特開 2024-75579 骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症及び貧血を治療するための方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公開特許公報(A)

(11)【公開番号】P2024075579

(43)【公開日】2024-06-04

(54)【発明の名称】骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症及び貧血を治療するための方法

(51)【国際特許分類】

   A61K 45/00 20060101AFI20240528BHJP

   A61P 7/00 20060101ALI20240528BHJP

   C07K 19/00 20060101ALI20240528BHJP

   C07K 16/00 20060101ALN20240528BHJP

   C07K 14/705 20060101ALN20240528BHJP

   C12N 15/62 20060101ALN20240528BHJP

【ＦＩ】

A61K45/00 ZNA

A61P7/00

C07K19/00

C07K16/00

C07K14/705

C12N15/62 Z

【審査請求】有

【請求項の数】1

【出願形態】ＯＬ

【外国語出願】

(21)【出願番号】P 2024027645

(22)【出願日】2024-02-27

(62)【分割の表示】P 2019569312の分割

【原出願日】2018-06-13

(31)【優先権主張番号】62/519,725

(32)【優先日】2017-06-14

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】62/679,210

(32)【優先日】2018-06-01

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(71)【出願人】

【識別番号】509307635

【氏名又は名称】セルジーン コーポレイション

(74)【代理人】

【識別番号】100097456

【弁理士】

【氏名又は名称】石川 徹

(72)【発明者】

【氏名】アブデラフマネ ラアデム

(72)【発明者】

【氏名】ロバート ガレ

(57)【要約】      （修正有）

【課題】骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症を治療するための方法を提供する。
【解決手段】ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬を対象に投与することを含む、方法とする。
【選択図】図１

【特許請求の範囲】

【請求項1】

骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症の治療を必要とする対象においてそれを治療するための
方法であって、薬学的有効量のＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬を前記対象に投与する
ことを含む、前記方法。

【請求項2】

前記対象が、貧血を有する、請求項１に記載の方法。

【請求項3】

骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症の治療を必要とする対象においてそれを治療するための
方法であって、前記方法が、薬学的有効量のＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬を前記対
象に投与することを含み、前記治療することが、前記対象の前記骨髄増殖性腫瘍関連骨髄
線維症の１つ以上の症状を軽減または緩和する、前記方法。

【請求項4】

前記症状が、疲労、寝汗、かゆみ、腹部不快感、左側肋骨下の痛み、早期満腹、または
骨痛のうちの１つ以上である、請求項３に記載の方法。

【請求項5】

貧血の治療を必要とする対象においてそれを治療するための方法であって、前記方法が
、薬学的有効量のＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬を前記対象に投与することを含み、
前記対象が、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症を有する、前記方法。

【請求項6】

前記骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症が、原発性骨髄線維症である、請求項１～５のいず
れか一項に記載の方法。

【請求項7】

前記骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症が、真性多血症後の骨髄線維症である、請求項１～
５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項8】

前記骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症が、本態性血小板血症後の骨髄線維症である、請求
項１～５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項9】

前記対象が赤血球輸血非依存性である、請求項１～５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項10】

前記対象が、前記ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬を前記対象に投与する前の８４日
の期間中に、０単位の赤血球を受容している場合、前記対象は赤血球輸血非依存性である
、請求項９に記載の方法。

【請求項11】

前記対象が、赤血球輸血依存性である、請求項１～８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項12】

前記対象が、前記ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬を前記対象に投与する前の少なく
とも８４日の期間中に、２８日毎に２～４単位の赤血球の平均赤血球輸血頻度を受容して
いる場合、前記対象は赤血球輸血依存性である、請求項１１に記載の方法。

【請求項13】

前記薬学的有効量が、０．３３ｍｇ／ｋｇ、０．４５ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、
０．８ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、１．３３ｍｇ／ｋｇ、１．７５ｍｇ／ｋｇ、または２
．０ｍｇ／ｋｇである、請求項１～１２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項14】

前記薬学的有効量が、１．０ｍｇ／ｋｇである、請求項１～１２のいずれか一項に記載
の方法。

【請求項15】

前記ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬が、前記対象に２１日毎に１回、２８日毎に１
回、または４８日毎に１回投与される、請求項１～１４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項16】

前記ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬が、前記対象に静脈内または皮下投与される、
請求項１～１５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項17】

前記ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬が、前記対象に２１日毎に１回皮下投与される
、請求項１４に記載の方法。

【請求項18】

前記ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬が、ＡｃｔＲＩＩＢの細胞外ドメイン及びヒト
ＩｇＧ１ Ｆｃドメインからなるヒト化融合タンパク質である、請求項１～１７のいずれ
か一項に記載の方法。

【請求項19】

前記ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬が、ＡｃｔＲＩＩＢの細胞外ドメイン及びヒト
ＩｇＧ１ Ｆｃドメインを含む融合タンパク質である、請求項１～１７のいずれか一項に
記載の方法。

【請求項20】

前記ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬が、
（ａ）配列番号４と９０％同一、
（ｂ）配列番号４と９５％同一、
（ｃ）配列番号４と９８％同一、
（ｄ）配列番号４、
（ｅ）配列番号７と９０％同一、
（ｆ）配列番号７と９５％同一、
（ｇ）配列番号７と９８％同一、
（ｈ）配列番号７、
（ｉ）配列番号８と９０％同一、
（ｊ）配列番号８と９５％同一、
（ｋ）配列番号８と９８％同一、
（ｌ）配列番号８、
（ｍ）配列番号１１と９０％同一、
（ｎ）配列番号１１と９５％同一、
（ｏ）配列番号１１と９８％同一、及び
（ｐ）配列番号１１、からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むポリペプチドであ
る、請求項１～１７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項21】

前記ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬が、
（ａ）配列番号１１と９０％同一、
（ｂ）配列番号１１と９５％同一、
（ｃ）配列番号１１と９８％同一、及び
（ｄ）配列番号１１、からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むポリペプチドであ
る、請求項１～１７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項22】

前記ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬が、配列番号１１のアミノ酸配列を含むポリペ
プチドである、請求項１～１７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項23】

前記ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬が、配列番号１１からなるアミノ酸配列を含む
ポリペプチドである、請求項１～１７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項24】

前記ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬が、配列番号１１に記載されるアミノ酸配列か
らなるポリペプチドである、請求項１～１７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項25】

前記対象が、ヒトである、請求項１～２４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項26】

骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症の治療を必要とする対象においてそれを治療するための
方法であって、前記方法が、０．３３ｍｇ／ｋｇ、０．４５ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋ
ｇ、０．８ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、１．３３ｍｇ／ｋｇ、１．７５ｍｇ／ｋｇ、また
は２．０ｍｇ／ｋｇの用量の、配列番号１１のアミノ酸配列を含むポリペプチドを前記対
象に投与することを含み、前記ポリペプチドが、前記対象に、２１日毎に１回皮下投与さ
れる、前記方法。

【請求項27】

骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症の治療を必要とする対象においてそれを治療するための
方法であって、前記方法が、０．３３ｍｇ／ｋｇ、０．４５ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋ
ｇ、０．８ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、１．３３ｍｇ／ｋｇ、１．７５ｍｇ／ｋｇ、また
は２．０ｍｇ／ｋｇの用量の、配列番号１１のアミノ酸配列からなるアミノ酸を含むポリ
ペプチドを前記対象に投与することを含み、前記ポリペプチドが、前記対象に、２１日毎
に１回皮下投与される、前記方法。

【請求項28】

骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症の治療を必要とする対象においてそれを治療するための
方法であって、前記方法が、０．３３ｍｇ／ｋｇ、０．４５ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋ
ｇ、０．８ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、１．３３ｍｇ／ｋｇ、１．７５ｍｇ／ｋｇ、また
は２．０ｍｇ／ｋｇの用量の、配列番号１１のアミノ酸配列からなるポリペプチドを前記
対象に投与することを含み、前記ポリペプチドが、前記対象に、２１日毎に１回皮下投与
される、前記方法。

【請求項29】

前記用量が、１．０ｍｇ／ｋｇである、請求項２６～２８のいずれか一項に記載の方法
。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本出願は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる、２０１７年６月１４日に出
願された米国仮出願第６２／５１９，７２５号、及び２０１８年６月１日に出願された同
第６２／６７９，２１０号の利益を主張する。

【0002】

本出願は、２０１８年６月６日に作成され、８１キロバイトのサイズを有する「１４２
４７－３０６－２２８＿ＳＥＱ＿ＬＩＳＴＩＮＧ．ｔｘｔ」と題されたテキストファイル
として本出願と共に提出された配列表を参照により組み込む。

【0003】

１． 技術分野
ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬を対象に投与することを含む、対象の骨髄増殖性腫
瘍関連骨髄線維症を治療するための方法が、本明細書に提供される。骨髄増殖性腫瘍関連
骨髄線維症の治療を必要とする対象においてそれを治療するための方法も本明細書に提供
され、本方法は、薬学的有効量のＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬を対象に投与するこ
とを含み、該治療することが該対象の骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症の１つ以上の症状を
軽減または緩和する。薬学的有効量のＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬を対象に投与す
ることを含む、貧血の治療を必要とする対象においてそれを治療するための方法も本明細
書に提供され、この対象は、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症を有する。

【背景技術】

【0004】

２． 背景技術
貧血は、赤血球の数の減少または血液中のヘモグロビンが正常よりも少ない量であるこ
とである。貧血はまた、ヘモグロビンの低下した酸素結合能力によって引き起こされ得る
。貧血は、血液の最も一般的な障害である。貧血は、無効造血によって引き起こされるこ
ともある。無効造血は、有効な造血が行われるが、成熟赤血球が適切な速度で発達できな
い場合に存在する。前駆細胞は、成熟赤血球の段階に達する前にアポトーシスを起こす。

【0005】

骨髄増殖性腫瘍－（ＭＰＮ－）関連骨髄線維症は、直接発生し得る（原発性骨髄線維症
（特発性骨髄化生、慢性突発性骨髄線維症、骨髄化生を伴う骨髄硬化症、突発性骨髄線維
症としても知られる））か、または他の骨髄性腫瘍に端を発し得る（真性多血症及び本態
性血小板血症）、骨髄機能障害及び線維症、髄外造血、及び炎症状態の増加によって特徴
付けられる、クローン性骨髄性腫瘍を説明するために使用される総称である。ＭＰＮ関連
骨髄線維症は、骨髄中の過剰な線維組織の形成を結果として生じ、これが重度の貧血、疲
労、衰弱、及び脾臓ならびに肝臓の肥大をもたらし得る。ＭＰＮ関連骨髄線維症の現在の
治療には、ヒドロキシ尿素、脾臓摘出術、及び同種造血幹細胞の移植が挙げられる。しか
しながら、ヒドロキシ尿素処置は、貧血を悪化させる場合があり、長期使用によるその変
異原性の可能性が懸念されており、脾臓摘出術は、媒体の短い奏功期間を有し、脾臓摘出
後の生存期間を短くする場合があり、かつ術後罹患率が高く、同種造血幹細胞の移植は、
白血病性形質転換をもたらし得る（Ｓｏｃｈａｃｋｉ ｅｔ ａｌ．，２０１６，Ｔｈｅ
ｒａｐｅｕｔｉｃ ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ ｉｎ ｍｙｅｌｏｆｉｂｒｏｓｉｓ ａｎｄ
ｍｙｅｌｏｄｙｓｐｌａｓｔｉｃ／ｍｙｅｌｏｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ ｏｖｅｒ
ｌａｐ ｓｙｎｄｒｏｍｅｓ，Ｏｎｃｏ Ｔａｒｇｅｔｓ Ｔｈｅｒ，２０１６（９）：
２２７３－２８６）。したがって、ＭＰＮ関連骨髄線維症の治療のための治療薬が依然と
して必要とされている。

【0006】

２つの関連するＩＩ型受容体、ＡｃｔＲＩＩＡ及びＡｃｔＲＩＩＢは、アクチビンに対
するＩＩ型受容体として同定されている（Ｍａｔｈｅｗｓ ａｎｄ Ｖａｌｅ，１９９１
，Ｃｅｌｌ ６５：９７３－９８２；Ａｔｔｉｓａｎｏ ｅｔ ａｌ．，１９９２，Ｃｅ
ｌｌ ６８：９７－１０８）。アクチビンのほかにも、ＡｃｔＲＩＩＡ及びＡｃｔＲＩＩ
Ｂは、ＢＭＰ７、Ｎｏｄａｌ、ＧＤＦ８、及びＧＤＦ１１を含む、いくつかの他のＴＧＦ
－ベータファミリータンパク質と生化学的に相互作用することができる。（Ｙａｍａｓｈ
ｉｔａ ｅｔ ａｌ．，１９９５，Ｊ．Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．１３０：２１７－２２６；
Ｌｅｅ ａｎｄ ＭｃＰｈｅｒｒｏｎ，２００１，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃ
ｉ．９８：９３０６－９３１１；Ｙｅｏ ａｎｄ Ｗｈｉｔｍａｎ，２００１，Ｍｏｌ．
Ｃｅｌｌ ７：９４９－９５７；Ｏｈ ｅｔ ａｌ．，２００２，Ｇｅｎｅｓ Ｄｅｖ．
１６：２７４９－５４）。ＡＬＫ４は、アクチビン、特にアクチビンＡに対する主なＩ型
受容体であり、ＡＬＫ－７は、アクチビンに対して、特にアクチビンＢに対して同様に受
容体として機能することができる。ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、無効造血及び
骨髄異形成症候群の治療に関して記載されている（例えば、国際特許出願公開第ＷＯ２０
１３／０５９３４７号、同第ＷＯ２０１１／０２００４５号、及び同第ＷＯ２０１６／０
９００７７号を参照されたい）。

【発明の概要】

【0007】

３． 発明の概要
骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症の治療を必要とする対象においてそれを治療するための
方法が本明細書に提供され、本方法は、薬学的有効量のＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害
薬を対象に投与することを含む。具体的な実施形態では、対象は貧血を有する。具体的な
実施形態では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症は、原発性骨髄線維症である。具体的な実
施形態では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症は、真性多血症骨髄線維症である。より具体
的な実施形態では、真性多血症骨髄線維症は、ＪＡＫ２変異、例えば、ＪＡＫ２ Ｖ６１
７Ｆ変異もしくはＪＡＫ２エクソン１２変異、またはトロンボポイエチン受容体（ＭＰＬ
）変異に関連するか、またはこれにより引き起こされる。具体的な実施形態では、骨髄増
殖性腫瘍関連骨髄線維症は、真性多血症後の骨髄線維症である。より具体的な実施形態で
は、真性多血症後の骨髄線維症は、ＪＡＫ２変異、例えば、ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ変異、
またはトロンボポイエチン受容体（ＭＰＬ）変異に関連するか、またはこれにより引き起
こされる。具体的な実施形態では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症は、本態性血小板減少
症または本態性血小板血症後の骨髄線維症である。より具体的な実施形態では、本態性血
小板減少症または本態性血小板血症後の骨髄線維症は、ＪＡＫ２変異、例えば、ＪＡＫ２
Ｖ６１７Ｆ変異、またはトロンボポイエチン受容体（ＭＰＬ）変異に関連するか、また
はこれにより引き起こされる。より具体的な実施形態では、本態性血小板減少症または本
態性血小板血症後の骨髄線維症には、レチクリン線維症またはトリクローム線維症が含ま
れる。具体的な実施形態では、対象は、赤血球輸血非依存性である。具体的な実施形態で
は、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬を対象に投与する前、６０、６１、６２、６３、
６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７
７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、また
は９０日の期間中に対象が赤血球の単位を受容していない場合（０単位を受容している場
合）、その対象は赤血球輸血非依存性である。具体的な実施形態では、対象は、赤血球輸
血依存性である。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬を対象に投
与する前、少なくとも６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、
７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８
３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、または９０日の期間中に対象が２８日毎に２
～４単位の赤血球の平均赤血球輸血頻度を受容している場合、その対象は赤血球輸血依存
性である。具体的な実施形態では、薬学的有効量は、０．３ｍｇ／ｋｇ～２．０ｍｇ／ｋ
ｇ、例えば、０．３３ｍｇ／ｋｇ、０．４５ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ
／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、１．３３ｍｇ／ｋｇ、１．７５ｍｇ／ｋｇ、または２．０ｍｇ／
ｋｇである。具体的な実施形態では、薬学的有効量は、１ｍｇ／ｋｇである。具体的な実
施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、対象に２１日毎に１回、２８日毎に
１回、または４８日毎に１回投与される。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナ
ル伝達阻害薬は、対象に２１日毎に１回投与される。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩ
ＩＢシグナル伝達阻害薬は、対象に静脈内または皮下投与される。具体的な実施形態では
、薬学的有効量は１ｍｇ／ｋｇであり、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、対象に２
１日毎に１回皮下投与される。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害
薬は、対象に皮下投与される。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害
薬は、ＡｃｔＲＩＩＢの細胞外ドメイン及びヒトＩｇＧ１ Ｆｃドメインからなるヒト化
融合タンパク質である。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、
ＡｃｔＲＩＩＢの細胞外ドメイン及びヒトＩｇＧ１ Ｆｃドメインを含む融合タンパク質
である。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、（ａ）配列番号
４と９０％同一、（ｂ）配列番号４と９５％同一、（ｃ）配列番号４と９８％同一、（ｄ
）配列番号４、（ｅ）配列番号７と９０％同一、（ｆ）配列番号７と９５％同一、（ｇ）
配列番号７と９８％同一、（ｈ）配列番号７、（ｉ）配列番号８と９０％同一、（ｊ）配
列番号８と９５％同一、（ｋ）配列番号８と９８％同一、（ｌ）配列番号８、（ｍ）配列
番号１１と９０％同一、（ｎ）配列番号１１と９５％同一、（ｏ）配列番号１１と９８％
同一、及び（ｐ）配列番号１１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むポリペプチ
ドである。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、（ａ）配列番
号１１と９０％同一、（ｂ）配列番号１１と９５％同一、（ｃ）配列番号１１と９８％同
一、及び（ｄ）配列番号１１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むポリペプチド
である。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、配列番号１１の
アミノ酸配列を含むポリペプチドである。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナ
ル伝達阻害薬は、配列番号１１のアミノ酸配列からなるアミノ酸配列を含むポリペプチド
である。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、配列番号１１に
記載されるアミノ酸配列からなるポリペプチドである。具体的な実施形態では、対象はヒ
トである。

【0008】

骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症の治療を必要とする対象においてそれを治療するための
方法も本明細書に提供され、本方法は、薬学的有効量のＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害
薬を対象に投与することを含み、該治療することが該対象の骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維
症の１つ以上の症状を軽減または緩和する。具体的な実施形態では、症状は、疲労、寝汗
、かゆみ、腹部不快感、左側肋骨下の痛み、早期満腹、または骨痛のうちの１つ以上であ
る。具体的な実施形態では、対象は貧血を有する。具体的な実施形態では、骨髄増殖性腫
瘍関連骨髄線維症は、原発性骨髄線維症である。具体的な実施形態では、骨髄増殖性腫瘍
関連骨髄線維症は、真性多血症骨髄線維症である。より具体的な実施形態では、真性多血
症骨髄線維症は、ＪＡＫ２変異、例えば、ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ変異もしくはＪＡＫ２エ
クソン１２変異、またはトロンボポイエチン受容体（ＭＰＬ）変異に関連するか、または
これにより引き起こされる。具体的な実施形態では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症は、
真性多血症後の骨髄線維症である。より具体的な実施形態では、真性多血症後の骨髄線維
症は、ＪＡＫ２変異、例えば、ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ変異、またはトロンボポイエチン受
容体（ＭＰＬ）変異に関連するか、またはこれにより引き起こされる。具体的な実施形態
では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症は、本態性血小板減少症または本態性血小板血症後
の骨髄線維症である。より具体的な実施形態では、本態性血小板減少症または本態性血小
板血症後の骨髄線維症は、ＪＡＫ２変異、例えば、ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ変異、またはト
ロンボポイエチン受容体（ＭＰＬ）変異に関連するか、またはこれにより引き起こされる
。より具体的な実施形態では、本態性血小板減少症または本態性血小板血症後の骨髄線維
症には、レチクリン線維症またはトリクローム線維症が含まれる。具体的な実施形態では
、対象は、赤血球輸血非依存性である。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル
伝達阻害薬を対象に投与する前、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６
８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１
、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、または９０日の期間中に対象が赤
血球の単位を受容していない場合（０単位を受容している場合）、その対象は赤血球輸血
非依存性である。具体的な実施形態では、対象は、赤血球輸血依存性である。具体的な実
施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬を対象に投与する前、少なくとも６０、
６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７
４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７
、８８、８９、または９０日の期間中に対象が２８日毎に２～４単位の赤血球の平均赤血
球輸血頻度を受容している場合、その対象は赤血球輸血依存性である。具体的な実施形態
では、薬学的有効量は、０．３ｍｇ／ｋｇ～２．０ｍｇ／ｋｇ、例えば、０．３３ｍｇ／
ｋｇ、０．４５ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、１．
３３ｍｇ／ｋｇ、１．７５ｍｇ／ｋｇ、または２．０ｍｇ／ｋｇである。具体的な実施形
態では、薬学的有効量は、１ｍｇ／ｋｇである。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢ
シグナル伝達阻害薬は、対象に２１日毎に１回、２８日毎に１回、または４８日毎に１回
投与される。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、対象に２１
日毎に１回投与される。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、
対象に静脈内または皮下投与される。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝
達阻害薬は、対象に皮下投与される。具体的な実施形態では、薬学的有効量は１ｍｇ／ｋ
ｇであり、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、対象に２１日毎に１回皮下投与される
。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、ＡｃｔＲＩＩＢの細胞
外ドメイン及びヒトＩｇＧ１ Ｆｃドメインからなるヒト化融合タンパク質である。具体
的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、ＡｃｔＲＩＩＢの細胞外ドメ
イン及びヒトＩｇＧ１ Ｆｃドメインを含む融合タンパク質である。具体的な実施形態で
は、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、（ａ）配列番号４と９０％同一、（ｂ）配列
番号４と９５％同一、（ｃ）配列番号４と９８％同一、（ｄ）配列番号４、（ｅ）配列番
号７と９０％同一、（ｆ）配列番号７と９５％同一、（ｇ）配列番号７と９８％同一、（
ｈ）配列番号７、（ｉ）配列番号８と９０％同一、（ｊ）配列番号８と９５％同一、（ｋ
）配列番号８と９８％同一、（ｌ）配列番号８、（ｍ）配列番号１１と９０％同一、（ｎ
）配列番号１１と９５％同一、（ｏ）配列番号１１と９８％同一、及び（ｐ）配列番号１
１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むポリペプチドである。具体的な実施形態
では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、（ａ）配列番号１１と９０％同一、（ｂ）
配列番号１１と９５％同一、（ｃ）配列番号１１と９８％同一、及び（ｄ）配列番号１１
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むポリペプチドである。具体的な実施形態で
は、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、配列番号１１のアミノ酸配列を含むポリペプ
チドである。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、配列番号１
１のアミノ酸配列からなるアミノ酸配列を含むポリペプチドである。具体的な実施形態で
は、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、配列番号１１に記載されるアミノ酸配列から
なるポリペプチドである。具体的な実施形態では、対象はヒトである。

【0009】

薬学的有効量のＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬を対象に投与することを含む、貧血
の治療を必要とする対象においてそれを治療するための方法も本明細書に提供され、この
対象は、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症を有する。具体的な実施形態では、骨髄増殖性腫
瘍関連骨髄線維症は、原発性骨髄線維症である。具体的な実施形態では、骨髄増殖性腫瘍
関連骨髄線維症は、真性多血症骨髄線維症である。より具体的な実施形態では、真性多血
症骨髄線維症は、ＪＡＫ２変異、例えば、ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ変異もしくはＪＡＫ２エ
クソン１２変異、またはトロンボポイエチン受容体（ＭＰＬ）変異に関連するか、または
これにより引き起こされる。具体的な実施形態では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症は、
真性多血症後の骨髄線維症である。より具体的な実施形態では、真性多血症後の骨髄線維
症は、ＪＡＫ２変異、例えば、ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ変異、またはトロンボポイエチン受
容体（ＭＰＬ）変異に関連するか、またはこれにより引き起こされる。具体的な実施形態
では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症は、本態性血小板減少症または本態性血小板血症後
の骨髄線維症である。より具体的な実施形態では、本態性血小板減少症または本態性血小
板血症後の骨髄線維症は、ＪＡＫ２変異、例えば、ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ変異、またはト
ロンボポイエチン受容体（ＭＰＬ）変異に関連するか、またはこれにより引き起こされる
。より具体的な実施形態では、本態性血小板減少症または本態性血小板血症後の骨髄線維
症には、レチクリン線維症またはトリクローム線維症が含まれる。具体的な実施形態では
、対象は、赤血球輸血非依存性である。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル
伝達阻害薬を対象に投与する前、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６
８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１
、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、または９０日の期間中に対象が赤
血球の単位を受容していない場合（０単位を受容している場合）、その対象は赤血球輸血
非依存性である。具体的な実施形態では、対象は、赤血球輸血依存性である。具体的な実
施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬を対象に投与する前、少なくとも６０、
６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７
４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７
、８８、８９、または９０日の期間中に対象が２８日毎に２～４単位の赤血球の平均赤血
球輸血頻度を受容している場合、その対象は赤血球輸血依存性である。具体的な実施形態
では、薬学的有効量は、０．３ｍｇ／ｋｇ～２．０ｍｇ／ｋｇ、例えば、０．３３ｍｇ／
ｋｇ、０．４５ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、１．
３３ｍｇ／ｋｇ、１．７５ｍｇ／ｋｇ、または２．０ｍｇ／ｋｇである。具体的な実施形
態では、薬学的有効量は、１ｍｇ／ｋｇである。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢ
シグナル伝達阻害薬は、対象に２１日毎に１回、２８日毎に１回、または４８日毎に１回
投与される。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、対象に２１
日毎に１回投与される。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、
対象に静脈内または皮下投与される。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝
達阻害薬は、対象に皮下投与される。具体的な実施形態では、薬学的有効量は１ｍｇ／ｋ
ｇであり、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、対象に２１日毎に１回皮下投与される
。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、ＡｃｔＲＩＩＢの細胞
外ドメイン及びヒトＩｇＧ１ Ｆｃドメインからなるヒト化融合タンパク質である。具体
的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、ＡｃｔＲＩＩＢの細胞外ドメ
イン及びヒトＩｇＧ１ Ｆｃドメインを含む融合タンパク質である。具体的な実施形態で
は、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、（ａ）配列番号４と９０％同一、（ｂ）配列
番号４と９５％同一、（ｃ）配列番号４と９８％同一、（ｄ）配列番号４、（ｅ）配列番
号７と９０％同一、（ｆ）配列番号７と９５％同一、（ｇ）配列番号７と９８％同一、（
ｈ）配列番号７、（ｉ）配列番号８と９０％同一、（ｊ）配列番号８と９５％同一、（ｋ
）配列番号８と９８％同一、（ｌ）配列番号８、（ｍ）配列番号１１と９０％同一、（ｎ
）配列番号１１と９５％同一、（ｏ）配列番号１１と９８％同一、及び（ｐ）配列番号１
１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むポリペプチドである。具体的な実施形態
では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、（ａ）配列番号１１と９０％同一、（ｂ）
配列番号１１と９５％同一、（ｃ）配列番号１１と９８％同一、及び（ｄ）配列番号１１
からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むポリペプチドである。具体的な実施形態で
は、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、配列番号１１のアミノ酸配列を含むポリペプ
チドである。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、配列番号１
１のアミノ酸配列からなるアミノ酸配列を含むポリペプチドである。具体的な実施形態で
は、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、配列番号１１に記載されるアミノ酸配列から
なるポリペプチドである。具体的な実施形態では、対象はヒトである。

【0010】

骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症の治療を必要とする対象においてそれを治療するための
方法も本明細書に提供され、本方法は、０．３３ｍｇ／ｋｇ、０．４５ｍｇ／ｋｇ、０．
６ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、１．３３ｍｇ／ｋｇ、１．７５ｍｇ／
ｋｇ、または２．０ｍｇ／ｋｇの用量の、配列番号１１のアミノ酸配列を含むポリペプチ
ドを対象に投与することを含み、ポリペプチドは、対象に、２１日毎に１回皮下投与され
る。具体的な実施形態では、対象は貧血を有する。具体的な実施形態では、骨髄増殖性腫
瘍関連骨髄線維症は、真性多血症骨髄線維症である。より具体的な実施形態では、真性多
血症骨髄線維症は、ＪＡＫ２変異、例えば、ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ変異もしくはＪＡＫ２
エクソン１２変異、またはトロンボポイエチン受容体（ＭＰＬ）変異に関連するか、また
はこれにより引き起こされる。具体的な実施形態では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症は
、真性多血症後の骨髄線維症である。より具体的な実施形態では、真性多血症後の骨髄線
維症は、ＪＡＫ２変異、例えば、ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ変異、またはトロンボポイエチン
受容体（ＭＰＬ）変異に関連するか、またはこれにより引き起こされる。具体的な実施形
態では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症は、本態性血小板減少症または本態性血小板血症
後の骨髄線維症である。より具体的な実施形態では、本態性血小板減少症または本態性血
小板血症後の骨髄線維症は、ＪＡＫ２変異、例えば、ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ変異、または
トロンボポイエチン受容体（ＭＰＬ）変異に関連するか、またはこれにより引き起こされ
る。より具体的な実施形態では、本態性血小板減少症または本態性血小板血症後の骨髄線
維症には、レチクリン線維症またはトリクローム線維症が含まれる。具体的な実施形態で
は、対象は、赤血球輸血非依存性である。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナ
ル伝達阻害薬を対象に投与する前、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、
６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８
１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、または９０日の期間中に対象が
赤血球の単位を受容していない場合（０単位を受容している場合）、その対象は赤血球輸
血非依存性である。具体的な実施形態では、対象は、赤血球輸血依存性である。具体的な
実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬を対象に投与する前、少なくとも６０
、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、
７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８
７、８８、８９、または９０日の期間中に対象が２８日毎に２～４単位の赤血球の平均赤
血球輸血頻度を受容している場合、その対象は赤血球輸血依存性である。具体的な実施形
態では、対象はヒトである。

