、Ｙ１Ｑ、Ｙ２Ｌ、Ｙ２Ｉ、Ｍ３Ｖ、Ｍ３Ｉ、Ｌ５Ｃ、Ｌ８Ｆ、Ｖ１２
Ｆ、Ｖ１３Ｙ、Ｆ１５Ｓ、Ａ１６Ｖ、Ａ１６Ｉ、Ｉ１８Ｖ、Ｉ１８Ｌ、Ｃ１９Ｍ、Ｃ２０
Ｍ、及びＣ２１Ｇに対応する１つ以上の置換によって改変される。いくつかの実施形態で
は、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号４に含まれる膜貫通ドメインのアミノ酸
配列を含み、配列番号８のＹ２Ｌ、Ｍ３Ｖ、Ａ１６Ｖ、及びＩ１８Ｖの置換に対応する置
換によって改変される。いくつかの実施形態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配
列番号４に含まれる膜貫通ドメインのアミノ酸配列を含み、配列番号８のＹ２Ｉ、Ｍ３Ｉ
、Ａ１６Ｉ、及びＩ１８Ｌの置換に対応する置換によって改変される。いくつかの実施形
態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号４に含まれる膜貫通ドメインのアミ
ノ酸配列を含み、配列番号８のＬ８Ｆ、Ｖ１２Ｆ、及びＦ１５Ｓの置換に対応する置換に
よって改変される。いくつかの実施形態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番
号１４～２６のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。
【0131】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＴ細胞受容体に由来する天然に存在しない
ＴＣＲ－ＴＭは、１つ以上のアミノ酸残基の置換によって改変された、配列番号８のアミ
ノ酸配列を含むγ ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含むか、それから本質的にな
るか、又はそれからなる。いくつかの実施形態では、γ ＴＣＲサブユニットの膜貫通ド
メインは、配列番号８中の５個以下のアミノ酸残基の置換によって改変される。いくつか
の実施形態では、γ ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、配列番号８中の単一のア
ミノ酸残基の置換によって改変される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のうちの
少なくとも１つは、対応する非置換残基よりも疎水性の残基で置換される。いくつかの実
施形態では、置換アミノ酸のそれぞれは、対応する非置換残基よりも疎水性の残基で置換
される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のうちの少なくとも１つは、結合ＣＤ３
に含まれるＴＣＲＭ中のアミノ酸の近位にある。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸
のそれぞれは、結合ＣＤ３に含まれるＴＣＲＭ中のアミノ酸の近位にある。
ＴＣＲ－ＴＭは、１つ以上のアミノ酸残基の置換によって改変された、配列番号８のアミ
ノ酸配列を含むγ ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含むか、それから本質的にな
るか、又はそれからなる。いくつかの実施形態では、γ ＴＣＲサブユニットの膜貫通ド
メインは、配列番号８中の５個以下のアミノ酸残基の置換によって改変される。いくつか
の実施形態では、γ ＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインは、配列番号８中の単一のア
ミノ酸残基の置換によって改変される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のうちの
少なくとも１つは、対応する非置換残基よりも疎水性の残基で置換される。いくつかの実
施形態では、置換アミノ酸のそれぞれは、対応する非置換残基よりも疎水性の残基で置換
される。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸のうちの少なくとも１つは、結合ＣＤ３
に含まれるＴＣＲＭ中のアミノ酸の近位にある。いくつかの実施形態では、置換アミノ酸
のそれぞれは、結合ＣＤ３に含まれるＴＣＲＭ中のアミノ酸の近位にある。
【0132】
いくつかの実施形態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号８のアミノ酸配
列を含み、配列番号８中の以下のアミノ酸、Ｙ１、Ｙ２、Ｍ３、Ｌ５、Ｌ８、Ｖ１２、Ｖ
１３、Ｆ１５、Ａ１６、Ｉ１８、Ｃ１９、Ｃ２０、及びＣ２１に対応するアミノ酸におけ
る１つ以上の置換（より疎水性の残基による置換など）によって改変される。いくつかの
実施形態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号８のアミノ酸配列を含み、配
列番号８中の、Ｙ２、Ｍ３、Ａ１６、及びＩ１８に対応するアミノ酸における置換（より
疎水性の残基による置換など）によって改変される。いくつかの実施形態では、天然に存
在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号８のアミノ酸配列を含み、配列番号８中の、Ｌ８、Ｖ
１２、及びＦ１５に対応するアミノ酸における置換（より疎水性の残基による置換など）
によって改変される。いくつかの実施形態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列
番号８のアミノ酸配列を含み、配列番号８中の以下の置換、Ｙ１Ｑ、Ｙ２Ｌ、Ｙ２Ｉ、Ｍ
３Ｖ、Ｍ３Ｉ、Ｌ５Ｃ、Ｌ８Ｆ、Ｖ１２Ｆ、Ｖ１３Ｙ、Ｆ１５Ｓ、Ａ１６Ｖ、Ａ１６Ｉ、
Ｉ１８Ｖ、Ｉ１８Ｌ、Ｃ１９Ｍ、Ｃ２０Ｍ、及びＣ２１Ｇに対応する１つ以上の置換によ
って改変される。いくつかの実施形態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号
８のアミノ酸配列を含み、配列番号８中の、Ｙ２Ｌ、Ｍ３Ｖ、Ａ１６Ｖ、及びＩ１８Ｖの
置換に対応する置換によって改変される。いくつかの実施形態では、天然に存在しないＴ
ＣＲ－ＴＭは、配列番号８のアミノ酸配列を含み、配列番号８中の、Ｙ２Ｉ、Ｍ３Ｉ、Ａ
１６Ｉ、及びＩ１８Ｌの置換に対応する置換によって改変される。いくつかの実施形態で
は、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号８のアミノ酸配列を含み、配列番号８中
の、Ｌ８Ｆ、Ｖ１２Ｆ、及びＦ１５Ｓの置換に対応する置換によって改変される。いくつ
かの実施形態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号１４～２６のいずれか１
つのアミノ酸配列を含む。
列を含み、配列番号８中の以下のアミノ酸、Ｙ１、Ｙ２、Ｍ３、Ｌ５、Ｌ８、Ｖ１２、Ｖ
１３、Ｆ１５、Ａ１６、Ｉ１８、Ｃ１９、Ｃ２０、及びＣ２１に対応するアミノ酸におけ
る１つ以上の置換（より疎水性の残基による置換など）によって改変される。いくつかの
実施形態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号８のアミノ酸配列を含み、配
列番号８中の、Ｙ２、Ｍ３、Ａ１６、及びＩ１８に対応するアミノ酸における置換（より
疎水性の残基による置換など）によって改変される。いくつかの実施形態では、天然に存
在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号８のアミノ酸配列を含み、配列番号８中の、Ｌ８、Ｖ
１２、及びＦ１５に対応するアミノ酸における置換（より疎水性の残基による置換など）
によって改変される。いくつかの実施形態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列
番号８のアミノ酸配列を含み、配列番号８中の以下の置換、Ｙ１Ｑ、Ｙ２Ｌ、Ｙ２Ｉ、Ｍ
３Ｖ、Ｍ３Ｉ、Ｌ５Ｃ、Ｌ８Ｆ、Ｖ１２Ｆ、Ｖ１３Ｙ、Ｆ１５Ｓ、Ａ１６Ｖ、Ａ１６Ｉ、
Ｉ１８Ｖ、Ｉ１８Ｌ、Ｃ１９Ｍ、Ｃ２０Ｍ、及びＣ２１Ｇに対応する１つ以上の置換によ
って改変される。いくつかの実施形態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号
８のアミノ酸配列を含み、配列番号８中の、Ｙ２Ｌ、Ｍ３Ｖ、Ａ１６Ｖ、及びＩ１８Ｖの
置換に対応する置換によって改変される。いくつかの実施形態では、天然に存在しないＴ
ＣＲ－ＴＭは、配列番号８のアミノ酸配列を含み、配列番号８中の、Ｙ２Ｉ、Ｍ３Ｉ、Ａ
１６Ｉ、及びＩ１８Ｌの置換に対応する置換によって改変される。いくつかの実施形態で
は、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号８のアミノ酸配列を含み、配列番号８中
の、Ｌ８Ｆ、Ｖ１２Ｆ、及びＦ１５Ｓの置換に対応する置換によって改変される。いくつ
かの実施形態では、天然に存在しないＴＣＲ－ＴＭは、配列番号１４～２６のいずれか１
つのアミノ酸配列を含む。
【0133】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲは、標的抗原に特異的に結合し
、ａ）配列番号７及び９～１３のアミノ酸配列のうちのいずれか１つを含むか、それから
本質的になるか、又はそれからなる第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、並びに配
列番号８及び１４～２６のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含むか、それから本質的
になるか、又はそれからなる第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原
に特異的に結合する抗原結合モジュールと、を含み、第１及び第２のＴＣＲＤは、少なく
とも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することができるＴＣＲＭを形成し、抗原
結合モジュールは、第１及び／又は第２のＴＣＲＤに連結する。いくつかの実施形態では
、ＴＣＲ－ＴＭのうちの少なくとも１つは、天然に存在しない。いくつかの実施形態では
、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、表２に列挙されるｃａＴＣＲのいずれ
かに従って選択される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ連結
ペプチド又はその断片を更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ連結ペプ
チド又はその断片を更に含む。いくつかの実施形態では、第１の連結ペプチドは、配列番
号３１若しくは３２又はその変異型のアミノ酸配列を含み、及び／又は第２の連結ペプチ
ドは、配列番号３３若しくは３４又はその変異型のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施
形態では、第１及び第２の連結ペプチドは、ジスルフィド結合によって連結される。いく
つかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び
／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態
では、第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、配列番号３６又はその変異型のアミノ酸配列を含
む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（ＣＤ２７
、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、又はＣＤ４０由来など）
を含む、少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態
では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインを含む安定化モジ
ュールを更に含み、第１及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化させる、互い
の結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ジ
スルフィド結合によって連結される。いくつかの実施形態では、第１及び第２の安定化ド
メインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体ドメイン、又はその変異型を含む。い
くつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε、及びζζからなる群から
選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することができる。いく
つかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号７及び８の配列を有するＴ細胞受容体膜貫通
ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動
員を強化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３
複合体形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール間
又はドメイン間にスペーサモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合モ
ジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’
、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。
抗原結合モジュール
、ａ）配列番号７及び９～１３のアミノ酸配列のうちのいずれか１つを含むか、それから
本質的になるか、又はそれからなる第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、並びに配
列番号８及び１４～２６のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含むか、それから本質的
になるか、又はそれからなる第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原
に特異的に結合する抗原結合モジュールと、を含み、第１及び第２のＴＣＲＤは、少なく
とも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することができるＴＣＲＭを形成し、抗原
結合モジュールは、第１及び／又は第２のＴＣＲＤに連結する。いくつかの実施形態では
、ＴＣＲ－ＴＭのうちの少なくとも１つは、天然に存在しない。いくつかの実施形態では
、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、表２に列挙されるｃａＴＣＲのいずれ
かに従って選択される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ連結
ペプチド又はその断片を更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ連結ペプ
チド又はその断片を更に含む。いくつかの実施形態では、第１の連結ペプチドは、配列番
号３１若しくは３２又はその変異型のアミノ酸配列を含み、及び／又は第２の連結ペプチ
ドは、配列番号３３若しくは３４又はその変異型のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施
形態では、第１及び第２の連結ペプチドは、ジスルフィド結合によって連結される。いく
つかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び
／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態
では、第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、配列番号３６又はその変異型のアミノ酸配列を含
む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（ＣＤ２７
、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、又はＣＤ４０由来など）
を含む、少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態
では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインを含む安定化モジ
ュールを更に含み、第１及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化させる、互い
の結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ジ
スルフィド結合によって連結される。いくつかの実施形態では、第１及び第２の安定化ド
メインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体ドメイン、又はその変異型を含む。い
くつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε、及びζζからなる群から
選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することができる。いく
つかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号７及び８の配列を有するＴ細胞受容体膜貫通
ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動
員を強化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３
複合体形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール間
又はドメイン間にスペーサモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、抗原結合モ
ジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’
、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。
【表2】
【0134】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲのいずれかによると、抗原結合
モジュールは抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’
、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、及び単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）からなる群から選択される。いくつ
かの実施形態では、抗体部分が、第１の抗体部分鎖及び第２の抗体部分鎖を含む多量体で
ある場合、ｃａＴＣＲは、第１又は第２の抗体部分鎖に連結された第１のＴＣＲＤと、他
方の抗体部分鎖に連結された第２のＴＣＲＤとを含む。いくつかの実施形態では、抗体部
分は、非限定的に、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、
ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ、及びＦＣＲＬ５、その変異型又は変異体を含むもの
を含む細胞表面抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ペプチ
ド／ＭＨＣ複合体に特異的に結合し、ペプチドは、非限定的に、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰ
Ｖ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲ
ＡＳ、ヒストンＨ３．３、及びＰＳＡ、その変異型又は変異体を含むものを含むタンパク
質に由来する。
モジュールは抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’
、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、及び単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）からなる群から選択される。いくつ
かの実施形態では、抗体部分が、第１の抗体部分鎖及び第２の抗体部分鎖を含む多量体で
ある場合、ｃａＴＣＲは、第１又は第２の抗体部分鎖に連結された第１のＴＣＲＤと、他
方の抗体部分鎖に連結された第２のＴＣＲＤとを含む。いくつかの実施形態では、抗体部
分は、非限定的に、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、
ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ、及びＦＣＲＬ５、その変異型又は変異体を含むもの
を含む細胞表面抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ペプチ
ド／ＭＨＣ複合体に特異的に結合し、ペプチドは、非限定的に、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰ
Ｖ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲ
ＡＳ、ヒストンＨ３．３、及びＰＳＡ、その変異型又は変異体を含むものを含むタンパク
質に由来する。
【0135】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲのいずれかによると、抗原結合
モジュールは、ＣＨ１及びＣＬドメインを含む抗体部分である。いくつかの実施形態では
、ＣＨ１ドメインは、ＩｇＧ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、又はＩｇＧ４）
重鎖、所望によりヒトに由来する。いくつかの実施形態では、ＣＨ１ドメインは、それが
由来する配列と比較して、１つ以上の改変（例えば、アミノ酸置換、挿入、及び／又は欠
失）を含む変異型である。いくつかの実施形態では、ＣＨ１ドメインは、配列番号３７～
４７、又はその変異型のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、
ＣＨ１ドメインは、配列番号３７、又はその変異型のアミノ酸配列を含む。いくつかの実
施形態では、ＣＬドメインは、カッパ又はラムダ軽鎖、所望によりヒトに由来する。いく
つかの実施形態では、ＣＬドメインは、それが由来する配列と比較して、１つ以上の改変
（例えば、アミノ酸置換、挿入、及び／又は欠失）を含む変異型である。いくつかの実施
形態では、ＣＬドメインは、配列番号４８、又はその変異型のアミノ酸配列を含む。いく
つかの実施形態では、ＣＨ１及び／又はＣＬドメインは、互いに結合親和性を実質的に変
化させない１つ以上の改変を含む。いくつかの実施形態では、ＣＨ１及び／又はＣＬドメ
インは、互いに結合親和性を増加させ、及び／又は天然に存在しないジスルフィド結合を
導入する１つ以上の改変を含む。
モジュールは、ＣＨ１及びＣＬドメインを含む抗体部分である。いくつかの実施形態では
、ＣＨ１ドメインは、ＩｇＧ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、又はＩｇＧ４）
重鎖、所望によりヒトに由来する。いくつかの実施形態では、ＣＨ１ドメインは、それが
由来する配列と比較して、１つ以上の改変（例えば、アミノ酸置換、挿入、及び／又は欠
失）を含む変異型である。いくつかの実施形態では、ＣＨ１ドメインは、配列番号３７～
４７、又はその変異型のいずれか１つのアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、
ＣＨ１ドメインは、配列番号３７、又はその変異型のアミノ酸配列を含む。いくつかの実
施形態では、ＣＬドメインは、カッパ又はラムダ軽鎖、所望によりヒトに由来する。いく
つかの実施形態では、ＣＬドメインは、それが由来する配列と比較して、１つ以上の改変
（例えば、アミノ酸置換、挿入、及び／又は欠失）を含む変異型である。いくつかの実施
形態では、ＣＬドメインは、配列番号４８、又はその変異型のアミノ酸配列を含む。いく
つかの実施形態では、ＣＨ１及び／又はＣＬドメインは、互いに結合親和性を実質的に変
化させない１つ以上の改変を含む。いくつかの実施形態では、ＣＨ１及び／又はＣＬドメ
インは、互いに結合親和性を増加させ、及び／又は天然に存在しないジスルフィド結合を
導入する１つ以上の改変を含む。
【0136】
いくつかの実施形態では、標的抗原に特異的に結合する抗体部分を含む本明細書に記載
のｃａＴＣＲのいずれかによると、抗体部分は、標的抗原に特異的な抗体部分のＣＤＲ又
は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む。いくつかの実施形態では、抗体
部分は、ＣＤ１９に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬド
メイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１７０６６１３６Ａ２を参照されたい）。いくつかの
実施形態では、抗体部分は、ＣＤ１９に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（Ｖ
Ｈ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、配列番号５８のアミノ酸配列を含むか、そ
れから本質的になるか、若しくはそれからなるものを含むＶＨドメイン、及び／又は配列
番号５９のアミノ酸配列を含むか、それから本質的になるか、若しくはそれからなるもの
を含むＶＬドメイン、或いはそれらに含まれるＣＤＲ）。いくつかの実施形態では、抗体
部分は、ＣＤ２０に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬド
メイン）を含む（例えば、配列番号６０のアミノ酸配列を含むか、それから本質的になる
か、若しくはそれからなるものを含むＶＨドメイン、及び／又は配列番号６１のアミノ酸
配列を含むか、それから本質的になるか、若しくはそれからなるものを含むＶＬドメイン
、或いはそれらに含まれるＣＤＲ）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＣＤ２２に
特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例
えば、参照によりその全てが本明細書に組み込まれる、２０１８年３月３０日出願のＵＳ
ＳＮ６２／６５０，９５５を参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｃ
Ｄ２２に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を
含む（例えば、配列番号１０１のアミノ酸配列を含むか、それから本質的になるか、若し
くはそれからなるものを含むＶＨドメイン、及び／又は配列番号１０２のアミノ酸配列を
含むか、それから本質的になるか、若しくはそれからなるものを含むＶＬドメイン、或い
はそれらに含まれるＣＤＲ）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＧＰＣ３に特異的
な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、
参照によりその全てが本明細書に組み込まれる、２０１７年４月２６日出願のＵＳＳＮ６
２／４９０，５８６を参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＧＰＣ３
に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（
例えば、配列番号６４のアミノ酸配列を含むか、それから本質的になるか、若しくはそれ
からなるものを含むＶＨドメイン、及び／又は配列番号６５のアミノ酸配列を含むか、そ
れから本質的になるか、若しくはそれからなるものを含むＶＬドメイン、或いはそれらに
含まれるＣＤＲ）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＲＯＲ１に特異的な抗体部分
のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１
６／１８７２２０及びＷＯ２０１６／１８７２１６を参照されたい）。いくつかの実施形
態では、抗体部分は、ＲＯＲ２に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び
／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１４２７６８を参照されたい）。
いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＢＣＭＡに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ド
メイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／０９０３２７及
びＷＯ２０１６／０９０３２０を参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は
、ＧＰＲＣ５Ｄに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメ
イン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／０９０３２９及びＷＯ２０１６／０９０３１２を
参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＦＣＲＬ５に特異的な抗体部分
のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１
６／０９０３３７を参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＷＴ－１に
特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例
えば、ＷＯ２０１２／１３５８５４、ＷＯ２０１５／０７００７８、及びＷＯ２０１５／
０７００６１を参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＡＦＰに特異的
な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、
ＷＯ２０１６／１６１３９０を参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、
ＨＰＶ１６－Ｅ７に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬド
メイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１８２９５７を参照されたい）。いくつかの実
施形態では、抗体部分は、ＮＹ－ＥＳＯ－１に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイ
ン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／２１０３６５を参照
されたい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＰＲＡＭＥに特異的な抗体部分のＣ
ＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／
１９１２４６を参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＥＢＶ－ＬＭＰ
２Ａに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含
む（例えば、ＷＯ２０１６／２０１１２４を参照されたい）。いくつかの実施形態では、
抗体部分は、ＫＲＡＳに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶ
Ｌドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１５４０４７を参照されたい）。いくつか
の実施形態では、抗体部分は、ＰＳＡに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（Ｖ
Ｈ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１７／０１５６３４を参照された
い）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＶＨドメイン及びＣＨ１ドメインを含む１
つのＦａｂ鎖と、ＶＬドメイン及びＣＬドメインを含む別のＦａｂ鎖と、を含むＦａｂで
ある。いくつかの実施形態では、ＣＨ１ドメインは、配列番号３７～４７のいずれか１つ
のアミノ酸配列を含み、及び／又はＣＬドメインは、配列番号４８のアミノ酸配列を含む
。いくつかの実施形態では、ＣＨ１ドメインは、配列番号３７のアミノ酸配列を含むか、
それから本質的になるか、又はそれからなり、ＣＬドメインは、配列番号４８のアミノ酸
配列を含むか、それから本質的になるか、又はそれからなる。
ｃａＴＣＲ構築物
のｃａＴＣＲのいずれかによると、抗体部分は、標的抗原に特異的な抗体部分のＣＤＲ又
は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む。いくつかの実施形態では、抗体
部分は、ＣＤ１９に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬド
メイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１７０６６１３６Ａ２を参照されたい）。いくつかの
実施形態では、抗体部分は、ＣＤ１９に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（Ｖ
Ｈ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、配列番号５８のアミノ酸配列を含むか、そ
れから本質的になるか、若しくはそれからなるものを含むＶＨドメイン、及び／又は配列
番号５９のアミノ酸配列を含むか、それから本質的になるか、若しくはそれからなるもの
を含むＶＬドメイン、或いはそれらに含まれるＣＤＲ）。いくつかの実施形態では、抗体
部分は、ＣＤ２０に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬド
メイン）を含む（例えば、配列番号６０のアミノ酸配列を含むか、それから本質的になる
か、若しくはそれからなるものを含むＶＨドメイン、及び／又は配列番号６１のアミノ酸
配列を含むか、それから本質的になるか、若しくはそれからなるものを含むＶＬドメイン
、或いはそれらに含まれるＣＤＲ）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＣＤ２２に
特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例
えば、参照によりその全てが本明細書に組み込まれる、２０１８年３月３０日出願のＵＳ
ＳＮ６２／６５０，９５５を参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｃ
Ｄ２２に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を
含む（例えば、配列番号１０１のアミノ酸配列を含むか、それから本質的になるか、若し
くはそれからなるものを含むＶＨドメイン、及び／又は配列番号１０２のアミノ酸配列を
含むか、それから本質的になるか、若しくはそれからなるものを含むＶＬドメイン、或い
はそれらに含まれるＣＤＲ）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＧＰＣ３に特異的
な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、
参照によりその全てが本明細書に組み込まれる、２０１７年４月２６日出願のＵＳＳＮ６
２／４９０，５８６を参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＧＰＣ３
に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（
例えば、配列番号６４のアミノ酸配列を含むか、それから本質的になるか、若しくはそれ
からなるものを含むＶＨドメイン、及び／又は配列番号６５のアミノ酸配列を含むか、そ
れから本質的になるか、若しくはそれからなるものを含むＶＬドメイン、或いはそれらに
含まれるＣＤＲ）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＲＯＲ１に特異的な抗体部分
のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１
６／１８７２２０及びＷＯ２０１６／１８７２１６を参照されたい）。いくつかの実施形
態では、抗体部分は、ＲＯＲ２に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び
／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１４２７６８を参照されたい）。
いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＢＣＭＡに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ド
メイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／０９０３２７及
びＷＯ２０１６／０９０３２０を参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は
、ＧＰＲＣ５Ｄに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメ
イン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／０９０３２９及びＷＯ２０１６／０９０３１２を
参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＦＣＲＬ５に特異的な抗体部分
のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１
６／０９０３３７を参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＷＴ－１に
特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例
えば、ＷＯ２０１２／１３５８５４、ＷＯ２０１５／０７００７８、及びＷＯ２０１５／
０７００６１を参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＡＦＰに特異的
な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、
ＷＯ２０１６／１６１３９０を参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、
ＨＰＶ１６－Ｅ７に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬド
メイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１８２９５７を参照されたい）。いくつかの実
施形態では、抗体部分は、ＮＹ－ＥＳＯ－１に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイ
ン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／２１０３６５を参照
されたい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＰＲＡＭＥに特異的な抗体部分のＣ
ＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／
１９１２４６を参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＥＢＶ－ＬＭＰ
２Ａに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含
む（例えば、ＷＯ２０１６／２０１１２４を参照されたい）。いくつかの実施形態では、
抗体部分は、ＫＲＡＳに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶ
Ｌドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１５４０４７を参照されたい）。いくつか
の実施形態では、抗体部分は、ＰＳＡに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（Ｖ
Ｈ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１７／０１５６３４を参照された
い）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＶＨドメイン及びＣＨ１ドメインを含む１
つのＦａｂ鎖と、ＶＬドメイン及びＣＬドメインを含む別のＦａｂ鎖と、を含むＦａｂで
ある。いくつかの実施形態では、ＣＨ１ドメインは、配列番号３７～４７のいずれか１つ
のアミノ酸配列を含み、及び／又はＣＬドメインは、配列番号４８のアミノ酸配列を含む
。いくつかの実施形態では、ＣＨ１ドメインは、配列番号３７のアミノ酸配列を含むか、
それから本質的になるか、又はそれからなり、ＣＬドメインは、配列番号４８のアミノ酸
配列を含むか、それから本質的になるか、又はそれからなる。
ｃａＴＣＲ構築物
【0137】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲは、標的抗原に特異的に結合し
、ａ）ＴＣＲの膜貫通ドメインのうちの１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１の
ＴＣＲＤ、及びＴＣＲの他の膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２の
ＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗体部分と、を含み、第１及び第２のＴＣ
ＲＤは、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することのできるＴＣＲＭ
を形成し、抗体部分は、第１及び／又は第２のＴＣＲＤに連結する。いくつかの実施形態
では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、及び単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ
）からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、抗体部分は、非限定的に、ＣＤ
１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、Ｇ
ＰＲＣ５Ｄ、及びＦＣＲＬ５、その変異型又は変異体を含むものを含む細胞表面抗原に特
異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ペプチド／ＭＨＣ複合体に特異
的に結合し、ペプチドは、非限定的に、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－Ｅ
ＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡＳ、ヒストンＨ３．３
、及びＰＳＡ、その変異型又は変異体を含むものを含むタンパク質に由来する。いくつか
の実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインを含む
安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化さ
せる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、安定化モジュールは、ＴＣ
ＲＭと抗体部分との間に位置する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭの両方が天然
に存在する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのうちの少なくとも１つは、天然に
存在しない。
、ａ）ＴＣＲの膜貫通ドメインのうちの１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１の
ＴＣＲＤ、及びＴＣＲの他の膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２の
ＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗体部分と、を含み、第１及び第２のＴＣ
ＲＤは、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することのできるＴＣＲＭ
を形成し、抗体部分は、第１及び／又は第２のＴＣＲＤに連結する。いくつかの実施形態
では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、及び単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ
）からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、抗体部分は、非限定的に、ＣＤ
１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、Ｇ
ＰＲＣ５Ｄ、及びＦＣＲＬ５、その変異型又は変異体を含むものを含む細胞表面抗原に特
異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ペプチド／ＭＨＣ複合体に特異
的に結合し、ペプチドは、非限定的に、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－Ｅ
ＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡＳ、ヒストンＨ３．３
、及びＰＳＡ、その変異型又は変異体を含むものを含むタンパク質に由来する。いくつか
の実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインを含む
安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化さ
せる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、安定化モジュールは、ＴＣ
ＲＭと抗体部分との間に位置する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭの両方が天然
に存在する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのうちの少なくとも１つは、天然に
存在しない。
【0138】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲは、標的抗原に特異的に結合し
、ａ）配列番号７及び９～１３のアミノ酸配列のうちのいずれか１つを含むか、それから
本質的になるか、又はそれからなる第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及び配列
番号８及び１４～２６のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含むか、それから本質的に
なるか、又はそれからなる第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に
特異的に結合する抗体部分と、を含み、第１及び第２のＴＣＲＤは、少なくとも１つのＴ
ＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することができるＴＣＲＭを形成し、抗体部分は、第１
及び／又は第２のＴＣＲＤに連結する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及
び第２のＴＣＲ－ＴＭは、表２に列挙されるｃａＴＣＲのいずれかに従って選択される。
いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、及び
単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、抗体部分は
、非限定的に、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯ
Ｒ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ、及びＦＣＲＬ５、その変異型又は変異体を含むものを含
む細胞表面抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ペプチド／
ＭＨＣ複合体に特異的に結合し、ペプチドは、非限定的に、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１
６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡＳ
、ヒストンＨ３．３、及びＰＳＡ、その変異型又は変異体を含むものを含むタンパク質に
由来する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ連結ペプチド又は
その断片を更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ連結ペプチド又はその
断片を更に含む。いくつかの実施形態では、第１の連結ペプチドは、配列番号３１若しく
は３２又はその変異型のアミノ酸配列を含み、及び／又は第２の連結ペプチドは、配列番
号３３若しくは３４又はその変異型のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第
１及び第２の連結ペプチドは、ジスルフィド結合によって連結される。いくつかの実施形
態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２の
ＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第２の
ＴＣＲ細胞内ドメインは、配列番号３６又はその変異型のアミノ酸配列を含む。いくつか
の実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（ＣＤ２７、ＣＤ２８、
４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、又はＣＤ４０由来など）を含む、少な
くとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴ
ＣＲが、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に
含み、第１及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化させる、互いの結合親和性
を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結
合によって連結される。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε
、及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動
員することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号７及び８の配列を
有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ
関連シグナル伝達分子の動員を強化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ
Ｍは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つ
のｃａＴＣＲモジュール間又はドメイン間にスペーサモジュールが存在する。いくつかの
実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭの両方が天然に存在する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ
－ＴＭのうちの少なくとも１つは、天然に存在しない。
、ａ）配列番号７及び９～１３のアミノ酸配列のうちのいずれか１つを含むか、それから
本質的になるか、又はそれからなる第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及び配列
番号８及び１４～２６のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含むか、それから本質的に
なるか、又はそれからなる第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に
特異的に結合する抗体部分と、を含み、第１及び第２のＴＣＲＤは、少なくとも１つのＴ
ＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することができるＴＣＲＭを形成し、抗体部分は、第１
及び／又は第２のＴＣＲＤに連結する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及
び第２のＴＣＲ－ＴＭは、表２に列挙されるｃａＴＣＲのいずれかに従って選択される。
いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、及び
単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、抗体部分は
、非限定的に、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯ
Ｒ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ、及びＦＣＲＬ５、その変異型又は変異体を含むものを含
む細胞表面抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ペプチド／
ＭＨＣ複合体に特異的に結合し、ペプチドは、非限定的に、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１
６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡＳ
、ヒストンＨ３．３、及びＰＳＡ、その変異型又は変異体を含むものを含むタンパク質に
由来する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ連結ペプチド又は
その断片を更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ連結ペプチド又はその
断片を更に含む。いくつかの実施形態では、第１の連結ペプチドは、配列番号３１若しく
は３２又はその変異型のアミノ酸配列を含み、及び／又は第２の連結ペプチドは、配列番
号３３若しくは３４又はその変異型のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第
１及び第２の連結ペプチドは、ジスルフィド結合によって連結される。いくつかの実施形
態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２の
ＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第２の
ＴＣＲ細胞内ドメインは、配列番号３６又はその変異型のアミノ酸配列を含む。いくつか
の実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（ＣＤ２７、ＣＤ２８、
４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、又はＣＤ４０由来など）を含む、少な
くとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴ
ＣＲが、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に
含み、第１及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化させる、互いの結合親和性
を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結
合によって連結される。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε
、及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動
員することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号７及び８の配列を
有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ
関連シグナル伝達分子の動員を強化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ
Ｍは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つ
のｃａＴＣＲモジュール間又はドメイン間にスペーサモジュールが存在する。いくつかの
実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭの両方が天然に存在する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ
－ＴＭのうちの少なくとも１つは、天然に存在しない。
【0139】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲは、標的抗原に特異的に結合し
、ａ）第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及び第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２の
ＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗体部分と、を含み、第１及び第２のＴＣ
Ｒ－ＴＭは、それぞれ、配列番号７及び８、９及び８、７及び１４、７及び１５、７及び
１６、１０及び１６、７及び１７、７及び１８、７及び１９、７及び２０、７及び２１、
７及び２２、１１及び２３、１２及び２４、７及び２５、又は１３及び２６のアミノ酸配
列を含むか、それから本質的になるか、又はそれからなり、第１及び第２のＴＣＲＤは、
少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することができるＴＣＲＭを形成し
、抗体部分は、第１及び／又は第２のＴＣＲＤに連結する。例えば、いくつかの実施形態
では、本明細書に記載のｃａＴＣＲは、標的抗原に特異的に結合し、ａ）配列番号７のア
ミノ酸配列を含むか、それから本質的になるか、又はそれからなる第１のＴＣＲ－ＴＭを
含む第１のＴＣＲＤ、及び配列番号８のアミノ酸配列を含むか、それから本質的になるか
、又はそれからなる第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に特異的
に結合する抗体部分と、を含み、第１及び第２のＴＣＲＤは、少なくとも１つのＴＣＲ関
連シグナル伝達分子を動員することができるＴＣＲＭを形成し、抗体部分は、第１及び／
又は第２のＴＣＲＤに連結する。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ
’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、及び単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）からなる群から選択される。いく
つかの実施形態では、抗体部分は、非限定的に、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４
７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ、及びＦＣＲＬ５、その
変異型又は変異体を含むものを含む細胞表面抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形
態では、抗体部分は、ペプチド／ＭＨＣ複合体に特異的に結合し、ペプチドは、非限定的
に、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－Ｌ
ＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡＳ、ヒストンＨ３．３、及びＰＳＡ、その変異型又は変異
体を含むものを含むタンパク質に由来する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは
、第１のＴＣＲ連結ペプチド又はその断片を更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第
２のＴＣＲ連結ペプチド又はその断片を更に含む。いくつかの実施形態では、第１の連結
ペプチドは、配列番号３１若しくは３２又はその変異型のアミノ酸配列を含み、及び／又
は第２の連結ペプチドは、配列番号３３若しくは３４又はその変異型のアミノ酸配列を含
む。いくつかの実施形態では、第１及び第２の連結ペプチドは、ジスルフィド結合によっ
て連結される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメイ
ンを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。
いくつかの実施形態では、第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、配列番号３６又はその変異型
のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル
伝達配列（ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、又は
ＣＤ４０由来など）を含む、少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメイ
ンを含む安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを
安定化させる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２の安
定化ドメインは、ジスルフィド結合によって連結される。いくつかの実施形態では、ＴＣ
ＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε、及びζζからなる群から選択される少なくとも１つの
ＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ
Ｍは、配列番号７及び８の配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比
較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化することができる。
いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。いく
つかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール間又はドメイン間にスペーサモ
ジュールが存在する。
、ａ）第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及び第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２の
ＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に特異的に結合する抗体部分と、を含み、第１及び第２のＴＣ
Ｒ－ＴＭは、それぞれ、配列番号７及び８、９及び８、７及び１４、７及び１５、７及び
１６、１０及び１６、７及び１７、７及び１８、７及び１９、７及び２０、７及び２１、
７及び２２、１１及び２３、１２及び２４、７及び２５、又は１３及び２６のアミノ酸配
列を含むか、それから本質的になるか、又はそれからなり、第１及び第２のＴＣＲＤは、
少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することができるＴＣＲＭを形成し
、抗体部分は、第１及び／又は第２のＴＣＲＤに連結する。例えば、いくつかの実施形態
では、本明細書に記載のｃａＴＣＲは、標的抗原に特異的に結合し、ａ）配列番号７のア
ミノ酸配列を含むか、それから本質的になるか、又はそれからなる第１のＴＣＲ－ＴＭを
含む第１のＴＣＲＤ、及び配列番号８のアミノ酸配列を含むか、それから本質的になるか
、又はそれからなる第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に特異的
に結合する抗体部分と、を含み、第１及び第２のＴＣＲＤは、少なくとも１つのＴＣＲ関
連シグナル伝達分子を動員することができるＴＣＲＭを形成し、抗体部分は、第１及び／
又は第２のＴＣＲＤに連結する。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ
’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、及び単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）からなる群から選択される。いく
つかの実施形態では、抗体部分は、非限定的に、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４
７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ、及びＦＣＲＬ５、その
変異型又は変異体を含むものを含む細胞表面抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形
態では、抗体部分は、ペプチド／ＭＨＣ複合体に特異的に結合し、ペプチドは、非限定的
に、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－Ｌ
ＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡＳ、ヒストンＨ３．３、及びＰＳＡ、その変異型又は変異
体を含むものを含むタンパク質に由来する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは
、第１のＴＣＲ連結ペプチド又はその断片を更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第
２のＴＣＲ連結ペプチド又はその断片を更に含む。いくつかの実施形態では、第１の連結
ペプチドは、配列番号３１若しくは３２又はその変異型のアミノ酸配列を含み、及び／又
は第２の連結ペプチドは、配列番号３３若しくは３４又はその変異型のアミノ酸配列を含
む。いくつかの実施形態では、第１及び第２の連結ペプチドは、ジスルフィド結合によっ
て連結される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメイ
ンを更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。
いくつかの実施形態では、第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、配列番号３６又はその変異型
のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル
伝達配列（ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、又は
ＣＤ４０由来など）を含む、少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメイ
ンを含む安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを
安定化させる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２の安
定化ドメインは、ジスルフィド結合によって連結される。いくつかの実施形態では、ＴＣ
ＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε、及びζζからなる群から選択される少なくとも１つの
ＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ
Ｍは、配列番号７及び８の配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比
較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化することができる。
いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。いく
つかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール間又はドメイン間にスペーサモ
ジュールが存在する。
【0140】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲは、標的抗原に特異的に結合し
、ａ）ＴＣＲの膜貫通ドメインのうちの１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１の
ＴＣＲＤに連結する第１のＦａｂ鎖を含む第１の抗原結合ドメインを含む第１のポリペプ
チド鎖と、ｂ）ＴＣＲの他の膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２の
ＴＣＲＤに連結する第２のＦａｂ鎖を含む第２の抗原結合ドメインを含む第２のポリペプ
チド鎖と、を含み、第１及び第２のＴＣＲＤは、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝
達分子を動員することができるＴＣＲＭを形成し、第１及び第２のＦａｂ鎖は、標的抗原
に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形成する。いくつかの実施形態では、
ａ）第１のＦａｂ鎖はＶＨ及びＣＨ１抗体ドメインを含み、第２のＦａｂ鎖はＶＬ及びＣ
Ｌ抗体ドメインを含み、又はｂ）第１のＦａｂ鎖はＶＬ及びＣＬ抗体ドメインを含み、第
２のＦａｂ鎖はＶＨ及びＣＨ１抗体ドメインを含む。例えば、いくつかの実施形態では、
ｃａＴＣＲは、ａ）第１のＴＣＲＤに連結されたＶＨ及びＣＨ１抗体ドメインを含む第１
のＦａｂ鎖を含む第１のポリペプチド鎖と、ｂ）第２のＴＣＲＤに連結されたＶＬ及びＣ
Ｌ抗体ドメインを含む第２のＦａｂ鎖と、を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ
は、ａ）第１のＴＣＲＤに連結されたＶＬ及びＣＬ抗体ドメインを含む第１のＦａｂ鎖と
、ｂ）第２のＴＣＲＤに連結されたＶＨ及びＣＨ１抗体ドメインを含む第２のＦａｂ鎖と
、を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＤの一方又は両方とそれらの連結したＦａｂ
鎖との間にペプチドリンカーが存在する。いくつかの実施形態では、ＣＨ１ドメイン内の
残基とＣＬドメイン内の残基との間にジスルフィド結合が存在する。いくつかの実施形態
では、ＣＨ１及び／又はＣＬドメインは、互いにＦａｂ鎖の結合親和性を増加させる１つ
以上の改変を含む。いくつかの実施形態では、ＣＨ１及びＣＬドメインは、Ｆａｂ鎖のう
ちの１つがＶＨ及びＣＬ抗体ドメインを含み、他方のＦａｂ鎖がＶＬ及びＣＨ１抗体ドメ
インを含むように交換される。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは
、非限定的に、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯ
Ｒ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ、及びＦＣＲＬ５、その変異型又は変異体を含むものを含
む細胞表面抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュ
ールは、ペプチド／ＭＨＣ複合体に特異的に結合し、ペプチドは、非限定的に、ＷＴ－１
、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、Ｈ
ＩＶ－１、ＫＲＡＳ、ヒストンＨ３．３、及びＰＳＡ、その変異型又は変異体を含むもの
を含むタンパク質に由来する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ド
メイン及び第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安
定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化させる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実
施形態では、第１又は第２の安定化ドメインは、第１のＴＣＲＤとその連結されたＦａｂ
鎖との間に位置し、他の安定化ドメインは、第２のＴＣＲＤとその連結されたＦａｂ鎖と
の間に位置する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭの両方が天然に存在する。いく
つかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのうちの少なくとも１つは、天然に存在しない。
、ａ）ＴＣＲの膜貫通ドメインのうちの１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１の
ＴＣＲＤに連結する第１のＦａｂ鎖を含む第１の抗原結合ドメインを含む第１のポリペプ
チド鎖と、ｂ）ＴＣＲの他の膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２の
ＴＣＲＤに連結する第２のＦａｂ鎖を含む第２の抗原結合ドメインを含む第２のポリペプ
チド鎖と、を含み、第１及び第２のＴＣＲＤは、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝
達分子を動員することができるＴＣＲＭを形成し、第１及び第２のＦａｂ鎖は、標的抗原
に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形成する。いくつかの実施形態では、
ａ）第１のＦａｂ鎖はＶＨ及びＣＨ１抗体ドメインを含み、第２のＦａｂ鎖はＶＬ及びＣ
Ｌ抗体ドメインを含み、又はｂ）第１のＦａｂ鎖はＶＬ及びＣＬ抗体ドメインを含み、第
２のＦａｂ鎖はＶＨ及びＣＨ１抗体ドメインを含む。例えば、いくつかの実施形態では、
ｃａＴＣＲは、ａ）第１のＴＣＲＤに連結されたＶＨ及びＣＨ１抗体ドメインを含む第１
のＦａｂ鎖を含む第１のポリペプチド鎖と、ｂ）第２のＴＣＲＤに連結されたＶＬ及びＣ
Ｌ抗体ドメインを含む第２のＦａｂ鎖と、を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ
は、ａ）第１のＴＣＲＤに連結されたＶＬ及びＣＬ抗体ドメインを含む第１のＦａｂ鎖と
、ｂ）第２のＴＣＲＤに連結されたＶＨ及びＣＨ１抗体ドメインを含む第２のＦａｂ鎖と
、を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＤの一方又は両方とそれらの連結したＦａｂ
鎖との間にペプチドリンカーが存在する。いくつかの実施形態では、ＣＨ１ドメイン内の
残基とＣＬドメイン内の残基との間にジスルフィド結合が存在する。いくつかの実施形態
では、ＣＨ１及び／又はＣＬドメインは、互いにＦａｂ鎖の結合親和性を増加させる１つ
以上の改変を含む。いくつかの実施形態では、ＣＨ１及びＣＬドメインは、Ｆａｂ鎖のう
ちの１つがＶＨ及びＣＬ抗体ドメインを含み、他方のＦａｂ鎖がＶＬ及びＣＨ１抗体ドメ
インを含むように交換される。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは
、非限定的に、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯ
Ｒ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ、及びＦＣＲＬ５、その変異型又は変異体を含むものを含
む細胞表面抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュ
ールは、ペプチド／ＭＨＣ複合体に特異的に結合し、ペプチドは、非限定的に、ＷＴ－１
、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、Ｈ
ＩＶ－１、ＫＲＡＳ、ヒストンＨ３．３、及びＰＳＡ、その変異型又は変異体を含むもの
を含むタンパク質に由来する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ド
メイン及び第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安
定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化させる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実
施形態では、第１又は第２の安定化ドメインは、第１のＴＣＲＤとその連結されたＦａｂ
鎖との間に位置し、他の安定化ドメインは、第２のＴＣＲＤとその連結されたＦａｂ鎖と
の間に位置する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭの両方が天然に存在する。いく
つかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのうちの少なくとも１つは、天然に存在しない。
【0141】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲは、標的抗原に特異的に結合し
、ａ）配列番号７及び９～１３のアミノ酸配列のうちのいずれか１つを含むか、それから
本質的になるか、又はそれからなる第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤに連結する
第１のＦａｂ鎖を含む第１の抗原結合ドメインを含む第１のポリペプチド鎖と、ｂ）配列
番号８及び１４～２６のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含むか、それから本質的に
なるか、又はそれからなる第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤに連結する第２のＦ
ａｂ鎖を含む第２の抗原結合ドメインを含む第２のポリペプチド鎖と、を含み、第１及び
第２のＴＣＲＤは、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することができ
るＴＣＲＭを形成し、第１及び第２のＦａｂ鎖は、標的抗原に特異的に結合するＦａｂ様
抗原結合モジュールを形成する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び第２
のＴＣＲ－ＴＭは、表２に列挙されるｃａＴＣＲのいずれかに従って選択される。いくつ
かの実施形態では、ａ）第１のＦａｂ鎖はＶＨ及びＣＨ１抗体ドメインを含み、第２のＦ
ａｂ鎖はＶＬ及びＣＬ抗体ドメインを含み、又はｂ）第１のＦａｂ鎖はＶＬ及びＣＬ抗体
ドメインを含み、第２のＦａｂ鎖はＶＨ及びＣＨ１抗体ドメインを含む。いくつかの実施
形態では、ＣＨ１ドメインは、配列番号３７～４７のいずれか１つのアミノ酸配列を含み
、及び／又はＣＬドメインは、配列番号４８のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態
では、ＣＨ１ドメインは、配列番号３７のアミノ酸配列を含むか、それから本質的になる
か、又はそれからなり、ＣＬドメインは、配列番号４８のアミノ酸配列を含むか、それか
ら本質的になるか、又はそれからなる。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジ
ュールは、非限定的に、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ
１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ、及びＦＣＲＬ５、その変異型又は変異体を含む
ものを含む細胞表面抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ様抗原結
合モジュールは、ペプチド／ＭＨＣ複合体に特異的に結合し、ペプチドは、非限定的に、
ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ
２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡＳ、ヒストンＨ３．３、及びＰＳＡ、その変異型又は変異体を
含むものを含むタンパク質に由来する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第
１のＴＣＲ連結ペプチド又はその断片を更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２の
ＴＣＲ連結ペプチド又はその断片を更に含む。いくつかの実施形態では、第１の連結ペプ
チドは、配列番号３１若しくは３２又はその変異型のアミノ酸配列を含み、及び／又は第
２の連結ペプチドは、配列番号３３若しくは３４又はその変異型のアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、第１及び第２の連結ペプチドは、ジスルフィド結合によって連
結される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを
更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いく
つかの実施形態では、第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、配列番号３６又はその変異型のア
ミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達
配列（ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、又はＣＤ
４０由来など）を含む、少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いく
つかの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインを
含む安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定
化させる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２の安定化
ドメインは、ジスルフィド結合によって連結される。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭ
は、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε、及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣ
Ｒ関連シグナル伝達分子を動員することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは
、配列番号７及び８の配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較し
て、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化することができる。いく
つかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。いくつか
の実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール間又はドメイン間にスペーサモジュ
ールが存在する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭの両方が天然に存在する。いく
つかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのうちの少なくとも１つは、天然に存在しない。
、ａ）配列番号７及び９～１３のアミノ酸配列のうちのいずれか１つを含むか、それから
本質的になるか、又はそれからなる第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤに連結する
第１のＦａｂ鎖を含む第１の抗原結合ドメインを含む第１のポリペプチド鎖と、ｂ）配列
番号８及び１４～２６のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含むか、それから本質的に
なるか、又はそれからなる第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤに連結する第２のＦ
ａｂ鎖を含む第２の抗原結合ドメインを含む第２のポリペプチド鎖と、を含み、第１及び
第２のＴＣＲＤは、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することができ
るＴＣＲＭを形成し、第１及び第２のＦａｂ鎖は、標的抗原に特異的に結合するＦａｂ様
抗原結合モジュールを形成する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び第２
のＴＣＲ－ＴＭは、表２に列挙されるｃａＴＣＲのいずれかに従って選択される。いくつ
かの実施形態では、ａ）第１のＦａｂ鎖はＶＨ及びＣＨ１抗体ドメインを含み、第２のＦ
ａｂ鎖はＶＬ及びＣＬ抗体ドメインを含み、又はｂ）第１のＦａｂ鎖はＶＬ及びＣＬ抗体
ドメインを含み、第２のＦａｂ鎖はＶＨ及びＣＨ１抗体ドメインを含む。いくつかの実施
形態では、ＣＨ１ドメインは、配列番号３７～４７のいずれか１つのアミノ酸配列を含み
、及び／又はＣＬドメインは、配列番号４８のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態
では、ＣＨ１ドメインは、配列番号３７のアミノ酸配列を含むか、それから本質的になる
か、又はそれからなり、ＣＬドメインは、配列番号４８のアミノ酸配列を含むか、それか
ら本質的になるか、又はそれからなる。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジ
ュールは、非限定的に、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ
１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ、及びＦＣＲＬ５、その変異型又は変異体を含む
ものを含む細胞表面抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ様抗原結
合モジュールは、ペプチド／ＭＨＣ複合体に特異的に結合し、ペプチドは、非限定的に、
ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ
２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡＳ、ヒストンＨ３．３、及びＰＳＡ、その変異型又は変異体を
含むものを含むタンパク質に由来する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第
１のＴＣＲ連結ペプチド又はその断片を更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２の
ＴＣＲ連結ペプチド又はその断片を更に含む。いくつかの実施形態では、第１の連結ペプ
チドは、配列番号３１若しくは３２又はその変異型のアミノ酸配列を含み、及び／又は第
２の連結ペプチドは、配列番号３３若しくは３４又はその変異型のアミノ酸配列を含む。
いくつかの実施形態では、第１及び第２の連結ペプチドは、ジスルフィド結合によって連
結される。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを
更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いく
つかの実施形態では、第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、配列番号３６又はその変異型のア
ミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達
配列（ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、又はＣＤ
４０由来など）を含む、少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いく
つかの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインを
含む安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定
化させる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２の安定化
ドメインは、ジスルフィド結合によって連結される。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭ
は、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε、及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣ
Ｒ関連シグナル伝達分子を動員することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは
、配列番号７及び８の配列を有するＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較し
て、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化することができる。いく
つかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。いくつか
の実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール間又はドメイン間にスペーサモジュ
ールが存在する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭの両方が天然に存在する。いく
つかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのうちの少なくとも１つは、天然に存在しない。
【0142】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲは、標的抗原に特異的に結合し
、ａ）第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤに連結する第１のＦａｂ鎖を含む第１の
抗原結合ドメインを含む第１のポリペプチド鎖と、第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣ
ＲＤに連結する第２のＦａｂ鎖を含む第２の抗原結合ドメインを含む第２のポリペプチド
鎖と、を含み、第１及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ、配列番号７及び８、９及び８
、７及び１４、７及び１５、７及び１６、１０及び１６、７及び１７、７及び１８、７及
び１９、７及び２０、７及び２１、７及び２２、１１及び２３、１２及び２４、７及び２
５、又は１３及び２６のアミノ酸配列を含むか、それから本質的になるか、又はそれから
なり、第１及び第２のＴＣＲＤは、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員
することができるＴＣＲＭを形成し、第１及び第２のＦａｂ鎖は、標的抗原に特異的に結
合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形成する。いくつかの実施形態では、ａ）第１のＦ
ａｂ鎖はＶＨ及びＣＨ１抗体ドメインを含み、第２のＦａｂ鎖はＶＬ及びＣＬ抗体ドメイ
ンを含み、又はｂ）第１のＦａｂ鎖はＶＬ及びＣＬ抗体ドメインを含み、第２のＦａｂ鎖
はＶＨ及びＣＨ１抗体ドメインを含む。いくつかの実施形態では、ＣＨ１ドメインは、配
列番号３７～４７のいずれか１つのアミノ酸配列を含み、及び／又はＣＬドメインは、配
列番号４８のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＨ１ドメインは、配列番
号３７のアミノ酸配列を含むか、それから本質的になるか、又はそれからなり、ＣＬドメ
インは、配列番号４８のアミノ酸配列を含むか、それから本質的になるか、又はそれから
なる。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、非限定的に、ＣＤ１９
、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲ
Ｃ５Ｄ、及びＦＣＲＬ５、その変異型又は変異体を含むものを含む細胞表面抗原に特異的
に結合する。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ペプチド／ＭＨ
Ｃ複合体に特異的に結合し、ペプチドは、非限定的に、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－
Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡＳ、ヒ
ストンＨ３．３、及びＰＳＡ、その変異型又は変異体を含むものを含むタンパク質に由来
する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ連結ペプチド又はその
断片を更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ連結ペプチド又はその断片
を更に含む。いくつかの実施形態では、第１の連結ペプチドは、配列番号３１若しくは３
２又はその変異型のアミノ酸配列を含み、及び／又は第２の連結ペプチドは、配列番号３
３若しくは３４又はその変異型のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１及
び第２の連結ペプチドは、ジスルフィド結合によって連結される。いくつかの実施形態で
は、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣ
ＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第２のＴＣ
Ｒ細胞内ドメインは、配列番号３６又はその変異型のアミノ酸配列を含む。いくつかの実
施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－
１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、又はＣＤ４０由来など）を含む、少なくと
も１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ
が、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み
、第１及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化させる、互いの結合親和性を有
する。いくつかの実施形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合に
よって連結される。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε、及
びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員す
ることができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号７及び８の配列を有す
るＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連
シグナル伝達分子の動員を強化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは
、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃ
ａＴＣＲモジュール間又はドメイン間にスペーサモジュールが存在する。
、ａ）第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤに連結する第１のＦａｂ鎖を含む第１の
抗原結合ドメインを含む第１のポリペプチド鎖と、第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣ
ＲＤに連結する第２のＦａｂ鎖を含む第２の抗原結合ドメインを含む第２のポリペプチド
鎖と、を含み、第１及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、それぞれ、配列番号７及び８、９及び８
、７及び１４、７及び１５、７及び１６、１０及び１６、７及び１７、７及び１８、７及
び１９、７及び２０、７及び２１、７及び２２、１１及び２３、１２及び２４、７及び２
５、又は１３及び２６のアミノ酸配列を含むか、それから本質的になるか、又はそれから
なり、第１及び第２のＴＣＲＤは、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員
することができるＴＣＲＭを形成し、第１及び第２のＦａｂ鎖は、標的抗原に特異的に結
合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形成する。いくつかの実施形態では、ａ）第１のＦ
ａｂ鎖はＶＨ及びＣＨ１抗体ドメインを含み、第２のＦａｂ鎖はＶＬ及びＣＬ抗体ドメイ
ンを含み、又はｂ）第１のＦａｂ鎖はＶＬ及びＣＬ抗体ドメインを含み、第２のＦａｂ鎖
はＶＨ及びＣＨ１抗体ドメインを含む。いくつかの実施形態では、ＣＨ１ドメインは、配
列番号３７～４７のいずれか１つのアミノ酸配列を含み、及び／又はＣＬドメインは、配
列番号４８のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＨ１ドメインは、配列番
号３７のアミノ酸配列を含むか、それから本質的になるか、又はそれからなり、ＣＬドメ
インは、配列番号４８のアミノ酸配列を含むか、それから本質的になるか、又はそれから
なる。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、非限定的に、ＣＤ１９
、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲ
Ｃ５Ｄ、及びＦＣＲＬ５、その変異型又は変異体を含むものを含む細胞表面抗原に特異的
に結合する。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ペプチド／ＭＨ
Ｃ複合体に特異的に結合し、ペプチドは、非限定的に、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－
Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡＳ、ヒ
ストンＨ３．３、及びＰＳＡ、その変異型又は変異体を含むものを含むタンパク質に由来
する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ連結ペプチド又はその
断片を更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ連結ペプチド又はその断片
を更に含む。いくつかの実施形態では、第１の連結ペプチドは、配列番号３１若しくは３
２又はその変異型のアミノ酸配列を含み、及び／又は第２の連結ペプチドは、配列番号３
３若しくは３４又はその変異型のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１及
び第２の連結ペプチドは、ジスルフィド結合によって連結される。いくつかの実施形態で
は、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２のＴＣ
ＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第２のＴＣ
Ｒ細胞内ドメインは、配列番号３６又はその変異型のアミノ酸配列を含む。いくつかの実
施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－
１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、又はＣＤ４０由来など）を含む、少なくと
も１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ
が、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み
、第１及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化させる、互いの結合親和性を有
する。いくつかの実施形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合に
よって連結される。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε、及
びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員す
ることができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、配列番号７及び８の配列を有す
るＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連
シグナル伝達分子の動員を強化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは
、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃ
ａＴＣＲモジュール間又はドメイン間にスペーサモジュールが存在する。
【0143】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲは、標的抗原に特異的に結合し
、ａ）ＴＣＲの膜貫通ドメインのうちの１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１の
ＴＣＲＤ、及びＴＣＲの他の膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２の
ＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に特異的に結合するＦａｂ’と、を含み、第１及び第２のＴＣ
ＲＤは、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することのできるＴＣＲＭ
を形成し、Ｆａｂ’は、ＶＨ、ＣＨ１、及び部分ヒンジ抗体ドメインを含む第１のＦａｂ
’鎖、並びにＶＬ及びＣＬ抗体ドメインを含む第２のＦａｂ’鎖を含み、第１のＦａｂ’
鎖は第１又は第２のＴＣＲＤに連結し、第２のＦａｂ’鎖は他のＴＣＲＤに連結する。い
くつかの実施形態では、ＴＣＲＤの一方又は両方とそれらの連結したＦａｂ’鎖との間に
ペプチドリンカーが存在する。いくつかの実施形態では、ＣＨ１ドメイン内の残基とＣＬ
ドメイン内の残基との間にジスルフィド結合が存在する。いくつかの実施形態では、ＣＨ
１及び／又はＣＬドメインは、互いにＦａｂ’鎖の結合親和性を増加させる１つ以上の改
変を含む。いくつかの実施形態では、ＣＨ１及びＣＬドメインは、第１のＦａｂ’鎖がＶ
Ｈ、ＣＬ、及び部分ヒンジ抗体ドメインを含み、第２のＦａｂ’鎖がＶＬ及びＣＨ１ドメ
インを含むように交換される。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ’は、非限定的に、ＣＤ
１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、Ｇ
ＰＲＣ５Ｄ、及びＦＣＲＬ５、その変異型又は変異体を含むものを含む細胞表面抗原に特
異的に結合する。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ’は、ペプチド／ＭＨＣ複合体に特異
的に結合し、ペプチドは、非限定的に、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－Ｅ
ＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡＳ、ヒストンＨ３．３
、及びＰＳＡ、その変異型又は変異体を含むものを含むタンパク質に由来する。いくつか
の実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインを含む
安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化さ
せる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１又は第２の安定化ドメ
インは、第１のＴＣＲＤとその連結されたＦａｂ’鎖との間に位置し、他の安定化ドメイ
ンは、第２のＴＣＲＤとその連結されたＦａｂ’鎖との間に位置する。いくつかの実施形
態では、ＴＣＲ－ＴＭの両方が天然に存在する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭ
のうちの少なくとも１つは、天然に存在しない。
、ａ）ＴＣＲの膜貫通ドメインのうちの１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１の
ＴＣＲＤ、及びＴＣＲの他の膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２の
ＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に特異的に結合するＦａｂ’と、を含み、第１及び第２のＴＣ
ＲＤは、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することのできるＴＣＲＭ
を形成し、Ｆａｂ’は、ＶＨ、ＣＨ１、及び部分ヒンジ抗体ドメインを含む第１のＦａｂ
’鎖、並びにＶＬ及びＣＬ抗体ドメインを含む第２のＦａｂ’鎖を含み、第１のＦａｂ’
鎖は第１又は第２のＴＣＲＤに連結し、第２のＦａｂ’鎖は他のＴＣＲＤに連結する。い
くつかの実施形態では、ＴＣＲＤの一方又は両方とそれらの連結したＦａｂ’鎖との間に
ペプチドリンカーが存在する。いくつかの実施形態では、ＣＨ１ドメイン内の残基とＣＬ
ドメイン内の残基との間にジスルフィド結合が存在する。いくつかの実施形態では、ＣＨ
１及び／又はＣＬドメインは、互いにＦａｂ’鎖の結合親和性を増加させる１つ以上の改
変を含む。いくつかの実施形態では、ＣＨ１及びＣＬドメインは、第１のＦａｂ’鎖がＶ
Ｈ、ＣＬ、及び部分ヒンジ抗体ドメインを含み、第２のＦａｂ’鎖がＶＬ及びＣＨ１ドメ
インを含むように交換される。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ’は、非限定的に、ＣＤ
１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、Ｇ
ＰＲＣ５Ｄ、及びＦＣＲＬ５、その変異型又は変異体を含むものを含む細胞表面抗原に特
異的に結合する。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ’は、ペプチド／ＭＨＣ複合体に特異
的に結合し、ペプチドは、非限定的に、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－Ｅ
ＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡＳ、ヒストンＨ３．３
、及びＰＳＡ、その変異型又は変異体を含むものを含むタンパク質に由来する。いくつか
の実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインを含む
安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化さ
せる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１又は第２の安定化ドメ
インは、第１のＴＣＲＤとその連結されたＦａｂ’鎖との間に位置し、他の安定化ドメイ
ンは、第２のＴＣＲＤとその連結されたＦａｂ’鎖との間に位置する。いくつかの実施形
態では、ＴＣＲ－ＴＭの両方が天然に存在する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭ
のうちの少なくとも１つは、天然に存在しない。
【0144】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲは、標的抗原に特異的に結合し
、ａ）ＴＣＲの膜貫通ドメインのうちの１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１の
ＴＣＲＤ、及びＴＣＲの他の膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２の
ＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に特異的に結合する（Ｆａｂ’）２と、を含み、第１及び第２
のＴＣＲＤは、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することのできるＴ
ＣＲＭを形成し、（Ｆａｂ’）２は、ＶＨ、ＣＨ１、及び部分ヒンジ抗体ドメインを含む
第１及び第２の（Ｆａｂ’）２鎖、並びにＶＬ及びＣＬ抗体ドメインを含む第３及び第４
の（Ｆａｂ’）２鎖を含み、第１の（Ｆａｂ’）２鎖は第１又は第２のＴＣＲＤに連結し
、第２の（Ｆａｂ’）２鎖は他のＴＣＲＤに連結する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ
Ｄの一方又は両方とそれらの連結した（Ｆａｂ’）２鎖との間にペプチドリンカーが存在
する。いくつかの実施形態では、ＣＨ１ドメイン内の残基とＣＬドメイン内の残基との間
にジスルフィド結合が存在する。いくつかの実施形態では、ＣＨ１及び／又はＣＬドメイ
ンは、互いに（Ｆａｂ’）２鎖の結合親和性を増加させる１つ以上の改変を含む。いくつ
かの実施形態では、ＣＨ１及びＣＬドメインは、第１及び第２の（Ｆａｂ’）２鎖がＶＨ
、ＣＬ、及び部分ヒンジ抗体ドメインを含み、第３及び第４の（Ｆａｂ’）２鎖がＶＬ及
びＣＨ１ドメインを含むように交換される。いくつかの実施形態では、（Ｆａｂ’）２は
、非限定的に、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯ
Ｒ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ、及びＦＣＲＬ５、その変異型又は変異体を含むものを含
む細胞表面抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、（Ｆａｂ’）２は、ペプ
チド／ＭＨＣ複合体に特異的に結合し、ペプチドは、非限定的に、ＷＴ－１、ＡＦＰ、Ｈ
ＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、Ｋ
ＲＡＳ、ヒストンＨ３．３、及びＰＳＡ、その変異型又は変異体を含むものを含むタンパ
