特開 2024-81450 生体物質のレプリカおよび生体物質のレプリカの製造方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公開特許公報(A)

(11)【公開番号】P2024081450

(43)【公開日】2024-06-18

(54)【発明の名称】生体物質のレプリカおよび生体物質のレプリカの製造方法

(51)【国際特許分類】

   C12M 1/00 20060101AFI20240611BHJP

【ＦＩ】

C12M1/00 Z

【審査請求】未請求

【請求項の数】17

【出願形態】ＯＬ

(21)【出願番号】P 2022195092

(22)【出願日】2022-12-06

(71)【出願人】

【識別番号】000002369

【氏名又は名称】セイコーエプソン株式会社

(74)【代理人】

【識別番号】100091292

【弁理士】

【氏名又は名称】増田 達哉

(74)【代理人】

【識別番号】100173428

【弁理士】

【氏名又は名称】藤谷 泰之

(74)【代理人】

【識別番号】100091627

【弁理士】

【氏名又は名称】朝比 一夫

(72)【発明者】

【氏名】小島 力

(72)【発明者】

【氏名】望月 理光

(72)【発明者】

【氏名】寺尾 真二

(72)【発明者】

【氏名】久保 景太

(72)【発明者】

【氏名】佐野 和貴

(72)【発明者】

【氏名】村井 清昭

(72)【発明者】

【氏名】小林 正彦

【テーマコード（参考）】

4B029

【Ｆターム（参考）】

4B029AA09

4B029AA21

4B029BB02

4B029BB06

4B029HA10

(57)【要約】

【課題】安全性を確保しながら、鋳型を持つポリマー層の安定した作製を可能にする生体物質のレプリカ、およびその製造方法を提供すること。
【解決手段】生体物質の立体構造に相似な三次元構造を有し、表面が無機材料で構成されていることを特徴とする生体物質のレプリカ。また、前記無機材料は、酸化物または窒化物であることが好ましい。さらに、本体部と、前記本体部の表面を被覆し、前記無機材料で構成されている被覆膜と、を備えることが好ましい。
【選択図】図１

【特許請求の範囲】

【請求項1】

生体物質の立体構造に相似な三次元構造を有し、表面が無機材料で構成されていることを特徴とする生体物質のレプリカ。

【請求項2】

前記無機材料は、酸化物または窒化物である請求項１に記載の生体物質のレプリカ。

【請求項3】

本体部と、
前記本体部の表面を被覆し、前記無機材料で構成されている被覆膜と、
を備える請求項１に記載の生体物質のレプリカ。

【請求項4】

前記本体部の構成材料は、前記被覆膜の構成材料と同じである請求項３に記載の生体物質のレプリカ。

【請求項5】

前記本体部の構成材料は、前記被覆膜の構成材料と異なる請求項３に記載の生体物質のレプリカ。

【請求項6】

前記本体部の構成材料は、金属または金属系化合物を含む請求項４または５に記載の生体物質のレプリカ。

【請求項7】

前記本体部の構成材料は、樹脂を含む請求項５に記載の生体物質のレプリカ。

【請求項8】

前記本体部は、粒子の集合体を含む請求項３ないし５のいずれか１項に記載の生体物質のレプリカ。

【請求項9】

前記粒子は、磁性材料で構成されている請求項８に記載の生体物質のレプリカ。

【請求項10】

前記相似な三次元構造を有する部位を複数備え、
前記部位同士が接続されてなる複合体である請求項１または２に記載の生体物質のレプリカ。

【請求項11】

生体物質の立体構造に相補的な三次元構造を有する鋳型を持つ鋳型膜を用意する準備工程と、
前記鋳型の内面に無機材料で構成される被覆膜を形成する被覆膜形成工程と、
前記被覆膜が形成された前記鋳型に充填用材料を供給して固化させることにより、前記生体物質の立体構造に相似な三次元構造を有するレプリカを形成する充填工程と、
前記鋳型膜から前記レプリカを回収する回収工程と、
を有することを特徴とする生体物質のレプリカの製造方法。

【請求項12】

前記相似な三次元構造を有する部位を複数備え、前記部位同士が接続されてなる複合体を形成する複合体形成工程をさらに有する請求項１１に記載の生体物質のレプリカの製造方法。

【請求項13】

前記複合体形成工程は、前記複合体に支持基板に貼り付ける操作を含み、
前記回収工程は、前記支持基板で支持された前記複合体を前記鋳型膜から回収する操作を含む請求項１２に記載の生体物質のレプリカの製造方法。

【請求項14】

前記被覆膜形成工程は、常温ＡＬＤ法により前記被覆膜を形成する操作を含む請求項１１ないし１３のいずれか１項に記載の生体物質のレプリカの製造方法。

【請求項15】

前記回収工程は、前記鋳型膜を加熱して膨張させる操作を含む請求項１１ないし１３のいずれか１項に記載の生体物質のレプリカの製造方法。

【請求項16】

前記充填用材料は、磁性材料であり、
前記回収工程は、前記生体物質の前記レプリカに磁場を印加する操作を含む請求項１１ないし１３のいずれか１項に記載の生体物質のレプリカの製造方法。

【請求項17】

前記回収工程は、プラズマ処理により前記鋳型膜を除去する操作を含む請求項１１ないし１３のいずれか１項に記載の生体物質のレプリカの製造方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、生体物質のレプリカおよび生体物質のレプリカの製造方法に関するものである。