【0011】

骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症の治療を必要とする対象においてそれを治療するための
方法も本明細書に提供され、本方法は、０．３３ｍｇ／ｋｇ、０．４５ｍｇ／ｋｇ、０．
６ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、１．３３ｍｇ／ｋｇ、１．７５ｍｇ／
ｋｇ、または２．０ｍｇ／ｋｇの用量の、配列番号１１のアミノ酸配列を含むポリペプチ
ドを対象に投与することを含み、ポリペプチドは、対象に、２１日毎に１回皮下投与され
る。具体的な実施形態では、用量は、１ｍｇ／ｋｇである。具体的な実施形態では、対象
は貧血を有する。具体的な実施形態では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症は、真性多血症
骨髄線維症である。より具体的な実施形態では、真性多血症骨髄線維症は、ＪＡＫ２変異
、例えば、ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ変異もしくはＪＡＫ２エクソン１２変異、またはトロン
ボポイエチン受容体（ＭＰＬ）変異に関連するか、またはこれにより引き起こされる。具
体的な実施形態では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症は、真性多血症後の骨髄線維症であ
る。より具体的な実施形態では、真性多血症後の骨髄線維症は、ＪＡＫ２変異、例えば、
ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ変異、またはトロンボポイエチン受容体（ＭＰＬ）変異に関連する
か、またはこれにより引き起こされる。具体的な実施形態では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄
線維症は、本態性血小板減少症または本態性血小板血症後の骨髄線維症である。より具体
的な実施形態では、本態性血小板減少症または本態性血小板血症後の骨髄線維症は、ＪＡ
Ｋ２変異、例えば、ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ変異、またはトロンボポイエチン受容体（ＭＰ
Ｌ）変異に関連するか、またはこれにより引き起こされる。より具体的な実施形態では、
本態性血小板減少症または本態性血小板血症後の骨髄線維症には、レチクリン線維症また
はトリクローム線維症が含まれる。具体的な実施形態では、対象は、赤血球輸血非依存性
である。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬を対象に投与する前
、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、
７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８
６、８７、８８、８９、または９０日の期間中に対象が赤血球の単位を受容していない場
合（０単位を受容している場合）、その対象は赤血球輸血非依存性である。具体的な実施
形態では、対象は、赤血球輸血依存性である。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシ
グナル伝達阻害薬を対象に投与する前、少なくとも６０、６１、６２、６３、６４、６５
、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、
７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、または９０日の
期間中に対象が２８日毎に２～４単位の赤血球の平均赤血球輸血頻度を受容している場合
、その対象は赤血球輸血依存性である。具体的な実施形態では、対象はヒトである。

【0012】

骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症の治療を必要とする対象においてそれを治療するための
方法も本明細書に提供され、本方法は、０．３３ｍｇ／ｋｇ、０．４５ｍｇ／ｋｇ、０．
６ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、１．３３ｍｇ／ｋｇ、１．７５ｍｇ／
ｋｇ、または２．０ｍｇ／ｋｇの用量の、配列番号１１のアミノ酸配列からなるポリペプ
チドを対象に投与することを含み、ポリペプチドは、対象に、２１日毎に１回皮下投与さ
れる。具体的な実施形態では、用量は、１ｍｇ／ｋｇである。具体的な実施形態では、対
象は貧血を有する。具体的な実施形態では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症は、真性多血
症骨髄線維症である。より具体的な実施形態では、真性多血症骨髄線維症は、ＪＡＫ２変
異、例えば、ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ変異もしくはＪＡＫ２エクソン１２変異、またはトロ
ンボポイエチン受容体（ＭＰＬ）変異に関連するか、またはこれにより引き起こされる。
具体的な実施形態では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症は、真性多血症後の骨髄線維症で
ある。より具体的な実施形態では、真性多血症後の骨髄線維症は、ＪＡＫ２変異、例えば
、ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ変異、またはトロンボポイエチン受容体（ＭＰＬ）変異に関連す
るか、またはこれにより引き起こされる。具体的な実施形態では、骨髄増殖性腫瘍関連骨
髄線維症は、本態性血小板減少症または本態性血小板血症後の骨髄線維症である。より具
体的な実施形態では、本態性血小板減少症または本態性血小板血症後の骨髄線維症は、Ｊ
ＡＫ２変異、例えば、ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ変異、またはトロンボポイエチン受容体（Ｍ
ＰＬ）変異に関連するか、またはこれにより引き起こされる。より具体的な実施形態では
、本態性血小板減少症または本態性血小板血症後の骨髄線維症には、レチクリン線維症ま
たはトリクローム線維症が含まれる。具体的な実施形態では、対象は、赤血球輸血非依存
性である。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬を対象に投与する
前、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２
、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、
８６、８７、８８、８９、または９０日の期間中に対象が赤血球の単位を受容していない
場合（０単位を受容している場合）、その対象は赤血球輸血非依存性である。具体的な実
施形態では、対象は、赤血球輸血依存性である。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢ
シグナル伝達阻害薬を対象に投与する前、少なくとも６０、６１、６２、６３、６４、６
５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８
、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、または９０日
の期間中に対象が２８日毎に２～４単位の赤血球の平均赤血球輸血頻度を受容している場
合、その対象は赤血球輸血依存性である。具体的な実施形態では、対象はヒトである。

【0013】

４． 用語及び略語
本明細書で使用される場合、「ＡｃｔＲＩＩ」とはアクチビン受容体ＩＩ型を指す。本
明細書で使用される場合、「ＡｃｔＲＩＩＡ」とはアクチビン受容体ＩＩＡ型を指す。例
えば、Ｍａｔｈｅｗｓ ａｎｄ Ｖａｌｅ，１９９１，Ｃｅｌｌ ６５：９７３－９８２
を参照されたい。ＧｅｎＢａｎｋ（商標）登録番号ＮＭ＿００１２７８５７９．１は、例
示的なヒトＡｃｔＲＩＩＡの核酸配列を提供している。ＧｅｎＢａｎｋ（商標）登録番号
ＮＰ＿００１２６５５０８．１は、例示的なヒトＡｃｔＲＩＩＡのアミノ酸配列を提供し
ている。本明細書で使用される場合、「ＡｃｔＲＩＩＢ」とはアクチビン受容体ＩＩＢ型
を指す。例えば、Ａｔｔｉｓａｎｏ ｅｔ ａｌ．，１９９２，Ｃｅｌｌ ６８：９７－
１０８を参照されたい。ＧｅｎＢａｎｋ（商標）登録番号 ＮＭ＿００１１０６．３は、
例示的なヒトＡｃｔＲＩＩＢの核酸配列を提供している。ＧｅｎＢａｎｋ（商標）登録番
号ＮＰ＿００１０９７．２は、例示的なヒトＡｃｔＲＩＩＢのアミノ酸配列を提供してい
る。

【0014】

本明細書で使用される場合、「Ｈｂ」及び「Ｈｇｂ」とは、ヘモグロビンを指す。

【0015】

本明細書で使用される場合、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量に関する「ｍｇ
／ｋｇ」とは、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬が投与される対象の体重１キログラム
当たりのＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬のミリグラムを指す。

【0016】

本明細書で使用される場合、「ＭＦ」とは、骨髄線維症を指す。

【0017】

本明細書で使用される場合、「ＰＭＦ」とは、原発性骨髄線維症を指す。

【0018】

本明細書で使用される場合、「ＰＶ後ＭＦ」とは、真性多血症後の骨髄線維症を指す。

【0019】

本明細書で使用される場合、「ＥＴ後ＭＦ」とは、本態性血小板血症後の骨髄線維症を
指す。

【0020】

本明細書で使用される場合、「ＭＰＮ」とは、骨髄増殖性腫瘍を指す。

【0021】

本明細書で使用される場合、「ＲＢＣ」とは、赤血球を指す。

【0022】

本明細書で使用される場合、「ＲＢＣ－ＴＩ」とは、赤血球輸血依存性を指す。

【図面の簡単な説明】

【0023】

４．１ 図面の簡単な説明

【図1】ルスパテルセプトの作用機序である。

【0024】

【図2】研究デザインである。

【発明を実施するための形態】

【0025】

５． 発明を実施するための形態
５．１ 概要
骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症の治療を必要とする対象においてそれを治療するための
方法が本明細書に提供され、本方法は、薬学的有効量のＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害
薬を対象に投与することを含む。具体的な実施形態では、対象は貧血を有する。具体的な
実施形態では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症は、原発性骨髄線維症である。具体的な実
施形態では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症は、真性多血症骨髄線維症である。より具体
的な実施形態では、真性多血症骨髄線維症は、ＪＡＫ２変異、例えば、ＪＡＫ２ Ｖ６１
７Ｆ変異もしくはＪＡＫ２エクソン１２変異、またはトロンボポイエチン受容体（ＭＰＬ
）変異に関連するか、またはこれにより引き起こされる。具体的な実施形態では、骨髄増
殖性腫瘍関連骨髄線維症は、真性多血症後の骨髄線維症である。より具体的な実施形態で
は、真性多血症後の骨髄線維症は、ＪＡＫ２変異、例えば、ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ変異、
またはトロンボポイエチン受容体（ＭＰＬ）変異に関連するか、またはこれにより引き起
こされる。具体的な実施形態では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症は、本態性血小板減少
症または本態性血小板血症後の骨髄線維症である。より具体的な実施形態では、本態性血
小板減少症または本態性血小板血症後の骨髄線維症は、ＪＡＫ２変異、例えば、ＪＡＫ２
Ｖ６１７Ｆ変異、またはトロンボポイエチン受容体（ＭＰＬ）変異に関連するか、また
はこれにより引き起こされる。より具体的な実施形態では、本態性血小板減少症または本
態性血小板血症後の骨髄線維症には、レチクリン線維症またはトリクローム線維症が含ま
れる。具体的な実施形態では、対象は、赤血球輸血非依存性である。具体的な実施形態で
は、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬を対象に投与する前、６０、６１、６２、６３、
６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７
７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、また
は９０日の期間中に対象が赤血球の単位を受容していない場合（０単位を受容している場
合）、その対象は赤血球輸血非依存性である。具体的な実施形態では、対象は、赤血球輸
血依存性である。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬を対象に投
与する前、少なくとも６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、
７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８
３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、または９０日の期間中に対象が２８日毎に２
～４単位の赤血球の平均赤血球輸血頻度を受容している場合、その対象は赤血球輸血依存
性である。具体的な実施形態では、薬学的有効量は、０．３ｍｇ／ｋｇ～２．０ｍｇ／ｋ
ｇ、例えば、０．３３ｍｇ／ｋｇ、０．４５ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ
／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、１．３３ｍｇ／ｋｇ、１．７５ｍｇ／ｋｇ、または２．０ｍｇ／
ｋｇである。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、対象に２１
日毎に１回、２８日毎に１回、または４８日毎に１回投与される。具体的な実施形態では
、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、対象に２１日毎に１回投与される。具体的な実
施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、対象に静脈内または皮下投与される
。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、対象に皮下投与される
。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、ＡｃｔＲＩＩＢの細胞
外ドメイン及びヒトＩｇＧ１ Ｆｃドメインからなるヒト化融合タンパク質である。具体
的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、（ａ）配列番号４と９０％同
一、（ｂ）配列番号４と９５％同一、（ｃ）配列番号４と９８％同一、（ｄ）配列番号４
、（ｅ）配列番号７と９０％同一、（ｆ）配列番号７と９５％同一、（ｇ）配列番号７と
９８％同一、（ｈ）配列番号７、（ｉ）配列番号８と９０％同一、（ｊ）配列番号８と９
５％同一、（ｋ）配列番号８と９８％同一、（ｌ）配列番号８、（ｍ）配列番号１１と９
０％同一、（ｎ）配列番号１１と９５％同一、（ｏ）配列番号１１と９８％同一、及び（
ｐ）配列番号１１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むポリペプチドである。具
体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、（ａ）配列番号１１と９０
％同一、（ｂ）配列番号１１と９５％同一、（ｃ）配列番号１１と９８％同一、及び（ｄ
）配列番号１１からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むポリペプチドである。具体
的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、配列番号１１のアミノ酸配列
を含むポリペプチドである。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬
は、配列番号１１のアミノ酸配列からなるアミノ酸配列を含むポリペプチドである。具体
的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、配列番号１１に記載されるア
ミノ酸配列からなるポリペプチドである。具体的な実施形態では、対象はヒトである。

【0026】

骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症の治療を必要とする対象においてそれを治療するための
方法も本明細書に提供され、本方法は、薬学的有効量のＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害
薬を対象に投与することを含み、該治療することが該対象の骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維
症の１つ以上の症状を軽減または緩和する。具体的な実施形態では、症状は、疲労、寝汗
、かゆみ、腹部不快感、左側肋骨下の痛み、早期満腹、または骨痛のうちの１つ以上であ
る。具体的な実施形態では、対象は貧血を有する。具体的な実施形態では、骨髄増殖性腫
瘍関連骨髄線維症は、原発性骨髄線維症である。具体的な実施形態では、骨髄増殖性腫瘍
関連骨髄線維症は、真性多血症骨髄線維症である。より具体的な実施形態では、真性多血
症骨髄線維症は、ＪＡＫ２変異、例えば、ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ変異もしくはＪＡＫ２エ
クソン１２変異、またはトロンボポイエチン受容体（ＭＰＬ）変異に関連するか、または
これにより引き起こされる。具体的な実施形態では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症は、
真性多血症後の骨髄線維症である。より具体的な実施形態では、真性多血症後の骨髄線維
症は、ＪＡＫ２変異、例えば、ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ変異、またはトロンボポイエチン受
容体（ＭＰＬ）変異に関連するか、またはこれにより引き起こされる。具体的な実施形態
では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症は、本態性血小板減少症または本態性血小板血症後
の骨髄線維症である。より具体的な実施形態では、本態性血小板減少症または本態性血小
板血症後の骨髄線維症は、ＪＡＫ２変異、例えば、ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ変異、またはト
ロンボポイエチン受容体（ＭＰＬ）変異に関連するか、またはこれにより引き起こされる
。より具体的な実施形態では、本態性血小板減少症または本態性血小板血症後の骨髄線維
症には、レチクリン線維症またはトリクローム線維症が含まれる。具体的な実施形態では
、対象は、赤血球輸血非依存性である。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル
伝達阻害薬を対象に投与する前、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６
８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１
、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、または９０日の期間中に対象が赤
血球の単位を受容していない場合（０単位を受容している場合）、その対象は赤血球輸血
非依存性である。具体的な実施形態では、対象は、赤血球輸血依存性である。具体的な実
施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬を対象に投与する前、少なくとも６０、
６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７
４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７
、８８、８９、または９０日の期間中に対象が２８日毎に２～４単位の赤血球の平均赤血
球輸血頻度を受容している場合、その対象は赤血球輸血依存性である。具体的な実施形態
では、薬学的有効量は、０．３ｍｇ／ｋｇ～２．０ｍｇ／ｋｇ、例えば、０．３３ｍｇ／
ｋｇ、０．４５ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、１．
３３ｍｇ／ｋｇ、１．７５ｍｇ／ｋｇ、または２．０ｍｇ／ｋｇである。具体的な実施形
態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、対象に２１日毎に１回、２８日毎に１回
、または４８日毎に１回投与される。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝
達阻害薬は、対象に２１日毎に１回投与される。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢ
シグナル伝達阻害薬は、対象に静脈内または皮下投与される。具体的な実施形態では、Ａ
ｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、対象に皮下投与される。具体的な実施形態では、Ａ
ｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、ＡｃｔＲＩＩＢの細胞外ドメイン及びヒトＩｇＧ１
Ｆｃドメインからなるヒト化融合タンパク質である。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲ
ＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、（ａ）配列番号４と９０％同一、（ｂ）配列番号４と９５
％同一、（ｃ）配列番号４と９８％同一、（ｄ）配列番号４、（ｅ）配列番号７と９０％
同一、（ｆ）配列番号７と９５％同一、（ｇ）配列番号７と９８％同一、（ｈ）配列番号
７、（ｉ）配列番号８と９０％同一、（ｊ）配列番号８と９５％同一、（ｋ）配列番号８
と９８％同一、（ｌ）配列番号８、（ｍ）配列番号１１と９０％同一、（ｎ）配列番号１
１と９５％同一、（ｏ）配列番号１１と９８％同一、及び（ｐ）配列番号１１からなる群
から選択されるアミノ酸配列を含むポリペプチドである。具体的な実施形態では、Ａｃｔ
ＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、（ａ）配列番号１１と９０％同一、（ｂ）配列番号１１
と９５％同一、（ｃ）配列番号１１と９８％同一、及び（ｄ）配列番号１１からなる群か
ら選択されるアミノ酸配列を含むポリペプチドである。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲ
ＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、配列番号１１のアミノ酸配列を含むポリペプチドである。
具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、配列番号１１のアミノ酸
配列からなるアミノ酸配列を含むポリペプチドである。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲ
ＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、配列番号１１に記載されるアミノ酸配列からなるポリペプ
チドである。具体的な実施形態では、対象はヒトである。

【0027】

薬学的有効量のＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬を対象に投与することを含む、貧血
の治療を必要とする対象においてそれを治療するための方法も本明細書に提供され、この
対象は、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症を有する。具体的な実施形態では、骨髄増殖性腫
瘍関連骨髄線維症は、原発性骨髄線維症である。具体的な実施形態では、骨髄増殖性腫瘍
関連骨髄線維症は、真性多血症骨髄線維症である。より具体的な実施形態では、真性多血
症骨髄線維症は、ＪＡＫ２変異、例えば、ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ変異もしくはＪＡＫ２エ
クソン１２変異、またはトロンボポイエチン受容体（ＭＰＬ）変異に関連するか、または
これにより引き起こされる。具体的な実施形態では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症は、
真性多血症後の骨髄線維症である。より具体的な実施形態では、真性多血症後の骨髄線維
症は、ＪＡＫ２変異、例えば、ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ変異、またはトロンボポイエチン受
容体（ＭＰＬ）変異に関連するか、またはこれにより引き起こされる。具体的な実施形態
では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症は、本態性血小板減少症または本態性血小板血症後
の骨髄線維症である。より具体的な実施形態では、本態性血小板減少症または本態性血小
板血症後の骨髄線維症は、ＪＡＫ２変異、例えば、ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ変異、またはト
ロンボポイエチン受容体（ＭＰＬ）変異に関連するか、またはこれにより引き起こされる
。より具体的な実施形態では、本態性血小板減少症または本態性血小板血症後の骨髄線維
症には、レチクリン線維症またはトリクローム線維症が含まれる。具体的な実施形態では
、対象は、赤血球輸血非依存性である。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル
伝達阻害薬を対象に投与する前、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６
８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１
、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、または９０日の期間中に対象が赤
血球の単位を受容していない場合（０単位を受容している場合）、その対象は赤血球輸血
非依存性である。具体的な実施形態では、対象は、赤血球輸血依存性である。具体的な実
施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬を対象に投与する前、少なくとも６０、
６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７
４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７
、８８、８９、または９０日の期間中に対象が２８日毎に２～４単位の赤血球の平均赤血
球輸血頻度を受容している場合、その対象は赤血球輸血依存性である。具体的な実施形態
では、薬学的有効量は、０．３ｍｇ／ｋｇ～２．０ｍｇ／ｋｇ、例えば、０．３３ｍｇ／
ｋｇ、０．４５ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、１．
３３ｍｇ／ｋｇ、１．７５ｍｇ／ｋｇ、または２．０ｍｇ／ｋｇである。具体的な実施形
態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、対象に２１日毎に１回、２８日毎に１回
、または４８日毎に１回投与される。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝
達阻害薬は、対象に２１日毎に１回投与される。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢ
シグナル伝達阻害薬は、対象に静脈内または皮下投与される。具体的な実施形態では、Ａ
ｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、対象に皮下投与される。具体的な実施形態では、Ａ
ｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、ＡｃｔＲＩＩＢの細胞外ドメイン及びヒトＩｇＧ１
Ｆｃドメインからなるヒト化融合タンパク質である。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲ
ＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、（ａ）配列番号４と９０％同一、（ｂ）配列番号４と９５
％同一、（ｃ）配列番号４と９８％同一、（ｄ）配列番号４、（ｅ）配列番号７と９０％
同一、（ｆ）配列番号７と９５％同一、（ｇ）配列番号７と９８％同一、（ｈ）配列番号
７、（ｉ）配列番号８と９０％同一、（ｊ）配列番号８と９５％同一、（ｋ）配列番号８
と９８％同一、（ｌ）配列番号８、（ｍ）配列番号１１と９０％同一、（ｎ）配列番号１
１と９５％同一、（ｏ）配列番号１１と９８％同一、及び（ｐ）配列番号１１からなる群
から選択されるアミノ酸配列を含むポリペプチドである。具体的な実施形態では、Ａｃｔ
ＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、（ａ）配列番号１１と９０％同一、（ｂ）配列番号１１
と９５％同一、（ｃ）配列番号１１と９８％同一、及び（ｄ）配列番号１１からなる群か
ら選択されるアミノ酸配列を含むポリペプチドである。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲ
ＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、配列番号１１のアミノ酸配列を含むポリペプチドである。
具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、配列番号１１のアミノ酸
配列からなるアミノ酸配列を含むポリペプチドである。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲ
ＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、配列番号１１に記載されるアミノ酸配列からなるポリペプ
チドである。具体的な実施形態では、対象はヒトである。

【0028】

骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症の治療を必要とする対象においてそれを治療するための
方法も本明細書に提供され、本方法は、０．３３ｍｇ／ｋｇ、０．４５ｍｇ／ｋｇ、０．
６ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、１．３３ｍｇ／ｋｇ、１．７５ｍｇ／
ｋｇ、または２．０ｍｇ／ｋｇの用量の、配列番号１１のアミノ酸配列からなるポリペプ
チドを対象に投与することを含み、ポリペプチドは、対象に、２１日毎に１回皮下投与さ
れる。具体的な実施形態では、対象は貧血を有する。具体的な実施形態では、骨髄増殖性
腫瘍関連骨髄線維症は、真性多血症骨髄線維症である。より具体的な実施形態では、真性
多血症骨髄線維症は、ＪＡＫ２変異、例えば、ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ変異もしくはＪＡＫ
２エクソン１２変異、またはトロンボポイエチン受容体（ＭＰＬ）変異に関連するか、ま
たはこれにより引き起こされる。具体的な実施形態では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症
は、真性多血症後の骨髄線維症である。より具体的な実施形態では、真性多血症後の骨髄
線維症は、ＪＡＫ２変異、例えば、ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ変異、またはトロンボポイエチ
ン受容体（ＭＰＬ）変異に関連するか、またはこれにより引き起こされる。具体的な実施
形態では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症は、本態性血小板減少症または本態性血小板血
症後の骨髄線維症である。より具体的な実施形態では、本態性血小板減少症または本態性
血小板血症後の骨髄線維症は、ＪＡＫ２変異、例えば、ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ変異、また
はトロンボポイエチン受容体（ＭＰＬ）変異に関連するか、またはこれにより引き起こさ
れる。より具体的な実施形態では、本態性血小板減少症または本態性血小板血症後の骨髄
線維症には、レチクリン線維症またはトリクローム線維症が含まれる。具体的な実施形態
では、対象は、赤血球輸血非依存性である。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグ
ナル伝達阻害薬を対象に投与する前、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７
、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、
８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、または９０日の期間中に対象
が赤血球の単位を受容していない場合（０単位を受容している場合）、その対象は赤血球
輸血非依存性である。具体的な実施形態では、対象は、赤血球輸血依存性である。具体的
な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬を対象に投与する前、少なくとも６
０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３
、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、
８７、８８、８９、または９０日の期間中に対象が１日当たり２～４単位の赤血球の平均
赤血球輸血頻度を受容している場合、その対象は赤血球輸血依存性である。具体的な実施
形態では、対象はヒトである。

【0029】

５．２ 治療方法
骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症の治療を必要とする対象においてそれを治療するための
方法が本明細書に提供され、本方法は、薬学的有効量のＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害
薬を対象に投与することを含む。具体的な実施形態では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症
は、原発性骨髄線維症である。具体的な実施形態では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症は
、真性多血症骨髄線維症である。より具体的な実施形態では、真性多血症骨髄線維症は、
ＪＡＫ２変異、例えば、ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ変異もしくはＪＡＫ２エクソン１２変異、
またはトロンボポイエチン受容体（ＭＰＬ）変異に関連するか、またはこれにより引き起
こされる。具体的な実施形態では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症は、真性多血症後の骨
髄線維症である。より具体的な実施形態では、真性多血症後の骨髄線維症は、ＪＡＫ２変
異、例えば、ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ変異、またはトロンボポイエチン受容体（ＭＰＬ）変
異に関連するか、またはこれにより引き起こされる。具体的な実施形態では、骨髄増殖性
腫瘍関連骨髄線維症は、本態性血小板減少症または本態性血小板血症後の骨髄線維症であ
る。より具体的な実施形態では、本態性血小板減少症または本態性血小板血症後の骨髄線
維症は、ＪＡＫ２変異、例えば、ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ変異、またはトロンボポイエチン
受容体（ＭＰＬ）変異に関連するか、またはこれにより引き起こされる。より具体的な実
施形態では、本態性血小板減少症または本態性血小板血症後の骨髄線維症には、レチクリ
ン線維症またはトリクローム線維症が含まれる。

【0030】

具体的な実施形態では、対象は、セクション５．３に記載される対象である。具体的な
実施形態では、対象はヒトである。具体的な実施形態では、対象は貧血を有する。具体的
な実施形態では、対象は、赤血球輸血非依存性である。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲ
ＩＩＢシグナル伝達阻害薬を対象に投与する前、６０、６１、６２、６３、６４、６５、
６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７
９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、または９０日の期
間中に対象が赤血球の単位を受容していない場合（０単位を受容している場合）、その対
象は赤血球輸血非依存性である。具体的な実施形態では、対象は、赤血球輸血依存性であ
る。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬を対象に投与する前、少
なくとも６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、
７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８
５、８６、８７、８８、８９、または９０日の期間中に対象が２８日毎に２～４単位の赤
血球の平均赤血球輸血頻度を受容している場合、その対象は赤血球輸血依存性である。

【0031】

具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、対象に組成物の一部と
して投与される。具体的な実施形態では、この組成物は、セクション５．５に記載される
組成物である。

【0032】

具体的な実施形態では、薬学的有効用量は、セクション５．６に記載される用量である
。具体的な実施形態では、薬学的有効量は、０．３ｍｇ／ｋｇ～２．０ｍｇ／ｋｇ、例え
ば、０．３３ｍｇ／ｋｇ、０．４５ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇ、
１ｍｇ／ｋｇ、１．３３ｍｇ／ｋｇ、１．７５ｍｇ／ｋｇ、または２．０ｍｇ／ｋｇのＡ
ｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬である。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナ
ル伝達阻害薬は、対象にセクション５．６に記載される頻度で投与される。具体的な実施
形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、対象に２１日毎に１回、２８日毎に１
回、または４８日毎に１回投与される。好ましい実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル
伝達阻害薬は、対象に２１日毎に１回投与される。

【0033】

具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、対象にセクション５．
６に記載される投与の経路で投与される。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナ
ル伝達阻害薬は、対象に静脈内または皮下投与される。好ましい実施形態では、ＡｃｔＲ
ＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、対象に皮下投与される。

【0034】

具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、セクション５．４に記
載されるＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬である。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩ
ＩＢシグナル伝達阻害薬は、配列番号１１のアミノ酸配列を含むポリペプチドである。具
体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、配列番号１１のアミノ酸配
列からなるアミノ酸配列を含むポリペプチドである。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩ
ＩＢシグナル伝達阻害薬は、配列番号１１に記載されるアミノ酸配列からなるポリペプチ
ドである。好ましい実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、ルスパテルセ
プトである。具体的な実施形態では、対象はヒトである。

【0035】

骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症の治療を必要とする対象においてそれを治療するための
方法も本明細書に提供され、本方法は、薬学的有効量のＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害
薬を対象に投与することを含み、該治療することが該対象の骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維
症の１つ以上の症状を軽減または緩和する。具体的な実施形態では、症状は、疲労、寝汗
、かゆみ、腹部不快感、左側肋骨下の痛み、早期満腹、または骨痛のうちの１つ以上であ
る。具体的な実施形態では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症は、原発性骨髄線維症である
。具体的な実施形態では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症は、真性多血症骨髄線維症であ
る。より具体的な実施形態では、真性多血症骨髄線維症は、ＪＡＫ２変異、例えば、ＪＡ
Ｋ２ Ｖ６１７Ｆ変異もしくはＪＡＫ２エクソン１２変異、またはトロンボポイエチン受
容体（ＭＰＬ）変異に関連するか、またはこれにより引き起こされる。具体的な実施形態
では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症は、真性多血症後の骨髄線維症である。より具体的
な実施形態では、真性多血症後の骨髄線維症は、ＪＡＫ２変異、例えば、ＪＡＫ２ Ｖ６
１７Ｆ変異、またはトロンボポイエチン受容体（ＭＰＬ）変異に関連するか、またはこれ
により引き起こされる。具体的な実施形態では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症は、本態
性血小板減少症または本態性血小板血症後の骨髄線維症である。より具体的な実施形態で
は、本態性血小板減少症または本態性血小板血症後の骨髄線維症は、ＪＡＫ２変異、例え
ば、ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ変異、またはトロンボポイエチン受容体（ＭＰＬ）変異に関連
するか、またはこれにより引き起こされる。より具体的な実施形態では、本態性血小板減
少症または本態性血小板血症後の骨髄線維症には、レチクリン線維症またはトリクローム
線維症が含まれる。

【0036】

具体的な実施形態では、対象は、セクション５．３に記載される対象である。具体的な
実施形態では、対象はヒトである。具体的な実施形態では、対象は貧血を有する。具体的
な実施形態では、対象は、赤血球輸血非依存性である。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲ
ＩＩＢシグナル伝達阻害薬を対象に投与する前、６０、６１、６２、６３、６４、６５、
６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７
９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、または９０日の期
間中に対象が赤血球の単位を受容していない場合（０単位を受容している場合）、その対
象は赤血球輸血非依存性である。具体的な実施形態では、対象は、赤血球輸血依存性であ
る。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬を対象に投与する前、少
なくとも６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、
７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８
５、８６、８７、８８、８９、または９０日の期間中に対象が２８日毎に２～４単位の赤
血球の平均赤血球輸血頻度を受容している場合、その対象は赤血球輸血依存性である。

