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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公開特許公報(A)
(11)【公開番号】P2024045242
(43)【公開日】2024-04-02
(54)【発明の名称】天然の防腐剤、抗微生物剤、及びこれらの組成物
(51)【国際特許分類】
A23L 3/3472 20060101AFI20240326BHJP
A23L 33/105 20160101ALI20240326BHJP
A23L 2/44 20060101ALI20240326BHJP
A61K 8/9789 20170101ALI20240326BHJP
A61K 9/06 20060101ALI20240326BHJP
A61K 9/08 20060101ALI20240326BHJP
A61K 9/14 20060101ALI20240326BHJP
A61K 9/16 20060101ALI20240326BHJP
A61K 9/20 20060101ALI20240326BHJP
A61K 9/48 20060101ALI20240326BHJP
A61K 47/10 20170101ALI20240326BHJP
A61K 47/22 20060101ALI20240326BHJP
A61Q 1/02 20060101ALI20240326BHJP
A61Q 1/06 20060101ALI20240326BHJP
A61Q 1/10 20060101ALI20240326BHJP
A61Q 5/00 20060101ALI20240326BHJP
A61Q 11/00 20060101ALI20240326BHJP
A61Q 19/10 20060101ALI20240326BHJP
A61Q 13/00 20060101ALI20240326BHJP
A61K 47/46 20060101ALI20240326BHJP
【ＦＩ】
A23L3/3472
A23L33/105
A23L2/00 P
A61K8/9789
A61K9/06
A61K9/08
A61K9/14
A61K9/16
A61K9/20
A61K9/48
A61K47/10
A61K47/22
A61Q1/02
A61Q1/06
A61Q1/10
A61Q5/00
A61Q11/00
A61Q19/10
A61Q13/00 100
A61K47/46
【審査請求】有
【請求項の数】1
【出願形態】ＯＬ
(21)【出願番号】P 2024005056
(22)【出願日】2024-01-17
(62)【分割の表示】P 2021102954の分割
【原出願日】2016-11-09
(31)【優先権主張番号】62/252,987
(32)【優先日】2015-11-09
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】15/345,006
(32)【優先日】2016-11-07
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(71)【出願人】
【識別番号】504000568
【氏名又は名称】ユニゲン・インコーポレーテッド
(74)【代理人】
【識別番号】110001173
【氏名又は名称】弁理士法人川口國際特許事務所
(72)【発明者】
【氏名】ピン・ジャオ
(72)【発明者】
【氏名】チイ・ジア
(72)【発明者】
【氏名】メイ・フェン・ホン
(72)【発明者】
【氏名】ミソン・キム
(57)【要約】 （修正有）
【課題】広範囲の微生物に対して強力な抗微生物活性を有する天然組成物を提供する。
【解決手段】少なくとも１種類のアルビジア抽出物とマグノリア抽出物との混合物を含む組成物を提供する。幾つかの実施形態では、この組成物は、１種類以上の大環状アルカロイドを豊富に含む少なくとも１種類のアルビジア抽出物と、１種類以上のリグナンを豊富に含む少なくとも１種類のマグノリア抽出物との混合物を含む。
【選択図】なし
【解決手段】少なくとも１種類のアルビジア抽出物とマグノリア抽出物との混合物を含む組成物を提供する。幾つかの実施形態では、この組成物は、１種類以上の大環状アルカロイドを豊富に含む少なくとも１種類のアルビジア抽出物と、１種類以上のリグナンを豊富に含む少なくとも１種類のマグノリア抽出物との混合物を含む。
【選択図】なし
【特許請求の範囲】
【請求項1】
少なくとも１種類のアルビジア抽出物とマグノリア抽出物との混合物を含む組成物。
【請求項2】
１種類以上の大環状アルカロイドを豊富に含む少なくとも１種類のアルビジア抽出物と、１種類以上のリグナンを豊富に含む少なくとも１種類のマグノリア抽出物との混合物を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項3】
請求項１に記載の組成物を含み、該組成物が防腐剤である、食品、化粧品、栄養補助食品又は医薬品。
【請求項4】
前記組成物が、前記食品、化粧品、栄養補助食品又は医薬品中に、前記食品、化粧品、栄養補助食品又は医薬品の総重量の約０．００１重量％～約１０重量％の範囲で存在する、請求項３に記載の組成物。
【請求項5】
前記組成物が、前記食品、化粧品、栄養補助食品又は医薬品中に、前記食品、化粧品、栄養補助食品又は医薬品の総重量の約０．０１重量％～約５重量％の範囲で存在する、請求項４に記載の組成物。
【請求項6】
前記アルビジア抽出物と前記マグノリア抽出物が、１０：１～１：１０の範囲の重量比でブレンドされる、請求項１に記載の組成物。
【請求項7】
前記アルビジア抽出物と前記マグノリア抽出物が、１：１の重量比でブレンドされる、請求項６に記載の組成物。
【請求項8】
前記アルビジア抽出物が、約０．０１％～９９．９％の大環状アルカロイドを含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項9】
前記マグノリア抽出物が、約０．０１％～９９．９％のジフェノールリグナンを含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項10】
前記アルビジアが、アルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）、アルビジア・シンペリアナ（Ａｌｂｉｚｉａ ｓｃｈｉｍｐｅｒｉａｎａ）、アルビジア・レベック（Ａｌｂｉｚｉａ ｌｅｂｂｅｋ）、アルビジア・ガムミフェラ（Ａｌｂｉｚｉａ ｇｕｍｍｉｆｅｒａ）、アルビジア・イノピナタ（Ａｌｂｉｚｚｉａ ｉｎｏｐｉｎａｔａ）、アルビジア・サマン（Ａｌｂｉｚｉａ ｓａｍａｎ）（サマネア・サマン（Ｓａｍａｎｅａ ｓａｍａｎ）＝ピテコロビウム・サマン（Ｐｉｔｈｅｃｏｌｏｂｉｕｍ ｓａｍａｎ））、アルビジア・アディアンチフォリア（Ａｌｂｉｚｉａ ａｄｉａｎｔｈｉｆｏｌｉａ）、アルビジア・アディノセファラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｄｉｎｏｃｅｐｈａｌａ）、アルビジア・アンテルミンチカ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｎｔｈｅｌｍｉｎｔｉｃａ）、アルビジア・アンチュネシアナ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｎｔｕｎｅｓｉａｎａ）、アルビジア・シェバリエリ（Ａｌｂｉｚｉａ ｃｈｅｖａｌｉｅｒｉ）、アルビジア・コルニキュラタ（Ａｌｂｉｚｉａ ｃｏｒｎｉｃｕｌａｔａ）、アルビジア・クラシラメア（Ａｌｂｉｚｉａ ｃｒａｓｓｉｒａｍｅａ）、アルビジア・デュクロウキシ（Ａｌｂｉｚｉａ ｄｕｃｌｏｕｘｉｉ）、アルビジア・グラブラ（Ａｌｂｉｚｉａ ｇｌａｂｒａ）、アルビジア・ジュリブリシン（Ａｌｂｉｚｉａ ｊｕｌｉｂｒｉｓｓｉｎ）、アルビジア・カルコラ（Ａｌｂｉｚｉａ ｋａｌｋｏｒａ）、アルビジア・レッベコイデス（Ａｌｂｉｚｉａ ｌｅｂｂｅｋｏｉｄｅｓ）、アルビジア・ミリオフィラ（Ａｌｂｉｚｉａ ｍｙｒｉｏｐｈｙｌｌａ）、アルビジア・ニグリカンス（Ａｌｂｉｚｉａ ｎｉｇｒｉｃａｎｓ）、アルビジア・オドラティッシマ（Ａｌｂｉｚｉａ ｏｄｏｒａｔｉｓｓｉｍａ）、アルビジア・ペテリサナ（Ａｌｂｉｚｉａ ｐｅｔｅｒｉｓａｎａ）、アルビジア・ポイラネイ（Ａｌｂｉｚｉａ ｐｏｉｌａｎｅｉ）、アルビジア・プロセラ（Ａｌｂｉｚｉａ ｐｒｏｃｅｒａ）、アルビジア・タンガニセンシス（Ａｌｂｉｚｉａ ｔａｎｇａｎｙｉｃｅｎｓｉｓ）、アルビジア・ビアレアナ・ピエール（Ａｌｂｉｚｉａ ｖｉａｌｅａｎａ Ｐｉｅｒｒｅ）、アルビジア・ジジア（Ａｌｂｉｚｉａ ｚｙｇｉａ）、アフェランドラ・フスコプンクタタ（Ａｐｈｅｌａｎｄｒａ ｆｕｓｃｏｐｕｎｃｔａｔａ）、エフェドラ種（Ｅｐｈｅｄｒａ ｓｐｐ．）、ベルバスカム・プソイドノビル（Ｖｅｒｂａｓｃｕｍ ｐｓｅｕｄｏｎｏｂｉｌｅ）、インカルビレア・シネンシス（Ｉｎｃａｒｖｉｌｌｅａ ｓｉｎｅｎｓｉｓ）、バーバスカム・フォエニカム（Ｖｅｒｂａｓｃｕｍ ｐｈｏｅｎｉｃｕｍ）、バーバスカム・ニグラム（Ｖｅｒｂａｓｃｕｍ ｎｉｇｒｕｍ）、クレロデンドラム・ブチネリ（Ｃｌｅｒｏｄｅｎｄｒｕｍ ｂｕｃｈｎｅｒｉ）、アフェランドラ・スクアローサ（Ａｐｈｅｌａｎｄｒａ ｓｑｕａｒｒｏｓａ）又はこれらの組み合わせから選択される、請求項１に記載の組成物。
【請求項11】
豊富化された少なくとも１種類の前記アルビジア抽出物が、水、エタノール、メタノール、アルコール及び水の混合溶媒を用いて、又は超臨界流体によってアルビジア植物から抽出される、請求項２に記載の組成物。
【請求項12】
少なくとも１種類の前記アルビジア抽出物から単離された前記アルカロイドが、ブドムンキアミンＡ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｊ、Ｋ、ブドムンキアミンＬ１、Ｌ２、Ｌ３、Ｌ４、Ｌ５、Ｌ６、１３－ノルメチルブドムンキアミンＫ、９－ノルメチルブドムンキアミンＫ、１－ノルメチルブドムンキアミンＫ、６’－ヒドロキシ－９－ノルメチルブドムンキアミンＫ、６’－ヒドロキシブドムンキアミンＫ、フェリペアルビジンＡ、フェリペアルビジンＢ、６′－ヒドロキシブドムンキアミンＣ、ピテコロビン、プロトメチン、ベルバメチン、ベルバメトリン、イソベルバメトリン、イソベルバメチン、ベルバメクリン、イソベルバメクリン、ベルバスシン、ベルバシン、ベルバシトリン、ベルバロシン、イソベルバシトリン、ベルバロセニン、イソベルバシクリン、Ｎ１－（Ｚ）－ｐ－メトキシシンナモイルブクネリン、ブクネリン、ベルバミジン、ベルバセニン、ベルバセニン、イソベルバミジン、シュウェイニン、プレランドリン、インカシンＢ’、インカシンＢ、又はこれらの組み合わせを含む、請求項２に記載の組成物。
【請求項13】
豊富化された少なくとも１種類の前記マグノリア抽出物が、水、エタノール、メタノール、アルコール及び水の混合溶媒を用いて、又は超臨界流体によってマグノリア植物から抽出される、請求項２に記載の組成物。
【請求項14】
前記マグノリアが、マグノリア・オフィシナリス（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ）、マグノリア・アキュミネート（Ｍａｇｎｏｌｉａ ａｃｕｍｉｎａｔｅ）、マグノリア・ビオンジ（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｂｉｏｎｄｉｉ）、マグノリア・ココ（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｃｏｃｏ）、マグノリア・デニュデート（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｄｅｎｕｄａｔｅ）、マグノリア・ファルゲッシ（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｆａｒｇｅｓｉｉ）、マグノリア・ガレッティ（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｇａｒｒｅｔｔｉｉ）、マグノリア・グランジフローラ（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｇｒａｎｄｉｆｌｏｒａ）、マグノリア・ヘンリ（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｈｅｎｒｙｉ）、マグノリア・リリフローラ（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｌｉｌｉｆｌｏｒａ）、マグノリア・カチラチライ（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｋａｃｈｉｒａｃｈｉｒａｉ）、マグノリア・コブス（Ｍａｇｎｏｌｉａ Ｋｏｂｕｓ）、マグノリア・オボヴァタ（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｏｂｏｖａｔａ）、マグノリア・プラエコシッシマ（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｐｒａｅｃｏｃｉｓｓｉｍａ）、マグノリア・プテロカルパ（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｐｔｅｒｏｃａｒｐａ）、マグノリア・ピラミダタ（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｐｙｒａｍｉｄａｔａ）、マグノリア・ロスラーテ（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｒｏｓｔｒａｔｅ）、マグノリア・サリシフォリア（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｓａｌｉｃｉｆｏｌｉａ）、マグノリア・シエボルディ（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｓｉｅｂｏｌｄｉｉ）、マグノリア・ソウランゲアナ（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｓｏｕｌａｎｇｅａｎａ）、マグノリア・ステラート（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｓｔｅｌｌａｔｅ）、マグノリア・バージニアナ（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｖｉｒｇｉｎｉａｎａ）、カバノキリグニンの分解産物、アカンサス・エブラクテアタス（Ａｃａｎｔｈｕｓ ｅｂｒａｃｔｅａｔｕｓ）、アプトシマム・スピネセンス（Ａｐｔｏｓｉｍｕｍ ｓｐｉｎｅｓｃｅｎｓ）、アラリア・ビピナータ（Ａｒａｌｉａ ｂｉｐｉｎｎａｔａ）、アラウカリア・アングスチフォリア（Ａｒａｕｃａｒｉａ ａｎｇｕｓｔｉｆｏｌｉａ）、アラウカリア・アラウカナ（Ａｒａｕｃａｒｉａ ａｒａｕｃａｎａ）、アルテミシア・アブシンシウム（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ａｂｓｉｎｔｈｉｕｍ）、ハプロフィラム・アクチフォリウム（Ｈａｐｌｏｐｈｙｌｌｕｍ ａｃｕｔｉｆｏｌｉｕｍ）、ハプロフィラム・ペルフォラタム（Ｈａｐｌｏｐｈｙｌｌｕｍ ｐｅｒｆｏｒａｔｕｍ）、リリオデンドロン・チューリッピフェラ（Ｌｉｒｉｏｄｅｎｄｒｏｎ ｔｕｌｉｐｉｆｅｒａ）、クラメリア・シスチソイデス（Ｋｒａｍｅｒｉａ ｃｙｓｔｉｓｏｉｄｅｓ）、ペリラ・フルテセンス（Ｐｅｒｉｌｌａ ｆｒｕｔｅｓｃｅｎｓ）、ローソニア・イネルミス・ミリスチカ（Ｌａｗｓｏｎｉａ ｉｎｅｒｍｉｓ Ｍｙｒｉｓｔｉｃａ）フレグランス（ナツメグ）、パラクメリア・ユンナネンシス（Ｐａｒａｋｍｅｒｉａ ｙｕｎｎａｎｅｎｓｉｓ）（好ましい属名はマグノリア）、ペルセア・ジャポニカ（Ｐｅｒｓｅａ ｊａｐｏｎｉｃａ）、ピパー・フトカドスラ（Ｐｉｐｅｒ ｆｕｔｏｋａｄｓｕｒａ）、ピパー・ワイチ（Ｐｉｐｅｒ ｗｉｇｈｔｉｉ）、ロリニア・ムコサ（Ｒｏｌｌｉｎｉａ ｍｕｃｏｓａ）、サッサフラス・ランダイエンス（Ｓａｓｓａｆｒａｓ ｒａｎｄａｉｅｎｓｅ）、スクロフラリア・アルビダ－コルチカ（Ｓｃｒｏｐｈｕｌａｒｉａ ａｌｂｉｄａ－ｃｏｌｃｈｉｃａ）、ステレラ・チャマエジャスメ（Ｓｔｅｌｌｅｒａ ｃｈａｍａｅｊａｓｍｅ）、シリンガ・ベルチナ（Ｓｙｒｉｎｇａ ｖｅｌｕｔｉｎａ）、シジジウム・クミニ（Ｓｙｚｙｇｉｕｍ ｃｕｍｉｎｉ）、タラウマ・グロリエンシス（Ｔａｌａｕｍａ ｇｌｏｒｉｅｎｓｉｓ）、ビロラ・エロンゲート（Ｖｉｒｏｌａ ｅｌｏｎｇａｔｅ）、アーバノデンドロン・ベルコサム（Ｕｒｂａｎｏｄｅｎｄｒｏｎ ｖｅｒｒｕｃｏｓｕｍ）、ウィクストロエミア・シコキアナ（Ｗｉｋｓｔｒｏｅｍｉａ ｓｉｋｏｋｉａｎａ）、又はこれらの組み合わせを含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項15】
少なくとも１種類の前記マグノリア抽出物から単離された前記リグナンが、マグノロール、ホノキオール、ビオンジニンＡ、２，３－ビス（４－ヒドロキシ－３－メトキシフェニル）－２－プロペナール、デヌダジオンＣ、クロバネマグノロール、８－［２－ヒドロキシ－５－（２－プロペニル）フェニル］－６－（２－プロペニル）－２Ｈ－１－ベンゾピラン－２－オン、デヌダノリドＣ、デヌダノリドＤ、デヌダノリドＢ、デヌダノリドＡ、デヌダチンＡ、デヌダチンＢ；（＋）－形態，４－ヒドロキシ－６’－メトキシ－３，３’－ビリグナ－７，７’－ジエン－９，９’－ジアール、４’－メトキシマグノジアルデヒド、５，５’－ジ－２－プロペニル－［１，１’－ビフェニル］－２，２’－ジオール、２，２’－ビカビコール、ＦＥＭＡ ４５５９、５，５’－ジアリル－２，２’－ジヒドロキシビフェニル、ボルニルマグノロール、５，５’－ジアリル－２－（３－メチル－２－ブテニルオキシ）ビフェニル－２’－オール、５，５’－ジアリル－２－（アリルオキシ）ビフェニル－２’－オール、３’，５－ジアリル－２，４’－ジヒドロキシビフェニル、３’，５－ジ－２－プロペニル－２，４’－ビフェニルジオール、５－アリル－３’－（１－プロペニル）ビフェニル－２，４’－ジオール、３’－（１－プロペニル）－５－（２－プロペニル）－２，４’－ビフェニルジオール、３’，５－ジアリル－２－ヒドロキシ－４’－メトキシビフェニル、４’－Ｏ－メチルホノキオール、２－ヒドロキシ－４’－メトキシ－３’，５－ジ－２－プロペニルビフェニル、４，４’－ジアリル－２，３’－ジヒドロキシジフェニルエーテル、２－［３－ヒドロキシ－４－（２－プロペニル）フェノキシ］－５－（２－プロペニル）フェノール、２－ヒドロキシ－３－メトキシ－４’，５－ジ－２－プロペニルジフェニルエーテル、４’，５－ジアリル－２－ヒドロキシ－３－メトキシジフェニルエーテル、２－メトキシ－４－（２－プロペニル）－６－［４－（２－プロペニル）フェノキシ］フェノール、ファルゲシン、メチルプルビアチロール、３，４－ジメトキシ－３’，４’－メチレンジオキシ－７，９’：７’，９－ジエポキシリグナン、コブシン、デスメトキシアシャンチン、Ｏ－メチルピペリトール、スピネシン、（＋）－ファルゲシン、プラニニン、メチルプルビアチロール、パラクメリンＡ、６－アリル－７－（３，４－ジメトキシフェニル）－２，３－ジメトキシ－８－メチルトリシクロ［４．２．０．