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特開2024-81763膵臓移植のファシリテーターとして繊維芽細胞を用いる１型糖尿病の治療方法および組成物
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公開特許公報(A)
(11)【公開番号】P2024081763
(43)【公開日】2024-06-18
(54)【発明の名称】膵臓移植のファシリテーターとして繊維芽細胞を用いる１型糖尿病の治療方法および組成物
(51)【国際特許分類】
A61K 35/33 20150101AFI20240611BHJP
A61K 35/35 20150101ALI20240611BHJP
A61K 35/39 20150101ALI20240611BHJP
A61K 35/50 20150101ALI20240611BHJP
A61K 35/44 20150101ALI20240611BHJP
A61K 35/28 20150101ALI20240611BHJP
A61P 3/10 20060101ALI20240611BHJP
A61P 5/50 20060101ALI20240611BHJP
【ＦＩ】
A61K35/33
A61K35/35
A61K35/39
A61K35/50
A61K35/44
A61K35/28
A61P3/10
A61P5/50
【審査請求】有
【請求項の数】1
【出願形態】ＯＬ
(21)【出願番号】P 2024059383
(22)【出願日】2024-04-02
(62)【分割の表示】P 2021524222の分割
【原出願日】2019-11-04
(31)【優先権主張番号】62/755,523
(32)【優先日】2018-11-04
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(71)【出願人】
【識別番号】516071686
【氏名又は名称】フィジーン、エルエルシー
【氏名又は名称原語表記】ＦＩＧＥＮＥ， ＬＬＣ
(74)【代理人】
【識別番号】110000729
【氏名又は名称】弁理士法人ユニアス国際特許事務所
(72)【発明者】
【氏名】オヒーロン、ピート
(72)【発明者】
【氏名】イチム、トーマス
(57)【要約】 （修正有）
【課題】インスリン産生細胞の置換による糖尿病の治療に関する方法および組成物を提供する。
【解決手段】インスリン産生細胞の生存、生着及び、寛容生成を増強するための細胞アジュバントの使用を提供する。場合によっては、本開示が同種インスリン産生細胞の統合を可能にするために、増強されたレベルで免疫学的寛容を促進するための肝微小環境の操作にを提供する。特定の実施形態は、生着時のインスリン産生細胞に対する免疫学的寛容を増強するために線維芽細胞を使用する。
【選択図】図１
【解決手段】インスリン産生細胞の生存、生着及び、寛容生成を増強するための細胞アジュバントの使用を提供する。場合によっては、本開示が同種インスリン産生細胞の統合を可能にするために、増強されたレベルで免疫学的寛容を促進するための肝微小環境の操作にを提供する。特定の実施形態は、生着時のインスリン産生細胞に対する免疫学的寛容を増強するために線維芽細胞を使用する。
【選択図】図１
【特許請求の範囲】
【請求項1】
明細書又は図面に記載の発明。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本出願は、２０１８年１１月４日に出願された米国仮特許出願第６２／７５５，５２３
号の優先権を主張し、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
号の優先権を主張し、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【0002】
（技術分野）
本開示の実施形態は、少なくとも細胞生物学、分子生物学、生理学、及び、糖尿病医学
を含む医学の分野に関するものである。
本開示の実施形態は、少なくとも細胞生物学、分子生物学、生理学、及び、糖尿病医学
を含む医学の分野に関するものである。
【背景技術】
【0003】
１型糖尿病は、生涯にわたるインスリン療法又は膵臓移植によって伝統的に治療されて
きた自己免疫状態である。しかしながら、低血糖の頻発エピソードは生涯にわたるインス
リン療法を受けている患者では一般的であり、全膵臓移植は重大なリスクを伴う侵襲的な
外科的処置である。ランゲルハンス島細胞移植は、１型糖尿病の従来の治療法に代わる魅
力的な代替法である。しかしながら、臨床的に膵島細胞移植の広範な使用における主要な
制限因子の２つは、十分な数の膵島が使用可能であること、及び、移植された膵島を長期
間保護するための現在の免疫抑制治療が不可能であることである。それにもかかわらず、
膵島移植は一部の患者で「治癒」が得られているという意味で、１型糖尿病の治療に革命
をもたらした［１］。膵島移植の欠点としては、複数のドナーが必要であること［２］、
安定した生着が得られないこと（５年で依然として１０％しか移植片がない）［３］、継
続的な免疫抑制が必要であること［４］があげられる。生着を増強するために様々な戦略
が用いられているが、大きな臨床的成功は見られていない。これまで膵島細胞移植で用い
られてきた多くの免疫抑制プロトコルは、膵β細胞機能及び、インスリン感受性に負の影
響を及ぼすことが示されているカルシニューリン阻害薬に依存している。したがって、宿
主の免疫攻撃からの防御を提供するにもかかわらず、これらの薬剤自体が移植片機能を低
下させ、移植された膵島の機能不全の一因となる可能性がある。さらに、膵島移植片のレ
シピエントは最初にそれらの疾患をもたらし、それによって移植された膵島の機能に長期
的に影響する糖尿病発症の自己免疫効果を依然として実証する。
きた自己免疫状態である。しかしながら、低血糖の頻発エピソードは生涯にわたるインス
リン療法を受けている患者では一般的であり、全膵臓移植は重大なリスクを伴う侵襲的な
外科的処置である。ランゲルハンス島細胞移植は、１型糖尿病の従来の治療法に代わる魅
力的な代替法である。しかしながら、臨床的に膵島細胞移植の広範な使用における主要な
制限因子の２つは、十分な数の膵島が使用可能であること、及び、移植された膵島を長期
間保護するための現在の免疫抑制治療が不可能であることである。それにもかかわらず、
膵島移植は一部の患者で「治癒」が得られているという意味で、１型糖尿病の治療に革命
をもたらした［１］。膵島移植の欠点としては、複数のドナーが必要であること［２］、
安定した生着が得られないこと（５年で依然として１０％しか移植片がない）［３］、継
続的な免疫抑制が必要であること［４］があげられる。生着を増強するために様々な戦略
が用いられているが、大きな臨床的成功は見られていない。これまで膵島細胞移植で用い
られてきた多くの免疫抑制プロトコルは、膵β細胞機能及び、インスリン感受性に負の影
響を及ぼすことが示されているカルシニューリン阻害薬に依存している。したがって、宿
主の免疫攻撃からの防御を提供するにもかかわらず、これらの薬剤自体が移植片機能を低
下させ、移植された膵島の機能不全の一因となる可能性がある。さらに、膵島移植片のレ
シピエントは最初にそれらの疾患をもたらし、それによって移植された膵島の機能に長期
的に影響する糖尿病発症の自己免疫効果を依然として実証する。
【0004】
本開示は、糖尿病治療のための当技術分野において長い間感じられてきた必要性を満た
す。
す。
【発明の概要】
【0005】
本開示の実施形態は、少なくとも細胞移植及び、同種移植片治療を含む、細胞治療に関
連する方法及び、組成物を含む。特定の局面において、この方法及び、組成物は移植され
る特定の型の細胞（例えば、糖尿病の処置に有益である少なくとも細胞を含む）の移植を
容易にする。少なくともいくつかの場合では、異なる細胞型の併用療法が別の型の細胞の
受容及び、免疫寛容を容易にする。特定の実施形態では線維芽細胞（単独で、又は他の細
胞と組み合わせて）は膵島細胞の有効な移植を容易にする。
連する方法及び、組成物を含む。特定の局面において、この方法及び、組成物は移植され
る特定の型の細胞（例えば、糖尿病の処置に有益である少なくとも細胞を含む）の移植を
容易にする。少なくともいくつかの場合では、異なる細胞型の併用療法が別の型の細胞の
受容及び、免疫寛容を容易にする。特定の実施形態では線維芽細胞（単独で、又は他の細
胞と組み合わせて）は膵島細胞の有効な移植を容易にする。
【0006】
特に開示されているのは、例えば、（１）同種内皮前駆細胞（ＥＰＣ）、及び、／又は
（２）同種線維芽細胞の同時投与を介して、肝微小環境における膵島同種移植片の生着、
生存性及び、機能を増強する手段である。本開示の１つの実施形態において、肝微小環境
はＥＰＣ（及び、／又はＥＰＣによって分泌される上清）の投与、続いて、線維芽細胞の
投与の間、又はその後によってプライミングされ；このようなプライミングは少なくとも
初期の炎症又は「危険」シグナルを抑制し、そして寛容発生及び、膵島同種移植片の組み
込みを可能にするために、肝微小環境の調節を容易にする。同種ＥＰＣの投与は、膵島の
移植又は膵島細胞の移植、並びに線維芽細胞投与と併せて行うことができる。１つの実施
形態において、同種異系線維芽細胞は同種異系ＥＰＣの移植を支持するために、ＥＰＣ投
与の後、間、及び、／又は前に（例えば、門脈内に）投与され、これは、最終的に、内因
性ＥＰＣが同種異系島移植片を取り囲むことを可能にし、したがって、移植に必要とされ
るドナー材料の量の減少を可能にする。特定の実施形態では場合によっては同種ＥＰＣが
移植され、場合によっては島細胞（又は島）が移植されるか、又はその両方である。
（２）同種線維芽細胞の同時投与を介して、肝微小環境における膵島同種移植片の生着、
生存性及び、機能を増強する手段である。本開示の１つの実施形態において、肝微小環境
はＥＰＣ（及び、／又はＥＰＣによって分泌される上清）の投与、続いて、線維芽細胞の
投与の間、又はその後によってプライミングされ；このようなプライミングは少なくとも
初期の炎症又は「危険」シグナルを抑制し、そして寛容発生及び、膵島同種移植片の組み
込みを可能にするために、肝微小環境の調節を容易にする。同種ＥＰＣの投与は、膵島の
移植又は膵島細胞の移植、並びに線維芽細胞投与と併せて行うことができる。１つの実施
形態において、同種異系線維芽細胞は同種異系ＥＰＣの移植を支持するために、ＥＰＣ投
与の後、間、及び、／又は前に（例えば、門脈内に）投与され、これは、最終的に、内因
性ＥＰＣが同種異系島移植片を取り囲むことを可能にし、したがって、移植に必要とされ
るドナー材料の量の減少を可能にする。特定の実施形態では場合によっては同種ＥＰＣが
移植され、場合によっては島細胞（又は島）が移植されるか、又はその両方である。
【0007】
本開示の実施形態は個体における同種又は自己インスリン産生細胞の移植の前、同時、
及び、／又は後に、有効量の内皮前駆細胞（ＥＰＣ）及び、／又は線維芽細胞を投与する
工程を含む、個体における同種又は自己インスリン産生細胞の生存を増強する方法を含む
。特定の場合、線維芽細胞及び、／又はＥＰＣは、個人に対して同種である。同種インス
リン産生細胞は、膵臓ドナーに由来し得る。同種異系インスリン産生細胞は、島細胞塊か
ら構成され得る。同種インスリン産生細胞は、前駆細胞の集団からのインビトロ分化に由
来し得る。特定の場合において、ＥＰＣは、ａ）ｆｌｋ－１；ｂ）ＣＤ３１；ｃ）ＣＤ３
４；ｄ）ＣＤ１３３；ｆ）ＰＤＧＦ－Ｒ；ｇ）ｈＴＥＲＴ；及び、ｈ）それらの組み合わ
せからなる群より選択されるマーカーを発現する。ＥＰＣは（ｉ）哺乳動物細胞集団を単
離する工程；（ｉｉ）ＣＤ４５－表現型プロファイルを発現する工程（ｉ）の細胞の亜集
団を濃縮する工程；（ｉｉｉ）ＣＤ３４＋表現型プロファイルを発現する工程（ｉｉ）に
由来するＣＤ４５－細胞の亜集団を濃縮する工程；及び、（ｉｖ）ＣＤ３１ｌｏ／－表現
型プロファイルを発現する工程（ｉｉｉ）に由来するＣＤ３４＋細胞の亜集団を単離し、
それによって内皮前駆細胞を単離する工程を含む方法によって誘導され得る。ＥＰＣは、
胎盤組織、骨髄、脂肪組織、大網、又はそれらの組合せに由来することができる。胎盤由
来ＥＰＣは胎児由来である可能性がある。線維芽細胞は、軟骨細胞系統に分化することが
できる。特定の場合には、線維芽細胞がａ）ＮＡＮＯＧ；ｂ）ＯＣＴ－４；ｃ）ＳＳＥＡ
－４；ｄ）幹細胞因子受容体；及び、ｅ）それらの組合せからなる群より選択される１以
上のマーカーを発現する。具体的な場合には、線維芽細胞が（ｉ）哺乳動物細胞集団を単
離する工程；（ｉｉ）ＣＤ４５－表現型プロファイルを発現する工程（ｉ）の細胞の亜集
団を濃縮する工程；及び、（ａ）ＣＤ３４＋表現型プロファイルを発現する工程（ｉｉ）
に由来するＣＤ４５－細胞の亜集団を濃縮する工程、及び、前記ＣＤ３４＋細胞の亜集団
を単離し、それによって再生特性を有する線維芽細胞を単離する工程を含む方法によって
単離される。本開示の方法において使用される線維芽細胞は、ａ）包皮；ｂ）タミータッ
ク；ｃ）胎盤；ｄ）耳たぶ；ｅ）脂肪組織；ｆ）網；ｇ）ウォートンゼリー；及び、ｈ）
それらの組み合わせからなる群より選択される１つ以上の組織供給源に由来し得る。使用
する場合、胎盤線維芽細胞は、胎盤の胎児側に由来してもよい。特定の実施形態では、Ｃ
Ｄ４５陰性線維芽細胞は胎児由来である。線維芽細胞は、ａ）磁気活性化細胞選別；ｂ）
フローサイトメトリー選別；ｃ）細胞パニング；ｄ）再生能力の細胞を選択的に選択する
ためのアフィニティーベースの手段；ｅ）再生能力を有する細胞を選択するための大きさ
ベースの手段；及び、ｆ）それらの組合せからなる群より選択される方法を使用して、再
生能力の１つ以上のマーカーの発現のために精製され得る。
及び、／又は後に、有効量の内皮前駆細胞（ＥＰＣ）及び、／又は線維芽細胞を投与する
工程を含む、個体における同種又は自己インスリン産生細胞の生存を増強する方法を含む
。特定の場合、線維芽細胞及び、／又はＥＰＣは、個人に対して同種である。同種インス
リン産生細胞は、膵臓ドナーに由来し得る。同種異系インスリン産生細胞は、島細胞塊か
ら構成され得る。同種インスリン産生細胞は、前駆細胞の集団からのインビトロ分化に由
来し得る。特定の場合において、ＥＰＣは、ａ）ｆｌｋ－１；ｂ）ＣＤ３１；ｃ）ＣＤ３
４；ｄ）ＣＤ１３３；ｆ）ＰＤＧＦ－Ｒ；ｇ）ｈＴＥＲＴ；及び、ｈ）それらの組み合わ
せからなる群より選択されるマーカーを発現する。ＥＰＣは（ｉ）哺乳動物細胞集団を単
離する工程；（ｉｉ）ＣＤ４５－表現型プロファイルを発現する工程（ｉ）の細胞の亜集
団を濃縮する工程；（ｉｉｉ）ＣＤ３４＋表現型プロファイルを発現する工程（ｉｉ）に
由来するＣＤ４５－細胞の亜集団を濃縮する工程；及び、（ｉｖ）ＣＤ３１ｌｏ／－表現
型プロファイルを発現する工程（ｉｉｉ）に由来するＣＤ３４＋細胞の亜集団を単離し、
それによって内皮前駆細胞を単離する工程を含む方法によって誘導され得る。ＥＰＣは、
胎盤組織、骨髄、脂肪組織、大網、又はそれらの組合せに由来することができる。胎盤由
来ＥＰＣは胎児由来である可能性がある。線維芽細胞は、軟骨細胞系統に分化することが
できる。特定の場合には、線維芽細胞がａ）ＮＡＮＯＧ；ｂ）ＯＣＴ－４；ｃ）ＳＳＥＡ
－４；ｄ）幹細胞因子受容体；及び、ｅ）それらの組合せからなる群より選択される１以
上のマーカーを発現する。具体的な場合には、線維芽細胞が（ｉ）哺乳動物細胞集団を単
離する工程；（ｉｉ）ＣＤ４５－表現型プロファイルを発現する工程（ｉ）の細胞の亜集
団を濃縮する工程；及び、（ａ）ＣＤ３４＋表現型プロファイルを発現する工程（ｉｉ）
に由来するＣＤ４５－細胞の亜集団を濃縮する工程、及び、前記ＣＤ３４＋細胞の亜集団
を単離し、それによって再生特性を有する線維芽細胞を単離する工程を含む方法によって
単離される。本開示の方法において使用される線維芽細胞は、ａ）包皮；ｂ）タミータッ
ク；ｃ）胎盤；ｄ）耳たぶ；ｅ）脂肪組織；ｆ）網；ｇ）ウォートンゼリー；及び、ｈ）
それらの組み合わせからなる群より選択される１つ以上の組織供給源に由来し得る。使用
する場合、胎盤線維芽細胞は、胎盤の胎児側に由来してもよい。特定の実施形態では、Ｃ
Ｄ４５陰性線維芽細胞は胎児由来である。線維芽細胞は、ａ）磁気活性化細胞選別；ｂ）
フローサイトメトリー選別；ｃ）細胞パニング；ｄ）再生能力の細胞を選択的に選択する
ためのアフィニティーベースの手段；ｅ）再生能力を有する細胞を選択するための大きさ
ベースの手段；及び、ｆ）それらの組合せからなる群より選択される方法を使用して、再
生能力の１つ以上のマーカーの発現のために精製され得る。
【0008】
一実施形態において、インスリン産生細胞に関連する１つ以上の抗原に対する寛容原性
免疫応答を個体において刺激する方法であって、有効量の同種異系インスリン産生細胞、
同種異系ＥＰＣ、及び、同種異系線維芽細胞を投与する工程を含む方法が存在する。別の
場合では、インシュリン産生細胞、ＥＰＣ、及び、線維芽細胞の１つ又はそれ以上が個体
に対して自己である。特定の実施形態において、寛容原性応答は、抗原特異的Ｔ調節細胞
の刺激を含む。Ｔ調節細胞は、インスリン産生細胞の活性を殺傷又は抑制する細胞を阻害
する能力を有している可能性がある。特定の実施形態において、Ｔ調節細胞は、転写因子
ＦｏｘＰ３を発現する。特定の実施形態において、寛容原性応答は抗原特異的Ｂ調節細胞
（例えば、ＣＤ１０を発現するＢ調節細胞）の刺激を含む。Ｂ調節細胞は、プロプラズマ
芽球であってもよい。
免疫応答を個体において刺激する方法であって、有効量の同種異系インスリン産生細胞、
同種異系ＥＰＣ、及び、同種異系線維芽細胞を投与する工程を含む方法が存在する。別の
場合では、インシュリン産生細胞、ＥＰＣ、及び、線維芽細胞の１つ又はそれ以上が個体
に対して自己である。特定の実施形態において、寛容原性応答は、抗原特異的Ｔ調節細胞
の刺激を含む。Ｔ調節細胞は、インスリン産生細胞の活性を殺傷又は抑制する細胞を阻害
する能力を有している可能性がある。特定の実施形態において、Ｔ調節細胞は、転写因子
ＦｏｘＰ３を発現する。特定の実施形態において、寛容原性応答は抗原特異的Ｂ調節細胞
（例えば、ＣＤ１０を発現するＢ調節細胞）の刺激を含む。Ｂ調節細胞は、プロプラズマ
芽球であってもよい。
【0009】
上記は以下の詳細な説明がより良く理解され得るように、本開示の特徴及び、技術的利
点をかなり広く概説した。本明細書の特許請求の範囲の主題を形成する追加の特徴及び、
利点を以下に説明する。開示された概念及び、特定の実施形態は本設計の同じ目的を実行
するために他の構造を修正又は設計するための基礎として容易に使用され得ることが、当
業者によって理解されるべきである。また、そのような同等の構成は、添付の特許請求の
範囲に記載される精神及び、範囲から逸脱しないことが当業者によって理解されるべきで
ある。本明細書に開示される設計の特徴であると考えられる新規な特徴はさらなる目的及
び、利点とともに、動作の構成及び、方法の両方に関して、添付の図面と関連して考慮さ
れる場合、以下の説明からより良く理解される。しかしながら、各図は、例示及び、説明
の目的のためだけに提供され、本開示の限定の定義として意図されないことが明確に理解
されるべきである。
点をかなり広く概説した。本明細書の特許請求の範囲の主題を形成する追加の特徴及び、
利点を以下に説明する。開示された概念及び、特定の実施形態は本設計の同じ目的を実行
するために他の構造を修正又は設計するための基礎として容易に使用され得ることが、当
業者によって理解されるべきである。また、そのような同等の構成は、添付の特許請求の
範囲に記載される精神及び、範囲から逸脱しないことが当業者によって理解されるべきで
ある。本明細書に開示される設計の特徴であると考えられる新規な特徴はさらなる目的及
び、利点とともに、動作の構成及び、方法の両方に関して、添付の図面と関連して考慮さ
れる場合、以下の説明からより良く理解される。しかしながら、各図は、例示及び、説明
の目的のためだけに提供され、本開示の限定の定義として意図されないことが明確に理解
されるべきである。
【図面の簡単な説明】
【0010】
本開示をより完全に理解するために、添付の図面と併せて以下の説明を参照する。
【0011】
【発明の詳細な説明】
【0012】
本明細書で使用されるとき、「ａ」又は「ａｎ」は１つ又は複数を意味することができ
、本明細書で使用されるとき、「含む」という語と併せて使用されるとき、「ａ」又は「
ａｎ」という語は１つ又は複数を意味することができ、本明細書で使用されるとき、「別
の」は少なくとも２つ又は複数を意味することができ、特定の実施形態では、本発明の態
様が、例えば、本発明の１つ又は複数の配列から「本質的になる」又は「からなる」。本
発明のいくつかの実施形態は、本発明の１つ以上の要素、方法ステップ、及び、／又は方
法から構成されてもよく、又は本質的にそれらから構成されてもよい。本明細書中に記載
されるいずれの方法又は組成物も、本明細書中に記載される任意の他の方法又は組成物に
関して使用され得ることが意図される。
、本明細書で使用されるとき、「含む」という語と併せて使用されるとき、「ａ」又は「
ａｎ」という語は１つ又は複数を意味することができ、本明細書で使用されるとき、「別
の」は少なくとも２つ又は複数を意味することができ、特定の実施形態では、本発明の態
様が、例えば、本発明の１つ又は複数の配列から「本質的になる」又は「からなる」。本
発明のいくつかの実施形態は、本発明の１つ以上の要素、方法ステップ、及び、／又は方
法から構成されてもよく、又は本質的にそれらから構成されてもよい。本明細書中に記載
されるいずれの方法又は組成物も、本明細書中に記載される任意の他の方法又は組成物に
関して使用され得ることが意図される。
【0013】
長年の特許法条約に従い、「ａ」および「ａｎ」という語は特許請求の範囲を含む、本
明細書中で使用される場合、「１つまたは複数の」ことを意味し、開示の一部の実施形態
は、開示の１つまたは複数の要素、方法ステップ、および／または方法から成るか、また
は本質的に成ることができる。本明細書に記載される任意の方法または組成物は、開示さ
れる本明細書に記載される任意の他の方法または組成物に関して実施され得、それでもな
お、開示の精神および範囲から逸脱することなく、類似のまたは類似の結果を得ることが
企図される。特許請求の範囲における「または」という用語の使用は代替のみを指すこと
が明示的に示されない限り、「および／または」を意味するために使用されるか、または
代替は相互に排他的であるが、開示は代替および「および／または」のみを指す定義をサ
ポートする。
明細書中で使用される場合、「１つまたは複数の」ことを意味し、開示の一部の実施形態
は、開示の１つまたは複数の要素、方法ステップ、および／または方法から成るか、また
は本質的に成ることができる。本明細書に記載される任意の方法または組成物は、開示さ
れる本明細書に記載される任意の他の方法または組成物に関して実施され得、それでもな
お、開示の精神および範囲から逸脱することなく、類似のまたは類似の結果を得ることが
企図される。特許請求の範囲における「または」という用語の使用は代替のみを指すこと
が明示的に示されない限り、「および／または」を意味するために使用されるか、または
代替は相互に排他的であるが、開示は代替および「および／または」のみを指す定義をサ
ポートする。
【0014】
本明細書全体にわたって、文脈がそわないことを必要とする場合を除いて、単語は「含
む」、「含む」、「構成する」とは規定されたステップ又は要素群の包含を意味するが、
他のステップ又は要素又は要素群の排除を意味しないと理解されるのであろう。ステップ
又は要素又は要素群の除外を意味するわけではない。「構成する」とは以下の「から成る
」ことを意味する。従って、「から成る」とは列挙された要素が必要又は必須であること
を示し、他の要素が存在する可能性があることを示す。「から成る」とは表現後に列挙さ
れた任意の要素を含み、他の要素が存在する可能性があることを意味する。「本質的に構
成する」とは列挙された要素の活性又は作用に影響を及ぼすか否かに応じて、列挙された
要素が必要又は必須であるが、他の要素が任意であり。
む」、「含む」、「構成する」とは規定されたステップ又は要素群の包含を意味するが、
他のステップ又は要素又は要素群の排除を意味しないと理解されるのであろう。ステップ
又は要素又は要素群の除外を意味するわけではない。「構成する」とは以下の「から成る
」ことを意味する。従って、「から成る」とは列挙された要素が必要又は必須であること
を示し、他の要素が存在する可能性があることを示す。「から成る」とは表現後に列挙さ
れた任意の要素を含み、他の要素が存在する可能性があることを意味する。「本質的に構
成する」とは列挙された要素の活性又は作用に影響を及ぼすか否かに応じて、列挙された
要素が必要又は必須であるが、他の要素が任意であり。
【0015】
本明細書全体を通して、「一実施形態」、「実施形態」、「特定の実施形態」、「関連
する実施形態」、「特定の実施形態」、「追加の実施形態」、又は「さらなる実施形態」
、又はそれらの組み合わせへの言及は、実施形態に関連して記載された特定の機能、構成
、又は特徴が本発明の少なくとも１つの実施形態に含まれることを手段する。したがって
、本明細書全体の様々な箇所における前述の語句の出現は、必ずしもすべてが同じ実施形
態を参照しているわけではない。さらに、特別な特徴、構造又は特質は１以上の実施形態
において任意の適当な方法で組み合わせられ得る。
する実施形態」、「特定の実施形態」、「追加の実施形態」、又は「さらなる実施形態」
、又はそれらの組み合わせへの言及は、実施形態に関連して記載された特定の機能、構成
、又は特徴が本発明の少なくとも１つの実施形態に含まれることを手段する。したがって
、本明細書全体の様々な箇所における前述の語句の出現は、必ずしもすべてが同じ実施形
態を参照しているわけではない。さらに、特別な特徴、構造又は特質は１以上の実施形態
において任意の適当な方法で組み合わせられ得る。
【0016】
本明細書で使用されるように、「又は」及び、／又は「及び、」又は「及び、／又は」
という用語は、複数の構成要素を互いに組み合わせ又は排他的に説明するために使用され
、例えば、「ｘ、ｙ、及び、／又はｚ」は「ｘ」単独、「ｙ」単独、「ｚ」単独、「ｘ、
ｙ、及び、ｚ」、「（ｘ及び、ｙ）又はｚ」、「（ｘ又は（ｙ及び、ｚ）」又は「ｘ又は
ｙ又はｚ」を意味することができ、具体的には、ｘ、ｙ、又はｚが実施形態から具体的に
除外されてもよいことが具体的に企図されている。
という用語は、複数の構成要素を互いに組み合わせ又は排他的に説明するために使用され
、例えば、「ｘ、ｙ、及び、／又はｚ」は「ｘ」単独、「ｙ」単独、「ｚ」単独、「ｘ、
ｙ、及び、ｚ」、「（ｘ及び、ｙ）又はｚ」、「（ｘ又は（ｙ及び、ｚ）」又は「ｘ又は
ｙ又はｚ」を意味することができ、具体的には、ｘ、ｙ、又はｚが実施形態から具体的に
除外されてもよいことが具体的に企図されている。
【0017】
本出願を通して、用語「約」は、値が値を決定するために使用されるデバイス又は方法
についての誤差の標準偏差を含むことを示すために、細胞及び、分子生物学の分野におけ
るその単純かつ通常の意味に従って使用される。
についての誤差の標準偏差を含むことを示すために、細胞及び、分子生物学の分野におけ
るその単純かつ通常の意味に従って使用される。
【0018】
「対象」及び、「被験者」及び、「個体」は、霊長類、哺乳類、及び、脊椎動物等のヒ
ト又は非ヒトのいずれかを意味する。特定の実施形態では、対象がヒト、イヌ、ネコ、ウ
マ、ウシ等である。
ト又は非ヒトのいずれかを意味する。特定の実施形態では、対象がヒト、イヌ、ネコ、ウ
マ、ウシ等である。
【0019】
疾患又は状態の「処置する」又は処置は、疾患の少なくとも１つの徴候又は症状を軽減
するために、１つ以上の薬物又は治療（細胞を含む）を患者に投与することを含み得るプ
ロトコールを実行することをいう。治療の望ましくなる効果としては、疾患の進行速度を
低下させること、病態を改善又は緩和すること、少なくとも１つの症状の発現を遅らせる
こと、及び、寛解又は予後を改善することがあげられる。軽減は、疾患又は症状が現れる
前、並びにその出現後、又はその両方に生じ得る。したがって、「治療する」又は「治療
する」は疾患又は望ましくない状態の「予防する」又は「予防する」ことを含むことがで
き、さらに、「治療する」又は「治療する」は１つ又は複数の徴候又は症状の完全な緩和
を必要とせず、治癒を必要とせず、具体的には患者にわずかな影響しか及ぼさないプロト
コールを含む。
するために、１つ以上の薬物又は治療（細胞を含む）を患者に投与することを含み得るプ
ロトコールを実行することをいう。治療の望ましくなる効果としては、疾患の進行速度を
低下させること、病態を改善又は緩和すること、少なくとも１つの症状の発現を遅らせる
こと、及び、寛解又は予後を改善することがあげられる。軽減は、疾患又は症状が現れる
前、並びにその出現後、又はその両方に生じ得る。したがって、「治療する」又は「治療
する」は疾患又は望ましくない状態の「予防する」又は「予防する」ことを含むことがで
き、さらに、「治療する」又は「治療する」は１つ又は複数の徴候又は症状の完全な緩和
を必要とせず、治癒を必要とせず、具体的には患者にわずかな影響しか及ぼさないプロト
コールを含む。
【0020】
本明細書で使用される場合、「予防する」、及び、「予防する」、「予防する」等の類
似語は、疾患又は状態の発生又は再発の可能性を予防、阻害、又は低減するためのアプロ
ーチを示し、例えば、癌、疾患又は状態の発生又は再発を遅延させる、又は疾患又は状態
の症状の発生又は再発を遅延させる、又は本明細書で使用される場合、「予防する」及び
、類似語は、疾患又は状態の発症又は再発前の疾患又は状態の強度、効果、症状及び、／
又は負荷を低減することも含む。
似語は、疾患又は状態の発生又は再発の可能性を予防、阻害、又は低減するためのアプロ
ーチを示し、例えば、癌、疾患又は状態の発生又は再発を遅延させる、又は疾患又は状態
の症状の発生又は再発を遅延させる、又は本明細書で使用される場合、「予防する」及び
、類似語は、疾患又は状態の発症又は再発前の疾患又は状態の強度、効果、症状及び、／
又は負荷を低減することも含む。
【0021】
本明細書中で使用される用語「薬学的に」又は「薬理学的に許容される」は、動物又は
ヒトに投与された場合に、有害な、アレルギー性の、又は他の不都合な反応を生じない分
子実体及び、組成物をいう。
ヒトに投与された場合に、有害な、アレルギー性の、又は他の不都合な反応を生じない分
子実体及び、組成物をいう。
【0022】
本明細書中で使用される用語「薬学的に受容可能なキャリア」は、水、エタノール、ポ
リオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、及び、液体ポリエチレングリ
コール等）、それらの適切な混合物、並びに植物油、コーティング、等張性及び、吸収遅
延剤、リポソーム、商業的に入手可能な洗浄剤等を含むが、これらに限定されない、任意
の及び、全ての溶媒、又は分散媒体を含む。補助的な生物活性成分もまた、このようなキ
ャリアに組み込まれ得る。
Ｉ．
リオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、及び、液体ポリエチレングリ
コール等）、それらの適切な混合物、並びに植物油、コーティング、等張性及び、吸収遅
延剤、リポソーム、商業的に入手可能な洗浄剤等を含むが、これらに限定されない、任意
の及び、全ての溶媒、又は分散媒体を含む。補助的な生物活性成分もまた、このようなキ
ャリアに組み込まれ得る。
Ｉ．
【0023】
定義例
【0024】
細胞培養は一般に、生体から採取され、制御された条件下（「培養」又は「培養」）で
増殖される細胞を指す。初代培養細胞とは、最初の継代培養の前に生物から直接採取した
細胞、組織、又は器官の培養である。細胞は、細胞の増殖及び、／又は分裂を容易にする
条件下で増殖培地中に置かれる場合、培養物中で増殖され、細胞のより大きな集団を生じ
る。細胞を培養で増殖させる場合、細胞増殖速度は、細胞が倍加時間と呼ばれる数を倍加
するのに必要な時間の量によって測定されることがある。
増殖される細胞を指す。初代培養細胞とは、最初の継代培養の前に生物から直接採取した
細胞、組織、又は器官の培養である。細胞は、細胞の増殖及び、／又は分裂を容易にする
条件下で増殖培地中に置かれる場合、培養物中で増殖され、細胞のより大きな集団を生じ
る。細胞を培養で増殖させる場合、細胞増殖速度は、細胞が倍加時間と呼ばれる数を倍加
するのに必要な時間の量によって測定されることがある。
【0025】
細胞株は、初代細胞培養物の１つ以上の継代培養によって形成される細胞の集団である
。継代培養の各ラウンドは継代と呼ばれる。細胞が継代培養される場合、それらは継代さ
れたものと呼ばれる。特定の細胞集団、又は細胞株は時に、それが継代された回数に言及
されるか、又は特徴付けられる。例えば、１０回継代された培養細胞集団は、Ｐ１０培養
物と呼ぶことができる。初代培養、すなわち組織から細胞を単離した後の最初の培養をＰ
０とする。最初の継代培養に続いて、細胞を二次培養（Ｐ１又は継代１）として記載する
。２回目の継代培養後、細胞は三次培養（Ｐ２又は継代２）になり、以下同様である。継
代の期間中に多くの集団倍加があり得ること；したがって、培養物の集団倍加の数は継代
数よりも多いことが、当業者によって理解される。継代間の期間中の細胞の増殖（すなわ
ち、集団倍加の数）は、播種密度、基質、培地、増殖条件、及び、継代間の時間を含むが
これらに限定されない多くの因子に依存する。
。継代培養の各ラウンドは継代と呼ばれる。細胞が継代培養される場合、それらは継代さ
れたものと呼ばれる。特定の細胞集団、又は細胞株は時に、それが継代された回数に言及
されるか、又は特徴付けられる。例えば、１０回継代された培養細胞集団は、Ｐ１０培養
物と呼ぶことができる。初代培養、すなわち組織から細胞を単離した後の最初の培養をＰ
０とする。最初の継代培養に続いて、細胞を二次培養（Ｐ１又は継代１）として記載する
。２回目の継代培養後、細胞は三次培養（Ｐ２又は継代２）になり、以下同様である。継
代の期間中に多くの集団倍加があり得ること；したがって、培養物の集団倍加の数は継代
数よりも多いことが、当業者によって理解される。継代間の期間中の細胞の増殖（すなわ
ち、集団倍加の数）は、播種密度、基質、培地、増殖条件、及び、継代間の時間を含むが
これらに限定されない多くの因子に依存する。
【0026】
条件培地は、特定の細胞又は細胞集団が培養され、次いで除去された培地である。細胞
を培地で培養すると、他の細胞に栄養支持を提供できる細胞因子を分泌することがある。
このような栄養因子にはホルモン、サイトカイン、細胞外マトリックス（ＥＣＭ）、タン
パク質、小胞、抗体、及び、顆粒が含まれるが、これらに限定されない。細胞因子を含有
する培地は、ならし培地である。いくつかの実施形態において、本発明は、寛容形成を促
進するための、ならし培地、又は濃縮ならし培地、又はＥＰＣもしくは線維芽細胞のなら
し培地から単離されたエキソソームの使用を教示する。
を培地で培養すると、他の細胞に栄養支持を提供できる細胞因子を分泌することがある。
このような栄養因子にはホルモン、サイトカイン、細胞外マトリックス（ＥＣＭ）、タン
パク質、小胞、抗体、及び、顆粒が含まれるが、これらに限定されない。細胞因子を含有
する培地は、ならし培地である。いくつかの実施形態において、本発明は、寛容形成を促
進するための、ならし培地、又は濃縮ならし培地、又はＥＰＣもしくは線維芽細胞のなら
し培地から単離されたエキソソームの使用を教示する。
【0027】
本明細書中で使用される場合、用語「増殖培地」は一般に、臍由来細胞の培養に十分な
培地をいう。特に、本明細書中の本発明の細胞の培養のための１つの特定の培地は、ダル
ベッコの改変必須培地（本明細書中でＤＭＥＭとも略される）を含む。特に好ましいのは
、ＤＭＥＭ－低グルコース（本明細書中ではＤＭＥＭ－ＬＧも）（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ
、Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡ）である。ＤＭＥＭ低グルコースは好ましくは１５％（ｖ／ｖ
）ウシ胎仔血清（例えば、規定ウシ胎仔血清、Ｈｙｃｌｏｎｅ、Ｌｏｇａｎ Ｕｔａｈ）
、抗生物質／抗真菌薬（好ましくは、ペニシリン（１００単位／ミリリットル）、ストレ
プトマイシン（１００ミリグラム／ミリリットル）、及び、アンホテリシンＢ（０．２５
マイクログラム／ミリリットル）、（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡ）
、並びに０．００１％（ｖ／ｖ）２－メルカプトエタノール（Ｓｉｇｍａ、Ｓｔ．Ｌｏｕ
ｉｓ Ｍｏ）で補充される。いくつかの場合において、異なる増殖培地が使用されるか、
又は異なる補充物が提供され、そしてこれらは、通常、増殖培地への補充物として本文中
に示される。
培地をいう。特に、本明細書中の本発明の細胞の培養のための１つの特定の培地は、ダル
ベッコの改変必須培地（本明細書中でＤＭＥＭとも略される）を含む。特に好ましいのは
、ＤＭＥＭ－低グルコース（本明細書中ではＤＭＥＭ－ＬＧも）（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ
、Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡ）である。ＤＭＥＭ低グルコースは好ましくは１５％（ｖ／ｖ
）ウシ胎仔血清（例えば、規定ウシ胎仔血清、Ｈｙｃｌｏｎｅ、Ｌｏｇａｎ Ｕｔａｈ）
、抗生物質／抗真菌薬（好ましくは、ペニシリン（１００単位／ミリリットル）、ストレ
プトマイシン（１００ミリグラム／ミリリットル）、及び、アンホテリシンＢ（０．２５
マイクログラム／ミリリットル）、（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡ）
、並びに０．００１％（ｖ／ｖ）２－メルカプトエタノール（Ｓｉｇｍａ、Ｓｔ．Ｌｏｕ
ｉｓ Ｍｏ）で補充される。いくつかの場合において、異なる増殖培地が使用されるか、
又は異なる補充物が提供され、そしてこれらは、通常、増殖培地への補充物として本文中
に示される。
【0028】
また、本発明に関連して、本明細書で使用される「標準増殖条件」という語は、５％の
ＣＯ２を含む標準大気中で３７℃で細胞を培養することを指す。相対湿度を約１００％に
維持する。前述の条件は培養に有益であるが、このような条件は細胞を培養するために当
業者が使用可能な選択肢、例えば、体温、ＣＯ２、相対湿度、酸素、増殖培地等を変化さ
せることによって変化させることができることを理解されたい。
ＣＯ２を含む標準大気中で３７℃で細胞を培養することを指す。相対湿度を約１００％に
維持する。前述の条件は培養に有益であるが、このような条件は細胞を培養するために当
業者が使用可能な選択肢、例えば、体温、ＣＯ２、相対湿度、酸素、増殖培地等を変化さ
せることによって変化させることができることを理解されたい。
【0029】
いくつかの実施形態における「線維芽細胞」は（１）プラスチックに接着し、（２）Ｃ
Ｄ７３、ＣＤ９０、及び、ＣＤ１０５抗原を発現し、一方、ＣＤ１４、ＣＤ３４、ＣＤ４
５、及び、ＨＬＡ－ＤＲ陰性であり、（３）以下の３つの系統のうち少なくとも１つに分
化する能力を有する細胞を指す：骨形成性、軟骨形成性及び、脂肪形成性の系統線維芽細
胞様の特性を有する他の細胞は「線維芽細胞」の定義の中に含まれ、細胞が以下の（少な
くともいくつかの場合において）少なくとも１つを有する状態：ａ）再生活性；ｂ）成長
因子の産生；ｃ）直接的に、又は内因性宿主修復機構の誘発を介して、治癒反応を誘導す
る能力を有する。線維芽細胞は例えば、骨髄、脂肪組織、羊水、子宮内膜、栄養膜由来組
織、臍帯血、Ｗｈａｒｔｏｎゼリー、胎盤、羊膜組織を含むが、これらに限定されない任
意の組織に由来することができる。「線維芽細胞」のいくつかの定義では細胞が組織から
の最初の単離時にＣＤ３４陽性であるが、表現型及び、機能的に記載された細胞と類似し
ている細胞を含む。本明細書で使用される場合、「線維芽細胞」は次のリストから選択さ
れる細胞表面マーカーを用いて組織から単離される細胞を含み得る：ＮＧＦ－Ｒ、ＰＤＧ
Ｆ－Ｒ、ＥＧＦ－Ｒ、ＩＧＦ－Ｒ、ＣＤ２９、ＣＤ４９ａ、ＣＤ５６、ＣＤ６３、ＣＤ７
３、ＣＤ１０５、ＣＤ１０６、ＣＤ１４０ｂ、ＣＤ１４６、ＣＤ２７１、ＭＳＣＡ－１、
ＳＳＥＡ４、ＳＴＲＯ－１及び、／又はＳＴＲＯ－３、又はそれらの任意の組み合わせ。
ＩＩ．
Ｄ７３、ＣＤ９０、及び、ＣＤ１０５抗原を発現し、一方、ＣＤ１４、ＣＤ３４、ＣＤ４
５、及び、ＨＬＡ－ＤＲ陰性であり、（３）以下の３つの系統のうち少なくとも１つに分
化する能力を有する細胞を指す：骨形成性、軟骨形成性及び、脂肪形成性の系統線維芽細
胞様の特性を有する他の細胞は「線維芽細胞」の定義の中に含まれ、細胞が以下の（少な
くともいくつかの場合において）少なくとも１つを有する状態：ａ）再生活性；ｂ）成長
因子の産生；ｃ）直接的に、又は内因性宿主修復機構の誘発を介して、治癒反応を誘導す
る能力を有する。線維芽細胞は例えば、骨髄、脂肪組織、羊水、子宮内膜、栄養膜由来組
織、臍帯血、Ｗｈａｒｔｏｎゼリー、胎盤、羊膜組織を含むが、これらに限定されない任
意の組織に由来することができる。「線維芽細胞」のいくつかの定義では細胞が組織から
の最初の単離時にＣＤ３４陽性であるが、表現型及び、機能的に記載された細胞と類似し
ている細胞を含む。本明細書で使用される場合、「線維芽細胞」は次のリストから選択さ
れる細胞表面マーカーを用いて組織から単離される細胞を含み得る：ＮＧＦ－Ｒ、ＰＤＧ
Ｆ－Ｒ、ＥＧＦ－Ｒ、ＩＧＦ－Ｒ、ＣＤ２９、ＣＤ４９ａ、ＣＤ５６、ＣＤ６３、ＣＤ７
３、ＣＤ１０５、ＣＤ１０６、ＣＤ１４０ｂ、ＣＤ１４６、ＣＤ２７１、ＭＳＣＡ－１、
ＳＳＥＡ４、ＳＴＲＯ－１及び、／又はＳＴＲＯ－３、又はそれらの任意の組み合わせ。
ＩＩ．
【0030】
一般的な実施形態
【0031】
本開示の実施態様は、ヒト、イヌ、ネコ、ウマ等を含む哺乳動物個体に対する細胞移植
（同種細胞移植を含む）の改善を含む。改善には、少なくとも、個体に投与された移植細
胞集団に対してインビボでより大きな免疫寛容を有する能力が含まれる。特定の実施形態
において、同種又は自己内皮前駆細胞（ＥＰＣ）及び、／又は同種又は自己線維芽細胞は
、改善された同種膵島移植を可能にする。特定の実施形態では、胎盤由来ＥＰＣ等の同種
内皮前駆細胞（ＥＰＣ）を、即時拒絶なしに（例えば、門脈内に）投与することができ、
ＥＰＣ細胞は単独で、又は線維芽細胞と一緒に肝微小環境を調節して、同種膵島移植の増
強を可能にする。
（同種細胞移植を含む）の改善を含む。改善には、少なくとも、個体に投与された移植細
胞集団に対してインビボでより大きな免疫寛容を有する能力が含まれる。特定の実施形態
において、同種又は自己内皮前駆細胞（ＥＰＣ）及び、／又は同種又は自己線維芽細胞は
、改善された同種膵島移植を可能にする。特定の実施形態では、胎盤由来ＥＰＣ等の同種
内皮前駆細胞（ＥＰＣ）を、即時拒絶なしに（例えば、門脈内に）投与することができ、
ＥＰＣ細胞は単独で、又は線維芽細胞と一緒に肝微小環境を調節して、同種膵島移植の増
強を可能にする。
【0032】
ＥＰＣはこれまで膵島の生着を支持するために自己由来の方法で使用されてきたが［５
］、これらは動物実験のみであり、実際にはＥＰＣは自己由来の方法、特に基礎病態の結
果としてＥＰＣが損なわれている糖尿病患者では使用が困難である［６、７］。したがっ
て、本発明は、膵島移植の促進剤としてＥＰＣ（胎盤由来を含む）及び、線維芽細胞を使
用する手段を提供する。１つの実施形態において、ＥＰＣ細胞及び、／又は膵島及び、／
又は膵島細胞は局所的又は全身的に（注射によって、及び、場合によっては門脈内を含む
）投与されて、門脈内寛容発生の天然に生じる機構を使用し、これは、以前に、門脈内に
免疫原性起源の種々の細胞を投与することによって実証されている［８］。本開示の１つ
の実施形態において、ＥＰＣ及び、線維芽細胞は両方とも同種異系であり、そして同じド
ナー起源である。特定の実施形態において、線維芽細胞は寛容原性事象を刺激するために
最初に（例えば、門脈内に）投与され、続いてＥＰＣの投与されるが、線維芽細胞はまた
、ＥＰＣの投与と共に、及び、／又はＥＰＣの投与の後に送達されてもよく、又はその代
わりに送達されてもよい。
ＩＩＩ．
］、これらは動物実験のみであり、実際にはＥＰＣは自己由来の方法、特に基礎病態の結
果としてＥＰＣが損なわれている糖尿病患者では使用が困難である［６、７］。したがっ
て、本発明は、膵島移植の促進剤としてＥＰＣ（胎盤由来を含む）及び、線維芽細胞を使
用する手段を提供する。１つの実施形態において、ＥＰＣ細胞及び、／又は膵島及び、／
又は膵島細胞は局所的又は全身的に（注射によって、及び、場合によっては門脈内を含む
）投与されて、門脈内寛容発生の天然に生じる機構を使用し、これは、以前に、門脈内に
免疫原性起源の種々の細胞を投与することによって実証されている［８］。本開示の１つ
