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特開2024-96258筋萎縮性側索硬化症における治療的介入を導くためのニューロフィラメントタンパク質
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公開特許公報(A)
(11)【公開番号】P2024096258
(43)【公開日】2024-07-12
(54)【発明の名称】筋萎縮性側索硬化症における治療的介入を導くためのニューロフィラメントタンパク質
(51)【国際特許分類】
A61K 45/00 20060101AFI20240705BHJP
A61P 21/00 20060101ALI20240705BHJP
A61P 25/00 20060101ALI20240705BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20240705BHJP
A61K 48/00 20060101ALI20240705BHJP
A61K 31/7088 20060101ALI20240705BHJP
C07K 14/47 20060101ALI20240705BHJP
C12Q 1/06 20060101ALI20240705BHJP
C12N 15/113 20100101ALI20240705BHJP
G01N 33/53 20060101ALI20240705BHJP
【ＦＩ】
A61K45/00
A61P21/00
A61P25/00
A61P43/00 105
A61K48/00
A61K31/7088
C07K14/47 ZNA
C12Q1/06
C12N15/113 Z
G01N33/53 D
【審査請求】有
【請求項の数】1
【出願形態】ＯＬ
【外国語出願】
(21)【出願番号】P 2024072811
(22)【出願日】2024-04-26
(62)【分割の表示】P 2021531983の分割
【原出願日】2019-12-03
(31)【優先権主張番号】62/776,253
(32)【優先日】2018-12-06
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】62/840,431
(32)【優先日】2019-04-30
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】62/842,063
(32)【優先日】2019-05-02
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(71)【出願人】
【識別番号】514198367
【氏名又は名称】バイオジェン・エムエイ・インコーポレイテッド
【氏名又は名称原語表記】Ｂｉｏｇｅｎ ＭＡ Ｉｎｃ．
(74)【代理人】
【識別番号】100078282
【弁理士】
【氏名又は名称】山本 秀策
(74)【代理人】
【識別番号】100113413
【弁理士】
【氏名又は名称】森下 夏樹
(72)【発明者】
【氏名】トビー アーロ ファーガソン
(72)【発明者】
【氏名】ダニエル リーゼッタ グラハム
(72)【発明者】
【氏名】スティーブ サン－ウー ハン
(72)【発明者】
【氏名】アレクサンダー リード ヴィンセント マッキャンベル
(72)【発明者】
【氏名】ジュリオ スルベック－トマシー
(57)【要約】
【課題】筋萎縮性側索硬化症における治療的介入を導くためのニューロフィラメントタンパク質の提供。
【解決手段】一態様では、本発明は、筋萎縮性側索硬化症患者の症状を緩和するための方法を提供し、患者に有効な治療薬を投与することを含み、有効な治療薬は、患者に投与される時、治療薬を投与されていない筋萎縮性側索硬化症患者のニューロフィラメントタンパク質のレベルよりも低い、患者の生体試料中のニューロフィラメントタンパク質のレベルをもたらす。一部の実施形態では、患者は、有効でない治療薬または有効な治療薬とは異なる治療薬のいずれかを、現在投与されているか、または以前に投与されている。
【選択図】なし
【解決手段】一態様では、本発明は、筋萎縮性側索硬化症患者の症状を緩和するための方法を提供し、患者に有効な治療薬を投与することを含み、有効な治療薬は、患者に投与される時、治療薬を投与されていない筋萎縮性側索硬化症患者のニューロフィラメントタンパク質のレベルよりも低い、患者の生体試料中のニューロフィラメントタンパク質のレベルをもたらす。一部の実施形態では、患者は、有効でない治療薬または有効な治療薬とは異なる治療薬のいずれかを、現在投与されているか、または以前に投与されている。
【選択図】なし
【特許請求の範囲】
【請求項1】
明細書に記載の発明。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
関連出願との相互参照
本出願は、２０１８年１２月６日に出願された米国仮出願第６２／７７６，２５３号、２０１９年４月３０日に出願された米国仮出願第６２／８４０，４３１号、及び２０１９年５月２日に出願された米国仮出願第６２／８４２，０６３号に対する優先権を主張する。上述の出願のそれぞれの内容は、全体が参照により本明細書に組み込まれる。
本出願は、２０１８年１２月６日に出願された米国仮出願第６２／７７６，２５３号、２０１９年４月３０日に出願された米国仮出願第６２／８４０，４３１号、及び２０１９年５月２日に出願された米国仮出願第６２／８４２，０６３号に対する優先権を主張する。上述の出願のそれぞれの内容は、全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【0002】
本発明は、生物学及び医学の分野、特に、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）の分野に関する。ＡＬＳ（運動ニューロン疾患（ＭＮＤ）、またはルーゲーリック病としても知られる）は、脳及び脊髄の神経細胞に影響を与える進行性の神経変性疾患である。ＡＬＳに影響を受けた神経細胞は、主に、咀嚼、歩行、及び会話などの、随意筋運動に関与しているものである。筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）は、運動神経路おけるニューロンの喪失及び機能不全により引き起こされ、３～５年で重度の衰弱、硬直、そして最終的に死に至る。
【0003】
散発性及び家族性の２つの異なるタイプのＡＬＳがある。米国で最も一般的な疾患形態である散発性は、全症例の９０～９５パーセントを占める。誰にでも、どこにでも影響を与え得る。家族性ＡＬＳ（ＦＡＬＳ）は、米国の全症例の５～１０パーセントを占め、家族性ＡＬＳは、疾患が遺伝することを意味する。それらの家族では、各子孫が遺伝子変異を継承し、疾患を発症し得る可能性は、５０％である。フランスの神経内科医Ｊｅａｎ－Ｍａｒｔｉｎ Ｃｈａｒｃｏｔは、１８６９年に疾患を発見した。
【0004】
ＡＬＳに対する既知の治癒はないが、リルゾール（Ｒｉｌｕｔｅｋとして販売）、エダラボン（Ｒａｄｉｃａｖａとして販売）を含む、ＡＬＳの症状を緩和する一部の治療薬がある。バクロフェン及びジアゼパムなどの追加の治療薬は、ＡＬＳにより引き起こされる痙縮を制御するために使用されるが、トリヘキシフェニジル及びグリコピロレートは、唾液を飲み込むのに問題があるＡＬＳ患者を助けるために使用することができる。
【0005】
しかし、全ての治療薬が、全てのＡＬＳ患者の症状を緩和するわけではなく、現在、ＡＬＳの既知の治癒はない。
【0006】
従って、依然として、患者のＡＬＳの症状を緩和する新しい治療薬を特定する必要性がある。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【0007】
一部の実施形態では、本発明は、治療薬がその患者に有効であり、それにより、ＡＬＳの１つ以上の症状を緩和し、その患者の障害の進行を遅くするかどうかを特定するための方法を提供する。一部の実施形態では、本発明は、適切な治療薬が可能な限り早く開始されるように早く重度ＡＬＳ疾患を特定する方法を提供する。一部の実施形態では、本発明は、特定の使用状況に臨床的に関連するカットポイントを提供する。一部の実施形態では、本発明は、ＡＬＳ患者が投与された治療薬に応答しているかどうか（すなわち、治療薬がその患者において有効であるかどうか）を判定する方法、及びその患者の症状を緩和する治療薬でＡＬＳ患者を処置する方法を提供する。
【0008】
従って、第１の態様では、本発明は、ＡＬＳ患者の症状を緩和するための方法を提供し、方法は、患者に有効である有効な治療薬を投与することを含み、有効な治療薬は、患者に投与される時、有効な治療薬が投与されていないＡＬＳ患者のニューロフィラメントタンパク質のレベルよりも低い（例えば、少なくとも１０％、１５％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、またはそれ以上低い）患者の生体試料（例えば、血液、血清、血漿、または脳脊髄液（ＣＳＦ））中のニューロフィラメントのレベルをもたらす。一部の実施形態では、患者は、（ａ）有効でない治療薬、または（ｂ）有効な治療薬とは異なる治療薬が、現在投与されているか、または以前に投与されている。
【0009】
別の態様では、本発明は、ＡＬＳ患者に投与される治療薬が患者に有効であるかどうかを判定するための方法を提供し、方法は、治療薬を投与された患者から生体試料（例えば、血液、血清、血漿、または脳脊髄液（ＣＳＦ））を取得するか、または取得していること；ならびに、処置後レベルを得るために、患者の生体試料（例えば、血液、血清、血漿、または脳脊髄液（ＣＳＦ））中のニューロフィラメントタンパク質のレベルを測定すること、または測定していること、を含み、治療薬が投与されていないＡＬＳ患者のニューロフィラメントタンパク質のレベルよりも低い（例えば、少なくとも１０％、１５％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、またはそれ以上低い）処置後レベルにより、治療薬が患者に有効であると特定される。一部の実施形態では、患者は、（ａ）有効でない治療薬、または（ｂ）有効な治療薬とは異なる治療薬が、現在投与されているか、または以前に投与されている。
【0010】
別の態様では、本発明は、有効な治療薬を用いてＡＬＳ患者を処置するための方法を提供し、方法は、（ｉ）（ａ）候補治療薬の投与後の患者由来の生体試料（例えば、血液、血清、血漿、もしくは脳脊髄液（ＣＳＦ））を得ること、または得ていること；及び、（ｂ）処置後レベルを得るために、患者の生体試料（例えば、血液、血清、血漿、または脳脊髄液（ＣＳＦ））中のニューロフィラメントタンパク質のレベルを測定すること、または測定していること、により候補治療薬で患者のＡＬＳの症状が緩和するかどうかを判定すること（処置後レベルが候補治療薬を投与されていないＡＬＳ患者のニューロフィラメントタンパク質のレベルよりも低い（例えば、少なくとも１０％、１５％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、またはそれ以上低い）場合、候補治療薬は、有効な治療薬である）、ならびに、（ｉｉ）患者に有効な治療薬を投与すること（有効な治療薬がＡＬＳ患者のＡＬＳの症状を緩和させることになる）を含む。一部の実施形態では、患者は、（ａ）非有効な治療薬、または（ｂ）候補治療薬とは異なる治療薬を、現在投与されているか、または以前に投与されている。
【0011】
さらに別の態様では、本発明は、ＡＬＳ患者のＡＬＳの症状を緩和する有効な治療薬を特定するための方法を提供し、方法は、患者に候補治療薬を投与すること、及び処置後レベルを得るために、患者が候補治療薬を少なくとも５週間（例えば、少なくとも５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０週間、もしくは少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、もしくは１２ヶ月間、または少なくとも１、２、３年、もしくはそれ以上）投与された後の処置された患者の生体試料（例えば、血液、血清、血漿、または脳脊髄液（ＣＳＦ））中のニューロフィラメントタンパク質のレベルを測定すること、を含み、候補治療薬を投与されていないＡＬＳ患者におけるニューロフィラメントタンパク質のレベルよりも低い（例えば、少なくとも１０％、１５％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、またはそれ以上低い）処置後レベルにより、候補治療薬が患者のＡＬＳの症状を緩和する有効な治療薬と特定される。一部の実施形態では、患者は、（ａ）非有効な治療薬、または（ｂ）候補治療薬とは異なる治療薬を、現在投与されているか、または以前に投与されている。
【0012】
種々の実施形態では、有効な治療薬の投与は、患者のＡＬＳ疾患の進行を遅らせる。
【0013】
別の態様では、本発明は、方法を必要とするヒト対象の筋萎縮性側索硬化症を処置する方法を提供し、方法は、ヒト対象から得られた第１の生体試料中のニューロフィラメントタンパク質レベルを測定すること；ヒト対象に１用量以上の治療薬を投与すること；及び１用量以上の治療薬の投与後に、ヒト対象から得られた第２の生体試料中のニューロフィラメントタンパク質レベルを測定すること、を含み、第２の生体試料中のニューロフィラメントタンパク質レベルが、第１の生体試料中のニューロフィラメントタンパク質レベルよりも低い。
【0014】
一部の実施形態では、方法は、第１の生体試料中のニューロフィラメントタンパク質レベルよりも低い、第２の生体試料中のニューロフィラメントタンパク質レベルを測定した後に、ヒト対象にさらなる用量の治療薬を投与することを必要とする。
【0015】
別の態様では、本発明は、方法を必要とするヒト対象の筋萎縮性側索硬化症を処置する方法を提供し、方法は、ヒト対象に初期用量の治療薬を投与すること（初期用量のそれぞれは、同じ量であり、投与間の同じ投与間隔で投与される）；初期用量の投与前にヒト対象から得られた第２の生体試料中で測定されたニューロフィラメントタンパク質レベルよりも低い、初期用量の投与後にヒト対象から得られた第１の生体試料中のニューロフィラメントタンパク質レベルを測定すること；ならびに、ヒト対象にさらなる用量の治療薬を投与すること（さらなる用量のそれぞれは、初期用量と比較して、同じかまたは少ない量及び同じかまたは延長された投与間隔のものである）を含む。
【0016】
別の態様では、本発明は、方法を必要とするヒト対象の筋萎縮性側索硬化症を処置する方法を提供し、方法は、ヒト対象に初期用量の治療薬を投与すること（初期用量のそれぞれは、同じ量であり、投与間の同じ投与間隔で投与される）；初期用量の投与前にヒト対象から得られた第２の生体試料中で測定されたニューロフィラメントタンパク質レベル以上の、初期用量の投与後にヒト対象から得られた第１の生体試料中のニューロフィラメントタンパク質を測定すること；ならびに、ヒト対象にさらなる用量の治療薬を投与すること（さらなる用量のそれぞれは、初期用量と比較して、増加した量及び／または短縮された投与間隔のものである）を含む。
