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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公開特許公報(A)
(11)【公開番号】P2024062997
(43)【公開日】2024-05-10
(54)【発明の名称】抗体／Ｔ細胞受容体キメラ構築物およびその使用
(51)【国際特許分類】
C12N 15/62 20060101AFI20240501BHJP
C07K 19/00 20060101ALI20240501BHJP
C12N 15/12 20060101ALN20240501BHJP
C12N 15/13 20060101ALN20240501BHJP
C12N 15/63 20060101ALN20240501BHJP
C07K 16/28 20060101ALN20240501BHJP
C07K 14/725 20060101ALN20240501BHJP
【ＦＩ】
C12N15/62 Z ZNA
C07K19/00
C12N15/12
C12N15/13
C12N15/63 Z
C07K16/28
C07K14/725
【審査請求】有
【請求項の数】1
【出願形態】ＯＬ
【外国語出願】
(21)【出願番号】P 2024015749
(22)【出願日】2024-02-05
(62)【分割の表示】P 2021204862の分割
【原出願日】2016-10-21
(31)【優先権主張番号】62/345,649
(32)【優先日】2016-06-03
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】62/304,918
(32)【優先日】2016-03-07
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】62/369,694
(32)【優先日】2016-08-01
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】62/245,944
(32)【優先日】2015-10-23
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(71)【出願人】
【識別番号】321002949
【氏名又は名称】ユーリカ セラピューティックス， インコーポレイテッド
(74)【代理人】
【識別番号】110002077
【氏名又は名称】園田・小林弁理士法人
(72)【発明者】
【氏名】ルー， ジンウェイ
(72)【発明者】
【氏名】ヤン， ジユアン
(72)【発明者】
【氏名】リュー， チェン
(72)【発明者】
【氏名】リュー， ホン
(72)【発明者】
【氏名】シュー， イーヤン
(72)【発明者】
【氏名】ヤン， スー
(72)【発明者】
【氏名】チャン， ヴィヴィアン ワイ－ファン
(72)【発明者】
【氏名】ホラン， ルーカス
(57)【要約】 （修正有）
【課題】ヒトＴ細胞において改善された発現および機能性を有する抗体－ＴＣＲキメラ受容体を提供する。
【解決手段】少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴＣＲＭに融合された、標的抗原に特異的に結合する抗体部分を含む、抗体－ＴＣＲキメラ構築物を提供する。これらの構築物を作製および使用する方法もまた提供される。本出願は、一態様では、Ｔ細胞受容体モジュールに融合した抗体部分（例えば、Ｆａｂ様抗原結合結合モジュール）を含む構築物（例えば、単離された構築物）を提供する。
【選択図】なし
【解決手段】少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴＣＲＭに融合された、標的抗原に特異的に結合する抗体部分を含む、抗体－ＴＣＲキメラ構築物を提供する。これらの構築物を作製および使用する方法もまた提供される。本出願は、一態様では、Ｔ細胞受容体モジュールに融合した抗体部分（例えば、Ｆａｂ様抗原結合結合モジュール）を含む構築物（例えば、単離された構築物）を提供する。
【選択図】なし
【特許請求の範囲】
【請求項1】
標的抗原に特異的に結合する抗体－Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）キメラ分子（ａｂＴＣＲ）
であって、
ａ）ＶＨおよびＣＨ１抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲサブ
ユニットの第１の膜貫通ドメインを含む第１のＴ細胞受容体ドメイン（ＴＣＲＤ）とを含
む第１のポリペプチド鎖；ならびに
ｂ）ＶＬおよびＣＬ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲサブユ
ニットの第２の膜貫通ドメインを含む第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖
を含み、
前記第１の抗原結合ドメインの前記ＶＨおよびＣＨ１ドメインと前記第２の抗原結合ド
メインの前記ＶＬおよびＣＬドメインとが、前記標的抗原に特異的に結合する抗原結合モ
ジュールを形成し、
前記第１のＴＣＲＤと前記第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル
伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）を形
成する、
ａｂＴＣＲ。
であって、
ａ）ＶＨおよびＣＨ１抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲサブ
ユニットの第１の膜貫通ドメインを含む第１のＴ細胞受容体ドメイン（ＴＣＲＤ）とを含
む第１のポリペプチド鎖；ならびに
ｂ）ＶＬおよびＣＬ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲサブユ
ニットの第２の膜貫通ドメインを含む第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖
を含み、
前記第１の抗原結合ドメインの前記ＶＨおよびＣＨ１ドメインと前記第２の抗原結合ド
メインの前記ＶＬおよびＣＬドメインとが、前記標的抗原に特異的に結合する抗原結合モ
ジュールを形成し、
前記第１のＴＣＲＤと前記第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル
伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）を形
成する、
ａｂＴＣＲ。
【請求項2】
前記抗原結合モジュールが、前記ＣＨ１ドメイン中の残基と前記ＣＬドメイン中の残基
との間のジスルフィド結合を含む、請求項１に記載のａｂＴＣＲ。
との間のジスルフィド結合を含む、請求項１に記載のａｂＴＣＲ。
【請求項3】
前記第１のポリペプチド鎖が、前記第１の抗原結合ドメインと前記第１のＴＣＲＤとの
間に第１のペプチドリンカーをさらに含む、請求項１または２に記載のａｂＴＣＲ。
間に第１のペプチドリンカーをさらに含む、請求項１または２に記載のａｂＴＣＲ。
【請求項4】
前記第２のポリペプチド鎖が、前記第２の抗原結合ドメインと前記第２のＴＣＲＤとの
間に第２のペプチドリンカーをさらに含む、請求項１から３のいずれか一項に記載のａｂ
ＴＣＲ。
間に第２のペプチドリンカーをさらに含む、請求項１から３のいずれか一項に記載のａｂ
ＴＣＲ。
【請求項5】
前記第１のペプチドリンカーおよび／または前記第２のペプチドリンカーが個々に、約
５～約５０アミノ酸長である、請求項３または４に記載のａｂＴＣＲ。
５～約５０アミノ酸長である、請求項３または４に記載のａｂＴＣＲ。
【請求項6】
前記標的抗原が細胞表面抗原である、請求項１から５のいずれか一項に記載のａｂＴＣ
Ｒ。
Ｒ。
【請求項7】
前記細胞表面抗原が、タンパク質、炭水化物および脂質からなる群から選択される、請
求項６に記載のａｂＴＣＲ。
求項６に記載のａｂＴＣＲ。
【請求項8】
前記細胞表面抗原が、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄまたは
ＦＣＲＬ５である、請求項７に記載のａｂＴＣＲ。
ＦＣＲＬ５である、請求項７に記載のａｂＴＣＲ。
【請求項9】
前記標的抗原が、ペプチドと主要組織適合複合体（ＭＨＣ）タンパク質とを含む複合体
である、請求項１から５のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ。
である、請求項１から５のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ。
【請求項10】
標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲであって、
ａ）ＶＨ抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲサブユニットの第
１の膜貫通ドメインを含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；および
ｂ）ＶＬ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲサブユニットの第
２の膜貫通ドメインを含む第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖
を含み、
前記第１の抗原結合ドメインの前記ＶＨドメインと前記第２の抗原結合ドメインの前記
ＶＬドメインとが、前記標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールを形成し、
前記第１のＴＣＲＤと前記第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル
伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）を形
成し、
前記標的抗原が、ペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む複合体である、
ａｂＴＣＲ。
ａ）ＶＨ抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲサブユニットの第
１の膜貫通ドメインを含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；および
ｂ）ＶＬ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲサブユニットの第
２の膜貫通ドメインを含む第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖
を含み、
前記第１の抗原結合ドメインの前記ＶＨドメインと前記第２の抗原結合ドメインの前記
ＶＬドメインとが、前記標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールを形成し、
前記第１のＴＣＲＤと前記第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル
伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）を形
成し、
前記標的抗原が、ペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む複合体である、
ａｂＴＣＲ。
【請求項11】
前記第１のポリペプチド鎖が、前記第１の抗原結合ドメインと前記第１のＴＣＲＤとの
間に第１のペプチドリンカーをさらに含み、前記第２のポリペプチド鎖が、前記第２の抗
原結合ドメインと前記第２のＴＣＲＤとの間に第２のペプチドリンカーをさらに含む、請
求項１０に記載のａｂＴＣＲ。
間に第１のペプチドリンカーをさらに含み、前記第２のポリペプチド鎖が、前記第２の抗
原結合ドメインと前記第２のＴＣＲＤとの間に第２のペプチドリンカーをさらに含む、請
求項１０に記載のａｂＴＣＲ。
【請求項12】
前記第１および／または第２のペプチドリンカーが、免疫グロブリンまたはＴ細胞受容
体サブユニット由来の定常ドメインまたはその断片を個々に含む、請求項１１に記載のａ
ｂＴＣＲ。
体サブユニット由来の定常ドメインまたはその断片を個々に含む、請求項１１に記載のａ
ｂＴＣＲ。
【請求項13】
前記第１および／または第２のペプチドリンカーが、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、ＣＨ４
もしくはＣＬ抗体ドメイン、またはそれらの断片を個々に含む、請求項１２に記載のａｂ
ＴＣＲ。
もしくはＣＬ抗体ドメイン、またはそれらの断片を個々に含む、請求項１２に記載のａｂ
ＴＣＲ。
【請求項14】
前記第１および／または第２のペプチドリンカーが、Ｃα、Ｃβ、ＣγもしくはＣδＴ
ＣＲドメイン、またはそれらの断片を個々に含む、請求項１２に記載のａｂＴＣＲ。
ＣＲドメイン、またはそれらの断片を個々に含む、請求項１２に記載のａｂＴＣＲ。
【請求項15】
前記第１のＴＣＲＤが、前記第１の膜貫通ドメインのＮ末端側に、ＴＣＲサブユニット
の第１の接続ペプチドまたはその断片をさらに含む、請求項１から１４のいずれか一項に
記載のａｂＴＣＲ。
の第１の接続ペプチドまたはその断片をさらに含む、請求項１から１４のいずれか一項に
記載のａｂＴＣＲ。
【請求項16】
前記第２のＴＣＲＤが、前記第２の膜貫通ドメインのＮ末端側に、ＴＣＲサブユニット
の第２の接続ペプチドまたはその断片をさらに含む、請求項１から１５のいずれか一項に
記載のａｂＴＣＲ。
の第２の接続ペプチドまたはその断片をさらに含む、請求項１から１５のいずれか一項に
記載のａｂＴＣＲ。
【請求項17】
前記ＴＣＲＭが、前記第１の接続ペプチド中の残基と前記第２の接続ペプチド中の残基
との間のジスルフィド結合を含む、請求項１５または１６に記載のａｂＴＣＲ。
との間のジスルフィド結合を含む、請求項１５または１６に記載のａｂＴＣＲ。
【請求項18】
前記第１のＴＣＲＤが、前記第１の膜貫通ドメインのＣ末端側に、ＴＣＲ細胞内配列を
含む第１のＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含む、請求項１から１７のいずれか一項に記載
のａｂＴＣＲ。
含む第１のＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含む、請求項１から１７のいずれか一項に記載
のａｂＴＣＲ。
【請求項19】
前記第２のＴＣＲＤが、前記第２の膜貫通ドメインのＣ末端側に、ＴＣＲ細胞内配列を
含む第２のＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含む、請求項１から１８のいずれか一項に記載
のａｂＴＣＲ。
含む第２のＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含む、請求項１から１８のいずれか一項に記載
のａｂＴＣＲ。
【請求項20】
前記第１のポリペプチド鎖が、前記第１の膜貫通ドメインのＣ末端側に、共刺激細胞内
シグナル伝達配列を含む第１のアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む、請求項１から１
９のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ。
シグナル伝達配列を含む第１のアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む、請求項１から１
９のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ。
【請求項21】
前記第２のポリペプチド鎖が、前記第２の膜貫通ドメインのＣ末端側に、共刺激細胞内
シグナル伝達配列を含む第２のアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む、請求項１から２
０のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ。
シグナル伝達配列を含む第２のアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む、請求項１から２
０のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ。
【請求項22】
前記第１のポリペプチド鎖が、前記第１の抗原結合ドメインのＮ末端側に、第１のシグ
ナル伝達ペプチドをさらに含む、請求項１から２１のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ。
ナル伝達ペプチドをさらに含む、請求項１から２１のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ。
【請求項23】
前記第２のポリペプチド鎖が、前記第２の抗原結合ドメインのＮ末端側に、第２のシグ
ナル伝達ペプチドをさらに含む、請求項１から２２のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ。
ナル伝達ペプチドをさらに含む、請求項１から２２のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ。
【請求項24】
前記標的抗原複合体中の前記ペプチドが、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ
－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群か
ら選択されるタンパク質に由来する、請求項９から２３のいずれか一項に記載のａｂＴＣ
Ｒ。
－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群か
ら選択されるタンパク質に由来する、請求項９から２３のいずれか一項に記載のａｂＴＣ
Ｒ。
【請求項25】
前記分子が、約０．１ｐＭ～約５００ｎＭの平衡解離定数（Ｋｄ）で前記標的抗原に結
合する、請求項１から２４のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ。
合する、請求項１から２４のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ。
【請求項26】
前記ＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールが、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζからな
る群から選択される、請求項１から２５のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ。
る群から選択される、請求項１から２５のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ。
【請求項27】
前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲα鎖であり、前記第２のＴＣＲサブユニットが
ＴＣＲβ鎖である、請求項１から２６のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ。
ＴＣＲβ鎖である、請求項１から２６のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ。
【請求項28】
前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲβ鎖であり、前記第２のＴＣＲサブユニットが
ＴＣＲα鎖である、請求項１から２６のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ。
ＴＣＲα鎖である、請求項１から２６のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ。
【請求項29】
前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲγ鎖であり、前記第２のＴＣＲサブユニットが
ＴＣＲδ鎖である、請求項１から２６のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ。
ＴＣＲδ鎖である、請求項１から２６のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ。
【請求項30】
前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲδ鎖であり、前記第２のＴＣＲサブユニットが
ＴＣＲγ鎖である、請求項１から２６のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ。
ＴＣＲγ鎖である、請求項１から２６のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ。
【請求項31】
請求項１から３０のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲの前記第１および第２のポリペプ
チド鎖をコードする核酸（複数可）。
チド鎖をコードする核酸（複数可）。
【請求項32】
請求項１から３０のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲと、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよ
びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールと
を含む複合体。
びζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールと
を含む複合体。
【請求項33】
前記ａｂＴＣＲとＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζとを含む八量体である、請求項３
２に記載の複合体。
２に記載の複合体。
【請求項34】
請求項１から３０のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲまたは請求項３２もしくは３３に
記載の複合体をその表面上に提示するエフェクター細胞。
記載の複合体をその表面上に提示するエフェクター細胞。
【請求項35】
請求項３１に記載の核酸（複数可）を含むエフェクター細胞。
【請求項36】
前記第１のＴＣＲサブユニットおよび／または前記第２のＴＣＲサブユニットを発現し
ない、請求項３４または３５に記載のエフェクター細胞。
ない、請求項３４または３５に記載のエフェクター細胞。
【請求項37】
ａ）前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲαであり、前記第２のＴＣＲサブユニット
がＴＣＲβであり；または
ｂ）前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲβであり、前記第２のＴＣＲサブユニット
がＴＣＲαであり；
前記エフェクター細胞がγδＴ細胞である、請求項３６に記載のエフェクター細胞。
がＴＣＲβであり；または
ｂ）前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲβであり、前記第２のＴＣＲサブユニット
がＴＣＲαであり；
前記エフェクター細胞がγδＴ細胞である、請求項３６に記載のエフェクター細胞。
【請求項38】
ａ）前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲγであり、前記第２のＴＣＲサブユニット
がＴＣＲδであり；または
ｂ）前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲδであり、前記第２のＴＣＲサブユニット
がＴＣＲγであり；
前記エフェクター細胞がαβＴ細胞である、請求項３６に記載のエフェクター細胞。
がＴＣＲδであり；または
ｂ）前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲδであり、前記第２のＴＣＲサブユニット
がＴＣＲγであり；
前記エフェクター細胞がαβＴ細胞である、請求項３６に記載のエフェクター細胞。
【請求項39】
第１の内因性ＴＣＲサブユニットおよび／または第２の内因性ＴＣＲサブユニットの発
現を遮断するまたは減少させるように改変されている、請求項３４から３６のいずれか一
項に記載のエフェクター細胞。
現を遮断するまたは減少させるように改変されている、請求項３４から３６のいずれか一
項に記載のエフェクター細胞。
【請求項40】
ａ）前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲαであり、前記第２のＴＣＲサブユニット
がＴＣＲβであり；または
ｂ）前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲβであり、前記第２のＴＣＲサブユニット
がＴＣＲαであり；
前記エフェクター細胞が、ＴＣＲαおよび／またはＴＣＲβの発現を遮断するまたは減少
させるように改変されたαβＴ細胞である、請求項３９に記載のエフェクター細胞。
がＴＣＲβであり；または
ｂ）前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲβであり、前記第２のＴＣＲサブユニット
がＴＣＲαであり；
前記エフェクター細胞が、ＴＣＲαおよび／またはＴＣＲβの発現を遮断するまたは減少
させるように改変されたαβＴ細胞である、請求項３９に記載のエフェクター細胞。
【請求項41】
ａ）前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲγであり、前記第２のＴＣＲサブユニット
がＴＣＲδであり；または
ｂ）前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲδであり、前記第２のＴＣＲサブユニット
がＴＣＲγであり；
前記エフェクター細胞が、ＴＣＲγおよび／またはＴＣＲδの発現を遮断するまたは減少
させるように改変されたγδＴ細胞である、請求項３９に記載のエフェクター細胞。
がＴＣＲδであり；または
ｂ）前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲδであり、前記第２のＴＣＲサブユニット
がＴＣＲγであり；
前記エフェクター細胞が、ＴＣＲγおよび／またはＴＣＲδの発現を遮断するまたは減少
させるように改変されたγδＴ細胞である、請求項３９に記載のエフェクター細胞。
【請求項42】
ＣＤ３＋細胞である、請求項３４から４１のいずれか一項に記載のエフェクター細胞。
【請求項43】
前記ＣＤ３＋細胞が、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞お
よびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される、請求項４２に記載のエフェクター細
胞。
よびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される、請求項４２に記載のエフェクター細
胞。
【請求項44】
ａ）第１のプロモーターの制御下の前記ａｂＴＣＲの前記第１のポリペプチド鎖をコー
ドする第１の核酸配列を含む第１のベクターと、ｂ）第２のプロモーターの制御下の前記
ａｂＴＣＲの前記第２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列を含む第２のベクタ
ーとを含む、請求項３４から４３のいずれか一項に記載のエフェクター細胞。
ドする第１の核酸配列を含む第１のベクターと、ｂ）第２のプロモーターの制御下の前記
ａｂＴＣＲの前記第２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列を含む第２のベクタ
ーとを含む、請求項３４から４３のいずれか一項に記載のエフェクター細胞。
【請求項45】
ａ）第１のプロモーターの制御下の前記ａｂＴＣＲの前記第１のポリペプチド鎖をコー
ドする第１の核酸配列と；ｂ）第２のプロモーターの制御下の前記ａｂＴＣＲの前記第２
のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列とを含むベクターを含む、請求項３４から
４３のいずれか一項に記載のエフェクター細胞。
ドする第１の核酸配列と；ｂ）第２のプロモーターの制御下の前記ａｂＴＣＲの前記第２
のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列とを含むベクターを含む、請求項３４から
４３のいずれか一項に記載のエフェクター細胞。
【請求項46】
ａ）前記ａｂＴＣＲの前記第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列と；ｂ）
前記ａｂＴＣＲの前記第２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列とを含むベクタ
ーを含み、前記第１および第２の核酸配列が、単一のプロモーターの制御下にある、請求
項３４から４３のいずれか一項に記載のエフェクター細胞。
前記ａｂＴＣＲの前記第２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列とを含むベクタ
ーを含み、前記第１および第２の核酸配列が、単一のプロモーターの制御下にある、請求
項３４から４３のいずれか一項に記載のエフェクター細胞。
【請求項47】
前記ａｂＴＣＲの前記第１のポリペプチド鎖の発現が、前記ａｂＴＣＲの前記第２のポ
リペプチド鎖の発現とは、２倍よりも大きく異なる、請求項３４から４５のいずれか一項
に記載のエフェクター細胞。
リペプチド鎖の発現とは、２倍よりも大きく異なる、請求項３４から４５のいずれか一項
に記載のエフェクター細胞。
【請求項48】
標的抗原を提示する標的細胞を死滅させる方法であって、前記標的細胞を、請求項３４
から４７のいずれか一項に記載のエフェクター細胞と接触させるステップを含み、前記ａ
ｂＴＣＲが、前記標的抗原に特異的に結合する、方法。
から４７のいずれか一項に記載のエフェクター細胞と接触させるステップを含み、前記ａ
ｂＴＣＲが、前記標的抗原に特異的に結合する、方法。
【請求項49】
標的抗原を提示する標的細胞を死滅させる方法であって、前記標的細胞を、前記標的抗
原に特異的に結合するａｂＴＣＲを含むエフェクターαβＴ細胞と接触させるステップを
含み、前記ａｂＴＣＲが、
ａ）ＶＨ抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲサブユニットの第
１の膜貫通ドメインを含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；および
ｂ）ＶＬ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲサブユニットの第
２の膜貫通ドメインを含む第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖
を含み、
前記第１の抗原結合ドメインの前記ＶＨドメインと前記第２の抗原結合ドメインの前記
ＶＬドメインとが、前記標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールを形成し、
前記第１のＴＣＲＤと前記第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル
伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）を形
成し、
前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲγであり、前記第２のＴＣＲサブユニットがＴ
ＣＲδである、または前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲδであり、前記第２のＴＣ
ＲサブユニットがＴＣＲγである、
方法。
原に特異的に結合するａｂＴＣＲを含むエフェクターαβＴ細胞と接触させるステップを
含み、前記ａｂＴＣＲが、
ａ）ＶＨ抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲサブユニットの第
１の膜貫通ドメインを含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；および
ｂ）ＶＬ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲサブユニットの第
２の膜貫通ドメインを含む第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖
を含み、
前記第１の抗原結合ドメインの前記ＶＨドメインと前記第２の抗原結合ドメインの前記
ＶＬドメインとが、前記標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールを形成し、
前記第１のＴＣＲＤと前記第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル
伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）を形
成し、
前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲγであり、前記第２のＴＣＲサブユニットがＴ
ＣＲδである、または前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲδであり、前記第２のＴＣ
ＲサブユニットがＴＣＲγである、
方法。
【請求項50】
前記第１のポリペプチド鎖が、前記第１の抗原結合ドメインと前記第１のＴＣＲＤとの
間に第１のペプチドリンカーをさらに含み、前記第２のポリペプチド鎖が、前記第２の抗
原結合ドメインと前記第２のＴＣＲＤとの間に第２のペプチドリンカーをさらに含む、請
求項４９に記載の方法。
間に第１のペプチドリンカーをさらに含み、前記第２のポリペプチド鎖が、前記第２の抗
原結合ドメインと前記第２のＴＣＲＤとの間に第２のペプチドリンカーをさらに含む、請
求項４９に記載の方法。
【請求項51】
前記第１および／または第２のペプチドリンカーが、免疫グロブリンまたはＴ細胞受容
体サブユニット由来の定常ドメインまたはその断片を個々に含む、請求項５０に記載の方
法。
体サブユニット由来の定常ドメインまたはその断片を個々に含む、請求項５０に記載の方
法。
【請求項52】
前記第１および／または第２のペプチドリンカーが、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、ＣＨ４
もしくはＣＬ抗体ドメイン、またはそれらの断片を個々に含む、請求項５１に記載の方法
。
もしくはＣＬ抗体ドメイン、またはそれらの断片を個々に含む、請求項５１に記載の方法
。
【請求項53】
前記第１および／または第２のペプチドリンカーが、Ｃα、Ｃβ、ＣγもしくはＣδＴ
ＣＲドメイン、またはそれらの断片を個々に含む、請求項５１に記載の方法。
ＣＲドメイン、またはそれらの断片を個々に含む、請求項５１に記載の方法。
【請求項54】
前記接触させるステップがｉｎ ｖｉｖｏである、請求項４８から５３のいずれか一項
に記載の方法。
に記載の方法。
【請求項55】
前記接触させるステップがｉｎ ｖｉｔｒｏである、請求項４８から５３のいずれか一
項に記載の方法。
項に記載の方法。
【請求項56】
請求項１から３０のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ、請求項３１に記載の核酸（複数
可）、または請求項３４から４７のいずれか一項に記載のエフェクター細胞と、薬学的に
許容されるキャリアとを含む医薬組成物。
可）、または請求項３４から４７のいずれか一項に記載のエフェクター細胞と、薬学的に
許容されるキャリアとを含む医薬組成物。
【請求項57】
それを必要とする個体において標的抗原関連疾患を処置する方法であって、前記個体に
、有効量の、請求項５１に記載の医薬組成物を投与するステップを含む方法。
、有効量の、請求項５１に記載の医薬組成物を投与するステップを含む方法。
【請求項58】
それを必要とする個体において標的抗原関連疾患を処置する方法であって、前記個体に
、有効量の、前記標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲを含むエフェクターαβＴ細胞
を含む組成物を投与するステップを含み、前記ａｂＴＣＲが、
ａ）ＶＨ抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲサブユニットの第
１の膜貫通ドメインを含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；および
ｂ）ＶＬ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲサブユニットの第
２の膜貫通ドメインを含む第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖
を含み、
前記第１の抗原結合ドメインの前記ＶＨドメインと前記第２の抗原結合ドメインの前記
ＶＬドメインとが、前記標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールを形成し、
前記第１のＴＣＲＤと前記第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル
伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）を形
成し、
前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲγであり、前記第２のＴＣＲサブユニットがＴ
ＣＲδである、または前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲδであり、前記第２のＴＣ
ＲサブユニットがＴＣＲγである、
方法。
、有効量の、前記標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲを含むエフェクターαβＴ細胞
を含む組成物を投与するステップを含み、前記ａｂＴＣＲが、
ａ）ＶＨ抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲサブユニットの第
１の膜貫通ドメインを含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；および
ｂ）ＶＬ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲサブユニットの第
２の膜貫通ドメインを含む第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖
を含み、
前記第１の抗原結合ドメインの前記ＶＨドメインと前記第２の抗原結合ドメインの前記
ＶＬドメインとが、前記標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールを形成し、
前記第１のＴＣＲＤと前記第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル
伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）を形
成し、
前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲγであり、前記第２のＴＣＲサブユニットがＴ
ＣＲδである、または前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲδであり、前記第２のＴＣ
ＲサブユニットがＴＣＲγである、
方法。
【請求項59】
前記第１のポリペプチド鎖が、前記第１の抗原結合ドメインと前記第１のＴＣＲＤとの
間に第１のペプチドリンカーをさらに含み、前記第２のポリペプチド鎖が、前記第２の抗
原結合ドメインと前記第２のＴＣＲＤとの間に第２のペプチドリンカーをさらに含む、請
求項５８に記載の方法。
間に第１のペプチドリンカーをさらに含み、前記第２のポリペプチド鎖が、前記第２の抗
原結合ドメインと前記第２のＴＣＲＤとの間に第２のペプチドリンカーをさらに含む、請
求項５８に記載の方法。
【請求項60】
前記第１および／または第２のペプチドリンカーが、免疫グロブリンまたはＴ細胞受容
体サブユニット由来の定常ドメインまたはその断片を個々に含む、請求項５９に記載の方
法。
体サブユニット由来の定常ドメインまたはその断片を個々に含む、請求項５９に記載の方
法。
【請求項61】
前記第１および／または第２のペプチドリンカーが、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、ＣＨ４
もしくはＣＬ抗体ドメイン、またはそれらの断片を個々に含む、請求項６０に記載の方法
。
もしくはＣＬ抗体ドメイン、またはそれらの断片を個々に含む、請求項６０に記載の方法
。
【請求項62】
前記第１および／または第２のペプチドリンカーが、Ｃα、Ｃβ、ＣγもしくはＣδＴ
ＣＲドメイン、またはそれらの断片を個々に含む、請求項６０に記載の方法。
ＣＲドメイン、またはそれらの断片を個々に含む、請求項６０に記載の方法。
【請求項63】
前記標的抗原関連疾患ががんである、請求項５７から６２のいずれか一項に記載の方法
。
。
【請求項64】
前記がんが、副腎皮質癌、膀胱がん、乳がん、子宮頸がん、胆管細胞癌、結腸直腸がん
、食道がん、グリア芽細胞腫、グリオーマ、肝細胞癌、頭頸部がん、腎臓がん、白血病、
リンパ腫、肺がん、メラノーマ、中皮腫、多発性骨髄腫、膵臓がん、褐色細胞腫、形質細
胞腫、神経芽細胞腫、卵巣がん、前立腺がん、肉腫、胃がん、子宮がんおよび甲状腺がん
からなる群から選択される、請求項６３に記載の方法。
、食道がん、グリア芽細胞腫、グリオーマ、肝細胞癌、頭頸部がん、腎臓がん、白血病、
リンパ腫、肺がん、メラノーマ、中皮腫、多発性骨髄腫、膵臓がん、褐色細胞腫、形質細
胞腫、神経芽細胞腫、卵巣がん、前立腺がん、肉腫、胃がん、子宮がんおよび甲状腺がん
からなる群から選択される、請求項６３に記載の方法。
【請求項65】
前記標的抗原関連疾患がウイルス感染症である、請求項５７から６２のいずれか一項に
記載の方法。
記載の方法。
【請求項66】
前記ウイルス感染症が、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、エプスタイン－バーウイル
ス（ＥＢＶ）、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス（ＫＳＨ
Ｖ）、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、伝染性軟属腫ウイルス（ＭＣＶ）、ヒトＴ細
胞白血病ウイルス１（ＨＴＬＶ－１）、ＨＩＶ（ヒト免疫不全ウイルス）およびＣ型肝炎
ウイルス（ＨＣＶ）からなる群から選択されるウイルスによって引き起こされる、請求項
６５に記載の方法。
ス（ＥＢＶ）、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス（ＫＳＨ
Ｖ）、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、伝染性軟属腫ウイルス（ＭＣＶ）、ヒトＴ細
胞白血病ウイルス１（ＨＴＬＶ－１）、ＨＩＶ（ヒト免疫不全ウイルス）およびＣ型肝炎
ウイルス（ＨＣＶ）からなる群から選択されるウイルスによって引き起こされる、請求項
６５に記載の方法。
【請求項67】
請求項３４から４７のいずれか一項に記載のエフェクター細胞について不均一な細胞集
団を富化する方法であって、
ａ）前記不均一な細胞集団を、前記標的抗原またはその中に含まれる１つもしくは複数
のエピトープを含むリガンドと接触させて、前記リガンドに結合した前記エフェクター細
胞の複合体を形成するステップ；および
ｂ）前記不均一な細胞集団から前記複合体を分離し、それによって、前記エフェクター
細胞について富化された細胞集団を生成するステップ
を含む方法。
団を富化する方法であって、
ａ）前記不均一な細胞集団を、前記標的抗原またはその中に含まれる１つもしくは複数
のエピトープを含むリガンドと接触させて、前記リガンドに結合した前記エフェクター細
胞の複合体を形成するステップ；および
ｂ）前記不均一な細胞集団から前記複合体を分離し、それによって、前記エフェクター
細胞について富化された細胞集団を生成するステップ
を含む方法。
【請求項68】
請求項１から３０のいずれか一項に記載の複数のａｂＴＣＲをコードする配列を含む核
酸ライブラリー。
酸ライブラリー。
【請求項69】
標的抗原に対して特異的なａｂＴＣＲをコードする配列について、請求項６８に記載の
核酸ライブラリーをスクリーニングする方法であって、
ａ）前記ａｂＴＣＲが複数の細胞の表面上で発現されるように、前記核酸ライブラリー
を前記複数の細胞中に導入するステップ；
ｂ）前記複数の細胞を、前記標的抗原またはその中に含まれる１つもしくは複数のエピ
トープを含むリガンドと共にインキュベートするステップ；
ｃ）前記リガンドに結合した細胞を収集するステップ；および
ｄ）ステップｃ）において収集した細胞から、前記ａｂＴＣＲをコードする配列を単離
し、それによって、前記標的抗原に対して特異的なａｂＴＣＲを同定するステップ
を含む方法。
核酸ライブラリーをスクリーニングする方法であって、
ａ）前記ａｂＴＣＲが複数の細胞の表面上で発現されるように、前記核酸ライブラリー
を前記複数の細胞中に導入するステップ；
ｂ）前記複数の細胞を、前記標的抗原またはその中に含まれる１つもしくは複数のエピ
トープを含むリガンドと共にインキュベートするステップ；
ｃ）前記リガンドに結合した細胞を収集するステップ；および
ｄ）ステップｃ）において収集した細胞から、前記ａｂＴＣＲをコードする配列を単離
し、それによって、前記標的抗原に対して特異的なａｂＴＣＲを同定するステップ
を含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
関連出願の相互参照
本願は、２０１５年１０月２３日に出願された米国仮出願第６２／２４５，９４４号、
２０１６年３月７日に出願された米国仮出願第６２／３０４，９１８号、２０１６年６月
３日に出願された米国仮出願第６２／３４５，６４９号、および２０１６年８月１日に出
願された米国仮出願第６２／３６９，６９４号の優先権を主張し、これらすべてが、全体
において参照によって組み込まれる。
本願は、２０１５年１０月２３日に出願された米国仮出願第６２／２４５，９４４号、
２０１６年３月７日に出願された米国仮出願第６２／３０４，９１８号、２０１６年６月
３日に出願された米国仮出願第６２／３４５，６４９号、および２０１６年８月１日に出
願された米国仮出願第６２／３６９，６９４号の優先権を主張し、これらすべてが、全体
において参照によって組み込まれる。
【0002】
本発明は、抗体／Ｔ細胞受容体キメラ構築物、ならびに疾患を処置および診断すること
を含むその使用に関する。
を含むその使用に関する。
【0003】
ＡＳＣＩＩテキストファイルでの配列表の提出
ＡＳＣＩＩテキストファイルでの以下の提出の内容は、その全体が参照によって本明細
書に組み込まれる：コンピューター可読形式（ＣＲＦ）の配列表（ファイル名：７５００
４２０００３４０ＳＥＱＬＩＳＴ．ｔｘｔ、データ記録：２０１６年１０月２０日、サイ
ズ：１０４ＫＢ）。
ＡＳＣＩＩテキストファイルでの以下の提出の内容は、その全体が参照によって本明細
書に組み込まれる：コンピューター可読形式（ＣＲＦ）の配列表（ファイル名：７５００
４２０００３４０ＳＥＱＬＩＳＴ．ｔｘｔ、データ記録：２０１６年１０月２０日、サイ
ズ：１０４ＫＢ）。
【背景技術】
【0004】
Ｔ細胞媒介性免疫は、ウイルス、細菌、寄生生物感染症または悪性細胞を排除するため
に、抗原（Ａｇ）特異的Ｔリンパ球を発達させる適応性のプロセスである。これには、自
己抗原の異常な認識もまた関与し、自己免疫性炎症性疾患をもたらし得る。Ｔリンパ球の
Ａｇ特異性は、Ａｇ提示細胞（ＡＰＣ）上の主要組織適合複合体（ＭＨＣ）分子によって
提示される独特の抗原性ペプチドの、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）を介した認識に基づく（Br
oereら、Principles of Immunopharmacology、２０１１年）。各Ｔリンパ球は、胸腺に
おける成熟化の際の発生的選択の結果として、細胞表面上に独特のＴＣＲを発現する。Ｔ
ＣＲは、αβヘテロ二量体またはγδヘテロ二量体のいずれかとして２つの形態で存在す
る。Ｔ細胞は、細胞表面上に、αβ形態またはγδ形態のいずれかのＴＣＲを発現する。
４つの鎖α／β／γ／δは全て、高度に多型の「免疫グロブリン可変領域」様のＮ末端ド
メインおよび「免疫グロブリン定常領域」様の第２のドメインからなる特徴的な細胞外構
造を有する。これらのドメインの各々は、特徴的なドメイン内ジスルフィド架橋を有する
。定常領域は、細胞膜に対して近位であり、接続ペプチド、膜貫通領域および短い細胞質
テイルが後に続く。ヘテロ二量体ＴＣＲの２つの鎖間の共有結合は、細胞外定常ドメイン
と膜貫通領域とを架橋する短い接続ペプチド配列内に位置する、対応する位置において対
形成したＴＣＲ鎖のシステイン残基と共にジスルフィド結合を形成するシステイン残基に
よって形成される（The T cell Receptor Factsbook、２００１年）。
に、抗原（Ａｇ）特異的Ｔリンパ球を発達させる適応性のプロセスである。これには、自
己抗原の異常な認識もまた関与し、自己免疫性炎症性疾患をもたらし得る。Ｔリンパ球の
Ａｇ特異性は、Ａｇ提示細胞（ＡＰＣ）上の主要組織適合複合体（ＭＨＣ）分子によって
提示される独特の抗原性ペプチドの、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）を介した認識に基づく（Br
oereら、Principles of Immunopharmacology、２０１１年）。各Ｔリンパ球は、胸腺に
おける成熟化の際の発生的選択の結果として、細胞表面上に独特のＴＣＲを発現する。Ｔ
ＣＲは、αβヘテロ二量体またはγδヘテロ二量体のいずれかとして２つの形態で存在す
る。Ｔ細胞は、細胞表面上に、αβ形態またはγδ形態のいずれかのＴＣＲを発現する。
４つの鎖α／β／γ／δは全て、高度に多型の「免疫グロブリン可変領域」様のＮ末端ド
メインおよび「免疫グロブリン定常領域」様の第２のドメインからなる特徴的な細胞外構
造を有する。これらのドメインの各々は、特徴的なドメイン内ジスルフィド架橋を有する
。定常領域は、細胞膜に対して近位であり、接続ペプチド、膜貫通領域および短い細胞質
テイルが後に続く。ヘテロ二量体ＴＣＲの２つの鎖間の共有結合は、細胞外定常ドメイン
と膜貫通領域とを架橋する短い接続ペプチド配列内に位置する、対応する位置において対
形成したＴＣＲ鎖のシステイン残基と共にジスルフィド結合を形成するシステイン残基に
よって形成される（The T cell Receptor Factsbook、２００１年）。
【0005】
αβＴＣＲおよびγδＴＣＲは、非多型の膜結合型ＣＤ３タンパク質と会合して、ＴＣ
Ｒヘテロ二量体と３つの二量体シグナル伝達モジュールＣＤ３δ／ε、ＣＤ３γ／εおよ
びＣＤ３ζ／ζまたはζ／ηとからなる、機能的な八量体ＴＣＲ－ＣＤ３複合体を形成す
る。各サブユニットの膜貫通ドメイン中のイオン化可能な残基は、複合体を一緒に保持す
る相互作用の極性ネットワークを形成する。Ｔ細胞活性化のために、ＴＣＲのＮ末端可変
領域は、標的細胞の表面上に提示されるペプチド／ＭＨＣ複合体を認識するが、ＣＤ３タ
ンパク質は、シグナル伝達に関与する（Callら、Cell. １１１巻（７号）：９６７～７
９頁、２００２年；The T cell Receptor Factsbook、２００１年）。
Ｒヘテロ二量体と３つの二量体シグナル伝達モジュールＣＤ３δ／ε、ＣＤ３γ／εおよ
びＣＤ３ζ／ζまたはζ／ηとからなる、機能的な八量体ＴＣＲ－ＣＤ３複合体を形成す
る。各サブユニットの膜貫通ドメイン中のイオン化可能な残基は、複合体を一緒に保持す
る相互作用の極性ネットワークを形成する。Ｔ細胞活性化のために、ＴＣＲのＮ末端可変
領域は、標的細胞の表面上に提示されるペプチド／ＭＨＣ複合体を認識するが、ＣＤ３タ
ンパク質は、シグナル伝達に関与する（Callら、Cell. １１１巻（７号）：９６７～７
９頁、２００２年；The T cell Receptor Factsbook、２００１年）。
【0006】
従来型のＴＣＲとも呼ばれるαβＴＣＲは、ほとんどのリンパ球上で発現され、グリコ
シル化された多型のα鎖およびβ鎖からなる。異なるαβＴＣＲは、その寸法および形状
が比較的一定であるＭＨＣ ＩＩ（ＡＰＣ細胞表面上で主に発現される）およびＭＨＣ
Ｉ（全ての有核細胞上で発現される）分子の表面中に包埋された異なるペプチド間を識別
できる。γδＴＣＲは、αβＴＣＲに構造的に類似しているが、ＭＨＣ提示から独立した
様式で、炭水化物保有、ヌクレオチド保有またはリン光体保有抗原を認識する（The T
cell Receptor Factsbook、２００１年；Girardiら、J. Invest. Dermatol. １２６
巻（１号）：２５～３１頁、２００６年；Hayesら、Immunity. １６巻（６号）：８２７
～３８頁、２００２年）。
シル化された多型のα鎖およびβ鎖からなる。異なるαβＴＣＲは、その寸法および形状
が比較的一定であるＭＨＣ ＩＩ（ＡＰＣ細胞表面上で主に発現される）およびＭＨＣ
Ｉ（全ての有核細胞上で発現される）分子の表面中に包埋された異なるペプチド間を識別
できる。γδＴＣＲは、αβＴＣＲに構造的に類似しているが、ＭＨＣ提示から独立した
様式で、炭水化物保有、ヌクレオチド保有またはリン光体保有抗原を認識する（The T
cell Receptor Factsbook、２００１年；Girardiら、J. Invest. Dermatol. １２６
巻（１号）：２５～３１頁、２００６年；Hayesら、Immunity. １６巻（６号）：８２７
～３８頁、２００２年）。
【0007】
細胞表面タンパク質は、細胞性タンパク質のごく一部を構成するにすぎず、これらのタ
ンパク質のほとんどは、腫瘍特異的ではない。対照的に、変異したまたは発癌性腫瘍関連
タンパク質は、典型的には、細胞内に位置し、核、細胞質または分泌性である。ほとんど
の細胞内タンパク質は、タンパク質異化およびＭＨＣ分子による提示の通常のプロセスの
一部として、細胞表面上に曝露される。細胞内タンパク質は、プロテアソームまたはエン
ドソーム／リソソームによって通常分解され、得られた特異的ペプチド断片は、ＭＨＣク
ラスＩ／ＩＩ分子に結合する。これらのペプチド／ＭＨＣ複合体は、細胞表面でディスプ
レイされ、この場所で、ペプチド／ＭＨＣ ＴＣＲ相互作用を介したＴ細胞認識のための
標的を提供する（Scheinbergら、Oncotarget. ４巻（５号）：６４７～８頁、２０１３
年；Cheeverら、Clin. Cancer Res. １５巻（１７号）：５３２３～３７頁、２００９
年）。
ンパク質のほとんどは、腫瘍特異的ではない。対照的に、変異したまたは発癌性腫瘍関連
タンパク質は、典型的には、細胞内に位置し、核、細胞質または分泌性である。ほとんど
の細胞内タンパク質は、タンパク質異化およびＭＨＣ分子による提示の通常のプロセスの
一部として、細胞表面上に曝露される。細胞内タンパク質は、プロテアソームまたはエン
ドソーム／リソソームによって通常分解され、得られた特異的ペプチド断片は、ＭＨＣク
ラスＩ／ＩＩ分子に結合する。これらのペプチド／ＭＨＣ複合体は、細胞表面でディスプ
レイされ、この場所で、ペプチド／ＭＨＣ ＴＣＲ相互作用を介したＴ細胞認識のための
標的を提供する（Scheinbergら、Oncotarget. ４巻（５号）：６４７～８頁、２０１３
年；Cheeverら、Clin. Cancer Res. １５巻（１７号）：５３２３～３７頁、２００９
年）。
【0008】
過去二十年間に、多数の腫瘍抗原の同定と組み合わせた、免疫学および腫瘍生物学にお
ける基礎的な進歩は、細胞ベースの免疫療法の分野における顕著な進行をもたらしている
。Ｔ細胞療法は、細胞ベースの免疫療法の分野において大きな空間を占め、自家のｅｘ
ｖｉｖｏで拡大増殖されたＴ細胞を患者に移入することによってがんを処置することを目
的とし、いくらかの著しい抗腫瘍応答を生じている（Blattmanら、Science. ３０５巻（
５６８１号）：２００～５頁、２００４年）。例えば、ｅｘ ｖｉｖｏで拡大増殖された
天然に存在する腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）の投与は、肝臓、肺、軟部組織および脳を含
む複数の部位における巨大な浸潤性腫瘍を含むメラノーマ患者において、５０～７０％の
範囲の客観的奏効率を媒介した（Rosenbergら、Nat. Rev. Cancer. ８巻（４号）：２
９９～３０８頁、２００８年；Dudley MEら、J. Clin. Oncol. ２３巻（１０号）：
２３４６～５７頁、２００５年）。
ける基礎的な進歩は、細胞ベースの免疫療法の分野における顕著な進行をもたらしている
。Ｔ細胞療法は、細胞ベースの免疫療法の分野において大きな空間を占め、自家のｅｘ
ｖｉｖｏで拡大増殖されたＴ細胞を患者に移入することによってがんを処置することを目
的とし、いくらかの著しい抗腫瘍応答を生じている（Blattmanら、Science. ３０５巻（
５６８１号）：２００～５頁、２００４年）。例えば、ｅｘ ｖｉｖｏで拡大増殖された
天然に存在する腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）の投与は、肝臓、肺、軟部組織および脳を含
む複数の部位における巨大な浸潤性腫瘍を含むメラノーマ患者において、５０～７０％の
範囲の客観的奏効率を媒介した（Rosenbergら、Nat. Rev. Cancer. ８巻（４号）：２
９９～３０８頁、２００８年；Dudley MEら、J. Clin. Oncol. ２３巻（１０号）：
２３４６～５７頁、２００５年）。
【0009】
ＴＩＬ療法の広範な適用に対する主要な制限は、抗腫瘍能を有するヒトＴ細胞を生成す
ることにおける困難である。代替的アプローチとして、外因性の高親和性ＴＣＲが、Ｔ細
胞操作を介して患者の正常な自家Ｔ細胞中に導入され得る。リンパ枯渇患者中へのこれら
の細胞の養子移入は、メラノーマ、結腸直腸癌および滑膜肉腫などのがんにおいてがん退
縮を媒介することが示されている（Kunert Rら、Front. Immunol. ４巻：３６３頁、
２０１３年）。滑膜肉腫に対する抗ＮＹ－ＥＳＯ－１ ＴＣＲを使用する最近の第Ｉ相臨
床試験は、６６％の奏効率を報告し、完全奏功が、Ｔ細胞療法を受けている患者の１人に
おいて達成された（Robbins PFら、Clin. Cancer Res. ２１巻（５号）：１０１９～
２７頁、２０１５年）。
ることにおける困難である。代替的アプローチとして、外因性の高親和性ＴＣＲが、Ｔ細
胞操作を介して患者の正常な自家Ｔ細胞中に導入され得る。リンパ枯渇患者中へのこれら
の細胞の養子移入は、メラノーマ、結腸直腸癌および滑膜肉腫などのがんにおいてがん退
縮を媒介することが示されている（Kunert Rら、Front. Immunol. ４巻：３６３頁、
２０１３年）。滑膜肉腫に対する抗ＮＹ－ＥＳＯ－１ ＴＣＲを使用する最近の第Ｉ相臨
床試験は、６６％の奏効率を報告し、完全奏功が、Ｔ細胞療法を受けている患者の１人に
おいて達成された（Robbins PFら、Clin. Cancer Res. ２１巻（５号）：１０１９～
２７頁、２０１５年）。
【0010】
ＴＣＲ操作されたＴ細胞療法の利点の１つは、プロセシングされＭＨＣ提示を介して細
胞表面に送達される潜在的細胞内腫瘍特異的タンパク質のアレイ全体を標的化できること
である。さらに、ＴＣＲは、高度に感受性であり、ごくわずかな抗原性ペプチド／ＭＨＣ
分子によって活性化され得、これは次に、サイトカイン分泌、Ｔ細胞増殖、および規定さ
れた標的細胞の細胞溶解を含む細胞溶解性Ｔ細胞応答を誘発し得る。したがって、抗体ま
たは小分子療法と比較すると、ＴＣＲ操作されたＴ細胞は、数少ないコピーの標的細胞内
抗原を有する標的細胞を死滅させるそれらの能力にとって特に役に立つ（Kunert Rら、F
ront. Immunol. ４巻：３６３頁、２０１３年）。
胞表面に送達される潜在的細胞内腫瘍特異的タンパク質のアレイ全体を標的化できること
である。さらに、ＴＣＲは、高度に感受性であり、ごくわずかな抗原性ペプチド／ＭＨＣ
分子によって活性化され得、これは次に、サイトカイン分泌、Ｔ細胞増殖、および規定さ
れた標的細胞の細胞溶解を含む細胞溶解性Ｔ細胞応答を誘発し得る。したがって、抗体ま
たは小分子療法と比較すると、ＴＣＲ操作されたＴ細胞は、数少ないコピーの標的細胞内
抗原を有する標的細胞を死滅させるそれらの能力にとって特に役に立つ（Kunert Rら、F
ront. Immunol. ４巻：３６３頁、２０１３年）。
【0011】
しかし、ハイブリドーマまたはディスプレイテクノロジーを介して主に発見された治療
抗体とは異なり、標的特異的ＴＣＲの同定は、患者Ｔ細胞由来の標的ペプチド／ＭＨＣ特
異的ＴＣＲクローンの確立、および最適な標的抗原結合親和性を有する正しいα－β鎖の
組合せについてのスクリーニングを必要とする。非常にしばしば、ファージ／酵母ディス
プレイが、ＴＣＲの標的結合親和性をさらに増強するために、患者Ｔ細胞由来のＴＣＲの
クローニング後に用いられる。プロセス全体は、多くの領域における専門知識を必要とし
、時間がかかる（Kobayashi Eら、Oncoimmunology. ３巻（１号）：ｅ２７２５８頁、
２０１４年）。ＴＣＲ発見プロセスにおける困難は、ＴＣＲ操作されたＴ細胞療法の広範
な適用を大きく妨害してきた。これは、特に、腫瘍細胞上で過剰発現されるが健康な細胞
上でも発現される抗原に対するＴＣＲ、またはオフ－ターゲットペプチド／ＭＨＣ複合体
を認識するＴＣＲによる、処置関連毒性によっても妨げられてきた（Rosenberg SAら、S
cience. ３４８巻（６２３０号）：６２～８頁、２０１５年）。
抗体とは異なり、標的特異的ＴＣＲの同定は、患者Ｔ細胞由来の標的ペプチド／ＭＨＣ特
異的ＴＣＲクローンの確立、および最適な標的抗原結合親和性を有する正しいα－β鎖の
組合せについてのスクリーニングを必要とする。非常にしばしば、ファージ／酵母ディス
プレイが、ＴＣＲの標的結合親和性をさらに増強するために、患者Ｔ細胞由来のＴＣＲの
クローニング後に用いられる。プロセス全体は、多くの領域における専門知識を必要とし
、時間がかかる（Kobayashi Eら、Oncoimmunology. ３巻（１号）：ｅ２７２５８頁、
２０１４年）。ＴＣＲ発見プロセスにおける困難は、ＴＣＲ操作されたＴ細胞療法の広範
な適用を大きく妨害してきた。これは、特に、腫瘍細胞上で過剰発現されるが健康な細胞
上でも発現される抗原に対するＴＣＲ、またはオフ－ターゲットペプチド／ＭＨＣ複合体
を認識するＴＣＲによる、処置関連毒性によっても妨げられてきた（Rosenberg SAら、S
cience. ３４８巻（６２３０号）：６２～８頁、２０１５年）。
【0012】
標的化されたがん免疫療法にＴ細胞を関与させるための異なるアプローチが、近年開発
されている。この新しいアプローチは、キメラ抗原受容体Ｔ細胞療法（ＣＡＲ－Ｔ）と呼
ばれる。これは、モノクローナル抗体の精巧な標的化特異性を、細胞傷害性Ｔ細胞により
もたらされる強力な細胞傷害性および長期間持続と合体させる。ＣＡＲは、細胞表面抗原
を認識する細胞外ドメイン、膜貫通領域、および細胞内シグナル伝達ドメインから構成さ
れる。細胞外ドメインは、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）に融合されたモノクローナル抗体の
重鎖および軽鎖由来の抗原結合結合可変領域からなる。細胞内シグナル伝達ドメインは、
免疫受容活性化チロシンモチーフ（ＩＴＡＭ）、例えば、ＣＤ３ζまたはＦｃＲγ由来の
もの、および１つまたは複数の共刺激シグナル伝達ドメイン、例えば、ＣＤ２８、４－１
ＢＢまたはＯＸ４０由来のものを含む（Barrett DMら、Annu. Rev. Med. ６５巻：３
３３～４７頁、２０１４年；Davila MLら、Oncoimmunology. １巻（９号）：１５７７
～１５８３頁、２０１２年）。Ｔ細胞表面上にグラフトされたＣＡＲによる標的抗原の結
合は、ＴＣＲ－ペプチド／ＭＨＣ複合体相互作用とは独立して、Ｔ細胞エフェクター機能
を誘発できる。したがって、ＣＡＲを備えたＴ細胞は、Ｔ細胞上のＴＣＲのＭＨＣ型とは
一致しないが標的細胞表面抗原を発現するものを含む、広範な種々の細胞を攻撃するよう
に再指向され得る。このアプローチは、ＭＨＣ拘束されたＴＣＲ認識の制約を克服し、抗
原提示またはＭＨＣ分子発現における機能障害を介した腫瘍エスケープを回避する。臨床
試験は、神経芽細胞腫（Louis CUら、Blood. １１８巻（２３号）：６０５０～６０５
６頁、２０１１年）、Ｂ－ＡＬＬ（Maude, SLら、New England Journal of Medicin
e ３７１巻：１６号：１５０７～１５１７頁、２０１４年）、ＣＬＬ（Brentjens, RJ
ら Blood １１８巻：１８号：４８１７～４８２８頁、２０１１年）およびＢ細胞リン
パ腫（Kochenderfer, JNら Blood １１６巻：２０号：４０９９～４１０２頁、２０１
０年）において、ＣＡＲ－Ｔ療法の臨床的に有意な抗腫瘍活性を示している。１つの研究
では、ＣＤ１９－ＣＡＲ Ｔ療法で処置されたＢ－ＡＬＬを有する３０人の患者において
、９０％の完全寛解率が報告された（Maude, SLら、上記）。
されている。この新しいアプローチは、キメラ抗原受容体Ｔ細胞療法（ＣＡＲ－Ｔ）と呼
ばれる。これは、モノクローナル抗体の精巧な標的化特異性を、細胞傷害性Ｔ細胞により
もたらされる強力な細胞傷害性および長期間持続と合体させる。ＣＡＲは、細胞表面抗原
を認識する細胞外ドメイン、膜貫通領域、および細胞内シグナル伝達ドメインから構成さ
れる。細胞外ドメインは、単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）に融合されたモノクローナル抗体の
重鎖および軽鎖由来の抗原結合結合可変領域からなる。細胞内シグナル伝達ドメインは、
免疫受容活性化チロシンモチーフ（ＩＴＡＭ）、例えば、ＣＤ３ζまたはＦｃＲγ由来の
もの、および１つまたは複数の共刺激シグナル伝達ドメイン、例えば、ＣＤ２８、４－１
ＢＢまたはＯＸ４０由来のものを含む（Barrett DMら、Annu. Rev. Med. ６５巻：３
３３～４７頁、２０１４年；Davila MLら、Oncoimmunology. １巻（９号）：１５７７
～１５８３頁、２０１２年）。Ｔ細胞表面上にグラフトされたＣＡＲによる標的抗原の結
合は、ＴＣＲ－ペプチド／ＭＨＣ複合体相互作用とは独立して、Ｔ細胞エフェクター機能
を誘発できる。したがって、ＣＡＲを備えたＴ細胞は、Ｔ細胞上のＴＣＲのＭＨＣ型とは
一致しないが標的細胞表面抗原を発現するものを含む、広範な種々の細胞を攻撃するよう
に再指向され得る。このアプローチは、ＭＨＣ拘束されたＴＣＲ認識の制約を克服し、抗
原提示またはＭＨＣ分子発現における機能障害を介した腫瘍エスケープを回避する。臨床
試験は、神経芽細胞腫（Louis CUら、Blood. １１８巻（２３号）：６０５０～６０５
６頁、２０１１年）、Ｂ－ＡＬＬ（Maude, SLら、New England Journal of Medicin
e ３７１巻：１６号：１５０７～１５１７頁、２０１４年）、ＣＬＬ（Brentjens, RJ
ら Blood １１８巻：１８号：４８１７～４８２８頁、２０１１年）およびＢ細胞リン
パ腫（Kochenderfer, JNら Blood １１６巻：２０号：４０９９～４１０２頁、２０１
０年）において、ＣＡＲ－Ｔ療法の臨床的に有意な抗腫瘍活性を示している。１つの研究
では、ＣＤ１９－ＣＡＲ Ｔ療法で処置されたＢ－ＡＬＬを有する３０人の患者において
、９０％の完全寛解率が報告された（Maude, SLら、上記）。
【0013】
全てではないにしても大多数のこれまでに研究されたＣＡＲは、高い細胞表面発現を有
する腫瘍抗原に指向されている。全ての公知の腫瘍特異的抗原の９５％に相当する低コピ
ー数の細胞表面腫瘍抗原および細胞内腫瘍抗原を標的化するために、より強力で有効な操
作された細胞療法を開発することが必要である（Cheeverら、Clin. Cancer Res. １５
巻（１７号）：５３２３～３７頁、２００９年）。
Ｔ細胞受容体エフェクター機能を有する、抗体特異性を有するキメラ受容体分子を操作
するためのいくつかの試みが行われてきた。例えば、Kuwana, Yら、Biochem. Biophys.
Res. Commun. １４９巻（３号）：９６０～９６８頁、１９８７年；Gross, Gら、Pr
oc. Natl. Acad. Sci. USA. ８６巻：１００２４～１００２８頁、１９８９年；Gro
ss, GおよびEshhar, Z、FASEB J. ６巻（１５号）：３３７０～３３７８頁、１９９
２年；米国特許第７，７４１，４６５号を参照のこと。今日まで、これらのキメラ受容体
の中には、臨床的使用に採用されたものは存在せず、ヒトＴ細胞において改善された発現
および機能性を有する抗体－ＴＣＲキメラ受容体の新規設計が必要とされている。
本明細書で言及される全ての刊行物、特許、特許出願および公開された特許出願の開示
は、それらの全体が参照によって本明細書に組み込まれる。
する腫瘍抗原に指向されている。全ての公知の腫瘍特異的抗原の９５％に相当する低コピ
ー数の細胞表面腫瘍抗原および細胞内腫瘍抗原を標的化するために、より強力で有効な操
作された細胞療法を開発することが必要である（Cheeverら、Clin. Cancer Res. １５
巻（１７号）：５３２３～３７頁、２００９年）。
Ｔ細胞受容体エフェクター機能を有する、抗体特異性を有するキメラ受容体分子を操作
するためのいくつかの試みが行われてきた。例えば、Kuwana, Yら、Biochem. Biophys.
Res. Commun. １４９巻（３号）：９６０～９６８頁、１９８７年；Gross, Gら、Pr
oc. Natl. Acad. Sci. USA. ８６巻：１００２４～１００２８頁、１９８９年；Gro
ss, GおよびEshhar, Z、FASEB J. ６巻（１５号）：３３７０～３３７８頁、１９９
２年；米国特許第７，７４１，４６５号を参照のこと。今日まで、これらのキメラ受容体
の中には、臨床的使用に採用されたものは存在せず、ヒトＴ細胞において改善された発現
および機能性を有する抗体－ＴＣＲキメラ受容体の新規設計が必要とされている。
本明細書で言及される全ての刊行物、特許、特許出願および公開された特許出願の開示
は、それらの全体が参照によって本明細書に組み込まれる。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0014】
【特許文献1】米国特許第７，７４１，４６５号明細書
【非特許文献】
【0015】
【非特許文献1】Broereら、Principles of Immunopharmacology、２０１１年
【非特許文献2】The T cell Receptor Factsbook、２００１年
【非特許文献3】Callら、Cell. １１１巻（７号）：９６７～７９頁、２００２年
【非特許文献4】Girardiら、J. Invest. Dermatol. １２６巻（１号）：２５～３１頁、２００６年
【非特許文献5】Hayesら、Immunity. １６巻（６号）：８２７～３８頁、２００２年
【非特許文献6】Scheinbergら、Oncotarget. ４巻（５号）：６４７～８頁、２０１３年
【非特許文献7】Cheeverら、Clin. Cancer Res. １５巻（１７号）：５３２３～３７頁、２００９年
【非特許文献8】Blattmanら、Science. ３０５巻（５６８１号）：２００～５頁、２００４年
【非特許文献9】Rosenbergら、Nat. Rev. Cancer. ８巻（４号）：２９９～３０８頁、２００８年
【非特許文献10】Dudley MEら、J. Clin. Oncol. ２３巻（１０号）：２３４６～５７頁、２００５年
【非特許文献11】Kunert Rら、Front. Immunol. ４巻：３６３頁、２０１３年
【非特許文献12】Robbins PFら、Clin. Cancer Res. ２１巻（５号）：１０１９～２７頁、２０１５年
【非特許文献13】Kunert Rら、Front. Immunol. ４巻：３６３頁、２０１３年
【非特許文献14】Kobayashi Eら、Oncoimmunology. ３巻（１号）：ｅ２７２５８頁、２０１４年
【非特許文献15】Rosenberg SAら、Science. ３４８巻（６２３０号）：６２～８頁、２０１５年
【非特許文献16】Barrett DMら、Annu. Rev. Med. ６５巻：３３３～４７頁、２０１４年
【非特許文献17】Davila MLら、Oncoimmunology. １巻（９号）：１５７７～１５８３頁、２０１２年
【非特許文献18】Louis CUら、Blood. １１８巻（２３号）：６０５０～６０５６頁、２０１１年）、Ｂ－ＡＬＬ（Maude, SLら、New England Journal of Medicine ３７１巻：１６号：１５０７～１５１７頁、２０１４年
【非特許文献19】Brentjens, RJら Blood １１８巻：１８号：４８１７～４８２８頁、２０１１年
【非特許文献20】Kochenderfer, JNら Blood １１６巻：２０号：４０９９～４１０２頁、２０１０年
【非特許文献21】Cheeverら、Clin. Cancer Res. １５巻（１７号）：５３２３～３７頁、２００９年
【非特許文献22】Kuwana, Yら、Biochem. Biophys. Res. Commun. １４９巻（３号）：９６０～９６８頁、１９８７年
【非特許文献23】Gross, Gら、Proc. Natl. Acad. Sci. USA. ８６巻：１００２４～１００２８頁、１９８９年
【非特許文献24】Gross, GおよびEshhar, Z、FASEB J. ６巻（１５号）：３３７０～３３７８頁、１９９２年
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【0016】
本出願は、一態様では、Ｔ細胞受容体モジュールに融合した抗体部分（例えば、Ｆａｂ
様抗原結合結合モジュール）を含む構築物（例えば、単離された構築物）を提供する（前
記構築物は、本明細書で「抗体－ＴＣＲキメラ分子」または「ａｂＴＣＲ」とも呼ぶ）。
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、標的抗原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合結合
モジュールと、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートするこ
とが可能なＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）とを含む。一部の実施形態では、標的抗
原は、ペプチドとＭＨＣタンパク質（例えば、ＭＨＣクラスＩタンパク質またはＭＨＣク
ラスＩＩタンパク質）とを含む複合体である。一部の実施形態では、標的抗原は細胞表面
抗原である。
様抗原結合結合モジュール）を含む構築物（例えば、単離された構築物）を提供する（前
記構築物は、本明細書で「抗体－ＴＣＲキメラ分子」または「ａｂＴＣＲ」とも呼ぶ）。
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、標的抗原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合結合
モジュールと、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートするこ
とが可能なＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）とを含む。一部の実施形態では、標的抗
原は、ペプチドとＭＨＣタンパク質（例えば、ＭＨＣクラスＩタンパク質またはＭＨＣク
ラスＩＩタンパク質）とを含む複合体である。一部の実施形態では、標的抗原は細胞表面
抗原である。
【0017】
一部の実施形態では、標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲ（例えば、単離されたａ
ｂＴＣＲ）であって、ａ）ＶＨおよびＣＨ１抗体ドメインを含む第１の抗原結合結合ドメ
インと第１のＴＣＲサブユニットの第１の膜貫通ドメインを含む第１のＴ細胞受容体ドメ
イン（ＴＣＲＤ）とを含む第１のポリペプチド鎖；ならびにｂ）ＶＬおよびＣＬ抗体ドメ
インを含む第２の抗原結合結合ドメインと第２のＴＣＲサブユニットの第２の膜貫通ドメ
インを含む第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖、を含み、第１の抗原結合結合
ドメインのＶＨおよびＣＨ１ドメインと第２の抗原結合結合ドメインのＶＬおよびＣＬド
メインとが、標的抗原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合結合モジュールを形成し、第
１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュー
ルをリクルートすることが可能なＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）を形成する、ａｂ
ＴＣＲが提供される。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド
鎖とは、１つまたは複数のジスルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、
Ｆａｂ様抗原結合結合モジュールは、第１のポリペプチド鎖中のＣＨ１ドメイン中の残基
と第２のポリペプチド鎖中のＣＬドメイン中の残基との間のジスルフィド結合を含む。一
部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖は、第１の抗原結合結合ドメインと第１のＴＣ
ＲＤとの間に第１のペプチドリンカーをさらに含む。一部の実施形態では、第２のポリペ
プチド鎖は、第２の抗原結合結合ドメインと第２のＴＣＲＤとの間に第２のペプチドリン
カーをさらに含む。一部の実施形態では、第１のペプチドリンカーおよび／または第２の
ペプチドリンカーは個々に、約５～約５０アミノ酸長である。一部の実施形態では、標的
抗原は細胞表面抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水化
物および脂質からなる群から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、ＣＤ１
９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５ＤまたはＦＣＲＬ５である。一部の実施
形態では、標的抗原は、ペプチドと主要組織適合複合体（ＭＨＣ）タンパク質とを含む複
合体である。
ｂＴＣＲ）であって、ａ）ＶＨおよびＣＨ１抗体ドメインを含む第１の抗原結合結合ドメ
インと第１のＴＣＲサブユニットの第１の膜貫通ドメインを含む第１のＴ細胞受容体ドメ
イン（ＴＣＲＤ）とを含む第１のポリペプチド鎖；ならびにｂ）ＶＬおよびＣＬ抗体ドメ
インを含む第２の抗原結合結合ドメインと第２のＴＣＲサブユニットの第２の膜貫通ドメ
インを含む第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖、を含み、第１の抗原結合結合
ドメインのＶＨおよびＣＨ１ドメインと第２の抗原結合結合ドメインのＶＬおよびＣＬド
メインとが、標的抗原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合結合モジュールを形成し、第
１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュー
ルをリクルートすることが可能なＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）を形成する、ａｂ
ＴＣＲが提供される。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド
鎖とは、１つまたは複数のジスルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、
Ｆａｂ様抗原結合結合モジュールは、第１のポリペプチド鎖中のＣＨ１ドメイン中の残基
と第２のポリペプチド鎖中のＣＬドメイン中の残基との間のジスルフィド結合を含む。一
部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖は、第１の抗原結合結合ドメインと第１のＴＣ
ＲＤとの間に第１のペプチドリンカーをさらに含む。一部の実施形態では、第２のポリペ
プチド鎖は、第２の抗原結合結合ドメインと第２のＴＣＲＤとの間に第２のペプチドリン
カーをさらに含む。一部の実施形態では、第１のペプチドリンカーおよび／または第２の
ペプチドリンカーは個々に、約５～約５０アミノ酸長である。一部の実施形態では、標的
抗原は細胞表面抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水化
物および脂質からなる群から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、ＣＤ１
９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５ＤまたはＦＣＲＬ５である。一部の実施
形態では、標的抗原は、ペプチドと主要組織適合複合体（ＭＨＣ）タンパク質とを含む複
合体である。
【0018】
一部の実施形態では、標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲであって、ａ）ＶＨ抗体
ドメインを含む第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲサブユニットの第１の膜貫通ドメ
インを含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；およびｂ）ＶＬ抗体ドメイン
を含む第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲサブユニットの第２の膜貫通ドメインを含
む第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖、を含み、第１の抗原結合ドメインのＶ
Ｈドメインと第２の抗原結合ドメインのＶＬドメインとが、標的抗原に特異的に結合する
抗原結合モジュールを形成し、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つの
ＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴ細胞受容体モジュー
ル（ＴＣＲＭ）を形成し、標的抗原が、ペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む複合体であ
る、ａｂＴＣＲが提供される。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖は、第１の抗
原結合ドメインと第１のＴＣＲＤとの間に第１のペプチドリンカーをさらに含み、第２の
ポリペプチド鎖は、第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲＤとの間に第２のペプチドリ
ンカーをさらに含む。一部の実施形態では、第１および／または第２のペプチドリンカー
は、免疫グロブリンまたはＴ細胞受容体サブユニット由来の定常ドメインまたはその断片
を個々に含む。一部の実施形態では、第１および／または第２のペプチドリンカーは、Ｃ
Ｈ１、ＣＨ２、ＣＨ３、ＣＨ４もしくはＣＬ抗体ドメイン、またはそれらの断片を個々に
含む。一部の実施形態では、第１および／または第２のペプチドリンカーは、Ｃα、Ｃβ
、ＣγもしくはＣδ ＴＣＲドメイン、またはそれらの断片を個々に含む。
ドメインを含む第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲサブユニットの第１の膜貫通ドメ
インを含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；およびｂ）ＶＬ抗体ドメイン
を含む第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲサブユニットの第２の膜貫通ドメインを含
む第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖、を含み、第１の抗原結合ドメインのＶ
Ｈドメインと第２の抗原結合ドメインのＶＬドメインとが、標的抗原に特異的に結合する
抗原結合モジュールを形成し、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つの
ＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴ細胞受容体モジュー
ル（ＴＣＲＭ）を形成し、標的抗原が、ペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む複合体であ
る、ａｂＴＣＲが提供される。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖は、第１の抗
原結合ドメインと第１のＴＣＲＤとの間に第１のペプチドリンカーをさらに含み、第２の
ポリペプチド鎖は、第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲＤとの間に第２のペプチドリ
ンカーをさらに含む。一部の実施形態では、第１および／または第２のペプチドリンカー
は、免疫グロブリンまたはＴ細胞受容体サブユニット由来の定常ドメインまたはその断片
を個々に含む。一部の実施形態では、第１および／または第２のペプチドリンカーは、Ｃ
Ｈ１、ＣＨ２、ＣＨ３、ＣＨ４もしくはＣＬ抗体ドメイン、またはそれらの断片を個々に
含む。一部の実施形態では、第１および／または第２のペプチドリンカーは、Ｃα、Ｃβ
、ＣγもしくはＣδ ＴＣＲドメイン、またはそれらの断片を個々に含む。
【0019】
一部の実施形態では、上記ａｂＴＣＲ（例えば、単離されたａｂＴＣＲ）のいずれかに
よれば、第１のＴＣＲＤは、第１の膜貫通ドメインのＮ末端側に、ＴＣＲサブユニットの
第１の接続ペプチドまたはその断片をさらに含む。第２のＴＣＲＤは、第２の膜貫通ドメ
インのＮ末端側に、ＴＣＲサブユニットの第２の接続ペプチドまたはその断片をさらに含
む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、第１の接続ペプチド中の残基と第２の接続ペプチ
ド中の残基との間のジスルフィド結合を含む。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、
第１の膜貫通ドメインのＣ末端側に、ＴＣＲ細胞内配列を含む第１のＴＣＲ細胞内ドメイ
ンをさらに含む。一部の実施形態では、第２のＴＣＲＤは、第２の膜貫通ドメインのＣ末
端側に、ＴＣＲ細胞内配列を含む第２のＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施
形態では、ａｂＴＣＲは、約０．１ｐＭ～約５００ｎＭの平衡解離定数（Ｋｄ）で標的抗
原に結合する。一部の実施形態では、ＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールは、ＣＤ３δε
、ＣＤ３γεおよびζζからなる群から選択される。
よれば、第１のＴＣＲＤは、第１の膜貫通ドメインのＮ末端側に、ＴＣＲサブユニットの
第１の接続ペプチドまたはその断片をさらに含む。第２のＴＣＲＤは、第２の膜貫通ドメ
インのＮ末端側に、ＴＣＲサブユニットの第２の接続ペプチドまたはその断片をさらに含
む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、第１の接続ペプチド中の残基と第２の接続ペプチ
ド中の残基との間のジスルフィド結合を含む。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、
第１の膜貫通ドメインのＣ末端側に、ＴＣＲ細胞内配列を含む第１のＴＣＲ細胞内ドメイ
ンをさらに含む。一部の実施形態では、第２のＴＣＲＤは、第２の膜貫通ドメインのＣ末
端側に、ＴＣＲ細胞内配列を含む第２のＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施
形態では、ａｂＴＣＲは、約０．１ｐＭ～約５００ｎＭの平衡解離定数（Ｋｄ）で標的抗
原に結合する。一部の実施形態では、ＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールは、ＣＤ３δε
、ＣＤ３γεおよびζζからなる群から選択される。
【0020】
一部の実施形態では、上記ａｂＴＣＲ（例えば、単離されたａｂＴＣＲ）のいずれかに
よれば、第１のポリペプチド鎖は、第１の膜貫通ドメインのＣ末端側に、共刺激細胞内シ
グナル伝達配列を含む第１のアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態で
は、第２のポリペプチド鎖は、第２の膜貫通ドメインのＣ末端側に、共刺激細胞内シグナ
ル伝達配列を含む第２のアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、
第１のポリペプチド鎖は、第１の抗原結合ドメインのＮ末端側に、第１のシグナル伝達ペ
プチドをさらに含む。一部の実施形態では、第２のポリペプチド鎖は、第２の抗原結合ド
メインのＮ末端側に、第２のシグナル伝達ペプチドをさらに含む。
よれば、第１のポリペプチド鎖は、第１の膜貫通ドメインのＣ末端側に、共刺激細胞内シ
グナル伝達配列を含む第１のアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態で
は、第２のポリペプチド鎖は、第２の膜貫通ドメインのＣ末端側に、共刺激細胞内シグナ
ル伝達配列を含む第２のアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、
第１のポリペプチド鎖は、第１の抗原結合ドメインのＮ末端側に、第１のシグナル伝達ペ
プチドをさらに含む。一部の実施形態では、第２のポリペプチド鎖は、第２の抗原結合ド
メインのＮ末端側に、第２のシグナル伝達ペプチドをさらに含む。
【0021】
一部の実施形態では、標的抗原がペプチドと主要組織適合複合体（ＭＨＣ）タンパク質
とを含む複合体である上記ａｂＴＣＲ（例えば、単離されたａｂＴＣＲ）のいずれかによ
れば、ペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭ
Ｅ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択されるタンパク質
に由来する。
とを含む複合体である上記ａｂＴＣＲ（例えば、単離されたａｂＴＣＲ）のいずれかによ
れば、ペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭ
Ｅ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択されるタンパク質
に由来する。
【0022】
一部の実施形態では、上記ａｂＴＣＲ（例えば、単離されたａｂＴＣＲ）のいずれかに
よれば、ａ）第１のＴＣＲサブユニットはＴＣＲα鎖であり、第２のＴＣＲサブユニット
はＴＣＲβ鎖であり；ｂ）第１のＴＣＲサブユニットはＴＣＲβ鎖であり、第２のＴＣＲ
サブユニットはＴＣＲα鎖であり；ｃ）第１のＴＣＲサブユニットはＴＣＲγ鎖であり、
第２のＴＣＲサブユニットはＴＣＲδ鎖であり；またはｄ）第１のＴＣＲサブユニットは
ＴＣＲδ鎖であり、第２のＴＣＲサブユニットはＴＣＲγ鎖である。
よれば、ａ）第１のＴＣＲサブユニットはＴＣＲα鎖であり、第２のＴＣＲサブユニット
はＴＣＲβ鎖であり；ｂ）第１のＴＣＲサブユニットはＴＣＲβ鎖であり、第２のＴＣＲ
サブユニットはＴＣＲα鎖であり；ｃ）第１のＴＣＲサブユニットはＴＣＲγ鎖であり、
第２のＴＣＲサブユニットはＴＣＲδ鎖であり；またはｄ）第１のＴＣＲサブユニットは
ＴＣＲδ鎖であり、第２のＴＣＲサブユニットはＴＣＲγ鎖である。
【0023】
一部の実施形態では、上記ａｂＴＣＲ（例えば、単離されたａｂＴＣＲ）のいずれかに
よれば、ａｂＴＣＲの第１および第２のポリペプチド鎖をコードする核酸が提供される。
よれば、ａｂＴＣＲの第１および第２のポリペプチド鎖をコードする核酸が提供される。
【0024】
一部の実施形態では、上記ａｂＴＣＲ（例えば、単離されたａｂＴＣＲ）のいずれかに
よれば、ａｂＴＣＲとＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζからなる群から選択される少な
くとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールとを含む複合体が提供される。一部の実
施形態では、複合体は、ａｂＴＣＲとＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζとを含む八量体
である。
よれば、ａｂＴＣＲとＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζからなる群から選択される少な
くとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールとを含む複合体が提供される。一部の実
施形態では、複合体は、ａｂＴＣＲとＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζとを含む八量体
である。
【0025】
一部の実施形態では、上記ａｂＴＣＲ（例えば、単離されたａｂＴＣＲ）のいずれかに
よれば、ａｂＴＣＲをその表面上に提示するエフェクター細胞が提供される。一部の実施
形態では、エフェクター細胞は、ａｂＴＣＲをコードする核酸を含む。一部の実施形態で
は、エフェクター細胞は、第１のＴＣＲサブユニットおよび／または第２のＴＣＲサブユ
ニットを発現しない。例えば、一部の実施形態では、ａ）第１のＴＣＲサブユニットはＴ
ＣＲγであり、第２のＴＣＲサブユニットはＴＣＲδであり；またはｂ）第１のＴＣＲサ
ブユニットはＴＣＲδであり、第２のＴＣＲサブユニットはＴＣＲγであり；エフェクタ
ー細胞はαβＴ細胞である。一部の実施形態では、ａ）第１のＴＣＲサブユニットはＴＣ
Ｒγであり、第２のＴＣＲサブユニットはＴＣＲδであり；またはｂ）第１のＴＣＲサブ
ユニットはＴＣＲδであり、第２のＴＣＲサブユニットはＴＣＲγであり；エフェクター
細胞はαβＴ細胞である。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、第１の内因性ＴＣ
Ｒサブユニットおよび／または第２の内因性ＴＣＲサブユニットの発現を遮断するまたは
減少させるように改変されている。例えば、一部の実施形態では、ａ）第１のＴＣＲサブ
ユニットはＴＣＲαであり、第２のＴＣＲサブユニットはＴＣＲβであり；またはｂ）第
１のＴＣＲサブユニットはＴＣＲβであり、第２のＴＣＲサブユニットはＴＣＲαであり
；エフェクター細胞は、ＴＣＲαおよび／またはＴＣＲβの発現を遮断するまたは減少さ
せるように改変されているαβＴ細胞である。一部の実施形態では、ａ）第１のＴＣＲサ
ブユニットはＴＣＲγであり、第２のＴＣＲサブユニットはＴＣＲδであり；またはｂ）
第１のＴＣＲサブユニットはＴＣＲδであり、第２のＴＣＲサブユニットはＴＣＲγであ
り；エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはＴＣＲδの発現を遮断するまたは減少
させるように改変されているγδＴ細胞である。
よれば、ａｂＴＣＲをその表面上に提示するエフェクター細胞が提供される。一部の実施
形態では、エフェクター細胞は、ａｂＴＣＲをコードする核酸を含む。一部の実施形態で
は、エフェクター細胞は、第１のＴＣＲサブユニットおよび／または第２のＴＣＲサブユ
ニットを発現しない。例えば、一部の実施形態では、ａ）第１のＴＣＲサブユニットはＴ
ＣＲγであり、第２のＴＣＲサブユニットはＴＣＲδであり；またはｂ）第１のＴＣＲサ
ブユニットはＴＣＲδであり、第２のＴＣＲサブユニットはＴＣＲγであり；エフェクタ
ー細胞はαβＴ細胞である。一部の実施形態では、ａ）第１のＴＣＲサブユニットはＴＣ
Ｒγであり、第２のＴＣＲサブユニットはＴＣＲδであり；またはｂ）第１のＴＣＲサブ
ユニットはＴＣＲδであり、第２のＴＣＲサブユニットはＴＣＲγであり；エフェクター
細胞はαβＴ細胞である。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、第１の内因性ＴＣ
Ｒサブユニットおよび／または第２の内因性ＴＣＲサブユニットの発現を遮断するまたは
減少させるように改変されている。例えば、一部の実施形態では、ａ）第１のＴＣＲサブ
ユニットはＴＣＲαであり、第２のＴＣＲサブユニットはＴＣＲβであり；またはｂ）第
１のＴＣＲサブユニットはＴＣＲβであり、第２のＴＣＲサブユニットはＴＣＲαであり
；エフェクター細胞は、ＴＣＲαおよび／またはＴＣＲβの発現を遮断するまたは減少さ
せるように改変されているαβＴ細胞である。一部の実施形態では、ａ）第１のＴＣＲサ
ブユニットはＴＣＲγであり、第２のＴＣＲサブユニットはＴＣＲδであり；またはｂ）
第１のＴＣＲサブユニットはＴＣＲδであり、第２のＴＣＲサブユニットはＴＣＲγであ
り；エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはＴＣＲδの発現を遮断するまたは減少
させるように改変されているγδＴ細胞である。
【0026】
一部の実施形態では、上記ａｂＴＣＲ（例えば、単離されたａｂＴＣＲ）のいずれかに
よれば、ａｂＴＣＲをその表面上に提示するエフェクター細胞であって、Ｔ細胞であるエ
フェクター細胞が提供される。一部の実施形態では、Ｔ細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘル
パーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択され
る。
よれば、ａｂＴＣＲをその表面上に提示するエフェクター細胞であって、Ｔ細胞であるエ
フェクター細胞が提供される。一部の実施形態では、Ｔ細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘル
パーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択され
る。
【0027】
一部の実施形態では、上記ａｂＴＣＲ（例えば、単離されたａｂＴＣＲ）のいずれかに
よれば、ａｂＴＣＲをその表面上に提示するエフェクター細胞であって、ａ）第１のプロ
モーターの制御下のａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列を含
む第１のベクターと、ｂ）第２のプロモーターの制御下のａｂＴＣＲの第２のポリペプチ
ド鎖をコードする第２の核酸配列を含む第２のベクターとを含む、エフェクター細胞が提
供される。
よれば、ａｂＴＣＲをその表面上に提示するエフェクター細胞であって、ａ）第１のプロ
モーターの制御下のａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列を含
む第１のベクターと、ｂ）第２のプロモーターの制御下のａｂＴＣＲの第２のポリペプチ
ド鎖をコードする第２の核酸配列を含む第２のベクターとを含む、エフェクター細胞が提
供される。
【0028】
一部の実施形態では、上記ａｂＴＣＲ（例えば、単離されたａｂＴＣＲ）のいずれかに
よれば、ａｂＴＣＲをその表面上に提示するエフェクター細胞であって、ａ）第１のプロ
モーターの制御下のａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列と；
ｂ）第２のプロモーターの制御下のａｂＴＣＲの第２のポリペプチド鎖をコードする第２
の核酸配列とを含むベクターを含む、エフェクター細胞が提供される。
よれば、ａｂＴＣＲをその表面上に提示するエフェクター細胞であって、ａ）第１のプロ
モーターの制御下のａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列と；
ｂ）第２のプロモーターの制御下のａｂＴＣＲの第２のポリペプチド鎖をコードする第２
の核酸配列とを含むベクターを含む、エフェクター細胞が提供される。
【0029】
一部の実施形態では、上記ａｂＴＣＲ（例えば、単離されたａｂＴＣＲ）のいずれかに
よれば、ａｂＴＣＲをその表面上に提示するエフェクター細胞であって、ａ）ａｂＴＣＲ
の第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列と；ａｂＴＣＲの第２のポリペプチ
ド鎖をコードする第２の核酸配列とを含むベクターを含み、第１および第２の核酸配列が
、単一のプロモーターの制御下にある、エフェクター細胞が提供される。
よれば、ａｂＴＣＲをその表面上に提示するエフェクター細胞であって、ａ）ａｂＴＣＲ
の第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列と；ａｂＴＣＲの第２のポリペプチ
ド鎖をコードする第２の核酸配列とを含むベクターを含み、第１および第２の核酸配列が
、単一のプロモーターの制御下にある、エフェクター細胞が提供される。
【0030】
一部の実施形態では、上記ａｂＴＣＲ（例えば、単離されたａｂＴＣＲ）のいずれかに
よれば、ａｂＴＣＲをその表面上に提示するエフェクター細胞であって、ａｂＴＣＲの第
１のポリペプチド鎖の発現が、ａｂＴＣＲの第２のポリペプチド鎖の発現とは、２倍より
も大きく異なる、エフェクター細胞が提供される。
よれば、ａｂＴＣＲをその表面上に提示するエフェクター細胞であって、ａｂＴＣＲの第
１のポリペプチド鎖の発現が、ａｂＴＣＲの第２のポリペプチド鎖の発現とは、２倍より
も大きく異なる、エフェクター細胞が提供される。
【0031】
一部の実施形態では、標的抗原を提示する標的細胞を死滅させる方法であって、標的細
胞を、上記ａｂＴＣＲ（例えば、単離されたａｂＴＣＲ）のいずれかにしたがうａｂＴＣ
Ｒを発現するエフェクター細胞と接触させるステップを含み、ａｂＴＣＲが、標的抗原に
特異的に結合する、方法が提供される。
胞を、上記ａｂＴＣＲ（例えば、単離されたａｂＴＣＲ）のいずれかにしたがうａｂＴＣ
Ｒを発現するエフェクター細胞と接触させるステップを含み、ａｂＴＣＲが、標的抗原に
特異的に結合する、方法が提供される。
【0032】
一部の実施形態では、標的抗原を提示する標的細胞を死滅させる方法であって、標的細
胞を、標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲを含むエフェクターαβＴ細胞と接触させ
るステップを含み、ａｂＴＣＲが、ａ）ＶＨ抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメイン
と第１のＴＣＲサブユニットの第１の膜貫通ドメインを含む第１のＴＣＲＤとを含む第１
のポリペプチド鎖；およびｂ）ＶＬ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインと第２の
ＴＣＲサブユニットの第２の膜貫通ドメインを含む第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペ
プチド鎖、を含み、第１の抗原結合ドメインのＶＨドメインと第２の抗原結合ドメインの
ＶＬドメインとが、標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールを形成し、第１のＴ
ＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリ
クルートすることが可能なＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）を形成し、第１のＴＣＲ
サブユニットがＴＣＲγであり、第２のＴＣＲサブユニットがＴＣＲδであり、または第
１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲδであり、第２のＴＣＲサブユニットがＴＣＲγである
、方法が提供される。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖は、第１の抗原結合ド
メインと第１のＴＣＲＤとの間に第１のペプチドリンカーをさらに含み、第２のポリペプ
チド鎖は、第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲＤとの間に第２のペプチドリンカーを
さらに含む。一部の実施形態では、第１および／または第２のペプチドリンカーは、免疫
グロブリンまたはＴ細胞受容体サブユニット由来の定常ドメインまたはその断片を個々に
含む。一部の実施形態では、第１および／または第２のペプチドリンカーは、ＣＨ１、Ｃ
Ｈ２、ＣＨ３、ＣＨ４もしくはＣＬ抗体ドメイン、またはそれらの断片を個々に含む。一
部の実施形態では、第１および／または第２のペプチドリンカーは、Ｃα、Ｃβ、Ｃγも
しくはＣδＴＣＲドメイン、またはそれらの断片を個々に含む。
胞を、標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲを含むエフェクターαβＴ細胞と接触させ
るステップを含み、ａｂＴＣＲが、ａ）ＶＨ抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメイン
と第１のＴＣＲサブユニットの第１の膜貫通ドメインを含む第１のＴＣＲＤとを含む第１
のポリペプチド鎖；およびｂ）ＶＬ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインと第２の
ＴＣＲサブユニットの第２の膜貫通ドメインを含む第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペ
プチド鎖、を含み、第１の抗原結合ドメインのＶＨドメインと第２の抗原結合ドメインの
ＶＬドメインとが、標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールを形成し、第１のＴ
ＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリ
クルートすることが可能なＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）を形成し、第１のＴＣＲ
サブユニットがＴＣＲγであり、第２のＴＣＲサブユニットがＴＣＲδであり、または第
１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲδであり、第２のＴＣＲサブユニットがＴＣＲγである
、方法が提供される。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖は、第１の抗原結合ド
メインと第１のＴＣＲＤとの間に第１のペプチドリンカーをさらに含み、第２のポリペプ
チド鎖は、第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲＤとの間に第２のペプチドリンカーを
さらに含む。一部の実施形態では、第１および／または第２のペプチドリンカーは、免疫
グロブリンまたはＴ細胞受容体サブユニット由来の定常ドメインまたはその断片を個々に
含む。一部の実施形態では、第１および／または第２のペプチドリンカーは、ＣＨ１、Ｃ
Ｈ２、ＣＨ３、ＣＨ４もしくはＣＬ抗体ドメイン、またはそれらの断片を個々に含む。一
部の実施形態では、第１および／または第２のペプチドリンカーは、Ｃα、Ｃβ、Ｃγも
しくはＣδＴＣＲドメイン、またはそれらの断片を個々に含む。
【0033】
一部の実施形態では、上記標的細胞を死滅させる方法のいずれかによれば、接触させる
ステップはｉｎ ｖｉｖｏである。一部の実施形態では、接触させるステップはｉｎ ｖ
ｉｔｒｏである。
ステップはｉｎ ｖｉｖｏである。一部の実施形態では、接触させるステップはｉｎ ｖ
ｉｔｒｏである。
【0034】
一部の実施形態では、上記ａｂＴＣＲ（例えば、単離されたａｂＴＣＲ）のいずれかに
したがうａｂＴＣＲと薬学的に許容されるキャリアとを含む医薬組成物が提供される。一
部の実施形態では、上記実施形態のいずれかにしたがうａｂＴＣＲをコードする核酸と薬
学的に許容されるキャリアとを含む医薬組成物が提供される。一部の実施形態では、上記
ａｂＴＣＲ（例えば、単離されたａｂＴＣＲ）のいずれかにしたがうａｂＴＣＲを発現す
るエフェクター細胞と薬学的に許容されるキャリアとを含む医薬組成物が提供される。
したがうａｂＴＣＲと薬学的に許容されるキャリアとを含む医薬組成物が提供される。一
部の実施形態では、上記実施形態のいずれかにしたがうａｂＴＣＲをコードする核酸と薬
学的に許容されるキャリアとを含む医薬組成物が提供される。一部の実施形態では、上記
ａｂＴＣＲ（例えば、単離されたａｂＴＣＲ）のいずれかにしたがうａｂＴＣＲを発現す
るエフェクター細胞と薬学的に許容されるキャリアとを含む医薬組成物が提供される。
【0035】
一部の実施形態では、それを必要とする個体において標的抗原関連疾患を処置する方法
であって、個体に、有効量の、上記ａｂＴＣＲ（例えば、単離されたａｂＴＣＲ）のいず
れかにしたがうａｂＴＣＲを発現するエフェクター細胞を含む医薬組成物を投与するステ
ップを含む方法が提供される。
であって、個体に、有効量の、上記ａｂＴＣＲ（例えば、単離されたａｂＴＣＲ）のいず
れかにしたがうａｂＴＣＲを発現するエフェクター細胞を含む医薬組成物を投与するステ
ップを含む方法が提供される。
【0036】
一部の実施形態では、それを必要とする個体において標的抗原関連疾患を処置する方法
であって、個体に、有効量の、標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲを含むエフェクタ
ーαβ Ｔ細胞を含む組成物を投与するステップを含み、ａｂＴＣＲが、ａ）ＶＨ抗体ド
メインを含む第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲサブユニットの第１の膜貫通ドメイ
ンを含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；およびｂ）ＶＬ抗体ドメインを
含む第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲサブユニットの第２の膜貫通ドメインを含む
第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖、を含み、第１の抗原結合ドメインのＶＨ
ドメインと第２の抗原結合ドメインのＶＬドメインとが、標的抗原に特異的に結合する抗
原結合モジュールを形成し、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴ
ＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴ細胞受容体モジュール
（ＴＣＲＭ）を形成し、第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲγであり、第２のＴＣＲサブ
ユニットがＴＣＲδであり、または第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲδであり、第２の
ＴＣＲサブユニットがＴＣＲγである、方法が提供される。一部の実施形態では、第１の
ポリペプチド鎖は、第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲＤとの間に第１のペプチドリ
ンカーをさらに含み、第２のポリペプチド鎖は、第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲ
Ｄとの間に第２のペプチドリンカーをさらに含む。一部の実施形態では、第１および／ま
たは第２のペプチドリンカーは、免疫グロブリンまたはＴ細胞受容体サブユニット由来の
定常ドメインまたはその断片を個々に含む。一部の実施形態では、第１および／または第
２のペプチドリンカーは、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、ＣＨ４もしくはＣＬ抗体ドメイン、
またはそれらの断片を個々に含む。一部の実施形態では、第１および／または第２のペプ
チドリンカーは、Ｃα、Ｃβ、ＣγもしくはＣδＴＣＲドメイン、またはそれらの断片を
個々に含む。
であって、個体に、有効量の、標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲを含むエフェクタ
ーαβ Ｔ細胞を含む組成物を投与するステップを含み、ａｂＴＣＲが、ａ）ＶＨ抗体ド
メインを含む第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲサブユニットの第１の膜貫通ドメイ
ンを含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；およびｂ）ＶＬ抗体ドメインを
含む第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲサブユニットの第２の膜貫通ドメインを含む
第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖、を含み、第１の抗原結合ドメインのＶＨ
ドメインと第２の抗原結合ドメインのＶＬドメインとが、標的抗原に特異的に結合する抗
原結合モジュールを形成し、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴ
ＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴ細胞受容体モジュール
（ＴＣＲＭ）を形成し、第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲγであり、第２のＴＣＲサブ
ユニットがＴＣＲδであり、または第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲδであり、第２の
ＴＣＲサブユニットがＴＣＲγである、方法が提供される。一部の実施形態では、第１の
ポリペプチド鎖は、第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲＤとの間に第１のペプチドリ
ンカーをさらに含み、第２のポリペプチド鎖は、第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲ
Ｄとの間に第２のペプチドリンカーをさらに含む。一部の実施形態では、第１および／ま
たは第２のペプチドリンカーは、免疫グロブリンまたはＴ細胞受容体サブユニット由来の
定常ドメインまたはその断片を個々に含む。一部の実施形態では、第１および／または第
２のペプチドリンカーは、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、ＣＨ４もしくはＣＬ抗体ドメイン、
またはそれらの断片を個々に含む。一部の実施形態では、第１および／または第２のペプ
チドリンカーは、Ｃα、Ｃβ、ＣγもしくはＣδＴＣＲドメイン、またはそれらの断片を
個々に含む。
【0037】
一部の実施形態では、上記標的抗原関連疾患を処置する方法のいずれかによれば、標的
抗原関連疾患はがんである。一部の実施形態では、がんは、副腎皮質癌、膀胱がん、乳が
ん、子宮頸がん、胆管細胞癌、結腸直腸がん、食道がん、グリア芽細胞腫、グリオーマ、
肝細胞癌、頭頸部がん、腎臓がん、リンパ腫、白血病、肺がん、メラノーマ、中皮腫、多
発性骨髄腫、膵臓がん、褐色細胞腫、形質細胞腫、神経芽細胞腫、卵巣がん、前立腺がん
、肉腫、胃がん、子宮がんおよび甲状腺がんからなる群から選択される。一部の実施形態
では、標的抗原関連疾患は、ウイルス感染症である。一部の実施形態では、ウイルス感染
症は、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、エプスタイン－バーウイルス（ＥＢＶ）、Ｂ型
肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス（ＫＳＨＶ）、ヒトパピロー
マウイルス（ＨＰＶ）、伝染性軟属腫ウイルス（ＭＣＶ）、ヒトＴ細胞白血病ウイルス１
（ＨＴＬＶ－１）、ＨＩＶ（ヒト免疫不全ウイルス）およびＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）
からなる群から選択されるウイルスによって引き起こされる。
抗原関連疾患はがんである。一部の実施形態では、がんは、副腎皮質癌、膀胱がん、乳が
ん、子宮頸がん、胆管細胞癌、結腸直腸がん、食道がん、グリア芽細胞腫、グリオーマ、
肝細胞癌、頭頸部がん、腎臓がん、リンパ腫、白血病、肺がん、メラノーマ、中皮腫、多
発性骨髄腫、膵臓がん、褐色細胞腫、形質細胞腫、神経芽細胞腫、卵巣がん、前立腺がん
、肉腫、胃がん、子宮がんおよび甲状腺がんからなる群から選択される。一部の実施形態
では、標的抗原関連疾患は、ウイルス感染症である。一部の実施形態では、ウイルス感染
症は、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、エプスタイン－バーウイルス（ＥＢＶ）、Ｂ型
肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス（ＫＳＨＶ）、ヒトパピロー
マウイルス（ＨＰＶ）、伝染性軟属腫ウイルス（ＭＣＶ）、ヒトＴ細胞白血病ウイルス１
（ＨＴＬＶ－１）、ＨＩＶ（ヒト免疫不全ウイルス）およびＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）
からなる群から選択されるウイルスによって引き起こされる。
【0038】
一部の実施形態では、それを必要とする個体において標的抗原関連疾患を処置する方法
であって、個体に、有効量の、上記ａｂＴＣＲ（例えば、単離されたａｂＴＣＲ）のいず
れかにしたがうａｂＴＣＲをコードする核酸を含む医薬組成物を投与するステップを含む
方法が提供される。
であって、個体に、有効量の、上記ａｂＴＣＲ（例えば、単離されたａｂＴＣＲ）のいず
れかにしたがうａｂＴＣＲをコードする核酸を含む医薬組成物を投与するステップを含む
方法が提供される。
【0039】
一部の実施形態では、上記ａｂＴＣＲ（例えば、単離されたａｂＴＣＲ）のいずれかに
したがうａｂＴＣＲを発現するエフェクター細胞について不均一な細胞集団を富化する方
法であって、ａ）不均一な細胞集団を、標的抗原またはその中に含まれる１つもしくは複
数のエピトープを含むリガンドと接触させて、リガンドに結合したエフェクター細胞の複
合体を形成するステップ；およびｂ）不均一な細胞集団から複合体を分離し、それによっ
て、エフェクター細胞について富化された細胞集団を生成するステップを含む方法が提供
される。
したがうａｂＴＣＲを発現するエフェクター細胞について不均一な細胞集団を富化する方
法であって、ａ）不均一な細胞集団を、標的抗原またはその中に含まれる１つもしくは複
数のエピトープを含むリガンドと接触させて、リガンドに結合したエフェクター細胞の複
合体を形成するステップ；およびｂ）不均一な細胞集団から複合体を分離し、それによっ
て、エフェクター細胞について富化された細胞集団を生成するステップを含む方法が提供
される。
【0040】
一部の実施形態では、上記ａｂＴＣＲ（例えば、単離されたａｂＴＣＲ）のいずれかに
したがう複数のａｂＴＣＲをコードする配列を含む、核酸ライブラリーが提供される。
したがう複数のａｂＴＣＲをコードする配列を含む、核酸ライブラリーが提供される。
【0041】
一部の実施形態では、標的抗原に対して特異的なａｂＴＣＲをコードする配列について
、上記実施形態のいずれかにしたがう核酸ライブラリーをスクリーニングする方法であっ
て、ａ）ａｂＴＣＲが複数の細胞の表面上で発現されるように、核酸ライブラリーを複数
の細胞中に導入するステップ；ｂ）複数の細胞を、標的抗原またはその中に含まれる１つ
もしくは複数のエピトープを含むリガンドと共にインキュベートするステップ；ｃ）リガ
ンドに結合した細胞を収集するステップ；およびｄ）ステップｃ）において収集した細胞
から、ａｂＴＣＲをコードする配列を単離し、それによって、標的抗原に対して特異的な
ａｂＴＣＲを同定するステップを含む方法が提供される。
、上記実施形態のいずれかにしたがう核酸ライブラリーをスクリーニングする方法であっ
て、ａ）ａｂＴＣＲが複数の細胞の表面上で発現されるように、核酸ライブラリーを複数
の細胞中に導入するステップ；ｂ）複数の細胞を、標的抗原またはその中に含まれる１つ
もしくは複数のエピトープを含むリガンドと共にインキュベートするステップ；ｃ）リガ
ンドに結合した細胞を収集するステップ；およびｄ）ステップｃ）において収集した細胞
から、ａｂＴＣＲをコードする配列を単離し、それによって、標的抗原に対して特異的な
ａｂＴＣＲを同定するステップを含む方法が提供される。
【0042】
本明細書に記載される構築物のいずれかを作製する方法、本明細書に記載される方法に
適切な製造物品およびキットもまた提供される。
適切な製造物品およびキットもまた提供される。
【図面の簡単な説明】
【0043】
【0044】
【0045】
【0046】
【0047】
【0048】
【0049】
【0050】
【0051】
【0052】
【0053】
【0054】
【図7】図７Ａは、ａｂＴＣＲ形質導入末梢血リンパ球のフローサイトメトリー分析を示す図である；細胞は、抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１結合部分を有するａｂＴＣＲ－６ＭＤ構築物を用いて形質導入され、抗ＣＤ４抗体、抗ＣＤ８抗体およびＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１四量体を用いて共染色された。点線四角は、図７ＢのＣＤ４／ＣＤ８プロットに示される細胞についての四量体＋集団ゲーティングを示す。図７Ｂは、偽形質導入または、抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１結合部分を有するａｂＴＣＲ－６ＭＤ構築物を用いて形質導入され、抗ＣＤ４および抗ＣＤ８抗体を用いて共染色された末梢血リンパ球上のＣＤ４およびＣＤ８発現のフローサイトメトリー分析を示す図である；ＣＤ４およびＣＤ８発現は、未ゲーティング細胞（上の２パネル）または四量体＋ゲーティング細胞（下パネル）について示されている。
【0055】
【0056】
【0057】
【0058】
【0059】
【0060】
【0061】
【図12A】図１２Ａ～１２Ｈは、標的がん細胞の存在を有してまたは有さずにサイトカイン産生についての形質導入Ｔ細胞のフローサイトメトリー分析を示す図である；Ｔ細胞は、両方とも同じ抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１結合部分可変ドメインを有するＣＡＲまたはａｂＴＣＲ－６ＭＤのいずれかを用いて形質導入され、ＳＫ－ＨＥＰ－１、ＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧまたはＨｅｐＧ２細胞のいずれかと共培養された；次に細胞は、ＰＥ標識されたＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１四量体、抗ＣＤ４抗体ならびに抗ＴＮＦ－α抗体（１２Ａおよび１２Ｂ）、抗ＩＦＮγ抗体（１２Ｃおよび１２Ｄ）、抗ＩＬ－２抗体（１２Ｅおよび１２Ｆ）または抗ＩＬ－６抗体（１２Ｇおよび１２Ｈ）の１つを用いて共染色された。示される集団は、ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１四量体＋細胞でゲーティングされた。
【0062】
【図12B】図１２Ａ～１２Ｈは、標的がん細胞の存在を有してまたは有さずにサイトカイン産生についての形質導入Ｔ細胞のフローサイトメトリー分析を示す図である；Ｔ細胞は、両方とも同じ抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１結合部分可変ドメインを有するＣＡＲまたはａｂＴＣＲ－６ＭＤのいずれかを用いて形質導入され、ＳＫ－ＨＥＰ－１、ＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧまたはＨｅｐＧ２細胞のいずれかと共培養された；次に細胞は、ＰＥ標識されたＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１四量体、抗ＣＤ４抗体ならびに抗ＴＮＦ－α抗体（１２Ａおよび１２Ｂ）、抗ＩＦＮγ抗体（１２Ｃおよび１２Ｄ）、抗ＩＬ－２抗体（１２Ｅおよび１２Ｆ）または抗ＩＬ－６抗体（１２Ｇおよび１２Ｈ）の１つを用いて共染色された。示される集団は、ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１四量体＋細胞でゲーティングされた。
【0063】
【図12C】図１２Ａ～１２Ｈは、標的がん細胞の存在を有してまたは有さずにサイトカイン産生についての形質導入Ｔ細胞のフローサイトメトリー分析を示す図である；Ｔ細胞は、両方とも同じ抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１結合部分可変ドメインを有するＣＡＲまたはａｂＴＣＲ－６ＭＤのいずれかを用いて形質導入され、ＳＫ－ＨＥＰ－１、ＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧまたはＨｅｐＧ２細胞のいずれかと共培養された；次に細胞は、ＰＥ標識されたＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１四量体、抗ＣＤ４抗体ならびに抗ＴＮＦ－α抗体（１２Ａおよび１２Ｂ）、抗ＩＦＮγ抗体（１２Ｃおよび１２Ｄ）、抗ＩＬ－２抗体（１２Ｅおよび１２Ｆ）または抗ＩＬ－６抗体（１２Ｇおよび１２Ｈ）の１つを用いて共染色された。示される集団は、ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１四量体＋細胞でゲーティングされた。
【0064】
【図12D】図１２Ａ～１２Ｈは、標的がん細胞の存在を有してまたは有さずにサイトカイン産生についての形質導入Ｔ細胞のフローサイトメトリー分析を示す図である；Ｔ細胞は、両方とも同じ抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１結合部分可変ドメインを有するＣＡＲまたはａｂＴＣＲ－６ＭＤのいずれかを用いて形質導入され、ＳＫ－ＨＥＰ－１、ＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧまたはＨｅｐＧ２細胞のいずれかと共培養された；次に細胞は、ＰＥ標識されたＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１四量体、抗ＣＤ４抗体ならびに抗ＴＮＦ－α抗体（１２Ａおよび１２Ｂ）、抗ＩＦＮγ抗体（１２Ｃおよび１２Ｄ）、抗ＩＬ－２抗体（１２Ｅおよび１２Ｆ）または抗ＩＬ－６抗体（１２Ｇおよび１２Ｈ）の１つを用いて共染色された。示される集団は、ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１四量体＋細胞でゲーティングされた。
【0065】
【図12E】図１２Ａ～１２Ｈは、標的がん細胞の存在を有してまたは有さずにサイトカイン産生についての形質導入Ｔ細胞のフローサイトメトリー分析を示す図である；Ｔ細胞は、両方とも同じ抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１結合部分可変ドメインを有するＣＡＲまたはａｂＴＣＲ－６ＭＤのいずれかを用いて形質導入され、ＳＫ－ＨＥＰ－１、ＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧまたはＨｅｐＧ２細胞のいずれかと共培養された；次に細胞は、ＰＥ標識されたＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１四量体、抗ＣＤ４抗体ならびに抗ＴＮＦ－α抗体（１２Ａおよび１２Ｂ）、抗ＩＦＮγ抗体（１２Ｃおよび１２Ｄ）、抗ＩＬ－２抗体（１２Ｅおよび１２Ｆ）または抗ＩＬ－６抗体（１２Ｇおよび１２Ｈ）の１つを用いて共染色された。示される集団は、ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１四量体＋細胞でゲーティングされた。
【図12F】図１２Ａ～１２Ｈは、標的がん細胞の存在を有してまたは有さずにサイトカイン産生についての形質導入Ｔ細胞のフローサイトメトリー分析を示す図である；Ｔ細胞は、両方とも同じ抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１結合部分可変ドメインを有するＣＡＲまたはａｂＴＣＲ－６ＭＤのいずれかを用いて形質導入され、ＳＫ－ＨＥＰ－１、ＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧまたはＨｅｐＧ２細胞のいずれかと共培養された；次に細胞は、ＰＥ標識されたＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１四量体、抗ＣＤ４抗体ならびに抗ＴＮＦ－α抗体（１２Ａおよび１２Ｂ）、抗ＩＦＮγ抗体（１２Ｃおよび１２Ｄ）、抗ＩＬ－２抗体（１２Ｅおよび１２Ｆ）または抗ＩＬ－６抗体（１２Ｇおよび１２Ｈ）の１つを用いて共染色された。示される集団は、ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１四量体＋細胞でゲーティングされた。
【図12G】図１２Ａ～１２Ｈは、標的がん細胞の存在を有してまたは有さずにサイトカイン産生についての形質導入Ｔ細胞のフローサイトメトリー分析を示す図である；Ｔ細胞は、両方とも同じ抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１結合部分可変ドメインを有するＣＡＲまたはａｂＴＣＲ－６ＭＤのいずれかを用いて形質導入され、ＳＫ－ＨＥＰ－１、ＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧまたはＨｅｐＧ２細胞のいずれかと共培養された；次に細胞は、ＰＥ標識されたＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１四量体、抗ＣＤ４抗体ならびに抗ＴＮＦ－α抗体（１２Ａおよび１２Ｂ）、抗ＩＦＮγ抗体（１２Ｃおよび１２Ｄ）、抗ＩＬ－２抗体（１２Ｅおよび１２Ｆ）または抗ＩＬ－６抗体（１２Ｇおよび１２Ｈ）の１つを用いて共染色された。示される集団は、ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１四量体＋細胞でゲーティングされた。
【図12H】図１２Ａ～１２Ｈは、標的がん細胞の存在を有してまたは有さずにサイトカイン産生についての形質導入Ｔ細胞のフローサイトメトリー分析を示す図である；Ｔ細胞は、両方とも同じ抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１結合部分可変ドメインを有するＣＡＲまたはａｂＴＣＲ－６ＭＤのいずれかを用いて形質導入され、ＳＫ－ＨＥＰ－１、ＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧまたはＨｅｐＧ２細胞のいずれかと共培養された；次に細胞は、ＰＥ標識されたＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１四量体、抗ＣＤ４抗体ならびに抗ＴＮＦ－α抗体（１２Ａおよび１２Ｂ）、抗ＩＦＮγ抗体（１２Ｃおよび１２Ｄ）、抗ＩＬ－２抗体（１２Ｅおよび１２Ｆ）または抗ＩＬ－６抗体（１２Ｇおよび１２Ｈ）の１つを用いて共染色された。示される集団は、ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１四量体＋細胞でゲーティングされた。
【0066】
【0067】
【0068】
【0069】
【図16AB】図１６Ａ～１６Ｃは、両方とも同じ抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１結合部分可変ドメインを有する抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１ ａｂＴＣＲ－６ＭＤまたは抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１ ａｂＴＣＲ－７のいずれかを用いて形質導入されたＴ細胞の特徴付けを示す図である。図１６Ａは、形質導入Ｔ細胞の細胞増殖を示す。図１６Ｂは、ＦＬＡＧタグ付き構築物を検出するために抗ＦＬＡＧ抗体を使用するＴ細胞におけるａｂＴＣＲ－６ＭＤおよびａｂＴＣＲ－７の発現についてのウエスタンブロット分析を示す。ＣＤ３ζについての染色は負荷対照として含まれた。図１６Ｃは、ａｂＴＣＲ－６ＭＤまたはａｂＴＣＲ－７のいずれかを用いて形質導入されたＴ細胞によって媒介されたＳＫ－ＨＥＰ－１およびＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧ細胞の殺滅を示す。
【図16C】図１６Ａ～１６Ｃは、両方とも同じ抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１結合部分可変ドメインを有する抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１ ａｂＴＣＲ－６ＭＤまたは抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１ ａｂＴＣＲ－７のいずれかを用いて形質導入されたＴ細胞の特徴付けを示す図である。図１６Ａは、形質導入Ｔ細胞の細胞増殖を示す。図１６Ｂは、ＦＬＡＧタグ付き構築物を検出するために抗ＦＬＡＧ抗体を使用するＴ細胞におけるａｂＴＣＲ－６ＭＤおよびａｂＴＣＲ－７の発現についてのウエスタンブロット分析を示す。ＣＤ３ζについての染色は負荷対照として含まれた。図１６Ｃは、ａｂＴＣＲ－６ＭＤまたはａｂＴＣＲ－７のいずれかを用いて形質導入されたＴ細胞によって媒介されたＳＫ－ＨＥＰ－１およびＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧ細胞の殺滅を示す。
【0070】
【0071】
【0072】
【0073】
【0074】
【0075】
【0076】
【0077】
【0078】
【0079】
【0080】
【0081】
【0082】
【0083】
【0084】
【0085】
【0086】
【0087】
【0088】
【0089】
【0090】
【0091】
【0092】
【0093】
【0094】
【0095】
【0096】
【0097】
【0098】
【0099】
【発明を実施するための形態】
【0100】
本出願は、ａ）標的抗原に特異的に結合する抗体部分、例えば、ＦａｂまたはＦｖ断片
；およびｂ）少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすること
が可能なＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）を含む、単離されたキメラ抗体／Ｔ細胞受
容体構築物（本明細書で「ａｂＴＣＲ」と呼ぶ）を提供する。
；およびｂ）少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすること
が可能なＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）を含む、単離されたキメラ抗体／Ｔ細胞受
容体構築物（本明細書で「ａｂＴＣＲ」と呼ぶ）を提供する。
【0101】
本発明者らは、本発明者らのＴＣＲ様ｍＡｂおよび従来のｍＡｂの結合特異性および親
和性を、ＴＣＲによって得られる標的特異的な細胞傷害効力および制御された活性化と組
み合わせる、一連の新規合成キメラ抗体／ＴＣＲ構築物を開発した。ａｂＴＣＲを発現す
るように形質導入された初代Ｔ細胞は、内因性ＣＤ３分子と会合した安定なＴＣＲ様シグ
ナル伝達複合体の効率的な表面発現および形成を示した。Ｔ細胞中に操作した場合、ａｂ
ＴＣＲは、ＭＨＣ依存的（ペプチド／ＭＨＣ抗原）およびＭＨＣ非依存的（細胞表面抗原
）構成の両方で、ｉｎ ｖｉｔｒｏおよびｉｎ ｖｉｖｏの両方で、標的保有腫瘍細胞に
対する強力な細胞傷害性を有するＴ細胞を与えた。標的特異的活性化は、ＣＤ４＋Ｔ細胞
、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞および調節性Ｔ（Ｔｒｅｇ）細胞
を含む、ａｂＴＣＲを発現するように形質導入された複数の異なるＴ細胞サブセットにつ
いて観察された。さらに、細胞内共刺激配列を含むａｂＴＣＲは、いずれの共刺激配列も
伴わない対応するａｂＴＣＲと同様に、一部の場合にはａｂＴＣＲよりも良好に機能する
ことが見出された。
和性を、ＴＣＲによって得られる標的特異的な細胞傷害効力および制御された活性化と組
み合わせる、一連の新規合成キメラ抗体／ＴＣＲ構築物を開発した。ａｂＴＣＲを発現す
るように形質導入された初代Ｔ細胞は、内因性ＣＤ３分子と会合した安定なＴＣＲ様シグ
ナル伝達複合体の効率的な表面発現および形成を示した。Ｔ細胞中に操作した場合、ａｂ
ＴＣＲは、ＭＨＣ依存的（ペプチド／ＭＨＣ抗原）およびＭＨＣ非依存的（細胞表面抗原
）構成の両方で、ｉｎ ｖｉｔｒｏおよびｉｎ ｖｉｖｏの両方で、標的保有腫瘍細胞に
対する強力な細胞傷害性を有するＴ細胞を与えた。標的特異的活性化は、ＣＤ４＋Ｔ細胞
、ＣＤ８＋Ｔ細胞、ナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞および調節性Ｔ（Ｔｒｅｇ）細胞
を含む、ａｂＴＣＲを発現するように形質導入された複数の異なるＴ細胞サブセットにつ
いて観察された。さらに、細胞内共刺激配列を含むａｂＴＣＲは、いずれの共刺激配列も
伴わない対応するａｂＴＣＲと同様に、一部の場合にはａｂＴＣＲよりも良好に機能する
ことが見出された。
【0102】
ＣＡＲ Ｔ細胞療法を用いて実証された顕著な治癒的潜在力にもかかわらず、臨床試験
は、過剰なサイトカイン放出および制御されないＴ細胞増殖と関連する重症な有害事象を
誘発し続けている。理論に束縛されないが、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞媒介性死滅を活性化す
るために内因性ＣＤ３複合体とのアセンブリを必要とするＴＣＲ活性化を制御する天然に
存在する機構によって調節され得、したがって、構成的に活性化されることを回避し得る
と考えられている。本発明者らは、ａｂＴＣＲ構築物を形質導入したＴ細胞が、がん細胞
死滅における等価な効力を有したままで、同じ抗体可変領域を有する対応するキメラ抗原
受容体（ＣＡＲ）を形質導入したＴ細胞よりも低いレベルのサイトカイン（例えば、ＩＬ
－２）およびＴ細胞消耗マーカー（例えば、ＰＤ－１、ＴＩＭ３およびＬＡＧ１）を発現
することを見出している。したがって、この戦略は、その細胞傷害性シグナル伝達が内因
性Ｔ細胞調節機構に応答し、ｉｎ ｖｉｖｏでより長く機能的に持続する潜在力を有する
Ｔ細胞が得られる、ＣＡＲを使用することを超える顕著な技術的利点を提供する。細胞表
面抗原またはペプチド／ＭＨＣ複合体などの特異的抗原へのモノクローナル抗体の精巧に
最適化された結合を、免疫細胞を活性化するために内因性シグナル伝達複合体を関与させ
るＴ細胞受容体の能力と組み合わせることによって、本発明は、ペプチド／ＭＨＣ複合体
を介した、低コピー数の細胞表面抗原、ならびに細胞内抗原または分泌された抗原の高度
に特異的で強力な標的化を可能にする。
は、過剰なサイトカイン放出および制御されないＴ細胞増殖と関連する重症な有害事象を
誘発し続けている。理論に束縛されないが、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞媒介性死滅を活性化す
るために内因性ＣＤ３複合体とのアセンブリを必要とするＴＣＲ活性化を制御する天然に
存在する機構によって調節され得、したがって、構成的に活性化されることを回避し得る
と考えられている。本発明者らは、ａｂＴＣＲ構築物を形質導入したＴ細胞が、がん細胞
死滅における等価な効力を有したままで、同じ抗体可変領域を有する対応するキメラ抗原
受容体（ＣＡＲ）を形質導入したＴ細胞よりも低いレベルのサイトカイン（例えば、ＩＬ
－２）およびＴ細胞消耗マーカー（例えば、ＰＤ－１、ＴＩＭ３およびＬＡＧ１）を発現
することを見出している。したがって、この戦略は、その細胞傷害性シグナル伝達が内因
性Ｔ細胞調節機構に応答し、ｉｎ ｖｉｖｏでより長く機能的に持続する潜在力を有する
Ｔ細胞が得られる、ＣＡＲを使用することを超える顕著な技術的利点を提供する。細胞表
面抗原またはペプチド／ＭＨＣ複合体などの特異的抗原へのモノクローナル抗体の精巧に
最適化された結合を、免疫細胞を活性化するために内因性シグナル伝達複合体を関与させ
るＴ細胞受容体の能力と組み合わせることによって、本発明は、ペプチド／ＭＨＣ複合体
を介した、低コピー数の細胞表面抗原、ならびに細胞内抗原または分泌された抗原の高度
に特異的で強力な標的化を可能にする。
【0103】
したがって、本出願は、標的抗原に特異的に結合する抗体部分と少なくとも１つのＴＣ
Ｒ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴＣＲＭとを含むａｂＴＣ
Ｒ（例えば、単離されたａｂＴＣＲ）を提供する。ａｂＴＣＲは、第１のポリペプチド鎖
と第２のポリペプチド鎖とを含むヘテロ二量体であり得る。抗体部分は、重鎖可変抗体ド
メイン（ＶＨ）および軽鎖可変抗体ドメイン（ＶＬ）を含み得る。一部の実施形態では、
抗体部分は、１つもしくは複数の抗体重鎖定常ドメイン、例えば、重鎖定常１抗体ドメイ
ン（ＣＨ１）および／または軽鎖定常抗体ドメイン（ＣＬ）をさらに含む。ＴＣＲＭは、
第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む第１のＴ細胞受容体ドメイン（ＴＣＲ
Ｄ）と、第２のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む第２のＴＣＲＤとを含む。ａ
ｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とは、１つまたは複数のジスル
フィド結合を介して連結され得る。例示的なａｂＴＣＲ構築物設計については、図１Ａを
参照のこと。
Ｒ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴＣＲＭとを含むａｂＴＣ
Ｒ（例えば、単離されたａｂＴＣＲ）を提供する。ａｂＴＣＲは、第１のポリペプチド鎖
と第２のポリペプチド鎖とを含むヘテロ二量体であり得る。抗体部分は、重鎖可変抗体ド
メイン（ＶＨ）および軽鎖可変抗体ドメイン（ＶＬ）を含み得る。一部の実施形態では、
抗体部分は、１つもしくは複数の抗体重鎖定常ドメイン、例えば、重鎖定常１抗体ドメイ
ン（ＣＨ１）および／または軽鎖定常抗体ドメイン（ＣＬ）をさらに含む。ＴＣＲＭは、
第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む第１のＴ細胞受容体ドメイン（ＴＣＲ
Ｄ）と、第２のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む第２のＴＣＲＤとを含む。ａ
ｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とは、１つまたは複数のジスル
フィド結合を介して連結され得る。例示的なａｂＴＣＲ構築物設計については、図１Ａを
参照のこと。
【0104】
別の態様では、ａｂＴＣＲをコードする１つまたは複数の核酸が提供される。
【0105】
さらに別の態様では、ａｂＴＣＲと少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュー
ルとを含む複合体（本明細書で「ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体」と呼ぶ）が提供される。複
合体は、４つの二量体、ａｂＴＣＲ、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζを含む八量体で
あり得る。ａｂＴＣＲもしくはａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体を発現するまたはそれと関連す
る、Ｔ細胞などのエフェクター細胞もまた提供される。
ルとを含む複合体（本明細書で「ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体」と呼ぶ）が提供される。複
合体は、４つの二量体、ａｂＴＣＲ、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζを含む八量体で
あり得る。ａｂＴＣＲもしくはａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体を発現するまたはそれと関連す
る、Ｔ細胞などのエフェクター細胞もまた提供される。
【0106】
さらに別の態様では、ａｂＴＣＲを含む組成物が提供される。組成物は、ａｂＴＣＲ、
またはａｂＴＣＲを発現するもしくはそれと関連するエフェクター細胞（例えば、ａｂＴ
ＣＲを発現するＴ細胞）を含む医薬組成物であり得る。
またはａｂＴＣＲを発現するもしくはそれと関連するエフェクター細胞（例えば、ａｂＴ
ＣＲを発現するＴ細胞）を含む医薬組成物であり得る。
【0107】
処置目的のためにａｂＴＣＲ（またはａｂＴＣＲを発現するもしくはそれと会合した細
胞）を作製および使用する方法、ならびにかかる方法に有用なキットおよび製造物品もま
た提供される。ａｂＴＣＲ（またはａｂＴＣＲを発現するもしくはそれと会合した細胞）
を使用して疾患を処置する方法がさらに提供される。
胞）を作製および使用する方法、ならびにかかる方法に有用なキットおよび製造物品もま
た提供される。ａｂＴＣＲ（またはａｂＴＣＲを発現するもしくはそれと会合した細胞）
を使用して疾患を処置する方法がさらに提供される。
【0108】
定義
本明細書で使用する場合、「処置」または「処置する」は、臨床結果を含む有益なまた
は所望の結果を得るためのアプローチである。本発明の目的のために、有益なまたは所望
の臨床結果には、以下のうち１または複数が含まれるがこれらに限定されない：疾患から
生じる１もしくは複数の症状を軽減すること、疾患の程度を弱めること、疾患を安定化す
ること（例えば、疾患の悪化を防止もしくは遅延させること）、疾患の拡散（例えば、転
移）を防止もしくは遅延させること、疾患の再発を防止もしくは遅延させること、疾患の
進行を遅延もしくは減速させること、疾患状態を緩和すること、疾患の寛解（部分的もし
くは全体的）を提供すること、疾患を処置するために必要とされる１もしくは複数の他の
薬物療法の用量を減少させること、疾患の進行を遅延させること、生活の質を増加もしく
は改善すること、体重増加を増加させること、および／または生存期間を延長させること
。疾患の病理学的結果（例えば、がんにおける腫瘍体積など）の低減もまた、「処置」に
よって包含される。本発明の方法は、処置のこれらの態様のうちいずれか１または複数を
企図する。
本明細書で使用する場合、「処置」または「処置する」は、臨床結果を含む有益なまた
は所望の結果を得るためのアプローチである。本発明の目的のために、有益なまたは所望
の臨床結果には、以下のうち１または複数が含まれるがこれらに限定されない：疾患から
生じる１もしくは複数の症状を軽減すること、疾患の程度を弱めること、疾患を安定化す
ること（例えば、疾患の悪化を防止もしくは遅延させること）、疾患の拡散（例えば、転
移）を防止もしくは遅延させること、疾患の再発を防止もしくは遅延させること、疾患の
進行を遅延もしくは減速させること、疾患状態を緩和すること、疾患の寛解（部分的もし
くは全体的）を提供すること、疾患を処置するために必要とされる１もしくは複数の他の
薬物療法の用量を減少させること、疾患の進行を遅延させること、生活の質を増加もしく
は改善すること、体重増加を増加させること、および／または生存期間を延長させること
。疾患の病理学的結果（例えば、がんにおける腫瘍体積など）の低減もまた、「処置」に
よって包含される。本発明の方法は、処置のこれらの態様のうちいずれか１または複数を
企図する。
【0109】
用語「再発」、「再燃する」または「再燃した」とは、疾患の消失の臨床評価後のがん
または疾患の復帰を指す。遠隔転移または局所的再発の診断は、再燃とみなされ得る。
または疾患の復帰を指す。遠隔転移または局所的再発の診断は、再燃とみなされ得る。
【0110】
用語「難治性」または「抵抗性」とは、処置に応答していないがんまたは疾患を指す。
【0111】
「活性化」とは、Ｔ細胞に関連して本明細書で使用する場合、検出可能な細胞増殖を誘
導するように十分に刺激されたＴ細胞の状態を指す。活性化は、誘導されたサイトカイン
産生、および検出可能なエフェクター機能とも関連し得る。
導するように十分に刺激されたＴ細胞の状態を指す。活性化は、誘導されたサイトカイン
産生、および検出可能なエフェクター機能とも関連し得る。
【0112】
用語「抗体」または「抗体部分」は、全長抗体およびその抗原結合断片を含む。全長抗
体は、２つの重鎖および２つの軽鎖を含む。軽鎖および重鎖の可変領域は、抗原結合を担
う。両方の鎖中の可変領域は、一般に、相補性決定領域（ＣＤＲ）と呼ばれる３つの高度
に可変性のループを含む（ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２およびＬＣ－ＣＤＲ３を含む
軽鎖（ＬＣ）ＣＤＲ、ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２およびＨＣ－ＣＤＲ３を含む重鎖
（ＨＣ）ＣＤＲ）。本明細書に開示される抗体および抗原結合断片についてのＣＤＲ境界
は、Ｋａｂａｔ、ＣｈｏｔｈｉａまたはＡｌ－Ｌａｚｉｋａｎｉの慣習によって定義また
は同定され得る（Ａｌ－Ｌａｚｉｋａｎｉ １９９７年；Ｃｈｏｔｈｉａ １９８５年；
Ｃｈｏｔｈｉａ １９８７年；Ｃｈｏｔｈｉａ １９８９年；Ｋａｂａｔ １９８７年；
Ｋａｂａｔ １９９１年）。重鎖または軽鎖の３つのＣＤＲは、ＣＤＲよりも高度に保存
され、超可変ループを支持するための足場を形成する、フレームワーク領域（ＦＲ）とし
て公知の隣接ストレッチ間に挟まれている。重鎖および軽鎖の定常領域は、抗原結合に関
与しないが、種々のエフェクター機能を示す。抗体は、それらの重鎖の定常領域のアミノ
酸配列に基づいてクラスに割り当てられる。抗体の５つの主要なクラスまたはアイソタイ
プは、それぞれ、α、δ、ε、γおよびμ重鎖の存在を特徴とする、ＩｇＡ、ＩｇＤ、Ｉ
ｇＥ、ＩｇＧおよびＩｇＭである。いくつかの主要な抗体クラスは、ＩｇＧ１（γ１重鎖
）、ＩｇＧ２（γ２重鎖）、ＩｇＧ３（γ３重鎖）、ＩｇＧ４（γ４重鎖）、ＩｇＡ１（
α１重鎖）またはＩｇＡ２（α２重鎖）などのサブクラスへと分割される。
体は、２つの重鎖および２つの軽鎖を含む。軽鎖および重鎖の可変領域は、抗原結合を担
う。両方の鎖中の可変領域は、一般に、相補性決定領域（ＣＤＲ）と呼ばれる３つの高度
に可変性のループを含む（ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２およびＬＣ－ＣＤＲ３を含む
軽鎖（ＬＣ）ＣＤＲ、ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２およびＨＣ－ＣＤＲ３を含む重鎖
（ＨＣ）ＣＤＲ）。本明細書に開示される抗体および抗原結合断片についてのＣＤＲ境界
は、Ｋａｂａｔ、ＣｈｏｔｈｉａまたはＡｌ－Ｌａｚｉｋａｎｉの慣習によって定義また
は同定され得る（Ａｌ－Ｌａｚｉｋａｎｉ １９９７年；Ｃｈｏｔｈｉａ １９８５年；
Ｃｈｏｔｈｉａ １９８７年；Ｃｈｏｔｈｉａ １９８９年；Ｋａｂａｔ １９８７年；
Ｋａｂａｔ １９９１年）。重鎖または軽鎖の３つのＣＤＲは、ＣＤＲよりも高度に保存
され、超可変ループを支持するための足場を形成する、フレームワーク領域（ＦＲ）とし
て公知の隣接ストレッチ間に挟まれている。重鎖および軽鎖の定常領域は、抗原結合に関
与しないが、種々のエフェクター機能を示す。抗体は、それらの重鎖の定常領域のアミノ
酸配列に基づいてクラスに割り当てられる。抗体の５つの主要なクラスまたはアイソタイ
プは、それぞれ、α、δ、ε、γおよびμ重鎖の存在を特徴とする、ＩｇＡ、ＩｇＤ、Ｉ
ｇＥ、ＩｇＧおよびＩｇＭである。いくつかの主要な抗体クラスは、ＩｇＧ１（γ１重鎖
）、ＩｇＧ２（γ２重鎖）、ＩｇＧ３（γ３重鎖）、ＩｇＧ４（γ４重鎖）、ＩｇＡ１（
α１重鎖）またはＩｇＡ２（α２重鎖）などのサブクラスへと分割される。
【0113】
本明細書で使用する用語「抗原結合断片」とは、例えば、ダイアボディ、Ｆａｂ、Ｆａ
ｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ断片、ジスルフィド安定化Ｆｖ断片（ｄｓＦｖ）、（ｄｓＦ
ｖ）２、二重特異的ｄｓＦｖ（ｄｓＦｖ－ｄｓＦｖ’）、ジスルフィド安定化ダイアボデ
ィ（ｄｓダイアボディ）、単鎖抗体分子（ｓｃＦｖ）、ｓｃＦｖダイマー（二価ダイアボ
ディ）、１もしくは複数のＣＤＲを含む抗体の一部分から形成された多特異的抗体、ラク
ダ化（ｃａｍｅｌｉｚｅｄ）単一ドメイン抗体、ナノボディ（ｎａｎｏｂｏｄｙ）、ドメ
イン抗体、二価ドメイン抗体、または抗原に結合するが完全な抗体構造を含まない任意の
他の抗体断片を含む抗体断片を指す。抗原結合断片は、親抗体または親抗体断片（例えば
、親ｓｃＦｖ）が結合する同じ抗原に結合することが可能である。一部の実施形態では、
抗原結合断片は、１または複数の異なるヒト抗体由来のフレームワーク領域にグラフトさ
れた、特定のヒト抗体由来の１または複数のＣＤＲを含み得る。
ｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ断片、ジスルフィド安定化Ｆｖ断片（ｄｓＦｖ）、（ｄｓＦ
ｖ）２、二重特異的ｄｓＦｖ（ｄｓＦｖ－ｄｓＦｖ’）、ジスルフィド安定化ダイアボデ
ィ（ｄｓダイアボディ）、単鎖抗体分子（ｓｃＦｖ）、ｓｃＦｖダイマー（二価ダイアボ
ディ）、１もしくは複数のＣＤＲを含む抗体の一部分から形成された多特異的抗体、ラク
ダ化（ｃａｍｅｌｉｚｅｄ）単一ドメイン抗体、ナノボディ（ｎａｎｏｂｏｄｙ）、ドメ
イン抗体、二価ドメイン抗体、または抗原に結合するが完全な抗体構造を含まない任意の
他の抗体断片を含む抗体断片を指す。抗原結合断片は、親抗体または親抗体断片（例えば
、親ｓｃＦｖ）が結合する同じ抗原に結合することが可能である。一部の実施形態では、
抗原結合断片は、１または複数の異なるヒト抗体由来のフレームワーク領域にグラフトさ
れた、特定のヒト抗体由来の１または複数のＣＤＲを含み得る。
【0114】
「Ｆａｂ様抗原結合モジュール」とは、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖
とを含む抗体部分を指し、第１および第２のポリペプチド鎖は、ＶＬ抗体ドメイン、ＣＬ
抗体ドメイン、ＶＨ抗体ドメインおよびＣＨ１抗体ドメインを含む。ＶＬおよびＣＬ抗体
ドメインは一方の鎖上にあり、ＶＨおよびＣＨ１抗体ドメインは他方の鎖上にあり得、ま
たはＶＬおよびＣＨ１抗体ドメインは一方の鎖上にあり、ＶＨおよびＣＬ抗体ドメインは
他方の鎖上にあり得る。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチ
ド鎖とは、ジスルフィド結合によって連結される。
とを含む抗体部分を指し、第１および第２のポリペプチド鎖は、ＶＬ抗体ドメイン、ＣＬ
抗体ドメイン、ＶＨ抗体ドメインおよびＣＨ１抗体ドメインを含む。ＶＬおよびＣＬ抗体
ドメインは一方の鎖上にあり、ＶＨおよびＣＨ１抗体ドメインは他方の鎖上にあり得、ま
たはＶＬおよびＣＨ１抗体ドメインは一方の鎖上にあり、ＶＨおよびＣＬ抗体ドメインは
他方の鎖上にあり得る。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチ
ド鎖とは、ジスルフィド結合によって連結される。
【0115】
本明細書で使用する場合、第１の抗体部分が、等モル濃度の第１の抗体部分の存在下で
、第２の抗体部分の標的抗原結合を、少なくとも約５０％（例えば、少なくとも約５５％
、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９８％または９
９％のいずれか）阻害する場合、第１の抗体部分は、標的抗原への結合について第２の抗
体部分と「競合する」、または逆もまた同様である。それらの交差競合に基づいて抗体を
「ビニングする」ためのハイスループットプロセスは、ＰＣＴ公開番号ＷＯ０３／４８７
３１に記載されている。
、第２の抗体部分の標的抗原結合を、少なくとも約５０％（例えば、少なくとも約５５％
、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９８％または９
９％のいずれか）阻害する場合、第１の抗体部分は、標的抗原への結合について第２の抗
体部分と「競合する」、または逆もまた同様である。それらの交差競合に基づいて抗体を
「ビニングする」ためのハイスループットプロセスは、ＰＣＴ公開番号ＷＯ０３／４８７
３１に記載されている。
【0116】
本明細書で使用する場合、用語「特異的に結合する」または「～に対して特異的である
」とは、生物学的分子を含む分子の不均一な集団の存在下での標的の存在を決定する、測
定可能で再現性のある相互作用、例えば、標的と抗体または抗体部分との間の結合を指す
。例えば、標的（エピトープであり得る）に特異的に結合する抗体部分は、他の標的への
その結合よりも、高い親和性、結合力で、容易に、および／または長い持続時間で、標的
に結合する抗体部分である。一部の実施形態では、抗原に特異的に結合する抗体部分は、
他の標的に対するその結合親和性の少なくとも約１０倍である結合親和性で、抗原（例え
ば、細胞表面抗原またはペプチド／ＭＨＣタンパク質複合体）の１つまたは複数の抗原決
定基と反応する。
」とは、生物学的分子を含む分子の不均一な集団の存在下での標的の存在を決定する、測
定可能で再現性のある相互作用、例えば、標的と抗体または抗体部分との間の結合を指す
。例えば、標的（エピトープであり得る）に特異的に結合する抗体部分は、他の標的への
その結合よりも、高い親和性、結合力で、容易に、および／または長い持続時間で、標的
に結合する抗体部分である。一部の実施形態では、抗原に特異的に結合する抗体部分は、
他の標的に対するその結合親和性の少なくとも約１０倍である結合親和性で、抗原（例え
ば、細胞表面抗原またはペプチド／ＭＨＣタンパク質複合体）の１つまたは複数の抗原決
定基と反応する。
【0117】
用語「Ｔ細胞受容体」または「ＴＣＲ」とは、Ｔ細胞の表面上で対形成する、αβまた
はγδ鎖から構成されるヘテロ二量体受容体を指す。各α、β、γおよびδ鎖は、２つの
Ｉｇ様ドメインから構成される：相補性決定領域（ＣＤＲ）を介した抗原認識を付与する
可変ドメイン（Ｖ）と、その後の接続ペプチドおよび膜貫通（ＴＭ）領域によって細胞膜
にアンカーされる定常ドメイン（Ｃ）。ＴＭ領域は、ＣＤ３シグナル伝達装置のインバリ
アントサブユニットと会合する。Ｖドメインの各々は、３つのＣＤＲを有する。これらの
ＣＤＲは、主要組織適合複合体によってコードされるタンパク質に結合した抗原性ペプチ
ド間の複合体（ｐＭＨＣ）と相互作用する（DavisおよびBjorkman（１９８８年）Nature
、３３４巻、３９５～４０２頁；Davisら（１９９８年）Annu Rev Immunol、１６巻、
５２３～５４４頁；Murphy（２０１２年）、ｘｉｘ、８６８頁）。
はγδ鎖から構成されるヘテロ二量体受容体を指す。各α、β、γおよびδ鎖は、２つの
Ｉｇ様ドメインから構成される：相補性決定領域（ＣＤＲ）を介した抗原認識を付与する
可変ドメイン（Ｖ）と、その後の接続ペプチドおよび膜貫通（ＴＭ）領域によって細胞膜
にアンカーされる定常ドメイン（Ｃ）。ＴＭ領域は、ＣＤ３シグナル伝達装置のインバリ
アントサブユニットと会合する。Ｖドメインの各々は、３つのＣＤＲを有する。これらの
ＣＤＲは、主要組織適合複合体によってコードされるタンパク質に結合した抗原性ペプチ
ド間の複合体（ｐＭＨＣ）と相互作用する（DavisおよびBjorkman（１９８８年）Nature
、３３４巻、３９５～４０２頁；Davisら（１９９８年）Annu Rev Immunol、１６巻、
５２３～５４４頁；Murphy（２０１２年）、ｘｉｘ、８６８頁）。
【0118】
用語「ＴＣＲ関連シグナル伝達モジュール」とは、ＴＣＲ－ＣＤ３複合体の一部である
細胞質免疫受容活性化チロシンモチーフ（ＩＴＡＭ）を有する分子を指す。ＴＣＲ関連シ
グナル伝達モジュールは、ＣＤ３γε、ＣＤ３δεおよびζζを含む。
細胞質免疫受容活性化チロシンモチーフ（ＩＴＡＭ）を有する分子を指す。ＴＣＲ関連シ
グナル伝達モジュールは、ＣＤ３γε、ＣＤ３δεおよびζζを含む。
【0119】
用語「モジュール」とは、タンパク質またはタンパク質の一部分を指す場合、タンパク
質またはタンパク質の一部分が、複数のポリペプチド鎖を含むことを意味する（例えば、
二量体タンパク質または二量体タンパク質の一部分）。複数のポリペプチド鎖は、リンカ
ー（例えば、ペプチドリンカー）または化学結合（例えば、ペプチド結合）などによって
連結され得る。「モジュール」とは、タンパク質を構成する１つまたは複数のポリペプチ
ドの構造的におよび／または機能的に関連する部分を含むことを意味する。例えば、二量
体受容体の膜貫通モジュールは、膜を貫通する、受容体の各ポリペプチド鎖の部分を指し
得る。モジュールはまた、単一のポリペプチド鎖の関連部分も指し得る。例えば、単量体
受容体の膜貫通モジュールは、膜を貫通する、受容体の単一のポリペプチド鎖の部分を指
し得る。
質またはタンパク質の一部分が、複数のポリペプチド鎖を含むことを意味する（例えば、
二量体タンパク質または二量体タンパク質の一部分）。複数のポリペプチド鎖は、リンカ
ー（例えば、ペプチドリンカー）または化学結合（例えば、ペプチド結合）などによって
連結され得る。「モジュール」とは、タンパク質を構成する１つまたは複数のポリペプチ
ドの構造的におよび／または機能的に関連する部分を含むことを意味する。例えば、二量
体受容体の膜貫通モジュールは、膜を貫通する、受容体の各ポリペプチド鎖の部分を指し
得る。モジュールはまた、単一のポリペプチド鎖の関連部分も指し得る。例えば、単量体
受容体の膜貫通モジュールは、膜を貫通する、受容体の単一のポリペプチド鎖の部分を指
し得る。
【0120】
用語「Ｔ細胞受容体モジュール」または「ＴＣＲＭ」とは、Ｔ細胞受容体に由来する配
列を含むヘテロ二量体を指す。ＴＣＲＭは、Ｔ細胞受容体膜貫通ドメインを含み、Ｔ細胞
受容体の接続ペプチドおよび／または細胞内ドメインの全てまたは一部分をさらに含み得
る。
列を含むヘテロ二量体を指す。ＴＣＲＭは、Ｔ細胞受容体膜貫通ドメインを含み、Ｔ細胞
受容体の接続ペプチドおよび／または細胞内ドメインの全てまたは一部分をさらに含み得
る。
【0121】
「単離された」構築物（例えば、ａｂＴＣＲ）とは、本明細書で使用する場合、（１）
天然に見出されるタンパク質と関連しない構築物、（２）同じ供給源由来の他のタンパク
質を含まない構築物、（３）異なる種由来の細胞によって発現される構築物、または（４
）天然に存在しない構築物を指す。
天然に見出されるタンパク質と関連しない構築物、（２）同じ供給源由来の他のタンパク
質を含まない構築物、（３）異なる種由来の細胞によって発現される構築物、または（４
）天然に存在しない構築物を指す。
【0122】
本明細書で使用する用語「単離された核酸」は、「単離された核酸」が、その起源によ
って、（１）「単離された核酸」が天然に見出されるポリヌクレオチドの全てもしくは一
部分と関連しない、（２）天然では関連しないポリヌクレオチドに作動可能に連結した、
または（３）より大きい配列の一部として天然では生じない、ゲノム、ｃＤＮＡもしくは
合成起源またはそれらのある組合せの核酸を意味することを意図する。
って、（１）「単離された核酸」が天然に見出されるポリヌクレオチドの全てもしくは一
部分と関連しない、（２）天然では関連しないポリヌクレオチドに作動可能に連結した、
または（３）より大きい配列の一部として天然では生じない、ゲノム、ｃＤＮＡもしくは
合成起源またはそれらのある組合せの核酸を意味することを意図する。
【0123】
本明細書で使用する場合、用語「ＣＤＲ」または「相補性決定領域」は、重鎖ポリペプ
チドおよび軽鎖ポリペプチドの両方の可変領域内に見出される非連続的な抗原結合部位（
ａｎｔｉｇｅｎ ｃｏｍｂｉｎｉｎｇ ｓｉｔｅ）を意味することを意図する。これらの
特定の領域は、Ｋａｂａｔら、Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ． ２５２巻：６６０９～６
６１６頁（１９７７年）；Ｋａｂａｔら、Ｕ．Ｓ． Ｄｅｐｔ． ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ
ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ、「Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ ｐｒｏｔｅｉｎ
ｓ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｎｔｅｒｅｓｔ」（１９９１年）；Ｃｈｏｔ
ｈｉａら、Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． １９６巻：９０１～９１７頁（１９８７年）；
およびＭａｃＣａｌｌｕｍら、Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． ２６２巻：７３２～７４５
頁（１９９６年）によって記載されており、ここで、定義は、互いに対して比較した場合
の、アミノ酸残基の重複またはサブセットを含む。それにもかかわらず、抗体もしくはグ
ラフト化抗体のＣＤＲまたはそのバリアントを指すためのいずれかの定義の適用は、本明
細書で定義および使用される用語の範囲内であることが意図される。上で引用した参考文
献の各々によって定義されるＣＤＲを包含するアミノ酸残基は、比較として以下の表１に
示される。
チドおよび軽鎖ポリペプチドの両方の可変領域内に見出される非連続的な抗原結合部位（
ａｎｔｉｇｅｎ ｃｏｍｂｉｎｉｎｇ ｓｉｔｅ）を意味することを意図する。これらの
特定の領域は、Ｋａｂａｔら、Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ． ２５２巻：６６０９～６
６１６頁（１９７７年）；Ｋａｂａｔら、Ｕ．Ｓ． Ｄｅｐｔ． ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ
ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ、「Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ ｐｒｏｔｅｉｎ
ｓ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｎｔｅｒｅｓｔ」（１９９１年）；Ｃｈｏｔ
ｈｉａら、Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． １９６巻：９０１～９１７頁（１９８７年）；
およびＭａｃＣａｌｌｕｍら、Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ． ２６２巻：７３２～７４５
頁（１９９６年）によって記載されており、ここで、定義は、互いに対して比較した場合
の、アミノ酸残基の重複またはサブセットを含む。それにもかかわらず、抗体もしくはグ
ラフト化抗体のＣＤＲまたはそのバリアントを指すためのいずれかの定義の適用は、本明
細書で定義および使用される用語の範囲内であることが意図される。上で引用した参考文
献の各々によって定義されるＣＤＲを包含するアミノ酸残基は、比較として以下の表１に
示される。
【表1-1】
【0124】
用語「キメラ抗体」とは、それらが本発明の生物学的活性を示す限り、重鎖および／ま
たは軽鎖の一部分が、特定の種に由来するまたは特定の抗体クラスもしくはサブクラスに
属する抗体中の対応する配列と同一または相同であるが、鎖（複数可）の残部が、別の種
に由来するまたは別の抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体ならびにかかる抗体の
断片中の対応する配列と同一または相同である抗体を指す（米国特許第４，８１６，５６
７号；およびＭｏｒｒｉｓｏｎら、Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． Ｕ
ＳＡ、８１巻：６８５１～６８５５頁（１９８４年）を参照のこと）。
たは軽鎖の一部分が、特定の種に由来するまたは特定の抗体クラスもしくはサブクラスに
属する抗体中の対応する配列と同一または相同であるが、鎖（複数可）の残部が、別の種
に由来するまたは別の抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体ならびにかかる抗体の
断片中の対応する配列と同一または相同である抗体を指す（米国特許第４，８１６，５６
７号；およびＭｏｒｒｉｓｏｎら、Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． Ｕ
ＳＡ、８１巻：６８５１～６８５５頁（１９８４年）を参照のこと）。
【0125】
抗体または抗体部分に関して、用語「半合成」とは、抗体または抗体部分が、１または
複数の天然に存在する配列および１または複数の天然に存在しない（即ち、合成）配列を
有することを意味する。
複数の天然に存在する配列および１または複数の天然に存在しない（即ち、合成）配列を
有することを意味する。
【0126】
抗体または抗体部分に関連する用語「完全合成」とは、抗体または抗体部分が、重鎖お
よび軽鎖の両方の６つ全てのＣＤＲの天然に存在しない（即ち、合成）配列を除いて、固
定された大部分のまたは全ての天然に存在するＶＨ／ＶＬフレームワークペアリングを有
することを意味する。天然に存在しないＣＤＲには、保存的アミノ酸置換または導入され
たシステイン残基によって改変されたＣＤＲ配列などの改変されたヒトＣＤＲ配列を含む
ものが含まれる。
よび軽鎖の両方の６つ全てのＣＤＲの天然に存在しない（即ち、合成）配列を除いて、固
定された大部分のまたは全ての天然に存在するＶＨ／ＶＬフレームワークペアリングを有
することを意味する。天然に存在しないＣＤＲには、保存的アミノ酸置換または導入され
たシステイン残基によって改変されたＣＤＲ配列などの改変されたヒトＣＤＲ配列を含む
ものが含まれる。
【0127】
非ヒト（例えば、げっ歯類）抗体の「ヒト化」形態は、非ヒト抗体に由来する最小配列
を含むキメラ抗体である。大部分は、ヒト化抗体は、レシピエントの超可変領域（ＨＶＲ
）由来の残基が、所望の抗体特異性、親和性および能力を有する、マウス、ラット、ウサ
ギまたは非ヒト霊長類などの非ヒト種（ドナー抗体）の超可変領域由来の残基によって置
き換えられた、ヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）である。一部の例では、ヒト免
疫グロブリンのフレームワーク領域（ＦＲ）残基は、対応する非ヒト残基によって置き換
えられる。さらに、ヒト化抗体は、レシピエント抗体中にもドナー抗体中にも見出されな
い残基を含み得る。これらの改変は、抗体性能をさらに洗練するために行われる。一般に
、ヒト化抗体は、少なくとも１つの、典型的には２つの可変ドメインの実質的に全てを含
み、ここで、超可変ループの全てまたは実質的に全ては、非ヒト免疫グロブリンのものと
対応し、ＦＲの全てまたは実質的に全ては、ヒト免疫グロブリン配列のものである。ヒト
化抗体は、任意選択で、免疫グロブリン定常領域の少なくとも一部分（Ｆｃ）、典型的に
はヒト免疫グロブリンのＦｃもまた含む。さらなる詳細については、Ｊｏｎｅｓら、Ｎａ
ｔｕｒｅ ３２１巻：５２２～５２５頁（１９８６年）；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎら、Ｎａｔ
ｕｒｅ ３３２巻：３２３～３２９頁（１９８８年）；およびＰｒｅｓｔａ、Ｃｕｒｒ．
Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．２巻：５９３～５９６頁（１９９２年）を参照のこと。
を含むキメラ抗体である。大部分は、ヒト化抗体は、レシピエントの超可変領域（ＨＶＲ
）由来の残基が、所望の抗体特異性、親和性および能力を有する、マウス、ラット、ウサ
ギまたは非ヒト霊長類などの非ヒト種（ドナー抗体）の超可変領域由来の残基によって置
き換えられた、ヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）である。一部の例では、ヒト免
疫グロブリンのフレームワーク領域（ＦＲ）残基は、対応する非ヒト残基によって置き換
えられる。さらに、ヒト化抗体は、レシピエント抗体中にもドナー抗体中にも見出されな
い残基を含み得る。これらの改変は、抗体性能をさらに洗練するために行われる。一般に
、ヒト化抗体は、少なくとも１つの、典型的には２つの可変ドメインの実質的に全てを含
み、ここで、超可変ループの全てまたは実質的に全ては、非ヒト免疫グロブリンのものと
対応し、ＦＲの全てまたは実質的に全ては、ヒト免疫グロブリン配列のものである。ヒト
化抗体は、任意選択で、免疫グロブリン定常領域の少なくとも一部分（Ｆｃ）、典型的に
はヒト免疫グロブリンのＦｃもまた含む。さらなる詳細については、Ｊｏｎｅｓら、Ｎａ
ｔｕｒｅ ３２１巻：５２２～５２５頁（１９８６年）；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎら、Ｎａｔ
ｕｒｅ ３３２巻：３２３～３２９頁（１９８８年）；およびＰｒｅｓｔａ、Ｃｕｒｒ．
Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．２巻：５９３～５９６頁（１９９２年）を参照のこと。
【0128】
「相同性」とは、２つのポリペプチド間または２つの核酸分子間の配列類似性または配
列同一性を指す。２つの比較される配列の両方における位置が、同じ塩基またはアミノ酸
単量体サブユニットによって占有される場合、例えば、２つのＤＮＡ分子の各々における
位置がアデニンによって占有される場合には、分子はその位置において「相同」である。
２つの配列間の「相同性のパーセント」または「パーセント配列同一性」は、任意の保存
的置換を配列同一性の一部とみなして、比較される位置の数によって除算した、２つの配
列によって共有される一致する位置または相同な位置の数に、１００を乗算した関数であ
る。例えば、２つの配列中の１０個の位置のうち６個が一致するまたは相同である場合に
は、２つの配列は、６０％相同である。例として、ＤＮＡ配列ＡＴＴＧＣＣとＴＡＴＧＧ
Ｃとは、５０％の相同性を共有する。一般に、比較は、２つの配列が最大の相同性を与え
るようにアラインされる場合になされる。パーセントアミノ酸配列同一性を決定すること
を目的としたアラインメントは、例えば、公に入手可能なコンピューターソフトウェア、
例えば、ＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ－２、ＡＬＩＧＮ、Ｍｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ
）またはＭＵＳＣＬＥソフトウェアを使用して、当業者の技術範囲内の種々の方法で達成
され得る。当業者は、比較されている配列の全長にわたって最大のアラインメントを達成
するために必要とされる任意のアルゴリズムを含む、アラインメントを測定するための適
切なパラメーターを決定することができる。しかし、本明細書の目的のために、％アミノ
酸配列同一性値は、配列比較コンピュータープログラムＭＵＳＣＬＥを使用して生成され
る（Edgar, R.C.、Nucleic Acids Research ３２巻（５号）：１７９２～１７９７頁
、２００４年；Edgar, R.C.、BMC Bioinformatics ５巻（１号）：１１３頁、２００
４年）。
列同一性を指す。２つの比較される配列の両方における位置が、同じ塩基またはアミノ酸
単量体サブユニットによって占有される場合、例えば、２つのＤＮＡ分子の各々における
位置がアデニンによって占有される場合には、分子はその位置において「相同」である。
２つの配列間の「相同性のパーセント」または「パーセント配列同一性」は、任意の保存
的置換を配列同一性の一部とみなして、比較される位置の数によって除算した、２つの配
列によって共有される一致する位置または相同な位置の数に、１００を乗算した関数であ
る。例えば、２つの配列中の１０個の位置のうち６個が一致するまたは相同である場合に
は、２つの配列は、６０％相同である。例として、ＤＮＡ配列ＡＴＴＧＣＣとＴＡＴＧＧ
Ｃとは、５０％の相同性を共有する。一般に、比較は、２つの配列が最大の相同性を与え
るようにアラインされる場合になされる。パーセントアミノ酸配列同一性を決定すること
を目的としたアラインメントは、例えば、公に入手可能なコンピューターソフトウェア、
例えば、ＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ－２、ＡＬＩＧＮ、Ｍｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ
）またはＭＵＳＣＬＥソフトウェアを使用して、当業者の技術範囲内の種々の方法で達成
され得る。当業者は、比較されている配列の全長にわたって最大のアラインメントを達成
するために必要とされる任意のアルゴリズムを含む、アラインメントを測定するための適
切なパラメーターを決定することができる。しかし、本明細書の目的のために、％アミノ
酸配列同一性値は、配列比較コンピュータープログラムＭＵＳＣＬＥを使用して生成され
る（Edgar, R.C.、Nucleic Acids Research ３２巻（５号）：１７９２～１７９７頁
、２００４年；Edgar, R.C.、BMC Bioinformatics ５巻（１号）：１１３頁、２００
４年）。
【0129】
ヒトＩｇＧの「ＣＨ１ドメイン」（「Ｈ１」ドメインの「Ｃ１」とも呼ぶ）は通常、約
アミノ酸１１８から約アミノ酸２１５まで及ぶ（ＥＵ番号付け系）。
アミノ酸１１８から約アミノ酸２１５まで及ぶ（ＥＵ番号付け系）。
【0130】
特記しない限り、「アミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列」は、互いの縮重バー
ジョンであり、同じアミノ酸配列をコードする、全てのヌクレオチド配列を含む。タンパ
ク質またはＲＮＡをコードする語句ヌクレオチド配列はまた、タンパク質をコードするヌ
クレオチド配列が、一部のバージョンにおいてイントロン（複数可）を含み得る程度まで
、イントロンを含み得る。
ジョンであり、同じアミノ酸配列をコードする、全てのヌクレオチド配列を含む。タンパ
ク質またはＲＮＡをコードする語句ヌクレオチド配列はまた、タンパク質をコードするヌ
クレオチド配列が、一部のバージョンにおいてイントロン（複数可）を含み得る程度まで
、イントロンを含み得る。
【0131】
用語「作動可能に連結した」とは、後者の発現を生じる、調節配列と異種核酸配列との
間の機能的連結を指す。例えば、第１の核酸配列が第２の核酸配列と機能的に関連して配
置される場合、第１の核酸配列は、第２の核酸配列と作動可能に連結している。例えば、
プロモーターがコード配列の転写または発現に影響を与える場合、プロモーターは、コー
ド配列に作動可能に連結している。一般に、作動可能に連結したＤＮＡ配列は、連続して
おり、２つのタンパク質コード領域をつなげることが必要な場合、同じリーディングフレ
ーム中にある。
間の機能的連結を指す。例えば、第１の核酸配列が第２の核酸配列と機能的に関連して配
置される場合、第１の核酸配列は、第２の核酸配列と作動可能に連結している。例えば、
プロモーターがコード配列の転写または発現に影響を与える場合、プロモーターは、コー
ド配列に作動可能に連結している。一般に、作動可能に連結したＤＮＡ配列は、連続して
おり、２つのタンパク質コード領域をつなげることが必要な場合、同じリーディングフレ
ーム中にある。
【0132】
用語「誘導性プロモーター」とは、１つまたは複数の特定のシグナルを添加または除去
することによってその活性が調節され得るプロモーターを指す。例えば、誘導性プロモー
ターは、特定のセットの条件下で、例えば、プロモーターを活性化するおよび／またはプ
ロモーターの抑制を軽減する誘導剤の存在下で、作動可能に連結した核酸の転写を活性化
し得る。
することによってその活性が調節され得るプロモーターを指す。例えば、誘導性プロモー
ターは、特定のセットの条件下で、例えば、プロモーターを活性化するおよび／またはプ
ロモーターの抑制を軽減する誘導剤の存在下で、作動可能に連結した核酸の転写を活性化
し得る。
【0133】
本明細書に開示されるａｂＴＣＲまたはａｂＴＣＲを含む組成物の「有効量」は、具体
的に述べられた目的を成し遂げるのに十分な量である。「有効量」は、実験的に、および
述べられた目的に関連する公知の方法によって、決定され得る。
的に述べられた目的を成し遂げるのに十分な量である。「有効量」は、実験的に、および
述べられた目的に関連する公知の方法によって、決定され得る。
【0134】
用語「治療有効量」とは、個体において疾患または障害を「処置する」のに有効な、本
明細書に開示されるａｂＴＣＲまたはａｂＴＣＲを含む組成物の量を指す。がんの場合、
治療有効量の、本明細書に開示されるａｂＴＣＲまたはａｂＴＣＲを含む組成物は、がん
細胞の数を低減する；腫瘍のサイズまたは重量を低減する；末梢臓器中へのがん細胞浸潤
を阻害する（即ち、ある程度まで減速させる、好ましくは停止させる）；腫瘍転移を阻害
する（即ち、ある程度まで減速させる、好ましくは停止させる）；腫瘍成長をある程度ま
で阻害する；および／またはがんと関連する症状のうち１つもしくは複数をある程度まで
軽減することができる。本明細書に開示されるａｂＴＣＲまたはａｂＴＣＲを含む組成物
が、成長を防止および／または既存のがん細胞を死滅させることができる限りにおいて、
これは、細胞分裂抑制性および／または細胞傷害性であり得る。一部の実施形態では、治
療有効量は、成長阻害量である。一部の実施形態では、治療有効量は、患者の無増悪生存
期間を改善する量である。ウイルス感染症などの感染性疾患の場合、治療有効量の、本明
細書に開示されるａｂＴＣＲまたはａｂＴＣＲを含む組成物は、病原体が感染した細胞の
数を低減する；病原体由来抗原の産生もしくは放出を低減する；非感染細胞への病原体の
拡散を阻害する（即ち、ある程度まで減速させる、好ましくは停止させる）；および／ま
たは感染症と関連する症状のうち１つもしくは複数をある程度まで軽減することができる
。一部の実施形態では、治療有効量は、患者の生存を延長させる量である。
明細書に開示されるａｂＴＣＲまたはａｂＴＣＲを含む組成物の量を指す。がんの場合、
治療有効量の、本明細書に開示されるａｂＴＣＲまたはａｂＴＣＲを含む組成物は、がん
細胞の数を低減する；腫瘍のサイズまたは重量を低減する；末梢臓器中へのがん細胞浸潤
を阻害する（即ち、ある程度まで減速させる、好ましくは停止させる）；腫瘍転移を阻害
する（即ち、ある程度まで減速させる、好ましくは停止させる）；腫瘍成長をある程度ま
で阻害する；および／またはがんと関連する症状のうち１つもしくは複数をある程度まで
軽減することができる。本明細書に開示されるａｂＴＣＲまたはａｂＴＣＲを含む組成物
が、成長を防止および／または既存のがん細胞を死滅させることができる限りにおいて、
これは、細胞分裂抑制性および／または細胞傷害性であり得る。一部の実施形態では、治
療有効量は、成長阻害量である。一部の実施形態では、治療有効量は、患者の無増悪生存
期間を改善する量である。ウイルス感染症などの感染性疾患の場合、治療有効量の、本明
細書に開示されるａｂＴＣＲまたはａｂＴＣＲを含む組成物は、病原体が感染した細胞の
数を低減する；病原体由来抗原の産生もしくは放出を低減する；非感染細胞への病原体の
拡散を阻害する（即ち、ある程度まで減速させる、好ましくは停止させる）；および／ま
たは感染症と関連する症状のうち１つもしくは複数をある程度まで軽減することができる
。一部の実施形態では、治療有効量は、患者の生存を延長させる量である。
【0135】
本明細書で使用する場合、「薬学的に許容される」または「薬理学的に適合する」とは
、生物学的にも他の点でも望ましくないことのない材料を意味し、例えば、材料は、任意
の顕著な望ましくない生物学的影響を引き起こすことも、それが含まれる組成物の他の成
分のいずれかと有害な様式で相互作用することもなしに、患者に投与される医薬組成物中
に組み入れることができる。薬学的に許容されるキャリアまたは賦形剤は、好ましくは、
毒性学的試験および製造試験の必要な標準を満たし、ならびに／または米国食品医薬品局
が作成したＩｎａｃｔｉｖｅ Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ Ｇｕｉｄｅ上に含まれる。
、生物学的にも他の点でも望ましくないことのない材料を意味し、例えば、材料は、任意
の顕著な望ましくない生物学的影響を引き起こすことも、それが含まれる組成物の他の成
分のいずれかと有害な様式で相互作用することもなしに、患者に投与される医薬組成物中
に組み入れることができる。薬学的に許容されるキャリアまたは賦形剤は、好ましくは、
毒性学的試験および製造試験の必要な標準を満たし、ならびに／または米国食品医薬品局
が作成したＩｎａｃｔｉｖｅ Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ Ｇｕｉｄｅ上に含まれる。
【0136】
本明細書に記載される発明の実施形態は、実施形態「からなる」および／または実施形
態「から本質的になる」を含むことが理解される。
態「から本質的になる」を含むことが理解される。
【0137】
本明細書の「約」値またはパラメーターに対する言及は、その値またはパラメーター自
体に対する変動を含む（および記載する）。例えば、「約Ｘ」に言及する記載は、「Ｘ」
の記載を含む。
体に対する変動を含む（および記載する）。例えば、「約Ｘ」に言及する記載は、「Ｘ」
の記載を含む。
【0138】
本明細書で使用する場合、値またはパラメーター「ではない」に対する言及は、値また
はパラメーター「以外」を一般に意味し記載する。例えば、方法が、Ｘ型のがんを処置す
るために使用されないとは、この方法が、Ｘ以外の型のがんを処置するために使用される
ことを意味する。
はパラメーター「以外」を一般に意味し記載する。例えば、方法が、Ｘ型のがんを処置す
るために使用されないとは、この方法が、Ｘ以外の型のがんを処置するために使用される
ことを意味する。
【0139】
本明細書および添付の特許請求の範囲で使用する場合、単数形「１つの、ある（ａ）」
、「もしくは、または、あるいは（ｏｒ）」および「この、その、前記、該（ｔｈｅ）」
は、文脈が明らかに他を指定しない限り、複数の指示対象を含む。
、「もしくは、または、あるいは（ｏｒ）」および「この、その、前記、該（ｔｈｅ）」
は、文脈が明らかに他を指定しない限り、複数の指示対象を含む。
【0140】
キメラ抗体／Ｔ細胞受容体構築物
一態様では、本発明は、標的抗原（例えば、細胞表面抗原またはペプチド／ＭＨＣ複合
体）に特異的に結合し、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュール（例えば、
ＣＤ３δε、ＣＤ３γεまたはζζ）をリクルートすることが可能な、標的抗原特異的キ
メラ抗体／Ｔ細胞受容体（ａｂＴＣＲ）を提供する。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは
、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とを含む。一部の実施形態では、第１の
ポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とは、例えば、共有結合（例えば、ペプチド結合
または他の化学結合）または非共有結合によって連結される。一部の実施形態では、ａｂ
ＴＣＲは、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とを含むヘテロ二量体である。
一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とは、少なくとも１
つのジスルフィド結合によって連結される。ａｂＴＣＲの特異性は、標的抗原に対する結
合特異性を付与する抗体部分に由来する。一部の実施形態では、抗体部分は、ＶＨ、ＣＨ
１、ＶＬおよびＣＬ抗体ドメインを含むＦａｂ様抗原結合モジュールである。一部の実施
形態では、抗体部分は、ＶＨおよびＶＬ抗体ドメインを含むＦｖ様抗原結合モジュールで
ある。ａｂＴＣＲがＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートする能力は、Ｔ細胞
受容体モジュール（ＴＣＲＭ）に由来する。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＴＣＲ（
例えば、αβＴＣＲまたはγδＴＣＲ）の膜貫通モジュールを含む。一部の実施形態では
、ＴＣＲＭは、ＴＣＲの接続ペプチドまたはその断片の一方または両方をさらに含む。一
部の実施形態では、膜貫通モジュールおよび接続ペプチドまたはその断片は、同じＴＣＲ
型（αβまたはγδ）に由来する。一部の実施形態では、膜貫通モジュールはαβＴＣＲ
に由来し、接続ペプチドもしくはその断片はγδＴＣＲに由来し、または膜貫通モジュー
ルはγδＴＣＲに由来し、接続ペプチドもしくはその断片はαβＴＣＲに由来する。一部
の実施形態では、ａｂＴＣＲは、少なくとも１つの細胞内ドメインをさらに含む。一部の
実施形態では、ａｂＴＣＲの少なくとも１つの細胞内ドメインのうち１つまたは複数は、
ＴＣＲの細胞内ドメイン由来の配列を含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲの少なくと
も１つの細胞内ドメインのうち１つまたは複数は、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列を含む
。共刺激シグナル伝達配列は、例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）
、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原－１（ＬＦＡ－１）
、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤ８３と特異的に結合する
リガンドなどを含む共刺激分子の細胞内ドメインの一部分であり得る。一部の実施形態で
は、抗体部分は、ａｂＴＣＲの細胞外ドメイン中に含まれる。一部の実施形態では、ａｂ
ＴＣＲは、細胞外ドメインの長さを最適化するために、抗体部分とＴＣＲＭとの間に１つ
または複数のペプチドリンカーをさらに含む。一部の実施形態では、標的抗原に特異的に
結合する抗原結合モジュール（例えば、Ｆａｂ様またはＦｖ様抗原結合モジュール）に対
する言及は、抗原結合モジュールが、ａ）他の分子に対するその結合親和性の少なくとも
約１０（例えば、少なくとも約１０、２０、３０、４０、５０、７５、１００、２００、
３００、４００、５００、７５０、１０００またはそれよりも大きい数のいずれかを含む
）倍である親和性で、またはｂ）他の分子への結合に対するそのＫｄの約１／１０倍以下
（例えば、約１／１０、１／２０、１／３０、１／４０、１／５０、１／７５、１／１０
０、１／２００、１／３００、１／４００、１／５００、１／７５０、１／１０００また
はそれ未満のいずれか以下）のＫｄで、標的抗原に結合することを意味する。結合親和性
は、ＥＬＩＳＡ、蛍光活性化細胞分取（ＦＡＣＳ）分析または放射性免疫沈降アッセイ（
ＲＩＡ）などの、当該分野で公知の方法によって決定され得る。Ｋｄは、例えば、Ｂｉａ
ｃｏｒｅ機器を利用する表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）アッセイ、または例えば、Ｓａｐ
ｉｄｙｎｅ機器を利用する速度論的排除アッセイ（ＫｉｎＥｘＡ）などの、当該分野で公
知の方法によって決定され得る。
一態様では、本発明は、標的抗原（例えば、細胞表面抗原またはペプチド／ＭＨＣ複合
体）に特異的に結合し、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュール（例えば、
ＣＤ３δε、ＣＤ３γεまたはζζ）をリクルートすることが可能な、標的抗原特異的キ
メラ抗体／Ｔ細胞受容体（ａｂＴＣＲ）を提供する。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは
、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とを含む。一部の実施形態では、第１の
ポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とは、例えば、共有結合（例えば、ペプチド結合
または他の化学結合）または非共有結合によって連結される。一部の実施形態では、ａｂ
ＴＣＲは、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とを含むヘテロ二量体である。
一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とは、少なくとも１
つのジスルフィド結合によって連結される。ａｂＴＣＲの特異性は、標的抗原に対する結
合特異性を付与する抗体部分に由来する。一部の実施形態では、抗体部分は、ＶＨ、ＣＨ
１、ＶＬおよびＣＬ抗体ドメインを含むＦａｂ様抗原結合モジュールである。一部の実施
形態では、抗体部分は、ＶＨおよびＶＬ抗体ドメインを含むＦｖ様抗原結合モジュールで
ある。ａｂＴＣＲがＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートする能力は、Ｔ細胞
受容体モジュール（ＴＣＲＭ）に由来する。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＴＣＲ（
例えば、αβＴＣＲまたはγδＴＣＲ）の膜貫通モジュールを含む。一部の実施形態では
、ＴＣＲＭは、ＴＣＲの接続ペプチドまたはその断片の一方または両方をさらに含む。一
部の実施形態では、膜貫通モジュールおよび接続ペプチドまたはその断片は、同じＴＣＲ
型（αβまたはγδ）に由来する。一部の実施形態では、膜貫通モジュールはαβＴＣＲ
に由来し、接続ペプチドもしくはその断片はγδＴＣＲに由来し、または膜貫通モジュー
ルはγδＴＣＲに由来し、接続ペプチドもしくはその断片はαβＴＣＲに由来する。一部
の実施形態では、ａｂＴＣＲは、少なくとも１つの細胞内ドメインをさらに含む。一部の
実施形態では、ａｂＴＣＲの少なくとも１つの細胞内ドメインのうち１つまたは複数は、
ＴＣＲの細胞内ドメイン由来の配列を含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲの少なくと
も１つの細胞内ドメインのうち１つまたは複数は、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列を含む
。共刺激シグナル伝達配列は、例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）
、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原－１（ＬＦＡ－１）
、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤ８３と特異的に結合する
リガンドなどを含む共刺激分子の細胞内ドメインの一部分であり得る。一部の実施形態で
は、抗体部分は、ａｂＴＣＲの細胞外ドメイン中に含まれる。一部の実施形態では、ａｂ
ＴＣＲは、細胞外ドメインの長さを最適化するために、抗体部分とＴＣＲＭとの間に１つ
または複数のペプチドリンカーをさらに含む。一部の実施形態では、標的抗原に特異的に
結合する抗原結合モジュール（例えば、Ｆａｂ様またはＦｖ様抗原結合モジュール）に対
する言及は、抗原結合モジュールが、ａ）他の分子に対するその結合親和性の少なくとも
約１０（例えば、少なくとも約１０、２０、３０、４０、５０、７５、１００、２００、
３００、４００、５００、７５０、１０００またはそれよりも大きい数のいずれかを含む
）倍である親和性で、またはｂ）他の分子への結合に対するそのＫｄの約１／１０倍以下
（例えば、約１／１０、１／２０、１／３０、１／４０、１／５０、１／７５、１／１０
０、１／２００、１／３００、１／４００、１／５００、１／７５０、１／１０００また
はそれ未満のいずれか以下）のＫｄで、標的抗原に結合することを意味する。結合親和性
は、ＥＬＩＳＡ、蛍光活性化細胞分取（ＦＡＣＳ）分析または放射性免疫沈降アッセイ（
ＲＩＡ）などの、当該分野で公知の方法によって決定され得る。Ｋｄは、例えば、Ｂｉａ
ｃｏｒｅ機器を利用する表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）アッセイ、または例えば、Ｓａｐ
ｉｄｙｎｅ機器を利用する速度論的排除アッセイ（ＫｉｎＥｘＡ）などの、当該分野で公
知の方法によって決定され得る。
【0141】
企図されたａｂＴＣＲ構築物には、例えば、細胞表面抗原に特異的に結合するａｂＴＣ
Ｒおよび細胞表面提示されたペプチド／ＭＨＣ複合体に特異的に結合するａｂＴＣＲが含
まれる。
Ｒおよび細胞表面提示されたペプチド／ＭＨＣ複合体に特異的に結合するａｂＴＣＲが含
まれる。
【0142】
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、ａ）ＶＨ抗体ドメインおよびＣＨ１抗体ドメイン
を含む第１の抗原結合ドメインを含む第１のポリペプチド鎖、ならびにｂ）ＶＬ抗体ドメ
インおよびＣＬ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインを含む第２のポリペプチド鎖
を含む、Ｆａｂ様抗原結合モジュールを含む。一部の実施形態では、第１の抗原結合ドメ
インは、ＣＨ１抗体ドメインのアミノ末端側に、ＶＨ抗体ドメインを含み、および／また
は第２の抗原結合ドメインは、ＣＬ抗体ドメインのアミノ末端側に、ＶＬ抗体ドメインを
含む。一部の実施形態では、ＶＬ抗体ドメインとＣＬ抗体ドメインとの間にペプチドリン
カーが、および／またはＶＨ抗体ドメインとＣＨ１抗体ドメインとの間にペプチドリンカ
ーが存在する。一部の実施形態では、ＶＬ抗体ドメインおよびＶＨ抗体ドメインのＣＤＲ
は全て、同じ抗体部分に由来する。一部の実施形態では、ＶＬ抗体ドメインおよびＶＨ抗
体ドメインは、１つよりも多い抗体部分に由来する抗体ＣＤＲを含む。一部の実施形態で
は、ＶＬ抗体ドメインは、ＶＨ抗体ドメインに由来する抗体ＣＤＲを含み、および／また
はＶＨ抗体ドメインは、ＶＬ抗体ドメインに由来する抗体ＣＤＲを含む。一部の実施形態
では、ＶＬ抗体ドメインは、１つの抗体に由来するフレームワーク領域と、別の抗体に由
来する１つもしくは複数のＣＤＲとを含み、および／またはＶＨ抗体ドメインは、１つの
抗体に由来するフレームワーク領域と、別の抗体に由来する１つもしくは複数のＣＤＲと
を含む。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とは、例え
ば、共有結合（例えば、ペプチド結合または他の化学結合）または非共有結合によって連
結される。一部の実施形態では、第１の抗原結合ドメインと第２の抗原結合ドメインとは
、ジスルフィド結合によって連結される。一部の実施形態では、第１の抗原結合ドメイン
と第２の抗原結合ドメインとは、ＣＨ１ドメイン中の残基とＣＬドメイン中の残基との間
のジスルフィド結合によって連結される。一部の実施形態では、ＣＨ１ドメインは、Ｉｇ
Ｇ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４）、ＩｇＡ（例えば、ＩｇＡ
１またはＩｇＡ２）、ＩｇＤ、ＩｇＭまたはＩｇＥ重鎖、任意選択でヒトに由来する。一
部の実施形態では、ＣＨ１ドメインは、配列番号３９および６０～６９のいずれか１つの
アミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）。一部の実施形態では、ＣＨ１ドメインは
、それが由来する配列と比較して、１つまたは複数の改変（例えば、アミノ酸の置換、挿
入および／または欠失）を含むバリアントである。一部の実施形態では、ＣＬドメインは
、カッパまたはラムダ軽鎖、任意選択でヒトに由来する。一部の実施形態では、ＣＬドメ
インは、配列番号４１のアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）。一部の実施形態
では、ＣＬドメインは、それが由来する配列と比較して、１つまたは複数の改変（例えば
、アミノ酸の置換、挿入および／または欠失）を含むバリアントである。一部の実施形態
では、ＣＨ１および／またはＣＬドメインは、互いに対するそれらの結合親和性を実質的
に変更しない１つまたは複数の改変を含む。一部の実施形態では、ＣＨ１および／または
ＣＬドメインは、互いに対するそれらの結合親和性を増加させるおよび／または天然に存
在しないジスルフィド結合を導入する１つまたは複数の改変を含む。一部の実施形態では
、ＣＨ１およびＣＬドメインは、ノブイントゥホール改変を含む（例えば、Carter P.
