特開 2025-20096 ＩＲＡＫ４阻害剤

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公開特許公報(A)

(11)【公開番号】P2025020096

(43)【公開日】2025-02-12

(54)【発明の名称】ＩＲＡＫ４阻害剤

(51)【国際特許分類】

   C07D 401/12 20060101AFI20250204BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20250204BHJP

   A61P 29/00 20060101ALI20250204BHJP

   A61P 21/00 20060101ALI20250204BHJP

   A61P 19/06 20060101ALI20250204BHJP

   A61P 17/00 20060101ALI20250204BHJP

   A61P 37/08 20060101ALI20250204BHJP

   A61P 17/06 20060101ALI20250204BHJP

   A61P 37/02 20060101ALI20250204BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20250204BHJP

   A61P 35/02 20060101ALI20250204BHJP

   A61K 31/4439 20060101ALI20250204BHJP

   C07D 405/14 20060101ALI20250204BHJP

   C07D 401/14 20060101ALI20250204BHJP

   C07D 413/14 20060101ALI20250204BHJP

   A61K 31/501 20060101ALI20250204BHJP

【ＦＩ】

C07D401/12 CSP

A61P43/00 111

A61P29/00 101

A61P29/00

A61P21/00

A61P19/06

A61P17/00

A61P37/08

A61P17/06

A61P37/02

A61P35/00

A61P35/02

A61K31/4439

C07D405/14

C07D401/14

C07D413/14

A61K31/501

【審査請求】未請求

【請求項の数】15

【出願形態】ＯＬ

【外国語出願】

(21)【出願番号】P 2024156852

(22)【出願日】2024-09-10

(62)【分割の表示】P 2024505444の分割

【原出願日】2023-02-13

(31)【優先権主張番号】63/267,956

(32)【優先日】2022-02-14

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

【公序良俗違反の表示】

（特許庁注：以下のものは登録商標）

１．ＴＷＥＥＮ

(71)【出願人】

【識別番号】391008951

【氏名又は名称】アストラゼネカ・アクチエボラーグ

【氏名又は名称原語表記】ＡＳＴＲＡＺＥＮＥＣＡ ＡＫＴＩＥＢＯＬＡＧ

(74)【代理人】

【識別番号】100106518

【弁理士】

【氏名又は名称】松谷 道子

(74)【代理人】

【識別番号】100156144

【弁理士】

【氏名又は名称】落合 康

(72)【発明者】

【氏名】ターシュティーゲ，イナ

(72)【発明者】

【氏名】シーサー，シュテファン

(57)【要約】      （修正有）

【課題】ＩＲＡＫ４を阻害し、結果として、医薬として有用である可能性を有する化合物を提供する。
【解決手段】式（Ｉ）の化合物およびその薬学的に許容される塩である。

具体的には、例えば６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１ｒ,４ｒ)－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミドが示される。
【選択図】なし

【特許請求の範囲】

【請求項1】

式(Ｉ)

【化1】

〔式中、
Ｒ^１はｉ)Ｈ、Ｍｅ、Ｅｔ、Ｐｒ、ｉ－Ｐｒ、シクロプロピル、ＣＨ_２ＣＮ、ＣＨ_２Ｆおよびオキセタンまたはii)何れの場合も所望によりＭｅ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＮ、ＯＭｅおよびＣ_１－Ｃ_３アルキルから選択される１以上の置換基で置換されているＣ_１－Ｃ_６アルキル基、Ｃ_３－Ｃ_６シクロアルキル基または５員Ｎ－ヘテロ環から選択され；
Ｒ^２はＨ、Ｆ、Ｃｌ、ＤおよびＭｅから選択され；
Ｒ^３およびＲ^４は各々独立してＨ、Ｍｅ、Ｅｔ、Ｆ、Ｃｌ、所望により置換されているＣ_１－Ｃ_３アルキルおよびＣ_１－Ｃ_３ハロアルキルから選択され；
ＹはＮ(Ｍｅ)ＣＯＭｅ、Ｎ(Ｒ^５)ＣＯＭｅ、Ｎ(Ｍｅ)ＣＯＲ^６、Ｎ(Ｍｅ)ＣＯＣＨ(ＯＨ)Ｍｅ、Ｎ(Ｍｅ)ＣＯＣＨ(ＯＲ^５)Ｒ^６、Ｎ(Ｒ^５)ＣＯＲ^６、ＣＯＮＭｅ_２、ＣＯＮＲ^５Ｒ^６、１,２,３－トリアゾール、１,２,４－トリアゾール、１,３,４－オキサジアゾール、２－ピロリジノン、２－イミダゾリジノン、イミダゾールもしくはピラゾールなどの５員Ｎ－ヘテロ環または１－ピリドンもしくはピリダジンなどの６員Ｎ－ヘテロ環であり、ここで、５員または６員Ｎ－ヘテロ環は所望によりＮを基Ｒ^５またはＣを基Ｒ^６で置換されており、ＺはＨ、Ｍｅ、Ｅｔまたは所望により置換されているＣ_１－Ｃ_６アルキルであるか；または
ＹおよびＺは一体となって所望により置換されている４員、５員または６員環を形成し；
ＸはＯＲ^７およびＮＲ^８Ｒ^９から選択され；
Ｒ^５はＨ、Ｍｅ、所望により置換されているＣ_１－Ｃ_６アルキルおよび所望により置換されているＣ_３－Ｃ_６シクロアルキルから選択され；
Ｒ^６はＭｅ、所望により置換されているＣ_１－Ｃ_６アルキルおよび所望により置換されているＣ_３－Ｃ_６シクロアルキルから選択され；
Ｒ^７はＭｅ、Ｅｔ、ｉ－プロピル、ｎ－プロピル、シクロプロピル、シクロブチル、所望により置換されているＣ_１－Ｃ_６アルキル、Ｃ_３－Ｃ_６シクロアルキル、－ＣＨ_２(Ｃ_３－Ｃ_６シクロアルキル)またはＯおよびＮから選択される１個のヘテロ原子を含む４員、５員もしくは６員環であり；
Ｒ^８およびＲ^９は独立してＨ、Ｍｅおよび所望により置換されているＣ_１－Ｃ_６アルキルから選択されるか、あるいは一体となって所望により置換されているＣ_３－Ｃ_６シクロアルキルまたはＯおよびＮから選択されるさらに１個のヘテロ原子を含む所望により置換されている４員、５員もしくは６員環を形成し；
ここで、Ｚ、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８およびＲ^９の任意的置換基は、存在するとき、ＯＨ、Ｃ_１－Ｃ_３アルキル、Ｃ_１－Ｃ_３アルコキシ、Ｃ(Ｏ)Ｍｅ、アミノ、ＮＨＭｅ、ＮＭｅ_２、ＦまたはＣｌから独立して選択される。〕
の化合物またはその薬学的に許容される塩。

【請求項2】

基Ｒ^１が

【化2】

から選択される、請求項１の化合物。

【請求項3】

基Ｒ^１がメチル、フルオロメチル、シアノメチルおよびシクロプロピルから選択される、請求項１に記載の化合物。

【請求項4】

基Ｒ^２がＨであり、基Ｒ^３がＨであるおよび／または基Ｒ^４がＨである、請求項１～３の何れかに記載の化合物。

【請求項5】

基ＹがＮ(Ｍｅ)ＣＯＭｅ、Ｎ(Ｒ^５)ＣＯＭｅ、Ｎ(Ｍｅ)ＣＯＲ^６、Ｎ(Ｍｅ)ＣＯＣＨ(ＯＨ)Ｍｅ、Ｎ(Ｍｅ)ＣＯＣＨ(ＯＲ^５)Ｒ^６、Ｎ(Ｒ^５)ＣＯＲ^６、ＣＯＮＭｅ_２、ＣＯＮＲ^５Ｒ^６、１,２,３－トリアゾール、１,２,４－トリアゾール、１,３,４－オキサジアゾール、２－ピロリジノン、２－イミダゾリジノン、イミダゾールもしくはピラゾールなどの５員Ｎ－ヘテロ環または１－ピリドンもしくはピリダジンなどの６員Ｎ－ヘテロ環から選択され、ＺがＨ、Ｍｅ、Ｅｔまたは所望により置換されているＣ_１－Ｃ_６アルキルである、請求項１～４の何れかに記載の化合物。

【請求項6】

基Ｙが、所望によりＮを基Ｒ^５またはＣを基Ｒ^６で置換されている

【化3】

から選択され、ＺがＨである、請求項１～４の何れかに記載の化合物。

【請求項7】

基Ｙが

【化4】

から選択される、請求項１～４の何れかに記載の化合物。

【請求項8】

次のものから選択される、請求項１の化合物：
６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１ｒ,４ｒ)－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１Ｒ,２Ｒ)－２－メチル－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１Ｒ,２Ｓ,４Ｒ)－２－メチル－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１Ｓ,２Ｒ,４Ｓ)－２－メチル－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
ｒｅｌ－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１Ｒ,２Ｓ,４Ｓ)－２－メチル－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
Ｎ－(１－(フルオロメチル)－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
Ｎ－(１－(シアノメチル)－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
Ｎ－(１－シクロプロピル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１Ｓ,４ｒ)－４－((Ｓ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
Ｎ－(１－シクロプロピル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－(オキセタン－３－イル)－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(２－オキソ－１－(１Ｈ－ピラゾール－４－イル)－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－(１－メチル－１Ｈ－ピラゾール－４－イル)－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－(１－メチル－１Ｈ－１,２,３－トリアゾール－４－イル)－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－(２－メチル－２Ｈ－１,２,３－トリアゾール－４－イル)－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１ｒ,４ｒ)－４－(２－オキソピロリジン－１－イル)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１ｒ,４ｒ)－４－(３－メチル－２－オキソイミダゾリジン－１－イル)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((５ｓ,８ｓ)－１－メチル－２－オキソ－３－オキサ－１－アザスピロ[４.５]デカン－８－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((５ｒ,８ｒ)－１－メチル－２－オキソ－３－オキサ－１－アザスピロ[４.５]デカン－８－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１ｒ,４ｒ)－４－(２－オキソピリジン－１(２Ｈ)－イル)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－(４－(ピリダジン－３－イル)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
２－((１ｒ,４ｒ)－４－(１,３,４－オキサジアゾール－２－イル)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
２－((１ｒ,４ｒ)－４－(１Ｈ－１,２,４－トリアゾール－１－イル)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
２－((１ｒ,４ｒ)－４－(１Ｈ－１,２,３－トリアゾール－１－イル)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
２－((１ｒ,４ｒ)－４－(２－(１－ヒドロキシエチル)－１Ｈ－イミダゾール－１－イル)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミドおよび
２－((１ｒ,４ｒ)－４－(４－(２－ヒドロキシプロパン－２－イル)－１Ｈ－１,２,３－トリアゾール－１－イル)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
またはその薬学的に許容される塩。

【請求項9】

請求項１～８の何れかに記載の式(Ｉ)の化合物および薬学的に許容される添加物を含む、医薬組成物。

【請求項10】

医薬として使用するための、請求項１～８の何れかに記載の式(Ｉ)の化合物。

【請求項11】

医薬の製造において使用するための、請求項１～８の何れかに記載の式(Ｉ)の化合物。

【請求項12】

ＩＲＡＫ４阻害が有益である疾患または状態を処置する方法であって、それを必要とする患者に、有効量の請求項１～８の何れかに記載の式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む、方法。

【請求項13】

使用、医薬または処置が炎症性疾患または全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、筋炎、シェーグレン症候群、全身性硬化症、痛風、子宮内膜症、アトピー性皮膚炎および乾癬などの自己炎症性／自己免疫性疾患のためである、請求項１０または１１に記載の使用のための化合物または請求項１２に記載の処置方法。

【請求項14】

使用、医薬または処置が黒色腫またはワルデンシュトレームマクログロブリン血症(ＷＭ)、非ホジキンリンパ腫(ＮＨＬ)、汎発性大Ｂ細胞リンパ腫(ＤＬＢＣＬ)、原発性中枢神経系リンパ腫(ＰＣＮＳＬ)、脾辺縁帯リンパ腫(ＳＭＺＬ)、小リンパ球性リンパ腫(ＳＬＬ)、白血病(慢性リンパ球性白血病(ＣＬＬ))および意義不明のモノクローナル高γグロブリン血症(ＭＧＵＳ－ＩｇＭ＋)から選択される血液学的悪性腫瘍のためである、請求項１０または１１に記載の使用のための化合物または請求項１２に記載の処置方法。

【請求項15】

請求項９に記載の医薬組成物および癌、炎症性疾患または自己炎症性／自己免疫性疾患の処置のためのその使用の指示を含む、キット。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本開示は、ＩＲＡＫ４を阻害し、結果として、医薬として有用である可能性がある化学化合物およびその薬学的に許容される塩に関する。本開示は、喘息および慢性閉塞性肺疾患(ＣＯＰＤ)などの呼吸器疾患、癌、炎症性疾患および全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、筋炎、シェーグレン症候群、全身性硬化症、痛風、子宮内膜症、アトピー性皮膚炎および乾癬などの自己炎症性／自己免疫性疾患の処置における、これらＩＲＡＫ４阻害剤の使用にも関する。本開示はまた該ＩＲＡＫ４阻害剤の製造に関与する方法および中間体化合物ならびにそれを含む医薬組成物にも関する。

【背景技術】

【0002】

インターロイキン－１受容体(ＩＬ－１Ｒ)関連キナーゼ４(ＩＲＡＫ４)は、免疫シグナル伝達のキーレギュレーターである。ＩＲＡＫ４は複数の細胞型により発現され、トール様受容体(ＴＬＲ)ならびにＩＬ－１Ｒ、ＩＬ－１８ＲおよびＩＬ－３３受容体ＳＴ２を含むインターロイキン－１(ＩＬ－１)ファミリーの受容体からのシグナル伝達に介在する。ＴＬＲはリポ多糖(ＬＰＳ)などの微生物由来のリガンドまたは微生物ＲＮＡもしくはＤＮＡを認識し、応答し、一方ＩＬ－１ファミリーの受容体は、ＴＬＲ活性化細胞(ＩＬ－１βおよびＩＬ－１８)または組織損傷(ＩＬ－１αおよびＩＬ－３３)により産生される内因性リガンドにより活性化される。リガンドによりＴＬＲまたはＩＬ－１受容体が活性化されたら、アダプタータンパク質骨髄分化一次応答８８(ＭｙＤ８８)が受容体に動員され、ＩＲＡＫファミリー(ＩＲＡＫ１、ＩＲＡＫ２およびＩＲＡＫ４)のタンパク質と共に「ミッドソーム(Myddosome)」と称される多量体タンパク質複合体を形成する。ミッドソームは核因子κＢ(ＮＦ－κＢ)およびマイトージェン活性タンパク質キナーゼ(ＭＡＰＫ)シグナル伝達経路を誘導するシグナル伝達プラットフォームとして働き、最終的に転写因子ＮＦ－κＢ、アクティベータータンパク質１(ＡＰ１)、ｃ－ＡＭＰ応答配列結合タンパク質(ＣＲＥＢ)およびインターフェロン制御因子５(ＩＲＦ５)を活性化し、炎症性サイトカインおよびケモカインの転写を誘導する。ＩＲＡＫ４を欠くマウスは生存可能であるが、ＩＬ－１β、ＩＬ－１８およびＬＰＳに対する炎症性サイトカイン応答を欠く。ＩＲＡＫ４の機能喪失型変異を呈するヒトは、免疫不全表現型を示し、免疫細胞はＴＬＲアゴニストおよびＩＬ－１受容体リガンドに対するサイトカイン応答の抑止を示す。

【0003】

ＩＲＡＫ４は、ＭｙＤ８８と中心部にあるキナーゼドメインの相互作用に介在するＮ末端デスドメインにより特徴づけられる。ミッドソーム形成は、ミッドソームの安定性および下流シグナル伝達を調節するＩＲＡＫ４自己リン酸化を促進する。ＩＲＡＫ４のキナーゼ活性は、キナーゼ失活ＩＲＡＫ４を発現するノックインマウスにおける研究および小分子ＩＲＡＫ４キナーゼ阻害剤を使用する研究で示されるとおり、ＴＬＲおよびＩＬ－１Ｒによるサイトカイン誘導に必要である。

【0004】

炎症性応答惹起における重要な役割を考慮して、ＩＲＡＫ４は、抗炎症効果を発揮する薬物の標的を構成する。

【0005】

喘息およびＣＯＰＤ(慢性閉塞性肺疾患)は、世界中で、大きな満たされていない医療の必要性を構成する慢性肺疾患である。喘息およびＣＯＰＤは異常サイトカイン放出、調節不全の免疫細胞活性化および気道リモデリングが関与する慢性気道炎症により特徴づけられる。喘息において、アレルゲン性、ウイルス性および細菌性傷害などの気道の傷害が、病原体関連分子パターン(ＰＡＭＰ)を介してＴＬＲ受容体ならびにＩＬ－３３およびＩＬ－１αを含むアラーミン放出を介してかつインフラマソーム活性化により放出されたＩＬ－１βにより、ＩＬ－１ＲおよびＳＴ２受容体を活性化する。ＴＬＲおよびＩＬ－１ファミリーの受容体は、マクロファージ、樹状細胞、肥満細胞、単球および上皮細胞を含む気道における複数細胞型に存在し、炎症性サイトカイン(ＴＮＦ－α、ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－５)放出によりリガンドに応答し、気道炎症、好中球および好酸球などの炎症性細胞動員、気道過敏反応性および粘液産生に至る。ＩＲＡＫ４阻害は、気道におけるこれら炎症性経路を抑制する可能性を有する。喘息およびＣＯＰＤ患者からの肺サンプルの遺伝子発現分析は、重症患者のサブセットでＩＬ－１ＲおよびＴＬＲ２／４炎症性経路と関連する遺伝子の発現の上方制御を確認している。ＩＲＡＫ４阻害剤は、我々の知る限り、呼吸器疾患処置のために臨床で探索されていないが、いくつかの研究グループからの前臨床データは、ＩＲＡＫ４制御経路の妨害は、喘息およびＣＯＰＤ両方の動物モデルで気道炎症を減弱することを示す。例えば、ミッドソームの中心成分であるＭｙＤ８８を欠くマウスは、ＩＲＡＫ２とＩＲＡＫ４の相互作用を遮断する小分子模倣体で処置されたマウスと同様、アレルゲンまたはＩＬ－３３により誘導される気道炎症から保護される。モノクローナル抗体でのＩＬ－１βの遮断が、喘息のステロイド抵抗性マウスモデルにおけるアレルゲンおよび細菌により誘導される気道炎症を抑制することも判明している。さらに、マウスのアレルゲン曝露時のＩＬ－１Ｒアンタゴニストアナキンラでの処置は、アレルギー性喘息のマウスモデルにおける喘息様症状を軽減する。タバコ煙への慢性暴露は、ＣＯＰＤ発症の主要寄与因子である。タバコ煙に暴露されたマウスで、ＩＬ－１シグナル伝達は、好中球性気道炎症を介在する中心的存在であり、ＩＬ－１α、ＩＬ－１βまたはＩＬ－１Ｒに対する抗体でのＩＬ－１シグナル伝達遮断は、タバコ煙暴露マウスにおける肺における好中球性炎症を軽減し、細菌またはウイルス誘導増悪を低減できる。まとめると、ＩＲＡＫ４阻害は、数個の疾患関連シグナル伝達経路の同時遮断により、炎症性呼吸器疾患における広い抗炎症効果を提供する可能性がある。

【0006】

ミッドソームの中心的レギュレーターとして、ＩＲＡＫ４は、ＩＬ－１Ｒ、ＴＬＲまたはＳＴ２介在機構により駆動される他の炎症性疾患の治療標的としても有望である。先に開示したとおり、ＩＲＡＫ４は、関節リウマチおよび全身性エリテマトーデス(ＳＬＥ)などの自己免疫性障害に役割を有する(例えばＷＯ２０１７２０７３８６およびＷＯ２０１５１５０９９５参照)。ＳＬＥにおいて、自己抗体および自己抗原からなる免疫複合体がＴＬＲ依存性病理学的シグナル伝達を駆動できる。ＳＬＥ病因において、ＩＲＡＫ４阻害は、形質細胞様樹状細胞におけるＴＬＲ７およびＴＬＲ９活性化により介在されるＩ型インターフェロンおよび炎症促進性サイトカインの放出を遮断すると報告されている。ＩＲＡＫ４のキナーゼ失活変異体を発現するまたはＩＲＡＫ４キナーゼ阻害剤化合物で処置したマウスは、実験的に誘導した関節炎およびループスに抵抗性である(例えばＷＯ２０１７２０７３８６参照)。関節リウマチの処置にアナキンラ(ＩＬ－１受容体アンタゴニスト)の使用が承認されていることも、この疾患における病原性ＩＬ－１Ｒシグナル伝達の役割を支持する。シェーグレン症候群において、ＴＬＲはＰＢＭＣ(末梢血単核細胞)および唾液腺で上方制御されており、ＴＬＲ活性化はインターフェロンおよび他の炎症性サイトカインの放出を刺激でき、シェーグレン病因への関与が示唆される。ＭｙＤ８８ノックアウトマウスも、シェーグレン症候群の実験的マウスモデルで疾患顕在化の減少を示す。全身性硬化症は、ＩＬ－１Ｒ、ＴＬＲ４、ＴＬＲ８およびＳＴ２－シグナル伝達が、微小血管損傷および線維症を含む病原性機構を駆動し得る重症自己免疫性障害である。全身性硬化症の処置としてのＩＲＡＫ４阻害は、故に、複数疾患関連経路を同時に遮断し得る。筋炎において、ＩＬ－１αおよびＩＬ－１βのレベル上昇が筋肉組織炎症に寄与し得る。筋炎患者はまた、ＴＬＲ７／９活性化により一部駆動され得る高Ｉ型インターフェロン遺伝子シグネチャーによっても特徴づけられ、ＩＬ－１Ｒシグナル伝達の関連は、小規模機構的臨床治験におけるアナキンラ処置筋炎患者の臨床的アウトカム改善によっても支持された。ＩＬ－１Ｒ経路の中心的レギュレーターとして、ＩＲＡＫ４はまた痛風の処置の標的としても有望である。痛風罹患者で特徴的に形成される尿酸ナトリウム結晶は、インフラマソームの活性化およびＩＬ－１β放出の引き金を引き得る。抗ＩＬ－１βモノクローナル抗体であるカナキヌマブまたはアナキンラ両方の使用は、痛風発作の処置で臨床的有効性を示している。ＩＬ－１βおよびＩＬ－３３のレベルの上昇は、子宮内膜症患者でも判明している。子宮内膜症の疾患プロセスにおけるＩＲＡＫ４の重要性は、ＩＲＡＫ４阻害剤の経口投与が病巣形成抑制を示したマウスモデルで示された。ＭｙＤ８８ノックアウトマウスは、同マウスモデルにおいて子宮内膜症の発症に対しても保護された。ＩＬ－３３／ＳＴ２シグナル伝達は、アトピー性皮膚炎における重要な機構であり、皮膚炎症、上皮性バリア完全性および好酸球動員の制御に関与する。ＩＬ－３３は、ＭｙＤ８８依存的様式でマウスにおいて湿疹および皮膚炎の引き金を引く。ＳＴ２シグナル伝達のレギュレーターおよびミッドソームの中心的成分として、ＩＲＡＫ４阻害はアトピー性皮膚炎における病原性ＩＬ－３３／ＳＴ２シグナル伝達を阻害する可能性を有する。ＴＬＲ７およびＩＬ－１Ｒ介在機構両方が乾癬に関与することが示唆されている。イミキモド(ＴＬＲ／８アゴニスト)は、ＭｙＤ８８依存的様式でマウスにおいて乾癬様疾患を誘導できる。ＩＬ－１βは乾癬性皮膚病巣で上方制御され、ＩＬ－１β／ＩＬ－１Ｒ軸は皮膚炎症に寄与し、乾癬病因においてＴＨ１７細胞から放出される重要なサイトカインであるＩＬ－１７の産生を制御することが示唆されている。ＩＲＡＫ４キナーゼ活性は、さらに、インビボでＴＨ１７分化およびＴＨ１７介在疾患の制御に必要であることが示されている。

【0007】

いくつかのＩＲＡＫ４キナーゼ阻害剤が知られ、主に腫瘍または炎症性疾患における使用のために、開発されている(例えばＷＯ２０１５１５０９９５、ＷＯ２０１７２０７３８６、ＷＯ２０１７００９８０６、ＷＯ２０１６１７４１８３、ＷＯ２０１８２３４３４２、ＷＯ２０２０２６３９６７、ＷＯ２０２０２６３９８０参照)。既知ＩＲＡＫ４キナーゼ阻害剤の中で、ＰＦ－０６６５０８３３は最近関節リウマチの処置についてのフェーズII臨床治験を完了した(clinicaltrials.gov entryのNCT02996500参照)。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0008】

まとめると、ＩＲＡＫ４阻害剤は、今日までこのような阻害剤が臨床使用に承認されていないにも関わらず、いくつかの疾患および状態の処置のための可能性を有する。例えば癌、喘息、ＣＯＰＤおよび慢性自己免疫性／自己炎症性疾患などのＩＲＡＫ４介在経路活性化と関連する炎症性疾患の処置における臨床使用に適するものとする物理化学および選択性プロファイルを有する新規ＩＲＡＫ４阻害剤の提供が、本開示の目的である。

【0009】

第一の態様において、本開示は、式(Ｉ)

【化1】

〔式中、
Ｒ^１はｉ)Ｈ、Ｍｅ、Ｅｔ、Ｐｒ、ｉ－Ｐｒ、シクロプロピル、ＣＨ_２ＣＮ、ＣＨ_２Ｆおよびオキセタンまたはii)何れの場合も所望によりＭｅ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＮ、ＯＭｅおよびＣ_１－Ｃ_３アルキルから選択される１以上の置換基で置換されているＣ_１－Ｃ_６アルキル基、Ｃ_３－Ｃ_６シクロアルキル基または５員Ｎ－ヘテロ環から選択され；
Ｒ^２はＨ、Ｆ、Ｃｌ、ＤおよびＭｅから選択され；
Ｒ^３およびＲ^４は各々独立してＨ、Ｍｅ、Ｅｔ、Ｆ、Ｃｌ、所望により置換されているＣ_１－Ｃ_３アルキルおよびＣ_１－Ｃ_３ハロアルキルから選択され；
ＹはＮ(Ｍｅ)ＣＯＭｅ、Ｎ(Ｒ^５)ＣＯＭｅ、Ｎ(Ｍｅ)ＣＯＲ^６、Ｎ(Ｍｅ)ＣＯＣＨ(ＯＨ)Ｍｅ、Ｎ(Ｍｅ)ＣＯＣＨ(ＯＲ^５)Ｒ^６、Ｎ(Ｒ^５)ＣＯＲ^６、ＣＯＮＭｅ_２、ＣＯＮＲ^５Ｒ^６、１,２,３－トリアゾール、１,２,４－トリアゾール、１,３,４－オキサジアゾール、２－ピロリジノン、２－イミダゾリジノン、イミダゾールもしくはピラゾールなどの５員Ｎ－ヘテロ環または１－ピリドンもしくはピリダジンなどの６員Ｎ－ヘテロ環であり、ここで、５員または６員Ｎ－ヘテロ環は所望によりＮを基Ｒ^５またはＣを基Ｒ^６で置換されており、ＺはＨ、Ｍｅ、Ｅｔまたは所望により置換されているＣ_１－Ｃ_６アルキルであるか；または
ＹおよびＺは一体となって所望により置換されている４員、５員または６員環を形成し；
ＸはＯＲ^７およびＮＲ^８Ｒ^９から選択され；
Ｒ^５はＨ、Ｍｅ、所望により置換されているＣ_１－Ｃ_６アルキルおよび所望により置換されているＣ_３－Ｃ_６シクロアルキルから選択され；
Ｒ^６はＭｅ、所望により置換されているＣ_１－Ｃ_６アルキルおよび所望により置換されているＣ_３－Ｃ_６シクロアルキルから選択され；
Ｒ^７はＭｅ、Ｅｔ、ｉ－プロピル、ｎ－プロピル、シクロプロピル、シクロブチル、所望により置換されているＣ_１－Ｃ_６アルキル、Ｃ_３－Ｃ_６シクロアルキル、－ＣＨ_２(Ｃ_３－Ｃ_６シクロアルキル)またはＯおよびＮから選択される１個のヘテロ原子を含む４員、５員もしくは６員環であり；
Ｒ^８およびＲ^９は独立してＨ、Ｍｅおよび所望により置換されているＣ_１－Ｃ_６アルキルから選択されるか、あるいは一体となって所望により置換されているＣ_３－Ｃ_６シクロアルキルまたはＯおよびＮから選択されるさらに１個のヘテロ原子を含む所望により置換されている４員、５員もしくは６員環を形成し；
ここで、Ｚ、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８およびＲ^９の任意的置換基は、存在するとき、ＯＨ、Ｃ_１－Ｃ_３アルキル、Ｃ_１－Ｃ_３アルコキシ、Ｃ(Ｏ)Ｍｅ、アミノ、ＮＨＭｅ、ＮＭｅ_２、ＦまたはＣｌから独立して選択される。〕
の化合物またはその薬学的に許容される塩を提供する。

【0010】

本明細書はまた式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩および少なくとも１個の薬学的に許容される添加物を含む医薬組成物も記載する。

【0011】

本明細書はまた医薬として使用するための式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩も記載する。

【0012】

本明細書はまた喘息および慢性閉塞性肺疾患(ＣＯＰＤ)などの呼吸器疾患の処置に使用するための式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩も記載する。

【0013】

本明細書はまた炎症性疾患の処置に使用するための式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩も記載する。

【0014】

本明細書はまた全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、筋炎、シェーグレン症候群、全身性硬化症、痛風、子宮内膜症、アトピー性皮膚炎および乾癬などの自己炎症性／自己免疫性疾患の処置に使用するための式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩も記載する。

【0015】

本明細書はまた、例えばＢＴＫ阻害剤と組み合わせて使用するための、癌の処置に使用するための式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩も記載する。

【0016】

本明細書はまた癌の処置に使用するための式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩も記載する。このような使用において、例えば血液学的悪性腫瘍の処置のために、式(Ｉ)の化合物は単剤療法としてまたはさらなる治療剤との組み合わせで使用される。処置される血液学的悪性腫瘍は、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症(ＷＭ)、非ホジキンリンパ腫(ＮＨＬ)、汎発性大Ｂ細胞リンパ腫(ＤＬＢＣＬ)、原発性中枢神経系リンパ腫(ＰＣＮＳＬ)、脾辺縁帯リンパ腫(ＳＭＺＬ)、小リンパ球性リンパ腫(ＳＬＬ)、白血病(慢性リンパ球性白血病(ＣＬＬ))および意義不明のモノクローナル高γグロブリン血症(ＭＧＵＳ－ＩｇＭ＋)から選択され得る。さらに、使用は、ＭＹＤ８８変異、Ｂ細胞受容体(ＢＣＲ)変異またはＭＹＤ８８およびＢＣＲ両方の変異を有する血液学的悪性腫瘍の処置のためであり得る。化合物をさらなる治療剤との組み合わせで使用するとき、第二剤は、ＢＣＲ阻害剤、例えばＢＴＫ阻害剤(例はイブルチニブ、アカラブルチニブ、ザヌブルチニブまたはチラブルチニブを含む)、ＰＩ３Ｋδ阻害剤およびＳＹＫ阻害剤または免疫療法からなる群から選択され得る。

【0017】

本明細書はまた医薬の製造における式(Ｉ)の化合物の使用、例えば、ここで、医薬が喘息および慢性閉塞性肺疾患(ＣＯＰＤ)などの呼吸器疾患の処置に使用するため、または癌の処置に使用するため、または全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、筋炎、シェーグレン症候群、全身性硬化症、痛風、子宮内膜症、アトピー性皮膚炎および乾癬などの自己炎症性／自己免疫性疾患の処置に使用するため、または炎症性疾患の処置に使用するためである、使用も記載する。

【0018】

本明細書はまた有効量の式(Ｉ)の化合物の、それを必要とする患者への投与を含む、処置方法であって、ここで、必要とする患者が喘息および慢性閉塞性肺疾患(ＣＯＰＤ)などの呼吸器疾患、癌、全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、筋炎、シェーグレン症候群、全身性硬化症、痛風、子宮内膜症、アトピー性皮膚炎および乾癬などの自己炎症性／自己免疫性疾患または炎症性疾患を有するものである、方法も記載する。