【0017】
上述の方法のいずれかの一部の実施形態では、治療薬は、以下の式によるアンチセンス化合物である：
ｍＣｅｓ Ａｅｏ Ｇｅｓ Ｇｅｏ Ａｅｓ Ｔｄｓ Ａｄｓ ｍＣｄｓ Ａｄｓ Ｔｄｓ Ｔｄｓ Ｔｄｓ ｍＣｄｓ Ｔｄｓ Ａｄｓ ｍＣｅｏ Ａｅｓ Ｇｅｏ ｍＣｅｓ Ｔｅ（配列番号８の核酸塩基配列）（式中、
Ａ＝アデニン、
ｍＣ＝５－メチルシトシン
Ｇ＝グアニン、
Ｔ＝チミン、
ｅ＝２’－Ｏ－メトキシエチルリボース修飾糖、
ｄ＝一部の実施形態では、２’－デオキシリボース糖、
ｓ＝ホスホロチオアートヌクレオシド間結合、及び
ｏ＝ホスホジエステルヌクレオシド間結合、
またはその薬学的に許容される塩）。
ｍＣｅｓ Ａｅｏ Ｇｅｓ Ｇｅｏ Ａｅｓ Ｔｄｓ Ａｄｓ ｍＣｄｓ Ａｄｓ Ｔｄｓ Ｔｄｓ Ｔｄｓ ｍＣｄｓ Ｔｄｓ Ａｄｓ ｍＣｅｏ Ａｅｓ Ｇｅｏ ｍＣｅｓ Ｔｅ（配列番号８の核酸塩基配列）（式中、
Ａ＝アデニン、
ｍＣ＝５－メチルシトシン
Ｇ＝グアニン、
Ｔ＝チミン、
ｅ＝２’－Ｏ－メトキシエチルリボース修飾糖、
ｄ＝一部の実施形態では、２’－デオキシリボース糖、
ｓ＝ホスホロチオアートヌクレオシド間結合、及び
ｏ＝ホスホジエステルヌクレオシド間結合、
またはその薬学的に許容される塩）。
【0018】
上述の方法のいずれかの一部の実施形態では、患者またはヒト対象は、筋萎縮性側索硬化症と関連するスーパーオキシドジスムターゼ１（ＳＯＤ１）遺伝子に変異を有する。一部の実施形態では、ＳＯＤ１遺伝子の変異は、Ａ４Ｖである。一部の実施形態では、ＳＯＤ１遺伝子の変異は、Ａ４Ｖ、Ｈ４６Ｒ、Ｇ９３Ｓ、Ａ４Ｔ、Ｇ１４１Ｘ、Ｄ１３３Ａ、Ｖ１４８Ｇ、Ｎ１３９Ｋ、Ｇ８５Ｒ、Ｇ９３Ａ、Ｖ１４Ｇ、Ｃ６Ｓ、Ｉ１１３Ｔ、Ｄ４９Ｋ、Ｇ３７Ｒ、Ａ８９Ｖ、Ｅ１００Ｇ、Ｄ９０Ａ、Ｔ１３７Ａ、Ｅ１００Ｋ、Ｇ４１Ａ、Ｇ４１Ｄ、Ｇ４１Ｓ、Ｇ１３Ｒ、Ｇ７２Ｓ、Ｌ８Ｖ、Ｆ２０Ｃ、Ｑ２２Ｌ、Ｈ４８Ｒ、Ｔ５４Ｒ、Ｓ５９１、Ｖ８７Ａ、Ｔ８８ｄｅｌｔａＴＡＤ、Ａ８９Ｔ、Ｖ９７Ｍ、Ｓ１０５ｄｅｌｔａＳＬ、Ｖ１１８Ｌ、Ｄ１２４Ｇ、Ｌ１１４Ｆ、Ｄ９０Ａ、Ｇ１２Ｒ、またはＧ１４７Ｒである。
【0019】
上述の方法のいずれかの一部の実施形態では、ニューロフィラメントタンパク質は、ニューロフィラメント軽鎖である。
【0020】
上述の方法のいずれかの一部の実施形態では、ニューロフィラメントタンパク質は、ニューロフィラメント重鎖（例えば、リン酸化ニューロフィラメント重鎖）である。
【0021】
上述の方法のいずれかの一部の実施形態では、第１の生体試料及び第２の生体試料は、血液、血清、血漿、または脳脊髄液を含む。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
（項目１）
筋萎縮性側索硬化症患者の症状を緩和するための方法であって、前記患者に有効な治療薬を投与することを含み、前記有効な治療薬が、前記患者に投与される時、前記有効な治療薬を投与されていない筋萎縮性側索硬化症患者のニューロフィラメントタンパク質のレベルよりも低い、前記患者の生体試料中のニューロフィラメントタンパク質のレベルをもたらす、前記方法。
（項目２）
筋萎縮性側索硬化症患者に投与された治療薬が、前記患者に有効である有効な治療薬であるかどうかを判定するための方法であって、前記治療薬を投与された前記患者から生体試料を得ること、または得ていること；及び、処置後レベルを得るために、前記患者の生体試料中のニューロフィラメントタンパク質のレベルを測定すること、または測定していること、を含み、前記治療薬を投与されていない筋萎縮性側索硬化症患者のニューロフィラメントタンパク質のレベルよりも低い処置後レベルにより、前記治療薬が前記患者に有効であると特定される、前記方法。
（項目３）
有効な治療薬の投与により筋萎縮性側索硬化症患者の症状を緩和するための方法であって、
（ａ）（ｉ）候補治療薬の投与後に、前記患者から生体試料を得ること、または得ていること、及び
（ｉｉ）処置後レベルを得るために、前記生体試料中のニューロフィラメントタンパク質のレベルを測定するか、または測定していること、
により、前記患者の筋萎縮性側索硬化症の症状が、前記候補治療薬で緩和されるかどうかを判定すること、を含み、
前記処置後レベルが前記候補治療薬を投与されていない筋萎縮性側索硬化症患者のニューロフィラメントタンパク質のレベルよりも低い場合、前記候補治療薬が有効な治療薬であり、
さらに前記方法が、
（ｂ）前記患者に前記有効な治療薬を投与すること、
を含み、
前記有効な治療薬の投与が、前記患者の前記筋萎縮性側索硬化症の症状を緩和する、
前記方法。
（項目４）
前記患者が、（ａ）非有効な治療薬、または（ｂ）前記候補治療薬とは異なる治療薬、を現在投与されているか、または以前に投与されている、項目１、２、または３に記載の方法。
（項目５）
有効な治療薬の投与により筋萎縮性側索硬化症患者の症状を緩和するための方法であって、前記患者の生体試料中のニューロフィラメントタンパク質のレベルを測定すること、を含み、前記患者が、（ａ）有効でない治療薬、または（ｂ）前記有効な治療薬とは異なる治療薬である第１の治療薬を現在投与されており、さらに前記方法が、前記レベルが前記有効な治療薬を投与されていない筋萎縮性側索硬化症患者のニューロフィラメントタンパク質のレベル以上である場合に、前記患者への前記第１の治療薬の投与を停止すること及び前記患者への前記有効な治療薬の投与を開始すること、を含む、前記方法。
（項目６）
前記有効な治療薬を投与された前記患者の前記生体試料中の前記ニューロフィラメントタンパク質の前記処置後レベルが、前記有効な治療薬を投与されていない患者の前記生体試料中の前記ニューロフィラメントタンパク質の前記レベルよりも少なくとも１０％低い、項目１～５のいずれか１項に記載の方法。
（項目７）
少なくとも３ヶ月間、前記有効な治療薬を投与された前記患者の前記生体試料中の前記ニューロフィラメントタンパク質の前記処置後レベルが、前記有効な治療薬を投与されていない患者の前記生体試料中の前記ニューロフィラメントタンパク質の前記レベルよりも少なくとも１０％低い、項目１～５のいずれか１項に記載の方法。
（項目８）
少なくとも６ヶ月間、前記有効な治療薬を投与された前記患者の前記生体試料中の前記ニューロフィラメントタンパク質の前記レベルが、前記有効な治療薬を投与されていない患者の前記生体試料中の前記ニューロフィラメントタンパク質の前記レベルよりも少なくとも１０％低い、項目１～５のいずれか１項に記載の方法。
（項目９）
少なくとも１２ヶ月間、前記有効な治療薬を投与された前記患者の前記生体試料中の前記ニューロフィラメントタンパク質の前記レベルが、前記有効な治療薬を投与されていない患者の前記生体試料中の前記ニューロフィラメントタンパク質の前記レベルよりも少なくとも１０％低い、項目１～５のいずれか１項に記載の方法。
（項目１０）
前記有効な治療薬の前記投与が、前記患者の筋萎縮性側索硬化症の進行を遅らせる、項目１～５のいずれか１項に記載の方法。
（項目１１）
前記生体試料が、血液、血清、血漿、または脳脊髄液を含む、項目１～１０のいずれか１項に記載の方法。
（項目１２）
筋萎縮性側索硬化症の処置を必要とするヒト対象の前記筋萎縮性側索硬化症を処置する方法あって、
前記ヒト対象から得られた第１の生体試料中のニューロフィラメントタンパク質レベルを測定すること、
前記ヒト対象に１用量以上の治療薬を投与すること、及び
前記１用量以上の前記治療薬の投与後に、前記ヒト対象から得られた第２の生体試料中のニューロフィラメントタンパク質レベルを測定すること、を含み、前記第２の生体試料中の前記ニューロフィラメントタンパク質レベルが、前記第１の生体試料中の前記ニューロフィラメントタンパク質レベルよりも低い、
前記方法。
（項目１３）
さらに、前記第１の生体試料中の前記ニューロフィラメントタンパク質レベルよりも低い、前記第２の生体試料中のニューロフィラメントタンパク質レベルを測定した後に、前記ヒト対象にさらなる用量の前記治療薬を投与することを含む、項目１２に記載の方法。（項目１４）
筋萎縮性側索硬化症の処置を必要とするヒト対象の前記筋萎縮性側索硬化症を処置する方法あって、
前記ヒト対象に初期用量の治療薬を投与することを含み、前記初期用量のそれぞれが、同じ量であり、投与間の同じ投与間隔で投与され、
前記方法が、前記初期用量の投与前に前記ヒト対象から得られた第２の生体試料中で測定されたニューロフィラメントタンパク質レベルよりも低い、前記初期用量の投与後に前記ヒト対象から得られた第１の生体試料中のニューロフィラメントタンパク質レベルを測定すること、及び
前記ヒト対象に、さらなる用量の前記治療薬を投与すること、を含み、前記さらなる用量のそれぞれが、前記初期用量と比較して、同じかまたはより少ない量及び同じかまたは延長された投与間隔のものである、
前記方法。
（項目１５）
方法を必要とするヒト対象の筋萎縮性側索硬化症を処置する方法あって、
前記ヒト対象に初期用量の治療薬を投与することを含み、前記初期用量のそれぞれが、同じ量であり、投与間の同じ投与間隔で投与され、
さらに前記方法が、前記初期用量の投与前に前記ヒト対象から得られた第２の生体試料中で測定されたニューロフィラメントタンパク質レベル以上の、前記初期用量の投与後に前記ヒト対象から得られた第１の生体試料中のニューロフィラメントタンパク質レベルを測定すること、及び
前記ヒト対象に、さらなる用量の前記治療薬を投与すること、を含み、前記さらなる用量のそれぞれが、前記初期用量と比較して、増加した量及び／または短縮された投与間隔のものである、
前記方法。
（項目１６）
前記治療薬が、以下の式によるアンチセンス化合物である、項目１２～１５のいずれか１項に記載の方法：
ｍＣｅｓ Ａｅｏ Ｇｅｓ Ｇｅｏ Ａｅｓ Ｔｄｓ Ａｄｓ ｍＣｄｓ Ａｄｓ Ｔｄｓ Ｔｄｓ Ｔｄｓ ｍＣｄｓ Ｔｄｓ Ａｄｓ ｍＣｅｏ Ａｅｓ Ｇｅｏ ｍＣｅｓ
Ｔｅ（配列番号８の核酸塩基配列）（式中、
Ａ＝アデニン、
ｍＣ＝５－メチルシトシン
Ｇ＝グアニン、
Ｔ＝チミン、
ｅ＝２’－Ｏ－メトキシエチルリボース修飾糖、
ｄ＝２’－デオキシリボース糖、
ｓ＝ホスホロチオアートヌクレオシド間結合、及び
ｏ＝ホスホジエステルヌクレオシド間結合、
またはその薬学的に許容される塩）。
（項目１７）
前記患者または前記ヒト対象が、筋萎縮性側索硬化症と関連したスーパーオキシドジスムターゼ１（ＳＯＤ１）遺伝子に変異を有する、先行項目のいずれか１項に記載の方法。（項目１８）
前記ＳＯＤ１遺伝子における前記変異が、Ａ４Ｖである、項目１７に記載の方法。
（項目１９）
前記ＳＯＤ１遺伝子における前記変異が、Ａ４Ｖ、Ｈ４６Ｒ、Ｇ９３Ｓ、Ａ４Ｔ、Ｇ１４１Ｘ、Ｄ１３３Ａ、Ｖ１４８Ｇ、Ｎ１３９Ｋ、Ｇ８５Ｒ、Ｇ９３Ａ、Ｖ１４Ｇ、Ｃ６Ｓ、Ｉ１１３Ｔ、Ｄ４９Ｋ、Ｇ３７Ｒ、Ａ８９Ｖ、Ｅ１００Ｇ、Ｄ９０Ａ、Ｔ１３７Ａ、Ｅ１００Ｋ、Ｇ４１Ａ、Ｇ４１Ｄ、Ｇ４１Ｓ、Ｇ１３Ｒ、Ｇ７２Ｓ、Ｌ８Ｖ、Ｆ２０Ｃ、Ｑ２２Ｌ、Ｈ４８Ｒ、Ｔ５４Ｒ、Ｓ５９１、Ｖ８７Ａ、Ｔ８８ｄｅｌｔａＴＡＤ、Ａ８９Ｔ、Ｖ９７Ｍ、Ｓ１０５ｄｅｌｔａＳＬ、Ｖ１１８Ｌ、Ｄ１２４Ｇ、Ｌ１１４Ｆ、Ｄ９０Ａ、Ｇ１２Ｒ、またはＧ１４７Ｒである、項目１７に記載の方法。
（項目２０）
前記ニューロフィラメントタンパク質が、ニューロフィラメント軽鎖である、先行項目のいずれか１項に記載の方法。
（項目２１）
前記ニューロフィラメントタンパク質が、ニューロフィラメント重鎖である、項目１～１９のいずれか１項に記載の方法。
（項目２２）
前記ニューロフィラメント重鎖が、リン酸化ニューロフィラメント重鎖である、項目２１に記載の方法。
（項目２３）
前記第１の生体試料及び前記第２の生体試料が、血液、血清、血漿、または脳脊髄液を含む、項目１２～２２のいずれか１項に記載の方法。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
（項目１）
筋萎縮性側索硬化症患者の症状を緩和するための方法であって、前記患者に有効な治療薬を投与することを含み、前記有効な治療薬が、前記患者に投与される時、前記有効な治療薬を投与されていない筋萎縮性側索硬化症患者のニューロフィラメントタンパク質のレベルよりも低い、前記患者の生体試料中のニューロフィラメントタンパク質のレベルをもたらす、前記方法。
（項目２）
筋萎縮性側索硬化症患者に投与された治療薬が、前記患者に有効である有効な治療薬であるかどうかを判定するための方法であって、前記治療薬を投与された前記患者から生体試料を得ること、または得ていること；及び、処置後レベルを得るために、前記患者の生体試料中のニューロフィラメントタンパク質のレベルを測定すること、または測定していること、を含み、前記治療薬を投与されていない筋萎縮性側索硬化症患者のニューロフィラメントタンパク質のレベルよりも低い処置後レベルにより、前記治療薬が前記患者に有効であると特定される、前記方法。
（項目３）
有効な治療薬の投与により筋萎縮性側索硬化症患者の症状を緩和するための方法であって、
（ａ）（ｉ）候補治療薬の投与後に、前記患者から生体試料を得ること、または得ていること、及び
（ｉｉ）処置後レベルを得るために、前記生体試料中のニューロフィラメントタンパク質のレベルを測定するか、または測定していること、
により、前記患者の筋萎縮性側索硬化症の症状が、前記候補治療薬で緩和されるかどうかを判定すること、を含み、
前記処置後レベルが前記候補治療薬を投与されていない筋萎縮性側索硬化症患者のニューロフィラメントタンパク質のレベルよりも低い場合、前記候補治療薬が有効な治療薬であり、
さらに前記方法が、
（ｂ）前記患者に前記有効な治療薬を投与すること、
を含み、
前記有効な治療薬の投与が、前記患者の前記筋萎縮性側索硬化症の症状を緩和する、
前記方法。
（項目４）
前記患者が、（ａ）非有効な治療薬、または（ｂ）前記候補治療薬とは異なる治療薬、を現在投与されているか、または以前に投与されている、項目１、２、または３に記載の方法。
（項目５）
有効な治療薬の投与により筋萎縮性側索硬化症患者の症状を緩和するための方法であって、前記患者の生体試料中のニューロフィラメントタンパク質のレベルを測定すること、を含み、前記患者が、（ａ）有効でない治療薬、または（ｂ）前記有効な治療薬とは異なる治療薬である第１の治療薬を現在投与されており、さらに前記方法が、前記レベルが前記有効な治療薬を投与されていない筋萎縮性側索硬化症患者のニューロフィラメントタンパク質のレベル以上である場合に、前記患者への前記第１の治療薬の投与を停止すること及び前記患者への前記有効な治療薬の投与を開始すること、を含む、前記方法。
（項目６）
前記有効な治療薬を投与された前記患者の前記生体試料中の前記ニューロフィラメントタンパク質の前記処置後レベルが、前記有効な治療薬を投与されていない患者の前記生体試料中の前記ニューロフィラメントタンパク質の前記レベルよりも少なくとも１０％低い、項目１～５のいずれか１項に記載の方法。
（項目７）
