特開 2025-3404 血液脳関門を通過するグラニュリンの送達のための化合物

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公開特許公報(A)

(11)【公開番号】P2025003404

(43)【公開日】2025-01-09

(54)【発明の名称】血液脳関門を通過するグラニュリンの送達のための化合物

(51)【国際特許分類】

   C07K 19/00 20060101AFI20241226BHJP

   C07K 16/28 20060101ALI20241226BHJP

   C07K 14/435 20060101ALI20241226BHJP

   C07K 16/18 20060101ALI20241226BHJP

   A61P 25/00 20060101ALI20241226BHJP

   A61P 25/28 20060101ALI20241226BHJP

   A61P 25/16 20060101ALI20241226BHJP

   A61P 21/00 20060101ALI20241226BHJP

   A61K 39/395 20060101ALI20241226BHJP

   A61K 47/68 20170101ALI20241226BHJP

   A61K 38/17 20060101ALI20241226BHJP

   C12N 15/12 20060101ALN20241226BHJP

   C12N 15/13 20060101ALN20241226BHJP

   C12N 15/62 20060101ALN20241226BHJP

【ＦＩ】

C07K19/00 ZNA

C07K16/28

C07K14/435

C07K16/18

A61P25/00

A61P25/28

A61P25/16

A61P21/00

A61K39/395 N

A61K47/68

A61K38/17

A61K39/395 L

C07K19/00

C12N15/12

C12N15/13

C12N15/62 Z

【審査請求】有

【請求項の数】39

【出願形態】ＯＬ

【外国語出願】

(21)【出願番号】P 2024100045

(22)【出願日】2024-06-21

(31)【優先権主張番号】63/509,352

(32)【優先日】2023-06-21

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(71)【出願人】

【識別番号】594197872

【氏名又は名称】イーライ リリー アンド カンパニー

(74)【代理人】

【識別番号】100092783

【弁理士】

【氏名又は名称】小林 浩

(74)【代理人】

【識別番号】100095360

【弁理士】

【氏名又は名称】片山 英二

(74)【代理人】

【識別番号】100103182

【弁理士】

【氏名又は名称】日野 真美

(74)【代理人】

【識別番号】100131990

【弁理士】

【氏名又は名称】大野 玲恵

(72)【発明者】

【氏名】アルベルト アルヴァラド

(72)【発明者】

【氏名】フォレスト エイチ． アンドリュース

(72)【発明者】

【氏名】デイヴィッド アルベルト ドライバー

(72)【発明者】

【氏名】ロス エドワード フェローズ

(72)【発明者】

【氏名】カレン ジーン フロニング

(72)【発明者】

【氏名】ダニエル スコット ギラルド

(72)【発明者】

【氏名】ペトラ ヴェルディノ

(72)【発明者】

【氏名】ヤミング ワン

【テーマコード（参考）】

4C076

4C084

4C085

4H045

【Ｆターム（参考）】

4C076AA95

4C076CC01

4C076CC41

4C076EE41

4C076EE59

4C084AA02

4C084BA01

4C084BA04

4C084BA08

4C084BA22

4C084BA23

4C084BA41

4C084DC50

4C084NA13

4C084NA14

4C084ZA02

4C084ZA15

4C084ZA16

4C084ZA20

4C084ZA22

4C085AA14

4C085AA21

4C085AA22

4C085AA23

4C085AA24

4C085BB31

4C085CC23

4C085EE01

4H045AA10

4H045AA11

4H045AA20

4H045AA30

4H045BA10

4H045BA41

4H045CA40

4H045DA76

4H045EA20

4H045FA72

4H045FA74

(57)【要約】      （修正有）

【課題】プログラニュリン、プログラニュリン断片、及び／又は少なくとも１つのグラニュリンタンパク質サブユニットを、血液脳関門を通過して送達するための化合物を提供する。
【解決手段】プログラニュリン、プログラニュリン断片、及び／又は少なくとも１つのグラニュリンタンパク質サブユニットを、血液脳関門を通過して送達するための化合物であって、プログラニュリンドメインと、ＴｆＲ１結合ドメインと、任意選択的にアルブミン結合ドメインと、を含む、化合物とする。
【選択図】なし

【特許請求の範囲】

【請求項1】

（ａ）プログラニュリンドメインと、
（ｂ）トランスフェリン受容体１（ＴｆＲ１）結合ドメインであって、重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、前記ＶＨが、重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含み、前記ＶＬが、軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む、ＴｆＲ１結合ドメインと、
を含む、化合物であって、
ＨＣＤＲ１のアミノ酸配列が、配列番号４５であり、
ＨＣＤＲ２のアミノ酸配列が、配列番号４６であり、
ＨＣＤＲ３のアミノ酸配列が、配列番号４７であり、
ＬＣＤＲ１のアミノ酸配列が、配列番号４８であり、
ＬＣＤＲ２のアミノ酸配列が、配列番号４９であり、
ＬＣＤＲ３のアミノ酸配列が、配列番号５０である、化合物。

【請求項2】

前記化合物が、アルブミン結合ドメインを更に含み、前記アルブミン結合ドメインが、相補性決定領域（ＣＤＲ）ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含み、
ＣＤＲ１のアミノ酸配列が、配列番号５１であり、
ＣＤＲ２のアミノ酸配列が、配列番号５２であり、
ＣＤＲ３のアミノ酸配列が、配列番号５３である、請求項１に記載の化合物。

【請求項3】

前記ＴｆＲ１結合ドメインが、第１のリンカーを用いて前記プログラニュリンドメインに連結され、前記アルブミン結合ドメインが、第２のリンカーを用いて前記プログラニュリンドメイン又は前記ＴｆＲ１結合ドメインに連結されている、請求項２に記載の化合物。

【請求項4】

前記化合物が、式：
Ｙ－Ｌ_１－Ｘ－Ｌ_２－Ｚ又はＺ－Ｌ_２－Ｙ－Ｌ_１－Ｘの化合物であり、
式中、Ｘが、前記プログラニュリンドメインであり、
Ｙが、前記ＴｆＲ１結合ドメインであり、
Ｚが、前記アルブミン結合ドメインであり、
Ｌ_１が、前記第１のリンカーであり
Ｌ_２が、前記第２のリンカーである、請求項２又は３に記載の化合物。

【請求項5】

前記化合物が、式：
Ｙ－Ｌ_１－Ｘ－Ｌ_２－Ｚの化合物であり、
前記ＴｆＲ１結合ドメインが、前記プログラニュリンドメインのＮ末端で前記プログラニュリンドメインに連結され、前記アルブミン結合ドメインが、前記プログラニュリンドメインのＣ末端で前記プログラニュリンに連結されている、請求項４に記載の化合物。

【請求項6】

前記ＴｆＲ１結合ドメイン及び前記アルブミン結合ドメインが、二量体を形成していない、請求項２～５のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項7】

前記ＴｆＲ１結合ドメインが、Ｆａｂ領域であり、前記第１のリンカーが、前記ＴｆＲ１結合ドメインの重鎖又は前記ＴｆＲ１結合ドメインの軽鎖に結合している、請求項３～６のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項8】

前記ＴｆＲ１結合ドメインが、ヒトＴｆＲ１受容体に対して約１ｎＭ～約１００ｎＭ、約５ｎＭ～２０ｎＭ未満、又は約１０ｎＭの親和性を有する、請求項１～７のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項9】

前記ＴｆＲ１結合ドメインが、
（ａ）重鎖であって、前記重鎖のアミノ酸配列が、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、又は配列番号１８である、重鎖、及び
（ｂ）軽鎖であって、前記軽鎖のアミノ酸配列が、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、又は配列番号２２である、軽鎖、を含む、請求項１～８のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項10】

前記ＴｆＲ１結合ドメインが、重鎖（ＨＣ）及び軽鎖（ＬＣ）を含み、前記ＨＣのアミノ酸配列が、配列番号１５であり、前記ＬＣのアミノ酸配列が、配列番号１９である、請求項１～９のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項11】

前記アルブミン結合ドメインが、Ｖ_ＨＨ抗体断片である、請求項２～１０のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項12】

前記アルブミン結合ドメインが、Ｌ_２を介して前記プログラニュリンドメインの前記Ｃ末端に結合している、請求項３～１１のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項13】

前記アルブミン結合ドメインのアミノ酸配列が、配列番号２３又は配列番号２４である、請求項１～２２のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項14】

Ｌ_１及びＬ_２が、独立して、共有結合、ペプチドリンカー、ＰＥＧリンカー、ジスルフィド結合、チオアセタール結合、又はチオエステル結合から選択される、請求項３～１３のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項15】

Ｌ_１及びＬ_２が、同一である、請求項３～１４のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項16】

Ｌ_１及びＬ_２のアミノ酸配列が、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、又は配列番号１４であり、好ましくは、Ｌ_１及びＬ_２のアミノ酸配列が、配列番号７である、請求項３～１５のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項17】

前記プログラニュリンドメインが、天然に存在する配列である、請求項１～１６のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項18】

前記プログラニュリンドメインが、プログラニュリンの断片を含み、前記プログラニュリンの断片のアミノ酸配列が、配列番号２である、請求項１～１７のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項19】

前記プログラニュリンドメインのアミノ酸配列が、配列番号１である、請求項１～１８のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項20】

前記化合物が、配列番号２５、配列番号２６、又は配列番号２９によって与えられるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する重鎖を含む、請求項１～１９のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項21】

前記化合物が、配列番号１９、配列番号３２、又は配列番号３３によって与えられるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する軽鎖を含む、請求項１～２０のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項22】

前記化合物が、
（ａ）重鎖であって、前記重鎖のアミノ酸配列が、配列番号２５、配列番号２６、又は配列番号２９である、重鎖、及び
（ｂ）軽鎖であって、前記軽鎖のアミノ酸配列が、配列番号１９、配列番号３２、又は配列番号３３である、軽鎖、を含む、請求項１～２２のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項23】

前記化合物が、重鎖（ＨＣ）及び軽鎖（ＬＣ）を含み、前記ＨＣのアミノ酸配列が、配列番号２５であり、前記ＬＣのアミノ酸配列が、配列番号１９である、請求項１～２２のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項24】

前記化合物が、重鎖（ＨＣ）及び軽鎖（ＬＣ）を含み、前記ＨＣのアミノ酸配列が、配列番号２６であり、前記ＬＣのアミノ酸配列が、配列番号１９である、請求項１～２３のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項25】

前記化合物が、重鎖（ＨＣ）及び軽鎖（ＬＣ）を含み、前記ＨＣのアミノ酸配列が、配列番号２９であり、前記ＬＣのアミノ酸配列が、配列番号３２である、請求項１～２４のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項26】

前記化合物が、重鎖（ＨＣ）及び軽鎖（ＬＣ）を含み、前記ＨＣのアミノ酸配列が、配列番号２９であり、前記ＬＣのアミノ酸配列が、配列番号３３である、請求項１～２５のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項27】

配列番号２５によって与えられるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む化合物であって、好ましくは、配列番号２５によって与えられるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、化合物。

【請求項28】

前記化合物が、重鎖（ＨＣ）及び軽鎖（ＬＣ）を含み、前記ＨＣのアミノ酸配列が、配列番号２５であり、前記ＬＣのアミノ酸配列が、配列番号１９である、請求項２７に記載の化合物。

【請求項29】

配列番号２６によって与えられるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む化合物であって、好ましくは、配列番号２６によって与えられるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、化合物。

【請求項30】

前記化合物が、重鎖（ＨＣ）及び軽鎖（ＬＣ）を含み、前記ＨＣのアミノ酸配列が、配列番号２６であり、前記ＬＣのアミノ酸配列が、配列番号１９である、請求項２９に記載の化合物。

【請求項31】

プログラニュリン断片を含む化合物であって、前記プログラニュリン断片のアミノ酸配列が、配列番号２である、化合物。

【請求項32】

前記プログラニュリン断片が、１００残基～５００残基の長さである、請求項３１に記載の化合物。

【請求項33】

１１型神経系セロイドリポフスチン症、前頭側頭型認知症、アルツハイマー疾患、パーキンソン疾患、筋萎縮性側索硬化症、又はそれらの組み合わせの治療に使用するための、請求項１～３２のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項34】

障害を治療する方法であって、請求項１～３２のいずれか一項に記載の化合物を、それを必要とする患者に投与することを含む、方法。

【請求項35】

前記障害が、１１型神経系セロイドリポフスチン症、前頭側頭型認知症、アルツハイマー疾患、パーキンソン疾患、筋萎縮性側索硬化症、又はそれらの組み合わせである、請求項３４に記載の方法。

【請求項36】

治療法で使用するための、請求項１～３２のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項37】

１１型神経系セロイドリポフスチン症、前頭側頭型認知症、アルツハイマー疾患、パーキンソン疾患、筋萎縮性側索硬化症、又はそれらの組み合わせの治療に使用するための、請求項１～３２のいずれか一項に記載の化合物を含む医薬組成物。

【請求項38】

１１型神経系セロイドリポフスチン症、前頭側頭型認知症、アルツハイマー疾患、パーキンソン疾患、筋萎縮性側索硬化症、又はそれらの組み合わせの治療のための医薬の製造における、請求項１～３２のいずれか一項に記載の化合物の使用。

【請求項39】

請求項１～３２のいずれか一項に記載の化合物と、薬学的に許容される担体と、を含む組成物。

【請求項40】

１１型神経系セロイドリポフスチン症、前頭側頭型認知症、アルツハイマー疾患、パーキンソン疾患、筋萎縮性側索硬化症、又はそれらの組み合わせの治療のための、請求項１～３２のいずれか一項に記載の化合物の使用。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

（配列表への参照）
本出願は、ＳＴ．２６ＸＭＬ形式の配列表とともに、提出されている。配列表は、２０２３年６月１９日に作成された「３０３３０」という表題のファイルとして提供され、サイズは６６キロバイトである。ＳＴ．２６ＸＭＬ形式の配列表情報は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。

【0002】

（発明の分野）
本発明は、血液脳関門を通過してプログラニュリン又はその断片を送達するための新規化合物に関する。本発明はまた、プログラニュリンドメイン、トランスフェリン受容体１（transferrin receptor 1、ＴｆＲ１）結合ドメイン、及びアルブミン結合ドメインを含む新規化合物に関する。

【背景技術】

【0003】

５９３アミノ酸タンパク質であるプログラニュリンは、ヒトにおいてＧＲＮ遺伝子によってコードされる前駆体タンパク質である。個々のグラニュリンタンパク質は、プログラニュリンから切断される。天然に存在するプログラニュリンは、パラグラニュリン（ｐ）によって表され、７グラニュリンタンパク質構造Ｇ－Ｆ－Ｂ－Ａ－Ｃ－Ｄ－Ｅに結合されたプロタンパク質を含み、ここで、グラニュリンタンパク質のそれぞれは大文字によって表される。全体として、天然に存在するプログラニュリンは、ｐ－Ｇ－Ｆ－Ｂ－Ａ－Ｃ－Ｄ－Ｅの構造を有する。

【0004】

とりわけ、１１型神経系セロイドリポフスチン症、前頭側頭型認知症、アルツハイマー疾患、パーキンソン疾患、筋萎縮性側索硬化症（amyotrophic lateral sclerosis、ＡＬＳ）などの様々な神経変性病態は、脳又は脳脊髄液（cerebrospinal fluid、ＣＳＦ）中のプログラニュリンの欠乏と関連付けられている。プログラニュリン欠乏は、早発性神経変性疾患である前頭側頭型認知症（frontotemporal dementia、ＦＴＤ）の全ての遺伝性形態のおよそ２５パーセントを占める。プログラニュリンは、増加したプログラニュリンレベルを有するいくつかの疾患モデルにおいて保護的に作用し、虚血からの行動回復を加速し（Ｔａｏ，Ｊ ｅｔ ａｌ．，（２０１２）Ｂｒａｉｎ Ｒｅｓ １４３６，１３０－１３６；Ｅｇａｓｈｉｒａ，Ｙ．ｅｔ ａｌ．，（２０１３）．Ｊ Ｎｅｕｒｏｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ １０，１０５）、パーキンソン疾患モデルにおける運動欠損を抑制し（Ｖａｎ Ｋａｍｐｅｎ，Ｊ．Ｍ ｅｔ ａｌ．（２０１４）．ＰＬｏＳ Ｏｎｅ ９，ｅ９７０３２）、筋萎縮性側索硬化症のモデル（Ｌａｉｒｄ，Ａ．Ｓ ｅｔ ａｌ．，（２０１０）．ＰＬｏＳ Ｏｎｅ ５，ｅ１３３６８．）、及び関節炎（Ｔａｎｇ，Ｗ ｅｔ ａｌ．，（２０１１）．Ｓｃｉｅｎｃｅ ３３２，４７８－４８４）において病状を減衰させ、アルツハイマー疾患モデルにおける記憶障害の予防を行う（Ｍｉｎａｍｉ，Ｓ．Ｓ ｅｔ ａｌ．，（２０１４）．Ｎａｔ Ｍｅｄ ２０，１１５７－１１６４）。

【0005】

したがって、プログラニュリン機能の喪失又はプログラニュリンレベルの低下によって引き起こされる障害に対処することができる療法を開発する必要がある。残念ながら、血液脳関門（Blood Brain Barrier、ＢＢＢ）を通過してプログラニュリンを送達すること、及び／又はプログラニュリン欠乏を有する患者の脳及び／又はＣＳＦ中で持続するのに十分長い半減期を有するプログラニュリンを提供することは困難であり得る。したがって、ＢＢＢを通過するプログラニュリン又は少なくとも１つのグラニュリンタンパク質の有効な送達を提供することができる化合物が必要とされている。更に、脳及び／又はＣＳＦ中で持続するのに十分長い半減期を有するプログラニュリンを提供することができる化合物も必要とされている。

【0006】

プログラニュリン変異体をＢＢＢを通過して送達するように設計された化合物が、米国特許出願第２０２２／０２１３１５５号などで知られているが、これらの化合物には、（１）天然に存在する配列ではなく、ソルチリンと相互作用するように設計されたプログラニュリン変異体、及び（２）トランスフェリン受容体１（ＴｆＲ１）結合ドメインとしてのＦｃ二量体が含まれる。それぞれについて本明細書で説明する。

【発明の概要】

【0007】

本明細書で提供されるのは、プログラニュリンの欠乏を有する患者に治療的利益を提供するのに十分長い半減期で、天然プログラニュリン又は天然プログラニュリンの断片をＢＢＢを通過して送達するための化合物である。

【0008】

プログラニュリンをＢＢＢを通過して送達しようとする以前の試みにおいて、プログラニュリンは、プログラニュリンタンパク質のＣ末端クリッピングを低減し、ソルチリン（配列番号４）に特異的に結合するように、残基５７４～５７６を置換することによって修飾されている。

【0009】

しかしながら、予想外にも、野生型プログラニュリンのＣ末端にアルブミン結合ドメインを代わりに結合させることによって、クリッピング（プログラニュリンペプチドの部分の意図しない分離）を更に低減できることが発見された。更に、図３に示すように、プログラニュリンを改変してソルリチンとの二次相互作用を誘導しても、ＢＢＢを通過する輸送が改善されないことも予想外に発見された。図４に示すように、アルブミン結合ドメインの使用は、プログラニュリンドメインの半減期の延長及び／又はＢＢＢを通過して送達されるプログラニュリンバリアントの量の増加をもたらした。

【0010】

更に、ＢＢＢを通過してプログラニュリンを送達しようとする以前の試みにおいて、Ｆｃ二量体がＴｆＲ１結合ドメインとして使用されている。しかしながら、図３に示すように、ヒトＴｆＲ１受容体に対してより高い結合親和性を有するＦａｂ領域を含むＴｆＲ１結合ドメインが、ＢＢＢを通過する送達の増加をもたらすことが予想外に見出された。

【0011】

全体として、プログラニュリンドメインと、ＢＢＢを通過するプログラニュリン又はプログラニュリン断片の送達を改善することができるトランスフェリン受容体１（ＴｆＲ１）結合ドメインとを含む化合物が本明細書に開示される。

【0012】

ＢＢＢを通過するプログラニュリン又は少なくとも１つのグラニュリンタンパク質の送達を改善することができ、改善された半減期を有するプログラニュリンドメイン、ＴｆＲ１結合ドメイン、及びアルブミン結合ドメインも本明細書で提供される。