J Immunol Methods. ２４８巻：７～１５頁、２００１年を参照のこと）。一部の実施
形態では、ＣＨ１およびＣＬドメインは、互いとのそれらの会合を増強するために、静電
操縦によって改変される（例えば、ＷＯ２００６１０６９０５およびGunasekaran Kら、
J Biol Chem. ２８５巻：１９６３７～４６頁、２０１０年を参照のこと）。一部の実
施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または完全
合成である。
を含む第１の抗原結合ドメインを含む第１のポリペプチド鎖、ならびにｂ）ＶＬ抗体ドメ
インおよびＣＬ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインを含む第２のポリペプチド鎖
を含む、Ｆａｂ様抗原結合モジュールを含む。一部の実施形態では、第１の抗原結合ドメ
インは、ＣＨ１抗体ドメインのアミノ末端側に、ＶＨ抗体ドメインを含み、および／また
は第２の抗原結合ドメインは、ＣＬ抗体ドメインのアミノ末端側に、ＶＬ抗体ドメインを
含む。一部の実施形態では、ＶＬ抗体ドメインとＣＬ抗体ドメインとの間にペプチドリン
カーが、および／またはＶＨ抗体ドメインとＣＨ１抗体ドメインとの間にペプチドリンカ
ーが存在する。一部の実施形態では、ＶＬ抗体ドメインおよびＶＨ抗体ドメインのＣＤＲ
は全て、同じ抗体部分に由来する。一部の実施形態では、ＶＬ抗体ドメインおよびＶＨ抗
体ドメインは、１つよりも多い抗体部分に由来する抗体ＣＤＲを含む。一部の実施形態で
は、ＶＬ抗体ドメインは、ＶＨ抗体ドメインに由来する抗体ＣＤＲを含み、および／また
はＶＨ抗体ドメインは、ＶＬ抗体ドメインに由来する抗体ＣＤＲを含む。一部の実施形態
では、ＶＬ抗体ドメインは、１つの抗体に由来するフレームワーク領域と、別の抗体に由
来する１つもしくは複数のＣＤＲとを含み、および／またはＶＨ抗体ドメインは、１つの
抗体に由来するフレームワーク領域と、別の抗体に由来する１つもしくは複数のＣＤＲと
を含む。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とは、例え
ば、共有結合（例えば、ペプチド結合または他の化学結合）または非共有結合によって連
結される。一部の実施形態では、第１の抗原結合ドメインと第２の抗原結合ドメインとは
、ジスルフィド結合によって連結される。一部の実施形態では、第１の抗原結合ドメイン
と第２の抗原結合ドメインとは、ＣＨ１ドメイン中の残基とＣＬドメイン中の残基との間
のジスルフィド結合によって連結される。一部の実施形態では、ＣＨ１ドメインは、Ｉｇ
Ｇ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４）、ＩｇＡ（例えば、ＩｇＡ
１またはＩｇＡ２）、ＩｇＤ、ＩｇＭまたはＩｇＥ重鎖、任意選択でヒトに由来する。一
部の実施形態では、ＣＨ１ドメインは、配列番号３９および６０～６９のいずれか１つの
アミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）。一部の実施形態では、ＣＨ１ドメインは
、それが由来する配列と比較して、１つまたは複数の改変（例えば、アミノ酸の置換、挿
入および／または欠失）を含むバリアントである。一部の実施形態では、ＣＬドメインは
、カッパまたはラムダ軽鎖、任意選択でヒトに由来する。一部の実施形態では、ＣＬドメ
インは、配列番号４１のアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）。一部の実施形態
では、ＣＬドメインは、それが由来する配列と比較して、１つまたは複数の改変（例えば
、アミノ酸の置換、挿入および／または欠失）を含むバリアントである。一部の実施形態
では、ＣＨ１および／またはＣＬドメインは、互いに対するそれらの結合親和性を実質的
に変更しない１つまたは複数の改変を含む。一部の実施形態では、ＣＨ１および／または
ＣＬドメインは、互いに対するそれらの結合親和性を増加させるおよび／または天然に存
在しないジスルフィド結合を導入する１つまたは複数の改変を含む。一部の実施形態では
、ＣＨ１およびＣＬドメインは、ノブイントゥホール改変を含む（例えば、Carter P.
J Immunol Methods. ２４８巻：７～１５頁、２００１年を参照のこと）。一部の実施
形態では、ＣＨ１およびＣＬドメインは、互いとのそれらの会合を増強するために、静電
操縦によって改変される（例えば、ＷＯ２００６１０６９０５およびGunasekaran Kら、
J Biol Chem. ２８５巻：１９６３７～４６頁、２０１０年を参照のこと）。一部の実
施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または完全
合成である。
【0143】
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、ａ）ＶＬ抗体ドメインおよびＣＨ１抗体ドメイン
を含む第１の抗原結合ドメインを含む第１のポリペプチド鎖、ならびにｂ）ＶＨ抗体ドメ
インおよびＣＬ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインを含む第２のポリペプチド鎖
を含む、Ｆａｂ様抗原結合モジュールを含む。一部の実施形態では、第１の抗原結合ドメ
インは、ＣＨ１抗体ドメインのアミノ末端側に、ＶＬ抗体ドメインを含み、および／また
は第２の抗原結合ドメインは、ＣＬ抗体ドメインのアミノ末端側に、ＶＨ抗体ドメインを
含む。一部の実施形態では、ＶＨ抗体ドメインとＣＬ抗体ドメインとの間にペプチドリン
カーが、および／またはＶＬ抗体ドメインとＣＨ１抗体ドメインとの間にペプチドリンカ
ーが存在する。一部の実施形態では、ＶＬ抗体ドメインおよびＶＨ抗体ドメインのＣＤＲ
は全て、同じ抗体部分に由来する。一部の実施形態では、ＶＬ抗体ドメインおよびＶＨ抗
体ドメインは、１つよりも多い抗体部分に由来する抗体ＣＤＲを含む。一部の実施形態で
は、ＶＬ抗体ドメインは、ＶＨ抗体ドメインに由来する抗体ＣＤＲを含み、および／また
はＶＨ抗体ドメインは、ＶＬ抗体ドメインに由来する抗体ＣＤＲを含む。一部の実施形態
では、ＶＬ抗体ドメインは、１つの抗体に由来するフレームワーク領域と、別の抗体に由
来する１つもしくは複数のＣＤＲとを含み、および／またはＶＨ抗体ドメインは、１つの
抗体に由来するフレームワーク領域と、別の抗体に由来する１つもしくは複数のＣＤＲと
を含む。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とは、例え
ば、共有結合（例えば、ペプチド結合または他の化学結合）または非共有結合によって連
結される。一部の実施形態では、第１の抗原結合ドメインと第２の抗原結合ドメインとは
、ジスルフィド結合によって連結される。一部の実施形態では、第１の抗原結合ドメイン
と第２の抗原結合ドメインとは、ＣＨ１ドメイン中の残基とＣＬドメイン中の残基との間
のジスルフィド結合によって連結される。一部の実施形態では、ＣＨ１ドメインは、Ｉｇ
Ｇ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４）、ＩｇＡ（例えば、ＩｇＡ
１またはＩｇＡ２）、ＩｇＤ、ＩｇＭまたはＩｇＥ重鎖、任意選択でヒトに由来する。一
部の実施形態では、ＣＨ１ドメインは、配列番号３９および６０～６９のいずれか１つの
アミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）。一部の実施形態では、ＣＨ１ドメインは
、それが由来する配列と比較して、１つまたは複数の改変（例えば、アミノ酸の置換、挿
入および／または欠失）を含むバリアントである。一部の実施形態では、ＣＬドメインは
、カッパまたはラムダ軽鎖、任意選択でヒトに由来する。一部の実施形態では、ＣＬドメ
インは、配列番号４１のアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）。一部の実施形態
では、ＣＬドメインは、それが由来する配列と比較して、１つまたは複数の改変（例えば
、アミノ酸の置換、挿入および／または欠失）を含むバリアントである。一部の実施形態
では、ＣＨ１および／またはＣＬドメインは、互いに対するそれらの結合親和性を実質的
に変更しない１つまたは複数の改変を含む。一部の実施形態では、ＣＨ１および／または
ＣＬドメインは、互いに対するそれらの結合親和性を増加させるおよび／または天然に存
在しないジスルフィド結合を導入する１つまたは複数の改変を含む。一部の実施形態では
、ＣＨ１およびＣＬドメインは、ノブイントゥホール改変を含む（例えば、Carter P.
J Immunol Methods. ２４８巻：７～１５頁、２００１年を参照のこと）。一部の実施
形態では、ＣＨ１およびＣＬドメインは、互いとのそれらの会合を増強するために、静電
操縦によって改変される（例えば、ＷＯ２００６１０６９０５およびGunasekaran Kら、
J Biol Chem. ２８５巻：１９６３７～４６頁、２０１０年を参照のこと）。一部の実
施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または完全
合成である。
を含む第１の抗原結合ドメインを含む第１のポリペプチド鎖、ならびにｂ）ＶＨ抗体ドメ
インおよびＣＬ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインを含む第２のポリペプチド鎖
を含む、Ｆａｂ様抗原結合モジュールを含む。一部の実施形態では、第１の抗原結合ドメ
インは、ＣＨ１抗体ドメインのアミノ末端側に、ＶＬ抗体ドメインを含み、および／また
は第２の抗原結合ドメインは、ＣＬ抗体ドメインのアミノ末端側に、ＶＨ抗体ドメインを
含む。一部の実施形態では、ＶＨ抗体ドメインとＣＬ抗体ドメインとの間にペプチドリン
カーが、および／またはＶＬ抗体ドメインとＣＨ１抗体ドメインとの間にペプチドリンカ
ーが存在する。一部の実施形態では、ＶＬ抗体ドメインおよびＶＨ抗体ドメインのＣＤＲ
は全て、同じ抗体部分に由来する。一部の実施形態では、ＶＬ抗体ドメインおよびＶＨ抗
体ドメインは、１つよりも多い抗体部分に由来する抗体ＣＤＲを含む。一部の実施形態で
は、ＶＬ抗体ドメインは、ＶＨ抗体ドメインに由来する抗体ＣＤＲを含み、および／また
はＶＨ抗体ドメインは、ＶＬ抗体ドメインに由来する抗体ＣＤＲを含む。一部の実施形態
では、ＶＬ抗体ドメインは、１つの抗体に由来するフレームワーク領域と、別の抗体に由
来する１つもしくは複数のＣＤＲとを含み、および／またはＶＨ抗体ドメインは、１つの
抗体に由来するフレームワーク領域と、別の抗体に由来する１つもしくは複数のＣＤＲと
を含む。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とは、例え
ば、共有結合（例えば、ペプチド結合または他の化学結合）または非共有結合によって連
結される。一部の実施形態では、第１の抗原結合ドメインと第２の抗原結合ドメインとは
、ジスルフィド結合によって連結される。一部の実施形態では、第１の抗原結合ドメイン
と第２の抗原結合ドメインとは、ＣＨ１ドメイン中の残基とＣＬドメイン中の残基との間
のジスルフィド結合によって連結される。一部の実施形態では、ＣＨ１ドメインは、Ｉｇ
Ｇ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４）、ＩｇＡ（例えば、ＩｇＡ
１またはＩｇＡ２）、ＩｇＤ、ＩｇＭまたはＩｇＥ重鎖、任意選択でヒトに由来する。一
部の実施形態では、ＣＨ１ドメインは、配列番号３９および６０～６９のいずれか１つの
アミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）。一部の実施形態では、ＣＨ１ドメインは
、それが由来する配列と比較して、１つまたは複数の改変（例えば、アミノ酸の置換、挿
入および／または欠失）を含むバリアントである。一部の実施形態では、ＣＬドメインは
、カッパまたはラムダ軽鎖、任意選択でヒトに由来する。一部の実施形態では、ＣＬドメ
インは、配列番号４１のアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）。一部の実施形態
では、ＣＬドメインは、それが由来する配列と比較して、１つまたは複数の改変（例えば
、アミノ酸の置換、挿入および／または欠失）を含むバリアントである。一部の実施形態
では、ＣＨ１および／またはＣＬドメインは、互いに対するそれらの結合親和性を実質的
に変更しない１つまたは複数の改変を含む。一部の実施形態では、ＣＨ１および／または
ＣＬドメインは、互いに対するそれらの結合親和性を増加させるおよび／または天然に存
在しないジスルフィド結合を導入する１つまたは複数の改変を含む。一部の実施形態では
、ＣＨ１およびＣＬドメインは、ノブイントゥホール改変を含む（例えば、Carter P.
J Immunol Methods. ２４８巻：７～１５頁、２００１年を参照のこと）。一部の実施
形態では、ＣＨ１およびＣＬドメインは、互いとのそれらの会合を増強するために、静電
操縦によって改変される（例えば、ＷＯ２００６１０６９０５およびGunasekaran Kら、
J Biol Chem. ２８５巻：１９６３７～４６頁、２０１０年を参照のこと）。一部の実
施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または完全
合成である。
【0144】
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、ａ）ＶＨ抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメ
インを含む第１のポリペプチド鎖、およびｂ）ＶＬ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ド
メインを含む第２のポリペプチド鎖を含む、Ｆｖ様抗原結合モジュールを含む。一部の実
施形態では、ＶＬ抗体ドメインのＣ末端に融合した第１のペプチドリンカーおよび／また
はＶＨ抗体ドメインのＣ末端に融合した第２のペプチドリンカーが存在する。一部の実施
形態では、第１および第２のペプチドリンカーは、互いに結合することが可能である。一
部の実施形態では、第１および／または第２のペプチドリンカーは、免疫グロブリン重鎖
および／または軽鎖定常領域に由来する。一部の実施形態では、第１および／または第２
のペプチドリンカーは、ＣＨ３抗体ドメインまたはそのバリアントを含む。一部の実施形
態では、ペプチドリンカー中に含まれる免疫グロブリン重鎖定常ドメイン（例えば、ＣＨ
１またはＣＨ３）は、ＩｇＧ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４）
、ＩｇＡ（例えば、ＩｇＡ１またはＩｇＡ２）、ＩｇＤ、ＩｇＭまたはＩｇＥ重鎖、任意
選択でヒトに由来する。一部の実施形態では、第１および／または第２のペプチドリンカ
ーは、ＴＣＲサブユニット定常領域に由来する。例えば、一部の実施形態では、第１およ
び／または第２のペプチドリンカーは、ａ）ＴＣＲαおよびβサブユニット定常ドメイン
；またはｂ）ＴＣＲγおよびδサブユニット定常ドメインに由来する。一部の実施形態で
は、第１および／または第２のペプチドリンカーは、合成である。一部の実施形態では、
ＶＬ抗体ドメインおよびＶＨ抗体ドメインのＣＤＲは全て、同じ抗体部分に由来する。一
部の実施形態では、ＶＬ抗体ドメインおよびＶＨ抗体ドメインは、１つよりも多い抗体部
分に由来する抗体ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、ＶＬ抗体ドメインは、ＶＨ抗体ド
メインに由来する抗体ＣＤＲを含み、および／またはＶＨ抗体ドメインは、ＶＬ抗体ドメ
インに由来する抗体ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、ＶＬ抗体ドメインは、１つの抗
体に由来するフレームワーク領域と、別の抗体に由来する１つもしくは複数のＣＤＲとを
含み、および／またはＶＨ抗体ドメインは、１つの抗体に由来するフレームワーク領域と
、別の抗体に由来する１つもしくは複数のＣＤＲとを含む。一部の実施形態では、第１の
ポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とは、例えば、共有結合（例えば、ペプチド結合
または他の化学結合）または非共有結合によって連結される。一部の実施形態では、第１
の抗原結合ドメインと第２の抗原結合ドメインとは、ジスルフィド結合によって連結され
る。一部の実施形態では、第１のペプチドリンカーと第２のペプチドリンカーとは、ジス
ルフィド結合によって連結される。一部の実施形態では、第１および／または第２のペプ
チドリンカーは、それが由来する配列と比較して、１つまたは複数の改変（例えば、アミ
ノ酸の置換、挿入および／または欠失）を含むバリアントである。一部の実施形態では、
第１および／または第２のペプチドリンカーは、互いに対するそれらの結合親和性を実質
的に変更しない１つまたは複数の改変を含む。一部の実施形態では、第１および／または
第２のペプチドリンカーは、互いに対するそれらの結合親和性を増加させるおよび／また
は天然に存在しないジスルフィド結合を導入する１つまたは複数の改変を含む。一部の実
施形態では、第１および第２のペプチドリンカーは、ノブイントゥホール改変を含む（例
えば、Carter P. J Immunol Methods. ２４８巻：７～１５頁、２００１年を参照の
こと）。一部の実施形態では、第１および第２のペプチドリンカーは、互いとのそれらの
会合を増強するために、静電操縦によって改変される（例えば、ＷＯ２００６１０６９０
５およびGunasekaran Kら、J Biol Chem. ２８５巻：１９６３７～４６頁、２０１０
年を参照のこと）。一部の実施形態では、Ｆｖ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト化、
キメラ、半合成または完全合成である。
インを含む第１のポリペプチド鎖、およびｂ）ＶＬ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ド
メインを含む第２のポリペプチド鎖を含む、Ｆｖ様抗原結合モジュールを含む。一部の実
施形態では、ＶＬ抗体ドメインのＣ末端に融合した第１のペプチドリンカーおよび／また
はＶＨ抗体ドメインのＣ末端に融合した第２のペプチドリンカーが存在する。一部の実施
形態では、第１および第２のペプチドリンカーは、互いに結合することが可能である。一
部の実施形態では、第１および／または第２のペプチドリンカーは、免疫グロブリン重鎖
および／または軽鎖定常領域に由来する。一部の実施形態では、第１および／または第２
のペプチドリンカーは、ＣＨ３抗体ドメインまたはそのバリアントを含む。一部の実施形
態では、ペプチドリンカー中に含まれる免疫グロブリン重鎖定常ドメイン（例えば、ＣＨ
１またはＣＨ３）は、ＩｇＧ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４）
、ＩｇＡ（例えば、ＩｇＡ１またはＩｇＡ２）、ＩｇＤ、ＩｇＭまたはＩｇＥ重鎖、任意
選択でヒトに由来する。一部の実施形態では、第１および／または第２のペプチドリンカ
ーは、ＴＣＲサブユニット定常領域に由来する。例えば、一部の実施形態では、第１およ
び／または第２のペプチドリンカーは、ａ）ＴＣＲαおよびβサブユニット定常ドメイン
；またはｂ）ＴＣＲγおよびδサブユニット定常ドメインに由来する。一部の実施形態で
は、第１および／または第２のペプチドリンカーは、合成である。一部の実施形態では、
ＶＬ抗体ドメインおよびＶＨ抗体ドメインのＣＤＲは全て、同じ抗体部分に由来する。一
部の実施形態では、ＶＬ抗体ドメインおよびＶＨ抗体ドメインは、１つよりも多い抗体部
分に由来する抗体ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、ＶＬ抗体ドメインは、ＶＨ抗体ド
メインに由来する抗体ＣＤＲを含み、および／またはＶＨ抗体ドメインは、ＶＬ抗体ドメ
インに由来する抗体ＣＤＲを含む。一部の実施形態では、ＶＬ抗体ドメインは、１つの抗
体に由来するフレームワーク領域と、別の抗体に由来する１つもしくは複数のＣＤＲとを
含み、および／またはＶＨ抗体ドメインは、１つの抗体に由来するフレームワーク領域と
、別の抗体に由来する１つもしくは複数のＣＤＲとを含む。一部の実施形態では、第１の
ポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とは、例えば、共有結合（例えば、ペプチド結合
または他の化学結合）または非共有結合によって連結される。一部の実施形態では、第１
の抗原結合ドメインと第２の抗原結合ドメインとは、ジスルフィド結合によって連結され
る。一部の実施形態では、第１のペプチドリンカーと第２のペプチドリンカーとは、ジス
ルフィド結合によって連結される。一部の実施形態では、第１および／または第２のペプ
チドリンカーは、それが由来する配列と比較して、１つまたは複数の改変（例えば、アミ
ノ酸の置換、挿入および／または欠失）を含むバリアントである。一部の実施形態では、
第１および／または第２のペプチドリンカーは、互いに対するそれらの結合親和性を実質
的に変更しない１つまたは複数の改変を含む。一部の実施形態では、第１および／または
第２のペプチドリンカーは、互いに対するそれらの結合親和性を増加させるおよび／また
は天然に存在しないジスルフィド結合を導入する１つまたは複数の改変を含む。一部の実
施形態では、第１および第２のペプチドリンカーは、ノブイントゥホール改変を含む（例
えば、Carter P. J Immunol Methods. ２４８巻：７～１５頁、２００１年を参照の
こと）。一部の実施形態では、第１および第２のペプチドリンカーは、互いとのそれらの
会合を増強するために、静電操縦によって改変される（例えば、ＷＯ２００６１０６９０
５およびGunasekaran Kら、J Biol Chem. ２８５巻：１９６３７～４６頁、２０１０
年を参照のこと）。一部の実施形態では、Ｆｖ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト化、
キメラ、半合成または完全合成である。
【0145】
一部の実施形態では、抗体部分（例えば、Ｆａｂ様抗原結合モジュールまたはＦｖ様抗
原結合モジュール）は、完全ヒト配列と１つまたは複数の合成領域とを含む、半合成であ
る。一部の実施形態では、抗体部分は、完全ヒトＶＬと、完全ヒトＦＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ
１、ＦＲ２、ＨＣ－ＣＤＲ２、ＦＲ３およびＦＲ４領域ならびに合成ＨＣ－ＣＤＲ３を含
む半合成ＶＨとを含む、半合成である。一部の実施形態では、半合成ＶＨは、約５～約２
５（例えば、約５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７
、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４または２５のいずれか）アミノ酸長の配列
を有する完全合成ＨＣ－ＣＤＲ３を含む。一部の実施形態では、半合成ＶＨまたは合成Ｈ
Ｃ－ＣＤＲ３は、約５～約２５（例えば、約５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１
３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４または２５の
いずれか）アミノ酸長の配列を有する完全合成ＨＣ－ＣＤＲ３領域を含む半合成ライブラ
リー（例えば、半合成ヒトライブラリー）から取得され、配列中の各アミノ酸は、標準的
なヒトアミノ酸マイナスシステインからランダムに選択される。一部の実施形態では、合
成ＨＣ－ＣＤＲ３は、約１０～約１９（例えば、約１０、１１、１２、１３、１４、１５
、１６、１７、１８または１９のいずれか）アミノ酸長である。一部の実施形態では、抗
体部分は、半合成ＶＬと半合成ＶＨとを含む、半合成である。一部の実施形態では、抗体
部分は、固定されたヒトＶＨ／ＶＬフレームワークペアリングを有するが、重鎖および軽
鎖の両方の６つ全てのＣＤＲについてランダム化された合成配列を有する抗体を含む、完
全合成である。
原結合モジュール）は、完全ヒト配列と１つまたは複数の合成領域とを含む、半合成であ
る。一部の実施形態では、抗体部分は、完全ヒトＶＬと、完全ヒトＦＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ
１、ＦＲ２、ＨＣ－ＣＤＲ２、ＦＲ３およびＦＲ４領域ならびに合成ＨＣ－ＣＤＲ３を含
む半合成ＶＨとを含む、半合成である。一部の実施形態では、半合成ＶＨは、約５～約２
５（例えば、約５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７
、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４または２５のいずれか）アミノ酸長の配列
を有する完全合成ＨＣ－ＣＤＲ３を含む。一部の実施形態では、半合成ＶＨまたは合成Ｈ
Ｃ－ＣＤＲ３は、約５～約２５（例えば、約５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１
３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４または２５の
いずれか）アミノ酸長の配列を有する完全合成ＨＣ－ＣＤＲ３領域を含む半合成ライブラ
リー（例えば、半合成ヒトライブラリー）から取得され、配列中の各アミノ酸は、標準的
なヒトアミノ酸マイナスシステインからランダムに選択される。一部の実施形態では、合
成ＨＣ－ＣＤＲ３は、約１０～約１９（例えば、約１０、１１、１２、１３、１４、１５
、１６、１７、１８または１９のいずれか）アミノ酸長である。一部の実施形態では、抗
体部分は、半合成ＶＬと半合成ＶＨとを含む、半合成である。一部の実施形態では、抗体
部分は、固定されたヒトＶＨ／ＶＬフレームワークペアリングを有するが、重鎖および軽
鎖の両方の６つ全てのＣＤＲについてランダム化された合成配列を有する抗体を含む、完
全合成である。
【0146】
抗体部分（例えば、Ｆａｂ様抗原結合モジュールまたはＦｖ様抗原結合モジュール）は
、一部の実施形態では、１つもしくは複数の抗体部分（例えば、モノクローナル抗体）に
由来する特定のＣＤＲ配列、または１つもしくは複数のアミノ酸置換を含むかかる配列の
ある特定のバリアントを含む。一部の実施形態では、バリアント配列中のアミノ酸置換は
、標的抗原に結合する抗体部分の能力を実質的に低減させない。標的抗原結合親和性を実
質的に改善する、または一部の他の特性、例えば、標的抗原の関連バリアントとの特異性
および／もしくは交差反応性に影響を与える変更もまた、企図される。
、一部の実施形態では、１つもしくは複数の抗体部分（例えば、モノクローナル抗体）に
由来する特定のＣＤＲ配列、または１つもしくは複数のアミノ酸置換を含むかかる配列の
ある特定のバリアントを含む。一部の実施形態では、バリアント配列中のアミノ酸置換は
、標的抗原に結合する抗体部分の能力を実質的に低減させない。標的抗原結合親和性を実
質的に改善する、または一部の他の特性、例えば、標的抗原の関連バリアントとの特異性
および／もしくは交差反応性に影響を与える変更もまた、企図される。
【0147】
ＴＣＲＭは、ａ）第１の膜貫通ドメインを含む第１のＴ細胞受容体ドメイン（ＴＣＲＤ
）を含む第１のポリペプチド鎖、およびｂ）第２の膜貫通ドメインを含む第２のＴＣＲＤ
を含む第２のポリペプチド鎖、を含む。一部の実施形態では、第１の膜貫通ドメインは、
第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインであり、および／または第２の膜貫通ドメイ
ンは、第２のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインである。一部の実施形態では、第１の
ＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲα鎖（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号：ＣＣＩ７３８９
５）であり、第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲβ鎖（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番
号：ＣＣＩ７３８９３）である。一部の実施形態では、第１のＴＣＲサブユニットはＴＣ
Ｒβ鎖であり、第２のＴＣＲサブユニットはＴＣＲα鎖である。一部の実施形態では、第
１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲγ鎖（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号：ＡＧＥ９１
７８８）であり、第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲδ鎖（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受
託番号：ＡＡＱ５７２７２）である。一部の実施形態では、第１のＴＣＲサブユニットは
ＴＣＲδ鎖であり、第２のＴＣＲサブユニットはＴＣＲγ鎖である。一部の実施形態では
、第１および／または第２の膜貫通ドメインは、配列番号７７～８０のアミノ酸配列のう
ち１つ中に含まれる膜貫通ドメインを個々に含む（例えば、それからなる）。一部の実施
形態では、第１および／または第２の膜貫通ドメインは、配列番号１～４のアミノ酸配列
のいずれか１つを個々に含む（例えば、それからなる）。一部の実施形態では、第１のＴ
ＣＲＤは、膜貫通ドメインのアミノ末端側に、第１の接続ペプチドをさらに含み、および
／または第２のＴＣＲＤは、膜貫通ドメインのアミノ末端側に、第２の接続ペプチドをさ
らに含む。一部の実施形態では、第１の接続ペプチドは、第１のＴＣＲサブユニットの接
続ペプチドの全てもしくは一部分を含み、および／または第２の接続ペプチドは、第２の
ＴＣＲサブユニットの接続ペプチドの全てもしくは一部分を含む。一部の実施形態では、
第１の膜貫通ドメインと第１の接続ペプチドとは、異なるＴＣＲサブユニットに由来し、
および／または第２の膜貫通ドメインと第２の接続ペプチドとは、異なるＴＣＲサブユニ
ットに由来する。一部の実施形態では、第１および／または第２の接続ペプチドは、配列
番号７７～８０のアミノ酸配列のうち１つ中に含まれる接続ペプチドまたはその断片を個
々に含む（例えば、それからなる）。一部の実施形態では、第１および／または第２の接
続ペプチドは、配列番号５～１２のアミノ酸配列のいずれか１つを個々に含む（例えば、
それからなる）。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１の膜貫通ドメインのカル
ボキシ末端側に、第１のＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含み、および／または第２のＴＣ
ＲＤは、第２の膜貫通ドメインのカルボキシ末端側に、第２のＴＣＲ細胞内ドメインをさ
らに含む。一部の実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメインは、第１のＴＣＲサブユニ
ットの細胞内ドメインの全てもしくは一部分を含み、および／または第２のＴＣＲ細胞内
ドメインは、第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインの全てもしくは一部分を含む。
一部の実施形態では、第１および／または第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、配列番号７７
～８０のアミノ酸配列のいずれか１つ中に含まれる細胞内ドメインの全てまたは一部分を
個々に含む。一部の実施形態では、第１および／または第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、
配列番号１３～１４のアミノ酸配列のいずれか１つを個々に含む。一部の実施形態では、
第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲサブユニットの断片であり、および／または第２のＴＣ
ＲＤは、第２のＴＣＲ鎖の断片である。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第
２のポリペプチド鎖とは、例えば、共有結合（例えば、ペプチド結合または他の化学結合
）または非共有結合によって連結される。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤと第２の
ＴＣＲＤとは、ジスルフィド結合によって連結される。一部の実施形態では、第１のＴＣ
ＲＤと第２のＴＣＲＤとは、第１の接続ペプチド中の残基と第２の接続ペプチド中の残基
との間のジスルフィド結合によって連結される。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ
３δε、ＣＤ３γεおよびζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シ
グナル伝達モジュールをリクルートすることが可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲ
Ｍは、八量体ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体を形成するため（即ち、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合
体形成を促進するため）に、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζの各々をリクルートする
ことが可能である。
）を含む第１のポリペプチド鎖、およびｂ）第２の膜貫通ドメインを含む第２のＴＣＲＤ
を含む第２のポリペプチド鎖、を含む。一部の実施形態では、第１の膜貫通ドメインは、
第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインであり、および／または第２の膜貫通ドメイ
ンは、第２のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインである。一部の実施形態では、第１の
ＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲα鎖（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号：ＣＣＩ７３８９
５）であり、第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲβ鎖（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番
号：ＣＣＩ７３８９３）である。一部の実施形態では、第１のＴＣＲサブユニットはＴＣ
Ｒβ鎖であり、第２のＴＣＲサブユニットはＴＣＲα鎖である。一部の実施形態では、第
１のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲγ鎖（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号：ＡＧＥ９１
７８８）であり、第２のＴＣＲサブユニットは、ＴＣＲδ鎖（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受
託番号：ＡＡＱ５７２７２）である。一部の実施形態では、第１のＴＣＲサブユニットは
ＴＣＲδ鎖であり、第２のＴＣＲサブユニットはＴＣＲγ鎖である。一部の実施形態では
、第１および／または第２の膜貫通ドメインは、配列番号７７～８０のアミノ酸配列のう
ち１つ中に含まれる膜貫通ドメインを個々に含む（例えば、それからなる）。一部の実施
形態では、第１および／または第２の膜貫通ドメインは、配列番号１～４のアミノ酸配列
のいずれか１つを個々に含む（例えば、それからなる）。一部の実施形態では、第１のＴ
ＣＲＤは、膜貫通ドメインのアミノ末端側に、第１の接続ペプチドをさらに含み、および
／または第２のＴＣＲＤは、膜貫通ドメインのアミノ末端側に、第２の接続ペプチドをさ
らに含む。一部の実施形態では、第１の接続ペプチドは、第１のＴＣＲサブユニットの接
続ペプチドの全てもしくは一部分を含み、および／または第２の接続ペプチドは、第２の
ＴＣＲサブユニットの接続ペプチドの全てもしくは一部分を含む。一部の実施形態では、
第１の膜貫通ドメインと第１の接続ペプチドとは、異なるＴＣＲサブユニットに由来し、
および／または第２の膜貫通ドメインと第２の接続ペプチドとは、異なるＴＣＲサブユニ
ットに由来する。一部の実施形態では、第１および／または第２の接続ペプチドは、配列
番号７７～８０のアミノ酸配列のうち１つ中に含まれる接続ペプチドまたはその断片を個
々に含む（例えば、それからなる）。一部の実施形態では、第１および／または第２の接
続ペプチドは、配列番号５～１２のアミノ酸配列のいずれか１つを個々に含む（例えば、
それからなる）。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１の膜貫通ドメインのカル
ボキシ末端側に、第１のＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含み、および／または第２のＴＣ
ＲＤは、第２の膜貫通ドメインのカルボキシ末端側に、第２のＴＣＲ細胞内ドメインをさ
らに含む。一部の実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメインは、第１のＴＣＲサブユニ
ットの細胞内ドメインの全てもしくは一部分を含み、および／または第２のＴＣＲ細胞内
ドメインは、第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメインの全てもしくは一部分を含む。
一部の実施形態では、第１および／または第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、配列番号７７
～８０のアミノ酸配列のいずれか１つ中に含まれる細胞内ドメインの全てまたは一部分を
個々に含む。一部の実施形態では、第１および／または第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、
配列番号１３～１４のアミノ酸配列のいずれか１つを個々に含む。一部の実施形態では、
第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲサブユニットの断片であり、および／または第２のＴＣ
ＲＤは、第２のＴＣＲ鎖の断片である。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第
２のポリペプチド鎖とは、例えば、共有結合（例えば、ペプチド結合または他の化学結合
）または非共有結合によって連結される。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤと第２の
ＴＣＲＤとは、ジスルフィド結合によって連結される。一部の実施形態では、第１のＴＣ
ＲＤと第２のＴＣＲＤとは、第１の接続ペプチド中の残基と第２の接続ペプチド中の残基
との間のジスルフィド結合によって連結される。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ
３δε、ＣＤ３γεおよびζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シ
グナル伝達モジュールをリクルートすることが可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲ
Ｍは、八量体ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体を形成するため（即ち、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合
体形成を促進するため）に、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζの各々をリクルートする
ことが可能である。
【0148】
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、ａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をそれによっ
て形成する、ＴＣＲＭの第１のポリペプチド鎖のアミノ末端側に、抗体部分（例えば、Ｆ
ａｂ様抗原結合モジュールまたはＦｖ様抗原結合モジュール）の第１のポリペプチド鎖の
融合物、およびａｂＴＣＲの第２のポリペプチド鎖をそれによって形成する、ＴＣＲＭの
第２のポリペプチド鎖のアミノ末端側に、抗体部分の第２のポリペプチド鎖の融合物、を
含む分子である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、抗体部分の第１のポリペプチド鎖
とＴＣＲＭの第１のポリペプチド鎖との間の第１のペプチドリンカー、および／または抗
体部分の第２のポリペプチド鎖とＴＣＲＭの第２のポリペプチド鎖との間の第２のペプチ
ドリンカーをさらに含む。一部の実施形態では、第１および／または第２のペプチドリン
カーは、約５～約７０の間（例えば、これらの値の間の任意の範囲を含んで、約５、１０
、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５または７０のい
ずれか）アミノ酸長である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖は
、第１の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチドをさらに含み、お
よび／またはａｂＴＣＲの第２のポリペプチド鎖は、第２の抗原結合ドメインのアミノ末
端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態では、第１および／また
は第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む（例えば、それからな
る）。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖は、第１の膜貫通ドメイ
ンのカルボキシ末端側に、第１のアクセサリ細胞内ドメインをさらに含み、および／また
はａｂＴＣＲの第２のポリペプチド鎖は、第２の膜貫通ドメインのカルボキシ末端側に、
第２のアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、第１および／また
は第２のアクセサリ細胞内ドメインは、ＴＣＲ共刺激ドメインを含む。一部の実施形態で
は、ＴＣＲ共刺激ドメインは、配列番号７０または７１のアミノ酸配列の全てまたは一部
分を含む。一部の実施形態では、第１および／または第２のアクセサリ細胞内ドメインは
、エピトープタグを含む。一部の実施形態では、エピトープタグは、配列番号５０～５２
のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲの第１のポリペ
プチド鎖と第２のポリペプチド鎖とは、例えば、共有結合（例えば、ペプチド結合または
他の化学結合）または非共有結合によって連結される。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲ
は、ヘテロ二量体である。
て形成する、ＴＣＲＭの第１のポリペプチド鎖のアミノ末端側に、抗体部分（例えば、Ｆ
ａｂ様抗原結合モジュールまたはＦｖ様抗原結合モジュール）の第１のポリペプチド鎖の
融合物、およびａｂＴＣＲの第２のポリペプチド鎖をそれによって形成する、ＴＣＲＭの
第２のポリペプチド鎖のアミノ末端側に、抗体部分の第２のポリペプチド鎖の融合物、を
含む分子である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、抗体部分の第１のポリペプチド鎖
とＴＣＲＭの第１のポリペプチド鎖との間の第１のペプチドリンカー、および／または抗
体部分の第２のポリペプチド鎖とＴＣＲＭの第２のポリペプチド鎖との間の第２のペプチ
ドリンカーをさらに含む。一部の実施形態では、第１および／または第２のペプチドリン
カーは、約５～約７０の間（例えば、これらの値の間の任意の範囲を含んで、約５、１０
、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５または７０のい
ずれか）アミノ酸長である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖は
、第１の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチドをさらに含み、お
よび／またはａｂＴＣＲの第２のポリペプチド鎖は、第２の抗原結合ドメインのアミノ末
端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態では、第１および／また
は第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む（例えば、それからな
る）。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖は、第１の膜貫通ドメイ
ンのカルボキシ末端側に、第１のアクセサリ細胞内ドメインをさらに含み、および／また
はａｂＴＣＲの第２のポリペプチド鎖は、第２の膜貫通ドメインのカルボキシ末端側に、
第２のアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、第１および／また
は第２のアクセサリ細胞内ドメインは、ＴＣＲ共刺激ドメインを含む。一部の実施形態で
は、ＴＣＲ共刺激ドメインは、配列番号７０または７１のアミノ酸配列の全てまたは一部
分を含む。一部の実施形態では、第１および／または第２のアクセサリ細胞内ドメインは
、エピトープタグを含む。一部の実施形態では、エピトープタグは、配列番号５０～５２
のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲの第１のポリペ
プチド鎖と第２のポリペプチド鎖とは、例えば、共有結合（例えば、ペプチド結合または
他の化学結合）または非共有結合によって連結される。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲ
は、ヘテロ二量体である。
【0149】
一部の実施形態では、標的抗原は細胞表面抗原である。一部の実施形態では、細胞表面
抗原は、タンパク質、炭水化物および脂質からなる群から選択される。一部の実施形態で
は、細胞表面抗原は、罹患細胞において発現される疾患関連抗原である。一部の実施形態
では、標的抗原は、ペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む複合体である。ペプチド／ＭＨ
Ｃ複合体には、例えば、罹患細胞において発現される疾患関連抗原に由来するペプチドと
ＭＨＣタンパク質とを含む表面提示された複合体が含まれる。一部の実施形態では、全長
疾患関連抗原は、罹患細胞の表面上では通常発現されない（例えば、疾患関連抗原は、細
胞内タンパク質または分泌されたタンパク質である）。一部の実施形態では、疾患はがん
であり、疾患関連抗原は、がん細胞において発現される腫瘍関連抗原である。一部の実施
形態では、腫瘍関連抗原は、腫瘍性タンパク質である。一部の実施形態では、腫瘍性タン
パク質は、癌原遺伝子における変異の結果であり、腫瘍性タンパク質は、変異を含むネオ
エピトープを含む。例えば、一部の実施形態では、標的抗原は、細胞表面腫瘍関連抗原（
例えば、ネオエピトープを含む腫瘍性タンパク質）である。一部の実施形態では、標的抗
原は、がん細胞の表面上では通常発現されない腫瘍関連抗原（例えば、ネオエピトープを
含む腫瘍性タンパク質）（例えば、細胞内腫瘍関連抗原または分泌された腫瘍関連抗原）
に由来するペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む複合体である。一部の実施形態では、疾
患はウイルス感染症であり、疾患関連抗原は、感染細胞において発現されるウイルス関連
抗原である。例えば、一部の実施形態では、標的抗原は、細胞表面ウイルス関連抗原であ
る。一部の実施形態では、標的抗原は、ウイルス感染細胞の表面上では通常発現されない
ウイルス関連抗原（例えば、細胞内ウイルス関連抗原または分泌されたウイルス関連抗原
）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む複合体である。一部の実施形態では、
ａｂＴＣＲ構築物は、約０．１ｐＭ～約５００ｎＭの間（例えば、これらの値の間の任意
の範囲を含んで、約０．１ｐＭ、１．０ｐＭ、１０ｐＭ、５０ｐＭ、１００ｐＭ、５００
ｐＭ、１ｎＭ、１０ｎＭ、５０ｎＭ、１００ｎＭまたは５００ｎＭのいずれか）のＫｄで
、標的抗原を結合する。
抗原は、タンパク質、炭水化物および脂質からなる群から選択される。一部の実施形態で
は、細胞表面抗原は、罹患細胞において発現される疾患関連抗原である。一部の実施形態
では、標的抗原は、ペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む複合体である。ペプチド／ＭＨ
Ｃ複合体には、例えば、罹患細胞において発現される疾患関連抗原に由来するペプチドと
ＭＨＣタンパク質とを含む表面提示された複合体が含まれる。一部の実施形態では、全長
疾患関連抗原は、罹患細胞の表面上では通常発現されない（例えば、疾患関連抗原は、細
胞内タンパク質または分泌されたタンパク質である）。一部の実施形態では、疾患はがん
であり、疾患関連抗原は、がん細胞において発現される腫瘍関連抗原である。一部の実施
形態では、腫瘍関連抗原は、腫瘍性タンパク質である。一部の実施形態では、腫瘍性タン
パク質は、癌原遺伝子における変異の結果であり、腫瘍性タンパク質は、変異を含むネオ
エピトープを含む。例えば、一部の実施形態では、標的抗原は、細胞表面腫瘍関連抗原（
例えば、ネオエピトープを含む腫瘍性タンパク質）である。一部の実施形態では、標的抗
原は、がん細胞の表面上では通常発現されない腫瘍関連抗原（例えば、ネオエピトープを
含む腫瘍性タンパク質）（例えば、細胞内腫瘍関連抗原または分泌された腫瘍関連抗原）
に由来するペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む複合体である。一部の実施形態では、疾
患はウイルス感染症であり、疾患関連抗原は、感染細胞において発現されるウイルス関連
抗原である。例えば、一部の実施形態では、標的抗原は、細胞表面ウイルス関連抗原であ
る。一部の実施形態では、標的抗原は、ウイルス感染細胞の表面上では通常発現されない
ウイルス関連抗原（例えば、細胞内ウイルス関連抗原または分泌されたウイルス関連抗原
）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む複合体である。一部の実施形態では、
ａｂＴＣＲ構築物は、約０．１ｐＭ～約５００ｎＭの間（例えば、これらの値の間の任意
の範囲を含んで、約０．１ｐＭ、１．０ｐＭ、１０ｐＭ、５０ｐＭ、１００ｐＭ、５００
ｐＭ、１ｎＭ、１０ｎＭ、５０ｎＭ、１００ｎＭまたは５００ｎＭのいずれか）のＫｄで
、標的抗原を結合する。
【0150】
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、細胞表面抗原に特異的に結合する抗体部分（例え
ば、Ｆａｂ様抗原結合モジュールまたはＦｖ様抗原結合モジュール）を含み、細胞表面抗
原は、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５ＤまたはＦＣＲＬ５である
。完全抗原、例えば、細胞表面抗原への特異的結合は、「ＭＨＣ拘束されない結合」と呼
ばれる場合がある。
ば、Ｆａｂ様抗原結合モジュールまたはＦｖ様抗原結合モジュール）を含み、細胞表面抗
原は、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５ＤまたはＦＣＲＬ５である
。完全抗原、例えば、細胞表面抗原への特異的結合は、「ＭＨＣ拘束されない結合」と呼
ばれる場合がある。
【0151】
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、ペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む複合体に特
異的に結合する抗体部分（例えば、Ｆａｂ様抗原結合モジュールまたはＦｖ様抗原結合モ
ジュール）を含み、ペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－
１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択され
るタンパク質に由来する。ペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む複合体への特異的結合は
、「ＭＨＣ拘束された結合」と呼ばれる場合がある。
異的に結合する抗体部分（例えば、Ｆａｂ様抗原結合モジュールまたはＦｖ様抗原結合モ
ジュール）を含み、ペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－
１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択され
るタンパク質に由来する。ペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む複合体への特異的結合は
、「ＭＨＣ拘束された結合」と呼ばれる場合がある。
【0152】
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、疾患関連抗原（例えば、腫瘍関連抗原またはウイ
ルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣクラスＩタンパク質とを含む複合体
に特異的に結合する抗体部分（例えば、Ｆａｂ様抗原結合モジュールまたはＦｖ様抗原結
合モジュール）を含み、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ、ＨＬＡ－Ｂ、ＨＬＡ
－Ｃ、ＨＬＡ－Ｅ、ＨＬＡ－ＦまたはＨＬＡ－Ｇである。一部の実施形態では、ＭＨＣク
ラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ、ＨＬＡ－ＢまたはＨＬＡ－Ｃである。一部の実施形態
では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。一部の実施形態では、ＭＨＣク
ラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ｂである。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク
質は、ＨＬＡ－Ｃである。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－
Ａ０１、ＨＬＡ－Ａ０２、ＨＬＡ－Ａ０３、ＨＬＡ－Ａ０９、ＨＬＡ－Ａ１０、ＨＬＡ－
Ａ１１、ＨＬＡ－Ａ１９、ＨＬＡ－Ａ２３、ＨＬＡ－Ａ２４、ＨＬＡ－Ａ２５、ＨＬＡ－
Ａ２６、ＨＬＡ－Ａ２８、ＨＬＡ－Ａ２９、ＨＬＡ－Ａ３０、ＨＬＡ－Ａ３１、ＨＬＡ－
Ａ３２、ＨＬＡ－Ａ３３、ＨＬＡ－Ａ３４、ＨＬＡ－Ａ３６、ＨＬＡ－Ａ４３、ＨＬＡ－
Ａ６６、ＨＬＡ－Ａ６８、ＨＬＡ－Ａ６９、ＨＬＡ－Ａ７４またはＨＬＡ－Ａ８０である
。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実
施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１～５５５のいずれか
１つ、例えば、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０２、ＨＬＡ－Ａ＊０２：
０３、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０４、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０５、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０６、Ｈ
ＬＡ－Ａ＊０２：０７、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０８、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０９、ＨＬＡ－Ａ
＊０２：１０、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１１、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１２、ＨＬＡ－Ａ＊０２：
１３、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１４、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１５、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１６、Ｈ
ＬＡ－Ａ＊０２：１７、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１８、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１９、ＨＬＡ－Ａ
＊０２：２０、ＨＬＡ－Ａ＊０２：２１、ＨＬＡ－Ａ＊０２：２２またはＨＬＡ－Ａ＊０
２：２４である。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ＊０２
：０１である。
ルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣクラスＩタンパク質とを含む複合体
に特異的に結合する抗体部分（例えば、Ｆａｂ様抗原結合モジュールまたはＦｖ様抗原結
合モジュール）を含み、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ、ＨＬＡ－Ｂ、ＨＬＡ
－Ｃ、ＨＬＡ－Ｅ、ＨＬＡ－ＦまたはＨＬＡ－Ｇである。一部の実施形態では、ＭＨＣク
ラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ、ＨＬＡ－ＢまたはＨＬＡ－Ｃである。一部の実施形態
では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。一部の実施形態では、ＭＨＣク
ラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ｂである。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク
質は、ＨＬＡ－Ｃである。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－
Ａ０１、ＨＬＡ－Ａ０２、ＨＬＡ－Ａ０３、ＨＬＡ－Ａ０９、ＨＬＡ－Ａ１０、ＨＬＡ－
Ａ１１、ＨＬＡ－Ａ１９、ＨＬＡ－Ａ２３、ＨＬＡ－Ａ２４、ＨＬＡ－Ａ２５、ＨＬＡ－
Ａ２６、ＨＬＡ－Ａ２８、ＨＬＡ－Ａ２９、ＨＬＡ－Ａ３０、ＨＬＡ－Ａ３１、ＨＬＡ－
Ａ３２、ＨＬＡ－Ａ３３、ＨＬＡ－Ａ３４、ＨＬＡ－Ａ３６、ＨＬＡ－Ａ４３、ＨＬＡ－
Ａ６６、ＨＬＡ－Ａ６８、ＨＬＡ－Ａ６９、ＨＬＡ－Ａ７４またはＨＬＡ－Ａ８０である
。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実
施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１～５５５のいずれか
１つ、例えば、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０２、ＨＬＡ－Ａ＊０２：
０３、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０４、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０５、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０６、Ｈ
ＬＡ－Ａ＊０２：０７、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０８、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０９、ＨＬＡ－Ａ
＊０２：１０、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１１、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１２、ＨＬＡ－Ａ＊０２：
１３、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１４、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１５、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１６、Ｈ
ＬＡ－Ａ＊０２：１７、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１８、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１９、ＨＬＡ－Ａ
＊０２：２０、ＨＬＡ－Ａ＊０２：２１、ＨＬＡ－Ａ＊０２：２２またはＨＬＡ－Ａ＊０
２：２４である。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ＊０２
：０１である。
【0153】
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、疾患関連抗原（例えば、腫瘍関連抗原またはウイ
ルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣクラスＩＩタンパク質とを含む複合
体に特異的に結合する抗体部分（例えば、Ｆａｂ様抗原結合モジュールまたはＦｖ様抗原
結合モジュール）を含み、ＭＨＣクラスＩＩタンパク質は、ＨＬＡ－ＤＰ、ＨＬＡ－ＤＱ
またはＨＬＡ－ＤＲである。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩＩタンパク質は、ＨＬ
Ａ－ＤＰである。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩＩタンパク質は、ＨＬＡ－ＤＱで
ある。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩＩタンパク質は、ＨＬＡ－ＤＲである。
ルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣクラスＩＩタンパク質とを含む複合
体に特異的に結合する抗体部分（例えば、Ｆａｂ様抗原結合モジュールまたはＦｖ様抗原
結合モジュール）を含み、ＭＨＣクラスＩＩタンパク質は、ＨＬＡ－ＤＰ、ＨＬＡ－ＤＱ
またはＨＬＡ－ＤＲである。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩＩタンパク質は、ＨＬ
Ａ－ＤＰである。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩＩタンパク質は、ＨＬＡ－ＤＱで
ある。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩＩタンパク質は、ＨＬＡ－ＤＲである。
【0154】
例えば、一部の実施形態では、ａ）標的抗原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジ
ュール、およびｂ）少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートす
ることが可能なＴＣＲＭ、を含むａｂＴＣＲ（例えば、単離されたａｂＴＣＲ）が提供さ
れる。一部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ＶＨ抗体ドメイン、ＣＨ１
抗体ドメイン、ＶＬ抗体ドメインおよびＣＬ抗体ドメインを含む。一部の実施形態では、
ＣＨ１ドメインは、ＩｇＧ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４）重
鎖、任意選択でヒトに由来する。一部の実施形態では、ＣＨ１ドメインは、それが由来す
る配列と比較して、１つまたは複数の改変（例えば、アミノ酸の置換、挿入および／また
は欠失）を含むバリアントである。一部の実施形態では、ＣＬドメインは、カッパまたは
ラムダ軽鎖、任意選択でヒトに由来する。一部の実施形態では、ＣＬドメインは、それが
由来する配列と比較して、１つまたは複数の改変（例えば、アミノ酸の置換、挿入および
／または欠失）を含むバリアントである。一部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュ
ールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または完全合成である。一部の実施形態では、Ｔ
ＣＲＭは、ＴＣＲ、例えば、αβＴＣＲまたはγδＴＣＲの膜貫通ドメインを含む。一部
の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＴＣＲ、例えば、αβＴＣＲまたはγδＴＣＲの接続ペプ
チドまたはその断片をさらに含む。一部の実施形態では、膜貫通ドメインおよび接続ペプ
チドは、αβＴＣＲまたはγδＴＣＲに由来する。一部の実施形態では、膜貫通ドメイン
はαβＴＣＲに由来し、接続ペプチドはγδＴＣＲに由来する、または膜貫通ドメインは
γδＴＣＲに由来し、接続ペプチドはαβＴＣＲに由来する。一部の実施形態では、ＴＣ
ＲＭは、ＴＣＲの細胞外ドメインの少なくとも１つの部分をさらに含む。一部の実施形態
では、ＴＣＲＭは、ＴＣＲの細胞内ドメイン由来の配列を含む少なくとも１つのＴＣＲ細
胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＴＣＲサブユニットの断
片を含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば
、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０
由来）および／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少
なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣ
Ｒは、第１の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチドおよび／また
は第２の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一
部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、少なくとも１つのジスルフィド結合をさらに含む。一
部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ジスルフィド結合を含み、および／
またはＴＣＲＭは、ジスルフィド結合を含む。一部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モ
ジュールは、ＣＨ１ドメイン中の残基とＣＬドメインの残基との間のジスルフィド結合を
含み、および／またはＴＣＲＭは、第１の接続ペプチド中の残基と第２の接続ペプチド中
の残基との間のジスルフィド結合を含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε
、ＣＤ３γεおよびζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル
伝達モジュールをリクルートすることが可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、
ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。一部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジ
ュールとＴＣＲＭとの間にはペプチドリンカーが存在する。一部の実施形態では、標的抗
原は細胞表面抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水化物
および脂質からなる群から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾患関連
抗原、例えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部の実施形態で
は、細胞表面抗原は、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５ＤまたはＦ
ＣＲＬ５である。一部の実施形態では、標的抗原は、表面提示されたペプチド／ＭＨＣ複
合体である。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例えば、
腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク質
とを含む。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタンパク
質とを含み、ペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、Ｐ
ＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択されるタン
パク質に由来する。一部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタンパク
質である。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。一部
の実施形態では、ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬＡ－
Ａ０２は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１である。
ュール、およびｂ）少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートす
ることが可能なＴＣＲＭ、を含むａｂＴＣＲ（例えば、単離されたａｂＴＣＲ）が提供さ
れる。一部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ＶＨ抗体ドメイン、ＣＨ１
抗体ドメイン、ＶＬ抗体ドメインおよびＣＬ抗体ドメインを含む。一部の実施形態では、
ＣＨ１ドメインは、ＩｇＧ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４）重
鎖、任意選択でヒトに由来する。一部の実施形態では、ＣＨ１ドメインは、それが由来す
る配列と比較して、１つまたは複数の改変（例えば、アミノ酸の置換、挿入および／また
は欠失）を含むバリアントである。一部の実施形態では、ＣＬドメインは、カッパまたは
ラムダ軽鎖、任意選択でヒトに由来する。一部の実施形態では、ＣＬドメインは、それが
由来する配列と比較して、１つまたは複数の改変（例えば、アミノ酸の置換、挿入および
／または欠失）を含むバリアントである。一部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュ
ールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または完全合成である。一部の実施形態では、Ｔ
ＣＲＭは、ＴＣＲ、例えば、αβＴＣＲまたはγδＴＣＲの膜貫通ドメインを含む。一部
の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＴＣＲ、例えば、αβＴＣＲまたはγδＴＣＲの接続ペプ
チドまたはその断片をさらに含む。一部の実施形態では、膜貫通ドメインおよび接続ペプ
チドは、αβＴＣＲまたはγδＴＣＲに由来する。一部の実施形態では、膜貫通ドメイン
はαβＴＣＲに由来し、接続ペプチドはγδＴＣＲに由来する、または膜貫通ドメインは
γδＴＣＲに由来し、接続ペプチドはαβＴＣＲに由来する。一部の実施形態では、ＴＣ
ＲＭは、ＴＣＲの細胞外ドメインの少なくとも１つの部分をさらに含む。一部の実施形態
では、ＴＣＲＭは、ＴＣＲの細胞内ドメイン由来の配列を含む少なくとも１つのＴＣＲ細
胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＴＣＲサブユニットの断
片を含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば
、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０
由来）および／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少
なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣ
Ｒは、第１の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチドおよび／また
は第２の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一
部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、少なくとも１つのジスルフィド結合をさらに含む。一
部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ジスルフィド結合を含み、および／
またはＴＣＲＭは、ジスルフィド結合を含む。一部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モ
ジュールは、ＣＨ１ドメイン中の残基とＣＬドメインの残基との間のジスルフィド結合を
含み、および／またはＴＣＲＭは、第１の接続ペプチド中の残基と第２の接続ペプチド中
の残基との間のジスルフィド結合を含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε
、ＣＤ３γεおよびζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル
伝達モジュールをリクルートすることが可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、
ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。一部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジ
ュールとＴＣＲＭとの間にはペプチドリンカーが存在する。一部の実施形態では、標的抗
原は細胞表面抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水化物
および脂質からなる群から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾患関連
抗原、例えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部の実施形態で
は、細胞表面抗原は、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５ＤまたはＦ
ＣＲＬ５である。一部の実施形態では、標的抗原は、表面提示されたペプチド／ＭＨＣ複
合体である。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例えば、
腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク質
とを含む。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタンパク
質とを含み、ペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、Ｐ
ＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択されるタン
パク質に由来する。一部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタンパク
質である。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。一部
の実施形態では、ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬＡ－
Ａ０２は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１である。
【0155】
一部の実施形態では、ａ）標的抗原に特異的に結合するＦｖ様抗原結合モジュール、お
よびｂ）少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可
能なＴＣＲＭ、を含むａｂＴＣＲ（例えば、単離されたａｂＴＣＲ）であって、標的抗原
がペプチド／ＭＨＣ複合体である、ａｂＴＣＲが提供される。一部の実施形態では、Ｆｖ
様抗原結合モジュールは、ＶＨ抗体ドメインとＶＬ抗体ドメインとを含む。一部の実施形
態では、ＶＬ抗体ドメインのＣ末端に融合した第１のペプチドリンカーおよび／またはＶ
Ｈ抗体ドメインのＣ末端に融合した第２のペプチドリンカーが存在する。一部の実施形態
では、第１および第２のペプチドリンカーは、互いに結合することが可能である。一部の
実施形態では、第１および／または第２のペプチドリンカーは、免疫グロブリン重鎖およ
び／または軽鎖定常領域に由来する。一部の実施形態では、第１および／または第２のペ
プチドリンカーは、ＴＣＲサブユニット定常領域に由来する。例えば、一部の実施形態で
は、第１および／または第２のペプチドリンカーは、ａ）ＴＣＲαおよびβサブユニット
定常ドメイン；またはｂ）ＴＣＲγおよびδサブユニット定常ドメインに由来する。一部
の実施形態では、第１および／または第２のペプチドリンカーは、合成である。一部の実
施形態では、Ｆｖ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または完全合
成である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＴＣＲ、例えば、αβＴＣＲまたはγδＴ
ＣＲの膜貫通ドメインを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＴＣＲ、例えば、αβ
ＴＣＲまたはγδＴＣＲの接続ペプチドまたはその断片をさらに含む。一部の実施形態で
は、膜貫通ドメインおよび接続ペプチドは、αβＴＣＲまたはγδＴＣＲに由来する。一
部の実施形態では、膜貫通ドメインはαβＴＣＲに由来し、接続ペプチドはγδＴＣＲに
由来する、または膜貫通ドメインはγδＴＣＲに由来し、接続ペプチドはαβＴＣＲに由
来する。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＴＣＲの細胞外ドメインの少なくとも１つの
部分をさらに含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＴＣＲの細胞内ドメイン由来の配
列を含む少なくとも１つのＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、Ｔ
ＣＲＭは、ＴＣＲサブユニットの断片を含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細
胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、
ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ
、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含
む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第
１のシグナルペプチドおよび／または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第２の
シグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、少なくとも１つの
ジスルフィド結合をさらに含む。一部の実施形態では、第１および／または第２のペプチ
ドリンカーは、ジスルフィド結合を含み、および／またはＴＣＲＭは、ジスルフィド結合
を含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、第１の接続ペプチド中の残基と第２の接続ペ
プチド中の残基との間のジスルフィド結合を含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、Ｃ
Ｄ３δε、ＣＤ３γεおよびζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連
シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可能である。一部の実施形態では、ＴＣ
ＲＭは、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。一部の実施形態では、標的抗原ペプ
チド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードす
る抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む。一部の実施形態では、ペプチ
ド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタンパク質とを含み、ペプチドは、ＷＴ－１、Ａ
ＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ
－１およびＰＳＡからなる群から選択されるタンパク質に由来する。一部の実施形態では
、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタンパク質である。一部の実施形態では、ＭＨＣ
クラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ
－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａ０２は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１であ
る。
よびｂ）少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可
能なＴＣＲＭ、を含むａｂＴＣＲ（例えば、単離されたａｂＴＣＲ）であって、標的抗原
がペプチド／ＭＨＣ複合体である、ａｂＴＣＲが提供される。一部の実施形態では、Ｆｖ
様抗原結合モジュールは、ＶＨ抗体ドメインとＶＬ抗体ドメインとを含む。一部の実施形
態では、ＶＬ抗体ドメインのＣ末端に融合した第１のペプチドリンカーおよび／またはＶ
Ｈ抗体ドメインのＣ末端に融合した第２のペプチドリンカーが存在する。一部の実施形態
では、第１および第２のペプチドリンカーは、互いに結合することが可能である。一部の
実施形態では、第１および／または第２のペプチドリンカーは、免疫グロブリン重鎖およ
び／または軽鎖定常領域に由来する。一部の実施形態では、第１および／または第２のペ
プチドリンカーは、ＴＣＲサブユニット定常領域に由来する。例えば、一部の実施形態で
は、第１および／または第２のペプチドリンカーは、ａ）ＴＣＲαおよびβサブユニット
定常ドメイン；またはｂ）ＴＣＲγおよびδサブユニット定常ドメインに由来する。一部
の実施形態では、第１および／または第２のペプチドリンカーは、合成である。一部の実
施形態では、Ｆｖ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または完全合
成である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＴＣＲ、例えば、αβＴＣＲまたはγδＴ
ＣＲの膜貫通ドメインを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＴＣＲ、例えば、αβ
ＴＣＲまたはγδＴＣＲの接続ペプチドまたはその断片をさらに含む。一部の実施形態で
は、膜貫通ドメインおよび接続ペプチドは、αβＴＣＲまたはγδＴＣＲに由来する。一
部の実施形態では、膜貫通ドメインはαβＴＣＲに由来し、接続ペプチドはγδＴＣＲに
由来する、または膜貫通ドメインはγδＴＣＲに由来し、接続ペプチドはαβＴＣＲに由
来する。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＴＣＲの細胞外ドメインの少なくとも１つの
部分をさらに含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＴＣＲの細胞内ドメイン由来の配
列を含む少なくとも１つのＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、Ｔ
ＣＲＭは、ＴＣＲサブユニットの断片を含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細
胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、
ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ
、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含
む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第
１のシグナルペプチドおよび／または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第２の
シグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、少なくとも１つの
ジスルフィド結合をさらに含む。一部の実施形態では、第１および／または第２のペプチ
ドリンカーは、ジスルフィド結合を含み、および／またはＴＣＲＭは、ジスルフィド結合
を含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、第１の接続ペプチド中の残基と第２の接続ペ
プチド中の残基との間のジスルフィド結合を含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、Ｃ
Ｄ３δε、ＣＤ３γεおよびζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連
シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可能である。一部の実施形態では、ＴＣ
ＲＭは、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。一部の実施形態では、標的抗原ペプ
チド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードす
る抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む。一部の実施形態では、ペプチ
ド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタンパク質とを含み、ペプチドは、ＷＴ－１、Ａ
ＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ
－１およびＰＳＡからなる群から選択されるタンパク質に由来する。一部の実施形態では
、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタンパク質である。一部の実施形態では、ＭＨＣ
クラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ
－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａ０２は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１であ
る。
【0156】
一部の実施形態では、標的抗原を特異的に認識するａｂＴＣＲであって、ａ）ＶＨおよ
びＣＨ１抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲサブユニットの膜貫
通ドメインを含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；ならびにｂ）ＶＬおよ
びＣＬ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲサブユニットの膜貫通
ドメインを含む第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖を含み、第１の抗原結合ド
メインのＶＨおよびＣＨ１ドメインと第２の抗原結合ドメインのＶＬおよびＣＬドメイン
とが、標的抗原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形成し、第１のＴＣＲ
Ｄと第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクル
ートすることが可能なＴＣＲＭを形成する、ａｂＴＣＲが提供される。一部の実施形態で
は、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または完全合成であ
る。一部の実施形態では、第１のＴＣＲサブユニットはＴＣＲα鎖であり、第２のＴＣＲ
サブユニットはＴＣＲβ鎖である。一部の実施形態では、第１のＴＣＲサブユニットはＴ
ＣＲβ鎖であり、第２のＴＣＲサブユニットはＴＣＲα鎖である。一部の実施形態では、
第１のＴＣＲサブユニットはＴＣＲγ鎖であり、第２のＴＣＲサブユニットはＴＣＲδ鎖
である。一部の実施形態では、第１のＴＣＲサブユニットはＴＣＲδ鎖であり、第２のＴ
ＣＲサブユニットはＴＣＲγ鎖である。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１の
ＴＣＲサブユニットの接続ペプチドもしくはその断片をさらに含み、および／または第２
のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲサブユニットの接続ペプチドもしくはその断片をさらに含む
。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン
の一部分をさらに含み、および／または第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲサブユニットの
細胞外ドメインの一部分をさらに含む。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１の
ＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含み、および／または第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細
胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメインは、第１
のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメイン由来の配列を含み、および／または第２のＴＣＲ
細胞内ドメインは、第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメイン由来の配列を含む。一部
の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲサブユニットの断片であり、および／
または第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ鎖の断片である。一部の実施形態では、ａｂＴＣ
Ｒは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ
１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）および／またはエピトープタグ（例
えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメイン
をさらに含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ末
端側に、第１のシグナルペプチドおよび／または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端側
に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δ
ε、ＣＤ３γεおよびζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナ
ル伝達モジュールをリクルートすることが可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは
、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。一部の実施形態では、第１の抗原結合ドメ
インと第１のＴＣＲＤとの間に第１のペプチドリンカーが、および／または第２の抗原結
合ドメインと第２のＴＣＲＤとの間に第２のペプチドリンカーが存在する。一部の実施形
態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とは、例えば、共有結合（例えば
、ペプチド結合または他の化学結合）または非共有結合によって連結される。一部の実施
形態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とは、ａ）第１のＴＣＲＤの接
続ペプチド中の残基と第２のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合
；および／またはｂ）第１の抗原結合ドメイン中のＣＨ１抗体ドメイン中の残基と第２の
抗原結合ドメイン中のＣＬ抗体ドメイン中の残基との間のジスルフィド結合を介して連結
される。一部の実施形態では、ＣＨ１ドメインは、ＩｇＧ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２
、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４）重鎖、任意選択でヒトに由来する。一部の実施形態では、Ｃ
Ｈ１ドメインは、それが由来する配列と比較して、１つまたは複数の改変（例えば、アミ
ノ酸の置換、挿入および／または欠失）を含むバリアントである。一部の実施形態では、
ＣＬドメインは、カッパまたはラムダ軽鎖、任意選択でヒトに由来する。一部の実施形態
では、ＣＬドメインは、それが由来する配列と比較して、１つまたは複数の改変（例えば
、アミノ酸の置換、挿入および／または欠失）を含むバリアントである。一部の実施形態
では、標的抗原は細胞表面抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク
質、炭水化物および脂質からなる群から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原
は、疾患関連抗原、例えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部
の実施形態では、細胞表面抗原は、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ
５ＤまたはＦＣＲＬ５である。一部の実施形態では、標的抗原は、表面提示されたペプチ
ド／ＭＨＣ複合体である。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗
原（例えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨ
Ｃタンパク質とを含む。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭ
ＨＣタンパク質とを含み、ペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－Ｅ
ＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選
択されるタンパク質に由来する。一部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラ
スＩタンパク質である。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ
である。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態で
は、ＨＬＡ－Ａ０２は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１である。
びＣＨ１抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲサブユニットの膜貫
通ドメインを含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；ならびにｂ）ＶＬおよ
びＣＬ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲサブユニットの膜貫通
ドメインを含む第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖を含み、第１の抗原結合ド
メインのＶＨおよびＣＨ１ドメインと第２の抗原結合ドメインのＶＬおよびＣＬドメイン
とが、標的抗原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形成し、第１のＴＣＲ
Ｄと第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクル
ートすることが可能なＴＣＲＭを形成する、ａｂＴＣＲが提供される。一部の実施形態で
は、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または完全合成であ
る。一部の実施形態では、第１のＴＣＲサブユニットはＴＣＲα鎖であり、第２のＴＣＲ
サブユニットはＴＣＲβ鎖である。一部の実施形態では、第１のＴＣＲサブユニットはＴ
ＣＲβ鎖であり、第２のＴＣＲサブユニットはＴＣＲα鎖である。一部の実施形態では、
第１のＴＣＲサブユニットはＴＣＲγ鎖であり、第２のＴＣＲサブユニットはＴＣＲδ鎖
である。一部の実施形態では、第１のＴＣＲサブユニットはＴＣＲδ鎖であり、第２のＴ
ＣＲサブユニットはＴＣＲγ鎖である。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１の
ＴＣＲサブユニットの接続ペプチドもしくはその断片をさらに含み、および／または第２
のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲサブユニットの接続ペプチドもしくはその断片をさらに含む
。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメイン
の一部分をさらに含み、および／または第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲサブユニットの
細胞外ドメインの一部分をさらに含む。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１の
ＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含み、および／または第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細
胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメインは、第１
のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメイン由来の配列を含み、および／または第２のＴＣＲ
細胞内ドメインは、第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメイン由来の配列を含む。一部
の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲサブユニットの断片であり、および／
または第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ鎖の断片である。一部の実施形態では、ａｂＴＣ
Ｒは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ
１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）および／またはエピトープタグ（例
えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメイン
をさらに含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ末
端側に、第１のシグナルペプチドおよび／または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端側
に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δ
ε、ＣＤ３γεおよびζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナ
ル伝達モジュールをリクルートすることが可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは
、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。一部の実施形態では、第１の抗原結合ドメ
インと第１のＴＣＲＤとの間に第１のペプチドリンカーが、および／または第２の抗原結
合ドメインと第２のＴＣＲＤとの間に第２のペプチドリンカーが存在する。一部の実施形
態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とは、例えば、共有結合（例えば
、ペプチド結合または他の化学結合）または非共有結合によって連結される。一部の実施
形態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とは、ａ）第１のＴＣＲＤの接
続ペプチド中の残基と第２のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合
；および／またはｂ）第１の抗原結合ドメイン中のＣＨ１抗体ドメイン中の残基と第２の
抗原結合ドメイン中のＣＬ抗体ドメイン中の残基との間のジスルフィド結合を介して連結
される。一部の実施形態では、ＣＨ１ドメインは、ＩｇＧ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２
、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４）重鎖、任意選択でヒトに由来する。一部の実施形態では、Ｃ
Ｈ１ドメインは、それが由来する配列と比較して、１つまたは複数の改変（例えば、アミ
ノ酸の置換、挿入および／または欠失）を含むバリアントである。一部の実施形態では、
ＣＬドメインは、カッパまたはラムダ軽鎖、任意選択でヒトに由来する。一部の実施形態
では、ＣＬドメインは、それが由来する配列と比較して、１つまたは複数の改変（例えば
、アミノ酸の置換、挿入および／または欠失）を含むバリアントである。一部の実施形態
では、標的抗原は細胞表面抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク
質、炭水化物および脂質からなる群から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原
は、疾患関連抗原、例えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部
の実施形態では、細胞表面抗原は、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ
５ＤまたはＦＣＲＬ５である。一部の実施形態では、標的抗原は、表面提示されたペプチ
ド／ＭＨＣ複合体である。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗
原（例えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨ
Ｃタンパク質とを含む。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭ
ＨＣタンパク質とを含み、ペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－Ｅ
ＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選
択されるタンパク質に由来する。一部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラ
スＩタンパク質である。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ
である。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態で
は、ＨＬＡ－Ａ０２は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１である。
【0157】
一部の実施形態では、標的抗原を特異的に認識するａｂＴＣＲであって、ａ）ＶＨ抗体
ドメインを含む第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを
含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；およびｂ）ＶＬ抗体ドメインを含む
第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む第２のＴＣ
ＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖、を含み、第１の抗原結合ドメインのＶＨドメインと
第２の抗原結合ドメインのＶＬドメインとが、標的抗原に特異的に結合するＦｖ様抗原結
合モジュールを形成し、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ
関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴＣＲＭを形成し、標的抗原
がペプチド／ＭＨＣ複合体である、ａｂＴＣＲが提供される。一部の実施形態では、Ｆｖ
様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または完全合成である。一部の
実施形態では、第１のＴＣＲサブユニットはＴＣＲ α鎖であり、第２のＴＣＲサブユニ
ットはＴＣＲβ鎖である。一部の実施形態では、第１のＴＣＲサブユニットはＴＣＲβ鎖
であり、第２のＴＣＲサブユニットはＴＣＲα鎖である。一部の実施形態では、第１のＴ
ＣＲサブユニットはＴＣＲγ鎖であり、第２のＴＣＲサブユニットはＴＣＲδ鎖である。
一部の実施形態では、第１のＴＣＲサブユニットはＴＣＲδ鎖であり、第２のＴＣＲサブ
ユニットはＴＣＲγ鎖である。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲサ
ブユニットの接続ペプチドもしくはその断片をさらに含み、および／または第２のＴＣＲ
Ｄは、第２のＴＣＲサブユニットの接続ペプチドもしくはその断片をさらに含む。一部の
実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインの一部分
をさらに含み、および／または第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲサブユニットの細胞外ド
メインの一部分をさらに含む。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細
胞内ドメインをさらに含み、および／または第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメ
インをさらに含む。一部の実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメインは、第１のＴＣＲ
サブユニットの細胞内ドメイン由来の配列を含み、および／または第２のＴＣＲ細胞内ド
メインは、第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメイン由来の配列を含む。一部の実施形
態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲサブユニットの断片であり、および／または第
２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ鎖の断片である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ
細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）
、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、Ｈ
Ａ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに
含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、
第１のシグナルペプチドおよび／または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第２
のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ
３γεおよびζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モ
ジュールをリクルートすることが可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ａｂＴ
ＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。一部の実施形態では、第１の抗原結合ドメインと第
１のＴＣＲＤとの間に第１のペプチドリンカーが、および／または第２の抗原結合ドメイ
ンと第２のＴＣＲＤとの間に第２のペプチドリンカーが存在する。一部の実施形態では、
第１および／または第２のペプチドリンカーは、免疫グロブリン重鎖および／または軽鎖
定常領域に由来する。一部の実施形態では、第１および／または第２のペプチドリンカー
は、ＴＣＲサブユニット定常領域に由来する。例えば、一部の実施形態では、第１および
／または第２のペプチドリンカーは、ａ）ＴＣＲαおよびβサブユニット定常ドメイン；
またはｂ）ＴＣＲγおよびδサブユニット定常ドメインに由来する。一部の実施形態では
、第１および／または第２のペプチドリンカーは、合成である。一部の実施形態では、第
１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とは、例えば、共有結合（例えば、ペプチド
結合または他の化学結合）または非共有結合によって連結される。一部の実施形態では、
第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とは、ａ）第１のＴＣＲＤの接続ペプチド
中の残基と第２のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合；および／
またはｂ）第１のペプチドリンカー中の残基と第２のペプチドリンカー中の残基との間の
ジスルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、第１および／または第２の
ペプチドリンカーは、それが由来する配列と比較して、１つまたは複数の改変（例えば、
アミノ酸の置換、挿入および／または欠失）を含むバリアントである。一部の実施形態で
は、第１および／または第２のペプチドリンカーは、互いに対するそれらの結合親和性を
実質的に変更しない１つまたは複数の改変を含む。一部の実施形態では、第１および／ま
たは第２のペプチドリンカーは、互いに対するそれらの結合親和性を増加させるおよび／
または天然に存在しないジスルフィド結合を導入する１つまたは複数の改変を含む。一部
の実施形態では、標的抗原ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例えば、腫瘍関連
抗原またはウイルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む
。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタンパク質とを含
み、ペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ
、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択されるタンパク質に
由来する。一部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタンパク質である
。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。一部の実施形
態では、ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａ０２は
、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１である。
ドメインを含む第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを
含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；およびｂ）ＶＬ抗体ドメインを含む
第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲサブユニットの膜貫通ドメインを含む第２のＴＣ
ＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖、を含み、第１の抗原結合ドメインのＶＨドメインと
第２の抗原結合ドメインのＶＬドメインとが、標的抗原に特異的に結合するＦｖ様抗原結
合モジュールを形成し、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ
関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴＣＲＭを形成し、標的抗原
がペプチド／ＭＨＣ複合体である、ａｂＴＣＲが提供される。一部の実施形態では、Ｆｖ
様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または完全合成である。一部の
実施形態では、第１のＴＣＲサブユニットはＴＣＲ α鎖であり、第２のＴＣＲサブユニ
ットはＴＣＲβ鎖である。一部の実施形態では、第１のＴＣＲサブユニットはＴＣＲβ鎖
であり、第２のＴＣＲサブユニットはＴＣＲα鎖である。一部の実施形態では、第１のＴ
ＣＲサブユニットはＴＣＲγ鎖であり、第２のＴＣＲサブユニットはＴＣＲδ鎖である。
一部の実施形態では、第１のＴＣＲサブユニットはＴＣＲδ鎖であり、第２のＴＣＲサブ
ユニットはＴＣＲγ鎖である。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲサ
ブユニットの接続ペプチドもしくはその断片をさらに含み、および／または第２のＴＣＲ
Ｄは、第２のＴＣＲサブユニットの接続ペプチドもしくはその断片をさらに含む。一部の
実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲサブユニットの細胞外ドメインの一部分
をさらに含み、および／または第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲサブユニットの細胞外ド
メインの一部分をさらに含む。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細
胞内ドメインをさらに含み、および／または第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメ
インをさらに含む。一部の実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメインは、第１のＴＣＲ
サブユニットの細胞内ドメイン由来の配列を含み、および／または第２のＴＣＲ細胞内ド
メインは、第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメイン由来の配列を含む。一部の実施形
態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲサブユニットの断片であり、および／または第
２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ鎖の断片である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ
細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）
、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、Ｈ
Ａ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに
含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、
第１のシグナルペプチドおよび／または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第２
のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ
３γεおよびζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モ
ジュールをリクルートすることが可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ａｂＴ
ＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。一部の実施形態では、第１の抗原結合ドメインと第
１のＴＣＲＤとの間に第１のペプチドリンカーが、および／または第２の抗原結合ドメイ
ンと第２のＴＣＲＤとの間に第２のペプチドリンカーが存在する。一部の実施形態では、
第１および／または第２のペプチドリンカーは、免疫グロブリン重鎖および／または軽鎖
定常領域に由来する。一部の実施形態では、第１および／または第２のペプチドリンカー
は、ＴＣＲサブユニット定常領域に由来する。例えば、一部の実施形態では、第１および
／または第２のペプチドリンカーは、ａ）ＴＣＲαおよびβサブユニット定常ドメイン；
またはｂ）ＴＣＲγおよびδサブユニット定常ドメインに由来する。一部の実施形態では
、第１および／または第２のペプチドリンカーは、合成である。一部の実施形態では、第
１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とは、例えば、共有結合（例えば、ペプチド
結合または他の化学結合）または非共有結合によって連結される。一部の実施形態では、
第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とは、ａ）第１のＴＣＲＤの接続ペプチド
中の残基と第２のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合；および／
またはｂ）第１のペプチドリンカー中の残基と第２のペプチドリンカー中の残基との間の
ジスルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、第１および／または第２の
ペプチドリンカーは、それが由来する配列と比較して、１つまたは複数の改変（例えば、
アミノ酸の置換、挿入および／または欠失）を含むバリアントである。一部の実施形態で
は、第１および／または第２のペプチドリンカーは、互いに対するそれらの結合親和性を
実質的に変更しない１つまたは複数の改変を含む。一部の実施形態では、第１および／ま
たは第２のペプチドリンカーは、互いに対するそれらの結合親和性を増加させるおよび／
または天然に存在しないジスルフィド結合を導入する１つまたは複数の改変を含む。一部
の実施形態では、標的抗原ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例えば、腫瘍関連
抗原またはウイルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む
。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタンパク質とを含
み、ペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ
、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択されるタンパク質に
由来する。一部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタンパク質である
。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。一部の実施形
態では、ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａ０２は
、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１である。
【0158】
一部の実施形態では、標的抗原を特異的に認識するａｂＴＣＲであって、ａ）ＶＨおよ
びＣＨ１抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインとＴＣＲα鎖の膜貫通ドメインを含
む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；ならびにｂ）ＶＬおよびＣＬ抗体ドメ
インを含む第２の抗原結合ドメインとＴＣＲβ鎖の膜貫通ドメインを含む第２のＴＣＲＤ
とを含む第２のポリペプチド鎖、を含み、第１の抗原結合ドメインのＶＨおよびＣＨ１ド
メインと第２の抗原結合ドメインのＶＬおよびＣＬドメインとが、標的抗原に特異的に結
合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形成し、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少
なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴＣＲ
Ｍを形成する、ａｂＴＣＲが提供される。一部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュ
ールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または完全合成である。一部の実施形態では、第
１のＴＣＲＤは、ＴＣＲα鎖の接続ペプチドもしくはその断片をさらに含み、および／ま
たは第２のＴＣＲＤは、ＴＣＲβ鎖の接続ペプチドもしくはその断片をさらに含む。一部
の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、ＴＣＲα鎖の細胞外ドメインの一部分をさらに含み
、および／または第２のＴＣＲＤは、ＴＣＲβ鎖の細胞外ドメインの一部分をさらに含む
。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含み、
および／または第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実
施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメインは、ＴＣＲα鎖の細胞内ドメイン由来の配列を
含み、および／または第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、ＴＣＲβ鎖の細胞内ドメイン由来
の配列を含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例
えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ
４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含
む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、ａｂ
ＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチドおよび／
または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む
。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζからなる群から
選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが
可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進す
る。一部の実施形態では、第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲＤとの間に第１のペプ
チドリンカーが、および／または第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲＤとの間に第２
のペプチドリンカーが存在する。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポ
リペプチド鎖とは、例えば、共有結合（例えば、ペプチド結合または他の化学結合）また
は非共有結合によって連結される。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２の
ポリペプチド鎖とは、ａ）第１のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基と第２のＴＣＲＤの接
続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合；および／またはｂ）第１の抗原結合ドメ
イン中のＣＨ１抗体ドメイン中の残基と第２の抗原結合ドメイン中のＣＬ抗体ドメイン中
の残基との間のジスルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、標的抗原は
細胞表面抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水化物およ
び脂質からなる群から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾患関連抗原
、例えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部の実施形態では、
細胞表面抗原は、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５ＤまたはＦＣＲ
Ｌ５である。一部の実施形態では、標的抗原は、表面提示されたペプチド／ＭＨＣ複合体
である。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例えば、腫瘍
関連抗原またはウイルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク質とを
含む。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタンパク質と
を含み、ペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡ
ＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択されるタンパク
質に由来する。一部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタンパク質で
ある。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。一部の実
施形態では、ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａ０
２は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１である。
びＣＨ１抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインとＴＣＲα鎖の膜貫通ドメインを含
む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；ならびにｂ）ＶＬおよびＣＬ抗体ドメ
インを含む第２の抗原結合ドメインとＴＣＲβ鎖の膜貫通ドメインを含む第２のＴＣＲＤ
とを含む第２のポリペプチド鎖、を含み、第１の抗原結合ドメインのＶＨおよびＣＨ１ド
メインと第２の抗原結合ドメインのＶＬおよびＣＬドメインとが、標的抗原に特異的に結
合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形成し、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少
なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴＣＲ
Ｍを形成する、ａｂＴＣＲが提供される。一部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュ
ールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または完全合成である。一部の実施形態では、第
１のＴＣＲＤは、ＴＣＲα鎖の接続ペプチドもしくはその断片をさらに含み、および／ま
たは第２のＴＣＲＤは、ＴＣＲβ鎖の接続ペプチドもしくはその断片をさらに含む。一部
の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、ＴＣＲα鎖の細胞外ドメインの一部分をさらに含み
、および／または第２のＴＣＲＤは、ＴＣＲβ鎖の細胞外ドメインの一部分をさらに含む
。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含み、
および／または第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実
施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメインは、ＴＣＲα鎖の細胞内ドメイン由来の配列を
含み、および／または第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、ＴＣＲβ鎖の細胞内ドメイン由来
の配列を含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例
えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ
４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含
む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、ａｂ
ＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチドおよび／
または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む
。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζからなる群から
選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが
可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進す
る。一部の実施形態では、第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲＤとの間に第１のペプ
チドリンカーが、および／または第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲＤとの間に第２
のペプチドリンカーが存在する。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポ
リペプチド鎖とは、例えば、共有結合（例えば、ペプチド結合または他の化学結合）また
は非共有結合によって連結される。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２の
ポリペプチド鎖とは、ａ）第１のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基と第２のＴＣＲＤの接
続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合；および／またはｂ）第１の抗原結合ドメ
イン中のＣＨ１抗体ドメイン中の残基と第２の抗原結合ドメイン中のＣＬ抗体ドメイン中
の残基との間のジスルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、標的抗原は
細胞表面抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水化物およ
び脂質からなる群から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾患関連抗原
、例えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部の実施形態では、
細胞表面抗原は、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５ＤまたはＦＣＲ
Ｌ５である。一部の実施形態では、標的抗原は、表面提示されたペプチド／ＭＨＣ複合体
である。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例えば、腫瘍
関連抗原またはウイルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク質とを
含む。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタンパク質と
を含み、ペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡ
ＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択されるタンパク
質に由来する。一部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタンパク質で
ある。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。一部の実
施形態では、ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａ０
２は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１である。
【0159】
一部の実施形態では、標的抗原を特異的に認識するａｂＴＣＲであって、ａ）ＶＨおよ
びＣＨ１抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインとＴＣＲβ鎖の膜貫通ドメインを含
む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；ならびにｂ）ＶＬおよびＣＬ抗体ドメ
インを含む第２の抗原結合ドメインとＴＣＲα鎖の膜貫通ドメインを含む第２のＴＣＲＤ
とを含む第２のポリペプチド鎖、を含み、第１の抗原結合ドメインのＶＨおよびＣＨ１ド
メインと第２の抗原結合ドメインのＶＬおよびＣＬドメインとが、標的抗原に特異的に結
合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形成し、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少
なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴＣＲ
Ｍを形成する、ａｂＴＣＲが提供される。一部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュ
ールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または完全合成である。一部の実施形態では、第
１のＴＣＲＤは、ＴＣＲβ鎖の接続ペプチドもしくはその断片をさらに含み、および／ま
たは第２のＴＣＲＤは、ＴＣＲα鎖の接続ペプチドもしくはその断片をさらに含む。一部
の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、ＴＣＲβ鎖の細胞外ドメインの一部分をさらに含み
、および／または第２のＴＣＲＤは、ＴＣＲα鎖の細胞外ドメインの一部分をさらに含む
。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含み、
および／または第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実
施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメインは、ＴＣＲβ鎖の細胞内ドメイン由来の配列を
含み、および／または第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、ＴＣＲα鎖の細胞内ドメイン由来
の配列を含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例
えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ
４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含
む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、ａｂ
ＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチドおよび／
または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む
。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζからなる群から
選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが
可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進す
る。一部の実施形態では、第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲＤとの間に第１のペプ
チドリンカーが、および／または第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲＤとの間に第２
のペプチドリンカーが存在する。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポ
リペプチド鎖とは、例えば、共有結合（例えば、ペプチド結合または他の化学結合）また
は非共有結合によって連結される。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２の
ポリペプチド鎖とは、ａ）第１のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基と第２のＴＣＲＤの接
続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合；および／またはｂ）第１の抗原結合ドメ
イン中のＣＨ１抗体ドメイン中の残基と第２の抗原結合ドメイン中のＣＬ抗体ドメイン中
の残基との間のジスルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、標的抗原は
細胞表面抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水化物およ
び脂質からなる群から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾患関連抗原
、例えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部の実施形態では、
細胞表面抗原は、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５ＤまたはＦＣＲ
Ｌ５である。一部の実施形態では、標的抗原は、表面提示されたペプチド／ＭＨＣ複合体
である。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例えば、腫瘍
関連抗原またはウイルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク質とを
含む。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタンパク質と
を含み、ペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡ
ＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択されるタンパク
質に由来する。一部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタンパク質で
ある。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。一部の実
施形態では、ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａ０
２は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１である。
びＣＨ１抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインとＴＣＲβ鎖の膜貫通ドメインを含
む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；ならびにｂ）ＶＬおよびＣＬ抗体ドメ
インを含む第２の抗原結合ドメインとＴＣＲα鎖の膜貫通ドメインを含む第２のＴＣＲＤ
とを含む第２のポリペプチド鎖、を含み、第１の抗原結合ドメインのＶＨおよびＣＨ１ド
メインと第２の抗原結合ドメインのＶＬおよびＣＬドメインとが、標的抗原に特異的に結
合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形成し、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少
なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴＣＲ
Ｍを形成する、ａｂＴＣＲが提供される。一部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュ
ールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または完全合成である。一部の実施形態では、第
１のＴＣＲＤは、ＴＣＲβ鎖の接続ペプチドもしくはその断片をさらに含み、および／ま
たは第２のＴＣＲＤは、ＴＣＲα鎖の接続ペプチドもしくはその断片をさらに含む。一部
の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、ＴＣＲβ鎖の細胞外ドメインの一部分をさらに含み
、および／または第２のＴＣＲＤは、ＴＣＲα鎖の細胞外ドメインの一部分をさらに含む
。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含み、
および／または第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実
施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメインは、ＴＣＲβ鎖の細胞内ドメイン由来の配列を
含み、および／または第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、ＴＣＲα鎖の細胞内ドメイン由来
の配列を含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例
えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ
４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含
む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、ａｂ
ＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチドおよび／
または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む
。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζからなる群から
選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが
可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進す
る。一部の実施形態では、第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲＤとの間に第１のペプ
チドリンカーが、および／または第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲＤとの間に第２
のペプチドリンカーが存在する。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポ
リペプチド鎖とは、例えば、共有結合（例えば、ペプチド結合または他の化学結合）また
は非共有結合によって連結される。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２の
ポリペプチド鎖とは、ａ）第１のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基と第２のＴＣＲＤの接
続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合；および／またはｂ）第１の抗原結合ドメ
イン中のＣＨ１抗体ドメイン中の残基と第２の抗原結合ドメイン中のＣＬ抗体ドメイン中
の残基との間のジスルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、標的抗原は
細胞表面抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水化物およ
び脂質からなる群から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾患関連抗原
、例えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部の実施形態では、
細胞表面抗原は、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５ＤまたはＦＣＲ
Ｌ５である。一部の実施形態では、標的抗原は、表面提示されたペプチド／ＭＨＣ複合体
である。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例えば、腫瘍
関連抗原またはウイルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク質とを
含む。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタンパク質と
を含み、ペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡ
ＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択されるタンパク
質に由来する。一部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタンパク質で
ある。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。一部の実
施形態では、ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａ０
２は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１である。
【0160】
一部の実施形態では、標的抗原を特異的に認識するａｂＴＣＲであって、ａ）ＶＨおよ
びＣＨ１抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインとＴＣＲγ鎖の膜貫通ドメインを含
む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；ならびにｂ）ＶＬおよびＣＬ抗体ドメ
インを含む第２の抗原結合ドメインとＴＣＲδ鎖の膜貫通ドメインを含む第２のＴＣＲＤ
とを含む第２のポリペプチド鎖、を含み、第１の抗原結合ドメインのＶＨおよびＣＨ１ド
メインと第２の抗原結合ドメインのＶＬおよびＣＬドメインとが、標的抗原に特異的に結
合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形成し、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少
なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴＣＲ
Ｍを形成する、ａｂＴＣＲが提供される。一部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュ
ールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または完全合成である。一部の実施形態では、第
１のＴＣＲＤは、ＴＣＲγ鎖の接続ペプチドもしくはその断片をさらに含み、および／ま
たは第２のＴＣＲＤは、ＴＣＲδ鎖の接続ペプチドもしくはその断片をさらに含む。一部
の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、ＴＣＲγ鎖の細胞外ドメインの一部分をさらに含み
、および／または第２のＴＣＲＤは、ＴＣＲδ鎖の細胞外ドメインの一部分をさらに含む
。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含み、
および／または第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実
施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメインは、ＴＣＲγ鎖の細胞内ドメイン由来の配列を
含み、および／または第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、ＴＣＲδ鎖の細胞内ドメイン由来
の配列を含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例
えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ
４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含
む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、ａｂ
ＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチドおよび／
または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む
。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζからなる群から
選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが
可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進す
る。一部の実施形態では、第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲＤとの間に第１のペプ
チドリンカーが、および／または第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲＤとの間に第２
のペプチドリンカーが存在する。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポ
リペプチド鎖とは、例えば、共有結合（例えば、ペプチド結合または他の化学結合）また
は非共有結合によって連結される。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２の
ポリペプチド鎖とは、ａ）第１のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基と第２のＴＣＲＤの接
続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合；および／またはｂ）第１の抗原結合ドメ
イン中のＣＨ１抗体ドメイン中の残基と第２の抗原結合ドメイン中のＣＬ抗体ドメイン中
の残基との間のジスルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、標的抗原は
細胞表面抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水化物およ
び脂質からなる群から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾患関連抗原
、例えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部の実施形態では、
細胞表面抗原は、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５ＤまたはＦＣＲ
Ｌ５である。一部の実施形態では、標的抗原は、表面提示されたペプチド／ＭＨＣ複合体
である。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例えば、腫瘍
関連抗原またはウイルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク質とを
含む。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタンパク質と
を含み、ペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡ
ＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択されるタンパク
質に由来する。一部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタンパク質で
ある。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。一部の実
施形態では、ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａ０
２は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１である。
びＣＨ１抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインとＴＣＲγ鎖の膜貫通ドメインを含
む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；ならびにｂ）ＶＬおよびＣＬ抗体ドメ
インを含む第２の抗原結合ドメインとＴＣＲδ鎖の膜貫通ドメインを含む第２のＴＣＲＤ
とを含む第２のポリペプチド鎖、を含み、第１の抗原結合ドメインのＶＨおよびＣＨ１ド
メインと第２の抗原結合ドメインのＶＬおよびＣＬドメインとが、標的抗原に特異的に結
合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形成し、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少
なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴＣＲ
Ｍを形成する、ａｂＴＣＲが提供される。一部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュ
ールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または完全合成である。一部の実施形態では、第
１のＴＣＲＤは、ＴＣＲγ鎖の接続ペプチドもしくはその断片をさらに含み、および／ま
たは第２のＴＣＲＤは、ＴＣＲδ鎖の接続ペプチドもしくはその断片をさらに含む。一部
の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、ＴＣＲγ鎖の細胞外ドメインの一部分をさらに含み
、および／または第２のＴＣＲＤは、ＴＣＲδ鎖の細胞外ドメインの一部分をさらに含む
。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含み、
および／または第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実
施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメインは、ＴＣＲγ鎖の細胞内ドメイン由来の配列を
含み、および／または第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、ＴＣＲδ鎖の細胞内ドメイン由来
の配列を含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例
えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ
４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含
む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、ａｂ
ＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチドおよび／
または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む
。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζからなる群から
選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが
可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進す
る。一部の実施形態では、第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲＤとの間に第１のペプ
チドリンカーが、および／または第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲＤとの間に第２
のペプチドリンカーが存在する。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポ
リペプチド鎖とは、例えば、共有結合（例えば、ペプチド結合または他の化学結合）また
は非共有結合によって連結される。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２の
ポリペプチド鎖とは、ａ）第１のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基と第２のＴＣＲＤの接
続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合；および／またはｂ）第１の抗原結合ドメ
イン中のＣＨ１抗体ドメイン中の残基と第２の抗原結合ドメイン中のＣＬ抗体ドメイン中
の残基との間のジスルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、標的抗原は
細胞表面抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水化物およ
び脂質からなる群から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾患関連抗原
、例えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部の実施形態では、
細胞表面抗原は、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５ＤまたはＦＣＲ
Ｌ５である。一部の実施形態では、標的抗原は、表面提示されたペプチド／ＭＨＣ複合体
である。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例えば、腫瘍
関連抗原またはウイルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク質とを
含む。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタンパク質と
を含み、ペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡ
ＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択されるタンパク
質に由来する。一部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタンパク質で
ある。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。一部の実
施形態では、ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａ０
２は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１である。
【0161】
一部の実施形態では、標的抗原を特異的に認識するａｂＴＣＲであって、ａ）ＶＨおよ
びＣＨ１抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインとＴＣＲδ鎖の膜貫通ドメインを含
む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；ならびにｂ）ＶＬおよびＣＬ抗体ドメ
インを含む第２の抗原結合ドメインとＴＣＲγ鎖の膜貫通ドメインを含む第２のＴＣＲＤ
とを含む第２のポリペプチド鎖、を含み、第１の抗原結合ドメインのＶＨおよびＣＨ１ド
メインと第２の抗原結合ドメインのＶＬおよびＣＬドメインとが、標的抗原に特異的に結
合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形成し、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少
なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴＣＲ
Ｍを形成する、ａｂＴＣＲが提供される。一部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュ
ールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または完全合成である。一部の実施形態では、第
１のＴＣＲＤは、ＴＣＲδ鎖の接続ペプチドもしくはその断片をさらに含み、および／ま
たは第２のＴＣＲＤは、ＴＣＲγ鎖の接続ペプチドもしくはその断片をさらに含む。一部
の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、ＴＣＲδ鎖の細胞外ドメインの一部分をさらに含み
、および／または第２のＴＣＲＤは、ＴＣＲγ鎖の細胞外ドメインの一部分をさらに含む
。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含み、
および／または第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実
施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメインは、ＴＣＲδ鎖の細胞内ドメイン由来の配列を
含み、および／または第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、ＴＣＲγ鎖の細胞内ドメイン由来
の配列を含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例
えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ
４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含
む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、ａｂ
ＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチドおよび／
または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む
。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζからなる群から
選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが
可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進す
る。一部の実施形態では、第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲＤとの間に第１のペプ
チドリンカーが、および／または第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲＤとの間に第２
のペプチドリンカーが存在する。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポ
リペプチド鎖とは、例えば、共有結合（例えば、ペプチド結合または他の化学結合）また
は非共有結合によって連結される。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２の
ポリペプチド鎖とは、ａ）第１のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基と第２のＴＣＲＤの接
続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合；および／またはｂ）第１の抗原結合ドメ
イン中のＣＨ１抗体ドメイン中の残基と第２の抗原結合ドメイン中のＣＬ抗体ドメイン中
の残基との間のジスルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、標的抗原は
細胞表面抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水化物およ
び脂質からなる群から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾患関連抗原
、例えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部の実施形態では、
細胞表面抗原は、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５ＤまたはＦＣＲ
Ｌ５である。一部の実施形態では、標的抗原は、表面提示されたペプチド／ＭＨＣ複合体
である。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例えば、腫瘍
関連抗原またはウイルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク質とを
含む。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタンパク質と
を含み、ペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡ
ＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択されるタンパク
質に由来する。一部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタンパク質で
ある。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。一部の実
施形態では、ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａ０
２は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１である。
びＣＨ１抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインとＴＣＲδ鎖の膜貫通ドメインを含
む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；ならびにｂ）ＶＬおよびＣＬ抗体ドメ
インを含む第２の抗原結合ドメインとＴＣＲγ鎖の膜貫通ドメインを含む第２のＴＣＲＤ
とを含む第２のポリペプチド鎖、を含み、第１の抗原結合ドメインのＶＨおよびＣＨ１ド
メインと第２の抗原結合ドメインのＶＬおよびＣＬドメインとが、標的抗原に特異的に結
合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形成し、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少
なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴＣＲ
Ｍを形成する、ａｂＴＣＲが提供される。一部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュ
ールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または完全合成である。一部の実施形態では、第
１のＴＣＲＤは、ＴＣＲδ鎖の接続ペプチドもしくはその断片をさらに含み、および／ま
たは第２のＴＣＲＤは、ＴＣＲγ鎖の接続ペプチドもしくはその断片をさらに含む。一部
の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、ＴＣＲδ鎖の細胞外ドメインの一部分をさらに含み
、および／または第２のＴＣＲＤは、ＴＣＲγ鎖の細胞外ドメインの一部分をさらに含む
。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含み、
および／または第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実
施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメインは、ＴＣＲδ鎖の細胞内ドメイン由来の配列を
含み、および／または第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、ＴＣＲγ鎖の細胞内ドメイン由来
の配列を含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例
えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ
４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含
む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、ａｂ
ＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチドおよび／
または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む
。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζからなる群から
選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが
可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進す
る。一部の実施形態では、第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲＤとの間に第１のペプ
チドリンカーが、および／または第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲＤとの間に第２
のペプチドリンカーが存在する。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポ
リペプチド鎖とは、例えば、共有結合（例えば、ペプチド結合または他の化学結合）また
は非共有結合によって連結される。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２の
ポリペプチド鎖とは、ａ）第１のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基と第２のＴＣＲＤの接
続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合；および／またはｂ）第１の抗原結合ドメ
イン中のＣＨ１抗体ドメイン中の残基と第２の抗原結合ドメイン中のＣＬ抗体ドメイン中
の残基との間のジスルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、標的抗原は
細胞表面抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水化物およ
び脂質からなる群から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾患関連抗原
、例えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部の実施形態では、
細胞表面抗原は、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５ＤまたはＦＣＲ
Ｌ５である。一部の実施形態では、標的抗原は、表面提示されたペプチド／ＭＨＣ複合体
である。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例えば、腫瘍
関連抗原またはウイルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク質とを
含む。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタンパク質と
を含み、ペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡ
ＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択されるタンパク
質に由来する。一部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタンパク質で
ある。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。一部の実
施形態では、ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａ０
２は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１である。
【0162】
一部の実施形態では、標的抗原を特異的に認識するａｂＴＣＲであって、ａ）ＶＨおよ
びＣＨ１抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインと配列番号１～４のいずれか１つの
アミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）膜貫通ドメインを含む第１のＴＣＲＤとを
含む第１のポリペプチド鎖；ならびにｂ）ＶＬおよびＣＬ抗体ドメインを含む第２の抗原
結合ドメインと配列番号１～４のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（例えば、それから
なる）膜貫通ドメインを含む第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖、を含み、第
１の抗原結合ドメインのＶＨおよびＣＨ１ドメインと第２の抗原結合ドメインのＶＬおよ
びＣＬドメインとが、標的抗原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形成し
、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジ
ュールをリクルートすることが可能なＴＣＲＭを形成する、ａｂＴＣＲが提供される。一
部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成また
は完全合成である。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲサブユニット
の第１の接続ペプチドもしくはその断片をさらに含み、および／または第２のＴＣＲＤは
、第２のＴＣＲサブユニットの第２の接続ペプチドもしくはその断片をさらに含み、第１
および／または第２の接続ペプチドは、配列番号５～１２のいずれか１つのアミノ酸配列
を含む（例えば、それからなる）。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣ
Ｒ細胞内ドメインをさらに含み、および／または第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内
ドメインをさらに含み、第１および／または第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、配列番号１
３～１４のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）。一部の実施形
態では、ａｂＴＣＲは、ａ）配列番号７０もしくは７１のアミノ酸配列を含む（例えば、
それからなる）少なくとも１つのＴ細胞共刺激シグナル伝達配列；および／またはｂ）配
列番号５０～５２のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）エピト
ープタグを含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形
態では、ａｂＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプ
チドおよび／または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチド
をさらに含み、第１および／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸
配列を含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζから
なる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルート
することが可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形
成を促進する。一部の実施形態では、第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲＤとの間に
第１のペプチドリンカーが、および／または第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲＤと
の間に第２のペプチドリンカーが存在する。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖
と第２のポリペプチド鎖とは、例えば、共有結合（例えば、ペプチド結合または他の化学
結合）または非共有結合によって連結される。一部の実施形態では、第１のポリペプチド
鎖と第２のポリペプチド鎖とは、ａ）第１のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基と第２のＴ
ＣＲＤの接続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合；および／またはｂ）第１の抗
原結合ドメイン中のＣＨ１抗体ドメイン中の残基と第２の抗原結合ドメイン中のＣＬ抗体
ドメイン中の残基との間のジスルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、
標的抗原は細胞表面抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭
水化物および脂質からなる群から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾
患関連抗原、例えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部の実施
形態では、細胞表面抗原は、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄま
たはＦＣＲＬ５である。一部の実施形態では、標的抗原は、表面提示されたペプチド／Ｍ
ＨＣ複合体である。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例
えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタン
パク質とを含む。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタ
ンパク質とを含み、ペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－
１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択され
るタンパク質に由来する。一部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタ
ンパク質である。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである
。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、Ｈ
ＬＡ－Ａ０２は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１である。
びＣＨ１抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインと配列番号１～４のいずれか１つの
アミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）膜貫通ドメインを含む第１のＴＣＲＤとを
含む第１のポリペプチド鎖；ならびにｂ）ＶＬおよびＣＬ抗体ドメインを含む第２の抗原
結合ドメインと配列番号１～４のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（例えば、それから
なる）膜貫通ドメインを含む第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖、を含み、第
１の抗原結合ドメインのＶＨおよびＣＨ１ドメインと第２の抗原結合ドメインのＶＬおよ
びＣＬドメインとが、標的抗原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形成し
、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジ
ュールをリクルートすることが可能なＴＣＲＭを形成する、ａｂＴＣＲが提供される。一
部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成また
は完全合成である。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲサブユニット
の第１の接続ペプチドもしくはその断片をさらに含み、および／または第２のＴＣＲＤは
、第２のＴＣＲサブユニットの第２の接続ペプチドもしくはその断片をさらに含み、第１
および／または第２の接続ペプチドは、配列番号５～１２のいずれか１つのアミノ酸配列
を含む（例えば、それからなる）。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣ
Ｒ細胞内ドメインをさらに含み、および／または第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内
ドメインをさらに含み、第１および／または第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、配列番号１
３～１４のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）。一部の実施形
態では、ａｂＴＣＲは、ａ）配列番号７０もしくは７１のアミノ酸配列を含む（例えば、
それからなる）少なくとも１つのＴ細胞共刺激シグナル伝達配列；および／またはｂ）配
列番号５０～５２のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）エピト
ープタグを含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形
態では、ａｂＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプ
チドおよび／または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチド
をさらに含み、第１および／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸
配列を含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζから
なる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルート
することが可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形
成を促進する。一部の実施形態では、第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲＤとの間に
第１のペプチドリンカーが、および／または第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲＤと
の間に第２のペプチドリンカーが存在する。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖
と第２のポリペプチド鎖とは、例えば、共有結合（例えば、ペプチド結合または他の化学
結合）または非共有結合によって連結される。一部の実施形態では、第１のポリペプチド
鎖と第２のポリペプチド鎖とは、ａ）第１のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基と第２のＴ
ＣＲＤの接続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合；および／またはｂ）第１の抗
原結合ドメイン中のＣＨ１抗体ドメイン中の残基と第２の抗原結合ドメイン中のＣＬ抗体
ドメイン中の残基との間のジスルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、
標的抗原は細胞表面抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭
水化物および脂質からなる群から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾
患関連抗原、例えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部の実施
形態では、細胞表面抗原は、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄま
たはＦＣＲＬ５である。一部の実施形態では、標的抗原は、表面提示されたペプチド／Ｍ
ＨＣ複合体である。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例
えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタン
パク質とを含む。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタ
ンパク質とを含み、ペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－
１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択され
るタンパク質に由来する。一部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタ
ンパク質である。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである
。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、Ｈ
ＬＡ－Ａ０２は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１である。
【0163】
一部の実施形態では、標的抗原を特異的に認識するａｂＴＣＲであって、ａ）ＶＨ抗体
ドメインを含む第１の抗原結合ドメインと配列番号１～４のいずれか１つのアミノ酸配列
を含む（例えば、それからなる）膜貫通ドメインを含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポ
リペプチド鎖；およびｂ）ＶＬ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインと配列番号１
～４のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）膜貫通ドメインを含
む第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖、を含み、第１の抗原結合ドメインのＶ
Ｈドメインと第２の抗原結合ドメインのＶＬドメインとが、標的抗原に特異的に結合する
Ｆｖ様抗原結合モジュールを形成し、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少なくとも
１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴＣＲＭを形成
し、標的抗原がペプチド／ＭＨＣ複合体である、ａｂＴＣＲが提供される。一部の実施形
態では、Ｆｖ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または完全合成で
ある。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲサブユニットの第１の接続
ペプチドもしくはその断片をさらに含み、および／または第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣ
Ｒサブユニットの第２の接続ペプチドもしくはその断片をさらに含み、第１および／また
は第２の接続ペプチドは、配列番号５～１２のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（例え
ば、それからなる）。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメ
インをさらに含み、および／または第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインをさ
らに含み、第１および／または第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、配列番号１３～１４のい
ずれか１つのアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）。一部の実施形態では、ａｂ
ＴＣＲは、ａ）配列番号７０もしくは７１のアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる
）少なくとも１つのＴ細胞共刺激シグナル伝達配列；および／またはｂ）配列番号５０～
５２のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）エピトープタグを含
む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、ａｂ
ＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチドおよび／
または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含み
、第１および／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む。
一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζからなる群から選
択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可
能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する
。一部の実施形態では、第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲＤとの間に第１のペプチ
ドリンカーが、および／または第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲＤとの間に第２の
ペプチドリンカーが存在する。一部の実施形態では、第１および第２のペプチドリンカー
は、互いに結合することが可能である。一部の実施形態では、第１および／または第２の
ペプチドリンカーは、免疫グロブリン重鎖および／または軽鎖定常領域に由来する。一部
の実施形態では、第１および／または第２のペプチドリンカーは、ＴＣＲサブユニット定
常領域に由来する。例えば、一部の実施形態では、第１および／または第２のペプチドリ
ンカーは、ａ）ＴＣＲαおよびβサブユニット定常ドメイン；またはｂ）ＴＣＲγおよび
δサブユニット定常ドメインに由来する。一部の実施形態では、第１および／または第２
のペプチドリンカーは、合成である。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２
のポリペプチド鎖とは、例えば、共有結合（例えば、ペプチド結合または他の化学結合）
または非共有結合によって連結される。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第
２のポリペプチド鎖とは、ａ）第１のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基と第２のＴＣＲＤ
の接続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合；および／またはｂ）第１のペプチド
リンカー中の残基と第２のペプチドリンカー中の残基との間のジスルフィド結合を介して
連結される。一部の実施形態では、第１および／または第２のペプチドリンカーは、それ
が由来する配列と比較して、１つまたは複数の改変（例えば、アミノ酸の置換、挿入およ
び／または欠失）を含むバリアントである。一部の実施形態では、第１および／または第
２のペプチドリンカーは、互いに対するそれらの結合親和性を実質的に変更しない１つま
たは複数の改変を含む。一部の実施形態では、第１および／または第２のペプチドリンカ
ーは、互いに対するそれらの結合親和性を増加させるおよび／または天然に存在しないジ
スルフィド結合を導入する１つまたは複数の改変を含む。一部の実施形態では、標的抗原
ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコー
ドする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む。一部の実施形態では、ペ
プチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタンパク質とを含み、ペプチドは、ＷＴ－１
、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、Ｈ
ＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択されるタンパク質に由来する。一部の実施形態
では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタンパク質である。一部の実施形態では、Ｍ
ＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａは、Ｈ
ＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａ０２は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１
である。
ドメインを含む第１の抗原結合ドメインと配列番号１～４のいずれか１つのアミノ酸配列
を含む（例えば、それからなる）膜貫通ドメインを含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポ
リペプチド鎖；およびｂ）ＶＬ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインと配列番号１
～４のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）膜貫通ドメインを含
む第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖、を含み、第１の抗原結合ドメインのＶ
Ｈドメインと第２の抗原結合ドメインのＶＬドメインとが、標的抗原に特異的に結合する
Ｆｖ様抗原結合モジュールを形成し、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少なくとも
１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴＣＲＭを形成
し、標的抗原がペプチド／ＭＨＣ複合体である、ａｂＴＣＲが提供される。一部の実施形
態では、Ｆｖ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または完全合成で
ある。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲサブユニットの第１の接続
ペプチドもしくはその断片をさらに含み、および／または第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣ
Ｒサブユニットの第２の接続ペプチドもしくはその断片をさらに含み、第１および／また
は第２の接続ペプチドは、配列番号５～１２のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（例え
ば、それからなる）。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメ
インをさらに含み、および／または第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインをさ
らに含み、第１および／または第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、配列番号１３～１４のい
ずれか１つのアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）。一部の実施形態では、ａｂ
ＴＣＲは、ａ）配列番号７０もしくは７１のアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる
）少なくとも１つのＴ細胞共刺激シグナル伝達配列；および／またはｂ）配列番号５０～
５２のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）エピトープタグを含
む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、ａｂ
ＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチドおよび／
または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含み
、第１および／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む。
一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζからなる群から選
択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可
能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する
。一部の実施形態では、第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲＤとの間に第１のペプチ
ドリンカーが、および／または第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲＤとの間に第２の
ペプチドリンカーが存在する。一部の実施形態では、第１および第２のペプチドリンカー
は、互いに結合することが可能である。一部の実施形態では、第１および／または第２の
ペプチドリンカーは、免疫グロブリン重鎖および／または軽鎖定常領域に由来する。一部
の実施形態では、第１および／または第２のペプチドリンカーは、ＴＣＲサブユニット定
常領域に由来する。例えば、一部の実施形態では、第１および／または第２のペプチドリ
ンカーは、ａ）ＴＣＲαおよびβサブユニット定常ドメイン；またはｂ）ＴＣＲγおよび
δサブユニット定常ドメインに由来する。一部の実施形態では、第１および／または第２
のペプチドリンカーは、合成である。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２
のポリペプチド鎖とは、例えば、共有結合（例えば、ペプチド結合または他の化学結合）
または非共有結合によって連結される。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第
２のポリペプチド鎖とは、ａ）第１のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基と第２のＴＣＲＤ
の接続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合；および／またはｂ）第１のペプチド
リンカー中の残基と第２のペプチドリンカー中の残基との間のジスルフィド結合を介して
連結される。一部の実施形態では、第１および／または第２のペプチドリンカーは、それ
が由来する配列と比較して、１つまたは複数の改変（例えば、アミノ酸の置換、挿入およ
び／または欠失）を含むバリアントである。一部の実施形態では、第１および／または第
２のペプチドリンカーは、互いに対するそれらの結合親和性を実質的に変更しない１つま
たは複数の改変を含む。一部の実施形態では、第１および／または第２のペプチドリンカ
ーは、互いに対するそれらの結合親和性を増加させるおよび／または天然に存在しないジ
スルフィド結合を導入する１つまたは複数の改変を含む。一部の実施形態では、標的抗原
ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコー
ドする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む。一部の実施形態では、ペ
プチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタンパク質とを含み、ペプチドは、ＷＴ－１
、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、Ｈ
ＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択されるタンパク質に由来する。一部の実施形態
では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタンパク質である。一部の実施形態では、Ｍ
ＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａは、Ｈ
ＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａ０２は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１
である。
【0164】
一部の実施形態では、標的抗原を特異的に認識するａｂＴＣＲであって、ａ）アミノ末
端からカルボキシ末端の順に、ＶＨおよびＣＨ１抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメ
インと、配列番号５～１２のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる
）接続ペプチドを含む第１のＴＣＲＤと、配列番号１～４のいずれか１つのアミノ酸配列
を含む（例えば、それからなる）膜貫通ドメインとを含む第１のポリペプチド鎖；ならび
にｂ）アミノ末端からカルボキシ末端の順に、ＶＬおよびＣＬ抗体ドメインを含む第２の
抗原結合ドメインと、配列番号５～１２のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（例えば、
それからなる）接続ペプチドを含む第２のＴＣＲＤと、配列番号１～４のいずれか１つの
アミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）膜貫通ドメインとを含む第２のポリペプチ
ド鎖、を含み；第１の抗原結合ドメインのＶＨおよびＣＨ１ドメインと第２の抗原結合ド
メインのＶＬおよびＣＬドメインとが、標的抗原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モ
ジュールを形成し、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連
シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴＣＲＭを形成する、ａｂＴＣＲ
が提供される。一部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト化、キ
メラ、半合成または完全合成である。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴ
ＣＲ細胞内ドメインをさらに含み、および／または第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞
内ドメインをさらに含み、第１および／または第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、配列番号
１３～１４のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）。一部の実施
形態では、ａｂＴＣＲは、ａ）配列番号７０もしくは７１のアミノ酸配列を含む（例えば
、それからなる）少なくとも１つのＴ細胞共刺激シグナル伝達配列；および／またはｂ）
配列番号５０～５２のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）エピ
トープタグを含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施
形態では、ａｂＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペ
プチドおよび／または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチ
ドをさらに含み、第１および／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ
酸配列を含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζか
らなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルー
トすることが可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体
形成を促進する。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖と
は、ａ）第１のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基と第２のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残
基との間のジスルフィド結合；および／またはｂ）第１の抗原結合ドメイン中のＣＨ１抗
体ドメイン中の残基と第２の抗原結合ドメイン中のＣＬ抗体ドメイン中の残基との間のジ
スルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、標的抗原は細胞表面抗原であ
る。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水化物および脂質からなる群
から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾患関連抗原、例えば、腫瘍関
連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、
ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５ＤまたはＦＣＲＬ５である。一部
の実施形態では、標的抗原は、表面提示されたペプチド／ＭＨＣ複合体である。一部の実
施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例えば、腫瘍関連抗原またはウ
イルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む。一部の実施
形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタンパク質とを含み、ペプチド
は、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－Ｌ
ＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択されるタンパク質に由来する。一
部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタンパク質である。一部の実施
形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。一部の実施形態では、ＨＬ
Ａ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａ０２は、ＨＬＡ－Ａ
＊０２：０１である。
端からカルボキシ末端の順に、ＶＨおよびＣＨ１抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメ
インと、配列番号５～１２のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる
）接続ペプチドを含む第１のＴＣＲＤと、配列番号１～４のいずれか１つのアミノ酸配列
を含む（例えば、それからなる）膜貫通ドメインとを含む第１のポリペプチド鎖；ならび
にｂ）アミノ末端からカルボキシ末端の順に、ＶＬおよびＣＬ抗体ドメインを含む第２の
抗原結合ドメインと、配列番号５～１２のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（例えば、
それからなる）接続ペプチドを含む第２のＴＣＲＤと、配列番号１～４のいずれか１つの
アミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）膜貫通ドメインとを含む第２のポリペプチ
ド鎖、を含み；第１の抗原結合ドメインのＶＨおよびＣＨ１ドメインと第２の抗原結合ド
メインのＶＬおよびＣＬドメインとが、標的抗原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モ
ジュールを形成し、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連
シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴＣＲＭを形成する、ａｂＴＣＲ
が提供される。一部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト化、キ
メラ、半合成または完全合成である。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴ
ＣＲ細胞内ドメインをさらに含み、および／または第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞
内ドメインをさらに含み、第１および／または第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、配列番号
１３～１４のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）。一部の実施
形態では、ａｂＴＣＲは、ａ）配列番号７０もしくは７１のアミノ酸配列を含む（例えば
、それからなる）少なくとも１つのＴ細胞共刺激シグナル伝達配列；および／またはｂ）
配列番号５０～５２のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）エピ
トープタグを含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施
形態では、ａｂＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペ
プチドおよび／または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチ
ドをさらに含み、第１および／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ
酸配列を含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζか
らなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルー
トすることが可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体
形成を促進する。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖と
は、ａ）第１のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基と第２のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残
基との間のジスルフィド結合；および／またはｂ）第１の抗原結合ドメイン中のＣＨ１抗
体ドメイン中の残基と第２の抗原結合ドメイン中のＣＬ抗体ドメイン中の残基との間のジ
スルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、標的抗原は細胞表面抗原であ
る。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水化物および脂質からなる群
から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾患関連抗原、例えば、腫瘍関
連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、
ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５ＤまたはＦＣＲＬ５である。一部
の実施形態では、標的抗原は、表面提示されたペプチド／ＭＨＣ複合体である。一部の実
施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例えば、腫瘍関連抗原またはウ
イルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む。一部の実施
形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタンパク質とを含み、ペプチド
は、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－Ｌ
ＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択されるタンパク質に由来する。一
部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタンパク質である。一部の実施
形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。一部の実施形態では、ＨＬ
Ａ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａ０２は、ＨＬＡ－Ａ
＊０２：０１である。
【0165】
一部の実施形態では、標的抗原を特異的に認識するａｂＴＣＲであって、ａ）アミノ末
端からカルボキシ末端の順に、ＶＨ抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインと、配列
番号５～１２のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）接続ペプチ
ドを含む第１のＴＣＲＤと、配列番号１～４のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（例え
ば、それからなる）膜貫通ドメインとを含む第１のポリペプチド鎖；およびｂ）アミノ末
端からカルボキシ末端の順に、ＶＬ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインと、配列
番号５～１２のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）接続ペプチ
ドを含む第２のＴＣＲＤと、配列番号１～４のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（例え
ば、それからなる）膜貫通ドメインとを含む第２のポリペプチド鎖、を含み、第１の抗原
結合ドメインのＶＨドメインと第２の抗原結合ドメインのＶＬドメインとが、標的抗原に
特異的に結合するＦｖ様抗原結合モジュールを形成し、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤ
とが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可能
なＴＣＲＭを形成し、標的抗原がペプチド／ＭＨＣ複合体である、ａｂＴＣＲが提供され
る。一部の実施形態では、Ｆｖ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成
または完全合成である。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲサブユニ
ットの第１の接続ペプチドもしくはその断片をさらに含み、および／または第２のＴＣＲ
Ｄは、第２のＴＣＲサブユニットの第２の接続ペプチドもしくはその断片をさらに含み、
第１および／または第２の接続ペプチドは、配列番号５～１２のいずれか１つのアミノ酸
配列を含む（例えば、それからなる）。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１の
ＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含み、および／または第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細
胞内ドメインをさらに含み、第１および／または第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、配列番
号１３～１４のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）。一部の実
施形態では、ａｂＴＣＲは、ａ）配列番号７０もしくは７１のアミノ酸配列を含む（例え
ば、それからなる）少なくとも１つのＴ細胞共刺激シグナル伝達配列；および／またはｂ
）配列番号５０～５２のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）エ
ピトープタグを含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実
施形態では、ａｂＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第１のシグナル
ペプチドおよび／または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプ
チドをさらに含み、第１および／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミ
ノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζ
からなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクル
ートすることが可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合
体形成を促進する。一部の実施形態では、第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲＤとの
間に第１のペプチドリンカーが、および／または第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲ
Ｄとの間に第２のペプチドリンカーが存在する。一部の実施形態では、第１および第２の
ペプチドリンカーは、互いに結合することが可能である。一部の実施形態では、第１およ
び／または第２のペプチドリンカーは、免疫グロブリン重鎖および／または軽鎖定常領域
に由来する。一部の実施形態では、第１および／または第２のペプチドリンカーは、ＴＣ
Ｒサブユニット定常領域に由来する。例えば、一部の実施形態では、第１および／または
第２のペプチドリンカーは、ａ）ＴＣＲαおよびβサブユニット定常ドメイン；またはｂ
）ＴＣＲγおよびδサブユニット定常ドメインに由来する。一部の実施形態では、第１お
よび／または第２のペプチドリンカーは、合成である。一部の実施形態では、第１のポリ
ペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とは、例えば、共有結合（例えば、ペプチド結合また
は他の化学結合）または非共有結合によって連結される。一部の実施形態では、第１のポ
リペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とは、ａ）第１のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基
と第２のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合；および／またはｂ
）第１のペプチドリンカー中の残基と第２のペプチドリンカー中の残基との間のジスルフ
ィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、第１および／または第２のペプチド
リンカーは、それが由来する配列と比較して、１つまたは複数の改変（例えば、アミノ酸
の置換、挿入および／または欠失）を含むバリアントである。一部の実施形態では、第１
および／または第２のペプチドリンカーは、互いに対するそれらの結合親和性を実質的に
変更しない１つまたは複数の改変を含む。一部の実施形態では、第１および／または第２
のペプチドリンカーは、互いに対するそれらの結合親和性を増加させるおよび／または天
然に存在しないジスルフィド結合を導入する１つまたは複数の改変を含む。一部の実施形
態では、標的抗原ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例えば、腫瘍関連抗原また
はウイルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む。一部の
実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタンパク質とを含み、ペプ
チドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ
－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択されるタンパク質に由来する
。一部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタンパク質である。一部の
実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。一部の実施形態では、
ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａ０２は、ＨＬＡ
－Ａ＊０２：０１である。
端からカルボキシ末端の順に、ＶＨ抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインと、配列
番号５～１２のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）接続ペプチ
ドを含む第１のＴＣＲＤと、配列番号１～４のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（例え
ば、それからなる）膜貫通ドメインとを含む第１のポリペプチド鎖；およびｂ）アミノ末
端からカルボキシ末端の順に、ＶＬ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインと、配列
番号５～１２のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）接続ペプチ
ドを含む第２のＴＣＲＤと、配列番号１～４のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（例え
ば、それからなる）膜貫通ドメインとを含む第２のポリペプチド鎖、を含み、第１の抗原
結合ドメインのＶＨドメインと第２の抗原結合ドメインのＶＬドメインとが、標的抗原に
特異的に結合するＦｖ様抗原結合モジュールを形成し、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤ
とが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可能
なＴＣＲＭを形成し、標的抗原がペプチド／ＭＨＣ複合体である、ａｂＴＣＲが提供され
る。一部の実施形態では、Ｆｖ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成
または完全合成である。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲサブユニ
ットの第１の接続ペプチドもしくはその断片をさらに含み、および／または第２のＴＣＲ
Ｄは、第２のＴＣＲサブユニットの第２の接続ペプチドもしくはその断片をさらに含み、
第１および／または第２の接続ペプチドは、配列番号５～１２のいずれか１つのアミノ酸
配列を含む（例えば、それからなる）。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１の
ＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含み、および／または第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細
胞内ドメインをさらに含み、第１および／または第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、配列番
号１３～１４のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）。一部の実
施形態では、ａｂＴＣＲは、ａ）配列番号７０もしくは７１のアミノ酸配列を含む（例え
ば、それからなる）少なくとも１つのＴ細胞共刺激シグナル伝達配列；および／またはｂ
）配列番号５０～５２のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）エ
ピトープタグを含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実
施形態では、ａｂＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第１のシグナル
ペプチドおよび／または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプ
チドをさらに含み、第１および／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミ
ノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζ
からなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクル
ートすることが可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合
体形成を促進する。一部の実施形態では、第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲＤとの
間に第１のペプチドリンカーが、および／または第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲ
Ｄとの間に第２のペプチドリンカーが存在する。一部の実施形態では、第１および第２の
ペプチドリンカーは、互いに結合することが可能である。一部の実施形態では、第１およ
び／または第２のペプチドリンカーは、免疫グロブリン重鎖および／または軽鎖定常領域
に由来する。一部の実施形態では、第１および／または第２のペプチドリンカーは、ＴＣ
Ｒサブユニット定常領域に由来する。例えば、一部の実施形態では、第１および／または
第２のペプチドリンカーは、ａ）ＴＣＲαおよびβサブユニット定常ドメイン；またはｂ
）ＴＣＲγおよびδサブユニット定常ドメインに由来する。一部の実施形態では、第１お
よび／または第２のペプチドリンカーは、合成である。一部の実施形態では、第１のポリ
ペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とは、例えば、共有結合（例えば、ペプチド結合また
は他の化学結合）または非共有結合によって連結される。一部の実施形態では、第１のポ
リペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とは、ａ）第１のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基
と第２のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合；および／またはｂ
）第１のペプチドリンカー中の残基と第２のペプチドリンカー中の残基との間のジスルフ
ィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、第１および／または第２のペプチド
リンカーは、それが由来する配列と比較して、１つまたは複数の改変（例えば、アミノ酸
の置換、挿入および／または欠失）を含むバリアントである。一部の実施形態では、第１
および／または第２のペプチドリンカーは、互いに対するそれらの結合親和性を実質的に
変更しない１つまたは複数の改変を含む。一部の実施形態では、第１および／または第２
のペプチドリンカーは、互いに対するそれらの結合親和性を増加させるおよび／または天
然に存在しないジスルフィド結合を導入する１つまたは複数の改変を含む。一部の実施形
態では、標的抗原ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例えば、腫瘍関連抗原また
はウイルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む。一部の
実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタンパク質とを含み、ペプ
チドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ
－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択されるタンパク質に由来する
。一部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタンパク質である。一部の
実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。一部の実施形態では、
ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａ０２は、ＨＬＡ
－Ａ＊０２：０１である。
【0166】
一部の実施形態では、標的抗原を特異的に認識するａｂＴＣＲであって、ａ）アミノ末
端からカルボキシ末端の順に、第１の抗原結合ドメインと配列番号１５のアミノ酸配列を
含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；およびｂ）アミノ末端からカルボキ
シ末端の順に、第２の抗原結合ドメインと配列番号１６のアミノ酸配列を含む第２のＴＣ
ＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖、を含み；第１の抗原結合ドメインと第２の抗原結合
ドメインとが、標的抗原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形成し、第１
のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュール
をリクルートすることが可能なＴＣＲＭを形成する、ａｂＴＣＲが提供される。一部の実
施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または完全
合成である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、ａ）配列番号７０もしくは７１のアミ
ノ酸配列を含む（例えば、それからなる）少なくとも１つのＴ細胞共刺激シグナル伝達配
列；および／またはｂ）配列番号５０～５２のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（例え
ば、それからなる）エピトープタグを含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインを
さらに含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ末端
側に、第１のシグナルペプチドおよび／または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端側に
、第２のシグナルペプチドをさらに含み、第１および／または第２のシグナルペプチドは
、配列番号４９のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、
ＣＤ３γεおよびζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝
達モジュールをリクルートすることが可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ａ
ｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と
第２のポリペプチド鎖とは、ａ）第１のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基と第２のＴＣＲ
Ｄの接続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合；および／またはｂ）Ｆａｂ様抗原
結合モジュール中のＣＨ１抗体ドメイン中の残基とＣＬ抗体ドメイン中の残基との間のジ
スルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、標的抗原は細胞表面抗原であ
る。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水化物および脂質からなる群
から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾患関連抗原、例えば、腫瘍関
連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、
ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５ＤまたはＦＣＲＬ５である。一部
の実施形態では、標的抗原は、表面提示されたペプチド／ＭＨＣ複合体である。一部の実
施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例えば、腫瘍関連抗原またはウ
イルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む。一部の実施
形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタンパク質とを含み、ペプチド
は、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－Ｌ
ＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択されるタンパク質に由来する。一
部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタンパク質である。一部の実施
形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。一部の実施形態では、ＨＬ
Ａ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａ０２は、ＨＬＡ－Ａ
＊０２：０１である。
端からカルボキシ末端の順に、第１の抗原結合ドメインと配列番号１５のアミノ酸配列を
含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；およびｂ）アミノ末端からカルボキ
シ末端の順に、第２の抗原結合ドメインと配列番号１６のアミノ酸配列を含む第２のＴＣ
ＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖、を含み；第１の抗原結合ドメインと第２の抗原結合
ドメインとが、標的抗原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形成し、第１
のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュール
をリクルートすることが可能なＴＣＲＭを形成する、ａｂＴＣＲが提供される。一部の実
施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または完全
合成である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、ａ）配列番号７０もしくは７１のアミ
ノ酸配列を含む（例えば、それからなる）少なくとも１つのＴ細胞共刺激シグナル伝達配
列；および／またはｂ）配列番号５０～５２のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（例え
ば、それからなる）エピトープタグを含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインを
さらに含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ末端
側に、第１のシグナルペプチドおよび／または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端側に
、第２のシグナルペプチドをさらに含み、第１および／または第２のシグナルペプチドは
、配列番号４９のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、
ＣＤ３γεおよびζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝
達モジュールをリクルートすることが可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ａ
ｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と
第２のポリペプチド鎖とは、ａ）第１のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基と第２のＴＣＲ
Ｄの接続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合；および／またはｂ）Ｆａｂ様抗原
結合モジュール中のＣＨ１抗体ドメイン中の残基とＣＬ抗体ドメイン中の残基との間のジ
スルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、標的抗原は細胞表面抗原であ
る。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水化物および脂質からなる群
から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾患関連抗原、例えば、腫瘍関
連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、
ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５ＤまたはＦＣＲＬ５である。一部
の実施形態では、標的抗原は、表面提示されたペプチド／ＭＨＣ複合体である。一部の実
施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例えば、腫瘍関連抗原またはウ
イルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む。一部の実施
形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタンパク質とを含み、ペプチド
は、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－Ｌ
ＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択されるタンパク質に由来する。一
部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタンパク質である。一部の実施
形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。一部の実施形態では、ＨＬ
Ａ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａ０２は、ＨＬＡ－Ａ
＊０２：０１である。
【0167】
一部の実施形態では、標的抗原を特異的に認識するａｂＴＣＲであって、ａ）アミノ末
端からカルボキシ末端の順に、第１の抗原結合ドメインと配列番号１７のアミノ酸配列を
含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；およびｂ）アミノ末端からカルボキ
シ末端の順に、第２の抗原結合ドメインと配列番号１８のアミノ酸配列を含む第２のＴＣ
ＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖、を含み；第１の抗原結合ドメインと第２の抗原結合
ドメインとが、標的抗原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形成し、第１
のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュール
をリクルートすることが可能なＴＣＲＭを形成する、ａｂＴＣＲが提供される。一部の実
施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または完全
合成である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、ａ）配列番号７０もしくは７１のアミ
ノ酸配列を含む（例えば、それからなる）少なくとも１つのＴ細胞共刺激シグナル伝達配
列；および／またはｂ）配列番号５０～５２のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（例え
ば、それからなる）エピトープタグを含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインを
さらに含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ末端
側に、第１のシグナルペプチドおよび／または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端側に
、第２のシグナルペプチドをさらに含み、第１および／または第２のシグナルペプチドは
、配列番号４９のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、
ＣＤ３γεおよびζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝
達モジュールをリクルートすることが可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ａ
ｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と
第２のポリペプチド鎖とは、ａ）第１のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基と第２のＴＣＲ
Ｄの接続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合；および／またはｂ）Ｆａｂ様抗原
結合モジュール中のＣＨ１抗体ドメイン中の残基とＣＬ抗体ドメイン中の残基との間のジ
スルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、標的抗原は細胞表面抗原であ
る。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水化物および脂質からなる群
から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾患関連抗原、例えば、腫瘍関
連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、
ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５ＤまたはＦＣＲＬ５である。一部
の実施形態では、標的抗原は、表面提示されたペプチド／ＭＨＣ複合体である。一部の実
施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例えば、腫瘍関連抗原またはウ
イルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む。一部の実施
形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタンパク質とを含み、ペプチド
は、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－Ｌ
ＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択されるタンパク質に由来する。一
部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタンパク質である。一部の実施
形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。一部の実施形態では、ＨＬ
Ａ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａ０２は、ＨＬＡ－Ａ
＊０２：０１である。
端からカルボキシ末端の順に、第１の抗原結合ドメインと配列番号１７のアミノ酸配列を
含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；およびｂ）アミノ末端からカルボキ
シ末端の順に、第２の抗原結合ドメインと配列番号１８のアミノ酸配列を含む第２のＴＣ
ＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖、を含み；第１の抗原結合ドメインと第２の抗原結合
ドメインとが、標的抗原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形成し、第１
のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュール
をリクルートすることが可能なＴＣＲＭを形成する、ａｂＴＣＲが提供される。一部の実
施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または完全
合成である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、ａ）配列番号７０もしくは７１のアミ
ノ酸配列を含む（例えば、それからなる）少なくとも１つのＴ細胞共刺激シグナル伝達配
列；および／またはｂ）配列番号５０～５２のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（例え
ば、それからなる）エピトープタグを含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインを
さらに含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ末端
側に、第１のシグナルペプチドおよび／または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端側に
、第２のシグナルペプチドをさらに含み、第１および／または第２のシグナルペプチドは
、配列番号４９のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、
ＣＤ３γεおよびζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝
達モジュールをリクルートすることが可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ａ
ｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と
第２のポリペプチド鎖とは、ａ）第１のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基と第２のＴＣＲ
Ｄの接続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合；および／またはｂ）Ｆａｂ様抗原
結合モジュール中のＣＨ１抗体ドメイン中の残基とＣＬ抗体ドメイン中の残基との間のジ
スルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、標的抗原は細胞表面抗原であ
る。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水化物および脂質からなる群
から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾患関連抗原、例えば、腫瘍関
連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、
ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５ＤまたはＦＣＲＬ５である。一部
の実施形態では、標的抗原は、表面提示されたペプチド／ＭＨＣ複合体である。一部の実
施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例えば、腫瘍関連抗原またはウ
イルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む。一部の実施
形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタンパク質とを含み、ペプチド
は、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－Ｌ
ＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択されるタンパク質に由来する。一
部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタンパク質である。一部の実施