の実施形態において、ＥＰＣ及び、線維芽細胞は両方とも同種異系であり、そして同じド
ナー起源である。特定の実施形態において、線維芽細胞は寛容原性事象を刺激するために
最初に（例えば、門脈内に）投与され、続いてＥＰＣの投与されるが、線維芽細胞はまた
、ＥＰＣの投与と共に、及び、／又はＥＰＣの投与の後に送達されてもよく、又はその代
わりに送達されてもよい。
ＩＩＩ．
【0033】
使用方法
【0034】
本開示の実施形態は、それを必要とする個体における島の生着を増強するために線維芽
細胞を使用する方法を含む。膵島移植を増強するための線維芽細胞の使用は任意の手段に
よってなし得るが、特定の実施形態において、線維芽細胞は膵島移植に対する有害な免疫
系反応を抑制する。免疫反応の抑制又は減少は、特定の実施形態において、肝臓において
生じる。特定の実施形態において、ＥＰＣは肝臓の一部をプライミングして、膵島移植片
の生存率及び、機能を増強するために、線維芽細胞と組み合わせて使用され；このような
効果は、ＥＰＣの血管新生効果及び、／又は寛容原性抗原提示細胞として作用するそれら
の能力のために生じ得る。本明細書中で使用される場合、「膵島移植片」は、ランゲルハ
ンス細胞の任意の種類の膵島の任意の集合体をいう。
細胞を使用する方法を含む。膵島移植を増強するための線維芽細胞の使用は任意の手段に
よってなし得るが、特定の実施形態において、線維芽細胞は膵島移植に対する有害な免疫
系反応を抑制する。免疫反応の抑制又は減少は、特定の実施形態において、肝臓において
生じる。特定の実施形態において、ＥＰＣは肝臓の一部をプライミングして、膵島移植片
の生存率及び、機能を増強するために、線維芽細胞と組み合わせて使用され；このような
効果は、ＥＰＣの血管新生効果及び、／又は寛容原性抗原提示細胞として作用するそれら
の能力のために生じ得る。本明細書中で使用される場合、「膵島移植片」は、ランゲルハ
ンス細胞の任意の種類の膵島の任意の集合体をいう。
【0035】
現在の本開示の範囲内では、線維芽細胞は、その使用が線維芽細胞に類似したもののた
めであり得るような免疫調節の観点から、間葉系幹細胞に類似した特性を有するという考
察がある。したがって、本開示の方法を実施するものを提供するためのＭＳＣの既知の特
性は、本明細書において、ＭＳＣから線維芽細胞に外挿される。ＭＳＣの免疫抑制作用の
いくつかは、局所炎症の存在によって誘導可能であると思われる。例えば、最近の研究で
は、ＭＳＣ上のＴＬＲ活性化がＤＣ成熟の遮断を介してＭＳＣのＴ細胞活性化を抑制する
能力を増大させることが示された［１７］。他の研究では、ＩＬ－１ベータ等の炎症性メ
ディエーターによるＭＳＣの治療が実際にはＤＣ成熟を阻止するＩＬ－１０等のサイトカ
インの産生を刺激することが示されている。ＩＬ－１処理ＭＳＣはＤＳＳ誘発大腸炎等の
炎症性疾患を抑制する優れインビボ能力を有する［１８］。また、炎症性サイトカインの
前投与によるＭＳＣの抗炎症活性の同様の増強がＩＦＮ－γによる治療によっても報告さ
れている［１９～２１］。細胞レベルでは、ＭＳＣを単球と共培養すると、一部はＩＬ－
１を産生した単球を介してＭＳＣの免疫抑制活性が亢進することが報告されている［２２
］。ＭＳＣによるＴ細胞反応性の阻害は広く記載されている。これを支持する最初の発表
の１つは、ヒのＭＳＣが同種リンパ球から増殖反応を誘発し、進行中の同種反応を阻害し
、強力なＴ細胞マイトジェンに対する増殖反応を阻害する能力について、インビトロでヒ
ヒのＭＳＣを評価した。ＭＳＣは同種リンパ球から増殖反応を誘発できないことが分かっ
た。０日目又は３日目のいずれかの混合リンパ球反応に加えたＭＳＣ、又はマイトジェン
刺激リンパ球に加えたＭＳＣは、増殖活性の５０％を超える減少をもたらした。この効果
は、ＭＳＣの用量を増加させることによって最大化され得、そして外因性ＩＬ－２の添加
によって減少され得る。ＭＳＣのインビボ投与は、対照動物と比較した場合、皮膚移植片
の生存期間の延長につながった［２３、２４］。Ｔ細胞増殖の抑制は、共刺激やＭＳＣを
ＩＦＮ－γで前処理しても回復できなかった［２５］。このことは前述した先行研究でＩ
Ｌ－２がＭＳＣを介した抑制を克服できることが示されたことを考えると興味深い。ヒト
化マウスを用いたインビボ試験では、ヒトＭＳＣはインビボでヒトＴ細胞応答を抑制する
ことが可能であり、同種異系応答と抗原特異的応答の両方が可能であることが実証された
［２６］。Ｔ細胞活性の抑制は増殖に限らず、ＣＤ８ Ｔ細胞の細胞傷害活性の抑制も含
まれることが実証された［２７、２８］。ＩＬ－２受容体α（ＣＤ２５）の阻害［２９］
、分裂停止の誘導［３０、３１］、Ｔ細胞アネルギーの直接的な誘導［３２］又は未成熟
ＤＣを介した誘導［３３］、ＩＬ－２シグナル伝達の遮断及び、ＰＧＥ２産生の誘導［３
６－４１］、ＴＧＦ－β［４２］の誘導、セリンプロテアーゼ阻害剤６［４４］の発現、
一酸化窒素放出の刺激［４５－４７］、ＣＤ３９及び、ＣＤ７３等のアデノシン生成外酵
素の発現［５２、５３］、ガレクチン発現［５４、５７］、ＰＤ１経路の活性化［５４、
５８－６０］、Ｆａｓリガンド発現等、いくつかの機序が報告されている［６１］ＣＤ２
００発現［６３］、Ｔｈ２偏位［６４－６６］、Ｔｈ１７の阻害分化［６７－７１］、Ｔ
ＳＧ－６発現［７２］、ＮＯＴＣＨ－１発現［７３］、Ｔｒｅｇ細胞生成刺激［７４－８
１］。
めであり得るような免疫調節の観点から、間葉系幹細胞に類似した特性を有するという考
察がある。したがって、本開示の方法を実施するものを提供するためのＭＳＣの既知の特
性は、本明細書において、ＭＳＣから線維芽細胞に外挿される。ＭＳＣの免疫抑制作用の
いくつかは、局所炎症の存在によって誘導可能であると思われる。例えば、最近の研究で
は、ＭＳＣ上のＴＬＲ活性化がＤＣ成熟の遮断を介してＭＳＣのＴ細胞活性化を抑制する
能力を増大させることが示された［１７］。他の研究では、ＩＬ－１ベータ等の炎症性メ
ディエーターによるＭＳＣの治療が実際にはＤＣ成熟を阻止するＩＬ－１０等のサイトカ
インの産生を刺激することが示されている。ＩＬ－１処理ＭＳＣはＤＳＳ誘発大腸炎等の
炎症性疾患を抑制する優れインビボ能力を有する［１８］。また、炎症性サイトカインの
前投与によるＭＳＣの抗炎症活性の同様の増強がＩＦＮ－γによる治療によっても報告さ
れている［１９～２１］。細胞レベルでは、ＭＳＣを単球と共培養すると、一部はＩＬ－
１を産生した単球を介してＭＳＣの免疫抑制活性が亢進することが報告されている［２２
］。ＭＳＣによるＴ細胞反応性の阻害は広く記載されている。これを支持する最初の発表
の１つは、ヒのＭＳＣが同種リンパ球から増殖反応を誘発し、進行中の同種反応を阻害し
、強力なＴ細胞マイトジェンに対する増殖反応を阻害する能力について、インビトロでヒ
ヒのＭＳＣを評価した。ＭＳＣは同種リンパ球から増殖反応を誘発できないことが分かっ
た。０日目又は３日目のいずれかの混合リンパ球反応に加えたＭＳＣ、又はマイトジェン
刺激リンパ球に加えたＭＳＣは、増殖活性の５０％を超える減少をもたらした。この効果
は、ＭＳＣの用量を増加させることによって最大化され得、そして外因性ＩＬ－２の添加
によって減少され得る。ＭＳＣのインビボ投与は、対照動物と比較した場合、皮膚移植片
の生存期間の延長につながった［２３、２４］。Ｔ細胞増殖の抑制は、共刺激やＭＳＣを
ＩＦＮ－γで前処理しても回復できなかった［２５］。このことは前述した先行研究でＩ
Ｌ－２がＭＳＣを介した抑制を克服できることが示されたことを考えると興味深い。ヒト
化マウスを用いたインビボ試験では、ヒトＭＳＣはインビボでヒトＴ細胞応答を抑制する
ことが可能であり、同種異系応答と抗原特異的応答の両方が可能であることが実証された
［２６］。Ｔ細胞活性の抑制は増殖に限らず、ＣＤ８ Ｔ細胞の細胞傷害活性の抑制も含
まれることが実証された［２７、２８］。ＩＬ－２受容体α（ＣＤ２５）の阻害［２９］
、分裂停止の誘導［３０、３１］、Ｔ細胞アネルギーの直接的な誘導［３２］又は未成熟
ＤＣを介した誘導［３３］、ＩＬ－２シグナル伝達の遮断及び、ＰＧＥ２産生の誘導［３
６－４１］、ＴＧＦ－β［４２］の誘導、セリンプロテアーゼ阻害剤６［４４］の発現、
一酸化窒素放出の刺激［４５－４７］、ＣＤ３９及び、ＣＤ７３等のアデノシン生成外酵
素の発現［５２、５３］、ガレクチン発現［５４、５７］、ＰＤ１経路の活性化［５４、
５８－６０］、Ｆａｓリガンド発現等、いくつかの機序が報告されている［６１］ＣＤ２
００発現［６３］、Ｔｈ２偏位［６４－６６］、Ｔｈ１７の阻害分化［６７－７１］、Ｔ
ＳＧ－６発現［７２］、ＮＯＴＣＨ－１発現［７３］、Ｔｒｅｇ細胞生成刺激［７４－８
１］。
【0036】
したがって、特定の実施形態では、複数の線維芽細胞及び、複数のＥＰＣが膵島移植の
対象である個体に使用される。線維芽細胞及び、／又はＥＰＣを受領する個体は糖尿病性
、前糖尿病性、又は糖尿病のリスク（例えば、家族歴又は個人歴）を有し得る。線維芽細
胞とＥＰＣとの組み合わせの使用は、移植片が個体において成功する改善された能力を提
供する。線維芽細胞及び、ＥＰＣは任意の経路及び、任意の場所に投与され得るが、特定
の場合には線維芽細胞及び、ＥＰＣの両方が膵島生着の位置又は膵島生着の最終的な位置
を含む、同じ位置に投与される。いくつかの場合において、投与の位置は、本質的に前寛
容原性である。
対象である個体に使用される。線維芽細胞及び、／又はＥＰＣを受領する個体は糖尿病性
、前糖尿病性、又は糖尿病のリスク（例えば、家族歴又は個人歴）を有し得る。線維芽細
胞とＥＰＣとの組み合わせの使用は、移植片が個体において成功する改善された能力を提
供する。線維芽細胞及び、ＥＰＣは任意の経路及び、任意の場所に投与され得るが、特定
の場合には線維芽細胞及び、ＥＰＣの両方が膵島生着の位置又は膵島生着の最終的な位置
を含む、同じ位置に投与される。いくつかの場合において、投与の位置は、本質的に前寛
容原性である。
【0037】
すでに寛容性を促進している環境（例えば、門脈内）で投与された線維芽細胞の組合せ
は寛容性を増強するが、寛容性の増大の開示の実践のためには直接的な血管新生支持を提
供するだけでなく、寛容性抗原提示細胞としても作用する同種ＥＰＣの投与によって支持
され得る。ＥＰＣは、代替の実施形態において、線維芽細胞の代替であり得る。本開示の
方法の実施のために、以下は本開示の方法の実施者が当該分野で公知の手段を使用し得る
ように、線維芽細胞が免疫系を調節する種々の方法である。例えば、線維芽細胞は樹状細
胞活性を調節する。樹状細胞（ＤＣ）は免疫応答の主要な標識と考えられており、Ｔ制御
細胞の刺激と免疫の抑制に対して、生産的な免疫が保証されるかどうかを決定する上で重
要な役割を果たしている［９、１０］。ＤＣにはさまざまなサブタイプが存在し、さまざ
まな特殊な機能をもつが、共通するテーマの１つは未熟な骨髄型ＤＣが末梢で未熟な状態
に存在することであると思われる。未熟な骨髄型ＤＣは抗原を飲み込み、リンパ節のＴ細
胞に寛容原性の様式で存在する。これは、自己許容性が維持されるメカニズムの１つであ
る。具体的には、少数の自己反応性Ｔ細胞が胸腺選択過程を逃れるが、これらのＴ細胞は
、未熟な樹状細胞が自己反応性Ｔ細胞に自己抗原を提示した結果、生成されたＴ制御細胞
によって、活性化されるか、または活性が抑制される。一方、Ｔｏｌｌ様受容体アゴニス
トのような「危険」なシグナルが存在すると、未熟な樹状細胞は、コスティミュレーター
分子の高発現を特徴とする成熟した表現型をとり、その後、Ｔ細胞の活性化を誘導する［
１１－１３］。Ｔ１Ｄに関しては、糖尿病の原因となる自己抗原を未熟なＤＣにターゲテ
ィングすることで、病気の予防につながることが実証されています［１４］。１０人のＴ
１Ｄ患者に未熟なＤＣを投与したところ、Ｃ－ペプチドレベルが上昇し、免疫調整作用が
あることが示唆された［１５］。
は寛容性を増強するが、寛容性の増大の開示の実践のためには直接的な血管新生支持を提
供するだけでなく、寛容性抗原提示細胞としても作用する同種ＥＰＣの投与によって支持
され得る。ＥＰＣは、代替の実施形態において、線維芽細胞の代替であり得る。本開示の
方法の実施のために、以下は本開示の方法の実施者が当該分野で公知の手段を使用し得る
ように、線維芽細胞が免疫系を調節する種々の方法である。例えば、線維芽細胞は樹状細
胞活性を調節する。樹状細胞（ＤＣ）は免疫応答の主要な標識と考えられており、Ｔ制御
細胞の刺激と免疫の抑制に対して、生産的な免疫が保証されるかどうかを決定する上で重
要な役割を果たしている［９、１０］。ＤＣにはさまざまなサブタイプが存在し、さまざ
まな特殊な機能をもつが、共通するテーマの１つは未熟な骨髄型ＤＣが末梢で未熟な状態
に存在することであると思われる。未熟な骨髄型ＤＣは抗原を飲み込み、リンパ節のＴ細
胞に寛容原性の様式で存在する。これは、自己許容性が維持されるメカニズムの１つであ
る。具体的には、少数の自己反応性Ｔ細胞が胸腺選択過程を逃れるが、これらのＴ細胞は
、未熟な樹状細胞が自己反応性Ｔ細胞に自己抗原を提示した結果、生成されたＴ制御細胞
によって、活性化されるか、または活性が抑制される。一方、Ｔｏｌｌ様受容体アゴニス
トのような「危険」なシグナルが存在すると、未熟な樹状細胞は、コスティミュレーター
分子の高発現を特徴とする成熟した表現型をとり、その後、Ｔ細胞の活性化を誘導する［
１１－１３］。Ｔ１Ｄに関しては、糖尿病の原因となる自己抗原を未熟なＤＣにターゲテ
ィングすることで、病気の予防につながることが実証されています［１４］。１０人のＴ
１Ｄ患者に未熟なＤＣを投与したところ、Ｃ－ペプチドレベルが上昇し、免疫調整作用が
あることが示唆された［１５］。
【0038】
本開示のいくつかの実施形態において、線維芽細胞と同時移植された膵島によってグル
コース制御を増強する方法が存在する。特定の場合には、線維芽細胞を、それを必要とす
る個体に膵島細胞（同種又は自家）を投与する。線維芽細胞は、例えばＣＤ７３のような
１つ以上の特異的マーカーを有していても、有していなくてもよい。
コース制御を増強する方法が存在する。特定の場合には、線維芽細胞を、それを必要とす
る個体に膵島細胞（同種又は自家）を投与する。線維芽細胞は、例えばＣＤ７３のような
１つ以上の特異的マーカーを有していても、有していなくてもよい。
【0039】
本開示の１つの実施形態において、線維芽細胞は、ＤＣを未成熟状態に維持するために
使用される。具体的には、ＤＣとともに線維芽細胞を投与すると、寛容形成が亢進する。
免疫対寛容の制御におけるＤＣの役割を考えると、線維芽細胞によるＤＣ成熟の操作は、
線維芽細胞の免疫調節的役割を強く支持するのであろう。初期の研究では線維芽細胞はイ
ンビトロ系を用いてＤＣのＣＤ４及び、ＣＤ８細胞刺激能を阻害する可能性が示唆された
が、線維芽細胞もＴ細胞活性化を直接阻害することが実証された［１６］。
使用される。具体的には、ＤＣとともに線維芽細胞を投与すると、寛容形成が亢進する。
免疫対寛容の制御におけるＤＣの役割を考えると、線維芽細胞によるＤＣ成熟の操作は、
線維芽細胞の免疫調節的役割を強く支持するのであろう。初期の研究では線維芽細胞はイ
ンビトロ系を用いてＤＣのＣＤ４及び、ＣＤ８細胞刺激能を阻害する可能性が示唆された
が、線維芽細胞もＴ細胞活性化を直接阻害することが実証された［１６］。
【0040】
特定の実施形態では、個体における同種異系インスリン産生細胞（膵臓ドナーに由来し
得るか、又は前駆細胞の集団からのインビトロ分化に由来し得るか、及び、／又は膵島細
胞塊から構成される）の生存を増強する方法が存在し、これは同種異系ＥＰＣ及び、同種
異系線維芽細胞の有効量を個体に提供する工程を含む。本開示の１つの実施形態において
、以下のステップを含む個体における同種インスリン産生細胞の生存を増強する方法（膵
臓ドナーに由来するか、又は前駆細胞集団からのインビトロ分化に由来する可能性があり
、及び、／又は膵島細胞集団を含む）がある：ａ）同種内皮前駆細胞（ＥＰＣ）の集団を
得る；ｂ）同種線維芽細胞の集団を得る；及び、ｃ）同種ＥＰＣ及び、同種線維芽細胞を
同種インスリン産生細胞の移植前、及び、／又は移植と同時に、及び、／又はその後に投
与する。同種ＥＰＣは、ａ）ｆｌｋ－１；ｂ）ＣＤ３１；ｃ）ＣＤ３４；ｄ）ＣＤ１３３
；ｆ）ＰＤＧＦ－Ｒ；ｇ）ｈＴＥＲＴ；及び、ｈ）それらの組み合わせからなる群より選
択されるマーカーを発現してもしなくてもよい。同種ＥＰＣは（ｉ）哺乳動物細胞集団を
単離する工程；（ｉｉ）ＣＤ４５－表現型プロファイルを発現する工程（ｉ）の細胞の亜
集団を濃縮する工程；（ｉｉｉ）ＣＤ３４＋表現型プロファイルを発現する工程（ｉｉ）
に由来するＣＤ４５－細胞の亜集団を濃縮する工程；及び、（ｉｖ）ＣＤ３１ｌｏ／－表
現型プロファイルを発現する工程（ｉｉｉ）に由来するＣＤ３４＋細胞の亜集団を単離し
、それによって内皮前駆細胞を単離する工程を含む方法によって誘導され得る。同種ＥＰ
Ｃは、胎盤組織；骨髄；脂肪組織；大網、又は胎盤由来ＥＰＣに由来することができる。
得るか、又は前駆細胞の集団からのインビトロ分化に由来し得るか、及び、／又は膵島細
胞塊から構成される）の生存を増強する方法が存在し、これは同種異系ＥＰＣ及び、同種
異系線維芽細胞の有効量を個体に提供する工程を含む。本開示の１つの実施形態において
、以下のステップを含む個体における同種インスリン産生細胞の生存を増強する方法（膵
臓ドナーに由来するか、又は前駆細胞集団からのインビトロ分化に由来する可能性があり
、及び、／又は膵島細胞集団を含む）がある：ａ）同種内皮前駆細胞（ＥＰＣ）の集団を
得る；ｂ）同種線維芽細胞の集団を得る；及び、ｃ）同種ＥＰＣ及び、同種線維芽細胞を
同種インスリン産生細胞の移植前、及び、／又は移植と同時に、及び、／又はその後に投
与する。同種ＥＰＣは、ａ）ｆｌｋ－１；ｂ）ＣＤ３１；ｃ）ＣＤ３４；ｄ）ＣＤ１３３
；ｆ）ＰＤＧＦ－Ｒ；ｇ）ｈＴＥＲＴ；及び、ｈ）それらの組み合わせからなる群より選
択されるマーカーを発現してもしなくてもよい。同種ＥＰＣは（ｉ）哺乳動物細胞集団を
単離する工程；（ｉｉ）ＣＤ４５－表現型プロファイルを発現する工程（ｉ）の細胞の亜
集団を濃縮する工程；（ｉｉｉ）ＣＤ３４＋表現型プロファイルを発現する工程（ｉｉ）
に由来するＣＤ４５－細胞の亜集団を濃縮する工程；及び、（ｉｖ）ＣＤ３１ｌｏ／－表
現型プロファイルを発現する工程（ｉｉｉ）に由来するＣＤ３４＋細胞の亜集団を単離し
、それによって内皮前駆細胞を単離する工程を含む方法によって誘導され得る。同種ＥＰ
Ｃは、胎盤組織；骨髄；脂肪組織；大網、又は胎盤由来ＥＰＣに由来することができる。
【0041】
一実施形態では、インスリン産生細胞に関連する抗原に対する寛容原性免疫応答を刺激
する方法であって、同種異系ＥＰＣ及び、同種異系線維芽細胞と共に有効量の同種異系イ
ンスリン産生細胞を投与する工程を含む方法がある。寛容原性応答は抗原特異的Ｔ調節細
胞の刺激を含み得、そしてＴ調節細胞はインスリン産生細胞の活性を殺すか又は抑制する
細胞を阻害する能力を有し得る。Ｔ調節細胞は、転写因子ＦｏｘＰ３を発現する場合とし
ない場合がある。特定の実施形態では寛容原性応答が抗原特異的Ｂ調節細胞の刺激を含み
、Ｂ調節細胞はＣＤ１０を発現してもしなくてもよく、プロプラズマ芽細胞であってもな
くてもよい。
する方法であって、同種異系ＥＰＣ及び、同種異系線維芽細胞と共に有効量の同種異系イ
ンスリン産生細胞を投与する工程を含む方法がある。寛容原性応答は抗原特異的Ｔ調節細
胞の刺激を含み得、そしてＴ調節細胞はインスリン産生細胞の活性を殺すか又は抑制する
細胞を阻害する能力を有し得る。Ｔ調節細胞は、転写因子ＦｏｘＰ３を発現する場合とし
ない場合がある。特定の実施形態では寛容原性応答が抗原特異的Ｂ調節細胞の刺激を含み
、Ｂ調節細胞はＣＤ１０を発現してもしなくてもよく、プロプラズマ芽細胞であってもな
くてもよい。
【0042】
本開示の一実施形態では、ドナー特異的寛容原性事象を誘導するために、膵臓同種移植
片と同じドナーの線維芽細胞を個体に投与する（例えば、門脈内及び、／又は全身に）。
別の実施形態において、線維芽細胞は、ドナーから得られ、及び、／又は生成され、免疫
隔離チャンバーに配置され、寛容発生を誘導する。別の実施形態では、ドナー特異的線維
芽細胞及び、／又は樹状細胞（ＤＣ）が個体において一緒に投与される。ＤＣが投与され
る場合、ＤＣは、共刺激分子の活性化又はアップレギュレーションを防止する様式で処置
され得る。１つは、ＩＬ－１０、アスピリン、ＮＦ－カッパＢ阻害剤、及び、ｔｏｌｌ様
受容体及び、ＴＬＲの下流シグナル伝達の阻害剤等の樹状細胞成熟の阻害剤で治療するこ
とができる。線維芽細胞及び、／又はＤＣは骨髄、末梢血、死体骨髄を含む任意の供給源
に由来してもよく、又は、例えば、ｉＰＳテクノロジーの手段によって生成されてもよい
。
片と同じドナーの線維芽細胞を個体に投与する（例えば、門脈内及び、／又は全身に）。
別の実施形態において、線維芽細胞は、ドナーから得られ、及び、／又は生成され、免疫
隔離チャンバーに配置され、寛容発生を誘導する。別の実施形態では、ドナー特異的線維
芽細胞及び、／又は樹状細胞（ＤＣ）が個体において一緒に投与される。ＤＣが投与され
る場合、ＤＣは、共刺激分子の活性化又はアップレギュレーションを防止する様式で処置
され得る。１つは、ＩＬ－１０、アスピリン、ＮＦ－カッパＢ阻害剤、及び、ｔｏｌｌ様
受容体及び、ＴＬＲの下流シグナル伝達の阻害剤等の樹状細胞成熟の阻害剤で治療するこ
とができる。線維芽細胞及び、／又はＤＣは骨髄、末梢血、死体骨髄を含む任意の供給源
に由来してもよく、又は、例えば、ｉＰＳテクノロジーの手段によって生成されてもよい
。
【0043】
有効量の線維芽細胞及び、ＥＰＣがインスリン産生細胞（膵島細胞であり得る）の生着
を増強するために個体に投与される場合、異なる細胞が個体に投与される順序は、任意の
種類であり得る。ある場合には、線維芽細胞はＥＰＣの前に投与されるが、他の場合には
線維芽細胞はＥＰＣの後に投与される。線維芽細胞は、ＥＰＣと同時に投与され得る。あ
る場合には膵島細胞の生着が線維芽細胞及び、／又はＥＰＣの投与前に起こり、一方、他
の場合には膵島細胞の生着が線維芽細胞及び、／又はＥＰＣの投与後に起こる。線維芽細
胞の投与経路は、ＥＰＣと同じであってもなくてもよい。
を増強するために個体に投与される場合、異なる細胞が個体に投与される順序は、任意の
種類であり得る。ある場合には、線維芽細胞はＥＰＣの前に投与されるが、他の場合には
線維芽細胞はＥＰＣの後に投与される。線維芽細胞は、ＥＰＣと同時に投与され得る。あ
る場合には膵島細胞の生着が線維芽細胞及び、／又はＥＰＣの投与前に起こり、一方、他
の場合には膵島細胞の生着が線維芽細胞及び、／又はＥＰＣの投与後に起こる。線維芽細
胞の投与経路は、ＥＰＣと同じであってもなくてもよい。
【0044】
線維芽細胞の有効量は、任意の種類であり得、臨床医によって決定され得るが、具体的
な実施形態では、その量が投与あたり１０４～１０８線維芽細胞／ｋｇレシピエント塊の
範囲内である。いくつかの実施形態において、投与当たりの最適投与量は、１０５～１０
７線維芽細胞／ｋｇである。多くの実施形態において、投与当たりの最適投与量は、５×
１０５～５×１０６線維芽細胞／ｋｇであろう。ＥＰＣの有効量は、任意の種類であって
もよく、臨床医によって決定されてもよい。いくつかの場合において、ＥＰＣに対する線
維芽細胞の特定の比率が、異なる細胞の投与において使用される。一例として、ＥＰＣに
対する線維芽細胞の比は、１：１；１：２；１：１０；１：２５；１：５０；１：１００
；１：１０００等であり得る。別の例として、ＥＰＣ対線維芽細胞の比は、１：１；１：
２；１：１０；１：２５；１：５０；１：１００；１：１０００等であり得る。
な実施形態では、その量が投与あたり１０４～１０８線維芽細胞／ｋｇレシピエント塊の
範囲内である。いくつかの実施形態において、投与当たりの最適投与量は、１０５～１０
７線維芽細胞／ｋｇである。多くの実施形態において、投与当たりの最適投与量は、５×
１０５～５×１０６線維芽細胞／ｋｇであろう。ＥＰＣの有効量は、任意の種類であって
もよく、臨床医によって決定されてもよい。いくつかの場合において、ＥＰＣに対する線
維芽細胞の特定の比率が、異なる細胞の投与において使用される。一例として、ＥＰＣに
対する線維芽細胞の比は、１：１；１：２；１：１０；１：２５；１：５０；１：１００
；１：１０００等であり得る。別の例として、ＥＰＣ対線維芽細胞の比は、１：１；１：
２；１：１０；１：２５；１：５０；１：１００；１：１０００等であり得る。
【0045】
いくつかの実施形態において、線維芽細胞は、１回の用量で主題に投与される。他のも
のでは、線維芽細胞を、連続して２回又はそれ以上の用量で被験体に投与する。線維芽細
胞が、単回用量、２回用量、及び、／又は３回以上用量で投与されるいくつかの他の実施
形態において、用量は同じであっても異なっていてもよく、それらはそれらの間で等しい
間隔で、又は等しくない間隔で投与されてもよい。
のでは、線維芽細胞を、連続して２回又はそれ以上の用量で被験体に投与する。線維芽細
胞が、単回用量、２回用量、及び、／又は３回以上用量で投与されるいくつかの他の実施
形態において、用量は同じであっても異なっていてもよく、それらはそれらの間で等しい
間隔で、又は等しくない間隔で投与されてもよい。
【0046】
線維芽細胞及び、／又はＥＰＣは、広範囲の時間にわたって多くの頻度で投与され得る
。いくつかの実施形態において、線維芽細胞及び、／又はＥＰＣは、１日未満の期間にわ
たって投与される。他の実施形態において、それらは、２、３、４、５、又は６日間にわ
たって投与される。いくつかの実施形態では、線維芽細胞及び、／又はＥＰＣが場合によ
っては数週間にわたる期間を含めて、１週間に１回以上投与される。他の実施形態におい
て、それらは、１～数ヶ月間、数週間の期間にわたって投与される。種々の実施形態にお
いて、それらは、数ヶ月の期間にわたって投与され得る。他の実施形態では、それらは１
年以上の期間にわたって投与されてもよい。一般に、治療の長さは、疾患プロセスの長さ
、適用される治療の有効性、並びに治療される対象の状態及び、応答に比例する。細胞の
単一用量は、一度に全て、部分的に、又はある期間にわたって連続的に送達され得ること
が理解されるべきである。用量全体はまた、単一の位置に送達され得るか、又はいくつか
の位置にわたって部分的に広がり得る。最初の投与及び、その後の投与のための、又は連
続投与のための適切なレジメンは、全て同じであり得るか、又は可変であり得る。適切な
レジメンは、当業者によって、この本開示、本明細書中に引用される文書、及び、当技術
分野における知識から確認され得る。
。いくつかの実施形態において、線維芽細胞及び、／又はＥＰＣは、１日未満の期間にわ
たって投与される。他の実施形態において、それらは、２、３、４、５、又は６日間にわ
たって投与される。いくつかの実施形態では、線維芽細胞及び、／又はＥＰＣが場合によ
っては数週間にわたる期間を含めて、１週間に１回以上投与される。他の実施形態におい
て、それらは、１～数ヶ月間、数週間の期間にわたって投与される。種々の実施形態にお
いて、それらは、数ヶ月の期間にわたって投与され得る。他の実施形態では、それらは１
年以上の期間にわたって投与されてもよい。一般に、治療の長さは、疾患プロセスの長さ
、適用される治療の有効性、並びに治療される対象の状態及び、応答に比例する。細胞の
単一用量は、一度に全て、部分的に、又はある期間にわたって連続的に送達され得ること
が理解されるべきである。用量全体はまた、単一の位置に送達され得るか、又はいくつか
の位置にわたって部分的に広がり得る。最初の投与及び、その後の投与のための、又は連
続投与のための適切なレジメンは、全て同じであり得るか、又は可変であり得る。適切な
レジメンは、当業者によって、この本開示、本明細書中に引用される文書、及び、当技術
分野における知識から確認され得る。
【0047】
種々の実施形態において、線維芽細胞及び、／又はＥＰＣは、初期用量で投与され得、
その後、線維芽細胞及び、／又はＥＰＣのさらなる投与によって維持され得る。線維芽細
胞及び、／又はＥＰＣは、最初に１つの方法によって投与され得、その後、同じ方法又は
１つ以上の異なる方法によって投与され得る。被験者の線維芽細胞レベルは、進行中の細
胞の投与によって維持することができる。様々な実施形態は線維芽細胞の最初の投与、又
は対象における線維芽細胞のレベルを維持するための投与、又はその両方を含み、特定の
例では、それは静脈内注射によるものであってもよい。様々な実施形態において、個体の
状態及び、本明細書の他の箇所で議論される他の因子に依存して、他の投与形態が使用さ
れる。
その後、線維芽細胞及び、／又はＥＰＣのさらなる投与によって維持され得る。線維芽細
胞及び、／又はＥＰＣは、最初に１つの方法によって投与され得、その後、同じ方法又は
１つ以上の異なる方法によって投与され得る。被験者の線維芽細胞レベルは、進行中の細
胞の投与によって維持することができる。様々な実施形態は線維芽細胞の最初の投与、又
は対象における線維芽細胞のレベルを維持するための投与、又はその両方を含み、特定の
例では、それは静脈内注射によるものであってもよい。様々な実施形態において、個体の
状態及び、本明細書の他の箇所で議論される他の因子に依存して、他の投与形態が使用さ
れる。
【0048】
ヒトの被験者は一般に実験動物よりも長い治療を受けるが、治療は一般に疾患過程の長
さと治療の有効性に比例する長さを有することが注目される。当業者はヒト及び、／又は
ラット、マウス、非ヒト霊長類等の動物において実施される他の手順の結果を使用して、
ヒトのための適切な用量を決定する際に、これを考慮する。このような決定はこれらの考
察に基づき、そして本開示及び、先行技術によって提供されるガイダンスを考慮に入れて
、当業者が過度の実験なしにそうすることを可能にする。
さと治療の有効性に比例する長さを有することが注目される。当業者はヒト及び、／又は
ラット、マウス、非ヒト霊長類等の動物において実施される他の手順の結果を使用して、
ヒトのための適切な用量を決定する際に、これを考慮する。このような決定はこれらの考
察に基づき、そして本開示及び、先行技術によって提供されるガイダンスを考慮に入れて
、当業者が過度の実験なしにそうすることを可能にする。
【0049】
治療の用量、頻度、及び、／又は期間は、疾患の性質、被験体、及び、投与され得る他
の治療法を含む因子に依存し得る。したがって、線維芽細胞及び、／又はＥＰＣを投与す
るために、多種多様なレジメンを使用することができる。一実施形態では、本方法が単離
された哺乳動物内皮前駆細胞を使用し、本方法は（ｉ）哺乳動物細胞集団を単離するステ
ップと、（ｉｉ）ＣＤ４５－表現型プロファイルを発現するステップ（ｉ）の細胞の亜集
団を濃縮するステップと、（ｉｉｉ）ＣＤ３４＋表現型プロファイルを発現するステップ
（ｉｉ）に由来するＣＤ４５－細胞の亜集団を濃縮するステップと、（ｉｖ）ＣＤ３１ｌ
ｏ／－表現型プロファイルを発現するステップ（ｉｉｉ）に由来するＣＤ３４＋細胞の亜
集団を単離し、それによって内皮前駆細胞を単離するステップとを含む。内皮前駆細胞は
投与（少なくとも門脈内を含む）、膵島移植の前、及び、／又は同時、及び、／又はその
後に、同種の様式で使用され得る。別の局面において、膵島移植で使用される哺乳動物内
皮前駆細胞を単離する方法であって、（ｉ）哺乳動物細胞集団を単離する工程；（ｉｉ）
ＣＤ４５－表現型プロファイルを発現する工程（ｉ）の細胞の亜集団を濃縮する工程；（
ｉｉｉ）ＣＤ３４＋表現型プロファイルを発現する工程（ｉｉ）に由来するＣＤ４５－細
胞の亜集団を濃縮する工程；及び、（ｉｖ）ＣＤ３１ｌｏ／－表現型プロファイルを発現
する工程（ｉｉｉ）に由来するＣＤ３４＋細胞の亜集団を単離し、それによって内皮前駆
細胞を単離する工程；の連続工程を含む方法が提供される。
ＩＶ．
の治療法を含む因子に依存し得る。したがって、線維芽細胞及び、／又はＥＰＣを投与す
るために、多種多様なレジメンを使用することができる。一実施形態では、本方法が単離
された哺乳動物内皮前駆細胞を使用し、本方法は（ｉ）哺乳動物細胞集団を単離するステ
ップと、（ｉｉ）ＣＤ４５－表現型プロファイルを発現するステップ（ｉ）の細胞の亜集
団を濃縮するステップと、（ｉｉｉ）ＣＤ３４＋表現型プロファイルを発現するステップ
（ｉｉ）に由来するＣＤ４５－細胞の亜集団を濃縮するステップと、（ｉｖ）ＣＤ３１ｌ
ｏ／－表現型プロファイルを発現するステップ（ｉｉｉ）に由来するＣＤ３４＋細胞の亜
集団を単離し、それによって内皮前駆細胞を単離するステップとを含む。内皮前駆細胞は
投与（少なくとも門脈内を含む）、膵島移植の前、及び、／又は同時、及び、／又はその
後に、同種の様式で使用され得る。別の局面において、膵島移植で使用される哺乳動物内
皮前駆細胞を単離する方法であって、（ｉ）哺乳動物細胞集団を単離する工程；（ｉｉ）
ＣＤ４５－表現型プロファイルを発現する工程（ｉ）の細胞の亜集団を濃縮する工程；（
ｉｉｉ）ＣＤ３４＋表現型プロファイルを発現する工程（ｉｉ）に由来するＣＤ４５－細
胞の亜集団を濃縮する工程；及び、（ｉｖ）ＣＤ３１ｌｏ／－表現型プロファイルを発現
する工程（ｉｉｉ）に由来するＣＤ３４＋細胞の亜集団を単離し、それによって内皮前駆
細胞を単離する工程；の連続工程を含む方法が提供される。
ＩＶ．
【0050】
線維芽細胞
【0051】
線維芽細胞は、肝臓位置への移植を含む、移植のための同種細胞の耐性を増強するため
に、本明細書中で使用される。線維芽細胞は、生着を受けているか又は受けているのであ
ろう個体に関して同種であってもよく、そわなくてもよい。線維芽細胞は、任意の種類の
ものであり得る。線維芽細胞は、個体への送達の前等、それらの使用の前に改変されても
されなくてもよい。このような修飾は例えば、出発集団として線維芽細胞によって発現さ
れなかった１つ以上のマーカーを発現するように修飾されることを含む、任意の種類のも
のであり得る。
に、本明細書中で使用される。線維芽細胞は、生着を受けているか又は受けているのであ
ろう個体に関して同種であってもよく、そわなくてもよい。線維芽細胞は、任意の種類の
ものであり得る。線維芽細胞は、個体への送達の前等、それらの使用の前に改変されても
されなくてもよい。このような修飾は例えば、出発集団として線維芽細胞によって発現さ
れなかった１つ以上のマーカーを発現するように修飾されることを含む、任意の種類のも
のであり得る。
【0052】
線維芽細胞は、軟骨細胞系統に分化することができる。それらは、ａ）ＮＡＮＯＧ；ｂ
）ＯＣＴ－４；ｃ）ＳＳＥＡ－４；ｄ）幹細胞因子受容体；及び、ｅ）それらの組み合わ
せからなる群より選択される１つ以上のマーカーを発現してもしなくてもよい。具体的な
場合において、線維芽細胞は（ｉ）哺乳動物細胞集団を単離する工程；（ｉｉ）ＣＤ４５
－表現型プロファイルを発現する工程（ｉ）の細胞の亜集団を濃縮する工程；及び、（ａ
）ＣＤ３４＋表現型プロファイルを発現する工程（ｉｉ）に由来するＣＤ４５－細胞の亜
集団を濃縮する工程、及び、前記ＣＤ３４＋細胞の亜集団を単離し、それによって再生特
性を有する線維芽細胞を単離する工程を含む方法によって単離され得る。線維芽細胞は、
ａ）包皮；ｂ）タミータック；ｃ）胎盤；ｄ）耳垂；ｅ）脂肪組織；ｆ）大網；及び、／
又はｇ）ウォートンゼリーから選択される一群の組織源に由来し得る。特定の実施形態で
は、胎盤線維芽細胞が使用され、それらは胎盤の胎児側に由来し得る。特定の局面におい
て、胎児由来であるＣＤ４５陰性線維芽細胞が使用される。線維芽細胞は、ａ）磁気活性
化細胞選別；ｂ）フローサイトメトリー選別；ｃ）細胞パニング；ｄ）再生能力の細胞を
選択的に選択するための親和性に基づく手段；及び、／又はｅ）再生能力を有する細胞を
選択するためのサイズに基づく手段から選択される方法を使用して、再生能力のマーカー
の発現のために精製され得る。
）ＯＣＴ－４；ｃ）ＳＳＥＡ－４；ｄ）幹細胞因子受容体；及び、ｅ）それらの組み合わ
せからなる群より選択される１つ以上のマーカーを発現してもしなくてもよい。具体的な
場合において、線維芽細胞は（ｉ）哺乳動物細胞集団を単離する工程；（ｉｉ）ＣＤ４５
－表現型プロファイルを発現する工程（ｉ）の細胞の亜集団を濃縮する工程；及び、（ａ
）ＣＤ３４＋表現型プロファイルを発現する工程（ｉｉ）に由来するＣＤ４５－細胞の亜
集団を濃縮する工程、及び、前記ＣＤ３４＋細胞の亜集団を単離し、それによって再生特
性を有する線維芽細胞を単離する工程を含む方法によって単離され得る。線維芽細胞は、
ａ）包皮；ｂ）タミータック；ｃ）胎盤；ｄ）耳垂；ｅ）脂肪組織；ｆ）大網；及び、／
又はｇ）ウォートンゼリーから選択される一群の組織源に由来し得る。特定の実施形態で
は、胎盤線維芽細胞が使用され、それらは胎盤の胎児側に由来し得る。特定の局面におい
て、胎児由来であるＣＤ４５陰性線維芽細胞が使用される。線維芽細胞は、ａ）磁気活性
化細胞選別；ｂ）フローサイトメトリー選別；ｃ）細胞パニング；ｄ）再生能力の細胞を
選択的に選択するための親和性に基づく手段；及び、／又はｅ）再生能力を有する細胞を
選択するためのサイズに基づく手段から選択される方法を使用して、再生能力のマーカー
の発現のために精製され得る。
【0053】
本開示のいくつかの実施形態において、線維芽細胞は、ＯＣＴ－４の胎盤発現のために
選択される。他の実施形態において、ＯＣＴ－４発現は、種々の培養条件下への曝露後の
培養及び、増殖のための細胞を同定する手段として使用される。Ｏｃｔ－４（ヒトのｏｃ
ｔ－３）は、胞胚前期胚、初期卵割期胚、胚盤胞の内部細胞塊の細胞、及び、胚性癌（”
ＥＣ”）細胞に発現する転写因子であり（Ｎｉｃｈｏｌｓ、Ｊ．ら．（１９９８）Ｃｅｌ
ｌ ９５：３７９－９１）、細胞が分化誘導されるとダウンレギュレートされる。ｏｃｔ
－４遺伝子（ヒトではｏｃｔ－３）は、ヒトでは少なくとも２つのスプライスバリアント
であるｏｃｔ－３Ａとｏｃｔ－３Ｂに転写される。ｏｃｔ－３Ｂスプライスバリアントは
多くの分化細胞に見出されるが、ｏｃｔ－３Ａスプライスバリアント（以前にｏｃｔ－３
／４とも呼ばれた）は未分化胚性幹細胞に特異的であることが報告されている。Ｓｈｉｍ
ｏｚａｋｉら（２００３）Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ １３０：２５０５－１２を参照のこ
と。ｏｃｔ－３／４の発現は、胚発生及び、分化の初期段階を決定するのに重要な役割を
果たす。Ｏｃｔ－３／４は、ｒｏｘ－１と組み合わせて、未分化状態でＥＳ細胞を維持す
るためにも必要とされるＺｎフィンガータンパク質ｒｅｘ－１の転写活性化を引き起こす
（Ｒｏｓｆｊｏｒｄ、Ｅ．及び、Ｒｉｚｚｉｎｏ、Ａ．（１９９７）Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｂ
ｉｏｐｈｙｓ Ｒｅｓ Ｃｏｍｍｕｎ ２０３：１７９５－８０２；Ｂｅｎ－Ｓｈｕｓｈ
ａｎ、Ｅ．ら（１９９８）Ｍｏｌ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ １８：１８６６－７８）。
選択される。他の実施形態において、ＯＣＴ－４発現は、種々の培養条件下への曝露後の
培養及び、増殖のための細胞を同定する手段として使用される。Ｏｃｔ－４（ヒトのｏｃ
ｔ－３）は、胞胚前期胚、初期卵割期胚、胚盤胞の内部細胞塊の細胞、及び、胚性癌（”
ＥＣ”）細胞に発現する転写因子であり（Ｎｉｃｈｏｌｓ、Ｊ．ら．（１９９８）Ｃｅｌ
ｌ ９５：３７９－９１）、細胞が分化誘導されるとダウンレギュレートされる。ｏｃｔ
－４遺伝子（ヒトではｏｃｔ－３）は、ヒトでは少なくとも２つのスプライスバリアント
であるｏｃｔ－３Ａとｏｃｔ－３Ｂに転写される。ｏｃｔ－３Ｂスプライスバリアントは
多くの分化細胞に見出されるが、ｏｃｔ－３Ａスプライスバリアント（以前にｏｃｔ－３
／４とも呼ばれた）は未分化胚性幹細胞に特異的であることが報告されている。Ｓｈｉｍ
ｏｚａｋｉら（２００３）Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ １３０：２５０５－１２を参照のこ
と。ｏｃｔ－３／４の発現は、胚発生及び、分化の初期段階を決定するのに重要な役割を
果たす。Ｏｃｔ－３／４は、ｒｏｘ－１と組み合わせて、未分化状態でＥＳ細胞を維持す
るためにも必要とされるＺｎフィンガータンパク質ｒｅｘ－１の転写活性化を引き起こす
（Ｒｏｓｆｊｏｒｄ、Ｅ．及び、Ｒｉｚｚｉｎｏ、Ａ．（１９９７）Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｂ
ｉｏｐｈｙｓ Ｒｅｓ Ｃｏｍｍｕｎ ２０３：１７９５－８０２；Ｂｅｎ－Ｓｈｕｓｈ
ａｎ、Ｅ．ら（１９９８）Ｍｏｌ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ １８：１８６６－７８）。
【0054】
本開示の種々の実施形態に従って使用するのに適切な線維芽細胞の用量は、多数の因子
に依存する。それは、異なる状況に対してかなり変化し得る。一次及び、補助療法のため
に投与される胎盤線維芽細胞の最適用量を決定するパラメータは、一般的に、以下のいく
つか又は全てを含もう：治療される疾患及び、その病期；被験体の種、その健康、性別、
年齢、体重、及び、代謝速度；被験体の免疫能；投与される他の治療法；被験体の病歴又
は遺伝子型から予想される合併症。パラメーターはまた、胎盤線維芽細胞が同系、自家、
同種、又は異種のいずれであるか；それらの効力（比活性）；線維芽細胞が有効であるた
めに標的化されなければならない部位及び、／又は分布；及び、線維芽細胞へのアクセス
及び、／又は線維芽細胞の生着のような部位のそのような特徴を含み得る。その他のパラ
メータには、他の因子（成長因子及び、サイトカイン等）の線維芽細胞との同時投与が含
まれる。所与の状況における最適用量はまた、細胞が処方される様式、それらが投与され
る様式、及び、細胞が投与後に標的部位に局在化される程度を考慮する。最後に、至適用
量の決定は必然的に、最大有益効果の閾値を下回ることもなく、線維芽細胞の用量に関連
する有害作用が増量した用量の利点を上回る閾値を上回る有効用量を提供するのであろう
。
に依存する。それは、異なる状況に対してかなり変化し得る。一次及び、補助療法のため
に投与される胎盤線維芽細胞の最適用量を決定するパラメータは、一般的に、以下のいく
つか又は全てを含もう：治療される疾患及び、その病期；被験体の種、その健康、性別、
年齢、体重、及び、代謝速度；被験体の免疫能；投与される他の治療法；被験体の病歴又
は遺伝子型から予想される合併症。パラメーターはまた、胎盤線維芽細胞が同系、自家、
同種、又は異種のいずれであるか；それらの効力（比活性）；線維芽細胞が有効であるた
めに標的化されなければならない部位及び、／又は分布；及び、線維芽細胞へのアクセス
及び、／又は線維芽細胞の生着のような部位のそのような特徴を含み得る。その他のパラ
メータには、他の因子（成長因子及び、サイトカイン等）の線維芽細胞との同時投与が含
まれる。所与の状況における最適用量はまた、細胞が処方される様式、それらが投与され
る様式、及び、細胞が投与後に標的部位に局在化される程度を考慮する。最後に、至適用
量の決定は必然的に、最大有益効果の閾値を下回ることもなく、線維芽細胞の用量に関連
する有害作用が増量した用量の利点を上回る閾値を上回る有効用量を提供するのであろう
。
【0055】
いくつかの実施形態についての線維芽細胞（場合によっては胎盤）の最適用量は、自己
単核骨髄移植に使用される用量の範囲内である。胎盤線維芽細胞のかなり純粋な調製物に
ついては、種々の実施形態における最適用量が投与あたり１０４～１０８の胎盤線維芽細
胞／ｋｇのレシピエント塊であろう。いくつかの実施形態において、投与当たりの最適投
与量は、１０５～１０７胎盤線維芽細胞／ｋｇである。多くの実施形態において、管理当
たりの最適管理量は、５×１０５～５×１０６胎盤線維芽細胞／ｋｇであろう。参考にす
ると、上記のより高い線量は、自家単核骨髄移植に用いられる有核細胞の線量と類似して
いる。低用量のいくつかは、自家単核骨髄移植で使用されるＣＤ３４＋細胞数／ｋｇに類
似している。
単核骨髄移植に使用される用量の範囲内である。胎盤線維芽細胞のかなり純粋な調製物に
ついては、種々の実施形態における最適用量が投与あたり１０４～１０８の胎盤線維芽細
胞／ｋｇのレシピエント塊であろう。いくつかの実施形態において、投与当たりの最適投
与量は、１０５～１０７胎盤線維芽細胞／ｋｇである。多くの実施形態において、管理当
たりの最適管理量は、５×１０５～５×１０６胎盤線維芽細胞／ｋｇであろう。参考にす
ると、上記のより高い線量は、自家単核骨髄移植に用いられる有核細胞の線量と類似して
いる。低用量のいくつかは、自家単核骨髄移植で使用されるＣＤ３４＋細胞数／ｋｇに類
似している。
【0056】
特定の実施形態では線維芽細胞が実質的な均質性を有するように単離され、特定の実施
形態では、胎児起源である。
形態では、胎児起源である。
【0057】
分化（Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ）とは特定化されていない（”コミットメント
されていない”）細胞、あるいはそれほど特殊化していない細胞が例えば神経細胞や筋細
胞のような特殊化した細胞の特徴を獲得する過程である。分化した細胞は細胞の系譜の中
でより特殊化した（”コミットされた”）位置をとったものである。運命拘束された用語