【0013】

また、本明細書では、プログラニュリンドメイン及びＴｆＲ１結合ドメインが提供され、ＴｆＲ１結合ドメインは、重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、ＶＨは、重鎖相補性決定領域（heavy chain complementarity determining region、ＨＣＤＲ）ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３を含み、ＶＬは、軽鎖相補性決定領域（light chain complementarity determining region、ＬＣＤＲ）ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３を含み、
ＨＣＤＲ１のアミノ酸配列は、配列番号４５であり、
ＨＣＤＲ２のアミノ酸配列は、配列番号４６であり、
ＨＣＤＲ３のアミノ酸配列は、配列番号４７であり、
ＬＣＤＲ１のアミノ酸配列は、配列番号４８であり、
ＬＣＤＲ２のアミノ酸配列は、配列番号４９であり、
ＬＣＤＲ３のアミノ酸配列は、配列番号５０である。

【0014】

プログラニュリン断片を含む化合物であって、プログラニュリン断片のアミノ酸配列が、配列番号２である化合物も本明細書で提供される。プログラニュリン断片は、１００残基～５００残基の長さであり得る。

【0015】

また、本明細書では、（ａ）プログラニュリンドメインＸと、（ｂ）第１のリンカーＬ_１でＸに連結されたＴｆＲ１結合ドメインＹと、（ｃ）第２のリンカーＬ_２でＸ又はＹに連結されたアルブミン結合ドメインＺと、を含む化合物も提供される。

【0016】

また、本明細書では、（ａ）プログラニュリンドメインと、（ｂ）第１のリンカーでプログラニュリンドメインに連結されたＴｆＲ１結合ドメインと、（ｃ）第２のリンカーでプログラニュリンドメイン又はＴｆＲ１結合ドメインに連結されたアルブミン結合ドメインと、を含む化合物も提供される。

【0017】

また、本明細書では、Ｈ０９ Ｆａｂ－ＰＧＲＮ－Ｃ９０．４３の重鎖である、配列番号２５によって与えられるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％又は少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む化合物も提供される。

【0018】

また、本明細書では、（ａ）配列番号２５によって与えられるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％又は少なくとも９５％の配列同一性を有する重鎖と、（ｂ）配列番号１９によって与えられるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％又は少なくとも９５％の配列同一性を有する軽鎖と、を含む化合物も提供される。

【0019】

また、本明細書では、（ａ）配列番号２５によって与えられるアミノ酸配列を有する重鎖と、（ｂ）配列番号１９によって与えられるアミノ酸配列を有する軽鎖と、を含む化合物も提供される。

【0020】

また、本明細書では、Ｈ０９ Ｆａｂ－ＰＧＲＮΔｐＧＦ－Ｃ９０．４３の重鎖である、配列番号２６によって与えられるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％又は少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む化合物も提供される。

【0021】

また、本明細書では、（ａ）配列番号２６によって与えられるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％又は少なくとも９５％の配列同一性を有する重鎖と、（ｂ）配列番号１９によって与えられるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％又は少なくとも９５％の配列同一性を有する軽鎖と、を含む化合物も提供される。

【0022】

また、本明細書では、（ａ）配列番号２６によって与えられるアミノ酸配列を有する重鎖と、（ｂ）配列番号１９によって与えられるアミノ酸配列を有する軽鎖と、を含む化合物も提供される。

【0023】

また、本明細書では、重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む化合物が提供され、ＶＨは、重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３を含み、ＶＬは、軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３を含み、ＨＣＤＲ１は、配列番号４５を含み、ＨＣＤＲ２は、配列番号４６を含み、ＨＣＤＲ３は、配列番号４７を含み、ＬＣＤＲ１は、配列番号４８を含み、ＬＣＤＲ２は、配列番号４９を含み、ＬＣＤＲ３は、配列番号５０を含む。

【0024】

また、本明細書では、（ａ）プログラニュリンドメインのアミノ酸配列が配列番号１又は配列番号２である、プログラニュリンドメインと、（ｂ）第１のリンカーでプログラニュリンドメインに連結されたトランスフェリン受容体１（ＴｆＲ１）結合ドメインであって、重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、ＶＨが重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３を含み、ＶＬが軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３を含み、ＨＣＤＲ１のアミノ酸配列が配列番号４５であり、ＨＣＤＲ２のアミノ酸配列が配列番号４６であり、ＨＣＤＲ３のアミノ酸配列が配列番号４７であり、ＬＣＤＲ１のアミノ酸配列が配列番号４８であり、ＬＣＤＲ２のアミノ酸配列が配列番号４９であり、ＬＣＤＲ３のアミノ酸配列が配列番号５０である、ＴｆＲ１結合ドメインと、（ｃ）第２のリンカーでプログラニュリンドメイン又はＴｆＲ１結合ドメインに連結されたアルブミン結合ドメインと、を含む化合物も提供される。

【0025】

また、本明細書では、障害を治療する方法であって、開示された化合物のいずれかを、それを必要とする患者に投与することを含み、好ましくは、障害が、１１型神経系セロイドリポフスチン症、前頭側頭型認知症、アルツハイマー疾患、パーキンソン疾患、筋萎縮性側索硬化症、又はそれらの組み合わせである、方法が提供される。

【0026】

また、本明細書では、１１型神経系セロイドリポフスチン症、前頭側頭型認知症、アルツハイマー疾患、パーキンソン疾患、筋萎縮性側索硬化症、又はそれらの組み合わせの治療に使用するための化合物が提供される。

【0027】

また、本明細書では、１１型神経系セロイドリポフスチン症、前頭側頭型認知症、アルツハイマー疾患、パーキンソン疾患、筋萎縮性側索硬化症、又はそれらの組み合わせの治療に使用するための開示された化合物のいずれかを含む医薬組成物が提供される。

【0028】

また、本明細書では、１１型神経系セロイドリポフスチン症、前頭側頭型認知症、アルツハイマー疾患、パーキンソン疾患、筋萎縮性側索硬化症、又はそれらの組み合わせの治療のための薬剤の製造における、開示された化合物のいずれかの使用が提供される。

【0029】

また、本明細書では、開示された化合物のいずれか１つ及び薬学的に許容される担体を含む組成物が提供される。

【図面の簡単な説明】

【0030】

【図1】プログラニュリン断片を有する構築物が、全長プログラニュリンペプチドを有する構築物と比較して延長された耐久性を有したことを示す。

【図2】タウターンオーバーに対するプログラニュリンの長さの影響を示す。

【図3】ＢＢＢを通過するＰＧＲＮ送達に対するＴｆＲシャトルのアーキテクチャの影響を示す。

【図4】ＢＢＢを通過する構築物の送達に対するＴｆＲシャトルの親和性の影響を示す。

【図5】ＴｆＲ結合ドメインが、ソルチリン結合ドメインの代わりにプログラニュリンをニューロンに送達する、好適なプログラニュリンシャトルであり得ることを示す。

【図6】ｈＴｆＲ ＫＩマウスにおける、サンドイッチ例２のＣＮＳ曝露を示す。

【図7】Ｇｒｎ ＫＯマウスにおけるリポフスチン病理、ニューロン損傷、神経炎症及びリソソーム機能に対するＢＢＢ通過ＰＧＲＮの影響を示す。

【発明を実施するための形態】

【0031】

化合物
開示される化合物は、プログラニュリン、プログラニュリンの断片、及び／又は少なくとも１つのグラニュリンタンパク質を、脳及び／又はＣＳＦ中で持続するのに十分長い半減期で、ＢＢＢを通過して送達する。開示される化合物は、プログラニュリンドメイン、ＴｆＲ１結合ドメイン、及び任意選択的にアルブミン結合ドメインを含む。開示される化合物はまた、プログラニュリンドメインＸと、第１のリンカーＬ_１でＸに連結されたＴｆＲ１結合ドメインＹと、第２のリンカーＬ_２でＸ又はＹに連結されたアルブミンドメインＺと、を含み、式Ｉ、ＩＩ、又はＩＩＩに示されるようなものである。
Ｙ－Ｌ_１－Ｘ－Ｌ_２－Ｚ
式Ｉ．

【0032】

いくつかの実施形態では、化合物は、式Ｉによって表すことができる。ＴｆＲ１結合ドメインＹは、第１のリンカーＬ_１でプログラニュリンドメインＸに連結することができる。ＴｆＲ１結合ドメインは、プログラニュリンドメインのＮ末端又はＣ末端でプログラニュリンドメインに結合することができる。アルブミン結合ドメインＺは、プログラニュリンドメインのＮ末端又はＣ末端で、第２のリンカーＬ_２でプログラニュリンドメインに連結することができる。ＴｆＲ１結合ドメイン及びアルブミン結合ドメインは、プログラニュリンドメインの反対端で連結することができる。例えば、ＴｆＲ１結合ドメインは、プログラニュリンドメインのＮ末端で、若しくはその５アミノ酸内で連結することができる一方で、アルブミン結合ドメインは、プログラニュリンドメインのＣ末端で、若しくはその５アミノ酸内で連結することができるか、又は、ＴｆＲ１結合ドメインは、プログラニュリンドメインのＣ末端で、若しくはその５アミノ酸内で連結することができる一方で、アルブミン結合ドメインは、プログラニュリンドメインのＮ末端、若しくはその５アミノ酸内で連結することができる。
Ｚ－Ｌ_２－Ｙ－Ｌ_１－Ｘ
式ＩＩ．化合物

【0033】

いくつかの実施形態では、化合物は、式ＩＩによって表すことができる。プログラニュリンドメインＸは、第１のリンカーＬ_１でＴｆＲ１結合ドメインに連結することができる。プログラニュリンドメインは、ＴｆＲ１結合ドメインのＮ末端又はＣ末端でＴｆＲ１結合ドメインに結合することができる。アルブミン結合ドメインＺは、プログラニュリンドメインのＮ末端又はＣ末端で、第２のリンカーＬ_２を用いてＴｆＲ１結合ドメインに連結することができる。プログラニュリンドメイン及びアルブミン結合ドメインは、ＴｆＲ１結合ドメインの反対側の末端で連結することができる。例えば、プログラニュリンドメインは、ＴｆＲ１結合ドメインのＮ末端で、若しくはその５アミノ酸内で連結することができる一方で、アルブミン結合ドメインは、ＴｆＲ１結合ドメインのＣ末端で、若しくはその５アミノ酸内で連結することができるか、又は、プログラニュリンドメインは、ＴｆＲ１結合ドメインのＣ末端で、若しくはその５アミノ酸内で連結することができる一方で、アルブミン結合ドメインは、ＴｆＲ１結合ドメインのＮ末端で、若しくはその５アミノ酸内で連結することができる。

【0034】

いくつかの実施形態では、プログラニュリンドメイン及びアルブミン結合ドメインは、ＴｆＲ１結合ドメインの同じ末端又は反対の末端のいずれかで連結することができる。

【0035】

いくつかの実施形態では、プログラニュリンドメインＸは、第１のリンカーＬ_１でＴｆＲ１結合ドメインに連結することができる。プログラニュリンドメインは、ＴｆＲ１結合ドメインのＮ末端又はＣ末端でＴｆＲ１結合ドメインに結合することができる。アルブミン結合ドメインＺは、プログラニュリンドメインのＮ末端又はＣ末端で、第２のリンカーＬ_２を用いてＴｆＲ１結合ドメインに連結することができる。プログラニュリンドメイン及びアルブミン結合ドメインは、ＴｆＲ１結合ドメインの同じ末端で連結することができる。例えば、プログラニュリンドメイン及びアルブミン結合ドメインは、ＴｆＲ１結合ドメインのＮ末端若しくはＣ末端で、又はその５アミノ酸内で連結することができる。

【0036】

いくつかの実施形態では、プログラニュリンドメインは、ＴｆＲ１結合ドメインの重鎖又は軽鎖に連結することができる。

【0037】

いくつかの実施形態では、化合物は、１つ以上のポリペプチド及び／又はタンパク質配列から作製される。したがって、いくつかの実施形態では、化合物は融合タンパク質とすることができる。いくつかの実施形態は、化合物は、ポリペプチド、タンパク質、及び／又は融合タンパク質である。

【0038】

いくつかの実施形態では、プログラニュリンドメイン、ＴｆＲ１結合ドメイン、及び／又はアルブミン結合ドメインのいずれか２つは、二量体を形成していない。例えば、いくつかの実施形態では、ＴｆＲ１結合ドメイン及びアルブミン結合ドメインがプログラニュリンドメインの同じ末端にある場合であっても、それらは相互作用してＴｆＲ１結合ドメイン－アルブミン結合ドメイン二量体を形成していない。二量体は、Ｆｃヘテロ二量体などのヘテロ二量体であり得る。

【0039】

いくつかの実施形態では、化合物は、配列番号２５、配列番号２６、及び／又は配列番号２９を含む重鎖を含む。いくつかの実施形態では、化合物は、配列番号１９、配列番号３２、及び／又は配列番号３３を含む軽鎖を含む。

【0040】

いくつかの実施形態では、化合物は、配列番号２５を含む重鎖を含む。いくつかの実施形態では、化合物は、配列番号１９を含む軽鎖を含む。

【0041】

いくつかの実施形態では、化合物は、配列番号２６を含む重鎖を含む。いくつかの実施形態では、化合物は、配列番号１９を含む軽鎖を含む。

【0042】

いくつかの実施形態では、化合物は、配列番号２９を含む重鎖を含む。いくつかの実施形態では、化合物は、配列番号３２を含む軽鎖を含む。

【0043】

いくつかの実施形態では、化合物は、配列番号２９を含む重鎖を含む。いくつかの実施形態では、化合物は、配列番号３３を含む軽鎖を含む。

【0044】

いくつかの実施形態では、化合物は、配列番号２５、配列番号２６、及び／又は配列番号２９によって与えられるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９５％、及び／又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する重鎖を含む。

【0045】

いくつかの実施形態では、化合物は、配列番号１９、配列番号３２、及び／又は配列番号３３によって与えられるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９５％、及び／又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する軽鎖を含む。

【0046】

プログラニュリンドメイン
開示される化合物は、プログラニュリンドメインを含む。プログラニュリンドメインは、少なくとも１つの改変されていない、天然に存在する、及び／又は野生型のグラニュリンタンパク質を表すアミノ酸配列を含む開示された化合物の部分である。プログラニュリンは、全長プログラニュリン前駆体から切断されるグラニュリンタンパク質の前駆体タンパク質である。プログラニュリンは、プロタンパク質（ｐ）、続いて７つのグラニュリンタンパク質配列：Ｇ－Ｆ－Ｂ－Ａ－Ｃ－Ｄ－Ｅを含む。

【0047】

プログラニュリンドメインは、少なくとも１つ、少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、少なくとも５つ、少なくとも６つ、又は７つ全ての未改変グラニュリンタンパク質を含むことができる。

【0048】

プログラニュリンドメインは、プロタンパク質及び７つ全てのグラニュリンタンパク質：ｐ－Ｇ－Ｆ－Ｂ－Ａ－Ｃ－Ｄ－Ｅを含む全長未改変プログラニュリン配列を含むことができ、それは配列番号１で表される。

【0049】

プログラニュリンドメインは、プログラニュリンの全長配列の断片を含むことができる。例えば、プログラニュリンドメインは、Ｂ－Ａ－Ｃ－Ｄ－Ｅ又はＰＧＲＮΔｐＧＦとして知られるプログラニュリン断片を含むことができ、それは配列番号２で表される。プログラニュリンドメインはまた、プログラニュリンの他の断片（例えば、とりわけ、ｐ－Ｇ－Ｆ、Ｇ－Ｆ－Ｂ－Ａ－Ｃ－Ｄ－Ｅなど）を含むことができる。

【0050】

プログラニュリンドメインは、未改変、野生型、及び／又は天然のプログラニュリン配列又はその断片を含むことができる。いくつかの実施形態では、プログラニュリンドメインは、天然に存在しない修飾されたグラニュリンタンパク質配列を含まず（not include）、かつ／又は含まない（free of）。

【0051】

プログラニュリンドメインが、プログラニュリンの断片、すなわち配列番号２で表されるプログラニュリン断片又はＰＧＲＮΔｐＧＦを含む場合、化合物は、プログラニュリンドメインが全長プログラニュリン配列を含む場合よりも長く安定したままであることが、予想外にも見出された。理論に束縛されるものではないが、全長プログラニュリンの断片であるＰＧＲＮΔｐＧＦは、より小さなプログラニュリンドメインに存在するクリッピングの減少により、より長い安定性を有すると考えられる。

【0052】

プログラニュリン断片は、５５０残基未満、５００残基未満、１００残基～５００残基、３５０残基～４５０残基、４００残基～４２５残基、又は４１４残基の長さを有することができる。

【0053】

ＴｆＲ１結合ドメイン
開示される化合物は、トランスフェリン受容体１（ＴｆＲ１）結合ドメインも含むことができる。ＴｆＲ１結合ドメインは、ＴｆＲ１受容体及び／又はヒトＴｆＲ１受容体に特異的に結合する化合物の一部である。ＴｆＲ１受容体は、ニューロン及びグリア細胞に見出され、したがって、理論に束縛されるものではないが、ＴｆＲ１受容体に対する高い結合親和性を有するＴｆＲ１結合ドメインをプログラニュリンドメインに結合させると、血液脳関門（ＢＢＢ）を通過する透過が、ＴｆＲ１結合ドメインに結合していないプログラニュリン配列と比較して増強されると考えられる。更に、ＢＢＢを通過するプログラニュリンドメインの送達が増強される場合、プログラニュリンが欠乏している患者への末梢投与を可能にすることができると考えられる。

【0054】

ＴｆＲ１結合ドメインは、ペプチド、タンパク質、抗体、抗体の断片、Ｆｃ領域、Ｆａｂ領域、単一ドメイン抗体、又はそれらの組み合わせであり得る。ＴｆＲ１結合ドメインは、Ｆａｂ領域を含むことができる。ＴｆＲ１結合ドメインはまた、Ｆｃ領域を含まなくてもよく（not include）、及び／又は含まなくてもよい（free of）。

【0055】

ＴｆＲ１結合ドメインは、ＴｆＲ１受容体に対するその親和性によっても説明することができる。ＴｆＲ１結合ドメインは、ヒトＴｆＲ１受容体に対して、約１ｎＭ～約１００ｎＭ、約１ｎＭ～約５０ｎＭ、１００ｎＭ未満、１ｎＭ超～２０ｎＭ未満、約５ｎＭ～２０ｎＭ未満、約５ｎＭ～約２０ｎＭ、約１０ｎＭ、又は１０ｎＭの親和性を有することができる。好ましくは、ＴｆＲ１結合ドメインの親和性は、約１０ｎＭ又は１０ｎＭであり得る。通常、ＢＢＢを通過する輸送は、ＴｆＲ１結合ドメインの親和性濃度が減少するにつれて最大化されると予想される。予期せぬことに、ＢＢＢを通過する輸送は、親和性が２０ｎＭ未満であるが、１ｎＭ又は約１０ｎＭを超える場合に最大化されることが見出された。

【0056】

いくつかの実施形態では、ＴｆＲ１結合ドメインは、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、及び／又は配列番号１８を含む重鎖を有することができる。いくつかの実施形態では、ＴｆＲ１結合ドメインは、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、及び／又は配列番号２２を含む軽鎖を有することができる。

【0057】

いくつかの実施形態では、ＴｆＲ１結合ドメインは、配列番号１５を含む重鎖と、配列番号１９を含む軽鎖と、を含む。

【0058】

いくつかの実施形態では、ＴｆＲ１結合ドメインは、配列番号１６を含む重鎖と、配列番号２０を含む軽鎖と、を含む。

【0059】

いくつかの実施形態では、ＴｆＲ１結合ドメインは、配列番号１７を含む重鎖と、配列番号２１を含む軽鎖と、を含む。

【0060】

いくつかの実施形態では、ＴｆＲ１結合ドメインは、配列番号１８を含む重鎖と、配列番号２２を含む軽鎖と、を含む。

【0061】

いくつかの実施形態では、ＴｆＲ１結合ドメインは、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、及び／又は配列番号２２によって与えられるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９５％、及び／又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むことができる。

【0062】

いくつかの実施形態では、好適なＴｆＲ１結合ドメインは、ＴｆＲ１受容体と相互作用すると考えられるドメインの領域である、その相補性決定領域（complementary determining region、ＣＤＲ）によって定義することができる。ＴｆＲ１結合ドメインの重鎖に好適なＣＤＲは、配列番号４５、配列番号４６、及び／又は配列番号４７を含むことができる。ＴｆＲ１結合ドメインの軽鎖に好適なＣＤＲは、配列番号４８、配列番号４９、及び／又は配列番号５０を含むことができる。

