特開 2025-12273 好気性微生物の培養方法および培養器

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公開特許公報(A)

(11)【公開番号】P2025012273

(43)【公開日】2025-01-24

(54)【発明の名称】好気性微生物の培養方法および培養器

(51)【国際特許分類】

   C12N 1/20 20060101AFI20250117BHJP

   C12M 1/00 20060101ALI20250117BHJP

【ＦＩ】

C12N1/20 A

C12M1/00 D

【審査請求】未請求

【請求項の数】7

【出願形態】ＯＬ

(21)【出願番号】P 2023114996

(22)【出願日】2023-07-13

【新規性喪失の例外の表示】特許法第３０条第２項適用申請有り 発行所名：公益社団法人日本農芸化学会 刊行物名：Ａｎｎｕａｌ Ｍｅｅｔｉｎｇ ｏｆ ｔｈｅ Ｊａｐａｎ Ｓｏｃｉｅｔｙ ｆｏｒ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ａｎｄ Ａｇｒｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２０２３ 大会講演要旨集 ＩＳＳＮ ２１８６－７９７６ 発行年月日：２０２３年３月５日 〔刊行物等〕 掲載年月日：２０２３年３月５日 掲載アドレス：ｈｔｔｐｓ：／／ｄｒｉｖｅ．ｇｏｏｇｌｅ．ｃｏｍ／ｆｉｌｅ／ｄ／１ＮｑｖＥｓｈｎｙＥＢＹｖＴｇ７ＣＸＴｈｖＦＬｅｅＢｐｈｈ７ｆＱ＿／ｖｉｅｗ？ｕｓｐ＝ｄｒｉｖｅ＿ｗｅｂ 〔刊行物等〕 掲載年月日：２０２３年５月１５日 掲載アドレス： ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｊｓｂｂａ．ｏｒ．ｊｐ／ＭｅｅｔｉｎｇｏｆＪＳＢＢＡ／ｍｅｅｔｉｎｇ＿ｏｆ＿ｊｓｂｂａ．ｈｔｍｌ ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｊｓｂｂａ．ｏｒ．ｊｐ／ＭｅｅｔｉｎｇｏｆＪＳＢＢＡ／２０２３／ＭｅｅｔｉｎｇｏｆＪＳＢＢＡ２０２３．ｐｄｆ

(71)【出願人】

【識別番号】000125347

【氏名又は名称】学校法人近畿大学

(74)【代理人】

【識別番号】100118924

【弁理士】

【氏名又は名称】廣幸 正樹

(72)【発明者】

【氏名】秋田 求

【テーマコード（参考）】

4B029

4B065

【Ｆターム（参考）】

4B029AA02

4B029AA27

4B029BB01

4B029CC01

4B029DB16

4B029DB19

4B029DF04

4B029DG10

4B029GB07

4B029GB09

4B065AA01X

4B065AA57X

4B065AA72X

4B065BC05

4B065BC50

4B065CA24

4B065CA27

(57)【要約】

【課題】好気性微生物の培養は攪拌、振蕩といった物理的な衝撃を与える方法がとられていたが、このような方法では微生物にストレスを与え、効率の高い培養ができなかった。
【解決手段】ガス透過性を有するフィルムで形成された培養器となる袋に微生物と培地を充填する工程と、
前記培養器を液密に封止する工程と、
前記培養器を、メッシュ状支持体に載置する工程を含む好気性微生物の培養方法は、ガス透過性を有するフィルムで作製された袋に培地と好気性微生物を封入し、ガス交換が可能な面積増やした状態で静止培養を行うので、微生物にストレスがかからず、効果的な培養が可能となる。
【選択図】図１

【特許請求の範囲】

【請求項1】

ガス透過性を有するフィルムで形成された培養器となる袋に微生物と培地を充填する工程と、
前記培養器を液密に封止する工程と、
前記培養器を、メッシュ状支持体に載置する工程を含む微生物の培養方法。

【請求項2】

前記微生物と培地を充填する工程の前に、
前記培養器を脱着可能なクリップで少なくとも２区画以上に分ける工程を含み、
前記微生物と培地を充填する工程は、前記区画の内の１の区画に前記微生物と培地を充填する工程であり、
前記１の区画に前記クリップを介して隣接する区画に前記培地を充填する工程と、
前記支持体に載置する工程の後に、
培養が進んだ際に、前記クリップを外す工程を有する請求項１に記載された微生物の培養方法。

