特開 2024-9839 障害を治療するための５ＨＴ作動薬

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公開特許公報(A)

(11)【公開番号】P2024009839

(43)【公開日】2024-01-23

(54)【発明の名称】障害を治療するための５ＨＴ作動薬

(51)【国際特許分類】

   A61K 45/00 20060101AFI20240116BHJP

   A61P 25/08 20060101ALI20240116BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20240116BHJP

【ＦＩ】

A61K45/00

A61P25/08

A61P43/00 111

【審査請求】有

【請求項の数】1

【出願形態】ＯＬ

【外国語出願】

(21)【出願番号】P 2023169390

(22)【出願日】2023-09-29

(62)【分割の表示】P 2021128790の分割

【原出願日】2016-02-24

(31)【優先権主張番号】62/120,726

(32)【優先日】2015-02-25

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(71)【出願人】

【識別番号】506115514

【氏名又は名称】ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニア

【氏名又は名称原語表記】Ｔｈｅ Ｒｅｇｅｎｔｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ

(74)【代理人】

【識別番号】110001173

【氏名又は名称】弁理士法人川口國際特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】スコット・シー・バラバン

(57)【要約】      （修正有）

【課題】癲癇症の治療方法を提供する。
【解決手段】特に、５ＨＴ受容体作動薬又はその医薬的に許容される塩を使用した癲癇症の治療方法を提供する。
【選択図】図１２Ａ

【特許請求の範囲】

【請求項1】

癲癇症の治療方法であって、前記治療を必要とする対象に治療有効量の５ＨＴ受容体作動薬又はその医薬的に許容される塩を投与することを含む前記方法。

【請求項2】

前記５ＨＴ受容体作動薬が、５ＨＴ_２Ａ受容体作動薬又は５ＨＴ_２Ｂ受容体作動薬である請求項１に記載の方法。

【請求項3】

前記５ＨＴ受容体作動薬が、５ＨＴ_２Ａ受容体と５ＨＴ_２Ｂ受容体の両方の作動薬である請求項２に記載の方法。

【請求項4】

前記５ＨＴ受容体作動薬が、クレミゾール又はフェンフルラミン以外のものである請求項１に記載の方法。

【請求項5】

前記５ＨＴ受容体作動薬が、５ＨＴ受容体と直接結合する請求項１に記載の方法。

【請求項6】

前記５ＨＴ受容体作動薬が、５ＨＴ受容体を特異的に活性化させる請求項１に記載の方法。

【請求項7】

前記５ＨＴ受容体作動薬が、５ＨＴ_２Ｃ受容体により介在される活性を同等以下にしながら５ＨＴ_２Ａ受容体又は５ＨＴ_２Ｂ受容体により介在される活性を増加させる請求項１に記載の方法。

【請求項8】

前記５ＨＴ受容体作動薬が、セロトニン再取り込み阻害薬以外のものである請求項１に記載の方法。

【請求項9】

前記５ＨＴ受容体作動薬が、５ＨＴ_１Ａ、５ＨＴ_１Ｂ、５ＨＴ_１Ｄ、５ＨＴ_２Ｃ、５ＨＴ_３、５ＨＴ_４、５ＨＴ_６、５ＨＴ_７、ＮＰＹ Ｙ１受容体、Ｌ型Ｃａチャネル、Ｎ型Ｃａチャネル、ＳＫ－Ｃａチャネル、ＧＡＢＡ依存性Ｃｌチャネル、ＧＡＢＡトランスポーター、ＧＡＢＡ－Ａ１受容体、ＧＡＢＡ－Ｂ１ｂ受容体、Ｎａチャネル、５ＨＴトランスポーター、ＣＢ１受容体、ＣＢ２受容体、ＢＺＤ又はエストロゲンＥＲαの少なくとも１種と有意に結合しないか又はその活性を調節しない請求項１に記載の方法。

【請求項10】

前記５ＨＴ受容体作動薬が、フリバンセリン、ＤＯＩ ＨＣｌ、ノルフェンフルラミン又はＢＷ７２３Ｃ８６である請求項１に記載の方法。

【請求項11】

前記５ＨＴ受容体作動薬が、スマトリプタン、ナラトリプタン、リザトリプタン、ゾルミトリプタン、ウラピジル、ＢＲＬ－５４４４３（３－（１－メチルピペリジン－４－イル）－１Ｈ－インドール－５－オール）、ロルカセリン、ブスピロン、ジプラシドン、ＴＣＢ－２（（４－ブロモ－３，６－ジメトキシベンゾシクロブテン－１－イル）メチルアミン臭化水素酸塩）、ＢＲＬ－１５５７２（３－（４－（４－クロロフェニル）ピペラジン－１－イル）－１，１－ジフェニル－２－プロパノール）、トラゾドン、ＢＭＹ７３７８（８－（２－［４－（２－メトキシフェニル）－１－ピペラジニル］エチル）－８－アザスピロ［４．５］デカン－７，９－ジオン）、アトモキセチン又はベンラファキシンである請求項１に記載の方法。

【請求項12】

前記５ＨＴ受容体作動薬が、トラゾドンである請求項１に記載の方法。

【請求項13】

前記癲癇症が、ドラベ症候群、レノックス・ガストー症候群、点頭癲癇又は大田原症候群である請求項１に記載の方法。

【請求項14】

前記癲癇症が、ドラベ症候群である請求項１３に記載の方法。

【請求項15】

前記癲癇症が、小児癲癇症である請求項１に記載の方法。

【請求項16】

前記対象が、心血管疾患をもつ請求項１に記載の方法。

【請求項17】

前記対象が、セロトニン再取り込み阻害薬による治療に耐性である請求項１に記載の方法。

【請求項18】

前記対象が、セロトニン再取り込み阻害薬を投与した場合の副作用に感受性である請求項１に記載の方法。

【請求項19】

前記セロトニン再取り込み阻害薬が、フェンフルラミンである請求項１７又は１８に記載の方法。

【請求項20】

前記対象が、ケト原性食を摂取している請求項１に記載の方法。

【請求項21】

前記５ＨＴ受容体作動薬が、癲癇対象、アルツハイマー病対象、自閉症対象又はパーキンソン病対象における強迫行為又はエレクトログラフ発作を抑制する請求項１に記載の方法。

【請求項22】

前記５ＨＴ受容体作動薬が、前記５ＨＴ受容体作動薬の不在下と比較した場合に前記対象における非誘発性発作の発生を抑制する請求項１に記載の方法。

【請求項23】

前記５ＨＴ受容体作動薬の前記投与が、５ＨＴ受容体作動薬の不在下と比較した場合に前記対象におけるミオクローヌス発作又は癲癇重積状態を抑制又は予防する請求項１に記載の方法。

【請求項24】

前記５ＨＴ受容体作動薬を体重１ｋｇ当たり約０．１ｍｇ～約１０００ｍｇの量で前記対象に投与する請求項１に記載の方法。

【請求項25】

前記５ＨＴ受容体作動薬を体重１ｋｇ当たり約０．１ｍｇ～約１０００ｍｇの１日用量で前記対象に投与する請求項２２に記載の方法。

【請求項26】

前記５ＨＴ受容体作動薬を抗癲癇薬（ＡＥＤ）と併用投与する請求項１に記載の方法。

【請求項27】

前記５ＨＴ受容体作動薬が、抗癲癇薬（ＡＥＤ）の補助療法である請求項１に記載の方法。

【請求項28】

前記ＡＥＤが、アセタゾラミド、ベンゾジアゼピン、カンナビジオール、カルバマゼピン、クロバザム、クロナゼパム、エスリカルバゼピン酢酸塩、エトスクシミド、エトトイン、フェルバメート、フェンフルラミン、フォスフェニトイン、ガバペンチン、ガナキソロン、フペルジンＡ、ラコサミド、ラモトリギン、レベチラセタム、ニトラゼパム、オクスカルバゼピン、ペランパネル、ピラセタム、フェノバルビタール、フェニトイン、臭化カリウム、プレガバリン、プリミドン、レチガビン、ルフィナミド、バルプロ酸、バルプロ酸ナトリウム、スチリペントール、チアガビン、トピラマート、ビガバトリン又はゾニサミドである請求項２６又は２７に記載の方法。

【請求項29】

前記ＡＥＤが、バルプロ酸、バルプロ酸ナトリウム、クロナゼパム、エトスクシミド、フェルバメート、ガバペンチン、カルバマゼピン、オクスカルバゼピン、ラモトリギン、レベチラセタム、ベンゾジアゼピン、フェノバルビタール、プレガバリン、プリミドン、チアガビン、トピラマート、臭化カリウム、フェニトイン、スチリペントール、ビガバトリン又はゾニサミドである請求項２８に記載の方法。

【請求項30】

前記ＡＥＤが、バルプロ酸、バルプロ酸ナトリウム、ガバペンチン、トピラマート、カルバマゼピン、オクスカルバゼピン又はビガバトリンである請求項２９に記載の方法。

【請求項31】

前記ＡＥＤが、フェンフルラミン又はトピラマート以外のものである請求項２６に記載の方法。

【請求項32】

前記ＡＥＤを前記５ＨＴ受容体作動薬と同時又は順次投与する請求項２６に記載の方法。

【請求項33】

癲癇症の治療方法であって、前記方法が前記治療を必要とする対象に治療有効量の５ＨＴ受容体作動薬又はその医薬的に許容される塩を投与することを含み、前記対象が心血管疾患をもつか、セロトニン再取り込み阻害薬による治療に耐性であるか、又はセロトニン再取り込み阻害薬を投与した場合の副作用に感受性である前記方法。

【請求項34】

前記５ＨＴ受容体作動薬が、５ＨＴ_２Ａ受容体作動薬又は５ＨＴ_２Ｂ受容体作動薬である請求項３３に記載の方法。

【請求項35】

前記５ＨＴ受容体作動薬が、５ＨＴ_２Ａ受容体と５ＨＴ_２Ｂ受容体の両方の作動薬である請求項３２に記載の方法。

【請求項36】

前記５ＨＴ受容体作動薬が、クレミゾール、クレミゾールアナログ又はその医薬的に許容される塩である請求項３３に記載の方法。

【請求項37】

前記医薬的に許容される塩がクレミゾールＨＣｌである請求項３６に記載の方法。

【請求項38】

前記クレミゾール、前記クレミゾールアナログ又は前記その医薬的に許容される塩が医薬組成物の一部を形成する請求項３６に記載の方法。

【請求項39】

前記医薬組成物が更に医薬的に許容される賦形剤を含有する請求項３８に記載の方法。

【請求項40】

前記医薬組成物が、治療有効量のクレミゾール、前記クレミゾールアナログ又は前記その医薬的に許容される塩を含有する請求項３８に記載の方法。

【請求項41】

前記医薬組成物を抗癲癇薬（ＡＥＤ）と併用投与する請求項４０に記載の方法。

【請求項42】

前記医薬組成物が、クレミゾール、前記クレミゾールアナログ又は前記その医薬的に許容される塩と、ＡＥＤを含有する請求項４１に記載の方法。

【請求項43】

前記５ＨＴ受容体作動薬が、フェンフルラミン以外のものである請求項３３に記載の方法。

【請求項44】

前記５ＨＴ受容体作動薬が、５ＨＴ受容体と直接結合する請求項３３に記載の方法。

【請求項45】

前記５ＨＴ受容体作動薬が、５ＨＴ受容体を特異的に活性化させる請求項３３に記載の方法。

【請求項46】

前記５ＨＴ受容体作動薬が、５ＨＴ_２Ｃ受容体により介在される活性を同等以下にしながら５ＨＴ_２Ａ受容体又は５ＨＴ_２Ｂ受容体により介在される活性を増加させる請求項３３に記載の方法。

【請求項47】

前記５ＨＴ受容体作動薬が、セロトニン再取り込み阻害薬以外のものである請求項３３に記載の方法。

【請求項48】

前記５ＨＴ受容体作動薬が、５ＨＴ_１Ａ、５ＨＴ_１Ｂ、５ＨＴ_１Ｄ、５ＨＴ_２Ｃ、５ＨＴ_３、５ＨＴ_４、５ＨＴ_６、５ＨＴ_７、ＮＰＹ Ｙ１受容体、Ｌ型Ｃａチャネル、Ｎ型Ｃａチャネル、ＳＫ－Ｃａチャネル、ＧＡＢＡ依存性Ｃｌチャネル、ＧＡＢＡトランスポーター、ＧＡＢＡ－Ａ１受容体、ＧＡＢＡ－Ｂ１ｂ受容体、Ｎａチャネル、５ＨＴトランスポーター、ＣＢ１受容体、ＣＢ２受容体、ＢＺＤ又はエストロゲンＥＲαの少なくとも１種と有意に結合しないか又はその活性を調節しない請求項３３に記載の方法。

【請求項49】

前記５ＨＴ受容体作動薬が、スマトリプタン、ナラトリプタン、リザトリプタン、ゾルミトリプタン、ウラピジル、ＢＲＬ－５４４４３（３－（１－メチルピペリジン－４－イル）－１Ｈ－インドール－５－オール）、ロルカセリン、ブスピロン、ジプラシドン、ＴＣＢ－２（（４－ブロモ－３，６－ジメトキシベンゾシクロブテン－１－イル）メチルアミン臭化水素酸塩）、ＢＲＬ－１５５７２（３－（４－（４－クロロフェニル）ピペラジン－１－イル）－１，１－ジフェニル－２－プロパノール）、トラゾドン、ＢＭＹ７３７８（８－（２－［４－（２－メトキシフェニル）－１－ピペラジニル］エチル）－８－アザスピロ［４．５］デカン－７，９－ジオン）、アトモキセチン又はベンラファキシンである請求項３３に記載の方法。

【請求項50】

前記５ＨＴ受容体作動薬が、トラゾドン又はその医薬的に許容される塩である請求項３３に記載の方法。

【請求項51】

５ＨＴ受容体をクレミゾール、クレミゾールアナログ又はその医薬的に許容される塩と接触させることを含む５ＨＴ受容体の活性の調節方法。

【請求項52】

前記調節が、活性化である請求項５１に記載の方法。

【請求項53】

前記５ＨＴ受容体が、５ＨＴ_２Ａ受容体又は５ＨＴ_２Ｂ受容体である請求項５１に記載の方法。

【請求項54】

脳内のセロトニンの不足により又は１種以上の５ＨＴ受容体の活動下で生じる疾患又は障害の治療方法であって、前記治療を必要とする対象に治療有効量のクレミゾール、クレミゾールアナログ又はその医薬的に許容される塩を投与することを含む前記方法。

【請求項55】

前記疾患又は障害が、癲癇以外のものである請求項５４に記載の方法。

【請求項56】

前記疾患又は障害が、ドラベ症候群以外のものである請求項５４に記載の方法。

【請求項57】

前記疾患又は障害が、片頭痛、脆弱Ｘ症候群、プラダー・ウィリー症候群、統合失調症、鬱病、アルツハイマー病、自閉症、神経障害性疼痛、パーキンソン病、過敏性腸症及び認知症から構成される群から選択される請求項５１に記載の方法。

【請求項58】

前記医薬的に許容される塩が、クレミゾールＨＣｌである請求項５０に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本開示は５ＨＴ受容体作動薬又はその医薬的に許容される塩を使用した癲癇症の治療方法を提供する。

【背景技術】

【0002】

ドラベ症候群（ＤＳ）は重度の知的障害、社会的発達障害及び持続性薬物耐性発作を伴う悲劇的な小児癲癇である。その主原因の１つは電位依存性ナトリウムチャネルであるＮａｖ１．１（ＳＣＮ１Ａ）の突然変異である。ＤＳ及び他の癲癇症患者に生じる発作は入手可能な抗癲癇薬（ＡＥＤ）を使用して十分に管理されず、ＤＳの小児は脳神経外科的切除の候補としては不適切である。従って、癲癇治療オプション、特にＤＳ及び関連する悲劇的な小児癲癇の治療オプションが当分野で必要とされている。本願はこれらの問題及び当分野の他の問題の解決方法を提供する。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0003】

本願は特に５ＨＴ作動薬又はその医薬的に許容される塩を使用した癲癇症の治療方法を提供する。１態様において、前記方法は前記治療を必要とする対象に治療有効量の５ＨＴ作動薬、５ＨＴ作動薬アナログ又はその医薬的に許容される塩を投与することを含む。別の態様において、前記方法は前記治療を必要とする対象に治療有効量の５ＨＴ作動薬、５ＨＴ作動薬アナログ又はその医薬的に許容される塩を含有する医薬組成物を投与することを含む。更に本願は癲癇症の治療用医薬組成物も提供する。

【課題を解決するための手段】

【0004】

本開示の１態様によると、癲癇症の治療方法は癲癇症をもつ患者に治療有効量の５ＨＴ受容体作動薬又はその医薬的に許容される塩を投与する段階を含むことができる。

【0005】

代表的な実施形態において、前記５ＨＴ作動薬は５ＨＴ_２Ａ受容体作動薬又は５ＨＴ_２Ｂ受容体作動薬とすることができる。所定の代表的な実施形態において、前記５ＨＴ作動薬はＡＣＰ－１０４、ＡＣＰ－１０６、ＡＲ－１１６０８１、ＡＲ－１１６０８２、ＡＴＨＸ－１０５、ベラドンナとエルゴタミン酒石酸塩の併用、ＢＷ７２３Ｃ８６、シサプリド、Ｃｉｚａ－ＭＰＳ、Ｃｉｚａｐ、Ｃｉｚａｐ－Ｍｐｓ、ＣＳＣ－５００シリーズ、ＤＯＩもしくはその塩（例えばＨＣｌ）、エルゴタミン酒石酸塩・カフェイン、Ｅｓｏｒｉｄ ＭＰＳ、フリバンセリン、Ｉｋａｒａｎ Ｌ．Ｐ．、Ｍａｎｏｔａｃ Ｐｌｕｓ、Ｍｉｇｒｉｌ、Ｍｉｒｔａｚａｐｉｎａ Ｒｉｍａｆａｒ、ミルタザピン、ナラトリプタン、ネロタンセリン、ノルフェンフルラミン、Ｎｏｒｍａｇｕｔ Ｔａｂ、ネファゾドン塩酸塩、ＯＳＵ－６１６２、Ｐｒｉｄｏｆｉｎ、Ｓｅｎｓｉｆｌｕ、ＰＲＸ－００９３３、ＲＰ－５０６３、炎症性疾患を対象として５－ＨＴ_２Ａを活性化させるための低分子、統合失調症と肥満症を対象として５－ＨＴ_２Ｃを活性化させるための低分子、肥満症を対象として５－ＨＴ_２Ｃ受容体を活性化させるための低分子、統合失調症を対象ととして５－ＨＴ_２Ｃ及び５－ＨＴ_６受容体を標的とする低分子、ＣＮＳ及び代謝障害を対象として５ＨＴ_２を調節するための低分子、ＴＧＢＡ－０１ＡＤ、トラゾドン塩酸塩、テマノグレル塩酸塩、バビカセリン塩酸塩、Ｖｉｒｄｅｘ、ＶＲ－１０６５、ジプラシドン塩酸塩及び／又はジプラシドン－シジラータのいずれか１種以上とすることができると予想される。

【0006】

所定の代表的な実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬はクレミゾール又はフェンフルラミン以外のものであると予想される。所定の代表的な実施形態において、更に前記５ＨＴ受容体作動薬はアセタゾラミド、ベンゾジアゼピン（ジアゼパム、クロバザム）、カンナビジオール、カルバマゼピン、クレミゾール、エトスクシミド、フェルバメート、フェンフルラミン、フルオキセチン、ガバペンチン、ガナキソロン、ラコサミド、ラモトリギン、レベチラセタム、ニトラゼパム、オクスカルバゼピン、ペランパネル、フェニトイン、フェノバルビタール、ピラセタム、臭化カリウム、プレガバリン、プリミドン、レチガビン、ルフィナミド、スチリペントール、チアガビン、トピラマート、バルプロ酸、ベラパミル、ビガバトリン及び／又はゾニサミド以外のものであると予想される。

【0007】

代表的な実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬は５ＨＴ受容体と直接結合する。代表的な実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬は５ＨＴ受容体を特異的に活性化させる。

【0008】

代表的な実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬は５ＨＴ_２Ｃ受容体により介在される活性を同等以下にしながら５ＨＴ_２Ａ受容体又は５ＨＴ_２Ｂ受容体により介在される活性を増加させる。

【0009】

代表的な実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬は５ＨＴ_２Ａ受容体と５ＨＴ_２Ｂ受容体の両方の作動薬である。

【0010】

代表的な実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬はセロトニン再取り込み阻害薬以外のものである。

【0011】

代表的な実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬は５ＨＴ_１Ａ、５ＨＴ_１Ｂ、５ＨＴ_１Ｄ、５ＨＴ_２Ｃ、５ＨＴ_３、５ＨＴ_４（例えば５ＨＴ_４ｅ）、５ＨＴ_６、５ＨＴ_７、ＮＰＹ Ｙ１受容体、Ｌ型Ｃａチャネル、Ｎ型Ｃａチャネル、ＳＫ－Ｃａチャネル、ＧＡＢＡ依存性Ｃｌチャネル、ＧＡＢＡトランスポーター、ＧＡＢＡ－Ａ１受容体、ＧＡＢＡ－Ｂ１ｂ受容体、Ｎａチャネル、５ＨＴトランスポーター、ＣＢ１受容体、ＣＢ２受容体、ＢＺＤ又はエストロゲンＥＲαの少なくとも１種と有意に結合しないか又はその活性を調節しない。

【0012】

代表的な実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬はフリバンセリン、２，５－ジメトキシ－４－ヨードアンフェタミン一塩酸塩（ＤＯＩ ＨＣｌ）、ノルフェンフルラミン又はＢＷ７２３Ｃ８６のいずれか１種以上である。

【0013】

代表的な実施形態において、前記癲癇症はドラベ症候群、レノックス・ガストー症候群、点頭癲癇又は大田原症候群である。代表的な実施形態において、前記癲癇症はドラベ症候群である。代表的な実施形態において、前記癲癇症は小児癲癇症である。

【0014】

代表的な実施形態において、前記対象は心血管疾患をもつ。

【0015】

代表的な実施形態において、前記対象はセロトニン再取り込み阻害薬による治療に耐性である。

【0016】

代表的な実施形態において、前記対象はセロトニン再取り込み阻害薬を投与した場合の副作用に感受性である。代表的な実施形態において、前記セロトニン再取り込み阻害薬はフェンフルラミンである。

【0017】

代表的な実施形態において、前記対象はケト原性食を摂取している。

【0018】

代表的な実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬は癲癇対象、アルツハイマー病対象、自閉症対象又はパーキンソン病対象における強迫行為又はエレクトログラフ発作を抑制する。

【0019】

代表的な実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬は前記５ＨＴ受容体作動薬の不在下と比較した場合に前記対象における非誘発性発作の発生を抑制する。

【0020】

代表的な実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬の投与は５ＨＴ受容体作動薬の不在下と比較した場合に前記対象におけるミオクローヌス発作又は癲癇重積状態を抑制又は予防する。

【0021】

代表的な実施形態では、前記５ＨＴ受容体作動薬を体重１ｋｇ当たり約０．１ｍｇ～約１０００ｍｇの量で前記対象に投与する。

【0022】

代表的な実施形態では、前記５ＨＴ受容体作動薬を体重１ｋｇ当たり約０．１ｍｇ～約１０００ｍｇの１日用量で前記対象に投与する。

【0023】

代表的な実施形態では、前記５ＨＴ受容体作動薬を抗癲癇薬（ＡＥＤ）と併用投与する。代表的な実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬は抗癲癇薬（ＡＥＤ）の補助療法である。代表的な実施形態において、前記ＡＥＤはアセタゾラミド、ベンゾジアゼピン、カンナビジオール、カルバマゼピン、クロバザム、クロナゼパム、エスリカルバゼピン酢酸塩、エトスクシミド、エトトイン、フェルバメート、フェンフルラミン、フォスフェニトイン、ガバペンチン、ガナキソロン、フペルジンＡ、ラコサミド、ラモトリギン、レベチラセタム、ニトラゼパム、オクスカルバゼピン、ペランパネル、ピラセタム、フェノバルビタール、フェニトイン、臭化カリウム、プレガバリン、プリミドン、レチガビン、ルフィナミド、バルプロ酸、バルプロ酸ナトリウム、スチリペントール、チアガビン、トピラマート、ビガバトリン又はゾニサミドである。代表的な実施形態において、前記ＡＥＤはバルプロ酸、バルプロ酸ナトリウム、クロナゼパム、エトスクシミド、フェルバメート、ガバペンチン、カルバマゼピン、オクスカルバゼピン、ラモトリギン、レベチラセタム、ベンゾジアゼピン、フェノバルビタール、プレガバリン、プリミドン、チアガビン、トピラマート、臭化カリウム、フェニトイン、スチリペントール、ビガバトリン又はゾニサミドである。代表的な実施形態において、前記ＡＥＤはバルプロ酸、バルプロ酸ナトリウム、ガバペンチン、トピラマート、カルバマゼピン、オクスカルバゼピン又はビガバトリンである。

【0024】

代表的な実施形態において、前記ＡＥＤはトピラマート以外のものである。

【0025】

代表的な実施形態において、前記ＡＥＤはフェンフルラミン以外のものである。

【0026】

代表的な実施形態では、前記ＡＥＤを前記５ＨＴ受容体作動薬と同時又は順次投与する。

【0027】

別の態様において、本開示は癲癇症の治療方法を提供し、前記方法は前記治療を必要とする対象に治療有効量の５ＨＴ受容体作動薬又はその医薬的に許容される塩を投与することを含み、前記対象は心血管疾患をもつか、セロトニン再取り込み阻害薬による治療に耐性であるか、又はセロトニン再取り込み阻害薬を投与した場合の副作用に感受性である。

【0028】

代表的な実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬は５ＨＴ_２Ａ受容体作動薬又は５ＨＴ_２Ｂ受容体作動薬である。代表的な実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬はクレミゾール、クレミゾールアナログ又はその医薬的に許容される塩である。代表的な実施形態において、前記医薬的に許容される塩はクレミゾールＨＣｌである。

【0029】

複数の実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬はスマトリプタン、ナラトリプタン、リザトリプタン、ゾルミトリプタン、ウラピジル、ＢＲＬ－５４４４３（３－（１－メチルピペリジン－４－イル）－１Ｈ－インドール－５－オール）、ロルカセリン、ブスピロン、ジプラシドン、ＴＣＢ－２（（４－ブロモ－３，６－ジメトキシベンゾシクロブテン－１－イル）メチルアミン臭化水素酸塩）、ＢＲＬ－１５５７２（３－（４－（４－クロロフェニル）ピペラジン－１－イル）－１，１－ジフェニル－２－プロパノール）、トラゾドン、ＢＭＹ７３７８（８－（２－［４－（２－メトキシフェニル）－１－ピペラジニル］エチル）－８－アザスピロ［４．５］デカン－７，９－ジオン）、アトモキセチン及びベンラファキシンである。複数の実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬はスマトリプタンである。複数の実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬はナラトリプタンである。複数の実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬はリザトリプタンである。複数の実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬はゾルミトリプタンである。複数の実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬はウラピジルである。複数の実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬はＢＲＬ－５４４４３（３－（１－メチルピペリジン－４－イル）－１Ｈ－インドール－５－オール）である。複数の実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬はロルカセリンである。複数の実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬はブスピロンである。複数の実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬はジプラシドンである。複数の実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬はＴＣＢ－２（（４－ブロモ－３，６－ジメトキシベンゾシクロブテン－１－イル）メチルアミン臭化水素酸塩）である。複数の実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬はＢＲＬ－１５５７２（３－（４－（４－クロロフェニル）ピペラジン－１－イル）－１，１－ジフェニル－２－プロパノール）である。複数の実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬はトラゾドンである。複数の実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬はＢＭＹ７３７８（８－（２－［４－（２－メトキシフェニル）－１－ピペラジニル］エチル）－８－アザスピロ［４．５］デカン－７，９－ジオン）である。複数の実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬はアトモキセチンである。複数の実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬はベンラファキシンである。

【0030】

複数の実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬はトラゾドン又はその医薬的に許容される塩である。

【0031】

代表的な実施形態において、クレミゾール、前記クレミゾールアナログ又は前記その医薬的に許容される塩は医薬組成物の一部を形成する。代表的な実施形態において、前記医薬組成物は更に医薬的に許容される賦形剤を含有する。代表的な実施形態において、前記医薬組成物は治療有効量のクレミゾール、前記クレミゾールアナログ又は前記その医薬的に許容される塩を含有する。

【0032】

代表的な実施形態では、前記医薬組成物を抗癲癇薬（ＡＥＤ）と併用投与する。代表的な実施形態において、前記医薬組成物はクレミゾール、前記クレミゾールアナログ又は前記その医薬的に許容される塩と、ＡＥＤを含有する。代表的な実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬はフェンフルラミン以外のものである。代表的な実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬は５ＨＴ受容体と直接結合する。

【0033】

代表的な実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬は５ＨＴ受容体を特異的に活性化させる。代表的な実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬は５ＨＴ_２Ｃ受容体により介在される活性を同等以下にしながら５ＨＴ_２Ａ受容体又は５ＨＴ_２Ｂ受容体により介在される活性を増加させる。代表的な実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬は５ＨＴ_２Ａ受容体と５ＨＴ_２Ｂ受容体の両方の作動薬である。