は分化の過程に適用される場合、分化経路において、正常な状況下では特定の細胞型又は
細胞型のサブセットに分化し続け、正常な状況下では異なる細胞型に分化するか、又はよ
り分化していない細胞型に戻すことができない点まで進んだ細胞を意味する。脱分化とは
、細胞が細胞株内のあまり特殊化されていない（又は確定されていない）位置に戻るプロ
セスをいう。本明細書で使用されるように、細胞の系統は細胞の遺伝性、すなわち、細胞
がどんな細胞から来たか、及び、細胞がどんな細胞を生じさせることができるかを定義す
る。細胞の系譜によって、細胞は開発と分化の遺伝的図式の中に配置される。
されていない”）細胞、あるいはそれほど特殊化していない細胞が例えば神経細胞や筋細
胞のような特殊化した細胞の特徴を獲得する過程である。分化した細胞は細胞の系譜の中
でより特殊化した（”コミットされた”）位置をとったものである。運命拘束された用語
は分化の過程に適用される場合、分化経路において、正常な状況下では特定の細胞型又は
細胞型のサブセットに分化し続け、正常な状況下では異なる細胞型に分化するか、又はよ
り分化していない細胞型に戻すことができない点まで進んだ細胞を意味する。脱分化とは
、細胞が細胞株内のあまり特殊化されていない（又は確定されていない）位置に戻るプロ
セスをいう。本明細書で使用されるように、細胞の系統は細胞の遺伝性、すなわち、細胞
がどんな細胞から来たか、及び、細胞がどんな細胞を生じさせることができるかを定義す
る。細胞の系譜によって、細胞は開発と分化の遺伝的図式の中に配置される。
【0058】
現在の本開示の文脈の中で、胎児由来の線維芽細胞は胎盤治療効果を有するように、部
分的には、主として胎児組織起源の幹細胞を選択することによって、抽出されるか、単離
される。
分的には、主として胎児組織起源の幹細胞を選択することによって、抽出されるか、単離
される。
【0059】
本明細書中で使用されるように、フレーズは中胚葉系列、外胚葉系列又は内胚葉系列に
分化し、それぞれ、特定の中胚葉系列、外胚葉系列又は内胚葉系列に運命拘束されるよう
になる細胞を指す。中胚葉系列に分化する、又は特定の中胚葉細胞を生じる細胞の例とし
ては脂肪生成細胞、軟骨形成細胞、心原性細胞、皮膚形成細胞、造血細胞、血管新生細胞
、筋原性細胞、腎原性細胞、泌尿器原性細胞、骨原性細胞、心膜原性細胞、又は間質細胞
があげられるが、これらに限定されない。外胚葉系列に分化する細胞の例としては表皮細
胞、神経原性細胞、及び、神経膠原性細胞があげられるが、これらに限定されない。内胚
葉系列に分化する細胞の例としては限定されるわけではないが、胸膜形成細胞、肝臓形成
細胞、腸の内層を生じる細胞、及び、膵臓形成細胞及び、内臓形成細胞を生じる細胞があ
げられる。
Ｖ．
分化し、それぞれ、特定の中胚葉系列、外胚葉系列又は内胚葉系列に運命拘束されるよう
になる細胞を指す。中胚葉系列に分化する、又は特定の中胚葉細胞を生じる細胞の例とし
ては脂肪生成細胞、軟骨形成細胞、心原性細胞、皮膚形成細胞、造血細胞、血管新生細胞
、筋原性細胞、腎原性細胞、泌尿器原性細胞、骨原性細胞、心膜原性細胞、又は間質細胞
があげられるが、これらに限定されない。外胚葉系列に分化する細胞の例としては表皮細
胞、神経原性細胞、及び、神経膠原性細胞があげられるが、これらに限定されない。内胚
葉系列に分化する細胞の例としては限定されるわけではないが、胸膜形成細胞、肝臓形成
細胞、腸の内層を生じる細胞、及び、膵臓形成細胞及び、内臓形成細胞を生じる細胞があ
げられる。
Ｖ．
【0060】
細胞の獲得、産生及び、／又は操作
【0061】
特定の実施形態において、細胞は、操作及び、／又は使用の前に組織及び、／又は器官
から単離される；細胞は、線維芽細胞、ＥＰＣ、又はインスリン産生細胞（例えば、島細
胞）であり得る。特定の場合において、単離手順は酵素消化プロセスを使用する。酵素は
組織を解離して細胞集団を抽出するために使用され、その後、胎児由来線維芽細胞の単離
のために収集され、そして増殖される。多くの酵素が培養物中での増殖を容易にするため
に、複雑な組織マトリックスから個々の細胞を単離するために有用であることが、当該分
野で公知である。組織からの細胞単離において使用するための広範囲の消化酵素は弱消化
性（例えば、デオキシリボヌクレアーゼ及び、中性プロテアーゼ、ディスパーゼ）から強
消化性（例えば、パパイン及び、トリプシン）までの範囲で当業者に使用可能であり、そ
してこのような酵素は、商業的に使用可能である。本明細書と適合する酵素の非網羅的な
リストには、粘液溶解酵素活性、メタロプロテアーゼ、中性プロテアーゼ、セリンプロテ
アーゼ（トリプシン、キモトリプシン、又はエラスターゼ等）、及び、デオキシリボヌク
レアーゼが含まれる。特定の場合は、メタロプロテアーゼ、中性プロテアーゼ及び、粘液
溶解活性から選択される酵素活性である。例えば、コラゲナーゼは、組織から種々の細胞
を単離するために有用であることが知られている。デオキシリボヌクレアーゼは、一本鎖
ＤＮＡを消化することができ、単離中の細胞凝集を最小限にすることができる。酵素は、
単独で、又は組み合わせて使用することができる。セリンプロテアーゼは、使用される他
の酵素を分解し得るので、好ましくは他の酵素の使用に続いて、配列で使用される。セリ
ンプロテアーゼとの接触の温度及び、時間をモニターしなければならない。セリンプロテ
アーゼは、血清中のα２ミクログロブリンで阻害することができ、したがって、消化に使
用される培地は、好ましくは無血清である。ＥＤＴＡ及び、ＤＮａｓｅが一般に使用され
、収率又は効率を改善することができる。好ましい方法は、例えば、コラゲナーゼ及び、
ディスパーゼ、又はコラゲナーゼ、ディスパーゼ、及び、ヒアルロニダーゼによる酵素処
理を含み、このような方法が提供され、特定の好ましい実施形態において、コラゲナーゼ
及び、中性プロテアーゼディスパーゼの混合物が、解離工程において使用される。より好
ましいのは、ヒストリチクム菌由来の少なくとも１つのコラゲナーゼ、並びにプロテアー
ゼ活性、ディスパーゼ及び、サーモリシンのいずれかの存在下での消化を用いる方法であ
る。さらに、より好ましいのは、コラゲナーゼ及び、ディスパーゼ酵素活性の両方による
消化を用いる方法である。コラゲナーゼ及び、ディスパーゼ活性に加えてヒアルロニダー
ゼ活性による消化を含む方法も好ましい。当業者は、種々の組織供給源から細胞を単離す
るための多くのこのような酵素処理が当該分野で公知であることを理解する。例えば、リ
ベラーズブレンドザイム（ＬＩＢＥＲＡＳＥ ＢＬＥＮＤＺＹＭＥ）（Ｒｏｃｈｅ）シリ
ーズのコラゲナーゼ及び、中性プロテアーゼの酵素組み合わせは、非常に有用であり、本
方法において使用され得る。他の酵素源が知られており、当業者はまた、そのような酵素
をその天然源から直接得ることができる。当業者はまた、本発明の細胞を単離する際のそ
れらの有用性について、新規の、又は追加の酵素又は酵素の組み合わせを評価するために
十分に装備されている。特定の酵素処理は、０．５、１、１．５、又は２時間以上である
。他の好ましい態様において、組織は、解離工程の酵素処理中に３７℃でインキュベート
される。消化物を希釈することはまた、細胞が粘性消化物内に捕捉され得るので、細胞の
収率を改善し得る。
から単離される；細胞は、線維芽細胞、ＥＰＣ、又はインスリン産生細胞（例えば、島細
胞）であり得る。特定の場合において、単離手順は酵素消化プロセスを使用する。酵素は
組織を解離して細胞集団を抽出するために使用され、その後、胎児由来線維芽細胞の単離
のために収集され、そして増殖される。多くの酵素が培養物中での増殖を容易にするため
に、複雑な組織マトリックスから個々の細胞を単離するために有用であることが、当該分
野で公知である。組織からの細胞単離において使用するための広範囲の消化酵素は弱消化
性（例えば、デオキシリボヌクレアーゼ及び、中性プロテアーゼ、ディスパーゼ）から強
消化性（例えば、パパイン及び、トリプシン）までの範囲で当業者に使用可能であり、そ
してこのような酵素は、商業的に使用可能である。本明細書と適合する酵素の非網羅的な
リストには、粘液溶解酵素活性、メタロプロテアーゼ、中性プロテアーゼ、セリンプロテ
アーゼ（トリプシン、キモトリプシン、又はエラスターゼ等）、及び、デオキシリボヌク
レアーゼが含まれる。特定の場合は、メタロプロテアーゼ、中性プロテアーゼ及び、粘液
溶解活性から選択される酵素活性である。例えば、コラゲナーゼは、組織から種々の細胞
を単離するために有用であることが知られている。デオキシリボヌクレアーゼは、一本鎖
ＤＮＡを消化することができ、単離中の細胞凝集を最小限にすることができる。酵素は、
単独で、又は組み合わせて使用することができる。セリンプロテアーゼは、使用される他
の酵素を分解し得るので、好ましくは他の酵素の使用に続いて、配列で使用される。セリ
ンプロテアーゼとの接触の温度及び、時間をモニターしなければならない。セリンプロテ
アーゼは、血清中のα２ミクログロブリンで阻害することができ、したがって、消化に使
用される培地は、好ましくは無血清である。ＥＤＴＡ及び、ＤＮａｓｅが一般に使用され
、収率又は効率を改善することができる。好ましい方法は、例えば、コラゲナーゼ及び、
ディスパーゼ、又はコラゲナーゼ、ディスパーゼ、及び、ヒアルロニダーゼによる酵素処
理を含み、このような方法が提供され、特定の好ましい実施形態において、コラゲナーゼ
及び、中性プロテアーゼディスパーゼの混合物が、解離工程において使用される。より好
ましいのは、ヒストリチクム菌由来の少なくとも１つのコラゲナーゼ、並びにプロテアー
ゼ活性、ディスパーゼ及び、サーモリシンのいずれかの存在下での消化を用いる方法であ
る。さらに、より好ましいのは、コラゲナーゼ及び、ディスパーゼ酵素活性の両方による
消化を用いる方法である。コラゲナーゼ及び、ディスパーゼ活性に加えてヒアルロニダー
ゼ活性による消化を含む方法も好ましい。当業者は、種々の組織供給源から細胞を単離す
るための多くのこのような酵素処理が当該分野で公知であることを理解する。例えば、リ
ベラーズブレンドザイム（ＬＩＢＥＲＡＳＥ ＢＬＥＮＤＺＹＭＥ）（Ｒｏｃｈｅ）シリ
ーズのコラゲナーゼ及び、中性プロテアーゼの酵素組み合わせは、非常に有用であり、本
方法において使用され得る。他の酵素源が知られており、当業者はまた、そのような酵素
をその天然源から直接得ることができる。当業者はまた、本発明の細胞を単離する際のそ
れらの有用性について、新規の、又は追加の酵素又は酵素の組み合わせを評価するために
十分に装備されている。特定の酵素処理は、０．５、１、１．５、又は２時間以上である
。他の好ましい態様において、組織は、解離工程の酵素処理中に３７℃でインキュベート
される。消化物を希釈することはまた、細胞が粘性消化物内に捕捉され得るので、細胞の
収率を改善し得る。
【0062】
酵素活性の使用が利用され得るが、本明細書中に提供されるような単離方法には必要と
されない。機械的分離のみに基づく方法は上記のように、臍から本細胞を単離するのに成
功し得る。
されない。機械的分離のみに基づく方法は上記のように、臍から本細胞を単離するのに成
功し得る。
【0063】
細胞は、組織が本明細書中で上記したような任意の培養培地に解離された後、再懸濁さ
れ得る。細胞は遠心分離工程の後に再懸濁されて、細胞を組織又は他の破片から分離し、
試験することができる。再懸濁は、細胞への培養培地の再懸濁及び、／又は単純な添加の
機械的方法を含み得る。
れ得る。細胞は遠心分離工程の後に再懸濁されて、細胞を組織又は他の破片から分離し、
試験することができる。再懸濁は、細胞への培養培地の再懸濁及び、／又は単純な添加の
機械的方法を含み得る。
【0064】
適切な増殖条件を提供することは、培養培地、サプリメント、大気条件、及び、細胞の
相対湿度に関する広範囲の選択肢を可能にする。特定の温度は３７℃であるが、温度は他
の培養条件及び、細胞又は培養物の所望の使用に応じて、約３５℃～３９℃の範囲であり
得る。
相対湿度に関する広範囲の選択肢を可能にする。特定の温度は３７℃であるが、温度は他
の培養条件及び、細胞又は培養物の所望の使用に応じて、約３５℃～３９℃の範囲であり
得る。
【0065】
いくつかの実施形態では、増殖培地と共に提供される補足血清中で使用可能であること
を除いて、外因性増殖因子を必要としない細胞を提供する方法がある。特定の増殖因子の
非存在下で増殖することができる臍細胞を誘導する方法もまた、本明細書中に提供される
。この方法は上記の方法と同様であるが、これらは細胞が最終的に再懸濁され、そして増
殖される培養培地中に、特定の増殖因子（このために、細胞は必要とされない）が存在し
ないことを必要とする。この意味で、この方法は、特定の増殖因子の非存在下で分裂する
ことができる細胞に対して選択的である。特定の細胞は、いくつかの実施形態において、
血清を添加しない化学的に規定された増殖培地中で増殖及び、増殖することができる。こ
のような場合、細胞は、細胞を支持及び、維持するために培地に添加され得る特定の増殖
因子を必要とし得る。無血清培地上又は中での増殖のために添加される特定の因子には、
ＦＧＦ、ＥＧＦ、ＩＧＦ、及び、ＰＤＧＦのうちの１つ以上が含まれる。より特定の実施
形態では、２つ、３つ、又は４つ全ての因子が無血清培地又は化学的に規定された培地に
添加される。他の実施形態において、ＬＩＦは、細胞の増殖を支持又は改善するために無
血清培地に添加される。
を除いて、外因性増殖因子を必要としない細胞を提供する方法がある。特定の増殖因子の
非存在下で増殖することができる臍細胞を誘導する方法もまた、本明細書中に提供される
。この方法は上記の方法と同様であるが、これらは細胞が最終的に再懸濁され、そして増
殖される培養培地中に、特定の増殖因子（このために、細胞は必要とされない）が存在し
ないことを必要とする。この意味で、この方法は、特定の増殖因子の非存在下で分裂する
ことができる細胞に対して選択的である。特定の細胞は、いくつかの実施形態において、
血清を添加しない化学的に規定された増殖培地中で増殖及び、増殖することができる。こ
のような場合、細胞は、細胞を支持及び、維持するために培地に添加され得る特定の増殖
因子を必要とし得る。無血清培地上又は中での増殖のために添加される特定の因子には、
ＦＧＦ、ＥＧＦ、ＩＧＦ、及び、ＰＤＧＦのうちの１つ以上が含まれる。より特定の実施
形態では、２つ、３つ、又は４つ全ての因子が無血清培地又は化学的に規定された培地に
添加される。他の実施形態において、ＬＩＦは、細胞の増殖を支持又は改善するために無
血清培地に添加される。
【0066】
また、細胞が、それらの雰囲気中で約５％～約２０％の酸素の存在下で膨張し得る方法
も提供される。Ｌ－バリンを必要とする細胞を得るための方法は、細胞をＬ－バリンの存
在下で培養することを必要とする。細胞が得られた後、Ｌ－バリンの必要性を試験し、Ｌ
－異性体を欠くＤ－バリン含有培地上で増殖させることによって確認することができる。
も提供される。Ｌ－バリンを必要とする細胞を得るための方法は、細胞をＬ－バリンの存
在下で培養することを必要とする。細胞が得られた後、Ｌ－バリンの必要性を試験し、Ｌ
－異性体を欠くＤ－バリン含有培地上で増殖させることによって確認することができる。
【0067】
老化状態に達する前に、細胞が少なくとも２５、３０、３５、又は４０回の倍加を受け
ることができる方法が提供される。１０１４以上の細胞に達するように倍加することがで
きる細胞を誘導するための方法が提供される。特定の方法は、少なくとも約１０１４、１
０１５、１０１６、又は１０１７以上のセルを、文化において約１０３から約１０６セル
／ｃｍ２までシードしたときに生成するのに十分に倍にできるセルを導出する方法である
。特に、これらの細胞数は、８０、７０、又は６０日以内に産生される。一実施形態では
、組織線維芽細胞を単離し、増殖させ、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ４４、ＣＤ７３、ＣＤ
９０、ＣＤ１４１、ＰＤＧＦｒ－α、ＨＬＡ－Ａ、Ｂ、Ｃ、及び、それらの組み合わせか
らなる群より選択される１つ以上のマーカーを有する。さらに、細胞は、特定の症例にお
いて、ＣＤ３１、ＣＤ４５、ＣＤ１１７、ＣＤ１４１、又はＨＬＡ－ＤＲ、ＤＰ、ＤＱの
１つ以上を産生することも、産生しないこともある。
ＶＩ．
ることができる方法が提供される。１０１４以上の細胞に達するように倍加することがで
きる細胞を誘導するための方法が提供される。特定の方法は、少なくとも約１０１４、１
０１５、１０１６、又は１０１７以上のセルを、文化において約１０３から約１０６セル
／ｃｍ２までシードしたときに生成するのに十分に倍にできるセルを導出する方法である
。特に、これらの細胞数は、８０、７０、又は６０日以内に産生される。一実施形態では
、組織線維芽細胞を単離し、増殖させ、ＣＤ１０、ＣＤ１３、ＣＤ４４、ＣＤ７３、ＣＤ
９０、ＣＤ１４１、ＰＤＧＦｒ－α、ＨＬＡ－Ａ、Ｂ、Ｃ、及び、それらの組み合わせか
らなる群より選択される１つ以上のマーカーを有する。さらに、細胞は、特定の症例にお
いて、ＣＤ３１、ＣＤ４５、ＣＤ１１７、ＣＤ１４１、又はＨＬＡ－ＤＲ、ＤＰ、ＤＱの
１つ以上を産生することも、産生しないこともある。
ＶＩ．
【0068】
膵臓の膵島細胞
【0069】
本開示の方法において医師を補助するために、膵島細胞を単離する方法が提供され、そ
して参照により組み込まれる。一実施形態では、米国特許出願第２００６／０１８２７２
２号に記載されている方法が提供される：膵臓が男性又は女性のドナーから入手すること
ができ、肝臓及び、膵臓の十二指腸の調達を組み合わせるために開発された技術である（
Ｍａｒｓｈら、Ｓｕｒｇ．Ｇｙｎｅｃｏｌ．Ｏｂｓｔｅｔ．１９８９；１６８：２５４－
２５８）。ドナーは、典型的には１５～５０歳の年齢の範囲である。一般的な除外基準に
は、例えば、全身性細菌感染症、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、ヒトＴ細胞リンパ栄
養ウイルス（ＨＴＬＶ）、Ｂ型肝炎ウイルス、又はＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）等のウイ
ルス、糖尿病の既往、頭蓋外腫瘍、及び、ＡＩＤＳの危険因子が含まれる。ドナー膵臓は
膵組織アデノシン三リン酸（ＡＴＰ）含量を改善し、貯蔵膵臓から単離された膵島の収率
を増加させ、膵島単離及び、移植のためのマージナルドナー膵臓の使用を可能にし、膵島
単離成功率を改善し、単離された膵島の完全性を保存する（例えば、単離された膵島が糖
尿病を逆転させることができるように）２層膵臓保存法を用いて保存することができる。
一般に、低温ウィスコンシン大学（ＵＷ）溶液（ＶｉａＳｐａｎ（登録商標）、ＤｕＰｏ
ｎｔ Ｐｈａｒｍａ、Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ、ＤＥ）（米国特許第４，７９８，８２４号
及び、第４，８７９，２８３号を参照のこと）又は改変ＵＷ溶液を、等容量の低温ペルフ
ルオロデカリン（ＦｌｕｏｒｏＭｅｄ、Ｌ．Ｐ、Ｒｏｕｎｄ Ｒｏｃｋ、ＴＸ）の上に注
ぐことができる。典型的には、２層保存方法は、例えば、ステンレス鋼メッシュプレート
が取り付けられた取り外し可能な蓋と、入口及び、出口ポートとを有する臓器輸送容器内
で実施される。例えば、米国特許６，４９０，８８０の臓器輸送容器を参照されたい。ペ
ルフルオロデカリンの比重はＶｉａＳｐａｎ（登録商標）及び、改質－ＵＷ溶液よりも大
きいので、ＶｉａＳｐａｎ（登録商標）又は改質ＵＷ溶液をペルフルオロデカリンに添加
した後、２つの層が形成される。改質ＵＷ溶液は、０．３５～０．４５ｇ／Ｌの水酸化カ
リウム、３．００～４．００ｇ／Ｌの一リン酸ナトリウム一水和物、０．０５～１．００
ｇ／Ｌの塩化カルシウム二水和物、１．１０～１．３０ｇ／Ｌの硫酸マグネシウム七水和
物、３３．００～３８．００ｇ／Ｌのラクトビオン酸、４．００～５．００ｇ／Ｌのヒス
チジン、１５．００～２０．００ｇ／Ｌのラフィノース、４．００～５．００ｇ／Ｌの水
酸化ナトリウム、１５．００～２５．００ｇ／Ｌのペンタデンプン、１．００～１．５０
ｇ／Ｌのアデノシン、及び、０．７５～１．５０ｇのグルタチオンを含む。特に、改質Ｕ
Ｗ溶液は、０．３９ｇ／Ｌの水酸化カリウム、３．４５ｇ／Ｌの一リン酸ナトリウム一水
和物、０．０７４ｇ／Ｌの塩化カルシウム二水和物、１．２３ｇ／Ｌの硫酸マグネシウム
七水和物、３５．８３ｇ／Ｌのラクトビオン酸、４．６６ｇ／Ｌのヒスチジン、１７．８
４ｇ／Ｌのラフィノース、４．６０ｇ／Ｌの水酸化ナトリウム、２０．００ｇ／Ｌのペン
タデンプン、１．３４ｇ／Ｌのアデノシン、及び、０．９２ｇ／Ｌのグルタチオンをを含
み得る。典型的には、ペルフルオロデカリンが３０～７０分間（例えば、４０～６０分間
）酸素化される。例えば、医療グレードの酸素は、０．２ｍｍフィルター（Ｇｅｌｍａｎ
Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ａｎｎ Ａｒｂｏｒ、ＭＩ）及び、輸送容器の入口ポートを通して
２．５Ｌ／分の速度で濾過することができる。好ましくは、ドナー膵臓の冷蔵時間が１２
時間未満（例えば、１０、８、６、４、又は２時間未満）である。ドナー膵臓を受け取る
と、出荷コンテナの完全性は、目視検査によって検証することができる。膵臓を取り出し
、８．００～１０．００ｇ／Ｌのマンニトール、３．００～６．００ｇ／Ｌのヒスチジン
、１８．００～２１．００ｇ／Ｌのグルコン酸、０．５０～２．００ｇ／Ｌの水酸化カリ
ウム、０．０１～０．０５ｇ／Ｌの塩化カルシウム、０．５０～２．００ｇ／Ｌの硫酸マ
グネシウム、０．４０～０．８０ｇ／Ｌのニコチンアミド、０．３０～０．７０ｇ／Ｌの
ピルビン酸、及び、１．５０～３．５０ｇ／Ｌのリン酸カリウム一塩基性物質を含有する
低温輸送溶液ですすぐことができる。例えば、低温輸送溶液は、８．５０～９．５０ｇ／
Ｌ（例えば、９．１１ｇ／Ｌ）のＤ－マンニトール、４．００～５．００ｇ／Ｌ（例えば
、４．６７ｇ／Ｌ）のＬ－ヒスチジン、１８．５０～２０．５０ｇ／Ｌ（例えば、１９．
６３ｇ／Ｌ）のＤ－グルコン酸ナトリウム塩、０．８０～１．４０ｇ／Ｌ（例えば、１．
１２ｇ／Ｌ）の水酸化カリウム、０．０２５～０．０４５ｇ／Ｌ（例えば、０．０３７ｇ
／Ｌ）の塩化カルシウム二水和物、１．００～１．５０ｇ／Ｌ（例えば、１．２３ｇ／Ｌ
）の硫酸マグネシウム七水和物、０．５５～０．６５ｇ／Ｌ（例えば、０．６１ｇ／Ｌ
ピルビン酸ナトリウム０．６０ｇ／Ｌ（例えば、０．５５ｇ／Ｌ）、リン酸カリウム１塩
基２．５０～３．２５ｇ／Ｌ（例えば、２．７２ｇ／Ｌ）を含み得る。膵島は、膵臓組織
解離の自動化された方法を使用して、ドナー膵臓から単離され得る。例えば、Ｒｉｃｏｒ
ｄｉら、Ｄｉａｂｅｔｅｓ １９８８；３７：４１３－４２０を参照のこと。この方法は
、１）解離；２）膨張；３）解離；及び、４）収集の一般的な工程を含む。膵臓の解離は
、外来脂肪（膨張中の漏出を最小限にするためにいくらかの脂肪を保持しながら）及び、
非膵臓組織を除去することを含み得る。典型的には、脂肪の約８０％～約９５％が除去さ
れる。解剖された膵臓は、例えば、ゲンタマイシン（Ｅｌｋｉｎｓ－Ｓｉｎｎ社）、セフ
ァゾリン（ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ Ｂｅｅｃｈａｍ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ）、
及び、アンホテリシン－Ｂ（Ａｐｏｔｈｅｃｏｎ（登録商標））を冷輸送溶液中に含有す
る局所抗生物質溶液中でインキュベートされ得、次いで、フェノールレッドフリーハンク
ス平衡塩類溶液（Ｍｅｄｉａｔｅｃｈ社、Ｈｅｒｎｄｏｎ、Ｖａ）中で連続的にリンスさ
れ得る。膵臓は頸部で「体と尾」と「頭」に分けることができ、以下のステップが各部分
で行われる。一般に、血管カテーテル（１６～２０ゲージ）を用いて膵管にカニューレを
挿入し、初期圧８０ｍｍＨｇに続いて拡張手技の残りの部分の圧力を１８０ｍｍＨｇに上
昇させる等、制御された条件下で膵臓を潅流することができる。第Ｉ相溶液は、膵臓を潅
流するために使用することができる。第Ｉ相溶液は、５．００～６．００ｇ／Ｌのマンニ
トール、０．５０～０．７０ｇ／Ｌの水酸化ナトリウム、５．００～７．００ｇ／Ｌの塩
化ナトリウム、０．２５～０．４０ｇ／Ｌの水酸化カリウム、０．０５～０．１５ｇ／Ｌ
の塩化カルシウム、０．１５～０．２５ｇ／Ｌの硫酸マグネシウム、及び、３．００～４
．００ｇ／Ｌのリン酸一塩基性ナトリウムを含む。例えば、第Ｉ相溶液は、５．４７ｇ／
ＬのＤ－マンニトール、０．６０ｇ／Ｌの水酸化ナトリウム、６．１４ｇ／Ｌの塩化ナト
リウム、０．３３ｇ／Ｌの水酸化カリウム、０．１１ｇ／Ｌの塩化カルシウム二水和物、
０．２０ｇ／Ｌの硫酸マグネシウム七水和物、及び、３．４５ｇ／Ｌのリン酸ナトリウム
を含み得る。典型的には、第Ｉ相溶液は、コラゲナーゼの１，０００～３，６００ Ｗｕ
ｎｓｃｈ単位（コラゲナーゼ活性）又は２８，０００～１２８，５００カゼイナーゼ単位
（タンパク質分解活性）を含有する。例えば、第Ｉ相溶液は、１５００～３０００（例え
ば、１，５６２～２，９５４又は２，０８２～２，３６３）Ｗｕｎｓｃｈ単位、又は４２
，０００～１０８，０００（例えば、４２，３２８～１０７，０６４又は５６，４３７～
８５，６５１）カゼイナーゼ単位のコラゲナーゼを含み得る。適切なコラゲナーゼには、
ヒト膵島の分離手順用に特別に配合されたＬｉｂｅｒａｓｅ．ＴＭ．ＨＩ（Ｒｏｃｈｅ
Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ、Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ、Ｉｎｄ．
）が含まれる。Ｌｉｎｅｔｓｋｙら、Ｄｉａｂｅｔｅｓ １９９７；４６：１１２０－１
１２３を参照のこと。好ましくは、粉末状のＬｉｂｅｒａｓｅ．ＴＭ．ＨＩは、第Ｉ相溶
液に添加する少なくとも２０分前から２時間以内に再構成される。第Ｉ相溶液はまた、プ
ロテアーゼ阻害剤（例えば、４－（２－アミノエチル）－ベンゼンスルホニルフルオリド
塩酸塩（Ｐｅｆａｂｌｏｃ（登録商標）ＳＣ ＰＬＵＳ）、ＴＬＣＫ（１－クロロ－３－
トシルアミド－７－アミノ－２－ヘプタノン塩酸塩）、または大豆由来のトリプシン阻害
剤などのトリプシン阻害剤）を含み得る。例えば、第Ｉ相溶液は、内因性プロテアーゼを
特異的に阻害し、自己消化を減少させるＰｅｆａｂｌｏｃＳＣ ＰＬＵＳを０．０５～０
．１５ｍｇ／ｍＬ含み得る。また、第Ｉ相溶液は、８～１２単位／ｍＬのヘパリン（例え
ば、Ｍｏｎｏｐａｒｉｎ（登録商標）、Ａｃｃｕｒａｔｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ ａｎｄ
Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）を含み得る。例えば、第Ｉ相溶液は、
１０単位／ｍＬのヘパリンを含み得る。
して参照により組み込まれる。一実施形態では、米国特許出願第２００６／０１８２７２
２号に記載されている方法が提供される：膵臓が男性又は女性のドナーから入手すること
ができ、肝臓及び、膵臓の十二指腸の調達を組み合わせるために開発された技術である（
Ｍａｒｓｈら、Ｓｕｒｇ．Ｇｙｎｅｃｏｌ．Ｏｂｓｔｅｔ．１９８９；１６８：２５４－
２５８）。ドナーは、典型的には１５～５０歳の年齢の範囲である。一般的な除外基準に
は、例えば、全身性細菌感染症、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、ヒトＴ細胞リンパ栄
養ウイルス（ＨＴＬＶ）、Ｂ型肝炎ウイルス、又はＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）等のウイ
ルス、糖尿病の既往、頭蓋外腫瘍、及び、ＡＩＤＳの危険因子が含まれる。ドナー膵臓は
膵組織アデノシン三リン酸（ＡＴＰ）含量を改善し、貯蔵膵臓から単離された膵島の収率
を増加させ、膵島単離及び、移植のためのマージナルドナー膵臓の使用を可能にし、膵島
単離成功率を改善し、単離された膵島の完全性を保存する（例えば、単離された膵島が糖
尿病を逆転させることができるように）２層膵臓保存法を用いて保存することができる。
一般に、低温ウィスコンシン大学（ＵＷ）溶液（ＶｉａＳｐａｎ（登録商標）、ＤｕＰｏ
ｎｔ Ｐｈａｒｍａ、Ｗｉｌｍｉｎｇｔｏｎ、ＤＥ）（米国特許第４，７９８，８２４号
及び、第４，８７９，２８３号を参照のこと）又は改変ＵＷ溶液を、等容量の低温ペルフ
ルオロデカリン（ＦｌｕｏｒｏＭｅｄ、Ｌ．Ｐ、Ｒｏｕｎｄ Ｒｏｃｋ、ＴＸ）の上に注
ぐことができる。典型的には、２層保存方法は、例えば、ステンレス鋼メッシュプレート
が取り付けられた取り外し可能な蓋と、入口及び、出口ポートとを有する臓器輸送容器内
で実施される。例えば、米国特許６，４９０，８８０の臓器輸送容器を参照されたい。ペ
ルフルオロデカリンの比重はＶｉａＳｐａｎ（登録商標）及び、改質－ＵＷ溶液よりも大
きいので、ＶｉａＳｐａｎ（登録商標）又は改質ＵＷ溶液をペルフルオロデカリンに添加
した後、２つの層が形成される。改質ＵＷ溶液は、０．３５～０．４５ｇ／Ｌの水酸化カ
リウム、３．００～４．００ｇ／Ｌの一リン酸ナトリウム一水和物、０．０５～１．００
ｇ／Ｌの塩化カルシウム二水和物、１．１０～１．３０ｇ／Ｌの硫酸マグネシウム七水和
物、３３．００～３８．００ｇ／Ｌのラクトビオン酸、４．００～５．００ｇ／Ｌのヒス
チジン、１５．００～２０．００ｇ／Ｌのラフィノース、４．００～５．００ｇ／Ｌの水
酸化ナトリウム、１５．００～２５．００ｇ／Ｌのペンタデンプン、１．００～１．５０
ｇ／Ｌのアデノシン、及び、０．７５～１．５０ｇのグルタチオンを含む。特に、改質Ｕ
Ｗ溶液は、０．３９ｇ／Ｌの水酸化カリウム、３．４５ｇ／Ｌの一リン酸ナトリウム一水
和物、０．０７４ｇ／Ｌの塩化カルシウム二水和物、１．２３ｇ／Ｌの硫酸マグネシウム
七水和物、３５．８３ｇ／Ｌのラクトビオン酸、４．６６ｇ／Ｌのヒスチジン、１７．８
４ｇ／Ｌのラフィノース、４．６０ｇ／Ｌの水酸化ナトリウム、２０．００ｇ／Ｌのペン
タデンプン、１．３４ｇ／Ｌのアデノシン、及び、０．９２ｇ／Ｌのグルタチオンをを含
み得る。典型的には、ペルフルオロデカリンが３０～７０分間（例えば、４０～６０分間
）酸素化される。例えば、医療グレードの酸素は、０．２ｍｍフィルター（Ｇｅｌｍａｎ
Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ａｎｎ Ａｒｂｏｒ、ＭＩ）及び、輸送容器の入口ポートを通して
２．５Ｌ／分の速度で濾過することができる。好ましくは、ドナー膵臓の冷蔵時間が１２
時間未満（例えば、１０、８、６、４、又は２時間未満）である。ドナー膵臓を受け取る
と、出荷コンテナの完全性は、目視検査によって検証することができる。膵臓を取り出し
、８．００～１０．００ｇ／Ｌのマンニトール、３．００～６．００ｇ／Ｌのヒスチジン
、１８．００～２１．００ｇ／Ｌのグルコン酸、０．５０～２．００ｇ／Ｌの水酸化カリ
ウム、０．０１～０．０５ｇ／Ｌの塩化カルシウム、０．５０～２．００ｇ／Ｌの硫酸マ
グネシウム、０．４０～０．８０ｇ／Ｌのニコチンアミド、０．３０～０．７０ｇ／Ｌの
ピルビン酸、及び、１．５０～３．５０ｇ／Ｌのリン酸カリウム一塩基性物質を含有する
低温輸送溶液ですすぐことができる。例えば、低温輸送溶液は、８．５０～９．５０ｇ／
Ｌ（例えば、９．１１ｇ／Ｌ）のＤ－マンニトール、４．００～５．００ｇ／Ｌ（例えば
、４．６７ｇ／Ｌ）のＬ－ヒスチジン、１８．５０～２０．５０ｇ／Ｌ（例えば、１９．
６３ｇ／Ｌ）のＤ－グルコン酸ナトリウム塩、０．８０～１．４０ｇ／Ｌ（例えば、１．
１２ｇ／Ｌ）の水酸化カリウム、０．０２５～０．０４５ｇ／Ｌ（例えば、０．０３７ｇ
／Ｌ）の塩化カルシウム二水和物、１．００～１．５０ｇ／Ｌ（例えば、１．２３ｇ／Ｌ
）の硫酸マグネシウム七水和物、０．５５～０．６５ｇ／Ｌ（例えば、０．６１ｇ／Ｌ
ピルビン酸ナトリウム０．６０ｇ／Ｌ（例えば、０．５５ｇ／Ｌ）、リン酸カリウム１塩
基２．５０～３．２５ｇ／Ｌ（例えば、２．７２ｇ／Ｌ）を含み得る。膵島は、膵臓組織
解離の自動化された方法を使用して、ドナー膵臓から単離され得る。例えば、Ｒｉｃｏｒ
ｄｉら、Ｄｉａｂｅｔｅｓ １９８８；３７：４１３－４２０を参照のこと。この方法は
、１）解離；２）膨張；３）解離；及び、４）収集の一般的な工程を含む。膵臓の解離は
、外来脂肪（膨張中の漏出を最小限にするためにいくらかの脂肪を保持しながら）及び、
非膵臓組織を除去することを含み得る。典型的には、脂肪の約８０％～約９５％が除去さ
れる。解剖された膵臓は、例えば、ゲンタマイシン（Ｅｌｋｉｎｓ－Ｓｉｎｎ社）、セフ
ァゾリン（ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ Ｂｅｅｃｈａｍ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ）、
及び、アンホテリシン－Ｂ（Ａｐｏｔｈｅｃｏｎ（登録商標））を冷輸送溶液中に含有す
る局所抗生物質溶液中でインキュベートされ得、次いで、フェノールレッドフリーハンク
ス平衡塩類溶液（Ｍｅｄｉａｔｅｃｈ社、Ｈｅｒｎｄｏｎ、Ｖａ）中で連続的にリンスさ
れ得る。膵臓は頸部で「体と尾」と「頭」に分けることができ、以下のステップが各部分
で行われる。一般に、血管カテーテル（１６～２０ゲージ）を用いて膵管にカニューレを
挿入し、初期圧８０ｍｍＨｇに続いて拡張手技の残りの部分の圧力を１８０ｍｍＨｇに上
昇させる等、制御された条件下で膵臓を潅流することができる。第Ｉ相溶液は、膵臓を潅
流するために使用することができる。第Ｉ相溶液は、５．００～６．００ｇ／Ｌのマンニ
トール、０．５０～０．７０ｇ／Ｌの水酸化ナトリウム、５．００～７．００ｇ／Ｌの塩
化ナトリウム、０．２５～０．４０ｇ／Ｌの水酸化カリウム、０．０５～０．１５ｇ／Ｌ
の塩化カルシウム、０．１５～０．２５ｇ／Ｌの硫酸マグネシウム、及び、３．００～４
．００ｇ／Ｌのリン酸一塩基性ナトリウムを含む。例えば、第Ｉ相溶液は、５．４７ｇ／
ＬのＤ－マンニトール、０．６０ｇ／Ｌの水酸化ナトリウム、６．１４ｇ／Ｌの塩化ナト
リウム、０．３３ｇ／Ｌの水酸化カリウム、０．１１ｇ／Ｌの塩化カルシウム二水和物、
０．２０ｇ／Ｌの硫酸マグネシウム七水和物、及び、３．４５ｇ／Ｌのリン酸ナトリウム
を含み得る。典型的には、第Ｉ相溶液は、コラゲナーゼの１，０００～３，６００ Ｗｕ
ｎｓｃｈ単位（コラゲナーゼ活性）又は２８，０００～１２８，５００カゼイナーゼ単位
（タンパク質分解活性）を含有する。例えば、第Ｉ相溶液は、１５００～３０００（例え
ば、１，５６２～２，９５４又は２，０８２～２，３６３）Ｗｕｎｓｃｈ単位、又は４２
，０００～１０８，０００（例えば、４２，３２８～１０７，０６４又は５６，４３７～
８５，６５１）カゼイナーゼ単位のコラゲナーゼを含み得る。適切なコラゲナーゼには、
ヒト膵島の分離手順用に特別に配合されたＬｉｂｅｒａｓｅ．ＴＭ．ＨＩ（Ｒｏｃｈｅ
Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ、Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ、Ｉｎｄ．
）が含まれる。Ｌｉｎｅｔｓｋｙら、Ｄｉａｂｅｔｅｓ １９９７；４６：１１２０－１
１２３を参照のこと。好ましくは、粉末状のＬｉｂｅｒａｓｅ．ＴＭ．ＨＩは、第Ｉ相溶
液に添加する少なくとも２０分前から２時間以内に再構成される。第Ｉ相溶液はまた、プ
ロテアーゼ阻害剤（例えば、４－（２－アミノエチル）－ベンゼンスルホニルフルオリド
塩酸塩（Ｐｅｆａｂｌｏｃ（登録商標）ＳＣ ＰＬＵＳ）、ＴＬＣＫ（１－クロロ－３－
トシルアミド－７－アミノ－２－ヘプタノン塩酸塩）、または大豆由来のトリプシン阻害
剤などのトリプシン阻害剤）を含み得る。例えば、第Ｉ相溶液は、内因性プロテアーゼを
特異的に阻害し、自己消化を減少させるＰｅｆａｂｌｏｃＳＣ ＰＬＵＳを０．０５～０
．１５ｍｇ／ｍＬ含み得る。また、第Ｉ相溶液は、８～１２単位／ｍＬのヘパリン（例え
ば、Ｍｏｎｏｐａｒｉｎ（登録商標）、Ａｃｃｕｒａｔｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ ａｎｄ
Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）を含み得る。例えば、第Ｉ相溶液は、
１０単位／ｍＬのヘパリンを含み得る。
【0070】
いくつかの実施形態では、第Ｉ相溶液が１，０００～３，６００Ｗｕｎｓｃｈ単位のコ
ラゲナーゼ、０．０５～０．１５ｍｇ／ｍＬのトリプシン阻害剤、及び、１０単位／ｍＬ
のヘパリンを含有する。十分な期間、例えば、８～２０分間の冷潅流の後、膨張した膵臓
は残りのカプセルをさらに切り取り、解離チャンバ（例えば、Ｒｉｃｏｒｄｉチャンバと
しても知られる無菌ステンレス鋼チャンバ（Ｗａｈｏｆｆら、Ａｎｎ．Ｓｕｒｇ．１９９
５；２２２：５６２－５７９））に入れることができる。膨張した膵臓から「漏れた」コ
ラゲナーゼをチャンバーに添加することができる。典型的には、Ｒｉｃｏｒｄｉチャンバ
が熱交換コイル（例えば、ステンレス鋼コイル）、ポンプ、温度モニタ及び、センサ、装
填フラスコ、流体収集フラスコ、サンプル収集フラスコ、並びに構成要素を流体接続する
ための管を含む循環システム内にある。流れ方向は、例えば、バルブ又はクランプを使用
して制御することができる。熱交換コイルは、水浴中に配置することができる。Ｒｉｃｏ
ｒｄｉチャンバーを収容する循環システムの一実施形態には、熱交換用のステンレススチ
ール製コイル、小径の６つのチューブ（Ｍａｓｔｅｒ Ｆｌｅｘチューブ、サイズ１６）
、大径の４つのチューブ（Ｍａｓｔｅｒ Ｆｌｅｘチューブ、サイズ１７）、サンプリン
グ用のスチール製３方活栓、４つのプラスチッククランプ、２５０ｍＬの円錐チューブ、
三方注入型使い捨てビーカー、１０００ｍＬ、ベル型プラスチックカバー、２つのＴ型コ
ネクター、（１）ルアーロックポート付きのＴ型コネクター、及び、２つのアームを備え
た１８インチスチール製リングスタンド、Ｉｓｍａｔｅｃポンプ、Ｍｏｎ－ａ－ｔｈｅｒ
ｍ温度モニター及び、センサー、及び、水浴がある。この系を第Ｉ相溶液で満たし、空気
を排気して消化段階を開始することができる。特に、第Ｉ相溶液は、ローディングフラス
コからポンプ、熱交換コイル、及び、Ｒｉｃｏｒｄｉチャンバーを通って流体収集フラス
コに流れることができる。第Ｉ相溶液の体積の１０％～３０％が流体収集フラスコに到達
した後、第Ｉ相溶液がシステムを通って再循環されるように、すなわち、第Ｉ相溶液が流
体収集フラスコからチャンバへ、及び、チャンバから流体収集フラスコへ流れるように、
システムの流れを調節することができる。チャンバは、組織解離を補助するために流体が
再循環されている間に撹拌され得る。流体の温度は２５℃～３７℃に維持することができ
、収集段階は、一旦、チャンバから遊離される組織の量が増加すると開始することができ
、膵島の大部分又は全ては周囲の腺房組織を含まず、無傷の膵島が観察され、腺房組織は
より細かくなる（小細胞クラスター）。ジフェニルチオカルバゾン（ＤＴＺ）染色を用い
て、島を非島組織から区別することができる。Ｌａｔｉｆら、Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔ
ｉｏｎ １９８８；４５：８２７－８３０を参照のこと。ＤＴＺは、島β細胞顆粒中の亜
鉛－インスリン複合体に選択的に結合し、島の赤色染色を生じる。ＤＴＺ染色は、腺房組
織からの膵島の識別のための迅速な手段を提供し、陽性反応は、インスリン含有β細胞が
存在することを示す。収集段階の間、システムの温度を約１０℃～約３０℃に下げること
ができ、流体収集フラスコ内の流体をポンプ及び、熱交換コイルを通してＲｉｃｏｒｄｉ
チャンバ内に流すことができ、第ＩＩ相溶液（ＲＰＭＩ １６４０、カタログ番号９９－
５９５－ＣＭ、Ｍｅｄｉａｔｅｃｈ社、Ｈｅｒｎｄｏｎ、Ｖａ）をローディングフラスコ
に添加することができる。第ＩＩ相溶液は、コラゲナーゼを希釈し、そして組織を洗浄す
るために、循環系を通してポンプ輸送され得る。消化された物質は、第ＩＩ相溶液及び、
ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）を含むフラスコに収集することができ、収集された物質は
、冷蔵溶液を使用して２～５回洗浄された。冷貯蔵液は、１６．００から２０．００ｇ／
Ｌのラフィノース、４．００から６．００ｇ／Ｌのヒスチジン、４．００から５．００ｇ
／Ｌの水酸化ナトリウム、３０．００から４０．００ｇ／Ｌのラクトビオン酸、０．３０
から０．５０ｇ／Ｌの水酸化カリウム、０．０５から０．１０ｇ／Ｌの塩化カルシウム、
１．００から１．５０ｇ／Ｌの硫酸マグネシウム、３．００から４．００ｇ／Ｌの一塩基
性リン酸ナトリウム、１９．００から２１．００ｇ／Ｌのペンタスターチ、８．００から
１２．００Ｕ／ｍＬのヘパリン、及び、８．００から１２．００μｇ／ｍＬのインシュリ
ンを含み得る。例えば、冷貯蔵溶液は、１７．８４ｇ／ＬのＤ（＋）ラフィノース、４．
６６ｇ／Ｌのヒスチジン、４．６０ｇ／Ｌの水酸化ナトリウム、３５．８３ｇ／Ｌのラク
トビオン酸、０．３９ｇ／Ｌの水酸化カリウム、０．３９ｇ／Ｌの塩化カルシウム二水和
物、１．２３ｇ／Ｌの硫酸マグネシウム七水和物、３．４５ｇ／Ｌの一塩基性リン酸ナト
リウム、２％五澱粉、１０Ｕ／ｍＬのヘパリン、及び、１０μｇ／ｍＬのインスリンを含
み得る。冷貯蔵溶液はＨ相ＩＩ溶液（８０体積％）を１０％ペンタデンプン（すなわち、
１００ｇ／Ｌ）（２０体積％）と組み合わせ、８．００～１２．００Ｕ／ｍＬヘパリン、
及び、８．００～１２．００μｇ／ｍＬインスリンを添加することによって作製すること
ができる。Ｈ相溶液は、１６．００～２０．００ｇ／Ｌラフィノース、４．００～６．０
０ｇ／Ｌヒスチジン、４．００～５．００ｇ／Ｌ水酸化ナトリウム、３０．００～４０．
００ｇ／Ｌラクトビオン酸、０．３０～０．５０ｇ／Ｌ水酸化カリウム、０．０５～０．
１０ｇ／Ｌ塩化カルシウム、１．００～１．５０ｇ／Ｌ硫酸マグネシウム、３．００～４
．００ｇ／Ｌリン酸一塩基ナトリウムを含む。Ｈ相ＩＩ溶液のｐＨは、塩酸又は水酸化ナ
トリウムを用いて７．３～７．５のｐＨに調整することができる。Ｈ相ＩＩ溶液の密度は
、典型的には１．０６３±０．００３である。例えば、Ｈ相ＩＩ溶液は、１７．８４ｇ／
ＬのＤ（＋）ラフィノース、４．６６ｇ／Ｌのヒスチジン、４．６０ｇ／Ｌの水酸化ナト
リウム、３５．８３ｇ／Ｌのラクトビオン酸、０．３９ｇ／Ｌの水酸化カリウム、０．３
９ｇ／Ｌの塩化カルシウム二水和物、１．２３ｇ／Ｌの硫酸マグネシウム七水和物、及び
、３．４５ｇ／Ｌの一塩基性リン酸ナトリウムを含み得る。洗浄した組織はキャッピング
層溶液及び、ＨＳＡ（例えば、２５％ ＨＳＡ）に再懸濁することができ、キャッピング
層溶液は、ｌ６．００～２０．００ｇ／Ｌラフィノース；４．００～６．００ｇ／Ｌヒス
チジン；４．００～５．００ｇ／Ｌ水酸化ナトリウム；３０．００～４０．００ｇ／Ｌラ
クトビオン酸；０．３０～０．５０ｇ／Ｌ水酸化カリウム；０．０５～０．１０ｇ／Ｌ塩
化カルシウム；１．００～１．５０ｇ／Ｌ硫酸マグネシウム；３．００～４．００ｇ／Ｌ
リン酸一塩基ナトリウム；及び、１９．００～２１．００ｇ／Ｌペンタスタッチを含み得
る。例えば、キャップ層液は、１．０３５～１．０３６ｇ／ｃｍ３の濃度を有することが
でき、１７．８４ｇ／ＬのＤ（＋）ラフィノース、４．６７ｇ／Ｌのヒスチジン、４．６
ｇ／Ｌの水酸化ナトリウム、３５．８３ｇ／Ｌのラクトビオン酸、０．３９３ｇ／Ｌの水
酸化カリウム、０．０７ｇ／Ｌの塩化カルシウム二水和物、１．２３ｇ／Ｌの硫酸マグネ
シウム七水和物、３．４５ｇ／Ｌのリン酸ナトリウム一塩基性、及び、２％の五澱粉を含
み得る。キャップ層溶液はＨ相ＩＩ溶液（８０体積％）を１０％ペンタデンプン（すなわ
ち、１００ｇ／Ｌ）（２０体積％）と組み合わせることによって作製し得る。島は、連続
密度勾配分離を用いて精製することができる。勾配は、イオジキサノール（ＯｐｔｉＰｒ
ｅｐ（登録商標）、Ｎｙｃｏｍｅｄ、Ｒｏｓｋｉｌｄｅ、Ｄｅｎｍａｒｋ）（密度１．３
２ｇ／ｃｍ３）及び、キャップ層溶液、冷蔵溶液及び、／又は高密度（ＨＤ）原液を用い
て調製することができる。ＨＤ原液は、１６．００～２０．００ｇ／Ｌのラフィノース；
４．００～６．００ｇ／Ｌのヒスチジン；４．００～５．００ｇ／Ｌの水酸化ナトリウム
；３０．００～４０．００ｇ／Ｌのラクトビオン酸；０．３０～０．５０ｇ／Ｌの水酸化
カリウム；０．０５～０．１０ｇ／Ｌの塩化カルシウム；１．００～１．５０ｇ／Ｌの硫
酸マグネシウム；３．００～４．００ｇ／Ｌの一塩基性リン酸ナトリウム；１５．００～
２５．００ｇ／Ｌのペンタスターチ；及び、２００～３００ｍｌ。ＨＤ原液の密度は、典
型的には１．１１２±０．００３ｇ／ｃｍ２・ｓｕｐ．３である。例えば、ＨＤ原液は、
１７．８４ｇ／ＬのＤ（＋）ラフィノース、４．６７ｇ／Ｌのヒスチジン、４．６ｇ／Ｌ
の水酸化ナトリウム、３５．８３ｇ／Ｌのラクトビオン酸、０．３９ｇ／Ｌの水酸化カリ
ウム、０．０７ｇ／Ｌの塩化カルシウム二水和物、１．２３ｇ／Ｌの硫酸マグネシウム七