【背景技術】

【0002】

食品衛生、医学的診断、環境モニタリング等の分野で、細菌等の生体物質を迅速かつ簡便に検出するセンサーの実現が期待されている。

【0003】

例えば、特許文献１には、検出用電極と、検出対象の微生物の立体構造に相補的な三次元構造の鋳型を持つポリマー層と、を有する検出部、および、検出部の質量変化等を検出する水晶片を備えたセンサーが開示されている。ポリマー層が持つ鋳型は、微生物の立体構造に相補的な三次元構造を有しているため、その三次元構造を持つ微生物を選択的に捕捉する一方、その三次元構造を持たない微生物は捕捉しない。このため、鋳型での捕捉状態に基づいて、標的微生物を高感度に検出することができる。

【0004】

また、特許文献１では、実際の微生物を用いてポリマー層を形成している。具体的には、微生物が取り込まれるようにポリマー層を形成する工程と、取り込まれた微生物を破壊する工程と、を有するポリマー層の形成方法が開示されている。これにより、ポリマー層には、実際の微生物の立体構造に相補的な三次元構造を持つ鋳型が形成される。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0005】

【特許文献1】国際公開第２０１４／１５６５８４号明細書

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0006】

特許文献１に記載のセンサーでは、鋳型を持つポリマー層の形成において、実際の微生物を用いる必要がある。ところが、微生物には、人体に有害なものもあり、取り扱いには細心の注意が必要となる。また、入手しにくい微生物の場合、多数の鋳型を安定して作製することが困難である。このため、安全性を確保しながら、鋳型を持つポリマー層を安定して作製する方法の実現が課題となっている。

【課題を解決するための手段】

【0007】

本発明の適用例に係る生体物質のレプリカは、
生体物質の立体構造に相似な三次元構造を有し、表面が無機材料で構成されている。

【0008】

本発明の適用例に係る生体物質のレプリカの製造方法は、
生体物質の立体構造に相補的な三次元構造を有する鋳型を持つ鋳型膜を用意する準備工程と、
前記鋳型の内面に無機材料で構成される被覆膜を形成する被覆膜形成工程と、
前記被覆膜が形成された前記鋳型に充填用材料を供給して固化させることにより、前記生体物質の立体構造に相似な三次元構造を有するレプリカを形成する充填工程と、
前記鋳型膜から前記レプリカを回収する回収工程と、
を有する。

【図面の簡単な説明】

【0009】

【図1】生体物質の一例である細菌を示す概略図、および、実施形態に係る生体物質のレプリカの断面図である。

【図2】図１のＡ１部およびＡ２部の拡大図である。

【図3】図２の本体部の変形例を示す部分拡大図である。

【図4】図１のレプリカの製造方法を示すフローチャートである。

【図5】図４に示す製造方法を説明するための断面図であって、細菌を示す概略図、および、鋳型を持つ鋳型膜の断面図である。

【図6】図４に示す製造方法を説明するための断面図であって、図５のＡ１部およびＡ３部の拡大図である。

【図7】図４に示す製造方法を説明するための断面図であって、細菌の一部が取り込まれた状態の鋳型膜を示す図である。

【図8】図４に示す製造方法を説明するための断面図であって、図７のＡ４部の拡大図である。

【図9】図４に示す製造方法を説明するための断面図であって、鋳型を持つ鋳型膜の断面図である。

【図10】図４に示す製造方法を説明するための断面図であって、鋳型の内面に被覆膜を形成した状態を示す断面図である。

【図11】図４に示す製造方法を説明するための断面図であって、図１０のＡ５部の拡大図である。

【図12】図４に示す製造方法を説明するための断面図であって、被覆膜の内側に本体部を形成した状態を示す断面図である。

【図13】図４に示す製造方法を説明するための断面図であって、鋳型膜を加熱して膨張させた様子を示す図である。

【図14】図４に示す製造方法を説明するための断面図であって、磁気的吸引力によりレプリカを吸引する様子を示す図である。

【発明を実施するための形態】

【0010】

以下、本発明の生体物質のレプリカおよび生体物質のレプリカの製造方法を添付図面に示す実施形態に基づいて詳細に説明する。

【0011】

１．生体物質のレプリカ
まず、実施形態に係る生体物質のレプリカについて説明する。

【0012】

図１は、生体物質の一例である細菌ＢＡを示す概略図、および、実施形態に係る生体物質のレプリカ１の断面図である。図２は、図１のＡ１部およびＡ２部の拡大図である。なお、以下の説明では、生体物質のレプリカ１を単に「レプリカ１」という。

【0013】

図１に示す細菌ＢＡは、生体物質の一例であり、表面には、図２に示すような固有の立体構造Ｓ１を有する。この立体構造Ｓ１は、例えば細菌ＢＡが持つ固有の分子構造に由来するものであり、生体物質の種類ごとに異なる。一方、図１に示すレプリカ１は、細菌ＢＡの立体構造Ｓ１に相似な相似的構造Ｓ２を有する。

【0014】

このようなレプリカ１は、例えばバイオセンサー等に用いられるポリマー層の作製に用いられる。ポリマー層は、細菌ＢＡの立体構造Ｓ１と相補的な三次元構造を有する鋳型を持つ高分子層であって、細菌ＢＡを選択的に捕捉する性質を有する。このため、ポリマー層を用いて細菌ＢＡを高感度に検出するバイオセンサー等を実現することができる。

【0015】

また、レプリカ１は、ポリマー層の作製に用いられた後も、１回または複数回の再使用が可能である。したがって、レプリカ１を用いることにより、実際の細菌ＢＡを用いてポリマー層を作製する場合に比べて、ポリマー層の効率的な作製が可能になる。

【0016】

図１および図２に示す矢印Ｓｉｍは、細菌ＢＡの立体構造Ｓ１とレプリカ１の相似的構造Ｓ２とが、互いに相似的であることを表す。本明細書において相似的とは、細菌ＢＡの立体構造Ｓ１の少なくとも一部と、レプリカ１の相似的構造Ｓ２とが、互いに同一の形状であるか、または、いずれか一方を拡大もしくは縮小することで互いに同一の形状になる関係のことをいう。なお、同一の形状は、製造誤差による形状のずれを許容する。また、いずれか一方を拡大または縮小する場合も、その拡大率や縮小率は、元の大きさに対して例えば５％以下程度と小さい。したがって、レプリカ１は、細菌ＢＡをほぼ原寸大で模造した模型であるといえる。