【0037】

具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、対象に組成物の一部と
して投与される。具体的な実施形態では、この組成物は、セクション５．５に記載される
組成物である。

【0038】

具体的な実施形態では、薬学的有効用量は、セクション５．６に記載される用量である
。具体的な実施形態では、薬学的有効量は、０．３ｍｇ／ｋｇ～２．０ｍｇ／ｋｇ、例え
ば、０．３３ｍｇ／ｋｇ、０．４５ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇ、
１ｍｇ／ｋｇ、１．３３ｍｇ／ｋｇ、１．７５ｍｇ／ｋｇ、または２．０ｍｇ／ｋｇのＡ
ｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬である。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナ
ル伝達阻害薬は、対象にセクション５．６に記載される頻度で投与される。具体的な実施
形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、対象に２１日毎に１回、２８日毎に１
回、または４８日毎に１回投与される。好ましい実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル
伝達阻害薬は、対象に２１日毎に１回投与される。

【0039】

具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、対象にセクション５．
６に記載される投与の経路で投与される。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナ
ル伝達阻害薬は、対象に静脈内または皮下投与される。好ましい実施形態では、ＡｃｔＲ
ＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、対象に皮下投与される。

【0040】

具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、セクション５．４に記
載されるＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬である。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩ
ＩＢシグナル伝達阻害薬は、配列番号１１のアミノ酸配列を含むポリペプチドである。具
体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、配列番号１１のアミノ酸配
列からなるアミノ酸配列を含むポリペプチドである。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩ
ＩＢシグナル伝達阻害薬は、配列番号１１に記載されるアミノ酸配列からなるポリペプチ
ドである。好ましい実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、ルスパテルセ
プトである。具体的な実施形態では、対象はヒトである。

【0041】

薬学的有効量のＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬を対象に投与することを含む、貧血
の治療を必要とする対象においてそれを治療するための方法も本明細書に提供され、この
対象は、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症を有する。具体的な実施形態では、骨髄増殖性腫
瘍関連骨髄線維症は、原発性骨髄線維症である。具体的な実施形態では、骨髄増殖性腫瘍
関連骨髄線維症は、真性多血症骨髄線維症である。より具体的な実施形態では、真性多血
症骨髄線維症は、ＪＡＫ２変異、例えば、ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ変異もしくはＪＡＫ２エ
クソン１２変異、またはトロンボポイエチン受容体（ＭＰＬ）変異に関連するか、または
これにより引き起こされる。具体的な実施形態では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症は、
真性多血症後の骨髄線維症である。より具体的な実施形態では、真性多血症後の骨髄線維
症は、ＪＡＫ２変異、例えば、ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ変異、またはトロンボポイエチン受
容体（ＭＰＬ）変異に関連するか、またはこれにより引き起こされる。具体的な実施形態
では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症は、本態性血小板減少症または本態性血小板血症後
の骨髄線維症である。より具体的な実施形態では、本態性血小板減少症または本態性血小
板血症後の骨髄線維症は、ＪＡＫ２変異、例えば、ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ変異、またはト
ロンボポイエチン受容体（ＭＰＬ）変異に関連するか、またはこれにより引き起こされる
。より具体的な実施形態では、本態性血小板減少症または本態性血小板血症後の骨髄線維
症には、レチクリン線維症またはトリクローム線維症が含まれる。

【0042】

具体的な実施形態では、対象は、セクション５．３に記載される対象である。具体的な
実施形態では、対象はヒトである。具体的な実施形態では、対象は、赤血球輸血非依存性
である。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬を対象に投与する前
、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、
７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８
６、８７、８８、８９、または９０日の期間中に対象が赤血球の単位を受容していない場
合（０単位を受容している場合）、その対象は赤血球輸血非依存性である。具体的な実施
形態では、対象は、赤血球輸血依存性である。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシ
グナル伝達阻害薬を対象に投与する前、少なくとも６０、６１、６２、６３、６４、６５
、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、
７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、または９０日の
期間中に対象が２８日毎に２～４単位の赤血球の平均赤血球輸血頻度を受容している場合
、その対象は赤血球輸血依存性である。

【0043】

具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、対象に組成物の一部と
して投与される。具体的な実施形態では、この組成物は、セクション５．５に記載される
組成物である。

【0044】

具体的な実施形態では、薬学的有効用量は、セクション５．６に記載される用量である
。具体的な実施形態では、薬学的有効量は、０．３ｍｇ／ｋｇ～２．０ｍｇ／ｋｇ、例え
ば、０．３３ｍｇ／ｋｇ、０．４５ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇ、
１ｍｇ／ｋｇ、１．３３ｍｇ／ｋｇ、１．７５ｍｇ／ｋｇ、または２．０ｍｇ／ｋｇのＡ
ｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬である。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナ
ル伝達阻害薬は、対象にセクション５．６に記載される頻度で投与される。具体的な実施
形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、対象に２１日毎に１回、２８日毎に１
回、または４８日毎に１回投与される。好ましい実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル
伝達阻害薬は、対象に２１日毎に１回投与される。

【0045】

具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、対象にセクション５．
６に記載される投与の経路で投与される。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナ
ル伝達阻害薬は、対象に静脈内または皮下投与される。好ましい実施形態では、ＡｃｔＲ
ＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、対象に皮下投与される。

【0046】

具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、セクション５．４に記
載されるＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬である。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩ
ＩＢシグナル伝達阻害薬は、配列番号１１のアミノ酸配列を含むポリペプチドである。具
体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、配列番号１１のアミノ酸配
列からなるアミノ酸配列を含むポリペプチドである。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩ
ＩＢシグナル伝達阻害薬は、配列番号１１に記載されるアミノ酸配列からなるポリペプチ
ドである。好ましい実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、ルスパテルセ
プトである。具体的な実施形態では、対象はヒトである。

【0047】

骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症の治療を必要とする対象においてそれを治療するための
方法も本明細書に提供され、本方法は、０．３３ｍｇ／ｋｇ、０．４５ｍｇ／ｋｇ、０．
６ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、１．３３ｍｇ／ｋｇ、１．７５ｍｇ／
ｋｇ、または２．０ｍｇ／ｋｇの用量の、配列番号１１のアミノ酸配列を含むポリペプチ
ドを対象に投与することを含み、ポリペプチドは、対象に、２１日毎に１回皮下投与され
る。具体的な実施形態では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症は、原発性骨髄線維症である
。具体的な実施形態では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症は、真性多血症骨髄線維症であ
る。より具体的な実施形態では、真性多血症骨髄線維症は、ＪＡＫ２変異、例えば、ＪＡ
Ｋ２ Ｖ６１７Ｆ変異もしくはＪＡＫ２エクソン１２変異、またはトロンボポイエチン受
容体（ＭＰＬ）変異に関連するか、またはこれにより引き起こされる。具体的な実施形態
では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症は、真性多血症後の骨髄線維症である。より具体的
な実施形態では、真性多血症後の骨髄線維症は、ＪＡＫ２変異、例えば、ＪＡＫ２ Ｖ６
１７Ｆ変異、またはトロンボポイエチン受容体（ＭＰＬ）変異に関連するか、またはこれ
により引き起こされる。具体的な実施形態では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症は、本態
性血小板減少症または本態性血小板血症後の骨髄線維症である。より具体的な実施形態で
は、本態性血小板減少症または本態性血小板血症後の骨髄線維症は、ＪＡＫ２変異、例え
ば、ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ変異、またはトロンボポイエチン受容体（ＭＰＬ）変異に関連
するか、またはこれにより引き起こされる。より具体的な実施形態では、本態性血小板減
少症または本態性血小板血症後の骨髄線維症には、レチクリン線維症またはトリクローム
線維症が含まれる。

【0048】

具体的な実施形態では、対象は、セクション５．３に記載される対象である。具体的な
実施形態では、対象は、赤血球輸血非依存性である。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩ
ＩＢシグナル伝達阻害薬を対象に投与する前、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６
６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９
、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、または９０日の期間
中に対象が赤血球の単位を受容していない場合（０単位を受容している場合）、その対象
は赤血球輸血非依存性である。具体的な実施形態では、対象は、赤血球輸血依存性である
。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬を対象に投与する前、少な
くとも６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７
２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５
、８６、８７、８８、８９、または９０日の期間中に対象が２８日毎に２～４単位の赤血
球の平均赤血球輸血頻度を受容している場合、その対象は赤血球輸血依存性である。

【0049】

具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、対象に組成物の一部と
して投与される。具体的な実施形態では、この組成物は、セクション５．５に記載される
組成物である。

【0050】

骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症の治療を必要とする対象においてそれを治療するための
方法も本明細書に提供され、本方法は、０．３３ｍｇ／ｋｇ、０．４５ｍｇ／ｋｇ、０．
６ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、１．３３ｍｇ／ｋｇ、１．７５ｍｇ／
ｋｇ、または２．０ｍｇ／ｋｇの用量の、配列番号１１のアミノ酸配列を含むポリペプチ
ドを対象に投与することを含み、ポリペプチドは、対象に、２１日毎に１回皮下投与され
る。具体的な実施形態では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症は、原発性骨髄線維症である
。具体的な実施形態では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症は、真性多血症骨髄線維症であ
る。より具体的な実施形態では、真性多血症骨髄線維症は、ＪＡＫ２変異、例えば、ＪＡ
Ｋ２ Ｖ６１７Ｆ変異もしくはＪＡＫ２エクソン１２変異、またはトロンボポイエチン受
容体（ＭＰＬ）変異に関連するか、またはこれにより引き起こされる。具体的な実施形態
では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症は、真性多血症後の骨髄線維症である。より具体的
な実施形態では、真性多血症後の骨髄線維症は、ＪＡＫ２変異、例えば、ＪＡＫ２ Ｖ６
１７Ｆ変異、またはトロンボポイエチン受容体（ＭＰＬ）変異に関連するか、またはこれ
により引き起こされる。具体的な実施形態では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症は、本態
性血小板減少症または本態性血小板血症後の骨髄線維症である。より具体的な実施形態で
は、本態性血小板減少症または本態性血小板血症後の骨髄線維症は、ＪＡＫ２変異、例え
ば、ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ変異、またはトロンボポイエチン受容体（ＭＰＬ）変異に関連
するか、またはこれにより引き起こされる。より具体的な実施形態では、本態性血小板減
少症または本態性血小板血症後の骨髄線維症には、レチクリン線維症またはトリクローム
線維症が含まれる。

【0051】

具体的な実施形態では、対象は、セクション５．３に記載される対象である。具体的な
実施形態では、対象は、赤血球輸血非依存性である。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩ
ＩＢシグナル伝達阻害薬を対象に投与する前、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６
６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９
、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、または９０日の期間
中に対象が赤血球の単位を受容していない場合（０単位を受容している場合）、その対象
は赤血球輸血非依存性である。具体的な実施形態では、対象は、赤血球輸血依存性である
。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬を対象に投与する前、少な
くとも６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７
２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５
、８６、８７、８８、８９、または９０日の期間中に対象が２８日毎に２～４単位の赤血
球の平均赤血球輸血頻度を受容している場合、その対象は赤血球輸血依存性である。

【0052】

具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、対象に組成物の一部と
して投与される。具体的な実施形態では、この組成物は、セクション５．５に記載される
組成物である。

【0053】

骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症の治療を必要とする対象においてそれを治療するための
方法も本明細書に提供され、本方法は、０．３３ｍｇ／ｋｇ、０．４５ｍｇ／ｋｇ、０．
６ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、１．３３ｍｇ／ｋｇ、１．７５ｍｇ／
ｋｇ、または２．０ｍｇ／ｋｇの用量の、配列番号１１のアミノ酸配列からなるポリペプ
チドを対象に投与することを含み、ポリペプチドは、対象に、２１日毎に１回皮下投与さ
れる。具体的な実施形態では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症は、原発性骨髄線維症であ
る。具体的な実施形態では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症は、真性多血症骨髄線維症で
ある。より具体的な実施形態では、真性多血症骨髄線維症は、ＪＡＫ２変異、例えば、Ｊ
ＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ変異もしくはＪＡＫ２エクソン１２変異、またはトロンボポイエチン
受容体（ＭＰＬ）変異に関連するか、またはこれにより引き起こされる。具体的な実施形
態では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症は、真性多血症後の骨髄線維症である。より具体
的な実施形態では、真性多血症後の骨髄線維症は、ＪＡＫ２変異、例えば、ＪＡＫ２ Ｖ
６１７Ｆ変異、またはトロンボポイエチン受容体（ＭＰＬ）変異に関連するか、またはこ
れにより引き起こされる。具体的な実施形態では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症は、本
態性血小板減少症または本態性血小板血症後の骨髄線維症である。より具体的な実施形態
では、本態性血小板減少症または本態性血小板血症後の骨髄線維症は、ＪＡＫ２変異、例
えば、ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ変異、またはトロンボポイエチン受容体（ＭＰＬ）変異に関
連するか、またはこれにより引き起こされる。より具体的な実施形態では、本態性血小板
減少症または本態性血小板血症後の骨髄線維症には、レチクリン線維症またはトリクロー
ム線維症が含まれる。

【0054】

具体的な実施形態では、対象は、セクション５．３に記載される対象である。具体的な
実施形態では、対象は、赤血球輸血非依存性である。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩ
ＩＢシグナル伝達阻害薬を対象に投与する前、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６
６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９
、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、または９０日の期間
中に対象が赤血球の単位を受容していない場合（０単位を受容している場合）、その対象
は赤血球輸血非依存性である。具体的な実施形態では、対象は、赤血球輸血依存性である
。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬を対象に投与する前、少な
くとも６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７
２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５
、８６、８７、８８、８９、または９０日の期間中に対象が２８日毎に２～４単位の赤血
球の平均赤血球輸血頻度を受容している場合、その対象は赤血球輸血依存性である。

【0055】

具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、対象に組成物の一部と
して投与される。具体的な実施形態では、この組成物は、セクション５．５に記載される
組成物である。

【0056】

５．３ 患者集団
本明細書に記載の方法に従って治療される対象は、齧歯類及び霊長類などの任意の哺乳
動物とすることができ、好ましい実施形態では、ヒトとすることができる。ある特定の実
施形態では、対象は、ヒトである。ある特定の実施形態では、本明細書に記載の方法は、
齧歯類及び霊長類などの任意哺乳動物における、好ましい実施形態ではヒト対象における
骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症及び／または貧血を治療するために使用することができる
。

【0057】

ある特定の実施形態では、本明細書に記載の方法に従って治療される対象は、任意の年
齢の対象とすることができる。ある特定の実施形態では、本明細書に記載の方法に従って
治療される対象は、１８歳未満である。１つの具体的な実施形態では、本明細書に記載の
方法に従って治療される対象は、１３歳未満である。別の具体的な実施形態では、本明細
書に記載の方法に従って治療される対象は、１２歳未満、１１歳未満、１０歳未満、９歳
未満、８歳未満、７歳未満、６歳未満、または５歳未満である。別の具体的な実施形態で
は、本明細書に記載の方法に従って治療される対象は、１～３歳、３～５歳、５～７歳、
７～９歳、９～１１歳、１１～１３歳、１３～１５歳、１５～２０歳、２０～２５歳、２
５～３０歳であるか、または３０歳を超える。別の具体的な実施形態では、本明細書に記
載の方法に従って治療される対象は、３０～３５歳、３５～４０歳、４０～４５歳、４５
～５０歳、５０～５５歳、５５～６０歳であるか、または６０歳を超える。別の具体的な
実施形態では、本明細書に記載の方法に従って治療される対象は、６０～６５歳、６５～
７０歳、７０～７５歳、７５～８０歳であるか、または８０歳を超える。

【0058】

ある特定の実施形態では、本明細書に提供される方法に従って治療される対象は、骨髄
増殖性腫瘍関連骨髄線維症を有する。ある特定の実施形態では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄
線維症は、原発性骨髄線維症である。具体的な実施形態では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線
維症は、真性多血症骨髄線維症である。より具体的な実施形態では、真性多血症骨髄線維
症は、ＪＡＫ２変異、例えば、ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ変異もしくはＪＡＫ２エクソン１２
変異、またはトロンボポイエチン受容体（ＭＰＬ）変異に関連するか、またはこれにより
引き起こされる。具体的な実施形態では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症は、真性多血症
後の骨髄線維症である。より具体的な実施形態では、真性多血症後の骨髄線維症は、ＪＡ
Ｋ２変異、例えば、ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ変異、またはトロンボポイエチン受容体（ＭＰ
Ｌ）変異に関連するか、またはこれにより引き起こされる。具体的な実施形態では、骨髄
増殖性腫瘍関連骨髄線維症は、本態性血小板減少症または本態性血小板血症後の骨髄線維
症である。より具体的な実施形態では、本態性血小板減少症または本態性血小板血症後の
骨髄線維症は、ＪＡＫ２変異、例えば、ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ変異、またはトロンボポイ
エチン受容体（ＭＰＬ）変異に関連するか、またはこれにより引き起こされる。より具体
的な実施形態では、本態性血小板減少症または本態性血小板血症後の骨髄線維症には、レ
チクリン線維症またはトリクローム線維症が含まれる。

【0059】

ある特定の実施形態では、本明細書に提供される方法に従って治療される対象は、貧血
を有する。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される方法に従って治療される対象
は、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症及び貧血を有する。ある特定の実施形態では、骨髄増
殖性腫瘍関連骨髄線維症は、原発性骨髄線維症である。具体的な実施形態では、骨髄増殖
性腫瘍関連骨髄線維症は、真性多血症骨髄線維症である。より具体的な実施形態では、真
性多血症骨髄線維症は、ＪＡＫ２変異、例えば、ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ変異もしくはＪＡ
Ｋ２エクソン１２変異、またはトロンボポイエチン受容体（ＭＰＬ）変異に関連するか、
またはこれにより引き起こされる。具体的な実施形態では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維
症は、真性多血症後の骨髄線維症である。より具体的な実施形態では、真性多血症後の骨
髄線維症は、ＪＡＫ２変異、例えば、ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ変異、またはトロンボポイエ
チン受容体（ＭＰＬ）変異に関連するか、またはこれにより引き起こされる。具体的な実
施形態では、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症は、本態性血小板減少症または本態性血小板
血症後の骨髄線維症である。より具体的な実施形態では、本態性血小板減少症または本態
性血小板血症後の骨髄線維症は、ＪＡＫ２変異、例えば、ＪＡＫ２ Ｖ６１７Ｆ変異、ま
たはトロンボポイエチン受容体（ＭＰＬ）変異に関連するか、またはこれにより引き起こ
される。より具体的な実施形態では、本態性血小板減少症または本態性血小板血症後の骨
髄線維症には、レチクリン線維症またはトリクローム線維症が含まれる。

【0060】

ある特定の実施形態では、本明細書に提供される方法に従って治療される対象は、ルキ
ソリチニブで以前に治療されたことがある。１つの具体的な実施形態では、本明細書に提
供される方法に従って治療される対象は、治療の直前少なくとも１１２日間、ルキソリチ
ニブの安定した投与を受けていた。

【0061】

ある特定の実施形態では、本明細書に提供される方法に従って治療される対象は、少な
くとも１１２日間のルキソリチニブの安定した投与を受ける、ルキソリチニブで以前に治
療されたことはない。

【0062】

ある特定の実施形態では、本明細書に提供される方法に従って治療される対象は、赤血
球輸血非依存性である。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の対
象への第１回目の投与前に、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、
６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、８１、８
２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、または９０日の期間中に対象が赤血球
の単位を受容していない場合（０単位を受容している場合）、その対象は赤血球輸血非依
存性である。

【0063】

ある特定の実施形態では、本明細書に提供される方法に従って治療される対象は、赤血
球輸血依存性である。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の対象
への第１回目の投与前に、少なくとも６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７
、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、８０、
８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、または９０日の期間中に対象
が２８日毎に２～４単位の赤血球の平均赤血球輸血頻度を受容している場合、その対象は
赤血球輸血依存性である。

【0064】

５．４ ＡＣＴＲＩＩＢシグナル伝達の阻害薬
本明細書で使用される場合、用語「ＡｃｔＲＩＩＢ」とは、任意の種からのアクチビン
受容体ＩＩＢ型（ＡｃｔＲＩＩＢ）タンパク質のファミリー、または突然変異誘発もしく
は他の改変により、このようなＡｃｔＲＩＩＢタンパク質から誘導された多様体を指す。
本明細書のＡｃｔＲＩＩＢへの言及は、この受容体の現在同定されている形態のうちのい
ずれか１つへの言及であると理解される。ＡｃｔＲＩＩＢファミリーのメンバーは、一般
的に、高システイン領域を有するリガンド結合細胞外ドメイン、膜貫通ドメイン、及び予
測されるセリン／スレオニンキナーゼ活性を有する細胞質ドメインから構成される膜貫通
タンパク質である。

【0065】

本明細書に記載の組成物及び方法において使用することができるＡｃｔＲＩＩＢシグナ
ル伝達阻害薬としては、アクチビン結合可溶性ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチド、アクチビン
（特に、アクチビンＡまたはＢサブユニット、βＡまたはβＢとも称される）に結合し、
かつＡｃｔＲＩＩＢ結合を破壊する抗体、ＡｃｔＲＩＩＢに結合し、かつアクチビン結合
を破壊する抗体、アクチビンまたはＡｃｔＲＩＩＢ結合に対して選択される非抗体タンパ
ク質、及びＦｃドメインに複合化され得るアクチビンまたはＡｃｔＲＩＩＢ結合に対して
選択されるランダム化ペプチドが挙げられるが、これらに限定されない。

【0066】

ある特定の実施形態では、アクチビンまたはＡｃｔＲＩＩＢ結合活性を有する２つ以上
の異なるタンパク質（または他の部分）、特に、Ｉ型（例えば、可溶性Ｉ型アクチビン受
容体）及びＩＩ型（例えば、可溶性ＩＩ型アクチビン受容体）結合部位をブロックするア
クチビンバインダーは、それぞれ、一緒に結合して、ＡｃｔＲＩＩＢを阻害する二官能性
または多官能性結合分子を形成することができるため、本明細書に記載の組成物及び方法
で使用され、含まれ得る。ある特定の実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢを阻害するアクチビ
ン－ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達軸拮抗薬には、核酸アプタマー、小分子及び他の薬剤が
挙げられ、本明細書に記載の組成物及び方法で使用され、含まれる。

【0067】

５．４．１ ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドを含むＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬
本明細書で使用される場合、用語「ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチド」とは、ＡｃｔＲＩＩ
Ｂファミリーメンバーの天然型ポリペプチドならびに有用な活性を保持するそれらの任意
の多様体（変異体、断片、融合体、及びペプチド模倣形態を含む）を含むポリペプチドを
指す。例えば、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドは、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドの配列と少
なくとも約８０％同一の配列を有し、任意に、少なくとも８５％、９０％、９５％、９６
％、９７％、９８％、９９％またはそれ以上の同一性を有する任意の既知のＡｃｔＲＩＩ
Ｂ受容体の配列に由来するポリペプチドを含む。例えば、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドは
、ＡｃｔＲＩＩＢタンパク質及び／またはアクチビンに結合することができ、かつそれら
の機能を阻害することができる。ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドの一例としては、ヒトＡｃ
ｔＲＩＩＢ前駆体ポリペプチド（配列番号３または配列番号１４）が挙げられる。そのア
ミノ酸配列が配列番号３もしくは配列番号１４として表示されるＡｃｔＲＩＩＢ前駆体ポ
リペプチド（すなわち、ヒトＡｃｔＲＩＩＢ前駆体ポリペプチド）に関して、ＡｃｔＲＩ
ＩＢ前駆体ポリペプチドのシグナルペプチドは、アミノ酸１～１８に位置し、細胞外ドメ
インは、アミノ酸１９～１３４に位置し、Ｎ結合グリコシル化可能部位は、アミノ酸位置
４２及び６５に位置している。配列番号３のヒトＡｃｔＲＩＩＢ前駆体ポリペプチドをコ
ードする核酸配列は、配列番号６として開示されている（配列番号６は、アミノ酸位置６
４に相当するコドンにおいてアラニンを提供するが、アミノ酸位置６４に相当するコドン
において代わりにアルギニンを提供するように、当該技術分野において既知の方法を用い
て当業者によって容易に改変され得る）。この配列の説明については、表２を参照された
い。

【0068】

本明細書に記載のＡｃｔＲＩＩＢ関連ポリペプチドの全てについてのアミノ酸の番号付
けは、別段の定めがない限り、配列番号３及び配列番号１４（位置６４で表されたアミノ
酸のみが異なる）についてのアミノ酸番号付けに基づいている。例えば、ＡｃｔＲＩＩＢ
ポリペプチドが、アミノ酸位置７９において置換／変異を有するものとして記載される場
合、位置７９が、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドがそれから誘導される配列番号３もしくは
配列番号１４中の第７９番目のアミノ酸を指すと理解されるべきである。同様に、Ａｃｔ
ＲＩＩＢポリペプチドが、アミノ酸位置６４においてアラニンまたはアルギニンを有する
ものとして記載される場合、位置６４が、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドがそれから誘導さ
れる配列番号３もしくは配列番号１４中の第６４番目のアミノ酸を指すと理解されるべき
である。

【0069】

ある特定の実施形態では、本明細書に記載の組成物及び方法で使用されるＡｃｔＲＩＩ
Ｂシグナル伝達の阻害薬は、ＡｃｔＲＩＩＢのアクチビン結合ドメインを含むポリペプチ
ドを含む。いくつかの実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢのアクチビン結合ドメインは、Ａｃ
ｔＲＩＩＢの細胞外ドメイン、またはその一部分を含む。具体的な実施形態では、Ａｃｔ
ＲＩＩＢの細胞外ドメインまたはその一部分は、可溶性である。ＡｃｔＲＩＩＢポリペプ
チドの例示的な改変形態は、米国特許出願公開第２００９０００５３０８号及び同第２０
１０００６８２１５号に開示されており、各々の開示は、参照によりそれらの全体が本明
細書に組み込まれる。ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドの例示的な改変形態はまた、国際特許
出願公開第ＷＯ２００８／０９７５４１号及び同第ＷＯ２０１０／０１９２６１号に開示
されており、各々の開示は、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。

【0070】

具体的な実施形態では、本明細書に記載の組成物及び方法で使用されるＡｃｔＲＩＩＢ
ポリペプチドは、可溶性ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドである。用語「可溶性ＡｃｔＲＩＩ
Ｂポリペプチド」とは、一般的に、ＡｃｔＲＩＩＢタンパク質の任意の天然型細胞外ドメ
インを含むＡｃｔＲＩＩＢタンパク質の細胞外ドメインならびにその任意の多様体（変異
体、断片及びペプチド模倣形態を含む）を含むポリペプチドを指す。可溶性ＡｃｔＲＩＩ
Ｂポリペプチドは、アクチビンに結合することができるが、野生型ＡｃｔＲＩＩＢタンパ
ク質は、ＧＤＦ８／１１と対比して、アクチビンへの結合における顕著な選択性を示さな
い。ある特定の実施形態では、異なる結合特性を有するＡｃｔＲＩＩＢの変更形態を、本
明細書に提供される方法で使用することができる。このような変更形態は、例えば、国際
特許出願公開第ＷＯ２００６／０１２６２７号及び同第ＷＯ２０１０／０１９２６１号に
開示されており、各々の開示は、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。天
然のまたは変更ＡｃｔＲＩＩＢタンパク質は、それらを第２のアクチビン選択的結合剤と
結合させることによって、付加されたアクチビンに対する特異性が供与されてもよい。例
示的なＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドは、ヒトＡｃｔＲＩＩＢポリペプチド（例えば、配列
番号４、５、９、１２、１３、１５、１６、１７、１８、１９、２２、２３、２８、及び
２９）の細胞外ドメインを含む。

【0071】

ＡｃｔＲＩＩＢ細胞外配列を有するＦｃ融合タンパク質（Ｈｉｌｄｅｎ ｅｔ ａｌ．
（Ｂｌｏｏｄ，１９９４，８３（８）：２１６３－７０）に開示）で、ＡｃｔＲＩＩＢ前
駆体アミノ酸配列のアミノ酸６４に相当する位置においアラニンを有するもの、すなわち
、配列番号３（本明細書では「Ａ６４」と称される）ものは、アクチビン及びＧＤＦ－１
１に比較的低い親和性を有することが実証されている。対照的に、ＡｃｔＲＩＩＢ前駆体
アミノ酸配列の６４位にアルギニンを有するＦｃ融合タンパク質（本明細書では「Ｒ６４
」と称される）は、低ナノモルから高ピコモル範囲のアクチビン及びＧＤＦ－１１に対す
る親和性を有する（例えば、その開示が、その全体で本明細書に組み込まれる、米国特許
出願公開第２０１０００６８２１５号を参照されたい）。また、その開示が、その全体で
本明細書に組み込まれる、国際公開第ＷＯ２０１０／０１９２６１号を参照されたい。６
４位にアルギニンを有するＡｃｔＲＩＩＢ前駆体のアミノ酸配列は、配列番号１４に提示
されている。したがって、ある特定の実施形態では、本明細書に記載の組成物及び方法に
従って使用されるＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドは、（ｉ）ＡｃｔＲＩＩＢ前駆体アミノ酸
配列のアミノ酸６４に相当する位置でアラニンを含む、すなわち配列番号３を含むか、ま
たは（ｉｉ）ＡｃｔＲＩＩＢ前駆体アミノ酸配列のアミノ酸６４にアルギニンを含む、す
なわち配列番号１４を含むかのいずれかであり得る。他の特定の実施形態では、本明細書
に記載の組成物及び方法に従って使用されるＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドは、ＡｃｔＲＩ
ＩＢ前駆体アミノ酸配列のアミノ酸６４に相当する位置でアラニンまたはアルギニンでは
ない、すなわち、配列番号３もしくは配列番号１４ではないアミノ酸を含んでもよい。