ク質に由来する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメイン及び第
２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安定化ドメイン
が、ｃａＴＣＲを安定化させる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、
第１又は第２の安定化ドメインは、第１のＴＣＲＤとその連結された（Ｆａｂ’）２鎖と
の間に位置し、他の安定化ドメインは、第２のＴＣＲＤとその連結された（Ｆａｂ’）２
鎖との間に位置する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭの両方が天然に存在する。
いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのうちの少なくとも１つは、天然に存在しない。
、ａ）ＴＣＲの膜貫通ドメインのうちの１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１の
ＴＣＲＤ、及びＴＣＲの他の膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２の
ＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に特異的に結合する（Ｆａｂ’）２と、を含み、第１及び第２
のＴＣＲＤは、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することのできるＴ
ＣＲＭを形成し、（Ｆａｂ’）２は、ＶＨ、ＣＨ１、及び部分ヒンジ抗体ドメインを含む
第１及び第２の（Ｆａｂ’）２鎖、並びにＶＬ及びＣＬ抗体ドメインを含む第３及び第４
の（Ｆａｂ’）２鎖を含み、第１の（Ｆａｂ’）２鎖は第１又は第２のＴＣＲＤに連結し
、第２の（Ｆａｂ’）２鎖は他のＴＣＲＤに連結する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ
Ｄの一方又は両方とそれらの連結した（Ｆａｂ’）２鎖との間にペプチドリンカーが存在
する。いくつかの実施形態では、ＣＨ１ドメイン内の残基とＣＬドメイン内の残基との間
にジスルフィド結合が存在する。いくつかの実施形態では、ＣＨ１及び／又はＣＬドメイ
ンは、互いに（Ｆａｂ’）２鎖の結合親和性を増加させる１つ以上の改変を含む。いくつ
かの実施形態では、ＣＨ１及びＣＬドメインは、第１及び第２の（Ｆａｂ’）２鎖がＶＨ
、ＣＬ、及び部分ヒンジ抗体ドメインを含み、第３及び第４の（Ｆａｂ’）２鎖がＶＬ及
びＣＨ１ドメインを含むように交換される。いくつかの実施形態では、（Ｆａｂ’）２は
、非限定的に、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯ
Ｒ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ、及びＦＣＲＬ５、その変異型又は変異体を含むものを含
む細胞表面抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、（Ｆａｂ’）２は、ペプ
チド／ＭＨＣ複合体に特異的に結合し、ペプチドは、非限定的に、ＷＴ－１、ＡＦＰ、Ｈ
ＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、Ｋ
ＲＡＳ、ヒストンＨ３．３、及びＰＳＡ、その変異型又は変異体を含むものを含むタンパ
ク質に由来する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメイン及び第
２の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安定化ドメイン
が、ｃａＴＣＲを安定化させる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、
第１又は第２の安定化ドメインは、第１のＴＣＲＤとその連結された（Ｆａｂ’）２鎖と
の間に位置し、他の安定化ドメインは、第２のＴＣＲＤとその連結された（Ｆａｂ’）２
鎖との間に位置する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭの両方が天然に存在する。
いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのうちの少なくとも１つは、天然に存在しない。
【0145】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲは、標的抗原に特異的に結合し
、ａ）ＴＣＲの膜貫通ドメインのうちの１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１の
ＴＣＲＤ、及びＴＣＲの他の膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２の
ＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に特異的に結合するＦｖと、を含み、第１及び第２のＴＣＲＤ
は、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することのできるＴＣＲＭを形
成し、Ｆｖは、ＶＨ抗体ドメインを含む第１のＦｖ鎖、及びＶＬ抗体ドメインを含む第２
のＦｖ鎖を含み、第１のＦｖ鎖は第１又は第２のＴＣＲＤに連結し、第２のＦｖ鎖は他の
ＴＣＲＤに連結する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＤの一方又は両方とそれらの連結
したＦｖ鎖との間にペプチドリンカーが存在する。いくつかの実施形態では、Ｆｖは、非
限定的に、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２
、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ、及びＦＣＲＬ５、その変異型又は変異体を含むものを含む細
胞表面抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、Ｆｖは、ペプチド／ＭＨＣ複
合体に特異的に結合し、ペプチドは、非限定的に、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７
、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡＳ、ヒスト
ンＨ３．３、及びＰＳＡ、その変異型又は変異体を含むものを含むタンパク質に由来する
。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメ
インを含む安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲ
を安定化させる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１又は第２の
安定化ドメインは、第１のＴＣＲＤとその連結されたＦｖ鎖との間に位置し、他の安定化
ドメインは、第２のＴＣＲＤとその連結されたＦｖ鎖との間に位置する。いくつかの実施
形態では、ＴＣＲ－ＴＭの両方が天然に存在する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－Ｔ
Ｍのうちの少なくとも１つは、天然に存在しない。
、ａ）ＴＣＲの膜貫通ドメインのうちの１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１の
ＴＣＲＤ、及びＴＣＲの他の膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２の
ＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に特異的に結合するＦｖと、を含み、第１及び第２のＴＣＲＤ
は、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することのできるＴＣＲＭを形
成し、Ｆｖは、ＶＨ抗体ドメインを含む第１のＦｖ鎖、及びＶＬ抗体ドメインを含む第２
のＦｖ鎖を含み、第１のＦｖ鎖は第１又は第２のＴＣＲＤに連結し、第２のＦｖ鎖は他の
ＴＣＲＤに連結する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＤの一方又は両方とそれらの連結
したＦｖ鎖との間にペプチドリンカーが存在する。いくつかの実施形態では、Ｆｖは、非
限定的に、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２
、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ、及びＦＣＲＬ５、その変異型又は変異体を含むものを含む細
胞表面抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、Ｆｖは、ペプチド／ＭＨＣ複
合体に特異的に結合し、ペプチドは、非限定的に、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７
、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡＳ、ヒスト
ンＨ３．３、及びＰＳＡ、その変異型又は変異体を含むものを含むタンパク質に由来する
。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメ
インを含む安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲ
を安定化させる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１又は第２の
安定化ドメインは、第１のＴＣＲＤとその連結されたＦｖ鎖との間に位置し、他の安定化
ドメインは、第２のＴＣＲＤとその連結されたＦｖ鎖との間に位置する。いくつかの実施
形態では、ＴＣＲ－ＴＭの両方が天然に存在する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－Ｔ
Ｍのうちの少なくとも１つは、天然に存在しない。
【0146】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲは、標的抗原に特異的に結合し
、ａ）ＴＣＲの膜貫通ドメインのうちの１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１の
ＴＣＲＤ、及びＴＣＲの他の膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２の
ＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に特異的に結合する第１のｓｃＦｖと、を含み、第１及び第２
のＴＣＲＤは、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することのできるＴ
ＣＲＭを形成し、第１のｓｃＦｖは、ＶＨ及びＶＬ抗体ドメインを含み、第１のｓｃＦｖ
は、第１又は第２のＴＣＲＤに連結する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１
のｓｃＦｖに連結するか、又は第１のｓｃＦｖに連結していないＴＣＲＤに連結する第２
の抗原結合モジュールを更に含む。いくつかの実施形態では、第２の抗原結合モジュール
は、標的抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、第２の抗原結合モジュール
は、標的抗原以外の抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、第２の抗原結合
モジュールは第２のｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、第１のｓｃＦｖとその連
結したＴＣＲＤとの間、及び／又は第２の抗原結合モジュールとその連結したｓｃＦｖ又
はＴＣＲＤとの間にペプチドリンカーが存在する。いくつかの実施形態では、ｓｃＦｖは
、非限定的に、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯ
Ｒ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ、及びＦＣＲＬ５、その変異型又は変異体を含むものを含
む細胞表面抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ｓｃＦｖは、ペプチド／
ＭＨＣ複合体に特異的に結合し、ペプチドは、非限定的に、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１
６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡＳ
、ヒストンＨ３．３、及びＰＳＡ、その変異型又は変異体を含むものを含むタンパク質に
由来する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメイン及び第２の安
定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安定化ドメインが、ｃ
ａＴＣＲを安定化させる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１又
は第２の安定化ドメインは、第１のｓｃＦｖとその連結されたＴＣＲＤとの間に位置し、
他の安定化ドメインは、第２のＴＣＲＤに連結する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－
ＴＭの両方が天然に存在する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのうちの少なくと
も１つは、天然に存在しない。
、ａ）ＴＣＲの膜貫通ドメインのうちの１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１の
ＴＣＲＤ、及びＴＣＲの他の膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２の
ＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に特異的に結合する第１のｓｃＦｖと、を含み、第１及び第２
のＴＣＲＤは、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することのできるＴ
ＣＲＭを形成し、第１のｓｃＦｖは、ＶＨ及びＶＬ抗体ドメインを含み、第１のｓｃＦｖ
は、第１又は第２のＴＣＲＤに連結する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１
のｓｃＦｖに連結するか、又は第１のｓｃＦｖに連結していないＴＣＲＤに連結する第２
の抗原結合モジュールを更に含む。いくつかの実施形態では、第２の抗原結合モジュール
は、標的抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、第２の抗原結合モジュール
は、標的抗原以外の抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、第２の抗原結合
モジュールは第２のｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、第１のｓｃＦｖとその連
結したＴＣＲＤとの間、及び／又は第２の抗原結合モジュールとその連結したｓｃＦｖ又
はＴＣＲＤとの間にペプチドリンカーが存在する。いくつかの実施形態では、ｓｃＦｖは
、非限定的に、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯ
Ｒ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ、及びＦＣＲＬ５、その変異型又は変異体を含むものを含
む細胞表面抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、ｓｃＦｖは、ペプチド／
ＭＨＣ複合体に特異的に結合し、ペプチドは、非限定的に、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１
６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡＳ
、ヒストンＨ３．３、及びＰＳＡ、その変異型又は変異体を含むものを含むタンパク質に
由来する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメイン及び第２の安
定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安定化ドメインが、ｃ
ａＴＣＲを安定化させる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１又
は第２の安定化ドメインは、第１のｓｃＦｖとその連結されたＴＣＲＤとの間に位置し、
他の安定化ドメインは、第２のＴＣＲＤに連結する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－
ＴＭの両方が天然に存在する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのうちの少なくと
も１つは、天然に存在しない。
【0147】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲは、標的抗原に特異的に結合し
、ａ）ＴＣＲの膜貫通ドメインのうちの１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１の
ＴＣＲＤ、及びＴＣＲの他の膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２の
ＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に特異的に結合する第１のｓｃＦｖ、及び第２のｓｃＦｖと、
を含み、第１及び第２のＴＣＲＤは、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動
員することのできるＴＣＲＭを形成し、第１及び第２のｓｃＦｖは、ＶＨ及びＶＬ抗体ド
メインを含み、第１のｓｃＦｖは、第１又は第２のＴＣＲＤに連結し、第２のｓｃＦｖは
他のＴＣＲＤに連結する。いくつかの実施形態では、第２のＴＣＲＤは、標的抗原に特異
的に結合する。いくつかの実施形態では、第２のｓｃＦｖは、第１のｓｃＦｖ．のアミノ
酸配列を含むか、それから本質的になるか、又はそれからなる。いくつかの実施形態では
、第２のｓｃＦｖは、標的抗原以外の抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では
、第１及び／又は第２のｓｃＦｖは、個々に、非限定的に、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２
２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ、及びＦＣＲ
Ｌ５、その変異型又は変異体を含むものを含む細胞表面抗原に特異的に結合する。いくつ
かの実施形態では、第１及び／又は第２のｓｃＦｖは、個々に、ペプチド／ＭＨＣ複合体
に特異的に結合し、ペプチドは、非限定的に、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、Ｎ
Ｙ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡＳ、ヒストンＨ
３．３、及びＰＳＡ、その変異型又は変異体を含むものを含むタンパク質に由来する。い
くつかの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメイン
を含む安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安
定化させる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１又は第２の安定
化ドメインは、第１のｓｃＦｖとその連結されたＴＣＲＤとの間に位置し、他の安定化ド
メインは、第２のｓｃＦｖとその連結されたＴＣＲＤとの間に位置する。いくつかの実施
形態では、ＴＣＲ－ＴＭの両方が天然に存在する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－Ｔ
Ｍのうちの少なくとも１つは、天然に存在しない。
多重特異性ｃａＴＣＲ
、ａ）ＴＣＲの膜貫通ドメインのうちの１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１の
ＴＣＲＤ、及びＴＣＲの他の膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２の
ＴＣＲＤと、ｂ）標的抗原に特異的に結合する第１のｓｃＦｖ、及び第２のｓｃＦｖと、
を含み、第１及び第２のＴＣＲＤは、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動
員することのできるＴＣＲＭを形成し、第１及び第２のｓｃＦｖは、ＶＨ及びＶＬ抗体ド
メインを含み、第１のｓｃＦｖは、第１又は第２のＴＣＲＤに連結し、第２のｓｃＦｖは
他のＴＣＲＤに連結する。いくつかの実施形態では、第２のＴＣＲＤは、標的抗原に特異
的に結合する。いくつかの実施形態では、第２のｓｃＦｖは、第１のｓｃＦｖ．のアミノ
酸配列を含むか、それから本質的になるか、又はそれからなる。いくつかの実施形態では
、第２のｓｃＦｖは、標的抗原以外の抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では
、第１及び／又は第２のｓｃＦｖは、個々に、非限定的に、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２
２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ、及びＦＣＲ
Ｌ５、その変異型又は変異体を含むものを含む細胞表面抗原に特異的に結合する。いくつ
かの実施形態では、第１及び／又は第２のｓｃＦｖは、個々に、ペプチド／ＭＨＣ複合体
に特異的に結合し、ペプチドは、非限定的に、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、Ｎ
Ｙ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１、ＫＲＡＳ、ヒストンＨ
３．３、及びＰＳＡ、その変異型又は変異体を含むものを含むタンパク質に由来する。い
くつかの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメイン
を含む安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安
定化させる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１又は第２の安定
化ドメインは、第１のｓｃＦｖとその連結されたＴＣＲＤとの間に位置し、他の安定化ド
メインは、第２のｓｃＦｖとその連結されたＴＣＲＤとの間に位置する。いくつかの実施
形態では、ＴＣＲ－ＴＭの両方が天然に存在する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－Ｔ
Ｍのうちの少なくとも１つは、天然に存在しない。
多重特異性ｃａＴＣＲ
【0148】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、２つ以上（例えば、２、３、４、又はそれ以
上）の異なる標的抗原又はエピトープに特異的に結合する多重特異性ｃａＴＣＲである。
いくつかの実施形態では、多重特異性ｃａＴＣＲは、２つ以上（例えば、２、３、４、又
はそれ以上）の異なる標的抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、多重特異
性ｃａＴＣＲは、同じ標的抗原上の２つ以上（例えば、２、３、４、又はそれ以上）の異
なるエピトープに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、多重特異性ｃａＴＣＲは
、抗原又はエピトープごとの抗原結合モジュールを含む。いくつかの実施形態では、多重
特異性ｃａＴＣＲは、少なくとも１つの抗原又はエピトープのための２つを超える抗原結
合モジュールを含む。いくつかの実施形態では、多重特異性ｃａＴＣＲは、抗原又はエピ
トープに各々特異的に結合する２つ以上（例えば、２、３、４、又はそれ以上）の抗原結
合ドメインを含む多重特異性抗原結合モジュールを含む。いくつかの実施形態では、多重
特異性ｃａＴＣＲは二重特異性である。いくつかの実施形態では、多重特異性ｃａＴＣＲ
は三重特異性である。
上）の異なる標的抗原又はエピトープに特異的に結合する多重特異性ｃａＴＣＲである。
いくつかの実施形態では、多重特異性ｃａＴＣＲは、２つ以上（例えば、２、３、４、又
はそれ以上）の異なる標的抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、多重特異
性ｃａＴＣＲは、同じ標的抗原上の２つ以上（例えば、２、３、４、又はそれ以上）の異
なるエピトープに特異的に結合する。いくつかの実施形態では、多重特異性ｃａＴＣＲは
、抗原又はエピトープごとの抗原結合モジュールを含む。いくつかの実施形態では、多重
特異性ｃａＴＣＲは、少なくとも１つの抗原又はエピトープのための２つを超える抗原結
合モジュールを含む。いくつかの実施形態では、多重特異性ｃａＴＣＲは、抗原又はエピ
トープに各々特異的に結合する２つ以上（例えば、２、３、４、又はそれ以上）の抗原結
合ドメインを含む多重特異性抗原結合モジュールを含む。いくつかの実施形態では、多重
特異性ｃａＴＣＲは二重特異性である。いくつかの実施形態では、多重特異性ｃａＴＣＲ
は三重特異性である。
【0149】
多重特異性分子は、少なくとも２つの異なる抗原又はエピトープに対する結合特異性を
有する分子である（例えば、二重特異性抗体は、２つの抗原又はエピトープに対する結合
特異性を有する）。２を超える価数及び／又は特異性を有する多重特異性ｃａＴＣＲも想
到される。二重特異性抗体は、記載されており、例えば、Ｂｒｉｎｋｍａｎｎ Ｕ．ａｎ
ｄ Ｋｏｎｔｅｒｍａｎｎ Ｒ．Ｅ．（２０１７）ＭＡＢＳ，９（２），１８２－２１２
を参照されたい。三重特異性抗体を調製することができる。Ｔｕｔｔ ｅｔ ａｌ．Ｊ．
Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７：６０（１９９１）を参照されたい。当業者は、当該技術分野に
おいて既知の個々の多重特異性分子の適切な特徴を選択して、多重特異性ｃａＴＣＲを形
成することができることを理解されたい。
有する分子である（例えば、二重特異性抗体は、２つの抗原又はエピトープに対する結合
特異性を有する）。２を超える価数及び／又は特異性を有する多重特異性ｃａＴＣＲも想
到される。二重特異性抗体は、記載されており、例えば、Ｂｒｉｎｋｍａｎｎ Ｕ．ａｎ
ｄ Ｋｏｎｔｅｒｍａｎｎ Ｒ．Ｅ．（２０１７）ＭＡＢＳ，９（２），１８２－２１２
を参照されたい。三重特異性抗体を調製することができる。Ｔｕｔｔ ｅｔ ａｌ．Ｊ．
Ｉｍｍｕｎｏｌ．１４７：６０（１９９１）を参照されたい。当業者は、当該技術分野に
おいて既知の個々の多重特異性分子の適切な特徴を選択して、多重特異性ｃａＴＣＲを形
成することができることを理解されたい。
【0150】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ（本明細書では「多重特異性ｃａＴＣＲ」とも称
される）は、ａ）第１の標的抗原に特異的に結合する第１の抗原結合ドメイン、及び第２
の標的抗原に特異的に結合する第２の抗原結合ドメインを含む多重特異性（例えば、二重
特異性）抗原結合モジュールと、ｂ）第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ（ＴＣＲ
Ｄ１）、及び第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ２）を含むＴＣＲＭと
、を含み、ＴＣＲＭは、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を促進する
。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ連結ペプチド又はその断片
を更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ連結ペプチド又はその断片を更
に含む。いくつかの実施形態では、第１の連結ペプチドは、第１のＴＣＲ－ＴＭが由来す
るＴＣＲサブユニットの連結ペプチドの全て若しくは一部、又はその変異型を含み、及び
／又は第２の連結ペプチドは、第２のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサブユニットの連結
ペプチドの全て若しくは一部、又はこれらの変異型を含む。いくつかの実施形態では、第
１及び第２の連結ペプチドは、ジスルフィド結合によって連結される。いくつかの実施形
態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２の
ＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１の
ＴＣＲ細胞内ドメインは、第１のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサブユニットの細胞内ド
メイン由来の配列を含み、及び／又は第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、第２のＴＣＲ－Ｔ
Ｍが由来するＴＣＲサブユニットの細胞内ドメイン由来の配列を含む。いくつかの実施形
態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサブユニットの断片で
あり、及び／又は、第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサブユニッ
トの断片である。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配
列（ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、又はＣＤ４
０由来など）を含む、少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつ
かの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインを含
む安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化
させる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２の安定化ド
メインは、ジスルフィド結合によって連結される。いくつかの実施形態では、第１及び第
２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体部分、又はその変異型を
含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε、及びζζからな
る群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することができ
る。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、天然に存在するαβ Ｔ細胞受容体の膜貫通
ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動
員を強化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３
複合体形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール間
又はドメイン間にスペーサモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣ
Ｒ－ＴＭ及び第２のＴＣＲ－ＴＭの両方は、天然に存在する。いくつかの実施形態では、
ＴＣＲ－ＴＭのうちの少なくとも１つは、天然に存在しない。いくつかの実施形態では、
第１のＴＣＲ－ＴＭは、それが由来する膜貫通ドメインと比較して、最大５個のアミノ酸
置換（例えば、単一のアミノ酸置換）を含み、及び／又は、第２のＴＣＲ－ＴＭは、それ
が由来する膜貫通ドメインと比較して、最大５個のアミノ酸置換（例えば、単一のアミノ
酸置換）を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ中の置換アミノ酸は、第
２のＴＣＲ－ＴＭ中の置換アミノ酸に近接している。いくつかの実施形態では、１つ以上
の置換アミノ酸は、ＣＤ３への結合に関与する第１又は第２のＴＣＲ－ＴＭ中のアミノ酸
に近接している。いくつかの実施形態では、１つ以上の（例えば、各）置換アミノ酸は、
それらの対応する非置換アミノ酸よりも疎水性である。いくつかの実施形態では、第１の
ＴＣＲ－ＴＭは、配列番号７及び９～１３のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含み、
第２のＴＣＲ－ＴＭは、配列番号８及び１４～２６のうちのいずれか１つのアミノ酸配列
を含む。
される）は、ａ）第１の標的抗原に特異的に結合する第１の抗原結合ドメイン、及び第２
の標的抗原に特異的に結合する第２の抗原結合ドメインを含む多重特異性（例えば、二重
特異性）抗原結合モジュールと、ｂ）第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ（ＴＣＲ
Ｄ１）、及び第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ２）を含むＴＣＲＭと
、を含み、ＴＣＲＭは、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を促進する
。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ連結ペプチド又はその断片
を更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ連結ペプチド又はその断片を更
に含む。いくつかの実施形態では、第１の連結ペプチドは、第１のＴＣＲ－ＴＭが由来す
るＴＣＲサブユニットの連結ペプチドの全て若しくは一部、又はその変異型を含み、及び
／又は第２の連結ペプチドは、第２のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサブユニットの連結
ペプチドの全て若しくは一部、又はこれらの変異型を含む。いくつかの実施形態では、第
１及び第２の連結ペプチドは、ジスルフィド結合によって連結される。いくつかの実施形
態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含み、及び／又は第２の
ＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、第１の
ＴＣＲ細胞内ドメインは、第１のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサブユニットの細胞内ド
メイン由来の配列を含み、及び／又は第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、第２のＴＣＲ－Ｔ
Ｍが由来するＴＣＲサブユニットの細胞内ドメイン由来の配列を含む。いくつかの実施形
態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサブユニットの断片で
あり、及び／又は、第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサブユニッ
トの断片である。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配
列（ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、又はＣＤ４
０由来など）を含む、少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメインを更に含む。いくつ
かの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインを含
む安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化
させる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第１及び第２の安定化ド
メインは、ジスルフィド結合によって連結される。いくつかの実施形態では、第１及び第
２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体部分、又はその変異型を
含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε、及びζζからな
る群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することができ
る。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、天然に存在するαβ Ｔ細胞受容体の膜貫通
ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動
員を強化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－ＣＤ３
複合体形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュール間
又はドメイン間にスペーサモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣ
Ｒ－ＴＭ及び第２のＴＣＲ－ＴＭの両方は、天然に存在する。いくつかの実施形態では、
ＴＣＲ－ＴＭのうちの少なくとも１つは、天然に存在しない。いくつかの実施形態では、
第１のＴＣＲ－ＴＭは、それが由来する膜貫通ドメインと比較して、最大５個のアミノ酸
置換（例えば、単一のアミノ酸置換）を含み、及び／又は、第２のＴＣＲ－ＴＭは、それ
が由来する膜貫通ドメインと比較して、最大５個のアミノ酸置換（例えば、単一のアミノ
酸置換）を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ中の置換アミノ酸は、第
２のＴＣＲ－ＴＭ中の置換アミノ酸に近接している。いくつかの実施形態では、１つ以上
の置換アミノ酸は、ＣＤ３への結合に関与する第１又は第２のＴＣＲ－ＴＭ中のアミノ酸
に近接している。いくつかの実施形態では、１つ以上の（例えば、各）置換アミノ酸は、
それらの対応する非置換アミノ酸よりも疎水性である。いくつかの実施形態では、第１の
ＴＣＲ－ＴＭは、配列番号７及び９～１３のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含み、
第２のＴＣＲ－ＴＭは、配列番号８及び１４～２６のうちのいずれか１つのアミノ酸配列
を含む。
【0151】
二重特異性ｃａＴＣＲの例示的な構造は図１３Ａ～１３Ｅに示され、標的抗原がＣＤ１
９及びＣＤ２２であるが、当業者は、他の標的抗原又はエピトープを標的化する二重特異
性ｃａＴＣＲが、同じ構造フォーマットを使用して調製し得ることを容易に理解する。
９及びＣＤ２２であるが、当業者は、他の標的抗原又はエピトープを標的化する二重特異
性ｃａＴＣＲが、同じ構造フォーマットを使用して調製し得ることを容易に理解する。
【0152】
例えば、ＤＶＤ ＩｇＧｓに由来する二重可変ドメイン（ＤＶＤ）（ＤｉＧｉａｍｍａ
ｒｉｎｏ ｅｔ ａｌ．，ｍＡｂｓ ３（５）：４８７－４９４を参照されたい）は、ｃ
ａＴＣＲ内の二重特異性抗原結合モジュールとして使用することができる（図１３Ａ）。
外側可変ドメイン及び内側可変ドメインの融合のための様々なリンカーが開発され、ＤＶ
Ｄモジュールを有する二重特異性ｃａＴＣＲを構築するのに有用であり得るＤＶＤ－Ｉｇ
ｓのために最適化されている。しかしながら、ＤＶＤモジュールにおける可変ドメインス
タッキング手法は、内側可変ドメインの折り畳み及び標的結合親和性に影響を及ぼし得る
。２つの可変ドメインの間のリンカーと２つの可変ドメインの順序とは、ｃａＴＣＲの有
効性に影響を及ぼし得る。
ｒｉｎｏ ｅｔ ａｌ．，ｍＡｂｓ ３（５）：４８７－４９４を参照されたい）は、ｃ
ａＴＣＲ内の二重特異性抗原結合モジュールとして使用することができる（図１３Ａ）。
外側可変ドメイン及び内側可変ドメインの融合のための様々なリンカーが開発され、ＤＶ
Ｄモジュールを有する二重特異性ｃａＴＣＲを構築するのに有用であり得るＤＶＤ－Ｉｇ
ｓのために最適化されている。しかしながら、ＤＶＤモジュールにおける可変ドメインス
タッキング手法は、内側可変ドメインの折り畳み及び標的結合親和性に影響を及ぼし得る
。２つの可変ドメインの間のリンカーと２つの可変ドメインの順序とは、ｃａＴＣＲの有
効性に影響を及ぼし得る。
【0153】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、ａ）第１の標的抗原に特異的に結合するＦｖ
、及び第２の標的抗原に特異的に結合するＦａｂを含む多重特異性（例えば、二重特異性
）抗原結合モジュールと、ｂ）第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ１）
、及び第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ２）を含むＴＣＲＭと、を含
み、ＴＣＲＭは、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を促進する。
、及び第２の標的抗原に特異的に結合するＦａｂを含む多重特異性（例えば、二重特異性
）抗原結合モジュールと、ｂ）第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ１）
、及び第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ２）を含むＴＣＲＭと、を含
み、ＴＣＲＭは、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を促進する。
【0154】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、（ｉ）Ｎ末端からＣ末端に向けて、ＶＨ１－
Ｌ１－ＶＨ２－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖、及びＮ末端からＣ末端
に向けて、ＶＬ１－Ｌ２－ＶＬ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む第２のポリペプチド鎖、（ｉ
ｉ）Ｎ末端からＣ末端に向けて、ＶＨ１－Ｌ１－ＶＬ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ１を含む第１の
ポリペプチド鎖、及びＮ末端からＣ末端に向けて、ＶＬ１－Ｌ２－ＶＨ２－ＣＨ１－ＴＣ
ＲＤ２を含む第２のポリペプチド鎖、（ｉｉｉ）Ｎ末端からＣ末端に向けて、ＶＬ１－Ｌ
１－ＶＨ２－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖、及びＮ末端からＣ末端に
向けて、ＶＨ１－Ｌ２－ＶＬ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む第２のポリペプチド鎖、又は（
ｉｖ）Ｎ末端からＣ末端に向けて、ＶＬ１－Ｌ１－ＶＬ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ１を含む第１
のポリペプチド鎖、及びＮ末端からＣ末端に向けて、ＶＨ１－Ｌ２－ＶＨ２－ＣＨ１－Ｔ
ＣＲＤ２を含む第２のポリペプチド鎖、を含み、ＶＨ１及びＶＬ１は、第１の標的抗原に
特異的に結合する第１の抗原結合ドメインを形成し、ＶＨ２及びＶＬ２は、第２の標的抗
原に特異的に結合する第２の抗原結合ドメインを形成し、ＴＣＲＤ１及びＴＣＲＤ２は、
少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を促進するＴＣＲＭを形成し、Ｌ１
及びＬ２は、ペプチドリンカーである。いくつかの実施形態では、Ｌ１及び／又はＬ２は
、約５～約５０（例えば、約５～１０、約１０～１５、又は約１５～３０）のアミノ酸長
である。いくつかの実施形態では、Ｌ１及びＬ２は同じ長さを有する。いくつかの実施形
態では、Ｌ１及びＬ２は、同一のアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、Ｌ１
及びＬ２は異なる長さを有する。いくつかの実施形態では、Ｌ１及びＬ２は、異なるアミ
ノ酸配列を有する。例示的な二重特異性ｃａＴＣＲを図１３Ａに示す。
Ｌ１－ＶＨ２－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖、及びＮ末端からＣ末端
に向けて、ＶＬ１－Ｌ２－ＶＬ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む第２のポリペプチド鎖、（ｉ
ｉ）Ｎ末端からＣ末端に向けて、ＶＨ１－Ｌ１－ＶＬ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ１を含む第１の
ポリペプチド鎖、及びＮ末端からＣ末端に向けて、ＶＬ１－Ｌ２－ＶＨ２－ＣＨ１－ＴＣ
ＲＤ２を含む第２のポリペプチド鎖、（ｉｉｉ）Ｎ末端からＣ末端に向けて、ＶＬ１－Ｌ
１－ＶＨ２－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖、及びＮ末端からＣ末端に
向けて、ＶＨ１－Ｌ２－ＶＬ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む第２のポリペプチド鎖、又は（
ｉｖ）Ｎ末端からＣ末端に向けて、ＶＬ１－Ｌ１－ＶＬ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ１を含む第１
のポリペプチド鎖、及びＮ末端からＣ末端に向けて、ＶＨ１－Ｌ２－ＶＨ２－ＣＨ１－Ｔ
ＣＲＤ２を含む第２のポリペプチド鎖、を含み、ＶＨ１及びＶＬ１は、第１の標的抗原に
特異的に結合する第１の抗原結合ドメインを形成し、ＶＨ２及びＶＬ２は、第２の標的抗
原に特異的に結合する第２の抗原結合ドメインを形成し、ＴＣＲＤ１及びＴＣＲＤ２は、
少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を促進するＴＣＲＭを形成し、Ｌ１
及びＬ２は、ペプチドリンカーである。いくつかの実施形態では、Ｌ１及び／又はＬ２は
、約５～約５０（例えば、約５～１０、約１０～１５、又は約１５～３０）のアミノ酸長
である。いくつかの実施形態では、Ｌ１及びＬ２は同じ長さを有する。いくつかの実施形
態では、Ｌ１及びＬ２は、同一のアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、Ｌ１
及びＬ２は異なる長さを有する。いくつかの実施形態では、Ｌ１及びＬ２は、異なるアミ
ノ酸配列を有する。例示的な二重特異性ｃａＴＣＲを図１３Ａに示す。
【0155】
ＣＯＤＶ－ＩｇＧｓ由来のクロスオーバー二重可変ドメイン（ＣＯＤＶ）（Ｓｔｅｉｎ
ｍｅｔｚ，ｅｔ ａｌ．ｍＡｂｓ（２０１６），８（５）：８６７－８７８を参照）を、
ｃａＴＣＲ中の二重特異性抗原結合モジュールとして使用することができる（図１３Ｂ）
。ＣＯＤＶは、各Ｆｖに対する比較的障害のない抗原結合部位を可能にする。重鎖及び軽
鎖可変領域の融合のための様々なリンカーが開発され、ＣＯＤＶモジュールを有する二重
特異性ｃａＴＣＲを構築するのに有用であり得るＣＯＤＶ－Ｉｇｓのために最適化されて
いる。しかしながら、ＣＯＤＶモジュールの適切な折り畳みは困難であり得、ＣＯＤＶモ
ジュールで使用される長いリンカーは、免疫原性の潜在的な供給源であり得、タンパク質
溶解切断を受けやすい可能性がある。
ｍｅｔｚ，ｅｔ ａｌ．ｍＡｂｓ（２０１６），８（５）：８６７－８７８を参照）を、
ｃａＴＣＲ中の二重特異性抗原結合モジュールとして使用することができる（図１３Ｂ）
。ＣＯＤＶは、各Ｆｖに対する比較的障害のない抗原結合部位を可能にする。重鎖及び軽
鎖可変領域の融合のための様々なリンカーが開発され、ＣＯＤＶモジュールを有する二重
特異性ｃａＴＣＲを構築するのに有用であり得るＣＯＤＶ－Ｉｇｓのために最適化されて
いる。しかしながら、ＣＯＤＶモジュールの適切な折り畳みは困難であり得、ＣＯＤＶモ
ジュールで使用される長いリンカーは、免疫原性の潜在的な供給源であり得、タンパク質
溶解切断を受けやすい可能性がある。
【0156】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、ａ）第１の標的抗原に特異的に結合する第１
のＦｖ、及び第２の標的抗原に特異的に結合する第２のＦｖを含む多重特異性（例えば、
二重特異性）抗原結合モジュールと、ｂ）第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ（Ｔ
ＣＲＤ１）、及び第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ２）を含むＴＣＲ
Ｍと、を含み、ＴＣＲＭは、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を促進
する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、ＣＨ１及びＣＬを更に含む。
のＦｖ、及び第２の標的抗原に特異的に結合する第２のＦｖを含む多重特異性（例えば、
二重特異性）抗原結合モジュールと、ｂ）第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ（Ｔ
ＣＲＤ１）、及び第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ２）を含むＴＣＲ
Ｍと、を含み、ＴＣＲＭは、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を促進
する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、ＣＨ１及びＣＬを更に含む。
【0157】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、（ｉ）Ｎ末端からＣ末端に向けて、ＶＨ１－
Ｌ１－ＶＨ２－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖、及びＮ末端からＣ末端
に向けて、ＶＬ２－Ｌ２－ＶＬ１－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む第２のポリペプチド鎖、又は
（ｉｉ）Ｎ末端からＣ末端に向けて、ＶＬ１－Ｌ１－ＶＬ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ１を含む第
１のポリペプチド鎖、及びＮ末端からＣ末端に向けて、ＶＨ２－Ｌ２－ＶＨ１－ＣＨ１－
ＴＣＲＤ２を含む第２のポリペプチド鎖、を含み、ＶＨ１及びＶＬ１は、第１の標的抗原
に特異的に結合する第１の抗原結合ドメインを形成し、ＶＨ２及びＶＬ２は、第２の標的
抗原に特異的に結合する第２の抗原結合ドメインを形成し、ＴＣＲＤ１及びＴＣＲＤ２は
、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を促進するＴＣＲＭを形成し、Ｌ
１及びＬ２は、ペプチドリンカーである。いくつかの実施形態では、Ｌ１及び／又はＬ２
は、約５～約５０（例えば、約５～２０、約１５～３０、又は約３０～５０）のアミノ酸
長である。いくつかの実施形態では、Ｌ１及びＬ２は同じ長さを有する。いくつかの実施
形態では、Ｌ１及びＬ２は、同一のアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、Ｌ
１及びＬ２は異なる長さを有する。いくつかの実施形態では、Ｌ１及びＬ２は、異なるア
ミノ酸配列を有する。例示的な二重特異性ｃａＴＣＲを図１３Ｂに示す。
Ｌ１－ＶＨ２－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖、及びＮ末端からＣ末端
に向けて、ＶＬ２－Ｌ２－ＶＬ１－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む第２のポリペプチド鎖、又は
（ｉｉ）Ｎ末端からＣ末端に向けて、ＶＬ１－Ｌ１－ＶＬ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ１を含む第
１のポリペプチド鎖、及びＮ末端からＣ末端に向けて、ＶＨ２－Ｌ２－ＶＨ１－ＣＨ１－
ＴＣＲＤ２を含む第２のポリペプチド鎖、を含み、ＶＨ１及びＶＬ１は、第１の標的抗原
に特異的に結合する第１の抗原結合ドメインを形成し、ＶＨ２及びＶＬ２は、第２の標的
抗原に特異的に結合する第２の抗原結合ドメインを形成し、ＴＣＲＤ１及びＴＣＲＤ２は
、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を促進するＴＣＲＭを形成し、Ｌ
１及びＬ２は、ペプチドリンカーである。いくつかの実施形態では、Ｌ１及び／又はＬ２
は、約５～約５０（例えば、約５～２０、約１５～３０、又は約３０～５０）のアミノ酸
長である。いくつかの実施形態では、Ｌ１及びＬ２は同じ長さを有する。いくつかの実施
形態では、Ｌ１及びＬ２は、同一のアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、Ｌ
１及びＬ２は異なる長さを有する。いくつかの実施形態では、Ｌ１及びＬ２は、異なるア
ミノ酸配列を有する。例示的な二重特異性ｃａＴＣＲを図１３Ｂに示す。
【0158】
Ｃｈｅｎ ｅｔ ａｌ．，ｍＡｂｓ８（４）：７６１－７７４に記載されているものな
どの、ｓｃＦｖ－融合タンパク質由来の二重特異性抗原結合モジュールは、二重特異性ｃ
ａＴＣＲ（図１３Ｃ）で使用されてもよい。同様の融合フォーマットを有する二重特異性
抗体の発現は、このフォーマットの適切な折り畳み及び安定性を示している。ｓｃＦｖを
定常ドメインに融合させるための様々なリンカーが開発され、同様のｓｃＦｖ融合ドメイ
ンを有する二重特異性ｃａＴＣＲを構築するのに有用であり得るこれらの二重特異性抗体
について最適化されている。しかしながら、ｓｃＦｖ間の立体障害は、ｓｃＦｖのそれら
の標的抗原への結合を損なう可能性がある。
どの、ｓｃＦｖ－融合タンパク質由来の二重特異性抗原結合モジュールは、二重特異性ｃ
ａＴＣＲ（図１３Ｃ）で使用されてもよい。同様の融合フォーマットを有する二重特異性
抗体の発現は、このフォーマットの適切な折り畳み及び安定性を示している。ｓｃＦｖを
定常ドメインに融合させるための様々なリンカーが開発され、同様のｓｃＦｖ融合ドメイ
ンを有する二重特異性ｃａＴＣＲを構築するのに有用であり得るこれらの二重特異性抗体
について最適化されている。しかしながら、ｓｃＦｖ間の立体障害は、ｓｃＦｖのそれら
の標的抗原への結合を損なう可能性がある。
【0159】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、ａ）第１の標的抗原に特異的に結合する第１
のｓｃＦｖ、及び第２の標的抗原に特異的に結合する第２のｓｃＦｖを含む多重特異性（
例えば、二重特異性）抗原結合モジュールと、ｂ）第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣ
ＲＤ（ＴＣＲＤ１）、及び第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ２）を含
むＴＣＲＭと、を含み、ＴＣＲＭは、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動
員を促進する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、ＣＨ１及びＣＬを更に含む。
のｓｃＦｖ、及び第２の標的抗原に特異的に結合する第２のｓｃＦｖを含む多重特異性（
例えば、二重特異性）抗原結合モジュールと、ｂ）第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣ
ＲＤ（ＴＣＲＤ１）、及び第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ２）を含
むＴＣＲＭと、を含み、ＴＣＲＭは、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動
員を促進する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、ＣＨ１及びＣＬを更に含む。
【0160】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、（ｉ）Ｎ末端からＣ末端に向けて、ｓｃＦｖ
１－Ｌ１－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖、及びＮ末端からＣ末端に向
けて、ｓｃＦｖ２－Ｌ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む第２のポリペプチド鎖、又は、（ｉｉ
）Ｎ末端からＣ末端に向けて、ｓｃＦｖ２－Ｌ１－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリ
ペプチド鎖、及びＮ末端からＣ末端に向けて、ｓｃＦｖ１－Ｌ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含
む第２のポリペプチド鎖、を含み、ｓｃＦｖ１は、第１の標的抗原に特異的に結合し、ｓ
ｃＦｖ２は、第２の標的抗原に特異的に結合し、ＴＣＲＤ１及びＴＣＲＤ２は、少なくと
も１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を促進するＴＣＲＭを形成し、Ｌ１及びＬ２
は、ペプチドリンカーである。いくつかの実施形態では、Ｌ１及び／又はＬ２は、約５～
約５０（例えば、約５～１０、約１０～１５、又は約１５～３０）のアミノ酸長である。
いくつかの実施形態では、Ｌ１及びＬ２は同じ長さを有する。いくつかの実施形態では、
Ｌ１及びＬ２は、同一のアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、Ｌ１及びＬ２
は異なる長さを有する。いくつかの実施形態では、Ｌ１及びＬ２は、異なるアミノ酸配列
を有する。例示的な二重特異性ｃａＴＣＲを図１３Ｃに示す。
１－Ｌ１－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖、及びＮ末端からＣ末端に向
けて、ｓｃＦｖ２－Ｌ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む第２のポリペプチド鎖、又は、（ｉｉ
）Ｎ末端からＣ末端に向けて、ｓｃＦｖ２－Ｌ１－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリ
ペプチド鎖、及びＮ末端からＣ末端に向けて、ｓｃＦｖ１－Ｌ２－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含
む第２のポリペプチド鎖、を含み、ｓｃＦｖ１は、第１の標的抗原に特異的に結合し、ｓ
ｃＦｖ２は、第２の標的抗原に特異的に結合し、ＴＣＲＤ１及びＴＣＲＤ２は、少なくと
も１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を促進するＴＣＲＭを形成し、Ｌ１及びＬ２
は、ペプチドリンカーである。いくつかの実施形態では、Ｌ１及び／又はＬ２は、約５～
約５０（例えば、約５～１０、約１０～１５、又は約１５～３０）のアミノ酸長である。
いくつかの実施形態では、Ｌ１及びＬ２は同じ長さを有する。いくつかの実施形態では、
Ｌ１及びＬ２は、同一のアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態では、Ｌ１及びＬ２
は異なる長さを有する。いくつかの実施形態では、Ｌ１及びＬ２は、異なるアミノ酸配列
を有する。例示的な二重特異性ｃａＴＣＲを図１３Ｃに示す。
【0161】
ＩｇＧ－ｓｃＦｖ二重特異性抗体又はＦａｂ－ｓｃＦｖ－Ｆｃ二重特異性抗体由来の二
重特異性抗原結合モジュールを、二重特異性ｃａＴＣＲにおいて使用することができる。
１つのフォーマット（図１３Ｄ）では、ｓｃＦｖは、ＦａｂのＶＨ又はＶＬのいずれかに
結合し、これにより、ｓｃＦｖのより高い柔軟性、したがってＦａｂのその標的抗原への
より大きなアクセスを可能にする。しかしながら、ｓｃＦｖ－Ｆａｂモジュールは安定性
の問題を有し得る。第２のフォーマット（図１３Ｅ）では、Ｆａｂは第１のＴＣＲＤに融
合され、ｓｃＦｖは、第２のＴＣＲＤに融合される。
重特異性抗原結合モジュールを、二重特異性ｃａＴＣＲにおいて使用することができる。
１つのフォーマット（図１３Ｄ）では、ｓｃＦｖは、ＦａｂのＶＨ又はＶＬのいずれかに
結合し、これにより、ｓｃＦｖのより高い柔軟性、したがってＦａｂのその標的抗原への
より大きなアクセスを可能にする。しかしながら、ｓｃＦｖ－Ｆａｂモジュールは安定性
の問題を有し得る。第２のフォーマット（図１３Ｅ）では、Ｆａｂは第１のＴＣＲＤに融
合され、ｓｃＦｖは、第２のＴＣＲＤに融合される。
【0162】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、ａ）第１の標的抗原に特異的に結合するｓｃ
Ｆｖ、及び第２の標的抗原に特異的に結合するＦａｂを含む多重特異性（例えば、二重特
異性）抗原結合モジュールと、ｂ）第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ
１）、及び第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ２）を含むＴＣＲＭと、
を含み、ＴＣＲＭは、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を促進する。
Ｆｖ、及び第２の標的抗原に特異的に結合するＦａｂを含む多重特異性（例えば、二重特
異性）抗原結合モジュールと、ｂ）第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ
１）、及び第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤ（ＴＣＲＤ２）を含むＴＣＲＭと、
を含み、ＴＣＲＭは、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を促進する。
【0163】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、（ｉ）Ｎ末端からＣ末端に向けて、ｓｃＦｖ
－Ｌ１－ＶＨ－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖、及びＮ末端からＣ末端
に向けて、ＶＬ－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む第２のポリペプチド鎖、又は、（ｉｉ）Ｎ末端
からＣ末端に向けて、ＶＨ－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖、及びＮ末
端からＣ末端に向けて、ｓｃＦｖ－Ｌ２－ＶＬ－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む第２のポリペプ
チド鎖、を含み、ｓｃＦｖは、第１の標的抗原に特異的に結合し、ＶＨ及びＶＬは、第２
の標的抗原に特異的に結合する第２の抗原結合ドメインを形成し、ＴＣＲＤ１及びＴＣＲ
Ｄ２は、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を促進するＴＣＲＭを形成
し、Ｌ１及びＬ２は、ペプチドリンカーである。いくつかの実施形態では、Ｌ１及び／又
はＬ２は、約５～約５０（例えば、約５～１０、約１０～１５、又は約１５～３０）のア
ミノ酸長である。例示的な二重特異性ｃａＴＣＲを図１３Ｄに示す。
－Ｌ１－ＶＨ－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖、及びＮ末端からＣ末端
に向けて、ＶＬ－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む第２のポリペプチド鎖、又は、（ｉｉ）Ｎ末端
からＣ末端に向けて、ＶＨ－ＣＨ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖、及びＮ末
端からＣ末端に向けて、ｓｃＦｖ－Ｌ２－ＶＬ－ＣＬ－ＴＣＲＤ２を含む第２のポリペプ
チド鎖、を含み、ｓｃＦｖは、第１の標的抗原に特異的に結合し、ＶＨ及びＶＬは、第２
の標的抗原に特異的に結合する第２の抗原結合ドメインを形成し、ＴＣＲＤ１及びＴＣＲ
Ｄ２は、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を促進するＴＣＲＭを形成
し、Ｌ１及びＬ２は、ペプチドリンカーである。いくつかの実施形態では、Ｌ１及び／又
はＬ２は、約５～約５０（例えば、約５～１０、約１０～１５、又は約１５～３０）のア
ミノ酸長である。例示的な二重特異性ｃａＴＣＲを図１３Ｄに示す。
【0164】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、（ｉ）Ｎ末端からＣ末端に向けて、ＶＬ－Ｃ
Ｌ－Ｌ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖、Ｎ末端からＣ末端に向けて、ＶＨ－
ＣＨ１を含む第２のポリペプチド鎖、及びＮ末端からＣ末端に向けて、ｓｃＦｖ－Ｌ２－
ＴＣＲＤ２を含む第３のポリペプチド鎖、（ｉｉ）Ｎ末端からＣ末端に向けて、ＶＨ－Ｃ
Ｈ１－Ｌ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖、及びＮ末端からＣ末端に向けて、
ＶＬ－ＣＬを含む第２のポリペプチド鎖、及びＮ末端からＣ末端に向けて、ｓｃＦｖ－Ｌ
２－ＴＣＲＤ２を含む第３のポリペプチド鎖、（ｉｉｉ）Ｎ末端からＣ末端に向けて、ｓ
ｃＦｖ－Ｌ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖、Ｎ末端からＣ末端に向けて、Ｖ
Ｈ－ＣＨ１を含む第２のポリペプチド鎖、及びＮ末端からＣ末端に向けて、ＶＬ－ＣＬ－
Ｌ２－ＴＣＲＤ２；を含む第３のポリペプチド鎖、又は、（ｉｖ）Ｎ末端からＣ末端に向
けて、ｓｃＦｖ－Ｌ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖、Ｎ末端からＣ末端に向
けて、ＶＬ－ＣＬを含む第２のポリペプチド鎖、及びＮ末端からＣ末端に向けて、ＶＨ－
ＣＨ１－Ｌ２－ＴＣＲＤ２を含む第３のポリペプチド鎖、を含み、ｓｃＦｖは、第１の標
的抗原に特異的に結合し、ＶＨ及びＶＬは、第２の標的抗原に特異的に結合する第２の抗
原結合ドメインを形成し、ＴＣＲＤ１及びＴＣＲＤ２は、少なくとも１つのＴＣＲ関連シ
グナル伝達分子の動員を促進するＴＣＲＭを形成し、Ｌ１及びＬ２は、ペプチドリンカー
である。いくつかの実施形態では、Ｌ１及び／又はＬ２は、約５～約５０（例えば、約５
～１０、約１０～１５、又は約１５～３０）のアミノ酸長である。例示的な二重特異性ｃ
ａＴＣＲを図１３Ｅに示す。ｓｃＦｖとＴＣＲＤとの間のペプチドリンカーの長さ、及び
ＦａｂとＴＣＲＤとの間のペプチドリンカーの長さは、ｓｃＦｖ及びＦａｂのそれらの標
的抗原への接近性に影響を及ぼし得るため最適化することができる。
Ｌ－Ｌ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖、Ｎ末端からＣ末端に向けて、ＶＨ－
ＣＨ１を含む第２のポリペプチド鎖、及びＮ末端からＣ末端に向けて、ｓｃＦｖ－Ｌ２－
ＴＣＲＤ２を含む第３のポリペプチド鎖、（ｉｉ）Ｎ末端からＣ末端に向けて、ＶＨ－Ｃ
Ｈ１－Ｌ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖、及びＮ末端からＣ末端に向けて、
ＶＬ－ＣＬを含む第２のポリペプチド鎖、及びＮ末端からＣ末端に向けて、ｓｃＦｖ－Ｌ
２－ＴＣＲＤ２を含む第３のポリペプチド鎖、（ｉｉｉ）Ｎ末端からＣ末端に向けて、ｓ
ｃＦｖ－Ｌ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖、Ｎ末端からＣ末端に向けて、Ｖ
Ｈ－ＣＨ１を含む第２のポリペプチド鎖、及びＮ末端からＣ末端に向けて、ＶＬ－ＣＬ－
Ｌ２－ＴＣＲＤ２；を含む第３のポリペプチド鎖、又は、（ｉｖ）Ｎ末端からＣ末端に向
けて、ｓｃＦｖ－Ｌ１－ＴＣＲＤ１を含む第１のポリペプチド鎖、Ｎ末端からＣ末端に向
けて、ＶＬ－ＣＬを含む第２のポリペプチド鎖、及びＮ末端からＣ末端に向けて、ＶＨ－
ＣＨ１－Ｌ２－ＴＣＲＤ２を含む第３のポリペプチド鎖、を含み、ｓｃＦｖは、第１の標
的抗原に特異的に結合し、ＶＨ及びＶＬは、第２の標的抗原に特異的に結合する第２の抗
原結合ドメインを形成し、ＴＣＲＤ１及びＴＣＲＤ２は、少なくとも１つのＴＣＲ関連シ
グナル伝達分子の動員を促進するＴＣＲＭを形成し、Ｌ１及びＬ２は、ペプチドリンカー
である。いくつかの実施形態では、Ｌ１及び／又はＬ２は、約５～約５０（例えば、約５
～１０、約１０～１５、又は約１５～３０）のアミノ酸長である。例示的な二重特異性ｃ
ａＴＣＲを図１３Ｅに示す。ｓｃＦｖとＴＣＲＤとの間のペプチドリンカーの長さ、及び
ＦａｂとＴＣＲＤとの間のペプチドリンカーの長さは、ｓｃＦｖ及びＦａｂのそれらの標
的抗原への接近性に影響を及ぼし得るため最適化することができる。
【0165】
多重特異性ｃａＴＣＲの多重特異性抗原結合モジュールは、標的抗原又はエピトープの
任意の適切な組み合わせに特異的に結合し得る。いくつかの実施形態では、多重特異性抗
原結合モジュールは、少なくとも１つの細胞表面抗原に特異的に結合する。いくつかの実
施形態では、少なくとも１つの細胞表面抗原は、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４
７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ、及びＦＣＲＬ５、その
変異型又は変異体を含むものからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、多重
特異性抗原結合モジュールは、少なくとも１つのペプチド／ＭＨＣ複合体に特異的に結合
する。いくつかの実施形態では、少なくとも１つのペプチド／ＭＨＣ複合体は、ＷＴ－１
、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、Ｈ
ＩＶ－１、ＫＲＡＳ、ヒストンＨ３．３、及びＰＳＡ、その変異型又は変異体を含むもの
からなる群から選択されるタンパク質に由来するペプチドを含む。いくつかの実施形態で
は、多重特異性抗原結合モジュールは、第１の細胞表面抗原及び第２の細胞表面抗原に特
異的に結合する。いくつかの実施形態では、多重特異性抗原結合モジュールは、ＣＤ１９
及びＣＤ２２に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、多重特異性抗原結合モジュ
ールは、ＣＤ１９及びＣＤ２０に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、多重特異
性抗原結合モジュールは、第１のペプチド／ＭＨＣ複合体及び第２のペプチド／ＭＨＣ複
合体に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、多重特異性抗原結合モジュールは、
細胞表面抗原及びペプチド／ＭＨＣ複合体に特異的に結合する。
キメラ共刺激受容体（ＣＳＲ）構築物
任意の適切な組み合わせに特異的に結合し得る。いくつかの実施形態では、多重特異性抗
原結合モジュールは、少なくとも１つの細胞表面抗原に特異的に結合する。いくつかの実
施形態では、少なくとも１つの細胞表面抗原は、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４
７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ、及びＦＣＲＬ５、その
変異型又は変異体を含むものからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、多重
特異性抗原結合モジュールは、少なくとも１つのペプチド／ＭＨＣ複合体に特異的に結合
する。いくつかの実施形態では、少なくとも１つのペプチド／ＭＨＣ複合体は、ＷＴ－１
、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、Ｈ
ＩＶ－１、ＫＲＡＳ、ヒストンＨ３．３、及びＰＳＡ、その変異型又は変異体を含むもの
からなる群から選択されるタンパク質に由来するペプチドを含む。いくつかの実施形態で
は、多重特異性抗原結合モジュールは、第１の細胞表面抗原及び第２の細胞表面抗原に特
異的に結合する。いくつかの実施形態では、多重特異性抗原結合モジュールは、ＣＤ１９
及びＣＤ２２に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、多重特異性抗原結合モジュ
ールは、ＣＤ１９及びＣＤ２０に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、多重特異
性抗原結合モジュールは、第１のペプチド／ＭＨＣ複合体及び第２のペプチド／ＭＨＣ複
合体に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、多重特異性抗原結合モジュールは、
細胞表面抗原及びペプチド／ＭＨＣ複合体に特異的に結合する。
キメラ共刺激受容体（ＣＳＲ）構築物
【0166】
本明細書に記載されるリガンド特異的キメラ共刺激受容体（ＣＳＲ）は、標的リガンド
（細胞表面抗原又はペプチド／ＭＨＣ複合体など）に特異的に結合し、表面に、標的リガ
ンドを、標的リガンド結合により機能的に発現する免疫細胞を刺激することができる。Ｃ
ＳＲは、リガンド結合特異性、膜貫通モジュール、及び免疫細胞の刺激を可能にする共刺
激免疫細胞シグナル伝達モジュールを提供するリガンド結合モジュールを含む。ＣＳＲは
、機能的な一次免疫細胞シグナル伝達配列を欠いている。いくつかの実施形態では、ＣＳ
Ｒは、あらゆる一次免疫細胞シグナル伝達配列を欠いている。いくつかの実施形態では、
ＣＳＲは、リガンド結合モジュール、膜貫通モジュール、及び共刺激シグナル伝達モジュ
ールを含む単一のポリペプチド鎖を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、第１のポ
リペプチド鎖及び第２のポリペプチド鎖を含み、第１及び第２のポリペプチド鎖は共に、
リガンド結合モジュール、膜貫通モジュール、及び共刺激シグナル伝達モジュールを形成
する。いくつかの実施形態では、第１及び第２のポリペプチド鎖は、別個のポリペプチド
鎖であり、ＣＳＲは二量体などの多量体である。いくつかの実施形態では、第１及び第２
のポリペプチド鎖は、ペプチド結合、又はジスルフィド結合などの別の化学結合によって
共有結合されている。いくつかの実施形態では、第１のポリペプチド鎖及び第２のポリペ
プチド鎖は、少なくとも１つのジスルフィド結合によって連結される。いくつかの実施形
態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞におけるＣＳＲの発現は、誘導可能である。いくつ
かの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞におけるＣＳＲの発現は、ｃａＴＣＲを
介したシグナル伝達時に誘導可能である。
（細胞表面抗原又はペプチド／ＭＨＣ複合体など）に特異的に結合し、表面に、標的リガ
ンドを、標的リガンド結合により機能的に発現する免疫細胞を刺激することができる。Ｃ
ＳＲは、リガンド結合特異性、膜貫通モジュール、及び免疫細胞の刺激を可能にする共刺
激免疫細胞シグナル伝達モジュールを提供するリガンド結合モジュールを含む。ＣＳＲは
、機能的な一次免疫細胞シグナル伝達配列を欠いている。いくつかの実施形態では、ＣＳ
Ｒは、あらゆる一次免疫細胞シグナル伝達配列を欠いている。いくつかの実施形態では、
ＣＳＲは、リガンド結合モジュール、膜貫通モジュール、及び共刺激シグナル伝達モジュ
ールを含む単一のポリペプチド鎖を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、第１のポ
リペプチド鎖及び第２のポリペプチド鎖を含み、第１及び第２のポリペプチド鎖は共に、
リガンド結合モジュール、膜貫通モジュール、及び共刺激シグナル伝達モジュールを形成
する。いくつかの実施形態では、第１及び第２のポリペプチド鎖は、別個のポリペプチド
鎖であり、ＣＳＲは二量体などの多量体である。いくつかの実施形態では、第１及び第２
のポリペプチド鎖は、ペプチド結合、又はジスルフィド結合などの別の化学結合によって
共有結合されている。いくつかの実施形態では、第１のポリペプチド鎖及び第２のポリペ
プチド鎖は、少なくとも１つのジスルフィド結合によって連結される。いくつかの実施形
態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞におけるＣＳＲの発現は、誘導可能である。いくつ
かの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞におけるＣＳＲの発現は、ｃａＴＣＲを
介したシグナル伝達時に誘導可能である。
【0167】
本発明のＣＳＲに使用する共刺激免疫細胞シグナル伝達ドメインの例としては、ｃａＴ
ＣＲと協調して作用してｃａＴＣＲ結合後のシグナル伝達を開始することができるＴ細胞
受容体（ＴＣＲ）の共受容体の細胞質配列、並びにこれらの配列の任意の誘導体又は変異
型、及び同じ機能能力を有する任意の合成配列が挙げられる。
ＣＲと協調して作用してｃａＴＣＲ結合後のシグナル伝達を開始することができるＴ細胞
受容体（ＴＣＲ）の共受容体の細胞質配列、並びにこれらの配列の任意の誘導体又は変異
型、及び同じ機能能力を有する任意の合成配列が挙げられる。
【0168】
いくつかの状況下では、ＴＣＲのみを介して生成されたシグナルは、Ｔ細胞の完全な活
性化に不十分であり、二次又は共刺激シグナルも必要とされる。したがって、いくつかの
実施形態では、Ｔ細胞活性化は、細胞内シグナル伝達配列の２つの異なるクラス：ＴＣＲ
を介して抗原依存的一次活性化を開始するもの（本明細書では「一次Ｔ細胞シグナル伝達
配列」と称される）、及び抗原独立様式で作用して、二次又は共刺激シグナルを提供する
もの（本明細書では「共刺激Ｔ細胞シグナル伝達配列」と称される）によって媒介される
。
性化に不十分であり、二次又は共刺激シグナルも必要とされる。したがって、いくつかの
実施形態では、Ｔ細胞活性化は、細胞内シグナル伝達配列の２つの異なるクラス：ＴＣＲ
を介して抗原依存的一次活性化を開始するもの（本明細書では「一次Ｔ細胞シグナル伝達
配列」と称される）、及び抗原独立様式で作用して、二次又は共刺激シグナルを提供する
もの（本明細書では「共刺激Ｔ細胞シグナル伝達配列」と称される）によって媒介される
。
【0169】
刺激様式で作用する一次免疫細胞シグナル伝達配列は、免疫受容体活性化チロシンモチ
ーフ又はＩＴＡＭとして知られるシグナル伝達モチーフを含んでもよい。ＩＴＡＭ含有一
次免疫細胞シグナル伝達配列の例としては、ＴＣＲζ、ＦｃＲγ、ＦｃＲβ、ＣＤ３γ、
ＣＤ３δ、ＣＤ３ε、ＣＤ５、ＣＤ２２、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ、及びＣＤ６６ｄに由
来するものが挙げられる。「機能的」一次免疫細胞シグナル伝達配列は、適切な受容体に
作動可能に結合するときに免疫細胞活性化シグナルを変換することができる配列である。
一次免疫細胞シグナル伝達配列の断片又は変異型を含み得る「非機能性」一次免疫細胞シ
グナル伝達配列は、免疫細胞活性化シグナルを変換することができない。本明細書に記載
のＣＳＲは、ＩＴＡＭを含む機能的シグナル伝達配列などの機能的一次免疫細胞シグナル
伝達配列を欠いている。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、あらゆる一次免疫細胞シグ
ナル伝達配列を欠いている。
ーフ又はＩＴＡＭとして知られるシグナル伝達モチーフを含んでもよい。ＩＴＡＭ含有一
次免疫細胞シグナル伝達配列の例としては、ＴＣＲζ、ＦｃＲγ、ＦｃＲβ、ＣＤ３γ、
ＣＤ３δ、ＣＤ３ε、ＣＤ５、ＣＤ２２、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ、及びＣＤ６６ｄに由
来するものが挙げられる。「機能的」一次免疫細胞シグナル伝達配列は、適切な受容体に
作動可能に結合するときに免疫細胞活性化シグナルを変換することができる配列である。
一次免疫細胞シグナル伝達配列の断片又は変異型を含み得る「非機能性」一次免疫細胞シ
グナル伝達配列は、免疫細胞活性化シグナルを変換することができない。本明細書に記載
のＣＳＲは、ＩＴＡＭを含む機能的シグナル伝達配列などの機能的一次免疫細胞シグナル
伝達配列を欠いている。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、あらゆる一次免疫細胞シグ
ナル伝達配列を欠いている。
【0170】
共刺激免疫細胞シグナル伝達配列は、例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ
１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ２７、ＣＤ４０、ＰＤ－１、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原
－１（ＬＦＡ－１）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤ８３
と特異的に結合するリガンドなどを含む共刺激分子の細胞内ドメインの一部であり得る。
１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ２７、ＣＤ４０、ＰＤ－１、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原
－１（ＬＦＡ－１）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤ８３
と特異的に結合するリガンドなどを含む共刺激分子の細胞内ドメインの一部であり得る。
【0171】
いくつかの実施形態では、標的リガンドは、細胞表面抗原である。いくつかの実施形態
では、標的リガンドは、ペプチド／ＭＨＣ複合体である。いくつかの実施形態では、標的
リガンドは、同じ免疫細胞で発現するｃａＴＣＲの標的抗原と同じである。いくつかの実
施形態では、標的リガンドは、同じ免疫細胞で発現するｃａＴＣＲの標的抗原と異なる。
いくつかの実施形態では、標的リガンドは、標的抗原を提示する細胞の表面に提示される
分子である。例えば、いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲの標的抗原は、がん細胞に提
示されるがん関連抗原であり、標的リガンドは、インテグリンなどのがん細胞の表面に発
現する偏在的分子である。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、疾患関連リガンド
である。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、がん関連リガンドである。いくつか
の実施形態では、がん関連リガンドは、例えば、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４
７、ＩＬ４、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ、又はＦＣＲＬ
５である。いくつかの実施形態では、がん関連リガンドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１
６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、及びＰＳＡを含むタン
パク質に由来するペプチドを含むペプチド／ＭＨＣ複合体である。いくつかの実施形態で
は、標的リガンドは、ウイルス関連リガンドである。いくつかの実施形態では、標的リガ
ンドは、免疫チェックポイント分子である。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイ
ント分子は、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳＬ、Ｂ７－Ｈ３、
Ｂ７－Ｈ４、ＨＶＥＭ、４－１ＢＢＬ、ＯＸ４０Ｌ、ＣＤ７０、ＣＤ４０、及びＧＡＬ９
を含む。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、アポトーシス分子である。いくつか
の実施形態では、アポトーシス分子は、ＦａｓＬ、ＦａｓＲ、ＴＮＦＲ１、及びＴＮＦＲ
２を含む。
では、標的リガンドは、ペプチド／ＭＨＣ複合体である。いくつかの実施形態では、標的
リガンドは、同じ免疫細胞で発現するｃａＴＣＲの標的抗原と同じである。いくつかの実
施形態では、標的リガンドは、同じ免疫細胞で発現するｃａＴＣＲの標的抗原と異なる。
いくつかの実施形態では、標的リガンドは、標的抗原を提示する細胞の表面に提示される
分子である。例えば、いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲの標的抗原は、がん細胞に提
示されるがん関連抗原であり、標的リガンドは、インテグリンなどのがん細胞の表面に発
現する偏在的分子である。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、疾患関連リガンド
である。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、がん関連リガンドである。いくつか
の実施形態では、がん関連リガンドは、例えば、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４
７、ＩＬ４、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ、又はＦＣＲＬ
５である。いくつかの実施形態では、がん関連リガンドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１
６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、及びＰＳＡを含むタン
パク質に由来するペプチドを含むペプチド／ＭＨＣ複合体である。いくつかの実施形態で
は、標的リガンドは、ウイルス関連リガンドである。いくつかの実施形態では、標的リガ
ンドは、免疫チェックポイント分子である。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイ
ント分子は、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳＬ、Ｂ７－Ｈ３、
Ｂ７－Ｈ４、ＨＶＥＭ、４－１ＢＢＬ、ＯＸ４０Ｌ、ＣＤ７０、ＣＤ４０、及びＧＡＬ９
を含む。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、アポトーシス分子である。いくつか
の実施形態では、アポトーシス分子は、ＦａｓＬ、ＦａｓＲ、ＴＮＦＲ１、及びＴＮＦＲ
２を含む。
【0172】
いくつかの実施形態では、リガンド結合モジュールは、抗体部分である。いくつかの実
施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓ
ｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、非限定的に、ＣＤ１９、ＣＤ２
０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ、
及びＦＣＲＬ５を含む細胞表面抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗体
部分は、ペプチド／ＭＨＣ複合体に特異的に結合し、ペプチドは、非限定的に、ＷＴ－１
、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、及
びＰＳＡを含むタンパク質に由来する。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＣＤ１９
に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（
例えば、ＷＯ２０１７０６６１３６Ａ２を参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗
体部分は、ＣＤ１９に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬ
ドメイン）を含む（例えば、配列番号５８を含むか、それから本質的になるか、若しくは
それからなるものを含むＶＨドメイン、及び／又は配列番号５９を含むか、それから本質
的になるか、若しくはそれからなるものを含むＶＬドメイン、或いはそれらに含まれるＣ
ＤＲ）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＣＤ２０に特異的な抗体部分のＣＤＲ又
は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、配列番号６０を含むか
、それから本質的になるか、若しくはそれからなるものを含むＶＨドメイン、及び／又は
配列番号６１を含むか、それから本質的になるか、若しくはそれからなるものを含むＶＬ
ドメイン、或いはそれらに含まれるＣＤＲ）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｃ
Ｄ２２に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を
含む（例えば、２０１８年３月３０日出願のＵＳＳＮ６２／６５０，９５５を参照された
い）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＣＤ２２に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は
可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、配列番号１０１を含むか
、それから本質的になるか、若しくはそれからなるものを含むＶＨドメイン、及び／又は
配列番号１０２を含むか、それから本質的になるか、若しくはそれからなるものを含むＶ
Ｌドメイン、或いはそれらに含まれるＣＤＲ）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、
ＧＰＣ３に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）
を含む（例えば、２０１７年４月２６日出願のＵＳＳＮ６２／４９０，５８６を参照され
たい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＧＰＣ３に特異的な抗体部分のＣＤＲ又
は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、配列番号６４を含むか
、それから本質的になるか、若しくはそれからなるものを含むＶＨドメイン、及び／又は
配列番号６５を含むか、それから本質的になるか、若しくはそれからなるものを含むＶＬ
ドメイン、或いはそれらに含まれるＣＤＲ）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｒ
ＯＲ１に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を
含む（例えば、ＷＯ２０１６／１８７２２０及びＷＯ２０１６／１８７２１６を参照され
たい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＲＯＲ２に特異的な抗体部分のＣＤＲ又
は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１４２
７６８を参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＢＣＭＡに特異的な抗
体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ
２０１６／０９０３２７及びＷＯ２０１６／０９０３２０を参照されたい）。いくつかの
実施形態では、抗体部分は、ＧＰＲＣ５Ｄに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン
（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／０９０３２９及びＷＯ
２０１６／０９０３１２を参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＦＣ
ＲＬ５に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を
含む（例えば、ＷＯ２０１６／０９０３３７を参照されたい）。いくつかの実施形態では
、抗体部分は、ＷＴ－１に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又は
ＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１２／１３５８５４、ＷＯ２０１５／０７００
７８、及びＷＯ２０１５／０７００６１を参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗
体部分は、ＡＦＰに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬド
メイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１６１３９０を参照されたい）。いくつかの実
施形態では、抗体部分は、ＨＰＶ１６－Ｅ７に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイ
ン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１８２９５７を参照
されたい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＮＹ－ＥＳＯ－１に特異的な抗体部
分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０
１６／２１０３６５を参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＰＲＡＭ
Ｅに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む
（例えば、ＷＯ２０１６／１９１２４６を参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗
体部分は、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び
／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／２０１１２４を参照されたい）。
いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＫＲＡＳに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ド
メイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１５４０４７を
参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＰＳＡに特異的な抗体部分のＣ
ＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１７／
０１５６３４を参照されたい）。
施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓ
ｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、非限定的に、ＣＤ１９、ＣＤ２
０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ、
及びＦＣＲＬ５を含む細胞表面抗原に特異的に結合する。いくつかの実施形態では、抗体
部分は、ペプチド／ＭＨＣ複合体に特異的に結合し、ペプチドは、非限定的に、ＷＴ－１
、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、及
びＰＳＡを含むタンパク質に由来する。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＣＤ１９
に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（
例えば、ＷＯ２０１７０６６１３６Ａ２を参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗
体部分は、ＣＤ１９に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬ
ドメイン）を含む（例えば、配列番号５８を含むか、それから本質的になるか、若しくは
それからなるものを含むＶＨドメイン、及び／又は配列番号５９を含むか、それから本質
的になるか、若しくはそれからなるものを含むＶＬドメイン、或いはそれらに含まれるＣ
ＤＲ）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＣＤ２０に特異的な抗体部分のＣＤＲ又
は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、配列番号６０を含むか
、それから本質的になるか、若しくはそれからなるものを含むＶＨドメイン、及び／又は
配列番号６１を含むか、それから本質的になるか、若しくはそれからなるものを含むＶＬ
ドメイン、或いはそれらに含まれるＣＤＲ）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｃ
Ｄ２２に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を
含む（例えば、２０１８年３月３０日出願のＵＳＳＮ６２／６５０，９５５を参照された
い）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＣＤ２２に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は
可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、配列番号１０１を含むか
、それから本質的になるか、若しくはそれからなるものを含むＶＨドメイン、及び／又は
配列番号１０２を含むか、それから本質的になるか、若しくはそれからなるものを含むＶ
Ｌドメイン、或いはそれらに含まれるＣＤＲ）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、
ＧＰＣ３に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）
を含む（例えば、２０１７年４月２６日出願のＵＳＳＮ６２／４９０，５８６を参照され
たい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＧＰＣ３に特異的な抗体部分のＣＤＲ又
は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、配列番号６４を含むか
、それから本質的になるか、若しくはそれからなるものを含むＶＨドメイン、及び／又は
配列番号６５を含むか、それから本質的になるか、若しくはそれからなるものを含むＶＬ
ドメイン、或いはそれらに含まれるＣＤＲ）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｒ
ＯＲ１に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を
含む（例えば、ＷＯ２０１６／１８７２２０及びＷＯ２０１６／１８７２１６を参照され
たい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＲＯＲ２に特異的な抗体部分のＣＤＲ又
は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１４２
７６８を参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＢＣＭＡに特異的な抗
体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ
２０１６／０９０３２７及びＷＯ２０１６／０９０３２０を参照されたい）。いくつかの
実施形態では、抗体部分は、ＧＰＲＣ５Ｄに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン
（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／０９０３２９及びＷＯ
２０１６／０９０３１２を参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＦＣ
ＲＬ５に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を
含む（例えば、ＷＯ２０１６／０９０３３７を参照されたい）。いくつかの実施形態では
、抗体部分は、ＷＴ－１に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又は
ＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１２／１３５８５４、ＷＯ２０１５／０７００
７８、及びＷＯ２０１５／０７００６１を参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗
体部分は、ＡＦＰに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬド
メイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１６１３９０を参照されたい）。いくつかの実
施形態では、抗体部分は、ＨＰＶ１６－Ｅ７に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイ
ン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１８２９５７を参照
されたい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＮＹ－ＥＳＯ－１に特異的な抗体部
分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０
１６／２１０３６５を参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＰＲＡＭ
Ｅに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む
（例えば、ＷＯ２０１６／１９１２４６を参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗
体部分は、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び
／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／２０１１２４を参照されたい）。
いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＫＲＡＳに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ド
メイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１５４０４７を
参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＰＳＡに特異的な抗体部分のＣ
ＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１７／
０１５６３４を参照されたい）。
【0173】
いくつかの実施形態では、リガンド結合モジュールは、標的リガンドの受容体の細胞外
ドメインの全て又は一部である（又はそれに由来する）。いくつかの実施形態では、受容
体は、例えば、ＦａｓＲ、ＴＮＦＲ１、ＴＮＦＲ２、ＰＤ－１、ＣＤ２８、ＣＴＬＡ－４
、ＩＣＯＳ、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＬＡＧ－３、４－１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ２７、及びＴ
ＩＭ－３を含む。
ドメインの全て又は一部である（又はそれに由来する）。いくつかの実施形態では、受容
体は、例えば、ＦａｓＲ、ＴＮＦＲ１、ＴＮＦＲ２、ＰＤ－１、ＣＤ２８、ＣＴＬＡ－４
、ＩＣＯＳ、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＬＡＧ－３、４－１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ２７、及びＴ
ＩＭ－３を含む。
【0174】
いくつかの実施形態では、膜貫通モジュールは、例えば、ＣＤ２８、ＣＤ３ε、ＣＤ３
ζ、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ
３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、又はＣＤ１５４に由来
する、１つ以上の膜貫通ドメインを含む。
ζ、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ
３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、又はＣＤ１５４に由来
する、１つ以上の膜貫通ドメインを含む。
【0175】
いくつかの実施形態では、共刺激シグナル伝達モジュールは、例えば、ＣＤ２７、ＣＤ
２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＩＣＯＳ、リンパ球
機能関連抗原－１（ＬＦＡ－１）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ
３、ＣＤ８３と特異的に結合するリガンドなどを含む免疫細胞共刺激分子の細胞内ドメイ
ンの全て又は一部を含むか、それから本質的になるか、又はそれからなる。いくつかの実
施形態では、共刺激シグナル伝達分子は、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＣＤ２８の
断片を含む。いくつかの実施形態では、共刺激シグナル伝達分子は、配列番号５２のアミ
ノ酸配列を含むＣＤ２８の断片を含む。いくつかの実施形態では、共刺激シグナル伝達分
子は、配列番号５３のアミノ酸配列を含む４－１ＢＢの断片を含む。いくつかの実施形態
では、共刺激シグナル伝達分子は、配列番号５４のアミノ酸配列を含む４－１ＢＢの断片
を含む。いくつかの実施形態では、共刺激シグナル伝達分子は、配列番号５７のアミノ酸
配列を含むＣＤ８の断片を含む。いくつかの実施形態では、共刺激シグナル伝達分子は、
配列番号５５のアミノ酸配列を含むＯＸ４０の断片を含む。いくつかの実施形態では、共
刺激シグナル伝達分子は、配列番号５６のアミノ酸配列を含むＯＸ４０の断片を含む。い
くつかの実施形態では、共刺激シグナル伝達分子は、配列番号８６又は８７のアミノ酸配
列を含むＣＤ２７の断片を含む。いくつかの実施形態では、共刺激シグナル伝達分子は、
配列番号８８又は８９のアミノ酸配列を含むＣＤ３０の断片を含む。
２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＩＣＯＳ、リンパ球
機能関連抗原－１（ＬＦＡ－１）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ
３、ＣＤ８３と特異的に結合するリガンドなどを含む免疫細胞共刺激分子の細胞内ドメイ
ンの全て又は一部を含むか、それから本質的になるか、又はそれからなる。いくつかの実
施形態では、共刺激シグナル伝達分子は、配列番号５１のアミノ酸配列を含むＣＤ２８の
断片を含む。いくつかの実施形態では、共刺激シグナル伝達分子は、配列番号５２のアミ
ノ酸配列を含むＣＤ２８の断片を含む。いくつかの実施形態では、共刺激シグナル伝達分
子は、配列番号５３のアミノ酸配列を含む４－１ＢＢの断片を含む。いくつかの実施形態
では、共刺激シグナル伝達分子は、配列番号５４のアミノ酸配列を含む４－１ＢＢの断片
を含む。いくつかの実施形態では、共刺激シグナル伝達分子は、配列番号５７のアミノ酸
配列を含むＣＤ８の断片を含む。いくつかの実施形態では、共刺激シグナル伝達分子は、
配列番号５５のアミノ酸配列を含むＯＸ４０の断片を含む。いくつかの実施形態では、共
刺激シグナル伝達分子は、配列番号５６のアミノ酸配列を含むＯＸ４０の断片を含む。い
くつかの実施形態では、共刺激シグナル伝達分子は、配列番号８６又は８７のアミノ酸配
列を含むＣＤ２７の断片を含む。いくつかの実施形態では、共刺激シグナル伝達分子は、
配列番号８８又は８９のアミノ酸配列を含むＣＤ３０の断片を含む。
【0176】
いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、リガンド結合モジュール、膜貫通モジュール、及
び共刺激シグナル伝達モジュールのいずれかの間にスペーサモジュールを更に含む。いく
つかの実施形態では、スペーサモジュールは、２つのＣＳＲモジュールを連結する１つ以
上のペプチドリンカーを含む。いくつかの実施形態では、スペーサモジュールは、約５～
約７０（約５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、
６５、又は７０のいずれかなど、これらの値間の任意の範囲を含む）の長さのアミノ酸の
１つ以上のペプチドリンカーを含む。
び共刺激シグナル伝達モジュールのいずれかの間にスペーサモジュールを更に含む。いく
つかの実施形態では、スペーサモジュールは、２つのＣＳＲモジュールを連結する１つ以
上のペプチドリンカーを含む。いくつかの実施形態では、スペーサモジュールは、約５～
約７０（約５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、
６５、又は７０のいずれかなど、これらの値間の任意の範囲を含む）の長さのアミノ酸の
１つ以上のペプチドリンカーを含む。
【0177】
いくつかの実施形態では、リガンド結合モジュール（抗体部分など）は、ａ）他の分子
に対する結合親和性の少なくとも約１０倍（例えば、少なくとも約１０、２０、３０、４
０、５０、７５、１００、２００、３００、４００、５００、７５０、１０００、若しく
はそれ以上のうちのいずれかを含む）の親和性で、又はｂ）他の分子に結合するためのＫ
ｄの約１／１０倍以下（例えば、約１／１０、１／２０、１／３０、１／４０、１／５０
、１／７５、１／１００、１／２００、１／３００、１／４００、１／５００、１／７５
０、１／１０００、若しくはそれ以下など）のＫｄで標的抗原に特異的に結合する。結合
親和性は、ＥＬＩＳＡ、蛍光標識細胞分取（ＦＡＣＳ）分析、又は放射線免疫沈降アッセ
イ（ＲＩＡ）などの当該技術分野において既知の方法によって決定することができる。Ｋ
ｄは、例えば、Ｂｉａｃｏｒｅ機器を利用する表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）アッセイ、
又は例えばＳａｐｉｄｙｎｅ機器を利用する動的排除アッセイ（ＫｉｎＥｘＡ）などの当
該技術分野において既知の方法によって決定することができる。
に対する結合親和性の少なくとも約１０倍（例えば、少なくとも約１０、２０、３０、４
０、５０、７５、１００、２００、３００、４００、５００、７５０、１０００、若しく
はそれ以上のうちのいずれかを含む）の親和性で、又はｂ）他の分子に結合するためのＫ
ｄの約１／１０倍以下（例えば、約１／１０、１／２０、１／３０、１／４０、１／５０
、１／７５、１／１００、１／２００、１／３００、１／４００、１／５００、１／７５
０、１／１０００、若しくはそれ以下など）のＫｄで標的抗原に特異的に結合する。結合
親和性は、ＥＬＩＳＡ、蛍光標識細胞分取（ＦＡＣＳ）分析、又は放射線免疫沈降アッセ
イ（ＲＩＡ）などの当該技術分野において既知の方法によって決定することができる。Ｋ
ｄは、例えば、Ｂｉａｃｏｒｅ機器を利用する表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）アッセイ、
又は例えばＳａｐｉｄｙｎｅ機器を利用する動的排除アッセイ（ＫｉｎＥｘＡ）などの当
該技術分野において既知の方法によって決定することができる。
【0178】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＣＳＲは、標的リガンド（細胞表面抗原又
はペプチド／ＭＨＣ複合体など）に特異的に結合し、ａ）標的リガンド結合ドメイン（Ｌ