【0034】

代表的な実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬はセロトニン再取り込み阻害薬以外のものである。

【0035】

代表的な実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬は５ＨＴ_１Ａ、５ＨＴ１_Ｂ、５ＨＴ_１Ｄ、５ＨＴ_２Ｃ、５ＨＴ_３、５ＨＴ_４（例えば５ＨＴ_４ｅ）、５ＨＴ_６、５ＨＴ_７、ＮＰＹ Ｙ１受容体、Ｌ型Ｃａチャネル、Ｎ型Ｃａチャネル、ＳＫ－Ｃａチャネル、ＧＡＢＡ依存性Ｃｌチャネル、ＧＡＢＡトランスポーター、ＧＡＢＡ－Ａ１受容体、ＧＡＢＡ－Ｂ１ｂ受容体、Ｎａチャネル、５ＨＴトランスポーター、ＣＢ１受容体、ＣＢ２受容体、ＢＺＤ又はエストロゲンＥＲαの少なくとも１種と有意に結合しない。

【0036】

別の態様において、本開示は５ＨＴ受容体をクレミゾール、クレミゾールアナログ又はその医薬的に許容される塩と接触させることを含む５ＨＴ受容体の活性の調節方法を提供する。

【0037】

代表的な実施形態において、前記調節は活性化である。

【0038】

代表的な実施形態において、前記５ＨＴ受容体は５ＨＴ_２Ａ受容体又は５ＨＴ_２Ｂ受容体である。

【0039】

別の態様において、本開示は脳内のセロトニンの不足により又は１種以上の５ＨＴ受容体の活動下で生じる疾患又は障害の治療方法として、前記治療を必要とする対象に治療有効量のクレミゾール、クレミゾールアナログ又はその医薬的に許容される塩を投与することを含む方法を提供する。

【0040】

代表的な実施形態において、前記疾患又は障害は癲癇以外のものである。

【0041】

代表的な実施形態において、前記疾患又は障害はドラベ症候群以外のものである。

【0042】

代表的な実施形態において、前記疾患又は障害は片頭痛、脆弱Ｘ症候群、プラダー・ウィリー症候群、統合失調症、鬱病、アルツハイマー病、自閉症、神経障害性疼痛、パーキンソン病、過敏性腸症及び認知症から構成される群から選択される。

【0043】

１態様では、脳内のセロトニンの不足により又は１種以上の５ＨＴ受容体の活動下で生じる疾患又は障害の治療用としての、クレミゾール、クレミゾールアナログ又はその医薬的に許容される塩を含有する医薬組成物を提供する。

【0044】

上記態様の複数の実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬は５ＨＴ１Ａ、５ＨＴ１Ｂ、５ＨＴ１Ｄ、５ＨＴ３、５ＨＴ４ｅ、ＧＡＢＡＡ１、ＧＡＢＡＢ_（１ｂ）、ＢＺＤ、ＣＢ_１、ＣＢ_２、ＧＡＢＡ依存性Ｃｌチャネル、ＳＫ－Ｃａチャネル又はＧＡＢＡトランスポーターの少なくとも１種と有意に結合しないか又はその活性を調節（例えば阻害）しない。複数の実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬は５ＨＴ１Ａ、５ＨＴ１Ｂ、５ＨＴ１Ｄ、５ＨＴ３、５ＨＴ４ｅ、ＧＡＢＡＡ１、ＧＡＢＡＢ_（１ｂ）、ＢＺＤ、ＣＢ_１、ＣＢ_２、ＧＡＢＡ依存性Ｃｌチャネル、ＳＫ－Ｃａチャネル及びＧＡＢＡトランスポーターと有意に結合しないか又はその活性を調節（例えば阻害）しない。

【0045】

上記態様の複数の実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬は基準モジュレーター（例えば当分野で広く使用されているような天然又は公知モジュレーター）に比較して約５０％未満の割合で標的を調節する。複数の実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬は基準モジュレーター（例えば当分野で広く使用されているような天然又は公知モジュレーター）に比較して約４０％未満の割合で標的を調節する。複数の実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬は基準モジュレーター（例えば当分野で広く使用されているような天然又は公知モジュレーター）に比較して約３０％未満の割合で標的を調節する。複数の実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬は基準モジュレーター（例えば当分野で広く使用されているような天然又は公知モジュレーター）に比較して約２０％未満の割合で標的を調節する。複数の実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬は基準モジュレーター（例えば当分野で広く使用されているような天然又は公知モジュレーター）に比較して約１０％未満の割合で標的を調節する。

【0046】

上記態様の複数の実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬が基準阻害薬（例えば当分野で広く使用されているような天然又は公知阻害薬）に比較して約５０％未満の割合で標的を調節（例えば阻害）できないときに前記５ＨＴ受容体作動薬は前記活性を有意に調節しない。複数の実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬が基準阻害薬（例えば当分野で広く使用されているような天然又は公知阻害薬）に比較して約４０％未満の割合で標的を調節（例えば阻害）できないときに前記５ＨＴ受容体作動薬は前記活性を有意に調節しない。複数の実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬が基準阻害薬（例えば当分野で広く使用されているような天然又は公知阻害薬）に比較して約３０％未満の割合で標的を調節（例えば阻害）できないときに前記５ＨＴ受容体作動薬は前記活性を有意に調節しない。複数の実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬が基準阻害薬（例えば当分野で広く使用されているような天然又は公知阻害薬）に比較して約２０％未満の割合で標的を調節（例えば阻害）できないときに前記５ＨＴ受容体作動薬は前記活性を有意に調節しない。複数の実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬が基準阻害薬（例えば当分野で広く使用されているような天然又は公知阻害薬）に比較して約１０％未満の割合で標的を調節（例えば阻害）できないときに前記５ＨＴ受容体作動薬は前記活性を有意に調節しない。複数の実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬が基準阻害薬（例えば当分野で広く使用されているような天然又は公知阻害薬）に比較して約５％未満の割合で標的を調節（例えば阻害）できないときに前記５ＨＴ受容体作動薬は前記活性を有意に調節しない。

【図面の簡単な説明】

【0047】

【図1A】ｓｃｎ１Ｌａｂゼブラフィッシュ突然変異体の分子特性解析。配列決定により、ｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体ｃＤＮＡにおけるＴ→Ｇ突然変異が確認された。

【図1B】ｑＰＣＲを使用してｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体では同腹対照に比較して３ｄｐｆ、５ｄｐｆ及び７ｄｐｆで発現が低下していることを検証した。データは平均±Ｓ．Ｅ．Ｍ．として表し、＊はスチューデントのｔ検定でｐ＜０．０５と判定される有意性を表す。データは内部標準遺伝子β－アクチンに正規化した。数値は３種類の発生段階の各々について５個の独立した生体試料（１サンプル＝１０匹の幼生プール）からの平均を表す。データは±Ｓ．Ｅ．Ｍ．として表し、＊はスチューデントのｔ検定でｐ＜０．０５と判定される有意性を表す。

【図1C】５ｄｐｆのＮａ_ｖ１．１突然変異体（ｎ＝５）と同腹対照（ｎ＝５）におけるｓｃｎ８ａａとｓｃｎ８ａｂの相対発現。データはＢと同様に表す。

【図1D】３ｄｐｆ、５ｄｐｆ及び７ｄｐｆの幼生ゼブラフィッシュにおけるｓｃｎ１Ｌａｂのホールマウントｉｎ ｓｉｔｕハイブリダイゼーション。野生型幼生を側面図で示し、発現を濃紫色で示す。比較のために３ｄｐｆのＳｃｎ１Ｌａａ発現を示す。５ｄｐｆと７ｄｐｆの図では心臓を矢尻により示す。

【図1E】３ｄｐｆにおけるｓｃｂ１Ｌａａ発現の背面図。幼生ゼブラフィッシュＣＮＳに対応する領域の顕著な発現に注目されたい。略語：Ｔｅｌ，終脳；ＴｅＯ，視蓋；Ｃｂ，小脳。スケールバー＝Ｄでは０．３５ｍｍ、Ｅでは０．２ｍｍ。

【図2A】ｓｃｎ１Ｌａｂゼブラフィッシュ突然変異体のマイクロアレイ解析。５ｄｐｆのｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体と同腹対照の幼生で発現の異なる遺伝子の発現を示すヒートマップ。横列は個々の遺伝子を表す。縦列は各幼生を表す。対照に比較してｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体で高度に発現される遺伝子を示す。

【図2B】全４４，０００個の遺伝子の正規化マイクロアレイデータのＭＡプロット。対数比Ｍと平均蛍光強度Ａは繰返し測定した全測定値の平均として計算した。

【図2C】ｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体と同腹対照の間で最大の発現差を示す上位３０種類の遺伝子のリスト。

【図3A】ｓｃｎ１Ｌａｂゼブラフィッシュ突然変異体の定量的ＲＴ－ＰＣＲ解析。マイクロアレイ解析（アレイ）とリアルタイムｑＰＣＲ解析により得られた遺伝子発現変化倍率の比較。ｙ軸は５ｄｐｆのゼブラフィッシュからの各遺伝子の遺伝子発現の平均変化倍率を表す。ｘ軸は種々の遺伝子を表す。

【図3B】癲癇発生に関与する３種類の遺伝子のｑＰＣＲ解析。相対遺伝子発現を最低量の転写産物に対するｌｏｇ２比（ｌｏｇ２ΔΔｃｔ）として表す。データは内部標準遺伝子β－アクチンに対して正規化した。数値は５個の独立した生体試料（１サンプル幼生１０匹のプール）からの平均を表す。各棒はＳ．Ｅ．Ｍ．を示し、＊はｔ検定でｐ＜０．０５である。

【図3C】５ｄｐｆのｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体で検出された発現の異なる遺伝子の遺伝子オントロジー分類（ＡＮＯＶＡ片側検定でｐ＜０．０５及び変化倍率＞１．５）。少なくとも１分類に少なくとも５個の遺伝子アノテーションを表す生物学的プロセスを示す。

【図4A】ｓｃｎ１Ｌａｂゼブラフィッシュ突然変異体における自発性発作。固定化・寒天包埋したゼブラフィッシュ幼生を示す。５ｄｐｆの同腹対照（Ａ、左）とｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体（Ａ、中央）の幼生で前脳電気生理学的記録中にオリンパス正立顕微鏡で４倍対物レンズと２倍接眼レンズを使用して画像を得た。突然変異体の暗色着色に注目されたい。図Ａ１～２には記録用電極が認められ、Ａの右図には代表的なＨｕＣ：ＧＦＰ標識幼生を使用して前脳における記録電極チップのおおよその位置（赤丸）を示す。スケールバー：１００μｍ。

【図4B】５ｄｐｆの同腹対照（Ｂ、左）とｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体（Ｂ、右）の幼生のサンプル移動運動追跡プロット。

【図4C】麻痺させて固定化・寒天包埋した３～７ｄｐｆのｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体幼生の前脳で得られた代表的な１０分間記録エポック。大小振幅の自発性バースト放電が存在し、発作活動が更に時間的に拡大していることに注目されたい。同一の記録条件下の５ｄｐｆの同腹対照幼生からの代表的な記録も示す。スケールバー：２ｍＶ、３０秒。

【図5A】ｓｃｎ１Ｌａｂゼブラフィッシュ突然変異体の薬理学的検証。９種類の異なるＡＥＤに対する反応を示すヒートマップ。各縦列は１個毎のゼブラフィッシュ突然変異体のバースト頻度の変化百分率（基線－薬物／基線×１００）を表す。発作イベントを抑制する薬物をダークブルーで示す。全薬物は１ｍＭの濃度で試験した。試験によっては、カルバマゼピンとビガバトリンが初期基線レベルよりもバースト頻度を高めていることに注目されたい。

【図5B】ヒートマップに示したデータのバースト頻度と標準偏差の平均変化のプロット。正規性検定に失敗したデータの対応のあるｔ検定又はウィルコキソンの順位和検定は以下のような有意性を示した。ジアゼパム（ｐ＝０．００２；ｎ＝７）、臭化カリウム（ｐ＝０．０１６；ｎ＝７）、スチリペントール（ｐ＝０．０２４；ｎ＝７）、及びバルプロ酸塩（ｐ＝０．００４；ｎ＝７）。

【図5C】図５Ａに示した全試験のバースト持続時間のプロット。データは基線時（黒棒）と薬物暴露後（白棒）のエレクトログラフ発作イベントの平均±Ｓ．Ｅ．Ｍ．として表す。挿入図はスチリペントール試験中の代表的な２分間の記録を示す；スケールバー：高倍率のトレースでは１ｍＶ、１秒；低倍率のトレースでは１ｍＶ、１００ミリ秒。

【図5D】図５Ａに示した全試験の発作に費やされた時間の割合のプロット。データは基線時（黒棒）と薬物暴露後（白棒）のエレクトログラフ発作イベントの平均±Ｓ．Ｅ．Ｍ．として表す。正規性検定に失敗したデータのスチューデントのｔ検定又はマン－ホイットニーの順位和検定は以下のような有意性を示した。ジアゼパム（ｐ＝０．００１；ｎ＝７）；臭化カリウム（ｐ＝０．０４３；ｎ＝７）；スチリペントール（ｐ＝０．００７；ｎ＝７）及びバルプロ酸塩（ｐ＝０．００７；ｎ＝７。

【図5E】ｓｃｎ１Ｌａｂゼブラフィッシュ突然変異体の薬理学的検証。胚培養液（上段）又は４８時間ケト原性食給餌で飼育した個々の突然変異体幼生１０匹の移動運動追跡プロット。プロットは遊泳速度と移動運動追跡を示し、色が濃いほど速度が早く、１０分間の試験を示す。

【図5F】図５Ｅに示したと同一の魚からの代表的な１０分間細胞外記録エポックであり、代表例を移動運動プロットに＊により示す。スケールバー：１ｍＶ、３０秒。挿入図は時間分解能を高くした場合のバーストを示す（＃により示す）；スケールバー：１ｍＶ、１００ミリ秒。

【図6A】ｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体癲癇表現型を回復させる薬物を同定するためのスクリーニング。胚培養液における突然変異体幼生の２日間連続記録の平均速度（ｍｍ／秒）の箱ひげ図。先ず突然変異体幼生を胚培養液に入れて基線移動運動反応を得ることにより実験を実施し、その後、（試験化合物に使用した手順に似せるために）胚培養液を新しい胚培養液に交換し、第２の移動運動反応を得た。基線（記録＃１）と実験（記録＃２）からの速度の変化百分率を示す。この箱ひげ図では、箱の下端と上端は夫々２５パーセンタイルと７５パーセンタイルを表す。箱を横切る線は中央値を表し、縦線は全範囲の数値を含む。このプロットは薬物チャレンジの不在下の活動を追跡した場合の通常の変化を表す。

【図6B】５ｄｐｆのｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体における移動運動発作行動に及ぼす１１種類の公知抗癲癇薬の効果のプロット。９６ウェルフォーマットで表現型アッセイを実施した（例えば図５Ｃ１参照）。各棒は突然変異体発作活動の基線記録を薬物投与後の同一突然変異体と比較した平均速度の変化の百分率を表す。全薬物試験で実験毎に６～１２匹を使用した。薬物は濃度１ｍＭで試験し、３４％（Ｂの点線に相当し、対照記録の標準偏差を上回る変化倍率を表す）を上回る速度変化として測定した場合に、ジアゼパム（Ｄｚｐ；ｐ＜０．００１）、カルバマゼピン（Ｃａｒｂ，ｐ＝０．０２４）、ガナキソロン（Ｇａｎ；ｐ＝０．００３）、スチリペントール（Ｓｔｐ；ｐ＝０．００１）、バルプロ酸塩（Ｖｐａ，ｐ＝０．０２６）及びケト原性食への４８時間暴露（ＫＤ；ｐ＝０．００３）は発作活動を抑制した。アセタゾラミド（Ａｃｅｔ，ｐ＜０．００１）とエトスクシミド（Ｅｔｘ；ｐ＝０．２５０）は発作行動を亢進させ、レベチラセタム（Ｌｅｖ；ｐ＝０．２４３）とラモトリギン（Ｌｔｇ；ｐ＝０．０５８）は効果がなかった。

【図6C】試験した３２０種類の化合物に関する５ｄｐｆのｓｃｎ１Ｌａａｂ突然変異体の移動運動発作行動のプロット。色付き丸は陽性ヒットを表し、活動を１００％抑制した化合物は一般に毒性であり、試験毎に６～１２匹を試験した。矢尻は最初のクレミゾール試験を表す。予想通り、化合物によっては発作活動を亢進させていることに注目されたい。

【図6D】薬物毎に１００μＭ、試験毎に１０匹で５ｄｐｆの別クラッチのｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体における薬物再試験のプロット。略語：Ｃｌｅｍ，クレミゾール；Ｃｌｅｍ＋ＰＴＺ，クレミゾール＋１５ｍＭ ＰＴＺ；Ｃｌｏｒｇ，クロルギリン；Ｔｏｌｐ，トルペリゾン；Ｚｏｘ，ゾキサゾラミン。ＰＴＺにより誘発させた発作行動に及ぼす急性クレミゾールの効果を野生型幼生について示す。各棒は平均±Ｓ．Ｅ．Ｍ．を表す。図Ｂ及びＤでは、対応のあるスチューデントのｔ検定又はマン－ホイットニーの順位和検定で有意性をｐ＝０．０１（＊）又はｐ＜０．００１（＊＊）に設定した。

【図6E】先ず移動運動アッセイ（図Ｄ）でクレミゾールに暴露した後に前脳細胞外記録電極を使用してモニターしたｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体からのサンプル電気生理学的記録（上段；発作時様バーストを挿入図に示す）。未処理Ｎａ_ｖ１．１突然変異体（中段）とゾキサゾラミンを投与した突然変異体（下段）について同様のトレースを示す。バーストの解析結果は未処理突然変異体（ｎ＝３）ではバースト頻度＝１．５±０．３回／分、バースト持続時間＝９２６±４１４ミリ秒、発作に費やされた時間の割合＝０．７３±０．１７％であったのに対して、クレミゾールを投与した突然変異体（ｎ＝７）ではバースト頻度＝０．２±０．０１回／分、バースト持続時間＝１５４±１２７ミリ秒、発作に費やされた時間の割合＝０．０３±０．０２％であり、全ての比較についてクルスカル・ウォリスＡＮＯＶＡとダンの多重対比較検定でｐ＝０．００１であった。スケールバー：高倍率のトレースでは０．５ｍＶ、１０秒；挿入図では０．５ｍＶ、１００ミリ秒。

【図7A】ｓｃｎ１Ｌａａ突然変異体におけるクレミゾール活性の確認。麻痺させて固定化・寒天包埋した６ｄｐｆのｓｃｎ１Ｌａａ突然変異体幼生の前脳で得られた代表的な１０分間記録エポック。大小振幅の自発性バースト放電の存在に注目されたい。

【図7B】個々の突然変異体及び野生型同腹幼生１０匹の移動運動追跡プロット。プロットは遊泳速度と移動運動トラックを示し、色が濃いほど速度が早く、１０分間の試験を示す。Ｂａｒａｂａｎ ｅｔ ａｌ．（Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ ２００５）に記載されているステージングシステムで発作を採点した。Ｓ０，遊泳活動が殆ど又は全くない；Ｓ１，移動運動亢進；Ｓ２，渦様遊泳活動；Ｓ３，速度の速い遊泳イベントと姿勢異常を伴う全身痙攣。

【図7C】ゼブラフィッシュ９６匹と、上記発作ステージに基づいて推定ｓｃｎ１Ｌａａ及び同腹対照プールに分類された魚の平均速度（ｍｍ／秒）の箱ひげ図。先ず突然変異体幼生を胚培養液に入れて基線移動運動反応を得ることにより実験を実施し、その後、胚培養液を新しい胚培養液に交換し、第２の移動運動反応を得た。基線（記録＃１）と実験（記録＃２）からの速度の変化百分率を示す。この箱ひげ図では、箱の下端と上端は夫々２５パーセンタイルと７５パーセンタイルを表す。箱を横切る線は中央値を表し、縦線は全範囲の数値を含む。全９６匹の魚（左）、推定ｓｃｎ１Ｌａａゼブラフィッシュ（中央）及び同腹対照（左）についてプロットを示す。その後、ＰＣＲ解析を実施し、突然変異体と対照のプールを確認した。

【図7D】５ｄｐｆのｓｃｎ１Ｌａａ突然変異体における移動運動発作行動に及ぼすスチリペントール（Ｓｔｐ）、ジアゼパム（Ｄｚｐ）、クレミゾール（Ｃｌｅｍ）及びラモトリギン（Ｌｔｇ）の効果のプロット。薬物投与前後の平均速度を示す。Ｎ＝薬物毎に７匹。各棒は平均±Ｓ．Ｅ．Ｍ．を表す。対応のあるスチューデントのｔ検定又はマン－ホイットニーの順位和検定で有意性をｐ＝０．０１（＊）又はｐ＜０．００１（＊＊）に設定した。

【図8】抗ヒスタミン薬はｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体では抗癲癇性がない。５ｄｐｆのｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体を使用した移動運動発作アッセイにおける種々の抗ヒスタミン薬の効果のプロット。薬物投与前後の平均速度を示す。Ｎ＝薬物毎に７匹。その他の化合物を右側に記載する。各棒は平均±Ｓ．Ｅ．Ｍ．を表す。対応のあるスチューデントのｔ検定又はマン－ホイットニーの順位和検定で有意性をｐ＝０．０１（＊）又はｐ＜０．００１（＊＊）に設定した。このアッセイでは抗ヒスタミン薬によっては発作活動が亢進していることに注目されたい。

【図9A】ｓｃｎ１Ｌａｂにおけるクレミゾール濃度－反応試験１。２回の異なる濃度－反応試験からのプロットであり、基線値からの平均速度の阻害百分率を示す。濃度毎にＮ＝７匹とし、別クラッチの突然変異体幼生で試験を行った。

【図9B】ｓｃｎ１Ｌａｂにおけるクレミゾール濃度－反応試験２。２回の異なる濃度－反応試験からのプロットであり、基線値からの平均速度の阻害百分率を示す。濃度毎にＮ＝７匹とし、別クラッチの突然変異体幼生で試験を行った。

【図10】抗ヒスタミン性をもつ３４種類の異なる化合物を使用してシェルフスクリーニングを実施した。指定する全化合物を薬物毎に６～１０匹ずつ５ｄｐｆのｓｃｎ１Ｌａｂ幼生の自発性発作に対して試験した。移動運動追跡データプロットからの平均速度の変化として結果を示す。化合物は０．１～１ｍＭの濃度で試験した。陽性ヒットの閾値を破線により示す。３種類の化合物がこの閾値に達したが、全３種とも毒性であることが確認された（矢印）。

【図11】５ＨＴライブラリースクリーニング。試験した６２種類の化合物に関する５ｄｐｆのｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体の移動運動発作行動のプロット。発作活動（陽性ヒット）の阻害の閾値を平均遊泳速度の≧３８％の低下として設定し、痙攣誘発又は過興奮作用の閾値を平均遊泳速度の≧４４％の増加として設定した（緑色破線）。濃度２５０μＭ、薬物毎に６匹で化合物を試験した。化合物リストを下段に示し、陽性ヒットを（表に）グレーの網かけ又は（プロットに）黒丸で示した。

【図12A】種々の濃度のトラゾドンに３０分間（黒棒）又は９０分間（グレー棒）の薬物暴露時間で暴露した５ｄｐｆのｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体の平均速度の変化のプロット。発作活動（陽性ヒット）の阻害の閾値を平均遊泳速度の≧４０％の低下として設定した。トラゾドンは７５０μＭ（斜線）で毒性であった。薬物毎に６匹で化合物を試験した。

【図12B】。トラゾドン（癲癇発作イベントの抑制）又は対照薬物ＭＫ－８０１（癲癇イベントの抑制なし）に暴露したｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体幼生のサンプルＥＥＧトレース。

【発明を実施するための形態】

【0048】

「５ＨＴ受容体」又は「５－ヒドロキシトリプタミン受容体」とは、中枢神経系（ＣＮＳ）と末梢神経系（ＰＮＳ）に存在し、一般にセロトニン受容体のグループに属する１群のＧタンパク質共役型受容体（ＧＰＣＲ）とリガンド依存性イオンチャネル（ＬＧＩＣ）を意味する。５ＨＴ受容体は５ＨＴ_１（例えばＧ_ｉ／Ｇ_０タンパク質共役型受容体）、５ＨＴ_２（例えばＧ_ｑ／Ｇ_１１タンパク質共役型受容体）、５ＨＴ_３（例えばリガンド依存性Ｎａ^＋及びＫ^＋カチオンチャネル）、５ＨＴ_４（例えばＧ_ｓタンパク質共役型受容体）、５ＨＴ_５（例えばＧ_ｉ／Ｇ_０タンパク質共役型受容体）、５ＨＴ_６（例えばＧ_ｓタンパク質共役型受容体）及び５ＨＴ_７（例えばＧ_ｓタンパク質共役型受容体）の７つの受容体ファミリーに分けることができる。また、７つの５ＨＴ受容体ファミリーを更に多数のサブファミリーに細分することができる。例えば、５ＨＴ_１ファミリーは更に以下のサブファミリー、即ち（例えば血管とＣＮＳで機能することが知られており、嗜癖、攻撃性、不安、食欲、オートレセプター、血圧、心血管機能、嘔吐、心拍数、衝動性、記憶、気分、悪心、侵害受容、勃起、瞳孔拡張、呼吸、性行動、睡眠、社交性、体温調節及び血管収縮に関与しているらしい）５ＨＴ_１Ａ、（例えば血管とＣＮＳで機能することが知られており、嗜癖、攻撃性、不安、オートレセプター、学習、移動運動、記憶、気分、勃起、性行動及び血管収縮に関与しているらしい）５ＨＴ_１Ｂ、（例えば血管とＣＮＳで機能することが知られており、不安、オートレセプター、移動運動及び血管収縮に関与しているらしい）５ＨＴ_１Ｄ、（例えばＣＮＳで機能することが知られており、片頭痛に関与しているらしい）５ＨＴ_１Ｅを含む。別の例として、５ＨＴ_２ファミリーは以下のサブファミリー、即ち（例えば血管、ＣＮＳ、胃腸管、血小板、ＰＮＳ及び平滑筋で機能することが知られており、嗜癖、不安、食欲、認知、想像、学習、記憶、気分、知覚、性行動、睡眠、体温調節及び血管収縮に関与しているらしい）５ＨＴ_２Ａ、（例えば血管、ＣＮＳ、胃腸管、血小板、ＰＮＳ及び平滑筋で機能することが知られており、不安、食欲、心血管機能、胃腸運動、睡眠及び血管収縮に関与しているらしい）５ＨＴ_２Ｂ、及び（例えば血管、ＣＮＳ、胃腸管、血小板、ＰＮＳ及び平滑筋で機能することが知られており、嗜癖、不安、食欲、胃腸運動、移動運動、気分、勃起、性行動、睡眠、体温調節及び血管収縮に関与しているらしい）５ＨＴ_２Ｃに細分することができる。また、５ＨＴ_５ファミリーは更に以下のサブファミリー、即ち（例えばＣＮＳで機能するらしく、移動運動と睡眠に役割を果たし、更にオートレセプターとしても機能するらしい）５ＨＴ_５Ａと、（例えば齧歯類で機能すると思われ、ヒトでは偽遺伝子であるらしい）５ＨＴ_５Ｂに細分することができる。

【0049】

「５ＨＴ受容体作動薬」とは、５ＨＴ受容体作動薬の不在下に比較して又はセロトニンと同様に５ＨＴ受容体を活性化させる任意の薬剤を意味する。典型的な５ＨＴ受容体作動薬としては、限定されないが、ＡＣＰ－１０４、ＡＣＰ－１０６、ＡＲ－１１６０８１、ＡＲ－１１６０８２、ＡＴＨＸ－１０５、ベラドンナとエルゴタミン酒石酸塩の併用、ＢＷ７２３Ｃ８６、シサプリド、Ｃｉｚａ－ＭＰＳ、Ｃｉｚａｐ、Ｃｉｚａｐ－Ｍｐｓ、ＣＳＣ－５００シリーズ、ＤＯＩもしくはその塩、エルゴタミン酒石酸塩・カフェイン、Ｅｓｏｒｉｄ ＭＰＳ、フリバンセリン、Ｉｋａｒａｎ Ｌ．Ｐ．、Ｍａｎｏｔａｃ Ｐｌｕｓ、Ｍｉｇｒｉｌ、Ｍｉｒｔａｚａｐｉｎａ Ｒｉｍａｆａｒ、ミルタザピン、ナラトリプタン、ネロタンセリン、ノルフェンフルラミン、Ｎｏｒｍａｇｕｔ Ｔａｂ、ネファゾドン塩酸塩、ＯＳＵ－６１６２、Ｐｒｉｄｏｆｉｎ、Ｓｅｎｓｉｆｌｕ、ＰＲＸ－００９３３、ＲＰ－５０６３、炎症性疾患を対象として５－ＨＴ_２Ａを活性化させるための低分子、統合失調症と肥満症を対象として５－ＨＴ_２Ｃを活性化させるための低分子、肥満症を対象として５－ＨＴ_２Ｃ受容体を活性化させるための低分子、統合失調症を対象として５－ＨＴ_２Ｃ及び５－ＨＴ_６受容体を標的とする低分子、ＣＮＳ及び代謝障害を対象として５ＨＴ_２を調節するための低分子、ＴＧＢＡ－０１ＡＤ、トラゾドン塩酸塩、テマノグレル塩酸塩、バビカセリン塩酸塩、Ｖｉｒｄｅｘ、ＶＲ－１０６５、ジプラシドン塩酸塩及びジプラシドン－シジラータのいずれか１種以上が挙げられる。