０２，８］オクタ－３－エン－５－オン、マグノサリン、ジピペリチルマグノロール、カチラチロールＢ、アクミナチン、リカリンＤ、オイデスホノキオールＡ、オイデスマグノロール、オイデスミン；（＋）－形態、（＋）－エピオイデスミン、（－）－エピオイデスミン、カチラチロールＡ、ユーポマテノイド１３、ファルゲシフェノールＢ、ファルゲシフェノールＣ、ファルゲソンＡ、ファルゲソンＢ、４，５－ジメトキシ－３’，４’－メチレンジオキシ－２，７’－ジオキソ－５，８’－リグナ－３，６，８－トリエン、４－（１，３－ベンゾジオキソール－５－イル）－２，３，４，５－テトラヒドロ－７－メトキシ－５－メチル－８Ｈ－２，５ａ－メタノ－１－ベンゾオキセピン－８－オン、ガレッチリグナンＡ、ガレッチリグナンＢ、テトラヒドロ－４－（３－ヒドロキシ－４，５－ジメトキシフェニル）－１Ｈ，３Ｈ－フロ［３，４－ｃ］フラン－１－オン、カチラノール、７’，９－ジヒドロキシ－３，３’，４，４’，５－ペンタメトキシ－７，９’－エポキシリグナン、マグノンＢ、３，３’，４，４’，５，９－ヘキサメトキシ－７，９’－エポキシリグナン－７’－オン、マグノレニンＣ、３’，４，７，９，９’－ペンタヒドロキシ－３，５’－ジメトキシ－８，４’－オキシネオリグナン、３，３’－ジメトキシ－４，５：４’，５’－ビス（メチレンジオキシ）ピラミダチン、３’－ヒドロキシ－３，４，４’，５，５’－ペンタメトキシピラミダチン、ピラミダチンＢ、３，３’，４’，５’－テトラメトキシ－４，５－メチレンジオキシピラミダチン、３，３’，４，４’，５，５’－ヘキサメトキシピラミダチン、ピラミダチンＣ、ピラミダチン、ピラミダチンＤ、３－ヒドロキシ－３’，４，４’，５，５’－ペンタメトキシピラミダチン、ピラミダチンＡ、３－ヒドロキシ－３’，４，５－トリメトキシ－４’，５’－メチレンジオキシピラミダチン、ピラミダチンＦ、ピラミダチンＧ、ピラミダチンＨ、ピラミダチンＥ、５’－ヒドロキシ－３，３’，４，４’，５－ペンタメトキシピラミダチン、マグノシニン、２’，３，４，４’，５，６－ヘキサメトキシ－２，７’－シクロリグナ－７－エン、アカントシドＢ、エレウテロシドＥ１、３－ヒドロキシ－３’，４，４’，５，５’－ペンタメトキシ－７，９’：７’，９－ジエポキシリグナン、（＋）－エピシリンガレシノール、リリオレシノールＡ、シンプリコシゲノール、コブシノールＢ、ファルゲソール、９－Ｏ－アセチルファルゲソール、マグノロン、ビオンジニンＢ、ビオンジニンＥ、マグノンＡ、７，９，９’－トリヒドロキシ－３，３’，４－トリメトキシ－８，４’－オキシネオリグナン、エリトロ－形態、トレオ－形態、マグノバチンＡ、マグノバチンＢ、オレイフェリンＣ、３，４：３’，４’－ビス（メチレンジオキシ）－７－リグナノール、７－ヒドロキシ－３，４：３’，４’－ビス（メチレンジオキシ）リグナン、リリフロジオン、デヌダジオンＢ、デヌダジオンＡ、リリフロールＡ、リリフロールＢ、デヌダトン、３－［２’，６－ジヒドロキシ－５’－（２－プロペニル）［１，１’－ビフェニル－３－イル］］－２－プロペナール、ランダイナール、マグナルデヒドＢ、マグナルデヒドＣ、６’－Ｏ－メチルマグナルデヒドＢ、４－デオキシ－６－メトキシマグナルデヒドＡ、４－メトキシマグナルデヒドＢ、２’，６－ジヒドロキシ－５’－（２－プロペニル）［１，１’－ビフェニル］－３－カルボキシアルデヒド、５－アリル－５’－ホルミル－２，２’－ジヒドロキシビフェニル、マグナルデヒドＥ、６－Ｏ－メチルマグナルデヒドＥ、９－ヒドロキシ－３，３’，４，４’，５－ペンタメトキシ－７，９’－エポキシリグナ－７’－エン、９，９’－ジヒドロキシ－３，３’，４，４’，５－ペンタメトキシ－２，７’－シクロリグナ－７－エン、マグノリアニン、マグノリグナンＩ、マグノリグナンＢ、マグノリグナンＡ、マグノリグナンＤ、マグノリグナンＣ ６’－グルコシド、マグノリグナンＣ、マグノリグナンＥ、マグノリグナンＦ、マグノリグナンＧ、マグノリグナンＨ、２－［４－ヒドロキシ－３－（２－プロペニル）フェニル］－２，５－シクロヘキサジエン－１，４－ジオン、２－（３－アリル－４－ヒドロキシフェニル）－１，４－ベンゾキノン、マグノサリシン；（７ＲＳ，７’ＳＲ，８ＲＳ，８’ＲＳ）－形態、マグノステリンＢ、マグノステリンＢ；７，９－ジエピマー、５－メトキシ，５－［２－ヒドロキシ－５－（２－プロペニル）フェニル］－２－メチルベンゾフラン、３－ヒドロキシ－３’，４，４’，５－テトラメトキシ－７，９’，７’，９－ジエポキシリグナン、３－デ－Ｏ－メチルマグノリン、マグノリン、３－Ｏ－デメチルアシャンチン、３’－Ｏ－デメチルアシャンチン、３－ヒドロキシ－４，５－ジメトキシ－３’，４’－メチレンジオキシ－７，９’：７’，９－ジエポキシリグナン、５’－ヒドロキシ－４’－Ｏ－メチルピペリトール、エピマグノリンＡ、７’－ヒドロキシ－３，３’，４，４’－テトラメトキシ－７，９’－エポキシリグナン、マグノステリンＡ、コブシノールＡ、４，７’－ジヒドロキシ－３，３’，４’－トリメトキシ－７，９’－エポキシリグナン、４’，５，９－トリヒドロキシ－３，３’－ジメトキシ－７，９’－エポキシリグナン、ファルゲシフェノールＡ、リリフロン、モノテルペニルマグノロール、ピペリチルホノキオール、モノテルペニルホノキオール、サウランギアニンＩ、セサミン；（－）－形態、シリンギノシド、シリンギン ４”－グルコシド、３，３’，４，５’－テトラメトキシ－７，９’：７’，９－ジエポキシリグナン、３’，５’－ジメトキシ－３，４－メチレンジオキシ－７，９’：７’，９－ジエポキシリグナン、Ｇａｌｇｒａｖｉｎ、２，２’－ジヒドロキシ－３－メトキシ－５，５’－ジ－２－プロペニルビフェニル、３－メトキシマグノロール、５，５’－ジアリル－２，２’－ジヒドロキシ－３－メトキシビフェニル、又はこれらの組み合わせを含む、請求項２に記載の組成物。
【請求項16】
前記組成物が、植物材料又は他の供給源に由来する少なくとも１種類のアルビジア抽出物と、植物材料又は別の供給源に由来する少なくとも１種類のマグノリア抽出物との混合物を含み、
少なくとも１種類の前記アルビジア抽出物は、少なくとも１種類の前記アルビジア抽出物の植物材料又は他の供給源における１種類以上の大環状アルカロイドの量又は活性と比較して、１種類以上の大環状アルカロイドの量又は活性が増えており、
少なくとも１種類の前記マグノリア抽出物は、少なくとも１種類の前記マグノリア抽出物の植物材料又は他の供給源における１種類以上のリグナンの量又は活性と比較して、１種類以上の前記リグナンの量又は活性が増えている、請求項１に記載の組成物。
少なくとも１種類の前記アルビジア抽出物は、少なくとも１種類の前記アルビジア抽出物の植物材料又は他の供給源における１種類以上の大環状アルカロイドの量又は活性と比較して、１種類以上の大環状アルカロイドの量又は活性が増えており、
少なくとも１種類の前記マグノリア抽出物は、少なくとも１種類の前記マグノリア抽出物の植物材料又は他の供給源における１種類以上のリグナンの量又は活性と比較して、１種類以上の前記リグナンの量又は活性が増えている、請求項１に記載の組成物。
【請求項17】
前記植物材料又は他の供給源が、茎、茎皮、幹、幹樹皮、小枝、塊茎、根、根皮、若芽、種子、根茎、花及び他の生殖器官、組織培養物及び幹細胞培養物、葉、その他の空中部分、又はこれらの組み合わせを含む、請求項１６に記載の組成物。
【請求項18】
前記組成物が、さらに、少なくとも１種類の既知の抗微生物成分を含み、前記成分は、プソラレア・コリリフォリア（Ｐｓｏｒａｌｅａ ｃｏｒｙｌｉｆｏｌｉａ）、クルクミン、オイゲノール、アルピニア・ガルガンガ（Ａｌｐｉｎｉａ ｇａｌｇａｎｇａ）、コプチジス（ｃｏｐｔｉｄｉｓ）、アザジラチタ・インディカ（Ａｚａｄｉｒａｃｈｔａ ｉｎｄｉｃａ）、プロポリス、チョウジ油、ソフォラ・フラベセンス（Ｓｏｐｈｏｒａ ｆｌａｖｅｓｃｅｎｓ）、アレカ・カテチュ（Ａｒｅｃａ ｃａｔｅｃｈｕ）、グリチリザ・グラブラＬ．（Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ ｇｌａｂｒａ Ｌ．）、スーヤ・プリカタ（Ｔｈｕｊａ ｐｌｉｃａｔａ）、コルテックス・フェロデンドリ（Ｃｏｒｔｅｘ ｐｈｅｌｌｏｄｅｎｄｒｉ）、レウム・パラーテ（Ｒｈｅｕｍ ｐａｌａｔｅ）、アルピニア・オフィシナラム（Ａｌｐｉｎｉａ ｏｆｆｉｃｉｎａｒｕｍ）、クルクマ・ロンガ（Ｃｕｒｃｕｍａ ｌｏｎｇａ）、ブロウソネティア・パピリフェラ（Ｂｒｏｕｓｓｏｎｅｔｉａ ｐａｐｙｒｉｆｅｒｒａ）、ビブルナム・コチニフォリウム（Ｖｉｂｕｒｎｕｍ ｃｏｔｉｎｉｆｏｌｉｕｍ）、ユーフォルビア・ヒルタ・リン（Ｅｕｐｈｏｒｂｉａ ｈｉｒｔａ Ｌｉｎｎ）、ビテックス・ネグンド（Ｖｉｔｅｘ ｎｅｇｕｎｄｏ）、又はこれらの組み合わせの植物粉末又は植物抽出物を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項19】
前記組成物は、さらに、少なくとも１種類の既知の抗微生物成分を含み、前記成分が、プロピオン酸カルシウム、安息香酸ナトリウム、硝酸ナトリウム、亜硝酸ナトリウム、ソルビン酸カリウム、安息香酸、サリチル酸、ソルビン酸、アルコール、ペノキシエタノール（ｐｅｎｏｘｙｅｔｈａｎｏｌ）、１，２－ジオールアルコール（１，２ プロパンジオール、１，２ ブタンジオール、１，２ ペンタンジオール、１，２－ヘキサンジオール）、１，３－ジオールアルコール（１，３ プロパンジオール、１，３ ブタンジオール、１，３ ペンタンジオール（ｐｅｎｔａｎｅｉｄｏｌ）、１，３－ヘキサンジオール）、１，５ ペンタンジオール、塩化ベンザルコニウム、パラベン、亜硫酸塩（二酸化硫黄、重亜硫酸ナトリウム、亜硫酸水素カリウムなど）及び二ナトリウムＥＤＴＡ及びＢＨＴ（ブチル化ヒドロキシトルエン）及びＢＨＡ（ブチル化ヒドロキシル）アニソール）、ホルムアルデヒド（通常は溶液）、グルタルアルデヒド（昆虫を殺す）及びメチルクロロイソチアゾリノンを含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項20】
前記組成物は、薬学的又は栄養学的に許容され得る担体、希釈剤又は賦形剤をさらに含み、医薬製剤又は栄養補助食品製剤が、約０．００１重量パーセント（ｗｔ％）～約１０ｗｔ％の抽出混合物の活性成分を含む、請求項１に記載の組成物。
【請求項21】
組成物が、錠剤、硬カプセル、軟ゲルカプセル、粉末、顆粒、液体、チンキ剤、小袋、すぐに飲めるショット剤又はロゼンジ錠、化粧クリーム、ゲル、ローション、シャンプー、ヘアコンディショナー、ボディリンス、ボディローション、ヘアカラー剤、皮膚カラー剤、アイカラー剤、リップバーム、香水、歯磨き、マウスウォッシュ、フルーツジュース、アロエジュース、ヨーグルト、食品、清涼飲料水、飲料、加工された果物、チーズ製品、ワイン、逸品、ピーナッツバター、ＲＴＤ、プロテインバー又はスナックバーとして処方される、請求項１に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本米国ＰＣＴ出願は、所有者が共通し、この全体が本明細書に参照により組み込まれる２０１５年１１月９日に出願された「Ｎａｔｕｒａｌ Ｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｖｅｓ ａｎｄ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ａｇｅｎｔｓ」という名称の米国仮特許出願番号第６２２５２９８７号、及び２０１６年１１月７日に出願された「Ｎａｔｕｒａｌ Ｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｖｅｓ ａｎｄ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ａｇｅｎｔｓ，Ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ Ｔｈｅｒｅｏｆ」という名称の米国実用特許出願第１５／３４５，００６号に対する優先権を主張する。
【0002】
本発明主題の分野は、防腐剤、抗微生物剤、又はこれらの組み合わせとして作用することができる組成物及び関連する方法に関する。想定される実施形態は、食品、化粧品、栄養補助食品、口腔衛生製品及び医薬品を防腐するために使用することができる、アルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）の種子及びマグノリア・オフィシナリス（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ）の樹皮から誘導される抽出物から誘導される防腐剤に関する。
【背景技術】
【0003】
防腐剤は、食品、医薬品、化粧品、生体サンプルなどの製品に添加されて、微生物の増殖又は望ましくない化学変化による分解を防ぐ物質である。抗微生物性防腐剤は、細菌による分解を防ぎ、細菌、真菌及び他の微生物の増殖を阻害し、製品の品質を維持し、貯蔵寿命を延ばす。防腐剤は、単独で使用することも可能であり、又は脱水、ＵＶ－Ｃ照射、凍結乾燥、冷蔵などの防腐のための他の物理的技術と併用することもできる。抗酸化性防腐剤は、食品業界、特に、脂肪含有量が高い食品に一般的に使用されている。一般的な抗酸化剤としては、フェノール誘導体ＢＨＴ（ブチル化ヒドロキシトルエン）及びＢＨＡ（ブチル化ヒドロキシルアニソール）が含まれる。他の防腐剤としては、ホルムアルデヒド、グルタルアルデヒド、エタノール及びメチルクロロイソチアゾリノンが挙げられる。
【0004】
化学防腐剤と物理的な防腐が、通常、組み合わせられる。一般的な抗微生物性防腐剤としては、異なる製品を標的としている、硝酸ナトリウム、亜硝酸ナトリウム、亜硫酸塩（二酸化硫黄、重亜硫酸ナトリウム及び亜硫酸水素カリウム）、安息香酸／安息香酸ナトリウム、ソルビン酸／ソルビン酸ナトリウム、プロピオン酸／プロピオン酸カルシウム／プロピオン酸ナトリウム、ＥＤＴＡ二ナトリウムが挙げられる。多くの合成防腐剤の有効性、安全性及び毒性は、欧州及び一部のアジア諸国でも同様に禁止されてきたパラベン及びその類似物など、顧客からの有害な報告及び懸念のために、学者及び規制機関の間で精査されている。天然防腐剤は、アルカロイド、フラボノイド、芳香族テルペノイド及びサポニンなどの広範な構造的に多様な生物活性化合物による微生物感染のための、より安全で環境に優しい代替物と考えられている。
【0005】
塩、砂糖、酢、茶抽出物、ハーブ精油及び有機酸などの天然物質は、伝統的な防腐剤として十分に受け入れられている。例えば、レモン又は他の柑橘類の果汁に由来するクエン酸及びアスコルビン酸は、果物及びジュース産業において褐色化防止剤及び抗酸化剤として一般に使用されて、食品の品質を改善する。しかし、現行の天然防腐剤は、合成防腐剤、特に抗微生物性防腐剤と比較して、高価であるか、又は有効性があまり高くない場合があり、食品、化粧品及び他の生物製品産業におけるこれらの広範な使用を制限してしまう。製品の貯蔵寿命を延ばし、製品の品質を維持し、加工及び輸送の全工程において多くの態様で恩恵を受けて、製品の安全性を高めるために、効率的で標的が絞られた適切な防腐剤が不可欠である。従って、広範囲の微生物に対して強力な抗微生物活性を有する特殊な天然組成物を発見して利用するという考え方は、実用的であり、魅力的である。
【0006】
従って、代替となる天然防腐剤及び抗微生物剤が必要である。天然防腐剤を開発するために、世界中から集められた薬用植物から生成された１０，２１６種類を超える有機抽出物（ＯＥ）及び水性抽出物（ＡＥ）の植物ライブラリをスクリーニングするために、ハイスループット抗Ｅ．コーライ（Ｅ．ｃｏｌｉ）アッセイを実施した。アルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）の種子抽出物が、ＭＩＣ値が４０ｕｇ／ｍＬの強力な抗グラム陰性阻害を示す最良のリード物質であると同定された。バイオアッセイで誘導された単離及び同定により、活性要素が、図１に示されるようなブドムンキアミン（ｂｕｄｍｕｎｃｈｉｍａｉｎｅ）Ｃ及びその類似体であることを確認した。
【0007】
アルビジアは、大部分がアジア、アフリカ、マダガスカル、アメリカ及びオーストラリアの亜熱帯地域と熱帯地域に分布する、約１５０種を超える属であるが、大部分が旧世界の熱帯地域に分布している。多くの種は、風邪、下痢、頭痛、腸の病気、胃がん、喉の痛み、及び腹痛のために、インド及び南アフリカ諸国で民間薬として使用されてきた。例えば、Ａ．シンペリアナ（Ａ．ｓｃｈｉｍｐｅｒｉａｎａ）の幹樹皮は、細菌及び寄生虫の感染を治療するために固有に使用され、もっと一般的には、熱及び痛みの緩和に固有に使用される。
【0008】
これらの植物の最近の研究は、抗微生物性、抗寄生虫性、抗トリパノソーマ性及び蚊の殺虫活性を示した。これらのアルビジア植物のさらなる調査から、ブドムンキアミンＡ－Ｉ及び他の類似体によって表される固有の種類の大環状アルカロイドの発見につながった（Ｄｉｘｉｔ １９９５；Ａｓｓｉｓ １９９９；Ｍｉｓｒａ，１９９５；Ｏｖｅｎｄｅｎ ２００２；Ｓａｍｏｙｌｅｎｋｏ ２００９）。この種の特徴的な大環状アルカロイドは、種々の抗微生物活性、抗寄生虫活性及び抗がん活性を有するアルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｚｉａ ａｍａｒａ）、アルビジア・レベック（Ａｌｂｉｚｚｉａ ｌｅｂｂｅｋ）の種子、アルビジア・ガムミフェラ（Ａｌｂｉｚｚｉａ ｇｕｍｍｉｆｅｒａ）、アルビジア・シムペラナ（Ａｌｂｉｚｚｉａ ｓｃｈｉｍｐｅｒａｎａ）、アルビジア・サマン（Ａｌｂｉｚｉａ ｓａｍａｎ）／サマネア・サマン（Ｓａｍａｎｅａ ｓａｍａｎ）、アルビジア・シムペリアナ（Ａｌｂｉｚｉａ ｓｃｈｉｍｐｅｒｉａｎａ）、アルビジア・アディノセファラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｄｉｎｏｃｅｐｈａｌａ）の幹樹皮又は樹皮、アルビジア・イノピナタ（Ａｌｂｉｚｚｉａ ｉｎｏｐｉｎａｔａ）、サマネア・サマン（Ｓａｍａｎｅａ ｓａｍａｎ）（ピテコロビウム・サマン（Ｐｉｔｈｅｃｏｌｏｂｉｕｍ ｓａｍａｎ）＝アルビジア・サマン（Ａｌｂｉｚｚｉａ ｓａｍａｎ））の葉から報告されている（Ｓａｍｏｙｌｅｎｋｏ ２００９；Ｇｅｙｉｄ ２００５；Ｔｈｉｐｐｅｓｗａｍｙ ２０１５；Ｍａｒ １９９１；Ｐｅｚｚｕｔｏａ １９９２）。
【0009】
【0010】
マグノリア・オフィシナリス（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ）は、中国語では一般的に「ホープ（ｈｏｕｐｕ）」として知られており、非常に広範囲の用途をもつ伝統的な人気のある中国漢方薬の一要素であり、中国に自生するマグノリアの一種であり、主に、四川省と湖北省で栽培されている。ホープ（ｈｏｕｐｕ）は、その厚い樹皮を指し、幹、枝及び根から剥がすことができる。伝統的な適応症は、中風（ｗｉｎｄ ｓｔｒｏｋｅ）、傷寒（ｃｏｌｄ ｄａｍａｇｅ）、頭痛、気との戦い（ｆｉｇｈｔ ｑｉ）及び血流障害を治療することである。マグノリア樹皮は、月経痙攣、腹痛、腹部膨満及びガス発生、吐き気及び消化不良を治療するために使用されてきた。この樹皮は、咳及び喘息の治療に使用される処方の一成分でもある。マグノリア樹皮を含む製剤の多くは、咳や喘息を含む肺疾患、又は腸の感染症や痙攣を治療し、様々な原因による腹部腫脹及び浮腫を緩和する際に使用される。
【0011】
現代の研究から、この植物薬の種々の微生物に対する強力な抗微生物活性及び抗真菌活性が発見され、ビスフェノールリグナンが、抗微生物の有効性を担う主な活性要素であると同定されている。マグノロールとホノキオールは、図２に示すように、マグノリアの樹皮に見られる２つの主要なポリフェノール化合物であり、抗酸化性、抗炎症性、及び抗腫瘍性などの様々な薬理学的活性及び機能を有することが報告されている（Ｐａｒｋ ２００４）。ホノキオールの抗がん試験は、乳癌、前立腺癌、胃癌及び卵巣癌などの幾つかの異なる固体腫瘍型にも拡張されており、現在の抗がん治療法を強化する可能性がある（Ｆｒｉｅｄ ２００９）。ホノキオールは、炎症及び酸化ストレスも減らし、神経保護、炎症性疾患の治療薬としての大きな可能性を有するグルコース調節に有益な効果をもたらす。特に、マグノロール及びホノキオールは、グラム陽性菌及びグラム陰性菌、並びにプロピオニバクテリウム種（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｓｐ．）及びＳ．アウレウス（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）などの真菌に対し、強力な抗微生物活性を示すことが知られており、このことは、感染耐性が大きな微生物に対して効果的な抗微生物剤としての可能性を示している（Ｈｏ ２００１；Ｂａｎｇ ２０００；Ｋｉｍ ２０１５）。ホノキオールとマグノロールの含有量は、市販のマグノリア樹皮抽出物において、１～９９％の範囲で変動し得る。
【0012】
【0013】
これらの要素の幾つかがなぜ重要であると考えられ得るかについて、内容を与えるのに役立つ多くの参考文献が存在する。ＵＳ８３２９０９５は、マグノリア・オフィシナリス（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ）の超臨界流体抽出物から得られるチモール、モノラウリン及びマグノロールを含む化粧品製剤のための防腐剤組成物を開示する。ＵＳ７５９２０２５は、表面活性剤と組み合わせてマグノリア樹皮抽出物を含む、口腔ケアのためのビヒクル及び方法を開示する。
【0014】
ＣＮ１０１５１６３６４は、ヒドロキシチロソールアルコール及び／又はオレウロペインと、リグスチリドオレウロペインアグリコン、マグノロール及びＰａｒｋフェノール、ゲニステイン、レスベラトロール、ＥＧＣＧ、マグノリア樹皮抽出物、カシュー果実抽出物及びグリチリザ・フォエチダ（Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ ｆｏｅｔｉｄａ）群などのさらなる要素の群から選択される少なくとも１種類のさらなる要素とを含む組成物を開示し、想定される実施形態は、医薬組成物としての使用、特に、障害の治療、炎症性薬物の障害の治療又は予防のための使用にも関する。
【0015】
ＣＮ１１０３７５６は、天然の消毒剤を開示し、この消毒剤は、９０～９９．７％のオフィシャル・マグノリア（ｏｆｆｉｃｉａｌ ｍａｇｎｏｌｉａ）の樹皮の抽出粉末と、残りの成分である中国大黄（Ｃｈｉｎｅｓｅ ｒｈｕｂａｒｂ）の抽出粉末とを混合することによって構成される。
【0016】
ＣＮ１００５４４５９７は、中国ハーブ医薬品のそれぞれの味の異なる特徴に基づき、原材料としてのマグノリア、クレマチス、フムルス、ルゴサの漢方防腐剤を開示する。
【0017】
ＣＮ１０３４１６４８０は、複合オレンジ防腐剤、植物抽出物、食品防腐剤、安定剤及び酸性調節剤複合材料の植物源のための方法を開示している。主な技術的特徴：主な成分は、褐色エマルションとして、防腐剤マグノリア抽出物１０～１５％、２０～３０％のチョウジ抽出物、ソルビン酸カリウム１０～２０％、１０～２０％プロピルパラベン、２～５％クエン酸、１～５％安定剤の特質を含有している。
【0018】
ＷＯ２００６０６９２０９は、有効な抗微生物性及び抗炎症性の経口組成物を開示し、この組成物は、マグノリア抽出物及びホップ抽出物からの１種類以上の活性化合物を含む活性成分の組み合わせを含む。
【0019】
ＷＯ２０１４１３１１９１は、ホノキオール及び／又はマグノロールを含む抗微生物活性物質とカルボン酸とを含む組成物を開示する。これらの使用方法も提供されている。しかし、これらの参考文献のいずれも、当該技術分野における防腐剤、抗微生物剤又はこれらの組み合わせとして作用する組成物の必要性に言及していない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0020】
【特許文献1】米国特許第８３２９０９５号
【特許文献2】米国特許第７５９２０２５号
【特許文献3】中国特許第１０１５１６３６４号
【特許文献4】中国特許第１１０３７５６号
【特許文献5】中国特許第１００５４４５９７号
【特許文献6】中国特許第１０３４１６４８０号
【特許文献7】国際公開第２００６０６９２０９号
【特許文献8】国際公開第２０１４１３１１９１号
【非特許文献】