少なくとも３ヶ月間、前記有効な治療薬を投与された前記患者の前記生体試料中の前記ニューロフィラメントタンパク質の前記処置後レベルが、前記有効な治療薬を投与されていない患者の前記生体試料中の前記ニューロフィラメントタンパク質の前記レベルよりも少なくとも１０％低い、項目１～５のいずれか１項に記載の方法。
（項目８）
少なくとも６ヶ月間、前記有効な治療薬を投与された前記患者の前記生体試料中の前記ニューロフィラメントタンパク質の前記レベルが、前記有効な治療薬を投与されていない患者の前記生体試料中の前記ニューロフィラメントタンパク質の前記レベルよりも少なくとも１０％低い、項目１～５のいずれか１項に記載の方法。
（項目９）
少なくとも１２ヶ月間、前記有効な治療薬を投与された前記患者の前記生体試料中の前記ニューロフィラメントタンパク質の前記レベルが、前記有効な治療薬を投与されていない患者の前記生体試料中の前記ニューロフィラメントタンパク質の前記レベルよりも少なくとも１０％低い、項目１～５のいずれか１項に記載の方法。
（項目１０）
前記有効な治療薬の前記投与が、前記患者の筋萎縮性側索硬化症の進行を遅らせる、項目１～５のいずれか１項に記載の方法。
（項目１１）
前記生体試料が、血液、血清、血漿、または脳脊髄液を含む、項目１～１０のいずれか１項に記載の方法。
（項目１２）
筋萎縮性側索硬化症の処置を必要とするヒト対象の前記筋萎縮性側索硬化症を処置する方法あって、
前記ヒト対象から得られた第１の生体試料中のニューロフィラメントタンパク質レベルを測定すること、
前記ヒト対象に１用量以上の治療薬を投与すること、及び
前記１用量以上の前記治療薬の投与後に、前記ヒト対象から得られた第２の生体試料中のニューロフィラメントタンパク質レベルを測定すること、を含み、前記第２の生体試料中の前記ニューロフィラメントタンパク質レベルが、前記第１の生体試料中の前記ニューロフィラメントタンパク質レベルよりも低い、
前記方法。
（項目１３）
さらに、前記第１の生体試料中の前記ニューロフィラメントタンパク質レベルよりも低い、前記第２の生体試料中のニューロフィラメントタンパク質レベルを測定した後に、前記ヒト対象にさらなる用量の前記治療薬を投与することを含む、項目１２に記載の方法。（項目１４）
筋萎縮性側索硬化症の処置を必要とするヒト対象の前記筋萎縮性側索硬化症を処置する方法あって、
前記ヒト対象に初期用量の治療薬を投与することを含み、前記初期用量のそれぞれが、同じ量であり、投与間の同じ投与間隔で投与され、
前記方法が、前記初期用量の投与前に前記ヒト対象から得られた第２の生体試料中で測定されたニューロフィラメントタンパク質レベルよりも低い、前記初期用量の投与後に前記ヒト対象から得られた第１の生体試料中のニューロフィラメントタンパク質レベルを測定すること、及び
前記ヒト対象に、さらなる用量の前記治療薬を投与すること、を含み、前記さらなる用量のそれぞれが、前記初期用量と比較して、同じかまたはより少ない量及び同じかまたは延長された投与間隔のものである、
前記方法。
（項目１５）
方法を必要とするヒト対象の筋萎縮性側索硬化症を処置する方法あって、
前記ヒト対象に初期用量の治療薬を投与することを含み、前記初期用量のそれぞれが、同じ量であり、投与間の同じ投与間隔で投与され、
さらに前記方法が、前記初期用量の投与前に前記ヒト対象から得られた第２の生体試料中で測定されたニューロフィラメントタンパク質レベル以上の、前記初期用量の投与後に前記ヒト対象から得られた第１の生体試料中のニューロフィラメントタンパク質レベルを測定すること、及び
前記ヒト対象に、さらなる用量の前記治療薬を投与すること、を含み、前記さらなる用量のそれぞれが、前記初期用量と比較して、増加した量及び／または短縮された投与間隔のものである、
前記方法。
（項目１６）
前記治療薬が、以下の式によるアンチセンス化合物である、項目１２～１５のいずれか１項に記載の方法：
ｍＣｅｓ Ａｅｏ Ｇｅｓ Ｇｅｏ Ａｅｓ Ｔｄｓ Ａｄｓ ｍＣｄｓ Ａｄｓ Ｔｄｓ Ｔｄｓ Ｔｄｓ ｍＣｄｓ Ｔｄｓ Ａｄｓ ｍＣｅｏ Ａｅｓ Ｇｅｏ ｍＣｅｓ
Ｔｅ（配列番号８の核酸塩基配列）（式中、
Ａ＝アデニン、
ｍＣ＝５－メチルシトシン
Ｇ＝グアニン、
Ｔ＝チミン、
ｅ＝２’－Ｏ－メトキシエチルリボース修飾糖、
ｄ＝２’－デオキシリボース糖、
ｓ＝ホスホロチオアートヌクレオシド間結合、及び
ｏ＝ホスホジエステルヌクレオシド間結合、
またはその薬学的に許容される塩）。
（項目１７）
前記患者または前記ヒト対象が、筋萎縮性側索硬化症と関連したスーパーオキシドジスムターゼ１（ＳＯＤ１）遺伝子に変異を有する、先行項目のいずれか１項に記載の方法。（項目１８）
前記ＳＯＤ１遺伝子における前記変異が、Ａ４Ｖである、項目１７に記載の方法。
（項目１９）
前記ＳＯＤ１遺伝子における前記変異が、Ａ４Ｖ、Ｈ４６Ｒ、Ｇ９３Ｓ、Ａ４Ｔ、Ｇ１４１Ｘ、Ｄ１３３Ａ、Ｖ１４８Ｇ、Ｎ１３９Ｋ、Ｇ８５Ｒ、Ｇ９３Ａ、Ｖ１４Ｇ、Ｃ６Ｓ、Ｉ１１３Ｔ、Ｄ４９Ｋ、Ｇ３７Ｒ、Ａ８９Ｖ、Ｅ１００Ｇ、Ｄ９０Ａ、Ｔ１３７Ａ、Ｅ１００Ｋ、Ｇ４１Ａ、Ｇ４１Ｄ、Ｇ４１Ｓ、Ｇ１３Ｒ、Ｇ７２Ｓ、Ｌ８Ｖ、Ｆ２０Ｃ、Ｑ２２Ｌ、Ｈ４８Ｒ、Ｔ５４Ｒ、Ｓ５９１、Ｖ８７Ａ、Ｔ８８ｄｅｌｔａＴＡＤ、Ａ８９Ｔ、Ｖ９７Ｍ、Ｓ１０５ｄｅｌｔａＳＬ、Ｖ１１８Ｌ、Ｄ１２４Ｇ、Ｌ１１４Ｆ、Ｄ９０Ａ、Ｇ１２Ｒ、またはＧ１４７Ｒである、項目１７に記載の方法。
（項目２０）
前記ニューロフィラメントタンパク質が、ニューロフィラメント軽鎖である、先行項目のいずれか１項に記載の方法。
（項目２１）
前記ニューロフィラメントタンパク質が、ニューロフィラメント重鎖である、項目１～１９のいずれか１項に記載の方法。
（項目２２）
前記ニューロフィラメント重鎖が、リン酸化ニューロフィラメント重鎖である、項目２１に記載の方法。
（項目２３）
前記第１の生体試料及び前記第２の生体試料が、血液、血清、血漿、または脳脊髄液を含む、項目１２～２２のいずれか１項に記載の方法。
【図面の簡単な説明】
【0022】
【図1】血漿中ニューロフィラメント重鎖の縦方向の低下を示す折れ線グラフであり、平均低下は、１ヶ月当たり１．８％である。
【図2】ニューロフィラメント重鎖レベルの上位三分位、中位三分位、及び下位三分位の患者の処置群による血漿中ニューロフィラメント重鎖レベルの縦方向の変化を示す折れ線グラフである。各三分位では、プラセボ処置群が上側の線であり、デクスプラミペキソール処置群が下側の線である。
【図3】ＳＯＤ１活性ＡＳＯまたはＳＯＤ１不活性ＡＳＯで処置されたＳＯＤ１Ｇ９３Ａマウスにおける神経筋接合部（ＮＭＪ）の喪失を比較する折れ線グラフである。
【図4】ＳＯＤ１活性ＡＳＯまたはＳＯＤ１不活性ＡＳＯで処置されたＳＯＤ１Ｇ９３Ａマウスの血清中のリン酸化ニューロフィラメント重鎖レベルを比較する折れ線グラフである。
【図5】様々なＡＳＯ１投与コホートにおけるＣＳＦ中ＳＯＤ１タンパク質濃度のベースラインからの倍数変化を示すグラフである。
【図6A】プラセボに対してＡＳＯ１ １００ｍｇで処置された急速な進行者である患者及びプラセボに対してＡＳＯ１ １００ｍｇで処置された全体的なＳＯＤ１変異（進行の速い及び他のＳＯＤ１変異）を有する患者のＡＬＳＦＲＳ－Ｒにおける、ベースラインからの平均変化を示すグラフである。
【図6B】プラセボに対してＡＳＯ１ １００ｍｇで処置された急速な進行者である患者及びプラセボに対してＡＳＯ１ １００ｍｇで処置された全体的なＳＯＤ１変異（進行の速い及び他のＳＯＤ１変異）を有する患者のＳＶＣ（％予測）における、ベースラインからの平均変化を示すグラフである。
【図6C】プラセボに対してＡＳＯ１ １００ｍｇで処置された急速な進行者であった患者における、８５日目のＣＳＦ中ｐＮｆＨにおけるベースラインに対する幾何平均比を示すグラフである。
【図7A】ＡＳＯ１ １００ｍｇまたはプラセボを用いる処置の過程の血漿中のｐＮｆＨレベルを示すグラフである。
【図7B】ＡＳＯ１ １００ｍｇまたはプラセボを用いる処置の過程の血漿中のＮｆＬレベルを示すグラフである。
【図7C】ＡＳＯ１ １００ｍｇまたはプラセボを用いる処置の過程のＣＳＦ中のｐＮｆＨレベルを示すグラフである。
【図7D】ＡＳＯ１ １００ｍｇまたはプラセボを用いる処置の過程のＣＳＦ中のＮｆＬレベルを示すグラフである。
【発明を実施するための形態】
【0023】
一部の実施形態では、本発明は、ＡＬＳ患者が治療薬に応答するかどうかを判定する方法、及びその患者の症状を緩和することになる治療薬でＡＬＳ患者を処置する方法を提供する。一部の実施形態では、患者は、ヒトである。
【0024】
本明細書で言及される刊行物（特許刊行物を含む）、ウェブサイト、会社名、及び科学文献は、当業者らが利用可能である知識を確立し、それぞれが参照により組み込まれることが具体的且つ個別に示されるのと同じ程度に、全体が参照により本明細書に組み込まれる。本明細書に引用されるあらゆる参考文献及び本明細書の特定の教示間のあらゆる矛盾は、後者を支持して解決されるものとする。
【0025】
本明細書に示される全てのアミノ酸配列は、別途指示のない限り、アミノ（Ｎ）からカルボキシ（Ｃ）の方向にある。本明細書に示される全てのヌクレオチド配列は、別途指示のない限り、５’から３’の方向にある。示されたアミノ酸配列に関して、含むことまたは含むことが使用される場合、１つ以上のアミノ酸残基が、示されたアミノ酸配列のＮ’末端に、示されたアミノ酸配列のＣ’末端に、または両端に出現し得るが、１つ以上のアミノ酸残基が、示されたアミノ酸配列中の所定のアミノ酸残基間に出現しないことを意味する。示されたヌクレオチド配列に関して、含むまたは含むことが使用される場合、１つ以上のヌクレオチド残基が、示されたヌクレオチド配列の５’末端に、示されたヌクレオチド配列の３’末端に、または両端に出現し得るが、１つ以上のヌクレオチド残基が、示されたヌクレオチド配列の所定のヌクレオチド残基間に出現しないことを意味する。
【0026】
明細書及び特許請求の範囲で定義または使用される用語は、別途文脈が要求しない限り、示された意味を有するものとする。本明細書で使用される技術用語及び科学用語は、別途定義のない限り、本発明の属する当業者が一般に理解する意味を有する。語または表現の表現当該技術分野で理解される定義及び本明細書で具体的に教示される語または表現の定義間の矛盾は、後者を支持して解決されるものとする。本明細書で使用される場合、以下の用語は、示された意味を有する。本明細書で使用される場合、単数形「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」は、内容が別途明確に示さない限り、それらが指す用語の複数形も具体的に包含する。「約」という用語は、本明細書では、おおよそ、その領域に、おおまかに、またはあたりに、を意味するために使用される。「約」という用語が数値範囲とともに使用される場合、それは、記載された数値の上下に境界を拡張することにより、その範囲を修正する。一般に、「約」という用語は、本明細書では、記載された値の上下の数値を２０％の変動で修正するために使用される。
【0027】
ＡＬＳは、脳及び脊髄の神経細胞に影響を及ぼす進行性の神経変性疾患である。ＡＬＳでは、上位運動ニューロン（脳内の運動ニューロン）及び下位運動ニューロン（脊髄内の運動ニューロン及び脳の運動核への運動ニューロン）はともに、変性または死滅し、筋肉へのメッセージの送信を停止させる。機能することができずに、筋肉が徐々に弱まり、（線維束攣縮を経て）痙攣し始め、（萎縮を経て）衰弱する。最終的に、脳は、随意運動を開始及び制御する能力を喪失する。衰弱は不可避で、診断後平均して２～５年で、通常は、呼吸不全による、死亡が発生する。患者の大多数は、散発性ＡＬＳに罹患しているが、患者のごく一部である約２％は、スーパーオキシドジスムターゼ１（ＳＯＤ１）の様々な変異により引き起こされる遺伝性または家族性ＡＬＳを有する。１９９３年の最初の発見以来、１８０を超えるＳＯＤ１変異がこの形態のＡＬＳ（ＳＯＤ１ ＡＬＳと呼ばれる）を引き起こすことが報告されている。（Ｔｈｅ Ａｍｙｏｔｒｏｐｈｉｃ Ｌａｔｅｒａｌ Ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ Ｏｎｌｉｎｅ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ Ｄａｔａｂａｓｅ（ＡＬＳｏＤ）．Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ，Ｐｓｙｃｈｏｌｏｇｙ ＆
Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ．Ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ ２０１５；Ｒｏｓｅｎ，Ｎａｔｕｒｅ，３６４（６４３５）：３６２（１９９３））。個々の変異に対する疾患の進行は様々であり、最も重篤な変異での生存期間は１５ヶ月未満である。変異がＳＯＤ１ ＡＬＳを引き起こす機序は知られていないが、説得力のあるデータは、ＳＯＤ１活性の喪失ではなく、毒性の機能獲得が、運動ニューロン死をもたらす事象のカスケードを開始するトリガーであることを示唆する（Ｂｒｕｉｊｎ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２８１（５３８４）：１８５１－４（１９９８））。
Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ．Ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ ２０１５；Ｒｏｓｅｎ，Ｎａｔｕｒｅ，３６４（６４３５）：３６２（１９９３））。個々の変異に対する疾患の進行は様々であり、最も重篤な変異での生存期間は１５ヶ月未満である。変異がＳＯＤ１ ＡＬＳを引き起こす機序は知られていないが、説得力のあるデータは、ＳＯＤ１活性の喪失ではなく、毒性の機能獲得が、運動ニューロン死をもたらす事象のカスケードを開始するトリガーであることを示唆する（Ｂｒｕｉｊｎ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２８１（５３８４）：１８５１－４（１９９８））。
【0028】
可溶性ＳＯＤ１酵素（Ｃｕ／Ｚｎスーパーオキシドジスムターゼとしても知られる）は、スーパーオキシド過酸化水素（Ｈ２Ｏ２）への不均化を触媒することにより、生体分子の酸化的損傷に対する防御を提供するスーパーオキシドジスムターゼの１つである（Ｆｒｉｄｏｖｉｃｈ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，６４：９７－１１２（１９９５））。スーパーオキシドアニオン（Ｏ２－）は、主にミトコンドリアの酸化的リン酸化のエラーにより生成される潜在的に有害な細胞副産物である（Ｔｕｒｒｅｎｓ，Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．，５５２：３３５－３４４（２００３））。ＳＯＤ１遺伝子の変異は、上位及び下位運動ニューロンの選択的変性を特徴とする障害である優性遺伝型のＡＬＳと関連する（Ｒｏｗｌａｎｄ，Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．，２００１，３４４：１６８８－１７００（２００１））。家族性ＡＬＳ及びＳＯＤ１遺伝子のミスセンス変異間には、密接な遺伝的連鎖がある（Ｒｏｓｅｎ，Ｎａｔｕｒｅ，３６２：５９－６２（１９９３））。変異型ＳＯＤ１の毒性は、ＡＬＳの病因に関与し得るプロセスである、活性酵素からの核の保護を低減（核内の機能喪失）させる、初期のミスフォールディングから生じる（機能の獲得）と考えられる（Ｓａｕ，Ｈｕｍ．Ｍｏｌ．Ｇｅｎｅｔ．，１６：１６０４－１６１８（２００７））。ＡＬＳの運動ニューロンの進行性変性は、最終的には、死に至る。運動ニューロンが死滅する場合、筋運動を開始及び制御する脳の能力が失われる。随意筋動作が徐々に影響を受け、疾患の後期の患者は、完全に麻痺する可能性がある。