【請求項3】

前記２区画以上に分ける工程では、
前記クリップを介して隣接する前記区画の大きさが異なる区画を作り、
前記微生物と培地を充填する工程は、前記区画の小さい方の区画に充填する工程である請求項２に記載の微生物の培養方法。

【請求項4】

前記１の区画に前記クリップを介して隣接する区画に培地を充填する工程は、前記培地に加え、さらに前記培地以外の成分も充填される請求項２に記載された微生物の培養方法。

【請求項5】

ガス透過性を有するフィルムで形成され、好気性微生物と培地を封入する袋と、
前記袋を静置する支持体を有する培養器。

【請求項6】

前記袋を各区画が液密となるように、少なくとも２区画以上に分ける脱着可能なクリップを有する請求項５に記載された培養器。

【請求項7】

前記クリップを介して隣接する複数の前記区画には、互いに大きさの異なる区画が隣接している部分がある請求項６に記載された培養器。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、液体培地を用いる培養、代表的には各種の実験室で比較的小規模に行われる培養に用いる好気性微生物の培養方法と培養器に係る。

【背景技術】

【0002】

液体培地中で好気性微生物を培養する際には、一般に、コンプレッサー等を用いた強制通気操作か、振盪操作を含む機械的拡販操作のうちの一つあるいは、両方が行われる。例えば、大量に培養する際に用いられるジャーファーメンターといった培養器は、通気しながら攪拌を行う機能が備わっている。

【0003】

しかし、これらの装置では、機械的通気・攪拌操作にともなって必然的に微生物に物理ストレスが加わるため、培養される微生物はその影響を常に受けている。したがって、物理ストレスを受けていない状態の微生物の性能を発揮させることができない。

【0004】

特許文献１は、培養される好気性微生物にストレスをかけることなく微細気泡発生装置でジャーファーメンター内に空気を供給することが提案されている。

【0005】

一方、比較的少量の培養では、回転式や往復式の振盪器がもっぱら利用される。これらは、上記の物理的ストレスに加えさらに以下の様な課題がある。

【0006】

第一に、機械通気・攪拌操作にともなって発生する熱が微生物に望ましくない場合には、培養液を冷却するために、さらに電力を必要とする。第二に、機械通気・攪拌により雑菌汚染される危険性が高まる。第三に、雑菌汚染させる危険性を防ぐための構造が必要となる。また第四に機械通気・攪拌のための装置が必要である。

【0007】

これらの問題点を解決できる提案としては、培養が完結するまで、密閉空間に培地と微生物を閉じ込め、静置することが必要と考えられる。特許文献２には、光合成微生物を培養する際にリアクターと呼ばれる３層構造の袋の中に培地と微生物を封入し、培地より比重の重い溶媒中に浮かべるという提案が開示されている。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0008】

【特許文献1】特開２０２１－５８８１６号公報

【特許文献2】国際公開第２００８／１５３２０２号

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0009】

特許文献２は、培養液収納バッグと、水素ガスバリアー性バッグと、それらを覆う被覆バッグの３層から構成され、しかも培養液より比重の重い液体中に浮かせるため、仮に空気と触れる面から空気を取り込めたとしても、好気性微生物を培養するには、酸素の供給が不十分となる。また、培地の交換については特に考慮されていない。

【0010】

本発明は上記のような課題に鑑みて想到されたもので、好気性微生物に攪拌、振盪といった物理的なストレスを与えることなく培養でき、さらに新しい培地の追加も可能な培養方法および培養器を提供するものである。

【課題を解決するための手段】

【0011】

より具体的に本発明に係る好気性微生物の培養方法は、
ガス透過性を有するフィルムで形成された培養器となる袋に微生物と培地を充填する工程と、
前記培養器を液密に封止する工程と、
前記培養器を、メッシュ状支持体に載置する工程を含むことを特徴とする。