【0017】

なお、レプリカ１が模造する部位は、細菌ＢＡの全部であってもよいし、任意の一部であってもよい。図１に示すレプリカ１は、棒状をなす細菌ＢＡの長手方向の一部が模造されたものである。また、生体物質は、細菌に限定されず、例えばウイルス、真菌、原虫のような細菌以外の微生物、細胞、エクソソーム等であってもよい。

【0018】

細菌の具体例としては、大腸菌、緑膿菌、黄色ブドウ球菌、枯草菌等が挙げられる。ウイルスとしては、例えば、Ａ型肝炎ウイルス、アデノウイルス、ロタウイルス、ノロウイルス等が挙げられる。真菌としては、例えば、カンジダが挙げられる。原虫としては、例えば、クリプトスポリジウムが挙げられる。

【0019】

図２に示すレプリカ１は、本体部４と、その表面を被覆する被覆膜５と、を備えるコアシェル構造になっている。したがって、相似的構造Ｓ２は、被覆膜５の一部が三次元形状に成形されている部位である。このような被覆膜５は、無機材料で構成されている。無機材料は、有機材料に比べて、機械的強度、剛性、耐摩耗性のような機械的特性、耐食性、耐熱性のような化学的特性に優れている。このため、被覆膜５が無機材料で構成されていることにより、相似的構造Ｓ２が安定して維持されるレプリカ１が得られる。

【0020】

レプリカ１がとり得る最も長い軸を長軸とするとき、長軸の長さＬ１は、生体物質の種類に応じて異なるが、例えば細菌の場合、０．３μｍ以上１０μｍ以下とされる。また、長軸に直交する軸を短軸とするとき、短軸の長さＷ１は、例えば細菌の場合、０．１μｍ以上５μｍ以下とされる。

【0021】

１．１．本体部
本体部４は、相似的構造Ｓ２を有する被覆膜５を支持する。本体部４の構成材料は、被覆膜５の構成材料と同じであってもよいし、異なっていてもよい。

【0022】

前者の場合、本体部４と被覆膜５の密着性を高めることができる。これにより、機械的強度が高いレプリカ１が得られる。なお、この場合、本体部４と被覆膜５とが一体になっていて、境界の区別がつかなくなっていてもよい。その場合も、少なくとも表面が無機材料で構成されていればよい。

【0023】

後者の場合、本体部４および被覆膜５に対し、材料に応じた互いに異なる特性を与えることができる。これにより、例えば、立体構造Ｓ１に対して高い再現性を有する相似的構造Ｓ２を有し、かつ、製造容易性が高いレプリカ１が得られる。

【0024】

本体部４の構成材料としては、例えば、樹脂のような有機材料、金属、金属系化合物、非金属、非金属系化合物のような無機材料が挙げられる。また、有機材料と無機材料とを組み合わせた複合材料であってもよい。

【0025】

金属としては、例えば、Ｆｅ、Ｃｏ、Ｎｉ、Ｃｕ、Ｔｉ、Ａｌ、Ｍｇ、Ａｇ、Ａｕ、Ｐｔ、Ｍｏ、Ｗ、Ｎｂ、Ｔａのような金属元素の単体またはこれらを主成分とする合金等が挙げられる。金属系化合物としては、例えば、金属の酸化物、炭化物、窒化物、塩化物、硫化物、炭酸物、水酸化物等が挙げられる。

【0026】

非金属としては、例えば、Ｓｉ、Ｂ、Ｃ等が挙げられる。非金属系化合物としては、例えば、非金属の酸化物、炭化物、窒化物等が挙げられる。

【0027】

なお、本体部４の構成材料は、上記のような無機材料から選択される２種以上を組み合わせた複合材料、または、上記の少なくとも１種と他の無機材料とを組み合わせた複合材料であってもよい。

【0028】

このうち、本体部４の構成材料は、金属または金属系化合物を含むことが好ましい。これらは、機械的特性や化学的特性が特に高いため、被覆膜５を長期にわたって良好に補強することができる。なお、このような効果を得るための金属または金属系化合物の含有率は、例えば８０質量％以上とされる。

【0029】

本体部４の構成材料が金属または金属系化合物を含まず、樹脂である場合、例えば、熱可塑性樹脂、熱硬化性樹脂、光硬化性樹脂等が挙げられる。本体部４の構成材料が樹脂を含むことにより、レプリカ１の製造容易性を高めることができる。なお、このような効果を得るための樹脂の含有率は、例えば８０質量％以上とされる。

【0030】

また、特に熱硬化性樹脂または光硬化性樹脂を用いた場合、熱可塑性樹脂を用いた場合よりも、本体部４の剛性および耐熱性を高めることができる。また、熱硬化性樹脂では熱の付与によって、光硬化性樹脂では光の照射によって、それぞれ硬化のタイミングを制御することができる。これにより、製造容易性が高いレプリカ１が得られる。さらに、光硬化性樹脂の場合は、光照射により重合するため、硬化による樹脂の体積変化が小さく、レプリカ１として元の鋳型の形状、サイズをより高い精度で保持することができる。

【0031】

熱可塑性樹脂としては、例えば、ポリ酢酸ビニル、ポリビニルアルコール、ポリビニルブチラール、ポリスチレン、ＡＢＳ（Acrylonitrile Butadiene Styrene）樹脂、メタクリル樹脂、ノリル樹脂、ポリウレタン、アイオノマー樹脂、セルロース系プラスチック、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリアミド、ポリカーボネート、ポリアセタール、ポリフェニレンサルファイド、ポリ塩化ビニリデン、ポリエステル、フッ素樹脂等が挙げられ、これらのうちの１種または２種以上を組み合わせて用いられる。