【0029】
ＡＬＳの初期症状には、通常、筋力低下または硬直が含まれる。徐々に、随意的制御下の全ての筋肉が影響を受け、個体は、力ならびに話す能力、食べる能力、移動する能力、及び呼吸する能力さえも喪失する。ＡＬＳを有するほとんどの者は、通常、症状が最初に現れた時から３～５年以内に、呼吸不全で死亡する。しかし、ＡＬＳを有する者の約１０パーセントは、１０年以上生存している。
【0030】
ＡＬＳの治癒はなく、ＡＬＳ患者への投与が承認されている治療薬があるが、あらゆるＡＬＳ患者が、あらゆる治療薬に応答するわけではない。従って、ＡＬＳの処置は、全てのＡＬＳ患者が同じ治療薬に応答するわけではないので、困難であり、特定の患者のために正しい治療薬を選択することは、困難であり得る。現在、特定の患者に使用される特定の治療薬を選択するのは、保健医療提供者次第である。保健医療提供者（例えば、医師）は、現在、特定の患者のＡＬＳ症状の緩和に基づいて、その特定の患者の処置のために特定の治療薬を選択するが、選択された特定の治療薬が、実際に、その特定の患者のＡＬＳの症状を緩和する確実性はない。
【0031】
治療薬が特定の患者のＡＬＳ症状を緩和するかどうかを判定するために、治療薬は、治療薬を投与されていない患者（例えば、未処置の患者または処置前の患者）と比較して、ＡＬＳ疾患の進行を遅らせ、及び／または治療薬を投与された患者のＡＬＳの症状を低減する能力により判断される。
【0032】
現在、ＡＬＳの症状は、筋力などの機能試験で測定される。一般に使用される１つのスケールは、ＡＬＳ機能評価尺度（ＡＬＳＦＲＳまたはＡＬＦＲＳ－Ｒ）である。評価は、一般に、言語、唾液分泌、嚥下、書字、摂食動作、着衣及び衛生、寝床での動作、歩行、階段をのぼる、呼吸困難、起座呼吸、呼吸不全などのカテゴリーに基づいている。一部の場合では、ＡＬＳ診断からの年数が考慮される。１２のカテゴリーのそれぞれは、０～４のスケールで患者によりランク付けされ、０が最悪（例えば、言語カテゴリーの会話の喪失）であり、４が最高（例えば、言語カテゴリーの正常な会話）である。これらの要因から、ＡＬＳＦＲＳ－Ｒ評価を計算することができ、０が最悪（すなわち、最も罹患している）であり、４０が最高（すなわち、症状が最も少ない）である。
【0033】
徒手筋力検査（ＭＭＴ）は、動き、収縮、運動の範囲、及び圧力に対する位置を保持する能力のような基準を試験する個々の筋肉に基づいて使用することもできる。評価範囲は、以下のように０～５である。
グレード０：収縮または筋運動はない。
グレード１：収縮の痕跡があるが、関節運動はない。
グレード２：重力を排除した関節運動。
グレード３：重力に逆らう運動があるが、さらなる抵抗に逆らう運動はない。
グレード４：通常よりも強度が低い外部抵抗に逆らう運動。
グレード５：通常の強度。
グレード０：収縮または筋運動はない。
グレード１：収縮の痕跡があるが、関節運動はない。
グレード２：重力を排除した関節運動。
グレード３：重力に逆らう運動があるが、さらなる抵抗に逆らう運動はない。
グレード４：通常よりも強度が低い外部抵抗に逆らう運動。
グレード５：通常の強度。
【0034】
一部の実施形態では、治療薬は、少なくとも３ヶ月間治療薬を投与した後に、患者のＡＬＳＦＲＳ－Ｒスコアが、治療薬の投与の開始前の患者のＡＬＳＦＲＳ－Ｒスコアと比較して、同じままか、増加するか、または１．０以下減少する場合、特定の患者のＡＬＳの症状を緩和する（すなわち、その患者において有効である）と言われる。例えば、治療薬は、投与前に、患者が初期ＡＬＳＦＲＳ－Ｒスコア２０を有し、治療薬を用いる処置の３ヶ月後に、患者のＡＬＳＦＲＳ－Ｒスコアは、２０のままであるか、または（例えば、２５もしくは３０に）増加するか、または１９に減少する場合、ＡＬＳの症状を緩和すると言われる。一部の実施形態では、治療薬は、少なくとも６ヶ月間の治療薬の投与後に、患者のＡＬＳＦＲＳ－Ｒスコアが、治療薬の投与の開始前の患者のＡＬＳＦＲＳ－Ｒスコアと比較して、同じままであるか、増加するか、または１．０以下減少する場合に、ＡＬＳの症状を緩和すると言われる。一部の実施形態では、治療薬は、少なくとも１２ヶ月間の治療薬の投与後に、患者のＡＬＳＦＲＳ－Ｒスコアが、治療薬の投与の開始前の患者のＡＬＳＦＲＳ－Ｒスコアと比較して、同じままであるか、増加するか、または１．０以下減少する場合に、ＡＬＳの症状を緩和すると言われる。
【0035】
ＡＬＳの症状及びその重症度を評価するために使用することができる別の機能試験は、肺活量（ＳＶＣ）試験である。ＳＶＣは、強制的または迅速な努力なしに最大の吸気後の弱い完全な呼気で測定された気体の量を表示する肺活量測定試験である。
【0036】
ＡＬＳ症状及びその重症度を評価するために使用することができる追加の機能試験は、ハンドヘルドダイナモメトリー（ＨＨＤ）試験である。
【0037】
ＡＬＳＦＲＳ－Ｒ試験などの機能試験は、非侵襲的であるが、実施に時間がかかり、多くの場合、数ヶ月、場合により、数年後にのみ変化を示す。さらに、一度機能が低下すると、復帰するのが難しいことがある。従って、ＡＬＳの疾患の進行は、好ましくは、機能低下を表す前に、物理的変化を追跡し続けることにより、検出することもできる。
【0038】
従って、機能試験を実施する前にすでに発生している機能の喪失に基づかない特定の患者に有効である治療薬を特定する方法を見つける必要がある。
【0039】
ニューロフィラメント（ＮＦ）は、ニューロンの細胞質にみられるタンパク質である。それらは、直径が約１０ｎｍ及び長さが数マイクロメートルを測定するタンパク質ポリマーである。微小管及びマイクロフィラメントと一緒に、それらは、神経細胞骨格を形成する。ニューロフィラメントは、ニューロフィラメントタンパク質Ｌ（低分子量、ＮＦＬ、ニューロフィラメント軽鎖とも呼ばれる）、ニューロフィラメントタンパク質Ｍ（中分子量、ＮＦＭ、ニューロフィラメント中鎖とも呼ばれる）、及びニューロフィラメントタンパク質Ｈ（高分子量、ＮＦＨ、ニューロフィラメント重鎖とも呼ばれる）を含む様々なタンパク質からなる。哺乳動物の神経系のニューロフィラメントは、タンパク質インターネキシンも含有し、末梢神経系におけるニューロフィラメントは、タンパク質末梢神経系も含有し得る。
【0040】
従って、本明細書で使用される場合、「ニューロフィラメントタンパク質」は、ニューロフィラメントプロテインＬ（低分子量、ＮＦＬ、ニューロフィラメント軽鎖とも呼ばれる）、ニューロフィラメントタンパク質Ｍ（中分子量；ＮＦＭ、ニューロフィラメント中鎖とも呼ばれる）、ニューロフィラメントタンパク質Ｈ（高分子量；ＮＦＨ、ニューロフィラメント重鎖とも呼ばれる）、インターネキシン及びペリフェリンを意味する。ヒトニューロフィラメント軽鎖のアミノ酸配列は、配列番号１及びＪｕｌｉｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｉｍｉｃａ ｅｔ Ｂｉｏｐｈｙｓｉｃａ Ａｃｔａ ９０９：１０－２０，１９８７で提供される（ＮＣＢＩ参照配列：ＮＰ＿００６１４９．２及びＮＣＢＩ参照配列：ＮＧ＿００８４９２．１も参照のこと）。ヒトニューロフィラメント重鎖のアミノ酸配列は、配列番号２及び配列番号３、ならびにＬｅｅｓ ｅｔ ａｌ．，ＥＭＢＯ Ｊ．７（７）：１９４７－１９５５，１９８８で提供される（ＮＣＢＩ参照配列：ＮＧ＿００８４０４．１及びＮＣＢＩ参照配列：ＮＰ＿０６６５５４．２も参照のこと）。ヒトニューロフィラメント中鎖のアミノ酸配列は、配列番号４及び配列番号５、ならびにＭｙｅｒｓ ｅｔ ａｌ．，ＥＭＢＯ Ｊ．６（６）：１６１７－１６２６，１９８７で提供される。配列番号６は、ヒトインターネキシンタンパク質の配列を提供する。配列番号７は、ヒトペリフェリンタンパク質の配列を提供する。
【0041】
ニューロンにおけるそれらの特定の構造的役割のために、ニューロフィラメントは、ニューロンの完全性を評価するために使用することができる。ニューロンが損傷している場合、ニューロフィラメントが損傷したニューロンから漏れ、脳脊髄液（ＣＳＦ）またはさらに血液（例えば、血液の血清もしくは血漿成分）中に見出すことができる。神経変性疾患患者は、脳脊髄液及び血漿中で高レベルのニューロフィラメントを呈する（Ｙｕａｎ Ａ，ｅｔ ａｌ．Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂ Ｐｅｒｓｐｅｃｔ Ｂｉｏｌ．２０１７；９（４）．２．Ｗｅｙｄｔ Ｐ，ｅｔ ａｌ．Ａｎｎ Ｎｅｕｒｏｌ２０１６；７９（１）：１５２－１５８を参照のこと）。これは、変性ニューロンの軸索内容物の細胞外放出を表し得る。実に、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）患者の観察データ及び大部分の断面データでは、ニューロフィラメントレベルと生存率及び筋萎縮性側索硬化症機能評価尺度－改訂（ＡＬＳＦＲＳ－Ｒ）の低下で示されるように、疾患重症度の間の相関が実証されている（ＭｃＣｏｍｂｅ ＰＡ，ｅｔ ａｌ．Ｊ Ｎｅｕｒｏｌ Ｓｃｉ．２０１５；３５３（１－２）：１２２－１２９；Ｂｏｙｌａｎ ＫＢ，ｅｔ ａｌ．Ｎｅｕｒｏｌ Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ．２０１３；８４（４）：４６７－４７２を参照のこと）。
【0042】
一部の実施形態では、ニューロフィラメントタンパク質は、ニューロフィラメント軽鎖である。一部の実施形態では、ニューロフィラメント軽鎖は、リン酸化されている。血清中のニューロフィラメント軽鎖を測定するためのアッセイが記載されている（例えば、Ｇａｉｏｔｔｉｎｏ ｅｔ ａｌ．，ＰＬｏＳ ＯＮＥ ８：ｅ７５０９１，２０１３；Ｋｕｈｌｅ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｌ．Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇ．Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ ８６（３）：２７３－２７９， ２０１４．を参照のこと）。例えば、患者由来の血清は、室温、１０００ｇで１０分間遠心分離し、収集後２時間以内に－８０℃で保存する。ニューロフィラメント軽鎖（ＮｆＬ）（例えば、血清中ＮｆＬ）濃度は、すぐに使える酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）希釈剤（Ｍａｂｔｅｃｈ ＡＢ， Ｎａｃｋａ
Ｓｔｒａｎｄ， Ｓｗｅｄｅｎ）、またはＧａｉｏｔｔｉｎｏ ｅｔ ａｌ．，ＰＬｏＳ ＯＮＥ ８：ｅ７５０９１，２０１３に記載のエレクトロケミルミネッセンス（ＥＣＬ）イムノアッセイ、またはＤｉｓａｎｔｏ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎ．Ｎｅｕｒｏｌ．８１（６）：８５７－８７０，２０１７に記載の単一分子アレイ（ＳＩＭＯＡ）法を使用して、（例えば、重複して）測定することができる。３つのアッセイ法は、Ｋｕｈｌ ｅｔ
ａｌ．，Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ５４（１０）：１６５５－１６６１，２０１６に比較されている。ＳＩＭＯＡアッセイ（特に、Ｓｉｍｏａ ＮＦ－ｌｉｇｈｔ Ａｄｖａｎｔａｇｅキットと呼ばれる）は、Ｑｕａｎｔｅｒｉｘ Ｃｏｒｐ．（Ｌｅｘｉｎｇｔｏｎ， ＭＡ， ＵＳＡ）から市販されている。
Ｓｔｒａｎｄ， Ｓｗｅｄｅｎ）、またはＧａｉｏｔｔｉｎｏ ｅｔ ａｌ．，ＰＬｏＳ ＯＮＥ ８：ｅ７５０９１，２０１３に記載のエレクトロケミルミネッセンス（ＥＣＬ）イムノアッセイ、またはＤｉｓａｎｔｏ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎ．Ｎｅｕｒｏｌ．８１（６）：８５７－８７０，２０１７に記載の単一分子アレイ（ＳＩＭＯＡ）法を使用して、（例えば、重複して）測定することができる。３つのアッセイ法は、Ｋｕｈｌ ｅｔ
ａｌ．，Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ５４（１０）：１６５５－１６６１，２０１６に比較されている。ＳＩＭＯＡアッセイ（特に、Ｓｉｍｏａ ＮＦ－ｌｉｇｈｔ Ａｄｖａｎｔａｇｅキットと呼ばれる）は、Ｑｕａｎｔｅｒｉｘ Ｃｏｒｐ．（Ｌｅｘｉｎｇｔｏｎ， ＭＡ， ＵＳＡ）から市販されている。
【0043】
ニューロフィラメントタンパク質の中鎖及び／または重鎖は、本発明の一部の実施形態に従って測定することもできる。
【0044】
例えば、ＳｉｍｐｌｅＰｌｅｘプラットフォームは、リン酸化Ｎｆ重鎖（ｐＮｆ－Ｈ）のレベルを測定するために使用することができる。ＳｉｍｐｌｅＰｌｅｘは、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｉｍｐｌｅ（Ｓａｎ Ｊｏｓｅ， ＣＡ， ＵＳＡ）から市販されている（Ｄｙｓｉｎｇｅｒ Ｍ，ｅｔ ａｌ．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｍｅｔｈｏｄｓ．４５１：１－１０，２０１７を参照のこと）。一部の実施形態では、ニューロフィラメント重鎖は、リン酸化されている。
【0045】
本明細書に記載されるように、ＣＳＦ及び血清中のニューロフィラメント軽鎖レベルの上昇が、ＭＲＩで観察される物理的損傷と相関すると記載されているが、血清及び／またはＣＳＦ中のニューロフィラメントタンパク質のレベルの上昇（または増加）がＡＬＳ患者の将来の身体的損傷または機能喪失を予測し得ることを、本発明者らは発見している。従って、特定の治療薬を服用している患者の血清（またはＣＳＦ）中のニューロフィラメントタンパク質のレベルを追跡することにより、医療提供者は、患者が機能喪失及び／または身体的損傷を示す前に、患者が治療薬に応答しているかどうか（すなわち、治療薬がその患者の症状を緩和するかどうか）を予測し得る。
【0046】
一態様では、本発明は、ＡＬＳ患者のＡＬＳ症状を緩和するための方法を提供し、方法は、（ａ）治療薬を投与されていない患者、または、（ｂ）治療薬の投与前の患者、の生体試料（例えば、血液、血清、血漿、または脳脊髄液（ＣＳＦ））中のニューロフィラメントタンパク質のレベルと比較して、患者の生体試料（例えば、血液、血清、血漿、または脳脊髄液（ＣＳＦ））中のニューロフィラメントタンパク質のレベルを維持または低減する治療薬を投与することを含む。