【0021】
【非特許文献1】Ｄｉｘｉｔ １９９５
【非特許文献2】Ａｓｓｉｓ １９９９
【非特許文献3】Ｍｉｓｒａ，１９９５
【非特許文献4】Ｏｖｅｎｄｅｎ ２００２
【非特許文献5】Ｓａｍｏｙｌｅｎｋｏ ２００９
【非特許文献6】Ｇｅｙｉｄ ２００５
【非特許文献7】Ｔｈｉｐｐｅｓｗａｍｙ ２０１５
【非特許文献8】Ｍａｒ １９９１
【非特許文献9】Ｐｅｚｚｕｔｏａ １９９２
【非特許文献10】Ｐａｒｋ ２００４
【非特許文献11】Ｆｒｉｅｄ ２００９
【非特許文献12】Ｈｏ ２００１
【非特許文献13】Ｂａｎｇ ２０００
【非特許文献14】Ｋｉｍ ２０１５
【発明の概要】
【0022】
少なくとも１種類のアルビジア抽出物とマグノリア抽出物との混合物を含む組成物が本明細書に開示される。幾つかの実施形態では、この組成物は、１種類以上の大環状アルカロイドを豊富に含む少なくとも１種類のアルビジア抽出物と、１種類以上のリグナンを豊富に含む少なくとも１種類のマグノリア抽出物との混合物を含む。
【図面の簡単な説明】
【0023】
【図1】ブドムンキアミンＣの化学構造
【図2】マグノロールとホノキオールの化学構造
【図3】１ｍｇ／ｍＬでの４１６－１４５－５０のコロニー数
【図4】５００ｕｇ／ｍＬでの４１６－１４５－５０のコロニー数
【図5】０．５％でのイオン性ｏ／ｗエマルション系における１９４０６０１のコロニー数
【図6】０．１％でのイオン性ｏ／ｗエマルション系における１９４０６０２のコロニー数
【発明を実施するための形態】
【0024】
簡潔には、本開示及び想定される実施形態は、開示される化合物の立体異性体、薬学的又は栄養学的に許容され得る塩、互変異性体、グリコシド及びプロドラッグを含む、防腐剤及び抗微生物剤として使用可能な化合物及び組成物、並びに関連する方法に関する。想定される実施形態は、食品、化粧品、栄養補助食品、口腔衛生製品及び医薬品を防腐するために使用することができる、アルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）の種子及びマグノリア・オフィシナリス（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ）の樹皮から誘導される抽出物から誘導される防腐剤に関する。
【0025】
想定される化合物及び組成物は、少なくとも１種類の植物抽出物から誘導されるか、又は少なくとも１種類の植物抽出物を含み、植物抽出物は、豊富化されていてもよく、又は豊富化されていなくてもよい。この開発の一部として、想定される化合物及び組成物を試験するために、頻繁に用いられる受け入れ可能なアッセイを利用した。
【0026】
具体的には、植物抽出物の混合物を含む、防腐剤及び抗微生物性組成物のための組成物、化合物及び方法が開示され、植物抽出物は、少なくとも１種類のアルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）の種子と、少なくとも１種類のマグノリア・オフィシナリス（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ）の樹皮とを含む。
【0027】
想定される実施形態は、少なくとも１種類のアルビジア抽出物と少なくとも１種類のマグノリア抽出物との混合物を含む、防腐剤混合物又は組成物を含む。さらに別の想定される実施形態は、１種類以上の大環状アルカロイドを豊富に含む少なくとも１種類のアルビジア抽出物と、１種類以上のリグナンを豊富に含む少なくとも１種類のマグノリア抽出物との混合物を含む、組成物を含む。想定される実施形態では、上述の組成物は、防腐剤、抗微生物剤又はこれらの組み合わせであると考えられる。
【0028】
幾つかの想定される実施形態は、植物材料又は他の供給源に由来する少なくとも１種類のアルビジア抽出物と、植物材料又は別の供給源に由来する少なくとも１種類のマグノリア抽出物との混合物を含み、少なくとも１種類のアルビジア抽出物は、この少なくとも１種類のアルビジア抽出物の植物材料又は別の供給源における１種類以上の大環状アルカロイドの量又は活性と比較して、１種類以上の大環状アルカロイドの量又は活性が増えており、少なくとも１種類のマグノリア抽出物は、この少なくとも１種類のマグノリア抽出物の植物材料又は別の供給源における１種類以上のリグナンの量又は活性と比較して、１種類以上のリグナンの量又は活性が増えている。
【0029】
幾つかの実施形態では、少なくとも１種類のアルビジア抽出物と少なくとも１種類のマグノリア抽出物を、約１０：１～１：１０の範囲の重量比でブレンドする。他の実施形態では、少なくとも１種類のアルビジア抽出物と少なくとも１種類のマグノリア抽出物を、約１：１の重量比でブレンドする。想定される防腐剤、組成物及び混合物を利用して、食品、化粧品、栄養補助食品及び医薬品を防腐することができる。これらの想定される防腐剤、組成物及び混合物は、全組成物の約０．００１重量％～約１０重量％の範囲で与えられてもよい。幾つかの実施形態では、その範囲は、全組成物の約０．０１重量％～約５重量％である。他の実施形態では、その範囲は、全組成物の約０．１重量％～約１重量％である。
【0030】
これに加え、植物抽出物の混合物を含む、防腐剤及び抗微生物性組成物のための組成物、化合物及び方法が開示され、植物抽出物は、１種類以上の大環状アルカロイドを豊富に含む少なくとも１種類のアルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）の種子抽出物と、１種類以上のビフェノールリグナンを豊富に含むマグノリアの樹皮抽出物とを含む。
【0031】
抗微生物活性が高い化合物及び抽出物の固有のブレンドを発見するという概念は、抗生物質の組み合わせの実践から拝借したものである。相乗的な抗生物質の組み合わせの分野は非常に広範であり、幾つかの固定された組み合わせは、薬物耐性を有する感染の治療に対する効果に関して商業的に成功裏に開発された。世界中から集められた薬用植物から生成された１０，２１６種類を超える有機抽出物及び水性抽出物の植物ライブラリのハイスループット抗Ｅ．コーライ（Ｅ．ｃｏｌｉ）スクリーニングによって、アルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）の種子抽出物が、ＭＩＣ値が４０ｕｇ／ｍＬの強力な抗グラム陰性阻害を示す最良のリード物質であると同定された。バイオアッセイで誘導された単離及び同定により、活性要素が、ブドムンキアミン（ｂｕｄｍｕｎｃｈｉｍａｉｎｅ）Ｃ及びその類似体であることを確認した。
【0032】
アルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）の種子抽出物は、抗グラム陽性菌及び抗グラム陰性菌の両方に対して強力な阻害を示したが、カンジダ・アルビカンス（Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ）又はアスペルギルス・ブラシリエンシス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）のいずれかに対し、中程度の抗真菌活性を有していた。ＵＳＰの＜５１＞章のカテゴリー２防腐剤で必要とされる、グラム陽性、グラム陰性及び真菌に対して有効な組成物を探索するために、主に、抗真菌活性、特に、Ｃ．アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）及びＡ．ブラシリエンシス（Ａ．ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）に対する抗真菌活性を増強することを目的とし、予測されない転帰の向上のために、アルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）種子抽出物が、マグノリア樹皮抽出物と共に配合された。
【0033】
驚くべきことに、予想されないことだが、マグノリア樹皮抽出物を添加すると、Ｃ．アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）及びＡ．ブラシリエンシス（Ａ．ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）両方に対する抗真菌活性が顕著に増加し、従って、これら２つの物質の組み合わせの重要性を意味している。これらの２種類の植物材料を組み合わせる利点が決定され、Ｃ．アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）とＡ．ブラシリエンシス（Ａ．ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）の両方に対する予想されない相乗効果が観察され、ＦＣＩ指数分析に基づく相加的な相互作用を超える有利な効果を有することが観察された。まとめると、これらの２種類の植物を特定の比率にすると、その顕著な抗微生物活性及び効果において示されるように、組成物の新規性を与えると主張されている。
【0034】
アルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）種子抽出物をマグノリア樹皮抽出物と１：３～１：１の比率でブレンドしたとき、興味深い相乗作用が発見された。これらの２種類の植物は、想定され、開示される生物活性物質を得るために、以前に特定の比率で組み合わされることがなく、これらの想定される実施形態における固有な組み合わせとして一般的に理解される。
【0035】
組成物１Ａ：１Ｍ（ここで、Ａはアルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）種子抽出物を表し、Ｍはマグノリア樹皮抽出物を表す。）の抗微生物活性及び有効性を、ＵＳＰ＜５１＞ガイドラインに従って評価した。組成物１Ａ：１Ｍは、比率１：１のアルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）種子抽出物とマグノリア樹皮抽出物であり、濃度１ｍｇ／ｍＬでＰ．エルジノーサ（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）及びＡ．ブラシリエンシス（Ａ．ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）の数を有意に下げ、Ｌｏｇ１０減少はそれぞれ５．５８及び４．１であり、有意には、完全ではなくても、４８時間後に、Ｓ．アウレウス（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）、Ｅ．コーライ（Ｅ．ｃｏｌｉ）及びＣ．アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）をなくし、５種類全ての微生物に対し、７日後、１４日後、２８日後に、細菌又は真菌の増殖は観察されなかった。実際に、構成成分のいずれも、アルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）とマグノリアとを含む想定される化合物又は組成物について示されたものと同等の大きさの強力で広範囲にわたる抗微生物活性を示さなかった。さらに、想定される固有の比率、即ち、約１Ａ：１Ｍは、Ｅ．コーライ（Ｅ．ｃｏｌｉ）、Ｐ．エルジノーサ（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、Ｓ．アウレウス（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）、Ａ．ブラシリエンシス（Ａ．ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）及びＣ．アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）を含む５種類全ての微生物に対する、この組成物の有効性を示した。
【0036】
アルビジアは、以下の少なくとも１種類から単独で、又は互いに組み合わせて誘導され、得られ、又は選択されることが想定される：アルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）、アルビジア・シンペリアナ（Ａｌｂｉｚｉａ ｓｃｈｉｍｐｅｒｉａｎａ）、アルビジア・レベック（Ａｌｂｉｚｉａ ｌｅｂｂｅｋ）、アルビジア・ガムミフェラ（Ａｌｂｉｚｉａ ｇｕｍｍｉｆｅｒａ）、アルビジア・イノピナタ（Ａｌｂｉｚｚｉａ ｉｎｏｐｉｎａｔａ）、アルビジア・サマン（Ａｌｂｉｚｉａ ｓａｍａｎ）（サマネア・サマン（Ｓａｍａｎｅａ ｓａｍａｎ）＝ピテコロビウム・サマン（Ｐｉｔｈｅｃｏｌｏｂｉｕｍ ｓａｍａｎ））、アルビジア・アディアンチフォリア（Ａｌｂｉｚｉａ ａｄｉａｎｔｈｉｆｏｌｉａ）、アルビジア・アディノセファラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｄｉｎｏｃｅｐｈａｌａ）、アルビジア・アンテルミンチカ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｎｔｈｅｌｍｉｎｔｉｃａ）、アルビジア・アンチュネシアナ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｎｔｕｎｅｓｉａｎａ）、アルビジア・シェバリエリ（Ａｌｂｉｚｉａ ｃｈｅｖａｌｉｅｒｉ）、アルビジア・コルニキュラタ（Ａｌｂｉｚｉａ ｃｏｒｎｉｃｕｌａｔａ）、アルビジア・クラシラメア（Ａｌｂｉｚｉａ ｃｒａｓｓｉｒａｍｅａ）、アルビジア・デュクロウキシ（Ａｌｂｉｚｉａ ｄｕｃｌｏｕｘｉｉ）、アルビジア・グラブラ（Ａｌｂｉｚｉａ ｇｌａｂｒａ）、アルビジア・ジュリブリシン（Ａｌｂｉｚｉａ ｊｕｌｉｂｒｉｓｓｉｎ）、アルビジア・カルコラ（Ａｌｂｉｚｉａ ｋａｌｋｏｒａ）、アルビジア・レッベコイデス（Ａｌｂｉｚｉａ ｌｅｂｂｅｋｏｉｄｅｓ）、アルビジア・ミリオフィラ（Ａｌｂｉｚｉａ ｍｙｒｉｏｐｈｙｌｌａ）、アルビジア・ニグリカンス（Ａｌｂｉｚｉａ ｎｉｇｒｉｃａｎｓ）、アルビジア・オドラティッシマ（Ａｌｂｉｚｉａ ｏｄｏｒａｔｉｓｓｉｍａ）、アルビジア・ペテリサナ（Ａｌｂｉｚｉａ ｐｅｔｅｒｉｓａｎａ）、アルビジア・ポイラネイ（Ａｌｂｉｚｉａ ｐｏｉｌａｎｅｉ）、アルビジア・プロセラ（Ａｌｂｉｚｉａ ｐｒｏｃｅｒａ）、アルビジア・タンガニセンシス（Ａｌｂｉｚｉａ ｔａｎｇａｎｙｉｃｅｎｓｉｓ）、アルビジア・ビアレアナ・ピエール（Ａｌｂｉｚｉａ ｖｉａｌｅａｎａ Ｐｉｅｒｒｅ）、アルビジア・ジジア（Ａｌｂｉｚｉａ ｚｙｇｉａ）、アフェランドラ・フスコプンクタタ（Ａｐｈｅｌａｎｄｒａ ｆｕｓｃｏｐｕｎｃｔａｔａ）、エフェドラ種（Ｅｐｈｅｄｒａ ｓｐｐ．）、ベルバスカム・プソイドノビル（Ｖｅｒｂａｓｃｕｍ ｐｓｅｕｄｏｎｏｂｉｌｅ）、インカルビレア・シネンシス（Ｉｎｃａｒｖｉｌｌｅａ ｓｉｎｅｎｓｉｓ）、バーバスカム・フォエニカム（Ｖｅｒｂａｓｃｕｍ ｐｈｏｅｎｉｃｕｍ）、バーバスカム・ニグラム（Ｖｅｒｂａｓｃｕｍ ｎｉｇｒｕｍ）、クレロデンドラム・ブチネリ（Ｃｌｅｒｏｄｅｎｄｒｕｍ ｂｕｃｈｎｅｒｉ）、又はアフェランドラ・スクアローサ（Ａｐｈｅｌａｎｄｒａ ｓｑｕａｒｒｏｓａ）。
【0037】
アルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）抽出物は、開示される通り、標的化合物又は組成物の一部として利用可能な、想定される要素又は構成成分である。アルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）抽出物は、アルビジア・シンペリアナ（Ａｌｂｉｚｉａ ｓｃｈｉｍｐｅｒｉａｎａ）、アルビジア・レベック（Ａｌｂｉｚｉａ ｌｅｂｂｅｋ）、アルビジア・ガムミフェラ（Ａｌｂｉｚｉａ ｇｕｍｍｉｆｅｒａ）、アルビジア・イノピナタ（Ａｌｂｉｚｚｉａ ｉｎｏｐｉｎａｔａ）、アルビジア・サマン（Ａｌｂｉｚｉａ ｓａｍａｎ）（サマネア・サマン（Ｓａｍａｎｅａ ｓａｍａｎ）＝ピテコロビウム・サマン（Ｐｉｔｈｅｃｏｌｏｂｉｕｍ ｓａｍａｎ））、アルビジア・アディアンチフォリア（Ａｌｂｉｚｉａ ａｄｉａｎｔｈｉｆｏｌｉａ）、アルビジア・アディノセファラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｄｉｎｏｃｅｐｈａｌａ）、アルビジア・アンテルミンチカ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｎｔｈｅｌｍｉｎｔｉｃａ）、アルビジア・アンチュネシアナ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｎｔｕｎｅｓｉａｎａ）、アルビジア・シェバリエリ（Ａｌｂｉｚｉａ ｃｈｅｖａｌｉｅｒｉ）、アルビジア・コルニキュラタ（Ａｌｂｉｚｉａ ｃｏｒｎｉｃｕｌａｔａ）、アルビジア・クラシラメア（Ａｌｂｉｚｉａ ｃｒａｓｓｉｒａｍｅａ）、アルビジア・デュクロウキシ（Ａｌｂｉｚｉａ ｄｕｃｌｏｕｘｉｉ）、アルビジア・グラブラ（Ａｌｂｉｚｉａ ｇｌａｂｒａ）、アルビジア・ジュリブリシン（Ａｌｂｉｚｉａ ｊｕｌｉｂｒｉｓｓｉｎ）、アルビジア・カルコラ（Ａｌｂｉｚｉａ ｋａｌｋｏｒａ）、アルビジア・レッベコイデス（Ａｌｂｉｚｉａ ｌｅｂｂｅｋｏｉｄｅｓ）、アルビジア・ミリオフィラ（Ａｌｂｉｚｉａ ｍｙｒｉｏｐｈｙｌｌａ）、アルビジア・ニグリカンス（Ａｌｂｉｚｉａ ｎｉｇｒｉｃａｎｓ）、アルビジア・オドラティッシマ（Ａｌｂｉｚｉａ ｏｄｏｒａｔｉｓｓｉｍａ）、アルビジア・ペテリサナ（Ａｌｂｉｚｉａ ｐｅｔｅｒｉｓａｎａ）、アルビジア・ポイラネイ（Ａｌｂｉｚｉａ ｐｏｉｌａｎｅｉ）、アルビジア・プロセラ（Ａｌｂｉｚｉａ ｐｒｏｃｅｒａ）、アルビジア・タンガニセンシス（Ａｌｂｉｚｉａ ｔａｎｇａｎｙｉｃｅｎｓｉｓ）、アルビジア・ビアレアナ・ピエール（Ａｌｂｉｚｉａ ｖｉａｌｅａｎａ Ｐｉｅｒｒｅ）、アルビジア・ジジア（Ａｌｂｉｚｉａ ｚｙｇｉａ）、アフェランドラ・フスコプンクタタ（Ａｐｈｅｌａｎｄｒａ ｆｕｓｃｏｐｕｎｃｔａｔａ）、エフェドラ種（Ｅｐｈｅｄｒａ ｓｐｐ．）、ベルバスカム・プソイドノビル（Ｖｅｒｂａｓｃｕｍ ｐｓｅｕｄｏｎｏｂｉｌｅ）、インカルビレア・シネンシス（Ｉｎｃａｒｖｉｌｌｅａ ｓｉｎｅｎｓｉｓ）、バーバスカム・フォエニカム（Ｖｅｒｂａｓｃｕｍ ｐｈｏｅｎｉｃｕｍ）、バーバスカム・ニグラム（Ｖｅｒｂａｓｃｕｍ ｎｉｇｒｕｍ）、クレロデンドラム・ブチネリ（Ｃｌｅｒｏｄｅｎｄｒｕｍ ｂｕｃｈｎｅｒｉ）、アフェランドラ・スクアローサ（Ａｐｈｅｌａｎｄｒａ ｓｑｕａｒｒｏｓａ）又はこれらの組み合わせを含む、任意の適切な１つ以上の供給源から得られ、誘導され、又は選択されてもよい。
【0038】
アルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）抽出物は、本明細書で想定されるように、１種類以上の大環状アルカロイドを豊富に含んでいてもよい。幾つかの想定される実施形態では、アルビジア抽出物は、約０．０１％～９９．９％の大環状アルカロイドを含む。アルビジア又はアルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）抽出物から単離された、想定されるアルカロイドは、水、メタノール、エタノール、アルコール、水の混合溶媒又はこれらの組み合わせを含む任意の適切な溶媒を用い、又は超臨界流体を用いて抽出される。想定される実施形態では、アルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）抽出物は、約０．０１％～約９９．９％の大環状アルカロイドを含む。アルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）抽出物から単離される、想定されるアルカロイドは、ブドムンキアミンＡ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｊ、Ｋ、ブドムンキアミンＬ１、Ｌ２、Ｌ３、Ｌ４、Ｌ５、Ｌ６、１３－ノルメチルブドムンキアミンＫ、９－ノルメチルブドムンキアミンＫ、１－ノルメチルブドムンキアミンＫ、６’－ヒドロキシ－９－ノルメチルブドムンキアミンＫ、６’－ヒドロキシブドムンキアミンＫ、フェリペアルビジン（Ｆｅｌｉｐｅａｌｂｉｚｉｎｅ）Ａ、フェリペアルビジンＢ、６′－ヒドロキシブドムンキアミンＣ、ピテコロビン、プロトメチン、ベルバメチン、ベルバメトリン、イソベルバメトリン、イソベルバメチン、ベルバメクリン、イソベルバメクリン、ベルバスシン（Ｖｅｒｂａｓｃｉｎｅ）、ベルバシン（Ｖｅｒｂａｃｉｎｅ）、ベルバシトリン、ベルバロシン、イソベルバシトリン、ベルバロセニン、イソベルバシクリン、Ｎ１－（Ｚ）－ｐ－メトキシシンナモイルブクネリン、ブクネリン、ベルバミジン、ベルバセニン、ベルバセニン、イソベルバミジン、シュウェイニン（Ｓｃｈｗｅｉｎｉｎｅ）、プレランドリン、インカシンＢ’、インカシンＢ、又はこれらの組み合わせである。
【0039】