水和物、３．４５ｇ／Ｌの一塩基性リン酸ナトリウム、２０ｇ／Ｌのペンタデンプン、及
び、２５０ｍＬ／Ｌのイオジキサノール（ＯｐｔｉｐｒｅｐＴＭ）を含み得る。いくつか
の実施形態において、ＨＤストック溶液はまた、８．００～１２．００Ｕ／ｍＬのヘパリ
ン及び、／又は８．００～１２．００μｇ／ｍＬのインスリンを含み得る。１．０８～１
．１３ｇ／ｃｍ３の範囲の密度を有する底部密度勾配溶液は、ＨＤ原液と冷貯蔵溶液とを
混合することによって調製することができる。密度１．０５０～１．０８０ｇ／ｃｍ３の
軽密度勾配溶液はイオジキサノールと低温貯蔵溶液を混合することによって作ることがで
き、一方、密度１．０６～１．１３ｇ／ｃｍ３の重密度勾配溶液は、低温貯蔵溶液と高温
貯蔵溶液とを混合することによって作り得る。
ラゲナーゼ、０．０５～０．１５ｍｇ／ｍＬのトリプシン阻害剤、及び、１０単位／ｍＬ
のヘパリンを含有する。十分な期間、例えば、８～２０分間の冷潅流の後、膨張した膵臓
は残りのカプセルをさらに切り取り、解離チャンバ（例えば、Ｒｉｃｏｒｄｉチャンバと
しても知られる無菌ステンレス鋼チャンバ（Ｗａｈｏｆｆら、Ａｎｎ．Ｓｕｒｇ．１９９
５；２２２：５６２－５７９））に入れることができる。膨張した膵臓から「漏れた」コ
ラゲナーゼをチャンバーに添加することができる。典型的には、Ｒｉｃｏｒｄｉチャンバ
が熱交換コイル（例えば、ステンレス鋼コイル）、ポンプ、温度モニタ及び、センサ、装
填フラスコ、流体収集フラスコ、サンプル収集フラスコ、並びに構成要素を流体接続する
ための管を含む循環システム内にある。流れ方向は、例えば、バルブ又はクランプを使用
して制御することができる。熱交換コイルは、水浴中に配置することができる。Ｒｉｃｏ
ｒｄｉチャンバーを収容する循環システムの一実施形態には、熱交換用のステンレススチ
ール製コイル、小径の６つのチューブ（Ｍａｓｔｅｒ Ｆｌｅｘチューブ、サイズ１６）
、大径の４つのチューブ（Ｍａｓｔｅｒ Ｆｌｅｘチューブ、サイズ１７）、サンプリン
グ用のスチール製３方活栓、４つのプラスチッククランプ、２５０ｍＬの円錐チューブ、
三方注入型使い捨てビーカー、１０００ｍＬ、ベル型プラスチックカバー、２つのＴ型コ
ネクター、（１）ルアーロックポート付きのＴ型コネクター、及び、２つのアームを備え
た１８インチスチール製リングスタンド、Ｉｓｍａｔｅｃポンプ、Ｍｏｎ－ａ－ｔｈｅｒ
ｍ温度モニター及び、センサー、及び、水浴がある。この系を第Ｉ相溶液で満たし、空気
を排気して消化段階を開始することができる。特に、第Ｉ相溶液は、ローディングフラス
コからポンプ、熱交換コイル、及び、Ｒｉｃｏｒｄｉチャンバーを通って流体収集フラス
コに流れることができる。第Ｉ相溶液の体積の１０％～３０％が流体収集フラスコに到達
した後、第Ｉ相溶液がシステムを通って再循環されるように、すなわち、第Ｉ相溶液が流
体収集フラスコからチャンバへ、及び、チャンバから流体収集フラスコへ流れるように、
システムの流れを調節することができる。チャンバは、組織解離を補助するために流体が
再循環されている間に撹拌され得る。流体の温度は２５℃～３７℃に維持することができ
、収集段階は、一旦、チャンバから遊離される組織の量が増加すると開始することができ
、膵島の大部分又は全ては周囲の腺房組織を含まず、無傷の膵島が観察され、腺房組織は
より細かくなる（小細胞クラスター）。ジフェニルチオカルバゾン（ＤＴＺ）染色を用い
て、島を非島組織から区別することができる。Ｌａｔｉｆら、Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔ
ｉｏｎ １９８８；４５：８２７－８３０を参照のこと。ＤＴＺは、島β細胞顆粒中の亜
鉛－インスリン複合体に選択的に結合し、島の赤色染色を生じる。ＤＴＺ染色は、腺房組
織からの膵島の識別のための迅速な手段を提供し、陽性反応は、インスリン含有β細胞が
存在することを示す。収集段階の間、システムの温度を約１０℃～約３０℃に下げること
ができ、流体収集フラスコ内の流体をポンプ及び、熱交換コイルを通してＲｉｃｏｒｄｉ
チャンバ内に流すことができ、第ＩＩ相溶液（ＲＰＭＩ １６４０、カタログ番号９９－
５９５－ＣＭ、Ｍｅｄｉａｔｅｃｈ社、Ｈｅｒｎｄｏｎ、Ｖａ）をローディングフラスコ
に添加することができる。第ＩＩ相溶液は、コラゲナーゼを希釈し、そして組織を洗浄す
るために、循環系を通してポンプ輸送され得る。消化された物質は、第ＩＩ相溶液及び、
ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）を含むフラスコに収集することができ、収集された物質は
、冷蔵溶液を使用して２～５回洗浄された。冷貯蔵液は、１６．００から２０．００ｇ／
Ｌのラフィノース、４．００から６．００ｇ／Ｌのヒスチジン、４．００から５．００ｇ
／Ｌの水酸化ナトリウム、３０．００から４０．００ｇ／Ｌのラクトビオン酸、０．３０
から０．５０ｇ／Ｌの水酸化カリウム、０．０５から０．１０ｇ／Ｌの塩化カルシウム、
１．００から１．５０ｇ／Ｌの硫酸マグネシウム、３．００から４．００ｇ／Ｌの一塩基
性リン酸ナトリウム、１９．００から２１．００ｇ／Ｌのペンタスターチ、８．００から
１２．００Ｕ／ｍＬのヘパリン、及び、８．００から１２．００μｇ／ｍＬのインシュリ
ンを含み得る。例えば、冷貯蔵溶液は、１７．８４ｇ／ＬのＤ（＋）ラフィノース、４．
６６ｇ／Ｌのヒスチジン、４．６０ｇ／Ｌの水酸化ナトリウム、３５．８３ｇ／Ｌのラク
トビオン酸、０．３９ｇ／Ｌの水酸化カリウム、０．３９ｇ／Ｌの塩化カルシウム二水和
物、１．２３ｇ／Ｌの硫酸マグネシウム七水和物、３．４５ｇ／Ｌの一塩基性リン酸ナト
リウム、２％五澱粉、１０Ｕ／ｍＬのヘパリン、及び、１０μｇ／ｍＬのインスリンを含
み得る。冷貯蔵溶液はＨ相ＩＩ溶液（８０体積％）を１０％ペンタデンプン（すなわち、
１００ｇ／Ｌ）（２０体積％）と組み合わせ、８．００～１２．００Ｕ／ｍＬヘパリン、
及び、８．００～１２．００μｇ／ｍＬインスリンを添加することによって作製すること
ができる。Ｈ相溶液は、１６．００～２０．００ｇ／Ｌラフィノース、４．００～６．０
０ｇ／Ｌヒスチジン、４．００～５．００ｇ／Ｌ水酸化ナトリウム、３０．００～４０．
００ｇ／Ｌラクトビオン酸、０．３０～０．５０ｇ／Ｌ水酸化カリウム、０．０５～０．
１０ｇ／Ｌ塩化カルシウム、１．００～１．５０ｇ／Ｌ硫酸マグネシウム、３．００～４
．００ｇ／Ｌリン酸一塩基ナトリウムを含む。Ｈ相ＩＩ溶液のｐＨは、塩酸又は水酸化ナ
トリウムを用いて７．３～７．５のｐＨに調整することができる。Ｈ相ＩＩ溶液の密度は
、典型的には１．０６３±０．００３である。例えば、Ｈ相ＩＩ溶液は、１７．８４ｇ／
ＬのＤ（＋）ラフィノース、４．６６ｇ／Ｌのヒスチジン、４．６０ｇ／Ｌの水酸化ナト
リウム、３５．８３ｇ／Ｌのラクトビオン酸、０．３９ｇ／Ｌの水酸化カリウム、０．３
９ｇ／Ｌの塩化カルシウム二水和物、１．２３ｇ／Ｌの硫酸マグネシウム七水和物、及び
、３．４５ｇ／Ｌの一塩基性リン酸ナトリウムを含み得る。洗浄した組織はキャッピング
層溶液及び、ＨＳＡ（例えば、２５％ ＨＳＡ）に再懸濁することができ、キャッピング
層溶液は、ｌ６．００～２０．００ｇ／Ｌラフィノース；４．００～６．００ｇ／Ｌヒス
チジン；４．００～５．００ｇ／Ｌ水酸化ナトリウム；３０．００～４０．００ｇ／Ｌラ
クトビオン酸；０．３０～０．５０ｇ／Ｌ水酸化カリウム；０．０５～０．１０ｇ／Ｌ塩
化カルシウム；１．００～１．５０ｇ／Ｌ硫酸マグネシウム；３．００～４．００ｇ／Ｌ
リン酸一塩基ナトリウム；及び、１９．００～２１．００ｇ／Ｌペンタスタッチを含み得
る。例えば、キャップ層液は、１．０３５～１．０３６ｇ／ｃｍ３の濃度を有することが
でき、１７．８４ｇ／ＬのＤ（＋）ラフィノース、４．６７ｇ／Ｌのヒスチジン、４．６
ｇ／Ｌの水酸化ナトリウム、３５．８３ｇ／Ｌのラクトビオン酸、０．３９３ｇ／Ｌの水
酸化カリウム、０．０７ｇ／Ｌの塩化カルシウム二水和物、１．２３ｇ／Ｌの硫酸マグネ
シウム七水和物、３．４５ｇ／Ｌのリン酸ナトリウム一塩基性、及び、２％の五澱粉を含
み得る。キャップ層溶液はＨ相ＩＩ溶液（８０体積％）を１０％ペンタデンプン（すなわ
ち、１００ｇ／Ｌ）（２０体積％）と組み合わせることによって作製し得る。島は、連続
密度勾配分離を用いて精製することができる。勾配は、イオジキサノール（ＯｐｔｉＰｒ
ｅｐ（登録商標）、Ｎｙｃｏｍｅｄ、Ｒｏｓｋｉｌｄｅ、Ｄｅｎｍａｒｋ）（密度１．３
２ｇ／ｃｍ３）及び、キャップ層溶液、冷蔵溶液及び、／又は高密度（ＨＤ）原液を用い
て調製することができる。ＨＤ原液は、１６．００～２０．００ｇ／Ｌのラフィノース；
４．００～６．００ｇ／Ｌのヒスチジン；４．００～５．００ｇ／Ｌの水酸化ナトリウム
；３０．００～４０．００ｇ／Ｌのラクトビオン酸；０．３０～０．５０ｇ／Ｌの水酸化
カリウム；０．０５～０．１０ｇ／Ｌの塩化カルシウム；１．００～１．５０ｇ／Ｌの硫
酸マグネシウム；３．００～４．００ｇ／Ｌの一塩基性リン酸ナトリウム；１５．００～
２５．００ｇ／Ｌのペンタスターチ；及び、２００～３００ｍｌ。ＨＤ原液の密度は、典
型的には１．１１２±０．００３ｇ／ｃｍ２・ｓｕｐ．３である。例えば、ＨＤ原液は、
１７．８４ｇ／ＬのＤ（＋）ラフィノース、４．６７ｇ／Ｌのヒスチジン、４．６ｇ／Ｌ
の水酸化ナトリウム、３５．８３ｇ／Ｌのラクトビオン酸、０．３９ｇ／Ｌの水酸化カリ
ウム、０．０７ｇ／Ｌの塩化カルシウム二水和物、１．２３ｇ／Ｌの硫酸マグネシウム七
水和物、３．４５ｇ／Ｌの一塩基性リン酸ナトリウム、２０ｇ／Ｌのペンタデンプン、及
び、２５０ｍＬ／Ｌのイオジキサノール（ＯｐｔｉｐｒｅｐＴＭ）を含み得る。いくつか
の実施形態において、ＨＤストック溶液はまた、８．００～１２．００Ｕ／ｍＬのヘパリ
ン及び、／又は８．００～１２．００μｇ／ｍＬのインスリンを含み得る。１．０８～１
．１３ｇ／ｃｍ３の範囲の密度を有する底部密度勾配溶液は、ＨＤ原液と冷貯蔵溶液とを
混合することによって調製することができる。密度１．０５０～１．０８０ｇ／ｃｍ３の
軽密度勾配溶液はイオジキサノールと低温貯蔵溶液を混合することによって作ることがで
き、一方、密度１．０６～１．１３ｇ／ｃｍ３の重密度勾配溶液は、低温貯蔵溶液と高温
貯蔵溶液とを混合することによって作り得る。
【0071】
連続勾配は例えば、デュアルチャンバ勾配メーカーにおいて、軽密度勾配溶液と重密度
勾配溶液とを組み合わせることによって作ることができる。底部密度勾配はＣｏｂｅ ２
９９１セルセパレータ（Ｌａｋｅｗｏｏｄ、ＣＯ）等のセルセパレータ用のセル処理バッ
グに移すことができ、連続勾配を底部密度勾配上に重ねることができる。再懸濁された組
織（上記のように）を連続勾配上に配置し、続いてキャッピング層溶液を配置し、次いで
勾配を回転させて膵島を分離することができる。画分を収集し、そして以下に記載される
ように、島の存在についてアッセイし得る。膵島純度（ＤＴＺ陽性細胞のパーセンテージ
）＞１０％を有する画分を、培養のために合わせることができる。精製された膵島は、培
養条件下でヒト膵島の生存率を維持するために有効である化学的に規定された培養培地を
使用して培養され得る。典型的には島は２２℃又は３７℃で、９５％大気及び、５％ＣＯ
２の大気中で培養される。いくつかの実施形態では島は室内空気の雰囲気中で培養するこ
とができる。島の生存率は、トリパンブルー又は蛍光色素包接／排除アッセイを用いて評
価することができる。例えば、Ｂａｒｎｅｔｔら、Ｃｅｌｌ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ、２
００４；１３（５）：４８１－８を参照のこと。化学的に規定された培養培地は、インス
リン、硫酸亜鉛、セレン、トランスフェリン、ピルビン酸ナトリウム、ＨＥＰＥＳ（Ｎ－
［２－ヒドロキシエチル］ピペラジン－Ｎ’［２－エタンスルホン酸］）、ＨＳＡ、及び
、ヘパリンのうちの１つ以上を含み得る。例えば、化学的に規定された培養培地は５．５
０～７．５０μｇ／ｍＬのインスリン、１５～１８μＭの硫酸亜鉛、５．５０～７．５０
ｎｇ／ｍＬのセレン（例えば、亜セレン酸）、及び、５．５０～７．５０μｇ／ｍＬのト
ランスフェリン（例えば、ヒトトランスフェリン）を含み得る。このような培養培地は、
以下の１つ以上をさらに含み得る：３～７ｍＭのピルビン酸ナトリウム、２０～３０ｍＭ
のＨＥＰＥＳ、０．５０～１．５０ｍｇ／ｍＬのＨＳＡ、８．００～１２．００ Ｕ／ｍ
Ｌのヘパリン、１～３ｍＭのＬ－アリニル－Ｌ－グルタミン、及び、４．５０～６．５０
μｇ／ｍＬのリノール酸。典型的には、細胞が９５％の室内空気及び、５％のＣＯ．ｓｕ
ｂ．２下で培養される場合、化学的に規定された培養培地は重炭酸塩（例えば、２．２ｇ
／Ｌ等の１．７５～２．７５ｇ／Ｌ）を含む。細胞を１００％の室内空気中で培養すると
、重炭酸塩濃度を低下させることができる。いくつかの実施形態において、化学的に規定
された培養培地はまた、シプロフロキサシン（Ｂａｙｅｒ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）の
ような抗生物質を含む。一実施形態では、化学的に規定された培養培地が２５ｍＭのＨＥ
ＰＥＳ、２ｍＭのＬ－アリニル－Ｌ－グルタミン、５ｍＭのピルビン酸ナトリウム、１％
（ｖｏｌ／ｖｏｌ）、ＩＴＳ添加剤（６．２５μｇ／ｍＬのヒト組換えインスリン、６．
２５μｇ／ｍＬのヒトトランスフェリン、６．２５ｎｇ／ｍＬの亜セレン酸、１．２５ｍ
ｇ／ｍＬのＨＳＡ、５．３５μｇ／ｍＬのリノール酸）、１６．７μＭの硫酸亜鉛、２０
μｇ／ｍＬのシプロフロキサシン（Ｂａｙｅｒ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、及び、０．
５％の最終濃度の２５％ ＨＳＡを補充したＣＭＲＬ １０６６（Ｍｅｄｉａｔｅｃｈ社
、Ｈｅｒｎｄｏｎ、Ｖａ）であり得る。ヒトインスリン様成長因子－Ｉ（ＩＧＦ－Ｉ、Ｇ
ＲＯ ＰＥＰ Ｐｔｙ社、Ａｄｅｌａｉｄｅ、Ｓｏｕｔｈ Ａｕｓｔｒａｌｉａ）を膵島
培養物に添加することができる。例えば、９０～１１０ｎｇ／ｍＬ（例えば、１００ｎｇ
／ｍＬ）のＩＧＦ－１を培養物に添加することができる。典型的には膵島を３７℃で一晩
培養し、次いで２２℃でさらに１～３日間、膵島の移植前培養は有益な代謝及び、免疫学
的効果を提供することができる。例えば、２日間の膵島の培養は、新たに単離された膵島
と比較して、培養された膵島の代謝効力を改善することができる。移植前の膵島培養によ
って、移植前にレシピエントにおいてＴ細胞指向性免疫抑制が達成される時間も可能とな
る。特定の機構に拘束されることなく、Ｔ細胞指向性免疫抑制を達成することは、移植さ
れた膵島が直ちに露出される自己反応性でプライミングされたＴ細胞によって媒介される
膵島指向性免疫応答を低下させる可能性がある。本明細書中に記載されるように、Ｔ細胞
枯渇抗体による治療の開始後２日まで移植を遅延させることは、移植された膵島の、第１
及び、第２の抗体注入に関連する種々の程度のサイトカイン放出への曝露を防止する。さ
らに、膵島の移植前培養は、組織の注入前に品質管理研究を実施することを可能にする。
勾配溶液とを組み合わせることによって作ることができる。底部密度勾配はＣｏｂｅ ２
９９１セルセパレータ（Ｌａｋｅｗｏｏｄ、ＣＯ）等のセルセパレータ用のセル処理バッ
グに移すことができ、連続勾配を底部密度勾配上に重ねることができる。再懸濁された組
織（上記のように）を連続勾配上に配置し、続いてキャッピング層溶液を配置し、次いで
勾配を回転させて膵島を分離することができる。画分を収集し、そして以下に記載される
ように、島の存在についてアッセイし得る。膵島純度（ＤＴＺ陽性細胞のパーセンテージ
）＞１０％を有する画分を、培養のために合わせることができる。精製された膵島は、培
養条件下でヒト膵島の生存率を維持するために有効である化学的に規定された培養培地を
使用して培養され得る。典型的には島は２２℃又は３７℃で、９５％大気及び、５％ＣＯ
２の大気中で培養される。いくつかの実施形態では島は室内空気の雰囲気中で培養するこ
とができる。島の生存率は、トリパンブルー又は蛍光色素包接／排除アッセイを用いて評
価することができる。例えば、Ｂａｒｎｅｔｔら、Ｃｅｌｌ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ、２
００４；１３（５）：４８１－８を参照のこと。化学的に規定された培養培地は、インス
リン、硫酸亜鉛、セレン、トランスフェリン、ピルビン酸ナトリウム、ＨＥＰＥＳ（Ｎ－
［２－ヒドロキシエチル］ピペラジン－Ｎ’［２－エタンスルホン酸］）、ＨＳＡ、及び
、ヘパリンのうちの１つ以上を含み得る。例えば、化学的に規定された培養培地は５．５
０～７．５０μｇ／ｍＬのインスリン、１５～１８μＭの硫酸亜鉛、５．５０～７．５０
ｎｇ／ｍＬのセレン（例えば、亜セレン酸）、及び、５．５０～７．５０μｇ／ｍＬのト
ランスフェリン（例えば、ヒトトランスフェリン）を含み得る。このような培養培地は、
以下の１つ以上をさらに含み得る：３～７ｍＭのピルビン酸ナトリウム、２０～３０ｍＭ
のＨＥＰＥＳ、０．５０～１．５０ｍｇ／ｍＬのＨＳＡ、８．００～１２．００ Ｕ／ｍ
Ｌのヘパリン、１～３ｍＭのＬ－アリニル－Ｌ－グルタミン、及び、４．５０～６．５０
μｇ／ｍＬのリノール酸。典型的には、細胞が９５％の室内空気及び、５％のＣＯ．ｓｕ
ｂ．２下で培養される場合、化学的に規定された培養培地は重炭酸塩（例えば、２．２ｇ
／Ｌ等の１．７５～２．７５ｇ／Ｌ）を含む。細胞を１００％の室内空気中で培養すると
、重炭酸塩濃度を低下させることができる。いくつかの実施形態において、化学的に規定
された培養培地はまた、シプロフロキサシン（Ｂａｙｅｒ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）の
ような抗生物質を含む。一実施形態では、化学的に規定された培養培地が２５ｍＭのＨＥ
ＰＥＳ、２ｍＭのＬ－アリニル－Ｌ－グルタミン、５ｍＭのピルビン酸ナトリウム、１％
（ｖｏｌ／ｖｏｌ）、ＩＴＳ添加剤（６．２５μｇ／ｍＬのヒト組換えインスリン、６．
２５μｇ／ｍＬのヒトトランスフェリン、６．２５ｎｇ／ｍＬの亜セレン酸、１．２５ｍ
ｇ／ｍＬのＨＳＡ、５．３５μｇ／ｍＬのリノール酸）、１６．７μＭの硫酸亜鉛、２０
μｇ／ｍＬのシプロフロキサシン（Ｂａｙｅｒ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、及び、０．
５％の最終濃度の２５％ ＨＳＡを補充したＣＭＲＬ １０６６（Ｍｅｄｉａｔｅｃｈ社
、Ｈｅｒｎｄｏｎ、Ｖａ）であり得る。ヒトインスリン様成長因子－Ｉ（ＩＧＦ－Ｉ、Ｇ
ＲＯ ＰＥＰ Ｐｔｙ社、Ａｄｅｌａｉｄｅ、Ｓｏｕｔｈ Ａｕｓｔｒａｌｉａ）を膵島
培養物に添加することができる。例えば、９０～１１０ｎｇ／ｍＬ（例えば、１００ｎｇ
／ｍＬ）のＩＧＦ－１を培養物に添加することができる。典型的には膵島を３７℃で一晩
培養し、次いで２２℃でさらに１～３日間、膵島の移植前培養は有益な代謝及び、免疫学
的効果を提供することができる。例えば、２日間の膵島の培養は、新たに単離された膵島
と比較して、培養された膵島の代謝効力を改善することができる。移植前の膵島培養によ
って、移植前にレシピエントにおいてＴ細胞指向性免疫抑制が達成される時間も可能とな
る。特定の機構に拘束されることなく、Ｔ細胞指向性免疫抑制を達成することは、移植さ
れた膵島が直ちに露出される自己反応性でプライミングされたＴ細胞によって媒介される
膵島指向性免疫応答を低下させる可能性がある。本明細書中に記載されるように、Ｔ細胞
枯渇抗体による治療の開始後２日まで移植を遅延させることは、移植された膵島の、第１
及び、第２の抗体注入に関連する種々の程度のサイトカイン放出への曝露を防止する。さ
らに、膵島の移植前培養は、組織の注入前に品質管理研究を実施することを可能にする。
【0072】
精製された膵島細胞は、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）もしくはエチレングリコー
ル、又は凍結保存剤の混合物等の凍結保存剤中に細胞を懸濁することによって凍結保存す
ることができる。例えば、Ｍｉｙａｍｏｔｏら、Ｃｅｌｌ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ ２０
０１；１０（４－５）：３６３－７１；Ｅｖａｎｓら、Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ
１９９０；５０（２）：２０２－２０６；及び、Ｌａｋｅｙら、Ｃｅｌｌ Ｔｒａｎｓ
ｐｌａｎｔ １９９６；５（３）：３９５－４０４を参照のこと。膵島細胞は、精製又は
培養後に凍結保存することができる。典型的には、凍結保存剤を段階的に添加し、島をゆ
っくりと－４０℃に冷却し、次いで－１９６℃で貯蔵し、島を急速に解凍し（例えば、３
７℃の水浴中で）、使用前にアッセイすることができる。凍結保存は後の移植又は他の目
的のために、これらの細胞の長期保存を可能にすることができる。膵島細胞の精製された
集団の凍結保存コレクションは、膵島バンクを産生するために特に有用である。
ル、又は凍結保存剤の混合物等の凍結保存剤中に細胞を懸濁することによって凍結保存す
ることができる。例えば、Ｍｉｙａｍｏｔｏら、Ｃｅｌｌ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ ２０
０１；１０（４－５）：３６３－７１；Ｅｖａｎｓら、Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ
１９９０；５０（２）：２０２－２０６；及び、Ｌａｋｅｙら、Ｃｅｌｌ Ｔｒａｎｓ
ｐｌａｎｔ １９９６；５（３）：３９５－４０４を参照のこと。膵島細胞は、精製又は
培養後に凍結保存することができる。典型的には、凍結保存剤を段階的に添加し、島をゆ
っくりと－４０℃に冷却し、次いで－１９６℃で貯蔵し、島を急速に解凍し（例えば、３
７℃の水浴中で）、使用前にアッセイすることができる。凍結保存は後の移植又は他の目
的のために、これらの細胞の長期保存を可能にすることができる。膵島細胞の精製された
集団の凍結保存コレクションは、膵島バンクを産生するために特に有用である。
【0073】
本明細書中に記載される方法を使用して精製された同質遺伝子島細胞の調製は、典型的
には、少なくとも５５％（例えば、少なくとも６０％、６５％、７０％、７５％、８０％
、８５％、９０％、又は９５％）の患者において成功した移植を生じる。移植は、患者が
インスリン非依存性、正常血糖、及び、単ドナー膵島移植後少なくとも１年間低血糖がな
い状態を維持した場合に成功とみなされる。
には、少なくとも５５％（例えば、少なくとも６０％、６５％、７０％、７５％、８０％
、８５％、９０％、又は９５％）の患者において成功した移植を生じる。移植は、患者が
インスリン非依存性、正常血糖、及び、単ドナー膵島移植後少なくとも１年間低血糖がな
い状態を維持した場合に成功とみなされる。
【0074】
精製された膵島細胞の調製物は、膵島が移植されるのに十分な効力を有することを確認
するためにアッセイされ得る。本明細書中で使用される場合、「移植効力」は膵島調製物
が患者に首尾よく移植され得る確率の推定値を指し、以下のパラメーターの１つ以上に基
づく：膵島調製物の安全性、膵島細胞数、膵島調製物の細胞組成、β細胞の数、インスリ
ン含量、組織体積、生存率、ＡＴＰ含量、細胞培養後に回収された膵島当量のパーセント
、壊死細胞及び、アポトーシス細胞のパーセント、グルコース刺激インスリン放出、並び
に酸素消費速度（ＯＣＲ）。例えば、移植効力は、ＡＴＰ／ＤＮＡ比、ＯＣＲ／ＤＮＡ比
、及び、β細胞数に基づいて推定することができる。成功した移植を構成する確率が少な
くとも６０％である精製島の調製物が特に有用である。膵島調製物の安全性は公知の技術
を使用して、好気性及び、嫌気性生物並びに真菌、マイコプラズマ、及び、他の外来性因
子（例えば、ウイルス）の存在についてアッセイすることによって決定され得る。例えば
、サンプルをグラム染色して細菌を検出することができる。移植に適した膵島細胞は、検
出可能な生物を含まず、機能的に無菌である。安全性を評価することはまた、調製物中に
存在するエンドトキシンを測定することを含み得る。移植に適した膵島細胞調製物は、１
．７ＥＵ／ｍＬ（５ＥＵ／ｋｇレシピエント体重）以下のエンドトキシン含量を有する。
島細胞数はＤＴＺで染色し、接眼マイクロメーターを用いた光学顕微鏡を用いて染色細胞
のサイズ分布を定量することによって評価することができる。Ｒｉｃｏｒｄｉら、Ａｃｔ
ａ Ｄｉａｂｅｔｏｌを参照のこと。Ｌａｔ．１９９０；２７：１８５－１９５。島体積
は島が球形であるという仮定に基づいて計算することができ、島の数は島当量（ＩＥ）で
表され、１つのＩＥは直径１５０μｍの島に等しい。少なくとも２．２ｘ１０５ ＩＥ（
例えば、２．７ｘ１０５、３．５ｘ１０５、４．５ｘ１０５、５．５ｘ１０５、７．０ｘ
１０５、９．０ｘ１０５、１．１ｘ１０６、又は１．４ｘ１０６ ＩＥ）を含むｉｓｌｅ
ｔの準備は、５，０００～２０，０００ ＩＥが移植可能／ｋｇ受信者体重として特に有
用である。１つのＩＥは、約６００～約８６００個の細胞を含み得る。膵島調製物の細胞
組成は、標準的なイムノアッセイ法を用いて評価することができる。インスリン、グルカ
ゴン、ソマトスタチン、膵臓ポリペプチド、アミラーゼ、及び、サイトケラチン１９に対
する結合親和性を有する抗体は、それぞれ、β細胞、α細胞、δ細胞、ｐｐ細胞、腺房細
胞、及び、管細胞を同定するために使用され得る。このような抗体は例えば、ＤＡＫＯ、
Ｃａｒｐｉｎｔｅｒｉａ、ＣＡ又はＳｉｇｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ．、Ｓｔ．Ｌｏ
ｕｉｓ、Ｍｏから市販されている。結合は特定のタンパク質（例えば、インスリン）に対
する結合親和性を有する抗体、又はこのような抗体に結合する二次抗体を、直接的又は間
接的のいずれかで標識することによって検出され得る。適当な標識としては限定されるも
のではないが、放射性核種（例えば、１２５１、１３１Ｉ、３５Ｓ、３Ｈ、３２Ｐ、３３
Ｐ、又は１４Ｃ）、放射性部分（例えば、フルオレセイン、ＦＩＴＣ、ＰｅｒＣＰ、ｒｈ
ｏｄａｍｉｎｅ又はＰＥ）、ルミネセンス部分（例えば、Ｑｕａｎｔｕｍ Ｄｏｔ Ｃｏ
ｒｐｏｒａｔｉｏｎ、パロアルト、カリフォルニア州、パロアルトによって供給されるＱ
ｄｏｔＴＭナノ物質）、定義されたスペクトルの光を吸収する物質、又はエンザイム（例
えば、アルカタス又はホースラディッシュペロキシダズ）があげられる。抗体は、ビオチ
ンとの結合によって間接的に標識され得、次いで、上記の分子で標識されたアビジン又は
ストレプトアビジンで検出され得る。標識を検出又は定量する方法は標識の性質に依存し
、当技術分野で公知である。検出器の例としてはｘ線フィルム、放射能カウンター、シン
チレーションカウンター、分光光度計、比色計、蛍光光度計、ルミノメーター、及び、濃
度計があげられるが、これらに限定されない。免疫学的アッセイは、サンドイッチアッセ
イ、競合アッセイ（競合ＲＩＡ）、又はブリッジイムノアッセイを含む、種々の公知の形
式で実施され得る。例えば、米国特許５，２９６，３４７；４，２３３，４０２；４，２
３３，４０２、４，０９８，８７６、４，０３４，０７４を参照されたい。ベータ細胞の
数は、細胞組成物試料中で同定されたベータ細胞の総ＤＮＡ含量及び、割合に基づいて計
算することができる。１つのＩＥは、約１４５～４０００のベータ細胞を含み得る。少な
くとも１×１０６β細胞／ｋｇ体重のレシピエント（すなわち、４５ｋｇのレシピエント
については４．５×１０７β細胞、５０ｋｇのレシピエントについては５×１０７β細胞
、５５ｋｇのレシピエントについては５．５×１０７β細胞）を含有する膵島細胞の調製
物を使用することができる。より多数のβ細胞（例えば、レシピエントの体重１ｋｇあた
り少なくとも２×１０６β細胞、レシピエントの体重１ｋｇあたり少なくとも３．５×１
０６β細胞、又はレシピエントの体重１ｋｇあたり少なくとも５．０×１０６β細胞）を
含む調製物が特に有効である。例えば、受領者の少なくとも３．５ｘ１０６ベータセル／
ｋｇ体重を含む製剤（すなわち、４５ｋｇ受領者の約１．５８ｘ１０８ベータセル、５０
ｋｇ受領者の約１．７５ｘ１０８ベータセル、及び、５５ｋｇ受領者の約１．９ｘ１０８
ベータセル）は、少なくとも１年間はインスリンの独立性を維持できる。インスリン含量
はイムノアッセイ、例えば、スウェーデン、Ｍｅｒｃｏｄｉａからのヒトインスリン酵素
免疫測定法（ＥＩＡ）キットを用いて評価し、ＤＮＡ含量について補正することができる
。Ｐｉｃｏ Ｇｒｅｅｎを用いてＤＮＡ含量を評価することができる。Ｐｉｃｏ Ｇｒｅ
ｅｎ法では、膵島細胞を、水酸化アンモニウム及び、非イオン性界面活性剤を含有する溶
液で溶解することができる。ピコグリーンを試料に添加し、暗所でインキュベートするこ
とができる。検体を、４８０ｎｍの励起及び、５２０ｎｍの発光を有する蛍光光度計で読
み取り、標準曲線と比較する。典型的には、１つのＩＥが約４～約６０ｎｇのＤＮＡを含
み得る。調製物の組織体積は、移植前の膵島細胞ペレットの体積を指す。膵島細胞は予め
秤量した組織培養フラスコに収集することができ、膵島は一定期間（例えば、５分間）に
わたってフラスコの底部コーナーに沈降させることができる。培地をフラスコから除去し
、質量を記録することができる。膵島細胞の適切な調製物は１０ｍＬ以下（例えば、８ｍ
Ｌ以下、７．０ｍＬ以下、５ｍＬ以下、３ｍＬ以下、又は２ｍＬ以下）の体積を有する。
膵島細胞調製物のＡＴＰ含量は高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）によって、又は
イムノアッセイ（例えば、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社、Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡからのＡＴ
Ｐ決定キット）を使用することによって評価され得る。いずれの方法においても、Ｍｉｃ
ｈｅｌｉら、Ｃｌｉｎ．Ｃｈｅｍ．Ａｃｔａ １９９３、２２０：１－１７（トリクロロ
酢酸を用いてＡＴＰを抽出し、フレオン／アミン溶液を用いて試料を中和する）の方法を
用いて試料を調製することができる。ＨＰＬＣで測定して少なくとも７６ｐｍｏｌ ＡＴ
Ｐ／μｇ ＤＮＡ（例えば、少なくとも８０、９０、１００、１１０、１５０、１７５、
１９０、又は１９３）を有する膵島細胞の調製物は、移植に特に有用である。蛍光色素包
接／排除アッセイを使用して、生存率を評価することができる。例えば、Ｌｏｎｄｏｎら
、Ｈｏｒｍｏｎｅ ＆ Ｍｅｔａｂｏｌｉｃ Ｒｅｓｅａｒｃｈを参照のこと 補遺１９
９０；２５：８２－８７。例えば、フルオレセインジアセテート及び、ヨウ化プロピジウ
ム（ＰＩ）を使用して生存率を評価することができる。フルオレセインジアセテートは細
胞内酵素によって遊離フルオレセインに解離され、これは、青色光励起（４９０ｎｍ）下
で緑色に蛍光を発し、そして細胞が生きており、そして代謝的に活性であるという証拠を
提供する。細胞膜が損傷を受けている場合、ＰＩは細胞に入り、核ＤＮＡに挿入され、緑
色光励起（５４５ｎｍ）下で赤色蛍光を発することができる。緑色（生存可能）及び、赤
色（死んだ）細胞の割合は、膵島調製物の生存能力の指標を与える。あるいは、ＳＹＴＯ
－１３／臭化エチジウム（ＳＹＴＯ／ＥＢ）及び、カルセインＡＭ／エチジウムホモダイ
マー（Ｃ／ＥｔｈＤ）蛍光染色を使用して、生存率を評価し得る。例えば、Ｂａｒｎｅｔ
ｔら、Ｃｅｌｌ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔを参照のこと。２００４；１３（５）：４８１－
８．少なくとも７０％（例えば、少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、
又は９７％）の生存細胞を含む膵島の調製物は、移植に特に有用である。
するためにアッセイされ得る。本明細書中で使用される場合、「移植効力」は膵島調製物
が患者に首尾よく移植され得る確率の推定値を指し、以下のパラメーターの１つ以上に基
づく：膵島調製物の安全性、膵島細胞数、膵島調製物の細胞組成、β細胞の数、インスリ
ン含量、組織体積、生存率、ＡＴＰ含量、細胞培養後に回収された膵島当量のパーセント
、壊死細胞及び、アポトーシス細胞のパーセント、グルコース刺激インスリン放出、並び
に酸素消費速度（ＯＣＲ）。例えば、移植効力は、ＡＴＰ／ＤＮＡ比、ＯＣＲ／ＤＮＡ比
、及び、β細胞数に基づいて推定することができる。成功した移植を構成する確率が少な
くとも６０％である精製島の調製物が特に有用である。膵島調製物の安全性は公知の技術
を使用して、好気性及び、嫌気性生物並びに真菌、マイコプラズマ、及び、他の外来性因
子（例えば、ウイルス）の存在についてアッセイすることによって決定され得る。例えば
、サンプルをグラム染色して細菌を検出することができる。移植に適した膵島細胞は、検
出可能な生物を含まず、機能的に無菌である。安全性を評価することはまた、調製物中に
存在するエンドトキシンを測定することを含み得る。移植に適した膵島細胞調製物は、１
．７ＥＵ／ｍＬ（５ＥＵ／ｋｇレシピエント体重）以下のエンドトキシン含量を有する。
島細胞数はＤＴＺで染色し、接眼マイクロメーターを用いた光学顕微鏡を用いて染色細胞
のサイズ分布を定量することによって評価することができる。Ｒｉｃｏｒｄｉら、Ａｃｔ
ａ Ｄｉａｂｅｔｏｌを参照のこと。Ｌａｔ．１９９０；２７：１８５－１９５。島体積
は島が球形であるという仮定に基づいて計算することができ、島の数は島当量（ＩＥ）で
表され、１つのＩＥは直径１５０μｍの島に等しい。少なくとも２．２ｘ１０５ ＩＥ（
例えば、２．７ｘ１０５、３．５ｘ１０５、４．５ｘ１０５、５．５ｘ１０５、７．０ｘ
１０５、９．０ｘ１０５、１．１ｘ１０６、又は１．４ｘ１０６ ＩＥ）を含むｉｓｌｅ
ｔの準備は、５，０００～２０，０００ ＩＥが移植可能／ｋｇ受信者体重として特に有
用である。１つのＩＥは、約６００～約８６００個の細胞を含み得る。膵島調製物の細胞
組成は、標準的なイムノアッセイ法を用いて評価することができる。インスリン、グルカ
ゴン、ソマトスタチン、膵臓ポリペプチド、アミラーゼ、及び、サイトケラチン１９に対
する結合親和性を有する抗体は、それぞれ、β細胞、α細胞、δ細胞、ｐｐ細胞、腺房細
胞、及び、管細胞を同定するために使用され得る。このような抗体は例えば、ＤＡＫＯ、
Ｃａｒｐｉｎｔｅｒｉａ、ＣＡ又はＳｉｇｍａ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏ．、Ｓｔ．Ｌｏ
ｕｉｓ、Ｍｏから市販されている。結合は特定のタンパク質（例えば、インスリン）に対
する結合親和性を有する抗体、又はこのような抗体に結合する二次抗体を、直接的又は間
接的のいずれかで標識することによって検出され得る。適当な標識としては限定されるも
のではないが、放射性核種（例えば、１２５１、１３１Ｉ、３５Ｓ、３Ｈ、３２Ｐ、３３
Ｐ、又は１４Ｃ）、放射性部分（例えば、フルオレセイン、ＦＩＴＣ、ＰｅｒＣＰ、ｒｈ
ｏｄａｍｉｎｅ又はＰＥ）、ルミネセンス部分（例えば、Ｑｕａｎｔｕｍ Ｄｏｔ Ｃｏ
ｒｐｏｒａｔｉｏｎ、パロアルト、カリフォルニア州、パロアルトによって供給されるＱ
ｄｏｔＴＭナノ物質）、定義されたスペクトルの光を吸収する物質、又はエンザイム（例
えば、アルカタス又はホースラディッシュペロキシダズ）があげられる。抗体は、ビオチ
ンとの結合によって間接的に標識され得、次いで、上記の分子で標識されたアビジン又は
ストレプトアビジンで検出され得る。標識を検出又は定量する方法は標識の性質に依存し
、当技術分野で公知である。検出器の例としてはｘ線フィルム、放射能カウンター、シン
チレーションカウンター、分光光度計、比色計、蛍光光度計、ルミノメーター、及び、濃
度計があげられるが、これらに限定されない。免疫学的アッセイは、サンドイッチアッセ
イ、競合アッセイ（競合ＲＩＡ）、又はブリッジイムノアッセイを含む、種々の公知の形
式で実施され得る。例えば、米国特許５，２９６，３４７；４，２３３，４０２；４，２
３３，４０２、４，０９８，８７６、４，０３４，０７４を参照されたい。ベータ細胞の
数は、細胞組成物試料中で同定されたベータ細胞の総ＤＮＡ含量及び、割合に基づいて計
算することができる。１つのＩＥは、約１４５～４０００のベータ細胞を含み得る。少な
くとも１×１０６β細胞／ｋｇ体重のレシピエント（すなわち、４５ｋｇのレシピエント
については４．５×１０７β細胞、５０ｋｇのレシピエントについては５×１０７β細胞
、５５ｋｇのレシピエントについては５．５×１０７β細胞）を含有する膵島細胞の調製
物を使用することができる。より多数のβ細胞（例えば、レシピエントの体重１ｋｇあた
り少なくとも２×１０６β細胞、レシピエントの体重１ｋｇあたり少なくとも３．５×１
０６β細胞、又はレシピエントの体重１ｋｇあたり少なくとも５．０×１０６β細胞）を
含む調製物が特に有効である。例えば、受領者の少なくとも３．５ｘ１０６ベータセル／
ｋｇ体重を含む製剤（すなわち、４５ｋｇ受領者の約１．５８ｘ１０８ベータセル、５０
ｋｇ受領者の約１．７５ｘ１０８ベータセル、及び、５５ｋｇ受領者の約１．９ｘ１０８
ベータセル）は、少なくとも１年間はインスリンの独立性を維持できる。インスリン含量
はイムノアッセイ、例えば、スウェーデン、Ｍｅｒｃｏｄｉａからのヒトインスリン酵素
免疫測定法（ＥＩＡ）キットを用いて評価し、ＤＮＡ含量について補正することができる
。Ｐｉｃｏ Ｇｒｅｅｎを用いてＤＮＡ含量を評価することができる。Ｐｉｃｏ Ｇｒｅ
ｅｎ法では、膵島細胞を、水酸化アンモニウム及び、非イオン性界面活性剤を含有する溶
液で溶解することができる。ピコグリーンを試料に添加し、暗所でインキュベートするこ
とができる。検体を、４８０ｎｍの励起及び、５２０ｎｍの発光を有する蛍光光度計で読
み取り、標準曲線と比較する。典型的には、１つのＩＥが約４～約６０ｎｇのＤＮＡを含
み得る。調製物の組織体積は、移植前の膵島細胞ペレットの体積を指す。膵島細胞は予め
秤量した組織培養フラスコに収集することができ、膵島は一定期間（例えば、５分間）に
わたってフラスコの底部コーナーに沈降させることができる。培地をフラスコから除去し
、質量を記録することができる。膵島細胞の適切な調製物は１０ｍＬ以下（例えば、８ｍ
Ｌ以下、７．０ｍＬ以下、５ｍＬ以下、３ｍＬ以下、又は２ｍＬ以下）の体積を有する。
膵島細胞調製物のＡＴＰ含量は高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）によって、又は
イムノアッセイ（例えば、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社、Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡからのＡＴ
Ｐ決定キット）を使用することによって評価され得る。いずれの方法においても、Ｍｉｃ
ｈｅｌｉら、Ｃｌｉｎ．Ｃｈｅｍ．Ａｃｔａ １９９３、２２０：１－１７（トリクロロ
酢酸を用いてＡＴＰを抽出し、フレオン／アミン溶液を用いて試料を中和する）の方法を
用いて試料を調製することができる。ＨＰＬＣで測定して少なくとも７６ｐｍｏｌ ＡＴ
Ｐ／μｇ ＤＮＡ（例えば、少なくとも８０、９０、１００、１１０、１５０、１７５、
１９０、又は１９３）を有する膵島細胞の調製物は、移植に特に有用である。蛍光色素包
接／排除アッセイを使用して、生存率を評価することができる。例えば、Ｌｏｎｄｏｎら
、Ｈｏｒｍｏｎｅ ＆ Ｍｅｔａｂｏｌｉｃ Ｒｅｓｅａｒｃｈを参照のこと 補遺１９
９０；２５：８２－８７。例えば、フルオレセインジアセテート及び、ヨウ化プロピジウ
ム（ＰＩ）を使用して生存率を評価することができる。フルオレセインジアセテートは細
胞内酵素によって遊離フルオレセインに解離され、これは、青色光励起（４９０ｎｍ）下
で緑色に蛍光を発し、そして細胞が生きており、そして代謝的に活性であるという証拠を
提供する。細胞膜が損傷を受けている場合、ＰＩは細胞に入り、核ＤＮＡに挿入され、緑
色光励起（５４５ｎｍ）下で赤色蛍光を発することができる。緑色（生存可能）及び、赤
色（死んだ）細胞の割合は、膵島調製物の生存能力の指標を与える。あるいは、ＳＹＴＯ
－１３／臭化エチジウム（ＳＹＴＯ／ＥＢ）及び、カルセインＡＭ／エチジウムホモダイ
マー（Ｃ／ＥｔｈＤ）蛍光染色を使用して、生存率を評価し得る。例えば、Ｂａｒｎｅｔ
ｔら、Ｃｅｌｌ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔを参照のこと。２００４；１３（５）：４８１－
８．少なくとも７０％（例えば、少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、
又は９７％）の生存細胞を含む膵島の調製物は、移植に特に有用である。
【0075】
培養後に回収されたＩＥのパーセントは、上記のようにＤＴＺを用いて決定することが
できる。ＩＥの少なくとも７０％（例えば、少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％
、又は９５％）が培養後に回収された膵島の調製物は、移植に特に有用である。壊死細胞
及び、アポトーシス細胞のパーセントは、公知の方法を用いて評価することができる。例
えば、アポトーシスは、ＤＮＡ断片化を試験することによって評価され得る。例えば、Ｃ
ｅｌｌ Ｄｅａｔｈ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ＥＬＩＳＡ．ｓｕｐである。Ｐｌｕｓ（Ｒｏ
ｃｈｅ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ、Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ、ＩＮ）は、細胞質ヒス
トン関連ＤＮＡフラグメントを検出するために使用され得る。細胞の３０％以下（例えば
、２５％、２０％、１５％、１０％、５％、又はそれ以下）がアポトーシス性又は壊死性
である島の調製物は、移植に有用である。グルコース刺激インスリン放出は、調製物の機
能的能力の尺度である。静的インキュベーション及び、ＤＮＡ含量について補正されたイ
ンスリン放出の評価のための標準的な技術は、膵島の機能的能力を決定するために使用さ
れる。Ｒｉｃｏｒｄｉら、Ａｃｔａ Ｄｉａｂｅｔｏｌ．Ｌａｔ．１９９０；２７：１８
５－１９５。刺激指数は、１６．７ｍＭグルコースでのインスリン放出を１．７ｍＭグル
コースでのインスリン放出で割ることによって計算される。＞１（例えば、＞４、＞７、
＞１０、＞１４、＞１７、又は＞２７）の刺激指数を有する膵島の調製物は、移植に特に
有用である。ＯＣＲはＯＣＲチャンバ（例えば、Ｉｎｓｔｅｃｈ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉ
ｅｓ社、Ｐｌｙｍｏｕｔｈ Ｍｅｅｔｉｎｇ、Ｐａから）を使用して測定することができ
る。例えば、Ｐａｐａｓら、Ｃｅｌｌ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔを参照のこと。２００３；
１２：１７７；Ｐａｐａｓら、Ｃｅｌｌ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ．２００３；１２：１７
６；及び、Ｐａｐａｓら、Ｃｅｌｌ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ． ２００１；１０：５１９
．＞７５ｎｍｏｌ／分／ｍｇ ＤＮＡ（例えば、＞１００、＞１５０、＞２００、又は＞
２３０ｎｍｏｌ／分／ｍｇ ＤＮＡ）のＯＣＲを有する膵島の調製物は、移植に特に有用
である。膵島細胞は、例えば、小開腹術又は経皮経肝門脈カテーテル法のような外科技術
を用いて患者の門脈に移植することができる。移植前に、患者は異なる治療レジメンを用
いて導入免疫抑制を受けることができる。患者はまた、移植後免疫抑制レジメンを受ける
ことができる。例えば、寛解導入療法には、ウサギ抗胸腺細胞グロブリン（ＲＡＴＧ）、
ダクリズマブ、及び、エタネルセプト（すなわち、可溶性腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）受容体
）による治療を含めることができる。ＲＡＴＧは強力な誘導物質であり、走化性シグナル
に対する白血球の応答も妨げ、強固な細胞接着に必要なインテグリンの発現を阻害する。
移植周辺期におけるＴＮＦαの選択的阻害は、辺縁塊膵島移植後の糖尿病の逆転を促進で
きる可能性がある。移植後、移植後１カ月の時点でタクロリムスを補充又は最小限にする
ことにより、生着した膵島の機能が増強される可能性がある。誘導療法の別の例は、自己
反応性の、プライミングされた、移植直後の膵島指向性Ｔ細胞を不活性化することができ
る抗ＣＤ３ ｍＡｂ ｈＯＫＴ３γ１（Ａｌａ－Ａｌａ）の使用を含み得る。抗ＣＤ３
ｍＡｂ、ｈＯＫＴ３γ１（Ａｌａ－Ａｌａ）はＯＫＴ３の結合領域を保持するが、マウス
フレームワークをヒトアミノ酸で置換するヒト化抗体である。さらに、ヒトＩｇＧ１ Ｆ