ＢＤ）と、ｂ）膜貫通ドメインと、ｃ）共刺激シグナル伝達ドメインと、を含み、ＣＳＲ
は、標的リガンドが、標的リガンド結合の際に機能的に表面に発現する免疫細胞を刺激す
ることができる。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、細胞表面抗原である。いく
つかの実施形態では、標的リガンドは、ペプチド／ＭＨＣ複合体である。いくつかの実施
形態では、標的リガンドは、同じ免疫細胞で発現するｃａＴＣＲの標的抗原と同じである
。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、同じ免疫細胞で発現するｃａＴＣＲの標的
抗原と異なる。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、疾患関連リガンドである。い
くつかの実施形態では、標的リガンドは、がん関連リガンドである。いくつかの実施形態
では、がん関連リガンドは、例えば、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＩＬ４
、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ、又はＦＣＲＬ５である。
いくつかの実施形態では、がん関連リガンドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、
ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、及びＰＳＡを含むタンパク質に由
来するペプチドを含むペプチド／ＭＨＣ複合体である。いくつかの実施形態では、標的リ
ガンドは、ウイルス関連リガンドである。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、免
疫チェックポイント分子である。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイント分子は
、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳＬ、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４
、ＨＶＥＭ、４－１ＢＢＬ、ＯＸ４０Ｌ、ＣＤ７０、ＣＤ４０、及びＧＡＬ９を含む。い
くつかの実施形態では、標的リガンドは、アポトーシス分子である。いくつかの実施形態
では、アポトーシス分子は、ＦａｓＬ、ＦａｓＲ、ＴＮＦＲ１、及びＴＮＦＲ２を含む。
いくつかの実施形態では、リガンド結合ドメインは、抗体部分である。いくつかの実施形
態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦ
ｖ）である。いくつかの実施形態では、リガンド結合ドメインは、標的リガンドの受容体
の細胞外ドメインの全て又は一部である（又はそれに由来する）。いくつかの実施形態で
は、受容体は、例えば、ＦａｓＲ、ＴＮＦＲ１、ＴＮＦＲ２、ＰＤ－１、ＣＤ２８、ＣＴ
ＬＡ－４、ＩＣＯＳ、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＬＡＧ－３、４－１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ２７
、及びＴＩＭ－３を含む。いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインは、例えば、ＣＤ２
８、ＣＤ３ε、ＣＤ３ζ、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ
２２、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、
又はＣＤ１５４を含む膜貫通タンパク質に由来する膜貫通ドメインを含む。いくつかの実
施形態では、ＣＳＲは、膜貫通タンパク質の断片（ｆＴＭＰ）を含み、ｆＴＭＰはＣＳＲ
膜貫通ドメインを含む。いくつかの実施形態では、共刺激シグナル伝達ドメインは、例え
ば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、
ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原－１（ＬＦＡ－１）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、Ｎ
ＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤ８３と特異的に結合するリガンドなどを含む免疫細胞共刺激
分子の細胞内ドメインの全て又は一部を含むか、それから本質的になるか、又はそれから
なる。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、免疫細胞共刺激分子の断片（ｆＣＳＭ）を含
み、ｆＣＳＭは、ＣＳＲ膜貫通ドメイン及びＣＳＲ共刺激シグナル伝達ドメインを含む。
いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、リガンド結合ドメイン、膜貫通ドメイン、及び共刺
激シグナル伝達ドメインのいずれかの間にスペーサドメインを更に含む。いくつかの実施
形態では、スペーサドメインは、２つのＣＳＲドメインを連結するペプチドリンカーを含
む。
はペプチド／ＭＨＣ複合体など）に特異的に結合し、ａ）標的リガンド結合ドメイン（Ｌ
ＢＤ）と、ｂ）膜貫通ドメインと、ｃ）共刺激シグナル伝達ドメインと、を含み、ＣＳＲ
は、標的リガンドが、標的リガンド結合の際に機能的に表面に発現する免疫細胞を刺激す
ることができる。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、細胞表面抗原である。いく
つかの実施形態では、標的リガンドは、ペプチド／ＭＨＣ複合体である。いくつかの実施
形態では、標的リガンドは、同じ免疫細胞で発現するｃａＴＣＲの標的抗原と同じである
。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、同じ免疫細胞で発現するｃａＴＣＲの標的
抗原と異なる。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、疾患関連リガンドである。い
くつかの実施形態では、標的リガンドは、がん関連リガンドである。いくつかの実施形態
では、がん関連リガンドは、例えば、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＩＬ４
、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ、又はＦＣＲＬ５である。
いくつかの実施形態では、がん関連リガンドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、
ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、及びＰＳＡを含むタンパク質に由
来するペプチドを含むペプチド／ＭＨＣ複合体である。いくつかの実施形態では、標的リ
ガンドは、ウイルス関連リガンドである。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、免
疫チェックポイント分子である。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイント分子は
、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳＬ、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４
、ＨＶＥＭ、４－１ＢＢＬ、ＯＸ４０Ｌ、ＣＤ７０、ＣＤ４０、及びＧＡＬ９を含む。い
くつかの実施形態では、標的リガンドは、アポトーシス分子である。いくつかの実施形態
では、アポトーシス分子は、ＦａｓＬ、ＦａｓＲ、ＴＮＦＲ１、及びＴＮＦＲ２を含む。
いくつかの実施形態では、リガンド結合ドメインは、抗体部分である。いくつかの実施形
態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦ
ｖ）である。いくつかの実施形態では、リガンド結合ドメインは、標的リガンドの受容体
の細胞外ドメインの全て又は一部である（又はそれに由来する）。いくつかの実施形態で
は、受容体は、例えば、ＦａｓＲ、ＴＮＦＲ１、ＴＮＦＲ２、ＰＤ－１、ＣＤ２８、ＣＴ
ＬＡ－４、ＩＣＯＳ、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＬＡＧ－３、４－１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ２７
、及びＴＩＭ－３を含む。いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインは、例えば、ＣＤ２
８、ＣＤ３ε、ＣＤ３ζ、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ
２２、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、
又はＣＤ１５４を含む膜貫通タンパク質に由来する膜貫通ドメインを含む。いくつかの実
施形態では、ＣＳＲは、膜貫通タンパク質の断片（ｆＴＭＰ）を含み、ｆＴＭＰはＣＳＲ
膜貫通ドメインを含む。いくつかの実施形態では、共刺激シグナル伝達ドメインは、例え
ば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、
ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原－１（ＬＦＡ－１）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、Ｎ
ＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤ８３と特異的に結合するリガンドなどを含む免疫細胞共刺激
分子の細胞内ドメインの全て又は一部を含むか、それから本質的になるか、又はそれから
なる。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、免疫細胞共刺激分子の断片（ｆＣＳＭ）を含
み、ｆＣＳＭは、ＣＳＲ膜貫通ドメイン及びＣＳＲ共刺激シグナル伝達ドメインを含む。
いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、リガンド結合ドメイン、膜貫通ドメイン、及び共刺
激シグナル伝達ドメインのいずれかの間にスペーサドメインを更に含む。いくつかの実施
形態では、スペーサドメインは、２つのＣＳＲドメインを連結するペプチドリンカーを含
む。
【0179】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＣＳＲは、標的リガンドに特異的に結合し
、ａ）標的リガンド結合ドメインと、ｂ）膜貫通ドメインと、ｃ）共刺激シグナル伝達ド
メインと、を含み、標的リガンドは細胞表面抗原であり、ＣＳＲは、標的リガンドが、標
的リガンド結合の際に機能的に表面に発現する免疫細胞を刺激することができる。いくつ
かの実施形態では、標的リガンドは、同じ免疫細胞で発現するｃａＴＣＲの標的抗原と同
じである。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、同じ免疫細胞で発現するｃａＴＣ
Ｒの標的抗原と異なる。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、疾患関連リガンドで
ある。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、がん関連リガンドである。いくつかの
実施形態では、がん関連リガンドは、例えば、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７
、ＩＬ４、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ、又はＦＣＲＬ５
である。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、ウイルス関連リガンドである。いく
つかの実施形態では、標的リガンドは、免疫チェックポイント分子である。いくつかの実
施形態では、免疫チェックポイント分子は、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＣＤ８０、ＣＤ８
６、ＩＣＯＳＬ、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＨＶＥＭ、４－１ＢＢＬ、ＯＸ４０Ｌ、ＣＤ
７０、ＣＤ４０、及びＧＡＬ９を含む。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、アポ
トーシス分子である。いくつかの実施形態では、アポトーシス分子は、ＦａｓＬ、Ｆａｓ
Ｒ、ＴＮＦＲ１、及びＴＮＦＲ２を含む。いくつかの実施形態では、リガンド結合ドメイ
ンは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆ
ａｂ’）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、リガン
ド結合ドメインは、標的リガンドの受容体の細胞外ドメインの全て又は一部である（又は
それに由来する）。いくつかの実施形態では、受容体は、例えば、ＦａｓＲ、ＴＮＦＲ１
、ＴＮＦＲ２、ＰＤ－１、ＣＤ２８、ＣＴＬＡ－４、ＩＣＯＳ、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＬＡ
Ｇ－３、４－１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ２７、及びＴＩＭ－３を含む。いくつかの実施形態
では、膜貫通ドメインは、例えば、ＣＤ２８、ＣＤ３ε、ＣＤ３ζ、ＣＤ４５、ＣＤ４、
ＣＤ５、ＣＤ８、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８
０、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、又はＣＤ１５４を含む膜貫通タンパク質に由来
する膜貫通ドメインを含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、膜貫通タンパク質の断
片（ｆＴＭＰ）を含み、ｆＴＭＰはＣＳＲ膜貫通ドメインを含む。いくつかの実施形態で
は、共刺激シグナル伝達ドメインは、例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１
３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原－１（ＬＦＡ
－１）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤ８３と特異的に結
合するリガンドなどを含む免疫細胞共刺激分子の細胞内ドメインの全て又は一部を含むか
、それから本質的になるか、又はそれからなる。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、免
疫細胞共刺激分子の断片（ｆＣＳＭ）を含み、ｆＣＳＭは、ＣＳＲ膜貫通ドメイン及びＣ
ＳＲ共刺激シグナル伝達ドメインを含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、リガンド
結合ドメイン、膜貫通ドメイン、及び共刺激シグナル伝達ドメインのいずれかの間にスペ
ーサドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、スペーサドメインは、２つのＣＳＲ
ドメインを連結するペプチドリンカーを含む。
、ａ）標的リガンド結合ドメインと、ｂ）膜貫通ドメインと、ｃ）共刺激シグナル伝達ド
メインと、を含み、標的リガンドは細胞表面抗原であり、ＣＳＲは、標的リガンドが、標
的リガンド結合の際に機能的に表面に発現する免疫細胞を刺激することができる。いくつ
かの実施形態では、標的リガンドは、同じ免疫細胞で発現するｃａＴＣＲの標的抗原と同
じである。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、同じ免疫細胞で発現するｃａＴＣ
Ｒの標的抗原と異なる。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、疾患関連リガンドで
ある。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、がん関連リガンドである。いくつかの
実施形態では、がん関連リガンドは、例えば、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７
、ＩＬ４、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ、又はＦＣＲＬ５
である。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、ウイルス関連リガンドである。いく
つかの実施形態では、標的リガンドは、免疫チェックポイント分子である。いくつかの実
施形態では、免疫チェックポイント分子は、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＣＤ８０、ＣＤ８
６、ＩＣＯＳＬ、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＨＶＥＭ、４－１ＢＢＬ、ＯＸ４０Ｌ、ＣＤ
７０、ＣＤ４０、及びＧＡＬ９を含む。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、アポ
トーシス分子である。いくつかの実施形態では、アポトーシス分子は、ＦａｓＬ、Ｆａｓ
Ｒ、ＴＮＦＲ１、及びＴＮＦＲ２を含む。いくつかの実施形態では、リガンド結合ドメイ
ンは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆ
ａｂ’）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、リガン
ド結合ドメインは、標的リガンドの受容体の細胞外ドメインの全て又は一部である（又は
それに由来する）。いくつかの実施形態では、受容体は、例えば、ＦａｓＲ、ＴＮＦＲ１
、ＴＮＦＲ２、ＰＤ－１、ＣＤ２８、ＣＴＬＡ－４、ＩＣＯＳ、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＬＡ
Ｇ－３、４－１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ２７、及びＴＩＭ－３を含む。いくつかの実施形態
では、膜貫通ドメインは、例えば、ＣＤ２８、ＣＤ３ε、ＣＤ３ζ、ＣＤ４５、ＣＤ４、
ＣＤ５、ＣＤ８、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８
０、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、又はＣＤ１５４を含む膜貫通タンパク質に由来
する膜貫通ドメインを含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、膜貫通タンパク質の断
片（ｆＴＭＰ）を含み、ｆＴＭＰはＣＳＲ膜貫通ドメインを含む。いくつかの実施形態で
は、共刺激シグナル伝達ドメインは、例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１
３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原－１（ＬＦＡ
－１）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤ８３と特異的に結
合するリガンドなどを含む免疫細胞共刺激分子の細胞内ドメインの全て又は一部を含むか
、それから本質的になるか、又はそれからなる。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、免
疫細胞共刺激分子の断片（ｆＣＳＭ）を含み、ｆＣＳＭは、ＣＳＲ膜貫通ドメイン及びＣ
ＳＲ共刺激シグナル伝達ドメインを含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、リガンド
結合ドメイン、膜貫通ドメイン、及び共刺激シグナル伝達ドメインのいずれかの間にスペ
ーサドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、スペーサドメインは、２つのＣＳＲ
ドメインを連結するペプチドリンカーを含む。
【0180】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＣＳＲは、標的リガンドに特異的に結合し
、ａ）標的リガンド結合ドメインと、ｂ）膜貫通ドメインと、ｃ）共刺激シグナル伝達ド
メインと、を含み、標的リガンドはペプチド／ＭＨＣ複合体であり、ＣＳＲは、標的リガ
ンドが、標的リガンド結合の際に機能的に表面に発現する免疫細胞を刺激することができ
る。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、同じ免疫細胞で発現するｃａＴＣＲの標
的抗原と同じである。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、同じ免疫細胞で発現す
るｃａＴＣＲの標的抗原と異なる。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、疾患関連
リガンドである。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、がん関連リガンドである。
いくつかの実施形態では、がん関連リガンドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、
ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、及びＰＳＡを含むタンパク質に由
来するペプチドを含むペプチド／ＭＨＣ複合体である。いくつかの実施形態では、標的リ
ガンドは、ウイルス関連リガンドである。いくつかの実施形態では、リガンド結合ドメイ
ンは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆ
ａｂ’）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、膜貫通
ドメインは、例えば、ＣＤ２８、ＣＤ３ε、ＣＤ３ζ、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ
８、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８６
、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、又はＣＤ１５４を含む膜貫通タンパク質に由来する膜貫通ド
メインを含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、膜貫通タンパク質の断片（ｆＴＭＰ
）を含み、ｆＴＭＰはＣＳＲ膜貫通ドメインを含む。いくつかの実施形態では、共刺激シ
グナル伝達ドメインは、例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ
４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原－１（ＬＦＡ－１）、ＣＤ
２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤ８３と特異的に結合するリガン
ドなどを含む免疫細胞共刺激分子の細胞内ドメインの全て又は一部を含むか、それから本
質的になるか、又はそれからなる。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、免疫細胞共刺激
分子の断片（ｆＣＳＭ）を含み、ｆＣＳＭは、ＣＳＲ膜貫通ドメイン及びＣＳＲ共刺激シ
グナル伝達ドメインを含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、リガンド結合ドメイン
、膜貫通ドメイン、及び共刺激シグナル伝達ドメインのいずれかの間にスペーサドメイン
を更に含む。いくつかの実施形態では、スペーサドメインは、２つのＣＳＲドメインを連
結するペプチドリンカーを含む。
、ａ）標的リガンド結合ドメインと、ｂ）膜貫通ドメインと、ｃ）共刺激シグナル伝達ド
メインと、を含み、標的リガンドはペプチド／ＭＨＣ複合体であり、ＣＳＲは、標的リガ
ンドが、標的リガンド結合の際に機能的に表面に発現する免疫細胞を刺激することができ
る。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、同じ免疫細胞で発現するｃａＴＣＲの標
的抗原と同じである。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、同じ免疫細胞で発現す
るｃａＴＣＲの標的抗原と異なる。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、疾患関連
リガンドである。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、がん関連リガンドである。
いくつかの実施形態では、がん関連リガンドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、
ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、及びＰＳＡを含むタンパク質に由
来するペプチドを含むペプチド／ＭＨＣ複合体である。いくつかの実施形態では、標的リ
ガンドは、ウイルス関連リガンドである。いくつかの実施形態では、リガンド結合ドメイ
ンは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆ
ａｂ’）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、膜貫通
ドメインは、例えば、ＣＤ２８、ＣＤ３ε、ＣＤ３ζ、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ
８、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８６
、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、又はＣＤ１５４を含む膜貫通タンパク質に由来する膜貫通ド
メインを含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、膜貫通タンパク質の断片（ｆＴＭＰ
）を含み、ｆＴＭＰはＣＳＲ膜貫通ドメインを含む。いくつかの実施形態では、共刺激シ
グナル伝達ドメインは、例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ
４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原－１（ＬＦＡ－１）、ＣＤ
２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤ８３と特異的に結合するリガン
ドなどを含む免疫細胞共刺激分子の細胞内ドメインの全て又は一部を含むか、それから本
質的になるか、又はそれからなる。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、免疫細胞共刺激
分子の断片（ｆＣＳＭ）を含み、ｆＣＳＭは、ＣＳＲ膜貫通ドメイン及びＣＳＲ共刺激シ
グナル伝達ドメインを含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、リガンド結合ドメイン
、膜貫通ドメイン、及び共刺激シグナル伝達ドメインのいずれかの間にスペーサドメイン
を更に含む。いくつかの実施形態では、スペーサドメインは、２つのＣＳＲドメインを連
結するペプチドリンカーを含む。
【0181】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＣＳＲは、標的リガンド（細胞表面抗原又
はペプチド／ＭＨＣ複合体など）に特異的に結合し、ａ）標的リガンド結合ドメインと、
ｂ）膜貫通ドメインと、ｃ）共刺激シグナル伝達ドメインと、を含み、リガンド結合ドメ
インは抗体部分であり、ＣＳＲは、標的リガンドが、標的リガンド結合の際に機能的に表
面に発現する免疫細胞を刺激することができる。いくつかの実施形態では、標的リガンド
は、細胞表面抗原である。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、ペプチド／ＭＨＣ
複合体である。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、同じ免疫細胞で発現するｃａ
ＴＣＲの標的抗原と同じである。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、同じ免疫細
胞で発現するｃａＴＣＲの標的抗原と異なる。いくつかの実施形態では、標的リガンドは
、疾患関連リガンドである。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、がん関連リガン
ドである。いくつかの実施形態では、がん関連リガンドは、例えば、ＣＤ１９、ＣＤ２０
、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＩＬ４、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ
５Ｄ、又はＦＣＲＬ５である。いくつかの実施形態では、がん関連リガンドは、ＷＴ－１
、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、及
びＰＳＡを含むタンパク質に由来するペプチドを含むペプチド／ＭＨＣ複合体である。い
くつかの実施形態では、標的リガンドは、ウイルス関連リガンドである。いくつかの実施
形態では、標的リガンドは、免疫チェックポイント分子である。いくつかの実施形態では
、免疫チェックポイント分子は、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯ
ＳＬ、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＨＶＥＭ、４－１ＢＢＬ、ＯＸ４０Ｌ、ＣＤ７０、ＣＤ
４０、及びＧＡＬ９を含む。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、アポトーシス分
子である。いくつかの実施形態では、アポトーシス分子は、ＦａｓＬ、ＦａｓＲ、ＴＮＦ
Ｒ１、及びＴＮＦＲ２を含む。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’
、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、
膜貫通ドメインは、例えば、ＣＤ２８、ＣＤ３ε、ＣＤ３ζ、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５
、ＣＤ８、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、Ｃ
Ｄ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、又はＣＤ１５４を含む膜貫通タンパク質に由来する膜
貫通ドメインを含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、膜貫通タンパク質の断片（ｆ
ＴＭＰ）を含み、ｆＴＭＰはＣＳＲ膜貫通ドメインを含む。いくつかの実施形態では、共
刺激シグナル伝達ドメインは、例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）
、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原－１（ＬＦＡ－１）
、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤ８３と特異的に結合する
リガンドなどを含む免疫細胞共刺激分子の細胞内ドメインの全て又は一部を含むか、それ
から本質的になるか、又はそれからなる。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、免疫細胞
共刺激分子の断片（ｆＣＳＭ）を含み、ｆＣＳＭは、ＣＳＲ膜貫通ドメイン及びＣＳＲ共
刺激シグナル伝達ドメインを含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、リガンド結合ド
メイン、膜貫通ドメイン、及び共刺激シグナル伝達ドメインのいずれかの間にスペーサド
メインを更に含む。いくつかの実施形態では、スペーサドメインは、２つのＣＳＲドメイ
ンを連結するペプチドリンカーを含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲドメインは、表
３に列挙されるＣＳＲのいずれかに従って選択される。
はペプチド／ＭＨＣ複合体など）に特異的に結合し、ａ）標的リガンド結合ドメインと、
ｂ）膜貫通ドメインと、ｃ）共刺激シグナル伝達ドメインと、を含み、リガンド結合ドメ
インは抗体部分であり、ＣＳＲは、標的リガンドが、標的リガンド結合の際に機能的に表
面に発現する免疫細胞を刺激することができる。いくつかの実施形態では、標的リガンド
は、細胞表面抗原である。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、ペプチド／ＭＨＣ
複合体である。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、同じ免疫細胞で発現するｃａ
ＴＣＲの標的抗原と同じである。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、同じ免疫細
胞で発現するｃａＴＣＲの標的抗原と異なる。いくつかの実施形態では、標的リガンドは
、疾患関連リガンドである。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、がん関連リガン
ドである。いくつかの実施形態では、がん関連リガンドは、例えば、ＣＤ１９、ＣＤ２０
、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＩＬ４、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ
５Ｄ、又はＦＣＲＬ５である。いくつかの実施形態では、がん関連リガンドは、ＷＴ－１
、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、及
びＰＳＡを含むタンパク質に由来するペプチドを含むペプチド／ＭＨＣ複合体である。い
くつかの実施形態では、標的リガンドは、ウイルス関連リガンドである。いくつかの実施
形態では、標的リガンドは、免疫チェックポイント分子である。いくつかの実施形態では
、免疫チェックポイント分子は、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯ
ＳＬ、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＨＶＥＭ、４－１ＢＢＬ、ＯＸ４０Ｌ、ＣＤ７０、ＣＤ
４０、及びＧＡＬ９を含む。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、アポトーシス分
子である。いくつかの実施形態では、アポトーシス分子は、ＦａｓＬ、ＦａｓＲ、ＴＮＦ
Ｒ１、及びＴＮＦＲ２を含む。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’
、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、
膜貫通ドメインは、例えば、ＣＤ２８、ＣＤ３ε、ＣＤ３ζ、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５
、ＣＤ８、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、Ｃ
Ｄ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、又はＣＤ１５４を含む膜貫通タンパク質に由来する膜
貫通ドメインを含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、膜貫通タンパク質の断片（ｆ
ＴＭＰ）を含み、ｆＴＭＰはＣＳＲ膜貫通ドメインを含む。いくつかの実施形態では、共
刺激シグナル伝達ドメインは、例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）
、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原－１（ＬＦＡ－１）
、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤ８３と特異的に結合する
リガンドなどを含む免疫細胞共刺激分子の細胞内ドメインの全て又は一部を含むか、それ
から本質的になるか、又はそれからなる。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、免疫細胞
共刺激分子の断片（ｆＣＳＭ）を含み、ｆＣＳＭは、ＣＳＲ膜貫通ドメイン及びＣＳＲ共
刺激シグナル伝達ドメインを含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、リガンド結合ド
メイン、膜貫通ドメイン、及び共刺激シグナル伝達ドメインのいずれかの間にスペーサド
メインを更に含む。いくつかの実施形態では、スペーサドメインは、２つのＣＳＲドメイ
ンを連結するペプチドリンカーを含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲドメインは、表
３に列挙されるＣＳＲのいずれかに従って選択される。
【表3】
【0182】
いくつかの実施形態では、ＣＳＲはＣＤ２８のｆＣＳＭを含む。いくつかの実施形態で
は、ＣＳＲは、ａ）標的リガンド結合ドメインと、（ｂ）配列番号５７のアミノ酸配列を
含むＣＤ８膜貫通ドメインと、ｃ）配列番号５２のアミノ酸配列を含むＣＤ２８の断片と
、を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、ａ）標的リガンド結合ドメインと、ｂ）
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＣＤ２８の断片と、を含む。いくつかの実施形態では
、ＣＳＲは、標的リガンド結合ドメインと、配列番号９０のアミノ酸配列を含むＣＳＲド
メインと、を含む。
は、ＣＳＲは、ａ）標的リガンド結合ドメインと、（ｂ）配列番号５７のアミノ酸配列を
含むＣＤ８膜貫通ドメインと、ｃ）配列番号５２のアミノ酸配列を含むＣＤ２８の断片と
、を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、ａ）標的リガンド結合ドメインと、ｂ）
配列番号５１のアミノ酸配列を含むＣＤ２８の断片と、を含む。いくつかの実施形態では
、ＣＳＲは、標的リガンド結合ドメインと、配列番号９０のアミノ酸配列を含むＣＳＲド
メインと、を含む。
【0183】
いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、４－１ＢＢのｆＣＳＭを含む。いくつかの実施形
態では、ＣＳＲは、ａ）標的リガンド結合ドメインと、（ｂ）配列番号５７のアミノ酸配
列を含むＣＤ８膜貫通ドメインと、ｃ）配列番号５４のアミノ酸配列を含む４－１ＢＢの
断片と、を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、ａ）標的リガンド結合ドメインと
、ｂ）配列番号５３のアミノ酸配列を含む４－１ＢＢの断片と、を含む。いくつかの実施
形態では、ＣＳＲは、標的リガンド結合ドメインと、配列番号９１又は９２のアミノ酸配
列を含むＣＳＲドメインと、を含む。
態では、ＣＳＲは、ａ）標的リガンド結合ドメインと、（ｂ）配列番号５７のアミノ酸配
列を含むＣＤ８膜貫通ドメインと、ｃ）配列番号５４のアミノ酸配列を含む４－１ＢＢの
断片と、を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、ａ）標的リガンド結合ドメインと
、ｂ）配列番号５３のアミノ酸配列を含む４－１ＢＢの断片と、を含む。いくつかの実施
形態では、ＣＳＲは、標的リガンド結合ドメインと、配列番号９１又は９２のアミノ酸配
列を含むＣＳＲドメインと、を含む。
【0184】
いくつかの実施形態では、ＣＳＲはＣＤ２７のｆＣＳＭを含む。いくつかの実施形態で
は、ＣＳＲは、ａ）標的リガンド結合ドメインと、（ｂ）配列番号５７のアミノ酸配列を
含むＣＤ８膜貫通ドメインと、ｃ）配列番号８７のアミノ酸配列を含むＣＤ２７の断片と
、を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、ａ）標的リガンド結合ドメインと、ｂ）
配列番号８６のアミノ酸配列を含むＣＤ２７の断片と、を含む。いくつかの実施形態では
、ＣＳＲは、標的リガンド結合ドメインと、配列番号９３又は９４のアミノ酸配列を含む
ＣＳＲドメインと、を含む。
は、ＣＳＲは、ａ）標的リガンド結合ドメインと、（ｂ）配列番号５７のアミノ酸配列を
含むＣＤ８膜貫通ドメインと、ｃ）配列番号８７のアミノ酸配列を含むＣＤ２７の断片と
、を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、ａ）標的リガンド結合ドメインと、ｂ）
配列番号８６のアミノ酸配列を含むＣＤ２７の断片と、を含む。いくつかの実施形態では
、ＣＳＲは、標的リガンド結合ドメインと、配列番号９３又は９４のアミノ酸配列を含む
ＣＳＲドメインと、を含む。
【0185】
いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、ＣＤ３０のｆＣＳＭを含む。いくつかの実施形態
では、ＣＳＲは、ａ）標的リガンド結合ドメインと、（ｂ）配列番号５７のアミノ酸配列
を含むＣＤ８膜貫通ドメインと、ｃ）配列番号８９のアミノ酸配列を含むＣＤ３０の断片
と、を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、ａ）標的リガンド結合ドメインと、ｂ
）配列番号８８のアミノ酸配列を含むＣＤ３０の断片と、を含む。いくつかの実施形態で
は、ＣＳＲは、標的リガンド結合ドメインと、配列番号９５又は９６のアミノ酸配列を含
むＣＳＲドメインと、を含む。
では、ＣＳＲは、ａ）標的リガンド結合ドメインと、（ｂ）配列番号５７のアミノ酸配列
を含むＣＤ８膜貫通ドメインと、ｃ）配列番号８９のアミノ酸配列を含むＣＤ３０の断片
と、を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、ａ）標的リガンド結合ドメインと、ｂ
）配列番号８８のアミノ酸配列を含むＣＤ３０の断片と、を含む。いくつかの実施形態で
は、ＣＳＲは、標的リガンド結合ドメインと、配列番号９５又は９６のアミノ酸配列を含
むＣＳＲドメインと、を含む。
【0186】
いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、ＯＸ４０のｆＣＳＭを含む。いくつかの実施形態
では、ＣＳＲは、ａ）標的リガンド結合ドメインと、（ｂ）配列番号５７のアミノ酸配列
を含むＣＤ８膜貫通ドメインと、ｃ）配列番号５６のアミノ酸配列を含むＯＸ４０の断片
と、を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、ａ）標的リガンド結合ドメインと、ｂ
）配列番号５５のアミノ酸配列を含むＯＸ４０の断片と、を含む。いくつかの実施形態で
は、ＣＳＲは、標的リガンド結合ドメインと、配列番号９７又は９８のアミノ酸配列を含
むＣＳＲドメインと、を含む。
では、ＣＳＲは、ａ）標的リガンド結合ドメインと、（ｂ）配列番号５７のアミノ酸配列
を含むＣＤ８膜貫通ドメインと、ｃ）配列番号５６のアミノ酸配列を含むＯＸ４０の断片
と、を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、ａ）標的リガンド結合ドメインと、ｂ
）配列番号５５のアミノ酸配列を含むＯＸ４０の断片と、を含む。いくつかの実施形態で
は、ＣＳＲは、標的リガンド結合ドメインと、配列番号９７又は９８のアミノ酸配列を含
むＣＳＲドメインと、を含む。
【0187】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＣＳＲは、標的リガンド（細胞表面抗原又
はペプチド／ＭＨＣ複合体など）に特異的に結合し、ａ）標的リガンド結合ドメインと、
ｂ）膜貫通ドメインと、ｃ）共刺激シグナル伝達ドメインと、を含み、リガンド結合ドメ
インは、標的リガンドの受容体の細胞外ドメインの全て又は一部であり（又はそれに由来
し）、ＣＳＲは、標的リガンドが、標的リガンド結合の際に機能的に表面に発現する免疫
細胞を刺激することができる。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、細胞表面抗原
である。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、同じ免疫細胞で発現するｃａＴＣＲ
の標的抗原と同じである。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、同じ免疫細胞で発
現するｃａＴＣＲの標的抗原と異なる。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、疾患
関連リガンドである。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、がん関連リガンドであ
る。いくつかの実施形態では、がん関連リガンドは、例えば、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ
２２、ＣＤ４７、ＩＬ４、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ、
又はＦＣＲＬ５である。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、免疫チェックポイン
ト分子である。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイント分子は、ＰＤ－Ｌ１、Ｐ
Ｄ－Ｌ２、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳＬ、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＨＶＥＭ、４－
１ＢＢＬ、ＯＸ４０Ｌ、ＣＤ７０、ＣＤ４０、及びＧＡＬ９を含む。いくつかの実施形態
では、標的リガンドは、アポトーシス分子である。いくつかの実施形態では、アポトーシ
ス分子は、ＦａｓＬ、ＦａｓＲ、ＴＮＦＲ１、及びＴＮＦＲ２を含む。いくつかの実施形
態では、標的リガンド受容体は、例えば、ＦａｓＲ、ＴＮＦＲ１、ＴＮＦＲ２、ＰＤ－１
、ＣＤ２８、ＣＴＬＡ－４、ＩＣＯＳ、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＬＡＧ－３、４－１ＢＢ、Ｏ
Ｘ４０、ＣＤ２７、及びＴＩＭ－３を含む。いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインは
、例えば、ＣＤ２８、ＣＤ３ε、ＣＤ３ζ、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８、ＣＤ９
、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ１３
４、ＣＤ１３７、又はＣＤ１５４に由来する膜貫通ドメインを含む。いくつかの実施形態
では、共刺激シグナル伝達ドメインは、例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ
１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原－１（ＬＦ
Ａ－１）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤ８３と特異的に
結合するリガンドなどを含む免疫細胞共刺激分子の細胞内ドメインの全て又は一部を含む
か、それから本質的になるか、又はそれからなる。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、
リガンド結合ドメイン、膜貫通ドメイン、及び共刺激シグナル伝達ドメインのいずれかの
間にスペーサドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、スペーサドメインは、２つ
のＣＳＲドメインを連結するペプチドリンカーを含む。
はペプチド／ＭＨＣ複合体など）に特異的に結合し、ａ）標的リガンド結合ドメインと、
ｂ）膜貫通ドメインと、ｃ）共刺激シグナル伝達ドメインと、を含み、リガンド結合ドメ
インは、標的リガンドの受容体の細胞外ドメインの全て又は一部であり（又はそれに由来
し）、ＣＳＲは、標的リガンドが、標的リガンド結合の際に機能的に表面に発現する免疫
細胞を刺激することができる。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、細胞表面抗原
である。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、同じ免疫細胞で発現するｃａＴＣＲ
の標的抗原と同じである。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、同じ免疫細胞で発
現するｃａＴＣＲの標的抗原と異なる。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、疾患
関連リガンドである。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、がん関連リガンドであ
る。いくつかの実施形態では、がん関連リガンドは、例えば、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ
２２、ＣＤ４７、ＩＬ４、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ、
又はＦＣＲＬ５である。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、免疫チェックポイン
ト分子である。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイント分子は、ＰＤ－Ｌ１、Ｐ
Ｄ－Ｌ２、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳＬ、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＨＶＥＭ、４－
１ＢＢＬ、ＯＸ４０Ｌ、ＣＤ７０、ＣＤ４０、及びＧＡＬ９を含む。いくつかの実施形態
では、標的リガンドは、アポトーシス分子である。いくつかの実施形態では、アポトーシ
ス分子は、ＦａｓＬ、ＦａｓＲ、ＴＮＦＲ１、及びＴＮＦＲ２を含む。いくつかの実施形
態では、標的リガンド受容体は、例えば、ＦａｓＲ、ＴＮＦＲ１、ＴＮＦＲ２、ＰＤ－１
、ＣＤ２８、ＣＴＬＡ－４、ＩＣＯＳ、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＬＡＧ－３、４－１ＢＢ、Ｏ
Ｘ４０、ＣＤ２７、及びＴＩＭ－３を含む。いくつかの実施形態では、膜貫通ドメインは
、例えば、ＣＤ２８、ＣＤ３ε、ＣＤ３ζ、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８、ＣＤ９
、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ１３
４、ＣＤ１３７、又はＣＤ１５４に由来する膜貫通ドメインを含む。いくつかの実施形態
では、共刺激シグナル伝達ドメインは、例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ
１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原－１（ＬＦ
Ａ－１）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤ８３と特異的に
結合するリガンドなどを含む免疫細胞共刺激分子の細胞内ドメインの全て又は一部を含む
か、それから本質的になるか、又はそれからなる。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、
リガンド結合ドメイン、膜貫通ドメイン、及び共刺激シグナル伝達ドメインのいずれかの
間にスペーサドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、スペーサドメインは、２つ
のＣＳＲドメインを連結するペプチドリンカーを含む。
【0188】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＣＳＲは、ＣＤ１９に特異的に結合し、ａ
）配列番号５８のアミノ酸配列を有するＶＨドメイン、及び配列番号５９のアミノ酸配列
を有するＶＬドメインを含むｓｃＦｖと、ｂ）配列番号５１又は５２のアミノ酸配列を含
むか、それから本質的になるか、又はそれからなる、ＣＤ２８の断片と、を含む。いくつ
かの実施形態では、ｓｃＦｖは、アミノ末端からカルボキシ末端に向けて、ＶＬドメイン
、配列番号７６のアミノ酸配列を含むペプチドリンカー、及びＶＨドメインを含む。いく
つかの実施形態では、ｓｃＦｖは、配列番号７７のアミノ酸配列を含むか、それから本質
的になるか、又はそれからなる。いくつかの実施形態では、ＣＤ２８の断片は、配列番号
５１のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、配列番号９０のアミノ
酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、アミノ末端からカルボキシ末端に向
けて、ｓｃＦｖ、配列番号１０３を含むペプチドリンカー、及びＣＤ２８の断片を含む。
いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、配列番号８０のアミノ酸配列を含むか、それから本
質的になるか、又はそれからなる。
）配列番号５８のアミノ酸配列を有するＶＨドメイン、及び配列番号５９のアミノ酸配列
を有するＶＬドメインを含むｓｃＦｖと、ｂ）配列番号５１又は５２のアミノ酸配列を含
むか、それから本質的になるか、又はそれからなる、ＣＤ２８の断片と、を含む。いくつ
かの実施形態では、ｓｃＦｖは、アミノ末端からカルボキシ末端に向けて、ＶＬドメイン
、配列番号７６のアミノ酸配列を含むペプチドリンカー、及びＶＨドメインを含む。いく
つかの実施形態では、ｓｃＦｖは、配列番号７７のアミノ酸配列を含むか、それから本質
的になるか、又はそれからなる。いくつかの実施形態では、ＣＤ２８の断片は、配列番号
５１のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、配列番号９０のアミノ
酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、アミノ末端からカルボキシ末端に向
けて、ｓｃＦｖ、配列番号１０３を含むペプチドリンカー、及びＣＤ２８の断片を含む。
いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、配列番号８０のアミノ酸配列を含むか、それから本
質的になるか、又はそれからなる。
【0189】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＣＳＲは、ＣＤ２０に特異的に結合し、ａ
）配列番号６０のアミノ酸配列を有するＶＨドメイン、及び配列番号６１のアミノ酸配列
を有するＶＬドメインを含むｓｃＦｖと、ｂ）配列番号５１又は５２のアミノ酸配列を含
むか、それから本質的になるか、又はそれからなる、ＣＤ２８の断片と、を含む。いくつ
かの実施形態では、ｓｃＦｖは、アミノ末端からカルボキシ末端に向けて、ＶＬドメイン
、配列番号７６のアミノ酸配列を含むペプチドリンカー、及びＶＨドメインを含む。いく
つかの実施形態では、ｓｃＦｖは、配列番号７８のアミノ酸配列を含むか、それから本質
的になるか、又はそれからなる。いくつかの実施形態では、ＣＤ２８の断片は、配列番号
５１のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、アミノ末端からカルボ
キシ末端に向けて、ｓｃＦｖ、配列番号１０３を含むペプチドリンカー、及びＣＤ２８の
断片を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、配列番号８１のアミノ酸配列を含むか
、それから本質的になるか、又はそれからなる。
）配列番号６０のアミノ酸配列を有するＶＨドメイン、及び配列番号６１のアミノ酸配列
を有するＶＬドメインを含むｓｃＦｖと、ｂ）配列番号５１又は５２のアミノ酸配列を含
むか、それから本質的になるか、又はそれからなる、ＣＤ２８の断片と、を含む。いくつ
かの実施形態では、ｓｃＦｖは、アミノ末端からカルボキシ末端に向けて、ＶＬドメイン
、配列番号７６のアミノ酸配列を含むペプチドリンカー、及びＶＨドメインを含む。いく
つかの実施形態では、ｓｃＦｖは、配列番号７８のアミノ酸配列を含むか、それから本質
的になるか、又はそれからなる。いくつかの実施形態では、ＣＤ２８の断片は、配列番号
５１のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、アミノ末端からカルボ
キシ末端に向けて、ｓｃＦｖ、配列番号１０３を含むペプチドリンカー、及びＣＤ２８の
断片を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、配列番号８１のアミノ酸配列を含むか
、それから本質的になるか、又はそれからなる。
【0190】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＣＳＲは、ＧＰＣ３に特異的に結合し、ａ
）配列番号６４のアミノ酸配列を有するＶＨドメイン、及び配列番号６５のアミノ酸配列
を有するＶＬドメインを含むｓｃＦｖと、ｂ）配列番号５１又は５２のアミノ酸配列を含
むか、それから本質的になるか、又はそれからなる、ＣＤ２８の断片と、を含む。いくつ
かの実施形態では、ｓｃＦｖは、アミノ末端からカルボキシ末端に向けて、ＶＬドメイン
、配列番号７６のアミノ酸配列を含むペプチドリンカー、及びＶＨドメインを含む。いく
つかの実施形態では、ｓｃＦｖは、配列番号７９のアミノ酸配列を含むか、それから本質
的になるか、又はそれからなる。いくつかの実施形態では、ＣＤ２８の断片は、配列番号
５１のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、アミノ末端からカルボ
キシ末端に向けて、ｓｃＦｖ、配列番号１０３を含むペプチドリンカー、及びＣＤ２８の
断片を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、配列番号８２のアミノ酸配列を含むか
、それから本質的になるか、又はそれからなる。
）配列番号６４のアミノ酸配列を有するＶＨドメイン、及び配列番号６５のアミノ酸配列
を有するＶＬドメインを含むｓｃＦｖと、ｂ）配列番号５１又は５２のアミノ酸配列を含
むか、それから本質的になるか、又はそれからなる、ＣＤ２８の断片と、を含む。いくつ
かの実施形態では、ｓｃＦｖは、アミノ末端からカルボキシ末端に向けて、ＶＬドメイン
、配列番号７６のアミノ酸配列を含むペプチドリンカー、及びＶＨドメインを含む。いく
つかの実施形態では、ｓｃＦｖは、配列番号７９のアミノ酸配列を含むか、それから本質
的になるか、又はそれからなる。いくつかの実施形態では、ＣＤ２８の断片は、配列番号
５１のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、アミノ末端からカルボ
キシ末端に向けて、ｓｃＦｖ、配列番号１０３を含むペプチドリンカー、及びＣＤ２８の
断片を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、配列番号８２のアミノ酸配列を含むか
、それから本質的になるか、又はそれからなる。
【0191】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＣＳＲは、ＣＤ２０に特異的に結合し、ａ
）配列番号６０のアミノ酸配列を有するＶＨドメイン、及び配列番号６１のアミノ酸配列
を有するＶＬドメインを含むｓｃＦｖと、ｂ）配列番号５１又は５２のアミノ酸配列を含
むか、それから本質的になるか、又はそれからなる、ＣＤ２８の断片と、を含む。いくつ
かの実施形態では、ｓｃＦｖは、アミノ末端からカルボキシ末端に向けて、ＶＬドメイン
、配列番号７６のアミノ酸配列を含むペプチドリンカー、及びＶＨドメインを含む。いく
つかの実施形態では、ｓｃＦｖは、配列番号７８のアミノ酸配列を含むか、それから本質
的になるか、又はそれからなる。いくつかの実施形態では、ＣＤ２８の断片は、配列番号
５１のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、アミノ末端からカルボ
キシ末端に向けて、ｓｃＦｖ、配列番号１０３を含むペプチドリンカー、及びＣＤ２８の
断片を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、配列番号８１のアミノ酸配列を含むか
、それから本質的になるか、又はそれからなる。
）配列番号６０のアミノ酸配列を有するＶＨドメイン、及び配列番号６１のアミノ酸配列
を有するＶＬドメインを含むｓｃＦｖと、ｂ）配列番号５１又は５２のアミノ酸配列を含
むか、それから本質的になるか、又はそれからなる、ＣＤ２８の断片と、を含む。いくつ
かの実施形態では、ｓｃＦｖは、アミノ末端からカルボキシ末端に向けて、ＶＬドメイン
、配列番号７６のアミノ酸配列を含むペプチドリンカー、及びＶＨドメインを含む。いく
つかの実施形態では、ｓｃＦｖは、配列番号７８のアミノ酸配列を含むか、それから本質
的になるか、又はそれからなる。いくつかの実施形態では、ＣＤ２８の断片は、配列番号
５１のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、アミノ末端からカルボ
キシ末端に向けて、ｓｃＦｖ、配列番号１０３を含むペプチドリンカー、及びＣＤ２８の
断片を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、配列番号８１のアミノ酸配列を含むか
、それから本質的になるか、又はそれからなる。
【0192】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＣＳＲは、ＣＤ１９に特異的に結合し、ａ
）配列番号５８のアミノ酸配列を有するＶＨドメイン、及び配列番号５９のアミノ酸配列
を有するＶＬドメインを含むｓｃＦｖと、ｂ）配列番号５３又は５４のアミノ酸配列を含
むか、それから本質的になるか、又はそれからなる、４－１ＢＢの断片と、を含む。いく
つかの実施形態では、ｓｃＦｖは、アミノ末端からカルボキシ末端に向けて、ＶＬドメイ
ン、配列番号７６のアミノ酸配列を含むペプチドリンカー、及びＶＨドメインを含む。い
くつかの実施形態では、４－１ＢＢの断片は、配列番号５３のアミノ酸配列を含む。いく
つかの実施形態では、ＣＳＲは、アミノ末端からカルボキシ末端に向けて、ｓｃＦｖ、配
列番号１０４を含むペプチドリンカー、及び４－１ＢＢの断片を含む。
）配列番号５８のアミノ酸配列を有するＶＨドメイン、及び配列番号５９のアミノ酸配列
を有するＶＬドメインを含むｓｃＦｖと、ｂ）配列番号５３又は５４のアミノ酸配列を含
むか、それから本質的になるか、又はそれからなる、４－１ＢＢの断片と、を含む。いく
つかの実施形態では、ｓｃＦｖは、アミノ末端からカルボキシ末端に向けて、ＶＬドメイ
ン、配列番号７６のアミノ酸配列を含むペプチドリンカー、及びＶＨドメインを含む。い
くつかの実施形態では、４－１ＢＢの断片は、配列番号５３のアミノ酸配列を含む。いく
つかの実施形態では、ＣＳＲは、アミノ末端からカルボキシ末端に向けて、ｓｃＦｖ、配
列番号１０４を含むペプチドリンカー、及び４－１ＢＢの断片を含む。
【0193】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＣＳＲはＣＤ１９に特異的に結合し、ａ）
配列番号５８のアミノ酸配列を有するＶＨドメイン、及び配列番号５９のアミノ酸配列を
有するＶＬドメインを含むｓｃＦｖと、ｂ）配列番号５７のアミノ酸配列を含むか、それ
から本質的になるか、又はそれからなる、ＣＤ８の断片と、ｃ）配列番号５４のアミノ酸
配列を含むか、それから本質的になるか、又はそれからなる４－１ＢＢの断片と、を含む
。いくつかの実施形態では、ｓｃＦｖは、アミノ末端からカルボキシ末端に向けて、ＶＬ
ドメイン、配列番号７６のアミノ酸配列を含むペプチドリンカー、及びＶＨドメインを含
む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、アミノ末端からカルボキシ末端に向けて、ｓｃ
Ｆｖ、配列番号１０４を含むペプチドリンカー、ＣＤ８の断片、及び４－１ＢＢの断片を
含む。
配列番号５８のアミノ酸配列を有するＶＨドメイン、及び配列番号５９のアミノ酸配列を
有するＶＬドメインを含むｓｃＦｖと、ｂ）配列番号５７のアミノ酸配列を含むか、それ
から本質的になるか、又はそれからなる、ＣＤ８の断片と、ｃ）配列番号５４のアミノ酸
配列を含むか、それから本質的になるか、又はそれからなる４－１ＢＢの断片と、を含む
。いくつかの実施形態では、ｓｃＦｖは、アミノ末端からカルボキシ末端に向けて、ＶＬ
ドメイン、配列番号７６のアミノ酸配列を含むペプチドリンカー、及びＶＨドメインを含
む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、アミノ末端からカルボキシ末端に向けて、ｓｃ
Ｆｖ、配列番号１０４を含むペプチドリンカー、ＣＤ８の断片、及び４－１ＢＢの断片を
含む。
【0194】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＣＳＲはＣＤ１９に特異的に結合し、ａ）
配列番号５８のアミノ酸配列を有するＶＨドメイン、及び配列番号５９のアミノ酸配列を
有するＶＬドメインを含むｓｃＦｖと、ｂ）配列番号５７のアミノ酸配列を含むか、それ
から本質的になるか、又はそれからなる、ＣＤ８の断片と、ｃ）配列番号５７のアミノ酸
配列を含むか、それから本質的になるか、又はそれからなるＯＸ４０の断片と、を含む。
いくつかの実施形態では、ｓｃＦｖは、アミノ末端からカルボキシ末端に向けて、ＶＬド
メイン、配列番号７６のアミノ酸配列を含むペプチドリンカー、及びＶＨドメインを含む
。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、アミノ末端からカルボキシ末端に向けて、ｓｃＦ
ｖ、配列番号１０４を含むペプチドリンカー、ＣＤ８の断片、及びＯＸ４０の断片を含む
。
配列番号５８のアミノ酸配列を有するＶＨドメイン、及び配列番号５９のアミノ酸配列を
有するＶＬドメインを含むｓｃＦｖと、ｂ）配列番号５７のアミノ酸配列を含むか、それ
から本質的になるか、又はそれからなる、ＣＤ８の断片と、ｃ）配列番号５７のアミノ酸
配列を含むか、それから本質的になるか、又はそれからなるＯＸ４０の断片と、を含む。
いくつかの実施形態では、ｓｃＦｖは、アミノ末端からカルボキシ末端に向けて、ＶＬド
メイン、配列番号７６のアミノ酸配列を含むペプチドリンカー、及びＶＨドメインを含む
。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、アミノ末端からカルボキシ末端に向けて、ｓｃＦ
ｖ、配列番号１０４を含むペプチドリンカー、ＣＤ８の断片、及びＯＸ４０の断片を含む
。
【0195】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＣＳＲは、ＣＤ１９に特異的に結合し、ａ
）配列番号５８のアミノ酸配列を有するＶＨドメイン、及び配列番号５９のアミノ酸配列
を有するＶＬドメインを含むｓｃＦｖと、ｂ）配列番号５６又は５７のアミノ酸配列を含
むか、それから本質的になるか、又はそれからなる、ＯＸ４０の断片と、を含む。いくつ
かの実施形態では、ｓｃＦｖは、アミノ末端からカルボキシ末端に向けて、ＶＬドメイン
、配列番号７６のアミノ酸配列を含むペプチドリンカー、及びＶＨドメインを含む。いく
つかの実施形態では、ＯＸ４０の断片は、配列番号５６のアミノ酸配列を含む。いくつか
の実施形態では、ＣＳＲは、アミノ末端からカルボキシ末端に向けて、ｓｃＦｖ、配列番
号１０４を含むペプチドリンカー、及びＯＸ４０の断片を含む。
）配列番号５８のアミノ酸配列を有するＶＨドメイン、及び配列番号５９のアミノ酸配列
を有するＶＬドメインを含むｓｃＦｖと、ｂ）配列番号５６又は５７のアミノ酸配列を含
むか、それから本質的になるか、又はそれからなる、ＯＸ４０の断片と、を含む。いくつ
かの実施形態では、ｓｃＦｖは、アミノ末端からカルボキシ末端に向けて、ＶＬドメイン
、配列番号７６のアミノ酸配列を含むペプチドリンカー、及びＶＨドメインを含む。いく
つかの実施形態では、ＯＸ４０の断片は、配列番号５６のアミノ酸配列を含む。いくつか
の実施形態では、ＣＳＲは、アミノ末端からカルボキシ末端に向けて、ｓｃＦｖ、配列番
号１０４を含むペプチドリンカー、及びＯＸ４０の断片を含む。
【0196】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＣＳＲはＣＤ１９に特異的に結合し、ａ）
配列番号５８のアミノ酸配列を有するＶＨドメイン、及び配列番号５９のアミノ酸配列を
有するＶＬドメインを含むｓｃＦｖと、ｂ）配列番号５７のアミノ酸配列を含むか、それ
から本質的になるか、又はそれからなる、ＣＤ８の断片と、ｃ）配列番号８７のアミノ酸
配列を含むか、それから本質的になるか、又はそれからなるＣＤ２７の断片と、を含む。
いくつかの実施形態では、ｓｃＦｖは、アミノ末端からカルボキシ末端に向けて、ＶＬド
メイン、配列番号７６のアミノ酸配列を含むペプチドリンカー、及びＶＨドメインを含む
。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、アミノ末端からカルボキシ末端に向けて、ｓｃＦ
ｖ、配列番号１０４を含むペプチドリンカー、ＣＤ８の断片、及びＣＤ２７の断片を含む
。
配列番号５８のアミノ酸配列を有するＶＨドメイン、及び配列番号５９のアミノ酸配列を
有するＶＬドメインを含むｓｃＦｖと、ｂ）配列番号５７のアミノ酸配列を含むか、それ
から本質的になるか、又はそれからなる、ＣＤ８の断片と、ｃ）配列番号８７のアミノ酸
配列を含むか、それから本質的になるか、又はそれからなるＣＤ２７の断片と、を含む。
いくつかの実施形態では、ｓｃＦｖは、アミノ末端からカルボキシ末端に向けて、ＶＬド
メイン、配列番号７６のアミノ酸配列を含むペプチドリンカー、及びＶＨドメインを含む
。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、アミノ末端からカルボキシ末端に向けて、ｓｃＦ
ｖ、配列番号１０４を含むペプチドリンカー、ＣＤ８の断片、及びＣＤ２７の断片を含む
。
【0197】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＣＳＲは、ＣＤ１９に特異的に結合し、ａ
）配列番号５８のアミノ酸配列を有するＶＨドメイン、及び配列番号５９のアミノ酸配列
を有するＶＬドメインを含むｓｃＦｖと、ｂ）配列番号８６又は８７のアミノ酸配列を含
むか、それから本質的になるか、又はそれからなる、ＣＤ２７の断片と、を含む。いくつ
かの実施形態では、ｓｃＦｖは、アミノ末端からカルボキシ末端に向けて、ＶＬドメイン
、配列番号７６のアミノ酸配列を含むペプチドリンカー、及びＶＨドメインを含む。いく
つかの実施形態では、ＣＤ２７の断片は、配列番号８６のアミノ酸配列を含む。いくつか
の実施形態では、ＣＳＲは、アミノ末端からカルボキシ末端に向けて、ｓｃＦｖ、配列番
号１０４を含むペプチドリンカー、及びＣＤ２７の断片を含む。
）配列番号５８のアミノ酸配列を有するＶＨドメイン、及び配列番号５９のアミノ酸配列
を有するＶＬドメインを含むｓｃＦｖと、ｂ）配列番号８６又は８７のアミノ酸配列を含
むか、それから本質的になるか、又はそれからなる、ＣＤ２７の断片と、を含む。いくつ
かの実施形態では、ｓｃＦｖは、アミノ末端からカルボキシ末端に向けて、ＶＬドメイン
、配列番号７６のアミノ酸配列を含むペプチドリンカー、及びＶＨドメインを含む。いく
つかの実施形態では、ＣＤ２７の断片は、配列番号８６のアミノ酸配列を含む。いくつか
の実施形態では、ＣＳＲは、アミノ末端からカルボキシ末端に向けて、ｓｃＦｖ、配列番
号１０４を含むペプチドリンカー、及びＣＤ２７の断片を含む。
【0198】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＣＳＲはＣＤ１９に特異的に結合し、ａ）
配列番号５８のアミノ酸配列を有するＶＨドメイン、及び配列番号５９のアミノ酸配列を
有するＶＬドメインを含むｓｃＦｖと、ｂ）配列番号５７のアミノ酸配列を含むか、それ
から本質的になるか、又はそれからなる、ＣＤ８の断片と、ｃ）配列番号８９のアミノ酸
配列を含むか、それから本質的になるか、又はそれからなるＣＤ３０の断片と、を含む。
いくつかの実施形態では、ｓｃＦｖは、アミノ末端からカルボキシ末端に向けて、ＶＬド
メイン、配列番号７６のアミノ酸配列を含むペプチドリンカー、及びＶＨドメインを含む
。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、アミノ末端からカルボキシ末端に向けて、ｓｃＦ
ｖ、配列番号１０４を含むペプチドリンカー、ＣＤ８の断片、及びＣＤ３０の断片を含む
。
配列番号５８のアミノ酸配列を有するＶＨドメイン、及び配列番号５９のアミノ酸配列を
有するＶＬドメインを含むｓｃＦｖと、ｂ）配列番号５７のアミノ酸配列を含むか、それ
から本質的になるか、又はそれからなる、ＣＤ８の断片と、ｃ）配列番号８９のアミノ酸
配列を含むか、それから本質的になるか、又はそれからなるＣＤ３０の断片と、を含む。
いくつかの実施形態では、ｓｃＦｖは、アミノ末端からカルボキシ末端に向けて、ＶＬド
メイン、配列番号７６のアミノ酸配列を含むペプチドリンカー、及びＶＨドメインを含む
。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、アミノ末端からカルボキシ末端に向けて、ｓｃＦ
ｖ、配列番号１０４を含むペプチドリンカー、ＣＤ８の断片、及びＣＤ３０の断片を含む
。
【0199】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＣＳＲは、ＣＤ１９に特異的に結合し、ａ
）配列番号５８のアミノ酸配列を有するＶＨドメイン、及び配列番号５９のアミノ酸配列
を有するＶＬドメインを含むｓｃＦｖと、ｂ）配列番号８８又は８９のアミノ酸配列を含
むか、それから本質的になるか、又はそれからなる、ＣＤ３０の断片と、を含む。いくつ
かの実施形態では、ｓｃＦｖは、アミノ末端からカルボキシ末端に向けて、ＶＬドメイン
、配列番号７６のアミノ酸配列を含むペプチドリンカー、及びＶＨドメインを含む。いく
つかの実施形態では、ＣＤ３０の断片は、配列番号８８のアミノ酸配列を含む。いくつか
の実施形態では、ＣＳＲは、アミノ末端からカルボキシ末端に向けて、ｓｃＦｖ、配列番
号１０４を含むペプチドリンカー、及びＣＤ３０の断片を含む。
）配列番号５８のアミノ酸配列を有するＶＨドメイン、及び配列番号５９のアミノ酸配列
を有するＶＬドメインを含むｓｃＦｖと、ｂ）配列番号８８又は８９のアミノ酸配列を含
むか、それから本質的になるか、又はそれからなる、ＣＤ３０の断片と、を含む。いくつ
かの実施形態では、ｓｃＦｖは、アミノ末端からカルボキシ末端に向けて、ＶＬドメイン
、配列番号７６のアミノ酸配列を含むペプチドリンカー、及びＶＨドメインを含む。いく
つかの実施形態では、ＣＤ３０の断片は、配列番号８８のアミノ酸配列を含む。いくつか
の実施形態では、ＣＳＲは、アミノ末端からカルボキシ末端に向けて、ｓｃＦｖ、配列番
号１０４を含むペプチドリンカー、及びＣＤ３０の断片を含む。
【0200】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞におけるＣＳＲの発現は、誘導
可能である。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞は、本明細書に記載
の誘導可能なプロモーターのいずれかを含む誘導可能なプロモーターに作動可能に連結さ
れたＣＳＲをコードする核酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ
免疫細胞におけるＣＳＲの発現は、ｃａＴＣＲを介したシグナル伝達時に誘導可能である
。いくつかのそのような実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞は、ｃａＴＣＲを介
したシグナル伝達に応答してプロモーター又は調節要素に作動可能に連結されたＣＳＲを
コードする核酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲをコードする核酸配列は、
活性化Ｔ細胞由来プロモーターの核因子（ＮＦＡＴ）に作動可能に連結される。いくつか
の実施形態では、ＮＦＡＴ由来プロモーターは、ＮＦＡＴ由来のミニマルプロモーターで
ある（例えば、Ｄｕｒａｎｄ，Ｄ．ｅｔ．ａｌ．，Ｍｏｌｅｃ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．８
，１７１５－１７２４（１９８８）、Ｃｌｉｐｓｔｏｎｅ，ＮＡ，Ｃｒａｂｔｒｅｅ，Ｇ
Ｒ．Ｎａｔｕｒｅ．１９９２ ３５７（６３８０）：６９５－７、Ｃｈｍｉｅｌｅｗｓｋ
ｉ，Ｍ．，ｅｔ ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ ｒｅｓｅａｒｃｈ ７１．１７（２０１１）：５
６９７－５７０６、及びＺｈａｎｇ，Ｌ．，ｅｔ ａｌ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｔｈｅｒ
ａｐｙ １９．４（２０１１）：７５１－７５９を参照されたい）。いくつかの実施形態
では、ＮＦＡＴ由来プロモーターは、配列番号８５のヌクレオチド配列を含む。いくつか
の実施形態では、ＣＳＲをコードする核酸配列は、ＩＬ－２プロモーターに作動可能に連
結される。
分泌二次エフェクター（ＳＳＥ）構築物
可能である。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞は、本明細書に記載
の誘導可能なプロモーターのいずれかを含む誘導可能なプロモーターに作動可能に連結さ
れたＣＳＲをコードする核酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ
免疫細胞におけるＣＳＲの発現は、ｃａＴＣＲを介したシグナル伝達時に誘導可能である
。いくつかのそのような実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞は、ｃａＴＣＲを介
したシグナル伝達に応答してプロモーター又は調節要素に作動可能に連結されたＣＳＲを
コードする核酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲをコードする核酸配列は、
活性化Ｔ細胞由来プロモーターの核因子（ＮＦＡＴ）に作動可能に連結される。いくつか
の実施形態では、ＮＦＡＴ由来プロモーターは、ＮＦＡＴ由来のミニマルプロモーターで
ある（例えば、Ｄｕｒａｎｄ，Ｄ．ｅｔ．ａｌ．，Ｍｏｌｅｃ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．８
，１７１５－１７２４（１９８８）、Ｃｌｉｐｓｔｏｎｅ，ＮＡ，Ｃｒａｂｔｒｅｅ，Ｇ
Ｒ．Ｎａｔｕｒｅ．１９９２ ３５７（６３８０）：６９５－７、Ｃｈｍｉｅｌｅｗｓｋ
ｉ，Ｍ．，ｅｔ ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ ｒｅｓｅａｒｃｈ ７１．１７（２０１１）：５
６９７－５７０６、及びＺｈａｎｇ，Ｌ．，ｅｔ ａｌ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｔｈｅｒ
ａｐｙ １９．４（２０１１）：７５１－７５９を参照されたい）。いくつかの実施形態
では、ＮＦＡＴ由来プロモーターは、配列番号８５のヌクレオチド配列を含む。いくつか
の実施形態では、ＣＳＲをコードする核酸配列は、ＩＬ－２プロモーターに作動可能に連
結される。
分泌二次エフェクター（ＳＳＥ）構築物
【0201】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞（Ｔ細胞など）は、分泌二次エ
フェクター（ＳＳＥ）を分泌することができる。このような免疫細胞は、本明細書では、
「ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ及びＳＳＥ免疫細胞」とも称される。ＳＳＥは、それが機能的に発
現及び分泌されるｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ及びＳＳＥ免疫細胞によって媒介される免疫応答を
強化する。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、他の免疫細胞（バイスタンダーＴ細胞又
はＮＫ細胞など）を標的疾患細胞（標的がん細胞など）に再指向することができる。いく
つかの実施形態では、ＳＳＥは、免疫細胞（Ｔ細胞又はＮＫ細胞など）及び疾患細胞（が
ん細胞など）を標的化する多重特異性抗体（二重特異性抗体など）である。いくつかの実
施形態では、ＳＳＥは、免疫抑制性腫瘍環境などの免疫抑制環境から、ｃａＴＣＲ＋ＣＳ
Ｒ及びＳＳＥ免疫細胞を保護する。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、ｃａＴＣＲ＋Ｃ
ＳＲ及びＳＳＥ免疫細胞上の刺激受容体の自己活性化をもたらす。いくつかの実施形態で
は、ＳＳＥは、外来性増殖因子又は刺激性サイトカインである。いくつかの実施形態では
、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ及びＳＳＥ免疫細胞におけるＳＳＥの発現は、誘導可能である。い
くつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ及びＳＳＥ免疫細胞におけるＳＳＥの発現は
、ｃａＴＣＲを介したシグナル伝達時に誘導可能である。
フェクター（ＳＳＥ）を分泌することができる。このような免疫細胞は、本明細書では、
「ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ及びＳＳＥ免疫細胞」とも称される。ＳＳＥは、それが機能的に発
現及び分泌されるｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ及びＳＳＥ免疫細胞によって媒介される免疫応答を
強化する。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、他の免疫細胞（バイスタンダーＴ細胞又
はＮＫ細胞など）を標的疾患細胞（標的がん細胞など）に再指向することができる。いく
つかの実施形態では、ＳＳＥは、免疫細胞（Ｔ細胞又はＮＫ細胞など）及び疾患細胞（が
ん細胞など）を標的化する多重特異性抗体（二重特異性抗体など）である。いくつかの実
施形態では、ＳＳＥは、免疫抑制性腫瘍環境などの免疫抑制環境から、ｃａＴＣＲ＋ＣＳ
Ｒ及びＳＳＥ免疫細胞を保護する。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、ｃａＴＣＲ＋Ｃ
ＳＲ及びＳＳＥ免疫細胞上の刺激受容体の自己活性化をもたらす。いくつかの実施形態で
は、ＳＳＥは、外来性増殖因子又は刺激性サイトカインである。いくつかの実施形態では
、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ及びＳＳＥ免疫細胞におけるＳＳＥの発現は、誘導可能である。い
くつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ及びＳＳＥ免疫細胞におけるＳＳＥの発現は
、ｃａＴＣＲを介したシグナル伝達時に誘導可能である。
【0202】
いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、Ｔ細胞及び疾患細胞を標的化する多重特異性抗体
（二重特異性抗体など）である。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、Ｔ細胞の表面抗原
に特異的に結合する抗体部分を含む。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞表面抗原はＣＤ３
である。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、疾患関連抗原（がん関連抗原など）に特異
的に結合する抗体部分を含む。いくつかの実施形態では、疾患関連抗原は、疾患細胞（が
ん細胞など）の表面抗原である。いくつかの実施形態では、疾患関連抗原は、グリピカン
－３（ＧＰＣ３）、ＣＤ４７、ムチン－１６（ＭＵＣ１６）、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ
２２、ＥｐＣＡＭ、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ２、ＣＥＡ、ＰＳＭＡ、ＡＦＰ、ＰＳＡ、ＢＣＭＡ
、ＦＣＲＬ５、ＮＹ－ＥＳＯ、ＨＰＶ１６、又はＦｏｘＰ３、その変異型又は変異体を含
むものである。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、タンデムｓｃＦｖ、ダイアボディ（
Ｄｂ）、単鎖ダイアボディ（ｓｃＤｂ）、二重親和性再標的化（ＤＡＲＴ）抗体、及び二
重可変ドメイン（ＤＶＤ）抗体からなる群から選択される多重特異性抗体である。いくつ
かの実施形態では、ＳＳＥは二重特異性抗体である。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは
、Ｔ細胞表面抗原を標的化する第１のｓｃＦｖと、疾患関連抗原を標的化する第２のｓｃ
Ｆｖと、を含む、タンデムｓｃＦｖである。
（二重特異性抗体など）である。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、Ｔ細胞の表面抗原
に特異的に結合する抗体部分を含む。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞表面抗原はＣＤ３
である。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、疾患関連抗原（がん関連抗原など）に特異
的に結合する抗体部分を含む。いくつかの実施形態では、疾患関連抗原は、疾患細胞（が
ん細胞など）の表面抗原である。いくつかの実施形態では、疾患関連抗原は、グリピカン
－３（ＧＰＣ３）、ＣＤ４７、ムチン－１６（ＭＵＣ１６）、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ
２２、ＥｐＣＡＭ、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ２、ＣＥＡ、ＰＳＭＡ、ＡＦＰ、ＰＳＡ、ＢＣＭＡ
、ＦＣＲＬ５、ＮＹ－ＥＳＯ、ＨＰＶ１６、又はＦｏｘＰ３、その変異型又は変異体を含
むものである。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、タンデムｓｃＦｖ、ダイアボディ（
Ｄｂ）、単鎖ダイアボディ（ｓｃＤｂ）、二重親和性再標的化（ＤＡＲＴ）抗体、及び二
重可変ドメイン（ＤＶＤ）抗体からなる群から選択される多重特異性抗体である。いくつ
かの実施形態では、ＳＳＥは二重特異性抗体である。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは
、Ｔ細胞表面抗原を標的化する第１のｓｃＦｖと、疾患関連抗原を標的化する第２のｓｃ
Ｆｖと、を含む、タンデムｓｃＦｖである。
【0203】
いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、ＣＤ３を標的化する第１のｓｃＦｖと、疾患関連
抗原を標的化する第２のｓｃＦｖと、を含む、タンデムｓｃＦｖである。いくつかの実施
形態では、疾患関連抗原は、ＧＰＣ３、ＣＤ４７、ＭＵＣ１６、ＣＤ１９、ＣＤ２０、Ｃ
Ｄ２２、ＥｐＣＡＭ、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ２、ＣＥＡ、ＰＳＭＡ、ＡＦＰ、ＰＳＡ、ＢＣＭ
Ａ、ＦＣＲＬ５、ＮＹ－ＥＳＯ、ＨＰＶ１６、又はＦｏｘＰ３、その変異型又は変異体を
含むものである。
抗原を標的化する第２のｓｃＦｖと、を含む、タンデムｓｃＦｖである。いくつかの実施
形態では、疾患関連抗原は、ＧＰＣ３、ＣＤ４７、ＭＵＣ１６、ＣＤ１９、ＣＤ２０、Ｃ
Ｄ２２、ＥｐＣＡＭ、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ２、ＣＥＡ、ＰＳＭＡ、ＡＦＰ、ＰＳＡ、ＢＣＭ
Ａ、ＦＣＲＬ５、ＮＹ－ＥＳＯ、ＨＰＶ１６、又はＦｏｘＰ３、その変異型又は変異体を
含むものである。
【0204】
いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、ＣＤ３を標的化する第１のｓｃＦｖと、ＧＰＣ３
を標的化する第２のｓｃＦｖと、を含む、タンデムｓｃＦｖである。いくつかの実施形態
では、第２のｓｃＦｖは、配列番号６４のアミノ酸配列を含むか、それから本質的になる
か、又はそれからなるＶＨドメインと、配列番号６５のアミノ酸配列を含むか、それから
本質的になるか、又はそれからなるＶＬドメインと、を含む。いくつかの実施形態では、
ＶＨドメインは、ＶＬドメインに対してアミノ末端側である。いくつかの実施形態では、
ＶＬドメインは、ＶＨドメインに対してアミノ末端側である。いくつかの実施形態では、
第２のｓｃＦｖは、配列番号７９のアミノ酸配列を含むか、それから本質的になるか、又
はそれからなる。いくつかの実施形態では、第１のｓｃＦｖは、第２のｓｃＦｖに対して
アミノ末端側である。いくつかの実施形態では、第２のｓｃＦｖは、第１のｓｃＦｖに対
してアミノ末端側である。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、配列番号１０５のアミノ
酸配列を含むか、それから本質的になるか、又はそれからなる。
を標的化する第２のｓｃＦｖと、を含む、タンデムｓｃＦｖである。いくつかの実施形態
では、第２のｓｃＦｖは、配列番号６４のアミノ酸配列を含むか、それから本質的になる
か、又はそれからなるＶＨドメインと、配列番号６５のアミノ酸配列を含むか、それから
本質的になるか、又はそれからなるＶＬドメインと、を含む。いくつかの実施形態では、
ＶＨドメインは、ＶＬドメインに対してアミノ末端側である。いくつかの実施形態では、
ＶＬドメインは、ＶＨドメインに対してアミノ末端側である。いくつかの実施形態では、
第２のｓｃＦｖは、配列番号７９のアミノ酸配列を含むか、それから本質的になるか、又
はそれからなる。いくつかの実施形態では、第１のｓｃＦｖは、第２のｓｃＦｖに対して
アミノ末端側である。いくつかの実施形態では、第２のｓｃＦｖは、第１のｓｃＦｖに対
してアミノ末端側である。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、配列番号１０５のアミノ
酸配列を含むか、それから本質的になるか、又はそれからなる。
【0205】
いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、ＣＤ３を標的化する第１のｓｃＦｖと、ＣＤ４７
を標的化する第２のｓｃＦｖと、を含む、タンデムｓｃＦｖである。いくつかの実施形態
では、ＳＳＥは、ＣＤ３を標的化する第１のｓｃＦｖと、ＭＵＣ１６を標的化する第２の
ｓｃＦｖと、を含む、タンデムｓｃＦｖである。
を標的化する第２のｓｃＦｖと、を含む、タンデムｓｃＦｖである。いくつかの実施形態
では、ＳＳＥは、ＣＤ３を標的化する第１のｓｃＦｖと、ＭＵＣ１６を標的化する第２の
ｓｃＦｖと、を含む、タンデムｓｃＦｖである。
【0206】
いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、ＮＫ細胞及び疾患関連抗原（がん関連抗原など）
を標的化する多重特異性抗体（二重特異性抗体など）である。いくつかの実施形態では、
ＳＳＥは、ＮＫ細胞の表面抗原に特異的に結合する抗体部分を含む。いくつかの実施形態
では、ＮＫ細胞表面抗原はＣＤ１６ａである。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、疾患
関連抗原（がん関連抗原など）に特異的に結合する抗体部分を含む。いくつかの実施形態
では、疾患関連抗原は、疾患細胞（がん細胞など）の表面抗原である。いくつかの実施形
態では、疾患関連抗原は、ＧＰＣ３、ＣＤ４７、ＭＵＣ１６、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ
２２、ＥｐＣＡＭ、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ２、ＣＥＡ、ＰＳＭＡ、ＡＦＰ、ＰＳＡ、ＢＣＭＡ
、ＦＣＲＬ５、ＮＹ－ＥＳＯ、ＨＰＶ１６、又はＦｏｘＰ３、その変異型又は変異体を含
むものである。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、タンデムｓｃＦｖ、ダイアボディ（
Ｄｂ）、単鎖ダイアボディ（ｓｃＤｂ）、二重親和性再標的化（ＤＡＲＴ）抗体、及び二
重可変ドメイン（ＤＶＤ）抗体からなる群から選択される多重特異性抗体である。いくつ
かの実施形態では、ＳＳＥは二重特異性抗体である。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは
、ＮＫ細胞表面抗原を標的化する第１のｓｃＦｖと、疾患関連抗原を標的化する第２のｓ
ｃＦｖと、を含む、タンデムｓｃＦｖである。
を標的化する多重特異性抗体（二重特異性抗体など）である。いくつかの実施形態では、
ＳＳＥは、ＮＫ細胞の表面抗原に特異的に結合する抗体部分を含む。いくつかの実施形態
では、ＮＫ細胞表面抗原はＣＤ１６ａである。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、疾患
関連抗原（がん関連抗原など）に特異的に結合する抗体部分を含む。いくつかの実施形態
では、疾患関連抗原は、疾患細胞（がん細胞など）の表面抗原である。いくつかの実施形
態では、疾患関連抗原は、ＧＰＣ３、ＣＤ４７、ＭＵＣ１６、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ
２２、ＥｐＣＡＭ、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ２、ＣＥＡ、ＰＳＭＡ、ＡＦＰ、ＰＳＡ、ＢＣＭＡ
、ＦＣＲＬ５、ＮＹ－ＥＳＯ、ＨＰＶ１６、又はＦｏｘＰ３、その変異型又は変異体を含
むものである。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、タンデムｓｃＦｖ、ダイアボディ（
Ｄｂ）、単鎖ダイアボディ（ｓｃＤｂ）、二重親和性再標的化（ＤＡＲＴ）抗体、及び二
重可変ドメイン（ＤＶＤ）抗体からなる群から選択される多重特異性抗体である。いくつ
かの実施形態では、ＳＳＥは二重特異性抗体である。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは
、ＮＫ細胞表面抗原を標的化する第１のｓｃＦｖと、疾患関連抗原を標的化する第２のｓ
ｃＦｖと、を含む、タンデムｓｃＦｖである。
【0207】
いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、ＣＤ１６ａを標的化する第１のｓｃＦｖと、疾患
関連抗原を標的化する第２のｓｃＦｖと、を含む、タンデムｓｃＦｖである。いくつかの
実施形態では、疾患関連抗原は、ＧＰＣ３、ＣＤ４７、ＭＵＣ１６、ＣＤ１９、ＣＤ２０
、ＣＤ２２、ＥｐＣＡＭ、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ２、ＣＥＡ、ＰＳＭＡ、ＡＦＰ、ＰＳＡ、Ｂ
ＣＭＡ、ＦＣＲＬ５、ＮＹ－ＥＳＯ、ＨＰＶ１６、又はＦｏｘＰ３、その変異型又は変異
体を含むものである。
関連抗原を標的化する第２のｓｃＦｖと、を含む、タンデムｓｃＦｖである。いくつかの
実施形態では、疾患関連抗原は、ＧＰＣ３、ＣＤ４７、ＭＵＣ１６、ＣＤ１９、ＣＤ２０
、ＣＤ２２、ＥｐＣＡＭ、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ２、ＣＥＡ、ＰＳＭＡ、ＡＦＰ、ＰＳＡ、Ｂ
ＣＭＡ、ＦＣＲＬ５、ＮＹ－ＥＳＯ、ＨＰＶ１６、又はＦｏｘＰ３、その変異型又は変異
体を含むものである。
【0208】
いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、ＣＤ１６ａを標的化する第１のｓｃＦｖと、ＧＰ
Ｃ３を標的化する第２のｓｃＦｖと、を含む、タンデムｓｃＦｖである。いくつかの実施
形態では、ＳＳＥは、ＣＤ１６ａを標的化する第１のｓｃＦｖと、ＣＤ４７を標的化する
第２のｓｃＦｖと、を含む、タンデムｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、ＳＳＥ
は、ＣＤ１６ａを標的化する第１のｓｃＦｖと、ＭＵＣ１６を標的化する第２のｓｃＦｖ
と、を含む、タンデムｓｃＦｖである。
Ｃ３を標的化する第２のｓｃＦｖと、を含む、タンデムｓｃＦｖである。いくつかの実施
形態では、ＳＳＥは、ＣＤ１６ａを標的化する第１のｓｃＦｖと、ＣＤ４７を標的化する
第２のｓｃＦｖと、を含む、タンデムｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、ＳＳＥ
は、ＣＤ１６ａを標的化する第１のｓｃＦｖと、ＭＵＣ１６を標的化する第２のｓｃＦｖ
と、を含む、タンデムｓｃＦｖである。
【0209】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＳＳＥは、疾患関連抗原に特異的に結合す
る抗体部分を含み、抗体部分は、疾患関連抗原に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメ
イン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｃ
Ｄ１９に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を
含む（例えば、ＷＯ２０１７０６６１３６Ａ２を参照されたい）。いくつかの実施形態で
は、抗体部分は、ＣＤ１９に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又
はＶＬドメイン）を含む（例えば、配列番号５８のアミノ酸配列を含むか、それから本質
的になるか、若しくはそれからなるものを含むＶＨドメイン、及び／又は配列番号５９の
アミノ酸配列を含むか、それから本質的になるか、若しくはそれからなるものを含むＶＬ
ドメイン、或いはそれらに含まれるＣＤＲ）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｃ
Ｄ２０に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を
含む（例えば、配列番号６０のアミノ酸配列を含むか、それから本質的になるか、若しく
はそれからなるものを含むＶＨドメイン、及び／又は配列番号６１のアミノ酸配列を含む
か、それから本質的になるか、若しくはそれからなるものを含むＶＬドメイン、或いはそ
れらに含まれるＣＤＲ）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＣＤ２２に特異的な抗
体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、参照
によりその全てが本明細書に組み込まれる、２０１８年３月３０日出願のＵＳＳＮ６２／
６５０，９５５を参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＣＤ２２に特
異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例え
ば、配列番号１０１のアミノ酸配列を含むか、それから本質的になるか、若しくはそれか
らなるものを含むＶＨドメイン、及び／又は配列番号１０２のアミノ酸配列を含むか、そ
れから本質的になるか、若しくはそれからなるものを含むＶＬドメイン、或いはそれらに
含まれるＣＤＲ）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＧＰＣ３に特異的な抗体部分
のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、参照により
その全てが本明細書に組み込まれる、２０１７年４月２６日出願のＵＳＳＮ６２／４９０
，５８６を参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＧＰＣ３に特異的な
抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、配
列番号６４のアミノ酸配列を含むか、それから本質的になるか、若しくはそれからなるも
のを含むＶＨドメイン、及び／又は配列番号６５のアミノ酸配列を含むか、それから本質
的になるか、若しくはそれからなるものを含むＶＬドメイン、或いはそれらに含まれるＣ
ＤＲ）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＲＯＲ１に特異的な抗体部分のＣＤＲ又
は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１８７
２２０及びＷＯ２０１６／１８７２１６を参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗
体部分は、ＲＯＲ２に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬ
ドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１４２７６８を参照されたい）。いくつかの
実施形態では、抗体部分は、ＢＣＭＡに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（Ｖ
Ｈ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／０９０３２７及びＷＯ２０
１６／０９０３２０を参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＧＰＲＣ
５Ｄに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含
む（例えば、ＷＯ２０１６／０９０３２９及びＷＯ２０１６／０９０３１２を参照された
い）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＦＣＲＬ５に特異的な抗体部分のＣＤＲ又
は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／０９０
３３７を参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＷＴ－１に特異的な抗
体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ
２０１２／１３５８５４、ＷＯ２０１５／０７００７８、及びＷＯ２０１５／０７００６
１を参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＡＦＰに特異的な抗体部分
のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１
６／１６１３９０を参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＨＰＶ１６
－Ｅ７に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を
含む（例えば、ＷＯ２０１６／１８２９５７を参照されたい）。いくつかの実施形態では
、抗体部分は、ＮＹ－ＥＳＯ－１に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及
び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／２１０３６５を参照されたい）
。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＰＲＡＭＥに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可
変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１９１２４
６を参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａに特異
的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば
、ＷＯ２０１６／２０１１２４を参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は
、ＫＲＡＳに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン
）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１５４０４７を参照されたい）。いくつかの実施形態
では、抗体部分は、ＰＳＡに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又
はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１７／０１５６３４を参照されたい）。いく
つかの実施形態では、抗体部分はｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、
ａ）Ｔ細胞の表面抗原（ＣＤ３など）又はＮＫ細胞の表面抗原（ＣＤ１６ａなど）に特異
的に結合する第１のｓｃＦｖと、ｂ）抗体部分と、を含み、郊外部分が第２のｓｃＦｖで
ある、タンデムｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、ペプチドリンカー
によって連結された第１及び第２のｓｃＦｖを含む。いくつかの実施形態では、第１のｓ
ｃＦｖは、第２のｓｃＦｖに対してアミノ末端側である。いくつかの実施形態では、第２
のｓｃＦｖは、第１のｓｃＦｖに対してアミノ末端側である。
る抗体部分を含み、抗体部分は、疾患関連抗原に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメ
イン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｃ
Ｄ１９に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を
含む（例えば、ＷＯ２０１７０６６１３６Ａ２を参照されたい）。いくつかの実施形態で
は、抗体部分は、ＣＤ１９に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又
はＶＬドメイン）を含む（例えば、配列番号５８のアミノ酸配列を含むか、それから本質
的になるか、若しくはそれからなるものを含むＶＨドメイン、及び／又は配列番号５９の
アミノ酸配列を含むか、それから本質的になるか、若しくはそれからなるものを含むＶＬ
ドメイン、或いはそれらに含まれるＣＤＲ）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｃ
Ｄ２０に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を
含む（例えば、配列番号６０のアミノ酸配列を含むか、それから本質的になるか、若しく
はそれからなるものを含むＶＨドメイン、及び／又は配列番号６１のアミノ酸配列を含む
か、それから本質的になるか、若しくはそれからなるものを含むＶＬドメイン、或いはそ
れらに含まれるＣＤＲ）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＣＤ２２に特異的な抗
体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、参照
によりその全てが本明細書に組み込まれる、２０１８年３月３０日出願のＵＳＳＮ６２／
６５０，９５５を参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＣＤ２２に特
異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例え
ば、配列番号１０１のアミノ酸配列を含むか、それから本質的になるか、若しくはそれか
らなるものを含むＶＨドメイン、及び／又は配列番号１０２のアミノ酸配列を含むか、そ
れから本質的になるか、若しくはそれからなるものを含むＶＬドメイン、或いはそれらに
含まれるＣＤＲ）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＧＰＣ３に特異的な抗体部分
のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、参照により
その全てが本明細書に組み込まれる、２０１７年４月２６日出願のＵＳＳＮ６２／４９０
，５８６を参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＧＰＣ３に特異的な
抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、配
列番号６４のアミノ酸配列を含むか、それから本質的になるか、若しくはそれからなるも
のを含むＶＨドメイン、及び／又は配列番号６５のアミノ酸配列を含むか、それから本質
的になるか、若しくはそれからなるものを含むＶＬドメイン、或いはそれらに含まれるＣ
ＤＲ）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＲＯＲ１に特異的な抗体部分のＣＤＲ又
は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１８７
２２０及びＷＯ２０１６／１８７２１６を参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗
体部分は、ＲＯＲ２に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬ
ドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１４２７６８を参照されたい）。いくつかの
実施形態では、抗体部分は、ＢＣＭＡに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（Ｖ
Ｈ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／０９０３２７及びＷＯ２０
１６／０９０３２０を参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＧＰＲＣ
５Ｄに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含
む（例えば、ＷＯ２０１６／０９０３２９及びＷＯ２０１６／０９０３１２を参照された
い）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＦＣＲＬ５に特異的な抗体部分のＣＤＲ又
は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／０９０
３３７を参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＷＴ－１に特異的な抗
体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ
２０１２／１３５８５４、ＷＯ２０１５／０７００７８、及びＷＯ２０１５／０７００６
１を参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＡＦＰに特異的な抗体部分
のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１
６／１６１３９０を参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＨＰＶ１６
－Ｅ７に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を
含む（例えば、ＷＯ２０１６／１８２９５７を参照されたい）。いくつかの実施形態では
、抗体部分は、ＮＹ－ＥＳＯ－１に特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及