【0032】

熱硬化性樹脂や光硬化性樹脂としては、例えば、ポリイミド、エポキシ樹脂、フェノール樹脂、ユリア樹脂、メラミン樹脂、シリコーン樹脂、ポリアミドイミド、ベンゾシクロブテン、ベンゾオキサジン、シアネート樹脂等が挙げられ、これらのうちの１種または２種以上を組み合わせて用いられる。

【0033】

図３は、図２の本体部４の変形例を示す部分拡大図である。
図３に示す本体部４は、粒子１３の集合体を含んでいる。粒子１３は、集合体を構成することにより、互いに固着または接着され、被覆膜５を支持する。粒子１３を用いることで、材料に流動性や成形性を付与することができる。粒子状にすることで、充填させにくい材料も、本体部４の構成材料として用いることができる。

【0034】

粒子１３の構成材料としては、前述した有機材料、無機材料が挙げられる。また、粒子１３の構成材料には、磁性材料が好ましく用いられる。磁性材料を用いることで、粒子１３に磁場を印加したとき、粒子１３に磁気的吸引力を発生させることができる。この磁気的吸引力を利用することで、後述するレプリカ１の製造方法を効率的に行うことができる。

【0035】

磁性材料は、常磁性材料であってもよいが、強磁性材料であるのが好ましい。強磁性材料であれば、透磁率が高いため、印加された磁場に対して大きな磁気的吸引力を発生させることができる。

【0036】

また、強磁性材料は、硬磁性材料であってもよいが、軟磁性材料であるのが好ましい。軟磁性材料は、透磁率が高く、かつ、保磁力が低い。このため、磁場が印加された状態では、大きな磁気的吸引力を発生させる一方、磁場の印加を停止すると、磁気的吸引力を大きく減少させることができる。これにより、磁場の印加のオン・オフを利用して、後述するレプリカ１の製造方法を特に効率よく行うことができる。軟磁性材料の保磁力は、好ましくは８００Ａ／ｍ以下とされ、より好ましくは４００Ａ／ｍ以下とされる。

【0037】

軟磁性材料としては、例えば、Ｆｅ基合金、Ｎｉ基合金、Ｃｏ基合金のような金属系軟磁性材料、いずれもＦｅ_３Ｏ_４を主成分とするスピネル型フェライト、マグネトプランバイト型フェライト、ガーネット型フェライトのような酸化物系軟磁性材料等が挙げられる。このうち、酸化物系軟磁性材料が好ましく用いられる。酸化物系軟磁性材料は、ｎｍサイズの粒子を低コストで製造可能であるため、粒子１３の構成材料として有用である。

【0038】

粒子１３の平均粒径は、５ｎｍ以上１μｍ以下であるのが好ましく、１０ｎｍ以上３００ｎｍ以下であるのがより好ましく、２０ｎｍ以上２００ｎｍ以下であるのがさらに好ましい。粒子１３の平均粒径が前記範囲内であれば、粒子１３の充填性を高めることができ、緻密な本体部４が得られる。なお、粒子１３の平均粒径が前記下限値を下回ると、粒子１３の取り扱いが難しくなり、粒子１３同士の凝集が起きるおそれがある。また、磁性材料の場合は、後述の鋳型部へ誘導するのに足る保磁力が得られない場合もある。一方、粒子１３の平均粒径が前記上限値を上回ると、粒子１３同士の隙間が大きくなり、本体部４の緻密性が低下するおそれがある。

【0039】

なお、粒子１３の平均粒径は、例えば、本体部４の断面を走査型電子顕微鏡（ＳＥＭ）で観察して、任意に選択した１０個以上の粒子１３の粒径を測定したとき、その平均値として求められる。

【0040】

また、粒子１３を用いる場合、必要に応じて、粒子１３同士を結着させる結着剤を用いるようにしてもよい。結着剤としては、例えば、前述した樹脂が用いられる。
この他、本体部４の構成材料には、任意の添加物が添加されていてもよい。

【0041】

１．２．被覆膜
被覆膜５は、前述したように無機材料で構成されている。この無機材料としては、例えば、酸化物、窒化物、炭化物、硫化物、フッ化物等が挙げられる。このうち、無機材料は、酸化物または窒化物であるのが好ましい。これらは、無機材料の中でも特に機械的特性および化学的特性に優れている。このため、相似的構造Ｓ２を特に安定して維持し得る被覆膜５を得ることができる。

【0042】

酸化物としては、例えば、酸化ケイ素、酸化チタン、酸化アルミニウム、酸化ジルコニウム、酸化ハフニウム、酸化ニオブ、酸化亜鉛、酸化スズ、酸化イットリウム、酸化マグネシウム、酸化カルシウム、酸化ホウ素等が挙げられる。

【0043】

このうち、酸化ケイ素、酸化チタンまたは酸化アルミニウムが好ましく用いられる。これらは、緻密な被覆膜５を形成可能であるとともに、機械的特性および化学的特性が特に良好である。酸化ケイ素は、組成式ＳｉＯ_ｘ（０＜ｘ≦２）で表される酸化物であるが、好ましくはＳｉＯ_２である。酸化チタンは、組成式ＴｉＯ_ｘ（０＜ｘ≦２）で表される酸化物であるが、好ましくはＴｉＯ_２である。酸化アルミニウムは、組成式ＡｌＯ_ｘ（０＜ｘ≦２）で表される酸化物であるが、好ましくはＡｌ_２Ｏ_３である。