形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。一部の実施形態では、ＨＬ
Ａ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａ０２は、ＨＬＡ－Ａ
＊０２：０１である。
【0168】
一部の実施形態では、標的抗原を特異的に認識するａｂＴＣＲであって、ａ）アミノ末
端からカルボキシ末端の順に、第１の抗原結合ドメインと配列番号１９のアミノ酸配列を
含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；およびｂ）アミノ末端からカルボキ
シ末端の順に、第２の抗原結合ドメインと配列番号２０のアミノ酸配列を含む第２のＴＣ
ＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖、を含み；第１の抗原結合ドメインと第２の抗原結合
ドメインとが、標的抗原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形成し、第１
のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュール
をリクルートすることが可能なＴＣＲＭを形成する、ａｂＴＣＲが提供される。一部の実
施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または完全
合成である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、ａ）配列番号７０もしくは７１のアミ
ノ酸配列を含む（例えば、それからなる）少なくとも１つのＴ細胞共刺激シグナル伝達配
列；および／またはｂ）配列番号５０～５２のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（例え
ば、それからなる）エピトープタグを含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインを
さらに含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ末端
側に、第１のシグナルペプチドおよび／または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端側に
、第２のシグナルペプチドをさらに含み、第１および／または第２のシグナルペプチドは
、配列番号４９のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、
ＣＤ３γεおよびζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝
達モジュールをリクルートすることが可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ａ
ｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と
第２のポリペプチド鎖とは、ａ）第１のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基と第２のＴＣＲ
Ｄの接続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合；および／またはｂ）Ｆａｂ様抗原
結合モジュール中のＣＨ１抗体ドメイン中の残基とＣＬ抗体ドメイン中の残基との間のジ
スルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、標的抗原は細胞表面抗原であ
る。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水化物および脂質からなる群
から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾患関連抗原、例えば、腫瘍関
連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、
ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５ＤまたはＦＣＲＬ５である。一部
の実施形態では、標的抗原は、表面提示されたペプチド／ＭＨＣ複合体である。一部の実
施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例えば、腫瘍関連抗原またはウ
イルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む。一部の実施
形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタンパク質とを含み、ペプチド
は、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－Ｌ
ＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択されるタンパク質に由来する。一
部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタンパク質である。一部の実施
形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。一部の実施形態では、ＨＬ
Ａ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａ０２は、ＨＬＡ－Ａ
＊０２：０１である。
端からカルボキシ末端の順に、第１の抗原結合ドメインと配列番号１９のアミノ酸配列を
含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；およびｂ）アミノ末端からカルボキ
シ末端の順に、第２の抗原結合ドメインと配列番号２０のアミノ酸配列を含む第２のＴＣ
ＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖、を含み；第１の抗原結合ドメインと第２の抗原結合
ドメインとが、標的抗原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形成し、第１
のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュール
をリクルートすることが可能なＴＣＲＭを形成する、ａｂＴＣＲが提供される。一部の実
施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または完全
合成である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、ａ）配列番号７０もしくは７１のアミ
ノ酸配列を含む（例えば、それからなる）少なくとも１つのＴ細胞共刺激シグナル伝達配
列；および／またはｂ）配列番号５０～５２のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（例え
ば、それからなる）エピトープタグを含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインを
さらに含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ末端
側に、第１のシグナルペプチドおよび／または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端側に
、第２のシグナルペプチドをさらに含み、第１および／または第２のシグナルペプチドは
、配列番号４９のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、
ＣＤ３γεおよびζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝
達モジュールをリクルートすることが可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ａ
ｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と
第２のポリペプチド鎖とは、ａ）第１のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基と第２のＴＣＲ
Ｄの接続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合；および／またはｂ）Ｆａｂ様抗原
結合モジュール中のＣＨ１抗体ドメイン中の残基とＣＬ抗体ドメイン中の残基との間のジ
スルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、標的抗原は細胞表面抗原であ
る。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水化物および脂質からなる群
から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾患関連抗原、例えば、腫瘍関
連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、
ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５ＤまたはＦＣＲＬ５である。一部
の実施形態では、標的抗原は、表面提示されたペプチド／ＭＨＣ複合体である。一部の実
施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例えば、腫瘍関連抗原またはウ
イルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む。一部の実施
形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタンパク質とを含み、ペプチド
は、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－Ｌ
ＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択されるタンパク質に由来する。一
部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタンパク質である。一部の実施
形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。一部の実施形態では、ＨＬ
Ａ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａ０２は、ＨＬＡ－Ａ
＊０２：０１である。
【0169】
一部の実施形態では、標的抗原を特異的に認識するａｂＴＣＲであって、ａ）アミノ末
端からカルボキシ末端の順に、第１の抗原結合ドメインと配列番号２１のアミノ酸配列を
含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；およびｂ）アミノ末端からカルボキ
シ末端の順に、第２の抗原結合ドメインと配列番号２２のアミノ酸配列を含む第２のＴＣ
ＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖、を含み；第１の抗原結合ドメインと第２の抗原結合
ドメインとが、標的抗原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形成し、第１
のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュール
をリクルートすることが可能なＴＣＲＭを形成する、ａｂＴＣＲが提供される。一部の実
施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または完全
合成である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、ａ）配列番号７０もしくは７１のアミ
ノ酸配列を含む（例えば、それからなる）少なくとも１つのＴ細胞共刺激シグナル伝達配
列；および／またはｂ）配列番号５０～５２のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（例え
ば、それからなる）エピトープタグを含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインを
さらに含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ末端
側に、第１のシグナルペプチドおよび／または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端側に
、第２のシグナルペプチドをさらに含み、第１および／または第２のシグナルペプチドは
、配列番号４９のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、
ＣＤ３γεおよびζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝
達モジュールをリクルートすることが可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ａ
ｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と
第２のポリペプチド鎖とは、ａ）第１のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基と第２のＴＣＲ
Ｄの接続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合；および／またはｂ）Ｆａｂ様抗原
結合モジュール中のＣＨ１抗体ドメイン中の残基とＣＬ抗体ドメイン中の残基との間のジ
スルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、標的抗原は細胞表面抗原であ
る。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水化物および脂質からなる群
から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾患関連抗原、例えば、腫瘍関
連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、
ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５ＤまたはＦＣＲＬ５である。一部
の実施形態では、標的抗原は、表面提示されたペプチド／ＭＨＣ複合体である。一部の実
施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例えば、腫瘍関連抗原またはウ
イルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む。一部の実施
形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタンパク質とを含み、ペプチド
は、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－Ｌ
ＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択されるタンパク質に由来する。一
部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタンパク質である。一部の実施
形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。一部の実施形態では、ＨＬ
Ａ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａ０２は、ＨＬＡ－Ａ
＊０２：０１である。
端からカルボキシ末端の順に、第１の抗原結合ドメインと配列番号２１のアミノ酸配列を
含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；およびｂ）アミノ末端からカルボキ
シ末端の順に、第２の抗原結合ドメインと配列番号２２のアミノ酸配列を含む第２のＴＣ
ＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖、を含み；第１の抗原結合ドメインと第２の抗原結合
ドメインとが、標的抗原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形成し、第１
のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュール
をリクルートすることが可能なＴＣＲＭを形成する、ａｂＴＣＲが提供される。一部の実
施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または完全
合成である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、ａ）配列番号７０もしくは７１のアミ
ノ酸配列を含む（例えば、それからなる）少なくとも１つのＴ細胞共刺激シグナル伝達配
列；および／またはｂ）配列番号５０～５２のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（例え
ば、それからなる）エピトープタグを含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインを
さらに含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ末端
側に、第１のシグナルペプチドおよび／または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端側に
、第２のシグナルペプチドをさらに含み、第１および／または第２のシグナルペプチドは
、配列番号４９のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、
ＣＤ３γεおよびζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝
達モジュールをリクルートすることが可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ａ
ｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と
第２のポリペプチド鎖とは、ａ）第１のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基と第２のＴＣＲ
Ｄの接続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合；および／またはｂ）Ｆａｂ様抗原
結合モジュール中のＣＨ１抗体ドメイン中の残基とＣＬ抗体ドメイン中の残基との間のジ
スルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、標的抗原は細胞表面抗原であ
る。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水化物および脂質からなる群
から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾患関連抗原、例えば、腫瘍関
連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、
ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５ＤまたはＦＣＲＬ５である。一部
の実施形態では、標的抗原は、表面提示されたペプチド／ＭＨＣ複合体である。一部の実
施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例えば、腫瘍関連抗原またはウ
イルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む。一部の実施
形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタンパク質とを含み、ペプチド
は、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－Ｌ
ＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択されるタンパク質に由来する。一
部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタンパク質である。一部の実施
形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。一部の実施形態では、ＨＬ
Ａ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａ０２は、ＨＬＡ－Ａ
＊０２：０１である。
【0170】
一部の実施形態では、ＡＦＰペプチドおよびＭＨＣ Ｉタンパク質を含む複合体を特異
的に認識するａｂＴＣＲであって、ａ）配列番号２３のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴ
ＣＲドメインを含む第１のポリペプチド鎖；およびｂ）配列番号２４のアミノ酸配列を含
む第２のａｂＴＣＲドメインを含む第２のポリペプチド鎖を含む、ａｂＴＣＲが提供され
る。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とは、１つまた
は複数のジスルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ
細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）
、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、Ｈ
Ａ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに
含む。一部の実施形態では、エピトープタグは、配列番号５０～５２のアミノ酸配列のい
ずれか１つを含む。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲド
メインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチドをさらに含み、および／または第２の
ポリペプチド鎖は、第２のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチ
ドをさらに含む。一部の実施形態では、第１および／または第２のシグナルペプチドは、
配列番号４９のアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）。
的に認識するａｂＴＣＲであって、ａ）配列番号２３のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴ
ＣＲドメインを含む第１のポリペプチド鎖；およびｂ）配列番号２４のアミノ酸配列を含
む第２のａｂＴＣＲドメインを含む第２のポリペプチド鎖を含む、ａｂＴＣＲが提供され
る。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とは、１つまた
は複数のジスルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ
細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）
、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、Ｈ
Ａ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに
含む。一部の実施形態では、エピトープタグは、配列番号５０～５２のアミノ酸配列のい
ずれか１つを含む。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲド
メインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチドをさらに含み、および／または第２の
ポリペプチド鎖は、第２のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチ
ドをさらに含む。一部の実施形態では、第１および／または第２のシグナルペプチドは、
配列番号４９のアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）。
【0171】
一部の実施形態では、ＡＦＰペプチドおよびＭＨＣ Ｉタンパク質を含む複合体を特異
的に認識するａｂＴＣＲであって、ａ）配列番号２５のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴ
ＣＲドメインを含む第１のポリペプチド鎖；およびｂ）配列番号２６のアミノ酸配列を含
む第２のａｂＴＣＲドメインを含む第２のポリペプチド鎖を含む、ａｂＴＣＲが提供され
る。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とは、１つまた
は複数のジスルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ
細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）
、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、Ｈ
Ａ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに
含む。一部の実施形態では、エピトープタグは、配列番号５０～５２のアミノ酸配列のい
ずれか１つを含む。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲド
メインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチドをさらに含み、および／または第２の
ポリペプチド鎖は、第２のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチ
ドをさらに含む。一部の実施形態では、第１および／または第２のシグナルペプチドは、
配列番号４９のアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）。
的に認識するａｂＴＣＲであって、ａ）配列番号２５のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴ
ＣＲドメインを含む第１のポリペプチド鎖；およびｂ）配列番号２６のアミノ酸配列を含
む第２のａｂＴＣＲドメインを含む第２のポリペプチド鎖を含む、ａｂＴＣＲが提供され
る。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とは、１つまた
は複数のジスルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ
細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）
、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、Ｈ
Ａ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに
含む。一部の実施形態では、エピトープタグは、配列番号５０～５２のアミノ酸配列のい
ずれか１つを含む。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲド
メインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチドをさらに含み、および／または第２の
ポリペプチド鎖は、第２のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチ
ドをさらに含む。一部の実施形態では、第１および／または第２のシグナルペプチドは、
配列番号４９のアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）。
【0172】
一部の実施形態では、ＡＦＰペプチドおよびＭＨＣ Ｉタンパク質を含む複合体を特異
的に認識するａｂＴＣＲであって、ａ）配列番号２７のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴ
ＣＲドメインを含む第１のポリペプチド鎖；およびｂ）配列番号２８のアミノ酸配列を含
む第２のａｂＴＣＲドメインを含む第２のポリペプチド鎖を含む、ａｂＴＣＲが提供され
る。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とは、１つまた
は複数のジスルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ
細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）
、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、Ｈ
Ａ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに
含む。一部の実施形態では、エピトープタグは、配列番号５０～５２のアミノ酸配列のい
ずれか１つを含む。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲド
メインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチドをさらに含み、および／または第２の
ポリペプチド鎖は、第２のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチ
ドをさらに含む。一部の実施形態では、第１および／または第２のシグナルペプチドは、
配列番号４９のアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）。
的に認識するａｂＴＣＲであって、ａ）配列番号２７のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴ
ＣＲドメインを含む第１のポリペプチド鎖；およびｂ）配列番号２８のアミノ酸配列を含
む第２のａｂＴＣＲドメインを含む第２のポリペプチド鎖を含む、ａｂＴＣＲが提供され
る。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とは、１つまた
は複数のジスルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ
細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）
、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、Ｈ
Ａ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに
含む。一部の実施形態では、エピトープタグは、配列番号５０～５２のアミノ酸配列のい
ずれか１つを含む。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲド
メインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチドをさらに含み、および／または第２の
ポリペプチド鎖は、第２のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチ
ドをさらに含む。一部の実施形態では、第１および／または第２のシグナルペプチドは、
配列番号４９のアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）。
【0173】
一部の実施形態では、ＡＦＰペプチドおよびＭＨＣ Ｉタンパク質を含む複合体を特異
的に認識するａｂＴＣＲであって、ａ）配列番号２９のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴ
ＣＲドメインを含む第１のポリペプチド鎖；およびｂ）配列番号３０のアミノ酸配列を含
む第２のａｂＴＣＲドメインを含む第２のポリペプチド鎖を含む、ａｂＴＣＲが提供され
る。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とは、１つまた
は複数のジスルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ
細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）
、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、Ｈ
Ａ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに
含む。一部の実施形態では、エピトープタグは、配列番号５０～５２のアミノ酸配列のい
ずれか１つを含む。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲド
メインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチドをさらに含み、および／または第２の
ポリペプチド鎖は、第２のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチ
ドをさらに含む。一部の実施形態では、第１および／または第２のシグナルペプチドは、
配列番号４９のアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）。
的に認識するａｂＴＣＲであって、ａ）配列番号２９のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴ
ＣＲドメインを含む第１のポリペプチド鎖；およびｂ）配列番号３０のアミノ酸配列を含
む第２のａｂＴＣＲドメインを含む第２のポリペプチド鎖を含む、ａｂＴＣＲが提供され
る。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とは、１つまた
は複数のジスルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ
細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）
、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、Ｈ
Ａ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに
含む。一部の実施形態では、エピトープタグは、配列番号５０～５２のアミノ酸配列のい
ずれか１つを含む。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲド
メインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチドをさらに含み、および／または第２の
ポリペプチド鎖は、第２のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチ
ドをさらに含む。一部の実施形態では、第１および／または第２のシグナルペプチドは、
配列番号４９のアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）。
【0174】
一部の実施形態では、ＡＦＰペプチドおよびＭＨＣ Ｉタンパク質を含む複合体を特異
的に認識するａｂＴＣＲであって、ａ）配列番号３１のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴ
ＣＲドメインを含む第１のポリペプチド鎖；およびｂ）配列番号３２のアミノ酸配列を含
む第２のａｂＴＣＲドメインを含む第２のポリペプチド鎖を含む、ａｂＴＣＲが提供され
る。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とは、１つまた
は複数のジスルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ
細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）
、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、Ｈ
Ａ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに
含む。一部の実施形態では、エピトープタグは、配列番号５０～５２のアミノ酸配列のい
ずれか１つを含む。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲド
メインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチドをさらに含み、および／または第２の
ポリペプチド鎖は、第２のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチ
ドをさらに含む。一部の実施形態では、第１および／または第２のシグナルペプチドは、
配列番号４９のアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）。
的に認識するａｂＴＣＲであって、ａ）配列番号３１のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴ
ＣＲドメインを含む第１のポリペプチド鎖；およびｂ）配列番号３２のアミノ酸配列を含
む第２のａｂＴＣＲドメインを含む第２のポリペプチド鎖を含む、ａｂＴＣＲが提供され
る。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とは、１つまた
は複数のジスルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ
細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）
、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、Ｈ
Ａ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに
含む。一部の実施形態では、エピトープタグは、配列番号５０～５２のアミノ酸配列のい
ずれか１つを含む。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲド
メインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチドをさらに含み、および／または第２の
ポリペプチド鎖は、第２のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチ
ドをさらに含む。一部の実施形態では、第１および／または第２のシグナルペプチドは、
配列番号４９のアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）。
【0175】
一部の実施形態では、ＡＦＰペプチドおよびＭＨＣ Ｉタンパク質を含む複合体を特異
的に認識するａｂＴＣＲであって、ａ）配列番号３３のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴ
ＣＲドメインを含む第１のポリペプチド鎖；およびｂ）配列番号３４のアミノ酸配列を含
む第２のａｂＴＣＲドメインを含む第２のポリペプチド鎖を含む、ａｂＴＣＲが提供され
る。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とは、１つまた
は複数のジスルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ
細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）
、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、Ｈ
Ａ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに
含む。一部の実施形態では、エピトープタグは、配列番号５０～５２のアミノ酸配列のい
ずれか１つを含む。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲド
メインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチドをさらに含み、および／または第２の
ポリペプチド鎖は、第２のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチ
ドをさらに含む。一部の実施形態では、第１および／または第２のシグナルペプチドは、
配列番号４９のアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）。
的に認識するａｂＴＣＲであって、ａ）配列番号３３のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴ
ＣＲドメインを含む第１のポリペプチド鎖；およびｂ）配列番号３４のアミノ酸配列を含
む第２のａｂＴＣＲドメインを含む第２のポリペプチド鎖を含む、ａｂＴＣＲが提供され
る。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とは、１つまた
は複数のジスルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ
細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）
、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、Ｈ
Ａ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに
含む。一部の実施形態では、エピトープタグは、配列番号５０～５２のアミノ酸配列のい
ずれか１つを含む。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲド
メインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチドをさらに含み、および／または第２の
ポリペプチド鎖は、第２のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチ
ドをさらに含む。一部の実施形態では、第１および／または第２のシグナルペプチドは、
配列番号４９のアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）。
【0176】
一部の実施形態では、ＡＦＰペプチドおよびＭＨＣ Ｉタンパク質を含む複合体を特異
的に認識するａｂＴＣＲであって、ａ）配列番号３５のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴ
ＣＲドメインを含む第１のポリペプチド鎖；およびｂ）配列番号３６のアミノ酸配列を含
む第２のａｂＴＣＲドメインを含む第２のポリペプチド鎖を含む、ａｂＴＣＲが提供され
る。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とは、１つまた
は複数のジスルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ
細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）
、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、Ｈ
Ａ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに
含む。一部の実施形態では、エピトープタグは、配列番号５０～５２のアミノ酸配列のい
ずれか１つを含む。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲド
メインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチドをさらに含み、および／または第２の
ポリペプチド鎖は、第２のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチ
ドをさらに含む。一部の実施形態では、第１および／または第２のシグナルペプチドは、
配列番号４９のアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）。
的に認識するａｂＴＣＲであって、ａ）配列番号３５のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴ
ＣＲドメインを含む第１のポリペプチド鎖；およびｂ）配列番号３６のアミノ酸配列を含
む第２のａｂＴＣＲドメインを含む第２のポリペプチド鎖を含む、ａｂＴＣＲが提供され
る。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とは、１つまた
は複数のジスルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ
細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）
、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、Ｈ
Ａ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに
含む。一部の実施形態では、エピトープタグは、配列番号５０～５２のアミノ酸配列のい
ずれか１つを含む。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲド
メインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチドをさらに含み、および／または第２の
ポリペプチド鎖は、第２のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチ
ドをさらに含む。一部の実施形態では、第１および／または第２のシグナルペプチドは、
配列番号４９のアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）。
【0177】
一部の実施形態では、ＡＦＰペプチドおよびＭＨＣ Ｉタンパク質を含む複合体を特異
的に認識するａｂＴＣＲであって、配列番号３８のアミノ酸配列を含む（一部の実施形態
ではそれからなる）ＶＨ抗体ドメイン、または少なくとも約９５％（例えば、少なくとも
約９６％、９７％、９８％または９９％のいずれか）の配列同一性を有するそのバリアン
ト、および配列番号４０のアミノ酸配列を含む（一部の実施形態ではそれからなる）ＶＬ
抗体ドメイン、または少なくとも約９５％（例えば、少なくとも約９６％、９７％、９８
％または９９％のいずれか）の配列同一性を有するそのバリアントを含む抗原結合モジュ
ールを含む、ａｂＴＣＲが提供される。
的に認識するａｂＴＣＲであって、配列番号３８のアミノ酸配列を含む（一部の実施形態
ではそれからなる）ＶＨ抗体ドメイン、または少なくとも約９５％（例えば、少なくとも
約９６％、９７％、９８％または９９％のいずれか）の配列同一性を有するそのバリアン
ト、および配列番号４０のアミノ酸配列を含む（一部の実施形態ではそれからなる）ＶＬ
抗体ドメイン、または少なくとも約９５％（例えば、少なくとも約９６％、９７％、９８
％または９９％のいずれか）の配列同一性を有するそのバリアントを含む抗原結合モジュ
ールを含む、ａｂＴＣＲが提供される。
【0178】
したがって、一部の実施形態では、上記ａｂＴＣＲのいずれかにしたがう、ＡＦＰペプ
チドおよびＭＨＣ Ｉタンパク質を含む複合体を特異的に認識するａｂＴＣＲであって、
Ｆａｂ様抗原結合モジュールのＶＨ抗体ドメインが、配列番号３８のアミノ酸配列を含む
（一部の実施形態ではそれからなる）配列、または少なくとも約９５％（例えば、少なく
とも約９６％、９７％、９８％または９９％のいずれか）の配列同一性を有するそのバリ
アントで置き換えられ、Ｆａｂ様抗原結合モジュールのＶＬ抗体ドメインが、配列番号４
０のアミノ酸配列を含む（一部の実施形態ではそれからなる）配列、または少なくとも約
９５％（例えば、少なくとも約９６％、９７％、９８％または９９％のいずれか）の配列
同一性を有するそのバリアントで置き換えられる、ａｂＴＣＲが提供される。
チドおよびＭＨＣ Ｉタンパク質を含む複合体を特異的に認識するａｂＴＣＲであって、
Ｆａｂ様抗原結合モジュールのＶＨ抗体ドメインが、配列番号３８のアミノ酸配列を含む
（一部の実施形態ではそれからなる）配列、または少なくとも約９５％（例えば、少なく
とも約９６％、９７％、９８％または９９％のいずれか）の配列同一性を有するそのバリ
アントで置き換えられ、Ｆａｂ様抗原結合モジュールのＶＬ抗体ドメインが、配列番号４
０のアミノ酸配列を含む（一部の実施形態ではそれからなる）配列、または少なくとも約
９５％（例えば、少なくとも約９６％、９７％、９８％または９９％のいずれか）の配列
同一性を有するそのバリアントで置き換えられる、ａｂＴＣＲが提供される。
【0179】
一部の実施形態では、ＣＤ１９を特異的に認識するａｂＴＣＲであって、ａ）配列番号
４２のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲドメインを含む第１のポリペプチド鎖；およ
びｂ）配列番号４３のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣＲドメインを含む第２のポリペ
プチド鎖を含む、ａｂＴＣＲが提供される。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖
と第２のポリペプチド鎖とは、１つまたは複数のジスルフィド結合を介して連結される。
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７
、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）およ
び／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも１
つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピトープタグは、
配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形態では、第１の
ポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチ
ドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴＣＲドメインの
アミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態では、第１およ
び／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む（例えば、そ
れからなる）。
４２のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲドメインを含む第１のポリペプチド鎖；およ
びｂ）配列番号４３のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣＲドメインを含む第２のポリペ
プチド鎖を含む、ａｂＴＣＲが提供される。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖
と第２のポリペプチド鎖とは、１つまたは複数のジスルフィド結合を介して連結される。
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７
、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）およ
び／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも１
つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピトープタグは、
配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形態では、第１の
ポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチ
ドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴＣＲドメインの
アミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態では、第１およ
び／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む（例えば、そ
れからなる）。
【0180】
一部の実施形態では、ＣＤ１９を特異的に認識するａｂＴＣＲであって、ａ）配列番号
４２のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲドメインを含む第１のポリペプチド鎖；およ
びｂ）配列番号５４のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣＲドメインを含む第２のポリペ
プチド鎖を含む、ａｂＴＣＲが提供される。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖
と第２のポリペプチド鎖とは、１つまたは複数のジスルフィド結合を介して連結される。
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７
、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）およ
び／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも１
つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピトープタグは、
配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形態では、第１の
ポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチ
ドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴＣＲドメインの
アミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態では、第１およ
び／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む（例えば、そ
れからなる）。
４２のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲドメインを含む第１のポリペプチド鎖；およ
びｂ）配列番号５４のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣＲドメインを含む第２のポリペ
プチド鎖を含む、ａｂＴＣＲが提供される。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖
と第２のポリペプチド鎖とは、１つまたは複数のジスルフィド結合を介して連結される。
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７
、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）およ
び／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも１
つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピトープタグは、
配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形態では、第１の
ポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチ
ドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴＣＲドメインの
アミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態では、第１およ
び／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む（例えば、そ
れからなる）。
【0181】
一部の実施形態では、ＣＤ１９を特異的に認識するａｂＴＣＲであって、ａ）配列番号
５５のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲドメインを含む第１のポリペプチド鎖；およ
びｂ）配列番号５４のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣＲドメインを含む第２のポリペ
プチド鎖を含む、ａｂＴＣＲが提供される。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖
と第２のポリペプチド鎖とは、１つまたは複数のジスルフィド結合を介して連結される。
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７
、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）およ
び／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも１
つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピトープタグは、
配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形態では、第１の
ポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチ
ドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴＣＲドメインの
アミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態では、第１およ
び／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む（例えば、そ
れからなる）。
５５のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲドメインを含む第１のポリペプチド鎖；およ
びｂ）配列番号５４のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣＲドメインを含む第２のポリペ
プチド鎖を含む、ａｂＴＣＲが提供される。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖
と第２のポリペプチド鎖とは、１つまたは複数のジスルフィド結合を介して連結される。
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７
、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）およ
び／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも１
つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピトープタグは、
配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形態では、第１の
ポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチ
ドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴＣＲドメインの
アミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態では、第１およ
び／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む（例えば、そ
れからなる）。
【0182】
一部の実施形態では、ＣＤ１９を特異的に認識するａｂＴＣＲであって、ａ）配列番号
５６のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲドメインを含む第１のポリペプチド鎖；およ
びｂ）配列番号５４のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣＲドメインを含む第２のポリペ
プチド鎖を含む、ａｂＴＣＲが提供される。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖
と第２のポリペプチド鎖とは、１つまたは複数のジスルフィド結合を介して連結される。
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７
、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）およ
び／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも１
つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピトープタグは、
配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形態では、第１の
ポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチ
ドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴＣＲドメインの
アミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態では、第１およ
び／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む（例えば、そ
れからなる）。
５６のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲドメインを含む第１のポリペプチド鎖；およ
びｂ）配列番号５４のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣＲドメインを含む第２のポリペ
プチド鎖を含む、ａｂＴＣＲが提供される。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖
と第２のポリペプチド鎖とは、１つまたは複数のジスルフィド結合を介して連結される。
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７
、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）およ
び／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも１
つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピトープタグは、
配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形態では、第１の
ポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチ
ドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴＣＲドメインの
アミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態では、第１およ
び／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む（例えば、そ
れからなる）。
【0183】
一部の実施形態では、ＣＤ１９を特異的に認識する、本明細書に記載される実施形態の
いずれかにしたがうａｂＴＣＲであって、配列番号４５のアミノ酸配列を含む（一部の実
施形態ではそれからなる）ＶＨ抗体ドメイン、または少なくとも約９５％（例えば、少な
くとも約９６％、９７％、９８％または９９％のいずれか）の配列同一性を有するそのバ
リアント、および配列番号４６のアミノ酸配列を含む（一部の実施形態ではそれからなる
）ＶＬ抗体ドメイン、または少なくとも約９５％（例えば、少なくとも約９６％、９７％
、９８％または９９％のいずれか）の配列同一性を有するそのバリアントを含む抗原結合
モジュールを含む、ａｂＴＣＲが提供される。
いずれかにしたがうａｂＴＣＲであって、配列番号４５のアミノ酸配列を含む（一部の実
施形態ではそれからなる）ＶＨ抗体ドメイン、または少なくとも約９５％（例えば、少な
くとも約９６％、９７％、９８％または９９％のいずれか）の配列同一性を有するそのバ
リアント、および配列番号４６のアミノ酸配列を含む（一部の実施形態ではそれからなる
）ＶＬ抗体ドメイン、または少なくとも約９５％（例えば、少なくとも約９６％、９７％
、９８％または９９％のいずれか）の配列同一性を有するそのバリアントを含む抗原結合
モジュールを含む、ａｂＴＣＲが提供される。
【0184】
一部の実施形態では、ＣＤ１９を特異的に認識する、本明細書に記載される実施形態の
いずれかにしたがうａｂＴＣＲであって、配列番号４５のアミノ酸配列を含む（一部の実
施形態ではそれからなる）ＶＨ抗体ドメイン、または少なくとも約９５％（例えば、少な
くとも約９６％、９７％、９８％または９９％のいずれか）の配列同一性を有するそのバ
リアント、および配列番号５７のアミノ酸配列を含む（一部の実施形態ではそれからなる
）ＶＬ抗体ドメイン、または少なくとも約９５％（例えば、少なくとも約９６％、９７％
、９８％または９９％のいずれか）の配列同一性を有するそのバリアントを含む抗原結合
モジュールを含む、ａｂＴＣＲが提供される。
いずれかにしたがうａｂＴＣＲであって、配列番号４５のアミノ酸配列を含む（一部の実
施形態ではそれからなる）ＶＨ抗体ドメイン、または少なくとも約９５％（例えば、少な
くとも約９６％、９７％、９８％または９９％のいずれか）の配列同一性を有するそのバ
リアント、および配列番号５７のアミノ酸配列を含む（一部の実施形態ではそれからなる
）ＶＬ抗体ドメイン、または少なくとも約９５％（例えば、少なくとも約９６％、９７％
、９８％または９９％のいずれか）の配列同一性を有するそのバリアントを含む抗原結合
モジュールを含む、ａｂＴＣＲが提供される。
【0185】
一部の実施形態では、ＣＤ１９を特異的に認識する、本明細書に記載される実施形態の
いずれかにしたがうａｂＴＣＲであって、配列番号５８のアミノ酸配列を含む（一部の実
施形態ではそれからなる）ＶＨ抗体ドメイン、または少なくとも約９５％（例えば、少な
くとも約９６％、９７％、９８％または９９％のいずれか）の配列同一性を有するそのバ
リアント、および配列番号５７のアミノ酸配列を含む（一部の実施形態ではそれからなる
）ＶＬ抗体ドメイン、または少なくとも約９５％（例えば、少なくとも約９６％、９７％
、９８％または９９％のいずれか）の配列同一性を有するそのバリアントを含む抗原結合
モジュールを含む、ａｂＴＣＲが提供される。
いずれかにしたがうａｂＴＣＲであって、配列番号５８のアミノ酸配列を含む（一部の実
施形態ではそれからなる）ＶＨ抗体ドメイン、または少なくとも約９５％（例えば、少な
くとも約９６％、９７％、９８％または９９％のいずれか）の配列同一性を有するそのバ
リアント、および配列番号５７のアミノ酸配列を含む（一部の実施形態ではそれからなる
）ＶＬ抗体ドメイン、または少なくとも約９５％（例えば、少なくとも約９６％、９７％
、９８％または９９％のいずれか）の配列同一性を有するそのバリアントを含む抗原結合
モジュールを含む、ａｂＴＣＲが提供される。
【0186】
一部の実施形態では、ＣＤ１９を特異的に認識する、本明細書に記載される実施形態の
いずれかにしたがうａｂＴＣＲであって、配列番号５９のアミノ酸配列を含む（一部の実
施形態ではそれからなる）ＶＨ抗体ドメイン、または少なくとも約９５％（例えば、少な
くとも約９６％、９７％、９８％または９９％のいずれか）の配列同一性を有するそのバ
リアント、および配列番号５７のアミノ酸配列を含む（一部の実施形態ではそれからなる
）ＶＬ抗体ドメイン、または少なくとも約９５％（例えば、少なくとも約９６％、９７％
、９８％または９９％のいずれか）の配列同一性を有するそのバリアントを含む抗原結合
モジュールを含む、ａｂＴＣＲが提供される。
いずれかにしたがうａｂＴＣＲであって、配列番号５９のアミノ酸配列を含む（一部の実
施形態ではそれからなる）ＶＨ抗体ドメイン、または少なくとも約９５％（例えば、少な
くとも約９６％、９７％、９８％または９９％のいずれか）の配列同一性を有するそのバ
リアント、および配列番号５７のアミノ酸配列を含む（一部の実施形態ではそれからなる
）ＶＬ抗体ドメイン、または少なくとも約９５％（例えば、少なくとも約９６％、９７％
、９８％または９９％のいずれか）の配列同一性を有するそのバリアントを含む抗原結合
モジュールを含む、ａｂＴＣＲが提供される。
【0187】
一部の実施形態では、ＮＹ－ＥＳＯ－１ １５７－１６５ペプチドおよびＭＨＣ Ｉタ
ンパク質を含む複合体を特異的に認識する、本明細書に記載される実施形態のいずれかに
したがうａｂＴＣＲであって、配列番号７２のアミノ酸配列を含む（一部の実施形態では
それからなる）ＶＨ抗体ドメイン、または少なくとも約９５％（例えば、少なくとも約９
６％、９７％、９８％または９９％のいずれか）の配列同一性を有するそのバリアント、
および配列番号７３のアミノ酸配列を含む（一部の実施形態ではそれからなる）ＶＬ抗体
ドメイン、または少なくとも約９５％（例えば、少なくとも約９６％、９７％、９８％ま
たは９９％のいずれか）の配列同一性を有するそのバリアントを含む抗原結合モジュール
を含む、ａｂＴＣＲが提供される。
ンパク質を含む複合体を特異的に認識する、本明細書に記載される実施形態のいずれかに
したがうａｂＴＣＲであって、配列番号７２のアミノ酸配列を含む（一部の実施形態では
それからなる）ＶＨ抗体ドメイン、または少なくとも約９５％（例えば、少なくとも約９
６％、９７％、９８％または９９％のいずれか）の配列同一性を有するそのバリアント、
および配列番号７３のアミノ酸配列を含む（一部の実施形態ではそれからなる）ＶＬ抗体
ドメイン、または少なくとも約９５％（例えば、少なくとも約９６％、９７％、９８％ま
たは９９％のいずれか）の配列同一性を有するそのバリアントを含む抗原結合モジュール
を含む、ａｂＴＣＲが提供される。
【0188】
一部の実施形態では、本明細書に記載されるａｂＴＣＲのいずれかにしたがう、標的抗
原への結合について第２の抗原結合モジュールと競合する第１の抗原結合モジュールを含
むａｂＴＣＲが提供される。一部の実施形態では、第１の抗原結合モジュールは、第２の
抗原結合モジュールと同じまたは実質的に同じエピトープに結合する。一部の実施形態で
は、標的抗原への第１の抗原結合モジュールの結合は、標的抗原への第２の抗原結合モジ
ュールの結合を、少なくとも約７０％（例えば、少なくとも約７５％、８０％、８５％、
９０％、９５％、９８％または９９％のいずれか）阻害し、または逆もまた同様である。
一部の実施形態では、第１の抗原結合モジュールおよび第２の抗原結合モジュールは、標
的抗原への結合について交差競合する、即ち、第１および第２の抗原結合モジュールの各
々は、標的抗原への結合について他方と競合する。
原への結合について第２の抗原結合モジュールと競合する第１の抗原結合モジュールを含
むａｂＴＣＲが提供される。一部の実施形態では、第１の抗原結合モジュールは、第２の
抗原結合モジュールと同じまたは実質的に同じエピトープに結合する。一部の実施形態で
は、標的抗原への第１の抗原結合モジュールの結合は、標的抗原への第２の抗原結合モジ
ュールの結合を、少なくとも約７０％（例えば、少なくとも約７５％、８０％、８５％、
９０％、９５％、９８％または９９％のいずれか）阻害し、または逆もまた同様である。
一部の実施形態では、第１の抗原結合モジュールおよび第２の抗原結合モジュールは、標
的抗原への結合について交差競合する、即ち、第１および第２の抗原結合モジュールの各
々は、標的抗原への結合について他方と競合する。
【0189】
一部の実施形態では、本明細書に記載されるａｂＴＣＲのいずれかにしたがうａｂＴＣ
Ｒであって、第１の抗原結合ドメインがＶＬおよびＣＨ１抗体ドメインを含み、第２の抗
原結合ドメインがＶＨおよびＣＬ抗体ドメインを含むように、ＶＬおよびＶＨドメインが
相互交換される、ａｂＴＣＲが提供される。
Ｒであって、第１の抗原結合ドメインがＶＬおよびＣＨ１抗体ドメインを含み、第２の抗
原結合ドメインがＶＨおよびＣＬ抗体ドメインを含むように、ＶＬおよびＶＨドメインが
相互交換される、ａｂＴＣＲが提供される。
【0190】
一部の実施形態では、本明細書に記載されるａｂＴＣＲのいずれかにしたがうａｂＴＣ
Ｒと、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζからなる群から選択される少なくとも１つのシ
グナル伝達モジュールとを含む複合体が提供される。一部の実施形態では、複合体は、Ｃ
Ｄ３δε、ＣＤ３γεおよびζζの各々を含む。したがって、一部の実施形態では、ａｂ
ＴＣＲ、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζを含む複合体が提供される。
Ｒと、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζからなる群から選択される少なくとも１つのシ
グナル伝達モジュールとを含む複合体が提供される。一部の実施形態では、複合体は、Ｃ
Ｄ３δε、ＣＤ３γεおよびζζの各々を含む。したがって、一部の実施形態では、ａｂ
ＴＣＲ、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζを含む複合体が提供される。
【0191】
異なる態様は、以下の種々のセクションにおいてさらに詳細に議論される。
【0192】
核酸
ａｂＴＣＲをコードする核酸分子もまた企図される。一部の実施形態では、本明細書に
記載されるａｂＴＣＲのいずれかによれば、ａｂＴＣＲをコードする核酸（または核酸の
セット）が提供される。
ａｂＴＣＲをコードする核酸分子もまた企図される。一部の実施形態では、本明細書に
記載されるａｂＴＣＲのいずれかによれば、ａｂＴＣＲをコードする核酸（または核酸の
セット）が提供される。
【0193】
本発明は、本発明の核酸が挿入されたベクターもまた提供する。
【0194】
簡潔にまとめると、ａｂＴＣＲをコードする核酸によるａｂＴＣＲの発現は、その核酸
が、例えば、プロモーター（例えば、リンパ球特異的プロモーター）および３’非翻訳領
域（ＵＴＲ）を含む５’および３’調節エレメントに作動可能に連結するように、適切な
発現ベクター中に核酸を挿入することによって達成され得る。ベクターは、真核生物宿主
細胞における複製および組込みに適切であり得る。典型的なクローニングベクターおよび
発現ベクターは、転写ターミネーターおよび翻訳ターミネーター、開始配列、ならびに所
望の核酸配列の発現の調節に有用なプロモーターを含む。
が、例えば、プロモーター（例えば、リンパ球特異的プロモーター）および３’非翻訳領
域（ＵＴＲ）を含む５’および３’調節エレメントに作動可能に連結するように、適切な
発現ベクター中に核酸を挿入することによって達成され得る。ベクターは、真核生物宿主
細胞における複製および組込みに適切であり得る。典型的なクローニングベクターおよび
発現ベクターは、転写ターミネーターおよび翻訳ターミネーター、開始配列、ならびに所
望の核酸配列の発現の調節に有用なプロモーターを含む。
【0195】
本発明の核酸はまた、標準的な遺伝子送達プロトコールを使用して、核酸免疫および遺
伝子治療のために使用され得る。遺伝子送達のための方法は、当該分野で公知である。例
えば、それらの全体が参照によって本明細書に組み込まれる米国特許第５，３９９，３４
６号、同第５，５８０，８５９号、同第５，５８９，４６６号を参照のこと。一部の実施
形態では、本発明は、遺伝子治療ベクターを提供する。
伝子治療のために使用され得る。遺伝子送達のための方法は、当該分野で公知である。例
えば、それらの全体が参照によって本明細書に組み込まれる米国特許第５，３９９，３４
６号、同第５，５８０，８５９号、同第５，５８９，４６６号を参照のこと。一部の実施
形態では、本発明は、遺伝子治療ベクターを提供する。
【0196】
核酸は、いくつかの型のベクター中にクローニングされ得る。例えば、核酸は、プラス
ミド、ファージミド、ファージ誘導体、動物ウイルスおよびコスミドが含まれるがこれら
に限定されないベクター中にクローニングされ得る。特に目的とするベクターには、発現
ベクター、複製ベクター、プローブ生成ベクターおよび配列決定ベクターが含まれる。
ミド、ファージミド、ファージ誘導体、動物ウイルスおよびコスミドが含まれるがこれら
に限定されないベクター中にクローニングされ得る。特に目的とするベクターには、発現
ベクター、複製ベクター、プローブ生成ベクターおよび配列決定ベクターが含まれる。
【0197】
さらに、発現ベクターは、ウイルスベクターの形態で細胞に提供され得る。ウイルスベ
クターテクノロジーは、当該分野で周知であり、例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋら（２００１
年、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ： Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ
、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ）
中、ならびに他のウイルス学および分子生物学のマニュアル中に記載されている。ベクタ
ーとして有用なウイルスには、レトロウイルス、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、
ヘルペスウイルスおよびレンチウイルスが含まれるがこれらに限定されない。一般に、適
切なベクターは、少なくとも１種の生物において機能的な複製起点、プロモーター配列、
簡便な制限エンドヌクレアーゼ部位、および１または複数の選択可能なマーカーを含む（
例えば、ＷＯ０１／９６５８４；ＷＯ０１／２９０５８；および米国特許第６，３２６，
１９３号を参照のこと）。
クターテクノロジーは、当該分野で周知であり、例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋら（２００１
年、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ： Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ
、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ）
中、ならびに他のウイルス学および分子生物学のマニュアル中に記載されている。ベクタ
ーとして有用なウイルスには、レトロウイルス、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、
ヘルペスウイルスおよびレンチウイルスが含まれるがこれらに限定されない。一般に、適
切なベクターは、少なくとも１種の生物において機能的な複製起点、プロモーター配列、
簡便な制限エンドヌクレアーゼ部位、および１または複数の選択可能なマーカーを含む（
例えば、ＷＯ０１／９６５８４；ＷＯ０１／２９０５８；および米国特許第６，３２６，
１９３号を参照のこと）。
【0198】
いくつかのウイルスベースの系が、哺乳動物細胞中への遺伝子移入のために開発されて
いる。例えば、レトロウイルスは、遺伝子送達系のための簡便なプラットフォームを提供
する。選択された遺伝子は、当該分野で公知の技術を使用して、ベクター中に挿入され得
、レトロウイルス粒子中にパッケージングされ得る。次いで、組換えウイルスは、単離さ
れ得、ｉｎ ｖｉｖｏまたはｅｘ ｖｉｖｏのいずれかで、対象の細胞に送達され得る。
いくつかのレトロウイルス系が、当該分野で公知である。一部の実施形態では、アデノウ
イルスベクターが使用される。いくつかのアデノウイルスベクターが、当該分野で公知で
ある。一部の実施形態では、レンチウイルスベクターが使用される。レンチウイルスなど
のレトロウイルスに由来するベクターは、導入遺伝子の長期の安定な組込みおよび娘細胞
におけるその伝播を可能にするので、長期遺伝子移入を達成するのに適切なツールである
。レンチウイルスベクターは、肝細胞などの非増殖性細胞を形質導入できるという点で、
マウス白血病ウイルスなどのオンコ－レトロウイルス（ｏｎｃｏ－ｒｅｔｒｏｖｉｒｕｓ
）に由来するベクターを越えるさらなる利点を有する。これらは、低い免疫原性のさらな
る利点もまた有する。
いる。例えば、レトロウイルスは、遺伝子送達系のための簡便なプラットフォームを提供
する。選択された遺伝子は、当該分野で公知の技術を使用して、ベクター中に挿入され得
、レトロウイルス粒子中にパッケージングされ得る。次いで、組換えウイルスは、単離さ
れ得、ｉｎ ｖｉｖｏまたはｅｘ ｖｉｖｏのいずれかで、対象の細胞に送達され得る。
いくつかのレトロウイルス系が、当該分野で公知である。一部の実施形態では、アデノウ
イルスベクターが使用される。いくつかのアデノウイルスベクターが、当該分野で公知で
ある。一部の実施形態では、レンチウイルスベクターが使用される。レンチウイルスなど
のレトロウイルスに由来するベクターは、導入遺伝子の長期の安定な組込みおよび娘細胞
におけるその伝播を可能にするので、長期遺伝子移入を達成するのに適切なツールである
。レンチウイルスベクターは、肝細胞などの非増殖性細胞を形質導入できるという点で、
マウス白血病ウイルスなどのオンコ－レトロウイルス（ｏｎｃｏ－ｒｅｔｒｏｖｉｒｕｓ
）に由来するベクターを越えるさらなる利点を有する。これらは、低い免疫原性のさらな
る利点もまた有する。
【0199】
さらなるプロモーターエレメント、例えば、エンハンサーは、転写開始の頻度を調節す
る。典型的には、これらは、開始部位の３０～１１０ｂｐ上流の領域中に位置するが、い
くつかのプロモーターは、開始部位の下流にも機能的エレメントを含むことが最近示され
ている。プロモーターエレメント間のスペーシングは、エレメントが互いに対して反転さ
れるまたは移動される場合にプロモーター機能が保存されるように、しばしば柔軟である
。チミジンキナーゼ（ｔｋ）プロモーターでは、プロモーターエレメント間のスペーシン
グは、活性が減退し始める前に、５０ｂｐ離れて増加され得る。
る。典型的には、これらは、開始部位の３０～１１０ｂｐ上流の領域中に位置するが、い
くつかのプロモーターは、開始部位の下流にも機能的エレメントを含むことが最近示され
ている。プロモーターエレメント間のスペーシングは、エレメントが互いに対して反転さ
れるまたは移動される場合にプロモーター機能が保存されるように、しばしば柔軟である
。チミジンキナーゼ（ｔｋ）プロモーターでは、プロモーターエレメント間のスペーシン
グは、活性が減退し始める前に、５０ｂｐ離れて増加され得る。
【0200】
適切なプロモーターの一例は、最初期サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）プロモーター配
列である。このプロモーター配列は、それに作用的に連結した任意のポリヌクレオチド配
列の高いレベルの発現を駆動することが可能な強い構成的プロモーター配列である。適切
なプロモーターの別の例は、伸長成長因子（Ｅｌｏｎｇａｔｉｏｎ Ｇｒｏｗｔｈ Ｆａ
ｃｔｏｒ）－１α（ＥＦ－１α）である。しかし、サルウイルス４０（ＳＶ４０）初期プ
ロモーター、マウス乳癌ウイルス（ＭＭＴＶ）、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）の長い
末端反復（ＬＴＲ）プロモーター、ＭｏＭｕＬＶプロモーター、トリ白血病ウイルスプロ
モーター、エプスタイン・バーウイルス最初期プロモーター、ラウス肉腫ウイルスプロモ
ーター、ならびに、これらに限定されないが、アクチンプロモーター、ミオシンプロモー
ター、ヘモグロビンプロモーターおよびクレアチンキナーゼプロモーターなどのヒト遺伝
子プロモーターが含まれるがこれらに限定されない、他の構成的プロモーター配列もまた
使用され得る。さらに、本発明は、構成的プロモーターの使用に限定されるべきではない
。誘導性プロモーターもまた、本発明の一部として企図される。誘導性プロモーターの使
用は、かかる発現が所望される場合には作用的に連結したポリヌクレオチド配列の発現の
スイッチをオンにし、または発現が所望されない場合には発現のスイッチをオフにするこ
とが可能な分子スイッチを提供する。誘導性プロモーターの例には、メタロチオネイン（
ｍｅｔａｌｌｏｔｈｉｏｎｉｎｅ）プロモーター、グルココルチコイドプロモーター、プ
ロゲステロンプロモーターおよびテトラサイクリンプロモーターが含まれるがこれらに限
定されない。
列である。このプロモーター配列は、それに作用的に連結した任意のポリヌクレオチド配
列の高いレベルの発現を駆動することが可能な強い構成的プロモーター配列である。適切
なプロモーターの別の例は、伸長成長因子（Ｅｌｏｎｇａｔｉｏｎ Ｇｒｏｗｔｈ Ｆａ
ｃｔｏｒ）－１α（ＥＦ－１α）である。しかし、サルウイルス４０（ＳＶ４０）初期プ
ロモーター、マウス乳癌ウイルス（ＭＭＴＶ）、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）の長い
末端反復（ＬＴＲ）プロモーター、ＭｏＭｕＬＶプロモーター、トリ白血病ウイルスプロ
モーター、エプスタイン・バーウイルス最初期プロモーター、ラウス肉腫ウイルスプロモ
ーター、ならびに、これらに限定されないが、アクチンプロモーター、ミオシンプロモー
ター、ヘモグロビンプロモーターおよびクレアチンキナーゼプロモーターなどのヒト遺伝
子プロモーターが含まれるがこれらに限定されない、他の構成的プロモーター配列もまた
使用され得る。さらに、本発明は、構成的プロモーターの使用に限定されるべきではない
。誘導性プロモーターもまた、本発明の一部として企図される。誘導性プロモーターの使
用は、かかる発現が所望される場合には作用的に連結したポリヌクレオチド配列の発現の
スイッチをオンにし、または発現が所望されない場合には発現のスイッチをオフにするこ
とが可能な分子スイッチを提供する。誘導性プロモーターの例には、メタロチオネイン（
ｍｅｔａｌｌｏｔｈｉｏｎｉｎｅ）プロモーター、グルココルチコイドプロモーター、プ
ロゲステロンプロモーターおよびテトラサイクリンプロモーターが含まれるがこれらに限
定されない。
【0201】
さらに、本発明は、構成的プロモーターの使用に限定されるべきではない。誘導性プロ
モーターもまた、本発明の一部として企図される。誘導性プロモーターの使用は、かかる
発現が所望される場合には作用的に連結したポリヌクレオチド配列の発現のスイッチをオ
ンにし、または発現が所望されない場合には発現のスイッチをオフにすることが可能な分
子スイッチを提供する。真核生物細胞における使用のための例示的な誘導性プロモーター
系には、ホルモン調節されるエレメント（例えば、Mader, S.およびWhite, J. H.（１
９９３年）Proc. Natl. Acad. Sci. USA ９０巻：５６０３～５６０７頁を参照のこ
と）、合成リガンド調節されるエレメント（例えば、Spencer, D. M.ら（１９９３年）
Science ２６２巻：１０１９～１０２４頁を参照のこと）および電離放射線調節される
エレメント（例えば、Manome, Y.ら（１９９３年）Biochemistry ３２巻：１０６０７
～１０６１３頁；Datta, R.ら（１９９２年）Proc. Natl. Acad. Sci. USA ８９巻
：１０１４～１０１５３頁を参照のこと）が含まれるがこれらに限定されない。ｉｎ ｖ
ｉｔｒｏまたはｉｎ ｖｉｖｏ哺乳動物系における使用のためのさらなる例示的な誘導性
プロモーター系は、Gingrichら（１９９８年）Annual Rev. Neurosci ２１巻：３７７
～４０５頁に概説されている。
モーターもまた、本発明の一部として企図される。誘導性プロモーターの使用は、かかる
発現が所望される場合には作用的に連結したポリヌクレオチド配列の発現のスイッチをオ
ンにし、または発現が所望されない場合には発現のスイッチをオフにすることが可能な分
子スイッチを提供する。真核生物細胞における使用のための例示的な誘導性プロモーター
系には、ホルモン調節されるエレメント（例えば、Mader, S.およびWhite, J. H.（１
９９３年）Proc. Natl. Acad. Sci. USA ９０巻：５６０３～５６０７頁を参照のこ
と）、合成リガンド調節されるエレメント（例えば、Spencer, D. M.ら（１９９３年）
Science ２６２巻：１０１９～１０２４頁を参照のこと）および電離放射線調節される
エレメント（例えば、Manome, Y.ら（１９９３年）Biochemistry ３２巻：１０６０７
～１０６１３頁；Datta, R.ら（１９９２年）Proc. Natl. Acad. Sci. USA ８９巻
：１０１４～１０１５３頁を参照のこと）が含まれるがこれらに限定されない。ｉｎ ｖ
ｉｔｒｏまたはｉｎ ｖｉｖｏ哺乳動物系における使用のためのさらなる例示的な誘導性
プロモーター系は、Gingrichら（１９９８年）Annual Rev. Neurosci ２１巻：３７７
～４０５頁に概説されている。
【0202】
本発明における使用のための例示的な誘導性プロモーター系は、Ｔｅｔ系である。かか
る系は、Gossenら（１９９３年）によって記載されたＴｅｔ系に基づく。例示的な実施形
態では、目的のポリヌクレオチドは、１つまたは複数のＴｅｔオペレーター（ＴｅｔＯ）
部位を含むプロモーターの制御下にある。不活性状態では、Ｔｅｔリプレッサー（Ｔｅｔ
Ｒ）がＴｅｔＯ部位に結合し、プロモーターからの転写を抑制する。活性状態では、例え
ば、テトラサイクリン（Ｔｃ）、アンヒドロテトラサイクリン、ドキシサイクリン（Ｄｏ
ｘ）、またはそれらの活性アナログなどの誘導剤の存在下では、誘導剤は、ＴｅｔＯから
のＴｅｔＲの放出を引き起こし、それによって、転写が起こるのを可能にする。ドキシサ
イクリンは、１－ジメチルアミノ－２，４ａ，５，７，１２－ペンタヒドロキシ－１１－
メチル－４，６－ジオキソ－１，４ａ，１１，１１ａ，１２，１２ａ－ヘキサヒドロテト
ラセン－３－カルボキサミドの化学名を有する、テトラサイクリンファミリーの抗生物質
のメンバーである。
る系は、Gossenら（１９９３年）によって記載されたＴｅｔ系に基づく。例示的な実施形
態では、目的のポリヌクレオチドは、１つまたは複数のＴｅｔオペレーター（ＴｅｔＯ）
部位を含むプロモーターの制御下にある。不活性状態では、Ｔｅｔリプレッサー（Ｔｅｔ
Ｒ）がＴｅｔＯ部位に結合し、プロモーターからの転写を抑制する。活性状態では、例え
ば、テトラサイクリン（Ｔｃ）、アンヒドロテトラサイクリン、ドキシサイクリン（Ｄｏ
ｘ）、またはそれらの活性アナログなどの誘導剤の存在下では、誘導剤は、ＴｅｔＯから
のＴｅｔＲの放出を引き起こし、それによって、転写が起こるのを可能にする。ドキシサ
イクリンは、１－ジメチルアミノ－２，４ａ，５，７，１２－ペンタヒドロキシ－１１－
メチル－４，６－ジオキソ－１，４ａ，１１，１１ａ，１２，１２ａ－ヘキサヒドロテト
ラセン－３－カルボキサミドの化学名を有する、テトラサイクリンファミリーの抗生物質
のメンバーである。
【0203】
一実施形態では、ＴｅｔＲは、哺乳動物細胞、例えば、マウスまたはヒト細胞における
発現のために、コドン最適化される。ほとんどのアミノ酸は、遺伝コードの縮重に起因し
て１つよりも多いコドンによってコードされ、核酸によってコードされるアミノ酸配列に
おけるいずれの変更も伴わずに、所与の核酸のヌクレオチド配列におけるかなりのバリエ
ーションを可能にする。しかし、多くの生物が、「コドンバイアス」（即ち、所与のアミ
ノ酸についての特定のコドン（複数可）の使用へのバイアス）としても公知の、コドン使
用法における差異を示す。コドンバイアスは、ｍＲＮＡ翻訳の効率を次に増加させる、特
定のコドンのためのｔＲＮＡの優勢な種の存在と相関する場合が多い。したがって、特定
の生物（例えば、原核生物）に由来するコード配列は、コドン最適化を介して、異なる生
物（例えば、真核生物）における改善された発現のために調整され得る。
発現のために、コドン最適化される。ほとんどのアミノ酸は、遺伝コードの縮重に起因し
て１つよりも多いコドンによってコードされ、核酸によってコードされるアミノ酸配列に
おけるいずれの変更も伴わずに、所与の核酸のヌクレオチド配列におけるかなりのバリエ
ーションを可能にする。しかし、多くの生物が、「コドンバイアス」（即ち、所与のアミ
ノ酸についての特定のコドン（複数可）の使用へのバイアス）としても公知の、コドン使
用法における差異を示す。コドンバイアスは、ｍＲＮＡ翻訳の効率を次に増加させる、特
定のコドンのためのｔＲＮＡの優勢な種の存在と相関する場合が多い。したがって、特定
の生物（例えば、原核生物）に由来するコード配列は、コドン最適化を介して、異なる生
物（例えば、真核生物）における改善された発現のために調整され得る。
【0204】
Ｔｅｔ系の他の特定のバリエーションには、以下の「Ｔｅｔ－Ｏｆｆ」および「Ｔｅｔ
－Ｏｎ」系が含まれる。Ｔｅｔ－Ｏｆｆ系では、転写は、ＴｃまたはＤｏｘの存在下では
不活性である。その系では、単純ヘルペスウイルス由来のＶＰ１６の強いトランス活性化
性ドメインに融合したＴｅｔＲから構成される、テトラサイクリン制御性トランス活性化
因子タンパク質（ｔＴＡ）が、テトラサイクリン応答性プロモーターエレメント（ＴＲＥ
）の転写制御下にある標的核酸の発現を調節する。ＴＲＥは、プロモーター（一般に、ヒ
トサイトメガロウイルス（ｈＣＭＶ）最初期プロモーターに由来するミニマルプロモータ
ー配列）に融合したＴｅｔＯ配列コンカテマーから構成される。ＴｃまたはＤｏｘの非存
在下では、ｔＴＡはＴＲＥに結合し、標的遺伝子の転写を活性化する。ＴｃまたはＤｏｘ
の存在下では、ｔＴＡは、ＴＲＥに結合できず、標的遺伝子からの発現は不活性なままで
ある。
－Ｏｎ」系が含まれる。Ｔｅｔ－Ｏｆｆ系では、転写は、ＴｃまたはＤｏｘの存在下では
不活性である。その系では、単純ヘルペスウイルス由来のＶＰ１６の強いトランス活性化
性ドメインに融合したＴｅｔＲから構成される、テトラサイクリン制御性トランス活性化
因子タンパク質（ｔＴＡ）が、テトラサイクリン応答性プロモーターエレメント（ＴＲＥ
）の転写制御下にある標的核酸の発現を調節する。ＴＲＥは、プロモーター（一般に、ヒ
トサイトメガロウイルス（ｈＣＭＶ）最初期プロモーターに由来するミニマルプロモータ
ー配列）に融合したＴｅｔＯ配列コンカテマーから構成される。ＴｃまたはＤｏｘの非存
在下では、ｔＴＡはＴＲＥに結合し、標的遺伝子の転写を活性化する。ＴｃまたはＤｏｘ
の存在下では、ｔＴＡは、ＴＲＥに結合できず、標的遺伝子からの発現は不活性なままで
ある。
【0205】
逆に、Ｔｅｔ－Ｏｎ系では、転写は、ＴｃまたはＤｏｘの存在下で活性である。Ｔｅｔ
－Ｏｎ系は、逆テトラサイクリン制御性トランス活性化因子、ｒｔＴＡに基づく。ｔＴＡ
と同様、ｒｔＴＡは、ＴｅｔＲリプレッサーおよびＶＰ１６トランス活性化ドメインから
構成される融合タンパク質である。しかし、ＴｅｔＲ ＤＮＡ結合部分における４アミノ
酸の変化が、Ｄｏｘの存在下で標的導入遺伝子のＴＲＥ中のｔｅｔＯ配列のみを認識でき
るように、ｒｔＴＡの結合特徴を変更させる。したがって、Ｔｅｔ－Ｏｎ系では、ＴＲＥ
調節される標的遺伝子の転写は、Ｄｏｘの存在下でのみｒｔＴＡによって刺激される。
－Ｏｎ系は、逆テトラサイクリン制御性トランス活性化因子、ｒｔＴＡに基づく。ｔＴＡ
と同様、ｒｔＴＡは、ＴｅｔＲリプレッサーおよびＶＰ１６トランス活性化ドメインから
構成される融合タンパク質である。しかし、ＴｅｔＲ ＤＮＡ結合部分における４アミノ
酸の変化が、Ｄｏｘの存在下で標的導入遺伝子のＴＲＥ中のｔｅｔＯ配列のみを認識でき
るように、ｒｔＴＡの結合特徴を変更させる。したがって、Ｔｅｔ－Ｏｎ系では、ＴＲＥ
調節される標的遺伝子の転写は、Ｄｏｘの存在下でのみｒｔＴＡによって刺激される。
【0206】
別の誘導性プロモーター系は、Ｅ．ｃｏｌｉ由来のｌａｃリプレッサー系である（Brow
nら、Cell ４９巻：６０３～６１２頁（１９８７年）を参照のこと）。ｌａｃリプレッ
サー系は、ｌａｃオペレーター（ｌａｃＯ）を含むプロモーターに作動可能に連結した目
的のポリヌクレオチドの転写を調節することによって機能する。ｌａｃリプレッサー（ｌ
ａｃＲ）は、ＬａｃＯに結合し、そうして、目的のポリヌクレオチドの転写を防止する。
目的のポリヌクレオチドの発現は、適切な誘導剤、例えば、イソプロピル－β－Ｄ－チオ
ガラクトピラノシド（ＩＰＴＧ）によって誘導される。
nら、Cell ４９巻：６０３～６１２頁（１９８７年）を参照のこと）。ｌａｃリプレッ
サー系は、ｌａｃオペレーター（ｌａｃＯ）を含むプロモーターに作動可能に連結した目
的のポリヌクレオチドの転写を調節することによって機能する。ｌａｃリプレッサー（ｌ
ａｃＲ）は、ＬａｃＯに結合し、そうして、目的のポリヌクレオチドの転写を防止する。
目的のポリヌクレオチドの発現は、適切な誘導剤、例えば、イソプロピル－β－Ｄ－チオ
ガラクトピラノシド（ＩＰＴＧ）によって誘導される。
【0207】
ポリペプチドまたはその一部分の発現を評価するために、細胞中に導入される発現ベク
ターは、ウイルスベクターを介してトランスフェクトまたは感染されることが求められる
細胞の集団からの発現細胞の同定および選択を促進するために、選択可能なマーカー遺伝
子もしくはレポーター遺伝子のいずれかまたはそれら両方もまた含み得る。他の態様では
、選択可能なマーカーは、ＤＮＡの別々の小片上に保有され得、共トランスフェクション
手順において使用され得る。選択可能なマーカーおよびレポーター遺伝子の両方には、宿
主細胞における発現を可能にする適切な調節配列が隣接し得る。有用な選択可能なマーカ
ーには、例えば、抗生物質耐性遺伝子、例えばｎｅｏなどが含まれる。
ターは、ウイルスベクターを介してトランスフェクトまたは感染されることが求められる
細胞の集団からの発現細胞の同定および選択を促進するために、選択可能なマーカー遺伝
子もしくはレポーター遺伝子のいずれかまたはそれら両方もまた含み得る。他の態様では
、選択可能なマーカーは、ＤＮＡの別々の小片上に保有され得、共トランスフェクション
手順において使用され得る。選択可能なマーカーおよびレポーター遺伝子の両方には、宿
主細胞における発現を可能にする適切な調節配列が隣接し得る。有用な選択可能なマーカ
ーには、例えば、抗生物質耐性遺伝子、例えばｎｅｏなどが含まれる。
【0208】
レポーター遺伝子は、潜在的にトランスフェクトされた細胞を同定するため、および調
節配列の機能性を評価するために使用される。一般に、レポーター遺伝子は、レシピエン
ト生物または組織中に存在することもそれらによって発現されることもなく、ある容易に
検出可能な特性、例えば、酵素活性によってその発現が明らかにされるポリペプチドをコ
ードする、遺伝子である。レポーター遺伝子の発現は、ＤＮＡがレシピエント細胞中に導
入された後の適切な時点でアッセイされる。適切なレポーター遺伝子には、ルシフェラー
ゼ、β－ガラクトシダーゼ、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ、分泌型
アルカリホスファターゼまたは緑色蛍光タンパク質遺伝子をコードする遺伝子が含まれ得
る（例えば、Ｕｉ－Ｔｅｌら、２０００年 ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔｅｒｓ ４７９巻：７９
～８２頁）。適切な発現系は、周知であり、公知の技術を使用して調製され得るまたは商
業的に取得され得る。一般に、レポーター遺伝子の最も高いレベルの発現を示す最小の５
’隣接領域を有する構築物が、プロモーターとして同定される。かかるプロモーター領域
は、レポーター遺伝子に連結され得、プロモーター駆動性の転写をモジュレートする能力
について薬剤を評価するために使用され得る。
節配列の機能性を評価するために使用される。一般に、レポーター遺伝子は、レシピエン
ト生物または組織中に存在することもそれらによって発現されることもなく、ある容易に
検出可能な特性、例えば、酵素活性によってその発現が明らかにされるポリペプチドをコ
ードする、遺伝子である。レポーター遺伝子の発現は、ＤＮＡがレシピエント細胞中に導
入された後の適切な時点でアッセイされる。適切なレポーター遺伝子には、ルシフェラー
ゼ、β－ガラクトシダーゼ、クロラムフェニコールアセチルトランスフェラーゼ、分泌型
アルカリホスファターゼまたは緑色蛍光タンパク質遺伝子をコードする遺伝子が含まれ得
る（例えば、Ｕｉ－Ｔｅｌら、２０００年 ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔｅｒｓ ４７９巻：７９
～８２頁）。適切な発現系は、周知であり、公知の技術を使用して調製され得るまたは商
業的に取得され得る。一般に、レポーター遺伝子の最も高いレベルの発現を示す最小の５
’隣接領域を有する構築物が、プロモーターとして同定される。かかるプロモーター領域
は、レポーター遺伝子に連結され得、プロモーター駆動性の転写をモジュレートする能力
について薬剤を評価するために使用され得る。
【0209】
一部の実施形態では、本明細書に記載されるａｂＴＣＲのいずれかにしたがうａｂＴＣ
Ｒをコードする核酸が提供される。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲをコードする核酸は
、ａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列およびａｂＴＣＲの第
２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列を含む。一部の実施形態では、第１の核
酸配列は、第１のベクター上に位置し、第２の核酸配列は、第２のベクター上に位置する
。一部の実施形態では、第１および第２の核酸配列は、同じベクター上に位置する。ベク
ターは、例えば、哺乳動物発現ベクターおよびウイルスベクター（例えば、レトロウイル
ス、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、ヘルペスウイルスおよびレンチウイルスに由
来するもの）からなる群から選択され得る。一部の実施形態では、第１の核酸配列は、第
１のプロモーターの制御下にあり、第２の核酸配列は、第２のプロモーターの制御下にあ
る。一部の実施形態では、第１および第２のプロモーターは、同じ配列を有する。一部の
実施形態では、第１および第２のプロモーターは、異なる配列を有する。一部の実施形態
では、第１および第２の核酸配列は、マルチシストロン性（例えば、バイシストロン性）
ベクター中の単一のプロモーターの制御下で、単一の転写物として発現される。例えば、
Kim, JHら、PLoS One ６巻（４号）：ｅ１８５５６頁、２０１１年を参照のこと。一
部の実施形態では、第１、第２および／または単一のプロモーターは、誘導性である。一
部の実施形態では、第１の核酸配列は、宿主細胞（例えば、Ｔ細胞）における第２の核酸
配列の発現レベルとほぼ同じである、宿主細胞における発現レベルを有する。一部の実施
形態では、第１の核酸配列は、宿主細胞（例えば、Ｔ細胞）における第２の核酸配列の発
現レベルの少なくとも約２（例えば、少なくとも約２、３、４、５またはそれよりも多く
のいずれか）倍である、宿主細胞における発現レベルを有する。一部の実施形態では、第
１の核酸配列は、宿主細胞（例えば、Ｔ細胞）における第２の核酸配列の発現レベルの約
１／２倍以下（例えば、約１／２、１／３、１／４、１／５またはそれ未満のいずれか以
下）である、宿主細胞における発現レベルを有する。発現は、ｍＲＮＡレベルまたはタン
パク質レベルで決定され得る。ｍＲＮＡ発現のレベルは、ノーザンブロッティング、定量
的ＲＴ－ＰＣＲ、マイクロアレイ分析などを含む、種々の周知の方法を使用して、核酸か
ら転写されたｍＲＮＡの量を測定することによって決定され得る。タンパク質発現のレベ
ルは、免疫細胞化学的染色、酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）、ウエスタンブロ
ット分析、発光アッセイ、質量分析、高速液体クロマトグラフィー、高圧液体クロマトグ
ラフィー－タンデム質量分析などを含む公知の方法によって測定され得る。
Ｒをコードする核酸が提供される。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲをコードする核酸は
、ａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列およびａｂＴＣＲの第
２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列を含む。一部の実施形態では、第１の核
酸配列は、第１のベクター上に位置し、第２の核酸配列は、第２のベクター上に位置する
。一部の実施形態では、第１および第２の核酸配列は、同じベクター上に位置する。ベク
ターは、例えば、哺乳動物発現ベクターおよびウイルスベクター（例えば、レトロウイル
ス、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、ヘルペスウイルスおよびレンチウイルスに由
来するもの）からなる群から選択され得る。一部の実施形態では、第１の核酸配列は、第
１のプロモーターの制御下にあり、第２の核酸配列は、第２のプロモーターの制御下にあ
る。一部の実施形態では、第１および第２のプロモーターは、同じ配列を有する。一部の
実施形態では、第１および第２のプロモーターは、異なる配列を有する。一部の実施形態
では、第１および第２の核酸配列は、マルチシストロン性（例えば、バイシストロン性）
ベクター中の単一のプロモーターの制御下で、単一の転写物として発現される。例えば、
Kim, JHら、PLoS One ６巻（４号）：ｅ１８５５６頁、２０１１年を参照のこと。一
部の実施形態では、第１、第２および／または単一のプロモーターは、誘導性である。一
部の実施形態では、第１の核酸配列は、宿主細胞（例えば、Ｔ細胞）における第２の核酸
配列の発現レベルとほぼ同じである、宿主細胞における発現レベルを有する。一部の実施
形態では、第１の核酸配列は、宿主細胞（例えば、Ｔ細胞）における第２の核酸配列の発
現レベルの少なくとも約２（例えば、少なくとも約２、３、４、５またはそれよりも多く
のいずれか）倍である、宿主細胞における発現レベルを有する。一部の実施形態では、第
１の核酸配列は、宿主細胞（例えば、Ｔ細胞）における第２の核酸配列の発現レベルの約
１／２倍以下（例えば、約１／２、１／３、１／４、１／５またはそれ未満のいずれか以
下）である、宿主細胞における発現レベルを有する。発現は、ｍＲＮＡレベルまたはタン
パク質レベルで決定され得る。ｍＲＮＡ発現のレベルは、ノーザンブロッティング、定量
的ＲＴ－ＰＣＲ、マイクロアレイ分析などを含む、種々の周知の方法を使用して、核酸か
ら転写されたｍＲＮＡの量を測定することによって決定され得る。タンパク質発現のレベ
ルは、免疫細胞化学的染色、酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）、ウエスタンブロ
ット分析、発光アッセイ、質量分析、高速液体クロマトグラフィー、高圧液体クロマトグ
ラフィー－タンデム質量分析などを含む公知の方法によって測定され得る。
【0210】
したがって、一部の実施形態では、本明細書に記載されるａｂＴＣＲのいずれかにした
がうａｂＴＣＲをコードする核酸であって、ａ）ａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコ
ードする第１の核酸配列、およびｂ）ａｂＴＣＲの第２のポリペプチド鎖をコードする第
２の核酸配列を含み、第１の核酸配列が、第１のベクター（例えば、レンチウイルスベク
ター）上に位置し、第１のプロモーターに作動可能に連結し、第２の核酸配列が、第２の
ベクター（例えば、レンチウイルスベクター）上に位置し、第２のプロモーターに作動可
能に連結する、核酸が提供される。一部の実施形態では、第１および第２のプロモーター
は、同じ配列を有する。一部の実施形態では、第１および第２のプロモーターは、異なる
配列を有する。一部の実施形態では、第１および／または第２のプロモーターは、誘導性
である。一部の実施形態では、第１の核酸配列は、宿主細胞（例えば、Ｔ細胞）における
第２の核酸配列の発現レベルとほぼ同じである、宿主細胞における発現レベルを有する。
一部の実施形態では、第１の核酸配列は、宿主細胞（例えば、Ｔ細胞）における第２の核
酸配列の発現レベルの少なくとも約２（例えば、少なくとも約２、３、４、５またはそれ
よりも多くのいずれか）倍である、宿主細胞における発現レベルを有する。一部の実施形
態では、第１の核酸配列は、宿主細胞（例えば、Ｔ細胞）における第２の核酸配列の発現
レベルの約１／２倍以下（例えば、約１／２、１／３、１／４、１／５またはそれ未満の
いずれか以下）である、宿主細胞における発現レベルを有する。一部の実施形態では、第
１および／または第２のベクターは、ウイルスベクター（例えば、レンチウイルスベクタ
ー）である。
がうａｂＴＣＲをコードする核酸であって、ａ）ａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコ
ードする第１の核酸配列、およびｂ）ａｂＴＣＲの第２のポリペプチド鎖をコードする第
２の核酸配列を含み、第１の核酸配列が、第１のベクター（例えば、レンチウイルスベク
ター）上に位置し、第１のプロモーターに作動可能に連結し、第２の核酸配列が、第２の
ベクター（例えば、レンチウイルスベクター）上に位置し、第２のプロモーターに作動可
能に連結する、核酸が提供される。一部の実施形態では、第１および第２のプロモーター
は、同じ配列を有する。一部の実施形態では、第１および第２のプロモーターは、異なる
配列を有する。一部の実施形態では、第１および／または第２のプロモーターは、誘導性
である。一部の実施形態では、第１の核酸配列は、宿主細胞（例えば、Ｔ細胞）における
第２の核酸配列の発現レベルとほぼ同じである、宿主細胞における発現レベルを有する。
一部の実施形態では、第１の核酸配列は、宿主細胞（例えば、Ｔ細胞）における第２の核
酸配列の発現レベルの少なくとも約２（例えば、少なくとも約２、３、４、５またはそれ
よりも多くのいずれか）倍である、宿主細胞における発現レベルを有する。一部の実施形
態では、第１の核酸配列は、宿主細胞（例えば、Ｔ細胞）における第２の核酸配列の発現
レベルの約１／２倍以下（例えば、約１／２、１／３、１／４、１／５またはそれ未満の
いずれか以下）である、宿主細胞における発現レベルを有する。一部の実施形態では、第
１および／または第２のベクターは、ウイルスベクター（例えば、レンチウイルスベクタ
ー）である。
【0211】
一部の実施形態では、本明細書に記載されるａｂＴＣＲのいずれかにしたがうａｂＴＣ
Ｒをコードする核酸を含むベクター（例えば、レンチウイルスベクター）であって、ａ）
ａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列に作動可能に連結した第
１のプロモーター；およびｂ）ａｂＴＣＲの第２のポリペプチド鎖をコードする第２の核
酸配列に作動可能に連結した第２のプロモーターを含む、ベクターが提供される。一部の
実施形態では、第１および第２のプロモーターは、同じ配列を有する。一部の実施形態で
は、第１および第２のプロモーターは、異なる配列を有する。一部の実施形態では、第１
および／または第２のプロモーターは、誘導性である。一部の実施形態では、第１の核酸
配列は、宿主細胞（例えば、Ｔ細胞）における第２の核酸配列の発現レベルとほぼ同じで
ある、宿主細胞における発現レベルを有する。一部の実施形態では、第１の核酸配列は、
宿主細胞（例えば、Ｔ細胞）における第２の核酸配列の発現レベルの少なくとも約２（例
えば、少なくとも約２、３、４、５またはそれよりも多くのいずれか）倍である、宿主細
胞における発現レベルを有する。一部の実施形態では、第１の核酸配列は、宿主細胞（例
えば、Ｔ細胞）における第２の核酸配列の発現レベルの約１／２倍以下（例えば、約１／
２、１／３、１／４、１／５またはそれ未満のいずれか以下）である、宿主細胞における
発現レベルを有する。一部の実施形態では、ベクターは、ウイルスベクター（例えば、レ
ンチウイルスベクター）である。
Ｒをコードする核酸を含むベクター（例えば、レンチウイルスベクター）であって、ａ）
ａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列に作動可能に連結した第
１のプロモーター；およびｂ）ａｂＴＣＲの第２のポリペプチド鎖をコードする第２の核
酸配列に作動可能に連結した第２のプロモーターを含む、ベクターが提供される。一部の
実施形態では、第１および第２のプロモーターは、同じ配列を有する。一部の実施形態で
は、第１および第２のプロモーターは、異なる配列を有する。一部の実施形態では、第１
および／または第２のプロモーターは、誘導性である。一部の実施形態では、第１の核酸
配列は、宿主細胞（例えば、Ｔ細胞）における第２の核酸配列の発現レベルとほぼ同じで
ある、宿主細胞における発現レベルを有する。一部の実施形態では、第１の核酸配列は、
宿主細胞（例えば、Ｔ細胞）における第２の核酸配列の発現レベルの少なくとも約２（例
えば、少なくとも約２、３、４、５またはそれよりも多くのいずれか）倍である、宿主細
胞における発現レベルを有する。一部の実施形態では、第１の核酸配列は、宿主細胞（例
えば、Ｔ細胞）における第２の核酸配列の発現レベルの約１／２倍以下（例えば、約１／
２、１／３、１／４、１／５またはそれ未満のいずれか以下）である、宿主細胞における
発現レベルを有する。一部の実施形態では、ベクターは、ウイルスベクター（例えば、レ
ンチウイルスベクター）である。
【0212】
一部の実施形態では、本明細書に記載されるａｂＴＣＲのいずれかにしたがうａｂＴＣ
Ｒをコードする核酸を含むベクター（例えば、レンチウイルスベクター）であって、ａ）
ａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列；およびｂ）ａｂＴＣＲ
の第２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列を含み；第１および第２の核酸配列
が、単一のプロモーターの制御下にある、ベクターが提供される。一部の実施形態では、
プロモーターは、第１の核酸配列の５’末端に作動可能に連結し、第１の核酸配列の３’
末端を第２の核酸配列の５’末端に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、お
よび自己切断性２Ａペプチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコード
する核酸からなる群から選択される核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の
核酸配列は、プロモーターの制御下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態で
は、プロモーターは、第２の核酸配列の５’末端に作動可能に連結し、第２の核酸配列の
３’末端を第１の核酸配列の５’末端に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）
、および自己切断性２Ａペプチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコ
ードする核酸からなる群から選択される核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第
２の核酸配列は、プロモーターの制御下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形
態では、プロモーターは、誘導性である。一部の実施形態では、ベクターは、ウイルスベ
クター（例えば、レンチウイルスベクター）である。
Ｒをコードする核酸を含むベクター（例えば、レンチウイルスベクター）であって、ａ）
ａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列；およびｂ）ａｂＴＣＲ
の第２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列を含み；第１および第２の核酸配列
が、単一のプロモーターの制御下にある、ベクターが提供される。一部の実施形態では、
プロモーターは、第１の核酸配列の５’末端に作動可能に連結し、第１の核酸配列の３’
末端を第２の核酸配列の５’末端に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、お
よび自己切断性２Ａペプチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコード
する核酸からなる群から選択される核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の
核酸配列は、プロモーターの制御下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態で
は、プロモーターは、第２の核酸配列の５’末端に作動可能に連結し、第２の核酸配列の
３’末端を第１の核酸配列の５’末端に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）
、および自己切断性２Ａペプチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコ
ードする核酸からなる群から選択される核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第
２の核酸配列は、プロモーターの制御下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形
態では、プロモーターは、誘導性である。一部の実施形態では、ベクターは、ウイルスベ
クター（例えば、レンチウイルスベクター）である。
【0213】
遺伝子を細胞中に導入し発現させる方法は、当該分野で公知である。発現ベクターに関
して、ベクターは、当該分野の任意の方法によって、宿主細胞、例えば、哺乳動物、細菌
、酵母または昆虫の細胞中に容易に導入され得る。例えば、発現ベクターは、物理的、化
学的または生物学的手段によって、宿主細胞中に移入され得る。
して、ベクターは、当該分野の任意の方法によって、宿主細胞、例えば、哺乳動物、細菌
、酵母または昆虫の細胞中に容易に導入され得る。例えば、発現ベクターは、物理的、化
学的または生物学的手段によって、宿主細胞中に移入され得る。
【0214】
ポリヌクレオチドを宿主細胞中に導入するための物理的方法には、リン酸カルシウム沈
殿、リポフェクション、微粒子銃、マイクロインジェクション、エレクトロポレーション
などが含まれる。ベクターおよび／または外因性核酸を含む細胞を産生するための方法は
、当該分野で周知である。例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋら（２００１年、Ｍｏｌｅｃｕｌａ
ｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ： Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉ
ｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ）を参照のこと。一部の
実施形態では、ポリヌクレオチドの宿主細胞中への導入は、リン酸カルシウムトランスフ
ェクションによって実施される。
殿、リポフェクション、微粒子銃、マイクロインジェクション、エレクトロポレーション
などが含まれる。ベクターおよび／または外因性核酸を含む細胞を産生するための方法は
、当該分野で周知である。例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋら（２００１年、Ｍｏｌｅｃｕｌａ
ｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ： Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉ
ｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ）を参照のこと。一部の
実施形態では、ポリヌクレオチドの宿主細胞中への導入は、リン酸カルシウムトランスフ
ェクションによって実施される。
【0215】
目的のポリヌクレオチドを宿主細胞中に導入するための生物学的方法には、ＤＮＡベク
ターおよびＲＮＡベクターの使用が含まれる。ウイルスベクター、特にレトロウイルスベ
クターは、哺乳動物、例えば、ヒト細胞中に遺伝子を挿入するための最も広く使用される
方法になっている。他のウイルスベクターは、レンチウイルス、ポックスウイルス、単純
ヘルペスウイルス１、アデノウイルスおよびアデノ随伴ウイルスなどに由来し得る。例え
ば、米国特許第５，３５０，６７４号および同第５，５８５，３６２号を参照のこと。
ターおよびＲＮＡベクターの使用が含まれる。ウイルスベクター、特にレトロウイルスベ
クターは、哺乳動物、例えば、ヒト細胞中に遺伝子を挿入するための最も広く使用される
方法になっている。他のウイルスベクターは、レンチウイルス、ポックスウイルス、単純
ヘルペスウイルス１、アデノウイルスおよびアデノ随伴ウイルスなどに由来し得る。例え
ば、米国特許第５，３５０，６７４号および同第５，５８５，３６２号を参照のこと。
【0216】
ポリヌクレオチドを宿主細胞中に導入するための化学的手段には、コロイド分散系、例
えば、高分子複合体、ナノカプセル、ミクロスフェア、ビーズ、ならびに水中油エマルジ
ョン、ミセル、混合ミセルおよびリポソームを含む脂質ベースの系が含まれる。ｉｎ ｖ
ｉｔｒｏおよびｉｎ ｖｉｖｏで送達ビヒクルとして使用するための例示的なコロイド系
は、リポソーム（例えば、人工膜小胞）である。
えば、高分子複合体、ナノカプセル、ミクロスフェア、ビーズ、ならびに水中油エマルジ
ョン、ミセル、混合ミセルおよびリポソームを含む脂質ベースの系が含まれる。ｉｎ ｖ
ｉｔｒｏおよびｉｎ ｖｉｖｏで送達ビヒクルとして使用するための例示的なコロイド系
は、リポソーム（例えば、人工膜小胞）である。
【0217】
非ウイルス送達系が利用される場合、例示的な送達ビヒクルは、リポソームである。脂
質製剤の使用が、核酸の宿主細胞中への導入（ｉｎ ｖｉｔｒｏ、ｅｘ ｖｉｖｏまたは
ｉｎ ｖｉｖｏ）のために企図される。別の態様では、核酸は、脂質と会合し得る。脂質
と会合した核酸は、リポソームの水性内部中に封入され得、リポソームの脂質二重層内に
散在され得、リポソームおよびオリゴヌクレオチドの両方と結合する連結分子を介してリ
ポソームに結合され得、リポソーム中に捕捉され得、リポソームと複合体形成され得、脂
質を含む溶液中に分散され得、脂質と混合され得、脂質と組み合わされ得、脂質中に懸濁
物として含まれ得、ミセルと共に含まれもしくはミセルと複合体形成され得、または脂質
と他の方法で会合し得る。脂質、脂質／ＤＮＡまたは脂質／発現ベクター会合組成物は、
溶液中の任意の特定の構造に限定されない。例えば、これら組成物は、二重層構造中に、
ミセルとして、または「崩壊した」構造で、存在し得る。これらはまた、溶液中に単に散
在して、サイズまたは形状が均一ではない凝集体をおそらくは形成し得る。脂質は、天然
に存在する脂質または合成脂質であり得る脂肪性物質である。例えば、脂質には、細胞質
中に天然に存在する脂肪滴、ならびに長鎖脂肪族炭化水素ならびにその誘導体、例えば、
脂肪酸、アルコール、アミン、アミノアルコールおよびアルデヒドを含む化合物のクラス
が含まれる。
質製剤の使用が、核酸の宿主細胞中への導入（ｉｎ ｖｉｔｒｏ、ｅｘ ｖｉｖｏまたは
ｉｎ ｖｉｖｏ）のために企図される。別の態様では、核酸は、脂質と会合し得る。脂質
と会合した核酸は、リポソームの水性内部中に封入され得、リポソームの脂質二重層内に
散在され得、リポソームおよびオリゴヌクレオチドの両方と結合する連結分子を介してリ
ポソームに結合され得、リポソーム中に捕捉され得、リポソームと複合体形成され得、脂
質を含む溶液中に分散され得、脂質と混合され得、脂質と組み合わされ得、脂質中に懸濁
物として含まれ得、ミセルと共に含まれもしくはミセルと複合体形成され得、または脂質
と他の方法で会合し得る。脂質、脂質／ＤＮＡまたは脂質／発現ベクター会合組成物は、
溶液中の任意の特定の構造に限定されない。例えば、これら組成物は、二重層構造中に、
ミセルとして、または「崩壊した」構造で、存在し得る。これらはまた、溶液中に単に散
在して、サイズまたは形状が均一ではない凝集体をおそらくは形成し得る。脂質は、天然
に存在する脂質または合成脂質であり得る脂肪性物質である。例えば、脂質には、細胞質
中に天然に存在する脂肪滴、ならびに長鎖脂肪族炭化水素ならびにその誘導体、例えば、
脂肪酸、アルコール、アミン、アミノアルコールおよびアルデヒドを含む化合物のクラス
が含まれる。
【0218】
外因性核酸を宿主細胞中に導入するためまたは細胞を本発明の阻害剤に他の方法で曝露
させるために使用される方法に関わらず、宿主細胞中の組換えＤＮＡ配列の存在を確認す
るために、種々のアッセイが実施され得る。かかるアッセイには、例えば、サザンおよび
ノーザンブロッティング、ＲＴ－ＰＣＲおよびＰＣＲなどの、当業者に周知の「分子生物
学的」アッセイ；例えば、免疫学的手段（ＥＬＩＳＡおよびウエスタンブロット）による
または本発明の範囲内に入る薬剤を同定するための本明細書に記載されるアッセイによる
、特定のペプチドの存在または非存在を検出するなどの「生化学的」アッセイが含まれる
。
させるために使用される方法に関わらず、宿主細胞中の組換えＤＮＡ配列の存在を確認す
るために、種々のアッセイが実施され得る。かかるアッセイには、例えば、サザンおよび
ノーザンブロッティング、ＲＴ－ＰＣＲおよびＰＣＲなどの、当業者に周知の「分子生物
学的」アッセイ；例えば、免疫学的手段（ＥＬＩＳＡおよびウエスタンブロット）による
または本発明の範囲内に入る薬剤を同定するための本明細書に記載されるアッセイによる
、特定のペプチドの存在または非存在を検出するなどの「生化学的」アッセイが含まれる
。
【0219】
ａｂＴＣＲエフェクター細胞
一部の実施形態では、本明細書に記載されるａｂＴＣＲのいずれかにしたがうａｂＴＣ
Ｒをその表面上に提示するエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞）が提供される。一部の実
施形態では、エフェクター細胞は、ａｂＴＣＲをコードする核酸を含み、ａｂＴＣＲは核
酸から発現され、エフェクター細胞表面に局在化される。一部の実施形態では、ａｂＴＣ
Ｒは、外因的に発現され、エフェクター細胞と組み合わされる。一部の実施形態では、エ
フェクター細胞は、Ｔ細胞である。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、細胞傷害
性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッサーＴ細胞からなる
群から選択される。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ａｂＴＣＲのＴＣＲＤが
由来するＴＣＲサブユニットを発現しない。例えば、一部の実施形態では、エフェクター
細胞はαβＴ細胞であり、導入されたａｂＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲδおよびγ鎖に由
来する配列を含み、またはＴ細胞はγδＴ細胞であり、導入されたａｂＴＣＲのＴＣＲＤ
は、ＴＣＲαおよびβ鎖に由来する配列を含む。一部の実施形態では、エフェクター細胞
は、ａｂＴＣＲのＴＣＲＤが由来する内因性ＴＣＲサブユニットの一方または両方の発現
を遮断するまたは減少させるように改変されている。例えば、一部の実施形態では、エフ
ェクター細胞は、ＴＣＲαおよび／またはβ鎖の発現を遮断するまたは減少させるように
改変されているαβＴ細胞であり、導入されたａｂＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲαおよび
β鎖に由来する配列を含み、あるいはエフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖
の発現を遮断するまたは減少させるように改変されているγδＴ細胞であり、導入された
ａｂＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲγおよびδ鎖に由来する配列を含む。遺伝子発現を破壊
するための細胞の改変には、例えば、ＲＮＡ干渉（例えば、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｍ
ｉＲＮＡ）、遺伝子編集（例えば、ＣＲＩＳＰＲベースまたはＴＡＬＥＮベースの遺伝子
ノックアウト）などを含む当該分野で公知の任意のかかる技術が含まれる。例えば、一部
の実施形態では、本明細書に記載されるａｂＴＣＲのいずれかにしたがうａｂＴＣＲをコ
ードする核酸を含むエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞）であって、ａｂＴＣＲが核酸か
ら発現され、エフェクター細胞表面に局在化される、エフェクター細胞が提供される。一
部の実施形態では、ａｂＴＣＲをコードする核酸は、ａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖
をコードする第１の核酸配列およびａｂＴＣＲの第２のポリペプチド鎖をコードする第２
の核酸配列を含む。一部の実施形態では、第１の核酸配列は、第１のベクター上に位置し
、第２の核酸配列は、第２のベクター上に位置する。一部の実施形態では、第１および第
２の核酸配列は、同じベクター上に位置する。ベクターは、例えば、哺乳動物発現ベクタ
ーおよびウイルスベクター（例えば、レトロウイルス、アデノウイルス、アデノ随伴ウイ
ルス、ヘルペスウイルスおよびレンチウイルスに由来するもの）からなる群から選択され
得る。一部の実施形態では、ベクターのうち１つまたは複数は、エフェクター細胞の宿主
ゲノム中に組み込まれる。一部の実施形態では、第１の核酸配列は、第１のプロモーター
の制御下にあり、第２の核酸配列は、第２のプロモーターの制御下にある。一部の実施形
態では、第１および第２のプロモーターは、同じ配列を有する。一部の実施形態では、第
１および第２のプロモーターは、異なる配列を有する。一部の実施形態では、第１および
第２の核酸は、単一のプロモーターの制御下にある。一部の実施形態では、第１、第２お
よび／または単一のプロモーターは、誘導性である。一部の実施形態では、第１のポリペ
プチド鎖の発現は、第２のポリペプチド鎖の発現とほぼ同じである。一部の実施形態では
、第１のポリペプチド鎖の発現は、第２のポリペプチド鎖の発現の少なくとも約２（例え
ば、少なくとも約２、３、４、５またはそれよりも多くのいずれか）倍である。一部の実
施形態では、第１のポリペプチド鎖の発現は、第２のポリペプチド鎖の発現の約１／２倍
以下（例えば、約１／２、１／３、１／４、１／５またはそれ未満のいずれか以下）であ
る。発現は、ｍＲＮＡレベルまたはタンパク質レベルで決定され得る。ｍＲＮＡ発現のレ
ベルは、ノーザンブロッティング、定量的ＲＴ－ＰＣＲ、マイクロアレイ分析などを含む
、種々の周知の方法を使用して、核酸から転写されたｍＲＮＡの量を測定することによっ
て決定され得る。タンパク質発現のレベルは、免疫細胞化学的染色、酵素結合免疫吸着ア
ッセイ（ＥＬＩＳＡ）、ウエスタンブロット分析、発光アッセイ、質量分析、高速液体ク
ロマトグラフィー、高圧液体クロマトグラフィー－タンデム質量分析などを含む公知の方
法によって測定され得る。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞
、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッサーＴ細胞からなる群から選
択される。
一部の実施形態では、本明細書に記載されるａｂＴＣＲのいずれかにしたがうａｂＴＣ
Ｒをその表面上に提示するエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞）が提供される。一部の実
施形態では、エフェクター細胞は、ａｂＴＣＲをコードする核酸を含み、ａｂＴＣＲは核
酸から発現され、エフェクター細胞表面に局在化される。一部の実施形態では、ａｂＴＣ
Ｒは、外因的に発現され、エフェクター細胞と組み合わされる。一部の実施形態では、エ
フェクター細胞は、Ｔ細胞である。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、細胞傷害
性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッサーＴ細胞からなる
群から選択される。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ａｂＴＣＲのＴＣＲＤが
由来するＴＣＲサブユニットを発現しない。例えば、一部の実施形態では、エフェクター
細胞はαβＴ細胞であり、導入されたａｂＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲδおよびγ鎖に由
来する配列を含み、またはＴ細胞はγδＴ細胞であり、導入されたａｂＴＣＲのＴＣＲＤ
は、ＴＣＲαおよびβ鎖に由来する配列を含む。一部の実施形態では、エフェクター細胞
は、ａｂＴＣＲのＴＣＲＤが由来する内因性ＴＣＲサブユニットの一方または両方の発現
を遮断するまたは減少させるように改変されている。例えば、一部の実施形態では、エフ
ェクター細胞は、ＴＣＲαおよび／またはβ鎖の発現を遮断するまたは減少させるように
改変されているαβＴ細胞であり、導入されたａｂＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲαおよび
β鎖に由来する配列を含み、あるいはエフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖
の発現を遮断するまたは減少させるように改変されているγδＴ細胞であり、導入された
ａｂＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲγおよびδ鎖に由来する配列を含む。遺伝子発現を破壊
するための細胞の改変には、例えば、ＲＮＡ干渉（例えば、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｍ
ｉＲＮＡ）、遺伝子編集（例えば、ＣＲＩＳＰＲベースまたはＴＡＬＥＮベースの遺伝子
ノックアウト）などを含む当該分野で公知の任意のかかる技術が含まれる。例えば、一部
の実施形態では、本明細書に記載されるａｂＴＣＲのいずれかにしたがうａｂＴＣＲをコ
ードする核酸を含むエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞）であって、ａｂＴＣＲが核酸か
ら発現され、エフェクター細胞表面に局在化される、エフェクター細胞が提供される。一
部の実施形態では、ａｂＴＣＲをコードする核酸は、ａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖
をコードする第１の核酸配列およびａｂＴＣＲの第２のポリペプチド鎖をコードする第２
の核酸配列を含む。一部の実施形態では、第１の核酸配列は、第１のベクター上に位置し
、第２の核酸配列は、第２のベクター上に位置する。一部の実施形態では、第１および第
２の核酸配列は、同じベクター上に位置する。ベクターは、例えば、哺乳動物発現ベクタ
ーおよびウイルスベクター（例えば、レトロウイルス、アデノウイルス、アデノ随伴ウイ
ルス、ヘルペスウイルスおよびレンチウイルスに由来するもの）からなる群から選択され
得る。一部の実施形態では、ベクターのうち１つまたは複数は、エフェクター細胞の宿主
ゲノム中に組み込まれる。一部の実施形態では、第１の核酸配列は、第１のプロモーター
の制御下にあり、第２の核酸配列は、第２のプロモーターの制御下にある。一部の実施形
態では、第１および第２のプロモーターは、同じ配列を有する。一部の実施形態では、第
１および第２のプロモーターは、異なる配列を有する。一部の実施形態では、第１および
第２の核酸は、単一のプロモーターの制御下にある。一部の実施形態では、第１、第２お
よび／または単一のプロモーターは、誘導性である。一部の実施形態では、第１のポリペ
プチド鎖の発現は、第２のポリペプチド鎖の発現とほぼ同じである。一部の実施形態では
、第１のポリペプチド鎖の発現は、第２のポリペプチド鎖の発現の少なくとも約２（例え
ば、少なくとも約２、３、４、５またはそれよりも多くのいずれか）倍である。一部の実
施形態では、第１のポリペプチド鎖の発現は、第２のポリペプチド鎖の発現の約１／２倍
以下（例えば、約１／２、１／３、１／４、１／５またはそれ未満のいずれか以下）であ
る。発現は、ｍＲＮＡレベルまたはタンパク質レベルで決定され得る。ｍＲＮＡ発現のレ
ベルは、ノーザンブロッティング、定量的ＲＴ－ＰＣＲ、マイクロアレイ分析などを含む
、種々の周知の方法を使用して、核酸から転写されたｍＲＮＡの量を測定することによっ
て決定され得る。タンパク質発現のレベルは、免疫細胞化学的染色、酵素結合免疫吸着ア
ッセイ（ＥＬＩＳＡ）、ウエスタンブロット分析、発光アッセイ、質量分析、高速液体ク
ロマトグラフィー、高圧液体クロマトグラフィー－タンデム質量分析などを含む公知の方
法によって測定され得る。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞
、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッサーＴ細胞からなる群から選
択される。
【0220】
したがって、一部の実施形態では、本明細書に記載されるａｂＴＣＲのいずれかにした
がうａｂＴＣＲをその表面上に発現するａｂＴＣＲエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞）
であって、ａ）ａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする核酸配列に作動可能に連
結した第１のプロモーターを含む第１の核酸、およびｂ）ａｂＴＣＲの第２のポリペプチ
ド鎖をコードする核酸配列に作動可能に連結した第２のプロモーターを含む第２の核酸、
を含み、第１のポリペプチド鎖が第１の核酸から発現され、第２のポリペプチド鎖が第２
の核酸から発現されて、ａｂＴＣＲを形成し、ａｂＴＣＲが、エフェクター細胞の表面に
局在する、ａｂＴＣＲエフェクター細胞が提供される。一部の実施形態では、第１および
第２のプロモーターは、同じ配列を有する。一部の実施形態では、第１および第２のプロ
モーターは、異なる配列を有する。一部の実施形態では、第１および／または第２のプロ
モーターは、誘導性である。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖の発現は、第２
のポリペプチド鎖の発現とほぼ同じである。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖
の発現は、第２のポリペプチド鎖の発現の少なくとも約２（例えば、少なくとも約２、３
、４、５またはそれよりも多くのいずれか）倍である。一部の実施形態では、第１のポリ
ペプチド鎖の発現は、第２のポリペプチド鎖の発現の約１／２倍以下（例えば、約１／２
、１／３、１／４、１／５またはそれ未満のいずれか以下）である。一部の実施形態では
、エフェクター細胞は、ａｂＴＣＲのＴＣＲＤが由来するＴＣＲサブユニットを発現しな
い。例えば、一部の実施形態では、エフェクター細胞はαβＴ細胞であり、導入されたａ
ｂＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲδおよびγ鎖に由来する配列を含み、またはエフェクター
細胞はγδＴ細胞であり、導入されたａｂＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲαおよびβ鎖に由
来する配列を含む。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ａｂＴＣＲのＴＣＲＤが
由来する内因性ＴＣＲサブユニットの一方または両方の発現を遮断するまたは減少させる
ように改変されている。例えば、一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲαお
よび／またはβ鎖の発現を遮断するまたは減少させるように改変されているαβＴ細胞で
あり、導入されたａｂＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲαおよびβ鎖に由来する配列を含み、
あるいはエフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現を遮断するまたは減少
させるように改変されているγδＴ細胞であり、導入されたａｂＴＣＲのＴＣＲＤは、Ｔ
ＣＲγおよびδ鎖に由来する配列を含む。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、細
胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッサーＴ細胞か
らなる群から選択される。一部の実施形態では、ベクターは、エフェクター細胞の宿主ゲ
ノム中に組み込まれるウイルスベクター（例えば、レンチウイルスベクター）である。
がうａｂＴＣＲをその表面上に発現するａｂＴＣＲエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞）
であって、ａ）ａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする核酸配列に作動可能に連
結した第１のプロモーターを含む第１の核酸、およびｂ）ａｂＴＣＲの第２のポリペプチ
ド鎖をコードする核酸配列に作動可能に連結した第２のプロモーターを含む第２の核酸、
を含み、第１のポリペプチド鎖が第１の核酸から発現され、第２のポリペプチド鎖が第２
の核酸から発現されて、ａｂＴＣＲを形成し、ａｂＴＣＲが、エフェクター細胞の表面に
局在する、ａｂＴＣＲエフェクター細胞が提供される。一部の実施形態では、第１および
第２のプロモーターは、同じ配列を有する。一部の実施形態では、第１および第２のプロ
モーターは、異なる配列を有する。一部の実施形態では、第１および／または第２のプロ
モーターは、誘導性である。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖の発現は、第２
のポリペプチド鎖の発現とほぼ同じである。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖
の発現は、第２のポリペプチド鎖の発現の少なくとも約２（例えば、少なくとも約２、３
、４、５またはそれよりも多くのいずれか）倍である。一部の実施形態では、第１のポリ
ペプチド鎖の発現は、第２のポリペプチド鎖の発現の約１／２倍以下（例えば、約１／２
、１／３、１／４、１／５またはそれ未満のいずれか以下）である。一部の実施形態では
、エフェクター細胞は、ａｂＴＣＲのＴＣＲＤが由来するＴＣＲサブユニットを発現しな
い。例えば、一部の実施形態では、エフェクター細胞はαβＴ細胞であり、導入されたａ
ｂＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲδおよびγ鎖に由来する配列を含み、またはエフェクター
細胞はγδＴ細胞であり、導入されたａｂＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲαおよびβ鎖に由
来する配列を含む。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ａｂＴＣＲのＴＣＲＤが
由来する内因性ＴＣＲサブユニットの一方または両方の発現を遮断するまたは減少させる
ように改変されている。例えば、一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲαお
よび／またはβ鎖の発現を遮断するまたは減少させるように改変されているαβＴ細胞で
あり、導入されたａｂＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲαおよびβ鎖に由来する配列を含み、
あるいはエフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現を遮断するまたは減少
させるように改変されているγδＴ細胞であり、導入されたａｂＴＣＲのＴＣＲＤは、Ｔ
ＣＲγおよびδ鎖に由来する配列を含む。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、細
胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッサーＴ細胞か
らなる群から選択される。一部の実施形態では、ベクターは、エフェクター細胞の宿主ゲ
ノム中に組み込まれるウイルスベクター（例えば、レンチウイルスベクター）である。
【0221】
一部の実施形態では、本明細書に記載されるａｂＴＣＲのいずれかにしたがうａｂＴＣ
Ｒをその表面上に発現するａｂＴＣＲエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞）であって、ａ
）ａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列に作動可能に連結した
第１のプロモーターを含む第１のベクター、およびｂ）ａｂＴＣＲの第２のポリペプチド
鎖をコードする第２の核酸配列に作動可能に連結した第２のプロモーターを含む第２のベ
クター、を含み、第１のポリペプチド鎖が第１の核酸配列から発現され、第２のポリペプ
チド鎖が第２の核酸配列から発現されて、ａｂＴＣＲを形成し、ａｂＴＣＲが、エフェク
ター細胞の表面に局在する、ａｂＴＣＲエフェクター細胞が提供される。一部の実施形態
では、第１および第２のプロモーターは、同じ配列を有する。一部の実施形態では、第１
および第２のプロモーターは、異なる配列を有する。一部の実施形態では、第１および／
または第２のプロモーターは、誘導性である。一部の実施形態では、第１のポリペプチド
鎖の発現は、第２のポリペプチド鎖の発現とほぼ同じである。一部の実施形態では、第１
のポリペプチド鎖の発現は、第２のポリペプチド鎖の発現の少なくとも約２（例えば、少
なくとも約２、３、４、５またはそれよりも多くのいずれか）倍である。一部の実施形態
では、第１のポリペプチド鎖の発現は、第２のポリペプチド鎖の発現の約１／２倍以下（
例えば、約１／２、１／３、１／４、１／５またはそれ未満のいずれか以下）である。一
部の実施形態では、エフェクター細胞は、ａｂＴＣＲのＴＣＲＤが由来するＴＣＲサブユ
ニットを発現しない。例えば、一部の実施形態では、エフェクター細胞はαβＴ細胞であ
り、導入されたａｂＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲδおよびγ鎖に由来する配列を含み、ま
たはエフェクター細胞はγδＴ細胞であり、導入されたａｂＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲ
αおよびβ鎖に由来する配列を含む。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ａｂＴ
ＣＲのＴＣＲＤが由来する内因性ＴＣＲサブユニットの一方または両方の発現を遮断する
または減少させるように改変されている。例えば、一部の実施形態では、エフェクター細
胞は、ＴＣＲαおよび／またはβ鎖の発現を遮断するまたは減少させるように改変されて
いるαβＴ細胞であり、導入されたａｂＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲαおよびβ鎖に由来
する配列を含み、あるいはエフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現を遮
断するまたは減少させるように改変されているγδＴ細胞であり、導入されたａｂＴＣＲ
のＴＣＲＤは、ＴＣＲγおよびδ鎖に由来する配列を含む。一部の実施形態では、エフェ
クター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプ
レッサーＴ細胞からなる群から選択される。一部の実施形態では、第１および第２のベク
ターは、エフェクター細胞の宿主ゲノム中に組み込まれるウイルスベクター（例えば、レ
ンチウイルスベクター）である。
Ｒをその表面上に発現するａｂＴＣＲエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞）であって、ａ
）ａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列に作動可能に連結した
第１のプロモーターを含む第１のベクター、およびｂ）ａｂＴＣＲの第２のポリペプチド
鎖をコードする第２の核酸配列に作動可能に連結した第２のプロモーターを含む第２のベ
クター、を含み、第１のポリペプチド鎖が第１の核酸配列から発現され、第２のポリペプ
チド鎖が第２の核酸配列から発現されて、ａｂＴＣＲを形成し、ａｂＴＣＲが、エフェク
ター細胞の表面に局在する、ａｂＴＣＲエフェクター細胞が提供される。一部の実施形態
では、第１および第２のプロモーターは、同じ配列を有する。一部の実施形態では、第１
および第２のプロモーターは、異なる配列を有する。一部の実施形態では、第１および／
または第２のプロモーターは、誘導性である。一部の実施形態では、第１のポリペプチド
鎖の発現は、第２のポリペプチド鎖の発現とほぼ同じである。一部の実施形態では、第１
のポリペプチド鎖の発現は、第２のポリペプチド鎖の発現の少なくとも約２（例えば、少
なくとも約２、３、４、５またはそれよりも多くのいずれか）倍である。一部の実施形態
では、第１のポリペプチド鎖の発現は、第２のポリペプチド鎖の発現の約１／２倍以下（
例えば、約１／２、１／３、１／４、１／５またはそれ未満のいずれか以下）である。一
部の実施形態では、エフェクター細胞は、ａｂＴＣＲのＴＣＲＤが由来するＴＣＲサブユ
ニットを発現しない。例えば、一部の実施形態では、エフェクター細胞はαβＴ細胞であ
り、導入されたａｂＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲδおよびγ鎖に由来する配列を含み、ま
たはエフェクター細胞はγδＴ細胞であり、導入されたａｂＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲ
αおよびβ鎖に由来する配列を含む。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ａｂＴ
ＣＲのＴＣＲＤが由来する内因性ＴＣＲサブユニットの一方または両方の発現を遮断する
または減少させるように改変されている。例えば、一部の実施形態では、エフェクター細
胞は、ＴＣＲαおよび／またはβ鎖の発現を遮断するまたは減少させるように改変されて
いるαβＴ細胞であり、導入されたａｂＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲαおよびβ鎖に由来
する配列を含み、あるいはエフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現を遮
断するまたは減少させるように改変されているγδＴ細胞であり、導入されたａｂＴＣＲ
のＴＣＲＤは、ＴＣＲγおよびδ鎖に由来する配列を含む。一部の実施形態では、エフェ
クター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプ
レッサーＴ細胞からなる群から選択される。一部の実施形態では、第１および第２のベク
ターは、エフェクター細胞の宿主ゲノム中に組み込まれるウイルスベクター（例えば、レ
ンチウイルスベクター）である。
【0222】
一部の実施形態では、本明細書に記載されるａｂＴＣＲのいずれかにしたがうａｂＴＣ
Ｒをその表面上に発現するａｂＴＣＲエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞）であって、ａ
）ａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列に作動可能に連結した
第１のプロモーター、およびｂ）ａｂＴＣＲの第２のポリペプチド鎖をコードする第２の
核酸配列に作動可能に連結した第２のプロモーターを含むベクターを含み、第１のポリペ
プチド鎖が第１の核酸配列から発現され、第２のポリペプチド鎖が第２の核酸配列から発
現されて、ａｂＴＣＲを形成し、ａｂＴＣＲが、エフェクター細胞の表面に局在する、ａ
ｂＴＣＲエフェクター細胞が提供される。一部の実施形態では、第１および第２のプロモ
ーターは、同じ配列を有する。一部の実施形態では、第１および第２のプロモーターは、
異なる配列を有する。一部の実施形態では、第１および／または第２のプロモーターは、
誘導性である。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖の発現は、第２のポリペプチ
ド鎖の発現とほぼ同じである。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖の発現は、第
２のポリペプチド鎖の発現の少なくとも約２（例えば、少なくとも約２、３、４、５また
はそれよりも多くのいずれか）倍である。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖の
発現は、第２のポリペプチド鎖の発現の約１／２倍以下（例えば、約１／２、１／３、１
／４、１／５またはそれ未満のいずれか以下）である。一部の実施形態では、エフェクタ
ー細胞は、ａｂＴＣＲのＴＣＲＤが由来するＴＣＲサブユニットを発現しない。例えば、
一部の実施形態では、エフェクター細胞はαβＴ細胞であり、導入されたａｂＴＣＲのＴ
ＣＲＤは、ＴＣＲδおよびγ鎖に由来する配列を含み、またはエフェクター細胞はγδＴ
細胞であり、導入されたａｂＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲαおよびβ鎖に由来する配列を
含む。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ａｂＴＣＲのＴＣＲＤが由来する内因
性ＴＣＲサブユニットの一方または両方の発現を遮断するまたは減少させるように改変さ
れている。例えば、一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲαおよび／または
β鎖の発現を遮断するまたは減少させるように改変されているαβＴ細胞であり、導入さ
れたａｂＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲαおよびβ鎖に由来する配列を含み、あるいはエフ
ェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現を遮断するまたは減少させるように
改変されているγδＴ細胞であり、導入されたａｂＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲγおよび
δ鎖に由来する配列を含む。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細
胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッサーＴ細胞からなる群から
選択される。一部の実施形態では、第１および第２のベクターは、エフェクター細胞の宿
主ゲノム中に組み込まれるウイルスベクター（例えば、レンチウイルスベクター）である
。
Ｒをその表面上に発現するａｂＴＣＲエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞）であって、ａ
）ａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列に作動可能に連結した
第１のプロモーター、およびｂ）ａｂＴＣＲの第２のポリペプチド鎖をコードする第２の
核酸配列に作動可能に連結した第２のプロモーターを含むベクターを含み、第１のポリペ
プチド鎖が第１の核酸配列から発現され、第２のポリペプチド鎖が第２の核酸配列から発
現されて、ａｂＴＣＲを形成し、ａｂＴＣＲが、エフェクター細胞の表面に局在する、ａ
ｂＴＣＲエフェクター細胞が提供される。一部の実施形態では、第１および第２のプロモ
ーターは、同じ配列を有する。一部の実施形態では、第１および第２のプロモーターは、
異なる配列を有する。一部の実施形態では、第１および／または第２のプロモーターは、
誘導性である。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖の発現は、第２のポリペプチ
ド鎖の発現とほぼ同じである。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖の発現は、第
２のポリペプチド鎖の発現の少なくとも約２（例えば、少なくとも約２、３、４、５また
はそれよりも多くのいずれか）倍である。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖の
発現は、第２のポリペプチド鎖の発現の約１／２倍以下（例えば、約１／２、１／３、１
／４、１／５またはそれ未満のいずれか以下）である。一部の実施形態では、エフェクタ
ー細胞は、ａｂＴＣＲのＴＣＲＤが由来するＴＣＲサブユニットを発現しない。例えば、
一部の実施形態では、エフェクター細胞はαβＴ細胞であり、導入されたａｂＴＣＲのＴ
ＣＲＤは、ＴＣＲδおよびγ鎖に由来する配列を含み、またはエフェクター細胞はγδＴ
細胞であり、導入されたａｂＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲαおよびβ鎖に由来する配列を
含む。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ａｂＴＣＲのＴＣＲＤが由来する内因
性ＴＣＲサブユニットの一方または両方の発現を遮断するまたは減少させるように改変さ
れている。例えば、一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲαおよび／または
β鎖の発現を遮断するまたは減少させるように改変されているαβＴ細胞であり、導入さ
れたａｂＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲαおよびβ鎖に由来する配列を含み、あるいはエフ
ェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現を遮断するまたは減少させるように
改変されているγδＴ細胞であり、導入されたａｂＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲγおよび
δ鎖に由来する配列を含む。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細
胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッサーＴ細胞からなる群から
選択される。一部の実施形態では、第１および第２のベクターは、エフェクター細胞の宿
主ゲノム中に組み込まれるウイルスベクター（例えば、レンチウイルスベクター）である
。
【0223】
一部の実施形態では、本明細書に記載されるａｂＴＣＲのいずれかにしたがうａｂＴＣ
Ｒをその表面上に発現するａｂＴＣＲエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞）であって、ａ
）ａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列に作動可能に連結した
第１のプロモーター、およびｂ）ａｂＴＣＲの第２のポリペプチド鎖をコードする第２の
核酸配列に作動可能に連結した第２のプロモーターを含む、宿主ゲノム組み込みされたレ
ンチウイルスベクターを含み、第１のポリペプチド鎖が第１の核酸配列から発現され、第
２のポリペプチド鎖が第２の核酸配列から発現されて、ａｂＴＣＲを形成し、ａｂＴＣＲ
が、エフェクター細胞の表面に局在する、ａｂＴＣＲエフェクター細胞が提供される。一
部の実施形態では、第１および第２のプロモーターは、同じ配列を有する。一部の実施形
態では、第１および第２のプロモーターは、異なる配列を有する。一部の実施形態では、
第１および／または第２のプロモーターは、誘導性である。一部の実施形態では、第１の
ポリペプチド鎖の発現は、第２のポリペプチド鎖の発現とほぼ同じである。一部の実施形
態では、第１のポリペプチド鎖の発現は、第２のポリペプチド鎖の発現の少なくとも約２
（例えば、少なくとも約２、３、４、５またはそれよりも多くのいずれか）倍である。一
部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖の発現は、第２のポリペプチド鎖の発現の約１
／２倍以下（例えば、約１／２、１／３、１／４、１／５またはそれ未満のいずれか以下
）である。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ａｂＴＣＲのＴＣＲＤが由来する
ＴＣＲサブユニットを発現しない。例えば、一部の実施形態では、エフェクター細胞はα
βＴ細胞であり、導入されたａｂＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲδおよびγ鎖に由来する配
列を含み、またはエフェクター細胞はγδＴ細胞であり、導入されたａｂＴＣＲのＴＣＲ
Ｄは、ＴＣＲαおよびβ鎖に由来する配列を含む。一部の実施形態では、エフェクター細
胞は、ａｂＴＣＲのＴＣＲＤが由来する内因性ＴＣＲサブユニットの一方または両方の発
現を遮断するまたは減少させるように改変されている。例えば、一部の実施形態では、エ
フェクター細胞は、ＴＣＲαおよび／またはβ鎖の発現を遮断するまたは減少させるよう
に改変されているαβＴ細胞であり、導入されたａｂＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲαおよ
びβ鎖に由来する配列を含み、あるいはエフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ
鎖の発現を遮断するまたは減少させるように改変されているγδＴ細胞であり、導入され
たａｂＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲγおよびδ鎖に由来する配列を含む。一部の実施形態
では、エフェクター細胞は、内因性ＴＣＲ鎖の一方または両方の発現を遮断するまたは減
少させるように改変されている。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、細胞傷害性
Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッサーＴ細胞からなる群
から選択される。
Ｒをその表面上に発現するａｂＴＣＲエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞）であって、ａ
）ａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列に作動可能に連結した
第１のプロモーター、およびｂ）ａｂＴＣＲの第２のポリペプチド鎖をコードする第２の
核酸配列に作動可能に連結した第２のプロモーターを含む、宿主ゲノム組み込みされたレ
ンチウイルスベクターを含み、第１のポリペプチド鎖が第１の核酸配列から発現され、第
２のポリペプチド鎖が第２の核酸配列から発現されて、ａｂＴＣＲを形成し、ａｂＴＣＲ
が、エフェクター細胞の表面に局在する、ａｂＴＣＲエフェクター細胞が提供される。一
部の実施形態では、第１および第２のプロモーターは、同じ配列を有する。一部の実施形
態では、第１および第２のプロモーターは、異なる配列を有する。一部の実施形態では、
第１および／または第２のプロモーターは、誘導性である。一部の実施形態では、第１の
ポリペプチド鎖の発現は、第２のポリペプチド鎖の発現とほぼ同じである。一部の実施形
態では、第１のポリペプチド鎖の発現は、第２のポリペプチド鎖の発現の少なくとも約２
（例えば、少なくとも約２、３、４、５またはそれよりも多くのいずれか）倍である。一
部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖の発現は、第２のポリペプチド鎖の発現の約１
／２倍以下（例えば、約１／２、１／３、１／４、１／５またはそれ未満のいずれか以下
）である。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ａｂＴＣＲのＴＣＲＤが由来する
ＴＣＲサブユニットを発現しない。例えば、一部の実施形態では、エフェクター細胞はα
βＴ細胞であり、導入されたａｂＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲδおよびγ鎖に由来する配
列を含み、またはエフェクター細胞はγδＴ細胞であり、導入されたａｂＴＣＲのＴＣＲ
Ｄは、ＴＣＲαおよびβ鎖に由来する配列を含む。一部の実施形態では、エフェクター細
胞は、ａｂＴＣＲのＴＣＲＤが由来する内因性ＴＣＲサブユニットの一方または両方の発
現を遮断するまたは減少させるように改変されている。例えば、一部の実施形態では、エ
フェクター細胞は、ＴＣＲαおよび／またはβ鎖の発現を遮断するまたは減少させるよう
に改変されているαβＴ細胞であり、導入されたａｂＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲαおよ
びβ鎖に由来する配列を含み、あるいはエフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ
鎖の発現を遮断するまたは減少させるように改変されているγδＴ細胞であり、導入され
たａｂＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲγおよびδ鎖に由来する配列を含む。一部の実施形態
では、エフェクター細胞は、内因性ＴＣＲ鎖の一方または両方の発現を遮断するまたは減
少させるように改変されている。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、細胞傷害性
Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッサーＴ細胞からなる群
から選択される。
【0224】
一部の実施形態では、本明細書に記載されるａｂＴＣＲのいずれかにしたがうａｂＴＣ
Ｒをその表面上に発現するａｂＴＣＲエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞）であって、ａ
）ａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列、およびｂ）ａｂＴＣ
Ｒの第２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列を含むベクターを含み、第１およ
び第２の核酸配列が、単一のプロモーターの制御下にあり、第１のポリペプチド鎖が第１
の核酸配列から発現され、第２のポリペプチド鎖が第２の核酸配列から発現されて、ａｂ
ＴＣＲを形成し、ａｂＴＣＲが、エフェクター細胞の表面に局在する、ａｂＴＣＲエフェ
クター細胞が提供される。一部の実施形態では、プロモーターは、第１の核酸配列の５’
末端に作動可能に連結し、第１の核酸配列の３’末端を第２の核酸配列の５’末端に連結
する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペプチド（例えば、
Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群から選択される核酸
リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモーターの制御下で単
一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、プロモーターは、第２の核酸配列の
５’末端に作動可能に連結し、第２の核酸配列の３’末端を第１の核酸配列の５’末端に
連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペプチド（例え
ば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群から選択される
核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモーターの制御下
で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、プロモーターは、誘導性である
。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ａｂＴＣＲのＴＣＲＤが由来するＴＣＲサ
ブユニットを発現しない。例えば、一部の実施形態では、エフェクター細胞はαβＴ細胞
であり、導入されたａｂＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲδおよびγ鎖に由来する配列を含み
、またはエフェクター細胞はγδＴ細胞であり、導入されたａｂＴＣＲのＴＣＲＤは、Ｔ
ＣＲαおよびβ鎖に由来する配列を含む。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ａ
ｂＴＣＲのＴＣＲＤが由来する内因性ＴＣＲサブユニットの一方または両方の発現を遮断
するまたは減少させるように改変されている。例えば、一部の実施形態では、エフェクタ
ー細胞は、ＴＣＲαおよび／またはβ鎖の発現を遮断するまたは減少させるように改変さ
れているαβＴ細胞であり、導入されたａｂＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲαおよびβ鎖に
由来する配列を含み、あるいはエフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現
を遮断するまたは減少させるように改変されているγδＴ細胞であり、導入されたａｂＴ
ＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲγおよびδ鎖に由来する配列を含む。一部の実施形態では、エ
フェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞および
サプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。一部の実施形態では、ベクターは、エフ
ェクター細胞の宿主ゲノム中に組み込まれるウイルスベクター（例えば、レンチウイルス
ベクター）である。
Ｒをその表面上に発現するａｂＴＣＲエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞）であって、ａ
）ａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列、およびｂ）ａｂＴＣ
Ｒの第２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列を含むベクターを含み、第１およ
び第２の核酸配列が、単一のプロモーターの制御下にあり、第１のポリペプチド鎖が第１
の核酸配列から発現され、第２のポリペプチド鎖が第２の核酸配列から発現されて、ａｂ
ＴＣＲを形成し、ａｂＴＣＲが、エフェクター細胞の表面に局在する、ａｂＴＣＲエフェ
クター細胞が提供される。一部の実施形態では、プロモーターは、第１の核酸配列の５’
末端に作動可能に連結し、第１の核酸配列の３’末端を第２の核酸配列の５’末端に連結
する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペプチド（例えば、
Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群から選択される核酸
リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモーターの制御下で単
一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、プロモーターは、第２の核酸配列の
５’末端に作動可能に連結し、第２の核酸配列の３’末端を第１の核酸配列の５’末端に
連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペプチド（例え
ば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群から選択される
核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモーターの制御下
で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、プロモーターは、誘導性である
。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ａｂＴＣＲのＴＣＲＤが由来するＴＣＲサ
ブユニットを発現しない。例えば、一部の実施形態では、エフェクター細胞はαβＴ細胞
であり、導入されたａｂＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲδおよびγ鎖に由来する配列を含み
、またはエフェクター細胞はγδＴ細胞であり、導入されたａｂＴＣＲのＴＣＲＤは、Ｔ
ＣＲαおよびβ鎖に由来する配列を含む。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ａ
ｂＴＣＲのＴＣＲＤが由来する内因性ＴＣＲサブユニットの一方または両方の発現を遮断
するまたは減少させるように改変されている。例えば、一部の実施形態では、エフェクタ
ー細胞は、ＴＣＲαおよび／またはβ鎖の発現を遮断するまたは減少させるように改変さ
れているαβＴ細胞であり、導入されたａｂＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲαおよびβ鎖に
由来する配列を含み、あるいはエフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現
を遮断するまたは減少させるように改変されているγδＴ細胞であり、導入されたａｂＴ
ＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲγおよびδ鎖に由来する配列を含む。一部の実施形態では、エ
フェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞および
サプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。一部の実施形態では、ベクターは、エフ
ェクター細胞の宿主ゲノム中に組み込まれるウイルスベクター（例えば、レンチウイルス
ベクター）である。
【0225】
一部の実施形態では、本明細書に記載されるａｂＴＣＲのいずれかにしたがうａｂＴＣ
Ｒをその表面上に発現するａｂＴＣＲエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞）であって、ａ
）ａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列、およびｂ）ａｂＴＣ
Ｒの第２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列を含む、宿主ゲノム組み込みされ
たレンチウイルスベクターを含み、第１および第２の核酸配列が、単一のプロモーターの
制御下にあり、第１のポリペプチド鎖が第１の核酸配列から発現され、第２のポリペプチ
ド鎖が第２の核酸配列から発現されて、ａｂＴＣＲを形成し、ａｂＴＣＲが、エフェクタ
ー細胞の表面に局在する、ａｂＴＣＲエフェクター細胞が提供される。一部の実施形態で
は、第１の核酸配列の５’末端に作動可能に連結したプロモーターが存在し、第１の核酸
配列の３’末端を第２の核酸配列の５’末端に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲ
ＥＳ）、および自己切断性２Ａペプチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ
）をコードする核酸からなる群から選択される核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列お
よび第２の核酸配列は、プロモーターの制御下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の
実施形態では、第２の核酸配列の５’末端に作動可能に連結したプロモーターが存在し、
第２の核酸配列の３’末端を第１の核酸配列の５’末端に連結する、内部リボソーム進入
部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペプチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２Ａま
たはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群から選択される核酸リンカーが存在し、第１の
核酸配列および第２の核酸配列は、プロモーターの制御下で単一のＲＮＡとして転写され
る。一部の実施形態では、プロモーターは、誘導性である。一部の実施形態では、エフェ
クター細胞は、ａｂＴＣＲのＴＣＲＤが由来するＴＣＲサブユニットを発現しない。例え
ば、一部の実施形態では、エフェクター細胞はαβＴ細胞であり、導入されたａｂＴＣＲ
のＴＣＲＤは、ＴＣＲδおよびγ鎖に由来する配列を含み、またはエフェクター細胞はγ
δＴ細胞であり、導入されたａｂＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲαおよびβ鎖に由来する配
列を含む。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ａｂＴＣＲのＴＣＲＤが由来する
内因性ＴＣＲサブユニットの一方または両方の発現を遮断するまたは減少させるように改
変されている。例えば、一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲαおよび／ま
たはβ鎖の発現を遮断するまたは減少させるように改変されているαβＴ細胞であり、導
入されたａｂＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲαおよびβ鎖に由来する配列を含み、あるいは
エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現を遮断するまたは減少させるよ
うに改変されているγδＴ細胞であり、導入されたａｂＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲγお
よびδ鎖に由来する配列を含む。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、細胞傷害性
Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッサーＴ細胞からなる群
から選択される。
Ｒをその表面上に発現するａｂＴＣＲエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞）であって、ａ
）ａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列、およびｂ）ａｂＴＣ
Ｒの第２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列を含む、宿主ゲノム組み込みされ
たレンチウイルスベクターを含み、第１および第２の核酸配列が、単一のプロモーターの
制御下にあり、第１のポリペプチド鎖が第１の核酸配列から発現され、第２のポリペプチ
ド鎖が第２の核酸配列から発現されて、ａｂＴＣＲを形成し、ａｂＴＣＲが、エフェクタ
ー細胞の表面に局在する、ａｂＴＣＲエフェクター細胞が提供される。一部の実施形態で
は、第１の核酸配列の５’末端に作動可能に連結したプロモーターが存在し、第１の核酸
配列の３’末端を第２の核酸配列の５’末端に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲ
ＥＳ）、および自己切断性２Ａペプチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ
）をコードする核酸からなる群から選択される核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列お
よび第２の核酸配列は、プロモーターの制御下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の
実施形態では、第２の核酸配列の５’末端に作動可能に連結したプロモーターが存在し、
第２の核酸配列の３’末端を第１の核酸配列の５’末端に連結する、内部リボソーム進入
部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペプチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２Ａま
たはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群から選択される核酸リンカーが存在し、第１の
核酸配列および第２の核酸配列は、プロモーターの制御下で単一のＲＮＡとして転写され
る。一部の実施形態では、プロモーターは、誘導性である。一部の実施形態では、エフェ
クター細胞は、ａｂＴＣＲのＴＣＲＤが由来するＴＣＲサブユニットを発現しない。例え
ば、一部の実施形態では、エフェクター細胞はαβＴ細胞であり、導入されたａｂＴＣＲ
のＴＣＲＤは、ＴＣＲδおよびγ鎖に由来する配列を含み、またはエフェクター細胞はγ
δＴ細胞であり、導入されたａｂＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲαおよびβ鎖に由来する配
列を含む。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ａｂＴＣＲのＴＣＲＤが由来する
内因性ＴＣＲサブユニットの一方または両方の発現を遮断するまたは減少させるように改
変されている。例えば、一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲαおよび／ま
たはβ鎖の発現を遮断するまたは減少させるように改変されているαβＴ細胞であり、導
入されたａｂＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲαおよびβ鎖に由来する配列を含み、あるいは
エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現を遮断するまたは減少させるよ
うに改変されているγδＴ細胞であり、導入されたａｂＴＣＲのＴＣＲＤは、ＴＣＲγお
よびδ鎖に由来する配列を含む。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、細胞傷害性
Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッサーＴ細胞からなる群
から選択される。
【0226】
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲをその表面上に発現するａｂＴＣＲエフェクター細胞
（例えば、Ｔ細胞）であって、ａ）アミノ末端からカルボキシ末端の順に、第１の抗原結
合ドメインと配列番号１５のアミノ酸配列を含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプ
チド鎖をコードする第１の核酸配列；およびｂ）アミノ末端からカルボキシ末端の順に、
第２の抗原結合ドメインと配列番号１６のアミノ酸配列を含む第２のＴＣＲＤとを含む第
２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列、を含み；第１の抗原結合ドメインと第
２の抗原結合ドメインとが、標的抗原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジュールを
形成し、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝
達モジュールをリクルートすることが可能なＴＣＲＭを形成する、ａｂＴＣＲエフェクタ
ー細胞が提供される。一部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト
化、キメラ、半合成または完全合成である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、ａ）配
列番号７０もしくは７１のアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）少なくとも１つ
のＴ細胞共刺激シグナル伝達配列；および／またはｂ）配列番号５０～５２のいずれか１
つのアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）エピトープタグを含む少なくとも１つ
のアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、第１の
抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチドおよび／または第２の抗原
結合ドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含み、第１および／ま
たは第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態で
は、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζからなる群から選択される少なくと
も１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可能である。一部の
実施形態では、ＴＣＲＭは、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。一部の実施形態
では、第１の核酸配列の５’末端に作動可能に連結したプロモーターが存在し、第１の核
酸配列の３’末端を第２の核酸配列の５’末端に連結する、内部リボソーム進入部位（Ｉ
ＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペプチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２
Ａ）をコードする核酸からなる群から選択される核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列
および第２の核酸配列は、プロモーターの制御下で単一のＲＮＡとして転写される。一部
の実施形態では、第２の核酸配列の５’末端に作動可能に連結したプロモーターが存在し
、第２の核酸配列の３’末端を第１の核酸配列の５’末端に連結する、内部リボソーム進
入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペプチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２Ａ
またはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群から選択される核酸リンカーが存在し、第１
の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモーターの制御下で単一のＲＮＡとして転写さ
れる。一部の実施形態では、プロモーターは、誘導性である。一部の実施形態では、標的
抗原は細胞表面抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水化
物および脂質からなる群から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾患関
連抗原、例えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部の実施形態
では、細胞表面抗原は、ＣＤ１９である。一部の実施形態では、標的抗原は、表面提示さ
れたペプチド／ＭＨＣ複合体である。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、
疾患関連抗原（例えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原）に由来するペプ
チドとＭＨＣタンパク質とを含む。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペ
プチドとＭＨＣタンパク質とを含み、ペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７
、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからな
る群から選択されるタンパク質に由来する。一部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、
ＭＨＣクラスＩタンパク質である。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、
ＨＬＡ－Ａである。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の
実施形態では、ＨＬＡ－Ａ０２は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１である。一部の実施形態では
、エフェクター細胞は、γδＴ細胞である。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、
ＴＣＲαおよび／またはβ鎖の発現を遮断するまたは減少させるように改変されているα
βＴ細胞である。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパ
ーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される
。
（例えば、Ｔ細胞）であって、ａ）アミノ末端からカルボキシ末端の順に、第１の抗原結
合ドメインと配列番号１５のアミノ酸配列を含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプ
チド鎖をコードする第１の核酸配列；およびｂ）アミノ末端からカルボキシ末端の順に、
第２の抗原結合ドメインと配列番号１６のアミノ酸配列を含む第２のＴＣＲＤとを含む第
２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列、を含み；第１の抗原結合ドメインと第
２の抗原結合ドメインとが、標的抗原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジュールを
形成し、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝
達モジュールをリクルートすることが可能なＴＣＲＭを形成する、ａｂＴＣＲエフェクタ
ー細胞が提供される。一部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト
化、キメラ、半合成または完全合成である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、ａ）配
列番号７０もしくは７１のアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）少なくとも１つ
のＴ細胞共刺激シグナル伝達配列；および／またはｂ）配列番号５０～５２のいずれか１
つのアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）エピトープタグを含む少なくとも１つ
のアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、第１の
抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチドおよび／または第２の抗原
結合ドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含み、第１および／ま
たは第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態で
は、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζからなる群から選択される少なくと
も１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可能である。一部の
実施形態では、ＴＣＲＭは、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。一部の実施形態
では、第１の核酸配列の５’末端に作動可能に連結したプロモーターが存在し、第１の核
酸配列の３’末端を第２の核酸配列の５’末端に連結する、内部リボソーム進入部位（Ｉ
ＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペプチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２
Ａ）をコードする核酸からなる群から選択される核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列
および第２の核酸配列は、プロモーターの制御下で単一のＲＮＡとして転写される。一部
の実施形態では、第２の核酸配列の５’末端に作動可能に連結したプロモーターが存在し
、第２の核酸配列の３’末端を第１の核酸配列の５’末端に連結する、内部リボソーム進
入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペプチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２Ａ
またはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群から選択される核酸リンカーが存在し、第１
の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモーターの制御下で単一のＲＮＡとして転写さ
れる。一部の実施形態では、プロモーターは、誘導性である。一部の実施形態では、標的
抗原は細胞表面抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水化
物および脂質からなる群から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾患関
連抗原、例えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部の実施形態
では、細胞表面抗原は、ＣＤ１９である。一部の実施形態では、標的抗原は、表面提示さ
れたペプチド／ＭＨＣ複合体である。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、
疾患関連抗原（例えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原）に由来するペプ
チドとＭＨＣタンパク質とを含む。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペ
プチドとＭＨＣタンパク質とを含み、ペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７
、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからな
る群から選択されるタンパク質に由来する。一部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、
ＭＨＣクラスＩタンパク質である。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、
ＨＬＡ－Ａである。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の
実施形態では、ＨＬＡ－Ａ０２は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１である。一部の実施形態では
、エフェクター細胞は、γδＴ細胞である。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、
ＴＣＲαおよび／またはβ鎖の発現を遮断するまたは減少させるように改変されているα
βＴ細胞である。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパ
ーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される
。
【0227】
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲをその表面上に発現するａｂＴＣＲエフェクター細胞
（例えば、Ｔ細胞）であって、ａ）アミノ末端からカルボキシ末端の順に、第１の抗原結
合ドメインと配列番号１７のアミノ酸配列を含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプ
チド鎖をコードする第１の核酸配列；およびｂ）アミノ末端からカルボキシ末端の順に、
第２の抗原結合ドメインと配列番号１８のアミノ酸配列を含む第２のＴＣＲＤとを含む第
２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列、を含み；第１の抗原結合ドメインと第
２の抗原結合ドメインとが、標的抗原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジュールを
形成し、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝
達モジュールをリクルートすることが可能なＴＣＲＭを形成する、ａｂＴＣＲエフェクタ
ー細胞が提供される。一部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト
化、キメラ、半合成または完全合成である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、ａ）配
列番号７０もしくは７１のアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）少なくとも１つ
のＴ細胞共刺激シグナル伝達配列；および／またはｂ）配列番号５０～５２のいずれか１
つのアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）エピトープタグを含む少なくとも１つ
のアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、第１の
抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチドおよび／または第２の抗原
結合ドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含み、第１および／ま
たは第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態で
は、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζからなる群から選択される少なくと
も１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可能である。一部の
実施形態では、ＴＣＲＭは、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。一部の実施形態
では、第１の核酸配列の５’末端に作動可能に連結したプロモーターが存在し、第１の核
酸配列の３’末端を第２の核酸配列の５’末端に連結する、内部リボソーム進入部位（Ｉ
ＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペプチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２
Ａ）をコードする核酸からなる群から選択される核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列
および第２の核酸配列は、プロモーターの制御下で単一のＲＮＡとして転写される。一部
の実施形態では、第２の核酸配列の５’末端に作動可能に連結したプロモーターが存在し
、第２の核酸配列の３’末端を第１の核酸配列の５’末端に連結する、内部リボソーム進
入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペプチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２Ａ
またはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群から選択される核酸リンカーが存在し、第１
の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモーターの制御下で単一のＲＮＡとして転写さ
れる。一部の実施形態では、プロモーターは、誘導性である。一部の実施形態では、標的
抗原は細胞表面抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水化
物および脂質からなる群から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾患関
連抗原、例えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部の実施形態
では、細胞表面抗原は、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄまたは
ＦＣＲＬ５である。一部の実施形態では、標的抗原は、表面提示されたペプチド／ＭＨＣ
複合体である。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例えば
、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク
質とを含む。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタンパ
ク質とを含み、ペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、
ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択されるタ
ンパク質に由来する。一部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタンパ
ク質である。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。一
部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬＡ
－Ａ０２は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１である。一部の実施形態では、エフェクター細胞は
、γδＴ細胞である。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲαおよび／また
はβ鎖の発現を遮断するまたは減少させるように改変されているαβＴ細胞である。一部
の実施形態では、エフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラル
キラーＴ細胞およびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
（例えば、Ｔ細胞）であって、ａ）アミノ末端からカルボキシ末端の順に、第１の抗原結
合ドメインと配列番号１７のアミノ酸配列を含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプ
チド鎖をコードする第１の核酸配列；およびｂ）アミノ末端からカルボキシ末端の順に、
第２の抗原結合ドメインと配列番号１８のアミノ酸配列を含む第２のＴＣＲＤとを含む第
２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列、を含み；第１の抗原結合ドメインと第
２の抗原結合ドメインとが、標的抗原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジュールを
形成し、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝
達モジュールをリクルートすることが可能なＴＣＲＭを形成する、ａｂＴＣＲエフェクタ
ー細胞が提供される。一部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト
化、キメラ、半合成または完全合成である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、ａ）配
列番号７０もしくは７１のアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）少なくとも１つ
のＴ細胞共刺激シグナル伝達配列；および／またはｂ）配列番号５０～５２のいずれか１
つのアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）エピトープタグを含む少なくとも１つ
のアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、第１の
抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチドおよび／または第２の抗原
結合ドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含み、第１および／ま
たは第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態で
は、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζからなる群から選択される少なくと
も１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可能である。一部の
実施形態では、ＴＣＲＭは、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。一部の実施形態
では、第１の核酸配列の５’末端に作動可能に連結したプロモーターが存在し、第１の核
酸配列の３’末端を第２の核酸配列の５’末端に連結する、内部リボソーム進入部位（Ｉ
ＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペプチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２
Ａ）をコードする核酸からなる群から選択される核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列
および第２の核酸配列は、プロモーターの制御下で単一のＲＮＡとして転写される。一部
の実施形態では、第２の核酸配列の５’末端に作動可能に連結したプロモーターが存在し
、第２の核酸配列の３’末端を第１の核酸配列の５’末端に連結する、内部リボソーム進
入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペプチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２Ａ
またはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群から選択される核酸リンカーが存在し、第１
の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモーターの制御下で単一のＲＮＡとして転写さ
れる。一部の実施形態では、プロモーターは、誘導性である。一部の実施形態では、標的
抗原は細胞表面抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水化
物および脂質からなる群から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾患関
連抗原、例えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部の実施形態
では、細胞表面抗原は、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄまたは
ＦＣＲＬ５である。一部の実施形態では、標的抗原は、表面提示されたペプチド／ＭＨＣ
複合体である。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例えば
、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク
質とを含む。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタンパ
ク質とを含み、ペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、
ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択されるタ
ンパク質に由来する。一部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタンパ
ク質である。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。一
部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬＡ
－Ａ０２は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１である。一部の実施形態では、エフェクター細胞は
、γδＴ細胞である。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲαおよび／また
はβ鎖の発現を遮断するまたは減少させるように改変されているαβＴ細胞である。一部
の実施形態では、エフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラル
キラーＴ細胞およびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
【0228】
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲをその表面上に発現するａｂＴＣＲエフェクター細胞
（例えば、Ｔ細胞）であって、ａ）アミノ末端からカルボキシ末端の順に、第１の抗原結
合ドメインと配列番号１９のアミノ酸配列を含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプ
チド鎖をコードする第１の核酸配列；およびｂ）アミノ末端からカルボキシ末端の順に、
第２の抗原結合ドメインと配列番号２０のアミノ酸配列を含む第２のＴＣＲＤとを含む第
２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列、を含み；第１の抗原結合ドメインと第
２の抗原結合ドメインとが、標的抗原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジュールを
形成し、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝
達モジュールをリクルートすることが可能なＴＣＲＭを形成する、ａｂＴＣＲエフェクタ
ー細胞が提供される。一部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト
化、キメラ、半合成または完全合成である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、ａ）配
列番号７０もしくは７１のアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）少なくとも１つ
のＴ細胞共刺激シグナル伝達配列；および／またはｂ）配列番号５０～５２のいずれか１
つのアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）エピトープタグを含む少なくとも１つ
のアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、第１の
抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチドおよび／または第２の抗原
結合ドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含み、第１および／ま
たは第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態で
は、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζからなる群から選択される少なくと
も１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可能である。一部の
実施形態では、ＴＣＲＭは、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。一部の実施形態
では、第１の核酸配列の５’末端に作動可能に連結したプロモーターが存在し、第１の核
酸配列の３’末端を第２の核酸配列の５’末端に連結する、内部リボソーム進入部位（Ｉ
ＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペプチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２
Ａ）をコードする核酸からなる群から選択される核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列
および第２の核酸配列は、プロモーターの制御下で単一のＲＮＡとして転写される。一部
の実施形態では、第２の核酸配列の５’末端に作動可能に連結したプロモーターが存在し
、第２の核酸配列の３’末端を第１の核酸配列の５’末端に連結する、内部リボソーム進
入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペプチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２Ａ
またはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群から選択される核酸リンカーが存在し、第１
の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモーターの制御下で単一のＲＮＡとして転写さ
れる。一部の実施形態では、プロモーターは、誘導性である。一部の実施形態では、標的
抗原は細胞表面抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水化
物および脂質からなる群から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾患関
連抗原、例えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部の実施形態
では、細胞表面抗原は、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄまたは
ＦＣＲＬ５である。一部の実施形態では、標的抗原は、表面提示されたペプチド／ＭＨＣ
複合体である。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例えば
、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク
質とを含む。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタンパ
ク質とを含み、ペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、
ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択されるタ
ンパク質に由来する。一部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタンパ
ク質である。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。一
部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬＡ
－Ａ０２は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１である。一部の実施形態では、エフェクター細胞は
、αβＴ細胞である。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／また
はδ鎖の発現を遮断するまたは減少させるように改変されているγδＴ細胞である。一部
の実施形態では、エフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラル
キラーＴ細胞およびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
（例えば、Ｔ細胞）であって、ａ）アミノ末端からカルボキシ末端の順に、第１の抗原結
合ドメインと配列番号１９のアミノ酸配列を含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプ
チド鎖をコードする第１の核酸配列；およびｂ）アミノ末端からカルボキシ末端の順に、
第２の抗原結合ドメインと配列番号２０のアミノ酸配列を含む第２のＴＣＲＤとを含む第
２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列、を含み；第１の抗原結合ドメインと第
２の抗原結合ドメインとが、標的抗原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジュールを
形成し、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝
達モジュールをリクルートすることが可能なＴＣＲＭを形成する、ａｂＴＣＲエフェクタ
ー細胞が提供される。一部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト
化、キメラ、半合成または完全合成である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、ａ）配
列番号７０もしくは７１のアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）少なくとも１つ
のＴ細胞共刺激シグナル伝達配列；および／またはｂ）配列番号５０～５２のいずれか１
つのアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）エピトープタグを含む少なくとも１つ
のアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、第１の
抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチドおよび／または第２の抗原
結合ドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含み、第１および／ま
たは第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態で
は、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζからなる群から選択される少なくと
も１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可能である。一部の
実施形態では、ＴＣＲＭは、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。一部の実施形態
では、第１の核酸配列の５’末端に作動可能に連結したプロモーターが存在し、第１の核
酸配列の３’末端を第２の核酸配列の５’末端に連結する、内部リボソーム進入部位（Ｉ
ＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペプチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２
Ａ）をコードする核酸からなる群から選択される核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列
および第２の核酸配列は、プロモーターの制御下で単一のＲＮＡとして転写される。一部
の実施形態では、第２の核酸配列の５’末端に作動可能に連結したプロモーターが存在し
、第２の核酸配列の３’末端を第１の核酸配列の５’末端に連結する、内部リボソーム進
入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペプチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２Ａ
またはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群から選択される核酸リンカーが存在し、第１
の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモーターの制御下で単一のＲＮＡとして転写さ
れる。一部の実施形態では、プロモーターは、誘導性である。一部の実施形態では、標的
抗原は細胞表面抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水化
物および脂質からなる群から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾患関
連抗原、例えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部の実施形態
では、細胞表面抗原は、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄまたは
ＦＣＲＬ５である。一部の実施形態では、標的抗原は、表面提示されたペプチド／ＭＨＣ
複合体である。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例えば
、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク
質とを含む。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタンパ
ク質とを含み、ペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、
ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択されるタ
ンパク質に由来する。一部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタンパ
ク質である。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。一
部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬＡ
－Ａ０２は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１である。一部の実施形態では、エフェクター細胞は
、αβＴ細胞である。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／また
はδ鎖の発現を遮断するまたは減少させるように改変されているγδＴ細胞である。一部
の実施形態では、エフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラル
キラーＴ細胞およびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
【0229】
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲをその表面上に発現するａｂＴＣＲエフェクター細胞
（例えば、Ｔ細胞）であって、ａ）アミノ末端からカルボキシ末端の順に、第１の抗原結
合ドメインと配列番号２１のアミノ酸配列を含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプ
チド鎖をコードする第１の核酸配列；およびｂ）アミノ末端からカルボキシ末端の順に、
第２の抗原結合ドメインと配列番号２２のアミノ酸配列を含む第２のＴＣＲＤとを含む第
２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列、を含み；第１の抗原結合ドメインと第
２の抗原結合ドメインとが、標的抗原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジュールを
形成し、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝
達モジュールをリクルートすることが可能なＴＣＲＭを形成する、ａｂＴＣＲエフェクタ
ー細胞が提供される。一部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト
化、キメラ、半合成または完全合成である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、ａ）配
列番号７０もしくは７１のアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）少なくとも１つ
のＴ細胞共刺激シグナル伝達配列；および／またはｂ）配列番号５０～５２のいずれか１
つのアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）エピトープタグを含む少なくとも１つ
のアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、第１の
抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチドおよび／または第２の抗原
結合ドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含み、第１および／ま
たは第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態で
は、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζからなる群から選択される少なくと
も１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可能である。一部の
実施形態では、ＴＣＲＭは、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。一部の実施形態
では、第１の核酸配列の５’末端に作動可能に連結したプロモーターが存在し、第１の核
酸配列の３’末端を第２の核酸配列の５’末端に連結する、内部リボソーム進入部位（Ｉ
ＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペプチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２
Ａ）をコードする核酸からなる群から選択される核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列
および第２の核酸配列は、プロモーターの制御下で単一のＲＮＡとして転写される。一部
の実施形態では、第２の核酸配列の５’末端に作動可能に連結したプロモーターが存在し
、第２の核酸配列の３’末端を第１の核酸配列の５’末端に連結する、内部リボソーム進
入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペプチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２Ａ
またはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群から選択される核酸リンカーが存在し、第１
の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモーターの制御下で単一のＲＮＡとして転写さ
れる。一部の実施形態では、プロモーターは、誘導性である。一部の実施形態では、標的
抗原は細胞表面抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水化
物および脂質からなる群から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾患関
連抗原、例えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部の実施形態
では、細胞表面抗原は、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄまたは
ＦＣＲＬ５である。一部の実施形態では、標的抗原は、表面提示されたペプチド／ＭＨＣ
複合体である。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例えば
、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク
質とを含む。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタンパ
ク質とを含み、ペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、
ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択されるタ
ンパク質に由来する。一部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタンパ
ク質である。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。一
部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬＡ
－Ａ０２は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１である。一部の実施形態では、エフェクター細胞は
、αβＴ細胞である。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／また
はδ鎖の発現を遮断するまたは減少させるように改変されているγδＴ細胞である。一部
の実施形態では、エフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラル
キラーＴ細胞およびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
（例えば、Ｔ細胞）であって、ａ）アミノ末端からカルボキシ末端の順に、第１の抗原結
合ドメインと配列番号２１のアミノ酸配列を含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプ
チド鎖をコードする第１の核酸配列；およびｂ）アミノ末端からカルボキシ末端の順に、
第２の抗原結合ドメインと配列番号２２のアミノ酸配列を含む第２のＴＣＲＤとを含む第
２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列、を含み；第１の抗原結合ドメインと第
２の抗原結合ドメインとが、標的抗原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジュールを
形成し、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝
達モジュールをリクルートすることが可能なＴＣＲＭを形成する、ａｂＴＣＲエフェクタ
ー細胞が提供される。一部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト
化、キメラ、半合成または完全合成である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、ａ）配
列番号７０もしくは７１のアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）少なくとも１つ
のＴ細胞共刺激シグナル伝達配列；および／またはｂ）配列番号５０～５２のいずれか１
つのアミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）エピトープタグを含む少なくとも１つ
のアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、第１の
抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチドおよび／または第２の抗原
結合ドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含み、第１および／ま
たは第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態で
は、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζからなる群から選択される少なくと
も１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可能である。一部の
実施形態では、ＴＣＲＭは、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。一部の実施形態
では、第１の核酸配列の５’末端に作動可能に連結したプロモーターが存在し、第１の核
酸配列の３’末端を第２の核酸配列の５’末端に連結する、内部リボソーム進入部位（Ｉ
ＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペプチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２
Ａ）をコードする核酸からなる群から選択される核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列
および第２の核酸配列は、プロモーターの制御下で単一のＲＮＡとして転写される。一部
の実施形態では、第２の核酸配列の５’末端に作動可能に連結したプロモーターが存在し
、第２の核酸配列の３’末端を第１の核酸配列の５’末端に連結する、内部リボソーム進
入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペプチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２Ａ
またはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群から選択される核酸リンカーが存在し、第１
の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモーターの制御下で単一のＲＮＡとして転写さ
れる。一部の実施形態では、プロモーターは、誘導性である。一部の実施形態では、標的
抗原は細胞表面抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水化
物および脂質からなる群から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾患関
連抗原、例えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部の実施形態
では、細胞表面抗原は、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄまたは
ＦＣＲＬ５である。一部の実施形態では、標的抗原は、表面提示されたペプチド／ＭＨＣ
複合体である。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例えば
、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク
質とを含む。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタンパ
ク質とを含み、ペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、
ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択されるタ
ンパク質に由来する。一部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタンパ
ク質である。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。一
部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬＡ
－Ａ０２は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１である。一部の実施形態では、エフェクター細胞は
、αβＴ細胞である。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／また
はδ鎖の発現を遮断するまたは減少させるように改変されているγδＴ細胞である。一部
の実施形態では、エフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラル
キラーＴ細胞およびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
【0230】
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲをその表面上に発現するａｂＴＣＲエフェクター細胞
（例えば、Ｔ細胞）であって、ａ）配列番号２３のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲ
ドメインを含むａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列、および
ｂ）配列番号２４のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣＲドメインを含むａｂＴＣＲの第
２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列、を含み、第１のポリペプチド鎖が第１
の核酸配列から発現され、第２のポリペプチド鎖が第２の核酸配列から発現されて、ａｂ
ＴＣＲを形成し、ａｂＴＣＲが、エフェクター細胞の表面に局在する、ａｂＴＣＲエフェ
クター細胞が提供される。一部の実施形態では、第１の核酸配列の５’末端に作動可能に
連結したプロモーターが存在し、第１の核酸配列の３’末端を第２の核酸配列の５’末端
に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペプチド（例
えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群から選択され
る核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモーターの制御
下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、第２の核酸配列の５’末端に
作動可能に連結したプロモーターが存在し、第２の核酸配列の３’末端を第１の核酸配列
の５’末端に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペ
プチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群か
ら選択される核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモー
ターの制御下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、プロモーターは、
誘導性である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例
えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ
４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含
む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピ
トープタグは、配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形
態では、第１のポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１の
シグナルペプチドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴ
ＣＲドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態
では、第１および／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含
む（例えば、それからなる）。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、γδＴ細胞で
ある。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲαおよび／またはβ鎖の発現を
遮断するまたは減少させるように改変されているαβＴ細胞である。一部の実施形態では
、エフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞お
よびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
（例えば、Ｔ細胞）であって、ａ）配列番号２３のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲ
ドメインを含むａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列、および
ｂ）配列番号２４のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣＲドメインを含むａｂＴＣＲの第
２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列、を含み、第１のポリペプチド鎖が第１
の核酸配列から発現され、第２のポリペプチド鎖が第２の核酸配列から発現されて、ａｂ
ＴＣＲを形成し、ａｂＴＣＲが、エフェクター細胞の表面に局在する、ａｂＴＣＲエフェ
クター細胞が提供される。一部の実施形態では、第１の核酸配列の５’末端に作動可能に
連結したプロモーターが存在し、第１の核酸配列の３’末端を第２の核酸配列の５’末端
に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペプチド（例
えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群から選択され
る核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモーターの制御
下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、第２の核酸配列の５’末端に
作動可能に連結したプロモーターが存在し、第２の核酸配列の３’末端を第１の核酸配列
の５’末端に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペ
プチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群か
ら選択される核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモー
ターの制御下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、プロモーターは、
誘導性である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例
えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ
４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含
む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピ
トープタグは、配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形
態では、第１のポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１の
シグナルペプチドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴ
ＣＲドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態
では、第１および／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含
む（例えば、それからなる）。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、γδＴ細胞で
ある。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲαおよび／またはβ鎖の発現を
遮断するまたは減少させるように改変されているαβＴ細胞である。一部の実施形態では
、エフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞お
よびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
【0231】
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲをその表面上に発現するａｂＴＣＲエフェクター細胞
（例えば、Ｔ細胞）であって、ａ）配列番号２５のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲ
ドメインを含むａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列、および
ｂ）配列番号２６のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣＲドメインを含むａｂＴＣＲの第
２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列、を含み、第１のポリペプチド鎖が第１
の核酸配列から発現され、第２のポリペプチド鎖が第２の核酸配列から発現されて、ａｂ
ＴＣＲを形成し、ａｂＴＣＲが、エフェクター細胞の表面に局在する、ａｂＴＣＲエフェ
クター細胞が提供される。一部の実施形態では、第１の核酸配列の５’末端に作動可能に
連結したプロモーターが存在し、第１の核酸配列の３’末端を第２の核酸配列の５’末端
に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペプチド（例
えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群から選択され
る核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモーターの制御
下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、第２の核酸配列の５’末端に
作動可能に連結したプロモーターが存在し、第２の核酸配列の３’末端を第１の核酸配列
の５’末端に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペ
プチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群か
ら選択される核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモー
ターの制御下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、プロモーターは、
誘導性である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例
えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ
４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含
む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピ
トープタグは、配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形
態では、第１のポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１の
シグナルペプチドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴ
ＣＲドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態
では、第１および／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含
む（例えば、それからなる）。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、γδＴ細胞で
ある。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲαおよび／またはβ鎖の発現を
遮断するまたは減少させるように改変されているαβＴ細胞である。一部の実施形態では
、エフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞お
よびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
（例えば、Ｔ細胞）であって、ａ）配列番号２５のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲ
ドメインを含むａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列、および
ｂ）配列番号２６のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣＲドメインを含むａｂＴＣＲの第
２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列、を含み、第１のポリペプチド鎖が第１
の核酸配列から発現され、第２のポリペプチド鎖が第２の核酸配列から発現されて、ａｂ
ＴＣＲを形成し、ａｂＴＣＲが、エフェクター細胞の表面に局在する、ａｂＴＣＲエフェ
クター細胞が提供される。一部の実施形態では、第１の核酸配列の５’末端に作動可能に
連結したプロモーターが存在し、第１の核酸配列の３’末端を第２の核酸配列の５’末端
に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペプチド（例
えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群から選択され
る核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモーターの制御
下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、第２の核酸配列の５’末端に
作動可能に連結したプロモーターが存在し、第２の核酸配列の３’末端を第１の核酸配列
の５’末端に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペ
プチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群か
ら選択される核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモー
ターの制御下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、プロモーターは、
誘導性である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例
えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ
４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含
む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピ
トープタグは、配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形
態では、第１のポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１の
シグナルペプチドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴ
ＣＲドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態
では、第１および／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含
む（例えば、それからなる）。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、γδＴ細胞で
ある。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲαおよび／またはβ鎖の発現を
遮断するまたは減少させるように改変されているαβＴ細胞である。一部の実施形態では
、エフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞お
よびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
【0232】
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲをその表面上に発現するａｂＴＣＲエフェクター細胞
（例えば、Ｔ細胞）であって、ａ）配列番号２７のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲ
ドメインを含むａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列、および
