特開 2024-39219 １２Ｒ－リポキシゲナーゼ産生促進剤

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公開特許公報(A)

(11)【公開番号】P2024039219

(43)【公開日】2024-03-22

(54)【発明の名称】１２Ｒ－リポキシゲナーゼ産生促進剤

(51)【国際特許分類】

   A61K 8/9789 20170101AFI20240314BHJP

   A61Q 19/00 20060101ALI20240314BHJP

   A61K 36/30 20060101ALI20240314BHJP

   A61P 17/00 20060101ALI20240314BHJP

【ＦＩ】

A61K8/9789

A61Q19/00

A61K36/30

A61P17/00 ZNA

【審査請求】未請求

【請求項の数】3

【出願形態】ＯＬ

(21)【出願番号】P 2022143604

(22)【出願日】2022-09-09

(71)【出願人】

【識別番号】592262543

【氏名又は名称】日本メナード化粧品株式会社

(72)【発明者】

【氏名】山口 弘毅

(72)【発明者】

【氏名】森瀬 綾子

【テーマコード（参考）】

4C083

4C088

【Ｆターム（参考）】

4C083AA111

4C083AA112

4C083AA122

4C083AB032

4C083AB312

4C083AB352

4C083AC022

4C083AC072

4C083AC102

4C083AC122

4C083AC182

4C083AC302

4C083AC422

4C083AC432

4C083AC442

4C083AC482

4C083AC532

4C083AC792

4C083AD092

4C083AD152

4C083AD352

4C083CC04

4C083CC05

4C083CC25

4C083DD41

4C088AB12

4C088AC01

4C088AC03

4C088AC04

4C088AC05

4C088AC06

4C088AC11

4C088BA08

4C088CA03

4C088NA14

4C088ZA89

(57)【要約】

【課題】くすみのない明るい肌にする１２Ｒ－リポキシゲナーゼ産生促進剤を提供する。
【解決手段】角質層中でω－Ｏ－アシルセラミド中のリノール酸残基を過酸化脂質化する１２Ｒ－リポキシゲナーゼの産生を促進させることで、角質細胞の脂質膜であるコルネオサイトリピッドエンベロープとコーニファイドエンベロープ構造の形成を促進して、微絨毛様突起の形成を抑制し、角質細胞の機能を正常化することでくすみのない明るい肌にするコンフリー抽出物を含有することを特徴とする、１２Ｒ－リポキシゲナーゼ産生促進剤、角質細胞のコルネオサイトリピッドエンベロープ形成促進剤及び角質細胞の微絨毛様突起形成抑制剤を提供する。本願発明は、医薬品、医薬部外品、化粧品、食品等へ配合することが可能である。
【選択図】なし

【特許請求の範囲】

【請求項1】

コンフリー抽出物を含有することを特徴とする１２Ｒ－リポキシゲナーゼ産生促進剤。

【請求項2】

コンフリー抽出物を含有することを特徴とする角質細胞のコルネオサイトリピッドエンベロープ形成促進剤。

【請求項3】

コンフリー抽出物を含有することを特徴とする角質細胞の微絨毛様突起形成抑制剤。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本願発明は、コンフリー抽出物を含有することを特徴とする１２Ｒ－リポキシゲナーゼ産生促進剤に関し又１２Ｒ－リポキシゲナーゼ産生促進剤が関与する症状や疾患に対する予防、改善又は治療用薬剤組成物に関する。

【背景技術】

【0002】

肌表面を覆う角質層の状態は、肌の美観を左右する。美しい肌では角質細胞が一定の速度で作られ、また落屑して角質層の機能を常に正常に保っている。しかし、紫外線や乾燥などの影響により角質細胞の産生が乱れると、角質細胞が落屑せずに角質層が肥厚してしまい、肌の明るさや透明感が低下してくすみなどの原因になり、美容上の問題になる。

【0003】

角質細胞は、表皮の顆粒細胞が分化して形成される表皮の最外層に位置する細胞で、タンパク質が凝集して形成されるコーニファイドエンベロープ（ＣＥ）で覆われている。さらにＣＥにはアシルセラミドが結合してコルネオサイトリピッドエンベロープ（ＣＬＥ）を形成している。ＣＥやＣＬＥは、角質細胞の機能を発揮するために必要な構造物であり、正常なＣＥやＣＬＥを有している角質細胞は、スクラブ剤やふき取り化粧水を用いた物理的な施術やピーリングなどの化学的な介入を行わなくても正常に落屑し、角質層が肥厚することもなく、くすみのない明るい肌になる。