【0044】

窒化物としては、例えば、窒化ガリウム、窒化ケイ素、窒化アルミニウム、窒化ホウ素、窒化チタン等が挙げられる。

【0045】

また、被覆膜５の構成材料は、上記のような無機材料から選択される２種以上を組み合わせた複合材料、または、上記の少なくとも１種と他の無機材料とを組み合わせた複合材料であってもよい。複合材料の例としては、Ａｌ_２Ｏ_３－ＳｉＯ_２複合材料が挙げられる。

【0046】

被覆膜５の平均厚さは、特に限定されないが、１ｎｍ以上５００ｎｍ以下であるのが好ましく、３ｎｍ以上１００ｎｍ以下であるのがより好ましく、５ｎｍ以上５０ｎｍ以下であるのがさらに好ましい。被覆膜５の平均厚さが前記範囲内であれば、相似的構造Ｓ２を形成するのに十分な厚さを確保できるとともに、被覆膜５が厚すぎることに伴う弊害を抑制することができる。すなわち、被覆膜５の平均厚さが前記下限値を下回ると、様々な突出高さの相似的構造Ｓ２を十分に形成できないおそれがある。一方、被覆膜５の平均厚さが前記上限値を上回ると、被覆膜５の形成に必要以上の時間がかかるため、レプリカ１の作製効率が低下するおそれがある。

【0047】

なお、被覆膜５の平均厚さは、レプリカ１の断面を走査型電子顕微鏡（ＳＥＭ）や走査透過型電子顕微鏡（ＳＴＥＭ）で観察して、任意に選択した１０か所以上の膜厚を測定したとき、その平均値として求められる。

【0048】

２．生体物質のレプリカの製造方法
次に、実施形態に係る生体物質のレプリカの製造方法について説明する。なお、以下の説明では、前述したレプリカ１の製造方法を例にして説明する。

【0049】

図４は、図１のレプリカ１の製造方法を示すフローチャートである。図５ないし図１４は、図４に示す製造方法を説明するための断面図である。なお、図５ないし図１４において、図１ないし図３と同様の構成については、同一の符号を付している。

【0050】

図４に示すレプリカ１の製造方法は、準備工程Ｓ１０２、被覆膜形成工程Ｓ１０４、充填工程Ｓ１０６および回収工程Ｓ１０８を有する。

【0051】

２．１．準備工程
準備工程Ｓ１０２では、細菌ＢＡの立体構造Ｓ１に相補的な関係を有する相補的構造Ｓ３を有する鋳型２を持つ鋳型膜３を用意する。鋳型２は、鋳型膜３の上面３１が凹没してなる穴であり、その内面２１に相補的構造Ｓ３が設けられている。

【0052】

図５は、細菌ＢＡを示す概略図、および、鋳型２を持つ鋳型膜３の断面図である。図６は、図５のＡ１部およびＡ３部の拡大図である。

【0053】

図５および図６に示す矢印Ｃｏｍは、細菌ＢＡの立体構造Ｓ１と鋳型２の相補的構造Ｓ３とが、互いに相補的であることを表す。本明細書において相補的とは、細菌ＢＡの立体構造Ｓ１の少なくとも一部と、鋳型２の相補的構造Ｓ３とが、互いに隙間なく組み合わせられる形状であるか、または、いずれか一方を拡大もしくは縮小することで互いに隙間なく組み合わせられる形状になる関係のことをいう。なお、組み合わせられる形状は、製造誤差による形状のずれ（製造誤差による隙間）を許容する。また、いずれか一方を拡大または縮小する場合も、その拡大率や縮小率は、元の大きさに対して例えば５％以下程度と小さい。したがって、鋳型２は、細菌ＢＡがほぼ原寸大で転写された模型であるといえる。

【0054】

なお、鋳型２に転写される部位は、細菌ＢＡの全部であってもよいし、任意の一部であってもよい。図５に示す鋳型２は、棒状をなす細菌ＢＡの長手方向の一部が転写されたものである。また、生体物質は、細菌に限定されず、例えばウイルス、真菌、原虫のような細菌以外の微生物、細胞、エクソソーム等であってもよい。

【0055】

鋳型２がとり得る最も長い軸を長軸とするとき、長軸の長さＬ２は、生体物質の種類に応じて異なるが、例えば細菌の場合、０．３μｍ以上１０μｍ以下とされる。また、長軸に直交する軸を短軸とするとき、短軸の長さＷ２は、例えば細菌の場合、０．１μｍ以上５μｍ以下とされる。

【0056】

鋳型２を持つ鋳型膜３は、例えば、次のようにして形成される。
まず、モノマーおよび細菌ＢＡを含む溶液を調製し、この溶液を基材上に塗布して、液状被膜を形成する。次に、液状被膜に電場を印加する。細菌ＢＡは、一般に負電荷を帯びている。このため、電場の向きを適宜設定することにより、細菌ＢＡを基材側に泳動させることができる。このタイミングで、基材上に塗布した溶液中のモノマーに重合反応を生じさせる。これにより、図７および図８に示すように、細菌ＢＡの一部が取り込まれた鋳型膜３が得られる。図８は、図７のＡ４部の拡大図である。

【0057】

次に、細菌ＢＡを除去する。これにより、図９に示すように、鋳型２を持つ鋳型膜３が得られる。細菌ＢＡを除去する方法としては、例えば、溶菌酵素を含む溶液に細菌ＢＡを接触させる方法が用いられる。

【0058】

モノマーとしては、特に限定されないが、例えば、ピロール、アニリン、チオフェンまたはそれらの誘導体等が挙げられる。モノマーとして例えばピロールを用いた場合、鋳型膜３はポリピロール膜となる。また、この場合、重合反応としては、例えば、電解重合反応が挙げられるが、本工程での重合反応は、これに限定されない。