【0072】

ＡｃｔＲＩＩＢの細胞外ドメインのＣ末端におけるプロリンノットの欠失が、アクチビ
ンに対する受容体の親和性を低下させることが示されている（例えば、Ａｔｔｉｓａｎｏ
ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｌｌ，１９９２，６８（１）：９７－１０８を参照されたい）。配
列番号１４のアミノ酸２０～１１９を含有するＡｃｔＲＩＩＢ－Ｆｃ融合タンパク質（す
なわち、配列番号１８）、「ＡｃｔＲＩＩＢ（２０～１１９）－Ｆｃ」は、プロリンノッ
ト領域及び完全な膜近傍ドメインを含む、配列番号１４のアミノ酸２０～１３４を含有す
るＡｃｔＲＩＩＢ－Ｆｃ融合タンパク質（すなわち、配列番号１７）、「ＡｃｔＲＩＩＢ
（２０～１３４）－Ｆｃ」と比べて、ＧＤＦ－１１及びアクチビンへの結合を低下させた
。しかしながら、配列番号１４のアミノ酸２０～１２９を含有するＡｃｔＲＩＩＢ－Ｆｃ
融合タンパク質、「ＡｃｔＲＩＩＢ（２０～１２９）－Ｆｃ」は、ＡｃｔＲＩＩＢの切断
されていない細胞外ドメインと比べて、プロリンノット領域が破壊されているにもかかわ
らず、同様ではあるが、いくらか低下した活性を保持する。したがって、配列番号１４（
もしくは配列番号３）のアミノ酸１３４、１３３、１３２、１３１、１３０、及び１２９
で停止する細胞外ドメインを含むＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドは、すべて、活性であると
予想されるがアミノ酸１３４または１３３で停止する構築物が最も活性であり得る。同様
に、配列番号１４のＰ１２９及びＰ１３０の変異が、リガンド結合を実質的減少させない
という事実によって示されるように、残基１２９～１３４のいずれにおける変異も、リガ
ンド結合親和性を大幅に変更することは予想されない。したがって、本明細書に記載の方
法及び組成物で使用されるＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドは、配列番号１４（もしくは配列
番号３）の早くもアミノ酸１０９（すなわち、最後のシステイン）で終了し得るが、配列
番号１４（または配列番号３）のアミノ酸１０９位及び１１９位で、またはこれらの間で
終了する形態が、低減したリガンド結合能力を有すると予想される。

【0073】

配列番号３及び配列番号１４のアミノ酸２９は、ＡｃｔＲＩＩＢ前駆体配列の最初のシ
ステインを表す。配列番号３もしくは配列番号１４のＮ末端のアミノ酸２９で、またはこ
れらのアミノ酸位置の前で開始するＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドが、リガンド結合活性を
保持するであろうことが予想される。配列番号３もしくは配列番号１４の２４位でのアラ
ニンのアスパラギンへの変異は、リガンド結合に実質的に影響を与えることなく、Ｎ結合
グリコシル化配列を導入する。これは、配列番号３もしくは配列番号１４のアミノ酸２０
～２９に相当する、シグナル切断ペプチドとシステイン架橋領域との間の領域における変
異が、十分に耐容性があること裏付けている。特に、配列番号３もしくは配列番号１４の
アミノ酸位置２０、２１、２２、２３及び２４で開始するＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドは
、活性を保持することになり、配列番号３もしくは配列番号１４のアミノ酸位置２５、２
６、２７、２８及び２９で開始するＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドもまた、活性を保持する
と予想される。配列番号３もしくは配列番号１４のアミノ酸位置２２、２３、２４または
２５で開始するＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドは、最高の活性を有するであろう。

【0074】

まとめると、本明細書に記載の方法及び組成物に従って使用されるＡｃｔＲＩＩＢ前駆
体タンパク質（すなわち、配列番号３または配列番号１４）の活性部分（すなわち、Ａｃ
ｔＲＩＩＢポリペプチド）は、一般的に、配列番号３もしくは配列番号１４のアミノ酸２
９～１０９を含み、このようなＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドは、例えば、配列番号３もし
くは配列番号１４のアミノ酸１９～２９のうちのいずれか１つに相当する残基で開始し、
かつ配列番号３もしくは配列番号１４のアミノ酸１０９～１３４のうちのいずれか１つに
相当する位置で終了することができる。本明細書に包含されるＡｃｔＲＩＩＢポリペプチ
ドの具体的な例としては、配列番号３もしくは配列番号１４の１９～２９、２０～２９ま
たは２１～２９からのアミノ酸位置で開始し、かつ配列番号３もしくは配列番号１４の１
１９～１３４、１１９～１３３または１２９～１３４、１２９～１３３からのアミノ酸位
置で終了するものが挙げられる。本明細書に包含されるＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドの他
の具体的な例としては、配列番号３もしくは配列番号１４の２０～２４（または２１～２
４、または２２～２５）からのアミノ酸位置で開始し、かつ配列番号３もしくは配列番号
１４の１０９～１３４（もしくは１０９～１３３）、１１９～１３４（もしくは１１９～
１３３）または１２９～１３４（もしくは１２９～１３３）からのアミノ酸位置で終了す
るものが挙げられる。これらの範囲内に入る多様体ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドもまた企
図され、特に配列番号３もしくは配列番号１４の対応する部分と少なくとも８０％、８５
％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、また
は９９％の配列同一性もしくは配列相同性を有するものも企図される。

【0075】

ある特定の実施形態では、本明細書に記載の組成物及び方法で使用されるＡｃｔＲＩＩ
Ｂシグナル伝達の阻害薬は、ＡｃｔＲＩＩＢの細胞外ドメインの切断型を含む。切断は、
ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドのカルボキシ末端及び／またはアミノ末端にあり得る。ある
特定の実施形態では、切断は、成熟ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドの細胞外ドメインに対し
て、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６
、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、または２５個のアミノ酸長であり
得る。ある特定の実施形態では、切断は、成熟ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドの細胞外ドメ
インの、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、
１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、または２５個のＮ－末端アミ
ノ酸であり得る。ある特定の実施形態では、切断は、成熟ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドの
細胞外ドメインの、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１
４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、または２５個のＣ
末端アミノ酸であり得る。例えば、ＡｃｔＲＩＩＢの切断型は、アミノ酸２０～１１９、
２０～１２８、２０～１２９、２０～１３０、２０～１３１、２０～１３２、２０～１３
３、２０～１３４、２０～１３１、２１～１３１、２２～１３１、２３～１３１、２４～
１３１、及び２５～１３１を有するポリペプチドを含み、これらのアミノ酸位置は、配列
番号３もしくは配列番号１４中のアミノ酸位置を指す。

【0076】

ＡｃｔＲＩＩＢの追加の例示的な切断型としては、（ｉ）配列番号３もしくは配列番号
１４のアミノ酸２１～２９のいずれかのアミノ酸で開始し（任意に、配列番号３もしくは
配列番号１４の２２～２５で開始し）かつ配列番号３もしくは配列番号１４のアミノ酸１
０９～１３４のいずれかで終了するポリペプチド、（ｉｉ）配列番号３もしくは配列番号
１４のアミノ酸２０～２９のいずれかで開始し（任意に、配列番号３もしくは配列番号１
４の２２～２５で開始し）かつ配列番号３もしくは配列番号１４のアミノ酸１０９～１３
３のいずれかで終了するポリペプチド、（ｉｉｉ）配列番号３もしくは配列番号１４のア
ミノ酸２０～２４のいずれかで開始し（任意に、配列番号３もしくは配列番号１４の２２
～２５で開始し）かつ配列番号３もしくは配列番号１４のアミノ酸１０９～１３３のいず
れかで終了するポリペプチド、（ｉｖ）配列番号３もしくは配列番号１４のアミノ酸２１
～２４のいずれかで開始し、かつ配列番号３もしくは配列番号１４のアミノ酸１０９～１
３４のいずれかで終了するポリペプチド、（ｖ）配列番号３もしくは配列番号１４のアミ
ノ酸２０～２４のいずれかで開始し、かつ配列番号３もしくは配列番号１４のアミノ酸１
１８～１３３のいずれかで終了するポリペプチド、（ｖｉ）配列番号３もしくは配列番号
１４のアミノ酸２１～２４のいずれかで開始し、かつ配列番号３もしくは配列番号１４の
アミノ酸１１８～１３４のいずれかで終了するポリペプチド、（ｖｉｉ）配列番号３もし
くは配列番号１４のアミノ酸２０～２４のいずれかで開始し、かつ配列番号３もしくは配
列番号１４のアミノ酸１２８～１３３のいずれかで終了するポリペプチド、（ｖｉｉｉ）
配列番号３もしくは配列番号１４のアミノ酸２０～２４のいずれかで開始し、かつ配列番
号３もしくは配列番号１４のアミノ酸１２８～１３３のいずれかで終了するポリペプチド
、（ｉｘ）配列番号３もしくは配列番号１４のアミノ酸２１～２９のいずれかで開始し、
かつ配列番号３もしくは配列番号１４のアミノ酸１１８～１３４のいずれかで終了するポ
リペプチド、（ｘ）配列番号３もしくは配列番号１４のアミノ酸２０～２９のいずれかで
開始し、かつ配列番号３もしくは配列番号１４のアミノ酸１１８～１３３のいずれかで終
了するポリペプチド、（ｘｉ）配列番号３もしくは配列番号１４のアミノ酸２１～２９の
いずれかで開始し、かつ配列番号３もしくは配列番号１４のアミノ酸１２８～１３４のい
ずれかで終了するポリペプチド、及び（ｘｉｉ）配列番号３もしくは配列番号１４のアミ
ノ酸２０～２９のいずれかで開始し、かつ配列番号３もしくは配列番号１４のアミノ酸１
２８～１３３のいずれかで終了するポリペプチドが挙げられる。具体的な実施形態では、
ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドは、配列番号３もしくは配列番号１４のアミノ酸位置２５で
開始し、かつ配列番号３もしくは配列番号１４のアミノ酸位置１３１で終了するアミノ酸
配列を含むか、それから本質的になるか、またはそれからなる。別の具体的な実施形態で
は、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドは、配列番号４、１８、２３、２６、２７、２９、３０
、３１、３２、または３３のアミノ酸配列からなるか、またはそれから本質的になる。

【0077】

本明細書に記載の組成物及び方法で使用されるＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドのいずれも
、ホモダイマーとして生成されてもよい。本明細書に記載の組成物及び方法で使用される
ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドのいずれも、ＦｃドメインなどのＩｇＧ重鎖からの定常領域
を含む異種部分を有する融合タンパク質として配合されてもよい。本明細書に記載の組成
物及び方法で使用されるＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドのいずれも、任意に配列番号３もし
くは配列番号１４に対する１つ以上の追加のアミノ酸置換、欠失または挿入と組み合わせ
て、配列番号３もしくは配列番号１４の７９位に相当する位置において酸性アミノ酸を含
んでもよい。

【0078】

具体的な実施形態では、本明細書に記載の組成物及び方法で使用されるＡｃｔＲＩＩＢ
シグナル伝達の阻害薬は、１つ以上のアミノ酸置換／変異を有するＡｃｔＲＩＩＢの細胞
外ドメインを含む。このようなアミノ酸置換／変異は、例えば、配列番号３もしくは配列
番号１４のアミノ酸位置７９でのロイシンから、酸性アミノ酸への、例えば、アスパラギ
ン酸またはグルタミン酸への交換であり得る。例えば、配列番号３もしくは配列番号１４
のＬ７９位は、ＡｃｔＲＩＩＢ細胞外ドメインポリペプチド中で変更されて、変更された
アクチビン－ミオスタチン（ＧＤＦ－１１）結合特性を付与してもよい。Ｌ７９Ａ及びＬ
７９Ｐ変異は、ＧＤＦ－１１結合をアクチビン結合よりも大きな程度まで低下させる。Ｌ
７９Ｅ及びＬ７９Ｄ変異は、ＧＤＦ－１１結合を保持すると同時に、大幅に低下したアク
チビン結合を実証している。

【0079】

ある特定の実施形態では、本明細書に記載の組成物及び方法で使用されるＡｃｔＲＩＩ
Ｂシグナル伝達の阻害薬は、アミノ酸置換、例えば、配列番号３もしくは配列番号１４の
アミノ酸位置７９でのロイシンからアスパラギン酸またはグルタミン酸などの酸性アミノ
酸への交換も担持するＡｃｔＲＩＩＢ細胞外ドメインの切断型を含む。具体的な実施形態
では、本明細書に記載の組成物及び方法で使用される、アミノ酸置換も担持するＡｃｔＲ
ＩＩＢポリペプチドの細胞外ドメインの切断型は、配列番号９である。切断された、及び
／また１つ以上のアミノ酸置換を担持するＡｃｔＲＩＩＢの形態は、上述したような抗体
のＦｃドメインに連結することができる。

【0080】

ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドの機能的に活性な断片は、例えば、ＡｃｔＲＩＩＢポリペ
プチドをコードする核酸の対応する断片から組換え生成されたポリペプチドをスクリーニ
ングすることにより、得ることができる。加えて、断片は、従来のメリフィールド固相ｆ
－Ｍｏｃまたはｔ－Ｂｏｃ化学合成法などの当該技術分野において既知の技術を使用して
、化学的に合成することができる。断片は、（組換えまたは化学合成により）生成され、
ＡｃｔＲＩＩＢタンパク質の、またはアクチビンにより媒介されるシグナル伝達の拮抗薬
（阻害薬）として機能し得るこれらのペプチジル断片を特定するために試験することがで
きる。

【0081】

加えて、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドの機能的に活性な多様体は、例えば、ＡｃｔＲＩ
ＩＢポリペプチドをコードする対応する変異誘発核酸から組換え生成された修飾ポリペプ
チドのライブラリをスクリーニングすることにより、得ることができる。多様体は、生成
され、ＡｃｔＲＩＩＢタンパク質の、またはアクチビンにより媒介されるシグナル伝達の
拮抗薬（阻害薬）として機能し得るものを特定するために試験することができる。ある特
定の実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドの機能的多様体は、配列番号４、５、９
、１２、１３、１５、１６、１７、１８、１９、２２、２３、２８、及び２９から選択さ
れるアミノ酸配列と少なくとも７５％同一であるアミノ酸配列を含む。ある特定の実施形
態では、機能的多様体は、配列番号４、５、９、１２、１３、１５、１６、１７、１８、
１９、２２、２３、２８、及び２９から選択されるアミノ酸配列と少なくとも８０％、８
５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一のアミノ酸配列を有
する。

【0082】

機能的多様体は、例えば、治療有効性、または安定性（例えば、エクスビボの貯蔵寿命
及びインビボでのタンパク質分解に対する耐性）を向上させるなどの目的で、ＡｃｔＲＩ
ＩＢポリペプチドの構造を修飾することによって産生されてもよい。アクチビン結合を保
持するように選択された場合のこのような修飾ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドは、天然型Ａ
ｃｔＲＩＩＢポリペプチドの機能的同等物と見なされる。修飾ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチ
ドはまた、例えば、アミノ酸置換、欠失、または付加により生成することができる。例え
ば、ロイシンのイソロイシンまたはバリンとの、アスパラギン酸のグルタミン酸との、ス
レオニンのセリンとの単離された置換、またはアミノ酸の構造的に関連したアミノ酸との
類似した置換（例えば、保存的変異）は、得られた分子の生物学的活性に対して主要な影
響を有さないと予想することが妥当である。保存的置換は、それらの側鎖において関連す
るアミノ酸のファミリー内で起こる置換である。ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドのアミノ酸
配列における変化が機能的相同体をもたらすかどうかは、多様体ＡｃｔＲＩＩＢポリペプ
チドの、野生型ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドと同様な様式で細胞内での応答を生じさせる
能力を評価することによって容易に判定することができる。

【0083】

ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチド変異体、特にＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドのコンビナトリ
アル変異体のセット、ならびに切断変異体、コンビナトリアル変異体のプールは、本明細
書に記載の方法及び組成物で使用され得る機能的多様体配列を特定するために特に有用で
ある。このようなコンビナトリアルライブラリをスクリーニングする目的は、例えば、作
動薬もしくは拮抗薬として作用し得るＡｃｔＲＩＩＢポリペプチド多様体、または代替的
に、全体で新規活性を保有するＡｃｔＲＩＩＢポリペプチド多様体を産生するためであり
得る。

【0084】

ＡｃｔＲＩＩＢのリガンド結合ポケットが、配列番号３もしくは配列番号１４の残基Ｙ
３１、Ｎ３３、Ｎ３５、Ｌ３８～Ｔ４１、Ｅ４７、Ｅ５０、Ｑ５３～Ｋ５５、Ｌ５７、Ｈ
５８、Ｙ６０、Ｓ６２、Ｋ７４、Ｗ７８～Ｎ８３、Ｙ８５、Ｒ８７、Ａ９２、及びＥ９４
～Ｆ１０１によって定義されることが証明されている。これらの位置において、保存的変
異は耐容性であるが、Ｋ７４Ａ変異は耐容性良好であり、Ｒ４０Ａ、Ｋ５５Ａ、Ｆ８２Ａ
及びＬ７９位での変異も同様である。Ｒ４０は、アフリカツメガエルではＫであり、この
位置における塩基性アミノ酸が耐容されることを示している。Ｑ５３は、ウシＡｃｔＲＩ
ＩＢではＲであり、アフリカツメガエルＡｃｔＲＩＩＢではＫであり、したがって、Ｒ、
Ｋ、Ｑ、Ｎ及びＨを含むアミノ酸は、この位置で耐容されるであろう。したがって、本明
細書に記載の方法及び組成物で使用するためのＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドについての一
般式は、配列番号３もしくは配列番号１４のアミノ酸２９～１０９を含むが、任意に、配
列番号３もしくは配列番号１４の２０～２４または２２～２５の範囲のアミノ酸位置で開
始し、かつ配列番号３もしくは配列番号１４の１２９～１３４の範囲のアミノ酸位置で終
了し、リガンド結合ポケット内の１、２、５、または１５個を超えない保存的アミノ酸変
化と、リガンド結合ポケット内の、配列番号３もしくは配列番号１４のアミノ酸位置４０
、５３、５５、７４、７９及び／または８２でのゼロの、１つ以上の非保存的変更を含む
一般式である。このようなＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドは、配列番号３もしくは配列番号
１４のアミノ酸２９～１０９と、８０％、９０％、９５％または９９％を超える配列同一
性または配列相同性を保持することができる。変化性が特に良好に耐容され得る結合ポケ
ットの外側の部位には、ＡｃｔＲＩＩＢの細胞外ドメインのアミノ末端及びカルボキシ末
端、及び４２～４６位ならびに６５～７３位が挙げられる。配列番号３もしくは配列番号
１４の６５位でのアスパラギンのアラニンへの変更（Ｎ６５Ａ）は、Ａ６４のバックグラ
ウンドにおいてリガンド結合を実際に改善し、したがって、Ｒ６４バックグラウンドにお
けるリガンド結合に及ぼす有害な影響を有さないと予想される。この変化は、おそらく、
Ａ６４バックグラウンドにおけるＮ６５でのグリコシル化を排除し、したがって、この領
域で著しい変化は耐容される可能性が高いことを証明している。Ｒ６４Ａの変化は、耐容
性が低いが、Ｒ６４Ｋは、良好に耐容され、したがって、Ｈなどの別の塩基性残基は、６
４位で耐容される可能性がある。

【0085】

リガンド結合ドメインに変異を有するＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドの具体的な例として
、ＡｃｔＲＩＩＢのリガンド結合ドメインの正に荷電したアミノ酸残基Ａｓｐ（Ｄ８０）
は、多様体ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドがＧＤＦ８に優先的に結合するが、アクチビンに
は優先的に結合しないように、異なるアミノ酸残基に変異することができる。具体的な実
施形態では、Ｄ８０残基は、非荷電アミノ酸残基、負荷電アミノ酸残基、及び疎水性アミ
ノ酸残基からなる群から選択されるアミノ酸残基に変えられる。さらなる具体的な例とし
て、ＧＤＦ１１結合を保持しながらアクチビン結合を大幅に低減させるために、疎水性残
基Ｌ７９は、酸性アミノ酸のアスパラギン酸またはグルタミン酸に変更され得る。当業者
によって認識されるように、記載した変異、多様体または修飾の大部分は、核酸レベルで
行われ得るか、または場合によっては、翻訳後修飾もしくは化学合成によって行われ得る
。このような技法は、当該技術分野において既知である。

【0086】

具体的な実施形態では、本明細書に記載の組成物及び方法で使用されるＡｃｔＲＩＩＢ
シグナル伝達の阻害薬は、抗体のＦｃ部分に連結したＡｃｔＲＩＩＢ受容体の細胞外ドメ
イン（例えば、アクチビン結合ドメイン）を含む複合／融合タンパク質を含む。このよう
な複合／融合タンパク質は、本明細書に開示されるＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドのうちの
いずれか（例えば、配列番号１７、１８、２３、２６、２７、２９、３０、３１、３２、
３３のうちのいずれか）、当該技術分野において既知の任意のＡｃｔＲＩＩＢポリペプチ
ド、または当該技術分野において既知の方法及び／または本明細書に提供される方法を使
用して産生された任意のＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドを含んでもよい。

【0087】

ある特定の実施形態では、細胞外ドメインは、リンカー、例えば、ペプチドリンカーを
介して抗体のＦｃ部分に連結される。例示的なリンカーとしては、２～１０、２～５、２
～４、２～３個のアミノ酸残基（例えば、グリシン残基）などの短いポリペプチド配列が
挙げられ、例えば、Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙリンカーなどである。具体的な実施形態では
、リンカーは、アミノ酸配列Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ（ＧＧＧ）を含む。別の具体的な実
施形態では、リンカーは、アミノ酸配列Ｔｈｒ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ（ＴＧＧＧ）を
含む。任意に、Ｆｃドメインは、Ａｓｐ－２６５、リジン３２２、及びＡｓｎ－４３４な
どの残基で１つ以上の変異を有する。ある特定の場合には、これらの変異のうちの１つ以
上（例えば、Ａｓｐ－２６５変異）を有する変異体Ｆｃドメインは、野生型Ｆｃドメイン
と比べて、Ｆｃγ受容体に結合する能力が低減する。他の場合には、これらの変異のうち
の１つ以上（例えば、Ａｓｎ－４３４変異）を有する変異体Ｆｃドメインは、野生型Ｆｃ
ドメインと比べて、ＭＨＣクラスＩ関連Ｆｃ受容体（ＦｃＲＮ）に結合する能力が増大す
る。Ｆｃドメインに融合したＡｃｔＲＩＩＢの可溶性細胞外ドメインを含む例示的な融合
タンパク質は、配列番号２０、２１、２４、２５、または３４に記載されている。

【0088】

具体的な実施形態では、本明細書に記載の組成物及び方法で使用されるＡｃｔＲＩＩＢ
シグナル伝達阻害薬は、抗体のＦｃ部分に連結したＡｃｔＲＩＩＢの細胞外ドメイン、ま
たはその一部分を含み、該ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、配列番号２０、２１、
２４、２５、３４から選択されるアミノ酸配列と少なくとも７５％同一であるアミノ酸配
列を含む。別の具体的な実施形態では、本明細書に記載の組成物及び方法で使用されるＡ
ｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、抗体のＦｃ部分に連結したＡｃｔＲＩＩＢの細胞外
ドメイン、またはその一部分を含み、該ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、配列番号
２０、２１、２４、２５、及び３４から選択されるアミノ酸配列と少なくとも８０％、８
５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％同一であるアミノ酸配列
を含む。

【0089】

具体的な実施形態では、本明細書に記載の組成物及び方法で使用されるためのＡｃｔＲ
ＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、ヒトＡｃｔＲＩＩＢ受容体の細胞外ドメインとＩｇＧ１の
Ｆｃ部分との間の融合タンパク質である。別の具体的な実施形態では、本明細書に記載の
組成物及び方法で使用されるためのＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、ヒトＡｃｔＲ
ＩＩＢ受容体の細胞外ドメインとＩｇＧ１のＦｃ部分との間の融合タンパク質である。別
の具体的な実施形態では、本明細書に記載の組成物及び方法で使用されるためのＡｃｔＲ
ＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、ヒトＡｃｔＲＩＩＢ受容体の切断型細胞外ドメインとＩｇ
Ｇ１のＦｃ部分との間の融合タンパク質であり、ヒトＡｃｔＲＩＩＢ受容体の切断型細胞
外ドメインは、配列番号３もしくは配列番号１４のアミノ酸７９に相当するアミノ酸位置
でアミノ酸置換を有する。一実施形態では、配列番号３もしくは配列番号１４のアミノ酸
７９に相当するアミノ酸位置でアミノ酸置換は、ロイシンのアスパラギン酸への置換（す
なわち、Ｌ７９Ｄ変異）である。

【0090】

具体的な実施形態では、本明細書に記載の組成物及び方法で使用されるためのＡｃｔＲ
ＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、配列番号１０または１１であり、これはヒトＡｃｔＲＩＩ
Ｂ受容体の細胞外ドメインとＩｇＧ１のＦｃ部分との間の融合タンパク質を表し、該Ａｃ
ｔＲＩＩＢ細胞外ドメインは、Ｌ７９Ｄ変異を有する配列番号１４のアミノ酸２５～１３
１を含む。配列番号１０のＡｃｔＲＩＩＢ－Ｆｃ融合タンパク質をコードする核酸配列は
、配列番号３１に提示されている。

【0091】

別の具体的な実施形態では、本明細書に記載の組成物及び方法で使用されるためのＡｃ
ｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、配列番号２０または２１であり、これはヒトＡｃｔＲ
ＩＩＢ受容体の細胞外ドメインとＩｇＧ１のＦｃ部分との間の融合タンパク質を表し、該
ＡｃｔＲＩＩＢ細胞外ドメインは、Ｌ７９Ｄ変異を有する配列番号３のアミノ酸２５～１
３１を含む。

【0092】

アスパラギン結合型グリコシル化認識部位は、一般的に、適切な細胞グリコシル化酵素
によって特異的に認識される、トリペプチド配列の、アスパラギン－Ｘ－スレオニン（ま
たはアスパラギン－Ｘ－セリン）（式中、「Ｘ」は、任意のアミノ酸である）を含む。改
変は、（Ｏ連結グリコシル化部位のための）野生型ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドの配列へ
の１つ以上のセリンまたはスレオニン残基の付加、またはそれによる置換によっても行わ
れ得る。グリコシル化認識部位の第１番目もしくは第３番目のアミノ酸位置の１つまたは
両方での様々なアミノ酸置換または欠失（及び／または第２の位置でのアミノ酸欠失）は
、修飾トリペプチド配列における非グリコシル化をもたらす。ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチ
ド上の炭水化物部分の数を増加させるための別の手段は、グリコシドのＡｃｔＲＩＩＢポ
リペプチドへの化学的または酵素的カップリングによるものである。使用されるカップリ
ングモードに応じて、糖（複数可）は、（ａ）アルギニン及びヒスチジン、（ｂ）遊離カ
ルボキシル基、（ｃ）遊離スルフヒドリル基（システインのものなど）、（ｄ）遊離ヒド
ロキシル基（セリン、スレオニン、またはヒドロキシプロリンのものなど）、（ｅ）芳香
族残基（フェニルアラニン、チロシン、またはトリプトファンのものなど）、または（ｆ
）グルタミンのアミド基に取り付けられてもよい。これらの方法は、参照により、本明細
書に組み込まれる、国際特許出願第ＷＯ８７／０５３３０号（１９８７年９月１１に公開
）、及びＡｐｌｉｎ ａｎｄ Ｗｒｉｓｔｏｎ（１９８１）ＣＲＣ Ｃｒｉｔ．Ｒｅｖ．
Ｂｉｏｃｈｅｍ．， ｐｐ． ２５９－３０６に記載されている。ＡｃｔＲＩＩＢポリペ
プチド上に存在する１つ以上の炭水化物部分の除去は、化学的及び／または酵素的に達成
することができる。化学的脱グリコシル化は、例えば、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドを、
化合物のトリフルオロメタンスルホン酸に、または同等の化合物に曝露することを伴い得
る。この処理は、アミノ酸配列をインタクトのまま残しながら、結合糖（Ｎ－アセチルグ
ルコサミンまたはＮ－アセチルガラクトサミン）を除く大部分またはすべての糖の開裂を
もたらす。化学的脱グリコシル化は、Ｈａｋｉｍｕｄｄｉｎ ｅｔ ａｌ．（１９８７）
Ａｒｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．２５９：５２により、及びＥｄｇｅ ｅ
ｔ ａｌ．（１９８１） Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１１８：１３１によりさらに記載
されている。ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチド上の炭水化物部分の酵素的開裂は、Ｔｈｏｔａ
ｋｕｒａ ｅｔ ａｌ．（１９８７） Ｍｅｔｈ．Ｅｎｚｙｍｏｌ．１３８：３５０によ
り記載されるように、様々なエンド－及びエキソ－グリコシダーゼの使用によって達成さ
れ得る。ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドの配列は、適宜、哺乳動物、酵母、昆虫及び植物細
胞などの使用される発現系の種類に応じて、ペプチドのアミノ酸配列によって影響され得
る様々なグリコシル化パターンをその後、すべて導入することができる。一般的に、ヒト
で使用するためのＡｃｔＲＩＩＢタンパク質は、ＨＥＫ２９３またはＣＨＯ細胞株などの
、適切なグリコシル化を提供する哺乳動物細胞株で発現されるであろうが、他の哺乳動物
発現細胞株、操作されたグリコシル化酵素を有する酵母細胞株、及び昆虫細胞などの他の
発現系も同様に有用であると予想される。