び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／２１０３６５を参照されたい）
。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＰＲＡＭＥに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可
変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１９１２４
６を参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａに特異
的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば
、ＷＯ２０１６／２０１１２４を参照されたい）。いくつかの実施形態では、抗体部分は
、ＫＲＡＳに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン
）を含む（例えば、ＷＯ２０１６／１５４０４７を参照されたい）。いくつかの実施形態
では、抗体部分は、ＰＳＡに特異的な抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又
はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０１７／０１５６３４を参照されたい）。いく
つかの実施形態では、抗体部分はｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、
ａ）Ｔ細胞の表面抗原（ＣＤ３など）又はＮＫ細胞の表面抗原（ＣＤ１６ａなど）に特異
的に結合する第１のｓｃＦｖと、ｂ）抗体部分と、を含み、郊外部分が第２のｓｃＦｖで
ある、タンデムｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、ペプチドリンカー
によって連結された第１及び第２のｓｃＦｖを含む。いくつかの実施形態では、第１のｓ
ｃＦｖは、第２のｓｃＦｖに対してアミノ末端側である。いくつかの実施形態では、第２
のｓｃＦｖは、第１のｓｃＦｖに対してアミノ末端側である。
【0210】
いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、１つ以上の可溶性免疫抑制剤を標的化する多重特
異性抗体（二重特異性抗体など）である。そのようなＳＳＥは、可溶性免疫抑制剤をそれ
らの標的から隔離するためのトラップとして作用することができ、それによってそれらの
免疫抑制効果を低減する。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、１つ以上の可溶性免疫抑
制剤に特異的に結合する１つ以上の抗体部分を含む。いくつかの実施形態では、免疫抑制
剤は免疫抑制サイトカインである。いくつかの実施形態では、免疫抑制サイトカインとし
ては、ＴＧＦ－βファミリーメンバー（例えば、ＴＧＦ－β１～４）、ＩＬ－４、及びＩ
Ｌ－１０、これらの変異型又は変異体を含むものが挙げられる。いくつかの実施形態では
、ＳＳＥは、タンデムｓｃＦｖ、ダイアボディ（Ｄｂ）、単鎖ダイアボディ（ｓｃＤｂ）
、二重親和性再標的化（ＤＡＲＴ）抗体、及び二重可変ドメイン（ＤＶＤ）抗体からなる
群から選択される多重特異性抗体である。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは二重特異性
抗体である。例えば、いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、第１の免疫抑制サイトカイン
（ＴＧＦβなど）を標的化する第１のｓｃＦｖと、第２の免疫抑制サイトカイン（ＩＬ－
４など）を標的化する第２のｓｃＦｖと、を含むタンデムｓｃＦｖである。
異性抗体（二重特異性抗体など）である。そのようなＳＳＥは、可溶性免疫抑制剤をそれ
らの標的から隔離するためのトラップとして作用することができ、それによってそれらの
免疫抑制効果を低減する。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、１つ以上の可溶性免疫抑
制剤に特異的に結合する１つ以上の抗体部分を含む。いくつかの実施形態では、免疫抑制
剤は免疫抑制サイトカインである。いくつかの実施形態では、免疫抑制サイトカインとし
ては、ＴＧＦ－βファミリーメンバー（例えば、ＴＧＦ－β１～４）、ＩＬ－４、及びＩ
Ｌ－１０、これらの変異型又は変異体を含むものが挙げられる。いくつかの実施形態では
、ＳＳＥは、タンデムｓｃＦｖ、ダイアボディ（Ｄｂ）、単鎖ダイアボディ（ｓｃＤｂ）
、二重親和性再標的化（ＤＡＲＴ）抗体、及び二重可変ドメイン（ＤＶＤ）抗体からなる
群から選択される多重特異性抗体である。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは二重特異性
抗体である。例えば、いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、第１の免疫抑制サイトカイン
（ＴＧＦβなど）を標的化する第１のｓｃＦｖと、第２の免疫抑制サイトカイン（ＩＬ－
４など）を標的化する第２のｓｃＦｖと、を含むタンデムｓｃＦｖである。
【0211】
いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、免疫チェックポイント分子を標的化する抗体部分
である。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、阻害性免疫チェックポイント分子のアンタ
ゴニストである。いくつかの実施形態では、阻害性免疫チェックポイント分子は、ＰＤ－
１、ＰＤ－Ｌ１、ＣＴＬＡ－４、ＨＶＥＭ、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＬＡＧ－３、ＴＩＭ－３
、及びＡ２ａＲからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、刺激性
免疫チェックポイント分子のアゴニストである。いくつかの実施形態では、刺激性免疫チ
ェックポイント分子は、ＣＤ２８、ＩＣＯＳ、４－１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ２７、及びＣ
Ｄ４０からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、抗体部分は、全長抗体、Ｆ
ａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの
実施形態では、抗体部分はｓｃＦｖである。
である。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、阻害性免疫チェックポイント分子のアンタ
ゴニストである。いくつかの実施形態では、阻害性免疫チェックポイント分子は、ＰＤ－
１、ＰＤ－Ｌ１、ＣＴＬＡ－４、ＨＶＥＭ、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＬＡＧ－３、ＴＩＭ－３
、及びＡ２ａＲからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、刺激性
免疫チェックポイント分子のアゴニストである。いくつかの実施形態では、刺激性免疫チ
ェックポイント分子は、ＣＤ２８、ＩＣＯＳ、４－１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ２７、及びＣ
Ｄ４０からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、抗体部分は、全長抗体、Ｆ
ａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの
実施形態では、抗体部分はｓｃＦｖである。
【0212】
いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、ＰＤ－１を標的化するアンタゴニスト抗体部分で
ある。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＰＤ－１に特異的なアンタゴニスト抗体部
分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０
１６／２１０１２９を参照されたい）。いくつかの実施形態では、アンタゴニスト抗体部
分は、全長抗体、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）
である。いくつかの実施形態では、アンタゴニスト抗体部分はｓｃＦｖである。
ある。いくつかの実施形態では、抗体部分は、ＰＤ－１に特異的なアンタゴニスト抗体部
分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例えば、ＷＯ２０
１６／２１０１２９を参照されたい）。いくつかの実施形態では、アンタゴニスト抗体部
分は、全長抗体、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）
である。いくつかの実施形態では、アンタゴニスト抗体部分はｓｃＦｖである。
【0213】
いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、ＣＤ４７を標的化するアンタゴニスト抗体部分で
ある。いくつかの実施形態では、アンタゴニスト抗体部分は、ＣＤ４７に特異的なアンタ
ゴニスト抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例
えば、配列番号６６のアミノ酸配列を含むか、それから本質的になるか、若しくはそれか
らなるものを含むＶＨドメイン、及び／又は配列番号６７のアミノ酸配列を含むか、それ
から本質的になるか、若しくはそれからなるものを含むＶＬドメイン、或いはそれらに含
まれるＣＤＲ）。いくつかの実施形態では、アンタゴニスト抗体部分は、全長抗体、Ｆａ
ｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実
施形態では、アンタゴニスト抗体部分はｓｃＦｖである。
ある。いくつかの実施形態では、アンタゴニスト抗体部分は、ＣＤ４７に特異的なアンタ
ゴニスト抗体部分のＣＤＲ又は可変ドメイン（ＶＨ及び／又はＶＬドメイン）を含む（例
えば、配列番号６６のアミノ酸配列を含むか、それから本質的になるか、若しくはそれか
らなるものを含むＶＨドメイン、及び／又は配列番号６７のアミノ酸配列を含むか、それ
から本質的になるか、若しくはそれからなるものを含むＶＬドメイン、或いはそれらに含
まれるＣＤＲ）。いくつかの実施形態では、アンタゴニスト抗体部分は、全長抗体、Ｆａ
ｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実
施形態では、アンタゴニスト抗体部分はｓｃＦｖである。
【0214】
いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、ａ）他の分子に対する結合親和性の少なくとも約
１０倍（例えば、少なくとも約１０、２０、３０、４０、５０、７５、１００、２００、
３００、４００、５００、７５０、１０００、若しくはそれ以上のうちのいずれかを含む
）の親和性で、又はｂ）他の分子に結合するためのＫｄの約１／１０倍以下（例えば、約
１／１０、１／２０、１／３０、１／４０、１／５０、１／７５、１／１００、１／２０
０、１／３００、１／４００、１／５００、１／７５０、１／１０００、若しくはそれ以
下など）のＫｄで標的抗原に結合する抗体部分を含む。結合親和性は、ＥＬＩＳＡ、蛍光
標識細胞分取（ＦＡＣＳ）分析、又は放射線免疫沈降アッセイ（ＲＩＡ）などの当該技術
分野において既知の方法によって決定することができる。Ｋｄは、例えば、Ｂｉａｃｏｒ
ｅ機器を利用する表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）アッセイ、又は例えばＳａｐｉｄｙｎｅ
機器を利用する動的排除アッセイ（ＫｉｎＥｘＡ）などの当該技術分野において既知の方
法によって決定することができる。
１０倍（例えば、少なくとも約１０、２０、３０、４０、５０、７５、１００、２００、
３００、４００、５００、７５０、１０００、若しくはそれ以上のうちのいずれかを含む
）の親和性で、又はｂ）他の分子に結合するためのＫｄの約１／１０倍以下（例えば、約
１／１０、１／２０、１／３０、１／４０、１／５０、１／７５、１／１００、１／２０
０、１／３００、１／４００、１／５００、１／７５０、１／１０００、若しくはそれ以
下など）のＫｄで標的抗原に結合する抗体部分を含む。結合親和性は、ＥＬＩＳＡ、蛍光
標識細胞分取（ＦＡＣＳ）分析、又は放射線免疫沈降アッセイ（ＲＩＡ）などの当該技術
分野において既知の方法によって決定することができる。Ｋｄは、例えば、Ｂｉａｃｏｒ
ｅ機器を利用する表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）アッセイ、又は例えばＳａｐｉｄｙｎｅ
機器を利用する動的排除アッセイ（ＫｉｎＥｘＡ）などの当該技術分野において既知の方
法によって決定することができる。
【0215】
いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、免疫抑制受容体のリガンドに特異的に結合する可
溶性分子である。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、免疫抑制受容体の細胞外ドメイン
に由来するリガンド結合ドメインを含む。いくつかの実施形態では、リガンド結合ドメイ
ンは、受容体の細胞外ドメインの一部である。いくつかの実施形態では、免疫抑制受容体
は、ＦａｓＲ、ＴＮＦＲ１、ＴＮＦＲ２、ＳＩＲＰα、ＰＤ－１、ＣＤ２８、ＣＴＬＡ－
４、ＩＣＯＳ、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＬＡＧ－３、４－１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ２７、ＣＤ
４０、及びＴＩＭ－３からなる群から選択される。
溶性分子である。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、免疫抑制受容体の細胞外ドメイン
に由来するリガンド結合ドメインを含む。いくつかの実施形態では、リガンド結合ドメイ
ンは、受容体の細胞外ドメインの一部である。いくつかの実施形態では、免疫抑制受容体
は、ＦａｓＲ、ＴＮＦＲ１、ＴＮＦＲ２、ＳＩＲＰα、ＰＤ－１、ＣＤ２８、ＣＴＬＡ－
４、ＩＣＯＳ、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＬＡＧ－３、４－１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ２７、ＣＤ
４０、及びＴＩＭ－３からなる群から選択される。
【0216】
いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、免疫抑制受容体に特異的に結合して拮抗する可溶
性分子である。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、免疫抑制受容体のリガンドの細胞外
ドメインに由来する受容体結合ドメインを含む。いくつかの実施形態では、受容体結合ド
メインは、リガンドの細胞外ドメインの一部である。いくつかの実施形態では、リガンド
は、ＦａｓＬ、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＣＤ４７、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳＬ、
ＨＶＥＭ、４－１ＢＢＬ、ＯＸ４０Ｌ、ＣＤ７０、ＣＤ４０Ｌ、及びＧＡＬ９からなる群
から選択される。
性分子である。いくつかの実施形態では、ＳＳＥは、免疫抑制受容体のリガンドの細胞外
ドメインに由来する受容体結合ドメインを含む。いくつかの実施形態では、受容体結合ド
メインは、リガンドの細胞外ドメインの一部である。いくつかの実施形態では、リガンド
は、ＦａｓＬ、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＣＤ４７、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳＬ、
ＨＶＥＭ、４－１ＢＢＬ、ＯＸ４０Ｌ、ＣＤ７０、ＣＤ４０Ｌ、及びＧＡＬ９からなる群
から選択される。
【0217】
いくつかの実施形態では、ＳＳＥは外来性刺激性サイトカインである。本明細書に記載
の外来性サイトカインは、外来性遺伝子から発現するサイトカインである。いくつかの実
施形態では、外因性刺激性サイトカインは、ＩＬ－１２ファミリーメンバーである。いく
つかの実施形態では、ＩＬ－１２ファミリーメンバーは、ＩＬ－１２、ＩＬ－２３、ＩＬ
－２７、又はＩＬ－３５である。いくつかの実施形態では、外因性刺激性サイトカインは
、ＩＬ－２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１８、又はＩＬ－２１である。いくつかの実施形態では
、外因性刺激性サイトカインは、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ及びＳＳＥ免疫細胞上のサイトカイ
ンの受容体の自己活性化をもたらすことができる。
の外来性サイトカインは、外来性遺伝子から発現するサイトカインである。いくつかの実
施形態では、外因性刺激性サイトカインは、ＩＬ－１２ファミリーメンバーである。いく
つかの実施形態では、ＩＬ－１２ファミリーメンバーは、ＩＬ－１２、ＩＬ－２３、ＩＬ
－２７、又はＩＬ－３５である。いくつかの実施形態では、外因性刺激性サイトカインは
、ＩＬ－２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１８、又はＩＬ－２１である。いくつかの実施形態では
、外因性刺激性サイトカインは、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ及びＳＳＥ免疫細胞上のサイトカイ
ンの受容体の自己活性化をもたらすことができる。
【0218】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ及びＳＳＥ免疫細胞におけるＳＳＥの発
現は、誘導可能である。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ及びＳＳＥ免疫細
胞は、本明細書に記載の誘導可能なプロモーターのいずれかを含む誘導可能なプロモータ
ーに作動可能に連結されたＳＳＥをコードする核酸配列を含む。いくつかの実施形態では
、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ及びＳＳＥ免疫細胞におけるＳＳＥの発現は、ｃａＴＣＲを介した
シグナル伝達時に誘導可能である。いくつかのそのような実施形態では、ｃａＴＣＲ＋Ｃ
ＳＲ及びＳＳＥ免疫細胞は、ｃａＴＣＲを介したシグナル伝達に応答してプロモーター又
は調節要素に作動可能に連結されたＳＳＥをコードする核酸配列を含む。いくつかの実施
形態では、ＳＳＥをコードする核酸配列は、活性化Ｔ細胞由来プロモーターの核因子（Ｎ
ＦＡＴ）に作動可能に連結される。いくつかの実施形態では、ＮＦＡＴ由来プロモーター
は、ＮＦＡＴ由来のミニマルプロモーターである（例えば、Ｄｕｒａｎｄ，Ｄ．ｅｔ．ａ
ｌ．，Ｍｏｌｅｃ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．８，１７１５－１７２４（１９８８）、Ｃｌｉ
ｐｓｔｏｎｅ，ＮＡ，Ｃｒａｂｔｒｅｅ，ＧＲ．Ｎａｔｕｒｅ．１９９２ ３５７（６３
８０）：６９５－７、Ｃｈｍｉｅｌｅｗｓｋｉ，Ｍ．，ｅｔ ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ ｒｅ
ｓｅａｒｃｈ ７１．１７（２０１１）：５６９７－５７０６、及びＺｈａｎｇ，Ｌ．，
ｅｔ ａｌ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｔｈｅｒａｐｙ １９．４（２０１１）：７５１－７
５９を参照されたい）。いくつかの実施形態では、ＮＦＡＴ由来プロモーターは、配列番
号８５のヌクレオチド配列を含む。いくつかの実施形態では、ＳＳＥをコードする核酸配
列は、ＩＬ－２プロモーターに作動可能に連結される。
核酸
現は、誘導可能である。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ及びＳＳＥ免疫細
胞は、本明細書に記載の誘導可能なプロモーターのいずれかを含む誘導可能なプロモータ
ーに作動可能に連結されたＳＳＥをコードする核酸配列を含む。いくつかの実施形態では
、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ及びＳＳＥ免疫細胞におけるＳＳＥの発現は、ｃａＴＣＲを介した
シグナル伝達時に誘導可能である。いくつかのそのような実施形態では、ｃａＴＣＲ＋Ｃ
ＳＲ及びＳＳＥ免疫細胞は、ｃａＴＣＲを介したシグナル伝達に応答してプロモーター又
は調節要素に作動可能に連結されたＳＳＥをコードする核酸配列を含む。いくつかの実施
形態では、ＳＳＥをコードする核酸配列は、活性化Ｔ細胞由来プロモーターの核因子（Ｎ
ＦＡＴ）に作動可能に連結される。いくつかの実施形態では、ＮＦＡＴ由来プロモーター
は、ＮＦＡＴ由来のミニマルプロモーターである（例えば、Ｄｕｒａｎｄ，Ｄ．ｅｔ．ａ
ｌ．，Ｍｏｌｅｃ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．８，１７１５－１７２４（１９８８）、Ｃｌｉ
ｐｓｔｏｎｅ，ＮＡ，Ｃｒａｂｔｒｅｅ，ＧＲ．Ｎａｔｕｒｅ．１９９２ ３５７（６３
８０）：６９５－７、Ｃｈｍｉｅｌｅｗｓｋｉ，Ｍ．，ｅｔ ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ ｒｅ
ｓｅａｒｃｈ ７１．１７（２０１１）：５６９７－５７０６、及びＺｈａｎｇ，Ｌ．，
ｅｔ ａｌ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｔｈｅｒａｐｙ １９．４（２０１１）：７５１－７
５９を参照されたい）。いくつかの実施形態では、ＮＦＡＴ由来プロモーターは、配列番
号８５のヌクレオチド配列を含む。いくつかの実施形態では、ＳＳＥをコードする核酸配
列は、ＩＬ－２プロモーターに作動可能に連結される。
核酸
【0219】
本明細書に記載されるｃａＴＣＲ、ＣＳＲ、及び／又はＳＳＥをコードする核酸分子も
想到される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるｃａＴＣＲ、ＣＳＲ、及び
ＳＳＥのいずれかによると、ｃａＴＣＲ、ＣＳＲ、及び／又はＳＳＥをコードする核酸（
又は核酸のセット）が提供される。
想到される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるｃａＴＣＲ、ＣＳＲ、及び
ＳＳＥのいずれかによると、ｃａＴＣＲ、ＣＳＲ、及び／又はＳＳＥをコードする核酸（
又は核酸のセット）が提供される。
【0220】
本発明はまた、本発明の核酸が挿入されるベクターも提供する。
【0221】
簡潔に述べると、ｃａＴＣＲ及び／又はＣＳＲ及び／又はＳＳＥをコードする核酸によ
る本明細書に記載のｃａＴＣＲ及び／又はＣＳＲ及び／又はＳＳＥの発現は、核酸を適切
な発現ベクターに挿入し、核酸を、例えばプロモーター（例えば、リンパ球特異的プロモ
ーター）及び３’非翻訳領域（ＵＴＲ）を含む、５’及び３’調節要素に作動可能に連結
するようにして達成できる。ベクターは、真核生物宿主細胞における複製及び組み込みに
適し得る。典型的なクローニング及び発現ベクターは、転写及び翻訳ターミネーター、開
始配列、並びに所望の核酸配列の発現の調節に有用なプロモーターを含む。
る本明細書に記載のｃａＴＣＲ及び／又はＣＳＲ及び／又はＳＳＥの発現は、核酸を適切
な発現ベクターに挿入し、核酸を、例えばプロモーター（例えば、リンパ球特異的プロモ
ーター）及び３’非翻訳領域（ＵＴＲ）を含む、５’及び３’調節要素に作動可能に連結
するようにして達成できる。ベクターは、真核生物宿主細胞における複製及び組み込みに
適し得る。典型的なクローニング及び発現ベクターは、転写及び翻訳ターミネーター、開
始配列、並びに所望の核酸配列の発現の調節に有用なプロモーターを含む。
【0222】
本発明の核酸は、標準的な遺伝子送達プロトコールを使用して、核酸免疫及び遺伝子治
療に使用してもよい。遺伝子送達の方法は、当該技術分野において既知である。例えば、
参照によりその全てが本明細書に組み込まれる米国特許第５，３９９，３４６号、同５，
５８０，８５９号、同５，５８９，４６６号を参照されたい。いくつかの実施形態では、
本発明は、遺伝子治療用ベクターを提供する。
療に使用してもよい。遺伝子送達の方法は、当該技術分野において既知である。例えば、
参照によりその全てが本明細書に組み込まれる米国特許第５，３９９，３４６号、同５，
５８０，８５９号、同５，５８９，４６６号を参照されたい。いくつかの実施形態では、
本発明は、遺伝子治療用ベクターを提供する。
【0223】
核酸は、多数の種類のベクターにクローニングすることができる。例えば、核酸は、プ
ラスミド、ファージミド、ファージ誘導体、動物ウイルス、及びコスミドを含むがこれら
に限定されないベクターにクローニングすることができる。特に重要なベクターとしては
、発現ベクター、複製ベクター、プローブ生成ベクター、及びシークエンシングベクター
が挙げられる。
ラスミド、ファージミド、ファージ誘導体、動物ウイルス、及びコスミドを含むがこれら
に限定されないベクターにクローニングすることができる。特に重要なベクターとしては
、発現ベクター、複製ベクター、プローブ生成ベクター、及びシークエンシングベクター
が挙げられる。
【0224】
更に、発現ベクターは、ウイルスベクターの形態の細胞に提供され得る。ウイルスベク
ター技術は当該技術分野において公知であり、例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．
（２００１，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎ
ｕａｌ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｎｅｗ Ｙｏ
ｒｋ）、及び他の生物学的及び分子生物学的マニュアルに記載されている。ベクターとし
て有用なウイルスとしては、レトロウイルス、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、ヘ
ルペスウイルス、及びレンチウイルスが挙げられるが、これらに限定されない。一般に、
適切なベクターは、少なくとも１つの生物で機能する複製起点、プロモーター配列、好都
合な制限エンドヌクレアーゼ部位、及び１つ以上の選択可能なマーカーを含む（例えば、
ＷＯ０１／９６５８４、ＷＯ０１／２９０５８、及び米国特許第６，３２６，１９３号を
参照されたい）。
ター技術は当該技術分野において公知であり、例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．
（２００１，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎ
ｕａｌ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｎｅｗ Ｙｏ
ｒｋ）、及び他の生物学的及び分子生物学的マニュアルに記載されている。ベクターとし
て有用なウイルスとしては、レトロウイルス、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、ヘ
ルペスウイルス、及びレンチウイルスが挙げられるが、これらに限定されない。一般に、
適切なベクターは、少なくとも１つの生物で機能する複製起点、プロモーター配列、好都
合な制限エンドヌクレアーゼ部位、及び１つ以上の選択可能なマーカーを含む（例えば、
ＷＯ０１／９６５８４、ＷＯ０１／２９０５８、及び米国特許第６，３２６，１９３号を
参照されたい）。
【0225】
哺乳類細胞への遺伝子導入のために、多数のウイルスベースの系が開発されてきた。例
えば、レトロウイルスは、遺伝子送達システムのための便利なプラットフォームを提供す
る。当該技術分野において既知の技術を使用して、選択された遺伝子をベクターに挿入し
、レトロウイルス粒子にパッケージ化することができる。次いで、組換えウイルスを単離
し、インビボ又はエクスビボのいずれかで対象の細胞に送達することができる。多くのレ
トロウイルス系が当該技術分野において既知である。いくつかの実施形態では、アデノウ
イルスベクターが使用される。多くのアデノウイルスベクターが当該技術分野において既
知である。いくつかの実施形態では、レンチウイルスベクターが使用される。レンチウイ
ルスなどのレトロウイルス由来のベクターは、長期的に安定した導入遺伝子の組み込み及
び娘細胞におけるその伝播を可能にするため、長期間の遺伝子導入を達成するのに適した
ツールである。レンチウイルスベクターは、肝細胞などの非増殖細胞を形質導入すること
ができるという点で、マウス白血病ウイルスなどのオンコレトロウイルス由来のベクター
を超える更なる利点を有する。これらはまた、低免疫原性という更なる利点を有する。
えば、レトロウイルスは、遺伝子送達システムのための便利なプラットフォームを提供す
る。当該技術分野において既知の技術を使用して、選択された遺伝子をベクターに挿入し
、レトロウイルス粒子にパッケージ化することができる。次いで、組換えウイルスを単離
し、インビボ又はエクスビボのいずれかで対象の細胞に送達することができる。多くのレ
トロウイルス系が当該技術分野において既知である。いくつかの実施形態では、アデノウ
イルスベクターが使用される。多くのアデノウイルスベクターが当該技術分野において既
知である。いくつかの実施形態では、レンチウイルスベクターが使用される。レンチウイ
ルスなどのレトロウイルス由来のベクターは、長期的に安定した導入遺伝子の組み込み及
び娘細胞におけるその伝播を可能にするため、長期間の遺伝子導入を達成するのに適した
ツールである。レンチウイルスベクターは、肝細胞などの非増殖細胞を形質導入すること
ができるという点で、マウス白血病ウイルスなどのオンコレトロウイルス由来のベクター
を超える更なる利点を有する。これらはまた、低免疫原性という更なる利点を有する。
【0226】
例えば、エンハンサーなどの追加のプロモーター要素は、転写開始の頻度を調節する。
典型的には、これらは開始部位の上流の３０～１１０ｂｐの領域に位置しているが、多く
のプロモーターが開始部位の下流にも同様に機能的要素を含むことが最近示されている。
プロモーター要素間の間隔は、多くの場合、柔軟性があり、そのため、要素が互いに対し
て反転又は移動されるときにプロモーター機能が保存される。チミジンキナーゼ（ｔｋ）
プロモーターでは、プロモーター要素間の間隔は、活性が低下し始める前に５０ｂｐまで
増加させることができる。
典型的には、これらは開始部位の上流の３０～１１０ｂｐの領域に位置しているが、多く
のプロモーターが開始部位の下流にも同様に機能的要素を含むことが最近示されている。
プロモーター要素間の間隔は、多くの場合、柔軟性があり、そのため、要素が互いに対し
て反転又は移動されるときにプロモーター機能が保存される。チミジンキナーゼ（ｔｋ）
プロモーターでは、プロモーター要素間の間隔は、活性が低下し始める前に５０ｂｐまで
増加させることができる。
【0227】
適切なプロモーターの一例は、最初期サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）プロモーター配
列である。このプロモーター配列は、それに作動可能に連結された任意のポリヌクレオチ
ド配列の高レベルの発現を駆動することができる強力な構成的プロモーター配列である。
適切なプロモーターの別の例は、伸長増殖因子－１α（ＥＦ－１α）である。しかしなが
ら、シミアンウイルス４０（ＳＶ４０）初期プロモーター、マウス乳腺腫瘍ウイルス（Ｍ
ＭＴＶ）、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）長末端反復（ＬＴＲ）プロモーター、ＭｏＭ
ｕＬＶプロモーター、ニワトリ白血病ウイルスプロモーター、エプスタイン・バーウイル
ス最初期プロモーター、ラウス肉腫ウイルスプロモーター、並びにアクチンプロモーター
、ミオシンプロモーター、ヘモグロビンプロモーター、及びクレアチンキナーゼプロモー
ターなどが挙げられるがこれらに限定されないヒト遺伝子プロモーターが挙げられるが、
これらに限定されない他の構成的プロモーター配列を使用してもよい。
列である。このプロモーター配列は、それに作動可能に連結された任意のポリヌクレオチ
ド配列の高レベルの発現を駆動することができる強力な構成的プロモーター配列である。
適切なプロモーターの別の例は、伸長増殖因子－１α（ＥＦ－１α）である。しかしなが
ら、シミアンウイルス４０（ＳＶ４０）初期プロモーター、マウス乳腺腫瘍ウイルス（Ｍ
ＭＴＶ）、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）長末端反復（ＬＴＲ）プロモーター、ＭｏＭ
ｕＬＶプロモーター、ニワトリ白血病ウイルスプロモーター、エプスタイン・バーウイル
ス最初期プロモーター、ラウス肉腫ウイルスプロモーター、並びにアクチンプロモーター
、ミオシンプロモーター、ヘモグロビンプロモーター、及びクレアチンキナーゼプロモー
ターなどが挙げられるがこれらに限定されないヒト遺伝子プロモーターが挙げられるが、
これらに限定されない他の構成的プロモーター配列を使用してもよい。
【0228】
更に、本発明は、構成的プロモーターの使用に限定されるべきではない。誘導可能なプ
ロモーターもまた、本発明の一部として想到される。誘導型プロモーターの使用は、その
ような発現が望まれるときに作動可能に連結されるポリヌクレオチド配列の発現をオンに
することが可能であるか、又は発現が望まれない場合に発現をオフにすることが可能であ
る分子スイッチを提供する。真核細胞で使用する例示的な誘導可能プロモーター系として
は、ホルモン調節要素（例えば、Ｍａｄｅｒ，Ｓ．ａｎｄ Ｗｈｉｔｅ，Ｊ．Ｈ．（１９
９３）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９０：５６０３－５６０７）、
合成リガンド制御要素（例えば、Ｓｐｅｎｃｅｒ，Ｄ．Ｍ．ｅｔ ａｌ １９９３）Ｓｃ
ｉｅｎｃｅ ２６２：１０１９－１０２４を参照されたい）、及び電離放射線調節要素（
例えば、Ｍａｎｏｍｅ，Ｙ．ｅｔ ａｌ．（１９９３）Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ３２
：１０６０７－１０６１３、Ｄａｔｔａ，Ｒ．ｅｔ ａｌ．（１９９２）Ｐｒｏｃ．Ｎａ
ｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８９：１０１４－１０１５３を参照されたい）が挙げ
られるが、これに限定されない。インビトロ又はインビボの哺乳類系で使用するための更
なる例示的な誘導可能なプロモーター系は、Ｇｉｎｇｒｉｃｈ ｅｔ ａｌ．（１９９８
）Ａｎｎｕａｌ Ｒｅｖ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ ２１：３７７－４０５に概説されている。
ロモーターもまた、本発明の一部として想到される。誘導型プロモーターの使用は、その
ような発現が望まれるときに作動可能に連結されるポリヌクレオチド配列の発現をオンに
することが可能であるか、又は発現が望まれない場合に発現をオフにすることが可能であ
る分子スイッチを提供する。真核細胞で使用する例示的な誘導可能プロモーター系として
は、ホルモン調節要素（例えば、Ｍａｄｅｒ，Ｓ．ａｎｄ Ｗｈｉｔｅ，Ｊ．Ｈ．（１９
９３）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９０：５６０３－５６０７）、
合成リガンド制御要素（例えば、Ｓｐｅｎｃｅｒ，Ｄ．Ｍ．ｅｔ ａｌ １９９３）Ｓｃ
ｉｅｎｃｅ ２６２：１０１９－１０２４を参照されたい）、及び電離放射線調節要素（
例えば、Ｍａｎｏｍｅ，Ｙ．ｅｔ ａｌ．（１９９３）Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ３２
：１０６０７－１０６１３、Ｄａｔｔａ，Ｒ．ｅｔ ａｌ．（１９９２）Ｐｒｏｃ．Ｎａ
ｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８９：１０１４－１０１５３を参照されたい）が挙げ
られるが、これに限定されない。インビトロ又はインビボの哺乳類系で使用するための更
なる例示的な誘導可能なプロモーター系は、Ｇｉｎｇｒｉｃｈ ｅｔ ａｌ．（１９９８
）Ａｎｎｕａｌ Ｒｅｖ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ ２１：３７７－４０５に概説されている。
【0229】
本発明で使用するための例示的な誘導可能なプロモーター系は、Ｔｅｔシステムである
。このようなシステムは、Ｇｏｓｓｅｎ ｅｔ ａｌ．（１９９３）によって記載される
Ｔｅｔシステムに基づく。例示的な実施形態では、目的のポリヌクレオチドは、１つ以上
のＴｅｔオペレーター（ＴｅｔＯ）部位を含むプロモーターの制御下にある。非活性状態
では、Ｔｅｔレプレッサー（ＴｅｔＲ）は、ＴｅｔＯ部位に結合し、プロモーターからの
転写を抑制する。活性状態では、例えば、テトラサイクリン（Ｔｃ）、無水テトラサイク
リン、ドキシサイクリン（Ｄｏｘ）、又はそれらの活性類似体などの誘導剤の存在下で、
誘導剤は、ＴｅｔＯからＴｅｔＲを放出させ、それによって転写を実施させることができ
る。ドキシサイクリンは、１－ジメチルアミノ－２，４ａ，５，７，１２－ペンタヒドロ
キシ－１１－メチル－４，６－ジオキソ－１，４ａ，１１，１１ａ，１２，１２－ヘキサ
ヒドロテトラセン－３－カルボキサミドの化学名を有する抗生物質のテトラサイクリンフ
ァミリーのメンバーである。
。このようなシステムは、Ｇｏｓｓｅｎ ｅｔ ａｌ．（１９９３）によって記載される
Ｔｅｔシステムに基づく。例示的な実施形態では、目的のポリヌクレオチドは、１つ以上
のＴｅｔオペレーター（ＴｅｔＯ）部位を含むプロモーターの制御下にある。非活性状態
では、Ｔｅｔレプレッサー（ＴｅｔＲ）は、ＴｅｔＯ部位に結合し、プロモーターからの
転写を抑制する。活性状態では、例えば、テトラサイクリン（Ｔｃ）、無水テトラサイク
リン、ドキシサイクリン（Ｄｏｘ）、又はそれらの活性類似体などの誘導剤の存在下で、
誘導剤は、ＴｅｔＯからＴｅｔＲを放出させ、それによって転写を実施させることができ
る。ドキシサイクリンは、１－ジメチルアミノ－２，４ａ，５，７，１２－ペンタヒドロ
キシ－１１－メチル－４，６－ジオキソ－１，４ａ，１１，１１ａ，１２，１２－ヘキサ
ヒドロテトラセン－３－カルボキサミドの化学名を有する抗生物質のテトラサイクリンフ
ァミリーのメンバーである。
【0230】
一実施形態では、ＴｅｔＲは、哺乳類細胞、例えば、マウス又はヒト細胞における発現
のためにコドン最適化される。多くのアミノ酸は、遺伝子コードの縮重により、１つを超
えるコドンによりコードされており、核酸によりコードされるアミノ酸配列の任意の変更
なしに、所与の核酸のヌクレオチド配列の実質的な変異を可能にする。しかしながら、多
くの生物は、「コドンバイアス」（すなわち、所与のアミノ酸の特定のコドンを使用する
ためのバイアス）としても知られるコドン使用の相違を示す。コドンバイアスは、多くの
場合、転じてｍＲＮＡ翻訳の効率を増加させる、特定のコドンのためのｔＲＮＡの優勢な
種の存在と相関する。したがって、特定の生物（例えば、原核生物）由来のコード配列は
、コドン最適化を介して異なる生物（例えば、真核生物）における発現の改善に合わせて
微調整され得る。
のためにコドン最適化される。多くのアミノ酸は、遺伝子コードの縮重により、１つを超
えるコドンによりコードされており、核酸によりコードされるアミノ酸配列の任意の変更
なしに、所与の核酸のヌクレオチド配列の実質的な変異を可能にする。しかしながら、多
くの生物は、「コドンバイアス」（すなわち、所与のアミノ酸の特定のコドンを使用する
ためのバイアス）としても知られるコドン使用の相違を示す。コドンバイアスは、多くの
場合、転じてｍＲＮＡ翻訳の効率を増加させる、特定のコドンのためのｔＲＮＡの優勢な
種の存在と相関する。したがって、特定の生物（例えば、原核生物）由来のコード配列は
、コドン最適化を介して異なる生物（例えば、真核生物）における発現の改善に合わせて
微調整され得る。
【0231】
Ｔｅｔシステムの他の特定の変形例としては、以下の「Ｔｅｔ－Ｏｆｆ」及び「Ｔｅｔ
－Ｏｎ」システムが挙げられる。Ｔｅｔ－Ｏｆｆシステムでは、転写は、ＴＣ又はＤｏｘ
の存在下で非活性である。このシステムでは、テトラサイクリン制御トランス活性化因子
タンパク質（ｔＴＡ）は、単純ヘルペスウイルス由来のＶＰ１６の強力なトランス活性化
ドメインに融合したＴｅｔＲで構成され、テトラサイクリン応答性プロモーター要素（Ｔ
ＲＥ）の転写制御下にある標的核酸の発現を調節する。ＴＲＥは、プロモーター（一般に
、ヒトサイトメガロウイルス（ｈＣＭＶ）の最初期プロモーターに由来するミニマルプロ
モーター配列）に融合したＴｅｔＯ配列のコンカテマーで形成される。Ｔｃ又はＤｏｘの
非存在下では、ｔＴＡはＴＲＥに結合し、標的遺伝子の転写を活性化する。Ｔｃ又はＤｏ
ｘの存在下では、ｔＴＡはＴＲＥに結合することができず、標的遺伝子からの発現は非活
性なままである。
－Ｏｎ」システムが挙げられる。Ｔｅｔ－Ｏｆｆシステムでは、転写は、ＴＣ又はＤｏｘ
の存在下で非活性である。このシステムでは、テトラサイクリン制御トランス活性化因子
タンパク質（ｔＴＡ）は、単純ヘルペスウイルス由来のＶＰ１６の強力なトランス活性化
ドメインに融合したＴｅｔＲで構成され、テトラサイクリン応答性プロモーター要素（Ｔ
ＲＥ）の転写制御下にある標的核酸の発現を調節する。ＴＲＥは、プロモーター（一般に
、ヒトサイトメガロウイルス（ｈＣＭＶ）の最初期プロモーターに由来するミニマルプロ
モーター配列）に融合したＴｅｔＯ配列のコンカテマーで形成される。Ｔｃ又はＤｏｘの
非存在下では、ｔＴＡはＴＲＥに結合し、標的遺伝子の転写を活性化する。Ｔｃ又はＤｏ
ｘの存在下では、ｔＴＡはＴＲＥに結合することができず、標的遺伝子からの発現は非活
性なままである。
【0232】
逆に、Ｔｅｔ－Ｏｎシステムでは、転写はＴｃ又はＤｏｘの存在下で活性である。Ｔｅ
ｔ－Ｏｎシステムは、逆テトラサイクリン制御トランス活性化因子、ｒｔＴＡに基づく。
ｔＴＡと同様に、ｒｔＴＡは、ＴｅｔＲリプレッサー及びＶＰ１６トランス活性化ドメイ
ンからなる融合タンパク質である。しかしながら、ＴｅｔＲ ＤＮＡ結合部分における４
つのアミノ酸変化は、Ｄｏｘの存在下で標的導入遺伝子のＴＲＥにおけるｔｅｔＯ配列の
みを認識できるように、ｒｔＴＡの結合特性を変化させる。したがって、Ｔｅｔ－Ｏｎシ
ステムでは、ＴＲＥ調節された標的遺伝子の転写は、Ｄｏｘの存在下でのみｒｔＴＡによ
って刺激される。
ｔ－Ｏｎシステムは、逆テトラサイクリン制御トランス活性化因子、ｒｔＴＡに基づく。
ｔＴＡと同様に、ｒｔＴＡは、ＴｅｔＲリプレッサー及びＶＰ１６トランス活性化ドメイ
ンからなる融合タンパク質である。しかしながら、ＴｅｔＲ ＤＮＡ結合部分における４
つのアミノ酸変化は、Ｄｏｘの存在下で標的導入遺伝子のＴＲＥにおけるｔｅｔＯ配列の
みを認識できるように、ｒｔＴＡの結合特性を変化させる。したがって、Ｔｅｔ－Ｏｎシ
ステムでは、ＴＲＥ調節された標的遺伝子の転写は、Ｄｏｘの存在下でのみｒｔＴＡによ
って刺激される。
【0233】
別の誘導可能なプロモーター系は、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）由来のｌａｃリプレッサー
系である。（Ｂｒｏｗｎ ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｌｌ ４９：６０３－６１２（１９８７）
を参照されたい）。ｌａｃリプレッサー系は、ｌａｃオペレーター（ｌａｃＯ）を含むプ
ロモーターに作動可能に連結された目的のポリヌクレオチドの転写を調節することによっ
て機能する。ｌａｃリプレッサー（ｌａｃＲ）は、ＬａｃＯに結合して目的のポリヌクレ
オチドの転写を防止する。目的のポリヌクレオチドの発現は、適切な誘導剤、例えば、イ
ソプロピル－β－チオガラクトピラノシド（ＩＰＴＧ）により誘導される。
系である。（Ｂｒｏｗｎ ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｌｌ ４９：６０３－６１２（１９８７）
を参照されたい）。ｌａｃリプレッサー系は、ｌａｃオペレーター（ｌａｃＯ）を含むプ
ロモーターに作動可能に連結された目的のポリヌクレオチドの転写を調節することによっ
て機能する。ｌａｃリプレッサー（ｌａｃＲ）は、ＬａｃＯに結合して目的のポリヌクレ
オチドの転写を防止する。目的のポリヌクレオチドの発現は、適切な誘導剤、例えば、イ
ソプロピル－β－チオガラクトピラノシド（ＩＰＴＧ）により誘導される。
【0234】
本発明で使用するための別の例示的な誘導可能プロモーターシステムは、活性化Ｔ細胞
系の核因子（ＮＦＡＴ）である。ＮＦＡＴファミリーの転写因子は、Ｔ細胞活性化の重要
な調節因子である。ＮＦＡＴ応答要素は、例えば、ＩＬ－２プロモーターにおいて見出さ
れる（例えば、Ｄｕｒａｎｄ，Ｄ．ｅｔ．ａｌ．，Ｍｏｌｅｃ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．８
，１７１５－１７２４（１９８８）、Ｃｌｉｐｓｔｏｎｅ，ＮＡ，Ｃｒａｂｔｒｅｅ，Ｇ
Ｒ．Ｎａｔｕｒｅ．１９９２ ３５７（６３８０）：６９５－７、Ｃｈｍｉｅｌｅｗｓｋ
ｉ，Ｍ．，ｅｔ ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ ｒｅｓｅａｒｃｈ ７１．１７（２０１１）：５
６９７－５７０６、及びＺｈａｎｇ，Ｌ．，ｅｔ ａｌ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｔｈｅｒ
ａｐｙ １９．４（２０１１）：７５１－７５９を参照されたい）。いくつかの実施形態
では、本明細書に記載の誘導可能プロモーターは、１つ以上（例えば、２、３、４、５、
６、又はそれ以上）のＮＦＡＴ応答要素を含む。いくつかの実施形態では、誘導可能プロ
モーターは、例えば、配列番号８３のヌクレオチド配列を含む６個のＮＦＡＴ応答要素を
含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の誘導可能プロモーターは、ミニマルＴ
Ａプロモーターなどのミニマルプロモーターに連結された１つ以上（例えば、２、３、４
、５、６、又はそれ以上）のＮＦＡＴ応答要素を含む。いくつかの実施形態では、ミニマ
ルＴＡプロモーターは、配列番号８４のヌクレオチド配列を含む。いくつかの実施形態で
は、誘導可能なプロモーターは、配列番号８５のヌクレオチド配列を含む。
系の核因子（ＮＦＡＴ）である。ＮＦＡＴファミリーの転写因子は、Ｔ細胞活性化の重要
な調節因子である。ＮＦＡＴ応答要素は、例えば、ＩＬ－２プロモーターにおいて見出さ
れる（例えば、Ｄｕｒａｎｄ，Ｄ．ｅｔ．ａｌ．，Ｍｏｌｅｃ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．８
，１７１５－１７２４（１９８８）、Ｃｌｉｐｓｔｏｎｅ，ＮＡ，Ｃｒａｂｔｒｅｅ，Ｇ
Ｒ．Ｎａｔｕｒｅ．１９９２ ３５７（６３８０）：６９５－７、Ｃｈｍｉｅｌｅｗｓｋ
ｉ，Ｍ．，ｅｔ ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ ｒｅｓｅａｒｃｈ ７１．１７（２０１１）：５
６９７－５７０６、及びＺｈａｎｇ，Ｌ．，ｅｔ ａｌ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｔｈｅｒ
ａｐｙ １９．４（２０１１）：７５１－７５９を参照されたい）。いくつかの実施形態
では、本明細書に記載の誘導可能プロモーターは、１つ以上（例えば、２、３、４、５、
６、又はそれ以上）のＮＦＡＴ応答要素を含む。いくつかの実施形態では、誘導可能プロ
モーターは、例えば、配列番号８３のヌクレオチド配列を含む６個のＮＦＡＴ応答要素を
含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の誘導可能プロモーターは、ミニマルＴ
Ａプロモーターなどのミニマルプロモーターに連結された１つ以上（例えば、２、３、４
、５、６、又はそれ以上）のＮＦＡＴ応答要素を含む。いくつかの実施形態では、ミニマ
ルＴＡプロモーターは、配列番号８４のヌクレオチド配列を含む。いくつかの実施形態で
は、誘導可能なプロモーターは、配列番号８５のヌクレオチド配列を含む。
【0235】
ポリペプチド又はその一部の発現を評価するために、細胞に導入される発現ベクターは
また、形質導入するか又はウイルスベクターを介して感染させることが求められる細胞集
団からの発現細胞の同定及び選択を促進するために、選択マーカー遺伝子若しくはレポー
ター遺伝子のいずれか又はその両方を含み得る。他の態様では、選択マーカーは、ＤＮＡ
の別個の断片上に担持され、共トランスフェクション手順で使用できる。選択マーカー及
びレポーター遺伝子の両方は、宿主細胞における発現を可能にするために適切な制御配列
を隣接させてもよい。有用な選択マーカーとしては、例えば、ｎｅｏなどの抗生物質耐性
遺伝子が挙げられる。
また、形質導入するか又はウイルスベクターを介して感染させることが求められる細胞集
団からの発現細胞の同定及び選択を促進するために、選択マーカー遺伝子若しくはレポー
ター遺伝子のいずれか又はその両方を含み得る。他の態様では、選択マーカーは、ＤＮＡ
の別個の断片上に担持され、共トランスフェクション手順で使用できる。選択マーカー及
びレポーター遺伝子の両方は、宿主細胞における発現を可能にするために適切な制御配列
を隣接させてもよい。有用な選択マーカーとしては、例えば、ｎｅｏなどの抗生物質耐性
遺伝子が挙げられる。
【0236】
レポーター遺伝子は、場合によって形質導入された細胞を同定するため、及び制御配列
の機能性を評価するために使用される。一般に、レポーター遺伝子は、レシピエント生物
又は組織内に存在しないか又は発現していない遺伝子であり、一部の容易に検出可能な特
性、例えば、酵素活性によって発現が明らかになるポリペプチドをコードする遺伝子であ
る。ＤＮＡがレシピエント細胞に導入された後、レポーター遺伝子の発現を適切な時間で
アッセイする。適切なレポーター遺伝子としては、ルシフェラーゼ、β－ガラクトシダー
ゼ、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ、分泌アルカリホスファターゼ、
又は緑色蛍光タンパク質遺伝子（例えば、，Ｕｉ－Ｔｅｌ ｅｔ ａｌ．，２０００ Ｆ
ＥＢＳ Ｌｅｔｔｅｒｓ ４７９：７９－８２）をコードする遺伝子を挙げ得る。適切な
発現系は公知であり、既知の技術を使用して調製することができ、又は商業的に入手する
ことができる。一般に、レポーター遺伝子の最高レベルの発現を示すミニマル５’隣接領
域を有する構築物は、プロモーターとして同定される。このようなプロモーター領域は、
レポーター遺伝子に連結され、プロモーター駆動転写を調節する能力について薬剤を評価
するために使用されてもよい。
の機能性を評価するために使用される。一般に、レポーター遺伝子は、レシピエント生物
又は組織内に存在しないか又は発現していない遺伝子であり、一部の容易に検出可能な特
性、例えば、酵素活性によって発現が明らかになるポリペプチドをコードする遺伝子であ
る。ＤＮＡがレシピエント細胞に導入された後、レポーター遺伝子の発現を適切な時間で
アッセイする。適切なレポーター遺伝子としては、ルシフェラーゼ、β－ガラクトシダー
ゼ、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ、分泌アルカリホスファターゼ、
又は緑色蛍光タンパク質遺伝子（例えば、，Ｕｉ－Ｔｅｌ ｅｔ ａｌ．，２０００ Ｆ
ＥＢＳ Ｌｅｔｔｅｒｓ ４７９：７９－８２）をコードする遺伝子を挙げ得る。適切な
発現系は公知であり、既知の技術を使用して調製することができ、又は商業的に入手する
ことができる。一般に、レポーター遺伝子の最高レベルの発現を示すミニマル５’隣接領
域を有する構築物は、プロモーターとして同定される。このようなプロモーター領域は、
レポーター遺伝子に連結され、プロモーター駆動転写を調節する能力について薬剤を評価
するために使用されてもよい。
【0237】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるｃａＴＣＲ、ＣＳＲ、及びＳＳＥのい
ずれかによるｃａＴＣＲ及び／又はＣＳＲをコードする核酸が提供される。いくつかの実
施形態では、核酸は、ｃａＴＣＲの全てのポリペプチド鎖をコードする１つ以上の核酸配
列を含む。いくつかの実施形態では、核酸は、ＣＳＲの全てのポリペプチド鎖をコードす
る１つ以上の核酸配列を含む。いくつかの実施形態では、核酸は、ｃａＴＣＲ及びＣＳＲ
の全てのポリペプチド鎖をコードする１つ以上の核酸配列を含む。いくつかの実施形態で
は、１つ以上の核酸配列のそれぞれは、別個のベクターに含まれる。いくつかの実施形態
では、核酸配列の少なくとも一部は、同じベクターに含まれる。いくつかの実施形態では
、核酸配列の全ては、同じベクターに含まれる。ベクターは、例えば、哺乳類発現ベクタ
ー、並びにウイルスベクター（レトロウイルス、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、
ヘルペスウイルス、及びレンチウイルス由来のものなど）からなる群から選択され得る。
ずれかによるｃａＴＣＲ及び／又はＣＳＲをコードする核酸が提供される。いくつかの実
施形態では、核酸は、ｃａＴＣＲの全てのポリペプチド鎖をコードする１つ以上の核酸配
列を含む。いくつかの実施形態では、核酸は、ＣＳＲの全てのポリペプチド鎖をコードす
る１つ以上の核酸配列を含む。いくつかの実施形態では、核酸は、ｃａＴＣＲ及びＣＳＲ
の全てのポリペプチド鎖をコードする１つ以上の核酸配列を含む。いくつかの実施形態で
は、１つ以上の核酸配列のそれぞれは、別個のベクターに含まれる。いくつかの実施形態
では、核酸配列の少なくとも一部は、同じベクターに含まれる。いくつかの実施形態では
、核酸配列の全ては、同じベクターに含まれる。ベクターは、例えば、哺乳類発現ベクタ
ー、並びにウイルスベクター（レトロウイルス、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、
ヘルペスウイルス、及びレンチウイルス由来のものなど）からなる群から選択され得る。
【0238】
例えば、いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、第１のｃａＴＣＲポリペプチド鎖及
び第２のｃａＴＣＲポリペプチド鎖を含む二量体であり、ＣＳＲは、単一のＣＳＲポリペ
プチド鎖を含む単量体であり、核酸は、第１のｃａＴＣＲポリペプチド鎖をコードする第
１の核酸配列、第２のｃａＴＣＲ鎖をコードする第２の核酸、及びＣＳＲポリペプチド鎖
をコードする第３の核酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の核酸配列は第１の
ベクターに含まれ、第２の核酸配列は第２のベクターに含まれ、第３の核酸配列は第３の
ベクターに含まれる。いくつかの実施形態では、第１及び第２の核酸配列は第１のベクタ
ーに含まれ、第３の核酸配列は第２のベクターに含まれる。いくつかの実施形態では、第
１及び第３の核酸配列は第１のベクターに含まれ、第２の核酸配列は第２のベクターに含
まれる。いくつかの実施形態では、第２及び第３の核酸配列は第１のベクターに含まれ、
第１の核酸配列は第２のベクターに含まれる。いくつかの実施形態では、第１、第２、及
び第３の核酸配列は、同じベクターに含まれる。いくつかの実施形態では、第１の核酸配
列は第１のプロモーターの制御下にあり、第２の核酸配列は第２のプロモーターの制御下
にあり、第３の核酸配列は第３のプロモーターの制御下にある。いくつかの実施形態では
、第１、第２、及び第３のプロモーターの一部又は全ては、同じ配列を有する。いくつか
の実施形態では、第１、第２、及び第３のプロモーターの一部又は全ては、異なる配列を
有する。いくつかの実施形態では、第１、第２、及び第３の核酸配列の一部又は全ては、
マルチシストロン性ベクターにおける単一のプロモーターの制御下で単一の転写物として
発現される。例えば、Ｋｉｍ，ＪＨ，ｅｔ ａｌ．，ＰＬｏＳ Ｏｎｅ ６（４）：ｅ１
８５５６，２０１１を参照されたい。いくつかの実施形態では、１つ以上のプロモーター
は誘導可能である。いくつかの実施形態では、ＣＳＲポリペプチド鎖をコードする第３の
核酸配列は、誘導可能なプロモーターに作動可能に連結される。いくつかの実施形態では
、誘導可能なプロモーターは、ＮＦＡＴ応答要素などの免疫細胞活性化に応答する１つ以
上の要素を含む。
び第２のｃａＴＣＲポリペプチド鎖を含む二量体であり、ＣＳＲは、単一のＣＳＲポリペ
プチド鎖を含む単量体であり、核酸は、第１のｃａＴＣＲポリペプチド鎖をコードする第
１の核酸配列、第２のｃａＴＣＲ鎖をコードする第２の核酸、及びＣＳＲポリペプチド鎖
をコードする第３の核酸配列を含む。いくつかの実施形態では、第１の核酸配列は第１の
ベクターに含まれ、第２の核酸配列は第２のベクターに含まれ、第３の核酸配列は第３の
ベクターに含まれる。いくつかの実施形態では、第１及び第２の核酸配列は第１のベクタ
ーに含まれ、第３の核酸配列は第２のベクターに含まれる。いくつかの実施形態では、第
１及び第３の核酸配列は第１のベクターに含まれ、第２の核酸配列は第２のベクターに含
まれる。いくつかの実施形態では、第２及び第３の核酸配列は第１のベクターに含まれ、
第１の核酸配列は第２のベクターに含まれる。いくつかの実施形態では、第１、第２、及
び第３の核酸配列は、同じベクターに含まれる。いくつかの実施形態では、第１の核酸配
列は第１のプロモーターの制御下にあり、第２の核酸配列は第２のプロモーターの制御下
にあり、第３の核酸配列は第３のプロモーターの制御下にある。いくつかの実施形態では
、第１、第２、及び第３のプロモーターの一部又は全ては、同じ配列を有する。いくつか
の実施形態では、第１、第２、及び第３のプロモーターの一部又は全ては、異なる配列を
有する。いくつかの実施形態では、第１、第２、及び第３の核酸配列の一部又は全ては、
マルチシストロン性ベクターにおける単一のプロモーターの制御下で単一の転写物として
発現される。例えば、Ｋｉｍ，ＪＨ，ｅｔ ａｌ．，ＰＬｏＳ Ｏｎｅ ６（４）：ｅ１
８５５６，２０１１を参照されたい。いくつかの実施形態では、１つ以上のプロモーター
は誘導可能である。いくつかの実施形態では、ＣＳＲポリペプチド鎖をコードする第３の
核酸配列は、誘導可能なプロモーターに作動可能に連結される。いくつかの実施形態では
、誘導可能なプロモーターは、ＮＦＡＴ応答要素などの免疫細胞活性化に応答する１つ以
上の要素を含む。
【0239】
いくつかの実施形態では、第１、第２、及び第３の核酸配列の一部又は全ては、宿主細
胞（Ｔ細胞など）において同様（実質的に又はほぼ同じなど）の発現レベルを有する。い
くつかの実施形態では、第１、第２、及び第３の核酸配列のうちのいくつかは、宿主細胞
（Ｔ細胞など）において、少なくとも約２倍（少なくとも約２、３、４、５倍、又はそれ
以上）異なる発現レベルを有する。発現は、ｍＲＮＡ又はタンパク質レベルで決定するこ
とができる。ｍＲＮＡ発現レベルは、ノーザンブロット、定量的ＲＴ－ＰＣＲ、マイクロ
アレイ解析などを含む様々な公知の方法を使用して、核酸から転写されたｍＲＮＡの量を
測定することによって決定することができる。タンパク質発現レベルは、免疫細胞化学染
色、酵素結合免疫吸着検査法（ＥＬＩＳＡ）、ウェスタンブロット分析、発光アッセイ、
質量分析、高速液体クロマトグラフィー、高圧液体クロマトグラフィー－タンデム質量分
析などを含む既知の方法によって測定することができる。
胞（Ｔ細胞など）において同様（実質的に又はほぼ同じなど）の発現レベルを有する。い
くつかの実施形態では、第１、第２、及び第３の核酸配列のうちのいくつかは、宿主細胞
（Ｔ細胞など）において、少なくとも約２倍（少なくとも約２、３、４、５倍、又はそれ
以上）異なる発現レベルを有する。発現は、ｍＲＮＡ又はタンパク質レベルで決定するこ
とができる。ｍＲＮＡ発現レベルは、ノーザンブロット、定量的ＲＴ－ＰＣＲ、マイクロ
アレイ解析などを含む様々な公知の方法を使用して、核酸から転写されたｍＲＮＡの量を
測定することによって決定することができる。タンパク質発現レベルは、免疫細胞化学染
色、酵素結合免疫吸着検査法（ＥＬＩＳＡ）、ウェスタンブロット分析、発光アッセイ、
質量分析、高速液体クロマトグラフィー、高圧液体クロマトグラフィー－タンデム質量分
析などを含む既知の方法によって測定することができる。
【0240】
本明細書に記載される実施形態の特徴は、任意の数の核酸配列を含む実施形態、例えば
、ｃａＴＣＲ及び／又はＣＳＲ及び／又はＳＳＥをコードする核酸が５つ以上の核酸配列
（例えば、ｃａＴＣＲ及びＳＳＥがそれぞれ２つ以上の異なるポリペプチド鎖を含む場合
）を含む実施形態を包含するように適合され、組み合わされ得ることを理解されたい。
、ｃａＴＣＲ及び／又はＣＳＲ及び／又はＳＳＥをコードする核酸が５つ以上の核酸配列
（例えば、ｃａＴＣＲ及びＳＳＥがそれぞれ２つ以上の異なるポリペプチド鎖を含む場合
）を含む実施形態を包含するように適合され、組み合わされ得ることを理解されたい。
【0241】
したがって、いくつかの実施形態では、核酸であって、ａ）本明細書に記載のｃａＴＣ
Ｒのいずれかによる第１のｃａＴＣＲポリペプチド鎖及び第２のｃａＴＣＲポリペプチド
鎖を含む二量体ｃａＴＣＲと、ｂ）本明細書に記載のＣＳＲのいずれかによる単一のＣＳ
Ｒポリペプチド鎖を含む単量体ＣＳＲと、をコードし、核酸が、ｉ）第１のｃａＴＣＲポ
リペプチド鎖をコードする第１のｃａＴＣＲ核酸配列、及びｉｉ）第２のｃａＴＣＲポリ
ペプチド鎖をコードする第２のｃａＴＣＲ核酸配列を含み、ＣＳＲポリペプチド鎖をコー
ドするＣＳＲ核酸配列を更に含む、核酸が提供される。いくつかの実施形態では、第１の
ｃａＴＣＲ核酸配列は、第１のベクター（レンチウイルスベクターなど）に含まれ、第２
のｃａＴＣＲ核酸配列は、第２のベクター（レンチウイルスベクターなど）に含まれ、Ｃ
ＳＲ核酸配列は、第３のベクター（レンチウイルスベクターなど）に含まれる。いくつか
の実施形態では、第１及び第２のｃａＴＣＲ核酸配列並びにＣＳＲ核酸配列の一部又は全
ては、同一のベクター（レンチウイルスベクターなど）に含まれる。いくつかの実施形態
では、第１及び第２のｃａＴＣＲ核酸配列並びにＣＳＲ核酸配列のそれぞれは、個々に、
プロモーターに作動可能に連結される。いくつかの実施形態では、プロモーターの一部又
は全ては、同じ配列を有する。いくつかの実施形態では、プロモーターの一部又は全ては
、異なる配列を有する。いくつかの実施形態では、プロモーターの一部又は全ては誘導可
能である。いくつかの実施形態では、ＣＳＲ核酸配列は、誘導可能なプロモーターに作動
可能に連結される。いくつかの実施形態では、誘導可能なプロモーターは、免疫細胞活性
化に応答する１つ以上の要素を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲ核酸配列は、ＮＦ
ＡＴ由来のプロモーターに作動可能に連結される。いくつかの実施形態では、ベクターの
一部又は全ては、ウイルスベクター（レンチウイルスベクターなど）である。
Ｒのいずれかによる第１のｃａＴＣＲポリペプチド鎖及び第２のｃａＴＣＲポリペプチド
鎖を含む二量体ｃａＴＣＲと、ｂ）本明細書に記載のＣＳＲのいずれかによる単一のＣＳ
Ｒポリペプチド鎖を含む単量体ＣＳＲと、をコードし、核酸が、ｉ）第１のｃａＴＣＲポ
リペプチド鎖をコードする第１のｃａＴＣＲ核酸配列、及びｉｉ）第２のｃａＴＣＲポリ
ペプチド鎖をコードする第２のｃａＴＣＲ核酸配列を含み、ＣＳＲポリペプチド鎖をコー
ドするＣＳＲ核酸配列を更に含む、核酸が提供される。いくつかの実施形態では、第１の
ｃａＴＣＲ核酸配列は、第１のベクター（レンチウイルスベクターなど）に含まれ、第２
のｃａＴＣＲ核酸配列は、第２のベクター（レンチウイルスベクターなど）に含まれ、Ｃ
ＳＲ核酸配列は、第３のベクター（レンチウイルスベクターなど）に含まれる。いくつか
の実施形態では、第１及び第２のｃａＴＣＲ核酸配列並びにＣＳＲ核酸配列の一部又は全
ては、同一のベクター（レンチウイルスベクターなど）に含まれる。いくつかの実施形態
では、第１及び第２のｃａＴＣＲ核酸配列並びにＣＳＲ核酸配列のそれぞれは、個々に、
プロモーターに作動可能に連結される。いくつかの実施形態では、プロモーターの一部又
は全ては、同じ配列を有する。いくつかの実施形態では、プロモーターの一部又は全ては
、異なる配列を有する。いくつかの実施形態では、プロモーターの一部又は全ては誘導可
能である。いくつかの実施形態では、ＣＳＲ核酸配列は、誘導可能なプロモーターに作動
可能に連結される。いくつかの実施形態では、誘導可能なプロモーターは、免疫細胞活性
化に応答する１つ以上の要素を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲ核酸配列は、ＮＦ
ＡＴ由来のプロモーターに作動可能に連結される。いくつかの実施形態では、ベクターの
一部又は全ては、ウイルスベクター（レンチウイルスベクターなど）である。
【0242】
いくつかの実施形態では、ａ）本明細書に記載のｃａＴＣＲのいずれかによる第１のｃ
ａＴＣＲポリペプチド鎖及び第２のｃａＴＣＲポリペプチド鎖を含む二量体ｃａＴＣＲを
コードする核酸を含む第１のベクター（レンチウイルスベクターなど）であって、ｉ）第
１のｃａＴＣＲポリペプチド鎖をコードする第１のｃａＴＣＲ核酸配列に作動可能に連結
された第１プロモーター、及びｉｉ）第２のｃａＴＣＲポリペプチド鎖をコードする第２
のｃａＴＣＲ核酸配列に作動可能に連結された第２プロモーターを含む、第１のベクター
と、ｂ）本明細書に記載のＣＳＲのいずれかによるＣＳＲポリペプチド鎖を含む単量体Ｃ
ＳＲをコードする核酸を含む第２のベクター（レンチウイルスベクターなど）であって、
ＣＳＲポリペプチド鎖をコードするＣＳＲ核酸配列に作動可能に連結された第３のプロモ
ーターを含む、第２のベクターと、が提供される。いくつかの実施形態では、プロモータ
ーの一部又は全ては、同じ配列を有する。いくつかの実施形態では、プロモーターの一部
又は全ては、異なる配列を有する。いくつかの実施形態では、プロモーターの一部又は全
ては誘導可能である。いくつかの実施形態では、第１及び／又は第２のベクターは、ウイ
ルスベクター（レンチウイルスベクターなど）である。
ａＴＣＲポリペプチド鎖及び第２のｃａＴＣＲポリペプチド鎖を含む二量体ｃａＴＣＲを
コードする核酸を含む第１のベクター（レンチウイルスベクターなど）であって、ｉ）第
１のｃａＴＣＲポリペプチド鎖をコードする第１のｃａＴＣＲ核酸配列に作動可能に連結
された第１プロモーター、及びｉｉ）第２のｃａＴＣＲポリペプチド鎖をコードする第２
のｃａＴＣＲ核酸配列に作動可能に連結された第２プロモーターを含む、第１のベクター
と、ｂ）本明細書に記載のＣＳＲのいずれかによるＣＳＲポリペプチド鎖を含む単量体Ｃ
ＳＲをコードする核酸を含む第２のベクター（レンチウイルスベクターなど）であって、
ＣＳＲポリペプチド鎖をコードするＣＳＲ核酸配列に作動可能に連結された第３のプロモ
ーターを含む、第２のベクターと、が提供される。いくつかの実施形態では、プロモータ
ーの一部又は全ては、同じ配列を有する。いくつかの実施形態では、プロモーターの一部
又は全ては、異なる配列を有する。いくつかの実施形態では、プロモーターの一部又は全
ては誘導可能である。いくつかの実施形態では、第１及び／又は第２のベクターは、ウイ
ルスベクター（レンチウイルスベクターなど）である。
【0243】
いくつかの実施形態では、ａ）本明細書に記載のｃａＴＣＲのいずれかによる第１のｃ
ａＴＣＲポリペプチド鎖及び第２のｃａＴＣＲポリペプチド鎖を含む二量体ｃａＴＣＲを
コードする核酸を含む第１のベクター（レンチウイルスベクターなど）であって、ｉ）第
１のｃａＴＣＲポリペプチド鎖をコードする第１のｃａＴＣＲ核酸配列、及びｉｉ）第２
のｃａＴＣＲポリペプチド鎖をコードする第２のｃａＴＣＲ核酸配列を含み、第１及び第
２のｃａＴＣＲ核酸配列が第１のプロモーターの制御下にある、第１のベクターと、ｂ）
本明細書に記載のＣＳＲのいずれかによるＣＳＲポリペプチド鎖を含む単量体ＣＳＲをコ
ードする核酸を含む第２のベクター（レンチウイルスベクターなど）であって、ＣＳＲポ
リペプチド鎖をコードするＣＳＲ核酸配列に作動可能に連結された第２のプロモーターを
含む、第２のベクターと、が提供される。いくつかの実施形態では、第１のプロモーター
は、第１のｃａＴＣＲ核酸配列の５’末端に作動可能に連結され、第１のｃａＴＣＲ核酸
配列の３’末端を第２のｃａＴＣＲ核酸配列の５’末端に連結させる、内部リボソーム侵
入部位（ＩＲＥＳ）、自己切断２Ａペプチド（Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２Ａ、又はＦ２Ａなど
）をコードする核酸からなる群から選択される核酸リンカーが存在し、第１のｃａＴＣＲ
核酸配列及び第２のｃａＴＣＲ核酸配列は、第１のプロモーターの制御下で単一ＲＮＡと
して転写される。いくつかの実施形態では、第１のプロモーターは、第２のｃａＴＣＲ核
酸配列の５’末端に作動可能に連結され、第２のｃａＴＣＲ核酸配列の３’末端を第１の
ｃａＴＣＲ核酸配列の５’末端に連結させる、内部リボソーム侵入部位（ＩＲＥＳ）、自
己切断２Ａペプチド（Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２Ａ、又はＦ２Ａなど）をコードする核酸から
なる群から選択される核酸リンカーが存在し、第１のｃａＴＣＲ核酸配列及び第２のｃａ
ＴＣＲ核酸配列は、第１のプロモーターの制御下で単一ＲＮＡとして転写される。いくつ
かの実施形態では、第１及び／又は第２のプロモーターは誘導可能である。いくつかの実
施形態では、第１及び／又は第２のベクターは、ウイルスベクター（レンチウイルスベク
ターなど）である。第１又は第２のｃａＴＣＲ核酸配列がＣＳＲ核酸配列と交換される場
合など、核酸配列のいずれかが交換される実施形態も想到されることを理解されたい。
ａＴＣＲポリペプチド鎖及び第２のｃａＴＣＲポリペプチド鎖を含む二量体ｃａＴＣＲを
コードする核酸を含む第１のベクター（レンチウイルスベクターなど）であって、ｉ）第
１のｃａＴＣＲポリペプチド鎖をコードする第１のｃａＴＣＲ核酸配列、及びｉｉ）第２
のｃａＴＣＲポリペプチド鎖をコードする第２のｃａＴＣＲ核酸配列を含み、第１及び第
２のｃａＴＣＲ核酸配列が第１のプロモーターの制御下にある、第１のベクターと、ｂ）
本明細書に記載のＣＳＲのいずれかによるＣＳＲポリペプチド鎖を含む単量体ＣＳＲをコ
ードする核酸を含む第２のベクター（レンチウイルスベクターなど）であって、ＣＳＲポ
リペプチド鎖をコードするＣＳＲ核酸配列に作動可能に連結された第２のプロモーターを
含む、第２のベクターと、が提供される。いくつかの実施形態では、第１のプロモーター
は、第１のｃａＴＣＲ核酸配列の５’末端に作動可能に連結され、第１のｃａＴＣＲ核酸
配列の３’末端を第２のｃａＴＣＲ核酸配列の５’末端に連結させる、内部リボソーム侵
入部位（ＩＲＥＳ）、自己切断２Ａペプチド（Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２Ａ、又はＦ２Ａなど
）をコードする核酸からなる群から選択される核酸リンカーが存在し、第１のｃａＴＣＲ
核酸配列及び第２のｃａＴＣＲ核酸配列は、第１のプロモーターの制御下で単一ＲＮＡと
して転写される。いくつかの実施形態では、第１のプロモーターは、第２のｃａＴＣＲ核
酸配列の５’末端に作動可能に連結され、第２のｃａＴＣＲ核酸配列の３’末端を第１の
ｃａＴＣＲ核酸配列の５’末端に連結させる、内部リボソーム侵入部位（ＩＲＥＳ）、自
己切断２Ａペプチド（Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２Ａ、又はＦ２Ａなど）をコードする核酸から
なる群から選択される核酸リンカーが存在し、第１のｃａＴＣＲ核酸配列及び第２のｃａ
ＴＣＲ核酸配列は、第１のプロモーターの制御下で単一ＲＮＡとして転写される。いくつ
かの実施形態では、第１及び／又は第２のプロモーターは誘導可能である。いくつかの実
施形態では、第１及び／又は第２のベクターは、ウイルスベクター（レンチウイルスベク
ターなど）である。第１又は第２のｃａＴＣＲ核酸配列がＣＳＲ核酸配列と交換される場
合など、核酸配列のいずれかが交換される実施形態も想到されることを理解されたい。
【0244】
いくつかの実施形態では、ベクター（例えば、ウイルスベクター、例えばレンチウイル
スベクターなど）であって、ａ）本明細書に記載のｃａＴＣＲのいずれかによる第１のｃ
ａＴＣＲポリペプチド鎖、及び第２のｃａＴＣＲポリペプチド鎖を含む二量体ｃａＴＣＲ
をコードする核酸であって、ｉ）第１のｃａＴＣＲポリペプチド鎖をコードする第１のｃ
ａＴＣＲ核酸配列、及びｉｉ）第２のｃａＴＣＲポリペプチド鎖をコードする第２のｃａ
ＴＣＲ核酸配列を含む核酸と、ｂ）ＣＳＲポリペプチド鎖をコードするＣＳＲ核酸配列を
含む、本明細書に記載のＣＳＲのいずれかによるＣＳＲポリペプチド鎖を含む単量体ＣＳ
Ｒをコードする核酸と、を含み、第１及び第２のｃａＴＣＲ核酸配列は、第１のプロモー
ターの制御下にあり、ＣＳＲ核酸配列は、第２のプロモーターの制御下にある、ベクター
が提供される。いくつかの実施形態では、第１のプロモーターは、内部リボソーム侵入部
位（ＩＲＥＳ）、自己切断２Ａペプチド（Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２Ａ、又はＦ２Ａなど）を
コードする核酸からなる群から選択された核酸リンカーによって他のｃａＴＣＲ核酸配列
に連結されるｃａＴＣＲ核酸配列のうちの１つに作動可能に連結され、第１及び第２のｃ
ａＴＣＲ核酸配列が、第１のプロモーターの制御下で単一ＲＮＡとして転写されるように
される。いくつかの実施形態では、第１及び／又は第２のプロモーターは誘導可能である
。いくつかの実施形態では、第２のプロモーターは誘導可能なプロモーターである。いく
つかの実施形態では、誘導可能なプロモーターは、免疫細胞活性化に応答する１つ以上の
要素を含む。いくつかの実施形態では、第２のプロモーターは、ＮＦＡＴ由来プロモータ
ーである。いくつかの実施形態では、ＮＦＡＴ由来プロモーターは、配列番号８５のヌク
レオチド配列を含む。いくつかの実施形態では、ベクターは、ウイルスベクター（レンチ
ウイルスベクターなど）である。
スベクターなど）であって、ａ）本明細書に記載のｃａＴＣＲのいずれかによる第１のｃ
ａＴＣＲポリペプチド鎖、及び第２のｃａＴＣＲポリペプチド鎖を含む二量体ｃａＴＣＲ
をコードする核酸であって、ｉ）第１のｃａＴＣＲポリペプチド鎖をコードする第１のｃ
ａＴＣＲ核酸配列、及びｉｉ）第２のｃａＴＣＲポリペプチド鎖をコードする第２のｃａ
ＴＣＲ核酸配列を含む核酸と、ｂ）ＣＳＲポリペプチド鎖をコードするＣＳＲ核酸配列を
含む、本明細書に記載のＣＳＲのいずれかによるＣＳＲポリペプチド鎖を含む単量体ＣＳ
Ｒをコードする核酸と、を含み、第１及び第２のｃａＴＣＲ核酸配列は、第１のプロモー
ターの制御下にあり、ＣＳＲ核酸配列は、第２のプロモーターの制御下にある、ベクター
が提供される。いくつかの実施形態では、第１のプロモーターは、内部リボソーム侵入部
位（ＩＲＥＳ）、自己切断２Ａペプチド（Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２Ａ、又はＦ２Ａなど）を
コードする核酸からなる群から選択された核酸リンカーによって他のｃａＴＣＲ核酸配列
に連結されるｃａＴＣＲ核酸配列のうちの１つに作動可能に連結され、第１及び第２のｃ
ａＴＣＲ核酸配列が、第１のプロモーターの制御下で単一ＲＮＡとして転写されるように
される。いくつかの実施形態では、第１及び／又は第２のプロモーターは誘導可能である
。いくつかの実施形態では、第２のプロモーターは誘導可能なプロモーターである。いく
つかの実施形態では、誘導可能なプロモーターは、免疫細胞活性化に応答する１つ以上の
要素を含む。いくつかの実施形態では、第２のプロモーターは、ＮＦＡＴ由来プロモータ
ーである。いくつかの実施形態では、ＮＦＡＴ由来プロモーターは、配列番号８５のヌク
レオチド配列を含む。いくつかの実施形態では、ベクターは、ウイルスベクター（レンチ
ウイルスベクターなど）である。
【0245】
いくつかの実施形態では、ベクター（レンチウイルスベクターなど）であって、ａ）本
明細書に記載のｃａＴＣＲのいずれかによる第１のｃａＴＣＲポリペプチド鎖、及び第２
のｃａＴＣＲポリペプチド鎖を含む二量体ｃａＴＣＲをコードする核酸であって、ｉ）第
１のｃａＴＣＲポリペプチド鎖をコードする第１のｃａＴＣＲ核酸配列、及びｉｉ）第２
のｃａＴＣＲポリペプチド鎖をコードする第２のｃａＴＣＲ核酸配列を含む核酸と、ｂ）
ＣＳＲポリペプチド鎖をコードするＣＳＲ核酸配列を含む、本明細書に記載のＣＳＲのい
ずれかによるＣＳＲポリペプチド鎖を含む単量体ＣＳＲをコードする核酸と、を含み、第
１及び第２のｃａＴＣＲ核酸配列、並びにＣＳＲ核酸配列は、単一のプロモーターの制御
下にある、ベクターが提供される。いくつかの実施形態では、プロモーターは、個々に内
部リボソーム侵入部位（ＩＲＥＳ）、自己切断２Ａペプチド（Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２Ａ、
又はＦ２Ａなど）をコードする核酸からなる群から選択される核酸リンカーによって他の
核酸配列に連結される核酸配列のうちの１つに作動可能に連結され、第１及び第２のｃａ
ＴＣＲ核酸配列並びにＣＳＲ核酸配列が、プロモーターの制御下で単一ＲＮＡとして転写
されるようにされる。いくつかの実施形態では、プロモーターは、誘導可能である。いく
つかの実施形態では、ベクターは、ウイルスベクター（レンチウイルスベクターなど）で
ある。
明細書に記載のｃａＴＣＲのいずれかによる第１のｃａＴＣＲポリペプチド鎖、及び第２
のｃａＴＣＲポリペプチド鎖を含む二量体ｃａＴＣＲをコードする核酸であって、ｉ）第
１のｃａＴＣＲポリペプチド鎖をコードする第１のｃａＴＣＲ核酸配列、及びｉｉ）第２
のｃａＴＣＲポリペプチド鎖をコードする第２のｃａＴＣＲ核酸配列を含む核酸と、ｂ）
ＣＳＲポリペプチド鎖をコードするＣＳＲ核酸配列を含む、本明細書に記載のＣＳＲのい
ずれかによるＣＳＲポリペプチド鎖を含む単量体ＣＳＲをコードする核酸と、を含み、第
１及び第２のｃａＴＣＲ核酸配列、並びにＣＳＲ核酸配列は、単一のプロモーターの制御
下にある、ベクターが提供される。いくつかの実施形態では、プロモーターは、個々に内
部リボソーム侵入部位（ＩＲＥＳ）、自己切断２Ａペプチド（Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２Ａ、
又はＦ２Ａなど）をコードする核酸からなる群から選択される核酸リンカーによって他の
核酸配列に連結される核酸配列のうちの１つに作動可能に連結され、第１及び第２のｃａ
ＴＣＲ核酸配列並びにＣＳＲ核酸配列が、プロモーターの制御下で単一ＲＮＡとして転写
されるようにされる。いくつかの実施形態では、プロモーターは、誘導可能である。いく
つかの実施形態では、ベクターは、ウイルスベクター（レンチウイルスベクターなど）で
ある。
【0246】
遺伝子を細胞に導入及び発現させる方法は、当該技術分野において既知である。発現ベ
クターの文脈において、ベクターは、当該技術分野における任意の方法により、宿主細胞
、例えば、哺乳類、細菌、酵母、又は昆虫細胞に容易に導入することができる。例えば、
発現ベクターは、物理的、化学的、又は生物学的手段によって宿主細胞に導入され得る。
クターの文脈において、ベクターは、当該技術分野における任意の方法により、宿主細胞
、例えば、哺乳類、細菌、酵母、又は昆虫細胞に容易に導入することができる。例えば、
発現ベクターは、物理的、化学的、又は生物学的手段によって宿主細胞に導入され得る。
【0247】
ポリヌクレオチドを宿主細胞に導入するための物理的方法としては、リン酸カルシウム
沈殿、リポフェクション、粒子衝突、マイクロインジェクション、エレクトロポレーショ
ンなどが挙げられる。ベクター及び／又は外因性核酸を含む細胞を産生する方法は、当該
技術分野において公知である。例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．（２００１，Ｍ
ｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌ
ｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ）を参照さ
れたい。いくつかの実施形態では、宿主細胞へのポリヌクレオチドの導入は、リン酸カル
シウムトランスフェクションによって行われる。
沈殿、リポフェクション、粒子衝突、マイクロインジェクション、エレクトロポレーショ
ンなどが挙げられる。ベクター及び／又は外因性核酸を含む細胞を産生する方法は、当該
技術分野において公知である。例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．（２００１，Ｍ
ｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌ
ｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ）を参照さ
れたい。いくつかの実施形態では、宿主細胞へのポリヌクレオチドの導入は、リン酸カル
シウムトランスフェクションによって行われる。
【0248】
宿主細胞に目的のポリヌクレオチドを導入するための生物学的方法としては、ＤＮＡ及
びＲＮＡベクターの使用が挙げられる。ウイルスベクター、特にレトロウイルスベクター
は、哺乳類、例えば、ヒト細胞に遺伝子を挿入するための最も広く使用されている方法と
なっている。他のウイルスベクターは、レンチウイルス、ポックスウイルス、単純ヘルペ
スウイルス１、アデノウイルス、及びアデノ随伴ウイルスなどに由来し得る。例えば、米
国特許第５，３５０，６７４号及び同第５，５８５，３６２号を参照されたい。
びＲＮＡベクターの使用が挙げられる。ウイルスベクター、特にレトロウイルスベクター
は、哺乳類、例えば、ヒト細胞に遺伝子を挿入するための最も広く使用されている方法と
なっている。他のウイルスベクターは、レンチウイルス、ポックスウイルス、単純ヘルペ
スウイルス１、アデノウイルス、及びアデノ随伴ウイルスなどに由来し得る。例えば、米
国特許第５，３５０，６７４号及び同第５，５８５，３６２号を参照されたい。
【0249】
ポリヌクレオチドを宿主細胞に導入するための化学的手段としては、巨大分子複合体、
ナノカプセル、ミクロスフェア、ビーズ、及び水中油型エマルション、ミセル、混合ミセ
ル、及びリポソームを含む脂質ベース系が挙げられる。インビトロ及びインビボで送達ビ
ヒクルとして使用するための例示的なコロイド系は、リポソーム（例えば人工膜小胞）で
ある。
ナノカプセル、ミクロスフェア、ビーズ、及び水中油型エマルション、ミセル、混合ミセ
ル、及びリポソームを含む脂質ベース系が挙げられる。インビトロ及びインビボで送達ビ
ヒクルとして使用するための例示的なコロイド系は、リポソーム（例えば人工膜小胞）で
ある。
【0250】
非ウイルス送達系が利用される場合、例示的な送達ビヒクルはリポソームである。脂質
製剤の使用は、宿主細胞（インビトロ、エクスビボ、又はインビボ）に核酸を導入するた
めに想到される。別の態様では、核酸は脂質と結合していてもよい。脂質に結合する核酸
は、リポソームの脂質二重層内に散在するリポソームの水性内部に封入されてもよく、リ
ポソーム及びオリゴヌクレオチドの両方に結合する連結分子を介してリポソームに結合し
ていてもよく、リポソームに封入されてもよく、リポソームと複合体化されてもよく、脂
質を含む溶液に分散されてもよく、脂質と混合されてもよく、脂質と混合されてもよく、
脂質と組み合わされてもよく、脂質中の懸濁液として含まれてもよく、ミセルに含まれる
か若しくは複合体化されてもよく、又はそうでなければ、脂質と結合していてもよい。脂
質、脂質／ＤＮＡ、又は脂質／発現ベクター結合組成物は、溶液中の任意の特定の構造に
限定されない。例えば、それらは、ミセルとして二重層構造で、又は「潰れた」構造で存
在してもよい。これらはまた、単に溶液中に散在してもよく、場合によっては、サイズ又
は形状が均一ではない凝集体を形成してもよい。脂質は、天然に存在し得る脂肪物質又は
合成脂質である。例えば、脂質としては、天然に細胞質中に生じる脂肪液滴、並びに長鎖
脂肪族炭化水素及び脂肪酸、アルコール、アミン、アミノアルコール、及びアルデヒドな
どの誘導体を含む化合物の類が挙げられる。
製剤の使用は、宿主細胞（インビトロ、エクスビボ、又はインビボ）に核酸を導入するた
めに想到される。別の態様では、核酸は脂質と結合していてもよい。脂質に結合する核酸
は、リポソームの脂質二重層内に散在するリポソームの水性内部に封入されてもよく、リ
ポソーム及びオリゴヌクレオチドの両方に結合する連結分子を介してリポソームに結合し
ていてもよく、リポソームに封入されてもよく、リポソームと複合体化されてもよく、脂
質を含む溶液に分散されてもよく、脂質と混合されてもよく、脂質と混合されてもよく、
脂質と組み合わされてもよく、脂質中の懸濁液として含まれてもよく、ミセルに含まれる
か若しくは複合体化されてもよく、又はそうでなければ、脂質と結合していてもよい。脂
質、脂質／ＤＮＡ、又は脂質／発現ベクター結合組成物は、溶液中の任意の特定の構造に
限定されない。例えば、それらは、ミセルとして二重層構造で、又は「潰れた」構造で存
在してもよい。これらはまた、単に溶液中に散在してもよく、場合によっては、サイズ又
は形状が均一ではない凝集体を形成してもよい。脂質は、天然に存在し得る脂肪物質又は
合成脂質である。例えば、脂質としては、天然に細胞質中に生じる脂肪液滴、並びに長鎖
脂肪族炭化水素及び脂肪酸、アルコール、アミン、アミノアルコール、及びアルデヒドな
どの誘導体を含む化合物の類が挙げられる。
【0251】
外因性核酸を宿主細胞に導入するために使用される方法、又は本発明の阻害剤に細胞を
曝露するために使用される方法にかかわらず、宿主細胞中の組み換えＤＮＡ配列の存在を
確認するために、様々なアッセイが行われてもよい。このようなアッセイとしては、例え
ば、サザン及びノーザンブロッティング、ＲＴ－ＰＣＲ及びＰＣＲなどの、当業者に公知
の「分子生物学的」アッセイが挙げられる。例えば、免疫学的手段（ＥＬＩＳＡ及びウェ
スタンブロット）による特定のペプチドの有無を検出することなどの「生化学的」アッセ
イ、又は薬剤を同定するための本明細書に記載のアッセイは、本発明の範囲内に含まれる
。
ｃａＴＣＲ、ＣＳＲ、及びＳＳＥの調製
曝露するために使用される方法にかかわらず、宿主細胞中の組み換えＤＮＡ配列の存在を
確認するために、様々なアッセイが行われてもよい。このようなアッセイとしては、例え
ば、サザン及びノーザンブロッティング、ＲＴ－ＰＣＲ及びＰＣＲなどの、当業者に公知
の「分子生物学的」アッセイが挙げられる。例えば、免疫学的手段（ＥＬＩＳＡ及びウェ
スタンブロット）による特定のペプチドの有無を検出することなどの「生化学的」アッセ
イ、又は薬剤を同定するための本明細書に記載のアッセイは、本発明の範囲内に含まれる
。
ｃａＴＣＲ、ＣＳＲ、及びＳＳＥの調製
【0252】
いくつかの実施形態では、抗体部分を含む本明細書に記載のｃａＴＣＲ、ＣＳＲ、及び
ＳＳＥのいずれかによると、抗体部分（例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆ
ｖ、又はｓｃＦｖ）は、モノクローナル抗体に由来する配列を含む。いくつかの実施形態
では、抗体部分は、モノクローナル抗体由来のＶＨ及びＶＬドメイン、又はその変異型を
含む。いくつかの実施形態では、抗体部分は、モノクローナル抗体由来のＣＨ１及びＣＬ
ドメイン、又はその変異型を更に含む。モノクローナル抗体は、例えば、Ｋｏｈｌｅｒ
ａｎｄ Ｍｉｌｓｔｅｉｎ，Ｎａｔｕｒｅ，２５６：４９５（１９７５）及びＳｅｒｇｅ
ｅｖａ ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ，１１７（１６）：４２６２－４２７２に記載される
もののようなハイブリドーマ法を使用して調製することができる。
ＳＳＥのいずれかによると、抗体部分（例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆ
ｖ、又はｓｃＦｖ）は、モノクローナル抗体に由来する配列を含む。いくつかの実施形態
では、抗体部分は、モノクローナル抗体由来のＶＨ及びＶＬドメイン、又はその変異型を
含む。いくつかの実施形態では、抗体部分は、モノクローナル抗体由来のＣＨ１及びＣＬ
ドメイン、又はその変異型を更に含む。モノクローナル抗体は、例えば、Ｋｏｈｌｅｒ
ａｎｄ Ｍｉｌｓｔｅｉｎ，Ｎａｔｕｒｅ，２５６：４９５（１９７５）及びＳｅｒｇｅ
ｅｖａ ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ，１１７（１６）：４２６２－４２７２に記載される
もののようなハイブリドーマ法を使用して調製することができる。
【0253】
ハイブリドーマ法では、ハムスター、マウス、又は他の適切な宿主動物は、典型的には
、免疫化剤により免疫されて、免疫化剤に特異的に結合する抗体を産生するか、又は産生
できるリンパ球を誘発する。別の方法としては、リンパ球をインビトロで免疫化できる。
免疫化剤は、目的のタンパク質のポリペプチド若しくは融合タンパク質、又はペプチド及
びＭＨＣタンパク質を含む複合体などの少なくとも２つの分子を含む複合体を含むことが
できる。一般に、ヒト由来細胞が望まれる場合は末梢血リンパ球（「ＰＢＬ」）を使用す
るか、又は、非ヒト哺乳類源が望まれる場合は脾臓細胞若しくはリンパ節細胞を使用する
。その後、リンパ球を、好適な融合剤、例えばポリエチレングリコールを用いて不死化細
胞株と融合し、ハイブリドーマ細胞を形成する。例えば、Ｇｏｄｉｎｇ，Ｍｏｎｏｃｌｏ
ｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ，（
Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ：Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ（１９８６），ｐｐ．５９－１０３を
参照されたい。不死化細胞株は、通常は、形質転換された哺乳類細胞、特に、げっ歯類、
ウシ及びヒト由来の骨髄腫細胞である。通常は、ラット又はマウス骨髄腫細胞株を用いる
。ハイブリドーマ細胞を、好ましくは、未融合の不死化細胞の増殖又は生存を阻害する１
種以上の物質を含む好適な培養培地中で培養し、増殖することができる。例えば、親細胞
が、酵素ヒポキサンチングアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＨＧＰＲＴ又はＨ
ＰＲＴ）を欠く場合、ハイブリドーマ用の培養培地は、典型的には、ＨＧＰＲＴ欠損細胞
の増殖を防ぐヒポキサンチン、アミノプテリン、及びチミジンを含む（「ＨＡＴ培地」）
。
、免疫化剤により免疫されて、免疫化剤に特異的に結合する抗体を産生するか、又は産生
できるリンパ球を誘発する。別の方法としては、リンパ球をインビトロで免疫化できる。
免疫化剤は、目的のタンパク質のポリペプチド若しくは融合タンパク質、又はペプチド及
びＭＨＣタンパク質を含む複合体などの少なくとも２つの分子を含む複合体を含むことが
できる。一般に、ヒト由来細胞が望まれる場合は末梢血リンパ球（「ＰＢＬ」）を使用す
るか、又は、非ヒト哺乳類源が望まれる場合は脾臓細胞若しくはリンパ節細胞を使用する
。その後、リンパ球を、好適な融合剤、例えばポリエチレングリコールを用いて不死化細
胞株と融合し、ハイブリドーマ細胞を形成する。例えば、Ｇｏｄｉｎｇ，Ｍｏｎｏｃｌｏ
ｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ，（
Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ：Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ（１９８６），ｐｐ．５９－１０３を
参照されたい。不死化細胞株は、通常は、形質転換された哺乳類細胞、特に、げっ歯類、
ウシ及びヒト由来の骨髄腫細胞である。通常は、ラット又はマウス骨髄腫細胞株を用いる
。ハイブリドーマ細胞を、好ましくは、未融合の不死化細胞の増殖又は生存を阻害する１
種以上の物質を含む好適な培養培地中で培養し、増殖することができる。例えば、親細胞
が、酵素ヒポキサンチングアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＨＧＰＲＴ又はＨ
ＰＲＴ）を欠く場合、ハイブリドーマ用の培養培地は、典型的には、ＨＧＰＲＴ欠損細胞
の増殖を防ぐヒポキサンチン、アミノプテリン、及びチミジンを含む（「ＨＡＴ培地」）
。
【0254】
いくつかの実施形態では、不死化細胞株は、効率的に融合し、選択された抗体産生細胞
による安定な高レベルの抗体発現を支持し、ＨＡＴ培地などの培地に感受性である。いく
つかの実施形態では、不死化細胞株は、例えば、Ｓａｌｋ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ Ｃｅｌ
ｌ Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ Ｃｅｎｔｅｒ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，Ｃａｌｉｆｏｒｎ
ｉａ及びＡｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ，Ｍａｎ
ａｓｓａｓ，Ｖｉｒｇｉｎｉａから得ることができるマウス骨髄腫株である。ヒト骨髄腫
及びマウス－ヒトヘテロ骨髄腫細胞株もまた、ヒトモノクローナル抗体の産生について記
載されている。Ｋｏｚｂｏｒ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１３３：３００１（１９８４）、
Ｂｒｏｄｅｕｒ ｅｔ ａｌ．Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｐｒｏｄｕｃ
ｔｉｏｎ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ（Ｍａｒｃｅｌ
Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．：Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９８７）ｐｐ．５１－６３。
による安定な高レベルの抗体発現を支持し、ＨＡＴ培地などの培地に感受性である。いく
つかの実施形態では、不死化細胞株は、例えば、Ｓａｌｋ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ Ｃｅｌ
ｌ Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ Ｃｅｎｔｅｒ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，Ｃａｌｉｆｏｒｎ
ｉａ及びＡｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ，Ｍａｎ
ａｓｓａｓ，Ｖｉｒｇｉｎｉａから得ることができるマウス骨髄腫株である。ヒト骨髄腫
及びマウス－ヒトヘテロ骨髄腫細胞株もまた、ヒトモノクローナル抗体の産生について記
載されている。Ｋｏｚｂｏｒ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１３３：３００１（１９８４）、
Ｂｒｏｄｅｕｒ ｅｔ ａｌ．Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｐｒｏｄｕｃ
ｔｉｏｎ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ（Ｍａｒｃｅｌ
Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．：Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９８７）ｐｐ．５１－６３。
【0255】
ハイブリドーマ細胞が培養される培養培地を、続いて、ポリペプチドに対するモノクロ
ーナル抗体の存在についてアッセイできる。ハイブリドーマ細胞によって産生されたモノ
クローナル抗体の結合特異性を、免疫沈降法により、又は、ラジオイムノアッセイ（ＲＩ
Ａ）若しくは酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）などのｉｎ ｖｉｔｒｏ結合アッ
セイによって測定することができる。このような手法及びアッセイ法は、当該技術分野に
おいて既知である。モノクローナル抗体の結合親和性は、例えば、Ｍｕｎｓｏｎ ａｎｄ
Ｐｏｌｌａｒｄ，Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１０７：２２０（１９８０）の標準的
な分析によって決定することができる。
ーナル抗体の存在についてアッセイできる。ハイブリドーマ細胞によって産生されたモノ
クローナル抗体の結合特異性を、免疫沈降法により、又は、ラジオイムノアッセイ（ＲＩ
Ａ）若しくは酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）などのｉｎ ｖｉｔｒｏ結合アッ
セイによって測定することができる。このような手法及びアッセイ法は、当該技術分野に
おいて既知である。モノクローナル抗体の結合親和性は、例えば、Ｍｕｎｓｏｎ ａｎｄ
Ｐｏｌｌａｒｄ，Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１０７：２２０（１９８０）の標準的
な分析によって決定することができる。
【0256】
所望のハイブリドーマ細胞を同定した後、限界希釈手順によってクローンをサブクロー
ニングし、標準的な方法により増殖させることができる。Ｇｏｄｉｎｇ、前出。この目的
のために好適な培養培地として、例えば、ダルベッコ改変イーグル培地及びＲＰＭＩ－１
６４０培地が挙げられる。代替的に、ハイブリドーマ細胞を哺乳類中の腹水としてインビ
ボで増殖させることもできる。
ニングし、標準的な方法により増殖させることができる。Ｇｏｄｉｎｇ、前出。この目的
のために好適な培養培地として、例えば、ダルベッコ改変イーグル培地及びＲＰＭＩ－１
６４０培地が挙げられる。代替的に、ハイブリドーマ細胞を哺乳類中の腹水としてインビ
ボで増殖させることもできる。
【0257】
サブクローンによって分泌されるモノクローナル抗体は、例えば、プロテインＡ－Ｓｅ
ｐｈａｒｏｓｅ、ヒドロキシアパタイトクロマトグラフィー、ゲル電気泳動、透析、又は
アフィニティクロマトグラフィーなどの従来の免疫グロブリン精製手順によって、培養培
地又は腹水から単離又は精製することができる。
ｐｈａｒｏｓｅ、ヒドロキシアパタイトクロマトグラフィー、ゲル電気泳動、透析、又は
アフィニティクロマトグラフィーなどの従来の免疫グロブリン精製手順によって、培養培
地又は腹水から単離又は精製することができる。
【0258】
いくつかの実施形態では、抗体部分を含む本明細書に記載のｃａＴＣＲ、ＣＳＲ、及び
ＳＳＥのいずれかによると、抗体部分は、抗体部分ライブラリー（ｓｃＦｖ又はＦａｂ断
片を提示するファージライブラリーなど）から選択されるクローン由来の配列を含む。ク
ローンは、所望の活性又は複数の活性を有する抗体断片のコンビナトリアルライブラリー
をスクリーニングすることによって同定され得る。例えば、ファージディスプレイライブ
ラリーを生成し、所望の結合特性を有する抗体についてそのようなライブラリーをスクリ
ーニングするための様々な方法が当該技術分野において既知である。このような方法は、
例えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ ｅｔ ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌ
ａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ １７８：１－３７（Ｏ’Ｂｒｉｅｎ ｅｔ ａｌ．，ｅｄ．，Ｈ
ｕｍａｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，Ｎ．Ｊ．，２００１）に概説されており、例えば
、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３４８：５５２－５５４、Ｃｌ
ａｃｋｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３５２：６２４－６２８（１９９１）、Ｍ
ａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１－５９７（１９９２）
、Ｍａｒｋｓ ａｎｄ Ｂｒａｄｂｕｒｙ，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ
Ｂｉｏｌｏｇｙ ２４８：１６１－１７５（Ｌｏ，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎ Ｐｒｅｓｓ，
Ｔｏｔｏｗａ，Ｎ．Ｊ．，２００３）、Ｓｉｄｈｕ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏ
ｌ．３３８（２）：２９９－３１０（２００４）、Ｌｅｅ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．
Ｂｉｏｌ．３４０（５）：１０７３－１０９３（２００４）、Ｆｅｌｌｏｕｓｅ，Ｐｒｏ
ｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ １０１（３４）：１２４６７－１２４７２（
２００４）、及びＬｅｅ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ２８４
（１－２）：１１９－１３２（２００４）に更に記載される。
ＳＳＥのいずれかによると、抗体部分は、抗体部分ライブラリー（ｓｃＦｖ又はＦａｂ断
片を提示するファージライブラリーなど）から選択されるクローン由来の配列を含む。ク
ローンは、所望の活性又は複数の活性を有する抗体断片のコンビナトリアルライブラリー
をスクリーニングすることによって同定され得る。例えば、ファージディスプレイライブ
ラリーを生成し、所望の結合特性を有する抗体についてそのようなライブラリーをスクリ
ーニングするための様々な方法が当該技術分野において既知である。このような方法は、
例えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ ｅｔ ａｌ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌ
ａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ １７８：１－３７（Ｏ’Ｂｒｉｅｎ ｅｔ ａｌ．，ｅｄ．，Ｈ
ｕｍａｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，Ｎ．Ｊ．，２００１）に概説されており、例えば
、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３４８：５５２－５５４、Ｃｌ
ａｃｋｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３５２：６２４－６２８（１９９１）、Ｍ
ａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１－５９７（１９９２）
、Ｍａｒｋｓ ａｎｄ Ｂｒａｄｂｕｒｙ，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ
Ｂｉｏｌｏｇｙ ２４８：１６１－１７５（Ｌｏ，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎ Ｐｒｅｓｓ，
Ｔｏｔｏｗａ，Ｎ．Ｊ．，２００３）、Ｓｉｄｈｕ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏ
ｌ．３３８（２）：２９９－３１０（２００４）、Ｌｅｅ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．
Ｂｉｏｌ．３４０（５）：１０７３－１０９３（２００４）、Ｆｅｌｌｏｕｓｅ，Ｐｒｏ
ｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ １０１（３４）：１２４６７－１２４７２（
２００４）、及びＬｅｅ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ２８４
（１－２）：１１９－１３２（２００４）に更に記載される。
【0259】
特定のファージディスプレイ方法では、ＶＨ及びＶＬ遺伝子のレパートリーは、ポリメ
ラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）によって別々にクローニングされ、ファージライブラリーにお
いてランダムに組み替えられ、次いで、Ｗｉｎｔｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．
Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１２：４３３－４５５（１９９４）に記載される抗原結合ファージに
ついてスクリーニングすることができる。ファージは、典型的には、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ
）断片又はＦａｂ断片のいずれかとして抗体断片を提示する。免疫源からのライブラリー
は、ハイブリドーマを構築する必要なしに、免疫原に対する高親和性抗体を提供する。あ
るいは、ナイーブ型レパートリーを（例えば、ヒトから）クローン化して、Ｇｒｉｆｆｉ
ｔｈｓ ｅｔ ａｌ．，ＥＭＢＯ Ｊ，１２：７２５－７３４（１９９３）に記載されて
いるような任意の免疫化なしに、非自己及び更に自己抗原も含む広範囲の抗原に対する単
一の抗体源を提供することができる。最後に、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ ａｎｄ Ｗｉｎｔ
ｅｒ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２７：３８１－３８８（１９９２）に記載されている
ように、ナイーブライブラリーはまた、幹細胞から再配列されていないＶ遺伝子セグメン
トをクローニングし、ランダム配列を含むＰＣＲプライマーを使用して高度に可変のＣＤ
Ｒ３領域をコードし、インビトロで再配列を達成することにより、合成的に作製すること
もできる。ヒト抗体ファージライブラリーを記載する特許公報には、例えば、米国特許第
５，７５０，３７３号、並びに米国特許公開第２００５／００７９５７４号、同第２００
５／０１１９４５５号、同第２００５／０２６６０００号、同第２００７／０１１７１２
６号、同第２００７／０１６０５９８号、同第２００７／０２３７７６４号、同第２００
７／０２９２９３６号、及び同第２００９／０００２３６０号が挙げられる。
ラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）によって別々にクローニングされ、ファージライブラリーにお
いてランダムに組み替えられ、次いで、Ｗｉｎｔｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．
Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１２：４３３－４５５（１９９４）に記載される抗原結合ファージに
ついてスクリーニングすることができる。ファージは、典型的には、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ
）断片又はＦａｂ断片のいずれかとして抗体断片を提示する。免疫源からのライブラリー
は、ハイブリドーマを構築する必要なしに、免疫原に対する高親和性抗体を提供する。あ
るいは、ナイーブ型レパートリーを（例えば、ヒトから）クローン化して、Ｇｒｉｆｆｉ
ｔｈｓ ｅｔ ａｌ．，ＥＭＢＯ Ｊ，１２：７２５－７３４（１９９３）に記載されて
いるような任意の免疫化なしに、非自己及び更に自己抗原も含む広範囲の抗原に対する単
一の抗体源を提供することができる。最後に、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ ａｎｄ Ｗｉｎｔ
ｅｒ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２７：３８１－３８８（１９９２）に記載されている
ように、ナイーブライブラリーはまた、幹細胞から再配列されていないＶ遺伝子セグメン
トをクローニングし、ランダム配列を含むＰＣＲプライマーを使用して高度に可変のＣＤ
Ｒ３領域をコードし、インビトロで再配列を達成することにより、合成的に作製すること
もできる。ヒト抗体ファージライブラリーを記載する特許公報には、例えば、米国特許第
５，７５０，３７３号、並びに米国特許公開第２００５／００７９５７４号、同第２００
５／０１１９４５５号、同第２００５／０２６６０００号、同第２００７／０１１７１２
６号、同第２００７／０１６０５９８号、同第２００７／０２３７７６４号、同第２００
７／０２９２９３６号、及び同第２００９／０００２３６０号が挙げられる。
【0260】
抗体部分は、標的抗原に特異的な抗体（ペプチド／ＭＨＣクラスＩ／ＩＩ複合体又は細
胞表面抗原など）のライブラリーをスクリーニングするために、ファージディスプレイを
使用して調製することができる。ライブラリーは、少なくとも１×１０９（少なくとも約
１×１０９、２．５×１０９、５×１０９、７．５×１０９、１×１０１０、２．５×１
０１０、５×１０１０、７．５×１０１０、１×１０１１のいずれかなど）の固有のヒト
抗体断片の多様性を有するヒトｓｃＦｖファージディスプレイライブラリーであり得る。
いくつかの実施形態では、ライブラリーは、ヒトのＰＭＢＣから抽出されるＤＮＡ及び健
康なドナーからの脾臓から構築されたナイーブ型ヒトライブラリーであり、全てのヒト重
鎖及び軽鎖サブファミリーを包含する。いくつかの実施形態では、ライブラリーは、自己
免疫疾患を有する患者、がん患者、及び感染性疾患を有する患者などの様々な疾患を有す
る患者から単離されるＰＢＭＣから抽出されるＤＮＡから構築されたナイーブ型ヒトライ
ブラリーである。いくつかの実施形態では、ライブラリーは半合成ヒトライブラリーであ
り、重鎖ＣＤＲ３は完全にランダム化され、全てのアミノ酸（システイン以外）は、任意
の所与の位置に存在する尤度が等しくなる（例えば、Ｈｏｅｔ，Ｒ．Ｍ．ｅｔ ａｌ．，
Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２３（３）：３４４－３４８，２００５を参照されたい
）。いくつかの実施形態では、半合成ヒトライブラリーの重鎖ＣＤＲ３は、約５～約２４
（約５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１
９、２０、２１、２２、２３、又は２４のいずれかなど）の長さのアミノ酸を有する。い
くつかの実施形態では、ライブラリーは、完全合成ファージディスプレイライブラリーで
ある。いくつかの実施形態では、ライブラリーは、非ヒトファージディスプレイライブラ
リーである。
胞表面抗原など）のライブラリーをスクリーニングするために、ファージディスプレイを
使用して調製することができる。ライブラリーは、少なくとも１×１０９（少なくとも約
１×１０９、２．５×１０９、５×１０９、７．５×１０９、１×１０１０、２．５×１
０１０、５×１０１０、７．５×１０１０、１×１０１１のいずれかなど）の固有のヒト
抗体断片の多様性を有するヒトｓｃＦｖファージディスプレイライブラリーであり得る。
いくつかの実施形態では、ライブラリーは、ヒトのＰＭＢＣから抽出されるＤＮＡ及び健
康なドナーからの脾臓から構築されたナイーブ型ヒトライブラリーであり、全てのヒト重
鎖及び軽鎖サブファミリーを包含する。いくつかの実施形態では、ライブラリーは、自己
免疫疾患を有する患者、がん患者、及び感染性疾患を有する患者などの様々な疾患を有す
る患者から単離されるＰＢＭＣから抽出されるＤＮＡから構築されたナイーブ型ヒトライ
ブラリーである。いくつかの実施形態では、ライブラリーは半合成ヒトライブラリーであ
り、重鎖ＣＤＲ３は完全にランダム化され、全てのアミノ酸（システイン以外）は、任意
の所与の位置に存在する尤度が等しくなる（例えば、Ｈｏｅｔ，Ｒ．Ｍ．ｅｔ ａｌ．，
Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２３（３）：３４４－３４８，２００５を参照されたい
）。いくつかの実施形態では、半合成ヒトライブラリーの重鎖ＣＤＲ３は、約５～約２４
（約５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１
９、２０、２１、２２、２３、又は２４のいずれかなど）の長さのアミノ酸を有する。い
くつかの実施形態では、ライブラリーは、完全合成ファージディスプレイライブラリーで
ある。いくつかの実施形態では、ライブラリーは、非ヒトファージディスプレイライブラ
リーである。
【0261】
高い親和性で標的抗原に結合するファージクローンは、固体支持体（例えば、溶液パニ
ングのためのビーズ又は細胞パニングのための哺乳類細胞など）に結合した標的抗原への
ファージの反復的な結合によって選択することができ、続いて非結合ファージを除去し、
特異的に結合したファージの溶出によって選択することができる。溶液パニングの例では
、標的抗原は、固体支持体への不動化のためにビオチン化され得る。ビオチン化標的抗原
は、ファージライブラリーと、ストレプトアビジンコンジュゲートＤｙｎａｂｅａｄｓ
Ｍ－２８０などの固体担体と混合され、次いで、標的抗原－ファージ－ビーズ複合体が単