ｂ）配列番号２８のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣＲドメインを含むａｂＴＣＲの第
２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列、を含み、第１のポリペプチド鎖が第１
の核酸配列から発現され、第２のポリペプチド鎖が第２の核酸配列から発現されて、ａｂ
ＴＣＲを形成し、ａｂＴＣＲが、エフェクター細胞の表面に局在する、ａｂＴＣＲエフェ
クター細胞が提供される。一部の実施形態では、第１の核酸配列の５’末端に作動可能に
連結したプロモーターが存在し、第１の核酸配列の３’末端を第２の核酸配列の５’末端
に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペプチド（例
えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群から選択され
る核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモーターの制御
下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、第２の核酸配列の５’末端に
作動可能に連結したプロモーターが存在し、第２の核酸配列の３’末端を第１の核酸配列
の５’末端に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペ
プチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群か
ら選択される核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモー
ターの制御下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、プロモーターは、
誘導性である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例
えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ
４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含
む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピ
トープタグは、配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形
態では、第１のポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１の
シグナルペプチドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴ
ＣＲドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態
では、第１および／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含
む（例えば、それからなる）。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、γδＴ細胞で
ある。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲαおよび／またはβ鎖の発現を
遮断するまたは減少させるように改変されているαβＴ細胞である。一部の実施形態では
、エフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞お
よびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
（例えば、Ｔ細胞）であって、ａ）配列番号２７のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲ
ドメインを含むａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列、および
ｂ）配列番号２８のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣＲドメインを含むａｂＴＣＲの第
２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列、を含み、第１のポリペプチド鎖が第１
の核酸配列から発現され、第２のポリペプチド鎖が第２の核酸配列から発現されて、ａｂ
ＴＣＲを形成し、ａｂＴＣＲが、エフェクター細胞の表面に局在する、ａｂＴＣＲエフェ
クター細胞が提供される。一部の実施形態では、第１の核酸配列の５’末端に作動可能に
連結したプロモーターが存在し、第１の核酸配列の３’末端を第２の核酸配列の５’末端
に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペプチド（例
えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群から選択され
る核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモーターの制御
下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、第２の核酸配列の５’末端に
作動可能に連結したプロモーターが存在し、第２の核酸配列の３’末端を第１の核酸配列
の５’末端に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペ
プチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群か
ら選択される核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモー
ターの制御下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、プロモーターは、
誘導性である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例
えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ
４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含
む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピ
トープタグは、配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形
態では、第１のポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１の
シグナルペプチドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴ
ＣＲドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態
では、第１および／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含
む（例えば、それからなる）。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、γδＴ細胞で
ある。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲαおよび／またはβ鎖の発現を
遮断するまたは減少させるように改変されているαβＴ細胞である。一部の実施形態では
、エフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞お
よびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
【0233】
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲをその表面上に発現するａｂＴＣＲエフェクター細胞
（例えば、Ｔ細胞）であって、ａ）配列番号２９のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲ
ドメインを含むａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列、および
ｂ）配列番号３０のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣＲドメインを含むａｂＴＣＲの第
２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列、を含み、第１のポリペプチド鎖が第１
の核酸配列から発現され、第２のポリペプチド鎖が第２の核酸配列から発現されて、ａｂ
ＴＣＲを形成し、ａｂＴＣＲが、エフェクター細胞の表面に局在する、ａｂＴＣＲエフェ
クター細胞が提供される。一部の実施形態では、第１の核酸配列の５’末端に作動可能に
連結したプロモーターが存在し、第１の核酸配列の３’末端を第２の核酸配列の５’末端
に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペプチド（例
えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群から選択され
る核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモーターの制御
下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、第２の核酸配列の５’末端に
作動可能に連結したプロモーターが存在し、第２の核酸配列の３’末端を第１の核酸配列
の５’末端に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペ
プチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群か
ら選択される核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモー
ターの制御下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、プロモーターは、
誘導性である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例
えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ
４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含
む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピ
トープタグは、配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形
態では、第１のポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１の
シグナルペプチドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴ
ＣＲドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態
では、第１および／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含
む（例えば、それからなる）。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、αβＴ細胞で
ある。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現を
遮断するまたは減少させるように改変されているγδＴ細胞である。一部の実施形態では
、エフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞お
よびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
（例えば、Ｔ細胞）であって、ａ）配列番号２９のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲ
ドメインを含むａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列、および
ｂ）配列番号３０のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣＲドメインを含むａｂＴＣＲの第
２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列、を含み、第１のポリペプチド鎖が第１
の核酸配列から発現され、第２のポリペプチド鎖が第２の核酸配列から発現されて、ａｂ
ＴＣＲを形成し、ａｂＴＣＲが、エフェクター細胞の表面に局在する、ａｂＴＣＲエフェ
クター細胞が提供される。一部の実施形態では、第１の核酸配列の５’末端に作動可能に
連結したプロモーターが存在し、第１の核酸配列の３’末端を第２の核酸配列の５’末端
に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペプチド（例
えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群から選択され
る核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモーターの制御
下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、第２の核酸配列の５’末端に
作動可能に連結したプロモーターが存在し、第２の核酸配列の３’末端を第１の核酸配列
の５’末端に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペ
プチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群か
ら選択される核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモー
ターの制御下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、プロモーターは、
誘導性である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例
えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ
４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含
む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピ
トープタグは、配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形
態では、第１のポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１の
シグナルペプチドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴ
ＣＲドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態
では、第１および／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含
む（例えば、それからなる）。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、αβＴ細胞で
ある。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現を
遮断するまたは減少させるように改変されているγδＴ細胞である。一部の実施形態では
、エフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞お
よびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
【0234】
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲをその表面上に発現するａｂＴＣＲエフェクター細胞
（例えば、Ｔ細胞）であって、ａ）配列番号３１のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲ
ドメインを含むａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列、および
ｂ）配列番号３２のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣＲドメインを含むａｂＴＣＲの第
２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列、を含み、第１のポリペプチド鎖が第１
の核酸配列から発現され、第２のポリペプチド鎖が第２の核酸配列から発現されて、ａｂ
ＴＣＲを形成し、ａｂＴＣＲが、エフェクター細胞の表面に局在する、ａｂＴＣＲエフェ
クター細胞が提供される。一部の実施形態では、第１の核酸配列の５’末端に作動可能に
連結したプロモーターが存在し、第１の核酸配列の３’末端を第２の核酸配列の５’末端
に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペプチド（例
えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群から選択され
る核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモーターの制御
下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、第２の核酸配列の５’末端に
作動可能に連結したプロモーターが存在し、第２の核酸配列の３’末端を第１の核酸配列
の５’末端に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペ
プチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群か
ら選択される核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモー
ターの制御下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、プロモーターは、
誘導性である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例
えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ
４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含
む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピ
トープタグは、配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形
態では、第１のポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１の
シグナルペプチドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴ
ＣＲドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態
では、第１および／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含
む（例えば、それからなる）。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、αβＴ細胞で
ある。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現を
遮断するまたは減少させるように改変されているγδＴ細胞である。一部の実施形態では
、エフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞お
よびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
（例えば、Ｔ細胞）であって、ａ）配列番号３１のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲ
ドメインを含むａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列、および
ｂ）配列番号３２のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣＲドメインを含むａｂＴＣＲの第
２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列、を含み、第１のポリペプチド鎖が第１
の核酸配列から発現され、第２のポリペプチド鎖が第２の核酸配列から発現されて、ａｂ
ＴＣＲを形成し、ａｂＴＣＲが、エフェクター細胞の表面に局在する、ａｂＴＣＲエフェ
クター細胞が提供される。一部の実施形態では、第１の核酸配列の５’末端に作動可能に
連結したプロモーターが存在し、第１の核酸配列の３’末端を第２の核酸配列の５’末端
に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペプチド（例
えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群から選択され
る核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモーターの制御
下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、第２の核酸配列の５’末端に
作動可能に連結したプロモーターが存在し、第２の核酸配列の３’末端を第１の核酸配列
の５’末端に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペ
プチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群か
ら選択される核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモー
ターの制御下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、プロモーターは、
誘導性である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例
えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ
４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含
む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピ
トープタグは、配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形
態では、第１のポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１の
シグナルペプチドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴ
ＣＲドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態
では、第１および／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含
む（例えば、それからなる）。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、αβＴ細胞で
ある。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現を
遮断するまたは減少させるように改変されているγδＴ細胞である。一部の実施形態では
、エフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞お
よびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
【0235】
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲをその表面上に発現するａｂＴＣＲエフェクター細胞
（例えば、Ｔ細胞）であって、ａ）配列番号３３のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲ
ドメインを含むａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列、および
ｂ）配列番号３４のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣＲドメインを含むａｂＴＣＲの第
２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列、を含み、第１のポリペプチド鎖が第１
の核酸配列から発現され、第２のポリペプチド鎖が第２の核酸配列から発現されて、ａｂ
ＴＣＲを形成し、ａｂＴＣＲが、エフェクター細胞の表面に局在する、ａｂＴＣＲエフェ
クター細胞が提供される。一部の実施形態では、第１の核酸配列の５’末端に作動可能に
連結したプロモーターが存在し、第１の核酸配列の３’末端を第２の核酸配列の５’末端
に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペプチド（例
えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群から選択され
る核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモーターの制御
下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、第２の核酸配列の５’末端に
作動可能に連結したプロモーターが存在し、第２の核酸配列の３’末端を第１の核酸配列
の５’末端に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペ
プチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群か
ら選択される核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモー
ターの制御下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、プロモーターは、
誘導性である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例
えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ
４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含
む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピ
トープタグは、配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形
態では、第１のポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１の
シグナルペプチドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴ
ＣＲドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態
では、第１および／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含
む（例えば、それからなる）。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、αβＴ細胞で
ある。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現を
遮断するまたは減少させるように改変されているγδＴ細胞である。一部の実施形態では
、エフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞お
よびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
（例えば、Ｔ細胞）であって、ａ）配列番号３３のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲ
ドメインを含むａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列、および
ｂ）配列番号３４のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣＲドメインを含むａｂＴＣＲの第
２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列、を含み、第１のポリペプチド鎖が第１
の核酸配列から発現され、第２のポリペプチド鎖が第２の核酸配列から発現されて、ａｂ
ＴＣＲを形成し、ａｂＴＣＲが、エフェクター細胞の表面に局在する、ａｂＴＣＲエフェ
クター細胞が提供される。一部の実施形態では、第１の核酸配列の５’末端に作動可能に
連結したプロモーターが存在し、第１の核酸配列の３’末端を第２の核酸配列の５’末端
に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペプチド（例
えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群から選択され
る核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモーターの制御
下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、第２の核酸配列の５’末端に
作動可能に連結したプロモーターが存在し、第２の核酸配列の３’末端を第１の核酸配列
の５’末端に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペ
プチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群か
ら選択される核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモー
ターの制御下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、プロモーターは、
誘導性である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例
えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ
４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含
む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピ
トープタグは、配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形
態では、第１のポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１の
シグナルペプチドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴ
ＣＲドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態
では、第１および／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含
む（例えば、それからなる）。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、αβＴ細胞で
ある。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現を
遮断するまたは減少させるように改変されているγδＴ細胞である。一部の実施形態では
、エフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞お
よびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
【0236】
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲをその表面上に発現するａｂＴＣＲエフェクター細胞
（例えば、Ｔ細胞）であって、ａ）配列番号３５のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲ
ドメインを含むａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列、および
ｂ）配列番号３６のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣＲドメインを含むａｂＴＣＲの第
２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列、を含み、第１のポリペプチド鎖が第１
の核酸配列から発現され、第２のポリペプチド鎖が第２の核酸配列から発現されて、ａｂ
ＴＣＲを形成し、ａｂＴＣＲが、エフェクター細胞の表面に局在する、ａｂＴＣＲエフェ
クター細胞が提供される。一部の実施形態では、第１の核酸配列の５’末端に作動可能に
連結したプロモーターが存在し、第１の核酸配列の３’末端を第２の核酸配列の５’末端
に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペプチド（例
えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群から選択され
る核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモーターの制御
下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、第２の核酸配列の５’末端に
作動可能に連結したプロモーターが存在し、第２の核酸配列の３’末端を第１の核酸配列
の５’末端に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペ
プチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群か
ら選択される核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモー
ターの制御下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、プロモーターは、
誘導性である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例
えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ
４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含
む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピ
トープタグは、配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形
態では、第１のポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１の
シグナルペプチドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴ
ＣＲドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態
では、第１および／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含
む（例えば、それからなる）。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、αβＴ細胞で
ある。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現を
遮断するまたは減少させるように改変されているγδＴ細胞である。一部の実施形態では
、エフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞お
よびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
（例えば、Ｔ細胞）であって、ａ）配列番号３５のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲ
ドメインを含むａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列、および
ｂ）配列番号３６のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣＲドメインを含むａｂＴＣＲの第
２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列、を含み、第１のポリペプチド鎖が第１
の核酸配列から発現され、第２のポリペプチド鎖が第２の核酸配列から発現されて、ａｂ
ＴＣＲを形成し、ａｂＴＣＲが、エフェクター細胞の表面に局在する、ａｂＴＣＲエフェ
クター細胞が提供される。一部の実施形態では、第１の核酸配列の５’末端に作動可能に
連結したプロモーターが存在し、第１の核酸配列の３’末端を第２の核酸配列の５’末端
に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペプチド（例
えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群から選択され
る核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモーターの制御
下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、第２の核酸配列の５’末端に
作動可能に連結したプロモーターが存在し、第２の核酸配列の３’末端を第１の核酸配列
の５’末端に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペ
プチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群か
ら選択される核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモー
ターの制御下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、プロモーターは、
誘導性である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例
えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ
４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含
む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピ
トープタグは、配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形
態では、第１のポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１の
シグナルペプチドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴ
ＣＲドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態
では、第１および／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含
む（例えば、それからなる）。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、αβＴ細胞で
ある。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現を
遮断するまたは減少させるように改変されているγδＴ細胞である。一部の実施形態では
、エフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞お
よびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
【0237】
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲをその表面上に発現するａｂＴＣＲエフェクター細胞
（例えば、Ｔ細胞）であって、ａ）配列番号４２のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲ
ドメインを含むａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列、および
ｂ）配列番号４３のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣＲドメインを含むａｂＴＣＲの第
２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列、を含み、第１のポリペプチド鎖が第１
の核酸配列から発現され、第２のポリペプチド鎖が第２の核酸配列から発現されて、ａｂ
ＴＣＲを形成し、ａｂＴＣＲが、エフェクター細胞の表面に局在する、ａｂＴＣＲエフェ
クター細胞が提供される。一部の実施形態では、第１の核酸配列の５’末端に作動可能に
連結したプロモーターが存在し、第１の核酸配列の３’末端を第２の核酸配列の５’末端
に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペプチド（例
えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群から選択され
る核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモーターの制御
下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、第２の核酸配列の５’末端に
作動可能に連結したプロモーターが存在し、第２の核酸配列の３’末端を第１の核酸配列
の５’末端に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペ
プチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群か
ら選択される核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモー
ターの制御下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、プロモーターは、
誘導性である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例
えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ
４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含
む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピ
トープタグは、配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形
態では、第１のポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１の
シグナルペプチドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴ
ＣＲドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態
では、第１および／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含
む（例えば、それからなる）。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、αβＴ細胞で
ある。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現を
遮断するまたは減少させるように改変されているγδＴ細胞である。一部の実施形態では
、エフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞お
よびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
（例えば、Ｔ細胞）であって、ａ）配列番号４２のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲ
ドメインを含むａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列、および
ｂ）配列番号４３のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣＲドメインを含むａｂＴＣＲの第
２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列、を含み、第１のポリペプチド鎖が第１
の核酸配列から発現され、第２のポリペプチド鎖が第２の核酸配列から発現されて、ａｂ
ＴＣＲを形成し、ａｂＴＣＲが、エフェクター細胞の表面に局在する、ａｂＴＣＲエフェ
クター細胞が提供される。一部の実施形態では、第１の核酸配列の５’末端に作動可能に
連結したプロモーターが存在し、第１の核酸配列の３’末端を第２の核酸配列の５’末端
に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペプチド（例
えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群から選択され
る核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモーターの制御
下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、第２の核酸配列の５’末端に
作動可能に連結したプロモーターが存在し、第２の核酸配列の３’末端を第１の核酸配列
の５’末端に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペ
プチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群か
ら選択される核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモー
ターの制御下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、プロモーターは、
誘導性である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例
えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ
４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含
む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピ
トープタグは、配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形
態では、第１のポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１の
シグナルペプチドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴ
ＣＲドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態
では、第１および／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含
む（例えば、それからなる）。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、αβＴ細胞で
ある。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現を
遮断するまたは減少させるように改変されているγδＴ細胞である。一部の実施形態では
、エフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞お
よびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
【0238】
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲをその表面上に発現するａｂＴＣＲエフェクター細胞
（例えば、Ｔ細胞）であって、ａ）配列番号４２のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲ
ドメインを含むａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列、および
ｂ）配列番号５４のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣＲドメインを含むａｂＴＣＲの第
２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列、を含み、第１のポリペプチド鎖が第１
の核酸配列から発現され、第２のポリペプチド鎖が第２の核酸配列から発現されて、ａｂ
ＴＣＲを形成し、ａｂＴＣＲが、エフェクター細胞の表面に局在する、ａｂＴＣＲエフェ
クター細胞が提供される。一部の実施形態では、第１の核酸配列の５’末端に作動可能に
連結したプロモーターが存在し、第１の核酸配列の３’末端を第２の核酸配列の５’末端
に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペプチド（例
えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群から選択され
る核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモーターの制御
下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、第２の核酸配列の５’末端に
作動可能に連結したプロモーターが存在し、第２の核酸配列の３’末端を第１の核酸配列
の５’末端に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペ
プチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群か
ら選択される核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモー
ターの制御下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、プロモーターは、
誘導性である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例
えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ
４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含
む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピ
トープタグは、配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形
態では、第１のポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１の
シグナルペプチドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴ
ＣＲドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態
では、第１および／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含
む（例えば、それからなる）。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、αβＴ細胞で
ある。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現を
遮断するまたは減少させるように改変されているγδＴ細胞である。一部の実施形態では
、エフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞お
よびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
（例えば、Ｔ細胞）であって、ａ）配列番号４２のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲ
ドメインを含むａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列、および
ｂ）配列番号５４のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣＲドメインを含むａｂＴＣＲの第
２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列、を含み、第１のポリペプチド鎖が第１
の核酸配列から発現され、第２のポリペプチド鎖が第２の核酸配列から発現されて、ａｂ
ＴＣＲを形成し、ａｂＴＣＲが、エフェクター細胞の表面に局在する、ａｂＴＣＲエフェ
クター細胞が提供される。一部の実施形態では、第１の核酸配列の５’末端に作動可能に
連結したプロモーターが存在し、第１の核酸配列の３’末端を第２の核酸配列の５’末端
に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペプチド（例
えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群から選択され
る核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモーターの制御
下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、第２の核酸配列の５’末端に
作動可能に連結したプロモーターが存在し、第２の核酸配列の３’末端を第１の核酸配列
の５’末端に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペ
プチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群か
ら選択される核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモー
ターの制御下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、プロモーターは、
誘導性である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例
えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ
４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含
む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピ
トープタグは、配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形
態では、第１のポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１の
シグナルペプチドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴ
ＣＲドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態
では、第１および／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含
む（例えば、それからなる）。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、αβＴ細胞で
ある。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現を
遮断するまたは減少させるように改変されているγδＴ細胞である。一部の実施形態では
、エフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞お
よびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
【0239】
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲをその表面上に発現するａｂＴＣＲエフェクター細胞
（例えば、Ｔ細胞）であって、ａ）配列番号５５のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲ
ドメインを含むａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列、および
ｂ）配列番号５４のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣＲドメインを含むａｂＴＣＲの第
２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列、を含み、第１のポリペプチド鎖が第１
の核酸配列から発現され、第２のポリペプチド鎖が第２の核酸配列から発現されて、ａｂ
ＴＣＲを形成し、ａｂＴＣＲが、エフェクター細胞の表面に局在する、ａｂＴＣＲエフェ
クター細胞が提供される。一部の実施形態では、第１の核酸配列の５’末端に作動可能に
連結したプロモーターが存在し、第１の核酸配列の３’末端を第２の核酸配列の５’末端
に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペプチド（例
えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群から選択され
る核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモーターの制御
下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、第２の核酸配列の５’末端に
作動可能に連結したプロモーターが存在し、第２の核酸配列の３’末端を第１の核酸配列
の５’末端に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペ
プチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群か
ら選択される核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモー
ターの制御下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、プロモーターは、
誘導性である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例
えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ
４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含
む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピ
トープタグは、配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形
態では、第１のポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１の
シグナルペプチドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴ
ＣＲドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態
では、第１および／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含
む（例えば、それからなる）。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、αβＴ細胞で
ある。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現を
遮断するまたは減少させるように改変されているγδＴ細胞である。一部の実施形態では
、エフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞お
よびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
（例えば、Ｔ細胞）であって、ａ）配列番号５５のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲ
ドメインを含むａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列、および
ｂ）配列番号５４のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣＲドメインを含むａｂＴＣＲの第
２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列、を含み、第１のポリペプチド鎖が第１
の核酸配列から発現され、第２のポリペプチド鎖が第２の核酸配列から発現されて、ａｂ
ＴＣＲを形成し、ａｂＴＣＲが、エフェクター細胞の表面に局在する、ａｂＴＣＲエフェ
クター細胞が提供される。一部の実施形態では、第１の核酸配列の５’末端に作動可能に
連結したプロモーターが存在し、第１の核酸配列の３’末端を第２の核酸配列の５’末端
に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペプチド（例
えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群から選択され
る核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモーターの制御
下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、第２の核酸配列の５’末端に
作動可能に連結したプロモーターが存在し、第２の核酸配列の３’末端を第１の核酸配列
の５’末端に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペ
プチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群か
ら選択される核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモー
ターの制御下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、プロモーターは、
誘導性である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例
えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ
４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含
む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピ
トープタグは、配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形
態では、第１のポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１の
シグナルペプチドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴ
ＣＲドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態
では、第１および／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含
む（例えば、それからなる）。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、αβＴ細胞で
ある。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現を
遮断するまたは減少させるように改変されているγδＴ細胞である。一部の実施形態では
、エフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞お
よびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
【0240】
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲをその表面上に発現するａｂＴＣＲエフェクター細胞
（例えば、Ｔ細胞）であって、ａ）配列番号５６のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲ
ドメインを含むａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列、および
ｂ）配列番号５４のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣＲドメインを含むａｂＴＣＲの第
２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列、を含み、第１のポリペプチド鎖が第１
の核酸配列から発現され、第２のポリペプチド鎖が第２の核酸配列から発現されて、ａｂ
ＴＣＲを形成し、ａｂＴＣＲが、エフェクター細胞の表面に局在する、ａｂＴＣＲエフェ
クター細胞が提供される。一部の実施形態では、第１の核酸配列の５’末端に作動可能に
連結したプロモーターが存在し、第１の核酸配列の３’末端を第２の核酸配列の５’末端
に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペプチド（例
えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群から選択され
る核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモーターの制御
下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、第２の核酸配列の５’末端に
作動可能に連結したプロモーターが存在し、第２の核酸配列の３’末端を第１の核酸配列
の５’末端に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペ
プチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群か
ら選択される核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモー
ターの制御下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、プロモーターは、
誘導性である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例
えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ
４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含
む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピ
トープタグは、配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形
態では、第１のポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１の
シグナルペプチドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴ
ＣＲドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態
では、第１および／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含
む（例えば、それからなる）。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、αβＴ細胞で
ある。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現を
遮断するまたは減少させるように改変されているγδＴ細胞である。一部の実施形態では
、エフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞お
よびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
（例えば、Ｔ細胞）であって、ａ）配列番号５６のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲ
ドメインを含むａｂＴＣＲの第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列、および
ｂ）配列番号５４のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣＲドメインを含むａｂＴＣＲの第
２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列、を含み、第１のポリペプチド鎖が第１
の核酸配列から発現され、第２のポリペプチド鎖が第２の核酸配列から発現されて、ａｂ
ＴＣＲを形成し、ａｂＴＣＲが、エフェクター細胞の表面に局在する、ａｂＴＣＲエフェ
クター細胞が提供される。一部の実施形態では、第１の核酸配列の５’末端に作動可能に
連結したプロモーターが存在し、第１の核酸配列の３’末端を第２の核酸配列の５’末端
に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペプチド（例
えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群から選択され
る核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモーターの制御
下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、第２の核酸配列の５’末端に
作動可能に連結したプロモーターが存在し、第２の核酸配列の３’末端を第１の核酸配列
の５’末端に連結する、内部リボソーム進入部位（ＩＲＥＳ）、および自己切断性２Ａペ
プチド（例えば、Ｐ２Ａ、Ｔ２Ａ、Ｅ２ＡまたはＦ２Ａ）をコードする核酸からなる群か
ら選択される核酸リンカーが存在し、第１の核酸配列および第２の核酸配列は、プロモー
ターの制御下で単一のＲＮＡとして転写される。一部の実施形態では、プロモーターは、
誘導性である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例
えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ
４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含
む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピ
トープタグは、配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形
態では、第１のポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１の
シグナルペプチドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴ
ＣＲドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態
では、第１および／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含
む（例えば、それからなる）。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、αβＴ細胞で
ある。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現を
遮断するまたは減少させるように改変されているγδＴ細胞である。一部の実施形態では
、エフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞お
よびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
【0241】
本明細書に記載される一部のかかる実施形態のいずれかでは、ａｂＴＣＲエフェクター
細胞は、類似の条件下で比較した場合、対応するＣＡＲエフェクター細胞（例えば、ａｂ
ＴＣＲの抗体部分を含むＣＡＲ、例えば、ａｂＴＣＲの抗体可変ドメインを構成するｓｃ
Ｆｖを含むＣＡＲをその表面上に提示するエフェクター細胞）と比較して、より低い割合
のキメラ受容体内在化を有する。例えば、一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター
細胞は、類似の条件下でのキメラ受容体エフェクター細胞の標的抗原依存的刺激後に、対
応するＣＡＲエフェクター細胞と比較して、より低い割合のキメラ受容体内在化を有する
。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞は、ａｂＴＣＲの標的抗原による刺
激の約９０分後に、約５０％未満（例えば、これらの値の間の任意の範囲を含んで、約４
５、４０、３５、３０、２５、２０、１５、１０または５％未満のいずれか）のａｂＴＣ
Ｒ内在化を有する。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞は、ａｂＴＣＲ
Ｔ細胞である。
細胞は、類似の条件下で比較した場合、対応するＣＡＲエフェクター細胞（例えば、ａｂ
ＴＣＲの抗体部分を含むＣＡＲ、例えば、ａｂＴＣＲの抗体可変ドメインを構成するｓｃ
Ｆｖを含むＣＡＲをその表面上に提示するエフェクター細胞）と比較して、より低い割合
のキメラ受容体内在化を有する。例えば、一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター
細胞は、類似の条件下でのキメラ受容体エフェクター細胞の標的抗原依存的刺激後に、対
応するＣＡＲエフェクター細胞と比較して、より低い割合のキメラ受容体内在化を有する
。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞は、ａｂＴＣＲの標的抗原による刺
激の約９０分後に、約５０％未満（例えば、これらの値の間の任意の範囲を含んで、約４
５、４０、３５、３０、２５、２０、１５、１０または５％未満のいずれか）のａｂＴＣ
Ｒ内在化を有する。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞は、ａｂＴＣＲ
Ｔ細胞である。
【0242】
本明細書に記載される一部のかかる実施形態のいずれかでは、ａｂＴＣＲエフェクター
細胞は、類似の条件下で比較した場合、対応するＣＡＲエフェクター細胞（例えば、ａｂ
ＴＣＲの抗体部分を含むＣＡＲをその表面上に提示するエフェクター細胞）と比較して、
より低い割合および／または発生率の疲弊を有する。エフェクター細胞の疲弊は、例えば
、ＰＤ－１、ＴＩＭ－３およびＬＡＧ－３を含むがこれに限定されない疲弊マーカーの発
現レベルを測定することによって、当該分野で公知の任意の手段によって決定され得る。
例えば、一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞は、類似の条件下でのキメラ
受容体エフェクター細胞の標的抗原依存的刺激後に、対応するＣＡＲエフェクター細胞と
比較して、より低い発現レベルの１つまたは複数の疲弊マーカー（例えば、ＰＤ－１、Ｔ
ＩＭ－３またはＬＡＧ－３）を有する。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細
胞は、類似の条件下でのキメラ受容体エフェクター細胞の標的抗原依存的刺激後に、対応
するＣＡＲエフェクター細胞と比較して、１つまたは複数の疲弊マーカー（例えば、ＰＤ
－１、ＴＩＭ－３またはＬＡＧ－３）について陽性であることの、より低い発生率を有す
る。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞は、ａｂＴＣＲの標的抗原による
刺激後に、１つまたは複数の疲弊マーカー（例えば、ＰＤ－１、ＴＩＭ－３またはＬＡＧ
－３）について陽性であることの、約５０％未満（例えば、これらの値の間の任意の範囲
を含んで、約４５、４０、３５、３０、２５、２０、１５、１０、５、４、３、２、１％
未満のいずれか）の発生率を有する。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞
は、ａｂＴＣＲ Ｔ細胞である。発生率は、例えば、キメラ受容体エフェクター細胞の集
団中の、疲弊マーカーについて陽性のキメラ受容体エフェクター細胞の百分率を定量する
ことによって、当該分野で公知の任意の手段によって計算され得、疲弊マーカーについて
陽性の細胞の百分率が発生率である。
細胞は、類似の条件下で比較した場合、対応するＣＡＲエフェクター細胞（例えば、ａｂ
ＴＣＲの抗体部分を含むＣＡＲをその表面上に提示するエフェクター細胞）と比較して、
より低い割合および／または発生率の疲弊を有する。エフェクター細胞の疲弊は、例えば
、ＰＤ－１、ＴＩＭ－３およびＬＡＧ－３を含むがこれに限定されない疲弊マーカーの発
現レベルを測定することによって、当該分野で公知の任意の手段によって決定され得る。
例えば、一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞は、類似の条件下でのキメラ
受容体エフェクター細胞の標的抗原依存的刺激後に、対応するＣＡＲエフェクター細胞と
比較して、より低い発現レベルの１つまたは複数の疲弊マーカー（例えば、ＰＤ－１、Ｔ
ＩＭ－３またはＬＡＧ－３）を有する。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細
胞は、類似の条件下でのキメラ受容体エフェクター細胞の標的抗原依存的刺激後に、対応
するＣＡＲエフェクター細胞と比較して、１つまたは複数の疲弊マーカー（例えば、ＰＤ
－１、ＴＩＭ－３またはＬＡＧ－３）について陽性であることの、より低い発生率を有す
る。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞は、ａｂＴＣＲの標的抗原による
刺激後に、１つまたは複数の疲弊マーカー（例えば、ＰＤ－１、ＴＩＭ－３またはＬＡＧ
－３）について陽性であることの、約５０％未満（例えば、これらの値の間の任意の範囲
を含んで、約４５、４０、３５、３０、２５、２０、１５、１０、５、４、３、２、１％
未満のいずれか）の発生率を有する。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞
は、ａｂＴＣＲ Ｔ細胞である。発生率は、例えば、キメラ受容体エフェクター細胞の集
団中の、疲弊マーカーについて陽性のキメラ受容体エフェクター細胞の百分率を定量する
ことによって、当該分野で公知の任意の手段によって計算され得、疲弊マーカーについて
陽性の細胞の百分率が発生率である。
【0243】
本明細書に記載される一部のかかる実施形態のいずれかでは、ａｂＴＣＲエフェクター
細胞は、類似の条件下で比較した場合、対応するＣＡＲエフェクター細胞（例えば、ａｂ
ＴＣＲの抗体部分を含むＣＡＲをその表面上に提示するエフェクター細胞）と比較して、
より低い割合および／または発生率の最終分化を有する。最終分化は、例えば、ＣＤ２８
、ＣＣＲ７およびグランザイムＢを含むがこれに限定されない分化マーカーの発現レベル
を測定することによって、当該分野で公知の任意の手段によって決定され得る。例えば、
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞は、類似の条件下の対応するＣＡＲエ
フェクター細胞と比較して、より低い発現レベルの１つまたは複数の最終分化マーカー（
例えば、グランザイムＢ）および／あるいはより高い発現の１つまたは複数の非最終分化
マーカー（例えば、ＣＤ２８またはＣＣＲ７）を有する。一部の実施形態では、ａｂＴＣ
Ｒエフェクター細胞は、類似の条件下の対応するＣＡＲエフェクター細胞と比較して、１
つまたは複数の最終分化マーカー（例えば、グランザイムＢ）について陽性であることの
、より低い発生率、および／あるいは１つまたは複数の非最終分化マーカー（例えば、Ｃ
Ｄ２８またはＣＣＲ７）について陽性であることの、より高い発生率を有する。一部の実
施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞は、ａｂＴＣＲの標的抗原による刺激後に、１
つまたは複数の最終分化マーカー（例えば、グランザイムＢ）について陽性であることの
、約５０％未満（例えば、これらの値の間の任意の範囲を含んで、約４５、４０、３５、
３０、２５、２０、１５、１０、５、４、３、２、１％未満のいずれか）の発生率、およ
び／あるいは１つまたは複数の非最終分化マーカー（例えば、ＣＤ２８またはＣＣＲ７）
について陽性であることの、約１０％よりも高い（例えば、これらの値の間の任意の範囲
を含んで、約１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７
０、７５、８０、８５、９０または９５％のいずれかよりも高い）発生率を有する。一部
の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞は、ａｂＴＣＲ Ｔ細胞である。発生率は
、例えば、キメラ受容体エフェクター細胞の集団中の、最終分化マーカーについて陽性の
キメラ受容体エフェクター細胞の百分率を定量することによって、当該分野で公知の任意
の手段によって計算され得、最終分化マーカーについて陽性の細胞の百分率が発生率であ
る。
細胞は、類似の条件下で比較した場合、対応するＣＡＲエフェクター細胞（例えば、ａｂ
ＴＣＲの抗体部分を含むＣＡＲをその表面上に提示するエフェクター細胞）と比較して、
より低い割合および／または発生率の最終分化を有する。最終分化は、例えば、ＣＤ２８
、ＣＣＲ７およびグランザイムＢを含むがこれに限定されない分化マーカーの発現レベル
を測定することによって、当該分野で公知の任意の手段によって決定され得る。例えば、
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞は、類似の条件下の対応するＣＡＲエ
フェクター細胞と比較して、より低い発現レベルの１つまたは複数の最終分化マーカー（
例えば、グランザイムＢ）および／あるいはより高い発現の１つまたは複数の非最終分化
マーカー（例えば、ＣＤ２８またはＣＣＲ７）を有する。一部の実施形態では、ａｂＴＣ
Ｒエフェクター細胞は、類似の条件下の対応するＣＡＲエフェクター細胞と比較して、１
つまたは複数の最終分化マーカー（例えば、グランザイムＢ）について陽性であることの
、より低い発生率、および／あるいは１つまたは複数の非最終分化マーカー（例えば、Ｃ
Ｄ２８またはＣＣＲ７）について陽性であることの、より高い発生率を有する。一部の実
施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞は、ａｂＴＣＲの標的抗原による刺激後に、１
つまたは複数の最終分化マーカー（例えば、グランザイムＢ）について陽性であることの
、約５０％未満（例えば、これらの値の間の任意の範囲を含んで、約４５、４０、３５、
３０、２５、２０、１５、１０、５、４、３、２、１％未満のいずれか）の発生率、およ
び／あるいは１つまたは複数の非最終分化マーカー（例えば、ＣＤ２８またはＣＣＲ７）
について陽性であることの、約１０％よりも高い（例えば、これらの値の間の任意の範囲
を含んで、約１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７
０、７５、８０、８５、９０または９５％のいずれかよりも高い）発生率を有する。一部
の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞は、ａｂＴＣＲ Ｔ細胞である。発生率は
、例えば、キメラ受容体エフェクター細胞の集団中の、最終分化マーカーについて陽性の
キメラ受容体エフェクター細胞の百分率を定量することによって、当該分野で公知の任意
の手段によって計算され得、最終分化マーカーについて陽性の細胞の百分率が発生率であ
る。
【0244】
本明細書に記載される一部のかかる実施形態のいずれかでは、ａｂＴＣＲエフェクター
細胞は、類似の条件下で比較した場合、対応するＣＡＲエフェクター細胞（例えば、ａｂ
ＴＣＲの抗体部分を含むＣＡＲをその表面上に提示するエフェクター細胞）と比較してよ
り高い割合の増殖を有する。増殖は、例えば、色素希釈を測定することによって、当該分
野で公知の任意の手段によって決定され得る。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェク
ター細胞は、ａｂＴＣＲ Ｔ細胞である。
細胞は、類似の条件下で比較した場合、対応するＣＡＲエフェクター細胞（例えば、ａｂ
ＴＣＲの抗体部分を含むＣＡＲをその表面上に提示するエフェクター細胞）と比較してよ
り高い割合の増殖を有する。増殖は、例えば、色素希釈を測定することによって、当該分
野で公知の任意の手段によって決定され得る。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェク
ター細胞は、ａｂＴＣＲ Ｔ細胞である。
【0245】
ａｂＴＣＲの調製
一部の実施形態では、本明細書に記載されるａｂＴＣＲのいずれかによれば、抗体部分
は、モノクローナル抗体由来の配列を含むＦａｂ様抗原結合モジュールである。一部の実
施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、モノクローナル抗体由来のＶＨ、ＣＨ１、
ＶＬおよびＣＬドメインを含む。モノクローナル抗体は、例えば、KohlerおよびMilstein
、Nature、２５６巻：４９５頁（１９７５年）ならびにSergeevaら、Blood、１１７巻（
１６号）：４２６２～４２７２頁によって記載されるものなどのハイブリドーマ法を使用
して調製され得る。
一部の実施形態では、本明細書に記載されるａｂＴＣＲのいずれかによれば、抗体部分
は、モノクローナル抗体由来の配列を含むＦａｂ様抗原結合モジュールである。一部の実
施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、モノクローナル抗体由来のＶＨ、ＣＨ１、
ＶＬおよびＣＬドメインを含む。モノクローナル抗体は、例えば、KohlerおよびMilstein
、Nature、２５６巻：４９５頁（１９７５年）ならびにSergeevaら、Blood、１１７巻（
１６号）：４２６２～４２７２頁によって記載されるものなどのハイブリドーマ法を使用
して調製され得る。
【0246】
ハイブリドーマ法では、ハムスター、マウスまたは他の適切な宿主動物が、典型的には
、免疫剤に特異的に結合する抗体を産生するまたは産生することが可能なリンパ球を惹起
するために、免疫剤で免疫される。あるいは、リンパ球は、ｉｎ ｖｉｔｒｏで免疫され
得る。免疫剤には、目的のタンパク質のポリペプチドもしくは融合タンパク質、または少
なくとも２つの分子を含む複合体、例えば、ペプチドおよびＭＨＣタンパク質を含む複合
体が含まれ得る。一般に、ヒト起源の細胞が所望される場合、末梢血リンパ球（「ＰＢＬ
」）が使用され、または非ヒト哺乳動物供給源が所望される場合、脾臓細胞もしくはリン
パ節細胞が使用される。次いで、リンパ球は、ハイブリドーマ細胞を形成するために、ポ
リエチレングリコールなどの適切な融合剤を使用して、不死化細胞株と融合される。例え
ば、Ｇｏｄｉｎｇ、Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ： Ｐｒｉｎｃｉｐｌ
ｅｓ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ（Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ： Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ
、１９８６年）、５９～１０３頁を参照のこと。不死化細胞株は通常、形質転換された哺
乳動物細胞、特に、げっ歯類、ウシおよびヒト起源の骨髄腫細胞である。通常、ラットま
たはマウス骨髄腫細胞株が使用される。ハイブリドーマ細胞は、未融合の不死化細胞の成
長または生存を阻害する１または複数の物質を好ましくは含む、適切な培養培地中で培養
され得る。例えば、親細胞が酵素ヒポキサンチングアニンホスホリボシルトランスフェラ
ーゼ（ＨＧＰＲＴまたはＨＰＲＴ）を欠く場合、ハイブリドーマ用の培養培地は、典型的
には、ＨＧＰＲＴ欠損細胞の成長を防止する、ヒポキサンチン、アミノプテリンおよびチ
ミジンを含む（「ＨＡＴ培地」）。
、免疫剤に特異的に結合する抗体を産生するまたは産生することが可能なリンパ球を惹起
するために、免疫剤で免疫される。あるいは、リンパ球は、ｉｎ ｖｉｔｒｏで免疫され
得る。免疫剤には、目的のタンパク質のポリペプチドもしくは融合タンパク質、または少
なくとも２つの分子を含む複合体、例えば、ペプチドおよびＭＨＣタンパク質を含む複合
体が含まれ得る。一般に、ヒト起源の細胞が所望される場合、末梢血リンパ球（「ＰＢＬ
」）が使用され、または非ヒト哺乳動物供給源が所望される場合、脾臓細胞もしくはリン
パ節細胞が使用される。次いで、リンパ球は、ハイブリドーマ細胞を形成するために、ポ
リエチレングリコールなどの適切な融合剤を使用して、不死化細胞株と融合される。例え
ば、Ｇｏｄｉｎｇ、Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ： Ｐｒｉｎｃｉｐｌ
ｅｓ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ（Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ： Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ
、１９８６年）、５９～１０３頁を参照のこと。不死化細胞株は通常、形質転換された哺
乳動物細胞、特に、げっ歯類、ウシおよびヒト起源の骨髄腫細胞である。通常、ラットま
たはマウス骨髄腫細胞株が使用される。ハイブリドーマ細胞は、未融合の不死化細胞の成
長または生存を阻害する１または複数の物質を好ましくは含む、適切な培養培地中で培養
され得る。例えば、親細胞が酵素ヒポキサンチングアニンホスホリボシルトランスフェラ
ーゼ（ＨＧＰＲＴまたはＨＰＲＴ）を欠く場合、ハイブリドーマ用の培養培地は、典型的
には、ＨＧＰＲＴ欠損細胞の成長を防止する、ヒポキサンチン、アミノプテリンおよびチ
ミジンを含む（「ＨＡＴ培地」）。
【0247】
一部の実施形態では、不死化細胞株は、効率的に融合し、選択された抗体産生細胞によ
る抗体の安定な高レベル発現を支持し、ＨＡＴ培地などの培地に対して感受性である。一
部の実施形態では、不死化細胞株は、例えば、Ｓａｌｋ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ Ｃｅｌｌ
Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ Ｃｅｎｔｅｒ、Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉ
ａおよびＡｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ、Ｍａｎ
ａｓｓａｓ、Ｖｉｒｇｉｎｉａから取得され得る、マウス骨髄腫株である。ヒト骨髄腫お
よびマウス－ヒトヘテロ骨髄腫（ｈｅｔｅｒｏｍｙｅｌｏｍａ）細胞株もまた、ヒトモノ
クローナル抗体の産生について記載されている。Ｋｏｚｂｏｒ、Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ．
、１３３巻：３００１頁（１９８４年）；Ｂｒｏｄｅｕｒら Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａ
ｎｔｉｂｏｄｙ Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃ
ａｔｉｏｎｓ（Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ， Ｉｎｃ．： Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、１９８
７年）５１～６３頁。
る抗体の安定な高レベル発現を支持し、ＨＡＴ培地などの培地に対して感受性である。一
部の実施形態では、不死化細胞株は、例えば、Ｓａｌｋ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ Ｃｅｌｌ
Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ Ｃｅｎｔｅｒ、Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉ
ａおよびＡｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ、Ｍａｎ
ａｓｓａｓ、Ｖｉｒｇｉｎｉａから取得され得る、マウス骨髄腫株である。ヒト骨髄腫お
よびマウス－ヒトヘテロ骨髄腫（ｈｅｔｅｒｏｍｙｅｌｏｍａ）細胞株もまた、ヒトモノ
クローナル抗体の産生について記載されている。Ｋｏｚｂｏｒ、Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ．
、１３３巻：３００１頁（１９８４年）；Ｂｒｏｄｅｕｒら Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａ
ｎｔｉｂｏｄｙ Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃ
ａｔｉｏｎｓ（Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ， Ｉｎｃ．： Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、１９８
７年）５１～６３頁。
【0248】
次いで、ハイブリドーマ細胞が培養される培養培地は、ポリペプチドに対するモノクロ
ーナル抗体の存在についてアッセイされ得る。ハイブリドーマ細胞によって産生されたモ
ノクローナル抗体の結合特異性は、免疫沈降によって、またはｉｎ ｖｉｔｒｏ結合アッ
セイ、例えば、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）もしくは酵素結合免疫吸着アッセイ（Ｅ
ＬＩＳＡ）によって決定され得る。かかる技術およびアッセイは、当該分野で公知である
。モノクローナル抗体の結合親和性は、例えば、ＭｕｎｓｏｎおよびＰｏｌｌａｒｄ、Ａ
ｎａｌ． Ｂｉｏｃｈｅｍ．、１０７巻：２２０頁（１９８０年）のスキャッチャード分
析によって決定され得る。
ーナル抗体の存在についてアッセイされ得る。ハイブリドーマ細胞によって産生されたモ
ノクローナル抗体の結合特異性は、免疫沈降によって、またはｉｎ ｖｉｔｒｏ結合アッ
セイ、例えば、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）もしくは酵素結合免疫吸着アッセイ（Ｅ
ＬＩＳＡ）によって決定され得る。かかる技術およびアッセイは、当該分野で公知である
。モノクローナル抗体の結合親和性は、例えば、ＭｕｎｓｏｎおよびＰｏｌｌａｒｄ、Ａ
ｎａｌ． Ｂｉｏｃｈｅｍ．、１０７巻：２２０頁（１９８０年）のスキャッチャード分
析によって決定され得る。
【0249】
所望のハイブリドーマ細胞が同定された後、それらのクローンは、限界希釈手順によっ
てサブクローニングされ得、標準的な方法によって成長され得る。Ｇｏｄｉｎｇ、上記。
この目的のために適切な培養培地には、例えば、ダルベッコ改変イーグル培地およびＲＰ
ＭＩ－１６４０培地が含まれる。あるいは、ハイブリドーマ細胞は、哺乳動物において腹
水としてｉｎ ｖｉｖｏで成長され得る。
てサブクローニングされ得、標準的な方法によって成長され得る。Ｇｏｄｉｎｇ、上記。
この目的のために適切な培養培地には、例えば、ダルベッコ改変イーグル培地およびＲＰ
ＭＩ－１６４０培地が含まれる。あるいは、ハイブリドーマ細胞は、哺乳動物において腹
水としてｉｎ ｖｉｖｏで成長され得る。
【0250】
サブクローンによって分泌されたモノクローナル抗体は、従来の免疫グロブリン精製手
順、例えば、プロテインＡ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ、ヒドロキシルアパタイトクロマトグラ
フィー、ゲル電気泳動、透析またはアフィニティクロマトグラフィーなどによって、培養
培地または腹水から単離または精製され得る。
順、例えば、プロテインＡ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ、ヒドロキシルアパタイトクロマトグラ
フィー、ゲル電気泳動、透析またはアフィニティクロマトグラフィーなどによって、培養
培地または腹水から単離または精製され得る。
【0251】
一部の実施形態では、本明細書に記載されるａｂＴＣＲのいずれかによれば、抗体部分
は、抗体部分ライブラリー（例えば、ｓｃＦｖまたはＦａｂ断片を提示するファージライ
ブラリー）から選択されたクローン由来の配列を含むＦａｂ様抗原結合モジュールである
。クローンは、所望の活性（単数または複数）を有する抗体断片についてコンビナトリア
ルライブラリーをスクリーニングすることによって同定され得る。例えば、ファージディ
スプレイライブラリーを生成し、所望の結合特徴を有する抗体についてかかるライブラリ
ーをスクリーニングするための種々の方法が、当該分野で公知である。かかる方法は、例
えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍら、Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌ
ｏｇｙ １７８巻：１～３７頁（Ｏ’Ｂｒｉｅｎら編、Ｈｕｍａｎ Ｐｒｅｓｓ、Ｔｏｔ
ｏｗａ、Ｎ．Ｊ．、２００１年）において概説され、例えば、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙら、
Ｎａｔｕｒｅ ３４８巻：５５２～５５４頁；Ｃｌａｃｋｓｏｎら、Ｎａｔｕｒｅ ３５
２巻：６２４～６２８頁（１９９１年）；Ｍａｒｋｓら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２
巻：５８１～５９７頁（１９９２年）；ＭａｒｋｓおよびＢｒａｄｂｕｒｙ、Ｍｅｔｈｏ
ｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ２４８巻：１６１～１７５頁（Ｌｏ
編、Ｈｕｍａｎ Ｐｒｅｓｓ、Ｔｏｔｏｗａ、Ｎ．Ｊ．、２００３年）；Ｓｉｄｈｕら、
Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３３８巻（２号）：２９９～３１０頁（２００４年）；Ｌｅｅら
、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３４０巻（５号）：１０７３～１０９３頁（２００４年）；Ｆ
ｅｌｌｏｕｓｅ、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ １０１巻（３４号）
：１２４６７～１２４７２頁（２００４年）；ならびにＬｅｅら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．
Ｍｅｔｈｏｄｓ ２８４巻（１～２号）：１１９～１３２頁（２００４年）においてさら
に記載されている。
は、抗体部分ライブラリー（例えば、ｓｃＦｖまたはＦａｂ断片を提示するファージライ
ブラリー）から選択されたクローン由来の配列を含むＦａｂ様抗原結合モジュールである
。クローンは、所望の活性（単数または複数）を有する抗体断片についてコンビナトリア
ルライブラリーをスクリーニングすることによって同定され得る。例えば、ファージディ
スプレイライブラリーを生成し、所望の結合特徴を有する抗体についてかかるライブラリ
ーをスクリーニングするための種々の方法が、当該分野で公知である。かかる方法は、例
えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍら、Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌ
ｏｇｙ １７８巻：１～３７頁（Ｏ’Ｂｒｉｅｎら編、Ｈｕｍａｎ Ｐｒｅｓｓ、Ｔｏｔ
ｏｗａ、Ｎ．Ｊ．、２００１年）において概説され、例えば、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙら、
Ｎａｔｕｒｅ ３４８巻：５５２～５５４頁；Ｃｌａｃｋｓｏｎら、Ｎａｔｕｒｅ ３５
２巻：６２４～６２８頁（１９９１年）；Ｍａｒｋｓら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２
巻：５８１～５９７頁（１９９２年）；ＭａｒｋｓおよびＢｒａｄｂｕｒｙ、Ｍｅｔｈｏ
ｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ２４８巻：１６１～１７５頁（Ｌｏ
編、Ｈｕｍａｎ Ｐｒｅｓｓ、Ｔｏｔｏｗａ、Ｎ．Ｊ．、２００３年）；Ｓｉｄｈｕら、
Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３３８巻（２号）：２９９～３１０頁（２００４年）；Ｌｅｅら
、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３４０巻（５号）：１０７３～１０９３頁（２００４年）；Ｆ
ｅｌｌｏｕｓｅ、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ １０１巻（３４号）
：１２４６７～１２４７２頁（２００４年）；ならびにＬｅｅら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．
Ｍｅｔｈｏｄｓ ２８４巻（１～２号）：１１９～１３２頁（２００４年）においてさら
に記載されている。
【0252】
ある特定のファージディスプレイ法では、Ｗｉｎｔｅｒら、Ａｎｎ． Ｒｅｖ． Ｉｍ
ｍｕｎｏｌ．、１２巻：４３３～４５５頁（１９９４年）に記載されるように、ＶＨ遺伝
子およびＶＬ遺伝子のレパートリーが、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）によって別々に
クローニングされ、ファージライブラリー中にランダムに組み換えられ、これは次いで、
抗原結合ファージについてスクリーニングされ得る。ファージは、典型的には、単鎖Ｆｖ
（ｓｃＦｖ）断片またはＦａｂ断片のいずれかとして、抗体断片をディスプレイする。免
疫された供給源由来のライブラリーは、ハイブリドーマを構築する必要なしに、免疫原に
対する高親和性抗体を提供する。あるいは、Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓら、ＥＭＢＯ Ｊ、１２
巻：７２５～７３４頁（１９９３年）によって記載されるように、いずれの免疫もなしに
、広範な非自己抗原およびまた自己抗原に対する抗体の単一の供給源を提供するために、
ナイーブレパートリーが、（例えば、ヒトから）クローニングされ得る。最後に、ナイー
ブライブラリーは、ＨｏｏｇｅｎｂｏｏｍおよびＷｉｎｔｅｒ、Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏ
ｌ．、２２７巻：３８１～３８８頁（１９９２年）に記載されるように、高度に可変性の
ＣＤＲ３領域をコードし、ｉｎ ｖｉｔｒｏで再構成を達成するために、再構成されてい
ないＶ遺伝子セグメントを幹細胞からクローニングし、ランダム配列を含むＰＣＲプライ
マーを使用することによって、合成によっても作製され得る。ヒト抗体ファージライブラ
リーを記載している特許公報には、例えば、米国特許第５，７５０，３７３号、ならびに
米国特許公開第２００５／００７９５７４号、同第２００５／０１１９４５５号、同第２
００５／０２６６０００号、同第２００７／０１１７１２６号、同第２００７／０１６０
５９８号、同第２００７／０２３７７６４号、同第２００７／０２９２９３６号および同
第２００９／０００２３６０号が含まれる。
ｍｕｎｏｌ．、１２巻：４３３～４５５頁（１９９４年）に記載されるように、ＶＨ遺伝
子およびＶＬ遺伝子のレパートリーが、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）によって別々に
クローニングされ、ファージライブラリー中にランダムに組み換えられ、これは次いで、
抗原結合ファージについてスクリーニングされ得る。ファージは、典型的には、単鎖Ｆｖ
（ｓｃＦｖ）断片またはＦａｂ断片のいずれかとして、抗体断片をディスプレイする。免
疫された供給源由来のライブラリーは、ハイブリドーマを構築する必要なしに、免疫原に
対する高親和性抗体を提供する。あるいは、Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓら、ＥＭＢＯ Ｊ、１２
巻：７２５～７３４頁（１９９３年）によって記載されるように、いずれの免疫もなしに
、広範な非自己抗原およびまた自己抗原に対する抗体の単一の供給源を提供するために、
ナイーブレパートリーが、（例えば、ヒトから）クローニングされ得る。最後に、ナイー
ブライブラリーは、ＨｏｏｇｅｎｂｏｏｍおよびＷｉｎｔｅｒ、Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏ
ｌ．、２２７巻：３８１～３８８頁（１９９２年）に記載されるように、高度に可変性の
ＣＤＲ３領域をコードし、ｉｎ ｖｉｔｒｏで再構成を達成するために、再構成されてい
ないＶ遺伝子セグメントを幹細胞からクローニングし、ランダム配列を含むＰＣＲプライ
マーを使用することによって、合成によっても作製され得る。ヒト抗体ファージライブラ
リーを記載している特許公報には、例えば、米国特許第５，７５０，３７３号、ならびに
米国特許公開第２００５／００７９５７４号、同第２００５／０１１９４５５号、同第２
００５／０２６６０００号、同第２００７／０１１７１２６号、同第２００７／０１６０
５９８号、同第２００７／０２３７７６４号、同第２００７／０２９２９３６号および同
第２００９／０００２３６０号が含まれる。
【0253】
Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、標的抗原（例えば、ペプチド／ＭＨＣクラスＩ／ＩＩ
複合体または細胞表面抗原）に対して特異的な抗体についてライブラリーをスクリーニン
グするためのファージディスプレイを使用して調製され得る。ライブラリーは、少なくと
も１×１０９（例えば、少なくとも約１×１０９、２．５×１０９、５×１０９、７．５
×１０９、１×１０１０、２．５×１０１０、５×１０１０、７．５×１０１０または１
×１０１１のいずれか）の独特のヒト抗体断片の多様性を有するヒトｓｃＦｖファージデ
ィスプレイライブラリーであり得る。一部の実施形態では、ライブラリーは、全てのヒト
重鎖および軽鎖サブファミリーを包含する、健康なドナー由来のヒトＰＭＢＣおよび脾臓
から抽出されたＤＮＡから構築されるナイーブヒトライブラリーである。一部の実施形態
では、ライブラリーは、種々の疾患を有する患者、例えば、自己免疫性疾患を有する患者
、がん患者、および感染性疾患を有する患者から単離されたＰＢＭＣから抽出されたＤＮ
Ａから構築されるナイーブヒトライブラリーである。一部の実施形態では、ライブラリー
は、重鎖ＣＤＲ３が完全にランダム化され、（システインを除く）全てのアミノ酸が任意
の所与の位置において等しく存在する可能性がある、半合成ヒトライブラリーである（例
えば、Hoet, R.M.ら、Nat. Biotechnol. ２３巻（３号）：３４４～３４８頁、２００
５年を参照のこと）。一部の実施形態では、半合成ヒトライブラリーの重鎖ＣＤＲ３は、
約５～約２４（例えば、約５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、
１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３または２４のいずれか）アミノ酸の長
さを有する。一部の実施形態では、ライブラリーは、完全合成ファージディスプレイライ
ブラリーである。一部の実施形態では、ライブラリーは、非ヒトファージディスプレイラ
イブラリーである。
複合体または細胞表面抗原）に対して特異的な抗体についてライブラリーをスクリーニン
グするためのファージディスプレイを使用して調製され得る。ライブラリーは、少なくと
も１×１０９（例えば、少なくとも約１×１０９、２．５×１０９、５×１０９、７．５
×１０９、１×１０１０、２．５×１０１０、５×１０１０、７．５×１０１０または１
×１０１１のいずれか）の独特のヒト抗体断片の多様性を有するヒトｓｃＦｖファージデ
ィスプレイライブラリーであり得る。一部の実施形態では、ライブラリーは、全てのヒト
重鎖および軽鎖サブファミリーを包含する、健康なドナー由来のヒトＰＭＢＣおよび脾臓
から抽出されたＤＮＡから構築されるナイーブヒトライブラリーである。一部の実施形態
では、ライブラリーは、種々の疾患を有する患者、例えば、自己免疫性疾患を有する患者
、がん患者、および感染性疾患を有する患者から単離されたＰＢＭＣから抽出されたＤＮ
Ａから構築されるナイーブヒトライブラリーである。一部の実施形態では、ライブラリー
は、重鎖ＣＤＲ３が完全にランダム化され、（システインを除く）全てのアミノ酸が任意
の所与の位置において等しく存在する可能性がある、半合成ヒトライブラリーである（例
えば、Hoet, R.M.ら、Nat. Biotechnol. ２３巻（３号）：３４４～３４８頁、２００
５年を参照のこと）。一部の実施形態では、半合成ヒトライブラリーの重鎖ＣＤＲ３は、
約５～約２４（例えば、約５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、
１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３または２４のいずれか）アミノ酸の長
さを有する。一部の実施形態では、ライブラリーは、完全合成ファージディスプレイライ
ブラリーである。一部の実施形態では、ライブラリーは、非ヒトファージディスプレイラ
イブラリーである。
【0254】
高い親和性で標的抗原に結合するファージクローンは、固体支持体（例えば、溶液パニ
ングにはビーズ、または細胞パニングには哺乳動物細胞など）に結合した標的抗原へのフ
ァージの反復結合と、その後の、非結合ファージの除去および特異的に結合したファージ
の溶出とによって選択され得る。溶液パニングの一例では、標的抗原は、固体支持体への
固定化のためにビオチン化され得る。ビオチン化標的抗原は、ファージライブラリーおよ
び固体支持体、例えば、ストレプトアビジンとコンジュゲートしたＤｙｎａｂｅａｄｓ
Ｍ－２８０と混合され、次いで、標的抗原－ファージ－ビーズ複合体が単離される。次い
で、結合したファージクローンが溶出され、発現および精製のために、Ｅ．ｃｏｌｉ Ｘ
Ｌ１－Ｂｌｕｅなどの適切な宿主細胞を感染させるために使用される。細胞パニングの一
例では、ＡＦＰペプチドを負荷したＴ２細胞（ＴＡＰ欠損、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＋リ
ンパ芽球細胞株）が、ファージライブラリーと混合され、その後、細胞が収集され、結合
したクローンが溶出され、発現および精製のために適切な宿主細胞を感染させるために使
用される。パニングは、標的抗原に特異的に結合するファージクローンについて富化する
ために、溶液パニング、細胞パニングまたは両方の組合せのいずれかを用いて複数（例え
ば、約２、３、４、５、６またはそれよりも多くのいずれか）ラウンド実施され得る。富
化されたファージクローンは、例えばＥＬＩＳＡおよびＦＡＣＳを含む当該分野で公知の
任意の方法によって、標的抗原への特異的結合について試験され得る。
ングにはビーズ、または細胞パニングには哺乳動物細胞など）に結合した標的抗原へのフ
ァージの反復結合と、その後の、非結合ファージの除去および特異的に結合したファージ
の溶出とによって選択され得る。溶液パニングの一例では、標的抗原は、固体支持体への
固定化のためにビオチン化され得る。ビオチン化標的抗原は、ファージライブラリーおよ
び固体支持体、例えば、ストレプトアビジンとコンジュゲートしたＤｙｎａｂｅａｄｓ
Ｍ－２８０と混合され、次いで、標的抗原－ファージ－ビーズ複合体が単離される。次い
で、結合したファージクローンが溶出され、発現および精製のために、Ｅ．ｃｏｌｉ Ｘ
Ｌ１－Ｂｌｕｅなどの適切な宿主細胞を感染させるために使用される。細胞パニングの一
例では、ＡＦＰペプチドを負荷したＴ２細胞（ＴＡＰ欠損、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１＋リ
ンパ芽球細胞株）が、ファージライブラリーと混合され、その後、細胞が収集され、結合
したクローンが溶出され、発現および精製のために適切な宿主細胞を感染させるために使
用される。パニングは、標的抗原に特異的に結合するファージクローンについて富化する
ために、溶液パニング、細胞パニングまたは両方の組合せのいずれかを用いて複数（例え
ば、約２、３、４、５、６またはそれよりも多くのいずれか）ラウンド実施され得る。富
化されたファージクローンは、例えばＥＬＩＳＡおよびＦＡＣＳを含む当該分野で公知の
任意の方法によって、標的抗原への特異的結合について試験され得る。
【0255】
ヒトおよびヒト化抗体部分
ａｂＴＣＲ抗体部分は、ヒトまたはヒト化であり得る。非ヒト（例えば、マウス）抗体
部分のヒト化形態は、非ヒト免疫グロブリンに由来する最小の配列を典型的には含む、キ
メラ免疫グロブリン、免疫グロブリン鎖、またはそれらの断片（例えば、Ｆｖ、Ｆａｂ、
Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、または抗体の他の抗原結合サブ配列）である。ヒ
ト化抗体部分には、レシピエントのＣＤＲ由来の残基が、所望の特異性、親和性および能
力を有するマウス、ラットまたはウサギなどの非ヒト種（ドナー抗体）のＣＤＲ由来の残
基によって置き換えられた、ヒト免疫グロブリン、免疫グロブリン鎖、またはそれらの断
片（レシピエント抗体）が含まれる。一部の場合には、ヒト免疫グロブリンのＦｖフレー
ムワーク残基が、対応する非ヒト残基によって置き換えられる。ヒト化抗体部分は、レシ
ピエント抗体部分中にも、インポートされたＣＤＲまたはフレームワーク配列中にも見出
されない残基もまた含み得る。一般に、ヒト化抗体部分は、少なくとも１つ、典型的には
２つの可変ドメインの実質的に全てを含み得、ここで、ＣＤＲ領域の全てまたは実質的に
全ては、非ヒト免疫グロブリンのものに対応し、ＦＲ領域の全てまたは実質的に全ては、
ヒト免疫グロブリンコンセンサス配列のものである。例えば、Jonesら、Nature、３２１
巻：５２２～５２５頁（１９８６年）；Riechmannら、Nature、３３２巻：３２３～３２
９頁（１９８８年）；Presta、Curr. Op. Struct. Biol.、２巻：５９３～５９６頁（
１９９２年）を参照のこと。
ａｂＴＣＲ抗体部分は、ヒトまたはヒト化であり得る。非ヒト（例えば、マウス）抗体
部分のヒト化形態は、非ヒト免疫グロブリンに由来する最小の配列を典型的には含む、キ
メラ免疫グロブリン、免疫グロブリン鎖、またはそれらの断片（例えば、Ｆｖ、Ｆａｂ、
Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、ｓｃＦｖ、または抗体の他の抗原結合サブ配列）である。ヒ
ト化抗体部分には、レシピエントのＣＤＲ由来の残基が、所望の特異性、親和性および能
力を有するマウス、ラットまたはウサギなどの非ヒト種（ドナー抗体）のＣＤＲ由来の残
基によって置き換えられた、ヒト免疫グロブリン、免疫グロブリン鎖、またはそれらの断
片（レシピエント抗体）が含まれる。一部の場合には、ヒト免疫グロブリンのＦｖフレー
ムワーク残基が、対応する非ヒト残基によって置き換えられる。ヒト化抗体部分は、レシ
ピエント抗体部分中にも、インポートされたＣＤＲまたはフレームワーク配列中にも見出
されない残基もまた含み得る。一般に、ヒト化抗体部分は、少なくとも１つ、典型的には
２つの可変ドメインの実質的に全てを含み得、ここで、ＣＤＲ領域の全てまたは実質的に
全ては、非ヒト免疫グロブリンのものに対応し、ＦＲ領域の全てまたは実質的に全ては、
ヒト免疫グロブリンコンセンサス配列のものである。例えば、Jonesら、Nature、３２１
巻：５２２～５２５頁（１９８６年）；Riechmannら、Nature、３３２巻：３２３～３２
９頁（１９８８年）；Presta、Curr. Op. Struct. Biol.、２巻：５９３～５９６頁（
１９９２年）を参照のこと。
【0256】
一般に、ヒト化抗体部分は、非ヒトである供給源由来のものの中に導入された１つまた
は複数のアミノ酸残基を有する。これらの非ヒトアミノ酸残基は、「インポート」残基と
呼ばれる場合が多く、これらは典型的には、「インポート」可変ドメインから取られる。
一部の実施形態によれば、ヒト化は、ヒト抗体部分の対応する配列をげっ歯類のＣＤＲま
たはＣＤＲ配列で置換することによって、Winterおよび共同研究者ら（Jonesら、Nature
、３２１巻：５２２～５２５頁（１９８６年）；Riechmannら、Nature、３３２巻：３２
３～３２７頁（１９８８年）；Verhoeyenら、Science、２３９巻：１５３４～１５３６頁
（１９８８年））の方法に従って本質的に実施され得る。したがって、かかる「ヒト化」
抗体部分は、実質的にインタクト未満のヒト可変ドメインが、非ヒト種由来の対応する配
列によって置換されている、抗体部分である（米国特許第４，８１６，５６７号）。実際
には、ヒト化抗体部分は、典型的には、一部のＣＤＲ残基およびおそらくは一部のＦＲ残
基が、げっ歯類抗体中の類似の部位由来の残基によって置換された、ヒト抗体部分である
。
は複数のアミノ酸残基を有する。これらの非ヒトアミノ酸残基は、「インポート」残基と
呼ばれる場合が多く、これらは典型的には、「インポート」可変ドメインから取られる。
一部の実施形態によれば、ヒト化は、ヒト抗体部分の対応する配列をげっ歯類のＣＤＲま
たはＣＤＲ配列で置換することによって、Winterおよび共同研究者ら（Jonesら、Nature
、３２１巻：５２２～５２５頁（１９８６年）；Riechmannら、Nature、３３２巻：３２
３～３２７頁（１９８８年）；Verhoeyenら、Science、２３９巻：１５３４～１５３６頁
（１９８８年））の方法に従って本質的に実施され得る。したがって、かかる「ヒト化」
抗体部分は、実質的にインタクト未満のヒト可変ドメインが、非ヒト種由来の対応する配
列によって置換されている、抗体部分である（米国特許第４，８１６，５６７号）。実際
には、ヒト化抗体部分は、典型的には、一部のＣＤＲ残基およびおそらくは一部のＦＲ残
基が、げっ歯類抗体中の類似の部位由来の残基によって置換された、ヒト抗体部分である
。
【0257】
ヒト化の代替法として、ヒト抗体部分が生成され得る。例えば、免疫の際に、内因性免
疫グロブリン産生の非存在下でヒト抗体の完全レパートリーを産生することが可能なトラ
ンスジェニック動物（例えば、マウス）を産生することが現在可能である。例えば、キメ
ラおよび生殖系列変異体マウスにおける抗体重鎖連結領域（ＪＨ）遺伝子のホモ接合性欠
失が、内因性抗体産生の完全な阻害を生じることが記載されている。かかる生殖系列変異
体マウス中へのヒト生殖系列免疫グロブリン遺伝子アレイの移入は、抗原チャレンジの際
にヒト抗体の産生を生じる。例えば、Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓら、ＰＮＡＳ ＵＳＡ、９０
巻：２５５１頁（１９９３年）；Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓら、Ｎａｔｕｒｅ、３６２巻：２
５５～２５８頁（１９９３年）；Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎら、Ｙｅａｒ ｉｎ Ｉｍｍｕｎ
ｏｌ．、７巻：３３頁（１９９３年）；米国特許第５，５４５，８０６号、第５，５６９
，８２５号、第５，５９１，６６９号；第５，５４５，８０７号；およびＷＯ９７／１７
８５２を参照のこと。あるいは、ヒト抗体は、内因性免疫グロブリン遺伝子が部分的また
は完全に不活性化されたトランスジェニック動物、例えば、マウス中にヒト免疫グロブリ
ン遺伝子座を導入することによって作製され得る。チャレンジの際に、遺伝子再構成、ア
センブリおよび抗体レパートリーを含むあらゆる点において、ヒトにおいて見られたもの
と密接に類似したヒト抗体産生が観察される。このアプローチは、例えば、米国特許第５
，５４５，８０７号；同第５，５４５，８０６号；同第５，５６９，８２５号；同第５，
６２５，１２６号；同第５，６３３，４２５号；および同第５，６６１，０１６号、なら
びにＭａｒｋｓら、Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、１０巻：７７９～７８３頁（１９９
２年）；Ｌｏｎｂｅｒｇら、Ｎａｔｕｒｅ、３６８巻：８５６～８５９頁（１９９４年）
；Ｍｏｒｒｉｓｏｎ、Ｎａｔｕｒｅ、３６８巻：８１２～８１３頁（１９９４年）；Ｆｉ
ｓｈｗｉｌｄら、Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、１４巻：８４５～８５１
頁（１９９６年）；Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ、Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、
１４巻：８２６頁（１９９６年）；ＬｏｎｂｅｒｇおよびＨｕｓｚａｒ、Ｉｎｔｅｒｎ．
Ｒｅｖ． Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１３巻：６５～９３頁（１９９５年）中に記載されてい
る。
疫グロブリン産生の非存在下でヒト抗体の完全レパートリーを産生することが可能なトラ
ンスジェニック動物（例えば、マウス）を産生することが現在可能である。例えば、キメ
ラおよび生殖系列変異体マウスにおける抗体重鎖連結領域（ＪＨ）遺伝子のホモ接合性欠
失が、内因性抗体産生の完全な阻害を生じることが記載されている。かかる生殖系列変異
体マウス中へのヒト生殖系列免疫グロブリン遺伝子アレイの移入は、抗原チャレンジの際
にヒト抗体の産生を生じる。例えば、Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓら、ＰＮＡＳ ＵＳＡ、９０
巻：２５５１頁（１９９３年）；Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓら、Ｎａｔｕｒｅ、３６２巻：２
５５～２５８頁（１９９３年）；Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎら、Ｙｅａｒ ｉｎ Ｉｍｍｕｎ
ｏｌ．、７巻：３３頁（１９９３年）；米国特許第５，５４５，８０６号、第５，５６９
，８２５号、第５，５９１，６６９号；第５，５４５，８０７号；およびＷＯ９７／１７
８５２を参照のこと。あるいは、ヒト抗体は、内因性免疫グロブリン遺伝子が部分的また
は完全に不活性化されたトランスジェニック動物、例えば、マウス中にヒト免疫グロブリ
ン遺伝子座を導入することによって作製され得る。チャレンジの際に、遺伝子再構成、ア
センブリおよび抗体レパートリーを含むあらゆる点において、ヒトにおいて見られたもの
と密接に類似したヒト抗体産生が観察される。このアプローチは、例えば、米国特許第５
，５４５，８０７号；同第５，５４５，８０６号；同第５，５６９，８２５号；同第５，
６２５，１２６号；同第５，６３３，４２５号；および同第５，６６１，０１６号、なら
びにＭａｒｋｓら、Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、１０巻：７７９～７８３頁（１９９
２年）；Ｌｏｎｂｅｒｇら、Ｎａｔｕｒｅ、３６８巻：８５６～８５９頁（１９９４年）
；Ｍｏｒｒｉｓｏｎ、Ｎａｔｕｒｅ、３６８巻：８１２～８１３頁（１９９４年）；Ｆｉ
ｓｈｗｉｌｄら、Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、１４巻：８４５～８５１
頁（１９９６年）；Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ、Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、
１４巻：８２６頁（１９９６年）；ＬｏｎｂｅｒｇおよびＨｕｓｚａｒ、Ｉｎｔｅｒｎ．
Ｒｅｖ． Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１３巻：６５～９３頁（１９９５年）中に記載されてい
る。
【0258】
ヒト抗体はまた、ｉｎ ｖｉｔｒｏで活性化されたＢ細胞（米国特許第５，５６７，６
１０号および同第５，２２９，２７５号を参照のこと）によって、またはファージディス
プレイライブラリーを含む当該分野で公知の種々の技術を使用することによって、生成さ
れ得る。ＨｏｏｇｅｎｂｏｏｍおよびＷｉｎｔｅｒ、Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ．、２２
７巻：３８１頁（１９９１年）；Ｍａｒｋｓら、Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ．、２２２巻
：５８１頁（１９９１年）。ＣｏｌｅらおよびＢｏｅｒｎｅｒらの技術は、ヒトモノクロ
ーナル抗体の調製のためにも利用可能である。Ｃｏｌｅら、Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎ
ｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ、Ａｌａｎ Ｒ． Ｌｉｓｓ
、７７頁（１９８５年）およびＢｏｅｒｎｅｒら、Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１４７巻（
１号）：８６～９５頁（１９９１年）。
１０号および同第５，２２９，２７５号を参照のこと）によって、またはファージディス
プレイライブラリーを含む当該分野で公知の種々の技術を使用することによって、生成さ
れ得る。ＨｏｏｇｅｎｂｏｏｍおよびＷｉｎｔｅｒ、Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ．、２２
７巻：３８１頁（１９９１年）；Ｍａｒｋｓら、Ｊ． Ｍｏｌ． Ｂｉｏｌ．、２２２巻
：５８１頁（１９９１年）。ＣｏｌｅらおよびＢｏｅｒｎｅｒらの技術は、ヒトモノクロ
ーナル抗体の調製のためにも利用可能である。Ｃｏｌｅら、Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎ
ｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ、Ａｌａｎ Ｒ． Ｌｉｓｓ
、７７頁（１９８５年）およびＢｏｅｒｎｅｒら、Ｊ． Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１４７巻（
１号）：８６～９５頁（１９９１年）。
【0259】
バリアント
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体のアミノ酸配列バリアントが企図され
る。例えば、抗体の結合親和性および／または他の生物学的特性を改善することが望まれ
得る。抗体のアミノ酸配列バリアントは、抗体をコードするヌクレオチド配列中に適切な
改変を導入することによって、またはペプチド合成によって調製され得る。かかる改変に
は、例えば、抗体のアミノ酸配列からの欠失、および／またはかかるアミノ酸配列中への
挿入、および／またはかかるアミノ酸配列内の残基の置換が含まれる。最終構築物が所望
の特徴、例えば、抗原結合を有することを条件として、欠失、挿入および置換の任意の組
合せが、最終構築物に到達するために作製され得る。
一部の実施形態では、本明細書で提供される抗体のアミノ酸配列バリアントが企図され
る。例えば、抗体の結合親和性および／または他の生物学的特性を改善することが望まれ
得る。抗体のアミノ酸配列バリアントは、抗体をコードするヌクレオチド配列中に適切な
改変を導入することによって、またはペプチド合成によって調製され得る。かかる改変に
は、例えば、抗体のアミノ酸配列からの欠失、および／またはかかるアミノ酸配列中への
挿入、および／またはかかるアミノ酸配列内の残基の置換が含まれる。最終構築物が所望
の特徴、例えば、抗原結合を有することを条件として、欠失、挿入および置換の任意の組
合せが、最終構築物に到達するために作製され得る。
【0260】
一部の実施形態では、１または複数のアミノ酸置換を有する抗体バリアントが提供され
る。置換変異誘発のための目的の部位には、ＨＶＲおよびＦＲが含まれる。アミノ酸置換
は、目的の抗体中に導入され得、産物は、所望の活性、例えば、保持／改善された抗原結
合、または減少した免疫原性について、スクリーニングされ得る。
る。置換変異誘発のための目的の部位には、ＨＶＲおよびＦＲが含まれる。アミノ酸置換
は、目的の抗体中に導入され得、産物は、所望の活性、例えば、保持／改善された抗原結
合、または減少した免疫原性について、スクリーニングされ得る。
【0261】
保存的置換は以下の表１に示される。
【表1-2】
【0262】
アミノ酸は、共通する側鎖特性に従って異なるクラスへとグループ分けされ得る：
ａ．疎水性：ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ；
ｂ．中性親水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ；
ｃ．酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ；
ｄ．塩基性：Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ；
ｅ．鎖配向に影響を与える残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ；
ｆ．芳香族：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ。
ａ．疎水性：ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ；
ｂ．中性親水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ；
ｃ．酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ；
ｄ．塩基性：Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ；
ｅ．鎖配向に影響を与える残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ；
ｆ．芳香族：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ。
【0263】
非保存的置換は、これらのクラスのうち１つのメンバーを別のクラスに交換することを
伴う。
伴う。
【0264】
例示的な置換バリアントは、例えば、ファージディスプレイベースの親和性成熟技術を
使用して簡便に生成され得る親和性成熟抗体である。簡潔に述べると、１または複数のＣ
ＤＲ残基が変異され、バリアント抗体部分がファージ上にディスプレイされ、特定の生物
学的活性（例えば、結合親和性）についてスクリーニングされる。変更（例えば、置換）
は、例えば、抗体部分の親和性を改善するために、ＨＶＲ中に作製され得る。かかる変更
は、ＨＶＲ「ホットスポット」、即ち、体細胞成熟プロセスの間に高頻度で変異を受ける
コドンによってコードされる残基（例えば、Ｃｈｏｗｄｈｕｒｙ、Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｏ
ｌ． Ｂｉｏｌ． ２０７巻：１７９～１９６頁（２００８年）を参照のこと）および／
または特異性決定残基（ＳＤＲ）中に作製され得、得られたバリアントＶＨまたはＶＬは
、結合親和性について試験される。二次ライブラリーから構築および再選択することによ
る親和性成熟は、例えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍら、Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃ
ｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ １７８巻：１～３７頁（Ｏ’Ｂｒｉｅｎら編、Ｈｕｍａｎ
Ｐｒｅｓｓ、Ｔｏｔｏｗａ、ＮＪ（２００１年））に記載されている。
使用して簡便に生成され得る親和性成熟抗体である。簡潔に述べると、１または複数のＣ
ＤＲ残基が変異され、バリアント抗体部分がファージ上にディスプレイされ、特定の生物
学的活性（例えば、結合親和性）についてスクリーニングされる。変更（例えば、置換）
は、例えば、抗体部分の親和性を改善するために、ＨＶＲ中に作製され得る。かかる変更
は、ＨＶＲ「ホットスポット」、即ち、体細胞成熟プロセスの間に高頻度で変異を受ける
コドンによってコードされる残基（例えば、Ｃｈｏｗｄｈｕｒｙ、Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｏ
ｌ． Ｂｉｏｌ． ２０７巻：１７９～１９６頁（２００８年）を参照のこと）および／
または特異性決定残基（ＳＤＲ）中に作製され得、得られたバリアントＶＨまたはＶＬは
、結合親和性について試験される。二次ライブラリーから構築および再選択することによ
る親和性成熟は、例えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍら、Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃ
ｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ １７８巻：１～３７頁（Ｏ’Ｂｒｉｅｎら編、Ｈｕｍａｎ
Ｐｒｅｓｓ、Ｔｏｔｏｗａ、ＮＪ（２００１年））に記載されている。
【0265】
親和性成熟の一部の実施形態では、多様性が、種々の方法（例えば、エラープローンＰ
ＣＲ、鎖シャッフリングまたはオリゴヌクレオチド指向性変異誘発（ｏｌｉｇｏｎｕｃｌ
ｅｏｔｉｄｅ－ｄｉｒｅｃｔｅｄ ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ））のいずれかによる成熟の
ために選択された可変遺伝子中に導入される。次いで、二次ライブラリーが作り出される
。次いで、ライブラリーは、所望の親和性を有する任意の抗体部分のバリアントを同定す
るためにスクリーニングされる。多様性を導入するための別の方法には、いくつかのＨＶ
Ｒ残基（例えば、一度に４～６残基）がランダム化されるＨＶＲ指向性アプローチが関与
する。抗原結合に関与するＨＶＲ残基は、例えば、アラニンスキャニング変異誘発または
モデル化を使用して、特異的に同定され得る。特に、ＣＤＲ－Ｈ３およびＣＤＲ－Ｌ３が
標的化される場合が多い。
ＣＲ、鎖シャッフリングまたはオリゴヌクレオチド指向性変異誘発（ｏｌｉｇｏｎｕｃｌ
ｅｏｔｉｄｅ－ｄｉｒｅｃｔｅｄ ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ））のいずれかによる成熟の
ために選択された可変遺伝子中に導入される。次いで、二次ライブラリーが作り出される
。次いで、ライブラリーは、所望の親和性を有する任意の抗体部分のバリアントを同定す
るためにスクリーニングされる。多様性を導入するための別の方法には、いくつかのＨＶ
Ｒ残基（例えば、一度に４～６残基）がランダム化されるＨＶＲ指向性アプローチが関与
する。抗原結合に関与するＨＶＲ残基は、例えば、アラニンスキャニング変異誘発または
モデル化を使用して、特異的に同定され得る。特に、ＣＤＲ－Ｈ３およびＣＤＲ－Ｌ３が
標的化される場合が多い。
【0266】
一部の実施形態では、置換、挿入または欠失が、かかる変更が抗原に結合する抗体部分
の能力を実質的に低減させない限り、１または複数のＨＶＲ内に存在し得る。例えば、結
合親和性を実質的に低減させない保存的変更（例えば、本明細書で提供される保存的置換
）が、ＨＶＲ中に作製され得る。かかる変更は、ＨＶＲ「ホットスポット」またはＳＤＲ
の外側にあり得る。上で提供されたバリアントＶＨ配列およびＶＬ配列の一部の実施形態
では、各ＨＶＲのいずれかが変更されていない、または１、２もしくは３つ以下のアミノ
酸置換を含む。
の能力を実質的に低減させない限り、１または複数のＨＶＲ内に存在し得る。例えば、結
合親和性を実質的に低減させない保存的変更（例えば、本明細書で提供される保存的置換
）が、ＨＶＲ中に作製され得る。かかる変更は、ＨＶＲ「ホットスポット」またはＳＤＲ
の外側にあり得る。上で提供されたバリアントＶＨ配列およびＶＬ配列の一部の実施形態
では、各ＨＶＲのいずれかが変更されていない、または１、２もしくは３つ以下のアミノ
酸置換を含む。
【0267】
変異誘発のために標的化され得る抗体の残基または領域の同定のために有用な方法は、
ＣｕｎｎｉｎｇｈａｍおよびＷｅｌｌｓ（１９８９年）Ｓｃｉｅｎｃｅ、２４４巻：１０
８１～１０８５頁によって記載されるように、「アラニンスキャニング変異誘発」と呼ば
れる。この方法では、標的残基（例えば、荷電残基、例えば、ａｒｇ、ａｓｐ、ｈｉｓ、
ｌｙｓおよびｇｌｕ）の１つの残基または群が同定され、抗体部分と抗原との相互作用が
影響を受けるかどうかを決定するために、中性または負に荷電したアミノ酸（例えば、ア
ラニンまたはポリアラニン）によって置き換えられる。さらなる置換が、初期の置換に対
する機能的感受性を明らかに示すアミノ酸位置において導入され得る。あるいは、または
さらに、抗原－抗体部分の複合体の結晶構造が、抗体部分と抗原との間の接触点を同定す
るために決定され得る。かかる接触残基および隣接残基は、置換のための候補として標的
化または排除され得る。バリアントは、それらが所望の特性を含むかどうかを決定するた
めにスクリーニングされ得る。
ＣｕｎｎｉｎｇｈａｍおよびＷｅｌｌｓ（１９８９年）Ｓｃｉｅｎｃｅ、２４４巻：１０
８１～１０８５頁によって記載されるように、「アラニンスキャニング変異誘発」と呼ば
れる。この方法では、標的残基（例えば、荷電残基、例えば、ａｒｇ、ａｓｐ、ｈｉｓ、
ｌｙｓおよびｇｌｕ）の１つの残基または群が同定され、抗体部分と抗原との相互作用が
影響を受けるかどうかを決定するために、中性または負に荷電したアミノ酸（例えば、ア
ラニンまたはポリアラニン）によって置き換えられる。さらなる置換が、初期の置換に対
する機能的感受性を明らかに示すアミノ酸位置において導入され得る。あるいは、または
さらに、抗原－抗体部分の複合体の結晶構造が、抗体部分と抗原との間の接触点を同定す
るために決定され得る。かかる接触残基および隣接残基は、置換のための候補として標的
化または排除され得る。バリアントは、それらが所望の特性を含むかどうかを決定するた
めにスクリーニングされ得る。
【0268】
アミノ酸配列挿入には、１残基から１００またはそれより多くの残基を含むポリペプチ
ドまでの長さの範囲のアミノ末端および／またはカルボキシル末端融合、ならびに単一ま
たは複数のアミノ酸残基の配列内挿入が含まれる。末端挿入の例には、Ｎ末端メチオニル
残基を有する抗体部分が含まれる。抗体部分の他の挿入バリアントには、酵素（例えば、
ＡＤＥＰＴのため）または抗体部分の血清半減期を増加させるポリペプチドへの、抗体部
分のＮまたはＣ末端への融合が含まれる。
ドまでの長さの範囲のアミノ末端および／またはカルボキシル末端融合、ならびに単一ま
たは複数のアミノ酸残基の配列内挿入が含まれる。末端挿入の例には、Ｎ末端メチオニル
残基を有する抗体部分が含まれる。抗体部分の他の挿入バリアントには、酵素（例えば、
ＡＤＥＰＴのため）または抗体部分の血清半減期を増加させるポリペプチドへの、抗体部
分のＮまたはＣ末端への融合が含まれる。
【0269】
誘導体
一部の実施形態では、本明細書に記載のａｂＴＣＲのいずれかにしたがうａｂＴＣＲは
、当該分野で公知であり容易に入手可能なさらなる非タンパク質性部分を含むように、さ
らに改変され得る。ａｂＴＣＲの誘導体化に適切な部分には、水溶性ポリマーが含まれる
がこれらに限定されない。水溶性ポリマーの非限定的な例には、ポリエチレングリコール
（ＰＥＧ）、エチレングリコール／プロピレングリコールのコポリマー、カルボキシメチ
ルセルロース、デキストラン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリ－１
，３－ジオキソラン、ポリ－１，３，６－トリオキサン、エチレン／無水マレイン酸コポ
リマー、ポリアミノ酸（ホモポリマーまたはランダムコポリマーのいずれか）、およびデ
キストランまたはポリ（ｎ－ビニルピロリドン）ポリエチレングリコール、プロプロピレ
ングリコール（ｐｒｏｐｒｏｐｙｌｅｎｅ ｇｌｙｃｏｌ）ホモポリマー、ポリプロピレ
ンオキシド（ｐｒｏｌｙｐｒｏｐｙｌｅｎｅ ｏｘｉｄｅ）／エチレンオキシドコポリマ
ー、ポリオキシエチル化ポリオール（例えば、グリセロール）、ポリビニルアルコール、
ならびにそれらの混合物が含まれるがこれらに限定されない。ポリエチレングリコールプ
ロピオンアルデヒドは、水中でのその安定性に起因して、製造における利点を有し得る。
ポリマーは、任意の分子量のものであり得、分岐鎖または非分岐鎖であり得る。ａｂＴＣ
Ｒに結合したポリマーの数は変動し得、１よりも多いポリマーが結合される場合、それら
は同じまたは異なる分子であり得る。一般に、誘導体化に使用されるポリマーの数および
／または型は、改善すべきａｂＴＣＲの特定の特性または機能、ａｂＴＣＲ誘導体が規定
された条件下で治療に使用されるかどうかなどが含まれるがこれらに限定されない考慮事
項に基づいて決定され得る。
一部の実施形態では、本明細書に記載のａｂＴＣＲのいずれかにしたがうａｂＴＣＲは
、当該分野で公知であり容易に入手可能なさらなる非タンパク質性部分を含むように、さ
らに改変され得る。ａｂＴＣＲの誘導体化に適切な部分には、水溶性ポリマーが含まれる
がこれらに限定されない。水溶性ポリマーの非限定的な例には、ポリエチレングリコール
（ＰＥＧ）、エチレングリコール／プロピレングリコールのコポリマー、カルボキシメチ
ルセルロース、デキストラン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリ－１
，３－ジオキソラン、ポリ－１，３，６－トリオキサン、エチレン／無水マレイン酸コポ
リマー、ポリアミノ酸（ホモポリマーまたはランダムコポリマーのいずれか）、およびデ
キストランまたはポリ（ｎ－ビニルピロリドン）ポリエチレングリコール、プロプロピレ
ングリコール（ｐｒｏｐｒｏｐｙｌｅｎｅ ｇｌｙｃｏｌ）ホモポリマー、ポリプロピレ
ンオキシド（ｐｒｏｌｙｐｒｏｐｙｌｅｎｅ ｏｘｉｄｅ）／エチレンオキシドコポリマ
ー、ポリオキシエチル化ポリオール（例えば、グリセロール）、ポリビニルアルコール、
ならびにそれらの混合物が含まれるがこれらに限定されない。ポリエチレングリコールプ
ロピオンアルデヒドは、水中でのその安定性に起因して、製造における利点を有し得る。
ポリマーは、任意の分子量のものであり得、分岐鎖または非分岐鎖であり得る。ａｂＴＣ
Ｒに結合したポリマーの数は変動し得、１よりも多いポリマーが結合される場合、それら
は同じまたは異なる分子であり得る。一般に、誘導体化に使用されるポリマーの数および
／または型は、改善すべきａｂＴＣＲの特定の特性または機能、ａｂＴＣＲ誘導体が規定
された条件下で治療に使用されるかどうかなどが含まれるがこれらに限定されない考慮事
項に基づいて決定され得る。
【0270】
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲと放射線への曝露によって選択的に加熱され得る非タ
ンパク質性部分とのコンジュゲートが提供される。一部の実施形態では、非タンパク質性
部分は、カーボンナノチューブである（Ｋａｍら、Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ．
Ｓｃｉ． ＵＳＡ １０２巻：１１６００～１１６０５頁（２００５年））。放射線は
、任意の波長のものであり得、これには、通常の細胞を害さないが、ａｂＴＣＲ－非タン
パク質性部分に対して近位の細胞が殺滅される温度まで非タンパク質性部分を加熱する波
長が含まれるがこれに限定されない。
ンパク質性部分とのコンジュゲートが提供される。一部の実施形態では、非タンパク質性
部分は、カーボンナノチューブである（Ｋａｍら、Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ．
Ｓｃｉ． ＵＳＡ １０２巻：１１６００～１１６０５頁（２００５年））。放射線は
、任意の波長のものであり得、これには、通常の細胞を害さないが、ａｂＴＣＲ－非タン
パク質性部分に対して近位の細胞が殺滅される温度まで非タンパク質性部分を加熱する波
長が含まれるがこれに限定されない。
【0271】
ａｂＴＣＲエフェクター細胞の調製
本発明は、一態様では、ａｂＴＣＲを発現するエフェクター細胞（例えば、リンパ球、
例えば、Ｔ細胞）を提供する。ａｂＴＣＲを発現するエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞
）（ａｂＴＣＲエフェクター細胞、例えば、ａｂＴＣＲ Ｔ細胞）を調製する例示的な方
法は、本明細書で提供される。
本発明は、一態様では、ａｂＴＣＲを発現するエフェクター細胞（例えば、リンパ球、
例えば、Ｔ細胞）を提供する。ａｂＴＣＲを発現するエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞
）（ａｂＴＣＲエフェクター細胞、例えば、ａｂＴＣＲ Ｔ細胞）を調製する例示的な方
法は、本明細書で提供される。
【0272】
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞（例えば、ａｂＴＣＲ Ｔ細胞）は
、標的抗原（例えば、疾患関連抗原）に特異的に結合するａｂＴＣＲ（例えば、本明細書
に記載されるａｂＴＣＲのいずれか）をコードする１つまたは複数の核酸（例えば、レン
チウイルスベクターを含む）をエフェクター細胞中に導入することによって生成され得る
。エフェクター細胞中への１つまたは複数の核酸の導入は、核酸について本明細書に記載
されるものなどの、当該分野で公知の技術を使用して達成され得る。一部の実施形態では
、本発明のａｂＴＣＲエフェクター細胞（例えば、ａｂＴＣＲ Ｔ細胞）は、ｉｎ ｖｉ
ｖｏで複製することができ、標的抗原の発現と関連する疾患（例えば、がんまたはウイル
ス感染症）の持続性の制御をもたらし得る長期持続を生じる。
、標的抗原（例えば、疾患関連抗原）に特異的に結合するａｂＴＣＲ（例えば、本明細書
に記載されるａｂＴＣＲのいずれか）をコードする１つまたは複数の核酸（例えば、レン
チウイルスベクターを含む）をエフェクター細胞中に導入することによって生成され得る
。エフェクター細胞中への１つまたは複数の核酸の導入は、核酸について本明細書に記載
されるものなどの、当該分野で公知の技術を使用して達成され得る。一部の実施形態では
、本発明のａｂＴＣＲエフェクター細胞（例えば、ａｂＴＣＲ Ｔ細胞）は、ｉｎ ｖｉ
ｖｏで複製することができ、標的抗原の発現と関連する疾患（例えば、がんまたはウイル
ス感染症）の持続性の制御をもたらし得る長期持続を生じる。
【0273】
一部の実施形態では、本発明は、リンパ球注入を使用する、例えば、がんもしくはウイ
ルス感染症を含む、標的抗原の発現と関連する疾患および／もしくは障害（本明細書で「
標的抗原陽性」または「ＴＡ陽性」疾患または障害とも呼ぶ）を有するまたは疾患および
／もしくは障害を発症するリスクがある患者の処置のために、本明細書に記載されるａｂ
ＴＣＲのいずれかにしたがう、標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲを発現する遺伝子
改変されたＴ細胞を投与することに関する。一部の実施形態では、自家リンパ球注入が、
処置において使用される。自家ＰＢＭＣは、処置を必要とする患者から収集され、Ｔ細胞
は、本明細書に記載されており、当該分野で公知の方法を使用して活性化および拡大増殖
され、次いで、患者に注入して戻される。
ルス感染症を含む、標的抗原の発現と関連する疾患および／もしくは障害（本明細書で「
標的抗原陽性」または「ＴＡ陽性」疾患または障害とも呼ぶ）を有するまたは疾患および
／もしくは障害を発症するリスクがある患者の処置のために、本明細書に記載されるａｂ
ＴＣＲのいずれかにしたがう、標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲを発現する遺伝子
改変されたＴ細胞を投与することに関する。一部の実施形態では、自家リンパ球注入が、
処置において使用される。自家ＰＢＭＣは、処置を必要とする患者から収集され、Ｔ細胞
は、本明細書に記載されており、当該分野で公知の方法を使用して活性化および拡大増殖
され、次いで、患者に注入して戻される。
【0274】
一部の実施形態では、本明細書に記載されるａｂＴＣＲのいずれかにしたがう、標的抗
原に特異的に結合するａｂＴＣＲを発現するＴ細胞（本明細書で「ａｂＴＣＲ Ｔ細胞」
とも呼ぶ）が提供される。本発明のａｂＴＣＲ Ｔ細胞は、ロバストなｉｎ ｖｉｖｏ
Ｔ細胞拡大増殖を受け得、血液および骨髄において延長された量の時間にわたって高いレ
ベルで持続する標的抗原特異的メモリー細胞を確立できる。一部の実施形態では、患者に
注入される本発明のａｂＴＣＲ Ｔ細胞は、標的抗原関連疾患を有する患者においてｉｎ
ｖｉｖｏで、標的抗原提示細胞、例えば、標的抗原提示がんまたはウイルス感染細胞を
排除できる。一部の実施形態では、患者に注入される本発明のａｂＴＣＲ Ｔ細胞は、少
なくとも１つの従来の処置に対して難治性である標的抗原関連疾患を有する患者において
ｉｎ ｖｉｖｏで、標的抗原提示細胞、例えば、標的抗原提示がんまたはウイルス感染細
胞を排除できる。
原に特異的に結合するａｂＴＣＲを発現するＴ細胞（本明細書で「ａｂＴＣＲ Ｔ細胞」
とも呼ぶ）が提供される。本発明のａｂＴＣＲ Ｔ細胞は、ロバストなｉｎ ｖｉｖｏ
Ｔ細胞拡大増殖を受け得、血液および骨髄において延長された量の時間にわたって高いレ
ベルで持続する標的抗原特異的メモリー細胞を確立できる。一部の実施形態では、患者に
注入される本発明のａｂＴＣＲ Ｔ細胞は、標的抗原関連疾患を有する患者においてｉｎ
ｖｉｖｏで、標的抗原提示細胞、例えば、標的抗原提示がんまたはウイルス感染細胞を
排除できる。一部の実施形態では、患者に注入される本発明のａｂＴＣＲ Ｔ細胞は、少
なくとも１つの従来の処置に対して難治性である標的抗原関連疾患を有する患者において
ｉｎ ｖｉｖｏで、標的抗原提示細胞、例えば、標的抗原提示がんまたはウイルス感染細
胞を排除できる。
【0275】
Ｔ細胞の拡大増殖および遺伝子改変の前に、Ｔ細胞の供給源が被験体から取得される。
Ｔ細胞は、末梢血単核球、骨髄、リンパ節組織、臍帯血、胸腺組織、感染の部位由来の組
織、腹水、胸水、脾臓組織および腫瘍を含むいくつかの供給源から取得され得る。本発明
の一部の実施形態では、当該分野で利用可能ないくつものＴ細胞株が使用され得る。本発
明の一部の実施形態では、Ｔ細胞は、Ｆｉｃｏｌｌ（商標）分離などの当業者に公知のい
くつもの技術を使用して被験体から収集された血液の単位から取得され得る。一部の実施
形態では、個体の循環血由来の細胞は、アフェレーシスによって取得される。アフェレー
シス産物は、典型的には、Ｔ細胞を含むリンパ球、単球、顆粒球、Ｂ細胞、他の有核白血
球、赤血球および血小板を含む。一部の実施形態では、アフェレーシスによって収集され
た細胞は、血漿画分を除去するため、および引き続く処理ステップに適切な緩衝液または
培地中に細胞を配置するために、洗浄され得る。一部の実施形態では、細胞は、リン酸緩
衝食塩水（ＰＢＳ）で洗浄される。一部の実施形態では、洗浄溶液は、カルシウムを欠き
、マグネシウムを欠き得る、または全てではないものの、多くの二価カチオンを欠き得る
。当業者が容易に理解するように、洗浄ステップは、当業者に公知の方法によって、例え
ば、製造業者の指示に従って半自動化「フロースルー」遠心分離機（例えば、Ｃｏｂｅ
２９９１細胞プロセッサー、Ｂａｘｔｅｒ ＣｙｔｏＭａｔｅまたはＨａｅｍｏｎｅｔｉ
ｃｓ Ｃｅｌｌ Ｓａｖｅｒ ５）を使用することによって達成され得る。洗浄後、細胞
は、種々の生体適合性緩衝液、例えば、無Ｃａ２＋、無Ｍｇ２＋ＰＢＳ、ＰｌａｓｍａＬ
ｙｔｅ Ａ、または緩衝剤ありもしくはなしの他の食塩水溶液中に再懸濁され得る。ある
いは、アフェレーシス試料の望ましくない成分が除去され得、細胞が培養培地中に直接再
懸濁され得る。
Ｔ細胞は、末梢血単核球、骨髄、リンパ節組織、臍帯血、胸腺組織、感染の部位由来の組
織、腹水、胸水、脾臓組織および腫瘍を含むいくつかの供給源から取得され得る。本発明
の一部の実施形態では、当該分野で利用可能ないくつものＴ細胞株が使用され得る。本発
明の一部の実施形態では、Ｔ細胞は、Ｆｉｃｏｌｌ（商標）分離などの当業者に公知のい
くつもの技術を使用して被験体から収集された血液の単位から取得され得る。一部の実施
形態では、個体の循環血由来の細胞は、アフェレーシスによって取得される。アフェレー
シス産物は、典型的には、Ｔ細胞を含むリンパ球、単球、顆粒球、Ｂ細胞、他の有核白血
球、赤血球および血小板を含む。一部の実施形態では、アフェレーシスによって収集され
た細胞は、血漿画分を除去するため、および引き続く処理ステップに適切な緩衝液または
培地中に細胞を配置するために、洗浄され得る。一部の実施形態では、細胞は、リン酸緩
衝食塩水（ＰＢＳ）で洗浄される。一部の実施形態では、洗浄溶液は、カルシウムを欠き
、マグネシウムを欠き得る、または全てではないものの、多くの二価カチオンを欠き得る
。当業者が容易に理解するように、洗浄ステップは、当業者に公知の方法によって、例え
ば、製造業者の指示に従って半自動化「フロースルー」遠心分離機（例えば、Ｃｏｂｅ
２９９１細胞プロセッサー、Ｂａｘｔｅｒ ＣｙｔｏＭａｔｅまたはＨａｅｍｏｎｅｔｉ
ｃｓ Ｃｅｌｌ Ｓａｖｅｒ ５）を使用することによって達成され得る。洗浄後、細胞
は、種々の生体適合性緩衝液、例えば、無Ｃａ２＋、無Ｍｇ２＋ＰＢＳ、ＰｌａｓｍａＬ
ｙｔｅ Ａ、または緩衝剤ありもしくはなしの他の食塩水溶液中に再懸濁され得る。ある
いは、アフェレーシス試料の望ましくない成分が除去され得、細胞が培養培地中に直接再
懸濁され得る。
【0276】
一部の実施形態では、Ｔ細胞は、赤血球を溶解させ、例えば、ＰＥＲＣＯＬＬ（商標）
勾配を介した遠心分離によって、または向流遠心分離溶出（ｃｏｕｎｔｅｒｆｌｏｗ ｃ
ｅｎｔｒｉｆｕｇａｌ ｅｌｕｔｒｉａｔｉｏｎ）によって単球を枯渇させることによっ
て、末梢血リンパ球から単離される。Ｔ細胞の特定の下位集団、例えば、ＣＤ３＋、ＣＤ
２８＋、ＣＤ４＋、ＣＤ８＋、ＣＤ４５ＲＡ＋およびＣＤ４５ＲＯ＋Ｔ細胞は、陽性また
は陰性選択技術によってさらに単離され得る。例えば、一部の実施形態では、Ｔ細胞は、
所望のＴ細胞の陽性選択に十分な期間にわたる、抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８（即ち、３×２８
）結合体化ビーズ、例えば、ＤＹＮＡＢＥＡＤＳ（登録商標）Ｍ－４５０ ＣＤ３／ＣＤ
２８ Ｔとのインキュベーションによって単離される。一部の実施形態では、期間は、約
３０分間である。一部の実施形態では、期間は、３０分間から３６時間またはそれ超まで
（これらの値のの間の全ての範囲を含む）である。一部の実施形態では、期間は、少なく
とも１、２、３、４、５または６時間である。一部の実施形態では、期間は、１０～２４
時間である。一部の実施形態では、インキュベーション期間は、２４時間である。白血病
を有する患者からのＴ細胞の単離のために、より長いインキュベーション時間、例えば２
４時間の使用が、細胞収量を増加させ得る。より長いインキュベーション時間は、他の細
胞型と比較して少ないＴ細胞が存在する任意の状況において、例えば、腫瘍組織からまた
は免疫無防備状態の個体から腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）を単離することにおいて、Ｔ細
胞を単離するために使用され得る。さらに、より長いインキュベーション時間の使用は、
ＣＤ８＋Ｔ細胞の捕捉の効率を増加させ得る。したがって、この時間を単純に短縮もしく
は延長させることによって、Ｔ細胞は、ＣＤ３／ＣＤ２８ビーズに結合するようになり、
および／またはビーズ対Ｔ細胞の比率を増加もしくは減少させることによって、Ｔ細胞の
下位集団は、培養開始の時点で、もしくはプロセスの間の他の時点で、有利にまたは不利
に優先的に選択され得る。さらに、ビーズまたは他の表面上の抗ＣＤ３および／または抗
ＣＤ２８抗体の比率を増加または減少させることによって、Ｔ細胞の下位集団は、培養開
始の時点で、または他の所望の時点で、有利にまたは不利に優先的に選択され得る。当業
者は、複数ラウンドの選択もまた本発明との関連において使用され得ることを認識してい
る。一部の実施形態では、活性化および拡大増殖プロセスにおいて、選択手順を実施し、
「選択されていない」細胞を使用することが望まれ得る。「選択されていない」細胞はま
た、さらなるラウンドの選択に供され得る。
勾配を介した遠心分離によって、または向流遠心分離溶出（ｃｏｕｎｔｅｒｆｌｏｗ ｃ
ｅｎｔｒｉｆｕｇａｌ ｅｌｕｔｒｉａｔｉｏｎ）によって単球を枯渇させることによっ
て、末梢血リンパ球から単離される。Ｔ細胞の特定の下位集団、例えば、ＣＤ３＋、ＣＤ
２８＋、ＣＤ４＋、ＣＤ８＋、ＣＤ４５ＲＡ＋およびＣＤ４５ＲＯ＋Ｔ細胞は、陽性また
は陰性選択技術によってさらに単離され得る。例えば、一部の実施形態では、Ｔ細胞は、
所望のＴ細胞の陽性選択に十分な期間にわたる、抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８（即ち、３×２８
）結合体化ビーズ、例えば、ＤＹＮＡＢＥＡＤＳ（登録商標）Ｍ－４５０ ＣＤ３／ＣＤ
２８ Ｔとのインキュベーションによって単離される。一部の実施形態では、期間は、約
３０分間である。一部の実施形態では、期間は、３０分間から３６時間またはそれ超まで
（これらの値のの間の全ての範囲を含む）である。一部の実施形態では、期間は、少なく
とも１、２、３、４、５または６時間である。一部の実施形態では、期間は、１０～２４
時間である。一部の実施形態では、インキュベーション期間は、２４時間である。白血病
を有する患者からのＴ細胞の単離のために、より長いインキュベーション時間、例えば２
４時間の使用が、細胞収量を増加させ得る。より長いインキュベーション時間は、他の細
胞型と比較して少ないＴ細胞が存在する任意の状況において、例えば、腫瘍組織からまた
は免疫無防備状態の個体から腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）を単離することにおいて、Ｔ細
胞を単離するために使用され得る。さらに、より長いインキュベーション時間の使用は、
ＣＤ８＋Ｔ細胞の捕捉の効率を増加させ得る。したがって、この時間を単純に短縮もしく
は延長させることによって、Ｔ細胞は、ＣＤ３／ＣＤ２８ビーズに結合するようになり、
および／またはビーズ対Ｔ細胞の比率を増加もしくは減少させることによって、Ｔ細胞の
下位集団は、培養開始の時点で、もしくはプロセスの間の他の時点で、有利にまたは不利
に優先的に選択され得る。さらに、ビーズまたは他の表面上の抗ＣＤ３および／または抗
ＣＤ２８抗体の比率を増加または減少させることによって、Ｔ細胞の下位集団は、培養開
始の時点で、または他の所望の時点で、有利にまたは不利に優先的に選択され得る。当業
者は、複数ラウンドの選択もまた本発明との関連において使用され得ることを認識してい
る。一部の実施形態では、活性化および拡大増殖プロセスにおいて、選択手順を実施し、
「選択されていない」細胞を使用することが望まれ得る。「選択されていない」細胞はま
た、さらなるラウンドの選択に供され得る。
【0277】
陰性選択によるＴ細胞集団の富化は、陰性選択された細胞に独自の表面マーカーに対す
る抗体の組合せを用いて達成され得る。１つの方法は、陰性選択される細胞上に存在する
細胞表面マーカーに対するモノクローナル抗体のカクテルを使用する、負の磁気免疫付着
（ｎｅｇａｔｉｖｅ ｍａｇｎｅｔｉｃ ｉｍｍｕｎｏａｄｈｅｒｅｎｃｅ）もしくはフ
ローサイトメトリーを介した細胞分取および／または選択である。例えば、陰性選択によ
ってＣＤ４＋細胞を富化するために、モノクローナル抗体カクテルは、典型的には、ＣＤ
１４、ＣＤ２０、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１６、ＨＬＡ－ＤＲおよびＣＤ８に対する抗体を含む
。一部の実施形態では、ＣＤ４＋、ＣＤ２５＋、ＣＤ６２Ｌｈｉ、ＧＩＴＲ＋およびＦｏ
ｘＰ３＋を典型的には発現する調節性Ｔ細胞を富化または陽性選択することが望まれ得る
。あるいは、一部の実施形態では、Ｔ調節細胞は、抗ＣＤ２５結合体化ビーズまたは他の
類似の選択方法によって枯渇される。
る抗体の組合せを用いて達成され得る。１つの方法は、陰性選択される細胞上に存在する
細胞表面マーカーに対するモノクローナル抗体のカクテルを使用する、負の磁気免疫付着
（ｎｅｇａｔｉｖｅ ｍａｇｎｅｔｉｃ ｉｍｍｕｎｏａｄｈｅｒｅｎｃｅ）もしくはフ
ローサイトメトリーを介した細胞分取および／または選択である。例えば、陰性選択によ
ってＣＤ４＋細胞を富化するために、モノクローナル抗体カクテルは、典型的には、ＣＤ
１４、ＣＤ２０、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１６、ＨＬＡ－ＤＲおよびＣＤ８に対する抗体を含む
。一部の実施形態では、ＣＤ４＋、ＣＤ２５＋、ＣＤ６２Ｌｈｉ、ＧＩＴＲ＋およびＦｏ
ｘＰ３＋を典型的には発現する調節性Ｔ細胞を富化または陽性選択することが望まれ得る
。あるいは、一部の実施形態では、Ｔ調節細胞は、抗ＣＤ２５結合体化ビーズまたは他の
類似の選択方法によって枯渇される。
【0278】
陽性または陰性選択による細胞の所望の集団の単離のために、細胞の濃度および表面（
例えば、ビーズなどの粒子）を変えることができる。一部の実施形態では、細胞とビーズ
との最大の接触を確実にするために、ビーズおよび細胞が一緒に混合される体積を顕著に
減少させる（即ち、細胞の濃度を増加させる）ことが望まれ得る。例えば、一部の実施形
態では、約２０億細胞／ｍｌの濃度が使用される。一部の実施形態では、約１０億細胞／
ｍｌの濃度が使用される。一部の実施形態では、約１００百万細胞／ｍｌ超が使用される
。一部の実施形態では、約１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５または５０
百万細胞／ｍｌのいずれかの細胞の濃度が使用される。一部の実施形態では、約７５、８
０、８５、９０、９５または１００百万細胞／ｍｌのいずれかの細胞の濃度が使用される
。一部の実施形態では、約１２５または約１５０百万細胞／ｍｌの濃度が使用される。高
い濃度を使用すると、増加した細胞収量、細胞活性化および細胞拡大増殖が生じ得る。さ
らに、高い細胞濃度の使用は、目的の標的抗原を弱く発現し得る細胞、例えばＣＤ２８陰
性Ｔ細胞の、または多くの腫瘍細胞が存在する試料（即ち、白血病血液、腫瘍組織など）
からの、より効率的な捕捉を可能にする。細胞のかかる集団は、治療的価値を有し得、取
得が望まれる。例えば、高濃度の細胞を使用すると、通常はより弱いＣＤ２８発現を有す
るＣＤ８＋Ｔ細胞のより効率的な選択が可能になる。
例えば、ビーズなどの粒子）を変えることができる。一部の実施形態では、細胞とビーズ
との最大の接触を確実にするために、ビーズおよび細胞が一緒に混合される体積を顕著に
減少させる（即ち、細胞の濃度を増加させる）ことが望まれ得る。例えば、一部の実施形
態では、約２０億細胞／ｍｌの濃度が使用される。一部の実施形態では、約１０億細胞／
ｍｌの濃度が使用される。一部の実施形態では、約１００百万細胞／ｍｌ超が使用される
。一部の実施形態では、約１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５または５０
百万細胞／ｍｌのいずれかの細胞の濃度が使用される。一部の実施形態では、約７５、８
０、８５、９０、９５または１００百万細胞／ｍｌのいずれかの細胞の濃度が使用される
。一部の実施形態では、約１２５または約１５０百万細胞／ｍｌの濃度が使用される。高
い濃度を使用すると、増加した細胞収量、細胞活性化および細胞拡大増殖が生じ得る。さ
らに、高い細胞濃度の使用は、目的の標的抗原を弱く発現し得る細胞、例えばＣＤ２８陰
性Ｔ細胞の、または多くの腫瘍細胞が存在する試料（即ち、白血病血液、腫瘍組織など）
からの、より効率的な捕捉を可能にする。細胞のかかる集団は、治療的価値を有し得、取
得が望まれる。例えば、高濃度の細胞を使用すると、通常はより弱いＣＤ２８発現を有す
るＣＤ８＋Ｔ細胞のより効率的な選択が可能になる。
【0279】
本発明の一部の実施形態では、Ｔ細胞は、処置後に患者から直接取得される。これに関
して、ある特定のがん処置、特に、免疫系を損傷する薬物による処置の後、患者が処置か
ら通常は回復している期間中の処置の直後に、取得されたＴ細胞の品質は、ｅｘ ｖｉｖ
ｏで拡大増殖するそれらの能力について、最適であり得るまたは改善され得ることが観察
されている。同様に、本明細書に記載された方法を使用するｅｘ ｖｉｖｏ操作の後、こ
れらの細胞は、増強された生着およびｉｎ ｖｉｖｏ拡大増殖のための好ましい状態にあ
り得る。したがって、本発明との関連において、この回復期の間に、Ｔ細胞、樹状細胞、
または造血系統の他の細胞を含む血液細胞を収集することが企図される。さらに、一部の
実施形態では、動員（例えば、ＧＭ－ＣＳＦによる動員）および条件付けレジメンが、被
験体において、特定の細胞型の再増殖、再循環、再生および／または拡大増殖が、特に、
治療後の規定された時間ウインドウの間に好まれる状態を作り出すために使用され得る。
例示的な細胞型には、Ｔ細胞、Ｂ細胞、樹状細胞、および免疫系の他の細胞が含まれる。
して、ある特定のがん処置、特に、免疫系を損傷する薬物による処置の後、患者が処置か
ら通常は回復している期間中の処置の直後に、取得されたＴ細胞の品質は、ｅｘ ｖｉｖ
ｏで拡大増殖するそれらの能力について、最適であり得るまたは改善され得ることが観察
されている。同様に、本明細書に記載された方法を使用するｅｘ ｖｉｖｏ操作の後、こ
れらの細胞は、増強された生着およびｉｎ ｖｉｖｏ拡大増殖のための好ましい状態にあ
り得る。したがって、本発明との関連において、この回復期の間に、Ｔ細胞、樹状細胞、
または造血系統の他の細胞を含む血液細胞を収集することが企図される。さらに、一部の
実施形態では、動員（例えば、ＧＭ－ＣＳＦによる動員）および条件付けレジメンが、被
験体において、特定の細胞型の再増殖、再循環、再生および／または拡大増殖が、特に、
治療後の規定された時間ウインドウの間に好まれる状態を作り出すために使用され得る。
例示的な細胞型には、Ｔ細胞、Ｂ細胞、樹状細胞、および免疫系の他の細胞が含まれる。
【0280】
望ましいａｂＴＣＲを発現させるためのＴ細胞の遺伝子改変の前であれ後であれ、Ｔ細
胞は、例えば、米国特許第６，３５２，６９４号；第６，５３４，０５５号；第６，９０
５，６８０号；第６，６９２，９６４号；第５，８５８，３５８号；第６，８８７，４６
６号；第６，９０５，６８１号；第７，１４４，５７５号；第７，０６７，３１８号；第
７，１７２，８６９号；第７，２３２，５６６号；第７，１７５，８４３号；第５，８８
３，２２３号；第６，９０５，８７４号；第６，７９７，５１４号；第６，８６７，０４
１号；および米国特許出願公開第２００６０１２１００５号に記載される方法を一般に使
用して、活性化および拡大増殖され得る。
胞は、例えば、米国特許第６，３５２，６９４号；第６，５３４，０５５号；第６，９０
５，６８０号；第６，６９２，９６４号；第５，８５８，３５８号；第６，８８７，４６
６号；第６，９０５，６８１号；第７，１４４，５７５号；第７，０６７，３１８号；第
７，１７２，８６９号；第７，２３２，５６６号；第７，１７５，８４３号；第５，８８
３，２２３号；第６，９０５，８７４号；第６，７９７，５１４号；第６，８６７，０４
１号；および米国特許出願公開第２００６０１２１００５号に記載される方法を一般に使
用して、活性化および拡大増殖され得る。
【0281】
一般に、本発明のＴ細胞は、それに結合したＣＤ３／ＴＣＲ複合体関連シグナルを刺激
する薬剤およびＴ細胞の表面上の共刺激分子を刺激するリガンドを有する表面との接触に
よって拡大増殖される。特に、Ｔ細胞集団は、例えば、表面上に固定された抗ＣＤ３抗体
もしくはその抗原結合断片、または抗ＣＤ２抗体との接触によって、あるいはカルシウム
イオノフォアと併せたタンパク質キナーゼＣ活性化因子（例えば、ブリオスタチン）との
接触によって、刺激され得る。Ｔ細胞の表面上のアクセサリ分子の共刺激のために、アク
セサリ分子を結合するリガンドが使用される。例えば、Ｔ細胞の集団は、Ｔ細胞の増殖を
刺激するのに適切な条件下で、抗ＣＤ３抗体および抗ＣＤ２８抗体と接触させられ得る。
ＣＤ４＋Ｔ細胞またはＣＤ８＋Ｔ細胞のいずれかの増殖を刺激するために、抗ＣＤ３抗体
および抗ＣＤ２８抗体。抗ＣＤ２８抗体の例には、９．３、Ｂ－Ｔ３、ＸＲ－ＣＤ２８（
Ｄｉａｃｌｏｎｅ、Ｂｅｓａｎｓｏｎ、Ｆｒａｎｃｅ）が含まれ、当該分野で一般に公知
である他の方法と同様に使用され得る（ｃａｎ ｂｅ ｕｓｅｄ ａｓ ｃａｎ ｏｔｈ
ｅｒ ｍｅｔｈｏｄｓ ｃｏｍｍｏｎｌｙ ｋｎｏｗｎ ｉｎ ｔｈｅ ａｒｔ）（Ｂｅ
ｒｇら、Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ Ｐｒｏｃ．３０巻（８号）：３９７５～３９７７頁、１
９９８年；Ｈａａｎｅｎら、Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１９０巻（９号）：１３１９～１３２
８頁、１９９９年；Ｇａｒｌａｎｄら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．２２７巻（１～
２号）：５３～６３頁、１９９９年）。
する薬剤およびＴ細胞の表面上の共刺激分子を刺激するリガンドを有する表面との接触に
よって拡大増殖される。特に、Ｔ細胞集団は、例えば、表面上に固定された抗ＣＤ３抗体
もしくはその抗原結合断片、または抗ＣＤ２抗体との接触によって、あるいはカルシウム
イオノフォアと併せたタンパク質キナーゼＣ活性化因子（例えば、ブリオスタチン）との
接触によって、刺激され得る。Ｔ細胞の表面上のアクセサリ分子の共刺激のために、アク
セサリ分子を結合するリガンドが使用される。例えば、Ｔ細胞の集団は、Ｔ細胞の増殖を
刺激するのに適切な条件下で、抗ＣＤ３抗体および抗ＣＤ２８抗体と接触させられ得る。
ＣＤ４＋Ｔ細胞またはＣＤ８＋Ｔ細胞のいずれかの増殖を刺激するために、抗ＣＤ３抗体
および抗ＣＤ２８抗体。抗ＣＤ２８抗体の例には、９．３、Ｂ－Ｔ３、ＸＲ－ＣＤ２８（
Ｄｉａｃｌｏｎｅ、Ｂｅｓａｎｓｏｎ、Ｆｒａｎｃｅ）が含まれ、当該分野で一般に公知
である他の方法と同様に使用され得る（ｃａｎ ｂｅ ｕｓｅｄ ａｓ ｃａｎ ｏｔｈ
ｅｒ ｍｅｔｈｏｄｓ ｃｏｍｍｏｎｌｙ ｋｎｏｗｎ ｉｎ ｔｈｅ ａｒｔ）（Ｂｅ
ｒｇら、Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ Ｐｒｏｃ．３０巻（８号）：３９７５～３９７７頁、１
９９８年；Ｈａａｎｅｎら、Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１９０巻（９号）：１３１９～１３２
８頁、１９９９年；Ｇａｒｌａｎｄら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈ．２２７巻（１～
２号）：５３～６３頁、１９９９年）。
【0282】
本明細書に記載される任意のかかる実施形態の一部では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞
の調製は、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の最小限の疲弊を生じるまたは疲弊を実質的に生
じない。例えば、一部の実施形態では、調製は、約５０％未満（例えば、約４５、４０、
３５、３０、２５、２０、１５、１０または５％未満のいずれか）の、疲弊していくａｂ
ＴＣＲエフェクター細胞を生じる。エフェクター細胞の疲弊は、本明細書に記載される任
意の手段を含む、当該分野で公知の任意の手段によって決定され得る。
の調製は、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の最小限の疲弊を生じるまたは疲弊を実質的に生
じない。例えば、一部の実施形態では、調製は、約５０％未満（例えば、約４５、４０、
３５、３０、２５、２０、１５、１０または５％未満のいずれか）の、疲弊していくａｂ
ＴＣＲエフェクター細胞を生じる。エフェクター細胞の疲弊は、本明細書に記載される任
意の手段を含む、当該分野で公知の任意の手段によって決定され得る。
【0283】
本明細書に記載される任意のかかる実施形態の一部では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞
の調製は、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の最小限の最終分化を生じるまたは最終分化を実
質的に生じない。例えば、一部の実施形態では、調製は、約５０％未満（例えば、約４５
、４０、３５、３０、２５、２０、１５、１０または５％未満のいずれか）の、最終分化
していくａｂＴＣＲエフェクター細胞を生じる。エフェクター細胞の分化は、本明細書に
記載される任意の手段を含む、当該分野で公知の任意の手段によって決定され得る。
の調製は、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の最小限の最終分化を生じるまたは最終分化を実
質的に生じない。例えば、一部の実施形態では、調製は、約５０％未満（例えば、約４５
、４０、３５、３０、２５、２０、１５、１０または５％未満のいずれか）の、最終分化
していくａｂＴＣＲエフェクター細胞を生じる。エフェクター細胞の分化は、本明細書に
記載される任意の手段を含む、当該分野で公知の任意の手段によって決定され得る。
【0284】
本明細書に記載される任意のかかる実施形態の一部では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞
の調製は、ａｂＴＣＲエフェクター細胞上のａｂＴＣＲの最小限の内在化を生じるまたは
内在化を実質的に生じない。例えば、一部の実施形態では、調製は、約５０％未満（例え
ば、約４５、４０、３５、３０、２５、２０、１５、１０または５％未満のいずれか）の
、内在化されていくａｂＴＣＲエフェクター細胞上のａｂＴＣＲを生じる。ａｂＴＣＲエ
フェクター細胞上のａｂＴＣＲの内在化は、本明細書に記載される任意の手段を含む、当
該分野で公知の任意の手段によって決定され得る。
の調製は、ａｂＴＣＲエフェクター細胞上のａｂＴＣＲの最小限の内在化を生じるまたは
内在化を実質的に生じない。例えば、一部の実施形態では、調製は、約５０％未満（例え
ば、約４５、４０、３５、３０、２５、２０、１５、１０または５％未満のいずれか）の
、内在化されていくａｂＴＣＲエフェクター細胞上のａｂＴＣＲを生じる。ａｂＴＣＲエ
フェクター細胞上のａｂＴＣＲの内在化は、本明細書に記載される任意の手段を含む、当
該分野で公知の任意の手段によって決定され得る。
【0285】
遺伝子改変
一部の実施形態では、本発明のａｂＴＣＲエフェクター細胞（例えば、ａｂＴＣＲ Ｔ
細胞）は、本明細書に記載されるａｂＴＣＲをコードするウイルスベクターで、エフェク
ター細胞（例えば、本明細書に記載される方法によって調製されるＴ細胞）を形質導入す
ることによって生成される。ウイルスベクター送達系には、エフェクター細胞への送達後
にエピソームまたは組み込まれたゲノムのいずれかを有する、ＤＮＡおよびＲＮＡウイル
スが含まれる。遺伝子療法手順の概説については、Anderson、Science ２５６巻：８０
８～８１３頁（１９９２年）；NabelおよびFeigner、TIBTECH １１巻：２１１～２１７
頁（１９９３年）；MitaniおよびCaskey、TIBTECH １１巻：１６２～１６６頁（１９９
３年）；Dillon、TIBTECH １１巻：１６７～１７５頁（１９９３年）；Miller、Nature
３５７巻：４５５～４６０頁（１９９２年）；Van Brunt、Biotechnology ６巻（１
０号）：１１４９～１１５４頁（１９８８年）；Vigne、Restorative Neurology and
Neuroscience ８巻：３５～３６頁（１９９５年）；KremerおよびPerricaudet、British
Medical Bulletin ５１巻（ｌ号）：３１～４４頁（１９９５年）；ならびにYuら、G
ene Therapy １巻：１３～２６頁（１９９４年）を参照のこと。一部の実施形態では、
ウイルスベクターは、レンチウイルスベクターであり、ａｂＴＣＲエフェクター細胞は、
ａｂＴＣＲエフェクター細胞ゲノム中に組み込まれたレンチウイルスベクターを含む。一
部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞は、そのゲノム中に組み込まれたレンチ
ウイルスベクターを含むａｂＴＣＲ Ｔ細胞である。
一部の実施形態では、本発明のａｂＴＣＲエフェクター細胞（例えば、ａｂＴＣＲ Ｔ
細胞）は、本明細書に記載されるａｂＴＣＲをコードするウイルスベクターで、エフェク
ター細胞（例えば、本明細書に記載される方法によって調製されるＴ細胞）を形質導入す
ることによって生成される。ウイルスベクター送達系には、エフェクター細胞への送達後
にエピソームまたは組み込まれたゲノムのいずれかを有する、ＤＮＡおよびＲＮＡウイル
スが含まれる。遺伝子療法手順の概説については、Anderson、Science ２５６巻：８０
８～８１３頁（１９９２年）；NabelおよびFeigner、TIBTECH １１巻：２１１～２１７
頁（１９９３年）；MitaniおよびCaskey、TIBTECH １１巻：１６２～１６６頁（１９９
３年）；Dillon、TIBTECH １１巻：１６７～１７５頁（１９９３年）；Miller、Nature
３５７巻：４５５～４６０頁（１９９２年）；Van Brunt、Biotechnology ６巻（１
０号）：１１４９～１１５４頁（１９８８年）；Vigne、Restorative Neurology and
Neuroscience ８巻：３５～３６頁（１９９５年）；KremerおよびPerricaudet、British
Medical Bulletin ５１巻（ｌ号）：３１～４４頁（１９９５年）；ならびにYuら、G
ene Therapy １巻：１３～２６頁（１９９４年）を参照のこと。一部の実施形態では、
ウイルスベクターは、レンチウイルスベクターであり、ａｂＴＣＲエフェクター細胞は、
ａｂＴＣＲエフェクター細胞ゲノム中に組み込まれたレンチウイルスベクターを含む。一
部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞は、そのゲノム中に組み込まれたレンチ
ウイルスベクターを含むａｂＴＣＲ Ｔ細胞である。
【0286】
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞は、内因性ＴＣＲ鎖の一方または両
方の発現を遮断するまたは減少させるように改変されているＴ細胞である。例えば、一部
の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞は、ＴＣＲαおよび／またはβ鎖の発現を
遮断するまたは減少させるように改変されているαβＴ細胞であり、あるいはａｂＴＣＲ
エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現を遮断するまたは減少させるよ
うに改変されているγδＴ細胞である。遺伝子発現を破壊するための細胞の改変には、例
えば、ＲＮＡ干渉（例えば、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ）、遺伝子編集（例え
ば、ＣＲＩＳＰＲベースまたはＴＡＬＥＮベースの遺伝子ノックアウト）などを含む当該
分野で公知の任意のかかる技術が含まれる。
方の発現を遮断するまたは減少させるように改変されているＴ細胞である。例えば、一部
の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞は、ＴＣＲαおよび／またはβ鎖の発現を
遮断するまたは減少させるように改変されているαβＴ細胞であり、あるいはａｂＴＣＲ
エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現を遮断するまたは減少させるよ
うに改変されているγδＴ細胞である。遺伝子発現を破壊するための細胞の改変には、例
えば、ＲＮＡ干渉（例えば、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ、ｍｉＲＮＡ）、遺伝子編集（例え
ば、ＣＲＩＳＰＲベースまたはＴＡＬＥＮベースの遺伝子ノックアウト）などを含む当該
分野で公知の任意のかかる技術が含まれる。
【0287】
一部の実施形態では、Ｔ細胞の内因性ＴＣＲ鎖の一方または両方の低減された発現を有
するａｂＴＣＲ Ｔ細胞は、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ系を使用して生成される。ＣＲＩＳＰ
Ｒ／Ｃａｓ系の遺伝子編集の概説については、例えば、Jian WおよびMarraffini LA、A
nnu. Rev. Microbiol. ６９巻、２０１５年；Hsu PDら、Cell、１５７巻（６号）：
１２６２～１２７８頁、２０１４年；ならびにO'Connell MRら、Nature ５１６巻：２
６３～２６６頁、２０１４年を参照のこと。一部の実施形態では、Ｔ細胞の内因性ＴＣＲ
鎖の一方または両方の低減された発現を有するａｂＴＣＲ Ｔ細胞は、ＴＡＬＥＮベース
のゲノム編集を使用して生成される。
するａｂＴＣＲ Ｔ細胞は、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ系を使用して生成される。ＣＲＩＳＰ
Ｒ／Ｃａｓ系の遺伝子編集の概説については、例えば、Jian WおよびMarraffini LA、A
nnu. Rev. Microbiol. ６９巻、２０１５年；Hsu PDら、Cell、１５７巻（６号）：
１２６２～１２７８頁、２０１４年；ならびにO'Connell MRら、Nature ５１６巻：２
６３～２６６頁、２０１４年を参照のこと。一部の実施形態では、Ｔ細胞の内因性ＴＣＲ
鎖の一方または両方の低減された発現を有するａｂＴＣＲ Ｔ細胞は、ＴＡＬＥＮベース
のゲノム編集を使用して生成される。
【0288】
富化
一部の実施形態では、本明細書に記載されるａｂＴＣＲエフェクター細胞のいずれかに
したがうａｂＴＣＲエフェクター細胞について不均一な細胞集団を富化する方法が提供さ
れる。
一部の実施形態では、本明細書に記載されるａｂＴＣＲエフェクター細胞のいずれかに
したがうａｂＴＣＲエフェクター細胞について不均一な細胞集団を富化する方法が提供さ
れる。
【0289】
標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲエフェクター細胞（例えば、ａｂＴＣＲ Ｔ細
胞）の特定の下位集団は、陽性選択技術によって富化され得る。例えば、一部の実施形態
では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞（例えば、ａｂＴＣＲ Ｔ細胞）は、所望のａｂＴＣ
Ｒエフェクター細胞の陽性選択に十分な期間にわたる、標的抗原コンジュゲートビーズと
のインキュベーションによって富化される。一部の実施形態では、期間は約３０分間であ
る。一部の実施形態では、期間は、３０分間から３６時間またはそれより長くまでの範囲
である（これらの値の間の全ての範囲を含む）。一部の実施形態では、期間は、少なくと
も１、２、３、４、５または６時間である。一部の実施形態では、期間は、１０～２４時
間である。一部の実施形態では、インキュベーション期間は、２４時間である。不均一な
細胞集団中に低レベルで存在するａｂＴＣＲエフェクター細胞の単離のために、より長い
インキュベーション時間、例えば、２４時間の使用は、細胞収量を増加させ得る。より長
いインキュベーション時間は、他の細胞型と比較して少ないａｂＴＣＲエフェクター細胞
が存在する任意の状況において、ａｂＴＣＲエフェクター細胞を単離するために使用され
得る。当業者は、複数ラウンドの選択もまた、本発明との関連において使用され得ること
を認識している。
胞）の特定の下位集団は、陽性選択技術によって富化され得る。例えば、一部の実施形態
では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞（例えば、ａｂＴＣＲ Ｔ細胞）は、所望のａｂＴＣ
Ｒエフェクター細胞の陽性選択に十分な期間にわたる、標的抗原コンジュゲートビーズと
のインキュベーションによって富化される。一部の実施形態では、期間は約３０分間であ
る。一部の実施形態では、期間は、３０分間から３６時間またはそれより長くまでの範囲
である（これらの値の間の全ての範囲を含む）。一部の実施形態では、期間は、少なくと
も１、２、３、４、５または６時間である。一部の実施形態では、期間は、１０～２４時
間である。一部の実施形態では、インキュベーション期間は、２４時間である。不均一な
細胞集団中に低レベルで存在するａｂＴＣＲエフェクター細胞の単離のために、より長い
インキュベーション時間、例えば、２４時間の使用は、細胞収量を増加させ得る。より長
いインキュベーション時間は、他の細胞型と比較して少ないａｂＴＣＲエフェクター細胞
が存在する任意の状況において、ａｂＴＣＲエフェクター細胞を単離するために使用され
得る。当業者は、複数ラウンドの選択もまた、本発明との関連において使用され得ること
を認識している。
【0290】
陽性選択によるａｂＴＣＲエフェクター細胞の所望の集団の単離のために、細胞の濃度
および表面（例えば、ビーズなどの粒子）を変えることができる。一部の実施形態では、
細胞とビーズとの最大の接触を確実にするために、ビーズと細胞とが一緒に混合される体
積を顕著に減少させる（即ち、細胞の濃度を増加させる）ことが望まれ得る。例えば、一
部の実施形態では、約２０億細胞／ｍｌの濃度が使用される。一部の実施形態では、約１
０億細胞／ｍｌの濃度が使用される。一部の実施形態では、約１００百万細胞／ｍｌより
も高くが使用される。一部の実施形態では、約１０、１５、２０、２５、３０、３５、４
０、４５または５０百万細胞／ｍｌのいずれかの細胞の濃度が使用される。一部の実施形
態では、約７５、８０、８５、９０、９５または１００百万細胞／ｍｌのいずれかの細胞
の濃度が使用される。一部の実施形態では、約１２５または約１５０百万細胞／ｍｌの濃
度が使用される。高い濃度を使用することは、増加した細胞収量、細胞活性化および細胞
拡大増殖を生じ得る。さらに、高い細胞濃度の使用は、ａｂＴＣＲを弱く発現し得るａｂ
ＴＣＲエフェクター細胞のより効率的な捕捉を可能にする。
および表面（例えば、ビーズなどの粒子）を変えることができる。一部の実施形態では、
細胞とビーズとの最大の接触を確実にするために、ビーズと細胞とが一緒に混合される体
積を顕著に減少させる（即ち、細胞の濃度を増加させる）ことが望まれ得る。例えば、一
部の実施形態では、約２０億細胞／ｍｌの濃度が使用される。一部の実施形態では、約１
０億細胞／ｍｌの濃度が使用される。一部の実施形態では、約１００百万細胞／ｍｌより
も高くが使用される。一部の実施形態では、約１０、１５、２０、２５、３０、３５、４
０、４５または５０百万細胞／ｍｌのいずれかの細胞の濃度が使用される。一部の実施形
態では、約７５、８０、８５、９０、９５または１００百万細胞／ｍｌのいずれかの細胞
の濃度が使用される。一部の実施形態では、約１２５または約１５０百万細胞／ｍｌの濃
度が使用される。高い濃度を使用することは、増加した細胞収量、細胞活性化および細胞
拡大増殖を生じ得る。さらに、高い細胞濃度の使用は、ａｂＴＣＲを弱く発現し得るａｂ
ＴＣＲエフェクター細胞のより効率的な捕捉を可能にする。
【0291】
本明細書に記載される任意のかかる実施形態の一部では、富化は、ａｂＴＣＲエフェク
ター細胞の最小限の疲弊を生じるまたは疲弊を実質的に生じない。例えば、一部の実施形
態では、富化は、約５０％未満（例えば、約４５、４０、３５、３０、２５、２０、１５
、１０または５％未満のいずれか）の、疲弊していくａｂＴＣＲエフェクター細胞を生じ
る。エフェクター細胞の疲弊は、本明細書に記載される任意の手段を含む、当該分野で公
知の任意の手段によって決定され得る。
ター細胞の最小限の疲弊を生じるまたは疲弊を実質的に生じない。例えば、一部の実施形
態では、富化は、約５０％未満（例えば、約４５、４０、３５、３０、２５、２０、１５
、１０または５％未満のいずれか）の、疲弊していくａｂＴＣＲエフェクター細胞を生じ
る。エフェクター細胞の疲弊は、本明細書に記載される任意の手段を含む、当該分野で公
知の任意の手段によって決定され得る。
【0292】
本明細書に記載される任意のかかる実施形態の一部では、富化は、ａｂＴＣＲエフェク
ター細胞の最小限の最終分化を生じるまたは最終分化を実質的に生じない。例えば、一部
の実施形態では、富化は、約５０％未満（例えば、約４５、４０、３５、３０、２５、２
０、１５、１０または５％未満のいずれか）の、最終分化していくａｂＴＣＲエフェクタ
ー細胞を生じる。エフェクター細胞の分化は、本明細書に記載される任意の手段を含む、
当該分野で公知の任意の手段によって決定され得る。
ター細胞の最小限の最終分化を生じるまたは最終分化を実質的に生じない。例えば、一部
の実施形態では、富化は、約５０％未満（例えば、約４５、４０、３５、３０、２５、２
０、１５、１０または５％未満のいずれか）の、最終分化していくａｂＴＣＲエフェクタ
ー細胞を生じる。エフェクター細胞の分化は、本明細書に記載される任意の手段を含む、
当該分野で公知の任意の手段によって決定され得る。
【0293】
本明細書に記載される任意のかかる実施形態の一部では、富化は、ａｂＴＣＲエフェク
ター細胞上のａｂＴＣＲの最小限の内在化を生じるまたは内在化を実質的に生じない。例
えば、一部の実施形態では、富化は、約５０％未満（例えば、約４５、４０、３５、３０
、２５、２０、１５、１０または５％未満のいずれか）の、内在化されていくａｂＴＣＲ
エフェクター細胞上のａｂＴＣＲを生じる。ａｂＴＣＲエフェクター細胞上のａｂＴＣＲ
の内在化は、本明細書に記載される任意の手段を含む、当該分野で公知の任意の手段によ
って決定され得る。
ター細胞上のａｂＴＣＲの最小限の内在化を生じるまたは内在化を実質的に生じない。例
えば、一部の実施形態では、富化は、約５０％未満（例えば、約４５、４０、３５、３０
、２５、２０、１５、１０または５％未満のいずれか）の、内在化されていくａｂＴＣＲ
エフェクター細胞上のａｂＴＣＲを生じる。ａｂＴＣＲエフェクター細胞上のａｂＴＣＲ
の内在化は、本明細書に記載される任意の手段を含む、当該分野で公知の任意の手段によ
って決定され得る。
【0294】
本明細書に記載される任意のかかる実施形態の一部では、富化は、ａｂＴＣＲエフェク
ター細胞の増加した増殖を生じる。例えば、一部の実施形態では、富化は、少なくとも約
１０％（例えば、少なくとも約２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１０
０、２００、３００、４００、５００、１０００％またはそれよりも多くのいずれか）の
、富化後のａｂＴＣＲエフェクター細胞の数における増加を生じる。
ター細胞の増加した増殖を生じる。例えば、一部の実施形態では、富化は、少なくとも約
１０％（例えば、少なくとも約２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１０
０、２００、３００、４００、５００、１０００％またはそれよりも多くのいずれか）の
、富化後のａｂＴＣＲエフェクター細胞の数における増加を生じる。
【0295】
したがって、一部の実施形態では、標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲを発現する
ａｂＴＣＲエフェクター細胞について不均一な細胞集団を富化する方法であって、ａ）不
均一な細胞集団を、標的抗原またはその中に含まれる１つもしくは複数のエピトープを含
むリガンドと接触させて、リガンドに結合したａｂＴＣＲエフェクター細胞を含む複合体
を形成するステップ；およびｂ）不均一な細胞集団から複合体を分離し、それによって、
ａｂＴＣＲエフェクター細胞について富化された細胞集団を生成するステップを含む方法
が提供される。一部の実施形態では、リガンドは、固体支持体に固定化される。一部の実
施形態では、固体支持体は、粒状物（例えば、ビーズ）である。一部の実施形態では、固
体支持体は、表面（例えば、ウェルの底）である。一部の実施形態では、リガンドは、タ
グで標識される。一部の実施形態では、タグは、蛍光分子、親和性タグまたは磁性タグで
ある。一部の実施形態では、方法は、リガンドからａｂＴＣＲエフェクター細胞を溶出さ
せるステップ、および溶出物を回収するステップをさらに含む。
ａｂＴＣＲエフェクター細胞について不均一な細胞集団を富化する方法であって、ａ）不
均一な細胞集団を、標的抗原またはその中に含まれる１つもしくは複数のエピトープを含
むリガンドと接触させて、リガンドに結合したａｂＴＣＲエフェクター細胞を含む複合体
を形成するステップ；およびｂ）不均一な細胞集団から複合体を分離し、それによって、
ａｂＴＣＲエフェクター細胞について富化された細胞集団を生成するステップを含む方法
が提供される。一部の実施形態では、リガンドは、固体支持体に固定化される。一部の実
施形態では、固体支持体は、粒状物（例えば、ビーズ）である。一部の実施形態では、固
体支持体は、表面（例えば、ウェルの底）である。一部の実施形態では、リガンドは、タ
グで標識される。一部の実施形態では、タグは、蛍光分子、親和性タグまたは磁性タグで
ある。一部の実施形態では、方法は、リガンドからａｂＴＣＲエフェクター細胞を溶出さ
せるステップ、および溶出物を回収するステップをさらに含む。
【0296】
ライブラリースクリーニング
標的抗原に対して特異的な候補ａｂＴＣＲ構築物を単離するために、ａｂＴＣＲライブ
ラリー、例えば、複数のａｂＴＣＲをコードする核酸のライブラリーを発現する細胞が、
標的抗原またはその中に含まれる１つもしくは複数のエピトープを含むリガンドに曝露さ
れ、その後、リガンドに特異的に結合するライブラリーの親和性メンバーが単離され得る
。一部の実施形態では、リガンドは、固体支持体上に固定化される。一部の実施形態では
、支持体は、ビーズ、マイクロタイタープレート、イムノチューブ、またはかかる目的に
有用な、当該分野で公知の任意の材料の表面であり得る。一部の実施形態では、タグ化さ
れたリガンド標的（例えば、ビオチン化リガンド）に対する相互作用は、溶液中で起こる
。一部の実施形態では、手順には、非特異的で非反応性のライブラリーメンバーを除去す
るための、１回または複数の洗浄するステップ（パニング）が含まれる。一部の実施形態
では、溶液中の複合体を精製するために、それらは、固定化によってまたは遠心分離によ
って捕捉される。一部の実施形態では、親和性メンバーは、可溶性ビオチン化リガンド上
で捕捉され、その後、ストレプトアビジンビーズ上に親和性複合体（親和性メンバーおよ
びリガンド）が固定化される。一部の実施形態では、固体支持体は、ビーズである。一部
の実施形態では、ビーズには、例えば、磁性ビーズ（例えば、Ｂａｎｇｓ Ｌａｂｏｒａ
ｔｏｒｉｅｓ、Ｐｏｌｙｓｃｉｅｎｃｅｓ ｉｎｃ．、Ｄｙｎａｌ Ｂｉｏｔｅｃｈ、Ｍ
ｉｌｔｅｎｙｉ ＢｉｏｔｅｃｈまたはＱｕａｎｔｕｍ Ｍａｇｎｅｔｉｃから）、非磁
性ビーズ（例えば、ＰｉｅｒｃｅおよびＵｐｓｔａｔｅ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）、単分
散ビーズ（例えば、Ｄｙｎａｌ ＢｉｏｔｅｃｈおよびＭｉｃｒｏｐａｒｔｉｃｌｅ Ｇ
ｍｂｈ）および多分散ビーズ（例えば、Ｃｈｅｍａｇｅｎ）が含まれる。磁性ビーズの使
用は、文献（Uhlen, Mら（１９９４年）、Advances in Biomagnetic Separation、Bi
oTechniques press、Westborough、MA）中に徹底的に記載されている。一部の実施形態
では、親和性メンバーは、陽性選択によって精製される。一部の実施形態では、親和性メ
ンバーは、望ましくないライブラリーメンバーを除去するために、陰性選択によって精製
される。一部の実施形態では、親和性メンバーは、陽性選択ステップおよび陰性選択ステ
ップの両方によって精製される。
標的抗原に対して特異的な候補ａｂＴＣＲ構築物を単離するために、ａｂＴＣＲライブ
ラリー、例えば、複数のａｂＴＣＲをコードする核酸のライブラリーを発現する細胞が、
標的抗原またはその中に含まれる１つもしくは複数のエピトープを含むリガンドに曝露さ
れ、その後、リガンドに特異的に結合するライブラリーの親和性メンバーが単離され得る
。一部の実施形態では、リガンドは、固体支持体上に固定化される。一部の実施形態では
、支持体は、ビーズ、マイクロタイタープレート、イムノチューブ、またはかかる目的に
有用な、当該分野で公知の任意の材料の表面であり得る。一部の実施形態では、タグ化さ
れたリガンド標的（例えば、ビオチン化リガンド）に対する相互作用は、溶液中で起こる
。一部の実施形態では、手順には、非特異的で非反応性のライブラリーメンバーを除去す
るための、１回または複数の洗浄するステップ（パニング）が含まれる。一部の実施形態
では、溶液中の複合体を精製するために、それらは、固定化によってまたは遠心分離によ
って捕捉される。一部の実施形態では、親和性メンバーは、可溶性ビオチン化リガンド上
で捕捉され、その後、ストレプトアビジンビーズ上に親和性複合体（親和性メンバーおよ
びリガンド）が固定化される。一部の実施形態では、固体支持体は、ビーズである。一部
の実施形態では、ビーズには、例えば、磁性ビーズ（例えば、Ｂａｎｇｓ Ｌａｂｏｒａ
ｔｏｒｉｅｓ、Ｐｏｌｙｓｃｉｅｎｃｅｓ ｉｎｃ．、Ｄｙｎａｌ Ｂｉｏｔｅｃｈ、Ｍ
ｉｌｔｅｎｙｉ ＢｉｏｔｅｃｈまたはＱｕａｎｔｕｍ Ｍａｇｎｅｔｉｃから）、非磁
性ビーズ（例えば、ＰｉｅｒｃｅおよびＵｐｓｔａｔｅ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）、単分
散ビーズ（例えば、Ｄｙｎａｌ ＢｉｏｔｅｃｈおよびＭｉｃｒｏｐａｒｔｉｃｌｅ Ｇ
ｍｂｈ）および多分散ビーズ（例えば、Ｃｈｅｍａｇｅｎ）が含まれる。磁性ビーズの使
用は、文献（Uhlen, Mら（１９９４年）、Advances in Biomagnetic Separation、Bi
oTechniques press、Westborough、MA）中に徹底的に記載されている。一部の実施形態
では、親和性メンバーは、陽性選択によって精製される。一部の実施形態では、親和性メ
ンバーは、望ましくないライブラリーメンバーを除去するために、陰性選択によって精製
される。一部の実施形態では、親和性メンバーは、陽性選択ステップおよび陰性選択ステ
ップの両方によって精製される。
【0297】
一般に、ライブラリー構築物を調製するために使用される技術は、公知の遺伝子操作技
術に基づく。これに関して、ライブラリー中の、発現されるａｂＴＣＲをコードする核酸
配列は、使用される発現系の型に適切な発現ベクター中に取り込まれる。ＣＤ３＋細胞な
どの細胞におけるディスプレイでの使用に適切な発現ベクターは、当該分野で周知であり
、記載されている。例えば、一部の実施形態では、発現ベクターは、ウイルスベクター、
例えば、レンチウイルスベクターである。
術に基づく。これに関して、ライブラリー中の、発現されるａｂＴＣＲをコードする核酸
配列は、使用される発現系の型に適切な発現ベクター中に取り込まれる。ＣＤ３＋細胞な
どの細胞におけるディスプレイでの使用に適切な発現ベクターは、当該分野で周知であり
、記載されている。例えば、一部の実施形態では、発現ベクターは、ウイルスベクター、
例えば、レンチウイルスベクターである。
【0298】
一部の実施形態では、本明細書に記載される実施形態のいずれか１つにしたがう複数の
ａｂＴＣＲをコードする配列を含む、核酸ライブラリーが提供される。一部の実施形態で
は、核酸ライブラリーは、複数のａｂＴＣＲをコードするウイルスベクターを含む。一部
の実施形態では、ウイルスベクターは、レンチウイルスベクターである。
ａｂＴＣＲをコードする配列を含む、核酸ライブラリーが提供される。一部の実施形態で
は、核酸ライブラリーは、複数のａｂＴＣＲをコードするウイルスベクターを含む。一部
の実施形態では、ウイルスベクターは、レンチウイルスベクターである。
【0299】
一部の実施形態では、標的抗原に対して特異的なａｂＴＣＲをコードする配列について
、本明細書に記載される実施形態のいずれかにしたがう核酸ライブラリーをスクリーニン
グする方法であって、ａ）ａｂＴＣＲが複数の細胞の表面上で発現されるように、核酸ラ
イブラリーを複数の細胞中に導入するステップ；ｂ）複数の細胞を、標的抗原またはその
中に含まれる１つもしくは複数のエピトープを含むリガンドと共にインキュベートするス
テップ；ｃ）リガンドに結合した細胞を収集するステップ；およびｄ）ステップｃ）にお
いて収集した細胞から、ａｂＴＣＲをコードする配列を単離し、それによって、標的抗原
に対して特異的なａｂＴＣＲを同定するステップを含む方法が提供される。一部の実施形
態では、方法は、１回または複数の洗浄ステップをさらに含む。一部の実施形態では、１
回または複数の洗浄ステップは、ステップｂ）とステップｃ）との間に実施される。一部
の実施形態では、複数の細胞は、複数のＣＤ３＋細胞である。一部の実施形態では、リガ
ンドは、固体支持体上に固定化される。一部の実施形態では、固体支持体は、ビーズであ
る。一部の実施形態では、リガンドに結合した細胞を収集するステップは、固体支持体に
結合したリガンドから細胞を溶出させること、および溶出物を収集することを含む。一部
の実施形態では、リガンドは、タグで標識される。一部の実施形態では、タグは、蛍光分
子、親和性タグまたは磁性タグである。一部の実施形態では、リガンドに結合した細胞を
収集するステップは、細胞と標識されたリガンドとを含む複合体を単離することを含む。
一部の実施形態では、細胞は、複合体から解離される。
、本明細書に記載される実施形態のいずれかにしたがう核酸ライブラリーをスクリーニン
グする方法であって、ａ）ａｂＴＣＲが複数の細胞の表面上で発現されるように、核酸ラ
イブラリーを複数の細胞中に導入するステップ；ｂ）複数の細胞を、標的抗原またはその
中に含まれる１つもしくは複数のエピトープを含むリガンドと共にインキュベートするス
テップ；ｃ）リガンドに結合した細胞を収集するステップ；およびｄ）ステップｃ）にお
いて収集した細胞から、ａｂＴＣＲをコードする配列を単離し、それによって、標的抗原
に対して特異的なａｂＴＣＲを同定するステップを含む方法が提供される。一部の実施形
態では、方法は、１回または複数の洗浄ステップをさらに含む。一部の実施形態では、１
回または複数の洗浄ステップは、ステップｂ）とステップｃ）との間に実施される。一部
の実施形態では、複数の細胞は、複数のＣＤ３＋細胞である。一部の実施形態では、リガ
ンドは、固体支持体上に固定化される。一部の実施形態では、固体支持体は、ビーズであ
る。一部の実施形態では、リガンドに結合した細胞を収集するステップは、固体支持体に
結合したリガンドから細胞を溶出させること、および溶出物を収集することを含む。一部
の実施形態では、リガンドは、タグで標識される。一部の実施形態では、タグは、蛍光分
子、親和性タグまたは磁性タグである。一部の実施形態では、リガンドに結合した細胞を
収集するステップは、細胞と標識されたリガンドとを含む複合体を単離することを含む。
一部の実施形態では、細胞は、複合体から解離される。
【0300】
ＭＨＣタンパク質
ＭＨＣクラスＩタンパク質は、主要組織適合複合体（ＭＨＣ）分子の２つの主要なクラ
スのうちの一方であり（他方はＭＨＣクラスＩＩである）、身体のほぼ全ての有核細胞上
で見出される。それらの機能は、細胞内由来のタンパク質の断片をＴ細胞にディスプレイ
することである；健康な細胞は無視されるが、外来タンパク質または変異したタンパク質
を含む細胞は、免疫系によって攻撃される。ＭＨＣクラスＩタンパク質は、細胞質ゾルタ
ンパク質に由来するペプチドを提示するので、ＭＨＣクラスＩ提示の経路は、細胞質ゾル
経路または内因性経路と呼ばれる場合が多い。クラスＩ ＭＨＣ分子は、プロテアソーム
による細胞質ゾルタンパク質の分解から主に生成されるペプチドを結合する。次いで、Ｍ
ＨＣ Ｉ：ペプチド複合体は、細胞の原形質膜中に挿入される。ペプチドは、クラスＩ
ＭＨＣ分子の細胞外部分に結合される。したがって、クラスＩ ＭＨＣの機能は、細胞内
タンパク質を細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＴＬ）にディスプレイすることである。しかし、クラ
スＩ ＭＨＣは、交差提示として公知のプロセスにおいて、外因性タンパク質から生成さ
れたペプチドもまた提示できる。
ＭＨＣクラスＩタンパク質は、主要組織適合複合体（ＭＨＣ）分子の２つの主要なクラ
スのうちの一方であり（他方はＭＨＣクラスＩＩである）、身体のほぼ全ての有核細胞上
で見出される。それらの機能は、細胞内由来のタンパク質の断片をＴ細胞にディスプレイ
することである；健康な細胞は無視されるが、外来タンパク質または変異したタンパク質
を含む細胞は、免疫系によって攻撃される。ＭＨＣクラスＩタンパク質は、細胞質ゾルタ
ンパク質に由来するペプチドを提示するので、ＭＨＣクラスＩ提示の経路は、細胞質ゾル
経路または内因性経路と呼ばれる場合が多い。クラスＩ ＭＨＣ分子は、プロテアソーム
による細胞質ゾルタンパク質の分解から主に生成されるペプチドを結合する。次いで、Ｍ
ＨＣ Ｉ：ペプチド複合体は、細胞の原形質膜中に挿入される。ペプチドは、クラスＩ
ＭＨＣ分子の細胞外部分に結合される。したがって、クラスＩ ＭＨＣの機能は、細胞内
タンパク質を細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＴＬ）にディスプレイすることである。しかし、クラ
スＩ ＭＨＣは、交差提示として公知のプロセスにおいて、外因性タンパク質から生成さ
れたペプチドもまた提示できる。
【0301】
ＭＨＣクラスＩタンパク質は、２つのポリペプチド鎖αおよびβ２－ミクログロブリン
（β２Ｍ）からなる。２つの鎖は、β２Ｍとα３ドメインとの相互作用を介して非共有結
合される。α鎖だけが多型であり、ＨＬＡ遺伝子によってコードされるが、β２Ｍサブユ
ニットは多型ではなく、β－２ミクログロブリン遺伝子によってコードされる。α３ドメ
インは、原形質膜貫通性であり、Ｔ細胞のＣＤ８共受容体と相互作用する。α３－ＣＤ８
相互作用は、ＭＨＣ Ｉ分子を適所に維持するが、細胞傷害性Ｔ細胞の表面上のＴ細胞受
容体（ＴＣＲ）は、そのα１－α２ヘテロ二量体リガンドに結合し、カップリングされた
ペプチドを抗原性についてチェックする。α１およびα２ドメインは、ペプチドが結合す
る溝を形成するようにフォールディングする。ＭＨＣクラスＩタンパク質は、８～１０ア
ミノ酸長のペプチドを結合する。
（β２Ｍ）からなる。２つの鎖は、β２Ｍとα３ドメインとの相互作用を介して非共有結
合される。α鎖だけが多型であり、ＨＬＡ遺伝子によってコードされるが、β２Ｍサブユ
ニットは多型ではなく、β－２ミクログロブリン遺伝子によってコードされる。α３ドメ
インは、原形質膜貫通性であり、Ｔ細胞のＣＤ８共受容体と相互作用する。α３－ＣＤ８
相互作用は、ＭＨＣ Ｉ分子を適所に維持するが、細胞傷害性Ｔ細胞の表面上のＴ細胞受
容体（ＴＣＲ）は、そのα１－α２ヘテロ二量体リガンドに結合し、カップリングされた
ペプチドを抗原性についてチェックする。α１およびα２ドメインは、ペプチドが結合す
る溝を形成するようにフォールディングする。ＭＨＣクラスＩタンパク質は、８～１０ア
ミノ酸長のペプチドを結合する。
【0302】
ＭＨＣクラスＩＩ分子は、樹状細胞、単核食細胞、一部の内皮細胞、胸腺上皮細胞およ
びＢ細胞などの抗原提示細胞上でのみ通常見出される分子のファミリーである。クラスＩ
Ｉペプチドによって提示される抗原は、細胞外タンパク質（クラスＩのように細胞質ゾル
タンパク質であるわけではない）に由来する；したがって、ＭＨＣクラスＩＩ依存的経路
の抗原提示は、エンドサイトーシス経路または外因性経路と呼ばれる。ＭＨＣクラスＩＩ
分子の負荷は、食作用によって生じる；細胞外タンパク質は、エンドサイトーシスされ、
リソソーム中で消化され、得られたエピトープ性ペプチド断片は、細胞表面へのそれらの
移動の前にＭＨＣクラスＩＩ分子上に負荷される。
びＢ細胞などの抗原提示細胞上でのみ通常見出される分子のファミリーである。クラスＩ
Ｉペプチドによって提示される抗原は、細胞外タンパク質（クラスＩのように細胞質ゾル
タンパク質であるわけではない）に由来する；したがって、ＭＨＣクラスＩＩ依存的経路
の抗原提示は、エンドサイトーシス経路または外因性経路と呼ばれる。ＭＨＣクラスＩＩ
分子の負荷は、食作用によって生じる；細胞外タンパク質は、エンドサイトーシスされ、
リソソーム中で消化され、得られたエピトープ性ペプチド断片は、細胞表面へのそれらの
移動の前にＭＨＣクラスＩＩ分子上に負荷される。
【0303】
ＭＨＣクラスＩ分子と同様、クラスＩＩ分子もまたヘテロ二量体であるが、この場合、
２つの同種のペプチド、αおよびβ鎖からなる。α１、α２などのサブ指定とは、ＨＬＡ
遺伝子内の別々のドメインを指す；各ドメインは通常、遺伝子内の異なるエクソンによっ
てコードされ、一部の遺伝子は、リーダー配列、膜貫通配列などをコードするさらなるド
メインを有する。ＭＨＣクラスＩＩ分子の抗原結合溝は、両方の末端において開放である
が、クラスＩ分子上の対応する溝は各末端において閉鎖されているので、ＭＨＣクラスＩ
Ｉ分子によって提示される抗原は、より長く、一般的には１５アミノ酸残基長と２４アミ
ノ酸残基長との間である。
２つの同種のペプチド、αおよびβ鎖からなる。α１、α２などのサブ指定とは、ＨＬＡ
遺伝子内の別々のドメインを指す；各ドメインは通常、遺伝子内の異なるエクソンによっ
てコードされ、一部の遺伝子は、リーダー配列、膜貫通配列などをコードするさらなるド
メインを有する。ＭＨＣクラスＩＩ分子の抗原結合溝は、両方の末端において開放である
が、クラスＩ分子上の対応する溝は各末端において閉鎖されているので、ＭＨＣクラスＩ
Ｉ分子によって提示される抗原は、より長く、一般的には１５アミノ酸残基長と２４アミ
ノ酸残基長との間である。
【0304】
ヒト白血球抗原（ＨＬＡ）遺伝子は、ＭＨＣ遺伝子のヒトバージョンである。ヒトにお
ける３つの主要なＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ、ＨＬＡ－ＢおよびＨＬＡ－
Ｃであり、３つのマイナーなＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ｅ、ＨＬＡ－Ｆおよ
びＨＬＡ－Ｇである。ヒトにおける抗原提示に関与する３つの主要なＭＨＣクラスＩＩタ
ンパク質は、ＨＬＡ－ＤＰ、ＨＬＤＡ－ＤＱおよびＨＬＡ－ＤＲであり、他のＭＨＣクラ
スＩＩタンパク質、ＨＬＡ－ＤＭおよびＨＬＡ－ＤＯは、抗原の内部プロセシングおよび
負荷に関与する。ＨＬＡ－Ａは、ヒトにおいて、最も速く進化するコード配列を有する遺
伝子の中にランクされる。２０１３年１２月の時点で、１７４０個の活性タンパク質およ
び１１７個のヌルタンパク質をコードする、２４３２個の公知のＨＬＡ－Ａ対立遺伝子が
存在した。ＨＬＡ－Ａ遺伝子は、第６染色体の短腕上に位置し、ＨＬＡ－Ａの構成要素で
あるより大きいα鎖をコードする。ＨＬＡ－Ａα鎖のバリエーションは、ＨＬＡ機能のカ
ギである。このバリエーションは、集団中の遺伝的多様性を促進する。各ＨＬＡは、ある
特定の構造のペプチドに対して異なる親和性を有するので、より多くの種類のＨＬＡは、
細胞表面上に「提示」されるより多くの種類の抗原を意味し、集団のサブセットが任意の
所与の外来侵入者に対して抵抗性である可能性を増強する。これは、単一の病原体がヒト
集団全体を全滅させる能力を有する可能性を減少させる。各個体は、最大で２つの型のＨ
ＬＡ－Ａを発現でき、一方の型は、それらの両親の各々由来である。一部の個体は、両親
から同じＨＬＡ－Ａを受け継ぎ、それら個体のＨＬＡ多様性を減少させる；しかし、個体
の大部分は、２つの異なるコピーのＨＬＡ－Ａを受け取る。この同じパターンは、全ての
ＨＬＡ群にも当てはまる。言い換えると、１人のヒトは、２４３２個の公知のＨＬＡ－Ａ
対立遺伝子のうち１つまたは２つのいずれかだけを発現できる。
ける３つの主要なＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ、ＨＬＡ－ＢおよびＨＬＡ－
Ｃであり、３つのマイナーなＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ｅ、ＨＬＡ－Ｆおよ
びＨＬＡ－Ｇである。ヒトにおける抗原提示に関与する３つの主要なＭＨＣクラスＩＩタ
ンパク質は、ＨＬＡ－ＤＰ、ＨＬＤＡ－ＤＱおよびＨＬＡ－ＤＲであり、他のＭＨＣクラ
スＩＩタンパク質、ＨＬＡ－ＤＭおよびＨＬＡ－ＤＯは、抗原の内部プロセシングおよび
負荷に関与する。ＨＬＡ－Ａは、ヒトにおいて、最も速く進化するコード配列を有する遺
伝子の中にランクされる。２０１３年１２月の時点で、１７４０個の活性タンパク質およ
び１１７個のヌルタンパク質をコードする、２４３２個の公知のＨＬＡ－Ａ対立遺伝子が
存在した。ＨＬＡ－Ａ遺伝子は、第６染色体の短腕上に位置し、ＨＬＡ－Ａの構成要素で
あるより大きいα鎖をコードする。ＨＬＡ－Ａα鎖のバリエーションは、ＨＬＡ機能のカ
ギである。このバリエーションは、集団中の遺伝的多様性を促進する。各ＨＬＡは、ある
特定の構造のペプチドに対して異なる親和性を有するので、より多くの種類のＨＬＡは、
細胞表面上に「提示」されるより多くの種類の抗原を意味し、集団のサブセットが任意の
所与の外来侵入者に対して抵抗性である可能性を増強する。これは、単一の病原体がヒト
集団全体を全滅させる能力を有する可能性を減少させる。各個体は、最大で２つの型のＨ
ＬＡ－Ａを発現でき、一方の型は、それらの両親の各々由来である。一部の個体は、両親
から同じＨＬＡ－Ａを受け継ぎ、それら個体のＨＬＡ多様性を減少させる；しかし、個体
の大部分は、２つの異なるコピーのＨＬＡ－Ａを受け取る。この同じパターンは、全ての
ＨＬＡ群にも当てはまる。言い換えると、１人のヒトは、２４３２個の公知のＨＬＡ－Ａ
対立遺伝子のうち１つまたは２つのいずれかだけを発現できる。
【0305】
全ての対立遺伝子は、４桁の分類、例えば、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１２を少なくとも与え
られる。Ａは、対立遺伝子が属するＨＬＡ遺伝子を示す。血清型による分類がカテゴリー
化を単純化するように、多くのＨＬＡ－Ａ対立遺伝子が存在する。桁の次の対は、この割
り当てを示す。例えば、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０２、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０４およびＨＬＡ
－Ａ＊０２：３２４は全て、Ａ２血清型のメンバーである（＊０２接頭辞によって指定さ
れる）。この群は、ＨＬＡ適合性を担う主要な因子である。これの後ろの全ての数は、血
清型決定によっては決定できず、遺伝子配列決定を介して指定される。２番目のセットの
桁は、どのＨＬＡタンパク質が産生されるかを示す。これらは、発見の順に割り当てられ
、２０１３年１２月の時点で、４５６個の異なるＨＬＡ－Ａ０２タンパク質が公知である
（名称ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１～ＨＬＡ－Ａ＊０２：４５６が割り当てられている）。最
も短い可能なＨＬＡ名は、これらの詳細の両方を含む。それを越えた各延長は、タンパク
質を変化させてもさせなくてもよいヌクレオチド変化を示す。
られる。Ａは、対立遺伝子が属するＨＬＡ遺伝子を示す。血清型による分類がカテゴリー
化を単純化するように、多くのＨＬＡ－Ａ対立遺伝子が存在する。桁の次の対は、この割
り当てを示す。例えば、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０２、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０４およびＨＬＡ
－Ａ＊０２：３２４は全て、Ａ２血清型のメンバーである（＊０２接頭辞によって指定さ
れる）。この群は、ＨＬＡ適合性を担う主要な因子である。これの後ろの全ての数は、血
清型決定によっては決定できず、遺伝子配列決定を介して指定される。２番目のセットの
桁は、どのＨＬＡタンパク質が産生されるかを示す。これらは、発見の順に割り当てられ
、２０１３年１２月の時点で、４５６個の異なるＨＬＡ－Ａ０２タンパク質が公知である
（名称ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１～ＨＬＡ－Ａ＊０２：４５６が割り当てられている）。最
も短い可能なＨＬＡ名は、これらの詳細の両方を含む。それを越えた各延長は、タンパク
質を変化させてもさせなくてもよいヌクレオチド変化を示す。
【0306】
一部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、疾患関連抗原（例えば、腫瘍関
連抗原またはウイルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣクラスＩタンパク
質とを含む複合体に特異的に結合し、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ、ＨＬＡ
－Ｂ、ＨＬＡ－Ｃ、ＨＬＡ－Ｅ、ＨＬＡ－ＦまたはＨＬＡ－Ｇである。一部の実施形態で
は、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ、ＨＬＡ－ＢまたはＨＬＡ－Ｃである。一
部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。一部の実施形態で
は、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ｂである。一部の実施形態では、ＭＨＣクラ
スＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ｃである。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質
は、ＨＬＡ－Ａ０１、ＨＬＡ－Ａ０２、ＨＬＡ－Ａ０３、ＨＬＡ－Ａ０９、ＨＬＡ－Ａ１
０、ＨＬＡ－Ａ１１、ＨＬＡ－Ａ１９、ＨＬＡ－Ａ２３、ＨＬＡ－Ａ２４、ＨＬＡ－Ａ２
５、ＨＬＡ－Ａ２６、ＨＬＡ－Ａ２８、ＨＬＡ－Ａ２９、ＨＬＡ－Ａ３０、ＨＬＡ－Ａ３
１、ＨＬＡ－Ａ３２、ＨＬＡ－Ａ３３、ＨＬＡ－Ａ３４、ＨＬＡ－Ａ３６、ＨＬＡ－Ａ４
３、ＨＬＡ－Ａ６６、ＨＬＡ－Ａ６８、ＨＬＡ－Ａ６９、ＨＬＡ－Ａ７４またはＨＬＡ－
Ａ８０である。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ０２であ
る。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１～５５
５のいずれか１つ、例えば、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０２、ＨＬＡ
－Ａ＊０２：０３、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０４、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０５、ＨＬＡ－Ａ＊０
２：０６、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０７、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０８、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０９
、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１０、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１１、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１２、ＨＬＡ
－Ａ＊０２：１３、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１４、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１５、ＨＬＡ－Ａ＊０
２：１６、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１７、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１８、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１９
、ＨＬＡ－Ａ＊０２：２０、ＨＬＡ－Ａ＊０２：２１、ＨＬＡ－Ａ＊０２：２２またはＨ
ＬＡ－Ａ＊０２：２４である。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬ
Ａ－Ａ＊０２：０１である。ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１は、全ての白人の３９～４６％で発
現され、したがって、本発明における使用のためのＭＨＣクラスＩタンパク質の適切な選
択を示す。
連抗原またはウイルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣクラスＩタンパク
質とを含む複合体に特異的に結合し、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ、ＨＬＡ
－Ｂ、ＨＬＡ－Ｃ、ＨＬＡ－Ｅ、ＨＬＡ－ＦまたはＨＬＡ－Ｇである。一部の実施形態で
は、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ、ＨＬＡ－ＢまたはＨＬＡ－Ｃである。一
部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。一部の実施形態で
は、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ｂである。一部の実施形態では、ＭＨＣクラ
スＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ｃである。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質
は、ＨＬＡ－Ａ０１、ＨＬＡ－Ａ０２、ＨＬＡ－Ａ０３、ＨＬＡ－Ａ０９、ＨＬＡ－Ａ１
０、ＨＬＡ－Ａ１１、ＨＬＡ－Ａ１９、ＨＬＡ－Ａ２３、ＨＬＡ－Ａ２４、ＨＬＡ－Ａ２
５、ＨＬＡ－Ａ２６、ＨＬＡ－Ａ２８、ＨＬＡ－Ａ２９、ＨＬＡ－Ａ３０、ＨＬＡ－Ａ３
１、ＨＬＡ－Ａ３２、ＨＬＡ－Ａ３３、ＨＬＡ－Ａ３４、ＨＬＡ－Ａ３６、ＨＬＡ－Ａ４
３、ＨＬＡ－Ａ６６、ＨＬＡ－Ａ６８、ＨＬＡ－Ａ６９、ＨＬＡ－Ａ７４またはＨＬＡ－
Ａ８０である。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ０２であ
る。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１～５５
５のいずれか１つ、例えば、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０２、ＨＬＡ
－Ａ＊０２：０３、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０４、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０５、ＨＬＡ－Ａ＊０
２：０６、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０７、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０８、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０９
、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１０、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１１、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１２、ＨＬＡ
－Ａ＊０２：１３、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１４、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１５、ＨＬＡ－Ａ＊０
２：１６、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１７、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１８、ＨＬＡ－Ａ＊０２：１９
、ＨＬＡ－Ａ＊０２：２０、ＨＬＡ－Ａ＊０２：２１、ＨＬＡ－Ａ＊０２：２２またはＨ
ＬＡ－Ａ＊０２：２４である。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬ
Ａ－Ａ＊０２：０１である。ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１は、全ての白人の３９～４６％で発
現され、したがって、本発明における使用のためのＭＨＣクラスＩタンパク質の適切な選
択を示す。
【0307】
一部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、疾患関連抗原（例えば、腫瘍関
連抗原またはウイルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣクラスＩＩタンパ
ク質とを含む複合体に特異的に結合し、ＭＨＣクラスＩＩタンパク質は、ＨＬＡ－ＤＰ、
ＨＬＡ－ＤＱまたはＨＬＡ－ＤＲである。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩＩタンパ
ク質は、ＨＬＡ－ＤＰである。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩＩタンパク質は、Ｈ
ＬＡ－ＤＱである。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩＩタンパク質は、ＨＬＡ－ＤＲ
である。
連抗原またはウイルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣクラスＩＩタンパ
ク質とを含む複合体に特異的に結合し、ＭＨＣクラスＩＩタンパク質は、ＨＬＡ－ＤＰ、
ＨＬＡ－ＤＱまたはＨＬＡ－ＤＲである。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩＩタンパ
ク質は、ＨＬＡ－ＤＰである。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩＩタンパク質は、Ｈ
ＬＡ－ＤＱである。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩＩタンパク質は、ＨＬＡ－ＤＲ
である。
【0308】
Ｆａｂ様抗原結合モジュールを生成する際の使用に適切なペプチドは、例えば、当業者
に公知のコンピューター予測モデルを使用して、ＨＬＡ（例えば、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０
１）結合モチーフ、ならびにプロテアソームおよび免疫プロテアソームの切断部位の存在
に基づいて、決定され得る。ＭＨＣ結合部位を予測するために、かかるモデルには、Ｐｒ
ｏＰｒｅｄ１（SinghおよびRaghava、ProPred: prediction of HLA-DR binding sit
es. BIOINFORMATICS １７巻（１２号）：１２３６～１２３７頁、２００１年により詳
細に記載されている）およびＳＹＦＰＥＩＴＨＩ（Schulerら SYFPEITHI, Database f
or Searching and T-Cell Epitope Prediction.、Immunoinformatics Methods in
Molecular Biology、４０９巻（１号）：７５～９３頁、２００７年を参照のこと）が
含まれるがこれらに限定されない。
に公知のコンピューター予測モデルを使用して、ＨＬＡ（例えば、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０
１）結合モチーフ、ならびにプロテアソームおよび免疫プロテアソームの切断部位の存在
に基づいて、決定され得る。ＭＨＣ結合部位を予測するために、かかるモデルには、Ｐｒ
ｏＰｒｅｄ１（SinghおよびRaghava、ProPred: prediction of HLA-DR binding sit
es. BIOINFORMATICS １７巻（１２号）：１２３６～１２３７頁、２００１年により詳
細に記載されている）およびＳＹＦＰＥＩＴＨＩ（Schulerら SYFPEITHI, Database f
or Searching and T-Cell Epitope Prediction.、Immunoinformatics Methods in
Molecular Biology、４０９巻（１号）：７５～９３頁、２００７年を参照のこと）が
含まれるがこれらに限定されない。
【0309】
適切なペプチドが同定されると、ペプチド合成が、当業者に周知のプロトコールに従っ
て行われ得る。それらの比較的小さいサイズに起因して、本発明のペプチドは、従来のペ
プチド合成技術に従って、溶液中でまたは固体支持体上で直接合成され得る。種々の自動
合成器が市販されており、公知のプロトコールに従って使用され得る。溶液相中でのペプ
チドの合成は、合成ペプチドの大規模産生のための十分確立された手順になっており、し
たがって、本発明のペプチドを調製するための適切な代替法である（例えば、John Morr
ow StewartおよびMartinら Application of Almez-mediated Amidation Reactions
to Solution Phase Peptide Synthesis、Tetrahedron Letters ３９巻、１５１
７～１５２０頁、１９９８年によるSolid Phase Peptide Synthesisを参照のこと）。
て行われ得る。それらの比較的小さいサイズに起因して、本発明のペプチドは、従来のペ
プチド合成技術に従って、溶液中でまたは固体支持体上で直接合成され得る。種々の自動
合成器が市販されており、公知のプロトコールに従って使用され得る。溶液相中でのペプ
チドの合成は、合成ペプチドの大規模産生のための十分確立された手順になっており、し
たがって、本発明のペプチドを調製するための適切な代替法である（例えば、John Morr
ow StewartおよびMartinら Application of Almez-mediated Amidation Reactions
to Solution Phase Peptide Synthesis、Tetrahedron Letters ３９巻、１５１
７～１５２０頁、１９９８年によるSolid Phase Peptide Synthesisを参照のこと）。
【0310】
医薬組成物
本明細書に記載される実施形態のいずれかにしたがうａｂＴＣＲ、本明細書に記載され
る実施形態のいずれかにしたがうａｂＴＣＲをコードする核酸、または本明細書に記載さ
れる実施形態のいずれかにしたがうａｂＴＣＲエフェクター細胞を含む組成物（例えば、
医薬組成物、本明細書で製剤とも呼ぶ）もまた本明細書で提供される。一部の実施形態で
は、組成物は、本明細書に記載されるａｂＴＣＲのいずれかにしたがうａｂＴＣＲをその
表面上に提示するエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞）を含むａｂＴＣＲエフェクター細
胞組成物（例えば、医薬組成物）である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター
細胞組成物は、医薬組成物である。
本明細書に記載される実施形態のいずれかにしたがうａｂＴＣＲ、本明細書に記載され
る実施形態のいずれかにしたがうａｂＴＣＲをコードする核酸、または本明細書に記載さ
れる実施形態のいずれかにしたがうａｂＴＣＲエフェクター細胞を含む組成物（例えば、
医薬組成物、本明細書で製剤とも呼ぶ）もまた本明細書で提供される。一部の実施形態で
は、組成物は、本明細書に記載されるａｂＴＣＲのいずれかにしたがうａｂＴＣＲをその
表面上に提示するエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞）を含むａｂＴＣＲエフェクター細
胞組成物（例えば、医薬組成物）である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター
細胞組成物は、医薬組成物である。
【0311】
組成物は、同じ細胞型の、および同じａｂＴＣＲを発現するａｂＴＣＲエフェクター細
胞を含む均一な細胞集団、または異なる細胞型の、および／もしくは異なるａｂＴＣＲを
発現するａｂＴＣＲエフェクター細胞を含む複数のａｂＴＣＲエフェクター細胞集団を含
む不均一な細胞集団を含み得る。組成物は、ａｂＴＣＲエフェクター細胞ではない細胞を
さらに含み得る。
胞を含む均一な細胞集団、または異なる細胞型の、および／もしくは異なるａｂＴＣＲを
発現するａｂＴＣＲエフェクター細胞を含む複数のａｂＴＣＲエフェクター細胞集団を含
む不均一な細胞集団を含み得る。組成物は、ａｂＴＣＲエフェクター細胞ではない細胞を
さらに含み得る。
【0312】
したがって、一部の実施形態では、同じ細胞型の、および同じａｂＴＣＲを発現するａ
ｂＴＣＲエフェクター細胞（例えば、ａｂＴＣＲ Ｔ細胞）の均一な細胞集団を含むａｂ
ＴＣＲエフェクター細胞組成物が提供される。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェク
ター細胞は、Ｔ細胞である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞は、細胞
傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッサーＴ細胞から
なる群から選択される。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞組成物は、医
薬組成物である。
ｂＴＣＲエフェクター細胞（例えば、ａｂＴＣＲ Ｔ細胞）の均一な細胞集団を含むａｂ
ＴＣＲエフェクター細胞組成物が提供される。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェク
ター細胞は、Ｔ細胞である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞は、細胞
傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッサーＴ細胞から
なる群から選択される。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞組成物は、医
薬組成物である。
【0313】
一部の実施形態では、異なる細胞型の、および／または異なるａｂＴＣＲを発現するａ
ｂＴＣＲエフェクター細胞を含む複数のａｂＴＣＲエフェクター細胞集団を含む不均一な
細胞集団を含むａｂＴＣＲエフェクター細胞組成物が提供される。一部の実施形態では、
ａｂＴＣＲエフェクター細胞は、Ｔ細胞である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェ
クター細胞の各集団は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞お
よびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される細胞型のものである。一部の実施形態
では、組成物中のａｂＴＣＲエフェクター細胞は全て、同じ細胞型のものである（例えば
、ａｂＴＣＲエフェクター細胞は全て、細胞傷害性Ｔ細胞である）。一部の実施形態では
、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の少なくとも１つの集団は、他とは異なる細胞型のもので
ある（例えば、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の１つの集団は、細胞傷害性Ｔ細胞からなり
、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の他の集団は、ナチュラルキラーＴ細胞からなる）。一部
の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、同じａｂＴＣＲを発現する。
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の少なくとも１つの集団は、他とは異
なるａｂＴＣＲを発現する。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の各集団
は、他とは異なるａｂＴＣＲを発現する。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター
細胞の各集団は、同じ標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲを発現する。一部の実施形
態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の少なくとも１つの集団は、他とは異なる標的抗原
に特異的に結合するａｂＴＣＲを発現する（例えば、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の１つ
の集団は、ｐＭＨＣ複合体に特異的に結合し、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の他の集団は
、細胞表面受容体に特異的に結合する）。ａｂＴＣＲエフェクター細胞の少なくとも１つ
の集団が異なる標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲを発現する一部の実施形態では、
ａｂＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、同じ疾患または障害と関連する標的抗原に特異
的に結合するａｂＴＣＲを発現する（例えば、標的抗原の各々は、乳がんなどのがんと関
連する）。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞組成物は、医薬組成物であ
る。
ｂＴＣＲエフェクター細胞を含む複数のａｂＴＣＲエフェクター細胞集団を含む不均一な
細胞集団を含むａｂＴＣＲエフェクター細胞組成物が提供される。一部の実施形態では、
ａｂＴＣＲエフェクター細胞は、Ｔ細胞である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェ
クター細胞の各集団は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞お
よびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される細胞型のものである。一部の実施形態
では、組成物中のａｂＴＣＲエフェクター細胞は全て、同じ細胞型のものである（例えば
、ａｂＴＣＲエフェクター細胞は全て、細胞傷害性Ｔ細胞である）。一部の実施形態では
、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の少なくとも１つの集団は、他とは異なる細胞型のもので
ある（例えば、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の１つの集団は、細胞傷害性Ｔ細胞からなり
、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の他の集団は、ナチュラルキラーＴ細胞からなる）。一部
の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、同じａｂＴＣＲを発現する。
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の少なくとも１つの集団は、他とは異
なるａｂＴＣＲを発現する。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の各集団
は、他とは異なるａｂＴＣＲを発現する。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター
細胞の各集団は、同じ標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲを発現する。一部の実施形
態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の少なくとも１つの集団は、他とは異なる標的抗原
に特異的に結合するａｂＴＣＲを発現する（例えば、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の１つ
の集団は、ｐＭＨＣ複合体に特異的に結合し、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の他の集団は
、細胞表面受容体に特異的に結合する）。ａｂＴＣＲエフェクター細胞の少なくとも１つ
の集団が異なる標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲを発現する一部の実施形態では、
ａｂＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、同じ疾患または障害と関連する標的抗原に特異
的に結合するａｂＴＣＲを発現する（例えば、標的抗原の各々は、乳がんなどのがんと関
連する）。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞組成物は、医薬組成物であ
る。
【0314】
したがって、一部の実施形態では、本明細書に記載される実施形態のいずれかにしたが
う複数のａｂＴＣＲエフェクター細胞集団を含むａｂＴＣＲエフェクター細胞組成物であ
って、組成物中のａｂＴＣＲエフェクター細胞が全て、同じ細胞型のものであり（例えば
、ａｂＴＣＲエフェクター細胞は全て、細胞傷害性Ｔ細胞である）、ａｂＴＣＲエフェク
ター細胞の各集団が、他とは異なるａｂＴＣＲを発現する、ａｂＴＣＲエフェクター細胞
組成物が提供される。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞は、Ｔ細胞であ
る。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパー
Ｔ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、同じ標的抗原に特異的に
結合するａｂＴＣＲを発現する。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の少
なくとも１つの集団は、他とは異なる標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲを発現する
（例えば、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の１つの集団は、ｐＭＨＣ複合体に特異的に結合
し、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の他の集団は、細胞表面受容体に特異的に結合する）。
ａｂＴＣＲエフェクター細胞の少なくとも１つの集団が異なる標的抗原に特異的に結合す
るａｂＴＣＲを発現する一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、
同じ疾患または障害と関連する標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲを発現する（例え
ば、標的抗原の各々は、乳がんなどのがんと関連する）。一部の実施形態では、ａｂＴＣ
Ｒエフェクター細胞組成物は、医薬組成物である。
う複数のａｂＴＣＲエフェクター細胞集団を含むａｂＴＣＲエフェクター細胞組成物であ
って、組成物中のａｂＴＣＲエフェクター細胞が全て、同じ細胞型のものであり（例えば
、ａｂＴＣＲエフェクター細胞は全て、細胞傷害性Ｔ細胞である）、ａｂＴＣＲエフェク
ター細胞の各集団が、他とは異なるａｂＴＣＲを発現する、ａｂＴＣＲエフェクター細胞
組成物が提供される。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞は、Ｔ細胞であ
る。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパー
Ｔ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、同じ標的抗原に特異的に
結合するａｂＴＣＲを発現する。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の少
なくとも１つの集団は、他とは異なる標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲを発現する
（例えば、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の１つの集団は、ｐＭＨＣ複合体に特異的に結合
し、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の他の集団は、細胞表面受容体に特異的に結合する）。
ａｂＴＣＲエフェクター細胞の少なくとも１つの集団が異なる標的抗原に特異的に結合す
るａｂＴＣＲを発現する一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、
同じ疾患または障害と関連する標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲを発現する（例え
ば、標的抗原の各々は、乳がんなどのがんと関連する）。一部の実施形態では、ａｂＴＣ
Ｒエフェクター細胞組成物は、医薬組成物である。
【0315】
一部の実施形態では、本明細書に記載される実施形態のいずれかにしたがう複数のａｂ
ＴＣＲエフェクター細胞集団を含む組成物であって、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の少な
くとも１つの集団が、他とは異なる細胞型のものである、組成物が提供される。一部の実
施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の集団は全て、異なる細胞型のものである。一
部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞は、Ｔ細胞である。一部の実施形態では
、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュ
ラルキラーＴ細胞およびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される細胞型のものであ
る。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、同じａｂＴＣＲを発
現する。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の少なくとも１つの集団は、
他とは異なるａｂＴＣＲを発現する。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞
の各集団は、他とは異なるａｂＴＣＲを発現する。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフ
ェクター細胞の各集団は、同じ標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲを発現する。一部
の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の少なくとも１つの集団は、他とは異なる
標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲを発現する（例えば、ａｂＴＣＲエフェクター細
胞の１つの集団は、ｐＭＨＣ複合体に特異的に結合し、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の他
の集団は、細胞表面受容体に特異的に結合する）。ａｂＴＣＲエフェクター細胞の少なく
とも１つの集団が異なる標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲを発現する一部の実施形
態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、同じ疾患または障害と関連する標的抗
原に特異的に結合するａｂＴＣＲを発現する（例えば、標的抗原の各々は、乳がんなどの
がんと関連する）。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞組成物は、医薬組
成物である。
ＴＣＲエフェクター細胞集団を含む組成物であって、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の少な
くとも１つの集団が、他とは異なる細胞型のものである、組成物が提供される。一部の実
施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の集団は全て、異なる細胞型のものである。一
部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞は、Ｔ細胞である。一部の実施形態では
、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュ
ラルキラーＴ細胞およびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される細胞型のものであ
る。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、同じａｂＴＣＲを発
現する。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の少なくとも１つの集団は、
他とは異なるａｂＴＣＲを発現する。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞
の各集団は、他とは異なるａｂＴＣＲを発現する。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフ
ェクター細胞の各集団は、同じ標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲを発現する。一部
の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の少なくとも１つの集団は、他とは異なる
標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲを発現する（例えば、ａｂＴＣＲエフェクター細
胞の１つの集団は、ｐＭＨＣ複合体に特異的に結合し、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の他
の集団は、細胞表面受容体に特異的に結合する）。ａｂＴＣＲエフェクター細胞の少なく
とも１つの集団が異なる標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲを発現する一部の実施形
態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、同じ疾患または障害と関連する標的抗
原に特異的に結合するａｂＴＣＲを発現する（例えば、標的抗原の各々は、乳がんなどの
がんと関連する）。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞組成物は、医薬組
成物である。
【0316】
組成物の調製の間の種々の時点において、細胞を凍結保存することが必要または有益で
あり得る。用語「凍結された／凍結する」および「凍結保存された／凍結保存する」は、
相互交換可能に使用され得る。凍結することには、フリーズドライすることが含まれる。
あり得る。用語「凍結された／凍結する」および「凍結保存された／凍結保存する」は、
相互交換可能に使用され得る。凍結することには、フリーズドライすることが含まれる。
【0317】
当業者に理解されるように、細胞の凍結は、破壊的であり得る（Mazur, P.、１９７７
年、Cryobiology １４巻：２５１～２７２頁を参照のこと）が、かかる損傷を防止する
ために利用可能な多数の手順が存在する。例えば、損傷は、（ａ）凍結保護剤の使用、（
ｂ）凍結速度の制御、および／または（ｃ）分解反応を最小化するのに十分に低い温度に
おける貯蔵、によって回避され得る。例示的な凍結保護剤には、ジメチルスルホキシド（
ＤＭＳＯ）（LovelockおよびBishop、１９５９年、Nature １８３巻：１３９４～１３９
５頁；Ashwood-Smith、１９６１年、Nature １９０巻：１２０４～１２０５頁）、グリ
セロール、ポリビニルピロリドン（polyvinylpyrrolidine）（Rinfret、１９６０年、Ann
. N.Y. Acad. Sci. ８５巻：５７６頁）、ポリエチレングリコール（Sloviterおよび
Ravdin、１９６２年、Nature １９６巻：５４８頁）、アルブミン、デキストラン、スク
ロース、エチレングリコール、ｉ－エリスリトール、Ｄ－リビトール、Ｄ－マンニトール
（Roweら、１９６２年、Fed. Proc. ２１巻：１５７頁）、Ｄ－ソルビトール、ｉ－イ
ノシトール、Ｄ－ラクトース、塩化コリン（Benderら、１９６０年、J. Appl. Physiol
. １５巻：５２０頁）、アミノ酸（Phan The TranおよびBender、１９６０年、Exp.