【0093】

具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢ（Ｒ６４）－Ｆｃの形態と比べて、ＡｃｔＲＩ
ＩＢ－Ｆｃ融合タンパク質の血清半減期を増加させるさらなるＮ結合型グリコシル化部位
（Ｎ－Ｘ－Ｓ／Ｔ）の付加を含む変異したＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドを、本明細書に記
載の方法及び組成物で使用することができる。具体的な実施形態では、配列番号３もしく
は配列番号１４の２４位でのアスパラギンの導入（Ａ２４Ｎ）は、より長い半減期を付与
するＮＸＴ配列の形成をもたらす。他のＮＸ（Ｔ／Ｓ）配列は、４２～４４（ＮＱＳ）及
び６５～６７（ＮＳＳ）で見出すことができるが、後者は６４位でのＲで（すなわち、Ｒ
６４ポリペプチドで）効率的にグリコシル化され得ない。Ｎ－Ｘ－Ｓ／Ｔ配列は、一般的
に、ＡｃｔＲＩＩＢのリガンド結合ポケットの外側の位置に導入されてもよく、これは、
上で詳説されている。非内因性Ｎ－Ｘ－Ｓ／Ｔ配列の導入に特に好適な部位としては、配
列番号３もしくは配列番号１４のアミノ酸２０～２９、２０～２４、２２～２５、１０９
～１３４、１２０～１３４または１２９～１３４が挙げられる。Ｎ－Ｘ－Ｓ／Ｔ配列はま
た、ＡｃｔＲＩＩＢ配列とＦｃまたは他の融合成分との間のリンカーに導入されてもよい
。このような部位は、Ｎを既存のＳもしくはＴに対する正確な位置に導入することによっ
て、またはＳもしくはＴを、既存のＮに相当する位置に導入することによって、最小限の
努力だけで導入することができる。したがって、Ｎ結合型グリコシル化部位を作り出すこ
とになる所望の改変は、Ａ２４Ｎ、Ｒ６４Ｎ、Ｓ６７Ｎ（おそらく、Ｎ６５Ａ改変と組み
合わせて）、Ｅ１０６Ｎ、Ｒ１１２Ｎ、Ｇ１２０Ｎ、Ｅ１２３Ｎ、Ｐ１２９Ｎ、Ａ１３２
Ｎ、Ｒ１１２Ｓ及びＲ１１２Ｔ（すべてのアミノ酸位置は、これらが配列番号３もしくは
配列番号１４で見出すことができる位置に相当する）である。グリコシル化されていると
予想されるいかなるＳも、グリコシル化によって保護が提供されているために、免疫原性
部位を作り出すことなくＴに変更され得る。同様に、グリコシル化されていると予想され
るいかなるＴも、Ｓに変更され得る。したがって、改変Ｓ６７Ｔ及びＳ４４Ｔは本明細書
に包含される。同様に、Ａ２４Ｎ多様体において、Ｓ２６Ｔ改変が使用され得る。したが
って、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドは、１つ以上の追加の、非内因性Ｎ結合型グリコシル
化コンセンサス配列を含んでもよい。

【0094】

様々なスクリーニングアッセイを用いて、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチド多様体を評価す
ることができる。例えば、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチド多様体は、ＡｃｔＲＩＩＢリガン
ドに結合する能力、ＡｃｔＲＩＩＢリガンドのＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドへの結合を阻
む能力、またはＡｃｔＲＩＩＢリガンドによって引き起こされるシグナル伝達を干渉する
能力についてスクリーニングされてもよい。ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドまたはその多様
体の活性はまた、細胞ベースのアッセイまたはインビトロアッセイで試験されてもよい。

【0095】

天然型ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドと比べて、選択的または概ね増大した効力を有する
、コンビナトリアル誘導多様体を産生することができる。同様に、突然変異誘発は、対応
する野生型ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドとは劇的に異なる細胞内半減期を有する多様体を
生じさせることができる。例えば、改変タンパク質は、タンパク質分解または天然Ａｃｔ
ＲＩＩＢポリペプチドの破壊、ないしは別の方法での不活性化をもたらす他の細胞プロセ
スに対してより安定に、またはより不安定のいずれかにすることができる。このような多
様体、及びそれらをコードする遺伝子は、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドの半減期を調節す
ることによって、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドレベルを変更するように利用することがで
きる。例えば、短い半減期は、より一過性の生物学的効果を生じさせることができ、対象
内の組換えＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドレベルのより厳密な制御を可能にすることができ
る。Ｆｃ融合タンパク質において、タンパク質の半減期を変更するために、変異はリンカ
ー（もしあるなら）で、及び／またはＦｃ部分で行うことができる。

【0096】

コンビナトリアルライブラリは、それぞれが可能性のあるＡｃｔＲＩＩＢポリペプチド
配列の少なくとも一部を含むポリペプチドのライブラリをコードする遺伝子の縮重ライブ
ラリとして生成され得る。例えば、可能性のあるＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドヌクレオチ
ド配列の縮重セットが、個々のポリペプチドとして発現可能であるか、あるいはより大き
な融合タンパク質のセットとして発現可能である（例えば、ファージディスプレイのため
に）ように、合成オリゴヌクレオチドの混合物を遺伝子配列に酵素的に連結することがで
きる。

【0097】

可能性のある相同体ライブラリが縮重オリゴヌクレオチド配列から産生され得る多くの
方法がある。縮重遺伝子配列の化学合成は、自動ＤＮＡシンセサイザーで実行することが
でき、次いで、合成遺伝子は、発現のために、適切なベクター中に連結することができる
。縮重オリゴヌクレオチドの合成は、当該技術分野において周知である（例えば、Ｎａｒ
ａｎｇ，Ｓ Ａ（１９８３）Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ ３９：３；Ｉｔａｋｕｒａ ｅｔ
ａｌ．，（１９８１）Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ＤＮＡ，Ｐｒｏｃ．３ｒｄ Ｃｌｅｖ
ｅｌａｎｄ Ｓｙｍｐｏｓ．Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ，ｅｄ．ＡＧ Ｗａｌｔｏｎ
，Ａｍｓｔｅｒｄａｍ：Ｅｌｓｅｖｉｅｒ ｐｐ２７３－２８９；Ｉｔａｋｕｒａ ｅｔ
ａｌ．，（１９８４）Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．５３：３２３；Ｉｔａｋｕ
ｒａ ｅｔ ａｌ．，（１９８４）Ｓｃｉｅｎｃｅ １９８：１０５６；Ｉｋｅ ｅｔ
ａｌ．，（１９８３）Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄ Ｒｅｓ．１１：４７７を参照されたい
）。このような技法は、他のタンパク質の指向性進化法で採用されている（例えば、Ｓｃ
ｏｔｔ ｅｔ ａｌ．，（１９９０）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４９：３８６－３９０；Ｒｏｂ
ｅｒｔｓ ｅｔ ａｌ．，（１９９２）ＰＮＡＳ ＵＳＡ ８９：２４２９－２４３３；
Ｄｅｖｌｉｎ ｅｔ ａｌ．，（１９９０）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４９：４０４－４０６；
Ｃｗｉｒｌａ ｅｔ ａｌ．，（１９９０）ＰＮＡＳ ＵＳＡ ８７：６３７８－６３８
２；ならびに米国特許第５，２２３，４０９号、同第５，１９８，３４６号、及び同第５
，０９６，８１５号を参照されたい）。

【0098】

あるいは、突然変異誘発の他の形態を利用して、コンビナトリアルライブラリを産生す
ることができる。例えば、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチド多様体は、例えば、アラニンスキ
ャニング突然変異誘発などを使用するスクリーニングによって（Ｒｕｆ ｅｔ ａｌ．，
（１９９４）Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ３３：１５６５－１５７２；Ｗａｎｇ ｅｔ
ａｌ．，（１９９４）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６９：３０９５－３０９９；Ｂａｌｉ
ｎｔ ｅｔ ａｌ．，（１９９３）Ｇｅｎｅ １３７：１０９－１１８；Ｇｒｏｄｂｅｒ
ｇ ｅｔ ａｌ．，（１９９３）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２１８：５９７－６０１
；Ｎａｇａｓｈｉｍａ ｅｔ ａｌ．，（１９９３）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２６８：
２８８８－２８９２；Ｌｏｗｍａｎ ｅｔ ａｌ．，（１９９１）Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔ
ｒｙ ３０：１０８３２－１０８３８；及びＣｕｎｎｉｎｇｈａｍ ｅｔ ａｌ．，（１
９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４４：１０８１－１０８５）、リンカースキャニング突然変
異誘発によって（Ｇｕｓｔｉｎ ｅｔ ａｌ．，（１９９３）Ｖｉｒｏｌｏｇｙ １９３
：６５３－６６０；Ｂｒｏｗｎ ｅｔ ａｌ．，（１９９２）Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ Ｂｉｏ
ｌ．１２：２６４４－２６５２；ＭｃＫｎｉｇｈｔ ｅｔ ａｌ．，（１９８２）Ｓｃｉ
ｅｎｃｅ ２３２：３１６）、飽和突然変異誘発によって（Ｍｅｙｅｒｓ ｅｔ ａｌ．
，（１９８６）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２３２：６１３）、ＰＣＲ突然変異誘発によって（Ｌｅ
ｕｎｇ ｅｔ ａｌ．，（１９８９）Ｍｅｔｈｏｄ Ｃｅｌｌ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ １：
１１－１９）、または化学的突然変異誘発などを含むランダム突然変異誘発によって（Ｍ
ｉｌｌｅｒ ｅｔ ａｌ．，（１９９２）Ａ Ｓｈｏｒｔ Ｃｏｕｒｓｅ ｉｎ Ｂａｃ
ｔｅｒｉａｌ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，ＣＳＨＬ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈ
ａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．；及びＧｒｅｅｎｅｒ ｅｔ ａｌ．，（１９９４）Ｓｔｒａｔｅ
ｇｉｅｓ ｉｎ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ ７：３２－３４）、ライブラリから産生し単離する
ことができる。特に、コンビナトリアル設定におけるリンカースキャニング突然変異誘発
は、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドの切断（生物活性）型を特定するために魅力的な方法で
ある。

【0099】

点変異及び切断によって作製されたコンビナトリアルライブラリの遺伝子産物をスクリ
ーニングするための、さらに言うなら、特定の特性を有する遺伝子産物についてｃＤＮＡ
ライブラリをスクリーニングするための、広範囲の技法が当該技術分野において既知であ
る。このような技法は、一般的に、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドのコンビナトリアル突然
変異誘発によって産生された遺伝子ライブラリの迅速なスクリーニングに適用可能であろ
う。大きな遺伝子ライブラリをスクリーニングするために最も広く使用されている技法は
、典型的には、遺伝子ライブラリを複製可能な発現ベクターにクローニングし、適切な細
胞を得られたライブラリベクターで形質転換し、そして所望の活性の検出が、その産物が
検出された遺伝子をコードするベクターの比較的容易な単離を促進する条件下でコンビナ
トリアル遺伝子を発現することを含む。好ましいアッセイとしては、アクチビン結合アッ
セイ及びアクチビン媒介細胞シグナル伝達アッセイが挙げられる。

【0100】

ある特定の実施形態では、本明細書に記載の方法及び組成物で使用されるＡｃｔＲＩＩ
Ｂポリペプチドは、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチド中に自然に存在するいずれかの修飾に加
えて、翻訳後修飾をさらに含む。このような修飾としては、アセチル化、カルボキシル化
、グリコシル化、リン酸化、脂質化、及びアシル化が挙げられるが、これらに限定されな
い。その結果として、修飾ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドは、ポリエチレングリコール、脂
質、多糖類もしくは単糖類、及びリン酸塩などの非アミノ酸要素を含有し得る。このよう
な非アミノ酸要素のＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドの機能性に及ぼす効果は、当業者に既知
の任意の方法によって試験することができる。ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドが、ＡｃｔＲ
ＩＩＢポリペプチドの初期形態を切断することによって細胞中で産生される場合、翻訳後
処理もまた、タンパク質の正確な折り畳み及び／または機能に重要であり得る。異なる細
胞（ＣＨＯ、ＨｅＬａ、ＭＤＣＫ、２９３、Ｗ１３８、ＮＩＨ－３Ｔ３またはＨＥＫ２９
３など）は、このような翻訳後活性のための特異的な細胞機構及び特徴的なメカニズムを
有し、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドの正確な修飾及び処理を確実にするように選択するこ
とができる。

【0101】

ある特定の態様では、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドの機能的多様体または修飾型は、Ａ
ｃｔＲＩＩＢポリペプチドの少なくとも一部分と、１つ以上の融合部分とを有する融合ド
メインを含む。このような融合ドメインのよく知られた例としては、ポリヒスチジン、Ｇ
ｌｕ－Ｇｌｕ、グルタチオンＳトランスフェラーゼ（ＧＳＴ）、チオレドキシン、プロテ
インＡ、タンパク質Ｇ、免疫グロブリン重鎖定常領域（Ｆｃ）、マルトース結合タンパク
質（ＭＢＰ）、またはヒト血清アルブミンが挙げられるが、これらに限定されない。融合
ドメインが、所望の特性を付与するように選択されてもよい。例えば、一部の融合ドメイ
ンは、親和性クロマトグラフィーによる融合タンパク質の単離に特に有用である。親和性
精製の目的のために、グルタチオン－、アミラーゼ－、及びニッケル－もしくはコバルト
－複合樹脂などの親和性クロマトグラフィーに関連したマトリックスが使用される。この
ようなマトリックスの多くは、「キット」形態として入手可能であり、例えば、Ｐｈａｒ
ｍａｃｉａ ＧＳＴ精製システム及び（ＨＩＳ６）融合パートナーで有用なＱＩＡｅｘｐ
ｒｅｓｓ ＴＭシステム（Ｑｉａｇｅｎ）がそうである。別の例として、融合ドメインは
、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドの検出を容易にするように選択されてもよい。このような
検出ドメインの例としては、様々な蛍光タンパク質（例えば、ＧＦＰ）、ならびに通常、
特異的抗体が使用可能である短いペプチド配列である「エピトープタグ」が挙げられる。
特異的モノクローナル抗体が容易に使用可能であるよく知られたエピトープタグとしては
、ＦＬＡＧ、インフルエンザウイルス血球凝集素（ＨＡ）、及びｃ－ｍｙｃタグが挙げら
れる。場合によっては、融合ドメインは、第Ｘａ因子またはトロンビンなどのプロテアー
ゼ切断部位を有し、これは、関連するプロテアーゼが融合タンパク質を部分的に消化する
ことを可能にし、それにより組換えタンパク質をそこから遊離させる。次いで、遊離され
たタンパク質は、その後のクロマトグラフィー分離によって、融合ドメインから単離する
ことができる。ある特定の好ましい実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドは、イン
ビボでＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドを安定化させるドメイン（「スタビライザードメイン
」）と融合される。「安定化させる」とは、血清半減期を延ばすいかなるものも意味し、
これが、破壊の減少、腎臓によるクリアランスの減少、または他の薬物動態作用によるも
のであるかどうかに無関係である。免疫グロブリンのＦｃ部分との融合は、広範囲のタン
パク質に所望の薬物動態特性を付与することが知られている。同様に、ヒト血清アルブミ
ンへの融合も所望の特性を付与することができる。選択され得る他のタイプの融合ドメイ
ンとしては、多量体化（例えば、二量体化、四量体化）ドメイン及び機能的ドメイン（必
要に応じて、骨成長または筋肉成長のさらなる刺激などの追加の生物学的機能を付与する
）が挙げられる。

【0102】

融合タンパク質の異なる要素は、所望の機能性と一致する方法で配置され得ることが理
解される。例えば、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドは、異種ドメインに対してＣ末端に配置
されてもよく、または代替的に、異種ドメインが、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドに対して
Ｃ末端に配置されてもよい。ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドドメイン及び異種ドメインは、
融合体タンパク質中で隣接する必要はなく、追加のドメインまたはアミノ酸配列が、いず
れかのドメインに対してＣ末端もしくはＮ末端に含まれてもよく、またはこれらのドメイ
ンの間に含まれてもよい。

【0103】

ある特定の実施形態では、本明細書に記載の方法及び組成物で使用されるＡｃｔＲＩＩ
Ｂポリペプチドは、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドを安定化することができる１つ以上の修
飾を含有する。例えば、このような修飾は、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドのインビトロ半
減期を向上させ、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドの循環半減期を向上させるか、またはＡｃ
ｔＲＩＩＢポリペプチドのタンパク質分解を低減させる。このような安定化修飾としては
、融合タンパク質（例えば、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドと安定化ドメインとを含む融合
タンパク質を含む）、グリコシル化部位の修飾（例えば、グリコシル化部位のＡｃｔＲＩ
ＩＢポリペプチドへの付加を含む）、及び炭水化物部分の修飾（例えば、炭水化物部分の
ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドからの除去を含む）が挙げられるが、これらに限定されない
。融合タンパク質の場合、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドは、ＩｇＧ分子などのスタビライ
ザードメイン（例えば、Ｆｃドメイン）に融合される。本明細書で使用される場合、「ス
タビライザードメイン」という用語は、融合タンパク質の場合の融合ドメイン（例えば、
Ｆｃ）を指すだけではなく、炭水化物部分などの非タンパク質性修飾、またはポリエチレ
ングリコールなどの非タンパク質性ポリマーも含む。

【0104】

ある特定の実施形態では、本明細書に記載の方法及び組成物は、単離された、または精
製されたＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドを使用し、すなわち、単離形態であるか、ないしは
別の方法で他のタンパク質を実質的に含まないＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドを、本明細書
に記載の方法及び組成物で使用することができる。ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドは、一般
的に、組換え核酸からの発現によって生成されるであろう。

【0105】

ある特定の態様では、本明細書に記載の方法及び組成物で使用されるＡｃｔＲＩＩＢポ
リペプチドは、単離及び／または組換え核酸によってコードされ、本明細書に開示される
断片、機能的多様体、及び融合タンパク質を含む。例えば、配列番号６は、天然型ヒトＡ
ｃｔＲＩＩＢ前駆体ポリペプチドをコードする。対象の核酸は、一本鎖または二本鎖であ
ることができる。このような核酸は、ＤＮＡまたはＲＮＡ分子であり得る。これらの核酸
は、例えば、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドを作製するための方法で、または直接治療薬と
して（例えば、遺伝子療法アプローチにおいて）使用されてもよい。

【0106】

ある特定の態様では、本明細書に記載の方法及び組成物で使用するために好適なＡｃｔ
ＲＩＩＢポリペプチドを生成するために使用され得る核酸は、配列番号６の多様体ならび
に可溶性ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドをコードするこれらの核酸配列の多様体（配列番号
４、５、９、１２、１３、１５、１６、１７、１８、１９、２２、２３、２８、及び２９
をコードする核酸）である核酸を含むことがさらに理解される。多様体ヌクレオチド配列
は、対立遺伝子多様体などの、１つ以上のヌクレオチド置換、付加または欠失によって異
なる配列を含む。

【0107】

ある特定の実施形態では、本明細書に記載の方法及び組成物で使用するために好適なＡ
ｃｔＲＩＩＢポリペプチドを生成するために使用され得る単離または組換え核酸は、配列
番号６もしくは可溶性ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドをコードするこれらの核酸配列（例え
ば、配列番号４、５、９、１２、１３、１５、１６、１７、１８、１９、２２、２３、２
８、及び２９をコードする核酸）と少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９７％
、９８％、９９％、または１００％同一である。配列番号６もしくは可溶性ＡｃｔＲＩＩ
Ｂポリペプチドをコードするこれらの核酸配列（例えば、配列番号４、５、９、１２、１
３、１５、１６、１７、１８、１９、２２、２３、２８、及び２９をコードする核酸）に
相補的な核酸配列、及び配列番号６もしくは可溶性ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドをコード
するこれらの核酸配列（例えば、配列番号４、５、９、１２、１３、１５、１６、１７、
１８、１９、２２、２３、２８、及び２９をコードする核酸）の多様体は、本明細書に記
載の方法及び組成物で使用することができることを当業者であれば理解されるであろう。
さらなる実施形態では、核酸配列は、単離核酸配列、組換え核酸配列、及び／または異種
ヌクレオチド配列と融合された核酸配列とすることができるか、あるいはＤＮＡライブラ
リ中の核酸配列とすることができる。

【0108】

他の実施形態では、本明細書に記載の方法及び組成物で使用するために好適なＡｃｔＲ
ＩＩＢポリペプチドを生成するために使用され得る核酸は、高度にストリンジェントな条
件下で、配列番号６で表示されたヌクレオチド配列もしくは可溶性ＡｃｔＲＩＩＢポリペ
プチドをコードするこれらの核酸配列（例えば、配列番号４、５、９、１２、１３、１５
、１６、１７、１８、１９、２２、２３、２８、及び２９をコードする核酸）、配列番号
６もしくは可溶性ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドをコードするこれらの核酸配列（例えば、
配列番号４、５、９、１２、１３、１５、１６、１７、１８、１９、２２、２３、２８、
及び２９をコードする核酸）の相補配列、またはこれらの断片にハイブリダイズするヌク
レオチド配列を含む。ＤＮＡハイブリダイゼーションを促進する適切なストリンジェント
な条件は変化し得ることは、当業者であれば理解するであろう。例えば、ハイブリダイゼ
ーションを、約摂氏４５度にて６．０倍希釈の塩化ナトリウム／クエン酸ナトリウム（Ｓ
ＳＣ）で実施し、続いて摂氏５０度にて２．０倍希釈のＳＳＣで洗浄することができる。
例えば、洗浄工程での塩濃度は、摂氏５０度での約２．０倍希釈のＳＳＣの低ストリンジ
ェンシーから摂氏５０度での約０．２倍希釈のＳＳＣの高ストリンジェンシーまで選択す
ることができる。加えて、洗浄工程での温度は、室温の約摂氏２２度での低ストリンジェ
ンシー条件から、約摂氏６５度での高ストリンジェンシー条件まで上昇させることができ
る。温度及び塩の両方を変化させてもよく、または他の変数を変化させながら、温度もし
くは塩濃度を一定に保持してもよい。一実施形態では、室温にて６倍希釈のＳＳＣの低ス
トリンジェンシー条件下でハイブリダイズし、続いて室温にて２倍希釈のＳＳＣで洗浄す
る核酸を、本明細書に記載の方法及び組成物で使用することができる。

【0109】

遺伝暗号の縮重のために、配列番号６で記載された核酸もしくは可溶性ＡｃｔＲＩＩＢ
ポリペプチドをコードするこれらの核酸配列（例えば、配列番号４、５、９、１２、１３
、１５、１６、１７、１８、１９、２２、２３、２８、及び２９をコードする核酸）とは
異なる単離核酸もまた、本明細書に記載の方法及び組成物で使用するために好適なＡｃｔ
ＲＩＩＢポリペプチドを生成するために使用することができる。例えば、多くのアミノ酸
は、２つ以上のトリプレットにより表示される。同じアミノ酸を指定するコドン、または
シノニム（例えば、ＣＡＵ及びＣＡＣは、ヒスチジンについてのシノニムである）は、タ
ンパク質のアミノ酸配列に影響を及ぼさない「サイレント」変異をもたらし得る。しかし
ながら、対象のタンパク質のアミノ酸配列の変化に確かにつながるＤＮＡ配列多型は、哺
乳動物細胞の間に存在するであろうことが予想される。当業者であれば、特定のタンパク
質をコードする核酸の１つ以上のヌクレオチドにおけるこれらの変動（最大で約３～５％
のヌクレオチド）が、自然の対立遺伝子変動のために、所与の種の個体間で存在し得るこ
とを理解されるであろう。ありとあらゆるこのようなヌクレオチド変異及び得られたアミ
ノ酸多型は、本明細書に記載の方法及び組成物で使用することができる。

【0110】

ある特定の実施形態では、本明細書に記載の方法及び組成物で使用するのに好適なＡｃ
ｔＲＩＩＢポリペプチドを生成するために使用され得る組換え核酸は、発現構築物内の１
つ以上の調節ヌクレオチド配列に作動可能に連結されてもよい。調節ヌクレオチド配列は
、一般的に、発現に使用される宿主細胞に適切な配列であろう。様々な宿主細胞に対する
多くのタイプの適切な発現ベクター及び好適な調節配列が、当該技術分野において既知で
ある。典型的には、該１つ以上の調節ヌクレオチド配列としては、プロモーター配列、リ
ーダーもしくはシグナル配列、リボソーム結合部位、転写開始ならびに終了配列、翻訳開
始及び終了配列、及びエンハンサーもしくはアクチベータ配列を挙げることができるが、
これらに限定されない。当該技術分野において既知であるような構成的プロモーターまた
は誘導生プロモーターは、本明細書に記載の方法及び組成物で使用することができる。こ
れらのプロモーターは、天然型プロモーター、または２つ以上のプロモーターの要素を組
み合わせるハイブリッドプロモーターのいずれかであってもよい。発現構築物は、プラス
ミドのように、エピソーム上に細胞内に存在してもよく、または発現構築物は、染色体中
に挿入されてもよい。好ましい実施形態では、発現ベクターは、形質転換宿主細胞の選択
を可能にするために、選択可能なマーカー遺伝子を含有する。選択可能なマーカー遺伝子
は、当該技術分野において周知であり、使用される宿主細胞により様々であろう。

【0111】

ある特定の態様では、本明細書に記載の方法及び組成物で使用するのに好適なＡｃｔＲ
ＩＩＢポリペプチドを生成するために使用され得る核酸は、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチド
をコードし、かつ少なくとも１つの調節配列に作動可能に連結されたヌクレオチド配列を
ふくむ発現ベクター中に提供される。調節配列は、当該技術分野において承認されており
、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドの直接発現のために選択される。したがって、調節配列と
いう用語は、プロモーター、エンハンサー、及び他の発現制御要素を含む。例示的な調節
配列は、Ｇｏｅｄｄｅｌ；Ｇｅｎｅ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ：Ｍ
ｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｓａｎ
Ｄｉｅｇｏ，Ｃａｌｉｆ．（１９９０）に記載されている。例えば、ＤＮＡ配列に作動的
に連結されるとＤＮＡ配列の発現を制御する、多種多様な発現制御配列のいずれも、Ａｃ
ｔＲＩＩＢポリペプチドをコードするＤＮＡ配列を発現するために、これらのベクター中
で使用されてもよい。このような有用な発現制御配列としては、例えば、ＳＶ４０の初期
及び後期プロモーター、アデノウイルスまたはサイトメガロウイルスの最初期プロモータ
ー、ＲＳＶプロモーター、ｌａｃシステム、ｔｒｐシステム、ＴＡＣまたはＴＲＣシステ
ム、その発現がＴ７ ＲＮＡポリメラーゼにより指向されるＴ７プロモーター、ラムダフ
ァージのメジャーオペレーター及びプロモーター領域、ｆｄコートタンパク質のための制
御領域、３－ホスホグリセリン酸キナーゼまたは他の解糖酵素のためのプロモーター、酸
性ホスファターゼのプロモーター、例えば、Ｐｈｏ５、酵母のプロモーター、アルファ－
接合因子、バキュロウイルス系の多面体プロモーター、ならびに原核細胞もしくは真核細
胞または他のウイルスの発現を制御することが知られている他の配列、及びこれらの様々
な組み合わせが挙げられる。発現ベクターの設計が、形質転換される宿主細胞の選択及び
／または発現されように望まれるタンパク質の種類などの因子に依存し得ることを理解さ
れたい。さらに、ベクターのコピー数、このコピー数を制御するための能力、及び抗生物
質マーカーなどのベクターによりコードされる任意の他のタンパク質の発現も考慮される
べきである。

【0112】

組換え核酸は、クローンされた遺伝子、またはその一部分を、原核細胞、真核細胞（酵
母、鳥類、昆虫または哺乳動物）、またはその両方のいずれかの発現に好適なベクターに
連結することによって生成することができる。組換えＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドの生成
のための発現ビヒクルには、プラスミド及び他のベクターが含まれる。例えば、好適なベ
クターとしては、これらの種のプラスミド：ｐＢＲ３２２由来プラスミド、ｐＥＭＢＬ由
来プラスミド、ｐＥＸ由来プラスミド、ｐＢＴａｃ由来プラスミド、及びＥ．ｃｏｌｉな
どの原核細胞中の発現用のｐＵＣ由来プラスミドが挙げられる。

【0113】

一部の哺乳動物発現ベクターは、細菌中のベクターの伝搬を容易にするための原核細胞
配列、及び真核細胞中で発現される１つ以上の真核細胞転写ユニットの両方を含有する。
ｐｃＤＮＡＩ／ａｍｐ、ｐｃＤＮＡＩ／ｎｅｏ、ｐＲｃ／ＣＭＶ、ｐＳＶ２ｇｐｔ、ｐＳ
Ｖ２ｎｅｏ、ｐＳＶ２－ｄｈｆｒ、ｐＴｋ２、ｐＲＳＶｎｅｏ、ｐＭＳＧ、ｐＳＶＴ７、
ｐｋｏ－ｎｅｏ及びｐＨｙｇ由来ベクターは、真核細胞のトランスフェクションに好適な
哺乳動物発現ベクターの例である。これらのベクターのうちのいくつかは、原核細胞及び
真核細胞の両方での複製及び薬物耐性選択を容易にするために、ｐＢＲ３２２などの細菌
プラスミドからの配列で修飾されている。あるいは、ウシパピローマウイルス（ＢＰＶ－
１）、またはエプスタイン・バールウイルス（ｐＨＥＢｏ、ｐＲＥＰ由来及びｐ２０５）
などのウイルスの派生物は、真核細胞中でのタンパク質の一過性発現に使用することがで
きる。他のウイルス（レトロウイルスを含む）発現系の例は、以下の遺伝子療法送達系の
説明で見出すことができる。プラスミドの調製及び宿主生物の形質転換で使用される様々
な方法は、当該技術分野において周知である。原核細胞及び真核細胞の両方のための他の
好適な発現系、ならびに一般的な組換え手順については、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎ
ｉｎｇ Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，３ｒｄ Ｅｄ．，ｅｄ．Ｓａｍｂｒ
ｏｏｋ，Ｆｒｉｔｓｃｈ ａｎｄ Ｍａｎｉａｔｉｓ （Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａ
ｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，２００１）を参照されたい。場合によっ
ては、バキュロウイルス発現系の使用によって組換えポリペプチドを発現することが望ま
しいこともある。このようなバキュロウイルス発現系の例としては、ｐＶＬ由来のベクタ
ー（ｐＶＬ１３９２、ｐＶＬ１３９３及びｐＶＬ９４１）、ｐＡｃＵＷ由来のベクター（
ｐＡｃＵＷ１など）、及びｐＢｌｕｅＢａｃ由来のベクター（ベータ－ｇａｌ含有ｐＢｌ
ｕｅＢａｃ ＩＩＩなど）が挙げられる。