【0059】

２．２．被覆膜形成工程
被覆膜形成工程Ｓ１０４では、図１０に示すように、鋳型２の内面２１に被覆膜５を形成する。被覆膜５は、無機材料で構成され、図１１に示すように、鋳型２が有する相補的構造Ｓ３に応じて成形された状態で成膜される。これにより、被覆膜５には、相補的構造Ｓ３が転写されてなる三次元構造が得られる。この三次元構造は、細菌ＢＡの立体構造Ｓ１と相似の関係を有する。したがって、前述した相似的構造Ｓ２を持つ被覆膜５が得られる。なお、図１１は、図１０のＡ５部の拡大図である。

【0060】

被覆膜５は、液相成膜法により形成されてもよいが、好ましくは気相成膜法により形成され、より好ましくはＡＬＤ（Ａｔｏｍｉｃ Ｌａｙｅｒ Ｄｅｐｏｓｉｔｉｏｎ）法により形成される。ＡＬＤ法では、原子層レベルで原料を堆積させることができるので、緻密で膜厚が薄い被覆膜５を形成することができる。また、ＡＬＤ法では、凹部や陰になる部分への原料や酸化剤等の回り込みが良好である。このため、ＡＬＤ法を用いることにより、鋳型２の相補的構造Ｓ３がより忠実に転写された相似的構造Ｓ２を持つ被覆膜５が得られる。したがって、この相似的構造Ｓ２は、細菌ＢＡの立体構造Ｓ１をより忠実に模造したものとなる。

【0061】

以下、一例として、ＡＬＤ法により、酸化ケイ素で構成される被覆膜５を形成する方法について説明する。まず、真空引きおよび雰囲気制御が可能なチャンバー内に図９に示す鋳型２を持つ鋳型膜３を投入する。次に、チャンバー内に、被覆膜５の原料となるプリカーサー（前駆体）を投入し、相補的構造Ｓ３を含む鋳型２の内面２１に吸着させる。プリカーサーは、被覆膜５を構成する無機材料に応じて適宜選択される。無機材料が酸化ケイ素である場合、プリカーサーとしては、例えば、ジメチルアミノシラン、メチルエチルアミノシラン、ジエチルアミノシラン、トリスジメチルアミノシラン、ビスジエチルアミノシラン、ビスターシャリブチルアミノシラン等が挙げられる。次に、余剰のプリカーサーを排出した後、チャンバー内に酸化剤を導入する。酸化剤としては、例えば、オゾン、プラズマ酸素、水蒸気等が挙げられる。酸化剤は、鋳型２に吸着しているプリカーサーと反応し、被覆膜５が形成される。

【0062】

また、ＡＬＤ法における処理温度は、プリカーサー等の種類に応じて適宜設定されるが、３０℃以上１５０℃以下であるのが好ましく、３０℃以上１００℃以下であるのがより好ましい。このような温度域は、気相成膜法の中でも比較的低温であることから、鋳型膜３の熱変性を抑えつつ、被覆膜５を形成することができる。これにより、最終的に、細菌ＢＡの立体構造Ｓ１を特に忠実に模造した相似的構造Ｓ２を有する被覆膜５が得られる。なお、このような温度域での成膜には、例えば、常温ＡＬＤ成膜装置を用いた常温ＡＬＤ法が用いられる。

【0063】

２．３．充填工程
充填工程Ｓ１０６では、鋳型２に充填用材料を供給して固化させる。これにより、図１２に示す本体部４が得られる。充填用材料は、固化により、本体部４が得られる材料であれば、特に限定されない。なお、本明細書における「固化」は、流動性および成形性を有する材料が、成形後に固まって、その形状を維持することをいい、硬化も含む。

【0064】

充填用材料としては、前述した本体部４の構成材料の原料が挙げられる。具体的には、固化前の樹脂を含む溶液、樹脂粉末を含む分散液、無機材料の前駆体、無機材料粉末、磁性材料粉末等が挙げられる。

【0065】

充填用材料は、流動性および成形性を有する状態に調製され、鋳型２に供給される。鋳型２から充填用材料があふれた場合、必要に応じて、スキージーを用いて余剰分を除去してもよい。次に、必要に応じて熱または光を付与することにより、充填用材料を固化させる。これにより、本体部４が得られる。そして、本体部４と被覆膜５を備えるレプリカ１が得られる。

【0066】

なお、充填用材料には、必要に応じて、結着剤（バインダー）、分散剤、難燃剤、紫外線吸収剤、フィラー、酸化防止剤等が添加されていてもよい。

【0067】

また、鋳型２からあふれた充填用材料を除去しなかった場合、複数の個体が接続された状態で固化に至る。このような状態を本明細書では「レプリカ複合体」ともいい、実施形態に係るレプリカ１の変形例である。

【0068】

レプリカ複合体は、複数の個体が接続されてなるものである。レプリカ複合体の状態にすることで、後述する回収工程Ｓ１０８がより平易になり、製造工程が効率的になる。個体とは、前述したレプリカ１と同様の構成を持つもの、つまり、細菌ＢＡの立体構造Ｓ１と相似の関係を有する相似的構造Ｓ２を持つ被覆膜５を有する部位である。回収工程Ｓ１０８で回収された後のレプリカ複合体は、個体を分離する工程に供されてもよいし、そのまま用いられてもよい。

【0069】

また、本工程では、レプリカ複合体に支持基板を貼り付ける操作を行ってもよい。これにより、レプリカ複合体の機械的特性を高めることができる。この場合、後述する回収工程Ｓ１０８では、支持基板ごと、レプリカ複合体を鋳型膜３から分離する操作を行うことができる。これにより、回収工程Ｓ１０８をより効率よく行うことができる。

【0070】

２．４．回収工程
回収工程Ｓ１０８では、鋳型膜３からレプリカ１を回収する。この回収は、鋳型膜３からレプリカ１を分離すればよい。これにより、被覆膜５が有する相似的構造Ｓ２が良好に維持された状態でレプリカ１を回収することができる。