マグノリア抽出物は、標的化合物又は組成物の一部として利用することができる、想定される要素又は構成成分である。マグノリア抽出物は、マグノリア・オフィシナリス（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓ）、マグノリア・アキュミネート（Ｍａｇｎｏｌｉａ ａｃｕｍｉｎａｔｅ）、マグノリア・ビオンジ（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｂｉｏｎｄｉｉ）、マグノリア・ココ（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｃｏｃｏ）、マグノリア・デニュデート（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｄｅｎｕｄａｔｅ）、マグノリア・ファルゲッシ（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｆａｒｇｅｓｉｉ）、マグノリア・ガレッティ（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｇａｒｒｅｔｔｉｉ）、マグノリア・グランジフローラ（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｇｒａｎｄｉｆｌｏｒａ）、マグノリア・ヘンリ（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｈｅｎｒｙｉ）、マグノリア・リリフローラ（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｌｉｌｉｆｌｏｒａ）、マグノリア・カチラチライ（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｋａｃｈｉｒａｃｈｉｒａｉ）、マグノリア・コブス（Ｍａｇｎｏｌｉａ Ｋｏｂｕｓ）、マグノリア・オボヴァタ（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｏｂｏｖａｔａ）、マグノリア・プラエコシッシマ（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｐｒａｅｃｏｃｉｓｓｉｍａ）、マグノリア・プテロカルパ（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｐｔｅｒｏｃａｒｐａ）、マグノリア・ピラミダタ（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｐｙｒａｍｉｄａｔａ）、マグノリア・ロスラーテ（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｒｏｓｔｒａｔｅ）、マグノリア・サリシフォリア（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｓａｌｉｃｉｆｏｌｉａ）、マグノリア・シエボルディ（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｓｉｅｂｏｌｄｉｉ）、マグノリア・ソウランゲアナ（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｓｏｕｌａｎｇｅａｎａ）、マグノリア・ステラート（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｓｔｅｌｌａｔｅ）、マグノリア・バージニアナ（Ｍａｇｎｏｌｉａ ｖｉｒｇｉｎｉａｎａ）、カバノキリグニンの分解産物、アカンサス・エブラクテアタス（Ａｃａｎｔｈｕｓ ｅｂｒａｃｔｅａｔｕｓ）、アプトシマム・スピネセンス（Ａｐｔｏｓｉｍｕｍ ｓｐｉｎｅｓｃｅｎｓ）、アラリア・ビピナータ（Ａｒａｌｉａ ｂｉｐｉｎｎａｔａ）、アラウカリア・アングスチフォリア（Ａｒａｕｃａｒｉａ ａｎｇｕｓｔｉｆｏｌｉａ）、アラウカリア・アラウカナ（Ａｒａｕｃａｒｉａ ａｒａｕｃａｎａ）、アルテミシア・アブシンシウム（Ａｒｔｅｍｉｓｉａ ａｂｓｉｎｔｈｉｕｍ）、ハプロフィラム・アクチフォリウム（Ｈａｐｌｏｐｈｙｌｌｕｍ ａｃｕｔｉｆｏｌｉｕｍ）、ハプロフィラム・ペルフォラタム（Ｈａｐｌｏｐｈｙｌｌｕｍ ｐｅｒｆｏｒａｔｕｍ）、リリオデンドロン・チューリッピフェラ（Ｌｉｒｉｏｄｅｎｄｒｏｎ ｔｕｌｉｐｉｆｅｒａ）、クラメリア・シスチソイデス（Ｋｒａｍｅｒｉａ ｃｙｓｔｉｓｏｉｄｅｓ）、ペリラ・フルテセンス（Ｐｅｒｉｌｌａ ｆｒｕｔｅｓｃｅｎｓ）、ローソニア・イネルミス・ミリスチカ（Ｌａｗｓｏｎｉａ ｉｎｅｒｍｉｓ Ｍｙｒｉｓｔｉｃａ）フレグランス（ナツメグ）、パラクメリア・ユンナネンシス（Ｐａｒａｋｍｅｒｉａ ｙｕｎｎａｎｅｎｓｉｓ）（好ましい属名はマグノリア）、ペルセア・ジャポニカ（Ｐｅｒｓｅａ ｊａｐｏｎｉｃａ）、ピパー・フトカドスラ（Ｐｉｐｅｒ ｆｕｔｏｋａｄｓｕｒａ）、ピパー・ワイチ（Ｐｉｐｅｒ ｗｉｇｈｔｉｉ）、ロリニア・ムコサ（Ｒｏｌｌｉｎｉａ ｍｕｃｏｓａ）、サッサフラス・ランダイエンス（Ｓａｓｓａｆｒａｓ ｒａｎｄａｉｅｎｓｅ）、スクロフラリア・アルビダ－コルチカ（Ｓｃｒｏｐｈｕｌａｒｉａ ａｌｂｉｄａ－ｃｏｌｃｈｉｃａ）、ステレラ・チャマエジャスメ（Ｓｔｅｌｌｅｒａ ｃｈａｍａｅｊａｓｍｅ）、シリンガ・ベルチナ（Ｓｙｒｉｎｇａ ｖｅｌｕｔｉｎａ）、シジジウム・クミニ（Ｓｙｚｙｇｉｕｍ ｃｕｍｉｎｉ）、タラウマ・グロリエンシス（Ｔａｌａｕｍａ ｇｌｏｒｉｅｎｓｉｓ）、ビロラ・エロンゲート（Ｖｉｒｏｌａ ｅｌｏｎｇａｔｅ）、アーバノデンドロン・ベルコサム（Ｕｒｂａｎｏｄｅｎｄｒｏｎ ｖｅｒｒｕｃｏｓｕｍ）、ウィクストロエミア・シコキアナ（Ｗｉｋｓｔｒｏｅｍｉａ ｓｉｋｏｋｉａｎａ）、又はこれらの組み合わせを含む、任意の適切な供給源から得られてもよい。
【0040】
マグノリア抽出物は、本明細書で想定されるように、ジフェノールリグナンを含む、１種類以上のリグナンを豊富に含んでいてもよい。マグノリア抽出物から単離された、想定されるリグナンは、水、メタノール、エタノール、アルコール、水混合溶媒又はこれらの組み合わせを含む任意の適切な溶媒を用い、又は超臨界流体を用いて抽出される。
【0041】
想定される実施形態では、マグノリア抽出物は、約０．０１％～約９９．９％のジフェノールリグナン、ビフェノールリグナン又はこれらの組み合わせを含む。マグノリア抽出物から単離された、想定されるリグナンは、マグノロール、ホノキオール、ビオンジニンＡ、２，３－ビス（４－ヒドロキシ－３－メトキシフェニル）－２－プロペナール、デヌダジオンＣ、クロバネマグノロール、８－［２－ヒドロキシ－５－（２－プロペニル）フェニル］－６－（２－プロペニル）－２Ｈ－１－ベンゾピラン－２－オン、デヌダノリドＣ、デヌダノリドＤ、デヌダノリドＢ、デヌダノリドＡ、デヌダチンＡ、デヌダチンＢ；（＋）－形態，４－ヒドロキシ－６’－メトキシ－３，３’－ビリグナ－７，７’－ジエン－９，９’－ジアール、４’－メトキシマグノジアルデヒド、５，５’－ジ－２－プロペニル－［１，１’－ビフェニル］－２，２’－ジオール、２，２’－ビカビコール、ＦＥＭＡ ４５５９、５，５’－ジアリル－２，２’－ジヒドロキシビフェニル、ボルニルマグノロール、５，５’－ジアリル－２－（３－メチル－２－ブテニルオキシ）ビフェニル－２’－オール、５，５’－ジアリル－２－（アリルオキシ）ビフェニル－２’－オール、３’，５－ジアリル－２，４’－ジヒドロキシビフェニル、３’，５－ジ－２－プロペニル－２，４’－ビフェニルジオール、５－アリル－３’－（１－プロペニル）ビフェニル－２，４’－ジオール、３’－（１－プロペニル）－５－（２－プロペニル）－２，４’－ビフェニルジオール、３’，５－ジアリル－２－ヒドロキシ－４’－メトキシビフェニル、４’－Ｏ－メチルホノキオール、２－ヒドロキシ－４’－メトキシ－３’，５－ジ－２－プロペニルビフェニル、４，４’－ジアリル－２，３’－ジヒドロキシジフェニルエーテル、２－［３－ヒドロキシ－４－（２－プロペニル）フェノキシ］－５－（２－プロペニル）フェノール、２－ヒドロキシ－３－メトキシ－４’，５－ジ－２－プロペニルジフェニルエーテル、４’，５－ジアリル－２－ヒドロキシ－３－メトキシジフェニルエーテル、２－メトキシ－４－（２－プロペニル）－６－［４－（２－プロペニル）フェノキシ］フェノール、ファルゲシン、メチルプルビアチロール、３，４－ジメトキシ－３’，４’－メチレンジオキシ－７，９’：７’，９－ジエポキシリグナン、コブシン、デスメトキシアシャンチン、Ｏ－メチルピペリトール、スピネシン、（＋）－ファルゲシン、プラニニン、メチルプルビアチロール、パラクメリンＡ、６－アリル－７－（３，４－ジメトキシフェニル）－２，３－ジメトキシ－８－メチルトリシクロ［４．２．０．０．２，８］オクタ－３－エン－５－オン、マグノサリン、ジピペリチルマグノロール、カチラチロールＢ、アクミナチン、リカリンＤ、オイデスホノキオールＡ、オイデスマグノロール、オイデスミン；（＋）－形態、（＋）－エピオイデスミン、（－）－エピオイデスミン、カチラチロールＡ、ユーポマテノイド１３、ファルゲシフェノールＢ、ファルゲシフェノールＣ、ファルゲソンＡ、ファルゲソンＢ、４，５－ジメトキシ－３’，４’－メチレンジオキシ－２，７’－ジオキソ－５，８’－リグナ－３，６，８－トリエン、４－（１，３－ベンゾジオキソール－５－イル）－２，３，４，５－テトラヒドロ－７－メトキシ－５－メチル－８Ｈ－２，５ａ－メタノ－１－ベンゾオキセピン－８－オン、ガレッチリグナンＡ、ガレッチリグナンＢ、テトラヒドロ－４－（３－ヒドロキシ－４，５－ジメトキシフェニル）－１Ｈ，３Ｈ－フロ［３，４－ｃ］フラン－１－オン、カチラノール、７’，９－ジヒドロキシ－３，３’，４，４’，５－ペンタメトキシ－７，９’－エポキシリグナン、マグノンＢ、３，３’，４，４’，５，９－ヘキサメトキシ－７，９’－エポキシリグナン－７’－オン、マグノレニンＣ、３’，４，７，９，９’－ペンタヒドロキシ－３，５’－ジメトキシ－８，４’－オキシネオリグナン、３，３’－ジメトキシ－４，５：４’，５’－ビス（メチレンジオキシ）ピラミダチン、３’－ヒドロキシ－３，４，４’，５，５’－ペンタメトキシピラミダチン、ピラミダチンＢ、３，３’，４’，５’－テトラメトキシ－４，５－メチレンジオキシピラミダチン、３，３’，４，４’，５，５’－ヘキサメトキシピラミダチン、ピラミダチンＣ、ピラミダチン、ピラミダチンＤ、３－ヒドロキシ－３’，４，４’，５，５’－ペンタメトキシピラミダチン、ピラミダチンＡ、３－ヒドロキシ－３’，４，５－トリメトキシ－４’，５’－メチレンジオキシピラミダチン、ピラミダチンＦ、ピラミダチンＧ、ピラミダチンＨ、ピラミダチンＥ、５’－ヒドロキシ－３，３’，４，４’，５－ペンタメトキシピラミダチン、マグノシニン、２’，３，４，４’，５，６－ヘキサメトキシ－２，７’－シクロリグナ－７－エン、アカントシドＢ、エレウテロシドＥ１、３－ヒドロキシ－３’，４，４’，５，５’－ペンタメトキシ－７，９’：７’，９－ジエポキシリグナン、（＋）－エピシリンガレシノール、リリオレシノールＡ、シンプリコシゲノール、コブシノールＢ、ファルゲソール、９－Ｏ－アセチルファルゲソール、マグノロン、ビオンジニンＢ、ビオンジニンＥ、マグノンＡ、７，９，９’－トリヒドロキシ－３，３’，４－トリメトキシ－８，４’－オキシネオリグナン、エリトロ－形態、トレオ－形態、マグノバチンＡ、マグノバチンＢ、オレイフェリンＣ、３，４：３’，４’－ビス（メチレンジオキシ）－７－リグナノール、７－ヒドロキシ－３，４：３’，４’－ビス（メチレンジオキシ）リグナン、リリフロジオン、デヌダジオンＢ、デヌダジオンＡ、リリフロールＡ、リリフロールＢ、デヌダトン、３－［２’，６－ジヒドロキシ－５’－（２－プロペニル）［１，１’－ビフェニル－３－イル］］－２－プロペナール、ランダイナール、マグナルデヒドＢ、マグナルデヒドＣ、６’－Ｏ－メチルマグナルデヒドＢ、４－デオキシ－６－メトキシマグナルデヒドＡ、４－メトキシマグナルデヒドＢ、２’，６－ジヒドロキシ－５’－（２－プロペニル）［１，１’－ビフェニル］－３－カルボキシアルデヒド、５－アリル－５’－ホルミル－２，２’－ジヒドロキシビフェニル、マグナルデヒドＥ、６－Ｏ－メチルマグナルデヒドＥ、９－ヒドロキシ－３，３’，４，４’，５－ペンタメトキシ－７，９’－エポキシリグナ－７’－エン、９，９’－ジヒドロキシ－３，３’，４，４’，５－ペンタメトキシ－２，７’－シクロリグナ－７－エン、マグノリアニン、マグノリグナンＩ、マグノリグナンＢ、マグノリグナンＡ、マグノリグナンＤ、マグノリグナンＣ ６’－グルコシド、マグノリグナンＣ、マグノリグナンＥ、マグノリグナンＦ、マグノリグナンＧ、マグノリグナンＨ、２－［４－ヒドロキシ－３－（２－プロペニル）フェニル］－２，５－シクロヘキサジエン－１，４－ジオン、２－（３－アリル－４－ヒドロキシフェニル）－１，４－ベンゾキノン、マグノサリシン；（７ＲＳ，７’ＳＲ，８ＲＳ，８’ＲＳ）－形態、マグノステリンＢ、マグノステリンＢ；７，９－ジエピマー、５－メトキシ，５－［２－ヒドロキシ－５－（２－プロペニル）フェニル］－２－メチルベンゾフラン、３－ヒドロキシ－３’，４，４’，５－テトラメトキシ－７，９’，７’，９－ジエポキシリグナン、３－デ－Ｏ－メチルマグノリン、マグノリン、３－Ｏ－デメチルアシャンチン、３’－Ｏ－デメチルアシャンチン、３－ヒドロキシ－４，５－ジメトキシ－３’，４’－メチレンジオキシ－７，９’：７’，９－ジエポキシリグナン、５’－ヒドロキシ－４’－Ｏ－メチルピペリトール、エピマグノリンＡ、７’－ヒドロキシ－３，３’，４，４’－テトラメトキシ－７，９’－エポキシリグナン、マグノステリンＡ、コブシノールＡ、４，７’－ジヒドロキシ－３，３’，４’－トリメトキシ－７，９’－エポキシリグナン、４’，５，９－トリヒドロキシ－３，３’－ジメトキシ－７，９’－エポキシリグナン、ファルゲシフェノールＡ、リリフロン、モノテルペニルマグノロール、ピペリチルホノキオール、モノテルペニルホノキオール、サウランギアニンＩ、セサミン；（－）－形態、シリンギノシド、シリンギン ４”－グルコシド、３，３’，４，５’－テトラメトキシ－７，９’：７’，９－ジエポキシリグナン、３’，５’－ジメトキシ－３，４－メチレンジオキシ－７，９’：７’，９－ジエポキシリグナン、Ｇａｌｇｒａｖｉｎ、２，２’－ジヒドロキシ－３－メトキシ－５，５’－ジ－２－プロペニルビフェニル、３－メトキシマグノロール、５，５’－ジアリル－２，２’－ジヒドロキシ－３－メトキシビフェニル、又はこれらの任意の組み合わせである。
【0042】
想定される化合物、医薬組成物及び組成物は、少なくとも１種類の抗微生物成分を含んでいてもよく、又は追加的に含んでいてもよく、又はこれらからなっていてもよい。幾つかの実施形態では、少なくとも１種類の抗微生物成分は、プソラレア・コリリフォリア（Ｐｓｏｒａｌｅａ ｃｏｒｙｌｉｆｏｌｉａ）、クルクミン、クルクマ・ロンガ（Ｃｕｒｃｕｍａ ｌｏｎｇａ）、オイゲノール、アルピニア・ガルガンガ（Ａｌｐｉｎｉａ ｇａｌｇａｎｇａ）、コプチジス（ｃｏｐｔｉｄｉｓ）、アザジラチタ・インディカ（Ａｚａｄｉｒａｃｈｔａ ｉｎｄｉｃａ）、プロポリス、チョウジ油、ソフォラ・フラベセンス（Ｓｏｐｈｏｒａ ｆｌａｖｅｓｃｅｎｓ）、アレカ・カテチュ（Ａｒｅｃａ ｃａｔｅｃｈｕ）、グリチリザ・グラブラ（Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚａ ｇｌａｂｒａ）、スーヤ・プリカタ（Ｔｈｕｊａ ｐｌｉｃａｔａ）、コルテックス・フェロデンドリ（Ｃｏｒｔｅｘ ｐｈｅｌｌｏｄｅｎｄｒｉ）、レウム・パラーテ（Ｒｈｅｕｍ ｐａｌａｔｅ）、アルピニア・オフィシナラム（Ａｌｐｉｎｉａ ｏｆｆｉｃｉｎａｒｕｍ）、ブロウソネティア・パピリフェラ（Ｂｒｏｕｓｓｏｎｅｔｉａ ｐａｐｙｒｉｆｅｒｒａ）、ビブルナム・コチニフォリウム（Ｖｉｂｕｒｎｕｍ ｃｏｔｉｎｉｆｏｌｉｕｍ）、ユーフォルビア・ヒルタ・リン（Ｅｕｐｈｏｒｂｉａ ｈｉｒｔａ Ｌｉｎｎ）、ビテックス・ネグンド（Ｖｉｔｅｘ ｎｅｇｕｎｄｏ）、又はこれらの組み合わせの植物粉末又は植物抽出物を含んでいてもよく、又はこれらからなっていてもよい。
【0043】
想定される化合物、医薬組成物及び組成物は、少なくとも１種類以上の既知の抗微生物性防腐剤、構成成分又は成分を含んでいてもよく、又は追加的に含んでいてもよく、これらからなっていてもよく、又は本質的にこれらからなっていてもよい。幾つかの実施形態では、少なくとも１種類の抗微生物成分は、プロピオン酸カルシウム、安息香酸ナトリウム、硝酸ナトリウム、亜硝酸ナトリウム、ソルビン酸カリウム、安息香酸、サリチル酸、ソルビン酸、アルコール、ペノキシエタノール（ｐｅｎｏｘｙｅｔｈａｎｏｌ）、１，２－ジオールアルコール（１，２ プロパンジオール、１，２ ブタンジオール、１，２ ペンタンジオール、１，２－ヘキサンジオール），１，３－ジオールアルコール（１，３ プロパンジオール、１，３ ブタンジオール、１，３ ペンタンジオール（ｐｅｎｔａｎｅｉｄｏｌ）、１，３－ヘキサンジオール）、１，５ ペンタンジオール、塩化ベンザルコニウム、パラベン、亜硫酸塩（二酸化硫黄、重亜硫酸ナトリウム、亜硫酸水素カリウムなど）及び二ナトリウムＥＤＴＡ及びＢＨＴ（ブチル化ヒドロキシトルエン）及びＢＨＡ（ブチル化ヒドロキシル）アニソール）、ホルムアルデヒド（通常は溶液）、グルタルアルデヒド（昆虫を殺す）及びメチルクロロイソチアゾリノンを含んでいてもよく、又はこれらからなっていてもよい。
【0044】
本組成物は、薬学的又は栄養学的又は化粧品学的に許容され得る担体、希釈剤又は賦形剤をさらに含み、医薬製剤又は栄養補助食品製剤が約０．００１重量パーセント（ｗｔ％）～約１０ｗｔ％の抽出混合物の活性成分を含む。これらの想定される活性成分は、全組成物の約０．００１重量％～約１０重量％の範囲で与えられてもよい。幾つかの実施形態では、その範囲は、全組成物の約０．０１重量％～約５重量％である。他の実施形態では、その範囲は、全組成物の約０．１重量％～約１重量％である。
【0045】
また、開示された化合物の防腐剤又は抗微生物剤が本明細書において想定される。このような産物は、主に酵素法に起因して、例えば、投与された化合物の酸化、還元、加水分解、アミド化、エステル化などから得られてもよい。従って、想定される化合物は、想定される化合物又は組成物を、その代謝産物を得るのに十分な期間、哺乳動物に投与することを含む方法によって産生される化合物である。このような産物は、典型的には、ラット、マウス、モルモット、イヌ、ネコ、ブタ、ヒツジ、ウマ、サル又はヒトなどの動物に検出可能な用量で本開示の放射性標識された化合物を投与し、代謝が起こるのに十分な時間放置し、次いで、その変換産物を尿、血液又は他の生体サンプルから単離することによって同定される。
【0046】
本明細書で使用される場合、「安定な化合物」及び「安定な構造」という句は、相互に置き換え可能に使用され、反応混合物から有用な程度の純度までの単離に耐え、配合して有効な治療薬剤とするのに耐えるほど十分に丈夫な化合物を示すために用いられる。
【0047】
本明細書で使用される場合、「哺乳動物」という用語は、ヒト、家畜動物（例えば、実験動物又は家庭用ペット（例えば、ラット、マウス、モルモット、ネコ、イヌ、ブタ、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ウマ、ウサギ、霊長類））、及び非家畜動物（例えば、野生動物など）の両方を含む。
【0048】
本明細書で使用される場合、「任意選択の」又は「任意選択的に」という用語は、相互に置き換え可能に使用されてもよく、その後に記載される要素、構成要素、事象又は状況が発生しても発生しなくてもよいことを意味し、その要素、構成要素、事象又は状況が起こる場合と、その要素、構成要素、事象又は状況が起こらない場合を含む。例えば、「任意選択的に置換されたアリール」は、アリール基が置換されていてもされていなくてもよいことを意味する。言い換えれば、この記載は、置換アリール基及び置換基をもたないアリール基の両方を含む。
【0049】
想定される化合物、医薬組成物及び組成物は、少なくとも１種の薬学的又は栄養学的又は化粧品学的に許容され得る担体、希釈剤又は賦形剤を含むか、追加的に含むか、又はこれらからなっていてもよい。本明細書で使用される場合、「薬学的又は栄養学的又は化粧品学的に許容され得る担体、希釈剤又は賦形剤」という句は、ヒト又は家畜動物に使用するために許容され得るものとして米国食品医薬品局によって承認されている任意のアジュバント、担体、賦形剤、流動促進剤、甘味剤、希釈剤、防腐剤、色素／着色剤、風味増強剤、界面活性剤、湿潤剤、分散剤、懸濁剤、安定化剤、等張剤、溶媒、又は乳化剤を含む。
【0050】
想定される化合物、医薬組成物及び組成物は、少なくとも１種の薬学的又は栄養学的又は化粧品学的に許容され得る塩を含んでいてもよく、又は追加的に含んでいてもよく、又はこれらからなっていてもよい。本明細書で使用される場合、「薬学的又は栄養学的又は化粧品学的に許容され得る塩」という句は、酸付加塩及び塩基付加塩の両方を含む。
【0051】
本明細書で使用される場合、「薬学的又は栄養学的又は化粧品学的に許容され得る酸付加塩」という句は、遊離塩基の生物学的有効性及び特性を保持し、生物学的に、又はその他の点で望ましくないものではなく、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などの無機酸、及び酢酸、２，２－ジクロロ酢酸、アジピン酸、アルギン酸、アスコルビン酸、アスパラギン酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、４－アセトアミド安息香酸、カンファー酸、カンファー－１０－スルホン酸、カプリン酸、カプロン酸、カプリル酸、炭酸、桂皮酸、クエン酸、シクラミン酸、ドデシル硫酸、エタン－１，２－ジスルホン酸、エタンスルホン酸、２－ヒドロキシエタンスルホン酸、ギ酸、フマル酸、ガラクタル酸、ゲンチシン酸、グルコヘプトン酸、グルコン酸、グルクロン酸、グルタミン酸、グルタル酸、２－オキソ－グルタル酸、グリセロリン酸、グリコール酸、馬尿酸、イソ酪酸、乳酸、ラクトビオン酸、ラウリン酸、マレイン酸、リンゴ酸、マロン酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、ムチン酸、ナフタレン－１，５－ジスルホン酸、ナフタレン－２－スルホン酸、１－ヒドロキシ－２－ナフトエ酸、ニコチン酸、オレイン酸、オロチン酸、シュウ酸、パルミチン酸、パモ酸、プロピオン酸、ピログルタミン酸、ピルビン酸、サリチル酸、４－アミノサリチル酸、セバシン酸、ステアリン酸、コハク酸、酒石酸、チオシアン酸、ｐ－トルエンスルホン酸、トリフルオロ酢酸、ウンデシレン酸などの有機酸を用いて作られる塩を指す。