離される。次いで、結合したファージクローンを溶離して使用し、発現及び精製のために
大腸菌ＸＬ１－Ｂｌｕｅなどの適切な宿主細胞を感染させる。細胞パニングの例では、Ａ
ＦＰペプチドを負荷したＴ２細胞（ＴＡＰ欠乏、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＋リンパ芽細胞
株）をファージライブラリーと混合した後、細胞を収集し、結合したクローンを溶離して
使用し、発現及び精製のために適切な宿主細胞を感染させる。パニングは、標的抗原に特
異的に結合するファージクローンを濃縮するために、溶液パニング、細胞パニング、又は
それらの両方の組み合わせのいずれかで、複数（約２、３、４、５、６、又はそれ以上の
いずれか）のラウンドで行うことができる。濃縮ファージクローンは、例えば、ＥＬＩＳ
Ａ及びＦＡＣＳを含む、当該技術分野において既知の任意の方法による標的抗原への特異
的結合について試験することができる。
ヒト及びヒト化抗体部分
ングのためのビーズ又は細胞パニングのための哺乳類細胞など）に結合した標的抗原への
ファージの反復的な結合によって選択することができ、続いて非結合ファージを除去し、
特異的に結合したファージの溶出によって選択することができる。溶液パニングの例では
、標的抗原は、固体支持体への不動化のためにビオチン化され得る。ビオチン化標的抗原
は、ファージライブラリーと、ストレプトアビジンコンジュゲートＤｙｎａｂｅａｄｓ
Ｍ－２８０などの固体担体と混合され、次いで、標的抗原－ファージ－ビーズ複合体が単
離される。次いで、結合したファージクローンを溶離して使用し、発現及び精製のために
大腸菌ＸＬ１－Ｂｌｕｅなどの適切な宿主細胞を感染させる。細胞パニングの例では、Ａ
ＦＰペプチドを負荷したＴ２細胞（ＴＡＰ欠乏、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＋リンパ芽細胞
株）をファージライブラリーと混合した後、細胞を収集し、結合したクローンを溶離して
使用し、発現及び精製のために適切な宿主細胞を感染させる。パニングは、標的抗原に特
異的に結合するファージクローンを濃縮するために、溶液パニング、細胞パニング、又は
それらの両方の組み合わせのいずれかで、複数（約２、３、４、５、６、又はそれ以上の
いずれか）のラウンドで行うことができる。濃縮ファージクローンは、例えば、ＥＬＩＳ
Ａ及びＦＡＣＳを含む、当該技術分野において既知の任意の方法による標的抗原への特異
的結合について試験することができる。
ヒト及びヒト化抗体部分
【0262】
ｃａＴＣＲ、ＣＳＲ、及びＳＳＥ抗体部分は、ヒト又はヒト化であり得る。非ヒト（例
えば、マウス）抗体部分のヒト化型は、非ヒト免疫グロブリン由来の最小限の配列を典型
的に含む、キメラ免疫グロブリン、免疫グロブリン鎖又はその断片（例えば、Ｆｖ、Ｆａ
ｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、又は抗体の他の抗原結合サブ配列）である。
ヒト化抗体部分として、レシピエントのＣＤＲの残基が、所望の特異性、親和性及び能力
を有するマウス、ラット、又はウサギなどの非ヒト種のＣＤＲの残基（ドナー抗体）で置
換されている、ヒト免疫グロブリン、免疫グロブリン鎖、又はその断片（レシピエント抗
体）が挙げられる。場合によっては、ヒト免疫グロブリンのＦｖフレームワーク残基が、
対応する非ヒト残基で置換される。ヒト化抗体部分は、レシピエント抗体部分においても
移入されたＣＤＲ若しくはフレームワーク配列においても見られない、残基も含み得る。
一般に、ヒト化抗体部分は、少なくとも１つの実質的に全て、典型的には２つの可変ドメ
インを含み得、全て又は実質的に全てのＣＤＲ領域は、非ヒト免疫グロブリンのものと一
致し、全て又は実質的に全てのＦＲ領域は、ヒト免疫グロブリンコンセンサス配列のもの
である。例えば、Ｊｏｎｅｓ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３２１：５２２－５２５（
１９８６）、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３３２：３２３－３２
９（１９８８）、Ｐｒｅｓｔａ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．，２：５９
３－５９６（１９９２）を参照されたい。
えば、マウス）抗体部分のヒト化型は、非ヒト免疫グロブリン由来の最小限の配列を典型
的に含む、キメラ免疫グロブリン、免疫グロブリン鎖又はその断片（例えば、Ｆｖ、Ｆａ
ｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、又は抗体の他の抗原結合サブ配列）である。
ヒト化抗体部分として、レシピエントのＣＤＲの残基が、所望の特異性、親和性及び能力
を有するマウス、ラット、又はウサギなどの非ヒト種のＣＤＲの残基（ドナー抗体）で置
換されている、ヒト免疫グロブリン、免疫グロブリン鎖、又はその断片（レシピエント抗
体）が挙げられる。場合によっては、ヒト免疫グロブリンのＦｖフレームワーク残基が、
対応する非ヒト残基で置換される。ヒト化抗体部分は、レシピエント抗体部分においても
移入されたＣＤＲ若しくはフレームワーク配列においても見られない、残基も含み得る。
一般に、ヒト化抗体部分は、少なくとも１つの実質的に全て、典型的には２つの可変ドメ
インを含み得、全て又は実質的に全てのＣＤＲ領域は、非ヒト免疫グロブリンのものと一
致し、全て又は実質的に全てのＦＲ領域は、ヒト免疫グロブリンコンセンサス配列のもの
である。例えば、Ｊｏｎｅｓ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３２１：５２２－５２５（
１９８６）、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３３２：３２３－３２
９（１９８８）、Ｐｒｅｓｔａ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．，２：５９
３－５９６（１９９２）を参照されたい。
【0263】
一般的に、ヒト化抗体部分は、非ヒト源から導入された１つ以上のアミノ酸残基を有す
る。これらの非ヒトアミノ酸残基は、典型的には「移入」可変ドメインから取り込まれた
「移入」残基と呼ばれることが多い。いくつかの実施形態によれば、ヒト化は、本質的に
Ｗｉｎｔｅｒ ａｎｄ ｃｏ－ｗｏｒｋｅｒｓ（Ｊｏｎｅｓ Ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒ
ｅ，３２１：５２２－５２５（１９８６）、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ
ｕｒｅ，３３２：３２３－３２７（１９８８）、Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｓ
ｃｉｅｎｃｅ，２３９：１５３４－１５３６（１９８８））の方法に従って、げっ歯類Ｃ
ＤＲ又はＣＤＲ配列をヒト抗体部分の対応する配列に置換することにより、実施できる。
したがって、そのような「ヒト化」抗体部分は、インタクトなヒト可変ドメインより実質
的に少ない部分が、非ヒト種からの対応する配列によって置換されている、抗体部分であ
る（米国特許第４８１６５６７号）。実際には、ヒト化抗体部分は、典型的には、いくつ
かのＣＤＲ残基及び場合によりいくつかのＦＲ残基が、げっ歯類抗体の類似部位由来の残
基で置換された、ヒト抗体部分である。
る。これらの非ヒトアミノ酸残基は、典型的には「移入」可変ドメインから取り込まれた
「移入」残基と呼ばれることが多い。いくつかの実施形態によれば、ヒト化は、本質的に
Ｗｉｎｔｅｒ ａｎｄ ｃｏ－ｗｏｒｋｅｒｓ（Ｊｏｎｅｓ Ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒ
ｅ，３２１：５２２－５２５（１９８６）、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ
ｕｒｅ，３３２：３２３－３２７（１９８８）、Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｓ
ｃｉｅｎｃｅ，２３９：１５３４－１５３６（１９８８））の方法に従って、げっ歯類Ｃ
ＤＲ又はＣＤＲ配列をヒト抗体部分の対応する配列に置換することにより、実施できる。
したがって、そのような「ヒト化」抗体部分は、インタクトなヒト可変ドメインより実質
的に少ない部分が、非ヒト種からの対応する配列によって置換されている、抗体部分であ
る（米国特許第４８１６５６７号）。実際には、ヒト化抗体部分は、典型的には、いくつ
かのＣＤＲ残基及び場合によりいくつかのＦＲ残基が、げっ歯類抗体の類似部位由来の残
基で置換された、ヒト抗体部分である。
【0264】
ヒト化の代替として、ヒト抗体部分を生成してもよい。例えば、今では、免疫化によっ
て、内因性免疫グロブリンを産生せずにヒト抗体の完全なレパートリーを産生可能な、ト
ランスジェニック動物（例えば、マウス）の作製が可能である。例えば、キメラ及び生殖
細胞系変異マウスにおける抗体重鎖連結領域（ＪＨ）遺伝子のホモ接合性欠失により、内
在性抗体産生が完全に阻害されることが報告されている。ヒト生殖系免疫グロブリン遺伝
子アレイをこのような生殖系変異マウスに導入すると、抗原誘発によってヒト抗体が産生
する。例えば、Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ ｅｔ ａｌ．，ＰＮＡＳ ＵＳＡ，９０：２５５
１（１９９３）、Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３６２：２５５
－２５８（１９９３）、Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｙｅａｒ ｉｎ Ｉｍｍ
ｕｎｏｌ．，７：３３（１９９３）、米国特許第５，５４５，８０６号、同第５，５６９
，８２５号、同第５，５９１，６６９号、同第５，５４５，８０７、及びＷＯ ９７／１
７８５２を参照されたい。代替的に、ヒト免疫グロブリン遺伝子座を、内因性免疫グロブ
リン遺伝子が部分的に又は完全に不活性化されている、トランスジェニック動物、例えば
、マウスに導入することによって、ヒト抗体を作製できる。誘発時、遺伝子再配列、集合
、及び抗体レパートリーなどの全ての点において、ヒトで見られるものとよく似たヒト抗
体産生が観察される。このアプローチは、例えば、米国特許第５，５４５，８０７号、同
第５，５４５，８０６号、同第５，５６９，８２５号、同第５，６２５，１２６号、同第
５，６３３，４２５号、及び同第５，６６１，０１６号、並びにＭａｒｋｓ ｅｔ ａｌ
．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１０：７７９－７８３（１９９２）、Ｌｏｎｂｅｒ
ｇ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３６８：８５６－８５９（１９９４）、Ｍｏｒｒｉｓ
ｏｎ，Ｎａｔｕｒｅ ３６８：８１２－８１３（１９９４）、Ｆｉｓｈｗｉｌｄ ｅｔ
ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１４：８４５－８５１（１９９６）、Ｎ
ｅｕｂｅｒｇｅｒ，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ．１４：８２６（１９９
６）、Ｌｏｎｂｅｒｇ ａｎｄ Ｈｕｓｚａｒ，Ｉｎｔｅｒｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ
．，１３：６５－９３（１９９５）、に記載されている。
て、内因性免疫グロブリンを産生せずにヒト抗体の完全なレパートリーを産生可能な、ト
ランスジェニック動物（例えば、マウス）の作製が可能である。例えば、キメラ及び生殖
細胞系変異マウスにおける抗体重鎖連結領域（ＪＨ）遺伝子のホモ接合性欠失により、内
在性抗体産生が完全に阻害されることが報告されている。ヒト生殖系免疫グロブリン遺伝
子アレイをこのような生殖系変異マウスに導入すると、抗原誘発によってヒト抗体が産生
する。例えば、Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ ｅｔ ａｌ．，ＰＮＡＳ ＵＳＡ，９０：２５５
１（１９９３）、Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３６２：２５５
－２５８（１９９３）、Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｙｅａｒ ｉｎ Ｉｍｍ
ｕｎｏｌ．，７：３３（１９９３）、米国特許第５，５４５，８０６号、同第５，５６９
，８２５号、同第５，５９１，６６９号、同第５，５４５，８０７、及びＷＯ ９７／１
７８５２を参照されたい。代替的に、ヒト免疫グロブリン遺伝子座を、内因性免疫グロブ
リン遺伝子が部分的に又は完全に不活性化されている、トランスジェニック動物、例えば
、マウスに導入することによって、ヒト抗体を作製できる。誘発時、遺伝子再配列、集合
、及び抗体レパートリーなどの全ての点において、ヒトで見られるものとよく似たヒト抗
体産生が観察される。このアプローチは、例えば、米国特許第５，５４５，８０７号、同
第５，５４５，８０６号、同第５，５６９，８２５号、同第５，６２５，１２６号、同第
５，６３３，４２５号、及び同第５，６６１，０１６号、並びにＭａｒｋｓ ｅｔ ａｌ
．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１０：７７９－７８３（１９９２）、Ｌｏｎｂｅｒ
ｇ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３６８：８５６－８５９（１９９４）、Ｍｏｒｒｉｓ
ｏｎ，Ｎａｔｕｒｅ ３６８：８１２－８１３（１９９４）、Ｆｉｓｈｗｉｌｄ ｅｔ
ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１４：８４５－８５１（１９９６）、Ｎ
ｅｕｂｅｒｇｅｒ，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ．１４：８２６（１９９
６）、Ｌｏｎｂｅｒｇ ａｎｄ Ｈｕｓｚａｒ，Ｉｎｔｅｒｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ
．，１３：６５－９３（１９９５）、に記載されている。
【0265】
ヒト抗体はまた、インビトロ活性化Ｂ細胞（米国特許第５，５６７，６１０号及び同第
５，２２９，２７５号を参照されたい）によって、又はファージディスプレイライブラリ
ーを含む当該技術分野において既知の様々な技術を使用することによって生成されてもよ
い。Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ ａｎｄ Ｗｉｎｔｅｒ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２７：
３８１（１９９１）、Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２２：５
８１（１９９１）。Ｃｏｌｅ ｅｔ ａｌ．及びＢｏｅｒｎｅｒ ｅｔ ａｌ．の技術も
また、ヒトモノクローナル抗体の調製に利用可能である。Ｃｏｌｅ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏ
ｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ，Ａ
ｌａｎ Ｒ．Ｌｉｓｓ，ｐ．７７（１９８５）及びＢｏｅｒｎｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．
Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４７（１）：８６－９５（１９９１）。
追加の変異型
５，２２９，２７５号を参照されたい）によって、又はファージディスプレイライブラリ
ーを含む当該技術分野において既知の様々な技術を使用することによって生成されてもよ
い。Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ ａｎｄ Ｗｉｎｔｅｒ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２７：
３８１（１９９１）、Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２２：５
８１（１９９１）。Ｃｏｌｅ ｅｔ ａｌ．及びＢｏｅｒｎｅｒ ｅｔ ａｌ．の技術も
また、ヒトモノクローナル抗体の調製に利用可能である。Ｃｏｌｅ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏ
ｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ，Ａ
ｌａｎ Ｒ．Ｌｉｓｓ，ｐ．７７（１９８５）及びＢｏｅｒｎｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．
Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４７（１）：８６－９５（１９９１）。
追加の変異型
【0266】
いくつかの実施形態では、本明細書で提供される抗原結合モジュールのアミノ酸配列変
異型が想到される。例えば、これは、抗原結合モジュールの結合親和性及び／又はその他
生物学的特性を改善するのに望ましい場合がある。抗原結合モジュールのアミノ酸配列変
異型は、抗原結合モジュールをコードするヌクレオチド配列に適切な改変を導入すること
によって、又はペプチド合成によって調製することができる。このような改変として、例
えば、抗原結合モジュールのアミノ酸配列内の残基の、欠失及び／又は挿入及び／又は置
換が挙げられる。最終構築物が所望の特性、例えば抗原結合を有することを条件として、
欠失、挿入、及び置換のいずれかの組み合わせを施して最終構築物に到達させることがで
きる。
異型が想到される。例えば、これは、抗原結合モジュールの結合親和性及び／又はその他
生物学的特性を改善するのに望ましい場合がある。抗原結合モジュールのアミノ酸配列変
異型は、抗原結合モジュールをコードするヌクレオチド配列に適切な改変を導入すること
によって、又はペプチド合成によって調製することができる。このような改変として、例
えば、抗原結合モジュールのアミノ酸配列内の残基の、欠失及び／又は挿入及び／又は置
換が挙げられる。最終構築物が所望の特性、例えば抗原結合を有することを条件として、
欠失、挿入、及び置換のいずれかの組み合わせを施して最終構築物に到達させることがで
きる。
【0267】
いくつかの実施形態では、１つ以上のアミノ酸置換を有する抗原結合モジュール変異型
が提供される。置換変異導入の目的の部位としては、抗体部分のＨＶＲ及びＦＲが挙げら
れる。アミノ酸置換は、目的の抗原結合モジュールに導入してもよく、生成物は、所望の
活性、例えば、保持／改善された抗原結合又は減少した免疫原性についてスクリーニング
される。
が提供される。置換変異導入の目的の部位としては、抗体部分のＨＶＲ及びＦＲが挙げら
れる。アミノ酸置換は、目的の抗原結合モジュールに導入してもよく、生成物は、所望の
活性、例えば、保持／改善された抗原結合又は減少した免疫原性についてスクリーニング
される。
【0268】
保存的置換を以下の表４に示す。
【表4】
【0269】
アミノ酸は、共通の側鎖特性に従って異なるクラスに分類され得る。
ａ．疎水性：ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ；
ｂ．中性親水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ；
ｃ．酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ；
ｄ．塩基性：Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ；
ｅ．鎖の配向に影響を与える残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ；
ｆ．芳香族：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ。
ａ．疎水性：ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ；
ｂ．中性親水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ；
ｃ．酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ；
ｄ．塩基性：Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ；
ｅ．鎖の配向に影響を与える残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ；
ｆ．芳香族：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ。
【0270】
非保存的置換は、これらの分類のうち１つを別の分類のものに交換することを伴う。
【0271】
例示的な置換変異型は、親和性成熟抗体部分であり、例えば、ファージディスプレイベ
ースの親和性成熟技術を使用して都合よく生成することができる。簡潔に述べると、１つ
以上のＣＤＲ残基が変異しており、ファージに提示される変異型抗体部分は、特定の生物
活性（例えば、結合親和性）についてスクリーニングされる。例えば、抗体部分親和性を
改善するために、改変（例えば、置換）をＨＶＲ中でなすことができる。このような改変
は、ＨＶＲ「ホットスポット」、すなわち、体細胞成熟プロセス中に高頻度で変異を受け
るコドンによってコードされる残基（例えば、Ｃｈｏｗｄｈｕｒｙ，Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍ
ｏｌ．Ｂｉｏｌ．２０７：１７９－１９６（２００８）を参照されたい）、及び／又は特
異性決定残基（ＳＤＲ）によってなされ、得られた変異型ＶＨ又はＶＬが結合親和性につ
いて試験される。二次ライブラリーを構築及び再選択することによる親和性成熟は、例え
ば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ ｅｔ ａｌ．ｉｎ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌ
ａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ １７８：１－３７（Ｏ’Ｂｒｉｅｎ ｅｔ ａｌ．，ｅｄ．，Ｈ
ｕｍａｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，（２００１））に記載されている。
ースの親和性成熟技術を使用して都合よく生成することができる。簡潔に述べると、１つ
以上のＣＤＲ残基が変異しており、ファージに提示される変異型抗体部分は、特定の生物
活性（例えば、結合親和性）についてスクリーニングされる。例えば、抗体部分親和性を
改善するために、改変（例えば、置換）をＨＶＲ中でなすことができる。このような改変
は、ＨＶＲ「ホットスポット」、すなわち、体細胞成熟プロセス中に高頻度で変異を受け
るコドンによってコードされる残基（例えば、Ｃｈｏｗｄｈｕｒｙ，Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍ
ｏｌ．Ｂｉｏｌ．２０７：１７９－１９６（２００８）を参照されたい）、及び／又は特
異性決定残基（ＳＤＲ）によってなされ、得られた変異型ＶＨ又はＶＬが結合親和性につ
いて試験される。二次ライブラリーを構築及び再選択することによる親和性成熟は、例え
ば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ ｅｔ ａｌ．ｉｎ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌ
ａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ １７８：１－３７（Ｏ’Ｂｒｉｅｎ ｅｔ ａｌ．，ｅｄ．，Ｈ
ｕｍａｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，（２００１））に記載されている。
【0272】
親和性成熟のいくつかの実施形態では、多様性は、多様な方法（例えば、エラー発生Ｐ
ＣＲ、鎖シャッフル、又はオリゴヌクレオチド指向変異導入）のいずれかによって成熟す
るために選択された可変遺伝子に導入される。次いで、二次ライブラリーが作製される。
次いで、ライブラリーをスクリーニングして、所望の親和性を有する任意の抗体部分変異
型を同定する。多様性を導入する別の方法は、いくつかのＨＶＲ残基（例えば、一度に４
～６残基）がランダム化される、ＨＶＲ指向性アプローチを伴う。抗原結合に関与するＨ
ＶＲ残基は、例えば、アラニンスキャニング変異導入又はモデリングを用いて特異的に同
定され得る。ＣＤＲ－Ｈ３及びＣＤＲ－Ｌ３は、特に標的化されることが多い。
ＣＲ、鎖シャッフル、又はオリゴヌクレオチド指向変異導入）のいずれかによって成熟す
るために選択された可変遺伝子に導入される。次いで、二次ライブラリーが作製される。
次いで、ライブラリーをスクリーニングして、所望の親和性を有する任意の抗体部分変異
型を同定する。多様性を導入する別の方法は、いくつかのＨＶＲ残基（例えば、一度に４
～６残基）がランダム化される、ＨＶＲ指向性アプローチを伴う。抗原結合に関与するＨ
ＶＲ残基は、例えば、アラニンスキャニング変異導入又はモデリングを用いて特異的に同
定され得る。ＣＤＲ－Ｈ３及びＣＤＲ－Ｌ３は、特に標的化されることが多い。
【0273】
いくつかの実施形態では、置換、挿入、又は欠失は、そのような改変が抗体部分の抗原
に結合する能力を実質的に低下させない限り、１つ以上のＨＶＲ内で生じてもよい。例え
ば、結合親和性を実質的に低下させない保存的改変（例えば、本明細書で提供される保存
的置換）は、ＨＶＲにおいて行われてもよい。このような改変は、ＨＶＲ「ホットスポッ
ト」又はＳＤＲの外側にあってもよい。上記に提供された変異型ＶＨ及びＶＬ配列のいく
つかの実施形態では、各ＨＶＲは、変更されていないか、又は１つ以下、２つ又は３つ以
下のアミノ酸置換を含む。
に結合する能力を実質的に低下させない限り、１つ以上のＨＶＲ内で生じてもよい。例え
ば、結合親和性を実質的に低下させない保存的改変（例えば、本明細書で提供される保存
的置換）は、ＨＶＲにおいて行われてもよい。このような改変は、ＨＶＲ「ホットスポッ
ト」又はＳＤＲの外側にあってもよい。上記に提供された変異型ＶＨ及びＶＬ配列のいく
つかの実施形態では、各ＨＶＲは、変更されていないか、又は１つ以下、２つ又は３つ以
下のアミノ酸置換を含む。
【0274】
変異導入の標的となり得る抗原結合モジュールの残基又は領域の同定のための有用な方
法は、「アラニンスキャニング変異導入」と呼ばれ、Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍ ａｎｄ Ｗ
ｅｌｌｓ Ｓｃｉｅｎｃｅ，２４４：１０８１－１０８５（１９８９）に記載されている
。この方法では、標的残基の１つ又は群の残基（例えば、ａｒｇ、ａｓｐ、ｈｉｓ、ｌｙ
ｓ、及びｇｌｕなどの荷電残基）が同定され、中性又は負荷電アミノ酸（例えば、アラニ
ン又はポリアラニン）で置換されて、抗原結合モジュールの抗原との相互作用に影響を及
ぼすかどうかを判定する。更なる置換は、初期置換に対する機能的感受性を示すアミノ酸
位置に導入されてもよい。代替的に、又はそれに加えて、抗原抗原結合モジュール複合体
の結晶構造を決定して、抗原結合モジュールと抗原との間の接触点を同定することができ
る。このような接触残基及び隣接する残基は、置換の候補として標的化又は排除され得る
。変異型をスクリーニングして、所望の特性を含むかどうかを判定することができる。
法は、「アラニンスキャニング変異導入」と呼ばれ、Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍ ａｎｄ Ｗ
ｅｌｌｓ Ｓｃｉｅｎｃｅ，２４４：１０８１－１０８５（１９８９）に記載されている
。この方法では、標的残基の１つ又は群の残基（例えば、ａｒｇ、ａｓｐ、ｈｉｓ、ｌｙ
ｓ、及びｇｌｕなどの荷電残基）が同定され、中性又は負荷電アミノ酸（例えば、アラニ
ン又はポリアラニン）で置換されて、抗原結合モジュールの抗原との相互作用に影響を及
ぼすかどうかを判定する。更なる置換は、初期置換に対する機能的感受性を示すアミノ酸
位置に導入されてもよい。代替的に、又はそれに加えて、抗原抗原結合モジュール複合体
の結晶構造を決定して、抗原結合モジュールと抗原との間の接触点を同定することができ
る。このような接触残基及び隣接する残基は、置換の候補として標的化又は排除され得る
。変異型をスクリーニングして、所望の特性を含むかどうかを判定することができる。
【0275】
アミノ酸配列挿入として、１つの残基から１００以上の残基を含むポリペプチドまでの
長さの範囲の、アミノ及び／又はカルボキシル末端融合、並びに、単一若しくは複数のア
ミノ酸残基の配列内挿入が挙げられる。末端挿入の例としては、Ｎ末端メチオニル残基を
有する抗原結合モジュールが挙げられる。抗原結合モジュールのその他の挿入変異体とし
て、酵素に対する抗原結合モジュールのＮ末端若しくはＣ末端への融合（例えば、ＡＤＥ
ＰＴのために）又は、抗原結合モジュールの血清半減期を延長するポリペプチドが挙げら
れる。
誘導体
長さの範囲の、アミノ及び／又はカルボキシル末端融合、並びに、単一若しくは複数のア
ミノ酸残基の配列内挿入が挙げられる。末端挿入の例としては、Ｎ末端メチオニル残基を
有する抗原結合モジュールが挙げられる。抗原結合モジュールのその他の挿入変異体とし
て、酵素に対する抗原結合モジュールのＮ末端若しくはＣ末端への融合（例えば、ＡＤＥ
ＰＴのために）又は、抗原結合モジュールの血清半減期を延長するポリペプチドが挙げら
れる。
誘導体
【0276】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲのいずれかによるｃａＴＣＲ及
び／又は本明細書に記載のＣＳＲのいずれかによるＣＳＲ及び／又は本明細書に記載のＳ
ＳＥのいずれかによるＳＳＥは、当該技術分野において既知であり、容易に入手可能な更
なる非タンパク質性部分を含むように更に改変されてもよい。ｃａＴＣＲ及び／又はＣＳ
Ｒ及び／又はＳＳＥの誘導体化に適切な部分としては、水溶性ポリマーが挙げられるが、
これらに限定されない。水溶性ポリマーの非限定例として、ポリエチレングリコール（Ｐ
ＥＧ）、エチレングリコール／プロピレングリコールのコポリマー、カルボキシメチルセ
ルロース、デキストラン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリ－１，３
－ジオキソラン、ポリ－１，３，６－トリオキサン、エチレン／無水マレイン酸コポリマ
ー、ポリアミノ酸（ホモポリマー又はランダムコポリマーのいずれか）、及びデキストラ
ン又はポリ（ｎ－ビニルピロリドン）ポリエチレングリコール、プロプロピレングリコー
ルホモポリマー、プロリプロピレンオキシド／エチレンオキシドコポリマー、ポリオキシ
エチル化ポリオール（例えば、グリセロール）、ポリビニルアルコール、及びそれらの混
合物が挙げられるが、これらに限定されない。ポリエチレングリコールプロピオンアルデ
ヒドは、その水中安定性から、製造における利点を有し得る。ポリマーは、任意の分子量
であってよく、分枝型又は非分枝型であってよい。ｃａＴＣＲ及び／又はＣＳＲ及び／又
はＳＳＥに付加されたポリマー数は可変であり、２種類以上のポリマーが付加されている
場合、それらは同一分子であっても異なる分子であっていてもよい。一般に、誘導体化に
使用されるポリマーの数及び／又は種類は、改善するｃａＴＣＲ及び／又はＣＳＲ及び／
又はＳＳＥの特定の特性又は機能が挙げられるが、これらに限定されない点、ｃａＴＣＲ
及び／又はＣＳＲ及び／又はＳＳＥの誘導体を特定の条件下での治療に使用するか、など
に基づいて決定できる。
び／又は本明細書に記載のＣＳＲのいずれかによるＣＳＲ及び／又は本明細書に記載のＳ
ＳＥのいずれかによるＳＳＥは、当該技術分野において既知であり、容易に入手可能な更
なる非タンパク質性部分を含むように更に改変されてもよい。ｃａＴＣＲ及び／又はＣＳ
Ｒ及び／又はＳＳＥの誘導体化に適切な部分としては、水溶性ポリマーが挙げられるが、
これらに限定されない。水溶性ポリマーの非限定例として、ポリエチレングリコール（Ｐ
ＥＧ）、エチレングリコール／プロピレングリコールのコポリマー、カルボキシメチルセ
ルロース、デキストラン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリ－１，３
－ジオキソラン、ポリ－１，３，６－トリオキサン、エチレン／無水マレイン酸コポリマ
ー、ポリアミノ酸（ホモポリマー又はランダムコポリマーのいずれか）、及びデキストラ
ン又はポリ（ｎ－ビニルピロリドン）ポリエチレングリコール、プロプロピレングリコー
ルホモポリマー、プロリプロピレンオキシド／エチレンオキシドコポリマー、ポリオキシ
エチル化ポリオール（例えば、グリセロール）、ポリビニルアルコール、及びそれらの混
合物が挙げられるが、これらに限定されない。ポリエチレングリコールプロピオンアルデ
ヒドは、その水中安定性から、製造における利点を有し得る。ポリマーは、任意の分子量
であってよく、分枝型又は非分枝型であってよい。ｃａＴＣＲ及び／又はＣＳＲ及び／又
はＳＳＥに付加されたポリマー数は可変であり、２種類以上のポリマーが付加されている
場合、それらは同一分子であっても異なる分子であっていてもよい。一般に、誘導体化に
使用されるポリマーの数及び／又は種類は、改善するｃａＴＣＲ及び／又はＣＳＲ及び／
又はＳＳＥの特定の特性又は機能が挙げられるが、これらに限定されない点、ｃａＴＣＲ
及び／又はＣＳＲ及び／又はＳＳＥの誘導体を特定の条件下での治療に使用するか、など
に基づいて決定できる。
【0277】
いくつかの実施形態では、放射線への曝露によって選択的に加熱され得るｃａＴＣＲ及
び／又はＣＳＲ及び／又はＳＳＥ並びに非タンパク質性部分のコンジュゲートが提供され
る。いくつかの実施形態では、非タンパク質性部分は、カーボンナノチューブである（Ｋ
ａｍ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ １０２：１１６
００－１１６０５（２００５））。放射線は、任意の波長のものであってもよく、通常の
細胞を害しないが、非タンパク質性部分を、ｃａＴＣＲ－及び／又はＣＳＲ－及び／又は
ＳＳＥの非タンパク質性部分の近位の細胞が殺傷される温度まで非タンパク質性部分を加
熱するものが挙げられるが、これらに限定されない。
ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の調製
び／又はＣＳＲ及び／又はＳＳＥ並びに非タンパク質性部分のコンジュゲートが提供され
る。いくつかの実施形態では、非タンパク質性部分は、カーボンナノチューブである（Ｋ
ａｍ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ １０２：１１６
００－１１６０５（２００５））。放射線は、任意の波長のものであってもよく、通常の
細胞を害しないが、非タンパク質性部分を、ｃａＴＣＲ－及び／又はＣＳＲ－及び／又は
ＳＳＥの非タンパク質性部分の近位の細胞が殺傷される温度まで非タンパク質性部分を加
熱するものが挙げられるが、これらに限定されない。
ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の調製
【0278】
一態様では、本発明は、本明細書に記載される実施形態のいずれかによるｃａＴＣＲ及
びＣＳＲを発現する免疫細胞（例えば、リンパ球、例えばＴ細胞）を提供する。ｃａＴＣ
Ｒ及びＣＳＲ（ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ Ｔ細胞などのｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞）を発現
する免疫細胞（Ｔ細胞など）を調製する例示的な方法が、本明細書で提供される。
びＣＳＲを発現する免疫細胞（例えば、リンパ球、例えばＴ細胞）を提供する。ｃａＴＣ
Ｒ及びＣＳＲ（ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ Ｔ細胞などのｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞）を発現
する免疫細胞（Ｔ細胞など）を調製する例示的な方法が、本明細書で提供される。
【0279】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞（ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ Ｔ細胞
など）は、標的抗原（疾患関連抗原など）に特異的に結合するｃａＴＣＲ（本明細書に記
載されるｃａＴＣＲのいずれかなど）、及び標的リガンドに特異的に結合するＣＳＲ（本
明細書に記載されるＣＳＲのいずれかなど）をコードする１つ以上の核酸（例えば、レン
チウイルスベクターを含む）を免疫細胞に導入することによって生成することができる。
１つ以上の核酸を免疫細胞に導入することは、核酸について本明細書に記載される技術な
ど、当該技術分野において既知の技術を使用して達成することができる。いくつかの実施
形態では、本発明のｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞（ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ Ｔ細胞など）は
、インビボで複製することができ、その結果、標的抗原の発現に関連する疾患（がん又は
ウイルス感染など）の持続的な制御をもたらし得る長期持続性をもたらし得る。
など）は、標的抗原（疾患関連抗原など）に特異的に結合するｃａＴＣＲ（本明細書に記
載されるｃａＴＣＲのいずれかなど）、及び標的リガンドに特異的に結合するＣＳＲ（本
明細書に記載されるＣＳＲのいずれかなど）をコードする１つ以上の核酸（例えば、レン
チウイルスベクターを含む）を免疫細胞に導入することによって生成することができる。
１つ以上の核酸を免疫細胞に導入することは、核酸について本明細書に記載される技術な
ど、当該技術分野において既知の技術を使用して達成することができる。いくつかの実施
形態では、本発明のｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞（ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ Ｔ細胞など）は
、インビボで複製することができ、その結果、標的抗原の発現に関連する疾患（がん又は
ウイルス感染など）の持続的な制御をもたらし得る長期持続性をもたらし得る。
【0280】
いくつかの実施形態では、本発明は、本明細書に記載のｃａＴＣＲのいずれかによる標
的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲ、及び本明細書に記載のＣＳＲのいずれかによる標
的リガンドに特異的に結合するＣＳＲを発現する、遺伝子改変Ｔ細胞を、例えば、リンパ
球注入を使用するがん又はウイルス感染を含む、標的抗原の発現と関連する疾患及び／又
は障害（本明細書では、「標的抗原陽性」又は「ＴＡ陽性」疾患又は障害とも称される）
を有するか、発症するリスクがある患者の治療のために投与することに関連する。いくつ
かの実施形態では、自己リンパ球注入は、治療に使用される。自己ＰＢＭＣは、治療を必
要とする患者から収集され、Ｔ細胞は、本明細書に記載され、当該技術分野において既知
の方法を使用して活性化及び増殖され、次いで患者に注入される。
的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲ、及び本明細書に記載のＣＳＲのいずれかによる標
的リガンドに特異的に結合するＣＳＲを発現する、遺伝子改変Ｔ細胞を、例えば、リンパ
球注入を使用するがん又はウイルス感染を含む、標的抗原の発現と関連する疾患及び／又
は障害（本明細書では、「標的抗原陽性」又は「ＴＡ陽性」疾患又は障害とも称される）
を有するか、発症するリスクがある患者の治療のために投与することに関連する。いくつ
かの実施形態では、自己リンパ球注入は、治療に使用される。自己ＰＢＭＣは、治療を必
要とする患者から収集され、Ｔ細胞は、本明細書に記載され、当該技術分野において既知
の方法を使用して活性化及び増殖され、次いで患者に注入される。
【0281】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲのいずれかによる標的抗原に特
異的に結合するｃａＴＣＲ、及び本明細書に記載のＣＳＲのいずれかによる標的リガンド
に特異的に結合するＣＳＲを発現する、Ｔ細胞（本明細書では「ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ Ｔ
細胞」とも称される）が提供される。本発明のｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ Ｔ細胞は、ロバスト
なインビボＴ細胞増殖を受けることができ、血液及び骨髄中で長期間にわたって高レベル
で持続する標的抗原特異的メモリー細胞を確立することができる。いくつかの実施形態で
は、患者に注入された本発明のｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ Ｔ細胞は、標的抗原関連疾患を有す
る患者において、インビボで、標的抗原提示細胞、例えば、標的抗原提示がん又はウイル
ス感染細胞を排除することができる。いくつかの実施形態では、患者に注入された本発明
のｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ Ｔ細胞は、少なくとも１つの従来の治療に難治性である標的抗原
関連疾患を有する患者において、インビボで、標的抗原提示細胞、例えば、標的抗原提示
がん又はウイルス感染細胞を排除することができる。
異的に結合するｃａＴＣＲ、及び本明細書に記載のＣＳＲのいずれかによる標的リガンド
に特異的に結合するＣＳＲを発現する、Ｔ細胞（本明細書では「ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ Ｔ
細胞」とも称される）が提供される。本発明のｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ Ｔ細胞は、ロバスト
なインビボＴ細胞増殖を受けることができ、血液及び骨髄中で長期間にわたって高レベル
で持続する標的抗原特異的メモリー細胞を確立することができる。いくつかの実施形態で
は、患者に注入された本発明のｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ Ｔ細胞は、標的抗原関連疾患を有す
る患者において、インビボで、標的抗原提示細胞、例えば、標的抗原提示がん又はウイル
ス感染細胞を排除することができる。いくつかの実施形態では、患者に注入された本発明
のｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ Ｔ細胞は、少なくとも１つの従来の治療に難治性である標的抗原
関連疾患を有する患者において、インビボで、標的抗原提示細胞、例えば、標的抗原提示
がん又はウイルス感染細胞を排除することができる。
【0282】
Ｔ細胞の増殖及び遺伝子改変の前に、Ｔ細胞源は対象から得られる。Ｔ細胞は、末梢血
単核細胞、骨髄、リンパ節組織、臍帯血、胸腺組織、感染部位からの組織、腹膜、胸膜滲
出液、脾臓組織、及び腫瘍を含む多数の供給源から得ることができる。本発明のいくつか
の実施形態では、当該技術分野において利用可能な任意の数のＴ細胞株を使用することが
できる。本発明のいくつかの実施形態では、Ｔ細胞は、ＦＩＣＯＬＬ（商標）分離などの
当業者に既知の任意の数の技術を使用して、対象から採取された血液の単位から得ること
ができる。いくつかの実施形態では、個体の循環血液からの細胞は、アフェレーシスによ
って得られる。アフェレーシス生成物は、典型的には、Ｔ細胞、単球、顆粒球、Ｂ細胞、
他の有核白血球、赤血球、及び血小板を含むリンパ球を含む。いくつかの実施形態では、
アフェレーシスによって収集された細胞を洗浄して血漿画分を除去し、後続の処理工程の
ために適切な緩衝液又は培地に細胞を配置することができる。いくつかの実施形態では、
細胞はリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で洗浄される。いくつかの実施形態では、洗浄溶
液はカルシウムを含まず、マグネシウムを含まなくてもよく、又は二価カチオンが全く存
在しない場合には多く存在しなくてもよい。当業者であれば容易に理解するように、洗浄
工程は、製造業者の説明書に従って、半自動化「フロースルー」遠心分離器（例えば、Ｃ
ｏｂｅ ２９９１ ｃｅｌｌ ｐｒｏｃｅｓｓｏｒ，ｔｈｅ Ｂａｘｔｅｒ ＣｙｔｏＭ
ａｔｅ，ｏｒ ｔｈｅ Ｈａｅｍｏｎｅｔｉｃｓ Ｃｅｌｌ Ｓａｖｅｒ ５）を使用す
ることによるなどの、当該技術分野において既知の方法によって達成され得る。洗浄後、
細胞は、Ｃａ２＋フリー、Ｍｇ２＋フリーＰＢＳ、ＰｌａｓｍａＬｙｔｅ Ａ、又は緩衝
剤を有する又は有さない他の生理食塩水溶液などの様々な生体適合性緩衝液中に再懸濁さ
れてもよい。あるいは、アフェレーシス試料の望ましくない成分を除去し、細胞を培養培
地に直接再懸濁させてもよい。
単核細胞、骨髄、リンパ節組織、臍帯血、胸腺組織、感染部位からの組織、腹膜、胸膜滲
出液、脾臓組織、及び腫瘍を含む多数の供給源から得ることができる。本発明のいくつか
の実施形態では、当該技術分野において利用可能な任意の数のＴ細胞株を使用することが
できる。本発明のいくつかの実施形態では、Ｔ細胞は、ＦＩＣＯＬＬ（商標）分離などの
当業者に既知の任意の数の技術を使用して、対象から採取された血液の単位から得ること
ができる。いくつかの実施形態では、個体の循環血液からの細胞は、アフェレーシスによ
って得られる。アフェレーシス生成物は、典型的には、Ｔ細胞、単球、顆粒球、Ｂ細胞、
他の有核白血球、赤血球、及び血小板を含むリンパ球を含む。いくつかの実施形態では、
アフェレーシスによって収集された細胞を洗浄して血漿画分を除去し、後続の処理工程の
ために適切な緩衝液又は培地に細胞を配置することができる。いくつかの実施形態では、
細胞はリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で洗浄される。いくつかの実施形態では、洗浄溶
液はカルシウムを含まず、マグネシウムを含まなくてもよく、又は二価カチオンが全く存
在しない場合には多く存在しなくてもよい。当業者であれば容易に理解するように、洗浄
工程は、製造業者の説明書に従って、半自動化「フロースルー」遠心分離器（例えば、Ｃ
ｏｂｅ ２９９１ ｃｅｌｌ ｐｒｏｃｅｓｓｏｒ，ｔｈｅ Ｂａｘｔｅｒ ＣｙｔｏＭ
ａｔｅ，ｏｒ ｔｈｅ Ｈａｅｍｏｎｅｔｉｃｓ Ｃｅｌｌ Ｓａｖｅｒ ５）を使用す
ることによるなどの、当該技術分野において既知の方法によって達成され得る。洗浄後、
細胞は、Ｃａ２＋フリー、Ｍｇ２＋フリーＰＢＳ、ＰｌａｓｍａＬｙｔｅ Ａ、又は緩衝
剤を有する又は有さない他の生理食塩水溶液などの様々な生体適合性緩衝液中に再懸濁さ
れてもよい。あるいは、アフェレーシス試料の望ましくない成分を除去し、細胞を培養培
地に直接再懸濁させてもよい。
【0283】
いくつかの実施形態では、Ｔ細胞は、赤血球を溶解し、単球を枯渇させることにより、
例えばＰＥＲＣＯＬＬ（商標）勾配による遠心分離、又は遠心分離エルトリエーションに
よる遠心分離によって単球を枯渇させることにより、末梢血リンパ球から単離される。Ｃ
Ｄ３＋、ＣＤ２８＋、ＣＤ４＋、ＣＤ８＋、ＣＤ４５ＲＡ＋、及びＣＤ４５ＲＯ＋Ｔ細胞
などのＴ細胞の特定の亜集団は、陽性又は陰性選択技術によって更に単離され得る。例え
ば、いくつかの実施形態では、Ｔ細胞は、所望のＴ細胞を陽性選択するのに十分な時間に
わたって、ＤＹＮＡＢＥＡＤＳ（登録商標）Ｍ－４５０ ＣＤ３／ＣＤ２８ Ｔなどの抗
ＣＤ３／抗ＣＤ２８（すなわち、３×２８）コンジュゲートビーズとのインキュベーショ
ンによって、単離される。いくつかの実施形態では、期間は約３０分である。いくつかの
実施形態では、期間は、３０分～３６時間又はそれ以上（これらの値間の全ての範囲を含
む）の範囲である。いくつかの実施形態では、期間は、少なくとも１、２、３、４、５、
又は６時間である。いくつかの実施形態では、期間は、１０～２４時間である。いくつか
の実施形態では、インキュベーション時間は２４時間である。白血病患者からＴ細胞を単
離するために、２４時間などのより長いインキュベーション時間の使用は、細胞収量を増
加させることができる。腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）を腫瘍組織又は免疫不全個体から単
離する際など、他の細胞型と比較してＴ細胞が少ない状況で、Ｔ細胞を単離するために、
より長いインキュベーション時間を使用することができる。更に、より長いインキュベー
ション時間の使用は、ＣＤ８＋Ｔ細胞の捕捉効率を高めることができる。したがって、単
に時間を短縮又は延長することによって、Ｔ細胞をＣＤ３／ＣＤ２８ビーズに結合させる
ことができ、及び／又は、Ｔ細胞に対するビーズの比を増加若しくは減少させることによ
って、Ｔ細胞の亜集団は、培養開始のために、若しくは培養開始時に、又はプロセス中の
他の時点で優先的に選択することができる。加えて、ビーズ又は他の表面上の抗ＣＤ３抗
体及び／又は抗ＣＤ２８抗体の比を増加又は減少させることによって、Ｔ細胞の亜集団は
、培養開始のために、若しくは培養開始時に、又は他の所望の時点で、又はそれに対して
優先的に選択することができる。当業者であれば、本発明の文脈において、複数ラウンド
の選択も使用できることを認識するであろう。いくつかの実施形態では、選択手順を実行
し、活性化及び増殖プロセスにおいて「非選択」細胞を使用することが望ましい場合があ
る。「非選択」細胞はまた、選択の更なるラウンドに供され得る。
例えばＰＥＲＣＯＬＬ（商標）勾配による遠心分離、又は遠心分離エルトリエーションに
よる遠心分離によって単球を枯渇させることにより、末梢血リンパ球から単離される。Ｃ
Ｄ３＋、ＣＤ２８＋、ＣＤ４＋、ＣＤ８＋、ＣＤ４５ＲＡ＋、及びＣＤ４５ＲＯ＋Ｔ細胞
などのＴ細胞の特定の亜集団は、陽性又は陰性選択技術によって更に単離され得る。例え
ば、いくつかの実施形態では、Ｔ細胞は、所望のＴ細胞を陽性選択するのに十分な時間に
わたって、ＤＹＮＡＢＥＡＤＳ（登録商標）Ｍ－４５０ ＣＤ３／ＣＤ２８ Ｔなどの抗
ＣＤ３／抗ＣＤ２８（すなわち、３×２８）コンジュゲートビーズとのインキュベーショ
ンによって、単離される。いくつかの実施形態では、期間は約３０分である。いくつかの
実施形態では、期間は、３０分～３６時間又はそれ以上（これらの値間の全ての範囲を含
む）の範囲である。いくつかの実施形態では、期間は、少なくとも１、２、３、４、５、
又は６時間である。いくつかの実施形態では、期間は、１０～２４時間である。いくつか
の実施形態では、インキュベーション時間は２４時間である。白血病患者からＴ細胞を単
離するために、２４時間などのより長いインキュベーション時間の使用は、細胞収量を増
加させることができる。腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）を腫瘍組織又は免疫不全個体から単
離する際など、他の細胞型と比較してＴ細胞が少ない状況で、Ｔ細胞を単離するために、
より長いインキュベーション時間を使用することができる。更に、より長いインキュベー
ション時間の使用は、ＣＤ８＋Ｔ細胞の捕捉効率を高めることができる。したがって、単
に時間を短縮又は延長することによって、Ｔ細胞をＣＤ３／ＣＤ２８ビーズに結合させる
ことができ、及び／又は、Ｔ細胞に対するビーズの比を増加若しくは減少させることによ
って、Ｔ細胞の亜集団は、培養開始のために、若しくは培養開始時に、又はプロセス中の
他の時点で優先的に選択することができる。加えて、ビーズ又は他の表面上の抗ＣＤ３抗
体及び／又は抗ＣＤ２８抗体の比を増加又は減少させることによって、Ｔ細胞の亜集団は
、培養開始のために、若しくは培養開始時に、又は他の所望の時点で、又はそれに対して
優先的に選択することができる。当業者であれば、本発明の文脈において、複数ラウンド
の選択も使用できることを認識するであろう。いくつかの実施形態では、選択手順を実行
し、活性化及び増殖プロセスにおいて「非選択」細胞を使用することが望ましい場合があ
る。「非選択」細胞はまた、選択の更なるラウンドに供され得る。
【0284】
陰性選択によるＴ細胞集団の濃縮は、陰性選択された細胞に固有の表面マーカーに対す
る抗体の組み合わせで達成することができる。１つの方法は、負に選択された細胞上に存
在する細胞表面マーカーに対するモノクローナル抗体のカクテルを使用する、陰性磁気免
疫接着又はフローサイトメトリーによる細胞選別及び／又は選択である。例えば、陰性選
択によってＣＤ４＋細胞を濃縮するために、モノクローナル抗体カクテルは、典型的には
、ＣＤ１４、ＣＤ２０、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１６、ＨＬＡ－ＤＲ、及びＣＤ８βに対する抗
体を含む。いくつかの実施形態では、典型的には、ＣＤ４＋、ＣＤ２５＋、ＣＤ６２Ｌｈ
ｉ、ＧＩＴＲ＋、及びＦｏｘＰ３＋を発現する制御性Ｔ細胞を濃縮又は陽性選択すること
が望ましい場合がある。代替的に、いくつかの実施形態では、制御性Ｔ細胞は、抗ＣＤ２
５コンジュゲートビーズ又は他の同様の選択方法によって枯渇される。
る抗体の組み合わせで達成することができる。１つの方法は、負に選択された細胞上に存
在する細胞表面マーカーに対するモノクローナル抗体のカクテルを使用する、陰性磁気免
疫接着又はフローサイトメトリーによる細胞選別及び／又は選択である。例えば、陰性選
択によってＣＤ４＋細胞を濃縮するために、モノクローナル抗体カクテルは、典型的には
、ＣＤ１４、ＣＤ２０、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１６、ＨＬＡ－ＤＲ、及びＣＤ８βに対する抗
体を含む。いくつかの実施形態では、典型的には、ＣＤ４＋、ＣＤ２５＋、ＣＤ６２Ｌｈ
ｉ、ＧＩＴＲ＋、及びＦｏｘＰ３＋を発現する制御性Ｔ細胞を濃縮又は陽性選択すること
が望ましい場合がある。代替的に、いくつかの実施形態では、制御性Ｔ細胞は、抗ＣＤ２
５コンジュゲートビーズ又は他の同様の選択方法によって枯渇される。
【0285】
陽性又は陰性選択による細胞の所望の集団の単離のために、細胞及び表面（例えば、ビ
ーズなどの粒子）の濃度を変化させることができる。いくつかの実施形態では、細胞及び
ビーズの最大接触を確実にするために、ビーズ及び細胞が一緒に混合される体積を著しく
減少させる（すなわち、細胞の濃度を増加させる）ことが望ましい場合がある。例えば、
いくつかの実施形態では、約２０億個の細胞／ｍｌの濃度が使用される。いくつかの実施
形態では、約１０億個の細胞／ｍｌの濃度が使用される。いくつかの実施形態では、約１
億個の細胞／ｍｌより多いものが使用される。いくつかの実施形態では、約１０００万、
１５００万、２０００万、２５００万、３０００万、３５００万、４０００万、４５００
万、又は５０００万個の細胞／ｍｌの細胞の濃度が使用される。いくつかの実施形態では
、約７５００万、８０００万、８５００万、９０００万、９５００万、又は１億個の細胞
／ｍｌの細胞の濃度が使用される。いくつかの実施形態では、約１億２５００万又は約１
億５０００万個の細胞／ｍｌの濃度が使用される。高濃度を使用すると、細胞収量、細胞
活性化、及び細胞増殖の増加をもたらすことができる。更に、高細胞濃度の使用は、ＣＤ
２８陰性Ｔ細胞などの目的の標的抗原を弱く発現し得る細胞、又は多くの腫瘍細胞が存在
する試料（すなわち、白血病血液、腫瘍組織など）から、より効率的な細胞の捕捉を可能
にする。このような細胞集団は、治療値を有してもよく、得られることが望ましい。例え
ば、高濃度の細胞を使用することにより、通常より弱いＣＤ２８発現を有するＣＤ８＋Ｔ
細胞のより効率的な選択を可能にする。
ーズなどの粒子）の濃度を変化させることができる。いくつかの実施形態では、細胞及び
ビーズの最大接触を確実にするために、ビーズ及び細胞が一緒に混合される体積を著しく
減少させる（すなわち、細胞の濃度を増加させる）ことが望ましい場合がある。例えば、
いくつかの実施形態では、約２０億個の細胞／ｍｌの濃度が使用される。いくつかの実施
形態では、約１０億個の細胞／ｍｌの濃度が使用される。いくつかの実施形態では、約１
億個の細胞／ｍｌより多いものが使用される。いくつかの実施形態では、約１０００万、
１５００万、２０００万、２５００万、３０００万、３５００万、４０００万、４５００
万、又は５０００万個の細胞／ｍｌの細胞の濃度が使用される。いくつかの実施形態では
、約７５００万、８０００万、８５００万、９０００万、９５００万、又は１億個の細胞
／ｍｌの細胞の濃度が使用される。いくつかの実施形態では、約１億２５００万又は約１
億５０００万個の細胞／ｍｌの濃度が使用される。高濃度を使用すると、細胞収量、細胞
活性化、及び細胞増殖の増加をもたらすことができる。更に、高細胞濃度の使用は、ＣＤ
２８陰性Ｔ細胞などの目的の標的抗原を弱く発現し得る細胞、又は多くの腫瘍細胞が存在
する試料（すなわち、白血病血液、腫瘍組織など）から、より効率的な細胞の捕捉を可能
にする。このような細胞集団は、治療値を有してもよく、得られることが望ましい。例え
ば、高濃度の細胞を使用することにより、通常より弱いＣＤ２８発現を有するＣＤ８＋Ｔ
細胞のより効率的な選択を可能にする。
【0286】
本発明のいくつかの実施形態では、Ｔ細胞は、治療直後に患者から得られる。この点に
関し、特定のがん治療後、特に、免疫系を損傷する薬物による特定の治療後、患者が通常
治療から回復する期間中に治療直後に、得られるＴ細胞の質は、エクスビボで増殖する能
力に関して最適であるか、又は改善され得ることが観察されている。同様に、本明細書に
記載される方法を使用したエクスビボ操作後、これらの細胞は、強化された生着及びイン
ビボ増殖のための好ましい状態であり得る。したがって、この回復期中に、Ｔ細胞、樹状
細胞、又は造血系の他の細胞を含む血液細胞を収集することが、本発明の文脈内で想到さ
れる。更に、いくつかの実施形態では、動員（例えば、ＧＭ－ＣＳＦによる動員）及び前
処置レジメンを使用して、特に治療後の定義された時間範囲中に、特定の細胞型の再集団
化、再循環、再生、及び／又は増殖が好ましい状況を対象においてもたらすことができる
。例示的な細胞型としては、Ｔ細胞、Ｂ細胞、樹状細胞、及び免疫系の他の細胞が挙げら
れる。
関し、特定のがん治療後、特に、免疫系を損傷する薬物による特定の治療後、患者が通常
治療から回復する期間中に治療直後に、得られるＴ細胞の質は、エクスビボで増殖する能
力に関して最適であるか、又は改善され得ることが観察されている。同様に、本明細書に
記載される方法を使用したエクスビボ操作後、これらの細胞は、強化された生着及びイン
ビボ増殖のための好ましい状態であり得る。したがって、この回復期中に、Ｔ細胞、樹状
細胞、又は造血系の他の細胞を含む血液細胞を収集することが、本発明の文脈内で想到さ
れる。更に、いくつかの実施形態では、動員（例えば、ＧＭ－ＣＳＦによる動員）及び前
処置レジメンを使用して、特に治療後の定義された時間範囲中に、特定の細胞型の再集団
化、再循環、再生、及び／又は増殖が好ましい状況を対象においてもたらすことができる
。例示的な細胞型としては、Ｔ細胞、Ｂ細胞、樹状細胞、及び免疫系の他の細胞が挙げら
れる。
【0287】
Ｔ細胞の遺伝子改変の前又は後に、所望のｃａＴＣＲ、ＣＳＲ、及び所望によりＳＳＥ
を発現するかどうかにかかわらず、Ｔ細胞は、例えば、米国特許第６，３５２，６９４号
、同第６，５３４，０５５号、同第６，９０５，６８０号、同第６，６９２，９６４号、
同第５，８５８，３５８号、同第６，８８７，４６６号、同第６，９０５，６８１号、同
第７，１４４，５７５号、同第７，０６７，３１８号、同第７，１７２，８６９号、同第
７，２３２，５６６号、同第７，１７５，８４３号、同第５，８８３，２２３号、同第６
，９０５，８７４号、同第６，７９７，５１４号、同第６，８６７，０４１号、及び米国
特許出願公開第２００６０１２１００５号に記載されている方法を使用して、全般に活性
化及び増殖させることができる。
を発現するかどうかにかかわらず、Ｔ細胞は、例えば、米国特許第６，３５２，６９４号
、同第６，５３４，０５５号、同第６，９０５，６８０号、同第６，６９２，９６４号、
同第５，８５８，３５８号、同第６，８８７，４６６号、同第６，９０５，６８１号、同
第７，１４４，５７５号、同第７，０６７，３１８号、同第７，１７２，８６９号、同第
７，２３２，５６６号、同第７，１７５，８４３号、同第５，８８３，２２３号、同第６
，９０５，８７４号、同第６，７９７，５１４号、同第６，８６７，０４１号、及び米国
特許出願公開第２００６０１２１００５号に記載されている方法を使用して、全般に活性
化及び増殖させることができる。
【0288】
一般的に、本発明のＴ細胞は、ＣＤ３／ＴＣＲ複合体関連シグナルを刺激する薬剤を結
合して有する表面と、Ｔ細胞の表面上の共刺激分子を刺激するリガンドとの接触によって
増殖される。具体的には、Ｔ細胞集団は、抗ＣＤ３抗体、若しくはその抗原結合断片との
接触、又は表面上に固定化された抗ＣＤ２抗体との接触、又はカルシウムイオノフォアと
組み合わされたタンパク質キナーゼＣ活性化因子（例えば、ブレソスタチン）との接触に
よってなどで、刺激されてもよい。Ｔ細胞の表面上のアクセサリー分子の共刺激のために
、アクセサリー分子に結合するリガンドが使用される。例えば、Ｔ細胞集団は、Ｔ細胞の
増殖を刺激するのに適切な条件下で、抗ＣＤ３抗体及び抗ＣＤ２８抗体と接触させること
ができる。ＣＤ４＋Ｔ細胞又はＣＤ８＋Ｔ細胞のいずれかの増殖を刺激するためには、抗
ＣＤ３抗体、及び抗ＣＤ２８抗体である。抗ＣＤ２８抗体の例としては、９．３、Ｂ－Ｔ
３、ＸＲ－ＣＤ２８（Ｄｉａｃｌｏｎｅ，Ｂｅｓａｎcｏｎ，Ｆｒａｎｃｅ）が挙げられ
、と当該技術分野において公知の他の方法で使用できるように使用できる（Ｂｅｒｇ ｅ
ｔ ａｌ．，Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ Ｐｒｏｃ．３０（８）：３９７５－３９７７，１９
９８、Ｈａａｎｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１９０（９）：１３１９１３
２８，１９９９、Ｇａｒｌａｎｄ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．２２
７（１－２）：５３－６３，１９９９）。
遺伝子改変
合して有する表面と、Ｔ細胞の表面上の共刺激分子を刺激するリガンドとの接触によって
増殖される。具体的には、Ｔ細胞集団は、抗ＣＤ３抗体、若しくはその抗原結合断片との
接触、又は表面上に固定化された抗ＣＤ２抗体との接触、又はカルシウムイオノフォアと
組み合わされたタンパク質キナーゼＣ活性化因子（例えば、ブレソスタチン）との接触に
よってなどで、刺激されてもよい。Ｔ細胞の表面上のアクセサリー分子の共刺激のために
、アクセサリー分子に結合するリガンドが使用される。例えば、Ｔ細胞集団は、Ｔ細胞の
増殖を刺激するのに適切な条件下で、抗ＣＤ３抗体及び抗ＣＤ２８抗体と接触させること
ができる。ＣＤ４＋Ｔ細胞又はＣＤ８＋Ｔ細胞のいずれかの増殖を刺激するためには、抗
ＣＤ３抗体、及び抗ＣＤ２８抗体である。抗ＣＤ２８抗体の例としては、９．３、Ｂ－Ｔ
３、ＸＲ－ＣＤ２８（Ｄｉａｃｌｏｎｅ，Ｂｅｓａｎcｏｎ，Ｆｒａｎｃｅ）が挙げられ
、と当該技術分野において公知の他の方法で使用できるように使用できる（Ｂｅｒｇ ｅ
ｔ ａｌ．，Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ Ｐｒｏｃ．３０（８）：３９７５－３９７７，１９
９８、Ｈａａｎｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１９０（９）：１３１９１３
２８，１９９９、Ｇａｒｌａｎｄ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．２２
７（１－２）：５３－６３，１９９９）。
遺伝子改変
【0289】
いくつかの実施形態では、本発明のｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞（ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ
Ｔ細胞など）は、本明細書に記載のｃａＴＣＲ及び本明細書に記載のＣＳＲをコードす
る１つ以上のウイルスベクターを免疫細胞（本明細書に記載の方法によって調製されるＴ
細胞など）に形質導入することによって生成される。ウイルスベクター送達系は、ＤＮＡ
及びＲＮＡウイルスを含み、それらは、免疫細胞への送達後にエピソームであるか、又は
ゲノムに組み込まれる。遺伝子治療手順の概説については、Ａｎｄｅｒｓｏｎ，Ｓｃｉｅ
ｎｃｅ ２５６：８０８－８１３（１９９２）、Ｎａｂｅｌ ＆ Ｆｅｉｇｎｅｒ，ＴＩ
ＢＴＥＣＨ １１：２１１－２１７（１９９３）、Ｍｉｔａｎｉ ＆ Ｃａｓｋｅｙ，Ｔ
ＩＢＴＥＣＨ １１：１６２－１６６（１９９３）、Ｄｉｌｌｏｎ，ＴＩＢＴＥＣＨ １
１：１６７－１７５（１９９３）、Ｍｉｌｌｅｒ，Ｎａｔｕｒｅ ３５７：４５５－４６
０（１９９２）、Ｖａｎ Ｂｒｕｎｔ，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ６（１０）：１１
４９－１ １５４（１９８８）、Ｖｉｇｎｅ，Ｒｅｓｔｏｒａｔｉｖｅ Ｎｅｕｒｏｌｏ
ｇｙ ａｎｄ Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ ８：３５－３６（１９９５）、Ｋｒｅｍｅｒ
＆ Ｐｅｒｒｉｃａｕｄｅｔ，Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｂｕｌｌｅｔｉｎ
５１（ｌ）：３１－４４（１９９５）、及びＹｕ ｅｔ ａｌ．，Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａ
ｐｙ １：１３－２６（１９９４）を参照されたい。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣ
Ｒ＋ＣＳＲ免疫細胞は、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞ゲノムに組み込まれた１つ以上のベ
クターを含む。いくつかの実施形態では、１つ以上のウイルスベクターは、レンチウイル
スベクターである。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞は、そのゲノ
ムに組み込まれたレンチウイルスベクターを含むｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ Ｔ細胞である。
Ｔ細胞など）は、本明細書に記載のｃａＴＣＲ及び本明細書に記載のＣＳＲをコードす
る１つ以上のウイルスベクターを免疫細胞（本明細書に記載の方法によって調製されるＴ
細胞など）に形質導入することによって生成される。ウイルスベクター送達系は、ＤＮＡ
及びＲＮＡウイルスを含み、それらは、免疫細胞への送達後にエピソームであるか、又は
ゲノムに組み込まれる。遺伝子治療手順の概説については、Ａｎｄｅｒｓｏｎ，Ｓｃｉｅ
ｎｃｅ ２５６：８０８－８１３（１９９２）、Ｎａｂｅｌ ＆ Ｆｅｉｇｎｅｒ，ＴＩ
ＢＴＥＣＨ １１：２１１－２１７（１９９３）、Ｍｉｔａｎｉ ＆ Ｃａｓｋｅｙ，Ｔ
ＩＢＴＥＣＨ １１：１６２－１６６（１９９３）、Ｄｉｌｌｏｎ，ＴＩＢＴＥＣＨ １
１：１６７－１７５（１９９３）、Ｍｉｌｌｅｒ，Ｎａｔｕｒｅ ３５７：４５５－４６
０（１９９２）、Ｖａｎ Ｂｒｕｎｔ，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ６（１０）：１１
４９－１ １５４（１９８８）、Ｖｉｇｎｅ，Ｒｅｓｔｏｒａｔｉｖｅ Ｎｅｕｒｏｌｏ
ｇｙ ａｎｄ Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ ８：３５－３６（１９９５）、Ｋｒｅｍｅｒ
＆ Ｐｅｒｒｉｃａｕｄｅｔ，Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｂｕｌｌｅｔｉｎ
５１（ｌ）：３１－４４（１９９５）、及びＹｕ ｅｔ ａｌ．，Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａ
ｐｙ １：１３－２６（１９９４）を参照されたい。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣ
Ｒ＋ＣＳＲ免疫細胞は、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞ゲノムに組み込まれた１つ以上のベ
クターを含む。いくつかの実施形態では、１つ以上のウイルスベクターは、レンチウイル
スベクターである。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞は、そのゲノ
ムに組み込まれたレンチウイルスベクターを含むｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ Ｔ細胞である。
【0290】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞は、その内因性のＴＣＲ鎖のう
ちの１つ又は両方の発現を遮断又は減少させるように改変される。例えば、いくつかの実
施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞は、ＴＣＲ α及び／又はβ鎖の発現を遮断又
は減少させるように改変されたαβ Ｔ細胞であり、又はｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞は
、ＴＣＲ γ及び／又はδ鎖の発現を遮断又は減少させるように改変されたγδ Ｔ細胞
である。遺伝子発現を破壊する細胞の改変としては、例えば、ＲＮＡ干渉（例えば、ｓｉ
ＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ）、遺伝子編集（例えば、ＣＲＩＳＰＲ又はＴＡＬＥＮ
系遺伝子ノックアウト）などを含む、当該技術分野において既知の任意のそのような技術
が挙げられる。
ちの１つ又は両方の発現を遮断又は減少させるように改変される。例えば、いくつかの実
施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞は、ＴＣＲ α及び／又はβ鎖の発現を遮断又
は減少させるように改変されたαβ Ｔ細胞であり、又はｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞は
、ＴＣＲ γ及び／又はδ鎖の発現を遮断又は減少させるように改変されたγδ Ｔ細胞
である。遺伝子発現を破壊する細胞の改変としては、例えば、ＲＮＡ干渉（例えば、ｓｉ
ＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ）、遺伝子編集（例えば、ＣＲＩＳＰＲ又はＴＡＬＥＮ
系遺伝子ノックアウト）などを含む、当該技術分野において既知の任意のそのような技術
が挙げられる。
【0291】
いくつかの実施形態では、Ｔ細胞の内因性ＴＣＲ鎖の一方又は両方の発現が減少したｃ
ａＴＣＲ＋ＣＳＲ Ｔ細胞は、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓシステムを使用して生成される。遺
伝子編集のＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓシステムの概説については、例えば、Ｊｉａｎ Ｗ ＆
Ｍａｒｒａｆｆｉｎｉ ＬＡ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．６９，２０１
５、Ｈｓｕ ＰＤ ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｌｌ，１５７（６）：１２６２－１２７８，２０
１４、及びＯ’Ｃｏｎｎｅｌｌ ＭＲ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ５１６：２６３－
２６６，２０１４を参照されたい。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞の内因性ＴＣＲ鎖の
一方又は両方の発現が減少したｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ Ｔ細胞は、ＴＡＬＥＮ系ゲノム編集
を使用して生成される。
濃縮
ａＴＣＲ＋ＣＳＲ Ｔ細胞は、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓシステムを使用して生成される。遺
伝子編集のＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓシステムの概説については、例えば、Ｊｉａｎ Ｗ ＆
Ｍａｒｒａｆｆｉｎｉ ＬＡ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．６９，２０１
５、Ｈｓｕ ＰＤ ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｌｌ，１５７（６）：１２６２－１２７８，２０
１４、及びＯ’Ｃｏｎｎｅｌｌ ＭＲ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ５１６：２６３－
２６６，２０１４を参照されたい。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞の内因性ＴＣＲ鎖の
一方又は両方の発現が減少したｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ Ｔ細胞は、ＴＡＬＥＮ系ゲノム編集
を使用して生成される。
濃縮
【0292】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載のｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞のいずれかに
よるｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の不均質な細胞集団を濃縮する方法が提供される。
よるｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の不均質な細胞集団を濃縮する方法が提供される。
【0293】
標的抗原及び標的リガンドに特異的に結合するｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞（ｃａＴＣ
Ｒ＋ＣＳＲ Ｔ細胞など）の特定の亜集団は、陽性選択技術によって濃縮され得る。例え
ば、いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞（ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ Ｔ細
胞など）は、所望のｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞を陽性選択するのに十分な時間にわたっ
て標的抗原コンジュゲートビーズ及び／又は標的リガンドコンジュゲートビーズとのイン
キュベーションによって濃縮される。いくつかの実施形態では、期間は約３０分である。
いくつかの実施形態では、期間は、３０分～３６時間又はそれ以上（これらの値間の全て
の範囲を含む）の範囲である。いくつかの実施形態では、期間は、少なくとも１、２、３
、４、５、又は６時間である。いくつかの実施形態では、期間は、１０～２４時間である
。いくつかの実施形態では、インキュベーション時間は２４時間である。異種細胞集団に
おいて低レベルで存在するｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の単離のために、２４時間などの
より長いインキュベーション時間の使用は、細胞収量を増加させることができる。他の細
胞型と比較して、少ないｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞が存在する任意の状況において、ｃ
ａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞を単離するために、より長いインキュベーション時間を使用す
ることができる。当業者であれば、本発明の文脈において、複数ラウンドの選択も使用で
きることを認識する。
Ｒ＋ＣＳＲ Ｔ細胞など）の特定の亜集団は、陽性選択技術によって濃縮され得る。例え
ば、いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞（ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ Ｔ細
胞など）は、所望のｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞を陽性選択するのに十分な時間にわたっ
て標的抗原コンジュゲートビーズ及び／又は標的リガンドコンジュゲートビーズとのイン
キュベーションによって濃縮される。いくつかの実施形態では、期間は約３０分である。
いくつかの実施形態では、期間は、３０分～３６時間又はそれ以上（これらの値間の全て
の範囲を含む）の範囲である。いくつかの実施形態では、期間は、少なくとも１、２、３
、４、５、又は６時間である。いくつかの実施形態では、期間は、１０～２４時間である
。いくつかの実施形態では、インキュベーション時間は２４時間である。異種細胞集団に
おいて低レベルで存在するｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の単離のために、２４時間などの
より長いインキュベーション時間の使用は、細胞収量を増加させることができる。他の細
胞型と比較して、少ないｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞が存在する任意の状況において、ｃ
ａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞を単離するために、より長いインキュベーション時間を使用す
ることができる。当業者であれば、本発明の文脈において、複数ラウンドの選択も使用で
きることを認識する。
【0294】
陽性選択によるｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の所望の集団の単離のために、細胞及び表
面（例えば、ビーズなどの粒子）の濃度を変更することができる。いくつかの実施形態で
は、細胞及びビーズの最大接触を確実にするために、ビーズ及び細胞が一緒に混合される
体積を著しく減少させる（すなわち、細胞の濃度を増加させる）ことが望ましい場合があ
る。例えば、いくつかの実施形態では、約２０億個の細胞／ｍｌの濃度が使用される。い
くつかの実施形態では、約１０億個の細胞／ｍｌの濃度が使用される。いくつかの実施形
態では、約１億個の細胞／ｍｌより多いものが使用される。いくつかの実施形態では、約
１０００万、１５００万、２０００万、２５００万、３０００万、３５００万、４０００
万、４５００万、又は５０００万個の細胞／ｍｌの細胞の濃度が使用される。いくつかの
実施形態では、約７５００万、８０００万、８５００万、９０００万、９５００万、又は
１億個の細胞／ｍｌの細胞の濃度が使用される。いくつかの実施形態では、約１億２５０
０万又は約１億５０００万個の細胞／ｍｌの濃度が使用される。高濃度を使用すると、細
胞収量、細胞活性化、及び細胞増殖の増加をもたらすことができる。更に、高細胞濃度の
使用は、ｃａＴＣＲ及び／又はＣＳＲを弱く発現し得るｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞のよ
り効率的な捕捉を可能にする。
面（例えば、ビーズなどの粒子）の濃度を変更することができる。いくつかの実施形態で
は、細胞及びビーズの最大接触を確実にするために、ビーズ及び細胞が一緒に混合される
体積を著しく減少させる（すなわち、細胞の濃度を増加させる）ことが望ましい場合があ
る。例えば、いくつかの実施形態では、約２０億個の細胞／ｍｌの濃度が使用される。い
くつかの実施形態では、約１０億個の細胞／ｍｌの濃度が使用される。いくつかの実施形
態では、約１億個の細胞／ｍｌより多いものが使用される。いくつかの実施形態では、約
１０００万、１５００万、２０００万、２５００万、３０００万、３５００万、４０００
万、４５００万、又は５０００万個の細胞／ｍｌの細胞の濃度が使用される。いくつかの
実施形態では、約７５００万、８０００万、８５００万、９０００万、９５００万、又は
１億個の細胞／ｍｌの細胞の濃度が使用される。いくつかの実施形態では、約１億２５０
０万又は約１億５０００万個の細胞／ｍｌの濃度が使用される。高濃度を使用すると、細
胞収量、細胞活性化、及び細胞増殖の増加をもたらすことができる。更に、高細胞濃度の
使用は、ｃａＴＣＲ及び／又はＣＳＲを弱く発現し得るｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞のよ
り効率的な捕捉を可能にする。
【0295】
本明細書に記載される任意のそのような実施形態のうちのいくつかにおいて、濃縮は、
ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の疲弊を最小限に抑えるか、又は実質的に全く疲弊させない
。例えば、いくつかの実施形態では、濃縮は、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の約５０％未
満（約４５、４０、３５、３０、２５、２０、１５、１０、又は５％のいずれか未満など
）が疲弊したものになる結果をもたらす。免疫細胞の疲弊は、本明細書に記載される任意
の手段を含む、当該技術分野において既知の任意の手段によって判定することができる。
ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の疲弊を最小限に抑えるか、又は実質的に全く疲弊させない
。例えば、いくつかの実施形態では、濃縮は、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の約５０％未
満（約４５、４０、３５、３０、２５、２０、１５、１０、又は５％のいずれか未満など
）が疲弊したものになる結果をもたらす。免疫細胞の疲弊は、本明細書に記載される任意
の手段を含む、当該技術分野において既知の任意の手段によって判定することができる。
【0296】
本明細書に記載される任意のそのような実施形態のうちのいくつかにおいて、濃縮は、
ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の終末分化を最小限に抑えるか、又は実質的に全く終末分化
させない。例えば、いくつかの実施形態では、濃縮は、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の約
５０％未満（約４５、４０、３５、３０、２５、２０、１５、１０、又は５％のいずれか
未満など）が終末分化したものになる結果をもたらす。免疫細胞の終末分化は、本明細書
に記載される任意の手段を含む、当該技術分野において既知の任意の手段によって判定す
ることができる。
ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の終末分化を最小限に抑えるか、又は実質的に全く終末分化
させない。例えば、いくつかの実施形態では、濃縮は、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の約
５０％未満（約４５、４０、３５、３０、２５、２０、１５、１０、又は５％のいずれか
未満など）が終末分化したものになる結果をもたらす。免疫細胞の終末分化は、本明細書
に記載される任意の手段を含む、当該技術分野において既知の任意の手段によって判定す
ることができる。
【0297】
本明細書に記載される任意のそのような実施形態のうちのいくつかにおいて、濃縮は、
ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞のｃａＴＣＲ及び／又はＣＳＲの内部移行を最小限に抑える
か、又は実質的に全くｃａＴＣＲ及び／又はＣＳＲを内部移行させない。例えば、いくつ
かの実施形態では、濃縮は、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞上の約５０％未満（約４５、４
０、３５、３０、２５、２０、１５、１０、又は５％のいずれか未満など）のｃａＴＣＲ
及び／又はＣＳＲが内部移行したものになる結果をもたらす。ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細
胞上のｃａＴＣＲ及び／又はＣＳＲの内部移行は、本明細書に記載される任意の手段を含
む当該技術分野において既知の任意の手段によって判定することができる。
ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞のｃａＴＣＲ及び／又はＣＳＲの内部移行を最小限に抑える
か、又は実質的に全くｃａＴＣＲ及び／又はＣＳＲを内部移行させない。例えば、いくつ
かの実施形態では、濃縮は、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞上の約５０％未満（約４５、４
０、３５、３０、２５、２０、１５、１０、又は５％のいずれか未満など）のｃａＴＣＲ
及び／又はＣＳＲが内部移行したものになる結果をもたらす。ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細
胞上のｃａＴＣＲ及び／又はＣＳＲの内部移行は、本明細書に記載される任意の手段を含
む当該技術分野において既知の任意の手段によって判定することができる。
【0298】
本明細書に記載される任意のそのような実施形態のうちのいくつかにおいて、濃縮は、
ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の増殖の増加をもたらす。例えば、いくつかの実施形態では
、濃縮は、濃縮後のｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の数の少なくとも約１０％（少なくとも
約２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、２００、３００、４００
、５００、１０００％、又はそれ以上のいずれかなど）の増加をもたらす。
ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の増殖の増加をもたらす。例えば、いくつかの実施形態では
、濃縮は、濃縮後のｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の数の少なくとも約１０％（少なくとも
約２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、２００、３００、４００
、５００、１０００％、又はそれ以上のいずれかなど）の増加をもたらす。
【0299】
したがって、いくつかの実施形態では、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲ、及び
標的リガンドに特異的に結合するＣＳＲを発現するｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の異種細
胞集団を濃縮する方法であって、ａ）異種細胞集団を、標的抗原若しくはその中に含まれ
る１つ以上のエピトープを含む第１の分子、及び／又は標的リガンド若しくはその中に含
まれる１つ以上のエピトープを含む第２の分子と接触させて、第１の分子に結合したｃａ
ＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞及び／又は第２の分子に結合したｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞を
含む複合体を形成することと、ｂ）複合体を異種細胞集団から分離することにより、ｃａ
ＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞について濃縮された細胞集団を生成することと、を含む、方法が
提供される。いくつかの実施形態では、第１及び／又は第２の分子は、個々に固体支持体
に固定化される。いくつかの実施形態では、固体支持体は粒子状（ビーズなど）である。
いくつかの実施形態では、固体支持体は、表面（ウェルの底部など）である。いくつかの
実施形態では、第１及び／又は第２の分子は、タグで個別に標識される。いくつかの実施
形態では、タグは、蛍光分子、親和性タグ、又は磁気タグである。いくつかの実施形態で
は、本方法は、第１及び／又は第２の分子からｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞を溶離させる
ことと、溶離液を回収することと、を更に含む。
ライブラリースクリーニング
標的リガンドに特異的に結合するＣＳＲを発現するｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の異種細
胞集団を濃縮する方法であって、ａ）異種細胞集団を、標的抗原若しくはその中に含まれ
る１つ以上のエピトープを含む第１の分子、及び／又は標的リガンド若しくはその中に含
まれる１つ以上のエピトープを含む第２の分子と接触させて、第１の分子に結合したｃａ
ＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞及び／又は第２の分子に結合したｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞を
含む複合体を形成することと、ｂ）複合体を異種細胞集団から分離することにより、ｃａ
ＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞について濃縮された細胞集団を生成することと、を含む、方法が
提供される。いくつかの実施形態では、第１及び／又は第２の分子は、個々に固体支持体
に固定化される。いくつかの実施形態では、固体支持体は粒子状（ビーズなど）である。
いくつかの実施形態では、固体支持体は、表面（ウェルの底部など）である。いくつかの
実施形態では、第１及び／又は第２の分子は、タグで個別に標識される。いくつかの実施
形態では、タグは、蛍光分子、親和性タグ、又は磁気タグである。いくつかの実施形態で
は、本方法は、第１及び／又は第２の分子からｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞を溶離させる
ことと、溶離液を回収することと、を更に含む。
ライブラリースクリーニング
【0300】
いくつかの実施形態では、標的抗原に特異的な候補ｃａＴＣＲ構築物を単離するために
、ｃａＴＣＲライブラリー、例えば、複数のｃａＴＣＲをコードする核酸のライブラリー
を発現する細胞は、標的抗原又はその中に含まれる１つ以上のエピトープを含む捕捉分子
に曝露され、続いて捕捉分子に特異的に結合するライブラリーの親和性メンバーを単離す
ることができる。いくつかの実施形態では、捕捉分子は固体支持体上に固定化される。い
くつかの実施形態では、支持体は、ビーズ、マイクロタイタープレート、免疫チューブ、
又はそのような目的に有用な当該技術分野において既知の任意の材料の表面であってもよ
い。いくつかの実施形態では、相互作用は、タグ付き捕捉分子（例えば、ビオチン化捕捉
分子）と溶液中で行われる。いくつかの実施形態では、この手順は、非特異的及び非反応
性のライブラリーメンバーを除去するための１つ以上の洗浄工程（パニング）を伴う。い
くつかの実施形態では、溶液中の複合体を精製するために、これらを、固定化又は遠心分
離のいずれかによって収集する。いくつかの実施形態では、親和性メンバーは、可溶性ビ
オチン化捕捉分子上に捕捉され、続いてストレプトアビジンビーズ上の親和性複合体（親
和性メンバー及び捕捉分子）の固定化が続く。いくつかの実施形態では、固体支持体はビ
ーズである。いくつかの実施形態では、ビーズとしては、例えば、磁気ビーズ（例えば、
Ｂａｎｇｓ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｐｏｌｙｓｃｉｅｎｃｅｓ ｉｎｃ．，Ｄｙｎ
ａｌ Ｂｉｏｔｅｃｈ，Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃｈ又はＱｕａｎｔｕｍ Ｍａｇ
ｎｅｔｉｃからの）、非磁性ビーズ（例えば、Ｐｉｅｒｃｅ ａｎｄ Ｕｐｓｔａｔｅ
ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）、単分散ビーズ（例えば、Ｄｙｎａｌ Ｂｉｏｔｅｃｈ及びＭｉ
ｃｒｏｐａｒｔｉｃｌｅ Ｇｍｂｈ）、及び多分散ビーズ（例えば、Ｃｈｅｍａｇｅｎ）
が挙げられる。磁気ビーズの使用は、文献（Ｕｈｌｅｎ，Ｍ，ｅｔ ａｌ（１９９４）ｉ
ｎ Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ｂｉｏｍａｇｎｅｔｉｃ Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ，Ｂｉｏ
Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ｐｒｅｓｓ，Ｗｅｓｔｂｏｒｏｕｇｈ，ＭＡ）に記載されている
。いくつかの実施形態では、親和性メンバーは、陽性選択によって精製される。いくつか
の実施形態では、親和性メンバーは、望ましくないライブラリーメンバーを除去するため
の陰性選択によって精製される。いくつかの実施形態では、親和性メンバーは、陽性及び
陰性選択工程の両方によって精製される。
、ｃａＴＣＲライブラリー、例えば、複数のｃａＴＣＲをコードする核酸のライブラリー
を発現する細胞は、標的抗原又はその中に含まれる１つ以上のエピトープを含む捕捉分子
に曝露され、続いて捕捉分子に特異的に結合するライブラリーの親和性メンバーを単離す
ることができる。いくつかの実施形態では、捕捉分子は固体支持体上に固定化される。い
くつかの実施形態では、支持体は、ビーズ、マイクロタイタープレート、免疫チューブ、
又はそのような目的に有用な当該技術分野において既知の任意の材料の表面であってもよ
い。いくつかの実施形態では、相互作用は、タグ付き捕捉分子（例えば、ビオチン化捕捉
分子）と溶液中で行われる。いくつかの実施形態では、この手順は、非特異的及び非反応
性のライブラリーメンバーを除去するための１つ以上の洗浄工程（パニング）を伴う。い
くつかの実施形態では、溶液中の複合体を精製するために、これらを、固定化又は遠心分
離のいずれかによって収集する。いくつかの実施形態では、親和性メンバーは、可溶性ビ
オチン化捕捉分子上に捕捉され、続いてストレプトアビジンビーズ上の親和性複合体（親
和性メンバー及び捕捉分子）の固定化が続く。いくつかの実施形態では、固体支持体はビ
ーズである。いくつかの実施形態では、ビーズとしては、例えば、磁気ビーズ（例えば、
Ｂａｎｇｓ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｐｏｌｙｓｃｉｅｎｃｅｓ ｉｎｃ．，Ｄｙｎ
ａｌ Ｂｉｏｔｅｃｈ，Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃｈ又はＱｕａｎｔｕｍ Ｍａｇ
ｎｅｔｉｃからの）、非磁性ビーズ（例えば、Ｐｉｅｒｃｅ ａｎｄ Ｕｐｓｔａｔｅ
ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）、単分散ビーズ（例えば、Ｄｙｎａｌ Ｂｉｏｔｅｃｈ及びＭｉ
ｃｒｏｐａｒｔｉｃｌｅ Ｇｍｂｈ）、及び多分散ビーズ（例えば、Ｃｈｅｍａｇｅｎ）
が挙げられる。磁気ビーズの使用は、文献（Ｕｈｌｅｎ，Ｍ，ｅｔ ａｌ（１９９４）ｉ
ｎ Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ｂｉｏｍａｇｎｅｔｉｃ Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ，Ｂｉｏ
Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ｐｒｅｓｓ，Ｗｅｓｔｂｏｒｏｕｇｈ，ＭＡ）に記載されている
。いくつかの実施形態では、親和性メンバーは、陽性選択によって精製される。いくつか
の実施形態では、親和性メンバーは、望ましくないライブラリーメンバーを除去するため
の陰性選択によって精製される。いくつかの実施形態では、親和性メンバーは、陽性及び
陰性選択工程の両方によって精製される。
【0301】
いくつかの実施形態では、標的リガンドに特異的な候補ＣＳＲ構築物を単離するために
、ＣＳＲライブラリー、例えば、複数のＣＳＲをコードする核酸のライブラリーを発現す
る細胞は、標的リガンド又はその中に含まれる１つ以上のエピトープを含む捕捉分子に曝
露され、続いて捕捉分子に特異的に結合するライブラリーの親和性メンバーを単離するこ
とができる。いくつかの実施形態では、捕捉分子は固体支持体上に固定化される。いくつ
かの実施形態では、支持体は、ビーズ、マイクロタイタープレート、免疫チューブ、又は
そのような目的に有用な当該技術分野において既知の任意の材料の表面であってもよい。
いくつかの実施形態では、相互作用は、タグ付き捕捉分子（例えば、ビオチン化捕捉分子
）と溶液中で行われる。いくつかの実施形態では、この手順は、非特異的及び非反応性の
ライブラリーメンバーを除去するための１つ以上の洗浄工程（パニング）を含む。いくつ
かの実施形態では、溶液中の複合体を精製するために、これらを、固定化又は遠心分離の
いずれかによって収集する。いくつかの実施形態では、親和性メンバーは、可溶性ビオチ
ン化捕捉分子上に捕捉され、続いてストレプトアビジンビーズ上の親和性複合体（親和性
メンバー及び捕捉分子）の固定化が続く。いくつかの実施形態では、固体支持体はビーズ
である。いくつかの実施形態では、ビーズとしては、例えば、磁気ビーズ（例えば、Ｂａ
ｎｇｓ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｐｏｌｙｓｃｉｅｎｃｅｓ ｉｎｃ．，Ｄｙｎａｌ
Ｂｉｏｔｅｃｈ，Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃｈ又はＱｕａｎｔｕｍ Ｍａｇｎｅ
ｔｉｃからの）、非磁性ビーズ（例えば、Ｐｉｅｒｃｅ ａｎｄ Ｕｐｓｔａｔｅ ｔｅ
ｃｈｎｏｌｏｇｙ）、単分散ビーズ（例えば、Ｄｙｎａｌ Ｂｉｏｔｅｃｈ及びＭｉｃｒ
ｏｐａｒｔｉｃｌｅ Ｇｍｂｈ）、及び多分散ビーズ（例えば、Ｃｈｅｍａｇｅｎ）が挙
げられる。いくつかの実施形態では、親和性メンバーは、陽性選択によって精製される。
いくつかの実施形態では、親和性メンバーは、望ましくないライブラリーメンバーを除去
するための陰性選択によって精製される。いくつかの実施形態では、親和性メンバーは、
陽性及び陰性選択工程の両方によって精製される。
、ＣＳＲライブラリー、例えば、複数のＣＳＲをコードする核酸のライブラリーを発現す
る細胞は、標的リガンド又はその中に含まれる１つ以上のエピトープを含む捕捉分子に曝
露され、続いて捕捉分子に特異的に結合するライブラリーの親和性メンバーを単離するこ
とができる。いくつかの実施形態では、捕捉分子は固体支持体上に固定化される。いくつ
かの実施形態では、支持体は、ビーズ、マイクロタイタープレート、免疫チューブ、又は
そのような目的に有用な当該技術分野において既知の任意の材料の表面であってもよい。
いくつかの実施形態では、相互作用は、タグ付き捕捉分子（例えば、ビオチン化捕捉分子
）と溶液中で行われる。いくつかの実施形態では、この手順は、非特異的及び非反応性の
ライブラリーメンバーを除去するための１つ以上の洗浄工程（パニング）を含む。いくつ
かの実施形態では、溶液中の複合体を精製するために、これらを、固定化又は遠心分離の
いずれかによって収集する。いくつかの実施形態では、親和性メンバーは、可溶性ビオチ
ン化捕捉分子上に捕捉され、続いてストレプトアビジンビーズ上の親和性複合体（親和性
メンバー及び捕捉分子）の固定化が続く。いくつかの実施形態では、固体支持体はビーズ
である。いくつかの実施形態では、ビーズとしては、例えば、磁気ビーズ（例えば、Ｂａ
ｎｇｓ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、Ｐｏｌｙｓｃｉｅｎｃｅｓ ｉｎｃ．，Ｄｙｎａｌ
Ｂｉｏｔｅｃｈ，Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｂｉｏｔｅｃｈ又はＱｕａｎｔｕｍ Ｍａｇｎｅ
ｔｉｃからの）、非磁性ビーズ（例えば、Ｐｉｅｒｃｅ ａｎｄ Ｕｐｓｔａｔｅ ｔｅ
ｃｈｎｏｌｏｇｙ）、単分散ビーズ（例えば、Ｄｙｎａｌ Ｂｉｏｔｅｃｈ及びＭｉｃｒ
ｏｐａｒｔｉｃｌｅ Ｇｍｂｈ）、及び多分散ビーズ（例えば、Ｃｈｅｍａｇｅｎ）が挙
げられる。いくつかの実施形態では、親和性メンバーは、陽性選択によって精製される。
いくつかの実施形態では、親和性メンバーは、望ましくないライブラリーメンバーを除去
するための陰性選択によって精製される。いくつかの実施形態では、親和性メンバーは、
陽性及び陰性選択工程の両方によって精製される。
【0302】
一般に、ライブラリー構築物を調製するために使用される技術は、既知の遺伝子工学技
術に基づく。この点に関し、ライブラリー内で発現するｃａＴＣＲ又はＣＳＲをコードす
る核酸配列は、使用される発現系の種類に適切な発現ベクターに組み込まれる。ＣＤ３＋
細胞などの細胞内での提示に使用するための適切な発現ベクターは公知であり、当該技術
分野において記載されている。例えば、いくつかの実施形態では、発現ベクターは、レン
チウイルスベクターなどのウイルスベクターである。
術に基づく。この点に関し、ライブラリー内で発現するｃａＴＣＲ又はＣＳＲをコードす
る核酸配列は、使用される発現系の種類に適切な発現ベクターに組み込まれる。ＣＤ３＋
細胞などの細胞内での提示に使用するための適切な発現ベクターは公知であり、当該技術
分野において記載されている。例えば、いくつかの実施形態では、発現ベクターは、レン
チウイルスベクターなどのウイルスベクターである。
【0303】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載される実施形態のいずれか１つによる複数の
ｃａＴＣＲをコードする配列を含む核酸ライブラリーが提供される。いくつかの実施形態
では、核酸ライブラリーは、複数のｃａＴＣＲをコードするウイルスベクターを含む。い
くつかの実施形態では、ウイルスベクターは、レンチウイルスベクターである。
ｃａＴＣＲをコードする配列を含む核酸ライブラリーが提供される。いくつかの実施形態
では、核酸ライブラリーは、複数のｃａＴＣＲをコードするウイルスベクターを含む。い
くつかの実施形態では、ウイルスベクターは、レンチウイルスベクターである。
【0304】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載される実施形態のいずれか１つによる複数の
ＣＳＲをコードする配列を含む核酸ライブラリーが提供される。いくつかの実施形態では
、核酸ライブラリーは、複数のＣＳＲをコードするウイルスベクターを含む。いくつかの
実施形態では、ウイルスベクターは、レンチウイルスベクターである。
ＣＳＲをコードする配列を含む核酸ライブラリーが提供される。いくつかの実施形態では
、核酸ライブラリーは、複数のＣＳＲをコードするウイルスベクターを含む。いくつかの
実施形態では、ウイルスベクターは、レンチウイルスベクターである。
【0305】
いくつかの実施形態では、標的抗原に特異的なｃａＴＣＲをコードする配列について、
本明細書に記載される実施形態のいずれかに記載の核酸ライブラリーをスクリーニングす
る方法であって、ａ）核酸ライブラリーを複数の細胞に導入することにより、ｃａＴＣＲ
を複数の細胞の表面に発現することと、ｂ）複数の細胞を、標的抗原又はその中に含まれ
る１つ以上のエピトープを含む捕捉分子と共にインキュベートすることと、ｃ）捕捉分子
に結合した細胞を収集することと、ｄ）工程ｃ）で収集された細胞からｃａＴＣＲをコー
ドする配列を単離することにより、標的抗原に特異的なｃａＴＣＲを同定することと、を
含む、方法が提供される。いくつかの実施形態では、本方法は、１つ以上の洗浄工程を更
に含む。いくつかの実施形態では、１つ以上の洗浄工程は、工程ｂ）と工程ｃ）との間で
実施される。いくつかの実施形態では、複数の細胞は、複数のＣＤ３＋細胞である。いく
つかの実施形態では、捕捉分子は固体支持体上に固定化される。いくつかの実施形態では
、固体支持体はビーズである。いくつかの実施形態では、捕捉分子に結合した細胞を収集
することは、固体支持体に結合した捕捉リガンドから細胞を溶離させ、溶離液を回収する
ことを含む。いくつかの実施形態では、捕捉分子はタグで標識される。いくつかの実施形
態では、タグは、蛍光分子、親和性タグ、又は磁気タグである。いくつかの実施形態では
、捕捉分子に結合した細胞を収集することは、細胞及び標識されたリガンドを含む複合体
を単離することを含む。いくつかの実施形態では、細胞は、複合体から解離される。
本明細書に記載される実施形態のいずれかに記載の核酸ライブラリーをスクリーニングす
る方法であって、ａ）核酸ライブラリーを複数の細胞に導入することにより、ｃａＴＣＲ
を複数の細胞の表面に発現することと、ｂ）複数の細胞を、標的抗原又はその中に含まれ
る１つ以上のエピトープを含む捕捉分子と共にインキュベートすることと、ｃ）捕捉分子
に結合した細胞を収集することと、ｄ）工程ｃ）で収集された細胞からｃａＴＣＲをコー
ドする配列を単離することにより、標的抗原に特異的なｃａＴＣＲを同定することと、を
含む、方法が提供される。いくつかの実施形態では、本方法は、１つ以上の洗浄工程を更
に含む。いくつかの実施形態では、１つ以上の洗浄工程は、工程ｂ）と工程ｃ）との間で
実施される。いくつかの実施形態では、複数の細胞は、複数のＣＤ３＋細胞である。いく
つかの実施形態では、捕捉分子は固体支持体上に固定化される。いくつかの実施形態では
、固体支持体はビーズである。いくつかの実施形態では、捕捉分子に結合した細胞を収集
することは、固体支持体に結合した捕捉リガンドから細胞を溶離させ、溶離液を回収する
ことを含む。いくつかの実施形態では、捕捉分子はタグで標識される。いくつかの実施形
態では、タグは、蛍光分子、親和性タグ、又は磁気タグである。いくつかの実施形態では
、捕捉分子に結合した細胞を収集することは、細胞及び標識されたリガンドを含む複合体
を単離することを含む。いくつかの実施形態では、細胞は、複合体から解離される。
【0306】
いくつかの実施形態では、標的リガンドに特異的なＣＳＲをコードする配列について、
本明細書に記載される実施形態のいずれかに記載の核酸ライブラリーをスクリーニングす
る方法であって、ａ）核酸ライブラリーを複数の細胞に導入することにより、ＣＳＲを複
数の細胞の表面に発現することと、ｂ）複数の細胞を、標的リガンド又はその中に含まれ
る１つ以上のエピトープを含む捕捉分子と共にインキュベートすることと、ｃ）捕捉分子
に結合した細胞を収集することと、ｄ）工程ｃ）で収集された細胞からＣＳＲをコードす
る配列を単離することにより、標的リガンドに特異的なＣＳＲを同定することと、を含む
、方法が提供される。いくつかの実施形態では、本方法は、１つ以上の洗浄工程を更に含
む。いくつかの実施形態では、１つ以上の洗浄工程は、工程ｂ）と工程ｃ）との間で実施
される。いくつかの実施形態では、複数の細胞は、複数のＣＤ３＋細胞である。いくつか
の実施形態では、捕捉分子は固体支持体上に固定化される。いくつかの実施形態では、固
体支持体はビーズである。いくつかの実施形態では、捕捉分子に結合した細胞を収集する
ことは、固体支持体に結合した捕捉リガンドから細胞を溶離させ、溶離液を回収すること
を含む。いくつかの実施形態では、捕捉分子はタグで標識される。いくつかの実施形態で
は、タグは、蛍光分子、親和性タグ、又は磁気タグである。いくつかの実施形態では、捕
捉分子に結合した細胞を収集することは、細胞及び標識されたリガンドを含む複合体を単
離することを含む。いくつかの実施形態では、細胞は、複合体から解離される。
ＭＨＣタンパク質
本明細書に記載される実施形態のいずれかに記載の核酸ライブラリーをスクリーニングす
る方法であって、ａ）核酸ライブラリーを複数の細胞に導入することにより、ＣＳＲを複
数の細胞の表面に発現することと、ｂ）複数の細胞を、標的リガンド又はその中に含まれ
る１つ以上のエピトープを含む捕捉分子と共にインキュベートすることと、ｃ）捕捉分子
に結合した細胞を収集することと、ｄ）工程ｃ）で収集された細胞からＣＳＲをコードす
る配列を単離することにより、標的リガンドに特異的なＣＳＲを同定することと、を含む
、方法が提供される。いくつかの実施形態では、本方法は、１つ以上の洗浄工程を更に含
む。いくつかの実施形態では、１つ以上の洗浄工程は、工程ｂ）と工程ｃ）との間で実施
される。いくつかの実施形態では、複数の細胞は、複数のＣＤ３＋細胞である。いくつか
の実施形態では、捕捉分子は固体支持体上に固定化される。いくつかの実施形態では、固
体支持体はビーズである。いくつかの実施形態では、捕捉分子に結合した細胞を収集する
ことは、固体支持体に結合した捕捉リガンドから細胞を溶離させ、溶離液を回収すること
を含む。いくつかの実施形態では、捕捉分子はタグで標識される。いくつかの実施形態で
は、タグは、蛍光分子、親和性タグ、又は磁気タグである。いくつかの実施形態では、捕
捉分子に結合した細胞を収集することは、細胞及び標識されたリガンドを含む複合体を単
離することを含む。いくつかの実施形態では、細胞は、複合体から解離される。
ＭＨＣタンパク質
【0307】
ＭＨＣクラスＩタンパク質は、主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）分子の２つの一次
クラスのうちの１つ（他方はＭＨＣクラスＩＩである）であり、生体のほぼ全ての有核細
胞上に見出される。それらの機能は、細胞内からＴ細胞へのタンパク質の断片を提示する
ことであり、健康な細胞は無視されるが、外来又は変異タンパク質を含む細胞は、免疫系
によって攻撃される。ＭＨＣクラスＩタンパク質は、細胞質タンパク質由来のペプチドを
提示するため、ＭＨＣクラスＩ提示の経路は、細胞質又は内因性の経路と呼ばれることが
多い。クラスＩ ＭＨＣ分子は、プロテアソームによる細胞質タンパク質の分解から主に
生成するペプチドに結合する。次いで、ＭＨＣ Ｉ：ペプチド複合体を細胞の原形質膜に
挿入する。ペプチドは、クラスＩ ＭＨＣ分子の細胞外部分に結合する。したがって、ク
ラスＩ ＭＨＣの機能は、細胞内タンパク質を細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＴＬ）に提示するこ
とである。しかしながら、クラスＩ ＭＨＣはまた、交差提示として知られるプロセスに
おいて、外因性タンパク質から生成されたペプチドを提示することができる。
クラスのうちの１つ（他方はＭＨＣクラスＩＩである）であり、生体のほぼ全ての有核細
胞上に見出される。それらの機能は、細胞内からＴ細胞へのタンパク質の断片を提示する
ことであり、健康な細胞は無視されるが、外来又は変異タンパク質を含む細胞は、免疫系
によって攻撃される。ＭＨＣクラスＩタンパク質は、細胞質タンパク質由来のペプチドを
提示するため、ＭＨＣクラスＩ提示の経路は、細胞質又は内因性の経路と呼ばれることが
多い。クラスＩ ＭＨＣ分子は、プロテアソームによる細胞質タンパク質の分解から主に
生成するペプチドに結合する。次いで、ＭＨＣ Ｉ：ペプチド複合体を細胞の原形質膜に
挿入する。ペプチドは、クラスＩ ＭＨＣ分子の細胞外部分に結合する。したがって、ク
ラスＩ ＭＨＣの機能は、細胞内タンパク質を細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＴＬ）に提示するこ
とである。しかしながら、クラスＩ ＭＨＣはまた、交差提示として知られるプロセスに
おいて、外因性タンパク質から生成されたペプチドを提示することができる。
【0308】
ＭＨＣクラスＩタンパク質は、２つのポリペプチド鎖、α及びβ２－ミクログロブリン
（β２Ｍ）からなる。２つの鎖は、β２Ｍとα３ドメインとの相互作用によって非共有結
合的に連結される。α鎖のみが多型であり、ＨＬＡ遺伝子によりコードされる一方で、β
２Ｍサブユニットは多型ではなく、β－２ミクログロブリン遺伝子によりコードされる。
α３ドメインは、原形質膜に広がり、Ｔ細胞のＣＤ８共受容体と相互作用する。α３－Ｃ
Ｄ８相互作用は、細胞傷害性Ｔ細胞の表面上のＴ細胞受容体（ＴＣＲ）がそのα１－α２
ヘテロ二量体リガンドに結合して抗原性のために結合されたペプチドを確認する間、ＭＨ
Ｃ Ｉ分子を定位置に保持する。α１及びα２ドメインは、結合するペプチドのための溝
を形成するように折り畳まれる。ＭＨＣクラスＩタンパク質は、８～１０の長さのアミノ
酸であるペプチドに結合する。
（β２Ｍ）からなる。２つの鎖は、β２Ｍとα３ドメインとの相互作用によって非共有結
合的に連結される。α鎖のみが多型であり、ＨＬＡ遺伝子によりコードされる一方で、β
２Ｍサブユニットは多型ではなく、β－２ミクログロブリン遺伝子によりコードされる。
α３ドメインは、原形質膜に広がり、Ｔ細胞のＣＤ８共受容体と相互作用する。α３－Ｃ
Ｄ８相互作用は、細胞傷害性Ｔ細胞の表面上のＴ細胞受容体（ＴＣＲ）がそのα１－α２
ヘテロ二量体リガンドに結合して抗原性のために結合されたペプチドを確認する間、ＭＨ
Ｃ Ｉ分子を定位置に保持する。α１及びα２ドメインは、結合するペプチドのための溝
を形成するように折り畳まれる。ＭＨＣクラスＩタンパク質は、８～１０の長さのアミノ
酸であるペプチドに結合する。
【0309】
ＭＨＣクラスＩＩ分子は、樹状細胞、単核食細胞、いくつかの内皮細胞、胸腺上皮細胞
、及びＢ細胞などの抗原提示細胞のみに通常見られる分子のファミリーである。クラスＩ