ｃは、Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）への結合を防止するために変異される。臨床的には、この遺
伝子操作された抗体が新規発症１型糖尿病における残存β細胞機能の保存に有効であるこ
とが証明されている。加えて、ｈＯＫＴ３γ１（Ａｌａ‐Ａｌａ）は腎移植片拒絶を逆転
させた。自己反応性及び、同種反応性Ｔ細胞応答の両方に対するこの二重活性は、親ＯＫ
Ｔ３抗体と比較して、副作用が著しく少なかった。
できる。ＩＥの少なくとも７０％（例えば、少なくとも７５％、８０％、８５％、９０％
、又は９５％）が培養後に回収された膵島の調製物は、移植に特に有用である。壊死細胞
及び、アポトーシス細胞のパーセントは、公知の方法を用いて評価することができる。例
えば、アポトーシスは、ＤＮＡ断片化を試験することによって評価され得る。例えば、Ｃ
ｅｌｌ Ｄｅａｔｈ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ＥＬＩＳＡ．ｓｕｐである。Ｐｌｕｓ（Ｒｏ
ｃｈｅ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ、Ｉｎｄｉａｎａｐｏｌｉｓ、ＩＮ）は、細胞質ヒス
トン関連ＤＮＡフラグメントを検出するために使用され得る。細胞の３０％以下（例えば
、２５％、２０％、１５％、１０％、５％、又はそれ以下）がアポトーシス性又は壊死性
である島の調製物は、移植に有用である。グルコース刺激インスリン放出は、調製物の機
能的能力の尺度である。静的インキュベーション及び、ＤＮＡ含量について補正されたイ
ンスリン放出の評価のための標準的な技術は、膵島の機能的能力を決定するために使用さ
れる。Ｒｉｃｏｒｄｉら、Ａｃｔａ Ｄｉａｂｅｔｏｌ．Ｌａｔ．１９９０；２７：１８
５－１９５。刺激指数は、１６．７ｍＭグルコースでのインスリン放出を１．７ｍＭグル
コースでのインスリン放出で割ることによって計算される。＞１（例えば、＞４、＞７、
＞１０、＞１４、＞１７、又は＞２７）の刺激指数を有する膵島の調製物は、移植に特に
有用である。ＯＣＲはＯＣＲチャンバ（例えば、Ｉｎｓｔｅｃｈ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉ
ｅｓ社、Ｐｌｙｍｏｕｔｈ Ｍｅｅｔｉｎｇ、Ｐａから）を使用して測定することができ
る。例えば、Ｐａｐａｓら、Ｃｅｌｌ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔを参照のこと。２００３；
１２：１７７；Ｐａｐａｓら、Ｃｅｌｌ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ．２００３；１２：１７
６；及び、Ｐａｐａｓら、Ｃｅｌｌ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ． ２００１；１０：５１９
．＞７５ｎｍｏｌ／分／ｍｇ ＤＮＡ（例えば、＞１００、＞１５０、＞２００、又は＞
２３０ｎｍｏｌ／分／ｍｇ ＤＮＡ）のＯＣＲを有する膵島の調製物は、移植に特に有用
である。膵島細胞は、例えば、小開腹術又は経皮経肝門脈カテーテル法のような外科技術
を用いて患者の門脈に移植することができる。移植前に、患者は異なる治療レジメンを用
いて導入免疫抑制を受けることができる。患者はまた、移植後免疫抑制レジメンを受ける
ことができる。例えば、寛解導入療法には、ウサギ抗胸腺細胞グロブリン（ＲＡＴＧ）、
ダクリズマブ、及び、エタネルセプト（すなわち、可溶性腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）受容体
）による治療を含めることができる。ＲＡＴＧは強力な誘導物質であり、走化性シグナル
に対する白血球の応答も妨げ、強固な細胞接着に必要なインテグリンの発現を阻害する。
移植周辺期におけるＴＮＦαの選択的阻害は、辺縁塊膵島移植後の糖尿病の逆転を促進で
きる可能性がある。移植後、移植後１カ月の時点でタクロリムスを補充又は最小限にする
ことにより、生着した膵島の機能が増強される可能性がある。誘導療法の別の例は、自己
反応性の、プライミングされた、移植直後の膵島指向性Ｔ細胞を不活性化することができ
る抗ＣＤ３ ｍＡｂ ｈＯＫＴ３γ１（Ａｌａ－Ａｌａ）の使用を含み得る。抗ＣＤ３
ｍＡｂ、ｈＯＫＴ３γ１（Ａｌａ－Ａｌａ）はＯＫＴ３の結合領域を保持するが、マウス
フレームワークをヒトアミノ酸で置換するヒト化抗体である。さらに、ヒトＩｇＧ１ Ｆ
ｃは、Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）への結合を防止するために変異される。臨床的には、この遺
伝子操作された抗体が新規発症１型糖尿病における残存β細胞機能の保存に有効であるこ
とが証明されている。加えて、ｈＯＫＴ３γ１（Ａｌａ‐Ａｌａ）は腎移植片拒絶を逆転
させた。自己反応性及び、同種反応性Ｔ細胞応答の両方に対するこの二重活性は、親ＯＫ
Ｔ３抗体と比較して、副作用が著しく少なかった。
【0076】
本開示の１つの実施形態において、線維芽細胞は、同種膵島又は自己膵島の寛容を増強
するために使用される。線維芽細胞は、操作されない様式で使用され得るか、又は培養条
件によって操作され得るか、又は遺伝的に操作され得る。遺伝子操作には、免疫抑制／免
疫調節面の増大、及び、／又は自己抗原によるトランスフェクションが含まれ得る。糖尿
病の場合、前記自己抗原は、島自己抗原、例えばＧＡＤ、ＩＳＬＡ－１、インスリン、プ
ロインスリン、ＮＲＰ、又はそれらのペプチドを含む。１つの実施形態において、線維芽
細胞は、骨髄由来ＭＳＣを使用する患者の処置のために以前に使用されたプロトコールに
従って生成される。いくつかの実施形態では、トランスフェクションはレンチウイルスベ
クターの使用によって達成され、レンチウイルス媒介トランスフェクションを行う前記手
段は当技術分野で周知であり、以下の参考文献［８２～８８］で論じられている。接着細
胞への遺伝子のトランスフェクションのいくつかの特定の例は幹細胞ホーミングを促進す
るためのＳＤＦ－１のトランスフェクション［８９］、又はＦＧＦ－１８［９１］、ＨＧ
Ｆ［９２］、ａｋｔ［９３］、ＴＲＡＩＬ［９４－９７］、遊走を増強するためのＮＵＲ
７７［１００］、ＨＩＦ－１α［１０１］、ＣＣＬ２［１０２］、免疫抑制活性を増強す
るためのＨＬＡ－Ｇ［１０４］、シトシンデアミナーゼ［１０６］、老化を減少させるた
めのＯＣＴ－４［１０７、１０８］、ＴＧＦ発現を減少させるためのＢＡＭＢＩ［１０９
］、抗アポトーシスのためのＨＯ－１［１１１］、血管形成を増強するためのｍｉＲ－１
２６［１１２、１１３］、アポトーシスを防止するためのｂｃｌ－２を含む［１１４］テ
ロメラーゼ及び、ミオカルジンは心臓形成を誘導し［１１５］、ＣＸＣＲ４は造血回復を
促進し［１１６］、腎臓同種移植片拒絶を減少させる［１１７］ｗｎｔ１１［１１８］、
膵臓分化を促進するためのＩｓｌｅｔ－１［１１９］、自己免疫疾患を減少させるための
ＩＬ－２７［１２０］、敗血症を減少させるためのＡＣＥ－２［１２１］、肝不全を減少
させるためのＣＸＣＲ４［１２２、１２３］、及び、癌を減少させるためのＨＧＦアンタ
ゴニストＮＫ４［１２４］。
するために使用される。線維芽細胞は、操作されない様式で使用され得るか、又は培養条
件によって操作され得るか、又は遺伝的に操作され得る。遺伝子操作には、免疫抑制／免
疫調節面の増大、及び、／又は自己抗原によるトランスフェクションが含まれ得る。糖尿
病の場合、前記自己抗原は、島自己抗原、例えばＧＡＤ、ＩＳＬＡ－１、インスリン、プ
ロインスリン、ＮＲＰ、又はそれらのペプチドを含む。１つの実施形態において、線維芽
細胞は、骨髄由来ＭＳＣを使用する患者の処置のために以前に使用されたプロトコールに
従って生成される。いくつかの実施形態では、トランスフェクションはレンチウイルスベ
クターの使用によって達成され、レンチウイルス媒介トランスフェクションを行う前記手
段は当技術分野で周知であり、以下の参考文献［８２～８８］で論じられている。接着細
胞への遺伝子のトランスフェクションのいくつかの特定の例は幹細胞ホーミングを促進す
るためのＳＤＦ－１のトランスフェクション［８９］、又はＦＧＦ－１８［９１］、ＨＧ
Ｆ［９２］、ａｋｔ［９３］、ＴＲＡＩＬ［９４－９７］、遊走を増強するためのＮＵＲ
７７［１００］、ＨＩＦ－１α［１０１］、ＣＣＬ２［１０２］、免疫抑制活性を増強す
るためのＨＬＡ－Ｇ［１０４］、シトシンデアミナーゼ［１０６］、老化を減少させるた
めのＯＣＴ－４［１０７、１０８］、ＴＧＦ発現を減少させるためのＢＡＭＢＩ［１０９
］、抗アポトーシスのためのＨＯ－１［１１１］、血管形成を増強するためのｍｉＲ－１
２６［１１２、１１３］、アポトーシスを防止するためのｂｃｌ－２を含む［１１４］テ
ロメラーゼ及び、ミオカルジンは心臓形成を誘導し［１１５］、ＣＸＣＲ４は造血回復を
促進し［１１６］、腎臓同種移植片拒絶を減少させる［１１７］ｗｎｔ１１［１１８］、
膵臓分化を促進するためのＩｓｌｅｔ－１［１１９］、自己免疫疾患を減少させるための
ＩＬ－２７［１２０］、敗血症を減少させるためのＡＣＥ－２［１２１］、肝不全を減少
させるためのＣＸＣＲ４［１２２、１２３］、及び、癌を減少させるためのＨＧＦアンタ
ゴニストＮＫ４［１２４］。
【0077】
細胞培養は、毎週無菌性を、エンドトキシンはリムルス・アメボサイト溶解物試験で、
マイコプラズマはＤＮＡ－フルオロクローム染色で検査される。
マイコプラズマはＤＮＡ－フルオロクローム染色で検査される。
【0078】
線維芽細胞培養物の質を決定するために、フローサイトメトリーを、ＳＨ－２、ＳＨ－
３、ＳＨ－４ ＭＳＣマーカーの表面発現、及び、汚染ＣＤ１４陽性細胞及び、ＣＤ－４
５陽性細胞の欠如について、すべての培養物について実施する。細胞を０．０５％トリプ
シン－ＥＤＴＡで分離し、ＤＰＢＳ ＋２％ウシアルブミンで洗浄し、１％パラホルムア
ルデヒド中で固定し、１０％血清中でブロックし、一次ＳＨ－２、ＳＨ－３及び、ＳＨ－
４抗体、続いてＰＥ結合抗マウスＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）抗体と別々にインキュベートした。１
７５ｃｍ２フラスコ中のコンフルエントな線維芽細胞をタイロード塩溶液で洗浄し、培地
１９９（Ｍ１９９）と共に６０分間インキュベートし、そして０．０５％トリプシン－Ｅ
ＤＴＡ（Ｇｉｂｃｏ）で分離する。１０個のフラスコからの細胞を一度に分離し、線維芽
細胞を４０ｍｌのＭ１９９＋１％ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ；Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｒｅ
ｄ Ｃｒｏｓｓ、Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ ＤＣ、ＵＳＡ）に再懸濁した。各１０フラスコ
セットから採取した線維芽細胞を４℃で４時間まで保存し、採取の終わりに合わせた。全
部で２～１０’１０６線維芽細胞／ｋｇをＭ１９９ ＋ １％ ＨＳＡに再懸濁し、２０
℃で１０分間４６０ｇで遠心分離した。細胞ペレットを新鮮なＭ１９９ ＋ １％ ＨＳ
Ａ培地に再懸濁し、４６０ｇで１０分間、２０℃でさらに３回遠心分離した。全収穫時間
は、フラスコ当たりのＭＳＣ収量及び、標的用量に基づいて２～４時間であった。回収し
た線維芽細胞を、１０％ ＤＭＳＯ（Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ、Ｓａｌ
ｔ Ｌａｋｅ Ｃｉｔｙ、ＵＴ、ＵＳＡ）及び、５％ＨＳＡの最終濃度で速度制御フリー
ザーを使用して、Ｃｒｙｏｃｙｔｅ（Ｂａｘｔｅｒ、Ｄｅｅｒｆｉｅｌｄ、ＩＬ、ＵＳＡ
）フリーズバッグ中で凍結保存する。注入当日、凍結保存したユニットを３７℃の水浴中
でベッドサイドで解凍し、５分以内に６０ｍｌのシリンジに移し、１０～１５分にわたっ
て患者に静脈内注入した。患者には、アセトアミノフェン３２５～６５０ｍｇ及び、ジフ
ェンヒドラミン１２．５～２５ｍｇを経口投与する前投薬を行う。血圧、脈拍、呼吸数、
温度及び、酸素飽和度を、注入時及び、その後１５分ごとに３時間モニターし、続いて２
時間ごとに６時間モニターする。
３、ＳＨ－４ ＭＳＣマーカーの表面発現、及び、汚染ＣＤ１４陽性細胞及び、ＣＤ－４
５陽性細胞の欠如について、すべての培養物について実施する。細胞を０．０５％トリプ
シン－ＥＤＴＡで分離し、ＤＰＢＳ ＋２％ウシアルブミンで洗浄し、１％パラホルムア
ルデヒド中で固定し、１０％血清中でブロックし、一次ＳＨ－２、ＳＨ－３及び、ＳＨ－
４抗体、続いてＰＥ結合抗マウスＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ）抗体と別々にインキュベートした。１
７５ｃｍ２フラスコ中のコンフルエントな線維芽細胞をタイロード塩溶液で洗浄し、培地
１９９（Ｍ１９９）と共に６０分間インキュベートし、そして０．０５％トリプシン－Ｅ
ＤＴＡ（Ｇｉｂｃｏ）で分離する。１０個のフラスコからの細胞を一度に分離し、線維芽
細胞を４０ｍｌのＭ１９９＋１％ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ；Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｒｅ
ｄ Ｃｒｏｓｓ、Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ ＤＣ、ＵＳＡ）に再懸濁した。各１０フラスコ
セットから採取した線維芽細胞を４℃で４時間まで保存し、採取の終わりに合わせた。全
部で２～１０’１０６線維芽細胞／ｋｇをＭ１９９ ＋ １％ ＨＳＡに再懸濁し、２０
℃で１０分間４６０ｇで遠心分離した。細胞ペレットを新鮮なＭ１９９ ＋ １％ ＨＳ
Ａ培地に再懸濁し、４６０ｇで１０分間、２０℃でさらに３回遠心分離した。全収穫時間
は、フラスコ当たりのＭＳＣ収量及び、標的用量に基づいて２～４時間であった。回収し
た線維芽細胞を、１０％ ＤＭＳＯ（Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ、Ｓａｌ
ｔ Ｌａｋｅ Ｃｉｔｙ、ＵＴ、ＵＳＡ）及び、５％ＨＳＡの最終濃度で速度制御フリー
ザーを使用して、Ｃｒｙｏｃｙｔｅ（Ｂａｘｔｅｒ、Ｄｅｅｒｆｉｅｌｄ、ＩＬ、ＵＳＡ
）フリーズバッグ中で凍結保存する。注入当日、凍結保存したユニットを３７℃の水浴中
でベッドサイドで解凍し、５分以内に６０ｍｌのシリンジに移し、１０～１５分にわたっ
て患者に静脈内注入した。患者には、アセトアミノフェン３２５～６５０ｍｇ及び、ジフ
ェンヒドラミン１２．５～２５ｍｇを経口投与する前投薬を行う。血圧、脈拍、呼吸数、
温度及び、酸素飽和度を、注入時及び、その後１５分ごとに３時間モニターし、続いて２
時間ごとに６時間モニターする。
【実施例0079】
以下の実施例は、本開示の好ましい実施形態を実証するために含まれる。以下の実施例
に開示される技術は本開示の実施において良好に機能することが本発明者によって発見さ
れた技術を表し、したがって、その実施のための好ましい形態を構成すると考えることが
できることを当業者は理解されたい。しかしながら、当業者は本開示に照らして、開示さ
れた特定の実施形態において多くの変更を行うことができ、それでも、本開示の精神及び
、範囲から逸脱することなく、同様の又は類似の結果を得ることができることを理解すべ
きである。
実施例１
線維芽細胞と同時移植した膵島によるグルコース制御の増強
に開示される技術は本開示の実施において良好に機能することが本発明者によって発見さ
れた技術を表し、したがって、その実施のための好ましい形態を構成すると考えることが
できることを当業者は理解されたい。しかしながら、当業者は本開示に照らして、開示さ
れた特定の実施形態において多くの変更を行うことができ、それでも、本開示の精神及び
、範囲から逸脱することなく、同様の又は類似の結果を得ることができることを理解すべ
きである。
実施例１
線維芽細胞と同時移植した膵島によるグルコース制御の増強
【0080】
β細胞毒性抗生物質ストレプトゾシン（ＳＴＺ）（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ Ｓｔ
．Ｌｏｉｓ、ＭＯ、ＵＳＡ）を使用して、ＢＡＬＢ／ｃマウスにおいて糖尿病を誘導した
（６５ｍｇ／ｋｇで５日間）。Ｃ５７／ＢＬ６マウスから、定常コラゲナーゼ消化及び、
Ｆｉｃｏｌｌ密度精製、続いてハンドピッキングを用いて島を単離した。ＢＡＬＢ／ｃレ
シピエント（雌雄とも）は膵島移植前１～３週間糖尿病であった。
．Ｌｏｉｓ、ＭＯ、ＵＳＡ）を使用して、ＢＡＬＢ／ｃマウスにおいて糖尿病を誘導した
（６５ｍｇ／ｋｇで５日間）。Ｃ５７／ＢＬ６マウスから、定常コラゲナーゼ消化及び、
Ｆｉｃｏｌｌ密度精製、続いてハンドピッキングを用いて島を単離した。ＢＡＬＢ／ｃレ
シピエント（雌雄とも）は膵島移植前１～３週間糖尿病であった。
【0081】
レシピエントをＡｖｅｒｔｉｎ（２，２，２，－トリブロモエタノール）で麻酔し、側
腹部切開を行い、左腎を動員した。腎上極に小切開を加え、腎下面、前外側面に向けて微
細なガラスプローブで被膜と腎実質を分離してパウチを作成した。新たに単離及び、精製
した島（＞９５％純度）を、２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１０％ウシ胎仔血清、並びに１％ペ
ニシリン及び、ストレプトマイシンを補充したＲＰＭＩ－１６４０中の１０×３５ｍｍペ
トリ皿の中心にもたらし、次いで、付属のマイクロマニピュレーターシリンジを用いてＰ
Ｅ－５０カテーテル（内径０．７６ｍｍ、長さ３０ｃｍ）中に引き上げた。カテーテル先
端を血液クリップで閉じ、シリンジ及び、カテーテル全体を３５０ｒｐｍで１５～２０秒
間回転させて、先端で島をペレット化した。血液クリップを除去した後、先端を腎臓被膜
の下に挿入し、膵島ペレットをパウチ内にゆっくりと前進させた。カテーテルを取り出し
、入口を眼科焼灼器で密封した。非空腹時血糖が２～３日（１０）以内に正常（＜９．４
ｍＭ）に戻った場合、移植は技術的に成功したとみなされた。膵島移植片機能を以下のよ
うに評価した。マウスに以下のいずれかを投与した：ａ）ストレプトゾシンなし；ｂ）ス
トレプトゾシン；ｃ）ストレプトゾシン＋骨髄間葉系幹細胞（１００，０００細胞）（Ａ
ｌｌＣｅｌｌｓ社から購入）及び、ｄ）ストレプトゾシン＋ＣＤ７３に選択した線維芽細
胞（１００，０００細胞）。
腹部切開を行い、左腎を動員した。腎上極に小切開を加え、腎下面、前外側面に向けて微
細なガラスプローブで被膜と腎実質を分離してパウチを作成した。新たに単離及び、精製
した島（＞９５％純度）を、２５ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１０％ウシ胎仔血清、並びに１％ペ
ニシリン及び、ストレプトマイシンを補充したＲＰＭＩ－１６４０中の１０×３５ｍｍペ
トリ皿の中心にもたらし、次いで、付属のマイクロマニピュレーターシリンジを用いてＰ
Ｅ－５０カテーテル（内径０．７６ｍｍ、長さ３０ｃｍ）中に引き上げた。カテーテル先
端を血液クリップで閉じ、シリンジ及び、カテーテル全体を３５０ｒｐｍで１５～２０秒
間回転させて、先端で島をペレット化した。血液クリップを除去した後、先端を腎臓被膜
の下に挿入し、膵島ペレットをパウチ内にゆっくりと前進させた。カテーテルを取り出し
、入口を眼科焼灼器で密封した。非空腹時血糖が２～３日（１０）以内に正常（＜９．４
ｍＭ）に戻った場合、移植は技術的に成功したとみなされた。膵島移植片機能を以下のよ
うに評価した。マウスに以下のいずれかを投与した：ａ）ストレプトゾシンなし；ｂ）ス
トレプトゾシン；ｃ）ストレプトゾシン＋骨髄間葉系幹細胞（１００，０００細胞）（Ａ
ｌｌＣｅｌｌｓ社から購入）及び、ｄ）ストレプトゾシン＋ＣＤ７３に選択した線維芽細
胞（１００，０００細胞）。
【0082】
腹腔内ブドウ糖負荷試験（ＩＰＧＴＴ）は、以前に報告されたプロトコル（アンジオテ
ンシンＩＩタイプ２受容体が膵島様細胞クラスターへのヒト胎児膵臓前駆細胞の発達とそ
の移植の可能性に重要である。Ｌｅｕｎｇ ＫＫ、Ｌｉａｎｇ Ｊ、Ｍａ ＭＴ、Ｌｅｕ
ｎｇ ＰＳ Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌｓ ２０１２ Ｍａｒ；３０（３）：５２５－３６）に
従って、移植後３０日に実施した。手短に言えば、全ての群は、６時間の絶食後に水溶性
グルコース（１ｇ／ｋｇ体重）の腹腔内注射を受け、血中グルコースをグルコース注射の
５０、１００、１５０分後にモニターした。図１は、血中グルコースレベルに基づいて、
線維芽細胞と同時移植された膵島によるグルコース制御の増強を実証する。
参考文献
ンシンＩＩタイプ２受容体が膵島様細胞クラスターへのヒト胎児膵臓前駆細胞の発達とそ
の移植の可能性に重要である。Ｌｅｕｎｇ ＫＫ、Ｌｉａｎｇ Ｊ、Ｍａ ＭＴ、Ｌｅｕ
ｎｇ ＰＳ Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌｓ ２０１２ Ｍａｒ；３０（３）：５２５－３６）に
従って、移植後３０日に実施した。手短に言えば、全ての群は、６時間の絶食後に水溶性
グルコース（１ｇ／ｋｇ体重）の腹腔内注射を受け、血中グルコースをグルコース注射の
５０、１００、１５０分後にモニターした。図１は、血中グルコースレベルに基づいて、
線維芽細胞と同時移植された膵島によるグルコース制御の増強を実証する。
参考文献
【0083】
本明細書において言及される全ての特許及び、刊行物は、本発明が関係する当業者のレ
ベルを示す。すべての特許及び、刊行物はあたかも各個々の刊行物が参照により組み込ま
れるように具体的かつ個別に示されたかのように、その全体が参照により本明細書に組み
込まれる。
特許及び、特許出願
ベルを示す。すべての特許及び、刊行物はあたかも各個々の刊行物が参照により組み込ま
れるように具体的かつ個別に示されたかのように、その全体が参照により本明細書に組み
込まれる。
特許及び、特許出願
【0084】
Ｕ．Ｓ．Ｐａｔ．Ｎｏ．４，０３４，０７４
【0085】
Ｕ．Ｓ．Ｐａｔ．Ｎｏ．４，０９８，８７６
【0086】
Ｕ．Ｓ．Ｐａｔ．Ｎｏ．４，２３３，４０２
【0087】
Ｕ．Ｓ．Ｐａｔ．Ｎｏ．４，７９８，８２４
【0088】
Ｕ．Ｓ．Ｐａｔ．Ｎｏ．４，８７９，２８３
【0089】
Ｕ．Ｓ．Ｐａｔ．Ｎｏ．５，２９６，３４７
【0090】
Ｕ．Ｓ．Ｐａｔ．Ｎｏ．６，４９０，８８０
【0091】
Ｕ．Ｓ．ＰａｔｅｎｔＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ＵＳ ２００６／０１８２７２２
文献
文献
【0092】
１．Ｓｈａｐｉｒｏ、Ａ．Ｍ．ら、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ｔｒｉａｌ ｏｆ
ｔｈｅ Ｅｄｍｏｎｔｏｎ ｐｒｏｔｏｃｏｌ ｆｏｒ ｉｓｌｅｔ ｔｒａｎｓｐｌａ
ｎｔａｔｉｏｎ．Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ、２００６．３５５（１３）：ｐ．１３１８
－３０．
ｔｈｅ Ｅｄｍｏｎｔｏｎ ｐｒｏｔｏｃｏｌ ｆｏｒ ｉｓｌｅｔ ｔｒａｎｓｐｌａ
ｎｔａｔｉｏｎ．Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ、２００６．３５５（１３）：ｐ．１３１８
－３０．
【0093】
２．ｖａｎ ｄｅｒ Ｔｏｒｒｅｎ、Ｃ．Ｒ．ら、Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏ
ｆ ｄｏｎｏｒ ｏｒｉｇｉｎ ａｎｄ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｏｆ ｔｒａｎｓｐｌａ
ｎｔｅｄ ｉｓｌｅｔｓ ｉｎ ｓｉｔｕ ｉｎ ｔｈｅ ｌｉｖｅｒ ｏｆ ａ ｔｙ
ｐｅ １ ｄｉａｂｅｔｉｃ ｒｅｃｉｐｉｅｎｔ．Ｃｅｌｌ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ、
２０１６．
ｆ ｄｏｎｏｒ ｏｒｉｇｉｎ ａｎｄ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｏｆ ｔｒａｎｓｐｌａ
ｎｔｅｄ ｉｓｌｅｔｓ ｉｎ ｓｉｔｕ ｉｎ ｔｈｅ ｌｉｖｅｒ ｏｆ ａ ｔｙ
ｐｅ １ ｄｉａｂｅｔｉｃ ｒｅｃｉｐｉｅｎｔ．Ｃｅｌｌ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ、
２０１６．
【0094】
３．Ｚｉｎｇｅｒ、Ａ．ａｎｄ Ｇ．Ｌｅｉｂｏｗｉｔｚ、Ｉｓｌｅｔ ｔｒａｎｓｐ
ｌａｎｔａｔｉｏｎ ｉｎ ｔｙｐｅ １ ｄｉａｂｅｔｅｓ：ｈｙｐｅ、ｈｏｐｅ ａ
ｎｄ ｒｅａｌｉｔｙ － ａ ｃｌｉｎｉｃｉａｎ’ｓ ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅ．Ｄ
ｉａｂｅｔｅｓ Ｍｅｔａｂ Ｒｅｓ Ｒｅｖ、２０１４．３０（２）：ｐ．８３－７．
ｌａｎｔａｔｉｏｎ ｉｎ ｔｙｐｅ １ ｄｉａｂｅｔｅｓ：ｈｙｐｅ、ｈｏｐｅ ａ
ｎｄ ｒｅａｌｉｔｙ － ａ ｃｌｉｎｉｃｉａｎ’ｓ ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅ．Ｄ
ｉａｂｅｔｅｓ Ｍｅｔａｂ Ｒｅｓ Ｒｅｖ、２０１４．３０（２）：ｐ．８３－７．
【0095】
４．Ｖａｎｔｙｇｈｅｍ、Ｍ．Ｃ．ら、Ｔｒｅａｔｉｎｇ ｄｉａｂｅｔｅｓ ｗｉｔ
ｈ ｉｓｌｅｔ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ：ｌｅｓｓｏｎｓ ｆｒｏｍ ｔｈｅ
ｐａｓｔ ｄｅｃａｄｅ ｉｎ Ｌｉｌｌｅ．Ｄｉａｂｅｔｅｓ Ｍｅｔａｂ、２０１
４．４０（２）：ｐ．１０８－１９．
ｈ ｉｓｌｅｔ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ：ｌｅｓｓｏｎｓ ｆｒｏｍ ｔｈｅ
ｐａｓｔ ｄｅｃａｄｅ ｉｎ Ｌｉｌｌｅ．Ｄｉａｂｅｔｅｓ Ｍｅｔａｂ、２０１
４．４０（２）：ｐ．１０８－１９．
【0096】
５．Ｑｕａｒａｎｔａ、Ｐ．ら、Ｃｏ－ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ｏｆ ｅｎ
ｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｐａｎｃｒｅａｔｉ
ｃ ｉｓｌｅｔｓ ｔｏ ｉｎｄｕｃｅ ｌｏｎｇ－ｌａｓｔｉｎｇ ｎｏｒｍｏｇｌｙ
ｃｅｍｉａ ｉｎ ｓｔｒｅｐｔｏｚｏｔｏｃｉｎ－ｔｒｅａｔｅｄ ｄｉａｂｅｔｉｃ
ｒａｔｓ．ＰＬｏＳ Ｏｎｅ、２０１４．９（４）：ｐ．ｅ９４７８３．
ｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｐａｎｃｒｅａｔｉ
ｃ ｉｓｌｅｔｓ ｔｏ ｉｎｄｕｃｅ ｌｏｎｇ－ｌａｓｔｉｎｇ ｎｏｒｍｏｇｌｙ
ｃｅｍｉａ ｉｎ ｓｔｒｅｐｔｏｚｏｔｏｃｉｎ－ｔｒｅａｔｅｄ ｄｉａｂｅｔｉｃ
ｒａｔｓ．ＰＬｏＳ Ｏｎｅ、２０１４．９（４）：ｐ．ｅ９４７８３．
【0097】
６．Ｗｉｌｓ、Ｊ．、Ｊ．Ｆａｖｒｅ、ａｎｄ Ｊ．Ｂｅｌｌｉｅｎ、Ｍｏｄｕｌａｔ
ｉｎｇ ｐｕｔａｔｉｖｅ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ ｃｅｌｌ
ｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｄｙｓｆｕ
ｎｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ ｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ
ｉｎ ｄｉａｂｅｔｅｓ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｔｈｅｒ、２０１６．
ｉｎｇ ｐｕｔａｔｉｖｅ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ ｃｅｌｌ
ｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｄｙｓｆｕ
ｎｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ ｃｏｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ
ｉｎ ｄｉａｂｅｔｅｓ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｔｈｅｒ、２０１６．
【0098】
７．Ｗｕ、Ｈ．ら、Ｄｉａｂｅｔｅｓ－Ｉｎｄｕｃｅｄ Ｏｘｉｄａｔｉｖｅ Ｓｔｒ
ｅｓｓ ｉｎ Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ Ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ Ｃｅｌｌｓ Ｍａｙ
Ｂｅ Ｓｕｓｔａｉｎｅｄ ｂｙ ａ Ｐｏｓｉｔｉｖｅ Ｆｅｅｄｂａｃｋ Ｌｏｏｐ
Ｉｎｖｏｌｖｉｎｇ Ｈｉｇｈ Ｍｏｂｉｌｉｔｙ Ｇｒｏｕｐ Ｂｏｘ－１．Ｏｘｉ
ｄ Ｍｅｄ Ｃｅｌｌ Ｌｏｎｇｅｖ、２０１６．２０１６：ｐ．１９４３９１８．
ｅｓｓ ｉｎ Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ Ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ Ｃｅｌｌｓ Ｍａｙ
Ｂｅ Ｓｕｓｔａｉｎｅｄ ｂｙ ａ Ｐｏｓｉｔｉｖｅ Ｆｅｅｄｂａｃｋ Ｌｏｏｐ
Ｉｎｖｏｌｖｉｎｇ Ｈｉｇｈ Ｍｏｂｉｌｉｔｙ Ｇｒｏｕｐ Ｂｏｘ－１．Ｏｘｉ
ｄ Ｍｅｄ Ｃｅｌｌ Ｌｏｎｇｅｖ、２０１６．２０１６：ｐ．１９４３９１８．
【0099】
８．Ｈｅ、Ｆ．ら、Ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ＣＤ４＋ＣＤ２５＋Ｆｏｘｐ３＋ ｒｅｇｕ
ｌａｔｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｔｏｌｅｒａｎｃｅ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ｐ
ｏｒｔａｌ ｖｅｎｏｕｓ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ．Ｓｕｒｇｅｒｙ、２００９．１４５（
６）：ｐ．６６３－７４．
ｌａｔｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｔｏｌｅｒａｎｃｅ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ｐ
ｏｒｔａｌ ｖｅｎｏｕｓ ｉｎｊｅｃｔｉｏｎ．Ｓｕｒｇｅｒｙ、２００９．１４５（
６）：ｐ．６６３－７４．
【0100】
９．Ｓｔｅｉｎｍａｎ、Ｒ．Ｍ．、Ｄ．Ｈａｗｉｇｅｒ、ａｎｄ Ｍ．Ｃ．Ｎｕｓｓｅ
ｎｚｗｅｉｇ、Ｔｏｌｅｒｏｇｅｎｉｃ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ．Ａｎｎｕ
Ｒｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ、２００３．２１：ｐ．６８５－７１１．
ｎｚｗｅｉｇ、Ｔｏｌｅｒｏｇｅｎｉｃ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ．Ａｎｎｕ
Ｒｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ、２００３．２１：ｐ．６８５－７１１．
【0101】
１０．Ａｄｅｍａ、Ｇ．Ｊ．、Ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ｆｒｏｍ ｂｅｎｃ
ｈ ｔｏ ｂｅｄｓｉｄｅ ａｎｄ ｂａｃｋ．Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｌｅｔｔ、２００９．
１２２（２）：ｐ．１２８－３０．
ｈ ｔｏ ｂｅｄｓｉｄｅ ａｎｄ ｂａｃｋ．Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｌｅｔｔ、２００９．
１２２（２）：ｐ．１２８－３０．
【0102】
１１．Ｓｔｅｉｎｍａｎ、Ｒ．Ｍ．ａｎｄ Ｋ．Ｉｎａｂａ、Ｍｙｅｌｏｉｄ ｄｅｎ
ｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ．Ｊ Ｌｅｕｋｏｃ Ｂｉｏｌ、１９９９．６６（２）：ｐ．
２０５－８．
ｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ．Ｊ Ｌｅｕｋｏｃ Ｂｉｏｌ、１９９９．６６（２）：ｐ．
２０５－８．
【0103】
１２．Ｓｔｅｉｎｍａｎ、Ｒ．Ｍ．、Ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｔｈ
ｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ ｉｍｍｕｎｉｔｙ：ｅｎｈａｎｃｉｎｇ ｔｈｅ ｅｆｆｉ
ｃｉｅｎｃｙ ｏｆ ａｎｔｉｇｅｎ ｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎ．Ｍｔ Ｓｉｎａｉ
Ｊ Ｍｅｄ、２００１．６８（３）：ｐ．１６０－６．
ｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ ｉｍｍｕｎｉｔｙ：ｅｎｈａｎｃｉｎｇ ｔｈｅ ｅｆｆｉ
ｃｉｅｎｃｙ ｏｆ ａｎｔｉｇｅｎ ｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎ．Ｍｔ Ｓｉｎａｉ
Ｊ Ｍｅｄ、２００１．６８（３）：ｐ．１６０－６．
【0104】
１３．Ｂｏｎｉｆａｚ、Ｌ．ら、Ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｏｆ ｐ
ｒｏｔｅｉｎ ａｎｔｉｇｅｎ ｔｏ ｔｈｅ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌ ｒｅｃ
ｅｐｔｏｒ ＤＥＣ－２０５ ｉｎ ｔｈｅ ｓｔｅａｄｙ ｓｔａｔｅ ｌｅａｄｓ
ｔｏ ａｎｔｉｇｅｎ ｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎ ｏｎ ｍａｊｏｒ ｈｉｓｔｏｃｏ
ｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ ｃｏｍｐｌｅｘ ｃｌａｓｓ Ｉ ｐｒｏｄｕｃｔｓ ａｎｄ
ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ＣＤ８＋ Ｔ ｃｅｌｌ ｔｏｌｅｒａｎｃｅ．Ｊ Ｅｘｐ
Ｍｅｄ、２００２．１９６（１２）：ｐ．１６２７－３８．
ｒｏｔｅｉｎ ａｎｔｉｇｅｎ ｔｏ ｔｈｅ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌ ｒｅｃ
ｅｐｔｏｒ ＤＥＣ－２０５ ｉｎ ｔｈｅ ｓｔｅａｄｙ ｓｔａｔｅ ｌｅａｄｓ
ｔｏ ａｎｔｉｇｅｎ ｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎ ｏｎ ｍａｊｏｒ ｈｉｓｔｏｃｏ
ｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ ｃｏｍｐｌｅｘ ｃｌａｓｓ Ｉ ｐｒｏｄｕｃｔｓ ａｎｄ
ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ＣＤ８＋ Ｔ ｃｅｌｌ ｔｏｌｅｒａｎｃｅ．Ｊ Ｅｘｐ
Ｍｅｄ、２００２．１９６（１２）：ｐ．１６２７－３８．
【0105】
１４．Ｍｕｋｈｏｐａｄｈａｙａ、Ａ．ら、Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｄｅｌｉｖｅｒｙ
ｏｆ ｂｅｔａ ｃｅｌｌ ａｎｔｉｇｅｎ ｔｏ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ
ｉｎ ｖｉｖｏ ｌｅａｄｓ ｔｏ ｄｅｌｅｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｏｌｅｒａｎｃｅ
ｏｆ ａｕｔｏｒｅａｃｔｉｖｅ ＣＤ８＋ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ＮＯＤ ｍｉｃｅ
．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ Ｕ Ｓ Ａ、２００８．１０５（１７）：ｐ
．６３７４－９．
ｏｆ ｂｅｔａ ｃｅｌｌ ａｎｔｉｇｅｎ ｔｏ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅｌｌｓ
ｉｎ ｖｉｖｏ ｌｅａｄｓ ｔｏ ｄｅｌｅｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｏｌｅｒａｎｃｅ
ｏｆ ａｕｔｏｒｅａｃｔｉｖｅ ＣＤ８＋ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ＮＯＤ ｍｉｃｅ
．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ Ｕ Ｓ Ａ、２００８．１０５（１７）：ｐ
．６３７４－９．
【0106】
１５．Ｇｉａｎｎｏｕｋａｋｉｓ、Ｎ．ら、Ｐｈａｓｅ Ｉ （ｓａｆｅｔｙ） ｓｔ
ｕｄｙ ｏｆ ａｕｔｏｌｏｇｏｕｓ ｔｏｌｅｒｏｇｅｎｉｃ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ
ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｔｙｐｅ １ ｄｉａｂｅｔｉｃ ｐａｔｉｅｎｔｓ．Ｄｉａｂｅｔ
ｅｓ Ｃａｒｅ、２０１１．３４（９）：ｐ．２０２６－３２．
ｕｄｙ ｏｆ ａｕｔｏｌｏｇｏｕｓ ｔｏｌｅｒｏｇｅｎｉｃ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ
ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｔｙｐｅ １ ｄｉａｂｅｔｉｃ ｐａｔｉｅｎｔｓ．Ｄｉａｂｅｔ
ｅｓ Ｃａｒｅ、２０１１．３４（９）：ｐ．２０２６－３２．
【0107】
１６．Ｋｒａｍｐｅｒａ、Ｍ．ら、Ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ
ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｉｎｈｉｂｉｔ ｔｈｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｏｆ ｎａｉｖ
ｅ ａｎｄ ｍｅｍｏｒｙ ａｎｔｉｇｅｎ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｔｏ
ｔｈｅｉｒ ｃｏｇｎａｔｅ ｐｅｐｔｉｄｅ．Ｂｌｏｏｄ、２００３．１０１（９）
：ｐ．３７２２－９．
ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｉｎｈｉｂｉｔ ｔｈｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｏｆ ｎａｉｖ
ｅ ａｎｄ ｍｅｍｏｒｙ ａｎｔｉｇｅｎ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｔｏ
ｔｈｅｉｒ ｃｏｇｎａｔｅ ｐｅｐｔｉｄｅ．Ｂｌｏｏｄ、２００３．１０１（９）
：ｐ．３７２２－９．
【0108】
１７．Ｏｐｉｔｚ、Ｃ．Ａ．ら、Ｔｏｌｌ－ｌｉｋｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｅｎｇａｇ
ｅｍｅｎｔ ｅｎｈａｎｃｅｓ ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ ｐｒｏ
ｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｍｅｓ
ｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｂｙ ｉｎｄｕｃｉｎｇ ｉｎｄｏｌｅａｍ
ｉｎｅ－２，３－ｄｉｏｘｙｇｅｎａｓｅ－１ ｖｉａ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ－ｂｅｔ
ａ ａｎｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅ Ｒ．Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌｓ、２００９．２
７（４）：ｐ．９０９－１９．
ｅｍｅｎｔ ｅｎｈａｎｃｅｓ ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ ｐｒｏ
ｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｍｅｓ
ｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｂｙ ｉｎｄｕｃｉｎｇ ｉｎｄｏｌｅａｍ
ｉｎｅ－２，３－ｄｉｏｘｙｇｅｎａｓｅ－１ ｖｉａ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ－ｂｅｔ
ａ ａｎｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅ Ｒ．Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌｓ、２００９．２
７（４）：ｐ．９０９－１９．
【0109】
１８．Ｆａｎ、Ｈ．ら、Ｐｒｅ－ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｗｉｔｈ ＩＬ－１ｂｅｔａ
ｅｎｈａｎｃｅｓ ｔｈｅ ｅｆｆｉｃａｃｙ ｏｆ ＭＳＣ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａ
ｔｉｏｎ ｉｎ ＤＳＳ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｃｏｌｉｔｉｓ．Ｃｅｌｌ Ｍｏｌ Ｉｍｍ
ｕｎｏｌ、２０１２．９（６）：ｐ．４７３－８１．
ｅｎｈａｎｃｅｓ ｔｈｅ ｅｆｆｉｃａｃｙ ｏｆ ＭＳＣ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａ
ｔｉｏｎ ｉｎ ＤＳＳ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｃｏｌｉｔｉｓ．Ｃｅｌｌ Ｍｏｌ Ｉｍｍ
ｕｎｏｌ、２０１２．９（６）：ｐ．４７３－８１．
【0110】
１９．Ｄｕｉｊｖｅｓｔｅｉｎ、Ｍ．ら、Ｐｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｗｉｔｈ ｉｎ
ｔｅｒｆｅｒｏｎ－ｇａｍｍａ ｅｎｈａｎｃｅｓ ｔｈｅ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ
ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｒｏｍａｌ ｃｅｌｌｓ ｉｎ
ａｎｉｍａｌ ｍｏｄｅｌｓ ｏｆ ｃｏｌｉｔｉｓ．Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌｓ、２０１
１．２９（１０）：ｐ．１５４９－５８．
ｔｅｒｆｅｒｏｎ－ｇａｍｍａ ｅｎｈａｎｃｅｓ ｔｈｅ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ
ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｒｏｍａｌ ｃｅｌｌｓ ｉｎ
ａｎｉｍａｌ ｍｏｄｅｌｓ ｏｆ ｃｏｌｉｔｉｓ．Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌｓ、２０１
１．２９（１０）：ｐ．１５４９－５８．
【0111】
２０．Ｋｒａｍｐｅｒａ、Ｍ．ら、Ｒｏｌｅ ｆｏｒ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ－ｇａｍ
ｍａ ｉｎ ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｏｍｏｄｕｌａｔｏｒｙ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｈ
ｕｍａｎ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ．
Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌｓ、２００６．２４（２）：ｐ．３８６－９８．
ｍａ ｉｎ ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｏｍｏｄｕｌａｔｏｒｙ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｈ
ｕｍａｎ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ．
Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌｓ、２００６．２４（２）：ｐ．３８６－９８．
【0112】
２１．Ｐｏｌｃｈｅｒｔ、Ｄ．ら、ＩＦＮ－ｇａｍｍａ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ
ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｆｏｒ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ａｎ
ｄ ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ ｏｆ ｇｒａｆｔ ｖｅｒｓｕｓ ｈｏｓｔ ｄｉｓｅａｓ
ｅ．Ｅｕｒ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ、２００８．３８（６）：ｐ．１７４５－５５．
ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｆｏｒ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ａｎ
ｄ ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ ｏｆ ｇｒａｆｔ ｖｅｒｓｕｓ ｈｏｓｔ ｄｉｓｅａｓ
ｅ．Ｅｕｒ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ、２００８．３８（６）：ｐ．１７４５－５５．
【0113】
２２．Ｇｒｏｈ、Ｍ．Ｅ．ら、Ｈｕｍａｎ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅ
ｌｌｓ ｒｅｑｕｉｒｅ ｍｏｎｏｃｙｔｅ－ｍｅｄｉａｔｅｄ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ
ｔｏ ｓｕｐｐｒｅｓｓ ａｌｌｏｒｅａｃｔｉｖｅ Ｔ ｃｅｌｌｓ．Ｅｘｐ Ｈｅ
ｍａｔｏｌ、２００５．３３（８）：ｐ．９２８－３４．
ｌｌｓ ｒｅｑｕｉｒｅ ｍｏｎｏｃｙｔｅ－ｍｅｄｉａｔｅｄ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ
ｔｏ ｓｕｐｐｒｅｓｓ ａｌｌｏｒｅａｃｔｉｖｅ Ｔ ｃｅｌｌｓ．Ｅｘｐ Ｈｅ
ｍａｔｏｌ、２００５．３３（８）：ｐ．９２８－３４．
【0114】
２３．Ｂａｒｔｈｏｌｏｍｅｗ、Ａ．ら、Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌ
ｌｓ ｓｕｐｐｒｅｓｓ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｉｎ
ｖｉｔｒｏ ａｎｄ ｐｒｏｌｏｎｇ ｓｋｉｎ ｇｒａｆｔ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｉｎ
ｖｉｖｏ．Ｅｘｐ Ｈｅｍａｔｏｌ、２００２．３０（１）：ｐ．４２－８．
ｌｓ ｓｕｐｐｒｅｓｓ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｉｎ
ｖｉｔｒｏ ａｎｄ ｐｒｏｌｏｎｇ ｓｋｉｎ ｇｒａｆｔ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｉｎ
ｖｉｖｏ．Ｅｘｐ Ｈｅｍａｔｏｌ、２００２．３０（１）：ｐ．４２－８．
【0115】
２４．Ｂｅｇｇｓ、Ｋ．Ｊ．ら、Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃ ｃｏｎｓｅｑｕｅｎｃｅｓ
ｏｆ ｍｕｌｔｉｐｌｅ、ｈｉｇｈ－ｄｏｓｅ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ
ａｌｌｏｇｅｎｅｉｃ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｔｏ ｂａ
ｂｏｏｎｓ．Ｃｅｌｌ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ、２００６．１５（８－９）：ｐ．７１１
－２１．
ｏｆ ｍｕｌｔｉｐｌｅ、ｈｉｇｈ－ｄｏｓｅ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ
ａｌｌｏｇｅｎｅｉｃ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｔｏ ｂａ
ｂｏｏｎｓ．Ｃｅｌｌ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ、２００６．１５（８－９）：ｐ．７１１
－２１．
【0116】
２５．Ｔｓｅ、Ｗ．Ｔ．ら、Ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ａｌｌｏｇｅｎｅｉｃ
Ｔ－ｃｅｌｌ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｂｙ ｈｕｍａｎ ｍａｒｒｏｗ ｓｔｒ
ｏｍａｌ ｃｅｌｌｓ：ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｉｎ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉ
ｏｎ．Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ、２００３．７５（３）：ｐ．３８９－９７．
Ｔ－ｃｅｌｌ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｂｙ ｈｕｍａｎ ｍａｒｒｏｗ ｓｔｒ
ｏｍａｌ ｃｅｌｌｓ：ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｉｎ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉ
ｏｎ．Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ、２００３．７５（３）：ｐ．３８９－９７．
【0117】
２６．Ｍａｉｔｒａ、Ｂ．ら、Ｈｕｍａｎ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅ
ｌｌｓ ｓｕｐｐｏｒｔ ｕｎｒｅｌａｔｅｄ ｄｏｎｏｒ ｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉ
ｃ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｓｕｐｐｒｅｓｓ Ｔ－ｃｅｌｌ ａｃｔｉｖａｔ
ｉｏｎ．Ｂｏｎｅ Ｍａｒｒｏｗ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ、２００４．３３（６）：ｐ．
５９７－６０４．
ｌｌｓ ｓｕｐｐｏｒｔ ｕｎｒｅｌａｔｅｄ ｄｏｎｏｒ ｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉ
ｃ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｓｕｐｐｒｅｓｓ Ｔ－ｃｅｌｌ ａｃｔｉｖａｔ
ｉｏｎ．Ｂｏｎｅ Ｍａｒｒｏｗ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ、２００４．３３（６）：ｐ．
５９７－６０４．
【0118】
２７．Ｒａｓｍｕｓｓｏｎ、Ｉ．ら、Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ
ｉｎｈｉｂｉｔ ｔｈｅ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ Ｔ ｌｙ
ｍｐｈｏｃｙｔｅｓ、ｂｕｔ ｎｏｔ ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ Ｔ
ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ ｏｒ ｎａｔｕｒａｌ ｋｉｌｌｅｒ ｃｅｌｌｓ．Ｔｒａｎ
ｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ、２００３．７６（８）：ｐ．１２０８－１３．
ｉｎｈｉｂｉｔ ｔｈｅ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ Ｔ ｌｙ
ｍｐｈｏｃｙｔｅｓ、ｂｕｔ ｎｏｔ ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ Ｔ
ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ ｏｒ ｎａｔｕｒａｌ ｋｉｌｌｅｒ ｃｅｌｌｓ．Ｔｒａｎ
ｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ、２００３．７６（８）：ｐ．１２０８－１３．
【0119】
２８．Ａｎｇｏｕｌｖａｎｔ、Ｄ．ら、Ｈｕｍａｎ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅ
ｍ ｃｅｌｌｓ ｓｕｐｐｒｅｓｓ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ
ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ ａｌｌｏａｎｔｉｇｅｎｓ．Ｂｉｏｒｈｅｏｌｏｇｙ、２００
４．４１（３－４）：ｐ．４６９－７６．
ｍ ｃｅｌｌｓ ｓｕｐｐｒｅｓｓ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ
ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｔｏ ａｌｌｏａｎｔｉｇｅｎｓ．Ｂｉｏｒｈｅｏｌｏｇｙ、２００
４．４１（３－４）：ｐ．４６９－７６．
【0120】
２９．Ｌｅ Ｂｌａｎｃ、Ｋ．ら、Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ
ｉｎｈｉｂｉｔ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＣＤ２５ （ｉｎｔｅｒｌｅｕ
ｋｉｎ－２ ｒｅｃｅｐｔｏｒ） ａｎｄ ＣＤ３８ ｏｎ ｐｈｙｔｏｈａｅｍａｇｇ
ｌｕｔｉｎｉｎ－ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ．Ｓｃａｎｄ Ｊ Ｉｍ
ｍｕｎｏｌ、２００４．６０（３）：ｐ．３０７－１５．
ｉｎｈｉｂｉｔ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＣＤ２５ （ｉｎｔｅｒｌｅｕ
ｋｉｎ－２ ｒｅｃｅｐｔｏｒ） ａｎｄ ＣＤ３８ ｏｎ ｐｈｙｔｏｈａｅｍａｇｇ
ｌｕｔｉｎｉｎ－ａｃｔｉｖａｔｅｄ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ．Ｓｃａｎｄ Ｊ Ｉｍ
ｍｕｎｏｌ、２００４．６０（３）：ｐ．３０７－１５．
【0121】
３０．Ｇｌｅｎｎｉｅ、Ｓ．ら、Ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ
ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｉｎｄｕｃｅ ｄｉｖｉｓｉｏｎ ａｒｒｅｓｔ ａｎｅｒｇｙ
ｏｆ ａｃｔｉｖａｔｅｄ Ｔ ｃｅｌｌｓ．Ｂｌｏｏｄ、２００５．１０５（７）：
ｐ．２８２１－７．
ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｉｎｄｕｃｅ ｄｉｖｉｓｉｏｎ ａｒｒｅｓｔ ａｎｅｒｇｙ
ｏｆ ａｃｔｉｖａｔｅｄ Ｔ ｃｅｌｌｓ．Ｂｌｏｏｄ、２００５．１０５（７）：
ｐ．２８２１－７．
【0122】
３１．Ｋｉｍ、Ｊ．Ａ．ら、Ｔｈｅ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ Ｔ－ｃｅｌｌｓ
ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｂｙ ｍｏｕｓｅ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ
ｃｅｌｌｓ ｔｈｒｏｕｇｈ ｔｈｅ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｐ１６ＩＮＫ４Ａ－
ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１／ｃｄｋ４ ａｎｄ ｐ２１ｗａｆ１、ｐ２７ｋｉｐ１－ｃｙｃｌｉ
ｎ Ｅ／ｃｄｋ２ ｐａｔｈｗａｙｓ．Ｃｅｌｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ、２００７．２４５（
１）：ｐ．１６－２３．
ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｂｙ ｍｏｕｓｅ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ
ｃｅｌｌｓ ｔｈｒｏｕｇｈ ｔｈｅ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｐ１６ＩＮＫ４Ａ－
ｃｙｃｌｉｎ Ｄ１／ｃｄｋ４ ａｎｄ ｐ２１ｗａｆ１、ｐ２７ｋｉｐ１－ｃｙｃｌｉ
ｎ Ｅ／ｃｄｋ２ ｐａｔｈｗａｙｓ．Ｃｅｌｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ、２００７．２４５（
１）：ｐ．１６－２３．
【0123】
３２．Ｚａｐｐｉａ、Ｅ．ら、Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ａｍ
ｅｌｉｏｒａｔｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ｅｎｃｅｐｈａ
ｌｏｍｙｅｌｉｔｉｓ ｉｎｄｕｃｉｎｇ Ｔ－ｃｅｌｌ ａｎｅｒｇｙ．Ｂｌｏｏｄ、
２００５．１０６（５）：ｐ．１７５５－６１．
ｅｌｉｏｒａｔｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ｅｎｃｅｐｈａ
ｌｏｍｙｅｌｉｔｉｓ ｉｎｄｕｃｉｎｇ Ｔ－ｃｅｌｌ ａｎｅｒｇｙ．Ｂｌｏｏｄ、
２００５．１０６（５）：ｐ．１７５５－６１．
【0124】
３３．Ｗａｎｇ、Ｑ．ら、Ｍｕｒｉｎｅ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ ｍｅｓｅｎｃｈｙ
ｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｃａｕｓｅ ｍａｔｕｒｅ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅ
ｌｌｓ ｔｏ ｐｒｏｍｏｔｅ Ｔ－ｃｅｌｌ ｔｏｌｅｒａｎｃｅ．Ｓｃａｎｄ Ｊ
Ｉｍｍｕｎｏｌ、２００８．６８（６）：ｐ．６０７－１５．
ｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｃａｕｓｅ ｍａｔｕｒｅ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｃｅ
ｌｌｓ ｔｏ ｐｒｏｍｏｔｅ Ｔ－ｃｅｌｌ ｔｏｌｅｒａｎｃｅ．Ｓｃａｎｄ Ｊ
Ｉｍｍｕｎｏｌ、２００８．６８（６）：ｐ．６０７－１５．
【0125】
３４．Ｐｌｕｍａｓ、Ｊ．ら、Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｉｎ
ｄｕｃｅ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｏｆ ａｃｔｉｖａｔｅｄ Ｔ ｃｅｌｌｓ．Ｌｅｕｋ
ｅｍｉａ、２００５．１９（９）：ｐ．１５９７－６０４．
ｄｕｃｅ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｏｆ ａｃｔｉｖａｔｅｄ Ｔ ｃｅｌｌｓ．Ｌｅｕｋ
ｅｍｉａ、２００５．１９（９）：ｐ．１５９７－６０４．
【0126】
３５．Ｌｉｍ、Ｊ．Ｈ．ら、Ｉｍｍｕｎｏｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｄｅｌａｙｅ
ｄ－ｔｙｐｅ ｈｙｐｅｒｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ｂｙ ｍｅｓ
ｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｉｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｂ
ｙｓｔａｎｄｅｒ Ｔ ｃｅｌｌ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｉｎ ｔｈｅ ｄｒａｉｎｉｎ
ｇ ｌｙｍｐｈ ｎｏｄｅ．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ、２０１０．１８５（７）：ｐ．４０２
２－９．
ｄ－ｔｙｐｅ ｈｙｐｅｒｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ｂｙ ｍｅｓ
ｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｉｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｂ
ｙｓｔａｎｄｅｒ Ｔ ｃｅｌｌ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｉｎ ｔｈｅ ｄｒａｉｎｉｎ
ｇ ｌｙｍｐｈ ｎｏｄｅ．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ、２０１０．１８５（７）：ｐ．４０２
２－９．
【0127】
３６．Ｒａｓｍｕｓｓｏｎ、Ｉ．ら、Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ
ｉｎｈｉｂｉｔ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｂｙ ｍｉｔ
ｏｇｅｎｓ ａｎｄ ａｌｌｏａｎｔｉｇｅｎｓ ｂｙ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｍｅｃｈ
ａｎｉｓｍｓ．Ｅｘｐ Ｃｅｌｌ Ｒｅｓ、２００５．３０５（１）：ｐ．３３－４１．
ｉｎｈｉｂｉｔ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｂｙ ｍｉｔ
ｏｇｅｎｓ ａｎｄ ａｌｌｏａｎｔｉｇｅｎｓ ｂｙ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｍｅｃｈ
ａｎｉｓｍｓ．Ｅｘｐ Ｃｅｌｌ Ｒｅｓ、２００５．３０５（１）：ｐ．３３－４１．
【0128】
３７．Ｘｕ、Ｇ．ら、Ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ
ｏｆ ｃｌｏｎｅｄ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃ
ｅｌｌｓ．Ｃｅｌｌ Ｒｅｓ、２００７．１７（３）：ｐ．２４０－８．
ｏｆ ｃｌｏｎｅｄ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃ
ｅｌｌｓ．Ｃｅｌｌ Ｒｅｓ、２００７．１７（３）：ｐ．２４０－８．
【0129】
３８．Ｅｎｇｌｉｓｈ、Ｋ．ら、Ｃｅｌｌ ｃｏｎｔａｃｔ、ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄ
ｉｎ Ｅ（２） ａｎｄ ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ｂ
ｅｔａ １ ｐｌａｙ ｎｏｎ－ｒｅｄｕｎｄａｎｔ ｒｏｌｅｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ
ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ＣＤ４＋Ｃ
Ｄ２５（Ｈｉｇｈ） ｆｏｒｋｈｅａｄ ｂｏｘ Ｐ３＋ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ
ｃｅｌｌｓ．Ｃｌｉｎ Ｅｘｐ Ｉｍｍｕｎｏｌ、２００９．１５６（１）：ｐ．１４９
－６０．
ｉｎ Ｅ（２） ａｎｄ ｔｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ｂ
ｅｔａ １ ｐｌａｙ ｎｏｎ－ｒｅｄｕｎｄａｎｔ ｒｏｌｅｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ
ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ＣＤ４＋Ｃ
Ｄ２５（Ｈｉｇｈ） ｆｏｒｋｈｅａｄ ｂｏｘ Ｐ３＋ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ
ｃｅｌｌｓ．Ｃｌｉｎ Ｅｘｐ Ｉｍｍｕｎｏｌ、２００９．１５６（１）：ｐ．１４９
－６０．
【0130】
３９．Ｓｐａｇｇｉａｒｉ、Ｇ．Ｍ．ら、ＭＳＣｓ ｉｎｈｉｂｉｔ ｍｏｎｏｃｙｔ
ｅ－ｄｅｒｉｖｅｄ ＤＣ ｍａｔｕｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｂｙ
ｓｅｌｅｃｔｉｖｅｌｙ ｉｎｔｅｒｆｅｒｉｎｇ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｇｅｎｅｒａｔ
ｉｏｎ ｏｆ ｉｍｍａｔｕｒｅ ＤＣｓ：ｃｅｎｔｒａｌ ｒｏｌｅ ｏｆ ＭＳＣ－
ｄｅｒｉｖｅｄ ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎ Ｅ２．Ｂｌｏｏｄ、２００９．１１３（
２６）：ｐ．６５７６－８３．
ｅ－ｄｅｒｉｖｅｄ ＤＣ ｍａｔｕｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｂｙ
ｓｅｌｅｃｔｉｖｅｌｙ ｉｎｔｅｒｆｅｒｉｎｇ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｇｅｎｅｒａｔ
ｉｏｎ ｏｆ ｉｍｍａｔｕｒｅ ＤＣｓ：ｃｅｎｔｒａｌ ｒｏｌｅ ｏｆ ＭＳＣ－
ｄｅｒｉｖｅｄ ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎ Ｅ２．Ｂｌｏｏｄ、２００９．１１３（
２６）：ｐ．６５７６－８３．
【0131】
４０．Ｙａｎｅｚ、Ｒ．ら、Ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎ Ｅ２ ｐｌａｙｓ ａ ｋ
ｅｙ ｒｏｌｅ ｉｎ ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ ｐｒｏｐｅｒｔ
ｉｅｓ ｏｆ ａｄｉｐｏｓｅ ａｎｄ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ ｔｉｓｓｕｅ－ｄｅ
ｒｉｖｅｄ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｒｏｍａｌ ｃｅｌｌｓ．Ｅｘｐ Ｃｅｌｌ
Ｒｅｓ、２０１０．３１６（１９）：ｐ．３１０９－２３．
ｅｙ ｒｏｌｅ ｉｎ ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ ｐｒｏｐｅｒｔ
ｉｅｓ ｏｆ ａｄｉｐｏｓｅ ａｎｄ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ ｔｉｓｓｕｅ－ｄｅ
ｒｉｖｅｄ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｒｏｍａｌ ｃｅｌｌｓ．Ｅｘｐ Ｃｅｌｌ
Ｒｅｓ、２０１０．３１６（１９）：ｐ．３１０９－２３．
【0132】
４１．Ｚａｆｒａｎｓｋａｙａ、Ｍ．ら、ＰＧＥ２ Ｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｓ ｔｏ
Ｉｎ ｖｉｔｒｏ ＭＳＣ－Ｍｅｄｉａｔｅｄ Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ Ｎｏｎ－
Ｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｎｄ Ａｎｔｉｇｅｎ－Ｓｐｅｃｉｆｉｃ Ｔ Ｃｅｌｌ Ｐｒｏ
ｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｉｎ ＭＳ Ｐａｔｉｅｎｔｓ．Ｓｃａｎｄ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏ
ｌ、２０１３．７８（５）：ｐ．４５５－６２．
Ｉｎ ｖｉｔｒｏ ＭＳＣ－Ｍｅｄｉａｔｅｄ Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ Ｎｏｎ－
Ｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｎｄ Ａｎｔｉｇｅｎ－Ｓｐｅｃｉｆｉｃ Ｔ Ｃｅｌｌ Ｐｒｏ
ｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｉｎ ＭＳ Ｐａｔｉｅｎｔｓ．Ｓｃａｎｄ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏ
ｌ、２０１３．７８（５）：ｐ．４５５－６２．
【0133】
４２．Ｎａｓｅｆ、Ａ．ら、Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ＩＬ－１０ ａｎ
ｄ ＴＧＦ－ｂｅｔａ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｓ ｉｎｖｏｌｖｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｉ
ｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ Ｔ－ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ
ｄｕｒｉｎｇ ｃｅｌｌ ｃｏｎｔａｃｔ ｗｉｔｈ ｈｕｍａｎ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍ
ａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ．Ｇｅｎｅ Ｅｘｐｒ、２００７．１３（４－５）：ｐ．２
１７－２６．
ｄ ＴＧＦ－ｂｅｔａ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｓ ｉｎｖｏｌｖｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｉ
ｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ Ｔ－ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ
ｄｕｒｉｎｇ ｃｅｌｌ ｃｏｎｔａｃｔ ｗｉｔｈ ｈｕｍａｎ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍ
ａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ．Ｇｅｎｅ Ｅｘｐｒ、２００７．１３（４－５）：ｐ．２
１７－２６．
【0134】
４３．Ｍａｇａｔｔｉ、Ｍ．ら、Ｈｕｍａｎ ａｍｎｉｏｎ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍｅ
ｈａｒｂｏｒｓ ｃｅｌｌｓ ｗｉｔｈ ａｌｌｏｇｅｎｅｉｃ Ｔ－ｃｅｌｌ ｓｕｐ
ｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ ｃａｐａｂｉｌｉｔｉｅｓ．Ｓｔ
ｅｍ Ｃｅｌｌｓ、２００８．２６（１）：ｐ．１８２－９２．
ｈａｒｂｏｒｓ ｃｅｌｌｓ ｗｉｔｈ ａｌｌｏｇｅｎｅｉｃ Ｔ－ｃｅｌｌ ｓｕｐ
ｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎ ｃａｐａｂｉｌｉｔｉｅｓ．Ｓｔ
ｅｍ Ｃｅｌｌｓ、２００８．２６（１）：ｐ．１８２－９２．
【0135】
４４．Ｅｌ Ｈａｄｄａｄ、Ｎ．ら、Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ
ｅｘｐｒｅｓｓ ｓｅｒｉｎｅ ｐｒｏｔｅａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｔｏ ｅｖ
ａｄｅ ｔｈｅ ｈｏｓｔ ｉｍｍｕｎｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅ．Ｂｌｏｏｄ、２０１１．
１１７（４）：ｐ．１１７６－８３．
ｅｘｐｒｅｓｓ ｓｅｒｉｎｅ ｐｒｏｔｅａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｔｏ ｅｖ
ａｄｅ ｔｈｅ ｈｏｓｔ ｉｍｍｕｎｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅ．Ｂｌｏｏｄ、２０１１．
１１７（４）：ｐ．１１７６－８３．
【0136】
４５．Ｓａｔｏ、Ｋ．ら、Ｎｉｔｒｉｃ ｏｘｉｄｅ ｐｌａｙｓ ａ ｃｒｉｔｉｃ
ａｌ ｒｏｌｅ ｉｎ ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｔ－ｃｅｌｌ ｐｒｏｌｉｆｅ
ｒａｔｉｏｎ ｂｙ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ．Ｂｌｏｏｄ、２
００７．１０９（１）：ｐ．２２８－３４．
ａｌ ｒｏｌｅ ｉｎ ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｔ－ｃｅｌｌ ｐｒｏｌｉｆｅ
ｒａｔｉｏｎ ｂｙ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ．Ｂｌｏｏｄ、２
００７．１０９（１）：ｐ．２２８－３４．
【0137】
４６．Ｏｈ、Ｉ．ら、Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ－ｇａｍｍａ ａｎｄ ＮＦ－ｋａｐｐａ
Ｂ ｍｅｄｉａｔｅ ｎｉｔｒｉｃ ｏｘｉｄｅ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｂｙ ｍｅｓ
ｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｒｏｍａｌ ｃｅｌｌｓ．Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｒ
ｅｓ Ｃｏｍｍｕｎ、２００７．３５５（４）：ｐ．９５６－６２．
Ｂ ｍｅｄｉａｔｅ ｎｉｔｒｉｃ ｏｘｉｄｅ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｂｙ ｍｅｓ
ｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｒｏｍａｌ ｃｅｌｌｓ．Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｒ
ｅｓ Ｃｏｍｍｕｎ、２００７．３５５（４）：ｐ．９５６－６２．
【0138】
４７．Ｒｅｎ、Ｇ．ら、Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ－ｍｅｄｉａｔ
ｅｄ ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｃｃｕｒｓ ｖｉａ ｃｏｎｃｅｒｔｅ
ｄ ａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｃｈｅｍｏｋｉｎｅｓ ａｎｄ ｎｉｔｒｉｃ ｏｘｉｄｅ．
Ｃｅｌｌ Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌ、２００８．２（２）：ｐ．１４１－５０．
ｅｄ ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｃｃｕｒｓ ｖｉａ ｃｏｎｃｅｒｔｅ
ｄ ａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｃｈｅｍｏｋｉｎｅｓ ａｎｄ ｎｉｔｒｉｃ ｏｘｉｄｅ．
Ｃｅｌｌ Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌ、２００８．２（２）：ｐ．１４１－５０．
【0139】
４８．ＤｅｌａＲｏｓａ、Ｏ．ら、Ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔ ｏｆ ＩＦＮ－ｇａｍｍ
ａ－ｍｅｄｉａｔｅｄ ｉｎｄｏｌｅａｍｉｎｅ ２，３－ｄｉｏｘｙｇｅｎａｓｅ ｅ
ｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｔｈｅ ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔ
ｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｂｙ ｈｕｍａｎ ａｄｉｐｏｓｅ－ｄｅｒｉｖｅｄ
ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ．Ｔｉｓｓｕｅ Ｅｎｇ Ｐａｒｔ Ａ、２００９．１５（１０
）：ｐ．２７９５－８０６．
ａ－ｍｅｄｉａｔｅｄ ｉｎｄｏｌｅａｍｉｎｅ ２，３－ｄｉｏｘｙｇｅｎａｓｅ ｅ
ｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｔｈｅ ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔ
ｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｂｙ ｈｕｍａｎ ａｄｉｐｏｓｅ－ｄｅｒｉｖｅｄ
ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ．Ｔｉｓｓｕｅ Ｅｎｇ Ｐａｒｔ Ａ、２００９．１５（１０
）：ｐ．２７９５－８０６．
【0140】
４９．Ｔｉｐｎｉｓ、Ｓ．、Ｃ．Ｖｉｓｗａｎａｔｈａｎ、ａｎｄ Ａ．Ｓ．Ｍａｊｕ
ｍｄａｒ、Ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆ ｈｕｍ
ａｎ ｕｍｂｉｌｉｃａｌ ｃｏｒｄ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔ
ｅｍ ｃｅｌｌｓ：ｒｏｌｅ ｏｆ Ｂ７－Ｈ１ ａｎｄ ＩＤＯ．Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｃ
ｅｌｌ Ｂｉｏｌ、２０１０．８８（８）：ｐ．７９５－８０６．
ｍｄａｒ、Ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆ ｈｕｍ
ａｎ ｕｍｂｉｌｉｃａｌ ｃｏｒｄ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔ
ｅｍ ｃｅｌｌｓ：ｒｏｌｅ ｏｆ Ｂ７－Ｈ１ ａｎｄ ＩＤＯ．Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｃ
ｅｌｌ Ｂｉｏｌ、２０１０．８８（８）：ｐ．７９５－８０６．
【0141】
５０．Ｇｅ、Ｗ．ら、Ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ－ｃｅｌｌ ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ
ａｎｄ ｋｉｄｎｅｙ ａｌｌｏｇｒａｆｔ ｔｏｌｅｒａｎｃｅ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂ
ｙ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ
ｉｎｄｏｌｅａｍｉｎｅ ２，３－ｄｉｏｘｙｇｅｎａｓｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．
Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ、２０１０．９０（１２）：ｐ．１３１２－２０．
ａｎｄ ｋｉｄｎｅｙ ａｌｌｏｇｒａｆｔ ｔｏｌｅｒａｎｃｅ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂ
ｙ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ
ｉｎｄｏｌｅａｍｉｎｅ ２，３－ｄｉｏｘｙｇｅｎａｓｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．
Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ、２０１０．９０（１２）：ｐ．１３１２－２０．
【0142】
５１．Ｆｒａｎｃｏｉｓ、Ｍ．ら、Ｈｕｍａｎ ＭＳＣ ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｃ
ｏｒｒｅｌａｔｅｓ ｗｉｔｈ ｃｙｔｏｋｉｎｅ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｉｎｄ
ｏｌｅａｍｉｎｅ ２，３－ｄｉｏｘｙｇｅｎａｓｅ ａｎｄ ｂｙｓｔａｎｄｅｒ Ｍ
２ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ．Ｍｏｌ Ｔｈｅｒ、２０
１２．２０（１）：ｐ．１８７－９５．
ｏｒｒｅｌａｔｅｓ ｗｉｔｈ ｃｙｔｏｋｉｎｅ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｉｎｄ
ｏｌｅａｍｉｎｅ ２，３－ｄｉｏｘｙｇｅｎａｓｅ ａｎｄ ｂｙｓｔａｎｄｅｒ Ｍ
２ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ．Ｍｏｌ Ｔｈｅｒ、２０
１２．２０（１）：ｐ．１８７－９５．
【0143】
５２．Ｓａｔｔｌｅｒ、Ｃ．ら、Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ Ｔ－ｃｅｌｌ ｐｒｏ
ｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｂｙ ｍｕｒｉｎｅ ｍｕｌｔｉｐｏｔｅｎｔ ｍｅｓｅｎｃｈ
ｙｍａｌ ｓｔｒｏｍａｌ ｃｅｌｌｓ ｉｓ ｍｅｄｉａｔｅｄ ｂｙ ＣＤ３９ ｅ
ｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ａｄｅｎｏｓｉｎｅ ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ．Ｃｅｌｌ
Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ、２０１１．２０（８）：ｐ．１２２１－３０．
ｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｂｙ ｍｕｒｉｎｅ ｍｕｌｔｉｐｏｔｅｎｔ ｍｅｓｅｎｃｈ
ｙｍａｌ ｓｔｒｏｍａｌ ｃｅｌｌｓ ｉｓ ｍｅｄｉａｔｅｄ ｂｙ ＣＤ３９ ｅ
ｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ａｄｅｎｏｓｉｎｅ ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ．Ｃｅｌｌ
Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ、２０１１．２０（８）：ｐ．１２２１－３０．
【0144】
５３．Ｓａｌｄａｎｈａ－Ａｒａｕｊｏ、Ｆ．ら、Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｒｏ
ｍａｌ ｃｅｌｌｓ ｕｐ－ｒｅｇｕｌａｔｅ ＣＤ３９ ａｎｄ ｉｎｃｒｅａｓｅ
ａｄｅｎｏｓｉｎｅ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｔｏ ｓｕｐｐｒｅｓｓ ａｃｔｉｖａｔ
ｅｄ Ｔ－ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ．Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌ Ｒｅｓ、２０１１．７（１）
：ｐ．６６－７４．
ｍａｌ ｃｅｌｌｓ ｕｐ－ｒｅｇｕｌａｔｅ ＣＤ３９ ａｎｄ ｉｎｃｒｅａｓｅ
ａｄｅｎｏｓｉｎｅ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｔｏ ｓｕｐｐｒｅｓｓ ａｃｔｉｖａｔ
ｅｄ Ｔ－ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ．Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌ Ｒｅｓ、２０１１．７（１）
：ｐ．６６－７４．
【0145】
５４．Ｘｕｅ、Ｑ．ら、Ｔｈｅ ｎｅｇａｔｉｖｅ ｃｏ－ｓｉｇｎａｌｉｎｇ ｍｏ
ｌｅｃｕｌｅ ｂ７－ｈ４ ｉｓ ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ｂｙ ｈｕｍａｎ ｂｏｎｅ
ｍａｒｒｏｗ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ａｎ
ｄ ｍｅｄｉａｔｅｓ ｉｔｓ Ｔ－ｃｅｌｌ ｍｏｄｕｌａｔｏｒｙ ａｃｔｉｖｉｔ
ｙ．Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌｓ Ｄｅｖ、２０１０．１９（１）：ｐ．２７－３８．
ｌｅｃｕｌｅ ｂ７－ｈ４ ｉｓ ｅｘｐｒｅｓｓｅｄ ｂｙ ｈｕｍａｎ ｂｏｎｅ
ｍａｒｒｏｗ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ａｎ
ｄ ｍｅｄｉａｔｅｓ ｉｔｓ Ｔ－ｃｅｌｌ ｍｏｄｕｌａｔｏｒｙ ａｃｔｉｖｉｔ
ｙ．Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌｓ Ｄｅｖ、２０１０．１９（１）：ｐ．２７－３８．
【0146】
５５．Ｇｉｅｓｅｋｅ、Ｆ．ら、Ｈｕｍａｎ ｍｕｌｔｉｐｏｔｅｎｔ ｍｅｓｅｎｃ
ｈｙｍａｌ ｓｔｒｏｍａｌ ｃｅｌｌｓ ｕｓｅ ｇａｌｅｃｔｉｎ－１ ｔｏ ｉｎ
ｈｉｂｉｔ ｉｍｍｕｎｅ ｅｆｆｅｃｔｏｒ ｃｅｌｌｓ．Ｂｌｏｏｄ、２０１０．１
１６（１９）：ｐ．３７７０－９．
ｈｙｍａｌ ｓｔｒｏｍａｌ ｃｅｌｌｓ ｕｓｅ ｇａｌｅｃｔｉｎ－１ ｔｏ ｉｎ
ｈｉｂｉｔ ｉｍｍｕｎｅ ｅｆｆｅｃｔｏｒ ｃｅｌｌｓ．Ｂｌｏｏｄ、２０１０．１
１６（１９）：ｐ．３７７０－９．
【0147】
５６．Ｃｈａｂａｎｎｅｓ、Ｄ．ら、Ａ ｒｏｌｅ ｆｏｒ ｈｅｍｅ ｏｘｙｇｅｎ
ａｓｅ－１ ｉｎ ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ
ａｄｕｌｔ ｒａｔ ａｎｄ ｈｕｍａｎ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅ
ｌｌｓ．Ｂｌｏｏｄ、２００７．１１０（１０）：ｐ．３６９１－４．
ａｓｅ－１ ｉｎ ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ
ａｄｕｌｔ ｒａｔ ａｎｄ ｈｕｍａｎ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅ
ｌｌｓ．Ｂｌｏｏｄ、２００７．１１０（１０）：ｐ．３６９１－４．
【0148】
５７．Ｍｏｕｇｉａｋａｋｏｓ、Ｄ．ら、Ｔｈｅ ｉｍｐａｃｔ ｏｆ ｉｎｆｌａｍ
ｍａｔｏｒｙ ｌｉｃｅｎｓｉｎｇ ｏｎ ｈｅｍｅ ｏｘｙｇｅｎａｓｅ－１－ｍｅｄ
ｉａｔｅｄ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｂｙ
ｈｕｍａｎ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ．Ｂｌｏｏｄ、２０１１
．１１７（１８）：ｐ．４８２６－３５．
ｍａｔｏｒｙ ｌｉｃｅｎｓｉｎｇ ｏｎ ｈｅｍｅ ｏｘｙｇｅｎａｓｅ－１－ｍｅｄ
ｉａｔｅｄ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｂｙ
ｈｕｍａｎ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ．Ｂｌｏｏｄ、２０１１
．１１７（１８）：ｐ．４８２６－３５．
【0149】
５８．Ａｕｇｅｌｌｏ、Ａ．ら、Ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ
ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ ｃｅｌｌｓ ｉｎｈｉｂｉｔ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ ｐｒｏｌ
ｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｂｙ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｐｒｏｇｒａｍｍｅ
ｄ ｄｅａｔｈ １ ｐａｔｈｗａｙ．Ｅｕｒ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ、２００５．３５（
５）：ｐ．１４８２－９０．
ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒ ｃｅｌｌｓ ｉｎｈｉｂｉｔ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ ｐｒｏｌ
ｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｂｙ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｐｒｏｇｒａｍｍｅ
ｄ ｄｅａｔｈ １ ｐａｔｈｗａｙ．Ｅｕｒ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ、２００５．３５（
５）：ｐ．１４８２－９０．
【0150】
５９．Ｓｈｅｎｇ、Ｈ．ら、Ａ ｃｒｉｔｉｃａｌ ｒｏｌｅ ｏｆ ＩＦＮｇａｍｍ
ａ ｉｎ ｐｒｉｍｉｎｇ ＭＳＣ－ｍｅｄｉａｔｅｄ ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ
Ｔ ｃｅｌｌ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｔｈｒｏｕｇｈ ｕｐ－ｒｅｇｕｌａｔ
ｉｏｎ ｏｆ Ｂ７－Ｈ１．Ｃｅｌｌ Ｒｅｓ、２００８．１８（８）：ｐ．８４６－５
７．
ａ ｉｎ ｐｒｉｍｉｎｇ ＭＳＣ－ｍｅｄｉａｔｅｄ ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ
Ｔ ｃｅｌｌ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｔｈｒｏｕｇｈ ｕｐ－ｒｅｇｕｌａｔ
ｉｏｎ ｏｆ Ｂ７－Ｈ１．Ｃｅｌｌ Ｒｅｓ、２００８．１８（８）：ｐ．８４６－５
７．
【0151】
６０．Ｌｕｚ－Ｃｒａｗｆｏｒｄ、Ｐ．ら、Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅ
ｌｌｓ ｒｅｐｒｅｓｓ Ｔｈ１７ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｐｒｏｇｒａｍ ｔｈｒｏｕ
ｇｈ ｔｈｅ ＰＤ－１ ｐａｔｈｗａｙ．ＰＬｏＳ Ｏｎｅ、２０１２．７（９）：ｐ
．ｅ４５２７２．
ｌｌｓ ｒｅｐｒｅｓｓ Ｔｈ１７ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｐｒｏｇｒａｍ ｔｈｒｏｕ
ｇｈ ｔｈｅ ＰＤ－１ ｐａｔｈｗａｙ．ＰＬｏＳ Ｏｎｅ、２０１２．７（９）：ｐ
．ｅ４５２７２．
【0152】
６１．Ａｋｉｙａｍａ、Ｋ．ら、Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ－ｓｔｅｍ－ｃｅｌｌ－ｉｎ
ｄｕｃｅｄ ｉｍｍｕｎｏｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｉｎｖｏｌｖｅｓ ＦＡＳ－ｌｉｇａ
ｎｄ－／ＦＡＳ－ｍｅｄｉａｔｅｄ Ｔ ｃｅｌｌ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ．Ｃｅｌｌ Ｓ
ｔｅｍ Ｃｅｌｌ、２０１２．１０（５）：ｐ．５４４－５５．
ｄｕｃｅｄ ｉｍｍｕｎｏｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｉｎｖｏｌｖｅｓ ＦＡＳ－ｌｉｇａ
ｎｄ－／ＦＡＳ－ｍｅｄｉａｔｅｄ Ｔ ｃｅｌｌ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ．Ｃｅｌｌ Ｓ
ｔｅｍ Ｃｅｌｌ、２０１２．１０（５）：ｐ．５４４－５５．
【0153】
６２．Ｇｕ、Ｙ．Ｚ．ら、Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｒｏｌｅｓ ｏｆ ＰＤ－Ｌ１ ａｎ
ｄ ＦａｓＬ ｉｎ ｉｍｍｕｎｏｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ ｍｅｄｉａｔｅｄ ｂｙ ｈ
ｕｍａｎ ｐｌａｃｅｎｔａ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃ
ｅｌｌｓ．Ｈｕｍ Ｉｍｍｕｎｏｌ、２０１３．７４（３）：ｐ．２６７－７６．
ｄ ＦａｓＬ ｉｎ ｉｍｍｕｎｏｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ ｍｅｄｉａｔｅｄ ｂｙ ｈ
ｕｍａｎ ｐｌａｃｅｎｔａ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃ
ｅｌｌｓ．Ｈｕｍ Ｉｍｍｕｎｏｌ、２０１３．７４（３）：ｐ．２６７－７６．
【0154】
６３．Ｎａｊａｒ、Ｍ．ら、Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ａｎｄ ｆｕｎｃｔ
ｉｏｎａｌｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅ ＣＤ２００－ＣＤ２００Ｒ ｓｙｓｔｅｍ ｄｕｒｉ
ｎｇ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｒｏｍａｌ ｃｅｌｌ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ
ｗｉｔｈ Ｔ－ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ．Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｌｅｔｔ、２０１２．１４
６（１－２）：ｐ．５０－６．
ｉｏｎａｌｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅ ＣＤ２００－ＣＤ２００Ｒ ｓｙｓｔｅｍ ｄｕｒｉ
ｎｇ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｒｏｍａｌ ｃｅｌｌ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ
ｗｉｔｈ Ｔ－ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｓ．Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｌｅｔｔ、２０１２．１４
６（１－２）：ｐ．５０－６．
【0155】
６４．Ｂａｔｔｅｎ、Ｐ．ら、Ｈｕｍａｎ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅ
ｌｌｓ ｉｎｄｕｃｅ Ｔ ｃｅｌｌ ａｎｅｒｇｙ ａｎｄ ｄｏｗｎｒｅｇｕｌａｔ
ｅ Ｔ ｃｅｌｌ ａｌｌｏ－ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ｖｉａ ｔｈｅ ＴＨ２ ｐａｔｈ
ｗａｙ：ｒｅｌｅｖａｎｃｅ ｔｏ ｔｉｓｓｕｅ ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ｈｕｍａ
ｎ ｈｅａｒｔ ｖａｌｖｅｓ．Ｔｉｓｓｕｅ Ｅｎｇ、２００６．１２（８）：ｐ．２
２６３－７３．
ｌｌｓ ｉｎｄｕｃｅ Ｔ ｃｅｌｌ ａｎｅｒｇｙ ａｎｄ ｄｏｗｎｒｅｇｕｌａｔ
ｅ Ｔ ｃｅｌｌ ａｌｌｏ－ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ｖｉａ ｔｈｅ ＴＨ２ ｐａｔｈ
ｗａｙ：ｒｅｌｅｖａｎｃｅ ｔｏ ｔｉｓｓｕｅ ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ｈｕｍａ
ｎ ｈｅａｒｔ ｖａｌｖｅｓ．Ｔｉｓｓｕｅ Ｅｎｇ、２００６．１２（８）：ｐ．２
２６３－７３．
【0156】
６５．Ｌｕ、Ｘ．ら、Ｉｍｍｕｎｏｍｏｄｕｌａｔｏｒｙ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｍ
ｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｉｎｖｏｌｖｅｄ ｉｎ ｆａｖｏｒｉ
ｎｇ ｔｙｐｅ ２ Ｔ ｃｅｌｌ ｓｕｂｓｅｔｓ．Ｔｒａｎｓｐｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ
、２００９．２２（１－２）：ｐ．５５－６１．
ｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｉｎｖｏｌｖｅｄ ｉｎ ｆａｖｏｒｉ
ｎｇ ｔｙｐｅ ２ Ｔ ｃｅｌｌ ｓｕｂｓｅｔｓ．Ｔｒａｎｓｐｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ
、２００９．２２（１－２）：ｐ．５５－６１．
【0157】
６６．Ｚａｎｏｎｅ、Ｍ．Ｍ．ら、Ｈｕｍａｎ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ
ｃｅｌｌｓ ｍｏｄｕｌａｔｅ ｃｅｌｌｕｌａｒ ｉｍｍｕｎｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅ
ｔｏ ｉｓｌｅｔ ａｎｔｉｇｅｎ ｇｌｕｔａｍｉｃ ａｃｉｄ ｄｅｃａｒｂｏｘｙ
ｌａｓｅ ｉｎ ｔｙｐｅ １ ｄｉａｂｅｔｅｓ．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏ
ｌ Ｍｅｔａｂ、２０１０．９５（８）：ｐ．３７８８－９７．
ｃｅｌｌｓ ｍｏｄｕｌａｔｅ ｃｅｌｌｕｌａｒ ｉｍｍｕｎｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅ
ｔｏ ｉｓｌｅｔ ａｎｔｉｇｅｎ ｇｌｕｔａｍｉｃ ａｃｉｄ ｄｅｃａｒｂｏｘｙ
ｌａｓｅ ｉｎ ｔｙｐｅ １ ｄｉａｂｅｔｅｓ．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏ
ｌ Ｍｅｔａｂ、２０１０．９５（８）：ｐ．３７８８－９７．
【0158】
６７．Ｋｏ、Ｅ．ら、Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｉｎｈｉｂｉ
ｔ ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ ＣＤ４＋ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｉｎ
ｔｏ ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－１７－ｓｅｃｒｅｔｉｎｇ Ｔ ｃｅｌｌｓ．Ａｃｔａ
Ｈａｅｍａｔｏｌ、２００８．１２０（３）：ｐ．１６５－７．
ｔ ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ ＣＤ４＋ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｉｎ
ｔｏ ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－１７－ｓｅｃｒｅｔｉｎｇ Ｔ ｃｅｌｌｓ．Ａｃｔａ
Ｈａｅｍａｔｏｌ、２００８．１２０（３）：ｐ．１６５－７．
【0159】
６８．Ｒａｆｅｉ、Ｍ．ら、Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｒｏｍａｌ ｃｅｌｌｓ
ａｍｅｌｉｏｒａｔｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ｅｎｃｅｐ
ｈａｌｏｍｙｅｌｉｔｉｓ ｂｙ ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ ＣＤ４ Ｔｈ１７ Ｔ ｃｅ
ｌｌｓ ｉｎ ａ ＣＣ ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ ｌｉｇａｎｄ ２－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ
ｍａｎｎｅｒ．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ、２００９．１８２（１０）：ｐ．５９９４－６０
０２．
ａｍｅｌｉｏｒａｔｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ｅｎｃｅｐ
ｈａｌｏｍｙｅｌｉｔｉｓ ｂｙ ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ ＣＤ４ Ｔｈ１７ Ｔ ｃｅ
ｌｌｓ ｉｎ ａ ＣＣ ｃｈｅｍｏｋｉｎｅ ｌｉｇａｎｄ ２－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ
ｍａｎｎｅｒ．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ、２００９．１８２（１０）：ｐ．５９９４－６０
０２．
【0160】
６９．Ｔａｔａｒａ、Ｒ．ら、Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｒｏｍａｌ ｃｅｌｌｓ
ｉｎｈｉｂｉｔ Ｔｈ１７ ｂｕｔ ｎｏｔ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ－ｃｅｌｌ
ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ．Ｃｙｔｏｔｈｅｒａｐｙ、２０１１．１３（６）：ｐ
．６８６－９４．
ｉｎｈｉｂｉｔ Ｔｈ１７ ｂｕｔ ｎｏｔ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ－ｃｅｌｌ
ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ．Ｃｙｔｏｔｈｅｒａｐｙ、２０１１．１３（６）：ｐ
．６８６－９４．
【0161】
７０．Ｄｕｆｆｙ、Ｍ．Ｍ．ら、Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ ｉｎ
ｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ Ｔ－ｈｅｌｐｅｒ １７ ｃｅｌｌ－ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉ
ａｔｉｏｎ ｉｓ ｔｒｉｇｇｅｒｅｄ ｂｙ ｃｅｌｌ－ｃｅｌｌ ｃｏｎｔａｃｔ
ａｎｄ ｍｅｄｉａｔｅｄ ｂｙ ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎ Ｅ２ ｖｉａ ｔｈｅ
ＥＰ４ ｒｅｃｅｐｔｏｒ．Ｅｕｒ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ、２０１１．４１（１０）：
ｐ．２８４０－５１．
ｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ Ｔ－ｈｅｌｐｅｒ １７ ｃｅｌｌ－ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉ
ａｔｉｏｎ ｉｓ ｔｒｉｇｇｅｒｅｄ ｂｙ ｃｅｌｌ－ｃｅｌｌ ｃｏｎｔａｃｔ
ａｎｄ ｍｅｄｉａｔｅｄ ｂｙ ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎ Ｅ２ ｖｉａ ｔｈｅ
ＥＰ４ ｒｅｃｅｐｔｏｒ．Ｅｕｒ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ、２０１１．４１（１０）：
ｐ．２８４０－５１．
【0162】
７１．Ｌｕｚ－Ｃｒａｗｆｏｒｄ、Ｐ．ら、Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅ
ｌｌｓ ｇｅｎｅｒａｔｅ ａ ＣＤ４＋ＣＤ２５＋Ｆｏｘｐ３＋ ｒｅｇｕｌａｔｏｒ
ｙ Ｔ ｃｅｌｌ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｄｕｒｉｎｇ ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ
ｉａｔｉｏｎ ｐｒｏｃｅｓｓ ｏｆ Ｔｈ１ ａｎｄ Ｔｈ１７ ｃｅｌｌｓ．Ｓｔｅ
ｍ Ｃｅｌｌ Ｒｅｓ Ｔｈｅｒ、２０１３．４（３）：ｐ．６５．
ｌｌｓ ｇｅｎｅｒａｔｅ ａ ＣＤ４＋ＣＤ２５＋Ｆｏｘｐ３＋ ｒｅｇｕｌａｔｏｒ
ｙ Ｔ ｃｅｌｌ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｄｕｒｉｎｇ ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ
ｉａｔｉｏｎ ｐｒｏｃｅｓｓ ｏｆ Ｔｈ１ ａｎｄ Ｔｈ１７ ｃｅｌｌｓ．Ｓｔｅ
ｍ Ｃｅｌｌ Ｒｅｓ Ｔｈｅｒ、２０１３．４（３）：ｐ．６５．
【0163】
７２．Ｋｏｔａ、Ｄ．Ｊ．ら、ＴＳＧ－６ ｐｒｏｄｕｃｅｄ ｂｙ ｈＭＳＣｓ ｄ
ｅｌａｙｓ ｔｈｅ ｏｎｓｅｔ ｏｆ ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ｄｉａｂｅｔｅｓ ｂ
ｙ ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｎｇ Ｔｈ１ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎｄ ｅｎｈａｎｃ
ｉｎｇ ｔｏｌｅｒｏｇｅｎｉｃｉｔｙ．Ｄｉａｂｅｔｅｓ、２０１３．６２（６）：ｐ
．２０４８－５８．
ｅｌａｙｓ ｔｈｅ ｏｎｓｅｔ ｏｆ ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ｄｉａｂｅｔｅｓ ｂ
ｙ ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｎｇ Ｔｈ１ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎｄ ｅｎｈａｎｃ
ｉｎｇ ｔｏｌｅｒｏｇｅｎｉｃｉｔｙ．Ｄｉａｂｅｔｅｓ、２０１３．６２（６）：ｐ
．２０４８－５８．
【0164】
７３．Ｄｅｌ Ｐａｐａ、Ｂ．ら、Ｎｏｔｃｈ１ ｍｏｄｕｌａｔｅｓ ｍｅｓｅｎｃ
ｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｍｅｄｉａｔｅｄ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ－ｃ
ｅｌｌ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ．Ｅｕｒ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ、２０１３．４３（１）：ｐ
．１８２－７．
ｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｍｅｄｉａｔｅｄ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ－ｃ
ｅｌｌ ｉｎｄｕｃｔｉｏｎ．Ｅｕｒ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ、２０１３．４３（１）：ｐ
．１８２－７．
【0165】
７４．Ｍａｃｃａｒｉｏ、Ｒ．ら、Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｍｅ
ｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｗｉｔｈ ｃｅｌｌｓ ｉｎｖｏｌｖｅｄ
ｉｎ ａｌｌｏａｎｔｉｇｅｎ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｉｍｍｕｎｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅ
ｆａｖｏｒｓ ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ ＣＤ４＋ Ｔ－ｃｅ
ｌｌ ｓｕｂｓｅｔｓ ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ ａ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ／ｓｕｐｐｒ
ｅｓｓｉｖｅ ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ．Ｈａｅｍａｔｏｌｏｇｉｃａ、２００５．９０（４
）：ｐ．５１６－２５．
ｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｗｉｔｈ ｃｅｌｌｓ ｉｎｖｏｌｖｅｄ
ｉｎ ａｌｌｏａｎｔｉｇｅｎ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｉｍｍｕｎｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅ
ｆａｖｏｒｓ ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ ＣＤ４＋ Ｔ－ｃｅ
ｌｌ ｓｕｂｓｅｔｓ ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ ａ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ／ｓｕｐｐｒ
ｅｓｓｉｖｅ ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ．Ｈａｅｍａｔｏｌｏｇｉｃａ、２００５．９０（４
）：ｐ．５１６－２５．
【0166】
７５．Ｐｒｅｖｏｓｔｏ、Ｃ．ら、Ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ＣＤ４＋ ｏｒ Ｃ
Ｄ８＋ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｕｐｏｎ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ
ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ－ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ．Ｈａｅｍａｔｏ
ｌｏｇｉｃａ、２００７．９２（７）：ｐ．８８１－８．
Ｄ８＋ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｕｐｏｎ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ
ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ－ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ．Ｈａｅｍａｔｏ
ｌｏｇｉｃａ、２００７．９２（７）：ｐ．８８１－８．
【0167】
７６．Ｄｉ Ｉａｎｎｉ、Ｍ．ら、Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｃｅｌｌｓ ｒｅｃｒｕ
ｉｔ ａｎｄ ｒｅｇｕｌａｔｅ Ｔ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ ｃｅｌｌｓ．Ｅｘｐ Ｈ
ｅｍａｔｏｌ、２００８．３６（３）：ｐ．３０９－１８．
ｉｔ ａｎｄ ｒｅｇｕｌａｔｅ Ｔ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ ｃｅｌｌｓ．Ｅｘｐ Ｈ
ｅｍａｔｏｌ、２００８．３６（３）：ｐ．３０９－１８．
【0168】
７７．Ｃａｓｉｒａｇｈｉ、Ｆ．ら、Ｐｒｅｔｒａｎｓｐｌａｎｔ ｉｎｆｕｓｉｏｎ
ｏｆ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｐｒｏｌｏｎｇｓ ｔｈｅ
ｓｕｒｖｉｖａｌ ｏｆ ａ ｓｅｍｉａｌｌｏｇｅｎｅｉｃ ｈｅａｒｔ ｔｒａｎｓ
ｐｌａｎｔ ｔｈｒｏｕｇｈ ｔｈｅ ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｒｅｇｕｌａｔｏ
ｒｙ Ｔ ｃｅｌｌｓ．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ、２００８．１８１（６）：ｐ．３９３３－
４６．
ｏｆ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｐｒｏｌｏｎｇｓ ｔｈｅ
ｓｕｒｖｉｖａｌ ｏｆ ａ ｓｅｍｉａｌｌｏｇｅｎｅｉｃ ｈｅａｒｔ ｔｒａｎｓ
ｐｌａｎｔ ｔｈｒｏｕｇｈ ｔｈｅ ｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｒｅｇｕｌａｔｏ
ｒｙ Ｔ ｃｅｌｌｓ．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ、２００８．１８１（６）：ｐ．３９３３－
４６．
【0169】
７８．Ｂｏｕｍａｚａ、Ｉ．ら、Ａｕｔｏｌｏｇｏｕｓ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ－ｄ
ｅｒｉｖｅｄ ｒａｔ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｐｒｏｍｏｔ
ｅ ＰＤＸ－１ ａｎｄ ｉｎｓｕｌｉｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｔｈｅ ｉｓ
ｌｅｔｓ、ａｌｔｅｒ Ｔ ｃｅｌｌ ｃｙｔｏｋｉｎｅ ｐａｔｔｅｒｎ ａｎｄ ｐ
ｒｅｓｅｒｖｅ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｔｈｅ ｐｅｒｉｐｈ
ｅｒｙ ａｎｄ ｉｎｄｕｃｅ ｓｕｓｔａｉｎｅｄ ｎｏｒｍｏｇｌｙｃｅｍｉａ．Ｊ
Ａｕｔｏｉｍｍｕｎ、２００９．３２（１）：ｐ．３３－４２．
ｅｒｉｖｅｄ ｒａｔ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｐｒｏｍｏｔ
ｅ ＰＤＸ－１ ａｎｄ ｉｎｓｕｌｉｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｔｈｅ ｉｓ
ｌｅｔｓ、ａｌｔｅｒ Ｔ ｃｅｌｌ ｃｙｔｏｋｉｎｅ ｐａｔｔｅｒｎ ａｎｄ ｐ
ｒｅｓｅｒｖｅ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｔｈｅ ｐｅｒｉｐｈ
ｅｒｙ ａｎｄ ｉｎｄｕｃｅ ｓｕｓｔａｉｎｅｄ ｎｏｒｍｏｇｌｙｃｅｍｉａ．Ｊ
Ａｕｔｏｉｍｍｕｎ、２００９．３２（１）：ｐ．３３－４２．
【0170】
７９．Ｙｅ、Ｚ．ら、Ｉｍｍｕｎｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ
ｒａｔ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ：ｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔ ｏ
ｆ ＣＤ４＋ＣＤ２５＋ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌｓ．Ｈｅｐａｔｏｂｉｌ
ｉａｒｙ Ｐａｎｃｒｅａｔ Ｄｉｓ Ｉｎｔ、２００８．７（６）：ｐ．６０８－１４
．
ｒａｔ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ：ｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔ ｏ
ｆ ＣＤ４＋ＣＤ２５＋ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌｓ．Ｈｅｐａｔｏｂｉｌ
ｉａｒｙ Ｐａｎｃｒｅａｔ Ｄｉｓ Ｉｎｔ、２００８．７（６）：ｐ．６０８－１４
．
【0171】
８０．Ｍａｄｅｃ、Ａ．Ｍ．ら、Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｐ
ｒｏｔｅｃｔ ＮＯＤ ｍｉｃｅ ｆｒｏｍ ｄｉａｂｅｔｅｓ ｂｙ ｉｎｄｕｃｉｎ
ｇ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌｓ．Ｄｉａｂｅｔｏｌｏｇｉａ、２００９．５
２（７）：ｐ．１３９１－９．
ｒｏｔｅｃｔ ＮＯＤ ｍｉｃｅ ｆｒｏｍ ｄｉａｂｅｔｅｓ ｂｙ ｉｎｄｕｃｉｎ
ｇ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌｓ．Ｄｉａｂｅｔｏｌｏｇｉａ、２００９．５
２（７）：ｐ．１３９１－９．
【0172】
８１．Ｍｅｌｉｅｆ、Ｓ．Ｍ．ら、Ｍｕｌｔｉｐｏｔｅｎｔ ｓｔｒｏｍａｌ ｃｅｌ
ｌｓ ｉｎｄｕｃｅ ｈｕｍａｎ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｔｈｒｏｕ
ｇｈ ａ ｎｏｖｅｌ ｐａｔｈｗａｙ ｉｎｖｏｌｖｉｎｇ ｓｋｅｗｉｎｇ ｏｆ
ｍｏｎｏｃｙｔｅｓ ｔｏｗａｒｄ ａｎｔｉ－ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｍａｃｒｏ
ｐｈａｇｅｓ．Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌｓ、２０１３．３１（９）：ｐ．１９８０－９１．
ｌｓ ｉｎｄｕｃｅ ｈｕｍａｎ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｔｈｒｏｕ
ｇｈ ａ ｎｏｖｅｌ ｐａｔｈｗａｙ ｉｎｖｏｌｖｉｎｇ ｓｋｅｗｉｎｇ ｏｆ
ｍｏｎｏｃｙｔｅｓ ｔｏｗａｒｄ ａｎｔｉ－ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｍａｃｒｏ
ｐｈａｇｅｓ．Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌｓ、２０１３．３１（９）：ｐ．１９８０－９１．
【0173】
８２．Ｚｈａｎｇ、Ｘ．Ｙ．ら、Ｌｅｎｔｉｖｉｒａｌ ｖｅｃｔｏｒｓ ｆｏｒ ｓ
ｕｓｔａｉｎｅｄ ｔｒａｎｓｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｂ
ｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｓｔｒｏｍａｌ ｃｅｌｌｓ．Ｍｏｌ Ｔｈｅ
ｒ、２００２．５（５ Ｐｔ １）：ｐ．５５５－６５．
ｕｓｔａｉｎｅｄ ｔｒａｎｓｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｂ
ｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｓｔｒｏｍａｌ ｃｅｌｌｓ．Ｍｏｌ Ｔｈｅ
ｒ、２００２．５（５ Ｐｔ １）：ｐ．５５５－６５．
【0174】
８３．Ｋｙｒｉａｋｏｕ、Ｃ．Ａ．ら、Ｈｕｍａｎ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅ
ｍ ｃｅｌｌｓ （ｈＭＳＣｓ） ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ ｔｒｕｎｃａｔｅｄ ｓｏｌ
ｕｂｌｅ ｖａｓｃｕｌａｒ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ
ｒｅｃｅｐｔｏｒ （ｔｓＦｌｋ－１） ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ ｌｅｎｔｉｖｉｒａｌ－
ｍｅｄｉａｔｅｄ ｇｅｎｅ ｔｒａｎｓｆｅｒ ｉｎｈｉｂｉｔ ｇｒｏｗｔｈ ｏｆ
Ｂｕｒｋｉｔｔ’ｓ ｌｙｍｐｈｏｍａ ｉｎ ａ ｍｕｒｉｎｅ ｍｏｄｅｌ．Ｊ
Ｇｅｎｅ Ｍｅｄ、２００６．８（３）：ｐ．２５３－６４．
ｍ ｃｅｌｌｓ （ｈＭＳＣｓ） ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ ｔｒｕｎｃａｔｅｄ ｓｏｌ
ｕｂｌｅ ｖａｓｃｕｌａｒ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ
ｒｅｃｅｐｔｏｒ （ｔｓＦｌｋ－１） ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ ｌｅｎｔｉｖｉｒａｌ－
ｍｅｄｉａｔｅｄ ｇｅｎｅ ｔｒａｎｓｆｅｒ ｉｎｈｉｂｉｔ ｇｒｏｗｔｈ ｏｆ
Ｂｕｒｋｉｔｔ’ｓ ｌｙｍｐｈｏｍａ ｉｎ ａ ｍｕｒｉｎｅ ｍｏｄｅｌ．Ｊ
Ｇｅｎｅ Ｍｅｄ、２００６．８（３）：ｐ．２５３－６４．
【0175】
８４．Ｗｏｒｓｈａｍ、Ｄ．Ｎ．ら、Ｉｎ ｖｉｖｏ ｇｅｎｅ ｔｒａｎｓｆｅｒ
ｉｎｔｏ ａｄｕｌｔ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｕｎｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｄ ｍ
ｉｃｅ ｂｙ ｉｎ ｓｉｔｕ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｏｆ ａ ｌｅｎｔｉｖｉｒａｌ
ｖｅｃｔｏｒ．Ｍｏｌ Ｔｈｅｒ、２００６．１４（４）：ｐ．５１４－２４．
ｉｎｔｏ ａｄｕｌｔ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｕｎｃｏｎｄｉｔｉｏｎｅｄ ｍ
ｉｃｅ ｂｙ ｉｎ ｓｉｔｕ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｏｆ ａ ｌｅｎｔｉｖｉｒａｌ
ｖｅｃｔｏｒ．Ｍｏｌ Ｔｈｅｒ、２００６．１４（４）：ｐ．５１４－２４．
【0176】
８５．Ｒａｂｉｎ、Ｎ．ら、Ａ ｎｅｗ ｘｅｎｏｇｒａｆｔ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｍ
ｙｅｌｏｍａ ｂｏｎｅ ｄｉｓｅａｓｅ ｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｉｎｇ ｔｈｅ ｅｆ
ｆｉｃａｃｙ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｅ
ｘｐｒｅｓｓｉｎｇ ｏｓｔｅｏｐｒｏｔｅｇｅｒｉｎ ｂｙ ｌｅｎｔｉｖｉｒａｌ
ｇｅｎｅ ｔｒａｎｓｆｅｒ．Ｌｅｕｋｅｍｉａ、２００７．２１（１０）：ｐ．２１８
１－９１．
ｙｅｌｏｍａ ｂｏｎｅ ｄｉｓｅａｓｅ ｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｉｎｇ ｔｈｅ ｅｆ
ｆｉｃａｃｙ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｅ
ｘｐｒｅｓｓｉｎｇ ｏｓｔｅｏｐｒｏｔｅｇｅｒｉｎ ｂｙ ｌｅｎｔｉｖｉｒａｌ
ｇｅｎｅ ｔｒａｎｓｆｅｒ．Ｌｅｕｋｅｍｉａ、２００７．２１（１０）：ｐ．２１８
１－９１．
【0177】
８６．Ｋａｌｌｉｆａｔｉｄｉｓ、Ｇ．ら、Ｉｍｐｒｏｖｅｄ ｌｅｎｔｉｖｉｒａｌ
ｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ
ｃｅｌｌｓ ｆｏｒ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎ ｉｎ ｐａ
ｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒ．Ｃａｎｃｅｒ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ、２００８．１５
（４）：ｐ．２３１－４０．
ｔｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ
ｃｅｌｌｓ ｆｏｒ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎ ｉｎ ｐａ
ｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒ．Ｃａｎｃｅｒ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ、２００８．１５
（４）：ｐ．２３１－４０．
【0178】
８７．Ｍｅｙｅｒｒｏｓｅ、Ｔ．Ｅ．ら、Ｌｅｎｔｉｖｉｒａｌ－ｔｒａｎｓｄｕｃｅ
ｄ ｈｕｍａｎ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｐｅｒｓｉｓｔｅｎ
ｔｌｙ ｅｘｐｒｅｓｓ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ｅｎｚｙｍｅ
ｉｎ ａ ｘｅｎｏｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｈｕｍａｎ
ｄｉｓｅａｓｅ．Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌｓ、２００８．２６（７）：ｐ．１７１３－２２
．
ｄ ｈｕｍａｎ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｐｅｒｓｉｓｔｅｎ
ｔｌｙ ｅｘｐｒｅｓｓ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ｅｎｚｙｍｅ
ｉｎ ａ ｘｅｎｏｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｈｕｍａｎ
ｄｉｓｅａｓｅ．Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌｓ、２００８．２６（７）：ｐ．１７１３－２２
．
【0179】
８８．ＭｃＧｉｎｌｅｙ、Ｌ．ら、Ｌｅｎｔｉｖｉｒａｌ ｖｅｃｔｏｒ ｍｅｄｉａ
ｔｅｄ ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌ
ｌｓ ＆ ｅｎｈａｎｃｅｄ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｉｎ ａｎ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｍｏ
ｄｅｌ ｏｆ ｉｓｃｈａｅｍｉａ．Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌ Ｒｅｓ Ｔｈｅｒ、２０１１
．２（２）：ｐ．１２．
ｔｅｄ ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌ
ｌｓ ＆ ｅｎｈａｎｃｅｄ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｉｎ ａｎ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｍｏ
ｄｅｌ ｏｆ ｉｓｃｈａｅｍｉａ．Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌ Ｒｅｓ Ｔｈｅｒ、２０１１
．２（２）：ｐ．１２．
【0180】
８９．Ｌｉａｎｇ、Ｘ．ら、Ｈｕｍａｎ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ ｍｅｓｅｎｃｈｙ
ｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ ＳＤＦ－１ ｐｒｏｍｏｔｅ
ｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａ
ｎ ｍｏｂｉｌｉｓｅｄ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ ＣＤ３４＋ ｃｅｌｌｓ
ｉｎ ｖｉｖｏ ａｎｄ ｉｎ ｖｉｔｒｏ．Ｉｎｔ Ｊ Ｒａｄｉａｔ Ｂｉｏｌ、
２０１０．８６（３）：ｐ．２３０－７．
ｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ ＳＤＦ－１ ｐｒｏｍｏｔｅ
ｈｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａ
ｎ ｍｏｂｉｌｉｓｅｄ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ ＣＤ３４＋ ｃｅｌｌｓ
ｉｎ ｖｉｖｏ ａｎｄ ｉｎ ｖｉｔｒｏ．Ｉｎｔ Ｊ Ｒａｄｉａｔ Ｂｉｏｌ、
２０１０．８６（３）：ｐ．２３０－７．
【0181】
９０．Ｈａｍｉｄｏｕｃｈｅ、Ｚ．ら、Ａｕｔｏｃｒｉｎｅ ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ
ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ １８ ｍｅｄｉａｔｅｓ ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ－
ｉｎｄｕｃｅｄ ｏｓｔｅｏｇｅｎｉｃ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｕ
ｒｉｎｅ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ．Ｊ Ｃｅｌｌ Ｐｈｙｓｉ
ｏｌ、２０１０．２２４（２）：ｐ．５０９－１５．
ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ １８ ｍｅｄｉａｔｅｓ ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ－
ｉｎｄｕｃｅｄ ｏｓｔｅｏｇｅｎｉｃ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｕ
ｒｉｎｅ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ．Ｊ Ｃｅｌｌ Ｐｈｙｓｉ
ｏｌ、２０１０．２２４（２）：ｐ．５０９－１５．
【0182】
９１．Ｇｌａｖａｓｋｉ－Ｊｏｋｓｉｍｏｖｉｃ、Ａ．ら、Ｇｌｉａｌ ｃｅｌｌ ｌ
ｉｎｅ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃ ｆａｃｔｏｒ－ｓｅｃｒｅｔｉｎ
ｇ ｇｅｎｅｔｉｃａｌｌｙ ｍｏｄｉｆｉｅｄ ｈｕｍａｎ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ
－ｄｅｒｉｖｅｄ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｐｒｏｍｏｔｅ
ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｉｎ ａ ｒａｔ ｍｏｄｅｌ ｏｆ Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ’ｓ ｄ