【0012】

また本発明に係る培養器は、
ガス透過性を有するフィルムで形成され、好気性微生物と培地を封入する袋と、
前記袋を静置する支持体を有することを特徴とする。

【発明の効果】

【0013】

本発明に係る培養器によれば、高い酸素透過性を有するフィルム素材からなる袋状の培養器であって、培養液を直接流動あるいはガス交換するチューブ等の構造を持たないため、容器内壁に直接接触する培養液容積を全培養液容積に対して相対的に大きくすることができる。そのため、培養中の微生物に対し十分な酸素を供給し、静置して培養することによって、培養中の微生物に加わる物理的ストレスを顕著に低下させ、代謝物生産性を向上させることができる。

【0014】

また、透過性を有する樹脂製フィルムを袋状にして、クリップを用いて液密上に区分けするので、一つの区画で培養が進んだら、クリップを外して、新たな培養液と培養空間を液密を壊すことなく与えることができ、微生物にストレスを与えることなく培養を継続することができる。

【図面の簡単な説明】

【0015】

【図1】本発明に係る培養器に第１区画と第２区画が設けられた状態を示した図である。

【図2】本発明に係る培養器の作製過程を示す図である。（ａ）はフィルムを丸めた状態を示す。（ｂ）は、一端を封止し、袋にした状態を示す。

【図3】微生物と培地を入れ、クリップで密閉し第１区画を作った状態を示す図である。

【図4】メッシュ状支持体上に袋を載置した状態を示す図である。

【図5】組換え大腸菌を使いペルオキシダーゼを産生させた場合の結果を示す図である。（ａ）はペルオキシダーゼ活性を示し、（ｂ）は菌体あたりのペルオキシダーゼ活性量を示す。

【図6】組換えＢ．ｃｈｏｓｉｎｅｎｓｉｓを使いペルオキシダーゼを産生させた場合の結果を示す図である。（ａ）はペルオキシダーゼ活性を示し、（ｂ）は菌体あたりのペルオキシダーゼ活性量を示す。

【発明を実施するための形態】

【0016】

以下に本発明に係る培養方法および培養器について図面および実施例を示し説明を行う。なお、以下の説明は、本発明の一実施形態および一実施例を例示するものであり、本発明が以下の説明に限定されるものではない。以下の説明は本発明の趣旨を逸脱しない範囲で改変することができる。なお、微生物の活性とは、単位時間あたりの増殖数若しくは産生物の量とする。

【0017】

図１に本発明に係る培養器の概要を示す。培養器１は袋１０と、袋１０の途中を区切ることのできるクリップ１２と図４に示す支持体２０で構成される。袋１０は、ガス透過性を有するフィルム９が好適に利用できる。ガス透過性という観点からはポリメチルペンテンが好適に利用できる。封止する好気性微生物に十分な酸素を供給するためである。

【0018】

図２（ａ）を参照する。フィルム９は、筒状にし、側面に当たる部分１０ｓおよび一端１０ａを溶着することで袋状に加工できる。袋１０にした状態は図２（ｂ）に示す。袋１０の他端１０ｂは開放されている。ここから培地と微生物等を投入する。

【0019】

袋１０を構成するフィルム９の厚さは、できるだけ薄い方が望ましい。例えば、１μｍから５００μｍの厚さが利用することができる。薄すぎると、強度がもたないし、厚すぎるとガスの透過性が低下し、好気性微生物への酸素の供給が行えないか、不十分になる。

【0020】

また、フィルム９は透明であるのが好ましい。袋１０にした際に袋１０内での培養の進み具合が目視で確認できるからである。

【0021】

図３を参照する。クリップ１２は、袋１０を液密に区分でき、さらにそれを開放できるものであれば、特に構成は問わない。図１では、上下のバー１２ａ、１２ｂで袋１０の途中を挟むことで、液密に区分できるクリップ１２を示した。しかし、ゴムや紐のようなもので袋１０の途中を縛ることで、袋１０を分割してもよい。したがって、本発明においてクリップ１２は、ゴムや紐といった拘束手段も含む。

【0022】

袋１０に培地を充填し微生物を入れ、クリップ１２で充填した部分だけを液密に封止する。微生物と培地が充填された部分を第１区画１０Ａと呼ぶ。また、第１区画１０Ａの厚さの最も大きな部分の厚みを厚みｔ１とする。なお、ここでは第１区画１０Ａを作ったクリップ１２をクリップ１２αとしておく。そして、第１区画１０Ａに隣接した部分に培地だけを注入し再びクリップ１２で封止する。図１はこの状態を示している。