【0071】

レプリカ１を回収する方法としては、例えば、鋳型膜３を加熱する操作、レプリカ１を鋳型膜３から引き抜く操作、鋳型膜３を除去する操作等を行う方法が挙げられる。

【0072】

このうち、鋳型膜３を加熱する操作では、加熱によって鋳型膜３を膨張させる。これにより、図１３に示すように、鋳型膜３とレプリカ１との間に隙間を生じさせることができる。その結果、レプリカ１を円滑に分離、回収することができる。加熱温度は、鋳型膜３を熱変性させない温度であれば、特に限定されないが、例えば４０℃以上１００℃以下とされる。また、レプリカ１の本体部４が無機材料である場合、鋳型膜３との熱膨張差が大きいので、より低温での加熱でも分離が可能になる。

【0073】

レプリカ１を鋳型膜３から引き抜く操作は、例えばレプリカ１の本体部４が磁性材料を含む場合に有効である。この場合、レプリカ１に対して磁場を印加すると、レプリカ１に磁気的吸引力が発生する。具体的には、図１４に示すように、鋳型膜３の上面３１側から磁場発生源６を近づけると、レプリカ１には磁場発生源６へ向かう磁気的吸引力が発生する。これにより、レプリカ１をより簡単に回収することができる。磁場発生源６としては、例えば、永久磁石、電磁石等が挙げられる。このうち、回収後のレプリカ１を磁場発生源６から容易に分離可能であるという観点から、電磁石が好ましく用いられる。

【0074】

鋳型膜３を除去する操作では、アッシング処理やウェット処理により、鋳型膜３を除去する。アッシング処理の具体例としては、プラズマアッシング、オゾンアッシング等が挙げられる。プラズマアッシングでは、プラズマ処理により、鋳型膜３を灰化して除去する。オゾンアッシングでは、オゾンと鋳型膜３とを接触させ、鋳型膜３を分解、気化させる。ウェット処理では、鋳型膜３を溶解させ除去する。

【0075】

このうち、プラズマ処理を用いる方法が好ましい。プラズマ処理を用いることにより、レプリカ１への影響を最小限に抑えつつ、鋳型膜３を除去することができる。プラズマ処理には、例えば酸素プラズマが好ましく用いられる。なお、レプリカ１は、無機材料で構成された被覆膜５を備えているため、プラズマ処理に対する良好な耐性を有している。

【0076】

３．レプリカの使用方法
レプリカ１は、細菌ＢＡの立体構造Ｓ１と相似な相似的構造Ｓ２を有する。このため、レプリカ１は、実際の細菌ＢＡに代わって、鋳型２を形成するための成形型となる。つまり、前述した、鋳型２を持つ鋳型膜３の形成方法において、細菌ＢＡをレプリカ１に置き換えることができる。レプリカ１が電荷を帯びている場合は、細菌ＢＡの場合と同じく電気泳動により誘導し、上記の鋳型膜３と同等のポリマー層を作製することが可能になる。一方、レプリカ１が電荷を帯びていない場合は、代わりに粒子１３を起源とする磁気を利用することができる。そして、電気泳動の代わりに、磁力を用いて電磁石により誘導することで、上記の鋳型膜３と同等のポリマー層を作製することが可能になる。このようにして作製したポリマー層は、例えば生体物質の検出等を行うバイオセンサーに用いることができる。

【0077】

レプリカ１を用いることで、実際の細菌ＢＡを使うことなく、ポリマー層を作製することができる。つまり、一旦、レプリカ１を作製してしまえば、人体に有害な細菌ＢＡを扱う必要がないので、安全性を確保することができる。また、レプリカ１は、細菌ＢＡを代替する成形型として繰り返し使用することができる。このため、ポリマー層の効率的な作製が可能になり、低コスト化を容易に図ることができる。また、入手しにくい細菌ＢＡであっても、需要に応じてポリマー層を安定的に作製することが可能になる。

【0078】

３．前記実施形態が奏する効果
以上のように、前記実施形態に係る生体物質のレプリカ１は、細菌ＢＡ（生体物質）の立体構造Ｓ１に相似な相似的構造Ｓ２（相似な三次元構造）を有し、表面が無機材料で構成されている。

【0079】

このようなレプリカ１によれば、例えばバイオセンサー等に用いるポリマー層を作製するとき、実際の細菌ＢＡを用いることなく形成することが可能になる。また、入手しにくい細菌ＢＡに適用されるポリマー層を作製する場合でも、レプリカ１をあらかじめ作製しておくことで、ポリマー層の安定した作製が可能になる。

【0080】

また、無機材料は、酸化物または窒化物であることが好ましい。これらは、無機材料の中でも特に機械的特性および化学的特性に優れている。このため、相似的構造Ｓ２を特に安定して維持し得るレプリカ１を得ることができる。

【0081】

また、レプリカ１は、本体部４と被覆膜５とを備えることが好ましい。被覆膜５は、本体部４の表面を被覆し、無機材料で構成されている。

【0082】

このような構成によれば、本体部４および被覆膜５の各構成材料を選択することで、双方に適した特性を与えることができる。

【0083】

また、本体部４の構成材料は、被覆膜５の構成材料と同じであってもよい。この場合、本体部４と被覆膜５の密着性を高めることができる。これにより、機械的強度が高いレプリカ１が得られる。

【0084】

また、本体部４の構成材料は、被覆膜５の構成材料と異なっていてもよい。この場合、材料に応じた互いに異なる特性を与えることができる。これにより、例えば、立体構造Ｓ１に対して高い再現性を有する相似的構造Ｓ２を有し、かつ、製造容易性が高いレプリカ１が得られる。