【0052】
本明細書で使用される場合、「薬学的又は栄養学的又は化粧品学的に許容され得る塩基付加塩」という句は、遊離酸の生物学的有効性及び特性を保持し、生物学的に、又はその他の点で望ましくないものではない塩を指す。これらの塩は、遊離酸に無機塩基又は有機塩基を添加することによって調製される。無機塩基から誘導される塩には、ナトリウム、カリウム、リチウム、アンモニウム、カルシウム、マグネシウム、鉄、亜鉛、銅、マンガン、アルミニウムの塩などが含まれる。特定の実施形態では、無機塩は、アンモニウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩又はマグネシウム塩である。有機塩基から誘導される塩には、一級、二級及び三級のアミン、天然に存在する置換アミンを含む置換アミン、環状アミン及び塩基性イオン交換樹脂、例えば、アンモニア、イソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、ジエタノールアミン、エタノールアミン、デアノール、２－ジメチルアミノエタノール、２－ジエチルアミノエタノール、ジシクロヘキシルアミン、リジン、アルギニン、ヒスチジン、プロカイン、ヒドラバミン、コリン、ベタイン、ベネタミン、ベンザチン、エチレンジアミン、グルコサミン、メチルグルカミン、テオブロミン、トリエタノールアミン、トロメタミン、プリン、ピペラジン、ピペリジン、Ｎ－エチルピペリジン、ポリアミン樹脂の塩などが含まれる。特に有用な有機塩基としては、イソプロピルアミン、ジエチルアミン、エタノールアミン、トリメチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、コリン又はカフェインが挙げられる。
【0053】
多くの場合、結晶化によって、想定される化合物の溶媒和物を生成するか、又は想定される化合物の溶媒和物を含む。本明細書で使用される場合、「溶媒和物」という用語は、想定される化合物、医薬組成物又は組成物の１つ以上の分子と、溶媒の１つ以上の分子とを含む凝集物を指す。溶媒は水であってもよく、この場合、溶媒和物は水和物であってもよい。あるいは、溶媒は有機溶媒であってもよい。従って、想定される化合物、医薬組成物又は組成物は、一水和物、二水和物、半水和物、セスキ水和物、三水和物、四水和物など、及び対応する溶媒和形態を含む水和物として存在してもよい。想定される化合物、医薬組成物又は組成物は、真の溶媒和物であってもよいが、他の場合において、想定される化合物、医薬組成物又は組成物は、単に偶発的に水を保持していてもよく、又は水と幾つかの偶発的に付加する溶媒の混合物であってもよい。
【0054】
防腐剤又は抗微生物剤とは、食品、化粧品、栄養補助食品、口腔衛生製品及び医薬品における抗微生物活性の送達のための分野で一般的に受け入れられている、想定される化合物、組成物又は医薬組成物及び媒体の製剤を指す。例えば、想定される防腐剤化合物又は防腐剤組成物は、独立した組成物として、又は処方薬、店頭（ＯＴＣ）薬、植物薬、ハーブ医薬品、ホメオパシー薬、又は政府機関によって審査され、承認された任意の他の形態のヘルスケア製品の一要素として配合されるか、又は使用されてもよい。例示的な想定される防腐剤組成物は、独立した組成物として、又は食品、新規食品、機能性食品、飲料、バー、食品フレーバー、食品添加物、医療食品、栄養補助サプリメント又はハーブ製品における栄養要素又は生理活性要素として配合されるか、又は使用されてもよい。当該技術分野で一般的に受け入れられている媒体には、薬学的又は栄養学的に許容され得る担体、希釈剤又は賦形剤の全てが含まれる。
【0055】
幾つかの実施形態では、想定される組成物は、錠剤、硬カプセル、軟ゲルカプセル、粉末、顆粒、液体、チンキ剤、小袋、すぐに飲めるショット剤又はロゼンジ錠、化粧クリーム、ゲル、ローション、シャンプー、ヘアコンディショナー、ボディリンス、ボディローション、ヘア（ｈｉｒｅ）カラー剤、皮膚カラー剤、アイカラー剤、リップバーム、香水、歯磨き、マウスウォッシュ、フルーツジュース、アロエジュース、ヨーグルト、食品、清涼飲料水、飲料、加工された果物、チーズ製品、ワイン、逸品、ピーナッツバター、ＲＴＤ、プロテインバー又はスナックバーとして処方される。
【0056】
本明細書中で使用される場合、「～を豊富に含む」という句は、抽出又は他の調製の前に植物材料又は他の供給源の重量中に見出される１種類以上の活性化合物の量又は活性と比較して、１種類以上の活性化合物の量又は活性が少なくとも約２倍から最大約１０００倍大きな植物抽出物又は他の調製物を指す。特定の実施形態では、抽出又は他の調製の前の植物材料又は他の供給源の重量は、乾燥重量、湿った状態での重量、又はこれらの組み合わせであってもよい。
【0057】
本明細書で使用される場合、「主要活性成分」又は「主要活性要素」は、少なくとも１つの生物活性を可能にする、植物抽出物又は他の調製物中に見出されるか、又は植物抽出物又は他の調製物中に豊富に含まれる１種類以上の活性な想定される化合物を指す。特定の実施形態では、豊富に含む抽出物の主要活性成分は、その抽出物中に豊富に含まれた１種類以上の活性化合物であろう。一般に、１種類以上の主要活性成分は、他の抽出要素と比較して、１つ以上の測定可能な生物活性又は生物学的効果の大部分（即ち、５０％を超える）を直接的又は間接的に与えるだろう。特定の実施形態では、主要活性成分は、抽出物の中で重量パーセントでは少量成分である（例えば、抽出物に含まれる構成要素の約５０％、２５％、２０％、１５％、１０％、５％、又は１％より少ない）が、それでも望ましい生物活性のほとんどを与えるものであってもよい。主要活性成分を含有する任意の想定される組成物は、豊富に含まれる組成物の医薬的又は栄養学的な活性に寄与してもよく、又は寄与しなくてもよいが、主要活性要素のレベルには寄与しない少量の活性要素も含有していてもよく、主要活性成分が存在しない状態では、少量の活性要素は単独では有効ではなくてもよい。
【0058】
本明細書で使用される場合、「有効量」又は「治療上有効量」という句は、食品、化粧品、栄養補助食品、口腔衛生製品及び医薬品に使用される場合に、細菌の分解を防ぎ、細菌、真菌及び他の微生物の成長を阻害するのに十分な、想定される化合物、医薬組成物又は組成物の量を指す。
【0059】
本明細書で使用される化学命名プロトコル及び任意の構造図は、ＡＣＤ／Ｎａｍｅ Ｖｅｒｓｉｏｎ ９．０７ソフトウェアプログラム又はＣｈｅｍＤｒａｗ Ｕｌｔｒａ Ｖｅｒｓｉｏｎ １１．０ソフトウェア命名プログラム（ＣａｍｂｒｉｄｇｅＳｏｆｔ）を使用する、Ｉ．Ｕ．Ｐ．Ａ．Ｃ．命名システムの改変された形態であり、本開示の化合物は、中心のコア構造（例えば、イミダゾピリジン構造）の誘導体として本明細書で命名される。本明細書において利用される複雑な化学名の場合、置換基は、それが結合する基の前に命名される。例えば、シクロプロピルエチルは、シクロプロピル置換基を有するエチル骨格を含む。
【0060】
想定される防腐剤組成物は、固体又は液体の形態であってもよい。一態様では、担体は粒子状であるため、組成物は例えば錠剤又は粉末の形態である。担体は、液体であってもよく、組成物は、例えば吸入投与に有用な経口シロップ、注射液又はエアロゾルである。
【0061】
経口投与を意図する場合、医薬組成物又は栄養補助食品組成物は、固体形態又は液体形態のいずれかであり、半固体、半液体、懸濁物及びゲルの形態は、固体又は液体のいずれかと本明細書で考えられる形態の中に含まれる。
【0062】
経口投与のための固体組成物として、防腐剤組成物は、粉末、顆粒、圧縮錠剤、丸剤、カプセル、チューインガム、ウェーハ、バーなどの形態に製剤化することができる。このような固体組成物は、典型的には、１種類以上の不活性希釈剤又は食用担体を含む。これに加え、カルボキシメチルセルロース、エチルセルロース、シクロデキストリン、微結晶性セルロース、トラガカントガム又はゼラチンなどの結合剤；デンプン、ラクトース又はデキストリンなどの賦形剤、アルギン酸、アルギン酸ナトリウム、Ｐｒｉｍｏｊｅｌ（Ｒ）、コーンスターチなどのような崩壊剤；ステアリン酸マグネシウム又はＳｔｅｒｏｔｅｘ（Ｒ）のような滑沢剤；コロイド状二酸化ケイ素のような流動促進剤；スクロース又はサッカリンのような甘味剤；ペパーミント、サリチル酸メチル又はオレンジフレーバーのような香味剤；着色剤のうち、１つ以上が存在していてもよい。
【0063】
想定される防腐剤組成物は、カプセル、例えばゼラチンカプセルの形態であってもよく、上述の種類の材料に加えて、ポリエチレングリコール又は油のような液体担体を含有していてもよい。
【0064】
想定される防腐剤組成物は、液体、例えば、エリキシル、シロップ、ゲル、溶液、エマルション又は懸濁物の形態であってもよい。液体は、２つの例として、経口投与又は注射による送達のためのものであってもよい。経口投与が想定される場合、有用な組成物は、本発明の化合物に加えて、甘味料、防腐剤、色素／着色料及び風味増強剤の１つ以上を含有する。注射によって投与されることが意図された組成物において、界面活性剤、防腐剤、湿潤剤、分散剤、懸濁剤、バッファー、安定化剤及び等張剤の１つ以上が含まれてもよい。
【0065】
想定される液体防腐剤組成物は、これらが溶液、懸濁物又は他の同様の形態であるかどうかにかかわらず、以下のアジュバントの１つ以上を含んでいてもよい。滅菌希釈剤、例えば、注射用水、食塩水溶液、例えば、生理食塩水、リンガー溶液、等張性塩化ナトリウム、不揮発性油、例えば、溶媒又は懸濁媒体として役立ち得る合成モノグリセリド又はジグリセリド、ポリエチレングリコール、グリセリン、プロピレングリコール又は他の溶媒；ベンジルアルコール又はメチルパラベンのような抗微生物剤；アスコルビン酸又は重亜硫酸ナトリウムのような酸化防止剤；エチレンジアミン四酢酸などのキレート剤；酢酸塩、クエン酸塩又はリン酸塩のようなバッファー、及び塩化ナトリウム又はデキストロースのような張度調整剤。非経口製剤は、ガラス製又はプラスチック製のアンプル、使い捨て注射器又は複数回投与バイアルに封入することができる。生理食塩水は、一般に有用なアジュバントである。注射用医薬組成物又は栄養補助食品組成物は、無菌である。
【0066】
非経口投与又は経口投与のいずれかを目的とする、想定される液体防腐剤組成物は、適切な投与量が得られるような量の想定される化合物、医薬組成物又は組成物を含有すべきである。
【0067】
想定される防腐剤組成物は、局所投与を意図していてもよく、その場合、担体は、溶液、エマルション、クリーム、ローション、軟膏又はゲル基剤を適切に含んでいてもよい。基剤は、例えば、ワセリン、ラノリン、ポリエチレングリコール、ミツロウ、鉱油、水及びアルコールのような希釈剤、乳化剤及び安定剤のうちの１種類以上を含んでいてもよい。増粘剤は、局所投与のための医薬組成物又は栄養補助食品組成物中に存在していてもよい。経皮投与が想定される場合、組成物は、経皮パッチ又はイオントフォレシス装置を含んでいてもよい。
【0068】
想定される防腐剤組成物は、直腸内で融解し薬物を放出する、例えば坐剤の形態の直腸投与を意図していてもよい。直腸投与のための組成物は、適切な非刺激性賦形剤として油性基剤を含有してもよい。このような基剤としては、ラノリン、ココアバター及びポリエチレングリコールが挙げられる。
【0069】
想定される防腐剤組成物は、固体又は液体の投薬単位の物理的形態を改変する様々な材料を含んでいてもよい。例えば、組成物は、活性成分の周囲にコーティングシェルを形成する材料を含んでいてもよい。コーティングシェルを形成する材料は、典型的には不活性であり、例えば、糖、シェラック及び他の腸溶性コーティング剤から選択することができる。あるいは、活性成分をゼラチンカプセルに入れてもよい。
【0070】
想定される固体又は液体の形態の防腐剤組成物は、想定される化合物に結合し、それによって化合物の送達を助ける薬剤を含んでいてもよい。この能力において作用し得る適切な薬剤には、モノクローナル抗体又はポリクローナル抗体、タンパク質又はリポソームが含まれる。
【0071】
想定される固体又は液体の形態の防腐剤組成物は、例えばバイオアベイラビリティを改善するために粒径を小さくすることを含んでいてもよい。賦形剤の有無にかかわらず、組成物中の粉末、顆粒、粒子、微小球などの大きさは、大きさとバルク密度を改善するために、マクロ（例えば目に見える、又は少なくとも１００μｍの大きさ）、マイクロ（例えば、約１００μｍから約１００ｎｍの範囲の大きさであってもよい。）、ナノ（例えば、１００ｎｍ以下の大きさであってもよい。）であってもよく、これらの間の任意の大きさ又はこれらの任意の組み合わせであってもよい。
【0072】
想定される防腐剤組成物は、防腐技術において周知の方法論によって調製されてもよい。例えば、注射によって投与されることが想定される防腐剤組成物は、想定される化合物と滅菌蒸留水とを、溶液を生成するように組み合わせることによって調製することができる。均質な溶液又は懸濁物の生成を容易にするために、界面活性剤を添加してもよい。界面活性剤は、水性送達系における化合物の溶解又は均一な懸濁を促進するために、想定される化合物と非共有結合的に相互作用する化合物である。
【0073】
想定される化合物、組成物及び医薬組成物、又はその薬学的若しくは栄養学的に許容され得る塩は、治療上有効量で投与され、この治療上有効量は、使用される特定の化合物の活性；化合物の代謝安定性及び作用の長さ；患者の年齢、体重、全身の健康状態、性別及び食事；投与の様式及び時間；排泄率；薬物の組み合わせ；特定の障害又は状態の重篤度；並びに治療を受ける被験体を含む様々な因子に依存して変わるであろう。
【0074】
想定される化合物、組成物及び医薬組成物、又はこれらの薬学的又は栄養学的に許容され得る誘導体はまた、１種類以上の他の治療薬の投与と同時、投与前又は投与後に投与されてもよい。このような併用療法は、想定される化合物及び１種類以上のさらなる活性薬剤を含む単一の医薬製剤又は栄養補助食品の投与製剤を投与すること、並びに想定される化合物及びそれぞれの活性薬剤をそれぞれ別個の医薬製剤又は栄養補助食品の投与製剤で投与することを含む。例えば、想定される化合物及び別の活性薬剤は、錠剤又はカプセルのような単一の経口投与組成物中で一緒に患者に投与することができ、又は各薬剤を別々の経口投与製剤で投与することができる。別個の投与製剤が使用される場合、想定される化合物及び１種類以上のさらなる活性薬剤は、本質的に同じ時期に、即ち同時に、又は別々に時間差で、即ち逐次的に投与されてもよい。併用療法は、これら全ての投与計画を含むと理解される。
【0075】
本明細書では、示された式の置換基又は変数の組み合わせは、このような寄与が安定な化合物をもたらす場合にのみ許容され得ることが理解される。
【0076】
本明細書に記載の方法において、中間体化合物の官能基を適切な保護基で保護する必要があり得ることも、当業者には理解されるであろう。このような官能基には、ヒドロキシ、アミノ、メルカプト及びカルボン酸が含まれる。ヒドロキシに適した保護基には、トリアルキルシリル又はジアリールアルキルシリル（例えば、ｔ－ブチルジメチルシリル、ｔ－ブチルジフェニルシリル又はトリメチルシリル）、テトラヒドロピラニル、ベンジルなどが含まれる。アミノ、アミジノ及びグアニジノに適した保護基には、ｔ－ブトキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニルなどが含まれる。メルカプトに適した保護基には、Ｃ（Ｏ）Ｒ”（Ｒ”は、アルキル、アリール又はアリールアルキルである。）、ｐ－メトキシベンジル、トリチルなどが含まれる。カルボン酸に適した保護基には、アルキル、アリール又はアリールアルキルエステルが含まれる。保護基は、当業者に知られており、本明細書に記載の標準的な技術に従って付加又は除去することができる。保護基の使用は、Ｇｒｅｅｎ，Ｔ．Ｗ．及びＰ．Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｚ、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（１９９９）、第３版、Ｗｉｌｅｙに詳細に記載されており、この全体が参照により本明細書に組み込まれる。当業者には理解されるように、保護基は、Ｗａｎｇ樹脂、Ｒｉｎｋ樹脂又は２－クロロトリチル－クロリド樹脂などのポリマー樹脂であってもよい。
【0077】
想定される化合物のこのような保護された誘導体は、それ自体が薬理活性を有していなくてもよいが、哺乳動物に投与され、その後に体内で代謝されて、薬理学的に活性な化合物を形成してもよいことも当業者には理解されるであろう。従って、このような誘導体は、「プロドラッグ」と記載されてもよい。想定される化合物の全てのプロドラッグは、本開示の範囲内に含まれる。
【0078】
さらに、遊離塩基又は遊離酸の形態で存在する想定される化合物は、当業者に知られている方法によって適切な無機又は有機の塩基又は酸で処理することによって、その薬学的又は栄養学的に許容され得る塩に変換することができる。想定される化合物の塩は、標準的な技術によってその遊離塩基又は酸の形態に変換することができる。
【0079】
幾つかの実施形態では、想定される化合物、組成物及び／又は医薬組成物は、植物源、例えば実施例及び本出願全体のその他の箇所に含まれる植物から単離することができる。想定される抽出物及び化合物を単離するのに適した植物の部位としては、葉、樹皮、幹、幹樹皮、茎、茎樹皮、小枝、塊茎、根、根皮、樹皮表面（例えば、周皮又はポリダームであり、コルク組織、コルク形成層、コルク皮層、又はこれらの任意の組み合わせを含んでいてもよい。）、若芽、地下茎、種子、果実、雄しべ、雌しべ、がく、雄ずい、花弁、がく片、心皮（雌ずい）、花、又はこれらの任意の組み合わせが挙げられる。想定される植物抽出物は、茎、茎皮、幹、幹樹皮、小枝、塊茎、根、根皮、若芽、種子、根茎、花及び他の生殖器官、組織培養物及び幹細胞培養物、葉、他の空中部分又はこれらの組み合わせからなる群から選択される少なくとも１つの植物の部位から誘導される。関連する幾つかの実施形態では、想定される化合物は、植物源から単離され、列挙された置換基のいずれかを含むように合成的に修飾される。これに関して、植物から単離された想定される化合物の合成的な修飾は、当該分野で公知であり、十分に当業者の知識の範囲内にある任意の数の技術を用いて達成することができる。
【実施例0080】
［実施例１］
有機抽出物の調製
乾燥した粉砕植物材料（２０ｇ）を２本の１００ｍＬステンレス鋼管に入れ、ＡＳＥ３００自動抽出機を用い、８０℃、及び圧力１５００ｐｓｉで、有機溶媒混合物（比率１：１の塩化メチレン／メタノール）を用いて２回抽出した。抽出溶液を自動的に濾過し、回収する。有機抽出溶液をロータリーエバポレーターで蒸発させて、粗有機抽出物（ＯＥ）を得る。上述のステンレス鋼管に新鮮な溶媒を流し、乾燥するまで窒素ガスをパージした後、５０℃で水性抽出に切り替えた。水溶液を濾過して、凍結乾燥し、水性抽出物（ＡＥ）を得た。
有機抽出物の調製
乾燥した粉砕植物材料（２０ｇ）を２本の１００ｍＬステンレス鋼管に入れ、ＡＳＥ３００自動抽出機を用い、８０℃、及び圧力１５００ｐｓｉで、有機溶媒混合物（比率１：１の塩化メチレン／メタノール）を用いて２回抽出した。抽出溶液を自動的に濾過し、回収する。有機抽出溶液をロータリーエバポレーターで蒸発させて、粗有機抽出物（ＯＥ）を得る。上述のステンレス鋼管に新鮮な溶媒を流し、乾燥するまで窒素ガスをパージした後、５０℃で水性抽出に切り替えた。水溶液を濾過して、凍結乾燥し、水性抽出物（ＡＥ）を得た。
【0081】
［実施例２］
エシェリキア・コーライ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）に対する抗微生物活性のためのハイスループットスクリーニング
９６ウェルマイクロタイタープレート中、ハイスループットスクリーニングを用い、１０，２１６のＯＥ及びＡＥを含む植物ライブラリを、Ｅ・コーライ（Ｅ．ｃｏｌｉ）に対する抗微生物活性についてスクリーニングした。微生物培養物Ｅ・コーライ（Ｅ．ｃｏｌｉ）ＫＣＴＣ２５７１（＝ＡＴＣＣ８７３９）を試験微生物として使用した。ＬＢブロスをウェル中の希釈剤又は培地として使用した。細菌の培養物を３７℃で２４時間インキュベートした。上述の植物ライブラリサンプルを２５０μｇ／ｍＬの濃度で各サンプルについて２個ずつスクリーニングした。１８０ｕｌのＥ・コーライ（Ｅ．Ｃｏｌｉ）培養物を、３×１０５ＣＦＵ／ｍＬの播種サイズで各ウェルに添加し、２０ｕｌの試験サンプルと混合した。未処理の２００ｕｌの細菌培養物を、ブランクとして２００ｕｌのＬＢ培地を含むコントロールとして使用した。細菌の培養物を３７℃で２４時間インキュベートし、ＯＤを各サンプルについて６００ｎｍで測定した。阻害率は以下の式に基づいて算出した。ブドウ種子抽出物をポジティブコントロールとして用いた。予備試験結果は、２５０ｕｇ／ｍＬで８０％を超える阻害率を有する８２種類の抽出物を示し、これをさらに５０ｕｇ／ｍＬで試験した。１１種類の植物抽出物は、５０ｕｇ／ｍＬの濃度で８０％以上の阻害率を示した。連続希釈を用いた同じ方法を用い、これらの１１ヒットについて、ＭＩＣ９９値を決定した。ＭＩＣ９９値に基づき、上述の植物のヒットを、さらなる発達のために選択した。アルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）の種子は、ＭＩＣ９９値が１２．５ｕｇ／ｍＬの強力な抗Ｅ．コーライ（Ｅ．ｃｏｌｉ）活性を有し、このスクリーニングから選択された最良のヒットであった。
エシェリキア・コーライ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）に対する抗微生物活性のためのハイスループットスクリーニング