【0023】

再度図１を参照する。第１区画１０Ａの隣に培地だけが封入された部分ができる。ここを第２区画１０Ｂと呼ぶ。第２区画１０Ｂの厚さの最も厚い部分の厚みを厚みｔ２とする。第２区画１０Ｂは再度クリップ１２で封止される。このクリップ１２をクリップ１２βと呼ぶ。したがって、培養器１は、ガス透過性のあるフィルム９で形成された袋１０をクリップ１２で区画分けし、微生物と培地を封入した第１区画１０Ａと、培地だけを封入した第２区画１０Ｂで形成されている。なお、本発明は第１区画１０Ａだけの場合を排除しない。

【0024】

本発明の培養方法では、微生物と培地を入れた袋１０を静置させるだけで培養する。したがって、フィルム９の表面から培地の中心部分まで酸素が通る必要がある。したがって、少なくとも第１区画１０Ａの厚みｔ１は一定値以下にしておく必要がある。第１区画１０Ａの厚みｔ１は培養する微生物と使用するフィルム９の厚みで変動するが、２０ｍｍ以下であるのが望ましい。なお、第１区画１０Ａの厚みｔ１の下限は、フィルム９の厚みの２倍以上であればよい。第２区画１０Ｂについても同様の厚みｔ２に揃えておくのが望ましい。

【0025】

また、第２区画１０Ｂは第１区画１０Ａより小さい面積（体積）であっても大きい面積であってもよい。この方法によれば、第１区画１０Ａで培養した後に、より大量の培地と培養空間を付与する、新たな基質を補給する、ホルモンなどの生理活性を新たに供給する、第２区画１０Ｂに特定の物質に対する吸収剤等を存在させることにより培養中に微生物が分泌した物質を吸着させる、などの操作を容易に行うことができる。これらによって一回の培養で得られる細胞量を増やす、新たな条件を微生物に与え代謝を調節して有用物質生産性を高める、微生物が分泌し微生物に悪影響を与える物質を低減する、分泌性の有用な物質の回収を容易にする、といったことが期待できる。

【0026】

図４を参照する。図１の様に準備された培養器１を支持体２０上に載置する。図４では、袋１０の全表面のうち、できるだけ多くの面積をガス交換に使用するためにメッシュ支持体２０上に培養器１を載置している。支持体２０は袋１０が投影されるエリアにおいてガス交換が妨げられないように通気可能な素材あるいは形状のものとし、袋１０の表面の気相への露出面積を多くすることが望ましい。

【0027】

支持体２０は培地および微生物が封入された袋１０を載置した際に水平に載置できるものが好ましい。培養の期間袋１０はほぼ動かされることがないため、袋１０に機械的歪ができるだけ少ないようにするためである。

【0028】

また、支持体２０は開口が大きすぎると、開口から袋１０が弛んで下がる。袋１０の部分的落下部（最下部）が最上部から２０ｍｍ未満となるように支持体２０の開口部の形状を決定するのが望ましい。

【0029】

なお、支持体２０は、いわば袋１０の下面に空気と接する部分を増やすことが目的であるので、メッシュ状、格子状、剣山状や、その他の幾何的およびランダムな開口の組み合わせであってもよい。このように開口が形成された支持体２０をここではメッシュ状支持体２０と呼ぶ。なお、袋１０を支持するために、袋１０の下面に接する支持体２０の面積に対して、接していない部分の面積が袋１０の裏面全面積に対する割合を開口率と呼ぶ。メッシュ状支持体２０の開口率は５０％以上であるのが好ましい。

【0030】

また、支持体２０の下方は空気が十分に通過できる程度の空間が設けられているのがよい。また、支持体２０は、棚状になっており、複数の袋１０が載置される状態であってもよい。

【0031】

本発明に係る好気性微生物の培養方法は以下の手順による。まず、ガス透過性のフィルム９を用いて袋１０を作製する。封じるためには、フィルムを溶着する、接着する、クリップ留めする方法のいずれかあるいは組み合わせることができる。図２で説明したように、筒状体を作って一端１０ａを液密に封じるようにして袋１０を形成する他、筒状体を作って一端１０ａをまずクリップ１２で密封することで袋１０を作ってもよい。あるいは２枚のガス透過性のフィルム９を重ね、その３辺を溶着あるいは接着してもよい。