【0019】

本開示はまた式(Ｉ)の化合物の製造方法にも関する。

【0020】

本開示のさらなる態様は、この明細書を読むことにより、当業者には明らかである。

【0021】

上記のとおり、式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩が強力なＩＲＡＫ４キナーゼの阻害剤であることが判明した。さらに、好ましい式(Ｉ)の化合物は、他のキナーゼを超える優れた選択性を有し、オフターゲット効果および毒性を回避するプロファイルを提供する。ＩＲＡＫ４阻害活性と有害なオフターゲット効果欠如のこの望ましい組み合わせは、医薬として使用するための本開示の化合物の適性を示す。

【0022】

他に定義しない限り、ここで使用する全ての技術的および科学的用語は、本開示が関連する分野の当業者に一般に理解されるのと同じ意味を有する。例えば、Concise Dictionary of Biomedicine and Molecular Biology, Juo, Pei-Show, 2nd ed., 2002, CRC Press; The Dictionary of Cell and Molecular Biology, 3rd ed., 1999, Academic Press;およびOxford Dictionary of Biochemistry and Molecular Biology, Revised, 2000, Oxford University Pressは、本開示において使用される用語の多くの一般的辞書を当業者に提供する。

【0023】

本開示がより容易に理解され得るように、ある用語を下に明示的に定義する。さらに、定義は、詳細な記載をとおして、適宜示される。

【0024】

単位、接頭辞および記号は、その国際単位系(ＳＩ)により認められた形態である。数値範囲は、該範囲を定義する数値を含む。

【0025】

用語「医薬組成物」は、活性成分の生物学的活性を可能とするような形態であり、組成物が投与される対象に許容不可能な毒性であるさらなる成分を含まない、製剤をいう。このような組成物は無菌であり得る。本開示の医薬組成物は、式(Ｉ)の化合物またはその医薬的に許容される塩および少なくとも１個の薬学的に許容される添加物を含む。

【0026】

「処置する」または「処置」または「処置するため」または「軽減する」または「軽減するため」などの用語は、(１)診断された病状または障害を治癒、減速、症状低減および／または進行停止する治療的手段および(２)標的の病状または障害を予防および／または発症遅延する予防または防止的手段両方をいう。故に、処置を必要とする者は、既に障害を有する者；障害を有しやすいまたは発症しやすい者；および障害を予防すべき者を含む。ある態様において、対象は、患者が呼吸器疾患の症状の、例えば、完全、部分的または一過性軽減を示すならば、本開示の方法により呼吸器疾患は十分「処置された」。

【0027】

用語「対象」は、特定の処置の受け手である、ヒト、非ヒト霊長類、齧歯類などを含むが、これらに限定されないあらゆる動物(例えば、哺乳動物)をいう。典型的に、用語「対象」および「患者」は、ここではヒト対象に関して相互交換可能に使用される。

【0028】

ここで使用する記号^*は、式(Ｉ)の化合物のある構成要素の化合物の他の構成要素への結合部位を示すために使用する。

【0029】

ここで使用する用語「アルキル」は、特定の数の炭素原子を有する直鎖および分岐鎖両方の飽和炭化水素ラジカルをいう。ここで使用する用語ジュウテロアルキルは、１以上の、所望により全ての、水素が重水素原子で置き換えられているアルキル基をいう。用語シクロアルキルは、飽和環状炭化水素をいう。ここで使用する用語ハロアルキルは、１以上の、所望により全ての、水素がハロゲン原子で置き換えられているアルキル基をいい、ここで例えばハロゲン原子はフッ素原子または塩素原子である。ハロアルキル基の実施態様は、ＣＦ_３、ＣＦ_２ＣＦ_３などの完全フッ素化のものまたはＣＨ_２Ｆ、ＣＨ_２Ｃｌ、ＣＦ_２ＣＨ_３、ＣＨ_２ＣＦ_３、ＣＨ_２ＣＨ_２ＦおよびＣＨ_２ＣＨ_２Ｃｌなどのアルキル基の同じ炭素原子に接続する１以上の水素を置き換えるフッ素または塩素を有するものを含む。

【0030】

本明細書において、Ｃ_ｘ－Ｃ_ｙアルキルなどの用語で使用する接頭辞「Ｃ_ｘ－Ｃ_ｙ」(ここで、ｘおよびｙは整数である)は、該基に存在する炭素原子数の範囲を示す。例えば、Ｃ_１－Ｃ_４アルキルはメチル、エチル、ｎ－プロピル、ｉ－プロピル、ｎ－ブチル、ｓ－ブチル、ｉ－ブチルおよびｔ－ブチルを含み、一方Ｃ_１－Ｃ_３アルキル基の例はメチル、エチル、ｎ－プロピルおよびｉ－プロピルを含む。Ｃ_１－Ｃ_４アルコキシ基はメトキシ、エトキシ、ｎ－プロポキシ、ｉ－プロポキシ、ｎ－ブトキシ、ｓ－ブトキシおよびｔ－ブトキシを含む。Ｃ_１－Ｃ_３アルコキシ基の例は、メトキシ、エトキシ、ｎ－プロポキシおよびｉ－プロポキシを含む。

【0031】

特に断らない限り、原子または基の結合は、該基の任意の適当な原子であり得る；例えば、プロピルはプロプ－１－イルおよびプロプ－２－イルを含む。

【0032】

ここで使用する用語「シクロアルキル」は、特定の数の炭素原子を有する環状飽和炭化水素ラジカルをいう。故に、Ｃ_３－Ｃ_６シクロアルキルはシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシル基をいう。

【0033】

ここで使用する用語「アルコキシ」は、アルキル鎖に結合した酸素原子を伴う基をいい、ここで、上記のとおり、アルキル鎖は特定の数の炭素原子を有する直鎖および分岐鎖飽和炭化水素ラジカルである。故に、Ｃ_１－Ｃ_３アルコキシは、メトキシ、エトキシ、Ｏ^ｎＰｒおよびＯ^ｉＰｒ基をいう。

【0034】

ここで記載する基Ｒ^１は、所望によりＭｅ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＮ、ＯＭｅおよびＣ_１－Ｃ_３アルキルから選択される１以上の置換基で置換されている５員Ｎ－ヘテロ環であり得る。ある実施態様において、５員Ｎ－ヘテロ環は、１個、２個または３個の環窒素を含む芳香族ヘテロ環、例えばピロール、イミダゾール、ピラゾール、１,２,３－トリアゾールまたは１,２,４－トリアゾールであり得る。ある実施態様において、５員Ｎ－ヘテロ環の環窒素は、Ｃ_１－Ｃ_３アルキル基、例えばメチル基で置換される。

【0035】

ここにおよび上に記載するとおり、シクロヘキシル基は基Ｒ^４で置換され得る。このような場合、基Ｒ^４は、任意の利用可能な環炭素に結合し得る。ある実施態様において、Ｒ^４は、下に示すとおり、インダゾール環に結合する炭素原子に隣接する炭素原子に結合する。

【化2】

【0036】

ここでおよび上で使用する用語「アセチル」は、式－Ｃ(Ｏ)Ｍｅの基をいう。ここでのＮ－アシル化基の記載は、小アルキル側鎖、すなわち所望により置換されているＣ_１－Ｃ_６アルキル側鎖または所望により置換されているＣ_３－Ｃ_６シクロアルキルを有するアミドをいい、各場合、任意的置換基はＯＨ、Ｃ_１－Ｃ_３アルコキシ、Ｃ(Ｏ)Ｍｅ、アミノ、ＮＨＭｅ、ＮＭｅ_２、ＦまたはＣｌから選択される。ある実施態様において、Ｎ－アシル化基は、Ｎ－アセチル基、すなわち基－ＮＲＣ(Ｏ)Ｍｅである。

【0037】

ここでおよび上に記載するとおり、式(Ｉ)の化合物は、一体となって４員、５員または６員環を形成し得る２個の基ＹおよびＺで置換されているシクロヘキシル環を含む。このような場合、４員、５員または６員環は、所望により１個または２個の環炭素がＯおよびＮから選択されるヘテロ原子で置き換えられている飽和炭化水素環系である。２個の環炭素がヘテロ原子で置き換えられている場合、ヘテロ原子は直接結合していない、すなわちヘテロ原子は非隣接環炭素を置き換え、または環内でＣＨ_２基により分離されていないが、例えばカルボニル基により連結され、例えばカーボネートまたはカルバメートモチーフをもたらす。炭化水素環は、ＹおよびＺが一体となって環状アミドを形成するときのように、カルボニル基を組み込み得る。ある実施態様において、４員、５員または６員環は、ピロリジン－２－オン、オキサゾリジン－２－オン、ピペリジン－２－オンおよび１,３－オキサジナン－２－オンなどの環状アミドまたはカルバメートである。あるいは、基ＹおよびＺは、一体となって、窒素でアシル基により置換されているアゼチジンを形成し得る。さらに、４員、５員または６員環は、ＯＨ、Ｃ_１－Ｃ_３アルキル、Ｃ_１－Ｃ_３アルコキシ、Ｃ(Ｏ)Ｍｅ、アミノ、ＮＨＭｅ、ＮＭｅ_２、ＦまたはＣｌから選択される基で置換され得る。これらの任意的置換基は、有利に溶解度などの分子の物理化学性質の調節、または、例えば他のキナーゼに対する、ＩＲＡＫ４キナーゼとの相互作用さらなる最適化に使用され、故に、より強力かつ選択的ＩＲＡＫ４キナーゼ阻害剤をもたらし得る。

【0038】

ここに記載するとおり、式(Ｉ)の化合物は、Ｎ(Ｍｅ)ＣＯＭｅ、Ｎ(Ｒ^５)ＣＯＭｅ、Ｎ(Ｍｅ)ＣＯＲ^６、Ｎ(Ｍｅ)ＣＯＣＨ(ＯＨ)Ｍｅ、Ｎ(Ｍｅ)ＣＯＣＨ(ＯＲ^５)Ｒ^６、Ｎ(Ｒ^５)ＣＯＲ^６、ＣＯＮＭｅ_２、ＣＯＮＲ^５Ｒ^６、１,２,３－トリアゾール、１,２,４－トリアゾール、１,３,４－オキサジアゾール、２－ピロリジノン、２－イミダゾリジノン、イミダゾールもしくはピラゾールなどの５員Ｎ－ヘテロ環または１－ピリドンもしくはピリダジンなどの６員Ｎ－ヘテロ環から選択される基Ｙを含み得て、ここで、５員または６員Ｎ－ヘテロ環は、所望によりＮを基Ｒ^５またはＣを基Ｒ^６で置換されている。このような場合、基ＺはＨ、Ｍｅ、Ｅｔまたは所望により置換されているＣ_１－Ｃ_６アルキルから選択される。他の５員および６員Ｎ－ヘテロ環はピロール、ピリジン、ピリミジンおよびピラジンを含む。基Ｙが所望により置換されている５員または６員Ｎ－ヘテロ環であるとき、実施態様は、１個のＲ^５基および／または１個のＲ^６基が存在し、基Ｒ^５またはＲ^６がメチル、Ｃ_１－Ｃ_３アルキル、Ｃ_１－Ｃ_３－ヒドロキシルアルキル、－ＣＨ(ＯＨ)Ｍｅ_２、－Ｃ(ＯＨ)Ｍｅ_２または－ＣＨ_２ＣＨ(ＯＨ)Ｍｅから選択される。ある実施態様において、Ｒ^５およびＲ^６基はメチル、Ｃ_１－Ｃ_３アルキル、Ｃ_１－Ｃ_３ヒドロキシルアルキル、－ＣＨ(ＯＨ)Ｍｅ_２、－Ｃ(ＯＨ)Ｍｅ_２および－ＣＨ_２ＣＨ(ＯＨ)Ｍｅから選択される。例えばＹがＮ(Ｍｅ)ＣＯＲ^６であるとき、Ｒ^６は、下に示すＣＨ(ＯＨ)Ｍｅであり得る。

【化3】

【0039】

ここでおよび上に記載するとおり、基Ｒ^７は、所望により置換されている、ＯおよびＮから選択される１個のヘテロ原子を含む４員、５員または６員環であり得る。疑いを避けるため、「１個のヘテロ原子を含む」は、環の原子の１個がＯまたはＮから選択されるヘテロ原子であることを意味する。ある実施態様において、ＯおよびＮから選択される１個のヘテロ原子を含む４員、５員または６員環は飽和である。ある実施態様において、ＯおよびＮから選択される１個のヘテロ原子を含む４員、５員または６員環はアゼチジン、オキセタン、テトラヒドロフラン、ピロリジン、テトラヒドロピランおよびピペリジンから選択される。ここでおよび上に記載するとおり、置換基Ｒ^８およびＲ^９は一体となって所望により置換されているさらに１個のヘテロ原子を含む４員、５員または６員環を形成し得る。さらに１個のヘテロ原子が存在するとき、ヘテロ原子はＮに直接結合しない、すなわち環内ヘテロ原子は隣接しておらず、またはＣＨ_２基により分離されていない。ある実施態様において、得られた環は飽和である、例えば得られた環はモルホリンまたはピペラジン環であり得る。

【0040】

当業者には明らかなとおり、式(Ｉ)の化合物および特にＲ^４、ＹおよびＺなどで置換されたシクロヘキシル基は、種々の立体化学形態で存在できる。本特許請求の範囲は、ＩＲＡＫ４阻害剤として最高の活性の化合物が好ましいが、式(Ｉ)の化合物の全立体化学形態を包含することは理解される。式(Ｉ)の化合物は、あらゆる比率で存在する式(Ｉ)の化合物の他の可能性のある立体異性形態の１以上を伴い、または伴わずに製造、単離および／または供給され得ることは認識される。立体富化または立体純粋化合物の製造は、当分野で周知の有機化学の標準技術により、例えば立体富化または立体純粋出発物質からの合成により、合成中の適切な立体富化または立体純粋触媒の使用によりおよび／または立体異性体のラセミまたは一部富化混合物の、例えばキラルクロマトグラフィーによる分割により、実施できる。例えば、本開示の化合物は、化合物の＞９０％、＞９５％または＞９９％が単一エナンチオマーまたはジアステレオマーとして存在する混合物として提供され得る。

【0041】

ここにおよび上に記載するとおり、式(Ｉ)の化合物のある構成要素は、所望により置換されている。ここで使用する用語所望により置換されているは、化合物の構成要素が、特定した任意的置換基の１以上で置換されていても置換されていなくてもよいことを意味する。任意的置換基が基Ｚ、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８およびＲ^９の１以上に存在するとき、０個、１個、２個または３個の置換基が各置換される基に存在し、例えば０個または１個の置換基が存在する。２個のヒドロキシル置換基が存在するとき、２個のヒドロキシル基は同じ炭素原子に結合しないことは理解される。任意的置換基がＦであるとき、１個、２個または３個のＦ置換基が存在でき、さらに、２個または３個のＦ置換基が存在するとき、一般に同じ炭素原子に直接結合する。基Ｒ^１がＣ_１－Ｃ_３アルキル基で置換されているある実施態様において、１個の置換基、例えばメチル基が存在し得る。これらの任意的置換基は、溶解度などの分子の物理化学性質の調節、代謝の調節または例えば他のキナーゼに対する、ＩＲＡＫ４キナーゼとの相互作用さらなる最適化に使用され、故に、より強力かつ選択的ＩＲＡＫ４キナーゼ阻害剤をもたらし得る。Ｚ、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８およびＲ^９の任意的置換基がＯＨ、Ｃ_１－Ｃ_３アルキル、Ｃ_１－Ｃ_３アルコキシ、Ｃ(Ｏ)Ｍｅ、アミノ、ＮＨＭｅおよびＮＭｅ_２から選択されるある実施態様において、基あたり０個または１個の独立して選択される置換基が存在する(すなわち０個または１個のＯＨ、Ｃ_１－Ｃ_３アルキル、Ｃ_１－Ｃ_３アルコキシ、Ｃ(Ｏ)Ｍｅ、アミノ、ＮＨＭｅおよびＮＭｅ_２から独立して選択される置換基がＺ、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８またはＲ^９基各々に存在し得る)。Ｚ、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８およびＲ^９の任意的置換基がＦまたはＣｌから独立して選択されるある実施態様において、基あたり０個、１個、２個または３個の独立して選択される置換基が存在し得る(すなわち０個、１個、２個または３個のＦまたはＣｌから独立して選択される置換基がＺ、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８およびＲ^９基各々に存在し得る)。ある実施態様において、基Ｚ、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８およびＲ^９は、存在する各場合、非置換である。

【0042】

上記のとおり、第一の実施態様において、本開示は式(Ｉ)

【化4】

〔式中、
Ｒ^１はｉ)Ｈ、Ｍｅ、Ｅｔ、Ｐｒ、ｉ－Ｐｒ、シクロプロピル、ＣＨ_２ＣＮ、ＣＨ_２Ｆおよびオキセタンまたはii)何れの場合も所望によりＭｅ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＮ、ＯＭｅおよびＣ_１－Ｃ_３アルキルから選択される１以上の置換基で置換されているＣ_１－Ｃ_６アルキル基、Ｃ_３－Ｃ_６シクロアルキル基または５員Ｎ－ヘテロ環から選択され；
Ｒ^２はＨ、Ｆ、Ｃｌ、ＤおよびＭｅから選択され；
Ｒ^３およびＲ^４は各々独立してＨ、Ｍｅ、Ｅｔ、Ｆ、Ｃｌ、所望により置換されているＣ_１－Ｃ_３アルキルおよびＣ_１－Ｃ_３ハロアルキルから選択され；
ＹはＮ(Ｍｅ)ＣＯＭｅ、Ｎ(Ｒ^５)ＣＯＭｅ、Ｎ(Ｍｅ)ＣＯＲ^６、Ｎ(Ｍｅ)ＣＯＣＨ(ＯＨ)Ｍｅ、Ｎ(Ｍｅ)ＣＯＣＨ(ＯＲ^５)Ｒ^６、Ｎ(Ｒ^５)ＣＯＲ^６、ＣＯＮＭｅ_２、ＣＯＮＲ^５Ｒ^６、１,２,３－トリアゾール、１,２,４－トリアゾール、１,３,４－オキサジアゾール、２－ピロリジノン、２－イミダゾリジノン、イミダゾールもしくはピラゾールなどの５員Ｎ－ヘテロ環または１－ピリドンもしくはピリダジンなどの６員Ｎ－ヘテロ環であり、ここで、５員または６員Ｎ－ヘテロ環は所望によりＮを基Ｒ^５またはＣを基Ｒ^６で置換されており、ＺはＨ、Ｍｅ、Ｅｔまたは所望により置換されているＣ_１－Ｃ_６アルキルであるか；または
ＹおよびＺは一体となって所望により置換されている４員、５員または６員環を形成し；
ＸはＯＲ^７およびＮＲ^８Ｒ^９から選択され；
Ｒ^５はＨ、Ｍｅ、所望により置換されているＣ_１－Ｃ_６アルキルおよび所望により置換されているＣ_３－Ｃ_６シクロアルキルから選択され；
Ｒ^６はＭｅ、所望により置換されているＣ_１－Ｃ_６アルキルおよび所望により置換されているＣ_３－Ｃ_６シクロアルキルから選択され；
Ｒ^７はＭｅ、Ｅｔ、ｉ－プロピル、ｎ－プロピル、シクロプロピル、シクロブチル、所望により置換されているＣ_１－Ｃ_６アルキル、Ｃ_３－Ｃ_６シクロアルキル、－ＣＨ_２(Ｃ_３－Ｃ_６シクロアルキル)またはＯおよびＮから選択される１個のヘテロ原子を含む４員、５員もしくは６員環であり；
Ｒ^８およびＲ^９は独立してＨ、Ｍｅおよび所望により置換されているＣ_１－Ｃ_６アルキルから選択されるか、あるいは一体となって所望により置換されているＣ_３－Ｃ_６シクロアルキルまたはＯおよびＮから選択されるさらに１個のヘテロ原子を含む所望により置換されている４員、５員もしくは６員環を形成し；
ここで、Ｚ、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７、Ｒ^８およびＲ^９の任意的置換基は、存在するとき、ＯＨ、Ｃ_１－Ｃ_３アルキル、Ｃ_１－Ｃ_３アルコキシ、Ｃ(Ｏ)Ｍｅ、アミノ、ＮＨＭｅ、ＮＭｅ_２、ＦまたはＣｌから独立して選択される。〕
の化合物またはその薬学的に許容される塩を提供する。

【0043】

ある実施態様において、式(Ｉ)の化合物は、基Ｒ^１が

【化5】

から選択される、式(Ｉａ)の化合物である。

【0044】

明確性のために、ここで使用する記号「^*」は、基がそこからの単結合を介して分子の残りの部分、この場合、ピリドンの窒素原子に結合する原子を示す。

【0045】

ある実施態様において、式(Ｉ)の化合物は、基Ｒ^１がメチル、フルオロメチルおよびシアノメチルから選択される式(Ｉｂ)の化合物である。

【0046】

ある実施態様において、式(Ｉ)の化合物は、基Ｒ^１がシクロプロピルである、式(Ｉｃ)の化合物である。

【化6】

【0047】

ある実施態様において、式(Ｉ)、(Ｉａ)、(Ｉｂ)、(Ｉｃ)の化合物は、基Ｒ^２がＨである、式(Ｉｄ)の化合物である。

【化7】

【0048】

ある実施態様において、式(Ｉ)、(Ｉａ)、(Ｉｂ)、(Ｉｃ)または(Ｉｄ)の化合物は、ＸがＯＲ^７である、式(Ｉｅ)の化合物である。

【化8】

【0049】

ある実施態様において、式(Ｉｅ)の化合物は、Ｒ^７がＭｅである、式(Ｉｆ)の化合物である。

【化9】

【0050】

ある実施態様において、式(Ｉ)、(Ｉａ)、(Ｉｂ)、(Ｉｃ)、(Ｉｄ)、(Ｉｅ)または(Ｉｆ)の化合物は、基Ｒ^３がＨである、式(Ｉｇ)の化合物である。

【0051】

ある実施態様において、式(Ｉ)、(Ｉａ)、(Ｉｂ)、(Ｉｃ)、(Ｉｄ)、(Ｉｅ)、(Ｉｆ)または(Ｉｇ)の化合物は、Ｒ^４がメチルである、式(Ｉｈ)の化合物である。

【0052】

ある実施態様において、式(Ｉ)、(Ｉａ)、(Ｉｂ)、(Ｉｃ)、(Ｉｄ)、(Ｉｅ)、(Ｉｆ)または(Ｉｇ)の化合物は、Ｒ^４がＨである、式(Ｉｉ)の化合物である。

【0053】

ある実施態様において、式(Ｉ)、(Ｉａ)、(Ｉｂ)、(Ｉｃ)、(Ｉｄ)、(Ｉｅ)、(Ｉｆ)、(Ｉｇ)、(Ｉｈ)または(Ｉｉ)の化合物は、ＹがＮ(Ｍｅ)ＣＯＭｅ、Ｎ(Ｒ^５)ＣＯＭｅ、Ｎ(Ｍｅ)ＣＯＲ^６、Ｎ(Ｍｅ)ＣＯＣＨ(ＯＨ)Ｍｅ、Ｎ(Ｍｅ)ＣＯＣＨ(ＯＲ^５)Ｒ^６、Ｎ(Ｒ^５)ＣＯＲ^６、ＣＯＮＭｅ_２、ＣＯＮＲ^５Ｒ^６、１,２,３－トリアゾール、１,２,４－トリアゾール、１,３,４－オキサジアゾール、２－ピロリジノン、２－イミダゾリジノン、イミダゾールもしくはピラゾールなどの５員Ｎ－ヘテロ環または１－ピリドンもしくはピリダジンなどの６員Ｎ－ヘテロ環であり、ＺがＨ、Ｍｅ、Ｅｔまたは所望により置換されているＣ_１－Ｃ_６アルキルである、式(Ｉｊ)の化合物である。

【0054】

ある実施態様において、式(Ｉ)、(Ｉａ)、(Ｉｂ)、(Ｉｃ)、(Ｉｄ)、(Ｉｅ)、(Ｉｆ)、(Ｉｇ)、(Ｉｈ)または(Ｉｉ)の化合物は、ＹがＮ(Ｍｅ)ＣＯＭｅ、Ｎ(Ｒ^５)ＣＯＭｅ、Ｎ(Ｍｅ)ＣＯＲ^６、Ｎ(Ｍｅ)ＣＯＣＨ(ＯＨ)Ｍｅ、Ｎ(Ｍｅ)ＣＯＣＨ(ＯＲ^５)Ｒ^６、Ｎ(Ｒ^５)ＣＯＲ^６、ＣＯＮＭｅ_２、ＣＯＮＲ^５Ｒ^６、１,２,３－トリアゾール、１,２,４－トリアゾール、１,３,４－オキサジアゾール、２－ピロリジノン、２－イミダゾリジノン、イミダゾールもしくはピラゾールなどの５員Ｎ－ヘテロ環または１－ピリドンもしくはピリダジンなどの６員Ｎ－ヘテロ環から選択され、ＺがＨである、式(Ｉｋ)の化合物である。

【0055】

ある実施態様において、式(Ｉ)、(Ｉａ)、(Ｉｂ)、(Ｉｃ)、(Ｉｄ)、(Ｉｅ)、(Ｉｆ)、(Ｉｇ)、(Ｉｈ)または(Ｉｉ)の化合物は、ＹがＮ(Ｍｅ)ＣＯＭｅ、Ｎ(Ｍｅ)ＣＯＣＨ(ＯＨ)Ｍｅ、ＣＯＮＭｅ_２または所望によりＮを基Ｒ^５またはＣを基Ｒ^６で置換されている１,２,３－トリアゾール、１,２,４－トリアゾール、１,３,４－オキサジアゾール、２－ピロリジノン、２－イミダゾリジノン、イミダゾール、ピラゾール、１－ピリドンまたはピリダジンであり、ＺがＨである、式(Ｉｌ)の化合物である。

【0056】

ある実施態様において、式(Ｉ)、(Ｉａ)、(Ｉｂ)、(Ｉｃ)、(Ｉｄ)、(Ｉｅ)、(Ｉｆ)、(Ｉｇ)、(Ｉｈ)または(Ｉｉ)の化合物は、Ｙが所望によりＮを基Ｒ^５またはＣを基Ｒ^６で置換されている

【化10】

から選択される５員または６員Ｎ－ヘテロ環であり、ＺがＨである、式(Ｉｍ)の化合物である。

【0057】

ある実施態様において、式(Ｉ)、(Ｉａ)、(Ｉｂ)、(Ｉｃ)、(Ｉｄ)、(Ｉｅ)、(Ｉｆ)、(Ｉｇ)、(Ｉｈ)または(Ｉｉ)の化合物は、ＹおよびＺが一体となって所望により置換されている４員、５員または６員環を形成する、式(Ｉｎ)の化合物である。

【0058】

ある実施態様において、式(Ｉｎ)の化合物は、ＹおよびＺがそれらが結合する炭素原子と一体となってオキサゾリジノン、例えばＮ－メチルオキサゾリジノン、

【化11】

を形成する式(Ｉｏ)の化合物であり、ここで、ＹおよびＺが結合する炭素原子は記号αにより示す。

【0059】

ある実施態様において、式(Ｉ)、(Ｉａ)、(Ｉｂ)、(Ｉｃ)、(Ｉｄ)、(Ｉｅ)、(Ｉｆ)、(Ｉｇ)、(Ｉｈ)または(Ｉｉ)の化合物は、Ｙが

【化12】

である、式(Ｉｏ)の化合物である。

【0060】

ある実施態様において、式(Ｉ)、(Ｉａ)、(Ｉｂ)、(Ｉｃ)、(Ｉｄ)、(Ｉｅ)、(Ｉｆ)、(Ｉｇ)、(Ｉｈ)または(Ｉｉ)の化合物は、Ｙが

【化13】

であり、ＺがＨである、式(Ｉｐ)の化合物である。

【0061】

ある実施態様において、式(Ｉ)、(Ｉａ)、(Ｉｂ)、(Ｉｃ)、(Ｉｄ)、(Ｉｅ)、(Ｉｆ)、(Ｉｇ)、(Ｉｈ)または(Ｉｉ)の化合物は、Ｙが

【化14】

であり、ＺがＨである、式(Ｉｑ)の化合物である。

【0062】

ある実施態様において、式(Ｉ)の化合物は次のものから選択される：
６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１ｒ,４ｒ)－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１Ｒ,２Ｒ)－２－メチル－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１Ｒ,２Ｓ,４Ｒ)－２－メチル－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１Ｓ,２Ｒ,４Ｓ)－２－メチル－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
ｒｅｌ－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１Ｒ,２Ｓ,４Ｓ)－２－メチル－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
Ｎ－(１－(フルオロメチル)－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
Ｎ－(１－(シアノメチル)－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
Ｎ－(１－シクロプロピル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１Ｓ,４ｒ)－４－((Ｓ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
Ｎ－(１－シクロプロピル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－(オキセタン－３－イル)－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(２－オキソ－１－(１Ｈ－ピラゾール－４－イル)－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－(１－メチル－１Ｈ－ピラゾール－４－イル)－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－(１－メチル－１Ｈ－１,２,３－トリアゾール－４－イル)－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－(２－メチル－２Ｈ－１,２,３－トリアゾール－４－イル)－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１ｒ,４ｒ)－４－(２－オキソピロリジン－１－イル)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１ｒ,４ｒ)－４－(３－メチル－２－オキソイミダゾリジン－１－イル)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((５ｓ,８ｓ)－１－メチル－２－オキソ－３－オキサ－１－アザスピロ[４.５]デカン－８－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((５ｒ,８ｒ)－１－メチル－２－オキソ－３－オキサ－１－アザスピロ[４.５]デカン－８－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１ｒ,４ｒ)－４－(２－オキソピリジン－１(２Ｈ)－イル)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－(４－(ピリダジン－３－イル)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
２－((１ｒ,４ｒ)－４－(１,３,４－オキサジアゾール－２－イル)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
２－((１ｒ,４ｒ)－４－(１Ｈ－１,２,４－トリアゾール－１－イル)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
２－((１ｒ,４ｒ)－４－(１Ｈ－１,２,３－トリアゾール－１－イル)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
２－((１ｒ,４ｒ)－４－(２－(１－ヒドロキシエチル)－１Ｈ－イミダゾール－１－イル)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミドおよび
２－((１ｒ,４ｒ)－４－(４－(２－ヒドロキシプロパン－２－イル)－１Ｈ－１,２,３－トリアゾール－１－イル)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド；
またはその薬学的に許容される塩。

【0063】

本開示のＩＲＡＫ４阻害剤は、Merck KGaAなどの商業的供給業者から、または当業者の一般的知識に含まれる方法により入手可能である、容易に入手可能な出発物質から製造できる。下記反応スキームは、ＩＲＡＫ４阻害剤の合成のための種々の方法を記載する。典型的または好ましい反応条件は、合成について示されるが、当業者は、ここに記載されない類似体を得るためのこれらの条件の修飾の想起が可能である。下記スキームは、故に、本開示化合物の代表的合成法であり、いかなる方法でも本開示の範囲を限定すると解釈すべきではない。さらに、反応の順番は、分子の種々の位置で、合成の種々の段階で、多様性を可能とするために、全体的合成を変更するよう、修飾され得る。

【0064】

当業者は、下記スキームにおける化合物が、ある場合、位置異性体および立体異性体の混合物として得られ、これは、当業者に周知のシリカ／Ｃ１８クロマトグラフィー、ＨＰＬＣ、ＳＦＣ、結晶化などの技術を使用して、合成の種々の段階で分離できることを認識する。

【0065】

式(Ｉ)の化合物への一般的合成アプローチ：
スキーム１：下記のとおり、基Ｒ^ａの並行構造である構成要素Ｉ－２の一般的合成(ここで、Ｒ^４、ＹおよびＺは式(Ｉ)の化合物について定義のとおりまたはその適切に保護された前駆体)。

【化15】

【0066】

スキーム１は、Ｎ－２インダゾール構成要素Ｉ－２の位置選択的合成を記載する。市販出発物質Ｉ－１の、アミンＲ^ａ－ＮＨ_２での適当な溶媒(例えばｉ－ＰｒＯＨ)中、高温での処理、続くトリ－ｎ－ブチルホスフィンの添加により、Ｉ－２を形成させる。