【0050】

複数の実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬はスマトリプタン、ナラトリプタン、リザトリプタン、ゾルミトリプタン、ウラピジル、ＢＲＬ－５４４４３（３－（１－メチルピペリジン－４－イル）－１Ｈ－インドール－５－オール）、ロルカセリン、ブスピロン、ジプラシドン、ＴＣＢ－２（（４－ブロモ－３，６－ジメトキシベンゾシクロブテン－１－イル）メチルアミン臭化水素酸塩）、ＢＲＬ－１５５７２（３－（４－（４－クロロフェニル）ピペラジン－１－イル）－１，１－ジフェニル－２－プロパノール）、トラゾドン、ＢＭＹ７３７８（８－（２－［４－（２－メトキシフェニル）－１－ピペラジニル］エチル）－８－アザスピロ［４．５］デカン－７，９－ジオン）、アトモキセチン又はベンラファキシンである。

【0051】

複数の実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬はトラゾドンである。

【0052】

更に、所定の実施形態において、前記５ＨＴ受容体作動薬はアセタゾラミド、ベンゾジアゼピン（ジアゼパム；クロバザム）、カンナビジオール、カルバマゼピン、クレミゾール、エトスクシミド、フェルバメート、フェンフルラミン、フルオキセチン、ガバペンチン、ガナキソロン、ラコサミド、ラモトリギン、レベチラセタム、ニトラゼパム、オクスカルバゼピン、ペランパネル、フェニトイン、フェノバルビタール、ピラセタム、臭化カリウム、プレガバリン、プリミドン、レチガビン、ルフィナミド、スチリペントール、チアガビン、トピラマート、バルプロ酸、ベラパミル、ビガバトリン及びゾニサミドの１種以上又は全部を含まないことも本開示の範囲内で予想される。

【0053】

「薬剤」とは任意の低分子化合物、抗体、核酸分子もしくはポリペプチド又はそのフラグメントを意味する。

【0054】

「心臓病態」とは、限定されないが、冠状動脈性心臓病（ＣＨＤ）、心筋症、心血管疾患（ＣＶＤ）、虚血性心臓病、心不全、高血圧性心臓病、炎症性心臓病、弁膜性心臓病、アテローム性動脈硬化症及び心臓肥大を含む関連疾患を意味する。心臓病態は心臓、脳、大半の主要臓器及び手足を冒す可能性のある全身疾患でもよい。「冠状動脈性心臓病（ＣＨＤ）」とは冠循環の不全により心筋と周囲組織に十分な血液を供給できなくなる疾患を意味する。「心血管疾患（ＣＶＤ）」とは心臓自体又は血管系、特に心筋組織と、心臓に出入りする静脈及び動脈を冒す多数の特定疾患のいずれかを意味する。例えばＣＶＤとしては、限定されないが、急性冠症候群、不整脈、アテローム性動脈硬化症、心不全、心筋梗塞、新生内膜過形成、肺高血圧症、卒中、弁膜症又は心臓肥大が挙げられる。心臓病は当分野で公知の種々の方法のいずれかにより診断することができる。例えば、このような方法としては、運動不耐性、浮腫、動悸、失神、意識消失又は咳等の当分野で公知の多数の症状のいずれかとして存在し得る呼吸困難、起座呼吸、発作性夜間呼吸困難、跛行、狭心症、胸痛について対象を評価する方法が挙げられ、心臓病は血液化学検査により診断することができる。上記のように、本願で使用する「心臓病」とは心臓自体又は循環系を冒す障害を意味する。

【0055】

「アナログ」又は「類似体」とは化学及び生物学分野におけるその単純な通常の意味に従って使用し、別の化合物（即ち所謂「基準」化合物）と構造的に類似しているが、組成の異なる化合物を意味し、例えばある原子が別の元素の原子で置換えられているもの、特定の官能基が存在するもの、ある官能基が別の官能基で置換えられているもの、又は基準化合物の１個以上のキラル中心の絶対立体配置が異なるものが挙げられる。従って、アナログとは基準化合物と機能及び外観が類似又は同等であるが、構造又は起源の異なる化合物である。

【0056】

「クレミゾール」とは式：

【0057】

【化1】

を有する化合物を意味する。

【0058】

クレミゾールは本願に記載するようなクレミゾールの医薬的に許容される塩と製剤（例えば「クレミゾール塩」）を含む。代表的なクレミゾール塩としては、限定されないが、クレミゾール塩酸塩、クレミゾールペニシリン、クレミゾール硫酸塩又はクレミゾールウンデシル酸塩が挙げられる。

【0059】

本願に記載する「クレミゾールアナログ」とは類似構造の化合物を意味する。このような化合物としては、例えばその開示内容全体を本願に援用するＰＣＴ／ＵＳ２００８／０７６８０４及び米国特許第４，０１１，３２２号に記載の化合物が挙げられる。その他の代表的なクレミゾールアナログは例えばＵＳ２０１２／０２３２０６２、ＰＣＴ公開第２００９／０３８２４８号、ＵＳ２０１０／１０７７３９、ＵＳ２０１０／１０７７４２、ＷＯ２００２／０８９７３１、ＷＯ２００５／０３２３２９、ＷＯ２００９／０３９２４８、ＷＯ２０１０／０３９１９５、ＷＯ２０１０／１０７７３９及びＷＯ２０１０／１０７７４２に記載されており、各々その開示内容全体を本願に援用する。本願に記載するクレミゾールアナログ（上記文献に記載されている化合物を含む）は下式（Ｉ）に示すように１位又は２位を置換（即ち修飾）されていてもよい（Ｙ枠及びＺ枠）。クレミゾールアナログは式（Ｉ）にＸ枠により示すように４位、５位、６位又は７位を置換（即ち修飾）されていてもよい。

【0060】

【化2】

【0061】

「フリバンセリン」とは下式（ＩＩ）：

【0062】

【化3】

を有する化合物を意味する。

【0063】

フリバンセリンはフリバンセリンの医薬的に許容される塩と製剤（例えば「フリバンセリン塩」）を含む。

【0064】

「ノルフェンフルラミン」とは下式（ＩＩＩ）：

【0065】

【化4】

を有する化合物を意味する。

【0066】

ノルフェンフルラミンはノルフェンフルラミンの医薬的に許容される塩と製剤（例えば「ノルフェンフルラミン塩」）を含む。

【0067】

「ＤＯＩ」とは２，５－ジメトキシ－４－ヨードアンフェタミンを意味する。ＤＯＩはＤＯＩの医薬的に許容される塩と製剤を含む。代表的なＤＯＩ塩としては、限定されないが、下式（ＩＶ）：

【0068】

【化5】

を有する２，５－ジメトキシ－４－ヨードアンフェタミン一塩酸塩（ＤＯＩ ＨＣｌ）が挙げられる。

【0069】

「ＢＷ７２３Ｃ８６」とは５ＨＴ_２Ｂ受容体作動薬として作用し、下式（Ｖ）：

【0070】

【化6】

を有するトリプタミン誘導体薬を意味する。

【0071】

ＢＷ７２３Ｃ８６はＢＷ７２３Ｃ８６の医薬的に許容される塩と製剤（例えば「ＢＷ７２３Ｃ８６塩」）を含む。

【0072】

「医薬的に許容される塩」なる用語は本願に記載する化合物に存在する特定の置換基に応じて比較的非毒性の酸又は塩基と共に製造される活性化合物の塩を意味する。５－ＨＴ作動薬が比較的酸性の官能基を含む場合には、このような化合物の中性形態を無熔媒下又は適切な不活性溶媒中で十分な量の所望の塩基と接触させることにより塩基付加塩を得ることができる。医薬的に許容される塩基付加塩の例としては、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、アンモニウム塩、有機アミン塩、マグネシウム塩又は同様の塩が挙げられる。５－ＨＴ作動薬が比較的塩基性の官能基を含む場合には、このような化合物の中性形態を無熔媒下又は適切な不活性溶媒中で十分な量の所望の酸と接触させることにより酸付加塩を得ることができる。医薬的に許容される酸付加塩の例としては、塩酸、臭化水素酸、硝酸、炭酸、炭酸水素酸、リン酸、リン酸水素酸、リン酸二水素酸、硫酸、硫酸水素酸、ヨウ化水素酸又は亜リン酸等の無機酸から誘導される塩と、酢酸、プロピオン酸、イソ酪酸、マレイン酸、マロン酸、安息香酸、コハク酸、スベリン酸、フマル酸、乳酸、マンデル酸、フタル酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ－トリルスルホン酸、クエン酸、酒石酸、蓚酸、メタンスルホン酸等の比較的非毒性の有機酸から誘導される塩が挙げられる。アルギン酸塩等のアミノ酸の塩や、グルクロン酸やガラクツロン酸等の有機酸の塩も挙げられる（例えばＢｅｒｇｅ ｅｔ ａｌ．，“Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ”，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９７７，６６，１－１９参照）。５－ＨＴ作動薬は塩基付加塩又は酸付加塩への変換を可能にする塩基性官能基と酸性官能基のいずれも含むことができる。

【0073】

従って、５－ＨＴ作動薬は（例えば医薬的に許容される酸との）塩として存在していてもよい。本発明はこのような塩を含む。このような塩の非限定的な例としては、塩酸塩、臭化水素酸塩、リン酸塩、硫酸塩、メタンスルホン酸塩、硝酸塩、マレイン酸塩、酢酸塩、クエン酸塩、フマル酸塩、プロピオン酸塩、酒石酸塩（例えば（＋）－酒石酸塩、（－）－酒石酸塩、又はラセミ混合物を含むその混合物）、コハク酸塩、安息香酸塩、並びにグルタミン酸等のアミノ酸との塩や、第四級アンモニウム塩（例えばヨウ化メチル、ヨウ化エチル等）が挙げられる。これらの塩は当業者に公知の方法により製造することができる。

【0074】

塩を塩基又は酸と接触させ、従来通りの方法で親化合物を分離することにより５－ＨＴ作動薬の中性形態を再生することが好ましい。化合物の親形態は極性溶媒への溶解度等の所定の物理的性質が種々の塩形態と異なっていてもよい。

【0075】

塩形態に加え、５－ＨＴ作動薬はプロドラッグ形態で提供してもよい。プロドラッグとは生理的条件下で容易に化学変化し、本発明の化合物となるような化合物である。５－ＨＴ作動薬のプロドラッグは投与後にインビボで変換することができる。更に、５－ＨＴ作動薬のプロドラッグは例えば適切な酵素又は化学的試薬と接触させる場合等のエクスビボ環境で化学的又は生化学的方法により活性化合物に変換することができる。

【0076】

５－ＨＴ作動薬は非溶媒和形態で存在することもできるし、水和形態を含む溶媒和形態で存在することもできる。一般に、溶媒和形態は非溶媒和形態と等価であり、本発明の範囲内に含まれる。５－ＨＴ作動薬は多結晶形態で存在していてもよいし、非晶質形態で存在していてもよい。一般に、本発明により予想される用途では全ての物理的形態が等価であり、本発明の範囲内に含むものとする。

【0077】

「有効量」とは、５－ＨＴ作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）が５－ＨＴ作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）の不在下に比較して指定目的を達成するため（例えば投与効果を得るため、疾患を治療するため、タンパク質／酵素活性を低下させるため、タンパク質／酵素活性を増加させるため、シグナル伝達経路を抑制するため、又は疾患もしくは病態の１種以上の症状を抑制するため）に十分な量である。「有効量」の１例は疾患の１以上の症状の治療、予防又は抑制に寄与するために十分な５－ＨＴ作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）の量であり、「治療有効量」と言うこともできる。１以上の症状の「抑制」（及びこの用語の文法的等価形態）とは症状の重度もしくは頻度の低下、又は症状（例えば発作）の解消を意味する。薬物の「予防有効量」とは、対象に投与したときに目的の予防効果、例えば損傷、疾患、病変もしくは病態の発症（又は再発）を予防もしくは遅延させる効果、又は損傷、疾患、病変もしくは病態もしくはその症状（例えば発作）が発症（又は再発）する可能性を減らす効果を生じる薬物の量である。完全な予防効果は必ずしも単回投与により生じず、一連の投与後のみに生じる場合もある。従って、予防有効量を１回以上に分けて投与してもよい。厳密な量は治療目的により異なり、公知技術を使用して当業者に確定されよう（例えばＬｉｅｂｅｒｍａｎ，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ（ｖｏｌｓ．１－３，１９９２）；Ｌｌｏｙｄ，Ｔｈｅ Ａｒｔ，Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏｍｐｏｕｎｄｉｎｇ（１９９９）；Ｐｉｃｋａｒ，Ｄｏｓａｇｅ Ｃａｌｃｕｌａｔｉｏｎｓ（１９９９）；及びＲｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，２０ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，２００３，Ｇｅｎｎａｒｏ，Ｅｄ．，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ参照）。

【0078】

５－ＨＴ作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）の治療有効量は先ず細胞培養アッセイから決定することができる。目標濃度は本願に記載する方法又は当分野で公知の方法を使用して測定した場合に本願に記載する方法を達成することが可能な活性化合物の濃度とする。

【0079】

当分野で周知のように、動物モデルから人体用の治療有効量を決定することもできる。例えば、動物で有効であることが分かっている濃度となるように人体用の用量を処方することができる。上記のように、化合物の有効性をモニターし、投与量を下方又は上方に調節することにより人体用の投与量を調節することができる。上記方法及び他の方法に基づいて人体で最大の効力を達成するように用量を調節することは通常の知識をもつ当業者が十分に可能である。

【0080】

投与量は患者の必要性と利用する化合物に応じて変えることができる。本発明に関して、患者に投与される用量は時間の経過と共に患者に有益な治療反応を生じるために十分な量とすべきである。用量のサイズは有害な副作用の存在、種類及び程度によっても左右されよう。特定の状況に適した投与量の決定は医師の技量の範囲内である。一般に、化合物の最適用量よりも少ない低用量で治療を開始する。その後、状況下で最適な効果に達するまで投与量を少量ずつ増加させる。

【0081】

投与量と投与間隔は投与される化合物の濃度が治療する特定の臨床徴候に有効となるように個々に調節することができる。こうして、個体の疾患状態の重度に見合った治療レジメンが提供されよう。

【0082】

本願に提供する教示を利用し、実質的な毒性を生じずに特定の患者により発現される臨床症状を治療するために有効な予防又は治療処置レジメンを計画することができる。この計画には、化合物効力、相対生体利用率、患者体重、有害な副作用の存在と重度、好ましい投与方法及び選択した薬剤の毒性プロファイル等の因子を考慮することにより活性化合物を注意深く選択する必要がある。

【0083】

「対照」又は「対照実験」とはその単純な通常の意味に従って使用し、実験の手順、試薬又は変数を省略する以外は並行実験と同様に実験の対象又は試薬を処理する実験を意味する。場合により、対照は実験効果を評価する際に比較標準として使用される。所定の実施形態において、対照は５－ＨＴ作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）の不在下における５－ＨＴ作動薬の活性の測定である。

【0084】

本願で使用する「試験化合物」とは特定の生体標的又は経路（例えば５－ＨＴ受容体）の活性、不活性又は他の変調を同定するためのスクリーニング法で使用される実験化合物を意味する。試験化合物はその医薬的に許容される塩を含めて本願に記載する５－ＨＴ作動薬とすることができる。

【0085】

「調節」、「調節する」又は「モジュレーター」なる用語はその単純な通常の意味に従って使用し、１種以上の性質を変化又は変更させる行為を意味する。「モジュレーター」とは標的分子の濃度又は標的分子の機能又は分子の標的の物理的状態を増減させる組成物又は化合物を意味する。「調節」とは１種以上の性質を変化又は変更させるプロセスを意味する。例えば、生体標的に及ぼすモジュレーターの作用について適用する場合、「調節する」とは生体標的（例えば５－ＨＴ受容体）の性質もしくは機能又は生体標的の量を増減することにより変化させることを意味する。

【0086】

タンパク質と阻害薬の相互作用に関して本願で使用する「阻害」、「阻害する」、「阻害している」等の用語はタンパク質の活性又は機能を阻害薬の不在下の活性又は機能に比較してマイナスに変化させる（例えば低下させる）ことを意味する。所定の実施形態において、阻害とは疾患又は疾患の症状の抑制を意味する。所定の実施形態において、阻害とは特定のタンパク質又は核酸標的の活性の低下を意味する。従って、阻害は刺激を部分的もしくは完全に阻止すること、活性化を抑制、防止もしくは遅延させること、又はもしくはシグナル伝達もしくはタンパク質／酵素活性もしくはタンパク質の量を不活性化、減感もしくはダウンレギュレートさせることを少なくとも一部に含む。

【0087】

タンパク質と化合物の相互作用に関して「活性化」又は「活性化させる」等の用語はタンパク質の活性又は機能を活性剤化合物の不在下の活性又は機能に比較してプラスに変化させる（例えば増加させる）ことを意味する。活性化とは特定のタンパク質標的の活性増加を意味する場合もある。活性化とは突然変異させたタンパク標的の機能低下の回復を意味する場合もある。本願で使用する活性化とは１種以上の５－ＨＴ受容体の活性化を意味する場合もある。

【0088】

「接触させる」とはその単純な通常の意味に従って使用し、少なくとも２個の別個の化学種（例えば生体分子又は細胞を含有する化合物）を相互に反応、相互作用又は物理的に接触させるために十分に接近させるプロセスを意味する。なお、得られる反応生成物は添加した試薬間の反応から直接生成することもできるし、添加した試薬の１種以上からの中間体から生成することもでき、前記中間体は反応混合物中で生成することができる。

【0089】

「接触させる」なる用語は２種類の化学種を反応、相互作用又は物理的に接触させることを含むことができ、前記２種類の化学種は本願に記載する化合物とタンパク質又は酵素とすることができる。所定の実施形態において、接触させるとは本願に記載する化合物を受容体（例えば５－ＨＴ受容体）と相互作用させることを含む。

【0090】

疾患に付随する物質又は物質活性もしくは機能に関して「随伴する」又は「～に随伴する」なる用語は疾患が（完全又は部分的に）その物質又は物質活性もしくは機能に起因すること又は疾患の症状が（完全又は部分的に）その物質又は物質活性もしくは機能に起因することを意味する。

【0091】

「患者」又は「～を必要とする対象」なる用語は本願に記載するような医薬組成物の投与により治療することができる疾患又は病態に罹患しているか又は罹患し易い生体を意味する。非限定的な例としては、ヒト、他の哺乳動物、ウシ、ラット、マウス、イヌ、サル、ヤギ、ヒツジ、乳牛、シカ及び他の非哺乳動物（例えばゼブラフィッシュ）が挙げられる。患者はヒトとすることができる。

【0092】

「疾患」又は「病態」なる用語は本願で提供する化合物又は方法で治療することが可能な患者又は対象の状態又は健康状態を意味する。

【0093】

本願における「癲癇障害」、「癲癇症」、「発作障害」又は「癲癇」なる用語は非誘発性発作の存在を最も多くの場合に特徴とする一連の慢性神経障害を意味する。例えばＮｏｅｂｅｌｓ ｅｔ．ａｌ．，Ｊａｓｐｅｒ’ｓ Ｂａｓｉｃ Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｅｐｉｌｅｐｓｉｅｓ，４ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ（ＭＤ）：Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｅｎｔｅｒ ｆｏｒ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ（ＵＳ）；２０１２参照。本願で使用する癲癇とは（例えば外傷、卒中又は癌に起因する）脳の損傷又は遺伝子突然変異を意味する場合がある。癲癇症の症状は脳のニューロン間の異常な電気化学的シグナル伝達に起因する場合がある。非誘発性発作を２回以上起こした患者を癲癇患者とみなすことができる。

【0094】

癲癇症の種類としては、例えば良性ローランド癲癇、前頭葉癲癇、点頭癲癇、若年性ミオクロニー癲癇（ＪＭＥ）、若年性欠神癲癇、小児欠神癲癇（例えばピクノレプシー）、熱性痙攣、ラフォラ病進行性ミオクローヌス癲癇、レノックス・ガストー症候群、ランドウ・クレフナー症候群、ドラベ症候群（ＤＳ）、全般癲癇熱性痙攣プラス（ＧＥＦＳ＋）、乳児重症ミオクロニー癲癇（ＳＭＥＩ）、良性家族性新生児痙攣（ＢＦＮＣ）、ウエスト症候群、大田原症候群、早期ミオクロニー脳症、移動性部分癲癇、点頭癲癇性脳症、結節性硬化症（ＴＳＣ）、限局性皮質異形成、Ｉ型滑脳症、ミラー・ディッカー症候群、アンジェルマン症候群、脆弱Ｘ症候群、自閉症スペクトラム障害の癲癇、皮質下帯状異所性灰白質、ウォーカー・ワールブルグ症候群、アルツハイマー病、外傷後癲癇、進行性ミオクローヌス癲癇、反射癲癇、ラスムッセン症候群、側頭葉癲癇、辺縁系癲癇、癲癇重積状態、腹部癲癇、両側汎発性ミオクローヌス、月経随伴性癲癇、ジャクソン発作、ウンフェルリヒト・ルンドボルグ病又は光感受性癲癇が挙げられる。

【0095】

「医薬的に許容される賦形剤」及び「医薬的に許容される担体」又は「担体部分」とは、対象への５－ＨＴ作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）の投与と吸収を助け、患者に重大な有害毒性作用を生じずに組成物に配合することができる物質を意味する。医薬的に許容される賦形剤の非限定的な例としては、水、ＮａＣｌ、生理的塩類溶液、乳酸リンゲル液、正規ショ糖、正規ブドウ糖、結合剤、充填剤、崩壊剤、滑沢剤、コーティング剤、甘味料、着香剤、塩類溶液（例えばリンゲル液）、アルコール類、油類、ゼラチン、炭水化物（ラクトース、アミロース又はデンプン）、脂肪酸エステル、ヒドロキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドン、及び着色剤等が挙げられる。このような調合剤を滅菌し、所望により、本発明の化合物と有害な反応を生じない助剤（例えば滑沢剤、防腐剤、安定剤、湿潤剤、乳化剤、浸透圧を変化させるための塩類、緩衝剤、着色剤及び／又は芳香族物質等）と混合することができる。当業者に自明の通り、他の医薬的に許容される賦形剤も本発明で有用である。

【0096】

「調合剤」なる用語は担体として封入剤を使用し、有効成分を他の担体の存在下又は不在下で担体により包囲し、一体化させてカプセル剤とした５－ＨＴ作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）の製剤を含むものとする。同様に、カシェ剤とロゼンジ剤も含む。錠剤、散剤、カプセル剤、丸剤、カシェ剤及びロゼンジ剤は経口投与に適した固体剤形として使用することができる。

【0097】

本願で使用する「投与する」なる用語は対象への経口投与、坐剤としての投与、局所接触、静脈内、腹腔内、筋肉内、病変内、髄腔内、鼻腔内もしくは皮下投与、又は遅延放出デバイス（例えば小型浸透圧ポンプ）の移植を意味する。投与は非経口及び経粘膜（例えば口腔、舌下、口蓋、歯肉、鼻孔、経膣、経直腸又は経皮）を含めたあらゆる経路による。非経口投与としては、例えば静脈内、筋肉内、細動脈内、皮内、皮下、腹腔内、心室内及び頭蓋内が挙げられる。他の送達方式としては、限定されないが、リポソーム製剤、静脈内輸液、経皮パッチ等の使用が挙げられる。

【0098】

５－ＨＴ作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）とその医薬組成物は局所経路により、又はアプリケータースティック、溶液剤、懸濁剤、乳剤、ジェル剤、クリーム、軟膏、ペースト、ゼリー、塗布剤、散剤及びエアゾールとして製剤化して経皮投与することができる。経口調合剤としては、患者が摂取するのに適した錠剤、丸剤、散剤、糖衣錠、カプセル剤、液剤、ロゼンジ剤、カシェ剤、ジェル剤、シロップ剤、スラリー、懸濁剤等が挙げられる。固体形態調合剤としては、散剤、錠剤、丸剤、カプセル剤、カシェ剤、坐剤及び水和性顆粒剤が挙げられる。液体形態の調合剤としては、溶液剤、懸濁剤及び乳剤（例えば水又は水／プロピレングリコール溶液）が挙げられる。５－ＨＴ作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）に更に徐放性及び／又は快適さを提供するための成分を添加してもよい。このような成分としては高分子量アニオン性ムコミメティックポリマー、ゲル化多糖類及び微粉状薬物担体基剤が挙げられる。これらの成分は米国特許第４，９１１，９２０号、５，４０３，８４１号、５，２１２，１６２号及び４，８６１，７６０号により詳細に記載されている。これらの特許の開示内容全体をあらゆる目的で本願に援用する。５－ＨＴ作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は体内に遅延放出するようにマイクロスフェアとして送達することもできる。例えば、マイクロスフェアは薬物を収容したマイクロスフェアを皮内注射してゆっくりと皮下放出させることにより投与することができ（Ｒａｏ，Ｊ．Ｂｉｏｍａｔｅｒ Ｓｃｉ．Ｐｏｌｙｍ．Ｅｄ．７：６２３－６４５，１９９５参照）、あるいは生分解性注射用ジェル製剤（例えばＧａｏ Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．１２：８５７－８６３，１９９５）として、又は経口投与用マイクロスフェア（例えばＥｙｌｅｓ，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．４９：６６９－６７４，１９９７参照）として投与することができる。５－ＨＴ作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）の組成物の製剤は細胞膜と融合するか又は細胞内に取り込まれるリポソームを使用することにより、即ち細胞の表面膜タンパク質受容体と結合してエンドサイトーシスを生じる受容体リガンドをリポソームに付加して利用することにより送達することができる。リポソームを使用することにより、特に標的細胞に特異的な受容体リガンドをリポソーム表面に担持させた場合又は他の方法で特定の臓器に対して優先的に特異的となるようにした場合には、標的細胞への５－ＨＴ作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）の組成物のインビボ送達に焦点を絞ることができる（例えばＡｌ－Ｍｕｈａｍｍｅｄ，Ｊ．Ｍｉｃｒｏｅｎｃａｐｓｕｌ．１３：２９３－３０６，１９９６；Ｃｈｏｎｎ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．６：６９８－７０８，１９９５；Ｏｓｔｒｏ，Ａｍ．Ｊ．Ｈｏｓｐ．Ｐｈａｒｍ．４６：１５７６－１５８７，１９８９参照）。組成物はナノ粒子として送達することもできる。

【0099】

「併用投与する」とは、本願に記載する組成物を１種以上の他の治療薬の投与と同時、その直前又は直後に投与することを意味する。５－ＨＴ作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は患者に単独投与することもできるし、併用投与することもできる。併用投与とは複数の化合物を個々に又は（２種以上の化合物を）組み合わせて同時又は順次投与することを意味する。従って、所望により、（例えば代謝機能低下を抑制するために）調合剤を他の有効物質と併用することもできる。５－ＨＴ作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は局所経路により、又はアプリケータースティック、溶液剤、懸濁剤、乳剤、ジェル剤、クリーム、軟膏、ペースト、ゼリー、塗布剤、散剤及びエアゾールとして製剤化して経皮投与することができる。

【0100】

「追加治療」、「追加療法」、「補助療法」及び「補助治療」なる用語は本願では同義に使用し、癲癇を治療するために５－ＨＴ作動薬又はその医薬的に許容される塩を別の抗痙攣薬と併用することを意味する。

【0101】

「抗発作薬」、「抗癲癇薬」、「ＡＥＤ」又は「抗痙攣薬」は本願ではその通常一般の意味に従って同義に使用し、発作を抑制又は解消するための組成物が挙げられる。抗痙攣薬としては、限定されないが、アセタゾラミド、ベンゾジアゼピン、カンナビジオール、カルバマゼピン、クロバザム、クロナゼパム、エスリカルバゼピン酢酸塩、エトスクシミド、エトトイン、フェルバメート、フェンフルラミン、フォスフェニトイン、ガバペンチン、ガナキソロン、フペルジンＡ、ラコサミド、ラモトリギン、レベチラセタム、ニトラゼパム、オクスカルバゼピン、ペランパネル、ピラセタム、フェノバルビタール、フェニトイン、臭化カリウム、プレガバリン、プリミドン、レチガビン、ルフィナミド、バルプロ酸、バルプロ酸ナトリウム、スチリペントール、チアガビン、トピラマート、ビガバトリン又はゾニサミドが挙げられる。

【0102】

本願で使用する「耐性」なる用語は薬剤又は薬物の有効性の低下を意味する。例えば、（例えばフェンフルラミン等の）セロトニン再取り込み阻害薬による治療に「耐性」の対象はセロトニン再取り込み阻害薬を対象に最初に投与したときに認められる反応に比較して反応の低下を示す。