Cell Res.２０巻：６５１頁）、メタノール、アセトアミド、グリセロールモノアセテー
ト（Lovelock、１９５４年、Biochem. J. ５６巻：２６５頁）および無機塩（Phan Th
e TranおよびBender、１９６０年、Proc. Soc. Exp. Biol. Med. １０４巻：３８
８頁；Phan The TranおよびBender、１９６１年、Radiobiology, Proceedings of t
he Third Australian Conference on Radiobiology、llbery編、Butterworth、Lond
on、５９頁）が含まれる。特定の実施形態では、ＤＭＳＯが使用され得る。（例えば、２
０～２５％の濃度になるような）血漿の添加は、ＤＭＳＯの保護効果を強化し得る。１％
のＤＭＳＯ濃度は、４℃を上回る温度では毒性であり得るので、ＤＭＳＯの添加後、細胞
は、凍結まで０℃で維持され得る。
年、Cryobiology １４巻：２５１～２７２頁を参照のこと）が、かかる損傷を防止する
ために利用可能な多数の手順が存在する。例えば、損傷は、（ａ）凍結保護剤の使用、（
ｂ）凍結速度の制御、および／または（ｃ）分解反応を最小化するのに十分に低い温度に
おける貯蔵、によって回避され得る。例示的な凍結保護剤には、ジメチルスルホキシド（
ＤＭＳＯ）（LovelockおよびBishop、１９５９年、Nature １８３巻：１３９４～１３９
５頁；Ashwood-Smith、１９６１年、Nature １９０巻：１２０４～１２０５頁）、グリ
セロール、ポリビニルピロリドン（polyvinylpyrrolidine）（Rinfret、１９６０年、Ann
. N.Y. Acad. Sci. ８５巻：５７６頁）、ポリエチレングリコール（Sloviterおよび
Ravdin、１９６２年、Nature １９６巻：５４８頁）、アルブミン、デキストラン、スク
ロース、エチレングリコール、ｉ－エリスリトール、Ｄ－リビトール、Ｄ－マンニトール
（Roweら、１９６２年、Fed. Proc. ２１巻：１５７頁）、Ｄ－ソルビトール、ｉ－イ
ノシトール、Ｄ－ラクトース、塩化コリン（Benderら、１９６０年、J. Appl. Physiol
. １５巻：５２０頁）、アミノ酸（Phan The TranおよびBender、１９６０年、Exp.
Cell Res.２０巻：６５１頁）、メタノール、アセトアミド、グリセロールモノアセテー
ト（Lovelock、１９５４年、Biochem. J. ５６巻：２６５頁）および無機塩（Phan Th
e TranおよびBender、１９６０年、Proc. Soc. Exp. Biol. Med. １０４巻：３８
８頁；Phan The TranおよびBender、１９６１年、Radiobiology, Proceedings of t
he Third Australian Conference on Radiobiology、llbery編、Butterworth、Lond
on、５９頁）が含まれる。特定の実施形態では、ＤＭＳＯが使用され得る。（例えば、２
０～２５％の濃度になるような）血漿の添加は、ＤＭＳＯの保護効果を強化し得る。１％
のＤＭＳＯ濃度は、４℃を上回る温度では毒性であり得るので、ＤＭＳＯの添加後、細胞
は、凍結まで０℃で維持され得る。
【0318】
細胞の凍結保存では、緩徐な制御された冷却速度が重要であり得、異なる凍結保護剤（
Rapatzら、１９６８年、Cryobiology ５巻（１号）：１８～２５頁）および異なる細胞
型は、異なる最適な冷却速度を有する（幹細胞の生存およびそれらの移植能に対する冷却
速度の効果については、例えば、RoweおよびRinfret、１９６２年、Blood ２０巻：６３
６頁；Rowe、１９６６年、Cryobiology ３巻（１号）：１２～１８頁；Lewisら、１９６
７年、Transfusion ７巻（１号）：１７～３２頁；ならびにMazur、１９７０年、Scienc
e １６８巻：９３９～９４９頁を参照のこと）。水が氷になる融解相の熱は、最小であ
るべきである。冷却手順は、例えば、プログラム可能な凍結デバイスまたはメタノール浴
手順の使用によって実施され得る。プログラム可能な凍結装置は、最適な冷却速度の決定
を可能にし、標準的な再現性のある冷却を促進する。
Rapatzら、１９６８年、Cryobiology ５巻（１号）：１８～２５頁）および異なる細胞
型は、異なる最適な冷却速度を有する（幹細胞の生存およびそれらの移植能に対する冷却
速度の効果については、例えば、RoweおよびRinfret、１９６２年、Blood ２０巻：６３
６頁；Rowe、１９６６年、Cryobiology ３巻（１号）：１２～１８頁；Lewisら、１９６
７年、Transfusion ７巻（１号）：１７～３２頁；ならびにMazur、１９７０年、Scienc
e １６８巻：９３９～９４９頁を参照のこと）。水が氷になる融解相の熱は、最小であ
るべきである。冷却手順は、例えば、プログラム可能な凍結デバイスまたはメタノール浴
手順の使用によって実施され得る。プログラム可能な凍結装置は、最適な冷却速度の決定
を可能にし、標準的な再現性のある冷却を促進する。
【0319】
特定の実施形態では、ＤＭＳＯ処理された細胞は、氷上で事前冷却され、次に機械的冷
蔵庫（例えば、ＨａｒｒｉｓまたはＲｅｖｃｏ）中－８０℃に配置される冷却メタノール
を含むトレイに移され得る。メタノール浴および試料の熱電対測定は、１℃～３℃／分の
冷却速度が好まれ得ることを示す。少なくとも２時間後、検体は、－８０℃の温度に達し
ていることができ、液体窒素（－１９６℃）中に直接配置され得る。
蔵庫（例えば、ＨａｒｒｉｓまたはＲｅｖｃｏ）中－８０℃に配置される冷却メタノール
を含むトレイに移され得る。メタノール浴および試料の熱電対測定は、１℃～３℃／分の
冷却速度が好まれ得ることを示す。少なくとも２時間後、検体は、－８０℃の温度に達し
ていることができ、液体窒素（－１９６℃）中に直接配置され得る。
【0320】
徹底的な凍結後、細胞は、長期凍結貯蔵容器に迅速に移され得る。好ましい実施形態で
は、試料は、液体窒素（－１９６℃）または蒸気（－１℃）中に凍結貯蔵され得る。かか
る貯蔵は、高度に効率的な液体窒素冷蔵庫の有用性によって促進される。
は、試料は、液体窒素（－１９６℃）または蒸気（－１℃）中に凍結貯蔵され得る。かか
る貯蔵は、高度に効率的な液体窒素冷蔵庫の有用性によって促進される。
【0321】
細胞の操作、凍結保存および長期貯蔵のためのさらなる考慮事項および手順は、以下の
例示的な参考文献中に見出すことができる：米国特許第４，１９９，０２２号；同第３，
７５３，３５７号；および同第４，５５９，２９８号；Gorin、１９８６年、Clinics In
Haematology １５巻（１号）：１９～４８頁；Bone-Marrow Conservation, Culture
and Transplantation、Proceedings of a Panel、Moscow、１９６８年７月２２～
２６日、International Atomic Energy Agency、Vienna、１０７～１８６頁；Livesey
およびLinner、１９８７年、Nature ３２７巻：２５５頁；Linnerら、１９８６年、J.
Histochem. Cytochem. ３４巻（９号）：１１２３～１１３５頁；Simione、１９９２年
、J. Parenter. Sci. Technol. ４６巻（６号）：２２６～３２頁。
例示的な参考文献中に見出すことができる：米国特許第４，１９９，０２２号；同第３，
７５３，３５７号；および同第４，５５９，２９８号；Gorin、１９８６年、Clinics In
Haematology １５巻（１号）：１９～４８頁；Bone-Marrow Conservation, Culture
and Transplantation、Proceedings of a Panel、Moscow、１９６８年７月２２～
２６日、International Atomic Energy Agency、Vienna、１０７～１８６頁；Livesey
およびLinner、１９８７年、Nature ３２７巻：２５５頁；Linnerら、１９８６年、J.
Histochem. Cytochem. ３４巻（９号）：１１２３～１１３５頁；Simione、１９９２年
、J. Parenter. Sci. Technol. ４６巻（６号）：２２６～３２頁。
【0322】
凍結保存後、凍結された細胞は、当業者に公知の方法に従って使用のために解凍され得
る。凍結された細胞は、好ましくは、迅速に解凍され、解凍後即座に冷却される。特定の
実施形態では、凍結された細胞を含むバイアルは、温水浴中にその首まで浸漬され得る；
穏やかな回転が、解凍される際の細胞懸濁物の混合を確実にし、温水から内部氷塊への熱
伝達を増加させる。氷が完全に融解したら直ぐに、バイアルは氷上に即座に配置され得る
。
る。凍結された細胞は、好ましくは、迅速に解凍され、解凍後即座に冷却される。特定の
実施形態では、凍結された細胞を含むバイアルは、温水浴中にその首まで浸漬され得る；
穏やかな回転が、解凍される際の細胞懸濁物の混合を確実にし、温水から内部氷塊への熱
伝達を増加させる。氷が完全に融解したら直ぐに、バイアルは氷上に即座に配置され得る
。
【0323】
特定の実施形態では、解凍の間に細胞凝集を防止するための方法が使用され得る。例示
的な方法には以下が含まれる：凍結の前および／または後のＤＮａｓｅの添加（Spitzer
ら、１９８０年、Cancer ４５巻：３０７５～３０８５頁）、低分子量デキストランおよ
びシトレート、ヒドロキシエチルデンプン（Stiffら、１９８３年、Cryobiology ２０巻
：１７～２４頁）など。［０１６２］当業者に理解されるように、ヒトに対して毒性であ
る凍結保護剤が使用される場合、それは、治療的使用の前に除去するべきである。ＤＭＳ
Ｏは、重大な毒性を有さない。
的な方法には以下が含まれる：凍結の前および／または後のＤＮａｓｅの添加（Spitzer
ら、１９８０年、Cancer ４５巻：３０７５～３０８５頁）、低分子量デキストランおよ
びシトレート、ヒドロキシエチルデンプン（Stiffら、１９８３年、Cryobiology ２０巻
：１７～２４頁）など。［０１６２］当業者に理解されるように、ヒトに対して毒性であ
る凍結保護剤が使用される場合、それは、治療的使用の前に除去するべきである。ＤＭＳ
Ｏは、重大な毒性を有さない。
【0324】
例示的なキャリアおよび細胞の投与様式は、米国特許出願公開第２０１０／０１８３５
６４号の１４～１５頁に記載されている。さらなる医薬キャリアは、Remington: The S
cience and Practice of Pharmacy、第２１版、David B. Troy編、Lippicott Wil
liams & Wilkins（２００５年）に記載されている。
６４号の１４～１５頁に記載されている。さらなる医薬キャリアは、Remington: The S
cience and Practice of Pharmacy、第２１版、David B. Troy編、Lippicott Wil
liams & Wilkins（２００５年）に記載されている。
【0325】
特定の実施形態では、細胞は、培養培地から回収され、洗浄され、治療有効量でキャリ
ア中に濃縮され得る。例示的なキャリアには、食塩水、緩衝食塩水、生理食塩水、水、ハ
ンクス溶液、リンゲル溶液、Ｎｏｎｎｏｓｏｌ－Ｒ（Ａｂｂｏｔｔ Ｌａｂｓ）、Ｐｌａ
ｓｍａ－Ｌｙｔｅ Ａ（Ｒ）（Ｂａｘｔｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．、Ｍ
ｏｒｔｏｎ Ｇｒｏｖｅ、ＩＬ）、グリセロール、エタノール、およびそれらの組合せが
含まれる。
ア中に濃縮され得る。例示的なキャリアには、食塩水、緩衝食塩水、生理食塩水、水、ハ
ンクス溶液、リンゲル溶液、Ｎｏｎｎｏｓｏｌ－Ｒ（Ａｂｂｏｔｔ Ｌａｂｓ）、Ｐｌａ
ｓｍａ－Ｌｙｔｅ Ａ（Ｒ）（Ｂａｘｔｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．、Ｍ
ｏｒｔｏｎ Ｇｒｏｖｅ、ＩＬ）、グリセロール、エタノール、およびそれらの組合せが
含まれる。
【0326】
特定の実施形態では、キャリアには、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）もしくは他のヒト
血清成分または胎仔ウシ血清が補充され得る。特定の実施形態では、注入のためのキャリ
アには、５％ＨＡＳまたはデキストロースを含む緩衝食塩水が含まれる。さらなる等張剤
には、三価またはそれよりも高い糖アルコールを含む多価糖アルコール、例えば、グリセ
リン、エリスリトール、アラビトール、キシリトール、ソルビトールまたはマンニトール
が含まれる。
血清成分または胎仔ウシ血清が補充され得る。特定の実施形態では、注入のためのキャリ
アには、５％ＨＡＳまたはデキストロースを含む緩衝食塩水が含まれる。さらなる等張剤
には、三価またはそれよりも高い糖アルコールを含む多価糖アルコール、例えば、グリセ
リン、エリスリトール、アラビトール、キシリトール、ソルビトールまたはマンニトール
が含まれる。
【0327】
キャリアには、緩衝剤、例えば、クエン酸緩衝液、コハク酸緩衝液、酒石酸緩衝液、フ
マル酸緩衝液、グルコン酸緩衝液、シュウ酸緩衝液、乳酸緩衝液、酢酸緩衝液、リン酸緩
衝液、ヒスチジン緩衝液および／またはトリメチルアミン塩が含まれ得る。
マル酸緩衝液、グルコン酸緩衝液、シュウ酸緩衝液、乳酸緩衝液、酢酸緩衝液、リン酸緩
衝液、ヒスチジン緩衝液および／またはトリメチルアミン塩が含まれ得る。
【0328】
安定剤とは、機能が増量剤から、容器の壁への細胞の粘着を防止するのに役立つ添加剤
までの範囲であり得る賦形剤の広いカテゴリーを指す。典型的な安定剤には、多価糖アル
コール；アミノ酸、例えば、アルギニン、リシン、グリシン、グルタミン、アスパラギン
、ヒスチジン、アラニン、オルニチン、Ｌ－ロイシン、２－フェニルアラニン、グルタミ
ン酸およびスレオニン；有機糖または糖アルコール、例えば、ラクトース、トレハロース
、スタキオース、マンニトール、ソルビトール、キシリトール、リビトール、ミオイノシ
トール（myoinisitol）、ガラクチトール、グリセロールおよびシクリトール、例えば、
イノシトール；ＰＥＧ；アミノ酸ポリマー；硫黄含有還元剤、例えば、尿素、グルタチオ
ン、チオクト酸、チオグリコール酸ナトリウム、チオグリセロール、アルファ－モノチオ
グリセロールおよびチオ硫酸ナトリウム；低分子量ポリペプチド（即ち、＜１０残基）；
タンパク質、例えば、ＨＳＡ、ウシ血清アルブミン、ゼラチンまたは免疫グロブリン；親
水性ポリマー、例えば、ポリビニルピロリドン；単糖、例えば、キシロース、マンノース
、フルクトースおよびグルコース；二糖、例えば、ラクトース、マルトースおよびスクロ
ース；三糖、例えば、ラフィノース、ならびに多糖、例えば、デキストランが含まれ得る
。
までの範囲であり得る賦形剤の広いカテゴリーを指す。典型的な安定剤には、多価糖アル
コール；アミノ酸、例えば、アルギニン、リシン、グリシン、グルタミン、アスパラギン
、ヒスチジン、アラニン、オルニチン、Ｌ－ロイシン、２－フェニルアラニン、グルタミ
ン酸およびスレオニン；有機糖または糖アルコール、例えば、ラクトース、トレハロース
、スタキオース、マンニトール、ソルビトール、キシリトール、リビトール、ミオイノシ
トール（myoinisitol）、ガラクチトール、グリセロールおよびシクリトール、例えば、
イノシトール；ＰＥＧ；アミノ酸ポリマー；硫黄含有還元剤、例えば、尿素、グルタチオ
ン、チオクト酸、チオグリコール酸ナトリウム、チオグリセロール、アルファ－モノチオ
グリセロールおよびチオ硫酸ナトリウム；低分子量ポリペプチド（即ち、＜１０残基）；
タンパク質、例えば、ＨＳＡ、ウシ血清アルブミン、ゼラチンまたは免疫グロブリン；親
水性ポリマー、例えば、ポリビニルピロリドン；単糖、例えば、キシロース、マンノース
、フルクトースおよびグルコース；二糖、例えば、ラクトース、マルトースおよびスクロ
ース；三糖、例えば、ラフィノース、ならびに多糖、例えば、デキストランが含まれ得る
。
【0329】
必要または有益な場合、組成物は、注射の部位における疼痛を和らげるために、リドカ
インなどの局所麻酔薬を含み得る。
インなどの局所麻酔薬を含み得る。
【0330】
例示的な防腐剤には、フェノール、ベンジルアルコール、メタ－クレゾール、メチルパ
ラベン、プロピルパラベン、塩化オクタデシルジメチルベンジルアンモニウム、ベンザル
コニウムハライド、塩化ヘキサメトニウム、アルキルパラベン、例えば、メチルパラベン
またはプロピルパラベン、カテコール、レゾルシノール、シクロヘキサノールおよび３－
ペンタノールが含まれる。
ラベン、プロピルパラベン、塩化オクタデシルジメチルベンジルアンモニウム、ベンザル
コニウムハライド、塩化ヘキサメトニウム、アルキルパラベン、例えば、メチルパラベン
またはプロピルパラベン、カテコール、レゾルシノール、シクロヘキサノールおよび３－
ペンタノールが含まれる。
【0331】
組成物内の細胞の治療有効量は、１０２細胞よりも高い、１０３細胞よりも高い、１０
４細胞よりも高い、１０５細胞よりも高い、１０６細胞よりも高い、１０７細胞よりも高
い、１０８細胞よりも高い、１０９細胞よりも高い、１０１０細胞よりも高い、または１
０１１細胞よりも高いとすることができる。
４細胞よりも高い、１０５細胞よりも高い、１０６細胞よりも高い、１０７細胞よりも高
い、１０８細胞よりも高い、１０９細胞よりも高い、１０１０細胞よりも高い、または１
０１１細胞よりも高いとすることができる。
【0332】
本明細書に開示される組成物および製剤では、細胞は一般に、１リットルもしくはそれ
未満、５００ｍｌもしくはそれ未満、２５０ｍｌもしくはそれ未満または１００ｍｌもし
くはそれ未満の体積中にある。したがって、投与される細胞の密度は、典型的には、１０
４細胞／ｍｌ、１０７細胞／ｍｌまたは１０８細胞／ｍｌよりも高い。
未満、５００ｍｌもしくはそれ未満、２５０ｍｌもしくはそれ未満または１００ｍｌもし
くはそれ未満の体積中にある。したがって、投与される細胞の密度は、典型的には、１０
４細胞／ｍｌ、１０７細胞／ｍｌまたは１０８細胞／ｍｌよりも高い。
【0333】
本明細書に記載されるａｂＴＣＲをコードする核酸のいずれかを含むａｂＴＣＲ核酸組
成物（例えば、医薬組成物、本明細書で製剤とも呼ぶ）もまた本明細書で提供される。一
部の実施形態では、ａｂＴＣＲ核酸組成物は、医薬組成物である。一部の実施形態では、
ａｂＴＣＲ核酸組成物は、等張化剤、賦形剤、希釈剤、増粘剤、安定剤、緩衝液および／
もしくは防腐剤；ならびに／または水性ビヒクル、例えば、精製水、糖水溶液、緩衝液溶
液、生理食塩水、ポリマー水溶液もしくは無ＲＮａｓｅ水のいずれかをさらに含む。添加
されるかかる添加剤および水性ビヒクルの量は、ａｂＴＣＲ核酸組成物の使用の形態に従
って適切に選択され得る。
成物（例えば、医薬組成物、本明細書で製剤とも呼ぶ）もまた本明細書で提供される。一
部の実施形態では、ａｂＴＣＲ核酸組成物は、医薬組成物である。一部の実施形態では、
ａｂＴＣＲ核酸組成物は、等張化剤、賦形剤、希釈剤、増粘剤、安定剤、緩衝液および／
もしくは防腐剤；ならびに／または水性ビヒクル、例えば、精製水、糖水溶液、緩衝液溶
液、生理食塩水、ポリマー水溶液もしくは無ＲＮａｓｅ水のいずれかをさらに含む。添加
されるかかる添加剤および水性ビヒクルの量は、ａｂＴＣＲ核酸組成物の使用の形態に従
って適切に選択され得る。
【0334】
本明細書に開示される組成物および製剤は、例えば、注射、注入、灌流または洗浄によ
る投与のために調製され得る。組成物および製剤は、骨髄、静脈内、真皮内、動脈内、結
節内、リンパ内、腹腔内、病巣内、前立腺内、腟内、直腸内、外用、髄腔内、腫瘍内、筋
肉内、小胞内および／または皮下注射のためにさらに製剤化され得る。
る投与のために調製され得る。組成物および製剤は、骨髄、静脈内、真皮内、動脈内、結
節内、リンパ内、腹腔内、病巣内、前立腺内、腟内、直腸内、外用、髄腔内、腫瘍内、筋
肉内、小胞内および／または皮下注射のためにさらに製剤化され得る。
【0335】
ｉｎ ｖｉｖｏ投与に使用される製剤は、滅菌でなければならない。これは、例えば、
滅菌濾過膜を介した濾過によって容易に達成される。
滅菌濾過膜を介した濾過によって容易に達成される。
【0336】
ａｂＴＣＲを使用する処置の方法
本発明のａｂＴＣＲおよび／または組成物は、例えば、がんおよび感染性疾患（例えば
、ウイルス感染症）を含む、標的抗原（ＴＡ）発現と関連する疾患および／または障害（
本明細書で「標的抗原陽性」または「ＴＡ陽性」疾患または障害とも呼ぶ）を処置するた
めに、個体（例えば、哺乳動物、例えば、ヒト）に投与され得る。したがって、本出願は
、一部の実施形態では、個体において標的抗原陽性疾患（例えば、がんまたはウイルス感
染症）を処置するための方法であって、個体に、有効量の、抗体部分を含むａｂＴＣＲ、
例えば、本明細書に記載されるａｂＴＣＲのいずれか１つを含む組成物（例えば、医薬組
成物）を投与するステップを含む方法を提供する。一部の実施形態では、組成物は、ａｂ
ＴＣＲと関連する細胞（例えば、エフェクター細胞）をさらに含む。一部の実施形態では
、がんは、例えば、副腎皮質癌、膀胱がん、乳がん、子宮頸がん、胆管細胞癌、結腸直腸
がん、食道がん、グリア芽細胞腫、グリオーマ、肝細胞癌、頭頸部がん、腎臓がん、肺が
ん、メラノーマ、中皮腫、多発性骨髄腫、膵臓がん、褐色細胞腫、形質細胞腫、神経芽細
胞腫、卵巣がん、前立腺がん、肉腫、胃がん、子宮がんおよび甲状腺がんからなる群から
選択される。一部の実施形態では、ウイルス感染症は、例えば、サイトメガロウイルス（
ＣＭＶ）、エプスタイン－バーウイルス（ＥＢＶ）、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、カポ
ジ肉腫関連ヘルペスウイルス（ＫＳＨＶ）、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、伝染性
軟属腫ウイルス（ＭＣＶ）、ヒトＴ細胞白血病ウイルス１（ＨＴＬＶ－１）、ＨＩＶ（ヒ
ト免疫不全ウイルス）およびＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）からなる群から選択されるウイ
ルスによって引き起こされる。
本発明のａｂＴＣＲおよび／または組成物は、例えば、がんおよび感染性疾患（例えば
、ウイルス感染症）を含む、標的抗原（ＴＡ）発現と関連する疾患および／または障害（
本明細書で「標的抗原陽性」または「ＴＡ陽性」疾患または障害とも呼ぶ）を処置するた
めに、個体（例えば、哺乳動物、例えば、ヒト）に投与され得る。したがって、本出願は
、一部の実施形態では、個体において標的抗原陽性疾患（例えば、がんまたはウイルス感
染症）を処置するための方法であって、個体に、有効量の、抗体部分を含むａｂＴＣＲ、
例えば、本明細書に記載されるａｂＴＣＲのいずれか１つを含む組成物（例えば、医薬組
成物）を投与するステップを含む方法を提供する。一部の実施形態では、組成物は、ａｂ
ＴＣＲと関連する細胞（例えば、エフェクター細胞）をさらに含む。一部の実施形態では
、がんは、例えば、副腎皮質癌、膀胱がん、乳がん、子宮頸がん、胆管細胞癌、結腸直腸
がん、食道がん、グリア芽細胞腫、グリオーマ、肝細胞癌、頭頸部がん、腎臓がん、肺が
ん、メラノーマ、中皮腫、多発性骨髄腫、膵臓がん、褐色細胞腫、形質細胞腫、神経芽細
胞腫、卵巣がん、前立腺がん、肉腫、胃がん、子宮がんおよび甲状腺がんからなる群から
選択される。一部の実施形態では、ウイルス感染症は、例えば、サイトメガロウイルス（
ＣＭＶ）、エプスタイン－バーウイルス（ＥＢＶ）、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、カポ
ジ肉腫関連ヘルペスウイルス（ＫＳＨＶ）、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、伝染性
軟属腫ウイルス（ＭＣＶ）、ヒトＴ細胞白血病ウイルス１（ＨＴＬＶ－１）、ＨＩＶ（ヒ
ト免疫不全ウイルス）およびＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）からなる群から選択されるウイ
ルスによって引き起こされる。
【0337】
例えば、一部の実施形態では、それを必要とする個体において標的抗原関連疾患（例え
ば、がんまたはウイルス感染症）を処置する方法であって、個体に、有効量の、ａ）標的
抗原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジュール、およびｂ）少なくとも１つのＴＣ
Ｒ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴＣＲＭを含むａｂＴＣＲ
（例えば、単離されたａｂＴＣＲ）をそれらの表面上に提示するエフェクター細胞（例え
ば、Ｔ細胞またはナチュラルキラー細胞）を含む組成物を投与するステップを含む方法が
提供される。一部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ＶＨ抗体ドメイン、
ＣＨ１抗体ドメイン、ＶＬ抗体ドメインおよびＣＬ抗体ドメインを含む。一部の実施形態
では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または完全合成で
ある。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＴＣＲ、例えば、αβＴＣＲまたはγδＴＣＲ
の膜貫通ドメインを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＴＣＲの接続ペプチドまた
はその断片をさらに含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＴＣＲの細胞外ドメインの
少なくとも１つの部分をさらに含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、少なくとも１
つの細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、少なくとも１つの細胞内ドメイ
ンは、ＴＣＲの細胞内ドメイン由来の配列、共刺激細胞内シグナル伝達配列、エピトープ
タグ、またはそれらの組合せのいずれかを含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、少
なくとも１つのジスルフィド結合をさらに含む。一部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合
モジュールは、ジスルフィド結合を含み、および／またはＴＣＲＭは、ジスルフィド結合
を含む。一部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ＣＨ１ドメイン中の残基
とＣＬドメインの残基との間のジスルフィド結合を含み、および／またはＴＣＲＭは、第
１の接続ペプチド中の残基と第２の接続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合を含
む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζからなる群か
ら選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすること
が可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進
する。一部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールとＴＣＲＭとの間にはペプチド
リンカーが存在する。一部の実施形態では、標的抗原は細胞表面抗原である。一部の実施
形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水化物および脂質からなる群から選択される
。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾患関連抗原、例えば、腫瘍関連抗原またはウ
イルスがコードする抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、ＣＤ１９、ＲＯ
Ｒ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５ＤまたはＦＣＲＬ５である。一部の実施形態では
、標的抗原は、表面提示されたペプチド／ＭＨＣ複合体である。一部の実施形態では、ペ
プチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコード
する抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む。一部の実施形態では、方法
は、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の最小限の疲弊を生じるまたは疲弊を実質的に生じない
。一部の実施形態では、方法は、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の最小限の最終分化を生じ
るまたは最終分化を実質的に生じない。一部の実施形態では、方法は、ａｂＴＣＲエフェ
クター細胞上のａｂＴＣＲの最小限の内在化を生じるまたは内在化を実質的に生じない。
一部の実施形態では、方法は、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の増加した増殖を生じる。
ば、がんまたはウイルス感染症）を処置する方法であって、個体に、有効量の、ａ）標的
抗原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジュール、およびｂ）少なくとも１つのＴＣ
Ｒ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴＣＲＭを含むａｂＴＣＲ
（例えば、単離されたａｂＴＣＲ）をそれらの表面上に提示するエフェクター細胞（例え
ば、Ｔ細胞またはナチュラルキラー細胞）を含む組成物を投与するステップを含む方法が
提供される。一部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ＶＨ抗体ドメイン、
ＣＨ１抗体ドメイン、ＶＬ抗体ドメインおよびＣＬ抗体ドメインを含む。一部の実施形態
では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または完全合成で
ある。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＴＣＲ、例えば、αβＴＣＲまたはγδＴＣＲ
の膜貫通ドメインを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＴＣＲの接続ペプチドまた
はその断片をさらに含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＴＣＲの細胞外ドメインの
少なくとも１つの部分をさらに含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、少なくとも１
つの細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、少なくとも１つの細胞内ドメイ
ンは、ＴＣＲの細胞内ドメイン由来の配列、共刺激細胞内シグナル伝達配列、エピトープ
タグ、またはそれらの組合せのいずれかを含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、少
なくとも１つのジスルフィド結合をさらに含む。一部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合
モジュールは、ジスルフィド結合を含み、および／またはＴＣＲＭは、ジスルフィド結合
を含む。一部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ＣＨ１ドメイン中の残基
とＣＬドメインの残基との間のジスルフィド結合を含み、および／またはＴＣＲＭは、第
１の接続ペプチド中の残基と第２の接続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合を含
む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζからなる群か
ら選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすること
が可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進
する。一部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールとＴＣＲＭとの間にはペプチド
リンカーが存在する。一部の実施形態では、標的抗原は細胞表面抗原である。一部の実施
形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水化物および脂質からなる群から選択される
。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾患関連抗原、例えば、腫瘍関連抗原またはウ
イルスがコードする抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、ＣＤ１９、ＲＯ
Ｒ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５ＤまたはＦＣＲＬ５である。一部の実施形態では
、標的抗原は、表面提示されたペプチド／ＭＨＣ複合体である。一部の実施形態では、ペ
プチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコード
する抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む。一部の実施形態では、方法
は、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の最小限の疲弊を生じるまたは疲弊を実質的に生じない
。一部の実施形態では、方法は、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の最小限の最終分化を生じ
るまたは最終分化を実質的に生じない。一部の実施形態では、方法は、ａｂＴＣＲエフェ
クター細胞上のａｂＴＣＲの最小限の内在化を生じるまたは内在化を実質的に生じない。
一部の実施形態では、方法は、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の増加した増殖を生じる。
【0338】
一部の実施形態では、それを必要とする個体において標的抗原関連疾患（例えば、がん
またはウイルス感染症）を処置する方法であって、個体に、有効量の、ａ）標的抗原に特
異的に結合するＦｖ様抗原結合モジュール、およびｂ）少なくとも１つのＴＣＲ関連シグ
ナル伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴＣＲＭを含むａｂＴＣＲ（例えば、
単離されたａｂＴＣＲ）をそれらの表面上に提示するエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞
またはナチュラルキラー細胞）を含む組成物を投与するステップを含み、標的抗原がペプ
チド／ＭＨＣ複合体である、方法が提供される。一部の実施形態では、Ｆｖ様抗原結合モ
ジュールは、ＶＨ抗体ドメインとＶＬ抗体ドメインとを含む。一部の実施形態では、ＶＬ
抗体ドメインのＣ末端に融合した第１のペプチドリンカーおよび／またはＶＨ抗体ドメイ
ンのＣ末端に融合した第２のペプチドリンカーが存在する。一部の実施形態では、第１お
よび第２のペプチドリンカーは、互いに結合することが可能である。一部の実施形態では
、第１および／または第２のペプチドリンカーは、免疫グロブリン重鎖および／または軽
鎖定常領域に由来する。一部の実施形態では、第１および／または第２のペプチドリンカ
ーは、ＴＣＲサブユニット定常領域に由来する。例えば、一部の実施形態では、第１およ
び／または第２のペプチドリンカーは、ａ）ＴＣＲαおよびβサブユニット定常ドメイン
；またはｂ）ＴＣＲγおよびδサブユニット定常ドメインに由来する。一部の実施形態で
は、第１および／または第２のペプチドリンカーは、合成である。一部の実施形態では、
Ｆｖ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または完全合成である。一
部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＴＣＲ、例えば、αβＴＣＲまたはγδＴＣＲの膜貫通
ドメインを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＴＣＲ、例えば、αβＴＣＲまたは
γδＴＣＲの接続ペプチドまたはその断片をさらに含む。一部の実施形態では、膜貫通ド
メインおよび接続ペプチドは、αβＴＣＲまたはγδＴＣＲに由来する。一部の実施形態
では、膜貫通ドメインはαβＴＣＲに由来し、接続ペプチドはγδＴＣＲに由来する、ま
たは膜貫通ドメインはγδＴＣＲに由来し、接続ペプチドはαβＴＣＲに由来する。一部
の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＴＣＲの細胞外ドメインの少なくとも１つの部分をさらに
含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＴＣＲの細胞内ドメイン由来の配列を含む少な
くとも１つのＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、Ｔ
ＣＲサブユニットの断片を含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグ
ナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、Ｃ
Ｄ３０またはＣＤ４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧま
たはｍｙｃ）を含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実
施形態では、ａｂＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第１のシグナル
ペプチドおよび／または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプ
チドをさらに含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、少なくとも１つのジスルフィド
結合をさらに含む。一部の実施形態では、第１および／または第２のペプチドリンカーは
、ジスルフィド結合を含み、および／またはＴＣＲＭは、ジスルフィド結合を含む。一部
の実施形態では、ＴＣＲＭは、第１の接続ペプチド中の残基と第２の接続ペプチド中の残
基との間のジスルフィド結合を含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、Ｃ
Ｄ３γεおよびζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達
モジュールをリクルートすることが可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ａｂ
ＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。一部の実施形態では、標的抗原ペプチド／ＭＨＣ
複合体は、疾患関連抗原（例えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原）に由
来するペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複
合体は、ペプチドとＭＨＣタンパク質とを含み、ペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ
１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰ
ＳＡからなる群から選択されるタンパク質に由来する。一部の実施形態では、ＭＨＣタン
パク質は、ＭＨＣクラスＩタンパク質である。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタン
パク質は、ＨＬＡ－Ａである。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２であ
る。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａ０２は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１である。一部の実
施形態では、方法は、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の最小限の疲弊を生じるまたは疲弊を
実質的に生じない。一部の実施形態では、方法は、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の最小限
の最終分化を生じるまたは最終分化を実質的に生じない。一部の実施形態では、方法は、
ａｂＴＣＲエフェクター細胞上のａｂＴＣＲの最小限の内在化を生じるまたは内在化を実
質的に生じない。一部の実施形態では、方法は、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の増加した
増殖を生じる。
またはウイルス感染症）を処置する方法であって、個体に、有効量の、ａ）標的抗原に特
異的に結合するＦｖ様抗原結合モジュール、およびｂ）少なくとも１つのＴＣＲ関連シグ
ナル伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴＣＲＭを含むａｂＴＣＲ（例えば、
単離されたａｂＴＣＲ）をそれらの表面上に提示するエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞
またはナチュラルキラー細胞）を含む組成物を投与するステップを含み、標的抗原がペプ
チド／ＭＨＣ複合体である、方法が提供される。一部の実施形態では、Ｆｖ様抗原結合モ
ジュールは、ＶＨ抗体ドメインとＶＬ抗体ドメインとを含む。一部の実施形態では、ＶＬ
抗体ドメインのＣ末端に融合した第１のペプチドリンカーおよび／またはＶＨ抗体ドメイ
ンのＣ末端に融合した第２のペプチドリンカーが存在する。一部の実施形態では、第１お
よび第２のペプチドリンカーは、互いに結合することが可能である。一部の実施形態では
、第１および／または第２のペプチドリンカーは、免疫グロブリン重鎖および／または軽
鎖定常領域に由来する。一部の実施形態では、第１および／または第２のペプチドリンカ
ーは、ＴＣＲサブユニット定常領域に由来する。例えば、一部の実施形態では、第１およ
び／または第２のペプチドリンカーは、ａ）ＴＣＲαおよびβサブユニット定常ドメイン
；またはｂ）ＴＣＲγおよびδサブユニット定常ドメインに由来する。一部の実施形態で
は、第１および／または第２のペプチドリンカーは、合成である。一部の実施形態では、
Ｆｖ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または完全合成である。一
部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＴＣＲ、例えば、αβＴＣＲまたはγδＴＣＲの膜貫通
ドメインを含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＴＣＲ、例えば、αβＴＣＲまたは
γδＴＣＲの接続ペプチドまたはその断片をさらに含む。一部の実施形態では、膜貫通ド
メインおよび接続ペプチドは、αβＴＣＲまたはγδＴＣＲに由来する。一部の実施形態
では、膜貫通ドメインはαβＴＣＲに由来し、接続ペプチドはγδＴＣＲに由来する、ま
たは膜貫通ドメインはγδＴＣＲに由来し、接続ペプチドはαβＴＣＲに由来する。一部
の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＴＣＲの細胞外ドメインの少なくとも１つの部分をさらに
含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＴＣＲの細胞内ドメイン由来の配列を含む少な
くとも１つのＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、Ｔ
ＣＲサブユニットの断片を含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグ
ナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、Ｃ
Ｄ３０またはＣＤ４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧま
たはｍｙｃ）を含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実
施形態では、ａｂＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第１のシグナル
ペプチドおよび／または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプ
チドをさらに含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、少なくとも１つのジスルフィド
結合をさらに含む。一部の実施形態では、第１および／または第２のペプチドリンカーは
、ジスルフィド結合を含み、および／またはＴＣＲＭは、ジスルフィド結合を含む。一部
の実施形態では、ＴＣＲＭは、第１の接続ペプチド中の残基と第２の接続ペプチド中の残
基との間のジスルフィド結合を含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、Ｃ
Ｄ３γεおよびζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達
モジュールをリクルートすることが可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ａｂ
ＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。一部の実施形態では、標的抗原ペプチド／ＭＨＣ
複合体は、疾患関連抗原（例えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原）に由
来するペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複
合体は、ペプチドとＭＨＣタンパク質とを含み、ペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ
１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰ
ＳＡからなる群から選択されるタンパク質に由来する。一部の実施形態では、ＭＨＣタン
パク質は、ＭＨＣクラスＩタンパク質である。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタン
パク質は、ＨＬＡ－Ａである。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２であ
る。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａ０２は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１である。一部の実
施形態では、方法は、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の最小限の疲弊を生じるまたは疲弊を
実質的に生じない。一部の実施形態では、方法は、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の最小限
の最終分化を生じるまたは最終分化を実質的に生じない。一部の実施形態では、方法は、
ａｂＴＣＲエフェクター細胞上のａｂＴＣＲの最小限の内在化を生じるまたは内在化を実
質的に生じない。一部の実施形態では、方法は、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の増加した
増殖を生じる。
【0339】
一部の実施形態では、それを必要とする個体において標的抗原関連疾患（例えば、がん
またはウイルス感染症）を処置する方法であって、個体に、有効量の、標的抗原を特異的
に認識するａｂＴＣＲをそれらの表面上に提示するエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞ま
たはナチュラルキラー細胞）を含む組成物を投与するステップを含み、ａｂＴＣＲが、ａ
）ＶＨおよびＣＨ１抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲサブユニ
ットの膜貫通ドメインを含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；ならびにｂ
）ＶＬおよびＣＬ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲサブユニッ
トの膜貫通ドメインを含む第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖、を含み、第１
の抗原結合ドメインのＶＨおよびＣＨ１ドメインと第２の抗原結合ドメインのＶＬおよび
ＣＬドメインとが、標的抗原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形成し、
第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュ
ールをリクルートすることが可能なＴＣＲＭを形成する、方法が提供される。一部の実施
形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または完全合
成である。一部の実施形態では、第１のＴＣＲサブユニットはＴＣＲα鎖であり、第２の
ＴＣＲサブユニットはＴＣＲβ鎖である。一部の実施形態では、第１のＴＣＲサブユニッ
トはＴＣＲβ鎖であり、第２のＴＣＲサブユニットはＴＣＲα鎖である。一部の実施形態
では、第１のＴＣＲサブユニットはＴＣＲγ鎖であり、第２のＴＣＲサブユニットはＴＣ
Ｒδ鎖である。一部の実施形態では、第１のＴＣＲサブユニットはＴＣＲδ鎖であり、第
２のＴＣＲサブユニットはＴＣＲγ鎖である。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、
第１のＴＣＲサブユニットの接続ペプチドもしくはその断片をさらに含み、および／また
は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲサブユニットの接続ペプチドもしくはその断片をさら
に含む。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲサブユニットの細胞外ド
メインの一部分をさらに含み、および／または第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲサブユニ
ットの細胞外ドメインの一部分をさらに含む。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、
第１のＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含み、および／または第２のＴＣＲＤは、第２のＴ
ＣＲ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメインは
、第１のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメイン由来の配列を含み、および／または第２の
ＴＣＲ細胞内ドメインは、第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメイン由来の配列を含む
。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第１
のシグナルペプチドおよび／または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第２のシ
グナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γ
εおよびζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュ
ールをリクルートすることが可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ａｂＴＣＲ
－ＣＤ３複合体形成を促進する。一部の実施形態では、第１の抗原結合ドメインと第１の
ＴＣＲＤとの間に第１のペプチドリンカーが、および／または第２の抗原結合ドメインと
第２のＴＣＲＤとの間に第２のペプチドリンカーが存在する。一部の実施形態では、第１
のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とは、例えば、共有結合（例えば、ペプチド結
合または他の化学結合）または非共有結合によって連結される。一部の実施形態では、第
１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とは、ａ）第１のＴＣＲＤの接続ペプチド中
の残基と第２のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合；および／ま
たはｂ）第１の抗原結合ドメイン中のＣＨ１抗体ドメイン中の残基と第２の抗原結合ドメ
イン中のＣＬ抗体ドメイン中の残基との間のジスルフィド結合を介して連結される。一部
の実施形態では、標的抗原は細胞表面抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は
、タンパク質、炭水化物および脂質からなる群から選択される。一部の実施形態では、細
胞表面抗原は、疾患関連抗原、例えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原で
ある。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ
、ＧＰＲＣ５ＤまたはＦＣＲＬ５である。一部の実施形態では、標的抗原は、表面提示さ
れたペプチド／ＭＨＣ複合体である。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、
疾患関連抗原（例えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原）に由来するペプ
チドとＭＨＣタンパク質とを含む。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペ
プチドとＭＨＣタンパク質とを含み、ペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７
、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからな
る群から選択されるタンパク質に由来する。
またはウイルス感染症）を処置する方法であって、個体に、有効量の、標的抗原を特異的
に認識するａｂＴＣＲをそれらの表面上に提示するエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞ま
たはナチュラルキラー細胞）を含む組成物を投与するステップを含み、ａｂＴＣＲが、ａ
）ＶＨおよびＣＨ１抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲサブユニ
ットの膜貫通ドメインを含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；ならびにｂ
）ＶＬおよびＣＬ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲサブユニッ
トの膜貫通ドメインを含む第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖、を含み、第１
の抗原結合ドメインのＶＨおよびＣＨ１ドメインと第２の抗原結合ドメインのＶＬおよび
ＣＬドメインとが、標的抗原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形成し、
第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュ
ールをリクルートすることが可能なＴＣＲＭを形成する、方法が提供される。一部の実施
形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または完全合
成である。一部の実施形態では、第１のＴＣＲサブユニットはＴＣＲα鎖であり、第２の
ＴＣＲサブユニットはＴＣＲβ鎖である。一部の実施形態では、第１のＴＣＲサブユニッ
トはＴＣＲβ鎖であり、第２のＴＣＲサブユニットはＴＣＲα鎖である。一部の実施形態
では、第１のＴＣＲサブユニットはＴＣＲγ鎖であり、第２のＴＣＲサブユニットはＴＣ
Ｒδ鎖である。一部の実施形態では、第１のＴＣＲサブユニットはＴＣＲδ鎖であり、第
２のＴＣＲサブユニットはＴＣＲγ鎖である。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、
第１のＴＣＲサブユニットの接続ペプチドもしくはその断片をさらに含み、および／また
は第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲサブユニットの接続ペプチドもしくはその断片をさら
に含む。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲサブユニットの細胞外ド
メインの一部分をさらに含み、および／または第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲサブユニ
ットの細胞外ドメインの一部分をさらに含む。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、
第１のＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含み、および／または第２のＴＣＲＤは、第２のＴ
ＣＲ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメインは
、第１のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメイン由来の配列を含み、および／または第２の
ＴＣＲ細胞内ドメインは、第２のＴＣＲサブユニットの細胞内ドメイン由来の配列を含む
。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第１
のシグナルペプチドおよび／または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第２のシ
グナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γ
εおよびζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュ
ールをリクルートすることが可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ａｂＴＣＲ
－ＣＤ３複合体形成を促進する。一部の実施形態では、第１の抗原結合ドメインと第１の
ＴＣＲＤとの間に第１のペプチドリンカーが、および／または第２の抗原結合ドメインと
第２のＴＣＲＤとの間に第２のペプチドリンカーが存在する。一部の実施形態では、第１
のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とは、例えば、共有結合（例えば、ペプチド結
合または他の化学結合）または非共有結合によって連結される。一部の実施形態では、第
１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチド鎖とは、ａ）第１のＴＣＲＤの接続ペプチド中
の残基と第２のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合；および／ま
たはｂ）第１の抗原結合ドメイン中のＣＨ１抗体ドメイン中の残基と第２の抗原結合ドメ
イン中のＣＬ抗体ドメイン中の残基との間のジスルフィド結合を介して連結される。一部
の実施形態では、標的抗原は細胞表面抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は
、タンパク質、炭水化物および脂質からなる群から選択される。一部の実施形態では、細
胞表面抗原は、疾患関連抗原、例えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原で
ある。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ
、ＧＰＲＣ５ＤまたはＦＣＲＬ５である。一部の実施形態では、標的抗原は、表面提示さ
れたペプチド／ＭＨＣ複合体である。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、
疾患関連抗原（例えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原）に由来するペプ
チドとＭＨＣタンパク質とを含む。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペ
プチドとＭＨＣタンパク質とを含み、ペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７
、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからな
る群から選択されるタンパク質に由来する。
【0340】
一部の実施形態では、それを必要とする個体において標的抗原関連疾患（例えば、がん
またはウイルス感染症）を処置する方法であって、個体に、有効量の、標的抗原を特異的
に認識するａｂＴＣＲをそれらの表面上に提示するエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞ま
たはナチュラルキラー細胞）を含む組成物を投与するステップを含み、ａｂＴＣＲが、ａ
）ＶＨおよびＣＨ１抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインとＴＣＲα鎖の膜貫通ド
メインを含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；ならびにｂ）ＶＬおよびＣ
Ｌ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインとＴＣＲβ鎖の膜貫通ドメインを含む第２
のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖、を含み、第１の抗原結合ドメインのＶＨおよ
びＣＨ１ドメインと第２の抗原結合ドメインのＶＬおよびＣＬドメインとが、細胞表面抗
原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形成し、第１のＴＣＲＤと第２のＴ
ＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすること
が可能なＴＣＲＭを形成する、方法が提供される。一部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結
合モジュールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または完全合成である。一部の実施形態
では、第１のＴＣＲＤは、ＴＣＲα鎖の接続ペプチドもしくはその断片をさらに含み、お
よび／または第２のＴＣＲＤは、ＴＣＲβ鎖の接続ペプチドもしくはその断片をさらに含
む。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、ＴＣＲα鎖の細胞外ドメインの一部分をさ
らに含み、および／または第２のＴＣＲＤは、ＴＣＲβ鎖の細胞外ドメインの一部分をさ
らに含む。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインをさら
に含み、および／または第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含む。
一部の実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメインは、ＴＣＲα鎖の細胞内ドメイン由来
の配列を含み、および／または第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、ＴＣＲβ鎖の細胞内ドメ
イン由来の配列を含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達
配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０ま
たはＣＤ４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙ
ｃ）を含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態で
は、ａｂＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチド
および／または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさ
らに含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζからな
る群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートす
ることが可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成
を促進する。一部の実施形態では、第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲＤとの間に第
１のペプチドリンカーが、および／または第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲＤとの
間に第２のペプチドリンカーが存在する。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と
第２のポリペプチド鎖とは、例えば、共有結合（例えば、ペプチド結合または他の化学結
合）または非共有結合によって連結される。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖
と第２のポリペプチド鎖とは、ａ）第１のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基と第２のＴＣ
ＲＤの接続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合；および／またはｂ）第１の抗原
結合ドメイン中のＣＨ１抗体ドメイン中の残基と第２の抗原結合ドメイン中のＣＬ抗体ド
メイン中の残基との間のジスルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、標
的抗原は細胞表面抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水
化物および脂質からなる群から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾患
関連抗原、例えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部の実施形
態では、細胞表面抗原は、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄまた
はＦＣＲＬ５である。一部の実施形態では、標的抗原は、表面提示されたペプチド／ＭＨ
Ｃ複合体である。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例え
ば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパ
ク質とを含む。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタン
パク質とを含み、ペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１
、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択される
タンパク質に由来する。一部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタン
パク質である。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。
一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬ
Ａ－Ａ０２は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１である。一部の実施形態では、エフェクター細胞
は、γδＴ細胞である。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲαおよび／ま
たはβ鎖の発現を遮断するまたは減少させるように改変されているαβＴ細胞である。一
部の実施形態では、エフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラ
ルキラーＴ細胞およびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
またはウイルス感染症）を処置する方法であって、個体に、有効量の、標的抗原を特異的
に認識するａｂＴＣＲをそれらの表面上に提示するエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞ま
たはナチュラルキラー細胞）を含む組成物を投与するステップを含み、ａｂＴＣＲが、ａ
）ＶＨおよびＣＨ１抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインとＴＣＲα鎖の膜貫通ド
メインを含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；ならびにｂ）ＶＬおよびＣ
Ｌ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインとＴＣＲβ鎖の膜貫通ドメインを含む第２
のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖、を含み、第１の抗原結合ドメインのＶＨおよ
びＣＨ１ドメインと第２の抗原結合ドメインのＶＬおよびＣＬドメインとが、細胞表面抗
原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形成し、第１のＴＣＲＤと第２のＴ
ＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすること
が可能なＴＣＲＭを形成する、方法が提供される。一部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結
合モジュールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または完全合成である。一部の実施形態
では、第１のＴＣＲＤは、ＴＣＲα鎖の接続ペプチドもしくはその断片をさらに含み、お
よび／または第２のＴＣＲＤは、ＴＣＲβ鎖の接続ペプチドもしくはその断片をさらに含
む。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、ＴＣＲα鎖の細胞外ドメインの一部分をさ
らに含み、および／または第２のＴＣＲＤは、ＴＣＲβ鎖の細胞外ドメインの一部分をさ
らに含む。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインをさら
に含み、および／または第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含む。
一部の実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメインは、ＴＣＲα鎖の細胞内ドメイン由来
の配列を含み、および／または第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、ＴＣＲβ鎖の細胞内ドメ
イン由来の配列を含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達
配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０ま
たはＣＤ４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙ
ｃ）を含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態で
は、ａｂＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチド
および／または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさ
らに含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζからな
る群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートす
ることが可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成
を促進する。一部の実施形態では、第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲＤとの間に第
１のペプチドリンカーが、および／または第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲＤとの
間に第２のペプチドリンカーが存在する。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と
第２のポリペプチド鎖とは、例えば、共有結合（例えば、ペプチド結合または他の化学結
合）または非共有結合によって連結される。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖
と第２のポリペプチド鎖とは、ａ）第１のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基と第２のＴＣ
ＲＤの接続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合；および／またはｂ）第１の抗原
結合ドメイン中のＣＨ１抗体ドメイン中の残基と第２の抗原結合ドメイン中のＣＬ抗体ド
メイン中の残基との間のジスルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、標
的抗原は細胞表面抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水
化物および脂質からなる群から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾患
関連抗原、例えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部の実施形
態では、細胞表面抗原は、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄまた
はＦＣＲＬ５である。一部の実施形態では、標的抗原は、表面提示されたペプチド／ＭＨ
Ｃ複合体である。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例え
ば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパ
ク質とを含む。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタン
パク質とを含み、ペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１
、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択される
タンパク質に由来する。一部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタン
パク質である。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。
一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬ
Ａ－Ａ０２は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１である。一部の実施形態では、エフェクター細胞
は、γδＴ細胞である。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲαおよび／ま
たはβ鎖の発現を遮断するまたは減少させるように改変されているαβＴ細胞である。一
部の実施形態では、エフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラ
ルキラーＴ細胞およびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
【0341】
一部の実施形態では、それを必要とする個体において標的抗原関連疾患（例えば、がん
またはウイルス感染症）を処置する方法であって、個体に、有効量の、標的抗原を特異的
に認識するａｂＴＣＲをそれらの表面上に提示するエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞ま
たはナチュラルキラー細胞）を含む組成物を投与するステップを含み、ａｂＴＣＲが、ａ
）ＶＨおよびＣＨ１抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインとＴＣＲβ鎖の膜貫通ド
メインを含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；ならびにｂ）ＶＬおよびＣ
Ｌ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインとＴＣＲα鎖の膜貫通ドメインを含む第２
のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖、を含み、第１の抗原結合ドメインのＶＨおよ
びＣＨ１ドメインと第２の抗原結合ドメインのＶＬおよびＣＬドメインとが、細胞表面抗
原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形成し、第１のＴＣＲＤと第２のＴ
ＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすること
が可能なＴＣＲＭを形成する、方法が提供される。一部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結
合モジュールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または完全合成である。一部の実施形態
では、第１のＴＣＲＤは、ＴＣＲβ鎖の接続ペプチドもしくはその断片をさらに含み、お
よび／または第２のＴＣＲＤは、ＴＣＲα鎖の接続ペプチドもしくはその断片をさらに含
む。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、ＴＣＲβ鎖の細胞外ドメインの一部分をさ
らに含み、および／または第２のＴＣＲＤは、ＴＣＲα鎖の細胞外ドメインの一部分をさ
らに含む。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインをさら
に含み、および／または第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含む。
一部の実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメインは、ＴＣＲβ鎖の細胞内ドメイン由来
の配列を含み、および／または第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、ＴＣＲα鎖の細胞内ドメ
イン由来の配列を含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達
配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０ま
たはＣＤ４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙ
ｃ）を含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態で
は、ａｂＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチド
および／または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさ
らに含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζからな
る群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートす
ることが可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成
を促進する。一部の実施形態では、第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲＤとの間に第
１のペプチドリンカーが、および／または第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲＤとの
間に第２のペプチドリンカーが存在する。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と
第２のポリペプチド鎖とは、例えば、共有結合（例えば、ペプチド結合または他の化学結
合）または非共有結合によって連結される。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖
と第２のポリペプチド鎖とは、ａ）第１のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基と第２のＴＣ
ＲＤの接続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合；および／またはｂ）第１の抗原
結合ドメイン中のＣＨ１抗体ドメイン中の残基と第２の抗原結合ドメイン中のＣＬ抗体ド
メイン中の残基との間のジスルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、標
的抗原は細胞表面抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水
化物および脂質からなる群から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾患
関連抗原、例えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部の実施形
態では、細胞表面抗原は、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄまた
はＦＣＲＬ５である。一部の実施形態では、標的抗原は、表面提示されたペプチド／ＭＨ
Ｃ複合体である。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例え
ば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパ
ク質とを含む。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタン
パク質とを含み、ペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１
、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択される
タンパク質に由来する。一部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタン
パク質である。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。
一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬ
Ａ－Ａ０２は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１である。一部の実施形態では、エフェクター細胞
は、γδＴ細胞である。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲαおよび／ま
たはβ鎖の発現を遮断するまたは減少させるように改変されているαβＴ細胞である。一
部の実施形態では、エフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラ
ルキラーＴ細胞およびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
またはウイルス感染症）を処置する方法であって、個体に、有効量の、標的抗原を特異的
に認識するａｂＴＣＲをそれらの表面上に提示するエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞ま
たはナチュラルキラー細胞）を含む組成物を投与するステップを含み、ａｂＴＣＲが、ａ
）ＶＨおよびＣＨ１抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインとＴＣＲβ鎖の膜貫通ド
メインを含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；ならびにｂ）ＶＬおよびＣ
Ｌ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインとＴＣＲα鎖の膜貫通ドメインを含む第２
のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖、を含み、第１の抗原結合ドメインのＶＨおよ
びＣＨ１ドメインと第２の抗原結合ドメインのＶＬおよびＣＬドメインとが、細胞表面抗
原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形成し、第１のＴＣＲＤと第２のＴ
ＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすること
が可能なＴＣＲＭを形成する、方法が提供される。一部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結
合モジュールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または完全合成である。一部の実施形態
では、第１のＴＣＲＤは、ＴＣＲβ鎖の接続ペプチドもしくはその断片をさらに含み、お
よび／または第２のＴＣＲＤは、ＴＣＲα鎖の接続ペプチドもしくはその断片をさらに含
む。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、ＴＣＲβ鎖の細胞外ドメインの一部分をさ
らに含み、および／または第２のＴＣＲＤは、ＴＣＲα鎖の細胞外ドメインの一部分をさ
らに含む。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインをさら
に含み、および／または第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含む。
一部の実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメインは、ＴＣＲβ鎖の細胞内ドメイン由来
の配列を含み、および／または第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、ＴＣＲα鎖の細胞内ドメ
イン由来の配列を含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達
配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０ま
たはＣＤ４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙ
ｃ）を含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態で
は、ａｂＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチド
および／または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさ
らに含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζからな
る群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートす
ることが可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成
を促進する。一部の実施形態では、第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲＤとの間に第
１のペプチドリンカーが、および／または第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲＤとの
間に第２のペプチドリンカーが存在する。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と
第２のポリペプチド鎖とは、例えば、共有結合（例えば、ペプチド結合または他の化学結
合）または非共有結合によって連結される。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖
と第２のポリペプチド鎖とは、ａ）第１のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基と第２のＴＣ
ＲＤの接続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合；および／またはｂ）第１の抗原
結合ドメイン中のＣＨ１抗体ドメイン中の残基と第２の抗原結合ドメイン中のＣＬ抗体ド
メイン中の残基との間のジスルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、標
的抗原は細胞表面抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水
化物および脂質からなる群から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾患
関連抗原、例えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部の実施形
態では、細胞表面抗原は、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄまた
はＦＣＲＬ５である。一部の実施形態では、標的抗原は、表面提示されたペプチド／ＭＨ
Ｃ複合体である。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例え
ば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパ
ク質とを含む。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタン
パク質とを含み、ペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１
、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択される
タンパク質に由来する。一部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタン
パク質である。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。
一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬ
Ａ－Ａ０２は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１である。一部の実施形態では、エフェクター細胞
は、γδＴ細胞である。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲαおよび／ま
たはβ鎖の発現を遮断するまたは減少させるように改変されているαβＴ細胞である。一
部の実施形態では、エフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラ
ルキラーＴ細胞およびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
【0342】
一部の実施形態では、それを必要とする個体において標的抗原関連疾患（例えば、がん
またはウイルス感染症）を処置する方法であって、個体に、有効量の、標的抗原を特異的
に認識するａｂＴＣＲをそれらの表面上に提示するエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞ま
たはナチュラルキラー細胞）を含む組成物を投与するステップを含み、ａｂＴＣＲが、ａ
）ＶＨおよびＣＨ１抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインとＴＣＲγ鎖の膜貫通ド
メインを含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；ならびにｂ）ＶＬおよびＣ
Ｌ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインとＴＣＲδ鎖の膜貫通ドメインを含む第２
のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖、を含み、第１の抗原結合ドメインのＶＨおよ
びＣＨ１ドメインと第２の抗原結合ドメインのＶＬおよびＣＬドメインとが、細胞表面抗
原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形成し、第１のＴＣＲＤと第２のＴ
ＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすること
が可能なＴＣＲＭを形成する、方法が提供される。一部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結
合モジュールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または完全合成である。一部の実施形態
では、第１のＴＣＲＤは、ＴＣＲγ鎖の接続ペプチドもしくはその断片をさらに含み、お
よび／または第２のＴＣＲＤは、ＴＣＲδ鎖の接続ペプチドもしくはその断片をさらに含
む。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、ＴＣＲγ鎖の細胞外ドメインの一部分をさ
らに含み、および／または第２のＴＣＲＤは、ＴＣＲδ鎖の細胞外ドメインの一部分をさ
らに含む。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインをさら
に含み、および／または第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含む。
一部の実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメインは、ＴＣＲγ鎖の細胞内ドメイン由来
の配列を含み、および／または第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、ＴＣＲδ鎖の細胞内ドメ
イン由来の配列を含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達
配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０ま
たはＣＤ４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙ
ｃ）を含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態で
は、ａｂＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチド
および／または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさ
らに含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζからな
る群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートす
ることが可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成
を促進する。一部の実施形態では、第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲＤとの間に第
１のペプチドリンカーが、および／または第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲＤとの
間に第２のペプチドリンカーが存在する。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と
第２のポリペプチド鎖とは、例えば、共有結合（例えば、ペプチド結合または他の化学結
合）または非共有結合によって連結される。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖
と第２のポリペプチド鎖とは、ａ）第１のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基と第２のＴＣ
ＲＤの接続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合；および／またはｂ）第１の抗原
結合ドメイン中のＣＨ１抗体ドメイン中の残基と第２の抗原結合ドメイン中のＣＬ抗体ド
メイン中の残基との間のジスルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、標
的抗原は細胞表面抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水
化物および脂質からなる群から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾患
関連抗原、例えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部の実施形
態では、細胞表面抗原は、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄまた
はＦＣＲＬ５である。一部の実施形態では、標的抗原は、表面提示されたペプチド／ＭＨ
Ｃ複合体である。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例え
ば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパ
ク質とを含む。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタン
パク質とを含み、ペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１
、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択される
タンパク質に由来する。一部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタン
パク質である。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。
一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬ
Ａ－Ａ０２は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１である。一部の実施形態では、エフェクター細胞
は、αβＴ細胞である。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／ま
たはδ鎖の発現を遮断するまたは減少させるように改変されているγδＴ細胞である。一
部の実施形態では、エフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラ
ルキラーＴ細胞およびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
またはウイルス感染症）を処置する方法であって、個体に、有効量の、標的抗原を特異的
に認識するａｂＴＣＲをそれらの表面上に提示するエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞ま
たはナチュラルキラー細胞）を含む組成物を投与するステップを含み、ａｂＴＣＲが、ａ
）ＶＨおよびＣＨ１抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインとＴＣＲγ鎖の膜貫通ド
メインを含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；ならびにｂ）ＶＬおよびＣ
Ｌ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインとＴＣＲδ鎖の膜貫通ドメインを含む第２
のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖、を含み、第１の抗原結合ドメインのＶＨおよ
びＣＨ１ドメインと第２の抗原結合ドメインのＶＬおよびＣＬドメインとが、細胞表面抗
原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形成し、第１のＴＣＲＤと第２のＴ
ＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすること
が可能なＴＣＲＭを形成する、方法が提供される。一部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結
合モジュールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または完全合成である。一部の実施形態
では、第１のＴＣＲＤは、ＴＣＲγ鎖の接続ペプチドもしくはその断片をさらに含み、お
よび／または第２のＴＣＲＤは、ＴＣＲδ鎖の接続ペプチドもしくはその断片をさらに含
む。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、ＴＣＲγ鎖の細胞外ドメインの一部分をさ
らに含み、および／または第２のＴＣＲＤは、ＴＣＲδ鎖の細胞外ドメインの一部分をさ
らに含む。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインをさら
に含み、および／または第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含む。
一部の実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメインは、ＴＣＲγ鎖の細胞内ドメイン由来
の配列を含み、および／または第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、ＴＣＲδ鎖の細胞内ドメ
イン由来の配列を含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達
配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０ま
たはＣＤ４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙ
ｃ）を含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態で
は、ａｂＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチド
および／または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさ
らに含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζからな
る群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートす
ることが可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成
を促進する。一部の実施形態では、第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲＤとの間に第
１のペプチドリンカーが、および／または第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲＤとの
間に第２のペプチドリンカーが存在する。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と
第２のポリペプチド鎖とは、例えば、共有結合（例えば、ペプチド結合または他の化学結
合）または非共有結合によって連結される。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖
と第２のポリペプチド鎖とは、ａ）第１のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基と第２のＴＣ
ＲＤの接続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合；および／またはｂ）第１の抗原
結合ドメイン中のＣＨ１抗体ドメイン中の残基と第２の抗原結合ドメイン中のＣＬ抗体ド
メイン中の残基との間のジスルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、標
的抗原は細胞表面抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水
化物および脂質からなる群から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾患
関連抗原、例えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部の実施形
態では、細胞表面抗原は、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄまた
はＦＣＲＬ５である。一部の実施形態では、標的抗原は、表面提示されたペプチド／ＭＨ
Ｃ複合体である。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例え
ば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパ
ク質とを含む。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタン
パク質とを含み、ペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１
、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択される
タンパク質に由来する。一部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタン
パク質である。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。
一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬ
Ａ－Ａ０２は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１である。一部の実施形態では、エフェクター細胞
は、αβＴ細胞である。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／ま
たはδ鎖の発現を遮断するまたは減少させるように改変されているγδＴ細胞である。一
部の実施形態では、エフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラ
ルキラーＴ細胞およびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
【0343】
一部の実施形態では、それを必要とする個体において標的抗原関連疾患（例えば、がん
またはウイルス感染症）を処置する方法であって、個体に、有効量の、標的抗原を特異的
に認識するａｂＴＣＲをそれらの表面上に提示するエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞ま
たはナチュラルキラー細胞）を含む組成物を投与するステップを含み、ａｂＴＣＲが、ａ
）ＶＨおよびＣＨ１抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインとＴＣＲδ鎖の膜貫通ド
メインを含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；ならびにｂ）ＶＬおよびＣ
Ｌ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインとＴＣＲγ鎖の膜貫通ドメインを含む第２
のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖、を含み、第１の抗原結合ドメインのＶＨおよ
びＣＨ１ドメインと第２の抗原結合ドメインのＶＬおよびＣＬドメインとが、細胞表面抗
原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形成し、第１のＴＣＲＤと第２のＴ
ＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすること
が可能なＴＣＲＭを形成する、方法が提供される。一部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結
合モジュールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または完全合成である。一部の実施形態
では、第１のＴＣＲＤは、ＴＣＲδ鎖の接続ペプチドもしくはその断片をさらに含み、お
よび／または第２のＴＣＲＤは、ＴＣＲγ鎖の接続ペプチドもしくはその断片をさらに含
む。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、ＴＣＲδ鎖の細胞外ドメインの一部分をさ
らに含み、および／または第２のＴＣＲＤは、ＴＣＲγ鎖の細胞外ドメインの一部分をさ
らに含む。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインをさら
に含み、および／または第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含む。
一部の実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメインは、ＴＣＲδ鎖の細胞内ドメイン由来
の配列を含み、および／または第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、ＴＣＲγ鎖の細胞内ドメ
イン由来の配列を含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達
配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０ま
たはＣＤ４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙ
ｃ）を含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態で
は、ａｂＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチド
および／または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさ
らに含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζからな
る群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートす
ることが可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成
を促進する。一部の実施形態では、第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲＤとの間に第
１のペプチドリンカーが、および／または第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲＤとの
間に第２のペプチドリンカーが存在する。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と
第２のポリペプチド鎖とは、例えば、共有結合（例えば、ペプチド結合または他の化学結
合）または非共有結合によって連結される。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖
と第２のポリペプチド鎖とは、ａ）第１のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基と第２のＴＣ
ＲＤの接続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合；および／またはｂ）第１の抗原
結合ドメイン中のＣＨ１抗体ドメイン中の残基と第２の抗原結合ドメイン中のＣＬ抗体ド
メイン中の残基との間のジスルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、標
的抗原は細胞表面抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水
化物および脂質からなる群から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾患
関連抗原、例えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部の実施形
態では、細胞表面抗原は、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄまた
はＦＣＲＬ５である。一部の実施形態では、標的抗原は、表面提示されたペプチド／ＭＨ
Ｃ複合体である。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例え
ば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパ
ク質とを含む。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタン
パク質とを含み、ペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１
、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択される
タンパク質に由来する。一部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタン
パク質である。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。
一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬ
Ａ－Ａ０２は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１である。一部の実施形態では、エフェクター細胞
は、αβＴ細胞である。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／ま
たはδ鎖の発現を遮断するまたは減少させるように改変されているγδＴ細胞である。一
部の実施形態では、エフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラ
ルキラーＴ細胞およびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
またはウイルス感染症）を処置する方法であって、個体に、有効量の、標的抗原を特異的
に認識するａｂＴＣＲをそれらの表面上に提示するエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞ま
たはナチュラルキラー細胞）を含む組成物を投与するステップを含み、ａｂＴＣＲが、ａ
）ＶＨおよびＣＨ１抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインとＴＣＲδ鎖の膜貫通ド
メインを含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；ならびにｂ）ＶＬおよびＣ
Ｌ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインとＴＣＲγ鎖の膜貫通ドメインを含む第２
のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖、を含み、第１の抗原結合ドメインのＶＨおよ
びＣＨ１ドメインと第２の抗原結合ドメインのＶＬおよびＣＬドメインとが、細胞表面抗
原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形成し、第１のＴＣＲＤと第２のＴ
ＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすること
が可能なＴＣＲＭを形成する、方法が提供される。一部の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結
合モジュールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または完全合成である。一部の実施形態
では、第１のＴＣＲＤは、ＴＣＲδ鎖の接続ペプチドもしくはその断片をさらに含み、お
よび／または第２のＴＣＲＤは、ＴＣＲγ鎖の接続ペプチドもしくはその断片をさらに含
む。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、ＴＣＲδ鎖の細胞外ドメインの一部分をさ
らに含み、および／または第２のＴＣＲＤは、ＴＣＲγ鎖の細胞外ドメインの一部分をさ
らに含む。一部の実施形態では、第１のＴＣＲＤは、第１のＴＣＲ細胞内ドメインをさら
に含み、および／または第２のＴＣＲＤは、第２のＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含む。
一部の実施形態では、第１のＴＣＲ細胞内ドメインは、ＴＣＲδ鎖の細胞内ドメイン由来
の配列を含み、および／または第２のＴＣＲ細胞内ドメインは、ＴＣＲγ鎖の細胞内ドメ
イン由来の配列を含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達
配列（例えば、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０ま
たはＣＤ４０由来）および／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙ
ｃ）を含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態で
は、ａｂＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチド
および／または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさ
らに含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζからな
る群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートす
ることが可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成
を促進する。一部の実施形態では、第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲＤとの間に第
１のペプチドリンカーが、および／または第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲＤとの
間に第２のペプチドリンカーが存在する。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖と
第２のポリペプチド鎖とは、例えば、共有結合（例えば、ペプチド結合または他の化学結
合）または非共有結合によって連結される。一部の実施形態では、第１のポリペプチド鎖
と第２のポリペプチド鎖とは、ａ）第１のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基と第２のＴＣ
ＲＤの接続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合；および／またはｂ）第１の抗原
結合ドメイン中のＣＨ１抗体ドメイン中の残基と第２の抗原結合ドメイン中のＣＬ抗体ド
メイン中の残基との間のジスルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、標
的抗原は細胞表面抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水
化物および脂質からなる群から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾患
関連抗原、例えば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部の実施形
態では、細胞表面抗原は、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄまた
はＦＣＲＬ５である。一部の実施形態では、標的抗原は、表面提示されたペプチド／ＭＨ
Ｃ複合体である。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例え
ば、腫瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパ
ク質とを含む。一部の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタン
パク質とを含み、ペプチドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１
、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択される
タンパク質に由来する。一部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタン
パク質である。一部の実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。
一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬ
Ａ－Ａ０２は、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１である。一部の実施形態では、エフェクター細胞
は、αβＴ細胞である。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／ま
たはδ鎖の発現を遮断するまたは減少させるように改変されているγδＴ細胞である。一
部の実施形態では、エフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラ
ルキラーＴ細胞およびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
【0344】
一部の実施形態では、それを必要とする個体において標的抗原関連疾患（例えば、がん
またはウイルス感染症）を処置する方法であって、個体に、有効量の、標的抗原を特異的
に認識するａｂＴＣＲをそれらの表面上に提示するエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞ま
たはナチュラルキラー細胞）を含む組成物を投与するステップを含み、ａｂＴＣＲが、ａ
）アミノ末端からカルボキシ末端の順に、第１の抗原結合ドメインと配列番号１５のアミ
ノ酸配列を含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；およびｂ）アミノ末端か
らカルボキシ末端の順に、第２の抗原結合ドメインと配列番号１６のアミノ酸配列を含む
第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖、を含み；第１の抗原結合ドメインと第２
の抗原結合ドメインとが、標的抗原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形
成し、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達
モジュールをリクルートすることが可能なＴＣＲＭを形成する、方法が提供される。一部
の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または
完全合成である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、ａ）配列番号７０もしくは７１の
アミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）少なくとも１つのＴ細胞共刺激シグナル伝
達配列；および／またはｂ）配列番号５０～５２のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（
例えば、それからなる）エピトープタグを含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメイ
ンをさらに含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ
末端側に、第１のシグナルペプチドおよび／または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端
側に、第２のシグナルペプチドをさらに含み、第１および／または第２のシグナルペプチ
ドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δ
ε、ＣＤ３γεおよびζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナ
ル伝達モジュールをリクルートすることが可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは
、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。一部の実施形態では、第１のポリペプチド
鎖と第２のポリペプチド鎖とは、ａ）第１のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基と第２のＴ
ＣＲＤの接続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合；および／またはｂ）Ｆａｂ様
抗原結合モジュール中のＣＨ１抗体ドメイン中の残基とＣＬ抗体ドメイン中の残基との間
のジスルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、標的抗原は細胞表面抗原
である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水化物および脂質からな
る群から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾患関連抗原、例えば、腫
瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原
は、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５ＤまたはＦＣＲＬ５である。
一部の実施形態では、標的抗原は、表面提示されたペプチド／ＭＨＣ複合体である。一部
の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例えば、腫瘍関連抗原また
はウイルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む。一部の
実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタンパク質とを含み、ペプ
チドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ
－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択されるタンパク質に由来する
。一部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタンパク質である。一部の
実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。一部の実施形態では、
ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａ０２は、ＨＬＡ
－Ａ＊０２：０１である。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、γδＴ細胞である
。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲαおよび／またはβ鎖の発現を遮断
するまたは減少させるように改変されているαβＴ細胞である。一部の実施形態では、エ
フェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞および
サプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
またはウイルス感染症）を処置する方法であって、個体に、有効量の、標的抗原を特異的
に認識するａｂＴＣＲをそれらの表面上に提示するエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞ま
たはナチュラルキラー細胞）を含む組成物を投与するステップを含み、ａｂＴＣＲが、ａ
）アミノ末端からカルボキシ末端の順に、第１の抗原結合ドメインと配列番号１５のアミ
ノ酸配列を含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；およびｂ）アミノ末端か
らカルボキシ末端の順に、第２の抗原結合ドメインと配列番号１６のアミノ酸配列を含む
第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖、を含み；第１の抗原結合ドメインと第２
の抗原結合ドメインとが、標的抗原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形
成し、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達
モジュールをリクルートすることが可能なＴＣＲＭを形成する、方法が提供される。一部
の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または
完全合成である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、ａ）配列番号７０もしくは７１の
アミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）少なくとも１つのＴ細胞共刺激シグナル伝
達配列；および／またはｂ）配列番号５０～５２のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（
例えば、それからなる）エピトープタグを含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメイ
ンをさらに含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ
末端側に、第１のシグナルペプチドおよび／または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端
側に、第２のシグナルペプチドをさらに含み、第１および／または第２のシグナルペプチ
ドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δ
ε、ＣＤ３γεおよびζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナ
ル伝達モジュールをリクルートすることが可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは
、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。一部の実施形態では、第１のポリペプチド
鎖と第２のポリペプチド鎖とは、ａ）第１のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基と第２のＴ
ＣＲＤの接続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合；および／またはｂ）Ｆａｂ様
抗原結合モジュール中のＣＨ１抗体ドメイン中の残基とＣＬ抗体ドメイン中の残基との間
のジスルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、標的抗原は細胞表面抗原
である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水化物および脂質からな
る群から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾患関連抗原、例えば、腫
瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原
は、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５ＤまたはＦＣＲＬ５である。
一部の実施形態では、標的抗原は、表面提示されたペプチド／ＭＨＣ複合体である。一部
の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例えば、腫瘍関連抗原また
はウイルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む。一部の
実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタンパク質とを含み、ペプ
チドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ
－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択されるタンパク質に由来する
。一部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタンパク質である。一部の
実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。一部の実施形態では、
ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａ０２は、ＨＬＡ
－Ａ＊０２：０１である。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、γδＴ細胞である
。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲαおよび／またはβ鎖の発現を遮断
するまたは減少させるように改変されているαβＴ細胞である。一部の実施形態では、エ
フェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞および
サプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
【0345】
一部の実施形態では、それを必要とする個体において標的抗原関連疾患（例えば、がん
またはウイルス感染症）を処置する方法であって、個体に、有効量の、標的抗原を特異的
に認識するａｂＴＣＲをそれらの表面上に提示するエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞ま
たはナチュラルキラー細胞）を含む組成物を投与するステップを含み、ａｂＴＣＲが、ａ
）アミノ末端からカルボキシ末端の順に、第１の抗原結合ドメインと配列番号１７のアミ
ノ酸配列を含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；およびｂ）アミノ末端か
らカルボキシ末端の順に、第２の抗原結合ドメインと配列番号１８のアミノ酸配列を含む
第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖、を含み；第１の抗原結合ドメインと第２
の抗原結合ドメインとが、標的抗原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形
成し、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達
モジュールをリクルートすることが可能なＴＣＲＭを形成する、方法が提供される。一部
の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または
完全合成である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、ａ）配列番号７０もしくは７１の
アミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）少なくとも１つのＴ細胞共刺激シグナル伝
達配列；および／またはｂ）配列番号５０～５２のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（
例えば、それからなる）エピトープタグを含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメイ
ンをさらに含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ
末端側に、第１のシグナルペプチドおよび／または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端
側に、第２のシグナルペプチドをさらに含み、第１および／または第２のシグナルペプチ
ドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δ
ε、ＣＤ３γεおよびζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナ
ル伝達モジュールをリクルートすることが可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは
、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。一部の実施形態では、第１のポリペプチド
鎖と第２のポリペプチド鎖とは、ａ）第１のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基と第２のＴ
ＣＲＤの接続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合；および／またはｂ）Ｆａｂ様
抗原結合モジュール中のＣＨ１抗体ドメイン中の残基とＣＬ抗体ドメイン中の残基との間
のジスルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、標的抗原は細胞表面抗原
である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水化物および脂質からな
る群から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾患関連抗原、例えば、腫
瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原
は、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５ＤまたはＦＣＲＬ５である。
一部の実施形態では、標的抗原は、表面提示されたペプチド／ＭＨＣ複合体である。一部
の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例えば、腫瘍関連抗原また
はウイルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む。一部の
実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタンパク質とを含み、ペプ
チドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ
－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択されるタンパク質に由来する
。一部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタンパク質である。一部の
実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。一部の実施形態では、
ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａ０２は、ＨＬＡ
－Ａ＊０２：０１である。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、γδＴ細胞である
。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲαおよび／またはβ鎖の発現を遮断
するまたは減少させるように改変されているαβＴ細胞である。一部の実施形態では、エ
フェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞および
サプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
またはウイルス感染症）を処置する方法であって、個体に、有効量の、標的抗原を特異的
に認識するａｂＴＣＲをそれらの表面上に提示するエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞ま
たはナチュラルキラー細胞）を含む組成物を投与するステップを含み、ａｂＴＣＲが、ａ
）アミノ末端からカルボキシ末端の順に、第１の抗原結合ドメインと配列番号１７のアミ
ノ酸配列を含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；およびｂ）アミノ末端か
らカルボキシ末端の順に、第２の抗原結合ドメインと配列番号１８のアミノ酸配列を含む
第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖、を含み；第１の抗原結合ドメインと第２
の抗原結合ドメインとが、標的抗原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形
成し、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達
モジュールをリクルートすることが可能なＴＣＲＭを形成する、方法が提供される。一部
の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または
完全合成である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、ａ）配列番号７０もしくは７１の
アミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）少なくとも１つのＴ細胞共刺激シグナル伝
達配列；および／またはｂ）配列番号５０～５２のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（
例えば、それからなる）エピトープタグを含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメイ
ンをさらに含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ
末端側に、第１のシグナルペプチドおよび／または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端
側に、第２のシグナルペプチドをさらに含み、第１および／または第２のシグナルペプチ
ドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δ
ε、ＣＤ３γεおよびζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナ
ル伝達モジュールをリクルートすることが可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは
、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。一部の実施形態では、第１のポリペプチド
鎖と第２のポリペプチド鎖とは、ａ）第１のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基と第２のＴ
ＣＲＤの接続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合；および／またはｂ）Ｆａｂ様
抗原結合モジュール中のＣＨ１抗体ドメイン中の残基とＣＬ抗体ドメイン中の残基との間
のジスルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、標的抗原は細胞表面抗原
である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水化物および脂質からな
る群から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾患関連抗原、例えば、腫
瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原
は、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５ＤまたはＦＣＲＬ５である。
一部の実施形態では、標的抗原は、表面提示されたペプチド／ＭＨＣ複合体である。一部
の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例えば、腫瘍関連抗原また
はウイルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む。一部の
実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタンパク質とを含み、ペプ
チドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ
－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択されるタンパク質に由来する
。一部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタンパク質である。一部の
実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。一部の実施形態では、
ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａ０２は、ＨＬＡ
－Ａ＊０２：０１である。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、γδＴ細胞である
。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲαおよび／またはβ鎖の発現を遮断
するまたは減少させるように改変されているαβＴ細胞である。一部の実施形態では、エ
フェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞および
サプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
【0346】
一部の実施形態では、それを必要とする個体において標的抗原関連疾患（例えば、がん
またはウイルス感染症）を処置する方法であって、個体に、有効量の、標的抗原を特異的
に認識するａｂＴＣＲをそれらの表面上に提示するエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞ま
たはナチュラルキラー細胞）を含む組成物を投与するステップを含み、ａｂＴＣＲが、ａ
）アミノ末端からカルボキシ末端の順に、第１の抗原結合ドメインと配列番号１９のアミ
ノ酸配列を含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；およびｂ）アミノ末端か
らカルボキシ末端の順に、第２の抗原結合ドメインと配列番号２０のアミノ酸配列を含む
第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖、を含み；第１の抗原結合ドメインと第２
の抗原結合ドメインとが、標的抗原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形
成し、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達
モジュールをリクルートすることが可能なＴＣＲＭを形成する、方法が提供される。一部
の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または
完全合成である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、ａ）配列番号７０もしくは７１の
アミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）少なくとも１つのＴ細胞共刺激シグナル伝
達配列；および／またはｂ）配列番号５０～５２のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（
例えば、それからなる）エピトープタグを含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメイ
ンをさらに含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ
末端側に、第１のシグナルペプチドおよび／または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端
側に、第２のシグナルペプチドをさらに含み、第１および／または第２のシグナルペプチ
ドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δ
ε、ＣＤ３γεおよびζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナ
ル伝達モジュールをリクルートすることが可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは
、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。一部の実施形態では、第１のポリペプチド
鎖と第２のポリペプチド鎖とは、ａ）第１のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基と第２のＴ
ＣＲＤの接続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合；および／またはｂ）Ｆａｂ様
抗原結合モジュール中のＣＨ１抗体ドメイン中の残基とＣＬ抗体ドメイン中の残基との間
のジスルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、標的抗原は細胞表面抗原
である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水化物および脂質からな
る群から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾患関連抗原、例えば、腫
瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原
は、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５ＤまたはＦＣＲＬ５である。
一部の実施形態では、標的抗原は、表面提示されたペプチド／ＭＨＣ複合体である。一部
の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例えば、腫瘍関連抗原また
はウイルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む。一部の
実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタンパク質とを含み、ペプ
チドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ
－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択されるタンパク質に由来する
。一部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタンパク質である。一部の
実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。一部の実施形態では、
ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａ０２は、ＨＬＡ
－Ａ＊０２：０１である。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、αβＴ細胞である
。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現を遮断
するまたは減少させるように改変されているγδＴ細胞である。一部の実施形態では、エ
フェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞および
サプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
またはウイルス感染症）を処置する方法であって、個体に、有効量の、標的抗原を特異的
に認識するａｂＴＣＲをそれらの表面上に提示するエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞ま
たはナチュラルキラー細胞）を含む組成物を投与するステップを含み、ａｂＴＣＲが、ａ
）アミノ末端からカルボキシ末端の順に、第１の抗原結合ドメインと配列番号１９のアミ
ノ酸配列を含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；およびｂ）アミノ末端か
らカルボキシ末端の順に、第２の抗原結合ドメインと配列番号２０のアミノ酸配列を含む
第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖、を含み；第１の抗原結合ドメインと第２
の抗原結合ドメインとが、標的抗原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形
成し、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達
モジュールをリクルートすることが可能なＴＣＲＭを形成する、方法が提供される。一部
の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または
完全合成である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、ａ）配列番号７０もしくは７１の
アミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）少なくとも１つのＴ細胞共刺激シグナル伝
達配列；および／またはｂ）配列番号５０～５２のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（
例えば、それからなる）エピトープタグを含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメイ
ンをさらに含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ
末端側に、第１のシグナルペプチドおよび／または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端
側に、第２のシグナルペプチドをさらに含み、第１および／または第２のシグナルペプチ
ドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δ
ε、ＣＤ３γεおよびζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナ
ル伝達モジュールをリクルートすることが可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは
、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。一部の実施形態では、第１のポリペプチド
鎖と第２のポリペプチド鎖とは、ａ）第１のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基と第２のＴ
ＣＲＤの接続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合；および／またはｂ）Ｆａｂ様
抗原結合モジュール中のＣＨ１抗体ドメイン中の残基とＣＬ抗体ドメイン中の残基との間
のジスルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、標的抗原は細胞表面抗原
である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水化物および脂質からな
る群から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾患関連抗原、例えば、腫
瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原
は、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５ＤまたはＦＣＲＬ５である。
一部の実施形態では、標的抗原は、表面提示されたペプチド／ＭＨＣ複合体である。一部
の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例えば、腫瘍関連抗原また
はウイルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む。一部の
実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタンパク質とを含み、ペプ
チドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ
－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択されるタンパク質に由来する
。一部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタンパク質である。一部の
実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。一部の実施形態では、
ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａ０２は、ＨＬＡ
－Ａ＊０２：０１である。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、αβＴ細胞である
。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現を遮断
するまたは減少させるように改変されているγδＴ細胞である。一部の実施形態では、エ
フェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞および
サプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
【0347】
一部の実施形態では、それを必要とする個体において標的抗原関連疾患（例えば、がん
またはウイルス感染症）を処置する方法であって、個体に、有効量の、標的抗原を特異的
に認識するａｂＴＣＲをそれらの表面上に提示するエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞ま
たはナチュラルキラー細胞）を含む組成物を投与するステップを含み、ａｂＴＣＲが、ａ
）アミノ末端からカルボキシ末端の順に、第１の抗原結合ドメインと配列番号２１のアミ
ノ酸配列を含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；およびｂ）アミノ末端か
らカルボキシ末端の順に、第２の抗原結合ドメインと配列番号２２のアミノ酸配列を含む
第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖、を含み；第１の抗原結合ドメインと第２
の抗原結合ドメインとが、標的抗原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形
成し、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達
モジュールをリクルートすることが可能なＴＣＲＭを形成する、方法が提供される。一部
の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または
完全合成である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、ａ）配列番号７０もしくは７１の
アミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）少なくとも１つのＴ細胞共刺激シグナル伝
達配列；および／またはｂ）配列番号５０～５２のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（
例えば、それからなる）エピトープタグを含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメイ
ンをさらに含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ
末端側に、第１のシグナルペプチドおよび／または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端
側に、第２のシグナルペプチドをさらに含み、第１および／または第２のシグナルペプチ
ドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δ
ε、ＣＤ３γεおよびζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナ
ル伝達モジュールをリクルートすることが可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは
、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。一部の実施形態では、第１のポリペプチド
鎖と第２のポリペプチド鎖とは、ａ）第１のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基と第２のＴ
ＣＲＤの接続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合；および／またはｂ）Ｆａｂ様
抗原結合モジュール中のＣＨ１抗体ドメイン中の残基とＣＬ抗体ドメイン中の残基との間
のジスルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、標的抗原は細胞表面抗原
である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水化物および脂質からな
る群から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾患関連抗原、例えば、腫
瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原
は、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５ＤまたはＦＣＲＬ５である。
一部の実施形態では、標的抗原は、表面提示されたペプチド／ＭＨＣ複合体である。一部
の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例えば、腫瘍関連抗原また
はウイルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む。一部の
実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタンパク質とを含み、ペプ
チドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ
－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択されるタンパク質に由来する
。一部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタンパク質である。一部の
実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。一部の実施形態では、
ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａ０２は、ＨＬＡ
－Ａ＊０２：０１である。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、αβＴ細胞である
。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現を遮断
するまたは減少させるように改変されているγδＴ細胞である。一部の実施形態では、エ
フェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞および
サプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
またはウイルス感染症）を処置する方法であって、個体に、有効量の、標的抗原を特異的
に認識するａｂＴＣＲをそれらの表面上に提示するエフェクター細胞（例えば、Ｔ細胞ま
たはナチュラルキラー細胞）を含む組成物を投与するステップを含み、ａｂＴＣＲが、ａ
）アミノ末端からカルボキシ末端の順に、第１の抗原結合ドメインと配列番号２１のアミ
ノ酸配列を含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；およびｂ）アミノ末端か
らカルボキシ末端の順に、第２の抗原結合ドメインと配列番号２２のアミノ酸配列を含む
第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖、を含み；第１の抗原結合ドメインと第２
の抗原結合ドメインとが、標的抗原に特異的に結合するＦａｂ様抗原結合モジュールを形
成し、第１のＴＣＲＤと第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達
モジュールをリクルートすることが可能なＴＣＲＭを形成する、方法が提供される。一部
の実施形態では、Ｆａｂ様抗原結合モジュールは、ヒト、ヒト化、キメラ、半合成または
完全合成である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、ａ）配列番号７０もしくは７１の
アミノ酸配列を含む（例えば、それからなる）少なくとも１つのＴ細胞共刺激シグナル伝
達配列；および／またはｂ）配列番号５０～５２のいずれか１つのアミノ酸配列を含む（
例えば、それからなる）エピトープタグを含む少なくとも１つのアクセサリ細胞内ドメイ
ンをさらに含む。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、第１の抗原結合ドメインのアミノ
末端側に、第１のシグナルペプチドおよび／または第２の抗原結合ドメインのアミノ末端
側に、第２のシグナルペプチドをさらに含み、第１および／または第２のシグナルペプチ
ドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは、ＣＤ３δ
ε、ＣＤ３γεおよびζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナ
ル伝達モジュールをリクルートすることが可能である。一部の実施形態では、ＴＣＲＭは
、ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成を促進する。一部の実施形態では、第１のポリペプチド
鎖と第２のポリペプチド鎖とは、ａ）第１のＴＣＲＤの接続ペプチド中の残基と第２のＴ
ＣＲＤの接続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合；および／またはｂ）Ｆａｂ様
抗原結合モジュール中のＣＨ１抗体ドメイン中の残基とＣＬ抗体ドメイン中の残基との間
のジスルフィド結合を介して連結される。一部の実施形態では、標的抗原は細胞表面抗原
である。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、タンパク質、炭水化物および脂質からな
る群から選択される。一部の実施形態では、細胞表面抗原は、疾患関連抗原、例えば、腫
瘍関連抗原またはウイルスがコードする抗原である。一部の実施形態では、細胞表面抗原
は、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５ＤまたはＦＣＲＬ５である。
一部の実施形態では、標的抗原は、表面提示されたペプチド／ＭＨＣ複合体である。一部
の実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、疾患関連抗原（例えば、腫瘍関連抗原また
はウイルスがコードする抗原）に由来するペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む。一部の
実施形態では、ペプチド／ＭＨＣ複合体は、ペプチドとＭＨＣタンパク質とを含み、ペプ
チドは、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ
－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択されるタンパク質に由来する
。一部の実施形態では、ＭＨＣタンパク質は、ＭＨＣクラスＩタンパク質である。一部の
実施形態では、ＭＨＣクラスＩタンパク質は、ＨＬＡ－Ａである。一部の実施形態では、
ＨＬＡ－Ａは、ＨＬＡ－Ａ０２である。一部の実施形態では、ＨＬＡ－Ａ０２は、ＨＬＡ
－Ａ＊０２：０１である。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、αβＴ細胞である
。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現を遮断
するまたは減少させるように改変されているγδＴ細胞である。一部の実施形態では、エ
フェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞および
サプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
【0348】
一部の実施形態では、それを必要とする個体においてＡＦＰ関連疾患を処置する方法で
あって、個体に、有効量の、ａｂＴＣＲをそれらの表面上に提示するエフェクター細胞（
例えば、Ｔ細胞またはナチュラルキラー細胞）を含む組成物を投与するステップを含み、
ａｂＴＣＲが、ａ）配列番号２３のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲドメインを含む
第１のポリペプチド鎖；およびｂ）配列番号２４のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣＲ
ドメインを含む第２のポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチ
ド鎖とが、１つまたは複数のジスルフィド結合を介して連結される、方法が提供される。
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７
、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）およ
び／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも１
つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピトープタグは、
配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形態では、第１の
ポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチ
ドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴＣＲドメインの
アミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態では、第１およ
び／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む（例えば、そ
れからなる）。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、γδＴ細胞である。一部の実
施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲαおよび／またはβ鎖の発現を遮断するまたは
減少させるように改変されているαβＴ細胞である。一部の実施形態では、エフェクター
細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッサ
ーＴ細胞からなる群から選択される。
あって、個体に、有効量の、ａｂＴＣＲをそれらの表面上に提示するエフェクター細胞（
例えば、Ｔ細胞またはナチュラルキラー細胞）を含む組成物を投与するステップを含み、
ａｂＴＣＲが、ａ）配列番号２３のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲドメインを含む
第１のポリペプチド鎖；およびｂ）配列番号２４のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣＲ
ドメインを含む第２のポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチ
ド鎖とが、１つまたは複数のジスルフィド結合を介して連結される、方法が提供される。
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７
、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）およ
び／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも１
つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピトープタグは、
配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形態では、第１の
ポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチ
ドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴＣＲドメインの
アミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態では、第１およ
び／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む（例えば、そ
れからなる）。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、γδＴ細胞である。一部の実
施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲαおよび／またはβ鎖の発現を遮断するまたは
減少させるように改変されているαβＴ細胞である。一部の実施形態では、エフェクター
細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッサ
ーＴ細胞からなる群から選択される。
【0349】
一部の実施形態では、それを必要とする個体においてＡＦＰ関連疾患を処置する方法で
あって、個体に、有効量の、ａｂＴＣＲをそれらの表面上に提示するエフェクター細胞（
例えば、Ｔ細胞またはナチュラルキラー細胞）を含む組成物を投与するステップを含み、
ａｂＴＣＲが、ａ）配列番号２５のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲドメインを含む
第１のポリペプチド鎖；およびｂ）配列番号２６のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣＲ
ドメインを含む第２のポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチ
ド鎖とが、１つまたは複数のジスルフィド結合を介して連結される、方法が提供される。
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７
、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）およ
び／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも１
つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピトープタグは、
配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形態では、第１の
ポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチ
ドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴＣＲドメインの
アミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態では、第１およ
び／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む（例えば、そ
れからなる）。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、γδＴ細胞である。一部の実
施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲαおよび／またはβ鎖の発現を遮断するまたは
減少させるように改変されているαβＴ細胞である。一部の実施形態では、エフェクター
細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッサ
ーＴ細胞からなる群から選択される。
あって、個体に、有効量の、ａｂＴＣＲをそれらの表面上に提示するエフェクター細胞（
例えば、Ｔ細胞またはナチュラルキラー細胞）を含む組成物を投与するステップを含み、
ａｂＴＣＲが、ａ）配列番号２５のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲドメインを含む
第１のポリペプチド鎖；およびｂ）配列番号２６のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣＲ
ドメインを含む第２のポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチ
ド鎖とが、１つまたは複数のジスルフィド結合を介して連結される、方法が提供される。
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７
、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）およ
び／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも１
つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピトープタグは、
配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形態では、第１の
ポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチ
ドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴＣＲドメインの
アミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態では、第１およ
び／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む（例えば、そ
れからなる）。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、γδＴ細胞である。一部の実
施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲαおよび／またはβ鎖の発現を遮断するまたは
減少させるように改変されているαβＴ細胞である。一部の実施形態では、エフェクター
細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッサ
ーＴ細胞からなる群から選択される。
【0350】
一部の実施形態では、それを必要とする個体においてＡＦＰ関連疾患を処置する方法で
あって、個体に、有効量の、ａｂＴＣＲをそれらの表面上に提示するエフェクター細胞（
例えば、Ｔ細胞またはナチュラルキラー細胞）を含む組成物を投与するステップを含み、
ａｂＴＣＲが、ａ）配列番号２７のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲドメインを含む
第１のポリペプチド鎖；およびｂ）配列番号２８のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣＲ
ドメインを含む第２のポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチ
ド鎖とが、１つまたは複数のジスルフィド結合を介して連結される、方法が提供される。
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７
、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）およ
び／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも１
つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピトープタグは、
配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形態では、第１の
ポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチ
ドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴＣＲドメインの
アミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態では、第１およ
び／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む（例えば、そ
れからなる）。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、γδＴ細胞である。一部の実
施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲαおよび／またはβ鎖の発現を遮断するまたは
減少させるように改変されているαβＴ細胞である。一部の実施形態では、エフェクター
細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッサ
ーＴ細胞からなる群から選択される。
あって、個体に、有効量の、ａｂＴＣＲをそれらの表面上に提示するエフェクター細胞（
例えば、Ｔ細胞またはナチュラルキラー細胞）を含む組成物を投与するステップを含み、
ａｂＴＣＲが、ａ）配列番号２７のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲドメインを含む
第１のポリペプチド鎖；およびｂ）配列番号２８のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣＲ
ドメインを含む第２のポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチ
ド鎖とが、１つまたは複数のジスルフィド結合を介して連結される、方法が提供される。
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７
、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）およ
び／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも１
つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピトープタグは、
配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形態では、第１の
ポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチ
ドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴＣＲドメインの
アミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態では、第１およ
び／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む（例えば、そ
れからなる）。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、γδＴ細胞である。一部の実
施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲαおよび／またはβ鎖の発現を遮断するまたは
減少させるように改変されているαβＴ細胞である。一部の実施形態では、エフェクター
細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッサ
ーＴ細胞からなる群から選択される。
【0351】
一部の実施形態では、それを必要とする個体においてＡＦＰ関連疾患を処置する方法で
あって、個体に、有効量の、ａｂＴＣＲをそれらの表面上に提示するエフェクター細胞（
例えば、Ｔ細胞またはナチュラルキラー細胞）を含む組成物を投与するステップを含み、
ａｂＴＣＲが、ａ）配列番号２９のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲドメインを含む
第１のポリペプチド鎖；およびｂ）配列番号３０のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣＲ
ドメインを含む第２のポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチ
ド鎖とが、１つまたは複数のジスルフィド結合を介して連結される、方法が提供される。
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７
、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）およ
び／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも１
つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピトープタグは、
配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形態では、第１の
ポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチ
ドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴＣＲドメインの
アミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態では、第１およ
び／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む（例えば、そ
れからなる）。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、αβＴ細胞である。一部の実
施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現を遮断するまたは
減少させるように改変されているγδＴ細胞である。一部の実施形態では、エフェクター
細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッサ
ーＴ細胞からなる群から選択される。
あって、個体に、有効量の、ａｂＴＣＲをそれらの表面上に提示するエフェクター細胞（
例えば、Ｔ細胞またはナチュラルキラー細胞）を含む組成物を投与するステップを含み、
ａｂＴＣＲが、ａ）配列番号２９のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲドメインを含む
第１のポリペプチド鎖；およびｂ）配列番号３０のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣＲ
ドメインを含む第２のポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチ
ド鎖とが、１つまたは複数のジスルフィド結合を介して連結される、方法が提供される。
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７
、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）およ
び／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも１
つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピトープタグは、
配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形態では、第１の
ポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチ
ドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴＣＲドメインの
アミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態では、第１およ
び／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む（例えば、そ
れからなる）。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、αβＴ細胞である。一部の実
施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現を遮断するまたは
減少させるように改変されているγδＴ細胞である。一部の実施形態では、エフェクター
細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッサ
ーＴ細胞からなる群から選択される。
【0352】
一部の実施形態では、それを必要とする個体においてＡＦＰ関連疾患を処置する方法で
あって、個体に、有効量の、ａｂＴＣＲをそれらの表面上に提示するエフェクター細胞（
例えば、Ｔ細胞またはナチュラルキラー細胞）を含む組成物を投与するステップを含み、
ａｂＴＣＲが、ａ）配列番号３１のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲドメインを含む
第１のポリペプチド鎖；およびｂ）配列番号３２のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣＲ
ドメインを含む第２のポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチ
ド鎖とが、１つまたは複数のジスルフィド結合を介して連結される、方法が提供される。
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７
、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）およ
び／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも１
つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピトープタグは、
配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形態では、第１の
ポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチ
ドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴＣＲドメインの
アミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態では、第１およ
び／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む（例えば、そ
れからなる）。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、αβＴ細胞である。一部の実
施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現を遮断するまたは
減少させるように改変されているγδＴ細胞である。一部の実施形態では、エフェクター
細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッサ
ーＴ細胞からなる群から選択される。
あって、個体に、有効量の、ａｂＴＣＲをそれらの表面上に提示するエフェクター細胞（
例えば、Ｔ細胞またはナチュラルキラー細胞）を含む組成物を投与するステップを含み、
ａｂＴＣＲが、ａ）配列番号３１のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲドメインを含む
第１のポリペプチド鎖；およびｂ）配列番号３２のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣＲ
ドメインを含む第２のポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチ
ド鎖とが、１つまたは複数のジスルフィド結合を介して連結される、方法が提供される。
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７
、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）およ
び／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも１
つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピトープタグは、
配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形態では、第１の
ポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチ
ドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴＣＲドメインの
アミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態では、第１およ
び／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む（例えば、そ
れからなる）。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、αβＴ細胞である。一部の実
施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現を遮断するまたは
減少させるように改変されているγδＴ細胞である。一部の実施形態では、エフェクター
細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッサ
ーＴ細胞からなる群から選択される。
【0353】
一部の実施形態では、それを必要とする個体においてＡＦＰ関連疾患を処置する方法で
あって、個体に、有効量の、ａｂＴＣＲをそれらの表面上に提示するエフェクター細胞（
例えば、Ｔ細胞またはナチュラルキラー細胞）を含む組成物を投与するステップを含み、
ａｂＴＣＲが、ａ）配列番号３３のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲドメインを含む
第１のポリペプチド鎖；およびｂ）配列番号３４のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣＲ
ドメインを含む第２のポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチ
ド鎖とが、１つまたは複数のジスルフィド結合を介して連結される、方法が提供される。
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７
、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）およ
び／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも１
つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピトープタグは、
配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形態では、第１の
ポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチ
ドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴＣＲドメインの
アミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態では、第１およ
び／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む（例えば、そ
れからなる）。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、αβＴ細胞である。一部の実
施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現を遮断するまたは
減少させるように改変されているγδＴ細胞である。一部の実施形態では、エフェクター
細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッサ
ーＴ細胞からなる群から選択される。
あって、個体に、有効量の、ａｂＴＣＲをそれらの表面上に提示するエフェクター細胞（
例えば、Ｔ細胞またはナチュラルキラー細胞）を含む組成物を投与するステップを含み、
ａｂＴＣＲが、ａ）配列番号３３のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲドメインを含む
第１のポリペプチド鎖；およびｂ）配列番号３４のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣＲ
ドメインを含む第２のポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチ
ド鎖とが、１つまたは複数のジスルフィド結合を介して連結される、方法が提供される。
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７
、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）およ
び／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも１
つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピトープタグは、
配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形態では、第１の
ポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチ
ドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴＣＲドメインの
アミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態では、第１およ