【0047】
別の態様では、本発明は、候補治療薬が特定の患者に有効であり、それにより、その候補治療薬を用いる処置の前の患者におけるレベルと比較して、候補治療薬が患者におけるニューロフィラメントタンパク質（例えば、血清またはＣＳＦ中ニューロフィラメントタンパク質）のレベルを低減させることができるかどうかを判定することにより、その患者のＡＬＳ疾患の症状を緩和するのに有用であるかどうかを判定する方法を提供する。候補治療薬が、候補治療薬を用いる処置の前の患者におけるレベルと比較して、患者におけるニューロフィラメントタンパク質（例えば、血清またはＣＳＦ中ニューロフィラメント）のレベルを低減させることができる場合、その候補治療薬は、その患者に有効であると特定される。
【0048】
別の態様において、本発明は、ＡＬＳ患者の症状を緩和するための方法を提供し、方法は、患者に有効である有効な治療薬を投与することを含み、有効な治療薬は、患者に投与される時、血清１ｍｌ当たり１６ｐｇの血清中ニューロフィラメント軽鎖に相当する量よりも少ないまたは治療薬を投与されていない筋萎縮性側索硬化症患者におけるニューロフィラメントタンパク質のレベルよりも低い、患者の血清中のニューロフィラメントタンパク質のレベルをもたらす。一部の実施形態では、患者は、有効でない治療薬または有効な治療薬とは異なる治療薬のいずれかを、現在投与されているか、または以前に投与されている。
【0049】
一部の実施形態では、ニューロフィラメントタンパク質は、ニューロフィラメント軽鎖（ＮｆＬ）である。一部の実施形態では、ニューロフィラメントタンパク質は、ニューロフィラメント中鎖（ＮｆＭ）である。一部の実施形態では、ニューロフィラメントタンパク質は、ニューロフィラメント重鎖（ＮｆＨ）（例えば、リン酸化ニューロフィラメント重鎖（ｐＮｆＨ））である。一部の実施形態では、ニューロフィラメントタンパク質は、ヒトタンパク質である。一部の実施形態では、生体試料（例えば、血液、血清、血漿、または脳脊髄液（ＣＳＦ））中のニューロフィラメントタンパク質のレベル（すなわち、量または数量）が測定される。
【0050】
ニューロフィラメントタンパク質（例えば、本明細書に記載のニューロフィラメントタンパク質、例えば、ＮｆＬまたはＮｆＨ、例えば、ｐＮｆＨ）のレベルが、増加する（すなわち、上昇する）、それと同じ（もしくはそれと等しい）、または減少する（すなわち、低減する）ものとして、記載される場合、そのレベルが、同種の分泌液から同じアッセイ法で得られたレベルと比較されていることが理解されるであろう。例えば、Ｓｉｍｏａアッセイを使用して、患者の血清から得られた血清中ニューロフィラメント軽鎖（ｓＮｆＬ）の処置後レベルは、Ｓｉｍｏａアッセイを使用して、患者由来のｓＮｆＬのベースライン（すなわち、処置の開始前）レベルと比較されることになるか、または、処置されていない患者の血清においてＳｉｍｏａアッセイで測定されるｓＮｆＬのレベルと比較されることになる。ニューロフィラメントタンパク質の「レベル」は、いかなる数量でも、例えば、生体試料（例えば、血液、血清、血漿、または脳脊髄液（ＣＳＦ））１ｍＬ当たりの、ニューロフィラメントタンパク質（例えば、ニューロフィラメント軽鎖）のピコグラムで、記載することができることも理解されるであろう。
【0051】
「治療薬」とは、単に、筋萎縮性側索硬化症を処置するために使用され得る薬物または薬剤を意味する。治療薬は、実際に疾患を治癒する必要性はなく、現在、筋萎縮性側索硬化症のための既知の治癒は存在しない。従って、治療薬で「処置」されている患者は、単に、患者が、その疾患に有効であり得る治療薬を投与されていることを意味する。この治療薬は、全てのＡＬＳ患者に有効でなくてもよい。むしろ、ＡＬＳの治療薬は、それらを投与すると何人かの患者のＡＬＳの症状を低減させ、それにより、治療薬に応答するＡＬＳ患者の生活の質の改善及び／または神経筋の機能の改善が可能になるので、疾患修飾療法または疾患修飾薬物（ＤＭＴまたはＤＭＤ）と呼ばれる場合がある。現在の治療薬は、有効である場合、ＡＬＳ疾患の進行を遅らせ、及び／または応答する患者の症状を緩和する。
【0052】
従って、「有効」とは、治療薬がＡＬＳ患者の症状を低減することを意味する。
【0053】
米国では、ＡＬＳを処置するための、米国食品医薬品局（ＦＤＡ）により承認された２つの治療薬がある。
【0054】
最初に、リルゾール（Ｒｉｌｕｔｅｋとして販売；Ｃｏｎｄｏｒｄｉａ）は、経口摂取可能な丸剤として投与され、ＡＬＳを有する一部の者に疾患の進行を遅らせるようにみえる。その正確な機序は、不明であるが、グルタミン酸が、多くの場合、ＡＬＳを有する者においてより高いレベルで存在するので、脳内のグルタミン酸のレベルを低減し得る。しかし、リルゾールの投与は、めまい、胃腸の状態、及び肝機能の変化などの副作用を引き起こし得る。
【0055】
２番目のＦＤＡ承認治療薬であるエダラボン（Ｒａｄｉｃａｖａとして販売；Ｍｉｔｓｕｂｉｓｈｉ）は、６ヶ月の期間にわたる投与が、ＡＬＳと関連する日常機能の低下の低減をもたらしたことを、臨床試験の証拠が示した後に、承認された。（静脈内投与される）エダラボンの副作用には、挫傷、歩行障害、蕁麻疹性丘疹、腫れ、及び息切れが含まれる。
【0056】
依然として開発中であり及び／または米国外で承認される、ＡＬＳを処置し及び／またはＡＬＳ症状を緩和するための追加の新種の治療薬には、Ｎｅｕｒｏｎａｔａ－Ｒ（Ｃｏｒｅｓｔｅｍ）、ＫＰＴ－３５０（Ｂｉｏｇｅｎ／Ｋａｒｙｏｐｈａｒｍ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）、ＣＮＳ１０－ＮＰＣ－ＧＤＮＦ（Ｓｖｅｄｓｅｎ Ｌａｂ）、Ｃｕ（ＩＩ）ＡＴＳＭ（ＰｒｏＣｙｐｒａ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）、ＳＯＤ１タンパク質のレベルを標的とするＢＩＩＢ０６７（Ｂｉｏｇｅｎ／Ｉｏｎｉｓ）、ＧＭ６０４（Ｇｅｎｅｒｖｏｎ Ｂｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）、本明細書に記載のＡＳＯ（例えば、ＡＳＯ１、ＡＳＯ２、またはＡＳＯ３）、及びＵＳ２０１７／００３７４１０Ａ１（全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載のＡＳＯが含まれるが、これらに限定されない。
【0057】
一部の実施形態では、治療薬、例えば、候補及び／または有効なＡＬＳ治療薬は、小分子、抗体もしくはそのフラグメント、核酸分子（例えば、アンチセンスオリゴヌクレオチド、マイクロＲＮＡ、アプタマー、小ヘアピンＲＮＡ、もしくは小干渉ＲＮＡ）、間葉系幹細胞、グリア制限前駆細胞、及び／またはウイルスベクター（例えば、アデノウイルスもしくはアデノ随伴ウイルス）を含む。一部の実施形態では、ウイルスベクターは、抗体もしくはそのフラグメント、及び／または核酸分子（例えば、アンチセンスオリゴヌクレオチド、マイクロＲＮＡ、アプタマー、小ヘアピンＲＮＡ、または小干渉ＲＮＡ）のうちの１つ以上を含むかまたはコードする。
【0058】
一部の実施形態では、治療薬は、ＡＬＳと関連する１つ以上の遺伝子変異（複数可）を標的とする。一部の実施形態では、治療薬、例えば、候補及び／または有効なＡＬＳ治療薬は、ＳＯＤ１遺伝子（例えば、変異ＳＯＤ１遺伝子）、ＯＤ１ ＲＮＡ（例えば、変異ＳＯＤ１ ＲＮＡ）、及び／またはＳＯＤ１ポリペプチド（例えば、変異ＳＯＤ１ポリペプチド）を標的とする（例えば、それに結合し、それを分解させ、及び／またはそのレベルを減少させる）分子を含む。実施形態では、変異ＳＯＤ１遺伝子、ＲＮＡ、またはポリペプチドは、ＡＬＳと関連する。実施形態では、治療薬は、ＳＯＤ１に対するマイクロＲＮＡ、例えば、ＶＹ－ＳＯＤ１０１（Ｖｏｙａｇｅｒ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ）を含む。一部の実施形態では、治療薬、例えば、候補及び／または有効なＡＬＳ治療薬は、全体が参照により本明細書に組み込まれるＵＳ２０１８２８２７３２Ａ１に記載されるＳＯＤ１を標的とする核酸を含む。一部の実施形態では、治療薬は、ＳＯＤ１遺伝子（例えば、変異ＳＯＤ１遺伝子）を標的とするアンチセンスオリゴヌクレオチドを含む。
【0059】
一部の実施形態では、治療薬、例えば、候補及び／または有効なＡＬＳ治療薬は、第９染色体オープンリーディングフレーム７２（Ｃ９ｏｒｆ７２）ヘキサヌクレオチド伸長ポリヌクレオチド（例えば、ＤＮＡもしくはＲＮＡ）、ならびに／またはＣ９ＯＲＦ７２ジペプチドリピート（ＤＰＲ）ポリペプチドを標的とする（例えば、結合し、分解させ、及び／またはレベルを減少させる）分子を含む。一部の実施形態では、治療薬は、例えば、Ｍａｒｔｉｅｒ ｅｔ ａｌ．Ｍｏｌ．Ｔｈｅｒａｐｙ Ｎｕｃ．Ａｃｉｄｓ １４（２０１９）：Ｐ５９３－６０８に記載されるような、Ｃ９ｏｒｆ７２を標的とするマイクロＲＮＡを含む。
【0060】
一部の実施形態では、治療薬、例えば、候補及び／または有効なＡＬＳ治療薬は、リルゾール、エダラボン、銅－ＡＴＳＭ、マシチニブ、チラセムチブ、ＮＰ００１、ピリメタミン、メコバラミン、イブジラスト、メキシレチン、ＧＤＣ－０１３４、メマンチン、ＥＰＩ－５８９、トシリズマブ、ＲＮＳ－６０、ピモジド、ＯＤＭ－１０９、エゾガビン、アミリックス、または低用量ＩＬ－２のうちの１つ以上を含む。一部の実施形態では、治療薬、例えば、候補及び／または有効なＡＬＳ治療薬は、抗Ｃ９ｏｒｆ７２アンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、Ｓａｒｅｅｎ ｅｔ ａｌ．Ｓｃｉ．Ｔｒａｎｓｌ．Ｍｅｄ．２０１３；５（２０８）：２０８ｒａ１４９に記載）；ＢＩＩＢ０６７（例えば、臨床試験識別番号ＮＣＴ０２６２３６９９に記載）；ＡＳ０８１６（例えば、Ｓａｒｅｅｎ
ｅｔ ａｌ Ｓｃｉ．Ｔｒａｎｓｌ Ｍｅｄ．２０１３；５（２０８）：２０８ｒａ１４９に記載）；ＩＳＩＳ ＳＭＮＲｘ、ＩＳＩＳ ３３３６１１（例えば、Ｍｉｌｌｅｒ
ｅｔ ａｌ．Ｌａｎｃｅｔ Ｎｅｕｒｏｌ．２０１３；１２（５）：４３５－４２に記載）；またはＡＳＯ０６１（例えば、Ｓａｒｅｅｎ ｅｔ ａｌ．Ｓｃｉ．Ｔｒａｎｓｌ．Ｍｅｄ．２０１３；５（２０８）：２０８ｒａ１４９に記載）のうちの１つ以上を含むアンチセンスオリゴヌクレオチドを含む。
ｅｔ ａｌ Ｓｃｉ．Ｔｒａｎｓｌ Ｍｅｄ．２０１３；５（２０８）：２０８ｒａ１４９に記載）；ＩＳＩＳ ＳＭＮＲｘ、ＩＳＩＳ ３３３６１１（例えば、Ｍｉｌｌｅｒ
ｅｔ ａｌ．Ｌａｎｃｅｔ Ｎｅｕｒｏｌ．２０１３；１２（５）：４３５－４２に記載）；またはＡＳＯ０６１（例えば、Ｓａｒｅｅｎ ｅｔ ａｌ．Ｓｃｉ．Ｔｒａｎｓｌ．Ｍｅｄ．２０１３；５（２０８）：２０８ｒａ１４９に記載）のうちの１つ以上を含むアンチセンスオリゴヌクレオチドを含む。
【0061】
一部の実施形態では、治療薬、例えば、候補及び／または有効なＡＬＳ治療薬は、ベタメゾン（例えば、臨床試験政府識別子：ＮＣＴ０３７０７７９５に記載）；ＭＣＩ－１８６（例えば、臨床試験政府識別子：ＮＣＴ０１４９２６８６に記載）；ＯＮＯ－２５０６ＰＯ（例えば、臨床試験政府識別子：ＮＣＴ００６９４９４１に記載）；ＴＲＯ１９６２２ ＮＣＴ０１２８５５８３；Ｅ０３０２（例えば、臨床試験政府識別子：ＮＣＴ００４４４６１３に記載）；ＡＰ－１０１（例えば、臨床試験政府識別子：ＮＣＴ０３９８１５３６に記載）；ラサギリン（例えば、臨床試験政府識別子：ＮＣＴ０１２３２７３８に記載）；ＴＣＨ３４６（例えば、臨床試験政府識別子：ＮＣＴ００２３００７４に記載）；ＮＰ００１（例えば、臨床試験政府識別子：ＮＣＴ０１２８１６３１に記載）；Ｔｒｉｕｍｅｑ（例えば、臨床試験政府識別子：ＮＣＴ０２８６８５８０に記載）；マシチニブ（例えば、臨床試験政府識別子：ＮＣＴ０２５８８６７７に記載）；顆粒球コロニー刺激因子（例えば、臨床試験政府識別子：ＮＣＴ０１８２５５５１に記載）；ＣＫ－２１２７１０７（例えば、臨床試験政府識別子：ＮＣＴ０３１６０８９８に記載）；チラセムチブ（例えば、臨床試験政府識別子：ＮＣＴ０２９３６６３５に記載）；Ｇｉｌｅｎｙａ（例えば、臨床試験政府識別子：ＮＣＴ０１７８６１７４に記載）；アリモクロモル（例えば、臨床試験政府識別子：ＮＣＴ００７０６１４７に記載）；ピモジド（例えば、臨床試験政府識別子：ＮＣＴ０３２７２５０３に記載）；Ｎｕｅｄｅｘｔａ（例えば、臨床試験政府識別子：ＮＣＴ０１８０６８５７に記載）；ＫＮＳ－７６０７０４（例えば、臨床試験政府識別子：ＮＣＴ００９３１９４４に記載）；ＭＮ－１６６（例えば、臨床試験政府識別子：ＮＣＴ０４０５７８９８に記載）；ＳＢ－５０９（例えば、臨床試験政府識別子：ＮＣＴ００７４８５０１に記載）；ＫＮＳ－７６０７０４（例えば、臨床試験政府識別子：ＮＣＴ００６４７２９６に記載）；オレソキシム（例えば、臨床試験政府識別子：ＮＣＴ００８６８１６６に記載）；レボシメンダン（例えば、臨床試験政府識別子：ＮＣＴ０３５０５０２１に記載）；メマンチン（例えば、臨床試験政府識別子：ＮＣＴ００３５３６６５に記載）；ＢＩＩＢ０６７（例えば、臨床試験政府識別子：ＮＣＴ０２６２３６９９に記載）；ＢＩＩＢ０７８（例えば、臨床試験政府識別子：ＮＣＴ０３６２６０１２に記載）；またはＢＩＩＢ１００（例えば、臨床試験政府識別子：ＮＣＴ０３９４５２７９）のうちの１つ以上を含む。
【0062】
一部の実施形態では、治療薬、例えば、候補及び／または有効なＡＬＳ治療薬は、例えば、ＷＯ２０１９０３２６０７Ａ１；ＷＯ２０１５／１５３８００；ＷＯ２００３／０００７０７；ＷＯ２０１４／０６２６９１；ＷＯ２０１５／０５４６７６；ＷＯ２０１６／１６８５９２；ＷＯ２０１４／０６２６８６；ＷＯ２０１４／０６２７３６；ＷＯ２０１７／０７９２９１；ＷＯ２０１７／１８０８３５；ＷＯ２０１５／０５７７２７；ＷＯ２０１５／０５７７３８；ＷＯ２０１６／１１２１３２；ＷＯ２０１６／１６７７８０；ＷＯ２０１５／１４３２４６；ＷＯ２０１５／１４３２４５；ＷＯ２０１７／１１７４９６（これらのそれぞれは、全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されるアンチセンスオリゴヌクレオチドを含む。
【0063】
一部の実施形態では、治療薬、例えば、候補及び／または有効なＡＬＳ治療薬は、例えば、全体が参照により本明細書に組み込まれるＷＯ２０１３／１７００６８に記載される小分子を含む。
【0064】