Ｉペプチドによって提示される抗原は、細胞外タンパク質（クラスＩのような細胞質では
ない）由来であり、したがって、抗原提示のＭＨＣクラスＩＩ－依存経路は、エンドサイ
トーシス又は外因性経路と呼ばれる。ＭＨＣクラスＩＩ分子のローディングは、食作用に
よって生じ、細胞外タンパク質は、エンドサイトーシスされ、リソソームで消化され、得
られたエピトープペプチド断片は、細胞表面への移動の前に、ＭＨＣクラスＩＩ分子上に
ローディングされる。
、及びＢ細胞などの抗原提示細胞のみに通常見られる分子のファミリーである。クラスＩ
Ｉペプチドによって提示される抗原は、細胞外タンパク質（クラスＩのような細胞質では
ない）由来であり、したがって、抗原提示のＭＨＣクラスＩＩ－依存経路は、エンドサイ
トーシス又は外因性経路と呼ばれる。ＭＨＣクラスＩＩ分子のローディングは、食作用に
よって生じ、細胞外タンパク質は、エンドサイトーシスされ、リソソームで消化され、得
られたエピトープペプチド断片は、細胞表面への移動の前に、ＭＨＣクラスＩＩ分子上に
ローディングされる。
【0310】
ＭＨＣクラスＩ分子と同様に、クラスＩＩ分子もヘテロ二量体であるが、この場合、２
つの均質なペプチド、α及びβ鎖からなる。サブ表記α１、α２などは、ＨＬＡ遺伝子内
の別個のドメインを指し、各ドメインは、通常、遺伝子内の異なるエクソンによってコー
ドされ、いくつかの遺伝子は、リーダー配列、膜貫通配列などをコードする更なるドメイ
ンを有する。ＭＨＣクラスＩＩ分子の抗原結合溝は両端で開放し、一方、クラスＩ分子上
の対応する溝は、各末端で閉鎖されているため、ＭＨＣクラスＩＩ分子によって提示され
る抗原は、より長く、概して１５～２４個のアミノ酸残基長である。
つの均質なペプチド、α及びβ鎖からなる。サブ表記α１、α２などは、ＨＬＡ遺伝子内
の別個のドメインを指し、各ドメインは、通常、遺伝子内の異なるエクソンによってコー
ドされ、いくつかの遺伝子は、リーダー配列、膜貫通配列などをコードする更なるドメイ
ンを有する。ＭＨＣクラスＩＩ分子の抗原結合溝は両端で開放し、一方、クラスＩ分子上
の対応する溝は、各末端で閉鎖されているため、ＭＨＣクラスＩＩ分子によって提示され
る抗原は、より長く、概して１５～２４個のアミノ酸残基長である。
【0311】
ヒト白血球抗原（ＨＬＡ）遺伝子は、ＭＨＣ遺伝子のヒト型である。ヒトにおける３つ
の主要なＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ、ＨＬＡ－Ｂ、及びＨＬＡ－Ｃである
一方、３つのマイナーなものは、ＨＬＡ－Ｅ、ＨＬＡ－Ｆ、及びＨＬＡ－Ｇである。ヒト
における抗原提示に関与する３つの主要なＭＨＣクラスＩＩタンパク質は、ＨＬＡ－ＤＰ
、ＨＬＤＡ－ＤＱ、及びＨＬＡ－ＤＲである一方、他のＭＨＣクラスＩＩタンパク質、Ｈ
ＬＡ－ＤＭ及びＨＬＡ－ＤＯは、抗原の内部プロセシング及びローディングに関与する。
ＨＬＡ－Ａは、ヒトにおける遺伝子の中で、最速で進化するコード配列に分類されている
。２０１３年１２月で、１７４０個の活性タンパク質及び１１７のヌルタンパク質をコー
ドする２４３２個の既知のＨＬＡ－Ａ対立遺伝子が存在した。ＨＬＡ－Ａ遺伝子は、第６
染色体の短腕上に位置し、ＨＬＡ－Ａのより大きいα鎖構成要素をコードする。ＨＬＡ－
Ａ α鎖の変異型は、ＨＬＡ機能に重要である。この変異型は、集団における遺伝的多様
性を促進する。各ＨＬＡは特定の構造のペプチドに対して異なる親和性を有するため、よ
り多様なＨＬＡは、細胞表面上に「提示」されるより多様な抗原を意味し、集団のサブセ
ットが任意の所与の外来の侵入体に対して耐性である尤度を高める。これにより、単一の
病原体がヒト集団全体を一掃する能力を有する尤度が減少する。各個体は、それらの親の
それぞれから１つずつ、２種類までのＨＬＡ－Ａを発現することができる。いくつかの個
体は、両方の親から同じＨＬＡ－Ａを遺伝し、それらの個々のＨＬＡの多様性を減少させ
る。しかしながら、個体の大部分は、ＨＬＡ－Ａの２つの異なるコピーを受容する。この
同じパターンは、全てのＨＬＡグループに関して続く。換言すれば、ヒトは、２４３２の
既知のＨＬＡ－Ａ対立遺伝子のうちのいずれか１つ又は２つのみを発現することができる
。
の主要なＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ、ＨＬＡ－Ｂ、及びＨＬＡ－Ｃである
一方、３つのマイナーなものは、ＨＬＡ－Ｅ、ＨＬＡ－Ｆ、及びＨＬＡ－Ｇである。ヒト
における抗原提示に関与する３つの主要なＭＨＣクラスＩＩタンパク質は、ＨＬＡ－ＤＰ
、ＨＬＤＡ－ＤＱ、及びＨＬＡ－ＤＲである一方、他のＭＨＣクラスＩＩタンパク質、Ｈ
ＬＡ－ＤＭ及びＨＬＡ－ＤＯは、抗原の内部プロセシング及びローディングに関与する。
ＨＬＡ－Ａは、ヒトにおける遺伝子の中で、最速で進化するコード配列に分類されている
。２０１３年１２月で、１７４０個の活性タンパク質及び１１７のヌルタンパク質をコー
ドする２４３２個の既知のＨＬＡ－Ａ対立遺伝子が存在した。ＨＬＡ－Ａ遺伝子は、第６
染色体の短腕上に位置し、ＨＬＡ－Ａのより大きいα鎖構成要素をコードする。ＨＬＡ－
Ａ α鎖の変異型は、ＨＬＡ機能に重要である。この変異型は、集団における遺伝的多様
性を促進する。各ＨＬＡは特定の構造のペプチドに対して異なる親和性を有するため、よ
り多様なＨＬＡは、細胞表面上に「提示」されるより多様な抗原を意味し、集団のサブセ
ットが任意の所与の外来の侵入体に対して耐性である尤度を高める。これにより、単一の
病原体がヒト集団全体を一掃する能力を有する尤度が減少する。各個体は、それらの親の
それぞれから１つずつ、２種類までのＨＬＡ－Ａを発現することができる。いくつかの個
体は、両方の親から同じＨＬＡ－Ａを遺伝し、それらの個々のＨＬＡの多様性を減少させ
る。しかしながら、個体の大部分は、ＨＬＡ－Ａの２つの異なるコピーを受容する。この
同じパターンは、全てのＨＬＡグループに関して続く。換言すれば、ヒトは、２４３２の
既知のＨＬＡ－Ａ対立遺伝子のうちのいずれか１つ又は２つのみを発現することができる
。
【0312】
全ての対立遺伝子は、少なくとも４桁の分類、例えば、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１２を受容
する。Ａは、その対立遺伝子がどのＨＬＡ遺伝子に属するかを意味する。血清型による分
類が分類を単純化するように、多くのＨＬＡ－Ａ対立遺伝子が存在する。次の１対の数字
は、この割り当てを示す。例えば、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０２、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０４、
及びＨＬＡ－Ａ＊０２：３２４は、全てがＡ２血清型のメンバー（＊０２プレフィックス
によって指定）である。この群は、ＨＬＡ適合性に関与する一次因子である。この後の全
ての数は、血清型によって決定することができず、遺伝子シークエンシングによって指定
される。第２の数字のセットは、どのＨＬＡタンパク質が産生されているかを示す。これ
らは発見のために割り当てられ、２０１３年１２月で、既知の４５６個の異なるＨＬＡ－
Ａ０２タンパク質が存在する（割り当てられた名称ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１～ＨＬＡ－Ａ
＊０２：４５６）。可能な限り短いＨＬＡ名は、これらの詳細の両方を含む。各延長部は
、タンパク質を変化させても変化しなくてもよいヌクレオチド変化を意味する。
する。Ａは、その対立遺伝子がどのＨＬＡ遺伝子に属するかを意味する。血清型による分
類が分類を単純化するように、多くのＨＬＡ－Ａ対立遺伝子が存在する。次の１対の数字
は、この割り当てを示す。例えば、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０２、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０４、
及びＨＬＡ－Ａ＊０２：３２４は、全てがＡ２血清型のメンバー（＊０２プレフィックス
によって指定）である。この群は、ＨＬＡ適合性に関与する一次因子である。この後の全
ての数は、血清型によって決定することができず、遺伝子シークエンシングによって指定
される。第２の数字のセットは、どのＨＬＡタンパク質が産生されているかを示す。これ
らは発見のために割り当てられ、２０１３年１２月で、既知の４５６個の異なるＨＬＡ－
Ａ０２タンパク質が存在する（割り当てられた名称ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１～ＨＬＡ－Ａ
＊０２：４５６）。可能な限り短いＨＬＡ名は、これらの詳細の両方を含む。各延長部は
、タンパク質を変化させても変化しなくてもよいヌクレオチド変化を意味する。
【0313】
いくつかの実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、疾患関連抗原（腫瘍関連抗
原又はウイルスコード抗原など）に由来するペプチド及びＭＨＣクラスＩタンパク質を含
む複合体に特異的に結合し、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ、ＨＬＡ－Ｂ、Ｈ
ＬＡ－Ｃ、ＨＬＡ－Ｅ、ＨＬＡ－Ｆ、又はＨＬＡ－Ｇである。いくつかの実施形態では、
ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ、ＨＬＡ－Ｂ、又はＨＬＡ－Ｃである。いくつ
かの実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。いくつかの実施形
態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ｂである。いくつかの実施形態では、Ｍ
ＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ｃである。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラス
Ｉタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ０１、ＨＬＡ－Ａ０２、ＨＬＡ－Ａ０３、ＨＬＡ－Ａ０９、
ＨＬＡ－Ａ１０、ＨＬＡ－Ａ１１、ＨＬＡ－Ａ１９、ＨＬＡ－Ａ２３、ＨＬＡ－Ａ２４、
ＨＬＡ－Ａ２５、ＨＬＡ－Ａ２６、ＨＬＡ－Ａ２８、ＨＬＡ－Ａ２９、ＨＬＡ－Ａ３０、
ＨＬＡ－Ａ３１、ＨＬＡ－Ａ３２、ＨＬＡ－Ａ３３、ＨＬＡ－Ａ３４、ＨＬＡ－Ａ３６、
ＨＬＡ－Ａ４３、ＨＬＡ－Ａ６６、ＨＬＡ－Ａ６８、ＨＬＡ－Ａ６９、ＨＬＡ－Ａ７４、
又はＨＬＡ－Ａ８０である。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、Ｈ
ＬＡ－Ａ０２である。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－
Ａ＊０２：０１－５５５、例えばＨＬＡ－Ａ＊０２：０１、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０２、Ｈ
ＬＡ－Ａ＊０２：０３、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０４、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０５、ＨＬＡ－Ａ
＊０２：０６、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０７、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０８、ＨＬＡ－Ａ＊０２：
０９、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１０、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１１、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１２、Ｈ
ＬＡ－Ａ＊０２：１３、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１４、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１５、ＨＬＡ－Ａ
＊０２：１６、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１７、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１８、ＨＬＡ－Ａ＊０２：
１９、ＨＬＡ－Ａ＊０２：２０、ＨＬＡ－Ａ＊０２：２１、ＨＬＡ－Ａ＊０２：２２、又
はＨＬＡ－Ａ＊０２：２４のうちのいずれか１つである。いくつかの実施形態では、ＭＨ
ＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１である。ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１は、
全ての白人の３９～４６％で発現し、したがって、本発明で使用するためのＭＨＣクラス
Ｉタンパク質の適切な選択を表す。
原又はウイルスコード抗原など）に由来するペプチド及びＭＨＣクラスＩタンパク質を含
む複合体に特異的に結合し、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ、ＨＬＡ－Ｂ、Ｈ
ＬＡ－Ｃ、ＨＬＡ－Ｅ、ＨＬＡ－Ｆ、又はＨＬＡ－Ｇである。いくつかの実施形態では、
ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ、ＨＬＡ－Ｂ、又はＨＬＡ－Ｃである。いくつ
かの実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。いくつかの実施形
態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ｂである。いくつかの実施形態では、Ｍ
ＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ｃである。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラス
Ｉタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ０１、ＨＬＡ－Ａ０２、ＨＬＡ－Ａ０３、ＨＬＡ－Ａ０９、
ＨＬＡ－Ａ１０、ＨＬＡ－Ａ１１、ＨＬＡ－Ａ１９、ＨＬＡ－Ａ２３、ＨＬＡ－Ａ２４、
ＨＬＡ－Ａ２５、ＨＬＡ－Ａ２６、ＨＬＡ－Ａ２８、ＨＬＡ－Ａ２９、ＨＬＡ－Ａ３０、
ＨＬＡ－Ａ３１、ＨＬＡ－Ａ３２、ＨＬＡ－Ａ３３、ＨＬＡ－Ａ３４、ＨＬＡ－Ａ３６、
ＨＬＡ－Ａ４３、ＨＬＡ－Ａ６６、ＨＬＡ－Ａ６８、ＨＬＡ－Ａ６９、ＨＬＡ－Ａ７４、
又はＨＬＡ－Ａ８０である。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、Ｈ
ＬＡ－Ａ０２である。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－
Ａ＊０２：０１－５５５、例えばＨＬＡ－Ａ＊０２：０１、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０２、Ｈ
ＬＡ－Ａ＊０２：０３、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０４、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０５、ＨＬＡ－Ａ
＊０２：０６、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０７、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０８、ＨＬＡ－Ａ＊０２：
０９、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１０、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１１、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１２、Ｈ
ＬＡ－Ａ＊０２：１３、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１４、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１５、ＨＬＡ－Ａ
＊０２：１６、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１７、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１８、ＨＬＡ－Ａ＊０２：
１９、ＨＬＡ－Ａ＊０２：２０、ＨＬＡ－Ａ＊０２：２１、ＨＬＡ－Ａ＊０２：２２、又
はＨＬＡ－Ａ＊０２：２４のうちのいずれか１つである。いくつかの実施形態では、ＭＨ
ＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１である。ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１は、
全ての白人の３９～４６％で発現し、したがって、本発明で使用するためのＭＨＣクラス
Ｉタンパク質の適切な選択を表す。
【0314】
いくつかの実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、疾患関連抗原（腫瘍関連抗
原又はウイルスコード抗原など）に由来するペプチド及びＭＨＣクラスＩＩタンパク質を
含む複合体に特異的に結合し、ＭＨＣクラスＩＩタンパク質は、ＨＬＡ－ＤＰ、ＨＬＡ－
ＤＱ、又はＨＬＡ－ＤＲである。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩＩタンパク質
は、ＨＬＡ－ＤＰである。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩＩタンパク質は、Ｈ
ＬＡ－ＤＱである。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩＩタンパク質は、ＨＬＡ－
ＤＲである。
原又はウイルスコード抗原など）に由来するペプチド及びＭＨＣクラスＩＩタンパク質を
含む複合体に特異的に結合し、ＭＨＣクラスＩＩタンパク質は、ＨＬＡ－ＤＰ、ＨＬＡ－
ＤＱ、又はＨＬＡ－ＤＲである。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩＩタンパク質
は、ＨＬＡ－ＤＰである。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩＩタンパク質は、Ｈ
ＬＡ－ＤＱである。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩＩタンパク質は、ＨＬＡ－
ＤＲである。
【0315】
Ｆａｂ様抗原結合モジュールの生成に使用するのに適したペプチドは、例えば、当業者
に既知のコンピュータ予測モデルを使用して、ＨＬＡ（例えば、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１
）結合モチーフ並びにプロテアソーム及び免疫プロテアソームの切断部位の存在に基づい
て決定することができる。ＭＨＣ結合部位を予測するために、このようなモデルとしては
、ＰｒｏＰｒｅｄ１（Ｓｉｎｇｈ ａｎｄ Ｒａｇｈａｖａ，ＰｒｏＰｒｅｄ：ｐｒｅｄ
ｉｃｔｉｏｎ ｏｆ ＨＬＡ－ＤＲ ｂｉｎｄｉｎｇ ｓｉｔｅｓ．ＢＩＯＩＮＦＯＲＭ
ＡＴＩＣＳ １７（１２）：１２３６－１２３７，２００１でより詳細に記載される）、
及びＳＹＦＰＥＩＴＨＩ（Ｓｃｈｕｌｅｒ ｅｔ ａｌ．ＳＹＦＰＥＩＴＨＩ，Ｄａｔａ
ｂａｓｅ ｆｏｒ Ｓｅａｒｃｈｉｎｇ ａｎｄ Ｔ－Ｃｅｌｌ Ｅｐｉｔｏｐｅ Ｐｒ
ｅｄｉｃｔｉｏｎ．ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ
Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ ４０９（１）：７５－９３，２００７
を参照されたい）が挙げられるが、これらに限定されない。
に既知のコンピュータ予測モデルを使用して、ＨＬＡ（例えば、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１
）結合モチーフ並びにプロテアソーム及び免疫プロテアソームの切断部位の存在に基づい
て決定することができる。ＭＨＣ結合部位を予測するために、このようなモデルとしては
、ＰｒｏＰｒｅｄ１（Ｓｉｎｇｈ ａｎｄ Ｒａｇｈａｖａ，ＰｒｏＰｒｅｄ：ｐｒｅｄ
ｉｃｔｉｏｎ ｏｆ ＨＬＡ－ＤＲ ｂｉｎｄｉｎｇ ｓｉｔｅｓ．ＢＩＯＩＮＦＯＲＭ
ＡＴＩＣＳ １７（１２）：１２３６－１２３７，２００１でより詳細に記載される）、
及びＳＹＦＰＥＩＴＨＩ（Ｓｃｈｕｌｅｒ ｅｔ ａｌ．ＳＹＦＰＥＩＴＨＩ，Ｄａｔａ
ｂａｓｅ ｆｏｒ Ｓｅａｒｃｈｉｎｇ ａｎｄ Ｔ－Ｃｅｌｌ Ｅｐｉｔｏｐｅ Ｐｒ
ｅｄｉｃｔｉｏｎ．ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ
Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ ４０９（１）：７５－９３，２００７
を参照されたい）が挙げられるが、これらに限定されない。
【0316】
適切なペプチドが同定されると、当業者に公知のプロトコールに従ってペプチド合成を
行うことができる。これらの比較的小さいサイズのため、本発明のペプチドは、従来のペ
プチド合成技術に従って溶液中又は固体担体上で直接合成され得る。様々な自動合成装置
が市販されており、既知のプロトコールに従って使用することができる。溶液相中のペプ
チドの合成は、合成ペプチドの大規模生産のための十分に確立された手順となっており、
したがって、本発明のペプチドを調製するための好適な代替方法である（例えば、Ｓｏｌ
ｉｄ Ｐｈａｓｅ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｂｙ Ｊｏｈｎ Ｍｏｒｒｏ
ｗ Ｓｔｅｗａｒｔ、及びＭａｒｔｉｎ ｅｔ ａｌ．Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ
Ａｌｍｅｚ－ｍｅｄｉａｔｅｄ Ａｍｉｄａｔｉｏｎ Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ ｔｏ Ｓｏ
ｌｕｔｉｏｎ Ｐｈａｓｅ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒ
ｏｎ Ｌｅｔｔｅｒｓ Ｖｏｌ．３９，ｐａｇｅｓ １５１７－１５２０，１９９８を参
照されたい）。
医薬組成物
行うことができる。これらの比較的小さいサイズのため、本発明のペプチドは、従来のペ
プチド合成技術に従って溶液中又は固体担体上で直接合成され得る。様々な自動合成装置
が市販されており、既知のプロトコールに従って使用することができる。溶液相中のペプ
チドの合成は、合成ペプチドの大規模生産のための十分に確立された手順となっており、
したがって、本発明のペプチドを調製するための好適な代替方法である（例えば、Ｓｏｌ
ｉｄ Ｐｈａｓｅ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｂｙ Ｊｏｈｎ Ｍｏｒｒｏ
ｗ Ｓｔｅｗａｒｔ、及びＭａｒｔｉｎ ｅｔ ａｌ．Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ
Ａｌｍｅｚ－ｍｅｄｉａｔｅｄ Ａｍｉｄａｔｉｏｎ Ｒｅａｃｔｉｏｎｓ ｔｏ Ｓｏ
ｌｕｔｉｏｎ Ｐｈａｓｅ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒ
ｏｎ Ｌｅｔｔｅｒｓ Ｖｏｌ．３９，ｐａｇｅｓ １５１７－１５２０，１９９８を参
照されたい）。
医薬組成物
【0317】
本明細書では、本明細書に記載されるｃａＴＣＲのいずれかによるｃａＴＣＲ、及び本
明細書に記載のＣＳＲのいずれかによるＣＳＲを表面に提示する免疫細胞（Ｔ細胞など）
を含む、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞組成物（医薬組成物など、本明細書では製剤とも呼
ばれる）も提供される。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞組成物は
、医薬組成物である。
明細書に記載のＣＳＲのいずれかによるＣＳＲを表面に提示する免疫細胞（Ｔ細胞など）
を含む、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞組成物（医薬組成物など、本明細書では製剤とも呼
ばれる）も提供される。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞組成物は
、医薬組成物である。
【0318】
組成物は、同じ細胞型のものであり、同じｃａＴＣＲ及びＣＳＲを発現するｃａＴＣＲ
＋ＣＳＲ免疫細胞を含む均質な細胞集団、又は異なる細胞型のｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細
胞を含み、異なるｃａＴＣＲを発現し、及び／又は異なるＣＳＲを発現する、複数のｃａ
ＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞を含む異種細胞集団を含んでもよい。組成物は、ｃａＴＣＲ＋Ｃ
ＳＲ免疫細胞ではない細胞を更に含んでもよい。
＋ＣＳＲ免疫細胞を含む均質な細胞集団、又は異なる細胞型のｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細
胞を含み、異なるｃａＴＣＲを発現し、及び／又は異なるＣＳＲを発現する、複数のｃａ
ＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞を含む異種細胞集団を含んでもよい。組成物は、ｃａＴＣＲ＋Ｃ
ＳＲ免疫細胞ではない細胞を更に含んでもよい。
【0319】
したがって、いくつかの実施形態では、同じ細胞型のものであり、同じｃａＴＣＲ及び
ＣＳＲを発現するｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞（ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ Ｔ細胞など）の均
質な細胞集団を含む、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞組成物が提供される。いくつかの実施
形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞は、Ｔ細胞である。いくつかの実施形態では、ｃ
ａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ
細胞、及びサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ｃ
ａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞組成物は、医薬組成物である。
ＣＳＲを発現するｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞（ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ Ｔ細胞など）の均
質な細胞集団を含む、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞組成物が提供される。いくつかの実施
形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞は、Ｔ細胞である。いくつかの実施形態では、ｃ
ａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ
細胞、及びサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ｃ
ａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞組成物は、医薬組成物である。
【0320】
いくつかの実施形態では、異なる細胞型のｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞を含み、異なる
ｃａＴＣＲを発現し、及び／又は異なるＣＳＲを発現する複数のｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫
細胞集団を含む異種細胞集団を含むｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞組成物が提供される。い
くつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞は、Ｔ細胞である。いくつかの実施
形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の各集団は、互いに独立して、細胞傷害性Ｔ細胞
、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、及びサプレッサーＴ細胞からなる群から選
択される細胞型のものである。いくつかの実施形態では、組成物中のｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ
免疫細胞の全ては、同じ細胞型のものである（例えば、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の全
ては細胞傷害性Ｔ細胞である）。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞
の少なくとも１つの集団は、他とは異なる細胞型のものである（例えば、ｃａＴＣＲ＋Ｃ
ＳＲ免疫細胞の１つの集団は細胞傷害性Ｔ細胞からなり、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の
他の集団は、ナチュラルキラーＴ細胞からなる）。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ
＋ＣＳＲ免疫細胞の各集団は、同じｃａＴＣＲを発現する。いくつかの実施形態では、ｃ
ａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の少なくとも１つの集団は、他とは異なるｃａＴＣＲを発現す
る。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の各集団は、他とは異なるｃ
ａＴＣＲを発現する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の各集団は
、同じ標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲを発現する。いくつかの実施形態では、ｃ
ａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の少なくとも１つの集団は、他とは異なる標的抗原に特異的に
結合するｃａＴＣＲを発現する（例えば、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の１つの集団は、
ｐＭＨＣ複合体に特異的に結合し、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の他の集団は、細胞表面
受容体に特異的に結合する）。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の
少なくとも１つの集団が、異なる標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲを発現する場合
、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の各集団は、同じ疾患又は障害に関連する標的抗原に特異
的に結合するｃａＴＣＲを発現する（例えば、標的抗原のそれぞれは、乳癌などのがんに
関連する）。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の各集団は、同じＣ
ＳＲを発現する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の少なくとも１
つの集団は、他とは異なるＣＳＲを発現する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋Ｃ
ＳＲ免疫細胞の各集団は、他とは異なるＣＳＲを発現する。いくつかの実施形態では、ｃ
ａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の各集団は、同じ標的リガンドに特異的に結合するＣＳＲを発
現する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の少なくとも１つの集団
は、他とは異なる標的リガンドに特異的に結合するＣＳＲを発現する（例えば、ｃａＴＣ
Ｒ＋ＣＳＲ免疫細胞の１つの集団は、ｐＭＨＣ複合体に特異的に結合し、ｃａＴＣＲ＋Ｃ
ＳＲ免疫細胞の他の集団は、細胞表面受容体に特異的に結合する）。いくつかの実施形態
では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の少なくとも１つの集団が、異なる標的リガンドに特
異的に結合するＣＳＲを発現する場合、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の各集団は、同じ疾
患又は障害に関連する標的リガンドに特異的に結合するＣＳＲを発現する（例えば、標的
リガンドのそれぞれは、乳癌などのがんに関連する）。いくつかの実施形態では、ｃａＴ
ＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞組成物は、医薬組成物である。
ｃａＴＣＲを発現し、及び／又は異なるＣＳＲを発現する複数のｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫
細胞集団を含む異種細胞集団を含むｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞組成物が提供される。い
くつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞は、Ｔ細胞である。いくつかの実施
形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の各集団は、互いに独立して、細胞傷害性Ｔ細胞
、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、及びサプレッサーＴ細胞からなる群から選
択される細胞型のものである。いくつかの実施形態では、組成物中のｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ
免疫細胞の全ては、同じ細胞型のものである（例えば、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の全
ては細胞傷害性Ｔ細胞である）。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞
の少なくとも１つの集団は、他とは異なる細胞型のものである（例えば、ｃａＴＣＲ＋Ｃ
ＳＲ免疫細胞の１つの集団は細胞傷害性Ｔ細胞からなり、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の
他の集団は、ナチュラルキラーＴ細胞からなる）。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ
＋ＣＳＲ免疫細胞の各集団は、同じｃａＴＣＲを発現する。いくつかの実施形態では、ｃ
ａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の少なくとも１つの集団は、他とは異なるｃａＴＣＲを発現す
る。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の各集団は、他とは異なるｃ
ａＴＣＲを発現する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の各集団は
、同じ標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲを発現する。いくつかの実施形態では、ｃ
ａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の少なくとも１つの集団は、他とは異なる標的抗原に特異的に
結合するｃａＴＣＲを発現する（例えば、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の１つの集団は、
ｐＭＨＣ複合体に特異的に結合し、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の他の集団は、細胞表面
受容体に特異的に結合する）。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の
少なくとも１つの集団が、異なる標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲを発現する場合
、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の各集団は、同じ疾患又は障害に関連する標的抗原に特異
的に結合するｃａＴＣＲを発現する（例えば、標的抗原のそれぞれは、乳癌などのがんに
関連する）。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の各集団は、同じＣ
ＳＲを発現する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の少なくとも１
つの集団は、他とは異なるＣＳＲを発現する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋Ｃ
ＳＲ免疫細胞の各集団は、他とは異なるＣＳＲを発現する。いくつかの実施形態では、ｃ
ａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の各集団は、同じ標的リガンドに特異的に結合するＣＳＲを発
現する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の少なくとも１つの集団
は、他とは異なる標的リガンドに特異的に結合するＣＳＲを発現する（例えば、ｃａＴＣ
Ｒ＋ＣＳＲ免疫細胞の１つの集団は、ｐＭＨＣ複合体に特異的に結合し、ｃａＴＣＲ＋Ｃ
ＳＲ免疫細胞の他の集団は、細胞表面受容体に特異的に結合する）。いくつかの実施形態
では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の少なくとも１つの集団が、異なる標的リガンドに特
異的に結合するＣＳＲを発現する場合、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の各集団は、同じ疾
患又は障害に関連する標的リガンドに特異的に結合するＣＳＲを発現する（例えば、標的
リガンドのそれぞれは、乳癌などのがんに関連する）。いくつかの実施形態では、ｃａＴ
ＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞組成物は、医薬組成物である。
【0321】
したがって、いくつかの実施形態では、本明細書に記載される実施形態のいずれかによ
る複数のｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞集団を含むｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞組成物が提
供され、組成物中のｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の全てが同じ細胞型であり（例えば、ｃ
ａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の全てが細胞傷害性Ｔ細胞である）、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫
細胞の各集団は、他とは異なるｃａＴＣＲを発現する。いくつかの実施形態では、ｃａＴ
ＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞は、Ｔ細胞である。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ
免疫細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、及びサプレ
ッサーＴ細胞からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ
免疫細胞の各集団は、同じ標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲを発現する。いくつか
の実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の少なくとも１つの集団は、他のものとは
異なる標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲを発現する（例えば、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ
免疫細胞の１つの集団は、ｐＭＨＣ複合体に特異的に結合し、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細
胞の他の集団は、細胞表面受容体に特異的に結合する）。いくつかの実施形態では、ｃａ
ＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の少なくとも１つの集団が、異なる標的抗原に特異的に結合する
ｃａＴＣＲを発現する場合、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の各集団は、同じ疾患又は障害
に関連する標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲを発現する（例えば、標的抗原のそれ
ぞれは、乳癌などのがんに関連する）。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免
疫細胞組成物は、医薬組成物である。
る複数のｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞集団を含むｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞組成物が提
供され、組成物中のｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の全てが同じ細胞型であり（例えば、ｃ
ａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の全てが細胞傷害性Ｔ細胞である）、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫
細胞の各集団は、他とは異なるｃａＴＣＲを発現する。いくつかの実施形態では、ｃａＴ
ＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞は、Ｔ細胞である。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ
免疫細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、及びサプレ
ッサーＴ細胞からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ
免疫細胞の各集団は、同じ標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲを発現する。いくつか
の実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の少なくとも１つの集団は、他のものとは
異なる標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲを発現する（例えば、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ
免疫細胞の１つの集団は、ｐＭＨＣ複合体に特異的に結合し、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細
胞の他の集団は、細胞表面受容体に特異的に結合する）。いくつかの実施形態では、ｃａ
ＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の少なくとも１つの集団が、異なる標的抗原に特異的に結合する
ｃａＴＣＲを発現する場合、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の各集団は、同じ疾患又は障害
に関連する標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲを発現する（例えば、標的抗原のそれ
ぞれは、乳癌などのがんに関連する）。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免
疫細胞組成物は、医薬組成物である。
【0322】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載される実施形態のいずれかによる複数のｃａ
ＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞集団を含むｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞組成物が提供され、組成
物中のｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の全てが同じ細胞型であり（例えば、ｃａＴＣＲ＋Ｃ
ＳＲ免疫細胞の全てが細胞傷害性Ｔ細胞である）、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の各集団
は、他とは異なるＣＳＲを発現する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫
細胞は、Ｔ細胞である。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞は、細胞
傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、及びサプレッサーＴ細胞から
なる群から選択される。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の各集団
は、同じ標的リガンドに特異的に結合するＣＳＲを発現する。いくつかの実施形態では、
ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の少なくとも１つの集団は、他のものとは異なる標的リガン
ドに特異的に結合するＣＳＲを発現する（例えば、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の１つの
集団は、ｐＭＨＣ複合体に特異的に結合し、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の他の集団は、
細胞表面受容体に特異的に結合する）。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免
疫細胞の少なくとも１つの集団が、異なる標的リガンドに特異的に結合するＣＳＲを発現
する場合、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の各集団は、同じ疾患又は障害に関連する標的リ
ガンドに特異的に結合するＣＳＲを発現する（例えば、標的リガンドのそれぞれは、乳癌
などのがんに関連する）。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞組成物
は、医薬組成物である。
ＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞集団を含むｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞組成物が提供され、組成
物中のｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の全てが同じ細胞型であり（例えば、ｃａＴＣＲ＋Ｃ
ＳＲ免疫細胞の全てが細胞傷害性Ｔ細胞である）、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の各集団
は、他とは異なるＣＳＲを発現する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫
細胞は、Ｔ細胞である。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞は、細胞
傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、及びサプレッサーＴ細胞から
なる群から選択される。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の各集団
は、同じ標的リガンドに特異的に結合するＣＳＲを発現する。いくつかの実施形態では、
ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の少なくとも１つの集団は、他のものとは異なる標的リガン
ドに特異的に結合するＣＳＲを発現する（例えば、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の１つの
集団は、ｐＭＨＣ複合体に特異的に結合し、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の他の集団は、
細胞表面受容体に特異的に結合する）。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免
疫細胞の少なくとも１つの集団が、異なる標的リガンドに特異的に結合するＣＳＲを発現
する場合、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の各集団は、同じ疾患又は障害に関連する標的リ
ガンドに特異的に結合するＣＳＲを発現する（例えば、標的リガンドのそれぞれは、乳癌
などのがんに関連する）。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞組成物
は、医薬組成物である。
【0323】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載される実施形態のいずれかによる複数のｃａ
ＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞集団を含む組成物が提供され、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の少
なくとも１つの集団は、他とは異なる細胞型のものである。いくつかの実施形態では、ｃ
ａＴＣＲ及びＣＳＲ免疫細胞の集団の全ては、異なる細胞型のものである。いくつかの実
施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞は、Ｔ細胞である。いくつかの実施形態では、
ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の各集団は、互いに独立して、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパー
Ｔ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、及びサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される細
胞型のものである。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の各集団は、
同じｃａＴＣＲを発現する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の少
なくとも１つの集団は、他とは異なるｃａＴＣＲを発現する。いくつかの実施形態では、
ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の各集団は、他とは異なるｃａＴＣＲを発現する。いくつか
の実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の各集団は、同じ標的抗原に特異的に結合
するｃａＴＣＲを発現する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の少
なくとも１つの集団は、他のものとは異なる標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲを発
現する（例えば、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の１つの集団は、ｐＭＨＣ複合体に特異的
に結合し、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の他の集団は、細胞表面受容体に特異的に結合す
る）。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の少なくとも１つの集団が
、異なる標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲを発現する場合、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免
疫細胞の各集団は、同じ疾患又は障害に関連する標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲ
を発現する（例えば、標的抗原のそれぞれは、乳癌などのがんに関連する）。いくつかの
実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の各集団は、同じＣＳＲを発現する。いくつ
かの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の少なくとも１つの集団は、他とは異な
るＣＳＲを発現する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の各集団は
、他とは異なるＣＳＲを発現する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細
胞の各集団は、同じ標的リガンドに特異的に結合するＣＳＲを発現する。いくつかの実施
形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の少なくとも１つの集団は、他のものとは異なる
標的リガンドに特異的に結合するＣＳＲを発現する（例えば、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細
胞の１つの集団は、ｐＭＨＣ複合体に特異的に結合し、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の他
の集団は、細胞表面受容体に特異的に結合する）。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ
＋ＣＳＲ免疫細胞の少なくとも１つの集団が、異なる標的リガンドに特異的に結合するＣ
ＳＲを発現する場合、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の各集団は、同じ疾患又は障害に関連
する標的リガンドに特異的に結合するＣＳＲを発現する（例えば、標的リガンドのそれぞ
れは、乳癌などのがんに関連する）。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫
細胞組成物は、医薬組成物である。
ＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞集団を含む組成物が提供され、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の少
なくとも１つの集団は、他とは異なる細胞型のものである。いくつかの実施形態では、ｃ
ａＴＣＲ及びＣＳＲ免疫細胞の集団の全ては、異なる細胞型のものである。いくつかの実
施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞は、Ｔ細胞である。いくつかの実施形態では、
ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の各集団は、互いに独立して、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパー
Ｔ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞、及びサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される細
胞型のものである。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の各集団は、
同じｃａＴＣＲを発現する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の少
なくとも１つの集団は、他とは異なるｃａＴＣＲを発現する。いくつかの実施形態では、
ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の各集団は、他とは異なるｃａＴＣＲを発現する。いくつか
の実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の各集団は、同じ標的抗原に特異的に結合
するｃａＴＣＲを発現する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の少
なくとも１つの集団は、他のものとは異なる標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲを発
現する（例えば、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の１つの集団は、ｐＭＨＣ複合体に特異的
に結合し、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の他の集団は、細胞表面受容体に特異的に結合す
る）。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の少なくとも１つの集団が
、異なる標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲを発現する場合、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免
疫細胞の各集団は、同じ疾患又は障害に関連する標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲ
を発現する（例えば、標的抗原のそれぞれは、乳癌などのがんに関連する）。いくつかの
実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の各集団は、同じＣＳＲを発現する。いくつ
かの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の少なくとも１つの集団は、他とは異な
るＣＳＲを発現する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の各集団は
、他とは異なるＣＳＲを発現する。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細
胞の各集団は、同じ標的リガンドに特異的に結合するＣＳＲを発現する。いくつかの実施
形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の少なくとも１つの集団は、他のものとは異なる
標的リガンドに特異的に結合するＣＳＲを発現する（例えば、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細
胞の１つの集団は、ｐＭＨＣ複合体に特異的に結合し、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の他
の集団は、細胞表面受容体に特異的に結合する）。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ
＋ＣＳＲ免疫細胞の少なくとも１つの集団が、異なる標的リガンドに特異的に結合するＣ
ＳＲを発現する場合、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞の各集団は、同じ疾患又は障害に関連
する標的リガンドに特異的に結合するＣＳＲを発現する（例えば、標的リガンドのそれぞ
れは、乳癌などのがんに関連する）。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫
細胞組成物は、医薬組成物である。
【0324】
組成物の調製中の様々な時点において、細胞を凍結保存することが必要であるか、又は
有益であり得る。用語「凍結される／凍結する」及び「凍結保存される／冷凍保存する」
は、互換可能に使用することができる。凍結は凍結乾燥を含む。
有益であり得る。用語「凍結される／凍結する」及び「凍結保存される／冷凍保存する」
は、互換可能に使用することができる。凍結は凍結乾燥を含む。
【0325】
当業者には理解されるように、細胞の凍結は破壊的であり得る（Ｍａｚｕｒ，Ｐ．，１
９７７，Ｃｒｙｏｂｉｏｌｏｇｙ １４：２５１－２７２を参照されたい）が、そのよう
な損傷を防止するために利用可能な多くの手順が存在する。例えば、損傷は、（ａ）凍結
保護剤の使用、（ｂ）凍結速度の制御、及び／又は（ｃ）分解反応を最小限に抑えるため
に十分な低い温度で保管することによって回避することができる。例示的な凍結保護剤と
しては、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）（Ｌｏｖｅｌｏｃｋ ａｎｄ Ｂｉｓｈｏｐ
，１９５９，Ｎａｔｕｒｅ １８３：１３９４－１３９５、Ａｓｈｗｏｏｄ－Ｓｍｉｔｈ
，１９６１，Ｎａｔｕｒｅ １９０：１２０４－１２０５）、グリセロール、ポリビニル
ピロリドン（Ｒｉｎｆｒｅｔ，１９６０，Ａｎｎ．Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．８５：５
７６）、ポリエチレングリコール（Ｓｌｏｖｉｔｅｒ ａｎｄ Ｒａｖｄｉｎ，１９６２
，Ｎａｔｕｒｅ １９６：５４８）、アルブミン、デキストラン、スクロース、エチレン
グリコール、ｉ－エリスリトール、Ｄ－リビトール、Ｄ－マンニトール（Ｒｏｗｅ ｅｔ
ａｌ．，１９６２，Ｆｅｄ．Ｐｒｏｃ．２１：１５７）、Ｄ－ソルビトール、ｉ－イノ
シトール、Ｄ－ラクトース、塩化コリン（Ｂｅｎｄｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９６０，Ｊ．
Ａｐｐｌ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．１５：５２０）、アミノ酸（Ｐｈａｎ Ｔｈｅ Ｔｒａｎ
ａｎｄ Ｂｅｎｄｅｒ，１９６０，Ｅｘｐ．Ｃｅｌｌ Ｒｅｓ．２０：６５１）、メタノ
ール、アセトアミド、グリセロールモノアセテート（Ｌｏｖｅｌｏｃｋ，１９５４，Ｂｉ
ｏｃｈｅｍ．Ｊ．５６：２６５）、及び無機塩（Ｐｈａｎ Ｔｈｅ Ｔｒａｎ ａｎｄ
Ｂｅｎｄｅｒ，１９６０，Ｐｒｏｃ．Ｓｏｃ．Ｅｘｐ．Ｂｉｏｌ．Ｍｅｄ．１０４：３８
８、Ｐｈａｎ Ｔｈｅ Ｔｒａｎ ａｎｄ Ｂｅｎｄｅｒ，１９６１，Ｒａｄｉｏｂｉｏ
ｌｏｇｙ，Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｔｈｉｒｄ Ａｕｓｔｒａｌｉａｎ
Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ ｏｎ Ｒａｄｉｏｂｉｏｌｏｇｙ，Ｌｌｌｅｒｙ ｅｄ．，Ｂ
ｕｔｔｅｒｗｏｒｔｈ，Ｌｏｎｄｏｎ，ｐ．５９）が挙げられる。特定の実施形態では、
ＤＭＳＯを使用することができる。血漿の添加（例えば、２０～２５％の濃度まで）は、
ＤＭＳＯの保護効果を増強することができる。ＤＭＳＯを添加した後、１％のＤＭＳＯ濃
度は４℃を超える温度で毒性であり得るため、凍結まで細胞を０℃で維持することができ
る。
９７７，Ｃｒｙｏｂｉｏｌｏｇｙ １４：２５１－２７２を参照されたい）が、そのよう
な損傷を防止するために利用可能な多くの手順が存在する。例えば、損傷は、（ａ）凍結
保護剤の使用、（ｂ）凍結速度の制御、及び／又は（ｃ）分解反応を最小限に抑えるため
に十分な低い温度で保管することによって回避することができる。例示的な凍結保護剤と
しては、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）（Ｌｏｖｅｌｏｃｋ ａｎｄ Ｂｉｓｈｏｐ
，１９５９，Ｎａｔｕｒｅ １８３：１３９４－１３９５、Ａｓｈｗｏｏｄ－Ｓｍｉｔｈ
，１９６１，Ｎａｔｕｒｅ １９０：１２０４－１２０５）、グリセロール、ポリビニル
ピロリドン（Ｒｉｎｆｒｅｔ，１９６０，Ａｎｎ．Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．８５：５
７６）、ポリエチレングリコール（Ｓｌｏｖｉｔｅｒ ａｎｄ Ｒａｖｄｉｎ，１９６２
，Ｎａｔｕｒｅ １９６：５４８）、アルブミン、デキストラン、スクロース、エチレン
グリコール、ｉ－エリスリトール、Ｄ－リビトール、Ｄ－マンニトール（Ｒｏｗｅ ｅｔ
ａｌ．，１９６２，Ｆｅｄ．Ｐｒｏｃ．２１：１５７）、Ｄ－ソルビトール、ｉ－イノ
シトール、Ｄ－ラクトース、塩化コリン（Ｂｅｎｄｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９６０，Ｊ．
Ａｐｐｌ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．１５：５２０）、アミノ酸（Ｐｈａｎ Ｔｈｅ Ｔｒａｎ
ａｎｄ Ｂｅｎｄｅｒ，１９６０，Ｅｘｐ．Ｃｅｌｌ Ｒｅｓ．２０：６５１）、メタノ
ール、アセトアミド、グリセロールモノアセテート（Ｌｏｖｅｌｏｃｋ，１９５４，Ｂｉ
ｏｃｈｅｍ．Ｊ．５６：２６５）、及び無機塩（Ｐｈａｎ Ｔｈｅ Ｔｒａｎ ａｎｄ
Ｂｅｎｄｅｒ，１９６０，Ｐｒｏｃ．Ｓｏｃ．Ｅｘｐ．Ｂｉｏｌ．Ｍｅｄ．１０４：３８
８、Ｐｈａｎ Ｔｈｅ Ｔｒａｎ ａｎｄ Ｂｅｎｄｅｒ，１９６１，Ｒａｄｉｏｂｉｏ
ｌｏｇｙ，Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｔｈｉｒｄ Ａｕｓｔｒａｌｉａｎ
Ｃｏｎｆｅｒｅｎｃｅ ｏｎ Ｒａｄｉｏｂｉｏｌｏｇｙ，Ｌｌｌｅｒｙ ｅｄ．，Ｂ
ｕｔｔｅｒｗｏｒｔｈ，Ｌｏｎｄｏｎ，ｐ．５９）が挙げられる。特定の実施形態では、
ＤＭＳＯを使用することができる。血漿の添加（例えば、２０～２５％の濃度まで）は、
ＤＭＳＯの保護効果を増強することができる。ＤＭＳＯを添加した後、１％のＤＭＳＯ濃
度は４℃を超える温度で毒性であり得るため、凍結まで細胞を０℃で維持することができ
る。
【0326】
細胞の冷凍保存において、低速制御冷却速度は重要であり得、異なる凍結保護剤（Ｒａ
ｐａｔｚ ｅｔ ａｌ．，１９６８，Ｃｒｙｏｂｉｏｌｏｇｙ ５（１）：１８－２５）
及び異なる細胞型は、異なる最適冷却速度を有する（例えば、Ｒｏｗｅ ａｎｄ Ｒｉｎ
ｆｒｅｔ，１９６２，Ｂｌｏｏｄ ２０：６３６、Ｒｏｗｅ，１９６６，Ｃｒｙｏｂｉｏ
ｌｏｇｙ ３（１）：１２－１８、Ｌｅｗｉｓ，ｅｔ ａｌ．，１９６７，Ｔｒａｎｓｆ
ｕｓｉｏｎ ７（１）：１７－３２、並びに、幹細胞の生存及びそれらの移植可能性に対
する冷却速度の影響についてのＭａｚｕｒ，１９７０，Ｓｃｉｅｎｃｅ １６８：９３９
－９４９を参照されたい）。水が氷になる融解相の熱は、最小限であるべきである。冷却
手順は、例えば、プログラム可能な凍結装置又はメタノール浴手順の使用によって実行す
ることができる。プログラム可能な凍結装置は、最適な冷却速度の決定を可能にし、標準
的な再現可能な冷却を促進する。
ｐａｔｚ ｅｔ ａｌ．，１９６８，Ｃｒｙｏｂｉｏｌｏｇｙ ５（１）：１８－２５）
及び異なる細胞型は、異なる最適冷却速度を有する（例えば、Ｒｏｗｅ ａｎｄ Ｒｉｎ
ｆｒｅｔ，１９６２，Ｂｌｏｏｄ ２０：６３６、Ｒｏｗｅ，１９６６，Ｃｒｙｏｂｉｏ
ｌｏｇｙ ３（１）：１２－１８、Ｌｅｗｉｓ，ｅｔ ａｌ．，１９６７，Ｔｒａｎｓｆ
ｕｓｉｏｎ ７（１）：１７－３２、並びに、幹細胞の生存及びそれらの移植可能性に対
する冷却速度の影響についてのＭａｚｕｒ，１９７０，Ｓｃｉｅｎｃｅ １６８：９３９
－９４９を参照されたい）。水が氷になる融解相の熱は、最小限であるべきである。冷却
手順は、例えば、プログラム可能な凍結装置又はメタノール浴手順の使用によって実行す
ることができる。プログラム可能な凍結装置は、最適な冷却速度の決定を可能にし、標準
的な再現可能な冷却を促進する。
【0327】
特定の実施形態では、ＤＭＳＯ処理した細胞を、氷上で予め冷却し、冷却メタノールを
収容するトレーに移すことができ、転じて－８０℃の機械的冷凍庫（例えば、Ｈａｒｒｉ
ｓ又はＲｅｖｃｏ）内に定置する。メタノール浴及び試料の熱電対測定値は、１℃～３℃
／分の冷却速度を示すことが好ましくあり得る。少なくとも２時間後、試料は－８０℃の
温度に到達することができ、液体窒素（－１９６℃）に直接配置することができる。
収容するトレーに移すことができ、転じて－８０℃の機械的冷凍庫（例えば、Ｈａｒｒｉ
ｓ又はＲｅｖｃｏ）内に定置する。メタノール浴及び試料の熱電対測定値は、１℃～３℃
／分の冷却速度を示すことが好ましくあり得る。少なくとも２時間後、試料は－８０℃の
温度に到達することができ、液体窒素（－１９６℃）に直接配置することができる。
【0328】
完全凍結後、細胞は、長期凍結保存容器に迅速に移され得る。好ましい実施形態では、
試料は、液体窒素（－１９６℃）又は蒸気（－１℃）に低温保存することができる。この
ような貯蔵は、高効率の液体窒素冷凍庫の利用可能性によって促進される。
試料は、液体窒素（－１９６℃）又は蒸気（－１℃）に低温保存することができる。この
ような貯蔵は、高効率の液体窒素冷凍庫の利用可能性によって促進される。
【0329】
細胞の操作、冷凍保存、及び長期保存のための更なる検討及び手順は、以下の例示的な
参考文献：米国特許第４，１９９，０２２号、同第３，７５３，３５７号、及び同第４，
５５９，２９８号、Ｇｏｒｉｎ，１９８６，Ｃｌｉｎｉｎ Ｈａｅｍａｔｏｌｏｇｙ １
５（１）：１９－４８、Ｂｏｎｅ－Ｍａｒｒｏｗ Ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｏｎ，Ｃｕｌｔ
ｕｒｅ ａｎｄ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ，Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ａ
Ｐａｎｅｌ，Ｍｏｓｃｏｗ，Ｊｕｌｙ ２２－２６，１９６８，Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏ
ｎａｌ Ａｔｏｍｉｃ Ｅｎｅｒｇｙ Ａｇｅｎｃｙ，Ｖｉｅｎｎａ，ｐｐ．１０７－１
８６、Ｌｉｖｅｓｅｙ ａｎｄ Ｌｉｎｎｅｒ，１９８７，Ｎａｔｕｒｅ ３２７：２５
５、Ｌｉｎｎｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９８６，Ｊ．Ｈｉｓｔｏｃｈｅｍ．Ｃｙｔｏｃｈｅ
ｍ．３４（９）：１ １２３－１ １３５、Ｓｉｍｉｏｎｅ，１９９２，Ｊ．Ｐａｒｅｎ
ｔｅｒ．Ｓｃｉ．Ｔｅｃｈｎｏｌ．４６（６）：２２６－３２に見出すことができる。
参考文献：米国特許第４，１９９，０２２号、同第３，７５３，３５７号、及び同第４，
５５９，２９８号、Ｇｏｒｉｎ，１９８６，Ｃｌｉｎｉｎ Ｈａｅｍａｔｏｌｏｇｙ １
５（１）：１９－４８、Ｂｏｎｅ－Ｍａｒｒｏｗ Ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｏｎ，Ｃｕｌｔ
ｕｒｅ ａｎｄ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ，Ｐｒｏｃｅｅｄｉｎｇｓ ｏｆ ａ
Ｐａｎｅｌ，Ｍｏｓｃｏｗ，Ｊｕｌｙ ２２－２６，１９６８，Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏ
ｎａｌ Ａｔｏｍｉｃ Ｅｎｅｒｇｙ Ａｇｅｎｃｙ，Ｖｉｅｎｎａ，ｐｐ．１０７－１
８６、Ｌｉｖｅｓｅｙ ａｎｄ Ｌｉｎｎｅｒ，１９８７，Ｎａｔｕｒｅ ３２７：２５
５、Ｌｉｎｎｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９８６，Ｊ．Ｈｉｓｔｏｃｈｅｍ．Ｃｙｔｏｃｈｅ
ｍ．３４（９）：１ １２３－１ １３５、Ｓｉｍｉｏｎｅ，１９９２，Ｊ．Ｐａｒｅｎ
ｔｅｒ．Ｓｃｉ．Ｔｅｃｈｎｏｌ．４６（６）：２２６－３２に見出すことができる。
【0330】
冷凍保存後、凍結した細胞を、当業者に既知の方法に従って使用するために解凍するこ
とができる。凍結した細胞は、好ましくは迅速に解凍され、解凍直後に冷却される。特定
の実施形態では、凍結した細胞を収容するバイアルを、温水浴中でその頸状部まで浸漬す
ることができ、穏やかな回転により、解凍するときの細胞懸濁液の混合、及び温水から内
部氷塊への熱伝達の増加を確実にする。氷が完全に融解するとすぐに、直ちに氷の上にバ
イアルを載せることができる。
とができる。凍結した細胞は、好ましくは迅速に解凍され、解凍直後に冷却される。特定
の実施形態では、凍結した細胞を収容するバイアルを、温水浴中でその頸状部まで浸漬す
ることができ、穏やかな回転により、解凍するときの細胞懸濁液の混合、及び温水から内
部氷塊への熱伝達の増加を確実にする。氷が完全に融解するとすぐに、直ちに氷の上にバ
イアルを載せることができる。
【0331】
特定の実施形態では、解凍中の細胞凝集を防止する、方法を使用することができる。例
示的な方法としては、ＤＮａｓｅ（Ｓｐｉｔｚｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９８０，Ｃａｎｃ
ｅｒ ４５：３０７５－３０８５）、低分子量デキストラン及びクエン酸、ヒドロキシエ
チルデンプン（Ｓｔｉｆｆ ｅｔ ａｌ．，１９８３，Ｃｒｙｏｂｉｏｌｏｇｙ ２０：
１７－２４）などの凍結前及び／又は凍結後の添加が挙げられる。［０１６２］当業者に
は理解されるように、ヒトに毒性がある凍結保護剤が使用される場合、治療的使用の前に
除去されるべきである。ＤＭＳＯは、深刻な毒性を有さない。
示的な方法としては、ＤＮａｓｅ（Ｓｐｉｔｚｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９８０，Ｃａｎｃ
ｅｒ ４５：３０７５－３０８５）、低分子量デキストラン及びクエン酸、ヒドロキシエ
チルデンプン（Ｓｔｉｆｆ ｅｔ ａｌ．，１９８３，Ｃｒｙｏｂｉｏｌｏｇｙ ２０：
１７－２４）などの凍結前及び／又は凍結後の添加が挙げられる。［０１６２］当業者に
は理解されるように、ヒトに毒性がある凍結保護剤が使用される場合、治療的使用の前に
除去されるべきである。ＤＭＳＯは、深刻な毒性を有さない。
【0332】
細胞の例示的な担体及び投与方法は、米国特許公開第２０１０／０１８３５６４号の１
４～１５ページに記載されている。追加の医薬担体は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓ
ｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ ｏｆ Ｍａｃｙ，２１ ｓｔ Ｅｄｉ
ｔｉｏｎ，Ｄａｖｉｄ Ｂ．Ｔｒｏｙ，ｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ
＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ（２００５）に記載されている。
４～１５ページに記載されている。追加の医薬担体は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓ
ｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ ｏｆ Ｍａｃｙ，２１ ｓｔ Ｅｄｉ
ｔｉｏｎ，Ｄａｖｉｄ Ｂ．Ｔｒｏｙ，ｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ
＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ（２００５）に記載されている。
【0333】
特定の実施形態では、細胞を培養培地から採取し、洗浄し、治療有効量で担体に濃縮す
ることができる。例示的な担体としては、生理食塩水、緩衝生理食塩水、生理食塩水、水
、Ｈａｎｋｓ溶液、リンガー溶液、Ｎｏｎｎｏｓｏｌ－Ｒ（Ａｂｂｏｔｔ Ｌａｂｓ）、
ＰｌａｓｍａＬｙｔｅ Ａ（Ｒ）（Ｂａｘｔｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．
，Ｍｏｒｔｏｎ Ｇｒｏｖｅ，ＩＬ）、グリセロール、エタノール、及びこれらの組み合
わせが挙げられる。
ることができる。例示的な担体としては、生理食塩水、緩衝生理食塩水、生理食塩水、水
、Ｈａｎｋｓ溶液、リンガー溶液、Ｎｏｎｎｏｓｏｌ－Ｒ（Ａｂｂｏｔｔ Ｌａｂｓ）、
ＰｌａｓｍａＬｙｔｅ Ａ（Ｒ）（Ｂａｘｔｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．
，Ｍｏｒｔｏｎ Ｇｒｏｖｅ，ＩＬ）、グリセロール、エタノール、及びこれらの組み合
わせが挙げられる。
【0334】
特定の実施形態では、担体は、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）又は他のヒト血清成分又
はウシ胎児血清を補充することができる。特定の実施形態では、注入のための担体は、５
％ＨＡＳ又はデキストロースを有する緩衝化生理食塩水を含む。さらなる等張剤として、
三価以上の糖アルコール、例えばグリセリン、エリスリトール、アラビトール、キシリト
ール、ソルビトール、又はマンニトールを含む多価糖アルコールが挙げられる。
はウシ胎児血清を補充することができる。特定の実施形態では、注入のための担体は、５
％ＨＡＳ又はデキストロースを有する緩衝化生理食塩水を含む。さらなる等張剤として、
三価以上の糖アルコール、例えばグリセリン、エリスリトール、アラビトール、キシリト
ール、ソルビトール、又はマンニトールを含む多価糖アルコールが挙げられる。
【0335】
担体としては、クエン酸緩衝剤、コハク酸塩緩衝剤、酒石酸緩衝剤、フマル酸緩衝剤、
グルコン酸緩衝剤、シュウ酸緩衝剤、乳酸緩衝剤、酢酸緩衝剤、リン酸緩衝剤、ヒスチジ
ン緩衝剤、及び／又はトリメチルアミン塩などの緩衝剤を挙げることができる。
グルコン酸緩衝剤、シュウ酸緩衝剤、乳酸緩衝剤、酢酸緩衝剤、リン酸緩衝剤、ヒスチジ
ン緩衝剤、及び／又はトリメチルアミン塩などの緩衝剤を挙げることができる。
【0336】
安定剤は、容器壁への細胞の接着を防止するのに役立つ増量剤から添加剤までの範囲で
機能することができる、広範囲の賦形剤を指す。典型的な安定剤としては、多価糖アルコ
ール；アルギニン、リジン、グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アラニ
ン、オルニチン、Ｌ－ロイシン、２－フェニルアラニン、グルタミン酸、及びスレオニン
などのアミノ酸；ラクトース、トレハロース、スタキオース、マンニトール、ソルビトー
ル、キシリトール、リビトール、ミオニシトール、ガラクチトール、グリセロール、など
の有機等又は糖アルコール、及びイノシトールなどのシクリトール；ＰＥＧ；アミノ酸ポ
リマー；尿素、グルタチオン、チオクト酸、チオグリコール酸ナトリウム、チオグリセロ
ール、α－モノチオグリセロール、及びチオ硫酸ナトリウムなどのイオウ含有還元剤；低
分子量ポリペプチド（すなわち、＜１０残基）；ＨＳＡ、ウシ血清アルブミン、ゼラチン
、又は免疫グロブリンなどのタンパク質；ポリビニルピロリドンなどの親水性ポリマー；
キシロース、マンノース、フルクトース、及びグルコースなどの単糖類；ラクトース、マ
ルトース、及びスクロースなどの二糖類；ラフィノースなどの三糖類、及びデキストラン
などの多糖類を挙げることができる。
機能することができる、広範囲の賦形剤を指す。典型的な安定剤としては、多価糖アルコ
ール；アルギニン、リジン、グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アラニ
ン、オルニチン、Ｌ－ロイシン、２－フェニルアラニン、グルタミン酸、及びスレオニン
などのアミノ酸；ラクトース、トレハロース、スタキオース、マンニトール、ソルビトー
ル、キシリトール、リビトール、ミオニシトール、ガラクチトール、グリセロール、など
の有機等又は糖アルコール、及びイノシトールなどのシクリトール；ＰＥＧ；アミノ酸ポ
リマー；尿素、グルタチオン、チオクト酸、チオグリコール酸ナトリウム、チオグリセロ
ール、α－モノチオグリセロール、及びチオ硫酸ナトリウムなどのイオウ含有還元剤；低
分子量ポリペプチド（すなわち、＜１０残基）；ＨＳＡ、ウシ血清アルブミン、ゼラチン
、又は免疫グロブリンなどのタンパク質；ポリビニルピロリドンなどの親水性ポリマー；
キシロース、マンノース、フルクトース、及びグルコースなどの単糖類；ラクトース、マ
ルトース、及びスクロースなどの二糖類；ラフィノースなどの三糖類、及びデキストラン
などの多糖類を挙げることができる。
【0337】
必要な又は有益な場合、組成物は、注射部位における疼痛を和らげるためにリドカイン
などの局所麻酔剤を含むことができる。
などの局所麻酔剤を含むことができる。
【0338】
例示的な防腐剤としては、フェノール、ベンジルアルコール、メタ－クレゾール、メチ
ルパラベン、プロピルパラベン、オクタデシルジメチルベンジルアンモニウムクロリド、
ベンザルコニウムハライド、ヘキサメトニウムクロリド、メチル又はプロピルパラベンな
どのアルキルパラベン、カテコール、レゾルシノール、シクロヘキサノール、及び３－ペ
ンタノールが挙げられる。
ルパラベン、プロピルパラベン、オクタデシルジメチルベンジルアンモニウムクロリド、
ベンザルコニウムハライド、ヘキサメトニウムクロリド、メチル又はプロピルパラベンな
どのアルキルパラベン、カテコール、レゾルシノール、シクロヘキサノール、及び３－ペ
ンタノールが挙げられる。
【0339】
組成物内の治療的に有効な量は、１０２細胞超、１０３細胞超、１０４細胞超、１０５
細胞超、１０６細胞超、１０７細胞超、１０８細胞超、１０９細胞超、１０１０細胞超、
又は１０１１細胞超であり得る。
細胞超、１０６細胞超、１０７細胞超、１０８細胞超、１０９細胞超、１０１０細胞超、
又は１０１１細胞超であり得る。
【0340】
本明細書に開示される組成物及び製剤において、細胞は、概して、１リットル以下、５
００ｍｌ以下、２５０ｍｌ以下、又は１００ｍｌ以下の容積中にある。したがって、投与
される細胞の密度は、典型的には、１０４細胞／ｍｌ、１０７細胞／ｍｌ、又は１０８細
胞／ｍｌ超である。
００ｍｌ以下、２５０ｍｌ以下、又は１００ｍｌ以下の容積中にある。したがって、投与
される細胞の密度は、典型的には、１０４細胞／ｍｌ、１０７細胞／ｍｌ、又は１０８細
胞／ｍｌ超である。
【0341】
本明細書では、本明細書に記載のｃａＴＣＲ及び／又はＣＳＲ及び／又はＳＳＥをコー
ドする核酸のいずれかを含む核酸組成物（医薬組成物など、本明細書では製剤とも呼ばれ
る）も提供される。いくつかの実施形態では、核酸組成物は、医薬組成物である。いくつ
かの実施形態では、核酸組成物は、等張剤、賦形剤、希釈剤、増粘剤、安定剤、緩衝剤、
及び／若しくは防腐剤、並びに／又は精製水、水性糖溶液、緩衝液、生理食塩水、水性ポ
リマー溶液、又はＲＮａｓｅ遊離水などの水性媒体のいずれかを更に含む。そのような添
加剤及び添加される水性媒体の量は、核酸組成物の使用形態に従って適切に選択すること
ができる。
ドする核酸のいずれかを含む核酸組成物（医薬組成物など、本明細書では製剤とも呼ばれ
る）も提供される。いくつかの実施形態では、核酸組成物は、医薬組成物である。いくつ
かの実施形態では、核酸組成物は、等張剤、賦形剤、希釈剤、増粘剤、安定剤、緩衝剤、
及び／若しくは防腐剤、並びに／又は精製水、水性糖溶液、緩衝液、生理食塩水、水性ポ
リマー溶液、又はＲＮａｓｅ遊離水などの水性媒体のいずれかを更に含む。そのような添
加剤及び添加される水性媒体の量は、核酸組成物の使用形態に従って適切に選択すること
ができる。
【0342】
本明細書に開示される組成物及び製剤は、例えば、注射、注入、灌流、又は洗浄によっ
て投与するために調製することができる。組成物及び製剤は、骨髄、静脈内、皮内、動脈
内、節内、リンパ内、腹腔内、病巣内、前立腺内、膣内、直腸内、局所内、髄腔内、腫瘍
内、筋肉内、膀胱内、及び／又は皮下の注射のために更に製剤化することができる。
て投与するために調製することができる。組成物及び製剤は、骨髄、静脈内、皮内、動脈
内、節内、リンパ内、腹腔内、病巣内、前立腺内、膣内、直腸内、局所内、髄腔内、腫瘍
内、筋肉内、膀胱内、及び／又は皮下の注射のために更に製剤化することができる。
【0343】
インビボ投与に使用される製剤は、滅菌される必要がある。これは、例えば、滅菌ろ過
膜を通じたろ過によって容易に達成される。
ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞を使用する治療方法
膜を通じたろ過によって容易に達成される。
ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞を使用する治療方法
【0344】
本発明のｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞は、例えば、がん及び感染性疾患（ウイルス感染
症など）を含む、標的抗原（ＴＡ）発現に関連する疾患及び／又は障害（本明細書では、
「標的抗原陽性」又は「ＴＡ陽性」疾患又は障害とも呼ばれる）を治療するために、個体
（例えば、ヒトなどの哺乳動物）に投与することができる。したがって、いくつかの実施
形態では、本出願は、本明細書に記載される実施形態のいずれか１つによるｃａＴＣＲ＋
ＣＳＲ免疫細胞を含む有効量の組成物（医薬組成物など）を個体に投与することを含む、
個体における標的抗原陽性疾患（がん又はウイルス感染など）を治療するための方法を提
供する。いくつかの実施形態では、がんは、例えば、副腎皮質癌、膀胱癌、乳癌、子宮頸
癌、胆管細胞癌、大腸直腸癌、食道癌、神経膠芽腫、神経膠腫、肝細胞癌、頭頸部癌、腎
臓癌、白血病、肺癌、リンパ腫、黒色腫、中皮腫、多発性骨髄腫、膵臓癌、褐色細胞腫、
形質細胞腫、神経芽腫、卵巣癌、前立腺癌、肉腫、胃癌、子宮癌、及び甲状腺癌からなる
群から選択される。いくつかの実施形態では、ウイルス感染は、例えば、サイトメガロウ
イルス（ＣＭＶ）、エプスタイン・バーウイルス（ＥＢＶ）、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ
）、カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス（ＫＳＨＶ）、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）
、伝染性軟属腫ウイルス（ＭＣＶ）、ヒトＴ細胞白血病ウイルス１（ＨＴＬＶ－１）、Ｈ
ＩＶ（ヒト免疫不全ウイルス）、及びＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）からなる群から選択さ
れるウイルスによって引き起こされる。
症など）を含む、標的抗原（ＴＡ）発現に関連する疾患及び／又は障害（本明細書では、
「標的抗原陽性」又は「ＴＡ陽性」疾患又は障害とも呼ばれる）を治療するために、個体
（例えば、ヒトなどの哺乳動物）に投与することができる。したがって、いくつかの実施
形態では、本出願は、本明細書に記載される実施形態のいずれか１つによるｃａＴＣＲ＋
ＣＳＲ免疫細胞を含む有効量の組成物（医薬組成物など）を個体に投与することを含む、
個体における標的抗原陽性疾患（がん又はウイルス感染など）を治療するための方法を提
供する。いくつかの実施形態では、がんは、例えば、副腎皮質癌、膀胱癌、乳癌、子宮頸
癌、胆管細胞癌、大腸直腸癌、食道癌、神経膠芽腫、神経膠腫、肝細胞癌、頭頸部癌、腎
臓癌、白血病、肺癌、リンパ腫、黒色腫、中皮腫、多発性骨髄腫、膵臓癌、褐色細胞腫、
形質細胞腫、神経芽腫、卵巣癌、前立腺癌、肉腫、胃癌、子宮癌、及び甲状腺癌からなる
群から選択される。いくつかの実施形態では、ウイルス感染は、例えば、サイトメガロウ
イルス（ＣＭＶ）、エプスタイン・バーウイルス（ＥＢＶ）、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ
）、カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス（ＫＳＨＶ）、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）
、伝染性軟属腫ウイルス（ＭＣＶ）、ヒトＴ細胞白血病ウイルス１（ＨＴＬＶ－１）、Ｈ
ＩＶ（ヒト免疫不全ウイルス）、及びＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）からなる群から選択さ
れるウイルスによって引き起こされる。
【0345】
例えば、いくつかの実施形態では、標的抗原関連疾患（がん又はウイルス感染症など）
を、治療を必要とする個体において治療する方法であって、ａ）ｉ）ＴＣＲの膜貫通ドメ
インのうちの１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及びＴＣＲの他
の膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤ、並びにｉｉ）標
的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールを含み、第１及び第２のＴＣＲＤが少なく
とも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することができるＴＣＲＭを形成し、抗原
結合モジュールが第１及び／又は第２のＴＣＲＤに連結する、ｃａＴＣＲと、ｂ）ｉ）標
的リガンドに特異的に結合するリガンド結合ドメイン、ｉｉ）膜貫通ドメイン、及びｉｉ
ｉ）免疫細胞に共刺激シグナルを提供することのできる細胞内シグナル伝達ドメインを含
む、キメラシグナル伝達受容体（ＣＳＲ）と、を表面に提示する免疫細胞（Ｔ細胞又はナ
チュラルキラー細胞など）を含む有効量の組成物を個体に投与することを含む、方法が提
供される。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭの両方が天然に存在する。いくつかの
実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのうちの少なくとも１つは、天然に存在しない。いくつかの
実施形態では、ＴＣＲはαβ ＴＣＲであり、第１及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲ
α及びβサブユニット膜貫通ドメインに由来する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲはγ
δ ＴＣＲであり、第１及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲ γ及びδサブユニット膜貫
通ドメインに由来する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ連結
ペプチド又はその断片を更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ連結ペプ
チド又はその断片を更に含む。いくつかの実施形態では、第１の連結ペプチドは、第１の
ＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサブユニットの連結ペプチドの全て若しくは一部、又はそ
の変異型を含み、及び／又は第２の連結ペプチドは、第２のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣ
Ｒサブユニットの連結ペプチドの全て若しくは一部、又はこれらの変異型を含む。いくつ
かの実施形態では、第１及び第２の連結ペプチドは、ジスルフィド結合によって連結され
る。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含
み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの
実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメインは、第１のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサ
ブユニットの細胞内ドメイン由来の配列を含み、及び／又は第２のＴＣＲ細胞内ドメイン
は、第２のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサブユニットの細胞内ドメイン由来の配列を含
む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲ
サブユニットの断片であり、及び／又は、第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ－ＴＭが由来
するＴＣＲサブユニットの断片である。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞
共刺激シグナル伝達配列（ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、
ＣＤ３０、又はＣＤ４０由来など）を含む、少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメイ
ンを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメイン及び第２
の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安定化ドメインが
、ｃａＴＣＲを安定化させる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第
１及び第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって連結される。いくつかの実施
形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体ド
メイン、又はその変異型を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、Ｃ
Ｄ３γε、及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達
分子を動員することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、Ｔ細胞受容体の膜
貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子
の動員を強化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－Ｃ
Ｄ３複合体形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュー
ル間又はドメイン間にスペーサモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、抗原結
合モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａ
ｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態で
は、抗原結合モジュールは、多重特異性（例えば、二重特異性）である。いくつかの実施
形態では、標的抗原は、細胞表面抗原である。いくつかの実施形態では、細胞表面抗原は
、タンパク質、炭水化物、及び脂質からなる群から選択される。いくつかの実施形態では
、細胞表面抗原は、腫瘍関連抗原又はウイルスコード抗原などの疾患関連抗原である。い
くつかの実施形態では、細胞表面抗原は、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、Ｇ
ＰＲＣ５Ｄ、又はＦＣＲＬ５である。いくつかの実施形態では、標的抗原は、表面提示ペ
プチド／ＭＨＣ複合体である。いくつかの実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾
患関連抗原（腫瘍関連抗原又はウイルスコード抗原など）に由来するペプチド及びＭＨＣ
タンパク質を含む。いくつかの実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチド及び
ＭＨＣタンパク質を含み、ペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－Ｅ
ＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、及びＰＳＡからなる群から選択されるタン
パク質に由来する。いくつかの実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタン
パク質である。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａであ
る。いくつかの実施形態では、ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。いくつかの実施形
態では、ＨＬＡ Ａ０２は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１である。いくつかの実施形態では、
ＣＳＲの標的リガンドは、細胞表面抗原である。いくつかの実施形態では、標的リガンド
は、ペプチド／ＭＨＣ複合体である。いくつかの実施形態では、ＣＳＲの標的リガンド及
びｃａＴＣＲの標的抗原は同じである。いくつかの実施形態では、標的リガンドと標的抗
体は異なる。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、疾患関連リガンドである。いく
つかの実施形態では、標的リガンドは、がん関連リガンドである。いくつかの実施形態で
は、がん関連リガンドは、例えば、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＩＬ４、
ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ、又はＦＣＲＬ５である。い
くつかの実施形態では、がん関連リガンドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、Ｎ
Ｙ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、及びＰＳＡを含むタンパク質に由来
するペプチドを含むペプチド／ＭＨＣ複合体である。いくつかの実施形態では、標的リガ
ンドは、ウイルス関連リガンドである。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、免疫
チェックポイント分子である。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイント分子は、
ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳＬ、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、
ＨＶＥＭ、４－１ＢＢＬ、ＯＸ４０Ｌ、ＣＤ７０、ＣＤ４０、及びＧＡＬ９を含む。いく
つかの実施形態では、標的リガンドは、アポトーシス分子である。いくつかの実施形態で
は、アポトーシス分子は、ＦａｓＬ、ＦａｓＲ、ＴＮＦＲ１、及びＴＮＦＲ２を含む。い
くつかの実施形態では、リガンド結合ドメインは、抗体部分である。いくつかの実施形態
では、リガンド結合ドメインの抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、
又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、リガンド結合ドメインは、
標的リガンドの受容体の細胞外ドメインの全て又は一部である（又はそれに由来する）。
いくつかの実施形態では、受容体は、例えば、ＦａｓＲ、ＴＮＦＲ１、ＴＮＦＲ２、ＰＤ
－１、ＣＤ２８、ＣＴＬＡ－４、ＩＣＯＳ、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＬＡＧ－３、４－１ＢＢ
、ＯＸ４０、ＣＤ２７、及びＴＩＭ－３を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲの膜貫
通ドメインは、例えば、ＣＤ２８、ＣＤ３ε、ＣＤ３ζ、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、Ｃ
Ｄ８、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８
６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、又はＣＤ１５４に由来する膜貫通ドメインを含む。いくつ
かの実施形態では、ＣＳＲの共刺激シグナル伝達ドメインは、例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２
８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＩＣＯＳ、リンパ球機
能関連抗原－１（ＬＦＡ－１）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ３
、ＣＤ８３と特異的に結合するリガンドなどを含む免疫細胞共刺激分子の細胞内ドメイン
の全て又は一部を含むか、それから本質的になるか、又はそれからなる。いくつかの実施
形態では、ＣＳＲは、リガンド結合ドメイン、膜貫通ドメイン、及び共刺激シグナル伝達
ドメインのいずれかの間にスペーサドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、スペ
ーサドメインは、２つのＣＳＲドメインを連結するペプチドリンカーを含む。いくつかの
実施形態では、免疫細胞はγδ Ｔ細胞である。いくつかの実施形態では、免疫細胞は、
ＴＣＲ α及び／又はβ鎖の発現を遮断又は減少させるように改変されたαβ Ｔ細胞で
ある。いくつかの実施形態では、免疫細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチ
ュラルキラーＴ細胞、及びサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
を、治療を必要とする個体において治療する方法であって、ａ）ｉ）ＴＣＲの膜貫通ドメ
インのうちの１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及びＴＣＲの他
の膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤ、並びにｉｉ）標
的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールを含み、第１及び第２のＴＣＲＤが少なく
とも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することができるＴＣＲＭを形成し、抗原
結合モジュールが第１及び／又は第２のＴＣＲＤに連結する、ｃａＴＣＲと、ｂ）ｉ）標
的リガンドに特異的に結合するリガンド結合ドメイン、ｉｉ）膜貫通ドメイン、及びｉｉ
ｉ）免疫細胞に共刺激シグナルを提供することのできる細胞内シグナル伝達ドメインを含
む、キメラシグナル伝達受容体（ＣＳＲ）と、を表面に提示する免疫細胞（Ｔ細胞又はナ
チュラルキラー細胞など）を含む有効量の組成物を個体に投与することを含む、方法が提
供される。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭの両方が天然に存在する。いくつかの
実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのうちの少なくとも１つは、天然に存在しない。いくつかの
実施形態では、ＴＣＲはαβ ＴＣＲであり、第１及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲ
α及びβサブユニット膜貫通ドメインに由来する。いくつかの実施形態では、ＴＣＲはγ
δ ＴＣＲであり、第１及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、ＴＣＲ γ及びδサブユニット膜貫
通ドメインに由来する。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ連結
ペプチド又はその断片を更に含み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ連結ペプ
チド又はその断片を更に含む。いくつかの実施形態では、第１の連結ペプチドは、第１の
ＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサブユニットの連結ペプチドの全て若しくは一部、又はそ
の変異型を含み、及び／又は第２の連結ペプチドは、第２のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣ
Ｒサブユニットの連結ペプチドの全て若しくは一部、又はこれらの変異型を含む。いくつ
かの実施形態では、第１及び第２の連結ペプチドは、ジスルフィド結合によって連結され
る。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含
み、及び／又は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインを更に含む。いくつかの
実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメインは、第１のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサ
ブユニットの細胞内ドメイン由来の配列を含み、及び／又は第２のＴＣＲ細胞内ドメイン
は、第２のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲサブユニットの細胞内ドメイン由来の配列を含
む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ－ＴＭが由来するＴＣＲ
サブユニットの断片であり、及び／又は、第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ－ＴＭが由来
するＴＣＲサブユニットの断片である。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲは、Ｔ細胞
共刺激シグナル伝達配列（ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、
ＣＤ３０、又はＣＤ４０由来など）を含む、少なくとも１つのアクセサリー細胞内ドメイ
ンを更に含む。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメイン及び第２
の安定化ドメインを含む安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安定化ドメインが
、ｃａＴＣＲを安定化させる、互いの結合親和性を有する。いくつかの実施形態では、第
１及び第２の安定化ドメインは、ジスルフィド結合によって連結される。いくつかの実施
形態では、第１及び第２の安定化ドメインは、ＣＨ１及びＣＬ抗体ドメインなどの抗体ド
メイン、又はその変異型を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、Ｃ
Ｄ３γε、及びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達
分子を動員することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、Ｔ細胞受容体の膜
貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子
の動員を強化することができる。いくつかの実施形態では、ＴＣＲＭは、ｃａＴＣＲ－Ｃ
Ｄ３複合体形成を促進する。いくつかの実施形態では、任意の２つのｃａＴＣＲモジュー
ル間又はドメイン間にスペーサモジュールが存在する。いくつかの実施形態では、抗原結
合モジュールは、抗体部分である。いくつかの実施形態では、抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａ
ｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態で
は、抗原結合モジュールは、多重特異性（例えば、二重特異性）である。いくつかの実施
形態では、標的抗原は、細胞表面抗原である。いくつかの実施形態では、細胞表面抗原は
、タンパク質、炭水化物、及び脂質からなる群から選択される。いくつかの実施形態では
、細胞表面抗原は、腫瘍関連抗原又はウイルスコード抗原などの疾患関連抗原である。い
くつかの実施形態では、細胞表面抗原は、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、Ｇ
ＰＲＣ５Ｄ、又はＦＣＲＬ５である。いくつかの実施形態では、標的抗原は、表面提示ペ
プチド／ＭＨＣ複合体である。いくつかの実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾
患関連抗原（腫瘍関連抗原又はウイルスコード抗原など）に由来するペプチド及びＭＨＣ
タンパク質を含む。いくつかの実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチド及び
ＭＨＣタンパク質を含み、ペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－Ｅ
ＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、及びＰＳＡからなる群から選択されるタン
パク質に由来する。いくつかの実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタン
パク質である。いくつかの実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａであ
る。いくつかの実施形態では、ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。いくつかの実施形
態では、ＨＬＡ Ａ０２は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１である。いくつかの実施形態では、
ＣＳＲの標的リガンドは、細胞表面抗原である。いくつかの実施形態では、標的リガンド
は、ペプチド／ＭＨＣ複合体である。いくつかの実施形態では、ＣＳＲの標的リガンド及
びｃａＴＣＲの標的抗原は同じである。いくつかの実施形態では、標的リガンドと標的抗
体は異なる。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、疾患関連リガンドである。いく
つかの実施形態では、標的リガンドは、がん関連リガンドである。いくつかの実施形態で
は、がん関連リガンドは、例えば、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＩＬ４、
ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ、又はＦＣＲＬ５である。い
くつかの実施形態では、がん関連リガンドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、Ｎ
Ｙ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、及びＰＳＡを含むタンパク質に由来
するペプチドを含むペプチド／ＭＨＣ複合体である。いくつかの実施形態では、標的リガ
ンドは、ウイルス関連リガンドである。いくつかの実施形態では、標的リガンドは、免疫
チェックポイント分子である。いくつかの実施形態では、免疫チェックポイント分子は、
ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＩＣＯＳＬ、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、
ＨＶＥＭ、４－１ＢＢＬ、ＯＸ４０Ｌ、ＣＤ７０、ＣＤ４０、及びＧＡＬ９を含む。いく
つかの実施形態では、標的リガンドは、アポトーシス分子である。いくつかの実施形態で
は、アポトーシス分子は、ＦａｓＬ、ＦａｓＲ、ＴＮＦＲ１、及びＴＮＦＲ２を含む。い