【0063】

いくつかの実施形態では、ＴｆＲ１結合ドメインは、配列番号４５～５０の１つ以上を含む。

【0064】

いくつかの実施形態では、ＴｆＲ１結合ドメインは、配列番号４５、配列番号４６、配列番号４７、配列番号４８、配列番号４９及び配列番号５０を含む。

【0065】

いくつかの実施形態では、好適なＴｆＲ１結合ドメインは、表Ａに記載のＣＤＲを含むことができる。

【0066】

【表1】

表ＡのＣＤＲは、Ｋａｂａｔ．（Ｋａｂａｔ，ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎ．ＮＹ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．１９０：３８２－９３（１９７１）、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｆｉｆｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，ＮＩＨ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ Ｎｏ．９１－３２４２（１９９１））、及びＮｏｒｔｈ番号付け法（Ｎｏｒｔｈ ｅｔ ａｌ．，Ａ Ｎｅｗ Ｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇ ｏｆ Ａｎｔｉｂｏｄｙ ＣＤＲ Ｌｏｏｐ Ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，４０６：２２８－２５６（２０１１））に記載されるように定義されるＨＣＤＲ２を除いて、Ｎｏｒｔｈに記載されるように定義される。

【0067】

【表2】

表Ａ－１のＣＤＲは、Ｋａｂａｔ（Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，「Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，」Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．（１９９１））、Ｃｈｏｔｈｉａ（Ｃｈｏｔｈｉａ ｅｔ ａｌ．，「Ｃａｎｏｎｉｃａｌ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｈｙｐｅｒｖａｒｉａｂｌｅ ｒｅｇｉｏｎｓ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎｓ」，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，１９６，９０１－９１７（１９８７）、Ａｌ－Ｌａｚｉｋａｎｉ ｅｔ ａｌ．，「Ｓｔａｎｄａｒｄ ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｃａｎｏｎｉｃａｌ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎｓ」，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，２７３，９２７－９４８（１９９７））、Ｎｏｒｔｈ（Ｎｏｒｔｈ ｅｔ ａｌ．，「Ａ Ｎｅｗ Ｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇ ｏｆ Ａｎｔｉｂｏｄｙ ＣＤＲ Ｌｏｏｐ Ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ」，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，４０６，２２８－２５６（２０１１））、又はＩＭＧＴ（ｗｗｗ．ｉｍｇｔ．ｏｒｇで利用可能なｔｈｅ ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ＩｍＭｕｎｏＧｅｎｅＴｉｃｓ ｄａｔａｂａｓｅ；Ｌｅｆｒａｎｃ ｅｔ ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１９９９；２７：２０９－２１２を参照されたい）に記載されるものなどの、当業者に周知の方法に従って定義される。

【0068】

アルブミン結合ドメイン
開示される化合物はまた、アルブミン結合ドメインを含むことができる。アルブミン結合ドメインは、アルブミン及び／又はヒト血清アルブミンに特異的に結合する化合物の一部である。一部の実施形態では、アルブミン結合ドメインは、ヒト血清アルブミンに結合するが、マウス、ラット、及びカニクイザルなどであるがこれらに限定されない他の種の血清アルブミンにも結合する。

【0069】

プログラニュリンドメインのＣ末端にアルブミン結合ドメインを結合させることによって、プログラニュリンドメインの半減期が改善され、かつ／又はプログラニュリンドメインのＢＢＢを通過する輸送が改善されることが予想通りに見出された。理論に束縛されるものではないが、プログラニュリンドメインのＣ末端におけるアルブミン結合ドメインの結合がプログラニュリンドメインのＣ末端クリッピングを防止し、かつ／又はプログラニュリンがアルブミンターンオーバープロセスを通じて再利用されることを可能にするため、プログラニュリンドメインの半減期が改善されると考えられる。

【0070】

いくつかの実施形態では、アルブミン結合ドメインは、Ｌ_１又はＬ_２などのリンカーを介してプログラニュリンドメインのＣ末端に結合している。

【0071】

アルブミン結合ドメインは、ペプチド、タンパク質、抗体、抗体の断片、Ｆｃ領域、Ｆａｂ領域、単一ドメイン抗体、又はそれらの組み合わせであり得る。好ましくは、アルブミン結合ドメインは、Ｖ_ＨＨなどの単一ドメイン抗体であり得る。

【0072】

いくつかの実施形態では、アルブミン結合ドメインは、配列番号２３又は配列番号２４によって表すことができる。

【0073】

いくつかの実施形態では、アルブミン結合ドメインは、配列番号２３又は配列番号２４によって与えられるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％、９５％、及び／又は９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むことができる。

【0074】

いくつかの実施形態では、好適なアルブミン結合ドメインは、アルブミンと相互作用すると考えられるドメインの領域である、その相補性決定領域（ＣＤＲ）によって定義され得る。アルブミン結合ドメインに好適なＣＤＲは、配列番号５１、配列番号５２、及び／又は配列番号５３を含むことができる。

【0075】

いくつかの実施形態では、ＴｆＲ１結合ドメインは、配列番号５１、配列番号５２、及び配列番号５３を含む。

【0076】

いくつかの実施形態では、好適なアルブミン結合ドメインは、表Ｂに記載されるＣＤＲを含むことができる。

【0077】

【表3】

ＣＤＲは、Ｋａｂａｔ．（Ｋａｂａｔ，ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎ．ＮＹ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．１９０：３８２－９３（１９７１）、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｆｉｆｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，ＮＩＨ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ Ｎｏ．９１－３２４２（１９９１））、及びＮｏｒｔｈ番号付け法（Ｎｏｒｔｈ ｅｔ ａｌ．，Ａ Ｎｅｗ Ｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇ ｏｆ Ａｎｔｉｂｏｄｙ ＣＤＲ Ｌｏｏｐ Ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，４０６：２２８－２５６（２０１１））に記載されるように定義されるＣＤＲ２を除いて、Ｎｏｒｔｈに記載されるように定義される。

【0078】

リンカー
開示される化合物は、１つ以上のリンカーＬ_１、Ｌ_２、Ｌ_３などを含む。リンカーは、プログラニュリンドメイン、ＴｆＲ１結合ドメイン、及びアルブミン結合ドメインを互いに接続するために使用される。いくつかの実施形態では、開示される化合物は、１つのリンカー、２つのリンカー、３つのリンカー、又は１～３つのリンカーを有する。

【0079】

いくつかの実施形態では、第１のリンカーＬ_１は、ＴｆＲ１結合ドメインＹをプログラニュリンドメインＸに接続する。いくつかの実施形態では、第２のリンカーＬ_２は、アルブミン結合ドメインＺをプログラニュリンドメインＸ又はＴｆＲ１結合ドメインＹに接続する。いくつかの実施形態では、Ｌ_１及びＬ_２は同一である。いくつかの実施形態では、Ｌ_１及びＬ_２は同一ではない。

【0080】

リンカーは、独立して、共有結合、ペプチドリンカー、ＰＥＧリンカー、ジスルフィド結合、チオアセタール結合、又はチオエステル結合を含むことができる。リンカーは、独立して、共有結合、ペプチドリンカー、ＰＥＧリンカー、ジスルフィド結合、チオアセタール結合、及びチオエステル結合から選択され得る。

【0081】

いくつかの実施形態では、リンカーは、ペプチドリンカーである。好適なペプチドリンカーとしては、２～５０アミノ酸長のペプチドが挙げられる。他の好適なペプチドリンカーとしては、（Ｇ_４Ｕ）_ｎが挙げられ、式中、Ｕは任意の好適なアミノ酸であり、ｎは１～１０の整数である。Ｕによって表され得る好適なアミノ酸としては、とりわけ、グルタミン（Ｑ）、セリン（Ｓ）、アスパラギン（Ｎ）、アラニン（Ａ）が挙げられる。好ましくは、リンカーは、（Ｇ４Ｑ）_ｎ又は（Ｇ４Ｓ）_ｎであり、式中、ｎは３～５である。

【0082】

いくつかの実施形態では、リンカーは、配列番号５～１４のうちの１つ以上によって表され得る。

【0083】

一部の実施形態では、第１のリンカー及び第２のリンカーは、配列番号７によって表すことができる。

【0084】

いくつかの実施形態では、リンカーは、ＰＥＧリンカーである。好適なＰＥＧリンカーとしては、式ＩＩＩによって表されるものが挙げられ、式中、ｎは１～１０の整数である。

【0085】

【化1】

【0086】

他の好適なペプチドリンカーとしては、ＤＫＴ（Ｇ_４Ｕ）_ｎが挙げられ、式中、Ｕは任意の好適なアミノ酸であり、ｎは１～１０の整数である。Ｕによって表され得る好適なアミノ酸としては、とりわけ、グルタミン（Ｑ）、セリン（Ｓ）、アスパラギン（Ｎ）、アラニン（Ａ）が挙げられる。いくつかの実施形態では、リンカーは、ＤＫＴ（Ｇ４Ｑ）_ｎ又はＤＫＴ（Ｇ４Ｓ）_ｎであり、式中、ｎは３～５である。

【0087】

組成物及び投与経路
本発明の化合物は、様々な経路によって投与される、ヒトの医療における医薬として使用することができる。最も好ましくは、そのような組成物は、非経口投与用である。そのような医薬組成物は、当該技術分野で周知の方法（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，１９ｔｈ ｅｄ．（１９９５），Ａ．Ｇｅｎｎａｒｏ ｅｔ ａｌ．，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．を参照）によって調製することができ、本明細書に開示される化合物と、薬学的に許容される担体、希釈剤又は賦形剤とを含む。

【0088】

治療方法
本開示の化合物は、患者の治療を補助するのに、特に、１１型神経系セロイドリポフスチン症、前頭側頭型認知症、アルツハイマー疾患、パーキンソン疾患、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）などの神経変性疾患を含むＣＮＳ疾患の治療を補助するのに使用することができる。治療は、血液脳関門を横切ってプログラニュリンドメインを送達して患者における低レベルのプログラニュリンの影響を軽減することによる利益を得るヒトにおける、ＣＮＳ疾患又は状態の治療のための本開示の化合物の投与を含む。

【0089】

定義
本明細書で使用される場合、「抗体」という用語は、抗原に結合する免疫グロブリン分子を指す。抗体の実施形態には、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、ヒト抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体、二重特異性若しくは多重特異性抗体、又はコンジュゲート抗体が含まれる。抗体は、任意のクラス（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ）、及び任意のサブクラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４）であってもよい。

【0090】

本開示の例示的な抗体は、４つのポリペプチド鎖：鎖間ジスルフィド結合を介して架橋される２つの重鎖（heavy chain、ＨＣ）及び２つの軽鎖（light chain、ＬＣ）から構成された、免疫グロブリンＧ（immunoglobulin G、ＩｇＧ）型抗体である。４つのポリペプチド鎖の各々のアミノ末端部分は、抗原認識に主に関与する約１００～１２５個以上のアミノ酸の可変領域を含む。４つのポリペプチド鎖の各々のカルボキシ末端部分は、エフェクター機能に主に関与する定常領域を含有する。各重鎖は、重鎖可変領域（ＶＨ）及び重鎖定常領域から構成される。各軽鎖は、軽鎖可変領域（ＶＬ）及び軽鎖定常領域から構成される。ＩｇＧアイソタイプは、サブクラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４）に更に分割され得る。

【0091】

ＶＨ及びＶＬ領域は、フレームワーク領域（framework region、ＦＲ）と呼ばれる、より保存されている領域が散在する、相補性決定領域（ＣＤＲ）と呼ばれる、超可変領域に更に細分され得る。ＣＤＲはタンパク質の表面上に露出しており、抗原結合特異性のための抗体の重要な領域である。各ＶＨ及びＶＬは、３つのＣＤＲ及び４つのＦＲから構成されており、ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４の順序でアミノ末端からカルボキシ末端へと配置される。本明細書では、重鎖の３つのＣＤＲを「ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３」と称し、軽鎖の３つのＣＤＲを「ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３」と称する。ＣＤＲは、抗原との特異的相互作用を形成する残基の大部分を含有する。アミノ酸残基のＣＤＲへの割り当ては、Ｋａｂａｔ（Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，「Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，」Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．（１９９１））、Ｃｈｏｔｈｉａ（Ｃｈｏｔｈｉａ ｅｔ ａｌ．，「Ｃａｎｏｎｉｃａｌ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｈｙｐｅｒｖａｒｉａｂｌｅ ｒｅｇｉｏｎｓ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎｓ」，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，１９６，９０１－９１７（１９８７）、Ａｌ－Ｌａｚｉｋａｎｉ ｅｔ ａｌ．，「Ｓｔａｎｄａｒｄ ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｃａｎｏｎｉｃａｌ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎｓ」，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，２７３，９２７－９４８（１９９７））、Ｎｏｒｔｈ（Ｎｏｒｔｈ ｅｔ ａｌ．，「Ａ Ｎｅｗ Ｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇ ｏｆ Ａｎｔｉｂｏｄｙ ＣＤＲ Ｌｏｏｐ Ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ」，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，４０６，２２８－２５６（２０１１））、又はＩＭＧＴ（ｔｈｅ ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ ＩｍＭｕｎｏＧｅｎｅＴｉｃｓ ｄａｔａｂａｓｅ、ｗｗｗ．ｉｍｇｔ．ｏｒｇで利用可能、Ｌｅｆｒａｎｃ ｅｔ ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１９９９；２７：２０９－２１２を参照されたい）に記載されるものを含む、周知のスキームに従って行うことができる。

【0092】

本開示の実施形態にはまた、本明細書で使用される場合、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ断片、ｓｃＦｖ抗体断片、ｓｃＦａｂ、ジスルフィド結合Ｆｖ（ｓｄＦｖ）、Ｆｄ断片などの、抗原又は抗原のエピトープと特異的に相互作用する能力を保持する抗体の少なくとも一部を含む、抗体断片又は抗原結合断片が含まれる。

【0093】

本明細書で使用される場合、「結合する（bind）」及び「結合する（binds）」という用語は、別段示されない限り、化学結合又は別のタンパク質若しくは分子との引力相互作用を形成する、化合物の結合ドメインの能力を意味し、当該技術分野で既知の一般的な方法によって決定されるように、２つのタンパク質又は分子の密接な近接をもたらす。

【0094】

「プログラニュリンドメイン」という用語は、少なくとも１つの未改変又は野生型グラニュリンタンパク質を表すアミノ酸配列を含む本開示の化合物又はポリペプチド配列の一部を指す。いくつかの実施形態では、プログラニュリンドメインは、７つまでのグラニュリンタンパク質及びプログラニュリンに天然に含まれるプロタンパク質を表すアミノ酸配列を含むことができる。いくつかの実施形態では、プログラニュリンドメインは、２つ以上であるが７つ未満のグラニュリンタンパク質を表すアミノ酸配列、及びプログラニュリンに天然に含まれるプロタンパク質すなわち、プログラニュリン断片を含むことができる。１つの非限定的な例では、プログラニュリンドメインは、配列番号１、配列番号２及び／又は配列番号３に対応するアミノ酸配列によって表される。別の非限定的な例では、プログラニュリンドメインは配列番号４を含まない。

【0095】

「ＴｆＲ１結合ドメイン」という用語は、トランスフェリン受容体、すなわちＴｆＲ１、に結合する抗体、抗体の一部、化合物の一部、又はポリペプチド配列を指す。

【0096】

「アルブミン結合ドメイン」という用語は、アルブミンに結合する抗体、抗体の一部、化合物の一部、又はポリペプチド配列を指す。１つの非限定的な例では、アルブミン結合ドメインは、ヒト血清アルブミンに結合する本開示の化合物の一部を指す。

【0097】

本明細書で互換的に使用される場合、「患者」、「対象」、及び「個体」という用語は、ヒトを指す。特定の実施形態では、患者は更にＣＮＳ疾患、障害、又は状態（例えば、ＣＮＳ神経変性疾患）を特徴とする。いくつかの実施形態では、患者は更に、ＣＮＳ障害、疾患、又は状態を発症するリスクがあるとして特徴付けられ得る。

【0098】

本明細書で使用される場合、「Ｆａｂ」は、抗体の断片抗原結合領域を意味する。更に、本明細書で使用される場合、Ｆａｂ領域は、リンカー、プログラニュリンドメイン、ＴｆＲ１結合ドメイン、及び／又はアルブミン結合ドメインなどの開示された化合物の別の部分に連結される重鎖を含む。Ｆａｂ領域はまた、重鎖に共有結合している軽鎖を含む。

【0099】

本明細書で使用される場合、「単一ドメイン抗体」は、単一の単量体可変抗体鎖からなる抗体断片である。単一ドメイン抗体は、抗原結合領域を含む。

【0100】

本明細書で使用される場合、「Ｖ_ＨＨ断片」は、ラクダ科動物において見出される重鎖抗体から操作された単一ドメイン抗体である。

【0101】

本明細書で使用される場合、「ペプチド」又は「ペプチド鎖」という用語は、一般に、ペプチド結合を介して連結された２つ以上のアミノ酸及び／又はアミノ酸誘導体を含むポリマーを指す。ペプチドの実施形態は、リン酸化、ヒドロキシル化、スルホン化、パルミトイル化、グリコシル化、及びジスルフィド形成などの翻訳後修飾を含む、修飾又はアミノ酸誘導体を含み得る。

【0102】

本明細書で使用される場合、「に連結された」又は「と連結された」という用語は、第１のヌクレオチド（又はポリヌクレオチド）又はペプチドが、第２のヌクレオチド（又はポリヌクレオチド）又はペプチドに会合、結合、接続、又は他の方法で接合されていることを指す。例えば、第１のポリヌクレオチドは、配列が翻訳される場合に融合ペプチド又はタンパク質を形成するように、第２のポリヌクレオチド配列に連結されることができる。同様に、第１のペプチド配列は、共有結合又は非共有結合相互作用を介して第２のペプチド配列に連結されて、多量体ペプチドを形成することができる。代替的に、「に連結された」又は「と連結された」とは、非ヌクレオチド又は非ペプチド部分に会合、接続又は接合されたヌクレオチド（又はポリヌクレオチド配列）又はペプチドを指す。例えば、ペプチドは、脂肪酸部分に連結されて（すなわち、アシル化されて）、コンジュゲートペプチドを形成し得る。

【0103】

「コンジュゲート基」という用語は、本明細書で使用される場合、ペプチドに結合又は連結される基を指す。コンジュゲート基は、コンジュゲート部分及びコンジュゲート部分をペプチドに結合又は連結するためのコンジュゲートリンカーを含むことができる。

【0104】

本明細書で使用される「コンジュゲートリンカー」という用語は、コンジュゲート部分を本明細書のペプチドに結合又は連結する少なくとも１つの結合を含む原子、原子群、分子又は化合物（アミノ酸又はアミノ酸群など）を指す。

【0105】

本明細書で使用される「コンジュゲート部分」という用語は、直接又はコンジュゲートリンカーを介して本明細書のペプチドに結合又は連結された分子又は化合物、特に非ペプチド分子又は化合物を意味する。

【実施例0106】

実施例１－開示される化合物の発現
本発明の化合物は、基本的に次のように発現させることができる。適切な宿主細胞、例えば、ＨＥＫ２９３又はＣＨＯは、最適な所定のＨＣ：ＬＣベクター比（１：３、１：２又は１：１など）を使用して抗体を分泌するための発現系、又はＨＣ及びＬＣの両方をコードする単一のベクター系で、一時的に又は安定的にのいずれかでトランスフェクトされ得る。