【0103】

本願で使用する「有意に結合しない」なる用語は本開示の５ＨＴ受容体作動薬が例えば５ＨＴ受容体、ＮＰＹ ＹＰ受容体、Ｃａ^＋チャネル、Ｃ１チャネル、ＧＡＢＡトランスポーターもしくはＧＡＢＡ－Ａ１受容体、Ｎａチャネル、５ＨＴトランスポーター及び／又はＣＢ１もしくはＣＢ２受容体等の別の膜貫通タンパク質との間に１０分の１又は２０分の１又は５０分の１又は６０分の１又は７０分の１又は８０分の１又は９０分の１又は１００分の１の結合性を示すという意味である。この結合レベルの低下はＥＬＩＳＡ又はバイオセンサー解析（例えばＢｉａｃｏｒｅ）により測定することができる。１例において、本開示の５ＨＴ受容体作動薬はＥＬＩＳＡ又はＢｉａｃｏｒｅ又はウェスタンブロット又はＦＡＣＳにより測定した場合に、５ＨＴ_１Ａ、５ＨＴ_１Ｂ、５ＨＴ_１Ｄ、５ＨＴ_２Ｃ、５ＨＴ_３、５ＨＴ_４、５ＨＴ_６、５ＨＴ_７、ＮＰＹ Ｙ１受容体、Ｌ型Ｃａチャネル、Ｃａチャネル（Ｎ型）、ＳＫ－Ｃａチャネル、ＧＡＢＡ依存性Ｃｌチャネル、ＧＡＢＡトランスポーター、ＧＡＢＡ－Ａ１受容体、ＧＡＢＡ－Ｂ１ｂ受容体、Ｎａチャネル、５ＨＴトランスポーター、ＣＢ１受容体、ＣＢ２受容体、ＢＺＤ又はエストロゲンＥＲαと検出可能な程度に結合しない。この関連で「検出可能な程度に結合しない」とは、結合レベルがバックグラウンドよりも有意に大きくないことを意味すると理解すべきである。代表的な実施形態において、５－ＨＴ作動薬は５ＨＴ_１Ａ、５ＨＴ_１Ｂ、５ＨＴ_１Ｄ、５ＨＴ_２Ｃ、５ＨＴ_３、５ＨＴ_４、５ＨＴ_６、５ＨＴ_７、ＮＰＹ Ｙ１受容体、Ｌ型Ｃａチャネル、Ｎ型Ｃａチャネル、ＳＫ－Ｃａチャネル、ＧＡＢＡ依存性Ｃｌチャネル、ＧＡＢＡトランスポーター、ＧＡＢＡ－Ａ１受容体、ＧＡＢＡ－Ｂ１ｂ受容体、Ｎａチャネル、５ＨＴトランスポーター、ＣＢ１受容体、ＣＢ２受容体、ＢＺＤ又はエストロゲンＥＲαの少なくとも１種の活性を有意に調節しない。本願で使用する「活性を有意に調節しない」なる用語は、本開示の５ＨＴ受容体作動薬がリガンドを活性化又は阻害しないという点を除いてその活性と実質的に同様の受容体介在性生体反応を誘発することを意味すると理解すべきである。

【0104】

治療方法
本願は癲癇症の治療方法を提供する。１態様において、前記方法は前記治療を必要とする対象に治療有効量の５－ＨＴ受容体作動薬又はその医薬的に許容される塩を投与することによる癲癇症の治療方法である。別の態様において、前記方法は前記治療を必要とする対象に本願に記載するような医薬組成物を投与することによる癲癇症の治療方法であり、前記医薬組成物は５－ＨＴ受容体作動薬又はその医薬的に許容される塩を含有する。対象はケト原性食を摂取しているものとすることができる（例えばケト原性食に従う食物を摂取しているものとすることができる）。対象は心血管疾患をもつものとすることができる。対象はセロトニン再取り込み阻害薬による治療に耐性のものとすることができる。対象はセロトニン再取り込み阻害薬を投与した場合の副作用に感受性のものとすることができる。対象は小児（例えば小児癲癇病態をもつ対象）とすることができる。

【0105】

癲癇症は良性ローランド癲癇、前頭葉癲癇、点頭癲癇、若年性ミオクロニー癲癇（ＪＭＥ）、若年性欠神癲癇、小児欠神癲癇（例えばピクノレプシー）、熱性痙攣、ラフォラ病進行性ミオクローヌス癲癇、レノックス・ガストー症候群、ランドウ・クレフナー症候群、ドラベ症候群、全般癲癇熱性痙攣プラス（ＧＥＦＳ＋）、乳児重症ミオクロニー癲癇（ＳＭＥＩ）、良性家族性新生児痙攣（ＢＦＮＣ）、ウエスト症候群、大田原症候群、早期ミオクロニー脳症、移動性部分癲癇、点頭癲癇性脳症、結節性硬化症（ＴＳＣ）、限局性皮質異形成、Ｉ型滑脳症、ミラー・ディッカー症候群、アンジェルマン症候群、脆弱Ｘ症候群、自閉症スペクトラム障害の癲癇、皮質下帯状異所性灰白質、ウォーカー・ワールブルグ症候群、アルツハイマー病、外傷後癲癇、進行性ミオクローヌス癲癇、反射癲癇、ラスムッセン症候群、側頭葉癲癇、辺縁系癲癇、癲癇重積状態、腹部癲癇、両側汎発性ミオクローヌス、月経随伴性癲癇、ジャクソン発作、ウンフェルリヒト・ルンドボルグ病又は光感受性癲癇とすることができる。癲癇は全般発作又は部分（即ち焦点性）発作を含むことができる。

【0106】

癲癇症はドラベ症候群、レノックス・ガストー症候群、点頭癲癇又は大田原症候群とすることができる。癲癇症はドラベ症候群、レノックス・ガストー症候群、点頭癲癇もしくは大田原症候群又は小児癲癇症とすることができる。小児癲癇症は良性小児癲癇、良性家族性新生児痙攣（ＢＦＮＣ）、熱性痙攣、ドラベ症候群、レノックス・ガストー症候群、点頭癲癇、大田原症候群、若年性ミオクロニー癲癇、若年性欠神癲癇、小児欠神癲癇（例えばピクノレプシー）、点頭癲癇とすることができる。癲癇症はドラベ症候群とすることができる。

【0107】

小児癲癇症は良性小児癲癇とすることができる。小児癲癇症は良性家族性新生児痙攣（ＢＦＮＣ）とすることができる。小児癲癇症は熱性痙攣とすることができる。小児癲癇症はドラベ症候群とすることができる。小児癲癇症はレノックス・ガストー症候群とすることができる。小児癲癇症は点頭癲癇とすることができる。小児癲癇症は大田原症候群とすることができる。小児癲癇症は若年性ミオクロニー癲癇とすることができる。小児癲癇症は若年性欠神癲癇とすることができる。小児癲癇症は小児欠神癲癇（例えばピクノレプシー）とすることができる。小児癲癇症は点頭癲癇とすることができる。

【0108】

癲癇症は例えば脳炎、大脳炎、膿瘍、卒中、腫瘍、外傷、遺伝的結節性硬化症、大脳形成異常又は低酸素性虚血性脳症等の神経疾患又は損傷の結果とすることができる。癲癇症は例えばアルツハイマー病やパーキンソン病等の神経変性疾患に随伴するものとすることができる。癲癇症は自閉症に随伴するものとすることができる。癲癇症は単一遺伝子突然変異に随伴するものとすることができる。癲癇症は強迫行為又はエレクトログラフ発作に随伴するものとすることができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬又はその医薬的に許容される塩を投与すると、癲癇症、アルツハイマー病対象（例えばアルツハイマー病に罹患している対象）、自閉症対象（例えば自閉症をもつ対象）、又はパーキンソン病対象（例えばパーキンソン病に罹患している対象）における強迫行為又はエレクトログラフ発作を抑制することができる。即ち、前記５－ＨＴ受容体作動薬又はその医薬的に許容される塩は癲癇症における強迫行為又はエレクトログラフ発作を抑制することができる。前記５－ＨＴ作動薬又はその医薬的に許容される塩はアルツハイマー病対象における強迫行為又はエレクトログラフ発作を抑制することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬又はその医薬的に許容される塩は自閉症対象における強迫行為又はエレクトログラフ発作を抑制することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬又はその医薬的に許容される塩はパーキンソン病対象における強迫行為又はエレクトログラフ発作を抑制することができる。

【0109】

前記５－ＨＴ受容体作動薬又はその医薬的に許容される塩を投与すると、５－ＨＴ受容体作動薬又はその医薬的に許容される塩の不在下に比較して前記対象における非誘発性発作の発生率（例えば発生回数）を減らすことができる。従って、本願に記載する化合物の投与前の時点（例えば対照又は対照時点）に比較して前記５－ＨＴ受容体作動薬又はその医薬的に許容される塩の投与に対する患者の反応を漸次モニターすることができる。

【0110】

前記５－ＨＴ受容体作動薬又はその医薬的に許容される塩を投与すると、５－ＨＴ受容体作動薬又はその医薬的に許容される塩の不在下に比較して前記対象におけるミオクローヌス発作又は癲癇重積状態を抑制又は予防することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬又はその医薬的に許容される塩を投与すると、５－ＨＴ受容体作動薬又はその医薬的に許容される塩の不在下に比較して前記対象におけるミオクローヌス発作を抑制又は予防することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬又はその医薬的に許容される塩を投与すると、５－ＨＴ受容体作動薬又はその医薬的に許容される塩の不在下に比較して前記対象における癲癇重積状態を抑制又は予防することができる。従って、本願に記載する化合物の投与前の時点（例えば対照又は対照時点）に比較して前記５－ＨＴ受容体作動薬又はその医薬的に許容される塩の投与に対する患者の反応を漸次モニターすることができる。

【0111】

癲癇症は抗癲癇薬（ＡＥＤ）による治療に非反応性の癲癇症とすることができる。対象はケト原性食を摂取しているものすることができる。癲癇症は成人（例えば約１６歳超）の癲癇症とすることができる。

【0112】

癲癇症は小児の癲癇症とすることができる。即ち、癲癇症は小児癲癇症とすることができる。小児は約１週齢未満とすることができる。小児は約１カ月齢未満とすることができる。小児は約６カ月齢未満とすることができる。小児は約１２カ月齢未満とすることができる。小児は約２歳未満とすることができる。小児は約３歳未満とすることができる。小児は約４歳未満とすることができる。小児は約５歳未満とすることができる。小児は約６歳未満とすることができる。小児は約７歳未満とすることができる。小児は約８歳未満とすることができる。小児は約９歳未満とすることができる。小児は約１０歳未満とすることができる。小児は約１２歳未満とすることができる。

【0113】

小児は約１週齢超とすることができる。小児は約１カ月齢超とすることができる。小児は約６カ月齢超とすることができる。小児は約１２カ月齢超とすることができる。小児は約２歳超とすることができる。小児は約３歳超とすることができる。小児は約４歳超とすることができる。小児は約５歳超とすることができる。小児は約５歳超とすることができる。小児は約６歳超とすることができる。小児は約７歳超とすることができる。小児は約８歳超とすることができる。小児は約９歳超とすることができる。小児は約１０歳超とすることができる。小児は約１１歳超とすることができる。小児は約１２歳超とすることができる。

【0114】

小児は本願に記載するようなＡＥＤを投与することにより治療される癲癇症をもつものとすることができる。従って、前記５－ＨＴ受容体作動薬又はその医薬的に許容される塩をこのような小児に（例えば追加療法として）投与することができる。

【0115】

別の態様ではドラベ症候群の治療方法を提供する。ドラベ症候群の治療方法は前記治療を必要とする対象に治療有効量の前記５－ＨＴ受容体作動薬又はその医薬的に許容される塩を投与することを含む。ドラベ症候群の治療方法は前記治療を必要とする対象に本願に記載するような５－ＨＴ受容体作動薬又はその医薬的に許容される塩の医薬組成物を投与することを含む。前記治療を必要とする対象に前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）を本願に記載するようなＡＥＤと併用投与することができる。

【0116】

本願に記載する方法では、前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）を抗癲癇薬（ＡＥＤ）と併用投与することができる。ＡＥＤはアセタゾラミド、ベンゾジアゼピン、カンナビジオール、カルバマゼピン、クロバザム、クロナゼパム、エスリカルバゼピン酢酸塩、エトスクシミド、エトトイン、フェルバメート、フェンフルラミン、フォスフェニトイン、ガバペンチン、ガナキソロン、フペルジンＡ、ラコサミド、ラモトリギン、レベチラセタム、ニトラゼパム、オクスカルバゼピン、ペランパネル、ピラセタム、フェノバルビタール、フェニトイン、臭化カリウム、プレガバリン、プリミドン、レチガビン、ルフィナミド、バルプロ酸、バルプロ酸ナトリウム、スチリペントール、チアガビン、トピラマート、ビガバトリン又はゾニサミドとすることができる。ＡＥＤはバルプロ酸、バルプロ酸ナトリウム、クロナゼパム、エトスクシミド、フェルバメート、ガバペンチン、カルバマゼピン、オクスカルバゼピン、ラモトリギン、レベチラセタム、ベンゾジアゼピン、フェノバルビタール、プレガバリン、プリミドン、チアガビン、トピラマート、臭化カリウム、フェニトイン、スチリペントール、ビガバトリン又はゾニサミドとすることができる。ＡＥＤはバルプロ酸、バルプロ酸ナトリウム、ガバペンチン、トピラマート、カルバマゼピン、オクスカルバゼピン又はビガバトリンとすることができる。

【0117】

ＡＥＤはアセタゾラミドとすることができる。ＡＥＤはベンゾジアゼピンとすることができる。ＡＥＤはカンナビジオールとすることができる。ＡＥＤはカルバマゼピンとすることができる。ＡＥＤはクロバザムとすることができる。ＡＥＤはクロナゼパムとすることができる。ＡＥＤはエスリカルバゼピン酢酸塩とすることができる。ＡＥＤはエトスクシミドとすることができる。ＡＥＤはエトトインとすることができる。ＡＥＤはフェルバメートとすることができる。ＡＥＤはフェンフルラミンとすることができる。ＡＥＤはフォスフェニトインとすることができる。ＡＥＤはガバペンチンとすることができる。ＡＥＤはガナキソロンとすることができる。ＡＥＤはフペルジンＡとすることができる。ＡＥＤはラコサミドとすることができる。ＡＥＤはラモトリギンとすることができる。ＡＥＤはレベチラセタムとすることができる。ＡＥＤはニトラゼパムとすることができる。ＡＥＤはオクスカルバゼピンとすることができる。ＡＥＤはペランパネルとすることができる。ＡＥＤはピラセタムとすることができる。ＡＥＤはフェノバルビタールとすることができる。ＡＥＤはフェニトインとすることができる。ＡＥＤは臭化カリウムとすることができる。ＡＥＤはプレガバリンとすることができる。ＡＥＤはプリミドンとすることができる。ＡＥＤはレチガビンとすることができる。ＡＥＤはルフィナミドとすることができる。ＡＥＤはバルプロ酸とすることができる。ＡＥＤはバルプロ酸ナトリウムとすることができる。ＡＥＤはスチリペントールとすることができる。ＡＥＤはチアガビンとすることができる。ＡＥＤはトピラマートとすることができる。ＡＥＤはビガバトリンとすることができる。ＡＥＤはゾニサミドとすることができる。本願に記載するＡＥＤの１種以上の補助療法としてクレミゾール（その医薬的に許容される塩を含む）もしくはクレミゾールアナログ又はクレミゾールもしくはクレミゾールアナログの医薬組成物を投与することができる。

【0118】

従って、前記５－ＨＴ受容体作動薬又はその医薬的に許容される塩は本願に記載する癲癇症に付随する発作を含めた発作を治療するためにＡＥＤ投薬の追加（例えば併用）として投与することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬又はその医薬的に許容される塩は本願に記載する癲癇症に付随する発作を含めた発作を治療するためにＡＥＤ投薬の補助療法（例えば併用）として投与することができる。

【0119】

癲癇症は部分発作又は全般発作を特徴とすることができる。癲癇症は部分発作を特徴とすることができる。癲癇症は全般発作を特徴とすることができる。部分発作は単純焦点発作、複雑焦点発作、又は二次性全般化を伴う部分焦点発作とすることができる。全般発作は全般強直間代発作、欠伸発作（即ち小発作）、ミオクローヌス発作、間代発作、強直発作又は無緊張発作とすることができる。

【0120】

本願に記載するＡＥＤと併用投与する場合には、前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）と前記ＡＥＤを同時に投与してもよい。同時に投与する場合には、前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）を前記ＡＥＤと（即ち単一用量単位として）合剤化してもよい。前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は前記ＡＥＤと別に投与するように製剤化してもよいが、同時に投与してもよい。本願に記載するＡＥＤと併用投与する場合には、前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は前記ＡＥＤの投与と順次（例えばその前後に）投与することができる。上記のように、順次投与順序は当業者が容易に決定できよう。

【0121】

前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は約１ｍｇ／ｋｇ～約１０００ｍｇ／ｋｇの用量で投与することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は約１０ｍｇ／ｋｇ～約１０００ｍｇ／ｋｇの用量で投与することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は約１０ｍｇ／ｋｇ～約６００ｍｇ／ｋｇの用量で投与することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は約２５ｍｇ／ｋｇ～約５００ｍｇ／ｋｇの用量で投与することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は約２５ｍｇ／ｋｇ～約４００ｍｇ／ｋｇの用量で投与することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は約２５ｍｇ／ｋｇ～約３５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は約２５ｍｇ／ｋｇ～約３００ｍｇ／ｋｇの用量で投与することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は約２５ｍｇ／ｋｇ～約２５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は約２５ｍｇ／ｋｇ～約２００ｍｇ／ｋｇの用量で投与することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は約２５ｍｇ／ｋｇ～約１５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は約２５ｍｇ／ｋｇ～約１００ｍｇ／ｋｇの用量で投与することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は約２５ｍｇ／ｋｇ～約７５ｍｇ／ｋｇの用量で投与することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は約２５ｍｇ／ｋｇ～約５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与することができる。本願で使用する「ｍｇ／ｋｇ」とは対象の体重１ｋｇ当たりのｍｇ値を意味する。本願に記載する投与量は前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）を単独の治療有効成分として投与する場合又は治療有効成分としての前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）と本願に記載するＡＥＤの（本願に記載するような）併用投与を含む。

【0122】

前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は約１ｍｇ／ｋｇの用量で投与することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は約５ｍｇ／ｋｇの用量で投与することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は約１０ｍｇ／ｋｇの用量で投与することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は約２０ｍｇ／ｋｇの用量で投与することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は約２５ｍｇ／ｋｇの用量で投与することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は約３０ｍｇ／ｋｇの用量で投与することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は約４０ｍｇ／ｋｇの用量で投与することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は約５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は約７５ｍｇ／ｋｇの用量で投与することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は約１００ｍｇ／ｋｇの用量で投与することができる。

【0123】

前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は約１２５ｍｇ／ｋｇの用量で投与することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は約１５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は約１７５ｍｇ／ｋｇの用量で投与することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は約２００ｍｇ／ｋｇの用量で投与することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は約２２５ｍｇ／ｋｇの用量で投与することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は約２５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は約２７５ｍｇ／ｋｇの用量で投与することができる。

【0124】

前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は約３００ｍｇ／ｋｇの用量で投与することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は約３２５ｍｇ／ｋｇの用量で投与することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は約３５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は約３７５ｍｇ／ｋｇの用量で投与することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は約４００ｍｇ／ｋｇの用量で投与することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は約４２５ｍｇ／ｋｇの用量で投与することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は約４５０ｍｇ／ｋｇの用量で投与することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は約４７５ｍｇ／ｋｇの用量で投与することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は約５００ｍｇ／ｋｇの用量で投与することができる。

【0125】

前記５－ＨＴ受容体作動薬アナログ（その医薬的に許容される塩を含む）は約６００ｍｇ／ｋｇの用量で投与することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は約７００ｍｇ／ｋｇの用量で投与することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は約８００ｍｇ／ｋｇの用量で投与することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は約９００ｍｇ／ｋｇの用量で投与することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は約１０００ｍｇ／ｋｇの用量で投与することができる。

【0126】

前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は本願に記載する投与量で少なくとも１日１回（例えば１時間、２時間、３時間、４時間、５時間、６時間、７時間、８時間、９時間、１０時間、１１時間又は１２時間毎に１回）投与することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は本願に記載する投与量で毎日投与することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は本願に記載する投与量で少なくとも週２回投与することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は少なくとも週３回本願に記載するように投与することができる。前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は月１回本願に記載するように投与することができる。

【0127】

本願では、治療有効量のクレミゾール、クレミゾールアナログ又はその医薬的に許容される塩を投与することにより、脳内のセロトニンの不足により又は１種以上の５ＨＴ受容体の活動下で生じる疾患又は障害を治療する方法も提供する。脳内のセロトニンの不足により又は１種以上の５ＨＴ受容体の活動下で生じる疾患又は障害は片頭痛とすることができる。脳内のセロトニンの不足により又は１種以上の５ＨＴ受容体の活動下で生じる疾患又は障害は脆弱Ｘ症候群とすることができる。脳内のセロトニンの不足により又は１種以上の５ＨＴ受容体の活動下で生じる疾患又は障害はプラダー・ウィリー症候群とすることができる。脳内のセロトニンの不足により又は１種以上の５ＨＴ受容体の活動下で生じる疾患又は障害は統合失調症とすることができる。脳内のセロトニンの不足により又は１種以上の５ＨＴ受容体の活動下で生じる疾患又は障害は鬱病とすることができる。脳内のセロトニンの不足により又は１種以上の５ＨＴ受容体の活動下で生じる疾患又は障害はアルツハイマー病とすることができる。脳内のセロトニンの不足により又は１種以上の５ＨＴ受容体の活動下で生じる疾患又は障害は自閉症とすることができる。脳内のセロトニンの不足により又は１種以上の５ＨＴ受容体の活動下で生じる疾患又は障害は神経障害性疼痛とすることができる。脳内のセロトニンの不足により又は１種以上の５ＨＴ受容体の活動下で生じる疾患又は障害はパーキンソン病とすることができる。脳内のセロトニンの不足により又は１種以上の５ＨＴ受容体の活動下で生じる疾患又は障害は過敏性腸症とすることができる。脳内のセロトニンの不足により又は１種以上の５ＨＴ受容体の活動下で生じる疾患又は障害は認知症とすることができる。

【0128】

更に、本願は５ＨＴ受容体をクレミゾール、クレミゾールアナログ又はその医薬的に許容される塩と接触させることを含む５ＨＴ受容体の活性の調節方法も提供する。

【0129】

クレミゾールアナログとしては本願に記載する式（Ｉ）の化合物が挙げられ、例えば本願に援用するＰＣＴ／ＵＳ２００８／０７６８０４、ＷＯ１０１０７７３９、ＷＯ２００９０３９２４８又は米国特許第４，０１１，３２２号に記載されているような同様の構造の化合物も挙げられる。

【0130】

複数の実施形態において、本開示は治療有効量のトラゾドン又はその医薬的に許容される塩を投与することによる癲癇又はドラベ症候群の治療方法を提供する。複数の実施形態において、治療有効量は約１０ｍｇ／日～約６００ｍｇ／日である。複数の実施形態において、前記方法は癲癇の治療方法である。複数の実施形態において、癲癇は小児癲癇である。複数の実施形態において、前記方法はドラベ症候群の治療方法である。

【0131】

医薬組成物
本願は上記疾患及び障害を治療するのに有用な５－ＨＴ受容体作動薬又はその医薬的に許容される塩を含有する医薬組成物を提供する。前記医薬組成物は本願に記載するように錠剤、散剤、カプセル剤、丸剤、カシェ剤又はロゼンジ剤として製剤化することができる。前記医薬組成物は経口投与用に錠剤、カプセル剤、丸剤、カシェ剤又はロゼンジ剤として製剤化することができる。前記医薬組成物は例えば静脈内投与等の技術により投与するために溶液に溶解させるように製剤化することができる。前記医薬組成物は本願に記載するように経口投与、坐剤投与、局所投与、静脈内投与、腹腔内投与、筋肉内投与、病変内投与、髄腔内投与、鼻腔内投与、皮下投与、移植、経皮投与又は経粘膜投与用に製剤化することができる。

【0132】

医薬組成物として投与する場合、前記医薬組成物は５－ＨＴ受容体作動薬の光学異性体、ジアステレオマー、エナンチオマー、アイソフォーム、多形、水和物、溶媒和物もしくは産物又は医薬的に許容される塩を含むことができる。前記医薬組成物に含まれる５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は上記のように担体部分と共有結合させてもよい。あるいは、前記医薬組成物に含まれる５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は担体部分と共有結合させない。

【0133】

前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は前記治療を必要とする対象に単独で投与してもよいし、本願に記載するようなＡＥＤと併用投与してもよい。併用投与とは本願に記載するように５－ＨＴ受容体作動薬を個々に又は（例えば２種以上の化合物、例えば本願に記載するＡＥＤと）併用して同時又は順次投与することを含めた意味である。所望される場合には、（例えば発作を予防するために）調合剤を他の有効物質と併用することもできる。

【0134】

製剤
本願に記載する５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）又は医薬組成物は多様な経口、非経口及び局所剤形で製造及び投与することができる。従って、本願に記載する５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）又は医薬組成物は注射により（例えば静脈内、筋肉内、皮内、皮下、十二指腸内又は腹腔内に）投与することができる。また、本願に記載する５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）又は医薬組成物は吸入により例えば鼻腔内に投与することもできる。更に、前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）又は医薬組成物は経皮投与することもできる。前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）又はこれを含有する医薬組成物を投与するために複数の投与経路（例えば筋肉内、経口、経皮）を使用できるとも予想される。本願に記載する医薬組成物は医薬的に許容される担体又は賦形剤と、５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）の１種以上を含有することができる。本願に記載する医薬組成物は医薬的に許容される担体又は賦形剤と、５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）の１種以上と、本願に記載するような１種以上のＡＥＤを含有することができる。

【0135】

調合剤は医薬的に許容される担体を含有することができる。医薬的に許容される担体は固体又は液体とすることができる。固体形態の調合剤としては、散剤、錠剤、丸剤、カプセル剤、カシェ剤、坐剤及び水和性顆粒剤が挙げられる。固体担体は希釈剤、着香剤、結合剤、防腐剤、錠剤崩壊剤又はカプセル封入材としても作用することができる１種以上の物質とすることができる。

【0136】

散剤において、担体は微粉状有効成分との混合物中の微粉状固体とすることができる。錠剤では、必要な結合性をもつ担体と有効成分を適切な割合で混合し、所望の形状と寸法に圧縮することができる。

【0137】

散剤と錠剤は５％～７０％の活性化合物を含有することが好ましい。適切な担体は炭酸マグネシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、糖類、ラクトース、ペクチン、デキストリン、デンプン、ゼラチン、トラガカントガム、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、低融点ろう、カカオ脂等である。「調合剤」なる用語は担体として封入剤を使用し、有効成分を他の担体の存在下又は不在下で担体により包囲し、一体化させてカプセル剤とした活性化合物の製剤を含むものとする。同様に、カシェ剤とロゼンジ剤も含む。錠剤、散剤、カプセル剤、丸剤、カシェ剤及びロゼンジ剤は経口投与に適した固体剤形として使用することができる。

【0138】

適切な固体賦形剤としては、限定されないが、炭酸マグネシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ペクチン、デキストリン、デンプン、トラガカントガム、低融点ろう、カカオ脂、炭水化物、糖類（限定されないが、ラクトース、スクロース、マンニトール又はソルビトール）、トウモロコシ、コムギ、コメ、ジャガイモ又は他の植物に由来するデンプン、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース又はカルボキシメチルセルロースナトリウム等のセルロース、及びアラビアガムやトラガカントガムを含むガム類が挙げられ、更に限定されないが、ゼラチンやコラーゲンを含むタンパク質類が挙げられる。必要に応じて、架橋ポリビニルピロリドン、寒天、アルギン酸又はその塩（例えばアルギン酸ナトリウム）等の崩壊剤又は可溶化剤を加えてもよい。

【0139】

糖衣錠素錠には、アラビアガム、タルク、ポリビニルピロリドン、カルボポールゲル、ポリエチレングリコール及び／又は二酸化チタンも含んでいてもよい濃厚糖溶液、ラッカー溶液並びに適切な有機溶媒又は混合溶媒等の適切なコーティングを施す。製品識別のため又は前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）もしくは医薬組成物の量（即ち投与量）を表示するために錠剤又は糖衣錠コーティングに染料又は顔料を加えてもよい。例えばゼラチン製の嵌合式カプセル剤や、ゼラチンとグリセロールやソルビトール等のコーティングから作製されたソフトシールカプセル剤を使用して本願に記載する医薬調合剤を経口使用することもできる。

【0140】

坐剤を製造するには、先ず脂肪酸グリセリド混合物等の低融点ろう又はカカオ脂を融解させ、撹拌等により有効成分を均質に分散させる。次に融解させた均質な混合物を適当な寸法の型に注入し、冷却して凝固させる。

【0141】

液体形態の調合剤としては、溶液剤、懸濁剤及び乳剤（例えば水又は水／プロピレングリコール溶液）が挙げられる。非経口注射用には、液体調合剤をポリエチレングリコール水溶液で溶液に製剤化することができる。