【0004】

微絨毛様突起は、角質細胞表面に観察される微細構造で、アトピー性皮膚炎など炎症を伴う皮膚疾患や紫外線曝露によって乾燥した皮膚の角質細胞でよく観察され、皮膚のターンオーバーが亢進し、皮膚状態が非常に悪い指標となる（特許文献１）。ＣＥ構造の異常を示す指標の一つでもあり、ＣＥ上に散在している細胞接着因子のコルネオデスモソームは微絨毛様突起に集積しており、微絨毛様突起を有する角質細胞同士は強固に接着して、角質細胞の剥離が困難となる。また、微絨毛様突起は、ビタミンＡ誘導体で改善することが示されている（特許文献２）。

【0005】

ＣＥとＣＬＥの形成には１２Ｒ－リポキシゲナーゼが必要である。この酵素の欠損により、ＣＬＥの形成が不全になるだけでなく、ＣＬＥが結合する角質細胞のＣＥも薄くなり角質細胞の健全性が損なわれることが示されている（非特許文献１）。そのため、この酵素が正常な角質細胞の形成に重要な因子であると考えられる。しかし、１２Ｒ－リポキシゲナーゼを用いて肌のくすみを改善する方法は報告されていない。

【0006】

コンフリー（和名：ヒレハリソウ、学名：Ｓｙｍｐｈｙｔｕｍ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ）とは、ムラサキ科ヒレハリソウ属の多年生草木である。古くから民間療法に利用され、葉は食用とされてきた。また、鎮痒剤（特許文献４）、抗炎症剤（特許文献４）、ＤＮＡ損傷修復剤（特許文献５）としても利用されている。また、特許文献６では、ふき取り化粧水として古い角質細胞を物理的に拭き取る作用が示されている。肌のくすみの原因の一つに古い角質細胞が落屑せずに滞留することが挙げられるが、特許文献６では肌のくすみ改善効果について示していない。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0007】

【特許文献1】特開２００３－３４４３９０

【特許文献2】特開２００５－２３９６２３

【特許文献3】特開２００８－８１５０５

【特許文献4】特開２００９－２５６２２２

【特許文献5】特開２０１８－１６８１６６

【特許文献6】特開２０１８－１７２３４３

【非特許文献】

【0008】

【非特許文献1】Ｄ．Ｃｒｕｍｒｉｎｅ Ｊ． Ｉｎｖｅｓｔ． Ｄｅｒｍａｔｏｌ． １３９， ７６０－７６８ （２０１９）

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0009】

かかる状況に鑑み、本願発明の課題は、有効で、副作用の少ない１２Ｒ－リポキシゲナーゼ産生促進作用を有する、１２Ｒ－リポキシゲナーゼ産生促進剤、角質細胞のコルネオサイトリピッドエンベロープ形成促進剤及び角質細胞の微絨毛様突起形成抑制剤を提供することで、くすみのない明るい肌にすることにある。

【課題を解決するための手段】

【0010】

本願発明者らは、健常人において角質細胞表面を覆うＣＬＥの形成が不十分であると角質細胞表面形状の異常である微絨毛様突起が形成されやすくなることを見出した。この結果から、ＣＬＥの形成を促進することが、微絨毛様突起の形成を抑制し、十分なＣＬＥやＣＥを有し正常に機能する角質細胞が形成されることで、くすみのない肌にすることができると考えた。本願発明ではこの考えを基に、ＣＬＥの前駆物質を産生して、ＣＬＥ形成を促進する１２Ｒ－リポキシゲナーゼに着目し、当該酵素の産生促進作用を有する有効成分を探索し、コンフリー抽出物を同定した。また、コンフリー抽出物にはＣＬＥ形成促進作用と微絨毛様突起形成抑制作用を示すことを明らかにし、これら作用により正常に機能する角質細胞が生成され、角質層の機能が改善することで皮膚の明度が増すことを示した。そして、コンフリー抽出物を含有する１２Ｒ－リポキシゲナーゼ産生促進剤、角質細胞のコルネオサイトリピッドエンベロープ形成促進剤及び角質細胞の微絨毛様突起形成抑制剤を提供することで本願発明を完成させた。

【発明の作用】

【0011】

本願発明のコンフリー抽出物は、１２Ｒ－リポキシゲナーゼ産生促進作用、角質細胞のコルネオサイトリピッドエンベロープ形成促進作用及び角質細胞の微絨毛様突起形成抑制作用を有しており、角質細胞表面のＣＬＥ形成を促進することで、角質細胞表面の微絨毛様突起形成を抑制して、角質細胞の機能を正常化して、肌を明るくするので、医薬品、医薬部外品、化粧品、食品の分野において利用できるものである。