【0067】

標的分子が縮合反応条件に感受性であるかまたは不適合である官能基を含むとき、試薬Ｒ^ａ－ＮＨ_２は、合成の後の段階でアンマスクできる最終標的化合物の例えば基Ｙの構成要素の適切に保護された前駆体を含み得る。例えば、最終生成物の基Ｙがアミンまたはアミドを含むならば、スキーム１に示す反応を、保護アミン(例えばＢｏｃ保護アミン)を含む試薬Ｒ^ａ－ＮＨ_２を用いて実施でき、保護基を、Ｉ－２のインダゾールコアが構成された後、開裂し得る。その後、アミンを適宜アルキル化するかまたはアミドに変換し得る。同様に、標的分子の基Ｙがアルコール官能基を含むとき、前駆体Ｒ^ａ－ＮＨ_２の対応する官能基を、スキーム１に示す反応の反応条件に耐え、標的化合物の合成における後の段階で開裂できる適当なアルコール保護基で保護し得る。保護基は、当分野で周知である(例えばGreene's Protective Groups in Organic Synthesis, Ed P.G.M. Wuts, Wiley, NY 2014, 5^th Edition参照)。あるいは、試薬Ｒ^ａ－ＮＨ_２は、適当な保護カルボニル官能基の形態でアミン／アミド／アルコール官能基の前駆体を含み得て、それは当業者に既知の合成法による合成の後の段階で脱保護され、標的化合物における所望のアミン／アミド／アルコール官能基に変換され得る。

【0068】

式(Ｉ)の化合物の一般的合成：
スキーム２：式(Ｉ)の化合物の一般的合成、方法１：

【化16】

【0069】

式(Ｉ)の化合物の製造法をスキーム２に示す。この経路の適当な出発物質は、スキーム１の下に記載のとおり、インダゾールＩ－２(ここで、Ｒ^４、ＹおよびＺは、式(Ｉ)の化合物に関連して定義したとおりまたはその適切に保護された前駆体である)である。ブロマイドＩ－２はスキーム１に記載のとおり得ることができ、まずＣＯ雰囲気(高圧で)下、溶媒としてのアルコールの存在下、Ｐｄ－触媒(例えばＰｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ_２)で処理して、エステルII－２を得る(溶媒としてＭｅＯＨを使用するならば、Ｍｅ－エステルII－２が形成される)。例えば水酸化リチウムまたは水酸化カリウムの適当な溶媒(例えば水)溶液でのエステルのその後の切断により、カルボン酸II－３を得る。この酸II－３とアミンＲ^ｂ－ＮＨ_２(Ｒ^１はここに定義するとおり)の反応からのアミド形成を、多様なアミドカップリング剤(例えばＨＡＴＵ、Ｔ３Ｐ)で実施し、所望の式(Ｉ)の化合物を得ることができる。

【0070】

ブロマイドＩ－２の式(Ｉ)の化合物への変換はまたワンポット・アミノカルボニル化プロトコールにより実施できる。Ｉ－２とＰｄ源(例えばＰｄ(ＯＡｃ)_２)および適当なリガンド(例えば１,３－ビス(ジフェニルホスフィノ)プロパンまたはジ(アダマンタン－１－イル)ブチルホスファン)の溶媒(例えばＭｅＣＮ)中、塩基(例えばＴＥＡ)との撹拌およびアミンＲ^ｂ－ＮＨ_２のＣＯ雰囲気(高圧で)下でのカップリングにより、式(Ｉ)の化合物を一工程で得る。

【0071】

スキーム２に示す一連の反応をＲ^ａが保護基を含む化合物Ｉ－２から出発するとき、Ｒ^ａにおけるＲ^４、Ｙおよび／またはＺの適切に保護された前駆体を式(Ｉ)の化合物官能基について定義するとおりのＲ^４、ＹおよびＺに変換するための変換(スキーム１の下に例示)を、変換の性質および一連の中間体に存在する官能基と反応条件の適合性に応じて、スキーム２に示す一連の合成の種々の段階で実施できる(当業者は工程の順番を決定できる)。

【0072】

スキーム３：Ｒ^ｃ＝ＹおよびＹおよびＲ_１は式(Ｉ)の化合物について上に定義するとおりの式(Ｉ)の化合物の一般的合成、方法２：

【化17】

【0073】

スキーム３は、化合物III－１(Ｒ_１は式(Ｉ)の化合物について上に定義するとおりであり、Ｌはメシラート／トシラートなどの求核置換反応に適する脱離基である)を、Ｒ^ｃとの求核置換反応により式(Ｉ)の化合物に変換する方法の例を示す。Ｒ^ｃは、例えば、アジドまたはトリアゾールである。出発物質III－１を、スキーム２に示す方法により得ることができる。スキーム３に示す方法は、直接式(Ｉ)の化合物または官能基相互変換により式(Ｉ)の化合物に変換できる前駆体をもたらす(当業者は必要な工程を決定できる)。

【0074】

本開示のある実施態様において、式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩の合成法、式(Ｉ)の化合物の合成における中間体、例えばここにおよび上に記載する方法および中間体が提供される。

【0075】

ある実施態様において、式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩を薬学的に許容される添加物と共に含む医薬組成物が提供される。このような実施態様において、式(Ｉ)の化合物は、好ましくは単一エナンチオマ－形態で使用される。他の立体異性形態の微量不純物、例えば質量で最大１％が所望により存在し得る。医薬組成物は、ここにおよび上に詳述するとおり、ＩＲＡＫ４キナーゼ阻害が有益であり得る状態の処置に使用され得る。

【0076】

ある実施態様において、医薬の製造に使用するための式(Ｉ)の化合物が提供され、所望により、ここで、医薬は、ここにおよび上に詳述するとおり、ＩＲＡＫ４キナーゼ阻害が有益であり得る状態の処置または予防に使用するためである。

【0077】

式(Ｉ)の化合物およびその薬学的に許容される塩を、非晶質形態、結晶形態または半結晶形態で製造、使用または供給でき、ある式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩は、水和された(例えば半水和物、一水和物、二水和物、三水和物または他の化学量論的水和物)および／または溶媒和された形態を含む、１を超える結晶および／または多形体で形成され得る。本開示は、式(Ｉ)の化合物およびその薬学的に許容される塩の任意かつ全てのこのような固体形態を包含することは理解される。

【0078】

本開示のさらなる実施態様において、下記「実施例」セクションに記載する方法で得られる式(Ｉ)の化合物が提供される。

【0079】

本開示は、本化合物で生じる原子の全同位体を包含することが意図される。同位体は、原子番号が同じであるが、質量数が異なる原子を含むことは理解される。例えば、水素の同位体はトリチウムおよび重水素を含む。炭素の同位体は^１３Ｃおよび^１４Ｃを含む。同位体標識された式(Ｉ)の化合物は、一般に当業者に知られる慣用技術によりまたは添付する実施例に記載のものに準ずる方法により、先に用いた非標識試薬の代わりに適切な同位体標識された試薬を使用して、製造され得る。

【0080】

式(Ｉ)の化合物の適当な薬学的に許容される塩は、例えば、酸付加塩であり得る。式(Ｉ)の化合物の適当な薬学的に許容される塩は、例えば、式(Ｉ)の化合物の酸付加塩、例えば無機または有機酸との酸付加塩であり得る。本開示の化合物は、遊離塩基化合物、すなわち非塩状態で提供され得る。

【0081】

式(Ｉ)の化合物のさらに適当な薬学的に許容される塩は、例えば、該ヒトまたは動物身体への式(Ｉ)の化合物の投与後、ヒトまたは動物身体内で形成される塩であり得る。

【0082】

式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩は、共結晶固体形態で製造され得る。式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩の薬学的に許容される共結晶は本開示の一態様を形成することは理解される。

【0083】

医薬で使用するために、大量の他の立体異性形態が存在することなく、式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩を提供することが好ましいことがある。

【0084】

式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩は、通常、経口経路で投与されるが、非経腸、静脈内、筋肉内、皮下または他の注射方法、バッカル、直腸、膣、経皮および／または経鼻経路および／または吸入により、医薬的に許容される剤形中に活性成分またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物またはそのような塩の溶媒和物を含む医薬製剤の形態で投与することが可能である。処置する障害および患者ならびに投与経路により、組成物を種々の用量、例えば１mg～１,０００mgまたは１mg～２,０００mgの経口用量で投与し得る。

【0085】

上記式(Ｉ)の化合物の医薬製剤を、例えば非経腸、皮下、筋肉内または静脈内投与用に製造し得る。

【0086】

上記式(Ｉ)の化合物の医薬製剤は、簡便には単位剤形で投与され、例えばRemington's Pharmaceutical Sciences, 17th ed., Mack Publishing Company, Easton, PA., (1985).に記載の医薬分野で周知の方法の何れかにより製造され得る。

【0087】

経口投与に適する医薬製剤は、１以上の生理学的に適合性の担体および／または添加物を含み得て、固体または液体形態であり得る。錠剤およびカプセルを、結合剤；充填剤；滑沢剤；および界面活性剤と製造し得る。液体組成物は、懸濁化剤；乳化剤；および防腐剤などの慣用の添加剤を含み得る。液体組成物は、例えば、ゼラチンに封入されて、単位剤形を提供し得る。固体経口投与形態は、錠剤、２ピース硬シェルカプセルおよび軟弾性ゼラチン(ＳＥＧ)カプセルを含む。本開示の経口組成物の例は、２ピース硬シェルカプセルまたは軟弾性ゼラチン(ＳＥＧ)カプセルに充填される式(Ｉ)の化合物および少なくとも１個の薬学的に許容される添加物を含む。

【0088】

さらなる実施態様により、ヒトなどの温血動物における医薬として使用するための、上に定義する式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩が提供される。このような実施態様において、医薬は、ＩＲＡＫ４阻害が有益である状態の処置、例えば癌、炎症性疾患または自己炎症性／自己免疫性疾患の処置に使用するためであり得る。

【0089】

化合物の使用が癌処置であるある実施態様において、癌はワルデンシュトレームマクログロブリン血症(ＷＭ)、非ホジキンリンパ腫(ＮＨＬ)、汎発性大Ｂ細胞リンパ腫(ＤＬＢＣＬ)、原発性中枢神経系リンパ腫(ＰＣＮＳＬ)、脾辺縁帯リンパ腫(ＳＭＺＬ)、小リンパ球性リンパ腫(ＳＬＬ)、白血病(慢性リンパ球性白血病(ＣＬＬ))および意義不明のモノクローナル高γグロブリン血症(ＭＧＵＳ－ＩｇＭ＋)から選択される血液学的悪性腫瘍であり得る。このような実施態様において、使用は、単剤でまたは別々に、連続的にまたは同時に投与される少なくとも１個の他の薬剤との組み合わせであり得る。このような実施態様において、第二剤は、ＢＣＲ阻害剤、例えばイブルチニブ、アカラブルチニブ、ザヌブルチニブまたはチラブルチニブなどのＢＴＫ阻害剤、ＰＩ３Ｋδ阻害剤、ＳＹＫ阻害剤または免疫療法を含む群から選択され得る。

【0090】

癌の処置に使用するための化合物のある実施態様において、黒色腫の処置における使用であり得て、所望により、ここで、使用は、別々に、連続的にまたは同時に投与される少なくとも１個の他の薬剤との組み合わせであり得る。このような実施態様において、第二剤はイブルチニブ、アカラブルチニブ、ザヌブルチニブまたはチラブルチニブなどのＢＴＫ阻害剤であり得る。

【0091】

さらなる実施態様により、ＩＲＡＫ４阻害が有益である状態の処置においてヒトなどの温血動物に使用するための医薬の製造における、上に定義する式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩の使用が提供される。このような実施態様において、医薬は、癌、例えばワルデンシュトレームマクログロブリン血症(ＷＭ)、非ホジキンリンパ腫(ＮＨＬ)、汎発性大Ｂ細胞リンパ腫(ＤＬＢＣＬ)、原発性中枢神経系リンパ腫(ＰＣＮＳＬ)、脾辺縁帯リンパ腫(ＳＭＺＬ)、小リンパ球性リンパ腫(ＳＬＬ)、白血病(慢性リンパ球性白血病(ＣＬＬ))および意義不明のモノクローナル高γグロブリン血症(ＭＧＵＳ－ＩｇＭ＋)から選択される血液学的悪性腫瘍の処置のためであり得る。このような実施態様において、医薬を、単剤としてまたは別々に、連続的にまたは同時に投与される少なくとも１個の他の薬剤と組み合わせて使用し得る。このような実施態様において、第二剤または医薬は、ＢＣＲ阻害剤、例えばイブルチニブ、アカラブルチニブ、ザヌブルチニブまたはチラブルチニブなどのＢＴＫ阻害剤、ＰＩ３Ｋδ阻害剤、ＳＹＫ阻害剤または免疫療法を含む群から選択され得る。

【0092】

ある実施態様において、癌の処置に使用するための医薬は黒色腫の処置に使用され得て、所望により、ここで、使用は、別々に、連続的にまたは同時に投与される少なくとも１個の他の薬剤との組み合わせであり得る。このような実施態様において、第二剤はイブルチニブ、アカラブルチニブ、ザヌブルチニブまたはチラブルチニブなどのＢＴＫ阻害剤であり得る。

【0093】

さらなる実施態様において、有効量の上に定義する式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩を、それを必要とする患者に投与することを含む、処置方法が提供される。このような実施態様において、処置方法は、ＩＲＡＫ４阻害が有益である状態のためであり得る。このような実施態様において、処置方法は、癌、例えばワルデンシュトレームマクログロブリン血症(ＷＭ)、非ホジキンリンパ腫(ＮＨＬ)、汎発性大Ｂ細胞リンパ腫(ＤＬＢＣＬ)、原発性中枢神経系リンパ腫(ＰＣＮＳＬ)、脾辺縁帯リンパ腫(ＳＭＺＬ)、小リンパ球性リンパ腫(ＳＬＬ)、白血病(慢性リンパ球性白血病(ＣＬＬ))および意義不明のモノクローナル高γグロブリン血症(ＭＧＵＳ－ＩｇＭ＋)から選択される血液学的悪性腫瘍であり得る。このような実施態様において、処置方法は、式(Ｉ)の化合物の単剤のまたは別々に、連続的にまたは同時に投与される少なくとも１個の他の薬剤または医薬との組み合わせの投与を含み得る。このような実施態様において、第二剤または医薬は、ＢＣＲ阻害剤、例えばイブルチニブ、アカラブルチニブ、ザヌブルチニブまたはチラブルチニブなどのＢＴＫ阻害剤、ＰＩ３Ｋδ阻害剤、ＳＹＫ阻害剤または免疫療法を含む群から選択され得る。

【0094】

ある実施態様において、処置方法は、黒色腫処置のためであり得る。このような実施態様において、方法は、さらなる薬剤または医薬の別々の、連続的なまたは同時の投与を含み得る。このような実施態様において、第二剤または医薬はイブルチニブ、アカラブルチニブ、ザヌブルチニブまたはチラブルチニブなどのＢＴＫ阻害剤であり得る。

【0095】

本開示において、特に断らない限り、用語「有効量」は、処置すべき症状および／または状態を顕著にかつ良い方向で修飾する化合物または組成物の量を意味する(例えば、正の臨床応答を提供する)。医薬組成物で使用する活性成分の有効量は、処置すべき特定の状態、状態の重症度、処置期間、同時の治療の性質、用いる特定の活性成分、利用される特定の薬学的に許容される添加物／担体および処置医の知識および経験の範囲内の類似因子により変わる。有効量は、一般に０.１mg～１,０００mgの範囲内である。

【0096】

さらなる実施態様により、ＩＲＡＫ４キナーゼに対する阻害性効果の提供に使用するための、上に定義する式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩が提供される。

【0097】

さらなる実施態様により、ＩＲＡＫ４キナーゼに対する阻害性効果の提供に使用するための医薬の製造における、上に定義する式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩の使用が提供される。

【0098】

さらなる実施態様により、有効量の上に定義する式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩を、それを必要とする患者に投与することを含む、ＩＲＡＫ４キナーゼに対する阻害性効果の提供のための方法も提供される。

【0099】

さらなる実施態様により、ＩＲＡＫ４キナーゼに対する選択的阻害性効果の提供に使用するための、上に定義する式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩が提供される。このような場合、選択的阻害性効果は、インビトロでＩＲＡＫ４キナーゼ活性の５０％阻害に必要な式(Ｉ)の化合物の濃度が、他のキナーゼ、例えば阻害されれば毒性副作用をもたらす他のキナーゼの５０％阻害に必要な濃度より１０倍、１００倍または１０００倍またはそれ以上低いことを示す。

【0100】

さらなる実施態様により、ＩＲＡＫ４キナーゼに対する選択的阻害性効果の提供に使用するための医薬の製造における、上に定義する式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩の使用が提供される。

【0101】

さらなる実施態様により、有効量の式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩を、それを必要とする患者に投与することを含む、ＩＲＡＫ４キナーゼに対する選択的阻害性効果の提供のための方法もまた提供される。

【0102】

ここに記載されるのは、ＩＲＡＫ４キナーゼを阻害できる化合物である。生化学および細胞ベースのアッセイにおいて、本開示の化合物は強力なＩＲＡＫ４キナーゼ阻害剤であることが示され、故に、ＩＲＡＫ４キナーゼ活性により介在される障害の処置、特に喘息および慢性閉塞性肺疾患(ＣＯＰＤ)などの呼吸器疾患炎症性疾患および全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、筋炎、シェーグレン症候群、全身性硬化症、痛風、子宮内膜症、アトピー性皮膚炎および乾癬などの自己炎症性／自己免疫性疾患の処置に有用であり得る。

【0103】

ある実施態様において、式(Ｉ)の化合物の呼吸器疾患の処置のための使用が提供され、所望により、ここで、呼吸器疾患は喘息および慢性閉塞性肺疾患(ＣＯＰＤ)である。

【0104】

ある実施態様において、式(Ｉ)の化合物の炎症性疾患または全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、筋炎、シェーグレン症候群、全身性硬化症、痛風、子宮内膜症、アトピー性皮膚炎および乾癬などの自己炎症性／自己免疫性疾患の処置のための使用が提供される。

【0105】

ある実施態様において、有効量の式(Ｉ)の化合物を、それを必要とする患者に投与することを含む処置方法が提供され、ここで、患者は呼吸器疾患を有し、所望により、ここで、呼吸器疾患は喘息および慢性閉塞性肺疾患(ＣＯＰＤ)である。

【0106】

ある実施態様において、有効量の式(Ｉ)の化合物を、それを必要とする患者に投与することを含む処置方法が提供され、ここで、患者は炎症性疾患または全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、筋炎、シェーグレン症候群、全身性硬化症、痛風、子宮内膜症、アトピー性皮膚炎および乾癬などの自己炎症性／自己免疫性疾患を有する。

【0107】

本開示のさらなる態様において、ＩＲＡＫ４キナーゼ活性により介在される障害の処置、特に喘息および慢性閉塞性肺疾患(ＣＯＰＤ)などの呼吸器疾患炎症性疾患および全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、筋炎、シェーグレン症候群、全身性硬化症、痛風、子宮内膜症、アトピー性皮膚炎および乾癬などの自己炎症性／自己免疫性疾患の処置に使用するための医薬の製造における、上に定義する式(Ｉ)の化合物またはその薬学的に許容される塩の使用が提供される。

【0108】

本開示のさらなる態様において、式(Ｉ)の化合物を含む医薬製剤およびある状態または疾患の処置における該医薬製剤の使用のための指示を含む、キットが提供される。このような実施態様において、状態または疾患は癌、炎症性疾患または自己炎症性／自己免疫性疾患であり得る。指示が癌処置のためであるとき、癌は黒色腫またはワルデンシュトレームマクログロブリン血症(ＷＭ)、非ホジキンリンパ腫(ＮＨＬ)、汎発性大Ｂ細胞リンパ腫(ＤＬＢＣＬ)、原発性中枢神経系リンパ腫(ＰＣＮＳＬ)、脾辺縁帯リンパ腫(ＳＭＺＬ)、小リンパ球性リンパ腫(ＳＬＬ)、白血病(慢性リンパ球性白血病(ＣＬＬ))および意義不明のモノクローナル高γグロブリン血症(ＭＧＵＳ－ＩｇＭ＋)から選択される血液学的悪性腫瘍であり得る。キットが炎症性疾患または自己炎症性／自己免疫性疾患に使用するためであるとき、疾患または状態は全身性エリテマトーデス、関節リウマチ、筋炎、シェーグレン症候群、全身性硬化症、痛風、子宮内膜症、アトピー性皮膚炎および乾癬から選択され得る。

【0109】

次の実施例は、本発明の特性が完全に理解され得るために提供することは認識される。また、次の実施例は本開示の範囲をいかなる方法でも限定する意図がないことも認識される。

【実施例0110】

次の略語を使用する：

【表1】

【表2】

【0111】

分析データで使用する略語は、上に定義されていないならば、当分野の一般的使用に一致する(J Med Chem Standard AbbreviationsおよびAcronyms http://pubsapp.acs.org/paragonplus/submission/jmcmar/jmcmar_abbreviations.pdf?参照)。

【0112】

下の化合物名は、PerkinElmer ChemDraw Professional, Version 20.0.2.51を使用して作成する。絶対立体化学が不確実である場合、相対的立体を可能な限り特定する。

【0113】

本開示の化合物を、当業者に周知の方法で、例えば上記スキーム１～３に概説した経路を直接使用してまたはさらなる官能基を取り込むための必要に応じたこれらのスキームの適応により、製造できる。特定の経路および試薬を下の実施例で示しているが、別の出発物質および試薬を使用して、多様な誘導体および／または反応条件をもたらし得ることは認識される。よって、特許請求の範囲にわたる化合物を、当分野で周知の化学の日常的な調節または修飾により容易に製造できる。

【0114】

化合物を標準技術により分析または精製した。特に断らない限り、反応は一般的に不活性雰囲気(例えば窒素またはアルゴン)下に行う。

【0115】

［中間体の製造］
Ｉｎｔ １：５－ブロモ－４－メトキシ－２－ニトロベンズアルデヒド
５－ブロモ－４－フルオロ－２－ニトロベンズアルデヒド

【化18】

発煙硝酸(１２.０mL、０.３mol)の濃硫酸(２５mL)溶液を、３－ブロモ－４－フルオロベンズアルデヒド(１９.３ｇ、９５.１mmol)の濃硫酸(７５mL)溶液に、０℃で滴下した。得られた黄色溶液をｒｔにゆっくり温め、４日間撹拌した。次いで、反応混合物を破砕氷に注加し、得られた沈殿を濾過により取得して、５－ブロモ－４－フルオロ－２－ニトロベンズアルデヒド(２２.６ｇ、９６％)を黄色固体として得た。m/z (ESI－), [M－H]^－ = 245/247

【0116】

５－ブロモ－４－メトキシ－２－ニトロベンズアルデヒド(Ｉｎｔ １)

【化19】

ナトリウムメトキシド(１０.９ｇ、６０.６mmol)のＭｅＯＨ(４６mL)溶液を、５－ブロモ－４－フルオロ－２－ニトロベンズアルデヒド(１０.０ｇ、４０.３mmol)のＭｅＯＨ(１５０mL)溶液にｒｔで添加した。１６時間撹拌後、水(３００mL)で反応をクエンチし、形成した固体を濾別し、水(１００mL)で洗浄して、５－ブロモ－４－メトキシ－２－ニトロベンズアルデヒド(６.６ｇ、６３％)を薄黄色固体として得た。¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 10.03 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 4.04 (s, 3H)

【0117】

Ｉｎｔ ２：ｔｅｒｔ－ブチル((１ｒ,４ｒ)－４－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)シクロヘキシル)カルバメート

【化20】

ｔｅｒｔ－ブチル((１ｒ,４ｒ)－４－アミノシクロヘキシル)カルバメート(１０.５ｇ、４９.０mmol)のｉ－ＰｒＯＨ(２００mL)溶液に、ｒｔで、Ｎ_２雰囲気下、５－ブロモ－４－メトキシ－２－ニトロベンズアルデヒド(Ｉｎｔ １)(１２.７ｇ、４９.０mmol)を添加した。得られた混合物を８０℃で１時間撹拌し、続いてトリ－ｎ－ブチルホスフィン(２９.７ｇ、１４７.０mmol)を添加した。反応混合物を８０℃で１３時間撹拌した。混合物をｒｔに冷却し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(９～５０％ＥｔＯＡｃのＰＥ溶液で溶出)で精製して、ｔｅｒｔ－ブチル((１ｒ,４ｒ)－４－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)シクロヘキシル)カルバメート(１４.２ｇ、６８％)を無色固体として得た。MS ESI, m/z = 424/426 [M+H]⁺

【0118】

Ｉｎｔ ３：メチル２－((１ｒ,４ｒ)－４－((ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル)(メチル)アミノ)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキシラート
ｔｅｒｔ－ブチル((１ｒ,４ｒ)－４－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)シクロヘキシル)(メチル)カルバメート

【化21】

ｔｅｒｔ－ブチル((１ｒ,４ｒ)－４－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)シクロヘキシル)カルバメート(Ｉｎｔ ２)(４.２ｇ、９.９mmol)のＤＭＦ(５０mL)溶液に、０℃でＮａＨ(６０wt.％)(７９２mg、１９.８mmol)を添加した。得られた混合物を２５℃で３０分間撹拌し、続いてヨードメタン(１.２４mL、１９.８mmol)を添加した。反応混合物をｒｔで１３時間撹拌し、次いで水(１５０mL)でクエンチした。沈殿を濾過し、水(１５０mL)で洗浄し、減圧下乾燥させて、ｔｅｒｔ－ブチル((１ｒ,４ｒ)－４－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)シクロヘキシル)(メチル)カルバメート(４.３６ｇ、１００％)を無色固体として得た。¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 8.28 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.11 (s, 1H), 4.42 (ddt, 1H), 3.87 - 4.06 (m, 1H), 3.86 (s, 3H), 2.71 (s, 3H), 2.09 - 2.23 (m, 2H), 1.87 - 2.08 (m, 2H), 1.62 - 1.87 (m, 4H), 1.42 (s, 9H). MS ESI, m/z = 438/440 (1:1) [M+H]⁺

【0119】

メチル２－((１ｒ,４ｒ)－４－((ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル)(メチル)アミノ)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキシラート(Ｉｎｔ ３)

【化22】

ｔｅｒｔ－ブチル((１ｒ,４ｒ)－４－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)シクロヘキシル)(メチル)カルバメート(４.３ｇ、９.８mmol)、Ｐｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ_２(７１４mg、１.０mmol)およびＴＥＡ(１３.６mL、９７.６mmol)のＭｅＯＨ(１２５mL)懸濁液を、ＣＯ雰囲気下、１５atmで１００℃で１５時間撹拌した。反応混合物をｒｔに冷却し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(３０～５０％ＥｔＯＡｃのＰＥ溶液で溶出)で精製して、メチル２－((１ｒ,４ｒ)－４－((ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル)(メチル)アミノ)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキシラート(３.８ｇ、９３％)を黄色固体として得た。MS ESI, m/z = 418 [M+H]⁺

【0120】

Ｉｎｔ ４：メチル６－メトキシ－２－((１ｒ,４ｒ)－４－(メチルアミノ)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキシラート

【化23】

メチル２－((１ｒ,４ｒ)－４－((ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル)(メチル)アミノ)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキシラート(Ｉｎｔ ３)(２.５ｇ、６.０mmol)のＤＣＭ(５０mL)溶液に、４Ｎ ＨＣｌジオキサン溶液(１５ml、５９.９mmol)を２５℃で、Ｎ_２雰囲気下、添加した。得られた混合物を２５℃で１８時間撹拌し、次いで減圧下濃縮して、メチル６－メトキシ－２－((１ｒ,４ｒ)－４－(メチルアミノ)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキシラートのＨＣｌ塩(２.１ｇ、１００％)を得て、それをさらに精製することなく使用した。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.77 (br. s, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.01 (s, 1H), 4.36 - 4.56 (m, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.74 (s, 3H), 3.53 (s, 3H), 2.95 - 3.14 (m, 1H), 2.11 - 2.26 (m, 4H), 1.92 (br. q, 2H), 1.60 (br. q, 2H). MS ESI, m/z = 318 [M+H]⁺

【0121】

Ｉｎｔ ５：２－((１ｒ,４ｒ)－４－((ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル)(メチル)アミノ)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボン酸

【化24】

メチル２－((１ｒ,４ｒ)－４－((ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル)(メチル)アミノ)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキシラート(Ｉｎｔ ３)(２.９ｇ、６.９mmol)のＭｅＯＨ(５０mL)／水(２５mL)溶液に、ｒｔでＮａＯＨ(５５６mg、１３.９mmol)を添加した。得られた溶液を３０℃で１２時間撹拌した。反応混合物をｒｔに冷却し、４Ｎ ＨＣｌでｐＨ約６に酸性化した。沈殿を濾過し、水(２００mL)で洗浄し、減圧下乾燥させて、２－((１ｒ,４ｒ)－４－((ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル)(メチル)アミノ)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボン酸(２.７ｇ、９５％)を薄黄色固体として得た。MS ESI, m/z = 404 [M+H]⁺

【0122】

Ｉｎｔ ６：２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボン酸
メチル２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－アセトキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキシラート

【化25】

メチル６－メトキシ－２－((１ｒ,４ｒ)－４－(メチルアミノ)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキシラートのＨＣｌ塩(Ｉｎｔ ４)(８００mg、２.３mmol)およびＴＥＡ(９４５μL、６.８mmol)のＤＣＭ(３０mL)溶液に、０℃で、Ｎ_２雰囲気下、(Ｒ)－１－クロロ－１－オキソプロパン－２－イルアセテート(５１１mg、３.４mmol)を添加した。得られた溶液を２５℃で１５時間撹拌し、次いで減圧下濃縮した。残渣をＣ１８－フラッシュクロマトグラフィー(１０～１００％ＭｅＣＮの水(０.１％ＮＨ_４ＯＨ)溶液で溶出)で精製して、メチル２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－アセトキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキシラート(９１０mg、９３％)を褐色固体として得た。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆)(4:5 回転異性体混合物) δ 8.46/8.43 (s, 1H)(回転異性体), 8.09/8.07 (s, 1H)(回転異性体), 7.06/7.04 (s, 1H)(回転異性体), 5.45/5.28 (q, 1H)(回転異性体), 4.39 - 4.55 (m, 1H), 4.28 - 4.39/3.33 - 3.41 (m, 1H)(回転異性体), 3.82 (s, 3H), 3.78 (s, 3H), 2.90 /2.75 (s, 3H)(回転異性体), 2.15 - 2.25 (m, 2H), 1.72 - 2.14 (m, 8H), 1.56 - 1.69 (m, 1H), 1.29 - 1.36 (m, 3H). MS ESI, m/z = 432 [M+H]⁺

【0123】

２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボン酸(Ｉｎｔ ６)

【化26】

メチル２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－アセトキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキシラート(９００mg、２.１mmol)のＭｅＯＨ(１０mL)溶液に、２５℃で、Ｎ_２雰囲気下、ＬｉＯＨ一水和物(５２５mg、１２.５mmol)の水(１０mL)溶液を添加した。得られた溶液を２５℃で１６時間撹拌した。反応混合物のｐＨを、１Ｎ ＨＣｌでｐＨ７に調節した。混合物をＣ１８－フラッシュクロマトグラフィー(５～１００％ＭｅＣＮの水(０.１％ＦＡ)溶液で溶出)で精製して、２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボン酸(７５０mg、９６％)を褐色固体として得た。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆)(4:5 回転異性体混合物) δ 8.43/8.40 (s, 1H)(回転異性体), 8.25 (s, 1H), 8.04/8.03 (s, 1H)(回転異性体), 7.01/7.00 (s, 1H)(回転異性体), 4.38 - 4.58 (m, 2H), 4.32 - 4.41/3.93 - 4.02 (m, 1H)(回転異性体), 3.81 (s, 3H), 2.90 /2.76 (s, 3H)(回転異性体), 1.94 - 2.24 (m, 4H), 1.71 - 1.94 (m, 3H), 1.59 - 1.71 (m, 1H), 1.17 - 1.26 (m, 3H). MS ESI, m/z = 376 [M+H]⁺

【0124】

Ｉｎｔ ７：２－((１ｒ,４ｒ)－４－アミノシクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド
メチル２－((１ｒ,４ｒ)－４－((ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル)アミノ)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキシラート

【化27】

ＭｅＯＨ(３０mL)中のｔｅｒｔ－ブチル((１ｒ,４ｒ)－４－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)シクロヘキシル)カルバメート(Ｉｎｔ ２)(１.５ｇ、３.５mmol)、Ｐｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ_２－ＣＨ_２Ｃｌ_２(５７７mg、０.７mmol)およびＤＩＰＥＡ(３.１mL、１７.７mmol)の混合物を、密封容器中、ＣＯ雰囲気下に１５atmで撹拌し、次いで１１０℃で１２時間加熱した。同じ規模の反応を３回並行して実施した。合わせた反応混合物を減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(５０％ＥｔＯＡｃのＰＥ溶液で溶出)で精製して、メチル２－((１ｒ,４ｒ)－４－((ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル)アミノ)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキシラート(４.４ｇ、定量的収率)を灰色固体として得た。¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 8.44 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.06 (s, 1H), 6.86 (d, 1H), 4.30 - 4.50 (m, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.79 (s, 3H), 3.28 - 3.44 (m, 1H), 2.03 - 2.19 (m, 2H), 1.82 - 2.03 (m, 4H), 1.40 (s, 11H). MS ESI, m/z = 404 [M+H]⁺

【0125】

２－((１ｒ,４ｒ)－４－((ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル)アミノ)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボン酸

【化28】

メチル２－((１ｒ,４ｒ)－４－((ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル)アミノ)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキシラート(１.５ｇ、３.７mmol)の水(５mL)およびＭｅＯＨ(１０mL)溶液に、ＮａＯＨ(０.３ｇ、７.４mmol)を添加した。得られた混合物を２５℃で４時間撹拌し、その後混合物のｐＨを０.１Ｎ ＨＣｌでｐＨ５に調節し、沈殿を生じさせた。沈殿を濾過により集め、水(１０mL)で洗浄し、減圧下乾燥させて、２－((１ｒ,４ｒ)－４－((ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル)アミノ)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボン酸(１.４ｇ、９７％)を薄黄色固体として得て、それをさらに精製することなく使用した。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 12.41 (br. s, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.03 (s, 1H), 6.86 (d, 1H), 4.29 - 4.52 (m, 1H), 3.81 (s, 3H), 2.03 - 2.17 (m, 2H), 1.86 - 2.03 (m, 4H), 1.39 (s, 9H), 1.32 - 1.49 (m, 2H). MS ESI, m/z = 390 [M+H]⁺

【0126】

ｔｅｒｔ－ブチル((１ｒ,４ｒ)－４－(６－メトキシ－５－((１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)カルバモイル)－２Ｈ－インダゾール－２－イル)シクロヘキシル)カルバメート

【化29】

２－((１ｒ,４ｒ)－４－((ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル)アミノ)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボン酸(６００mg、１.５mmol)、ＨＡＴＵ(８７９mg、２.３mmol)およびＤＩＰＥＡ(８０７μL、４.６mmol)のＤＭＦ(１０mL)溶液に、３－アミノ－１－メチルピリジン－２(１Ｈ)－オン(３８３mg、３.１mmol)を添加した。反応混合物を２５℃で５時間撹拌した。混合物をＣ１８－フラッシュクロマトグラフィー(０～１００％ＭｅＣＮの水(０.１％ＮＨ_４ＯＨ)溶液で溶出)で精製して、ｔｅｒｔ－ブチル((１ｒ,４ｒ)－４－(６－メトキシ－５－((１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)カルバモイル)－２Ｈ－インダゾール－２－イル)シクロヘキシル)カルバメート(６４０mg、８４％)を明黄色固体として得た。¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 11.04 (s, 1H), 8.55 (s, 2H), 8.44 (dd, 1H), 7.42 (dd, 1H), 7.22 (s, 1H), 6.87 (d, 1H), 6.30 (t, 1H), 4.35 - 4.50 (m, 1H), 4.06 (s, 3H), 3.55 (s, 3H), 2.04 - 2.20 (m, 2H), 1.85 - 2.04 (m, 4H), 1.39 (s, 9H), 1.30 - 1.51 (m, 2H). MS ESI, m/z = 496 [M+H]⁺

【0127】

２－((１ｒ,４ｒ)－４－アミノシクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(Ｉｎｔ ７)

【化30】

ｔｅｒｔ－ブチル((１ｒ,４ｒ)－４－(６－メトキシ－５－((１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)カルバモイル)－２Ｈ－インダゾール－２－イル)シクロヘキシル)カルバメート(６２０mg、１.３mmol)のＤＣＭ(７mL)溶液に、２Ｎ ＨＣｌジオキサン溶液(６.３mL、１２.５mmol)を添加し、得られた溶液を２５℃で４時間撹拌した。混合物を減圧下濃縮して、２－((１ｒ,４ｒ)－４－アミノシクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミドのＨＣｌ塩(５６５mg、定量的収率)を無色固体として得た。¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆)(HCl塩) δ 11.03 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.56 (s, 1H), 8.43 (dd, 1H), 8.36 (br d, 3H), 7.43 (dd, 1H), 7.20 (s, 1H), 6.30 (t, 1H), 4.42 - 4.57 (m, 1H), 4.06 (s, 3H), 3.55 (s, 3H), 3.02 - 3.22 (m, 1H), 2.08 - 2.29 (m, 4H), 1.90 - 2.08 (m, 2H), 1.52 - 1.73 (m, 2H). MS ESI, m/z = 396 [M+H]⁺

【0128】

Ｉｎｔ ８：(１ｓ,４ｓ)－４－(６－メトキシ－５－((１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)カルバモイル)－２Ｈ－インダゾール－２－イル)シクロヘキシルメタンスルホネート
(１ｓ,４ｓ)－４－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)シクロヘキサン－１－オール

【化31】

(１ｓ,４ｓ)－４－アミノシクロヘキサン－１－オール(６.０ｇ、５２.１mmol)を、５－ブロモ－４－メトキシ－２－ニトロベンズアルデヒド(Ｉｎｔ １)(１３.８ｇ、５３.１mmol)のｉ－ＰｒＯＨ(５００mL)溶液に、Ｎ_２雰囲気下、添加した。得られた混合物を８０℃で１５時間撹拌した。次いで、反応混合物を室温に冷却し、トリブチルホスファン(３１.６ｇ、１５６.３mmol)を、混合物に添加した。得られた混合物を８０℃で６時間撹拌し、次いで減圧下濃縮した。粗製物をシリカクロマトグラフィー(７０％ＥｔＯＡｃのＰＥ溶液で溶出)で精製して、(１ｓ,４ｓ)－４－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)シクロヘキサン－１－オール(１２ｇ、７１％)を無色固体として得た。MS ESI, m/z = 325/327 [M+H]⁺

【0129】

メチル２－((１ｓ,４ｓ)－４－ヒドロキシシクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキシラート

【化32】

(１ｓ,４ｓ)－４－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)シクロヘキサン－１－オール(１０ｇ、３０.８mmol)、ＴＥＡ(２１.４mL、１５３.８mmol)およびＰｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ_２－ＣＨ_２Ｃｌ_２(５.０ｇ、６.２mmol)のＭｅＯＨ(２００mL)溶液を、ＣＯ雰囲気下、１５atmで、１１０℃で１５時間撹拌した。混合物をｒｔに冷却し、減圧下濃縮した。粗製物をシリカクロマトグラフィー(１％ＭｅＯＨのＤＣＭ溶液で溶出)で精製して、メチル２－((１ｓ,４ｓ)－４－ヒドロキシシクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキシラート(８.０ｇ、８５％)を褐色油状物として得た。MS ESI, m/z = 305 [M+H]⁺

【0130】

２－((１ｓ,４ｓ)－４－ヒドロキシシクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボン酸

【化33】

２Ｍ ＮａＯＨ水溶液(５０ml、１００.０mmol)を、メチル２－((１ｓ,４ｓ)－４－ヒドロキシシクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキシラート(８.０ｇ、２６.１mmol)のＭｅＯＨ(１００mL)溶液に添加した。得られた混合物をｒｔで１５時間撹拌した。次いで、反応混合物を水(７００mL)で希釈し、ＥｔＯＡｃ(２×６００mL)で洗浄した。水相を集め、ｐＨを２Ｍ ＨＣｌ水溶液でｐＨ４に調節した。水相をＥｔＯＡｃ(１×６００mL)およびＤＣＭ(２×５００mL)で抽出した。有機層を合わせ、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、減圧下濃縮して、２－((１ｓ,４ｓ)－４－ヒドロキシシクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボン酸(７.０ｇ、９２％)を橙色固体として得て、それをさらに精製することなく使用した。MS ESI, m/z = 291 [M+H]⁺

【0131】

２－((１ｓ,４ｓ)－４－ヒドロキシシクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド

【化34】

２－((１ｓ,４ｓ)－４－ヒドロキシシクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボン酸(７.０ｇ、２３.９mmol)およびＨＡＴＵ(１０.９ｇ、２８.７mmol)のＤＭＦ(１００mL)溶液に、ｒｔで、Ｎ_２雰囲気下、ＤＩＰＥＡ(１２.５mL、７１.８mmol)を添加した。得られた溶液を１０分間撹拌し、続いて３－アミノ－１－メチルピリジン－２(１Ｈ)－オン塩酸塩(４.４ｇ、２７.５mmol)を添加した。反応混合物をｒｔで１５時間撹拌し、次いで濾過した。固体を水(５０mL)で洗浄して、２－((１ｓ,４ｓ)－４－ヒドロキシシクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(７.５ｇ、７９％)を明黄色固体として得た。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 11.04 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.45 (dd, 1H), 7.41 (dd, 1H), 7.21 (s, 1H), 6.30 (t, 1H), 4.51 (d, 1H), 4.44 (tt, 1H), 4.07 (s, 3H), 3.84 - 3.93 (m, 1H), 3.55 (s, 3H), 2.29 (qd, 2H), 1.82 - 1.94 (m, 2H), 1.72 - 1.82 (m, 2H), 1.57 - 1.70 (m, 2H). MS ESI, m/z = 397 [M+H]⁺

【0132】

(１ｓ,４ｓ)－４－(６－メトキシ－５－((１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)カルバモイル)－２Ｈ－インダゾール－２－イル)シクロヘキシルメタンスルホネート(Ｉｎｔ ８)

【化35】

ＭｓＣｌ(２.５mL、３１.５mmol)を、２－((１ｓ,４ｓ)－４－ヒドロキシシクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(５.０ｇ、１２.６mmol)およびＴＥＡ(１０.６mL、７５.７mmol)のＤＣＭ(３００mL)溶液に、０℃で、Ｎ_２雰囲気下、滴下した。得られた溶液をｒｔで１５時間撹拌した。次いで、反応混合物をＭｅＯＨ(１０mL)でクエンチし、濾過し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(２％ＭｅＯＨのＤＣＭ溶液で溶出)で精製して、(１ｓ,４ｓ)－４－(６－メトキシ－５－((１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)カルバモイル)－２Ｈ－インダゾール－２－イル)シクロヘキシルメタンスルホネート(４.１０ｇ、６９％)をピンク色固体として得た。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 11.04 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.45 (dd, 1H), 7.42 (dd, 1H), 7.25 (s, 1H), 6.30 (t, 1H), 4.94 - 5.04 (m, 1H), 4.60 (tt, 1H), 4.07 (s, 3H), 3.56 (s, 3H), 3.23 (s, 3H), 1.96 - 2.29 (m, 6H), 1.82 - 1.96 (m, 2H). MS ESI, m/z = 475 [M+H]⁺

【0133】

［実施例］
６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１ｒ,４ｒ)－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(実施例１)
メチル６－メトキシ－２－((１ｒ,４ｒ)－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキシラート

【化36】

メチル６－メトキシ－２－((１ｒ,４ｒ)－４－(メチルアミノ)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキシラートのＨＣｌ塩(Ｉｎｔ ４)(４１０mg、１.２mmol)およびＴＥＡ(４８５μL、３.５mmol)のＤＣＭ(８mL)溶液に、酢酸無水物(２１９μL、２.３mmol)を添加した。得られた混合物を２５℃で２時間撹拌し、次いでＤＣＭ(２５mL)で希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液(２０mL)、塩水(２５mL)で連続的に洗浄した。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮して、メチル６－メトキシ－２－((１ｒ,４ｒ)－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキシラート(４１５mg、１００％)を褐色油状物として得て、それをさらに精製することなく次工程で使用した。¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆)(3:2 回転異性体混合物) δ 8.46/8.44 (s, 1H)(回転異性体), 8.09/8.08 (s, 1H)(回転異性体), 7.05/7.04 (s, 1H)(回転異性体), 4.34 - 4.56/3.68 - 3.90 (m, 2H)(回転異性体), 3.81 (s, 3H), 3.78 (s, 3H), 2.85/2.72 (s, 3H)(回転異性体), 1.90 - 2.19 (m, 7H), 1.57 - 1.88 (m, 4H). MS ESI, m/z = 360 [M+H]⁺

【0134】

６－メトキシ－２－((１ｒ,４ｒ)－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボン酸

【化37】

メチル６－メトキシ－２－((１ｒ,４ｒ)－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキシラート(Ｉｎｔ ５)(４００mg、１.１mmol)のＭｅＯＨ／水(９mL、２：１)溶液に、２５で、Ｎ_２雰囲気下、ＮａＯＨ(８９mg、２.２３mmol)を添加した。得られた溶液を２５℃で２時間撹拌し、次いで２Ｎ ＨＣｌでｐＨ６に酸性化し、減圧下濃縮した。残渣をＣ１８－フラッシュクロマトグラフィー(０～８０％ＭｅＣＮの水(０.１％ＦＡ)溶液で溶出)で精製して、６－メトキシ－２－((１ｒ,４ｒ)－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボン酸(３８４mg、１００％)を無色固体として得た。¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆)(3:2 回転異性体混合物) δ 12.44 (br. s, 1H), 8.44/8.42 (s, 1H)(回転異性体), 8.08/8.06 (s, 1H)(回転異性体), 7.02/7.01 (s, 1H)(回転異性体), 4.34 - 4.54/3.70 - 3.81 (m, 2H)(回転異性体), 3.82 (s, 3H), 2.85/2.72 (s, 3H)(回転異性体), 2.12 - 2.24 (m, 2H), 1.89 - 2.12 (m, 5H), 1.68 - 1.89 (m, 3H), 1.57 - 1.68 (m, 1H). MS ESI, m/z = 346 [M+H]⁺

【0135】

６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１ｒ,４ｒ)－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド、実施例１

【化38】

６－メトキシ－２－((１ｒ,４ｒ)－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボン酸(１００mg、０.２９mmol)、ＤＩＰＥＡ(１５２μL、０.８７mmol)および３－アミノ－１－メチルピリジン－２(１Ｈ)－オン(５３.９mg、０.４３mmol)のＤＣＭ(３mL)溶液に、２５℃で、Ｎ_２雰囲気下、Ｔ３Ｐ^{(登録商標)}(５０wt.％のＥｔＯＡｃ溶液)(５５３mg、０.８７mmol)を添加した。得られた溶液を２５℃で２時間撹拌し、次いで減圧下濃縮した。残渣をＣ１８－フラッシュクロマトグラフィー(０～８０％ＭｅＣＮの水(０.１％ＦＡ)溶液で溶出)、さらに分取ＨＰＬＣ(YMC-Actus Triart C18 ExRS ５μm ３０×１５０mm；溶出勾配１２～４５％ＭｅＣＮの水(１０mM(ＮＨ_４)_２ＣＯ_３＋０.１％ＮＨ_４ＯＨ)溶液を７分間；６０mL／分)で精製して、６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１ｒ,４ｒ)－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(９３mg、７１％)、実施例１を薄黄色固体として得た。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆)(3:2 回転異性体混合物) δ 11.04 (s, 1H), 8.53 - 8.60 (m, 2H), 8.45 (dd, 1H), 7.43 (dd, 1H), 7.22/7.20 (s, 1H)(回転異性体), 6.31 (t, 1H), 4.45 - 4.55 (m, 1H), 4.36 - 4.45/3.72 - 3.85 (m, 1H)(回転異性体), 4.07 (s, 3H), 3.56 (s, 3H), 2.86/2.72 (s, 3H)(回転異性体), 2.15 - 2.25 (m, 2H), 1.94 - 2.15 (m, 5H), 1.70 - 1.93 (m, 3H), 1.58 - 1.70 (m, 1H). MS ESI, m/z = 452 [M+H]⁺

【0136】

６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１Ｒ,２Ｒ)－２－メチル－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド － 異性体１(実施例２)および異性体２(実施例３)
ｒａｃ－(７Ｒ,８Ｒ)－Ｎ－ベンジル－７－メチル－１,４－ジオキサスピロ[４.５]デカン－８－アミン

【化39】

７－メチル－１,４－ジオキサスピロ[４.５]デカン－８－オン(３.０ｇ、１７.６mmol)およびフェニルメタンアミン(２.８ｇ、２６.４mmol)のトルエン(５０mL)溶液に、Ｎ_２雰囲気下、４－メチルベンゼンスルホン酸一水和物(３３５mg、１.８mmol)を添加した。得られた溶液を１２０℃で１５時間撹拌した。反応混合物をｒｔに冷却し、減圧下濃縮して、粗製イミン中間体を得た。イミンのＭｅＯＨ(６０mL)溶液に、－６０℃で、ＮａＢＨ_４(０.６ｇ、１５.８mmol)を、５分間かけて、Ｎ_２雰囲気下、少しずつ添加した。得られた混合物を－６０℃で１時間撹拌し、次いでｒｔにゆっくり温め、３時間撹拌した。５バッチの粗製生成物溶液を上記のとおり並行して製造し、合わせ、その後精製した。反応混合物を減圧下濃縮した、ＥｔＯＡｃ(５００mL)に溶解し、塩水(３００mL×３)で洗浄した。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮した。残渣をＣ１８－フラッシュクロマトグラフィー(０～１００％ＭｅＣＮの水(０.０５％ＮＨ_４ＨＣＯ_３)溶液で溶出)で精製して、ｒａｃ－(７Ｒ,８Ｒ)－Ｎ－ベンジル－７－メチル－１,４－ジオキサスピロ[４.５]デカン－８－アミン(８.１ｇ、３５％)を橙色油状物として得た。MS ESI, m/z = 262 [M+H]⁺

【0137】

ｒａｃ－(７Ｒ,８Ｒ)－７－メチル－１,４－ジオキサスピロ[４.５]デカン－８－アミン

【化40】

ｒａｃ－(７Ｒ,８Ｒ)－Ｎ－ベンジル－７－メチル－１,４－ジオキサスピロ[４.５]デカン－８－アミン(８.１ｇ、３１.０mmol)のＭｅＯＨ(１００mL)溶液に、Ｎ_２雰囲気下、Ｐｄ(ＯＨ)_２／炭素(２０wt.％)(８７２mg、１.２mmol)を添加した。得られた懸濁液をｒｔで、２atmの水素下、１５時間撹拌した。反応混合物をセライトで濾過し、セライトケーキをＭｅＯＨ(１５０mL)で洗浄した。合わせためｅＯＨ溶液を減圧下濃縮して、粗製ｒａｃ－(７Ｒ,８Ｒ)－７－メチル－１,４－ジオキサスピロ[４.５]デカン－８－アミン(５.０ｇ)を褐色油状物として得て、それをさらに精製することなく使用した。

【0138】

５－ブロモ－６－メトキシ－２－((７Ｒ,８Ｒ)－７－メチル－１,４－ジオキサスピロ[４.５]デカン－８－イル)－２Ｈ－インダゾール

【化41】

５－ブロモ－４－メトキシ－２－ニトロベンズアルデヒド(Ｉｎｔ １)(１０.６ｇ、４０.９mmol)のｉ－ＰｒＯＨ(２００mL)溶液に、ｒｔで、Ｎ_２雰囲気下、粗製ｒａｃ－(７Ｒ,８Ｒ)－７－メチル－１,４－ジオキサスピロ[４.５]デカン－８－アミン(７.０ｇ)を添加した。得られた混合物を８０℃で２時間撹拌し、次いでｒｔに冷却し、続いてトリ－ｎ－ブチルホスフィン(４１.４ｇ、２０４.４mmol)を添加した。反応混合物を８０℃で２４時間撹拌した。混合物をｒｔに冷却し、減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(０～１０％ＭｅＯＨのＤＣＭ溶液で溶出)、さらにＣ１８－フラッシュクロマトグラフィー(０～１００％ＭｅＣＮの水(０.０５％ＮＨ_４ＯＨ)溶液で溶出)で精製して、ｒａｃ－５－ブロモ－６－メトキシ－２－((７Ｒ,８Ｒ)－７－メチル－１,４－ジオキサスピロ[４.５]デカン－８－イル)－２Ｈ－インダゾールを黄色固体として得た。この物質をキラル分取ＳＦＣ(Chiralpak^{(登録商標)}IG、５μm ５０×２５０mm；ＣＯ_２(３５℃、１００バール)中５０％ＭｅＯＨ(０.１％２Ｎ ＮＨ_３－ＭｅＯＨ)で定組成)で精製して、５－ブロモ－６－メトキシ－２－((７Ｒ,８Ｒ)－７－メチル－１,４－ジオキサスピロ[４.５]デカン－８－イル)－２Ｈ－インダゾール(３.０ｇ、１９％、１００％ｅｅ)を灰色固体として得た。¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 8.25 (d, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.12 (s, 1H), 4.13 (td, 1H), 3.87 - 3.99 (m, 4H), 3.87 (s, 3H), 2.26 - 2.43 (m, 1H), 2.19 (td, 1H), 1.75 - 1.96 (m, 3H), 1.68 (td, 1H), 1.46 (t, 1H), 0.52 (d, 3H). MS ESI, m/z = 381/383 [M+H]⁺

【0139】

(３Ｒ,４Ｒ)－４－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)－３－メチルシクロヘキサン－１－オン

【化42】

５－ブロモ－６－メトキシ－２－((７Ｒ,８Ｒ)－７－メチル－１,４－ジオキサスピロ[４.５]デカン－８－イル)－２Ｈ－インダゾール(１８５mg、０.５mmol)のＴＨＦ(５mL)溶液に、ｒｔで、Ｎ_２雰囲気下、４Ｎ ＨＣｌ水溶液(５mL、２０.０mmol)を添加した。反応混合物をｒｔで１２時間撹拌した。反応混合物をＮＨ_４ＯＨ水溶液でｐＨ約７に中和し、次いで減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(０～５０％ＥｔＯＡｃのＰＥ溶液で溶出)で精製して、(３Ｒ,４Ｒ)－４－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)－３－メチルシクロヘキサン－１－オン(１６０mg、９８％)を黄色油状物として得た。MS ESI, m/z = 337/339 [M+H]⁺

【0140】

(３Ｒ,４Ｒ)－４－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)－Ｎ,３－ジメチルシクロヘキサン－１－アミン

【化43】

(３Ｒ,４Ｒ)－４－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)－３－メチルシクロヘキサン－１－オン(１８０mg、０.５mmol)およびメタンアミン(３３wt.％のＭｅＯＨ溶液)(７５４mg、８.０mmol)のＤＣＥ(６mL)溶液に、ナトリウムトリアセトキシボロハイドライド(３３９mg、１.６mmol)を添加した。得られた混合物をｒｔで２時間撹拌し、次いで水(１mL)でクエンチし、減圧下濃縮した。残渣をＣ１８－フラッシュクロマトグラフィー(０～１００％ＭｅＣＮの水(２％ＮＨ_４ＯＨ)溶液で溶出)で精製して、(３Ｒ,４Ｒ)－４－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)－Ｎ,３－ジメチルシクロヘキサン－１－アミン(１５０mg、８０％)を無色固体として得た。MS ESI, m/z = 337/339 (1:1) [M+H]⁺

【0141】

Ｎ－((３Ｒ,４Ｒ)－４－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)－３－メチルシクロヘキシル)－Ｎ－メチルアセトアミド

【化44】

(３Ｒ,４Ｒ)－４－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)－Ｎ,３－ジメチルシクロヘキサン－１－アミン(１４０mg、０.４mmol)およびＴＥＡ(２２２μL、１.６mmol)のＤＣＭ(５mL)溶液に、酢酸無水物(８１mg、０.８mmol)を添加した。得られた混合物をｒｔで１時間撹拌した。次いで、反応混合物を減圧下濃縮し、Ｃ１８－フラッシュクロマトグラフィー(０～１００％ＭｅＣＮの水(０.１％ＦＡ)溶液で溶出)で精製して、Ｎ－((３Ｒ,４Ｒ)－４－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)－３－メチルシクロヘキシル)－Ｎ－メチルアセトアミド(１２５mg、８０％)を黄色固体として得た。MS ESI, m/z = 394/396 (1:1) [M+H]⁺

【0142】

メチル６－メトキシ－２－((１Ｒ,２Ｒ)－２－メチル－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキシラート

【化45】

ＭｅＯＨ(１０mL)中のＮ－((３Ｒ,４Ｒ)－４－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)－３－メチルシクロヘキシル)－Ｎ－メチルアセトアミド(１２０mg、０.３mmol)、Ｐｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ_２(４５mg、０.０６mmol)およびＤＩＰＥＡ(２６６μL、１.５mmol)の混合物を、密封容器中、ＣＯ雰囲気下に１５atmで撹拌し、次いで１１０℃で１５時間加熱した。反応混合物を減圧下濃縮した。残渣をＣ１８－フラッシュクロマトグラフィー(０～１００％ＭｅＣＮの水(０.０５％ＮＨ_４ＯＨ)溶液で溶出)で精製して、メチル６－メトキシ－２－((１Ｒ,２Ｒ)－２－メチル－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキシラート(１０５mg、９２％)を蝋様黄色固体として得た。MS ESI, m/z = 374 [M+H]⁺

【0143】

６－メトキシ－２－((１Ｒ,２Ｒ)－２－メチル－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボン酸

【化46】

メチル６－メトキシ－２－((１Ｒ,２Ｒ)－２－メチル－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキシラート(１０２mg、０.３mmol)のＭｅＯＨ(３mL)溶液に、ｒｔで、Ｎ_２雰囲気下、ＬｉＯＨ(２０mg、０.８mmol)の水(１０mL)溶液を添加した。得られた溶液をｒｔで２時間撹拌し、次いで２Ｎ ＨＣｌでｐＨ６に調節した。反応混合物を直接Ｃ１８－フラッシュクロマトグラフィー(５～１００％ＭｅＣＮの水(０.０５％ＦＡ)溶液で溶出)で精製して、６－メトキシ－２－((１Ｒ,２Ｒ)－２－メチル－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボン酸(９８mg、１００％)を無色固体として得た。MS ESI, m/z = 360 [M+H]⁺

【0144】

６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１Ｒ,２Ｒ)－２－メチル－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド － 異性体１、実施例２および異性体２、実施例３

【化47】

６－メトキシ－２－((１Ｒ,２Ｒ)－２－メチル－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボン酸(８８mg、０.２mmol)、ＤＩＰＥＡ(１７１μL、１.０mmol)および３－アミノ－１－メチルピリジン－２(１Ｈ)－オン塩酸塩(７９mg、０.５mmol)のＤＣＭ(５mL)溶液に、２５℃で、Ｎ_２雰囲気下、Ｔ３Ｐ^{(登録商標)}(５０wt.％のＥｔＯＡｃ溶液)(３１２mg、０.５mmol)を添加した。得られた溶液をｒｔで２時間撹拌し、その後減圧下濃縮した。残渣をＣ１８－フラッシュクロマトグラフィー(０～１００％ＭｅＣＮの水(０.０５％ＦＡ)溶液で溶出)で精製し、次いでキラル分取ＨＰＬＣ(Chiralpak^{(登録商標)}IF、５μm ２０mm×２５０mm；２６分間ＥｔＯＨ中５０％ＭＴＢＥ(０.５％２Ｍ ＮＨ_３－ＭｅＯＨ溶液)で定組成；２０.０mL／分)でさらに分離して、６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１Ｒ,２Ｒ)－２－メチル－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド － 異性体１(４０mg、３５％、１００％ｅｅ)および６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１Ｒ,２Ｒ)－２－メチル－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド － 異性体２(１４mg、１２％、９９.６％ｅｅ)を両者とも無色固体として得た。異性体１(実施例２)：¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆)(3:2 回転異性体混合物) δ 11.04 (s, 1H), 8.68 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.45 (dd, 1H), 7.43 (dd, 1H), 7.25 (s, 1H), 6.31 (t, 1H), 4.52 - 4.70/3.91 - 4.05 (m, 1H)(回転異性体), 4.30 - 4.48 (m, 1H), 4.08 (s, 3H), 3.56 (s, 3H), 2.85/2.70 (br. s, 4H)(回転異性体), 0.89 - 2.38 (m, 12H). MS ESI, m/z = 466 [M+H]⁺. 異性体２（実施例３）:¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆)(3:2 回転異性体混合物) δ 11.04 (s, 1H), 8.57 - 8.60 (m, 1H), 8.57/8.55 (s, 1H)(回転異性体), 8.45 (dd, 1H), 7.43 (dd, 1H), 7.24/7.21 (s, 1H)(回転異性体), 6.31 (t, 1H), 4.45 - 4.55 (m, 1H), 4.45 - 4.55/3.81 - 3.92 (m, 1H)(回転異性体), 4.09 - 4.18 (m, 1H), 4.07 (s, 3H), 3.56 (s, 3H), 2.86/2.72 (s, 3H)(回転異性体), 1.94 - 2.28 (m, 6H), 1.56 - 1.90 (m, 4H), 0.53 - 0.63 (m, 3H). MS ESI, m/z = 466 [M+H]⁺

【0145】

６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１Ｒ,２Ｓ,４Ｒ)－２－メチル－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(実施例４)
６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１Ｓ,２Ｒ,４Ｓ)－２－メチル－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(実施例５)
ｒｅｌ－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１Ｒ,２Ｓ,４Ｓ)－２－メチル－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド － 異性体１(実施例６)および異性体２(実施例７)
ｒａｃ－(７Ｒ,８Ｓ)－Ｎ－ベンジル－７－メチル－１,４－ジオキサスピロ[４.５]デカン－８－アミン

【化48】

－６０℃以下に冷却したＮ－ベンジル－７－メチル－１,４－ジオキサスピロ[４.５]デカン－８－イミン(３.２kg、１２.３mol)のＭｅＯＨ(１５Ｌ)溶液に、ＮａＢＨ_４(４６６.８ｇ、１２.３mol)を、Ｎ_２雰囲気下、５バッチで３０分間かけて添加した。得られた混合物を１時間かけて－６０℃から－３０℃、次いで０.５時間かけて－３０℃から１０℃に温めた。混合物を飽和ＮＨ_４Ｃｌ水溶液(５Ｌ)でクエンチし、ＤＣＭ(５Ｌ×３)で抽出した。合わせた有機層を水(６Ｌ)および塩水(６Ｌ)で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、次いで減圧下濃縮した。残渣をＣ１８－フラッシュクロマトグラフィー(４０～７０％ＭｅＣＮの水(０.０５％ＮＨ_４ＨＣＯ_３)溶液で溶出)で精製して、ｔｒａｎｓ－異性体(１.３kg、４０％)および所望のｒａｃ－(７Ｒ,８Ｓ)－Ｎ－ベンジル－７－メチル－１,４－ジオキサスピロ[４.５]デカン－８－アミンを得た。¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 7.19 - 7.38 (m, 5H), 3.87 - 4 (m, 4H), 3.84 (d, 1H), 3.65 (d, 1H), 2.70 (q, 1H), 1.93 - 2.07 (m, 1H), 1.79 - 1.93 (m, 2H), 1.71 (dd, 1H), 1.43 - 1.62 (m, 3H), 0.96 (d, 3H). MS ESI, m/z = 262 [M+H]⁺

【0146】

ｒａｃ－(７Ｒ,８Ｓ)－７－メチル－１,４－ジオキサスピロ[４.５]デカン－８－アミン

【化49】

パラジウム／炭素(１０wt.％)(３.０ｇ、２.８mmol)およびｒａｃ－(７Ｒ,８Ｓ)－Ｎ－ベンジル－７－メチル－１,４－ジオキサスピロ[４.５]デカン－８－アミン(２０.０ｇ、７６.５mmol)のＭｅＯＨ(２００mL)懸濁液をｒｔで、Ｈ_２雰囲気下、２atmで１５時間撹拌した。次いで、混合物をセライトで濾過し、濾液を減圧下濃縮して、ｒａｃ－(７Ｒ,８Ｓ)－７－メチル－１,４－ジオキサスピロ[４.５]デカン－８－アミン(１１.０ｇ、８４％)を暗色油状物として得て、それをさらに精製することなく使用した。¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 3.77 - 3.87 (m, 4H), 2.79 (q, 1H), 1.65 - 1.78 (m, 2H), 1.48 - 1.6 (m, 3H), 1.06 - 1.47 (m, 4H), 0.83 (d, 3H). MS ESI, m/z = 172 [M+H]⁺