【0142】

非経口投与が必要とされる場合又は所望される場合、前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）又はこれを含有する医薬組成物に特に適切な混合物は注射用滅菌溶液、好ましくは油性もしくは水性溶液、懸濁液、エマルション、又は坐剤を含むインプラントである。特に、非経口投与用担体としては、デキストロースの水溶液、塩類溶液、純水、エタノール、グリセロール、プロピレングリコール、ピーナッツ油、ゴマ油、ポリオキシエチレンブロックポリマー等が挙げられる。アンプル剤は便利な単位用量製剤である。前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）又はこれを含有する医薬組成物はリポソームに組込むこともできるし、経皮ポンプ又はパッチにより投与することもできる。本願で使用するのに適した医薬混合物としては、例えばいずれもその教示内容を本願に援用するＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（１７ｔｈ Ｅｄ．，Ｍａｃｋ Ｐｕｂ．Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ）とＷＯ９６／０５３０９に記載されているものが挙げられる。

【0143】

経口用に適した水溶液は有効成分を水に溶解させ、必要に応じて適切な着色剤、着香剤、安定剤及び増粘剤を加えることにより製造することができる。経口用に適した水性懸濁液は微粉状の有効成分を粘稠性材料と共に水に分散させることにより製造することができ、このような材料としては、天然又は合成ガム、樹脂類、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トラガカントガム及びアラビアガム、並びに分散剤又は湿潤剤として、天然ホスファチド（例えばレシチン）、アルキレンオキシドと脂肪酸の縮合物（例えばステアリン酸ポリオキシエチレン）、エチレンオキシドと長鎖脂肪アルコールの縮合物（例えばヘプタデカエチレンオキシセタノール）、脂肪酸とヘキシトールから誘導される部分エステルとエチレンオキシドの縮合物（例えばモノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビトール）、又は脂肪酸とヘキシトール無水物から誘導される部分エステルとエチレンオキシドの縮合物（例えばモノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン）が挙げられる。水性懸濁液には更に、１種以上の防腐剤（例えばｐ－ヒドロキシ安息香酸エチルやｐ－ヒドロキシ安息香酸ｎ－プロピル）、１種以上の着色剤、１種以上の着香剤及び１種以上の甘味剤（例えばスクロース、アスパルテーム又はサッカリン）を添加することができる。製剤はオスモル濃度を調整することができる。

【0144】

使用直前に経口投与用液体形態調合剤に変換するように構成された固体形態調合剤も本願に含まれる。このような液体形態としては、溶液、懸濁液及びエマルションが挙げられる。これらの調合剤には有効成分に加え、着色剤、着香剤、安定剤、緩衝剤、人工及び天然甘味料、分散剤、増粘剤、可溶化剤等を添加してもよい。

【0145】

油性懸濁液には蜜蝋、固形パラフィン又はセチルアルコール等の増粘剤を添加することができる。口当たりのよい経口調合剤とするために、グリセロール、ソルビトール又はスクロース等の甘味剤を添加することができる。これらの製剤はアスコルビン酸等の酸化防止剤を添加して防腐処理することができる。注射用油脂性基剤の１例としては、Ｍｉｎｔｏ，Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．２８１：９３－１０２，１９９７参照。本願に記載する医薬製剤は水中油型エマルションの形態とすることもできる。油相は上記植物油もしくは鉱物油、又はこれらの混合物とすることができる。適切な乳化剤としては、アラビアガムやトラガカントガム等の天然ガム、大豆レシチン等の天然ホスファチド、脂肪酸とヘキシトール無水物から誘導されるエステルもしくは部分エステル類（例えばモノオレイン酸ソルビタン）、及びこれらの部分エステル類とエチレンオキシドの縮合物（例えばモノオレイン酸ポリオキシエチレンソルビタン）が挙げられる。乳剤にはシロップ剤及びエリキシル剤の製剤と同様に更に甘味剤と着香剤も添加することができる。このような製剤には更に粘膜保護剤、防腐剤又は着色剤を添加することができる。

【0146】

医薬調合剤は単位用量形態とすることが好ましい。このような形態では、適量の有効成分を含有する単位用量に調合剤を細分する。単位用量形態は個別の量の調合剤を含むパッケージ調合剤とすることができ、例えば錠剤、カプセル剤及び散剤をバイアル又はアンプルに小分けしたものが挙げられる。また、単位用量形態はカプセル剤、錠剤、カシェ剤又はロゼンジ剤１錠することもできるし、これらのいずれかを適当な個数ずつ包装した形態とすることもできる。

【0147】

単位用量調合剤中の有効成分の量は特定の用途と有効成分の効力に応じて０．１ｍｇから１００００ｍｇまで変動又は調節することができる。必要に応じて、更に他の適合可能な治療剤を組成物に加えることもできる。

【0148】

製剤は組成物中に界面活性剤又は他の適切な補助溶媒を含有していてもよい。このような補助溶媒としては、ポリソルベート２０、６０及び８０；プルロニック（登録商標）Ｆ－６８、Ｆ－８４及びＰ－１０３；シクロデキストリン；並びにポリオキシル３５ヒマシ油が挙げられる。このような補助溶媒は一般的に約０．０１～約２重量％の濃度で利用される。製剤の調合の変動を減らすため、懸濁剤又は乳剤の成分の物理的な分離を抑制するため、及び／又は他の方法で製剤を改善するために単純な水溶液よりも高粘度にすることが望ましい場合がある。このような増粘剤としては、例えばポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、コンドロイチン硫酸とその塩、ヒアルロン酸とその塩、及びこれらの組み合わせが挙げられる。このような増粘剤は一般的に約０．０１～約２重量％の濃度で利用される。

【0149】

製剤の調合の変動を減らすため、懸濁剤又は乳剤の成分の物理的な分離を抑制するため、及び／又は他の方法で製剤を改善するために単純な水溶液よりも高粘度にすることが望ましい場合がある。このような増粘剤としては、例えばポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、コンドロイチン硫酸とその塩、ヒアルロン酸とその塩、これらの組み合わせ、及び当業者に公知の他の増粘剤が挙げられる。このような増粘剤は一般的に約０．０１～約２重量％の濃度で利用される。上記助剤のいずれの許容量も当業者により容易に決定される。

【0150】

前記医薬組成物に更に徐放性及び／又は快適さを提供するための成分を添加してもよい。このような成分としては高分子量アニオン性ムコミメティックポリマー、ゲル化多糖類及び微粉状薬物担体基剤が挙げられる。これらの成分は米国特許第４，９１１，９２０号、５，４０３，８４１号、５，２１２，１６２号及び４，８６１，７６０号により詳細に記載されている。これらの特許の開示内容全体をあらゆる目的で本願に援用する。

【0151】

前記医薬組成物は静脈内用としてもよい。医薬的に許容される賦形剤としては、ｐＨを静脈内用に望ましい範囲に調整するための緩衝剤を挙げることができる。リン酸塩、硼酸塩及び硫酸塩等の無機酸の塩をはじめとする多数の緩衝剤が知られている。

【0152】

前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）又はその医薬組成物は本願に記載する癲癇症を治療するために、局所経路により、又はアプリケータースティック、溶液剤、懸濁剤、乳剤、ジェル剤、クリーム、軟膏、ペースト、ゼリー、塗布剤、散剤及びエアゾールとして製剤化して経皮投与することができる。

【0153】

前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）は本願に記載する医薬組成物で塩として提供することができ、限定されないが、塩酸、硫酸、酢酸、乳酸、酒石酸、リンゴ酸、コハク酸等の多数の酸と共に形成することができる。塩は対応する遊離塩基形態よりも水性又は他のプロトン性溶媒への溶解度が高くなる傾向がある。

【0154】

本願に記載する癲癇症を治療するために投与される前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）又はその医薬組成物は静脈内（ＩＶ）投与又は体腔もしくは臓器内腔への投与等の非経口投与により投与してもよい。投与用製剤は一般に本発明の組成物を医薬的に許容される担体に溶解させた溶液から構成される。利用することができる許容される基剤及び溶媒としては特に水と、等張塩化ナトリウム溶液であるリンゲル液が挙げられる。更に、溶媒又は懸濁媒として従来通りに滅菌不揮発性油を利用することができる。この目的には、合成モノ又はジグリセリドを含むあらゆる無刺激性の不揮発性油を利用することができる。更に、オレイン酸等の脂肪酸も注射剤の製剤に使用することができる。これらの溶液は無菌であり、一般に望ましくない物質を含まない。これらの製剤は従来の周知の滅菌技術により滅菌することができる。製剤には生理条件に近づける必要に応じて医薬的に許容される補助物質（例えばｐＨ調節剤及び緩衝剤）、毒性調節剤（例えば酢酸ナトリウム、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、乳酸ナトリウム）等を添加してもよい。これらの製剤における本発明の組成物の濃度は広い範囲を取ることができ、選択された特定の投与方式と患者の必要に従って主に液量、粘度、体重等に基づいて選択される。ＩＶ投与では、製剤を滅菌注射用水性又は油性懸濁液等の滅菌注射調合剤とすることができる。この懸濁剤は適切な分散剤又は湿潤剤と懸濁剤を使用して公知技術に従って製剤化することができる。滅菌注射用調合剤は非経口投与に許容される非毒性希釈剤又は溶媒の滅菌注射溶液又は懸濁液（例えば１，３－ブタンジオールの溶液）とすることもできる。

【0155】

癲癇症の治療用の前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）の医薬製剤は細胞膜と融合するか又は細胞に取り込まれるリポソームを使用することにより、即ち細胞の表面膜タンパク質受容体と結合してエンドサイトーシスを生じるリガンドをリポソームに付加するか又はオリゴヌクレオチドに直接付加して利用することにより送達することができる。リポソームを使用することにより、特に標的細胞に特異的な受容体リガンドをリポソーム表面に担持させた場合又は他の方法で特定の臓器に対して優先的に特異的となるようにした場合には、標的細胞への本発明の組成物のインビボ送達に焦点を絞ることができる（例えばＡｌ－Ｍｕｈａｍｍｅｄ，Ｊ．Ｍｉｃｒｏｅｎｃａｐｓｕｌ．１３：２９３－３０６，１９９６；Ｃｈｏｎｎ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．６：６９８－７０８，１９９５；Ｏｓｔｒｏ，Ａｍ．Ｊ．Ｈｏｓｐ．Ｐｈａｒｍ．４６：１５７６－１５８７，１９８９参照）。

【0156】

併用投与は第１の有効成分（例えばクレミゾール又はクレミゾールアナログ（その医薬的に許容される塩を含む））を第２の有効成分（例えば抗痙攣薬）の０．５時間以内、１時間以内、２時間以内、４時間以内、６時間以内、８時間以内、１０時間以内、１２時間以内、１６時間以内、２０時間以内又は２４時間以内に投与することを含む。併用投与は第１の有効成分を第２の有効成分の０．５時間以内、１時間以内、２時間以内、４時間以内、６時間以内、８時間以内、１０時間以内、１２時間以内、１６時間以内、２０時間以内又は２４時間以内に投与することを含むことができる。併用投与は２種類の有効成分を同時、ほぼ同時（例えば相互に約１分以内、５分以内、１０分以内、１５分以内、２０分以内又は３０分以内）、又は任意順序で順次投与することを含むことができる。併用投与は合剤化、即ち両方の有効成分を含有する単一の医薬組成物を製造することにより実施することができる。他の実施形態では、有効成分を別々に製剤化することができる。有効成分及び／又は助剤を相互に連結又は結合させてもよい。

【0157】

併用投与は更に食事の要求や食事の変更等の癲癇症治療との併用も含む。従って、前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）又はその医薬組成物は限定されないが、ケト原性食（例えば高脂質、十分なタンパク質、低炭水化物の食事）等の特殊食を摂取している対象に投与することができる。

【0158】

有効用量
前記医薬組成物は治療有効量、即ちその所期目的を達成するために有効な量の前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）を含有することができる。特定の用途に有効な実際の量は特に治療する病態により異なる。例えば、癲癇症（例えばドラベ症候群）の治療方法で投与する場合、このような組成物は所望の結果（例えば発作の抑制）を達成するために有効な量の前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）又はその医薬組成物を含有する。

【0159】

前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）又はその医薬組成物の投与量及び頻度（単回又は複数回）は投与経路、被投与者の体格、年齢、性別、健康状態、体重、体格指数及び食事；治療する疾患の症状の種類と程度；他の疾患又は他の健康関連問題の存在；同時治療の種類；並びに疾患又は治療レジメンに起因する合併症を含む種々の因子に応じて変えることができる。本願に記載する方法と他の治療レジメン又は治療剤を併用することができる。

【0160】

本願に記載する癲癇症を治療するための前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）又はその医薬組成物の治療有効量は先ず細胞培養アッセイから決定することができる。目標濃度は患者に発生する発作を抑制又は他の方法で減少させることが可能な前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）又はその医薬組成物の濃度とする。

【0161】

人体で使用する場合の前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）又はその医薬組成物の治療有効量は動物モデルから決定することができる。例えば、動物で有効であることが分かっている濃度となるように人体用の用量を処方することができる。上記のように、患者の治療反応をモニターし、投与量を上方又は下方に調節することにより人体用の投与量を調節することができる。

【0162】

投与量は対象の必要性と利用する化合物に応じて変えることができる。本願に記載する医薬組成物に関して、対象に投与される用量は時間の経過と共に対象に有益な治療反応を生じるために十分な量とすべきである。用量のサイズは有害な副作用の有無、種類及び程度によっても左右されよう。一般に、化合物の最適用量よりも少ない低用量で治療を開始する。その後、状況下で最適な効果に達するまで投与量を少量ずつ増加させる。

【0163】

投与量と投与間隔は投与される前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）又はその医薬組成物の濃度が治療する特定の癲癇症に有効となるように個々に調節することができる。こうして、個体の疾患状態の重度に見合った治療レジメンが提供されよう。

【0164】

本願に提供する教示を利用し、実質的な毒性を生じずに特定の患者により発現される臨床症状を治療するために完全に有効な予防又は治療処置レジメンを計画することができる。この計画には、効力、相対生体利用率、患者体重、有害な副作用の存在と重度、好ましい投与方式及び選択した薬剤の毒性プロファイル等の因子を考慮することにより、前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）又はその医薬組成物を注意深く選択する必要がある。

【0165】

毒性
特定の化合物の毒性と治療効果の比はその治療指数であり、ＬＤ_５０（集団の５０％が死亡する化合物の量）とＥＤ_５０（集団の５０％で有効な化合物の量）の比として表すことができる。治療指数の高い化合物が好ましい。人体用投与量範囲を処方するには、細胞培養アッセイ及び／又は動物試験から得られた治療指数データを使用することができる。このような化合物の投与量は毒性を殆ど又は全く生じることなしにＥＤ_５０を含む血漿濃度の範囲内にあることが好ましい。用量は利用する剤形と利用する投与経路に応じてこの範囲内で変えることができる。例えばＦｉｎｇｌ ｅｔ ａｌ．，Ｉｎ：ＴＨＥ ＰＨＡＲＭＡＣＯＬＯＧＩＣＡＬ ＢＡＳＩＳ ＯＦ ＴＨＥＲＡＰＥＵＴＩＣＳ，Ｃｈ．１，ｐ．ｌ，１９７５参照。厳密な処方、投与経路及び投与量は患者の病態と化合物を使用する特定の方法に鑑みて個々の医師が選択することができる。

【0166】

非経口投与が必要とされる場合又は所望される場合、前記医薬組成物に含まれる前記５－ＨＴ受容体作動薬（その医薬的に許容される塩を含む）に特に適切な混合物は注射用滅菌溶液、油性もしくは水性溶液、懸濁液、エマルション、又は坐剤を含むインプラントとすることができる。特に、非経口投与用担体としては、デキストロースの水溶液、塩類溶液、純水、エタノール、グリセロール、プロピレングリコール、ピーナッツ油、ゴマ油、ポリオキシエチレンブロックポリマー等が挙げられる。アンプル剤は便利な単位用量製剤である。本願に記載する医薬組成物で使用するのに適した医薬混合物としては、例えばいずれもその教示内容を本願に援用するＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（１７ｔｈ Ｅｄ．，Ｍａｃｋ Ｐｕｂ．Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ）とＷＯ９６／０５３０９に記載されているものが挙げられる。

【実施例0167】

［実施例１］
癲癇は脳の損傷又は遺伝子突然変異の結果として生ずる。遺伝的癲癇としては、ＳＣＮ１Ａ遺伝子で６５０種類を超える変異体が同定されている（Ｈａｒｋｉｎ，Ｌ．Ａ．ｅｔ ａｌ．Ｔｈｅ ｓｐｅｃｔｒｕｍ ｏｆ ＳＣＮ１Ａ－ｒｅｌａｔｅｄ ｉｎｆａｎｔｉｌｅ ｅｐｉｌｅｐｔｉｃ ｅｎｃｅｐｈａｌｏｐａｔｈｉｅｓ．Ｂｒａｉｎ １３０，８４３－８５２（２００７）；Ｍｕｌｌｅｙ Ｊ．Ｃ．，ｅｔ ａｌ．，ＳＣＮ１Ａ ｍｕｔａｔｉｏｎｓ ａｎｄ ｅｐｉｌｅｐｓｙ．Ｈｕｍ．Ｍｕｔａｔ．２５，５３５－５４２（２００５））。この遺伝子のミスセンス又はフレームシフト突然変異は全般癲癇熱性痙攣プラス（ＧＥＦＳ＋）（Ｃｅｕｌｅｍａｎｓ，Ｂ．Ｐ．，ｅｔ ａｌ．，Ｃｌｉｎｉｃａｌ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｓ ｏｆ ｍｕｔａｔｉｏｎｓ ｉｎ ｔｈｅ ＳＣＮ１Ａ ｇｅｎｅ：ｆｒｏｍ ｆｅｂｒｉｌｅ ｓｅｉｚｕｒｅｓ ｔｏ ｓｅｖｅｒｅ ｍｙｏｃｌｏｎｉｃ ｅｐｉｌｅｐｓｙ ｉｎ ｉｎｆａｎｃｙ．Ｐｅｄｉａｔｒｉｃ Ｎｅｕｒｏｌ．３０，２３６－２４３（２００４））と、ドラベ症候群と呼ばれるより重度の障害に関連している。ＤＳの小児は最初に正常な発育を示すが、生後１年以内に熱性痙攣エピソードを生じることが多く、その結果、重度の自発性反復性発作、知的障害、運動失調及び精神運動機能障害に進行する。発作は入手可能な抗癲癇薬（ＡＥＤ）を使用して十分に管理されず、これらの小児は脳神経外科的切除の候補としては不適切である（Ｂｅｎｄｅｒ，Ａ．Ｃ．，ｅｔ ａｌ．，ＳＣＮ１Ａ ｍｕｔａｔｉｏｎｓ ｉｎ Ｄｒａｖｅｔ ｓｙｎｄｒｏｍｅ：Ｉｍｐａｃｔ ｏｆ ｉｎｔｅｒｎｅｕｒｏｎ ｄｙｓｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｎ ｎｅｕｒａｌ ｎｅｔｗｏｒｋｓ ａｎｄ ｃｏｇｎｉｔｉｖｅ ｏｕｔｃｏｍｅ．Ｅｐｉｌｅｐｓｙ Ｂｅｈ．２３，１７７－１８６（２０１２））。

【0168】

哺乳動物の脳には、夫々遺伝子ＳＣＮ１Ａ、ＳＣＮ２Ａ、ＳＣＮ３Ａ及びＳＣＮ８Ａによりコードされる電位依存性ナトリウムチャネルαサブユニットの４種類の主要なサブタイプであるＮａＶ１．１、ＮａＶ１．２、ＮａＶ１．３及びＮａＶ１．６が存在する。これらのチャネルが開くと、例えば活動電位開始に不可欠な特徴であるナトリウムコンダクタンスと迅速な細胞膜脱分極が生じる（Ｃａｔｔｅｒａｌｌ，Ｗ．Ａ．，ｅｔ ａｌ．，Ｎａ_ｖ１．１ ｃｈａｎｎｅｌｓ ａｎｄ ｅｐｉｌｅｐｓｙ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．５８８，１８４９－１８５９（２０１０））。マウスにおいて、Ｎａ_ｖ１．１はパルバルブミン陽性海馬介在ニューロンと興奮性主細胞の軸索起始部を含む中枢神経系で広く発現される（Ｋｉｍ，Ｄ．Ｙ．，ｅｔ ａｌ．，Ｒｅｄｕｃｅｄ ｓｏｄｉｕｍ ｃｈａｎｎｅｌ Ｎａ（ｖ）１．１ ｌｅｖｅｌｓ ｉｎ ＢＡＣＥ１－ｎｕｌｌ ｍｉｃｅ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２８６，８１０６－８１１６（２０１１）；Ｃｈｅｎ，Ｃ．，ｅｔ ａｌ．，Ｍｉｃｅ ｌａｃｋｉｎｇ ｓｏｄｉｕｍ ｃｈａｎｎｅｌ ｂｅｔａ１ ｓｕｂｕｎｉｔｓ ｄｉｓｐｌａｙ ｄｅｆｅｃｔｓ ｉｎ ｎｅｕｒｏｎａｌ ｅｘｃｉｔａｂｉｌｉｔｙ，ｓｏｄｉｕｍ ｃｈａｎｎｅｌ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ，ａｎｄ ｎｏｄａｌ ａｒｃｈｉｔｅｃｔｕｒｅ．Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２４，４０３０－４０４２（２００４））。マウスにおけるＮａ_ｖ１．１のヘテロ接合体欠失は急激に解離した急速スパイク介在ニューロンの発火性の低下に繋がる（Ｙｕ，Ｆ．Ｈ．，ｅｔ ａｌ．，Ｒｅｄｕｃｅｄ ｓｏｄｉｕｍ ｃｕｒｒｅｎｔ ｉｎ ＧＡＢＡｅｒｇｉｃ ｉｎｔｅｒｎｅｕｒｏｎｓ ｉｎ ａ ｍｏｕｓｅ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｓｅｖｅｒｅ ｍｙｏｃｌｏｎｉｃ ｅｐｉｌｅｐｓｙ ｉｎ ｉｎｆａｎｃｙ．Ｎａｔ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．９，１１４２－１１４９（２００６））。Ｎａ_ｖ１．１の完全又は介在ニューロン特異的なヘテロ接合体欠失を伴うマウスは温度誘発性と自発性の発作、軽度運動失調、自閉症様行動及び早期死亡を示す（Ｙｕ，Ｆ．Ｈ．，ｅｔ ａｌ．，Ｒｅｄｕｃｅｄ ｓｏｄｉｕｍ ｃｕｒｒｅｎｔ ｉｎ ＧＡＢＡｅｒｇｉｃ ｉｎｔｅｒｎｅｕｒｏｎｓ ｉｎ ａ ｍｏｕｓｅ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｓｅｖｅｒｅ ｍｙｏｃｌｏｎｉｃ ｅｐｉｌｅｐｓｙ ｉｎ ｉｎｆａｎｃｙ．Ｎａｔ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．９，１１４２－１１４９（２００６）；Ｏａｋｌｅｙ，Ｊ．Ｃ．，ｅｔ ａｌ．，Ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ－ ａｎｄ ａｇｅ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｓｅｉｚｕｒｅｓ ｉｎ ａ ｍｏｕｓｅ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｓｅｖｅｒｅ ｍｙｏｃｌｏｎｉｃ ｅｐｉｌｅｐｓｙ ｉｎ ｉｎｆａｎｃｙ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ １０６，３９９４－３９９９（２００９）；Ｃｈｅａｈ，Ｃ．Ｓ．，ｅｔ ａｌ．，Ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｄｅｌｅｔｉｏｎ ｏｆ Ｎａ_ｖ１．１ ｓｏｄｉｕｍ ｃｈａｎｎｅｌｓ ｉｎ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｉｎｔｅｒｎｅｕｒｏｎｓ ｃａｕｓｅｓ ｓｅｉｚｕｒｅｓ ａｎｄ ｐｒｅｍａｔｕｒｅ ｄｅａｔｈ ｉｎ ａ ｍｏｕｓｅ ｍｏｄｅｌ ｏｆ Ｄｒａｖｅｔ ｓｙｎｄｒｏｍｅ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ １０９，１４６４６－１４６５１（２０１２））。Ｎａ_ｖ１．１チャネルのドメインＩＩＩに未成熟終止コドンを導入したノックインマウスも長期介在ニューロン発火中のスパイク振幅の減少と、温度誘発性発作に対する感受性の増加を示す（Ｏｇｉｗａｒａ，Ｉ．，ｅｔ ａｌ．，Ｎａ_ｖ１．１ ｌｏｃａｌｉｚｅｓ ｔｏ ａｘｏｎｓ ｏｆ ｐａｒｖａｌｂｕｍｉｎ－ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｉｎｔｅｒｎｅｕｒｏｎｓ：ａ ｃｉｒｃｕｉｔ ｂａｓｉｓ ｆｏｒ ｅｐｉｌｅｐｔｉｃ ｓｅｉｚｕｒｅｓ ｉｎ ｍｉｃｅ ｃａｒｒｙｉｎｇ ａｎ Ｓｃｎ１ａ ｇｅｎｅ ｍｕｔａｔｉｏｎ．Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２７，５９０３－５９１４（２００７））。

【0169】

ＤＳの病理生理を解明し、新規治療法を同定し易くするための作業には、有効な動物モデルの作製と特性解析が不可欠である。マウスにおけるＳＣＮ１Ａ突然変異のモデル化に大きな関心が寄せられているが、これらの動物は交配させにくいことが証明されており、癲癇表現型はバックグラウンド系統の遺伝的特徴に強く影響される。実際に、ＤＳ患者から多能性幹細胞を作製することができるが、個々のニューロンはインビボ発作発生に必要なネットワーク環境を再現しない。単純な脊椎動物種であるゼブラフィッシュ（Ｄａｎｉｏ ｒｅｒｉｏ）は遺伝子操作、費用効率の高い交配及びインビボ新薬発見に大きな利点を備える代替モデルシステムとなる（Ｌｅｓｓｍａｎ，Ｃ．Ａ．，Ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ（Ｄａｎｉｏ ｒｅｒｉｏ）：ａ ｖｅｒｔｅｂｒａｔｅ ｍｏｄｅｌ ｆｏｒ ｈｉｇｈ－ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｏｆ ｃｈｅｍｉｃａｌ ｌｉｂｒａｒｉｅｓ．Ｂｉｒｔｈ Ｄｅｆｅｃｔｓ Ｒｅｓ．Ｃ．Ｅｍｂｒｙｏ Ｔｏｄａｙ ９３，２６８－２８０（２０１１）；Ｄｅｌｖｅｃｃｈｉｏ，Ｃ．，ｅｔ ａｌ．，Ｔｈｅ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ：ａ ｐｏｗｅｒｆｕｌ ｐｌａｔｆｏｒｍ ｆｏｒ ｉｎ ｖｉｖｏ，ＨＴＳ ｄｒｕｇ ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ．Ａｓｓａｙ Ｄｒｕｇ Ｄｅｖ．Ｔｅｃｈｎｏｌ．９，３５４－３６１（２０１１）；Ｒｉｎｋｗｉｔｚ，Ｓ．，ｅｔ ａｌ．，Ｚｅｂｒａｆｉｓｈ：ａｎ ｉｎｔｅｇｒａｔｉｖｅ ｓｙｓｔｅｍ ｆｏｒ ｎｅｕｒｏｇｅｎｏｍｉｃｓ ａｎｄ ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅｓ．Ｐｒｏｇ．Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．９３，２３１－２４３（２０１１））。動物モデルは疾患の既知の遺伝的原因（ＳＣＮ１Ａ突然変異）を基礎とし、疾患（癲癇）の主要な特徴を正確に再現し、疾患をもつ患者で一般に使用されている治療法に反応性又は非反応性である（薬理学的検証）ことが理想的である。このようなモデルが得られるならば、疾患プロセスの解明を図り、新規治療法の開発の足掛かりとなろう。

【0170】

ゼブラフィッシュにおいて、電位依存性ナトリウムチャネルファミリーはｓｃｎ１Ｌａａとｓｃｎ１Ｌａｂ、ｓｃｎ４ａａとｓｃｎ４ａｂ、ｓｃｎ５Ｌａａとｓｃｎ５Ｌａｂ、及びｓｃｎ８ａａとｓｃｎ８ａｂの２個組４組の遺伝子から構成される（Ｎｏｖａｋ，Ａ．Ｅ．，ｅｔ ａｌ．，Ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ ａｎｄ ｌａｒｖａｌ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ｖｏｌｔａｇｅ－ｇａｔｅｄ ｓｏｄｉｕｍ ｃｈａｎｎｅｌ ａｌｐｈａ－ｓｕｂｕｎｉｔ ｇｅｎｅｓ．Ｄｅｖ．Ｄｙｎ．２３５，１９６２－１９７３（２００６））。ゼブラフィッシュｓｃｎ１Ｌａｂ遺伝子はヒトＳＣＮ１Ａとの一致度が７７％であり、中枢神経系で発現される。視運動性反応をアッセイとして使用する化学的突然変異誘発スクリーニングでこの遺伝子（当初の呼称ｄｉｄｙ^ｓ５５２）のホモ接合性ゼブラフィッシュ突然変異体が発見された（Ｓｃｈｏｏｎｈｅｉｍ，Ｐ．Ｊ．，Ａｒｒｅｎｂｅｒｇ，Ａ．Ｂ．，Ｄｅｌ Ｂｅｎｅ，Ｆ．，＆ Ｂａｉｅｒ Ｈ．，Ｏｐｔｏｇｅｎｅｔｉｃ ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ ａｎｄ ｇｅｎｅｔｉｃ ｐｅｒｔｕｒｂａｔｉｏｎ ｏｆ ｓａｃｃａｄｅ－ｇｅｎｅｒａｔｉｎｇ ｎｅｕｒｏｎｓ ｉｎ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ．Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．３０，７１１１－７１２０（２０１０））。これらの型のスクリーニングはアルキル化剤であるＮ－エチル－Ｎ－ニトロソウレア（ＥＮＵ）を使用したランダム点突然変異の誘導に基づき、得られる突然変異は一般的に機能低下し、劣性になる。これはホモ接合性突然変異であるが、ゼブラフィッシュにおけるゲノム重複と別のＮａ_ｖ１．１ホモログ（ｓｃｎ１Ｌａａ）の存在により、ｓｃｎ１Ｌａｂゼブラフィッシュ突然変異体は常染色体優性ヒトドラベ症候群に関連がある。ｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体を分子レベルと行動レベルで特性解析した処、突然変異体は自発性の薬物耐性発作を示すことが実証されたため、癲癇表現型を改善する化合物を同定するための新規高スループットスクリーニングプログラムで使用した。表現型に基づくスクリーニングの結果、ＦＤＡに承認された化合物であるクレミゾールがこれらの突然変異体で自発性痙攣行動とエレクトログラフ発作の有効な阻害薬であるとして同定された。