【発明を実施するための最良の形態】

【0012】

以下に、本願発明について詳細に述べる。

【0013】

本願発明で述べている１２Ｒ－リポキシゲナーゼ（１２Ｒ－ＬＯＸ）とは、ＡＬＯＸ１２Ｂ遺伝子にコードされるアラキドン酸代謝に関与する酵素である。当該酵素は、表皮の角質層においてＯ－リノレオイル－ω－ハイドロキシセラミドのリノール酸部分を過酸化脂質化する反応を触媒し、角質細胞表面のＣＥに結合している脂質膜であるＣＬＥの前駆体を産生する。そのため、ＡＬＯＸ１２Ｂ遺伝子が欠損するとＣＬＥが形成されなくなる（Ｙ．Ｚｈｅｎｇ， ｅｔ． ａｌ． Ｊ． Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２８６， ２４０４６－２４０５６ （２０１１））。また、１２Ｒ－ＬＯＸは、紫外線で発現が抑制され、紫外線によるＣＬＥ形成抑制の原因となる（Ｄ．Ｇｕｎｅｒｉ， ｅｔ ａｌ． Ｉｎｔ． Ｊ． Ｃｏｓｍｅｔ． Ｓｃｉ． ４１， ２７４－２８０ （２０１９））。加えて、ＡＬＯＸ１２Ｂ遺伝子はステロイド産生と脂質代謝に関与することから、生殖機能における働きが注目されており、特に４０歳未満で卵巣機能が低下して無月経（月経が３ヶ月以上無い状態）となる早発卵巣不全の原因遺伝子である可能性が指摘されている（Ａ．Ａｌａｖｉ， ｅｔ ａｌ． Ｍｏｌ Ｇｅｎｅｔ Ｇｅｎｏｍｉｃｓ ２９５， １０３９－１０５３ （２０２０））。即ち、皮膚において正常な角質細胞の形成に関与し、生殖機能にも関与する当該酵素は、美容や生殖医療の分野で注目されており、産業的に重要視されている。

【0014】

本願発明で述べている角質細胞表面の脂質膜（コルネオサイトリピッドエンベロープ、Ｃｏｒｎｅｏｃｙｔｅ Ｌｉｐｉｄ Ｅｎｖｅｌｏｐｅ：ＣＬＥ）は、角質細胞表面に結合したω－アシルセラミドで構成させる脂質膜で、ＣＥと角質細胞間脂質層を結びつけることで皮膚バリアの形成に関与している。ＣＬＥを構成するセラミドは、ω水酸基にリノール酸が結合したものを前駆体とし、脂肪酸の鎖長がＣ２８以上であり、非常に疎水性が高いという特徴がある。また、遺伝性の疾患である魚鱗癬の中には、ＣＬＥを構成するセラミドの輸送や合成に関与する遺伝子の異常が原因で発症するものもあることから、ＣＬＥ、その構成脂質又はセラミド合成に関与する遺伝子などを標的とした皮膚バリア機能の改善方法や魚鱗癬の新規治療法の開発が期待されている。

【0015】

本願発明に用いるコンフリー抽出物とは、ムラサキ科ヒレハリソウ属ヒレハリソウ（Ｓｙｍｐｈｙｔｕｍ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ）の花、実、種子、茎、葉、根等の植物体の一部又は全草から抽出したものであり、茎、葉、根から抽出したものが好ましく、最も好ましくは葉から抽出したものである。又、抽出には、これらの植物体をそのまま使用してもよく、乾燥、粉砕、細切等の処理を行ってもよい。

【0016】

抽出方法は、特に限定されないが、水もしくは熱水又は水と有機溶媒の混合溶媒を用い、撹拌又はカラム抽出する方法等により行うことができる。抽出溶媒としては、例えば、水、低級アルコール類（メタノール、エタノール、１－プロパノール、２－プロパノール、１－ブタノール、２－ブタノール等）、液状多価アルコール類（１，３－ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリン等）、ケトン類（アセトン、メチルエチルケトン等）、アセトニトリル、エステル類（酢酸エチル、酢酸ブチル等）、炭化水素類（ヘキサン、ヘプタン、流動パラフィン等）、エーテル類（エチルエーテル、テトラヒドロフラン、プロピルエーテル等）が挙げられる。好ましくは、水、低級アルコール及び液状多価アルコール等の極性溶媒がよく、特に好ましくは、水、エタノール、１，３－ブチレングリコール及びプロピレングリコールがよい。これらの溶媒は一種でも二種以上を混合して用いてもよい。特に好ましい抽出溶媒としては、水又は水－エタノール系の混合極性溶媒が挙げられる。溶媒の使用量については、特に限定はなく、例えばコンフリーの植物体（乾燥重量）に対し、１０倍以上、好ましくは２０倍以上であればよいが、抽出後に濃縮を行ったり、単離したりする場合の操作の便宜上１００倍以下であることが好ましい。また、抽出温度や時間は、用いる溶媒の種類や抽出時の圧力等によって適宜選択できる。