び／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む（例えば、そ
れからなる）。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、αβＴ細胞である。一部の実
施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現を遮断するまたは
減少させるように改変されているγδＴ細胞である。一部の実施形態では、エフェクター
細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッサ
ーＴ細胞からなる群から選択される。
【0354】
一部の実施形態では、それを必要とする個体においてＡＦＰ関連疾患を処置する方法で
あって、個体に、有効量の、ａｂＴＣＲをそれらの表面上に提示するエフェクター細胞（
例えば、Ｔ細胞またはナチュラルキラー細胞）を含む組成物を投与するステップを含み、
ａｂＴＣＲが、ａ）配列番号３５のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲドメインを含む
第１のポリペプチド鎖；およびｂ）配列番号３６のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣＲ
ドメインを含む第２のポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチ
ド鎖とが、１つまたは複数のジスルフィド結合を介して連結される、方法が提供される。
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７
、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）およ
び／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも１
つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピトープタグは、
配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形態では、第１の
ポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチ
ドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴＣＲドメインの
アミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態では、第１およ
び／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む（例えば、そ
れからなる）。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、αβＴ細胞である。一部の実
施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現を遮断するまたは
減少させるように改変されているγδＴ細胞である。一部の実施形態では、エフェクター
細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッサ
ーＴ細胞からなる群から選択される。
あって、個体に、有効量の、ａｂＴＣＲをそれらの表面上に提示するエフェクター細胞（
例えば、Ｔ細胞またはナチュラルキラー細胞）を含む組成物を投与するステップを含み、
ａｂＴＣＲが、ａ）配列番号３５のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲドメインを含む
第１のポリペプチド鎖；およびｂ）配列番号３６のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣＲ
ドメインを含む第２のポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプチ
ド鎖とが、１つまたは複数のジスルフィド結合を介して連結される、方法が提供される。
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２７
、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）およ
び／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも１
つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピトープタグは、
配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形態では、第１の
ポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプチ
ドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴＣＲドメインの
アミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態では、第１およ
び／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む（例えば、そ
れからなる）。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、αβＴ細胞である。一部の実
施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現を遮断するまたは
減少させるように改変されているγδＴ細胞である。一部の実施形態では、エフェクター
細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッサ
ーＴ細胞からなる群から選択される。
【0355】
一部の実施形態では、それを必要とする個体においてＣＤ１９関連疾患を処置する方法
であって、個体に、有効量の、ａｂＴＣＲをそれらの表面上に提示するエフェクター細胞
（例えば、Ｔ細胞またはナチュラルキラー細胞）を含む組成物を投与するステップを含み
、ａｂＴＣＲが、ａ）配列番号４２のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲドメインを含
む第１のポリペプチド鎖；およびｂ）配列番号４３のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣ
Ｒドメインを含む第２のポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプ
チド鎖とが、１つまたは複数のジスルフィド結合を介して連結される、方法が提供される
。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２
７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）お
よび／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも
１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピトープタグは
、配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形態では、第１
のポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプ
チドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴＣＲドメイン
のアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態では、第１お
よび／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む（例えば、
それからなる）。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、αβＴ細胞である。一部の
実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現を遮断するまた
は減少させるように改変されているγδＴ細胞である。一部の実施形態では、エフェクタ
ー細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッ
サーＴ細胞からなる群から選択される。
であって、個体に、有効量の、ａｂＴＣＲをそれらの表面上に提示するエフェクター細胞
（例えば、Ｔ細胞またはナチュラルキラー細胞）を含む組成物を投与するステップを含み
、ａｂＴＣＲが、ａ）配列番号４２のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲドメインを含
む第１のポリペプチド鎖；およびｂ）配列番号４３のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣ
Ｒドメインを含む第２のポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプ
チド鎖とが、１つまたは複数のジスルフィド結合を介して連結される、方法が提供される
。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２
７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）お
よび／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも
１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピトープタグは
、配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形態では、第１
のポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプ
チドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴＣＲドメイン
のアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態では、第１お
よび／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む（例えば、
それからなる）。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、αβＴ細胞である。一部の
実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現を遮断するまた
は減少させるように改変されているγδＴ細胞である。一部の実施形態では、エフェクタ
ー細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッ
サーＴ細胞からなる群から選択される。
【0356】
一部の実施形態では、それを必要とする個体においてＣＤ１９関連疾患を処置する方法
であって、個体に、有効量の、ａｂＴＣＲをそれらの表面上に提示するエフェクター細胞
（例えば、Ｔ細胞またはナチュラルキラー細胞）を含む組成物を投与するステップを含み
、ａｂＴＣＲが、ａ）配列番号４２のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲドメインを含
む第１のポリペプチド鎖；およびｂ）配列番号５４のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣ
Ｒドメインを含む第２のポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプ
チド鎖とが、１つまたは複数のジスルフィド結合を介して連結される、方法が提供される
。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２
７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）お
よび／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも
１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピトープタグは
、配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形態では、第１
のポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプ
チドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴＣＲドメイン
のアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態では、第１お
よび／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む（例えば、
それからなる）。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、αβＴ細胞である。一部の
実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現を遮断するまた
は減少させるように改変されているγδＴ細胞である。一部の実施形態では、エフェクタ
ー細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッ
サーＴ細胞からなる群から選択される。
であって、個体に、有効量の、ａｂＴＣＲをそれらの表面上に提示するエフェクター細胞
（例えば、Ｔ細胞またはナチュラルキラー細胞）を含む組成物を投与するステップを含み
、ａｂＴＣＲが、ａ）配列番号４２のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲドメインを含
む第１のポリペプチド鎖；およびｂ）配列番号５４のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣ
Ｒドメインを含む第２のポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプ
チド鎖とが、１つまたは複数のジスルフィド結合を介して連結される、方法が提供される
。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２
７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）お
よび／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも
１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピトープタグは
、配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形態では、第１
のポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプ
チドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴＣＲドメイン
のアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態では、第１お
よび／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む（例えば、
それからなる）。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、αβＴ細胞である。一部の
実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現を遮断するまた
は減少させるように改変されているγδＴ細胞である。一部の実施形態では、エフェクタ
ー細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッ
サーＴ細胞からなる群から選択される。
【0357】
一部の実施形態では、それを必要とする個体においてＣＤ１９関連疾患を処置する方法
であって、個体に、有効量の、ａｂＴＣＲをそれらの表面上に提示するエフェクター細胞
（例えば、Ｔ細胞またはナチュラルキラー細胞）を含む組成物を投与するステップを含み
、ａｂＴＣＲが、ａ）配列番号５５のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲドメインを含
む第１のポリペプチド鎖；およびｂ）配列番号５４のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣ
Ｒドメインを含む第２のポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプ
チド鎖とが、１つまたは複数のジスルフィド結合を介して連結される、方法が提供される
。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２
７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）お
よび／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも
１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピトープタグは
、配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形態では、第１
のポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプ
チドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴＣＲドメイン
のアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態では、第１お
よび／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む（例えば、
それからなる）。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、αβＴ細胞である。一部の
実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現を遮断するまた
は減少させるように改変されているγδＴ細胞である。一部の実施形態では、エフェクタ
ー細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッ
サーＴ細胞からなる群から選択される。
であって、個体に、有効量の、ａｂＴＣＲをそれらの表面上に提示するエフェクター細胞
（例えば、Ｔ細胞またはナチュラルキラー細胞）を含む組成物を投与するステップを含み
、ａｂＴＣＲが、ａ）配列番号５５のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲドメインを含
む第１のポリペプチド鎖；およびｂ）配列番号５４のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣ
Ｒドメインを含む第２のポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプ
チド鎖とが、１つまたは複数のジスルフィド結合を介して連結される、方法が提供される
。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２
７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）お
よび／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも
１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピトープタグは
、配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形態では、第１
のポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプ
チドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴＣＲドメイン
のアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態では、第１お
よび／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む（例えば、
それからなる）。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、αβＴ細胞である。一部の
実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現を遮断するまた
は減少させるように改変されているγδＴ細胞である。一部の実施形態では、エフェクタ
ー細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッ
サーＴ細胞からなる群から選択される。
【0358】
一部の実施形態では、それを必要とする個体においてＣＤ１９関連疾患を処置する方法
であって、個体に、有効量の、ａｂＴＣＲをそれらの表面上に提示するエフェクター細胞
（例えば、Ｔ細胞またはナチュラルキラー細胞）を含む組成物を投与するステップを含み
、ａｂＴＣＲが、ａ）配列番号５６のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲドメインを含
む第１のポリペプチド鎖；およびｂ）配列番号５４のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣ
Ｒドメインを含む第２のポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプ
チド鎖とが、１つまたは複数のジスルフィド結合を介して連結される、方法が提供される
。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２
７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）お
よび／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも
１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピトープタグは
、配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形態では、第１
のポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプ
チドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴＣＲドメイン
のアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態では、第１お
よび／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む（例えば、
それからなる）。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、αβＴ細胞である。一部の
実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現を遮断するまた
は減少させるように改変されているγδＴ細胞である。一部の実施形態では、エフェクタ
ー細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッ
サーＴ細胞からなる群から選択される。
であって、個体に、有効量の、ａｂＴＣＲをそれらの表面上に提示するエフェクター細胞
（例えば、Ｔ細胞またはナチュラルキラー細胞）を含む組成物を投与するステップを含み
、ａｂＴＣＲが、ａ）配列番号５６のアミノ酸配列を含む第１のａｂＴＣＲドメインを含
む第１のポリペプチド鎖；およびｂ）配列番号５４のアミノ酸配列を含む第２のａｂＴＣ
Ｒドメインを含む第２のポリペプチド鎖を含み、第１のポリペプチド鎖と第２のポリペプ
チド鎖とが、１つまたは複数のジスルフィド結合を介して連結される、方法が提供される
。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、Ｔ細胞共刺激シグナル伝達配列（例えば、ＣＤ２
７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０またはＣＤ４０由来）お
よび／またはエピトープタグ（例えば、ＨＡ、ＦＬＡＧまたはｍｙｃ）を含む少なくとも
１つのアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む。一部の実施形態では、エピトープタグは
、配列番号５０～５２のアミノ酸配列のいずれか１つを含む。一部の実施形態では、第１
のポリペプチド鎖は、第１のａｂＴＣＲドメインのアミノ末端側に、第１のシグナルペプ
チドをさらに含み、および／または第２のポリペプチド鎖は、第２のａｂＴＣＲドメイン
のアミノ末端側に、第２のシグナルペプチドをさらに含む。一部の実施形態では、第１お
よび／または第２のシグナルペプチドは、配列番号４９のアミノ酸配列を含む（例えば、
それからなる）。一部の実施形態では、エフェクター細胞は、αβＴ細胞である。一部の
実施形態では、エフェクター細胞は、ＴＣＲγおよび／またはδ鎖の発現を遮断するまた
は減少させるように改変されているγδＴ細胞である。一部の実施形態では、エフェクタ
ー細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッ
サーＴ細胞からなる群から選択される。
【0359】
それを必要とする個体において標的抗原関連疾患を処置する方法であって、個体に、異
なるａｂＴＣＲを発現する複数のエフェクター細胞を含む組成物を投与するステップを含
む、方法もまた企図される。したがって、一部の実施形態では、本明細書に記載される個
体において標的抗原関連疾患を処置するための方法のいずれかによれば、組成物は、本明
細書に記載される不均一なａｂＴＣＲエフェクター細胞組成物である。
なるａｂＴＣＲを発現する複数のエフェクター細胞を含む組成物を投与するステップを含
む、方法もまた企図される。したがって、一部の実施形態では、本明細書に記載される個
体において標的抗原関連疾患を処置するための方法のいずれかによれば、組成物は、本明
細書に記載される不均一なａｂＴＣＲエフェクター細胞組成物である。
【0360】
例えば、一部の実施形態では、それを必要とする個体において標的抗原関連疾患（例え
ば、がんまたはウイルス感染症）を処置する方法であって、個体に、有効量の、本明細書
に記載される実施形態のいずれかにしたがう複数のａｂＴＣＲエフェクター細胞集団を含
む不均一なａｂＴＣＲエフェクター細胞組成物を投与するステップを含み、組成物中のａ
ｂＴＣＲエフェクター細胞が全て、同じ細胞型のものであり（例えば、ａｂＴＣＲエフェ
クター細胞は全て、細胞傷害性Ｔ細胞である）、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の各集団が
、他とは異なるａｂＴＣＲを発現し、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の少なくとも１つの集
団が、標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲを発現する、方法が提供される。一部の実
施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞は、Ｔ細胞である。一部の実施形態では、ａｂ
ＴＣＲエフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細
胞およびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。一部の実施形態では、ａｂＴＣ
Ｒエフェクター細胞の各集団は、標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲを発現する。一
部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の少なくとも１つの集団は、異なる標的
抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲを発現する。ａｂＴＣＲエフェクター細胞の少なくと
も１つの集団が異なる標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲを発現する一部の実施形態
では、異なる標的抗原の各々は、標的抗原関連疾患と関連する。
ば、がんまたはウイルス感染症）を処置する方法であって、個体に、有効量の、本明細書
に記載される実施形態のいずれかにしたがう複数のａｂＴＣＲエフェクター細胞集団を含
む不均一なａｂＴＣＲエフェクター細胞組成物を投与するステップを含み、組成物中のａ
ｂＴＣＲエフェクター細胞が全て、同じ細胞型のものであり（例えば、ａｂＴＣＲエフェ
クター細胞は全て、細胞傷害性Ｔ細胞である）、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の各集団が
、他とは異なるａｂＴＣＲを発現し、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の少なくとも１つの集
団が、標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲを発現する、方法が提供される。一部の実
施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞は、Ｔ細胞である。一部の実施形態では、ａｂ
ＴＣＲエフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細
胞およびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。一部の実施形態では、ａｂＴＣ
Ｒエフェクター細胞の各集団は、標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲを発現する。一
部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の少なくとも１つの集団は、異なる標的
抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲを発現する。ａｂＴＣＲエフェクター細胞の少なくと
も１つの集団が異なる標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲを発現する一部の実施形態
では、異なる標的抗原の各々は、標的抗原関連疾患と関連する。
【0361】
一部の実施形態では、それを必要とする個体において標的抗原関連疾患（例えば、がん
またはウイルス感染症）を処置する方法であって、個体に、有効量の、本明細書に記載さ
れる実施形態のいずれかにしたがう複数のａｂＴＣＲエフェクター細胞集団を含む不均一
なａｂＴＣＲエフェクター細胞組成物を投与するステップを含み、ａｂＴＣＲエフェクタ
ー細胞の少なくとも１つの集団が、他とは異なる細胞型のものであり、ａｂＴＣＲエフェ
クター細胞の少なくとも１つの集団が、標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲを発現す
る、方法が提供される。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の集団は全て
、異なる細胞型のものである。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞は、Ｔ
細胞である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、細胞傷害性
Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッサーＴ細胞からなる群
から選択される細胞型のものである。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞
の各集団は、同じａｂＴＣＲを発現する。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター
細胞の少なくとも１つの集団は、他とは異なるａｂＴＣＲを発現する。一部の実施形態で
は、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、他とは異なるａｂＴＣＲを発現する。一部
の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、標的抗原に特異的に結合する
ａｂＴＣＲを発現する。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の少なくとも
１つの集団は、異なる標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲを発現する。ａｂＴＣＲエ
フェクター細胞の少なくとも１つの集団が異なる標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲ
を発現する一部の実施形態では、異なる標的抗原の各々は、標的抗原関連疾患と関連する
。
またはウイルス感染症）を処置する方法であって、個体に、有効量の、本明細書に記載さ
れる実施形態のいずれかにしたがう複数のａｂＴＣＲエフェクター細胞集団を含む不均一
なａｂＴＣＲエフェクター細胞組成物を投与するステップを含み、ａｂＴＣＲエフェクタ
ー細胞の少なくとも１つの集団が、他とは異なる細胞型のものであり、ａｂＴＣＲエフェ
クター細胞の少なくとも１つの集団が、標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲを発現す
る、方法が提供される。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の集団は全て
、異なる細胞型のものである。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞は、Ｔ
細胞である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、細胞傷害性
Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッサーＴ細胞からなる群
から選択される細胞型のものである。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞
の各集団は、同じａｂＴＣＲを発現する。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター
細胞の少なくとも１つの集団は、他とは異なるａｂＴＣＲを発現する。一部の実施形態で
は、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、他とは異なるａｂＴＣＲを発現する。一部
の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の各集団は、標的抗原に特異的に結合する
ａｂＴＣＲを発現する。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の少なくとも
１つの集団は、異なる標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲを発現する。ａｂＴＣＲエ
フェクター細胞の少なくとも１つの集団が異なる標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲ
を発現する一部の実施形態では、異なる標的抗原の各々は、標的抗原関連疾患と関連する
。
【0362】
一部の実施形態では、それを必要とする個体において複数の標的抗原と関連する疾患を
処置する方法であって、個体に、有効量の、本明細書に記載される実施形態のいずれかに
したがう複数のａｂＴＣＲエフェクター細胞集団を含む不均一なａｂＴＣＲエフェクター
細胞組成物を投与するステップを含み、組成物中のａｂＴＣＲエフェクター細胞が全て、
同じ細胞型のものであり（例えば、ａｂＴＣＲエフェクター細胞は全て、細胞傷害性Ｔ細
胞である）、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の各集団が、他とは異なるａｂＴＣＲを発現し
、複数の標的抗原の各標的抗原について、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の少なくとも１つ
の集団が、標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲを発現する、方法が提供される。一部
の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞は、Ｔ細胞である。一部の実施形態では、
ａｂＴＣＲエフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラー
Ｔ細胞およびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
処置する方法であって、個体に、有効量の、本明細書に記載される実施形態のいずれかに
したがう複数のａｂＴＣＲエフェクター細胞集団を含む不均一なａｂＴＣＲエフェクター
細胞組成物を投与するステップを含み、組成物中のａｂＴＣＲエフェクター細胞が全て、
同じ細胞型のものであり（例えば、ａｂＴＣＲエフェクター細胞は全て、細胞傷害性Ｔ細
胞である）、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の各集団が、他とは異なるａｂＴＣＲを発現し
、複数の標的抗原の各標的抗原について、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の少なくとも１つ
の集団が、標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲを発現する、方法が提供される。一部
の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞は、Ｔ細胞である。一部の実施形態では、
ａｂＴＣＲエフェクター細胞は、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラー
Ｔ細胞およびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される。
【0363】
一部の実施形態では、それを必要とする個体において複数の標的抗原と関連する疾患を
処置する方法であって、個体に、有効量の、本明細書に記載される実施形態のいずれかに
したがう複数のａｂＴＣＲエフェクター細胞集団を含む不均一なａｂＴＣＲエフェクター
細胞組成物を投与するステップを含み、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の少なくとも１つの
集団が、他とは異なる細胞型のものであり、複数の標的抗原の各標的抗原について、ａｂ
ＴＣＲエフェクター細胞の少なくとも１つの集団が、標的抗原に特異的に結合するａｂＴ
ＣＲを発現する、方法が提供される。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞
の集団は全て、異なる細胞型のものである。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクタ
ー細胞は、Ｔ細胞である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の各集団は
、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッサーＴ細
胞からなる群から選択される細胞型のものである。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフ
ェクター細胞の各集団は、他とは異なるａｂＴＣＲを発現する。
処置する方法であって、個体に、有効量の、本明細書に記載される実施形態のいずれかに
したがう複数のａｂＴＣＲエフェクター細胞集団を含む不均一なａｂＴＣＲエフェクター
細胞組成物を投与するステップを含み、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の少なくとも１つの
集団が、他とは異なる細胞型のものであり、複数の標的抗原の各標的抗原について、ａｂ
ＴＣＲエフェクター細胞の少なくとも１つの集団が、標的抗原に特異的に結合するａｂＴ
ＣＲを発現する、方法が提供される。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞
の集団は全て、異なる細胞型のものである。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクタ
ー細胞は、Ｔ細胞である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞の各集団は
、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッサーＴ細
胞からなる群から選択される細胞型のものである。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフ
ェクター細胞の各集団は、他とは異なるａｂＴＣＲを発現する。
【0364】
一部の実施形態では、個体は、哺乳動物（例えば、ヒト、非ヒト霊長類、ラット、マウ
ス、ウシ、ウマ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、イヌ、ネコなど）である。一部の実施形態では、
個体は、ヒトである。一部の実施形態では、個体は、臨床患者、臨床試験の志願者、実験
動物などである。一部の実施形態では、個体は、約６０歳未満（例えば、約５０歳未満、
約４０歳未満、約３０歳未満、約２５歳未満、約２０歳未満、約１５歳未満、または約１
０歳未満のいずれかを含む）である。一部の実施形態では、個体は、約６０歳超（例えば
、約７０歳超、約８０歳超、約９０歳超、または約１００歳超のいずれかを含む）である
。一部の実施形態では、個体は、本明細書に記載される疾患または障害（例えば、がんま
たはウイルス感染症）のうちの１つまたは複数と診断されているまたはそれに環境的もし
くは遺伝的にかかりやすい。一部の実施形態では、個体は、本明細書に記載される１つま
たは複数の疾患または障害に関連づけられる１つまたは複数の危険因子を有する。
ス、ウシ、ウマ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、イヌ、ネコなど）である。一部の実施形態では、
個体は、ヒトである。一部の実施形態では、個体は、臨床患者、臨床試験の志願者、実験
動物などである。一部の実施形態では、個体は、約６０歳未満（例えば、約５０歳未満、
約４０歳未満、約３０歳未満、約２５歳未満、約２０歳未満、約１５歳未満、または約１
０歳未満のいずれかを含む）である。一部の実施形態では、個体は、約６０歳超（例えば
、約７０歳超、約８０歳超、約９０歳超、または約１００歳超のいずれかを含む）である
。一部の実施形態では、個体は、本明細書に記載される疾患または障害（例えば、がんま
たはウイルス感染症）のうちの１つまたは複数と診断されているまたはそれに環境的もし
くは遺伝的にかかりやすい。一部の実施形態では、個体は、本明細書に記載される１つま
たは複数の疾患または障害に関連づけられる１つまたは複数の危険因子を有する。
【0365】
一部の実施形態では、本発明のａｂＴＣＲエフェクター細胞組成物は、標的抗原発現が
関与する疾患または障害を処置するために、第２、第３または第４の薬剤（例えば、抗新
生物剤、成長阻害剤、細胞傷害剤または化学療法剤を含む）と組み合わせて投与される。
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞組成物は、サイトカイン（例えば、Ｉ
Ｌ－２）と組み合わせて投与される。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、ＭＨＣタンパ
ク質の発現を増加させる薬剤および／またはＭＨＣタンパク質によるペプチドの表面提示
を増強する薬剤と組み合わせて投与される。一部の実施形態では、薬剤には、例えば、Ｉ
ＦＮ受容体アゴニスト、Ｈｓｐ９０阻害剤、ｐ５３発現のエンハンサー、および化学療法
剤が含まれる。一部の実施形態では、薬剤は、例えば、ＩＦＮγ、ＩＦＮβおよびＩＦＮ
αを含むＩＦＮ受容体アゴニストである。一部の実施形態では、薬剤は、例えば、タネス
ピマイシン（１７－ＡＡＧ）、アルベスピマイシン（１７－ＤＭＡＧ）、レタスピマイシ
ン（ＩＰＩ－５０４）、ＩＰＩ－４９３、ＣＮＦ２０２４／ＢＩＩＢ０２１、ＭＰＣ－３
１００、Ｄｅｂｉｏ ０９３２（ＣＵＤＣ－３０５）、ＰＵ－Ｈ７１、Ｇａｎｅｔｅｓｐ
ｉｂ（ＳＴＡ－９０９０）、ＮＶＰ－ＡＵＹ９２２（ＶＥＲ－５２２６９）、ＨＳＰ９９
０、ＫＷ－２４７８、ＡＴ１３３８７、ＳＮＸ－５４２２、ＤＳ－２２４８およびＸＬ８
８８を含むＨｓｐ９０阻害剤である。一部の実施形態では、薬剤は、例えば、５－フルオ
ロウラシルおよびヌトリン－３を含む、ｐ５３発現のエンハンサーである。一部の実施形
態では、薬剤は、例えば、トポテカン、エトポシド、シスプラチン、パクリタキセルおよ
びビンブラスチンを含む化学療法剤である。
関与する疾患または障害を処置するために、第２、第３または第４の薬剤（例えば、抗新
生物剤、成長阻害剤、細胞傷害剤または化学療法剤を含む）と組み合わせて投与される。
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞組成物は、サイトカイン（例えば、Ｉ
Ｌ－２）と組み合わせて投与される。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲは、ＭＨＣタンパ
ク質の発現を増加させる薬剤および／またはＭＨＣタンパク質によるペプチドの表面提示
を増強する薬剤と組み合わせて投与される。一部の実施形態では、薬剤には、例えば、Ｉ
ＦＮ受容体アゴニスト、Ｈｓｐ９０阻害剤、ｐ５３発現のエンハンサー、および化学療法
剤が含まれる。一部の実施形態では、薬剤は、例えば、ＩＦＮγ、ＩＦＮβおよびＩＦＮ
αを含むＩＦＮ受容体アゴニストである。一部の実施形態では、薬剤は、例えば、タネス
ピマイシン（１７－ＡＡＧ）、アルベスピマイシン（１７－ＤＭＡＧ）、レタスピマイシ
ン（ＩＰＩ－５０４）、ＩＰＩ－４９３、ＣＮＦ２０２４／ＢＩＩＢ０２１、ＭＰＣ－３
１００、Ｄｅｂｉｏ ０９３２（ＣＵＤＣ－３０５）、ＰＵ－Ｈ７１、Ｇａｎｅｔｅｓｐ
ｉｂ（ＳＴＡ－９０９０）、ＮＶＰ－ＡＵＹ９２２（ＶＥＲ－５２２６９）、ＨＳＰ９９
０、ＫＷ－２４７８、ＡＴ１３３８７、ＳＮＸ－５４２２、ＤＳ－２２４８およびＸＬ８
８８を含むＨｓｐ９０阻害剤である。一部の実施形態では、薬剤は、例えば、５－フルオ
ロウラシルおよびヌトリン－３を含む、ｐ５３発現のエンハンサーである。一部の実施形
態では、薬剤は、例えば、トポテカン、エトポシド、シスプラチン、パクリタキセルおよ
びビンブラスチンを含む化学療法剤である。
【0366】
一部の実施形態では、それを必要とする個体において標的抗原陽性疾患を処置する方法
であって、個体に、サイトカイン（例えば、ＩＬ－２）と組み合わせて、本明細書に記載
される実施形態のいずれかにしたがうａｂＴＣＲエフェクター細胞組成物を投与するステ
ップを含む方法が提供される。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞組成物
とサイトカインとは、同時に投与される。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター
細胞組成物とサイトカインとは、逐次投与される。
であって、個体に、サイトカイン（例えば、ＩＬ－２）と組み合わせて、本明細書に記載
される実施形態のいずれかにしたがうａｂＴＣＲエフェクター細胞組成物を投与するステ
ップを含む方法が提供される。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞組成物
とサイトカインとは、同時に投与される。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター
細胞組成物とサイトカインとは、逐次投与される。
【0367】
一部の実施形態では、それを必要とする個体において標的抗原陽性疾患を処置する方法
であって、標的抗原を発現する細胞が、それらの表面上に、標的抗原とＭＨＣクラスＩタ
ンパク質とを含む複合体を通常は提示しないまたは比較的低いレベルで提示し、個体に、
ＭＨＣクラスＩタンパク質の発現を増加させる薬剤および／またはＭＨＣクラスＩタンパ
ク質による標的抗原の表面提示を増強する薬剤と組み合わせて、本明細書に記載される実
施形態のいずれかにしたがうａｂＴＣＲエフェクター細胞組成物を投与するステップを含
む、方法が提供される。一部の実施形態では、薬剤には、例えば、ＩＦＮ受容体アゴニス
ト、Ｈｓｐ９０阻害剤、ｐ５３発現のエンハンサー、および化学療法剤が含まれる。一部
の実施形態では、薬剤は、例えば、ＩＦＮγ、ＩＦＮβおよびＩＦＮαを含むＩＦＮ受容
体アゴニストである。一部の実施形態では、薬剤は、例えば、タネスピマイシン（１７－
ＡＡＧ）、アルベスピマイシン（１７－ＤＭＡＧ）、レタスピマイシン（ＩＰＩ－５０４
）、ＩＰＩ－４９３、ＣＮＦ２０２４／ＢＩＩＢ０２１、ＭＰＣ－３１００、Ｄｅｂｉｏ
０９３２（ＣＵＤＣ－３０５）、ＰＵ－Ｈ７１、Ｇａｎｅｔｅｓｐｉｂ（ＳＴＡ－９０
９０）、ＮＶＰ－ＡＵＹ９２２（ＶＥＲ－５２２６９）、ＨＳＰ９９０、ＫＷ－２４７８
、ＡＴ１３３８７、ＳＮＸ－５４２２、ＤＳ－２２４８およびＸＬ８８８を含むＨｓｐ９
０阻害剤である。一部の実施形態では、薬剤は、例えば、５－フルオロウラシルおよびヌ
トリン－３を含む、ｐ５３発現のエンハンサーである。一部の実施形態では、薬剤は、例
えば、トポテカン、エトポシド、シスプラチン、パクリタキセルおよびビンブラスチンを
含む化学療法剤である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞組成物と薬剤
とは、同時に投与される。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞組成物と薬
剤とは、逐次投与される。
であって、標的抗原を発現する細胞が、それらの表面上に、標的抗原とＭＨＣクラスＩタ
ンパク質とを含む複合体を通常は提示しないまたは比較的低いレベルで提示し、個体に、
ＭＨＣクラスＩタンパク質の発現を増加させる薬剤および／またはＭＨＣクラスＩタンパ
ク質による標的抗原の表面提示を増強する薬剤と組み合わせて、本明細書に記載される実
施形態のいずれかにしたがうａｂＴＣＲエフェクター細胞組成物を投与するステップを含
む、方法が提供される。一部の実施形態では、薬剤には、例えば、ＩＦＮ受容体アゴニス
ト、Ｈｓｐ９０阻害剤、ｐ５３発現のエンハンサー、および化学療法剤が含まれる。一部
の実施形態では、薬剤は、例えば、ＩＦＮγ、ＩＦＮβおよびＩＦＮαを含むＩＦＮ受容
体アゴニストである。一部の実施形態では、薬剤は、例えば、タネスピマイシン（１７－
ＡＡＧ）、アルベスピマイシン（１７－ＤＭＡＧ）、レタスピマイシン（ＩＰＩ－５０４
）、ＩＰＩ－４９３、ＣＮＦ２０２４／ＢＩＩＢ０２１、ＭＰＣ－３１００、Ｄｅｂｉｏ
０９３２（ＣＵＤＣ－３０５）、ＰＵ－Ｈ７１、Ｇａｎｅｔｅｓｐｉｂ（ＳＴＡ－９０
９０）、ＮＶＰ－ＡＵＹ９２２（ＶＥＲ－５２２６９）、ＨＳＰ９９０、ＫＷ－２４７８
、ＡＴ１３３８７、ＳＮＸ－５４２２、ＤＳ－２２４８およびＸＬ８８８を含むＨｓｐ９
０阻害剤である。一部の実施形態では、薬剤は、例えば、５－フルオロウラシルおよびヌ
トリン－３を含む、ｐ５３発現のエンハンサーである。一部の実施形態では、薬剤は、例
えば、トポテカン、エトポシド、シスプラチン、パクリタキセルおよびビンブラスチンを
含む化学療法剤である。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞組成物と薬剤
とは、同時に投与される。一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞組成物と薬
剤とは、逐次投与される。
【0368】
一部の実施形態では、それを必要とする個体において標的抗原関連疾患（例えば、がん
またはウイルス感染症）を処置する方法であって、個体に、有効量の、本明細書に記載さ
れる実施形態のいずれかにしたがうａｂＴＣＲをコードする核酸を含む組成物を投与する
ステップを含む方法が提供される。遺伝子送達のための方法は、当該分野で公知である。
例えば、その全体が参照によって本明細書に組み込まれる米国特許第５，３９９，３４６
号、同第５，５８０，８５９号、同第５，５８９，４６６号を参照のこと。
またはウイルス感染症）を処置する方法であって、個体に、有効量の、本明細書に記載さ
れる実施形態のいずれかにしたがうａｂＴＣＲをコードする核酸を含む組成物を投与する
ステップを含む方法が提供される。遺伝子送達のための方法は、当該分野で公知である。
例えば、その全体が参照によって本明細書に組み込まれる米国特許第５，３９９，３４６
号、同第５，５８０，８５９号、同第５，５８９，４６６号を参照のこと。
【0369】
がんの処置は、例えば、腫瘍の退縮、腫瘍の重量またはサイズの減少、進行までの時間
、生存の持続時間、無増悪生存期間、奏効率、応答の持続時間、生活の質、タンパク質の
発現および／または活性によって評価することができる。例えば放射線画像法による応答
の測定を含む、療法の有効性を決定するための手法を用いることができる。
、生存の持続時間、無増悪生存期間、奏効率、応答の持続時間、生活の質、タンパク質の
発現および／または活性によって評価することができる。例えば放射線画像法による応答
の測定を含む、療法の有効性を決定するための手法を用いることができる。
【0370】
一部の実施形態では、処置の有効性は、腫瘍成長阻害の百分率（％ＴＧＩ）として測定
され、これは、方程式１００－（Ｔ／Ｃ×１００）（式中、Ｔは、処置される腫瘍の相対
的な腫瘍体積の平均であり、Ｃは、無処置の腫瘍の相対的な腫瘍体積の平均である）を使
用して算出される。一部の実施形態では、％ＴＧＩは、約１０％、約２０％、約３０％、
約４０％、約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約９０％、約９１％、約９２％、
約９３％、約９４％、約９５％、または９５％超である。
され、これは、方程式１００－（Ｔ／Ｃ×１００）（式中、Ｔは、処置される腫瘍の相対
的な腫瘍体積の平均であり、Ｃは、無処置の腫瘍の相対的な腫瘍体積の平均である）を使
用して算出される。一部の実施形態では、％ＴＧＩは、約１０％、約２０％、約３０％、
約４０％、約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約９０％、約９１％、約９２％、
約９３％、約９４％、約９５％、または９５％超である。
【0371】
ウイルス感染症の処置は、例えば、ウイルス負荷、生存の持続時間、生活の質、タンパ
ク質発現および／または活性によって評価され得る。
ク質発現および／または活性によって評価され得る。
【0372】
疾患
ａｂＴＣＲエフェクター細胞は、一部の実施形態では、標的抗原と関連するがんを処置
するために有用であり得る。本明細書に記載される方法のいずれかを使用して処置され得
るがんには、血管新生されていない腫瘍、またはまだ実質的に血管新生されていない腫瘍
、ならびに血管新生された腫瘍が含まれる。がんは、非固形腫瘍（例えば、血液学的腫瘍
、例えば、白血病およびリンパ腫）を含み得、または固形腫瘍を含み得る。本発明のａｂ
ＴＣＲエフェクター細胞で処置されるがんの型には、癌腫、芽細胞腫および肉腫、ならび
にある特定の白血病またはリンパ様悪性腫瘍、良性および悪性の腫瘍、ならびに悪性腫瘍
、例えば、肉腫、癌腫およびメラノーマが含まれるがこれらに限定されない。成体腫瘍／
がんおよび小児腫瘍／がんもまた含まれる。
ａｂＴＣＲエフェクター細胞は、一部の実施形態では、標的抗原と関連するがんを処置
するために有用であり得る。本明細書に記載される方法のいずれかを使用して処置され得
るがんには、血管新生されていない腫瘍、またはまだ実質的に血管新生されていない腫瘍
、ならびに血管新生された腫瘍が含まれる。がんは、非固形腫瘍（例えば、血液学的腫瘍
、例えば、白血病およびリンパ腫）を含み得、または固形腫瘍を含み得る。本発明のａｂ
ＴＣＲエフェクター細胞で処置されるがんの型には、癌腫、芽細胞腫および肉腫、ならび
にある特定の白血病またはリンパ様悪性腫瘍、良性および悪性の腫瘍、ならびに悪性腫瘍
、例えば、肉腫、癌腫およびメラノーマが含まれるがこれらに限定されない。成体腫瘍／
がんおよび小児腫瘍／がんもまた含まれる。
【0373】
血液学的がんは、血液または骨髄のがんである。血液学的（または血行性）がんの例に
は、急性白血病（例えば、急性リンパ球性白血病、急性骨髄球性白血病、急性骨髄性白血
病ならびに骨髄芽球性、前骨髄球性、骨髄単球性、単球性および赤白血病）、慢性白血病
（例えば、慢性骨髄球性（顆粒球性）白血病、慢性骨髄性白血病および慢性リンパ球性白
血病）、真性赤血球増加症、リンパ腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫（低悪性度およ
び高悪性度形態）、多発性骨髄腫、形質細胞腫、ワルデンストレーム高ガンマグロブリン
血症、重鎖病、骨髄異形成症候群、ヘアリー細胞白血病および脊髄形成異常症を含む白血
病が含まれる。
は、急性白血病（例えば、急性リンパ球性白血病、急性骨髄球性白血病、急性骨髄性白血
病ならびに骨髄芽球性、前骨髄球性、骨髄単球性、単球性および赤白血病）、慢性白血病
（例えば、慢性骨髄球性（顆粒球性）白血病、慢性骨髄性白血病および慢性リンパ球性白
血病）、真性赤血球増加症、リンパ腫、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫（低悪性度およ
び高悪性度形態）、多発性骨髄腫、形質細胞腫、ワルデンストレーム高ガンマグロブリン
血症、重鎖病、骨髄異形成症候群、ヘアリー細胞白血病および脊髄形成異常症を含む白血
病が含まれる。
【0374】
固形腫瘍は、嚢胞も液体領域も通常は含まない、組織の異常な塊である。固形腫瘍は、
良性であっても、または悪性であってもよい。異なる型の固形腫瘍は、それらを形成する
細胞の型によって命名される（例えば、肉腫、癌腫およびリンパ腫）。固形腫瘍、例えば
、肉腫および癌腫の例には、副腎皮質癌、胆管細胞癌、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、
軟骨肉腫、骨肉腫および他の肉腫、滑膜腫、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋肉腫、横紋
筋肉腫、結腸癌、胃がん、リンパ様悪性腫瘍、膵臓がん、乳がん、肺がん、卵巣がん、前
立腺がん、肝細胞癌、扁平上皮細胞癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、甲状腺がん（例えば
、甲状腺髄様癌および甲状腺乳頭癌）、褐色細胞腫、皮脂腺癌、乳頭状癌、乳頭状腺癌、
髄様癌、気管支癌、腎細胞癌、ヘパトーマ、胆管癌、絨毛癌、ウィルムス腫瘍、子宮頸が
ん（例えば、子宮頸癌および前侵襲性子宮頸部形成異常）、結腸直腸がん、肛門、肛門管
または肛門直腸のがん、膣がん、外陰部のがん（例えば、扁平上皮細胞癌、上皮内癌、腺
癌および線維肉腫）、陰茎がん、口咽頭がん、食道がん、頭部がん（例えば、扁平上皮細
胞癌）、頸部がん（例えば、扁平上皮細胞癌）、精巣がん（例えば、セミノーマ、奇形腫
、胎児性癌、奇形癌、絨毛癌、肉腫、ライディッヒ細胞腫瘍、線維腫、線維腺腫、腺腫様
腫瘍および脂肪腫）、膀胱癌、腎臓がん、メラノーマ、子宮のがん（例えば、子宮内膜癌
）、尿路上皮がん（例えば、扁平上皮細胞癌、移行上皮癌、腺癌、尿管がんおよび膀胱が
ん）、およびＣＮＳ腫瘍（例えば、グリオーマ（例えば、脳幹グリオーマおよび混合グリ
オーマ）、グリア芽細胞腫（多形性グリア芽細胞腫としても公知）、星状細胞腫、ＣＮＳ
リンパ腫、胚細胞腫、髄芽細胞腫、シュワン細胞腫、頭蓋咽頭腫（craniopharyogioma）
、上衣（細胞）腫、松果体腫、血管芽細胞腫、聴神経腫、乏枝グリオーマ、髄膜腫（mena
ngioma）、神経芽細胞腫、網膜芽細胞腫および脳転移）が含まれる。
良性であっても、または悪性であってもよい。異なる型の固形腫瘍は、それらを形成する
細胞の型によって命名される（例えば、肉腫、癌腫およびリンパ腫）。固形腫瘍、例えば
、肉腫および癌腫の例には、副腎皮質癌、胆管細胞癌、線維肉腫、粘液肉腫、脂肪肉腫、
軟骨肉腫、骨肉腫および他の肉腫、滑膜腫、中皮腫、ユーイング腫瘍、平滑筋肉腫、横紋
筋肉腫、結腸癌、胃がん、リンパ様悪性腫瘍、膵臓がん、乳がん、肺がん、卵巣がん、前
立腺がん、肝細胞癌、扁平上皮細胞癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、甲状腺がん（例えば
、甲状腺髄様癌および甲状腺乳頭癌）、褐色細胞腫、皮脂腺癌、乳頭状癌、乳頭状腺癌、
髄様癌、気管支癌、腎細胞癌、ヘパトーマ、胆管癌、絨毛癌、ウィルムス腫瘍、子宮頸が
ん（例えば、子宮頸癌および前侵襲性子宮頸部形成異常）、結腸直腸がん、肛門、肛門管
または肛門直腸のがん、膣がん、外陰部のがん（例えば、扁平上皮細胞癌、上皮内癌、腺
癌および線維肉腫）、陰茎がん、口咽頭がん、食道がん、頭部がん（例えば、扁平上皮細
胞癌）、頸部がん（例えば、扁平上皮細胞癌）、精巣がん（例えば、セミノーマ、奇形腫
、胎児性癌、奇形癌、絨毛癌、肉腫、ライディッヒ細胞腫瘍、線維腫、線維腺腫、腺腫様
腫瘍および脂肪腫）、膀胱癌、腎臓がん、メラノーマ、子宮のがん（例えば、子宮内膜癌
）、尿路上皮がん（例えば、扁平上皮細胞癌、移行上皮癌、腺癌、尿管がんおよび膀胱が
ん）、およびＣＮＳ腫瘍（例えば、グリオーマ（例えば、脳幹グリオーマおよび混合グリ
オーマ）、グリア芽細胞腫（多形性グリア芽細胞腫としても公知）、星状細胞腫、ＣＮＳ
リンパ腫、胚細胞腫、髄芽細胞腫、シュワン細胞腫、頭蓋咽頭腫（craniopharyogioma）
、上衣（細胞）腫、松果体腫、血管芽細胞腫、聴神経腫、乏枝グリオーマ、髄膜腫（mena
ngioma）、神経芽細胞腫、網膜芽細胞腫および脳転移）が含まれる。
【0375】
がんの処置は、例えば、腫瘍の退縮、腫瘍の重量またはサイズの収縮、進行までの時間
、生存の持続期間、無増悪生存期間、全体的奏効率、応答の持続期間、生活の質、タンパ
ク質の発現および／または活性によって評価することができる。例えば放射線画像法によ
る応答の測定を含む、療法の有効性を決定するため手法を用いることができる。
、生存の持続期間、無増悪生存期間、全体的奏効率、応答の持続期間、生活の質、タンパ
ク質の発現および／または活性によって評価することができる。例えば放射線画像法によ
る応答の測定を含む、療法の有効性を決定するため手法を用いることができる。
【0376】
ａｂＴＣＲエフェクター細胞は、他の実施形態では、病原体関連（例えば、ウイルスが
コードする）抗原を標的化することによって感染性疾患を処置するために有用であり得る
。予防または処置される感染症は、例えば、ウイルス、細菌、原生生物または寄生生物に
よって引き起こされ得る。標的抗原は、病原体によって引き起こされる疾患の原因となる
、または病原体が感染した宿主において免疫学的応答を誘導することが可能な、病原性タ
ンパク質、ポリペプチドまたはペプチドであり得る。ａｂＴＣＲエフェクター細胞によっ
て標的化され得る病原性抗原には、Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂａｕｍａｎｎｉｉ、
Ａｎａｐｌａｓｍａ属、Ａｎａｐｌａｓｍａ ｐｈａｇｏｃｙｔｏｐｈｉｌｕｍ、Ａｎｃ
ｙｌｏｓｔｏｍａ ｂｒａｚｉｌｉｅｎｓｅ、Ａｎｃｙｌｏｓｔｏｍａ ｄｕｏｄｅｎａ
ｌｅ、Ａｒｃａｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｍ、Ａｓｃａｒｉｓ
ｌｕｍｂｒｉｃｏｉｄｅｓ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ属、アストロウイルス科、Ｂａｂｅ
ｓｉａ属、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｎｔｈｒａｃｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ、
Ｂａｒｔｏｎｅｌｌａ ｈｅｎｓｅｌａｅ、ＢＫウイルス、Ｂｌａｓｔｏｃｙｓｔｉｓ
ｈｏｍｉｎｉｓ、Ｂｌａｓｔｏｍｙｃｅｓ ｄｅｒｍａｔｉｔｉｄｉｓ、Ｂｏｒｄｅｔｅ
ｌｌａ ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉ、Ｂｏｒｒｅ
ｌｉａ属、Ｂｏｒｒｅｌｉａ ｓｐｐ、Ｂｒｕｃｅｌｌａ属、Ｂｒｕｇｉａ ｍａｌａｙ
ｉ、ブニヤウイルス科、Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ ｃｅｐａｃｉａおよび他のＢｕｒｋ
ｈｏｌｄｅｒｉａ種、Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ ｍａｌｌｅｉ、Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒ
ｉａ ｐｓｅｕｄｏｍａｌｌｅｉ、カリシウイルス科、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ属、
Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ、Ｃａｎｄｉｄａ ｓｐｐ、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｔ
ｒａｃｈｏｍａｔｉｓ、Ｃｈｌａｍｙｄｏｐｈｉｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｃｈｌａ
ｍｙｄｏｐｈｉｌａ ｐｓｉｔｔａｃｉ、ＣＪＤプリオン、Ｃｌｏｎｏｒｃｈｉｓ ｓｉ
ｎｅｎｓｉｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｂｏｔｕｌｉｎｕｍ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ
ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ、Ｃｌｏｓｔ
ｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｓｐｐ、Ｃｌｏｓｔ
ｒｉｄｉｕｍ ｔｅｔａｎｉ、Ｃｏｃｃｉｄｉｏｉｄｅｓ ｓｐｐ、コロナウイルス、Ｃ
ｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅ、Ｃｏｘｉｅｌｌａ ｂｕｒｎ
ｅｔｉｉ、クリミアコンゴ出血熱ウイルス、Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｎｅｏｆｏｒｍ
ａｎｓ、Ｃｒｙｐｔｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ属、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、デング
ウイルス（ＤＥＮ－１、ＤＥＮ－２、ＤＥＮ－３およびＤＥＮ－４）、Ｄｉｅｎｔａｍｏ
ｅｂａ ｆｒａｇｉｌｉｓ、エボラウイルス（ＥＢＯＶ）、Ｅｃｈｉｎｏｃｏｃｃｕｓ属
、Ｅｈｒｌｉｃｈｉａ ｃｈａｆｆｅｅｎｓｉｓ、Ｅｈｒｌｉｃｈｉａ ｅｗｉｎｇｉｉ
、Ｅｈｒｌｉｃｈｉａ属、Ｅｎｔａｍｏｅｂａ ｈｉｓｔｏｌｙｔｉｃａ、Ｅｎｔｅｒｏ
ｃｏｃｃｕｓ属、エンテロウイルス属、エンテロウイルス、主にコクサッキーＡウイルス
およびエンテロウイルス７１（ＥＶ７１）、Ｅｐｉｄｅｒｍｏｐｈｙｔｏｎ ｓｐｐ、エ
プスタイン－バーウイルス（ＥＢＶ）、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ Ｏ１５７：
Ｈ７、Ｏ１１１およびＯ１０４：Ｈ４、Ｆａｓｃｉｏｌａ ｈｅｐａｔｉｃａおよびＦａ
ｓｃｉｏｌａ ｇｉｇａｎｔｉｃａ、ＦＦＩプリオン、Ｆｉｌａｒｉｏｉｄｅａ上科、フ
ラビウイルス、Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ ｔｕｌａｒｅｎｓｉｓ、Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒ
ｉｕｍ属、Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ ｃａｎｄｉｄｕｍ、Ｇｉａｒｄｉａ ｉｎｔｅｓｔｉ
ｎａｌｉｓ、Ｇｎａｔｈｏｓｔｏｍａ ｓｐｐ、ＧＳＳプリオン、グアナリトウイルス、
Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｄｕｃｒｅｙｉ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚ
ａｅ、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ、ヘニパウイルス（ヘンドラウイルス、
ニパーウイルス）、Ａ型肝炎ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、Ｃ型肝炎ウイルス
（ＨＣＶ）、Ｄ型肝炎ウイルス、Ｅ型肝炎ウイルス、単純ヘルペスウイルス１および２（
ＨＳＶ－１およびＨＳＶ－２）、Ｈｉｓｔｏｐｌａｓｍａ ｃａｐｓｕｌａｔｕｍ、ＨＩ
Ｖ（ヒト免疫不全ウイルス）、Ｈｏｒｔａｅａ ｗｅｒｎｅｃｋｉｉ、ヒトボカウイルス
（ＨＢｏＶ）、ヒトヘルペスウイルス６（ＨＨＶ－６）およびヒトヘルペスウイルス７（
ＨＨＶ－７）、ヒトメタニューモウイルス（ｈＭＰＶ）、ヒトパピローマウイルス（ＨＰ
Ｖ）、ヒトパラインフルエンザウイルス（ＨＰＩＶ）、ヒトＴ細胞白血病ウイルス１（Ｈ
ＴＬＶ－１）、日本脳炎ウイルス、ＪＣウイルス、フニンウイルス、カポジ肉腫関連ヘル
ペスウイルス（ＫＳＨＶ）、Ｋｉｎｇｅｌｌａ ｋｉｎｇａｅ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ
ｇｒａｎｕｌｏｍａｔｉｓ、クーループリオン、ラッサウイルス、Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ
ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ、Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ属、Ｌｅｐｔｏｓｐｉｒａ属、Ｌｉｓ
ｔｅｒｉａ ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ、リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス（ＬＣＭＶ）
、マチュポウイルス、Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｐ、マールブルグウイルス、麻疹ウイ
ルス、Ｍｅｔａｇｏｎｉｍｕｓ ｙｏｋａｇａｗａｉ、Ｍｉｃｒｏｓｐｏｒｉｄｉａ ｐ
ｈｙｌｕｍ、伝染性軟属腫ウイルス（ＭＣＶ）、ムンプスウイルス、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅ
ｒｉｕｍ ｌｅｐｒａｅおよびＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｅｐｒｏｍａｔｏｓｉｓ
、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕ
ｍ ｕｌｃｅｒａｎｓ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｎａｅｇｌｅｒ
ｉａ ｆｏｗｌｅｒｉ、Ｎｅｃａｔｏｒ ａｍｅｒｉｃａｎｕｓ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ
ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ、Ｎｏｃａｒ
ｄｉａ ａｓｔｅｒｏｉｄｅｓ、Ｎｏｃａｒｄｉａ ｓｐｐ、Ｏｎｃｈｏｃｅｒｃａ ｖ
ｏｌｖｕｌｕｓ、Ｏｒｉｅｎｔｉａ ｔｓｕｔｓｕｇａｍｕｓｈｉ、オルトミクソウイル
ス科（インフルエンザ）、Ｐａｒａｃｏｃｃｉｄｉｏｉｄｅｓ ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉ
ｓ、Ｐａｒａｇｏｎｉｍｕｓ ｓｐｐ、Ｐａｒａｇｏｎｉｍｕｓ ｗｅｓｔｅｒｍａｎｉ
、パルボウイルスＢ１９、Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ属、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ属、Ｐｎｅ
ｕｍｏｃｙｓｔｉｓ ｊｉｒｏｖｅｃｉｉ、ポリオウイルス、狂犬病ウイルス、呼吸器多
核体ウイルス（ＲＳＶ）、ライノウイルス属、ライノウイルス、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ
ａｋａｒｉ、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ属、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ｐｒｏｗａｚｅｋｉｉ、
Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ｒｉｃｋｅｔｔｓｉｉ、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ｔｙｐｈｉ、リ
フトバレー熱ウイルス、ロタウイルス、風疹ウイルス、サビアウイルス、Ｓａｌｍｏｎｅ
ｌｌａ属、Ｓａｒｃｏｐｔｅｓ ｓｃａｂｉｅｉ、ＳＡＲＳコロナウイルス、Ｓｃｈｉｓ
ｔｏｓｏｍａ属、Ｓｈｉｇｅｌｌａ属、シンノンブルウイルス、ハンタウイルス、Ｓｐｏ
ｒｏｔｈｒｉｘ ｓｃｈｅｎｃｋｉｉ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ属、Ｓｔａｐｈｙ
ｌｏｃｏｃｃｕｓ属、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｇａｌａｃｔｉａｅ、Ｓｔｒｅｐ
ｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎ
ｅｓ、Ｓｔｒｏｎｇｙｌｏｉｄｅｓ ｓｔｅｒｃｏｒａｌｉｓ、Ｔａｅｎｉａ属、Ｔａｅ
ｎｉａ ｓｏｌｉｕｍ、ダニ媒介性脳炎ウイルス（ＴＢＥＶ）、Ｔｏｘｏｃａｒａ ｃａ
ｎｉｓまたはＴｏｘｏｃａｒａ ｃａｔｉ、Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ ｇｏｎｄｉｉ、Ｔｒ
ｅｐｏｎｅｍａ ｐａｌｌｉｄｕｍ、Ｔｒｉｃｈｉｎｅｌｌａ ｓｐｉｒａｌｉｓ、Ｔｒ
ｉｃｈｏｍｏｎａｓ ｖａｇｉｎａｌｉｓ、Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ ｓｐｐ、Ｔｒｉ
ｃｈｕｒｉｓ ｔｒｉｃｈｉｕｒａ、Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ ｂｒｕｃｅｉ、Ｔｒｙｐ
ａｎｏｓｏｍａ ｃｒｕｚｉ、Ｕｒｅａｐｌａｓｍａ ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ、水痘帯
状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）、水痘帯状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）、大痘瘡または小痘瘡、ｖ
ＣＪＤプリオン、ベネズエラウマ脳炎ウイルス、Ｖｉｂｒｉｏ ｃｈｏｌｅｒａｅ、ウエ
ストナイルウイルス、西部ウマ脳炎ウイルス、Ｗｕｃｈｅｒｅｒｉａ ｂａｎｃｒｏｆｔ
ｉ、黄熱病ウイルス、Ｙｅｒｓｉｎｉａ ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｃａ、Ｙｅｒｓｉｎ
ｉａ ｐｅｓｔｉｓ、ならびにＹｅｒｓｉｎｉａ ｐｓｅｕｄｏｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉ
ｓに由来する抗原が含まれるがこれらに限定されない。
コードする）抗原を標的化することによって感染性疾患を処置するために有用であり得る
。予防または処置される感染症は、例えば、ウイルス、細菌、原生生物または寄生生物に
よって引き起こされ得る。標的抗原は、病原体によって引き起こされる疾患の原因となる
、または病原体が感染した宿主において免疫学的応答を誘導することが可能な、病原性タ
ンパク質、ポリペプチドまたはペプチドであり得る。ａｂＴＣＲエフェクター細胞によっ
て標的化され得る病原性抗原には、Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂａｕｍａｎｎｉｉ、
Ａｎａｐｌａｓｍａ属、Ａｎａｐｌａｓｍａ ｐｈａｇｏｃｙｔｏｐｈｉｌｕｍ、Ａｎｃ
ｙｌｏｓｔｏｍａ ｂｒａｚｉｌｉｅｎｓｅ、Ａｎｃｙｌｏｓｔｏｍａ ｄｕｏｄｅｎａ
ｌｅ、Ａｒｃａｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｍ、Ａｓｃａｒｉｓ
ｌｕｍｂｒｉｃｏｉｄｅｓ、Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ属、アストロウイルス科、Ｂａｂｅ
ｓｉａ属、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｎｔｈｒａｃｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ、
Ｂａｒｔｏｎｅｌｌａ ｈｅｎｓｅｌａｅ、ＢＫウイルス、Ｂｌａｓｔｏｃｙｓｔｉｓ
ｈｏｍｉｎｉｓ、Ｂｌａｓｔｏｍｙｃｅｓ ｄｅｒｍａｔｉｔｉｄｉｓ、Ｂｏｒｄｅｔｅ
ｌｌａ ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉ、Ｂｏｒｒｅ
ｌｉａ属、Ｂｏｒｒｅｌｉａ ｓｐｐ、Ｂｒｕｃｅｌｌａ属、Ｂｒｕｇｉａ ｍａｌａｙ
ｉ、ブニヤウイルス科、Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ ｃｅｐａｃｉａおよび他のＢｕｒｋ
ｈｏｌｄｅｒｉａ種、Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ ｍａｌｌｅｉ、Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒ
ｉａ ｐｓｅｕｄｏｍａｌｌｅｉ、カリシウイルス科、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ属、
Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ、Ｃａｎｄｉｄａ ｓｐｐ、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｔ
ｒａｃｈｏｍａｔｉｓ、Ｃｈｌａｍｙｄｏｐｈｉｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｃｈｌａ
ｍｙｄｏｐｈｉｌａ ｐｓｉｔｔａｃｉ、ＣＪＤプリオン、Ｃｌｏｎｏｒｃｈｉｓ ｓｉ
ｎｅｎｓｉｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｂｏｔｕｌｉｎｕｍ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ
ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ、Ｃｌｏｓｔ
ｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｓｐｐ、Ｃｌｏｓｔ
ｒｉｄｉｕｍ ｔｅｔａｎｉ、Ｃｏｃｃｉｄｉｏｉｄｅｓ ｓｐｐ、コロナウイルス、Ｃ
ｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅ、Ｃｏｘｉｅｌｌａ ｂｕｒｎ
ｅｔｉｉ、クリミアコンゴ出血熱ウイルス、Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｎｅｏｆｏｒｍ
ａｎｓ、Ｃｒｙｐｔｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ属、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、デング
ウイルス（ＤＥＮ－１、ＤＥＮ－２、ＤＥＮ－３およびＤＥＮ－４）、Ｄｉｅｎｔａｍｏ
ｅｂａ ｆｒａｇｉｌｉｓ、エボラウイルス（ＥＢＯＶ）、Ｅｃｈｉｎｏｃｏｃｃｕｓ属
、Ｅｈｒｌｉｃｈｉａ ｃｈａｆｆｅｅｎｓｉｓ、Ｅｈｒｌｉｃｈｉａ ｅｗｉｎｇｉｉ
、Ｅｈｒｌｉｃｈｉａ属、Ｅｎｔａｍｏｅｂａ ｈｉｓｔｏｌｙｔｉｃａ、Ｅｎｔｅｒｏ
ｃｏｃｃｕｓ属、エンテロウイルス属、エンテロウイルス、主にコクサッキーＡウイルス
およびエンテロウイルス７１（ＥＶ７１）、Ｅｐｉｄｅｒｍｏｐｈｙｔｏｎ ｓｐｐ、エ
プスタイン－バーウイルス（ＥＢＶ）、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ Ｏ１５７：
Ｈ７、Ｏ１１１およびＯ１０４：Ｈ４、Ｆａｓｃｉｏｌａ ｈｅｐａｔｉｃａおよびＦａ
ｓｃｉｏｌａ ｇｉｇａｎｔｉｃａ、ＦＦＩプリオン、Ｆｉｌａｒｉｏｉｄｅａ上科、フ
ラビウイルス、Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ ｔｕｌａｒｅｎｓｉｓ、Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒ
ｉｕｍ属、Ｇｅｏｔｒｉｃｈｕｍ ｃａｎｄｉｄｕｍ、Ｇｉａｒｄｉａ ｉｎｔｅｓｔｉ
ｎａｌｉｓ、Ｇｎａｔｈｏｓｔｏｍａ ｓｐｐ、ＧＳＳプリオン、グアナリトウイルス、
Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｄｕｃｒｅｙｉ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚ
ａｅ、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ、ヘニパウイルス（ヘンドラウイルス、
ニパーウイルス）、Ａ型肝炎ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、Ｃ型肝炎ウイルス
（ＨＣＶ）、Ｄ型肝炎ウイルス、Ｅ型肝炎ウイルス、単純ヘルペスウイルス１および２（
ＨＳＶ－１およびＨＳＶ－２）、Ｈｉｓｔｏｐｌａｓｍａ ｃａｐｓｕｌａｔｕｍ、ＨＩ
Ｖ（ヒト免疫不全ウイルス）、Ｈｏｒｔａｅａ ｗｅｒｎｅｃｋｉｉ、ヒトボカウイルス
（ＨＢｏＶ）、ヒトヘルペスウイルス６（ＨＨＶ－６）およびヒトヘルペスウイルス７（
ＨＨＶ－７）、ヒトメタニューモウイルス（ｈＭＰＶ）、ヒトパピローマウイルス（ＨＰ
Ｖ）、ヒトパラインフルエンザウイルス（ＨＰＩＶ）、ヒトＴ細胞白血病ウイルス１（Ｈ
ＴＬＶ－１）、日本脳炎ウイルス、ＪＣウイルス、フニンウイルス、カポジ肉腫関連ヘル
ペスウイルス（ＫＳＨＶ）、Ｋｉｎｇｅｌｌａ ｋｉｎｇａｅ、Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ
ｇｒａｎｕｌｏｍａｔｉｓ、クーループリオン、ラッサウイルス、Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ
ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ、Ｌｅｉｓｈｍａｎｉａ属、Ｌｅｐｔｏｓｐｉｒａ属、Ｌｉｓ
ｔｅｒｉａ ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ、リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス（ＬＣＭＶ）
、マチュポウイルス、Ｍａｌａｓｓｅｚｉａ ｓｐｐ、マールブルグウイルス、麻疹ウイ
ルス、Ｍｅｔａｇｏｎｉｍｕｓ ｙｏｋａｇａｗａｉ、Ｍｉｃｒｏｓｐｏｒｉｄｉａ ｐ
ｈｙｌｕｍ、伝染性軟属腫ウイルス（ＭＣＶ）、ムンプスウイルス、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅ
ｒｉｕｍ ｌｅｐｒａｅおよびＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｅｐｒｏｍａｔｏｓｉｓ
、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕ
ｍ ｕｌｃｅｒａｎｓ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｎａｅｇｌｅｒ
ｉａ ｆｏｗｌｅｒｉ、Ｎｅｃａｔｏｒ ａｍｅｒｉｃａｎｕｓ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ
ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ、Ｎｏｃａｒ
ｄｉａ ａｓｔｅｒｏｉｄｅｓ、Ｎｏｃａｒｄｉａ ｓｐｐ、Ｏｎｃｈｏｃｅｒｃａ ｖ
ｏｌｖｕｌｕｓ、Ｏｒｉｅｎｔｉａ ｔｓｕｔｓｕｇａｍｕｓｈｉ、オルトミクソウイル
ス科（インフルエンザ）、Ｐａｒａｃｏｃｃｉｄｉｏｉｄｅｓ ｂｒａｓｉｌｉｅｎｓｉ
ｓ、Ｐａｒａｇｏｎｉｍｕｓ ｓｐｐ、Ｐａｒａｇｏｎｉｍｕｓ ｗｅｓｔｅｒｍａｎｉ
、パルボウイルスＢ１９、Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ属、Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍ属、Ｐｎｅ
ｕｍｏｃｙｓｔｉｓ ｊｉｒｏｖｅｃｉｉ、ポリオウイルス、狂犬病ウイルス、呼吸器多
核体ウイルス（ＲＳＶ）、ライノウイルス属、ライノウイルス、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ
ａｋａｒｉ、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ属、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ｐｒｏｗａｚｅｋｉｉ、
Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ｒｉｃｋｅｔｔｓｉｉ、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ｔｙｐｈｉ、リ
フトバレー熱ウイルス、ロタウイルス、風疹ウイルス、サビアウイルス、Ｓａｌｍｏｎｅ
ｌｌａ属、Ｓａｒｃｏｐｔｅｓ ｓｃａｂｉｅｉ、ＳＡＲＳコロナウイルス、Ｓｃｈｉｓ
ｔｏｓｏｍａ属、Ｓｈｉｇｅｌｌａ属、シンノンブルウイルス、ハンタウイルス、Ｓｐｏ
ｒｏｔｈｒｉｘ ｓｃｈｅｎｃｋｉｉ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ属、Ｓｔａｐｈｙ
ｌｏｃｏｃｃｕｓ属、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｇａｌａｃｔｉａｅ、Ｓｔｒｅｐ
ｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎ
ｅｓ、Ｓｔｒｏｎｇｙｌｏｉｄｅｓ ｓｔｅｒｃｏｒａｌｉｓ、Ｔａｅｎｉａ属、Ｔａｅ
ｎｉａ ｓｏｌｉｕｍ、ダニ媒介性脳炎ウイルス（ＴＢＥＶ）、Ｔｏｘｏｃａｒａ ｃａ
ｎｉｓまたはＴｏｘｏｃａｒａ ｃａｔｉ、Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ ｇｏｎｄｉｉ、Ｔｒ
ｅｐｏｎｅｍａ ｐａｌｌｉｄｕｍ、Ｔｒｉｃｈｉｎｅｌｌａ ｓｐｉｒａｌｉｓ、Ｔｒ
ｉｃｈｏｍｏｎａｓ ｖａｇｉｎａｌｉｓ、Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ ｓｐｐ、Ｔｒｉ
ｃｈｕｒｉｓ ｔｒｉｃｈｉｕｒａ、Ｔｒｙｐａｎｏｓｏｍａ ｂｒｕｃｅｉ、Ｔｒｙｐ
ａｎｏｓｏｍａ ｃｒｕｚｉ、Ｕｒｅａｐｌａｓｍａ ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ、水痘帯
状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）、水痘帯状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）、大痘瘡または小痘瘡、ｖ
ＣＪＤプリオン、ベネズエラウマ脳炎ウイルス、Ｖｉｂｒｉｏ ｃｈｏｌｅｒａｅ、ウエ
ストナイルウイルス、西部ウマ脳炎ウイルス、Ｗｕｃｈｅｒｅｒｉａ ｂａｎｃｒｏｆｔ
ｉ、黄熱病ウイルス、Ｙｅｒｓｉｎｉａ ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｃａ、Ｙｅｒｓｉｎ
ｉａ ｐｅｓｔｉｓ、ならびにＹｅｒｓｉｎｉａ ｐｓｅｕｄｏｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉ
ｓに由来する抗原が含まれるがこれらに限定されない。
【0377】
一部の実施形態では、ａｂＴＣＲエフェクター細胞は、発癌性感染性疾患、例えば、発
癌性ウイルスによる感染症を処置するために使用される。発癌性ウイルスには、ＣＭＶ、
ＥＢＶ、ＨＢＶ、ＫＳＨＶ、ＨＰＶ、ＭＣＶ、ＨＴＬＶ－１、ＨＩＶ－１およびＨＣＶが
含まれるがこれらに限定されない。ａｂＴＣＲの標的抗原は、Ｔａｘ、Ｅ７、Ｅ６／Ｅ７
、Ｅ６、ＨＢｘ、ＥＢＮＡタンパク質（例えば、ＥＢＮＡ３Ａ、ＥＢＮＡ３ＣおよびＥＢ
ＮＡ２）、ｖ－サイクリン、ＬＡＮＡ１、ＬＡＮＡ２、ＬＭＰ－１、ｋ－ｂＺＩＰ、ＲＴ
Ａ、ＫＳＨＶ Ｋ８、およびそれらの断片が含まれるがこれらに限定されないウイルス腫
瘍性タンパク質であり得る。Ahuja, Richaら、Curr. Sci.、２０１４年を参照のこと。
癌性ウイルスによる感染症を処置するために使用される。発癌性ウイルスには、ＣＭＶ、
ＥＢＶ、ＨＢＶ、ＫＳＨＶ、ＨＰＶ、ＭＣＶ、ＨＴＬＶ－１、ＨＩＶ－１およびＨＣＶが
含まれるがこれらに限定されない。ａｂＴＣＲの標的抗原は、Ｔａｘ、Ｅ７、Ｅ６／Ｅ７
、Ｅ６、ＨＢｘ、ＥＢＮＡタンパク質（例えば、ＥＢＮＡ３Ａ、ＥＢＮＡ３ＣおよびＥＢ
ＮＡ２）、ｖ－サイクリン、ＬＡＮＡ１、ＬＡＮＡ２、ＬＭＰ－１、ｋ－ｂＺＩＰ、ＲＴ
Ａ、ＫＳＨＶ Ｋ８、およびそれらの断片が含まれるがこれらに限定されないウイルス腫
瘍性タンパク質であり得る。Ahuja, Richaら、Curr. Sci.、２０１４年を参照のこと。
【0378】
製造物品およびキット
本発明の一部の実施形態では、標的抗原陽性疾患、例えば、がん（例えば、副腎皮質癌
、膀胱がん、乳がん、子宮頸がん、胆管細胞癌、結腸直腸がん、食道がん、グリア芽細胞
腫、グリオーマ、肝細胞癌、頭頸部がん、腎臓がん、肺がん、メラノーマ、中皮腫、多発
性骨髄腫、膵臓がん、褐色細胞腫、形質細胞腫、神経芽細胞腫、卵巣がん、前立腺がん、
肉腫、胃がん、子宮がんまたは甲状腺がん）またはウイルス感染症（例えば、ＣＭＶ、Ｅ
ＢＶ、ＨＢＶ、ＫＳＨＶ、ＨＰＶ、ＭＣＶ、ＨＴＬＶ－１、ＨＩＶ－１またはＨＣＶによ
る感染症）の処置に有用な材料を含む製造物品が提供される。製造物品は、容器、および
、容器上のまたは容器に付随する標識または添付文書を含み得る。適切な容器としては、
例えば、ビン、バイアル、シリンジなどが挙げられる。容器は、ガラスまたはプラスチッ
クなどの種々の材料から形成されたものであってよい。一般に、容器は、本明細書に記載
の疾患または障害の処置に有効である組成物を保持し、滅菌アクセスポートを有し得る（
例えば、容器は、静脈内溶液バッグまたは皮下注射針で穴をあけることができる止め栓を
有するバイアルであってよい）。組成物中の少なくとも１つの活性剤は、本発明のａｂＴ
ＣＲをその表面上に提示するエフェクター細胞である。標識または添付文書は、組成物が
特定の状態を処置するために使用されるものであることを示す。標識または添付文書は、
ａｂＴＣＲエフェクター細胞組成物の患者への投与に関する指示をさらに含む。本明細書
に記載のコンビナトリアル治療を含む製造物品およびキットも企図される。
本発明の一部の実施形態では、標的抗原陽性疾患、例えば、がん（例えば、副腎皮質癌
、膀胱がん、乳がん、子宮頸がん、胆管細胞癌、結腸直腸がん、食道がん、グリア芽細胞
腫、グリオーマ、肝細胞癌、頭頸部がん、腎臓がん、肺がん、メラノーマ、中皮腫、多発
性骨髄腫、膵臓がん、褐色細胞腫、形質細胞腫、神経芽細胞腫、卵巣がん、前立腺がん、
肉腫、胃がん、子宮がんまたは甲状腺がん）またはウイルス感染症（例えば、ＣＭＶ、Ｅ
ＢＶ、ＨＢＶ、ＫＳＨＶ、ＨＰＶ、ＭＣＶ、ＨＴＬＶ－１、ＨＩＶ－１またはＨＣＶによ
る感染症）の処置に有用な材料を含む製造物品が提供される。製造物品は、容器、および
、容器上のまたは容器に付随する標識または添付文書を含み得る。適切な容器としては、
例えば、ビン、バイアル、シリンジなどが挙げられる。容器は、ガラスまたはプラスチッ
クなどの種々の材料から形成されたものであってよい。一般に、容器は、本明細書に記載
の疾患または障害の処置に有効である組成物を保持し、滅菌アクセスポートを有し得る（
例えば、容器は、静脈内溶液バッグまたは皮下注射針で穴をあけることができる止め栓を
有するバイアルであってよい）。組成物中の少なくとも１つの活性剤は、本発明のａｂＴ
ＣＲをその表面上に提示するエフェクター細胞である。標識または添付文書は、組成物が
特定の状態を処置するために使用されるものであることを示す。標識または添付文書は、
ａｂＴＣＲエフェクター細胞組成物の患者への投与に関する指示をさらに含む。本明細書
に記載のコンビナトリアル治療を含む製造物品およびキットも企図される。
【0379】
添付文書とは、市販の治療用製品の市販パッケージに慣例的に含まれる、そのような治
療用製品の使用にかかわる適応症、使用法、投与量、投与、禁忌および／または警告につ
いての情報を含有する指示を指す。一部の実施形態では、添付文書は、組成物が、標的抗
原陽性がん（例えば、副腎皮質癌、膀胱がん、乳がん、子宮頸がん、胆管細胞癌、結腸直
腸がん、食道がん、グリア芽細胞腫、グリオーマ、肝細胞癌、頭頸部がん、腎臓がん、肺
がん、メラノーマ、中皮腫、多発性骨髄腫、膵臓がん、褐色細胞腫、形質細胞腫、神経芽
細胞腫、卵巣がん、前立腺がん、肉腫、胃がん、子宮がんまたは甲状腺がん）を処置する
ために使用されるものであることを示す。他の実施形態では、添付文書は、組成物が、標
的抗原陽性ウイルス感染症（例えば、ＣＭＶ、ＥＢＶ、ＨＢＶ、ＫＳＨＶ、ＨＰＶ、ＭＣ
Ｖ、ＨＴＬＶ－１、ＨＩＶ－１またはＨＣＶによる感染症）を処置するために使用される
ものであることを示す。
療用製品の使用にかかわる適応症、使用法、投与量、投与、禁忌および／または警告につ
いての情報を含有する指示を指す。一部の実施形態では、添付文書は、組成物が、標的抗
原陽性がん（例えば、副腎皮質癌、膀胱がん、乳がん、子宮頸がん、胆管細胞癌、結腸直
腸がん、食道がん、グリア芽細胞腫、グリオーマ、肝細胞癌、頭頸部がん、腎臓がん、肺
がん、メラノーマ、中皮腫、多発性骨髄腫、膵臓がん、褐色細胞腫、形質細胞腫、神経芽
細胞腫、卵巣がん、前立腺がん、肉腫、胃がん、子宮がんまたは甲状腺がん）を処置する
ために使用されるものであることを示す。他の実施形態では、添付文書は、組成物が、標
的抗原陽性ウイルス感染症（例えば、ＣＭＶ、ＥＢＶ、ＨＢＶ、ＫＳＨＶ、ＨＰＶ、ＭＣ
Ｖ、ＨＴＬＶ－１、ＨＩＶ－１またはＨＣＶによる感染症）を処置するために使用される
ものであることを示す。
【0380】
さらに、製造物品は、注射用静菌水（ＢＷＦＩ）、リン酸緩衝食塩水、リンゲル液およ
びブドウ糖溶液などの、薬学的に許容される緩衝液を含む第２の容器をさらに含み得る。
製造物品は、他の緩衝液、希釈剤、フィルター、針、およびシリンジを含む、商業的観点
および使用者の観点から望ましい他の材料をさらに含み得る。
びブドウ糖溶液などの、薬学的に許容される緩衝液を含む第２の容器をさらに含み得る。
製造物品は、他の緩衝液、希釈剤、フィルター、針、およびシリンジを含む、商業的観点
および使用者の観点から望ましい他の材料をさらに含み得る。
【0381】
任意選択で製造物品と組み合わせた、本明細書に記載される標的抗原陽性疾患または障
害の処置のためなどの種々の目的に有用なキットもまた提供される。本発明のキットは、
ａｂＴＣＲエフェクター細胞組成物（または単位剤形および／または製造物品）を含む１
つまたは複数の容器を含み、一部の実施形態では、本明細書に記載される方法のいずれか
にしたがう使用のための別の薬剤（例えば、本明細書に記載される薬剤）および／または
指示をさらに含む。キットは、処置に適切な個体の選択の説明をさらに含み得る。本発明
のキット中で提供される指示は、典型的には、標識または添付文書（例えば、キット中に
含まれる紙シート）上の書面による指示であるが、機械可読指示（例えば、磁気または光
学記憶ディスク上に保持される指示）もまた許容される。
害の処置のためなどの種々の目的に有用なキットもまた提供される。本発明のキットは、
ａｂＴＣＲエフェクター細胞組成物（または単位剤形および／または製造物品）を含む１
つまたは複数の容器を含み、一部の実施形態では、本明細書に記載される方法のいずれか
にしたがう使用のための別の薬剤（例えば、本明細書に記載される薬剤）および／または
指示をさらに含む。キットは、処置に適切な個体の選択の説明をさらに含み得る。本発明
のキット中で提供される指示は、典型的には、標識または添付文書（例えば、キット中に
含まれる紙シート）上の書面による指示であるが、機械可読指示（例えば、磁気または光
学記憶ディスク上に保持される指示）もまた許容される。
【0382】
例えば、一部の実施形態では、キットは、ａｂＴＣＲをその表面上に提示するエフェク
ター細胞を含む組成物を含む。一部の実施形態では、キットは、ａ）ａｂＴＣＲをその表
面上に提示するエフェクター細胞を含む組成物、およびｂ）有効量の少なくとも１つの他
の薬剤を含み、他の薬剤は、ＭＨＣタンパク質の発現を増加させるおよび／またはＭＨＣ
タンパク質によるペプチドの表面提示を増強する（例えば、ＩＦＮγ、ＩＦＮβ、ＩＦＮ
α、またはＨｓｐ９０阻害剤）。一部の実施形態では、キットは、ａ）ａｂＴＣＲをその
表面上に提示するエフェクター細胞を含む組成物、およびｂ）標的抗原陽性疾患（例えば
、がんまたはウイルス感染症）の処置のために個体にａｂＴＣＲエフェクター細胞組成物
を投与することについての指示を含む。一部の実施形態では、キットは、ａ）ａｂＴＣＲ
をその表面上に提示するエフェクター細胞を含む組成物、ｂ）有効量の少なくとも１つの
他の薬剤であって、ＭＨＣタンパク質の発現を増加させるおよび／またはＭＨＣタンパク
質によるペプチドの表面提示を増強する（例えば、ＩＦＮγ、ＩＦＮβ、ＩＦＮα、また
はＨｓｐ９０阻害剤）、他の薬剤、ならびにｃ）標的抗原陽性疾患（例えば、がんまたは
ウイルス感染症）の処置のために個体にａｂＴＣＲエフェクター細胞組成物および他の薬
剤（複数可）を投与することについての指示を含む。ａｂＴＣＲエフェクター細胞組成物
および他の薬剤（複数可）は、別々の容器中に存在していてもよく、単一の容器中に存在
していてもよい。例えば、キットは、１つの別個の組成物を含んでもよく、２つまたはそ
れよりも多い組成物であって、１つの組成物がａｂＴＣＲエフェクター細胞を含み、別の
組成物が他の薬剤を含む、組成物を含んでもよい。
ター細胞を含む組成物を含む。一部の実施形態では、キットは、ａ）ａｂＴＣＲをその表
面上に提示するエフェクター細胞を含む組成物、およびｂ）有効量の少なくとも１つの他
の薬剤を含み、他の薬剤は、ＭＨＣタンパク質の発現を増加させるおよび／またはＭＨＣ
タンパク質によるペプチドの表面提示を増強する（例えば、ＩＦＮγ、ＩＦＮβ、ＩＦＮ
α、またはＨｓｐ９０阻害剤）。一部の実施形態では、キットは、ａ）ａｂＴＣＲをその
表面上に提示するエフェクター細胞を含む組成物、およびｂ）標的抗原陽性疾患（例えば
、がんまたはウイルス感染症）の処置のために個体にａｂＴＣＲエフェクター細胞組成物
を投与することについての指示を含む。一部の実施形態では、キットは、ａ）ａｂＴＣＲ
をその表面上に提示するエフェクター細胞を含む組成物、ｂ）有効量の少なくとも１つの
他の薬剤であって、ＭＨＣタンパク質の発現を増加させるおよび／またはＭＨＣタンパク
質によるペプチドの表面提示を増強する（例えば、ＩＦＮγ、ＩＦＮβ、ＩＦＮα、また
はＨｓｐ９０阻害剤）、他の薬剤、ならびにｃ）標的抗原陽性疾患（例えば、がんまたは
ウイルス感染症）の処置のために個体にａｂＴＣＲエフェクター細胞組成物および他の薬
剤（複数可）を投与することについての指示を含む。ａｂＴＣＲエフェクター細胞組成物
および他の薬剤（複数可）は、別々の容器中に存在していてもよく、単一の容器中に存在
していてもよい。例えば、キットは、１つの別個の組成物を含んでもよく、２つまたはそ
れよりも多い組成物であって、１つの組成物がａｂＴＣＲエフェクター細胞を含み、別の
組成物が他の薬剤を含む、組成物を含んでもよい。
【0383】
一部の実施形態では、キットは、ａ）ａｂＴＣＲを含む組成物、およびｂ）ａｂＴＣＲ
をエフェクター細胞（例えば、個体に由来する、エフェクター細胞、例えば、Ｔ細胞また
はナチュラルキラー細胞）と組み合わせて、ａｂＴＣＲをそれらの表面上に提示するエフ
ェクター細胞を含む組成物を形成し、標的抗原陽性疾患（例えば、がんまたはウイルス感
染症）の処置のために個体にａｂＴＣＲエフェクター細胞組成物を投与することについて
の指示を含む。一部の実施形態では、キットは、ａ）ａｂＴＣＲを含む組成物、およびｂ
）エフェクター細胞（例えば、細胞傷害性細胞）を含む。一部の実施形態では、キットは
、ａ）ａｂＴＣＲを含む組成物、ｂ）エフェクター細胞（例えば、細胞傷害性細胞）、お
よびｃ）ａｂＴＣＲをエフェクター細胞と組み合わせて、ａｂＴＣＲをその表面上に提示
するエフェクター細胞を含む組成物を形成し、標的抗原陽性疾患（例えば、がんまたはウ
イルス感染症）の処置のために個体にａｂＴＣＲエフェクター細胞組成物を投与すること
についての指示を含む。
をエフェクター細胞（例えば、個体に由来する、エフェクター細胞、例えば、Ｔ細胞また
はナチュラルキラー細胞）と組み合わせて、ａｂＴＣＲをそれらの表面上に提示するエフ
ェクター細胞を含む組成物を形成し、標的抗原陽性疾患（例えば、がんまたはウイルス感
染症）の処置のために個体にａｂＴＣＲエフェクター細胞組成物を投与することについて
の指示を含む。一部の実施形態では、キットは、ａ）ａｂＴＣＲを含む組成物、およびｂ
）エフェクター細胞（例えば、細胞傷害性細胞）を含む。一部の実施形態では、キットは
、ａ）ａｂＴＣＲを含む組成物、ｂ）エフェクター細胞（例えば、細胞傷害性細胞）、お
よびｃ）ａｂＴＣＲをエフェクター細胞と組み合わせて、ａｂＴＣＲをその表面上に提示
するエフェクター細胞を含む組成物を形成し、標的抗原陽性疾患（例えば、がんまたはウ
イルス感染症）の処置のために個体にａｂＴＣＲエフェクター細胞組成物を投与すること
についての指示を含む。
【0384】
一部の実施形態では、キットは、ａｂＴＣＲをコードする核酸（または核酸のセット）
を含む。一部の実施形態では、キットは、ａ）ａｂＴＣＲをコードする核酸（または核酸
のセット）、およびｂ）核酸（または核酸のセット）を発現するための宿主細胞（例えば
、エフェクター細胞）を含む。一部の実施形態では、キットは、ａ）ａｂＴＣＲをコード
する核酸（または核酸のセット）、ならびにｂ）ｉ）宿主細胞（例えば、エフェクター細
胞、例えば、Ｔ細胞）においてａｂＴＣＲを発現させること、ｉｉ）ａｂＴＣＲを発現す
る宿主細胞を含む組成物を調製すること、およびｉｉｉ）ａｂＴＣＲを発現する宿主細胞
を含む組成物を、標的抗原陽性疾患（例えば、がんまたはウイルス感染症）の処置のため
に個体に投与することに関する指示を含む。一部の実施形態では、宿主細胞は、個体に由
来する。一部の実施形態では、キットは、ａ）ａｂＴＣＲをコードする核酸（または核酸
のセット）、ｂ）核酸（または核酸のセット）を発現するための宿主細胞（例えば、エフ
ェクター細胞）、ならびにｃ）ｉ）宿主細胞においてａｂＴＣＲを発現させること、ｉｉ
）ａｂＴＣＲを発現する宿主細胞を含む組成物を調製すること、およびｉｉｉ）ａｂＴＣ
Ｒを発現する宿主細胞を含む組成物を、標的抗原陽性疾患（例えば、がんまたはウイルス
感染症）の処置のために個体に投与することに関する指示を含む。
を含む。一部の実施形態では、キットは、ａ）ａｂＴＣＲをコードする核酸（または核酸
のセット）、およびｂ）核酸（または核酸のセット）を発現するための宿主細胞（例えば
、エフェクター細胞）を含む。一部の実施形態では、キットは、ａ）ａｂＴＣＲをコード
する核酸（または核酸のセット）、ならびにｂ）ｉ）宿主細胞（例えば、エフェクター細
胞、例えば、Ｔ細胞）においてａｂＴＣＲを発現させること、ｉｉ）ａｂＴＣＲを発現す
る宿主細胞を含む組成物を調製すること、およびｉｉｉ）ａｂＴＣＲを発現する宿主細胞
を含む組成物を、標的抗原陽性疾患（例えば、がんまたはウイルス感染症）の処置のため
に個体に投与することに関する指示を含む。一部の実施形態では、宿主細胞は、個体に由
来する。一部の実施形態では、キットは、ａ）ａｂＴＣＲをコードする核酸（または核酸
のセット）、ｂ）核酸（または核酸のセット）を発現するための宿主細胞（例えば、エフ
ェクター細胞）、ならびにｃ）ｉ）宿主細胞においてａｂＴＣＲを発現させること、ｉｉ
）ａｂＴＣＲを発現する宿主細胞を含む組成物を調製すること、およびｉｉｉ）ａｂＴＣ
Ｒを発現する宿主細胞を含む組成物を、標的抗原陽性疾患（例えば、がんまたはウイルス
感染症）の処置のために個体に投与することに関する指示を含む。
【0385】
本発明のキットは、適切なパッケージ中に入れられる。適切なパッケージとしては、こ
れらに限定されないが、バイアル、ビン、ジャー、フレキシブル包装（例えば、密封Ｍｙ
ｌａｒまたはプラスチックバッグ）などが挙げられる。キットは、任意選択で、緩衝液な
どの追加的な成分および説明情報も提供し得る。したがって、本出願は、バイアル（例え
ば、密封バイアル）、ビン、ジャー、フレキシブル包装などを含む製造物品も提供する。
れらに限定されないが、バイアル、ビン、ジャー、フレキシブル包装（例えば、密封Ｍｙ
ｌａｒまたはプラスチックバッグ）などが挙げられる。キットは、任意選択で、緩衝液な
どの追加的な成分および説明情報も提供し得る。したがって、本出願は、バイアル（例え
ば、密封バイアル）、ビン、ジャー、フレキシブル包装などを含む製造物品も提供する。
【0386】
ａｂＴＣＲエフェクター細胞組成物の使用に関する指示は、一般に、投与量、投薬スケ
ジュール、および意図した処置のための投与経路に関する情報を含む。容器は、単位用量
、バルクパッケージ（例えば、多用量パッケージ）またはサブ単位用量であり得る。例え
ば、延長された期間、例えば、１週間、８日間、９日間、１０日間、１１日間、１２日間
、１３日間、２週間、３週間、４週間、６週間、８週間、３ヶ月間、４ヶ月間、５ヶ月間
、７ヶ月間、８ヶ月間、９ヶ月間またはそれよりも長くのいずれかにわたって個体の有効
な処置を提供するために十分な投与量の、本明細書に開示されるａｂＴＣＲエフェクター
細胞組成物を含むキットが提供され得る。キットは、薬局、例えば、病院薬局および調剤
薬局における貯蔵および使用に十分な量で包装された、ａｂＴＣＲおよび医薬組成物の複
数の単位用量、ならびに使用についての指示もまた含み得る。
ジュール、および意図した処置のための投与経路に関する情報を含む。容器は、単位用量
、バルクパッケージ（例えば、多用量パッケージ）またはサブ単位用量であり得る。例え
ば、延長された期間、例えば、１週間、８日間、９日間、１０日間、１１日間、１２日間
、１３日間、２週間、３週間、４週間、６週間、８週間、３ヶ月間、４ヶ月間、５ヶ月間
、７ヶ月間、８ヶ月間、９ヶ月間またはそれよりも長くのいずれかにわたって個体の有効
な処置を提供するために十分な投与量の、本明細書に開示されるａｂＴＣＲエフェクター
細胞組成物を含むキットが提供され得る。キットは、薬局、例えば、病院薬局および調剤
薬局における貯蔵および使用に十分な量で包装された、ａｂＴＣＲおよび医薬組成物の複
数の単位用量、ならびに使用についての指示もまた含み得る。
【0387】
本発明の範囲および主旨の中でいくつかの実施形態が可能であることが当業者には理解
されよう。ここで以下の非限定的な例に言及することにより、本発明をより詳細に記載す
る。以下の例は、本発明をさらに例示するものであるが、当然、いかなる形でもその範囲
を限定するものと解釈されるべきではない。
例示的な実施形態
されよう。ここで以下の非限定的な例に言及することにより、本発明をより詳細に記載す
る。以下の例は、本発明をさらに例示するものであるが、当然、いかなる形でもその範囲
を限定するものと解釈されるべきではない。
例示的な実施形態
【0388】
（実施形態１）
標的抗原に特異的に結合する抗体－Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）キメラ分子（ａｂＴＣＲ）
であって、
ａ）ＶＨおよびＣＨ１抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲサブ
ユニットの第１の膜貫通ドメインを含む第１のＴ細胞受容体ドメイン（ＴＣＲＤ）とを含
む第１のポリペプチド鎖；ならびに
ｂ）ＶＬおよびＣＬ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲサブユ
ニットの第２の膜貫通ドメインを含む第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖
を含み、
前記第１の抗原結合ドメインの前記ＶＨおよびＣＨ１ドメインと前記第２の抗原結合ド
メインの前記ＶＬおよびＣＬドメインとが、前記標的抗原に特異的に結合する抗原結合モ
ジュールを形成し、
前記第１のＴＣＲＤと前記第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル
伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）を形
成する、
ａｂＴＣＲ。
標的抗原に特異的に結合する抗体－Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）キメラ分子（ａｂＴＣＲ）
であって、
ａ）ＶＨおよびＣＨ１抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲサブ
ユニットの第１の膜貫通ドメインを含む第１のＴ細胞受容体ドメイン（ＴＣＲＤ）とを含
む第１のポリペプチド鎖；ならびに
ｂ）ＶＬおよびＣＬ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲサブユ
ニットの第２の膜貫通ドメインを含む第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖
を含み、
前記第１の抗原結合ドメインの前記ＶＨおよびＣＨ１ドメインと前記第２の抗原結合ド
メインの前記ＶＬおよびＣＬドメインとが、前記標的抗原に特異的に結合する抗原結合モ
ジュールを形成し、
前記第１のＴＣＲＤと前記第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル
伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）を形
成する、
ａｂＴＣＲ。
【0389】
（実施形態２）
前記抗原結合モジュールが、前記ＣＨ１ドメイン中の残基と前記ＣＬドメイン中の残基
との間のジスルフィド結合を含む、実施形態１に記載のａｂＴＣＲ。
前記抗原結合モジュールが、前記ＣＨ１ドメイン中の残基と前記ＣＬドメイン中の残基
との間のジスルフィド結合を含む、実施形態１に記載のａｂＴＣＲ。
【0390】
（実施形態３）
前記第１のポリペプチド鎖が、前記第１の抗原結合ドメインと前記第１のＴＣＲＤとの
間に第１のペプチドリンカーをさらに含む、実施形態１または２に記載のａｂＴＣＲ。
前記第１のポリペプチド鎖が、前記第１の抗原結合ドメインと前記第１のＴＣＲＤとの
間に第１のペプチドリンカーをさらに含む、実施形態１または２に記載のａｂＴＣＲ。
【0391】
（実施形態４）
前記第２のポリペプチド鎖が、前記第２の抗原結合ドメインと前記第２のＴＣＲＤとの
間に第２のペプチドリンカーをさらに含む、実施形態１から３のいずれか一項に記載のａ
ｂＴＣＲ。
前記第２のポリペプチド鎖が、前記第２の抗原結合ドメインと前記第２のＴＣＲＤとの
間に第２のペプチドリンカーをさらに含む、実施形態１から３のいずれか一項に記載のａ
ｂＴＣＲ。
【0392】
（実施形態５）
前記第１のペプチドリンカーおよび／または前記第２のペプチドリンカーが個々に、約
５～約５０アミノ酸長である、実施形態３または４に記載のａｂＴＣＲ。
前記第１のペプチドリンカーおよび／または前記第２のペプチドリンカーが個々に、約
５～約５０アミノ酸長である、実施形態３または４に記載のａｂＴＣＲ。
【0393】
（実施形態６）
前記標的抗原が細胞表面抗原である、実施形態１から５のいずれか一項に記載のａｂＴ
ＣＲ。
前記標的抗原が細胞表面抗原である、実施形態１から５のいずれか一項に記載のａｂＴ
ＣＲ。
【0394】
（実施形態７）
前記細胞表面抗原が、タンパク質、炭水化物および脂質からなる群から選択される、実
施形態６に記載のａｂＴＣＲ。
前記細胞表面抗原が、タンパク質、炭水化物および脂質からなる群から選択される、実
施形態６に記載のａｂＴＣＲ。
【0395】
（実施形態８）
前記細胞表面抗原が、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄまたは
ＦＣＲＬ５である、実施形態７に記載のａｂＴＣＲ。
前記細胞表面抗原が、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５Ｄまたは
ＦＣＲＬ５である、実施形態７に記載のａｂＴＣＲ。
【0396】
（実施形態９）
前記標的抗原が、ペプチドと主要組織適合複合体（ＭＨＣ）タンパク質とを含む複合体
である、実施形態１から５のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ。
前記標的抗原が、ペプチドと主要組織適合複合体（ＭＨＣ）タンパク質とを含む複合体
である、実施形態１から５のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ。
【0397】
（実施形態１０）
標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲであって、
ａ）ＶＨ抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲサブユニットの第
１の膜貫通ドメインを含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；および
ｂ）ＶＬ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲサブユニットの第
２の膜貫通ドメインを含む第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖
を含み、
前記第１の抗原結合ドメインの前記ＶＨドメインと前記第２の抗原結合ドメインの前記
ＶＬドメインとが、前記標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールを形成し、
前記第１のＴＣＲＤと前記第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル
伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）を形
成し、
前記標的抗原が、ペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む複合体である、
ａｂＴＣＲ。
標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲであって、
ａ）ＶＨ抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲサブユニットの第
１の膜貫通ドメインを含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；および
ｂ）ＶＬ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲサブユニットの第
２の膜貫通ドメインを含む第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖
を含み、
前記第１の抗原結合ドメインの前記ＶＨドメインと前記第２の抗原結合ドメインの前記
ＶＬドメインとが、前記標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールを形成し、
前記第１のＴＣＲＤと前記第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル
伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）を形
成し、
前記標的抗原が、ペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む複合体である、
ａｂＴＣＲ。
【0398】
（実施形態１１）
前記第１のポリペプチド鎖が、前記第１の抗原結合ドメインと前記第１のＴＣＲＤとの
間に第１のペプチドリンカーをさらに含み、前記第２のポリペプチド鎖が、前記第２の抗
原結合ドメインと前記第２のＴＣＲＤとの間に第２のペプチドリンカーをさらに含む、実
施形態１０に記載のａｂＴＣＲ。
前記第１のポリペプチド鎖が、前記第１の抗原結合ドメインと前記第１のＴＣＲＤとの
間に第１のペプチドリンカーをさらに含み、前記第２のポリペプチド鎖が、前記第２の抗
原結合ドメインと前記第２のＴＣＲＤとの間に第２のペプチドリンカーをさらに含む、実
施形態１０に記載のａｂＴＣＲ。
【0399】
（実施形態１２）
前記第１および／または第２のペプチドリンカーが、免疫グロブリンまたはＴ細胞受容
体サブユニット由来の定常ドメインまたはその断片を個々に含む、実施形態１１に記載の
ａｂＴＣＲ。
前記第１および／または第２のペプチドリンカーが、免疫グロブリンまたはＴ細胞受容
体サブユニット由来の定常ドメインまたはその断片を個々に含む、実施形態１１に記載の
ａｂＴＣＲ。
【0400】
（実施形態１３）
前記第１および／または第２のペプチドリンカーが、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、ＣＨ４
もしくはＣＬ抗体ドメイン、またはそれらの断片を個々に含む、実施形態１２に記載のａ
ｂＴＣＲ。
前記第１および／または第２のペプチドリンカーが、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、ＣＨ４
もしくはＣＬ抗体ドメイン、またはそれらの断片を個々に含む、実施形態１２に記載のａ
ｂＴＣＲ。
【0401】
（実施形態１４）
前記第１および／または第２のペプチドリンカーが、Ｃα、Ｃβ、ＣγもしくはＣδＴ
ＣＲドメイン、またはそれらの断片を個々に含む、実施形態１２に記載のａｂＴＣＲ。
前記第１および／または第２のペプチドリンカーが、Ｃα、Ｃβ、ＣγもしくはＣδＴ
ＣＲドメイン、またはそれらの断片を個々に含む、実施形態１２に記載のａｂＴＣＲ。
【0402】
（実施形態１５）
前記第１のＴＣＲＤが、前記第１の膜貫通ドメインのＮ末端側に、ＴＣＲサブユニット
の第１の接続ペプチドまたはその断片をさらに含む、実施形態１から１４のいずれか一項
に記載のａｂＴＣＲ。
前記第１のＴＣＲＤが、前記第１の膜貫通ドメインのＮ末端側に、ＴＣＲサブユニット
の第１の接続ペプチドまたはその断片をさらに含む、実施形態１から１４のいずれか一項
に記載のａｂＴＣＲ。
【0403】
（実施形態１６）
前記第２のＴＣＲＤが、前記第２の膜貫通ドメインのＮ末端側に、ＴＣＲサブユニット
の第２の接続ペプチドまたはその断片をさらに含む、実施形態１から１５のいずれか一項
に記載のａｂＴＣＲ。
前記第２のＴＣＲＤが、前記第２の膜貫通ドメインのＮ末端側に、ＴＣＲサブユニット
の第２の接続ペプチドまたはその断片をさらに含む、実施形態１から１５のいずれか一項
に記載のａｂＴＣＲ。
【0404】
（実施形態１７）
前記ＴＣＲＭが、前記第１の接続ペプチド中の残基と前記第２の接続ペプチド中の残基
との間のジスルフィド結合を含む、実施形態１５または１６に記載のａｂＴＣＲ。
前記ＴＣＲＭが、前記第１の接続ペプチド中の残基と前記第２の接続ペプチド中の残基
との間のジスルフィド結合を含む、実施形態１５または１６に記載のａｂＴＣＲ。
【0405】
（実施形態１８）
前記第１のＴＣＲＤが、前記第１の膜貫通ドメインのＣ末端側に、ＴＣＲ細胞内配列を
含む第１のＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含む、実施形態１から１７のいずれか一項に記
載のａｂＴＣＲ。
前記第１のＴＣＲＤが、前記第１の膜貫通ドメインのＣ末端側に、ＴＣＲ細胞内配列を
含む第１のＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含む、実施形態１から１７のいずれか一項に記
載のａｂＴＣＲ。
【0406】
（実施形態１９）
前記第２のＴＣＲＤが、前記第２の膜貫通ドメインのＣ末端側に、ＴＣＲ細胞内配列を
含む第２のＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含む、実施形態１から１８のいずれか一項に記
載のａｂＴＣＲ。
前記第２のＴＣＲＤが、前記第２の膜貫通ドメインのＣ末端側に、ＴＣＲ細胞内配列を
含む第２のＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含む、実施形態１から１８のいずれか一項に記
載のａｂＴＣＲ。
【0407】
（実施形態２０）
前記第１のポリペプチド鎖が、前記第１の膜貫通ドメインのＣ末端側に、共刺激細胞内
シグナル伝達配列を含む第１のアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む、実施形態１から
１９のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ。
前記第１のポリペプチド鎖が、前記第１の膜貫通ドメインのＣ末端側に、共刺激細胞内
シグナル伝達配列を含む第１のアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む、実施形態１から
１９のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ。
【0408】
（実施形態２１）
前記第２のポリペプチド鎖が、前記第２の膜貫通ドメインのＣ末端側に、共刺激細胞内
シグナル伝達配列を含む第２のアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む、実施形態１から
２０のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ。
前記第２のポリペプチド鎖が、前記第２の膜貫通ドメインのＣ末端側に、共刺激細胞内
シグナル伝達配列を含む第２のアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む、実施形態１から
２０のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ。
【0409】
（実施形態２２）
前記第１のポリペプチド鎖が、前記第１の抗原結合ドメインのＮ末端側に、第１のシグ
ナル伝達ペプチドをさらに含む、実施形態１から２１のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ
。
前記第１のポリペプチド鎖が、前記第１の抗原結合ドメインのＮ末端側に、第１のシグ
ナル伝達ペプチドをさらに含む、実施形態１から２１のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ
。
【0410】
（実施形態２３）
前記第２のポリペプチド鎖が、前記第２の抗原結合ドメインのＮ末端側に、第２のシグ
ナル伝達ペプチドをさらに含む、実施形態１から２２のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ
。
前記第２のポリペプチド鎖が、前記第２の抗原結合ドメインのＮ末端側に、第２のシグ
ナル伝達ペプチドをさらに含む、実施形態１から２２のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ
。
【0411】
（実施形態２４）
前記標的抗原複合体中の前記ペプチドが、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ
－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群か
ら選択されるタンパク質に由来する、実施形態９から２３のいずれか一項に記載のａｂＴ
ＣＲ。
前記標的抗原複合体中の前記ペプチドが、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ
－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群か
ら選択されるタンパク質に由来する、実施形態９から２３のいずれか一項に記載のａｂＴ
ＣＲ。
【0412】
（実施形態２５）
前記分子が、約０．１ｐＭ～約５００ｎＭの平衡解離定数（Ｋｄ）で前記標的抗原に結
合する、実施形態１から２４のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ。
前記分子が、約０．１ｐＭ～約５００ｎＭの平衡解離定数（Ｋｄ）で前記標的抗原に結
合する、実施形態１から２４のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ。
【0413】
（実施形態２６）
前記ＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールが、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζからな
る群から選択される、実施形態１から２５のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ。
前記ＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールが、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζからな
る群から選択される、実施形態１から２５のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ。
【0414】
（実施形態２７）
前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲα鎖であり、前記第２のＴＣＲサブユニットが
ＴＣＲβ鎖である、実施形態１から２６のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ。
前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲα鎖であり、前記第２のＴＣＲサブユニットが
ＴＣＲβ鎖である、実施形態１から２６のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ。
【0415】
（実施形態２８）
前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲβ鎖であり、前記第２のＴＣＲサブユニットが
ＴＣＲα鎖である、実施形態１から２６のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ。
前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲβ鎖であり、前記第２のＴＣＲサブユニットが
ＴＣＲα鎖である、実施形態１から２６のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ。
【0416】
（実施形態２９）
前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲγ鎖であり、前記第２のＴＣＲサブユニットが
ＴＣＲδ鎖である、実施形態１から２６のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ。
前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲγ鎖であり、前記第２のＴＣＲサブユニットが
ＴＣＲδ鎖である、実施形態１から２６のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ。
【0417】
（実施形態３０）
前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲδ鎖であり、前記第２のＴＣＲサブユニットが
ＴＣＲγ鎖である、実施形態１から２６のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ。
前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲδ鎖であり、前記第２のＴＣＲサブユニットが
ＴＣＲγ鎖である、実施形態１から２６のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ。
【0418】
（実施形態３１）
実施形態１から３０のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲの前記第１および第２のポリペ
プチド鎖をコードする核酸（複数可）。
実施形態１から３０のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲの前記第１および第２のポリペ
プチド鎖をコードする核酸（複数可）。
【0419】
（実施形態３２）
実施形態１から３０のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲと、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεお
よびζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュール
とを含む複合体。
実施形態１から３０のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲと、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεお
よびζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュール
とを含む複合体。
【0420】
（実施形態３３）
前記ａｂＴＣＲとＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζとを含む八量体である、実施形態
３２に記載の複合体。
前記ａｂＴＣＲとＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζとを含む八量体である、実施形態
３２に記載の複合体。
【0421】
（実施形態３４）
実施形態１から３０のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲまたは実施形態３２もしくは３
３に記載の複合体をその表面上に提示するエフェクター細胞。
実施形態１から３０のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲまたは実施形態３２もしくは３
３に記載の複合体をその表面上に提示するエフェクター細胞。
【0422】
（実施形態３５）
実施形態３１に記載の核酸（複数可）を含むエフェクター細胞。
実施形態３１に記載の核酸（複数可）を含むエフェクター細胞。
【0423】
（実施形態３６）
前記第１のＴＣＲサブユニットおよび／または前記第２のＴＣＲサブユニットを発現し
ない、実施形態３４または３５に記載のエフェクター細胞。
前記第１のＴＣＲサブユニットおよび／または前記第２のＴＣＲサブユニットを発現し
ない、実施形態３４または３５に記載のエフェクター細胞。
【0424】
（実施形態３７）
ａ）前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲαであり、前記第２のＴＣＲサブユニット
がＴＣＲβであり；または
ｂ）前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲβであり、前記第２のＴＣＲサブユニット
がＴＣＲαであり；
前記エフェクター細胞がγδＴ細胞である、実施形態３６に記載のエフェクター細胞。
ａ）前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲαであり、前記第２のＴＣＲサブユニット
がＴＣＲβであり；または
ｂ）前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲβであり、前記第２のＴＣＲサブユニット
がＴＣＲαであり；
前記エフェクター細胞がγδＴ細胞である、実施形態３６に記載のエフェクター細胞。
【0425】
（実施形態３８）
ａ）前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲγであり、前記第２のＴＣＲサブユニット
がＴＣＲδであり；または
ｂ）前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲδであり、前記第２のＴＣＲサブユニット
がＴＣＲγであり；
前記エフェクター細胞がαβＴ細胞である、実施形態３６に記載のエフェクター細胞。
ａ）前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲγであり、前記第２のＴＣＲサブユニット
がＴＣＲδであり；または
ｂ）前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲδであり、前記第２のＴＣＲサブユニット
がＴＣＲγであり；
前記エフェクター細胞がαβＴ細胞である、実施形態３６に記載のエフェクター細胞。
【0426】
（実施形態３９）
第１の内因性ＴＣＲサブユニットおよび／または第２の内因性ＴＣＲサブユニットの発
現を遮断するまたは減少させるように改変されている、実施形態３４から３６のいずれか
一項に記載のエフェクター細胞。
第１の内因性ＴＣＲサブユニットおよび／または第２の内因性ＴＣＲサブユニットの発
現を遮断するまたは減少させるように改変されている、実施形態３４から３６のいずれか
一項に記載のエフェクター細胞。
【0427】
（実施形態４０）
ａ）前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲαであり、前記第２のＴＣＲサブユニット
がＴＣＲβであり；または
ｂ）前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲβであり、前記第２のＴＣＲサブユニット
がＴＣＲαであり；
前記エフェクター細胞が、ＴＣＲαおよび／またはＴＣＲβの発現を遮断するまたは減少
させるように改変されたαβＴ細胞である、実施形態３９に記載のエフェクター細胞。
ａ）前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲαであり、前記第２のＴＣＲサブユニット
がＴＣＲβであり；または
ｂ）前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲβであり、前記第２のＴＣＲサブユニット
がＴＣＲαであり；
前記エフェクター細胞が、ＴＣＲαおよび／またはＴＣＲβの発現を遮断するまたは減少
させるように改変されたαβＴ細胞である、実施形態３９に記載のエフェクター細胞。
【0428】
（実施形態４１）
ａ）前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲγであり、前記第２のＴＣＲサブユニット
がＴＣＲδであり；または
ｂ）前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲδであり、前記第２のＴＣＲサブユニット
がＴＣＲγであり；
前記エフェクター細胞が、ＴＣＲγおよび／またはＴＣＲδの発現を遮断するまたは減少
させるように改変されたγδＴ細胞である、実施形態３９に記載のエフェクター細胞。
ａ）前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲγであり、前記第２のＴＣＲサブユニット
がＴＣＲδであり；または
ｂ）前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲδであり、前記第２のＴＣＲサブユニット
がＴＣＲγであり；
前記エフェクター細胞が、ＴＣＲγおよび／またはＴＣＲδの発現を遮断するまたは減少
させるように改変されたγδＴ細胞である、実施形態３９に記載のエフェクター細胞。
【0429】
（実施形態４２）
ＣＤ３＋細胞である、実施形態３４から４１のいずれか一項に記載のエフェクター細胞
。
ＣＤ３＋細胞である、実施形態３４から４１のいずれか一項に記載のエフェクター細胞
。
【0430】
（実施形態４３）
前記ＣＤ３＋細胞が、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞お
よびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される、実施形態４２に記載のエフェクター
細胞。
前記ＣＤ３＋細胞が、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞お
よびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される、実施形態４２に記載のエフェクター
細胞。
【0431】
（実施形態４４）
ａ）第１のプロモーターの制御下の前記ａｂＴＣＲの前記第１のポリペプチド鎖をコー
ドする第１の核酸配列を含む第１のベクターと、ｂ）第２のプロモーターの制御下の前記
ａｂＴＣＲの前記第２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列を含む第２のベクタ
ーとを含む、実施形態３４から４３のいずれか一項に記載のエフェクター細胞。
ａ）第１のプロモーターの制御下の前記ａｂＴＣＲの前記第１のポリペプチド鎖をコー
ドする第１の核酸配列を含む第１のベクターと、ｂ）第２のプロモーターの制御下の前記
ａｂＴＣＲの前記第２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列を含む第２のベクタ
ーとを含む、実施形態３４から４３のいずれか一項に記載のエフェクター細胞。
【0432】
（実施形態４５）
ａ）第１のプロモーターの制御下の前記ａｂＴＣＲの前記第１のポリペプチド鎖をコー
ドする第１の核酸配列と；ｂ）第２のプロモーターの制御下の前記ａｂＴＣＲの前記第２
のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列とを含むベクターを含む、実施形態３４か
ら４３のいずれか一項に記載のエフェクター細胞。
ａ）第１のプロモーターの制御下の前記ａｂＴＣＲの前記第１のポリペプチド鎖をコー
ドする第１の核酸配列と；ｂ）第２のプロモーターの制御下の前記ａｂＴＣＲの前記第２
のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列とを含むベクターを含む、実施形態３４か
ら４３のいずれか一項に記載のエフェクター細胞。
【0433】
（実施形態４６）
ａ）前記ａｂＴＣＲの前記第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列と；ｂ）
前記ａｂＴＣＲの前記第２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列とを含むベクタ
ーを含み、前記第１および第２の核酸配列が、単一のプロモーターの制御下にある、実施
形態３４から４３のいずれか一項に記載のエフェクター細胞。
ａ）前記ａｂＴＣＲの前記第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列と；ｂ）
前記ａｂＴＣＲの前記第２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列とを含むベクタ
ーを含み、前記第１および第２の核酸配列が、単一のプロモーターの制御下にある、実施
形態３４から４３のいずれか一項に記載のエフェクター細胞。
【0434】
（実施形態４７）
前記ａｂＴＣＲの前記第１のポリペプチド鎖の発現が、前記ａｂＴＣＲの前記第２のポ
リペプチド鎖の発現とは、２倍よりも大きく異なる、実施形態３４から４５のいずれか一
項に記載のエフェクター細胞。
前記ａｂＴＣＲの前記第１のポリペプチド鎖の発現が、前記ａｂＴＣＲの前記第２のポ
リペプチド鎖の発現とは、２倍よりも大きく異なる、実施形態３４から４５のいずれか一
項に記載のエフェクター細胞。
【0435】
（実施形態４８）
標的抗原を提示する標的細胞を死滅させる方法であって、前記標的細胞を、実施形態３
４から４７のいずれか一項に記載のエフェクター細胞と接触させるステップを含み、前記
ａｂＴＣＲが、前記標的抗原に特異的に結合する、方法。
標的抗原を提示する標的細胞を死滅させる方法であって、前記標的細胞を、実施形態３
４から４７のいずれか一項に記載のエフェクター細胞と接触させるステップを含み、前記
ａｂＴＣＲが、前記標的抗原に特異的に結合する、方法。
【0436】
（実施形態４９）
標的抗原を提示する標的細胞を死滅させる方法であって、前記標的細胞を、前記標的抗
原に特異的に結合するａｂＴＣＲを含むエフェクターαβＴ細胞と接触させるステップを
含み、前記ａｂＴＣＲが、
ａ）ＶＨ抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲサブユニットの第
１の膜貫通ドメインを含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；および
ｂ）ＶＬ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲサブユニットの第
２の膜貫通ドメインを含む第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖
を含み、
前記第１の抗原結合ドメインの前記ＶＨドメインと前記第２の抗原結合ドメインの前記
ＶＬドメインとが、前記標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールを形成し、
前記第１のＴＣＲＤと前記第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル
伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）を形
成し、
前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲγであり、前記第２のＴＣＲサブユニットがＴ
ＣＲδである、または前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲδであり、前記第２のＴＣ
ＲサブユニットがＴＣＲγである、
方法。
標的抗原を提示する標的細胞を死滅させる方法であって、前記標的細胞を、前記標的抗
原に特異的に結合するａｂＴＣＲを含むエフェクターαβＴ細胞と接触させるステップを
含み、前記ａｂＴＣＲが、
ａ）ＶＨ抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲサブユニットの第
１の膜貫通ドメインを含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；および
ｂ）ＶＬ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲサブユニットの第
２の膜貫通ドメインを含む第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖
を含み、
前記第１の抗原結合ドメインの前記ＶＨドメインと前記第２の抗原結合ドメインの前記
ＶＬドメインとが、前記標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールを形成し、
前記第１のＴＣＲＤと前記第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル
伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）を形
成し、
前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲγであり、前記第２のＴＣＲサブユニットがＴ
ＣＲδである、または前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲδであり、前記第２のＴＣ
ＲサブユニットがＴＣＲγである、
方法。
【0437】
（実施形態５０）
前記第１のポリペプチド鎖が、前記第１の抗原結合ドメインと前記第１のＴＣＲＤとの
間に第１のペプチドリンカーをさらに含み、前記第２のポリペプチド鎖が、前記第２の抗
原結合ドメインと前記第２のＴＣＲＤとの間に第２のペプチドリンカーをさらに含む、実
施形態４９に記載の方法。
前記第１のポリペプチド鎖が、前記第１の抗原結合ドメインと前記第１のＴＣＲＤとの
間に第１のペプチドリンカーをさらに含み、前記第２のポリペプチド鎖が、前記第２の抗
原結合ドメインと前記第２のＴＣＲＤとの間に第２のペプチドリンカーをさらに含む、実
施形態４９に記載の方法。
【0438】
（実施形態５１）
前記第１および／または第２のペプチドリンカーが、免疫グロブリンまたはＴ細胞受容
体サブユニット由来の定常ドメインまたはその断片を個々に含む、実施形態５０に記載の
方法。
前記第１および／または第２のペプチドリンカーが、免疫グロブリンまたはＴ細胞受容
体サブユニット由来の定常ドメインまたはその断片を個々に含む、実施形態５０に記載の
方法。
【0439】
（実施形態５２）
前記第１および／または第２のペプチドリンカーが、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、ＣＨ４
もしくはＣＬ抗体ドメイン、またはそれらの断片を個々に含む、実施形態５１に記載の方
法。
前記第１および／または第２のペプチドリンカーが、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、ＣＨ４
もしくはＣＬ抗体ドメイン、またはそれらの断片を個々に含む、実施形態５１に記載の方
法。
【0440】
（実施形態５３）
前記第１および／または第２のペプチドリンカーが、Ｃα、Ｃβ、ＣγもしくはＣδＴ
ＣＲドメイン、またはそれらの断片を個々に含む、実施形態５１に記載の方法。
前記第１および／または第２のペプチドリンカーが、Ｃα、Ｃβ、ＣγもしくはＣδＴ
ＣＲドメイン、またはそれらの断片を個々に含む、実施形態５１に記載の方法。
【0441】
（実施形態５４）
前記接触させるステップがｉｎ ｖｉｖｏである、実施形態４８から５３のいずれか一
項に記載の方法。
前記接触させるステップがｉｎ ｖｉｖｏである、実施形態４８から５３のいずれか一
項に記載の方法。
【0442】
（実施形態５５）
前記接触させるステップがｉｎ ｖｉｔｒｏである、実施形態４８から５３のいずれか
一項に記載の方法。
前記接触させるステップがｉｎ ｖｉｔｒｏである、実施形態４８から５３のいずれか
一項に記載の方法。
【0443】
（実施形態５６）
実施形態１から３０のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ、実施形態３１に記載の核酸（
複数可）、または実施形態３４から４７のいずれか一項に記載のエフェクター細胞と、薬
学的に許容されるキャリアとを含む医薬組成物。
実施形態１から３０のいずれか一項に記載のａｂＴＣＲ、実施形態３１に記載の核酸（
複数可）、または実施形態３４から４７のいずれか一項に記載のエフェクター細胞と、薬
学的に許容されるキャリアとを含む医薬組成物。
【0444】
（実施形態５７）
それを必要とする個体において標的抗原関連疾患を処置する方法であって、前記個体に
、有効量の、実施形態５１に記載の医薬組成物を投与するステップを含む方法。
それを必要とする個体において標的抗原関連疾患を処置する方法であって、前記個体に
、有効量の、実施形態５１に記載の医薬組成物を投与するステップを含む方法。
【0445】
（実施形態５８）
それを必要とする個体において標的抗原関連疾患を処置する方法であって、前記個体に
、有効量の、前記標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲを含むエフェクターαβＴ細胞
を含む組成物を投与するステップを含み、前記ａｂＴＣＲが、
ａ）ＶＨ抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲサブユニットの第
１の膜貫通ドメインを含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；および
ｂ）ＶＬ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲサブユニットの第
２の膜貫通ドメインを含む第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖
を含み、
前記第１の抗原結合ドメインの前記ＶＨドメインと前記第２の抗原結合ドメインの前記
ＶＬドメインとが、前記標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールを形成し、
前記第１のＴＣＲＤと前記第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル
伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）を形
成し、
前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲγであり、前記第２のＴＣＲサブユニットがＴ
ＣＲδである、または前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲδであり、前記第２のＴＣ
ＲサブユニットがＴＣＲγである、
方法。
それを必要とする個体において標的抗原関連疾患を処置する方法であって、前記個体に
、有効量の、前記標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲを含むエフェクターαβＴ細胞
を含む組成物を投与するステップを含み、前記ａｂＴＣＲが、
ａ）ＶＨ抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲサブユニットの第
１の膜貫通ドメインを含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；および
ｂ）ＶＬ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲサブユニットの第
２の膜貫通ドメインを含む第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖
を含み、
前記第１の抗原結合ドメインの前記ＶＨドメインと前記第２の抗原結合ドメインの前記
ＶＬドメインとが、前記標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールを形成し、
前記第１のＴＣＲＤと前記第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル
伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）を形
成し、
前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲγであり、前記第２のＴＣＲサブユニットがＴ
ＣＲδである、または前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲδであり、前記第２のＴＣ
ＲサブユニットがＴＣＲγである、
方法。
【0446】
（実施形態５９）
前記第１のポリペプチド鎖が、前記第１の抗原結合ドメインと前記第１のＴＣＲＤとの
間に第１のペプチドリンカーをさらに含み、前記第２のポリペプチド鎖が、前記第２の抗
原結合ドメインと前記第２のＴＣＲＤとの間に第２のペプチドリンカーをさらに含む、実
施形態５８に記載の方法。
前記第１のポリペプチド鎖が、前記第１の抗原結合ドメインと前記第１のＴＣＲＤとの
間に第１のペプチドリンカーをさらに含み、前記第２のポリペプチド鎖が、前記第２の抗
原結合ドメインと前記第２のＴＣＲＤとの間に第２のペプチドリンカーをさらに含む、実
施形態５８に記載の方法。
【0447】
（実施形態６０）
前記第１および／または第２のペプチドリンカーが、免疫グロブリンまたはＴ細胞受容
体サブユニット由来の定常ドメインまたはその断片を個々に含む、実施形態５９に記載の
方法。
前記第１および／または第２のペプチドリンカーが、免疫グロブリンまたはＴ細胞受容
体サブユニット由来の定常ドメインまたはその断片を個々に含む、実施形態５９に記載の
方法。
【0448】
（実施形態６１）
前記第１および／または第２のペプチドリンカーが、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、ＣＨ４
もしくはＣＬ抗体ドメイン、またはそれらの断片を個々に含む、実施形態６０に記載の方
法。
前記第１および／または第２のペプチドリンカーが、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、ＣＨ４
もしくはＣＬ抗体ドメイン、またはそれらの断片を個々に含む、実施形態６０に記載の方
法。
【0449】
（実施形態６２）
前記第１および／または第２のペプチドリンカーが、Ｃα、Ｃβ、ＣγもしくはＣδＴ
ＣＲドメイン、またはそれらの断片を個々に含む、実施形態６０に記載の方法。
前記第１および／または第２のペプチドリンカーが、Ｃα、Ｃβ、ＣγもしくはＣδＴ
ＣＲドメイン、またはそれらの断片を個々に含む、実施形態６０に記載の方法。
【0450】
（実施形態６３）
前記標的抗原関連疾患ががんである、実施形態５７から６２のいずれか一項に記載の方
法。
前記標的抗原関連疾患ががんである、実施形態５７から６２のいずれか一項に記載の方
法。
【0451】
（実施形態６４）
前記がんが、副腎皮質癌、膀胱がん、乳がん、子宮頸がん、胆管細胞癌、結腸直腸がん
、食道がん、グリア芽細胞腫、グリオーマ、肝細胞癌、頭頸部がん、腎臓がん、白血病、
リンパ腫、肺がん、メラノーマ、中皮腫、多発性骨髄腫、膵臓がん、褐色細胞腫、形質細
胞腫、神経芽細胞腫、卵巣がん、前立腺がん、肉腫、胃がん、子宮がんおよび甲状腺がん
からなる群から選択される、実施形態６３に記載の方法。
前記がんが、副腎皮質癌、膀胱がん、乳がん、子宮頸がん、胆管細胞癌、結腸直腸がん
、食道がん、グリア芽細胞腫、グリオーマ、肝細胞癌、頭頸部がん、腎臓がん、白血病、
リンパ腫、肺がん、メラノーマ、中皮腫、多発性骨髄腫、膵臓がん、褐色細胞腫、形質細
胞腫、神経芽細胞腫、卵巣がん、前立腺がん、肉腫、胃がん、子宮がんおよび甲状腺がん
からなる群から選択される、実施形態６３に記載の方法。
【0452】
（実施形態６５）
前記標的抗原関連疾患がウイルス感染症である、実施形態５７から６２のいずれか一項
に記載の方法。
前記標的抗原関連疾患がウイルス感染症である、実施形態５７から６２のいずれか一項
に記載の方法。
【0453】
（実施形態６６）
前記ウイルス感染症が、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、エプスタイン－バーウイル
ス（ＥＢＶ）、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス（ＫＳＨ
Ｖ）、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、伝染性軟属腫ウイルス（ＭＣＶ）、ヒトＴ細
胞白血病ウイルス１（ＨＴＬＶ－１）、ＨＩＶ（ヒト免疫不全ウイルス）およびＣ型肝炎
ウイルス（ＨＣＶ）からなる群から選択されるウイルスによって引き起こされる、実施形
態６５に記載の方法。
前記ウイルス感染症が、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、エプスタイン－バーウイル
ス（ＥＢＶ）、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス（ＫＳＨ
Ｖ）、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、伝染性軟属腫ウイルス（ＭＣＶ）、ヒトＴ細
胞白血病ウイルス１（ＨＴＬＶ－１）、ＨＩＶ（ヒト免疫不全ウイルス）およびＣ型肝炎
ウイルス（ＨＣＶ）からなる群から選択されるウイルスによって引き起こされる、実施形
態６５に記載の方法。
【0454】
（実施形態６７）
実施形態３４～４７のいずれか１つに記載のエフェクター細胞について不均一な細胞集
団を富化する方法であって、
ａ）不均一な細胞集団を、固体支持体に固定化された標的抗原と接触させて、固体支持
体上の標的抗原に結合したエフェクター細胞の複合体を形成するステップ；および
ｂ）不均一な細胞集団から複合体を分離し、それによって、エフェクター細胞について
富化された細胞集団を生成するステップ
を含む方法。
実施形態３４～４７のいずれか１つに記載のエフェクター細胞について不均一な細胞集
団を富化する方法であって、
ａ）不均一な細胞集団を、固体支持体に固定化された標的抗原と接触させて、固体支持
体上の標的抗原に結合したエフェクター細胞の複合体を形成するステップ；および
ｂ）不均一な細胞集団から複合体を分離し、それによって、エフェクター細胞について
富化された細胞集団を生成するステップ
を含む方法。
【0455】
（実施形態６８）
実施形態１から３０のいずれか一項に記載の複数のａｂＴＣＲをコードする配列を含む
核酸ライブラリー。
実施形態１から３０のいずれか一項に記載の複数のａｂＴＣＲをコードする配列を含む
核酸ライブラリー。
【0456】
（実施形態６９）
標的抗原に対して特異的なａｂＴＣＲをコードする配列について、実施形態６８に記載
の核酸ライブラリーをスクリーニングする方法であって、
ａ）ａｂＴＣＲが複数のＣＤ３＋細胞の表面上で発現されるように、核酸ライブラリー
を複数のＣＤ３＋細胞中に導入するステップ；
ｂ）複数のＣＤ３＋細胞を、標識された標的抗原と共にインキュベートするステップ；
ｃ）標識された標的抗原と結合したＣＤ３＋細胞を収集するステップ；および
ｄ）ステップｃ）において収集した細胞から、ａｂＴＣＲをコードする配列を単離し、
それによって、標的抗原に対して特異的なａｂＴＣＲを同定するステップ
を含む方法。
標的抗原に対して特異的なａｂＴＣＲをコードする配列について、実施形態６８に記載
の核酸ライブラリーをスクリーニングする方法であって、
ａ）ａｂＴＣＲが複数のＣＤ３＋細胞の表面上で発現されるように、核酸ライブラリー
を複数のＣＤ３＋細胞中に導入するステップ；
ｂ）複数のＣＤ３＋細胞を、標識された標的抗原と共にインキュベートするステップ；
ｃ）標識された標的抗原と結合したＣＤ３＋細胞を収集するステップ；および
ｄ）ステップｃ）において収集した細胞から、ａｂＴＣＲをコードする配列を単離し、
それによって、標的抗原に対して特異的なａｂＴＣＲを同定するステップ
を含む方法。
【実施例0457】
材料および方法
細胞試料、細胞株および抗体
細胞株ＨｅｐＧ２（ＡＴＣＣ ＨＢ－８０６５；ＨＬＡ－Ａ２＋、ＡＦＰ＋）、ＳＫ－
ＨＥＰ－１（ＡＴＣＣ ＨＴＢ－５２；ＨＬＡ－Ａ２＋、ＡＦＰ－）、Ｒａｊｉ（ＡＴＣ
Ｃ ＣＣＬ－８６；ＣＤ１９＋）、ＣＡ４６（ＡＴＣＣ ＣＲＬ－１６４８；ＣＤ１９＋
）、Ｊｕｒｋａｔ（ＡＴＣＣ ＣＲＬ－２８９９、ＣＤ１９－）、Ｊ．ＲＴ３－Ｔ３．５
（ＡＴＣＣ ＴＩＢ－１５３）、Ｊｅｋｏ－１（ＡＴＣＣ ＣＲＬ－３００６；ＣＤ１９
＋）、ＴＨＰ－１（ＡＴＣＣ ＴＩＢ－２０２、ＣＤ１９－）、Ｄａｕｄｉ（ＡＴＣＣ
ＣＣＬ－２１３；ＣＤ１９＋）、ＨｅＬａ（ＡＴＣＣ ＣＣＬ－２）、ＭＤＡ－ＭＢ－２
３１（ＡＴＣＣ ＨＴＢ－２６）およびＭＣＦ－７（ＡＴＣＣ ＨＴＢ－２２）は、Ａｍ
ｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎから取得した。Ｊｕｒ
ｋａｔは、Ｔ細胞白血病由来のヒトＴリンパ球細胞株である。Ｊ．ＲＴ３－Ｔ３．５は、
Ｔ細胞受容体β鎖を欠いているＪｕｒｋａｔ細胞由来変異株である。Ｒａｊｉは、ＣＤ１
９を発現するＢｕｒｋｉｔｔリンパ腫細胞株である。Ｒａｊｉ－ＣＤ１９ノックアウト（
Ｒａｊｉ－ＣＤ１９ＫＯ）株は、ＣＲＩＳＰＲ技術によって生成された。３つの異なるガ
イド配列は、Ｒａｊｉ細胞中のＣＤ１９を標的化するように設計された。ＣＲＩＳＰＲ－
Ｃａｓ９ベクターはＯｒｉｇｅｎｅから購入し、各ガイドは、ｐＣａｓ－Ｇｕｉｄｅベク
ターに別々にクローニングした。電気穿孔法の３日後、各ガイドによるノックアウト効率
をフローサイトメトリーによって評価し、最良のＣＤ１９ノックアウトプールを限界希釈
によってクローン選択のために選択した。選択されたクローンを配列決定によって完全な
ＣＤ１９ノックアウトとして確認した。別の対照細胞株、ＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－Ｍ
Ｇは、ＡＦＰペプチドＡＦＰ１５８（配列番号５３）を発現するミニ遺伝子カセットを用
いてＳＫ－ＨＥＰ－１細胞株を形質導入することによって生成し、ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ
－Ａ＊０２：０１複合体の高レベルの細胞表面発現を生じた。すべての細胞株を１０％Ｆ
ＢＳおよび２ｍＭグルタミンを補充したＲＰＭＩ１６４０またはＤＭＥＭにおいて３７℃
／５％ＣＯ２で培養した。
細胞試料、細胞株および抗体
細胞株ＨｅｐＧ２（ＡＴＣＣ ＨＢ－８０６５；ＨＬＡ－Ａ２＋、ＡＦＰ＋）、ＳＫ－
ＨＥＰ－１（ＡＴＣＣ ＨＴＢ－５２；ＨＬＡ－Ａ２＋、ＡＦＰ－）、Ｒａｊｉ（ＡＴＣ
Ｃ ＣＣＬ－８６；ＣＤ１９＋）、ＣＡ４６（ＡＴＣＣ ＣＲＬ－１６４８；ＣＤ１９＋
）、Ｊｕｒｋａｔ（ＡＴＣＣ ＣＲＬ－２８９９、ＣＤ１９－）、Ｊ．ＲＴ３－Ｔ３．５
（ＡＴＣＣ ＴＩＢ－１５３）、Ｊｅｋｏ－１（ＡＴＣＣ ＣＲＬ－３００６；ＣＤ１９
＋）、ＴＨＰ－１（ＡＴＣＣ ＴＩＢ－２０２、ＣＤ１９－）、Ｄａｕｄｉ（ＡＴＣＣ
ＣＣＬ－２１３；ＣＤ１９＋）、ＨｅＬａ（ＡＴＣＣ ＣＣＬ－２）、ＭＤＡ－ＭＢ－２
３１（ＡＴＣＣ ＨＴＢ－２６）およびＭＣＦ－７（ＡＴＣＣ ＨＴＢ－２２）は、Ａｍ
ｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎから取得した。Ｊｕｒ
ｋａｔは、Ｔ細胞白血病由来のヒトＴリンパ球細胞株である。Ｊ．ＲＴ３－Ｔ３．５は、
Ｔ細胞受容体β鎖を欠いているＪｕｒｋａｔ細胞由来変異株である。Ｒａｊｉは、ＣＤ１
９を発現するＢｕｒｋｉｔｔリンパ腫細胞株である。Ｒａｊｉ－ＣＤ１９ノックアウト（
Ｒａｊｉ－ＣＤ１９ＫＯ）株は、ＣＲＩＳＰＲ技術によって生成された。３つの異なるガ
イド配列は、Ｒａｊｉ細胞中のＣＤ１９を標的化するように設計された。ＣＲＩＳＰＲ－
Ｃａｓ９ベクターはＯｒｉｇｅｎｅから購入し、各ガイドは、ｐＣａｓ－Ｇｕｉｄｅベク
ターに別々にクローニングした。電気穿孔法の３日後、各ガイドによるノックアウト効率
をフローサイトメトリーによって評価し、最良のＣＤ１９ノックアウトプールを限界希釈
によってクローン選択のために選択した。選択されたクローンを配列決定によって完全な
ＣＤ１９ノックアウトとして確認した。別の対照細胞株、ＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－Ｍ
Ｇは、ＡＦＰペプチドＡＦＰ１５８（配列番号５３）を発現するミニ遺伝子カセットを用
いてＳＫ－ＨＥＰ－１細胞株を形質導入することによって生成し、ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ
－Ａ＊０２：０１複合体の高レベルの細胞表面発現を生じた。すべての細胞株を１０％Ｆ
ＢＳおよび２ｍＭグルタミンを補充したＲＰＭＩ１６４０またはＤＭＥＭにおいて３７℃
／５％ＣＯ２で培養した。
【0458】
ＦＩＴＣまたはＡＰＣにコンジュゲートしたヒトＨＬＡ－Ａ０２（クローンＢＢ７．２
）に対するモノクローナルＡｂ、およびＦＩＴＣまたはＡＰＣにコンジュゲートしたその
アイソタイプ対照マウスＩｇＧ ２ｂ、ヒトまたはマウスＣＤ３に対する抗体、ヒトＴ細
胞受容体の種々のサブユニット、３ｘＦｌａｇタグ、ＨＡタグ、ＰＥまたはＦＩＴＣとコ
ンジュゲートしたヤギＦ（ａｂ）２抗ヒトＩｇＧおよび蛍光コンジュゲートヤギＦ（ａｂ
’）２抗マウスＩｇ’ｓ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を購入した。ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－
Ａ＊０２：０１－特異的抗体に対する抗イディオタイプ抗体を開発し、Ｅｕｒｅｋａ Ｔ
ｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓにおいて組織内で産生した。フローサイトメトリーデータをＢＤ
ＦＡＣＳＣａｎｔｏ ＩＩを使用して収集し、ＦｌｏｗＪｏソフトウェアパッケージを
使用して分析した。
）に対するモノクローナルＡｂ、およびＦＩＴＣまたはＡＰＣにコンジュゲートしたその
アイソタイプ対照マウスＩｇＧ ２ｂ、ヒトまたはマウスＣＤ３に対する抗体、ヒトＴ細
胞受容体の種々のサブユニット、３ｘＦｌａｇタグ、ＨＡタグ、ＰＥまたはＦＩＴＣとコ
ンジュゲートしたヤギＦ（ａｂ）２抗ヒトＩｇＧおよび蛍光コンジュゲートヤギＦ（ａｂ
’）２抗マウスＩｇ’ｓ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を購入した。ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－
Ａ＊０２：０１－特異的抗体に対する抗イディオタイプ抗体を開発し、Ｅｕｒｅｋａ Ｔ
ｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓにおいて組織内で産生した。フローサイトメトリーデータをＢＤ
ＦＡＣＳＣａｎｔｏ ＩＩを使用して収集し、ＦｌｏｗＪｏソフトウェアパッケージを
使用して分析した。
【0459】
すべてのペプチドは、Ｅｌｉｍ Ｂｉｏｐｈａｒｍａによって合成され、購入した。ペ
プチドは、純度＞９０％であった。ペプチドを１０ｍｇ／ｍＬでＤＭＳＯに溶解するまた
は生理食塩水に希釈し、－８０℃で凍結した。ビオチン化単鎖ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ
＊０２：０１および対照ペプチド／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１複合体モノマーをペプチドを
組換えＨＬＡ－Ａ＊０２：０１およびベータ－２ミクログロブリン（β２Ｍ）と再フォー
ルディングさせることによって生成した。モノマーをＢｉｒＡ酵素によってＨＬＡ－Ａ＊
０２：０１細胞外ドメイン（ＥＣＤ）のＣ末端に連結されたＢＳＰペプチドを介してビオ
チン化した。蛍光標識ペプチド／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１四量体を形成するために蛍光標
識ストレプトアビジンをビオチン化ペプチド／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１複合体モノマーと
混合した。
プチドは、純度＞９０％であった。ペプチドを１０ｍｇ／ｍＬでＤＭＳＯに溶解するまた
は生理食塩水に希釈し、－８０℃で凍結した。ビオチン化単鎖ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ
＊０２：０１および対照ペプチド／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１複合体モノマーをペプチドを
組換えＨＬＡ－Ａ＊０２：０１およびベータ－２ミクログロブリン（β２Ｍ）と再フォー
ルディングさせることによって生成した。モノマーをＢｉｒＡ酵素によってＨＬＡ－Ａ＊
０２：０１細胞外ドメイン（ＥＣＤ）のＣ末端に連結されたＢＳＰペプチドを介してビオ
チン化した。蛍光標識ペプチド／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１四量体を形成するために蛍光標
識ストレプトアビジンをビオチン化ペプチド／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１複合体モノマーと
混合した。
【0460】
ヒトＣＤ１９特異的またはＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１－特異的ＣＡＲまた
はａｂＴＣＲを含有するレンチウイルスは、例えばキメラ構築物をコードするベクターを
用いた２９３Ｔ細胞のトランスフェクションによって産生した。初代ヒトＴ細胞を、１０
０Ｕ／ｍｌのインターロイキン－２（ＩＬ－２）の存在下でＣＤ３／ＣＤ２８ビーズ（Ｄ
ｙｎａｂｅａｄｓ（登録商標）、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）で１日刺激した後の形質導入に
使用した。濃縮レンチウイルスをＲｅｔｒｏｎｅｃｔｉｎ（Ｔａｋａｒａ）でコーティン
グした６ウェルプレート中のＴ細胞にアプライし、９６時間置いた。抗ＡＦＰおよび抗Ｃ
Ｄ１９キメラ構築物の形質導入効率を、それぞれビオチン化ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊
０２：０１四量体（「ＡＦＰ１５８四量体」）およびＰＥコンジュゲートストレプトアビ
ジンまたは抗ｍｙｃ抗体を使用して、フローサイトメトリーにより評価した。反復フロー
サイトメトリー分析を、その後５日目および３～４日ごとに行った。
はａｂＴＣＲを含有するレンチウイルスは、例えばキメラ構築物をコードするベクターを
用いた２９３Ｔ細胞のトランスフェクションによって産生した。初代ヒトＴ細胞を、１０
０Ｕ／ｍｌのインターロイキン－２（ＩＬ－２）の存在下でＣＤ３／ＣＤ２８ビーズ（Ｄ
ｙｎａｂｅａｄｓ（登録商標）、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）で１日刺激した後の形質導入に
使用した。濃縮レンチウイルスをＲｅｔｒｏｎｅｃｔｉｎ（Ｔａｋａｒａ）でコーティン
グした６ウェルプレート中のＴ細胞にアプライし、９６時間置いた。抗ＡＦＰおよび抗Ｃ
Ｄ１９キメラ構築物の形質導入効率を、それぞれビオチン化ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊
０２：０１四量体（「ＡＦＰ１５８四量体」）およびＰＥコンジュゲートストレプトアビ
ジンまたは抗ｍｙｃ抗体を使用して、フローサイトメトリーにより評価した。反復フロー
サイトメトリー分析を、その後５日目および３～４日ごとに行った。
【0461】
細胞株をａｂＴＣＲ構築物の２つのサブユニットをコードする１つまたは２つのベクタ
ーのいずれかを用いて形質導入した。形質導入５日後、細胞可溶化物を抗ＨＡ（抗ＨＡタ
グ抗体－ＣｈＩＰ Ｇｒａｄｅ、Ａｂｃａｍ）または抗Ｆｌａｇ抗体（ウサギで産生され
た抗Ｆｌａｇ抗体、Ｓｉｇｍａ）を使用するウエスタンブロットのために生成した。
ーのいずれかを用いて形質導入した。形質導入５日後、細胞可溶化物を抗ＨＡ（抗ＨＡタ
グ抗体－ＣｈＩＰ Ｇｒａｄｅ、Ａｂｃａｍ）または抗Ｆｌａｇ抗体（ウサギで産生され
た抗Ｆｌａｇ抗体、Ｓｉｇｍａ）を使用するウエスタンブロットのために生成した。
【0462】
腫瘍細胞傷害性をＣｙｔｏｘ ９６ Ｎｏｎ－ｒａｄｉｏａｃｔｉｖｅ ＬＤＨ Ｃｙ
ｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ Ａｓｓａｙ（Ｐｒｏｍｅｇａ）によってアッセイした。ＣＤ３＋
Ｔ細胞をＣＤ１４、ＣＤ１６、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ３６、ＣＤ５６、ＣＤ６６ｂ、
ＣＤ１２３、グリコホリンＡ発現細胞を陰性に枯渇させるＥａｓｙＳｅｐ Ｈｕｍａｎ
Ｔ Ｃｅｌｌ Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ Ｋｉｔ（ＳｔｅｍＣｅｌｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉ
ｅｓ）を使用してＰＢＭＣ富化全血から調製した。ヒトＴ細胞は、例えば、ＣＤ３／ＣＤ
２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を製造者のプロトコールに従って用
いて活性化し、拡大増殖させた。活性化Ｔ細胞（ＡＴＣ）を１０％ＦＢＳに加えて１００
Ｕ／ｍｌ ＩＬ－２を含むＲＰＭＩ１６４０培地中で培養および維持し、７～１４日目に
使用した。活性化Ｔ細胞（エフェクター細胞）および標的細胞を種々のエフェクターおよ
び標的の比（例えば、２．５：１または５：１）で１６時間共培養し、細胞傷害性につい
てアッセイした。
ｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ Ａｓｓａｙ（Ｐｒｏｍｅｇａ）によってアッセイした。ＣＤ３＋
Ｔ細胞をＣＤ１４、ＣＤ１６、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ３６、ＣＤ５６、ＣＤ６６ｂ、
ＣＤ１２３、グリコホリンＡ発現細胞を陰性に枯渇させるＥａｓｙＳｅｐ Ｈｕｍａｎ
Ｔ Ｃｅｌｌ Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ Ｋｉｔ（ＳｔｅｍＣｅｌｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉ
ｅｓ）を使用してＰＢＭＣ富化全血から調製した。ヒトＴ細胞は、例えば、ＣＤ３／ＣＤ
２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を製造者のプロトコールに従って用
いて活性化し、拡大増殖させた。活性化Ｔ細胞（ＡＴＣ）を１０％ＦＢＳに加えて１００
Ｕ／ｍｌ ＩＬ－２を含むＲＰＭＩ１６４０培地中で培養および維持し、７～１４日目に
使用した。活性化Ｔ細胞（エフェクター細胞）および標的細胞を種々のエフェクターおよ
び標的の比（例えば、２．５：１または５：１）で１６時間共培養し、細胞傷害性につい
てアッセイした。
【0463】
（実施例１）
抗体－Ｔ細胞受容体（ａｂＴＣＲ）キメラ設計
４つの異なる抗体－Ｔ細胞受容体キメラ構築物（ａｂＴＣＲ）設計（ａｂＴＣＲ－３、
ａｂＴＣＲ－４、ａｂＴＣＲ－５およびａｂＴＣＲ－６）を、企図されるバリエーション
も含んで、図１Ａおよび１Ｂに示す。これらの設計では、抗体Ｆａｂ断片の重鎖（ＩｇＶ
Ｈ－ＩｇＣＨ１）および軽鎖（ＩｇＶＬ－ＩｇＣＬ）ドメインは、可変および定常ドメイ
ンを欠いており、Ｔ細胞表面上に発現され得るキメラ抗体－ＴＣＲヘテロ二量体を形成す
るようにそれらの接続ペプチド（定常ドメイン後の領域）のすべてまたは一部を含むＴ細
胞受容体α／β鎖またはγ／δ鎖断片のアミノ末端に融合される。ａｂＴＣＲ設計それぞ
れのＩｇＶＨおよびＩｇＶＬドメインは、抗原結合特異性を決定し、ＩｇＣＨ１およびＩ
ｇＣＬと合わせてＦａｂ断片に似た構造を形成する。天然ＴＣＲでは、Ｖα／Ｖβまたは
Ｖδ／ＶγドメインはＴＣＲの抗原結合ドメインを形成する。これらの設計は、Ｖα－Ｃ
α／Ｖβ－ＣβまたはＶδ－Ｃδ／Ｖγ－Ｃγ領域をＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１またはＩｇＶ
Ｌ－ＩｇＣＬで置き換え、それによりＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびＣＤ３ζζなどの天
然ＴＣＲ複合体中のアクセサリ分子と会合する構築物の能力を維持しながら、構築物への
抗体の結合特異性を付与している。これらの設計は、抗体の可変ドメインがＴＣＲ定常領
域に連結され、Ｖα／Ｖβ領域だけをＩｇＶＨ／ＩｇＶＬで置き換えている、Grossおよ
びEshhar（Endowing T cells with antibody specificity using chimeric T c
ell receptors、FASEB J. １９９２年（１５巻）：３３７０頁）によって記載された
ｃＴＣＲ設計とは異なっている。
抗体－Ｔ細胞受容体（ａｂＴＣＲ）キメラ設計
４つの異なる抗体－Ｔ細胞受容体キメラ構築物（ａｂＴＣＲ）設計（ａｂＴＣＲ－３、
ａｂＴＣＲ－４、ａｂＴＣＲ－５およびａｂＴＣＲ－６）を、企図されるバリエーション
も含んで、図１Ａおよび１Ｂに示す。これらの設計では、抗体Ｆａｂ断片の重鎖（ＩｇＶ
Ｈ－ＩｇＣＨ１）および軽鎖（ＩｇＶＬ－ＩｇＣＬ）ドメインは、可変および定常ドメイ
ンを欠いており、Ｔ細胞表面上に発現され得るキメラ抗体－ＴＣＲヘテロ二量体を形成す
るようにそれらの接続ペプチド（定常ドメイン後の領域）のすべてまたは一部を含むＴ細
胞受容体α／β鎖またはγ／δ鎖断片のアミノ末端に融合される。ａｂＴＣＲ設計それぞ
れのＩｇＶＨおよびＩｇＶＬドメインは、抗原結合特異性を決定し、ＩｇＣＨ１およびＩ
ｇＣＬと合わせてＦａｂ断片に似た構造を形成する。天然ＴＣＲでは、Ｖα／Ｖβまたは
Ｖδ／ＶγドメインはＴＣＲの抗原結合ドメインを形成する。これらの設計は、Ｖα－Ｃ
α／Ｖβ－ＣβまたはＶδ－Ｃδ／Ｖγ－Ｃγ領域をＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１またはＩｇＶ
Ｌ－ＩｇＣＬで置き換え、それによりＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびＣＤ３ζζなどの天
然ＴＣＲ複合体中のアクセサリ分子と会合する構築物の能力を維持しながら、構築物への
抗体の結合特異性を付与している。これらの設計は、抗体の可変ドメインがＴＣＲ定常領
域に連結され、Ｖα／Ｖβ領域だけをＩｇＶＨ／ＩｇＶＬで置き換えている、Grossおよ
びEshhar（Endowing T cells with antibody specificity using chimeric T c
ell receptors、FASEB J. １９９２年（１５巻）：３３７０頁）によって記載された
ｃＴＣＲ設計とは異なっている。
【0464】
他のａｂＴＣＲ設計では、ペプチドおよびＭＨＣタンパク質（ＭＨＣ限定抗体部分）を
含む複合体に対して特異的である抗体Ｆｖ断片の重鎖（ＩｇＶＨ）および軽鎖（ＩｇＶＬ
）ドメインは、可変ドメインを欠いており、それらの接続ペプチド（定常ドメイン後の領
域）のすべてまたは一部を含むＴ細胞受容体α／β鎖またはγ／δ鎖断片のアミノ末端に
融合される。これらのａｂＴＣＲ設計の一部では、Ｔ細胞受容体α／β鎖またはγ／δ鎖
断片は、ＴＣＲ定常ドメインのすべてまたは一部を含む。かかる設計の１つ、ａｂＴＣＲ
－７ではＩｇＶＨは、定常ドメインを含むＴＣＲδ断片に融合されており、ＩｇＶＬは定
常ドメインを含むＴＣＲγ断片に融合されている。これらの設計は、抗体可変ドメインが
非ＭＨＣ限定結合のためのものである、GrossおよびEshhar（上記）によって記載された
ｃＴＣＲ設計とは異なっている。
含む複合体に対して特異的である抗体Ｆｖ断片の重鎖（ＩｇＶＨ）および軽鎖（ＩｇＶＬ
）ドメインは、可変ドメインを欠いており、それらの接続ペプチド（定常ドメイン後の領
域）のすべてまたは一部を含むＴ細胞受容体α／β鎖またはγ／δ鎖断片のアミノ末端に
融合される。これらのａｂＴＣＲ設計の一部では、Ｔ細胞受容体α／β鎖またはγ／δ鎖
断片は、ＴＣＲ定常ドメインのすべてまたは一部を含む。かかる設計の１つ、ａｂＴＣＲ
－７ではＩｇＶＨは、定常ドメインを含むＴＣＲδ断片に融合されており、ＩｇＶＬは定
常ドメインを含むＴＣＲγ断片に融合されている。これらの設計は、抗体可変ドメインが
非ＭＨＣ限定結合のためのものである、GrossおよびEshhar（上記）によって記載された
ｃＴＣＲ設計とは異なっている。
【0465】
ａｂＴＣＲ－３（ＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１－ＴＣＲα／ＩｇＶＬ－ＩｇＣＬ－ＴＣＲβ）
設計では、抗体重鎖の可変ドメインおよび第１の定常ドメイン（ＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１）
は、ＴＣＲα鎖のアミノ末端部分をＶα－Ｃα領域後の細胞外ドメイン中の接続ペプチド
と境界を接するまたはその中の位置まで置き換えている。対応する抗体軽鎖の可変ドメイ
ンおよび定常ドメイン（ＩｇＶＬ－ＩｇＣＬ）は、ＴＣＲβ鎖のアミノ末端部分をＶβ－
Ｃβ領域後の細胞外ドメイン中の接続ペプチドと境界を接するまたはその中の位置まで置
き換えている。ａｂＴＣＲ－４（ＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１－ＴＣＲβ／ＩｇＶＬ－ＩｇＣＬ
－ＴＣＲα）設計では、抗体重鎖の可変ドメインおよび第１の定常ドメイン（ＩｇＶＨ－
ＩｇＣＨ１）は、ＴＣＲβ鎖のアミノ末端部分をＶβ－Ｃβ領域後の細胞外ドメイン中の
接続ペプチドと境界を接するまたはその中の位置まで置き換えている。対応する抗体軽鎖
の可変ドメインおよび定常ドメイン（ＩｇＶＬ－ＩｇＣＬ）は、ＴＣＲα鎖のアミノ末端
部分をＶα－Ｃα領域後の細胞外ドメイン中の接続ペプチドと境界を接するまたはその中
の位置まで置き換えている。キメラαおよびβ鎖は、１つはＩｇＣＬとＩｇＣＨ１ドメイ
ンとの間、１つはＴＣＲαおよびβ鎖中の接続ペプチド間の、２つのジスルフィド結合を
通じて二量体化される。３ｘ－ＦｌａｇタグはＴＣＲα鎖細胞質性領域のＣ末端に任意選
択で融合されており、ＨＡタグはＴＣＲβ鎖細胞質性領域のＣ末端に任意選択で融合され
ている。
設計では、抗体重鎖の可変ドメインおよび第１の定常ドメイン（ＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１）
は、ＴＣＲα鎖のアミノ末端部分をＶα－Ｃα領域後の細胞外ドメイン中の接続ペプチド
と境界を接するまたはその中の位置まで置き換えている。対応する抗体軽鎖の可変ドメイ
ンおよび定常ドメイン（ＩｇＶＬ－ＩｇＣＬ）は、ＴＣＲβ鎖のアミノ末端部分をＶβ－
Ｃβ領域後の細胞外ドメイン中の接続ペプチドと境界を接するまたはその中の位置まで置
き換えている。ａｂＴＣＲ－４（ＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１－ＴＣＲβ／ＩｇＶＬ－ＩｇＣＬ
－ＴＣＲα）設計では、抗体重鎖の可変ドメインおよび第１の定常ドメイン（ＩｇＶＨ－
ＩｇＣＨ１）は、ＴＣＲβ鎖のアミノ末端部分をＶβ－Ｃβ領域後の細胞外ドメイン中の
接続ペプチドと境界を接するまたはその中の位置まで置き換えている。対応する抗体軽鎖
の可変ドメインおよび定常ドメイン（ＩｇＶＬ－ＩｇＣＬ）は、ＴＣＲα鎖のアミノ末端
部分をＶα－Ｃα領域後の細胞外ドメイン中の接続ペプチドと境界を接するまたはその中
の位置まで置き換えている。キメラαおよびβ鎖は、１つはＩｇＣＬとＩｇＣＨ１ドメイ
ンとの間、１つはＴＣＲαおよびβ鎖中の接続ペプチド間の、２つのジスルフィド結合を
通じて二量体化される。３ｘ－ＦｌａｇタグはＴＣＲα鎖細胞質性領域のＣ末端に任意選
択で融合されており、ＨＡタグはＴＣＲβ鎖細胞質性領域のＣ末端に任意選択で融合され
ている。
【0466】
１つのａｂＴＣＲ－３実施形態では、一方の鎖は、配列番号２３の配列（抗ＡＦＰ１５
８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１－ａｂＴＣＲ－３）を含み、ここで抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ
－Ａ＊０２：０１抗体（配列番号３８）のＩｇＶＨドメインは配列番号１５、接続ペプチ
ドの一部をＶα－Ｃα領域後のＴＣＲα鎖の細胞外ドメインに含むＴＣＲα鎖の一部に融
合されたＩｇＣＨ１ドメイン（配列番号３９）に融合されており、他方の鎖は、配列番号
２４の配列を含み、ここで抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１抗体（配列番号４０
）のＩｇＶＬドメインは配列番号１６、Ｖβ－Ｃβ領域後のＴＣＲβ鎖の細胞外ドメイン
に接続ペプチドの一部を含むＴＣＲβ鎖のカルボキシ部分に融合されたＩｇＣＬドメイン
（配列番号４１）に融合されている。１つのａｂＴＣＲ－４実施形態では、一方の鎖は、
配列番号２５（抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１－ａｂＴＣＲ－４）の配列を含
み、ここで抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１抗体（配列番号４０）のＩｇＶＬド
メインは配列番号１５、Ｖα－Ｃα領域後のＴＣＲα鎖の細胞外ドメイン中に接続ペプチ
ドの一部を含むＴＣＲα鎖の一部に融合されたＩｇＣＬドメイン（配列番号４１）に融合
されており、他方の鎖は、配列番号２６の配列を含み、ここで抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－
Ａ＊０２：０１抗体（配列番号３８）のＩｇＶＨドメインは配列番号１６、Ｖβ－Ｃβ領
域後のＴＣＲβ鎖の細胞外ドメインに接続ペプチドの一部を含むＴＣＲβ鎖のカルボキシ
部分に融合されたＩｇＣＨ１ドメイン（配列番号３９）に融合されている。
８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１－ａｂＴＣＲ－３）を含み、ここで抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ
－Ａ＊０２：０１抗体（配列番号３８）のＩｇＶＨドメインは配列番号１５、接続ペプチ
ドの一部をＶα－Ｃα領域後のＴＣＲα鎖の細胞外ドメインに含むＴＣＲα鎖の一部に融
合されたＩｇＣＨ１ドメイン（配列番号３９）に融合されており、他方の鎖は、配列番号
２４の配列を含み、ここで抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１抗体（配列番号４０
）のＩｇＶＬドメインは配列番号１６、Ｖβ－Ｃβ領域後のＴＣＲβ鎖の細胞外ドメイン
に接続ペプチドの一部を含むＴＣＲβ鎖のカルボキシ部分に融合されたＩｇＣＬドメイン
（配列番号４１）に融合されている。１つのａｂＴＣＲ－４実施形態では、一方の鎖は、
配列番号２５（抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１－ａｂＴＣＲ－４）の配列を含
み、ここで抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１抗体（配列番号４０）のＩｇＶＬド
メインは配列番号１５、Ｖα－Ｃα領域後のＴＣＲα鎖の細胞外ドメイン中に接続ペプチ
ドの一部を含むＴＣＲα鎖の一部に融合されたＩｇＣＬドメイン（配列番号４１）に融合
されており、他方の鎖は、配列番号２６の配列を含み、ここで抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－
Ａ＊０２：０１抗体（配列番号３８）のＩｇＶＨドメインは配列番号１６、Ｖβ－Ｃβ領
域後のＴＣＲβ鎖の細胞外ドメインに接続ペプチドの一部を含むＴＣＲβ鎖のカルボキシ
部分に融合されたＩｇＣＨ１ドメイン（配列番号３９）に融合されている。
【0467】
ａｂＴＣＲ－５（ＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１－ＴＣＲγ／ＩｇＶＬ－ＩｇＣＬ－ＴＣＲδ）
設計では、抗体重鎖の可変ドメインおよび第１の定常ドメイン（ＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１）
は、ＴＣＲγ鎖のアミノ末端部分をＶγ－Ｃγ領域後のＴＣＲγ鎖の細胞外ドメイン中の
接続ペプチドと境界を接するまたはその中の位置まで置き換えている。対応する抗体軽鎖
の可変ドメインおよび定常ドメイン（ＩｇＶＬ－ＩｇＣＬ）は、ＴＣＲδ鎖のアミノ末端
部分をＶδ－Ｃδ領域後のＴＣＲδ鎖の細胞外ドメイン中の接続ペプチドと境界を接する
またはその中の位置まで置き換えている。ａｂＴＣＲ－６（ＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１－ＴＣ
Ｒδ／ＩｇＶＬ－ＩｇＣＬ－ＴＣＲγ）設計では、抗体重鎖の可変ドメインおよび第１の
定常ドメイン（ＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１）は、ＴＣＲδ鎖のアミノ末端部分をＶδ－Ｃδ領
域後のＴＣＲδ鎖の細胞外ドメイン中の接続ペプチドと境界を接するまたはその中の位置
まで置き換えている。対応する抗体軽鎖の可変ドメインおよび定常ドメイン（ＩｇＶＬ－
ＩｇＣＬ）は、ＴＣＲγ鎖のアミノ末端部分をＶγ－Ｃγ領域後のＴＣＲγ鎖の細胞外ド
メイン中の接続ペプチドと境界を接するまたはその中の位置まで置き換えている。キメラ
γおよびδ鎖は、１つはＩｇＣＬとＩｇＣＨ１ドメインとの間、１つはＴＣＲγおよびδ
鎖中の接続ペプチド間の、２つのジスルフィド結合を通じて二量体化される。３ｘｆｌａ
ｇタグはＴＣＲγ鎖細胞質性領域のＣ末端に任意選択で融合されており、ＨＡタグはＴＣ
Ｒδ鎖細胞質性領域のＣ末端に任意選択で融合されている。
設計では、抗体重鎖の可変ドメインおよび第１の定常ドメイン（ＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１）
は、ＴＣＲγ鎖のアミノ末端部分をＶγ－Ｃγ領域後のＴＣＲγ鎖の細胞外ドメイン中の
接続ペプチドと境界を接するまたはその中の位置まで置き換えている。対応する抗体軽鎖
の可変ドメインおよび定常ドメイン（ＩｇＶＬ－ＩｇＣＬ）は、ＴＣＲδ鎖のアミノ末端
部分をＶδ－Ｃδ領域後のＴＣＲδ鎖の細胞外ドメイン中の接続ペプチドと境界を接する
またはその中の位置まで置き換えている。ａｂＴＣＲ－６（ＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１－ＴＣ
Ｒδ／ＩｇＶＬ－ＩｇＣＬ－ＴＣＲγ）設計では、抗体重鎖の可変ドメインおよび第１の
定常ドメイン（ＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１）は、ＴＣＲδ鎖のアミノ末端部分をＶδ－Ｃδ領
域後のＴＣＲδ鎖の細胞外ドメイン中の接続ペプチドと境界を接するまたはその中の位置
まで置き換えている。対応する抗体軽鎖の可変ドメインおよび定常ドメイン（ＩｇＶＬ－
ＩｇＣＬ）は、ＴＣＲγ鎖のアミノ末端部分をＶγ－Ｃγ領域後のＴＣＲγ鎖の細胞外ド
メイン中の接続ペプチドと境界を接するまたはその中の位置まで置き換えている。キメラ
γおよびδ鎖は、１つはＩｇＣＬとＩｇＣＨ１ドメインとの間、１つはＴＣＲγおよびδ
鎖中の接続ペプチド間の、２つのジスルフィド結合を通じて二量体化される。３ｘｆｌａ
ｇタグはＴＣＲγ鎖細胞質性領域のＣ末端に任意選択で融合されており、ＨＡタグはＴＣ
Ｒδ鎖細胞質性領域のＣ末端に任意選択で融合されている。
【0468】
１つのａｂＴＣＲ－５実施形態では、一方の鎖は配列番号３０の配列（抗ＡＦＰ１５８
／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１－ａｂＴＣＲ－５）を含み、ここで抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－
Ａ＊０２：０１抗体（配列番号３８）のＩｇＶＨドメインは配列番号２０、Ｖγ－Ｃγ領
域後のＴＣＲγ鎖の細胞外ドメイン中に接続ペプチドの一部を含むＴＣＲγ鎖の一部に融
合されたＩｇＣＨ１ドメイン（配列番号３９）に融合されており、他方の鎖は、配列番号
２９の配列を含み、ここで抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１抗体（配列番号４０
）のＩｇＶＬドメインはＩｇＣＬドメイン（配列番号４１）および次いで配列番号１９、
Ｖδ－Ｃδ領域後のＴＣＲδ鎖の細胞外ドメイン中の接続ペプチドの一部を含むＴＣＲδ
鎖のカルボキシ部分に融合されている。１つのａｂＴＣＲ－６実施形態では、一方の鎖は
配列番号３４の配列（抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１－ａｂＴＣＲ－６）を含
み、ここで抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１抗体（配列番号４０）のＩｇＶＬド
メインは配列番号２０、Ｖγ－Ｃγ領域後のＴＣＲγ鎖の細胞外ドメイン中に接続ペプチ
ドの一部を含むＴＣＲγ鎖の一部に融合されたＩｇＣＬドメイン（配列番号４１）に融合
されており、他方の鎖は、配列番号３３の配列を含み、ここで抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－
Ａ＊０２：０１抗体（配列番号３８）のＩｇＶＨドメインは配列番号１９、Ｖδ－Ｃδ領
域後のＴＣＲδ鎖の細胞外ドメイン中の接続ペプチドの一部を含むＴＣＲδ鎖のカルボキ
シ末端部分に融合されたＩｇＣＨ１ドメイン（配列番号３９）に融合されている。
／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１－ａｂＴＣＲ－５）を含み、ここで抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－
Ａ＊０２：０１抗体（配列番号３８）のＩｇＶＨドメインは配列番号２０、Ｖγ－Ｃγ領
域後のＴＣＲγ鎖の細胞外ドメイン中に接続ペプチドの一部を含むＴＣＲγ鎖の一部に融
合されたＩｇＣＨ１ドメイン（配列番号３９）に融合されており、他方の鎖は、配列番号
２９の配列を含み、ここで抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１抗体（配列番号４０
）のＩｇＶＬドメインはＩｇＣＬドメイン（配列番号４１）および次いで配列番号１９、
Ｖδ－Ｃδ領域後のＴＣＲδ鎖の細胞外ドメイン中の接続ペプチドの一部を含むＴＣＲδ
鎖のカルボキシ部分に融合されている。１つのａｂＴＣＲ－６実施形態では、一方の鎖は
配列番号３４の配列（抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１－ａｂＴＣＲ－６）を含
み、ここで抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１抗体（配列番号４０）のＩｇＶＬド
メインは配列番号２０、Ｖγ－Ｃγ領域後のＴＣＲγ鎖の細胞外ドメイン中に接続ペプチ
ドの一部を含むＴＣＲγ鎖の一部に融合されたＩｇＣＬドメイン（配列番号４１）に融合
されており、他方の鎖は、配列番号３３の配列を含み、ここで抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－
Ａ＊０２：０１抗体（配列番号３８）のＩｇＶＨドメインは配列番号１９、Ｖδ－Ｃδ領
域後のＴＣＲδ鎖の細胞外ドメイン中の接続ペプチドの一部を含むＴＣＲδ鎖のカルボキ
シ末端部分に融合されたＩｇＣＨ１ドメイン（配列番号３９）に融合されている。
【0469】
図１Ｂに例示のとおり、４つのａｂＴＣＲ設計それぞれのバリエーションもまた企図さ
れる。かかるバリエーションは（ｉ）ＩｇＣとＴＣＲとの融合によって形成される接合部
に残基を付加することによる伸長または（ｉｉ）ＴＣＲ接続ペプチドのＮ－末端で残基を
欠失させることによる短縮、などの細胞外ドメインの長さの変更を含む場合がある。ａｂ
ＴＣＲ－６のかかるバリエーションの実施形態は、ａｂＴＣＲ－６ＭＤであり、ここで一
方の鎖は配列番号３６の配列（抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１－ａｂＴＣＲ－
６ＭＤ）を含み、ここで抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１抗体（配列番号４０）
のＩｇＶＬドメインは、配列番号２２、ＴＣＲγ鎖中のＶγ－Ｃγ領域の後に接続ペプチ
ドのより長い（ａｂＴＣＲ－６と比較して）部分を含むＴＣＲγ鎖のカルボキシ末端部分
に融合されたＩｇＣＬドメイン（配列番号４１）に融合されており、他方の鎖は、配列番
号３５の配列を含み、ここで抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１抗体（配列番号３
８）のＩｇＶＨドメインは配列番号２１、ＴＣＲδ鎖のＶδ－Ｃδ領域後の接続ペプチド
のより長い（ａｂＴＣＲ－６と比較して）部分を含むＴＣＲδ鎖のカルボキシ末端部分に
融合されたＩｇＣＨ１ドメイン（配列番号３９）に融合されている。ａｂＴＣＲ－５のか
かるバリエーションの実施形態はａｂＴＣＲ－５ＭＤであり、ここで一方の鎖は配列番号
３１の配列（抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１－ａｂＴＣＲ－５ＭＤ）を含み、
ここで抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１抗体（配列番号４０）のＩｇＶＬドメイ
ンは配列番号２１、ＴＣＲδ鎖のＶδ－Ｃδ領域後の接続ペプチドのより長い（ａｂＴＣ
Ｒ－５と比較して）部分を含むＴＣＲδ鎖のカルボキシ末端部分に融合されたＩｇＣＬド
メイン（配列番号４１）に融合されており、他方の鎖は、配列番号３２の配列を含み、こ
こで抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１抗体（配列番号３８）のＩｇＶＨドメイン
は配列番号２２、ＴＣＲγ鎖のＶγ－Ｃγ領域後の接続ペプチドのより長い（ａｂＴＣＲ
－５と比較して）部分を含むＴＣＲγ鎖のカルボキシ末端部分に融合されたＩｇＣＨ１ド
メイン（配列番号３９）に融合されている。ａｂＴＣＲ－４のかかるバリエーションの実
施形態はａｂＴＣＲ－４ＭＤであり、ここで一方の鎖は配列番号２７の配列（抗ＡＦＰ１
５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１－ａｂＴＣＲ－４ＭＤ）を含み、ここで抗ＡＦＰ１５８／
ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１抗体（配列番号４０）のＩｇＶＬドメインは配列番号１７、Ｖα
－Ｃα領域後の接続ペプチドのより長い（ａｂＴＣＲ－４と比較して）部分を含むＴＣＲ
α鎖のカルボキシ末端部分に融合されたＩｇＣＬドメイン（配列番号４１）に融合されて
おり、他方の鎖は、配列番号２８の配列を含み、ここで抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０
２：０１抗体（配列番号３８）のＩｇＶＨドメインは配列番号１８、Ｖβ－Ｃβ領域後の
接続ペプチドのより長い（ａｂＴＣＲ－４と比較して）部分を含むＴＣＲβ鎖のカルボキ
シ末端部分に融合されたＩｇＣＨ１ドメイン（配列番号３９）に融合されている。
れる。かかるバリエーションは（ｉ）ＩｇＣとＴＣＲとの融合によって形成される接合部
に残基を付加することによる伸長または（ｉｉ）ＴＣＲ接続ペプチドのＮ－末端で残基を
欠失させることによる短縮、などの細胞外ドメインの長さの変更を含む場合がある。ａｂ
ＴＣＲ－６のかかるバリエーションの実施形態は、ａｂＴＣＲ－６ＭＤであり、ここで一
方の鎖は配列番号３６の配列（抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１－ａｂＴＣＲ－
６ＭＤ）を含み、ここで抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１抗体（配列番号４０）
のＩｇＶＬドメインは、配列番号２２、ＴＣＲγ鎖中のＶγ－Ｃγ領域の後に接続ペプチ
ドのより長い（ａｂＴＣＲ－６と比較して）部分を含むＴＣＲγ鎖のカルボキシ末端部分
に融合されたＩｇＣＬドメイン（配列番号４１）に融合されており、他方の鎖は、配列番
号３５の配列を含み、ここで抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１抗体（配列番号３
８）のＩｇＶＨドメインは配列番号２１、ＴＣＲδ鎖のＶδ－Ｃδ領域後の接続ペプチド
のより長い（ａｂＴＣＲ－６と比較して）部分を含むＴＣＲδ鎖のカルボキシ末端部分に
融合されたＩｇＣＨ１ドメイン（配列番号３９）に融合されている。ａｂＴＣＲ－５のか
かるバリエーションの実施形態はａｂＴＣＲ－５ＭＤであり、ここで一方の鎖は配列番号
３１の配列（抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１－ａｂＴＣＲ－５ＭＤ）を含み、
ここで抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１抗体（配列番号４０）のＩｇＶＬドメイ
ンは配列番号２１、ＴＣＲδ鎖のＶδ－Ｃδ領域後の接続ペプチドのより長い（ａｂＴＣ
Ｒ－５と比較して）部分を含むＴＣＲδ鎖のカルボキシ末端部分に融合されたＩｇＣＬド
メイン（配列番号４１）に融合されており、他方の鎖は、配列番号３２の配列を含み、こ
こで抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１抗体（配列番号３８）のＩｇＶＨドメイン
は配列番号２２、ＴＣＲγ鎖のＶγ－Ｃγ領域後の接続ペプチドのより長い（ａｂＴＣＲ
－５と比較して）部分を含むＴＣＲγ鎖のカルボキシ末端部分に融合されたＩｇＣＨ１ド
メイン（配列番号３９）に融合されている。ａｂＴＣＲ－４のかかるバリエーションの実
施形態はａｂＴＣＲ－４ＭＤであり、ここで一方の鎖は配列番号２７の配列（抗ＡＦＰ１
５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１－ａｂＴＣＲ－４ＭＤ）を含み、ここで抗ＡＦＰ１５８／
ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１抗体（配列番号４０）のＩｇＶＬドメインは配列番号１７、Ｖα
－Ｃα領域後の接続ペプチドのより長い（ａｂＴＣＲ－４と比較して）部分を含むＴＣＲ
α鎖のカルボキシ末端部分に融合されたＩｇＣＬドメイン（配列番号４１）に融合されて
おり、他方の鎖は、配列番号２８の配列を含み、ここで抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０
２：０１抗体（配列番号３８）のＩｇＶＨドメインは配列番号１８、Ｖβ－Ｃβ領域後の
接続ペプチドのより長い（ａｂＴＣＲ－４と比較して）部分を含むＴＣＲβ鎖のカルボキ
シ末端部分に融合されたＩｇＣＨ１ドメイン（配列番号３９）に融合されている。
【0470】
さらなるバリエーションは、さらなるエフェクタードメイン（例えば、ＣＤ２８の細胞
内ドメイン）のＴＣＲα／β／δ／γ鎖のいずれかのＣ末端への融合を含む場合がある。
別のバリエーションは、ＩｇＶとＩｇＣドメインとの間のリンカー領域の変更を含む場合
がある。
内ドメイン）のＴＣＲα／β／δ／γ鎖のいずれかのＣ末端への融合を含む場合がある。
別のバリエーションは、ＩｇＶとＩｇＣドメインとの間のリンカー領域の変更を含む場合
がある。
【0471】
（実施例２）
Ｔ細胞株におけるａｂＴＣＲの発現
成熟Ｔ細胞ではＴＣＲ－ＣＤ３複合体は、図２に示すとおり、無処置複合体を形成する
ように膜内および膜外接触を通じて会合すると考えられている４つの二量体モジュール：
ＴＣＲαβ（またはＴＣＲγδ）、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびＣＤ３ζζからなる（
Wucherpfennig KWら、Structural biology of the T-cell receptor: insights
into receptor assembly, ligand recognition, and initiation of signaling.