くつかの実施形態では、リガンド結合ドメインは、抗体部分である。いくつかの実施形態
では、リガンド結合ドメインの抗体部分は、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、
又は単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）である。いくつかの実施形態では、リガンド結合ドメインは、
標的リガンドの受容体の細胞外ドメインの全て又は一部である（又はそれに由来する）。
いくつかの実施形態では、受容体は、例えば、ＦａｓＲ、ＴＮＦＲ１、ＴＮＦＲ２、ＰＤ
－１、ＣＤ２８、ＣＴＬＡ－４、ＩＣＯＳ、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＬＡＧ－３、４－１ＢＢ
、ＯＸ４０、ＣＤ２７、及びＴＩＭ－３を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲの膜貫
通ドメインは、例えば、ＣＤ２８、ＣＤ３ε、ＣＤ３ζ、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、Ｃ
Ｄ８、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８
６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、又はＣＤ１５４に由来する膜貫通ドメインを含む。いくつ
かの実施形態では、ＣＳＲの共刺激シグナル伝達ドメインは、例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２
８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＩＣＯＳ、リンパ球機
能関連抗原－１（ＬＦＡ－１）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ３
、ＣＤ８３と特異的に結合するリガンドなどを含む免疫細胞共刺激分子の細胞内ドメイン
の全て又は一部を含むか、それから本質的になるか、又はそれからなる。いくつかの実施
形態では、ＣＳＲは、リガンド結合ドメイン、膜貫通ドメイン、及び共刺激シグナル伝達
ドメインのいずれかの間にスペーサドメインを更に含む。いくつかの実施形態では、スペ
ーサドメインは、２つのＣＳＲドメインを連結するペプチドリンカーを含む。いくつかの
実施形態では、免疫細胞はγδ Ｔ細胞である。いくつかの実施形態では、免疫細胞は、
ＴＣＲ α及び／又はβ鎖の発現を遮断又は減少させるように改変されたαβ Ｔ細胞で
ある。いくつかの実施形態では、免疫細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチ
ュラルキラーＴ細胞、及びサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
【0346】
いくつかの実施形態では、標的抗原関連疾患（がん又はウイルス感染症など）を、治療
を必要とする個体において治療する方法であって、ａ）ｉ）天然に存在するαβ ＴＣＲ
の膜貫通ドメインのうちの１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及
び天然に存在するαβ ＴＣＲの他の膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含
む第２のＴＣＲＤ、並びにｉｉ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールを含み
、第１及び第２のＴＣＲＤが少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員するこ
とができるＴＣＲＭを形成し、抗原結合モジュールが第１及び／又は第２のＴＣＲＤに連
結する、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲと、ｂ）ｉ）標的リガンドに特異的に結
合するリガンド結合ドメイン、ｉｉ）膜貫通ドメイン、及びｉｉｉ）免疫細胞に共刺激シ
グナルを提供することのできる細胞内シグナル伝達ドメインを含む、キメラシグナル伝達
受容体（ＣＳＲ）と、を表面に提示する免疫細胞（Ｔ細胞又はナチュラルキラー細胞など
）を含む有効量の組成物を個体に投与することを含む、方法が提供される。
を必要とする個体において治療する方法であって、ａ）ｉ）天然に存在するαβ ＴＣＲ
の膜貫通ドメインのうちの１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及
び天然に存在するαβ ＴＣＲの他の膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含
む第２のＴＣＲＤ、並びにｉｉ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールを含み
、第１及び第２のＴＣＲＤが少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員するこ
とができるＴＣＲＭを形成し、抗原結合モジュールが第１及び／又は第２のＴＣＲＤに連
結する、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲと、ｂ）ｉ）標的リガンドに特異的に結
合するリガンド結合ドメイン、ｉｉ）膜貫通ドメイン、及びｉｉｉ）免疫細胞に共刺激シ
グナルを提供することのできる細胞内シグナル伝達ドメインを含む、キメラシグナル伝達
受容体（ＣＳＲ）と、を表面に提示する免疫細胞（Ｔ細胞又はナチュラルキラー細胞など
）を含む有効量の組成物を個体に投与することを含む、方法が提供される。
【0347】
いくつかの実施形態では、標的抗原関連疾患（がん又はウイルス感染症など）を、治療
を必要とする個体において治療する方法であって、ａ）ｉ）天然に存在するγδ ＴＣＲ
の膜貫通ドメインのうちの１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及
び天然に存在するγδ ＴＣＲの他の膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含
む第２のＴＣＲＤ、並びにｉｉ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールを含み
、第１及び第２のＴＣＲＤが少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員するこ
とができるＴＣＲＭを形成し、抗原結合モジュールが第１及び／又は第２のＴＣＲＤに連
結する、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲと、ｂ）ｉ）標的リガンドに特異的に結
合するリガンド結合ドメイン、ｉｉ）膜貫通ドメイン、及びｉｉｉ）免疫細胞に共刺激シ
グナルを提供することのできる細胞内シグナル伝達ドメインを含む、キメラシグナル伝達
受容体（ＣＳＲ）と、を表面に提示する免疫細胞（Ｔ細胞又はナチュラルキラー細胞など
）を含む有効量の組成物を個体に投与することを含む、方法が提供される。
を必要とする個体において治療する方法であって、ａ）ｉ）天然に存在するγδ ＴＣＲ
の膜貫通ドメインのうちの１つに由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及
び天然に存在するγδ ＴＣＲの他の膜貫通ドメインに由来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含
む第２のＴＣＲＤ、並びにｉｉ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールを含み
、第１及び第２のＴＣＲＤが少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員するこ
とができるＴＣＲＭを形成し、抗原結合モジュールが第１及び／又は第２のＴＣＲＤに連
結する、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲと、ｂ）ｉ）標的リガンドに特異的に結
合するリガンド結合ドメイン、ｉｉ）膜貫通ドメイン、及びｉｉｉ）免疫細胞に共刺激シ
グナルを提供することのできる細胞内シグナル伝達ドメインを含む、キメラシグナル伝達
受容体（ＣＳＲ）と、を表面に提示する免疫細胞（Ｔ細胞又はナチュラルキラー細胞など
）を含む有効量の組成物を個体に投与することを含む、方法が提供される。
【0348】
いくつかの実施形態では、標的抗原関連疾患（がん又はウイルス感染症など）を、治療
を必要とする個体において治療する方法であって、ａ）ｉ）配列番号５のアミノ酸配列に
由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及び配列番号６のアミノ酸配列に由
来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤ、並びにｂ）標的抗原に特異的に結合す
る抗原結合モジュールを含み、第１及び第２のＴＣＲＤが少なくとも１つのＴＣＲ関連シ
グナル伝達分子を動員することができるＴＣＲＭを形成し、抗原結合モジュールが第１及
び／又は第２のＴＣＲＤに連結する、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲと、ｂ）ｉ
）標的リガンドに特異的に結合するリガンド結合ドメイン、ｉｉ）膜貫通ドメイン、及び
ｉｉｉ）免疫細胞に共刺激シグナルを提供することのできる細胞内シグナル伝達ドメイン
を含む、キメラシグナル伝達受容体（ＣＳＲ）と、を表面に提示する免疫細胞（Ｔ細胞又
はナチュラルキラー細胞など）を含む有効量の組成物を個体に投与することを含む、方法
が提供される。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのうちの少なくとも１つは、それ
が由来するアミノ酸配列と比較して、１つ以上（２、３、４、５、又はそれ以上など）の
アミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのそれぞれは、互いに独立
して、それが由来するアミノ酸配列と比較して、１つ以上（２、３、４、５、又はそれ以
上など）のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又
は第２のＴＣＲ－ＴＭはそれぞれ、互いに独立して、それらが由来するアミノ酸配列と比
較して、５個以下のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのうち
の少なくとも１つは、それが由来するアミノ酸配列と比較して、単一のアミノ酸置換を含
む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのそれぞれは、それが由来するアミノ酸配列
と比較して、単一のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ
中の置換アミノ酸のうちの少なくとも１つは、ｃａＴＣＲにおいて、第２のＴＣＲ－ＴＭ
中の置換アミノ酸のうちの少なくとも１つと相互作用することができるように配置される
。
を必要とする個体において治療する方法であって、ａ）ｉ）配列番号５のアミノ酸配列に
由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及び配列番号６のアミノ酸配列に由
来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤ、並びにｂ）標的抗原に特異的に結合す
る抗原結合モジュールを含み、第１及び第２のＴＣＲＤが少なくとも１つのＴＣＲ関連シ
グナル伝達分子を動員することができるＴＣＲＭを形成し、抗原結合モジュールが第１及
び／又は第２のＴＣＲＤに連結する、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲと、ｂ）ｉ
）標的リガンドに特異的に結合するリガンド結合ドメイン、ｉｉ）膜貫通ドメイン、及び
ｉｉｉ）免疫細胞に共刺激シグナルを提供することのできる細胞内シグナル伝達ドメイン
を含む、キメラシグナル伝達受容体（ＣＳＲ）と、を表面に提示する免疫細胞（Ｔ細胞又
はナチュラルキラー細胞など）を含む有効量の組成物を個体に投与することを含む、方法
が提供される。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのうちの少なくとも１つは、それ
が由来するアミノ酸配列と比較して、１つ以上（２、３、４、５、又はそれ以上など）の
アミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのそれぞれは、互いに独立
して、それが由来するアミノ酸配列と比較して、１つ以上（２、３、４、５、又はそれ以
上など）のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又
は第２のＴＣＲ－ＴＭはそれぞれ、互いに独立して、それらが由来するアミノ酸配列と比
較して、５個以下のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのうち
の少なくとも１つは、それが由来するアミノ酸配列と比較して、単一のアミノ酸置換を含
む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのそれぞれは、それが由来するアミノ酸配列
と比較して、単一のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ
中の置換アミノ酸のうちの少なくとも１つは、ｃａＴＣＲにおいて、第２のＴＣＲ－ＴＭ
中の置換アミノ酸のうちの少なくとも１つと相互作用することができるように配置される
。
【0349】
いくつかの実施形態では、標的抗原関連疾患（がん又はウイルス感染症など）を、治療
を必要とする個体において治療する方法であって、ａ）ｉ）配列番号７のアミノ酸配列に
由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及び配列番号８のアミノ酸配列に由
来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤ、並びにｂ）標的抗原に特異的に結合す
る抗原結合モジュールを含み、第１及び第２のＴＣＲＤが少なくとも１つのＴＣＲ関連シ
グナル伝達分子を動員することができるＴＣＲＭを形成し、抗原結合モジュールが第１及
び／又は第２のＴＣＲＤに連結する、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲと、ｂ）ｉ
）標的リガンドに特異的に結合するリガンド結合ドメイン、ｉｉ）膜貫通ドメイン、及び
ｉｉｉ）免疫細胞に共刺激シグナルを提供することのできる細胞内シグナル伝達ドメイン
を含む、キメラシグナル伝達受容体（ＣＳＲ）と、を表面に提示する免疫細胞（Ｔ細胞又
はナチュラルキラー細胞など）を含む有効量の組成物を個体に投与することを含む、方法
が提供される。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのうちの少なくとも１つは、それ
が由来するアミノ酸配列と比較して、１つ以上（２、３、４、５、又はそれ以上など）の
アミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのそれぞれは、互いに独立
して、それが由来するアミノ酸配列と比較して、１つ以上（２、３、４、５、又はそれ以
上など）のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又
は第２のＴＣＲ－ＴＭはそれぞれ、互いに独立して、それらが由来するアミノ酸配列と比
較して、５個以下のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのうち
の少なくとも１つは、それが由来するアミノ酸配列と比較して、単一のアミノ酸置換を含
む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのそれぞれは、それが由来するアミノ酸配列
と比較して、単一のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ
中の置換アミノ酸のうちの少なくとも１つは、ｃａＴＣＲにおいて、第２のＴＣＲ－ＴＭ
中の置換アミノ酸のうちの少なくとも１つと相互作用することができるように配置される
。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、表２に列挙
されるｃａＴＣＲのいずれかに従って選択される。いくつかの実施形態では、ＣＳＲドメ
インは、表３に列挙されるＣＳＲのいずれかに従って選択される。
を必要とする個体において治療する方法であって、ａ）ｉ）配列番号７のアミノ酸配列に
由来する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及び配列番号８のアミノ酸配列に由
来する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤ、並びにｂ）標的抗原に特異的に結合す
る抗原結合モジュールを含み、第１及び第２のＴＣＲＤが少なくとも１つのＴＣＲ関連シ
グナル伝達分子を動員することができるＴＣＲＭを形成し、抗原結合モジュールが第１及
び／又は第２のＴＣＲＤに連結する、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲと、ｂ）ｉ
）標的リガンドに特異的に結合するリガンド結合ドメイン、ｉｉ）膜貫通ドメイン、及び
ｉｉｉ）免疫細胞に共刺激シグナルを提供することのできる細胞内シグナル伝達ドメイン
を含む、キメラシグナル伝達受容体（ＣＳＲ）と、を表面に提示する免疫細胞（Ｔ細胞又
はナチュラルキラー細胞など）を含む有効量の組成物を個体に投与することを含む、方法
が提供される。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのうちの少なくとも１つは、それ
が由来するアミノ酸配列と比較して、１つ以上（２、３、４、５、又はそれ以上など）の
アミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのそれぞれは、互いに独立
して、それが由来するアミノ酸配列と比較して、１つ以上（２、３、４、５、又はそれ以
上など）のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び／又
は第２のＴＣＲ－ＴＭはそれぞれ、互いに独立して、それらが由来するアミノ酸配列と比
較して、５個以下のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのうち
の少なくとも１つは、それが由来するアミノ酸配列と比較して、単一のアミノ酸置換を含
む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲ－ＴＭのそれぞれは、それが由来するアミノ酸配列
と比較して、単一のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ
中の置換アミノ酸のうちの少なくとも１つは、ｃａＴＣＲにおいて、第２のＴＣＲ－ＴＭ
中の置換アミノ酸のうちの少なくとも１つと相互作用することができるように配置される
。いくつかの実施形態では、第１のＴＣＲ－ＴＭ及び第２のＴＣＲ－ＴＭは、表２に列挙
されるｃａＴＣＲのいずれかに従って選択される。いくつかの実施形態では、ＣＳＲドメ
インは、表３に列挙されるＣＳＲのいずれかに従って選択される。
【0350】
いくつかの実施形態では、標的抗原関連疾患（がん又はウイルス感染症など）を、治療
を必要とする個体において治療する方法であって、ａ）ｉ）配列番号１０のアミノ酸配列
を有する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及び配列番号１６のアミノ酸配列を
有する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤ、並びにｂ）標的抗原に特異的に結合す
る抗原結合モジュールを含み、第１及び第２のＴＣＲＤが少なくとも１つのＴＣＲ関連シ
グナル伝達分子を動員することができるＴＣＲＭを形成し、抗原結合モジュールが第１及
び／又は第２のＴＣＲＤに連結する、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲと、ｂ）ｉ
）標的リガンドに特異的に結合するリガンド結合ドメイン、ｉｉ）膜貫通ドメイン、及び
ｉｉｉ）免疫細胞に共刺激シグナルを提供することのできる細胞内シグナル伝達ドメイン
を含む免疫細胞共刺激分子の断片（ｆＣＳＭ）を含み、共刺激分子の断片が、配列番号５
１～５６及び８６～８９のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含む、キメラシグナル伝
達受容体（ＣＳＲ）と、を表面に提示する免疫細胞（Ｔ細胞又はナチュラルキラー細胞な
ど）を含む有効量の組成物を個体に投与することを含む、方法が提供される。いくつかの
実施形態では、ＣＳＲ膜貫通ドメインは、ＣＤ８に由来する。いくつかの実施形態では、
ＣＳＲは、膜貫通タンパク質の断片（ｆＴＭＰ）を含み、膜貫通タンパク質の断片は、配
列番号５７のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、リガンド結合ド
メインに続くスペーサペプチドを含む。いくつかの実施形態では、スペーサペプチドは、
配列番号１０３又は１０４のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲドメ
インは、表３に列挙されるＣＳＲのいずれかに従って選択される。いくつかの実施形態で
は、標的抗原はＣＤ１９である。いくつかの実施形態では、標的リガンドはＣＤ１９であ
る。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲの抗原結合モジュールは、配列番号５８のアミ
ノ酸配列を含むＶＨドメインと、配列番号５９のアミノ酸配列を含むＶＬドメインと、を
含むＦａｂ様抗原結合部分である。いくつかの実施形態では、標的抗原はＣＤ１９であり
、標的リガンドはＣＤ１９である。いくつかの実施形態では、ＣＳＲのリガンド結合ドメ
インは、配列番号７７のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、
標的抗原はＣＤ１９であり、標的リガンドはＣＤ２０である。いくつかの実施形態では、
ＣＳＲのリガンド結合ドメインは、配列番号７８のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである。
いくつかの実施形態では、標的抗原はＡＦＰペプチド／ＭＨＣ複合体（例えば、ＡＦＰ１
５８／ＨＬＡ－Ａ０２複合体）であり、標的リガンドはＧＰＣ３である。いくつかの実施
形態では、ｃａＴＣＲの抗原結合モジュールは、配列番号６２のアミノ酸配列を含むＶＨ
ドメインと、配列番号６３のアミノ酸配列を含むＶＬドメインと、を含むＦａｂ様抗原結
合部分である。いくつかの実施形態では、ＣＳＲのリガンド結合ドメインは、配列番号７
９のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである。
を必要とする個体において治療する方法であって、ａ）ｉ）配列番号１０のアミノ酸配列
を有する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及び配列番号１６のアミノ酸配列を
有する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤ、並びにｂ）標的抗原に特異的に結合す
る抗原結合モジュールを含み、第１及び第２のＴＣＲＤが少なくとも１つのＴＣＲ関連シ
グナル伝達分子を動員することができるＴＣＲＭを形成し、抗原結合モジュールが第１及
び／又は第２のＴＣＲＤに連結する、標的抗原に特異的に結合するｃａＴＣＲと、ｂ）ｉ
）標的リガンドに特異的に結合するリガンド結合ドメイン、ｉｉ）膜貫通ドメイン、及び
ｉｉｉ）免疫細胞に共刺激シグナルを提供することのできる細胞内シグナル伝達ドメイン
を含む免疫細胞共刺激分子の断片（ｆＣＳＭ）を含み、共刺激分子の断片が、配列番号５
１～５６及び８６～８９のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含む、キメラシグナル伝
達受容体（ＣＳＲ）と、を表面に提示する免疫細胞（Ｔ細胞又はナチュラルキラー細胞な
ど）を含む有効量の組成物を個体に投与することを含む、方法が提供される。いくつかの
実施形態では、ＣＳＲ膜貫通ドメインは、ＣＤ８に由来する。いくつかの実施形態では、
ＣＳＲは、膜貫通タンパク質の断片（ｆＴＭＰ）を含み、膜貫通タンパク質の断片は、配
列番号５７のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、リガンド結合ド
メインに続くスペーサペプチドを含む。いくつかの実施形態では、スペーサペプチドは、
配列番号１０３又は１０４のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲドメ
インは、表３に列挙されるＣＳＲのいずれかに従って選択される。いくつかの実施形態で
は、標的抗原はＣＤ１９である。いくつかの実施形態では、標的リガンドはＣＤ１９であ
る。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲの抗原結合モジュールは、配列番号５８のアミ
ノ酸配列を含むＶＨドメインと、配列番号５９のアミノ酸配列を含むＶＬドメインと、を
含むＦａｂ様抗原結合部分である。いくつかの実施形態では、標的抗原はＣＤ１９であり
、標的リガンドはＣＤ１９である。いくつかの実施形態では、ＣＳＲのリガンド結合ドメ
インは、配列番号７７のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである。いくつかの実施形態では、
標的抗原はＣＤ１９であり、標的リガンドはＣＤ２０である。いくつかの実施形態では、
ＣＳＲのリガンド結合ドメインは、配列番号７８のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである。
いくつかの実施形態では、標的抗原はＡＦＰペプチド／ＭＨＣ複合体（例えば、ＡＦＰ１
５８／ＨＬＡ－Ａ０２複合体）であり、標的リガンドはＧＰＣ３である。いくつかの実施
形態では、ｃａＴＣＲの抗原結合モジュールは、配列番号６２のアミノ酸配列を含むＶＨ
ドメインと、配列番号６３のアミノ酸配列を含むＶＬドメインと、を含むＦａｂ様抗原結
合部分である。いくつかの実施形態では、ＣＳＲのリガンド結合ドメインは、配列番号７
９のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである。
【0351】
いくつかの実施形態では、ＣＤ１９関連疾患（がんなど）を、治療を必要とする個体に
おいて治療する方法であって、ａ）ｉ）配列番号１０のアミノ酸配列を有する第１のＴＣ
Ｒ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及び配列番号１６のアミノ酸配列を有する第２のＴＣＲ
－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤ、並びにｂ）配列番号５８のアミノ酸配列を含むＶＨドメイ
ンを含む第１のＦａｂ鎖及び配列番号５９のアミノ酸配列を含むＶＬドメインを含む第２
のＦａｂ鎖を含む、Ｆａｂ様抗原結合モジュールを含み、第１及び第２のＴＣＲＤが少な
くとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することができるＴＣＲＭを形成し、第
１のＦａｂ鎖が第１及び第２のＴＣＲＤのうちの１つに連結し、第２のＦａｂ鎖が他のＴ
ＣＲＤに連結する、ＣＤ１９に特異的に結合するｃａＴＣＲと、ｂ）ｉ）配列番号５８の
アミノ酸配列を含むＶＨドメイン及び配列番号５９のアミノ酸配列を含むＶＬドメインを
含む、ＣＤ１９に特異的に結合するｓｃＦｖ、ｉｉ）膜貫通ドメイン、及びｉｉｉ）免疫
細胞に共刺激シグナルを提供することのできる細胞内シグナル伝達ドメインを含む免疫細
胞共刺激分子の断片（ｆＣＳＭ）を含み、共刺激分子の断片が、配列番号５１～５６及び
８６～８９のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含む、キメラシグナル伝達受容体（Ｃ
ＳＲ）と、を表面に提示する免疫細胞（Ｔ細胞又はナチュラルキラー細胞など）を含む有
効量の組成物を個体に投与することを含む、方法が提供される。いくつかの実施形態では
、ＣＳＲ膜貫通ドメインは、ＣＤ８に由来する。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、膜
貫通タンパク質の断片（ｆＴＭＰ）を含み、膜貫通タンパク質の断片は、配列番号５７の
アミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、リガンド結合ドメインに続く
スペーサペプチドを含む。いくつかの実施形態では、スペーサペプチドは、配列番号１０
３又は１０４のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲドメインは、表３
に列挙されるＣＳＲのいずれかに従って選択される。いくつかの実施形態では、ＣＳＲの
リガンド結合ドメインは、配列番号７７のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである。いくつか
の実施形態では、ＣＤ１９関連疾患は、白血病、例えば、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）
である。
おいて治療する方法であって、ａ）ｉ）配列番号１０のアミノ酸配列を有する第１のＴＣ
Ｒ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及び配列番号１６のアミノ酸配列を有する第２のＴＣＲ
－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤ、並びにｂ）配列番号５８のアミノ酸配列を含むＶＨドメイ
ンを含む第１のＦａｂ鎖及び配列番号５９のアミノ酸配列を含むＶＬドメインを含む第２
のＦａｂ鎖を含む、Ｆａｂ様抗原結合モジュールを含み、第１及び第２のＴＣＲＤが少な
くとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することができるＴＣＲＭを形成し、第
１のＦａｂ鎖が第１及び第２のＴＣＲＤのうちの１つに連結し、第２のＦａｂ鎖が他のＴ
ＣＲＤに連結する、ＣＤ１９に特異的に結合するｃａＴＣＲと、ｂ）ｉ）配列番号５８の
アミノ酸配列を含むＶＨドメイン及び配列番号５９のアミノ酸配列を含むＶＬドメインを
含む、ＣＤ１９に特異的に結合するｓｃＦｖ、ｉｉ）膜貫通ドメイン、及びｉｉｉ）免疫
細胞に共刺激シグナルを提供することのできる細胞内シグナル伝達ドメインを含む免疫細
胞共刺激分子の断片（ｆＣＳＭ）を含み、共刺激分子の断片が、配列番号５１～５６及び
８６～８９のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含む、キメラシグナル伝達受容体（Ｃ
ＳＲ）と、を表面に提示する免疫細胞（Ｔ細胞又はナチュラルキラー細胞など）を含む有
効量の組成物を個体に投与することを含む、方法が提供される。いくつかの実施形態では
、ＣＳＲ膜貫通ドメインは、ＣＤ８に由来する。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、膜
貫通タンパク質の断片（ｆＴＭＰ）を含み、膜貫通タンパク質の断片は、配列番号５７の
アミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、リガンド結合ドメインに続く
スペーサペプチドを含む。いくつかの実施形態では、スペーサペプチドは、配列番号１０
３又は１０４のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲドメインは、表３
に列挙されるＣＳＲのいずれかに従って選択される。いくつかの実施形態では、ＣＳＲの
リガンド結合ドメインは、配列番号７７のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである。いくつか
の実施形態では、ＣＤ１９関連疾患は、白血病、例えば、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）
である。
【0352】
いくつかの実施形態では、ＣＤ１９／ＣＤ２０関連疾患（がんなど）を、治療を必要と
する個体において治療する方法であって、ａ）ｉ）配列番号１０のアミノ酸配列を有する
第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及び配列番号１６のアミノ酸配列を有する第
２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤ、並びにｂ）配列番号５８のアミノ酸配列を含む
ＶＨドメインを含む第１のＦａｂ鎖及び配列番号５９のアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む第２のＦａｂ鎖を含む、Ｆａｂ様抗原結合モジュールを含み、第１及び第２のＴＣ
ＲＤが少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することができるＴＣＲＭを
形成し、第１のＦａｂ鎖が第１及び第２のＴＣＲＤのうちの１つに連結し、第２のＦａｂ
鎖が他のＴＣＲＤに連結する、ＣＤ１９に特異的に結合するｃａＴＣＲと、ｂ）ｉ）配列
番号６０のアミノ酸配列を含むＶＨドメイン及び配列番号６１のアミノ酸配列を含むＶＬ
ドメインを含む、ＣＤ２０に特異的に結合するｓｃＦｖ、ｉｉ）膜貫通ドメイン、及びｉ
ｉｉ）免疫細胞に共刺激シグナルを提供することのできる細胞内シグナル伝達ドメインを
含む免疫細胞共刺激分子の断片（ｆＣＳＭ）を含み、共刺激分子の断片が、配列番号５１
～５６及び８６～８９のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含む、キメラシグナル伝達
受容体（ＣＳＲ）と、を表面に提示する免疫細胞（Ｔ細胞又はナチュラルキラー細胞など
）を含む有効量の組成物を個体に投与することを含む、方法が提供される。いくつかの実
施形態では、ＣＳＲ膜貫通ドメインは、ＣＤ８に由来する。いくつかの実施形態では、Ｃ
ＳＲは、膜貫通タンパク質の断片（ｆＴＭＰ）を含み、膜貫通タンパク質の断片は、配列
番号５７のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、リガンド結合ドメ
インに続くスペーサペプチドを含む。いくつかの実施形態では、スペーサペプチドは、配
列番号１０３又は１０４のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲドメイ
ンは、表３に列挙されるＣＳＲのいずれかに従って選択される。いくつかの実施形態では
、ＣＳＲのリガンド結合ドメインは、配列番号８１のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである
。
する個体において治療する方法であって、ａ）ｉ）配列番号１０のアミノ酸配列を有する
第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及び配列番号１６のアミノ酸配列を有する第
２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤ、並びにｂ）配列番号５８のアミノ酸配列を含む
ＶＨドメインを含む第１のＦａｂ鎖及び配列番号５９のアミノ酸配列を含むＶＬドメイン
を含む第２のＦａｂ鎖を含む、Ｆａｂ様抗原結合モジュールを含み、第１及び第２のＴＣ
ＲＤが少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員することができるＴＣＲＭを
形成し、第１のＦａｂ鎖が第１及び第２のＴＣＲＤのうちの１つに連結し、第２のＦａｂ
鎖が他のＴＣＲＤに連結する、ＣＤ１９に特異的に結合するｃａＴＣＲと、ｂ）ｉ）配列
番号６０のアミノ酸配列を含むＶＨドメイン及び配列番号６１のアミノ酸配列を含むＶＬ
ドメインを含む、ＣＤ２０に特異的に結合するｓｃＦｖ、ｉｉ）膜貫通ドメイン、及びｉ
ｉｉ）免疫細胞に共刺激シグナルを提供することのできる細胞内シグナル伝達ドメインを
含む免疫細胞共刺激分子の断片（ｆＣＳＭ）を含み、共刺激分子の断片が、配列番号５１
～５６及び８６～８９のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含む、キメラシグナル伝達
受容体（ＣＳＲ）と、を表面に提示する免疫細胞（Ｔ細胞又はナチュラルキラー細胞など
）を含む有効量の組成物を個体に投与することを含む、方法が提供される。いくつかの実
施形態では、ＣＳＲ膜貫通ドメインは、ＣＤ８に由来する。いくつかの実施形態では、Ｃ
ＳＲは、膜貫通タンパク質の断片（ｆＴＭＰ）を含み、膜貫通タンパク質の断片は、配列
番号５７のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、リガンド結合ドメ
インに続くスペーサペプチドを含む。いくつかの実施形態では、スペーサペプチドは、配
列番号１０３又は１０４のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲドメイ
ンは、表３に列挙されるＣＳＲのいずれかに従って選択される。いくつかの実施形態では
、ＣＳＲのリガンド結合ドメインは、配列番号８１のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖである
。
【0353】
いくつかの実施形態では、ＡＦＰ／ＧＰＣ３関連疾患（例えば、肝臓癌などのがんなど
）を、治療を必要とする個体において治療する方法であって、ａ）ｉ）配列番号１０のア
ミノ酸配列を有する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及び配列番号１６のアミ
ノ酸配列を有する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤ、並びにｂ）配列番号６２の
アミノ酸配列を含むＶＨドメインを含む第１のＦａｂ鎖及び配列番号６３のアミノ酸配列
を含むＶＬドメインを含む第２のＦａｂ鎖を含む、Ｆａｂ様抗原結合モジュールを含み、
第１及び第２のＴＣＲＤが少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員すること
ができるＴＣＲＭを形成し、第１のＦａｂ鎖が第１及び第２のＴＣＲＤのうちの１つに連
結し、第２のＦａｂ鎖が他のＴＣＲＤに連結する、ＡＦＰペプチド／ＭＨＣ複合体（例え
ば、ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ０２複合体）に特異的に結合するｃａＴＣＲと、ｂ）ｉ）
配列番号６４のアミノ酸配列を含むＶＨドメイン及び配列番号６５のアミノ酸配列を含む
ＶＬドメインを含む、ＧＰＣ３に特異的に結合するｓｃＦｖ、ｉｉ）膜貫通ドメイン、及
びｉｉｉ）免疫細胞に共刺激シグナルを提供することのできる細胞内シグナル伝達ドメイ
ンを含む免疫細胞共刺激分子の断片（ｆＣＳＭ）を含み、共刺激分子の断片が、配列番号
５１～５６及び８６～８９のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含む、キメラシグナル
伝達受容体（ＣＳＲ）と、を表面に提示する免疫細胞（Ｔ細胞又はナチュラルキラー細胞
など）を含む有効量の組成物を個体に投与することを含む、方法が提供される。いくつか
の実施形態では、ＣＳＲ膜貫通ドメインは、ＣＤ８に由来する。いくつかの実施形態では
、ＣＳＲは、膜貫通タンパク質の断片（ｆＴＭＰ）を含み、膜貫通タンパク質の断片は、
配列番号５７のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、リガンド結合
ドメインに続くスペーサペプチドを含む。いくつかの実施形態では、スペーサペプチドは
、配列番号１０３又は１０４のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲド
メインは、表３に列挙されるＣＳＲのいずれかに従って選択される。いくつかの実施形態
では、ＣＳＲのリガンド結合ドメインは、配列番号８２のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖで
ある。
）を、治療を必要とする個体において治療する方法であって、ａ）ｉ）配列番号１０のア
ミノ酸配列を有する第１のＴＣＲ－ＴＭを含む第１のＴＣＲＤ、及び配列番号１６のアミ
ノ酸配列を有する第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤ、並びにｂ）配列番号６２の
アミノ酸配列を含むＶＨドメインを含む第１のＦａｂ鎖及び配列番号６３のアミノ酸配列
を含むＶＬドメインを含む第２のＦａｂ鎖を含む、Ｆａｂ様抗原結合モジュールを含み、
第１及び第２のＴＣＲＤが少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子を動員すること
ができるＴＣＲＭを形成し、第１のＦａｂ鎖が第１及び第２のＴＣＲＤのうちの１つに連
結し、第２のＦａｂ鎖が他のＴＣＲＤに連結する、ＡＦＰペプチド／ＭＨＣ複合体（例え
ば、ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ０２複合体）に特異的に結合するｃａＴＣＲと、ｂ）ｉ）
配列番号６４のアミノ酸配列を含むＶＨドメイン及び配列番号６５のアミノ酸配列を含む
ＶＬドメインを含む、ＧＰＣ３に特異的に結合するｓｃＦｖ、ｉｉ）膜貫通ドメイン、及
びｉｉｉ）免疫細胞に共刺激シグナルを提供することのできる細胞内シグナル伝達ドメイ
ンを含む免疫細胞共刺激分子の断片（ｆＣＳＭ）を含み、共刺激分子の断片が、配列番号
５１～５６及び８６～８９のうちのいずれか１つのアミノ酸配列を含む、キメラシグナル
伝達受容体（ＣＳＲ）と、を表面に提示する免疫細胞（Ｔ細胞又はナチュラルキラー細胞
など）を含む有効量の組成物を個体に投与することを含む、方法が提供される。いくつか
の実施形態では、ＣＳＲ膜貫通ドメインは、ＣＤ８に由来する。いくつかの実施形態では
、ＣＳＲは、膜貫通タンパク質の断片（ｆＴＭＰ）を含み、膜貫通タンパク質の断片は、
配列番号５７のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲは、リガンド結合
ドメインに続くスペーサペプチドを含む。いくつかの実施形態では、スペーサペプチドは
、配列番号１０３又は１０４のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、ＣＳＲド
メインは、表３に列挙されるＣＳＲのいずれかに従って選択される。いくつかの実施形態
では、ＣＳＲのリガンド結合ドメインは、配列番号８２のアミノ酸配列を含むｓｃＦｖで
ある。
【0354】
異なるｃａＴＣＲ及び／又は異なるＣＳＲを発現する複数の免疫細胞を含む組成物を個
体に投与することを含む、治療を必要とする個体における標的抗原関連疾患を治療する方
法も想到される。したがって、いくつかの実施形態では、本明細書に記載される個体にお
ける標的抗原関連疾患を治療するための方法のいずれかによると、組成物は、本明細書に
記載される異種ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞組成物である。
体に投与することを含む、治療を必要とする個体における標的抗原関連疾患を治療する方
法も想到される。したがって、いくつかの実施形態では、本明細書に記載される個体にお
ける標的抗原関連疾患を治療するための方法のいずれかによると、組成物は、本明細書に
記載される異種ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞組成物である。
【0355】
いくつかの実施形態では、個体は、哺乳動物（例えば、ヒト、非ヒト霊長類、ラット、
マウス、ウシ、ウマ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、イヌ、ネコなど）である。いくつかの実施形
態では、個体はヒトである。いくつかの実施形態では、個体は、臨床患者、臨床治験ボラ
ンティア、実験動物などである。いくつかの実施形態では、個体は、約６０歳よりも若い
（例えば、約５０、４０、３０、２５、２０、１５、又は１０歳のうちのいずれかよりも
若い）。いくつかの実施形態では、個体は、約６０歳よりも老いている（例えば、約７０
、８０、９０、又は１００歳のうちのいずれかよりも老いている）。いくつかの実施形態
では、個体は、本明細書に記載される疾患若しくは障害（がん又はウイルス感染など）の
うちの１つ以上と診断されるか、又は環境的に若しくは遺伝的に発症する傾向にある。い
くつかの実施形態では、個体は、本明細書に記載される１つ以上の疾患又は障害に関連す
る１つ以上のリスク因子を有する。
マウス、ウシ、ウマ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、イヌ、ネコなど）である。いくつかの実施形
態では、個体はヒトである。いくつかの実施形態では、個体は、臨床患者、臨床治験ボラ
ンティア、実験動物などである。いくつかの実施形態では、個体は、約６０歳よりも若い
（例えば、約５０、４０、３０、２５、２０、１５、又は１０歳のうちのいずれかよりも
若い）。いくつかの実施形態では、個体は、約６０歳よりも老いている（例えば、約７０
、８０、９０、又は１００歳のうちのいずれかよりも老いている）。いくつかの実施形態
では、個体は、本明細書に記載される疾患若しくは障害（がん又はウイルス感染など）の
うちの１つ以上と診断されるか、又は環境的に若しくは遺伝的に発症する傾向にある。い
くつかの実施形態では、個体は、本明細書に記載される１つ以上の疾患又は障害に関連す
る１つ以上のリスク因子を有する。
【0356】
いくつかの実施形態では、本発明のｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞組成物は、標的抗原発
現を伴う疾患又は障害を治療するために、第２、第３、又は第４の薬剤（例えば、抗腫瘍
剤、増殖抑制剤、細胞傷害性剤、又は化学療法剤を含む）と組み合わせて投与される。い
くつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞組成物は、サイトカイン（ＩＬ－２
など）と組み合わせて投与される。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細
胞組成物は、ＭＨＣタンパク質の発現を増加させる、及び／又はＭＨＣタンパク質による
ペプチドの表面提示を強化する薬剤と組み合わせて投与される。いくつかの実施形態では
、薬剤は、例えば、ＩＦＮ受容体アゴニスト、Ｈｓｐ９０阻害剤、ｐ５３発現のエンハン
サー、及び化学療法剤を含む。いくつかの実施形態では、薬剤は、例えば、ＩＦＮγ、Ｉ
ＦＮβ、及びＩＦＮαを含むＩＦＮ受容体アゴニストである。いくつかの実施形態では、
薬剤は、Ｈｓｐ９０阻害剤であり、例えば、タエピマイシン（１７－ＡＡＧ）、アレベピ
マイシン（１７－ＤＭＡＧ）、リタピマイシン（ＩＰＩ－５０４）、ＩＰＩ－４９３、Ｃ
ＮＦ２０２４／ＢＩＩＢ０２１、ＭＰＣ－３１００、Ｄｅｂｉｏ ０９３２（ＣＵＤＣ－
３０５）、ＰＵ－Ｈ７１、Ｇａｎｅｔｅｓｐｉｂ（ＳＴＡ－９０９０）、ＮＶＰ－ＡＵＹ
９２２（ＶＥＲ－５２２６９）、ＨＳＰ９９０、ＫＷ－２４７８、ＡＴ１３３８７、ＳＮ
Ｘ－５４２２、ＤＳ－２２４８、及びＸＬ８８８を含む。いくつかの実施形態では、薬剤
は、例えば５－フルオロウラシル及びｎｕｔｌｉｎ－３を含むｐ５３発現のエンハンサー
である。いくつかの実施形態では、薬剤は、例えば、トポテカン、エトポシド、シスプラ
チン、パクリタキセル、及びビンブラスチンを含む化学療法剤である。
現を伴う疾患又は障害を治療するために、第２、第３、又は第４の薬剤（例えば、抗腫瘍
剤、増殖抑制剤、細胞傷害性剤、又は化学療法剤を含む）と組み合わせて投与される。い
くつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞組成物は、サイトカイン（ＩＬ－２
など）と組み合わせて投与される。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細
胞組成物は、ＭＨＣタンパク質の発現を増加させる、及び／又はＭＨＣタンパク質による
ペプチドの表面提示を強化する薬剤と組み合わせて投与される。いくつかの実施形態では
、薬剤は、例えば、ＩＦＮ受容体アゴニスト、Ｈｓｐ９０阻害剤、ｐ５３発現のエンハン
サー、及び化学療法剤を含む。いくつかの実施形態では、薬剤は、例えば、ＩＦＮγ、Ｉ
ＦＮβ、及びＩＦＮαを含むＩＦＮ受容体アゴニストである。いくつかの実施形態では、
薬剤は、Ｈｓｐ９０阻害剤であり、例えば、タエピマイシン（１７－ＡＡＧ）、アレベピ
マイシン（１７－ＤＭＡＧ）、リタピマイシン（ＩＰＩ－５０４）、ＩＰＩ－４９３、Ｃ
ＮＦ２０２４／ＢＩＩＢ０２１、ＭＰＣ－３１００、Ｄｅｂｉｏ ０９３２（ＣＵＤＣ－
３０５）、ＰＵ－Ｈ７１、Ｇａｎｅｔｅｓｐｉｂ（ＳＴＡ－９０９０）、ＮＶＰ－ＡＵＹ
９２２（ＶＥＲ－５２２６９）、ＨＳＰ９９０、ＫＷ－２４７８、ＡＴ１３３８７、ＳＮ
Ｘ－５４２２、ＤＳ－２２４８、及びＸＬ８８８を含む。いくつかの実施形態では、薬剤
は、例えば５－フルオロウラシル及びｎｕｔｌｉｎ－３を含むｐ５３発現のエンハンサー
である。いくつかの実施形態では、薬剤は、例えば、トポテカン、エトポシド、シスプラ
チン、パクリタキセル、及びビンブラスチンを含む化学療法剤である。
【0357】
いくつかの実施形態では、標的抗原陽性疾患を、治療を必要とする個体において治療す
る方法であって、本明細書に記載される実施形態のいずれかによるｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免
疫細胞組成物を、サイトカイン（ＩＬ－２など）と組み合わせて個体に投与することを含
む、方法が提供される。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞組成物及
びサイトカインは同時に投与される。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫
細胞組成物及びサイトカインは、順次投与される。
る方法であって、本明細書に記載される実施形態のいずれかによるｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免
疫細胞組成物を、サイトカイン（ＩＬ－２など）と組み合わせて個体に投与することを含
む、方法が提供される。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞組成物及
びサイトカインは同時に投与される。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫
細胞組成物及びサイトカインは、順次投与される。
【0358】
いくつかの実施形態では、標的抗原陽性疾患を、治療を必要とする個体において治療す
る方法であって、標的抗原を発現する細胞は、標的抗原及びＭＨＣクラスＩタンパク質を
含む複合体を、表面に通常には提示しないか、又は比較的低レベルで提示し、ＭＨＣクラ
スＩタンパク質の発現を増加させる及び／又はＭＨＣクラスＩタンパク質による標的抗原
の表面提示を強化する薬剤と組み合わせて、本明細書に記載される実施形態のいずれかに
記載のｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞組成物を個体に投与することを含む、方法が提供され
る。いくつかの実施形態では、薬剤は、例えば、ＩＦＮ受容体アゴニスト、Ｈｓｐ９０阻
害剤、ｐ５３発現のエンハンサー、及び化学療法剤を含む。いくつかの実施形態では、薬
剤は、例えば、ＩＦＮγ、ＩＦＮβ、及びＩＦＮαを含むＩＦＮ受容体アゴニストである
。いくつかの実施形態では、薬剤は、Ｈｓｐ９０阻害剤であり、例えば、タエピマイシン
（１７－ＡＡＧ）、アレベピマイシン（１７－ＤＭＡＧ）、リタピマイシン（ＩＰＩ－５
０４）、ＩＰＩ－４９３、ＣＮＦ２０２４／ＢＩＩＢ０２１、ＭＰＣ－３１００、Ｄｅｂ
ｉｏ ０９３２（ＣＵＤＣ－３０５）、ＰＵ－Ｈ７１、Ｇａｎｅｔｅｓｐｉｂ（ＳＴＡ－
９０９０）、ＮＶＰ－ＡＵＹ９２２（ＶＥＲ－５２２６９）、ＨＳＰ９９０、ＫＷ－２４
７８、ＡＴ１３３８７、ＳＮＸ－５４２２、ＤＳ－２２４８、及びＸＬ８８８を含む。い
くつかの実施形態では、薬剤は、例えば５－フルオロウラシル及びｎｕｔｌｉｎ－３を含
むｐ５３発現のエンハンサーである。いくつかの実施形態では、薬剤は、例えば、トポテ
カン、エトポシド、シスプラチン、パクリタキセル、及びビンブラスチンを含む化学療法
剤である。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞組成物及び薬剤は同時
に投与される。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞組成物及び薬剤は
、順次投与される。
る方法であって、標的抗原を発現する細胞は、標的抗原及びＭＨＣクラスＩタンパク質を
含む複合体を、表面に通常には提示しないか、又は比較的低レベルで提示し、ＭＨＣクラ
スＩタンパク質の発現を増加させる及び／又はＭＨＣクラスＩタンパク質による標的抗原
の表面提示を強化する薬剤と組み合わせて、本明細書に記載される実施形態のいずれかに
記載のｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞組成物を個体に投与することを含む、方法が提供され
る。いくつかの実施形態では、薬剤は、例えば、ＩＦＮ受容体アゴニスト、Ｈｓｐ９０阻
害剤、ｐ５３発現のエンハンサー、及び化学療法剤を含む。いくつかの実施形態では、薬
剤は、例えば、ＩＦＮγ、ＩＦＮβ、及びＩＦＮαを含むＩＦＮ受容体アゴニストである
。いくつかの実施形態では、薬剤は、Ｈｓｐ９０阻害剤であり、例えば、タエピマイシン
（１７－ＡＡＧ）、アレベピマイシン（１７－ＤＭＡＧ）、リタピマイシン（ＩＰＩ－５
０４）、ＩＰＩ－４９３、ＣＮＦ２０２４／ＢＩＩＢ０２１、ＭＰＣ－３１００、Ｄｅｂ
ｉｏ ０９３２（ＣＵＤＣ－３０５）、ＰＵ－Ｈ７１、Ｇａｎｅｔｅｓｐｉｂ（ＳＴＡ－
９０９０）、ＮＶＰ－ＡＵＹ９２２（ＶＥＲ－５２２６９）、ＨＳＰ９９０、ＫＷ－２４
７８、ＡＴ１３３８７、ＳＮＸ－５４２２、ＤＳ－２２４８、及びＸＬ８８８を含む。い
くつかの実施形態では、薬剤は、例えば５－フルオロウラシル及びｎｕｔｌｉｎ－３を含
むｐ５３発現のエンハンサーである。いくつかの実施形態では、薬剤は、例えば、トポテ
カン、エトポシド、シスプラチン、パクリタキセル、及びビンブラスチンを含む化学療法
剤である。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞組成物及び薬剤は同時
に投与される。いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞組成物及び薬剤は
、順次投与される。
【0359】
いくつかの実施形態では、標的抗原関連疾患（がん又はウイルス感染症など）を、治療
を必要とする個体において治療する方法であって、本明細書に記載される実施形態のいず
れかによるｃａＴＣＲ及びＣＳＲをコードする核酸を含む有効量の組成物を個体に投与す
ることを含む、方法が提供される。遺伝子送達の方法は、当該技術分野において既知であ
る。例えば、参照によりその全てが本明細書に組み込まれる米国特許第５，３９９，３４
６号、同５，５８０，８５９号、同５，５８９，４６６号を参照されたい。
を必要とする個体において治療する方法であって、本明細書に記載される実施形態のいず
れかによるｃａＴＣＲ及びＣＳＲをコードする核酸を含む有効量の組成物を個体に投与す
ることを含む、方法が提供される。遺伝子送達の方法は、当該技術分野において既知であ
る。例えば、参照によりその全てが本明細書に組み込まれる米国特許第５，３９９，３４
６号、同５，５８０，８５９号、同５，５８９，４６６号を参照されたい。
【0360】
がん治療は、例えば、腫瘍退縮、腫瘍重量又はサイズ収縮、進行時間、生存期間、無増
悪生存率、全奏功率、応答期間、生活の質、タンパク質発現及び／又は活性によって評価
することができる。例えば、放射線学的イメージングによる応答の測定を含む、治療の有
効性を判定するためのアプローチを利用することができる。
悪生存率、全奏功率、応答期間、生活の質、タンパク質発現及び／又は活性によって評価
することができる。例えば、放射線学的イメージングによる応答の測定を含む、治療の有
効性を判定するためのアプローチを利用することができる。
【0361】
いくつかの実施形態では、治療の有効性は、式１００－（Ｔ／Ｃ×１００）を使用して
計算された腫瘍増殖阻害パーセント（ＴＧＩ％）として測定され、式中、Ｔは、治療され
た腫瘍の平均相対腫瘍体積であり、Ｃは、未治療腫瘍の平均相対腫瘍体積である。いくつ
かの実施形態では、ＴＧＩ％は、約１０％、約２０％、約３０％、約４０％、約５０％、
約６０％、約７０％、約８０％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、
約９５％、又は９５％超である。
計算された腫瘍増殖阻害パーセント（ＴＧＩ％）として測定され、式中、Ｔは、治療され
た腫瘍の平均相対腫瘍体積であり、Ｃは、未治療腫瘍の平均相対腫瘍体積である。いくつ
かの実施形態では、ＴＧＩ％は、約１０％、約２０％、約３０％、約４０％、約５０％、
約６０％、約７０％、約８０％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、
約９５％、又は９５％超である。
【0362】
ウイルス感染治療は、例えば、ウイルス負荷、生存期間、生活の質、タンパク質発現、
及び／又は活性によって評価することができる。
疾患
及び／又は活性によって評価することができる。
疾患
【0363】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞は、標的抗原に関連するがんを
治療するのに有用であり得る。本明細書に記載される方法のいずれかを使用して治療され
得るがんには、血管新生化されていない、又はまだ実質的に血管新生化されていない腫瘍
、並びに血管新生化腫瘍が含まれる。がんは、非固形腫瘍（白血病及びリンパ腫などの血
液腫瘍など）を含み得るか、又は固形腫瘍を含み得る。本発明のｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫
細胞で治療すべきがんの種類としては、がん腫、芽細胞腫、及び肉腫並びに特定の白血病
又はリンパ性悪性疾患、良性及び悪性の腫瘍、並びに悪性腫瘍、例えば肉腫、がん腫、及
び黒色腫が挙げられるが、これらに限定されない。成人の腫瘍／がん及び小児の腫瘍／が
んもまた含まれる。
治療するのに有用であり得る。本明細書に記載される方法のいずれかを使用して治療され
得るがんには、血管新生化されていない、又はまだ実質的に血管新生化されていない腫瘍
、並びに血管新生化腫瘍が含まれる。がんは、非固形腫瘍（白血病及びリンパ腫などの血
液腫瘍など）を含み得るか、又は固形腫瘍を含み得る。本発明のｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫
細胞で治療すべきがんの種類としては、がん腫、芽細胞腫、及び肉腫並びに特定の白血病
又はリンパ性悪性疾患、良性及び悪性の腫瘍、並びに悪性腫瘍、例えば肉腫、がん腫、及
び黒色腫が挙げられるが、これらに限定されない。成人の腫瘍／がん及び小児の腫瘍／が
んもまた含まれる。
【0364】
血液がんは、血液又は骨髄の癌である。血液学的（又は血液系）がんの例としては、急
性白血病（急性リンパ性白血病、急性骨髄球性白血病、急性骨髄性白血病及び骨髄芽球性
、前骨髄球性、骨髄球性、単球性及び赤血球性白血病など）、慢性白血病（慢性骨髄球性
（顆粒球）白血病、慢性骨髄性白血病、及び慢性リンパ性白血病）、多発性血中血症、リ
ンパ腫、ホジキンリンパ疾患、非ホジキンリンパ腫（緩慢性及び高悪性度形態）、多発性
骨髄腫、形質細胞腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、重鎖疾患、骨髄異形
成症候群、有毛細胞白血病、及び骨髄異形成症を含む白血病が挙げられる。
性白血病（急性リンパ性白血病、急性骨髄球性白血病、急性骨髄性白血病及び骨髄芽球性
、前骨髄球性、骨髄球性、単球性及び赤血球性白血病など）、慢性白血病（慢性骨髄球性
（顆粒球）白血病、慢性骨髄性白血病、及び慢性リンパ性白血病）、多発性血中血症、リ
ンパ腫、ホジキンリンパ疾患、非ホジキンリンパ腫（緩慢性及び高悪性度形態）、多発性
骨髄腫、形質細胞腫、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、重鎖疾患、骨髄異形
成症候群、有毛細胞白血病、及び骨髄異形成症を含む白血病が挙げられる。
【0365】
固形腫瘍は、通常、嚢胞又は液体領域を含まない異常な組織塊である。固形腫瘍は、良
性又は悪性であり得る。異なる種類の固形腫瘍は、それらを形成する細胞の種類（例えば
、肉腫、癌腫、及びリンパ腫）に関して命名されている。肉腫及び癌腫などの固形腫瘍の
例としては、副腎皮質癌、胆管細胞癌、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨肉
腫、及び他の肉腫、滑膜腫、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋肉腫、心臓横紋筋肉腫、結
腸癌、胃癌、リンパ系悪性疾患、膵臓癌、乳癌、肺癌、卵巣癌、前立腺癌、肝細胞癌、扁
平上皮癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、甲状腺癌（例えば、甲状腺髄様癌及び乳頭甲状腺
癌）、褐色細胞腫皮脂腺癌、乳頭癌癌、乳頭腺癌、髄様癌、気管支癌、腎細胞癌、肝癌、
胆管癌、絨毛癌、ウィルムス腫瘍、子宮頸癌（例えば、子宮頸癌及び浸潤前の子宮頸部異
形成）、大腸直腸癌、肛門癌、肛門管、又は肛門癌、膣癌、外陰部の癌（例えば、扁平上
皮癌、上皮内癌、腺癌、及び線維肉腫）、陰茎癌、中咽頭癌、食道癌、頭部癌（例えば、
扁平上皮癌）、頸部癌（例えば、扁平上皮癌）、精巣癌（例えば、セミノーマ、奇形腫、
胎児性癌、奇形癌、絨毛癌、肉腫、ライディッヒ細胞腫瘍、線維腫、線維腺腫、腺腫様腫
瘍、及び脂肪腫）、膀胱癌、腎臓癌、黒色腫、子宮癌（例えば、子宮内膜癌）、尿路上皮
癌（例えば、扁平上皮癌、転移細胞癌、腺癌、尿管癌、及び膀胱癌）、並びにＣＮＳ腫瘍
（神経膠腫（脳幹膠腫及び混合神経膠腫など）、神経膠芽腫（多形神経膠芽腫としても知
られる）、星状細胞腫、ＣＮＳリンパ腫、胚細胞腫、髄芽芽腫、シュワン細胞腫、頭蓋咽
頭腫、上衣腫、松果体腫、血管芽細胞腫、聴神経腫、乏突起膠腫、髄膜腫、神経芽腫、網
膜芽細胞腫、及び脳転移など）が挙げられる。
性又は悪性であり得る。異なる種類の固形腫瘍は、それらを形成する細胞の種類（例えば
、肉腫、癌腫、及びリンパ腫）に関して命名されている。肉腫及び癌腫などの固形腫瘍の
例としては、副腎皮質癌、胆管細胞癌、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、軟骨肉腫、骨肉
腫、及び他の肉腫、滑膜腫、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋肉腫、心臓横紋筋肉腫、結
腸癌、胃癌、リンパ系悪性疾患、膵臓癌、乳癌、肺癌、卵巣癌、前立腺癌、肝細胞癌、扁
平上皮癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、甲状腺癌（例えば、甲状腺髄様癌及び乳頭甲状腺
癌）、褐色細胞腫皮脂腺癌、乳頭癌癌、乳頭腺癌、髄様癌、気管支癌、腎細胞癌、肝癌、
胆管癌、絨毛癌、ウィルムス腫瘍、子宮頸癌（例えば、子宮頸癌及び浸潤前の子宮頸部異
形成）、大腸直腸癌、肛門癌、肛門管、又は肛門癌、膣癌、外陰部の癌（例えば、扁平上
皮癌、上皮内癌、腺癌、及び線維肉腫）、陰茎癌、中咽頭癌、食道癌、頭部癌（例えば、
扁平上皮癌）、頸部癌（例えば、扁平上皮癌）、精巣癌（例えば、セミノーマ、奇形腫、
胎児性癌、奇形癌、絨毛癌、肉腫、ライディッヒ細胞腫瘍、線維腫、線維腺腫、腺腫様腫
瘍、及び脂肪腫）、膀胱癌、腎臓癌、黒色腫、子宮癌（例えば、子宮内膜癌）、尿路上皮
癌（例えば、扁平上皮癌、転移細胞癌、腺癌、尿管癌、及び膀胱癌）、並びにＣＮＳ腫瘍
（神経膠腫（脳幹膠腫及び混合神経膠腫など）、神経膠芽腫（多形神経膠芽腫としても知
られる）、星状細胞腫、ＣＮＳリンパ腫、胚細胞腫、髄芽芽腫、シュワン細胞腫、頭蓋咽
頭腫、上衣腫、松果体腫、血管芽細胞腫、聴神経腫、乏突起膠腫、髄膜腫、神経芽腫、網
膜芽細胞腫、及び脳転移など）が挙げられる。
【0366】
がん治療は、例えば、腫瘍退縮、腫瘍重量又はサイズ収縮、進行時間、生存期間、無増
悪生存率、全奏功率、応答期間、生活の質、タンパク質発現及び／又は活性によって評価
することができる。例えば、放射線学的イメージングによる応答の測定を含む、治療の有
効性を判定するためのアプローチを利用することができる。
悪生存率、全奏功率、応答期間、生活の質、タンパク質発現及び／又は活性によって評価
することができる。例えば、放射線学的イメージングによる応答の測定を含む、治療の有
効性を判定するためのアプローチを利用することができる。
【0367】
他の実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞は、病原体関連（ウイルスコードなど
）抗原を標的化することによって、感染性疾患を治療するのに有用であり得る。感染は、
例えば、ウイルス、細菌、原虫、又は寄生体によって引き起こされ得る。標的抗原は、病
原体によって引き起こされる疾患に関与する病原性タンパク質、ポリペプチド、若しくは
ペプチドであってもよく、又は病原体に感染した宿主において免疫応答を誘導することが
できる。ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞によって標的化され得る病原性抗原としては、Ａｃ
ｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂａｕｍａｎｎｉｉ、アナプラマ属、Ａｎａｐｌａｓｍａ ｐ
ｈａｇｏｃｙｔｏｐｈｉｌｕｍ、Ａｎｃｙｌｏｓｔｏｍａ ｂｒａｚｉｌｉｅｎｓｅ、Ａ
ｎｃｙｌｏｓｔｏｍａ ｄｕｏｄｅｎａｌｅ、Ａｒｃａｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｈａｅ
ｍｏｌｙｔｉｃｕｍ、Ａｓｃａｒｉｓ ｌｕｍｂｒｉｃｏｉｄｅｓ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌ
ｕｓ属、Ａｓｔｒｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｂａｂｅｓｉａ属、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｎｔｈｒ
ａｃｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ、Ｂａｒｔｏｎｅｌｌａ ｈｅｎｓｅｌａｅ
、Ｂｋウイルス、Ｂｌａｓｔｏｃｙｓｔｉｓ ｈｏｍｉｎｉｓ、Ｂｌａｓｔｏｍｙｃｅｓ
ｄｅｒｍａｔｉｔｉｄｉｓ、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ、ボルレア属
、ボルレア属、ボルレア属、ブッジラ属、Ｂｒｕｇｉａ ｍａｌａｙｉ、ブニヤウイルス
科、Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ ｃｅｐａｃｉａ及び他のバークホルデリア属、Ｂｕｒｋ
ｈｏｌｄｅｒｉａ ｍａｌｌｅｉ、Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ ｐｓｅｕｄｏｍａｌｌｅ
ｉ、カリシウイルス科、カンピロバクター属、Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ、カン
ジダ属、Ｃｈｌａｍｙｄｏｐｈｉｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｃｈｌａｍｙｄｏｐｈｉ
ｌａ ｐｓｉｔｔａｃｉ、ＣＪＤプリオン、Ｃｌｏｎｏｒｃｈｉｓ ｓｉｎｅｎｓｉｓ、
Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｂｏｔｕｌｉｎｕｍ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｄｉｆｆｉｃ
ｉｌｅ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ
ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ、クロストリジウム属、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｔｅｔａｎｉ
、コクシジオイデス属、コロナウイルス、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｄｉｐｈｔ
ｈｅｒｉａｅ、Ｃｏｘｉｅｌｌａ ｂｕｒｎｅｔｉｉ、クリミアコンゴ出血熱ウイルス、
Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ、クリプトスポリジウム属、サイトメ
ガロウイルス（ＣＭＶ）、デング熱ウイルス（ＤＥＮ－１、ＤＥＮ－２、ＤＥＮ－３、及
びＤＥＮ－４）、Ｄｉｅｎｔａｍｏｅｂａ ｆｒａｇｉｌｉｓ、エボラウイルス（ＥＢＯ
Ｖ）、エシェリコッカス属、Ｅｈｒｌｉｃｈｉａ ｃｈａｆｆｅｅｎｓｉｓ、Ｅｈｒｌｉ
ｃｈｉａ ｅｗｉｎｇｉｉ、Ｅｈｒｌｉｃｈｉａ属、Ｅｎｔａｍｏｅｂａ ｈｉｓｔｏｌ
ｙｔｉｃａ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ属、Ｅｎｔｅｒｏｖｉｒｕｓ属、エンテロウイル
ス、主にコクサッキーＡウイルス及びエンテロウイルス７１（ＥＶ７１）、エピデルモフ
ィトン属、エプスタイン－バーウイルス（ＥＢＶ）、大腸菌Ｏ１５７：Ｈ７、Ｏ１１１、
及びＯ１０４：Ｈ４、Ｆａｓｃｉｏｌａ ｈｅｐａｔｉｃａ及びＦａｓｃｉｏｌａ ｇｉ
ｇａｎｔｉｃａ、ＦＦＩプリオン、フィラノイデスーパーファミリー、フラビウイルス、
Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ ｔｕｌａｒｅｎｓｉｓ、フソバクテリウム属、Ｇｅｏｔｒｉｃ
ｈｕｍ ｃａｎｄｉｄｕｍ、Ｇｉａｒｄｉａ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｉｓ、顎口虫属、Ｇ
ＳＳプリオン、グアナアリスウイルス、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｄｕｃｒｅｙｉ、イン
フルエンザ菌、ヘリコバクターピロリ、ヘニパウイルス（ヘンドラウイルスニパウイルス
、）、Ａ型肝炎ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）、
Ｄ型肝炎ウイルス、Ｅ型肝炎ウイルス、単純ヘルペスウイルス１及び２（ＨＳＶ－１及び
ＨＳＶ－２）、Ｈｉｓｔｏｐｌａｓｍａ ｃａｐｓｕｌａｔｕｍ、ＨＩＶ（ヒト免疫不全
ウイルス）、Ｈｏｒｔａｅａ ｗｅｒｎｅｃｋｉｉ、ヒトボカウイルス（ＨＢｏＶ）、ヒ
トヘルペスウイルス６（ＨＨＶ－６）、ヒトヘルペスウイルス７（ＨＨＶ－７）、ヒトメ
タニューモウイルス（ｈＭＰＶ）、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、ヒトパラインフ
ルエンザウイルス（ＨＰＩＶ）、ヒトＴ細胞白血病ウイルス１（ＨＴＬＶ－１）、日本脳
炎ウイルス、ＪＣウイルス、フニンウイルス、カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス（ＫＳＨ
Ｖ）、Ｋｉｎｇｅｌｌａ ｋｉｎｇａｅ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｇｒａｎｕｌｏｍａｔ
ｉｓ、Ｋｕｒｕプリオン、ラッサウイルス、Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｐｈｉ
ｌａ、リーシュマニア属、レプトスピラ属、Ｌｉｓｔｅｒｉａ ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎ
ｅｓ、リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス（ＬＣＭＶ）、マチュポウイルス、マラセチア属、
マールブルクウイルス、麻疹ウイルス、Ｍｅｔａｇｏｎｉｍｕｓ ｙｏｋａｇａｗａｉ、
Ｍｉｃｒｏｓｐｏｒｉｄｉａ ｐｈｙｌｕｍ、伝染性軟属腫ウイルス（ＭＣＶ）、おたふ
く風邪ウイルス、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｅｐｒａｅ及びＭｙｃｏｂａｃｔｅｒ
ｉｕｍ ｌｅｐｒｏｍａｔｏｓｉｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏ
ｓｉｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｕｌｃｅｒａｎｓ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｐｎ
ｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｎａｅｇｌｅｒｉａ ｆｏｗｌｅｒｉ、Ｎｅｃａｔｏｒ ａｍｅｒｉ
ｃａｎｕｓ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｍｅ
ｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ、Ｎｏｃａｒｄｉａ ａｓｔｅｒｏｉｄｅｓ、ノカルジア属、Ｏｎ
ｃｈｏｃｅｒｃａ ｖｏｌｖｕｌｕｓ、Ｏｒｉｅｎｔｉａ ｔｓｕｔｓｕｇａｍｕｓｈｉ
、オルソミクソウイルス科（インフルエンザ）、Ｐａｒａｃｏｃｃｉｄｉｏｉｄｅｓ ｂ
ｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ、パラゴニムス属、Ｐａｒａｇｏｎｉｍｕｓ ｗｅｓｔｅｒｍａ
ｎｉ、パルボウイルスＢ１９、パスツレラ属、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ属、Ｐｎｅｕｍｏｃ
ｙｓｔｉｓ Ｊｉｒｏｖｅｃｉｉ、ポリオウイルス、狂犬病ウイルス、呼吸器合胞体ウイ
ルス（ＲＳＶ）、ライノウイルス、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ａｋａｒｉ、リケッチア属、
Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ｐｒｏｗａｚｅｋｉｉ、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ｒｉｃｋｅｔｔ
ｓｉｉ、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ｔｙｐｈｉ、リフトバレー熱ウイルス、ロタウイルス、
風疹ウイルス、サビアウイルス、サルモネラ属、Ｓａｒｃｏｐｔｅｓ ｓｃａｂｉｅｉ、
ＳＡＲＳコロナウイルス、住血吸虫属、シゲラ属、シンノンブレウイルス、ハンタウイル
ス属、Ｓｐｏｒｏｔｈｒｉｘ ｓｃｈｅｎｃｋｉｉ、ブドウ球菌属、ブドウ球菌属、Ｓｔ
ｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｇａｌａｃｔｉａｅ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅ
ｕｍｏｎｉａｅ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓ、Ｓｔｒｏｎｇｙｌｏ
ｉｄｅｓ ｓｔｅｒｃｏｒａｌｉｓ、条虫属、Ｔａｅｎｉａ ｓｏｌｉｕｍ、ダニ媒介脳
炎ウイルス（ＴＢＥＶ）、Ｔｏｘｏｃａｒａ ｃａｎｉｓ又はＴｏｘｏｃａｒａ ｃａｔ
ｉ、Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ ｇｏｎｄｉｉ、Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ ｐａｌｌｉｄｕｍ、Ｔ
ｒｉｃｈｉｎｅｌｌａ ｓｐｉｒａｌｉｓ、Ｔｒｉｃｈｏｍｏｎａｓ ｖａｇｉｎａｌｉ
ｓ、トリコフィトン属、Ｔｒｉｃｈｕｒｉｓ ｔｒｉｃｈｉｕｒａ、Ｔｒｙｐａｎｏｓｏ
ｍａ ｂｒｕｃｅｉ、Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ ｃｒｕｚｉ、Ｕｒｅａｐｌａｓｍａ ｕ
ｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ、水痘帯状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）、水痘帯状疱疹ウイルス（ＶＺ
Ｖ）、大痘瘡又は小痘瘡、ｖＣＪＤプリオン、ベネズエラウマ脳炎ウイルス、Ｖｉｂｒｉ
ｏ ｃｈｏｌｅｒａｅ、西ナイルウイルス、西ウマ脳炎ウイルス、Ｗｕｃｈｅｒｅｒｉａ
ｂａｎｃｒｏｆｔｉ、黄熱病、Ｙｅｒｓｉｎｉａ ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｃａ、Ｙ
ｅｒｓｉｎｉａ ｐｅｓｔｉｓ、及びＹｅｒｓｉｎｉａ Ｐｓｅｕｄｏｔｕｂｅｒｃｕｌ
ｏｓｉｓが挙げられる。
）抗原を標的化することによって、感染性疾患を治療するのに有用であり得る。感染は、
例えば、ウイルス、細菌、原虫、又は寄生体によって引き起こされ得る。標的抗原は、病
原体によって引き起こされる疾患に関与する病原性タンパク質、ポリペプチド、若しくは
ペプチドであってもよく、又は病原体に感染した宿主において免疫応答を誘導することが
できる。ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞によって標的化され得る病原性抗原としては、Ａｃ
ｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂａｕｍａｎｎｉｉ、アナプラマ属、Ａｎａｐｌａｓｍａ ｐ
ｈａｇｏｃｙｔｏｐｈｉｌｕｍ、Ａｎｃｙｌｏｓｔｏｍａ ｂｒａｚｉｌｉｅｎｓｅ、Ａ
ｎｃｙｌｏｓｔｏｍａ ｄｕｏｄｅｎａｌｅ、Ａｒｃａｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｈａｅ
ｍｏｌｙｔｉｃｕｍ、Ａｓｃａｒｉｓ ｌｕｍｂｒｉｃｏｉｄｅｓ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌ
ｕｓ属、Ａｓｔｒｏｖｉｒｉｄａｅ、Ｂａｂｅｓｉａ属、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｎｔｈｒ
ａｃｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ、Ｂａｒｔｏｎｅｌｌａ ｈｅｎｓｅｌａｅ
、Ｂｋウイルス、Ｂｌａｓｔｏｃｙｓｔｉｓ ｈｏｍｉｎｉｓ、Ｂｌａｓｔｏｍｙｃｅｓ
ｄｅｒｍａｔｉｔｉｄｉｓ、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ、ボルレア属
、ボルレア属、ボルレア属、ブッジラ属、Ｂｒｕｇｉａ ｍａｌａｙｉ、ブニヤウイルス
科、Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ ｃｅｐａｃｉａ及び他のバークホルデリア属、Ｂｕｒｋ
ｈｏｌｄｅｒｉａ ｍａｌｌｅｉ、Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ ｐｓｅｕｄｏｍａｌｌｅ
ｉ、カリシウイルス科、カンピロバクター属、Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ、カン
ジダ属、Ｃｈｌａｍｙｄｏｐｈｉｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｃｈｌａｍｙｄｏｐｈｉ
ｌａ ｐｓｉｔｔａｃｉ、ＣＪＤプリオン、Ｃｌｏｎｏｒｃｈｉｓ ｓｉｎｅｎｓｉｓ、
Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｂｏｔｕｌｉｎｕｍ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｄｉｆｆｉｃ
ｉｌｅ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ
ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ、クロストリジウム属、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｔｅｔａｎｉ
、コクシジオイデス属、コロナウイルス、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｄｉｐｈｔ
ｈｅｒｉａｅ、Ｃｏｘｉｅｌｌａ ｂｕｒｎｅｔｉｉ、クリミアコンゴ出血熱ウイルス、
Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓ、クリプトスポリジウム属、サイトメ
ガロウイルス（ＣＭＶ）、デング熱ウイルス（ＤＥＮ－１、ＤＥＮ－２、ＤＥＮ－３、及
びＤＥＮ－４）、Ｄｉｅｎｔａｍｏｅｂａ ｆｒａｇｉｌｉｓ、エボラウイルス（ＥＢＯ
Ｖ）、エシェリコッカス属、Ｅｈｒｌｉｃｈｉａ ｃｈａｆｆｅｅｎｓｉｓ、Ｅｈｒｌｉ
ｃｈｉａ ｅｗｉｎｇｉｉ、Ｅｈｒｌｉｃｈｉａ属、Ｅｎｔａｍｏｅｂａ ｈｉｓｔｏｌ
ｙｔｉｃａ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ属、Ｅｎｔｅｒｏｖｉｒｕｓ属、エンテロウイル
ス、主にコクサッキーＡウイルス及びエンテロウイルス７１（ＥＶ７１）、エピデルモフ
ィトン属、エプスタイン－バーウイルス（ＥＢＶ）、大腸菌Ｏ１５７：Ｈ７、Ｏ１１１、
及びＯ１０４：Ｈ４、Ｆａｓｃｉｏｌａ ｈｅｐａｔｉｃａ及びＦａｓｃｉｏｌａ ｇｉ
ｇａｎｔｉｃａ、ＦＦＩプリオン、フィラノイデスーパーファミリー、フラビウイルス、
Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ ｔｕｌａｒｅｎｓｉｓ、フソバクテリウム属、Ｇｅｏｔｒｉｃ
ｈｕｍ ｃａｎｄｉｄｕｍ、Ｇｉａｒｄｉａ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｉｓ、顎口虫属、Ｇ
ＳＳプリオン、グアナアリスウイルス、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｄｕｃｒｅｙｉ、イン
フルエンザ菌、ヘリコバクターピロリ、ヘニパウイルス（ヘンドラウイルスニパウイルス
、）、Ａ型肝炎ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）、
Ｄ型肝炎ウイルス、Ｅ型肝炎ウイルス、単純ヘルペスウイルス１及び２（ＨＳＶ－１及び
ＨＳＶ－２）、Ｈｉｓｔｏｐｌａｓｍａ ｃａｐｓｕｌａｔｕｍ、ＨＩＶ（ヒト免疫不全
ウイルス）、Ｈｏｒｔａｅａ ｗｅｒｎｅｃｋｉｉ、ヒトボカウイルス（ＨＢｏＶ）、ヒ
トヘルペスウイルス６（ＨＨＶ－６）、ヒトヘルペスウイルス７（ＨＨＶ－７）、ヒトメ
タニューモウイルス（ｈＭＰＶ）、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、ヒトパラインフ
ルエンザウイルス（ＨＰＩＶ）、ヒトＴ細胞白血病ウイルス１（ＨＴＬＶ－１）、日本脳
炎ウイルス、ＪＣウイルス、フニンウイルス、カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス（ＫＳＨ
Ｖ）、Ｋｉｎｇｅｌｌａ ｋｉｎｇａｅ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｇｒａｎｕｌｏｍａｔ
ｉｓ、Ｋｕｒｕプリオン、ラッサウイルス、Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｐｈｉ
ｌａ、リーシュマニア属、レプトスピラ属、Ｌｉｓｔｅｒｉａ ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎ
ｅｓ、リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス（ＬＣＭＶ）、マチュポウイルス、マラセチア属、
マールブルクウイルス、麻疹ウイルス、Ｍｅｔａｇｏｎｉｍｕｓ ｙｏｋａｇａｗａｉ、
Ｍｉｃｒｏｓｐｏｒｉｄｉａ ｐｈｙｌｕｍ、伝染性軟属腫ウイルス（ＭＣＶ）、おたふ
く風邪ウイルス、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｅｐｒａｅ及びＭｙｃｏｂａｃｔｅｒ
ｉｕｍ ｌｅｐｒｏｍａｔｏｓｉｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏ
ｓｉｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｕｌｃｅｒａｎｓ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｐｎ
ｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｎａｅｇｌｅｒｉａ ｆｏｗｌｅｒｉ、Ｎｅｃａｔｏｒ ａｍｅｒｉ
ｃａｎｕｓ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｍｅ
ｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ、Ｎｏｃａｒｄｉａ ａｓｔｅｒｏｉｄｅｓ、ノカルジア属、Ｏｎ
ｃｈｏｃｅｒｃａ ｖｏｌｖｕｌｕｓ、Ｏｒｉｅｎｔｉａ ｔｓｕｔｓｕｇａｍｕｓｈｉ
、オルソミクソウイルス科（インフルエンザ）、Ｐａｒａｃｏｃｃｉｄｉｏｉｄｅｓ ｂ
ｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ、パラゴニムス属、Ｐａｒａｇｏｎｉｍｕｓ ｗｅｓｔｅｒｍａ
ｎｉ、パルボウイルスＢ１９、パスツレラ属、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ属、Ｐｎｅｕｍｏｃ
ｙｓｔｉｓ Ｊｉｒｏｖｅｃｉｉ、ポリオウイルス、狂犬病ウイルス、呼吸器合胞体ウイ
ルス（ＲＳＶ）、ライノウイルス、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ａｋａｒｉ、リケッチア属、
Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ｐｒｏｗａｚｅｋｉｉ、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ｒｉｃｋｅｔｔ
ｓｉｉ、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ｔｙｐｈｉ、リフトバレー熱ウイルス、ロタウイルス、
風疹ウイルス、サビアウイルス、サルモネラ属、Ｓａｒｃｏｐｔｅｓ ｓｃａｂｉｅｉ、
ＳＡＲＳコロナウイルス、住血吸虫属、シゲラ属、シンノンブレウイルス、ハンタウイル
ス属、Ｓｐｏｒｏｔｈｒｉｘ ｓｃｈｅｎｃｋｉｉ、ブドウ球菌属、ブドウ球菌属、Ｓｔ
ｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｇａｌａｃｔｉａｅ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅ
ｕｍｏｎｉａｅ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓ、Ｓｔｒｏｎｇｙｌｏ
ｉｄｅｓ ｓｔｅｒｃｏｒａｌｉｓ、条虫属、Ｔａｅｎｉａ ｓｏｌｉｕｍ、ダニ媒介脳
炎ウイルス（ＴＢＥＶ）、Ｔｏｘｏｃａｒａ ｃａｎｉｓ又はＴｏｘｏｃａｒａ ｃａｔ
ｉ、Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ ｇｏｎｄｉｉ、Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ ｐａｌｌｉｄｕｍ、Ｔ
ｒｉｃｈｉｎｅｌｌａ ｓｐｉｒａｌｉｓ、Ｔｒｉｃｈｏｍｏｎａｓ ｖａｇｉｎａｌｉ
ｓ、トリコフィトン属、Ｔｒｉｃｈｕｒｉｓ ｔｒｉｃｈｉｕｒａ、Ｔｒｙｐａｎｏｓｏ
ｍａ ｂｒｕｃｅｉ、Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ ｃｒｕｚｉ、Ｕｒｅａｐｌａｓｍａ ｕ
ｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ、水痘帯状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）、水痘帯状疱疹ウイルス（ＶＺ
Ｖ）、大痘瘡又は小痘瘡、ｖＣＪＤプリオン、ベネズエラウマ脳炎ウイルス、Ｖｉｂｒｉ
ｏ ｃｈｏｌｅｒａｅ、西ナイルウイルス、西ウマ脳炎ウイルス、Ｗｕｃｈｅｒｅｒｉａ
ｂａｎｃｒｏｆｔｉ、黄熱病、Ｙｅｒｓｉｎｉａ ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｃａ、Ｙ
ｅｒｓｉｎｉａ ｐｅｓｔｉｓ、及びＹｅｒｓｉｎｉａ Ｐｓｅｕｄｏｔｕｂｅｒｃｕｌ
ｏｓｉｓが挙げられる。
【0368】
いくつかの実施形態では、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞は、発がん性ウイルスによる感
染などの発がん性感染症を治療するために使用される。発がん性ウイルスとしては、ＣＭ
Ｖ、ＥＢＶ、ＨＢＶ、ＫＳＨＶ、ＨＰＶ、ＭＣＶ、ＨＴＬＶ－１、ＨＩＶ－１、及びＨＣ
Ｖが挙げられるが、これらに限定されない。ｃａＴＣＲの標的抗原は、Ｔａｘ、Ｅ７、Ｅ
６／Ｅ７、Ｅ６、ＨＢｘ、ＥＢＮＡタンパク質（例えば、ＥＢＮＡ３Ａ、ＥＢＮＡ３Ｃ、
及びＥＢＮＡ２）、ｖ－サイクリン、ＬＡＮＡ１、ＬＡＮＡ２、ＬＭＰ－１、ｋ－ｂＺＩ
Ｐ、ＲＴＡ、ＫＳＨＶ Ｋ８、及びこれらの断片が挙げられるが、これらに限定されない
ウイルス性がんタンパク質であり得る。Ａｈｕｊａ，Ｒｉｃｈａ，ｅｔ ａｌ．，Ｃｕｒ
ｒ．Ｓｃｉ．，２０１４を参照されたい。
製品及びキット
染などの発がん性感染症を治療するために使用される。発がん性ウイルスとしては、ＣＭ
Ｖ、ＥＢＶ、ＨＢＶ、ＫＳＨＶ、ＨＰＶ、ＭＣＶ、ＨＴＬＶ－１、ＨＩＶ－１、及びＨＣ
Ｖが挙げられるが、これらに限定されない。ｃａＴＣＲの標的抗原は、Ｔａｘ、Ｅ７、Ｅ
６／Ｅ７、Ｅ６、ＨＢｘ、ＥＢＮＡタンパク質（例えば、ＥＢＮＡ３Ａ、ＥＢＮＡ３Ｃ、
及びＥＢＮＡ２）、ｖ－サイクリン、ＬＡＮＡ１、ＬＡＮＡ２、ＬＭＰ－１、ｋ－ｂＺＩ
Ｐ、ＲＴＡ、ＫＳＨＶ Ｋ８、及びこれらの断片が挙げられるが、これらに限定されない
ウイルス性がんタンパク質であり得る。Ａｈｕｊａ，Ｒｉｃｈａ，ｅｔ ａｌ．，Ｃｕｒ
ｒ．Ｓｃｉ．，２０１４を参照されたい。
製品及びキット
【0369】
本発明のいくつかの実施形態では、がん（例えば、副腎皮質癌、膀胱癌、乳癌、子宮頸
癌、胆管細胞癌、大腸直腸癌、食道癌、神経膠芽腫、神経膠腫、肝細胞癌、頭頸部癌、腎
臓癌、白血病、肺癌、リンパ腫、黒色腫、中皮腫、多発性骨髄腫、膵臓癌、褐色細胞腫、
形質細胞腫、神経芽腫、卵巣癌、前立腺癌、肉腫、胃癌、子宮癌、若しくは甲状腺癌）又
はウイルス感染（例えば、ＣＭＶ、ＥＢＶ、ＨＢＶ、ＫＳＨＶ、ＨＰＶ、ＭＣＶ、ＨＴＬ
Ｖ－１、ＨＩＶ－１、又はＨＣＶによる感染）などの標的抗原陽性疾患の治療に有用な材
料を含む製品が提供される。製品は、容器と、この容器上にある又はこの容器に付随した
ラベル又は添付文書と、を含むことができる。適切な容器としては、例えば、ボトル、バ
イアル、シリンジなどが挙げられる。容器は、ガラス又はプラスチックなどの様々な材料
から形成することができる。一般に、容器は、本明細書に記載の疾患又は障害を治療する
のに有効な組成物を保持するものであり、滅菌アクセスポートを有し得る（例えば、容器
は、皮下注射針によって貫通可能なストッパーを有する静脈輸液バッグ又はバイアルであ
ってよい）。組成物中の少なくとも１つの活性剤は、表面上に本発明のｃａＴＣＲ及びＣ
ＳＲを提示する免疫細胞である。ラベル又は添付文書は、組成物が、特定の状態を治療す
るために使用されることを表示する。ラベル又は添付文書は、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細
胞組成物を患者に投与するための説明書を更に含む。本明細書に記載の併用療法をなす製
品及びキットもまた想到される。
癌、胆管細胞癌、大腸直腸癌、食道癌、神経膠芽腫、神経膠腫、肝細胞癌、頭頸部癌、腎
臓癌、白血病、肺癌、リンパ腫、黒色腫、中皮腫、多発性骨髄腫、膵臓癌、褐色細胞腫、
形質細胞腫、神経芽腫、卵巣癌、前立腺癌、肉腫、胃癌、子宮癌、若しくは甲状腺癌）又
はウイルス感染（例えば、ＣＭＶ、ＥＢＶ、ＨＢＶ、ＫＳＨＶ、ＨＰＶ、ＭＣＶ、ＨＴＬ
Ｖ－１、ＨＩＶ－１、又はＨＣＶによる感染）などの標的抗原陽性疾患の治療に有用な材
料を含む製品が提供される。製品は、容器と、この容器上にある又はこの容器に付随した
ラベル又は添付文書と、を含むことができる。適切な容器としては、例えば、ボトル、バ
イアル、シリンジなどが挙げられる。容器は、ガラス又はプラスチックなどの様々な材料
から形成することができる。一般に、容器は、本明細書に記載の疾患又は障害を治療する
のに有効な組成物を保持するものであり、滅菌アクセスポートを有し得る（例えば、容器
は、皮下注射針によって貫通可能なストッパーを有する静脈輸液バッグ又はバイアルであ
ってよい）。組成物中の少なくとも１つの活性剤は、表面上に本発明のｃａＴＣＲ及びＣ
ＳＲを提示する免疫細胞である。ラベル又は添付文書は、組成物が、特定の状態を治療す
るために使用されることを表示する。ラベル又は添付文書は、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細
胞組成物を患者に投与するための説明書を更に含む。本明細書に記載の併用療法をなす製
品及びキットもまた想到される。
【0370】
添付文書は、治療用製品の商品パッケージに習慣的に含まれている、このような治療用
製品の使用に関しての指示、使用法、用量、投与、禁忌及び／又は警告に関する情報を記
載している説明書を参照する。いくつかの実施形態では、添付文書は、組成物が、標的抗
原陽性がん（副腎皮質癌、膀胱癌、乳癌、子宮頸癌、胆管細胞癌、大腸直腸癌、食道癌、
神経膠芽腫、神経膠腫、肝細胞癌、頭頸部癌、腎臓癌、白血病、肺癌、リンパ腫、黒色腫
、中皮腫、多発性骨髄腫、膵臓癌、褐色細胞腫、形質細胞腫、神経芽腫、卵巣癌、前立腺
癌、肉腫、胃癌、子宮癌、又は甲状腺癌など）の治療のために使用されることを示す。他
の実施形態では、添付文書は、組成物が標的抗原陽性ウイルス感染（例えば、ＣＭＶ、Ｅ
ＢＶ、ＨＢＶ、ＫＳＨＶ、ＨＰＶ、ＭＣＶ、ＨＴＬＶ－１、ＨＩＶ－１、又はＨＣＶによ
る感染）の治療のために使用されることを示す。
製品の使用に関しての指示、使用法、用量、投与、禁忌及び／又は警告に関する情報を記
載している説明書を参照する。いくつかの実施形態では、添付文書は、組成物が、標的抗
原陽性がん（副腎皮質癌、膀胱癌、乳癌、子宮頸癌、胆管細胞癌、大腸直腸癌、食道癌、
神経膠芽腫、神経膠腫、肝細胞癌、頭頸部癌、腎臓癌、白血病、肺癌、リンパ腫、黒色腫
、中皮腫、多発性骨髄腫、膵臓癌、褐色細胞腫、形質細胞腫、神経芽腫、卵巣癌、前立腺
癌、肉腫、胃癌、子宮癌、又は甲状腺癌など）の治療のために使用されることを示す。他
の実施形態では、添付文書は、組成物が標的抗原陽性ウイルス感染（例えば、ＣＭＶ、Ｅ
ＢＶ、ＨＢＶ、ＫＳＨＶ、ＨＰＶ、ＭＣＶ、ＨＴＬＶ－１、ＨＩＶ－１、又はＨＣＶによ
る感染）の治療のために使用されることを示す。
【0371】
加えて、製品は、静菌注射用水（ＢＷＦＩ）、リン酸緩衝食塩水、リンガー液及びブド
ウ糖液など、医薬上許容される緩衝液を含む第２の容器を更に含んでよい。これは、他の
緩衝液、希釈液、濾過器、針、及び注射器を含めて、商業上及び利用者の立場からの他の
望ましい材料を更に含んでよい。
ウ糖液など、医薬上許容される緩衝液を含む第２の容器を更に含んでよい。これは、他の
緩衝液、希釈液、濾過器、針、及び注射器を含めて、商業上及び利用者の立場からの他の
望ましい材料を更に含んでよい。
【0372】
例えば、本明細書に記載される標的抗原陽性疾患又は障害の治療のために、所望により
製品と組み合わせて、様々な目的で有用であるキットも提供される。本発明のキットは、
ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞組成物（又は単位剤形及び／又は製品）を収容する１つ以上
の容器を含み、いくつかの実施形態では、別の薬剤（本明細書に記載の薬剤など）及び／
又は本明細書に記載される方法のいずれかに従って使用するための説明書を更に含む。こ
のキットは、治療に適している個体の選択についての説明を更に含んでよい。本発明のキ
ットで提供される説明書は、典型的には、ラベル又は添付文書（例えば、キットに含まれ
る紙シート）に書かれた説明書であるが、機械読み出し可能な命令（例えば、磁気又は光
学記憶ディスクで実行される命令）も許容可能である。
製品と組み合わせて、様々な目的で有用であるキットも提供される。本発明のキットは、
ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞組成物（又は単位剤形及び／又は製品）を収容する１つ以上
の容器を含み、いくつかの実施形態では、別の薬剤（本明細書に記載の薬剤など）及び／
又は本明細書に記載される方法のいずれかに従って使用するための説明書を更に含む。こ
のキットは、治療に適している個体の選択についての説明を更に含んでよい。本発明のキ
ットで提供される説明書は、典型的には、ラベル又は添付文書（例えば、キットに含まれ
る紙シート）に書かれた説明書であるが、機械読み出し可能な命令（例えば、磁気又は光
学記憶ディスクで実行される命令）も許容可能である。
【0373】
例えば、いくつかの実施形態では、キットは、表面上にｃａＴＣＲ及びＣＳＲを提示す
る免疫細胞を含む組成物を含む。いくつかの実施形態では、キットは、ａ）表面上にｃａ
ＴＣＲ及びＣＳＲを提示する免疫細胞を含む組成物と、ｂ）有効量の少なくとも１種の他
の薬剤と、を含み、他の薬剤は、ＭＨＣタンパク質の発現を増加させ、及び／又はＭＨＣ
タンパク質によるペプチドの表面提示を強化する（例えば、ＩＦＮγ、ＩＦＮβ、ＩＦＮ
α、又はＨｓｐ９０阻害剤）。いくつかの実施形態では、キットは、ａ）表面上にｃａＴ
ＣＲ及びＣＳＲを提示する免疫細胞を含む組成物と、ｂ）標的抗原陽性疾患（がん又はウ
イルス感染など）の治療のために、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞組成物を個体に投与する
ための指示書と、を含む。いくつかの実施形態では、キットは、ａ）表面上にｃａＴＣＲ
及びＣＳＲを提示する免疫細胞を含む組成物と、ｂ）有効量の少なくとも１種の他の薬剤
であって、ＭＨＣタンパク質の発現を増加させ、及び／又はＭＨＣタンパク質によるペプ
チドの表面提示を強化する他の薬剤（例えば、ＩＦＮγ、ＩＦＮβ、ＩＦＮα、又はＨｓ
ｐ９０阻害剤）と、ｃ）標的抗原陽性疾患（がん又はウイルス感染など）の治療のために
、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞組成物及び他の薬剤を個体に投与するための指示書と、を
含む。ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞組成物及び他の薬剤は、別個の容器又は単一の容器内
に存在し得る。例えば、キットは、１つの別個の組成物又は２つ以上の組成物を含んでも
よく、１つの組成物はｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞を含み、別の組成物は他の薬剤を含む
。
る免疫細胞を含む組成物を含む。いくつかの実施形態では、キットは、ａ）表面上にｃａ
ＴＣＲ及びＣＳＲを提示する免疫細胞を含む組成物と、ｂ）有効量の少なくとも１種の他
の薬剤と、を含み、他の薬剤は、ＭＨＣタンパク質の発現を増加させ、及び／又はＭＨＣ
タンパク質によるペプチドの表面提示を強化する（例えば、ＩＦＮγ、ＩＦＮβ、ＩＦＮ
α、又はＨｓｐ９０阻害剤）。いくつかの実施形態では、キットは、ａ）表面上にｃａＴ
ＣＲ及びＣＳＲを提示する免疫細胞を含む組成物と、ｂ）標的抗原陽性疾患（がん又はウ
イルス感染など）の治療のために、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞組成物を個体に投与する
ための指示書と、を含む。いくつかの実施形態では、キットは、ａ）表面上にｃａＴＣＲ
及びＣＳＲを提示する免疫細胞を含む組成物と、ｂ）有効量の少なくとも１種の他の薬剤
であって、ＭＨＣタンパク質の発現を増加させ、及び／又はＭＨＣタンパク質によるペプ
チドの表面提示を強化する他の薬剤（例えば、ＩＦＮγ、ＩＦＮβ、ＩＦＮα、又はＨｓ
ｐ９０阻害剤）と、ｃ）標的抗原陽性疾患（がん又はウイルス感染など）の治療のために
、ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞組成物及び他の薬剤を個体に投与するための指示書と、を
含む。ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞組成物及び他の薬剤は、別個の容器又は単一の容器内
に存在し得る。例えば、キットは、１つの別個の組成物又は２つ以上の組成物を含んでも
よく、１つの組成物はｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞を含み、別の組成物は他の薬剤を含む
。
【0374】
いくつかの実施形態では、キットは、ａ）ｃａＴＣＲ及びＣＳＲを含む１つ以上の組成
物と、ｂ）ｃａＴＣＲ及びＣＳＲを、免疫細胞（例えば、個体に由来する免疫細胞、例え
ばＴ細胞又はナチュラルキラー細胞など）と組み合わせて、ｃａＴＣＲ及びＣＳＲを表面
に提示する免疫細胞を含む組成物を形成し、標的抗原陽性疾患（がん又はウイルス感染な
ど）の治療のためにｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞組成物を個体に投与するための指示書と
、を含む。いくつかの実施形態では、キットは、ａ）ｃａＴＣＲ及びＣＳＲを含む１つ以
上の組成物と、ｂ）免疫細胞（細胞傷害性細胞など）と、を含む。いくつかの実施形態で
は、キットは、ａ）ｃａＴＣＲ及びＣＳＲを含む１つ以上の組成物と、ｂ）免疫細胞（細
胞傷害性細胞など）と、ｃ）ｃａＴＣＲ及びＣＳＲを免疫細胞と組み合わせて、ｃａＴＣ
Ｒ及びＣＳＲを表面に提示する免疫細胞を含む組成物を形成し、標的抗原陽性疾患（がん
又はウイルス感染など）の治療のためにｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞組成物を個体に投与
するための指示書と、を含む。
物と、ｂ）ｃａＴＣＲ及びＣＳＲを、免疫細胞（例えば、個体に由来する免疫細胞、例え
ばＴ細胞又はナチュラルキラー細胞など）と組み合わせて、ｃａＴＣＲ及びＣＳＲを表面
に提示する免疫細胞を含む組成物を形成し、標的抗原陽性疾患（がん又はウイルス感染な
ど）の治療のためにｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞組成物を個体に投与するための指示書と
、を含む。いくつかの実施形態では、キットは、ａ）ｃａＴＣＲ及びＣＳＲを含む１つ以
上の組成物と、ｂ）免疫細胞（細胞傷害性細胞など）と、を含む。いくつかの実施形態で
は、キットは、ａ）ｃａＴＣＲ及びＣＳＲを含む１つ以上の組成物と、ｂ）免疫細胞（細
胞傷害性細胞など）と、ｃ）ｃａＴＣＲ及びＣＳＲを免疫細胞と組み合わせて、ｃａＴＣ
Ｒ及びＣＳＲを表面に提示する免疫細胞を含む組成物を形成し、標的抗原陽性疾患（がん
又はウイルス感染など）の治療のためにｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞組成物を個体に投与
するための指示書と、を含む。
【0375】
いくつかの実施形態では、キットは、ｃａＴＣＲ及びＣＳＲをコードする核酸（又は核
酸のセット）を含む。いくつかの実施形態では、キットは、ａ）ｃａＴＣＲ及びＣＳＲを
コードする核酸（又は核酸のセット）と、ｂ）核酸（又は核酸のセット）を発現するため
の宿主細胞（免疫細胞など）を含む。いくつかの実施形態では、キットは、ａ）ｃａＴＣ
Ｒ及びＣＳＲをコードする核酸（又は核酸のセット）と、ｂ）ｉ）宿主細胞（例えば、Ｔ
細胞などの免疫細胞など）中でｃａＴＣＲ及びＣＳＲを発現すること、ｉｉ）ｃａＴＣＲ
及びＣＳＲを発現する宿主細胞を含む組成物を調製すること、並びにｉｉｉ）ｃａＴＣＲ
及びＣＳＲを発現する宿主細胞を含む組成物を、標的抗原陽性疾患（がん又はウイルス感
染など）の治療のために個体に投与することのための指示書と、を含む。いくつかの実施
形態では、宿主細胞は個体に由来する。いくつかの実施形態では、キットは、ａ）ｃａＴ
ＣＲ及びＣＳＲをコードする核酸（又は核酸のセット）と、ｂ）核酸（又は核酸のセット
）を発現するための宿主細胞（免疫細胞など）と、ｃ）宿主細胞中でｃａＴＣＲ及びＣＳ
Ｒを発現すること、ｉｉ）ｃａＴＣＲ及びＣＳＲを発現する宿主細胞を含む組成物を調製
すること、並びにｉｉｉ）ｃａＴＣＲ及びＣＳＲを発現する宿主細胞を含む組成物を、標
的抗原陽性疾患（がん又はウイルス感染など）の治療のために個体に投与することのため
の指示書と、を含む。
酸のセット）を含む。いくつかの実施形態では、キットは、ａ）ｃａＴＣＲ及びＣＳＲを
コードする核酸（又は核酸のセット）と、ｂ）核酸（又は核酸のセット）を発現するため
の宿主細胞（免疫細胞など）を含む。いくつかの実施形態では、キットは、ａ）ｃａＴＣ
Ｒ及びＣＳＲをコードする核酸（又は核酸のセット）と、ｂ）ｉ）宿主細胞（例えば、Ｔ
細胞などの免疫細胞など）中でｃａＴＣＲ及びＣＳＲを発現すること、ｉｉ）ｃａＴＣＲ
及びＣＳＲを発現する宿主細胞を含む組成物を調製すること、並びにｉｉｉ）ｃａＴＣＲ
及びＣＳＲを発現する宿主細胞を含む組成物を、標的抗原陽性疾患（がん又はウイルス感
染など）の治療のために個体に投与することのための指示書と、を含む。いくつかの実施
形態では、宿主細胞は個体に由来する。いくつかの実施形態では、キットは、ａ）ｃａＴ
ＣＲ及びＣＳＲをコードする核酸（又は核酸のセット）と、ｂ）核酸（又は核酸のセット
）を発現するための宿主細胞（免疫細胞など）と、ｃ）宿主細胞中でｃａＴＣＲ及びＣＳ
Ｒを発現すること、ｉｉ）ｃａＴＣＲ及びＣＳＲを発現する宿主細胞を含む組成物を調製
すること、並びにｉｉｉ）ｃａＴＣＲ及びＣＳＲを発現する宿主細胞を含む組成物を、標
的抗原陽性疾患（がん又はウイルス感染など）の治療のために個体に投与することのため
の指示書と、を含む。
【0376】
本発明のキットは、好適なパッケージに入っている。好適なパッケージには、バイアル
、ボトル、ジャー、可撓性パッケージ（例えば、密閉マイラー又はプラスチック袋）など
が挙げられるが、これらに限定されない。キットは、所望により、緩衝材及び解釈的情報
など追加構成要素を提供してよい。したがって、本出願はまた、バイアル（密閉バイアル
など）、ボトル、ジャー、可撓性パッケージなどを含む製品を提供する。
、ボトル、ジャー、可撓性パッケージ（例えば、密閉マイラー又はプラスチック袋）など
が挙げられるが、これらに限定されない。キットは、所望により、緩衝材及び解釈的情報
など追加構成要素を提供してよい。したがって、本出願はまた、バイアル（密閉バイアル
など）、ボトル、ジャー、可撓性パッケージなどを含む製品を提供する。
【0377】
ｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞組成物の使用に関する説明書は、意図する治療向けの用量
、投与スケジュール、及び投与経路に関する情報を概ね含む。容器は、単位用量、大量容
器（例えば、多用量パッケージ）又は亜単位用量であってよい。例えば、本明細書に開示
するように十分な用量のｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞組成物を含んで、１週間、８日、９
日、１０日、１１日、１２日、１３日、２週間、３週間、４週間、６週間、８週間、３か
月、４か月、５か月、７か月、８か月、９か月、又はそれ以上のうちのいずれかなど長期
間にわたって個体の有効な治療を提供するキットを提供し得る。キットはまた、複数のｃ
ａＴＣＲ及びＣＳＲの単位用量と、医薬組成物と、使用説明書と、を含んでよく、例えば
、院内薬局及び調剤薬局など薬局での保管及び使用に十分な量でパッケージ化される。
、投与スケジュール、及び投与経路に関する情報を概ね含む。容器は、単位用量、大量容
器（例えば、多用量パッケージ）又は亜単位用量であってよい。例えば、本明細書に開示
するように十分な用量のｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ免疫細胞組成物を含んで、１週間、８日、９
日、１０日、１１日、１２日、１３日、２週間、３週間、４週間、６週間、８週間、３か
月、４か月、５か月、７か月、８か月、９か月、又はそれ以上のうちのいずれかなど長期
間にわたって個体の有効な治療を提供するキットを提供し得る。キットはまた、複数のｃ
ａＴＣＲ及びＣＳＲの単位用量と、医薬組成物と、使用説明書と、を含んでよく、例えば
、院内薬局及び調剤薬局など薬局での保管及び使用に十分な量でパッケージ化される。
【0378】
当業者は、本発明の範囲及び趣旨内でいくつかの実施形態が可能であることを理解する
であろう。次に、以下の非限定的な実施例を参照して、本発明を更に詳細に説明する。以
下の実施例は、本発明を更に説明するが、当然のことながら、決してその範囲を限定する
ものとして解釈されるべきではない。
例示的な実施形態
であろう。次に、以下の非限定的な実施例を参照して、本発明を更に詳細に説明する。以
下の実施例は、本発明を更に説明するが、当然のことながら、決してその範囲を限定する
ものとして解釈されるべきではない。
例示的な実施形態
【0379】
実施形態１ 一実施形態では、免疫細胞であって、
ａ）キメラ抗体－Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）構築物（ｃａＴＣＲ）であって、
ｉ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュール、並びに
ｉｉ）第１のＴＣＲ膜貫通ドメイン（ＴＣＲ－ＴＭ）を含む第１のＴＣＲドメイン（
ＴＣＲＤ）、及び第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを含むＴ細胞受容体モジュー
ル（ＴＣＲＭ）を含み、
ＴＣＲＭが、少なくとも１つのＴＣＲ－関連シグナル伝達分子の動員を促進する、キメ
ラ抗体－Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）構築物（ｃａＴＣＲ）と、
ｂ）キメラシグナル伝達受容体（ＣＳＲ）であって、
ｉ）標的リガンドに結合又は相互作用することができるリガンド結合モジュール、
ｉｉ）膜貫通モジュール、及び
ｉｉｉ）免疫細胞に共刺激シグナルを提供することができる共刺激免疫細胞シグナル
伝達モジュールを含み、
リガンド結合モジュール及び共刺激免疫細胞シグナル伝達モジュールが同一の分子に由
来せず、ＣＳＲが機能的な一次免疫細胞シグナル伝達ドメインを欠く、キメラシグナル伝
達受容体（ＣＳＲ）と、を含む、免疫細胞が提供される。
ａ）キメラ抗体－Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）構築物（ｃａＴＣＲ）であって、
ｉ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュール、並びに
ｉｉ）第１のＴＣＲ膜貫通ドメイン（ＴＣＲ－ＴＭ）を含む第１のＴＣＲドメイン（
ＴＣＲＤ）、及び第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを含むＴ細胞受容体モジュー
ル（ＴＣＲＭ）を含み、
ＴＣＲＭが、少なくとも１つのＴＣＲ－関連シグナル伝達分子の動員を促進する、キメ
ラ抗体－Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）構築物（ｃａＴＣＲ）と、
ｂ）キメラシグナル伝達受容体（ＣＳＲ）であって、
ｉ）標的リガンドに結合又は相互作用することができるリガンド結合モジュール、
ｉｉ）膜貫通モジュール、及び
ｉｉｉ）免疫細胞に共刺激シグナルを提供することができる共刺激免疫細胞シグナル
伝達モジュールを含み、
リガンド結合モジュール及び共刺激免疫細胞シグナル伝達モジュールが同一の分子に由
来せず、ＣＳＲが機能的な一次免疫細胞シグナル伝達ドメインを欠く、キメラシグナル伝
達受容体（ＣＳＲ）と、を含む、免疫細胞が提供される。
【0380】
実施形態２ ＣＳＲが、いずれの一次免疫細胞シグナル伝達配列も欠く、実施形態１に
記載の免疫細胞。
記載の免疫細胞。
【0381】
実施形態３ 標的抗原が細胞表面抗原である、実施形態１又は２に記載の免疫細胞。
【0382】
実施形態４ 細胞表面抗原が、タンパク質、炭水化物、及び脂質からなる群から選択さ
れる、実施形態３に記載の免疫細胞。
れる、実施形態３に記載の免疫細胞。
【0383】
実施形態５ 細胞表面抗原が、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５
Ｄ、及びＦＣＲＬ５からなる群から選択される、実施形態４に記載の免疫細胞。
Ｄ、及びＦＣＲＬ５からなる群から選択される、実施形態４に記載の免疫細胞。
【0384】
実施形態６ 標的抗原が、ペプチド及び主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）タンパク
質を含む複合体である、実施形態１又は２に記載の免疫細胞。