【0147】

ｒａｃ－５－ブロモ－６－メトキシ－２－((７Ｒ,８Ｓ)－７－メチル－１,４－ジオキサスピロ[４.５]デカン－８－イル)－２Ｈ－インダゾール

【化50】

５－ブロモ－４－メトキシ－２－ニトロベンズアルデヒド(Ｉｎｔ １)(１６.６ｇ、６５.２mmol)のｉ－ＰｒＯＨ(１０２mL)溶液に、ｒａｃ－(７Ｒ,８Ｓ)－７－メチル－１,４－ジオキサスピロ[４.５]デカン－８－アミン(１０.２ｇ、５９.６mmol)を、Ｎ_２雰囲気下、添加した。得られた混合物を８０℃で３時間撹拌し、次いでｒｔに冷却し、続いてトリ－ｎ－ブチルホスフィン(４６.８ｇ、２３１.３mmol)を添加した。反応混合物を８０℃で１１時間撹拌し、次いで冷却し、０℃で１時間撹拌した。得られた懸濁液を濾紙で濾過し、集めた固体をｉ－ＰｒＯＨ(６０mL)／ｎ－ヘプタン(３６mL)に懸濁し、６０℃で１日間撹拌した。ｒｔに冷却後、所望の生成物を濾過により得て、ｒａｃ－５－ブロモ－６－メトキシ－２－((７Ｒ,８Ｓ)－７－メチル－１,４－ジオキサスピロ[４.５]デカン－８－イル)－２Ｈ－インダゾール(１６.３ｇ、７２％)を灰色固体として得た。¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 8.25 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.15 (s, 1H), 4.66 (q, 1H), 3.83 - 3.98 (m, 7H), 2.24 - 2.40 (m, 2H), 2.00 - 2.16 (m, 3H), 1.57 - 1.70 (m, 2H), 0.55 (d, 3H). MS ESI, m/z = 381/383 [M+H]⁺

【0148】

ｒａｃ－(３Ｒ,４Ｓ)－４－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)－３－メチルシクロヘキサン－１－オン

【化51】

ｒａｃ－５－ブロモ－６－メトキシ－２－((７Ｒ,８Ｓ)－７－メチル－１,４－ジオキサスピロ[４.５]デカン－８－イル)－２Ｈ－インダゾール(１６.３ｇ、４２.６mmolのＴＨＦ／水(３００mL １：１)溶液に、１２Ｎ ＨＣｌ水溶液(６０mL、７２０.０mmol)を添加した。反応混合物をｒｔで２時間撹拌し、その後混合物のｐＨを２Ｎ ＮａＯＨ水溶液でｐＨ約６に調節した。ＴＨＦを減圧下除去して、水性懸濁液を得た。懸濁液を濾過し、集めた沈殿をＰＥ(１００mL)で洗浄し、減圧下乾燥させて、ｒａｃ－(３Ｒ,４Ｓ)－４－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)－３－メチルシクロヘキサン－１－オン(１３.７０ｇ、９５％)を薄黄色固体として得て、それをさらに精製することなく使用した。¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 8.35 (d, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.15 (s, 1H), 5.02 (dt, 1H), 3.87 (s, 3H), 2.61 - 2.8 (m, 2H), 2.24 - 2.61 (m, 5H), 0.60 (d, 3H). MS ESI, m/z = 337/339 [M+H]⁺

【0149】

ｒａｃ－(３Ｒ,４Ｓ)－４－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)－Ｎ,３－ジメチルシクロヘキサン－１－アミン

【化52】

ｒａｃ－(３Ｒ,４Ｓ)－４－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)－３－メチルシクロヘキサン－１－オン(７８０mg、２.３mmol)およびメタンアミン(３３wt.％のＭｅＯＨ溶液)(２.２ｇ、２３.１mmol)のＤＣＥ(１０mL)溶液に、ナトリウムトリアセトキシボロハイドライド(１.５ｇ、６.９mmol)を添加した。得られた混合物を２５℃で１時間撹拌し、水(２０mL)でクエンチし、ＤＣＭ(５０mL×２)で抽出した。合わせた有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、次いで減圧下濃縮して、ｒａｃ－(３Ｒ,４Ｓ)－４－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)－Ｎ,３－ジメチルシクロヘキサン－１－アミン(８００mg、９８％)を黄色固体として得て、それをさらに精製することなく使用した。MS ESI, m/z = 352/354 [M+H]⁺

【0150】

ｒａｃ－Ｎ－((３Ｒ,４Ｓ)－４－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)－３－メチルシクロヘキシル)－Ｎ－メチルアセトアミド

【化53】

ｒａｃ－(３Ｒ,４Ｓ)－４－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)－Ｎ,３－ジメチルシクロヘキサン－１－アミン(７８０mg、２.２mmol)およびＴＥＡ(１.２mL、８.９mmol)のＤＣＭ(１０mL)溶液に、酢酸無水物(４５２mg、４.４mmol)を添加した。得られた混合物をｒｔで１時間撹拌した。次いで、反応混合物を減圧下濃縮し、Ｃ１８－フラッシュクロマトグラフィー(０～１００％ＭｅＣＮの水(０.１％ＦＡ)溶液で溶出)で精製して、ｒａｃ－Ｎ－((３Ｒ,４Ｓ)－４－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)－３－メチルシクロヘキシル)－Ｎ－メチルアセトアミド(７２０mg、８２％)を固体として得た。¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆)(4:5 立体異性体混合物) δ 8.29/8.28 (s, 1H)(立体異性体), 8.00 (s, 1H), 7.11 (s, 1H), 4.61 - 4.69 (m, 1H), 4.46 - 4.61/3.85 - 3.92 (m, 1H)(立体異性体), 3.89 (s, 3H), 2.97/2.84 (s, 3H)(立体異性体), 1.93 - 2.24 (m, 7H), 1.22 - 1.55 (m, 2H), 0.52 - 0.6 (m, 3H). MS ESI, m/z = 394/396 [M+H]⁺

【0151】

ｒａｃ－メチル６－メトキシ－２－((１Ｓ,２Ｒ)－２－メチル－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキシラート

【化54】

ＭｅＯＨ(１０mL)中のｒａｃ－Ｎ－((３Ｒ,４Ｓ)－４－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)－３－メチルシクロヘキシル)－Ｎ－メチルアセトアミド(７２０mg、１.８mmol)、Ｐｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ_２(２６７mg、０.４mmol)およびＤＩＰＥＡ(１.６mL、９.１mmol)の混合物を密封容器中、ＣＯ雰囲気下に１５atmで撹拌し、次いで１１０℃で１５時間加熱し、その後減圧下濃縮した。残渣をＣ１８－フラッシュクロマトグラフィー(０～１００％ＭｅＣＮの水(０.０５％ＮＨ_４ＯＨ)溶液で溶出)で精製して、ｒａｃ－メチル６－メトキシ－２－((１Ｓ,２Ｒ)－２－メチル－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキシラート(６４０mg、９４％)を蝋様黄色固体として得た。¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆)(4:5 立体異性体混合物) δ 8.46/8.45 (s, 1H)(立体異性体), 8.10 (s, 1H), 7.05 (s, 1H), 4.62 - 4.73 (m, 1H), 4.47 - 4.62 (m, 1H), 4.47 - 4.62/3.81 - 3.92 (m, 1H)(立体異性体), 3.84 (s, 3H), 3.78 (s, 3H), 2.97/2.84 (s, 3H)(立体異性体),1.90 - 2.37 (m, 7H), 1.22 - 1.58 (m, 2H), 0.53 - 0.63 (m, 3H). MS ESI, m/z = 374 [M+H]⁺

【0152】

ｒａｃ－６－メトキシ－２－((１Ｓ,２Ｒ)－２－メチル－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボン酸

【化55】

ｒａｃ－メチル６－メトキシ－２－((１Ｓ,２Ｒ)－２－メチル－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキシラート(６２０mg、１.７mmol)のＭｅＯＨ(３mL)溶液に、ｒｔで、Ｎ_２雰囲気下、ＬｉＯＨ(１１９mg、５.０mmol)の水(３mL)溶液を添加した。得られた溶液をｒｔで２時間撹拌した。次いで、反応混合物のｐＨを２Ｎ ＨＣｌでｐＨ６に調節した。混合物を直接Ｃ１８－フラッシュクロマトグラフィー(５～１００％ＭｅＣＮの水(０.０５％ＦＡ)溶液で溶出)で精製して、ｒａｃ－６－メトキシ－２－((１Ｓ,２Ｒ)－２－メチル－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボン酸(５９０mg、９９％)を無色固体として得た。¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆)(2:3 立体異性体混合物) δ 8.43/8.42 (s, 1H)(立体異性体), 8.07 (s, 1H), 7.03 (s, 1H), 4.62 - 4.71 (m, 1H), 4.47 - 4.62/3.79 - 3.93 (m, 1H)(立体異性体), 3.84 (s, 3H), 2.97/2.84 (s, 3H)(立体異性体), 2.43 - 2.65 (m, 1H), 1.92 - 2.38 (m, 7H), 1.22 - 1.60 (m, 2H), 0.51 - 0.65 (m, 3H). MS ESI, m/z = 360 [M+H]⁺

【0153】

６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１Ｒ,２Ｓ,４Ｒ)－２－メチル－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド、実施例４

【化56】

６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１Ｓ,２Ｒ,４Ｓ)－２－メチル－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド、実施例５

【化57】

ｒｅｌ－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１Ｒ,２Ｓ,４Ｓ)－２－メチル－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド － 異性体１、実施例６および異性体２、実施例７

【化58】

ｒａｃ－６－メトキシ－２－((１Ｓ,２Ｒ)－２－メチル－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボン酸(５５０mg、１.５mmol)、ＨＡＴＵ(６９８mg、１.８mmol)およびＤＩＰＥＡ(１.３mL、７.７mmol)のＤＭＦ(７mL)溶液に、２５℃で、Ｎ_２雰囲気下、３－アミノ－１－メチルピリジン－２(１Ｈ)－オン塩酸塩(６１４mg、３.８mmol)を添加した。反応混合物をｒｔで２時間撹拌し、次いで減圧下濃縮した。残渣をＣ１８－フラッシュクロマトグラフィー(０～１００％ＭｅＣＮの水(０.０５％ＮＨ_４ＯＨ)溶液で溶出)で精製して、ｒａｃ－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１Ｒ,２Ｓ,４Ｒ)－２－メチル－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(１３０mg)およびｒａｃ－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１Ｒ,２Ｓ,４Ｓ)－２－メチル－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(４５０mg)を得た。

【0154】

ｒａｃ－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１Ｒ,２Ｓ,４Ｒ)－２－メチル－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド分取キラルＨＰＬＣ(Chiralpak^{(登録商標)}IA、５μm ２１.２mm×１５０mm；３０分間ＥｔＯＨ中５０％ＭＴＢＥで定組成；２０.０mL／分)により分離して、６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１Ｒ,２Ｓ,４Ｒ)－２－メチル－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(３１mg、４％、１００％ｅｅ)および６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１Ｓ,２Ｒ,４Ｓ)－２－メチル－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(３０mg、４％、９９.８％ｅｅ)を両方無色固体として得た。

【0155】

ｒａｃ－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１Ｒ,２Ｓ,４Ｓ)－２－メチル－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド分取キラルＨＰＬＣ(Chiralpak^{(登録商標)}IH、５μm ２０mm×２５０mm；１４分間ＥｔＯＨ中８０％ＭＴＢＥ(０.５％２Ｍ ＮＨ_３－ＭｅＯＨ溶液)で定組成；２０.０mL／分)により分離して、ｒｅｌ－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１Ｒ,２Ｓ,４Ｓ)－２－メチル－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド － 異性体１(１７７mg、２５％、１００％ｅｅ)およびｒｅｌ－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１Ｒ,２Ｓ,４Ｓ)－２－メチル－４－(Ｎ－メチルアセトアミド)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド － 異性体２(１６９mg、２４％、１００％ｅｅ)を両方無色固体として得た。

【0156】

(１Ｒ,２Ｓ,４Ｒ)－異性体、実施例４：¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆)(2:3 回転異性体混合物) δ 11.04 (s, 1H), 8.59/8.57 (s, 1H)(回転異性体), 8.54/8.51 (s, 1H)(回転異性体), 8.45 (dd, 1H), 7.43 (dd, 1H), 7.20 - 7.25 (m, 1H), 6.31 (t, 1H), 4.58 - 4.73 (m, 1H), 4.58 - 4.73/3.84 - 3.98 (m, 1H)(回転異性体), 4.07 (s, 3H), 3.56 (s, 3H), 2.84/2.72 (s, 3H)(回転異性体), 2.62 - 2.70 (m, 1H), 2.31 - 2.45 (m, 1H), 1.93 - 2.19 (m, 5H), 1.63 - 1.93 (m, 2H), 1.55 - 1.63/1.40 - 1.51 (m, 1H)(回転異性体), 0.67/0.63 (d, 3H)(回転異性体). MS ESI, m/z = 466 [M+H]⁺

【0157】

(１Ｓ,２Ｒ,４Ｓ)－異性体、実施例５：¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆)(2:3 回転異性体混合物) δ 11.04 (s, 1H), 8.59/8.57 (s, 1H)(回転異性体), 8.54/8.50 (s, 1H)(回転異性体), 8.45 (dd, 1H), 7.43 (dd, 1H), 7.20 - 7.25 (m, 1H), 6.31 (t, 1H), 4.60 - 4.72 (m, 1H), 4.60 - 4.72/3.84 - 3.98 (m, 1H)(回転異性体), 4.07 (s, 3H), 3.56 (s, 3H), 2.84/2.72 (s, 3H)(回転異性体), 2.62 - 2.70 (m, 1H), 2.31 - 2.45 (m, 1H), 1.97 - 2.16 (m, 5H), 1.63 - 1.91 (m, 2H), 1.55 - 1.63/1.42 - 1.50 (m, 1H)(回転異性体), 0.67/0.63 (d, 3H)(回転異性体). MS ESI, m/z = 466 [M+H]⁺

【0158】

(１Ｒ,２Ｓ,４Ｓ)－異性体１、実施例６：¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆)(5:4 回転異性体混合物) δ 11.03 (s, 1H), 8.60 (s, 1H), 8.58/8.56 (s, 1H)(回転異性体), 8.45 (dd, 1H), 7.43 (dd, 1H), 7.22 (s, 1H), 6.31 (t, 1H), 4.66 - 4.75 (m, 1H), 4.50 - 4.61/3.82 - 3.92 (m, 1H)(回転異性体), 4.09 (s, 3H), 3.56 (s, 3H), 2.98/2.85 (s, 3H)(回転異性体), 2.40 - 2.69 (m, 1H), 1.95 - 2.39 (m, 7H), 1.49 - 1.57/1.33 - 1.41 (m, 1H)(回転異性体), 1.41 - 1.49/1.26 - 1.33 (m, 1H)(回転異性体), 0.53 - 0.66 (m, 3H). MS ESI, m/z = 466 [M+H]⁺

【0159】

(１Ｒ,２Ｓ,４Ｓ)－異性体２、実施例７：¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆)(5:4 回転異性体混合物) δ 11.03 (s, 1H), 8.60 (s, 1H), 8.58/8.56 (s, 1H)(回転異性体), 8.45 (dd, 1H), 7.43 (dd, 1H), 7.22 (s, 1H), 6.31 (t, 1H), 4.66 - 4.75 (m, 1H), 4.49 - 4.61/3.81 - 3.94 (m, 1H)(回転異性体), 4.09 (s, 3H), 3.56 (s, 3H), 2.98/2.85 (s, 3H)(回転異性体), 2.40 - 2.67 (m, 1H), 1.96 - 2.39 (m, 7H), 1.49 - 1.57/1.33 - 1.41 (m, 1H)(回転異性体), 1.41 - 1.49/1.26 - 1.33 (m, 1H)(回転異性体), 0.55 - 0.65 (m, 3H). MS ESI, m/z = 466 [M+H]⁺

【0160】

２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(実施例８)
ｔｅｒｔ－ブチル((１ｒ,４ｒ)－４－(６－メトキシ－５－((１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)カルバモイル)－２Ｈ－インダゾール－２－イル)シクロヘキシル)(メチル)カルバメート

【化59】

２－((１ｒ,４ｒ)－４－((ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル)(メチル)アミノ)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボン酸(Ｉｎｔ ５)(１２０mg、０.３mmol)、３－アミノ－１－メチルピリジン－２(１Ｈ)－オン(４４mg、０.４mmol)およびＤＩＰＥＡ(１５６μL、０.９mmol)のＤＭＦ(５mL)溶液に、２５℃で、Ｎ_２雰囲気下、ＨＡＴＵ(１７０mg、０.５mmol)を添加した。反応混合物を２５℃で１５時間撹拌した。混合物を直接Ｃ１８－フラッシュクロマトグラフィー(０～１００％ＭｅＣＮの水(０.１％ＦＡ)溶液で溶出)で精製して、ｔｅｒｔ－ブチル((１ｒ,４ｒ)－４－(６－メトキシ－５－((１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)カルバモイル)－２Ｈ－インダゾール－２－イル)シクロヘキシル)(メチル)カルバメート(１１０mg、７３％)を薄黄色固体として得た。¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 11.04 (s, 1H), 8.54 - 8.60 (m, 2H), 8.45 (dd, 1H), 7.43 (dd, 1H), 7.22 (s, 1H), 6.31 (t, 1H), 4.39 - 4.55 (m, 1H), 4.06 (s, 3H), 3.75 - 4.04 (m, 1H), 3.56 (s, 3H), 2.72 (s, 3H), 2.11 - 2.24 (m, 2H), 1.90 - 2.06 (m, 2H), 1.65 - 1.90 (m, 4H), 1.42 (s, 9H). MS ESI, m/z = 510 [M+H]⁺

【0161】

６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１ｒ,４ｒ)－４－(メチルアミノ)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド

【化60】

ｔｅｒｔ－ブチル((１ｒ,４ｒ)－４－(６－メトキシ－５－((１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)カルバモイル)－２Ｈ－インダゾール－２－イル)シクロヘキシル)(メチル)カルバメート(１００mg、０.２mmol)を、２Ｎ ＨＣｌジオキサン溶液(８.０mL、１６.０mmol)に、２５℃で、Ｎ_２雰囲気下添加した。得られた混合物を２５℃で２時間撹拌し、その後減圧下濃縮して、６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１ｒ,４ｒ)－４－(メチルアミノ)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(９５mg、１００％)をＨＣｌ塩として得て、それをさらに精製することなく使用した。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆)(HCl 塩) δ 11.03 (s, 1H), 8.97 - 9.11 (m, 2H), 8.57 (s, 2H), 8.44 (dd, 1H), 7.43 (dd, 1H), 7.21 (s, 1H), 6.31 (t, 1H), 4.46 - 4.58 (m, 1H), 4.06 (s, 3H), 3.56 (s, 3H), 3.00 - 3.16 (m, 1H), 2.56 (t, 3H), 2.16 - 2.29 (m, 4H), 1.89 - 2.05 (m, 2H), 1.54 - 1.69 (m, 2H). MS ESI, m/z = 410 [M+H]⁺

【0162】

(Ｒ)－１－(((１ｒ,４Ｒ)－４－(６－メトキシ－５－((１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)カルバモイル)－２Ｈ－インダゾール－２－イル)シクロヘキシル)(メチル)アミノ)－１－オキソプロパン－２－イルアセテート

【化61】

６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１ｒ,４ｒ)－４－(メチルアミノ)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(９０mg、０.２mmol)およびＴＥＡ(１１３μL、０.８mmol)のＨＣｌ塩のＤＣＭ(８mL)溶液に、２５℃で、Ｎ_２雰囲気下、(Ｒ)－１－クロロ－１－オキソプロパン－２－イルアセテート(４６mg、０.３mmol)を添加した。得られた溶液を２５℃で２時間撹拌し、次いで飽和ＮＨ_４Ｃｌ溶液(１０mL)に注加し、ＤＣＭ(２５mL×２)で抽出した。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮して、(Ｒ)－１－(((１ｒ,４Ｒ)－４－(６－メトキシ－５－((１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)カルバモイル)－２Ｈ－インダゾール－２－イル)シクロヘキシル)(メチル)アミノ)－１－オキソプロパン－２－イルアセテート(１００mg、９５％)を黄色固体として得て、それをさらに精製することなく使用した。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆)(5:4 回転異性体混合物) δ 11.04 (s, 1H), 8.53 - 8.61 (m, 2H), 8.45 (dd, 1H), 7.43 (dd, 1H), 7.22/7.20 (s, 1H)(回転異性体), 6.31 (t, 1H), 5.46/5.28 (q, 1H)(回転異性体), 4.40 - 4.58 (m, 1H), 4.29 - 4.40 (m, 1H), 4.06 (s, 3H), 3.56 (s, 3H), 2.91/2.75 (s, 3H)(回転異性体), 1.58 - 2.28 (m, 11H), 1.33/1.31 (d, 3H)(回転異性体). MS ESI, m/z = 524 [M+H]⁺

【0163】

２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド、実施例８

【化62】

(Ｒ)－１－(((１ｒ,４Ｒ)－４－(６－メトキシ－５－((１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)カルバモイル)－２Ｈ－インダゾール－２－イル)シクロヘキシル)(メチル)アミノ)－１－オキソプロパン－２－イルアセテート(９０mg、０.２mmol)のＴＨＦ／水(８mL、１：１)溶液に、２５℃で、Ｎ_２雰囲気下、ＬｉＯＨ(２１mg、０.９mmol)を添加した。得られた溶液を２５℃で２時間撹拌し、次いで飽和ＮＨ_４Ｃｌ溶液(１０mL)に注加し、ＤＣＭ(２５mL×３)で抽出した。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ(Xbridge^{(登録商標)}BEH OBD C18 ５μm ３０×１５０mm；溶出勾配１８～３８％ＭｅＣＮの水(１０mM ＮＨ_４ＨＣＯ_３＋０.１％ＮＨ_４ＯＨ)溶液を８分間；６０mL／分)で精製して、２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(５２mg、６３％)、実施例８を薄黄色固体として得た。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆)(5:4 回転異性体混合物) δ 11.05 (s, 1H), 8.54 - 8.61 (m, 2H), 8.45 (dd, 1H), 7.43 (dd, 1H), 7.22/7.20 (s, 1H)(回転異性体), 6.31 (t, 1H), 4.86 - 5.02/4.66 - 4.86 (m, 1H)(回転異性体), 4.33 - 4.58/3.93 - 4.03 (m, 3H)(回転異性体), 4.07 (s, 3H), 3.56 (s, 3H), 2.90/2.76 (s, 3H)(回転異性体), 2.14 - 2.26 (m, 2H), 1.58 - 2.14 (m, 6H), 1.21/1.18 (d, 3H)(回転異性体). MS ESI, m/z = 482 [M+H]⁺

【0164】

Ｎ－(１－(フルオロメチル)－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(実施例９)
１－(フルオロメチル)－３－ニトロピリジン－２(１Ｈ)－オン

【化63】

３－ニトロピリジン－２(１Ｈ)－オン(３００mg、２.１mmol)およびＫ_２ＣＯ_３(８８８mg、６.４mmol)のＤＭＦ(８mL)懸濁液に、２５℃で、Ｎ_２雰囲気下、フルオロヨードメタン(８５６mg、５.４mmol)を添加した。得られた混合物を８０℃で２時間加熱し、次いで水(２０mL)でクエンチし、ＤＣＭ／ｉ－ＰｒＯＨ(３／１)(２５mL×３)で抽出した。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ(Waters SunFire^{(登録商標)}C18 OBD、５μm ３０×１５０mm；溶出勾配４～２０％ＭｅＣＮの水(０.１％ＴＦＡ)溶液を７分間；６０mL／分)で精製して、１－(フルオロメチル)－３－ニトロピリジン－２(１Ｈ)－オン(１３０mg、３５％)を黄色固体として得た。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.51 (dd, 1H), 8.32 (dd, 1H), 6.53 (dd, 1H), 6.05 (d, 2H). MS ESI, m/z = 173 [M+H]⁺

【0165】

３－アミノ－１－(フルオロメチル)ピリジン－２(１Ｈ)－オン

【化64】

１－(フルオロメチル)－３－ニトロピリジン－２(１Ｈ)－オン(１２０mg、０.７mmol)および亜鉛(２２８mg、３.５mmol)のＴＨＦ／ＭｅＯＨ(１：２、６mL)懸濁液に、２５℃で、Ｎ_２雰囲気下で、ＮＨ_４Ｃｌ(１８６mg、３.５mmol)の水(２mL)溶液を添加した。得られた懸濁液を６０℃で２時間加熱した。反応混合物をシリカゲルで濾過し、シリカゲルケーキをＭｅＯＨ(２０mL)で洗浄した。合わせた濾液を減圧下濃縮した。残渣を３０％ＮＨ_４ＯＨ水溶液で塩基性化し、水(１０mL)で希釈し、ＥｔＯＡｃ(２５mL×３)で抽出した。合わせた有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮した。残渣を分取ＴＬＣ(５０％ＥｔＯＡｃのＰＥ溶液で溶出)で精製して、３－アミノ－１－(フルオロメチル)ピリジン－２(１Ｈ)－オン(７０mg、７１％)を黄色油状物として得た。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 7.02 (dd, 1H), 6.45 (dd, 1H), 6.10 (t, 1H), 5.95 (d, 2H), 5.26 (s, 2H). MS ESI, m/z = 143 [M+H]⁺

【0166】

Ｎ－(１－(フルオロメチル)－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド、実施例９

【化65】

２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボン酸(Ｉｎｔ ６)(４０mg、０.１mmol)、ＨＡＴＵ(４９mg、０.１mmol)およびＤＩＰＥＡ(７４μL、０.４mmol)のＤＭＦ(３mL)溶液を２５℃で、Ｎ_２雰囲気下、１時間撹拌し、続いて３－アミノ－１－(フルオロメチル)ピリジン－２(１Ｈ)－オン(５３mg、０.４mmol)を添加した。得られた溶液を６０℃で１２時間撹拌した。反応混合物を直接分取ＨＰＬＣ(YMC-Actus Triart C18 ExRS ５μm ３０×１５０mm；溶出勾配２４～３６％ＭｅＣＮの水(１０mM ＮＨ_４ＨＣＯ_３＋０.１％ＮＨ_４ＯＨ)溶液を１０分間；６０mL／分)で２回精製して、Ｎ－(１－(フルオロメチル)－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(２３mg、４３％)、実施例９を無色固体として得た。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆)(5:6 回転異性体混合物) δ 11.05 (s, 1H), 8.56 - 8.63 (m, 2H), 8.51 (dd, 1H), 7.57 (dd, 1H), 7.24/7.21 (s, 1H)(回転異性体), 6.41 (t, 1H), 6.07 (d, 2H), 4.93/4.75 (d, 1H)(回転異性体), 4.33 - 4.59/3.93 - 4.04 (m, 3H)(回転異性体), 4.08 (s, 3H), 2.91 (s, 2H), 2.76 (s, 1H), 2.91/2.76 (s, 3H)(回転異性体), 2.15 - 2.27 (m, 2H), 1.6 - 2.15 (m, 6H), 1.22/1.18 (d, 3H)(回転異性体). MS ESI, m/z = 500 [M+H]⁺

【0167】

Ｎ－(１－(シアノメチル)－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(実施例１０)

【化66】

２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボン酸(Ｉｎｔ ６)(４０mg、０.１mmol)、ＨＡＴＵ(４９mg、０.１mmol)およびＤＩＰＥＡ(７４μL、０.４mmol)のＤＭＦ(３mL)溶液を、２５℃で、Ｎ_２雰囲気下、１時間撹拌し、続いて２－(３－アミノ－２－オキソピリジン－１(２Ｈ)－イル)アセトニトリル(４０mg、０.３mmol)を添加した。反応混合物を６０℃で２時間撹拌した。混合物を直接分取ＨＰＬＣ(Xbridge^{(登録商標)}BEH OBD C18 ５μm ３０×１５０mm；溶出勾配２１～３６％ＭｅＣＮの水(１０mM ＮＨ_４ＨＣＯ_３＋０.１％ＮＨ_４ＯＨ)溶液を８分間；６０mL／分)で精製して、Ｎ－(１－(シアノメチル)－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(２９mg、５５％)、実施例１０を無色固体として得た。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆)(5:6 回転異性体混合物) δ 11.03 (s, 1H), 8.55 - 8.64 (m, 2H), 8.51 (dd, 1H), 7.51 (dd, 1H), 7.24/7.22 (s, 1H)(回転異性体), 6.45 (t, 1H), 5.16 (s, 2H), 4.93/4.75 (d, 1H)(回転異性体), 4.34 - 4.57/3.93 - 4.03 (m, 3H)(回転異性体), 4.09 (s, 3H), 2.91/2.76 (s, 3H)(回転異性体), 2.15 - 2.26 (m, 2H), 1.62 - 2.15 (m, 6H), 1.22/1.18 (d, 3H)(回転異性体). MS ESI, m/z = 507 [M+H]⁺

【0168】

Ｎ－(１－シクロプロピル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１Ｓ,４ｒ)－４－((Ｓ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(実施例１１)
ｔｅｒｔ－ブチル((１ｒ,４ｒ)－４－(５－((１－シクロプロピル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)カルバモイル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)シクロヘキシル)(メチル)カルバメート

【化67】

２－((１ｒ,４ｒ)－４－((ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル)(メチル)アミノ)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボン酸(Ｉｎｔ ５)(３００mg、０.７mmol)、ＨＡＴＵ(３３９mg、０.９mmol)およびＤＩＰＥＡ(５１９μL、３.０mmol)のＤＭＦ(５mL)溶液に、２５℃で、Ｎ_２雰囲気下、３－アミノ－１－シクロプロピルピリジン－２(１Ｈ)－オン塩酸塩(１６７mg、０.９mmol)を添加した。反応混合物を２５℃で１５時間撹拌した。混合物を直接Ｃ１８－フラッシュクロマトグラフィー(０～１００％ＭｅＣＮの水(０.０５％ＮＨ_４ＯＨ)溶液で溶出)で精製して、ｔｅｒｔ－ブチル((１ｒ,４ｒ)－４－(５－((１－シクロプロピル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)カルバモイル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)シクロヘキシル)(メチル)カルバメート(３００mg、７５％)を無色固体として得た。¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 11.05 (s, 1H), 8.53 - 8.59 (m, 2H), 8.42 (dd, 1H), 7.29 (dd, 1H), 7.22 (s, 1H), 6.27 (t, 1H), 4.37 - 4.54 (m, 1H), 4.07 (s, 3H), 3.76 - 4.03 (m, 1H), 3.39 - 3.49 (m, 1H), 2.71 (s, 3H), 2.09 - 2.26 (m, 2H), 1.87 - 2.08 (m, 2H), 1.59 - 1.86 (m, 4H), 1.41 (s, 9H), 0.97 - 1.09 (m, 2H), 0.81 - 0.93 (m, 2H). MS ESI, m/z = 536 [M+H]⁺

【0169】

Ｎ－(１－シクロプロピル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－６－メトキシ－２－((１ｒ,４ｒ)－４－(メチルアミノ)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド

【化68】

ｔｅｒｔ－ブチル((１ｒ,４ｒ)－４－(５－((１－シクロプロピル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)カルバモイル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)シクロヘキシル)(メチル)カルバメート(２９５mg、０.６mmol)のＤＣＭ(１mL)溶液に、４Ｎ ＨＣｌジオキサン溶液(６８８μL、２.８mmol)を２５℃で、Ｎ_２雰囲気下、添加した。得られた混合物を２５℃で１７時間撹拌し、次いで減圧下濃縮して、Ｎ－(１－シクロプロピル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－６－メトキシ－２－((１ｒ,４ｒ)－４－(メチルアミノ)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(２６０mg、１００％)のＨＣｌ塩を無色固体として得て、それをさらに精製することなく使用した。¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 11.04 (s, 1H), 8.57 (s, 2H), 8.42 (dd, 1H), 7.29 (dd, 1 H), 7.21 (s, 1H), 6.27 (t, 1H), 4.43 - 4.58 (m, 1H), 4.07 (s, 3H), 3.39 - 3.48 (m, 1H), 2.97 - 3.13 (m, 1H), 2.54 (t, 3H), 2.13 - 2.31 (m, 4H), 1.86 - 2.06 (m, 2H), 1.52 - 1.71 (m, 2H), 0.97 - 1.10 (m, 2H), 0.85 - 0.93 (m, 2H). MS ESI, m/z = 436 [M+H]⁺