【0017】

上記抽出物は、抽出した溶液のまま用いてもよいが、必要に応じて、本願発明の作用を奏する範囲で、濃縮（減圧濃縮、膜濃縮等による濃縮）、希釈、濾過、活性炭等による脱色、脱臭、エタノール沈殿等の処理を行ってから用いてもよい。さらには、抽出した溶液を濃縮乾固、噴霧乾燥、凍結乾燥等の処理を行い、乾燥物として用いてもよい。抽出物は、単独で用いてもよいが、２種以上を併用してもよい。併用する場合、その混合比率は限定されない。

【0018】

本願発明の外用剤又は内用剤への配合は、上記抽出物をそのまま使用してもよく、抽出物の作用を損なわない範囲内で、化粧品、医薬部外品、医薬品又は食品等に用いられる成分である油脂類、ロウ類、炭化水素類、脂肪酸類、アルコール類、エステル類、界面活性剤、金属石鹸、ｐＨ調整剤、防腐剤、香料、保湿剤、粉体、紫外線吸収剤、増粘剤、色素、酸化防止剤、美白剤、キレート剤、賦形剤、皮膜剤、甘味料、酸味料等の成分が含有されていてもよい。

【0019】

本願発明の剤型としては、例えば、化粧水、クリーム、マッサージクリーム、乳液、ゲル剤、エアゾール剤、パック、洗浄剤、浴用剤、ファンデーション、打粉、口紅、軟膏、パップ剤、ペースト剤、プラスター剤、エッセンス、散剤、丸剤、錠剤、注射剤、坐剤、乳剤、カプセル剤、顆粒剤、液剤（チンキ剤、流抽出物剤、酒精剤、懸濁剤、リモナーデ剤等を含む）、錠菓、飲料等が挙げられる。

【0020】

本願発明で用いるコンフリー抽出物の含有量は、固形物に換算して０．００１重量％以上、好ましくは０．０１～１重量％がよい。０．００１重量％未満であると本願発明の作用が十分に発揮されにくい場合がある。添加の方法については、予め加えておいても、製造途中で添加してもよく、作業性を考えて適宜選択すればよい。

【0021】

次に本願発明を詳細に説明するため、実施例として本願発明に用いるコンフリー抽出物の製造例、処方例及び実験例を挙げるが、本願発明はこれに限定されるものではない。例中の含有量は、全て重量％とする。

【0022】

以下に、コンフリー抽出物の製造例を示す。

【実施例0023】

製造例１ コンフリーの熱水抽出物
コンフリーの葉の乾燥物１０ｇに精製水２００ｍＬを加え、９５～１００℃で２時間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮し、凍結乾燥してコンフリーの葉の熱水抽出物を１．６ｇ得た。

【0024】

製造例２ コンフリーの５０％エタノール抽出物
コンフリーの葉の乾燥物１０ｇに５０％エタノール２００ｍＬを加え、常温で７日間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮乾固して、コンフリーの葉の５０％エタノール抽出物を１．２ｇ得た。

【0025】

製造例３ コンフリーのエタノール抽出物
コンフリーの葉の乾燥物１０ｇにエタノール２００ｍＬを加え、常温で７日間抽出した後、濾過し、その濾液を濃縮乾固して、コンフリーの葉のエタノール抽出物を０．８ｇ得た。

【0026】

製造例４ コンフリーの１，３－ブチレングリコール抽出液
コンフリーの葉の乾燥物１０ｇに１，３－ブチレングリコール２００ｍＬを加え、常温で７日間抽出した後、濾過し、コンフリーの葉の１，３－ブチレングリコール抽出液を１８０ｍＬ得た。

【実施例0027】

処方例１ ローション
処方 含有量（％）
１．コンフリー抽出液（製造例４） １．０
２．１，３－ブチレングリコール ８．０
３．グリセリン ２．０
４．キサンタンガム ０．０２
５．クエン酸 ０．０１
６．クエン酸ナトリウム ０．１
７．エタノール ５．０
８．パラオキシ安息香酸メチル ０．１
９．ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（４０Ｅ．Ｏ．） ０．１
１０．香料 適量
１１．精製水にて全量を１００とする
［製造方法］成分１～６及び１１と、成分７～１０をそれぞれ均一に溶解し、両者を混合し濾過して製品とする。