Cold Spring Harb Perspect Biol. ２０１０年４月;２巻（４号）：ａ００５１４
０から）。複合体アセンブリは小胞体（ＥＲ）で生じる。完全なＴＣＲ－ＣＤ３複合体だ
けが、ゴルジ装置に移入され、グリコシル化工程を通り、Ｔ細胞の細胞膜に輸送される。
不完全なＴＣＲは、ゴルジから、それらが分解されるリソソームに方向付けられる。
Ｔ細胞株におけるａｂＴＣＲの発現
成熟Ｔ細胞ではＴＣＲ－ＣＤ３複合体は、図２に示すとおり、無処置複合体を形成する
ように膜内および膜外接触を通じて会合すると考えられている４つの二量体モジュール：
ＴＣＲαβ（またはＴＣＲγδ）、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびＣＤ３ζζからなる（
Wucherpfennig KWら、Structural biology of the T-cell receptor: insights
into receptor assembly, ligand recognition, and initiation of signaling.
Cold Spring Harb Perspect Biol. ２０１０年４月;２巻（４号）：ａ００５１４
０から）。複合体アセンブリは小胞体（ＥＲ）で生じる。完全なＴＣＲ－ＣＤ３複合体だ
けが、ゴルジ装置に移入され、グリコシル化工程を通り、Ｔ細胞の細胞膜に輸送される。
不完全なＴＣＲは、ゴルジから、それらが分解されるリソソームに方向付けられる。
【0472】
Ｔ細胞におけるａｂＴＣＲ発現を検査し、ＣＤ３分子をリクルートし、Ｔ細胞表面での
ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体の発現を可能にすることにａｂＴＣＲが内因性ＴＣＲと同様に
機能し得るかどうかを検討するために、ａｂＴＣＲ構築物を変異Ｊｕｒｋａｔ Ｔ細胞株
、Ｊ．ＲＴ３－Ｔ３．５に導入した。Ｊｕｒｋａｔ、αβＴＣＲ陽性白血病Ｔ細胞株とは
異なり、Ｊ．ＲＴ３－Ｔ３．５はＴＣＲβサブユニット発現を欠いているＪｕｒｋａｔ変
異株である。ＴＣＲ－ＣＤ３複合体のアセンブリはＴＣＲβサブユニット無しでは損なわ
れることから、Ｊ．ＲＴ３－Ｔ３．５細胞ではＴＣＲおよびＣＤ３は、いずれも細胞膜に
輸送され得ない。
ａｂＴＣＲ－ＣＤ３複合体の発現を可能にすることにａｂＴＣＲが内因性ＴＣＲと同様に
機能し得るかどうかを検討するために、ａｂＴＣＲ構築物を変異Ｊｕｒｋａｔ Ｔ細胞株
、Ｊ．ＲＴ３－Ｔ３．５に導入した。Ｊｕｒｋａｔ、αβＴＣＲ陽性白血病Ｔ細胞株とは
異なり、Ｊ．ＲＴ３－Ｔ３．５はＴＣＲβサブユニット発現を欠いているＪｕｒｋａｔ変
異株である。ＴＣＲ－ＣＤ３複合体のアセンブリはＴＣＲβサブユニット無しでは損なわ
れることから、Ｊ．ＲＴ３－Ｔ３．５細胞ではＴＣＲおよびＣＤ３は、いずれも細胞膜に
輸送され得ない。
【0473】
ウエスタンブロットによるａｂＴＣＲ発現の検出
５セットのａｂＴＣＲ構築物（ａｂＴＣＲ－３、－４、－５、－６、－６ＭＤ）を、抗
ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１抗体のＩｇＶＨおよびＩｇＶＬ領域を用いて生成
した。Ｊ．ＲＴ３－Ｔ３．５およびＪｕｒｋａｔ細胞は、ａｂＴＣＲ－３（配列番号２３
および２４）、ａｂＴＣＲ－４（配列番号２５および２６）、ａｂＴＣＲ－５（配列番号
２９および３０）、ａｂＴＣＲ－６（配列番号３３および３４）またはａｂＴＣＲ－６Ｍ
Ｄ（配列番号３５および３６）構築物を用いて形質導入し、ａｂＴＣＲの個々のサブユニ
ットの発現を抗Ｆｌａｇまたは抗ＨＡ抗体を使用するウエスタンブロットにおいて検出し
た（図３）。各構築物について２つのサブユニットを２つの別々のレンチウイルスベクタ
ーにサブクローニングした。完全なａｂＴＣＲヘテロ二量体を発現するために、Ｔ細胞を
両方のベクターを用いて形質導入した。ＴＣＲβおよびＴＣＲδキメラをＨＡを用いてタ
グ付けした一方で、ＴＣＲαおよびＴＣＲγキメラはａｂＴＣＲサブユニットのＣ末端に
結合された３ｘＦｌａｇを用いてタグ付けした。ＨＡまたは３ｘＦｌａｇタグを有するＴ
ＣＲ鎖は、図３で各ａｂＴＣＲ設計についての表示の下に括弧で示されている。
５セットのａｂＴＣＲ構築物（ａｂＴＣＲ－３、－４、－５、－６、－６ＭＤ）を、抗
ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１抗体のＩｇＶＨおよびＩｇＶＬ領域を用いて生成
した。Ｊ．ＲＴ３－Ｔ３．５およびＪｕｒｋａｔ細胞は、ａｂＴＣＲ－３（配列番号２３
および２４）、ａｂＴＣＲ－４（配列番号２５および２６）、ａｂＴＣＲ－５（配列番号
２９および３０）、ａｂＴＣＲ－６（配列番号３３および３４）またはａｂＴＣＲ－６Ｍ
Ｄ（配列番号３５および３６）構築物を用いて形質導入し、ａｂＴＣＲの個々のサブユニ
ットの発現を抗Ｆｌａｇまたは抗ＨＡ抗体を使用するウエスタンブロットにおいて検出し
た（図３）。各構築物について２つのサブユニットを２つの別々のレンチウイルスベクタ
ーにサブクローニングした。完全なａｂＴＣＲヘテロ二量体を発現するために、Ｔ細胞を
両方のベクターを用いて形質導入した。ＴＣＲβおよびＴＣＲδキメラをＨＡを用いてタ
グ付けした一方で、ＴＣＲαおよびＴＣＲγキメラはａｂＴＣＲサブユニットのＣ末端に
結合された３ｘＦｌａｇを用いてタグ付けした。ＨＡまたは３ｘＦｌａｇタグを有するＴ
ＣＲ鎖は、図３で各ａｂＴＣＲ設計についての表示の下に括弧で示されている。
【0474】
Ｊ．ＲＴ３－Ｔ３．５およびＪｕｒｋａｔの両方でのＨＡタグ付きキメラの内（図３、
抗ＨＡパネル）、ａｂＴＣＲ－３中のＩｇＶＬ－ＩｇＣＬ－ＴＣＲβサブユニットは、最
も高い発現を示し、ａｂＴＣＲ－６およびａｂＴＣＲ－６ＭＤ中のＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１
－ＴＣＲδサブユニット、ならびにａｂＴＣＲ－４中のＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１－ＴＣＲβ
サブユニットが続いた。３ｘＦｌａｇタグ付きキメラの内（図３、抗ｆｌａｇパネル）、
最も高い発現は、ａｂＴＣＲ－６およびａｂＴＣＲ－６ＭＤ中のＩｇＶＬ－ＩｇＣＬ－Ｔ
ＣＲγについて観察され、ａｂ－ＴＣＲ－４中のＩｇＶＬ－ＩｇＣＬ－ＴＣＲαが続いた
。ａｂＴＣＲ－５（ＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１－ＴＣＲγ／ＩｇＶＬ－ＩｇＣＬ－ＴＣＲδ）
について両鎖は、検査した５セットの構築物の内で最も低い発現量を示した。ａｂＴＣＲ
－６ＭＤについてのＴＣＲδ鎖は、ａｂＴＣＲ６と同様のレベルで発現された一方で、ａ
ｂＴＣＲ－６ＭＤについてのＴＣＲγ鎖はａｂＴＣＲ６について観察されたよりも低いレ
ベルで発現された。形質導入された細胞の百分率および形質導入細胞内の発現レベルの両
方がウエスタンブロットにおいて検出されるシグナルに寄与する。したがって次にフロー
サイトメトリーを細胞表面でのａｂＴＣＲ発現レベルを決定するために実施した。
抗ＨＡパネル）、ａｂＴＣＲ－３中のＩｇＶＬ－ＩｇＣＬ－ＴＣＲβサブユニットは、最
も高い発現を示し、ａｂＴＣＲ－６およびａｂＴＣＲ－６ＭＤ中のＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１
－ＴＣＲδサブユニット、ならびにａｂＴＣＲ－４中のＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１－ＴＣＲβ
サブユニットが続いた。３ｘＦｌａｇタグ付きキメラの内（図３、抗ｆｌａｇパネル）、
最も高い発現は、ａｂＴＣＲ－６およびａｂＴＣＲ－６ＭＤ中のＩｇＶＬ－ＩｇＣＬ－Ｔ
ＣＲγについて観察され、ａｂ－ＴＣＲ－４中のＩｇＶＬ－ＩｇＣＬ－ＴＣＲαが続いた
。ａｂＴＣＲ－５（ＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１－ＴＣＲγ／ＩｇＶＬ－ＩｇＣＬ－ＴＣＲδ）
について両鎖は、検査した５セットの構築物の内で最も低い発現量を示した。ａｂＴＣＲ
－６ＭＤについてのＴＣＲδ鎖は、ａｂＴＣＲ６と同様のレベルで発現された一方で、ａ
ｂＴＣＲ－６ＭＤについてのＴＣＲγ鎖はａｂＴＣＲ６について観察されたよりも低いレ
ベルで発現された。形質導入された細胞の百分率および形質導入細胞内の発現レベルの両
方がウエスタンブロットにおいて検出されるシグナルに寄与する。したがって次にフロー
サイトメトリーを細胞表面でのａｂＴＣＲ発現レベルを決定するために実施した。
【0475】
フローサイトメトリーによるａｂＴＣＲ細胞表面発現およびＴＣＲ－ＣＤ３複合体形成
の検出
上に記載の５対のキメラａｂＴＣＲ鎖（ａｂＴＣＲ－３、－４、－５、－６、－６ＭＤ
）をＪ．ＲＴ３－Ｔ３．５（図４Ａ～４Ｃ）およびＪｕｒｋａｔ（図５Ａ～５Ｃ）細胞に
個々に形質導入した。ａｂＴＣＲ構築物を用いて形質導入された細胞を、次の：（ｉ）Ｊ
．ＲＴ３－Ｔ３．５細胞でのＣＤ３ε発現のレスキューを評価するための抗ＣＤ３ε抗体
（図４Ａ）、（ｉｉ）Ｊｕｒｋａｔ細胞でのＴＣＲαβの内因性発現へのａｂＴＣＲ構築
物の影響を評価するための抗ＴＣＲαβ抗体（図５Ａ）、（ｉｉｉ）形質導入ａｂＴＣＲ
構築物による抗原結合を評価するためのＰＥ標識されたＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２
：０１四量体（図４Ｂおよび５Ｂ）、ならびに（ｉｖ）キメラ構築物の表面発現を評価す
るためにａｂＴＣＲキメラ（図４Ｃおよび５Ｃ）において使用された抗ＡＦＰ１５８／Ｈ
ＬＡ－Ａ＊０２：０１抗体に対する抗イディオタイプ抗体、によって評価した。
の検出
上に記載の５対のキメラａｂＴＣＲ鎖（ａｂＴＣＲ－３、－４、－５、－６、－６ＭＤ
）をＪ．ＲＴ３－Ｔ３．５（図４Ａ～４Ｃ）およびＪｕｒｋａｔ（図５Ａ～５Ｃ）細胞に
個々に形質導入した。ａｂＴＣＲ構築物を用いて形質導入された細胞を、次の：（ｉ）Ｊ
．ＲＴ３－Ｔ３．５細胞でのＣＤ３ε発現のレスキューを評価するための抗ＣＤ３ε抗体
（図４Ａ）、（ｉｉ）Ｊｕｒｋａｔ細胞でのＴＣＲαβの内因性発現へのａｂＴＣＲ構築
物の影響を評価するための抗ＴＣＲαβ抗体（図５Ａ）、（ｉｉｉ）形質導入ａｂＴＣＲ
構築物による抗原結合を評価するためのＰＥ標識されたＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２
：０１四量体（図４Ｂおよび５Ｂ）、ならびに（ｉｖ）キメラ構築物の表面発現を評価す
るためにａｂＴＣＲキメラ（図４Ｃおよび５Ｃ）において使用された抗ＡＦＰ１５８／Ｈ
ＬＡ－Ａ＊０２：０１抗体に対する抗イディオタイプ抗体、によって評価した。
【0476】
Ｊ．ＲＴ３－Ｔ３．５細胞について、偽形質導入はＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：
０１四量体および抗イディオタイプ抗体への結合を付与せず、細胞表面にＣＤ３ε発現を
生じなかった（図４Ａ～４Ｃ）。抗イディオタイプ抗体は、ａｂＴＣＲ－３およびａｂＴ
ＣＲ－４を用いて形質導入されたＪ．ＲＴ３－Ｔ３．５細胞においてａｂＴＣＲ陰性ピー
クから伸びる肩を検出した。対照的に、ａｂＴＣＲ－５、－６および－６ＭＤを用いて形
質導入された細胞は、抗イディオタイプ抗体を用いて染色した場合に高蛍光強度で別々の
ピークを示した（図４Ｃ）。ａｂＴＣＲ構築物は、標的抗原ＡＦＰ１５８四量体に結合し
得ることに機能性である（図４Ｂ）。ａｂＴＣＲ－６ＭＤにおける、より高いＡＦＰ１５
８四量体陽性ピークによって明らかであるとおり、ａｂＴＣＲ－６と比較してさらに多く
の細胞集団がａｂＴＣＲ－６ＭＤ構築物を発現した。しかしａｂＴＣＲ－６ＭＤ形質導入
細胞は、ＡＦＰ１５８四量体陽性ピークが類似する平均蛍光強度（ＭＦＩ）を有すること
から、細胞あたりのコピー数でａｂＴＣＲ－６形質導入細胞と類似する発現が見られる。
さらに、ａｂＴＣＲ構築物の発現は、Ｊ．ＲＴ３－Ｔ３．５細胞でのＣＤ３εの細胞表面
発現をレスキューした（図４Ａ）。これは、ＴＣＲの定常ドメインがＣＤ３鎖との相互作
用をもたらしたことから予測外である（KuhnsおよびDavis、TCR Signaling Emerges f
rom the Sum of Many Parts、Front Immunol. ２０１２年；３巻：１５９頁、Wan
gおよびReinherz、The structural basis of αβ T-lineage immune recognitio
n: TCR docking topologies, mechanotransduction, and co-receptor function
、Immunol Rev. ２０１２年、２５０巻：１０２頁によって概説されている）。キメラ
がＴＣＲ定常ドメインをＩｇＣを用いて置き換えていることから、本発明者らは、ＴＣＲ
定常ドメインがＴＣＲ複合体を含むＣＤ３アセンブリのために必要ないことを実証した。
ａｂＴＣＲ－６およびａｂＴＣＲ－６ＭＤ形質導入細胞を抗ＣＤ３εおよびＡＦＰ１５８
／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１四量体で共染色し、フローサイトメトリーによって分析した場
合に、本発明者らは、ＣＤ３ε＋Ｊ．ＲＴ３－Ｔ３．５細胞もまたＡＦＰ１５８四量体陽
性であることを確認した（図６）。これは、外因性ａｂＴＣＲキメラが、それらの同族抗
原に結合でき、Ｊ．ＲＴ３－Ｔ３．５細胞上のＣＤ３複合体の細胞表面発現をレスキュー
する機能的受容体を形成することを示している。
０１四量体および抗イディオタイプ抗体への結合を付与せず、細胞表面にＣＤ３ε発現を
生じなかった（図４Ａ～４Ｃ）。抗イディオタイプ抗体は、ａｂＴＣＲ－３およびａｂＴ
ＣＲ－４を用いて形質導入されたＪ．ＲＴ３－Ｔ３．５細胞においてａｂＴＣＲ陰性ピー
クから伸びる肩を検出した。対照的に、ａｂＴＣＲ－５、－６および－６ＭＤを用いて形
質導入された細胞は、抗イディオタイプ抗体を用いて染色した場合に高蛍光強度で別々の
ピークを示した（図４Ｃ）。ａｂＴＣＲ構築物は、標的抗原ＡＦＰ１５８四量体に結合し
得ることに機能性である（図４Ｂ）。ａｂＴＣＲ－６ＭＤにおける、より高いＡＦＰ１５
８四量体陽性ピークによって明らかであるとおり、ａｂＴＣＲ－６と比較してさらに多く
の細胞集団がａｂＴＣＲ－６ＭＤ構築物を発現した。しかしａｂＴＣＲ－６ＭＤ形質導入
細胞は、ＡＦＰ１５８四量体陽性ピークが類似する平均蛍光強度（ＭＦＩ）を有すること
から、細胞あたりのコピー数でａｂＴＣＲ－６形質導入細胞と類似する発現が見られる。
さらに、ａｂＴＣＲ構築物の発現は、Ｊ．ＲＴ３－Ｔ３．５細胞でのＣＤ３εの細胞表面
発現をレスキューした（図４Ａ）。これは、ＴＣＲの定常ドメインがＣＤ３鎖との相互作
用をもたらしたことから予測外である（KuhnsおよびDavis、TCR Signaling Emerges f
rom the Sum of Many Parts、Front Immunol. ２０１２年；３巻：１５９頁、Wan
gおよびReinherz、The structural basis of αβ T-lineage immune recognitio
n: TCR docking topologies, mechanotransduction, and co-receptor function
、Immunol Rev. ２０１２年、２５０巻：１０２頁によって概説されている）。キメラ
がＴＣＲ定常ドメインをＩｇＣを用いて置き換えていることから、本発明者らは、ＴＣＲ
定常ドメインがＴＣＲ複合体を含むＣＤ３アセンブリのために必要ないことを実証した。
ａｂＴＣＲ－６およびａｂＴＣＲ－６ＭＤ形質導入細胞を抗ＣＤ３εおよびＡＦＰ１５８
／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１四量体で共染色し、フローサイトメトリーによって分析した場
合に、本発明者らは、ＣＤ３ε＋Ｊ．ＲＴ３－Ｔ３．５細胞もまたＡＦＰ１５８四量体陽
性であることを確認した（図６）。これは、外因性ａｂＴＣＲキメラが、それらの同族抗
原に結合でき、Ｊ．ＲＴ３－Ｔ３．５細胞上のＣＤ３複合体の細胞表面発現をレスキュー
する機能的受容体を形成することを示している。
【0477】
同じセットの実験を、ａｂＴＣＲ－３、－４、－５、－６および－６ＭＤ構築物を抗Ａ
ＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１抗体と共に使用してＪｕｒｋａｔ細胞（αβＴＣＲ
陽性Ｔ細胞株）においてもまた行った（図５Ａ～５Ｃ）。結果は、ＡＦＰ１５８四量体染
色（図５Ｂ）および抗イディオタイプ抗体結合（図５Ｃ）に関してＪ．ＲＴ３－Ｔ３．５
細胞において観察されたものと一致している。形質転換細胞を、内因性ＴＣＲα／β鎖の
発現へのａｂＴＣＲ構築物の影響を決定するために抗ＴＣＲα／β抗体でもまた染色した
。偽形質導入Ｊｕｒｋａｔ細胞が高レベルのＴＣＲα／βを発現した一方で、ＴＣＲα／
β陰性集団がそれぞれのａｂＴＣＲ形質転換細胞においてＴＣＲα／βピークの左側の肩
として検出された（図５Ａ）。これらのデータは、ａｂＴＣＲキメラの発現がＣＤ３鎖に
ついて競合しており、内因性ＴＣＲα／βの表面発現の低減を生じていることを示唆して
いる。
ＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１抗体と共に使用してＪｕｒｋａｔ細胞（αβＴＣＲ
陽性Ｔ細胞株）においてもまた行った（図５Ａ～５Ｃ）。結果は、ＡＦＰ１５８四量体染
色（図５Ｂ）および抗イディオタイプ抗体結合（図５Ｃ）に関してＪ．ＲＴ３－Ｔ３．５
細胞において観察されたものと一致している。形質転換細胞を、内因性ＴＣＲα／β鎖の
発現へのａｂＴＣＲ構築物の影響を決定するために抗ＴＣＲα／β抗体でもまた染色した
。偽形質導入Ｊｕｒｋａｔ細胞が高レベルのＴＣＲα／βを発現した一方で、ＴＣＲα／
β陰性集団がそれぞれのａｂＴＣＲ形質転換細胞においてＴＣＲα／βピークの左側の肩
として検出された（図５Ａ）。これらのデータは、ａｂＴＣＲキメラの発現がＣＤ３鎖に
ついて競合しており、内因性ＴＣＲα／βの表面発現の低減を生じていることを示唆して
いる。
【0478】
ウエスタンブロットおよびフローサイトメトリー実験からの観察を合わせて、本発明者
らはａｂＴＣＲ－３および－４形質導入細胞において、一部の内因性ＴＣＲαサブユニッ
トがａｂＴＣＲキメラの外因性β鎖と対形成し、細胞表面に輸送され得るＴＣＲ－ＣＤ３
複合体を形成することを仮定する。あるいは、ａｂＴＣＲ－３および－４は、抗イディオ
タイプ抗体へのエピトープの曝露を限定する異なるコンホメーションを有する可能性があ
る。ａｂＴＣＲ－３－形質導入Ｊ．ＲＴ３－Ｔ３．５およびＪｕｒｋａｔ細胞では、Ｉｇ
ＶＬ－ＩｇＣＬ－ＴＣＲβ鎖の高レベル発現（ウエスタンブロットあたり、図３）は、細
胞表面にＣＤ３εを発現するＪ．ＲＴ３－Ｔ３．５細胞の高い百分率（図４Ａ）および、
ａｂＴＣＲ－３を用いて形質導入されたＪｕｒｋａｔ細胞のサブセットでの内因性ＴＣＲ
α／β発現の低減を生じた。ａｂＴＣＲ－４形質導入細胞では、ＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１－
ＴＣＲβ鎖もまた、Ｊ．ＲＴ３－Ｔ３．５細胞でのＣＤ３ε発現およびＪｕｒｋａｔ細胞
での内因性ＴＣＲα／β発現の低減を生じたが、キメラａｂＴＣＲβ鎖発現がａｂＴＣＲ
－３と比較してａｂＴＣＲ－４では低いことから程度は低かった（ウエスタンブロットあ
たり、図３）。
らはａｂＴＣＲ－３および－４形質導入細胞において、一部の内因性ＴＣＲαサブユニッ
トがａｂＴＣＲキメラの外因性β鎖と対形成し、細胞表面に輸送され得るＴＣＲ－ＣＤ３
複合体を形成することを仮定する。あるいは、ａｂＴＣＲ－３および－４は、抗イディオ
タイプ抗体へのエピトープの曝露を限定する異なるコンホメーションを有する可能性があ
る。ａｂＴＣＲ－３－形質導入Ｊ．ＲＴ３－Ｔ３．５およびＪｕｒｋａｔ細胞では、Ｉｇ
ＶＬ－ＩｇＣＬ－ＴＣＲβ鎖の高レベル発現（ウエスタンブロットあたり、図３）は、細
胞表面にＣＤ３εを発現するＪ．ＲＴ３－Ｔ３．５細胞の高い百分率（図４Ａ）および、
ａｂＴＣＲ－３を用いて形質導入されたＪｕｒｋａｔ細胞のサブセットでの内因性ＴＣＲ
α／β発現の低減を生じた。ａｂＴＣＲ－４形質導入細胞では、ＩｇＶＨ－ＩｇＣＨ１－
ＴＣＲβ鎖もまた、Ｊ．ＲＴ３－Ｔ３．５細胞でのＣＤ３ε発現およびＪｕｒｋａｔ細胞
での内因性ＴＣＲα／β発現の低減を生じたが、キメラａｂＴＣＲβ鎖発現がａｂＴＣＲ
－３と比較してａｂＴＣＲ－４では低いことから程度は低かった（ウエスタンブロットあ
たり、図３）。
【0479】
ａｂＴＣＲ－３および－４形質導入細胞について、ＴＣＲαβ＋Ｔ細胞での外因性ＴＣ
Ｒβキメラの内因性ＴＣＲα鎖との対形成は、外因性ＴＣＲαキメラ鎖との正しい対形成
のために利用可能なＴＣＲβキメラ鎖のプールを低減すると予測される。キメラがＴＣＲ
δおよびＴＣＲγ鎖を用いて生成されるａｂＴＣＲ－５、－６または－６ＭＤ構築物を発
現する場合にＴＣＲαβ＋Ｔ細胞においてこれは問題でない。ａｂＴＣＲ陽性ピークでの
高ＭＦＩは、ａｂＴＣＲ－５、－６または－６ＭＤ構築物を発現するＪ．ＲＴ３－Ｔ３．
５およびＪｕｒｋａｔ細胞の両方での正しく対形成したキメラの数の多さと一致する。反
対に、キメラがＴＣＲαおよびＴＣＲβ鎖を用いて生成されるＴＣＲδγ＋Ｔ細胞での発
現のためのａｂＴＣＲ－３および－４構築物の使用は、外因性キメラ鎖と内因性ＴＣＲδ
およびＴＣＲγ鎖との対形成を回避するために好ましい。
Ｒβキメラの内因性ＴＣＲα鎖との対形成は、外因性ＴＣＲαキメラ鎖との正しい対形成
のために利用可能なＴＣＲβキメラ鎖のプールを低減すると予測される。キメラがＴＣＲ
δおよびＴＣＲγ鎖を用いて生成されるａｂＴＣＲ－５、－６または－６ＭＤ構築物を発
現する場合にＴＣＲαβ＋Ｔ細胞においてこれは問題でない。ａｂＴＣＲ陽性ピークでの
高ＭＦＩは、ａｂＴＣＲ－５、－６または－６ＭＤ構築物を発現するＪ．ＲＴ３－Ｔ３．
５およびＪｕｒｋａｔ細胞の両方での正しく対形成したキメラの数の多さと一致する。反
対に、キメラがＴＣＲαおよびＴＣＲβ鎖を用いて生成されるＴＣＲδγ＋Ｔ細胞での発
現のためのａｂＴＣＲ－３および－４構築物の使用は、外因性キメラ鎖と内因性ＴＣＲδ
およびＴＣＲγ鎖との対形成を回避するために好ましい。
【0480】
（実施例３）
初代Ｔ細胞でのａｂＴＣＲの発現
ａｂＴＣＲ構築物をＴ細胞株に良好に形質導入でき、ＣＤ３複合体と共に機能性抗原結
合受容体として細胞表面に発現できたことを実証し、次いで本発明者らは初代Ｔ細胞での
ａｂＴＣＲの発現を検査した。
初代Ｔ細胞でのａｂＴＣＲの発現
ａｂＴＣＲ構築物をＴ細胞株に良好に形質導入でき、ＣＤ３複合体と共に機能性抗原結
合受容体として細胞表面に発現できたことを実証し、次いで本発明者らは初代Ｔ細胞での
ａｂＴＣＲの発現を検査した。
【0481】
ＣＤ４＋およびＣＤ８＋初代Ｔ細胞において発現されたａｂＴＣＲ
末梢血リンパ球を健常ドナーから単離し、抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１結
合部分（配列番号３５および３６）をコードするａｂＴＣＲ－６ＭＤ構築物を用いて形質
導入した。ａｂＴＣＲγおよびδサブユニットを初代ヒトＴ細胞を形質導入するために同
じレンチウイルスベクターにサブクローニングした。形質導入の５日後、ａｂＴＣＲ－Ｔ
細胞および偽形質導入細胞をＡＦＰ１５８四量体ならびにＣＤ４およびＣＤ８抗体を用い
て共染色し、フローサイトメトリーによって分析した。図７Ａは、ＣＤ８対抗原（ＡＦＰ
１５８四量体）の結合の散布図を示しており、一方図７Ｂは、ＣＤ８対ＣＤ４の散布図を
示している。偽形質導入Ｔ細胞ではＣＤ４：ＣＤ８の比は、約２：１である（図７Ｂ上パ
ネル）。同じＣＤ４：ＣＤ８の比がａｂＴＣＲ－６ＭＤ構築物を用いて形質導入された細
胞において観察された（図７Ｂ中央パネル）。本発明者らは、ＣＤ４：ＣＤ８の比がａｂ
ＴＣＲ－６ＭＤ形質導入細胞中のＡＦＰ１５８四量体＋集団においてもまた約２：１であ
ることを見出した（図７Ｂ下パネルおよび図７Ａでのゲーティングを参照のこと）。これ
は、ａｂＴＣＲキメラがＣＤ４＋およびＣＤ８＋初代Ｔ細胞の両方で発現され得ることを
示している。
末梢血リンパ球を健常ドナーから単離し、抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１結
合部分（配列番号３５および３６）をコードするａｂＴＣＲ－６ＭＤ構築物を用いて形質
導入した。ａｂＴＣＲγおよびδサブユニットを初代ヒトＴ細胞を形質導入するために同
じレンチウイルスベクターにサブクローニングした。形質導入の５日後、ａｂＴＣＲ－Ｔ
細胞および偽形質導入細胞をＡＦＰ１５８四量体ならびにＣＤ４およびＣＤ８抗体を用い
て共染色し、フローサイトメトリーによって分析した。図７Ａは、ＣＤ８対抗原（ＡＦＰ
１５８四量体）の結合の散布図を示しており、一方図７Ｂは、ＣＤ８対ＣＤ４の散布図を
示している。偽形質導入Ｔ細胞ではＣＤ４：ＣＤ８の比は、約２：１である（図７Ｂ上パ
ネル）。同じＣＤ４：ＣＤ８の比がａｂＴＣＲ－６ＭＤ構築物を用いて形質導入された細
胞において観察された（図７Ｂ中央パネル）。本発明者らは、ＣＤ４：ＣＤ８の比がａｂ
ＴＣＲ－６ＭＤ形質導入細胞中のＡＦＰ１５８四量体＋集団においてもまた約２：１であ
ることを見出した（図７Ｂ下パネルおよび図７Ａでのゲーティングを参照のこと）。これ
は、ａｂＴＣＲキメラがＣＤ４＋およびＣＤ８＋初代Ｔ細胞の両方で発現され得ることを
示している。
【0482】
外因性ａｂＴＣＲ鎖はＣＤ３複合体と物理的に会合する
Ｔ細胞株におけるａｂＴＣＲ発現がＪ．ＲＴ３－Ｔ３．５細胞でのＣＤ３εの表面発現
をレスキューできたと仮定して、本発明者らは初代Ｔ細胞において発現されたａｂＴＣＲ
構築物がＣＤ３複合体中の個々の鎖と物理的に会合するかどうかを共免疫沈降（ｃｏ－ｉ
ｐ）によって検査した。初代Ｔ細胞を抗ＣＤ３および抗ＣＤ２８を使用して刺激し、次い
で偽形質導入または、抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１結合部分（配列番号３５
および３６）をコードするａｂＴＣＲ－６ＭＤ構築物を用いて形質導入した。形質導入の
１２日後、ａｂＴＣＲ－Ｔ細胞をＡＦＰ１５８四量体＋細胞を富化させるためにＳＫ－Ｈ
ＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧとさらに１２日間共培養した。次いで細胞をジギトニン（０．１
％）溶解緩衝液を用いて溶解し、抗Ｆｌａｇ抗体を３ｘＦｌａｇタグを介してＴＣＲγ鎖
をｉ．ｐ．するために使用した。図８に示すとおりＣＤ３δ、ＣＤ３ε、ＣＤ３γおよび
ＣＤ３ζ鎖をａｂＴＣＲγキメラを用いて同時免疫沈降し、形質導入ａｂＴＣＲキメラが
内因性ＣＤ３複合体と物理的に会合したことを実証した。抗Ｆｌａｇ免疫沈降で偽形質導
入試料において観察されたＣＤ３εより大きなＭＷを有するバンドは、非特異的バンドで
ある。
Ｔ細胞株におけるａｂＴＣＲ発現がＪ．ＲＴ３－Ｔ３．５細胞でのＣＤ３εの表面発現
をレスキューできたと仮定して、本発明者らは初代Ｔ細胞において発現されたａｂＴＣＲ
構築物がＣＤ３複合体中の個々の鎖と物理的に会合するかどうかを共免疫沈降（ｃｏ－ｉ
ｐ）によって検査した。初代Ｔ細胞を抗ＣＤ３および抗ＣＤ２８を使用して刺激し、次い
で偽形質導入または、抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１結合部分（配列番号３５
および３６）をコードするａｂＴＣＲ－６ＭＤ構築物を用いて形質導入した。形質導入の
１２日後、ａｂＴＣＲ－Ｔ細胞をＡＦＰ１５８四量体＋細胞を富化させるためにＳＫ－Ｈ
ＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧとさらに１２日間共培養した。次いで細胞をジギトニン（０．１
％）溶解緩衝液を用いて溶解し、抗Ｆｌａｇ抗体を３ｘＦｌａｇタグを介してＴＣＲγ鎖
をｉ．ｐ．するために使用した。図８に示すとおりＣＤ３δ、ＣＤ３ε、ＣＤ３γおよび
ＣＤ３ζ鎖をａｂＴＣＲγキメラを用いて同時免疫沈降し、形質導入ａｂＴＣＲキメラが
内因性ＣＤ３複合体と物理的に会合したことを実証した。抗Ｆｌａｇ免疫沈降で偽形質導
入試料において観察されたＣＤ３εより大きなＭＷを有するバンドは、非特異的バンドで
ある。
【0483】
同様の共免疫沈降実験をＪＲＴ３－Ｔ３．５およびＪｕｒｋａｔ細胞株において行う。
ＪＲＴ３－Ｔ３．５およびＪｕｒｋａｔ細胞株を抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０
１結合部分（配列番号３５および３６）をコードするａｂＴＣＲ－６ＭＤ構築物を用いて
形質導入する。形質導入５日後、ＣＥＬＬｅｃｔｉｏｎ ｂｉｏｔｉｎ ｂｉｎｄｅｒ
ｋｉｔをＪＲＴ３－Ｔ３．５およびＪｕｒｋａｔ細胞株からＡＦＰ１５８四量体＋集団を
精製するために使用する。ａｂＴＣＲ－６ＭＤを用いて形質導入され、ＡＦＰ１５８四量
体を用いて精製されたＪｕｒｋａｔおよびＪＲＴ３－Ｔ３．５細胞をそれぞれＪｕｒｋａ
ｔ－ａｂＴＣＲ－ｐｕｒｅおよびＪＲＴ３－Ｔ３．５－ａｂＴＣＲ－ｐｕｒｅと命名する
。ＪＲＴ３－Ｔ３．５、ＪＲＴ３－Ｔ３．５－ａｂＴＣＲ－ｐｕｒｅ、Ｊｕｒｋａｔおよ
びＪｕｒｋａｔ－ａｂＴＣＲ－ｐｕｒｅ細胞を拡大増殖させ、０．１％ジギトニン溶解緩
衝液中で溶解する。共免疫沈降を抗Ｆｌａｇ抗体（Ｓｉｇｍａ）およびＤｙｎａｂｅａｄ
ｓ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｇ ｆｏｒ ｉｍｍｕｎｏｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎ（Ｌｉｆｅ
Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用して標準的プロトコールに従って実施する。
ＪＲＴ３－Ｔ３．５およびＪｕｒｋａｔ細胞株を抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０
１結合部分（配列番号３５および３６）をコードするａｂＴＣＲ－６ＭＤ構築物を用いて
形質導入する。形質導入５日後、ＣＥＬＬｅｃｔｉｏｎ ｂｉｏｔｉｎ ｂｉｎｄｅｒ
ｋｉｔをＪＲＴ３－Ｔ３．５およびＪｕｒｋａｔ細胞株からＡＦＰ１５８四量体＋集団を
精製するために使用する。ａｂＴＣＲ－６ＭＤを用いて形質導入され、ＡＦＰ１５８四量
体を用いて精製されたＪｕｒｋａｔおよびＪＲＴ３－Ｔ３．５細胞をそれぞれＪｕｒｋａ
ｔ－ａｂＴＣＲ－ｐｕｒｅおよびＪＲＴ３－Ｔ３．５－ａｂＴＣＲ－ｐｕｒｅと命名する
。ＪＲＴ３－Ｔ３．５、ＪＲＴ３－Ｔ３．５－ａｂＴＣＲ－ｐｕｒｅ、Ｊｕｒｋａｔおよ
びＪｕｒｋａｔ－ａｂＴＣＲ－ｐｕｒｅ細胞を拡大増殖させ、０．１％ジギトニン溶解緩
衝液中で溶解する。共免疫沈降を抗Ｆｌａｇ抗体（Ｓｉｇｍａ）およびＤｙｎａｂｅａｄ
ｓ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｇ ｆｏｒ ｉｍｍｕｎｏｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｏｎ（Ｌｉｆｅ
Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用して標準的プロトコールに従って実施する。
【0484】
（実施例４）
同じ抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１可変ドメインを含有するａｂＴＣＲ－６
ＭＤおよびＣＡＲ構築物を用いて形質導入されたＴ細胞の生物学的活性の特徴付け
ａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞は抗原陽性がん細胞を特異的に殺滅し得る
初代Ｔ細胞を偽形質導入または、抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１ ｓｃＦｖ
（配列番号３７）を含有するＣＡＲもしくは同じ抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０
１可変ドメイン（配列番号３５および３６）を含有するａｂＴＣＲ－６ＭＤをコードする
レンチウイルスベクターを用いて形質導入した。形質導入効率をＰＥ標識されたＡＦＰ１
５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１四量体を用いる染色によって決定した（図９Ａ）。同様の
形質導入率（ＣＡＲＴについて３２％およびａｂＴＣＲについて３４％）を有するＴ細胞
集団をがん細胞株を殺滅するそれらの能力を検査するために使用した。２．５：１のエフ
ェクターおよび標的の比で３つの細胞株を使用した：ＨｅｐＧ２（ＡＦＰ＋／ＨＬＡ－Ａ
２＋）、ＳＫ－ＨＥＰ－１（ＡＦＰ－／ＨＬＡ－Ａ２＋）およびＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦ
Ｐ－ＭＧ（ＡＦＰミニ遺伝子を用いて形質導入されたＳＫ－ＨＥＰ－１）。特異的溶解を
１６時間インキュベーション後に、Ｃｙｔｏｘ ９６ Ｎｏｎ－ｒａｄｉｏａｃｔｉｖｅ
Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ Ａｓｓａｙ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を使用して測定した。図９
Ｂに示すとおり、ＣＡＲおよび、抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１結合部分を有
するａｂＴＣＲ－６ＭＤの両方を用いて形質導入されたＴ細胞は、抗原陽性細胞株Ｈｅｐ
Ｇ２およびＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧの殺滅を方向付けたが、抗原陰性細胞株ＳＫ
－ＨＥＰ－１の殺滅はもたらさなかった。ａｂＴＣＲ形質導入細胞において観察された特
異的溶解のレベルは、ＣＡＲ－Ｔ細胞についてのもとの同等である。
同じ抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１可変ドメインを含有するａｂＴＣＲ－６
ＭＤおよびＣＡＲ構築物を用いて形質導入されたＴ細胞の生物学的活性の特徴付け
ａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞は抗原陽性がん細胞を特異的に殺滅し得る
初代Ｔ細胞を偽形質導入または、抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１ ｓｃＦｖ
（配列番号３７）を含有するＣＡＲもしくは同じ抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０
１可変ドメイン（配列番号３５および３６）を含有するａｂＴＣＲ－６ＭＤをコードする
レンチウイルスベクターを用いて形質導入した。形質導入効率をＰＥ標識されたＡＦＰ１
５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１四量体を用いる染色によって決定した（図９Ａ）。同様の
形質導入率（ＣＡＲＴについて３２％およびａｂＴＣＲについて３４％）を有するＴ細胞
集団をがん細胞株を殺滅するそれらの能力を検査するために使用した。２．５：１のエフ
ェクターおよび標的の比で３つの細胞株を使用した：ＨｅｐＧ２（ＡＦＰ＋／ＨＬＡ－Ａ
２＋）、ＳＫ－ＨＥＰ－１（ＡＦＰ－／ＨＬＡ－Ａ２＋）およびＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦ
Ｐ－ＭＧ（ＡＦＰミニ遺伝子を用いて形質導入されたＳＫ－ＨＥＰ－１）。特異的溶解を
１６時間インキュベーション後に、Ｃｙｔｏｘ ９６ Ｎｏｎ－ｒａｄｉｏａｃｔｉｖｅ
Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ Ａｓｓａｙ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を使用して測定した。図９
Ｂに示すとおり、ＣＡＲおよび、抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１結合部分を有
するａｂＴＣＲ－６ＭＤの両方を用いて形質導入されたＴ細胞は、抗原陽性細胞株Ｈｅｐ
Ｇ２およびＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧの殺滅を方向付けたが、抗原陰性細胞株ＳＫ
－ＨＥＰ－１の殺滅はもたらさなかった。ａｂＴＣＲ形質導入細胞において観察された特
異的溶解のレベルは、ＣＡＲ－Ｔ細胞についてのもとの同等である。
【0485】
ａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞は抗原刺激で脱顆粒する
ａｂＴＣＲ対ＣＡＲ形質導入Ｔ細胞での生物学的活性をさらに特徴付けるために、本発
明者らは、脱顆粒活性の測定としてＣＤ１０７ａ表面発現を検出するためのフローサイト
メトリーアッセイを使用した。抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ＊０２：０１結合部分を有するａ
ｂＴＣＲおよびＣＡＲ形質導入Ｔ細胞は、上のとおり生成され、ＨｅｐＧ２、ＳＫ－ＨＥ
Ｐ－１およびＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧ細胞と４時間、抗ＣＤ１０７ａ抗体とｐｒ
ｏｔｅｉｎ ｔｒａｎｓｐｏｒｔ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｃｏｃｋｔａｉｌ（ｅＢｉｏｓ
ｃｉｅｎｃｅ）の１：２００希釈物の存在下で同時インキュベートした。標的細胞との同
時インキュベーション後、形質導入Ｔ細胞をＡＦＰ１５８／ＨＬＡ四量体および抗ＣＤ８
を用いて染色した。四量体陽性、ＣＤ８陽性Ｔ細胞での脱顆粒を図１０右パネルに示す。
ＣＤ１０７ａ発現によって測定された最も高いレベルの脱顆粒は、ＳＫ－ＨＥＰ－１－Ａ
ＦＰ－ＭＧ（実線、灰色）に続くＨｅｐＧ２（点線、灰色）との同時インキュベーション
で観察された一方で、脱顆粒はａｂＴＣＲおよびＣＡＲの両方の形質導入Ｔ細胞を用いた
親抗原陰性ＳＫ－ＨＥＰ－１（実線、白色）では観察されなかった。同じ標的細胞が使用
される場合に脱顆粒のレベルは、ａｂＴＣＲおよびＣＡＲ形質導入細胞の間で同様であっ
た。これは、上記のＴ細胞媒介細胞溶解データと一致する。合わせて考えて本発明者らは
、ａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞が脱顆粒において抗原陽性がん細胞に対してＣＡＲ形質導入
細胞と同等に応答性であり（図１０）、細胞殺滅を媒介する（図９）ことを実証した。
ａｂＴＣＲ対ＣＡＲ形質導入Ｔ細胞での生物学的活性をさらに特徴付けるために、本発
明者らは、脱顆粒活性の測定としてＣＤ１０７ａ表面発現を検出するためのフローサイト
メトリーアッセイを使用した。抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ＊０２：０１結合部分を有するａ
ｂＴＣＲおよびＣＡＲ形質導入Ｔ細胞は、上のとおり生成され、ＨｅｐＧ２、ＳＫ－ＨＥ
Ｐ－１およびＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧ細胞と４時間、抗ＣＤ１０７ａ抗体とｐｒ
ｏｔｅｉｎ ｔｒａｎｓｐｏｒｔ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｃｏｃｋｔａｉｌ（ｅＢｉｏｓ
ｃｉｅｎｃｅ）の１：２００希釈物の存在下で同時インキュベートした。標的細胞との同
時インキュベーション後、形質導入Ｔ細胞をＡＦＰ１５８／ＨＬＡ四量体および抗ＣＤ８
を用いて染色した。四量体陽性、ＣＤ８陽性Ｔ細胞での脱顆粒を図１０右パネルに示す。
ＣＤ１０７ａ発現によって測定された最も高いレベルの脱顆粒は、ＳＫ－ＨＥＰ－１－Ａ
ＦＰ－ＭＧ（実線、灰色）に続くＨｅｐＧ２（点線、灰色）との同時インキュベーション
で観察された一方で、脱顆粒はａｂＴＣＲおよびＣＡＲの両方の形質導入Ｔ細胞を用いた
親抗原陰性ＳＫ－ＨＥＰ－１（実線、白色）では観察されなかった。同じ標的細胞が使用
される場合に脱顆粒のレベルは、ａｂＴＣＲおよびＣＡＲ形質導入細胞の間で同様であっ
た。これは、上記のＴ細胞媒介細胞溶解データと一致する。合わせて考えて本発明者らは
、ａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞が脱顆粒において抗原陽性がん細胞に対してＣＡＲ形質導入
細胞と同等に応答性であり（図１０）、細胞殺滅を媒介する（図９）ことを実証した。
【0486】
腫瘍細胞殺滅におけるａｂＴＣＲおよびＣＡＲ Ｔ細胞よるサイトカイン産生および分
泌
ａｂＴＣＲまたはＣＡＲのいずれかを用いて形質導入され、同様の形質導入率を有する
Ｔ細胞を生成し、上記のとおり標的細胞と同時インキュベートした。図９Ｂに示すｉｎ
ｖｉｔｒｏ殺滅アッセイ後のＩＬ－２、ＩＬ－４、ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＩＬ－１０、Ｇ
Ｍ－ＣＳＦ、ＩＦＮ－γおよびＴＮＦ－αの培地への放出をＭａｇｐｉｘ ｍｕｌｔｉｐ
ｌｅｘ ｓｙｓｔｅｍ（Ｌｕｍｉｎｅｘ）をＢｉｏ－ｐｌｅｘ Ｐｒｏ Ｈｕｍａｎ Ｃ
ｙｔｏｋｉｎｅ ８－ｐｌｅｘ Ａｓｓａｙ（ＢｉｏＲａｄ）と共に使用して測定した。
アッセイの検出限界に達するようにＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧ標的反応由来の上清
は２５倍希釈したが、他のすべての試料は希釈しなかった。サイトカイン濃度を、培地、
標的単独およびエフェクター単独由来のサイトカイン放出を減算した後に公知の標準曲線
を用いて決定した。
泌
ａｂＴＣＲまたはＣＡＲのいずれかを用いて形質導入され、同様の形質導入率を有する
Ｔ細胞を生成し、上記のとおり標的細胞と同時インキュベートした。図９Ｂに示すｉｎ
ｖｉｔｒｏ殺滅アッセイ後のＩＬ－２、ＩＬ－４、ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＩＬ－１０、Ｇ
Ｍ－ＣＳＦ、ＩＦＮ－γおよびＴＮＦ－αの培地への放出をＭａｇｐｉｘ ｍｕｌｔｉｐ
ｌｅｘ ｓｙｓｔｅｍ（Ｌｕｍｉｎｅｘ）をＢｉｏ－ｐｌｅｘ Ｐｒｏ Ｈｕｍａｎ Ｃ
ｙｔｏｋｉｎｅ ８－ｐｌｅｘ Ａｓｓａｙ（ＢｉｏＲａｄ）と共に使用して測定した。
アッセイの検出限界に達するようにＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧ標的反応由来の上清
は２５倍希釈したが、他のすべての試料は希釈しなかった。サイトカイン濃度を、培地、
標的単独およびエフェクター単独由来のサイトカイン放出を減算した後に公知の標準曲線
を用いて決定した。
【0487】
本発明者らは、ＨｅｐＧ２の表面上のＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１複合体の
数を高分解能顕微鏡を使用して細胞あたり約１００であると推定した（データ示さず）。
かかる低コピー数のペプチド／ＨＬＡ複合体では、抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：
０１抗体を使用するフローサイトメトリーは顕著なＭＦＩシフトを検出し得なかった。対
照的に、ＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧ細胞でのＡＦＰミニ遺伝子の発現はフローサイ
トメトリーによるＭＦＩでの１ログシフトを生じ、ＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧ細胞
上でのＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１複合体のレベルがＨｅｐＧ２におけるもの
よりも顕著に高かったことを示している。ＨｅｐＧ２を標的細胞として使用する場合、８
つのヒトサイトカイン（ＩＬ－２、ＩＬ－４、ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＩＬ－１０、ＧＭ－
ＣＳＦ、ＩＦＮ－γ、ＴＮＦ－α）のパネルをａｂＴＣＲまたはＣＡＲ形質導入Ｔ細胞を
用いた１６時間の同時インキュベーション後に測定し、ＩＬ－８、ＩＬ－１０、ＧＭ－Ｃ
ＳＦ、ＩＦＮ－γ、ＴＮＦ－αが培地において検出可能であった（図１１Ａ）。サイトカ
イン放出は、ＣＡＲ形質導入試料と比較した場合にａｂＴＣＲを形質導入試料において一
貫して低かった。同じアッセイをＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧを用いて行った場合、
本発明者らが検査した８つのサイトカインの内７つの分泌は、ａｂＴＣＲ－またはＣＡＲ
形質導入初代Ｔ細胞との同時インキュベーションで検出された（図１１Ｂ）。検査した各
サイトカインにおいて、培地中で検出されたサイトカインのレベルは、ＣＡＲ－Ｔ試料と
比較してａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞を含有する試料において同様または低く、一部は２分
の１未満であった（例えば、ＩＬ－２、ＩＦＮ－γ、ＴＮＦ－α）。ＳＫ－ＨＥＰ－１細
胞のみもまた、Ｔ細胞の非存在下で検出可能なレベル（バックグラウンドを約３０００ｐ
ｇ／ｍｌ超える）のＩＬ－６およびＩＬ－８を示した。
数を高分解能顕微鏡を使用して細胞あたり約１００であると推定した（データ示さず）。
かかる低コピー数のペプチド／ＨＬＡ複合体では、抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：
０１抗体を使用するフローサイトメトリーは顕著なＭＦＩシフトを検出し得なかった。対
照的に、ＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧ細胞でのＡＦＰミニ遺伝子の発現はフローサイ
トメトリーによるＭＦＩでの１ログシフトを生じ、ＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧ細胞
上でのＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１複合体のレベルがＨｅｐＧ２におけるもの
よりも顕著に高かったことを示している。ＨｅｐＧ２を標的細胞として使用する場合、８
つのヒトサイトカイン（ＩＬ－２、ＩＬ－４、ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＩＬ－１０、ＧＭ－
ＣＳＦ、ＩＦＮ－γ、ＴＮＦ－α）のパネルをａｂＴＣＲまたはＣＡＲ形質導入Ｔ細胞を
用いた１６時間の同時インキュベーション後に測定し、ＩＬ－８、ＩＬ－１０、ＧＭ－Ｃ
ＳＦ、ＩＦＮ－γ、ＴＮＦ－αが培地において検出可能であった（図１１Ａ）。サイトカ
イン放出は、ＣＡＲ形質導入試料と比較した場合にａｂＴＣＲを形質導入試料において一
貫して低かった。同じアッセイをＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧを用いて行った場合、
本発明者らが検査した８つのサイトカインの内７つの分泌は、ａｂＴＣＲ－またはＣＡＲ
形質導入初代Ｔ細胞との同時インキュベーションで検出された（図１１Ｂ）。検査した各
サイトカインにおいて、培地中で検出されたサイトカインのレベルは、ＣＡＲ－Ｔ試料と
比較してａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞を含有する試料において同様または低く、一部は２分
の１未満であった（例えば、ＩＬ－２、ＩＦＮ－γ、ＴＮＦ－α）。ＳＫ－ＨＥＰ－１細
胞のみもまた、Ｔ細胞の非存在下で検出可能なレベル（バックグラウンドを約３０００ｐ
ｇ／ｍｌ超える）のＩＬ－６およびＩＬ－８を示した。
【0488】
培地中に検出されるサイトカインの供給源としての形質導入Ｔ細胞の寄与を決定するた
めに、同様の形質導入効率（３４％）を有するａｂＴＣＲおよびＣＡＲ形質導入Ｔ細胞を
２．５：１の比で標的細胞と、サイトカイン分泌を妨げるためのｐｒｏｔｅｉｎ ｔｒａ
ｎｓｐｏｒｔ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｃｏｃｋｔａｉｌ（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ Ｃａ
ｔ＃００４９８００３）を用いて共培養した。処置４時間後、Ｔ細胞をＡＦＰ１５８／Ｈ
ＬＡ－Ａ＊０２：０１四量体および抗ＣＤ４抗体を抗ＴＮＦ－α、抗ＩＦＮ－γ、抗ＩＬ
－２または抗ＩＬ－６抗体と共に用いて染色した。フローサイトメトリーを使用し、ＡＦ
Ｐ１５８四量体＋細胞（図１２Ａ～１２Ｈ）でゲーティングして、本発明者らは、抗原陽
性標的細胞と共培養された場合に、ａｂＴＣＲおよびＣＡＲ形質導入Ｔ細胞の両方におい
て細胞内ＴＮＦ－α、ＩＦＮ－γおよびＩＬ－２は発現されたが、ＩＬ－６はされなかっ
たことを実証した。検討した各サイトカインについて、細胞内サイトカインのレベルは、
標的細胞上での抗原発現のレベルに相関してＨｅｐＧ２よりもＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ
－ＭＧにおいて一貫して高かった。各標的細胞集団に関して検査した各サイトカインにつ
いてａｂＴＣＲに対するＣＡＲ形質導入細胞の間で細胞内サイトカインに顕著な差異はな
かった。これは、サイトカイン放出アッセイにおいて見られた差異がサイトカインフィー
ドバックによるものである可能性があることを示唆している。形質導入Ｔ細胞での細胞内
ＩＬ－６の非存在は、図１１Ｂで培地中に検出されたＩＬ－６の供給源がＳＫ－ＨＥＰ－
１細胞由来であり、Ｔ細胞ではないことを示唆している。
めに、同様の形質導入効率（３４％）を有するａｂＴＣＲおよびＣＡＲ形質導入Ｔ細胞を
２．５：１の比で標的細胞と、サイトカイン分泌を妨げるためのｐｒｏｔｅｉｎ ｔｒａ
ｎｓｐｏｒｔ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｃｏｃｋｔａｉｌ（ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ Ｃａ
ｔ＃００４９８００３）を用いて共培養した。処置４時間後、Ｔ細胞をＡＦＰ１５８／Ｈ
ＬＡ－Ａ＊０２：０１四量体および抗ＣＤ４抗体を抗ＴＮＦ－α、抗ＩＦＮ－γ、抗ＩＬ
－２または抗ＩＬ－６抗体と共に用いて染色した。フローサイトメトリーを使用し、ＡＦ
Ｐ１５８四量体＋細胞（図１２Ａ～１２Ｈ）でゲーティングして、本発明者らは、抗原陽
性標的細胞と共培養された場合に、ａｂＴＣＲおよびＣＡＲ形質導入Ｔ細胞の両方におい
て細胞内ＴＮＦ－α、ＩＦＮ－γおよびＩＬ－２は発現されたが、ＩＬ－６はされなかっ
たことを実証した。検討した各サイトカインについて、細胞内サイトカインのレベルは、
標的細胞上での抗原発現のレベルに相関してＨｅｐＧ２よりもＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ
－ＭＧにおいて一貫して高かった。各標的細胞集団に関して検査した各サイトカインにつ
いてａｂＴＣＲに対するＣＡＲ形質導入細胞の間で細胞内サイトカインに顕著な差異はな
かった。これは、サイトカイン放出アッセイにおいて見られた差異がサイトカインフィー
ドバックによるものである可能性があることを示唆している。形質導入Ｔ細胞での細胞内
ＩＬ－６の非存在は、図１１Ｂで培地中に検出されたＩＬ－６の供給源がＳＫ－ＨＥＰ－
１細胞由来であり、Ｔ細胞ではないことを示唆している。
【0489】
ＣＤ４＋Ｔ細胞でのａｂＴＣＲの活性化が特異的生物学的応答をもたらし得るかどうか
を決定するために、本発明者らはＡＦＰを発現しているがん細胞株を用いた刺激後のＣＤ
４＋、抗ＡＦＰ１５８ ａｂＴＣＲ発現Ｔ細胞での細胞内サイトカイン発現を調査した。
上に記載のとおりＣＤ３＋Ｔ細胞を抗ＡＦＰ１５８ ａｂＴＣＲを用いて形質導入し、が
ん細胞株ＳＫ－ＨＥＰ１－ＭＧ（ＡＦＰ＋）、ＳＫ－ＨＥＰ１（ＡＦＰ－）またはＨＥＰ
Ｇ２（ＡＦＰ＋）と共にタンパク質輸送阻害剤の存在下で４時間、インキュベートした。
陰性対照として、ａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞をいずれのがん細胞株も非存在でインキュベ
ートした。インキュベーション後、Ｔ細胞を抗ＩＦＮγ、抗ＩＬ２または抗ＴＮＦα抗体
を用いて染色し、ＡＦＰ－四量体－ＰＥおよび抗ＣＤ４を用いて共染色した。ａｂＴＣＲ
発現についてゲーティングした細胞をフローサイトメトリーによって粒度およびサイトカ
イン発現について分析した（図１３、Ｙ軸は側方散乱、Ｘ軸はサイトカイン染色）。ＩＦ
Ｎγ、ＩＬ２およびＴＮＦαの発現は、ＡＦＰ＋がん細胞株ＳＫ－ＨＥＰ１－ＭＧおよび
ＨＥＰＧ２を用いた抗ＡＦＰ１５８ ａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞のインキュベーション後
に誘導されたが、ＡＦＰ－細胞株ＳＫ－ＨＥＰ１を用いて、またはいずれのがん細胞株も
非存在でインキュベートした場合はされず、ＣＤ４＋Ｔ細胞でのａｂＴＣＲの抗原特異的
活性化を示している。
を決定するために、本発明者らはＡＦＰを発現しているがん細胞株を用いた刺激後のＣＤ
４＋、抗ＡＦＰ１５８ ａｂＴＣＲ発現Ｔ細胞での細胞内サイトカイン発現を調査した。
上に記載のとおりＣＤ３＋Ｔ細胞を抗ＡＦＰ１５８ ａｂＴＣＲを用いて形質導入し、が
ん細胞株ＳＫ－ＨＥＰ１－ＭＧ（ＡＦＰ＋）、ＳＫ－ＨＥＰ１（ＡＦＰ－）またはＨＥＰ
Ｇ２（ＡＦＰ＋）と共にタンパク質輸送阻害剤の存在下で４時間、インキュベートした。
陰性対照として、ａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞をいずれのがん細胞株も非存在でインキュベ
ートした。インキュベーション後、Ｔ細胞を抗ＩＦＮγ、抗ＩＬ２または抗ＴＮＦα抗体
を用いて染色し、ＡＦＰ－四量体－ＰＥおよび抗ＣＤ４を用いて共染色した。ａｂＴＣＲ
発現についてゲーティングした細胞をフローサイトメトリーによって粒度およびサイトカ
イン発現について分析した（図１３、Ｙ軸は側方散乱、Ｘ軸はサイトカイン染色）。ＩＦ
Ｎγ、ＩＬ２およびＴＮＦαの発現は、ＡＦＰ＋がん細胞株ＳＫ－ＨＥＰ１－ＭＧおよび
ＨＥＰＧ２を用いた抗ＡＦＰ１５８ ａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞のインキュベーション後
に誘導されたが、ＡＦＰ－細胞株ＳＫ－ＨＥＰ１を用いて、またはいずれのがん細胞株も
非存在でインキュベートした場合はされず、ＣＤ４＋Ｔ細胞でのａｂＴＣＲの抗原特異的
活性化を示している。
【0490】
標的細胞との共培養後のａｂＴＣＲおよびＣＡＲ Ｔ細胞におけるＴ細胞消耗マーカー
の発現
抗原刺激の際にａｂＴＣＲおよびＣＡＲ形質導入細胞上に発現される消耗マーカーのレ
ベルを検討するために、ＣＤ３＋Ｔ細胞をＥａｓｙＳｅｐ Ｈｕｍａｎ Ｔ Ｃｅｌｌ
Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ Ｋｉｔ（ＳｔｅｍＣｅｌｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用し
てＰＢＭＣ富化全血から調製し、上記のとおりＣＤ３／ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓを
用いて活性化させた。活性化および拡大増殖させた細胞集団は、フローサイトメトリーに
よって＞９９％ＣＤ３＋であった。次いでこれらの細胞を抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊
０２：０１ ｓｃＦｖ（配列番号３７）を含有するＣＡＲまたは同じ抗ＡＦＰ１５８／Ｈ
ＬＡ－Ａ＊０２：０１可変ドメイン（配列番号３５および３６）を含有するａｂＴＣＲ－
６ＭＤをコードするレンチウイルスベクターを用いて７～９日間形質導入した。形質導入
細胞をエフェクターおよび標的の比２．５：１で標的細胞と１６時間共培養し、ＡＦＰ１
５８四量体および抗ＣＤ８抗体を消耗マーカーＰＤ－１、ＴＩＭ－３またはＬＡＧ－３に
対する抗体と共に用いて共染色した。形質導入Ｔ細胞上の消耗マーカーのレベルを四量体
＋（即ち、形質導入された）Ｔ細胞でのゲーティングによってフローサイトメトリーによ
って分析した。独立したフローサイトメトリー実験では、本発明者らはＣＤ８－であった
四量体＋Ｔ細胞がＣＤ４＋であった（データ示さず）ことを決定した。
の発現
抗原刺激の際にａｂＴＣＲおよびＣＡＲ形質導入細胞上に発現される消耗マーカーのレ
ベルを検討するために、ＣＤ３＋Ｔ細胞をＥａｓｙＳｅｐ Ｈｕｍａｎ Ｔ Ｃｅｌｌ
Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ Ｋｉｔ（ＳｔｅｍＣｅｌｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用し
てＰＢＭＣ富化全血から調製し、上記のとおりＣＤ３／ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓを
用いて活性化させた。活性化および拡大増殖させた細胞集団は、フローサイトメトリーに
よって＞９９％ＣＤ３＋であった。次いでこれらの細胞を抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊
０２：０１ ｓｃＦｖ（配列番号３７）を含有するＣＡＲまたは同じ抗ＡＦＰ１５８／Ｈ
ＬＡ－Ａ＊０２：０１可変ドメイン（配列番号３５および３６）を含有するａｂＴＣＲ－
６ＭＤをコードするレンチウイルスベクターを用いて７～９日間形質導入した。形質導入
細胞をエフェクターおよび標的の比２．５：１で標的細胞と１６時間共培養し、ＡＦＰ１
５８四量体および抗ＣＤ８抗体を消耗マーカーＰＤ－１、ＴＩＭ－３またはＬＡＧ－３に
対する抗体と共に用いて共染色した。形質導入Ｔ細胞上の消耗マーカーのレベルを四量体
＋（即ち、形質導入された）Ｔ細胞でのゲーティングによってフローサイトメトリーによ
って分析した。独立したフローサイトメトリー実験では、本発明者らはＣＤ８－であった
四量体＋Ｔ細胞がＣＤ４＋であった（データ示さず）ことを決定した。
【0491】
ＰＤ－１の上方制御がＣＤ８－四量体＋Ｔ細胞において観察された一方でＬＡＧ－１お
よびＴＩＭ－３の上方制御が、ＡＦＰ（ＨｅｐＧ２およびＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－Ｍ
Ｇ）を発現する標的細胞への曝露後にＣＤ８＋四量体＋Ｔ細胞において観察された（図１
４）。すべての場合において、ＣＡＲ形質導入Ｔ細胞において観察された消耗マーカーレ
ベルの上方制御は、ａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞において観察されたものと同等またはより
高かった。これは、ａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞が低レベルのＴ細胞消耗を生じる場合があ
り、ｉｎ ｖｉｖｏでのより長いＴ細胞持続性をもたらしていることを示唆している。検
査条件下で各消耗マーカーについて陽性の細胞のパーセントを決定し、表２に示す。
よびＴＩＭ－３の上方制御が、ＡＦＰ（ＨｅｐＧ２およびＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－Ｍ
Ｇ）を発現する標的細胞への曝露後にＣＤ８＋四量体＋Ｔ細胞において観察された（図１
４）。すべての場合において、ＣＡＲ形質導入Ｔ細胞において観察された消耗マーカーレ
ベルの上方制御は、ａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞において観察されたものと同等またはより
高かった。これは、ａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞が低レベルのＴ細胞消耗を生じる場合があ
り、ｉｎ ｖｉｖｏでのより長いＴ細胞持続性をもたらしていることを示唆している。検
査条件下で各消耗マーカーについて陽性の細胞のパーセントを決定し、表２に示す。
【表2】
【0492】
ａｂＴＣＲおよびＣＡＲ Ｔ細胞でのＴ細胞分化マーカーの発現
抗ＡＦＰ１５８ ａｂＴＣＲがｉｎ ｖｉｔｒｏ拡大増殖の際にＴ細胞の分化を遅延さ
せ得るかどうかを決定するために、本発明者らは、３つのＴ細胞分化マーカー、メモリー
Ｔ細胞マーカーＣＣＲ７およびＣＤ２８、ならびに最終分化マーカー、グランザイムＢの
細胞表面発現を測定した。抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１ ｓｃＦｖ（配列番
号３７）を含有するＣＡＲまたは同じ抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１可変ドメ
イン（配列番号３５および３６）を含有するａｂＴＣＲ－６ＭＤをコードするレンチウイ
ルスベクターを用いてＴ細胞を形質導入し、これらのマーカーに対する抗体を用いて染色
し、フローサイトメトリーによってウイルス形質導入後１０～１２日目に分析した（図１
５）。結果は、ＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞の両方についてａｂＴＣＲ Ｔ細胞がＣＡ
Ｒ Ｔ細胞よりも多くのＣＣＲ７およびＣＤ２８を発現したが、グランザイムＢは少なか
ったことを示し、抗ＡＦＰ１５８ ａｂＴＣＲ Ｔ細胞がｉｎ ｖｉｔｒｏでのＴ細胞拡
大増殖後に抗ＡＦＰ１５８ ＣＡＲ Ｔ細胞よりも分化していないことを示唆している。
抗ＡＦＰ１５８ ａｂＴＣＲがｉｎ ｖｉｔｒｏ拡大増殖の際にＴ細胞の分化を遅延さ
せ得るかどうかを決定するために、本発明者らは、３つのＴ細胞分化マーカー、メモリー
Ｔ細胞マーカーＣＣＲ７およびＣＤ２８、ならびに最終分化マーカー、グランザイムＢの
細胞表面発現を測定した。抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１ ｓｃＦｖ（配列番
号３７）を含有するＣＡＲまたは同じ抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１可変ドメ
イン（配列番号３５および３６）を含有するａｂＴＣＲ－６ＭＤをコードするレンチウイ
ルスベクターを用いてＴ細胞を形質導入し、これらのマーカーに対する抗体を用いて染色
し、フローサイトメトリーによってウイルス形質導入後１０～１２日目に分析した（図１
５）。結果は、ＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞の両方についてａｂＴＣＲ Ｔ細胞がＣＡ
Ｒ Ｔ細胞よりも多くのＣＣＲ７およびＣＤ２８を発現したが、グランザイムＢは少なか
ったことを示し、抗ＡＦＰ１５８ ａｂＴＣＲ Ｔ細胞がｉｎ ｖｉｔｒｏでのＴ細胞拡
大増殖後に抗ＡＦＰ１５８ ＣＡＲ Ｔ細胞よりも分化していないことを示唆している。
【0493】
抗ＡＦＰ ａｂＴＣＲ－６ＭＤとａｂＴＣＲ－７構築物との比較
抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１ ａｂＴＣＲ－６ＭＤを発現するように形質
導入された初代Ｔ細胞の細胞増殖を同じ抗体可変ドメインを有する抗ＡＦＰ１５８／ＨＬ
Ａ－Ａ＊０２：０１ ａｂＴＣＲ－７を用いて形質導入されたＴ細胞のものと比較した。
６．７×１０５Ｔ細胞を０日目に１００Ｕ／ｍｌ ＩＬ－２の存在下でαＣＤ３／αＣＤ
２８ビーズ（１：１の割合）によって活性化させた。活性化Ｔ細胞を抗ＡＦＰ１５８／Ｈ
ＬＡ－Ａ＊０２：０１ ａｂＴＣＲ－６ＭＤ（配列番号３５のアミノ酸配列を有するＴＣ
Ｒδキメラサブユニットおよび配列番号３６のアミノ酸配列を有するＴＣＲγキメラサブ
ユニット）をコードするレンチウイルスベクターまたは、抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊
０２：０１ ａｂＴＣＲ－７（配列番号８１のアミノ酸配列を有するＴＣＲδキメラサブ
ユニットおよび配列番号８２のアミノ酸配列を有するＴＣＲγキメラサブユニット）をコ
ードするレンチウイルスベクターのいずれかでＭＯＩ４で１日目に形質導入した。次いで
形質導入Ｔ細胞を培養し、ＩＬ－２の存在下で９～１０日間拡大増殖させた。細胞数を１
日目、５日目、７日目および９日目に計数した。図１６Ａに示すとおりａｂＴＣＲ－６－
ＭＤ形質導入Ｔ細胞は、９日目までにおよそ２倍の生細胞を有して、ａｂＴＣＲ－７形質
導入Ｔ細胞よりも早く増殖した。形質導入Ｔ細胞でのａｂＴＣＲ－６ＭＤおよびａｂＴＣ
Ｒ－７構築物の発現を９日目にＦＬＡＧタグ付き構築物についてのウエスタンブロット分
析によって評価した。簡潔に述べると、５００万形質導入Ｔ細胞を１００μｌ溶解緩衝液
に溶解し、可溶化物１３μｌをＮｕＰａｇｅ ｓｙｓｔｅｍを使用して４～１２％ポリア
クリルアミドゲル上で分離した。マウス抗ＦＬＡＧ抗体（１μｇ／ｍｌ）をａｂＴＣＲガ
ンマ鎖を検出するために使用し、マウス抗ＣＤ３ゼータ（１μｇ／ｍｌ）を内因性ＣＤ３
を検出するために使用した。図１６Ｂに示すとおりａｂＴＣＲ－７構築物は、ａｂＴＣＲ
－６ＭＤ構築物よりも高いレベルで発現された。対応する抗ＣＤ３ζバンドで標準化した
可溶化物についての抗ＦＬＡＧバンドの強度をＩｍａｇｅＪソフトウェアを使用して定量
し、ａｂＴＣＲ－６ＭＤと比較したａｂＴＣＲ－７の発現の２０％の相対的増加を示した
。
抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１ ａｂＴＣＲ－６ＭＤを発現するように形質
導入された初代Ｔ細胞の細胞増殖を同じ抗体可変ドメインを有する抗ＡＦＰ１５８／ＨＬ
Ａ－Ａ＊０２：０１ ａｂＴＣＲ－７を用いて形質導入されたＴ細胞のものと比較した。
６．７×１０５Ｔ細胞を０日目に１００Ｕ／ｍｌ ＩＬ－２の存在下でαＣＤ３／αＣＤ
２８ビーズ（１：１の割合）によって活性化させた。活性化Ｔ細胞を抗ＡＦＰ１５８／Ｈ
ＬＡ－Ａ＊０２：０１ ａｂＴＣＲ－６ＭＤ（配列番号３５のアミノ酸配列を有するＴＣ
Ｒδキメラサブユニットおよび配列番号３６のアミノ酸配列を有するＴＣＲγキメラサブ
ユニット）をコードするレンチウイルスベクターまたは、抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊
０２：０１ ａｂＴＣＲ－７（配列番号８１のアミノ酸配列を有するＴＣＲδキメラサブ
ユニットおよび配列番号８２のアミノ酸配列を有するＴＣＲγキメラサブユニット）をコ
ードするレンチウイルスベクターのいずれかでＭＯＩ４で１日目に形質導入した。次いで
形質導入Ｔ細胞を培養し、ＩＬ－２の存在下で９～１０日間拡大増殖させた。細胞数を１
日目、５日目、７日目および９日目に計数した。図１６Ａに示すとおりａｂＴＣＲ－６－
ＭＤ形質導入Ｔ細胞は、９日目までにおよそ２倍の生細胞を有して、ａｂＴＣＲ－７形質
導入Ｔ細胞よりも早く増殖した。形質導入Ｔ細胞でのａｂＴＣＲ－６ＭＤおよびａｂＴＣ
Ｒ－７構築物の発現を９日目にＦＬＡＧタグ付き構築物についてのウエスタンブロット分
析によって評価した。簡潔に述べると、５００万形質導入Ｔ細胞を１００μｌ溶解緩衝液
に溶解し、可溶化物１３μｌをＮｕＰａｇｅ ｓｙｓｔｅｍを使用して４～１２％ポリア
クリルアミドゲル上で分離した。マウス抗ＦＬＡＧ抗体（１μｇ／ｍｌ）をａｂＴＣＲガ
ンマ鎖を検出するために使用し、マウス抗ＣＤ３ゼータ（１μｇ／ｍｌ）を内因性ＣＤ３
を検出するために使用した。図１６Ｂに示すとおりａｂＴＣＲ－７構築物は、ａｂＴＣＲ
－６ＭＤ構築物よりも高いレベルで発現された。対応する抗ＣＤ３ζバンドで標準化した
可溶化物についての抗ＦＬＡＧバンドの強度をＩｍａｇｅＪソフトウェアを使用して定量
し、ａｂＴＣＲ－６ＭＤと比較したａｂＴＣＲ－７の発現の２０％の相対的増加を示した
。
【0494】
抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１ ａｂＴＣＲ－６ＭＤ Ｔ細胞の標的細胞殺
滅活性を抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１ ａｂＴＣＲ－７ Ｔ細胞のものと比
較した。初代Ｔ細胞を偽形質導入または、上に記載のとおり抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ
＊０２：０１ ａｂＴＣＲ－６ＭＤもしくは抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１
ａｂＴＣＲ－７構築物のいずれかをコードするレンチウイルスベクターを用いて形質導入
した。ａｂＴＣＲ－６ＭＤまたはａｂＴＣＲ－７を用いて形質導入されたＴ細胞をＳＫ－
ＨＥＰ－１（ＡＦＰ－／ＨＬＡ－Ａ２＋）およびＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧ（ＡＦ
Ｐミニ遺伝子を用いて形質導入されたＳＫ－ＨＥＰ－１）細胞を殺滅するそれらの能力に
ついてエフェクターおよび標的の比５：１で検査した。特異的殺滅のレベルを１６時間で
上に記載のとおり測定した。図１６Ｃに示すとおり、抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２
：０１結合部分を有するａｂＴＣＲ－６ＭＤ構築物は、同じ抗体可変ドメインを有するａ
ｂＴＣＲ－７と比較して、ＡＦＰ陽性ＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧ細胞と同様の特異
的溶解を方向付けた。
滅活性を抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１ ａｂＴＣＲ－７ Ｔ細胞のものと比
較した。初代Ｔ細胞を偽形質導入または、上に記載のとおり抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ
＊０２：０１ ａｂＴＣＲ－６ＭＤもしくは抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１
ａｂＴＣＲ－７構築物のいずれかをコードするレンチウイルスベクターを用いて形質導入
した。ａｂＴＣＲ－６ＭＤまたはａｂＴＣＲ－７を用いて形質導入されたＴ細胞をＳＫ－
ＨＥＰ－１（ＡＦＰ－／ＨＬＡ－Ａ２＋）およびＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧ（ＡＦ
Ｐミニ遺伝子を用いて形質導入されたＳＫ－ＨＥＰ－１）細胞を殺滅するそれらの能力に
ついてエフェクターおよび標的の比５：１で検査した。特異的殺滅のレベルを１６時間で
上に記載のとおり測定した。図１６Ｃに示すとおり、抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２
：０１結合部分を有するａｂＴＣＲ－６ＭＤ構築物は、同じ抗体可変ドメインを有するａ
ｂＴＣＲ－７と比較して、ＡＦＰ陽性ＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧ細胞と同様の特異
的溶解を方向付けた。
【0495】
（実施例５）
ａｂＴＣＲ－６ＭＤおよび、同じ抗ヒトＣＤ１９可変ドメインを有するＣＡＲ構築物を
用いて形質導入されたＴ細胞の生物学的活性の特徴付け
実施例４では、使用された抗体部分は抗原としてペプチド／ＭＨＣ複合体に結合するＴ
ＣＲ模倣物であった。ａｂＴＣＲ設計が伝統的抗体標的（細胞表面抗原）とも作用するこ
とを実証するために、同様の実験設定をヒトＣＤ１９に対する抗体に基づいた構築物を使
用して実行した。
ａｂＴＣＲ－６ＭＤおよび、同じ抗ヒトＣＤ１９可変ドメインを有するＣＡＲ構築物を
用いて形質導入されたＴ細胞の生物学的活性の特徴付け
実施例４では、使用された抗体部分は抗原としてペプチド／ＭＨＣ複合体に結合するＴ
ＣＲ模倣物であった。ａｂＴＣＲ設計が伝統的抗体標的（細胞表面抗原）とも作用するこ
とを実証するために、同様の実験設定をヒトＣＤ１９に対する抗体に基づいた構築物を使
用して実行した。
【0496】
ＣＤ１９ ａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞はＣＤ１９陽性がん細胞を殺滅し得る
初代Ｔ細胞を偽形質導入または、抗ＣＤ１９結合ドメインを含有するＣＡＲ（配列番号
４４、ＩｇＶＨドメインを有するｓｃＦｖ、配列番号４５、およびＩｇＶＬドメイン、配
列番号４６を含む、例示的抗ＣＤ１９抗体由来）または同じ抗ＣＤ１９可変ドメインを含
有するａｂＴＣＲ－６ＭＤ（配列番号４２および４３）をコードするレンチウイルスベク
ターを用いて形質導入した。ＣＡＲまたはａｂＴＣＲ（両方とも形質導入率２５％）を用
いて形質導入されたＴ細胞をＢ細胞株ＪｅＫｏ－１（ＣＤ１９＋）、ＩＭ９（ＣＤ１９＋
）、Ｊｕｒｋａｔ（ＣＤ１９－）およびＴＨＰ－１（ＣＤ１９－）を、エフェクターおよ
び標的の比５：１で殺滅するそれらの能力を検査するために使用した。特異的殺滅のレベ
ルを図９Ｂについての記載と同じ方法を使用して１６時間で測定した。図１７に示すとお
り、抗ＣＤ１９結合部分を有するＣＡＲおよびａｂＴＣＲ－６ＭＤの両方はＣＤ１９陽性
ＪｅＫｏ－１およびＩＭ９細胞の殺滅を同様のレベルで方向付けたが、ＣＤ１９陰性であ
るＪｕｒｋａｔおよびＴＨＰ－１は殺滅しなかった。
初代Ｔ細胞を偽形質導入または、抗ＣＤ１９結合ドメインを含有するＣＡＲ（配列番号
４４、ＩｇＶＨドメインを有するｓｃＦｖ、配列番号４５、およびＩｇＶＬドメイン、配
列番号４６を含む、例示的抗ＣＤ１９抗体由来）または同じ抗ＣＤ１９可変ドメインを含
有するａｂＴＣＲ－６ＭＤ（配列番号４２および４３）をコードするレンチウイルスベク
ターを用いて形質導入した。ＣＡＲまたはａｂＴＣＲ（両方とも形質導入率２５％）を用
いて形質導入されたＴ細胞をＢ細胞株ＪｅＫｏ－１（ＣＤ１９＋）、ＩＭ９（ＣＤ１９＋
）、Ｊｕｒｋａｔ（ＣＤ１９－）およびＴＨＰ－１（ＣＤ１９－）を、エフェクターおよ
び標的の比５：１で殺滅するそれらの能力を検査するために使用した。特異的殺滅のレベ
ルを図９Ｂについての記載と同じ方法を使用して１６時間で測定した。図１７に示すとお
り、抗ＣＤ１９結合部分を有するＣＡＲおよびａｂＴＣＲ－６ＭＤの両方はＣＤ１９陽性
ＪｅＫｏ－１およびＩＭ９細胞の殺滅を同様のレベルで方向付けたが、ＣＤ１９陰性であ
るＪｕｒｋａｔおよびＴＨＰ－１は殺滅しなかった。
【0497】
腫瘍細胞殺滅でのａｂＴＣＲおよびＣＡＲ Ｔ細胞によるサイトカイン分泌
上記がん殺滅実験において使用されたものと同じ形質導入されたＴ細胞集団を標的細胞
としてのＪｅＫｏ－１、ＩＭ９、ＴＨＰ－１およびＪｕｒｋａｔとそれらとを共インキュ
ベートすることによるサイトカイン放出アッセイにおいて使用した。８つのヒトサイトカ
インのパネル（ＩＬ－２、ＩＬ－４、ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＩＬ－１０、ＧＭ－ＣＳＦ、
ＩＦＮ－γ、ＴＮＦ－α）を１６時間後に測定した。検査したすべてのサイトカインは、
ＣＤ１９＋標的細胞との共インキュベーションの際にＣＡＲ形質導入Ｔ細胞の培地中で検
出されたが、ＣＤ１９－細胞ではされなかった（図１８Ａおよび１８Ｂ）。ａｂＴＣＲ形
質導入Ｔ細胞を用いた共インキュベーション試料では、ＩＬ－１０を除く検査したすべて
のサイトカインの放出は、ＣＤ１９＋細胞を含むａｂＴＣＲ試料において低かった。抗Ｃ
Ｄ１９抗体構築物でのこれらの発見は、抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１抗体構
築物のものと同様であり：同様のがん細胞殺滅がＣＡＲ－ＴおよびａｂＴＣＲ形質導入細
胞において観察された一方で、サイトカイン放出のレベルはａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞が
使用された場合に低かった。これは、高レベルのサイトカイン放出が望ましくない生理学
的作用を生じる設定においてａｂＴＣＲを使用することに有利である可能性がある。
上記がん殺滅実験において使用されたものと同じ形質導入されたＴ細胞集団を標的細胞
としてのＪｅＫｏ－１、ＩＭ９、ＴＨＰ－１およびＪｕｒｋａｔとそれらとを共インキュ
ベートすることによるサイトカイン放出アッセイにおいて使用した。８つのヒトサイトカ
インのパネル（ＩＬ－２、ＩＬ－４、ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＩＬ－１０、ＧＭ－ＣＳＦ、
ＩＦＮ－γ、ＴＮＦ－α）を１６時間後に測定した。検査したすべてのサイトカインは、
ＣＤ１９＋標的細胞との共インキュベーションの際にＣＡＲ形質導入Ｔ細胞の培地中で検
出されたが、ＣＤ１９－細胞ではされなかった（図１８Ａおよび１８Ｂ）。ａｂＴＣＲ形
質導入Ｔ細胞を用いた共インキュベーション試料では、ＩＬ－１０を除く検査したすべて
のサイトカインの放出は、ＣＤ１９＋細胞を含むａｂＴＣＲ試料において低かった。抗Ｃ
Ｄ１９抗体構築物でのこれらの発見は、抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１抗体構
築物のものと同様であり：同様のがん細胞殺滅がＣＡＲ－ＴおよびａｂＴＣＲ形質導入細
胞において観察された一方で、サイトカイン放出のレベルはａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞が
使用された場合に低かった。これは、高レベルのサイトカイン放出が望ましくない生理学
的作用を生じる設定においてａｂＴＣＲを使用することに有利である可能性がある。
【0498】
ＣＤ４＋Ｔ細胞でのａｂＴＣＲの活性化が特異的生物学的応答をもたらし得るかどうか
を決定するために、本発明者らはＣＤ１９を発現しているがん細胞株を用いた刺激後のＣ
Ｄ４＋、抗ＣＤ１９ ａｂＴＣＲ発現Ｔ細胞での細胞内サイトカイン発現を調査した。Ｃ
Ｄ３＋Ｔ細胞をクローン５－１３ ａｂＴＣＲ－６ＭＤ（配列番号５６および５４のアミ
ノ酸配列を含む抗ＣＤ１９クローン５－１３結合部分を有するａｂＴＣＲ－６ＭＤ）を用
いて形質導入し、がん細胞株Ｒａｊｉ（ＣＤ１９＋）、Ｒａｊｉ－ＣＤ１９ＫＯ（ＣＤ１
９－）またはＪｅｋｏ－１（ＣＤ１９＋）と共にタンパク質輸送阻害剤の存在下で４時間
、インキュベートした。陰性対照として、ａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞をいずれのがん細胞
株も非存在でインキュベートした。インキュベーション後、Ｔ細胞を抗ＩＦＮγ、抗ＩＬ
２または抗ＴＮＦα抗体を用いて染色し、抗ヒトＦａｂ（ＣＤ１９）および抗ＣＤ４を用
いて共染色した。ａｂＴＣＲ発現についてゲーティングした細胞をフローサイトメトリー
によって粒度およびサイトカイン発現について分析した（図１９、Ｙ軸は側方散乱、Ｘ軸
はサイトカイン染色）。ＩＦＮγ、ＩＬ２およびＴＮＦαの発現は、ＣＤ１９＋がん細胞
株ＲａｊｉおよびＪｅｋｏ－１を用いた抗ＣＤ１９ ａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞のインキ
ュベーション後では誘導されたが、ＣＤ１９－細胞株Ｒａｊｉ－ＣＤ１９ＫＯを用いて、
またはいずれのがん細胞株も非存在でインキュベートした場合はされず、ＣＤ４＋Ｔ細胞
でのａｂＴＣＲの抗原特異的活性化を示している。
を決定するために、本発明者らはＣＤ１９を発現しているがん細胞株を用いた刺激後のＣ
Ｄ４＋、抗ＣＤ１９ ａｂＴＣＲ発現Ｔ細胞での細胞内サイトカイン発現を調査した。Ｃ
Ｄ３＋Ｔ細胞をクローン５－１３ ａｂＴＣＲ－６ＭＤ（配列番号５６および５４のアミ
ノ酸配列を含む抗ＣＤ１９クローン５－１３結合部分を有するａｂＴＣＲ－６ＭＤ）を用
いて形質導入し、がん細胞株Ｒａｊｉ（ＣＤ１９＋）、Ｒａｊｉ－ＣＤ１９ＫＯ（ＣＤ１
９－）またはＪｅｋｏ－１（ＣＤ１９＋）と共にタンパク質輸送阻害剤の存在下で４時間
、インキュベートした。陰性対照として、ａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞をいずれのがん細胞
株も非存在でインキュベートした。インキュベーション後、Ｔ細胞を抗ＩＦＮγ、抗ＩＬ
２または抗ＴＮＦα抗体を用いて染色し、抗ヒトＦａｂ（ＣＤ１９）および抗ＣＤ４を用
いて共染色した。ａｂＴＣＲ発現についてゲーティングした細胞をフローサイトメトリー
によって粒度およびサイトカイン発現について分析した（図１９、Ｙ軸は側方散乱、Ｘ軸
はサイトカイン染色）。ＩＦＮγ、ＩＬ２およびＴＮＦαの発現は、ＣＤ１９＋がん細胞
株ＲａｊｉおよびＪｅｋｏ－１を用いた抗ＣＤ１９ ａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞のインキ
ュベーション後では誘導されたが、ＣＤ１９－細胞株Ｒａｊｉ－ＣＤ１９ＫＯを用いて、
またはいずれのがん細胞株も非存在でインキュベートした場合はされず、ＣＤ４＋Ｔ細胞
でのａｂＴＣＲの抗原特異的活性化を示している。
【0499】
標的細胞との共培養後のａｂＴＣＲおよびＣＡＲ Ｔ細胞でのＴ細胞消耗マーカーの発
現
抗原刺激の際に抗ＣＤ１９ ａｂＴＣＲおよびＣＡＲ形質導入細胞で発現される消耗マ
ーカーのレベルを抗ＡＦＰ１５８キメラ受容体について上に記載のとおり決定した。細胞
をクローン５－１３ ａｂＴＣＲ－６ＭＤまたは同じ抗ＣＤ１９可変ドメインを含有する
ＣＡＲを用いて形質導入した。標的細胞株は、Ｒａｊｉ（ＣＤ１９＋）、Ｒａｊｉ－ＣＤ
１９ＫＯ（ＣＤ１９－）およびＪｅｋｏ－１（ＣＤ１９＋）を含んだ。検査条件下で各消
耗マーカーについて陽性の細胞のパーセントを決定し、表３に示す。
現
抗原刺激の際に抗ＣＤ１９ ａｂＴＣＲおよびＣＡＲ形質導入細胞で発現される消耗マ
ーカーのレベルを抗ＡＦＰ１５８キメラ受容体について上に記載のとおり決定した。細胞
をクローン５－１３ ａｂＴＣＲ－６ＭＤまたは同じ抗ＣＤ１９可変ドメインを含有する
ＣＡＲを用いて形質導入した。標的細胞株は、Ｒａｊｉ（ＣＤ１９＋）、Ｒａｊｉ－ＣＤ
１９ＫＯ（ＣＤ１９－）およびＪｅｋｏ－１（ＣＤ１９＋）を含んだ。検査条件下で各消
耗マーカーについて陽性の細胞のパーセントを決定し、表３に示す。
【表3】
【0500】
ａｂＴＣＲおよびＣＡＲ Ｔ細胞でのＴ細胞分化マーカーの発現
抗ＣＤ１９ ａｂＴＣＲがｉｎ ｖｉｔｒｏ拡大増殖の際にＴ細胞の分化を遅延させ得
るかどうかを決定するために、本発明者らは、３つのＴ細胞分化マーカー、メモリーＴ細
胞マーカーＣＣＲ７およびＣＤ２８、ならびに最終分化マーカー、グランザイムＢの細胞
表面発現を測定した。Ｔ細胞をクローン ５－１３ａｂＴＣＲ－６ＭＤまたは同じ抗ＣＤ
１９可変ドメインを有するＣＡＲを用いて形質導入し、これらのマーカーに対する抗体を
用いて染色し、フローサイトメトリーによってウイルス形質導入後１０～１２日目に分析
した（図２０）。結果は、ＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞の両方についてａｂＴＣＲ Ｔ
細胞がＣＡＲ Ｔ細胞よりも多くのＣＣＲ７およびＣＤ２８を発現したが、グランザイム
Ｂは少なかったことを示し、クローン５－１３ ａｂＴＣＲ Ｔ細胞がｉｎ ｖｉｔｒｏ
でのＴ細胞拡大増殖後に対応する ＣＡＲ Ｔ細胞よりも分化していないことを示唆して
おり、抗ＡＦＰ１５８キメラ受容体について観察されたものと一致していた。
抗ＣＤ１９ ａｂＴＣＲがｉｎ ｖｉｔｒｏ拡大増殖の際にＴ細胞の分化を遅延させ得
るかどうかを決定するために、本発明者らは、３つのＴ細胞分化マーカー、メモリーＴ細
胞マーカーＣＣＲ７およびＣＤ２８、ならびに最終分化マーカー、グランザイムＢの細胞
表面発現を測定した。Ｔ細胞をクローン ５－１３ａｂＴＣＲ－６ＭＤまたは同じ抗ＣＤ
１９可変ドメインを有するＣＡＲを用いて形質導入し、これらのマーカーに対する抗体を
用いて染色し、フローサイトメトリーによってウイルス形質導入後１０～１２日目に分析
した（図２０）。結果は、ＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞の両方についてａｂＴＣＲ Ｔ
細胞がＣＡＲ Ｔ細胞よりも多くのＣＣＲ７およびＣＤ２８を発現したが、グランザイム
Ｂは少なかったことを示し、クローン５－１３ ａｂＴＣＲ Ｔ細胞がｉｎ ｖｉｔｒｏ
でのＴ細胞拡大増殖後に対応する ＣＡＲ Ｔ細胞よりも分化していないことを示唆して
おり、抗ＡＦＰ１５８キメラ受容体について観察されたものと一致していた。
【0501】
ａｂＴＣＲおよびＣＡＲ Ｔ細胞の増殖
ａｂＴＣＲ Ｔ細胞があまり分化しておらず、ＣＡＲ Ｔ細胞よりも高い増殖能力を有
するかどうかをさらに決定するために、本発明者らは抗原陽性がん細胞とのエンゲージメ
ント後のａｂＴＣＲおよびＣＡＲ Ｔ細胞のＣＦＳＥ蛍光、細胞分割の指標における変化
をモニターした。Ｔ細胞をクローン５－１３ ａｂＴＣＲ－６ＭＤまたは同じ抗ＣＤ１９
可変ドメインを有するＣＡＲを用いたウイルス形質導入１０日後にＣＦＳＥ色素を用いて
標識し、ベースライン蛍光をフローサイトメトリーによって記録した。標識Ｔ細胞をＲａ
ｊｉ細胞（ＣＤ１９＋がん細胞株）とサイトカイン不含有培地中でインキュベートした。
ＣＦＳＥ蛍光を２日目および３日目にＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞についてフローサイ
トメトリーによって測定した（図２１）。２日目と３日目の間のＣＦＳＥ蛍光強度の減少
は、細胞増殖の量を示し、ＣＡＲ Ｔ細胞よりもａｂＴＣＲ Ｔ細胞において顕著に高く
、クローン５－１３ ａｂＴＣＲ Ｔ細胞が対応するＣＡＲ Ｔ細胞よりも多くの細胞分
割を受けていることを示している。
ａｂＴＣＲ Ｔ細胞があまり分化しておらず、ＣＡＲ Ｔ細胞よりも高い増殖能力を有
するかどうかをさらに決定するために、本発明者らは抗原陽性がん細胞とのエンゲージメ
ント後のａｂＴＣＲおよびＣＡＲ Ｔ細胞のＣＦＳＥ蛍光、細胞分割の指標における変化
をモニターした。Ｔ細胞をクローン５－１３ ａｂＴＣＲ－６ＭＤまたは同じ抗ＣＤ１９
可変ドメインを有するＣＡＲを用いたウイルス形質導入１０日後にＣＦＳＥ色素を用いて
標識し、ベースライン蛍光をフローサイトメトリーによって記録した。標識Ｔ細胞をＲａ
ｊｉ細胞（ＣＤ１９＋がん細胞株）とサイトカイン不含有培地中でインキュベートした。
ＣＦＳＥ蛍光を２日目および３日目にＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞についてフローサイ
トメトリーによって測定した（図２１）。２日目と３日目の間のＣＦＳＥ蛍光強度の減少
は、細胞増殖の量を示し、ＣＡＲ Ｔ細胞よりもａｂＴＣＲ Ｔ細胞において顕著に高く
、クローン５－１３ ａｂＴＣＲ Ｔ細胞が対応するＣＡＲ Ｔ細胞よりも多くの細胞分
割を受けていることを示している。
【0502】
ａｂＴＣＲおよびＣＡＲ Ｔ細胞のキメラ受容体内部移行
Ｔ細胞表面ａｂＴＣＲとＣＡＲとの内部移行率を比較するために、Ｔ細胞をクローン５
－１３ ａｂＴＣＲ－６ＭＤまたは、同じ抗ＣＤ１９可変ドメインを含有するＣＡＲを用
いて形質導入し、ＣｙｐＨｅｒ５Ｅ、酸性ｐＨ６．５で蛍光を発するＰＨ感受性色素を用
いて標識した抗ＣＤ１９結合部分を認識する抗イディオタイプ抗体を用いて氷上、３０分
間染色した。次いで細胞を３７℃で表示の時間インキュベートし、固定し、粒度およびキ
メラ受容体発現についてフローサイトメトリーによって分析した（図２２、Ｙ軸は側方散
乱、Ｘ軸はＣｙｐＨｅｒ５Ｅ染色）。結果は、ほとんどすべてのＣＡＲが染色後９０分ま
でに内部移行されたことを示している。対照的にａｂＴＣＲは、ずっと低い率で内部移行
され、大部分のａｂＴＣＲは９０分間でさえ細胞表面上に残っていた。
Ｔ細胞表面ａｂＴＣＲとＣＡＲとの内部移行率を比較するために、Ｔ細胞をクローン５
－１３ ａｂＴＣＲ－６ＭＤまたは、同じ抗ＣＤ１９可変ドメインを含有するＣＡＲを用
いて形質導入し、ＣｙｐＨｅｒ５Ｅ、酸性ｐＨ６．５で蛍光を発するＰＨ感受性色素を用
いて標識した抗ＣＤ１９結合部分を認識する抗イディオタイプ抗体を用いて氷上、３０分
間染色した。次いで細胞を３７℃で表示の時間インキュベートし、固定し、粒度およびキ
メラ受容体発現についてフローサイトメトリーによって分析した（図２２、Ｙ軸は側方散
乱、Ｘ軸はＣｙｐＨｅｒ５Ｅ染色）。結果は、ほとんどすべてのＣＡＲが染色後９０分ま
でに内部移行されたことを示している。対照的にａｂＴＣＲは、ずっと低い率で内部移行
され、大部分のａｂＴＣＲは９０分間でさえ細胞表面上に残っていた。
【0503】
抗ＣＤ１９ ａｂＴＣＲとｃＴＣＲ構築物との比較
抗ＣＤ１９ ａｂＴＣＲ－６ＭＤを発現するように形質導入された初代Ｔ細胞の細胞増
殖を同じ抗体可変ドメインおよび膜貫通ドメインを有するがＴＣＲδおよびＴＣＲγポリ
ペプチド由来の定常領域を含む抗ＣＤ１９キメラ構築物（ｃＴＣＲ）を用いて形質導入さ
れたＴ細胞のものと比較した。６．７×１０５個のＴ細胞を０日目に１００Ｕ／ｍｌ Ｉ
Ｌ－２の存在下でαＣＤ３／αＣＤ２８ビーズ（１：１の割合）によって活性化させた。
活性化Ｔ細胞を抗ＣＤ１９ ａｂＴＣＲ－６ＭＤ（配列番号５６のアミノ酸配列を有する
ＴＣＲδキメラサブユニットおよび配列番号５４のアミノ酸配列を有するＴＣＲγキメラ
サブユニット）をコードするレンチウイルスベクターまたは、抗ＣＤ１９ ｃＴＣＲ（配
列番号７５のアミノ酸配列を有するＴＣＲδキメラサブユニットおよび配列番号７６のア
ミノ酸配列を有するＴＣＲγキメラサブユニット）をコードするレンチウイルスベクター
のいずれかでＭＯＩ４で１日目に形質導入した。次いで形質導入Ｔ細胞を培養し、ＩＬ－
２の存在下で９～１０日間拡大増殖させた。細胞数を１日目、５日目、７日目および９日
目に計数した。図２３Ａに示すとおりａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞は、９日目に１．７倍超
の生細胞数を有して、ｃＴＣＲ形質導入Ｔ細胞よりも早く増殖した。
抗ＣＤ１９ ａｂＴＣＲ－６ＭＤを発現するように形質導入された初代Ｔ細胞の細胞増
殖を同じ抗体可変ドメインおよび膜貫通ドメインを有するがＴＣＲδおよびＴＣＲγポリ
ペプチド由来の定常領域を含む抗ＣＤ１９キメラ構築物（ｃＴＣＲ）を用いて形質導入さ
れたＴ細胞のものと比較した。６．７×１０５個のＴ細胞を０日目に１００Ｕ／ｍｌ Ｉ
Ｌ－２の存在下でαＣＤ３／αＣＤ２８ビーズ（１：１の割合）によって活性化させた。
活性化Ｔ細胞を抗ＣＤ１９ ａｂＴＣＲ－６ＭＤ（配列番号５６のアミノ酸配列を有する
ＴＣＲδキメラサブユニットおよび配列番号５４のアミノ酸配列を有するＴＣＲγキメラ
サブユニット）をコードするレンチウイルスベクターまたは、抗ＣＤ１９ ｃＴＣＲ（配
列番号７５のアミノ酸配列を有するＴＣＲδキメラサブユニットおよび配列番号７６のア
ミノ酸配列を有するＴＣＲγキメラサブユニット）をコードするレンチウイルスベクター
のいずれかでＭＯＩ４で１日目に形質導入した。次いで形質導入Ｔ細胞を培養し、ＩＬ－
２の存在下で９～１０日間拡大増殖させた。細胞数を１日目、５日目、７日目および９日
目に計数した。図２３Ａに示すとおりａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞は、９日目に１．７倍超
の生細胞数を有して、ｃＴＣＲ形質導入Ｔ細胞よりも早く増殖した。
【0504】
抗ＣＤ１９ ａｂＴＣＲ Ｔ細胞の標的細胞殺滅活性を抗ＣＤ１９ ｃＴＣＲ Ｔ細胞
のものと比較した。初代Ｔ細胞を偽形質導入または、抗ＣＤ１９ ａｂＴＣＲ－６ＭＤも
しくは抗ＣＤ１９ ｃＴＣＲのいずれかをコードするレンチウイルスベクターを用いて形
質導入した。ａｂＴＣＲまたはｃＴＣＲを用いて形質導入されたＴ細胞をエフェクターお
よび標的の比５：１でＣＤ１９陽性標的細胞株Ｎａｌｍ－６を殺滅させるそれらの能力に
ついて検査した。特異的殺滅のレベルを上に記載のとおり１６時間で測定した。図２３Ｂ
に示すとおり、抗ＣＤ１９結合部分を有するａｂＴＣＲ－６ＭＤ構築物は、同じ抗ＣＤ１
９可変ドメインを有するｃＴＣＲよりもＣＤ１９陽性Ｎａｌｍ－６細胞のより多い特異的
溶解を方向付けた。
のものと比較した。初代Ｔ細胞を偽形質導入または、抗ＣＤ１９ ａｂＴＣＲ－６ＭＤも
しくは抗ＣＤ１９ ｃＴＣＲのいずれかをコードするレンチウイルスベクターを用いて形
質導入した。ａｂＴＣＲまたはｃＴＣＲを用いて形質導入されたＴ細胞をエフェクターお
よび標的の比５：１でＣＤ１９陽性標的細胞株Ｎａｌｍ－６を殺滅させるそれらの能力に
ついて検査した。特異的殺滅のレベルを上に記載のとおり１６時間で測定した。図２３Ｂ
に示すとおり、抗ＣＤ１９結合部分を有するａｂＴＣＲ－６ＭＤ構築物は、同じ抗ＣＤ１
９可変ドメインを有するｃＴＣＲよりもＣＤ１９陽性Ｎａｌｍ－６細胞のより多い特異的
溶解を方向付けた。
【0505】
（実施例６）
ａｂＴＣＲ－６ＭＤおよび、同じ抗ＮＹ－ＥＳＯ－１／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１可変ド
メインを有するＣＡＲ構築物を用いて形質導入されたＴ細胞の生物学的活性の特徴付け
抗ＮＹ－ＥＳＯ－１／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１ ａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞はＮＹ－Ｅ
ＳＯ－１陽性がん細胞を殺滅し得る
初代Ｔ細胞を偽形質導入または、ＣＡＲもしくは、配列番号７３のアミノ酸配列を有す
るＩｇＶＬドメインおよび配列番号７２のアミノ酸配列を有するＩｇＶＨドメインを含む
抗ＮＹ－ＥＳＯ－１／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１結合部分を含有するａｂＴＣＲ－６ＭＤの
いずれかを発現するように形質導入した。ＣＡＲは、Ｎ－末端からＣ末端までを有するｓ
ｃＦｖ、ＩｇＶＬドメイン、リンカー（配列番号７４）およびＩｇＶＨドメインを含んだ
。ＣＡＲまたはａｂＴＣＲを用いて形質導入されたＴ細胞は、フローサイトメトリーによ
ってアッセイされたとおりそれらのそれぞれのキメラ受容体を同様のレベルで発現し、エ
フェクターおよび標的の比５：１で細胞株ＩＭ９（ＨＬＡ－Ａ２＋、ＮＹ－ＥＳＯ－１＋
）、Ｃｏｌｏ２０５（ＨＬＡ－Ａ２＋、ＮＹ－ＥＳＯ－１－）、ＭＤＡ－２３１（ＨＬＡ
－Ａ２＋、ＮＹ－ＥＳＯ－１－）、ＭＣＦ７（ＨＬＡ－Ａ２＋、ＮＹ－ＥＳＯ－１－）、
ＪｅＫｏ－１（ＨＬＡ－Ａ２＋、ＮＹ－ＥＳＯ－１＋）、Ｒａｊｉ（ＨＬＡ－Ａ２＋、Ｎ
Ｙ－ＥＳＯ－１－）、Ｈｅｐ１（ＨＬＡ－Ａ２＋、ＮＹ－ＥＳＯ－１－）およびＪｕｒｋ
ａｔ（ＨＬＡ－Ａ２＋、ＮＹ－ＥＳＯ－１－）を殺滅するそれらの能力を検査するために
使用した。特異的殺滅のレベルを上の記載と同じ方法を使用して１６時間で測定した。図
２４に示すとおり、ＣＡＲおよび、抗ＮＹ－ＥＳＯ－１／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１結合部
分を有するａｂＴＣＲ－６ＭＤの両方がＮＹ－ＥＳＯ－１陽性ＪｅＫｏ－１およびＩＭ９
細胞の殺滅を同様のレベルで方向付けたが、ＮＹ－ＥＳＯ－１陰性である他の細胞は殺滅
させなかった。
ａｂＴＣＲ－６ＭＤおよび、同じ抗ＮＹ－ＥＳＯ－１／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１可変ド
メインを有するＣＡＲ構築物を用いて形質導入されたＴ細胞の生物学的活性の特徴付け
抗ＮＹ－ＥＳＯ－１／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１ ａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞はＮＹ－Ｅ
ＳＯ－１陽性がん細胞を殺滅し得る
初代Ｔ細胞を偽形質導入または、ＣＡＲもしくは、配列番号７３のアミノ酸配列を有す
るＩｇＶＬドメインおよび配列番号７２のアミノ酸配列を有するＩｇＶＨドメインを含む
抗ＮＹ－ＥＳＯ－１／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１結合部分を含有するａｂＴＣＲ－６ＭＤの
いずれかを発現するように形質導入した。ＣＡＲは、Ｎ－末端からＣ末端までを有するｓ
ｃＦｖ、ＩｇＶＬドメイン、リンカー（配列番号７４）およびＩｇＶＨドメインを含んだ
。ＣＡＲまたはａｂＴＣＲを用いて形質導入されたＴ細胞は、フローサイトメトリーによ
ってアッセイされたとおりそれらのそれぞれのキメラ受容体を同様のレベルで発現し、エ
フェクターおよび標的の比５：１で細胞株ＩＭ９（ＨＬＡ－Ａ２＋、ＮＹ－ＥＳＯ－１＋
）、Ｃｏｌｏ２０５（ＨＬＡ－Ａ２＋、ＮＹ－ＥＳＯ－１－）、ＭＤＡ－２３１（ＨＬＡ
－Ａ２＋、ＮＹ－ＥＳＯ－１－）、ＭＣＦ７（ＨＬＡ－Ａ２＋、ＮＹ－ＥＳＯ－１－）、
ＪｅＫｏ－１（ＨＬＡ－Ａ２＋、ＮＹ－ＥＳＯ－１＋）、Ｒａｊｉ（ＨＬＡ－Ａ２＋、Ｎ
Ｙ－ＥＳＯ－１－）、Ｈｅｐ１（ＨＬＡ－Ａ２＋、ＮＹ－ＥＳＯ－１－）およびＪｕｒｋ
ａｔ（ＨＬＡ－Ａ２＋、ＮＹ－ＥＳＯ－１－）を殺滅するそれらの能力を検査するために
使用した。特異的殺滅のレベルを上の記載と同じ方法を使用して１６時間で測定した。図
２４に示すとおり、ＣＡＲおよび、抗ＮＹ－ＥＳＯ－１／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１結合部
分を有するａｂＴＣＲ－６ＭＤの両方がＮＹ－ＥＳＯ－１陽性ＪｅＫｏ－１およびＩＭ９
細胞の殺滅を同様のレベルで方向付けたが、ＮＹ－ＥＳＯ－１陰性である他の細胞は殺滅
させなかった。
【0506】
腫瘍細胞殺滅におけるａｂＴＣＲおよびＣＡＲ Ｔ細胞によるサイトカイン分泌
上記がん殺滅実験において使用したものと同じ形質導入Ｔ細胞集団を、それらをＩＭ９
、Ｃｏｌｏ２０５、ＭＤＡ－２３１、ＭＣＦ７、ＪｅＫｏ－１、Ｈｅｐ１およびＪｕｒｋ
ａｔ細胞と共インキュベーションすることによってサイトカイン放出アッセイにおいて使
用した。４つのヒトサイトカイン（ＩＬ－２、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＦＮ－γ、ＴＮＦ－α）
のパネルを１６時間後に測定した。検査したすべてのサイトカインは、ＮＹ－ＥＳＯ－１
＋標的細胞との共インキュベーションの際にＣＡＲおよびａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞の培
地で検出されたが、大部分のＮＹ－ＥＳＯ－１－細胞ではされなかった（データ示さず）
。重要なことにａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞共インキュベーションによって検査したＮＹ－
ＥＳＯ－１＋標的細胞の大部分から放出されたサイトカインのレベルは、ＣＡＲ形質導入
Ｔ細胞共インキュベーションによるものより顕著に低かった（データ示さず）。
上記がん殺滅実験において使用したものと同じ形質導入Ｔ細胞集団を、それらをＩＭ９
、Ｃｏｌｏ２０５、ＭＤＡ－２３１、ＭＣＦ７、ＪｅＫｏ－１、Ｈｅｐ１およびＪｕｒｋ
ａｔ細胞と共インキュベーションすることによってサイトカイン放出アッセイにおいて使
用した。４つのヒトサイトカイン（ＩＬ－２、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＦＮ－γ、ＴＮＦ－α）
のパネルを１６時間後に測定した。検査したすべてのサイトカインは、ＮＹ－ＥＳＯ－１
＋標的細胞との共インキュベーションの際にＣＡＲおよびａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞の培
地で検出されたが、大部分のＮＹ－ＥＳＯ－１－細胞ではされなかった（データ示さず）
。重要なことにａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞共インキュベーションによって検査したＮＹ－
ＥＳＯ－１＋標的細胞の大部分から放出されたサイトカインのレベルは、ＣＡＲ形質導入
Ｔ細胞共インキュベーションによるものより顕著に低かった（データ示さず）。
【0507】
（実施例７）
ａｂＴＣＲ－６ＭＤ構築物を用いて形質導入されたナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞
および制御性Ｔ（Ｔｒｅｇ）細胞の生物学的活性の特徴付け
抗ＣＤ１９ ａｂＴＣＲ形質導入ＮＫＴ細胞
ビオチン抗体カクテルおよび抗ビオチンマイクロビーズを用いる非ＣＤ３＋／ＣＤ５６
＋細胞（非ＮＫＴ細胞）の間接磁気標識化によってＮＫＴ細胞をヒトＰＢＭＣから単離し
、ＣＤ３＋／ＣＤ５６＋ＮＫＴ細胞について富化するために非ＮＫＴ細胞を枯渇させた。
富化ＮＫＴ細胞集団についてＣＤ３およびＣＤ５６の表面発現をフローサイトメトリーに
よって評価し、図２５Ａに示す。ＮＫＴ細胞を抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ビーズによって活性
化し、抗ＣＤ１９ ａｂＴＣＲをコードするレンチウイルスを用いて形質導入し、１０％
ＦＢＳおよびＩＬ－２（１００Ｕ／ｍｌ）を含有するＲＰＭＩ－１６４０中で拡大増殖さ
せた。形質導入効率は、抗ＣＤ１９結合部分に特異的な抗イディオタイプ抗体を用いるフ
ローサイトメトリーによって測定して８０％超であった。ＮＫＴ細胞をＣＤ１９発現Ｒａ
ｊｉまたはＲａｊｉ ＣＤ１９－ノックアウト（ＣＤ１９ｋｏ）がん細胞株とエフェクタ
ーおよび標的の比５：１で１６時間共インキュベートし、培地中のサイトカイン放出（Ｉ
Ｌ－２、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＦＮγ、ＴＮＦα）の測定が続いた（図２５Ｂ）。抗ＣＤ１９
ａｂＴＣＲ形質導入ＮＫＴ細胞は、ＣＤ１９－陽性Ｒａｊｉ細胞とインキュベートされ
た場合に、検査したそれぞれのサイトカインを放出するが、ＣＤ１９陰性Ｒａｊｉ ＣＤ
１９ｋｏ細胞とインキュベートされた場合には放出しないように活性化されたが、偽形質
導入ＮＫＴ細胞はされず、ＣＤ１９抗原を含む形質導入されたａｂＴＣＲのがん細胞への
結合を通じてＮＫＴ細胞が特異的に活性化され得ることを示している。
ａｂＴＣＲ－６ＭＤ構築物を用いて形質導入されたナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞
および制御性Ｔ（Ｔｒｅｇ）細胞の生物学的活性の特徴付け
抗ＣＤ１９ ａｂＴＣＲ形質導入ＮＫＴ細胞
ビオチン抗体カクテルおよび抗ビオチンマイクロビーズを用いる非ＣＤ３＋／ＣＤ５６
＋細胞（非ＮＫＴ細胞）の間接磁気標識化によってＮＫＴ細胞をヒトＰＢＭＣから単離し
、ＣＤ３＋／ＣＤ５６＋ＮＫＴ細胞について富化するために非ＮＫＴ細胞を枯渇させた。
富化ＮＫＴ細胞集団についてＣＤ３およびＣＤ５６の表面発現をフローサイトメトリーに
よって評価し、図２５Ａに示す。ＮＫＴ細胞を抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ビーズによって活性
化し、抗ＣＤ１９ ａｂＴＣＲをコードするレンチウイルスを用いて形質導入し、１０％
ＦＢＳおよびＩＬ－２（１００Ｕ／ｍｌ）を含有するＲＰＭＩ－１６４０中で拡大増殖さ
せた。形質導入効率は、抗ＣＤ１９結合部分に特異的な抗イディオタイプ抗体を用いるフ
ローサイトメトリーによって測定して８０％超であった。ＮＫＴ細胞をＣＤ１９発現Ｒａ
ｊｉまたはＲａｊｉ ＣＤ１９－ノックアウト（ＣＤ１９ｋｏ）がん細胞株とエフェクタ
ーおよび標的の比５：１で１６時間共インキュベートし、培地中のサイトカイン放出（Ｉ
Ｌ－２、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＦＮγ、ＴＮＦα）の測定が続いた（図２５Ｂ）。抗ＣＤ１９
ａｂＴＣＲ形質導入ＮＫＴ細胞は、ＣＤ１９－陽性Ｒａｊｉ細胞とインキュベートされ
た場合に、検査したそれぞれのサイトカインを放出するが、ＣＤ１９陰性Ｒａｊｉ ＣＤ
１９ｋｏ細胞とインキュベートされた場合には放出しないように活性化されたが、偽形質
導入ＮＫＴ細胞はされず、ＣＤ１９抗原を含む形質導入されたａｂＴＣＲのがん細胞への
結合を通じてＮＫＴ細胞が特異的に活性化され得ることを示している。
【0508】
抗ＣＤ１９ ａｂＴＣＲ形質導入Ｔｒｅｇ細胞
Ｔｒｅｇ細胞をＣＤ４＋／ＣＤ２５＋Ｔｒｅｇ細胞の直接磁気標識化によってヒトＰＢ
ＭＣから単離した。単離されたＴｒｅｇ細胞集団についてＣＤ４およびＣＤ２５の表面発
現をフローサイトメトリーによって評価し、図２６Ａに示す。Ｔｒｅｇ細胞を抗ＣＤ３／
抗ＣＤ２８ビーズによって活性化し、抗ＣＤ１９ ａｂＴＣＲをコードするレンチウイル
スを用いて形質導入し、１０％ＦＢＳおよびＩＬ－２（１００Ｕ／ｍｌ）を含有するＲＰ
ＭＩ－１６４０中で拡大増殖させた。形質導入効率は、抗ＣＤ１９結合部分に特異的な抗
イディオタイプ抗体を用いるフローサイトメトリーによって測定して８０％であった。Ｔ
ｒｅｇ細胞をＣＤ１９発現ＲａｊｉまたはＲａｊｉ ＣＤ１９－ノックアウト（ＣＤ１９
ｋｏ）がん細胞株とエフェクターおよび標的の比５：１で１６時間共インキュベートし、
培地中のＩＬ－１０サイトカイン放出の測定が続いた（図２６Ｂ）。抗ＣＤ１９ ａｂＴ
ＣＲ形質導入Ｔｒｅｇ細胞は、ＣＤ１９陽性Ｒａｊｉ細胞とインキュベートされた場合に
ＩＬ－１０を放出するが、ＣＤ１９陰性Ｒａｊｉ ＣＤ１９ｋｏ細胞とインキュベートさ
れた場合には放出しないように活性化されたが、偽形質導入Ｔｒｅｇ細胞はされず、ＣＤ
１９抗原を含む形質導入ａｂＴＣＲのがん細胞への結合を通じてＴｒｅｇ細胞が特異的に
活性化され得ることを示している。
Ｔｒｅｇ細胞をＣＤ４＋／ＣＤ２５＋Ｔｒｅｇ細胞の直接磁気標識化によってヒトＰＢ
ＭＣから単離した。単離されたＴｒｅｇ細胞集団についてＣＤ４およびＣＤ２５の表面発
現をフローサイトメトリーによって評価し、図２６Ａに示す。Ｔｒｅｇ細胞を抗ＣＤ３／
抗ＣＤ２８ビーズによって活性化し、抗ＣＤ１９ ａｂＴＣＲをコードするレンチウイル
スを用いて形質導入し、１０％ＦＢＳおよびＩＬ－２（１００Ｕ／ｍｌ）を含有するＲＰ
ＭＩ－１６４０中で拡大増殖させた。形質導入効率は、抗ＣＤ１９結合部分に特異的な抗
イディオタイプ抗体を用いるフローサイトメトリーによって測定して８０％であった。Ｔ
ｒｅｇ細胞をＣＤ１９発現ＲａｊｉまたはＲａｊｉ ＣＤ１９－ノックアウト（ＣＤ１９
ｋｏ）がん細胞株とエフェクターおよび標的の比５：１で１６時間共インキュベートし、
培地中のＩＬ－１０サイトカイン放出の測定が続いた（図２６Ｂ）。抗ＣＤ１９ ａｂＴ
ＣＲ形質導入Ｔｒｅｇ細胞は、ＣＤ１９陽性Ｒａｊｉ細胞とインキュベートされた場合に
ＩＬ－１０を放出するが、ＣＤ１９陰性Ｒａｊｉ ＣＤ１９ｋｏ細胞とインキュベートさ
れた場合には放出しないように活性化されたが、偽形質導入Ｔｒｅｇ細胞はされず、ＣＤ
１９抗原を含む形質導入ａｂＴＣＲのがん細胞への結合を通じてＴｒｅｇ細胞が特異的に
活性化され得ることを示している。
【0509】
（実施例８）
異なる抗体重鎖定常ドメインを有するａｂＴＣＲを用いて形質導入されたＴ細胞の生物
学的活性の特徴付け
先の実施例ではａｂＴＣＲ構築物において使用された抗体部分は、配列番号３９のアミ
ノ酸配列を有するＩｇＧ１ ＣＨ１ドメインを含有した。ａｂＴＣＲ設計が他の免疫グロ
ブリン重鎖由来のＣＨ１ドメインとも作用することを実証するために、標的細胞殺滅アッ
セイをＩｇＧ１（配列番号３９）、ＩｇＧ２（配列番号６０、６１もしくは６２）、Ｉｇ
Ｇ３（配列番号６３）またはＩｇＧ４（配列番号６４）のいずれか由来のＣＨ１ドメイン
を有する抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１抗体に基づく構築物を使用して上に記
載のとおり実行した。ａｂＴＣＲを用いて形質導入されたＴ細胞を表面発現の指標として
ＡＦＰ１５８四量体結合についてアッセイし（表４）、ＨｅｐＧ２（ＡＦＰ＋／ＨＬＡ－
Ａ２＋）、ＳＫ－ＨＥＰ－１（ＡＦＰ－／ＨＬＡ－Ａ２＋）およびＳＫ－ＨＥＰ－１－Ａ
ＦＰ－ＭＧ（ＡＦＰミニ遺伝子を用いて形質導入されたＳＫ－ＨＥＰ－１）細胞を殺滅す
るそれらの能力について検査した。特異的溶解を１６時間インキュベーション後にＣｙｔ
ｏｘ ９６ Ｎｏｎ－ｒａｄｉｏａｃｔｉｖｅ Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ Ａｓｓａｙ
（Ｐｒｏｍｅｇａ）を使用して測定した。図２７に示すとおり、抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ
－Ａ＊０２：０１結合部分を有するａｂＴＣＲのいずれかを用いて形質導入されたＴ細胞
は、抗原陽性細胞株ＨｅｐＧ２およびＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧの殺滅を方向付け
たが、抗原陰性細胞株ＳＫ－ＨＥＰ－１の殺滅はもたらさなかった。重要なことに、非Ｉ
ｇＧ１ ＣＨ１ドメイン含有ａｂＴＣＲの表面発現はＩｇＧ１ ＣＨ１含有ａｂＴＣＲと
比較して低かったが（表４を参照のこと）、それらは同様のレベルの標的細胞殺滅を生じ
、それらの機能特性が増強されていることを示唆している。
異なる抗体重鎖定常ドメインを有するａｂＴＣＲを用いて形質導入されたＴ細胞の生物
学的活性の特徴付け
先の実施例ではａｂＴＣＲ構築物において使用された抗体部分は、配列番号３９のアミ
ノ酸配列を有するＩｇＧ１ ＣＨ１ドメインを含有した。ａｂＴＣＲ設計が他の免疫グロ
ブリン重鎖由来のＣＨ１ドメインとも作用することを実証するために、標的細胞殺滅アッ
セイをＩｇＧ１（配列番号３９）、ＩｇＧ２（配列番号６０、６１もしくは６２）、Ｉｇ
Ｇ３（配列番号６３）またはＩｇＧ４（配列番号６４）のいずれか由来のＣＨ１ドメイン
を有する抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１抗体に基づく構築物を使用して上に記
載のとおり実行した。ａｂＴＣＲを用いて形質導入されたＴ細胞を表面発現の指標として
ＡＦＰ１５８四量体結合についてアッセイし（表４）、ＨｅｐＧ２（ＡＦＰ＋／ＨＬＡ－
Ａ２＋）、ＳＫ－ＨＥＰ－１（ＡＦＰ－／ＨＬＡ－Ａ２＋）およびＳＫ－ＨＥＰ－１－Ａ
ＦＰ－ＭＧ（ＡＦＰミニ遺伝子を用いて形質導入されたＳＫ－ＨＥＰ－１）細胞を殺滅す
るそれらの能力について検査した。特異的溶解を１６時間インキュベーション後にＣｙｔ
ｏｘ ９６ Ｎｏｎ－ｒａｄｉｏａｃｔｉｖｅ Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ Ａｓｓａｙ
（Ｐｒｏｍｅｇａ）を使用して測定した。図２７に示すとおり、抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ
－Ａ＊０２：０１結合部分を有するａｂＴＣＲのいずれかを用いて形質導入されたＴ細胞
は、抗原陽性細胞株ＨｅｐＧ２およびＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧの殺滅を方向付け
たが、抗原陰性細胞株ＳＫ－ＨＥＰ－１の殺滅はもたらさなかった。重要なことに、非Ｉ
ｇＧ１ ＣＨ１ドメイン含有ａｂＴＣＲの表面発現はＩｇＧ１ ＣＨ１含有ａｂＴＣＲと
比較して低かったが（表４を参照のこと）、それらは同様のレベルの標的細胞殺滅を生じ
、それらの機能特性が増強されていることを示唆している。
【表4】
【0510】
（実施例９）
共刺激ドメイン含有ａｂＴＣＲを用いて形質導入されたＴ細胞の生物学的活性の特徴付
け
Ｃ末端共刺激ドメインを含むａｂＴＣＲ設計の実現可能性を実証するために、種々の抗
ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１ ａｂＴＣＲ構築物をＣＤ２８および／または４
－１ＢＢ由来の共刺激断片を使用して設計した（図２８）。ａｂＴＣＲは、配列番号３６
のアミノ酸配列を含有するＴＣＲγキメラサブユニットおよび配列番号３５のアミノ酸配
列を含有するＴＣＲδキメラサブユニットからなった。ＣＤ２８共刺激ドメインを有する
ａｂＴＣＲサブユニットは、それらのＣ末端に融合した配列番号７０のアミノ酸配列を有
し、４－１ＢＢ共刺激ドメインを有するサブユニットはそれらのＣ末端に融合した配列番
号７１のアミノ酸配列を有した。ａｂＴＣＲ構築物をＪ．ＲＴ３－Ｒ３．５細胞に形質導
入し、ａｂＴＣＲ発現およびＣＤ３表面発現レスキューをフローサイトメトリーを使用し
て上に記載のとおりアッセイした。結果を表５に要約する。ａｂＴＣＲの発現およびＣＤ
３発現をレスキューするそれらの能力は、共刺激ドメインを含むまたは含まない種々のａ
ｂＴＣＲ構築物の間で同様であった。別の実験では初代Ｔ細胞を、ａｂＴＣＲ構築物を用
いて形質導入し、フローサイトメトリーによってＣＤ８発現およびＡＦＰ１５８四量体結
合についてアッセイした（表６）。ａｂＴＣＲを用いて形質導入された初代Ｔ細胞をＡＦ
Ｐ１５８四量体結合およびＣＤ４またはＣＤ８発現のいずれかについてゲーティングし、
フローサイトメトリーによってＣＣＲ７、ＣＤ４５ＲＡ、ＣＤ２８およびグランザイムＢ
の発現についてアッセイした（表７）。これらの結果は、ウイルス形質導入および形質導
入されたＴ細胞の分化が共刺激ドメインを含むまたは含まない種々のａｂＴＣＲ構築物間
で同様であることを示している。標的細胞殺滅アッセイをａｂＴＣＲ構築物を使用して上
に記載のとおり実行した。ａｂＴＣＲを用いて形質導入されたＴ細胞をＨｅｐＧ２（ＡＦ
Ｐ＋／ＨＬＡ－Ａ２＋）、ＳＫ－ＨＥＰ－１（ＡＦＰ－／ＨＬＡ－Ａ２＋）およびＳＫ－
ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧ（ＡＦＰミニ遺伝子を用いて形質導入されたＳＫ－ＨＥＰ－１
）細胞を殺滅するそれらの能力についてアッセイした。図２９に示すとおり、ａｂＴＣＲ
のいずれかを用いて形質導入されたＴ細胞は、抗原陽性細胞株ＨｅｐＧ２およびＳＫ－Ｈ
ＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧの殺滅を方向付けたが、抗原陰性細胞株ＳＫ－ＨＥＰ－１の殺滅
はもたらさなかった。
共刺激ドメイン含有ａｂＴＣＲを用いて形質導入されたＴ細胞の生物学的活性の特徴付
け
Ｃ末端共刺激ドメインを含むａｂＴＣＲ設計の実現可能性を実証するために、種々の抗
ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１ ａｂＴＣＲ構築物をＣＤ２８および／または４
－１ＢＢ由来の共刺激断片を使用して設計した（図２８）。ａｂＴＣＲは、配列番号３６
のアミノ酸配列を含有するＴＣＲγキメラサブユニットおよび配列番号３５のアミノ酸配
列を含有するＴＣＲδキメラサブユニットからなった。ＣＤ２８共刺激ドメインを有する
ａｂＴＣＲサブユニットは、それらのＣ末端に融合した配列番号７０のアミノ酸配列を有
し、４－１ＢＢ共刺激ドメインを有するサブユニットはそれらのＣ末端に融合した配列番
号７１のアミノ酸配列を有した。ａｂＴＣＲ構築物をＪ．ＲＴ３－Ｒ３．５細胞に形質導
入し、ａｂＴＣＲ発現およびＣＤ３表面発現レスキューをフローサイトメトリーを使用し
て上に記載のとおりアッセイした。結果を表５に要約する。ａｂＴＣＲの発現およびＣＤ
３発現をレスキューするそれらの能力は、共刺激ドメインを含むまたは含まない種々のａ
ｂＴＣＲ構築物の間で同様であった。別の実験では初代Ｔ細胞を、ａｂＴＣＲ構築物を用
いて形質導入し、フローサイトメトリーによってＣＤ８発現およびＡＦＰ１５８四量体結
合についてアッセイした（表６）。ａｂＴＣＲを用いて形質導入された初代Ｔ細胞をＡＦ
Ｐ１５８四量体結合およびＣＤ４またはＣＤ８発現のいずれかについてゲーティングし、
フローサイトメトリーによってＣＣＲ７、ＣＤ４５ＲＡ、ＣＤ２８およびグランザイムＢ
の発現についてアッセイした（表７）。これらの結果は、ウイルス形質導入および形質導
入されたＴ細胞の分化が共刺激ドメインを含むまたは含まない種々のａｂＴＣＲ構築物間
で同様であることを示している。標的細胞殺滅アッセイをａｂＴＣＲ構築物を使用して上
に記載のとおり実行した。ａｂＴＣＲを用いて形質導入されたＴ細胞をＨｅｐＧ２（ＡＦ
Ｐ＋／ＨＬＡ－Ａ２＋）、ＳＫ－ＨＥＰ－１（ＡＦＰ－／ＨＬＡ－Ａ２＋）およびＳＫ－
ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧ（ＡＦＰミニ遺伝子を用いて形質導入されたＳＫ－ＨＥＰ－１
）細胞を殺滅するそれらの能力についてアッセイした。図２９に示すとおり、ａｂＴＣＲ
のいずれかを用いて形質導入されたＴ細胞は、抗原陽性細胞株ＨｅｐＧ２およびＳＫ－Ｈ
ＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧの殺滅を方向付けたが、抗原陰性細胞株ＳＫ－ＨＥＰ－１の殺滅
はもたらさなかった。
【0511】
共刺激ドメインを含有するａｂＴＣＲ構築物をさらに特徴付けるために、種々のａｂＴ
ＣＲを用いて形質導入されたＴ細胞を４つの異なる集団（ＣＤ８＋／ａｂＴＣＲ＋；ＣＤ
８＋／ａｂＴＣＲ－；ＣＤ４＋／ａｂＴＣＲ＋；ＣＤ４＋／ａｂＴＣＲ－）にゲーティン
グし、ＨｅｐＧ２、ＳＫ－ＨＥＰ－１およびＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧ細胞とのイ
ンキュベーション後にＴ細胞消耗マーカーＰＤ－１、ＴＩＭ－３およびＬＡＧ－３の発現
についてフローサイトメトリーによってアッセイした。Ｃ末端共刺激ドメインを含有する
種々のａｂＴＣＲを用いて形質導入されたＴ細胞は、いずれの共刺激ドメインも欠いてい
るａｂＴＣＲを用いて形質導入されたＴ細胞と比較して、標的陽性細胞ＨｅｐＧ２および
ＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧによる活性化後にＴ細胞消耗の顕著な増加を示さなかっ
た（データ示さず）。種々のａｂＴＣＲを用いて形質導入されたＴ細胞を、それらをＳＫ
－ＨＥＰ－１およびＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧ細胞と共インキュベートすることに
よって上に記載のサイトカイン放出アッセイにおいて使用した。４つのヒトサイトカイン
（ＩＬ－２、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＦＮ－γ、ＴＮＦ－α）のパネルを１６時間後に測定した
。検査したすべてのサイトカインは、ａｂＴＣＲを用いて形質導入されたＴ細胞のＡＦＰ
＋ＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧ細胞との共インキュベーションの際に培地中に検出し
たが、ＡＦＰ－ＳＫ－ＨＥＰ－１細胞ではしなかった（図３０）。Ｃ末端共刺激ドメイン
を含有する種々のａｂＴＣＲを用いて形質導入されたＴ細胞は、いずれの共刺激ドメイン
も欠いているａｂＴＣＲを用いて形質導入されたＴ細胞と比較して標的陽性ＳＫ－ＨＥＰ
－１－ＡＦＰ－ＭＧ細胞による活性化後にサイトカイン放出の顕著な増加を示さず、一部
の場合ではサイトカイン放出の低減を示した。
ＣＲを用いて形質導入されたＴ細胞を４つの異なる集団（ＣＤ８＋／ａｂＴＣＲ＋；ＣＤ
８＋／ａｂＴＣＲ－；ＣＤ４＋／ａｂＴＣＲ＋；ＣＤ４＋／ａｂＴＣＲ－）にゲーティン
グし、ＨｅｐＧ２、ＳＫ－ＨＥＰ－１およびＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧ細胞とのイ
ンキュベーション後にＴ細胞消耗マーカーＰＤ－１、ＴＩＭ－３およびＬＡＧ－３の発現
についてフローサイトメトリーによってアッセイした。Ｃ末端共刺激ドメインを含有する
種々のａｂＴＣＲを用いて形質導入されたＴ細胞は、いずれの共刺激ドメインも欠いてい
るａｂＴＣＲを用いて形質導入されたＴ細胞と比較して、標的陽性細胞ＨｅｐＧ２および
ＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧによる活性化後にＴ細胞消耗の顕著な増加を示さなかっ
た（データ示さず）。種々のａｂＴＣＲを用いて形質導入されたＴ細胞を、それらをＳＫ
－ＨＥＰ－１およびＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧ細胞と共インキュベートすることに
よって上に記載のサイトカイン放出アッセイにおいて使用した。４つのヒトサイトカイン
（ＩＬ－２、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＦＮ－γ、ＴＮＦ－α）のパネルを１６時間後に測定した
。検査したすべてのサイトカインは、ａｂＴＣＲを用いて形質導入されたＴ細胞のＡＦＰ
＋ＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧ細胞との共インキュベーションの際に培地中に検出し
たが、ＡＦＰ－ＳＫ－ＨＥＰ－１細胞ではしなかった（図３０）。Ｃ末端共刺激ドメイン
を含有する種々のａｂＴＣＲを用いて形質導入されたＴ細胞は、いずれの共刺激ドメイン
も欠いているａｂＴＣＲを用いて形質導入されたＴ細胞と比較して標的陽性ＳＫ－ＨＥＰ
－１－ＡＦＰ－ＭＧ細胞による活性化後にサイトカイン放出の顕著な増加を示さず、一部
の場合ではサイトカイン放出の低減を示した。
【0512】
標的細胞殺滅、Ｔ細胞消耗およびサイトカイン放出実験を、上に記載し、図２８に示す
とおりのＣＤ２８および／または４－１ＢＢ由来の共刺激断片を使用して設計された抗Ｃ
Ｄ１９ ａｂＴＣＲ構築物を使用して繰り返した。ａｂＴＣＲは、配列番号５４のアミノ
酸配列を含有するＴＣＲγキメラサブユニットおよび配列番号５６のアミノ酸配列を含有
するＴＣＲδキメラサブユニットからなった。抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１
ａｂＴＣＲ構築物と同様に、共刺激ドメインを含有する抗ＣＤ１９ ａｂＴＣＲを用い
て形質導入されたＴ細胞は、いずれの共刺激ドメインも含まない抗ＣＤ１９ ａｂＴＣＲ
構築物を用いて形質導入されたＴ細胞と同様に挙動した（図３１および３２）。
とおりのＣＤ２８および／または４－１ＢＢ由来の共刺激断片を使用して設計された抗Ｃ
Ｄ１９ ａｂＴＣＲ構築物を使用して繰り返した。ａｂＴＣＲは、配列番号５４のアミノ
酸配列を含有するＴＣＲγキメラサブユニットおよび配列番号５６のアミノ酸配列を含有
するＴＣＲδキメラサブユニットからなった。抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１
ａｂＴＣＲ構築物と同様に、共刺激ドメインを含有する抗ＣＤ１９ ａｂＴＣＲを用い
て形質導入されたＴ細胞は、いずれの共刺激ドメインも含まない抗ＣＤ１９ ａｂＴＣＲ
構築物を用いて形質導入されたＴ細胞と同様に挙動した（図３１および３２）。
【表5】
【表6】
【表7】
【0513】
（実施例１０）
ａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞のｉｎ ｖｉｖｏ有効性研究
ヒト肝細胞癌異種移植モデルでの抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１抗体につい
てのｉｎ ｖｉｖｏ抗腫瘍性活性
抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１結合部分（配列番号３５および３６）を含有
するａｂＴＣＲ－６ＭＤ構築物を用いて形質導入されたＴ細胞のｉｎ ｖｉｖｏ抗腫瘍性
活性をＳＣＩＤ－ｂｅｉｇｅマウスにおいてＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧの皮下（ｓ
．ｃ．）モデルを使用して検査した。ＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧ細胞をＳＣＩＤ－
ｂｅｉｇｅマウスの右側腹部にマウス１匹あたり５×１０６細胞ｓ．ｃ．移植した。平均
腫瘍体積が１００ｍｍ３に達したら、動物を腫瘍体積に基づいて：（ｉ）偽形質導入Ｔ細
胞および（ｉｉ）ａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞、を受ける２つの群にランダム化した（１群
あたりマウス８匹）。動物をランダム化の直後にマウス１匹あたり１０７の偽またはａｂ
ＴＣＲ形質導入を２週間ごとに１回、３回用量で静脈注射（ｉ．ｖ．）によって処置した
。マウスを全身健康状態、有害応答の可能性およびある場合は腫瘍体積の変化について注
意深くモニターした。偽およびａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞の両方が現在の用量およびスケ
ジュールを十分に許容した。投薬に関連する体重変化は、研究全体を通じて観察されなか
った（図３３）。ＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧ腫瘍は偽またはａｂＴＣＲ形質導入Ｔ
細胞のｉ．ｖ．投与後に継続して増殖したが、ａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞で処置した腫瘍
の増殖速度は偽Ｔ処置腫瘍と比較して減速した。図３４Ａに示すとおり、腫瘍増殖曲線の
分離は、投薬開始後２０日目に始まった。３１日目に、ａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細処置腫瘍
において２３％増殖阻害が観察された（ｔ検定、ｐ＝０．０１８）。
ａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞のｉｎ ｖｉｖｏ有効性研究
ヒト肝細胞癌異種移植モデルでの抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１抗体につい
てのｉｎ ｖｉｖｏ抗腫瘍性活性
抗ＡＦＰ１５８／ＨＬＡ－Ａ＊０２：０１結合部分（配列番号３５および３６）を含有
するａｂＴＣＲ－６ＭＤ構築物を用いて形質導入されたＴ細胞のｉｎ ｖｉｖｏ抗腫瘍性
活性をＳＣＩＤ－ｂｅｉｇｅマウスにおいてＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧの皮下（ｓ
．ｃ．）モデルを使用して検査した。ＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧ細胞をＳＣＩＤ－
ｂｅｉｇｅマウスの右側腹部にマウス１匹あたり５×１０６細胞ｓ．ｃ．移植した。平均
腫瘍体積が１００ｍｍ３に達したら、動物を腫瘍体積に基づいて：（ｉ）偽形質導入Ｔ細
胞および（ｉｉ）ａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞、を受ける２つの群にランダム化した（１群
あたりマウス８匹）。動物をランダム化の直後にマウス１匹あたり１０７の偽またはａｂ
ＴＣＲ形質導入を２週間ごとに１回、３回用量で静脈注射（ｉ．ｖ．）によって処置した
。マウスを全身健康状態、有害応答の可能性およびある場合は腫瘍体積の変化について注
意深くモニターした。偽およびａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞の両方が現在の用量およびスケ
ジュールを十分に許容した。投薬に関連する体重変化は、研究全体を通じて観察されなか
った（図３３）。ＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧ腫瘍は偽またはａｂＴＣＲ形質導入Ｔ
細胞のｉ．ｖ．投与後に継続して増殖したが、ａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞で処置した腫瘍
の増殖速度は偽Ｔ処置腫瘍と比較して減速した。図３４Ａに示すとおり、腫瘍増殖曲線の
分離は、投薬開始後２０日目に始まった。３１日目に、ａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細処置腫瘍
において２３％増殖阻害が観察された（ｔ検定、ｐ＝０．０１８）。
【0514】
ａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞の抗腫瘍性活性をより大きなＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－Ｍ
Ｇ ｓ．ｃ．腫瘍でさらに評価した。ＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧ腫瘍を有するマウ
スでの研究では、平均腫瘍体積が３００ｍｍ３に達したら動物を２つの群にランダム化し
た（ｎ＝１群あたりマウス４匹）。動物は、無処置またはマウス１匹あたり１０７ａｂＴ
ＣＲ形質導入Ｔ細胞の単回腫瘍内注射（ｉ．ｔ．）のいずれかを受けた。図３４Ｂに示す
とおり、ａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞のｉ．ｔ．送達は、経時的な腫瘍体積における変化に
よって測定される大きなＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧ腫瘍の増殖速度を減速させた。
無処置とａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞で処置した大きなＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧ腫
瘍との間での曲線下面積の比較は、２つの群間で統計的有意差を示した（両側ｔ検定、ｐ
＝０．０４）。合わせて、ａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞のｉ．ｖ．およびｉ．ｔ．投与の両
方がＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧの確立されたｓ．ｃ．異種移植の増殖を顕著に阻害
した。
Ｇ ｓ．ｃ．腫瘍でさらに評価した。ＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧ腫瘍を有するマウ
スでの研究では、平均腫瘍体積が３００ｍｍ３に達したら動物を２つの群にランダム化し
た（ｎ＝１群あたりマウス４匹）。動物は、無処置またはマウス１匹あたり１０７ａｂＴ
ＣＲ形質導入Ｔ細胞の単回腫瘍内注射（ｉ．ｔ．）のいずれかを受けた。図３４Ｂに示す
とおり、ａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞のｉ．ｔ．送達は、経時的な腫瘍体積における変化に
よって測定される大きなＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧ腫瘍の増殖速度を減速させた。
無処置とａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞で処置した大きなＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧ腫
瘍との間での曲線下面積の比較は、２つの群間で統計的有意差を示した（両側ｔ検定、ｐ
＝０．０４）。合わせて、ａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞のｉ．ｖ．およびｉ．ｔ．投与の両
方がＳＫ－ＨＥＰ－１－ＡＦＰ－ＭＧの確立されたｓ．ｃ．異種移植の増殖を顕著に阻害
した。
【0515】
リンパ腫異種移植モデルでの抗ＣＤ１９抗体についてのｉｎ ｖｉｖｏ抗腫瘍性活性
ＣＡＲおよび、例示的抗ｈＣＤ１９抗体結合部分を含むａｂＴＣＲを用いて形質導入さ
れたＴ細胞のｉｎ ｖｉｖｏ抗腫瘍性活性をＮＯＤ ＳＣＩＤガンマ（ＮＳＧ）マウスに
おけるＣＤ１９陽性ヒトリンパ腫異種移植モデルにおいて検査する。Ｒａｊｉ－ｌｕｃ－
ＧＦＰ細胞をＣｏｍｐａｒａｔｉｖｅ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｉｎｃ．（Ｓｕｎｎｙ
ｖｉｌｌｅ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ ９４０８５）から購入し、ＲＰＭＩ培地＋１０％Ｆ
ＢＳおよび１％Ｌ－グルタミンにおいて３７℃、５％ＣＯ２を用いた加湿雰囲気中で培養
する。Ｒａｊｉ－ｌｕｃ－ＧＦＰ細胞は、ＣＤ１９陽性バーキットリンパ腫細胞株、Ｒａ
ｊｉ由来であり、ホタルルシフェラーゼ（ｌｕｃ）および緑色蛍光タンパク質の両方をコ
ードする二重レポーター遺伝子を用いる安定トランスフェクション後に、生物発光画像法
を使用してｉｎ ｖｉｖｏで追跡可能な細胞を生じる。ＮＳＧマウスをＪａｃｋｓｏｎ
Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｂａｒ Ｈａｒｂｏｒ、ＭＥ ＵＳＡ ０４６０９）から購
入し、実験の前に少なくとも７日間順化させる。Ｒａｊｉ－ｌｕｃ－ＧＦＰ細胞をＰＢＳ
に再懸濁し、ＮＳＧマウスに尾静脈を通じて１×１０６細胞／１００μｌ／マウスで静脈
内（ｉ．ｖ．）移植する。腫瘍移植５日後、動物をＸｅｎｏｇｅｎ ＩＶＩＳ ｉｍａｇ
ｉｎｇ ｓｙｓｔｅｍを使用して腫瘍負荷の評価のために画像化する。マウスを光子発光
に基づいて６．７×１０５光子の平均光子発光で次の４つの群にランダム化する（ｎ＝１
群あたりマウス６匹）：（ｉ）無処置、（ｉｉ）偽形質導入ヒトＴ細胞、（ｉｉｉ）抗Ｃ
Ｄ１９ ＣＡＲ－Ｔ処置、および（ｉｖ）抗ｈＣＤ１９ ａｂＴＣＲ Ｔ細胞処置。ラン
ダム化の直後に動物を偽または抗ＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞を用いてマウス１匹あたり１
０７細胞の用量で、２週間ごとに１回、３回用量で、ｉ．ｖ．で処置する。
ＣＡＲおよび、例示的抗ｈＣＤ１９抗体結合部分を含むａｂＴＣＲを用いて形質導入さ
れたＴ細胞のｉｎ ｖｉｖｏ抗腫瘍性活性をＮＯＤ ＳＣＩＤガンマ（ＮＳＧ）マウスに
おけるＣＤ１９陽性ヒトリンパ腫異種移植モデルにおいて検査する。Ｒａｊｉ－ｌｕｃ－
ＧＦＰ細胞をＣｏｍｐａｒａｔｉｖｅ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｉｎｃ．（Ｓｕｎｎｙ
ｖｉｌｌｅ、Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ ９４０８５）から購入し、ＲＰＭＩ培地＋１０％Ｆ
ＢＳおよび１％Ｌ－グルタミンにおいて３７℃、５％ＣＯ２を用いた加湿雰囲気中で培養
する。Ｒａｊｉ－ｌｕｃ－ＧＦＰ細胞は、ＣＤ１９陽性バーキットリンパ腫細胞株、Ｒａ
ｊｉ由来であり、ホタルルシフェラーゼ（ｌｕｃ）および緑色蛍光タンパク質の両方をコ
ードする二重レポーター遺伝子を用いる安定トランスフェクション後に、生物発光画像法
を使用してｉｎ ｖｉｖｏで追跡可能な細胞を生じる。ＮＳＧマウスをＪａｃｋｓｏｎ
Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｂａｒ Ｈａｒｂｏｒ、ＭＥ ＵＳＡ ０４６０９）から購
入し、実験の前に少なくとも７日間順化させる。Ｒａｊｉ－ｌｕｃ－ＧＦＰ細胞をＰＢＳ
に再懸濁し、ＮＳＧマウスに尾静脈を通じて１×１０６細胞／１００μｌ／マウスで静脈
内（ｉ．ｖ．）移植する。腫瘍移植５日後、動物をＸｅｎｏｇｅｎ ＩＶＩＳ ｉｍａｇ
ｉｎｇ ｓｙｓｔｅｍを使用して腫瘍負荷の評価のために画像化する。マウスを光子発光
に基づいて６．７×１０５光子の平均光子発光で次の４つの群にランダム化する（ｎ＝１
群あたりマウス６匹）：（ｉ）無処置、（ｉｉ）偽形質導入ヒトＴ細胞、（ｉｉｉ）抗Ｃ
Ｄ１９ ＣＡＲ－Ｔ処置、および（ｉｖ）抗ｈＣＤ１９ ａｂＴＣＲ Ｔ細胞処置。ラン
ダム化の直後に動物を偽または抗ＣＤ１９ ＣＡＲ－Ｔ細胞を用いてマウス１匹あたり１
０７細胞の用量で、２週間ごとに１回、３回用量で、ｉ．ｖ．で処置する。
【0516】
動物は、投薬後は注意深くモニターする。Ｘｅｎｏｇｅｎ ＩＶＩＳ ｓｙｓｔｅｍを
使用する生物発光画像法を１週間に１回、８週間まで撮る。
使用する生物発光画像法を１週間に１回、８週間まで撮る。
【0517】
動物研究を抗ＣＤ１９結合部分を有するａｂＴＣＲ－６ＭＤを用いて形質導入されたＴ
細胞のｉｎ ｖｉｖｏ抗腫瘍能力を評価するために上に記載のとおり実行した。
細胞のｉｎ ｖｉｖｏ抗腫瘍能力を評価するために上に記載のとおり実行した。
【0518】
６～８週齢メスＮＳＧマウスをこの研究において使用した。Ｒａｊｉ－ｌｕｃ－ＧＦＰ
細胞株をＲＰＭＩ培地＋１０％ＦＢＳおよび１％Ｌ－グルタミン、３７℃、５％ＣＯ２を
用いた加湿雰囲気中で培養した。Ｒａｊｉ－ｌｕｃ－ＧＦＰ細胞をＰＢＳ中に再懸濁し、
１×１０６細胞／１００μｌ／マウスでＮＳＧマウス４０匹にｉ．ｖ．移植した。
細胞株をＲＰＭＩ培地＋１０％ＦＢＳおよび１％Ｌ－グルタミン、３７℃、５％ＣＯ２を
用いた加湿雰囲気中で培養した。Ｒａｊｉ－ｌｕｃ－ＧＦＰ細胞をＰＢＳ中に再懸濁し、
１×１０６細胞／１００μｌ／マウスでＮＳＧマウス４０匹にｉ．ｖ．移植した。
【0519】
腫瘍移植４日後、腫瘍増殖を確認するためにＩｖｉｓ Ｓｐｅｃｔｒｕｍを使用してマ
ウスを画像化した。次いでマウスを光子発光に基づいて、次の処置のために６つの群にラ
ンダム化した（ｎ＝マウス６匹／群）：１）ビヒクル（ＰＢＳ）；２）偽（８×１０６個
の偽形質導入Ｔ細胞）；３）クローン５ ａｂＴＣＲ（配列番号４２および５４のアミノ
酸配列を含む抗ＣＤ１９クローン５結合部分を有するａｂＴＣＲ－６ＭＤを用いて形質導
入された８×１０６個のＴ細胞）；４）クローン５－３ ａｂＴＣＲ（配列番号４２およ
び４３のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ１９クローン５－３結合部分を有するａｂＴＣＲ－６
ＭＤを用いて形質導入された８×１０６個のＴ細胞）；５）クローン５－９ ａｂＴＣＲ
（配列番号５５および５４のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ１９クローン５－９結合部分を有
するａｂＴＣＲ－６ＭＤを用いて形質導入された８×１０６個のＴ細胞）；ならびに６）
クローン５－１３ ａｂＴＣＲ（配列番号５６および５４のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ１
９クローン５－１３結合部分を有するａｂＴＣＲ－６ＭＤを用いて形質導入された８×１
０６個のＴ細胞）。
ウスを画像化した。次いでマウスを光子発光に基づいて、次の処置のために６つの群にラ
ンダム化した（ｎ＝マウス６匹／群）：１）ビヒクル（ＰＢＳ）；２）偽（８×１０６個
の偽形質導入Ｔ細胞）；３）クローン５ ａｂＴＣＲ（配列番号４２および５４のアミノ
酸配列を含む抗ＣＤ１９クローン５結合部分を有するａｂＴＣＲ－６ＭＤを用いて形質導
入された８×１０６個のＴ細胞）；４）クローン５－３ ａｂＴＣＲ（配列番号４２およ
び４３のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ１９クローン５－３結合部分を有するａｂＴＣＲ－６
ＭＤを用いて形質導入された８×１０６個のＴ細胞）；５）クローン５－９ ａｂＴＣＲ
（配列番号５５および５４のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ１９クローン５－９結合部分を有
するａｂＴＣＲ－６ＭＤを用いて形質導入された８×１０６個のＴ細胞）；ならびに６）
クローン５－１３ ａｂＴＣＲ（配列番号５６および５４のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ１
９クローン５－１３結合部分を有するａｂＴＣＲ－６ＭＤを用いて形質導入された８×１
０６個のＴ細胞）。
【0520】
動物は、腫瘍移植後は注意深くモニターし、８００万受容体陽性Ｔ細胞を投薬した。動
物を秤量し、Ｘｅｎｏｇｅｎ画像法を研究期間について１週間に２回行った。次の状態を
示す動物を安楽死させ「条件死」と記録した：ａ）急性有害応答：努力呼吸、振戦、受動
的行動（食欲の喪失および嗜眠）；ｂ）初期体重の２５％超の体重喪失；ならびにｃ）マ
ウス移動に影響する四肢麻痺。
物を秤量し、Ｘｅｎｏｇｅｎ画像法を研究期間について１週間に２回行った。次の状態を
示す動物を安楽死させ「条件死」と記録した：ａ）急性有害応答：努力呼吸、振戦、受動
的行動（食欲の喪失および嗜眠）；ｂ）初期体重の２５％超の体重喪失；ならびにｃ）マ
ウス移動に影響する四肢麻痺。
【0521】
この実験の結果を、腫瘍由来の総フラックス発光をａｂＴＣＲ細胞または対照の投薬後
日数に対してプロットする図３５に示す。４つすべてのＣＤ１９－ａｂＴＣＲ Ｔ細胞は
ｉｎ ｖｉｖｏでＣＤ１９陽性Ｒａｊｉ腫瘍を標的化し、溶解して、腫瘍増殖を阻害する
ａｂＴＣＲプラットフォームでの抗ＣＤ１９抗体の有効性を実証している。
日数に対してプロットする図３５に示す。４つすべてのＣＤ１９－ａｂＴＣＲ Ｔ細胞は
ｉｎ ｖｉｖｏでＣＤ１９陽性Ｒａｊｉ腫瘍を標的化し、溶解して、腫瘍増殖を阻害する
ａｂＴＣＲプラットフォームでの抗ＣＤ１９抗体の有効性を実証している。
【0522】
別の実験では、腫瘍を移植されなかったＮＳＧマウスを抗ＣＤ１９ ａｂＴＣＲ－６Ｍ
Ｄまたは、同じ結合配列を有する抗ＣＤ１９ ＣＡＲを用いて形質導入されたＴ細胞８×
１０６を用いて処置し、これらの形質導入Ｔ細胞のｉｎ ｖｉｖｏでの効果を比較した。
抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞を用いて処置したマウスは２４時間以内に死んだ、一方で抗
ＣＤ１９ ａｂＴＣＲ Ｔ細胞を用いて処置したマウスは５週間後に生存していた。この
結果は、ａｂＴＣＲ構築物を発現しているＴ細胞が、ＣＡＲを発現しているものよりも安
全であることを示している。
Ｄまたは、同じ結合配列を有する抗ＣＤ１９ ＣＡＲを用いて形質導入されたＴ細胞８×
１０６を用いて処置し、これらの形質導入Ｔ細胞のｉｎ ｖｉｖｏでの効果を比較した。
抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞を用いて処置したマウスは２４時間以内に死んだ、一方で抗
ＣＤ１９ ａｂＴＣＲ Ｔ細胞を用いて処置したマウスは５週間後に生存していた。この
結果は、ａｂＴＣＲ構築物を発現しているＴ細胞が、ＣＡＲを発現しているものよりも安
全であることを示している。
【0523】
抗ＣＤ１９ ａｂＴＣＲと抗ＣＤ１９ ＣＡＲの比較
Ｒａｊｉ Ｂ細胞リンパ腫Ｒａｊｉ－ｌｕｃ－ＧＦＰ細胞をＮＳＧマウスに上に記載の
とおり移植した。次いでマウスにクローン５－１３ ａｂＴＣＲ－６ＭＤ（配列番号５６
および５４のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ１９クローン５－１３結合部分を有するａｂＴＣ
Ｒ－６ＭＤ）を用いて形質導入された５×１０６個のａｂＴＣＲ＋Ｔ細胞、クローン５－
１３ ＣＡＲ（抗ＣＤ１９クローン５－１３結合部分を有するＣＡＲ）を用いて形質導入
された５×１０６個のＣＡＲ＋Ｔ細胞、または５×１０６個の偽Ｔ細胞を、注射試料あた
りマウス８匹の群に注射した。血清をＴ細胞移植２４時間後に収集し、血清中のヒトサイ
トカインの濃度をＬｕｍｉｎｅｘ Ｍａｇｐｉｘ ｍａｃｈｉｎｅを使用して上に記載の
とおり測定した。サイトカイン測定結果を図３６に示す。腫瘍負荷を既に記載のとおりル
シフェラーゼ活性によって測定し、結果を図３７（定量）および２７（画像法）に示す。
Ｒａｊｉ Ｂ細胞リンパ腫Ｒａｊｉ－ｌｕｃ－ＧＦＰ細胞をＮＳＧマウスに上に記載の
とおり移植した。次いでマウスにクローン５－１３ ａｂＴＣＲ－６ＭＤ（配列番号５６
および５４のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ１９クローン５－１３結合部分を有するａｂＴＣ
Ｒ－６ＭＤ）を用いて形質導入された５×１０６個のａｂＴＣＲ＋Ｔ細胞、クローン５－
１３ ＣＡＲ（抗ＣＤ１９クローン５－１３結合部分を有するＣＡＲ）を用いて形質導入
された５×１０６個のＣＡＲ＋Ｔ細胞、または５×１０６個の偽Ｔ細胞を、注射試料あた
りマウス８匹の群に注射した。血清をＴ細胞移植２４時間後に収集し、血清中のヒトサイ
トカインの濃度をＬｕｍｉｎｅｘ Ｍａｇｐｉｘ ｍａｃｈｉｎｅを使用して上に記載の
とおり測定した。サイトカイン測定結果を図３６に示す。腫瘍負荷を既に記載のとおりル
シフェラーゼ活性によって測定し、結果を図３７（定量）および２７（画像法）に示す。
【0524】
クローン５－１３ ＣＡＲとクローン５－１３ ａｂＴＣＲ Ｔ細胞との間の直接比較
では、マウスに注射されたａｂＴＣＲ Ｔ細胞はＣＡＲ Ｔ細胞と比較して早期の時点で
急速な腫瘍退縮を生じた一方で、ＣＡＲ Ｔ細胞を注射されたマウスは約５日後まで腫瘍
退縮を示さなかった。本実験全体を通じてクローン５－１３ ａｂＴＣＲ Ｔ細胞は、ク
ローン５－１３ ＣＡＲ Ｔ細胞よりも高いｉｎ ｖｉｖｏ腫瘍阻害有効性を示した。２
４時間でのサイトカイン測定結果は、クローン５－１３ ａｂＴＣＲ Ｔ細胞を用いて処
置されたマウスもまたサイトカイン分泌レベルがＣＡＲ Ｔ細胞処置マウスよりも低減し
ていたことを示している。これらの結果は、ａｂＴＣＲ Ｔ細胞がＣＡＲ Ｔ細胞よりも
低いサイトカイン分泌効果にも関わらず、高い腫瘍阻害効力を有することから、抗腫瘍有
効性がサイトカインの過産生を必要としないことの証拠を提供している。
では、マウスに注射されたａｂＴＣＲ Ｔ細胞はＣＡＲ Ｔ細胞と比較して早期の時点で
急速な腫瘍退縮を生じた一方で、ＣＡＲ Ｔ細胞を注射されたマウスは約５日後まで腫瘍
退縮を示さなかった。本実験全体を通じてクローン５－１３ ａｂＴＣＲ Ｔ細胞は、ク
ローン５－１３ ＣＡＲ Ｔ細胞よりも高いｉｎ ｖｉｖｏ腫瘍阻害有効性を示した。２
４時間でのサイトカイン測定結果は、クローン５－１３ ａｂＴＣＲ Ｔ細胞を用いて処
置されたマウスもまたサイトカイン分泌レベルがＣＡＲ Ｔ細胞処置マウスよりも低減し
ていたことを示している。これらの結果は、ａｂＴＣＲ Ｔ細胞がＣＡＲ Ｔ細胞よりも
低いサイトカイン分泌効果にも関わらず、高い腫瘍阻害効力を有することから、抗腫瘍有
効性がサイトカインの過産生を必要としないことの証拠を提供している。
【0525】
腫瘍移植７週間後、クローン５－１３ ａｂＴＣＲ Ｔ細胞を用いて処置したマウスで
検出可能な腫瘍を有するものはなかった。この時点で偽Ｔ細胞処置群由来のマウス３匹お
よびクローン５－１３ ａｂＴＣＲ Ｔ細胞処置群由来のマウス３匹を、５×１０５個の
Ｒａｊｉリンパ腫細胞を用いるｉ．ｖ．移植によって再チャレンジした。腫瘍負荷をルシ
フェラーゼ活性によって既に記載のとおり測定し、結果を図３９に示す。偽Ｔ細胞処置群
由来のマウスにおいて腫瘍が急速に増殖する一方で、クローン５－１３ ａｂＴＣＲ形質
導入Ｔ細胞を用いる先行処置は、Ｒａｊｉリンパ腫細胞移植を用いる再チャレンジ後の腫
瘍の増殖を妨げ、ａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞が抗原に応答するそれらの能力を継続し、維
持していることを示している。
検出可能な腫瘍を有するものはなかった。この時点で偽Ｔ細胞処置群由来のマウス３匹お
よびクローン５－１３ ａｂＴＣＲ Ｔ細胞処置群由来のマウス３匹を、５×１０５個の
Ｒａｊｉリンパ腫細胞を用いるｉ．ｖ．移植によって再チャレンジした。腫瘍負荷をルシ
フェラーゼ活性によって既に記載のとおり測定し、結果を図３９に示す。偽Ｔ細胞処置群
由来のマウスにおいて腫瘍が急速に増殖する一方で、クローン５－１３ ａｂＴＣＲ形質
導入Ｔ細胞を用いる先行処置は、Ｒａｊｉリンパ腫細胞移植を用いる再チャレンジ後の腫
瘍の増殖を妨げ、ａｂＴＣＲ形質導入Ｔ細胞が抗原に応答するそれらの能力を継続し、維
持していることを示している。
【0526】
別の実験では５×１０６個のクローン５－３ ａｂＴＣＲ－６ＭＤ（配列番号４２およ
び４３のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ１９クローン５－３結合部分を有するａｂＴＣＲ－６
ＭＤ）Ｔ細胞または、５×１０６個のクローン５－３ ＣＡＲ（抗ＣＤ１９クローン５－
３結合部分を有するＣＡＲ、配列番号４４）Ｔ細胞のいずれかの注射の２４時間後にＮＳ
Ｇマウスから血清を、収集した。マウス血清中のサイトカインの濃度を上に記載のとおり
測定した。高レベルのＴ細胞由来ヒトサイトカインおよびマウス由来ＩＬ－６をクローン
５－３ ＣＡＲ Ｔ細胞を用いて処置したマウスにおいて見出した。対照的に、クローン
５－３ ａｂＴＣＲを用いて処置されたマウスは、血清サイトカインレベルの劇的な低下
を示し（データ示さず）、ａｂＴＣＲ Ｔ細胞についてサイトカイン過産生への効果の低
減のさらなる証明を提供している。
び４３のアミノ酸配列を含む抗ＣＤ１９クローン５－３結合部分を有するａｂＴＣＲ－６
ＭＤ）Ｔ細胞または、５×１０６個のクローン５－３ ＣＡＲ（抗ＣＤ１９クローン５－
３結合部分を有するＣＡＲ、配列番号４４）Ｔ細胞のいずれかの注射の２４時間後にＮＳ
Ｇマウスから血清を、収集した。マウス血清中のサイトカインの濃度を上に記載のとおり
測定した。高レベルのＴ細胞由来ヒトサイトカインおよびマウス由来ＩＬ－６をクローン
５－３ ＣＡＲ Ｔ細胞を用いて処置したマウスにおいて見出した。対照的に、クローン
５－３ ａｂＴＣＲを用いて処置されたマウスは、血清サイトカインレベルの劇的な低下
を示し（データ示さず）、ａｂＴＣＲ Ｔ細胞についてサイトカイン過産生への効果の低
減のさらなる証明を提供している。
【0527】
白血病異種移植モデルにおける抗ＣＤ１９抗体についてのｉｎ ｖｉｖｏ抗腫瘍性活性
例示的抗ｈＣＤ１９抗体結合部分を含有するＣＡＲまたはａｂＴＣＲを用いて形質導入
されたＴ細胞のｉｎ ｖｉｖｏ抗腫瘍性活性をＮＳＧマウスでのＣＤ１９陽性ヒト白血病
異種移植モデルにおいて検査した。ＮＡＬＭ－６－ｌｕｃ－ＧＦＰ細胞は、Ｍｅｍｏｒｉ
ａｌ Ｓｌｏａｎ Ｋｅｔｔｅｒｉｎｇ Ｃａｎｃｅｒ ＣｅｎｔｅｒのＥｒｉｃ Ｓｍ
ｉｔｈの研究室からの贈与であり、ＲＰＭＩ培地＋１０％ＦＢＳ中、３７℃、５％ＣＯ２
を用いた加湿雰囲気中で培養した。ＮＡＬＭ－６－ｌｕｃ－ＧＦＰ細胞は、ＣＤ１９陽性
急性リンパ性白血病細胞株、ＮＡＬＭ－６由来であり、ホタルルシフェラーゼ（ｌｕｃ）
および緑色蛍光タンパク質の両方をコードする二重レポーター遺伝子を用いる安定トラン
スフェクション後に、生物発光画像法を使用してｉｎ ｖｉｖｏで追跡可能な細胞を生じ
る。ＮＳＧマウスをＪａｃｋｓｏｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｂａｒ Ｈａｒｂｏｒ
、ＭＥ ＵＳＡ ０４６０９）から購入し、実験の前に少なくとも３日間順化させる。Ｎ
ＡＬＭ－６－ｌｕｃ－ＧＦＰ細胞をＰＢＳに再懸濁し、６～８週齢メスＮＳＧマウス３０
匹に尾静脈を通じて５×１０５細胞／１００μｌ／マウスで静脈内（ｉ．ｖ．）移植する
。腫瘍移植４日後、動物をＸｅｎｏｇｅｎ ＩＶＩＳ ｉｍａｇｉｎｇ ｓｙｓｔｅｍを
使用して腫瘍負荷の評価のために画像化した。マウスを光子発光に基づいて次の４群にラ
ンダム化した：（ｉ）ビヒクル、ＰＢＳのみ（ｎ＝マウス６匹）；（ｉｉ）１０×１０６
個の偽形質導入ヒトＴ細胞（ｎ＝マウス６匹）；（ｉｉｉ）５×１０６個のクローン５－
１３ ＣＡＲ Ｔ細胞（抗ＣＤ１９クローン５－１３結合部分を有するＣＡＲを用いて形
質導入されたＴ細胞）（ｎ＝マウス８匹）；ならびに（ｉｖ）５×１０６個のクローン５
－１３ ａｂＴＣＲ－６ＭＤ Ｔ細胞（配列番号５６および５４のアミノ酸配列を含む抗
ＣＤ１９クローン５－１３結合部分を有するａｂＴＣＲ－６ＭＤを用いて形質導入された
Ｔ細胞）（ｎ＝マウス８匹）。
例示的抗ｈＣＤ１９抗体結合部分を含有するＣＡＲまたはａｂＴＣＲを用いて形質導入
されたＴ細胞のｉｎ ｖｉｖｏ抗腫瘍性活性をＮＳＧマウスでのＣＤ１９陽性ヒト白血病
異種移植モデルにおいて検査した。ＮＡＬＭ－６－ｌｕｃ－ＧＦＰ細胞は、Ｍｅｍｏｒｉ
ａｌ Ｓｌｏａｎ Ｋｅｔｔｅｒｉｎｇ Ｃａｎｃｅｒ ＣｅｎｔｅｒのＥｒｉｃ Ｓｍ
ｉｔｈの研究室からの贈与であり、ＲＰＭＩ培地＋１０％ＦＢＳ中、３７℃、５％ＣＯ２
を用いた加湿雰囲気中で培養した。ＮＡＬＭ－６－ｌｕｃ－ＧＦＰ細胞は、ＣＤ１９陽性
急性リンパ性白血病細胞株、ＮＡＬＭ－６由来であり、ホタルルシフェラーゼ（ｌｕｃ）
および緑色蛍光タンパク質の両方をコードする二重レポーター遺伝子を用いる安定トラン
スフェクション後に、生物発光画像法を使用してｉｎ ｖｉｖｏで追跡可能な細胞を生じ
る。ＮＳＧマウスをＪａｃｋｓｏｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｂａｒ Ｈａｒｂｏｒ
、ＭＥ ＵＳＡ ０４６０９）から購入し、実験の前に少なくとも３日間順化させる。Ｎ
ＡＬＭ－６－ｌｕｃ－ＧＦＰ細胞をＰＢＳに再懸濁し、６～８週齢メスＮＳＧマウス３０
匹に尾静脈を通じて５×１０５細胞／１００μｌ／マウスで静脈内（ｉ．ｖ．）移植する
。腫瘍移植４日後、動物をＸｅｎｏｇｅｎ ＩＶＩＳ ｉｍａｇｉｎｇ ｓｙｓｔｅｍを
使用して腫瘍負荷の評価のために画像化した。マウスを光子発光に基づいて次の４群にラ
ンダム化した：（ｉ）ビヒクル、ＰＢＳのみ（ｎ＝マウス６匹）；（ｉｉ）１０×１０６
個の偽形質導入ヒトＴ細胞（ｎ＝マウス６匹）；（ｉｉｉ）５×１０６個のクローン５－
１３ ＣＡＲ Ｔ細胞（抗ＣＤ１９クローン５－１３結合部分を有するＣＡＲを用いて形
質導入されたＴ細胞）（ｎ＝マウス８匹）；ならびに（ｉｖ）５×１０６個のクローン５
－１３ ａｂＴＣＲ－６ＭＤ Ｔ細胞（配列番号５６および５４のアミノ酸配列を含む抗
ＣＤ１９クローン５－１３結合部分を有するａｂＴＣＲ－６ＭＤを用いて形質導入された
Ｔ細胞）（ｎ＝マウス８匹）。
【0528】
動物は、腫瘍移植後は注意深くモニターし、受容体陽性Ｔ細胞を投薬した。動物を秤量
し、Ｘｅｎｏｇｅｎ画像法を研究期間について１週間に２回行った。次の状態を示す動物
を安楽死させ「条件死」と記録した：ａ）急性有害応答：努力呼吸、振戦、受動的行動（
食欲の喪失および嗜眠）；ｂ）初期体重の２５％超の体重喪失；ならびにｃ）マウス移動
に影響する四肢麻痺。
し、Ｘｅｎｏｇｅｎ画像法を研究期間について１週間に２回行った。次の状態を示す動物
を安楽死させ「条件死」と記録した：ａ）急性有害応答：努力呼吸、振戦、受動的行動（
食欲の喪失および嗜眠）；ｂ）初期体重の２５％超の体重喪失；ならびにｃ）マウス移動
に影響する四肢麻痺。
【0529】
この実験の結果を、各処置群についての腫瘍由来の平均総フラックス発光を処置後日数
に対してプロットした図４０に示す。クローン５－１３ ａｂＴＣＲ Ｔ細胞およびクロ
ーン５－１３ ＣＡＲ Ｔ細胞の両方がｉｎ ｖｉｖｏでＣＤ１９陽性ＮＡＬＭ－６腫瘍
を標的化および溶解し、複数のがんモデルにおいて腫瘍増殖を阻害するａｂＴＣＲプラッ
トフォームでの抗ＣＤ１９抗体の有効性を実証している。
に対してプロットした図４０に示す。クローン５－１３ ａｂＴＣＲ Ｔ細胞およびクロ
ーン５－１３ ＣＡＲ Ｔ細胞の両方がｉｎ ｖｉｖｏでＣＤ１９陽性ＮＡＬＭ－６腫瘍
を標的化および溶解し、複数のがんモデルにおいて腫瘍増殖を阻害するａｂＴＣＲプラッ
トフォームでの抗ＣＤ１９抗体の有効性を実証している。
【0530】
処置２４時間後に血液を１群あたり３匹のマウスからサイトカイン測定のために収集し
、結果を図４１に示す。リンパ腫異種移植モデルと同様に、白血病異種移植モデルでの抗
ＣＤ１９ ａｂＴＣＲ Ｔ細胞を用いた処置は、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞を用いた処
置よりも低いレベルのサイトカイン分泌を生じた。
、結果を図４１に示す。リンパ腫異種移植モデルと同様に、白血病異種移植モデルでの抗
ＣＤ１９ ａｂＴＣＲ Ｔ細胞を用いた処置は、抗ＣＤ１９ ＣＡＲ Ｔ細胞を用いた処
置よりも低いレベルのサイトカイン分泌を生じた。
【0531】
処置後７日目および１３日目に血液を各群の代表的なマウスから収集し、Ａｆｆｙｍｅ
ｔｒｉｘ ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ，Ｉｎｃ．からの「１２３ｃｏｕｎｔ ｅＢｅａｄｓ
」キットを使用して、血液１μｌあたりのＣＤ３＋Ｔ細胞、ＣＡＲ／ａｂＴＣＲ発現Ｔ細
胞および腫瘍細胞の数およびＴ細胞上のＰＤ－１発現のレベルを決定するためにフローサ
イトメトリーによって分析した。処置１３日後に１群あたりマウス２匹を安楽死させ、骨
髄抽出物をＣＤ３＋／ＣＡＲ／ａｂＴＣＲ Ｔ細胞、腫瘍細胞の存在およびＴ細胞上のＰ
Ｄ－１発現レベルについてフローサイトメトリーによって分析した。
ｔｒｉｘ ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅ，Ｉｎｃ．からの「１２３ｃｏｕｎｔ ｅＢｅａｄｓ
」キットを使用して、血液１μｌあたりのＣＤ３＋Ｔ細胞、ＣＡＲ／ａｂＴＣＲ発現Ｔ細
胞および腫瘍細胞の数およびＴ細胞上のＰＤ－１発現のレベルを決定するためにフローサ
イトメトリーによって分析した。処置１３日後に１群あたりマウス２匹を安楽死させ、骨
髄抽出物をＣＤ３＋／ＣＡＲ／ａｂＴＣＲ Ｔ細胞、腫瘍細胞の存在およびＴ細胞上のＰ
Ｄ－１発現レベルについてフローサイトメトリーによって分析した。
【0532】
ａｂＴＣＲ Ｔ細胞を投与されたマウスは、投与後７および１３日目の両方でＣＡＲ
Ｔ細胞を投与されたマウスについて観察されたものよりも高いレベルのキメラ受容体発現
Ｔ細胞をそれらの血液中に有し（図４２）、ａｂＴＣＲ Ｔ細胞がこのモデルにおいてそ
れらの対応するＣＡＲ Ｔ細胞よりも高いレベルの生存率および／または増殖を有するこ
とを示している。図４３および４４に示すとおり、ＣＡＲ Ｔ細胞またはａｂＴＣＲ Ｔ
細胞のいずれかで処置したマウスが、ビヒクルおよび偽処置対照動物と比較して処置後１
３日目に末梢血および骨髄の両方において腫瘍細胞の低減を示した（ＦＩＴＣ染色によっ
て示された）一方で、末梢血および骨髄の両方における腫瘍細胞の低減はａｂＴＣＲ Ｔ
細胞を用いて処置された動物に対してより大きかった。図４５および４６に示すとおり、
末梢血および骨髄の両方由来のＴ細胞の表面上のＰＤ－１、Ｔ細胞消耗マーカーの発現レ
ベルは、ＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞の両方について、ａｂＴＣＲ Ｔ細胞を用いて処
置したマウスにおいての方が、ＣＡＲ Ｔ細胞を用いて処置したものよりも低く、偽処置
マウスにおいて観察されたレベルに匹敵した。これらの結果は、ａｂＴＣＲ発現Ｔ細胞が
ＣＡＲ発現Ｔ細胞よりも消耗しにくい可能性があることを示唆している。
＜配列表＞
SEQUENCE LISTING
<110> Eureka Therapeutics, Inc.