【0170】

(Ｓ)－１－(((１ｒ,４Ｓ)－４－(５－((１－シクロプロピル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)カルバモイル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)シクロヘキシル)(メチル)アミノ)－１－オキソプロパン－２－イルアセテート

【化69】

Ｎ－(１－シクロプロピル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－６－メトキシ－２－((１ｒ,４ｒ)－４－(メチルアミノ)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミドのＨＣｌ塩(２５５mg、０.５mmol)およびＴＥＡ(２２６μL、１.６mmol)のＤＣＭ(２０mL)溶液に、０℃で、Ｎ_２雰囲気下、(Ｓ)－１－クロロ－１－オキソプロパン－２－イルアセテート(１１４mg、０.８mmol)を添加した。得られた混合物を２５℃で３０分間撹拌し、次いで水(２５mL)でクエンチし、ＤＣＭ(１５mL)で抽出した。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮した。残渣をＣ１８－フラッシュクロマトグラフィー(０～１００％ＭｅＣＮの水(０.０５％ＮＨ_４ＯＨ)溶液で溶出)で精製して、(Ｓ)－１－(((１ｒ,４Ｓ)－４－(５－((１－シクロプロピル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)カルバモイル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)シクロヘキシル)(メチル)アミノ)－１－オキソプロパン－２－イルアセテート(２９５mg、９９％)を無色固体として得た。¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆)(2:3 回転異性体混合物) δ 11.05 (s, 1H), 8.50 - 8.59 (m, 2H), 8.42 (dd, 1H), 7.29 (dd, 1H), 7.22/7.20 (s, 1H)(回転異性体), 6.27 (t, 1H), 5.45/ 5.27 (q, 1H)(回転異性体), 4.40 - 4.56 (m, 1H), 4.26 - 4.39/3.71 - 3.86 (m, 1H)(回転異性体), 4.07 (s, 3H), 3.39 - 3.49 (m, 1H), 2.90/2.74 (s, 3H)(回転異性体), 1.69 - 2.28 (m, 10H), 1.54 - 1.68 (m, 1H), 1.31 (t, 3H), 0.98 - 1.11 (m, 2H), 0.84 - 0.94 (m, 2H). MS ESI, m/z = 550 [M+H]⁺

【0171】

Ｎ－(１－シクロプロピル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１Ｓ,４ｒ)－４－((Ｓ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド、実施例１１

【化70】

(Ｓ)－１－(((１ｒ,４Ｓ)－４－(５－((１－シクロプロピル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)カルバモイル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)シクロヘキシル)(メチル)アミノ)－１－オキソプロパン－２－イルアセテート(２９０mg、０.５mmol)のＭｅＯＨ(１０mL)溶液に、２５℃で、Ｎ_２雰囲気下、ＬｉＯＨ(３８mg、１.６mmol)の水(１０mL)溶液を添加した。得られた溶液を２５℃で１５時間撹拌した。反応混合物を直接Ｃ１８－フラッシュクロマトグラフィー(２０～５０％ＭｅＣＮの水(０.０５％ＮＨ_４ＯＨ)溶液で溶出)で精製して、Ｎ－(１－シクロプロピル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１Ｓ,４ｒ)－４－((Ｓ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(２５０mg、９３％、９９.８％ｅｅ)、実施例１１を無色固体として得た。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆)(2:3 回転異性体混合物) δ 11.05 (s, 1H), 8.53 - 8.61 (m, 2H), 8.42 (dd, 1H), 7.29 (dd, 1H), 7.22/7.19 (s, 1H)(回転異性体), 6.27 (t, 1H), 4.91/4.75 (br.s, 1H)(回転異性体), 4.32 - 4.56/3.91 - 4.03 (m, 3H)(回転異性体), 4.07 (s, 3H), 3.40 - 3.48 (m, 1H), 2.90/2.75 (s, 3H)(回転異性体), 1.71 - 2.27 (m, 7H), 1.60 - 1.70 (m, 1H), 1.21/1.17 (d, 3H)(回転異性体), 0.99 - 1.08 (m, 2H), 0.86 - 0.92 (m, 2H). MS ESI, m/z = 508 [M+H]⁺

【0172】

Ｎ－(１－シクロプロピル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(実施例１２)

【化71】

２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボン酸(Ｉｎｔ ６)(２００mg、０.５mmol)、３－アミノ－１－シクロプロピルピリジン－２(１Ｈ)－オン(１２０mg、０.８mmol)およびＤＩＰＥＡ(３７２μL、２.１mmol)のＤＭＦ(２mL)溶液に、Ｎ_２雰囲気下、ＨＡＴＵ(２４３mg、０.６mmol)を添加した。反応混合物を２０℃で１７時間撹拌した。反応混合物を直接Ｃ１８－フラッシュクロマトグラフィー(０～１００％ＭｅＣＮの水(０.０５％ＦＡ)溶液で溶出)、さらに分取ＨＰＬＣ(YMC-Actus Triart C18 ５μm ３０×１５０mm；溶出勾配１５～４０％ＭｅＣＮの水(１０mM(ＮＨ_４)_２ＣＯ_３＋０.１％ＮＨ_４ＯＨ)溶液を１０分間；６０mL／分)で精製して、Ｎ－(１－シクロプロピル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(３２mg、１２％)、実施例１２を無色固体として得た。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆)(4:5 回転異性体混合物) δ 11.05 (s, 1H), 8.54 - 8.61 (m, 2H), 8.43 (dd, 1H), 7.29 (dd, 1H), 7.23/7.20 (s, 1H)(回転異性体), 6.28 (t, 1H), 4.91/4.73 (d, 1H)(回転異性体), 4.37 - 4.56 (m, 2H), 4.34 - 4.45/3.93 - 4.04 (m, 1H)(回転異性体), 4.08 (s, 3H), 3.45 (tt, 1H), 2.91/2.77 (s, 3H)(回転異性体), 2.15 - 2.28 (m, 2H), 1.96 - 2.15 (m, 2H), 1.72 - 1.96 (m, 3H), 1.68 (s, 1H), 1.16 - 1.26 (m, 3H), 1 - 1.09 (m, 2H), 0.87 - 0.95 (m, 2H). MS ESI, m/z = 508 [M+H]⁺

【0173】

２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－(オキセタン－３－イル)－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(実施例１３)

【化72】

２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボン酸(Ｉｎｔ ６)(５０mg、０.１mmol)、ＨＡＴＵ(６１mg、０.２mmol)およびＤＩＰＥＡ(９３μL、０.５mmol)のＤＭＦ(２mL)溶液に、２５℃で、Ｎ_２雰囲気下、３－アミノ－１－(オキセタン－３－イル)ピリジン－２(１Ｈ)－オン(２７ｍｇ、０.２mmol)を添加した。反応混合物を２５℃で１６時間撹拌した。混合物を直接分取ＨＰＬＣ(Waters XSelect CSH Fluoro-Phenyl OBD、５μm ３０×１５０mm；溶出勾配２６～３６％ＭｅＣＮの水(０.１％ＦＡ)溶液を８分間、６０mL／分；続くXbridge^{(登録商標)}BEH OBD C18 ５μm ３０×１５０mm；溶出勾配１７～３７％ＭｅＣＮの水(１０mM ＮＨ_４ＨＣＯ_３＋０.１％ＮＨ_４ＯＨ)溶液を８分間；６０mL／分)で精製して、２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－(オキセタン－３－イル)－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(３３mg、４７％)、実施例１３を無色固体として得た。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆)(5:6 回転異性体混合物) δ 10.98 (s, 1H), 8.53 - 8.63 (m, 2H), 8.49 (dd, 1H), 7.57 (dd, 1H), 7.22/7.19 (s, 1H)(回転異性体), 6.45 (t, 1H), 5.66 (p, 1H), 4.92 (t, 2H), 4.80 (t, 2H), 4.33 - 4.57/3.93 - 4.02 (m, 3H)(回転異性体), 4.05 (s, 3H), 2.91/2.76 (s, 3H)(回転異性体), 2.14 - 2.28 (m, 2H), 1.61 - 2.14 (m, 6H), 1.21/1.18 (d, 3H)(回転異性体). MS ESI, m/z = 524 [M+H]⁺

【0174】

２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(２－オキソ－１－(１Ｈ－ピラゾール－４－イル)－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(実施例１４)
３－アミノ－１－(１－((２－(トリメチルシリル)エトキシ)メチル)－１Ｈ－ピラゾール－４－イル)ピリジン－２(１Ｈ)－オン

【化73】

３－アミノピリジン－２(１Ｈ)－オン(１００mg、０.９mmol)、Ｎ,Ｎ’－ジメチルエチレンジアミン(１６０mg、１.８mmol)、Ｃｓ_２ＣＯ_３(５９２mg、１.８mmol)およびヨウ化銅(Ｉ)(３５mg、０.２mmol)の１,４－ジオキサン(１０mL)懸濁液気に、２５℃で、Ｎ_２雰囲気下、４－ブロモ－１－((２－(トリメチルシリル)エトキシ)メチル)－１Ｈ－ピラゾール(２５２mg、０.９mmol)を添加した。得られた混合物を１０５℃で１５時間加熱した。同じ規模の反応を並行して１１回実施した。合わせた反応混合物をセライトで濾過した。濾液を減圧下濃縮した。残渣をＣ１８フラッシュクロマトグラフィー(０～１００％ＭｅＣＮの水(０.０５％ＮＨ_４ＯＨ)溶液で溶出)で精製して、３－アミノ－１－(１－((２－(トリメチルシリル)エトキシ)メチル)－１Ｈ－ピラゾール－４－イル)ピリジン－２(１Ｈ)－オン(２.１ｇ、６９％)を暗色油状物として得た。MS ESI, m/z = 307 [M+H]⁺

【0175】

２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(２－オキソ－１－(１－((２－(トリメチルシリル)エトキシ)メチル)－１Ｈ－ピラゾール－４－イル)－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド

【化74】

２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボン酸(Ｉｎｔ ６)(１９９mg、０.５mmol)、ＨＡＴＵ(２４２mg、０.６mmol)およびＤＩＰＥＡ(３７０μL、２.１mmol)のＤＭＦ(１０mL)溶液に、２５℃で、Ｎ_２雰囲気下、３－アミノ－１－(１－((２－(トリメチルシリル)エトキシ)メチル)－１Ｈ－ピラゾール－４－イル)ピリジン－２(１Ｈ)－オン(１９５mg、０.６mmol)を添加した。反応混合物を２５℃で１６時間撹拌した。混合物をＣ１８－フラッシュクロマトグラフィー(５～１００％ＭｅＣＮの水(０.０５％ＮＨ_４ＯＨ)溶液で溶出)で精製して、２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(２－オキソ－１－(１－((２－(トリメチルシリル)エトキシ)メチル)－１Ｈ－ピラゾール－４－イル)－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(１９３mg、５５％)を灰色固体として得た。¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆)(5:6 回転異性体混合物) δ 11.10 (s, 1H), 8.56 - 8.64 (m, 2H), 8.55 (s, 1H), 8.51 (dd, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.62 (dd, 1H), 7.23/7.20 (s, 1H)(回転異性体), 6.47 (t, 1H), 5.48 (s, 2H), 4.92/4.74 (d, 1H)(回転異性体), 4.31 - 4.59/3.92 - 4.03 (m, 3H)(回転異性体), 4.07 (s, 3H), 3.61 (t, 2H), 2.91/2.77 (s, 3H)(回転異性体), 1.59 - 2.30 (m, 8H), 1.14 - 1.27 (m, 3H), 0.87 (t, 2H), -0.02 (s, 9H). MS ESI, m/z = 664 [M+H]⁺

【0176】

２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(２－オキソ－１－(１Ｈ－ピラゾール－４－イル)－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド、実施例１４

【化75】

２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(２－オキソ－１－(１－((２－(トリメチルシリル)エトキシ)メチル)－１Ｈ－ピラゾール－４－イル)－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(１９０mg、０.３mmol)のＤＣＭ(２０mL)溶液に、４Ｎ ＨＣｌジオキサン溶液(３５８μL、１.４３mmol)を２５℃で、Ｎ_２雰囲気下、添加した。得られた混合物を２５℃で１６時間撹拌し、次いで減圧下濃縮した。残渣を分取ＨＰＬＣ(Xbridge^{(登録商標)}BEH OBD C18 ５μm ３０×１５０mm；溶出勾配１８～３８％ＭｅＣＮの水(１０mM ＮＨ_４ＨＣＯ_３＋０.１％ＮＨ_４ＯＨ)溶液を８分間、６０mL／分；続くWaters XSelect CSH Fluoro-Phenyl OBD、５μm ３０×１５０mm；溶出勾配３０～４０％ＭｅＣＮの水(０.１％ＦＡ)溶液を８分間、６０mL／分)で２回精製して、２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(２－オキソ－１－(１Ｈ－ピラゾール－４－イル)－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(２６mg、１７％)、実施例１４を無色固体として得た。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆)(5:6 回転異性体混合物) δ 13.15 (br. s, 1H), 11.10 (s, 1H), 8.54 - 8.64 (m, 2H), 8.50 (dd, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.59 (dd, 1H), 7.22/7.20 (s, 1H)(回転異性体), 6.44 (t, 1H), 4.92/4.72 (d, 1H)(回転異性体), 4.33 - 4.57/3.93 - 4.03 (m, 3H)(回転異性体), 4.06 (s, 3H), 2.91/2.76 (s, 3H)(回転異性体), 2.15 - 2.27 (m, 2H), 1.62 - 2.15 (m, 6H), 1.22/1.18 (d, 3H)(回転異性体). MS ESI, m/z = 534 [M+H]⁺

【0177】

２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－(１－メチル－１Ｈ－ピラゾール－４－イル)－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(実施例１５)

【化76】

２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボン酸(Ｉｎｔ ６)(１５０mg、０.４mmol)、ＨＡＴＵ(２１３mg、０.６mmol)およびＤＩＰＥＡ(２０９μL、１.２mmol)のＤＭＦ(６mL)溶液に、２５℃で、Ｎ_２雰囲気下、３－アミノ－１－(１－メチル－１Ｈ－ピラゾール－４－イル)ピリジン－２(１Ｈ)－オン(１１４mg、０.６mmol)を添加した。反応混合物を２５℃で１６時間撹拌した。混合物を直接Ｃ１８－フラッシュクロマトグラフィー(０～１００％ＭｅＣＮの水(０.１％ＮＨ_４ＯＨ)溶液で溶出)、続く分取ＨＰＬＣ(Xbridge^{(登録商標)}BEH OBD C18 ５μm ３０×１５０mm；溶出勾配２１～４１％ＭｅＣＮの水(１０mM ＮＨ_４ＨＣＯ_３＋０.１％ＮＨ_４ＯＨ)溶液を８分間；６０mL／分)で精製して、２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－(１－メチル－１Ｈ－ピラゾール－４－イル)－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(６４mg、３０％)、実施例１５を無色固体として得た。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆)(5:6 回転異性体混合物) δ 11.09 (s, 1H), 8.55 - 8.62 (m, 2H), 8.50 (dd, 1H), 8.33 (s, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.58 (dd, 1H), 7.22/7.20 (s, 1H)(回転異性体), 6.45 (t, 1H), 4.91/4.73 (d, 1H)(回転異性体), 4.34 - 4.57/3.94 - 4.04 (m, 3H)(回転異性体), 4.07 (s, 3H), 3.91 (s, 3H), 2.91/2.77 (s, 3H)(回転異性体), 2.15 - 2.28 (m, 2H), 1.62 - 2.15 (m, 6H), 1.22/1.19 (d, 1H)(回転異性体). MS ESI, m/z = 548 [M+H]⁺

【0178】

２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－(１－メチル－１Ｈ－１,２,３－トリアゾール－４－イル)－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(実施例１６)

【化77】

３－アミノ－１－(１－メチル－１Ｈ－１,２,３－トリアゾール－４－イル)ピリジン－２(１Ｈ)－オン

【化78】

３－アミノピリジン－２(１Ｈ)－オン(１００mg、０.９mmol)、４－ブロモ－１－メチル－１Ｈ－１,２,３－トリアゾール(２２１mg、１.４mmol)、Ｃｓ_２ＣＯ_３(５９２mg、１.８mmol)およびヨウ化銅(Ｉ)(３５mg、０.２mmol)の１,４－ジオキサン(１０mL)懸濁液気に、２５℃で、Ｎ_２雰囲気下、Ｎ,Ｎ’－ジメチルエチレンジアミン(１６０mg、１.８mmol)を添加した。得られた混合物を１０５℃で１６時間加熱した。同じ規模の反応を並行して６回実施した。合わせた反応混合物をセライトで濾過した。濾液を減圧下濃縮した。残渣をＣ１８フラッシュクロマトグラフィー(０～３０％ＭｅＣＮの水(０.０５％ＮＨ_４ＯＨ溶液で溶出)、次いで０～３０％ＭｅＣＮの水(０.１％ＨＣｌ)溶液)で２回、続く分取ＨＰＬＣ(YMC-Actus Triart C18 ５μm ３０×１５０mm；溶出勾配５～２０％ＭｅＣＮの水(１０mM ＮＨ_４ＨＣＯ_３＋０.１％ＮＨ_４ＯＨ)溶液を８分間；６０mL／分)、さらにＣ１８フラッシュクロマトグラフィー(０～３０％ＭｅＣＮの水(０.０５％ＮＨ_４ＯＨ)溶液で溶出)で精製して、３－アミノ－１－(１－メチル－１Ｈ－１,２,３－トリアゾール－４－イル)ピリジン－２(１Ｈ)－オン(５３mg、５％)を黄色固体として得た。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.64 (s, 1H), 7.62 (d, 1H), 6.50 (d, 1H), 6.27 (t, 1H), 5.34 (s, 2H), 4.13 (s, 3H). MS ESI, m/z = 192 [M+H]⁺

【0179】

２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－(１－メチル－１Ｈ－１,２,３－トリアゾール－４－イル)－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド、実施例１６

【化79】

２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボン酸(Ｉｎｔ ６)(４８mg、０.１mmol)、３－アミノ－１－(１－メチル－１Ｈ－１,２,３－トリアゾール－４－イル)ピリジン－２(１Ｈ)－オン(３６mg、０.２mmol)およびＤＩＰＥＡ(８９μL、０.６mmol)のＤＭＦ(３mL)溶液に、２５℃で、Ｎ_２雰囲気下、ＨＡＴＵ(５８mg、０.２mmol)を添加した。反応混合物を５０℃で１６時間加熱した。混合物を直接Ｃ１８－フラッシュクロマトグラフィー(０～１００％ＭｅＣＮの水(０.０５％ＮＨ_４ＯＨ)溶液で溶出)、さらに分取ＨＰＬＣ(YMC-Actus Triart C18 ５μm ３０×１５０mm；溶出勾配２５～４５％ＭｅＣＮの水(１０mM ＮＨ_４ＨＣＯ_３＋０.１％ＮＨ_４ＯＨ)溶液を１０分間；６０mL／分)で精製して、２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－(１－メチル－１Ｈ－１,２,３－トリアゾール－４－イル)－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(４０mg、６１％)、実施例１６を無色固体として得た。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆)(5:6 回転異性体混合物) δ 11.10 (s, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.57 - 8.65 (m, 2H), 8.56 (dd, 1H), 8.07 (dd, 1H), 7.24/7.22 (s, 1H)(回転異性体), 6.57 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 4.92/4.73 (d, 1H)(回転異性体), 4.33 - 4.58/3.93 - 4.04 (m, 3H)(回転異性体), 4.17 (s, 3H), 4.09 (s, 3H), 2.91/2.77 (s, 3H)(回転異性体), 2.15 - 2.28 (m, 2H), 1.61 - 2.15 (m, 6H), 1.22/1.19 (d, 3H)(回転異性体). MS ESI, m/z = 549 [M+H]⁺

【0180】

２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－(２－メチル－２Ｈ－１,２,３－トリアゾール－４－イル)－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(実施例１７)
３－アミノ－１－(２－メチル－２Ｈ－１,２,３－トリアゾール－４－イル)ピリジン－２(１Ｈ)－オン

【化80】

３－アミノピリジン－２(１Ｈ)－オン(１００mg、０.９mmol)、４－ブロモ－１－メチル－１Ｈ－１,２,３－トリアゾール(２２１mg、１.４mmol)、Ｃｓ_２ＣＯ_３(５９２mg、１.８mmol)およびヨウ化銅(Ｉ)(３５mg、０.２mmol)の１,４－ジオキサン(１０mL)懸濁液気に、２５℃で、Ｎ_２雰囲気下、Ｎ,Ｎ’－ジメチルエチレンジアミン(１６０mg、１.８mmol)を添加した。得られた混合物を１０５℃で１６時間加熱した。同じ規模の反応を並行して６回実施した。合わせた反応混合物をセライトで濾過した。濾液を減圧下濃縮した。残渣をＣ１８フラッシュクロマトグラフィー(５～３０％ＭｅＣＮの水(０.０５％ＮＨ_４ＯＨ)溶液で溶出)、さらに分取ＨＰＬＣ(Xbridge^{(登録商標)}BEH OBD C18 ５μm ３０×１５０mm；溶出勾配５～２５％ＭｅＣＮの水(１０mM ＮＨ_４ＨＣＯ_３＋０.１％ＮＨ_４ＯＨ)溶液を８分間；６０mL／分)で精製して、３－アミノ－１－(２－メチル－２Ｈ－１,２,３－トリアゾール－４－イル)ピリジン－２(１Ｈ)－オン(１５０mg、１４％)を暗色固体として得た。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.22 (s, 1H), 7.28 (dd, 1H), 6.48 (dd, 1H), 6.23 (t, 1H), 5.37 (s, 2H), 4.19 (s, 3H). MS ESI, m/z = 192 [M+H]⁺

【0181】

２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－(２－メチル－２Ｈ－１,２,３－トリアゾール－４－イル)－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド、実施例１７

【化81】

２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボン酸(Ｉｎｔ ６)(６０mg、０.２mmol)、３－アミノ－１－(２－メチル－２Ｈ－１,２,３－トリアゾール－４－イル)ピリジン－２(１Ｈ)－オン(４０mg、０.２mmol)およびＤＩＰＥＡ(１１２μL、０.６mmol)のＤＭＦ(２mL)溶液に、２５℃で、Ｎ_２雰囲気下、ＨＡＴＵ(９１mg、０.２４ｍｍｏｌ)を添加した。反応混合物を５０℃で１５時間撹拌した。混合物を直接分取ＨＰＬＣ(Xbridge^{(登録商標)}BEH OBD C18 ５μm ３０×１５０mm；溶出勾配２５～４２％ＭｅＣＮの水(１０mM ＮＨ_４ＨＣＯ_３＋０.１％ＮＨ_４ＯＨ)溶液を８分間；６０mL／分)で精製して、２－((１Ｒ,４ｒ)－４－((Ｒ)－２－ヒドロキシ－Ｎ－メチルプロパンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－(２－メチル－２Ｈ－１,２,３－トリアゾール－４－イル)－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(３４mg、３９％)、実施例１７を無色固体として得た。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆)(5:6 回転異性体混合物) δ 11.09 (s, 1H), 8.56 - 8.65 (m, 2H), 8.54 (dd, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.73 (dd, 1H), 7.23/7.21 (s, 1H)(回転異性体), 6.53 (t, 1H), 4.94/ 4.75 (d, 1H)(回転異性体), 4.33 - 4.58/3.93 - 4.03 (m, 3H)(回転異性体), 4.23 (s, 3H), 4.07 (s, 3H), 2.91/2.76 (s, 3H)(回転異性体), 2.14 - 2.28 (m, 2H), 1.62 - 2.14 (m, 6H), 1.22/1.18 (d, 3H)(回転異性体). MS ESI, m/z = 549 [M+H]⁺

【0182】

６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１ｒ,４ｒ)－４－(２－オキソピロリジン－１－イル)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(実施例１８)
２－((１ｒ,４ｒ)－４－(４－クロロブタンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド

【化82】

２－((１ｒ,４ｒ)－４－アミノシクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミドのＨＣｌ塩(Ｉｎｔ ７)(１５０mg、０.３mmol)およびＴＥＡ(１６５μL、１.１mmol)のＤＣＭ(１mL)溶液に、４－クロロブタノイルクロライド(９８mg、０.７mmol)を添加した。得られた混合物を２５℃で１時間撹拌した。混合物を直接Ｃ１８－フラッシュクロマトグラフィー(０～１００％ＭｅＣＮの水(０.１％ＮＨ_４ＯＨ)溶液で溶出)で精製して、２－((１ｒ,４ｒ)－４－(４－クロロブタンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(９０mg、５３％)を明黄色固体として得た。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 11.03 (br. s, 1H), 8.54 - 8.62 (m, 2H), 8.47 (br. s, 1H), 8.44 (dd, 1H), 7.44 (dd, 1H), 7.19 - 7.24 (m, 1H), 6.30 (t, 1H), 4.43 - 4.54 (m, 1H), 4.06 (s, 3H), 3.58 - 3.66 (m, 3H), 3.55 (s, 3H), 2.06 - 2.29 (m, 5H), 1.85 - 2.06 (m, 5H), 1.58 - 1.72 (m, 1H), 1.36 - 1.51 (m, 1H). MS ESI, m/z = 500/502 (2:1) [M+H]⁺

【0183】

６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１ｒ,４ｒ)－４－(２－オキソピロリジン－１－イル)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド、実施例１８

【化83】

カリウムｔｅｒｔ－ブトキシド(９mg、０.１mmol)のＴＨＦ(４mL)溶液に、２－((１ｒ,４ｒ)－４－(４－クロロブタンアミド)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(２０mg、０.０４mmol)を添加した。得られた混合物を５０℃で１０時間、Ｎ_２雰囲気下、撹拌した。同じ規模の反応を並行して２回実施した。合わせた反応混合物を直接Ｃ１８フラッシュクロマトグラフィー(０～１００％ＭｅＣＮの水(０.１％ＮＨ_４ＯＨ)溶液で溶出)、さらに分取ＨＰＬＣ(YMC-Actus Triart C18 ５μm ３０×１５０mm；溶出勾配３０～４０％ＭｅＣＮの水(１０mM ＮＨ_４ＨＣＯ_３＋０.１％ＮＨ_４ＯＨ)溶液を８分間；６０mL／分)で精製して、６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１ｒ,４ｒ)－４－(２－オキソピロリジン－１－イル)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(１５mg、４１％)、実施例１８を無色固体として得た。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 11.04 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.45 (dd, 1H), 7.43 (dd, 1H), 7.22 (s, 1H), 6.31 (t, 1H), 4.43 - 4.54 (m, 1H), 4.07 (s, 3H), 3.84 - 3.97 (m, 1H), 3.56 (s, 3H), 2.14 - 2.29 (m, 4H), 1.97 - 2.11 (m, 2H), 1.92 (p, 2H), 1.65 - 1.83 (m, 4H). MS ESI, m/z = 464 [M+H]⁺

【0184】

６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１ｒ,４ｒ)－４－(３－メチル－２－オキソイミダゾリジン－１－イル)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(実施例１９)
ｔｅｒｔ－ブチル(２－(((１ｒ,４ｒ)－４－(６－メトキシ－５－((１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)カルバモイル)－２Ｈ－インダゾール－２－イル)シクロヘキシル)アミノ)エチル)(メチル)カルバメート

【化84】

ｔｅｒｔ－ブチルメチル(２－オキソエチル)カルバメート(２０mg、０.１mmol)を２－((１ｒ,４ｒ)－４－アミノシクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミドのＨＣｌ塩(Ｉｎｔ ７)(７９wt.％)(５０mg、０.１mmol)のＤＣＥ(４mL)溶液に添加し、続いてナトリウムトリアセトキシボロハイドライド(５２mg、０.２mmol)を添加した。得られた混合物を２５℃で６時間撹拌した。反応混合物を直接Ｃ１８フラッシュクロマトグラフィー(０～１００％ＭｅＣＮの水(０.１％ＮＨ_４ＯＨ)溶液で溶出)で精製して、ｔｅｒｔ－ブチル(２－(((１ｒ,４ｒ)－４－(６－メトキシ－５－((１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)カルバモイル)－２Ｈ－インダゾール－２－イル)シクロヘキシル)アミノ)エチル)(メチル)カルバメート(１００mg、５２％)を褐色固体として得た。MS ESI, m/z = 553 [M+H]⁺

【0185】

６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１ｒ,４ｒ)－４－((２－(メチルアミノ)エチル)アミノ)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド

【化85】

ｔｅｒｔ－ブチル(２－(((１ｒ,４ｒ)－４－(６－メトキシ－５－((１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)カルバモイル)－２Ｈ－インダゾール－２－イル)シクロヘキシル)アミノ)エチル)(メチル)カルバメート(９５mg、０.２mmol)のＤＣＭ(１５mL)溶液に、２Ｎ ＨＣｌジオキサン溶液(８６０μL、１.７mmol)を添加し、得られた溶液を２５℃で４時間撹拌した。混合物を減圧下濃縮して、６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１ｒ,４ｒ)－４－((２－(メチルアミノ)エチル)アミノ)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(７８mg、１００％)のＨＣｌ塩を褐色固体として得た。MS ESI, m/z = 453 [M+H]⁺

【0186】

６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１ｒ,４ｒ)－４－(３－メチル－２－オキソイミダゾリジン－１－イル)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド、実施例１９

【化86】

６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１ｒ,４ｒ)－４－((２－(メチルアミノ)エチル)アミノ)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド塩酸塩(３０mg、０.１mmol)およびＤＩＰＥＡ(４６μL、０.３mmol)のＤＣＥ(５mL)溶液に、Ｎ_２雰囲気下、ＣＤＩ(１３mg、０.１mmol)を添加した。得られた溶液を６０℃で５時間撹拌した。同じ規模の反応を並行して２回実施した。合わせた反応混合物を直接分取ＨＰＬＣ(YMC-Actus Triart C18 ExRS ５μm ３０×１５０mm；溶出勾配２１～４３％ＭｅＣＮの水(１０mM ＮＨ_４ＨＣＯ_３＋０.１％ＮＨ_４ＯＨ)溶液を８分間；６０mL／分)で精製して、６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１ｒ,４ｒ)－４－(３－メチル－２－オキソイミダゾリジン－１－イル)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(１０mg、１７％)、実施例１９を明黄色固体として得た。¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 11.04 (s, 1H), 8.54 - 8.60 (m, 2H), 8.45 (dd, 1H), 7.43 (dd, 1H), 7.22 (s, 1H), 6.31 (t, 1H), 4.40 - 4.54 (m, 1H), 4.06 (s, 3H), 3.59 - 3.74 (m, 1H), 3.56 (s, 3H), 3.16 - 3.29 (m, 4H), 2.65 (s, 3H), 2.12 - 2.31 (m, 2H), 1.92 - 2.12 (m, 2H), 1.64 - 1.83 (m, 4H). MS ESI, m/z = 479 [M+H]⁺

【0187】

６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((５ｓ,８ｓ)－１－メチル－２－オキソ－３－オキサ－１－アザスピロ[４.５]デカン－８－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(実施例２０)
(４－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)シクロヘキシル)メタノール

【化87】

(４－アミノシクロヘキシル)メタノール(４.２ｇ、２５.４mmol)のｉ－ＰｒＯＨ(４０mL)溶液に、ｒｔで、５－ブロモ－４－メトキシ－２－ニトロベンズアルデヒド(Ｉｎｔ １)(６.６ｇ、２５.４mmol)およびＴＥＡ(１０.６mL、７６.１mmol)を、Ｎ_２雰囲気下に添加した。得られた混合物を９０℃で３０分間撹拌し、次いでｒｔに冷却し、続いてトリ－ｎ－ブチルホスフィン(１５.４ｇ、７６.１mmol)を添加した。反応混合物を９０℃で１０時間撹拌した。混合物をｒｔに冷却し、直接Ｃ－１８フラッシュクロマトグラフィー(０～１００％ＭｅＣＮの水(１％ＮＨ_４ＯＨ)溶液で溶出)で精製して、黒色液体を得て、それをさらに精製することなく次工程で使用した。MS ESI, m/z = 339/341 [M+H]⁺