【0032】

培地と好気性微生物は、この状態で袋１０に入れられ、次にクリップ１２αを使用、あるいは溶着・接着して液密に封じ込める。この際、この封じ込めた空間には空気は入らない方が好ましい。ガス交換は液体との間で行われるため、空気が入ると、ガス交換の面積が実質的に減り、あるいは、液厚にむらが生じ、再現性が低下するからである。好気性微生物と培地が封止された区画が第１区画１０Ａである。

【0033】

次に第１区画１０Ａに、クリップ１２αを介して隣接する部分に培地だけを入れ、袋１０の他端１０ｂをクリップ１２βあるいは溶着・接着して密閉し、第２区画１０Ｂを形成する。培地だけが入った部分は第２区画１０Ｂである。この状態で、支持体２０の上に載置する。

【0034】

培養は、支持体２０上に培地および微生物が封入された袋１０を載置したら、そのまま放置で行われる。なお、袋１０の周囲の湿度は８０％～１００％であるのが望ましい。ガス透過性フィルムは、水分子も通過させるので、本発明のようにガス透過性フィルムで構成された袋１０に微生物と培地を入れて静置させるだけの方法では、周囲の湿度が低いと、培地中の水分がどんどん抜けていってしまうからである。

【0035】

培養の進行は、好気性微生物の増殖具合や、産生物の量などが目安になるが、透過率や時間で決めることができる。増殖具合を濁度で求める場合は、フィルム９ごしに観測することができる。一定の培養期間が経過したら、第１区画１０Ａと第２区画１０Ｂの間のクリップ１２αを取り去る。すると第２区画１０Ｂ中の培地が第１区画１０Ａの培地と混じり、微生物にとっては新たな成分を得ることができる。

【0036】

また、微生物が増加している場合は、第２区画１０Ｂ分だけ占有できる空間が増える。このように培養の進みに応じて新たな培地と培養空間を得ることで、微生物はさらにストレスなく培養される。

【0037】

なお、第２区分１０Ｂは、培地以外の成分が含まれていてもよい。培養が進むに従って与える栄養の種類を変えることができるからである。

【0038】

以上のように本発明に係る好気性微生物の培養方法では、袋１０に封入した微生物と培地を静置させておくだけであるので、微生物に物理的ストレスがかからない。また、培養が進んだ際に、新たな培地および培養空間はクリップ１２を取り去るだけで供給されるので、ほとんどストレスなく操作することができる。

【0039】

また、植物の不定根、糸状菌の菌糸など、培養中に塊をなすことが起こりやすい微生物にあっては、定期的にフィルム９ごしに当該微生物の塊をほぐし、培地中に常に分散させられるので、当該微生物塊の内部への基質供給が妨げられることによる培養効率の低下を防ぐことができる。

【実施例0040】

（実施例１）
＜ペルオキシダーゼを生産する組換え大腸菌の培養＞
フィルム厚さ５０μｍのＴＰＸ製フィルムを用いて、縦４ｃｍ、横７ｃｍの袋状の容器を作った。組換え大腸菌として、ＩＰＴＧで誘導可能であって、植物由来のペルオキシダーゼ遺伝子発現カセットを連結したプラスミドを有する株を用いた。

【0041】

ＴＢ培地１００ｍＬを入れた５００ｍＬフラスコで３７℃で振とう培養し、濁度（ＯＤ_６００）が２．１に達した時点で、その培養液２ｍＬを当該容器に入れ、終濃度０．０５ｍＭのＩＰＴＧを添加してから開口部を融着することによって完全に密閉した。そのまま３７℃で１６時間静置した（ＴＰＸ区）。ＴＰＸ区は本発明の実施例サンプル１－１に当たる。

【0042】

対照区サンプル１－１として、低密度ポリエチレン製フィルム（酸素透過性はＴＰＸの１／８程度とされる）をＴＰＸ製フィルムの場合と同様に静置培養に用いた（ＬＤＰＥ区）。

【0043】

対照区サンプル１－２として、外径３０ｍｍ、長さ１１５ｍｍのポリプロピレン製コニカルチューブに培養液２ｍＬを入れ、同様にＩＰＴＧ添加後３７℃で１６時間静置した（Ｓ－Ｔ区）。