【0085】

また、本体部４の構成材料は、金属または金属系化合物を含んでいてもよい。これらは、機械的特性や化学的特性が特に高いため、被覆膜５を長期にわたって良好に補強することができる。

【0086】

また、本体部４の構成材料は、樹脂を含んでいてもよい。これにより、レプリカ１の製造容易性を高めることができる。

【0087】

また、本体部４は、粒子１３の集合体を含んでいてもよい。粒子１３を用いることで、材料に流動性や成形性を付与することができる。これにより、充填させにくい材料も、本体部４の構成材料として用いることができる。

【0088】

また、粒子１３は、磁性材料で構成されていてもよい。磁性材料を用いることで、粒子１３に磁場を印加したとき、粒子１３を含む本体部４に磁気的吸引力を発生させることができる。このため、効率的に製造可能なレプリカ１が得られる。

【0089】

また、相似的構造Ｓ２（相似な三次元構造）を有する部位（個体）を複数備え、この部位同士が接続されてなる複合体であってもよい。

【0090】

個体同士が接続されたレプリカ複合体となることで、個々の個体を回収するよりも回収プロセスが平易になる。このため、効率的に製造可能なレプリカが得られる。

【0091】

前記実施形態に係る生体物質のレプリカ１の製造方法は、準備工程Ｓ１０２と、被覆膜形成工程Ｓ１０４と、充填工程Ｓ１０６と、回収工程Ｓ１０８と、を有する。準備工程Ｓ１０２では、細菌ＢＡ（生体物質）の立体構造Ｓ１に相補的な相補的構造Ｓ３（相補的な三次元構造）を有する鋳型２を持つ鋳型膜３を用意する。被覆膜形成工程Ｓ１０４では、鋳型２の内面２１に無機材料で構成される被覆膜５を形成する。充填工程Ｓ１０６では、被覆膜５が形成された鋳型２に充填用材料を供給して固化させることにより、細菌ＢＡの立体構造Ｓ１に相似な相似的構造Ｓ２（相似な三次元構造）を有するレプリカ１を形成する。回収工程Ｓ１０８では、鋳型膜３からレプリカ１を回収する。

【0092】

このような構成によれば、細菌ＢＡ（生体物質）をほぼ原寸大で模造したレプリカ１を製造することができる。このようなレプリカ１は、例えばバイオセンサー等に用いるポリマー層を作製するとき、実際の細菌ＢＡを用いることなく形成することが可能になる。また、入手しにくい細菌ＢＡに適用されるポリマー層を作製する場合でも、レプリカ１をあらかじめ作製しておくことで、ポリマー層の安定した作製が可能になる。

【0093】

また、生体物質のレプリカ１の製造方法は、複合体形成工程をさらに有していてもよい。複合体形成工程では、相似的構造Ｓ２（相似な三次元構造）を有する部位（個体）を複数備え、この部位同士が接続されてなる複合体を形成する。

【0094】

このような構成によれば、個々の個体を回収するよりも回収工程Ｓ１０８がより平易になり、レプリカの製造工程が効率的になる。

【0095】

また、複合体形成工程は、複合体に支持基板を貼り付ける操作を含み、回収工程Ｓ１０８は、支持基板で支持された複合体を鋳型膜３から回収する操作を含んでいてもよい。
このような構成によれば、回収工程Ｓ１０８をより効率よく行うことができる。

【0096】

また、被覆膜形成工程Ｓ１０４は、常温ＡＬＤ法により前記被覆膜を形成する操作を含むことが好ましい。これにより、鋳型膜３の熱変性を抑えつつ、被覆膜５を形成することができる。これにより、最終的に、細菌ＢＡの立体構造Ｓ１を特に忠実に模造した相似的構造Ｓ２を有する被覆膜５が得られる。

【0097】

また、回収工程Ｓ１０８は、鋳型膜３を加熱して膨張させる操作を含んでいてもよい。これにより、鋳型膜３とレプリカ１との間に隙間を生じさせることができる。その結果、レプリカ１を円滑に分離、回収することができる。

【0098】

また、充填用材料は、磁性材料であってもよい。この場合、回収工程Ｓ１０８は、細菌ＢＡ（生体物質）のレプリカ１に磁場を印加する操作を含むことが好ましい。これにより、レプリカ１には磁場発生源６へ向かう磁気的吸引力が発生する。その結果、レプリカ１をより簡単に回収することができる。

【0099】

また、回収工程Ｓ１０８は、プラズマ処理により鋳型膜３を除去する操作を含んでいてもよい。これにより、レプリカ１への影響を最小限に抑えつつ、鋳型膜３を除去することができる。

【0100】

以上、本発明の生体物質のレプリカおよび生体物質のレプリカの製造方法を図示の実施形態に基づいて説明したが、本発明はこれに限定されるものではない。例えば、本発明の生体物質のレプリカでは、前記実施形態の各部の構成が、同様の機能を有する任意の構成に置換されていてもよく、前記実施形態に他の任意の構成物が付加されていてもよい。また、本発明の生体物質のレプリカの製造方法は、前記実施形態に任意の目的の工程が追加された方法であってもよい。

【符号の説明】

【0101】

１…レプリカ、２…鋳型、３…鋳型膜、４…本体部、５…被覆膜、６…磁場発生源、１３…粒子、２１…内面、３１…上面、ＢＡ…細菌、Ｃｏｍ…矢印、Ｓ１…立体構造、Ｓ１０２…準備工程、Ｓ１０４…被覆膜形成工程、Ｓ１０６…充填工程、Ｓ１０８…回収工程、Ｓ２…相似的構造、Ｓ３…相補的構造、Ｓｉｍ…矢印、Ｌ１…長さ、Ｌ２…長さ、Ｗ１…長さ、Ｗ２…長さ

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】

【図14】