【0171】

突然変異体ゼブラフィッシュのｓｃｎ１Ｌａｂ発現と特性解析。化学的突然変異誘発スクリーニング中に電位依存性ナトリウムチャネルのドメインＩＩＩに突然変異をもつゼブラフィッシュがＨｅｒｗｉｇ Ｂａｉｅｒ博士により同定された（Ｓｃｈｏｏｎｈｅｉｍ，Ｐ．Ｊ．，Ａｒｒｅｎｂｅｒｇ，Ａ．Ｂ．，Ｄｅｌ Ｂｅｎｅ，Ｆ．，＆ Ｂａｉｅｒ Ｈ．，Ｏｐｔｏｇｅｎｅｔｉｃ ｌｏｃａｌｉｚａｔｉｏｎ ａｎｄ ｇｅｎｅｔｉｃ ｐｅｒｔｕｒｂａｔｉｏｎ ｏｆ ｓａｃｃａｄｅ－ｇｅｎｅｒａｔｉｎｇ ｎｅｕｒｏｎｓ ｉｎ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ．Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．３０，７１１１－７１２０（２０１０））。当初のｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体を７～１０世代にわたってＴｕｐｆｅｌ ｌｏｎｇ（ＴＬ）バックグラウンドに戻し交配させ、コロニーにメチオニン（Ｍ）からアルギニン（Ｒ）への突然変異を確認した（図１Ａ）。逆転写（ＲＴ）及び定量的（ｑ）ＰＣＲの結果、発酵後日数（ｄｐｆ）が３日、５日及び７日の突然変異体幼生ではｓｃｎ１ＬａｂのｍＲＮＡ発現が低下しており（図１Ｂ）、ゼブラフィッシュでこのタンパク質を認識する抗体は得られないことが判明した。予想通り（Ｎｏｖａｋ，Ａ．Ｅ．，ｅｔ ａｌ．，Ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ ａｎｄ ｌａｒｖａｌ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ｖｏｌｔａｇｅ－ｇａｔｅｄ ｓｏｄｉｕｍ ｃｈａｎｎｅｌ ａｌｐｈａ－ｓｕｂｕｎｉｔ ｇｅｎｅｓ．Ｄｅｖ．Ｄｙｎ．２３５，１９６２－１９７３（２００６））、ｓｃｎ１Ｌａｂは幼生発生の初期段階中に顕著に発現され（図１Ｂ）、３ｄｐｆでは中枢神経系で特異的に発現される（図１Ｄ、Ｅ）。ホールマウントｉｎ ｓｉｔｕハイブリダイゼーションの結果、前脳（終脳）、視蓋及び小脳に対応する脳領域に散らばっているが、顕著な発現が判明した。３ｄｐｆのｓｃｎ１Ｌａａでも同様の発現パターンが認められた。５ｄｐｆと７ｄｐｆでは、ＣＮＳ発現はまだ顕著であり、心臓で微弱なｓｃｎ１Ｌａｂシグナルも認められた（図１Ｄ）。例えばＤＳの遺伝子モディファイヤーとして作用すると考えられているサブユニットであるｓｃｎ８ａａ又はｓｃｎ８ａｂ（Ｎａｖ１．６）の相対発現（Ｍａｒｔｉｎ，Ｍ．Ｓ．，ｅｔ ａｌ．，Ｔｈｅ ｖｏｌｔａｇｅ－ｇａｔｅｄ ｓｏｄｉｕｍ ｃｈａｎｎｅｌ Ｓｃｎ８ａ ｉｓ ａ ｇｅｎｅｔｉｃ ｍｏｄｉｆｉｅｒ ｏｆ ｓｅｖｅｒｅ ｍｙｏｃｌｏｎｉｃ ｅｐｉｌｅｐｓｙ ｏｆ ｉｎｆａｎｃｙ．Ｈｕｍ．Ｍｏｌ．Ｇｅｎ．１６，２８９２－２８９９（２００７））から５ｄｐｆで突然変異体と同腹対照に有意な発現差を検出することはできなかった（図１Ｃ）。同様に、５ｄｐｆのマイクロアレイ解析でも他方のホモログ（ｓｃｎ１Ｌａａ）を含む１３種類の異なるゼブラフィッシュｓｃｎサブユニットのｍＲＮＡ発現に補償的変化を検出することはできなかった（表Ｉ）。これらの結果は早期発生中にＣＮＳで発現されるゼブラフィッシュＮａ_ｖ１．１遺伝子に選択的な異常があることを実証するものである。

【0172】

ｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体の大規模トランスクリプトミクス解析。電位依存性イオンチャネルの遺伝性障害は癲癇の病因であることが認められているが、癲癇関連チャネロパチーについて転写変異の調査は報告されていない。偏らない方法で遺伝子発現差を検出するために、約４４，０００個のプローブをカバーするＡｇｉｌｅｎｔゼブラフィッシュチップ（図２Ａ、Ｂ）を使用した。階層的クラスタリング解析の結果、これらのプローブの約２．５％（１０９９個）は５ｄｐｆの突然変異体と同腹対照で発現に差があることが判明し（ｔ検定でｐ≦０．０１；アップレギュレート６７４個とダウンレギュレート４２５個）、４０５個は「不明機能」分類に割り当てられた。ダウンレギュレートされた遺伝子とアップレギュレートされた遺伝子のうちで最大の発現差を示す３０種類の既知遺伝子のリストを図２Ｃに示す。同定された遺伝子の９０％（９９０／１０９９）は０．８～２．０の変化倍率を示したのでこれらの差は小さかった。Ｍｅｃｐ２単一遺伝子突然変異体マウスのマイクロアレイ解析（Ｊｏｒｄａｎ，Ｃ．，ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｒｅｂｅｌｌａｒ ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｐｒｏｆｉｌｅｓ ｏｆ ｍｏｕｓｅ ｍｏｄｅｌｓ ｆｏｒ Ｒｅｔｔ ｓｙｎｄｒｏｍｅ ｒｅｖｅａｌ ｎｏｖｅｌ ＭｅＣＰ２ ｔａｒｇｅｔｓ．ＢＭＣ Ｍｅｄ．Ｇｅｎｅｔ．８，３６（２００７））と同様に、同定された遺伝子の多くは明白なＣＮＳ関連機能及び／又は発現がなかった。

【0173】

変化倍率が最大であったソマトラクチンβとＮａ，Ｋ－ＡＴＰａｓｅの２種類の遺伝子は発現が主に脳下垂体（ｓｍｔｌｂ）（Ｌｏｐｅｚ，Ｍ．，ｅｔ ａｌ．，Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｓｏｍａｔｏｌａｃｔｉｎ β ｇｅｎｅ ｄｕｒｉｎｇ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ．Ｇｅｎｅ Ｅｘｐｒ．Ｐａｔｔｅｒｎｓ ６，１５６－１６１（２００６））又は耳、腸管膨大部及び前腎輸管（ａｔｐ１ａ１ａ．５）（Ｂｌａｓｉｏｌｅ，Ｂ．，ｅｔ ａｌ．，Ｃｌｏｎｉｎｇ，ｍａｐｐｉｎｇ，ａｎｄ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ａ ｓｉｘｔｈ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ Ｎａ，Ｋ－ＡＴＰａｓｅ ａｌｐｈａ１ ｓｕｂｕｎｉｔ ｇｅｎｅ（ａｔｐ１ａ１ａ．５）．Ｍｅｃｈ．Ｄｅｖ．１１９，Ｓｕｐｐｌ １：Ｓ２１１－Ｓ２１４（２００２））に限られていた。アポトーシスに関連する数種類の遺伝子（ｃａｓｐ８、ｃａｓｐ８ｂ及びｃａｓｐ３ｂ）のプローブはマイクロアレイ試験で統計的に有意な変化を示さなかった。ｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体で発現が変化している遺伝子のうちの６個はこれまでに神経障害に関係があるとされている（例えばｐｃｄｈ１９（点頭癲癇性脳症）、ｃｙｆｉｐ１及びｆｘｒ２（脆弱Ｘ症候群）、ｏｃｒｌ（ロウ症候群）、ｕｂａｐ２ｌ（パーキンソン病）並びにｏｃａ２（アンジェルマン症候群））。１４個のランダムに選択した遺伝子についてｑＰＣＲを使用してマイクロアレイによる遺伝子発現測定を検証した（図３Ａ）。

【0174】

遺伝子オントロジー（ＧＯ）アノテーションを使用して全遺伝子に生物学的機能を割り当て、少なくとも１．５倍の発現変化とｐ値＜０．０１を示す４８２個の遺伝子を更に分類した（図３Ｃ）。カルシウムイオン結合遺伝子はアネキシンＡ１ｃ、Ａ１ｂ及び２ａと、スペクトリンα２と、ニューレキシン２ａと、カルシンテニン１と、パルバルブミン３を含む。軸索起始部（ｓｐｎａ２）とＧＡＢＡ受容体のユビキチンドメイン（ｍａｐ１ｌｃ３ｂ）の電位依存性ナトリウムチャネルのクラスタリングに関与する遺伝子であるギャップジャンクションチャネル（ｃｘ４３）にも顕著な変化が認められた。マイクロアレイで検出されなかった３個の別の遺伝子をｑＰＣＲ解析（図３Ｂ）に選択した処、データマイニングを使用してＳＣＮ１Ａと相関することが分かっており、数種類の発作モデルでダウンレギュレートされている遺伝子であるｈｃｎ１（Ｎｏａｍ，Ｙ．，ｅｔ ａｌ．，Ｔｏｗａｒｄｓ ａｎ ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ ｖｉｅｗ ｏｆ ＨＣＮ ｃｈａｎｎｅｌ ｒｏｌｅ ｉｎ ｅｐｉｌｅｐｓｙ．Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．２１，８７３－８７９（２０１１））は同腹対照と比較してｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体で有意に減っていた（スチューデントの両側ｔ検定でｐ＜０．０５）。一方、例えば反復性の興奮性シナプスの形成に関連するシナプス形成と癲癇に関与する遺伝子であるｈｏｍｅｒとｂｄｎｆ（Ａｖｅｄｉｓｓｉａｎ，Ｍ．，ｅｔ ａｌ．，Ｈｉｐｐｏｃａｍｐａｌ ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ ｕｓｉｎｇ ｔｈｅ ＯＲＥＳＴＥＳ ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ ｓｈｏｗｓ ｔｈａｔ ｈｏｍｅｒ １ａ ｍＲＮＡ ｉｓ ｕｐｒｅｇｕｌａｔｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ａｃｕｔｅ ｐｅｒｉｏｄ ｏｆ ｔｈｅ ｐｉｌｏｃａｒｐｉｎｅ ｅｐｉｌｅｐｓｙ ｍｏｄｅｌ．Ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ １７，１３０－１３６（２００７）；Ｔｏｎｇｉｏｒｇｉ，Ｅ．，ｅｔ ａｌ．，Ｂｒａｉｎ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃ ｆａｃｔｏｒ ｍＲＮＡ ａｎｄ ｐｒｏｔｅｉｎ ａｒｅ ｔａｒｇｅｔｅｄ ｔｏ ｄｉｓｃｒｅｔｅ ｄｅｎｄｒｉｔｉｃ ｌａｍｉｎａｓ ｂｙ ｅｖｅｎｔｓ ｔｈａｔ ｔｒｉｇｇｅｒ ｅｐｉｌｅｐｔｏｇｅｎｅｓｉｓ．Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２４，６８４２－６８５２（２００４））は変わらなかった。

【0175】

ｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体ゼブラフィッシュにおける自発性発作。例えば癲癇様放電を検出できる最初の幼生段階である３ｄｐｆから開始して自発性のエレクトログラフ発作の徴候についてｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体をモニターした（Ｂａｒａｂａｎ，Ｓ．Ｃ．，ｅｔ ａｌ．，Ａ ｌａｒｇｅ－ｓｃａｌｅ ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ ｓｃｒｅｅｎ ｔｏ ｉｄｅｎｔｉｆｙ ｓｅｉｚｕｒｅ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ．Ｅｐｉｌｅｐｓｉａ ４８，１１５１－１５７（２００７）；Ｈｏｒｔｏｐａｎ，Ｇ．Ａ．，ｅｔ ａｌ．，Ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓ ｓｅｉｚｕｒｅｓ ａｎｄ ａｌｔｅｒｅｄ ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ＧＡＢＡ ｓｉｇｎａｌｉｎｇ ｐａｔｈｗａｙｓ ｉｎ ａ ｍｉｎｄ ｂｏｍｂ ｍｕｔａｎｔ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ．Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．３０，１３７１８－１３７２８（２０１０）；Ｈｕｎｔ，Ｒ．Ｆ．，Ｈｏｒｔｏｐａｎ，Ｇ．Ａ．，Ｇｉｌｌｅｓｐｉｅ，Ａ．，＆ Ｂａｒａｂａｎ，Ｓ．Ｃ．，Ａ ｎｏｖｅｌ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｈｙｐｅｒｔｈｅｒｍｉａ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｓｅｉｚｕｒｅｓ ｒｅｖｅａｌｓ ａ ｒｏｌｅ ｆｏｒ ＴＲＰＶ４ ｃｈａｎｎｅｌｓ ａｎｄ ＮＭＤＡ－ｔｙｐｅ ｇｌｕｔａｍａｔｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ．Ｅｘｐ．Ｎｅｕｒｏｌ．２３７，１９９－２０６（２０１２）；Ｂａｒａｂａｎ，Ｓ．Ｃ．，Ｔａｙｌｏｒ，Ｍ．Ｒ．，Ｃａｓｔｒｏ，Ｐ．Ａ．，＆ Ｂａｉｅｒ Ｈ．，Ｐｅｎｔｙｌｅｎｅｔｅｔｒａｚｏｌｅ ｉｎｄｕｃｅｄ ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ｂｅｈａｖｉｏｒ，ｎｅｕｒａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｃ－ｆｏｓ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ １３１，７５９－７６８（２００５）；Ｃｈｅｇｅ，Ｓ．Ｗ．，Ｈｏｒｔｏｐａｎ，Ｇ．Ａ．，Ｄｉｎｄａｙ，Ｍ．Ｔ．，＆ Ｂａｒａｂａｎ，Ｓ．Ｃ．，Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ＫＣＮＱ ｃｈａｎｎｅｌｓ ｉｎ ｌａｒｖａｌ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ．Ｄｅｖ．Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．７２，１８６－１９８（２０１２））。突然変異体幼生は色素凝集の異常を表すその「黒色」外観（図４Ａ）により識別され、従来報告されているように、１０～１２ｄｐｆで早期死亡する（Ｎｏｖａｋ，Ａ．Ｅ．，ｅｔ ａｌ．，Ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ ａｎｄ ｌａｒｖａｌ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ｖｏｌｔａｇｅ－ｇａｔｅｄ ｓｏｄｉｕｍ ｃｈａｎｎｅｌ ａｌｐｈａ－ｓｕｂｕｎｉｔ ｇｅｎｅｓ．Ｄｅｖ．Ｄｙｎ．２３５，１９６２－１９７３（２００６））。麻痺させて寒天で固定化したｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体からの前脳細胞外フィールド記録は３ｄｐｆから開始する頻繁な短い発作間様バーストと振幅の大きい長時間の発作時様イベントを特徴とし（ｎ＝４）、４～７ｄｐｆで徐々に顕著になった（ｎ＝１３２）（図２Ｃ）。これらのイベントは３ｄｐｆで突然変異体の１００％、４ｄｐｆで１００％、５ｄｐｆで９７％、６ｄｐｆで９８％、７ｄｐｆで１００％に確認された。

【0176】

年齢をマッチさせた同腹対照ではどの発生段階でも異常な電気的イベントは認められなかった（ｎ＝３６）。温熱療法により誘発される発作（Ｈｕｎｔ，Ｒ．Ｆ．，Ｈｏｒｔｏｐａｎ，Ｇ．Ａ．，Ｇｉｌｌｅｓｐｉｅ，Ａ．，＆ Ｂａｒａｂａｎ，Ｓ．Ｃ．，Ａ ｎｏｖｅｌ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｈｙｐｅｒｔｈｅｒｍｉａ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｓｅｉｚｕｒｅｓ ｒｅｖｅａｌｓ ａ ｒｏｌｅ ｆｏｒ ＴＲＰＶ４ ｃｈａｎｎｅｌｓ ａｎｄ ＮＭＤＡ－ｔｙｐｅ ｇｌｕｔａｍａｔｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ．Ｅｘｐ．Ｎｅｕｒｏｌ．２３７，１９９－２０６（２０１２））は５ｄｐｆ ｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体と対照に明白に同等の温度閾値で誘発させることができた（突然変異体：２６．９±０．５℃；ｎ＝１４；対照：２５．９±０．５℃；ｎ＝１４；ｔ検定でｐ＝０．１６４）。一方、これらの測定は突然変異体では高頻度自発性癲癇様放電の同時発生により複雑になった。突然変異体は遊泳活動が高レベルであり、４ｄｐｆで開始する全身痙攣と方向性のない速い運動から構成される非誘発性発作様の行動を示した（ｎ＝３６）。活動過剰と痙攣行動を示すｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体の代表的な移動運動追跡プロットを図４Ｂに示す。この行動はペンチレンテトラゾールに暴露した幼生でステージＩＩＩ発作として分類されたものと同様である（Ｂａｒａｂａｎ，Ｓ．Ｃ．，Ｔａｙｌｏｒ，Ｍ．Ｒ．，Ｃａｓｔｒｏ，Ｐ．Ａ．，＆ Ｂａｉｅｒ Ｈ．，Ｐｅｎｔｙｌｅｎｅｔｅｔｒａｚｏｌｅ ｉｎｄｕｃｅｄ ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ｂｅｈａｖｉｏｒ，ｎｅｕｒａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｃ－ｆｏｓ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ １３１，７５９－７６８（２００５））。対照にはどの発生段階でも発作行動は認められなかった（ｎ＝３６）。突然変異体と同腹対照幼生のプールのうち、ｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体はシャーレの側面に集まったままであり、魚類の接触走性の１形態であるとみなされる（Ｅｌｌｉｓ，Ｌ．Ｄ．，Ｓｅｉｂｅｒｔ，Ｊ．，＆ Ｓｏａｎｅｓ，Ｋ．Ｈ．，Ｄｉｓｔｉｎｃｔ ｍｏｄｅｓ ｏｆ ｉｎｄｕｃｅｄ ｈｙｐｅｒａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ｌａｒｖａｅ．Ｂｒａｉｎ Ｒｅｓ．１４４９，４６－５９（２０１２））。これらの結果はｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体ゼブラフィッシュにおける顕著な癲癇表現型を明示するものである。

【0177】

ｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体ゼブラフィッシュの薬理学的評価。ＳＣＮ１Ａ突然変異に伴う発作は大半のＡＥＤに対する反応性が低い。薬物感受性を評価するために、自発性のエレクトログラフ発作を寒天包埋ｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体（５～６ｄｐｆ）で基線条件下に記録し、市販のＡＥＤの投与後に再び記録した。全薬物は１ｍＭの濃度で薬浴させ、薬物毎に７匹を試験した。ｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体における癲癇様イベント頻度（発作間様放電と発作時様放電を含む）と発作に費やされた時間の割合はバルプロ酸塩、ジアゼパム、臭化カリウム及びスチリペントールにより低下した（図５Ａ、Ｂ、Ｄ）。バースト持続時間はこれらの薬物暴露のいずれでも有意に変化しなかった（図５Ｃ）。

【0178】

予想通り、大半のＡＥＤは効果がなく、カルバマゼピン（７匹のうち２匹）、エトスクシミド（７匹のうち４匹）又はビガバトリン（７匹のうち６匹）に暴露後に癲癇様活動はより高頻度になった。ＤＳの小児はケト原性食（ＫＤ）に反応することが多い（Ｄｒａｖｅｔ，Ｃ．，ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｖｅｒｅ ｍｙｏｃｌｏｎｉｃ ｅｐｉｌｅｐｓｙ ｉｎ ｉｎｆａｎｃｙ：Ｄｒａｖｅｔ ｓｙｎｄｒｏｍｅ．Ａｄｖ．Ｎｅｕｒｏｌ．９５，７１－１０２（２００５））ので、別クラッチのｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体、同腹及びＷＴ対照を４ｄｐｆから開始して１形態のケト原性食に４８時間暴露した。ＫＤに暴露した幼生の６ｄｐｆにおける移動運動追跡データによると、１０匹の突然変異体のうちの７匹で対照レベルまでの発作様行動の抑制が確認される（図Ｅ；平均速度，処理後突然変異体＝０．４３±０．０９ｍｍ／秒，ｎ＝１６；未処理突然変異体＝０．８１±０．０５ｍｍ／秒，ｎ＝２８；順位に基づくクルスカル・ウォリスＡＮＯＶＡとダンの多重対比較検定でｐ＜０．０５）。ＫＤを給餌した同腹対照（平均速度＝０．６３±０．０５ｍｍ／秒，ｎ＝２０）では６ｄｐｆの未処理ＷＴ幼生（平均速度＝０．６２±０．０７ｍｍ／秒；ｎ＝２０）に比較して遊泳行動の有意な差は認められなかった。ケト原性食への急性暴露（２０分）は移動運動アッセイにおける突然変異体発作行動に何の影響もなかった（ｎ＝１４；平均速度の変化＜３４％）。移動運動アッセイで使用した同一ゼブラフィッシュから得られたその後の前脳フィールド記録（図５Ｆ、上段トレース）によると、胚培養液に暴露したｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体における自発性癲癇様放電の発生と、ＫＤに４８時間暴露した突然変異体におけるバースト活動の抑制が確認された（図５Ｆ、下段トレース）。これらの結果はｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体の薬理学的プロファイルがＤＳの小児で見られるものと似ていることを実証するものである。

【0179】

ｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体における高スループット薬物スクリーニング。行動上の発作活動は移動運動追跡フォーマットを使用して簡単且つ迅速にモニターされる（Ｂａｒａｂａｎ，Ｓ．Ｃ．，ｅｔ ａｌ．，Ａ ｌａｒｇｅ－ｓｃａｌｅ ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ ｓｃｒｅｅｎ ｔｏ ｉｄｅｎｔｉｆｙ ｓｅｉｚｕｒｅ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ．Ｅｐｉｌｅｐｓｉａ ４８，１１５１－１５７（２００７）；Ｈｏｒｔｏｐａｎ，Ｇ．Ａ．，ｅｔ ａｌ．，Ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓ ｓｅｉｚｕｒｅｓ ａｎｄ ａｌｔｅｒｅｄ ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ＧＡＢＡ ｓｉｇｎａｌｉｎｇ ｐａｔｈｗａｙｓ ｉｎ ａ ｍｉｎｄ ｂｏｍｂｍｕｔａｎｔ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ．Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．３０，１３７１８－１３７２８（２０１０）；Ｂａｒａｂａｎ，Ｓ．Ｃ．，Ｔａｙｌｏｒ，Ｍ．Ｒ．，Ｃａｓｔｒｏ，Ｐ．Ａ．，＆ Ｂａｉｅｒ Ｈ．，Ｐｅｎｔｙｌｅｎｅｔｅｔｒａｚｏｌｅ ｉｎｄｕｃｅｄ ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ｂｅｈａｖｉｏｒ，ｎｅｕｒａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｃ－ｆｏｓ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ １３１，７５９－７６８（２００５）；Ｃｈｅｇｅ，Ｓ．Ｗ．，Ｈｏｒｔｏｐａｎ，Ｇ．Ａ．，Ｄｉｎｄａｙ，Ｍ．Ｔ．，＆ Ｂａｒａｂａｎ，Ｓ．Ｃ．，Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ＫＣＮＱ ｃｈａｎｎｅｌｓ ｉｎ ｌａｒｖａｌ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ．Ｄｅｖ．Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．７２，１８６－１９８（２０１２）；Ｂｅｒｇｈｍａｎｓ，Ｓ．，Ｈｕｎｔ，Ｊ．，Ｒｏａｃｈ，Ａ．，＆ Ｇｏｌｄｓｍｉｔｈ，Ｐ．，Ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ｏｆｆｅｒ ｔｈｅ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｆｏｒ ａ ｐｒｉｍａｒｙ ｓｃｒｅｅｎ ｔｏ ｉｄｅｎｔｉｆｙ ａ ｗｉｄｅ ｖａｒｉｅｔｙ ｏｆ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ａｎｔｉｃｏｎｖｕｌｓａｎｔｓ．Ｅｐｉｌｅｐｓｙ Ｒｅｓ．７５，１８－２８（２００７）；Ｂａｘｅｎｄａｌｅ，Ｓ．，ｅｔ ａｌ．，Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ｗｉｔｈ ａｎｔｉ－ｃｏｎｖｕｌｓａｎｔ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｉｎ ａ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｅｐｉｌｅｐｔｉｃ ｓｅｉｚｕｒｅｓ．Ｄｉｓ．Ｍｏｄｅｌ．Ｍｅｃｈ．５，７７３－７７４（２０１２）；Ｃａｒｉｏ，Ｃ．Ｌ．，Ｆａｒｒｅｌｌ，Ｔ．Ｃ．，Ｍｉｌａｎｅｓｅ，Ｃ．，＆ Ｂｕｒｔｏｎ，Ｅ．Ａ．，Ａｕｔｏｍａｔｅｄ ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ ｏｆ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ｌａｒｖａｌ ｍｏｖｅｍｅｎｔ．Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．５８９，３７０３－３７０８（２０１１）；Ｗｉｎｔｅｒ，Ｍ．Ｊ．，ｅｔ ａｌ．，Ｖａｌｉｄａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｌａｒｖａｌ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ｌｏｃｏｍｏｔｏｒ ａｓｓａｙ ｆｏｒ ａｓｓｅｓｓｉｎｇ ｔｈｅ ｓｅｉｚｕｒｅ ｌｉａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｅａｒｌｙ－ｓｔａｇｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｄｒｕｇｓ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｔｏｘ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ５，１７６－１８７（２００８）；Ｏｒｅｌｌａｎａ－Ｐａｕｃａｒ，Ａ．Ｍ．，ｅｔ ａｌ．，Ａｎｔｉｃｏｎｖｕｌｓａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｂｉｓａｂｏｌｅｎｅ ｓｅｓｑｕｉｔｅｒｐｅｎｏｉｄｓ ｏｆ Ｃｕｒｃｕｍａ ｌｏｎｇａ ｉｎ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ａｎｄ ｍｏｕｓｅ ｓｅｉｚｕｒｅ ｍｏｄｅｌｓ．Ｅｐｉｌｅｐｓｙ Ｂｅｈ．２４，１４－２２（２０１２）（図４Ｂ及び５Ｂ１）ので、突然変異体行動をステージ０（遊泳活動が僅少）又はステージＩ（遊泳活動が亢進しているが、非痙攣性）、例えば正常なＷＴ突然変異体で見られるものと同等の行動まで抑制する化合物について化合物ライブラリーをスクリーニングするように高スループット表現型ストラテジーをデザインした。ＥｔｈｏＶｉｓｉｏｎ追跡ソフトウェア（Ｎｏｌｄｕｓ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）と高速カメラを使用して幼生活動の自動測定を行った。従来の試験により、≧２０ｍｍ／秒の高速運動が突発性の発作様痙攣（ステージＩＩＩ）に対応することが確認されている（Ｗｉｎｔｅｒ，Ｍ．Ｊ．，ｅｔ ａｌ．，Ｖａｌｉｄａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｌａｒｖａｌ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ｌｏｃｏｍｏｔｏｒ ａｓｓａｙ ｆｏｒ ａｓｓｅｓｓｉｎｇ ｔｈｅ ｓｅｉｚｕｒｅ ｌｉａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｅａｒｌｙ－ｓｔａｇｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｄｒｕｇｓ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｔｏｘ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ５，１７６－１８７（２００８）；Ｏｒｅｌｌａｎａ－Ｐａｕｃａｒ，Ａ．Ｍ．，ｅｔ ａｌ．，Ａｎｔｉｃｏｎｖｕｌｓａｎｔ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｂｉｓａｂｏｌｅｎｅ ｓｅｓｑｕｉｔｅｒｐｅｎｏｉｄｓ ｏｆ Ｃｕｒｃｕｍａ ｌｏｎｇａ ｉｎ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ａｎｄ ｍｏｕｓｅ ｓｅｉｚｕｒｅ ｍｏｄｅｌｓ．Ｅｐｉｌｅｐｓｙ Ｂｅｈ．２４，１４－２２（２０１２））。