【0114】

一実施形態では、ベクターは、ＣＨＯ細胞中での本明細書に記載の方法及び組成物で使
用されるＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドの生成のため設計することができ、例えば、Ｐｃｍ
ｖ－Ｓｃｒｉｐｔベクター（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ，Ｌａ Ｊｏｌｌａ，Ｃａｌｉｆ．）
、ｐｃＤＮＡ４ベクター（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，Ｃａｒｌｓｂａｄ，Ｃａｌｉｆ．）及
びｐＣＩ－ｎｅｏベクター（Ｐｒｏｍｅｇａ，Ｍａｄｉｓｏｎ，Ｗｉｓ．）である。明ら
かなように、対象の遺伝子構築物は、例えば、精製のための、融合タンパク質または多様
体タンパク質を含むタンパク質を生成するために、培養で増殖した細胞中での対象のＡｃ
ｔＲＩＩＢポリペプチドの発現を引き起こすために使用することができる。

【0115】

対象のＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドのうちの１つ以上についてのコード配列（例えば、
配列番号６もしくは可溶性ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドをコードするこれらの核酸配列（
例えば、配列番号４、５、９、１２、１３、１５、１６、１７、１８、１９、２２、２３
、２８、及び２９をコードする核酸））は、本明細書に記載の方法及び組成物で使用する
ために好適なＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドを生成するために使用することができる。ホス
ト細胞は、任意の原核細胞または真核細胞であってもよい。例えば、ＡｃｔＲＩＩＢポリ
ペプチドは、Ｅ．ｃｏｌｉなどの細菌細胞、昆虫細胞（例えば、バキュロウイルス発現系
を使用して）、酵母、または哺乳動物細胞中で発現されてもよい。他の好適な宿主細胞は
、当業者に既知である。

【0116】

したがって、本明細書に記載の方法及び組成物で使用されるＡｃｔＲＩＩＢポリペプチ
ドを生成する方法が、本明細書に提供される。例えば、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドをコ
ードする発現ベクターでトランスフェクトされた宿主細胞は、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチ
ドの発現を可能にする適切な条件下で培養することができる。ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチ
ドは、分泌され、細胞とＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドを含有する培地の混合物から単離す
ることができる。あるいは、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドは、細胞質で、または膜画分中
に保持され、細胞が採取され、溶解されてタンパク質が単離され得る。細胞培養物は、宿
主細胞、培地及び他の副産物を含む。細胞培養に好適な培地は、当該技術分野において周
知である。対象のＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドは、イオン交換クロマトグラフィー、ゲル
濾過クロマトグラフィー、限外濾過、電気泳動、ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドの特定のエ
ピトープに特異的な抗体を用いる免疫親和性精製、及びＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドに融
合したドメインに結合する薬剤を用いる親和性精製（例えば、プロテインＡカラムを使用
して、ＡｃｔＲＩＩＢ－Ｆｃ融合を精製することができる）を含む、タンパク質を精製す
るための当該技術分野において既知の技法を使用して、細胞培養培地、宿主細胞、または
これらの両方から単離することができる。好ましい実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢポリペ
プチドは、その精製を容易にするドメインを含有する融合タンパク質である。好ましい実
施形態では、精製は、例えば、以下の：任意の順序で、プロテインＡクロマトグラフィー
、Ｑセファロースクロマトグラフィー、フェニルセファロースクロマトグラフィー、サイ
ズ排除クロマトグラフィー、及びカチオン交換クロマトグラフィーのうちの３つ以上を含
む一連のカラムクロマトグラフィー工程によって達成される。精製は、ウイルス濾過及び
緩衝液交換により完了することができる。本明細書で実証されたように、ＡｃｔＲＩＩＢ
－ｈＦｃタンパク質は、サイズ排除クロマトグラフィーで決定されるとき、＞９８％の純
度まで、及びＳＤＳ ＰＡＧＥで決定されるとき、＞９５％の純度まで精製される。この
純度のレベルは、マウスでの骨に対する所望の効果、及びマウス、ラットならびに非ヒト
霊長類での許容できる安全性プロファイルを達成するのに十分なものであった。

【0117】

別の実施形態では、組換えＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドの所望の部分のＮ末端における
ポリ－（Ｈｉｓ）／エンテロキナーゼ切断部位配列などの精製リーダー配列をコードする
融合遺伝子は、Ｎｉ２＋金属樹脂を使用する親和性クロマトグラフィーによる発現された
融合タンパク質の精製を可能にする。次いで、精製リーダー配列は、エンテロキナーゼに
よる処理でその後除去され、精製ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドを提供する（例えばＨｏｃ
ｈｕｌｉ ｅｔ ａｌ．，（１９８７）Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ４１１：１
７７；及びＪａｎｋｎｅｃｈｔ ｅｔ ａｌ．，ＰＮＡＳ ＵＳＡ ８８：８９７２を参
照されたい）。

【0118】

融合遺伝子を作製するための技法は、周知である。本質的に、異なるポリペプチド配列
をコードする様々なＤＮＡ断片の接合は、ライゲーションのための平滑端またはジグザグ
端の末端、適切な末端を提供するための制限酵素消化、必要に応じての粘着末端の埋め込
み、望ましくない接合を回避するためのアルカリホスファターゼ処理、及び酵素ライゲー
ションを使用する従来の技法に従って実施される。別の実施形態では、融合遺伝子は、自
動ＤＮＡシンセサイザーを含む従来の技法により合成することができる。あるいは、遺伝
子断片のＰＣＲ増幅は、２つの連続した遺伝子断片間の相補的オーバーハングを生じさせ
るアンカープライマーを使用して実行し、その後、アニールされて、キメラ遺伝子配列を
産生することができる（例えば、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅ
ｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，ｅｄｓ．Ａｕｓｕｂｅｌ ｅｔ ａｌ．，Ｊｏｈｎ Ｗｉ
ｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ：１９９２を参照されたい）。

【0119】

ＡｃｔＲＩＩＢ－Ｆｃ融合タンパク質は、配列番号２の組織プラスミノーゲンリーダー
配列を使用して、ｐＡＩＤ４ベクター（ＳＶ４０ ｏｒｉ／エンハンサー、ＣＭＶプロモ
ーター）から安定してトランスフェクトされたＣＨＯ－ＤＵＫＸ Ｂｌ１細胞で発現する
ことができる。Ｆｃ部分は、配列番号１に示されるように、ヒトＩｇＧ１ Ｆｃ配列を含
むことができる。ある特定の実施形態では、発現時に、含まれるタンパク質は、ＡｃｔＲ
ＩＩＢ－Ｆｃ融合タンパク質の分子当たり、平均で約１．５～２．５モルのシアル酸を有
する。

【0120】

ある特定の実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢ－Ｆｃ融合タンパク質の長い血清半減期は、
ヒト対象において、２５～３２日であり得る。さらに、ＣＨＯ細胞発現物質は、ヒト２９
３細胞中で発現されたＡｃｔＲＩＩＢ－ｈＦｃ融合タンパク質について報告されたものよ
りもアクチビンＢに対してより高い親和性を有し得る（ｄｅｌ Ｒｅ ｅｔ ａｌ．，Ｊ
ＢｉｏｌＣｈｅｍ．２００４Ｄｅｃ １７；２７９（５１）：５３１２６－３５）。さ
らに、理論に束縛されるものではないが、ＴＰＡリーダー配列の使用は、他のリーダー配
列よりも大きな生成をもたらし、天然のリーダー配列で発現されたＡｃｔＲＩＩＢ－Ｆｃ
とは異なり、非常に純粋なＮ末端配列を提供することができる。天然のリーダー配列の使
用は、それぞれが異なるＮ末端配列を有する、ＡｃｔＲＩＩＢ－Ｆｃの２つの主要な種を
もたらし得る。

【0121】

ある好ましい実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、ルスパテルセプト
である（医薬品国際一般的名称（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｎｏｎｐｒｏｐｒｉｅｔ
ａｒｙ Ｎａｍｅｓ ｆｏｒ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ（
ＩＮＮ））、ＷＨＯ Ｄｒｕｇ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ，Ｖｏｌ．２７，Ｎｏ．４，２
０１３，Ｐｒｏｐｏｓｅｄ ＩＮＮ：Ｌｉｓｔ １１０－４５８，４２２を参照されたい
）。

【0122】

５．５ 組成物
ある特定の実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、本明細書に記載の方
法で使用するために、薬学的に許容される担体と共に製剤化される。例えば、ＡｃｔＲＩ
ＩＢシグナル伝達阻害薬は、単独で、または医薬製剤（治療用組成物）の成分として投与
することができる。対象の化合物は、ヒト向けまたは動物向けの医薬品で使用するための
任意の従来の方法での投与用に製剤化され得る。

【0123】

好ましい実施形態では、ＡｃｔＲＩＩシグナル伝達阻害薬は、皮下投与用に製剤化され
る。

【0124】

別の好ましい実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、無菌の防腐剤フリ
ーの凍結乾燥粉末またはケークとして容器内に包装される。ある特定の実施形態では、容
器は、２５ｍｇのＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬を含む。ある特定の実施形態では、
２５ｍｇのＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬を含む容器は、合計で３７．５ｍｇのタン
パク質を含む。ある特定の実施形態では、２５ｍｇのＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬
を含む容器内のＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、０．６８ｍＬの注射用水で再構成
される。ある特定の実施形態では、容器は、７５ｍｇのＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害
薬を含む。ある特定の実施形態では、７５ｍｇのＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬を含
む容器は、合計で８７．５ｍｇのタンパク質を含む。ある特定の実施形態では、７５ｍｇ
のＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬を含む容器内のＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬
は、１．６ｍＬの注射用水で再構成される。ある特定の実施形態では、容器内のＡｃｔＲ
ＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、注射用水中の再構成されたＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻
害薬の最終濃度がおよそ６．５のｐＨで５０ｍｇ／ｍＬであるような水の容量で再構成さ
れる。ある特定の実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、対象に再構成後
１０時間以内に投与される。ある特定の実施形態では、容器は、１０ｍＭのクエン酸緩衝
液ベースの溶液中に５０ｍｇ／ｍＬの濃度でＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬を含み、
１０ｍＭのクエン酸緩衝液ベースの溶液は、１０ｍＭのクエン酸塩、ｐＨ６．５、９％の
スクロース、及び０．０２％のポリソルベート８０を含む。ある特定の実施形態において
、容器は、２℃～８℃で保管される。ある特定の実施形態では、容器は、２℃～８℃で１
８ヶ月間保存される。ある特定の実施形態では、容器は、灰色ブチルコーティングが施さ
れたストッパーを備えた３ｍＬのガラスバイアルである。ある特定の実施形態では、容器
は、灰色ゴムストッパーを備えた３ｍＬのガラスバイアルである。ある特定の実施形態で
は、ゴムストッパーは、着色プラスチックボタンを備えた圧着アルミニウムフリップキャ
ップで定位置に固定される。ある特定の実施形態では、３ｍＬのガラスバイアルは、２５
ｍｇのＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬を含み、着色プラスチックボタンは赤色である
。ある特定の実施形態では、３ｍＬのガラスバイアルは、７５ｍｇのＡｃｔＲＩＩＢシグ
ナル伝達阻害薬を含み、着色プラスチックボタンは白色である。具体的な実施形態では、
ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、配列番号１１のアミノ酸配列を含むポリペプチド
である。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、配列番号１１の
アミノ酸配列からなるアミノ酸配列を含むポリペプチドである。具体的な実施形態では、
ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、配列番号１１に記載されるアミノ酸配列からなる
ポリペプチドである。

【0125】

具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、無菌の防腐剤フリーの
凍結乾燥粉末またはケークとして容器内に包装される。具体的な実施形態では、容器は、
１０ｍＭのクエン酸緩衝液、ｐＨ６．５中に５０ｍｇ／ｍＬのＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝
達阻害薬を含む。具体的な実施形態では、容器は、５６ｍｇのＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝
達阻害薬、０．１９ｍｇのクエン酸一水和物、３．０３ｍｇのクエン酸三ナトリウム無水
物、０．２４ｍｇのポリソルベート８０、及び１００．８０ｍｇのスクロースを含む。具
体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、配列番号１１のアミノ酸配
列を含むポリペプチドである。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害
薬は、配列番号１１のアミノ酸配列からなるアミノ酸配列を含むポリペプチドである。具
体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、配列番号１１に記載される
アミノ酸配列からなるポリペプチドである。

【0126】

ある特定の実施形態では、本明細書に提供される治療方法は、組成物（ＡｃｔＲＩＩＢ
シグナル伝達阻害薬を含む）を全身投与するか、またはインプラントもしくはデバイスと
して局所投与することを含む。投与される場合、本明細書に提供される使用のための治療
用組成物は、パイロジェンフリーの生理学的に許容される形態である。任意に上記の組成
物中に含まれてもよいＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬以外の治療的に有用な薬剤は、
対象の化合物（例えば、ＡｃｔＲＩＩＡ及び／またはＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドなどの
ＡｃｔＲＩＩポリペプチド）と同時にまたは逐次的に投与されてもよい。

【0127】

典型的には、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、非経口投与されるであろう。好ま
しい実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、皮下投与されるであろう。非
経口投与に好適な医薬組成物は、１つ以上のＡｃｔＲＩＩＢポリペプチドを、１つ以上の
薬学的に許容される滅菌等張水溶液もしくは非水溶液、分散液、懸濁液またはエマルジョ
ン、あるいは使用の直前に滅菌注射可能な溶液もしくは分散液に再構成され得る滅菌粉末
と組み合わせて含むことができ、医薬組成物は、酸化防止剤、緩衝液、静菌剤、製剤を対
象レシピエントの血液と等張にする溶質、または懸濁剤もしくは増粘剤を含んでもよい。
本明細書に記載の方法で使用するための医薬組成物において使用され得る好適な水性及び
非水性担体の例としては、水、エタノール、ポリオール（グリセロール、プロピレングリ
コール、ポリエチレングリコール等）、及びそれらの好適な混合物、オリーブ油等の植物
油、ならびにオレイン酸エチル等の注射用有機エステルが挙げられる。適切な流動性は、
例えば、レシチンなどのコーティング材料の使用により、分散液の場合は必要な粒径の維
持により、かつ表面活性剤の使用により、維持することができる。

【0128】

本明細書に記載の組成物はまた、防腐剤、湿潤剤、乳化剤、及び分散剤などのアジュバ
ントを含むことができる。微生物の作用の防止は、様々な抗菌及び抗真菌剤、例えば、パ
ラベン、クロロブタノール、フェノールソルビン酸など、を含めることによって確保する
ことができる。糖、塩化ナトリウムなどのような等張剤を組成物に含有させることもまた
、望ましいことであり得る。加えて、注射可能な医薬形態の持続的吸収は、モノステアリ
ン酸アルミニウム及びゼラチンなどの吸収を遅らせる薬剤の含有によってもたらすことが
できる。

【0129】

ある特定の実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、医薬組成物中で実質
的に純粋である。具体的には、医薬組成物中の化合物の最大で２０％、１０％、５％、２
．５％、１％、０．１％、または最大で０．０５％は、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害
薬以外の化合物及び薬学的に許容される担体である。

【0130】

ある特定の実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、本明細書に提供され
る方法に従って、室温で患者に投与される。

【0131】

５．６ 投与の用量及び経路
本明細書に記載の治療の方法（例えば、セクション５．２を参照されたい）と関連付け
て対象に投与するための、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量も本明細書に提供さ
れる。ある特定の実施形態では、用量は、薬学的有効用量である。

【0132】

ある特定の実施形態では、ＡｃｔＲＩＩシグナル伝達阻害薬の薬学的有効用量は、骨髄
増殖性腫瘍関連骨髄線維症の１つ以上の症状を軽減または緩和するのに十分な用量である
。ある特定の実施形態では、ＡｃｔＲＩＩシグナル伝達阻害薬の薬学的有効用量は、骨髄
増殖性腫瘍関連骨髄線維症の少なくとも１つの症状が悪化するのを予防するのに十分な用
量である。骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症の非限定的な例としては、疲労、寝汗、かゆみ
、腹部不快感、左側肋骨下の痛み、早期満腹、または骨痛が挙げられる。

【0133】

ある特定の実施形態では、ＡｃｔＲＩＩシグナル伝達阻害薬の薬学的有効用量は、骨髄
増殖性腫瘍関連骨髄線維症によって引き起こされるか、またはこれに関連する貧血の１つ
以上の症状を軽減または緩和するのに十分な用量である。ある特定の実施形態では、Ａｃ
ｔＲＩＩシグナル伝達阻害薬の薬学的有効用量は、貧血の少なくとも１つの症状が悪化す
るのを予防するのに十分な用量である。貧血の非限定的な例としては、疲労、エネルギー
損失、頻拍、息切れ、頭痛、集中力欠如、めまい、蒼白、下肢痙攣、及び不眠症が挙げら
れる。

【0134】

ある特定の実施形態では、ＡｃｔＲＩＩシグナル伝達阻害薬の薬学的有効用量は、貧血
の１つ以上の症状及び骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症の１つ以上の症状を軽減または緩和
するのに十分な用量である。ある特定の実施形態では、ＡｃｔＲＩＩシグナル伝達阻害薬
の薬学的有効用量は、貧血の少なくとも１つの症状が悪化するのを予防し、かつ骨髄増殖
性腫瘍関連骨髄線維症の少なくとも１つの症状が悪化するのを予防するのに十分な用量で
ある。貧血の非限定的な例としては、疲労、エネルギー損失、頻拍、息切れ、頭痛、集中
力欠如、めまい、蒼白、下肢痙攣、及び不眠症が挙げられる。骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線
維症の非限定的な例としては、疲労、寝汗、かゆみ、腹部不快感、左側肋骨下の痛み、早
期満腹、または骨痛が挙げられる。

【0135】

ある特定の実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、０．２ｍｇ／ｋｇ以
上の血清濃度、例えば、１ｍｇ／ｋｇまたは２ｍｇ／ｋｇ以上の血清濃度を達成するのに
十分な間隔及び量で投与される。投与レジメンは、０．２～１５ｍｇ／ｋｇ、及び任意に
１～５ｍｇ／ｋｇの血清濃度に達するように設計することができる。ヒトでは、０．１ｍ
ｇ／ｋｇ以上の単回用量で、０．２ｍｇ／ｋｇの血清濃度を達成することができ、０．３
ｍｇ／ｋｇの単回用量で１ｍｇ／ｋｇの血清濃度を達成することができる。分子の観察さ
れた血清半減期は、大部分のＦｃ融合タンパク質よりも実質的に長い約２０～３０日であ
り、したがって、例えば、０．２～０．４ｍｇ／ｋｇを週１回の頻度でまたは２週間に１
回の頻度で投与することによって、持続的に有効な血清レベルを達成することができ、ま
たはより高い用量を投与間のより長い間隔で使用してもよい。例えば、１～３ｍｇ／ｋｇ
の用量を、１ヶ月に１回または２ヶ月に１回の頻度で使用することもでき、骨に及ぼす効
果が、投与が３、４、５、６、９、１２ヶ月、またはそれ以上毎に１回の投与だけが必要
であるように十分に持続的であり得る。ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の血清レベル
は、当業者に既知の任意の手段によって測定することができる。例えば、ＡｃｔＲＩＩＢ
シグナル伝達阻害薬に対する抗体は、例えば、ＥＬＩＳＡを使用してＡｃｔＲＩＩＢシグ
ナル伝達阻害薬の血清レベルを決定するために用いることができる。具体的な実施形態で
は、本明細書に提供される方法は、骨密度及び強度に著しい効果も達成する。

【0136】

ある特定の実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、約０．１ｍｇ
／ｋｇ、約０．３ｍｇ／ｋｇ、約０．４５ｍｇ／ｋｇ、約０．５ｍｇ／ｋｇ、約０．６ｍ
ｇ／ｋｇ、０．７５ｍｇ／ｋｇ、約０．８ｍｇ／ｋｇ、約１．０ｍｇ／ｋｇ、約１．２５
ｍｇ／ｋｇ、約１．３３ｍｇ／ｋｇ、約１．５ｍｇ／ｋｇ、約１．７５ｍｇ／ｋｇ、約２
．０ｍｇ／ｋｇ、または約２．２５ｍｇ／ｋｇである。ある特定の実施形態では、Ａｃｔ
ＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、０．１ｍｇ／ｋｇ～２．２５ｍｇ／ｋｇである。
ある特定の実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、０．１ｍｇ／ｋ
ｇ～１ｍｇ／ｋｇである。ある特定の実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬
の用量は、０．３ｍｇ／ｋｇ～１．２５ｍｇ／ｋｇである。ある特定の実施形態では、Ａ
ｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、０．５ｍｇ／ｋｇ～１．５ｍｇ／ｋｇである
。ある特定の実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、０．１ｍｇ／
ｋｇ～２．０ｍｇ／ｋｇである。ある特定の実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達
阻害薬の用量は、０．３３ｍｇ／ｋｇ～２．０ｍｇ／ｋｇである。ある特定の実施形態で
は、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、０．７５ｍｇ／ｋｇ～１．０ｍｇ／ｋ
ｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ～１．２５ｍｇ／ｋｇ、１．２５ｍｇ／ｋｇ～１．５ｍｇ／ｋｇ、
１．５ｍｇ／ｋｇ～１．７５ｍｇ／ｋｇ、または１．７５ｍｇ／ｋｇ～２．０ｍｇ／ｋｇ
である。ある特定の実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、薬学的
有効用量である。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、
０．３３ｍｇ／ｋｇである。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬
の用量は、０．４５ｍｇ／ｋｇである。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル
伝達阻害薬の用量は、０．６ｍｇ／ｋｇである。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢ
シグナル伝達阻害薬の用量は、０．８ｍｇ／ｋｇである。具体的な実施形態では、Ａｃｔ
ＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、１．０ｍｇ／ｋｇである。具体的な実施形態では
、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、１．３３ｍｇ／ｋｇである。具体的な実
施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、１．７５ｍｇ／ｋｇである。
具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、２．００ｍｇ／ｋ
ｇである。本明細書に提供される用量（例えば、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用
量または第２の活性薬剤の用量）と関連して使用される場合、「約」という単語は、参照
された数値の１、５、または１０％内の任意の数値を指す。

【0137】

ある特定の実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、薬学的有効用
量である。ある特定の実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の薬学的有効用
量は、約０．１ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ／ｋｇ、約０．４５ｍｇ／ｋｇ、約０．５ｍｇ
／ｋｇ、約０．６ｍｇ／ｋｇ、０．７５ｍｇ／ｋｇ、約０．８ｍｇ／ｋｇ、約１．０ｍｇ
／ｋｇ、約１．２５ｍｇ／ｋｇ、約１．３３ｍｇ／ｋｇ、約１．５ｍｇ／ｋｇ、約１．７
５ｍｇ／ｋｇ、約２．０ｍｇ／ｋｇ、または約２．２５ｍｇ／ｋｇである。ある特定の実
施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の薬学的有効用量は、０．１ｍｇ／ｋｇ
～２．２５ｍｇ／ｋｇである。ある特定の実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻
害薬の薬学的有効用量は、０．１ｍｇ／ｋｇ～１ｍｇ／ｋｇである。ある特定の実施形態
では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の薬学的有効用量は、０．３ｍｇ／ｋｇ～１．
２５ｍｇ／ｋｇである。ある特定の実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の
薬学的有効用量は、０．５ｍｇ／ｋｇ～１．５ｍｇ／ｋｇである。ある特定の実施形態で
は、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の薬学的有効用量は、０．１ｍｇ／ｋｇ～２．０
ｍｇ／ｋｇである。ある特定の実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の薬学
的有効用量は、０．３３ｍｇ／ｋｇ～２．０ｍｇ／ｋｇである。ある特定の実施形態では
、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の薬学的有効用量は、０．７５ｍｇ／ｋｇ～１．０
ｍｇ／ｋｇ、１．０ｍｇ／ｋｇ～１．２５ｍｇ／ｋｇ、１．２５ｍｇ／ｋｇ～１．５ｍｇ
／ｋｇ、１．５ｍｇ／ｋｇ～１．７５ｍｇ／ｋｇ、または１．７５ｍｇ／ｋｇ～２．０ｍ
ｇ／ｋｇである。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、
０．３３ｍｇ／ｋｇである。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬
の用量は、０．４５ｍｇ／ｋｇである。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル
伝達阻害薬の用量は、０．６ｍｇ／ｋｇである。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢ
シグナル伝達阻害薬の用量は、０．８ｍｇ／ｋｇである。具体的な実施形態では、Ａｃｔ
ＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、１．０ｍｇ／ｋｇである。具体的な実施形態では
、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、１．３３ｍｇ／ｋｇである。具体的な実
施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、１．７５ｍｇ／ｋｇである。
具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、２．００ｍｇ／ｋ
ｇである。

【0138】

ある特定の実施形態では、本明細書に提供される方法に従って対象に投与されるＡｃｔ
ＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、ベースラインにおける対象のヘモグロビン
のレベルと比べて、対象のヘモグロビンのレベルを増加させるのに十分な用量である。対
象のヘモグロビンのレベルの増加の評価に関して、「ベースライン」とは、ＡｃｔＲＩＩ
Ｂシグナル伝達阻害薬の対象への初回投与直前の時間を指す。ある特定の実施形態では、
本明細書に提供される方法に従って対象に投与されるＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬
の用量は、対象がＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の初回用量を投与された後に、ベー
スラインでの対象のヘモグロビンのレベルと比較して、任意の連続した８４日の期間にわ
たって、少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少
なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも
４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、
少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくと
も９０％、少なくとも９５％、または少なくとも１００％、対象のヘモグロビンのレベル
を増加させるのに十分な用量であり、この対象は、連続した８４日の期間中に０単位の赤
血球単位を輸血されていた。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される方法に従っ
て対象に投与されるＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、対象がＡｃｔＲＩＩＢ
シグナル伝達阻害薬の初回用量を投与された後に、ベースラインでの対象のヘモグロビン
のレベルと比較して、任意の連続した８４日の期間にわたって、最大で５％、最大で１０
％、最大で１５％、最大で２０％、最大で２５％、最大で３０％、最大で３５％、最大で
４０％、最大で４５％、最大で５０％、最大で５５％、最大で６０％、最大で６５％、最
大で７０％、最大で７５％、最大で８０％、最大で８５％、最大で９０％、最大で９５％
、または最大で１００％、対象のヘモグロビンのレベルを増加させるのに十分な用量であ
り、この対象は、連続した８４日の期間中に０単位の赤血球単位を輸血されていた。ある
特定の実施形態では、本明細書に提供される方法に従って対象に投与されるＡｃｔＲＩＩ
Ｂシグナル伝達阻害薬の用量は、対象がＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の初回用量を
投与された後に、ベースラインでの対象のヘモグロビンのレベルと比較して、任意の連続
した８４日の期間にわたって、少なくとも１．５ｇ／ｄＬ、少なくとも１．８ｇ／ｄＬ、
少なくとも２．０ｇ／ｄＬ、少なくとも２．２ｇ／ｄＬ、少なくとも２．４ｇ／ｄＬ、少
なくとも２．６ｇ／ｄＬ、少なくとも２．８ｇ／ｄＬ、少なくとも３．０ｇ／ｄＬ、少な
くとも３．２ｇ／ｄＬ、少なくとも３．４ｇ／ｄＬ、少なくとも３．６ｇ／ｄＬ、少なく
とも３．８ｇ／ｄＬ、少なくとも４．０ｇ／ｄＬ、少なくとも５．０ｇ／ｄＬ、または少
なくとも６．０ｇ／ｄＬ、ヘモグロビンのレベルを増加させるのに十分な用量であり、こ
の対象は、連続した８４日の期間中に０単位の赤血球単位を輸血されていた。ある特定の
実施形態では、本明細書に提供される方法に従って対象に投与されるＡｃｔＲＩＩＢシグ
ナル伝達阻害薬の用量は、対象がＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の初回用量を投与さ
れた後に、ベースラインでの対象のヘモグロビンのレベルと比較して、任意の連続した８
４日の期間にわたって、最大で１．５ｇ／ｄＬ、最大で１．８ｇ／ｄＬ、最大で２．０ｇ
／ｄＬ、最大で２．２ｇ／ｄＬ、最大で２．４ｇ／ｄＬ、最大で２．６ｇ／ｄＬ、最大で
２．８ｇ／ｄＬ、最大で３．０ｇ／ｄＬ、最大で３．２ｇ／ｄＬ、最大で３．４ｇ／ｄＬ
、最大で３．６ｇ／ｄＬ、最大で３．８ｇ／ｄＬ、最大で４．０ｇ／ｄＬ、最大で５．０
ｇ／ｄＬ、または最大で６．０ｇ／ｄＬ、対象のヘモグロビンのレベルを増加させるのに
十分な用量であり、この対象は、連続した８４日の期間中に０単位の赤血球単位を輸血さ
れていた。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される方法に従って対象に投与され
るＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の投
与後、少なくとも３ヶ月間、少なくとも４ヶ月間、少なくとも５ヶ月間、少なくとも６ヶ
月間、少なくとも１２ヶ月間、少なくとも１８ヶ月間、少なくとも２４ヶ月間、または少
なくとも４８ヶ月間、対象のヘモグロビンレベルの増加をもたらすのに十分な用量である
。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される方法に従って対象に投与されるＡｃｔ
ＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の投与後無期
限に、対象のヘモグロビンレベルの増加をもたらすのに十分な用量である。ある特定の実
施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、０．３３ｍｇ／ｋｇ～２．０
ｍｇ／ｋｇである。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は
、０．３３ｍｇ／ｋｇである。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害
薬の用量は、０．４５ｍｇ／ｋｇである。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナ
ル伝達阻害薬の用量は、０．６ｍｇ／ｋｇである。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩ
Ｂシグナル伝達阻害薬の用量は、０．８ｍｇ／ｋｇである。具体的な実施形態では、Ａｃ
ｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、１．０ｍｇ／ｋｇである。具体的な実施形態で
は、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、１．３３ｍｇ／ｋｇである。具体的な
実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、１．７５ｍｇ／ｋｇである
。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、２．００ｍｇ／
ｋｇである。ある特定の実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、セクショ
ン５．４に記載されるＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬である。具体的な実施形態では
、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、配列番号１１のアミノ酸配列を含むポリペプチ
ドである。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、配列番号１１
のアミノ酸配列からなるアミノ酸配列を含むポリペプチドである。具体的な実施形態では
、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、配列番号１１に記載されるアミノ酸配列からな
るポリペプチドである。好ましい実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、
ルスパテルセプトである。