９６ウェルマイクロタイタープレート中、ハイスループットスクリーニングを用い、１０，２１６のＯＥ及びＡＥを含む植物ライブラリを、Ｅ・コーライ（Ｅ．ｃｏｌｉ）に対する抗微生物活性についてスクリーニングした。微生物培養物Ｅ・コーライ（Ｅ．ｃｏｌｉ）ＫＣＴＣ２５７１（＝ＡＴＣＣ８７３９）を試験微生物として使用した。ＬＢブロスをウェル中の希釈剤又は培地として使用した。細菌の培養物を３７℃で２４時間インキュベートした。上述の植物ライブラリサンプルを２５０μｇ／ｍＬの濃度で各サンプルについて２個ずつスクリーニングした。１８０ｕｌのＥ・コーライ（Ｅ．Ｃｏｌｉ）培養物を、３×１０５ＣＦＵ／ｍＬの播種サイズで各ウェルに添加し、２０ｕｌの試験サンプルと混合した。未処理の２００ｕｌの細菌培養物を、ブランクとして２００ｕｌのＬＢ培地を含むコントロールとして使用した。細菌の培養物を３７℃で２４時間インキュベートし、ＯＤを各サンプルについて６００ｎｍで測定した。阻害率は以下の式に基づいて算出した。ブドウ種子抽出物をポジティブコントロールとして用いた。予備試験結果は、２５０ｕｇ／ｍＬで８０％を超える阻害率を有する８２種類の抽出物を示し、これをさらに５０ｕｇ／ｍＬで試験した。１１種類の植物抽出物は、５０ｕｇ／ｍＬの濃度で８０％以上の阻害率を示した。連続希釈を用いた同じ方法を用い、これらの１１ヒットについて、ＭＩＣ９９値を決定した。ＭＩＣ９９値に基づき、上述の植物のヒットを、さらなる発達のために選択した。アルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）の種子は、ＭＩＣ９９値が１２．５ｕｇ／ｍＬの強力な抗Ｅ．コーライ（Ｅ．ｃｏｌｉ）活性を有し、このスクリーニングから選択された最良のヒットであった。
【0082】
【数1】
【0083】
［実施例３］
アルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）種子からの有機抽出物の調製
乾燥したアルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）種子粉末を合計１００ｇ、５本の１００ｍＬステンレス鋼管に入れ、ＡＳＥ３５０自動抽出器を用い、８０℃、圧力１５００ｐｓｉで、メタノールを用いて２回抽出した。抽出溶液を自動的に濾過し、回収する。有機抽出溶液をロータリーエバポレーターで蒸発させて、粗有機抽出物（ＯＥ）を得た（２５．１ｇ、２５．１％）。
アルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）種子からの有機抽出物の調製
乾燥したアルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）種子粉末を合計１００ｇ、５本の１００ｍＬステンレス鋼管に入れ、ＡＳＥ３５０自動抽出器を用い、８０℃、圧力１５００ｐｓｉで、メタノールを用いて２回抽出した。抽出溶液を自動的に濾過し、回収する。有機抽出溶液をロータリーエバポレーターで蒸発させて、粗有機抽出物（ＯＥ）を得た（２５．１ｇ、２５．１％）。
【0084】
同じ手順を用いて同様の結果を得たが、有機溶媒をメタノール又はエタノールで置換して、メタノール抽出物（ＭＥ）又はエタノール抽出物（ＥＥ）、メタノール：Ｈ２Ｏ（７：３）抽出物、メタノール：Ｈ２Ｏ（１：１）抽出物、メタノール：Ｈ２Ｏ（３：７）、エタノール：Ｈ２Ｏ（７：３）抽出物、エタノール：Ｈ２Ｏ（１：１）抽出物、エタノール：Ｈ２Ｏ（３：７）抽出物及び水抽出物をそれぞれ得た。
【0085】
【表1】
【0086】
［実施例４］
アルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）種子抽出物からの活性化合物の分画、精製、同定及び定量
バイオアッセイに基づく単離によって、活性な大環状アルカロイドであるブドムンキアミンＣを単離し、同定した。２ｇのアルビジア種子のメタノール抽出物を、Ｃ１８パックドオープンカラムに入れ、ＭｅＯＨと０．０５％トリフルオロ酢酸水溶液の混合物の溶媒系で、５５％ＭｅＯＨから７５％ＭｅＯＨの範囲で溶出させた。９個の画分を回収した。活性画分４０ｍｇを水４ｍＬに溶解した。次いで、上述のサンプルに酢酸エチル８ｍＬを添加した。遠心分離処理後、下層を回収し、この手順を３回繰り返した。次いで、サンプルを、ｐＨ値１１の水酸化アンモニア水４ｍＬに溶解し、酢酸エチル８ｍＬで３回洗浄して、ブドムンキアミンＣ（２３．５ｍｇ）を得る。メタノール又はエタノールの抽出物が、最終的な抽出において最も高いアルカロイド含有量を示したため、抽出のための最後の溶媒としてメタノール／エタノールを選択した。
アルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）種子抽出物からの活性化合物の分画、精製、同定及び定量
バイオアッセイに基づく単離によって、活性な大環状アルカロイドであるブドムンキアミンＣを単離し、同定した。２ｇのアルビジア種子のメタノール抽出物を、Ｃ１８パックドオープンカラムに入れ、ＭｅＯＨと０．０５％トリフルオロ酢酸水溶液の混合物の溶媒系で、５５％ＭｅＯＨから７５％ＭｅＯＨの範囲で溶出させた。９個の画分を回収した。活性画分４０ｍｇを水４ｍＬに溶解した。次いで、上述のサンプルに酢酸エチル８ｍＬを添加した。遠心分離処理後、下層を回収し、この手順を３回繰り返した。次いで、サンプルを、ｐＨ値１１の水酸化アンモニア水４ｍＬに溶解し、酢酸エチル８ｍＬで３回洗浄して、ブドムンキアミンＣ（２３．５ｍｇ）を得る。メタノール又はエタノールの抽出物が、最終的な抽出において最も高いアルカロイド含有量を示したため、抽出のための最後の溶媒としてメタノール／エタノールを選択した。
【0087】
異なる溶媒系による抽出における抽出物中のブドムンキアミンＣ含有量は、ＲＰ－Ｃ１８カラム（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ、４．６ｘ２５０ｍｍ、５μｍ）を用いたＨＰＬＣ法によって、メタノール及び０．５％ＴＦＡ水溶液による流速１ｍＬ／分での勾配溶出を用い、ＵＶ検出器によって２１０ｎｍで、又はＥＬＳＤ検出器で検出し、分析することができた。社内で単離し、同定した標準化合物との比較に基づき、ブドムンキアミンＣピークを同定した。メタノール抽出物（ＲＮ３６８－２９－０１）は、水、５０％メタノール／Ｈ２Ｏ抽出物と比較して、最も高いブドムンキアミンＣ含有量を有しており、最良の抗Ｅ．コーライ（Ｅ．ｃｏｌｉ）活性を示し、ＭＩＣ値が４０ｕｇ／ｍＬであった。この結果は、この植物の抗グラム陰性菌活性を担う活性要素としてのブドムンキアミンＣ及びその類似体の発見及び同定と一致している。異なる種、部位から得て、異なる場所及び季節から集めた植物抽出物中のブドムンキアミン含有量は、０～６％の範囲で変動し得る。アルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）種子のメタノール抽出物は、ブドムンキアミン型アルカロイドの良好な供給源として同定された。
【0088】
【表2】
【0089】
［実施例５］
異なるアルビジア種の抗微生物活性
良好な抗グラム陰性菌活性を有するアルビジア材料を探求するために、異なる種及び異なる部位のアルビジア植物を、多様な地理的位置を有する中国、インド、パナマ、ガーナ及びジンバブエを含む数カ国から回収した。実施例２に示すプロトコルに従って、それぞれのアルビジア材料の抽出物について、抗Ｅ．コーライ（Ｅ．ｃｏｌｉ）活性を評価し、ＭＩＣ値を決定した。抗微生物活性の結果を表３に示す。
異なるアルビジア種の抗微生物活性
良好な抗グラム陰性菌活性を有するアルビジア材料を探求するために、異なる種及び異なる部位のアルビジア植物を、多様な地理的位置を有する中国、インド、パナマ、ガーナ及びジンバブエを含む数カ国から回収した。実施例２に示すプロトコルに従って、それぞれのアルビジア材料の抽出物について、抗Ｅ．コーライ（Ｅ．ｃｏｌｉ）活性を評価し、ＭＩＣ値を決定した。抗微生物活性の結果を表３に示す。
【0090】
【表3】
【0091】
［実施例６］
アルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）種子抽出物及びブドムンキアミンＣの抗微生物活性
アルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）種子抽出物及び活性マーカー化合物ブドムンキアミンＣについて、細菌Ｓ．アウレウス（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）、Ｐ．エルジノーサ（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、Ｅ．コーライ（Ｅ．ｃｏｌｉ）、真菌Ａ．ブラシリエンシス（Ａ．ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）及びＣ．アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）に対する最小発育阻止濃度を決定した。最小発育阻止濃度法（ＭＩＣ）は、液体中での微生物の増殖を阻害し得る抗微生物剤の最小レベルを測定するために、一般的な微生物プロトコルに従って実施される。試験微生物を、細菌のための液体培地中、又は真菌のための寒天上で調製する。試験微生物の懸濁液は、適切なブロス溶液、通常はＭｕｅｌｌｅｒ－Ｈｉｎｔｏｎブロス中で希釈することによって標準化される。試験物質は、９６ウェルマイクロタイタープレート又は小型試験管中で、Ｍｕｅｌｌｅｒ－Ｈｉｎｔｏｎブロス又は他の適切な培地によって数回の連続的な１：１希釈を行うことによって調製される。希釈した試験物質を含有する全てのウェル又は試験管に、個々に試験微生物を接種し、全ての試験容器中で生成物をさらに１回、最終的に希釈する。マイクロタイタープレート又は試験管を１８～２４時間インキュベートする。インキュベート時間の後、濁り（試験微生物の増殖の指標）が観察されないウェル中の試験物質の最小濃度である最小濃度（ＭＩＣ）と、最小殺菌濃度（ＭＢＣ）とを決定するために観察を行う。
アルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）種子抽出物及びブドムンキアミンＣの抗微生物活性
アルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）種子抽出物及び活性マーカー化合物ブドムンキアミンＣについて、細菌Ｓ．アウレウス（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）、Ｐ．エルジノーサ（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、Ｅ．コーライ（Ｅ．ｃｏｌｉ）、真菌Ａ．ブラシリエンシス（Ａ．ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）及びＣ．アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）に対する最小発育阻止濃度を決定した。最小発育阻止濃度法（ＭＩＣ）は、液体中での微生物の増殖を阻害し得る抗微生物剤の最小レベルを測定するために、一般的な微生物プロトコルに従って実施される。試験微生物を、細菌のための液体培地中、又は真菌のための寒天上で調製する。試験微生物の懸濁液は、適切なブロス溶液、通常はＭｕｅｌｌｅｒ－Ｈｉｎｔｏｎブロス中で希釈することによって標準化される。試験物質は、９６ウェルマイクロタイタープレート又は小型試験管中で、Ｍｕｅｌｌｅｒ－Ｈｉｎｔｏｎブロス又は他の適切な培地によって数回の連続的な１：１希釈を行うことによって調製される。希釈した試験物質を含有する全てのウェル又は試験管に、個々に試験微生物を接種し、全ての試験容器中で生成物をさらに１回、最終的に希釈する。マイクロタイタープレート又は試験管を１８～２４時間インキュベートする。インキュベート時間の後、濁り（試験微生物の増殖の指標）が観察されないウェル中の試験物質の最小濃度である最小濃度（ＭＩＣ）と、最小殺菌濃度（ＭＢＣ）とを決定するために観察を行う。
【0092】
スタフィロコッカス・アウレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）（ＡＴＣＣ ６５３８）、エシェリキア・コーライ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）（ＡＴＣＣ ８７３９）、シュードモナス・エルジノーサ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）（ＡＴＣＣ ９０２７）、カンジダ・アルビカンス（Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ）（ＡＴＣＣ １０２３１）、アスペルギルス・ブラシリエンシス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）（ＡＴＣＣ １６４０４）を含むカテゴリー２に必要な５種類の微生物に対し、アルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）種子抽出物ＲＮ３６８－３１－ＭＩＸ及びブドムンキアミンＣを試験した。アルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）種子抽出物及びブドムンキアミンＣは、両方とも、強力な抗Ｅ．コーライ（Ｅ．Ｃｏｌｉ）活性を示し、ＭＩＣ値は種子抽出物では６２．５ｕｇ／ｍＬ、ブドムンキアミンＣでは３１．２５ｕｇ／ｍＬであった。この種子抽出物及びブドムンキアミンＣについて、比較的弱い抗真菌活性が観察された。６種類の他の微生物に対し、ブドムンキアミンＣをさらに試験し、ＭＩＣ及びＭＢＣ両方の結果を表５に示す。ブドムンキアミンＣは、ストレプトコッカス・ピオゲネス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓ）に対し、ＭＩＣが０．９７ｕｇ／ｍＬより小さく、最も強力な有効性を示した。トリコフィトン・メンタグロファイテス（Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ ｍｅｎｔａｇｒｏｐｈｙｔｅｓ）、トリコフィトン・ルブルム（Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ ｒｕｂｒｕｍ）、プロピオニバクテリウム・アクネス（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｃｎｅｓ）、及びスタフィロコッカス・エピデルミス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｅｐｉｄｅｒｍｉｓ）に対しても、有意な有効性を示した。
【0093】
【表4】
【0094】
【表5】
【0095】
［実施例７］
マグノリア幹樹皮抽出物の分析のための分析方法
マグノリア幹樹皮抽出物を、活性マーカー化合物であるホノキオール及びマグノロールの定量によって、ＲＰ－ＨＰＬＣ法により分析した。抽出物をメタノール溶液として調製し、約１０分間超音波処理した。フラスコを室温及びＱＳまで冷却し、抽出方法を実施した。十分に混合し、０．４５ｕｍのナイロンシリンジフィルターを通して濾過し、２０μｌの溶液を注入し、分析した。マグノリア幹樹皮抽出物中のマグノロール及びホノキオールの含有量を、Ｃ１８カラムを備えるＡｇｉｌｅｎｔ ＨＰＬＣ／ＰＤＡシステム（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ、ＵＳＡ）で、ＲＰ－ＨＰＬＣ方法によって定量した。マグノロール及びホノキオールを検出するために、精製水とアセトニトリルの二相溶媒系を用い、７７％アセトニトリル水溶液の定組成溶離を１８分間、流速１ｍＬ／分、カラム温度３５℃、波長２９０ｎｍを用いた。マグノリア幹樹皮抽出物（ＦＰ０７２３１２－０１）のホノキオール及びマグノロールの含有量は、それぞれ５１．２％及び４７．２％であり、抽出物中の総含有量は９８．４％であった。
マグノリア幹樹皮抽出物の分析のための分析方法
マグノリア幹樹皮抽出物を、活性マーカー化合物であるホノキオール及びマグノロールの定量によって、ＲＰ－ＨＰＬＣ法により分析した。抽出物をメタノール溶液として調製し、約１０分間超音波処理した。フラスコを室温及びＱＳまで冷却し、抽出方法を実施した。十分に混合し、０．４５ｕｍのナイロンシリンジフィルターを通して濾過し、２０μｌの溶液を注入し、分析した。マグノリア幹樹皮抽出物中のマグノロール及びホノキオールの含有量を、Ｃ１８カラムを備えるＡｇｉｌｅｎｔ ＨＰＬＣ／ＰＤＡシステム（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ、ＵＳＡ）で、ＲＰ－ＨＰＬＣ方法によって定量した。マグノロール及びホノキオールを検出するために、精製水とアセトニトリルの二相溶媒系を用い、７７％アセトニトリル水溶液の定組成溶離を１８分間、流速１ｍＬ／分、カラム温度３５℃、波長２９０ｎｍを用いた。マグノリア幹樹皮抽出物（ＦＰ０７２３１２－０１）のホノキオール及びマグノロールの含有量は、それぞれ５１．２％及び４７．２％であり、抽出物中の総含有量は９８．４％であった。
【0096】
マグノリア樹皮中のホノキオール及びマグノロールの天然の含有量は、それぞれ２～１１％及び０．３～４．６％の範囲であると報告された。市販のマグノリア樹皮抽出物中のホノキオール及びマグノロールの総含有量は、豊富化することができ、１～９９％の範囲に調整することができた。
【0097】
［実施例８］
マグノリア幹樹皮抽出物の抗微生物活性
中国語でのホープ（ｈｏｕｐｕ）という一般的な名称を有するマグノリア樹皮は、非常に広範囲の用途をもつ伝統的な人気のあるハーブ医薬品の１つである。マグノリア樹皮を含む製剤の多くは、咳や喘息を含む肺疾患、腸の感染症や痙攣を治療し、様々な原因による腹部腫脹及び浮腫を緩和する際に使用される。精油は、２つの主要なマーカー化合物であるホノキオール及びマグノロールを含む活性な構成成分として同定された。現代の研究では、マグノリア幹樹皮抽出物が強力な抗微生物活性を示すことが示されている。細菌スタフィロコッカス・アウレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）、エシェリキア・コーライ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）、真菌株ミクロスポルム・カニス（Ｍｉｃｒｏｓｐｏｒｕｍ ｃａｎｉｓ）、トリコフィトン・メンタグロファイテス（Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ ｍｅｎｔａｇｒｏｐｈｙｔｅｓ）、トリコフィトン・ルブルム（Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ ｒｕｂｒｕｍ）、Ａ．ブラシリエンシス（Ａ．ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）、Ｃ．アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）を含む７種類の微生物を選択して、抗微生物活性と、抗微生物剤としてのマグノリアの使用の可能性について試験した。ＭＩＣ及びＭＢＣは、実施例６に記載されているように標準プロトコルに従って決定され、活性結果は表６にある。マグノリア幹樹皮抽出物は、抗微生物活性を除き、強力な抗真菌活性も示し、Ｃ．アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）に対するＭＩＣ値は８０ｕｇ／ｍＬであった。
マグノリア幹樹皮抽出物の抗微生物活性
中国語でのホープ（ｈｏｕｐｕ）という一般的な名称を有するマグノリア樹皮は、非常に広範囲の用途をもつ伝統的な人気のあるハーブ医薬品の１つである。マグノリア樹皮を含む製剤の多くは、咳や喘息を含む肺疾患、腸の感染症や痙攣を治療し、様々な原因による腹部腫脹及び浮腫を緩和する際に使用される。精油は、２つの主要なマーカー化合物であるホノキオール及びマグノロールを含む活性な構成成分として同定された。現代の研究では、マグノリア幹樹皮抽出物が強力な抗微生物活性を示すことが示されている。細菌スタフィロコッカス・アウレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）、エシェリキア・コーライ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）、真菌株ミクロスポルム・カニス（Ｍｉｃｒｏｓｐｏｒｕｍ ｃａｎｉｓ）、トリコフィトン・メンタグロファイテス（Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ ｍｅｎｔａｇｒｏｐｈｙｔｅｓ）、トリコフィトン・ルブルム（Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ ｒｕｂｒｕｍ）、Ａ．ブラシリエンシス（Ａ．ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）、Ｃ．アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）を含む７種類の微生物を選択して、抗微生物活性と、抗微生物剤としてのマグノリアの使用の可能性について試験した。ＭＩＣ及びＭＢＣは、実施例６に記載されているように標準プロトコルに従って決定され、活性結果は表６にある。マグノリア幹樹皮抽出物は、抗微生物活性を除き、強力な抗真菌活性も示し、Ｃ．アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）に対するＭＩＣ値は８０ｕｇ／ｍＬであった。
【0098】
【表6】
【0099】
［実施例９］
アルビジア種子抽出物とマグノリア樹皮抽出物との混合物の抗真菌活性