<120> ANTIBODY/T-CELL RECEPTOR CHIMERIC
CONSTRUCTS AND USES THEREOF
<130> 750042000340
<140> Not Yet Assigned
<141> Concurrently Herewith
<150> US 62/245,944
<151> 2015-10-23
<150> US 62/304,918
<151> 2016-03-07
<150> US 62/345,649
<151> 2016-06-03
<150> US 62/369,694
<151> 2016-08-01
<160> 82
<170> FastSEQ for Windows Version 4.0
<210> 1
<211> 20
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRalpha transmembrane domain
<400> 1
Ile Leu Leu Leu Lys Val Ala Gly Phe Asn Leu Leu Met Thr Leu Arg
1 5 10 15
Leu Trp Ser Ser
20
<210> 2
<211> 23
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRbeta transmembrane domain
<400> 2
Thr Ile Leu Tyr Glu Ile Leu Leu Gly Lys Ala Thr Leu Tyr Ala Val
1 5 10 15
Leu Val Ser Ala Leu Val Leu
20
<210> 3
<211> 20
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRdelta transmembrane domain
<400> 3
Met Leu Phe Ala Lys Thr Val Ala Val Asn Phe Leu Leu Thr Ala Lys
1 5 10 15
Leu Phe Phe Leu
20
<210> 4
<211> 23
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRgamma transmembrane domain
<400> 4
Tyr Tyr Met Tyr Leu Leu Leu Leu Leu Lys Ser Val Val Tyr Phe Ala
1 5 10 15
Ile Ile Thr Cys Cys Leu Leu
20
<210> 5
<211> 30
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRalpha connecting peptide
<400> 5
Glu Ser Ser Cys Asp Val Lys Leu Val Glu Lys Ser Phe Glu Thr Asp
1 5 10 15
Thr Asn Leu Asn Phe Gln Asn Leu Ser Val Ile Gly Phe Arg
20 25 30
<210> 6
<211> 17
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRbeta connecting peptide
<400> 6
Ala Asp Cys Gly Phe Thr Ser Val Ser Tyr Gln Gln Gly Val Leu Ser
1 5 10 15
Ala
<210> 7
<211> 41
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRdelta connecting peptide
<400> 7
Asp His Val Lys Pro Lys Glu Thr Glu Asn Thr Lys Gln Pro Ser Lys
1 5 10 15
Ser Cys His Lys Pro Lys Ala Ile Val His Thr Glu Lys Val Asn Met
20 25 30
Met Ser Leu Thr Val Leu Gly Leu Arg
35 40
<210> 8
<211> 24
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRgamma connecting peptide
<400> 8
Met Asp Pro Lys Asp Asn Cys Ser Lys Asp Ala Asn Asp Thr Leu Leu
1 5 10 15
Leu Gln Leu Thr Asn Thr Ser Ala
20
<210> 9
<211> 40
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRalpha connecting peptide MD
<400> 9
Ile Pro Glu Asp Thr Phe Phe Pro Ser Pro Glu Ser Ser Cys Asp Val
1 5 10 15
Lys Leu Val Glu Lys Ser Phe Glu Thr Asp Thr Asn Leu Asn Phe Gln
20 25 30
Asn Leu Ser Val Ile Gly Phe Arg
35 40
<210> 10
<211> 19
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRbeta connecting peptide MD
<400> 10
Gly Arg Ala Asp Cys Gly Phe Thr Ser Val Ser Tyr Gln Gln Gly Val
1 5 10 15
Leu Ser Ala
<210> 11
<211> 48
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRdelta connecting peptide MD
<400> 11
Glu Val Lys Thr Asp Ser Thr Asp His Val Lys Pro Lys Glu Thr Glu
1 5 10 15
Asn Thr Lys Gln Pro Ser Lys Ser Cys His Lys Pro Lys Ala Ile Val
20 25 30
His Thr Glu Lys Val Asn Met Met Ser Leu Thr Val Leu Gly Leu Arg
35 40 45
<210> 12
<211> 32
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRgamma connecting peptide MD
<400> 12
Pro Ile Lys Thr Asp Val Ile Thr Met Asp Pro Lys Asp Asn Cys Ser
1 5 10 15
Lys Asp Ala Asn Asp Thr Leu Leu Leu Gln Leu Thr Asn Thr Ser Ala
20 25 30
<210> 13
<211> 9
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRbeta intracellular domain
<400> 13
Met Ala Met Val Lys Arg Lys Asp Phe
1 5
<210> 14
<211> 12
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRgamma intracellular domain
<400> 14
Arg Arg Thr Ala Phe Cys Cys Asn Gly Glu Lys Ser
1 5 10
<210> 15
<211> 50
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRD alpha
<400> 15
Glu Ser Ser Cys Asp Val Lys Leu Val Glu Lys Ser Phe Glu Thr Asp
1 5 10 15
Thr Asn Leu Asn Phe Gln Asn Leu Ser Val Ile Gly Phe Arg Ile Leu
20 25 30
Leu Leu Lys Val Ala Gly Phe Asn Leu Leu Met Thr Leu Arg Leu Trp
35 40 45
Ser Ser
50
<210> 16
<211> 49
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRD beta
<400> 16
Ala Asp Cys Gly Phe Thr Ser Val Ser Tyr Gln Gln Gly Val Leu Ser
1 5 10 15
Ala Thr Ile Leu Tyr Glu Ile Leu Leu Gly Lys Ala Thr Leu Tyr Ala
20 25 30
Val Leu Val Ser Ala Leu Val Leu Met Ala Met Val Lys Arg Lys Asp
35 40 45
Phe
<210> 17
<211> 60
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRD alpha MD
<400> 17
Ile Pro Glu Asp Thr Phe Phe Pro Ser Pro Glu Ser Ser Cys Asp Val
1 5 10 15
Lys Leu Val Glu Lys Ser Phe Glu Thr Asp Thr Asn Leu Asn Phe Gln
20 25 30
Asn Leu Ser Val Ile Gly Phe Arg Ile Leu Leu Leu Lys Val Ala Gly
35 40 45
Phe Asn Leu Leu Met Thr Leu Arg Leu Trp Ser Ser
50 55 60
<210> 18
<211> 51
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRD beta MD
<400> 18
Gly Arg Ala Asp Cys Gly Phe Thr Ser Val Ser Tyr Gln Gln Gly Val
1 5 10 15
Leu Ser Ala Thr Ile Leu Tyr Glu Ile Leu Leu Gly Lys Ala Thr Leu
20 25 30
Tyr Ala Val Leu Val Ser Ala Leu Val Leu Met Ala Met Val Lys Arg
35 40 45
Lys Asp Phe
50
<210> 19
<211> 61
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRD delta
<400> 19
Asp His Val Lys Pro Lys Glu Thr Glu Asn Thr Lys Gln Pro Ser Lys
1 5 10 15
Ser Cys His Lys Pro Lys Ala Ile Val His Thr Glu Lys Val Asn Met
20 25 30
Met Ser Leu Thr Val Leu Gly Leu Arg Met Leu Phe Ala Lys Thr Val
35 40 45
Ala Val Asn Phe Leu Leu Thr Ala Lys Leu Phe Phe Leu
50 55 60
<210> 20
<211> 59
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRD gamma
<400> 20
Met Asp Pro Lys Asp Asn Cys Ser Lys Asp Ala Asn Asp Thr Leu Leu
1 5 10 15
Leu Gln Leu Thr Asn Thr Ser Ala Tyr Tyr Met Tyr Leu Leu Leu Leu
20 25 30
Leu Lys Ser Val Val Tyr Phe Ala Ile Ile Thr Cys Cys Leu Leu Arg
35 40 45
Arg Thr Ala Phe Cys Cys Asn Gly Glu Lys Ser
50 55
<210> 21
<211> 68
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRD delta MD
<400> 21
Glu Val Lys Thr Asp Ser Thr Asp His Val Lys Pro Lys Glu Thr Glu
1 5 10 15
Asn Thr Lys Gln Pro Ser Lys Ser Cys His Lys Pro Lys Ala Ile Val
20 25 30
His Thr Glu Lys Val Asn Met Met Ser Leu Thr Val Leu Gly Leu Arg
35 40 45
Met Leu Phe Ala Lys Thr Val Ala Val Asn Phe Leu Leu Thr Ala Lys
50 55 60
Leu Phe Phe Leu
65
<210> 22
<211> 67
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRD gamma MD
<400> 22
Pro Ile Lys Thr Asp Val Ile Thr Met Asp Pro Lys Asp Asn Cys Ser
1 5 10 15
Lys Asp Ala Asn Asp Thr Leu Leu Leu Gln Leu Thr Asn Thr Ser Ala
20 25 30
Tyr Tyr Met Tyr Leu Leu Leu Leu Leu Lys Ser Val Val Tyr Phe Ala
35 40 45
Ile Ile Thr Cys Cys Leu Leu Arg Arg Thr Ala Phe Cys Cys Asn Gly
50 55 60
Glu Lys Ser
65
<210> 23
<211> 270
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> anti-AFP158/HLA-A*02:01-abTCR-3 alpha
<400> 23
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Thr Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Pro Asn Tyr
20 25 30
Trp Ile Thr Trp Val Arg Gln Met Ser Gly Gly Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Gly Asp Ser Tyr Thr Thr Tyr Asn Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly His Val Thr Ile Ser Ile Asp Lys Ser Thr Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu His Trp Asn Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Tyr Val Ser Leu Val Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu
115 120 125
Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys
130 135 140
Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser
145 150 155 160
Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser
165 170 175
Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser
180 185 190
Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn
195 200 205
Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Glu Ser Ser Cys
210 215 220
Asp Val Lys Leu Val Glu Lys Ser Phe Glu Thr Asp Thr Asn Leu Asn
225 230 235 240
Phe Gln Asn Leu Ser Val Ile Gly Phe Arg Ile Leu Leu Leu Lys Val
245 250 255
Ala Gly Phe Asn Leu Leu Met Thr Leu Arg Leu Trp Ser Ser
260 265 270
<210> 24
<211> 265
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> anti-AFP158/HLA-A*02:01-abTCR-3 beta
<400> 24
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr
20 25 30
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Met Ile Tyr Asp Val Asn Asn Arg Pro Ser Glu Val Ser Asn Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Thr Gly
85 90 95
Ser Arg Ala Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln
100 105 110
Pro Lys Ala Asn Pro Thr Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu
115 120 125
Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr
130 135 140
Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Gly Ser Pro Val Lys
145 150 155 160
Ala Gly Val Glu Thr Thr Lys Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr
165 170 175
Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His
180 185 190
Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys
195 200 205
Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser Ala Asp Cys Gly Phe Thr Ser Val
210 215 220
Ser Tyr Gln Gln Gly Val Leu Ser Ala Thr Ile Leu Tyr Glu Ile Leu
225 230 235 240
Leu Gly Lys Ala Thr Leu Tyr Ala Val Leu Val Ser Ala Leu Val Leu
245 250 255
Met Ala Met Val Lys Arg Lys Asp Phe
260 265
<210> 25
<211> 266
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> anti-AFP158/HLA-A*02:01-abTCR-4 alpha
<400> 25
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr
20 25 30
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Met Ile Tyr Asp Val Asn Asn Arg Pro Ser Glu Val Ser Asn Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Thr Gly
85 90 95
Ser Arg Ala Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln
100 105 110
Pro Lys Ala Asn Pro Thr Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu
115 120 125
Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr
130 135 140
Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Gly Ser Pro Val Lys
145 150 155 160
Ala Gly Val Glu Thr Thr Lys Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr
165 170 175
Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His
180 185 190
Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys
195 200 205
Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser Glu Ser Ser Cys Asp Val Lys Leu
210 215 220
Val Glu Lys Ser Phe Glu Thr Asp Thr Asn Leu Asn Phe Gln Asn Leu
225 230 235 240
Ser Val Ile Gly Phe Arg Ile Leu Leu Leu Lys Val Ala Gly Phe Asn
245 250 255
Leu Leu Met Thr Leu Arg Leu Trp Ser Ser
260 265
<210> 26
<211> 269
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> anti-AFP158/HLA-A*02:01-abTCR-4 beta
<400> 26
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Thr Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Pro Asn Tyr
20 25 30
Trp Ile Thr Trp Val Arg Gln Met Ser Gly Gly Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Gly Asp Ser Tyr Thr Thr Tyr Asn Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly His Val Thr Ile Ser Ile Asp Lys Ser Thr Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu His Trp Asn Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Tyr Val Ser Leu Val Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu
115 120 125
Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys
130 135 140
Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser
145 150 155 160
Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser
165 170 175
Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser
180 185 190
Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn
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Tyr Glu Ile Leu Leu Gly Lys Ala Thr Leu Tyr Ala Val Leu Val Ser
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210 215 220
Ser Pro Glu Ser Ser Cys Asp Val Lys Leu Val Glu Lys Ser Phe Glu
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Thr Asp Thr Asn Leu Asn Phe Gln Asn Leu Ser Val Ile Gly Phe Arg
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> anti-AFP158/HLA-A*02:01-abTCR-6MD gamma
<400> 36
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> anti-AFP158/HLA-A*02:01-scFv CAR
<400> 37
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100 105 110
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195 200 205
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245 250 255
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260 265 270
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275 280 285
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<210> 38
<211> 117
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IgVH domain of anti-AFP158/HLA-A*02:01 antibody
<400> 38
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115
<210> 39
<211> 103
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> IgG1 CH1 domain
<400> 39
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys
1 5 10 15
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100
<210> 40
<211> 110
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IgVL domain of AFP158/HLA-A*02:01 antibody
<400> 40
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1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr
20 25 30
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Met Ile Tyr Asp Val Asn Asn Arg Pro Ser Glu Val Ser Asn Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Thr Gly
85 90 95
Ser Arg Ala Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105 110
<210> 41
<211> 106
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> IgCL domain
<400> 41
Gly Gln Pro Lys Ala Asn Pro Thr Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser
1 5 10 15
Glu Glu Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp
20 25 30
Phe Tyr Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Gly Ser Pro
35 40 45
Val Lys Ala Gly Val Glu Thr Thr Lys Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn
50 55 60
Lys Tyr Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys
65 70 75 80
Ser His Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val
85 90 95
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100 105
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<211> 301
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
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<400> 42
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1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile Tyr Pro Gly Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
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85 90 95
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100 105 110
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245 250 255
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260 265 270
Met Ser Leu Thr Val Leu Gly Leu Arg Met Leu Phe Ala Lys Thr Val
275 280 285
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<213> Artificial Sequence
<220>
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<400> 43
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20 25 30
His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Val Tyr
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115 120 125
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130 135 140
Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Gly Ser Pro Val Lys Ala Gly
145 150 155 160
Val Glu Thr Thr Lys Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr Ala Ala
165 170 175
Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His Arg Ser
180 185 190
Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys Thr Val
195 200 205
Ala Pro Thr Glu Cys Ser Pro Ile Lys Thr Asp Val Ile Thr Met Asp
210 215 220
Pro Lys Asp Asn Cys Ser Lys Asp Ala Asn Asp Thr Leu Leu Leu Gln
225 230 235 240
Leu Thr Asn Thr Ser Ala Tyr Tyr Met Tyr Leu Leu Leu Leu Leu Lys
245 250 255
Ser Val Val Tyr Phe Ala Ile Ile Thr Cys Cys Leu Leu Arg Arg Thr
260 265 270
Ala Phe Cys Cys Asn Gly Glu Lys Ser
275 280
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
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50 55 60
Asn Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Thr Ile Ser Arg Val Glu Ala Gly
65 70 75 80
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Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Ser Arg Gly
100 105 110
Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Leu Glu
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130 135 140
Gly Glu Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Thr
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195 200 205
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Tyr Cys Ala Arg Gln Val Trp Gly Trp Gln Gly Gly Met Tyr Pro Arg
225 230 235 240
Ser Asn Trp Trp Tyr Asn Met Asp Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val
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Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala Ile Glu Val Met Tyr Pro Pro Pro Tyr
260 265 270
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Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser
450 455 460
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Pro Arg
<210> 45
<211> 130
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IgVH domain of anti-CD19 antibody
<400> 45
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile Tyr Pro Gly Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe
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Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
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115 120 125
Ser Ser
130
<210> 46
<211> 108
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IgVL domain of anti-CD19 antibody
<400> 46
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1 5 10 15
Thr Ala Arg Ile Thr Cys Gly Gly Asn Asn Ile Gly Ser Lys Ser Val
20 25 30
His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Val Tyr
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Asp Asp Ser Asn Arg Pro Ser Gly Ile Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Asn Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Thr Ile Ser Arg Val Glu Ala Gly
65 70 75 80
Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Val Trp Asp Ser Ser Ser Glu Tyr
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Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
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<210> 47
<211> 107
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> fragment of CD28
<400> 47
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1 5 10 15
Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu
20 25 30
Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly
35 40 45
Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe
50 55 60
Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn
65 70 75 80
Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr
85 90 95
Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser
100 105
<210> 48
<211> 112
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> fragment of CD3-zeta
<400> 48
Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly
1 5 10 15
Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr
20 25 30
Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys
35 40 45
Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys
50 55 60
Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg
65 70 75 80
Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala
85 90 95
Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg
100 105 110
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<213> Homo sapiens
<220>
<223> Signal peptide
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1 5 10 15
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20
<210> 50
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
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<400> 50
Tyr Pro Tyr Asp Val Pro Asp Tyr Ala
1 5
<210> 51
<211> 22
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 3x Flag tag
<400> 51
Asp Tyr Lys Asp His Asp Gly Asp Tyr Lys Asp His Asp Ile Asp Tyr
1 5 10 15
Lys Asp Asp Asp Asp Lys
20
<210> 52
<211> 10
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> myc tag
<400> 52
Glu Gln Lys Leu Ile Ser Glu Glu Asp Leu
1 5 10
<210> 53
<211> 9
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> AFP158
<400> 53
Phe Met Asn Lys Phe Ile Tyr Glu Ile
1 5
<210> 54
<211> 281
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> anti-CD19 clone 5 abTCR-6MD gamma
<400> 54
Leu Pro Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ala Pro Gly Lys
1 5 10 15
Thr Ala Arg Ile Thr Cys Gly Gly Asn Asn Ile Gly Ser Lys Ser Val
20 25 30
His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Val Tyr
35 40 45
Asp Asp Ser Asp Arg Pro Ser Gly Ile Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Asn Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Thr Ile Ser Arg Val Glu Ala Gly
65 70 75 80
Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Val Trp Asp Ser Ser Ser Asp Tyr
85 90 95
Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln Pro Lys
100 105 110
Ala Asn Pro Thr Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu Leu Gln
115 120 125
Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr Pro Gly
130 135 140
Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Gly Ser Pro Val Lys Ala Gly
145 150 155 160
Val Glu Thr Thr Lys Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr Ala Ala
165 170 175
Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His Arg Ser
180 185 190
Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys Thr Val
195 200 205
Ala Pro Thr Glu Cys Ser Pro Ile Lys Thr Asp Val Ile Thr Met Asp
210 215 220
Pro Lys Asp Asn Cys Ser Lys Asp Ala Asn Asp Thr Leu Leu Leu Gln
225 230 235 240
Leu Thr Asn Thr Ser Ala Tyr Tyr Met Tyr Leu Leu Leu Leu Leu Lys
245 250 255
Ser Val Val Tyr Phe Ala Ile Ile Thr Cys Cys Leu Leu Arg Arg Thr
260 265 270
Ala Phe Cys Cys Asn Gly Glu Lys Ser
275 280
<210> 55
<211> 301
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> anti-CD19 clone 5-9 abTCR-6MD delta
<400> 55
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile Tyr Pro Gly Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Phe Phe
50 55 60
Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gln Val Trp Gly Trp Gln Gly Gly Met Tyr Pro Arg Ser Asn
100 105 110
Trp Trp Tyr Asn Met Asp Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val
115 120 125
Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser
130 135 140
Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys
145 150 155 160
Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu
165 170 175
Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu
180 185 190
Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr
195 200 205
Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val
210 215 220
Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Glu Val Lys Thr Asp Ser Thr
225 230 235 240
Asp His Val Lys Pro Lys Glu Thr Glu Asn Thr Lys Gln Pro Ser Lys
245 250 255
Ser Cys His Lys Pro Lys Ala Ile Val His Thr Glu Lys Val Asn Met
260 265 270
Met Ser Leu Thr Val Leu Gly Leu Arg Met Leu Phe Ala Lys Thr Val
275 280 285
Ala Val Asn Phe Leu Leu Thr Ala Lys Leu Phe Phe Leu
290 295 300
<210> 56
<211> 301
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> anti-CD19 clone 5-13 abTCR-6MD delta
<400> 56
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
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Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
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Gly Ile Ile Tyr Pro Gly Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
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Trp Trp Tyr Asn Leu Asp Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val
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Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser
130 135 140
Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys
145 150 155 160
Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu
165 170 175
Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu
180 185 190
Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr
195 200 205
Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val
210 215 220
Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Glu Val Lys Thr Asp Ser Thr
225 230 235 240
Asp His Val Lys Pro Lys Glu Thr Glu Asn Thr Lys Gln Pro Ser Lys
245 250 255
Ser Cys His Lys Pro Lys Ala Ile Val His Thr Glu Lys Val Asn Met
260 265 270
Met Ser Leu Thr Val Leu Gly Leu Arg Met Leu Phe Ala Lys Thr Val
275 280 285
Ala Val Asn Phe Leu Leu Thr Ala Lys Leu Phe Phe Leu
290 295 300
<210> 57
<211> 108
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IgVL domain of anti-CD19 antibody clone 5
<400> 57
Leu Pro Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ala Pro Gly Lys
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His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Val Tyr
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Asp Asp Ser Asp Arg Pro Ser Gly Ile Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser
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Asn Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Thr Ile Ser Arg Val Glu Ala Gly
65 70 75 80
Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Val Trp Asp Ser Ser Ser Asp Tyr
85 90 95
Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105
<210> 58
<211> 130
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IgVH domain of anti-CD19 antibody clone 5-9
<400> 58
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile Tyr Pro Gly Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Phe Phe
50 55 60
Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gln Val Trp Gly Trp Gln Gly Gly Met Tyr Pro Arg Ser Asn
100 105 110
Trp Trp Tyr Asn Met Asp Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val
115 120 125
Ser Ser
130
<210> 59
<211> 130
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IgVH domain of anti-CD19 antibody clone 5-13
<400> 59
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Ser Tyr
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Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
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65 70 75 80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gln Val Trp Gly Trp Gln Gly Gly Met Tyr Pro Arg Ser Asn
100 105 110
Trp Trp Tyr Asn Leu Asp Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val
115 120 125
Ser Ser
130
<210> 60
<211> 101
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> IgG2-0C CH1
<400> 60
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Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Thr Val Glu Arg Lys
100
<210> 61
<211> 102
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> IgG2-1C CH1
<400> 61
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
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65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Thr Val Glu Arg Lys Cys
100
<210> 62
<211> 103
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> IgG2-2C CH1
<400> 62
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys
100
<210> 63
<211> 103
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> IgG3 CH1
<400> 63
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Arg Val Glu Leu Lys Thr Pro
100
<210> 64
<211> 103
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> IgG4 CH1
<400> 64
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly
100
<210> 65
<211> 121
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> IgA1 CH1
<400> 65
Ala Ser Pro Thr Ser Pro Lys Val Phe Pro Leu Ser Leu Cys Ser Thr
1 5 10 15
Gln Pro Asp Gly Asn Val Val Ile Ala Cys Leu Val Gln Gly Phe Phe
20 25 30
Pro Gln Glu Pro Leu Ser Val Thr Trp Ser Glu Ser Gly Gln Gly Val
35 40 45
Thr Ala Arg Asn Phe Pro Pro Ser Gln Asp Ala Ser Gly Asp Leu Tyr
50 55 60
Thr Thr Ser Ser Gln Leu Thr Leu Pro Ala Thr Gln Cys Leu Ala Gly
65 70 75 80
Lys Ser Val Thr Cys His Val Lys His Tyr Thr Asn Pro Ser Gln Asp
85 90 95
Val Thr Val Pro Cys Pro Val Pro Ser Thr Pro Pro Thr Pro Ser Pro
100 105 110
Ser Thr Pro Pro Thr Pro Ser Pro Ser
115 120
<210> 66
<211> 108
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> IgA2 CH1
<400> 66
Ala Ser Pro Thr Ser Pro Lys Val Phe Pro Leu Ser Leu Asp Ser Thr
1 5 10 15
Pro Gln Asp Gly Asn Val Val Val Ala Cys Leu Val Gln Gly Phe Phe
20 25 30
Pro Gln Glu Pro Leu Ser Val Thr Trp Ser Glu Ser Gly Gln Asn Val
35 40 45
Thr Ala Arg Asn Phe Pro Pro Ser Gln Asp Ala Ser Gly Asp Leu Tyr
50 55 60
Thr Thr Ser Ser Gln Leu Thr Leu Pro Ala Thr Gln Cys Pro Asp Gly
65 70 75 80
Lys Ser Val Thr Cys His Val Lys His Tyr Thr Asn Pro Ser Gln Asp
85 90 95
Val Thr Val Pro Cys Pro Val Pro Pro Pro Pro Pro
100 105
<210> 67
<211> 159
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> IgD CH1
<400> 67
Ala Pro Thr Lys Ala Pro Asp Val Phe Pro Ile Ile Ser Gly Cys Arg
1 5 10 15
His Pro Lys Asp Asn Ser Pro Val Val Leu Ala Cys Leu Ile Thr Gly
20 25 30
Tyr His Pro Thr Ser Val Thr Val Thr Trp Tyr Met Gly Thr Gln Ser
35 40 45
Gln Pro Gln Arg Thr Phe Pro Glu Ile Gln Arg Arg Asp Ser Tyr Tyr
50 55 60
Met Thr Ser Ser Gln Leu Ser Thr Pro Leu Gln Gln Trp Arg Gln Gly
65 70 75 80
Glu Tyr Lys Cys Val Val Gln His Thr Ala Ser Lys Ser Lys Lys Glu
85 90 95
Ile Phe Arg Trp Pro Glu Ser Pro Lys Ala Gln Ala Ser Ser Val Pro
100 105 110
Thr Ala Gln Pro Gln Ala Glu Gly Ser Leu Ala Lys Ala Thr Thr Ala
115 120 125
Pro Ala Thr Thr Arg Asn Thr Gly Arg Gly Gly Glu Glu Lys Lys Lys
130 135 140
Glu Lys Glu Lys Glu Glu Gln Glu Glu Arg Glu Thr Lys Thr Pro
145 150 155
<210> 68
<211> 103
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> IgE CH1
<400> 68
Ala Ser Thr Gln Ser Pro Ser Val Phe Pro Leu Thr Arg Cys Cys Lys
1 5 10 15
Asn Ile Pro Ser Asn Ala Thr Ser Val Thr Leu Gly Cys Leu Ala Thr
20 25 30
Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Met Val Thr Trp Asp Thr Gly Ser Leu
35 40 45
Asn Gly Thr Thr Met Thr Leu Pro Ala Thr Thr Leu Thr Leu Ser Gly
50 55 60
His Tyr Ala Thr Ile Ser Leu Leu Thr Val Ser Gly Ala Trp Ala Lys
65 70 75 80
Gln Met Phe Thr Cys Arg Val Ala His Thr Pro Ser Ser Thr Asp Trp
85 90 95
Val Asp Asn Lys Thr Phe Ser
100
<210> 69
<211> 104
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> IgM CH1
<400> 69
Gly Ser Ala Ser Ala Pro Thr Leu Phe Pro Leu Val Ser Cys Glu Asn
1 5 10 15
Ser Pro Ser Asp Thr Ser Ser Val Ala Val Gly Cys Leu Ala Gln Asp
20 25 30
Phe Leu Pro Asp Ser Ile Thr Leu Ser Trp Lys Tyr Lys Asn Asn Ser
35 40 45
Asp Ile Ser Ser Thr Arg Gly Phe Pro Ser Val Leu Arg Gly Gly Lys
50 55 60
Tyr Ala Ala Thr Ser Gln Val Leu Leu Pro Ser Lys Asp Val Met Gln
65 70 75 80
Gly Thr Asp Glu His Val Val Cys Lys Val Gln His Pro Asn Gly Asn
85 90 95
Lys Glu Lys Asn Val Pro Leu Pro
100
<210> 70
<211> 41
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> CD28 co-stimulatory fragment
<400> 70
Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr
1 5 10 15
Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro
20 25 30
Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser
35 40
<210> 71
<211> 42
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> 4-1BB co-stimulatory fragment
<400> 71
Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met
1 5 10 15
Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe
20 25 30
Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu
35 40
<210> 72
<211> 117
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IgVH domain of anti-NY-ESO-1/HLA-A*02:01
antibody clone 35
<400> 72
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Asp Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ser Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Arg Ile Ile Pro Ile Leu Gly Ile Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Tyr
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Leu Ser Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ser Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Asn Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Trp Ser Tyr Ser Ile Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 73
<211> 111
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IgVL domain of anti-NY-ESO-1/HLA-A*02:01
antibody clone 35
<400> 73
Gln Ser Val Val Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Ala Ala Pro Gly Gln
1 5 10 15
Lys Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Asn Asn
20 25 30
Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Asp Asn Asn Lys Arg Pro Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Thr Leu Gly Ile Thr Gly Leu Gln
65 70 75 80
Thr Gly Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gly Thr Trp Asp Ser Ser Leu
85 90 95
Ser Ala Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
100 105 110
<210> 74
<211> 21
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> scFv linker
<400> 74
Ser Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Glu Met Ala
20
<210> 75
<211> 284
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> anti-CD19-cTCR delta
<400> 75
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile Tyr Pro Gly Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gln Val Trp Gly Trp Gln Gly Gly Met Tyr Pro Arg Ser Asn
100 105 110
Trp Trp Tyr Asn Leu Asp Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val
115 120 125
Ser Ser Arg Ser Gln Pro His Thr Lys Pro Ser Val Phe Val Met Lys
130 135 140
Asn Gly Thr Asn Val Ala Cys Leu Val Lys Glu Phe Tyr Pro Lys Asp
145 150 155 160
Ile Arg Ile Asn Leu Val Ser Ser Lys Lys Ile Thr Glu Phe Asp Pro
165 170 175
Ala Ile Val Ile Ser Pro Ser Gly Lys Tyr Asn Ala Val Lys Leu Gly
180 185 190
Lys Tyr Glu Asp Ser Asn Ser Val Thr Cys Ser Val Gln His Asp Asn
195 200 205
Lys Thr Val His Ser Thr Asp Phe Glu Val Lys Thr Asp Ser Thr Asp
210 215 220
His Val Lys Pro Lys Glu Thr Glu Asn Thr Lys Gln Pro Ser Lys Ser
225 230 235 240
Cys His Lys Pro Lys Ala Ile Val His Thr Glu Lys Val Asn Met Met
245 250 255
Ser Leu Thr Val Leu Gly Leu Arg Met Leu Phe Ala Lys Thr Val Ala
260 265 270
Val Asn Phe Leu Leu Thr Ala Lys Leu Phe Phe Leu
275 280
<210> 76
<211> 282
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> anti-CD19-cTCR gamma
<400> 76
Leu Pro Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ala Pro Gly Lys
1 5 10 15
Thr Ala Arg Ile Thr Cys Gly Gly Asn Asn Ile Gly Ser Lys Ser Val
20 25 30
His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Val Tyr
35 40 45
Asp Asp Ser Asp Arg Pro Ser Gly Ile Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Asn Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Thr Ile Ser Arg Val Glu Ala Gly
65 70 75 80
Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Val Trp Asp Ser Ser Ser Asp Tyr
85 90 95
Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Asp Lys Gln
100 105 110
Leu Asp Ala Asp Val Ser Pro Lys Pro Thr Ile Phe Leu Pro Ser Ile
115 120 125
Ala Glu Thr Lys Leu Gln Lys Ala Gly Thr Tyr Leu Cys Leu Leu Glu
130 135 140
Lys Phe Phe Pro Asp Val Ile Lys Ile His Trp Gln Glu Lys Lys Ser
145 150 155 160
Asn Thr Ile Leu Gly Ser Gln Glu Gly Asn Thr Met Lys Thr Asn Asp
165 170 175
Thr Tyr Met Lys Phe Ser Trp Leu Thr Val Pro Glu Lys Ser Leu Asp
180 185 190
Lys Glu His Arg Cys Ile Val Arg His Glu Asn Asn Lys Asn Gly Val
195 200 205
Asp Gln Glu Ile Ile Phe Pro Pro Ile Lys Thr Asp Val Ile Thr Met
210 215 220
Asp Pro Lys Asp Asn Cys Ser Lys Asp Ala Asn Asp Thr Leu Leu Leu
225 230 235 240
Gln Leu Thr Asn Thr Ser Ala Tyr Tyr Met Tyr Leu Leu Leu Leu Leu
245 250 255
Lys Ser Val Val Tyr Phe Ala Ile Ile Thr Cys Cys Leu Leu Arg Arg
260 265 270
Thr Ala Phe Cys Cys Asn Gly Glu Lys Ser
275 280
<210> 77
<211> 142
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRalpha constant domain
<400> 77
Pro Asn Ile Gln Asn Pro Asp Pro Ala Val Tyr Gln Leu Arg Asp Ser
1 5 10 15
Lys Ser Ser Asp Lys Ser Val Cys Leu Phe Thr Asp Phe Asp Ser Gln
20 25 30
Thr Asn Val Ser Gln Ser Lys Asp Ser Asp Val Tyr Ile Thr Asp Lys
35 40 45
Thr Val Leu Asp Met Arg Ser Met Asp Phe Lys Ser Asn Ser Ala Val
50 55 60
Ala Trp Ser Asn Lys Ser Asp Phe Ala Cys Ala Asn Ala Phe Asn Asn
65 70 75 80
Ser Ile Ile Pro Glu Asp Thr Phe Phe Pro Ser Pro Glu Ser Ser Cys
85 90 95
Asp Val Lys Leu Val Glu Lys Ser Phe Glu Thr Asp Thr Asn Leu Asn
100 105 110
Phe Gln Asn Leu Ser Val Ile Gly Phe Arg Ile Leu Leu Leu Lys Val
115 120 125
Ala Gly Phe Asn Leu Leu Met Thr Leu Arg Leu Trp Ser Ser
130 135 140
<210> 78
<211> 177
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRbeta constant domain
<400> 78
Glu Asp Leu Asn Lys Val Phe Pro Pro Glu Val Ala Val Phe Glu Pro
1 5 10 15
Ser Glu Ala Glu Ile Ser His Thr Gln Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu
20 25 30
Ala Thr Gly Phe Phe Pro Asp His Val Glu Leu Ser Trp Trp Val Asn
35 40 45
Gly Lys Glu Val His Ser Gly Val Ser Thr Asp Pro Gln Pro Leu Lys
50 55 60
Glu Gln Pro Ala Leu Asn Asp Ser Arg Tyr Cys Leu Ser Ser Arg Leu
65 70 75 80
Arg Val Ser Ala Thr Phe Trp Gln Asn Pro Arg Asn His Phe Arg Cys
85 90 95
Gln Val Gln Phe Tyr Gly Leu Ser Glu Asn Asp Glu Trp Thr Gln Asp
100 105 110
Arg Ala Lys Pro Val Thr Gln Ile Val Ser Ala Glu Ala Trp Gly Arg
115 120 125
Ala Asp Cys Gly Phe Thr Ser Val Ser Tyr Gln Gln Gly Val Leu Ser
130 135 140
Ala Thr Ile Leu Tyr Glu Ile Leu Leu Gly Lys Ala Thr Leu Tyr Ala
145 150 155 160
Val Leu Val Ser Ala Leu Val Leu Met Ala Met Val Lys Arg Lys Asp
165 170 175
Phe
<210> 79
<211> 153
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRdelta constant domain
<400> 79
Ser Gln Pro His Thr Lys Pro Ser Val Phe Val Met Lys Asn Gly Thr
1 5 10 15
Asn Val Ala Cys Leu Val Lys Glu Phe Tyr Pro Lys Asp Ile Arg Ile
20 25 30
Asn Leu Val Ser Ser Lys Lys Ile Thr Glu Phe Asp Pro Ala Ile Val
35 40 45
Ile Ser Pro Ser Gly Lys Tyr Asn Ala Val Lys Leu Gly Lys Tyr Glu
50 55 60
Asp Ser Asn Ser Val Thr Cys Ser Val Gln His Asp Asn Lys Thr Val
65 70 75 80
His Ser Thr Asp Phe Glu Val Lys Thr Asp Ser Thr Asp His Val Lys
85 90 95
Pro Lys Glu Thr Glu Asn Thr Lys Gln Pro Ser Lys Ser Cys His Lys
100 105 110
Pro Lys Ala Ile Val His Thr Glu Lys Val Asn Met Met Ser Leu Thr
115 120 125
Val Leu Gly Leu Arg Met Leu Phe Ala Lys Thr Val Ala Val Asn Phe
130 135 140
Leu Leu Thr Ala Lys Leu Phe Phe Leu
145 150
<210> 80
<211> 173
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRgamma constant domain
<400> 80
Asp Lys Gln Leu Asp Ala Asp Val Ser Pro Lys Pro Thr Ile Phe Leu
1 5 10 15
Pro Ser Ile Ala Glu Thr Lys Leu Gln Lys Ala Gly Thr Tyr Leu Cys
20 25 30
Leu Leu Glu Lys Phe Phe Pro Asp Val Ile Lys Ile His Trp Gln Glu
35 40 45
Lys Lys Ser Asn Thr Ile Leu Gly Ser Gln Glu Gly Asn Thr Met Lys
50 55 60
Thr Asn Asp Thr Tyr Met Lys Phe Ser Trp Leu Thr Val Pro Glu Lys
65 70 75 80
Ser Leu Asp Lys Glu His Arg Cys Ile Val Arg His Glu Asn Asn Lys
85 90 95
Asn Gly Val Asp Gln Glu Ile Ile Phe Pro Pro Ile Lys Thr Asp Val
100 105 110
Ile Thr Met Asp Pro Lys Asp Asn Cys Ser Lys Asp Ala Asn Asp Thr
115 120 125
Leu Leu Leu Gln Leu Thr Asn Thr Ser Ala Tyr Tyr Met Tyr Leu Leu
130 135 140
Leu Leu Leu Lys Ser Val Val Tyr Phe Ala Ile Ile Thr Cys Cys Leu
145 150 155 160
Leu Arg Arg Thr Ala Phe Cys Cys Asn Gly Glu Lys Ser
165 170
<210> 81
<211> 271
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> anti-AFP158/HLA-A*02:01 abTCR-7 delta
<400> 81
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Thr Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Pro Asn Tyr
20 25 30
Trp Ile Thr Trp Val Arg Gln Met Ser Gly Gly Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Gly Asp Ser Tyr Thr Thr Tyr Asn Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly His Val Thr Ile Ser Ile Asp Lys Ser Thr Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu His Trp Asn Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Tyr Val Ser Leu Val Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser Arg Ser Gln Pro His Thr Lys Pro Ser Val Phe
115 120 125
Val Met Lys Asn Gly Thr Asn Val Ala Cys Leu Val Lys Glu Phe Tyr
130 135 140
Pro Lys Asp Ile Arg Ile Asn Leu Val Ser Ser Lys Lys Ile Thr Glu
145 150 155 160
Phe Asp Pro Ala Ile Val Ile Ser Pro Ser Gly Lys Tyr Asn Ala Val
165 170 175
Lys Leu Gly Lys Tyr Glu Asp Ser Asn Ser Val Thr Cys Ser Val Gln
180 185 190
His Asp Asn Lys Thr Val His Ser Thr Asp Phe Glu Val Lys Thr Asp
195 200 205
Ser Thr Asp His Val Lys Pro Lys Glu Thr Glu Asn Thr Lys Gln Pro
210 215 220
Ser Lys Ser Cys His Lys Pro Lys Ala Ile Val His Thr Glu Lys Val
225 230 235 240
Asn Met Met Ser Leu Thr Val Leu Gly Leu Arg Met Leu Phe Ala Lys
245 250 255
Thr Val Ala Val Asn Phe Leu Leu Thr Ala Lys Leu Phe Phe Leu
260 265 270
<210> 82
<211> 283
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> anti-AFP158/HLA-A*02:01 abTCR-7 gamma
<400> 82
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr
20 25 30
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Met Ile Tyr Asp Val Asn Asn Arg Pro Ser Glu Val Ser Asn Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Thr Gly
85 90 95
Ser Arg Ala Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Asp Lys
100 105 110
Gln Leu Asp Ala Asp Val Ser Pro Lys Pro Thr Ile Phe Leu Pro Ser
115 120 125
Ile Ala Glu Thr Lys Leu Gln Lys Ala Gly Thr Tyr Leu Cys Leu Leu
130 135 140
Glu Lys Phe Phe Pro Asp Val Ile Lys Ile His Trp Gln Glu Lys Lys
145 150 155 160
Ser Asn Thr Ile Leu Gly Ser Gln Glu Gly Asn Thr Met Lys Thr Asn
165 170 175
Asp Thr Tyr Met Lys Phe Ser Trp Leu Thr Val Pro Glu Lys Ser Leu
180 185 190
Asp Lys Glu His Arg Cys Ile Val Arg His Glu Asn Asn Lys Asn Gly
195 200 205
Val Asp Gln Glu Ile Ile Phe Pro Pro Ile Lys Thr Asp Val Ile Thr
210 215 220
Met Asp Pro Lys Asp Asn Cys Ser Lys Asp Ala Asn Asp Thr Leu Leu
225 230 235 240
Leu Gln Leu Thr Asn Thr Ser Ala Tyr Tyr Met Tyr Leu Leu Leu Leu
245 250 255
Leu Lys Ser Val Val Tyr Phe Ala Ile Ile Thr Cys Cys Leu Leu Arg
260 265 270
Arg Thr Ala Phe Cys Cys Asn Gly Glu Lys Ser
275 280
Ｔ細胞を投与されたマウスについて観察されたものよりも高いレベルのキメラ受容体発現
Ｔ細胞をそれらの血液中に有し（図４２）、ａｂＴＣＲ Ｔ細胞がこのモデルにおいてそ
れらの対応するＣＡＲ Ｔ細胞よりも高いレベルの生存率および／または増殖を有するこ
とを示している。図４３および４４に示すとおり、ＣＡＲ Ｔ細胞またはａｂＴＣＲ Ｔ
細胞のいずれかで処置したマウスが、ビヒクルおよび偽処置対照動物と比較して処置後１
３日目に末梢血および骨髄の両方において腫瘍細胞の低減を示した（ＦＩＴＣ染色によっ
て示された）一方で、末梢血および骨髄の両方における腫瘍細胞の低減はａｂＴＣＲ Ｔ
細胞を用いて処置された動物に対してより大きかった。図４５および４６に示すとおり、
末梢血および骨髄の両方由来のＴ細胞の表面上のＰＤ－１、Ｔ細胞消耗マーカーの発現レ
ベルは、ＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞の両方について、ａｂＴＣＲ Ｔ細胞を用いて処
置したマウスにおいての方が、ＣＡＲ Ｔ細胞を用いて処置したものよりも低く、偽処置
マウスにおいて観察されたレベルに匹敵した。これらの結果は、ａｂＴＣＲ発現Ｔ細胞が
ＣＡＲ発現Ｔ細胞よりも消耗しにくい可能性があることを示唆している。
【表8-1】
【表8-2】
【表8-3】
【表8-4】
【表8-5】
【表8-6】
【表8-7】
【表8-8】
【表8-9】
【表8-10】
SEQUENCE LISTING
<110> Eureka Therapeutics, Inc.
<120> ANTIBODY/T-CELL RECEPTOR CHIMERIC
CONSTRUCTS AND USES THEREOF
<130> 750042000340
<140> Not Yet Assigned
<141> Concurrently Herewith
<150> US 62/245,944
<151> 2015-10-23
<150> US 62/304,918
<151> 2016-03-07
<150> US 62/345,649
<151> 2016-06-03
<150> US 62/369,694
<151> 2016-08-01
<160> 82
<170> FastSEQ for Windows Version 4.0
<210> 1
<211> 20
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRalpha transmembrane domain
<400> 1
Ile Leu Leu Leu Lys Val Ala Gly Phe Asn Leu Leu Met Thr Leu Arg
1 5 10 15
Leu Trp Ser Ser
20
<210> 2
<211> 23
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRbeta transmembrane domain
<400> 2
Thr Ile Leu Tyr Glu Ile Leu Leu Gly Lys Ala Thr Leu Tyr Ala Val
1 5 10 15
Leu Val Ser Ala Leu Val Leu
20
<210> 3
<211> 20
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRdelta transmembrane domain
<400> 3
Met Leu Phe Ala Lys Thr Val Ala Val Asn Phe Leu Leu Thr Ala Lys
1 5 10 15
Leu Phe Phe Leu
20
<210> 4
<211> 23
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRgamma transmembrane domain
<400> 4
Tyr Tyr Met Tyr Leu Leu Leu Leu Leu Lys Ser Val Val Tyr Phe Ala
1 5 10 15
Ile Ile Thr Cys Cys Leu Leu
20
<210> 5
<211> 30
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRalpha connecting peptide
<400> 5
Glu Ser Ser Cys Asp Val Lys Leu Val Glu Lys Ser Phe Glu Thr Asp
1 5 10 15
Thr Asn Leu Asn Phe Gln Asn Leu Ser Val Ile Gly Phe Arg
20 25 30
<210> 6
<211> 17
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRbeta connecting peptide
<400> 6
Ala Asp Cys Gly Phe Thr Ser Val Ser Tyr Gln Gln Gly Val Leu Ser
1 5 10 15
Ala
<210> 7
<211> 41
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRdelta connecting peptide
<400> 7
Asp His Val Lys Pro Lys Glu Thr Glu Asn Thr Lys Gln Pro Ser Lys
1 5 10 15
Ser Cys His Lys Pro Lys Ala Ile Val His Thr Glu Lys Val Asn Met
20 25 30
Met Ser Leu Thr Val Leu Gly Leu Arg
35 40
<210> 8
<211> 24
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRgamma connecting peptide
<400> 8
Met Asp Pro Lys Asp Asn Cys Ser Lys Asp Ala Asn Asp Thr Leu Leu
1 5 10 15
Leu Gln Leu Thr Asn Thr Ser Ala
20
<210> 9
<211> 40
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRalpha connecting peptide MD
<400> 9
Ile Pro Glu Asp Thr Phe Phe Pro Ser Pro Glu Ser Ser Cys Asp Val
1 5 10 15
Lys Leu Val Glu Lys Ser Phe Glu Thr Asp Thr Asn Leu Asn Phe Gln
20 25 30
Asn Leu Ser Val Ile Gly Phe Arg
35 40
<210> 10
<211> 19
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRbeta connecting peptide MD
<400> 10
Gly Arg Ala Asp Cys Gly Phe Thr Ser Val Ser Tyr Gln Gln Gly Val
1 5 10 15
Leu Ser Ala
<210> 11
<211> 48
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRdelta connecting peptide MD
<400> 11
Glu Val Lys Thr Asp Ser Thr Asp His Val Lys Pro Lys Glu Thr Glu
1 5 10 15
Asn Thr Lys Gln Pro Ser Lys Ser Cys His Lys Pro Lys Ala Ile Val
20 25 30
His Thr Glu Lys Val Asn Met Met Ser Leu Thr Val Leu Gly Leu Arg
35 40 45
<210> 12
<211> 32
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRgamma connecting peptide MD
<400> 12
Pro Ile Lys Thr Asp Val Ile Thr Met Asp Pro Lys Asp Asn Cys Ser
1 5 10 15
Lys Asp Ala Asn Asp Thr Leu Leu Leu Gln Leu Thr Asn Thr Ser Ala
20 25 30
<210> 13
<211> 9
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRbeta intracellular domain
<400> 13
Met Ala Met Val Lys Arg Lys Asp Phe
1 5
<210> 14
<211> 12
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRgamma intracellular domain
<400> 14
Arg Arg Thr Ala Phe Cys Cys Asn Gly Glu Lys Ser
1 5 10
<210> 15
<211> 50
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRD alpha
<400> 15
Glu Ser Ser Cys Asp Val Lys Leu Val Glu Lys Ser Phe Glu Thr Asp
1 5 10 15
Thr Asn Leu Asn Phe Gln Asn Leu Ser Val Ile Gly Phe Arg Ile Leu
20 25 30
Leu Leu Lys Val Ala Gly Phe Asn Leu Leu Met Thr Leu Arg Leu Trp
35 40 45
Ser Ser
50
<210> 16
<211> 49
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRD beta
<400> 16
Ala Asp Cys Gly Phe Thr Ser Val Ser Tyr Gln Gln Gly Val Leu Ser
1 5 10 15
Ala Thr Ile Leu Tyr Glu Ile Leu Leu Gly Lys Ala Thr Leu Tyr Ala
20 25 30
Val Leu Val Ser Ala Leu Val Leu Met Ala Met Val Lys Arg Lys Asp
35 40 45
Phe
<210> 17
<211> 60
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRD alpha MD
<400> 17
Ile Pro Glu Asp Thr Phe Phe Pro Ser Pro Glu Ser Ser Cys Asp Val
1 5 10 15
Lys Leu Val Glu Lys Ser Phe Glu Thr Asp Thr Asn Leu Asn Phe Gln
20 25 30
Asn Leu Ser Val Ile Gly Phe Arg Ile Leu Leu Leu Lys Val Ala Gly
35 40 45
Phe Asn Leu Leu Met Thr Leu Arg Leu Trp Ser Ser
50 55 60
<210> 18
<211> 51
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRD beta MD
<400> 18
Gly Arg Ala Asp Cys Gly Phe Thr Ser Val Ser Tyr Gln Gln Gly Val
1 5 10 15
Leu Ser Ala Thr Ile Leu Tyr Glu Ile Leu Leu Gly Lys Ala Thr Leu
20 25 30
Tyr Ala Val Leu Val Ser Ala Leu Val Leu Met Ala Met Val Lys Arg
35 40 45
Lys Asp Phe
50
<210> 19
<211> 61
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRD delta
<400> 19
Asp His Val Lys Pro Lys Glu Thr Glu Asn Thr Lys Gln Pro Ser Lys
1 5 10 15
Ser Cys His Lys Pro Lys Ala Ile Val His Thr Glu Lys Val Asn Met
20 25 30
Met Ser Leu Thr Val Leu Gly Leu Arg Met Leu Phe Ala Lys Thr Val
35 40 45
Ala Val Asn Phe Leu Leu Thr Ala Lys Leu Phe Phe Leu
50 55 60
<210> 20
<211> 59
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRD gamma
<400> 20
Met Asp Pro Lys Asp Asn Cys Ser Lys Asp Ala Asn Asp Thr Leu Leu
1 5 10 15
Leu Gln Leu Thr Asn Thr Ser Ala Tyr Tyr Met Tyr Leu Leu Leu Leu
20 25 30
Leu Lys Ser Val Val Tyr Phe Ala Ile Ile Thr Cys Cys Leu Leu Arg
35 40 45
Arg Thr Ala Phe Cys Cys Asn Gly Glu Lys Ser
50 55
<210> 21
<211> 68
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRD delta MD
<400> 21
Glu Val Lys Thr Asp Ser Thr Asp His Val Lys Pro Lys Glu Thr Glu
1 5 10 15
Asn Thr Lys Gln Pro Ser Lys Ser Cys His Lys Pro Lys Ala Ile Val
20 25 30
His Thr Glu Lys Val Asn Met Met Ser Leu Thr Val Leu Gly Leu Arg
35 40 45
Met Leu Phe Ala Lys Thr Val Ala Val Asn Phe Leu Leu Thr Ala Lys
50 55 60
Leu Phe Phe Leu
65
<210> 22
<211> 67
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRD gamma MD
<400> 22
Pro Ile Lys Thr Asp Val Ile Thr Met Asp Pro Lys Asp Asn Cys Ser
1 5 10 15
Lys Asp Ala Asn Asp Thr Leu Leu Leu Gln Leu Thr Asn Thr Ser Ala
20 25 30
Tyr Tyr Met Tyr Leu Leu Leu Leu Leu Lys Ser Val Val Tyr Phe Ala
35 40 45
Ile Ile Thr Cys Cys Leu Leu Arg Arg Thr Ala Phe Cys Cys Asn Gly
50 55 60
Glu Lys Ser
65
<210> 23
<211> 270
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> anti-AFP158/HLA-A*02:01-abTCR-3 alpha
<400> 23
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1 5 10 15
Ser Leu Thr Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Pro Asn Tyr
20 25 30
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35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Gly Asp Ser Tyr Thr Thr Tyr Asn Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly His Val Thr Ile Ser Ile Asp Lys Ser Thr Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu His Trp Asn Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Tyr Val Ser Leu Val Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu
115 120 125
Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys
130 135 140
Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser
145 150 155 160
Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser
165 170 175
Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser
180 185 190
Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn
195 200 205
Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Glu Ser Ser Cys
210 215 220
Asp Val Lys Leu Val Glu Lys Ser Phe Glu Thr Asp Thr Asn Leu Asn
225 230 235 240
Phe Gln Asn Leu Ser Val Ile Gly Phe Arg Ile Leu Leu Leu Lys Val
245 250 255
Ala Gly Phe Asn Leu Leu Met Thr Leu Arg Leu Trp Ser Ser
260 265 270
<210> 24
<211> 265
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> anti-AFP158/HLA-A*02:01-abTCR-3 beta
<400> 24
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr
20 25 30
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Met Ile Tyr Asp Val Asn Asn Arg Pro Ser Glu Val Ser Asn Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Thr Gly
85 90 95
Ser Arg Ala Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln
100 105 110
Pro Lys Ala Asn Pro Thr Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu
115 120 125
Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr
130 135 140
Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Gly Ser Pro Val Lys
145 150 155 160
Ala Gly Val Glu Thr Thr Lys Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr
165 170 175
Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His
180 185 190
Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys
195 200 205
Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser Ala Asp Cys Gly Phe Thr Ser Val
210 215 220
Ser Tyr Gln Gln Gly Val Leu Ser Ala Thr Ile Leu Tyr Glu Ile Leu
225 230 235 240
Leu Gly Lys Ala Thr Leu Tyr Ala Val Leu Val Ser Ala Leu Val Leu
245 250 255
Met Ala Met Val Lys Arg Lys Asp Phe
260 265
<210> 25
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> anti-AFP158/HLA-A*02:01-abTCR-4 alpha
<400> 25
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr
20 25 30
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Met Ile Tyr Asp Val Asn Asn Arg Pro Ser Glu Val Ser Asn Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Thr Gly
85 90 95
Ser Arg Ala Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln
100 105 110
Pro Lys Ala Asn Pro Thr Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu
115 120 125
Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr
130 135 140
Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Gly Ser Pro Val Lys
145 150 155 160
Ala Gly Val Glu Thr Thr Lys Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr
165 170 175
Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His
180 185 190
Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys
195 200 205
Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser Glu Ser Ser Cys Asp Val Lys Leu
210 215 220
Val Glu Lys Ser Phe Glu Thr Asp Thr Asn Leu Asn Phe Gln Asn Leu
225 230 235 240
Ser Val Ile Gly Phe Arg Ile Leu Leu Leu Lys Val Ala Gly Phe Asn
245 250 255
Leu Leu Met Thr Leu Arg Leu Trp Ser Ser
260 265
<210> 26
<211> 269
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> anti-AFP158/HLA-A*02:01-abTCR-4 beta
<400> 26
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Thr Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Pro Asn Tyr
20 25 30
Trp Ile Thr Trp Val Arg Gln Met Ser Gly Gly Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Gly Asp Ser Tyr Thr Thr Tyr Asn Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly His Val Thr Ile Ser Ile Asp Lys Ser Thr Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu His Trp Asn Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Tyr Val Ser Leu Val Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu
115 120 125
Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys
130 135 140
Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser
145 150 155 160
Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser
165 170 175
Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser
180 185 190
Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn
195 200 205
Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Ala Asp Cys Gly
210 215 220
Phe Thr Ser Val Ser Tyr Gln Gln Gly Val Leu Ser Ala Thr Ile Leu
225 230 235 240
Tyr Glu Ile Leu Leu Gly Lys Ala Thr Leu Tyr Ala Val Leu Val Ser
245 250 255
Ala Leu Val Leu Met Ala Met Val Lys Arg Lys Asp Phe
260 265
<210> 27
<211> 276
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> anti-AFP158/HLA-A*02:01-abTCR-4MD alpha
<400> 27
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr
20 25 30
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Met Ile Tyr Asp Val Asn Asn Arg Pro Ser Glu Val Ser Asn Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Thr Gly
85 90 95
Ser Arg Ala Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln
100 105 110
Pro Lys Ala Asn Pro Thr Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu
115 120 125
Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr
130 135 140
Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Gly Ser Pro Val Lys
145 150 155 160
Ala Gly Val Glu Thr Thr Lys Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr
165 170 175
Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His
180 185 190
Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys
195 200 205
Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser Ile Pro Glu Asp Thr Phe Phe Pro
210 215 220
Ser Pro Glu Ser Ser Cys Asp Val Lys Leu Val Glu Lys Ser Phe Glu
225 230 235 240
Thr Asp Thr Asn Leu Asn Phe Gln Asn Leu Ser Val Ile Gly Phe Arg
245 250 255
Ile Leu Leu Leu Lys Val Ala Gly Phe Asn Leu Leu Met Thr Leu Arg
260 265 270
Leu Trp Ser Ser
275
<210> 28
<211> 271
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> anti-AFP158/HLA-A*02:01-abTCR-4MD beta
<400> 28
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Thr Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Pro Asn Tyr
20 25 30
Trp Ile Thr Trp Val Arg Gln Met Ser Gly Gly Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Gly Asp Ser Tyr Thr Thr Tyr Asn Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly His Val Thr Ile Ser Ile Asp Lys Ser Thr Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu His Trp Asn Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Tyr Val Ser Leu Val Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu
115 120 125
Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys
130 135 140
Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser
145 150 155 160
Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser
165 170 175
Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser
180 185 190
Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn
195 200 205
Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Gly Arg Ala Asp
210 215 220
Cys Gly Phe Thr Ser Val Ser Tyr Gln Gln Gly Val Leu Ser Ala Thr
225 230 235 240
Ile Leu Tyr Glu Ile Leu Leu Gly Lys Ala Thr Leu Tyr Ala Val Leu
245 250 255
Val Ser Ala Leu Val Leu Met Ala Met Val Lys Arg Lys Asp Phe
260 265 270
<210> 29
<211> 277
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> anti-AFP158/HLA-A*02:01-abTCR-5 delta
<400> 29
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr
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Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Met Ile Tyr Asp Val Asn Asn Arg Pro Ser Glu Val Ser Asn Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Thr Gly
85 90 95
Ser Arg Ala Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln
100 105 110
Pro Lys Ala Asn Pro Thr Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu
115 120 125
Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr
130 135 140
Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Gly Ser Pro Val Lys
145 150 155 160
Ala Gly Val Glu Thr Thr Lys Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr
165 170 175
Ala Ala Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His
180 185 190
Arg Ser Tyr Ser Cys Gln Val Thr His Glu Gly Ser Thr Val Glu Lys
195 200 205
Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser Asp His Val Lys Pro Lys Glu Thr
210 215 220
Glu Asn Thr Lys Gln Pro Ser Lys Ser Cys His Lys Pro Lys Ala Ile
225 230 235 240
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245 250 255
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260 265 270
Lys Leu Phe Phe Leu
275
<210> 30
<211> 279
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> anti-AFP158/HLA-A*02:01-abTCR-5 gamma
<400> 30
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
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Trp Ile Thr Trp Val Arg Gln Met Ser Gly Gly Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Gly Asp Ser Tyr Thr Thr Tyr Asn Pro Ser Phe
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65 70 75 80
Leu His Trp Asn Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
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100 105 110
Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu
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130 135 140
Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser
145 150 155 160
Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser
165 170 175
Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser
180 185 190
Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn
195 200 205
Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Met Asp Pro Lys
210 215 220
Asp Asn Cys Ser Lys Asp Ala Asn Asp Thr Leu Leu Leu Gln Leu Thr
225 230 235 240
Asn Thr Ser Ala Tyr Tyr Met Tyr Leu Leu Leu Leu Leu Lys Ser Val
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260 265 270
Cys Cys Asn Gly Glu Lys Ser
275
<210> 31
<211> 284
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> anti-AFP158/HLA-A*02:01-abTCR-5MD delta
<400> 31
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr
20 25 30
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Met Ile Tyr Asp Val Asn Asn Arg Pro Ser Glu Val Ser Asn Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Thr Gly
85 90 95
Ser Arg Ala Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Gln
100 105 110
Pro Lys Ala Asn Pro Thr Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu
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Leu Gln Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr
130 135 140
Pro Gly Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Gly Ser Pro Val Lys
145 150 155 160
Ala Gly Val Glu Thr Thr Lys Pro Ser Lys Gln Ser Asn Asn Lys Tyr
165 170 175
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180 185 190
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195 200 205
Thr Val Ala Pro Thr Glu Cys Ser Glu Val Lys Thr Asp Ser Thr Asp
210 215 220
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225 230 235 240
Cys His Lys Pro Lys Ala Ile Val His Thr Glu Lys Val Asn Met Met
245 250 255
Ser Leu Thr Val Leu Gly Leu Arg Met Leu Phe Ala Lys Thr Val Ala
260 265 270
Val Asn Phe Leu Leu Thr Ala Lys Leu Phe Phe Leu
275 280
<210> 32
<211> 287
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
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<400> 32
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1 5 10 15
Ser Leu Thr Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Pro Asn Tyr
20 25 30
Trp Ile Thr Trp Val Arg Gln Met Ser Gly Gly Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Gly Asp Ser Tyr Thr Thr Tyr Asn Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly His Val Thr Ile Ser Ile Asp Lys Ser Thr Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu His Trp Asn Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Tyr Val Ser Leu Val Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu
115 120 125
Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys
130 135 140
Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser
145 150 155 160
Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser
165 170 175
Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser
180 185 190
Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn
195 200 205
Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Pro Ile Lys Thr
210 215 220
Asp Val Ile Thr Met Asp Pro Lys Asp Asn Cys Ser Lys Asp Ala Asn
225 230 235 240
Asp Thr Leu Leu Leu Gln Leu Thr Asn Thr Ser Ala Tyr Tyr Met Tyr
245 250 255
Leu Leu Leu Leu Leu Lys Ser Val Val Tyr Phe Ala Ile Ile Thr Cys
260 265 270
Cys Leu Leu Arg Arg Thr Ala Phe Cys Cys Asn Gly Glu Lys Ser
275 280 285
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1 5 10 15
Ser Leu Thr Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Pro Asn Tyr
20 25 30
Trp Ile Thr Trp Val Arg Gln Met Ser Gly Gly Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Gly Asp Ser Tyr Thr Thr Tyr Asn Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly His Val Thr Ile Ser Ile Asp Lys Ser Thr Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu His Trp Asn Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
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100 105 110
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115 120 125
Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys
130 135 140
Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser
145 150 155 160
Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser
165 170 175
Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser
180 185 190
Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn
195 200 205
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210 215 220
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225 230 235 240
Pro Lys Ala Ile Val His Thr Glu Lys Val Asn Met Met Ser Leu Thr
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Leu Leu Thr Ala Lys Leu Phe Phe Leu
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Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
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Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser
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Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr
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Pro Lys Ala Asn Pro Thr Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu
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Leu Gln Leu Thr Asn Thr Ser Ala Tyr Tyr Met Tyr Leu Leu Leu Leu
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Asn Thr Ala Tyr Leu His Trp Asn Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala
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Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala Ile Glu Val Met
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Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg
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<213> Artificial Sequence
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<213> Artificial Sequence
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Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
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<210> 41
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<220>
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Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Ser Tyr
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Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
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Gly Ile Ile Tyr Pro Gly Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe
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Ala Arg Gln Val Trp Gly Trp Gln Gly Gly Met Tyr Pro Arg Ser Asn
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Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys
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Asp His Val Lys Pro Lys Glu Thr Glu Asn Thr Lys Gln Pro Ser Lys
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<213> Artificial Sequence
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Leu Pro Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ala Pro Gly Lys
1 5 10 15
Thr Ala Arg Ile Thr Cys Gly Gly Asn Asn Ile Gly Ser Lys Ser Val
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His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Val Tyr
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Asp Asp Ser Asn Arg Pro Ser Gly Ile Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser
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Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr Pro Gly
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Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Gly Ser Pro Val Lys Ala Gly
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275 280
<210> 44
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<400> 44
Leu Pro Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ala Pro Gly Lys
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His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Val Tyr
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50 55 60
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Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Leu Glu
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Gly Glu Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Thr
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180 185 190
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195 200 205
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245 250 255
Thr Val Ser Ser Ala Ala Ala Ile Glu Val Met Tyr Pro Pro Pro Tyr
260 265 270
Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys
275 280 285
His Leu Cys Pro Ser Pro Leu Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp
290 295 300
Val Leu Val Val Val Gly Gly Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val
305 310 315 320
Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu
325 330 335
Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr
340 345 350
Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr
355 360 365
Arg Ser Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln
370 375 380
Gln Gly Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu
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Glu Tyr Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly
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Gly Lys Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu
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Gln Lys Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly
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Glu Arg Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser
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Pro Arg
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<211> 130
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IgVH domain of anti-CD19 antibody
<400> 45
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
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Ser Ser
130
<210> 46
<211> 108
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<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IgVL domain of anti-CD19 antibody
<400> 46
Leu Pro Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ala Pro Gly Lys
1 5 10 15
Thr Ala Arg Ile Thr Cys Gly Gly Asn Asn Ile Gly Ser Lys Ser Val
20 25 30
His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Val Tyr
35 40 45
Asp Asp Ser Asn Arg Pro Ser Gly Ile Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Asn Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Thr Ile Ser Arg Val Glu Ala Gly
65 70 75 80
Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Val Trp Asp Ser Ser Ser Glu Tyr
85 90 95
Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105
<210> 47
<211> 107
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> fragment of CD28
<400> 47
Ile Glu Val Met Tyr Pro Pro Pro Tyr Leu Asp Asn Glu Lys Ser Asn
1 5 10 15
Gly Thr Ile Ile His Val Lys Gly Lys His Leu Cys Pro Ser Pro Leu
20 25 30
Phe Pro Gly Pro Ser Lys Pro Phe Trp Val Leu Val Val Val Gly Gly
35 40 45
Val Leu Ala Cys Tyr Ser Leu Leu Val Thr Val Ala Phe Ile Ile Phe
50 55 60
Trp Val Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn
65 70 75 80
Met Thr Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr
85 90 95
Ala Pro Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser
100 105
<210> 48
<211> 112
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> fragment of CD3-zeta
<400> 48
Arg Val Lys Phe Ser Arg Ser Ala Asp Ala Pro Ala Tyr Gln Gln Gly
1 5 10 15
Gln Asn Gln Leu Tyr Asn Glu Leu Asn Leu Gly Arg Arg Glu Glu Tyr
20 25 30
Asp Val Leu Asp Lys Arg Arg Gly Arg Asp Pro Glu Met Gly Gly Lys
35 40 45
Pro Arg Arg Lys Asn Pro Gln Glu Gly Leu Tyr Asn Glu Leu Gln Lys
50 55 60
Asp Lys Met Ala Glu Ala Tyr Ser Glu Ile Gly Met Lys Gly Glu Arg
65 70 75 80
Arg Arg Gly Lys Gly His Asp Gly Leu Tyr Gln Gly Leu Ser Thr Ala
85 90 95
Thr Lys Asp Thr Tyr Asp Ala Leu His Met Gln Ala Leu Pro Pro Arg
100 105 110
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<211> 20
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> Signal peptide
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Gly Ser Thr Gly
20
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> HA tag
<400> 50
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1 5
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<211> 22
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> 3x Flag tag
<400> 51
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Lys Asp Asp Asp Asp Lys
20
<210> 52
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> myc tag
<400> 52
Glu Gln Lys Leu Ile Ser Glu Glu Asp Leu
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<211> 9
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> AFP158
<400> 53
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<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> anti-CD19 clone 5 abTCR-6MD gamma
<400> 54
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1 5 10 15
Thr Ala Arg Ile Thr Cys Gly Gly Asn Asn Ile Gly Ser Lys Ser Val
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35 40 45
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50 55 60
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65 70 75 80
Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Val Trp Asp Ser Ser Ser Asp Tyr
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100 105 110
Ala Asn Pro Thr Val Thr Leu Phe Pro Pro Ser Ser Glu Glu Leu Gln
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Ala Asn Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu Ile Ser Asp Phe Tyr Pro Gly
130 135 140
Ala Val Thr Val Ala Trp Lys Ala Asp Gly Ser Pro Val Lys Ala Gly
145 150 155 160
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Ser Ser Tyr Leu Ser Leu Thr Pro Glu Gln Trp Lys Ser His Arg Ser
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Ala Pro Thr Glu Cys Ser Pro Ile Lys Thr Asp Val Ile Thr Met Asp
210 215 220
Pro Lys Asp Asn Cys Ser Lys Asp Ala Asn Asp Thr Leu Leu Leu Gln
225 230 235 240
Leu Thr Asn Thr Ser Ala Tyr Tyr Met Tyr Leu Leu Leu Leu Leu Lys
245 250 255
Ser Val Val Tyr Phe Ala Ile Ile Thr Cys Cys Leu Leu Arg Arg Thr
260 265 270
Ala Phe Cys Cys Asn Gly Glu Lys Ser
275 280
<210> 55
<211> 301
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> anti-CD19 clone 5-9 abTCR-6MD delta
<400> 55
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile Tyr Pro Gly Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Phe Phe
50 55 60
Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gln Val Trp Gly Trp Gln Gly Gly Met Tyr Pro Arg Ser Asn
100 105 110
Trp Trp Tyr Asn Met Asp Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val
115 120 125
Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser
130 135 140
Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys
145 150 155 160
Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu
165 170 175
Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu
180 185 190
Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr
195 200 205
Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val
210 215 220
Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Glu Val Lys Thr Asp Ser Thr
225 230 235 240
Asp His Val Lys Pro Lys Glu Thr Glu Asn Thr Lys Gln Pro Ser Lys
245 250 255
Ser Cys His Lys Pro Lys Ala Ile Val His Thr Glu Lys Val Asn Met
260 265 270
Met Ser Leu Thr Val Leu Gly Leu Arg Met Leu Phe Ala Lys Thr Val
275 280 285
Ala Val Asn Phe Leu Leu Thr Ala Lys Leu Phe Phe Leu
290 295 300
<210> 56
<211> 301
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> anti-CD19 clone 5-13 abTCR-6MD delta
<400> 56
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile Tyr Pro Gly Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
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Ala Arg Gln Val Trp Gly Trp Gln Gly Gly Met Tyr Pro Arg Ser Asn
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Trp Trp Tyr Asn Leu Asp Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val
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Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser
130 135 140
Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys
145 150 155 160
Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu
165 170 175
Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu
180 185 190
Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr
195 200 205
Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val
210 215 220
Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Glu Val Lys Thr Asp Ser Thr
225 230 235 240
Asp His Val Lys Pro Lys Glu Thr Glu Asn Thr Lys Gln Pro Ser Lys
245 250 255
Ser Cys His Lys Pro Lys Ala Ile Val His Thr Glu Lys Val Asn Met
260 265 270
Met Ser Leu Thr Val Leu Gly Leu Arg Met Leu Phe Ala Lys Thr Val
275 280 285
Ala Val Asn Phe Leu Leu Thr Ala Lys Leu Phe Phe Leu
290 295 300
<210> 57
<211> 108
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IgVL domain of anti-CD19 antibody clone 5
<400> 57
Leu Pro Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ala Pro Gly Lys
1 5 10 15
Thr Ala Arg Ile Thr Cys Gly Gly Asn Asn Ile Gly Ser Lys Ser Val
20 25 30
His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Val Tyr
35 40 45
Asp Asp Ser Asp Arg Pro Ser Gly Ile Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Asn Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Thr Ile Ser Arg Val Glu Ala Gly
65 70 75 80
Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Val Trp Asp Ser Ser Ser Asp Tyr
85 90 95
Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu
100 105
<210> 58
<211> 130
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IgVH domain of anti-CD19 antibody clone 5-9
<400> 58
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile Tyr Pro Gly Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Phe Phe
50 55 60
Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gln Val Trp Gly Trp Gln Gly Gly Met Tyr Pro Arg Ser Asn
100 105 110
Trp Trp Tyr Asn Met Asp Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val
115 120 125
Ser Ser
130
<210> 59
<211> 130
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IgVH domain of anti-CD19 antibody clone 5-13
<400> 59
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile Tyr Pro Gly Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gln Val Trp Gly Trp Gln Gly Gly Met Tyr Pro Arg Ser Asn
100 105 110
Trp Trp Tyr Asn Leu Asp Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val
115 120 125
Ser Ser
130
<210> 60
<211> 101
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> IgG2-0C CH1
<400> 60
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Thr Val Glu Arg Lys
100
<210> 61
<211> 102
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> IgG2-1C CH1
<400> 61
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Thr Val Glu Arg Lys Cys
100
<210> 62
<211> 103
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> IgG2-2C CH1
<400> 62
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Asn Phe Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Thr Val Glu Arg Lys Cys Cys
100
<210> 63
<211> 103
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> IgG3 CH1
<400> 63
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Arg Val Glu Leu Lys Thr Pro
100
<210> 64
<211> 103
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> IgG4 CH1
<400> 64
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg
1 5 10 15
Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr
20 25 30
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser
35 40 45
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser
50 55 60
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr
65 70 75 80
Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys
85 90 95
Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly
100
<210> 65
<211> 121
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> IgA1 CH1
<400> 65
Ala Ser Pro Thr Ser Pro Lys Val Phe Pro Leu Ser Leu Cys Ser Thr
1 5 10 15
Gln Pro Asp Gly Asn Val Val Ile Ala Cys Leu Val Gln Gly Phe Phe
20 25 30
Pro Gln Glu Pro Leu Ser Val Thr Trp Ser Glu Ser Gly Gln Gly Val
35 40 45
Thr Ala Arg Asn Phe Pro Pro Ser Gln Asp Ala Ser Gly Asp Leu Tyr
50 55 60
Thr Thr Ser Ser Gln Leu Thr Leu Pro Ala Thr Gln Cys Leu Ala Gly
65 70 75 80
Lys Ser Val Thr Cys His Val Lys His Tyr Thr Asn Pro Ser Gln Asp
85 90 95
Val Thr Val Pro Cys Pro Val Pro Ser Thr Pro Pro Thr Pro Ser Pro
100 105 110
Ser Thr Pro Pro Thr Pro Ser Pro Ser
115 120
<210> 66
<211> 108
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> IgA2 CH1
<400> 66
Ala Ser Pro Thr Ser Pro Lys Val Phe Pro Leu Ser Leu Asp Ser Thr
1 5 10 15
Pro Gln Asp Gly Asn Val Val Val Ala Cys Leu Val Gln Gly Phe Phe
20 25 30
Pro Gln Glu Pro Leu Ser Val Thr Trp Ser Glu Ser Gly Gln Asn Val
35 40 45
Thr Ala Arg Asn Phe Pro Pro Ser Gln Asp Ala Ser Gly Asp Leu Tyr
50 55 60
Thr Thr Ser Ser Gln Leu Thr Leu Pro Ala Thr Gln Cys Pro Asp Gly
65 70 75 80
Lys Ser Val Thr Cys His Val Lys His Tyr Thr Asn Pro Ser Gln Asp
85 90 95
Val Thr Val Pro Cys Pro Val Pro Pro Pro Pro Pro
100 105
<210> 67
<211> 159
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> IgD CH1
<400> 67
Ala Pro Thr Lys Ala Pro Asp Val Phe Pro Ile Ile Ser Gly Cys Arg
1 5 10 15
His Pro Lys Asp Asn Ser Pro Val Val Leu Ala Cys Leu Ile Thr Gly
20 25 30
Tyr His Pro Thr Ser Val Thr Val Thr Trp Tyr Met Gly Thr Gln Ser
35 40 45
Gln Pro Gln Arg Thr Phe Pro Glu Ile Gln Arg Arg Asp Ser Tyr Tyr
50 55 60
Met Thr Ser Ser Gln Leu Ser Thr Pro Leu Gln Gln Trp Arg Gln Gly
65 70 75 80
Glu Tyr Lys Cys Val Val Gln His Thr Ala Ser Lys Ser Lys Lys Glu
85 90 95
Ile Phe Arg Trp Pro Glu Ser Pro Lys Ala Gln Ala Ser Ser Val Pro
100 105 110
Thr Ala Gln Pro Gln Ala Glu Gly Ser Leu Ala Lys Ala Thr Thr Ala
115 120 125
Pro Ala Thr Thr Arg Asn Thr Gly Arg Gly Gly Glu Glu Lys Lys Lys
130 135 140
Glu Lys Glu Lys Glu Glu Gln Glu Glu Arg Glu Thr Lys Thr Pro
145 150 155
<210> 68
<211> 103
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> IgE CH1
<400> 68
Ala Ser Thr Gln Ser Pro Ser Val Phe Pro Leu Thr Arg Cys Cys Lys
1 5 10 15
Asn Ile Pro Ser Asn Ala Thr Ser Val Thr Leu Gly Cys Leu Ala Thr
20 25 30
Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Met Val Thr Trp Asp Thr Gly Ser Leu
35 40 45
Asn Gly Thr Thr Met Thr Leu Pro Ala Thr Thr Leu Thr Leu Ser Gly
50 55 60
His Tyr Ala Thr Ile Ser Leu Leu Thr Val Ser Gly Ala Trp Ala Lys
65 70 75 80
Gln Met Phe Thr Cys Arg Val Ala His Thr Pro Ser Ser Thr Asp Trp
85 90 95
Val Asp Asn Lys Thr Phe Ser
100
<210> 69
<211> 104
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> IgM CH1
<400> 69
Gly Ser Ala Ser Ala Pro Thr Leu Phe Pro Leu Val Ser Cys Glu Asn
1 5 10 15
Ser Pro Ser Asp Thr Ser Ser Val Ala Val Gly Cys Leu Ala Gln Asp
20 25 30
Phe Leu Pro Asp Ser Ile Thr Leu Ser Trp Lys Tyr Lys Asn Asn Ser
35 40 45
Asp Ile Ser Ser Thr Arg Gly Phe Pro Ser Val Leu Arg Gly Gly Lys
50 55 60
Tyr Ala Ala Thr Ser Gln Val Leu Leu Pro Ser Lys Asp Val Met Gln
65 70 75 80
Gly Thr Asp Glu His Val Val Cys Lys Val Gln His Pro Asn Gly Asn
85 90 95
Lys Glu Lys Asn Val Pro Leu Pro
100
<210> 70
<211> 41
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> CD28 co-stimulatory fragment
<400> 70
Arg Ser Lys Arg Ser Arg Leu Leu His Ser Asp Tyr Met Asn Met Thr
1 5 10 15
Pro Arg Arg Pro Gly Pro Thr Arg Lys His Tyr Gln Pro Tyr Ala Pro
20 25 30
Pro Arg Asp Phe Ala Ala Tyr Arg Ser
35 40
<210> 71
<211> 42
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> 4-1BB co-stimulatory fragment
<400> 71
Lys Arg Gly Arg Lys Lys Leu Leu Tyr Ile Phe Lys Gln Pro Phe Met
1 5 10 15
Arg Pro Val Gln Thr Thr Gln Glu Glu Asp Gly Cys Ser Cys Arg Phe
20 25 30
Pro Glu Glu Glu Glu Gly Gly Cys Glu Leu
35 40
<210> 72
<211> 117
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IgVH domain of anti-NY-ESO-1/HLA-A*02:01
antibody clone 35
<400> 72
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Ser
1 5 10 15
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Asp Thr Phe Ser Ser Tyr
20 25 30
Ser Ile Ser Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Arg Ile Ile Pro Ile Leu Gly Ile Ala Asn Tyr Ala Gln Lys Tyr
50 55 60
Gln Gly Arg Val Thr Leu Ser Ala Asp Lys Ser Thr Ser Thr Ser Tyr
65 70 75 80
Met Glu Leu Asn Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Asp Trp Ser Tyr Ser Ile Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser
115
<210> 73
<211> 111
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> IgVL domain of anti-NY-ESO-1/HLA-A*02:01
antibody clone 35
<400> 73
Gln Ser Val Val Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Ala Ala Pro Gly Gln
1 5 10 15
Lys Val Thr Ile Ser Cys Ser Gly Ser Ser Ser Asn Ile Gly Asn Asn
20 25 30
Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln Leu Pro Gly Thr Ala Pro Lys Leu Leu
35 40 45
Ile Tyr Asp Asn Asn Lys Arg Pro Ser Gly Ile Pro Asp Arg Phe Ser
50 55 60
Gly Ser Lys Ser Gly Thr Ser Ala Thr Leu Gly Ile Thr Gly Leu Gln
65 70 75 80
Thr Gly Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gly Thr Trp Asp Ser Ser Leu
85 90 95
Ser Ala Trp Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly
100 105 110
<210> 74
<211> 21
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> scFv linker
<400> 74
Ser Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Glu Met Ala
20
<210> 75
<211> 284
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> anti-CD19-cTCR delta
<400> 75
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Lys Ile Ser Cys Lys Gly Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Ser Tyr
20 25 30
Trp Ile Gly Trp Val Arg Gln Met Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Ile Ile Tyr Pro Gly Asp Ser Asp Thr Arg Tyr Ser Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly Gln Val Thr Ile Ser Ala Asp Lys Ser Ile Ser Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Trp Ser Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Gln Val Trp Gly Trp Gln Gly Gly Met Tyr Pro Arg Ser Asn
100 105 110
Trp Trp Tyr Asn Leu Asp Ser Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val
115 120 125
Ser Ser Arg Ser Gln Pro His Thr Lys Pro Ser Val Phe Val Met Lys
130 135 140
Asn Gly Thr Asn Val Ala Cys Leu Val Lys Glu Phe Tyr Pro Lys Asp
145 150 155 160
Ile Arg Ile Asn Leu Val Ser Ser Lys Lys Ile Thr Glu Phe Asp Pro
165 170 175
Ala Ile Val Ile Ser Pro Ser Gly Lys Tyr Asn Ala Val Lys Leu Gly
180 185 190
Lys Tyr Glu Asp Ser Asn Ser Val Thr Cys Ser Val Gln His Asp Asn
195 200 205
Lys Thr Val His Ser Thr Asp Phe Glu Val Lys Thr Asp Ser Thr Asp
210 215 220
His Val Lys Pro Lys Glu Thr Glu Asn Thr Lys Gln Pro Ser Lys Ser
225 230 235 240
Cys His Lys Pro Lys Ala Ile Val His Thr Glu Lys Val Asn Met Met
245 250 255
Ser Leu Thr Val Leu Gly Leu Arg Met Leu Phe Ala Lys Thr Val Ala
260 265 270
Val Asn Phe Leu Leu Thr Ala Lys Leu Phe Phe Leu
275 280
<210> 76
<211> 282
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> anti-CD19-cTCR gamma
<400> 76
Leu Pro Val Leu Thr Gln Pro Pro Ser Val Ser Val Ala Pro Gly Lys
1 5 10 15
Thr Ala Arg Ile Thr Cys Gly Gly Asn Asn Ile Gly Ser Lys Ser Val
20 25 30
His Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Ala Pro Val Leu Val Val Tyr
35 40 45
Asp Asp Ser Asp Arg Pro Ser Gly Ile Pro Glu Arg Phe Ser Gly Ser
50 55 60
Asn Ser Gly Asn Thr Ala Thr Leu Thr Ile Ser Arg Val Glu Ala Gly
65 70 75 80
Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Gln Val Trp Asp Ser Ser Ser Asp Tyr
85 90 95
Val Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Gly Asp Lys Gln
100 105 110
Leu Asp Ala Asp Val Ser Pro Lys Pro Thr Ile Phe Leu Pro Ser Ile
115 120 125
Ala Glu Thr Lys Leu Gln Lys Ala Gly Thr Tyr Leu Cys Leu Leu Glu
130 135 140
Lys Phe Phe Pro Asp Val Ile Lys Ile His Trp Gln Glu Lys Lys Ser
145 150 155 160
Asn Thr Ile Leu Gly Ser Gln Glu Gly Asn Thr Met Lys Thr Asn Asp
165 170 175
Thr Tyr Met Lys Phe Ser Trp Leu Thr Val Pro Glu Lys Ser Leu Asp
180 185 190
Lys Glu His Arg Cys Ile Val Arg His Glu Asn Asn Lys Asn Gly Val
195 200 205
Asp Gln Glu Ile Ile Phe Pro Pro Ile Lys Thr Asp Val Ile Thr Met
210 215 220
Asp Pro Lys Asp Asn Cys Ser Lys Asp Ala Asn Asp Thr Leu Leu Leu
225 230 235 240
Gln Leu Thr Asn Thr Ser Ala Tyr Tyr Met Tyr Leu Leu Leu Leu Leu
245 250 255
Lys Ser Val Val Tyr Phe Ala Ile Ile Thr Cys Cys Leu Leu Arg Arg
260 265 270
Thr Ala Phe Cys Cys Asn Gly Glu Lys Ser
275 280
<210> 77
<211> 142
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRalpha constant domain
<400> 77
Pro Asn Ile Gln Asn Pro Asp Pro Ala Val Tyr Gln Leu Arg Asp Ser
1 5 10 15
Lys Ser Ser Asp Lys Ser Val Cys Leu Phe Thr Asp Phe Asp Ser Gln
20 25 30
Thr Asn Val Ser Gln Ser Lys Asp Ser Asp Val Tyr Ile Thr Asp Lys
35 40 45
Thr Val Leu Asp Met Arg Ser Met Asp Phe Lys Ser Asn Ser Ala Val
50 55 60
Ala Trp Ser Asn Lys Ser Asp Phe Ala Cys Ala Asn Ala Phe Asn Asn
65 70 75 80
Ser Ile Ile Pro Glu Asp Thr Phe Phe Pro Ser Pro Glu Ser Ser Cys
85 90 95
Asp Val Lys Leu Val Glu Lys Ser Phe Glu Thr Asp Thr Asn Leu Asn
100 105 110
Phe Gln Asn Leu Ser Val Ile Gly Phe Arg Ile Leu Leu Leu Lys Val
115 120 125
Ala Gly Phe Asn Leu Leu Met Thr Leu Arg Leu Trp Ser Ser
130 135 140
<210> 78
<211> 177
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRbeta constant domain
<400> 78
Glu Asp Leu Asn Lys Val Phe Pro Pro Glu Val Ala Val Phe Glu Pro
1 5 10 15
Ser Glu Ala Glu Ile Ser His Thr Gln Lys Ala Thr Leu Val Cys Leu
20 25 30
Ala Thr Gly Phe Phe Pro Asp His Val Glu Leu Ser Trp Trp Val Asn
35 40 45
Gly Lys Glu Val His Ser Gly Val Ser Thr Asp Pro Gln Pro Leu Lys
50 55 60
Glu Gln Pro Ala Leu Asn Asp Ser Arg Tyr Cys Leu Ser Ser Arg Leu
65 70 75 80
Arg Val Ser Ala Thr Phe Trp Gln Asn Pro Arg Asn His Phe Arg Cys
85 90 95
Gln Val Gln Phe Tyr Gly Leu Ser Glu Asn Asp Glu Trp Thr Gln Asp
100 105 110
Arg Ala Lys Pro Val Thr Gln Ile Val Ser Ala Glu Ala Trp Gly Arg
115 120 125
Ala Asp Cys Gly Phe Thr Ser Val Ser Tyr Gln Gln Gly Val Leu Ser
130 135 140
Ala Thr Ile Leu Tyr Glu Ile Leu Leu Gly Lys Ala Thr Leu Tyr Ala
145 150 155 160
Val Leu Val Ser Ala Leu Val Leu Met Ala Met Val Lys Arg Lys Asp
165 170 175
Phe
<210> 79
<211> 153
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRdelta constant domain
<400> 79
Ser Gln Pro His Thr Lys Pro Ser Val Phe Val Met Lys Asn Gly Thr
1 5 10 15
Asn Val Ala Cys Leu Val Lys Glu Phe Tyr Pro Lys Asp Ile Arg Ile
20 25 30
Asn Leu Val Ser Ser Lys Lys Ile Thr Glu Phe Asp Pro Ala Ile Val
35 40 45
Ile Ser Pro Ser Gly Lys Tyr Asn Ala Val Lys Leu Gly Lys Tyr Glu
50 55 60
Asp Ser Asn Ser Val Thr Cys Ser Val Gln His Asp Asn Lys Thr Val
65 70 75 80
His Ser Thr Asp Phe Glu Val Lys Thr Asp Ser Thr Asp His Val Lys
85 90 95
Pro Lys Glu Thr Glu Asn Thr Lys Gln Pro Ser Lys Ser Cys His Lys
100 105 110
Pro Lys Ala Ile Val His Thr Glu Lys Val Asn Met Met Ser Leu Thr
115 120 125
Val Leu Gly Leu Arg Met Leu Phe Ala Lys Thr Val Ala Val Asn Phe
130 135 140
Leu Leu Thr Ala Lys Leu Phe Phe Leu
145 150
<210> 80
<211> 173
<212> PRT
<213> Homo sapiens
<220>
<223> TCRgamma constant domain
<400> 80
Asp Lys Gln Leu Asp Ala Asp Val Ser Pro Lys Pro Thr Ile Phe Leu
1 5 10 15
Pro Ser Ile Ala Glu Thr Lys Leu Gln Lys Ala Gly Thr Tyr Leu Cys
20 25 30
Leu Leu Glu Lys Phe Phe Pro Asp Val Ile Lys Ile His Trp Gln Glu
35 40 45
Lys Lys Ser Asn Thr Ile Leu Gly Ser Gln Glu Gly Asn Thr Met Lys
50 55 60
Thr Asn Asp Thr Tyr Met Lys Phe Ser Trp Leu Thr Val Pro Glu Lys
65 70 75 80
Ser Leu Asp Lys Glu His Arg Cys Ile Val Arg His Glu Asn Asn Lys
85 90 95
Asn Gly Val Asp Gln Glu Ile Ile Phe Pro Pro Ile Lys Thr Asp Val
100 105 110
Ile Thr Met Asp Pro Lys Asp Asn Cys Ser Lys Asp Ala Asn Asp Thr
115 120 125
Leu Leu Leu Gln Leu Thr Asn Thr Ser Ala Tyr Tyr Met Tyr Leu Leu
130 135 140
Leu Leu Leu Lys Ser Val Val Tyr Phe Ala Ile Ile Thr Cys Cys Leu
145 150 155 160
Leu Arg Arg Thr Ala Phe Cys Cys Asn Gly Glu Lys Ser
165 170
<210> 81
<211> 271
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> anti-AFP158/HLA-A*02:01 abTCR-7 delta
<400> 81
Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Lys Lys Pro Gly Glu
1 5 10 15
Ser Leu Thr Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Pro Asn Tyr
20 25 30
Trp Ile Thr Trp Val Arg Gln Met Ser Gly Gly Gly Leu Glu Trp Met
35 40 45
Gly Arg Ile Asp Pro Gly Asp Ser Tyr Thr Thr Tyr Asn Pro Ser Phe
50 55 60
Gln Gly His Val Thr Ile Ser Ile Asp Lys Ser Thr Asn Thr Ala Tyr
65 70 75 80
Leu His Trp Asn Ser Leu Lys Ala Ser Asp Thr Ala Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Arg Tyr Tyr Val Ser Leu Val Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Leu
100 105 110
Val Thr Val Ser Ser Arg Ser Gln Pro His Thr Lys Pro Ser Val Phe
115 120 125
Val Met Lys Asn Gly Thr Asn Val Ala Cys Leu Val Lys Glu Phe Tyr
130 135 140
Pro Lys Asp Ile Arg Ile Asn Leu Val Ser Ser Lys Lys Ile Thr Glu
145 150 155 160
Phe Asp Pro Ala Ile Val Ile Ser Pro Ser Gly Lys Tyr Asn Ala Val
165 170 175
Lys Leu Gly Lys Tyr Glu Asp Ser Asn Ser Val Thr Cys Ser Val Gln
180 185 190
His Asp Asn Lys Thr Val His Ser Thr Asp Phe Glu Val Lys Thr Asp
195 200 205
Ser Thr Asp His Val Lys Pro Lys Glu Thr Glu Asn Thr Lys Gln Pro
210 215 220
Ser Lys Ser Cys His Lys Pro Lys Ala Ile Val His Thr Glu Lys Val
225 230 235 240
Asn Met Met Ser Leu Thr Val Leu Gly Leu Arg Met Leu Phe Ala Lys
245 250 255
Thr Val Ala Val Asn Phe Leu Leu Thr Ala Lys Leu Phe Phe Leu
260 265 270
<210> 82
<211> 283
<212> PRT
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> anti-AFP158/HLA-A*02:01 abTCR-7 gamma
<400> 82
Gln Ser Val Leu Thr Gln Pro Ala Ser Val Ser Gly Ser Pro Gly Gln
1 5 10 15
Ser Ile Thr Ile Ser Cys Thr Gly Thr Ser Ser Asp Val Gly Gly Tyr
20 25 30
Asn Tyr Val Ser Trp Tyr Gln Gln His Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu
35 40 45
Met Ile Tyr Asp Val Asn Asn Arg Pro Ser Glu Val Ser Asn Arg Phe
50 55 60
Ser Gly Ser Lys Ser Gly Asn Thr Ala Ser Leu Thr Ile Ser Gly Leu
65 70 75 80
Gln Ala Glu Asp Glu Ala Asp Tyr Tyr Cys Ser Ser Tyr Thr Thr Gly
85 90 95
Ser Arg Ala Val Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Thr Val Leu Asp Lys
100 105 110
Gln Leu Asp Ala Asp Val Ser Pro Lys Pro Thr Ile Phe Leu Pro Ser
115 120 125
Ile Ala Glu Thr Lys Leu Gln Lys Ala Gly Thr Tyr Leu Cys Leu Leu
130 135 140
Glu Lys Phe Phe Pro Asp Val Ile Lys Ile His Trp Gln Glu Lys Lys
145 150 155 160
Ser Asn Thr Ile Leu Gly Ser Gln Glu Gly Asn Thr Met Lys Thr Asn
165 170 175
Asp Thr Tyr Met Lys Phe Ser Trp Leu Thr Val Pro Glu Lys Ser Leu
180 185 190
Asp Lys Glu His Arg Cys Ile Val Arg His Glu Asn Asn Lys Asn Gly
195 200 205
Val Asp Gln Glu Ile Ile Phe Pro Pro Ile Lys Thr Asp Val Ile Thr
210 215 220
Met Asp Pro Lys Asp Asn Cys Ser Lys Asp Ala Asn Asp Thr Leu Leu
225 230 235 240
Leu Gln Leu Thr Asn Thr Ser Ala Tyr Tyr Met Tyr Leu Leu Leu Leu
245 250 255
Leu Lys Ser Val Val Tyr Phe Ala Ile Ile Thr Cys Cys Leu Leu Arg
260 265 270
Arg Thr Ala Phe Cys Cys Asn Gly Glu Lys Ser
275 280
【図1A】
【図1B】
【図2】
【図3】
【図4A】
【図4B】
【図4C】
【図5A】
【図5B】
【図5C】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9A】
【図9B】
【図10】
【図11A】
【図11B】
【図12A】
【図12B】
【図12C】
【図12D】
【図12E】
【図12F】
【図12G】
【図12H】
【図13】
【図14】
【図15】
【図16AB】
【図16C】
【図17】
【図18A】
【図18B】
【図19】
【図20】
【図21】
【図22】
【図23】
【図24】
【図25】
【図26】
【図27】
【図28】
【図29】
【図30】
【図31】
【図32】
【図33】
【図34】
【図35】
【図36】
【図37】
【図38】
【図39】
【図40】
【図41】
【図42】
【図43】
【図44】
【図45】
【図46】
【配列表】
【手続補正書】
【提出日】2024-03-06
【手続補正1】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項1】
標的抗原に特異的に結合する抗体－Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）キメラ分子（ａｂＴＣＲ）
であって、
ａ）ＶＨおよびＣＨ１抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲサブ
ユニットの第１の膜貫通ドメインを含む第１のＴ細胞受容体ドメイン（ＴＣＲＤ）とを含
む第１のポリペプチド鎖；ならびに
ｂ）ＶＬおよびＣＬ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲサブユ
ニットの第２の膜貫通ドメインを含む第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖
を含み、
前記第１の抗原結合ドメインの前記ＶＨおよびＣＨ１ドメインと前記第２の抗原結合ド
メインの前記ＶＬおよびＣＬドメインとが、前記標的抗原に特異的に結合する抗原結合モ
ジュールを形成し、
前記第１のＴＣＲＤと前記第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル
伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）を形
成する、
ａｂＴＣＲ。
であって、
ａ）ＶＨおよびＣＨ１抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲサブ
ユニットの第１の膜貫通ドメインを含む第１のＴ細胞受容体ドメイン（ＴＣＲＤ）とを含
む第１のポリペプチド鎖；ならびに
ｂ）ＶＬおよびＣＬ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲサブユ
ニットの第２の膜貫通ドメインを含む第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖
を含み、
前記第１の抗原結合ドメインの前記ＶＨおよびＣＨ１ドメインと前記第２の抗原結合ド
メインの前記ＶＬおよびＣＬドメインとが、前記標的抗原に特異的に結合する抗原結合モ
ジュールを形成し、
前記第１のＴＣＲＤと前記第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル
伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）を形
成する、
ａｂＴＣＲ。
【手続補正2】
【補正対象書類名】明細書
【補正対象項目名】００４２
【補正方法】変更
【補正の内容】
【0042】
本明細書に記載される構築物のいずれかを作製する方法、本明細書に記載される方法に
適切な製造物品およびキットもまた提供される。
＜本発明の更なる実施態様＞
［実施態様１］
標的抗原に特異的に結合する抗体－Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）キメラ分子（ａｂＴＣＲ）であって、
ａ）ＶＨおよびＣＨ１抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲサブユニットの第１の膜貫通ドメインを含む第１のＴ細胞受容体ドメイン（ＴＣＲＤ）とを含む第１のポリペプチド鎖；ならびに
ｂ）ＶＬおよびＣＬ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲサブユニットの第２の膜貫通ドメインを含む第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖を含み、
前記第１の抗原結合ドメインの前記ＶＨおよびＣＨ１ドメインと前記第２の抗原結合ドメインの前記ＶＬおよびＣＬドメインとが、前記標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールを形成し、
前記第１のＴＣＲＤと前記第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）を形成する、
ａｂＴＣＲ。
［実施態様２］
前記抗原結合モジュールが、前記ＣＨ１ドメイン中の残基と前記ＣＬドメイン中の残基との間のジスルフィド結合を含む、実施態様１に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様３］
前記第１のポリペプチド鎖が、前記第１の抗原結合ドメインと前記第１のＴＣＲＤとの間に第１のペプチドリンカーをさらに含む、実施態様１または２に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様４］
前記第２のポリペプチド鎖が、前記第２の抗原結合ドメインと前記第２のＴＣＲＤとの間に第２のペプチドリンカーをさらに含む、実施態様１から３のいずれか一に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様５］
前記第１のペプチドリンカーおよび／または前記第２のペプチドリンカーが個々に、約５～約５０アミノ酸長である、実施態様３または４に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様６］
前記標的抗原が細胞表面抗原である、実施態様１から５のいずれか一に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様７］
前記細胞表面抗原が、タンパク質、炭水化物および脂質からなる群から選択される、実施態様６に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様８］
前記細胞表面抗原が、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５ＤまたはＦＣＲＬ５である、実施態様７に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様９］
前記標的抗原が、ペプチドと主要組織適合複合体（ＭＨＣ）タンパク質とを含む複合体である、実施態様１から５のいずれか一に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様１０］
標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲであって、
ａ）ＶＨ抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲサブユニットの第１の膜貫通ドメインを含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；および
ｂ）ＶＬ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲサブユニットの第２の膜貫通ドメインを含む第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖
を含み、
前記第１の抗原結合ドメインの前記ＶＨドメインと前記第２の抗原結合ドメインの前記ＶＬドメインとが、前記標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールを形成し、
前記第１のＴＣＲＤと前記第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）を形成し、
前記標的抗原が、ペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む複合体である、
ａｂＴＣＲ。
［実施態様１１］
前記第１のポリペプチド鎖が、前記第１の抗原結合ドメインと前記第１のＴＣＲＤとの間に第１のペプチドリンカーをさらに含み、前記第２のポリペプチド鎖が、前記第２の抗原結合ドメインと前記第２のＴＣＲＤとの間に第２のペプチドリンカーをさらに含む、実施態様１０に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様１２］
前記第１および／または第２のペプチドリンカーが、免疫グロブリンまたはＴ細胞受容体サブユニット由来の定常ドメインまたはその断片を個々に含む、実施態様１１に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様１３］
前記第１および／または第２のペプチドリンカーが、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、ＣＨ４もしくはＣＬ抗体ドメイン、またはそれらの断片を個々に含む、実施態様１２に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様１４］
前記第１および／または第２のペプチドリンカーが、Ｃα、Ｃβ、ＣγもしくはＣδＴＣＲドメイン、またはそれらの断片を個々に含む、実施態様１２に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様１５］
前記第１のＴＣＲＤが、前記第１の膜貫通ドメインのＮ末端側に、ＴＣＲサブユニットの第１の接続ペプチドまたはその断片をさらに含む、実施態様１から１４のいずれか一に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様１６］
前記第２のＴＣＲＤが、前記第２の膜貫通ドメインのＮ末端側に、ＴＣＲサブユニットの第２の接続ペプチドまたはその断片をさらに含む、実施態様１から１５のいずれか一に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様１７］
前記ＴＣＲＭが、前記第１の接続ペプチド中の残基と前記第２の接続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合を含む、実施態様１５または１６に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様１８］
前記第１のＴＣＲＤが、前記第１の膜貫通ドメインのＣ末端側に、ＴＣＲ細胞内配列を含む第１のＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含む、実施態様１から１７のいずれか一に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様１９］
前記第２のＴＣＲＤが、前記第２の膜貫通ドメインのＣ末端側に、ＴＣＲ細胞内配列を含む第２のＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含む、実施態様１から１８のいずれか一に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様２０］
前記第１のポリペプチド鎖が、前記第１の膜貫通ドメインのＣ末端側に、共刺激細胞内シグナル伝達配列を含む第１のアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む、実施態様１から１９のいずれか一に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様２１］
前記第２のポリペプチド鎖が、前記第２の膜貫通ドメインのＣ末端側に、共刺激細胞内シグナル伝達配列を含む第２のアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む、実施態様１から２０のいずれか一に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様２２］
前記第１のポリペプチド鎖が、前記第１の抗原結合ドメインのＮ末端側に、第１のシグナル伝達ペプチドをさらに含む、実施態様１から２１のいずれか一に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様２３］
前記第２のポリペプチド鎖が、前記第２の抗原結合ドメインのＮ末端側に、第２のシグル伝達ペプチドをさらに含む、実施態様１から２２のいずれか一に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様２４］
前記標的抗原複合体中の前記ペプチドが、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ
－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択されるタンパク質に由来する、実施態様９から２３のいずれか一に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様２５］
前記分子が、約０．１ｐＭ～約５００ｎＭの平衡解離定数（Ｋｄ）で前記標的抗原に結合する、実施態様１から２４のいずれか一に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様２６］
前記ＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールが、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζからなる群から選択される、実施態様１から２５のいずれか一に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様２７］
前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲα鎖であり、前記第２のＴＣＲサブユニットがＴＣＲβ鎖である、実施態様１から２６のいずれか一に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様２８］
前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲβ鎖であり、前記第２のＴＣＲサブユニットがＴＣＲα鎖である、実施態様１から２６のいずれか一に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様２９］
前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲγ鎖であり、前記第２のＴＣＲサブユニットがＴＣＲδ鎖である、実施態様１から２６のいずれか一に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様３０］
前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲδ鎖であり、前記第２のＴＣＲサブユニットがＴＣＲγ鎖である、実施態様１から２６のいずれか一に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様３１］
実施態様１から３０のいずれか一に記載のａｂＴＣＲの前記第１および第２のポリペプチド鎖をコードする核酸（複数可）。
［実施態様３２］
実施態様１から３０のいずれか一に記載のａｂＴＣＲと、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールとを含む複合体。
［実施態様３３］
前記ａｂＴＣＲとＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζとを含む八量体である、実施態様３２に記載の複合体。
［実施態様３４］
実施態様１から３０のいずれか一に記載のａｂＴＣＲまたは実施態様３２もしくは３３に記載の複合体をその表面上に提示するエフェクター細胞。
［実施態様３５］
実施態様３１に記載の核酸（複数可）を含むエフェクター細胞。
［実施態様３６］
前記第１のＴＣＲサブユニットおよび／または前記第２のＴＣＲサブユニットを発現しない、実施態様３４または３５に記載のエフェクター細胞。
［実施態様３７］
ａ）前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲαであり、前記第２のＴＣＲサブユニットがＴＣＲβであり；または
ｂ）前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲβであり、前記第２のＴＣＲサブユニットがＴＣＲαであり；
前記エフェクター細胞がγδＴ細胞である、実施態様３６に記載のエフェクター細胞。
［実施態様３８］
ａ）前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲγであり、前記第２のＴＣＲサブユニットがＴＣＲδであり；または
ｂ）前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲδであり、前記第２のＴＣＲサブユニットがＴＣＲγであり；
前記エフェクター細胞がαβＴ細胞である、実施態様３６に記載のエフェクター細胞。
［実施態様３９］
第１の内因性ＴＣＲサブユニットおよび／または第２の内因性ＴＣＲサブユニットの発現を遮断するまたは減少させるように改変されている、実施態様３４から３６のいずれか一に記載のエフェクター細胞。
［実施態様４０］
ａ）前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲαであり、前記第２のＴＣＲサブユニットがＴＣＲβであり；または
ｂ）前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲβであり、前記第２のＴＣＲサブユニットがＴＣＲαであり；
前記エフェクター細胞が、ＴＣＲαおよび／またはＴＣＲβの発現を遮断するまたは減少させるように改変されたαβＴ細胞である、実施態様３９に記載のエフェクター細胞。
［実施態様４１］
ａ）前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲγであり、前記第２のＴＣＲサブユニットがＴＣＲδであり；または
ｂ）前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲδであり、前記第２のＴＣＲサブユニットがＴＣＲγであり；
前記エフェクター細胞が、ＴＣＲγおよび／またはＴＣＲδの発現を遮断するまたは減少させるように改変されたγδＴ細胞である、実施態様３９に記載のエフェクター細胞。
［実施態様４２］
ＣＤ３＋細胞である、実施態様３４から４１のいずれか一に記載のエフェクター細胞。［実［実施態様４３］
前記ＣＤ３＋細胞が、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される、実施態様４２に記載のエフェクター細胞。
［実施態様４４］
ａ）第１のプロモーターの制御下の前記ａｂＴＣＲの前記第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列を含む第１のベクターと、ｂ）第２のプロモーターの制御下の前記ａｂＴＣＲの前記第２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列を含む第２のベクターとを含む、実施態様３４から４３のいずれか一に記載のエフェクター細胞。
［実施態様４５］
ａ）第１のプロモーターの制御下の前記ａｂＴＣＲの前記第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列と；ｂ）第２のプロモーターの制御下の前記ａｂＴＣＲの前記第２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列とを含むベクターを含む、実施態様３４から４３のいずれか一に記載のエフェクター細胞。
［実施態様４６］
ａ）前記ａｂＴＣＲの前記第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列と；ｂ）前記ａｂＴＣＲの前記第２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列とを含むベクターを含み、前記第１および第２の核酸配列が、単一のプロモーターの制御下にある、実施態様３４から４３のいずれか一に記載のエフェクター細胞。
［実施態様４７］
前記ａｂＴＣＲの前記第１のポリペプチド鎖の発現が、前記ａｂＴＣＲの前記第２のポリペプチド鎖の発現とは、２倍よりも大きく異なる、実施態様３４から４５のいずれか一に記載のエフェクター細胞。
［実施態様４８］
標的抗原を提示する標的細胞を死滅させる方法であって、前記標的細胞を、実施態様３４から４７のいずれか一に記載のエフェクター細胞と接触させるステップを含み、前記ａｂＴＣＲが、前記標的抗原に特異的に結合する、方法。
［実施態様４９］
標的抗原を提示する標的細胞を死滅させる方法であって、前記標的細胞を、前記標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲを含むエフェクターαβＴ細胞と接触させるステップを含み、前記ａｂＴＣＲが、
ａ）ＶＨ抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲサブユニットの第１の膜貫通ドメインを含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；およ ｂ）ＶＬ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲサブユニットの第２の膜貫通ドメインを含む第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖
を含み、
前記第１の抗原結合ドメインの前記ＶＨドメインと前記第２の抗原結合ドメインの前記ＶＬドメインとが、前記標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールを形成し、
前記第１のＴＣＲＤと前記第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）を形成し、
前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲγであり、前記第２のＴＣＲサブユニットがＴＣＲδである、または前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲδであり、前記第２のＴＣＲサブユニットがＴＣＲγである、
方法。
［実施態様５０］
前記第１のポリペプチド鎖が、前記第１の抗原結合ドメインと前記第１のＴＣＲＤとの間に第１のペプチドリンカーをさらに含み、前記第２のポリペプチド鎖が、前記第２の抗原結合ドメインと前記第２のＴＣＲＤとの間に第２のペプチドリンカーをさらに含む、実施態様４９に記載の方法。
［実施態様５１］
前記第１および／または第２のペプチドリンカーが、免疫グロブリンまたはＴ細胞受容体サブユニット由来の定常ドメインまたはその断片を個々に含む、実施態様５０に記載の方法。
［実施態様５２］
前記第１および／または第２のペプチドリンカーが、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、ＣＨ４もしくはＣＬ抗体ドメイン、またはそれらの断片を個々に含む、実施態様５１に記載の方法。
［実施態様５３］
前記第１および／または第２のペプチドリンカーが、Ｃα、Ｃβ、ＣγもしくはＣδＴＣＲドメイン、またはそれらの断片を個々に含む、実施態様５１に記載の方法。
［実施態様５４］
前記接触させるステップがｉｎ ｖｉｖｏである、実施態様４８から５３のいずれか一に記載の方法。
［実施態様５５］
前記接触させるステップがｉｎ ｖｉｔｒｏである、実施態様４８から５３のいずれか一に記載の方法。
［実施態様５６］
実施態様１から３０のいずれか一に記載のａｂＴＣＲ、実施態様３１に記載の核酸（複数可）、または実施態様３４から４７のいずれか一に記載のエフェクター細胞と、薬学的に許容されるキャリアとを含む医薬組成物。
［実施態様５７］
それを必要とする個体において標的抗原関連疾患を処置する方法であって、前記個体に、有効量の、実施態様５１に記載の医薬組成物を投与するステップを含む方法。
［実施態様５８］
それを必要とする個体において標的抗原関連疾患を処置する方法であって、前記個体に、有効量の、前記標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲを含むエフェクターαβＴ細胞を含む組成物を投与するステップを含み、前記ａｂＴＣＲが、
ａ）ＶＨ抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲサブユニットの第１の膜貫通ドメインを含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；および
ｂ）ＶＬ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲサブユニットの第２の膜貫通ドメインを含む第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖
を含み、
前記第１の抗原結合ドメインの前記ＶＨドメインと前記第２の抗原結合ドメインの前記ＶＬドメインとが、前記標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールを形成し、
前記第１のＴＣＲＤと前記第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）を形成し、
前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲγであり、前記第２のＴＣＲサブユニットがＴＣＲδである、または前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲδであり、前記第２のＴＣＲサブユニットがＴＣＲγである、
方法。
［実施態様５９］
前記第１のポリペプチド鎖が、前記第１の抗原結合ドメインと前記第１のＴＣＲＤとの間に第１のペプチドリンカーをさらに含み、前記第２のポリペプチド鎖が、前記第２の抗原結合ドメインと前記第２のＴＣＲＤとの間に第２のペプチドリンカーをさらに含む、実施態様５８に記載の方法。
［実施態様６０］
前記第１および／または第２のペプチドリンカーが、免疫グロブリンまたはＴ細胞受容体サブユニット由来の定常ドメインまたはその断片を個々に含む、実施態様５９に記載の方法。
［実施態様６１］
前記第１および／または第２のペプチドリンカーが、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、ＣＨ４もしくはＣＬ抗体ドメイン、またはそれらの断片を個々に含む、実施態様６０に記載の方法。
［実施態様６２］
前記第１および／または第２のペプチドリンカーが、Ｃα、Ｃβ、ＣγもしくはＣδＴＣＲドメイン、またはそれらの断片を個々に含む、実施態様６０に記載の方法。
［実施態様６３］
前記標的抗原関連疾患ががんである、実施態様５７から６２のいずれか一に記載の方法。
［実施態様６４］
前記がんが、副腎皮質癌、膀胱がん、乳がん、子宮頸がん、胆管細胞癌、結腸直腸がん、食道がん、グリア芽細胞腫、グリオーマ、肝細胞癌、頭頸部がん、腎臓がん、白血病、リンパ腫、肺がん、メラノーマ、中皮腫、多発性骨髄腫、膵臓がん、褐色細胞腫、形質細胞腫、神経芽細胞腫、卵巣がん、前立腺がん、肉腫、胃がん、子宮がんおよび甲状腺がんからなる群から選択される、実施態様６３に記載の方法。
［実施態様６５］
前記標的抗原関連疾患がウイルス感染症である、実施態様５７から６２のいずれか一に記載の方法。
［実施態様６６］
前記ウイルス感染症が、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、エプスタイン－バーウイルス（ＥＢＶ）、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス（ＫＳＨＶ）、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、伝染性軟属腫ウイルス（ＭＣＶ）、ヒトＴ細胞白血病ウイルス１（ＨＴＬＶ－１）、ＨＩＶ（ヒト免疫不全ウイルス）およびＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）からなる群から選択されるウイルスによって引き起こされる、実施態様６５に記載の方法。
［実施態様６７］
実施態様３４から４７のいずれか一に記載のエフェクター細胞について不均一な細胞集団を富化する方法であって、
ａ）前記不均一な細胞集団を、前記標的抗原またはその中に含まれる１つもしくは複数のエピトープを含むリガンドと接触させて、前記リガンドに結合した前記エフェクター細胞の複合体を形成するステップ；および
ｂ）前記不均一な細胞集団から前記複合体を分離し、それによって、前記エフェクター細胞について富化された細胞集団を生成するステップ
を含む方法。
［実施態様６８］
実施態様１から３０のいずれか一に記載の複数のａｂＴＣＲをコードする配列を含む核酸ライブラリー。
［実施態様６９］
標的抗原に対して特異的なａｂＴＣＲをコードする配列について、実施態様６８に記載の核酸ライブラリーをスクリーニングする方法であって、
ａ）前記ａｂＴＣＲが複数の細胞の表面上で発現されるように、前記核酸ライブラリーを前記複数の細胞中に導入するステップ；
ｂ）前記複数の細胞を、前記標的抗原またはその中に含まれる１つもしくは複数のエピトープを含むリガンドと共にインキュベートするステップ；
ｃ）前記リガンドに結合した細胞を収集するステップ；および
ｄ）ステップｃ）において収集した細胞から、前記ａｂＴＣＲをコードする配列を単離し、それによって、前記標的抗原に対して特異的なａｂＴＣＲを同定するステップ
を含む方法。
適切な製造物品およびキットもまた提供される。
＜本発明の更なる実施態様＞
［実施態様１］
標的抗原に特異的に結合する抗体－Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）キメラ分子（ａｂＴＣＲ）であって、
ａ）ＶＨおよびＣＨ１抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲサブユニットの第１の膜貫通ドメインを含む第１のＴ細胞受容体ドメイン（ＴＣＲＤ）とを含む第１のポリペプチド鎖；ならびに
ｂ）ＶＬおよびＣＬ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲサブユニットの第２の膜貫通ドメインを含む第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖を含み、
前記第１の抗原結合ドメインの前記ＶＨおよびＣＨ１ドメインと前記第２の抗原結合ドメインの前記ＶＬおよびＣＬドメインとが、前記標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールを形成し、
前記第１のＴＣＲＤと前記第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）を形成する、
ａｂＴＣＲ。
［実施態様２］
前記抗原結合モジュールが、前記ＣＨ１ドメイン中の残基と前記ＣＬドメイン中の残基との間のジスルフィド結合を含む、実施態様１に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様３］
前記第１のポリペプチド鎖が、前記第１の抗原結合ドメインと前記第１のＴＣＲＤとの間に第１のペプチドリンカーをさらに含む、実施態様１または２に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様４］
前記第２のポリペプチド鎖が、前記第２の抗原結合ドメインと前記第２のＴＣＲＤとの間に第２のペプチドリンカーをさらに含む、実施態様１から３のいずれか一に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様５］
前記第１のペプチドリンカーおよび／または前記第２のペプチドリンカーが個々に、約５～約５０アミノ酸長である、実施態様３または４に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様６］
前記標的抗原が細胞表面抗原である、実施態様１から５のいずれか一に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様７］
前記細胞表面抗原が、タンパク質、炭水化物および脂質からなる群から選択される、実施態様６に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様８］
前記細胞表面抗原が、ＣＤ１９、ＲＯＲ１、ＲＯＲ２、ＢＣＭＡ、ＧＰＲＣ５ＤまたはＦＣＲＬ５である、実施態様７に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様９］
前記標的抗原が、ペプチドと主要組織適合複合体（ＭＨＣ）タンパク質とを含む複合体である、実施態様１から５のいずれか一に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様１０］
標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲであって、
ａ）ＶＨ抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲサブユニットの第１の膜貫通ドメインを含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；および
ｂ）ＶＬ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲサブユニットの第２の膜貫通ドメインを含む第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖
を含み、
前記第１の抗原結合ドメインの前記ＶＨドメインと前記第２の抗原結合ドメインの前記ＶＬドメインとが、前記標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールを形成し、
前記第１のＴＣＲＤと前記第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）を形成し、
前記標的抗原が、ペプチドとＭＨＣタンパク質とを含む複合体である、
ａｂＴＣＲ。
［実施態様１１］
前記第１のポリペプチド鎖が、前記第１の抗原結合ドメインと前記第１のＴＣＲＤとの間に第１のペプチドリンカーをさらに含み、前記第２のポリペプチド鎖が、前記第２の抗原結合ドメインと前記第２のＴＣＲＤとの間に第２のペプチドリンカーをさらに含む、実施態様１０に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様１２］
前記第１および／または第２のペプチドリンカーが、免疫グロブリンまたはＴ細胞受容体サブユニット由来の定常ドメインまたはその断片を個々に含む、実施態様１１に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様１３］
前記第１および／または第２のペプチドリンカーが、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、ＣＨ４もしくはＣＬ抗体ドメイン、またはそれらの断片を個々に含む、実施態様１２に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様１４］
前記第１および／または第２のペプチドリンカーが、Ｃα、Ｃβ、ＣγもしくはＣδＴＣＲドメイン、またはそれらの断片を個々に含む、実施態様１２に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様１５］
前記第１のＴＣＲＤが、前記第１の膜貫通ドメインのＮ末端側に、ＴＣＲサブユニットの第１の接続ペプチドまたはその断片をさらに含む、実施態様１から１４のいずれか一に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様１６］
前記第２のＴＣＲＤが、前記第２の膜貫通ドメインのＮ末端側に、ＴＣＲサブユニットの第２の接続ペプチドまたはその断片をさらに含む、実施態様１から１５のいずれか一に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様１７］
前記ＴＣＲＭが、前記第１の接続ペプチド中の残基と前記第２の接続ペプチド中の残基との間のジスルフィド結合を含む、実施態様１５または１６に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様１８］
前記第１のＴＣＲＤが、前記第１の膜貫通ドメインのＣ末端側に、ＴＣＲ細胞内配列を含む第１のＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含む、実施態様１から１７のいずれか一に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様１９］
前記第２のＴＣＲＤが、前記第２の膜貫通ドメインのＣ末端側に、ＴＣＲ細胞内配列を含む第２のＴＣＲ細胞内ドメインをさらに含む、実施態様１から１８のいずれか一に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様２０］
前記第１のポリペプチド鎖が、前記第１の膜貫通ドメインのＣ末端側に、共刺激細胞内シグナル伝達配列を含む第１のアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む、実施態様１から１９のいずれか一に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様２１］
前記第２のポリペプチド鎖が、前記第２の膜貫通ドメインのＣ末端側に、共刺激細胞内シグナル伝達配列を含む第２のアクセサリ細胞内ドメインをさらに含む、実施態様１から２０のいずれか一に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様２２］
前記第１のポリペプチド鎖が、前記第１の抗原結合ドメインのＮ末端側に、第１のシグナル伝達ペプチドをさらに含む、実施態様１から２１のいずれか一に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様２３］
前記第２のポリペプチド鎖が、前記第２の抗原結合ドメインのＮ末端側に、第２のシグル伝達ペプチドをさらに含む、実施態様１から２２のいずれか一に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様２４］
前記標的抗原複合体中の前記ペプチドが、ＷＴ－１、ＡＦＰ、ＨＰＶ１６－Ｅ７、ＮＹ
－ＥＳＯ－１、ＰＲＡＭＥ、ＥＢＶ－ＬＭＰ２Ａ、ＨＩＶ－１およびＰＳＡからなる群から選択されるタンパク質に由来する、実施態様９から２３のいずれか一に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様２５］
前記分子が、約０．１ｐＭ～約５００ｎＭの平衡解離定数（Ｋｄ）で前記標的抗原に結合する、実施態様１から２４のいずれか一に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様２６］
前記ＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールが、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζからなる群から選択される、実施態様１から２５のいずれか一に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様２７］
前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲα鎖であり、前記第２のＴＣＲサブユニットがＴＣＲβ鎖である、実施態様１から２６のいずれか一に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様２８］
前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲβ鎖であり、前記第２のＴＣＲサブユニットがＴＣＲα鎖である、実施態様１から２６のいずれか一に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様２９］
前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲγ鎖であり、前記第２のＴＣＲサブユニットがＴＣＲδ鎖である、実施態様１から２６のいずれか一に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様３０］
前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲδ鎖であり、前記第２のＴＣＲサブユニットがＴＣＲγ鎖である、実施態様１から２６のいずれか一に記載のａｂＴＣＲ。
［実施態様３１］
実施態様１から３０のいずれか一に記載のａｂＴＣＲの前記第１および第２のポリペプチド鎖をコードする核酸（複数可）。
［実施態様３２］
実施態様１から３０のいずれか一に記載のａｂＴＣＲと、ＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζからなる群から選択される少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールとを含む複合体。
［実施態様３３］
前記ａｂＴＣＲとＣＤ３δε、ＣＤ３γεおよびζζとを含む八量体である、実施態様３２に記載の複合体。
［実施態様３４］
実施態様１から３０のいずれか一に記載のａｂＴＣＲまたは実施態様３２もしくは３３に記載の複合体をその表面上に提示するエフェクター細胞。
［実施態様３５］
実施態様３１に記載の核酸（複数可）を含むエフェクター細胞。
［実施態様３６］
前記第１のＴＣＲサブユニットおよび／または前記第２のＴＣＲサブユニットを発現しない、実施態様３４または３５に記載のエフェクター細胞。
［実施態様３７］
ａ）前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲαであり、前記第２のＴＣＲサブユニットがＴＣＲβであり；または
ｂ）前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲβであり、前記第２のＴＣＲサブユニットがＴＣＲαであり；
前記エフェクター細胞がγδＴ細胞である、実施態様３６に記載のエフェクター細胞。
［実施態様３８］
ａ）前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲγであり、前記第２のＴＣＲサブユニットがＴＣＲδであり；または
ｂ）前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲδであり、前記第２のＴＣＲサブユニットがＴＣＲγであり；
前記エフェクター細胞がαβＴ細胞である、実施態様３６に記載のエフェクター細胞。
［実施態様３９］
第１の内因性ＴＣＲサブユニットおよび／または第２の内因性ＴＣＲサブユニットの発現を遮断するまたは減少させるように改変されている、実施態様３４から３６のいずれか一に記載のエフェクター細胞。
［実施態様４０］
ａ）前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲαであり、前記第２のＴＣＲサブユニットがＴＣＲβであり；または
ｂ）前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲβであり、前記第２のＴＣＲサブユニットがＴＣＲαであり；
前記エフェクター細胞が、ＴＣＲαおよび／またはＴＣＲβの発現を遮断するまたは減少させるように改変されたαβＴ細胞である、実施態様３９に記載のエフェクター細胞。
［実施態様４１］
ａ）前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲγであり、前記第２のＴＣＲサブユニットがＴＣＲδであり；または
ｂ）前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲδであり、前記第２のＴＣＲサブユニットがＴＣＲγであり；
前記エフェクター細胞が、ＴＣＲγおよび／またはＴＣＲδの発現を遮断するまたは減少させるように改変されたγδＴ細胞である、実施態様３９に記載のエフェクター細胞。
［実施態様４２］
ＣＤ３＋細胞である、実施態様３４から４１のいずれか一に記載のエフェクター細胞。［実［実施態様４３］
前記ＣＤ３＋細胞が、細胞傷害性Ｔ細胞、ヘルパーＴ細胞、ナチュラルキラーＴ細胞およびサプレッサーＴ細胞からなる群から選択される、実施態様４２に記載のエフェクター細胞。
［実施態様４４］
ａ）第１のプロモーターの制御下の前記ａｂＴＣＲの前記第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列を含む第１のベクターと、ｂ）第２のプロモーターの制御下の前記ａｂＴＣＲの前記第２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列を含む第２のベクターとを含む、実施態様３４から４３のいずれか一に記載のエフェクター細胞。
［実施態様４５］
ａ）第１のプロモーターの制御下の前記ａｂＴＣＲの前記第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列と；ｂ）第２のプロモーターの制御下の前記ａｂＴＣＲの前記第２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列とを含むベクターを含む、実施態様３４から４３のいずれか一に記載のエフェクター細胞。
［実施態様４６］
ａ）前記ａｂＴＣＲの前記第１のポリペプチド鎖をコードする第１の核酸配列と；ｂ）前記ａｂＴＣＲの前記第２のポリペプチド鎖をコードする第２の核酸配列とを含むベクターを含み、前記第１および第２の核酸配列が、単一のプロモーターの制御下にある、実施態様３４から４３のいずれか一に記載のエフェクター細胞。
［実施態様４７］
前記ａｂＴＣＲの前記第１のポリペプチド鎖の発現が、前記ａｂＴＣＲの前記第２のポリペプチド鎖の発現とは、２倍よりも大きく異なる、実施態様３４から４５のいずれか一に記載のエフェクター細胞。
［実施態様４８］
標的抗原を提示する標的細胞を死滅させる方法であって、前記標的細胞を、実施態様３４から４７のいずれか一に記載のエフェクター細胞と接触させるステップを含み、前記ａｂＴＣＲが、前記標的抗原に特異的に結合する、方法。
［実施態様４９］
標的抗原を提示する標的細胞を死滅させる方法であって、前記標的細胞を、前記標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲを含むエフェクターαβＴ細胞と接触させるステップを含み、前記ａｂＴＣＲが、
ａ）ＶＨ抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲサブユニットの第１の膜貫通ドメインを含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；およ ｂ）ＶＬ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲサブユニットの第２の膜貫通ドメインを含む第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖
を含み、
前記第１の抗原結合ドメインの前記ＶＨドメインと前記第２の抗原結合ドメインの前記ＶＬドメインとが、前記標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールを形成し、
前記第１のＴＣＲＤと前記第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）を形成し、
前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲγであり、前記第２のＴＣＲサブユニットがＴＣＲδである、または前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲδであり、前記第２のＴＣＲサブユニットがＴＣＲγである、
方法。
［実施態様５０］
前記第１のポリペプチド鎖が、前記第１の抗原結合ドメインと前記第１のＴＣＲＤとの間に第１のペプチドリンカーをさらに含み、前記第２のポリペプチド鎖が、前記第２の抗原結合ドメインと前記第２のＴＣＲＤとの間に第２のペプチドリンカーをさらに含む、実施態様４９に記載の方法。
［実施態様５１］
前記第１および／または第２のペプチドリンカーが、免疫グロブリンまたはＴ細胞受容体サブユニット由来の定常ドメインまたはその断片を個々に含む、実施態様５０に記載の方法。
［実施態様５２］
前記第１および／または第２のペプチドリンカーが、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、ＣＨ４もしくはＣＬ抗体ドメイン、またはそれらの断片を個々に含む、実施態様５１に記載の方法。
［実施態様５３］
前記第１および／または第２のペプチドリンカーが、Ｃα、Ｃβ、ＣγもしくはＣδＴＣＲドメイン、またはそれらの断片を個々に含む、実施態様５１に記載の方法。
［実施態様５４］
前記接触させるステップがｉｎ ｖｉｖｏである、実施態様４８から５３のいずれか一に記載の方法。
［実施態様５５］
前記接触させるステップがｉｎ ｖｉｔｒｏである、実施態様４８から５３のいずれか一に記載の方法。
［実施態様５６］
実施態様１から３０のいずれか一に記載のａｂＴＣＲ、実施態様３１に記載の核酸（複数可）、または実施態様３４から４７のいずれか一に記載のエフェクター細胞と、薬学的に許容されるキャリアとを含む医薬組成物。
［実施態様５７］
それを必要とする個体において標的抗原関連疾患を処置する方法であって、前記個体に、有効量の、実施態様５１に記載の医薬組成物を投与するステップを含む方法。
［実施態様５８］
それを必要とする個体において標的抗原関連疾患を処置する方法であって、前記個体に、有効量の、前記標的抗原に特異的に結合するａｂＴＣＲを含むエフェクターαβＴ細胞を含む組成物を投与するステップを含み、前記ａｂＴＣＲが、
ａ）ＶＨ抗体ドメインを含む第１の抗原結合ドメインと第１のＴＣＲサブユニットの第１の膜貫通ドメインを含む第１のＴＣＲＤとを含む第１のポリペプチド鎖；および
ｂ）ＶＬ抗体ドメインを含む第２の抗原結合ドメインと第２のＴＣＲサブユニットの第２の膜貫通ドメインを含む第２のＴＣＲＤとを含む第２のポリペプチド鎖
を含み、
前記第１の抗原結合ドメインの前記ＶＨドメインと前記第２の抗原結合ドメインの前記ＶＬドメインとが、前記標的抗原に特異的に結合する抗原結合モジュールを形成し、
前記第１のＴＣＲＤと前記第２のＴＣＲＤとが、少なくとも１つのＴＣＲ関連シグナル伝達モジュールをリクルートすることが可能なＴ細胞受容体モジュール（ＴＣＲＭ）を形成し、
前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲγであり、前記第２のＴＣＲサブユニットがＴＣＲδである、または前記第１のＴＣＲサブユニットがＴＣＲδであり、前記第２のＴＣＲサブユニットがＴＣＲγである、
方法。
［実施態様５９］
前記第１のポリペプチド鎖が、前記第１の抗原結合ドメインと前記第１のＴＣＲＤとの間に第１のペプチドリンカーをさらに含み、前記第２のポリペプチド鎖が、前記第２の抗原結合ドメインと前記第２のＴＣＲＤとの間に第２のペプチドリンカーをさらに含む、実施態様５８に記載の方法。
［実施態様６０］
前記第１および／または第２のペプチドリンカーが、免疫グロブリンまたはＴ細胞受容体サブユニット由来の定常ドメインまたはその断片を個々に含む、実施態様５９に記載の方法。
［実施態様６１］
前記第１および／または第２のペプチドリンカーが、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、ＣＨ４もしくはＣＬ抗体ドメイン、またはそれらの断片を個々に含む、実施態様６０に記載の方法。
［実施態様６２］
前記第１および／または第２のペプチドリンカーが、Ｃα、Ｃβ、ＣγもしくはＣδＴＣＲドメイン、またはそれらの断片を個々に含む、実施態様６０に記載の方法。
［実施態様６３］
前記標的抗原関連疾患ががんである、実施態様５７から６２のいずれか一に記載の方法。
［実施態様６４］
前記がんが、副腎皮質癌、膀胱がん、乳がん、子宮頸がん、胆管細胞癌、結腸直腸がん、食道がん、グリア芽細胞腫、グリオーマ、肝細胞癌、頭頸部がん、腎臓がん、白血病、リンパ腫、肺がん、メラノーマ、中皮腫、多発性骨髄腫、膵臓がん、褐色細胞腫、形質細胞腫、神経芽細胞腫、卵巣がん、前立腺がん、肉腫、胃がん、子宮がんおよび甲状腺がんからなる群から選択される、実施態様６３に記載の方法。
［実施態様６５］
前記標的抗原関連疾患がウイルス感染症である、実施態様５７から６２のいずれか一に記載の方法。
［実施態様６６］
前記ウイルス感染症が、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、エプスタイン－バーウイルス（ＥＢＶ）、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス（ＫＳＨＶ）、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、伝染性軟属腫ウイルス（ＭＣＶ）、ヒトＴ細胞白血病ウイルス１（ＨＴＬＶ－１）、ＨＩＶ（ヒト免疫不全ウイルス）およびＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）からなる群から選択されるウイルスによって引き起こされる、実施態様６５に記載の方法。
［実施態様６７］
実施態様３４から４７のいずれか一に記載のエフェクター細胞について不均一な細胞集団を富化する方法であって、
ａ）前記不均一な細胞集団を、前記標的抗原またはその中に含まれる１つもしくは複数のエピトープを含むリガンドと接触させて、前記リガンドに結合した前記エフェクター細胞の複合体を形成するステップ；および
ｂ）前記不均一な細胞集団から前記複合体を分離し、それによって、前記エフェクター細胞について富化された細胞集団を生成するステップ
を含む方法。
［実施態様６８］
実施態様１から３０のいずれか一に記載の複数のａｂＴＣＲをコードする配列を含む核酸ライブラリー。
［実施態様６９］
標的抗原に対して特異的なａｂＴＣＲをコードする配列について、実施態様６８に記載の核酸ライブラリーをスクリーニングする方法であって、
ａ）前記ａｂＴＣＲが複数の細胞の表面上で発現されるように、前記核酸ライブラリーを前記複数の細胞中に導入するステップ；
ｂ）前記複数の細胞を、前記標的抗原またはその中に含まれる１つもしくは複数のエピトープを含むリガンドと共にインキュベートするステップ；
ｃ）前記リガンドに結合した細胞を収集するステップ；および
ｄ）ステップｃ）において収集した細胞から、前記ａｂＴＣＲをコードする配列を単離し、それによって、前記標的抗原に対して特異的なａｂＴＣＲを同定するステップ
を含む方法。
【外国語明細書】