一部の実施形態では、治療薬、例えば、候補及び／または有効なＡＬＳ治療薬は、例えば、ＷＯ２０１６／０５０８２２及びＷＯ２０１９／２１００５４（これらの両方は、全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されるような、ポリペプチド、例えば、抗体またはそのフラグメントを含む。一部の実施形態では、治療薬、例えば、候補及び／または有効なＡＬＳ治療薬は、以下の抗体：全体が参照により本明細書に組み込まれるＷＯ２０１６／０５０８２２に記載されるようなＮＩ－３０８．１８Ｆ７、ＮＩ－３０８．１５Ｏ７、ＮＩ－３０８．２８Ｇ１、ＮＩ－３０８．４５Ｃ２、ＮＩ．３０８．２４Ｅ１１、ＮＩ－３０８．５Ｇ２、ＮＩ－３０８．４６Ｅ９、ＮＩ３０８－６Ｂ１１、ＮＩ－３０８．４６Ｆ８、ＮＩ－３０８．４Ｍ１、ＮＩ－３０８．１２Ａ３、またはＮＩ－３０８．１６Ｃ１０のうちの１つの、可変重鎖アミノ酸配列、可変軽鎖アミノ酸配列、及び／または相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む抗体またはそのフラグメントを含む。一部の実施形態では、治療薬、例えば、候補及び／または有効なＡＬＳ治療薬は、本明細書に参照により組み込まれる、ＷＯ２０１９／２１００５４に記載されるような配列番号４０、４４、４５、４６、４７、４８、４９、及び／もしくは５０、ならびに／またはＷＯ２０１９／２１００５４の表１４の配列から選択される可変重鎖アミノ酸配列、可変軽鎖アミノ酸配列、及び／または相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む抗体またはそのフラグメントを含む。
【0065】
「投与」または「投与すること」は、患者への治療薬の送達を意味する。投与経路は、限定されないが、経口、直腸、静脈内、髄腔内、腹腔内、筋肉内、皮下、経鼻、局所、非経口、及び舌下を含む任意の手段によるものであり得る。治療薬のための投薬量及び投与スケジュールは、規制機関（例えば、米国食品医薬品局または欧州医薬品庁）のラベルによるものであり得る。治療薬を投与される患者は、患者が実際に投与された治療薬に応答するかどうかに関わらず、その治療薬で処置されていると言われてもよい。患者が投与された治療薬に応答しない場合、その治療薬は、その患者には有効でない。
【0066】
「ＡＬＳの症状」とは、ＡＬＳ患者が経験し得る症状のいずれかを意味する。ＡＬＳの症状には、筋力低下、協調の問題、筋肉の硬直、筋肉の喪失、筋痙攣、過度の反射、発話困難、声帯の痙攣、嚥下困難、流涎症、抑制欠如、軽度認知障害、重度の便秘、重度の意図しない体重減少、息切れ、足を上げるのが困難、及び筋萎縮性側索硬化症の個体が経験するその他の症状が含まれるが、これらに限定されない。誤解を避けるために、生体試料（例えば、血液、血清、血漿、または脳脊髄液（ＣＳＦ））中のニューロフィラメントタンパク質（例えば、ニューロフィラメント軽鎖またはニューロフィラメント重鎖）は、ＡＬＳの症状ではない。従って、ＡＬＳ患者のＡＬＳのあらゆる症状を低減させることなく、単に、生体試料（例えば、血液、血清、血漿、または脳脊髄液（ＣＳＦ））中のニューロフィラメントタンパク質を低減させる治療薬は、その患者に有効でない。
【0067】
本明細書で使用される場合、「ＡＬＳの症状を緩和する」とは、治療薬が患者のＡＬＳ疾患の症状を低減し、及び／またはＡＬＳ疾患の進行を遅らせることを意味する。ＡＬＳ症状が治療薬を投与することにより緩和される患者は、示された治療薬に応答する、または反応すると言われる。例えば、患者のＡＬＳの症状を緩和する治療薬は、治療薬の投与時に、治療薬で処置されていないＡＬＳ患者または治療薬を用いる処置の前のＡＬＳ患者と同じ、またはそれより高い、またはそれより１．０未満小さいＡＬＳ機能評価尺度（ＡＬＳＦＲＳ及びＡＬＦＲＳ－Ｒ）をもたらす。治療薬が、その患者に治療薬を投与した時に、ＡＬＳの症状を緩和することができる場合、治療薬は、その患者に有効であると言われる。
【0068】
「治療薬を投与されていない」患者への言及は、単に、示された治療薬で処置されていない患者（例えば、ＡＬＳ患者）であることに留意すべきである。従って、この患者が、将来のある時点で、示された治療薬を投与される同じ患者であっても、示された治療薬を投与されていない完全に異なる患者であってもよい。治療薬を投与されていない患者は、現在、別の治療薬で処置されていても、過去に指示された治療薬で処置されていてもよいが、現在、示された治療薬で処置されていないことに留意すべきである。
【0069】
一部の実施形態では、治療薬で患者のＡＬＳ症状が緩和される患者の生体試料（例えば、血液、血清、血漿、または脳脊髄液（ＣＳＦ））中のニューロフィラメントタンパク質（例えば、ニューロフィラメント軽鎖）のレベルの維持または低減（未処置の患者のレベルと比較）は、（本明細書に記載の評価のうちの１つで決定されるように）ＡＬＳ症状の緩和の観察の少なくとも２ヶ月前、２．５ヶ月前、３ヶ月前、４ヶ月前、５ヶ月前、もしくは少なくとも６ヶ月前、または少なくとも１年前に検出可能である。
【0070】
配列表の開示
配列番号１（ヒトニューロフィラメント軽鎖アミノ酸配列）
ＭＳＳＦＳＹＥＰＹＹＳＴＳＹＫＲＲＹＶＥＴＰＲＶＨＩＳＳＶＲＳＧＹＳＴＡＲＳＡＹＳＳＹＳＡＰＶＳＳＳＬＳＶＲＲＳＹＳＳＳＳＧＳＬＭＰＳＬＥＮ
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配列番号２（ヒトニューロフィラメント重鎖アミノ酸配列）
ＭＭＳＦＧＧＡＤＡＬＬＧＡＰＦＡＰＬＨＧＧＧＳＬＨＹＡＬＡＲＫＧＧＡＧＧＴＲＳＡＡＧＳＳＳＧＦＨＳＷＴＲＴＳＶＳＳＶＳＡ
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配列番号３
１ ｍｍｓｆｇｇａｄａｌ ｌｇａｐｆａｐｌｈｇ ｇｇｓｌｈｙａｌａｒ ｋｇｇａｇｇｔｒｓａ ａｇｓｓｓｇｆｈｓｗ ｔｒｔｓｖｓｓｖｓａ
６１ ｓｐｓｒｆｒｇａｇａ ａｓｓｔｄｓｌｄｔｌ ｓｎｇｐｅｇｃｍｖａ ｖａｔｓｒｓｅｋｅｑ ｌｑａｌｎｄｒｆａｇ ｙｉｄｋｖｒｑｌｅａ
１２１ ｈｎｒｓｌｅｇｅａａ ａｌｒｑｑｑａｇｒｓ ａｍｇｅｌｙｅｒｅｖ ｒｅｍｒｇａｖｌｒｌ ｇａａｒｇｑｌｒｌｅ ｑｅｈｌｌｅｄｉａｈ
１８１ ｖｒｑｒｌｄｄｅａｒ ｑｒｅｅａｅａａａｒ ａｌａｒｆａｑｅａｅ ａａｒｖｄｌｑｋｋａ ｑａｌｑｅｅｃｇｙｌ ｒｒｈｈｑｅｅｖｇｅ
２４１ ｌｌｇｑｉｑｇｓｇａ ａｑａｑｍｑａｅｔｒ ｄａｌｋｃｄｖｔｓａ ｌｒｅｉｒａｑｌｅｇ ｈａｖｑｓｔｌｑｓｅ ｅｗｆｒｖｒｌｄｒｌ
３０１ ｓｅａａｋｖｎｔｄａ ｍｒｓａｑｅｅｉｔｅ ｙｒｒｑｌｑａｒｔｔ ｅｌｅａｌｋｓｔｋｄ ｓｌｅｒｑｒｓｅｌｅ ｄｒｈｑａｄｉａｓｙ
３６１ ｑｅａｉｑｑｌｄａｅ ｌｒｎｔｋｗｅｍａａ ｑｌｒｅｙｑｄｌｌｎ ｖｋｍａｌｄｉｅｉａ ａｙｒｋｌｌｅｇｅｅ ｃｒｉｇｆｇｐｉｐｆ
４２１ ｓｌｐｅｇｌｐｋｉｐ ｓｖｓｔｈｉｋｖｋｓ ｅｅｋｉｋｖｖｅｋｓ ｅｋｅｔｖｉｖｅｅｑ ｔｅｅｔｑｖｔｅｅｖ ｔｅｅｅｅｋｅａｋｅ
４８１ ｅｅｇｋｅｅｅｇｇｅ ｅｅｅａｅｇｇｅｅｅ ｔｋｓｐｐａｅｅａａ ｓｐｅｋｅａｋｓｐｖ ｋｅｅａｋｓｐａｅａ ｋｓｐｅｋｅｅａｋｓ
５４１ ｐａｅｖｋｓｐｅｋａ ｋｓｐａｋｅｅａｋｓ ｐｐｅａｋｓｐｅｋｅ ｅａｋｓｐａｅｖｋｓ ｐｅｋａｋｓｐａｋｅ ｅａｋｓｐａｅａｋｓ
６０１ ｐｅｋａｋｓｐｖｋｅ ｅａｋｓｐａｅａｋｓ ｐｖｋｅｅａｋｓｐａ ｅｖｋｓｐｅｋａｋｓ ｐｔｋｅｅａｋｓｐｅ ｋａｋｓｐｅｋｅｅａ
６６１ ｋｓｐｅｋａｋｓｐｖ ｋａｅａｋｓｐｅｋａ ｋｓｐｖｋａｅａｋｓ ｐｅｋａｋｓｐｖｋｅ ｅａｋｓｐｅｋａｋｓ ｐｖｋｅｅａｋｓｐｅ
７２１ ｋａｋｓｐｖｋｅｅａ ｋｔｐｅｋａｋｓｐｖ ｋｅｅａｋｓｐｅｋａ ｋｓｐｅｋａｋｔｌｄ ｖｋｓｐｅａｋｔｐａ ｋｅｅａｒｓｐａｄｋ
７８１ ｆｐｅｋａｋｓｐｖｋ ｅｅｖｋｓｐｅｋａｋ ｓｐｌｋｅｄａｋａｐ ｅｋｅｉｐｋｋｅｅｖ ｋｓｐｖｋｅｅｅｋｐ ｑｅｖｋｖｋｅｐｐｋ
８４１ ｋａｅｅｅｋａｐａｔ ｐｋｔｅｅｋｋｄｓｋ ｋｅｅａｐｋｋｅａｐ ｋｐｋｖｅｅｋｋｅｐ ａｖｅｋｐｋｅｓｋｖ ｅａｋｋｅｅａｅｄｋ
９０１ ｋｋｖｐｔｐｅｋｅａ ｐａｋｖｅｖｋｅｄａ ｋｐｋｅｋｔｅｖａｋ ｋｅｐｄｄａｋａｋｅ ｐｓｋｐａｅｋｋｅａ ａｐｅｋｋｄｔｋｅｅ
９６１ ｋａｋｋｐｅｅｋｐｋ ｔｅａｋａｋｅｄｄｋ ｔｌｓｋｅｐｓｋｐｋ ａｅｋａｅｋｓｓｓｔ ｄｑｋｄｓｋｐｐｅｋ ａｔｅｄｋａａｋｇｋ
配列番号４（ヒトニューロフィラメント中鎖アミノ酸配列）：
ＭＳＹＴＬＤＳＬＧＮＰＳＡＹＲＲＶＴＥＴＲＳＳＦＳＲＶＳＧＳＰＳＳＧＦＲＳＱＳＷＳＲＧＳＰＳＴＶＳＳＳＹＫＲＳＭＬＡＰＲ
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ＹＬＥＱＱＮＫＥＩＥＡＥＩＱＡＬＲＱＫＱＡＳＨＡＱＬＧＤＡＹＤＱＥＩＲＥＬＲＡＴＬＥＭＶＮＨＥＫＡＱＶＱＬＤＳＤＨＬＥＥ
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ＶＥＥＫＧＫＳＰＶＳＫＳＰＶＥＥＫＡＫＳＰＶＰＫＳＰＶＥＥＡＫＳＫＡＥＶＧＫＧＥＱＫＥＥＥＥＫＥＶＫＥＡＰＫＥＥＫＶＥＫ
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ＥＫＫＧＧＤＫＳＥＥＫＶＶＶＴＫＴＶＥＫＩＴＳＥＧＧＤＧＡＴＫＹＩＴＫＳＶＴＶＴＱＫＶＥＥＨＥＥＴＦＥＥＫＬＶＳＴＫＫＶ
ＥＫＶＴＳＨＡＩＶＫＥＶＴＱＳＤ
配列番号５
ＭＡＲＨＬＲＥＹＱＤＬＬＮＶＫＭＡＬＤＩＥＩＡＡＹＲＫＬＬＥＧＥＥＴＲＦＳＴＦＡＧＳＩＴＧＰＬＹＴＨＲＰＰＩＴＩＳＳＫＩＱＫＰＫＶＥＡＰＫＬ
ＫＶＱＨＫＦＶＥＥＩＩＥＥＴＫＶＥＤＥＫＳＥＭＥＥＡＬＴＡＩＴＥＥＬＡＶＳＭＫＥＥＫＫＥＡＡＥＥＫＥＥＥＰＥＡＥＥＥＥＶＡＡＫＫＳＰＶＫＡＴ
ＡＰＥＶＫＥＥＥＧＥＫＥＥＥＥＧＱＥＥＥＥＥＥＤＥＧＡＫＳＤＱＡＥＥＧＧＳＥＫＥＧＳＳＥＫＥＥＧＥＱＥＥＧＥＴＥＡＥＡＥＧＥＥＡＥＡＫＥＥＫ
ＫＶＥＥＫＳＥＥＶＡＴＫＥＥＬＶＡＤＡＫＶＥＫＰＥＫＡＫＳＰＶＰＫＳＰＶＥＥＫＧＫＳＰＶＰＫＳＰＶＥＥＫＧＫＳＰＶＰＫＳＰＶＥＥＫＧＫＳＰＶ
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ＫＥＤＩＡＶＮＧＥＶＥＧＫＥＥＶＥＱＥＴＫＥＫＧＳＧＲＥＥＥＫＧＶＶＴＮＧＬＤＬＳＰＡＤＥＫＫＧＧＤＫＳＥＥＫＶＶＶＴＫＴＶＥＫＩＴＳＥＧＧ
ＤＧＡＴＫＹＩＴＫＳＶＴＶＴＱＫＶＥＥＨＥＥＴＦＥＥＫＬＶＳＴＫＫＶＥＫＶＴＳＨＡＩＶＫＥＶＴＱＳＤ
配列番号６
ＭＳＦＧＳＥＨＹＬＣＳＳＳＳＹＲＫＶＦＧＤＧＳＲＬＳＡＲＬＳＧＡＧＧＡＧＧＦＲＳＱＳＬＳＲＳＮＶＡＳＳＡＡＣＳＳＡＳＳＬ
ＧＬＧＬＡＹＲＲＰＰＡＳＤＧＬＤＬＳＱＡＡＡＲＴＮＥＹＫＩＩＲＴＮＥＫＥＱＬＱＧＬＮＤＲＦＡＶＦＩＥＫＶＨＱＬＥＴＱＮＲ
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配列番号７
ＭＳＨＨＰＳＧＬＲＡＧＦＳＳＴＳＹＲＲＴＦＧＰＰＰＳＬＳＰＧＡＦＳＹＳＳＳＳＲＦＳＳＳＲＬＬＧＳＡＳＰＳＳＳＶＲＬＧＳＦ
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ＴＴＶＰＥＶＥＰＰＱＤＳＨＳＲＫＴＶＬＩＫＴＩＥＴＲＮＧＥＶＶＴＥＳＱＫＥＱＲＳＥＬＤＫＳＳＡＨＳＹ
配列番号８
ＣＡＧＧＡＴＡＣＡＴＴＴＣＴＡＣＡＧＣＴ
配列番号９
ＴＴＡＡＴＧＴＴＴＡＴＣＡＧＧＡＴ
配列番号１０
ＡＧＴＧＴＴＴＡＡＴＧＴＴＴＡＴＣ
配列番号１１
ＣＣＧＴＣＧＣＣＣＴＴＣＡＧＣＡＣＧＣＡ
配列番号１２
ＣＣＴＴＣＣＣＴＧＡＡＧＧＴＴＣＣＴＣＣ
配列番号１３
ＣＣＴＡＴＡＧＧＡＣＴＡＴＣＣＡＧＧＡＡ
配列番号１（ヒトニューロフィラメント軽鎖アミノ酸配列）
ＭＳＳＦＳＹＥＰＹＹＳＴＳＹＫＲＲＹＶＥＴＰＲＶＨＩＳＳＶＲＳＧＹＳＴＡＲＳＡＹＳＳＹＳＡＰＶＳＳＳＬＳＶＲＲＳＹＳＳＳＳＧＳＬＭＰＳＬＥＮ
ＬＤＬＳＱＶＡＡＩＳＮＤＬＫＳＩＲＴＱＥＫＡＱＬＱＤＬＮＤＲＦＡＳＦＩＥＲＶＨＥＬＥＱＱＮＫＶＬＥＡＥＬＬＶＬＲＱＫＨＳＥＰＳＲＦＲＡＬＹＥ
ＱＥＩＲＤＬＲＬＡＡＥＤＡＴＮＥＫＱＡＬＱＧＥＲＥＧＬＥＥＴＬＲＮＬＱＡＲＹＥＥＥＶＬＳＲＥＤＡＥＧＲＬＭＥＡＲＫＧＡＤＥＡＡＬＡＲＡＥＬＥ
ＫＲＩＤＳＬＭＤＥＩＳＦＬＫＫＶＨＥＥＥＩＡＥＬＱＡＱＩＱＹＡＱＩＳＶＥＭＤＶＴＫＰＤＬＳＡＡＬＫＤＩＲＡＱＹＥＫＬＡＡＫＮＭＱＮＡＥＥＷＦ
ＫＳＲＦＴＶＬＴＥＳＡＡＫＮＴＤＡＶＲＡＡＫＤＥＶＳＥＳＲＲＬＬＫＡＫＴＬＥＩＥＡＣＲＧＭＮＥＡＬＥＫＱＬＱＥＬＥＤＫＱＮＡＤＩＳＡＭＱＤＴ
ＩＮＫＬＥＮＥＬＲＴＴＫＳＥＭＡＲＹＬＫＥＹＱＤＬＬＮＶＫＭＡＬＤＩＥＩＡＡＹＲＫＬＬＥＧＥＥＴＲＬＳＦＴＳＶＧＳＩＴＳＧＹＳＱＳＳＱＶＦＧ
ＲＳＡＹＧＧＬＱＴＳＳＹＬＭＳＴＲＳＦＰＳＹＹＴＳＨＶＱＥＥＱＩＥＶＥＥＴＩＥＡＡＫＡＥＥＡＫＤＥＰＰＳＥＧＥＡＥＥＥＥＫＤＫＥＥＡＥＥＥＥ
ＡＡＥＥＥＥＡＡＫＥＥＳＥＥＡＫＥＥＥＥＧＧＥＧＥＥＧＥＥＴＫＥＡＥＥＥＥＫＫＶＥＧＡＧＥＥＱＡＡＫＫＫＤ
配列番号２（ヒトニューロフィラメント重鎖アミノ酸配列）
ＭＭＳＦＧＧＡＤＡＬＬＧＡＰＦＡＰＬＨＧＧＧＳＬＨＹＡＬＡＲＫＧＧＡＧＧＴＲＳＡＡＧＳＳＳＧＦＨＳＷＴＲＴＳＶＳＳＶＳＡ
ＳＰＳＲＦＲＧＡＧＡＡＳＳＴＤＳＬＤＴＬＳＮＧＰＥＧＣＭＶＡＶＡＴＳＲＳＥＫＥＱＬＱＡＬＮＤＲＦＡＧＹＩＤＫＶＲＱＬＥＡ
ＨＮＲＳＬＥＧＥＡＡＡＬＲＱＱＱＡＧＲＳＡＭＧＥＬＹＥＲＥＶＲＥＭＲＧＡＶＬＲＬＧＡＡＲＧＱＬＲＬＥＱＥＨＬＬＥＤＩＡＨ
ＶＲＱＲＬＤＤＥＡＲＱＲＥＥＡＥＡＡＡＲＡＬＡＲＦＡＱＥＡＥＡＡＲＶＤＬＱＫＫＡＱＡＬＱＥＥＣＧＹＬＲＲＨＨＱＥＥＶＧＥ
ＬＬＧＱＩＱＧＳＧＡＡＱＡＱＭＱＡＥＴＲＤＡＬＫＣＤＶＴＳＡＬＲＥＩＲＡＱＬＥＧＨＡＶＱＳＴＬＱＳＥＥＷＦＲＶＲＬＤＲＬ
ＳＥＡＡＫＶＮＴＤＡＭＲＳＡＱＥＥＩＴＥＹＲＲＱＬＱＡＲＴＴＥＬＥＡＬＫＳＴＫＤＳＬＥＲＱＲＳＥＬＥＤＲＨＱＡＤＩＡＳＹ
ＱＥＡＩＱＱＬＤＡＥＬＲＮＴＫＷＥＭＡＡＱＬＲＥＹＱＤＬＬＮＶＫＭＡＬＤＩＥＩＡＡＹＲＫＬＬＥＧＥＥＣＲＩＧＦＧＰＩＰＦ
ＳＬＰＥＧＬＰＫＩＰＳＶＳＴＨＩＫＶＫＳＥＥＫＩＫＶＶＥＫＳＥＫＥＴＶＩＶＥＥＱＴＥＥＴＱＶＴＥＥＶＴＥＥＥＥＫＥＡＫＥ
ＥＥＧＫＥＥＥＧＧＥＥＥＥＡＥＧＧＥＥＥＴＫＳＰＰＡＥＥＡＡＳＰＥＫＥＡＫＳＰＶＫＥＥＡＫＳＰＡＥＡＫＳＰＥＫＥＥＡＫＳ
ＰＡＥＶＫＳＰＥＫＡＫＳＰＡＫＥＥＡＫＳＰＰＥＡＫＳＰＥＫＥＥＡＫＳＰＡＥＶＫＳＰＥＫＡＫＳＰＡＫＥＥＡＫＳＰＡＥＡＫＳ
ＰＥＫＡＫＳＰＶＫＥＥＡＫＳＰＡＥＡＫＳＰＶＫＥＥＡＫＳＰＡＥＶＫＳＰＥＫＡＫＳＰＴＫＥＥＡＫＳＰＥＫＡＫＳＰＥＫＡＫＳ
ＰＥＫＥＥＡＫＳＰＥＫＡＫＳＰＶＫＡＥＡＫＳＰＥＫＡＫＳＰＶＫＡＥＡＫＳＰＥＫＡＫＳＰＶＫＥＥＡＫＳＰＥＫＡＫＳＰＶＫＥ
ＥＡＫＳＰＥＫＡＫＳＰＶＫＥＥＡＫＴＰＥＫＡＫＳＰＶＫＥＥＡＫＳＰＥＫＡＫＳＰＥＫＡＫＴＬＤＶＫＳＰＥＡＫＴＰＡＫＥＥＡ
ＲＳＰＡＤＫＦＰＥＫＡＫＳＰＶＫＥＥＶＫＳＰＥＫＡＫＳＰＬＫＥＤＡＫＡＰＥＫＥＩＰＫＫＥＥＶＫＳＰＶＫＥＥＥＫＰＱＥＶＫ
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ＥＥＡＥＤＫＫＫＶＰＴＰＥＫＥＡＰＡＫＶＥＶＫＥＤＡＫＰＫＥＫＴＥＶＡＫＫＥＰＤＤＡＫＡＫＥＰＳＫＰＡＥＫＫＥＡＡＰＥＫ
ＫＤＴＫＥＥＫＡＫＫＰＥＥＫＰＫＴＥＡＫＡＫＥＤＤＫＴＬＳＫＥＰＳＫＰＫＡＥＫＡＥＫＳＳＳＴＤＱＫＤＳＫＰＰＥＫＡＴＥＤ
ＫＡＡＫＧＫ
配列番号３
１ ｍｍｓｆｇｇａｄａｌ ｌｇａｐｆａｐｌｈｇ ｇｇｓｌｈｙａｌａｒ ｋｇｇａｇｇｔｒｓａ ａｇｓｓｓｇｆｈｓｗ ｔｒｔｓｖｓｓｖｓａ