ｉｓｅａｓｅ．Ｊ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ Ｒｅｓ、２０１０．８８（１２）：ｐ．２６６９
－８１．
ｉｎｅ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃ ｆａｃｔｏｒ－ｓｅｃｒｅｔｉｎ
ｇ ｇｅｎｅｔｉｃａｌｌｙ ｍｏｄｉｆｉｅｄ ｈｕｍａｎ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ
－ｄｅｒｉｖｅｄ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｐｒｏｍｏｔｅ
ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｉｎ ａ ｒａｔ ｍｏｄｅｌ ｏｆ Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ’ｓ ｄ
ｉｓｅａｓｅ．Ｊ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ Ｒｅｓ、２０１０．８８（１２）：ｐ．２６６９
－８１．
【0183】
９２．Ｌｉｕ、Ａ．Ｍ．ら、Ｕｍｂｉｌｉｃａｌ ｃｏｒｄ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｍｅｓ
ｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｗｉｔｈ ｆｏｒｃｅｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉ
ｏｎ ｏｆ ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ｅｎｈａｎｃｅ ｒ
ｅｍｙｅｌｉｎａｔｉｏｎ ａｎｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｉｎ
ａ ｒａｔ ｉｎｔｒａｃｅｒｅｂｒａｌ ｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ ｍｏｄｅｌ．Ｎｅｕ
ｒｏｓｕｒｇｅｒｙ、２０１０．６７（２）：ｐ．３５７－６５；ｄｉｓｃｕｓｓｉｏｎ
３６５－６．
ｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｗｉｔｈ ｆｏｒｃｅｄ ｅｘｐｒｅｓｓｉ
ｏｎ ｏｆ ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ｅｎｈａｎｃｅ ｒ
ｅｍｙｅｌｉｎａｔｉｏｎ ａｎｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｉｎ
ａ ｒａｔ ｉｎｔｒａｃｅｒｅｂｒａｌ ｈｅｍｏｒｒｈａｇｅ ｍｏｄｅｌ．Ｎｅｕ
ｒｏｓｕｒｇｅｒｙ、２０１０．６７（２）：ｐ．３５７－６５；ｄｉｓｃｕｓｓｉｏｎ
３６５－６．
【0184】
９３．Ｙｕ、Ｙ．Ｓ．ら、ＡＫＴ－ｍｏｄｉｆｉｅｄ ａｕｔｏｌｏｇｏｕｓ ｉｎｔ
ｒａｃｏｒｏｎａｒｙ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｐｒｅｖｅｎ
ｔ ｒｅｍｏｄｅｌｉｎｇ ａｎｄ ｒｅｐａｉｒ ｉｎ ｓｗｉｎｅ ｉｎｆａｒｃｔ
ｅｄ ｍｙｏｃａｒｄｉｕｍ．Ｃｈｉｎ Ｍｅｄ Ｊ （Ｅｎｇｌ）、２０１０．１２３
（１３）：ｐ．１７０２－８．
ｒａｃｏｒｏｎａｒｙ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｐｒｅｖｅｎ
ｔ ｒｅｍｏｄｅｌｉｎｇ ａｎｄ ｒｅｐａｉｒ ｉｎ ｓｗｉｎｅ ｉｎｆａｒｃｔ
ｅｄ ｍｙｏｃａｒｄｉｕｍ．Ｃｈｉｎ Ｍｅｄ Ｊ （Ｅｎｇｌ）、２０１０．１２３
（１３）：ｐ．１７０２－８．
【0185】
９４．Ｍｕｅｌｌｅｒ、Ｌ．Ｐ．ら、ＴＲＡＩＬ－ｔｒａｎｓｄｕｃｅｄ ｍｕｌｔｉ
ｐｏｔｅｎｔ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｒｏｍａｌ ｃｅｌｌｓ （ＴＲＡＩＬ－
ＭＳＣ） ｏｖｅｒｃｏｍｅ ＴＲＡＩＬ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｉｎ ｓｅｌｅｃｔ
ｅｄ ＣＲＣ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅｓ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ａｎｄ ｉｎ ｖｉｖｏ．Ｃ
ａｎｃｅｒ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ、２０１１．１８（４）：ｐ．２２９－３９．
ｐｏｔｅｎｔ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｒｏｍａｌ ｃｅｌｌｓ （ＴＲＡＩＬ－
ＭＳＣ） ｏｖｅｒｃｏｍｅ ＴＲＡＩＬ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｉｎ ｓｅｌｅｃｔ
ｅｄ ＣＲＣ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅｓ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ａｎｄ ｉｎ ｖｉｖｏ．Ｃ
ａｎｃｅｒ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ、２０１１．１８（４）：ｐ．２２９－３９．
【0186】
９５．Ｙａｎ、Ｃ．ら、Ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｏｒｔｈｏｔｏｐｉｃａｌｌ
ｙ ｉｍｐｌａｎｔｅｄ ｈｅｐａｔｏｃａｒｃｉｎｏｍａ ｉｎ ｍｉｃｅ ｂｙ ｕ
ｍｂｉｌｉｃａｌ ｃｏｒｄ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃ
ｅｌｌｓ ｗｉｔｈ ｓＴＲＡＩＬ ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｄｒｉｖｅｎ
ｂｙ ＡＦＰ ｐｒｏｍｏｔｅｒ．Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ、２０１４．３５（９）：
ｐ．３０３５－４３．
ｙ ｉｍｐｌａｎｔｅｄ ｈｅｐａｔｏｃａｒｃｉｎｏｍａ ｉｎ ｍｉｃｅ ｂｙ ｕ
ｍｂｉｌｉｃａｌ ｃｏｒｄ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃ
ｅｌｌｓ ｗｉｔｈ ｓＴＲＡＩＬ ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｄｒｉｖｅｎ
ｂｙ ＡＦＰ ｐｒｏｍｏｔｅｒ．Ｂｉｏｍａｔｅｒｉａｌｓ、２０１４．３５（９）：
ｐ．３０３５－４３．
【0187】
９６．Ｄｅｎｇ、Ｑ．ら、ＴＲＡＩＬ－ｓｅｃｒｅｔｉｎｇ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ
ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｐｒｏｍｏｔｅ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｉｎ ｈｅａｔ－ｓｈ
ｏｃｋ－ｔｒｅａｔｅｄ ｌｉｖｅｒ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｉｎｈｉｂ
ｉｔ ｔｕｍｏｒ ｇｒｏｗｔｈ ｉｎ ｎｕｄｅ ｍｉｃｅ．Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ、２
０１４．２１（３）：ｐ．３１７－２７．
ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｐｒｏｍｏｔｅ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｉｎ ｈｅａｔ－ｓｈ
ｏｃｋ－ｔｒｅａｔｅｄ ｌｉｖｅｒ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｉｎｈｉｂ
ｉｔ ｔｕｍｏｒ ｇｒｏｗｔｈ ｉｎ ｎｕｄｅ ｍｉｃｅ．Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ、２
０１４．２１（３）：ｐ．３１７－２７．
【0188】
９７．Ｓａｇｅ、Ｅ．Ｋ．ら、Ｓｙｓｔｅｍｉｃ ｂｕｔ ｎｏｔ ｔｏｐｉｃａｌ
ＴＲＡＩＬ－ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ
ｒｅｄｕｃｅ ｔｕｍｏｕｒ ｇｒｏｗｔｈ ｉｎ ｍａｌｉｇｎａｎｔ ｍｅｓｏｔｈ
ｅｌｉｏｍａ．Ｔｈｏｒａｘ、２０１４．６９（７）：ｐ．６３８－４７．
ＴＲＡＩＬ－ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ
ｒｅｄｕｃｅ ｔｕｍｏｕｒ ｇｒｏｗｔｈ ｉｎ ｍａｌｉｇｎａｎｔ ｍｅｓｏｔｈ
ｅｌｉｏｍａ．Ｔｈｏｒａｘ、２０１４．６９（７）：ｐ．６３８－４７．
【0189】
９８．Ｌｉａｎ、Ｗ．Ｓ．ら、Ｉｎ ｖｉｖｏ ｔｈｅｒａｐｙ ｏｆ ｍｙｏｃａｒ
ｄｉａｌ ｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅ
ｌｌｓ ｍｏｄｉｆｉｅｄ ｗｉｔｈ ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎ Ｉ ｓｙｎｔｈａ
ｓｅ ｇｅｎｅ ｉｍｐｒｏｖｅｓ ｃａｒｄｉａｃ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｉｎ
ｍｉｃｅ．Ｌｉｆｅ Ｓｃｉ、２０１１．８８（９－１０）：ｐ．４５５－６４．
ｄｉａｌ ｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅ
ｌｌｓ ｍｏｄｉｆｉｅｄ ｗｉｔｈ ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎ Ｉ ｓｙｎｔｈａ
ｓｅ ｇｅｎｅ ｉｍｐｒｏｖｅｓ ｃａｒｄｉａｃ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｉｎ
ｍｉｃｅ．Ｌｉｆｅ Ｓｃｉ、２０１１．８８（９－１０）：ｐ．４５５－６４．
【0190】
９９．Ｍａｉｊｅｎｂｕｒｇ、Ｍ．Ｗ．ら、Ｎｕｃｌｅａｒ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ Ｎ
ｕｒ７７ ａｎｄ Ｎｕｒｒ１ ｍｏｄｕｌａｔｅ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｒｏ
ｍａｌ ｃｅｌｌ ｍｉｇｒａｔｉｏｎ．Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌｓ Ｄｅｖ、２０１２．２
１（２）：ｐ．２２８－３８．
ｕｒ７７ ａｎｄ Ｎｕｒｒ１ ｍｏｄｕｌａｔｅ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｒｏ
ｍａｌ ｃｅｌｌ ｍｉｇｒａｔｉｏｎ．Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌｓ Ｄｅｖ、２０１２．２
１（２）：ｐ．２２８－３８．
【0191】
１００．Ｈａｒｐｅｒ、Ｍ．Ｍ．ら、Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ｏｆ ＢＤＮ
Ｆ－ｓｅｃｒｅｔｉｎｇ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｐｒｏｖｉ
ｄｅｓ ｎｅｕｒｏｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ ｉｎ ｃｈｒｏｎｉｃａｌｌｙ ｈｙｐｅｒ
ｔｅｎｓｉｖｅ ｒａｔ ｅｙｅｓ．Ｉｎｖｅｓｔ Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ Ｖｉｓ Ｓ
ｃｉ、２０１１．５２（７）：ｐ．４５０６－１５．
Ｆ－ｓｅｃｒｅｔｉｎｇ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｐｒｏｖｉ
ｄｅｓ ｎｅｕｒｏｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ ｉｎ ｃｈｒｏｎｉｃａｌｌｙ ｈｙｐｅｒ
ｔｅｎｓｉｖｅ ｒａｔ ｅｙｅｓ．Ｉｎｖｅｓｔ Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ Ｖｉｓ Ｓ
ｃｉ、２０１１．５２（７）：ｐ．４５０６－１５．
【0192】
１０１．Ｚｏｕ、Ｄ．ら、Ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｓｔｕｄｙ ｏｆ ｅｎｈａｎｃｅｄ
ｏｓｔｅｏｇｅｎｅｓｉｓ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ＨＩＦ－１ａｌｐｈａ－ｔｒａｎｓ
ｄｕｃｅｄ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ．Ｃｅｌｌ Ｐｒｏｌｉｆ
、２０１１．４４（３）：ｐ．２３４－４３．
ｏｓｔｅｏｇｅｎｅｓｉｓ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ＨＩＦ－１ａｌｐｈａ－ｔｒａｎｓ
ｄｕｃｅｄ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ．Ｃｅｌｌ Ｐｒｏｌｉｆ
、２０１１．４４（３）：ｐ．２３４－４３．
【0193】
１０２．Ｓａｉｔｏ、Ｓ．ら、Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｓｔ
ａｂｌｙ ｔｒａｎｓｄｕｃｅｄ ｗｉｔｈ ａ ｄｏｍｉｎａｎｔ－ｎｅｇａｔｉｖｅ
ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｏｆ ＣＣＬ２ ｇｒｅａｔｌｙ ａｔｔｅｎｕａｔｅ ｂｌｅ
ｏｍｙｃｉｎ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｌｕｎｇ ｄａｍａｇｅ．Ａｍ Ｊ Ｐａｔｈｏｌ、２
０１１．１７９（３）：ｐ．１０８８－９４．
ａｂｌｙ ｔｒａｎｓｄｕｃｅｄ ｗｉｔｈ ａ ｄｏｍｉｎａｎｔ－ｎｅｇａｔｉｖｅ
ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｏｆ ＣＣＬ２ ｇｒｅａｔｌｙ ａｔｔｅｎｕａｔｅ ｂｌｅ
ｏｍｙｃｉｎ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｌｕｎｇ ｄａｍａｇｅ．Ａｍ Ｊ Ｐａｔｈｏｌ、２
０１１．１７９（３）：ｐ．１０８８－９４．
【0194】
１０３．Ｓｅｏ、Ｋ．Ｗ．ら、Ａｎｔｉ－ｔｕｍｏｒ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｃａｎ
ｉｎｅ ａｄｉｐｏｓｅ ｔｉｓｓｕｅ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓ
ｔｒｏｍａｌ ｃｅｌｌ－ｂａｓｅｄ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ－ｂｅｔａ ｇｅｎｅ ｔ
ｈｅｒａｐｙ ａｎｄ ｃｉｓｐｌａｔｉｎ ｉｎ ａ ｍｏｕｓｅ ｍｅｌａｎｏｍａ
ｍｏｄｅｌ．Ｃｙｔｏｔｈｅｒａｐｙ、２０１１．１３（８）：ｐ．９４４－５５．
ｉｎｅ ａｄｉｐｏｓｅ ｔｉｓｓｕｅ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓ
ｔｒｏｍａｌ ｃｅｌｌ－ｂａｓｅｄ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ－ｂｅｔａ ｇｅｎｅ ｔ
ｈｅｒａｐｙ ａｎｄ ｃｉｓｐｌａｔｉｎ ｉｎ ａ ｍｏｕｓｅ ｍｅｌａｎｏｍａ
ｍｏｄｅｌ．Ｃｙｔｏｔｈｅｒａｐｙ、２０１１．１３（８）：ｐ．９４４－５５．
【0195】
１０４．Ｙａｎｇ、Ｈ．Ｍ．ら、Ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ ｏｆ ｔｈｅ ｉｍｍｕｎ
ｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｈｕｍａｎ ａｄｉｐｏｓｅ ｔｉｓ
ｓｕｅ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｒｏｍａｌ ｃｅｌｌｓ ｔｈ
ｒｏｕｇｈ ＨＬＡ－Ｇ１ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．Ｃｙｔｏｔｈｅｒａｐｙ、２０１２
．１４（１）：ｐ．７０－９．
ｏｓｕｐｐｒｅｓｓｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｈｕｍａｎ ａｄｉｐｏｓｅ ｔｉｓ
ｓｕｅ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｒｏｍａｌ ｃｅｌｌｓ ｔｈ
ｒｏｕｇｈ ＨＬＡ－Ｇ１ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．Ｃｙｔｏｔｈｅｒａｐｙ、２０１２
．１４（１）：ｐ．７０－９．
【0196】
１０５．Ｌｉａｎｇ、Ｘ．Ｊ．ら、Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａ
ｎ ｕｍｂｉｌｉｃａｌ ｃｏｒｄ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ
ｉｎｔｏ ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ－ｌｉｋｅ ｃｅｌｌｓ ｂｙ ｈＴＥＲＴ ｇｅｎｅ
ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ ｉｎ ｖｉｔｒｏ．Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ Ｉｎｔ、２０１
２．３６（２）：ｐ．２１５－２１．
ｎ ｕｍｂｉｌｉｃａｌ ｃｏｒｄ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ
ｉｎｔｏ ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ－ｌｉｋｅ ｃｅｌｌｓ ｂｙ ｈＴＥＲＴ ｇｅｎｅ
ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ ｉｎ ｖｉｔｒｏ．Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ Ｉｎｔ、２０１
２．３６（２）：ｐ．２１５－２１．
【0197】
１０６．Ｆｅｉ、Ｓ．ら、Ｔｈｅ ａｎｔｉｔｕｍｏｒ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｍｅｓ
ｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｔｒａｎｓｄｕｃｅｄ ｗｉｔｈ ａ ｌｅ
ｎｔｉｖｉｒａｌ ｖｅｃｔｏｒ ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ ｃｙｔｏｓｉｎｅ ｄｅａｍ
ｉｎａｓｅ ｉｎ ａ ｒａｔ ｇｌｉｏｍａ ｍｏｄｅｌ．Ｊ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ
Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ、２０１２．１３８（２）：ｐ．３４７－５７．
ｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｔｒａｎｓｄｕｃｅｄ ｗｉｔｈ ａ ｌｅ
ｎｔｉｖｉｒａｌ ｖｅｃｔｏｒ ｅｘｐｒｅｓｓｉｎｇ ｃｙｔｏｓｉｎｅ ｄｅａｍ
ｉｎａｓｅ ｉｎ ａ ｒａｔ ｇｌｉｏｍａ ｍｏｄｅｌ．Ｊ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ
Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ、２０１２．１３８（２）：ｐ．３４７－５７．
【0198】
１０７．Ｊａｇａｎａｔｈａｎ、Ｂ．Ｇ．ａｎｄ Ｄ．Ｂｏｎｎｅｔ、Ｈｕｍａｎ ｍ
ｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｒｏｍａｌ ｃｅｌｌｓ ｓｅｎｅｓｃｅ ｗｉｔｈ ｅｘ
ｏｇｅｎｏｕｓ ＯＣＴ４．Ｃｙｔｏｔｈｅｒａｐｙ、２０１２．１４（９）：ｐ．１０
５４－６３．
ｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｒｏｍａｌ ｃｅｌｌｓ ｓｅｎｅｓｃｅ ｗｉｔｈ ｅｘ
ｏｇｅｎｏｕｓ ＯＣＴ４．Ｃｙｔｏｔｈｅｒａｐｙ、２０１２．１４（９）：ｐ．１０
５４－６３．
【0199】
１０８．Ｈａｎ、Ｓ．Ｈ．ら、Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｅｃｔｏｐｉｃ ＯＣＴ４ ｅｘ
ｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｎ ｃａｎｉｎｅ ａｄｉｐｏｓｅ ｔｉｓｓｕｅ－ｄｅｒｉｖｅ
ｄ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ．Ｃｅ
ｌｌ Ｂｉｏｌ Ｉｎｔ、２０１４．３８（１０）：ｐ．１１６３－７３．
ｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｎ ｃａｎｉｎｅ ａｄｉｐｏｓｅ ｔｉｓｓｕｅ－ｄｅｒｉｖｅ
ｄ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ．Ｃｅ
ｌｌ Ｂｉｏｌ Ｉｎｔ、２０１４．３８（１０）：ｐ．１１６３－７３．
【0200】
１０９．Ｓｈａｎｇｇｕａｎ、Ｌ．ら、Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ＴＧＦ－ｂｅｔ
ａ／Ｓｍａｄ ｓｉｇｎａｌｉｎｇ ｂｙ ＢＡＭＢＩ ｂｌｏｃｋｓ ｄｉｆｆｅｒｅ
ｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ
ｔｏ ｃａｒｃｉｎｏｍａ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ ａｎｄ
ａｂｏｌｉｓｈｅｓ ｔｈｅｉｒ ｐｒｏｔｕｍｏｒ ｅｆｆｅｃｔｓ．Ｓｔｅｍ Ｃ
ｅｌｌｓ、２０１２．３０（１２）：ｐ．２８１０－９．
ａ／Ｓｍａｄ ｓｉｇｎａｌｉｎｇ ｂｙ ＢＡＭＢＩ ｂｌｏｃｋｓ ｄｉｆｆｅｒｅ
ｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ
ｔｏ ｃａｒｃｉｎｏｍａ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ ａｎｄ
ａｂｏｌｉｓｈｅｓ ｔｈｅｉｒ ｐｒｏｔｕｍｏｒ ｅｆｆｅｃｔｓ．Ｓｔｅｍ Ｃ
ｅｌｌｓ、２０１２．３０（１２）：ｐ．２８１０－９．
【0201】
１１０．Ｋｅａｒｎｓ－Ｊｏｎｋｅｒ、Ｍ．ら、Ｇｅｎｅｔｉｃａｌｌｙ Ｅｎｇｉｎ
ｅｅｒｅｄ Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌｓ Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ Ｇ
ｅｎｅ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ Ｄｏｎｏｒ Ｃａｒｄｉｏｍｙｏｃｙｔｅｓ ａ
ｎｄ ｔｈｅ Ｒｅｃｉｐｉｅｎｔ Ｈｅａｒｔ．Ｊ Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌ Ｒｅｓ Ｔ
ｈｅｒ、２０１２．Ｓ１．
ｅｅｒｅｄ Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌｓ Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ Ｇ
ｅｎｅ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ Ｄｏｎｏｒ Ｃａｒｄｉｏｍｙｏｃｙｔｅｓ ａ
ｎｄ ｔｈｅ Ｒｅｃｉｐｉｅｎｔ Ｈｅａｒｔ．Ｊ Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌ Ｒｅｓ Ｔ
ｈｅｒ、２０１２．Ｓ１．
【0202】
１１１．Ｍａ、Ｇ．Ｌ．ら、［Ｓｔｕｄｙ ｏｆ ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ ａｎｄ ｋ
ｉｌｌｉｎｇ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ ＬＩＧＨＴ ｈｕｍａｎ
ｕｍｂｉｌｉｃａｌ ｃｏｒｄ ｂｌｏｏｄ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃ
ｅｌｌｓ ｏｎ ｓｔｏｍａｃｈ ｃａｎｃｅｒ］．Ｚｈｏｎｇｈｕａ Ｗｅｉ Ｃｈａ
ｎｇ Ｗａｉ Ｋｅ Ｚａ Ｚｈｉ、２０１２．１５（１１）：ｐ．１１７８－８１．
ｉｌｌｉｎｇ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ ＬＩＧＨＴ ｈｕｍａｎ
ｕｍｂｉｌｉｃａｌ ｃｏｒｄ ｂｌｏｏｄ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃ
ｅｌｌｓ ｏｎ ｓｔｏｍａｃｈ ｃａｎｃｅｒ］．Ｚｈｏｎｇｈｕａ Ｗｅｉ Ｃｈａ
ｎｇ Ｗａｉ Ｋｅ Ｚａ Ｚｈｉ、２０１２．１５（１１）：ｐ．１１７８－８１．
【0203】
１１２．Ｈｕａｎｇ、Ｆ．ら、Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｍｏ
ｄｉｆｉｅｄ ｗｉｔｈ ｍｉＲ－１２６ ｒｅｌｅａｓｅ ａｎｇｉｏｇｅｎｉｃ ｆ
ａｃｔｏｒｓ ａｎｄ ａｃｔｉｖａｔｅ Ｎｏｔｃｈ ｌｉｇａｎｄ Ｄｅｌｔａ－ｌ
ｉｋｅ－４，ｅｎｈａｎｃｉｎｇ ｉｓｃｈｅｍｉｃ ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ ａｎ
ｄ ｃｅｌｌ ｓｕｒｖｉｖａｌ．Ｉｎｔ Ｊ Ｍｏｌ Ｍｅｄ、２０１３．３１（２）
：ｐ．４８４－９２．
ｄｉｆｉｅｄ ｗｉｔｈ ｍｉＲ－１２６ ｒｅｌｅａｓｅ ａｎｇｉｏｇｅｎｉｃ ｆ
ａｃｔｏｒｓ ａｎｄ ａｃｔｉｖａｔｅ Ｎｏｔｃｈ ｌｉｇａｎｄ Ｄｅｌｔａ－ｌ
ｉｋｅ－４，ｅｎｈａｎｃｉｎｇ ｉｓｃｈｅｍｉｃ ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ ａｎ
ｄ ｃｅｌｌ ｓｕｒｖｉｖａｌ．Ｉｎｔ Ｊ Ｍｏｌ Ｍｅｄ、２０１３．３１（２）
：ｐ．４８４－９２．
【0204】
１１３．Ｈｕａｎｇ、Ｆ．ら、Ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｍｉＲ－１２６
ｐｒｏｍｏｔｅｓ ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｅｓｅｎｃｈ
ｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｔｏｗａｒｄ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｃｅｌｌｓ
ｖｉａ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ ａｎｄ ＭＡＰＫ／ＥＲＫ
ｐａｔｈｗａｙｓ ａｎｄ ｒｅｌｅａｓｅ ｏｆ ｐａｒａｃｒｉｎｅ ｆａｃｔｏ
ｒｓ．Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ、２０１３．３９４（９）：ｐ．１２２３－３３．
ｐｒｏｍｏｔｅｓ ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｅｓｅｎｃｈ
ｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｔｏｗａｒｄ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｃｅｌｌｓ
ｖｉａ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ ａｎｄ ＭＡＰＫ／ＥＲＫ
ｐａｔｈｗａｙｓ ａｎｄ ｒｅｌｅａｓｅ ｏｆ ｐａｒａｃｒｉｎｅ ｆａｃｔｏ
ｒｓ．Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ、２０１３．３９４（９）：ｐ．１２２３－３３．
【0205】
１１４．Ｆａｎｇ、Ｚ．ら、Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ ＧＦＰ－Ｂｃｌ
－２－ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｔｏｗ
ａｒｄｓ ａ ｎｕｃｌｅｕｓ ｐｕｌｐｏｓｕｓ－ｌｉｋｅ ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ ｕ
ｎｄｅｒ ｈｙｐｏｘｉａ ｉｎ ｖｉｔｒｏ．Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｒｅ
ｓ Ｃｏｍｍｕｎ、２０１３．４３２（３）：ｐ．４４４－５０．
－２－ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｔｏｗ
ａｒｄｓ ａ ｎｕｃｌｅｕｓ ｐｕｌｐｏｓｕｓ－ｌｉｋｅ ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ ｕ
ｎｄｅｒ ｈｙｐｏｘｉａ ｉｎ ｖｉｔｒｏ．Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｒｅ
ｓ Ｃｏｍｍｕｎ、２０１３．４３２（３）：ｐ．４４４－５０．
【0206】
１１５．Ｍａｄｏｎｎａ、Ｒ．ら、Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｅｓｅ
ｎｃｈｙｍａｌ ｃｅｌｌｓ ｒｅｊｕｖｅｎａｔｅｄ ｂｙ ｔｈｅ ｏｖｅｒｅｘｐ
ｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ ａｎｄ ｍｙｏｃａｒｄｉｎ ｐｒｏｍ
ｏｔｅｓ ｒｅｖａｓｃｕｌａｒｉｚａｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｉｓｓｕｅ ｒｅｐａｉｒ
ｉｎ ａ ｍｕｒｉｎｅ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｈｉｎｄｌｉｍｂ ｉｓｃｈｅｍｉａ．
Ｃｉｒｃ Ｒｅｓ、２０１３．１１３（７）：ｐ．９０２－１４．
ｎｃｈｙｍａｌ ｃｅｌｌｓ ｒｅｊｕｖｅｎａｔｅｄ ｂｙ ｔｈｅ ｏｖｅｒｅｘｐ
ｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ ａｎｄ ｍｙｏｃａｒｄｉｎ ｐｒｏｍ
ｏｔｅｓ ｒｅｖａｓｃｕｌａｒｉｚａｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｉｓｓｕｅ ｒｅｐａｉｒ
ｉｎ ａ ｍｕｒｉｎｅ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｈｉｎｄｌｉｍｂ ｉｓｃｈｅｍｉａ．
Ｃｉｒｃ Ｒｅｓ、２０１３．１１３（７）：ｐ．９０２－１４．
【0207】
１１６．Ｚａｎｇ、Ｙ．ら、［Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ ｏｆ ＣＸＣＲ４ ｏｖｅｒｅｘ
ｐｒｅｓｓｅｄ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｏｎ ｈｅｍａｔｏ
ｐｏｉｅｔｉｃ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｏｆ ｉｒｒａｄｉａｔｅｄ ｍｉｃｅ］．Ｚｈｏ
ｎｇｇｕｏ Ｓｈｉ Ｙａｎ Ｘｕｅ Ｙｅ Ｘｕｅ Ｚａ Ｚｈｉ、２０１３．２１（
５）：ｐ．１２６１－５．
ｐｒｅｓｓｅｄ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｏｎ ｈｅｍａｔｏ
ｐｏｉｅｔｉｃ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｏｆ ｉｒｒａｄｉａｔｅｄ ｍｉｃｅ］．Ｚｈｏ
ｎｇｇｕｏ Ｓｈｉ Ｙａｎ Ｘｕｅ Ｙｅ Ｘｕｅ Ｚａ Ｚｈｉ、２０１３．２１（
５）：ｐ．１２６１－５．
【0208】
１１７．Ｃａｏ、Ｚ．ら、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｍｅｓｅｎ
ｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｗｉｔｈ ＣＸＣＲ４ ｕｐ－ｒｅｇｕｌａｔｉ
ｏｎ ｉｎ ａ ｒａｔ ｒｅｎａｌ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ｍｏｄｅｌ．
ＰＬｏＳ Ｏｎｅ、２０１３．８（１２）：ｐ．ｅ８２９４９．
ｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｗｉｔｈ ＣＸＣＲ４ ｕｐ－ｒｅｇｕｌａｔｉ
ｏｎ ｉｎ ａ ｒａｔ ｒｅｎａｌ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ｍｏｄｅｌ．
ＰＬｏＳ Ｏｎｅ、２０１３．８（１２）：ｐ．ｅ８２９４９．
【0209】
１１８．Ｌｉｕ、Ｓ．ら、Ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｗｎｔ１１ ｐｒｏ
ｍｏｔｅｓ ｃｈｏｎｄｒｏｇｅｎｉｃ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｂｏ
ｎｅ ｍａｒｒｏｗ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ
ｉｎ ｓｙｎｅｒｇｉｓｍ ｗｉｔｈ ＴＧＦ－ｂｅｔａ．Ｍｏｌ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏ
ｃｈｅｍ、２０１４．３９０（１－２）：ｐ．１２３－３１．
ｍｏｔｅｓ ｃｈｏｎｄｒｏｇｅｎｉｃ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｂｏ
ｎｅ ｍａｒｒｏｗ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ
ｉｎ ｓｙｎｅｒｇｉｓｍ ｗｉｔｈ ＴＧＦ－ｂｅｔａ．Ｍｏｌ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏ
ｃｈｅｍ、２０１４．３９０（１－２）：ｐ．１２３－３１．
【0210】
１１９．Ｙｉｎ、Ｎ．ら、Ｉｓｌｅｔ－１ ｐｒｏｍｏｔｅｓ ｔｈｅ ｃａｒｄｉａ
ｃ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａ
ｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｔｈｒｏｕｇｈ ｔｈｅ ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｈ
ｉｓｔｏｎｅ ａｃｅｔｙｌａｔｉｏｎ．Ｉｎｔ Ｊ Ｍｏｌ Ｍｅｄ、２０１４．３３
（５）：ｐ．１０７５－８２．
ｃ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａ
ｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｔｈｒｏｕｇｈ ｔｈｅ ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｈ
ｉｓｔｏｎｅ ａｃｅｔｙｌａｔｉｏｎ．Ｉｎｔ Ｊ Ｍｏｌ Ｍｅｄ、２０１４．３３
（５）：ｐ．１０７５－８２．
【0211】
１２０．Ｈａｊｉｚａｄｅｈ－Ｓｉｋａｒｏｏｄｉ、Ｓ．ら、Ｌｅｎｔｉｖｉｒａｌ
Ｍｅｄｉａｔｉｎｇ Ｇｅｎｅｔｉｃ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ
Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌｓ ｆｏｒ Ｒｅｌｅａｓｉｎｇ ＩＬ－２７ ａｓ ａ Ｇｅｎ
ｅ Ｔｈｅｒａｐｙ Ａｐｐｒｏａｃｈ ｆｏｒ Ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ Ｄｉｓｅａｓ
ｅｓ．Ｃｅｌｌ Ｊ、２０１４．１６（３）：ｐ．２５５－６２．
Ｍｅｄｉａｔｉｎｇ Ｇｅｎｅｔｉｃ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ
Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌｓ ｆｏｒ Ｒｅｌｅａｓｉｎｇ ＩＬ－２７ ａｓ ａ Ｇｅｎ
ｅ Ｔｈｅｒａｐｙ Ａｐｐｒｏａｃｈ ｆｏｒ Ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ Ｄｉｓｅａｓ
ｅｓ．Ｃｅｌｌ Ｊ、２０１４．１６（３）：ｐ．２５５－６２．
【0212】
１２１．Ｈｅ、Ｈ．ら、Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌｓ Ｏｖｅｒｅ
ｘｐｒｅｓｓｉｎｇ Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ－Ｃｏｎｖｅｒｔｉｎｇ Ｅｎｚｙｍｅ
２ Ｒｅｓｃｕｅ Ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ－Ｉｎｄｕｃｅｄ Ｌｕｎｇ
Ｉｎｊｕｒｙ．Ｃｅｌｌ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ、２０１４．
ｘｐｒｅｓｓｉｎｇ Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ－Ｃｏｎｖｅｒｔｉｎｇ Ｅｎｚｙｍｅ
２ Ｒｅｓｃｕｅ Ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ－Ｉｎｄｕｃｅｄ Ｌｕｎｇ
Ｉｎｊｕｒｙ．Ｃｅｌｌ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ、２０１４．
【0213】
１２２．Ｍａ、Ｈ．Ｃ．ら、Ｔａｒｇｅｔｅｄ ｍｉｇｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｅｓｅ
ｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｍｏｄｉｆｉｅｄ ｗｉｔｈ ＣＸＣＲ４ ｔ
ｏ ａｃｕｔｅ ｆａｉｌｉｎｇ ｌｉｖｅｒ ｉｍｐｒｏｖｅｓ ｌｉｖｅｒ ｒｅｇ
ｅｎｅｒａｔｉｏｎ．Ｗｏｒｌｄ Ｊ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ、２０１４．２０（
４０）：ｐ．１４８８４－９４．
ｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｍｏｄｉｆｉｅｄ ｗｉｔｈ ＣＸＣＲ４ ｔ
ｏ ａｃｕｔｅ ｆａｉｌｉｎｇ ｌｉｖｅｒ ｉｍｐｒｏｖｅｓ ｌｉｖｅｒ ｒｅｇ
ｅｎｅｒａｔｉｏｎ．Ｗｏｒｌｄ Ｊ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ、２０１４．２０（
４０）：ｐ．１４８８４－９４．
【0214】
１２３．Ｙａｎｇ、Ｊ．Ｘ．ら、ＣＸＣＲ４ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｏｖｅｒｅｘｐｒｅ
ｓｓｉｏｎ ｉｎ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｆａｃｉｌｉｔａ
ｔｅｓ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ａｃｕｔｅ ｌｕｎｇ ｉｎｊｕｒｙ ｉｎ ｒａ
ｔｓ．Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ、２０１５．２９０（４）：ｐ．１９９４－２００６．
ｓｓｉｏｎ ｉｎ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｆａｃｉｌｉｔａ
ｔｅｓ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ａｃｕｔｅ ｌｕｎｇ ｉｎｊｕｒｙ ｉｎ ｒａ
ｔｓ．Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ、２０１５．２９０（４）：ｐ．１９９４－２００６．
【0215】
１２４．Ｚｈｕ、Ｙ．ら、Ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ－ｂａｓｅｄ
ＮＫ４ ｇｅｎｅ ｔｈｅｒａｐｙ ｉｎ ｎｕｄｅ ｍｉｃｅ ｂｅａｒｉｎｇ ｇ
ａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｘｅｎｏｇｒａｆｔｓ．Ｄｒｕｇ Ｄｅｓ Ｄｅｖｅｌ
Ｔｈｅｒ、２０１４．８：ｐ．２４４９－６２．
本開示及び、その利点を詳細に説明してきたが、添付の特許請求の範囲によって定義さ
れる設計の精神及び、範囲から逸脱することなく、様々な変更、置換、及び、変更を本明
細書で行うことができることを理解されたい。さらに、本出願の範囲は、本明細書に記載
されたプロセス、機械、製造、組成物、手段、方法、及び、ステップの特定の実施形態に
限定されることを意図していない。当業者であれば、本開示から容易に理解するように、
本明細書で説明される対応する実施形態と実質的に同じ機能を実行するか、又は実質的に
同じ結果を達成する、現在存在するか又は後に開発されるプロセス、機械、製造、物質の
組成、手段、方法、又はステップを、本開示に従って使用することができる。したがって
、添付の特許請求の範囲はその範囲内に、そのようなプロセス、機械、製造、組成物、手
段、方法、又はステップを含むことが意図される。
ＮＫ４ ｇｅｎｅ ｔｈｅｒａｐｙ ｉｎ ｎｕｄｅ ｍｉｃｅ ｂｅａｒｉｎｇ ｇ
ａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｘｅｎｏｇｒａｆｔｓ．Ｄｒｕｇ Ｄｅｓ Ｄｅｖｅｌ
Ｔｈｅｒ、２０１４．８：ｐ．２４４９－６２．
本開示及び、その利点を詳細に説明してきたが、添付の特許請求の範囲によって定義さ
れる設計の精神及び、範囲から逸脱することなく、様々な変更、置換、及び、変更を本明
細書で行うことができることを理解されたい。さらに、本出願の範囲は、本明細書に記載
されたプロセス、機械、製造、組成物、手段、方法、及び、ステップの特定の実施形態に
限定されることを意図していない。当業者であれば、本開示から容易に理解するように、
本明細書で説明される対応する実施形態と実質的に同じ機能を実行するか、又は実質的に
同じ結果を達成する、現在存在するか又は後に開発されるプロセス、機械、製造、物質の
組成、手段、方法、又はステップを、本開示に従って使用することができる。したがって
、添付の特許請求の範囲はその範囲内に、そのようなプロセス、機械、製造、組成物、手
段、方法、又はステップを含むことが意図される。
【図1】
【手続補正書】
【提出日】2024-05-01
【手続補正1】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項1】
個体における同種又は自己インスリン産生細胞の生存を増強する方法であって、個体における同種又は自己インスリン産生細胞の移植の前、同時、及び、／又は後に、有効量の内皮前駆細胞（ＥＰＣ）及び、／又は線維芽細胞を投与する工程を含む、方法。