【0107】

カッパ設計の精製
ＣＩプールの精製特性を評価するために、ＣＩを含有する１ＬのｓＣＨＯ上清を、３カラムプロセスを使用して精製した。上清を、２０ｍＭ Ｔｒｉｓ（ｐＨ ７．０）で予め平衡化した約６０ｍＬの予め充填したＣａｐｔｏＬ樹脂カラムに適用した。続いて、上清をロードしたカラムを５カラム体積の２０ｍＭ Ｔｒｉｓ（ｐＨ ７．０）で洗浄した。５カラム体積の混合酸溶出緩衝液（２０ｍＭ酢酸、５ｍＭクエン酸）を適用することによって、ＣａｐｔｏＬ樹脂からｍＡｂを溶出した。ＣａｐｔｏＬ溶出プールを０．５Ｍ Ｔｒｉｓ塩基でｐＨ ５に中和し、遠心分離し、０．２２ミクロン滅菌フィルターに適用した。このＣａｐｔｏＬ精製物質を、ＰｒｉｓｍＡ樹脂アフィニティー精製によって更に精製した。ＣａｐｔｏＬプールを、１Ｍ Ｔｒｉｓ ｐＨ７．５を使用してｐＨ約７に調整し、５０ｍＭ Ｔｒｉｓ（ｐＨ８．０）中で予め平衡化した５８ｍＬ ＰｒｉｓｍＡプレパックカラムに適用し、５カラム体積の平衡化緩衝液で洗浄し、５カラム体積の混合酸溶出緩衝液（２０ｍＭ酢酸、５ｍＭクエン酸）で溶出した。ＰｒｉｓｍＡプールを、０．５Ｍ Ｔｒｉｓ塩基を用いてｐＨ約５に中和した。陽イオン交換クロマトグラフィー（Cation Exchange、ＣＥＸ）を用いて、プールを更に精製した。ＣａｐｔｏＬプールを、２０ｍＭ酢酸、ｐＨ５で平衡化した７０ｍＬプレパックＰｏｒｏｓ ＨＳ５０ ＣＥＸカラムにロードし、１Ｍ ＮａＣｌを補充した同じ緩衝液を用いて、１５カラム体積にわたって５～６０％線形勾配で溶出した。続いて、単量体を含有する溶出画分をプールし、滅菌濾過し、ＰＢＳ中に４℃で一晩透析した。透析後、タンパク質を滅菌濾過し、計算された吸光係数を使用してＡ２８０でタンパク質濃度／収率を決定した。このｓＣＨＯ材料を用いて、全ての開発可能性及びＨＣＰタンパク質の分析を行った。

【0108】

【表4】

【0109】

サンドイッチ設計の精製
ＣＩプールの精製特性を評価するために、ＣＩを含有する３ＬのｓＣＨＯ上清を、３カラムプロセスを使用して精製した。上清を、５０ｍＭ Ｔｒｉｓ（ｐＨ ８．０）で予め平衡化した約１３８ｍＬの予め充填したＰｒｉｓｍＡ樹脂カラムに適用した。続いて、上清をロードしたカラムを５カラム体積の５０ｍＭ Ｔｒｉｓ（ｐＨ ８．０）で洗浄した。５カラム体積の混合酸溶出緩衝液（２０ｍＭ酢酸、５ｍＭクエン酸）を適用することによって、ＰｒｉｓｍＡ樹脂からｍＡｂを溶出した。ＰｒｉｓｍＡ溶出プールを０．５Ｍ Ｔｒｉｓ塩基でｐＨ ５に中和し、遠心分離し、０．２２ミクロン滅菌フィルターに適用した。このＰｒｉｓｍＡ精製物質をＣａｐｔｏＬ樹脂アフィニティー精製により更に精製した。ＰｒｉｓｍＡプールを、１Ｍ Ｔｒｉｓ ｐＨ７．５を使用してｐＨ約７に調整し、２０ｍＭ Ｔｒｉｓ（ｐＨ７）中で予め平衡化した１２０ｍＬ ＣａｐｔｏＬプレパックカラムに適用し、５カラム体積の平衡化緩衝液で洗浄し、５カラム体積の混合酸溶出緩衝液（２０ｍＭ酢酸、５ｍＭクエン酸）で溶出した。ＣａｐｔｏＬプールを、０．５Ｍ Ｔｒｉｓ塩基を用いてｐＨ約５に中和した。陽イオン交換クロマトグラフィー（ＣＥＸ）を用いて、プールを更に精製した。ＣａｐｔｏＬプールを、２０ｍＭ酢酸、ｐＨ５で平衡化した７０ｍＬプレパックＰｏｒｏｓ ＨＳ５０ ＣＥＸカラムにロードし、１Ｍ ＮａＣｌを補充した同じ緩衝液を用いて、１５カラム体積にわたって５～６０％線形勾配で溶出した。続いて、単量体を含有する溶出画分をプールし、滅菌濾過し、ＰＢＳ中に４℃で一晩透析した。透析後、タンパク質を滅菌濾過し、計算された吸光係数を使用してＡ２８０でタンパク質濃度／収率を決定した。このｓＣＨＯ材料を用いて、全ての開発可能性及びＨＣＰタンパク質の分析を行った。

【0110】

【表5】

^１ＴｆＲ１結合ドメイン／／プログラニュリンドメイン及びプログラニュリンドメイン／／アルブミン結合ドメイン、の間の連結に用いられるリンカー

【0111】

比較例１の発現及び精製
比較例１を発現させ、国際公開第２０１９２４６０７１（Ａ１）号に記載されているように精製した（国際公開第２０１９２４６０７１（Ａ１）号中の配列番号２２７及び２９１）。

【0112】

【表6】

【0113】

実施例２－Ｈ０９結合ドメインのトランスフェリン受容体１（ＴｆＲ１）結合
ヒトＴｆＲ１（human TfR1、ｈＴｆＲ１）、ヒトＴｆＲ２（human TfR2、ｈＴｆＲ２）及びカニクイザルＴｆＲ１に対する、Ｈ０９－ＰＧＲＮ及びＢＡＣＤＥの結合動態及び親和性を決定するために、抗原に対する抗体の結合親和性及び動態を、ＢＩＡＣＯＲＥ（登録商標）Ｔ２００機器を使用して決定した。ＢＩＡｃｏｒｅ（登録商標）Ｔ２００（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ，Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，Ｎ．Ｊ．）などの表面プラズモン共鳴バイオセンサーを使用して、ヒトＴｆＲ１ ＥＣＤに対する抗体Ｈ０９－ＰＧＲＮ及びＢＡＣＤＥの結合動態及び親和性を決定した。簡単に説明すると、ＢＩＡｃｏｒｅ（登録商標）Ｔ２００装置を使用して、サンドイッチ例１（Ｈ０９－ＰＧＲＮ－Ｃ９０．４３）及びサンドイッチ例２（Ｈ０９－ＰＧＲＮΔｐＧＦ－Ｃ９０．４３）の、２５℃での表面プラズモン共鳴（surface plasmon resonance、ＳＰＲ）による、ｈＴｆＲ１、ｈＴｆＲ２及びｃｙｎｏ Ｔｆｒ１に対する結合動態を測定する。試料を１×ＨＢＳ－ＥＰ＋ランニング緩衝液（Ｔｅｋｎｏｖａカタログ番号Ｈ８０２）に溶解させ、ｈＴｆＲ１、ｈＴｆＲ２、及びｃｙｎｏ ＴｆＲのＨｉｓタグ付きＥＣＤを、Ｃｙｔｉｖａ ＣＭ３ Ｓｅｒｉｅｓ Ｓセンサーチップにアミンカップリングした。

【0114】

ヘキサヒスチジンタグを有するヒトＴｆＲ１ ＥＣＤタンパク質を作製し、２９３細胞で発現させ、ニッケルチャージしたＩＭＡＣ、続いてサイズ排除クロマトグラフィーによって精製した。ｈＴｆＲ２及びカニクイザルＴｆＲ ＥＣＤはＳＹＮＧＥＮＥから購入した。

【0115】

結合は、複数の分析サイクルを使用して評価する。各サイクルは、リガンドの結合及び解離について５０μｌ／分の流速で、２５℃で行う。各動態サイクルは、以下のステップからなる：サンドイッチ例１（Ｈ０９－ＰＧＲＮ－Ｃ９０．４３）及びサンドイッチ例２（Ｈ０９－ＰＧＲＮΔｐＧＦ－Ｃ９０．４３）を、４つのフローセル全てにわたって（１２５ｎＭで開始し、各サイクルについて２倍連続希釈を使用して）２４０秒間注入し、続いて解離相を９００秒間、及び３Ｍ ＭｇＣｌ_２塩酸塩を使用して３０秒間の接触時間で再生させた。それぞれの結合速度（すなわち、ｋ_ｏｎ）及び解離速度（すなわち、ｋ_ｏｆｆ）は、標準的な二重参照を使用して評価し、バッチモードでのＢｉａＥｖａｌｕａｔｉｏｎソフトウェアにおける「１：１（Ｌａｎｇｍｕｉｒ）結合」モデルにフィットさせる。親和性（ＫＤ）を、関係式Ｋ）＝Ｋｏｆｆ／Ｋｏｎに従って結合動態から算出する。

【0116】

記載されるように実施された実験において、本発明のタンパク質構築物は、表４に示されるＴｆＲ１リガンドに対する以下の親和性を示した。表４に示すように、サンドイッチ例１及びサンドイッチ例２の両方が、１：１結合を示した。

【0117】

【表7】

【0118】

実施例３－Ｇｒｎ ＫＯマウスにおけるＰＤ耐久性
ビス（モノアシルグリセロ）ホスフェート（Bis(monoacylglycero)phosphate、ＢＭＰ）は、リソソームタンパク質膜のドッキングに重要な構造脂質であり、機能は、リソソーム機能不全の重要なバイオマーカーとして提案されている。ＰＧＲＮは、リソソームにおけるＢＭＰレベルの維持に決定的に関与する（Ｌｏｇａｎ ｅｔ ａｌ，Ｃｅｌｌ，２０２１、Ｂｏｌａｎｄ ｅｔ ａｌ，Ｎａｔ Ｃｏｍｍ，２０２２）。ＢＭＰ欠損のレスキューに対するＰＧＲＮ変異体の影響を評価するために、３～４ヶ月齢のＧｒｎ ＫＯマウスを１０Ｅ１０カッパＰＧＲＮ（カッパ例５、ＨＣ：配列番号３４及びＬＣ：配列番号３５）又は１０Ｅ１０カッパＰＧＲＮΔｐＧＦ（カッパ例６、ＨＣ：配列番号３４及びＬＣ：配列番号３６）を１．５、５及び１５ｍｇ／ｋｇで静脈内（ｉ．ｖ．）投与により処置した。処置していない野生型同腹仔及びＧｒｎ ＫＯマウスを、それぞれ陽性対照及び陰性対照として使用した。脳のＢＭＰ ２２：６レベルを、処置後１、４、７、１４、２１、３５及び６３日目に評価した。

【0119】

【表8】

【0120】

表５及び図１は、プログラニュリン断片を有する構築物（ＰＧＲＮΔｐＧＦ、すなわちプログラニュリン断片は、ｐプロタンパク質、Ｇグラニュリン、及びＦグラニュリンを含まない）が、全長プログラニュリンペプチドを有する構築物と比較して、Ｇｒｎ ＫＯマウスにおいて薬理学的応答を誘導する際に延長されたＰＤ効果及び延長された耐久性を有することを示す。理論に束縛されるものではないが、ＰＧＲＮΔｐＧＦを含む構築物は、ＰＧＲＮを含む構築物と比較して長期の耐久性を有すると考えられる。

【0121】

実施例４－タウターンオーバー
タウターンオーバーに対するＢＢＢ通過ＰＧＲＮの影響を評価するために、野生型マウスをカッパＨ０９ ＰＧＲＮ（カッパ例３）及びカッパＨ０９ ＰＧＲＮΔｐＧＦ（カッパ例４）の５ｍｇ／ｋｇ静脈内投与により処置した。可溶性タウタンパク質のレベルを、ＥＬＩＳＡを使用して処置の７日後に試験した。統計的有意性は、多重比較のための補正を伴う一元配置ＡＮＯＶＡを使用して決定した。

【0122】

表７及び図２は、両方の構築物（全長ＰＧＲＮ及びＰＧＲＮΔｐＧＦ）が、タウターンオーバーを減少させたことを示す。タウターンオーバーは、両方の構築物が野生型マウスにおいてＢＢＢを通過してプログラニュリンを送達していることを示すバイオマーカーである。

【0123】

【表9】

【0124】

実施例５－ＴｆＲシャトルは、ＢＢＢを通過してＰＧＲＮを送達する
ＢＢＢ通過ＰＧＲＮがＧｒｎ ＫＯマウスにおけるリポフスチン蓄積をレスキューすることができるかどうかを調査するために、８ヶ月齢のＧｒｎ ＫＯマウスを、様々な用量及び投与間隔でＫａｐｐ ＰＧＲＮ又はカッパＰＧＲＮΔｐＧＦで処置した。脳の組織及びＣＳＦを、初回投与の１２週間後に採取した。試験物品に対する任意の免疫原性を回避するために、ＣＤ４ Ｔ細胞を、ＧＫ１．５抗ＣＤ４モノクローナル抗体を使用して枯渇させた。リポフスチン蓄積、ミクログリア及びアストロサイトの活性化並びにＣＳＦ神経フィラメント軽鎖（neurofilament light chain、ＮｆＬ）レベルに対するＢＢＢ通過ＰＧＲＮの影響を、処置後１、６、１０、２４、４８、７２、及び１６８時間で評価した。間質液及び脳の細胞内区画におけるＰＧＲＮ曝露を推定するために、リン酸緩衝生理食塩水（phosphate-buffered saline、ＰＢＳ）緩衝液可溶性タンパク質及びＲＩＰＡ緩衝液（細胞質、膜、核、及びミトコンドリアタンパク質の単離を容易にするため、細胞及び組織の溶解に使用される緩衝液）可溶性タンパク質を連続的に抽出した。ＰＢＳ、脳組織のＲＩＰＡ画分、及び脳脊髄液（ＣＳＦ）中のＰＧＲＮレベルを、酵素結合免疫測定法（enzyme-linked immunoassay、ＥＬＩＳＡ）を使用して測定した。ＰＴＶ１１（比較例１）を、また参照化合物として評価した。

【0125】

表８は、サンドイッチ例１による処置後最大１６８時間後にＢＢＢを通過して脳及び／又はＣＳＦに送達されたプログラニュリンのレベルを示す。表９は、カッパ例３による処置の最大１６８時間後にＢＢＢを通過して脳及び／又はＣＳＦに送達されたプログラニュリンのレベルを示す。サンドイッチ例１及びカッパ例３は、同じコンポーネント、すなわち（Ｇ４Ｑ）_３ペプチドリンカーで全長プログラニュリンに連結されたＨ０９ Ｆａｂ及びＣ９０．４３ ＶＨＨを有する。しかしながら、サンドイッチ例１においては、配列番号２５に示すように、Ｈ０９ Ｆａｂ抗体部分の重鎖がプログラニュリン配列のＮ末端に連結され、Ｃ９０．４３ Ｖ_ＨＨがプログラニュリン配列のＣ末端に連結されている。カッパ例３においては、Ｈ０９ Ｆａｂ抗体部分の重鎖がＣ９０．４３ Ｖ ＶＨＨに連結され、Ｈ０９ Ｆａｂ抗体部分の軽鎖がプログラニュリン配列のＮ末端に連結されている。表８及び図３に示されるように、サンドイッチ例１の投与は、カッパ例３と比較して、脳及びＣＳＦにおけるＰＧＲＮレベルの増加をもたらした。この結果は、処置後１６８時間までの全処置後期間を通して一貫していた。

【0126】

表１０は、比較例１による処置後最大１６８時間後にＢＢＢを通過して脳及び／又はＣＳＦに送達されたプログラニュリンのレベルを示す。比較例１は、米国特許出願公開第２０２１／０２８４７０２号に開示された文献化合物である。表１０及び図３に示されるように、両方の本発明の構築物、すなわちサンドイッチ例１及びカッパ例３の投与は、比較例１での投与と比較して、脳及びＣＳＦにおいてより高いレベルのプログラニュリンをもたらした。この結果は、処置後１６８時間までの全処置後期間を通して一貫していた。したがって、本明細書に開示される構築物は、ＢＢＢを通過する脳及びＣＳＦへのＰＧＲＮの送達を改善すると考えられる。

【0127】

【表10】

【0128】

【表11】

【0129】

【表12】

【0130】

【表13】

【0131】

図６は、ｈＴｆＲ ＫＩマウスにおけるサンドイッチ例２のＣＮＳ曝露を示し、図７は、Ｇｒｎ ＫＯマウスにおけるリポフスチン病理、ニューロン損傷、神経炎症及びリソソーム機能に対するＢＢＢ通過ＰＧＲＮの影響を示す。

【0132】

実施例６－ＰＧＲＮ ＣＮＳ送達に対するＴｆＲ１シャトル親和性の評価
ＢＢＢを通過してＰＧＲＮを送達する際のＴｆＲ１シャトルの親和性の要件をよりよく理解するために、Ｇｒｎ－／－マウスを、１０ｎＭ（カッパ例６）、３００ｎＭ（カッパ例７）、及び１０００ｎＭ（カッパ例８）のＴｆＲ結合を有する３つの１０Ｅ１０－ＰＧＲＮ変異体を５ｍｇ／ｋｇで処置した。脳ＢＭＰ ２２：６レベルを、処置後７日目に評価した。処置していない野生型同腹仔及びＧｒｎ－／－マウスを、それぞれ陽性対照及び陰性対照として使用した。Ｈｉｓタグ付きＰＧＲＮ（ＳＹＮＧＥＮＥ、配列番号５５）も対照として評価した。

【0133】

表１１は、野生型マウスが０．７４±０．０７の脳ＢＭＰ ２２：６レベルを有し、Ｇｒｎ－／－マウスが０．３９±０．０２の脳ＢＭＰ ２２：６レベルを有したことを示す。Ｈｉｓタグ付きＰＧＲＮ（Ｈｉｓ－ＰＧＲＮ）の末梢用量は、Ｇｒｎ－／－マウスにおける脳ＢＭＰ ２２：６レベルを改善しなかった。１０００ｎＭのＴｆＲ１親和性を有するＴｆＲ結合ドメインを含む構築物（カッパ例８）は、０．６５±０．０９の脳ＢＭＰ ２２：６レベルをもたらし、これは、この構築物が、脳内のＰＧＲＮのレベルを、ＰＧＲＮ単独又は処置なしよりも良好に改善したが、改善は、野生型マウスにおいて見られるＰＧＲＮの量に近づかなかったことを示した。予期せぬことに、より強い親和性（３００ｎＭ）を有するＴｆＲ１結合ドメインを有する構築物（カッパ例７）は、Ｇｒｎ－／－マウスで見られたＰＧＲＮの量を改善しなかった。代わりに、３００ｎＭシャトルを有する構築物（カッパ例７）は、Ｇｒｎ－／－マウスにおけるＰＧＲＮのレベルは、未処置のＧｒｎ－／－マウス又はＴｆＲ１結合ドメインを含まないＰＧＲＮで処置したＧｒｎ－／－マウスで見られたＰＧＲＮのレベルと同等のレベルをもたらした。

【0134】

予期せぬことに、ＴｆＲ１に対して１０ｎＭの親和性を有するＴｆＲ１結合ドメインを有する構築物（カッパ例６）は、Ｇｒｎ－／－マウスで見られたＰＧＲＮの量を改善した。実際に、１０ｎＭのＴｆＲ１結合ドメインを含む構築物で処置したＧｒｎ－／－マウスで見られたＰＧＲＮのレベルは、陽性対照（野生型マウス）と同様であった。表１１及び図４のデータは、約１０ｎＭの親和性を有するＴｆＲ１結合ドメインを有する構築物が、結合したプログラニュリンドメインのＢＢＢを通過する輸送をもたらし、Ｇｒｎ－／－マウスにおいて見られるＰＧＲＮレベルの欠乏を改善することを実証する。

【0135】

【表14】

【0136】

実施例７－ＴｆＲは、ソルチリン結合の非存在下でＰＧＲＮ内部移行を媒介し、インビトロでカテプシンＤ代謝を促進した
ＰＧＲＮ欠損は、ＰＧＲＮ ＦＴＤにおけるカテプシンＤ調節不全をもたらすことが報告されている（Ｇｏｔｚｌ ｅｔ ａｌ，Ａｃｔａ Ｎｅｕｒｏｐａｔｈｏｌ，２０１４）。したがって、ＨＥＫ２９３細胞を、１００ｎｇ／ｍＬのヒトＴｆＲ又はソルチリン受容体に結合するか又は結合しないＰＧＲＮ－ＴｆＲ融合タンパク質で２４時間処理した。細胞溶解物中の成熟カテプシンＤレベルをＥＬＩＳＡによって評価した。