６１ ｓｐｓｒｆｒｇａｇａ ａｓｓｔｄｓｌｄｔｌ ｓｎｇｐｅｇｃｍｖａ ｖａｔｓｒｓｅｋｅｑ ｌｑａｌｎｄｒｆａｇ ｙｉｄｋｖｒｑｌｅａ
１２１ ｈｎｒｓｌｅｇｅａａ ａｌｒｑｑｑａｇｒｓ ａｍｇｅｌｙｅｒｅｖ ｒｅｍｒｇａｖｌｒｌ ｇａａｒｇｑｌｒｌｅ ｑｅｈｌｌｅｄｉａｈ
１８１ ｖｒｑｒｌｄｄｅａｒ ｑｒｅｅａｅａａａｒ ａｌａｒｆａｑｅａｅ ａａｒｖｄｌｑｋｋａ ｑａｌｑｅｅｃｇｙｌ ｒｒｈｈｑｅｅｖｇｅ
２４１ ｌｌｇｑｉｑｇｓｇａ ａｑａｑｍｑａｅｔｒ ｄａｌｋｃｄｖｔｓａ ｌｒｅｉｒａｑｌｅｇ ｈａｖｑｓｔｌｑｓｅ ｅｗｆｒｖｒｌｄｒｌ
３０１ ｓｅａａｋｖｎｔｄａ ｍｒｓａｑｅｅｉｔｅ ｙｒｒｑｌｑａｒｔｔ ｅｌｅａｌｋｓｔｋｄ ｓｌｅｒｑｒｓｅｌｅ ｄｒｈｑａｄｉａｓｙ
３６１ ｑｅａｉｑｑｌｄａｅ ｌｒｎｔｋｗｅｍａａ ｑｌｒｅｙｑｄｌｌｎ ｖｋｍａｌｄｉｅｉａ ａｙｒｋｌｌｅｇｅｅ ｃｒｉｇｆｇｐｉｐｆ
４２１ ｓｌｐｅｇｌｐｋｉｐ ｓｖｓｔｈｉｋｖｋｓ ｅｅｋｉｋｖｖｅｋｓ ｅｋｅｔｖｉｖｅｅｑ ｔｅｅｔｑｖｔｅｅｖ ｔｅｅｅｅｋｅａｋｅ
４８１ ｅｅｇｋｅｅｅｇｇｅ ｅｅｅａｅｇｇｅｅｅ ｔｋｓｐｐａｅｅａａ ｓｐｅｋｅａｋｓｐｖ ｋｅｅａｋｓｐａｅａ ｋｓｐｅｋｅｅａｋｓ
５４１ ｐａｅｖｋｓｐｅｋａ ｋｓｐａｋｅｅａｋｓ ｐｐｅａｋｓｐｅｋｅ ｅａｋｓｐａｅｖｋｓ ｐｅｋａｋｓｐａｋｅ ｅａｋｓｐａｅａｋｓ
６０１ ｐｅｋａｋｓｐｖｋｅ ｅａｋｓｐａｅａｋｓ ｐｖｋｅｅａｋｓｐａ ｅｖｋｓｐｅｋａｋｓ ｐｔｋｅｅａｋｓｐｅ ｋａｋｓｐｅｋｅｅａ
６６１ ｋｓｐｅｋａｋｓｐｖ ｋａｅａｋｓｐｅｋａ ｋｓｐｖｋａｅａｋｓ ｐｅｋａｋｓｐｖｋｅ ｅａｋｓｐｅｋａｋｓ ｐｖｋｅｅａｋｓｐｅ
７２１ ｋａｋｓｐｖｋｅｅａ ｋｔｐｅｋａｋｓｐｖ ｋｅｅａｋｓｐｅｋａ ｋｓｐｅｋａｋｔｌｄ ｖｋｓｐｅａｋｔｐａ ｋｅｅａｒｓｐａｄｋ
７８１ ｆｐｅｋａｋｓｐｖｋ ｅｅｖｋｓｐｅｋａｋ ｓｐｌｋｅｄａｋａｐ ｅｋｅｉｐｋｋｅｅｖ ｋｓｐｖｋｅｅｅｋｐ ｑｅｖｋｖｋｅｐｐｋ
８４１ ｋａｅｅｅｋａｐａｔ ｐｋｔｅｅｋｋｄｓｋ ｋｅｅａｐｋｋｅａｐ ｋｐｋｖｅｅｋｋｅｐ ａｖｅｋｐｋｅｓｋｖ ｅａｋｋｅｅａｅｄｋ
９０１ ｋｋｖｐｔｐｅｋｅａ ｐａｋｖｅｖｋｅｄａ ｋｐｋｅｋｔｅｖａｋ ｋｅｐｄｄａｋａｋｅ ｐｓｋｐａｅｋｋｅａ ａｐｅｋｋｄｔｋｅｅ
９６１ ｋａｋｋｐｅｅｋｐｋ ｔｅａｋａｋｅｄｄｋ ｔｌｓｋｅｐｓｋｐｋ ａｅｋａｅｋｓｓｓｔ ｄｑｋｄｓｋｐｐｅｋ ａｔｅｄｋａａｋｇｋ
配列番号４（ヒトニューロフィラメント中鎖アミノ酸配列）：
ＭＳＹＴＬＤＳＬＧＮＰＳＡＹＲＲＶＴＥＴＲＳＳＦＳＲＶＳＧＳＰＳＳＧＦＲＳＱＳＷＳＲＧＳＰＳＴＶＳＳＳＹＫＲＳＭＬＡＰＲ
ＬＡＹＳＳＡＭＬＳＳＡＥＳＳＬＤＦＳＱＳＳＳＬＬＮＧＧＳＧＰＧＧＤＹＫＬＳＲＳＮＥＫＥＱＬＱＧＬＮＤＲＦＡＧＹＩＥＫＶＨ
ＹＬＥＱＱＮＫＥＩＥＡＥＩＱＡＬＲＱＫＱＡＳＨＡＱＬＧＤＡＹＤＱＥＩＲＥＬＲＡＴＬＥＭＶＮＨＥＫＡＱＶＱＬＤＳＤＨＬＥＥ
ＤＩＨＲＬＫＥＲＦＥＥＥＡＲＬＲＤＤＴＥＡＡＩＲＡＬＲＫＤＩＥＥＡＳＬＶＫＶＥＬＤＫＫＶＱＳＬＱＤＥＶＡＦＬＲＳＮＨＥＥ
ＥＶＡＤＬＬＡＱＩＱＡＳＨＩＴＶＥＲＫＤＹＬＫＴＤＩＳＴＡＬＫＥＩＲＳＱＬＥＳＨＳＤＱＮＭＨＱＡＥＥＷＦＫＣＲＹＡＫＬＴ
ＥＡＡＥＱＮＫＥＡＩＲＳＡＫＥＥＩＡＥＹＲＲＱＬＱＳＫＳＩＥＬＥＳＶＲＧＴＫＥＳＬＥＲＱＬＳＤＩＥＥＲＨＮＨＤＬＳＳＹＱ
ＤＴＩＱＱＬＥＮＥＬＲＧＴＫＷＥＭＡＲＨＬＲＥＹＱＤＬＬＮＶＫＭＡＬＤＩＥＩＡＡＹＲＫＬＬＥＧＥＥＴＲＦＳＴＦＡＧＳＩＴ
ＧＰＬＹＴＨＲＰＰＩＴＩＳＳＫＩＱＫＰＫＶＥＡＰＫＬＫＶＱＨＫＦＶＥＥＩＩＥＥＴＫＶＥＤＥＫＳＥＭＥＥＡＬＴＡＩＴＥＥＬ
ＡＶＳＭＫＥＥＫＫＥＡＡＥＥＫＥＥＥＰＥＡＥＥＥＥＶＡＡＫＫＳＰＶＫＡＴＡＰＥＶＫＥＥＥＧＥＫＥＥＥＥＧＱＥＥＥＥＥＥＤ
ＥＧＡＫＳＤＱＡＥＥＧＧＳＥＫＥＧＳＳＥＫＥＥＧＥＱＥＥＧＥＴＥＡＥＡＥＧＥＥＡＥＡＫＥＥＫＫＶＥＥＫＳＥＥＶＡＴＫＥＥ
ＬＶＡＤＡＫＶＥＫＰＥＫＡＫＳＰＶＰＫＳＰＶＥＥＫＧＫＳＰＶＰＫＳＰＶＥＥＫＧＫＳＰＶＰＫＳＰＶＥＥＫＧＫＳＰＶＰＫＳＰ
ＶＥＥＫＧＫＳＰＶＳＫＳＰＶＥＥＫＡＫＳＰＶＰＫＳＰＶＥＥＡＫＳＫＡＥＶＧＫＧＥＱＫＥＥＥＥＫＥＶＫＥＡＰＫＥＥＫＶＥＫ
ＫＥＥＫＰＫＤＶＰＥＫＫＫＡＥＳＰＶＫＥＥＡＶＡＥＶＶＴＩＴＫＳＶＫＶＨＬＥＫＥＴＫＥＥＧＫＰＬＱＱＥＫＥＫＥＫＡＧＧＥ
ＧＧＳＥＥＥＧＳＤＫＧＡＫＧＳＲＫＥＤＩＡＶＮＧＥＶＥＧＫＥＥＶＥＱＥＴＫＥＫＧＳＧＲＥＥＥＫＧＶＶＴＮＧＬＤＬＳＰＡＤ
ＥＫＫＧＧＤＫＳＥＥＫＶＶＶＴＫＴＶＥＫＩＴＳＥＧＧＤＧＡＴＫＹＩＴＫＳＶＴＶＴＱＫＶＥＥＨＥＥＴＦＥＥＫＬＶＳＴＫＫＶ
ＥＫＶＴＳＨＡＩＶＫＥＶＴＱＳＤ
配列番号５
ＭＡＲＨＬＲＥＹＱＤＬＬＮＶＫＭＡＬＤＩＥＩＡＡＹＲＫＬＬＥＧＥＥＴＲＦＳＴＦＡＧＳＩＴＧＰＬＹＴＨＲＰＰＩＴＩＳＳＫＩＱＫＰＫＶＥＡＰＫＬ
ＫＶＱＨＫＦＶＥＥＩＩＥＥＴＫＶＥＤＥＫＳＥＭＥＥＡＬＴＡＩＴＥＥＬＡＶＳＭＫＥＥＫＫＥＡＡＥＥＫＥＥＥＰＥＡＥＥＥＥＶＡＡＫＫＳＰＶＫＡＴ
ＡＰＥＶＫＥＥＥＧＥＫＥＥＥＥＧＱＥＥＥＥＥＥＤＥＧＡＫＳＤＱＡＥＥＧＧＳＥＫＥＧＳＳＥＫＥＥＧＥＱＥＥＧＥＴＥＡＥＡＥＧＥＥＡＥＡＫＥＥＫ
ＫＶＥＥＫＳＥＥＶＡＴＫＥＥＬＶＡＤＡＫＶＥＫＰＥＫＡＫＳＰＶＰＫＳＰＶＥＥＫＧＫＳＰＶＰＫＳＰＶＥＥＫＧＫＳＰＶＰＫＳＰＶＥＥＫＧＫＳＰＶ
ＰＫＳＰＶＥＥＫＧＫＳＰＶＳＫＳＰＶＥＥＫＡＫＳＰＶＰＫＳＰＶＥＥＡＫＳＫＡＥＶＧＫＧＥＱＫＥＥＥＥＫＥＶＫＥＡＰＫＥＥＫＶＥＫＫＥＥＫＰＫ
ＤＶＰＥＫＫＫＡＥＳＰＶＫＥＥＡＶＡＥＶＶＴＩＴＫＳＶＫＶＨＬＥＫＥＴＫＥＥＧＫＰＬＱＱＥＫＥＫＥＫＡＧＧＥＧＧＳＥＥＥＧＳＤＫＧＡＫＧＳＲ
ＫＥＤＩＡＶＮＧＥＶＥＧＫＥＥＶＥＱＥＴＫＥＫＧＳＧＲＥＥＥＫＧＶＶＴＮＧＬＤＬＳＰＡＤＥＫＫＧＧＤＫＳＥＥＫＶＶＶＴＫＴＶＥＫＩＴＳＥＧＧ
ＤＧＡＴＫＹＩＴＫＳＶＴＶＴＱＫＶＥＥＨＥＥＴＦＥＥＫＬＶＳＴＫＫＶＥＫＶＴＳＨＡＩＶＫＥＶＴＱＳＤ
配列番号６
ＭＳＦＧＳＥＨＹＬＣＳＳＳＳＹＲＫＶＦＧＤＧＳＲＬＳＡＲＬＳＧＡＧＧＡＧＧＦＲＳＱＳＬＳＲＳＮＶＡＳＳＡＡＣＳＳＡＳＳＬ
ＧＬＧＬＡＹＲＲＰＰＡＳＤＧＬＤＬＳＱＡＡＡＲＴＮＥＹＫＩＩＲＴＮＥＫＥＱＬＱＧＬＮＤＲＦＡＶＦＩＥＫＶＨＱＬＥＴＱＮＲ
ＡＬＥＡＥＬＡＡＬＲＱＲＨＡＥＰＳＲＶＧＥＬＦＱＲＥＬＲＤＬＲＡＱＬＥＥＡＳＳＡＲＳＱＡＬＬＥＲＤＧＬＡＥＥＶＱＲＬＲＡ
ＲＣＥＥＥＳＲＧＲＥＧＡＥＲＡＬＫＡＱＱＲＤＶＤＧＡＴＬＡＲＬＤＬＥＫＫＶＥＳＬＬＤＥＬＡＦＶＲＱＶＨＤＥＥＶＡＥＬＬＡ
ＴＬＱＡＳＳＱＡＡＡＥＶＤＶＴＶＡＫＰＤＬＴＳＡＬＲＥＩＲＡＱＹＥＳＬＡＡＫＮＬＱＳＡＥＥＷＹＫＳＫＦＡＮＬＮＥＱＡＡＲ
ＳＴＥＡＩＲＡＳＲＥＥＩＨＥＹＲＲＱＬＱＡＲＴＩＥＩＥＧＬＲＧＡＮＥＳＬＥＲＱＩＬＥＬＥＥＲＨＳＡＥＶＡＧＹＱＤＳＩＧＱ
ＬＥＮＤＬＲＮＴＫＳＥＭＡＲＨＬＲＥＹＱＤＬＬＮＶＫＭＡＬＤＩＥＩＡＡＹＲＫＬＬＥＧＥＥＴＲＦＳＴＳＧＬＳＩＳＧＬＮＰＬ
ＰＮＰＳＹＬＬＰＰＲＩＬＳＡＴＴＳＫＶＳＳＴＧＬＳＬＫＫＥＥＥＥＥＥＡＳＫＶＡＳＫＫＴＳＱＩＧＥＳＦＥＥＩＬＥＥＴＶＩＳ
ＴＫＫＴＥＫＳＮＩＥＥＴＴＩＳＳＱＫＩ
配列番号７
ＭＳＨＨＰＳＧＬＲＡＧＦＳＳＴＳＹＲＲＴＦＧＰＰＰＳＬＳＰＧＡＦＳＹＳＳＳＳＲＦＳＳＳＲＬＬＧＳＡＳＰＳＳＳＶＲＬＧＳＦ
ＲＳＰＲＡＧＡＧＡＬＬＲＬＰＳＥＲＬＤＦＳＭＡＥＡＬＮＱＥＦＬＡＴＲＳＮＥＫＱＥＬＱＥＬＮＤＲＦＡＮＦＩＥＫＶＲＦＬＥＱ
ＱＮＡＡＬＲＧＥＬＳＱＡＲＧＱＥＰＡＲＡＤＱＬＣＱＱＥＬＲＥＬＲＲＥＬＥＬＬＧＲＥＲＤＲＶＱＶＥＲＤＧＬＡＥＤＬＡＡＬＫ
ＱＲＬＥＥＥＴＲＫＲＥＤＡＥＨＮＬＶＬＦＲＫＤＶＤＤＡＴＬＳＲＬＥＬＥＲＫＩＥＳＬＭＤＥＩＥＦＬＫＫＬＨＥＥＥＬＲＤＬＱ
ＶＳＶＥＳＱＱＶＱＱＶＥＶＥＡＴＶＫＰＥＬＴＡＡＬＲＤＩＲＡＱＹＥＳＩＡＡＫＮＬＱＥＡＥＥＷＹＫＳＫＹＡＤＬＳＤＡＡＮＲ
ＮＨＥＡＬＲＱＡＫＱＥＭＮＥＳＲＲＱＩＱＳＬＴＣＥＶＤＧＬＲＧＴＮＥＡＬＬＲＱＬＲＥＬＥＥＱＦＡＬＥＡＧＧＹＱＡＧＡＡＲ
ＬＥＥＥＬＲＱＬＫＥＥＭＡＲＨＬＲＥＹＱＥＬＬＮＶＫＭＡＬＤＩＥＩＡＴＹＲＫＬＬＥＧＥＥＳＲＩＳＶＰＶＨＳＦＡＳＬＮＩＫ
ＴＴＶＰＥＶＥＰＰＱＤＳＨＳＲＫＴＶＬＩＫＴＩＥＴＲＮＧＥＶＶＴＥＳＱＫＥＱＲＳＥＬＤＫＳＳＡＨＳＹ
配列番号８
ＣＡＧＧＡＴＡＣＡＴＴＴＣＴＡＣＡＧＣＴ
配列番号９
ＴＴＡＡＴＧＴＴＴＡＴＣＡＧＧＡＴ
配列番号１０
ＡＧＴＧＴＴＴＡＡＴＧＴＴＴＡＴＣ
配列番号１１
ＣＣＧＴＣＧＣＣＣＴＴＣＡＧＣＡＣＧＣＡ
配列番号１２
ＣＣＴＴＣＣＣＴＧＡＡＧＧＴＴＣＣＴＣＣ
配列番号１３
ＣＣＴＡＴＡＧＧＡＣＴＡＴＣＣＡＧＧＡＡ
【0071】
本明細書に記載の発明を説明するが、それを限定することを意図していない以下の実施例が提供される。
【0072】
実施例１：ＡＬＳに有効ではない治療薬
候補治療薬であるデクスプラミペキソールが、ＡＬＳ症状を緩和する能力を有するかどうかを調査する臨床試験を実施した。
候補治療薬であるデクスプラミペキソールが、ＡＬＳ症状を緩和する能力を有するかどうかを調査する臨床試験を実施した。
【0073】
結果は、デプラミペキソールの投与がＡＬＳ症状を低減しなかったことを示した。
【0074】
デクスプラミペキソールで処置された患者の血清中のニューロフィラメントタンパク質、すなわち、ニューロフィラメント重鎖のレベルの遡及的調査。ベースラインの決定、ならびにデクスプラミペキソールの臨床試験における縦方向の血漿中ニューロフィラメント重鎖（ＮＦＨ）濃度、ＥＭＰＯＷＥＲ、ならびに生存率及び筋力の低下率（ハンドヘルドダイナモメトリー［ＨＨＤ］で評価）、肺活量（ＳＶＣ）、ならびにＡＬＳＦＲＳ－Ｒを含む臨床転帰との関係の評価。
【0075】
軽鎖、中間鎖、及び重鎖のヘテロポリマーを含むニューロフィラメントは、成熟軸索の主要な構造成分である。神経変性疾患患者は、ニューロフィラメントのＣＳＦ及び血漿中レベルの上昇を呈し、これは、推定上、変性ニューロンの軸索内容物の細胞外放出を表す。ＡＬＳ患者からの観察データ及び大部分の断面データでは、生存率及びＡＬＳＦＲＳ－Ｒの低下で示されるように、ＮＦレベル及び疾患の重症度間の相関関係が示されている。
【0076】
ＥＭＰＯＷＥＲは、９４３人の成人を登録する８１の学術医療センターで実行されたＡＬＳの処置におけるデクスプラミペキソールの安全性及び有効性の世界規模の第３相無作為化臨床試験（ＲＣＴ）であった（Ｃｕｄｋｏｗｉｃｚ ＭＥ ｅｔ ａｌ．，Ｌａｎｃｅｔ Ｎｅｕｒｏｌ．２０１３ Ｎｏｖ；１２（１１）：１０５９－６７を参照のこと）。
【0077】
ＥＭＰＯＷＥＲの実験に含まれる対象は、可能な、予想される、または明確なＡＬＳの診断を有さなければならず、２４ヶ月未満のＡＬＳの症状を有しており、予測値の少なくとも６５％であったＳＶＣ値を有し、及び重大な併存疾患を有さない。
【0078】
この実験では、デクスプラミペキソールまたはプラセボを用いる１２ヶ月間の処置に対して１：１の比率で、対象を割り当てた。
【0079】
Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｉｍｐｌｅ製の自動化マイクロ流体カートリッジベースのイムノアッセイプラットフォームであるＥｌｌａでＮＦＨアッセイを使用して、血漿中ニューロフィラメント重鎖（ＮＦＨ）を測定した。
【0080】
結果は、表１に示される。
【表1】
【0081】
複数の共変量を調整した後、ベースライン血漿中ＮＦＨ（ｌｏｇ１０変換）は、以下の通り相関していた：
－－実験中の生存率（ＨＲ＝２．４１、ｐ＜０．００１）
－－ＨＨＤの低下率（ｂ＝－０．０２６、ｐ＜０．００１、調整ｒ２＝０．１４）、
－－ＳＶＣの低下率（ｂ＝－１．７７、ｐ＜０．００１、調整ｒ２＝０．２０）、
－－ＡＬＳＦＲＳ－Ｒの低下率（ｂ＝－０．６１、ｐ＜０．００１、調整ｒ２＝０．２０）。
－－実験中の生存率（ＨＲ＝２．４１、ｐ＜０．００１）
－－ＨＨＤの低下率（ｂ＝－０．０２６、ｐ＜０．００１、調整ｒ２＝０．１４）、
－－ＳＶＣの低下率（ｂ＝－１．７７、ｐ＜０．００１、調整ｒ２＝０．２０）、
－－ＡＬＳＦＲＳ－Ｒの低下率（ｂ＝－０．６１、ｐ＜０．００１、調整ｒ２＝０．２０）。
【0082】
平均血漿中ニューロフィラメント重鎖レベルは、１ヶ月に１．８％低下した（図１を参照のこと）。しかし、知見は、プラセボに割り当てられた対象対デクスプラミエキソールに割り当てられた対象間の縦方向の血漿中ＮＦＨの経過に差異がなかったことを示し、療法は、このＥＭＰＯＷＥＲ実験で臨床的有効性がなかった（図２を参照のこと）。
【0083】
実施例２：ＡＬＳ患者に有効であると期待される治療薬の投与は、血清中ニューロフィラメントレベルの低下をもたらした
スーパーオキシドジスムターゼ１（ＳＯＤ１）の変異は、家族性ＡＬＳの２０％に関与する。この優勢な遺伝性疾患における毒性機能の獲得を考えると、ＳＯＤ１ ｍＲＮＡ及びタンパク質を低下させることは、治療上の利益を提供し得る。
スーパーオキシドジスムターゼ１（ＳＯＤ１）の変異は、家族性ＡＬＳの２０％に関与する。この優勢な遺伝性疾患における毒性機能の獲得を考えると、ＳＯＤ１ ｍＲＮＡ及びタンパク質を低下させることは、治療上の利益を提供し得る。
【0084】
ＳＯＤ１を標的とするアンチセンスオリゴヌクレオチド（ＡＳＯ）は、ＳＯＤ１ ｍＲＮＡ及びタンパク質を低減させ、ＳＯＤ１Ｇ９３Ａラットにおいて５０日超に及びＳＯＤ１Ｇ９３Ａマウスにおいてほぼ４０日に生存率を延長させる。
【0085】
以下に示されるように、ＳＯＤ１Ｇ９３Ａマウスにおける複合筋活動電位の最初の喪失は、ＳＯＤ１ ＡＳＯの単回投与後に逆転する。さらに、血清中ホスホニューロフィラメント重鎖レベルの増加は、ＳＯＤ１ ＡＳＯ療法により停止する。
【0086】
使用されたアンチセンスオリゴヌクレオチドは、表２の通りであった。
表２に示される６つのアンチセンスオリゴヌクレオチドは、ホスホロチオアート骨格修飾（「
」は、未修飾のホスホジエステル結合を示す）、２’－Ｏ－メトキシエチルリボース（ＭＯＥ；太字）、ならびに５’及び３’ウィングの（Ｓ）－２’，４’－拘束２’－Ｏ－エチル（ｃＥｔ；イタリック）基を含有する。ＡＳＯは、ＳＯＤ１ ｍＲＮＡの３’ＵＴＲ（ＡＳＯ１、ＡＳＯ２、及びＡＳＯ３）、ＳＯＤ１ ｍＲＮＡのエクソン１（３３３６１１）に標的化されるか、または齧歯動物ゲノムのいずれにも標的化されなかった（不活性ＡＳＯ）。評価された配列及び化学修飾の場所が提供される。異なる対照（不活性）ＡＳＯを、ｉｎ ｖｉｔｒｏ及びｉｎ ｖｉｖｏ実験に使用した。全てのシトシン残基は、５’メチルシトシンである。
【表2】
【化1】
」は、未修飾のホスホジエステル結合を示す）、２’－Ｏ－メトキシエチルリボース（ＭＯＥ；太字）、ならびに５’及び３’ウィングの（Ｓ）－２’，４’－拘束２’－Ｏ－エチル（ｃＥｔ；イタリック）基を含有する。ＡＳＯは、ＳＯＤ１ ｍＲＮＡの３’ＵＴＲ（ＡＳＯ１、ＡＳＯ２、及びＡＳＯ３）、ＳＯＤ１ ｍＲＮＡのエクソン１（３３３６１１）に標的化されるか、または齧歯動物ゲノムのいずれにも標的化されなかった（不活性ＡＳＯ）。評価された配列及び化学修飾の場所が提供される。異なる対照（不活性）ＡＳＯを、ｉｎ ｖｉｔｒｏ及びｉｎ ｖｉｖｏ実験に使用した。全てのシトシン残基は、５’メチルシトシンである。