【0188】

(４－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)シクロヘキシル)メチルカルバメート

【化88】

粗製(４－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)シクロヘキシル)メタノール(７.９ｇ)のＤＣＭ(１０００mL)溶液に、０℃で２,２,２－トリクロロアセチルイソシアネート(５.３ｇ、３２.０mmol)を添加した。得られた溶液をｒｔに温め、２時間撹拌した。その後、ＭｅＯＨ(２０mL)およびＫ_２ＣＯ_３(３２０mg、２.３mmol)を添加した。得られた混合物をｒｔで３時間撹拌し、次いで減圧下濃縮した。残渣を直接Ｃ－１８フラッシュクロマトグラフィー(０～１００％ＭｅＣＮの水(１％ＮＨ_４ＯＨ)溶液で溶出)で精製して、(４－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)シクロヘキシル)メチルカルバメート(６.６ｇ、８５％)を暗色油状物として得た。MS ESI, m/z = 382/384 [M+H]⁺

【0189】

(５ｓ,８ｓ)－８－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)－３－オキサ－１－アザスピロ[４.５]デカン－２－オン

【化89】

(５ｒ,８ｒ)－８－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)－３－オキサ－１－アザスピロ[４.５]デカン－２－オン

【化90】

酸化マグネシウム(３.１ｇ、７７.０mmol)、フェニル－λ^３－ヨーダンジイルジアセテート(１５.１ｇ、４６.９mmol)および粗製(４－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)シクロヘキシル)メチルカルバメート(６.４ｇ)のＤＣＭ(８０mL)懸濁液気に、２０℃で、Ｎ_２雰囲気下、[Ｒｈ_２(ＯＡｃ)_４](１.５ｇ、３.４mmol)を添加した。得られた混合物を４０℃で１５時間撹拌した。反応混合物を次いで濾紙で濾過した。濾液をＤＣＭ(２００mL)で希釈し、塩水(１００mL)で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、次いで減圧下濃縮した。残渣をＣ－１８フラッシュクロマトグラフィー(０～１００％ＭｅＣＮの水(１％ＮＨ_４ＯＨ)溶液で溶出)、さらに分取ＳＦＣ(GreenSep^TM Basic、５μm ３０mm×１５０mm；ＣＯ_２(３５℃、１００バール)中２５％ＭｅＯＨ(０.５％２Ｍ ＮＨ_３－ＭｅＯＨ)で定組成；８０mL／分；)で精製して、(５ｓ,８ｓ)－８－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)－３－オキサ－１－アザスピロ[４.５]デカン－２－オン(６０mg、１％)および(５ｒ,８ｒ)－８－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)－３－オキサ－１－アザスピロ[４.５]デカン－２－オン(１５０mg、２％)を両方黄色固体として得た。(５ｓ,８ｓ)－異性体：¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 8.41 (s, 1H), 8.30 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.07 (s, 1H), 4.35 - 4.52 (m, 1H), 4.04 (s, 2H), 3.87 (s, 3H), 1.65 - 2.23 (m, 8H). MS ESI, m/z = 380/382 (1:1) [M+H]⁺. (5r,8r)-異性体:¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 8.30 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.12 (s, 1H), 4.37 - 4.51 (m, 1H), 4.22 (s, 2H), 3.86 (s, 3H), 1.65 - 2.15 (m, 8H). MS ESI, m/z = 380/382 (1:1) [M+H]⁺

【0190】

(５ｓ,８ｓ)－８－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)－１－メチル－３－オキサ－１－アザスピロ[４.５]デカン－２－オン

【化91】

(５ｓ,８ｓ)－８－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)－３－オキサ－１－アザスピロ[４.５]デカン－２－オン(６０mg、０.２mmol)およびＮａＨ(６０wt.％)(１０mg、０.２mmol)のＤＭＦ(６mL)懸濁液に、２５℃で、Ｎ_２雰囲気下、ヨードメタン(６７mg、０.５mmol)を添加した。反応混合物を２５℃で１５時間撹拌し、次いで飽和ＮＨ_４Ｃｌ水溶液(５mL)でクエンチし、直接Ｃ１８－フラッシュクロマトグラフィー(０～１００％ＭｅＣＮの水(０.１％ＦＡ)溶液で溶出)で精製して、(５ｓ,８ｓ)－８－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)－１－メチル－３－オキサ－１－アザスピロ[４.５]デカン－２－オン(４５mg、７２％)を赤色固体として得た。¹H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.43 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.15 (s, 1H), 4.58 - 4.67 (m, 1H), 4.21 (s, 2H), 3.87 (s, 3H), 2.58 (s, 3H), 2.35 - 2.48 (m, 2H), 1.87 - 2.12 (m, 4H), 1.40 - 1.58 (m, 2H). MS ESI, m/z = 394/396 (1:1) [M+H]⁺

【0191】

メチル６－メトキシ－２－((５ｓ,８ｓ)－１－メチル－２－オキソ－３－オキサ－１－アザスピロ[４.５]デカン－８－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキシラート

【化92】

ＭｅＯＨ(１０mL)中の(５ｓ,８ｓ)－８－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)－１－メチル－３－オキサ－１－アザスピロ[４.５]デカン－２－オン(４５mg、０.１mmol)、Ｐｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ_２(１７mg、０.０２mmol)およびＴＥＡ(２５０μL、１.８mmol)の混合物を密封容器中、ＣＯ雰囲気下、１０atmで撹拌し、次いで１００℃で１２時間加熱した。反応混合物を減圧下濃縮した。残渣をＣ１８－フラッシュクロマトグラフィー(０～１００％ＭｅＣＮの水(１％ＮＨ_４ＯＨ)溶液で溶出)で精製して、メチル６－メトキシ－２－((５ｓ,８ｓ)－１－メチル－２－オキソ－３－オキサ－１－アザスピロ[４.５]デカン－８－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキシラート(４０mg、９４％)を無色固体として得た。¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 8.60 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 4.58 - 4.69 (m, 1H), 4.22 (s, 2H), 3.83 (s, 3H), 3.79 (s, 3H), 2.58 (s, 3H), 1.91 - 2.08 (m, 8H). MS ESI, m/z = 374 [M+H]⁺

【0192】

６－メトキシ－２－((５ｓ,８ｓ)－１－メチル－２－オキソ－３－オキサ－１－アザスピロ[４.５]デカン－８－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボン酸

【化93】

メチル６－メトキシ－２－((５ｓ,８ｓ)－１－メチル－２－オキソ－３－オキサ－１－アザスピロ[４.５]デカン－８－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキシラート(３８mg、０.１mmol)のＭｅＯＨ(１mL)溶液に、２５℃でＬｉＯＨ(７mg、０.３mmol)の水(１mL)溶液を添加した。得られた溶液を２５℃で１０時間撹拌した。反応混合物のｐＨを２Ｎ ＨＣｌでｐＨ６に調節した。反応混合物を直接Ｃ１８－フラッシュクロマトグラフィー(０～１００％ＭｅＣＮの水(０.１％ＦＡ)溶液で溶出)で精製して、６－メトキシ－２－((５ｓ,８ｓ)－１－メチル－２－オキソ－３－オキサ－１－アザスピロ[４.５]デカン－８－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボン酸(３５mg、９６％)を黄色固体として得た。¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 8.53 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.02 (s, 1H), 4.58 - 4.68 (m, 1H), 4.22 (s, 2H), 3.81 (s, 3H), 2.57 (s, 3H), 1.87 - 2.16 (m, 8H). MS ESI, m/z = 360 [M+H]⁺

【0193】

６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((５ｓ,８ｓ)－１－メチル－２－オキソ－３－オキサ－１－アザスピロ[４.５]デカン－８－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド、実施例２０

【化94】

６－メトキシ－２－((５ｓ,８ｓ)－１－メチル－２－オキソ－３－オキサ－１－アザスピロ[４.５]デカン－８－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボン酸(３３ｍｇ、０.１mmol)、ＤＩＰＥＡ(１７μL、０.１mmol)およびＴ３Ｐ(５０wt.％のＥｔＯＡｃ溶液)(６２mg、０.１mmol)のＤＣＭ(０.５mL)溶液に、２５℃で、Ｎ_２雰囲気下、(６２mg、０.１mmol) ３－アミノ－１－メチルピリジン－２(１Ｈ)－オン(２４mg、０.２mmol)を添加した。得られた溶液を５０℃で１０時間撹拌した。反応混合物を減圧下濃縮し、次いで分取ＨＰＬＣ(Waters Xbridge^{(登録商標)}Shield RP18 OBD、５μm ３０×１５０mm；溶出勾配２０～３５％ＭｅＣＮの水(１０mM ＮＨ_４ＨＣＯ_３＋０.１％ＮＨ_４ＯＨ)溶液を８分間、次いで３５％を２分間；６０mL／分)で精製して、６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((５ｓ,８ｓ)－１－メチル－２－オキソ－３－オキサ－１－アザスピロ[４.５]デカン－８－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(１５mg、３５％)、実施例２０を無色固体として得た。¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 11.05 (s, 1H), 8.72 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.45 (dd, 1H), 7.44 (dd, 1H), 7.26 (s, 1H), 6.31 (t, 1H), 4.64 - 4.73 (m, 1H), 4.23 (s, 2H), 4.08 (s, 3H), 3.56 (s, 3H), 2.59 (s, 3H), 1.90 - 2.17 (m, 4H), 1.43 - 1.61 (m, 2H). MS ESI, m/z = 466 [M+H]⁺

【0194】

６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((５ｒ,８ｒ)－１－メチル－２－オキソ－３－オキサ－１－アザスピロ[４.５]デカン－８－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(実施例２１)

【化95】

６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((５ｒ,８ｒ)－１－メチル－２－オキソ－３－オキサ－１－アザスピロ[４.５]デカン－８－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミドを、(５ｒ,８ｒ)－８－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)－３－オキサ－１－アザスピロ[４.５]デカン－２－オンから、上記６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((５ｓ,８ｓ)－１－メチル－２－オキソ－３－オキサ－１－アザスピロ[４.５]デカン－８－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(実施例２０)の合成に準じて製造した。粗製６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((５ｒ,８ｒ)－１－メチル－２－オキソ－３－オキサ－１－アザスピロ[４.５]デカン－８－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミドを分取ＨＰＬＣ(YMC-Actus Triart C18 ５μm ３０×１５０mm；溶出勾配２０～５０％ＭｅＣＮの水(１０mM ＮＨ_４ＨＣＯ_３＋０.１％ＮＨ_４ＯＨ)溶液を８分間；６０mL／分)、次いで分取ＳＦＣ(DAICEL DCpak(登録商標)P4VP、５μm ３０mm×２５０mm；ＣＯ_２(３５℃、１００バール)中５０％ＩＰＡ(０.５％２Ｍ ＮＨ_３－ＭｅＯＨ)で定組成；６０mL／分)で精製して、６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((５ｒ,８ｒ)－１－メチル－２－オキソ－３－オキサ－１－アザスピロ[４.５]デカン－８－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(１０mg、４工程で１４％)、実施例２１を無色固体として得た。¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 11.04 (s, 1H), 8.58 (s, 2H), 8.45 (dd, 1H), 7.43 (dd, 1H), 7.23 (s, 1H), 6.31 (t, 1H), 4.45 - 4.61 (m, 1H), 4.27 (s, 2H), 4.06 (s, 3H), 3.56 (s, 3H), 2.71 (s, 3H), 2.09 - 2.23 (m, 2H), 1.91 - 2.09 (m, 4H), 1.62 - 1.78 (m, 2H). MS ESI, m/z = 466 [M+H]⁺

【0195】

６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１ｒ,４ｒ)－４－(２－オキソピリジン－１(２Ｈ)－イル)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(実施例２２)
ｔｅｒｔ－ブチル((１ｒ,４ｒ)－４－(２－オキソピリジン－１(２Ｈ)－イル)シクロヘキシル)カルバメート

【化96】

(１ｓ,４ｓ)－４－((ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル)アミノ)シクロヘキシル４－メチルベンゼンスルホネート(１.０ｇ、２.７mmol)およびＣｓ_２ＣＯ_３(２.７ｇ、８.１mmol)のＴＨＦ(３０mL)溶液に、ピリジン－２(１Ｈ)－オン(０.５ｇ、５.４mmol)を添加した。反応混合物を９０℃で２４時間撹拌し、次いで水(３００mL)でクエンチし、ＥｔＯＡｃ(３００mL×２)で抽出した。有機層を減圧下濃縮した。残渣をＣ１８－フラッシュクロマトグラフィー(０～７０％ＭｅＣＮの水(０.１％ＮＨ_４ＯＨ)溶液で溶出)で精製して、ｔｅｒｔ－ブチル((１ｒ,４ｒ)－４－(２－オキソピリジン－１(２Ｈ)－イル)シクロヘキシル)カルバメート(２０５mg、２６％)を無色固体として得た。¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 7.70 (dd, 1H), 7.34 (ddd, 1H), 6.77 (d, 1H), 6.34 (dd, 1H), 6.21 (td,), 4.60 (tt, 1H), 3.23 - 3.41 (m, 1H), 1.80 - 1.95 (m, 2H), 1.56 - 1.78 (m, 4H), 1.37 (s, 11H). MS ESI, m/z = 293 [M+H]⁺

【0196】

１－((１ｒ,４ｒ)－４－アミノシクロヘキシル)ピリジン－２(１Ｈ)－オン

【化97】

ｔｅｒｔ－ブチル((１ｒ,４ｒ)－４－(２－オキソピリジン－１(２Ｈ)－イル)シクロヘキシル)カルバメート(２００mg、０.７mmol)のＤＣＭ(５mL)溶液に、４Ｎ ＨＣｌジオキサン溶液(１.７mL、６.８mmol)を添加した。得られた混合物を２５℃で５時間撹拌した。反応混合物を減圧下濃縮して、１－((１ｒ,４ｒ)－４－アミノシクロヘキシル)ピリジン－２(１Ｈ)－オン(１５６mg、１００％)のＨＣｌ塩を薄黄色固体として得て、それをさらに精製することなく使用した。¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 7.68 (dd, 1H), 7.36 (ddd, 1H), 6.36 (dd, 1H), 6.24 (td, 1H), 5.88 (br. s, 2H), 4.64 (p, 8 1H), 2.92 - 3.14 (m, 1H), 1.99 - 2.13 (m, 2H), 1.66 - 1.87 (m, 4H), 1.39 - 1.63 (m, 2H). MS ESI, m/z = 193 [M+H]⁺

【0197】

１－((１ｒ,４ｒ)－４－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)シクロヘキシル)ピリジン－２(１Ｈ)－オン

【化98】

１－((１ｒ,４ｒ)－４－アミノシクロヘキシル)ピリジン－２(１Ｈ)－オン(１４５mg、０.６mmol)およびＴＥＡ(１９２mg、１.９mmol)のｉ－ＰｒＯＨ(５mL)溶液に、５－ブロモ－４－メトキシ－２－ニトロベンズアルデヒドのＨＣｌ塩(Ｉｎｔ １)(１６５mg、０.６mmol)を２５℃で、Ｎ_２雰囲気下、添加した。得られた混合物を８０℃で１時間撹拌し、次いでｒｔに冷却し、続いてトリ－ｎ－ブチルホスフィン(３８５mg、１.９mmol)を添加した。反応混合物を８０℃で１３時間撹拌し、次いで減圧下濃縮した。残渣をＣ１８－フラッシュクロマトグラフィー(０～１００％ＭｅＣＮの水(０.１％ＮＨ_４ＯＨ)溶液で溶出)で精製して、所望の生成物およびトリ－ｎ－ブチルホスフィンの混合物を得た。混合物を次いでＰＥ(２５mL)で洗浄して、１－((１ｒ,４ｒ)－４－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)シクロヘキシル)ピリジン－２(１Ｈ)－オン(１７０mg、６７％)を薄黄色固体として得た。¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 8.35 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.77 (dd, 1H), 7.39 (ddd, 1H), 7.12 (s, 1H), 6.40 (dd, 1H), 6.28 (td, 1H), 4.79 - 4.93 (m, 1H), 4.48 - 4.62 (m, 1H), 3.87 (s, 3H), 2.19 - 2.32 (m, 2H), 1.82 - 2.19 (m, 6H). MS ESI, m/z = 402/404 [M+H]⁺

【0198】

メチル６－メトキシ－２－((１ｒ,４ｒ)－４－(２－オキソピリジン－１(２Ｈ)－イル)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキシラート

【化99】

ＭｅＯＨ(１０mL)中の１－((１ｒ,４ｒ)－４－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)シクロヘキシル)ピリジン－２(１Ｈ)－オン(１５０mg、０.４mmol)、ＴＥＡ(５２０μL、３.７mmol)およびＰｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ_２－ＣＨ_２Ｃｌ_２(４６mg、０.０６mmol)の混合物を、密封容器中、ＣＯ雰囲気下に１５atmで撹拌し、次いで１１０℃で１５時間加熱した。反応混合物を減圧下濃縮した。残渣をＣ１８－フラッシュクロマトグラフィー(０～１００％ＭｅＣＮの水(０.１％ＮＨ_４ＯＨ)溶液で溶出)で精製して、メチル６－メトキシ－２－((１ｒ,４ｒ)－４－(２－オキソピリジン－１(２Ｈ)－イル)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキシラート(１２０mg、８４％)を無色固体として得た。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.52 (d, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.77 (dd, 1H), 7.39 (ddd, 1H), 7.06 (s, 1H), 6.41 (dd, 1H), 6.28 (td, 1H), 4.82 - 4.92 (m, 1H), 4.52 - 4.61 (m, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.79 (s, 3H), 2.22 - 2.31 (m, 2H), 2.05 - 2.18 (m, 2H), 1.84 - 2.05 (m, 4H). MS ESI, m/z = 382 [M+H]⁺

【0199】

６－メトキシ－２－((１ｒ,４ｒ)－４－(２－オキソピリジン－１(２Ｈ)－イル)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボン酸

【化100】

メチル６－メトキシ－２－((１ｒ,４ｒ)－４－(２－オキソピリジン－１(２Ｈ)－イル)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキシラート(１１５mg、０.３mmol)のＭｅＯＨ／水(２：１、７.５mL)溶液に、ＬｉＯＨ(２２mg、０.９mmol)を添加した。得られた混合物を２５℃で１２時間撹拌した。反応混合物を２Ｎ ＨＣｌでｐＨ６に酸性化し、次いで直接Ｃ１８－フラッシュクロマトグラフィー(０～７０％ＭｅＣＮの水(０.１％ＦＡ)溶液で溶出)で精製して、６－メトキシ－２－((１ｒ,４ｒ)－４－(２－オキソピリジン－１(２Ｈ)－イル)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボン酸(１０９mg、９８％)を無色固体として得た。¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 8.49 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.78 (dd, 1H), 7.39 (ddd, 1H), 7.03 (s, 1H), 6.41 (dd, 1H), 6.28 (td, 1H), 4.80 - 4.94 (m, 1H), 4.50 - 4.62 (m, 1H), 3.82 (s, 3H), 2.20 - 2.33 (m, 2H), 1.82 - 2.20 (m, 6H). MS ESI, m/z = 368 [M+H]⁺

【0200】

６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１ｒ,４ｒ)－４－(２－オキソピリジン－１(２Ｈ)－イル)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド、実施例２２

【化101】

６－メトキシ－２－((１ｒ,４ｒ)－４－(２－オキソピリジン－１(２Ｈ)－イル)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボン酸(１００mg、０.３mmol)およびＤＩＰＥＡ(１９０μL、１.１mmol)のＤＭＦ(３mL)溶液に、ＨＡＴＵ(１３５mg、０.４mmol)を２５℃で、Ｎ_２雰囲気下、添加した。得られた混合物を２５℃で５分間撹拌し、続いて３－アミノ－１－メチルピリジン－２(１Ｈ)－オン塩酸塩(８７mg、０.５mmol)を添加した。反応混合物を２５℃で１２時間撹拌した。混合物を直接Ｃ１８－フラッシュクロマトグラフィー(０～７０％ＭｅＣＮの水(０.１％ＨＣｌ)溶液で溶出)、さらに分取ＨＰＬＣ(Waters Xbridge^{(登録商標)}BEH OBD C18 ５μm ３０×１５０mm；溶出勾配１５～４５％ＭｅＣＮの水(１０mM ＮＨ_４ＨＣＯ_３＋０.１％ＮＨ_４ＯＨ)溶液を８分間、次いで４５％ＭｅＣＮの水(１０mM ＮＨ_４ＨＣＯ_３＋０.１％ＮＨ_４ＯＨ)溶液で定組成溶出；６０mL／分)で精製して、６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－((１ｒ,４ｒ)－４－(２－オキソピリジン－１(２Ｈ)－イル)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(９３mg、７２％)、実施例２２を無色固体として得た。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 11.05 (s, 1H), 8.64 (d, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.45 (dd, 1H), 7.78 (dd, 1H), 7.36 - 7.47 (m, 2H), 7.23 (s, 1H), 6.41 (dd, 1H), 6.26 - 6.34 (m, 2H), 4.83 - 4.93 (m, 1H), 4.55 - 4.65 (m, 1H), 4.07 (s, 3H), 3.56 (s, 3H), 2.23 - 2.35 (m, 2H), 2.14 (qd, 2H), 1.86 - 2.07 (m, 4H). MS ESI, m/z = 474 [M+H]⁺

【0201】

６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－(４－(ピリダジン－３－イル)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド － 異性体１(実施例２３)および異性体２(実施例２４)
ｔｅｒｔ－ブチル(４－(ピリダジン－３－イル)シクロヘキシ－３－エン－１－イル)カルバメート

【化102】

ｔｅｒｔ－ブチル(４－(４,４,５,５－テトラメチル－１,３,２－ジオキサボロラン－２－イル)シクロヘキシ－３－エン－１－イル)カルバメート(２.０ｇ、６.２mmol)、３－クロロピリダジン(９２１mg、８.０mmol)、Ｐｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ_２－ＣＨ_２Ｃｌ_２(１.０ｇ、１.２mmol)およびＫ_２ＣＯ_３(２.６ｇ、１８.６mmol)の１,４－ジオキサン(３０mL)懸濁液を８０℃で３時間加熱した。反応混合物をＥｔＯＡｃ(５０mL×２)で抽出し、有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮して、褐色油状物を得た。残渣をシリカゲルクロマトグラフィー(１００％ＥｔＯＡｃで溶出)で精製して、ｔｅｒｔ－ブチル(４－(ピリダジン－３－イル)シクロヘキシ－３－エン－１－イル)カルバメート(１.７ｇ、９７％)を黄色油状物として得た。¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 9.07 (dd, 1H), 7.86 (dd, 1H), 7.61 (dd, 1H), 6.89 (d, 1H), 6.63 - 6.73 (m, 1H), 3.50 - 3.66 (m, 1H), 2.73 - 2.88 (m, 1H), 2.42 - 2.64 (m, 2H), 2.07 - 2.24 (m, 1H), 1.89 - 2.03 (m, 1H), 1.50 - 1.66 (m, 1H), 1.40 (s, 9H). MS ESI, m/z = 276 [M+H]⁺

【0202】

ｔｅｒｔ－ブチル(４－(ピリダジン－３－イル)シクロヘキシル)カルバメート

【化103】

１０wt.％パラジウム／炭素(０.６ｇ、０.６mmol)およびｔｅｒｔ－ブチル(４－(ピリダジン－３－イル)シクロヘキシ－３－エン－１－イル)カルバメート(１.６ｇ、５.６mmol)のＥｔＯＡｃ(３０mL)懸濁液を、２５℃で、１atmのＨ_２下、２時間撹拌した。反応混合物をシリカゲルで濾過し、濾液を減圧下濃縮して、ｔｅｒｔ－ブチル(４－(ピリダジン－３－イル)シクロヘキシル)カルバメート(１.６ｇ、１００％)を褐色油状物として得て、それをさらに精製することなく使用した。¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆)(立体異性体混合物) δ 9.02 - 9.12 (m, 1H), 7.57 - 7.74 (m, 2H), 6.95/6.80 (d, 1H)(立体異性体), 3.61 - 3.78/3.23 - 3.38 (m, 1H)(立体異性体), 2.72 - 3.01 (m, 1H)(立体異性体), 1.82 - 1.97 (m, 2H), 1.52 - 1.77 (m, 4H), 1.22 - 1.47 (m, 11H). MS ESI, m/z = 278 [M+H]⁺

【0203】

４－(ピリダジン－３－イル)シクロヘキサン－１－アミン

【化104】

ＭｅＯＨ(２５mL)中のｔｅｒｔ－ブチル(４－(ピリダジン－３－イル)シクロヘキシル)カルバメート(５００mg、１.８mmol)および２Ｎ ＨＣｌジオキサン溶液(９.０mL、１８.０mmol)の混合物を２５℃で３時間撹拌した。次いで、反応混合物を減圧下濃縮して、４－(ピリダジン－３－イル)シクロヘキサン－１－アミン(６００mg、定量的収率、６４wt.％)のＨＣｌ塩を褐色油状物として得て、それをさらに精製することなく使用した。¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆)(立体異性体混合物) δ 9.31 - 9.54 (m, 1H), 8.18 - 8.35 (m, 2H), 3.39 - 3.46/3.18 - 3.32 (m, 1H)(立体異性体), 2.98 - 3.14 (m, 1H), 2.08 - 2.34 (m, 2H), 1.86 - 2.08 (m, 2H), 1.64 - 1.86 (m, 3H), 1.45 - 1.64 (m, 1H). MS ESI, m/z = 178 [M+H]⁺

【0204】

５－ブロモ－６－メトキシ－２－(４－(ピリダジン－３－イル)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール

【化105】

５－ブロモ－４－メトキシ－２－ニトロベンズアルデヒド(Ｉｎｔ １)(４９８mg、１.９mmol)およびＴＥＡ(１.２mL、８.７mmol)のｉ－ＰｒＯＨ(２０mL)溶液に、４－(ピリダジン－３－イル)シクロヘキサン－１－アミンのＨＣｌ塩(６４wt.％)(５８０mg、１.７mmol)を、Ｎ_２雰囲気下、添加した。得られた混合物を８０℃で３時間撹拌し、次いでｒｔに冷却し、続いてトリ－ｎ－ブチルホスフィン(１.７mL、７.０mmol)を添加した。反応混合物を８０℃で１１時間撹拌し、次いで減圧下濃縮した。残渣をＣ１８－フラッシュクロマトグラフィー(０～１００％ＭｅＣＮの水(０.１％ＦＡ)溶液で溶出)で精製して、５－ブロモ－６－メトキシ－２－(４－(ピリダジン－３－イル)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール(１.１ｇ、定量的収率、６０wt.％)を褐色油状物として得て、それをさらに精製することなく使用した。¹H NMR (400MHz, DMSO-d₆)(立体異性体混合物) δ 9.10/9.08 (dd, 1H)(立体異性体), 8.35/8.54 (s, 1H)(立体異性体), 7.98/7.95 (s, 1H)(立体異性体), 7.64 - 7.67/7.60 - 7.63 (m, 2H)(立体異性体), 7.14/7.13 (s, 1H)(立体異性体), 4.63 - 4.72/4.51 - 4.63 (m, 1H)(立体異性体), 3.87/3.85 (s, 3H)(立体異性体), 3.16 - 3.26/2.99 - 3.11 (m, 1H)(立体異性体), 2.31 - 2.45 (m, 1H), 2.21 - 2.30 (m, 1H), 1.98 - 2.21 (m, 4H), 1.79 - 1.97 (m, 2H). MS ESI, m/z = 387/389 (1:1) [M+H]⁺

【0205】

メチル６－メトキシ－２－(４－(ピリダジン－３－イル)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキシラート

【化106】

５－ブロモ－６－メトキシ－２－(４－(ピリダジン－３－イル)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール(６０wt.％)(１.１ｇ、１.７mmol)、ＴＥＡ(２.７ｇ、２７.０mmol)およびＰｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ_２－ＣＨ_２Ｃｌ_２(４４１mg、０.５mmol)の混合物を、密封容器中、ＣＯ雰囲気下に１５atmで撹拌し、次いで１１０℃で１５時間加熱した。反応混合物を減圧下濃縮し、残渣をＣ１８－フラッシュクロマトグラフィー(０～１００％ＭｅＣＮの水(０.０５％ＦＡ)溶液で溶出)で精製して、メチル６－メトキシ－２－(４－(ピリダジン－３－イル)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキシラート(３１５mg、４９％)を褐色固体として得た。¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆)(立体異性体混合物) δ 9.06 - 9.13 (m, 1H), 8.5 - 8.55 (m, 1H), 8.09 - 8.16 (m, 1H), 7.61 - 7.68 (m, 2H), 7.08 (s, 1H), 4.66 - 4.75/4.52 - 4.66 (m, 1H)(立体異性体), 3.76 - 3.85 (m, 6H), 3.28 - 3.13/2.97 - 3.13 (m, 1H)(立体異性体), 1.81 - 2.33 (m, 8H). MS ESI, m/z = 367 [M+H]⁺

【0206】

６－メトキシ－２－(４－(ピリダジン－３－イル)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボン酸

【化107】

メチル６－メトキシ－２－(４－(ピリダジン－３－イル)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキシラート(２９５mg、０.８mmol)のＴＨＦ／水(１：１、３０mL)溶液に、ＬｉＯＨ(１９３mg、８.１mmol)を添加した。得られた混合物を２５℃で３時間撹拌した。次いで、反応混合物を２Ｎ ＨＣｌでｐＨ６に酸性化し、ＥｔＯＡｃ(５０mL×２)で抽出した。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、減圧下濃縮した。残渣をＣ１８－フラッシュクロマトグラフィー(０～１００％ＭｅＣＮの水(０.１％ＦＡ)溶液で溶出)で精製して、６－メトキシ－２－(４－(ピリダジン－３－イル)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボン酸(１５０mg、５３％)を黄色固体として得た。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆)(1:1 立体異性体混合物) δ 9.11/9.08 (dd, 1H)(立体異性体), 8.43/8.42 (s, 1H)(立体異性体), 8.38 (br. s, 1H), 7.92/7.90 (s, 1H)(立体異性体), 7.58 - 7.70 (m, 2H), 6.99 (s, 1H), 4.63 - 4.73/4.51 - 4.62 (m, 1H)(立体異性体), 3.80/3.78 (s, 3H)(立体異性体), 3.17 - 3.26/3.01 - 3.11 (m, 1H)(立体異性体), 2.35 - 2.46 (m, 1H), 2.22 - 2.32 (m, 1H), 2.00 - 2.20 (m, 4H), 1.82 - 1.97 (m, 2H). MS ESI, m/z = 353 [M+H]⁺

【0207】

６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－(４－(ピリダジン－３－イル)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド － 異性体１、実施例２３および異性体２、実施例２４

【化108】

６－メトキシ－２－(４－(ピリダジン－３－イル)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボン酸(１３０mg、０.４mmol)、ＤＩＰＥＡ(３２２μL、１.８mmol)および３－アミノ－１－メチルピリジン－２(１Ｈ)－オン塩酸塩(５９mg、０.４mmol)のＤＭＦ(１０mL)溶液に、ＨＡＴＵ(４２１mg、１.１mmol)を２５℃で、Ｎ_２雰囲気下、添加した。反応混合物を２５℃で１５時間撹拌した。混合物を直接Ｃ１８－フラッシュクロマトグラフィー(０～１００％ＭｅＣＮの水(０.１％ＦＡ)溶液で溶出)で精製し、さらにキラル分取ＨＰＬＣ(Chiralpak^{(登録商標)}IF、５μm ２０mm×２５０mm；２６分間ＭｅＯＨ中５０％ＭＴＢＥ(０.５％２Ｍ ＮＨ_３－ＭｅＯＨ溶液)で定組成；２０.０mL／分)で分離して、６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－(４－(ピリダジン－３－イル)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド － 異性体１(１０.６mg、６％)および６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２－(４－(ピリダジン－３－イル)シクロヘキシル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド － 異性体２(１５.１mg、９％)を両方無色固体として得た。異性体１、実施例２３：¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 11.04 (s, 1H), 9.09 (dd, 1H), 8.65 (s, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.45 (dd, 1H), 7.70 - 7.58 (m, 2H), 7.43 (dd, 1H), 7.25 (s, 1H), 6.31 (d, 1H), 4.70 - 4.80 (m, 1H), 4.06 (s, 3H), 3.56 (s, 3H), 3.18 - 3.28 (m, 1H), 2.35 - 2.47 (m, 2H), 2.23 - 2.03 (m, 4H), 1.88 - 2.00 (m, 2H). MS ESI, m/z = 459 [M+H]⁺. 異性体2, 実施例24:¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 11.05 (s, 1H), 9.11 (dd, 1H), 8.63 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.46 (dd, 1H), 7.63 - 7.73 (m, 2H), 7.44 (dd, 1H), 7.24 (s, 1H), 6.31 (t, 1H), 4.58 - 4.68 (m, 1H), 4.08 (s, 3H), 3.56 (s, 3H), 3.02 - 3.12 (m, 1H), 2.26 - 2.35 (m, 2H), 2.06 - 2.21 (m, 4H), 1.84 - 1.98 (m, 2H). MS ESI, m/z = 459 [M+H]⁺