【0137】

表１２及び図５に示されるように、ＴｆＲは、ソルチリン結合の非存在下でＰＧＲＮ内在化を媒介し、インビトロでカテプシンＤ代謝を促進した。図５に示すように、比較例２は、ＰＧＲＮをＨＥＫ２９３細胞にシャトルすることができた。比較例２は、ソルチリンに結合することができるが、ＴｆＲには結合しない。しかしながら、８Ｄ３－ＰＧＲＮ－Ｃ９０．４３は、ソルリチン又はＴｆＲに結合することができないため、ＰＧＲＮをＨＥＫ２９３細胞にシャトルすることができなかった。予期せぬことに、８Ｄ３ Ｆａｂ部分がＨ３．０３で置換された場合、ＰＧＲＮがＨＥＫ２９３細胞に効果的にシャトルされ得ることが見出された。１つの違いは、図５に示すように、Ｈ３．０３がソルリチンではなくＴｆＲに結合できることである。理論に束縛されることを望まないが、表１２及び図５に示されるデータは、ＴｆＲ結合が、ＢＢＢを通過してＰＧＲＮを輸送するためのソルチリン結合の有効な代替物であり得ることを実証すると考えられる。

【0138】

【表15】

【0139】

実施例８－タンパク質の品質に対するリンカーの影響
プログラニュリンリンカー変異体の精製特性を評価するために、リンカー変異体を含有する１００ｍＬのｔＣＨＯ上清を、１カラムプロセスを使用して精製した。上清を、３カラム体積の３Ｍ Ｔｒｉｓ（ｐＨ ８．０）で予め平衡化した５ｍＬの予め充填したＨｉＴｒａｐ ＰｒｉｓｍＡ樹脂カラムに適用した。続いて、上清をロードしたカラムを、２．５カラム体積の２０ｍＭ Ｔｒｉｓ（ｐＨ ７）、２．５カラム体積の２０ｍＭ Ｔｒｉｓ、１Ｍ ＮａＣｌ（ｐＨ ７）、及び２．５カラム体積の２０ｍＭ Ｔｒｉｓ（ｐＨ ７）で洗浄した。５カラム体積の混合酸溶出緩衝液（２０ｍＭ酢酸、５ｍＭクエン酸）を適用することによって、融合タンパク質をＰｒｉｓｍＡ樹脂から溶出した。ＰｒｉｓｍＡ溶出プールを１Ｍ Ｔｒｉｓ（ｐＨ ８）でｐＨ ５に中和し、遠心分離し、０．２２ミクロン滅菌フィルターに適用した。タンパク質濃度／収率を、計算された吸光係数を使用してＡ２８０で決定した。純度は、５０ｍＭリン酸、３００ｍＭ ＮａＣｌ（ｐＨ ７）緩衝液中の定組成溶離を用いるＴＳＫｇｅｌ ＵＰ－ＳＷ３０００カラムでの分析用サイズ排除クロマトグラフィーで評価した。

【0140】

表１３に示されるように、リンカーの長さが、（Ｇ４Ｑ）_１～（Ｇ４Ｑ）_２～（Ｇ４Ｑ）_３に増加した場合、タンパク質の質及び純度は、両方の構築物の場合において増加した。

【0141】

【表16】

【0142】

配列表
プログラニュリン配列
配列番号１－ヒトプログラニュリン
ＴＲＣＰＤＧＱＦＣＰＶＡＣＣＬＤＰＧＧＡＳＹＳＣＣＲＰＬＬＤＫＷＰＴＴＬＳＲＨＬＧＧＰＣＱＶＤＡＨＣＳＡＧＨＳＣＩＦＴＶＳＧＴＳＳＣＣＰＦＰＥＡＶＡＣＧＤＧＨＨＣＣＰＲＧＦＨＣＳＡＤＧＲＳＣＦＱＲＳＧＮＮＳＶＧＡＩＱＣＰＤＳＱＦＥＣＰＤＦＳＴＣＣＶＭＶＤＧＳＷＧＣＣＰＭＰＱＡＳＣＣＥＤＲＶＨＣＣＰＨＧＡＦＣＤＬＶＨＴＲＣＩＴＰＴＧＴＨＰＬＡＫＫＬＰＡＱＲＴＮＲＡＶＡＬＳＳＳＶＭＣＰＤＡＲＳＲＣＰＤＧＳＴＣＣＥＬＰＳＧＫＹＧＣＣＰＭＰＮＡＴＣＣＳＤＨＬＨＣＣＰＱＤＴＶＣＤＬＩＱＳＫＣＬＳＫＥＮＡＴＴＤＬＬＴＫＬＰＡＨＴＶＧＤＶＫＣＤＭＥＶＳＣＰＤＧＹＴＣＣＲＬＱＳＧＡＷＧＣＣＰＦＴＱＡＶＣＣＥＤＨＩＨＣＣＰＡＧＦＴＣＤＴＱＫＧＴＣＥＱＧＰＨＱＶＰＷＭＥＫＡＰＡＨＬＳＬＰＤＰＱＡＬＫＲＤＶＰＣＤＮＶＳＳＣＰＳＳＤＴＣＣＱＬＴＳＧＥＷＧＣＣＰＩＰＥＡＶＣＣＳＤＨＱＨＣＣＰＱＧＹＴＣＶＡＥＧＱＣＱＲＧＳＥＩＶＡＧＬＥＫＭＰＡＲＲＡＳＬＳＨＰＲＤＩＧＣＤＱＨＴＳＣＰＶＧＱＴＣＣＰＳＬＧＧＳＷＡＣＣＱＬＰＨＡＶＣＣＥＤＲＱＨＣＣＰＡＧＹＴＣＮＶＫＡＲＳＣＥＫＥＶＶＳＡＱＰＡＴＦＬＡＲＳＰＨＶＧＶＫＤＶＥＣＧＥＧＨＦＣＨＤＮＱＴＣＣＲＤＮＲＱＧＷＡＣＣＰＹＲＱＧＶＣＣＡＤＲＲＨＣＣＰＡＧＦＲＣＡＡＲＧＴＫＣＬＲＲＥＡＰＲＷＤＡＰＬＲＤＰＡＬＲＱＬＬ

【0143】

配列番号２－ヒトプログラニュリンΔＰＧＦ
ＴＰＴＧＴＨＰＬＡＫＫＬＰＡＱＲＴＮＲＡＶＡＬＳＳＳＶＭＣＰＤＡＲＳＲＣＰＤＧＳＴＣＣＥＬＰＳＧＫＹＧＣＣＰＭＰＮＡＴＣＣＳＤＨＬＨＣＣＰＱＤＴＶＣＤＬＩＱＳＫＣＬＳＫＥＮＡＴＴＤＬＬＴＫＬＰＡＨＴＶＧＤＶＫＣＤＭＥＶＳＣＰＤＧＹＴＣＣＲＬＱＳＧＡＷＧＣＣＰＦＴＱＡＶＣＣＥＤＨＩＨＣＣＰＡＧＦＴＣＤＴＱＫＧＴＣＥＱＧＰＨＱＶＰＷＭＥＫＡＰＡＨＬＳＬＰＤＰＱＡＬＫＲＤＶＰＣＤＮＶＳＳＣＰＳＳＤＴＣＣＱＬＴＳＧＥＷＧＣＣＰＩＰＥＡＶＣＣＳＤＨＱＨＣＣＰＱＧＹＴＣＶＡＥＧＱＣＱＲＧＳＥＩＶＡＧＬＥＫＭＰＡＲＲＡＳＬＳＨＰＲＤＩＧＣＤＱＨＴＳＣＰＶＧＱＴＣＣＰＳＬＧＧＳＷＡＣＣＱＬＰＨＡＶＣＣＥＤＲＱＨＣＣＰＡＧＹＴＣＮＶＫＡＲＳＣＥＫＥＶＶＳＡＱＰＡＴＦＬＡＲＳＰＨＶＧＶＫＤＶＥＣＧＥＧＨＦＣＨＤＮＱＴＣＣＲＤＮＲＱＧＷＡＣＣＰＹＲＱＧＶＣＣＡＤＲＲＨＣＣＰＡＧＦＲＣＡＡＲＧＴＫＣＬＲＲＥＡＰＲＷＤＡＰＬＲＤＰＡＬＲＱＬＬ

【0144】

配列番号３－ＰＧＲＮｄｅｓＱＬＬ
ＴＲＣＰＤＧＱＦＣＰＶＡＣＣＬＤＰＧＧＡＳＹＳＣＣＲＰＬＬＤＫＷＰＴＴＬＳＲＨＬＧＧＰＣＱＶＤＡＨＣＳＡＧＨＳＣＩＦＴＶＳＧＴＳＳＣＣＰＦＰＥＡＶＡＣＧＤＧＨＨＣＣＰＲＧＦＨＣＳＡＤＧＲＳＣＦＱＲＳＧＮＮＳＶＧＡＩＱＣＰＤＳＱＦＥＣＰＤＦＳＴＣＣＶＭＶＤＧＳＷＧＣＣＰＭＰＱＡＳＣＣＥＤＲＶＨＣＣＰＨＧＡＦＣＤＬＶＨＴＲＣＩＴＰＴＧＴＨＰＬＡＫＫＬＰＡＱＲＴＮＲＡＶＡＬＳＳＳＶＭＣＰＤＡＲＳＲＣＰＤＧＳＴＣＣＥＬＰＳＧＫＹＧＣＣＰＭＰＮＡＴＣＣＳＤＨＬＨＣＣＰＱＤＴＶＣＤＬＩＱＳＫＣＬＳＫＥＮＡＴＴＤＬＬＴＫＬＰＡＨＴＶＧＤＶＫＣＤＭＥＶＳＣＰＤＧＹＴＣＣＲＬＱＳＧＡＷＧＣＣＰＦＴＱＡＶＣＣＥＤＨＩＨＣＣＰＡＧＦＴＣＤＴＱＫＧＴＣＥＱＧＰＨＱＶＰＷＭＥＫＡＰＡＨＬＳＬＰＤＰＱＡＬＫＲＤＶＰＣＤＮＶＳＳＣＰＳＳＤＴＣＣＱＬＴＳＧＥＷＧＣＣＰＩＰＥＡＶＣＣＳＤＨＱＨＣＣＰＱＧＹＴＣＶＡＥＧＱＣＱＲＧＳＥＩＶＡＧＬＥＫＭＰＡＲＲＡＳＬＳＨＰＲＤＩＧＣＤＱＨＴＳＣＰＶＧＱＴＣＣＰＳＬＧＧＳＷＡＣＣＱＬＰＨＡＶＣＣＥＤＲＱＨＣＣＰＡＧＹＴＣＮＶＫＡＲＳＣＥＫＥＶＶＳＡＱＰＡＴＦＬＡＲＳＰＨＶＧＶＫＤＶＥＣＧＥＧＨＦＣＨＤＮＱＴＣＣＲＤＮＲＱＧＷＡＣＣＰＹＲＱＧＶＣＣＡＤＲＲＨＣＣＰＡＧＦＲＣＡＡＲＧＴＫＣＬＲＲＥＡＰＲＷＤＡＰＬＱＤＰＡＬＲ

【0145】

配列番号４－アミノ酸残基番号５７４～５７６でＱＬＬがＰＩＬに変更されたヒトプログラニュリン
ＴＲＣＰＤＧＱＦＣＰＶＡＣＣＬＤＰＧＧＡＳＹＳＣＣＲＰＬＬＤＫＷＰＴＴＬＳＲＨＬＧＧＰＣＱＶＤＡＨＣＳＡＧＨＳＣＩＦＴＶＳＧＴＳＳＣＣＰＦＰＥＡＶＡＣＧＤＧＨＨＣＣＰＲＧＦＨＣＳＡＤＧＲＳＣＦＱＲＳＧＮＮＳＶＧＡＩＱＣＰＤＳＱＦＥＣＰＤＦＳＴＣＣＶＭＶＤＧＳＷＧＣＣＰＭＰＱＡＳＣＣＥＤＲＶＨＣＣＰＨＧＡＦＣＤＬＶＨＴＲＣＩＴＰＴＧＴＨＰＬＡＫＫＬＰＡＱＲＴＮＲＡＶＡＬＳＳＳＶＭＣＰＤＡＲＳＲＣＰＤＧＳＴＣＣＥＬＰＳＧＫＹＧＣＣＰＭＰＮＡＴＣＣＳＤＨＬＨＣＣＰＱＤＴＶＣＤＬＩＱＳＫＣＬＳＫＥＮＡＴＴＤＬＬＴＫＬＰＡＨＴＶＧＤＶＫＣＤＭＥＶＳＣＰＤＧＹＴＣＣＲＬＱＳＧＡＷＧＣＣＰＦＴＱＡＶＣＣＥＤＨＩＨＣＣＰＡＧＦＴＣＤＴＱＫＧＴＣＥＱＧＰＨＱＶＰＷＭＥＫＡＰＡＨＬＳＬＰＤＰＱＡＬＫＲＤＶＰＣＤＮＶＳＳＣＰＳＳＤＴＣＣＱＬＴＳＧＥＷＧＣＣＰＩＰＥＡＶＣＣＳＤＨＱＨＣＣＰＱＧＹＴＣＶＡＥＧＱＣＱＲＧＳＥＩＶＡＧＬＥＫＭＰＡＲＲＡＳＬＳＨＰＲＤＩＧＣＤＱＨＴＳＣＰＶＧＱＴＣＣＰＳＬＧＧＳＷＡＣＣＱＬＰＨＡＶＣＣＥＤＲＱＨＣＣＰＡＧＹＴＣＮＶＫＡＲＳＣＥＫＥＶＶＳＡＱＰＡＴＦＬＡＲＳＰＨＶＧＶＫＤＶＥＣＧＥＧＨＦＣＨＤＮＱＴＣＣＲＤＮＲＱＧＷＡＣＣＰＹＲＱＧＶＣＣＡＤＲＲＨＣＣＰＡＧＦＲＣＡＡＲＧＴＫＣＬＲＲＥＡＰＲＷＤＡＰＬＲＤＰＡＬＲＰＩＬ

【0146】

ペプチドリンカー
配列番号５－（Ｇ４Ｑ） _１
ＧＧＧＧＱ
配列番号６－（Ｇ４Ｑ） _２
ＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱ
配列番号７－（Ｇ４Ｑ） _３
ＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱ
配列番号８－（Ｇ４Ｑ） _４
ＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱ
配列番号９－（Ｇ４Ｑ） _５
ＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱ
配列番号１０－（Ｇ４Ｓ） _１
ＧＧＧＧＳ
配列番号１１－（Ｇ４Ｓ） _２
ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ
配列番号１２－（Ｇ４Ｓ） _３
ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ
配列番号１３－（Ｇ４Ｓ） _４
ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ
配列番号１４－（Ｇ４Ｓ） _５
ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ

【0147】

ＴｆＲ１結合ドメインとしてのＦａｂの重鎖
配列番号１５－Ｈ０９ Ｆａｂ重鎖
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＫＰＧＧＳＬＲＬＳＣＶＡＳＧＦＴＦＳＳＹＳＭＮＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＳＩＳＳＳＳＳＹＩＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＲＨＧＹＳＮＳＤＡＦＤＮＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴ
配列番号１６－Ｈ３．０３ Ｆａｂ重鎖
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＫＰＧＧＳＬＲＬＳＣＶＡＳＧＦＴＦＳＳＹＳＭＮＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＳＩＳＲＳＳＳＹＩＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＩＨＧＹＳＮＳＤＡＦＤＫＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＣＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴ
配列番号１７－８ｄ３ Ｆａｂ重鎖
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＮＳＬＴＬＳＣＶＡＳＧＦＴＦＳＮＹＧＭＨＷＩＲＱＡＰＫＫＧＬＥＷＩＡＭＩＹＹＤＳＳＫＭＮＹＡＤＴＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＥＭＮＳＬＲＳＥＤＴＡＭＹＹＣＡＶＰＴＳＨＹＶＶＤＶＷＧＱＧＶＳＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＣＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴ
配列番号１８－１０Ｅ１０ Ｆａｂ重鎖
ＱＳＬＥＥＳＧＧＤＬＶＫＰＥＧＳＬＴＬＴＣＴＡＳＧＦＳＦＳＧＳＹＷＩＣＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＩＧＣＩＹＳＴＳＧＧＲＴＹＹＡＳＷＶＫＧＲＦＴＩＳＫＴＳＳＴＴＶＴＬＱＭＴＳＬＴＡＡＤＴＡＴＹＦＣＡＲＧＤＤＳＩＳＤＡＹＦＤＬＷＧＰＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＣＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＫＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＳＫＹＧＰＰ

【0148】

ＴｆＲ１結合ドメインとしてのＦａｂの軽鎖
配列番号１９－Ｈ０９ Ｆａｂ軽鎖
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＡＭＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＧＩＳＨＹＬＶＷＦＱＱＫＰＧＫＶＰＫＲＬＩＹＡＡＳＳＬＱＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＬＱＨＮＳＹＰＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
配列番号２０－８Ｄ３ Ｆａｂ軽鎖
ＤＩＱＭＴＱＳＰＡＳＬＳＡＳＬＥＥＩＶＴＩＴＣＱＡＳＱＤＩＧＮＷＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＳＰＱＬＬＩＹＧＡＴＳＬＡＤＧＶＰＳＲＦＳＧＳＲＳＧＴＱＦＳＬＫＩＳＲＶＱＶＥＤＩＧＩＹＹＣＬＱＡＹＮＴＰＷＴＦＧＧＧＴＫＬＥＬＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
配列番号２１－Ｈ３．０３ Ｆａｂ軽鎖
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＡＭＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＧＩＳＮＹＬＡＷＦＱＱＫＰＧＫＶＰＫＲＬＩＹＡＡＳＳＬＱＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＬＱＨＮＳＹＰＲＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
配列番号２２－１０Ｅ１０ Ｆａｂ軽鎖
ＡＬＤＭＴＱＴＡＳＰＶＳＡＡＶＧＧＴＶＴＩＮＣＱＳＳＱＳＶＹＮＮＮＲＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＤＡＳＴＬＡＳＧＶＰＳＲＦＫＧＳＧＳＧＴＱＦＴＬＴＩＳＧＶＱＳＤＤＳＡＴＹＹＣＱＧＴＹＦＳＳＧＷＳＷＡＦＧＧＧＴＥＶＶＶＫＲＡＤＡＡＰＴＶＳＩＦＰＰＳＳＥＱＬＴＳＧＧＡＳＶＶＣＦＬＮＮＦＹＰＫＤＩＮＶＫＷＫＩＤＧＳＥＲＱＮＧＶＬＮＳＷＴＤＱＤＳＫＤＳＴＹＳＭＳＳＴＬＴＬＴＫＤＥＹＥＲＨＮＳＹＴＣＥＡＴＨＫＴＳＴＳＰＩＶＫＳＦＮＲＮＥＣ
アルブミン結合ドメインとしてのＶ _Ｈ Ｈ
配列番号２３－Ｃ９０．４３ Ｖ _Ｈ Ｈ
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＲＹＩＤＥＴＡＶＡＷＦＲＱＡＰＧＫＧＲＥＦＶＡＧＩＧＧＧＶＤＩＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＰＥＤＴＡＶＹＹＣＧＡＲＰＧＲＰＬＩＴＳＫＶＡＤＬＹＰＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＰＰ
配列番号２４－Ｃ８０．４３ Ｖ _Ｈ Ｈ
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＲＹＩＤＥＴＡＶＡＷＦＲＱＡＰＧＫＧＲＥＦＶＡＧＩＧＧＧＶＤＩＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＰＥＤＴＡＶＹＹＣＡＡＲＰＧＲＰＬＩＴＳＫＶＡＤＬＹＰＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＰＰ

【0149】

サンドイッチＰＧＲＮペイロード
配列番号２５－Ｈ０９ Ｆａｂ－ＰＧＲＮ－Ｃ９０．４３重鎖
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＫＰＧＧＳＬＲＬＳＣＶＡＳＧＦＴＦＳＳＹＳＭＮＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＳＩＳＳＳＳＳＹＩＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＲＨＧＹＳＮＳＤＡＦＤＮＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＴＲＣＰＤＧＱＦＣＰＶＡＣＣＬＤＰＧＧＡＳＹＳＣＣＲＰＬＬＤＫＷＰＴＴＬＳＲＨＬＧＧＰＣＱＶＤＡＨＣＳＡＧＨＳＣＩＦＴＶＳＧＴＳＳＣＣＰＦＰＥＡＶＡＣＧＤＧＨＨＣＣＰＲＧＦＨＣＳＡＤＧＲＳＣＦＱＲＳＧＮＮＳＶＧＡＩＱＣＰＤＳＱＦＥＣＰＤＦＳＴＣＣＶＭＶＤＧＳＷＧＣＣＰＭＰＱＡＳＣＣＥＤＲＶＨＣＣＰＨＧＡＦＣＤＬＶＨＴＲＣＩＴＰＴＧＴＨＰＬＡＫＫＬＰＡＱＲＴＮＲＡＶＡＬＳＳＳＶＭＣＰＤＡＲＳＲＣＰＤＧＳＴＣＣＥＬＰＳＧＫＹＧＣＣＰＭＰＮＡＴＣＣＳＤＨＬＨＣＣＰＱＤＴＶＣＤＬＩＱＳＫＣＬＳＫＥＮＡＴＴＤＬＬＴＫＬＰＡＨＴＶＧＤＶＫＣＤＭＥＶＳＣＰＤＧＹＴＣＣＲＬＱＳＧＡＷＧＣＣＰＦＴＱＡＶＣＣＥＤＨＩＨＣＣＰＡＧＦＴＣＤＴＱＫＧＴＣＥＱＧＰＨＱＶＰＷＭＥＫＡＰＡＨＬＳＬＰＤＰＱＡＬＫＲＤＶＰＣＤＮＶＳＳＣＰＳＳＤＴＣＣＱＬＴＳＧＥＷＧＣＣＰＩＰＥＡＶＣＣＳＤＨＱＨＣＣＰＱＧＹＴＣＶＡＥＧＱＣＱＲＧＳＥＩＶＡＧＬＥＫＭＰＡＲＲＡＳＬＳＨＰＲＤＩＧＣＤＱＨＴＳＣＰＶＧＱＴＣＣＰＳＬＧＧＳＷＡＣＣＱＬＰＨＡＶＣＣＥＤＲＱＨＣＣＰＡＧＹＴＣＮＶＫＡＲＳＣＥＫＥＶＶＳＡＱＰＡＴＦＬＡＲＳＰＨＶＧＶＫＤＶＥＣＧＥＧＨＦＣＨＤＮＱＴＣＣＲＤＮＲＱＧＷＡＣＣＰＹＲＱＧＶＣＣＡＤＲＲＨＣＣＰＡＧＦＲＣＡＡＲＧＴＫＣＬＲＲＥＡＰＲＷＤＡＰＬＲＤＰＡＬＲＱＬＬＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＲＹＩＤＥＴＡＶＡＷＦＲＱＡＰＧＫＧＲＥＦＶＡＧＩＧＧＧＶＤＩＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＰＥＤＴＡＶＹＹＣＧＡＲＰＧＲＰＬＩＴＳＫＶＡＤＬＹＰＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＰＰ
配列番号２６－Ｈ０９ Ｆａｂ－ＰＧＲＮΔｐＧＦ－Ｃ９０．４３重鎖
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＫＰＧＧＳＬＲＬＳＣＶＡＳＧＦＴＦＳＳＹＳＭＮＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＳＩＳＳＳＳＳＹＩＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＲＨＧＹＳＮＳＤＡＦＤＮＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＴＰＴＧＴＨＰＬＡＫＫＬＰＡＱＲＴＮＲＡＶＡＬＳＳＳＶＭＣＰＤＡＲＳＲＣＰＤＧＳＴＣＣＥＬＰＳＧＫＹＧＣＣＰＭＰＮＡＴＣＣＳＤＨＬＨＣＣＰＱＤＴＶＣＤＬＩＱＳＫＣＬＳＫＥＮＡＴＴＤＬＬＴＫＬＰＡＨＴＶＧＤＶＫＣＤＭＥＶＳＣＰＤＧＹＴＣＣＲＬＱＳＧＡＷＧＣＣＰＦＴＱＡＶＣＣＥＤＨＩＨＣＣＰＡＧＦＴＣＤＴＱＫＧＴＣＥＱＧＰＨＱＶＰＷＭＥＫＡＰＡＨＬＳＬＰＤＰＱＡＬＫＲＤＶＰＣＤＮＶＳＳＣＰＳＳＤＴＣＣＱＬＴＳＧＥＷＧＣＣＰＩＰＥＡＶＣＣＳＤＨＱＨＣＣＰＱＧＹＴＣＶＡＥＧＱＣＱＲＧＳＥＩＶＡＧＬＥＫＭＰＡＲＲＡＳＬＳＨＰＲＤＩＧＣＤＱＨＴＳＣＰＶＧＱＴＣＣＰＳＬＧＧＳＷＡＣＣＱＬＰＨＡＶＣＣＥＤＲＱＨＣＣＰＡＧＹＴＣＮＶＫＡＲＳＣＥＫＥＶＶＳＡＱＰＡＴＦＬＡＲＳＰＨＶＧＶＫＤＶＥＣＧＥＧＨＦＣＨＤＮＱＴＣＣＲＤＮＲＱＧＷＡＣＣＰＹＲＱＧＶＣＣＡＤＲＲＨＣＣＰＡＧＦＲＣＡＡＲＧＴＫＣＬＲＲＥＡＰＲＷＤＡＰＬＲＤＰＡＬＲＱＬＬＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＲＹＩＤＥＴＡＶＡＷＦＲＱＡＰＧＫＧＲＥＦＶＡＧＩＧＧＧＶＤＩＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＰＥＤＴＡＶＹＹＣＧＡＲＰＧＲＰＬＩＴＳＫＶＡＤＬＹＰＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＰＰ
配列番号２７－８Ｄ３－ＰＧＲＮ－Ｃ９０．４３重鎖
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＮＳＬＴＬＳＣＶＡＳＧＦＴＦＳＮＹＧＭＨＷＩＲＱＡＰＫＫＧＬＥＷＩＡＭＩＹＹＤＳＳＫＭＮＹＡＤＴＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＥＭＮＳＬＲＳＥＤＴＡＭＹＹＣＡＶＰＴＳＨＹＶＶＤＶＷＧＱＧＶＳＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＣＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＴＲＣＰＤＧＱＦＣＰＶＡＣＣＬＤＰＧＧＡＳＹＳＣＣＲＰＬＬＤＫＷＰＴＴＬＳＲＨＬＧＧＰＣＱＶＤＡＨＣＳＡＧＨＳＣＩＦＴＶＳＧＴＳＳＣＣＰＦＰＥＡＶＡＣＧＤＧＨＨＣＣＰＲＧＦＨＣＳＡＤＧＲＳＣＦＱＲＳＧＮＮＳＶＧＡＩＱＣＰＤＳＱＦＥＣＰＤＦＳＴＣＣＶＭＶＤＧＳＷＧＣＣＰＭＰＱＡＳＣＣＥＤＲＶＨＣＣＰＨＧＡＦＣＤＬＶＨＴＲＣＩＴＰＴＧＴＨＰＬＡＫＫＬＰＡＱＲＴＮＲＡＶＡＬＳＳＳＶＭＣＰＤＡＲＳＲＣＰＤＧＳＴＣＣＥＬＰＳＧＫＹＧＣＣＰＭＰＮＡＴＣＣＳＤＨＬＨＣＣＰＱＤＴＶＣＤＬＩＱＳＫＣＬＳＫＥＮＡＴＴＤＬＬＴＫＬＰＡＨＴＶＧＤＶＫＣＤＭＥＶＳＣＰＤＧＹＴＣＣＲＬＱＳＧＡＷＧＣＣＰＦＴＱＡＶＣＣＥＤＨＩＨＣＣＰＡＧＦＴＣＤＴＱＫＧＴＣＥＱＧＰＨＱＶＰＷＭＥＫＡＰＡＨＬＳＬＰＤＰＱＡＬＫＲＤＶＰＣＤＮＶＳＳＣＰＳＳＤＴＣＣＱＬＴＳＧＥＷＧＣＣＰＩＰＥＡＶＣＣＳＤＨＱＨＣＣＰＱＧＹＴＣＶＡＥＧＱＣＱＲＧＳＥＩＶＡＧＬＥＫＭＰＡＲＲＡＳＬＳＨＰＲＤＩＧＣＤＱＨＴＳＣＰＶＧＱＴＣＣＰＳＬＧＧＳＷＡＣＣＱＬＰＨＡＶＣＣＥＤＲＱＨＣＣＰＡＧＹＴＣＮＶＫＡＲＳＣＥＫＥＶＶＳＡＱＰＡＴＦＬＡＲＳＰＨＶＧＶＫＤＶＥＣＧＥＧＨＦＣＨＤＮＱＴＣＣＲＤＮＲＱＧＷＡＣＣＰＹＲＱＧＶＣＣＡＤＲＲＨＣＣＰＡＧＦＲＣＡＡＲＧＴＫＣＬＲＲＥＡＰＲＷＤＡＰＬＲＤＰＡＬＲＱＬＬＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＲＹＩＤＥＴＡＶＡＷＦＲＱＡＰＧＫＧＲＥＦＶＡＧＩＧＧＧＶＤＩＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＰＥＤＴＡＶＹＹＣＧＡＲＰＧＲＰＬＩＴＳＫＶＡＤＬＹＰＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＰＰ
配列番号２８－Ｈ３．０３－ＰＧＲＮ－Ｃ９０．４３重鎖
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＫＰＧＧＳＬＲＬＳＣＶＡＳＧＦＴＦＳＳＹＳＭＮＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＳＩＳＲＳＳＳＹＩＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＩＨＧＹＳＮＳＤＡＦＤＫＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＣＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＴＲＣＰＤＧＱＦＣＰＶＡＣＣＬＤＰＧＧＡＳＹＳＣＣＲＰＬＬＤＫＷＰＴＴＬＳＲＨＬＧＧＰＣＱＶＤＡＨＣＳＡＧＨＳＣＩＦＴＶＳＧＴＳＳＣＣＰＦＰＥＡＶＡＣＧＤＧＨＨＣＣＰＲＧＦＨＣＳＡＤＧＲＳＣＦＱＲＳＧＮＮＳＶＧＡＩＱＣＰＤＳＱＦＥＣＰＤＦＳＴＣＣＶＭＶＤＧＳＷＧＣＣＰＭＰＱＡＳＣＣＥＤＲＶＨＣＣＰＨＧＡＦＣＤＬＶＨＴＲＣＩＴＰＴＧＴＨＰＬＡＫＫＬＰＡＱＲＴＮＲＡＶＡＬＳＳＳＶＭＣＰＤＡＲＳＲＣＰＤＧＳＴＣＣＥＬＰＳＧＫＹＧＣＣＰＭＰＮＡＴＣＣＳＤＨＬＨＣＣＰＱＤＴＶＣＤＬＩＱＳＫＣＬＳＫＥＮＡＴＴＤＬＬＴＫＬＰＡＨＴＶＧＤＶＫＣＤＭＥＶＳＣＰＤＧＹＴＣＣＲＬＱＳＧＡＷＧＣＣＰＦＴＱＡＶＣＣＥＤＨＩＨＣＣＰＡＧＦＴＣＤＴＱＫＧＴＣＥＱＧＰＨＱＶＰＷＭＥＫＡＰＡＨＬＳＬＰＤＰＱＡＬＫＲＤＶＰＣＤＮＶＳＳＣＰＳＳＤＴＣＣＱＬＴＳＧＥＷＧＣＣＰＩＰＥＡＶＣＣＳＤＨＱＨＣＣＰＱＧＹＴＣＶＡＥＧＱＣＱＲＧＳＥＩＶＡＧＬＥＫＭＰＡＲＲＡＳＬＳＨＰＲＤＩＧＣＤＱＨＴＳＣＰＶＧＱＴＣＣＰＳＬＧＧＳＷＡＣＣＱＬＰＨＡＶＣＣＥＤＲＱＨＣＣＰＡＧＹＴＣＮＶＫＡＲＳＣＥＫＥＶＶＳＡＱＰＡＴＦＬＡＲＳＰＨＶＧＶＫＤＶＥＣＧＥＧＨＦＣＨＤＮＱＴＣＣＲＤＮＲＱＧＷＡＣＣＰＹＲＱＧＶＣＣＡＤＲＲＨＣＣＰＡＧＦＲＣＡＡＲＧＴＫＣＬＲＲＥＡＰＲＷＤＡＰＬＲＤＰＡＬＲＱＬＬＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＲＹＩＤＥＴＡＶＡＷＦＲＱＡＰＧＫＧＲＥＦＶＡＧＩＧＧＧＶＤＩＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＰＥＤＴＡＶＹＹＣＧＡＲＰＧＲＰＬＩＴＳＫＶＡＤＬＹＰＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＰＰ

【0150】

カッパＰＧＲＮペイロード
配列番号２９－Ｈ０９－Ｃ９０．４３重鎖
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＫＰＧＧＳＬＲＬＳＣＶＡＳＧＦＴＦＳＳＹＳＭＮＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＳＩＳＳＳＳＳＹＩＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＲＨＧＹＳＮＳＤＡＦＤＮＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＲＹＩＤＥＴＡＶＡＷＦＲＱＡＰＧＫＧＲＥＦＶＡＧＩＧＧＧＶＤＩＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＰＥＤＴＡＶＹＹＣＧＡＲＰＧＲＰＬＩＴＳＫＶＡＤＬＹＰＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＰＰ
配列番号３０－Ｈ０９ ＰＧＲＮｄｅｓＱＬＬ軽鎖
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＡＭＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＧＩＳＨＹＬＶＷＦＱＱＫＰＧＫＶＰＫＲＬＩＹＡＡＳＳＬＱＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＬＱＨＮＳＹＰＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＴＲＣＰＤＧＱＦＣＰＶＡＣＣＬＤＰＧＧＡＳＹＳＣＣＲＰＬＬＤＫＷＰＴＴＬＳＲＨＬＧＧＰＣＱＶＤＡＨＣＳＡＧＨＳＣＩＦＴＶＳＧＴＳＳＣＣＰＦＰＥＡＶＡＣＧＤＧＨＨＣＣＰＲＧＦＨＣＳＡＤＧＲＳＣＦＱＲＳＧＮＮＳＶＧＡＩＱＣＰＤＳＱＦＥＣＰＤＦＳＴＣＣＶＭＶＤＧＳＷＧＣＣＰＭＰＱＡＳＣＣＥＤＲＶＨＣＣＰＨＧＡＦＣＤＬＶＨＴＲＣＩＴＰＴＧＴＨＰＬＡＫＫＬＰＡＱＲＴＮＲＡＶＡＬＳＳＳＶＭＣＰＤＡＲＳＲＣＰＤＧＳＴＣＣＥＬＰＳＧＫＹＧＣＣＰＭＰＮＡＴＣＣＳＤＨＬＨＣＣＰＱＤＴＶＣＤＬＩＱＳＫＣＬＳＫＥＮＡＴＴＤＬＬＴＫＬＰＡＨＴＶＧＤＶＫＣＤＭＥＶＳＣＰＤＧＹＴＣＣＲＬＱＳＧＡＷＧＣＣＰＦＴＱＡＶＣＣＥＤＨＩＨＣＣＰＡＧＦＴＣＤＴＱＫＧＴＣＥＱＧＰＨＱＶＰＷＭＥＫＡＰＡＨＬＳＬＰＤＰＱＡＬＫＲＤＶＰＣＤＮＶＳＳＣＰＳＳＤＴＣＣＱＬＴＳＧＥＷＧＣＣＰＩＰＥＡＶＣＣＳＤＨＱＨＣＣＰＱＧＹＴＣＶＡＥＧＱＣＱＲＧＳＥＩＶＡＧＬＥＫＭＰＡＲＲＡＳＬＳＨＰＲＤＩＧＣＤＱＨＴＳＣＰＶＧＱＴＣＣＰＳＬＧＧＳＷＡＣＣＱＬＰＨＡＶＣＣＥＤＲＱＨＣＣＰＡＧＹＴＣＮＶＫＡＲＳＣＥＫＥＶＶＳＡＱＰＡＴＦＬＡＲＳＰＨＶＧＶＫＤＶＥＣＧＥＧＨＦＣＨＤＮＱＴＣＣＲＤＮＲＱＧＷＡＣＣＰＹＲＱＧＶＣＣＡＤＲＲＨＣＣＰＡＧＦＲＣＡＡＲＧＴＫＣＬＲＲＥＡＰＲＷＤＡＰＬＱＤＰＡＬＲ
配列番号３１－Ｈ０９ ＰＧＲＮΔｐＧＦ ｄｅｓＱＬＬ軽鎖
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＡＭＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＧＩＳＨＹＬＶＷＦＱＱＫＰＧＫＶＰＫＲＬＩＹＡＡＳＳＬＱＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＬＱＨＮＳＹＰＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＴＰＴＧＴＨＰＬＡＫＫＬＰＡＱＲＴＮＲＡＶＡＬＳＳＳＶＭＣＰＤＡＲＳＲＣＰＤＧＳＴＣＣＥＬＰＳＧＫＹＧＣＣＰＭＰＮＡＴＣＣＳＤＨＬＨＣＣＰＱＤＴＶＣＤＬＩＱＳＫＣＬＳＫＥＮＡＴＴＤＬＬＴＫＬＰＡＨＴＶＧＤＶＫＣＤＭＥＶＳＣＰＤＧＹＴＣＣＲＬＱＳＧＡＷＧＣＣＰＦＴＱＡＶＣＣＥＤＨＩＨＣＣＰＡＧＦＴＣＤＴＱＫＧＴＣＥＱＧＰＨＱＶＰＷＭＥＫＡＰＡＨＬＳＬＰＤＰＱＡＬＫＲＤＶＰＣＤＮＶＳＳＣＰＳＳＤＴＣＣＱＬＴＳＧＥＷＧＣＣＰＩＰＥＡＶＣＣＳＤＨＱＨＣＣＰＱＧＹＴＣＶＡＥＧＱＣＱＲＧＳＥＩＶＡＧＬＥＫＭＰＡＲＲＡＳＬＳＨＰＲＤＩＧＣＤＱＨＴＳＣＰＶＧＱＴＣＣＰＳＬＧＧＳＷＡＣＣＱＬＰＨＡＶＣＣＥＤＲＱＨＣＣＰＡＧＹＴＣＮＶＫＡＲＳＣＥＫＥＶＶＳＡＱＰＡＴＦＬＡＲＳＰＨＶＧＶＫＤＶＥＣＧＥＧＨＦＣＨＤＮＱＴＣＣＲＤＮＲＱＧＷＡＣＣＰＹＲＱＧＶＣＣＡＤＲＲＨＣＣＰＡＧＦＲＣＡＡＲＧＴＫＣＬＲＲＥＡＰＲＷＤＡＰＬＲＤＰＡＬＲ
配列番号３２－Ｈ０９ ＰＧＲＮ軽鎖
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＡＭＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＧＩＳＨＹＬＶＷＦＱＱＫＰＧＫＶＰＫＲＬＩＹＡＡＳＳＬＱＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＬＱＨＮＳＹＰＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＴＲＣＰＤＧＱＦＣＰＶＡＣＣＬＤＰＧＧＡＳＹＳＣＣＲＰＬＬＤＫＷＰＴＴＬＳＲＨＬＧＧＰＣＱＶＤＡＨＣＳＡＧＨＳＣＩＦＴＶＳＧＴＳＳＣＣＰＦＰＥＡＶＡＣＧＤＧＨＨＣＣＰＲＧＦＨＣＳＡＤＧＲＳＣＦＱＲＳＧＮＮＳＶＧＡＩＱＣＰＤＳＱＦＥＣＰＤＦＳＴＣＣＶＭＶＤＧＳＷＧＣＣＰＭＰＱＡＳＣＣＥＤＲＶＨＣＣＰＨＧＡＦＣＤＬＶＨＴＲＣＩＴＰＴＧＴＨＰＬＡＫＫＬＰＡＱＲＴＮＲＡＶＡＬＳＳＳＶＭＣＰＤＡＲＳＲＣＰＤＧＳＴＣＣＥＬＰＳＧＫＹＧＣＣＰＭＰＮＡＴＣＣＳＤＨＬＨＣＣＰＱＤＴＶＣＤＬＩＱＳＫＣＬＳＫＥＮＡＴＴＤＬＬＴＫＬＰＡＨＴＶＧＤＶＫＣＤＭＥＶＳＣＰＤＧＹＴＣＣＲＬＱＳＧＡＷＧＣＣＰＦＴＱＡＶＣＣＥＤＨＩＨＣＣＰＡＧＦＴＣＤＴＱＫＧＴＣＥＱＧＰＨＱＶＰＷＭＥＫＡＰＡＨＬＳＬＰＤＰＱＡＬＫＲＤＶＰＣＤＮＶＳＳＣＰＳＳＤＴＣＣＱＬＴＳＧＥＷＧＣＣＰＩＰＥＡＶＣＣＳＤＨＱＨＣＣＰＱＧＹＴＣＶＡＥＧＱＣＱＲＧＳＥＩＶＡＧＬＥＫＭＰＡＲＲＡＳＬＳＨＰＲＤＩＧＣＤＱＨＴＳＣＰＶＧＱＴＣＣＰＳＬＧＧＳＷＡＣＣＱＬＰＨＡＶＣＣＥＤＲＱＨＣＣＰＡＧＹＴＣＮＶＫＡＲＳＣＥＫＥＶＶＳＡＱＰＡＴＦＬＡＲＳＰＨＶＧＶＫＤＶＥＣＧＥＧＨＦＣＨＤＮＱＴＣＣＲＤＮＲＱＧＷＡＣＣＰＹＲＱＧＶＣＣＡＤＲＲＨＣＣＰＡＧＦＲＣＡＡＲＧＴＫＣＬＲＲＥＡＰＲＷＤＡＰＬＱＤＰＡＬＲＱＬＬ
配列番号３３－Ｈ０９ ＰＧＲＮΔｐＧＦ軽鎖
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＡＭＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＧＩＳＨＹＬＶＷＦＱＱＫＰＧＫＶＰＫＲＬＩＹＡＡＳＳＬＱＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＬＱＨＮＳＹＰＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＴＰＴＧＴＨＰＬＡＫＫＬＰＡＱＲＴＮＲＡＶＡＬＳＳＳＶＭＣＰＤＡＲＳＲＣＰＤＧＳＴＣＣＥＬＰＳＧＫＹＧＣＣＰＭＰＮＡＴＣＣＳＤＨＬＨＣＣＰＱＤＴＶＣＤＬＩＱＳＫＣＬＳＫＥＮＡＴＴＤＬＬＴＫＬＰＡＨＴＶＧＤＶＫＣＤＭＥＶＳＣＰＤＧＹＴＣＣＲＬＱＳＧＡＷＧＣＣＰＦＴＱＡＶＣＣＥＤＨＩＨＣＣＰＡＧＦＴＣＤＴＱＫＧＴＣＥＱＧＰＨＱＶＰＷＭＥＫＡＰＡＨＬＳＬＰＤＰＱＡＬＫＲＤＶＰＣＤＮＶＳＳＣＰＳＳＤＴＣＣＱＬＴＳＧＥＷＧＣＣＰＩＰＥＡＶＣＣＳＤＨＱＨＣＣＰＱＧＹＴＣＶＡＥＧＱＣＱＲＧＳＥＩＶＡＧＬＥＫＭＰＡＲＲＡＳＬＳＨＰＲＤＩＧＣＤＱＨＴＳＣＰＶＧＱＴＣＣＰＳＬＧＧＳＷＡＣＣＱＬＰＨＡＶＣＣＥＤＲＱＨＣＣＰＡＧＹＴＣＮＶＫＡＲＳＣＥＫＥＶＶＳＡＱＰＡＴＦＬＡＲＳＰＨＶＧＶＫＤＶＥＣＧＥＧＨＦＣＨＤＮＱＴＣＣＲＤＮＲＱＧＷＡＣＣＰＹＲＱＧＶＣＣＡＤＲＲＨＣＣＰＡＧＦＲＣＡＡＲＧＴＫＣＬＲＲＥＡＰＲＷＤＡＰＬＲＤＰＡＬＲＱＬＬ
配列番号３４－１０Ｅ１０－Ｃ８０．４３重鎖
ＱＳＬＥＥＳＧＧＤＬＶＫＰＥＧＳＬＴＬＴＣＴＡＳＧＦＳＦＳＧＳＹＷＩＣＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＩＧＣＩＹＳＴＳＧＧＲＴＹＹＡＳＷＶＫＧＲＦＴＩＳＫＴＳＳＴＴＶＴＬＱＭＴＳＬＴＡＡＤＴＡＴＹＦＣＡＲＧＤＤＳＩＳＤＡＹＦＤＬＷＧＰＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＣＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＫＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＳＫＹＧＰＰＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＲＹＩＤＥＴＡＶＡＷＦＲＱＡＰＧＫＧＲＥＦＶＡＧＩＧＧＧＶＤＩＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＰＥＤＴＡＶＹＹＣＡＡＲＰＧＲＰＬＩＴＳＫＶＡＤＬＹＰＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＰＰ
配列番号３５－１０Ｅ１０ ＰＧＲＮ軽鎖
ＡＬＤＭＴＱＴＡＳＰＶＳＡＡＶＧＧＴＶＴＩＮＣＱＳＳＱＳＶＹＮＮＮＲＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＤＡＳＴＬＡＳＧＶＰＳＲＦＫＧＳＧＳＧＴＱＦＴＬＴＩＳＧＶＱＳＤＤＳＡＴＹＹＣＱＧＴＹＦＳＳＧＷＳＷＡＦＧＧＧＴＥＶＶＶＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＴＲＣＰＤＧＱＦＣＰＶＡＣＣＬＤＰＧＧＡＳＹＳＣＣＲＰＬＬＤＫＷＰＴＴＬＳＲＨＬＧＧＰＣＱＶＤＡＨＣＳＡＧＨＳＣＩＦＴＶＳＧＴＳＳＣＣＰＦＰＥＡＶＡＣＧＤＧＨＨＣＣＰＲＧＦＨＣＳＡＤＧＲＳＣＦＱＲＳＧＮＮＳＶＧＡＩＱＣＰＤＳＱＦＥＣＰＤＦＳＴＣＣＶＭＶＤＧＳＷＧＣＣＰＭＰＱＡＳＣＣＥＤＲＶＨＣＣＰＨＧＡＦＣＤＬＶＨＴＲＣＩＴＰＴＧＴＨＰＬＡＫＫＬＰＡＱＲＴＮＲＡＶＡＬＳＳＳＶＭＣＰＤＡＲＳＲＣＰＤＧＳＴＣＣＥＬＰＳＧＫＹＧＣＣＰＭＰＮＡＴＣＣＳＤＨＬＨＣＣＰＱＤＴＶＣＤＬＩＱＳＫＣＬＳＫＥＮＡＴＴＤＬＬＴＫＬＰＡＨＴＶＧＤＶＫＣＤＭＥＶＳＣＰＤＧＹＴＣＣＲＬＱＳＧＡＷＧＣＣＰＦＴＱＡＶＣＣＥＤＨＩＨＣＣＰＡＧＦＴＣＤＴＱＫＧＴＣＥＱＧＰＨＱＶＰＷＭＥＫＡＰＡＨＬＳＬＰＤＰＱＡＬＫＲＤＶＰＣＤＮＶＳＳＣＰＳＳＤＴＣＣＱＬＴＳＧＥＷＧＣＣＰＩＰＥＡＶＣＣＳＤＨＱＨＣＣＰＱＧＹＴＣＶＡＥＧＱＣＱＲＧＳＥＩＶＡＧＬＥＫＭＰＡＲＲＡＳＬＳＨＰＲＤＩＧＣＤＱＨＴＳＣＰＶＧＱＴＣＣＰＳＬＧＧＳＷＡＣＣＱＬＰＨＡＶＣＣＥＤＲＱＨＣＣＰＡＧＹＴＣＮＶＫＡＲＳＣＥＫＥＶＶＳＡＱＰＡＴＦＬＡＲＳＰＨＶＧＶＫＤＶＥＣＧＥＧＨＦＣＨＤＮＱＴＣＣＲＤＮＲＱＧＷＡＣＣＰＹＲＱＧＶＣＣＡＤＲＲＨＣＣＰＡＧＦＲＣＡＡＲＧＴＫＣＬＲＲＥＡＰＲＷＤＡＰＬＲＤＰＡＬＲＱＬＬ
配列番号３６－１０Ｅ１０ ＰＧＲＮΔｐＧＦ軽鎖
ＡＬＤＭＴＱＴＡＳＰＶＳＡＡＶＧＧＴＶＴＩＮＣＱＳＳＱＳＶＹＮＮＮＲＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＤＡＳＴＬＡＳＧＶＰＳＲＦＫＧＳＧＳＧＴＱＦＴＬＴＩＳＧＶＱＳＤＤＳＡＴＹＹＣＱＧＴＹＦＳＳＧＷＳＷＡＦＧＧＧＴＥＶＶＶＫＲＡＤＡＡＰＴＶＳＩＦＰＰＳＳＥＱＬＴＳＧＧＡＳＶＶＣＦＬＮＮＦＹＰＫＤＩＮＶＫＷＫＩＤＧＳＥＲＱＮＧＶＬＮＳＷＴＤＱＤＳＫＤＳＴＹＳＭＳＳＴＬＴＬＴＫＤＥＹＥＲＨＮＳＹＴＣＥＡＴＨＫＴＳＴＳＰＩＶＫＳＦＮＲＮＥＣＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＴＰＴＧＴＨＰＬＡＫＫＬＰＡＱＲＴＮＲＡＶＡＬＳＳＳＶＭＣＰＤＡＲＳＲＣＰＤＧＳＴＣＣＥＬＰＳＧＫＹＧＣＣＰＭＰＮＡＴＣＣＳＤＨＬＨＣＣＰＱＤＴＶＣＤＬＩＱＳＫＣＬＳＫＥＮＡＴＴＤＬＬＴＫＬＰＡＨＴＶＧＤＶＫＣＤＭＥＶＳＣＰＤＧＹＴＣＣＲＬＱＳＧＡＷＧＣＣＰＦＴＱＡＶＣＣＥＤＨＩＨＣＣＰＡＧＦＴＣＤＴＱＫＧＴＣＥＱＧＰＨＱＶＰＷＭＥＫＡＰＡＨＬＳＬＰＤＰＱＡＬＫＲＤＶＰＣＤＮＶＳＳＣＰＳＳＤＴＣＣＱＬＴＳＧＥＷＧＣＣＰＩＰＥＡＶＣＣＳＤＨＱＨＣＣＰＱＧＹＴＣＶＡＥＧＱＣＱＲＧＳＥＩＶＡＧＬＥＫＭＰＡＲＲＡＳＬＳＨＰＲＤＩＧＣＤＱＨＴＳＣＰＶＧＱＴＣＣＰＳＬＧＧＳＷＡＣＣＱＬＰＨＡＶＣＣＥＤＲＱＨＣＣＰＡＧＹＴＣＮＶＫＡＲＳＣＥＫＥＶＶＳＡＱＰＡＴＦＬＡＲＳＰＨＶＧＶＫＤＶＥＣＧＥＧＨＦＣＨＤＮＱＴＣＣＲＤＮＲＱＧＷＡＣＣＰＹＲＱＧＶＣＣＡＤＲＲＨＣＣＰＡＧＦＲＣＡＡＲＧＴＫＣＬＲＲＥＡＰＲＷＤＡＰＬＲＤＰＡＬＲＱＬＬ
配列番号３７－１０Ｅ１０ Ｒ３２Ｗ（３００ｎＭ）ＰＧＲＮ軽鎖
ＡＬＤＭＴＱＴＡＳＰＶＳＡＡＶＧＧＴＶＴＩＮＣＱＳＳＱＳＶＹＮＮＮＷＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＤＡＳＴＬＡＳＧＶＰＳＲＦＫＧＳＧＳＧＴＱＦＴＬＴＩＳＧＶＱＳＤＤＳＡＴＹＹＣＱＧＴＹＦＳＳＧＷＳＷＡＦＧＧＧＴＥＶＶＶＫＲＡＤＡＡＰＴＶＳＩＦＰＰＳＳＥＱＬＴＳＧＧＡＳＶＶＣＦＬＮＮＦＹＰＫＤＩＮＶＫＷＫＩＤＧＳＥＲＱＮＧＶＬＮＳＷＴＤＱＤＳＫＤＳＴＹＳＭＳＳＴＬＴＬＴＫＤＥＹＥＲＨＮＳＹＴＣＥＡＴＨＫＴＳＴＳＰＩＶＫＳＦＮＲＮＥＣＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＴＲＣＰＤＧＱＦＣＰＶＡＣＣＬＤＰＧＧＡＳＹＳＣＣＲＰＬＬＤＫＷＰＴＴＬＳＲＨＬＧＧＰＣＱＶＤＡＨＣＳＡＧＨＳＣＩＦＴＶＳＧＴＳＳＣＣＰＦＰＥＡＶＡＣＧＤＧＨＨＣＣＰＲＧＦＨＣＳＡＤＧＲＳＣＦＱＲＳＧＮＮＳＶＧＡＩＱＣＰＤＳＱＦＥＣＰＤＦＳＴＣＣＶＭＶＤＧＳＷＧＣＣＰＭＰＱＡＳＣＣＥＤＲＶＨＣＣＰＨＧＡＦＣＤＬＶＨＴＲＣＩＴＰＴＧＴＨＰＬＡＫＫＬＰＡＱＲＴＮＲＡＶＡＬＳＳＳＶＭＣＰＤＡＲＳＲＣＰＤＧＳＴＣＣＥＬＰＳＧＫＹＧＣＣＰＭＰＮＡＴＣＣＳＤＨＬＨＣＣＰＱＤＴＶＣＤＬＩＱＳＫＣＬＳＫＥＮＡＴＴＤＬＬＴＫＬＰＡＨＴＶＧＤＶＫＣＤＭＥＶＳＣＰＤＧＹＴＣＣＲＬＱＳＧＡＷＧＣＣＰＦＴＱＡＶＣＣＥＤＨＩＨＣＣＰＡＧＦＴＣＤＴＱＫＧＴＣＥＱＧＰＨＱＶＰＷＭＥＫＡＰＡＨＬＳＬＰＤＰＱＡＬＫＲＤＶＰＣＤＮＶＳＳＣＰＳＳＤＴＣＣＱＬＴＳＧＥＷＧＣＣＰＩＰＥＡＶＣＣＳＤＨＱＨＣＣＰＱＧＹＴＣＶＡＥＧＱＣＱＲＧＳＥＩＶＡＧＬＥＫＭＰＡＲＲＡＳＬＳＨＰＲＤＩＧＣＤＱＨＴＳＣＰＶＧＱＴＣＣＰＳＬＧＧＳＷＡＣＣＱＬＰＨＡＶＣＣＥＤＲＱＨＣＣＰＡＧＹＴＣＮＶＫＡＲＳＣＥＫＥＶＶＳＡＱＰＡＴＦＬＡＲＳＰＨＶＧＶＫＤＶＥＣＧＥＧＨＦＣＨＤＮＱＴＣＣＲＤＮＲＱＧＷＡＣＣＰＹＲＱＧＶＣＣＡＤＲＲＨＣＣＰＡＧＦＲＣＡＡＲＧＴＫＣＬＲＲＥＡＰＲＷＤＡＰＬＲＤＰＡＬＲＱＬＬ
配列番号３８－１０Ｅ１０ Ｔ５２Ｇ ＰＧＲＮ軽鎖（１０００ｎＭ）
ＡＩＤＭＴＱＴＡＳＰＶＳＡＡＶＧＧＴＶＴＩＮＣＱＳＳＱＳＶＹＮＮＮＲＬＡＷＹＱＱＫＰＧＱＰＰＫＬＬＩＹＧＡＳＴＬＡＳＧＶＰＳＲＦＫＧＳＧＳＧＴＱＦＴＬＴＩＳＧＶＱＣＤＤＳＡＴＹＹＣＱＧＴＹＦＳＳＧＷＳＷＡＦＧＧＧＴＥＶＶＶＫＲＡＤＡＡＰＴＶＳＩＦＰＰＳＳＥＱＬＴＳＧＧＡＳＶＶＣＦＬＮＮＦＹＰＫＤＩＮＶＫＷＫＩＤＧＳＥＲＱＮＧＶＬＮＳＷＴＤＱＤＳＫＤＳＴＹＳＭＳＳＴＬＴＬＴＫＤＥＹＥＲＨＮＳＹＴＣＥＡＴＨＫＴＳＴＳＰＩＶＫＳＦＮＲＮＥＣＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＴＲＣＰＤＧＱＦＣＰＶＡＣＣＬＤＰＧＧＡＳＹＳＣＣＲＰＬＬＤＫＷＰＴＴＬＳＲＨＬＧＧＰＣＱＶＤＡＨＣＳＡＧＨＳＣＩＦＴＶＳＧＴＳＳＣＣＰＦＰＥＡＶＡＣＧＤＧＨＨＣＣＰＲＧＦＨＣＳＡＤＧＲＳＣＦＱＲＳＧＮＮＳＶＧＡＩＱＣＰＤＳＱＦＥＣＰＤＦＳＴＣＣＶＭＶＤＧＳＷＧＣＣＰＭＰＱＡＳＣＣＥＤＲＶＨＣＣＰＨＧＡＦＣＤＬＶＨＴＲＣＩＴＰＴＧＴＨＰＬＡＫＫＬＰＡＱＲＴＮＲＡＶＡＬＳＳＳＶＭＣＰＤＡＲＳＲＣＰＤＧＳＴＣＣＥＬＰＳＧＫＹＧＣＣＰＭＰＮＡＴＣＣＳＤＨＬＨＣＣＰＱＤＴＶＣＤＬＩＱＳＫＣＬＳＫＥＮＡＴＴＤＬＬＴＫＬＰＡＨＴＶＧＤＶＫＣＤＭＥＶＳＣＰＤＧＹＴＣＣＲＬＱＳＧＡＷＧＣＣＰＦＴＱＡＶＣＣＥＤＨＩＨＣＣＰＡＧＦＴＣＤＴＱＫＧＴＣＥＱＧＰＨＱＶＰＷＭＥＫＡＰＡＨＬＳＬＰＤＰＱＡＬＫＲＤＶＰＣＤＮＶＳＳＣＰＳＳＤＴＣＣＱＬＴＳＧＥＷＧＣＣＰＩＰＥＡＶＣＣＳＤＨＱＨＣＣＰＱＧＹＴＣＶＡＥＧＱＣＱＲＧＳＥＩＶＡＧＬＥＫＭＰＡＲＲＡＳＬＳＨＰＲＤＩＧＣＤＱＨＴＳＣＰＶＧＱＴＣＣＰＳＬＧＧＳＷＡＣＣＱＬＰＨＡＶＣＣＥＤＲＱＨＣＣＰＡＧＹＴＣＮＶＫＡＲＳＣＥＫＥＶＶＳＡＱＰＡＴＦＬＡＲＳＰＨＶＧＶＫＤＶＥＣＧＥＧＨＦＣＨＤＮＱＴＣＣＲＤＮＲＱＧＷＡＣＣＰＹＲＱＧＶＣＣＡＤＲＲＨＣＣＰＡＧＦＲＣＡＡＲＧＴＫＣＬＲＲＥＡＰＲＷＤＡＰＬＲＤＰＡＬＲＱＬＬ