【0180】

９６ウェルフォーマットを使用して、基線における突然変異体遊泳活動を自動追跡した後、試験化合物（１００μｌ）の添加後に再び追跡し、各化合物を５ｄｐｆの個々の幼生６～１２匹で試験した。胚培養液における２回の連続する記録エポック間の突然変異体遊泳活動の変化を基線とみなし、図６Ａに示す（ｎ＝２８）。溶液交換のみに伴う基線記録の１７．３の標準偏差に基づき、（平均速度の変化として測定した）運動を≧３４％抑制した化合物をスクリーニングした。このアプローチを検証するために、このアッセイを使用して先ず１１種類のＡＥＤとＫＤをスクリーニングした。電気生理学的アッセイ（図５）から予想されるように、ジアゼパム、臭化カリウム、スチリペントール、バルプロ酸塩及びＫＤへの４８時間暴露は移動運動アッセイで発作行動を有効に抑制し（図６Ｂ）、アロプレグナロンに類縁の神経刺激性ステロイドであるガナキソロンも有効であった。次に、米国食品医薬品局（ＦＤＡ）に承認された毒性試験済みの薬物を含むライブラリーから６６７μＭの初期濃度で試験化合物をスクリーニングした。

【0181】

インビボスクリーニングした３２０種類の化合物のうちで１８種類はｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体における自発性発作をステージ０もしくはステージＩの行動と同等のレベルまで有意に抑制すること、及び／又は平均遊泳速度を低下させることが判明した（図６Ｃの赤丸）。次にこれらの１８種類の化合物を６６７μＭ、６７μＭ及び６．７μＭの濃度で別クラッチのｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体で再試験した。初期スクリーニングで８１種類の化合物が致死性であるとみなされ、即ち３０分間暴露後に目に見える心拍又は接触に反応する運動がなく、１００倍の希釈倍率で再評価したが、これらのうちでそれ以上進行したものは皆無であった。抗痙攣性があると推定されるが、９６ウェル移動運動アッセイで６６７μＭでも無効であった多数の他の化合物（ベクラミド、アミノヒドロキシ酪酸及びチレタミン）を薬物ライブラリーに加えた。再試験した化合物のうちの１４種類は第２のクラッチのｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体でも発作行動を首尾よく抑制することができないか、又は最高薬物濃度でしか行動を抑制できなかった。次に、全３種類の薬物濃度で発作により誘発される遊泳活動と平均速度の抑制に有効であった（１８種類のうちの）４種類の化合物、即ちゾキサゾラミン、クレミゾールＨＣｌ、クロルギリンＨＣｌ及びトルペリゾンＨＣｌを更に試験するために選択した（図６Ｄ）。これらの化合物の各々を移動運動アッセイで１００μＭの濃度で３回目の評価を行った後、前脳脳波活動をモニターした。クロルギリン（モノアミンオキシダーゼＡ阻害薬）と、筋肉弛緩薬であるゾキサゾラミン（Ｈａｄｒａ，Ｒ．＆ Ｍｉｌｌｉｃｈａｐ Ｊ．Ｇ．，Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ ｏｆ ｍｏｔｏｒ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｉｎ ｃｅｒｅｂｒａｌ ｐａｌｓｙ：ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｚｏｘａｚｏｌａｍｉｎｅ（ｆｌｅｘｉｎ），ａ ｎｅｗ ｍｕｓｃｕｌａｒ ｒｅｌａｘａｎｔ ａｇｅｎｔ．Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ ６，８４３－８５２（１９５６））及びトルペリゾン（Ｓａｋｉｔａｍａ，Ｋ．，Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｃｅｎｔｒａｌｌｙ ａｃｔｉｎｇ ｍｕｓｃｌｅ ｒｅｌａｘａｎｔｓ ｏｎ ｔｈｅ ｉｎｔｒａｔｈｅｃａｌ ｎｏｒａｄｒｅｎａｌｉｎｅ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｆａｃｉｌｉｔａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｆｌｅｘｏｒ ｒｅｆｌｅｘ ｍｅｄｉａｔｅｄ ｂｙ ｇｒｏｕｐ ＩＩ ａｆｆｅｒｅｎｔ ｆｉｂｅｒｓ ｉｎ ｒａｔｓ．Ｊｐｎ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．６３，３６９－７３６（１９９３））はこの濃度で遊泳活動を抑制したので、「疑陽性」とみなしたが、同一の突然変異体を寒天に包埋した場合には、やはりエレクトログラフ発作イベントが認められた（図６Ｅ参照）。

【0182】

ただ１種類の化合物、即ちクレミゾール（抗ヒスタミン及びＮＳ４Ｂ ＲＮＡ結合性阻害薬）（Ｆｉｎｋｅｌｓｔｅｉｎ，Ｍ．，Ｋｒｏｍｅｒ，Ｃ．Ｍ．，Ｓｗｅｅｎｅｙ，Ｓ．Ａ．，＆ Ｄｅｌａｈｕｎｔ Ｃ．Ｓ．，Ｓｏｍｅ ａｓｐｅｃｔｓ ｏｆ ｔｈｅ ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ｏｆ ｃｌｅｍｉｚｏｌｅ ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ．Ｊ．Ａｍ．Ｐｈａｒｍ．Ａｓｓｏｃ．Ａｍ．Ｐｈａｒｍ．Ａｓｓｏｃ．４９，１８－２２（１９６０）；Ｅｉｎａｖ，Ｓ．，Ｓｏｂｏｌ，Ｈ．Ｄ．，Ｇｅｈｒｉｇ，Ｅ．，＆ Ｇｌｅｎｎ Ｊ．Ｓ．，Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ｏｆ ａ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ ｔａｒｇｅｔ ａｎｄ ｉｔｓ ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｂｙ ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃ ａｆｆｉｎｉｔｙ ａｎａｌｙｓｉｓ．Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２６，１０１９－１０２７（２００８））のみが両方のアッセイで自発性発作活動を抑制するのに有効であった（図６Ｄ～Ｅ）。クレミゾールは移動運動アッセイで６．２５～５０μＭの濃度では発作行動に有意な効果がなかった（ｎ＝３３）。急性クレミゾール投与の治療能力の別の評価として、１００μＭクレミゾールは１５ｍＭペンチレンテトラゾールに暴露したＷＴゼブラフィッシュ（図６Ｄ；ｎ＝１０）、即ちＧＡＢＡ受容体拮抗作用に基づく急性発作のモデルで発作行動の抑制に有効であることが実証された。これらの結果は、ドラベ症候群に対する潜在的なリード化合物を同定するための高スループットスクリーニングでｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体を使用できることを示唆している。

【0183】

本願に記載するｓｃｎ１Ｌａｂゼブラフィッシュ突然変異体は小児における悲劇的な形態の薬物耐性癲癇であるドラベ症候群の特徴を再現するナトリウムチャネル突然変異の最初の単純な脊椎動物モデルである。これらの突然変異体は痙攣性行動を含む活動過剰、自発性のエレクトログラフ発作、寿命の短縮及びヒト病態に似た薬理学的プロファイルを示す。ｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体の別の分子解析によると、全体的な遺伝子発現の著しい変化はなく、ＲＮＡレベルで他の電位依存性Ｎａ^＋チャネルサブユニットによる補償がないと思われる。ＳＣＮ１Ａ突然変異に伴う癲癇表現型を改善する能力をもつリード化合物を同定する２段階表現型薬物スクリーニングストラテジーの結果、１種類のＦＤＡ承認薬（クレミゾール）が同定された。

【0184】

ＤＳ患者では脳波（ＥＥＧ）活動は一般的に生後１年間正常であるが、１～９歳で異常な突発性の多棘波活動へと発展する。ｓｃｎ１ａ発現が顕著になった年齢の発生中のゼブラフィッシュ幼生でこの年齢依存パターンを模倣した。非常に若い幼生（３ｄｐｆ）の前脳細胞外記録はほぼ正常であり、たまに多棘波活動の小バーストが現れた。振幅の大きい多棘波バースト放電を伴う高頻度の短い発作間様活動は幼生が成長するにつれて顕著になった。これらの電気的イベントの構成はペンチレンテトラゾール（Ｂａｒａｂａｎ，Ｓ．Ｃ．，Ｔａｙｌｏｒ，Ｍ．Ｒ．，Ｃａｓｔｒｏ，Ｐ．Ａ．，＆ Ｂａｉｅｒ Ｈ．，Ｐｅｎｔｙｌｅｎｅｔｅｔｒａｚｏｌｅ ｉｎｄｕｃｅｄ ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ｂｅｈａｖｉｏｒ，ｎｅｕｒａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｃ－ｆｏｓ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ １３１，７５９－７６８（２００５））、４－アミノピリジン（Ｂａｒａｂａｎ，Ｓ．Ｃ．，ｅｔ ａｌ．，Ａ ｌａｒｇｅ－ｓｃａｌｅ ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ ｓｃｒｅｅｎ ｔｏ ｉｄｅｎｔｉｆｙ ｓｅｉｚｕｒｅ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ．Ｅｐｉｌｅｐｓｉａ ４８，１１５１－１５７（２００７））、リノピルジン（Ｃｈｅｇｅ，Ｓ．Ｗ．，Ｈｏｒｔｏｐａｎ，Ｇ．Ａ．，Ｄｉｎｄａｙ，Ｍ．Ｔ．，＆ Ｂａｒａｂａｎ，Ｓ．Ｃ．，Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｏｆ ＫＣＮＱ ｃｈａｎｎｅｌｓ ｉｎ ｌａｒｖａｌ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ．Ｄｅｖ．Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌ．７２，１８６－１９８（２０１２））又は温熱療法（Ｈｕｎｔ，Ｒ．Ｆ．，Ｈｏｒｔｏｐａｎ，Ｇ．Ａ．，Ｇｉｌｌｅｓｐｉｅ，Ａ．，＆ Ｂａｒａｂａｎ，Ｓ．Ｃ．，Ａ ｎｏｖｅｌ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｈｙｐｅｒｔｈｅｒｍｉａ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｓｅｉｚｕｒｅｓ ｒｅｖｅａｌｓ ａ ｒｏｌｅ ｆｏｒ ＴＲＰＶ４ ｃｈａｎｎｅｌｓ ａｎｄ ＮＭＤＡ－ｔｙｐｅ ｇｌｕｔａｍａｔｅ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ．Ｅｘｐ．Ｎｅｕｒｏｌ．２３７，１９９－２０６（２０１２））に暴露した野生型幼生で従来記載されているものに似ていた。

【0185】

エレクトログラフ発作活動の出現は自由に行動する突然変異体における高速遊泳活動と短時間の姿勢悪化を伴う全身痙攣である活動過剰に対応する。これらの型の自発性行動は野生型幼生では認められず、この点でも、痙攣誘引剤に暴露中のみに従来認められている結果と似ている。これらの行動は発作活動の間接的指標であり、自動移動運動追跡ソフトウェアを使用してマルチウェルフォーマットで薬物投与と致死性の急速インビボ評価に使用できよう（Ｂｅｒｇｈｍａｎｓ，Ｓ．，Ｈｕｎｔ，Ｊ．，Ｒｏａｃｈ，Ａ．，＆ Ｇｏｌｄｓｍｉｔｈ，Ｐ．，Ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ｏｆｆｅｒ ｔｈｅ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｆｏｒ ａ ｐｒｉｍａｒｙ ｓｃｒｅｅｎ ｔｏ ｉｄｅｎｔｉｆｙ ａ ｗｉｄｅ ｖａｒｉｅｔｙ ｏｆ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ａｎｔｉｃｏｎｖｕｌｓａｎｔｓ．Ｅｐｉｌｅｐｓｙ Ｒｅｓ．７５，１８－２８（２００７）；Ｂａｘｅｎｄａｌｅ，Ｓ．，ｅｔ ａｌ．，Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ｗｉｔｈ ａｎｔｉ－ｃｏｎｖｕｌｓａｎｔ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｉｎ ａ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｅｐｉｌｅｐｔｉｃ ｓｅｉｚｕｒｅｓ．Ｄｉｓ．Ｍｏｄｅｌ．Ｍｅｃｈ．５，７７３－７７４（２０１２）；Ｗｉｎｔｅｒ，Ｍ．Ｊ．，ｅｔ ａｌ．，Ｖａｌｉｄａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｌａｒｖａｌ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ｌｏｃｏｍｏｔｏｒ ａｓｓａｙ ｆｏｒ ａｓｓｅｓｓｉｎｇ ｔｈｅ ｓｅｉｚｕｒｅ ｌｉａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｅａｒｌｙ－ｓｔａｇｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｄｒｕｇｓ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｔｏｘ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ５，１７６－１８７（２００８））。ｓｃｎ１Ｌａｂゼブラフィッシュ突然変異体における発作はケト原性食とＤＳ患者に臨床処方されている４種類のＡＥＤ（例えばバルプロ酸塩、ベンゾジアゼピン、臭化カリウム及びスチリペントール）に反応性であった。

【0186】

興味深いことに、ｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体におけるエレクトログラフ発作イベントは数種類の市販のＡＥＤに対して変わらなかった（又は恐らく悪化した）。電気的イベントが生じないようにするためには１ｍＭよりも高い薬物濃度が必要になると考えられるが、このような濃度は高く、潜在的に非選択的な濃度であるとみなされる。幼生ゼブラフィッシュで急性ＰＴＺ誘発性発作モデルを使用した薬物試験（Ｂａｒａｂａｎ，Ｓ．Ｃ．，ｅｔ ａｌ．，Ａ ｌａｒｇｅ－ｓｃａｌｅ ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ ｓｃｒｅｅｎ ｔｏ ｉｄｅｎｔｉｆｙ ｓｅｉｚｕｒｅ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ．Ｅｐｉｌｅｐｓｉａ ４８，１１５１－１５７（２００７）；Ｂｅｒｇｈｍａｎｓ，Ｓ．，Ｈｕｎｔ，Ｊ．，Ｒｏａｃｈ，Ａ．，＆ Ｇｏｌｄｓｍｉｔｈ，Ｐ．，Ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ｏｆｆｅｒ ｔｈｅ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｆｏｒ ａ ｐｒｉｍａｒｙ ｓｃｒｅｅｎ ｔｏ ｉｄｅｎｔｉｆｙ ａ ｗｉｄｅ ｖａｒｉｅｔｙ ｏｆ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ａｎｔｉｃｏｎｖｕｌｓａｎｔｓ．Ｅｐｉｌｅｐｓｙ Ｒｅｓ．７５，１８－２８（２００７）；Ｂａｘｅｎｄａｌｅ，Ｓ．，ｅｔ ａｌ．，Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ｗｉｔｈ ａｎｔｉ－ｃｏｎｖｕｌｓａｎｔ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｉｎ ａ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｅｐｉｌｅｐｔｉｃ ｓｅｉｚｕｒｅｓ．Ｄｉｓ．Ｍｏｄｅｌ．Ｍｅｃｈ．５，７７３－７７４（２０１２）；Ａｆｒｉｋａｎｏｖａ，Ｔ．，ｅｔ ａｌ．，Ｖａｌｉｄａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ｐｅｎｔｙｌｅｎｅｔｅｔｒａｚｏｌ ｓｅｉｚｕｒｅ ｍｏｄｅｌ：ｌｏｃｏｍｏｔｏｒ ｖｅｒｓｕｓ ｅｌｅｃｔｒｏｇｒａｐｈｉｃ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ｔｏ ａｎｔｉｅｐｉｌｅｐｔｉｃ ｄｒｕｇｓ．ＰＬｏＳ Ｏｎｅ ８，ｅ５４１６６（２０１３））では、多くの場合に１ｍＭ以下のＡＥＤ濃度で抗癲癇活性を評価するのに十分であった。７種類の異なるＡＥＤに反応できないので、このモデルは薬物耐性癲癇の臨床的定義に合致する（ｄｅ Ｔｏｆｆｏｌ，Ｂ．，ｅｔ ａｌ．，ＥＳＰＥＲＡ ｓｔｕｄｙ：Ａｐｐｌｉｃａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅ ｎｅｗ ＩＬＡＥ ｃｒｉｔｅｒｉａ ｆｏｒ ａｎｔｉｅｐｉｌｅｐｔｉｃ ｄｒｕｇ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｏｆ ｆｏｃａｌ ｅｐｉｌｅｐｓｉｅｓ ｉｎ ｃｕｒｒｅｎｔ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｐｒａｃｔｉｃｅ．Ｅｐｉｌｅｐｓｙ Ｂｅｈ ２５，１６６－１６９（２０１２））。

【0187】

約４０年間にわたり、新規ＡＥＤの発見と同定は齧歯類における後天性又は急性発作の前臨床動物モデルにほぼ完全に依存している（Ｌｏｓｃｈｅｒ，Ｗ．＆ Ｓｃｈｍｉｄｔ，Ｄ．，Ｍｏｄｅｒｎ ａｎｔｉｅｐｉｌｅｐｔｉｃ ｄｒｕｇ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｈａｓ ｆａｉｌｅｄ ｔｏ ｄｅｌｉｖｅｒ：Ｗａｙｓ ｏｕｔ ｏｆ ｔｈｅ ｃｕｒｒｅｎｔ ｄｉｌｅｍｍａ．Ｅｐｉｌｅｐｓｉａ ５２，６５７－６５８（２０１１））。このアプローチはヒトにおける全身性強直間代発作を阻止する薬物の同定に成功している（Ｂｉａｌｅｒ，Ｍ．＆ Ｗｈｉｔｅ Ｈ．Ｓ．，Ｋｅｙ ｆａｃｔｏｒｓ ｉｎ ｔｈｅ ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ａｎｄ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｎｅｗ ａｎｔｉｅｐｉｌｅｐｔｉｃ ｄｒｕｇｓ．Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖ．９，１０－１９（２０１２））が、依然として時間がかかり、資源集約的であり、費用と労力がかかる。ゼブラフィッシュ幼生におけるＰＴＺ誘発性又は他の型の後天性発作に対する試験は齧歯類における同様のアッセイよりも効率的であると思われる（Ｂｅｒｇｈｍａｎｓ，Ｓ．，Ｈｕｎｔ，Ｊ．，Ｒｏａｃｈ，Ａ．，＆ Ｇｏｌｄｓｍｉｔｈ，Ｐ．，Ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ｏｆｆｅｒ ｔｈｅ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｆｏｒ ａ ｐｒｉｍａｒｙ ｓｃｒｅｅｎ ｔｏ ｉｄｅｎｔｉｆｙ ａ ｗｉｄｅ ｖａｒｉｅｔｙ ｏｆ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ａｎｔｉｃｏｎｖｕｌｓａｎｔｓ．Ｅｐｉｌｅｐｓｙ Ｒｅｓ．７５，１８－２８（２００７）；Ｂａｘｅｎｄａｌｅ，Ｓ．，ｅｔ ａｌ．，Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ｗｉｔｈ ａｎｔｉ－ｃｏｎｖｕｌｓａｎｔ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｉｎ ａ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｅｐｉｌｅｐｔｉｃ ｓｅｉｚｕｒｅｓ．Ｄｉｓ．Ｍｏｄｅｌ．Ｍｅｃｈ．５，７７３－７７４（２０１２）Ａｆｒｉｋａｎｏｖａ，Ｔ．，ｅｔ ａｌ．，Ｖａｌｉｄａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ｐｅｎｔｙｌｅｎｅｔｅｔｒａｚｏｌ ｓｅｉｚｕｒｅ ｍｏｄｅｌ：ｌｏｃｏｍｏｔｏｒ ｖｅｒｓｕｓ ｅｌｅｃｔｒｏｇｒａｐｈｉｃ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ｔｏ ａｎｔｉｅｐｉｌｅｐｔｉｃ ｄｒｕｇｓ．ＰＬｏＳ Ｏｎｅ ８，ｅ５４１６６（２０１３））が、最終的に同類の化合物を同定できるはずである。

【0188】

一方、本願では迅速な自動行動モニター用の９６ウェルフォーマットを使用した後に、既知のヒト遺伝病に似せた突然変異体魚類における自発性のエレクトログラフ発作活動の高感度電気生理学的アッセイを使用する代替スクリーニングストラテジーについて記載する。このインビボストラテジーは同時に致死率をモニターし、ＳＣＮ１Ａに限定されず、あらゆる癲癇症に適用することができる。実際に、この表現型アプローチは遺伝情報に基づく又は「パーソナライズされた」新薬発見アプローチの基礎を形成することができる。既知のＳＣＮ１Ａ突然変異に似せて癲癇を示す遺伝子改変マウスは開発されているが、交配が複雑な場合があり、バックグラウンド系統が発作表現型を改変する可能性があり、これらの動物でＡＥＤが試験されることは稀である。例えば、Ｓｃｎ１ａ^ＲＸ／＋突然変異体マウスで温熱療法により誘発させた発作閾値に及ぼす効果についてスチリペントールとクロバザムのみが評価されている（Ｃａｏ，Ｄ．，ｅｔ ａｌ．，Ｅｆｆｉｃａｃｙ ｏｆ ｓｔｉｒｉｐｅｎｔｏｌ ｉｎ ｈｙｐｅｒｔｈｅｒｍｉａ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｓｅｉｚｕｒｅｓ ｉｎ ａ ｍｏｕｓｅ ｍｏｄｅｌ ｏｆ Ｄｒａｖｅｔ ｓｙｎｄｒｏｍｅ．Ｅｐｉｌｅｐｓｉａ ５３，１１４０－１１４５（２０１２））。Ｓｃｎ１ａ^＋／－突然変異体マウスにＧＡＢＡ－Ａ受容体のアロステリックモジュレーターであるクロナゼパムを投与すると、自閉症様行動の一部が回復したが、抗癲癇薬としては評価されなかった（ｄｅ Ｔｏｆｆｏｌ，Ｂ．，ｅｔ ａｌ．，ＥＳＰＥＲＡ ｓｔｕｄｙ：Ａｐｐｌｉｃａｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅ ｎｅｗ ＩＬＡＥ ｃｒｉｔｅｒｉａ ｆｏｒ ａｎｔｉｅｐｉｌｅｐｔｉｃ ｄｒｕｇ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｏｆ ｆｏｃａｌ ｅｐｉｌｅｐｓｉｅｓ ｉｎ ｃｕｒｒｅｎｔ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｐｒａｃｔｉｃｅ．Ｅｐｉｌｅｐｓｙ Ｂｅｈ ２５，１６６－１６９（２０１２））。

【0189】

キンドリング又は癲癇重積状態後モデルから選択される野生型ラットのサブグループ等の薬物耐性齧歯類癲癇モデルが記載されている（Ｈａｎ，Ｓ．，ｅｔ ａｌ．，Ａｕｔｉｓｔｉｃ－ｌｉｋｅ ｂｅｈａｖｉｏｕｒ ｉｎ Ｓｃｎ１ａ＋／－ｍｉｃｅ ａｎｄ ｒｅｓｃｕｅ ｂｙ ｅｎｈａｎｃｅｄ ＧＡＢＡ－ｍｅｄｉａｔｅｄ ｎｅｕｒｏｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ．Ｎａｔｕｒｅ ４８９，３８５－３９０（２０１２））が、ほんの僅かしか特性解析されておらず、初期高スループット段階の薬物スクリーニングには適していない。一方、ヒトナトリウムチャネル突然変異との配列一致度が７５％を上回るゼブラフィッシュｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体を使用し、４４，０００個を越えるプローブの大規模トランスクリプトミクスプロファイルングを完了し、ｓｃｎ１Ｌａｂチャネル発現と癲癇表現型の発生過程での進行を実証し、入手可能な抗癲癇治療薬の効果を分析し、３２０種類の化合物のライブラリーを自発性非誘発性発作についてスクリーニングした。この最初の原理証明スクリーニングはウェル当たり１匹、試験毎に６～１２匹、週１回の割合で実施したが、１週間当たり数百～数千匹の幼生を試験するように（特に商業的環境で）ゼブラフィッシュの規模を拡大し易いため、迅速な大規模第一段階インビボ新薬発見プログラムに魅力的なシステムである。リード化合物を実験室から臨床に移すことができない最大の原因の１つは毒性であるが、毒性を同時にインビボ評価できることも、利用可能な器官型海馬培養又はインシリコスクリーニングストラテジーに勝るこのアプローチの重要な利点である。

【0190】

どのような動物モデル新薬発見データも慎重に取り扱うべきであるが、Ｈ１拮抗作用とＮＳ４Ｂ ＲＮＡ阻害性をもつ化合物であるクレミゾールはこのスクリーニングから得られた安全な毒性プロファイルをもつＦＤＡ承認薬であり、更に研究するのに魅力的な出発点を提供する。例えば、抗ヒスタミン薬は新生ラットに誘発させた発作を抑制することが最近確認された（Ｙａｍａｄａ，Ｋ．，Ｔａｋｉｚａｗａ，Ｆ．，Ｔａｍｕｒａ，Ｔ．，＆ Ｋａｎｄａ Ｔ．，Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ａｎｔｉｈｉｓｔａｍｉｎｅｓ ｏｎ ｓｅｉｚｕｒｅｓ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ－ｃｕｒｒｅｎｔ ｅｌｅｃｔｒｏｓｈｏｃｋｓ：ｋｅｔｏｔｉｆｅｎ，ｂｕｔ ｎｏｔ ｏｌｏｐａｔａｄｉｎｅ，ｐｒｏｍｏｔｅｓ ｔｈｅ ｓｅｉｚｕｒｅｓ ｉｎ ｉｎｆａｎｔ ｒａｔｓ．Ｂｉｏｌ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．３５，６９３－６９７（２０１２））が、特定の理論に拘泥するものではないが、これは本願の作用機序でないように思われる。本発明者らは４種類の他のＨ１抗ヒスタミン薬（ピメチキセンマレイン酸塩、クロロピラミンＨＣｌ、メブヒドロリンナフタレンスルホン酸塩及びイプロヘプチン）がｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体における痙攣行動を抑制できないことを実証した。更に、Ｈ１抗ヒスタミン薬は小児における発作に有害に作用する可能性があることが示唆されており（Ｍｉｙａｔａ，Ｉ．，Ｓａｅｇｕｓａ，Ｈ．，＆ Ｓａｋｕｒａｉ，Ｍ．，Ｓｅｉｚｕｒｅ－ｍｏｄｉｆｙｉｎｇ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｏｆ ｈｉｓｔａｍｉｎｅ Ｈ１ ａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ：ａ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ．Ｐｅｄｉａｔｒ．Ｉｎｔ．５３，７０６－７０８（２０１１））、作用機序を同定するには更に詳細な解析が必要になろう。クレミゾールはゼブラフィッシュでのメトラゾール試験でも有効であったので、ユタ大学のＮＩＨ支援抗痙攣薬開発プログラムで更に前臨床試験を進める価値があると思われる。最も重要な点として、これらの研究はインビボ薬物スクリーニングとｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体ゼブラフィッシュの実験解析がドラベ症候群の解明（及び治療）に極めて有益であることを示唆している。

【0191】

動物。Ｓｃｎ１Ｌａｂ（ｄｉｄｙ^ｓ５５２）ゼブラフィッシュ胚はＨｅｒｗｉｇ Ｂａｉｅｒから寄贈された。成体ＨｕＣ：ＧＦＰゼブラフィッシュはＳｔｅｐｈｅｎ Ｅｋｋｅｒから寄贈された。ゼブラフィッシュはカリフォルニア大学、サンフランシスコ校、動物実験委員会のガイドラインに従って作製・飼育した。ゼブラフィッシュ幼生は殺菌剤として０．００２％メチレンブルーを添加した脱イオン水に０．０３％インスタントオーシャン（Ａｑｕａｒｉｕｍ Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．，Ｍｅｎｔｏｒ，ＯＨ，米国）を加えた「胚培養液」で飼育した。ＴＬ野生型又はＨｕＣ：ＧＦＰゼブラフィッシュまで少なくとも７世代戻し交配させておいたｓｃｎ１Ｌａｂヘテロ接合体動物から幼生ゼブラフィッシュクラッチを交配させた。（色素沈着に基づいて選別した）ホモ接合性突然変異体と年齢をマッチさせた同腹幼生を使用した。皮膚色素沈着問題の原因となる正確な遺伝子異常は不明であるが、メラノコルチン５ａ受容体をコードする遺伝子の１．５倍のアップレギュレーションがマイクロアレイデータで認められたことは興味深い。