【0028】

比較例１ 従来のローション
処方例１において、コンフリー抽出液を精製水に置き換えたものを従来のローションとした。

【0029】

処方例２ 乳液
処方 含有量（％）
１．コンフリー抽出物（製造例１） １．０
２．スクワラン ５．０
３．オリーブ油 ５．０
４．ホホバ油 ５．０
５．セタノール １．５
６．モノステアリン酸グリセリン ２．０
７．ポリオキシエチレンセチルエーテル（２０Ｅ．Ｏ．） ３．０
８．ポリオキシエチレンソルビタンモノオレエート ２．０
９．香料 ０．１
１０．プロピレングリコール １．０
１１．グリセリン ２．０
１２．パラオキシ安息香酸メチル ０．２
１３．精製水にて全量を１００とする
［製造方法］成分２～８を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分１０～１３を加熱溶解して混合し、７５℃に保ち水相とする。油相に水相を加えて乳化して、かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分９を加え、更に３０℃まで冷却して成分１を加え、製品とする。

【0030】

比較例２ 従来の乳液
処方例２において、コンフリー抽出物を精製水に置き換えたものを従来の乳液とした。

【0031】

処方例３ クリーム
成分 含有量（％）
１．コンフリー抽出物（製造例２） １．０
２．イソステアリン酸ポリグリセリル－１０ １．３
３．ミリスチン酸ポリグリセリル－１０ １．３
４．グリセリン ４．５
５．ジメチコン １０．０
６．ジフェニルシロキシフェニルトリメチコン １０．０
７．ＥＤＴＡ－２Ｎａ ０．０５
８．カルボキシビニルポリマー ０．３
９．１，３－ブチレングリコール １０．０
１０．パラオキシ安息香酸メチル ０．３
１１．ＡＭＰＤ ０．１５
１２．精製水にて全量を１００とする
［製造方法］成分２～６を加熱して混合し、７０℃に保ち油相とする。成分７～１２を加熱溶解して混合し、７０℃に保ち水相とする。油相に水相を加え乳化し、かき混ぜながら冷却し、４５℃で成分１を加え、更に３０℃まで冷却して製品とする。

【0032】

比較例３ 従来のクリーム
処方例３において、コンフリー抽出物を精製水に置き換えたものを従来のクリームとする。

【0033】

処方例４ ゲル剤
成分 含有量（％）
１．コンフリー抽出物（製造例３） ０．５
２．エタノール ５．０
３．パラオキシ安息香酸メチル ０．１
４．ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（６０Ｅ．Ｏ．） ０．１
５．香料 適量
６．１，３－ブチレングリコール ５．０
７．グリセリン ５．０
８．キサンタンガム ０．１
９．カルボキシビニルポリマー ０．２
１０．水酸化カリウム ０．２
１１．精製水にて全量を１００とする
［製造方法］成分２～５と、成分１及び６～１１をそれぞれ均一に溶解し、両者を混合して製品とする。

【0034】

処方例５ 浴用剤
成分 含有量（％）
１．コンフリー抽出物（製造例２） １．０
２．炭酸水素ナトリウム ５０．０
３．黄色２０２号（１） 適量
４．香料 適量
５．硫酸ナトリウムにて全量を１００とする
［製造方法］成分１～５を均一に混合し製品とする。

【0035】

処方例６ 錠剤
成分 含有量（％）
１．コンフリー抽出物（製造例３） ０．５
２．乾燥コーンスターチ ２９．５
３．カルボキシメチルセルロースカルシウム ２０．０
４．微結晶セルロース ４０．０
５．ポリビニルピロリドン ７．０
６．タルク ３．０
［製造方法］成分１～４を混合し、次いで成分５の水溶液を結合剤として加えて顆粒成型する。成型した顆粒に成分６を加えて打錠する。１錠０．５２ｇとする。

【0036】

処方例７ 錠菓
成分 含有量（％）
１．コンフリー抽出物（製造例３） ０．５
２．乾燥コーンスターチ ５０．８
３．エリスリトール ４０．５
４．クエン酸 ５．０
５．ショ糖脂肪酸エステル ３．０
６．香料 ０．１
７．精製水 ０．１
［製造方法］成分１～４及び７を混合し、顆粒成型する。成型した顆粒に成分５及び６を加えて打錠する。１粒１．０ｇとする。