【0044】

対照区サンプル１－３は常法の振とう培養である。外径３０ｍｍ、長さ１１５ｍｍのポリプロピレン製コニカルチューブに培養液２ｍＬを入れ、振とう培養器を使用して２００ｒｐｍ、３７℃で１６時間振とう培養した（２００Ｒ－Ｔ区）。

【0045】

図５（ａ）は培養液あたりのペルオキシダーゼ総活性量（Ｕ／ｍＬ：縦軸）であり、図５（ｂ）は菌体あたりのペルオキシダーゼ総活性量（Ｕ／ＯＤ_６００・１０：縦軸）を示している。それぞれ横軸はサンプル種を表す。

【0046】

有意差検定の結果、培養液あたりのペルオキシダーゼ総活性量はＴＰＸ区と２００Ｒ－Ｔ区に差が無く（図５（ａ））、菌体あたりのペルオキシダーゼ総活性量は、ＴＰＸ区で有意に大きかった（図５（ｂ））。なお、図５（ｂ）でＬＤＰＥ区が高いのは、菌体量が少なかったことに起因するのであって生産効率は低い。したがって、本発明により、微生物静置培養において常法と同等以上の生産効率を達成した。これは十分な酸素供給が行われる状況で静置培養した結果、ストレスなく培養され、活性効率が高まった結果であると言える。

【0047】

（実施例２）
＜ペルオキシダーゼを生産する組換えＢｒｅｖｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｈｏｓｉｎｅｎｓｉｓの培養＞
植物由来のペルオキシダーゼを分泌生産する組換えＢ．ｃｈｏｓｉｎｅｎｓｉｓを用いた。Ｂ．ｃｈｏｓｉｎｅｎｓｉｓは、実施例１に示した大腸菌よりも酸素濃度の低下に敏感である。フィルム厚さ５０μｍのＴＰＸ製フィルムを用いて、縦４ｃｍ、横７ｃｍの袋状の容器を作った。

【0048】

ＭＴ培地１００ｍＬを入れた５００ｍＬフラスコでＢ．ｃｈｏｓｉｎｅｎｓｉｓを３７℃で１６時間振とう培養し、その培養液２ｍＬを当該容器に分注し、開口部を融着することによって完全に密閉した。そのまま３７℃で７２時間静置した（ＴＰＸ区）。ＴＰＸ区は本発明の実施例サンプル２－１に当たる。

【0049】

対照区サンプル２－１として、低密度ポリエチレン製フィルムをＴＰＸ製フィルムの場合と同様に静置培養に用いた（ＬＤＰＥ区）。

【0050】

対照区サンプル２－２として、外径３０ｍｍ、長さ１１５ｍｍのポリプロピレン製コニカルチューブに培養液２ｍＬを入れ、３７℃で７２時間静置した（Ｓ－Ｔ区）。

【0051】

対照区サンプル２－３は振とう培養とした。外径３０ｍｍ、長さ１１５ｍｍのポリプロピレン製コニカルチューブに培養液２ｍＬを入れ、振とう培養器を使用して１８０ｒｐｍ、３７℃で７２時間振とう培養した（１８０Ｒ－Ｔ区）。

【0052】

図６（ａ）は培地中のペルオキシダーゼ総活性量（Ｕ／ｍＬ：縦軸）、図６（ｂ）は、菌体あたりのペルオキシダーゼ総活性量（Ｕ／ＯＤ_６００・１０：縦軸）を示している。いずれのグラフも横軸はサンプル種類である。図６（ａ）および図６（ｂ）のいずれにおいても本発明によるもの（ＴＰＸ）が有意に大きかった。したがって、本発明により、微生物静置培養において常法以上の生産効率を達成した。これは十分な酸素供給が行われる状況で静置培養した結果、ストレスなく培養され、活性効率が高まった結果であると言える。

【産業上の利用可能性】

【0053】

本発明は、微生物の培養に好適に利用することができる。特に小規模の培養に適している。

【符号の説明】

【0054】

１ 培養器
９ フィルム
１０ 袋
１０ａ （袋の）一端
１０ｂ （袋の）他端
１０ｓ （袋の）側面に当たる部分
１０Ａ 第１区画
１０Ｂ 第２区画
ｔ１ （第１区画の）厚み
ｔ２ （第１区画の）厚み
１２ クリップ
１２α クリップ
１２β クリップ
１２ａ、１２ｂ （クリップの）上下のバー
２０ 支持体

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】