ＵＳＰの＜５１＞章のカテゴリー２防腐剤で必要とされる５種類全ての微生物に対して有効な組成物を見つけるために、主に、抗真菌活性、特に、Ｃ．アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）及びＡ．ブラシリエンシス（Ａ．ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）に対する抗真菌活性を増強することを目的とし、予測されない転帰の向上を探索するために、アルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）種子抽出物が、マグノリア樹皮抽出物と共にブレンドされた。
アルビジア種子抽出物とマグノリア樹皮抽出物との混合物の抗真菌活性
ＵＳＰの＜５１＞章のカテゴリー２防腐剤で必要とされる５種類全ての微生物に対して有効な組成物を見つけるために、主に、抗真菌活性、特に、Ｃ．アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）及びＡ．ブラシリエンシス（Ａ．ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）に対する抗真菌活性を増強することを目的とし、予測されない転帰の向上を探索するために、アルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）種子抽出物が、マグノリア樹皮抽出物と共にブレンドされた。
【0100】
これらの２種類の材料は、メタノールに溶解したサンプルを所望の量で混合することによって異なる比率で配合され、次いで減圧下で乾燥させて、混合物が得られた。製造により、アルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）種子抽出物及びマグノリア樹皮抽出物を所望な比率で直接的に混合して、組み合わせ組成物を調製することができた。
【0101】
組成物１Ａ：１Ｍ及び１Ａ：３Ｍ（ここで、Ａはアルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）種子抽出物を表し、Ｍはマグノリア樹皮抽出物を表す。）は、Ｃ．アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）に対し、ＭＩＣが３０ｕｇ／ｍＬで同様の阻害を与え、Ａ．ブラシリエンシス（Ａ．ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）に対し、ＭＩＣが１３０ｕｇ／ｍＬで比較的弱い活性を与えた。第３の成分プソラレア・コリリフォリア（Ｐｓｏｒａｌｅａ ｃｏｒｙｌｉｆｏｌｉａ）種子抽出物（Ｐ）を１Ａ：６Ｍ組成物に比率３Ｐで加えたが、この３成分製剤（１Ａ：６Ｍ：３Ｐ）は、２成分組成物と比較して、優れた活性を示さなかった。事実を踏まえると、アルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）種子抽出物及びマグノリア樹皮抽出物の比率１：１の組成物（４１６－１４５－５０）が、Ｃ．アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）及びＡ．ブラシリエンシス（Ａ．ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）の両方に対して最良のＭＩＣをもたらした。この組成物を、リード組成物であると考え、＜ＵＳＰ５１＞章に従う抗微生物有効性試験でさらに評価するために選択し、実施例１２に詳細を示す。
【0102】
【表7】
【0103】
［実施例１０］
アルビジア種子抽出物とマグノリア樹皮抽出物の混合物の組成についての相乗効果の評価
ｉｎ ｖｉｔｒｏでの抗真菌剤の組み合わせは、一般的に、併用発育阻止濃度（ＦＩＣ）指数に基づいて評価され、この指数は、試験されるそれぞれの物質のＦＩＣの合計を表す。ＦＩＣは、それぞれの物質について（組み合わせ中の薬物ＡのＭＩＣ／薬物ＡのみのＭＩＣ）であると定義される。ＦＩＣ指数式は、薬物が自身と相互作用することができず、従って、自身との薬物の組み合わせの効果は、常に相加的であり、ＦＩＣ指数は１であるという仮説に基づいている。ＦＩＣ指数が１より小さいか、又は高いことは、組み合わせた２種類の薬物間の相互作用という観点で、相乗効果を示すか、又は拮抗効果を示す。２倍の薬物希釈スキームを考慮すると、０．５～４の範囲のＦＩＣ指数は、薬物の組み合わせについて相加的又は無関係のいずれの相互作用もないと考えられた。相乗効果を定義するために０．５以下のカットオフが示唆され、一方、４以上のカットオフは、拮抗作用と解釈された（Ｆａｒｒａｒ １９７３；Ｈｕａｎｇ ２０１３；Ｏｄｄｓ、２００３；Ｐａｎｋｅｙ、２００５）。
アルビジア種子抽出物とマグノリア樹皮抽出物の混合物の組成についての相乗効果の評価
ｉｎ ｖｉｔｒｏでの抗真菌剤の組み合わせは、一般的に、併用発育阻止濃度（ＦＩＣ）指数に基づいて評価され、この指数は、試験されるそれぞれの物質のＦＩＣの合計を表す。ＦＩＣは、それぞれの物質について（組み合わせ中の薬物ＡのＭＩＣ／薬物ＡのみのＭＩＣ）であると定義される。ＦＩＣ指数式は、薬物が自身と相互作用することができず、従って、自身との薬物の組み合わせの効果は、常に相加的であり、ＦＩＣ指数は１であるという仮説に基づいている。ＦＩＣ指数が１より小さいか、又は高いことは、組み合わせた２種類の薬物間の相互作用という観点で、相乗効果を示すか、又は拮抗効果を示す。２倍の薬物希釈スキームを考慮すると、０．５～４の範囲のＦＩＣ指数は、薬物の組み合わせについて相加的又は無関係のいずれの相互作用もないと考えられた。相乗効果を定義するために０．５以下のカットオフが示唆され、一方、４以上のカットオフは、拮抗作用と解釈された（Ｆａｒｒａｒ １９７３；Ｈｕａｎｇ ２０１３；Ｏｄｄｓ、２００３；Ｐａｎｋｅｙ、２００５）。
【0104】
併用発育阻止濃度（ＦＩＣ）は、以下の式を用いて計算された。薬物ＡのＦＩＣ（ＦＩＣ Ａ）＝組み合わせ中の薬物ＡのＭＩＣ／薬物ＡのみのＭＩＣ、薬物ＢのＦＩＣ（ＦＩＣ Ｂ）＝組み合わせ中の薬物ＢのＭＩＣ／薬物ＢのみのＭＩＣ。ＦＩＣ指数（ＦＩＣＩ）を、各ＦＩＣの合計（ΣＦＩＣ）として計算した。この組み合わせ試験のＦＩＣ指数を、表８に示すように計算した。Ｃ．アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）に対する１Ａ：１Ｍ及び１Ａ：３Ｍの指数の計算値は、０．１８７及び０．２９２であった。Ａ．ブラシリエンシス（Ａ．ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）について、同様の計算から、１Ａ：１Ｍ及び１Ａ：３ＭのＦＩＣ指数はそれぞれ０．２９３及び０．３０９になる。１Ａ：１Ｍの組み合わせについて、０．１８７及び０．２８２のＦＩＣ指数は、相加効果ではなく相乗効果であるという大きな確実性を示した。１Ａ：３Ｍの組み合わせについて、これら２種類の真菌株に対して同様の相乗効果が観察され、ＦＩＣ指数は０．２８２及び０．３０９であった。１Ａ：６Ｍ：３Ｐの組み合わせは、Ｃ．アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）に対して弱い相乗効果を有していたが、Ａ．ブラシリエンシス（Ａ．ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）に対しては相互作用の効果はなかった。
【0105】
この組み合わせ試験の抗真菌活性は、特定の比率でこれらの２成分を配合する際に相乗効果が存在することを示していた。１Ａ：１Ｍの組み合わせは、Ｃ．アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）及びＡ．ブラシリエンシス（Ａ．ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）の両方に対して、抗真菌効果が増強されていることがわかり、ＦＩＣ指数が０．５未満であり、ＦＩＣ指数分析に基づく相乗的な相互作用であると分類された。アルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）種子抽出物とマグノリア樹皮抽出物を一緒に合わせることの利点は、Ｃ．アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）及びＡ．ブラシリエンシス（Ａ．ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）の両方に対する抗真菌活性の予想されない向上によって確認された。
【0106】
【表8】
【0107】
［実施例１１］
アルビジア種子抽出物とマグノリア樹皮抽出物の混合物の有効性試験
想定される防腐剤の抗微生物活性及び有効性は、ＵＳＰ＜５１＞ガイドラインに従って評価された。ＵＳＰ＜５１＞試験方法は、非滅菌投薬形態に添加された抗微生物性防腐剤の定量的評価である。この試験に使用されるパラメータは、天然製品によって決定され、４つのカテゴリーのどれかが適用される。典型的な接触時間は、２８日まで及び、残存する微生物含有量の観察は、７日間隔で行われる。この試験には、従来から、使用される中和法が試験物質及び微生物に適切であることを確認するための中和確認アッセイを伴う。試験物質１Ａ：１Ｍの組み合わせ（４１６－１４５－５０）を、濃度１ｍｇ／ｍＬでＤＭＳＯに溶解した。結果を図３に示す。試験微生物スタフィロコッカス・アウレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）（ＡＴＣＣ ６５３８）、エシェリキア・コーライ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）（ＡＴＣＣ ８７３９）、シュードモナス・エルジノーサ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）（ＡＴＣＣ ９０２７）、カンジダ・アルビカンス（Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ）（ＡＴＣＣ １０２３１）、アスペルギルス・ブラシリエンシス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）（ＡＴＣＣ １６４０４）は、液体中、又は寒天培地上での増殖によって調製される。液体培地で増殖させた微生物を遠心分離処理し、試験前に洗浄する。試験微生物の懸濁液は、緩衝食塩水溶液中での希釈によって標準化される。試験物質及びコントロール物質は、同様の既知の体積で、滅菌容器に分注される。独立した体積の試験物質及びコントロール物質に、それぞれの試験微生物を接種し、混合し、インキュベートする。コントロール物質は、すぐに採取され、試験開始時（即ち、時間０）に存在する濃度を表す。
アルビジア種子抽出物とマグノリア樹皮抽出物の混合物の有効性試験
想定される防腐剤の抗微生物活性及び有効性は、ＵＳＰ＜５１＞ガイドラインに従って評価された。ＵＳＰ＜５１＞試験方法は、非滅菌投薬形態に添加された抗微生物性防腐剤の定量的評価である。この試験に使用されるパラメータは、天然製品によって決定され、４つのカテゴリーのどれかが適用される。典型的な接触時間は、２８日まで及び、残存する微生物含有量の観察は、７日間隔で行われる。この試験には、従来から、使用される中和法が試験物質及び微生物に適切であることを確認するための中和確認アッセイを伴う。試験物質１Ａ：１Ｍの組み合わせ（４１６－１４５－５０）を、濃度１ｍｇ／ｍＬでＤＭＳＯに溶解した。結果を図３に示す。試験微生物スタフィロコッカス・アウレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）（ＡＴＣＣ ６５３８）、エシェリキア・コーライ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）（ＡＴＣＣ ８７３９）、シュードモナス・エルジノーサ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）（ＡＴＣＣ ９０２７）、カンジダ・アルビカンス（Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ）（ＡＴＣＣ １０２３１）、アスペルギルス・ブラシリエンシス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）（ＡＴＣＣ １６４０４）は、液体中、又は寒天培地上での増殖によって調製される。液体培地で増殖させた微生物を遠心分離処理し、試験前に洗浄する。試験微生物の懸濁液は、緩衝食塩水溶液中での希釈によって標準化される。試験物質及びコントロール物質は、同様の既知の体積で、滅菌容器に分注される。独立した体積の試験物質及びコントロール物質に、それぞれの試験微生物を接種し、混合し、インキュベートする。コントロール物質は、すぐに採取され、試験開始時（即ち、時間０）に存在する濃度を表す。
【0108】
インキュベートした試験物質は、化学的な中和により各接触時間終了時に収穫される。生存している微生物の数を２日、７日、１４日及び２８日に評価し、時間０に観察された初期濃度に基づいて、対数減少を計算する。Ｌｏｇ１０の減少は、Ｌｏｇ（Ｂ／Ａ）として計算された。ここで、Ｂ＝接種直後のコントロール物質中の生存可能な試験微生物の数、Ａ＝接触時間後の試験物質中の生存可能な試験微生物の数。４１６－１４５－５０は、Ｐ．エルジノーサ（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）及びＡ．ブラシリエンシス（Ａ．ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）の数を有意に下げ、Ｌｏｇ１０減少はそれぞれ５．５８及び４．１であり、有意には、完全ではなくても、２日後に、Ｓ．アウレウス（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）、Ｅ．コーライ（Ｅ．ｃｏｌｉ）及びＣ．アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）をなくし、５種類全ての微生物に対し、７日後、１４日後及び２８日後に、細菌又は真菌の増殖は観察されなかった。この試験は、Ｅ．コーライ（Ｅ．ｃｏｌｉ）、Ｐ．エルジノーサ（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、Ｓ．アウレウス（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）、Ａ．ブラシリエンシス（Ａ．ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）及びＣ．アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）に対する組成物４１６－１４５－５０の有効性を明確に示しており、初期の計測数から１４日目に２－Ｌｏｇ１０以上の減少、細菌では２８日目に１４日目の計測数から増加していないこと、酵母及びカビでは１４日目及び２８日目に初期の計算された数から増加していないことというカテゴリー２の要求を満たす。
【0109】
【表9】
【0110】
［実施例１２］
アルビジア種子抽出物とマグノリア樹皮抽出物の混合物の有効性試験
Ｅ．コーライ（Ｅ．ｃｏｌｉ）、Ｐ．エルジノーサ（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、Ｓ．アウレウス（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）、Ａ．ブラシリエンシス（Ａ．ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）及びＣ．アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）に対し、濃度０．５ｍｇ／ｍＬで、実施例１２に記載するＵＳＰ＜５１＞ガイドラインに従い、１Ａ：１Ｍの組み合わせ（４１６－１４５－５０）の抗微生物活性及び有効性をさらに評価した。結果を図４に示す。生存している微生物の数を４８時間、７日、１４日及び２８日に評価し、表１０に示すように、時間０に観察された初期濃度に基づいて、対数減少を計算する。この試験は、Ｅ．コーライ（Ｅ．ｃｏｌｉ）、Ｐ．エルジノーサ（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、Ｓ．アウレウス（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）、Ａ．ブラシリエンシス（Ａ．ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）及びＣ．アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）といった５種類全ての微生物に対する０．０５％での組成物４１６－１４５－５０の有効性を明確に示しており、初期の計測数から１４日目に２－Ｌｏｇ１０以上の減少、細菌では２８日目に１４日目の計測数から増加していないこと、酵母及びカビでは１４日目及び２８日目に初期の計算された数から増加していないことというカテゴリー２の要求を満たす。
アルビジア種子抽出物とマグノリア樹皮抽出物の混合物の有効性試験
Ｅ．コーライ（Ｅ．ｃｏｌｉ）、Ｐ．エルジノーサ（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、Ｓ．アウレウス（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）、Ａ．ブラシリエンシス（Ａ．ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）及びＣ．アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）に対し、濃度０．５ｍｇ／ｍＬで、実施例１２に記載するＵＳＰ＜５１＞ガイドラインに従い、１Ａ：１Ｍの組み合わせ（４１６－１４５－５０）の抗微生物活性及び有効性をさらに評価した。結果を図４に示す。生存している微生物の数を４８時間、７日、１４日及び２８日に評価し、表１０に示すように、時間０に観察された初期濃度に基づいて、対数減少を計算する。この試験は、Ｅ．コーライ（Ｅ．ｃｏｌｉ）、Ｐ．エルジノーサ（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、Ｓ．アウレウス（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）、Ａ．ブラシリエンシス（Ａ．ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）及びＣ．アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）といった５種類全ての微生物に対する０．０５％での組成物４１６－１４５－５０の有効性を明確に示しており、初期の計測数から１４日目に２－Ｌｏｇ１０以上の減少、細菌では２８日目に１４日目の計測数から増加していないこと、酵母及びカビでは１４日目及び２８日目に初期の計算された数から増加していないことというカテゴリー２の要求を満たす。
【0111】
【表10】
【0112】
［実施例１３］
アルビジア種子抽出物とマグノリア樹皮抽出物の混合物の抗微生物活性
細菌Ｓ．アウレウス（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）、Ｐ．エルジノーサ（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）及びＥ．コーライ（Ｅ．ｃｏｌｉ）に対する最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）を、アルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）種子抽出物とマグノリア樹皮抽出物の１Ａ：１Ｍの組み合わせについて決定した。最小発育阻止濃度法（ＭＩＣ）は、実施例６に記載される通り、液体中での微生物の増殖を阻害し得る抗微生物剤の最小レベルを測定するために、一般的な微生物プロトコルに従って実施され、活性の結果は表１１である。スタフィロコッカス・アウレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）に対する強力な抗微生物活性が見出され、ＭＩＣは２０μｇ／ｍＬであった。このアルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）種子抽出物及びマグノリア樹皮抽出物の組み合わせについて、エシェリキア・コーライ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）及びシュードモナス・エルジノーサ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）の両グラム陰性菌に対するＭＩＣが１０００ｕｇ／ｍＬであると決定された。
アルビジア種子抽出物とマグノリア樹皮抽出物の混合物の抗微生物活性