質を含む複合体である、実施形態１又は２に記載の免疫細胞。
【0385】
実施形態７ ペプチドが、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、
ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、及びＰＳＡからなる群から選択されるタンパク質に由
来する、実施形態６に記載の免疫細胞。
ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、及びＰＳＡからなる群から選択されるタンパク質に由
来する、実施形態６に記載の免疫細胞。
【0386】
実施形態８ 第１のＴＣＲ－ＴＭが、第１のＴ細胞受容体の膜貫通ドメインのうちの１
つに由来し、第２のＴＣＲ－ＴＭが、第１のＴ細胞受容体の他の膜貫通ドメインに由来す
る、実施形態１～７のいずれか１つに記載の免疫細胞。
つに由来し、第２のＴＣＲ－ＴＭが、第１のＴ細胞受容体の他の膜貫通ドメインに由来す
る、実施形態１～７のいずれか１つに記載の免疫細胞。
【0387】
実施形態９ ＴＣＲ－ＴＭのうちの少なくとも１つが天然に存在しないものである、実
施形態８に記載の免疫細胞。
施形態８に記載の免疫細胞。
【0388】
実施形態１０ ＴＣＲＭが、第１のＴ細胞受容体膜貫通ドメインを含むＴＣＲＭと比較
して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化させる、実施形態９に
記載の免疫細胞。
して、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を強化させる、実施形態９に
記載の免疫細胞。
【0389】
実施形態１１ 第１のＴＣＲ－ＴＭが、それが由来する膜貫通ドメインと比較して、最
大５個のアミノ酸置換を含み、及び／又は、第２のＴＣＲ－ＴＭが、それが由来する膜貫
通ドメインと比較して、最大５個のアミノ酸置換を含む、実施形態８～１０のいずれか１
つに記載の免疫細胞。
大５個のアミノ酸置換を含み、及び／又は、第２のＴＣＲ－ＴＭが、それが由来する膜貫
通ドメインと比較して、最大５個のアミノ酸置換を含む、実施形態８～１０のいずれか１
つに記載の免疫細胞。
【0390】
実施形態１２ 第１のＴＣＲ－ＴＭが、単一のアミノ酸置換を含み、及び／又は第２の
ＴＣＲ－ＴＭが、単一のアミノ酸置換を含む、実施形態１１に記載の免疫細胞。
ＴＣＲ－ＴＭが、単一のアミノ酸置換を含む、実施形態１１に記載の免疫細胞。
【0391】
実施形態１３ 第１のＴ細胞受容体がγ／δ Ｔ細胞受容体である、実施形態８～１２
のいずれか１つに記載の免疫細胞。
のいずれか１つに記載の免疫細胞。
【0392】
実施形態１４ 第１のＴ細胞受容体がα／β Ｔ細胞受容体である、実施形態８～１２
のいずれか１つに記載の免疫細胞。
のいずれか１つに記載の免疫細胞。
【0393】
実施形態１５ 抗原結合モジュールが、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、及
び単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）からなる群から選択される抗体部分である、実施形態１～１４の
いずれか１つに記載の免疫細胞。
び単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）からなる群から選択される抗体部分である、実施形態１～１４の
いずれか１つに記載の免疫細胞。
【0394】
実施形態１６ 抗原結合モジュールが、ＶＨドメイン及びＶＬドメインを含み、ＶＨド
メインが、ＴＣＲＤのうちの１つのアミノ末端に連結され、ＶＬドメインが、他のＴＣＲ
Ｄのアミノ末端に連結されている、実施形態１５に記載の免疫細胞。
メインが、ＴＣＲＤのうちの１つのアミノ末端に連結され、ＶＬドメインが、他のＴＣＲ
Ｄのアミノ末端に連結されている、実施形態１５に記載の免疫細胞。
【0395】
実施形態１７ ＶＨドメインが、ＣＨ１ドメインを介してＴＣＲＤのうちの１つに連結
され、ＶＬドメインが、ＣＬドメインを介して他のＴＣＲＤに結合されている、実施形態
１６に記載の免疫細胞。
され、ＶＬドメインが、ＣＬドメインを介して他のＴＣＲＤに結合されている、実施形態
１６に記載の免疫細胞。
【0396】
実施形態１８ ｃａＴＣＲが、少なくとも１つの追加の抗原結合モジュールを更に含む
、実施形態１５に記載の免疫細胞。
、実施形態１５に記載の免疫細胞。
【0397】
実施形態１９ 少なくとも１つの追加の抗原結合モジュールが抗体部分である、実施形
態１８に記載の免疫細胞。
態１８に記載の免疫細胞。
【0398】
実施形態２０ ｃａＴＣＲが多重特異性である、実施形態１８又は１９に記載の免疫細
胞。
胞。
【0399】
実施形態２１ 抗原結合モジュールが、ＴＣＲＤのうちの１つのアミノ末端に融合した
ｓｃＦｖを含む、実施形態１５～２０のいずれか１つに記載の免疫細胞。
ｓｃＦｖを含む、実施形態１５～２０のいずれか１つに記載の免疫細胞。
【0400】
実施形態２２ ｃａＴＣＲが、第１のＴＣＲＤのアミノ末端に融合した第１のｓｃＦｖ
と、第２のＴＣＲＤのアミノ末端に融合した第２のｓｃＦｖとを含む、実施形態２１に記
載の免疫細胞。
と、第２のＴＣＲＤのアミノ末端に融合した第２のｓｃＦｖとを含む、実施形態２１に記
載の免疫細胞。
【0401】
実施形態２３ 第１のｓｃＦｖが、第２のｓｃＦｖとは異なる標的に結合する、実施形
態２２に記載の免疫細胞。
態２２に記載の免疫細胞。
【0402】
実施形態２４ ｃａＴＣＲが、第１のＴＣＲＤを含む第１のポリペプチド鎖と、第２の
ＴＣＲＤを含む第２のポリペプチド鎖とを含むヘテロ二量体であり、抗原結合モジュール
が、第１及び第２のＴＣＲＤの一方又は両方のアミノ末端に連結されている、実施形態１
～２３のいずれか１つに記載の免疫細胞。
ＴＣＲＤを含む第２のポリペプチド鎖とを含むヘテロ二量体であり、抗原結合モジュール
が、第１及び第２のＴＣＲＤの一方又は両方のアミノ末端に連結されている、実施形態１
～２３のいずれか１つに記載の免疫細胞。
【0403】
実施形態２５ ｃａＴＣＲが、第１の安定化ドメイン及び第２の安定化ドメインを含む
安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化さ
せる、互いの結合親和性を有する、実施形態１～２４のいずれか１つに記載の免疫細胞。
安定化モジュールを更に含み、第１及び第２の安定化ドメインが、ｃａＴＣＲを安定化さ
せる、互いの結合親和性を有する、実施形態１～２４のいずれか１つに記載の免疫細胞。
【0404】
実施形態２６ 安定化モジュールが、ＣＨ１－ＣＬモジュール、ＣＨ２－ＣＨ２モジュ
ール、ＣＨ３－ＣＨ３モジュール、及びＣＨ４－ＣＨ４モジュールからなる群から選択さ
れる、実施形態２５に記載の免疫細胞。
ール、ＣＨ３－ＣＨ３モジュール、及びＣＨ４－ＣＨ４モジュールからなる群から選択さ
れる、実施形態２５に記載の免疫細胞。
【0405】
実施形態２７ 第１の安定化ドメインと第２の安定化ドメインとの間に共有結合が存在
する、実施形態２５又は２６に記載の免疫細胞。
する、実施形態２５又は２６に記載の免疫細胞。
【0406】
実施形態２８ 共有結合がジスルフィド結合である、実施形態２７に記載の免疫細胞。
【0407】
実施形態２９ 安定化モジュールが、抗原結合モジュールとＴＣＲＭとの間に位置する
、実施形態２５～２８のいずれか１つに記載の免疫細胞。
、実施形態２５～２８のいずれか１つに記載の免疫細胞。
【0408】
実施形態３０ ｃａＴＣＲが、
ａ）第１のＴＣＲＤのアミノ末端に融合した第１の安定化ドメインを含む第１のポリペ
プチド鎖と、第２のＴＣＲＤのアミノ末端に融合した第２の安定化ドメインを含む第２の
ポリペプチド鎖と、を含み、抗原結合モジュールが、第１及び第２の安定化ドメインの一
方又は両方のアミノ末端に融合するヘテロ二量体である、実施形態２５～２９のいずれか
１つに記載の免疫細胞。
ａ）第１のＴＣＲＤのアミノ末端に融合した第１の安定化ドメインを含む第１のポリペ
プチド鎖と、第２のＴＣＲＤのアミノ末端に融合した第２の安定化ドメインを含む第２の
ポリペプチド鎖と、を含み、抗原結合モジュールが、第１及び第２の安定化ドメインの一
方又は両方のアミノ末端に融合するヘテロ二量体である、実施形態２５～２９のいずれか
１つに記載の免疫細胞。
【0409】
実施形態３１ ｃａＴＣＲが、約０．１ｐＭ～約５００ｎＭの平衡解離定数（Ｋｄ）で
標的抗原に結合する、実施形態１～３０のいずれか１つに記載の免疫細胞。
標的抗原に結合する、実施形態１～３０のいずれか１つに記載の免疫細胞。
【0410】
実施形態３２ ＴＣＲ関連シグナル伝達分子が、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε、及びζζか
らなる群から選択される、実施形態１～３１のいずれか１つに記載の免疫細胞。
らなる群から選択される、実施形態１～３１のいずれか１つに記載の免疫細胞。
【0411】
実施形態３３ 標的抗原と標的リガンドが同一である、実施形態１～３２のいずれか１
つに記載の免疫細胞。
つに記載の免疫細胞。
【0412】
実施形態３４ 標的抗原と標的リガンドが異なる、実施形態１～３２のいずれか１つに
記載の免疫細胞。
記載の免疫細胞。
【0413】
実施形態３５ 標的リガンドが、標的抗原を提示する細胞の表面に発現するリガンドで
ある、実施形態３４に記載の免疫細胞。
ある、実施形態３４に記載の免疫細胞。
【0414】
実施形態３６ 標的リガンドが疾患関連リガンドである、実施形態１～３５のいずれか
１つに記載の免疫細胞。
１つに記載の免疫細胞。
【0415】
実施形態３７ 標的リガンドが、がん関連リガンドである、実施形態３６に記載の免疫
細胞。
細胞。
【0416】
実施形態３８ がん関連リガンドが、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ４７、ＩＬ
４、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ、及びＦＣＲＬ５からな
る群から選択される、実施形態３７に記載の免疫細胞。
４、ＧＰＣ－３、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄ、及びＦＣＲＬ５からな
る群から選択される、実施形態３７に記載の免疫細胞。
【0417】
実施形態３９ がん関連リガンドが、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－Ｅ
ＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、及びＰＳＡからなる群から選択されるタン
パク質に由来するペプチドを含むペプチド／ＭＨＣ複合体である、実施形態３７に記載の
免疫細胞。
ＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、及びＰＳＡからなる群から選択されるタン
パク質に由来するペプチドを含むペプチド／ＭＨＣ複合体である、実施形態３７に記載の
免疫細胞。
【0418】
実施形態４０ 標的リガンドが、ウイルス関連リガンドである、実施形態３６に記載の
免疫細胞。
免疫細胞。
【0419】
実施形態４１ 標的リガンドが免疫調節分子である、実施形態１～３５のいずれか１つ
に記載の免疫細胞。
に記載の免疫細胞。
【0420】
実施形態４２ 免疫調節分子が免疫抑制受容体であり、ＣＳＲが免疫抑制受容体のアン
タゴニストである、実施形態４１に記載の免疫細胞。
タゴニストである、実施形態４１に記載の免疫細胞。
【0421】
実施形態４３ 免疫調節分子が免疫刺激受容体であり、ＣＳＲが免疫刺激受容体のアゴ
ニストである、実施形態４１に記載の免疫細胞。
ニストである、実施形態４１に記載の免疫細胞。
【0422】
実施形態４４ 標的リガンドが免疫チェックポイント分子である、実施形態４１に記載
の免疫細胞。
の免疫細胞。
【0423】
実施形態４５ 免疫チェックポイント分子が、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、ＣＤ８０、Ｃ
Ｄ８６、ＩＣＯＳＬ、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＨＶＥＭ、４－１ＢＢＬ、ＯＸ４０Ｌ、
ＣＤ７０、ＣＤ４０、及びＧＡＬ９からなる群から選択される、実施形態４４に記載の免
疫細胞。
Ｄ８６、ＩＣＯＳＬ、Ｂ７－Ｈ３、Ｂ７－Ｈ４、ＨＶＥＭ、４－１ＢＢＬ、ＯＸ４０Ｌ、
ＣＤ７０、ＣＤ４０、及びＧＡＬ９からなる群から選択される、実施形態４４に記載の免
疫細胞。
【0424】
実施形態４６ 標的リガンドが阻害性サイトカインである、実施形態４１に記載の免疫
細胞。
細胞。
【0425】
実施形態４７ 標的リガンドがアポトーシス分子である、実施形態１～３５のいずれか
１つに記載の免疫細胞。
１つに記載の免疫細胞。
【0426】
実施形態４８ アポトーシス分子が、ＦａｓＬ、ＦａｓＲ、ＴＮＦＲ１、及びＴＮＦＲ
２からなる群から選択される、実施形態４７に記載の免疫細胞。
２からなる群から選択される、実施形態４７に記載の免疫細胞。
【0427】
実施形態４９ リガンド結合モジュールが抗体部分である、実施形態１～４８のいずれ
か１つに記載の免疫細胞。
か１つに記載の免疫細胞。
【0428】
実施形態５０ ＣＳＲの抗体部分が、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、及び
単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）からなる群から選択される、実施形態４９に記載の免疫細胞。
単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）からなる群から選択される、実施形態４９に記載の免疫細胞。
【0429】
実施形態５１ ＣＳＲの抗体部分がｓｃＦｖである、実施形態５０に記載の免疫細胞。
【0430】
実施形態５２ リガンド結合モジュールが、受容体の細胞外ドメインに由来する、実施
形態１～４８のいずれか１つに記載の免疫細胞。
形態１～４８のいずれか１つに記載の免疫細胞。
【0431】
実施形態５３ 受容体が、ＦａｓＲ、ＴＮＦＲ１、ＴＮＦＲ２、ＰＤ－１、ＣＤ２８、
ＣＴＬＡ－４、ＩＣＯＳ、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＬＡＧ－３、４－１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ
２７、ＴＩＭ－３、ＩＬ－１０Ｒ、ＩＬ－６Ｒ、及びＩＬ－４Ｒからなる群から選択され
る、実施形態５２に記載の免疫細胞。
ＣＴＬＡ－４、ＩＣＯＳ、ＢＴＬＡ、ＫＩＲ、ＬＡＧ－３、４－１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ
２７、ＴＩＭ－３、ＩＬ－１０Ｒ、ＩＬ－６Ｒ、及びＩＬ－４Ｒからなる群から選択され
る、実施形態５２に記載の免疫細胞。
【0432】
実施形態５４ ＣＳＲの膜貫通モジュールが、ＣＤ２８、ＣＤ３ε、ＣＤ３ζ、ＣＤ４
５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ
６４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、又はＣＤ１５４に由来する膜貫通
ドメインを含む、実施形態１～５３のいずれか１つに記載の免疫細胞。
５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ
６４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、又はＣＤ１５４に由来する膜貫通
ドメインを含む、実施形態１～５３のいずれか１つに記載の免疫細胞。
【0433】
実施形態５５ 共刺激免疫細胞シグナル伝達モジュールが、ＴＣＲの共刺激受容体の細
胞内ドメインに由来する、実施形態１～５４のいずれか１つに記載の免疫細胞。
胞内ドメインに由来する、実施形態１～５４のいずれか１つに記載の免疫細胞。
【0434】
実施形態５６ 共刺激受容体が、ＣＤ２８、４－１ＢＢ、ＯＸ４０、ＩＣＯＳ、ＣＤ２
７、及びＣＤ４０からなる群から選択される、実施形態５５に記載の免疫細胞。
７、及びＣＤ４０からなる群から選択される、実施形態５５に記載の免疫細胞。
【0435】
実施形態５７ ＣＳＲの発現が誘導可能である、実施形態１～５６のいずれか１つに記
載の免疫細胞。
載の免疫細胞。
【0436】
実施形態５８ ＣＳＲの発現が、免疫細胞の活性化の際に誘導可能である、実施形態５
７に記載の免疫細胞。
７に記載の免疫細胞。
【0437】
実施形態５９ ｃａＴＣＲの抗原結合モジュールが、ＣＤ１９に結合する抗体部分を含
み、ＣＳＲのリガンド結合モジュールがＣＤ１９に結合するｓｃＦｖを含み、膜貫通モジ
ュールと共刺激免疫細胞シグナル伝達モジュールは両方ともＣＤ２８に由来する、実施形
態１～３２のいずれか１つに記載の免疫細胞。
み、ＣＳＲのリガンド結合モジュールがＣＤ１９に結合するｓｃＦｖを含み、膜貫通モジ
ュールと共刺激免疫細胞シグナル伝達モジュールは両方ともＣＤ２８に由来する、実施形
態１～３２のいずれか１つに記載の免疫細胞。
【0438】
実施形態６０ ＣＤ１９に結合する抗体部分が、配列番号５８のアミノ酸配列を含むＶ
Ｈドメインと、配列番号５９のアミノ酸配列を含むＶＬドメインとを含み、ＣＤ１９に結
合するｓｃＦｖが、配列番号５８のアミノ酸配列を含むＶＬドメインと、配列番号５９の
アミノ酸配列を含むＶＬドメインと、を含み、ＣＳＲが、配列番号５１のアミノ酸配列を
含むＣＤ２８の断片を含む、実施形態５９に記載の免疫細胞。
Ｈドメインと、配列番号５９のアミノ酸配列を含むＶＬドメインとを含み、ＣＤ１９に結
合するｓｃＦｖが、配列番号５８のアミノ酸配列を含むＶＬドメインと、配列番号５９の
アミノ酸配列を含むＶＬドメインと、を含み、ＣＳＲが、配列番号５１のアミノ酸配列を
含むＣＤ２８の断片を含む、実施形態５９に記載の免疫細胞。
【0439】
実施形態６１ ｃａＴＣＲが、配列番号７２と７３又は配列番号７４と７５のアミノ酸
配列を含む２つのポリペプチド鎖を含み、及び／又はＣＳＲが配列番号８０のアミノ酸配
列を含む、実施形態６０に記載の免疫細胞。
配列を含む２つのポリペプチド鎖を含み、及び／又はＣＳＲが配列番号８０のアミノ酸配
列を含む、実施形態６０に記載の免疫細胞。
【0440】
実施形態６２ ｃａＴＣＲの抗原結合モジュールが、ＡＦＰに結合する抗体部分を含み
、ＣＳＲのリガンド結合モジュールがＧＰＣ３に結合するｓｃＦｖを含み、膜貫通モジュ
ールと共刺激免疫細胞シグナル伝達モジュールは両方ともＣＤ２８に由来する、実施形態
１～３２のいずれか１つに記載の免疫細胞。
、ＣＳＲのリガンド結合モジュールがＧＰＣ３に結合するｓｃＦｖを含み、膜貫通モジュ
ールと共刺激免疫細胞シグナル伝達モジュールは両方ともＣＤ２８に由来する、実施形態
１～３２のいずれか１つに記載の免疫細胞。
【0441】
実施形態６３ ＡＦＰに結合する抗体部分が、配列番号６２のアミノ酸配列を含むＶＨ
ドメインと、配列番号６３のアミノ酸配列を含むＶＬドメインとを含み、ＧＰＣ３に結合
するｓｃＦｖが、配列番号６４のアミノ酸配列を含むＶＬドメインと、配列番号６５のア
ミノ酸配列を含むＶＬドメインと、を含み、ＣＳＲが、配列番号５１のアミノ酸配列を含
むＣＤ２８の断片を含む、実施形態６２に記載の免疫細胞。
ドメインと、配列番号６３のアミノ酸配列を含むＶＬドメインとを含み、ＧＰＣ３に結合
するｓｃＦｖが、配列番号６４のアミノ酸配列を含むＶＬドメインと、配列番号６５のア
ミノ酸配列を含むＶＬドメインと、を含み、ＣＳＲが、配列番号５１のアミノ酸配列を含
むＣＤ２８の断片を含む、実施形態６２に記載の免疫細胞。
【0442】
実施形態６４ ｃａＴＣＲが、配列番号６８と６９又は配列番号７０と７１のアミノ酸
配列を含む２つのポリペプチド鎖を含み、及び／又はＣＳＲが配列番号８２のアミノ酸配
列を含む、実施形態６３に記載の免疫細胞。
配列を含む２つのポリペプチド鎖を含み、及び／又はＣＳＲが配列番号８２のアミノ酸配
列を含む、実施形態６３に記載の免疫細胞。
【0443】
実施形態６５ ｃａＴＣＲの抗原結合モジュールが、ＣＤ１９に結合する抗体部分を含
み、ＣＳＲのリガンド結合モジュールがＣＤ２０に結合するｓｃＦｖを含み、膜貫通モジ
ュールと共刺激免疫細胞シグナル伝達モジュールは両方ともＣＤ２８に由来する、実施形
態１～３２のいずれか１つに記載の免疫細胞。
み、ＣＳＲのリガンド結合モジュールがＣＤ２０に結合するｓｃＦｖを含み、膜貫通モジ
ュールと共刺激免疫細胞シグナル伝達モジュールは両方ともＣＤ２８に由来する、実施形
態１～３２のいずれか１つに記載の免疫細胞。
【0444】
実施形態６６ ＣＤ１９に結合する抗体部分が、配列番号５８のアミノ酸配列を含むＶ
Ｈドメインと、配列番号５９のアミノ酸配列を含むＶＬドメインとを含み、ＣＤ２０に結
合するｓｃＦｖが、配列番号６０のアミノ酸配列を含むＶＨドメインと、配列番号６１の
アミノ酸配列を含むＶＬドメインと、を含み、ＣＳＲが、配列番号５１のアミノ酸配列を
含むＣＤ２８の断片を含む、実施形態６５に記載の免疫細胞。
Ｈドメインと、配列番号５９のアミノ酸配列を含むＶＬドメインとを含み、ＣＤ２０に結
合するｓｃＦｖが、配列番号６０のアミノ酸配列を含むＶＨドメインと、配列番号６１の
アミノ酸配列を含むＶＬドメインと、を含み、ＣＳＲが、配列番号５１のアミノ酸配列を
含むＣＤ２８の断片を含む、実施形態６５に記載の免疫細胞。
【0445】
実施形態６７ ｃａＴＣＲが、配列番号７２と７３又は配列番号７４と７５のアミノ酸
配列を含む２つのポリペプチド鎖を含み、及び／又はＣＳＲが配列番号８１のアミノ酸配
列を含む、実施形態６６に記載の免疫細胞。
配列を含む２つのポリペプチド鎖を含み、及び／又はＣＳＲが配列番号８１のアミノ酸配
列を含む、実施形態６６に記載の免疫細胞。
【0446】
実施形態６８ 一実施形態では、実施形態１～６７のいずれか１つに記載のｃａＴＣＲ
及びＣＳＲをコードしている１つ以上の核酸であって、ｃａＴＣＲ及びＣＳＲがそれぞれ
、１つ以上の核酸によりコードされる１つ以上のポリペプチド鎖からなる、１つ以上の核
酸が提供される。
及びＣＳＲをコードしている１つ以上の核酸であって、ｃａＴＣＲ及びＣＳＲがそれぞれ
、１つ以上の核酸によりコードされる１つ以上のポリペプチド鎖からなる、１つ以上の核
酸が提供される。
【0447】
実施形態６９ 一実施形態では、１つ以上の核酸であって、
ａ）キメラ抗体－Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）構築物（ｃａＴＣＲ）であって、
ｉ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュール、並びに
ｉｉ）第１のＴＣＲ膜貫通ドメイン（ＴＣＲ－ＴＭ）を含む第１のＴＣＲドメイン（
ＴＣＲＤ）、及び第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを含むＴ細胞受容体モジュー
ル（ＴＣＲＭ）を含み、ＴＣＲＭが、少なくとも１つのＴＣＲ－関連シグナル伝達分子の
動員を促進し、ｃａＴＣＲは、１つ以上のポリペプチド鎖からなる、キメラ抗体－Ｔ細胞
受容体（ＴＣＲ）構築物（ｃａＴＣＲ）と、
ｂ）キメラシグナル伝達受容体（ＣＳＲ）であって、
ｉ）標的リガンドに結合又は相互作用することができるリガンド結合モジュール、
ｉｉ）膜貫通モジュール、並びに
ｉｉｉ）免疫細胞に共刺激シグナルを提供することができる共刺激免疫細胞シグナル
伝達モジュールを含み、リガンド結合モジュール及び共刺激免疫細胞シグナル伝達モジュ
ールは、同一の分子から誘導されない、キメラシグナル伝達受容体（ＣＳＲ）と、をコー
ドし、ＣＳＲが機能的な一次免疫細胞シグナル伝達ドメインを欠き、ＣＳＲが１つ以上の
ポリペプチド鎖からなる、１つ以上の核酸が提供される。
ａ）キメラ抗体－Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）構築物（ｃａＴＣＲ）であって、
ｉ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュール、並びに
ｉｉ）第１のＴＣＲ膜貫通ドメイン（ＴＣＲ－ＴＭ）を含む第１のＴＣＲドメイン（
ＴＣＲＤ）、及び第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを含むＴ細胞受容体モジュー
ル（ＴＣＲＭ）を含み、ＴＣＲＭが、少なくとも１つのＴＣＲ－関連シグナル伝達分子の
動員を促進し、ｃａＴＣＲは、１つ以上のポリペプチド鎖からなる、キメラ抗体－Ｔ細胞
受容体（ＴＣＲ）構築物（ｃａＴＣＲ）と、
ｂ）キメラシグナル伝達受容体（ＣＳＲ）であって、
ｉ）標的リガンドに結合又は相互作用することができるリガンド結合モジュール、
ｉｉ）膜貫通モジュール、並びに
ｉｉｉ）免疫細胞に共刺激シグナルを提供することができる共刺激免疫細胞シグナル
伝達モジュールを含み、リガンド結合モジュール及び共刺激免疫細胞シグナル伝達モジュ
ールは、同一の分子から誘導されない、キメラシグナル伝達受容体（ＣＳＲ）と、をコー
ドし、ＣＳＲが機能的な一次免疫細胞シグナル伝達ドメインを欠き、ＣＳＲが１つ以上の
ポリペプチド鎖からなる、１つ以上の核酸が提供される。
【0448】
実施形態７０ ｃａＴＣＲ及びＣＳＲが、同じ核酸分子上にコードされている、実施形
態６８又は６９に記載の１つ以上の核酸。
態６８又は６９に記載の１つ以上の核酸。
【0449】
実施形態７１ ｃａＴＣＲ及びＣＳＲが異なる核酸分子上にコードされている、実施形
態６８又は６９に記載の１つ以上の核酸。
態６８又は６９に記載の１つ以上の核酸。
【0450】
実施形態７２ 誘導可能なプロモーターに作動可能に連結されたＣＳＲをコードするヌ
クレオチド配列を含む、実施形態６８～７１のいずれか１つに記載の１つ以上の核酸。
クレオチド配列を含む、実施形態６８～７１のいずれか１つに記載の１つ以上の核酸。
【0451】
実施形態７３ 誘導可能なプロモーターが、免疫細胞の活性化の際に誘導可能である、
実施形態７２に記載の１つ以上の核酸。
実施形態７２に記載の１つ以上の核酸。
【0452】
実施形態７４ 誘導可能なプロモーターが、活性化Ｔ細胞由来プロモーターの核因子（
ＮＦＡＴ）である、実施形態７２に記載の１つ以上の核酸。
ＮＦＡＴ）である、実施形態７２に記載の１つ以上の核酸。
【0453】
実施形態７５ 一実施形態では、実施形態６８～７４のいずれか１つに記載の１つ以上
の核酸を含む、１つ以上のベクターが提供される。
の核酸を含む、１つ以上のベクターが提供される。
【0454】
実施形態７６ ベクターのうちの少なくとも１つが、ｃａＴＣＲをコードする核酸配列
を含み、少なくとも１つの他のベクターが、ＣＳＲをコードする核酸配列を含む、実施形
態７５に記載の１つ以上のベクター。
を含み、少なくとも１つの他のベクターが、ＣＳＲをコードする核酸配列を含む、実施形
態７５に記載の１つ以上のベクター。
【0455】
実施形態７７ １つ以上の核酸を含む単一のベクターを含む、実施形態７５に記載の１
つ以上のベクター。
つ以上のベクター。
【0456】
実施形態７８ 一実施形態では、実施形態６８～７４のいずれか１つに記載の１つ以上
の核酸、又は実施形態７５～７７のいずれか１つに記載の１つ以上のベクターを含む、組
成物が提供される。
の核酸、又は実施形態７５～７７のいずれか１つに記載の１つ以上のベクターを含む、組
成物が提供される。
【0457】
実施形態７９ 一実施形態では、実施形態６８～７４のいずれか１つに記載の１つ以上
の核酸、又は実施形態７５～７７のいずれか１つに記載の１つ以上のベクターを含む、免
疫細胞が提供される。
の核酸、又は実施形態７５～７７のいずれか１つに記載の１つ以上のベクターを含む、免
疫細胞が提供される。
【0458】
実施形態８０ 免疫細胞が、実施形態６８～７４のいずれか１つに記載の１つ以上の核
酸又は実施形態７５～７７のいずれか１つに記載の１つ以上のベクターから発現するｃａ
ＴＣＲを更に含む、実施形態７９に記載の免疫細胞。
酸又は実施形態７５～７７のいずれか１つに記載の１つ以上のベクターから発現するｃａ
ＴＣＲを更に含む、実施形態７９に記載の免疫細胞。
【0459】
実施形態８１ 免疫細胞が、実施形態６８～７４のいずれか１つに記載の１つ以上の核
酸、又は実施形態７５～７７のいずれか１つに記載の１つ以上のベクターから発現するＣ
ＳＲを更に含む、実施形態７９又は８０に記載の免疫細胞。
酸、又は実施形態７５～７７のいずれか１つに記載の１つ以上のベクターから発現するＣ
ＳＲを更に含む、実施形態７９又は８０に記載の免疫細胞。
【0460】
実施形態８２ 免疫細胞が、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ
細胞、及びサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される、実施形態１～６７及び７９～
８１のいずれか１つに記載の免疫細胞。
細胞、及びサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される、実施形態１～６７及び７９～
８１のいずれか１つに記載の免疫細胞。
【0461】
実施形態８３ 実施形態１～６７及び７９～８２のいずれか１つに記載の免疫細胞であ
って、
ａ）ｃａＴＣＲが、第１のＴＣＲＤを含む第１のポリペプチド鎖と、第２のＴＣＲＤを
含む第２のポリペプチド鎖とを含むヘテロ二量体であり、抗原結合モジュールが、ＴＣＲ
Ｄの一方又は両方のアミノ末端に連結されている、１つ又は２つのポリペプチド鎖を含み
、
ｂ）ＣＳＲが、単一のポリペプチド鎖を含み、免疫細胞が、
ｉ）ｃａＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列と、
ｉｉ）ｃａＴＣＲの第２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列と、
ｉｉｉ）ＣＳＲをコードする第３の核酸配列と、を含む、免疫細胞。
って、
ａ）ｃａＴＣＲが、第１のＴＣＲＤを含む第１のポリペプチド鎖と、第２のＴＣＲＤを
含む第２のポリペプチド鎖とを含むヘテロ二量体であり、抗原結合モジュールが、ＴＣＲ
Ｄの一方又は両方のアミノ末端に連結されている、１つ又は２つのポリペプチド鎖を含み
、
ｂ）ＣＳＲが、単一のポリペプチド鎖を含み、免疫細胞が、
ｉ）ｃａＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列と、
ｉｉ）ｃａＴＣＲの第２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列と、
ｉｉｉ）ＣＳＲをコードする第３の核酸配列と、を含む、免疫細胞。
【0462】
実施形態８４ 実施形態８３の免疫細胞であって、
ａ）第１のプロモーターの制御下の第１の核酸配列を含む第１のベクターと、
ｂ）第２のプロモーターの制御下の第２の核酸配列を含む第２のベクターと、
ｃ）第３のプロモーターの制御下の第３の核酸配列を含む第３のベクターと、を含む、
免疫細胞。
ａ）第１のプロモーターの制御下の第１の核酸配列を含む第１のベクターと、
ｂ）第２のプロモーターの制御下の第２の核酸配列を含む第２のベクターと、
ｃ）第３のプロモーターの制御下の第３の核酸配列を含む第３のベクターと、を含む、
免疫細胞。
【0463】
実施形態８５ 実施形態８３の免疫細胞であって、
ａ）第１のベクターであって、
ｉ）第１のプロモーターの制御下の第１の核酸配列、及び
ｉｉ）第２のプロモーターの制御下の第２の核酸配列を含む、ベクターと、
ｂ）第３のプロモーターの制御下の前記第３の核酸配列を含む第２のベクターと、を含
む、免疫細胞。
ａ）第１のベクターであって、
ｉ）第１のプロモーターの制御下の第１の核酸配列、及び
ｉｉ）第２のプロモーターの制御下の第２の核酸配列を含む、ベクターと、
ｂ）第３のプロモーターの制御下の前記第３の核酸配列を含む第２のベクターと、を含
む、免疫細胞。
【0464】
実施形態８６ 実施形態８３の免疫細胞であって、
ａ）第１のプロモーターの制御下の第１の核酸配列と、
ｂ）第２のプロモーターの制御下の第２の核酸配列と、
ｃ）第３のプロモーターの制御下の第３の核酸配列と、を含むベクターを含む、免疫細
胞。
ａ）第１のプロモーターの制御下の第１の核酸配列と、
ｂ）第２のプロモーターの制御下の第２の核酸配列と、
ｃ）第３のプロモーターの制御下の第３の核酸配列と、を含むベクターを含む、免疫細
胞。
【0465】
実施形態８７ 第１のプロモーター及び／又は第２のプロモーターが、常時活性型のプ
ロモーターである、実施形態８４～８６のいずれか１つに記載の免疫細胞。
ロモーターである、実施形態８４～８６のいずれか１つに記載の免疫細胞。
【0466】
実施形態８８ 第３のプロモーターが誘導可能なプロモーターである、実施形態８４～
８７のいずれか１つに記載の免疫細胞。
８７のいずれか１つに記載の免疫細胞。
【0467】
実施形態８９ 実施形態８３の免疫細胞であって、
ａ）単一の第１のプロモーターの制御下の、第１の核酸配列及び第２の核酸配列を含む
、第１のベクターと、
ｂ）第２のプロモーターの制御下の第３の核酸配列を含む第２のベクターと、を含む、
免疫細胞。
ａ）単一の第１のプロモーターの制御下の、第１の核酸配列及び第２の核酸配列を含む
、第１のベクターと、
ｂ）第２のプロモーターの制御下の第３の核酸配列を含む第２のベクターと、を含む、
免疫細胞。
【0468】
実施形態９０ 実施形態８３の免疫細胞であって、
ａ）単一の第１のプロモーターの制御下の、第１の核酸配列及び第２の核酸配列と、
ｂ）第２のプロモーターの制御下の第３の核酸配列と、を含むベクターを含む、免疫細
胞。
ａ）単一の第１のプロモーターの制御下の、第１の核酸配列及び第２の核酸配列と、
ｂ）第２のプロモーターの制御下の第３の核酸配列と、を含むベクターを含む、免疫細
胞。
【0469】
実施形態９１ 第１のプロモーターが常時活性型のプロモーターである、実施形態８９
又は９０に記載の免疫細胞。
又は９０に記載の免疫細胞。
【0470】
実施形態９２ 第２のプロモーターが誘導可能なプロモーターである、実施形態８９～
９１のいずれか１つに記載の免疫細胞。
９１のいずれか１つに記載の免疫細胞。
【0471】
実施形態９３ 誘導可能なプロモーターが、免疫細胞の活性化の際に誘導可能である、
実施形態８８又は９２に記載の免疫細胞。
実施形態８８又は９２に記載の免疫細胞。
【0472】
実施形態９４ 誘導可能なプロモーターが、ＮＦＡＴ由来のプロモーターである、実施
形態８８又は９２に記載の免疫細胞。
形態８８又は９２に記載の免疫細胞。
【0473】
実施形態９５ すべてが単一のプロモーターの制御下の、第１の核酸配列と、第２の核
酸配列と、第３の核酸配列を含むベクターと、を含む、実施形態８３に記載の免疫細胞。
酸配列と、第３の核酸配列を含むベクターと、を含む、実施形態８３に記載の免疫細胞。
【0474】
実施形態９６ ベクターが免疫細胞ゲノムに組み込まれている、実施形態８４～９５の
いずれか１つに記載の免疫細胞。
いずれか１つに記載の免疫細胞。
【0475】
実施形態９７ 一実施形態では、実施形態１～６７及び７９～９６のいずれか１つに記
載の免疫細胞と、医薬的に許容される担体と、を含む医薬組成物が提供される。
載の免疫細胞と、医薬的に許容される担体と、を含む医薬組成物が提供される。
【0476】
実施形態９８ 一実施形態では、標的抗原を提示する標的細胞を殺傷する（又は標的抗
原関連疾患を治療する）方法であって、標的細胞を実施形態１～６７及び７９～９６のい
ずれか１つに記載の免疫細胞と接触させることを含む、方法が提供される。
原関連疾患を治療する）方法であって、標的細胞を実施形態１～６７及び７９～９６のい
ずれか１つに記載の免疫細胞と接触させることを含む、方法が提供される。
【0477】
実施形態９９ 接触させることがインビボで実施される、実施形態９８に記載の方法。
【0478】
実施形態１００ 接触させることがインビトロで実施される、実施形態９８に記載の方
法。
法。
【0479】
実施形態１０１ 一実施形態では、標的抗原関連疾患を、それを必要とする個体におい
て治療する方法であって、有効量の実施形態９７に記載の医薬組成物を個体に投与するこ
とを含む、方法が提供される。
て治療する方法であって、有効量の実施形態９７に記載の医薬組成物を個体に投与するこ
とを含む、方法が提供される。
【0480】
実施形態１０２ 標的抗原関連疾患が、がんである、実施形態１０１に記載の方法。
【0481】
実施形態１０３ がんが、副腎皮質癌、膀胱癌、乳癌、子宮頸癌、胆管細胞癌、大腸直
腸癌、食道癌、神経膠芽腫、神経膠腫、肝細胞癌、頭頸部癌、腎臓癌、白血病、肺癌、リ
ンパ腫、黒色腫、中皮腫、多発性骨髄腫、膵臓癌、褐色細胞腫、形質細胞腫、神経芽腫、
卵巣癌、前立腺癌、肉腫、胃癌、子宮癌、及び甲状腺癌である、実施形態１０２に記載の
方法。
腸癌、食道癌、神経膠芽腫、神経膠腫、肝細胞癌、頭頸部癌、腎臓癌、白血病、肺癌、リ
ンパ腫、黒色腫、中皮腫、多発性骨髄腫、膵臓癌、褐色細胞腫、形質細胞腫、神経芽腫、
卵巣癌、前立腺癌、肉腫、胃癌、子宮癌、及び甲状腺癌である、実施形態１０２に記載の
方法。
【0482】
実施形態１０４ 標的抗原関連疾患がウイルス感染である、実施形態１０１に記載の方
法。
法。
【0483】
実施形態１０５ ウイルス感染が、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、エプスタイン・
バーウイルス（ＥＢＶ）、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、カポジ肉腫関連ヘルペスウイル
ス（ＫＳＨＶ）、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、伝染性軟属腫ウイルス（ＭＣＶ）
、ヒトＴ細胞白血病ウイルス１（ＨＴＬＶ－１）、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、及
びＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）からなる群から選択されるウイルスによって引き起こされ
る、実施形態１０４に記載の方法。
バーウイルス（ＥＢＶ）、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、カポジ肉腫関連ヘルペスウイル
ス（ＫＳＨＶ）、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、伝染性軟属腫ウイルス（ＭＣＶ）
、ヒトＴ細胞白血病ウイルス１（ＨＴＬＶ－１）、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、及
びＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）からなる群から選択されるウイルスによって引き起こされ
る、実施形態１０４に記載の方法。
【0484】
実施形態１０６ 免疫細胞が個体にとって自家性である、実施形態１０１～１０５のい
ずれか１つに記載の方法。
ずれか１つに記載の方法。
【0485】
実施形態１０７ 一実施形態では、ｃａＴＣＲを含むか、又はｃａＴＣＲをコードする
核酸で形質導入された免疫細胞に共刺激シグナルを提供する方法であって、実施形態６８
～７４のいずれか１つに記載の１つ以上の核酸又は実施形態７５～７７のいずれか１つに
記載の１つ以上のベクターを上記細胞に導入することを含む、方法が提供される。
核酸で形質導入された免疫細胞に共刺激シグナルを提供する方法であって、実施形態６８
～７４のいずれか１つに記載の１つ以上の核酸又は実施形態７５～７７のいずれか１つに
記載の１つ以上のベクターを上記細胞に導入することを含む、方法が提供される。
【実施例0486】
材料及び方法
細胞試料、細胞株、及び抗体
細胞株ＨｅｐＧ２（ＡＴＣＣ ＨＢ－８０６５、ＨＬＡ－Ａ２＋、ＡＦＰ＋）、ＳＫ－
ＨＥＰ－１（ＡＴＣＣ ＨＴＢ－５２、ＨＬＡ－Ａ２＋、ＡＦＰ－）、Ｒａｊｉ（ＡＴＣ
Ｃ ＣＣＬ－８６、ＣＤ１９＋）、ＣＡ４６（ＡＴＣＣ ＣＲＬ－１６４８、ＣＤ１９＋
）、Ｊｕｒｋａｔ（ＡＴＣＣ ＣＲＬ－２８９９、ＣＤ１９－）、Ｊ．ＲＴ３－Ｔ３．５
（ＡＴＣＣ ＴＩＢ－１５３）、Ｊｅｋｏ－１（ＡＴＣＣ ＣＲＬ－３００６、ＣＤ１９
＋）、ＴＨＰ－１（ＡＴＣＣ ＴＩＢ－２０２、ＣＤ１９－）、Ｄａｕｄｉ（ＡＴＣＣ
ＣＣＬ－２１３、ＣＤ１９＋）、ＨｅＬａ（ＡＴＣＣ ＣＣＬ－２）、ＭＤＡ－ＭＢ－２
３１（ＡＴＣＣ ＨＴＢ－２６）、及びＭＣＦ－７（ＡＴＣＣ ＨＴＢ－２２）をＡｍｅ
ｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎから入手した。Ｊｕｒｋ
ａｔは、Ｔ細胞白血病由来のヒトＴリンパ球細胞株である。Ｊ．ＲＴ３－Ｔ３．５は、Ｔ
細胞受容体β鎖を欠くＪｕｒｋａｔ細胞由来の変異株である。Ｒａｊｉは、ＣＤ１９を発
現するバーキットリンパ腫細胞株である。Ｒａｊｉ－ＣＤ１９ノックアウト（Ｒａｊｉ－
ＣＤ１９ＫＯ）株を、ＣＲＩＳＰＲ技術によって生成した。３つの異なるガイド配列を、
Ｒａｊｉ細胞内のＣＤ１９を標的化するように設計した。ＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓ９ベクタ
ーをＯｒｉｇｅｎｅから購入し、各ガイドをｐＣａｓ－Ｇｕｉｄｅベクターに別々にクロ
ーニングした。エレクトロポレーションの３日後、各ガイドによるノックアウト効率をフ
ローサイトメトリーによって評価し、限界希釈法によるクローン選択のために最良のＣＤ
１９ノックアウトプールを選択した。選択されたクローンを、シークエンシングによって
完全なＣＤ１９ノックアウトとして確認した。全ての細胞株を、３７℃／５％ＣＯ２で、
１０％ＦＢＳ及び２ｍＭグルタミンを補充したＲＰＭＩ１６４０又はＤＭＥＭ中で培養し
た。
細胞試料、細胞株、及び抗体
細胞株ＨｅｐＧ２（ＡＴＣＣ ＨＢ－８０６５、ＨＬＡ－Ａ２＋、ＡＦＰ＋）、ＳＫ－
ＨＥＰ－１（ＡＴＣＣ ＨＴＢ－５２、ＨＬＡ－Ａ２＋、ＡＦＰ－）、Ｒａｊｉ（ＡＴＣ
Ｃ ＣＣＬ－８６、ＣＤ１９＋）、ＣＡ４６（ＡＴＣＣ ＣＲＬ－１６４８、ＣＤ１９＋
）、Ｊｕｒｋａｔ（ＡＴＣＣ ＣＲＬ－２８９９、ＣＤ１９－）、Ｊ．ＲＴ３－Ｔ３．５
（ＡＴＣＣ ＴＩＢ－１５３）、Ｊｅｋｏ－１（ＡＴＣＣ ＣＲＬ－３００６、ＣＤ１９
＋）、ＴＨＰ－１（ＡＴＣＣ ＴＩＢ－２０２、ＣＤ１９－）、Ｄａｕｄｉ（ＡＴＣＣ
ＣＣＬ－２１３、ＣＤ１９＋）、ＨｅＬａ（ＡＴＣＣ ＣＣＬ－２）、ＭＤＡ－ＭＢ－２
３１（ＡＴＣＣ ＨＴＢ－２６）、及びＭＣＦ－７（ＡＴＣＣ ＨＴＢ－２２）をＡｍｅ
ｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎから入手した。Ｊｕｒｋ
ａｔは、Ｔ細胞白血病由来のヒトＴリンパ球細胞株である。Ｊ．ＲＴ３－Ｔ３．５は、Ｔ
細胞受容体β鎖を欠くＪｕｒｋａｔ細胞由来の変異株である。Ｒａｊｉは、ＣＤ１９を発
現するバーキットリンパ腫細胞株である。Ｒａｊｉ－ＣＤ１９ノックアウト（Ｒａｊｉ－
ＣＤ１９ＫＯ）株を、ＣＲＩＳＰＲ技術によって生成した。３つの異なるガイド配列を、
Ｒａｊｉ細胞内のＣＤ１９を標的化するように設計した。ＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓ９ベクタ
ーをＯｒｉｇｅｎｅから購入し、各ガイドをｐＣａｓ－Ｇｕｉｄｅベクターに別々にクロ
ーニングした。エレクトロポレーションの３日後、各ガイドによるノックアウト効率をフ
ローサイトメトリーによって評価し、限界希釈法によるクローン選択のために最良のＣＤ
１９ノックアウトプールを選択した。選択されたクローンを、シークエンシングによって
完全なＣＤ１９ノックアウトとして確認した。全ての細胞株を、３７℃／５％ＣＯ２で、
１０％ＦＢＳ及び２ｍＭグルタミンを補充したＲＰＭＩ１６４０又はＤＭＥＭ中で培養し
た。
【0487】
ＦＩＴＣ又はＡＰＣにコンジュゲートしたヒトＨＬＡ Ａ０２（クローンＢＢ７．２）
に対するモノクローナルＡｂ、及びＦＩＴＣ又はＡＰＣにコンジュゲートしたアイソタイ
プ対照マウスＩｇＧ２ｂ、ヒト又はマウスＣＤ３に対する抗体、ヒトＴ細胞受容体の様々
なサブユニット、３×Ｆｌａｇタグ、ＨＡタグ、ＰＥ又はＦＩＴＣにコンジュゲートした
ヤギＦ（ａｂ）２抗ヒトＩｇＧ、並びに蛍光コンジュゲートヤギＦ（ａｂ’）２抗マウス
Ｉｇ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を購入した。ＡＦＰ１５８に対する抗イディオタイプ抗体
／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１特異的抗体を開発し、Ｅｕｒｅｋａ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ
ｓの工場内で産生した。フローサイトメトリーデータをＢＤ ＦＡＣＳＣａｎｔｏ ＩＩ
を使用して収集し、ＦｌｏｗＪｏソフトウェアパッケージを使用して分析した。
に対するモノクローナルＡｂ、及びＦＩＴＣ又はＡＰＣにコンジュゲートしたアイソタイ
プ対照マウスＩｇＧ２ｂ、ヒト又はマウスＣＤ３に対する抗体、ヒトＴ細胞受容体の様々
なサブユニット、３×Ｆｌａｇタグ、ＨＡタグ、ＰＥ又はＦＩＴＣにコンジュゲートした
ヤギＦ（ａｂ）２抗ヒトＩｇＧ、並びに蛍光コンジュゲートヤギＦ（ａｂ’）２抗マウス
Ｉｇ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を購入した。ＡＦＰ１５８に対する抗イディオタイプ抗体
／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１特異的抗体を開発し、Ｅｕｒｅｋａ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ
ｓの工場内で産生した。フローサイトメトリーデータをＢＤ ＦＡＣＳＣａｎｔｏ ＩＩ
を使用して収集し、ＦｌｏｗＪｏソフトウェアパッケージを使用して分析した。
【0488】
全てのペプチドを購入し、Ｅｌｉｍ Ｂｉｏｐｈａｒｍａにより合成した。ペプチドは
、＞９０％の純度であった。ペプチドを１０ｍｇ／ｍＬでＤＭＳＯに溶解させ、又は生理
食塩水で希釈し、－８０℃で凍結した。ビオチン化単鎖ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２
：０１及び対照ペプチド／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１複合体単量体を、組換えＨＬＡ－Ａ＊
０２：０１及びβ－２ミクログロブリン（β２Ｍ）を用いてペプチドを再折り畳みするこ
とにより生成した。単量体は、ＢｉｒＡ酵素によるＨＬＡ－Ａ＊０２：０１細胞外ドメイ
ン（ＥＣＤ）のＣ末端に連結されたＢＳＰペプチドを介してビオチン化した。蛍光標識ス
トレプトアビジンをビオチン化ペプチド／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１複合体単量体と混合し
て、蛍光標識されたペプチド／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１四量体を形成した。
、＞９０％の純度であった。ペプチドを１０ｍｇ／ｍＬでＤＭＳＯに溶解させ、又は生理
食塩水で希釈し、－８０℃で凍結した。ビオチン化単鎖ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２
：０１及び対照ペプチド／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１複合体単量体を、組換えＨＬＡ－Ａ＊
０２：０１及びβ－２ミクログロブリン（β２Ｍ）を用いてペプチドを再折り畳みするこ
とにより生成した。単量体は、ＢｉｒＡ酵素によるＨＬＡ－Ａ＊０２：０１細胞外ドメイ
ン（ＥＣＤ）のＣ末端に連結されたＢＳＰペプチドを介してビオチン化した。蛍光標識ス
トレプトアビジンをビオチン化ペプチド／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１複合体単量体と混合し
て、蛍光標識されたペプチド／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１四量体を形成した。
【0489】
ヒトＣＤ１９特異的若しくはＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１特異的なＣＡＲ又
はｃａＴＣＲを含むレンチウイルスを、例えば、キメラ構築物をコードするベクターを用
いた２９３Ｔ細胞のトランスフェクションによって作製した。初代培養ヒトＴ細胞を、１
００Ｕ／ｍｌのインターロイキン－２（ＩＬ－２）の存在下で、ＣＤ３／ＣＤ２８ビーズ
（Ｄｙｎａｂｅａｄｓ（登録商標）、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）による１日間の刺激後に形
質導入に使用した。濃縮レンチウイルスを、レトロネクチン（Ｔａｋａｒａ）コーティン
グされた６ウェルプレート中のＴ細胞に９６時間適用した。抗ＡＦＰ及び抗ＣＤ１９キメ
ラ構築物の形質導入効率を、それぞれＰＥコンジュゲートストレプトアビジン又は抗ｍｙ
ｃ抗体を有するビオチン化ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１四量体（「ＡＦＰ１５
８四量体」）を使用して、フローサイトメトリーによって評価した。繰り返しフローサイ
トメトリー分析を５日目及びその後３～４日おきに行った。
はｃａＴＣＲを含むレンチウイルスを、例えば、キメラ構築物をコードするベクターを用
いた２９３Ｔ細胞のトランスフェクションによって作製した。初代培養ヒトＴ細胞を、１
００Ｕ／ｍｌのインターロイキン－２（ＩＬ－２）の存在下で、ＣＤ３／ＣＤ２８ビーズ
（Ｄｙｎａｂｅａｄｓ（登録商標）、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）による１日間の刺激後に形
質導入に使用した。濃縮レンチウイルスを、レトロネクチン（Ｔａｋａｒａ）コーティン
グされた６ウェルプレート中のＴ細胞に９６時間適用した。抗ＡＦＰ及び抗ＣＤ１９キメ
ラ構築物の形質導入効率を、それぞれＰＥコンジュゲートストレプトアビジン又は抗ｍｙ
ｃ抗体を有するビオチン化ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１四量体（「ＡＦＰ１５
８四量体」）を使用して、フローサイトメトリーによって評価した。繰り返しフローサイ
トメトリー分析を５日目及びその後３～４日おきに行った。
【0490】
細胞株は、ｃａＴＣＲ構築物の２つのサブユニットをコードする１つ又は２つのベクタ
ーのいずれかで形質導入した。形質導入から５日後に、抗ＨＡ（抗ＨＡタグ抗体－ＣｈＩ
Ｐグレード、Ａｂｃａｍ）又は抗Ｆｌａｇ抗体（Ａｎｔｉ－Ｆｌａｇ Ａｎｔｉｂｏｄｙ
Ｐｒｏｄｕｃｅｄ ｉｎ Ｒａｂｂｉｔ，Ｓｉｇｍａ）を使用するウェスタンブロット
のために細胞溶解物を生成した。
ーのいずれかで形質導入した。形質導入から５日後に、抗ＨＡ（抗ＨＡタグ抗体－ＣｈＩ
Ｐグレード、Ａｂｃａｍ）又は抗Ｆｌａｇ抗体（Ａｎｔｉ－Ｆｌａｇ Ａｎｔｉｂｏｄｙ
Ｐｒｏｄｕｃｅｄ ｉｎ Ｒａｂｂｉｔ，Ｓｉｇｍａ）を使用するウェスタンブロット
のために細胞溶解物を生成した。
【0491】
腫瘍細胞傷害性を、Ｃｙｔｏｘ ９６非放射性ＬＤＨ細胞傷害性アッセイ（Ｐｒｏｍｅ
ｇａ）によりアッセイした。ＣＤ３＋Ｔ細胞は、ＣＤ１４、ＣＤ１６、ＣＤ１９、ＣＤ２
０、ＣＤ３６、ＣＤ５６、ＣＤ６６ｂ、ＣＤ１２３、グリコホルリンＡ発現細胞を陰性に
枯渇させるＥａｓｙＳｅｐヒトＴ細胞単離キット（ＳｔｅｍＣｅｌｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏ
ｇｉｅｓ）を使用して、ＰＢＭＣ濃縮全血から調製した。ヒトＴ細胞を活性化し、例えば
、製造元のプロトコールに従ってＣＤ３／ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓ（Ｉｎｖｉｔｒ
ｏｇｅｎ）で増殖させた。活性化Ｔ細胞（ＡＴＣ）を、１０％ＦＢＳ＋１００Ｕ／ｍｌの
ＩＬ－２を有するＲＰＭＩ１６４０培地で培養して維持し、７～１４日目に使用した。活
性化Ｔ細胞（免疫細胞）及び標的細胞を、様々なエフェクター対標的比（例えば、２．５
：１又は５：１）で１６時間共培養し、細胞傷害性についてアッセイした。
実施例１キメラ抗体－Ｔ細胞受容体（ｃａＴＣＲ）設計
ｇａ）によりアッセイした。ＣＤ３＋Ｔ細胞は、ＣＤ１４、ＣＤ１６、ＣＤ１９、ＣＤ２
０、ＣＤ３６、ＣＤ５６、ＣＤ６６ｂ、ＣＤ１２３、グリコホルリンＡ発現細胞を陰性に
枯渇させるＥａｓｙＳｅｐヒトＴ細胞単離キット（ＳｔｅｍＣｅｌｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏ
ｇｉｅｓ）を使用して、ＰＢＭＣ濃縮全血から調製した。ヒトＴ細胞を活性化し、例えば
、製造元のプロトコールに従ってＣＤ３／ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓ（Ｉｎｖｉｔｒ
ｏｇｅｎ）で増殖させた。活性化Ｔ細胞（ＡＴＣ）を、１０％ＦＢＳ＋１００Ｕ／ｍｌの
ＩＬ－２を有するＲＰＭＩ１６４０培地で培養して維持し、７～１４日目に使用した。活
性化Ｔ細胞（免疫細胞）及び標的細胞を、様々なエフェクター対標的比（例えば、２．５
：１又は５：１）で１６時間共培養し、細胞傷害性についてアッセイした。
実施例１キメラ抗体－Ｔ細胞受容体（ｃａＴＣＲ）設計
【0492】
様々なキメラ抗体－Ｔ細胞受容体（ｃａＴＣＲ）設計が想到され、６つの異なる例が図
１に示される（ｃａＴＣＲ－１、ｃａＴＣＲ－２、ｃａＴＣＲ－３、ｃａＴＣＲ－４、ｃ
ａＴＣＲ－５、及びｃａＴＣＲ－６）。これらの設計では、様々な抗体部分（Ｆａｂ、Ｆ
ａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、又はｓｃＦｖ）は、可変ドメイン及び定常ドメインを欠
くＴ細胞受容体α／β鎖又はγ／δ鎖のアミノ末端に融合され、それらの連結ペプチド（
定常ドメイン後の領域）、それらの膜貫通ドメイン又はその変異型、及び任意の細胞内ド
メインの全て又は一部を含み、Ｔ細胞の表面に発現され得るｃａＴＣＲヘテロ二量体を形
成する。天然のＴＣＲでは、Ｖα／Ｖβ又はＶδ／Ｖγドメインは、ＴＣＲの抗原結合ド
メインを形成する。本発明者らの設計は、様々な抗体部分を有するＶα－Ｃα／Ｖβ－Ｃ
β又はＶδ－Ｃδ／Ｖγ－Ｃγ領域を置換し、少なくとも１つのＴＣＲ膜貫通ドメインを
導入し、したがって、抗体の結合特異性を構築物に付与し、天然に存在するＴＣＲ膜貫通
ドメインのみを有するＴＣＲ又は関連する構築物と比較して、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε、
及びＣＤ３ζζなどのＴＣＲ複合体において、ＴＣＲ複合体中のアクセサリー分子を動員
する構築物の向上した能力をもたらす。ｃａＴＣＲ構築物を以下のように命名した：ｃａ
ＴＣＲ－［設計番号］－［変異位置］［番号］。設計番号１は、Ｆａｂ抗体部分を有する
ｃａＴＣＲに対応し、設計番号２は、Ｆａｂ’抗体部分を有するｃａＴＣＲに対応し、設
計番号３は、（Ｆａｂ’）２抗体部分を有するｃａＴＣＲに対応し、設計番号４は、Ｆｖ
抗体部分を有するｃａＴＣＲに対応し、設計番号５は、単一のｓｃＦｖ抗体部分を有する
ｃａＴＣＲに対応し、設計番号６は、２つのｓｃＦｖ抗体部分を有するｃａＴＣＲに対応
する（図１を参照されたい）。変異位置及び番号０（例えば、ｃａＴＣＲ－１－０）は、
天然に存在するＴＣＲドメインを有する構築物に対応し、＃≧１は、変異位置における特
定の変異を有するｃａＴＣＲに対応する（例えば、ｃａＴＣＲ－１－ＴＭ１は、１つの膜
貫通ドメイン変異型に対応し、ｃａＴＣＲ－１－ＥＣ１は、１つの細胞外ドメイン変異型
に対する、表２を参照されたい）。
１に示される（ｃａＴＣＲ－１、ｃａＴＣＲ－２、ｃａＴＣＲ－３、ｃａＴＣＲ－４、ｃ
ａＴＣＲ－５、及びｃａＴＣＲ－６）。これらの設計では、様々な抗体部分（Ｆａｂ、Ｆ
ａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、又はｓｃＦｖ）は、可変ドメイン及び定常ドメインを欠
くＴ細胞受容体α／β鎖又はγ／δ鎖のアミノ末端に融合され、それらの連結ペプチド（
定常ドメイン後の領域）、それらの膜貫通ドメイン又はその変異型、及び任意の細胞内ド
メインの全て又は一部を含み、Ｔ細胞の表面に発現され得るｃａＴＣＲヘテロ二量体を形
成する。天然のＴＣＲでは、Ｖα／Ｖβ又はＶδ／Ｖγドメインは、ＴＣＲの抗原結合ド
メインを形成する。本発明者らの設計は、様々な抗体部分を有するＶα－Ｃα／Ｖβ－Ｃ
β又はＶδ－Ｃδ／Ｖγ－Ｃγ領域を置換し、少なくとも１つのＴＣＲ膜貫通ドメインを
導入し、したがって、抗体の結合特異性を構築物に付与し、天然に存在するＴＣＲ膜貫通
ドメインのみを有するＴＣＲ又は関連する構築物と比較して、ＣＤ３δε、ＣＤ３γε、
及びＣＤ３ζζなどのＴＣＲ複合体において、ＴＣＲ複合体中のアクセサリー分子を動員
する構築物の向上した能力をもたらす。ｃａＴＣＲ構築物を以下のように命名した：ｃａ
ＴＣＲ－［設計番号］－［変異位置］［番号］。設計番号１は、Ｆａｂ抗体部分を有する
ｃａＴＣＲに対応し、設計番号２は、Ｆａｂ’抗体部分を有するｃａＴＣＲに対応し、設
計番号３は、（Ｆａｂ’）２抗体部分を有するｃａＴＣＲに対応し、設計番号４は、Ｆｖ
抗体部分を有するｃａＴＣＲに対応し、設計番号５は、単一のｓｃＦｖ抗体部分を有する
ｃａＴＣＲに対応し、設計番号６は、２つのｓｃＦｖ抗体部分を有するｃａＴＣＲに対応
する（図１を参照されたい）。変異位置及び番号０（例えば、ｃａＴＣＲ－１－０）は、
天然に存在するＴＣＲドメインを有する構築物に対応し、＃≧１は、変異位置における特
定の変異を有するｃａＴＣＲに対応する（例えば、ｃａＴＣＲ－１－ＴＭ１は、１つの膜
貫通ドメイン変異型に対応し、ｃａＴＣＲ－１－ＥＣ１は、１つの細胞外ドメイン変異型
に対する、表２を参照されたい）。
【0493】
ｃａＴＣＲ－１（ＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１－ＴＣＲδ／ＩｇＶＬ－ＩｇＣＬ－ＴＣＲγ）
設計では、抗体重鎖の可変ドメイン及び第１の定常ドメイン（ＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１）は
、ＴＣＲδ鎖のアミノ末端部分を、境界位置まで、又はＶδ－Ｃδ領域に続くＴＣＲδ鎖
の細胞外ドメインの連結ペプチド内で置換し、所望により、ＴＣＲδ鎖の膜貫通ドメイン
は、１つ以上のアミノ酸の置換などにより改変されている。対応する抗体軽鎖の可変ドメ
イン及び定常ドメイン（ＩｇＶＬ－ＩｇＣＬ）は、ＴＣＲγ鎖のアミノ末端部分を、境界
位置まで、又はＶγ－Ｃγ領域に続くＴＣＲγ鎖の細胞外ドメインの連結ペプチド内で置
換し、所望により、ＴＣＲγ鎖の膜貫通ドメインは、１つ以上のアミノ酸の置換などによ
り改変されている。
設計では、抗体重鎖の可変ドメイン及び第１の定常ドメイン（ＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１）は
、ＴＣＲδ鎖のアミノ末端部分を、境界位置まで、又はＶδ－Ｃδ領域に続くＴＣＲδ鎖
の細胞外ドメインの連結ペプチド内で置換し、所望により、ＴＣＲδ鎖の膜貫通ドメイン
は、１つ以上のアミノ酸の置換などにより改変されている。対応する抗体軽鎖の可変ドメ
イン及び定常ドメイン（ＩｇＶＬ－ＩｇＣＬ）は、ＴＣＲγ鎖のアミノ末端部分を、境界
位置まで、又はＶγ－Ｃγ領域に続くＴＣＲγ鎖の細胞外ドメインの連結ペプチド内で置
換し、所望により、ＴＣＲγ鎖の膜貫通ドメインは、１つ以上のアミノ酸の置換などによ
り改変されている。
【0494】
ｃａＴＣＲ－１の一実施形態では、１つの鎖は、ＴＣＲδ鎖の膜貫通ドメイン及び連結
ペプチドの全て又は一部を含むＴＣＲδ鎖のカルボキシ末端部分に融合された、ＩｇＣＨ
１ドメイン（配列番号３７～４７のうちのいずれか１つ）に融合された抗ＡＦＰ１５８／
ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１抗体（配列番号６２）のＩｇＶＨドメインを含み、また、他方の
鎖は、ＴＣＲγ鎖の膜貫通ドメイン及び連結ペプチドの全て又は一部を含むＴＣＲγ鎖の
カルボキシ末端部分に融合された、ＩｇＣＬドメイン（配列番号４８）に融合された抗Ａ
ＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１抗体（配列番号６３）のＩｇＶＬドメインを含む。
いくつかの実施形態では、ＴＣＲ膜貫通ドメインの両方が天然に存在する。いくつかの実
施形態では、ＴＣＲ膜貫通ドメインのうちの少なくとも１つは、１つ以上のアミノ酸置換
を含む天然に存在しない変異型である。いくつかの実施形態では、ＴＣＲδ鎖のカルボキ
シ末端部分は、配列番号３１又は３２のアミノ酸配列を有する連結ペプチドを含む。いく
つかの実施形態では、ＴＣＲδ鎖のカルボキシ末端部分は、配列番号７及び９～１３のう
ちのいずれか１つのアミノ酸配列を有する膜貫通ドメインを含む。いくつかの実施形態で
は、ＴＣＲγ鎖のカルボキシ末端部分は、配列番号３３又は３４のアミノ酸配列を有する
連結ペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲγ鎖のカルボキシ末端部分は、配
列番号８及び１４～２６のいずれか１つのアミノ酸配列を有する膜貫通ドメインを含む。
ペプチドの全て又は一部を含むＴＣＲδ鎖のカルボキシ末端部分に融合された、ＩｇＣＨ
１ドメイン（配列番号３７～４７のうちのいずれか１つ）に融合された抗ＡＦＰ１５８／
ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１抗体（配列番号６２）のＩｇＶＨドメインを含み、また、他方の
鎖は、ＴＣＲγ鎖の膜貫通ドメイン及び連結ペプチドの全て又は一部を含むＴＣＲγ鎖の
カルボキシ末端部分に融合された、ＩｇＣＬドメイン（配列番号４８）に融合された抗Ａ
ＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１抗体（配列番号６３）のＩｇＶＬドメインを含む。
いくつかの実施形態では、ＴＣＲ膜貫通ドメインの両方が天然に存在する。いくつかの実
施形態では、ＴＣＲ膜貫通ドメインのうちの少なくとも１つは、１つ以上のアミノ酸置換
を含む天然に存在しない変異型である。いくつかの実施形態では、ＴＣＲδ鎖のカルボキ
シ末端部分は、配列番号３１又は３２のアミノ酸配列を有する連結ペプチドを含む。いく
つかの実施形態では、ＴＣＲδ鎖のカルボキシ末端部分は、配列番号７及び９～１３のう
ちのいずれか１つのアミノ酸配列を有する膜貫通ドメインを含む。いくつかの実施形態で
は、ＴＣＲγ鎖のカルボキシ末端部分は、配列番号３３又は３４のアミノ酸配列を有する
連結ペプチドを含む。いくつかの実施形態では、ＴＣＲγ鎖のカルボキシ末端部分は、配
列番号８及び１４～２６のいずれか１つのアミノ酸配列を有する膜貫通ドメインを含む。
【0495】
ｃａＴＣＲ－２（ＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１－ヒンジ－ＴＣＲδ／ＩｇＶＬ－ＩｇＣＬ－リ
ンカー－ＴＣＲγ）設計では、抗体重鎖の可変ドメイン、第１の定常ドメイン、及びヒン
ジ（ＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１－ヒンジ）は、ＴＣＲδ鎖のアミノ末端部分を、境界位置まで
、又はＶδ－Ｃδ領域に続くＴＣＲδ鎖の細胞外ドメインの連結ペプチド内で置換し、所
望により、ＴＣＲδ鎖の膜貫通ドメインは、１つ以上のアミノ酸の置換などにより改変さ
れている。リンカー（ＩｇＶＬ－ＩｇＣＬ－リンカー）に融合された対応する抗体軽鎖の
可変ドメイン及び定常ドメインは、ＴＣＲγ鎖のアミノ末端部分を、境界位置まで、又は
Ｖγ－Ｃγ領域に続くＴＣＲγ鎖の細胞外ドメインの連結ペプチド内で置換し、所望によ
り、ＴＣＲγ鎖の膜貫通ドメインは、１つ以上のアミノ酸の置換などにより改変されてい
る。
ンカー－ＴＣＲγ）設計では、抗体重鎖の可変ドメイン、第１の定常ドメイン、及びヒン
ジ（ＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１－ヒンジ）は、ＴＣＲδ鎖のアミノ末端部分を、境界位置まで
、又はＶδ－Ｃδ領域に続くＴＣＲδ鎖の細胞外ドメインの連結ペプチド内で置換し、所
望により、ＴＣＲδ鎖の膜貫通ドメインは、１つ以上のアミノ酸の置換などにより改変さ
れている。リンカー（ＩｇＶＬ－ＩｇＣＬ－リンカー）に融合された対応する抗体軽鎖の
可変ドメイン及び定常ドメインは、ＴＣＲγ鎖のアミノ末端部分を、境界位置まで、又は
Ｖγ－Ｃγ領域に続くＴＣＲγ鎖の細胞外ドメインの連結ペプチド内で置換し、所望によ
り、ＴＣＲγ鎖の膜貫通ドメインは、１つ以上のアミノ酸の置換などにより改変されてい
る。
【0496】
ｃａＴＣＲ－３（ＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１－ヒンジ－ＴＣＲδ／ＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１－
ヒンジ－ＴＣＲγ＋ＩｇＶＬ－ＩｇＣＬ）設計では、抗体重鎖の可変ドメイン、第１の定
常ドメイン、及びヒンジ（ＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１－ヒンジ）は、ＴＣＲδ鎖のアミノ末端
部分を、境界位置まで、又はＶδ－Ｃδ領域に続くＴＣＲδ鎖の細胞外ドメインの連結ペ
プチド内で置換し、所望により、ＴＣＲδ鎖の膜貫通ドメインは、１つ以上のアミノ酸の
置換などにより改変されている。抗体重鎖の可変ドメイン、第１の定常ドメイン、及びヒ
ンジ（ＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１－ヒンジ）は、ＴＣＲγ鎖のアミノ末端部分を、境界位置ま
で、又はＶγ－Ｃγ領域に続くＴＣＲγ鎖の細胞外ドメインの連結ペプチド内で置換し、
所望により、ＴＣＲγ鎖の膜貫通ドメインは、１つ以上のアミノ酸の置換などにより改変
されている。対応する抗体軽鎖（ＩｇＶＬ－ＩｇＣＬ）の可変ドメイン及び定常ドメイン
は、ＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１ドメインと結合する。
ヒンジ－ＴＣＲγ＋ＩｇＶＬ－ＩｇＣＬ）設計では、抗体重鎖の可変ドメイン、第１の定
常ドメイン、及びヒンジ（ＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１－ヒンジ）は、ＴＣＲδ鎖のアミノ末端
部分を、境界位置まで、又はＶδ－Ｃδ領域に続くＴＣＲδ鎖の細胞外ドメインの連結ペ
プチド内で置換し、所望により、ＴＣＲδ鎖の膜貫通ドメインは、１つ以上のアミノ酸の
置換などにより改変されている。抗体重鎖の可変ドメイン、第１の定常ドメイン、及びヒ
ンジ（ＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１－ヒンジ）は、ＴＣＲγ鎖のアミノ末端部分を、境界位置ま
で、又はＶγ－Ｃγ領域に続くＴＣＲγ鎖の細胞外ドメインの連結ペプチド内で置換し、
所望により、ＴＣＲγ鎖の膜貫通ドメインは、１つ以上のアミノ酸の置換などにより改変
されている。対応する抗体軽鎖（ＩｇＶＬ－ＩｇＣＬ）の可変ドメイン及び定常ドメイン
は、ＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１ドメインと結合する。
【0497】
ｃａＴＣＲ－４（ＩｇＶＨ－ＴＣＲδ／ＩｇＶＬ－ＴＣＲγ）設計では、抗体重鎖の可
変ドメイン（ＩｇＶＨ）は、ＴＣＲδ鎖のアミノ末端部分を、境界位置まで、又はＶδ－
Ｃδ領域に続くＴＣＲδ鎖の細胞外ドメインの連結ペプチド内で置換し、所望により、Ｔ
ＣＲδ鎖の膜貫通ドメインは、１つ以上のアミノ酸の置換などにより改変されている。対
応する抗体軽鎖の可変ドメイン（ＩｇＶＬ）は、ＴＣＲγ鎖のアミノ末端部分を、境界位
置まで、又はＶγ－Ｃγ領域に続くＴＣＲγ鎖の細胞外ドメインの連結ペプチド内で置換
し、所望により、ＴＣＲγ鎖の膜貫通ドメインは、１つ以上のアミノ酸の置換などにより
改変されている。
変ドメイン（ＩｇＶＨ）は、ＴＣＲδ鎖のアミノ末端部分を、境界位置まで、又はＶδ－
Ｃδ領域に続くＴＣＲδ鎖の細胞外ドメインの連結ペプチド内で置換し、所望により、Ｔ
ＣＲδ鎖の膜貫通ドメインは、１つ以上のアミノ酸の置換などにより改変されている。対
応する抗体軽鎖の可変ドメイン（ＩｇＶＬ）は、ＴＣＲγ鎖のアミノ末端部分を、境界位
置まで、又はＶγ－Ｃγ領域に続くＴＣＲγ鎖の細胞外ドメインの連結ペプチド内で置換
し、所望により、ＴＣＲγ鎖の膜貫通ドメインは、１つ以上のアミノ酸の置換などにより
改変されている。
【0498】
ｃａＴＣＲ－５（ＩｇＶＨ－ＩｇＶＬ－ＴＣＲδ／ＴＣＲγ）設計では、対応する抗体
軽鎖の可変ドメインに融合した抗体重鎖の可変ドメイン（ＩｇＶＨ－ＩｇＶＬ又はＩｇＶ
Ｌ－ＩｇＶＨ）は、ＴＣＲδ鎖のアミノ末端部分を、境界位置まで、又はＶδ－Ｃδ領域
に続くＴＣＲδ鎖の細胞外ドメインの連結ペプチド内で置換し、所望により、ＴＣＲδ鎖
の膜貫通ドメインは、１つ以上のアミノ酸の置換などにより改変されている。ＴＣＲγ鎖
のアミノ末端部分は、境界位置まで、又はＶγ－Ｃγ領域に続くＴＣＲγ鎖の細胞外ドメ
インの連結ペプチド内で欠失し、所望により、ＴＣＲγ鎖の膜貫通ドメインは、１つ以上
のアミノ酸の置換などにより改変されている。
軽鎖の可変ドメインに融合した抗体重鎖の可変ドメイン（ＩｇＶＨ－ＩｇＶＬ又はＩｇＶ
Ｌ－ＩｇＶＨ）は、ＴＣＲδ鎖のアミノ末端部分を、境界位置まで、又はＶδ－Ｃδ領域
に続くＴＣＲδ鎖の細胞外ドメインの連結ペプチド内で置換し、所望により、ＴＣＲδ鎖
の膜貫通ドメインは、１つ以上のアミノ酸の置換などにより改変されている。ＴＣＲγ鎖
のアミノ末端部分は、境界位置まで、又はＶγ－Ｃγ領域に続くＴＣＲγ鎖の細胞外ドメ
インの連結ペプチド内で欠失し、所望により、ＴＣＲγ鎖の膜貫通ドメインは、１つ以上
のアミノ酸の置換などにより改変されている。
【0499】
ｃａＴＣＲ－６（ＩｇＶＨ－ＩｇＶＬ－ＴＣＲδ／ＩｇＶＨ－ＩｇＶＬ－ＴＣＲγ）設
計では、対応する抗体軽鎖の可変ドメインに融合した抗体重鎖の可変ドメイン（ＩｇＶＨ
－ＩｇＶＬ又はＩｇＶＬ－ＩｇＶＨ）は、ＴＣＲδ鎖のアミノ末端部分を、境界位置まで
、又はＶδ－Ｃδ領域に続くＴＣＲδ鎖の細胞外ドメインの連結ペプチド内で置換し、所
望により、ＴＣＲδ鎖の膜貫通ドメインは、１つ以上のアミノ酸の置換などにより改変さ
れている。対応する抗体軽鎖の可変ドメインに融合した抗体重鎖の可変ドメイン（ＩｇＶ
Ｈ－ＩｇＶＬ又はＩｇＶＬ－ＩｇＶＨ）は、ＴＣＲγ鎖のアミノ末端部分を、境界位置ま
で、又はＶγ－Ｃγ領域に続くＴＣＲγ鎖の細胞外ドメインの連結ペプチド内で置換し、
所望により、ＴＣＲγ鎖の膜貫通ドメインは、１つ以上のアミノ酸の置換などにより改変
されている。
実施例２：抗ＣＤ１９ ｃａＴＣＲ－１及び抗ＣＤ１９キメラ刺激受容体で形質導入さ
れたＴ細胞の構築及び特性評価
計では、対応する抗体軽鎖の可変ドメインに融合した抗体重鎖の可変ドメイン（ＩｇＶＨ
－ＩｇＶＬ又はＩｇＶＬ－ＩｇＶＨ）は、ＴＣＲδ鎖のアミノ末端部分を、境界位置まで
、又はＶδ－Ｃδ領域に続くＴＣＲδ鎖の細胞外ドメインの連結ペプチド内で置換し、所
望により、ＴＣＲδ鎖の膜貫通ドメインは、１つ以上のアミノ酸の置換などにより改変さ
れている。対応する抗体軽鎖の可変ドメインに融合した抗体重鎖の可変ドメイン（ＩｇＶ
Ｈ－ＩｇＶＬ又はＩｇＶＬ－ＩｇＶＨ）は、ＴＣＲγ鎖のアミノ末端部分を、境界位置ま
で、又はＶγ－Ｃγ領域に続くＴＣＲγ鎖の細胞外ドメインの連結ペプチド内で置換し、
所望により、ＴＣＲγ鎖の膜貫通ドメインは、１つ以上のアミノ酸の置換などにより改変
されている。
実施例２：抗ＣＤ１９ ｃａＴＣＲ－１及び抗ＣＤ１９キメラ刺激受容体で形質導入さ
れたＴ細胞の構築及び特性評価
【0500】
抗ＣＤ１９結合部分をコードする核酸断片（配列番号５８及び５９）を使用して、ＣＤ
２８膜貫通及び細胞内シグナル伝達配列（配列番号５１）を含むキメラ共刺激受容体（Ｃ
ＳＲ；本明細書では「ＣＳＲ１」とも称される）並びにｃａＴＣＲ－１構築物（ｃａＴＣ
Ｒ－１－０又はｃａＴＣＲ－１－ＴＭ５）の両方を生成した。初代培養Ｔ細胞を、ＣＳＲ
単独、ｃａＴＣＲ－１－０単独、ＣＳＲと組み合わせたｃａＴＣＲ－１－０、又はＣＳＲ
と組み合わせたｃａＴＣＲ－１－ＴＭ５のいずれかで形質導入した。形質導入効率は、細
胞表面染色によって決定され、全てのｃａＴＣＲ－１ Ｔ細胞は、モックＴ細胞と混合す
ることにより、およそ４０％の受容体陽性で一致した。
インビトロでの殺傷
２８膜貫通及び細胞内シグナル伝達配列（配列番号５１）を含むキメラ共刺激受容体（Ｃ
ＳＲ；本明細書では「ＣＳＲ１」とも称される）並びにｃａＴＣＲ－１構築物（ｃａＴＣ
Ｒ－１－０又はｃａＴＣＲ－１－ＴＭ５）の両方を生成した。初代培養Ｔ細胞を、ＣＳＲ
単独、ｃａＴＣＲ－１－０単独、ＣＳＲと組み合わせたｃａＴＣＲ－１－０、又はＣＳＲ
と組み合わせたｃａＴＣＲ－１－ＴＭ５のいずれかで形質導入した。形質導入効率は、細
胞表面染色によって決定され、全てのｃａＴＣＲ－１ Ｔ細胞は、モックＴ細胞と混合す
ることにより、およそ４０％の受容体陽性で一致した。
インビトロでの殺傷
【0501】
ＣＤ８０／８６陰性ＮＡＬＭ６細胞（ＣＤ１９を発現する白血病細胞）を、２．５：１
．のエフェクター対標的比でのＴ細胞刺激の標的細胞として使用した。Ｃｙｔｏｘ ９６
非放射性細胞傷害性アッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を使用して、１６時間インキュベーショ
ン後に特異的Ｔ細胞溶解を測定した。
．のエフェクター対標的比でのＴ細胞刺激の標的細胞として使用した。Ｃｙｔｏｘ ９６
非放射性細胞傷害性アッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を使用して、１６時間インキュベーショ
ン後に特異的Ｔ細胞溶解を測定した。
【0502】
抗ＣＤ１９－ｃａＴＣＲ－１－０又は抗ＣＤ１９－ｃａＴＣＲ－１－ＴＭ５のいずれか
での抗ＣＤ１９－ＣＳＲの発現は、インビトロでＮＡＬＭ６腫瘍細胞を溶解することがで
きる完全機能的細胞傷害性Ｔ細胞を作製した（図２）。ＣａＴＣＲ－１－０のみを発現し
ているＴ細胞並びにｃａＴＣＲ－１（ｃａＴＣＲ－１－０又はｃａＴＣＲ－１－ＴＭ５）
及びＣＳＲの両方を発現しているＴ細胞は全て、ＮＡＬＭ６標的細胞のほぼ１００％を溶
解することができたため、２種類のＴ細胞間では、殺傷された標的細胞数の有意な差は観
察されなかった。
サイトカイン分泌
での抗ＣＤ１９－ＣＳＲの発現は、インビトロでＮＡＬＭ６腫瘍細胞を溶解することがで
きる完全機能的細胞傷害性Ｔ細胞を作製した（図２）。ＣａＴＣＲ－１－０のみを発現し
ているＴ細胞並びにｃａＴＣＲ－１（ｃａＴＣＲ－１－０又はｃａＴＣＲ－１－ＴＭ５）
及びＣＳＲの両方を発現しているＴ細胞は全て、ＮＡＬＭ６標的細胞のほぼ１００％を溶
解することができたため、２種類のＴ細胞間では、殺傷された標的細胞数の有意な差は観
察されなかった。
サイトカイン分泌
【0503】
インビトロ殺傷反応の上清に放出されたサイトカインの濃度を、Ｂｉｏ－ｐｌｅｘ Ｐ
ｒｏ Ｈｕｍａｎ Ｃｙｔｏｋｉｎｅ ８ ｐｌｅｘキット（ＢｉｏＲａｄ）を使用して
Ｂｉｏｐｌｅｘ２００（Ｌｕｍｉｎｅｘ）により測定した。ＣＳＲを発現するＴ細胞は、
ｃａＴＣＲ（ＣＳＲ陽性及びｃａＴＣＲ陽性Ｔ細胞）と組み合わせて、ＣＡ－ＴＣＲ－１
－０単独を発現するＴ細胞よりも、より多くの細胞傷害性のサイトカインを放出した（図
３）。
細胞内サイトカイン発現
ｒｏ Ｈｕｍａｎ Ｃｙｔｏｋｉｎｅ ８ ｐｌｅｘキット（ＢｉｏＲａｄ）を使用して
Ｂｉｏｐｌｅｘ２００（Ｌｕｍｉｎｅｘ）により測定した。ＣＳＲを発現するＴ細胞は、
ｃａＴＣＲ（ＣＳＲ陽性及びｃａＴＣＲ陽性Ｔ細胞）と組み合わせて、ＣＡ－ＴＣＲ－１
－０単独を発現するＴ細胞よりも、より多くの細胞傷害性のサイトカインを放出した（図
３）。
細胞内サイトカイン発現
【0504】
Ｔ細胞を、分泌阻害剤ブレフェルジンＡ（ＢＦＡ）の存在下で４時間、１：２のＥ：Ｔ
比で、標的細胞で刺激した。Ｔ細胞を透過処理し、サイトカイン特異的抗体を使用して、
腫瘍刺激に応答して発現したサイトカインを検出した。サイトカイン陽性細胞のパーセン
テージを、フローサイトメトリーを用いて決定した。ＣＳＲ陽性及びｃａＴＣＲ陽性Ｔ細
胞は、ｃａ－ＴＣＲ－１－０単独を発現するＴ細胞よりも、より多くの細胞内サイトカイ
ンを発現した（表５）。
比で、標的細胞で刺激した。Ｔ細胞を透過処理し、サイトカイン特異的抗体を使用して、
腫瘍刺激に応答して発現したサイトカインを検出した。サイトカイン陽性細胞のパーセン
テージを、フローサイトメトリーを用いて決定した。ＣＳＲ陽性及びｃａＴＣＲ陽性Ｔ細
胞は、ｃａ－ＴＣＲ－１－０単独を発現するＴ細胞よりも、より多くの細胞内サイトカイ
ンを発現した（表５）。
【表5】
【0505】
まとめると、結果は、ＣＳＲの添加が、ｃａＴＣＲ Ｔ細胞の感度及び応答性を増加さ
せることを示す。ＣＳＲ－ｃａＴＣＲの二重陽性Ｔ細胞で発現し放出されるサイトカイン
の量が増加すると、ｃａＴＣＲ－１及びＣＳＲの両方の共刺激がＴ細胞の細胞傷害性の可
能性を上昇させることを示す。
脱顆粒
せることを示す。ＣＳＲ－ｃａＴＣＲの二重陽性Ｔ細胞で発現し放出されるサイトカイン
の量が増加すると、ｃａＴＣＲ－１及びＣＳＲの両方の共刺激がＴ細胞の細胞傷害性の可
能性を上昇させることを示す。
脱顆粒
【0506】
Ｔ細胞が腫瘍細胞を溶解する一次機構は、標的細胞中に放出される細胞傷害性分子の分
泌顆粒を産生することによる。ＣＤ１０７ａは、脱顆粒活性のマーカーとして使用するこ
とができ、ＣＤ１０７ａの発現の増加は、細胞傷害性Ｔ細胞機能の増加と相関する。
泌顆粒を産生することによる。ＣＤ１０７ａは、脱顆粒活性のマーカーとして使用するこ
とができ、ＣＤ１０７ａの発現の増加は、細胞傷害性Ｔ細胞機能の増加と相関する。
【0507】
Ｔ細胞を蛍光コンジュゲート抗ＣＤ１０７ａと混合し、エンドサイトーシス阻害剤モネ
ンシンの存在下で４時間、１：２のＥ：Ｔ比で、標的細胞で刺激した。Ｔ細胞表面上で検
出されたＣＤ１０７ａの量は、抗原認識により誘導される細胞傷害性脱顆粒の程度の直接
的な尺度である。ｃａＴＣＲ Ｔ細胞上のＣＳＲの結合はＴ細胞脱顆粒を増加させ、ＣＳ
Ｒが治療用Ｔ細胞を意図された腫瘍細胞に向かってより反応性にすることを更に実証する
（図４）。
増殖
ンシンの存在下で４時間、１：２のＥ：Ｔ比で、標的細胞で刺激した。Ｔ細胞表面上で検
出されたＣＤ１０７ａの量は、抗原認識により誘導される細胞傷害性脱顆粒の程度の直接
的な尺度である。ｃａＴＣＲ Ｔ細胞上のＣＳＲの結合はＴ細胞脱顆粒を増加させ、ＣＳ
Ｒが治療用Ｔ細胞を意図された腫瘍細胞に向かってより反応性にすることを更に実証する
（図４）。
増殖
【0508】
遺伝的に改変されたＴ細胞の増殖及び持続は、がんを治療する際の養子Ｔ細胞移植療法
の成功に重要である。Ｔ細胞増殖及び持続性に対するＣＳＲの効果をアッセイするために
、本発明者らは、細胞内色素ＣＦＳＥでＴ細胞を標識し、腫瘍細胞で刺激したときにＴ細
胞が分裂するときの色素の希釈を観察した。また、示された日に残ったＣＦＳＥ陽性細胞
の数を計数することにより、Ｔ細胞の持続性を測定することも可能であった。
の成功に重要である。Ｔ細胞増殖及び持続性に対するＣＳＲの効果をアッセイするために
、本発明者らは、細胞内色素ＣＦＳＥでＴ細胞を標識し、腫瘍細胞で刺激したときにＴ細
胞が分裂するときの色素の希釈を観察した。また、示された日に残ったＣＦＳＥ陽性細胞
の数を計数することにより、Ｔ細胞の持続性を測定することも可能であった。
【0509】
それぞれのＴ細胞を一晩血清飢餓処理し、ＣｅｌｌＴｒａｃｅ ＣＦＳＥ（Ｔｈｅｒｍ
ｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｃ３４５５４）を用いてＣＦＳＥで標識した。１００，０００個のＴ
細胞を、２：１のＥ：Ｔ比でインキュベートし、示された日に、フローサイトメトリーを
使用してＴ細胞が分裂するときのＣＦＳＥ色素の連続希釈を観察した。Ｔ細胞の総数をＦ
ＡＣｓで計数した。
ｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｃ３４５５４）を用いてＣＦＳＥで標識した。１００，０００個のＴ
細胞を、２：１のＥ：Ｔ比でインキュベートし、示された日に、フローサイトメトリーを
使用してＴ細胞が分裂するときのＣＦＳＥ色素の連続希釈を観察した。Ｔ細胞の総数をＦ
ＡＣｓで計数した。
【0510】
ＣＦＳＥ希釈はＣＳＲ刺激により増加し、これらのＴ細胞はより高い増殖可能性を有し
たことを示した（図５）。重要なことに、細胞数の増加はまた、細胞がより良好に増殖す
るだけでなく、それらの持続性も維持されることを意味する（表６）。
たことを示した（図５）。重要なことに、細胞数の増加はまた、細胞がより良好に増殖す
るだけでなく、それらの持続性も維持されることを意味する（表６）。
【表6】
【0511】
結果は、本発明者らにより、標的リガンド及び標的抗原の両方を発現する腫瘍細胞でＣ
ＳＲ及びｃａＴＣＲの両方を同時に刺激することができ、ＣＳＲ及びｃａＴＣＲの共刺激
は、ｃａＴＣＲ Ｔ細胞の細胞傷害性、増殖可能性、及び持続性を強化したことを示す。
これらは、養子移植を用いてｃａＴＣＲに基づく治療の治療可能性を増加させる全ての特
性である。
実施例３．抗ＡＦＰ ｃａＴＣＲ－１及び抗ＧＰＣ３ ＣＳＲで形質導入されたＴ細胞
の構築及び特性評価
ＳＲ及びｃａＴＣＲの両方を同時に刺激することができ、ＣＳＲ及びｃａＴＣＲの共刺激
は、ｃａＴＣＲ Ｔ細胞の細胞傷害性、増殖可能性、及び持続性を強化したことを示す。
これらは、養子移植を用いてｃａＴＣＲに基づく治療の治療可能性を増加させる全ての特
性である。
実施例３．抗ＡＦＰ ｃａＴＣＲ－１及び抗ＧＰＣ３ ＣＳＲで形質導入されたＴ細胞
の構築及び特性評価
【0512】
抗ＡＦＰ結合部分をコードする核酸断片（配列番号６２及び６３）を使用して、ｃａＴ
ＣＲ－１構築物（ｃａＴＣＲ－１－０又はｃａＴＣＲ－１－ＴＭ５）を生成した。抗ＧＰ
Ｃ３結合部分をコードする核酸断片（配列番号６４及び６５）を使用して、ＣＤ２８膜貫
通及び細胞内シグナル伝達配列（配列番号５１）を含むＣＳＲ（すなわち、ＣＳＲ１）を
生成した。
インビトロでの殺傷
ＣＲ－１構築物（ｃａＴＣＲ－１－０又はｃａＴＣＲ－１－ＴＭ５）を生成した。抗ＧＰ
Ｃ３結合部分をコードする核酸断片（配列番号６４及び６５）を使用して、ＣＤ２８膜貫
通及び細胞内シグナル伝達配列（配列番号５１）を含むＣＳＲ（すなわち、ＣＳＲ１）を
生成した。
インビトロでの殺傷
【0513】
ＨＥＰＧ２細胞（ＡＦＰ及びＧＰＣ３を発現しているヒト肝癌細胞）並びにＨＥＰＧ２
－ＧＰＣ３．ＫＯ細胞（ＧＰＣ３遺伝子の標的化ノックアウトを有するＨＥＰＧ２細胞）
を、２．５：１のエフェクター対標的比でのＴ細胞刺激の標的細胞として使用した。Ｃｙ
ｔｏｘ ９６非放射性細胞傷害性アッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を使用して、１６時間イン
キュベーション後に特異的Ｔ細胞溶解を測定した。
－ＧＰＣ３．ＫＯ細胞（ＧＰＣ３遺伝子の標的化ノックアウトを有するＨＥＰＧ２細胞）
を、２．５：１のエフェクター対標的比でのＴ細胞刺激の標的細胞として使用した。Ｃｙ
ｔｏｘ ９６非放射性細胞傷害性アッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を使用して、１６時間イン
キュベーション後に特異的Ｔ細胞溶解を測定した。
【0514】
抗ＡＦＰ－ｃａＴＣＲ－１－０又は抗ＡＦＰ－ｃａＴＣＲ－１－ＴＭ５のいずれかでの
抗ＧＰＣ３－ＣＳＲの発現は、インビトロでＨＥＰＧ２細胞を溶解することができる完全
機能的細胞傷害性Ｔ細胞をもたらした（図６）。ｃａＴＣＲ－１－０のみを発現している
Ｔ細胞は、ｃａＴＣＲ－１（ｃａＴＣＲ－１－０又はｃａＴＣＲ－１－ＴＭ５）及びＣＳ
Ｒ（約５５％～約６５％）の両方を発現しているものよりもはるかに少ない（約１５％）
特異的殺傷を有した。対照的に、特異的殺傷は、ＨＥＰＧ２－ＧＰＣ３．ＫＯ標的細胞を
使用するとき、ｃａＴＣＲ及びＣＳＲの両方を発現するＴ細胞については、約１０％に減
少し（図６）、これは、ＣＳＲとその標的リガンドとの結合が、増加した細胞傷害性に関
与することを示している。
サイトカイン分泌
抗ＧＰＣ３－ＣＳＲの発現は、インビトロでＨＥＰＧ２細胞を溶解することができる完全
機能的細胞傷害性Ｔ細胞をもたらした（図６）。ｃａＴＣＲ－１－０のみを発現している
Ｔ細胞は、ｃａＴＣＲ－１（ｃａＴＣＲ－１－０又はｃａＴＣＲ－１－ＴＭ５）及びＣＳ
Ｒ（約５５％～約６５％）の両方を発現しているものよりもはるかに少ない（約１５％）
特異的殺傷を有した。対照的に、特異的殺傷は、ＨＥＰＧ２－ＧＰＣ３．ＫＯ標的細胞を
使用するとき、ｃａＴＣＲ及びＣＳＲの両方を発現するＴ細胞については、約１０％に減
少し（図６）、これは、ＣＳＲとその標的リガンドとの結合が、増加した細胞傷害性に関
与することを示している。
サイトカイン分泌
【0515】
インビトロ殺傷実験の上清に放出されたサイトカインの濃度を、Ｂｉｏ－ｐｌｅｘ Ｐ
ｒｏ Ｈｕｍａｎ Ｃｙｔｏｋｉｎｅ ８ ｐｌｅｘキット（ＢｉｏＲａｄ）を使用して
Ｂｉｏｐｌｅｘ２００（Ｌｕｍｉｎｅｘ）により測定した。ＣＳＲ陽性及びｃａＴＣＲ陽
性Ｔ細胞は、ｃａＴＣＲ標的抗原及びＣＳＲ標的リガンドの両方を発現するＨＥＰＧ２標
的細胞に対して、ＣＡ－ＴＣＲ－１－０単独を発現するＴ細胞よりも、より多くの細胞傷
害性のサイトカインを放出した（図７）。対照的に、ＣＡ－ＴＣＲ－１－０単独又はｃａ
ＴＣＲ及びＣＳＲの両方を発現しているＴ細胞の間では、ＣＳＲ標的リガンドを欠くＨＥ
ＰＧ２－ＧＰＣ３．ＫＯ標的細胞に対する差はほとんど又は全く差がなかった（図７）。
細胞内サイトカイン発現
ｒｏ Ｈｕｍａｎ Ｃｙｔｏｋｉｎｅ ８ ｐｌｅｘキット（ＢｉｏＲａｄ）を使用して
Ｂｉｏｐｌｅｘ２００（Ｌｕｍｉｎｅｘ）により測定した。ＣＳＲ陽性及びｃａＴＣＲ陽
性Ｔ細胞は、ｃａＴＣＲ標的抗原及びＣＳＲ標的リガンドの両方を発現するＨＥＰＧ２標
的細胞に対して、ＣＡ－ＴＣＲ－１－０単独を発現するＴ細胞よりも、より多くの細胞傷
害性のサイトカインを放出した（図７）。対照的に、ＣＡ－ＴＣＲ－１－０単独又はｃａ
ＴＣＲ及びＣＳＲの両方を発現しているＴ細胞の間では、ＣＳＲ標的リガンドを欠くＨＥ
ＰＧ２－ＧＰＣ３．ＫＯ標的細胞に対する差はほとんど又は全く差がなかった（図７）。
細胞内サイトカイン発現
【0516】
Ｔ細胞を、分泌阻害剤ブレフェルジンＡ（ＢＦＡ）の存在下で４時間、１：２のＥ：Ｔ
比で、標的細胞（ＨＥＰＧ２）で刺激した。Ｔ細胞を透過処理し、サイトカイン特異的抗
体を使用して、腫瘍刺激に応答して発現したサイトカインを検出した。サイトカイン陽性
細胞のパーセントを、フローサイトメトリーを用いて決定した。ＣＳＲ陽性及びｃａＴＣ
Ｒ陽性Ｔ細胞は、ｃａ－ＴＣＲ－１－０単独を発現するＴ細胞よりも、より多くの細胞内
サイトカインを発現した（表７）。
比で、標的細胞（ＨＥＰＧ２）で刺激した。Ｔ細胞を透過処理し、サイトカイン特異的抗
体を使用して、腫瘍刺激に応答して発現したサイトカインを検出した。サイトカイン陽性
細胞のパーセントを、フローサイトメトリーを用いて決定した。ＣＳＲ陽性及びｃａＴＣ
Ｒ陽性Ｔ細胞は、ｃａ－ＴＣＲ－１－０単独を発現するＴ細胞よりも、より多くの細胞内
サイトカインを発現した（表７）。
【表7】
【0517】
まとめると、結果は、ＣＳＲの添加が、異なるｃａＴＣＲ標的抗原及びＣＳＲ標的リガ
ンドを有するｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ Ｔ細胞の感度及び応答性を増加させることを示す。こ
れらのＣＳＲ－ｃａＴＣＲ個二重陽性Ｔ細胞で発現し放出されるサイトカインの量が増加
すると、ｃａＴＣＲ－１及びＣＳＲの両方の共刺激がＴ細胞の細胞傷害性の可能性を上昇
させる証拠を更に示す。
脱顆粒
ンドを有するｃａＴＣＲ＋ＣＳＲ Ｔ細胞の感度及び応答性を増加させることを示す。こ
れらのＣＳＲ－ｃａＴＣＲ個二重陽性Ｔ細胞で発現し放出されるサイトカインの量が増加
すると、ｃａＴＣＲ－１及びＣＳＲの両方の共刺激がＴ細胞の細胞傷害性の可能性を上昇
させる証拠を更に示す。
脱顆粒
【0518】
Ｔ細胞を蛍光コンジュゲート抗ＣＤ１０７ａと混合し、エンドサイトーシス阻害剤モネ
ンシンの存在下で４時間、１：２のＥ：Ｔ比で、ＨＥＰＧ２標的細胞で刺激した。ｃａＴ
ＣＲ Ｔ細胞上のＣＳＲの結合はＴ細胞脱顆粒を増加させ、ＣＳＲが治療用Ｔ細胞を意図
された腫瘍細胞に向かってより反応性にすることを更に実証する（図８）。
増殖
ンシンの存在下で４時間、１：２のＥ：Ｔ比で、ＨＥＰＧ２標的細胞で刺激した。ｃａＴ
ＣＲ Ｔ細胞上のＣＳＲの結合はＴ細胞脱顆粒を増加させ、ＣＳＲが治療用Ｔ細胞を意図
された腫瘍細胞に向かってより反応性にすることを更に実証する（図８）。
増殖
【0519】
Ｔ細胞を細胞内色素ＣＦＳＥで標識し、指示された日で、染料希釈及び残っているＣＦ
ＳＥ陽性細胞の数を測定した。
ＳＥ陽性細胞の数を測定した。
【0520】
それぞれのＴ細胞を一晩血清飢餓処理し、ＣｅｌｌＴｒａｃｅ ＣＦＳＥ（Ｔｈｅｒｍ
ｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｃ３４５５４）を用いてＣＦＳＥで標識した。１００，０００個のＴ
細胞を、２：１のＥ：Ｔ比でインキュベートし、示された日に、フローサイトメトリーを
使用してＴ細胞が分裂するときのＣＦＳＥ色素の連続希釈を観察した。Ｔ細胞の総数をＦ
ＡＣｓで計数した。
ｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｃ３４５５４）を用いてＣＦＳＥで標識した。１００，０００個のＴ
細胞を、２：１のＥ：Ｔ比でインキュベートし、示された日に、フローサイトメトリーを
使用してＴ細胞が分裂するときのＣＦＳＥ色素の連続希釈を観察した。Ｔ細胞の総数をＦ
ＡＣｓで計数した。
【0521】
ＣＦＳＥ希釈はＣＳＲ刺激により増加し、これらのＴ細胞はより高い増殖可能性を有し
たことを示した（図９）。重要なことに、細胞数の増加はまた、細胞がより良好に増殖す
るだけでなく、それらの持続性も維持されることを意味する（表８）。
たことを示した（図９）。重要なことに、細胞数の増加はまた、細胞がより良好に増殖す
るだけでなく、それらの持続性も維持されることを意味する（表８）。
【表8】
【0522】
結果は、本発明者らにより、ＣＳＲ及びｃａＴＣＲの両方をリガンド陽性腫瘍細胞で同
時に刺激することができ、ＣＳＲ及びｃａＴＣＲの共刺激は、ｃａＴＣＲ Ｔ細胞の細胞
傷害性、増殖可能性、及び持続性を強化したことを示す。これらは全て、養子移植を用い
てｃａＴＣＲに基づく治療の治療可能性を増加させる特性である。
実施例４抗ＣＤ１９ ｃａＴＣＲ－１及び抗ＣＤ２０ ＣＳＲで形質導入されたＴ細胞
の構築及び特性評価
時に刺激することができ、ＣＳＲ及びｃａＴＣＲの共刺激は、ｃａＴＣＲ Ｔ細胞の細胞
傷害性、増殖可能性、及び持続性を強化したことを示す。これらは全て、養子移植を用い
てｃａＴＣＲに基づく治療の治療可能性を増加させる特性である。
実施例４抗ＣＤ１９ ｃａＴＣＲ－１及び抗ＣＤ２０ ＣＳＲで形質導入されたＴ細胞
の構築及び特性評価
【0523】
抗ＣＤ２０結合部分（配列番号６０及び６１）をコードする核酸断片を使用して、抗Ｃ
Ｄ１９結合部分（配列番号５８及び５９）を使用して生成される抗ＣＤ１９ｃａＴＣＲ－
１－０又はｃａＴＣＲ－１－ＴＭ５を発現する同じベクター上に発現させた、ＣＤ２８膜
貫通及び細胞内シグナル伝達配列（配列番号５１）を含む抗ＣＤ２０ ＣＳＲ（すなわち
、「ＣＳＲ１」）を生成した。
インビトロでの殺傷
Ｄ１９結合部分（配列番号５８及び５９）を使用して生成される抗ＣＤ１９ｃａＴＣＲ－
１－０又はｃａＴＣＲ－１－ＴＭ５を発現する同じベクター上に発現させた、ＣＤ２８膜
貫通及び細胞内シグナル伝達配列（配列番号５１）を含む抗ＣＤ２０ ＣＳＲ（すなわち
、「ＣＳＲ１」）を生成した。
インビトロでの殺傷
【0524】
Ｒａｊｉ、ＢＶ１７３、ＮＡＬＭ６、及びＪｅｋｏ－１細胞（ＣＤ１９及びＣＤ２０を
発現する細胞株）を、２．５：１．のエフェクター対標的比でＴ細胞殺傷のための標的細
胞として使用した。Ｃｙｔｏｘ ９６非放射性細胞傷害性アッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を
使用して、１６時間インキュベーション後に特異的Ｔ細胞溶解を測定した。
発現する細胞株）を、２．５：１．のエフェクター対標的比でＴ細胞殺傷のための標的細
胞として使用した。Ｃｙｔｏｘ ９６非放射性細胞傷害性アッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を
使用して、１６時間インキュベーション後に特異的Ｔ細胞溶解を測定した。
【0525】
抗ＣＤ１９－ｃａＴＣＲ－１－０又は抗ＣＤ１９－ｃａＴＣＲ－１－ＴＭ５のいずれか
での抗ＣＤ２０－ＣＳＲの発現は、インビトロで様々なＣＤ１９陽性細胞、ＣＤ２０陽性
腫瘍細胞を溶解することができる完全機能的細胞傷害性Ｔ細胞を作製した（図１０）。
サイトカイン分泌
での抗ＣＤ２０－ＣＳＲの発現は、インビトロで様々なＣＤ１９陽性細胞、ＣＤ２０陽性
腫瘍細胞を溶解することができる完全機能的細胞傷害性Ｔ細胞を作製した（図１０）。
サイトカイン分泌
【0526】
Ｒａｊｉインビトロ殺傷実験の上清に放出されたサイトカインの濃度を、Ｂｉｏ－ｐｌ
ｅｘ Ｐｒｏ Ｈｕｍａｎ Ｃｙｔｏｋｉｎｅ ８ ｐｌｅｘキット（ＢｉｏＲａｄ）を
使用してＢｉｏｐｌｅｘ２００（Ｌｕｍｉｎｅｘ）により測定した。ＣＳＲ陽性及びｃａ
ＴＣＲ陽性Ｔ細胞は、ＣＡ－ＴＣＲ－１－０単独を発現するＴ細胞よりも、より多くのＧ
Ｍ－ＣＳＦ、ＩＦＮγ、及びＴＮＦαを放出した（図１１）。
脱顆粒
ｅｘ Ｐｒｏ Ｈｕｍａｎ Ｃｙｔｏｋｉｎｅ ８ ｐｌｅｘキット（ＢｉｏＲａｄ）を
使用してＢｉｏｐｌｅｘ２００（Ｌｕｍｉｎｅｘ）により測定した。ＣＳＲ陽性及びｃａ
ＴＣＲ陽性Ｔ細胞は、ＣＡ－ＴＣＲ－１－０単独を発現するＴ細胞よりも、より多くのＧ
Ｍ－ＣＳＦ、ＩＦＮγ、及びＴＮＦαを放出した（図１１）。
脱顆粒
【0527】
Ｔ細胞を蛍光コンジュゲート抗ＣＤ１０７ａと混合し、エンドサイトーシス阻害剤モネ
ンシンの存在下で４時間、１：２のＥ：Ｔ比で、Ｒａｊｉ標的細胞で刺激した。ｃａＴＣ
Ｒ Ｔ細胞上のＣＳＲの結合はＴ細胞脱顆粒を増加させ、ＣＳＲが治療用Ｔ細胞を意図さ
れた腫瘍細胞に向かってより反応性にすることを更に実証する（図１２）。
ンシンの存在下で４時間、１：２のＥ：Ｔ比で、Ｒａｊｉ標的細胞で刺激した。ｃａＴＣ
Ｒ Ｔ細胞上のＣＳＲの結合はＴ細胞脱顆粒を増加させ、ＣＳＲが治療用Ｔ細胞を意図さ
れた腫瘍細胞に向かってより反応性にすることを更に実証する（図１２）。
【0528】
実施例２～４は、ＣＳＲが、様々な抗原標的部分と組み合わせて使用されて、広範囲の
疾患細胞に対してｃａＴＣＲ発現Ｔ細胞の治療可能性を増加させることができるモジュー
ル式分子であることを示す。
実施例５：抗ＣＤ１９ ｃａＴＣＲ－１及び抗ＣＤ１９キメラ刺激受容体変異型で形質
導入されたＴ細胞の構築及び特性評価
疾患細胞に対してｃａＴＣＲ発現Ｔ細胞の治療可能性を増加させることができるモジュー
ル式分子であることを示す。
実施例５：抗ＣＤ１９ ｃａＴＣＲ－１及び抗ＣＤ１９キメラ刺激受容体変異型で形質
導入されたＴ細胞の構築及び特性評価
【0529】
抗ＣＤ１９結合部分をコードする核酸断片（配列番号５８及び５９）を使用して、キメ
ラ共刺激受容体（ＣＳＲ）及びｃａＴＣＲ－１－０構築物（この実施例では、「ｃａＴＣ
Ｒ－１」と称される）の両方を生成した。抗ＣＤ１９結合部分をＣＳＲ配列に融合させる
ことによって、異なるＣＳＲを調製した。ＣＳＲ１は、ＣＤ２８膜貫通及び細胞内シグナ
ル伝達配列（配列番号９０）を含む。ＣＳＲ２は、ＣＤ８膜貫通配列及び４－１ＢＢ細胞
内（instracellular）シグナル伝達配列（配列番号９１）を含む。ＣＳＲ３は、４－１Ｂ
Ｂ膜貫通及び細胞内シグナル伝達配列（配列番号９２）を含む。ＣＳＲ４は、ＣＤ８α膜
貫通配列及びＣＤ２７細胞内シグナル伝達配列（配列番号９３）を含む。ＣＳＲ５は、Ｃ
Ｄ２７膜貫通及び細胞内シグナル伝達配列（配列番号９４）を含む。ＣＳＲ６は、ＣＤ８
膜貫通配列及びＣＤ３０細胞内シグナル伝達配列（配列番号９５）を含む。ＣＳＲ７は、
ＣＤ３０膜貫通及び細胞内シグナル伝達配列（配列番号９６）を含む。ＣＳＲ８は、ＣＤ
８膜貫通配列及びＯＸ４０細胞内シグナル伝達配列（配列番号９７）を含む。ＣＳＲ９は
、ＯＸ４０膜貫通及び細胞内シグナル伝達配列（配列番号９８）を含む。
ラ共刺激受容体（ＣＳＲ）及びｃａＴＣＲ－１－０構築物（この実施例では、「ｃａＴＣ
Ｒ－１」と称される）の両方を生成した。抗ＣＤ１９結合部分をＣＳＲ配列に融合させる
ことによって、異なるＣＳＲを調製した。ＣＳＲ１は、ＣＤ２８膜貫通及び細胞内シグナ
ル伝達配列（配列番号９０）を含む。ＣＳＲ２は、ＣＤ８膜貫通配列及び４－１ＢＢ細胞
内（instracellular）シグナル伝達配列（配列番号９１）を含む。ＣＳＲ３は、４－１Ｂ
Ｂ膜貫通及び細胞内シグナル伝達配列（配列番号９２）を含む。ＣＳＲ４は、ＣＤ８α膜
貫通配列及びＣＤ２７細胞内シグナル伝達配列（配列番号９３）を含む。ＣＳＲ５は、Ｃ
Ｄ２７膜貫通及び細胞内シグナル伝達配列（配列番号９４）を含む。ＣＳＲ６は、ＣＤ８
膜貫通配列及びＣＤ３０細胞内シグナル伝達配列（配列番号９５）を含む。ＣＳＲ７は、
ＣＤ３０膜貫通及び細胞内シグナル伝達配列（配列番号９６）を含む。ＣＳＲ８は、ＣＤ
８膜貫通配列及びＯＸ４０細胞内シグナル伝達配列（配列番号９７）を含む。ＣＳＲ９は
、ＯＸ４０膜貫通及び細胞内シグナル伝達配列（配列番号９８）を含む。
【0530】
抗ＣＤ１９ ＣＳＲ単独で、又は抗ＣＤ１９ ＣＳＲと組み合わせた抗ＣＤ１９ ｃａ
ＴＣＲ－１で、初代培養Ｔ細胞を形質導入した。形質導入効率は、細胞表面染色によって
決定され、全てのｃａＴＣＲ形質導入Ｔ細胞は、モックＴ細胞と混合することにより、お
よそ４０％の受容体陽性で一致した。
抗ＣＤ１９ ＣＳＲ単独を発現するＴ細胞
インビトロでの殺傷
ＴＣＲ－１で、初代培養Ｔ細胞を形質導入した。形質導入効率は、細胞表面染色によって
決定され、全てのｃａＴＣＲ形質導入Ｔ細胞は、モックＴ細胞と混合することにより、お
よそ４０％の受容体陽性で一致した。
抗ＣＤ１９ ＣＳＲ単独を発現するＴ細胞
インビトロでの殺傷
【0531】
Ｒａｊｉ又はＮＡＬＭ６細胞を、２．５：１．のエフェクター対標的比でのＴ細胞刺激
の標的細胞として使用した。Ｃｙｔｏｘ ９６非放射性細胞傷害性アッセイ（Ｐｒｏｍｅ
ｇａ）を使用して、１６時間インキュベーション後に特異的Ｔ細胞溶解を測定した。抗Ｃ
Ｄ１９ ＣＳＲ－６、ＣＳＲ－７、ＣＳＲ－８、又はＣＳＲ－９単独を発現しているＴ細
胞は、形質導入されていないモックＴ細胞と比較して、多くの数の殺傷された標的細胞を
もたらさなかった（データ示さず）。
サイトカイン分泌
の標的細胞として使用した。Ｃｙｔｏｘ ９６非放射性細胞傷害性アッセイ（Ｐｒｏｍｅ
ｇａ）を使用して、１６時間インキュベーション後に特異的Ｔ細胞溶解を測定した。抗Ｃ
Ｄ１９ ＣＳＲ－６、ＣＳＲ－７、ＣＳＲ－８、又はＣＳＲ－９単独を発現しているＴ細
胞は、形質導入されていないモックＴ細胞と比較して、多くの数の殺傷された標的細胞を
もたらさなかった（データ示さず）。
サイトカイン分泌
【0532】
インビトロ殺傷反応の上清に放出されたサイトカインの濃度を、Ｂｉｏ－ｐｌｅｘ Ｐ
ｒｏ Ｈｕｍａｎ Ｃｙｔｏｋｉｎｅ ８ ｐｌｅｘキット（ＢｉｏＲａｄ）を使用して
Ｂｉｏｐｌｅｘ２００（Ｌｕｍｉｎｅｘ）により測定した。抗ＣＤ１９ ＣＳＲ－６、Ｃ
ＳＲ－７、ＣＳＲ－８、又はＣＳＲ－９単独を発現するＴ細胞は、Ｒａｊｉ又はＮＡＬＭ
６と共にインキュベートされるときに有意な量のＩＦＮγを放出しなかった（データ示さ
ず）。
抗ＣＤ１９ ｃａＴＣＲ－１及び抗ＣＤ１９ ＣＳＲを発現するＴ細胞
ｒｏ Ｈｕｍａｎ Ｃｙｔｏｋｉｎｅ ８ ｐｌｅｘキット（ＢｉｏＲａｄ）を使用して
Ｂｉｏｐｌｅｘ２００（Ｌｕｍｉｎｅｘ）により測定した。抗ＣＤ１９ ＣＳＲ－６、Ｃ
ＳＲ－７、ＣＳＲ－８、又はＣＳＲ－９単独を発現するＴ細胞は、Ｒａｊｉ又はＮＡＬＭ
６と共にインキュベートされるときに有意な量のＩＦＮγを放出しなかった（データ示さ
ず）。
抗ＣＤ１９ ｃａＴＣＲ－１及び抗ＣＤ１９ ＣＳＲを発現するＴ細胞
【0533】
２つの異なる実験バッチでは、抗ＣＤ１９ ｃａＴＣＲ－１及び抗ＣＤ１９ ＣＳＲの
両方を発現するそれぞれのＴ細胞を一晩血清飢餓処理し、ＣｅｌｌＴｒａｃｅ ＣＦＳＥ
（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｃ３４５５４）を用いてＣＦＳＥで標識した。Ｔ細胞を
、２：１のＥ：Ｔ比でＮＡＬＭ６とインキュベートし、示された日に、フローサイトメト
リーを使用してＴ細胞が分裂するときのＣＦＳＥ色素の連続希釈を観察した。Ｔ細胞の総
数をＦＡＣｓで計数した。これらの実験を、第２のドナーから得られた初代培養Ｔ細胞を
使用して繰り返した。同様の結果が観察された（データ示さず）。
両方を発現するそれぞれのＴ細胞を一晩血清飢餓処理し、ＣｅｌｌＴｒａｃｅ ＣＦＳＥ
（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｃ３４５５４）を用いてＣＦＳＥで標識した。Ｔ細胞を
、２：１のＥ：Ｔ比でＮＡＬＭ６とインキュベートし、示された日に、フローサイトメト
リーを使用してＴ細胞が分裂するときのＣＦＳＥ色素の連続希釈を観察した。Ｔ細胞の総
数をＦＡＣｓで計数した。これらの実験を、第２のドナーから得られた初代培養Ｔ細胞を
使用して繰り返した。同様の結果が観察された（データ示さず）。
【0534】
抗ＣＤ１９ ｃａＴＣＲ－１及び抗ＣＤ１９ ＣＳＲの両方を発現している全てのＴ細
胞において、ＣＦＳＥ希釈を観察し、これらのＴ細胞の高い増殖可能性を示した（図１４
－１５）。加えて、抗ＣＤ１９ ｃａＴＣＲ－１及び抗ＣＤ１９ ＣＳＲの両方を発現し
ているＴ細胞は、１０日間にわたって有意な持続性を示した（表９）。対照実験では、抗
ＣＤ１９ ＣＳＲ－１から抗ＣＤ１９ ＣＳＲ－５ｍまでのいずれか１つを単独で発現し
ているＴ細胞は、経時的に、増殖可能性又は持続性の増加を示さなかった（データ示さず
）。
実施例６：抗ＣＤ１９ ｃａＴＣＲ－１及び抗ＣＤ１９ ＣＳＲで形質導入されたＴ細
胞のインビボ有効性試験
胞において、ＣＦＳＥ希釈を観察し、これらのＴ細胞の高い増殖可能性を示した（図１４
－１５）。加えて、抗ＣＤ１９ ｃａＴＣＲ－１及び抗ＣＤ１９ ＣＳＲの両方を発現し
ているＴ細胞は、１０日間にわたって有意な持続性を示した（表９）。対照実験では、抗
ＣＤ１９ ＣＳＲ－１から抗ＣＤ１９ ＣＳＲ－５ｍまでのいずれか１つを単独で発現し
ているＴ細胞は、経時的に、増殖可能性又は持続性の増加を示さなかった（データ示さず
）。
【表9】
胞のインビボ有効性試験
【0535】
抗ＣＤ１９ ｃａＴＣＲ－１及び抗ＣＤ１９ ＣＳＲ－１の両方を発現しているＴ細胞
のインビボ抗腫瘍活性を、ヒトＣＤ１９＋ＮＡＬＭ－６プレＢ急性リンパ芽球性白血病（
ＡＬＬ）モデルで試験した。Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ発現ＮＡＬＭ－６細胞を、ＮＯＤ Ｓ
ＣＩＤガンマ（ＮＳＧ）免疫不全マウスに静脈内（ｉ．ｖ．）移植し、腫瘍由来生物発光
を測定することにより、腫瘍量を評価した。腫瘍移植から６日後、マウスを、治療群への
全生物発光流量に基づいて無作為化した：（１）５×１０６個の形質導入されていないド
ナーに適合した（Ｍｏｃｋ）Ｔ細胞のｉ．ｖ．注射、（２）抗ＣＤ１９ ｃａＴＣＲ－１
のみを発現する２×１０６個のＴ細胞（「ｃａＴＣＲ－１ Ｔ細胞」）のｉ．ｖ．注射、
及び（３）抗ＣＤ１９ ｃａＴＣＲ－１及び抗ＣＤ１９ ＣＳＲ－１の両方を発現する２
×１０６個のＴ細胞（「ｃａＴＣＲ－１ ＣＳＲ－１ Ｔ細胞」）のｉ．ｖ．注射、（ｎ
＝６マウス／群）。マウスにおけるＴ細胞注入から得られる健康効果を、それらの全身外
観、体重、及び他の有害応答の臨床的徴候（低体温、努力性呼吸、及び後肢麻痺／衰弱を
含む）をモニタリングすることによって評価した。
のインビボ抗腫瘍活性を、ヒトＣＤ１９＋ＮＡＬＭ－６プレＢ急性リンパ芽球性白血病（
ＡＬＬ）モデルで試験した。Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ発現ＮＡＬＭ－６細胞を、ＮＯＤ Ｓ
ＣＩＤガンマ（ＮＳＧ）免疫不全マウスに静脈内（ｉ．ｖ．）移植し、腫瘍由来生物発光
を測定することにより、腫瘍量を評価した。腫瘍移植から６日後、マウスを、治療群への
全生物発光流量に基づいて無作為化した：（１）５×１０６個の形質導入されていないド
ナーに適合した（Ｍｏｃｋ）Ｔ細胞のｉ．ｖ．注射、（２）抗ＣＤ１９ ｃａＴＣＲ－１
のみを発現する２×１０６個のＴ細胞（「ｃａＴＣＲ－１ Ｔ細胞」）のｉ．ｖ．注射、
及び（３）抗ＣＤ１９ ｃａＴＣＲ－１及び抗ＣＤ１９ ＣＳＲ－１の両方を発現する２
×１０６個のＴ細胞（「ｃａＴＣＲ－１ ＣＳＲ－１ Ｔ細胞」）のｉ．ｖ．注射、（ｎ
＝６マウス／群）。マウスにおけるＴ細胞注入から得られる健康効果を、それらの全身外
観、体重、及び他の有害応答の臨床的徴候（低体温、努力性呼吸、及び後肢麻痺／衰弱を
含む）をモニタリングすることによって評価した。
【0536】
図１６に示すように、ｃａＴＣＲ－１ Ｔ細胞及びｃａＴＣＲ－１ ＣＳＲ－１ Ｔ細
胞処理の両方が腫瘍増殖阻害をもたらす一方、ｃａＴＣＲ－１ ＣＳＲ－１ Ｔ細胞は、
ｃａＴＣＲ－１ Ｔ細胞と比較して抗腫瘍活性の増強を示した。全てのｃａＴＣＲ－１
Ｔ細胞処理及びｃａＴＣＲ－１ ＣＳＲ－１ Ｔ細胞処理マウスは、試験期間にわたる正
常な歩行、姿勢、及び活動／応答性を示した。加えて、ｃａＴＣＲ－１ Ｔ細胞処理及び
ｃａＴＣＲ－１ ＣＳＲ－１ Ｔ細胞処理マウスは、試験中に体重を減少させなかった。
全体として、処理されたマウスにおける観察可能な異常パラメーターの欠如は、ｃａＴＣ
Ｒ－１ ＣＳＲ－１ Ｔ細胞療法の安全性を示す。
胞処理の両方が腫瘍増殖阻害をもたらす一方、ｃａＴＣＲ－１ ＣＳＲ－１ Ｔ細胞は、
ｃａＴＣＲ－１ Ｔ細胞と比較して抗腫瘍活性の増強を示した。全てのｃａＴＣＲ－１
Ｔ細胞処理及びｃａＴＣＲ－１ ＣＳＲ－１ Ｔ細胞処理マウスは、試験期間にわたる正
常な歩行、姿勢、及び活動／応答性を示した。加えて、ｃａＴＣＲ－１ Ｔ細胞処理及び
ｃａＴＣＲ－１ ＣＳＲ－１ Ｔ細胞処理マウスは、試験中に体重を減少させなかった。
全体として、処理されたマウスにおける観察可能な異常パラメーターの欠如は、ｃａＴＣ
Ｒ－１ ＣＳＲ－１ Ｔ細胞療法の安全性を示す。
【0537】
インビボでのサイトカイン放出レベルを決定するために、臨床のサイトカイン放出症候
群に関連するものを含む主要なサイトカインを、ＮＡＬＭ－６腫瘍担持マウスに抗ＣＤ１
９ ＣＡＲ－Ｔ細胞又はｃａＴＣＲ－１ ＣＳＲ－１ Ｔ細胞と共に投与した２４時間後
に分析した。ＢｉｏＲａｄ Ｂｉｏ－Ｐｌｅｘキットを使用して、Ｌｕｍｉｎｅｘ Ｍａ
ｇｐｉｘ技術によりサイトカインレベルを定量した。図１７のｃａＴＣＲ－１に示すよう
に、ＣＳＲ－１ Ｔ細胞処理マウスは、ＣＡＲ－Ｔ処理マウスよりも顕著に低いサイトカ
イン放出レベルを有した。
実施例７：抗ＡＦＰ ｃａＴＣＲ－１及び抗ＧＰＣ３ ＣＳＲで形質導入されたＴ細胞
のインビボ有効性試験
群に関連するものを含む主要なサイトカインを、ＮＡＬＭ－６腫瘍担持マウスに抗ＣＤ１
９ ＣＡＲ－Ｔ細胞又はｃａＴＣＲ－１ ＣＳＲ－１ Ｔ細胞と共に投与した２４時間後
に分析した。ＢｉｏＲａｄ Ｂｉｏ－Ｐｌｅｘキットを使用して、Ｌｕｍｉｎｅｘ Ｍａ
ｇｐｉｘ技術によりサイトカインレベルを定量した。図１７のｃａＴＣＲ－１に示すよう
に、ＣＳＲ－１ Ｔ細胞処理マウスは、ＣＡＲ－Ｔ処理マウスよりも顕著に低いサイトカ
イン放出レベルを有した。
実施例７：抗ＡＦＰ ｃａＴＣＲ－１及び抗ＧＰＣ３ ＣＳＲで形質導入されたＴ細胞
のインビボ有効性試験
【0538】
抗ＡＦＰ ｃａＴＣＲ－１及び抗ＧＰＣ３ ＣＳＲ－１（構築物の情報について、実施
例３を参照されたい）の両方を発現するＴ細胞のインビボ抗腫瘍活性を、確立されたヒト
ＡＦＰ＋／ＨＬＡ－Ａ２＋ Ｈｅｐ Ｇ２肝癌異種移植モデルにおいて試験した。Ｈｅｐ
Ｇ２細胞を、ＳＣＩＤ－Ｂｅｉｇｅマウスの右脇腹に皮下（ｓ．ｃ．）移植した。腫瘍
が約１００ｍｍ３に達したとき、マウスは、（１）５×１０６個の形質導入していないド
ナー一致（モック）Ｔ細胞、（２）同じ抗ＡＦＰ結合部分を含む抗ＡＦＰ ＣＡＲを発現
する２×１０６個のＴ細胞（配列番号６２及び６３）、又は（３）抗ＡＦＰ ｃａＴＣＲ
－１及び抗ＧＰＣ３ ＣＳＲ－１（ｎ＝６マウス／群）の両方を発現する２×１０６個の
Ｔ細胞のいずれかを腫瘍内注射した（ｎ＝６マウス／群）。マウスにおけるＴ細胞注入か
ら得られる健康効果を、それらの全身外観、体重、及び他の有害応答の臨床的徴候（低体
温、努力性呼吸、及び後肢麻痺／衰弱を含む）をモニタリングすることによって評価した
。
例３を参照されたい）の両方を発現するＴ細胞のインビボ抗腫瘍活性を、確立されたヒト
ＡＦＰ＋／ＨＬＡ－Ａ２＋ Ｈｅｐ Ｇ２肝癌異種移植モデルにおいて試験した。Ｈｅｐ
Ｇ２細胞を、ＳＣＩＤ－Ｂｅｉｇｅマウスの右脇腹に皮下（ｓ．ｃ．）移植した。腫瘍
が約１００ｍｍ３に達したとき、マウスは、（１）５×１０６個の形質導入していないド
ナー一致（モック）Ｔ細胞、（２）同じ抗ＡＦＰ結合部分を含む抗ＡＦＰ ＣＡＲを発現
する２×１０６個のＴ細胞（配列番号６２及び６３）、又は（３）抗ＡＦＰ ｃａＴＣＲ
－１及び抗ＧＰＣ３ ＣＳＲ－１（ｎ＝６マウス／群）の両方を発現する２×１０６個の
Ｔ細胞のいずれかを腫瘍内注射した（ｎ＝６マウス／群）。マウスにおけるＴ細胞注入か
ら得られる健康効果を、それらの全身外観、体重、及び他の有害応答の臨床的徴候（低体
温、努力性呼吸、及び後肢麻痺／衰弱を含む）をモニタリングすることによって評価した
。
【0539】
図１８に示すように、抗ＡＦＰ ＣＡＲ Ｔ細胞処理及び抗ＡＦＰ ｃａＴＣＲ－１／
抗ＧＰＣ３ ＣＳＲ－１ Ｔ細胞処理の両方は、顕著かつ有意な（＊＊＊ｐ＜０．０００
１；Ｄｕｎｎｅｔｔの多重比較試験）腫瘍増殖阻害をもたらした。全ての抗ＡＦＰ ＣＡ
Ｒ－Ｔ処理及び抗ＡＦＰ ｃａＴＣＲ－１／抗ＧＰＣ３ ＣＳＲ－１ Ｔ細胞処理マウス
は、試験期間にわたる正常な歩行、姿勢、及び活動／応答性を示した。加えて、抗ＡＦＰ
ＣＡＲ－Ｔ処理及び抗ＡＦＰ ｃａＴＣＲ－１／抗ＧＰＣ３ ＣＳＲ－１ Ｔ細胞処理
マウスは、試験中に体重を減少させなかった。全体として、処理されたマウスにおける観
察可能な異常パラメーターの欠如は、抗ＡＦＰ ｃａＴＣＲ－１／抗ＧＰＣ３ ＣＳＲ－
１ Ｔ細胞療法の安全性を示す。
抗ＧＰＣ３ ＣＳＲ－１ Ｔ細胞処理の両方は、顕著かつ有意な（＊＊＊ｐ＜０．０００
１；Ｄｕｎｎｅｔｔの多重比較試験）腫瘍増殖阻害をもたらした。全ての抗ＡＦＰ ＣＡ
Ｒ－Ｔ処理及び抗ＡＦＰ ｃａＴＣＲ－１／抗ＧＰＣ３ ＣＳＲ－１ Ｔ細胞処理マウス
は、試験期間にわたる正常な歩行、姿勢、及び活動／応答性を示した。加えて、抗ＡＦＰ
ＣＡＲ－Ｔ処理及び抗ＡＦＰ ｃａＴＣＲ－１／抗ＧＰＣ３ ＣＳＲ－１ Ｔ細胞処理
マウスは、試験中に体重を減少させなかった。全体として、処理されたマウスにおける観
察可能な異常パラメーターの欠如は、抗ＡＦＰ ｃａＴＣＲ－１／抗ＧＰＣ３ ＣＳＲ－
１ Ｔ細胞療法の安全性を示す。
【表10-1】
【表10-2】
【表10-3】
【表10-4】
【表10-5】
【表10-6】
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10】
【図11】
【図12】
【図13A】
【図13B】
【図13C】
【図13D】
【図13E】
【図14】
【図15】
【図16】
【図17】
【図18】
【配列表】
【手続補正書】
【提出日】2024-01-19
【手続補正1】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項1】
免疫細胞であって、
ａ）キメラ抗体－Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）構築物（ｃａＴＣＲ）であって、
ｉ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュール、並びに
ｉｉ）第１のＴＣＲ膜貫通ドメイン（ＴＣＲ－ＴＭ）を含む第１のＴＣＲドメイン（ＴＣＲＤ）、及び第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを含むＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）を含み、
前記ＴＣＲＭが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を促進する、キメラ抗体－Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）構築物（ｃａＴＣＲ）と、
ｂ）キメラシグナル伝達受容体（ＣＳＲ）であって、
ｉ）標的リガンドに結合又は相互作用することができるリガンド結合モジュール、
ｉｉ）膜貫通モジュール、及び
ｉｉｉ）前記免疫細胞に共刺激シグナルを提供することができる共刺激免疫細胞シグナル伝達モジュールを含み、
前記リガンド結合モジュール及び前記共刺激免疫細胞シグナル伝達モジュールが同一の分子に由来せず、前記ＣＳＲが機能的な一次免疫細胞シグナル伝達ドメインを欠く、キメラシグナル伝達受容体（ＣＳＲ）と、
を含む、免疫細胞。
ａ）キメラ抗体－Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）構築物（ｃａＴＣＲ）であって、
ｉ）標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュール、並びに
ｉｉ）第１のＴＣＲ膜貫通ドメイン（ＴＣＲ－ＴＭ）を含む第１のＴＣＲドメイン（ＴＣＲＤ）、及び第２のＴＣＲ－ＴＭを含む第２のＴＣＲＤを含むＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）を含み、
前記ＴＣＲＭが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達分子の動員を促進する、キメラ抗体－Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）構築物（ｃａＴＣＲ）と、
ｂ）キメラシグナル伝達受容体（ＣＳＲ）であって、
ｉ）標的リガンドに結合又は相互作用することができるリガンド結合モジュール、
ｉｉ）膜貫通モジュール、及び
ｉｉｉ）前記免疫細胞に共刺激シグナルを提供することができる共刺激免疫細胞シグナル伝達モジュールを含み、
前記リガンド結合モジュール及び前記共刺激免疫細胞シグナル伝達モジュールが同一の分子に由来せず、前記ＣＳＲが機能的な一次免疫細胞シグナル伝達ドメインを欠く、キメラシグナル伝達受容体（ＣＳＲ）と、
を含む、免疫細胞。
【外国語明細書】