【0139】

対象が赤血球輸血依存性である、ある特定の実施形態では、本明細書に提供される方法
に従って対象に投与されるＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、対象がＡｃｔＲ
ＩＩＢシグナル伝達阻害薬の初回用量を投与された後に、任意の連続した８４日の期間に
わたって、対象の赤血球輸血非依存性をもたらすのに十分な用量である。ある特定の実施
形態では、対象が、任意の連続した６０日、６１日、６２日、６３日、６４日、６５日、
６６日、６７日、６８日、６９日、７０日、７１日、７２日、７３日、７４日、７５日、
７６日、７７日、７８日、７９日、８０日、８１日、８２日、８３日、８４日、８５日、
８６日、８７日、８８日、８９日、または９０日の期間中に、０の赤血球単位を受容して
いる場合、対象は赤血球輸血非依存性である。ある特定の実施形態では、対象が、Ａｃｔ
ＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の対象への初回投与前に、少なくとも６０、６１、６２、６
３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６
、７７、７８、７９、８０、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、
または９０日の期間中に対象が２８日毎に２～４単位の赤血球の平均赤血球輸血頻度を受
容している場合、その対象は赤血球輸血依存性である。ある特定の実施形態では、本明細
書に提供される方法に従って対象に投与されるＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量
は、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の投与後、少なくとも３ヶ月間、少なくとも４ヶ
月間、少なくとも５ヶ月間、少なくとも６ヶ月間、少なくとも１２ヶ月間、少なくとも１
８ヶ月間、少なくとも２４ヶ月間、または少なくとも４８ヶ月間、対象の赤血球輸血非依
存性をもたらすのに十分な用量である。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される
方法に従って対象に投与されるＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、ＡｃｔＲＩ
ＩＢシグナル伝達阻害薬の投与後無期限に、対象の赤血球輸血非依存性をもたらすのに十
分な用量である。ある特定の実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は
、０．３３ｍｇ／ｋｇ～２．０ｍｇ／ｋｇである。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩ
Ｂシグナル伝達阻害薬の用量は、０．３３ｍｇ／ｋｇである。具体的な実施形態では、Ａ
ｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、０．４５ｍｇ／ｋｇである。具体的な実施形
態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、０．６ｍｇ／ｋｇである。具体的
な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、０．８ｍｇ／ｋｇである
。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、１．０ｍｇ／ｋ
ｇである。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、１．３
３ｍｇ／ｋｇである。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量
は、１．７５ｍｇ／ｋｇである。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻
害薬の用量は、２．００ｍｇ／ｋｇである。ある特定の実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシ
グナル伝達阻害薬は、セクション５．４に記載されるＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬
である。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、配列番号１１の
アミノ酸配列を含むポリペプチドである。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナ
ル伝達阻害薬は、配列番号１１のアミノ酸配列からなるアミノ酸配列を含むポリペプチド
である。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、配列番号１１に
記載されるアミノ酸配列からなるポリペプチドである。好ましい実施形態では、ＡｃｔＲ
ＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、ルスパテルセプトである。

【0140】

ある特定の実施形態では、本明細書に提供される方法に従って対象に投与されるＡｃｔ
ＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、ベースラインにおける対象の赤血球輸血の頻度と
比べて、対象の赤血球輸血の頻度を減少させるのに十分な用量である。対象の赤血球輸血
の頻度の減少の評価に関して、「ベースライン」とは、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害
薬の対象への初回投与直前の時間を指す。対象の赤血球輸血の頻度における減少を、ベー
スラインでの対象の赤血球輸血の頻度と比べて評価するために、対象がＡｃｔＲＩＩＢシ
グナル伝達阻害薬の初回用量を投与された後、４週の期間あたり対象に輸血された赤血球
単位の平均数を、ベースラインで４週の期間あたり対象に輸血された赤血球単位の平均数
と比較する。ある特定の実施形態では、本明細書に提供される方法に従って対象に投与さ
れるＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、ベースラインで４週の期間あたり対象
に輸血された赤血球単位の平均数と比べて、対象がＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の
初回用量を投与された後、４週の期間あたり対象に輸血された赤血球単位の平均数を、少
なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも
５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、
または少なくとも１００％、低減させるのに十分な用量である。ある特定の実施形態では
、本明細書に提供される方法に従って対象に投与されるＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害
薬の用量は、ベースラインで４週の期間あたり対象に輸血された赤血球単位の平均数と比
べて、対象がＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の初回用量を投与された後、４週の期間
あたり対象に輸血された赤血球単位の平均数を、最大で１０％、最大で２０％、最大で３
０％、最大で４０％、最大で５０％、最大で６０％、最大で７０％、最大で８０％、最大
で９０％、または最大で１００％、低減させるのに十分な用量である。ある特定の実施形
態では、本明細書に提供される方法に従って対象に投与されるＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝
達阻害薬の用量は、ベースラインで４週の期間あたり対象に輸血された赤血球単位の平均
数と比べて、対象がＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の初回用量を投与された後、４週
の期間あたり対象に輸血された赤血球単位の平均数を、少なくとも１単位、少なくとも２
単位、少なくとも３単位、少なくとも４単位、少なくとも５単位、少なくとも６単位、少
なくとも７単位、または少なくとも８単位、低減させるのに十分な用量である。ある特定
の実施形態では、本明細書に提供される方法に従って対象に投与されるＡｃｔＲＩＩＢシ
グナル伝達阻害薬の用量は、ベースラインで４週の期間あたり対象に輸血された赤血球単
位の平均数と比べて、対象がＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の初回用量を投与された
後、４週の期間あたり対象に輸血された赤血球単位の平均数を、最大で１単位、最大で２
単位、最大で３単位、最大で４単位、最大で５単位、最大で６単位、最大で７単位、また
は最大で８単位、低減させるのに十分な用量である。ある特定の実施形態では、１ＲＢＣ
単位は、約１５０ｍＬ、２００ｍＬ、２５０ｍＬ、３００ｍＬ、３５０ｍＬ、１００～２
００ｍＬ、１５０～２５０ｍＬ、２００～３００ｍＬ、２５０～３００ｍＬ、または２５
０～３５０ｍＬのＲＢＣである。ある特定の実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達
阻害薬の用量は、０．３３ｍｇ／ｋｇ～２．０ｍｇ／ｋｇである。具体的な実施形態では
、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、０．３３ｍｇ／ｋｇである。具体的な実
施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、０．４５ｍｇ／ｋｇである。
具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、０．６ｍｇ／ｋｇ
である。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、０．８ｍ
ｇ／ｋｇである。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、
１．０ｍｇ／ｋｇである。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の
用量は、１．３３ｍｇ／ｋｇである。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝
達阻害薬の用量は、１．７５ｍｇ／ｋｇである。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢ
シグナル伝達阻害薬の用量は、２．００ｍｇ／ｋｇである。ある特定の実施形態では、Ａ
ｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、セクション５．４に記載されるＡｃｔＲＩＩＢシグ
ナル伝達阻害薬である。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、
配列番号１１のアミノ酸配列を含むポリペプチドである。具体的な実施形態では、Ａｃｔ
ＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、配列番号１１のアミノ酸配列からなるアミノ酸配列を含
むポリペプチドである。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、
配列番号１１に記載されるアミノ酸配列からなるポリペプチドである。好ましい実施形態
では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、ルスパテルセプトである。

【0141】

ある特定の実施形態では、本明細書に提供される方法に従って対象に投与されるＡｃｔ
ＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、ベースラインでの対象の輸血負荷と比べて、対象
がＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の初回用量を投与された後の任意の期間にわたって
、少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくと
も２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％
、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なく
とも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０
％、少なくとも９５％、または少なくとも１００％、対象の輸血負荷を減少させるのに十
分な用量である。対象の輸血負荷の減少の評価に関して、「ベースライン」とは、Ａｃｔ
ＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の対象への初回投与直前の時間を指す。ある特定の実施形態
では、本明細書に提供される方法に従って対象に投与されるＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達
阻害薬の用量は、ベースラインでの対象の輸血負荷と比べて、対象がＡｃｔＲＩＩＢシグ
ナル伝達阻害薬の初回用量を投与された後の任意の期間にわたって、最大で５％、最大で
１０％、最大で１５％、最大で２０％、最大で２５％、最大で３０％、最大で３５％、最
大で４０％、最大で４５％、最大で５０％、最大で５５％、最大で６０％、最大で６５％
、最大で７０％、最大で７５％、最大で８０％、最大で８５％、最大で９０％、最大で９
５％、または最大で１００％、対象の輸血負荷を減少させるのに十分な用量である。ある
特定の実施形態では、対象の輸血負荷が減少される期間は、少なくとも４週、少なくとも
５週、少なくとも６週、少なくとも７週、少なくとも８週、少なくとも９週、少なくとも
１０週、少なくとも１１週、または少なくとも１２週である。ある特定の実施形態では、
対象の輸血負荷が減少される期間は、１２週（すなわち、８４日）である。ある特定の実
施形態では、本明細書に提供される方法に従って対象に投与されるＡｃｔＲＩＩＢシグナ
ル伝達阻害薬の用量は、ベースラインでの対象の輸血負荷と比べて、対象がＡｃｔＲＩＩ
Ｂシグナル伝達阻害薬の初回用量を投与された後の任意の連続した８４日の期間にわたっ
て、少なくとも５０％、対象の輸血負荷を減少させるのに十分な用量である。ある特定の
実施形態では、本明細書に提供される方法に従って対象に投与されるＡｃｔＲＩＩＢシグ
ナル伝達阻害薬の用量は、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の投与後、少なくとも３ヶ
月間、少なくとも４ヶ月間、少なくとも５ヶ月間、少なくとも６ヶ月間、少なくとも１２
ヶ月間、少なくとも１８ヶ月間、少なくとも２４ヶ月間、または少なくとも４８ヶ月間、
対象の輸血負荷を減少させるのに十分な用量である。ある特定の実施形態では、本明細書
に提供される方法に従って対象に投与されるＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は
、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の投与後無期限に、対象の輸血負荷を減少させるの
に十分な用量である。ある特定の実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用
量は、０．３３ｍｇ／ｋｇ～２．０ｍｇ／ｋｇである。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲ
ＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、０．３３ｍｇ／ｋｇである。具体的な実施形態では
、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、０．４５ｍｇ／ｋｇである。具体的な実
施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、０．６ｍｇ／ｋｇである。具
体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、０．８ｍｇ／ｋｇで
ある。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、１．０ｍｇ
／ｋｇである。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、１
．３３ｍｇ／ｋｇである。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の
用量は、１．７５ｍｇ／ｋｇである。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝
達阻害薬の用量は、２．００ｍｇ／ｋｇである。ある特定の実施形態では、ＡｃｔＲＩＩ
Ｂシグナル伝達阻害薬は、セクション５．４に記載されるＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻
害薬である。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、配列番号１
１のアミノ酸配列を含むポリペプチドである。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシ
グナル伝達阻害薬は、配列番号１１のアミノ酸配列からなるアミノ酸配列を含むポリペプ
チドである。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、配列番号１
１に記載されるアミノ酸配列からなるポリペプチドである。好ましい実施形態では、Ａｃ
ｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、ルスパテルセプトである。

【0142】

ある特定の実施形態では、貧血応答が測定される。いくつかの実施形態では、貧血応答
は、それがヘモグロビン（Ｈｇｂ）の増加に関連しているとき、例えば、ＲＢＣ輸血なし
に任意の連続した８４日の期間にわたって、ベースラインからの≧１．５ｇ／ｄＬのヘモ
グロビンの増加を達成する対象の（例えば、ルスパテルセプトを受容している対象での）
比率に関連しているときに、測定される。いくつかの実施形態では、貧血応答は、それが
赤血球（ＲＢＣ）輸血の非依存性に関連しているとき、例えば、任意の連続した８４日の
期間にわたって、ＲＢＣ輸血を受けないようになる対象の（例えば、ルスパテルセプトを
受容している対象での）比率に関連しているときに、測定される。いくつかの実施形態で
は、貧血応答は、それが貧血応答までの時間に関連しているとき、例えば、ルスパテルセ
プトの初回投与から貧血応答の最初の発症までの時間（例えば、ルスパテルセプトを受容
している対象での）関連しているときに、測定される。いくつかの実施形態では、貧血応
答は、それが貧血応答の持続時間に関連しているとき、例えば、対象での（例えば、ルス
パテルセプトを受容している対象での）貧血応答の最長持続時間に関連しているときに、
測定される。いくつかの実施形態では、貧血応答は、それがＲＢＣ輸血の頻度に関連して
いるとき、例えば、４週当たりの対象ごとの（例えば、ルスパテルセプトを受容している
対象での）輸血されたＲＢＣ単位の平均数に関連しているときに、測定される。いくつか
の実施形態では、貧血応答は、それがＲＢＣ輸血依存性の頻度に関連しているとき、例え
ば、任意の連続した８４日の期間にわたって、ベースラインから≧５０％の対象の輸血負
荷を低減させるＲＢＣ輸血依存性対象の（例えば、ルスパテルセプトを受容している対象
での）比率に関連しているときに、測定される。いくつかの実施形態では、貧血応答は、
それが改訂骨髄増殖性腫瘍症状評価フォーム（Ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｍｙｅｌｏｐｒｏｌｉ
ｆｅｒａｔｉｖｅ Ｎｅｏｐｌａｓｍ Ｓｙｍｐｔｏｍ Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ Ｆｏｒ
ｍ（ＭＰＮ－ＳＡＦ））により記録され評価されたとき、疲労症状の軽減を達成する対象
の（例えば、ルスパテルセプトを受容している対象において、例えば、ＭＰＮ－ＳＡＦで
測定された疲労症状の≧５０％の軽減を達成する対象において）比率に関連しているとき
に測定され（Ｅｍａｎｕａｌ ｅｔ ａｌ．，“Ｍｙｅｌｏｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ
Ｎｅｏｐｌａｓｍ （ＭＰＮ） Ｓｙｍｐｔｏｍ Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ Ｆｏｒｍ
Ｔｏｔａｌ Ｓｙｍｐｔｏｍ Ｓｃｏｒｅ：Ｐｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ Ｉｎｔｅｒｎａｔ
ｉｏｎａｌ Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ ｏｆ ａｎ Ａｂｂｒｅｖｉａｔｅｄ Ｓｙｍｐｔ
ｏｍ Ｂｕｒｄｅｎ Ｓｃｏｒｉｎｇ Ｓｙｓｔｅｍ Ａｍｏｎｇ Ｐａｔｉｅｎｔｓ
Ｗｉｔｈ ＭＰＮｓ，”Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．３０（３３）：４０９８－４１０３
（２０１２）を参照されたい）、ＭＰＮ－ＳＡＦは、例えば、疲労、寝汗、かゆみ、腹部
不快感、左側肋骨下の痛み、早期満腹、及び骨痛を測定する。いくつかの実施形態では、
貧血応答は、それが改訂骨髄増殖性腫瘍症状評価フォーム（ＭＰＮ－ＳＡＦ）により記録
され評価されたとき、総症状スコア（ＴＳＳ）の≧５０％を達成する対象の（例えば、ル
スパテルセプトを受容している対象での）比率に関連しているときに測定され（Ｅｍａｎ
ｕａｌ ｅｔ ａｌ．，“Ｍｙｅｌｏｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ Ｎｅｏｐｌａｓｍ
（ＭＰＮ） Ｓｙｍｐｔｏｍ Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ Ｆｏｒｍ Ｔｏｔａｌ Ｓｙｍｐ
ｔｏｍ Ｓｃｏｒｅ：Ｐｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ａｓｓｅ
ｓｓｍｅｎｔ ｏｆ ａｎ Ａｂｂｒｅｖｉａｔｅｄ Ｓｙｍｐｔｏｍ Ｂｕｒｄｅｎ
Ｓｃｏｒｉｎｇ Ｓｙｓｔｅｍ Ａｍｏｎｇ Ｐａｔｉｅｎｔｓ Ｗｉｔｈ ＭＰＮｓ，
”Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．３０（３３）：４０９８－４１０３（２０１２）を参照さ
れたい）、ＭＰＮ－ＳＡＦは、例えば、疲労、寝汗、かゆみ、腹部不快感、左側肋骨下の
痛み、早期満腹、及び骨痛を測定する。いくつかの実施形態では、貧血応答は、それが健
康に関連する生活の質（ＨＲＱｏＬ）尺度に関連しているとき、例えば、ベースラインス
コアと比較されたＨＲＱｏＬアンケートドメインスコアにおける尺度平均変化（例えば、
ルスパテルセプトを受容している対象での）に関連しているときに測定される。いくつか
の実施形態では、貧血応答は、それがＥＱ－５Ｄ－５Ｌアンケートスコア（ＥｕｒｏＱｏ
ｌ，Ｒｏｔｔｅｒｄａｍ，Ｔｈｅ Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）に関連しているとき、例え
ば、ベースラインスコアと比較されたＥＱ－５Ｄ－５Ｌアンケートドメインスコアにおけ
る尺度平均変化（例えば、ルスパテルセプトを受容している対象での）に関連していると
きに測定される。いくつかの実施形態では、貧血応答は、それが、有害事象（ＡＥ）に関
連しているとき、例えば、有害事象の種類、頻度、及び重症度（例えば、ルスパテルセプ
トを受容している対象での）に関連しているときに測定される。いくつかの実施形態では
、貧血応答は、抗薬物抗体（ＡＤＡ）を使用して測定される（例えば、ルスパテルセプト
を受容している対象における抗薬物抗体の頻度及び有効性、安全性または薬物動態に及ぼ
す効果）。いくつかの実施形態では、貧血応答は、薬物動態パラメータ、例えば、血漿濃
度－時間曲線、薬物濃度曲線下面積（ＡＵＣ）、Ｃｍａｘ（例えば、ルスパテルセプトを
受容している対象についての）を使用して測定される。

【0143】

ある特定の実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、注射を介して
投与される。ある特定の実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、皮
下投与される。ある特定の実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬の用量は、
３週ごとに１回投与される。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬
は、配列番号１１のアミノ酸配列を含むポリペプチドである。具体的な実施形態では、Ａ
ｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、配列番号１１のアミノ酸配列からなるアミノ酸配列
を含むポリペプチドである。具体的な実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬
は、配列番号１１に記載されるアミノ酸配列からなるポリペプチドである。好ましい実施
形態では、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬は、ルスパテルセプトである。

【0144】

アッセイ
様々なＡｃｔＲＩＩＢポリペプチド多様体、または可溶性ＡｃｔＲＩＩＢポリペプチド
多様体を、それらのＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達を阻害する能力について試験することが
できる。加えて、化合物を、それらのＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達を阻害する能力につい
て試験することができる。ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達の阻害薬の活性が確認されれば、
これらの化合物は、本明細書に提供される方法で使用することができる。以下のアッセイ
は、ＡｃｔＲＩＩＡについて記載されているが、ＡｃｔＲＩＩＢについても同様に実行す
ることができる。

【0145】

例えば、骨の生成及び骨の破壊に関与するＡｃｔＲＩＩＡポリペプチド多様体の遺伝子
の発現に及ぼす効果が評価されてもよい。これは、必要に応じて、１つ以上の組換えＡｃ
ｔＲＩＩＡリガンドタンパク質（例えば、アクチビン）の存在下で実行されてもよく、細
胞は、ＡｃｔＲＩＩＡポリペプチド及び／またはその多様体、ならびに任意にＡｃｔＲＩ
ＩＡリガンドを生成するようにトランスフェクトされ得る。同様に、ＡｃｔＲＩＩＡポリ
ペプチドは、マウスまたは他の動物に投与されてもよく、１つ以上の骨特性、例えば、密
度または体積を評価することができる。骨折の治癒率も、評価されてもよい。二重エネル
ギーＸ線吸収測定法（ＤＥＸＡ）は、動物の骨密度を評価するための十分に確立された、
非侵襲的な定量的な技法である。ヒトでは、躯幹骨ＤＥＸＡシステムを使用して、脊椎及
び骨盤の骨密度を評価することができる。これらは、全体的な骨密度についての最高の予
測因子である。末梢骨ＤＥＸＡシステムは、例えば、手、手首、足首及び足の骨を含む末
梢骨の骨密度を評価するために使用することができる。ＣＡＴスキャンを含む従来のＸ線
殺像システムを使用して、骨成長及び骨折治癒を評価してもよい。加えて、骨密度は、定
量的コンピュータ断層撮影法（ｑＣＴ）を使用して測定することが可能である。骨の機械
的強度も評価されてもよい。

【0146】

ある特定の態様では、ＡｃｔＲＩＩＡポリペプチド（例えば、可溶性ＡｃｔＲＩＩＡポ
リペプチド）及びアクチビンポリペプチドの、アクチビン－ＡｃｔＲＩＩＡシグナル伝達
経路の作動薬または拮抗薬である化合物（薬剤）を特定するための使用が、本明細書に提
供される。このスクリーニングを通して特定された化合物は、それらのインビトロでの骨
成長またはミネラル化を調節するための能力を評価するために試験することができる。任
意に、これらの化合物は、それらのインビボでの組織増殖を調節する能力を評価するため
に、動物モデルでさらに試験することができる。

【0147】

アクチビン及びＡｃｔＲＩＩＡポリペプチドを標的化することにより、組織増殖を調節
するための治療薬をスクリーニングするための多くのアプローチがある。ある特定の実施
形態では、化合物のハイスループットスクリーニングを実行して、骨へのアクチビンまた
はＡｃｔＲＩＩＡ媒介作用を攪乱させる薬剤を特定することができる。ある特定の実施形
態では、アッセイを行って、ＡｃｔＲＩＩＡポリペプチドのアクチビンへの結合を特異的
に阻害するか、または低減させる化合物を特定する。あるいは、アッセイを使用して、Ａ
ｃｔＲＩＩＡポリペプチドのアクチビンへの結合を増強させる化合物を特定することがで
きる。さらなる実施形態では、化合物は、それらのアクチビンまたはＡｃｔＲＩＩＡポリ
ペプチドと相互作用する能力によって、特定することができる。

【0148】

本開示の観点から、様々なアッセイ形式が満足させるものであり、本明細書に明示的に
説明されていないものであっても、当業者であれば理解されるであろう。本明細書で記載
される場合、本明細書で使用される試験化合物（薬剤）は、任意のコンビナトリアルケミ
ストリーの方法により作り出すことができる。あるいは、対象の化合物は、インビボまた
はインビトロで合成された天然型生体分子であってもよい。組織増殖の調節因子として作
用するためのそれらの能力が試験される化合物（薬剤）は、例えば、化学的に生成された
（例えば、ペプチド模倣薬を含む小分子）、または組換え的に生成された、細菌、酵母、
植物、または他の生物（例えば、天然物）によって生成され得る。本明細書で企図される
試験化合物としては、非ペプチジル有機分子、ペプチド、ポリペプチド、ペプチド模倣薬
、糖、ホルモン、及び核酸分子が挙げられる。具体的な実施形態では、試験薬剤は、約２
，０００ダルトン未満の分子量を有する有機小分子である。

【0149】

試験化合物は、単一の個別の実体として提供され得るか、またはコンビナトリアルケミ
ストリーによって作製されたような、より複雑なライブラリで提供され得る。これらのラ
イブラリは、例えば、アルコール、アルキルハロゲン化物、アミン、アミド、エステル、
アルデヒド、エーテル、及び他の部類の有機化合物を含むことができる。試験化合物の試
験システムへの提示は、特に初期スクリーニング工程で、化合物の単離形態または混合物
としてのいずれかであり得る。任意に、化合物は、他の化合物で誘導体化されてもよく、
化合物の単離を容易にする誘導体化基を有する。誘導体化基の非限定的な例としては、ビ
オチン、フルオレセイン、ジゴキシゲニン、緑色蛍光タンパク質、アイソトープ、ポリヒ
スチジン、磁気ビーズ、グルタチオンＳトランスフェラーゼ（ＧＳＴ）、光活性化架橋剤
、またはこれらの任意の組み合わせが挙げられる。

【0150】

化合物及び天然抽出物のライブラリを試験する多くの薬物スクリーニングプログラムで
は、所与の期間での検査される化合物の数を最大化するために、ハイスループットアッセ
イが望ましい。精製タンパク質または半精製タンパク質で誘導体化され得るものなどの無
細胞系で実施されるアッセイは、多くの場合、これらが試験化合物によって媒介される分
子標的中の改変の迅速な発生及び比較的容易な検出を可能にするように産生され得るとい
う点で、「一次」スクリーニングとして好ましい。さらに、試験化合物の細胞毒性または
生物学的利用能の効果は、一般的に、インビトロ系では無視することができ、ＡｃｔＲＩ
ＩＡポリペプチドとアクチビンとの間の結合親和性の改変で明らかであり得るために、ア
ッセイは、代わりに、薬物の分子標的に及ぼす効果に主として焦点が当てられる。

【0151】

例示にすぎないが、例示的なスクリーニングアッセイでは、対象とする化合物を、通常
、アクチビンに結合することができる単離し精製されたＡｃｔＲＩＩＡポリペプチドと接
触させる。次いで、化合物とＡｃｔＲＩＩＡポリペプチドとの混合物に、ＡｃｔＲＩＩＡ
リガンドを含有する組成物が添加される。ＡｃｔＲＩＩＡ／アクチビン複合体の検出及び
定量化は、ＡｃｔＲＩＩＡポリペプチドとアクチビンとの間の複合体形成を阻害する（ま
たは増強する）ことに関する化合物の有効性を判定するための手段を提供する。化合物の
有効性は、様々な濃度の試験化合物を使用して得られたデータから用量反応曲線を作成す
ることによって評価することができる。さらに、対照アッセイも、比較のためのベースラ
インを提供するために実施することができる。例えば、対照アッセイでは、単離され精製
されたアクチビンを、ＡｃｔＲＩＩＡポリペプチドを含有する組成物に添加し、ＡｃｔＲ
ＩＩＡ／アクチビン複合体の形成を、試験化合物の非存在下で定量化する。一般的に、反
応体が混合され得る順序は様々であってもよく、同時に混合することも可能であることを
理解されたい。さらに、精製タンパク質に代えて、細胞抽出物及び細胞溶解物を使用して
、好適な無細胞系にしてもよい。

【0152】

ＡｃｔＲＩＩＡポリペプチドとアクチビンとの間の複合体形成は、様々な技法によって
検出されてもよい。例えば、複合体の形成の調節は、例えば、放射標識された（例えば、
３２Ｐ、３５Ｓ、１４Ｃまたは３Ｈ）、蛍光標識された（例えば、ＦＩＴＣ）、または酵
素標識されたＡｃｔＲＩＩＡポリペプチドもしくはアクチビンなどの検出可能に標識され
たタンパク質を用いて、免疫アッセイによって、またはクロマトグラフィーによる検出に
よって定量化することができる。

【0153】

ある特定の実施形態では、ＡｃｔＲＩＩＡポリペプチドとその結合タンパク質との間の
相互作用の程度の直接的または間接的のいずれかでの測定における蛍光偏光アッセイ及び
蛍光共鳴エネルギー移動（ＦＲＥＴ）アッセイの使用が本明細書で企図される。さらに、
光導波路（ＰＣＴ公開第ＷＯ９６／２６４３２号及び米国特許第５，６７７，１９６号）
、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）、表面電荷センサー、及び表面力センサーに基づくもの
などの他の検出モードは、本明細書に記載の多くの実施形態と適合性がある。

【0154】

さらに、「ツーハイブリッドアッセイ」としても知られる相互作用トラップアッセイは
、ＡｃｔＲＩＩＡポリペプチドとその結合タンパク質との間の相互作用を攪乱するか、ま
たは増強する薬剤を特定するために使用することができる。例えば、米国特許第５，２８
３，３１７号、ＺＥＲＶＯＳ ｅｔ ａｌ．（１９９３） Ｃｅｌｌ ７２：２２３－２
３２、Ｍａｄｕｒａ ｅｔ ａｌ．（１９９３） Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２６８：１
２０４６－１２０５４、Ｂａｒｔｅｌ ｅｔ ａｌ．（１９９３） Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉ
ｑｕｅｓ １４：９２０－９２４、及びＩｗａｂｕｃｈｉ ｅｔ ａｌ．（１９９３）
Ｏｎｃｏｇｅｎｅ ８：１６９３－１６９６）を参照されたい。具体的な実施形態では、
ＡｃｔＲＩＩＡポリペプチドとその結合タンパク質との間の相互作用を解離する化合物（
例えば、小分子またはペプチド）を特定するための逆ツーハイブリッドシステムの使用が
本明細書で企図される。例えば、Ｖｉｄａｌ ａｎｄ Ｌｅｇｒａｉｎ，（１９９９）Ｎ
ｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ ２７：９１９－２９、Ｖｉｄａｌ ａｎｄ Ｌｅｇ
ｒａｉｎ，（１９９９）Ｔｒｅｎｄｓ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ １７：３７４－８１、及
び米国特許第５，５２５，４９０号、同第５，９５５，２８０号、ならびに同第５，９６
５，３６８号を参照されたい。