細菌Ｓ．アウレウス（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）、Ｐ．エルジノーサ（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）及びＥ．コーライ（Ｅ．ｃｏｌｉ）に対する最小発育阻止濃度（ＭＩＣ）を、アルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）種子抽出物とマグノリア樹皮抽出物の１Ａ：１Ｍの組み合わせについて決定した。最小発育阻止濃度法（ＭＩＣ）は、実施例６に記載される通り、液体中での微生物の増殖を阻害し得る抗微生物剤の最小レベルを測定するために、一般的な微生物プロトコルに従って実施され、活性の結果は表１１である。スタフィロコッカス・アウレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）に対する強力な抗微生物活性が見出され、ＭＩＣは２０μｇ／ｍＬであった。このアルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）種子抽出物及びマグノリア樹皮抽出物の組み合わせについて、エシェリキア・コーライ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）及びシュードモナス・エルジノーサ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）の両グラム陰性菌に対するＭＩＣが１０００ｕｇ／ｍＬであると決定された。
【0113】
【表11】
【0114】
［実施例１４］
ｐＨ＝３でのエシェリキア・コーライ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）に対するアルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）種子抽出物の抗微生物活性
アルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）種子抽出物（ＲＮ３６８－３１－ｍｉｘ）について、酸性（ｐＨ＝３）条件でのグラム陰性菌エシェリキア・コーライ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）に対する最小発育阻止濃度を決定した。
ｐＨ＝３でのエシェリキア・コーライ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）に対するアルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）種子抽出物の抗微生物活性
アルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）種子抽出物（ＲＮ３６８－３１－ｍｉｘ）について、酸性（ｐＨ＝３）条件でのグラム陰性菌エシェリキア・コーライ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）に対する最小発育阻止濃度を決定した。
【0115】
最小発育阻止濃度法（ＭＩＣ）は、液体中での微生物の増殖を阻害し得る抗微生物剤の最小レベルを測定するために、一般的な微生物プロトコルに従って実施される。試験物質を、クエン酸とクエン酸ナトリウムとの水中の混合物を用い、ｐＨ＝３でバッファー溶液に溶解し、次いで、９６ウェルマイクロタイタープレート中で、Ｍｕｅｌｌｅｒ－Ｈｉｎｔｏｎブロス又は他の適切な培地によって数回の連続的な１：１希釈を行うことによって調製される。希釈した試験物質を含有する全てのウェル又は試験管に、個々に試験微生物を接種し、全ての試験容器中で生成物をさらに１回、最終的に希釈する。マイクロタイタープレートを１８～２４時間インキュベートする。インキュベート時間の後、濁り（試験微生物の増殖の指標）が観察されないウェル中の試験物質の最小濃度である最小濃度（ＭＩＣ）を決定するために観察を行う。ＭＩＣは、アルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）種子抽出物についてｐＨ＝３でＥ．コーライ（Ｅ．ｃｏｌｉ）に対して１２５ｕｇ／ｍＬであり、中性条件でのＭＩＣ（６２．５ｕｇ／ｍＬ）と比較して、わずかに弱い活性であった。
【0116】
［実施例１５］
ｐＨ＝３でのアスペルギルス・ブラシリエンシス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）に対するアルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）種子抽出物とマグノリア樹皮抽出物の組み合わせの抗真菌活性
アルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）種子抽出物とマグノリア樹皮抽出物の組み合わせについて、酸性（ｐＨ＝３）条件でのＡ．ブラシリエンシス（Ａ．ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）に対する最小発育阻止濃度を決定した。
ｐＨ＝３でのアスペルギルス・ブラシリエンシス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）に対するアルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）種子抽出物とマグノリア樹皮抽出物の組み合わせの抗真菌活性
アルビジア・アマラ（Ａｌｂｉｚｉａ ａｍａｒａ）種子抽出物とマグノリア樹皮抽出物の組み合わせについて、酸性（ｐＨ＝３）条件でのＡ．ブラシリエンシス（Ａ．ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）に対する最小発育阻止濃度を決定した。
【0117】
最小発育阻止濃度法（ＭＩＣ）は、液体中での微生物の増殖を阻害し得る抗微生物剤の最小レベルを測定するために、一般的な微生物プロトコルに従って実施される。試験物質を、クエン酸とクエン酸ナトリウムとの２０％ＤＭＳＯ／水中の混合物を用い、ｐＨ＝３でバッファー溶液に溶解し、次いで、９６ウェルマイクロタイタープレート中で、Ｍｕｅｌｌｅｒ－Ｈｉｎｔｏｎブロス又は他の適切な培地によって数回の連続的な１：１希釈を行うことによってさらに調製される。希釈した試験物質を含有する全てのウェル又は試験管に、個々に試験微生物を接種し、全ての試験容器中で生成物をさらに１回、最終的に希釈する。マイクロタイタープレート又は試験管を１８～２４時間インキュベートする。インキュベート時間の後、濁り（試験微生物の増殖の指標）が観察されないウェル中の試験物質の最小濃度である最小濃度（ＭＩＣ）を決定するために観察を行う。ＭＩＣは、この１Ａ：１Ｍの組み合わせについて、ｐＨ＝３で１２５ｕｇ／ｍＬであると決定された。抗真菌活性は、この１Ａ：１Ｍの組み合わせについて、４００ｕｇ／ｍＬの元々のＭＩＣと比較して、酸性条件下で向上する。
【0118】
［実施例１６］
アルビジア種子抽出物とマグノリア樹皮抽出物の混合物の処方
１Ａ：１Ｍの組み合わせ（Ｂ１－１１２０２０１５）を、それぞれ０．１％及び０．５％の２つの濃度で、非イオン性Ｏ／Ｗエマルション系を用い、さらに配合した。エマルションのｐＨが６．０～６．５の範囲にあるクリーム製剤中、重量で３％（３重量％）の１，２－ヘキサンジオールをＢ１－１１２０２０１５のための担体溶媒として使用した。Ｂ１－１１２０２０１５は、クリーム基剤に添加する前に５０℃で、３重量％の１，２ヘキサンジオール中に完全に分散させた。均一になり、全ての固体物質が溶融し、混合するまで、全ての成分を７０℃で混合することによって、クリーム基剤を調製した。６０℃に冷却した後、２０％ＮａＯＨ溶液又は２０％クエン酸溶液を加えることによって、クリーム基剤材料のｐＨ値を６．０～６．５に調整する。クリーム基剤を５０℃まで冷却した後、３％の１，２ ヘキサンジオール及びＢ１－１１２０２１０５を添加した。配合された材料のｐＨ値を、必要ならば６．０～６．５の範囲にさらに調整する。同じ様式で、０．５％の１Ａ：１Ｍの組み合わせ（１９４０６０１）及び０．１％の１Ａ：１Ｍ（１９４０６０２）を用い、２種類の配合サンプルを調製した。
アルビジア種子抽出物とマグノリア樹皮抽出物の混合物の処方
１Ａ：１Ｍの組み合わせ（Ｂ１－１１２０２０１５）を、それぞれ０．１％及び０．５％の２つの濃度で、非イオン性Ｏ／Ｗエマルション系を用い、さらに配合した。エマルションのｐＨが６．０～６．５の範囲にあるクリーム製剤中、重量で３％（３重量％）の１，２－ヘキサンジオールをＢ１－１１２０２０１５のための担体溶媒として使用した。Ｂ１－１１２０２０１５は、クリーム基剤に添加する前に５０℃で、３重量％の１，２ヘキサンジオール中に完全に分散させた。均一になり、全ての固体物質が溶融し、混合するまで、全ての成分を７０℃で混合することによって、クリーム基剤を調製した。６０℃に冷却した後、２０％ＮａＯＨ溶液又は２０％クエン酸溶液を加えることによって、クリーム基剤材料のｐＨ値を６．０～６．５に調整する。クリーム基剤を５０℃まで冷却した後、３％の１，２ ヘキサンジオール及びＢ１－１１２０２１０５を添加した。配合された材料のｐＨ値を、必要ならば６．０～６．５の範囲にさらに調整する。同じ様式で、０．５％の１Ａ：１Ｍの組み合わせ（１９４０６０１）及び０．１％の１Ａ：１Ｍ（１９４０６０２）を用い、２種類の配合サンプルを調製した。
【0119】
［実施例１７］
処方されたアルビジア種子抽出物及びマグノリア樹皮抽出物の組み合わせの有効性試験
Ｅ．コーライ（Ｅ．ｃｏｌｉ）、Ｐ．エルジノーサ（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、Ｓ．アウレウス（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）、Ａ．ブラシリエンシス（Ａ．ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）及びＣ．アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）に対し、濃度０．５％で、実施例１１に記載したＵＳＰ＜５１＞ガイドラインに従い、非イオン性ｏ／ｗエマルションに配合した１Ａ：１Ｍの組み合わせ（１９４０６０１）の抗微生物活性及び有効性を評価した。結果を図５に示す。生存している微生物の数を２日、７日、１４日及び２８日に評価し、表１２に示すように、時間０に観察された初期濃度に基づいて、対数減少を計算する。この試験は、Ｅ．コーライ（Ｅ．ｃｏｌｉ）、Ｐ．エルジノーサ（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、Ｓ．アウレウス（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）といった３種類全ての細菌、及び酵母Ｃ．アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）に対する０．５％でのこの組成物１９４０６０１の有効性を明確に示しており、２日後から、７日後、１４日後、２８日後まで延ばしても、細菌又は真菌の増殖は観察されなかった。Ａ．ブラシリエンシス（Ａ．ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）について、１９４０６０１は、比較的弱い阻害を示し、Ｌｏｇ１０の減少は、それぞれＤ２及びＤ７で０．７３及び１．５３であった。Ｄ１４（２．３２）及びＤ２８（３．３２）で、２－ＬＯＧ１０減少に達した。
処方されたアルビジア種子抽出物及びマグノリア樹皮抽出物の組み合わせの有効性試験
Ｅ．コーライ（Ｅ．ｃｏｌｉ）、Ｐ．エルジノーサ（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、Ｓ．アウレウス（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）、Ａ．ブラシリエンシス（Ａ．ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）及びＣ．アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）に対し、濃度０．５％で、実施例１１に記載したＵＳＰ＜５１＞ガイドラインに従い、非イオン性ｏ／ｗエマルションに配合した１Ａ：１Ｍの組み合わせ（１９４０６０１）の抗微生物活性及び有効性を評価した。結果を図５に示す。生存している微生物の数を２日、７日、１４日及び２８日に評価し、表１２に示すように、時間０に観察された初期濃度に基づいて、対数減少を計算する。この試験は、Ｅ．コーライ（Ｅ．ｃｏｌｉ）、Ｐ．エルジノーサ（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、Ｓ．アウレウス（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）といった３種類全ての細菌、及び酵母Ｃ．アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）に対する０．５％でのこの組成物１９４０６０１の有効性を明確に示しており、２日後から、７日後、１４日後、２８日後まで延ばしても、細菌又は真菌の増殖は観察されなかった。Ａ．ブラシリエンシス（Ａ．ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）について、１９４０６０１は、比較的弱い阻害を示し、Ｌｏｇ１０の減少は、それぞれＤ２及びＤ７で０．７３及び１．５３であった。Ｄ１４（２．３２）及びＤ２８（３．３２）で、２－ＬＯＧ１０減少に達した。
【0120】
この試験は、Ｅ．コーライ（Ｅ．ｃｏｌｉ）、Ｐ．エルジノーサ（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、Ｓ．アウレウス（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）、Ａ．ブラシリエンシス（Ａ．ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）及びＣ．アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）といった５種類全ての株に対する組成物１９４０６０１の有効性を明確に示しており、ＵＳＰ５１の基準に合格することによって、カテゴリー２の製品であることを明確に示しており、この基準は、初期の計測数から１４日目に２－Ｌｏｇ１０以上の減少、細菌では２８日目に１４日目の計測数から増加していないこと、酵母及びカビでは１４日目及び２８日目に初期の数から増加していないことを必要とする。
【0121】
【表12】
【0122】
［実施例１８］
処方されたアルビジア種子抽出物及びマグノリア樹皮抽出物の組み合わせの有効性試験
Ｅ．コーライ（Ｅ．ｃｏｌｉ）、Ｐ．エルジノーサ（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、Ｓ．アウレウス（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）、Ａ．ブラシリエンシス（Ａ．ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）及びＣ．アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）といった５種類の株に対し、濃度０．１％で、実施例１１に記載したＵＳＰ＜５１＞ガイドラインに従うチャレンジ試験において、非イオン性ｏ／ｗエマルション系を用いて配合した１Ａ：１Ｍの組み合わせ（１９４０６０２）の抗微生物活性及び有効性をさらに評価した。結果を図６に示す。生存している微生物の数を２日、７日、１４日及び２８日に評価し、表１３に示すように、時間０に観察された初期濃度に基づいて、対数減少を計算する。
処方されたアルビジア種子抽出物及びマグノリア樹皮抽出物の組み合わせの有効性試験
Ｅ．コーライ（Ｅ．ｃｏｌｉ）、Ｐ．エルジノーサ（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、Ｓ．アウレウス（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）、Ａ．ブラシリエンシス（Ａ．ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）及びＣ．アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）といった５種類の株に対し、濃度０．１％で、実施例１１に記載したＵＳＰ＜５１＞ガイドラインに従うチャレンジ試験において、非イオン性ｏ／ｗエマルション系を用いて配合した１Ａ：１Ｍの組み合わせ（１９４０６０２）の抗微生物活性及び有効性をさらに評価した。結果を図６に示す。生存している微生物の数を２日、７日、１４日及び２８日に評価し、表１３に示すように、時間０に観察された初期濃度に基づいて、対数減少を計算する。
【0123】
この試験は、この組成物１９４０６０２が、０．１％で、２日目にＥ．コーライ（Ｅ．ｃｏｌｉ）、Ｐ．エルジノーサ（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、Ｓ．アウレウス（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）及びＣ．アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）をなくしたことを示した。４つの接触時間点Ｄ２、Ｄ７、Ｄ１４及びＤ２８全てで、増殖は観察されなかった。Ａ．ブラシリエンシス（Ａ．ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）については、Ｄ２では阻害は見られず、Ｄ２の後に改善が見られた。Ｌｏｇ１０の減少は、Ｄ７、Ｄ１４、Ｄ２８でそれぞれ１．０２、０．２３、１．３３である。この試験は、Ｅ．コーライ（Ｅ．ｃｏｌｉ）、Ｐ．エルジノーサ（Ｐ．ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、Ｓ．アウレウス（Ｓ．ａｕｒｅｕｓ）、Ａ．ブラシリエンシス（Ａ．ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ）及びＣ．アルビカンス（Ｃ．ａｌｂｉｃａｎｓ）に対して組成物１９４０６０２が有効であることを明確に示しており、ＵＳＰ５１の基準に合格することによって、１９４０６０２がカテゴリー２の製品として適合品であることを明確に示しており、この基準は、初期の計測数から１４日目に２－Ｌｏｇ１０以上の減少、細菌では２８日目に１４日目の計測数から増加していないこと、酵母及びカビでは１４日目及び２８日目に初期の数から増加していないことを必要とする。
【0124】
【表13】
【0125】
【表14】
【0126】
従って、肝臓の健康を改善し、維持する関連する方法と共に、開示された化合物の立体異性体、薬学的又は栄養学的に許容され得る塩、互変異性体、グリコシド及びプロドラッグを含む、防腐剤及び抗微生物剤に有用な化合物及び組成物の具体的な実施形態及び方法が開示された。しかし、本明細書の発明の概念から逸脱することなく、既に説明した以外の多くの変更が可能であることは、当業者には明らかなはずである。従って、本発明の主題は、本明細書の開示の精神を除き、限定されるものではない。さらに、明細書及び特許請求の範囲を解釈する際には、全ての用語は、文脈と一致する最も広い可能な様式で解釈されるべきである。特に、用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」及び「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、要素、構成要素又は工程を非排他的な様式で参照するものと解釈されるべきであり、参照された要素、構成要素又は工程が存在していてもよく、又は利用してもよく、又は、明示的に言及されていない他の要素、構成要素又は工程と組み合わせてもよいことを示している。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【手続補正書】
【提出日】2024-02-15
【手続補正1】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項1】
少なくとも１種類のアルビジア抽出物とマグノリア抽出物との混合物及び少なくとも１種類の抗微生物成分を含む、防腐剤組成物であって、
前記少なくとも１種類のアルビジア抽出物は、１種類以上の大環状アルカロイドを豊富に含み、及び、前記少なくとも１種類のマグノリア抽出物は、１種類以上のリグナンを豊富に含み、
前記少なくとも１種類のアルビジア抽出物とマグノリア抽出物との混合物は、前記組成物の総重量の０．００１重量％～１０重量％の範囲で存在し、並びに
前記アルビジア抽出物と前記マグノリア抽出物が、１０：１～１：１０の範囲の重量比でブレンドされており、
ただし、枳実、ビンロウジ（アレカ・カテチュの種子）、六神曲、生姜、木胡蝶、法半夏、青肌、橘紅、カルダモン、合歓皮（アルビジア・ジュリブリシンの樹皮）、エゴマ、蝉の抜け殻、及び厚朴（ホオノキ（マグノリア・オホヴァタ）の樹皮）の混合粉末を抽出して得られる複合抽出物を含む組成物を除く、
前記組成物。
前記少なくとも１種類のアルビジア抽出物は、１種類以上の大環状アルカロイドを豊富に含み、及び、前記少なくとも１種類のマグノリア抽出物は、１種類以上のリグナンを豊富に含み、
前記少なくとも１種類のアルビジア抽出物とマグノリア抽出物との混合物は、前記組成物の総重量の０．００１重量％～１０重量％の範囲で存在し、並びに
前記アルビジア抽出物と前記マグノリア抽出物が、１０：１～１：１０の範囲の重量比でブレンドされており、
ただし、枳実、ビンロウジ（アレカ・カテチュの種子）、六神曲、生姜、木胡蝶、法半夏、青肌、橘紅、カルダモン、合歓皮（アルビジア・ジュリブリシンの樹皮）、エゴマ、蝉の抜け殻、及び厚朴（ホオノキ（マグノリア・オホヴァタ）の樹皮）の混合粉末を抽出して得られる複合抽出物を含む組成物を除く、
前記組成物。