【0087】
ヒト神経芽細胞腫細胞株（ＳＨ－ＳＹ５Ｙ）では、これらのＡＳＯ（ＡＳＯ１及びＡＳＯ２）は、用量依存的に、ＳＯＤ１ ｍＲＮＡを強力に低下させた。
【0088】
ＳＯＤ１低下ＡＳＯを用いる処置は、ＳＯＤ１Ｇ９３Ａマウス及びラットにおいて疾患の発症を大幅に遅延させ、生存期間を延長する。ＳＯＤ１Ｇ９３Ａ齧歯動物モデルでの変異型ＳＯＤ１の発現は、運動機能の喪失、そして最終的には死に至る、四肢及び胴体の重度の萎縮を引き起こすことが知られる。
【0089】
ＳＯＤ１低下ＡＳＯ方策が疾患パラメーターを遅延させ得るかどうかを調査するために、ＳＯＤ１Ｇ９３Ａマウス（Ｂ６．ＣｇＴｇ（ＳＯＤ１＊Ｇ９３Ａ）Ｇｕｒ／Ｊ）の脳室内（ｉ．ｃ．ｖ．）に５０日齢及び９４日齢で、３００μｇのＡＳＯ１のボーラス用量を注入した。ロータロッド上での重量及び性能を毎週試験した。ＡＳＯ１を投与されたマウスは、同様の濃度の対照不活性ＡＳＯ（不活性ＡＳＯ）を注射されたマウスよりも、ロータロッド上で、体重を２６日長く維持し、良好に動いた（データは示さず）。ＡＳＯ１処置マウスの中央生存率は、不活性なＡＳＯと比較して３７日長く、マウスモデルでの生存期間の２２％の延長を表す。
【0090】
ＳＯＤ１Ｇ９３Ａラット（Ｔａｃｏｎｉｃ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ、モデル２１４８）は、腰髄のＬ３椎骨及びＬ５椎骨間に配置されたポリエチレンカテーテルを介して３０μｌの髄腔内ボーラス注射を投与された。６５日齢のラットに、１０００μｇのＡＳＯ１、ＡＳＯ２、ＡＳＯ３、ＡＳＯ ３３３６１１、不活性ＡＳＯ、または人工脳脊髄液（ａＣＳＦ）ビヒクル対照を与えた。全てのＡＳＯをａＣＳＦで希釈した。全ての処置群は、コピー数の浮動または性的表現型誘導変動を制御するために性的表現型及び同産群を適合させた。
【0091】
結果は、ＡＳＯ１またはＡＳＯ２で処置されたラットが、ａＣＳＦで処置されたラットよりも、それぞれ、７０日（Ｐ＜０．０００１）及び６７日（Ｐ＜０．００１）長く、体重を維持したことを示した。３３３６１１は、体重減少の開始を適度に遅延させた（中央値１３９日、ａＣＳＦ中央値１２１日と比較）。
【0092】
８０日間の活性ＡＳＯ処置及び１１０日間の活性ＡＳＯ処置間で発症または生存率に有意差がなかった。
【0093】
ＡＳＯによるＳＯＤ１の低減が疾患のマーカーに影響を与え得るかどうかを試験するために、ＳＯＤ１Ｇ９３Ａマウスに１００μｇのＡＳＯ１と５週齢でいったん脳室内に注入し、複合筋活動電位（ＣＭＡＰ）の変化、神経筋接合部の神経支配、及び血清中ホスホニューロフィラメント重鎖（ｐＮｆＨ）レベルについて評価した。ＳＯＤ１Ｇ９３Ａマウスでは、ＣＭＡＰは、時間とともに低下し、運動ニューロンの喪失に先行する。５週にＡＳＯ１で処置されたＳＯＤ１Ｇ９３Ａマウスは、次の１２週間にわたってＣＭＡＰを維持したが、対照処置動物のＣＭＡＰを、同じ期間にわたって半分以上低減した（データは示さず）。保存された筋機能のＣＭＡＰ電気生理学的実証と一致して、ＡＳＯ１処置マウス（３００μｇのＡＳＯ１の単一用量を５週齢で１回注射）は、後肢の前脛骨筋の神経支配を維持したが、対照処置動物は、証拠を示した筋終板の７５％以上の除神経の所見を示した（図３、群毎にｎ＝１２；平均±ＳＥＭ）。
【0094】
ＡＬＳ齧歯動物モデル、ヒトＡＬＳ患者、及び他の神経変性疾患のＣＳＦ及び血清中のｐＮｆＨが増加する。血清中のリン酸化ニューロフィラメント重鎖レベルを調査するために、血液をｉ．ｃ．ｖ．注射前のベースライン（５週間）で収集し、次に、３００μｇのＡＳＯ１の単一用量を５週齢で１回注射されたＳＯＤ１Ｇ９３Ａ変異型マウスから、８及び１０週齢で、再度、収集した。製造者の使用説明書に従い、ＥＬＬＡマイクロ流体ＥＬＩＳＡプラットフォーム（Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｉｍｐｌｅ）で、ｐＮｆＨ血清中レベルを測定した。要約すると、指定された時点で顔面静脈穿刺により最大１００μｌの血液を採取した。ＢＤバキュテイナーＳＳＴチューブ（ＢＤ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ）の遠心分離により、血清試料を調製し、使用するまで－８０℃で保存した。図４に示されるように、活性ＡＳＯ１で処置されたＳＯＤ１マウスは、対照ＡＳＯ（すなわち、ＳＯＤ１不活性ＡＳＯ）で処置されたＳＯＤ１マウスと比較して低レベルのｐＮｆＨを示した（（群毎にｎ＝１２；図４の平均±ＳＥＭ））。
【0095】
ラット及びマウスモデルにおける、この実施例２の結果、ならびにＳＯＤ１活性ＡＳＯがリン酸化ニューロフィラメント重鎖の血清中レベルを低減させることができるという事実に基づいて、ＳＯＤ１活性ＡＳＯが、ＡＬＳ患者のＡＬＳの症状を緩和するための有効な治療薬であることが予想される。
【0096】
実施例３：ＡＬＳ患者の治療薬の切り替え
この先見的な実施例では、近年ＡＬＳと診断され且つＡＬＳＦＲＳ－Ｒスコアが３１の患者が、リルゾールで処置される。患者の血清中のニューロフィラメントタンパク質レベルを測定し、初期レベルと呼ばれるレベルであることが判定される。患者の医師は、６ヶ月毎にＡＬＳＦＲＳ－Ｒ評価を受けるよう患者に依頼するであろう。しかし、３ヶ月後（すなわち、ＡＬＳＦＲＳ－Ｒ試験を受ける前）、医師は、患者の血清中ニューロフィラメントタンパク質レベルを測定し、患者の血清中ニューロフィラメントタンパク質レベルが初期レベルよりも高いことを発見する。次に、医師は、患者が６ヶ月のＡＬＳＦＲＳ－Ｒ試験を受ける前に、別の治療薬（例えば、その患者に有効であり得るエダロボン）に切り替えるように患者にアドバイスする。患者が治療薬を切り替えた場合、次のＡＬＳＦＲＳ－Ｒ試験（すなわち、切り替えの３ヶ月後）は、新しい治療薬（例えば、エダロボン）が患者に有効であるならば、患者がリルゾールを服用し続けていた場合よりも高くなると予測される。
この先見的な実施例では、近年ＡＬＳと診断され且つＡＬＳＦＲＳ－Ｒスコアが３１の患者が、リルゾールで処置される。患者の血清中のニューロフィラメントタンパク質レベルを測定し、初期レベルと呼ばれるレベルであることが判定される。患者の医師は、６ヶ月毎にＡＬＳＦＲＳ－Ｒ評価を受けるよう患者に依頼するであろう。しかし、３ヶ月後（すなわち、ＡＬＳＦＲＳ－Ｒ試験を受ける前）、医師は、患者の血清中ニューロフィラメントタンパク質レベルを測定し、患者の血清中ニューロフィラメントタンパク質レベルが初期レベルよりも高いことを発見する。次に、医師は、患者が６ヶ月のＡＬＳＦＲＳ－Ｒ試験を受ける前に、別の治療薬（例えば、その患者に有効であり得るエダロボン）に切り替えるように患者にアドバイスする。患者が治療薬を切り替えた場合、次のＡＬＳＦＲＳ－Ｒ試験（すなわち、切り替えの３ヶ月後）は、新しい治療薬（例えば、エダロボン）が患者に有効であるならば、患者がリルゾールを服用し続けていた場合よりも高くなると予測される。
【0097】
実施例４：ＡＬＳ治療薬の投与は、ニューロフィラメントレベルの低下をもたらした。
二重盲検無作為化プラセボ対照の臨床試験をＳＯＤ１ ＡＬＳ患者で実施した。この試験には、単回及び複数回の漸増用量（ＳＡＤ／ＭＡＤ）実験が含まれていた。ＭＡＤ部分では、参加者は、約３ヶ月間にわたって５用量の治験薬を投与された。ＳＯＤ１変異を有する５０人の成人参加者をコホート毎に３：１（ＡＳＯ：プラセボ）に無作為化し、２０ｍｇ、４０ｍｇ、６０ｍｇ、または１００ｍｇのプラセボまたはＳＯＤ－１減少ＡＳＯ－ＡＳＯ１（配列番号８）を投与した。コホート毎の１～４人のＡＳＯ１処置参加者は、進行が速いと先験的に判断された、実証されたＳＯＤ１変異（主に、Ａ４Ｖ）を有していた。
二重盲検無作為化プラセボ対照の臨床試験をＳＯＤ１ ＡＬＳ患者で実施した。この試験には、単回及び複数回の漸増用量（ＳＡＤ／ＭＡＤ）実験が含まれていた。ＭＡＤ部分では、参加者は、約３ヶ月間にわたって５用量の治験薬を投与された。ＳＯＤ１変異を有する５０人の成人参加者をコホート毎に３：１（ＡＳＯ：プラセボ）に無作為化し、２０ｍｇ、４０ｍｇ、６０ｍｇ、または１００ｍｇのプラセボまたはＳＯＤ－１減少ＡＳＯ－ＡＳＯ１（配列番号８）を投与した。コホート毎の１～４人のＡＳＯ１処置参加者は、進行が速いと先験的に判断された、実証されたＳＯＤ１変異（主に、Ａ４Ｖ）を有していた。
【0098】
ＳＯＤ１レベルの低減
ＣＳＦ中ＳＯＤ１濃度のベースラインの低減が、４０ｍｇ、６０ｍｇ、及び１００ｍｇのコホートで観察され、これは、投薬量とともに増加し、時間とともに、８５日目の１００ｍｇの処置群において最大の低減を有していた。図５を参照のこと。前臨床データに基づいたモデル化は、１００ｍｇのＡＳＯ１が、脊髄におけるＳＯＤ１レベルを９９％超、効果的に低減させ、皮質におけるＳＯＤ１レベルを約２５～３０％低減させることを示唆する。
ＣＳＦ中ＳＯＤ１濃度のベースラインの低減が、４０ｍｇ、６０ｍｇ、及び１００ｍｇのコホートで観察され、これは、投薬量とともに増加し、時間とともに、８５日目の１００ｍｇの処置群において最大の低減を有していた。図５を参照のこと。前臨床データに基づいたモデル化は、１００ｍｇのＡＳＯ１が、脊髄におけるＳＯＤ１レベルを９９％超、効果的に低減させ、皮質におけるＳＯＤ１レベルを約２５～３０％低減させることを示唆する。
【0099】
臨床観察
ＡＳＯ１を用いる処置は、プラセボと比較して、機能低下の遅延（ＡＬＳＦＲＳ－Ｒ）及び呼吸機能の低下の遅延（ＳＶＣで測定）を示した。図６Ａ及び６Ｂを参照のこと。進行の速いＳＯＤ１変異を有する参加者では、ＡＳＯ１ １００ｍｇ群及びプラセボ群間の大きな差異は、他の変異を有するものと比較したこれらの測定値全体で観察された。
ＡＳＯ１を用いる処置は、プラセボと比較して、機能低下の遅延（ＡＬＳＦＲＳ－Ｒ）及び呼吸機能の低下の遅延（ＳＶＣで測定）を示した。図６Ａ及び６Ｂを参照のこと。進行の速いＳＯＤ１変異を有する参加者では、ＡＳＯ１ １００ｍｇ群及びプラセボ群間の大きな差異は、他の変異を有するものと比較したこれらの測定値全体で観察された。
【0100】
ＣＳＦ中リン酸化ニューロフィラメント重鎖（ｐＮｆＨ）レベル
ＣＳＦ中ｐＮｆＨの低下は、プラセボと比較して、ＡＳＯ１ １００ｍｇコホートで観察され、ＡＳＯ１ １００ｍｇ群及びプラセボ群間の大きな差異は、進行の速いＳＯＤ１変異を有する参加者で観察された。進行の速いＳＯＤ１変異を有する患者では、ＡＳＯ１を用いる処置は、プラセボと比較してＣＳＦ中ｐＮｆＨレベルの低減及び臨床的低下の遅延をもたらした。図６Ｃは、進行の速いＳＯＤ１変異を有する患者で観察された、ＡＳＯ１ １００ｍｇ群及びプラセボ群間の８５日目のｐＮｆＨレベルの差異を示す。
ＣＳＦ中ｐＮｆＨの低下は、プラセボと比較して、ＡＳＯ１ １００ｍｇコホートで観察され、ＡＳＯ１ １００ｍｇ群及びプラセボ群間の大きな差異は、進行の速いＳＯＤ１変異を有する参加者で観察された。進行の速いＳＯＤ１変異を有する患者では、ＡＳＯ１を用いる処置は、プラセボと比較してＣＳＦ中ｐＮｆＨレベルの低減及び臨床的低下の遅延をもたらした。図６Ｃは、進行の速いＳＯＤ１変異を有する患者で観察された、ＡＳＯ１ １００ｍｇ群及びプラセボ群間の８５日目のｐＮｆＨレベルの差異を示す。
【0101】
血漿及びＣＳＦ中ｐＮｆＨ及びニューロフィラメント軽鎖（ＮｆＬ）レベル
ベースラインｐＮｆＨ及びＮｆＬレベルは、進行の速い患者で最も高く、疾患活性（ＡＬＳＦＲＳ－Ｒ事前無作為化勾配で測定）と相関していた。プラセボを用いた明らかな安定化または増加と比較して、ＡＳＯ１ １００ｍｇでの処置を用いたｐＮｆＨ及びＮｆＬレベルの両方における低減が、血漿及びＣＳＦ中の両方で経時的に観察された。図７Ａ～７Ｄを参照のこと。図７Ａ～７Ｄでは、全体的なプラセボ（ｎ＝１２）は、実験全体を通して、１．０ベースライン測定値の、それの付近の、または、それより上の実線であり；全体的なＡＳＯ１ １００ｍｇ処置（ｎ＝１０）は、実験全体を通して、１．０ベースライン測定値を下回る実線であり；進行の速いプラセボ（ｎ＝４）は、実験全体を通して、１．０ベースライン測定値の、それの付近の、または、それより上の破線であり；進行の速いＡＳＯ１ １００ｍｇ処置（ｎ＝４）は、実験全体を通して、１．０ベースライン測定値を下回る破線である。ＰｒｏｔｅｉｎＳｉｍｐｌｅ（商標）Ｓｉｍｐｌｅ Ｐｌｅｘ
Ｅｌｌａイムノアッセイを使用して、ｐＮｆＨレベルを評価した。Ｑｕａｎｔｅｒｉｘ
Ｓｉｍｏａ ＮｆＬ Ａｄｖａｎｔａｇｅアッセイを使用して、ＮｆＬレベルを評価した。
ベースラインｐＮｆＨ及びＮｆＬレベルは、進行の速い患者で最も高く、疾患活性（ＡＬＳＦＲＳ－Ｒ事前無作為化勾配で測定）と相関していた。プラセボを用いた明らかな安定化または増加と比較して、ＡＳＯ１ １００ｍｇでの処置を用いたｐＮｆＨ及びＮｆＬレベルの両方における低減が、血漿及びＣＳＦ中の両方で経時的に観察された。図７Ａ～７Ｄを参照のこと。図７Ａ～７Ｄでは、全体的なプラセボ（ｎ＝１２）は、実験全体を通して、１．０ベースライン測定値の、それの付近の、または、それより上の実線であり；全体的なＡＳＯ１ １００ｍｇ処置（ｎ＝１０）は、実験全体を通して、１．０ベースライン測定値を下回る実線であり；進行の速いプラセボ（ｎ＝４）は、実験全体を通して、１．０ベースライン測定値の、それの付近の、または、それより上の破線であり；進行の速いＡＳＯ１ １００ｍｇ処置（ｎ＝４）は、実験全体を通して、１．０ベースライン測定値を下回る破線である。ＰｒｏｔｅｉｎＳｉｍｐｌｅ（商標）Ｓｉｍｐｌｅ Ｐｌｅｘ
Ｅｌｌａイムノアッセイを使用して、ｐＮｆＨレベルを評価した。Ｑｕａｎｔｅｒｉｘ
Ｓｉｍｏａ ＮｆＬ Ａｄｖａｎｔａｇｅアッセイを使用して、ＮｆＬレベルを評価した。
【0102】
従って、特定の理論に拘束されることを望まないが、本明細書で提供される結果は、ＡＬＳ患者が処置されている治療薬が、実際に、その患者に有効であるかどうかを判定するマーカー（例えば、薬力学的マーカー）としての、ニューロフィラメントタンパク質レベル（例えば、血清及び／またはＣＳＦ中ニューロフィラメントタンパク質レベル）の使用を支援する。例えば、患者が、以前に、有効でない治療薬を受けており、依然として、増加するＡＬＳ症状を有する場合、血清中ニューロフィラメントレベルの測定により、不可逆的な機能低下が発生する前に、治療薬が有効ではなく、その患者に有効であり得る新しい治療薬に切り替えなければならないという事前通知を与え得る。
【0103】
上記の本発明の実施形態は、単に例示的であることを意図しており、多数の変形及び修正が、当業者らに明らかになるであろう。そのような全ての変形及び修正は、添付の特許請求の範囲で定義される本発明の範囲内にあることが意図される。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6A】
【図6B】
【図6C】
【図7A】
【図7B】
【図7C】
【図7D】
【外国語明細書】