【0155】

ある特定の実施形態では、対象の化合物は、ＡｃｔＲＩＩＡもしくはアクチビンポリペ
プチドと相互作用するためのそれらの能力によって特定される。化合物とＡｃｔＲＩＩＡ
もしくはアクチビンポリペプチドとの間の相互作用は、共有結合性または非共有結合性で
あってもよい。例えば、このような相互作用は、光架橋、放射標識リガンド結合、及び親
和性クロマトグラフィーを含む、インビトロ生化学的方法を使用してタンパク質レベルで
特定することができる（Ｊａｋｏｂｙ Ｗ Ｂ ｅｔ ａｌ．，１９７４，Ｍｅｔｈｏｄ
ｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ ４６：１）。ある特定の場合には、化合物は、アクチ
ビンもしくはＡｃｔＲＩＩＡポリペプチドに結合する化合物を検出するためのアッセイな
どのメカニズムベースのアッセイでスクリーニングされてもよい。これは、固相または流
体相結合事象を含み得る。あるいは、アクチビンもしくはＡｃｔＲＩＩＡポリペプチドを
コードする遺伝子は、レポーター系（例えば、β－ガラクトシダーゼ、ルシフェラーゼ、
または緑色蛍光タンパク質）で細胞中にトランスフェクトされ、好ましくはハイスループ
ットスクリーニングによりライブラリに対して、またはライブラリ個々のメンバーでスク
リーニングされ得る。例えば、自由エネルギーの変化を検出する結合アッセイなどの他の
メカニズムベースの結合アッセイが使用されてもよい。結合アッセイは、ウェル、ビーズ
またはチップに固定された標的、または固定化抗体によって捕捉されるか、もしくはキャ
ピラリー電気泳動によって分離された標的で実施することができる。結合化合物は、通常
、比色法または蛍光法または表面プラズモン共鳴を使用して検出され得る。

【実施例0156】

６．実施例
６．１ 実施例１：赤血球輸血依存性の有無による骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症及び
貧血を有する対象におけるルスパテルセプトの有効性及び安全性を評価するための第２相
、多施設、非盲検試験
この実施例は、赤血球輸血依存性の有無による骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症及び貧血
を有する対象におけるルスパテルセプト、ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬を評価する
ための第２相、多施設、非盲検試験に関するものである。本試験は、スクリーニング期間
、治療期間（第１相、１６９日目の疾患応答評価及び延長相からなる）、続いて治療後追
跡調査期間に分割される。この第２相試験の目的は、無効な赤血球形成を修正し、それに
より貧血、すなわち、ほぼすべてのＭＰＮ関連ＭＦ患者で発症する病態（ここでは疲労が
症状である）を軽減させることによる、ルスパテルセプトによる有効性シグナルが、貧血
であり、ＲＢＣ輸血依存性であり得るか、またはそうではないＭＰＮ関連ＭＦを有する患
者においてあるかどうかを評価することである。

【0157】

対象は、彼らの適格基準に基づいて、以下のコホート（同時に登録される）のうちの１
つの割り当てられる：（Ｉ）コホート１：現在ＲＢＣ輸血を受けていない、貧血のみを有
する最高で２０人の対象を含む（これらの対象は、本実施例全体を通して「貧血のみ」と
称され、サイクル１、１日目（Ｃ１Ｄ１）の日時の直前まで０ＲＢＣ単位／８４日を受容
したと定義される）、（ＩＩ）コホート２：ＲＢＣ輸血依存性である最高で２０人の対象
を含む（これらの対象は、本実施例全体を通して「ＲＢＣ輸血依存性」と称され、Ｃ１Ｄ
１の日時の直前までの少なくとも８４日間に、２～４ ＲＢＣ単位／２８日の平均ＲＢＣ
輸血頻度を受けたと定義された）、（ＩＩＩ）コホート３Ａ：コホート１（貧血のみ）の
適格基準を満たすが、登録日時の直前少なくとも１１２日間、ルキソリチニブの安定用量
を受けていた≧１０人の対象を含み（コホート３は、合計で３０人の対象を含む）、及び
（ＩＶ）コホート３Ｂ：コホート２（ＲＢＣ輸血依存性）の適格基準を満たすが、登録日
時の直前少なくとも１１２日間、ルキソリチニブの安定用量を受けていた≧１０人の対象
を含む（コホート３は、合計で３０人の対象を含む）。全体として、本試験は、世界中で
およそ７０人の対象が登録するであろう。

【0158】

６．１．１ 主要評価項目
以下は、第２相試験についての主要評価項目である：（ｉ）貧血応答（それがヘモグロ
ビン（Ｈｇｂ）の増加に関連するときの）（ＲＢＣ輸血なしの任意の連続した８４日の期
間にわたって、ベースラインからの≧１．５ｇ／ｄＬのヘモグロビンの増加を達成するコ
ホート１及び３Ａの対象の比率であり；測定の時間枠は、およそ最長で１６８日である）
、（ｉｉ）貧血応答（それが赤血球（ＲＢＣ）輸血依存性の増加に関連するときの）（任
意の連続した８４日の期間にわたって、ＲＢＣ輸血フリーになるコホート２及び３Ｂの対
象の比率であり；測定の時間枠は、およそ最長で１６８日である）、（ｉｉｉ）貧血応答
までの時間（コホートのそれぞれにおける初回ルスパテルセプトの投与から貧血応答の最
初の発症までの時間であり；測定の時間枠は、およそ最長で２年である）、（ｉｖ）貧血
応答の持続時間（コホートのそれぞれにおける貧血応答の最長持続時間であり；測定の時
間枠は、およそ最長で２年である）、（ｖ）ＲＢＣ輸血の頻度（４週当たりの対象ごとの
輸血されたＲＢＣ単位の平均数であり；測定の時間枠は、およそ最長で２年である）、（
ｖｉ）ＲＢＣ輸血依存性の頻度（任意の連続した８４日の期間にわたってベースラインか
ら≧５０％の対象の輸血負荷を低減させるＲＢＣ輸血依存性対象の比率であり；測定の時
間枠は、およそ最長で２年である）、（ｖｉｉ）改訂骨髄増殖性腫瘍症状評価フォーム（
ＭＰＮ－ＳＡＦ）により記録され評価されたとき、貧血を有する骨髄増殖性腫瘍関連骨髄
線維症の患者の間で共通の症状である疲労症状の≧５０％の軽減を達成する対象の比率（
Ｅｍａｎｕａｌ ｅｔ ａｌ．，“Ｍｙｅｌｏｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ Ｎｅｏｐｌ
ａｓｍ（ＭＰＮ）Ｓｙｍｐｔｏｍ Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ Ｆｏｒｍ Ｔｏｔａｌ Ｓｙ
ｍｐｔｏｍ Ｓｃｏｒｅ：Ｐｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ａｓ
ｓｅｓｓｍｅｎｔ ｏｆ ａｎ Ａｂｂｒｅｖｉａｔｅｄ Ｓｙｍｐｔｏｍ Ｂｕｒｄｅ
ｎ Ｓｃｏｒｉｎｇ Ｓｙｓｔｅｍ Ａｍｏｎｇ Ｐａｔｉｅｎｔｓ Ｗｉｔｈ ＭＰＮ
ｓ，”Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．３０（３３）：４０９８－４１０３（２０１２）を参
照されたい；測定の時間枠は、およそ最長で２年である）、（ｖｉｉｉ）総症状スコア（
ＴＳＳ）の≧５０％を達成する対象の比率。改訂骨髄増殖性腫瘍症状評価フォーム（ＭＰ
Ｎ－ＳＡＦ）により記録され評価されたとき、骨髄増殖性腫瘍（ＭＰＮ）関連骨髄線維症
関連症状（疲労、寝汗、かゆみ、腹部不快感、左側肋骨下の痛み、早期満腹、及び骨痛）
（Ｅｍａｎｕａｌ ｅｔ ａｌ．，“Ｍｙｅｌｏｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅ Ｎｅｏｐ
ｌａｓｍ （ＭＰＮ） Ｓｙｍｐｔｏｍ Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ Ｆｏｒｍ Ｔｏｔａｌ
Ｓｙｍｐｔｏｍ Ｓｃｏｒｅ：Ｐｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ
Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ ｏｆ ａｎ Ａｂｂｒｅｖｉａｔｅｄ Ｓｙｍｐｔｏｍ Ｂｕ
ｒｄｅｎ Ｓｃｏｒｉｎｇ Ｓｙｓｔｅｍ Ａｍｏｎｇ Ｐａｔｉｅｎｔｓ Ｗｉｔｈ
ＭＰＮｓ，”Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．３０（３３）：４０９８－４１０３（２０１２
）を参照されたい）、（ｉｘ）健康関連生活の質（ＨＲＱｏＬ）：試験にわたるＨＲＱｏ
Ｌアンケートドメインの平均変化の測定値が、ベースラインスコアと比較される（測定の
時間枠は、およそ最長で２年である）、（ｘ）ＥＱ－５Ｄ－５Ｌアンケート（ＥｕｒｏＱ
ｏｌ，Ｒｏｔｔｅｒｄａｍ，Ｔｈｅ Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）：試験にわたるＥＱ－５
Ｄ－５Ｌアンケートドメインスコアにおける尺度平均変化が、ベースラインスコアと比較
される（測定の時間枠は、およそ最長で２年である）、（ｘｉ）有害事象（ＡＥ）（種類
、頻度、及び重症度を含むものが評価される；測定の時間枠は、およそ最長で２年である
）、（ｘｉｉ）抗薬物抗体（ＡＤＡ）（抗薬物抗体の頻度及び有効性、安全性または薬物
動態に及ぼす効果；測定の時間枠は、およそ最長で２年である）、（ｘｉｉｉ）薬物動態
（薬物濃度曲線下面積（ＡＵＣ）及びＣｍａｘ；測定の時間枠は、およそ最長で２年であ
る）、及び（ｘｉｖ）がん療法－貧血の機能的評価（ＦＡＣＴ－Ａｎ）：試験にわたるＦ
ＡＣＴ－Ａｎアンケートドメインスコアの平均変化の測定値が、ベースラインスコアと比
較される（測定の時間枠は、およそ最長で２年である）。

【0159】

６．１．２ 選択基準
対象は、本試験で登録されるために、本セクションの基準を満たさねばならず（登録日
時は、対象が自動応答技術［ＩＲＴ］においてコホートに割り当てられる日時として定義
される）、そのルスパテルセプトの初回投与を受ける。

【0160】

対象は、同意説明文書（ＩＣＦ）に署名した時点で≧１８歳でなければならない。

【0161】

対象は、ローカル病理報告で確認されるとき、ＭＰＮ関連骨髄線維症（ＰＭＦ、ＰＶ後
ＭＦ、及び／またはＥＴ後ＭＦ）を有する。

【0162】

対象は以下のように定義される貧血を有する：（Ｉ）コホート１及び３Ａ：（ａ）対象
は、Ｃ１Ｄ１の日時までの直前８４日の期間中に、投与日を含む別々の≧３日に記録され
た≦９．５ｇ／ｄＬの≧３のＨｇｂレベルを有し；ヘモグロビン測定値が登録される間の
間隔が≧４２日の対象はいないこと、及び（ｂ）Ｃ１Ｄ１の日時までの直前の８４日の期
間内にいかなるＲＢＣ輸血もないこと；ならびに（ＩＩ）コホート２及び３Ｂ；（ａ）対
象がＣ１Ｄ１の日時までの直前少なくとも８４日にわたって２～４ＲＢＣ単位／２８日の
平均ＲＢＣ輸血頻度を有し、≧１ＲＢＣ輸血なしの＞４２日の間隔がないこと、（ｂ）対
象がルスパテルセプトの投与前にＣ１Ｄ１に＜１３ｇ／ｄＬのＨｇｂ値を有さねばならな
いこと；（ｃ）適格性の判定において、≦９．５ｇ／ｄＬのＨｇｂが採点された場合にだ
けＲＢＣ輸血が供与されること、及び（ｄ）出血、感染、または化学療法誘発貧血のため
に供与されたＲＢＣ輸血は、適格性の判定において採点されないこと。

【0163】

対象は、≦２の米国東部腫瘍学共同研究グループ（ＥＣＯＧ）パフォーマンススコアを
有する。例えば、ＥＣＯＧパフォーマンススコアに関しては、その全体が参照により本明
細書に組み込まれる、Ｏｋｅｎ ｅｔ ａｌ．（１９８２）． “Ｔｏｘｉｃｉｔｙ ａ
ｎｄ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｃｒｉｔｅｒｉａ ｏｆ ｔｈｅ Ｅａｓｔｅｒｎ Ｃｏｏｐ
ｅｒａｔｉｖｅ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ Ｇｒｏｕｐ”．Ａｍ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．
５（６）：６４９－５５を参照されたい。ＥＣＯＧパフォーマンススコア０を有する対象
は、無症候性（すなわち、完全に活動的であり、すべての疾患前活動を制限なく行うこと
ができる）である。ＥＣＯＧパフォーマンススコア１を有する対象は、症候性ではあるが
、完全に歩行可能である（すなわち、肉体的に激しい活動は制限されるが、歩行可能で、
軽作業や座っての作業は行うことができる（例えば、軽い家事、事務作業）。ＥＣＯＧパ
フォーマンススコア２を有する対象は、症候性であり、日中は＜５０％はベッドで過ごす
（すなわち、歩行可能で、自分の身の回りのことは全て可能だが、作業はできない；起床
時間の５０％超はベッドで過ごす）。ＥＣＯＧパフォーマンススコア３を有する対象は、
症候性であり、＞５０％をベッドで過ごすが、寝たきりではない（すなわち、限られた自
分の身の回りのことしかできず、起床時間の５０％以上をベッドまたは椅子で過ごす）。
ＥＣＯＧパフォーマンススコア４を有する対象は、寝たきりである（すなわち、全く動け
ない；自分の身の回りのことは全くできない；完全にベッドか椅子で過ごす）。ＥＣＯＧ
パフォーマンススコア５を有する対象は、死亡している。

【0164】

対象は、Ｃ１Ｄ１の日時から６ヶ月間は、造血細胞移植を受けないと予想される。

【0165】

本試験に関して、妊娠可能な女性（ＦＣＢＰ）は、（１）ある時点で初潮を向かえた女
性、及び（２）少なくとも連続した２４ヶ月間に子宮摘出術または両側療法を受けていな
い（妊娠の可能性を排除しない）女性（すなわち、連続した２４ヶ月前の任意の時点で生
理があった女性）として定義される。本試験に参加するＦＣＢＰは、（ａ）試験療法を開
始する前に治験担当医よって確認された妊娠検査が２回とも陰性でなければならず、試験
過程及び試験処置終了時で妊娠検査を受けることを了承しなければならず、これは、対象
が異性との接触を確実に自制するとしても適用されること、及び（ｂ）試験療法中（投与
中断を含める）、治験薬を開始する前２８日間、及び試験療法の中断後、１２週間（複数
回投与の薬物動態［ＰＫ］データに基づく、ルスパテルセプトの平均終了半減期のおよそ
５倍）異性との接触を確実に自制することを約束する（これは、毎月再調査するか、また
は文書確認をせねばならない）か、または中断することなく有効な避妊具を使用すること
に同意し、かつそれを遵守するかのいずれかでなければならない。

【0166】

男性対象は、（ａ）彼が精管切除に成功していたとしても、投与中断中、及び治験薬中
断後の少なくとも１２週間（複数回投与のＰＫデータに基づく、ルスパテルセプトの平均
終了半減期のおよそ５倍）、確実な禁欲を実行せねばならない（毎月再調査されねばなら
ない）か、または、試験に参加している間の妊婦または妊娠の可能性のある女性との性的
接触中のコンドームの使用を了承せねばならない。

【0167】

対象は、どのような試験関連評価／手技も行われる前に、同意説明文書を理解して自主
的に署名しなければならない。

【0168】

対象は、試験の来訪スケジュール及び他のプロトコル要件を着実に実行することに同意
しており、実行可能である。

【0169】

６．１．３ 治療方法
ルスパテルセプトの用量は１．７５ｍｇ／ｋｇである。

【0170】

ルスパテルセプトは、２１日毎に１回、最長で２年、対象に皮下投与される。

【0171】

６．２ 実施例２．
６．２．１ 背景
骨髄増殖性腫瘍（ＭＰＮ）関連骨髄線維症（ＭＦ）は、骨髄の線維症、骨髄機能の欠陥
、髄外造血、急性転化期へ移行の可能性、及び炎症で特徴付けられるクローン性骨髄系腫
瘍である（Ｍｅｓａ ＲＡ，ｅｔ ａｌ．Ｌｅｕｋ Ｒｅｓ．２０１１；３５（１）：１
２－１３）。貧血及び赤血球（ＲＢＣ）輸血依存性（ＴＤ）は、これらの患者間の生存に
ついての独立した予後不良及び予測変数である（Ｐａｓｓａｍｏｎｔｉ Ｆ， ｅｔ ａ
ｌ．Ｂｌｏｏｄ． ２０１０；１１５（９）：１７０３－１７０８；Ｅｌｅｎａ Ｃ，
ｅｔ ａｌ．Ｈａｅｍａｔｏｌｏｇｉｃａ． ２０１１；９６（１）：１６７－１７０）
。

【0172】

ルスパテルセプトは、ヒト免疫グロブリンＧ１（ＩｇＧ１）のＦｃドメインに連結した
修飾アクチビン受容体ＩＩＢ型からなる組換え融合タンパク質である（図１）（Ａｔｔｉ
ｅ ＫＭ， ｅｔ ａｌ．Ａｍ Ｊ Ｈｅｍａｔｏｌ．２０１４；８９（７）：７６６－
７７０、；Ｓｕｒａｇａｎｉ ＲＮ， ｅｔ ａｌ．Ｎａｔ Ｍｅｄ．２０１４；２０（
４）：４０８－４１４）。ルスパテルセプトは、増殖分化因子ー１１（ＧＤＦ１１）など
の特定の形質転換増殖因子－β（ＴＧＦ－β）スーパーファミリーリガンドに結合し、Ｒ
ＢＣ生成の増加をもたらすことによって、赤血球成熟剤として作用する（Ｓｕｒａｇａｎ
ｉ ＲＮ， ｅｔ ａｌ．Ｎａｔ Ｍｅｄ．２０１４；２０（４）：４０８－４１４）。
最近の第２相試験では、ルスパテルセプトは、リスクの低い骨髄異形成症候群を有する患
者の貧血の治療に有効であり、かつ良好な耐容性であることを示した（Ｐｌａｔｚｂｅｃ
ｋｅｒ Ｕ， ｅｔ ａｌ．Ｌａｎｃｅｔ Ｏｎｃｏｌ． ２０１７；１８（１０）：１
３３８－１３４７）。

【0173】

この臨床試験の目的は、ＲＢＣ－ＴＤの有無による、ＭＰＮ関連ＭＦの患者の貧血を治
療するためのルスパテルセプトの有効性及び安全性を評価することである。

【0174】

６．２．２ 試験の詳細
この実施例は、進行中の多施設、非盲検、第２相試験に関するものである。

【0175】

６．２．３ 試験集団
この試験に関する選択基準は、以下の通りである：（ｉ）年齢≧１８歳であること、（
ｉｉ）ＭＰＮ関連ＭＦ（原発性ＭＦ、真性多血症後ＭＦ、または本態性血小板血症後ＭＦ
）であること、（ｉｉｉ）（ａ）コホート１及び３ａ：サイクル１の１日目（Ｃ１Ｄ１）
前の８４日間にＲＢＣ輸血がなく、≧３日目（投与日を含む）に≦９．５ｇ／ｄＬの≧３
のヘモグロビン（Ｈｂ）レベル；測定の間の≧４２日が除外されること、（ｂ）コホート
２及び３ｂ；≧１回のＲＢＣ輸血がなく、＞４２日の間隔がなく、Ｃ１Ｄ１前の≧８４日
間にわたって２～４のＲＢＣ単位／２８日の平均ＲＢＣ輸血頻度；ルスパテルセプトの投
与前Ｃ１Ｄ１に＜１３ｇ／ｄＬのＨｂであること、及び（ｉｖ）≦２の米国東部腫瘍学共
同研究グループパフォーマンスの状態であること。

【0176】

６．２．４ 試験設計及び治療
試験は、３つの期間を含む（図２）：（ｉ）スクリーニング期間、（ｉｉ）治療期間（
第１相、１６９日目の疾患応答評価、及び延長相）、及び（ｉｉｉ）治療後追跡調査期間
。

【0177】

（ａ） スクリーニング期間
すべてのスクリーニング手順は、登録前、≦２８日に行う。

【0178】

（ｂ） 治療期間
すべての患者は、ルスパテルセプト１ｍｇ／ｋｇを、各２１日サイクルの１日目に皮下
投与される。患者は、ＲＢＣ輸血の必要性に従ってコホートに登録される：（ｉ）コホー
ト１及び３ａ（貧血のみ）及び（ｉｉ）コホート２及び３ｂ（ＲＢＣ－ＴＤ）。ベストサ
ポーティブケアを、治験薬と組み合わせて用いてことができる。疾患応答評価は、治験薬
の初回投与後１６９日目に完了せねばならない。応答者は、さらに１．５年まで治療を継
続することができる。非応答者は、治療を中断する。

【0179】

（ｃ） 治療後追跡調査期
治療の中断後に、追跡安全性データを、治験薬の最後の投与後、最長で４２日まで収集
する。次いで、安全性データを、治験薬の最後の投与後、３ヶ月毎に最長で３年まで、ま
たは死亡まで、同意が撤回されるまで、もしくは追跡不能になるまで収集する。

【0180】

６．２．５ 評価項目
主要評価項目及び副次的評価項目は、表１（下記）に列挙されている。探索的評価項目
は、治療曝露応答、バイオマーカー、及び変異解析を含む。すべての有効性解析は、主と
して、登録されたすべての患者として定義された、治験意図による集団で実施される。確
認的有効性解析は、（ｉ）治験薬の≧３サイクルを受容し、３回目の治験薬投与後≧２１
日間、試験に留まったすべての患者、または（ｉｉ）＜３サイクルでＨｂ＞１３ｇ／ｄＬ
を達成した全ての患者として定義された有効性評価可能な集団で実施する。安全性解析は
、≧１回の治験薬を受容するすべての患者で実施する。有害事象及び検査所見の異常は、
ＮＣＩ－ＣＴＣＡＥバージョン４．０３に従って分類される。薬物動態解析は、薬物動態
パラメータを決定するための評価可能な濃度データを有するすべての患者に基づく。

【0181】

６．２．６ 統計解析
記述統計解析を主として使用する。カプラン・マイヤー法を、貧血応答の持続時間の推
測に使用することができる。コホート間の推測比較は実施しない。

【0182】

６．２．７ 試験状況
登録は、２０１７年１１月に開始した。目標の登録者は、ＲＢＣ－ＴＤの有無による、
ＭＰＮ関連ＭＦ及び貧血を有する７０人の患者である。２０１８年４月９日の時点で、２
４の臨床現場において、１２人の患者がこの試験に登録している。

【0183】

表１．試験評価項目

【表1】

【0184】

７． 配列情報
表２．

【表2】

【図1】

【図2】

【配列表】

2024075579000001.app

【手続補正書】

【提出日】2024-03-25

【手続補正1】

【補正対象書類名】特許請求の範囲

【補正対象項目名】全文

【補正方法】変更

【補正の内容】

【請求項1】

骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症の治療を必要とする対象においてそれを治療するための方法であって、薬学的有効量のＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬を前記対象に投与することを含む、前記方法。

【手続補正書】

【提出日】2024-03-25

【手続補正1】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】０１８４

【補正方法】変更

【補正の内容】

【0184】

７． 配列情報
表２．

【表2】

本件出願は、以下の態様の発明を提供する。
（態様１）
骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症の治療を必要とする対象においてそれを治療するための
方法であって、薬学的有効量のＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬を前記対象に投与する
ことを含む、前記方法。
（態様２）
前記対象が、貧血を有する、態様１に記載の方法。
（態様３）
骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症の治療を必要とする対象においてそれを治療するための
方法であって、前記方法が、薬学的有効量のＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬を前記対
象に投与することを含み、前記治療することが、前記対象の前記骨髄増殖性腫瘍関連骨髄
線維症の１つ以上の症状を軽減または緩和する、前記方法。
（態様４）
前記症状が、疲労、寝汗、かゆみ、腹部不快感、左側肋骨下の痛み、早期満腹、または
骨痛のうちの１つ以上である、態様３に記載の方法。
（態様５）
貧血の治療を必要とする対象においてそれを治療するための方法であって、前記方法が
、薬学的有効量のＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬を前記対象に投与することを含み、
前記対象が、骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症を有する、前記方法。
（態様６）
前記骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症が、原発性骨髄線維症である、態様１～５のいずれ
か一項に記載の方法。
（態様７）
前記骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症が、真性多血症後の骨髄線維症である、態様１～５
のいずれか一項に記載の方法。
（態様８）
前記骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症が、本態性血小板血症後の骨髄線維症である、態様
１～５のいずれか一項に記載の方法。
（態様９）
前記対象が赤血球輸血非依存性である、態様１～５のいずれか一項に記載の方法。
（態様１０）
前記対象が、前記ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬を前記対象に投与する前の８４日
の期間中に、０単位の赤血球を受容している場合、前記対象は赤血球輸血非依存性である
、態様９に記載の方法。
（態様１１）
前記対象が、赤血球輸血依存性である、態様１～８のいずれか一項に記載の方法。
（態様１２）
前記対象が、前記ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬を前記対象に投与する前の少なく
とも８４日の期間中に、２８日毎に２～４単位の赤血球の平均赤血球輸血頻度を受容して
いる場合、前記対象は赤血球輸血依存性である、態様１１に記載の方法。
（態様１３）
前記薬学的有効量が、０．３３ｍｇ／ｋｇ、０．４５ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、
０．８ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、１．３３ｍｇ／ｋｇ、１．７５ｍｇ／ｋｇ、または２
．０ｍｇ／ｋｇである、態様１～１２のいずれか一項に記載の方法。
（態様１４）
前記薬学的有効量が、１．０ｍｇ／ｋｇである、態様１～１２のいずれか一項に記載の
方法。
（態様１５）
前記ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬が、前記対象に２１日毎に１回、２８日毎に１
回、または４８日毎に１回投与される、態様１～１４のいずれか一項に記載の方法。
（態様１６）
前記ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬が、前記対象に静脈内または皮下投与される、
態様１～１５のいずれか一項に記載の方法。
（態様１７）
前記ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬が、前記対象に２１日毎に１回皮下投与される
、態様１４に記載の方法。
（態様１８）
前記ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬が、ＡｃｔＲＩＩＢの細胞外ドメイン及びヒト
ＩｇＧ１ Ｆｃドメインからなるヒト化融合タンパク質である、態様１～１７のいずれか
一項に記載の方法。
（態様１９）
前記ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬が、ＡｃｔＲＩＩＢの細胞外ドメイン及びヒト
ＩｇＧ１ Ｆｃドメインを含む融合タンパク質である、態様１～１７のいずれか一項に記
載の方法。
（態様２０）
前記ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬が、
（ａ）配列番号４と９０％同一、
（ｂ）配列番号４と９５％同一、
（ｃ）配列番号４と９８％同一、
（ｄ）配列番号４、
（ｅ）配列番号７と９０％同一、
（ｆ）配列番号７と９５％同一、
（ｇ）配列番号７と９８％同一、
（ｈ）配列番号７、
（ｉ）配列番号８と９０％同一、
（ｊ）配列番号８と９５％同一、
（ｋ）配列番号８と９８％同一、
（ｌ）配列番号８、
（ｍ）配列番号１１と９０％同一、
（ｎ）配列番号１１と９５％同一、
（ｏ）配列番号１１と９８％同一、及び
（ｐ）配列番号１１、からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むポリペプチドであ
る、態様１～１７のいずれか一項に記載の方法。
（態様２１）
前記ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬が、
（ａ）配列番号１１と９０％同一、
（ｂ）配列番号１１と９５％同一、
（ｃ）配列番号１１と９８％同一、及び
（ｄ）配列番号１１、からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むポリペプチドであ
る、態様１～１７のいずれか一項に記載の方法。
（態様２２）
前記ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬が、配列番号１１のアミノ酸配列を含むポリペ
プチドである、態様１～１７のいずれか一項に記載の方法。
（態様２３）
前記ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬が、配列番号１１からなるアミノ酸配列を含む
ポリペプチドである、態様１～１７のいずれか一項に記載の方法。
（態様２４）
前記ＡｃｔＲＩＩＢシグナル伝達阻害薬が、配列番号１１に記載されるアミノ酸配列か
らなるポリペプチドである、態様１～１７のいずれか一項に記載の方法。
（態様２５）
前記対象が、ヒトである、態様１～２４のいずれか一項に記載の方法。
（態様２６）
骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症の治療を必要とする対象においてそれを治療するための
方法であって、前記方法が、０．３３ｍｇ／ｋｇ、０．４５ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋ
ｇ、０．８ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、１．３３ｍｇ／ｋｇ、１．７５ｍｇ／ｋｇ、また
は２．０ｍｇ／ｋｇの用量の、配列番号１１のアミノ酸配列を含むポリペプチドを前記対
象に投与することを含み、前記ポリペプチドが、前記対象に、２１日毎に１回皮下投与さ
れる、前記方法。
（態様２７）
骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症の治療を必要とする対象においてそれを治療するための
方法であって、前記方法が、０．３３ｍｇ／ｋｇ、０．４５ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋ
ｇ、０．８ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、１．３３ｍｇ／ｋｇ、１．７５ｍｇ／ｋｇ、また
は２．０ｍｇ／ｋｇの用量の、配列番号１１のアミノ酸配列からなるアミノ酸を含むポリ
ペプチドを前記対象に投与することを含み、前記ポリペプチドが、前記対象に、２１日毎
に１回皮下投与される、前記方法。
（態様２８）
骨髄増殖性腫瘍関連骨髄線維症の治療を必要とする対象においてそれを治療するための
方法であって、前記方法が、０．３３ｍｇ／ｋｇ、０．４５ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋ
ｇ、０．８ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ、１．３３ｍｇ／ｋｇ、１．７５ｍｇ／ｋｇ、また
は２．０ｍｇ／ｋｇの用量の、配列番号１１のアミノ酸配列からなるポリペプチドを前記
対象に投与することを含み、前記ポリペプチドが、前記対象に、２１日毎に１回皮下投与
される、前記方法。
（態様２９）
前記用量が、１．０ｍｇ／ｋｇである、態様２６～２８のいずれか一項に記載の方法。

【手続補正書】

【提出日】2024-05-21

【手続補正1】

【補正対象書類名】特許請求の範囲

【補正対象項目名】全文

【補正方法】変更

【補正の内容】

【請求項1】

本願明細書に実質的に記載された、新規な物、方法及び製造方法。

【外国語明細書】