【0208】

２－((１ｒ,４ｒ)－４－(１,３,４－オキサジアゾール－２－イル)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(実施例２５)
ベンジル((１ｒ,４ｒ)－４－(ヒドラジンカルボニル)シクロヘキシル)カルバメート

【化109】

(１ｒ,４ｒ)－４－(((ベンジルオキシ)カルボニル)アミノ)シクロヘキサン－１－カルボン酸(３.０ｇ、１０.８mmol)のＴＨＦ(１００mL)溶液に、ＣＤＩ(２.２ｇ、１３.５mmol)を一度に添加した。得られた溶液を２５℃で１５時間撹拌した。その後、ヒドラジン一水和物(２.２ｇ、４３.３mmol)を上記溶液に添加した。得られた混合物を２５℃で１時間撹拌した。沈殿を濾過により集め、ＥｔＯＡｃ／ＰＥ(１：２、１５０mL)で洗浄し、次いで減圧下乾燥させて、ベンジル((１ｒ,４ｒ)－４－(ヒドラジンカルボニル)シクロヘキシル)カルバメート(２.３ｇ、７３％)を無色固体として得て、それをさらに精製することなく使用した。¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 8.91 (s, 1H), 7.26 - 7.44 (m, 5H), 7.16 - 7.24 (m, 1H), 5.00 (s, 2H), 3.11 - 3.31 (m, 1H), 1.89 - 2.04 (m, 1H), 1.67 - 1.89 (m, 4H), 1.38 - 1.67 (m, 2H), 1.00 - 1.38 (m, 2H). MS ESI, m/z = 292 [M+H]⁺

【0209】

ベンジル((１ｒ,４ｒ)－４－(１,３,４－オキサジアゾール－２－イル)シクロヘキシル)カルバメート

【化110】

ベンジル((１ｒ,４ｒ)－４－(ヒドラジンカルボニル)シクロヘキシル)カルバメート(２.１ｇ、７.２mmol)およびトリメトキシメタン(１９.１ｇ、１８０.２mmol)の混合物に、４－メチルベンゼンスルホン酸(２４８mg、１.４mmol)を添加した。得られた混合物を９０℃で２時間撹拌した。反応混合物を直接Ｃ１８フラッシュクロマトグラフィー(５～８０％ＭｅＣＮの水(０.０５％ＦＡ)溶液で溶出)で精製して、ベンジル((１ｒ,４ｒ)－４－(１,３,４－オキサジアゾール－２－イル)シクロヘキシル)カルバメート(１.５ｇ、７０％)を無色固体として得た。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 9.13 (s, 1H), 7.26 - 7.43 (m, 6H), 5.02 (s, 2H), 3.25 - 3.80 (m, 1H), 2.90 (tt, 1H), 2.00 - 2.15 (m, 2H), 1.80 - 2.00 (m, 2H), 1.45 - 1.63 (m, 2H), 1.20 - 1.45 (m, 2H). MS ESI, m/z = 302 [M+H]⁺

【0210】

(１ｒ,４ｒ)－４－(１,３,４－オキサジアゾール－２－イル)シクロヘキサン－１－アミン

【化111】

１０wt.％パラジウム／炭素(４７０mg、０.４mmol)およびベンジル((１ｒ,４ｒ)－４－(１,３,４－オキサジアゾール－２－イル)シクロヘキシル)カルバメート(１.３ｇ、４.４mmol)のＭｅＯＨ(６０mL)懸濁液を、５０℃で、１atmの水素下、２時間撹拌した。反応混合物を次いでセライトで濾過した。濾液を減圧下濃縮して、(１ｒ,４ｒ)－４－(１,３,４－オキサジアゾール－２－イル)シクロヘキサン－１－アミン(６８０mg、９２％)を無色固体として得た。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 9.10 (s, 1H), 2.80 - 2.95 (m, 1H), 2.51 - 2.61 (m, 1H), 1.06 - 2.18 (m, 8H)). MS ESI, m/z = 168 [M+H]⁺

【0211】

２－((１ｒ,４ｒ)－４－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)シクロヘキシル)－１,３,４－オキサジアゾール

【化112】

(１ｒ,４ｒ)－４－(１,３,４－オキサジアゾール－２－イル)シクロヘキサン－１－アミン(６４０mg、３.８mmol)のｉ－ＰｒＯＨ(１００mL)溶液に、５－ブロモ－４－メトキシ－２－ニトロベンズアルデヒド(Ｉｎｔ １)(１.１ｇ、４.２mmol)を、Ｎ_２雰囲気下、添加した。得られた混合物を８０℃で３時間撹拌し、次いでｒｔに冷却し、続いてトリ－ｎ－ブチルホスフィン(３.８mL、１５.３mmol)を添加した。反応混合物を８０℃で１１時間撹拌し、次いで減圧下濃縮した。残渣をＣ１８フラッシュクロマトグラフィー(０～１００％ＭｅＣＮの水(０.１％ＮＨ_４ＯＨ)溶液で溶出)、さらにＰＥ(５０mL)からの結晶化により精製して、２－((１ｒ,４ｒ)－４－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)シクロヘキシル)－１,３,４－オキサジアゾール(６４０mg、４４％)を褐色固体として得た。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 9.18 (s, 1H), 8.30 (d, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.11 (s, 1H), 4.55 (tt, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.08 - 3.17 (m, 1H), 2.17 - 2.28 (m, 4H), 2.07 (qd, 2H), 1.77 (qd, 2H). MS ESI, m/z = 377/379 (1:1) [M+H]⁺

【0212】

メチル２－((１ｒ,４ｒ)－４－(１,３,４－オキサジアゾール－２－イル)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキシラート

【化113】

ＭｅＯＨ(１０mL)中の２－((１ｒ,４ｒ)－４－(５－ブロモ－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－２－イル)シクロヘキシル)－１,３,４－オキサジアゾール(３００mg、０.８mmol)、Ｐｄ(ｄｐｐｆ)Ｃｌ_２－ＣＨ_２Ｃｌ_２(１３０mg、０.２mmol)およびＤＩＰＥＡ(６９４μL、４.０mmol)の混合物を、密封容器中、ＣＯ雰囲気下に１５atmで撹拌し、次いで１１０℃で１２時間加熱した。反応混合物を直接Ｃ１８フラッシュクロマトグラフィー(０～１００％ＭｅＣＮの水(０.１％ＮＨ_４ＯＨ)溶液で溶出)で精製して、メチル２－((１ｒ,４ｒ)－４－(１,３,４－オキサジアゾール－２－イル)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキシラート(２４０mg、８５％)を明黄色固体として得た。¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 9.18 (s, 1H), 8.47 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.07 (s, 1H), 4.50 - 4.64 (m, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.79 (s, 3H), 3.07 - 3.21 (m, 1H), 2.18 - 2.35 (m, 4H), 1.99 - 2.18 (m, 2H), 1.70-1.88 (m, 2H). MS ESI, m/z = 357 [M+H]⁺

【0213】

２－((１ｒ,４ｒ)－４－(１,３,４－オキサジアゾール－２－イル)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボン酸

【化114】

メチル２－((１ｒ,４ｒ)－４－(１,３,４－オキサジアゾール－２－イル)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキシラート(２３５mg、０.７mmol)のＭｅＯＨ／水(２：１、７.５mL)溶液に、ＬｉＯＨ(４０mg、１.７mmol)を添加した。得られた溶液を２５℃で５時間撹拌した。次いで、反応混合物のｐＨを０.１Ｎ ＨＣｌでｐＨ３～４に調節した。得られた沈殿を濾過により集め、減圧下乾燥させて、２－((１ｒ,４ｒ)－４－(１,３,４－オキサジアゾール－２－イル)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボン酸(１５５mg、６９％)を薄黄色固体として得て、それをさらに精製することなく使用した。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 12.24 (br. s, 1H), 9.17 (s, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.03 (s, 1H), 4.56 (tt, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.06 - 3.16 (m, 1H), 2.16 - 2.3 (m, 4H), 2.01 - 2.16 (m, 2H), 1.71 - 1.84 (m, 2H). MS ESI, m/z = 343 [M+H]⁺

【0214】

２－((１ｒ,４ｒ)－４－(１,３,４－オキサジアゾール－２－イル)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド、実施例２５

【化115】

２－((１ｒ,４ｒ)－４－(１,３,４－オキサジアゾール－２－イル)シクロヘキシル)－６－メトキシ－２Ｈ－インダゾール－５－カルボン酸(１３５mg、０.４mmol)、ＨＡＴＵ(２２５mg、０.６mmol)およびＤＩＰＥＡ(２０７μL、１.２mmol)のＤＭＦ(５mL)溶液に、３－アミノ－１－メチルピリジン－２(１Ｈ)－オン塩酸塩(１２７mg、０.８mmol)を添加した。反応混合物を２５℃で、Ｎ_２雰囲気下、１０時間撹拌した。混合物を直接分取ＨＰＬＣ(Xbridge^{(登録商標)}BEH OBD C18 ５μm ３０×１５０mm；溶出勾配１９～３９％ＭｅＣＮの水(１０mM ＮＨ_４ＨＣＯ_３＋０.１％ＮＨ_４ＯＨ)溶液を８分間；６０mL／分)で精製して、２－((１ｒ,４ｒ)－４－(１,３,４－オキサジアゾール－２－イル)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(１０５mg、５９％)、実施例２５を無色固体として得た。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 11.05 (s, 1H), 9.18 (s, 1H), 8.59 (s, 2H), 8.45 (dd, 1H), 7.43 (dd, 1H), 7.23 (s, 1H), 6.31 (t, 1H), 4.55 - 4.66 (m, 1H), 4.07 (s, 3H), 3.56 (s, 3H), 3.09 - 3.20 (m, 1H), 2.20 - 2.31 (m, 4H), 2.03 - 2.18 (m, 2H), 1.73 - 1.87 (m, 2H). MS ESI, m/z = 449 [M+H]⁺

【0215】

２－((１ｒ,４ｒ)－４－(１Ｈ－１,２,４－トリアゾール－１－イル)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(実施例２６)

【化116】

(１ｓ,４ｓ)－４－(６－メトキシ－５－((１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)カルバモイル)－２Ｈ－インダゾール－２－イル)シクロヘキシルメタンスルホネート(Ｉｎｔ ８)(４００mg、０.８mmol)および４Ｈ－１,２,４－トリアゾール(１.２ｇ、１６.９mmol)のトルエン(５mL)溶液に、Ｃｓ_２ＣＯ_３(８２４mg、２.５mmol)を添加した。得られた混合物を９０℃で１５時間撹拌し、次いで減圧下濃縮した。残渣を直接Ｃ１８－フラッシュクロマトグラフィー(０～１００％ＭｅＣＮの水(０.１％ＮＨ_４ＯＨ)溶液で溶出)、さらに分取ＨＰＬＣ(Xbridge^{(登録商標)}BEH OBD C18 ５μm ３０×１５０mm；溶出勾配１５～３５％ＭｅＣＮの水(１０mM ＮＨ_４ＨＣＯ_３＋０.１％ＮＨ_４ＯＨ)溶液を８分間、次いで３５％ＭｅＣＮの水(１０mM ＮＨ_４ＨＣＯ_３＋０.１％ＮＨ_４ＯＨ)溶液で定組成溶出；６０mL／分)で精製して、２－((１ｒ,４ｒ)－４－(１Ｈ－１,２,４－トリアゾール－１－イル)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(３４mg、９％)、実施例２６を無色固体として得た。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 11.05 (s, 1H), 8.56 - 8.63 (m, 3H), 8.45 (dd, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.43 (dd, 1H), 7.23 (s, 1H), 6.31 (t, 1H), 4.57 - 4.72 (m, 1H), 4.42 - 4.56 (m, 1H), 4.07 (s, 3H), 3.56 (s, 3H), 2.21 - 2.31 (m, 4H), 2.09 - 2.20 (m, 2H), 1.96 - 2.09 (m, 2H). MS ESI, m/z = 448 [M+H]⁺

【0216】

２－((１ｒ,４ｒ)－４－(１Ｈ－１,２,３－トリアゾール－１－イル)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(実施例２７)

【化117】

(１ｓ,４ｓ)－４－(６－メトキシ－５－((１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)カルバモイル)－２Ｈ－インダゾール－２－イル)シクロヘキシルメタンスルホネート(Ｉｎｔ ８)(７４wt.％)(５００mg、０.８mmol)およびＣｓ_２ＣＯ_３(９１４mg、２.８mmol)のＤＭＦ(５mL)懸濁液に、１Ｈ－１,２,３－トリアゾール(１.０ｇ、１４.８mmol)。得られた混合物を９０℃で２時間撹拌した。反応混合物を直接Ｃ１８－フラッシュクロマトグラフィー(０～１００％ＭｅＣＮの水(０.１％ＦＡ)溶液で溶出)、さらに分取ＨＰＬＣ(Xbridge^{(登録商標)}BEH OBD C18 ５μm ３０×１５０mm；溶出勾配２０～３５％ＭｅＣＮの水(１０mM ＮＨ_４ＨＣＯ_３＋０.１％ＮＨ_４ＯＨ)溶液を８分間；６０mL／分)で精製して、２－((１ｒ,４ｒ)－４－(１Ｈ－１,２,３－トリアゾール－１－イル)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(２０mg、４４％)、実施例２７を無色固体として得た。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 11.05 (s, 1H), 8.62 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.45 (dd, 1H), 8.24 (d, 1H), 7.76 (d, 1H), 7.44 (dd, 1H), 7.24 (s, 1H), 6.31 (t, 1H), 4.60 - 4.77 (m, 2H), 4.07 (s, 3H), 3.56 (s, 3H), 2.04 - 2.34 (m, 8H). MS ESI, m/z = 448 [M+H]⁺

【0217】

２－((１ｒ,４ｒ)－４－(２－(１－ヒドロキシエチル)－１Ｈ－イミダゾール－１－イル)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド － 異性体１(実施例２８)および異性体２(実施例２９)
２－((１ｒ,４ｒ)－４－(２－アセチル－１Ｈ－イミダゾール－１－イル)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド

【化118】

(１ｓ,４ｓ)－４－(６－メトキシ－５－((１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)カルバモイル)－２Ｈ－インダゾール－２－イル)シクロヘキシルメタンスルホネート(Ｉｎｔ ８)(５００mg、１.１mmol)および１－(１Ｈ－イミダゾール－２－イル)エタン－１－オン(２.３ｇ、２１.１mmol)のキシレン(１０mL)溶液に、Ｃｓ_２ＣＯ_３(１.０ｇ、３.２mmol)を、Ｎ_２雰囲気下添加した。得られた混合物を１２０℃で４時間撹拌した。次いで、反応混合物を減圧下濃縮した。残渣をＣ１８－フラッシュクロマトグラフィー(０～１００％ＭｅＣＮの水(０.１％ＮＨ_４ＯＨ)溶液で溶出)で精製して、２－((１ｒ,４ｒ)－４－(２－アセチル－１Ｈ－イミダゾール－１－イル)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(６０mg、１２％)を褐色固体として得た。¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 11.05 (s, 1H), 8.64 (d, 1H), 8.58 (s, 1H), 8.45 (dd, 1H), 7.78 (d, 1H), 7.43 (dd, 1H), 7.23 (s, 1H), 7.18 (d, 1H), 6.31 (t, 1H), 5.11 - 5.32 (m, 1H), 4.51 - 4.70 (m, 1H), 4.07 (s, 3H), 3.56 (s, 3H), 2.58 (s, 3H), 2.21 - 2.39 (m, 2H), 1.90 - 2.21 (m, 6H). MS ESI, m/z = 489 [M+H]⁺

【0218】

２－((１ｒ,４ｒ)－４－(２－(１－ヒドロキシエチル)－１Ｈ－イミダゾール－１－イル)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド － 異性体１、実施例２８および異性体２、実施例２９

【化119】

２－((１ｒ,４ｒ)－４－(２－アセチル－１Ｈ－イミダゾール－１－イル)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(５５mg、０.１mmol)のＭｅＯＨ(５mL)溶液に、Ｎ_２雰囲気下、ｒｔでＮａＢＨ_４(９mg、０.２mmol)を添加した。得られた混合物をｒｔで１時間撹拌し、次いで減圧下濃縮した。残渣をＣ１８－フラッシュクロマトグラフィー(０～１００％ＭｅＣＮの水(０.１％ＮＨ_４ＯＨ)溶液で溶出)で精製し、次いで分取キラル－ＨＰＬＣ(YMC CHIRAL ART Cellulose-SC ５μm ２０mm×２５０mm；２０％ヘキサン／ＤＣＭ(１／１)(０.５％２Ｍ ＮＨ_３－ＭｅＯＨ)のＩＰＡ溶液で定組成；２０mL／分)で分離して、２－((１ｒ,４ｒ)－４－(２－(１－ヒドロキシエチル)－１Ｈ－イミダゾール－１－イル)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド － 異性体１(１５mg、２７％；１００％ｅｅ)および２－((１ｒ,４ｒ)－４－(２－(１－ヒドロキシエチル)－１Ｈ－イミダゾール－１－イル)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド － 異性体２(１４mg、２５％；９８.３％ｅｅ)を両方無色固体として得た。

【0219】

異性体１、実施例２８：¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 11.04 (s, 1H), 8.61 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.45 (dd, 1H), 7.43 (dd, 1H), 7.28 (d, 1H), 7.22 (s, 1H), 6.81 (d, 1H), 6.31 (t, 1H), 5.31 (d, 1H), 4.89 (p, 1H), 4.48 - 4.66 (m, 2H), 4.08 (s, 3H), 3.56 (s, 3H), 2.21 - 2.32 (m, 2H), 1.90 - 2.21 (m, 6H), 1.50 (d, 3H). MS ESI, m/z = 491 [M+H]⁺

【0220】

異性体２、実施例２９：¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 11.04 (s, 1H), 8.62 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.45 (dd, 1H), 7.43 (dd, 1H), 7.28 (d, 1H), 7.22 (s, 1H), 6.81 (d, 1H), 6.31 (t, 1H), 5.31 (d, 1H), 4.89 (p, 1H), 4.47 - 4.67 (m, 2H), 4.08 (s, 3H), 3.56 (s, 3H), 2.20 - 2.32 (m, 2H), 1.92 - 2.20 (m, 6H), 1.50 (d, 3H). MS ESI, m/z = 491 [M+H]⁺

【0221】

２－((１ｒ,４ｒ)－４－(４－(２－ヒドロキシプロパン－２－イル)－１Ｈ－１,２,３－トリアゾール－１－イル)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(実施例３０)
２－((１ｒ,４ｒ)－４－アジドシクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド

【化120】

(１ｓ,４ｓ)－４－(６－メトキシ－５－((１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)カルバモイル)－２Ｈ－インダゾール－２－イル)シクロヘキシルメタンスルホネート(Ｉｎｔ ８)(７０wt.％)(５００mg、０.７mmol)のＤＭＦ(０.５mL)溶液に、Ｎ_２雰囲気下、ナトリウムアジド(１２１mg、１.９mmol)を添加した。得られた混合物を９０℃で５時間撹拌し、次いで水(１５０mL)で希釈し、ＤＣＭ(２５０mL)で抽出した。有機層を減圧下濃縮した。残渣をＣ１８－フラッシュクロマトグラフィー(３０～８０％ＭｅＣＮの水(０.１％ＮＨ_４ＯＨ)溶液で溶出)で精製して、２－((１ｒ,４ｒ)－４－アジドシクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(２５０mg、８０％)を無色固体として得た。¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 11.04 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.55 (br. s, 1H), 8.44 (dd, 1H), 7.43 (dd, 1H), 7.21 (s, 1H), 6.31 (t, 1H), 4.45 - 4.61 (m, 1H), 4.06 (s, 3H), 3.52 - 3.68 (m, 1H), 3.56 (s, 3H), 1.93 - 2.25 (m, 6H), 1.47 - 1.67 (m, 2H). MS ESI, m/z = 422 [M+H]⁺

【0222】

２－((１ｒ,４ｒ)－４－(４－(２－ヒドロキシプロパン－２－イル)－１Ｈ－１,２,３－トリアゾール－１－イル)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド、実施例３０

【化121】

２－((１ｒ,４ｒ)－４－アジドシクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(２５０mg、０.６mmol)のＤＭＦ(５mL)溶液に、Ｎ_２雰囲気下、２－メチルブト－３－ｙｎ－２－オール(１.５ｇ、１７.８mmol)を添加した。得られた混合物を１００℃で１５時間撹拌した。反応混合物を直接Ｃ１８－フラッシュクロマトグラフィー(０～１００％ＭｅＣＮの水(０.１％ＮＨ_４ＯＨ)溶液で溶出)、さらに分取ＨＰＬＣ(Waters XSelect CSH Fluoro-Phenyl OBD、５μm ３０×１５０mm；溶出勾配３０～４０％ＭｅＣＮの水(０.１％ＦＡ)溶液を８分間；６０mL／分；)で精製して、２－((１ｒ,４ｒ)－４－(４－(２－ヒドロキシプロパン－２－イル)－１Ｈ－１,２,３－トリアゾール－１－イル)シクロヘキシル)－６－メトキシ－Ｎ－(１－メチル－２－オキソ－１,２－ジヒドロピリジン－３－イル)－２Ｈ－インダゾール－５－カルボキサミド(１４５mg、４８％)、実施例３０を無色固体として得た。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 11.05 (s, 1H), 8.61 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.45 (dd, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.44 (dd, 1H), 7.23 (s, 1H), 6.31 (t, 1H), 5.11 (s, 1H), 4.58 - 4.70 (m, 2H), 4.07 (s, 3H), 3.56 (s, 3H), 2.01 - 2.35 (m, 8H), 1.47 (s, 6H). MS ESI, m/z = 506 [M+H]⁺

【0223】

ＩＲＡＫ４酵素アッセイでのＩＲＡＫ４阻害剤化合物の効力
化合物のＩＲＡＫ４に対する阻害活性を、マススペクトロメトリー読み出しを使用する酵素アッセイで決定した。１μMまたは１０μMの最高濃度の１０点ハーフログ化合物濃度応答曲線を、ＤＭＳＯに溶解した化合物の１０mM原液から、Echo 655(Labcyte Inc)を使用して作製し、３８４ウェルアッセイプレート(Greiner #781280)に添加した。アッセイプレートに、アッセイ緩衝液(５０mM Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ ｐＨ７.４、１０mM ＭｇＣｌ、５mM グルタチオン、０.０１％ＢＳＡ、３mM ＡＴＰ)で最終濃度０.２nMに希釈した１０μLのヒト組み換えＩＲＡＫ４タンパク質(Life Technologies #PV4002)を添加した。酵素を、化合物と、室温で１５分間インキュベートし、その後ペプチド基質(KKARFSRFAGSSPSQSSMVAR、Innovagenカスタム合成、ＤＭＳＯ中１０mM)を、Echo 655(Labcyte Inc)を使用して最終濃度１０μMで各ウェルに添加した。２時間、室温の後、６５μLの０.４％ギ酸(Merck #33015)で反応を停止させた。非リン酸化およびリン酸化ペプチドを、Waters TQ-SマススペクトロメーターでＬＣ－ＭＳ／ＭＳにより測定した。TargetLynxソフトウェアを使用して、ピークを統合し、リン酸化対非リン酸化ペプチド比を計算した。曲線を当て嵌め、化合物効力をGenedata Screener 19(Genedata AG)で決定した。ＩＣ_５０値は、少なくとも２実験の幾何平均である。

【0224】

ＩＲＡＫ４リン酸化細胞アッセイ
ＴＬＲまたはＩＬ－１ＲリガンドによるＩＲＡＫ４活性化はＩＲＡＫ４自己リン酸化に至り、これは、ＩＲＡＫ４キナーゼ阻害剤により予防され得る。ＩＲＡＫ４自己リン酸化に対するＩＲＡＫ４阻害剤化合物の効果を、ＩＬ－１β刺激Karpas-299細胞で、細胞分化能の指標として評価した。Karpas-299細胞を、１０％ＦＢＳ(Gibco #10270)含有ＲＰＭＩ １６４０(Gibco 61870-010)で培養した。細胞を、２×１０^４細胞／ウェルで、化合物をEcho 655(Labcyte Inc)を使用して種々の濃度(３０μMの最終最高濃度で１０点ハーフログ用量応答)を添加してあるポリ－Ｄ－リシン被覆３８４ウェルプレート(Corning #356663)に播種した。細胞を遠心分離し(２５０ｇ、４分間)、３７℃で１時間インキュベートし、次いで２２.７ng／mL 組み換えＩＬ－１β(R&D Systems, #201-LB-025)で３７℃で１０分間刺激し、続いて、４％パラホルムアルデヒドで２０分間固定し、氷冷７０％ＭｅＯＨのＰＢＳ溶液で３０分間透過性処理した。細胞をリン酸緩衝化食塩水(ＰＢＳ)で、BlueWasher(BlueCatBio)上で２回洗浄し、次いで１０％ＦＢＳ含有ＰＢＳで２０分間遮断した。遮断溶液をBlueWasherで除去し、細胞を、０.０５％Ｔｗｅｅｎ－２０含有遮断緩衝液中、抗ｐＩＲＡＫ４(Ｔｈｒ３４５／Ｓｅｒ３４６)(ＣＳＴ、#11927、１：４００)で１時間染色し、次いでBlueWasher上で０.０５％Ｔｗｅｅｎ－２０含有ＰＢＳで２回洗浄し、続いて０.０５％Ｔｗｅｅｎ－２０含有遮断緩衝液中、Alexa 647コンジュゲート二次抗ウサギＩｇＧ抗体(ＣＳＴ、#4414、１：２,０００)およびHoechst 33342(Sigma、１：２,０００)で３０分間染色した。最後に、細胞を０.０５％Ｔｗｅｅｎ－２０含有ＰＢＳで２回洗浄し、適切なフィルターを使用するImageXpress Micro(Molecular Devices)で１０倍空気対物で造営した。画像をColumbus(PerkinElmer)で分析し、二次抗体からの細胞あたりの蛍光強度を定量した。定量データをGenedata Screener 19(Genedata AG)で分析した。このアッセイで得た結果を表に示し、本開示の化合物が細胞におけるＩＲＡＫ４を阻害する能力を示す。ＩＣ_５０値は、少なくとも２実験の幾何平均である。

【表3】

【0225】

ｃＫｉｔ酵素アッセイにおけるＩＲＡＫ４阻害剤化合物の効力
ヒトｃＫｉｔキナーゼの活性に対するＩＲＡＫ４阻害剤化合物の効果の評価を、ヒト組み換え酵素およびEurofins CEREP, catalog item 3070, SOP no 1C768のLANCE^{(登録商標)}検出方法を使用して、基質Ulight-TKペプチドのリン酸化の測定により定量した：試験化合物、参照化合物または水(対照)を、４０mM Ｈｅｐｅｓ／Ｔｒｉｓ(ｐＨ７.４)、０.８mM ＥＧＴＡ／Ｔｒｉｓ、８mM ＭｇＣｌ_２、１.６mM ＤＴＴおよび０.００８％Ｔｗｅｅｎ ２０を含む緩衝液中、酵素(０.３８ng)と混合する。その後、１００nMの基質Ulight-TKペプチドおよび５０μM ＡＴＰの添加により、反応を開始させ、混合物を３０分間、室温でインキュベートする。対照基底測定のあｔめに、酵素を反応混合物から除く。インキュベーション後、１３mM ＥＤＴＡの添加により反応を停止させる。５分後、ユーロピウムキレートで標識した抗ホスホ－ＰＴ６６抗体を添加する。さらに６０分後、蛍光伝達を、マイクロプレートリーダー(Envision, Perkin Elmer)を使用して、ｌｅｘ＝３３７nm、ｌｅｍ＝６２０nmおよびｌｅｍ＝６６５nmで測定する。酵素活性を、６６５nmでのシグナル測定値を６２０nmのもので除することにより決定する(比率)。結果を、対照酵素活性のパーセント阻害として表す。標準参照阻害化合物はスタウロスポリンであり、これを、各実験で数濃度で試験して、阻害曲線を得て、そのＩＣ_５０値を計算する。

【0226】

示すデータは、少なくともｎ＝２の幾何平均であるか、＊で示すのは、一実験から得られるものである。表１および２のデータの比較から認識され得るとおり、本開示の化合物は、ｃＫｉｔに対してＩＲＡＫ４を選択的に阻害する。ここに示していないさらなるスクリーニングは、本開示の化合物が広い範囲のキナーゼに対してＩＲＡＫ４に選択的であることを示す。キナーゼ選択性は、オフターゲット毒性が低減または排除できるため、臨床的有用性の重要な決定因子であり得る。

【表4】

【0227】

血漿タンパク質結合は、薬物の薬物動態挙動に重要な関係を有し得る。血漿における非結合分画(ｆｕ)薬物がインビボ実験の解釈における重要なパラメータである、高度に結合性の薬物で特に当てはまる。伝統的に、血漿タンパク質への薬物結合の程度の毛ッてに使用される数種の異なる技術があり、平衡透析がおそらく最も一般的である。

【0228】

この方法は、Wernevik J et al. (2020) “A Fully Integrated Assay Panel for Early Drug Metabolism and Pharmacokinetics Profiling” Assay. Drug. Dev. Technol 18:157-179; DOI 10.1089/adt.2020.970に記載される、ＲＥＤ(Rapid Equilibrium Dialysis)デバイスおよびHamiltonサンプルハンドリングシステムを使用する、ヒト血漿における我々の現在の自動化平衡透析アッセイを記載する。

【0229】

アッセイは、一般に結果を出すのを含め、３日間にわたり、行う。プールされた化合物を血漿で５μMに希釈し、ＲＥＤデバイスの内側チャンバーに、リン酸緩衝液(ｐＨ７.４)を周囲チャンバーに添加して、８kDaの分子量カットオフの半透膜をとおして平衡透析する。５μM溶液を使用して、サンプリングを０および１８時の時点両方で実施し、、ＲＥＤデバイスで血漿における化合物安定性および回収(物質収支)も確立する。低回収は、透析装置への結合または溶解度問題を示す。

【0230】

１８時間透析後、血漿および緩衝液サンプルを、液体クロマトグラフィーおよびマススペクトロメトリー(ＬＣ／ＭＳＭＳ)による分析のために調製する。血漿における１.４nM～７μM範囲の７点較正曲線を使用して、サンプルを定量する。較正曲線を含む全サンプルは内部標準(ＩＳ)を含み、ＵＰＬＣ－ＭＳ／ＭＳ装置への注入体積の変動の正規化を可能とする。

【0231】

３品質管理(ＱＣ)を各ランで使用する。低ｆｕ(ｆｕ平均約１％)のワルファリンを、各プールの対照として使用する。プロプラノロール(約３０％)およびメトプロロール(約９０％)を各ランに無作為に入れる。管理物を、ＱＣの許容基準を２.５８×標準偏差と規定する、‘Manhattan tool’’(Winiwarter et al. (2015) “Time dependent analysis of assay comparability: a novel approach to understand intra- and inter-site variability over time” J. Comput. Aided Mol. Des. 29:795-807; DOI 10.1007/s10822-015-9836-5)においてモニターする。

【0232】

表３のデータに見られ得るとおり、本開示の化合物の濃度は、遊離化合物が、インビボでＩＲＡＫ４に結合し、阻害するために利用可能であることを示す、血漿に非結合である。

【表5】

【外国語明細書】