【0192】

発作モニター。移動運動追跡と電気生理学的検査の手順は記載されている（Ｂａｒａｂａｎ，Ｓ．Ｃ．，ｅｔ ａｌ．，Ａ ｌａｒｇｅ－ｓｃａｌｅ ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ ｓｃｒｅｅｎ ｔｏ ｉｄｅｎｔｉｆｙ ｓｅｉｚｕｒｅ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ．Ｅｐｉｌｅｐｓｉａ ４８，１１５１－１５７（２００７）；Ｂａｒａｂａｎ，Ｓ．Ｃ．，Ｔａｙｌｏｒ，Ｍ．Ｒ．，Ｃａｓｔｒｏ，Ｐ．Ａ．，＆ Ｂａｉｅｒ Ｈ．，Ｐｅｎｔｙｌｅｎｅｔｅｔｒａｚｏｌｅ ｉｎｄｕｃｅｄ ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ｂｅｈａｖｉｏｒ，ｎｅｕｒａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｃ－ｆｏｓ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ １３１，７５９－７６８（２００５））。パイロット実験では、記録用電極の位置を推定するためにＨｕＣ：ＧＦＰゼブラフィッシュを電気生理学的実験で使用した。ＥｔｈｏＶｉｓｉｏｎ ＸＴソフトウェア（Ｎｏｌｄｕｓ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ；Ｌｅｅｓｂｕｒｇ，ＶＡ）を実行するＤａｎｉｏＶｉｓｉｏｎシステムを使用して１０分間記録エポックでウェル当たり１匹ずつの移動運動プロットを得た。発作スコアは従来記載されているように実施した（Ｂａｒａｂａｎ，Ｓ．Ｃ．，Ｔａｙｌｏｒ，Ｍ．Ｒ．，Ｃａｓｔｒｏ，Ｐ．Ａ．，＆ Ｂａｉｅｒ Ｈ．，Ｐｅｎｔｙｌｅｎｅｔｅｔｒａｚｏｌｅ ｉｎｄｕｃｅｄ ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ｂｅｈａｖｉｏｒ，ｎｅｕｒａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｃ－ｆｏｓ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ １３１，７５９－７６８（２００５））。移動距離（ｍｍ）と平均速度（ｍｍ／秒）について移動運動プロットを解析した。癲癇様イベントをｐＣｌａｍｐ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ；Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ，ＣＡ）で解析し、基線ノイズレベルの２倍を上回る上向き又は下向きの膜の振れとして定義し、発作間様（持続時間１００～３００ミリ秒）又は発作時様（持続時間１０００～５０００ミリ秒）に分類した。１０分間記録エポック中の１分当たりの癲癇様イベント数を計数することによりバースト頻度を求めた。同一エポック中の全イベントのオンセットからオフセットまでの間隔を測定することによりバースト持続時間を求めた。

【0193】

薬物はＳｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈから入手し、胚培養液に溶解させた。ストック溶液は胚培養液で１ｍＭに調製し、ｐＨは約７．５に調整した。ガナキソロンはＢｉｏＣｒｅａ ＧｍｂＨ（Ｒａｄｅｂｅｕｌ，ドイツ）から寄贈された。薬物スクリーニング用化合物はＭｉｃｒｏＳｏｕｒｃｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．（Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｄｒｕｇ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ；Ｇａｙｌｏｒｄｓｖｉｌｌｅ，ＣＴ）から購入し、１０ｍＭ ＤＭＳＯ溶液とした。試験化合物を胚培養液に溶解させ、６．７～６６７μＭの濃度で試験し、最終ＤＭＳＯ濃度を約７％とした。自由に遊泳する魚の行動試験には６６７μＭの初期スクリーニング濃度を選択したが、これは幼生ゼブラフィッシュにＰＴＺ（１０～２０ｍＭ）により誘発させた発作に対して有効であることがこれまでに報告されているＡＥＤ濃度の下側範囲（０．１～２５ｍＭ）に相当し（Ｂａｒａｂａｎ，Ｓ．Ｃ．，Ｔａｙｌｏｒ，Ｍ．Ｒ．，Ｃａｓｔｒｏ，Ｐ．Ａ．，＆ Ｂａｉｅｒ Ｈ．，Ｐｅｎｔｙｌｅｎｅｔｅｔｒａｚｏｌｅ ｉｎｄｕｃｅｄ ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ｂｅｈａｖｉｏｒ，ｎｅｕｒａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｃ－ｆｏｓ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉｅｎｃｅ １３１，７５９－７６８（２００５）；Ｂｅｒｇｈｍａｎｓ，Ｓ．，Ｈｕｎｔ，Ｊ．，Ｒｏａｃｈ，Ａ．，＆ Ｇｏｌｄｓｍｉｔｈ，Ｐ．，Ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ｏｆｆｅｒ ｔｈｅ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｆｏｒ ａ ｐｒｉｍａｒｙ ｓｃｒｅｅｎ ｔｏ ｉｄｅｎｔｉｆｙ ａ ｗｉｄｅ ｖａｒｉｅｔｙ ｏｆ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ａｎｔｉｃｏｎｖｕｌｓａｎｔｓ．Ｅｐｉｌｅｐｓｙ Ｒｅｓ．７５，１８－２８（２００７）；Ａｆｒｉｋａｎｏｖａ，Ｔ．，ｅｔ ａｌ．，Ｖａｌｉｄａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ ｐｅｎｔｙｌｅｎｅｔｅｔｒａｚｏｌ ｓｅｉｚｕｒｅ ｍｏｄｅｌ：ｌｏｃｏｍｏｔｏｒ ｖｅｒｓｕｓ ｅｌｅｃｔｒｏｇｒａｐｈｉｃ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ｔｏ ａｎｔｉｅｐｉｌｅｐｔｉｃ ｄｒｕｇｓ．ＰＬｏＳ Ｏｎｅ ８，ｅ５４１６６（２０１３））、ＭｉｃｒｏＳｏｕｒｃｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．により提供される小容量のストック溶液（２５０μＬ）を最も効率的に使用できたためである。図５及び６の初期ＡＥＤ検証アッセイには、寒天への拡散に伴う潜在的な合併症を考慮してやや高い濃度（１ｍＭ）を選択した。野生型幼生（ｎ＝濃度毎に１２匹）を使用して０．０１～１００％の希釈倍率でＤＭＳＯの毒性を評価した処、ＤＭＳＯは＞２５％で致死性であった。

【0194】

全薬物スクリーニング試験で化合物をコード化し、試験者に化合物の種類を知らせずに実験を実施した。胚培養液に薬浴させた突然変異体から発作活動の基線記録を得た後、試験化合物への溶液交換後に第２のプロットを得た。移動運動アッセイで「陽性ヒット」として分類された各試験化合物を目視確認し、接触に反応する運動と目に見える心拍に基づいて生存していることを確認した。ＷＴ魚はこれらの１０分間記録エポック中に自発性の遊泳活動を殆ど～全く示さなかった（図３Ｂ参照）ので、新薬発見アッセイに使用しなかった。

【0195】

マイクロアレイ、定量的ＰＣＲ及びホールマウントｉｎ ｓｉｔｕハイブリダイゼーションの手順は記載されている（Ｈｏｒｔｏｐａｎ，Ｇ．Ａ．，ｅｔ ａｌ．，Ｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓ ｓｅｉｚｕｒｅｓ ａｎｄ ａｌｔｅｒｅｄ ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ＧＡＢＡ ｓｉｇｎａｌｉｎｇ ｐａｔｈｗａｙｓ ｉｎ ａ ｍｉｎｄ ｂｏｍｂｍｕｔａｎｔ ｚｅｂｒａｆｉｓｈ．Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．３０，１３７１８－１３７２８（２０１０））。

【0196】

特に指定しない限り、データは平均及びＳＥＭとして表す。特に指定しない限り、対比較の統計的有意性はスチューデントの対応のない両側ｔ検定、ＡＮＯＶＡ又はマン－ホイットニーの順位和検定により適宜決定した。特に指定しない限り、Ｐ＜０．０５の場合に結果を有意とみなした。

【0197】

［実施例２］
本発明者らのこれまでの検討と、マウスの定性的ＭＥＳスクリーニングで１００ｍｇ／ｋｇと３００ｍｇ／ｋｇの用量で認められた若干の活性に基づき、ＭＥＳ／ｓｃＭＥＴ／Ｔｏｘマウスモデルで定量的試験を進め、ＥＤ５０／ＴＤ５０を求めた。ＭＥＳモデルでＴＰＥを求める間に、３００ｍｇ／ｋｇの出発時の用量で活性は認められなかった。一方、５００ｍｇ／ｋｇの用量では活性が認められ、４匹のうちの２匹が０．２５分、４匹のうちの４匹が３０分で保護された。試験した他のどの用量又は試験時点でも活性又は毒性（回転棒を掴めない）は認められなかった。ｓｃＭＥＴモデルでは活性が認められなかった。ＭＥＳモデルのデータによると、このマウスモデルではＡＳＰ４６９０１６により有意な活性／保護が得られ、ＥＤ５０＜４００ｍｇ／ｋｇである。

【0198】

抗痙攣スクリーニング結果－マウスＩＰ定量

【0199】

【表1】

【0200】

［実施例３］
本発明者らの初期Ｔ３１（ＭＥＳ／ｓｃＭＥＴ／Ｔｏｘ）スクリーニングではＡＳＰ４６９０１６を３０ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇ及び３００ｍｇ／ｋｇで試験した。各条件のデータをＮ／Ｆとして表し、ここでＮは保護された動物数であり、Ｆは試験した動物数である。毒性（ＴＯＸ）試験では、Ｎは毒性作用を示す動物数であり、Ｆは試験した動物数である。Ｃ列のコードは実験を実施する技術者からのコメントを意味し、必要に応じてコメントセクションに定義する。死亡は認められない。６Ｈｚ（３２ｍＡ）モデルに示すように、１００ｍｇ／ｋｇで３０分にて４匹中の１匹のみが保護された。ＭＥＳにより誘発させた発作モデルでは、１００ｍｇ／ｋｇと３００ｍｇ／ｋｇで３０分にて４匹中の１匹のみが保護された。試験した他のどの用量又は時点でも毒性（回転棒を掴めない）又は活性は検出されなかった。

【0201】

抗痙攣スクリーニング結果－マウスＭＥＳ及び６Ｈｚ同定

【0202】

【表2】

【0203】

［実施例４］
１３９種類の異なるインビトロ受容体結合アッセイ及び酵素アッセイの集合であるＣＥＲＥＰ ＢｉｏＰｒｉｎｔ Ｐｒｏｆｉｌｅでクレミゾール（１４９９３４－Ｌ６）を試験した。初期ＢｉｏＰｒｉｎｔスクリーニングには、１０μΜ（１．０Ｅ－５Ｍ）の遊離化合物濃度を使用した。各標的に特異的な放射性標識リガンドの結合の阻害率％として化合物結合性を計算した。対照酵素活性の阻害率％として化合物酵素阻害効果を計算した。各実験で夫々の基準化合物をクレミゾール（１４９９３４－Ｌ６）と同時に試験し、ＣＥＲＥＰで測定された歴史的数値とデータを比較した。実験はＣＥＲＥＰの検証標準操作手順に従って承認された。５０％よりも高い阻害（又は基礎条件で実施したアッセイの刺激）を示す結果が試験化合物の有意な効果に相当するとみなされる。これらの結果をまとめたものを以下に示す。

【0204】

【表3】

【0205】

［実施例５］
クレミゾールは抗ヒスタミン薬の作用機序により抗癲癇活性を発揮するものではない。３２種類の異なる抗ヒスタミン化合物（図１０）をｓｃｎ１Ｌａｂゼブラフィッシュアッセイでスクリーニングした処、クレミゾールの抗癲癇作用と似ている化合物は皆無であった。化合物のうちの３種類は毒性であり、抗ヒスタミン薬が小児癲癇患者における発作を悪化させるという臨床報告通りに、５種類の化合物は発作行動を亢進させた。

【0206】

［実施例６］
出願人らはセロトニンシグナル伝達経路に作用する６２種類の薬物を含むＳｅｌｌｅｃｋ Ｃｕｓｔｏｍｉｚｅｄ Ｌｉｂｒａｒｙをスクリーニングした。これらの化合物を先ずゼブラフィッシュ移動運動アッセイでスクリーニングした処、図１１に示すように、１５種類の化合物が初回通過移動運動アッセイ（アッセイの詳細についてはＢａｒａｂａｎ ｅｔ ａｌ．Ｎａｔ．Ｃｏｍｍ．２０１３及びＤｉｎｄａｙ ａｎｄ Ｂａｒａｂａｎ，ｅＮｅｕｒｏ ２０１５を参酌できる）で陽性ヒットと認定された。これらの試験は、５ＨＴシグナル伝達の調節、特にシナプス後部５ＨＴ受容体の活性化が潜在的な抗癲癇効果をもつことを示唆している。

【0207】

初回通過移動運動アッセイで同定された全ての５ＨＴ化合物における濃度－反応再試験。トラゾドン（Ｄｅｓｒｙｌ、Ｏｌｅｐｔｒｏ）の結果を代表例として示す。移動運動アッセイで１００～７５０μＭの濃度で自発性の発作行動の確実な阻害を示す（図１２Ａ）ことに加え、トラゾドンは更に２５０～５００μＭの濃度でｓｃｎ１Ｌａｂ突然変異体（ｎ＝１５）におけるＥＥＧ活性を有効に阻害し（図１２Ｂ）、薬物ウォッシュアウト期間を設けた別の試験（ｎ＝１２）でも同様であった。陽性ヒットの化合物としては、スマトリプタン、ナラトリプタン、リザトリプタン、ゾルミトリプタン、ウラピジル、ＢＲＬ－５４４４３（３－（１－メチルピペリジン－４－イル）－１Ｈ－インドール－５－オール）、ロルカセリン、ブスピロン、ジプラシドン、ＴＣＢ－２（（４－ブロモ－３，６－ジメトキシベンゾシクロブテン－１－イル）メチルアミン臭化水素酸塩）、ＢＲＬ－１５５７２（３－（４－（４－クロロフェニル）ピペラジン－１－イル）－１，１－ジフェニル－２－プロパノール）、トラゾドン、ＢＭＹ７３７８（８－（２－［４－（２－メトキシフェニル）－１－ピペラジニル］エチル）－８－アザスピロ［４．５］デカン－７，９－ジオン）、アトモキセチン及びベンラファキシンが挙げられる。

【0208】

その他の実施形態
実施形態１．癲癇症の治療方法であって、前記治療を必要とする対象に治療有効量の５ＨＴ受容体作動薬又はその医薬的に許容される塩を投与することを含む前記方法。

【0209】

実施形態２．前記５ＨＴ受容体作動薬が、５ＨＴ２Ａ受容体作動薬又は５ＨＴ２Ｂ受容体作動薬である実施形態１に記載の方法。

【0210】

実施形態３．前記５ＨＴ受容体作動薬が、５ＨＴ２Ａ受容体と５ＨＴ２Ｂ受容体の両方の作動薬である実施形態２に記載の方法。

【0211】

実施形態４．前記５ＨＴ受容体作動薬が、クレミゾール又はフェンフルラミン以外のものである実施形態１に記載の方法。

【0212】

実施形態５．前記５ＨＴ受容体作動薬が、５ＨＴ受容体と直接結合する実施形態１に記載の方法。

【0213】

実施形態６．前記５ＨＴ受容体作動薬が、５ＨＴ受容体を特異的に活性化させる実施形態１に記載の方法。

【0214】

実施形態７．前記５ＨＴ受容体作動薬が、５ＨＴ２Ｃ受容体により介在される活性を同等以下にしながら５ＨＴ２Ａ受容体又は５ＨＴ２Ｂ受容体により介在される活性を増加させる実施形態１に記載の方法。

【0215】

実施形態８．前記５ＨＴ受容体作動薬が、セロトニン再取り込み阻害薬以外のものである実施形態１に記載の方法。

【0216】

実施形態９．前記５ＨＴ受容体作動薬が、５ＨＴ１Ａ、５ＨＴ１Ｂ、５ＨＴ１Ｄ、５ＨＴ２Ｃ、５ＨＴ３、５ＨＴ４、５ＨＴ６、５ＨＴ７、ＮＰＹ Ｙ１受容体、Ｌ型Ｃａチャネル、Ｎ型Ｃａチャネル、ＳＫ－Ｃａチャネル、ＧＡＢＡ依存性Ｃｌチャネル、ＧＡＢＡトランスポーター、ＧＡＢＡ－Ａ１受容体、ＧＡＢＡ－Ｂ１ｂ受容体、Ｎａチャネル、５ＨＴトランスポーター、ＣＢ１受容体、ＣＢ２受容体、ＢＺＤ又はエストロゲンＥＲαの少なくとも１種と有意に結合しないか又はその活性を調節しない実施形態１に記載の方法。

【0217】

実施形態１０．前記５ＨＴ受容体作動薬が、フリバンセリン、ＤＯＩ ＨＣｌ、ノルフェンフルラミン又はＢＷ７２３Ｃ８６である実施形態１に記載の方法。

【0218】

実施形態１１．前記５ＨＴ受容体作動薬が、スマトリプタン、ナラトリプタン、リザトリプタン、ゾルミトリプタン、ウラピジル、ＢＲＬ－５４４４３（３－（１－メチルピペリジン－４－イル）－１Ｈ－インドール－５－オール）、ロルカセリン、ブスピロン、ジプラシドン、ＴＣＢ－２（（４－ブロモ－３，６－ジメトキシベンゾシクロブテン－１－イル）メチルアミン臭化水素酸塩）、ＢＲＬ－１５５７２（３－（４－（４－クロロフェニル）ピペラジン－１－イル）－１，１－ジフェニル－２－プロパノール）、トラゾドン、ＢＭＹ７３７８（８－（２－［４－（２－メトキシフェニル）－１－ピペラジニル］エチル）－８－アザスピロ［４．５］デカン－７，９－ジオン）、アトモキセチン又はベンラファキシンである実施形態１に記載の方法。

【0219】

実施形態１２．前記５ＨＴ受容体作動薬が、トラゾドン又はその医薬的に許容される塩である実施形態１に記載の方法。複数の実施形態において、前記トラゾドンの医薬的に許容される塩は塩酸塩、臭化水素酸塩、リン酸塩、硫酸塩、メタンスルホン酸塩、硝酸塩、マレイン酸塩、酢酸塩、クエン酸塩、フマル酸塩、プロピオン酸塩、酒石酸塩、コハク酸塩、安息香酸塩、グルタミン酸塩又は第４級アンモニウム塩である。

【0220】

実施形態１３．前記癲癇症が、ドラベ症候群、レノックス・ガストー症候群、点頭癲癇又は大田原症候群である実施形態１に記載の方法。

【0221】

実施形態１４．前記癲癇症が、ドラベ症候群である実施形態１３に記載の方法。

【0222】

実施形態１５．前記癲癇症が、小児癲癇症である実施形態１に記載の方法。

【0223】

実施形態１６．前記対象が、心血管疾患をもつ実施形態１に記載の方法。

【0224】

実施形態１７．前記対象が、セロトニン再取り込み阻害薬による治療に耐性である実施形態１に記載の方法。

【0225】

実施形態１８．前記対象が、セロトニン再取り込み阻害薬を投与した場合の副作用に感受性である実施形態１に記載の方法。

【0226】

実施形態１９．前記セロトニン再取り込み阻害薬が、フェンフルラミンである実施形態１７又は１８に記載の方法。

【0227】

実施形態２０．前記対象がケト原性食を摂取している実施形態１に記載の方法。

【0228】

実施形態２１．前記５ＨＴ受容体作動薬が、癲癇対象、アルツハイマー病対象、自閉症対象又はパーキンソン病対象における強迫行為又はエレクトログラフ発作を抑制する実施形態１に記載の方法。

【0229】

実施形態２２．前記５ＨＴ受容体作動薬が、前記５ＨＴ受容体作動薬の不在下と比較した場合に前記対象における非誘発性発作の発生を抑制する実施形態１に記載の方法。

【0230】

実施形態２３．前記５ＨＴ受容体作動薬の投与が、５ＨＴ受容体作動薬の不在下と比較した場合に前記対象におけるミオクローヌス発作又は癲癇重積状態を抑制又は予防する実施形態１に記載の方法。

【0231】

実施形態２４．前記５ＨＴ受容体作動薬を体重１ｋｇ当たり約０．１ｍｇ～約１０００ｍｇの量で前記対象に投与する実施形態１に記載の方法。

【0232】

実施形態２５．前記５ＨＴ受容体作動薬を体重１ｋｇ当たり約０．１ｍｇ～約１０００ｍｇの１日用量で前記対象に投与する実施形態２２に記載の方法。

【0233】

実施形態２６．前記５ＨＴ受容体作動薬を抗癲癇薬（ＡＥＤ）と併用投与する実施形態１に記載の方法。

【0234】

実施形態２７．前記５ＨＴ受容体作動薬が、抗癲癇薬（ＡＥＤ）の補助療法である実施形態１に記載の方法。

【0235】

実施形態２８．前記ＡＥＤが、アセタゾラミド、ベンゾジアゼピン、カンナビジオール、カルバマゼピン、クロバザム、クロナゼパム、エスリカルバゼピン酢酸塩、エトスクシミド、エトトイン、フェルバメート、フェンフルラミン、フォスフェニトイン、ガバペンチン、ガナキソロン、フペルジンＡ、ラコサミド、ラモトリギン、レベチラセタム、ニトラゼパム、オクスカルバゼピン、ペランパネル、ピラセタム、フェノバルビタール、フェニトイン、臭化カリウム、プレガバリン、プリミドン、レチガビン、ルフィナミド、バルプロ酸、バルプロ酸ナトリウム、スチリペントール、チアガビン、トピラマート、ビガバトリン又はゾニサミドである実施形態２６又は２７に記載の方法。

【0236】

実施形態２９．前記ＡＥＤが、バルプロ酸、バルプロ酸ナトリウム、クロナゼパム、エトスクシミド、フェルバメート、ガバペンチン、カルバマゼピン、オクスカルバゼピン、ラモトリギン、レベチラセタム、ベンゾジアゼピン、フェノバルビタール、プレガバリン、プリミドン、チアガビン、トピラマート、臭化カリウム、フェニトイン、スチリペントール、ビガバトリン又はゾニサミドである実施形態２８に記載の方法。

【0237】

実施形態３０．前記ＡＥＤが、バルプロ酸、バルプロ酸ナトリウム、ガバペンチン、トピラマート、カルバマゼピン、オクスカルバゼピン又はビガバトリンである実施形態２９に記載の方法。

【0238】

実施形態３１．前記ＡＥＤが、フェンフルラミン又はトピラマート以外のものである実施形態２６に記載の方法。

【0239】

実施形態３２．前記ＡＥＤを前記５ＨＴ受容体作動薬と同時又は順次投与する実施形態２６に記載の方法。

【0240】

実施形態３３．癲癇症の治療方法であって、前記方法が前記治療を必要とする対象に治療有効量の５ＨＴ受容体作動薬又はその医薬的に許容される塩を投与することを含み、前記対象が心血管疾患をもつか、セロトニン再取り込み阻害薬による治療に耐性であるか、又はセロトニン再取り込み阻害薬を投与した場合の副作用に感受性である前記方法。

【0241】

実施形態３４．前記５ＨＴ受容体作動薬が、５ＨＴ２Ａ受容体作動薬又は５ＨＴ２Ｂ受容体作動薬である実施形態３３に記載の方法。

【0242】

実施形態３５．前記５ＨＴ受容体作動薬が、５ＨＴ２Ａ受容体と５ＨＴ２Ｂ受容体の両方の作動薬である実施形態３２に記載の方法。

【0243】

実施形態３６．前記５ＨＴ受容体作動薬が、クレミゾール、クレミゾールアナログ又はその医薬的に許容される塩である実施形態３３に記載の方法。

【0244】

実施形態３７．前記医薬的に許容される塩が、クレミゾールＨＣｌである実施形態３６に記載の方法。

【0245】

実施形態３８．前記クレミゾール、前記クレミゾールアナログ又は前記その医薬的に許容される塩が、医薬組成物の一部を形成する実施形態３６に記載の方法。

【0246】

実施形態３９．前記医薬組成物が、更に医薬的に許容される賦形剤を含有する実施形態３８に記載の方法。

【0247】

実施形態４０．前記医薬組成物が、治療有効量のクレミゾール、前記クレミゾールアナログ又は前記その医薬的に許容される塩を含有する実施形態３８に記載の方法。

【0248】

実施形態４１．前記医薬組成物を抗癲癇薬（ＡＥＤ）と併用投与する実施形態４０に記載の方法。

【0249】

実施形態４２．前記医薬組成物が、クレミゾール、前記クレミゾールアナログ又は前記その医薬的に許容される塩と、ＡＥＤを含有する実施形態４１に記載の方法。

【0250】

実施形態４３．前記５ＨＴ受容体作動薬が、フェンフルラミン以外のものである実施形態３３に記載の方法。

【0251】

実施形態４４．前記５ＨＴ受容体作動薬が、５ＨＴ受容体と直接結合する実施形態３３に記載の方法。

【0252】

実施形態４５．前記５ＨＴ受容体作動薬が、５ＨＴ受容体を特異的に活性化させる実施形態３３に記載の方法。

【0253】

実施形態４６．前記５ＨＴ受容体作動薬が、５ＨＴ２Ｃ受容体により介在される活性を同等以下にしながら５ＨＴ２Ａ受容体又は５ＨＴ２Ｂ受容体により介在される活性を増加させる実施形態３３に記載の方法。

【0254】

実施形態４７．前記５ＨＴ受容体作動薬が、セロトニン再取り込み阻害薬以外のものである実施形態３３に記載の方法。

【0255】

実施形態４８．前記５ＨＴ受容体作動薬が、５ＨＴ１Ａ、５ＨＴ１Ｂ、５ＨＴ１Ｄ、５ＨＴ２Ｃ、５ＨＴ３、５ＨＴ４、５ＨＴ６、５ＨＴ７、ＮＰＹ Ｙ１受容体、Ｌ型Ｃａチャネル、Ｎ型Ｃａチャネル、ＳＫ－Ｃａチャネル、ＧＡＢＡ依存性Ｃｌチャネル、ＧＡＢＡトランスポーター、ＧＡＢＡ－Ａ１受容体、ＧＡＢＡ－Ｂ１ｂ受容体、Ｎａチャネル、５ＨＴトランスポーター、ＣＢ１受容体、ＣＢ２受容体、ＢＺＤ又はエストロゲンＥＲαの少なくとも１種と有意に結合しないか又はその活性を調節しない実施形態３３に記載の方法。

【0256】

実施形態４９．前記５ＨＴ受容体作動薬が、スマトリプタン、ナラトリプタン、リザトリプタン、ゾルミトリプタン、ウラピジル、ＢＲＬ－５４４４３（３－（１－メチルピペリジン－４－イル）－１Ｈ－インドール－５－オール）、ロルカセリン、ブスピロン、ジプラシドン、ＴＣＢ－２（（４－ブロモ－３，６－ジメトキシベンゾシクロブテン－１－イル）メチルアミン臭化水素酸塩）、ＢＲＬ－１５５７２（３－（４－（４－クロロフェニル）ピペラジン－１－イル）－１，１－ジフェニル－２－プロパノール）、トラゾドン、ＢＭＹ７３７８（８－（２－［４－（２－メトキシフェニル）－１－ピペラジニル］エチル）－８－アザスピロ［４．５］デカン－７，９－ジオン）、アトモキセチン又はベンラファキシンである実施形態３３に記載の方法。

【0257】

実施形態５０．前記５ＨＴ受容体作動薬が、トラゾドン又はその医薬的に許容される塩である実施形態３３に記載の方法。

【0258】

実施形態５１．５ＨＴ受容体をクレミゾール、クレミゾールアナログ又はその医薬的に許容される塩と接触させることを含む５ＨＴ受容体の活性の調節方法。

【0259】

実施形態５２．前記調節が、活性化である実施形態５１に記載の方法。

【0260】

実施形態５３．前記５ＨＴ受容体が、５ＨＴ２Ａ受容体又は５ＨＴ２Ｂ受容体である実施形態５１に記載の方法。

【0261】

実施形態５４．脳内のセロトニンの不足により又は１種以上の５ＨＴ受容体の活動下で生じる疾患又は障害の治療方法であって、前記治療を必要とする対象に治療有効量のクレミゾール、クレミゾールアナログ又はその医薬的に許容される塩を投与することを含む前記方法。

【0262】

実施形態５５．前記疾患又は障害が、癲癇以外のものである実施形態５４に記載の方法。

【0263】

実施形態５６．前記疾患又は障害が、ドラベ症候群以外のものである実施形態５４に記載の方法。

【0264】

実施形態５７．前記疾患又は障害が、片頭痛、脆弱Ｘ症候群、プラダー・ウィリー症候群、統合失調症、鬱病，アルツハイマー病、自閉症、神経障害性疼痛、パーキンソン病、過敏性腸症及び認知症から構成される群から選択される実施形態５１に記載の方法。

【0265】

実施形態５８．前記医薬的に許容される塩が、クレミゾールＨＣｌである実施形態５０に記載の方法。

【図1A】

【図1B】

【図1C】

【図1D】

【図1E】

【図2A】

【図2B】

【図2C】

【図3A】

【図3B】

【図3C】

【図4A】

【図4B】

【図4C】

【図5A】

【図5B】

【図5C】

【図5D】

【図5E】

【図5F】

【図6A】

【図6B】

【図6C】

【図6D】

【図6E】

【図7A】

【図7B】

【図7C】

【図7D】

【図8】

【図9A】

【図9B】

【図10】

【図11】

【図12A】

【図12B】

【手続補正書】

【提出日】2023-10-27

【手続補正1】

【補正対象書類名】特許請求の範囲

【補正対象項目名】全文

【補正方法】変更

【補正の内容】

【請求項1】

癲癇症の治療方法であって、前記治療を必要とする対象に治療有効量の５ＨＴ受容体作動薬又はその医薬的に許容される塩を投与することを含む前記方法。

【外国語明細書】