【0151】

ノブ及びホール
配列番号３９－ｓｃＦｖ ８Ｄ３－ｈＩｇＧ１－ＬＡＬＡノブ
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＮＳＬＴＬＳＣＶＡＳＧＦＴＦＳＮＹＧＭＨＷＩＲＱＡＰＫＫＣＬＥＷＩＡＭＩＹＹＤＳＳＫＭＮＹＡＤＴＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＥＭＮＳＬＲＳＥＤＴＡＭＹＹＣＡＶＰＴＳＨＹＶＶＤＶＷＧＱＧＶＳＶＴＶＳＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＤＩＱＭＴＱＳＰＡＳＬＳＡＳＬＥＥＩＶＴＩＴＣＱＡＳＱＤＩＧＮＷＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＳＰＱＬＬＩＹＧＡＴＳＬＡＤＧＶＰＳＲＦＳＧＳＲＳＧＴＱＦＳＬＫＩＳＲＶＱＶＥＤＩＧＩＹＹＣＬＱＡＹＮＴＰＷＴＦＧＣＧＴＫＬＥＬＫＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＡＡＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＷＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
配列番号４０－ｈＩｇＧ１ ＬＡＬＡホール－ＰＧＲＮ
ＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＡＡＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＳＣＡＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＶＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＴＲＣＰＤＧＱＦＣＰＶＡＣＣＬＤＰＧＧＡＳＹＳＣＣＲＰＬＬＤＫＷＰＴＴＬＳＲＨＬＧＧＰＣＱＶＤＡＨＣＳＡＧＨＳＣＩＦＴＶＳＧＴＳＳＣＣＰＦＰＥＡＶＡＣＧＤＧＨＨＣＣＰＲＧＦＨＣＳＡＤＧＲＳＣＦＱＲＳＧＮＮＳＶＧＡＩＱＣＰＤＳＱＦＥＣＰＤＦＳＴＣＣＶＭＶＤＧＳＷＧＣＣＰＭＰＱＡＳＣＣＥＤＲＶＨＣＣＰＨＧＡＦＣＤＬＶＨＴＲＣＩＴＰＴＧＴＨＰＬＡＫＫＬＰＡＱＲＴＮＲＡＶＡＬＳＳＳＶＭＣＰＤＡＲＳＲＣＰＤＧＳＴＣＣＥＬＰＳＧＫＹＧＣＣＰＭＰＮＡＴＣＣＳＤＨＬＨＣＣＰＱＤＴＶＣＤＬＩＱＳＫＣＬＳＫＥＮＡＴＴＤＬＬＴＫＬＰＡＨＴＶＧＤＶＫＣＤＭＥＶＳＣＰＤＧＹＴＣＣＲＬＱＳＧＡＷＧＣＣＰＦＴＱＡＶＣＣＥＤＨＩＨＣＣＰＡＧＦＴＣＤＴＱＫＧＴＣＥＱＧＰＨＱＶＰＷＭＥＫＡＰＡＨＬＳＬＰＤＰＱＡＬＫＲＤＶＰＣＤＮＶＳＳＣＰＳＳＤＴＣＣＱＬＴＳＧＥＷＧＣＣＰＩＰＥＡＶＣＣＳＤＨＱＨＣＣＰＱＧＹＴＣＶＡＥＧＱＣＱＲＧＳＥＩＶＡＧＬＥＫＭＰＡＲＲＡＳＬＳＨＰＲＤＩＧＣＤＱＨＴＳＣＰＶＧＱＴＣＣＰＳＬＧＧＳＷＡＣＣＱＬＰＨＡＶＣＣＥＤＲＱＨＣＣＰＡＧＹＴＣＮＶＫＡＲＳＣＥＫＥＶＶＳＡＱＰＡＴＦＬＡＲＳＰＨＶＧＶＫＤＶＥＣＧＥＧＨＦＣＨＤＮＱＴＣＣＲＤＮＲＱＧＷＡＣＣＰＹＲＱＧＶＣＣＡＤＲＲＨＣＣＰＡＧＦＲＣＡＡＲＧＴＫＣＬＲＲＥＡＰＲＷＤＡＰＬＲＤＰＡＬＲＱＬＬ
配列番号４１－３Ｆ５軽鎖
ＡＥＶＶＭＴＱＴＰＳＳＶＳＡＡＶＧＧＴＶＴＩＫＣＱＡＳＱＮＩＮＳＷＬＳＷＹＱＱＫＰＧＱＲＰＫＬＬＩＹＳＡＳＴＬＡＳＧＶＰＳＲＦＥＧＳＧＳＧＴＥＹＴＬＴＩＳＤＬＥＣＤＤＡＡＴＹＹＣＱＳＳＹＧＳＳＹＤＦＧＧＧＴＥＶＶＶＫＧＤＬＶＡＰＴＶＬＩＦＰＰＡＡＤＱＶＡＴＧＴＶＴＩＶＣＶＡＮＫＹＦＰＤＶＴＶＴＷＥＶＤＧＴＴＱＴＴＧＩＥＮＳＫＴＰＱＮＳＡＤＣＴＹＮＬＳＳＴＬＴＬＴＳＴＱＹＮＳＨＫＥＹＴＣＫＶＴＱＧＴＴＳＶＶＱＳＦＮＲＧＤＣ
配列番号４２－３Ｆ５ ｈＩｇＧ１ ＬＡＬＡノブ
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＴＡＳＧＦＳＦＳＳＧＹＷＩＣＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＣＩＨＳＶＲＳＨＭＴＹＹＡＱＫＦＱＧＲＶＴＩＴＡＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＤＡＳＧＶＷＮＹＦＴＬＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＣＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＫＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＳＫＹＣＰＰＣＰＡＰＥＡＡＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＷＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
配列番号４３－断端ｈＩｇＧ１ ＴＶ ＬＡＬＡノブ
ＴＲＣＰＤＧＱＦＣＰＶＡＣＣＬＤＰＧＧＡＳＹＳＣＣＲＰＬＬＤＫＷＰＴＴＬＳＲＨＬＧＧＰＣＱＶＤＡＨＣＳＡＧＨＳＣＩＦＴＶＳＧＴＳＳＣＣＰＦＰＥＡＶＡＣＧＤＧＨＨＣＣＰＲＧＦＨＣＳＡＤＧＲＳＣＦＱＲＳＧＮＮＳＶＧＡＩＱＣＰＤＳＱＦＥＣＰＤＦＳＴＣＣＶＭＶＤＧＳＷＧＣＣＰＭＰＱＡＳＣＣＥＤＲＶＨＣＣＰＨＧＡＦＣＤＬＶＨＴＲＣＩＴＰＴＧＴＨＰＬＡＫＫＬＰＡＱＲＴＮＲＡＶＡＬＳＳＳＶＭＣＰＤＡＲＳＲＣＰＤＧＳＴＣＣＥＬＰＳＧＫＹＧＣＣＰＭＰＮＡＴＣＣＳＤＨＬＨＣＣＰＱＤＴＶＣＤＬＩＱＳＫＣＬＳＫＥＮＡＴＴＤＬＬＴＫＬＰＡＨＴＶＧＤＶＫＣＤＭＥＶＳＣＰＤＧＹＴＣＣＲＬＱＳＧＡＷＧＣＣＰＦＴＱＡＶＣＣＥＤＨＩＨＣＣＰＡＧＦＴＣＤＴＱＫＧＴＣＥＱＧＰＨＱＶＰＷＭＥＫＡＰＡＨＬＳＬＰＤＰＱＡＬＫＲＤＶＰＣＤＮＶＳＳＣＰＳＳＤＴＣＣＱＬＴＳＧＥＷＧＣＣＰＩＰＥＡＶＣＣＳＤＨＱＨＣＣＰＱＧＹＴＣＶＡＥＧＱＣＱＲＧＳＥＩＶＡＧＬＥＫＭＰＡＲＲＡＳＬＳＨＰＲＤＩＧＣＤＱＨＴＳＣＰＶＧＱＴＣＣＰＳＬＧＧＳＷＡＣＣＱＬＰＨＡＶＣＣＥＤＲＱＨＣＣＰＡＧＹＴＣＮＶＫＡＲＳＣＥＫＥＶＶＳＡＱＰＡＴＦＬＡＲＳＰＨＶＧＶＫＤＶＥＣＧＥＧＨＦＣＨＤＮＱＴＣＣＲＤＮＲＱＧＷＡＣＣＰＹＲＱＧＶＣＣＡＤＲＲＨＣＣＰＡＧＦＲＣＡＡＲＧＴＫＣＬＲＲＥＡＰＲＷＤＡＰＬＲＤＰＡＬＲＱＬＬＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＡＡＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＳＣＡＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＶＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
配列番号４４－断端ｈＩｇＧ１ ＬＡＬＡノブ
ＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＡＡＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＷＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ

【0152】

ＴｆＲ１結合ドメイン相補性決定領域
配列番号４５－重鎖ＶＨ ＣＤＲ１－Ｎｏｒｔｈ
ＶＡＳＧＦＴＦＳＳＹＳＭＮ
配列番号４６－重鎖ＶＨ ＣＤＲ２－Ｋａｂａｔ
ＳＩＳＳＳＳＳＹＩＹＹＡＤＳＶＫＧ
配列番号４７－重鎖ＶＨ ＣＤＲ３－Ｎｏｒｔｈ
ＡＲＲＨＧＹＳＮＳＤＡＦＤＮ
配列番号４８－軽鎖カッパＣＤＲ１－Ｎｏｒｔｈ
ＲＡＳＱＧＩＳＨＹＬＶ
配列番号４９－軽鎖カッパＣＤＲ２－Ｎｏｒｔｈ
ＹＡＡＳＳＬＱＳ
配列番号５０－軽鎖カッパＣＤＲ３－Ｎｏｒｔｈ
ＬＱＨＮＳＹＰＷＴ

【0153】

アルブミン結合ドメイン相補性決定領域
配列番号５１－Ｃ９０．４３ ＣＤＲ１
ＡＡＳＧＲＹＩＤＥＴＡＶＡ
配列番号５２－Ｃ９０．４３ ＣＤＲ２
ＧＩＧＧＧＶＤＩＴＹＹＡＤＳＶＫＧ
配列番号５３－Ｃ９０．４３ ＣＤＲ３
ＧＡＲＰＧＲＰＬＩＴＳＫＶＡＤＬＹＰＹ

【0154】

ＴｆＲ１結合ドメイン可変重鎖（Ｖ _Ｈ ）
配列番号５４－Ｈ０９ Ｆａｂ Ｖ_Ｈ（ＨＣＶＲ）
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＫＰＧＧＳＬＲＬＳＣＶＡＳＧＦＴＦＳＳＹＳＭＮＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＳＩＳＳＳＳＳＹＩＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＫＮＳＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＲＨＧＹＳＮＳＤＡＦＤＮＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ

【0155】

他の配列
配列番号５５－Ｈｉｓタグ付きＰＧＲＮ
ＨＨＨＨＨＨＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＧＧＧＧＱＥＮＬＹＦＱＳＧＧＧＧＱＴＲＣＰＤＧＱＦＣＰＶＡＣＣＬＤＰＧＧＡＳＹＳＣＣＲＰＬＬＤＫＷＰＴＴＬＳＲＨＬＧＧＰＣＱＶＤＡＨＣＳＡＧＨＳＣＩＦＴＶＳＧＴＳＳＣＣＰＦＰＥＡＶＡＣＧＤＧＨＨＣＣＰＲＧＦＨＣＳＡＤＧＲＳＣＦＱＲＳＧＮＮＳＶＧＡＩＱＣＰＤＳＱＦＥＣＰＤＦＳＴＣＣＶＭＶＤＧＳＷＧＣＣＰＭＰＱＡＳＣＣＥＤＲＶＨＣＣＰＨＧＡＦＣＤＬＶＨＴＲＣＩＴＰＴＧＴＨＰＬＡＫＫＬＰＡＱＲＴＮＲＡＶＡＬＳＳＳＶＭＣＰＤＡＲＳＲＣＰＤＧＳＴＣＣＥＬＰＳＧＫＹＧＣＣＰＭＰＮＡＴＣＣＳＤＨＬＨＣＣＰＱＤＴＶＣＤＬＩＱＳＫＣＬＳＫＥＮＡＴＴＤＬＬＴＫＬＰＡＨＴＶＧＤＶＫＣＤＭＥＶＳＣＰＤＧＹＴＣＣＲＬＱＳＧＡＷＧＣＣＰＦＴＱＡＶＣＣＥＤＨＩＨＣＣＰＡＧＦＴＣＤＴＱＫＧＴＣＥＱＧＰＨＱＶＰＷＭＥＫＡＰＡＨＬＳＬＰＤＰＱＡＬＫＲＤＶＰＣＤＮＶＳＳＣＰＳＳＤＴＣＣＱＬＴＳＧＥＷＧＣＣＰＩＰＥＡＶＣＣＳＤＨＱＨＣＣＰＱＧＹＴＣＶＡＥＧＱＣＱＲＧＳＥＩＶＡＧＬＥＫＭＰＡＲＲＡＳＬＳＨＰＲＤＩＧＣＤＱＨＴＳＣＰＶＧＱＴＣＣＰＳＬＧＧＳＷＡＣＣＱＬＰＨＡＶＣＣＥＤＲＱＨＣＣＰＡＧＹＴＣＮＶＫＡＲＳＣＥＫＥＶＶＳＡＱＰＡＴＦＬＡＲＳＰＨＶＧＶＫＤＶＥＣＧＥＧＨＦＣＨＤＮＱＴＣＣＲＤＮＲＱＧＷＡＣＣＰＹＲＱＧＶＣＣＡＤＲＲＨＣＣＰＡＧＦＲＣＡＡＲＧＴＫＣＬＲＲＥＡＰＲＷＤＡＰＬＲＤＰＡＬＲＱＬＬ

【0156】

ＴｆＲ１結合ドメイン相補性決定領域
配列番号５６－重鎖ＶＨ ＣＤＲ２－Ｎｏｒｔｈ
ＳＩＳＳＳＳＳＹＩＹ
配列番号５７－重鎖ＶＨ ＣＤＲ１－Ｋａｂａｔ
ＳＹＳＭＮ
配列番号５８－重鎖ＶＨ ＣＤＲ３－Ｋａｂａｔ
ＲＨＧＹＳＮＳＤＡＦＤＮ
配列番号５９－軽鎖カッパＣＤＲ１－Ｋａｂａｔ
ＲＡＳＱＧＩＳＨＹＬＶ
配列番号６０－軽鎖カッパＣＤＲ２－Ｋａｂａｔ
ＡＡＳＳＬＱＳ
配列番号６１－軽鎖カッパＣＤＲ３－Ｋａｂａｔ
ＬＱＨＮＳＹＰＷＴ
配列番号６２－重鎖ＶＨ ＣＤＲ１－ＩＭＧＴ
ＧＦＴＦＳＳＹＳ
配列番号６３－重鎖ＶＨ ＣＤＲ２－ＩＭＧＴ
ＩＳＳＳＳＳＹＩ
配列番号６４－重鎖ＶＨ ＣＤＲ３－ＩＭＧＴ
ＡＲＲＨＧＹＳＮＳＤＡＦＤＮ
配列番号６５－軽鎖カッパ鎖ＣＤＲ１－ＩＭＧＴ
ＱＧＩＳＨＹ
配列番号６６－軽鎖カッパ鎖ＣＤＲ２－ＩＭＧＴ
ＡＡＳ
配列番号６７－軽鎖カッパ鎖ＣＤＲ３－ＩＭＧＴ
ＬＱＨＮＳＹＰＷＴ
配列番号６８－重鎖ＶＨ ＣＤＲ１－Ｃｈｏｔｈｉａ
ＧＦＴＦＳＳＹ
配列番号６９－重鎖ＶＨ ＣＤＲ２－Ｃｈｏｔｈｉａ
ＳＳＳＳＳＹ
配列番号７０－重鎖ＶＨ ＣＤＲ３－Ｃｈｏｔｈｉａ
ＲＨＧＹＳＮＳＤＡＦＤＮ
配列番号７１－軽鎖カッパＣＤＲ１－Ｃｈｏｔｈｉａ
ＲＡＳＱＧＩＳＨＹＬＶ
配列番号７２－軽鎖カッパＣＤＲ２－Ｃｈｏｔｈｉａ
ＡＡＳＳＬＱＳ
配列番号７３－軽鎖カッパＣＤＲ３－Ｃｈｏｔｈｉａ
ＬＱＨＮＳＹＰＷＴ

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【配列表】

2025003404000001.xml

【手続補正書】

【提出日】2024-10-11

【手続補正1】

【補正対象書類名】特許請求の範囲

【補正対象項目名】全文

【補正方法】変更

【補正の内容】

【請求項1】

（ａ）プログラニュリンドメインと、
（ｂ）トランスフェリン受容体１（ＴｆＲ１）結合ドメインであって、重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、前記ＶＨが、重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含み、前記ＶＬが、軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む、ＴｆＲ１結合ドメインと、
を含む、化合物であって、
ＨＣＤＲ１のアミノ酸配列が、配列番号４５であり、
ＨＣＤＲ２のアミノ酸配列が、配列番号４６であり、
ＨＣＤＲ３のアミノ酸配列が、配列番号４７であり、
ＬＣＤＲ１のアミノ酸配列が、配列番号４８であり、
ＬＣＤＲ２のアミノ酸配列が、配列番号４９であり、
ＬＣＤＲ３のアミノ酸配列が、配列番号５０である、化合物。

【請求項2】

前記化合物が、アルブミン結合ドメインを更に含み、前記アルブミン結合ドメインが、相補性決定領域（ＣＤＲ）ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含み、
ＣＤＲ１のアミノ酸配列が、配列番号５１であり、
ＣＤＲ２のアミノ酸配列が、配列番号５２であり、
ＣＤＲ３のアミノ酸配列が、配列番号５３である、請求項１に記載の化合物。

【請求項3】

前記ＴｆＲ１結合ドメインが、第１のリンカーを用いて前記プログラニュリンドメインに連結され、前記アルブミン結合ドメインが、第２のリンカーを用いて前記プログラニュリンドメイン又は前記ＴｆＲ１結合ドメインに連結されている、請求項２に記載の化合物。

【請求項4】

前記化合物が、式：
Ｙ－Ｌ_１－Ｘ－Ｌ_２－Ｚ又はＺ－Ｌ_２－Ｙ－Ｌ_１－Ｘの化合物であり、
式中、Ｘが、前記プログラニュリンドメインであり、
Ｙが、前記ＴｆＲ１結合ドメインであり、
Ｚが、前記アルブミン結合ドメインであり、
Ｌ_１が、前記第１のリンカーであり
Ｌ_２が、前記第２のリンカーである、請求項２又は３に記載の化合物。

【請求項5】

前記化合物が、式：
Ｙ－Ｌ_１－Ｘ－Ｌ_２－Ｚの化合物であり、
前記ＴｆＲ１結合ドメインが、前記プログラニュリンドメインのＮ末端で前記プログラニュリンドメインに連結され、前記アルブミン結合ドメインが、前記プログラニュリンドメインのＣ末端で前記プログラニュリンに連結されている、請求項４に記載の化合物。

【請求項6】

前記ＴｆＲ１結合ドメイン及び前記アルブミン結合ドメインが、二量体を形成していない、請求項２～５のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項7】

前記ＴｆＲ１結合ドメインが、Ｆａｂ領域であり、前記第１のリンカーが、前記ＴｆＲ１結合ドメインの重鎖又は前記ＴｆＲ１結合ドメインの軽鎖に結合している、請求項３～６のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項8】

前記ＴｆＲ１結合ドメインが、ヒトＴｆＲ１受容体に対して約１ｎＭ～約１００ｎＭ、約５ｎＭ～２０ｎＭ未満、又は約１０ｎＭの親和性を有する、請求項１～７のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項9】

前記ＴｆＲ１結合ドメインが、
（ａ）重鎖であって、前記重鎖のアミノ酸配列が、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、又は配列番号１８である、重鎖、及び
（ｂ）軽鎖であって、前記軽鎖のアミノ酸配列が、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、又は配列番号２２である、軽鎖、を含む、請求項１～８のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項10】

前記ＴｆＲ１結合ドメインが、重鎖（ＨＣ）及び軽鎖（ＬＣ）を含み、前記ＨＣのアミノ酸配列が、配列番号１５であり、前記ＬＣのアミノ酸配列が、配列番号１９である、請求項１～９のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項11】

前記アルブミン結合ドメインが、Ｖ_ＨＨ抗体断片である、請求項２～１０のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項12】

前記アルブミン結合ドメインが、Ｌ_２を介して前記プログラニュリンドメインの前記Ｃ末端に結合している、請求項３～１１のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項13】

前記アルブミン結合ドメインのアミノ酸配列が、配列番号２３又は配列番号２４である、請求項１～２２のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項14】

Ｌ_１及びＬ_２が、独立して、共有結合、ペプチドリンカー、ＰＥＧリンカー、ジスルフィド結合、チオアセタール結合、又はチオエステル結合から選択される、請求項３～１３のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項15】

Ｌ_１及びＬ_２が、同一である、請求項３～１４のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項16】

Ｌ_１及びＬ_２のアミノ酸配列が、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、又は配列番号１４であり、好ましくは、Ｌ_１及びＬ_２のアミノ酸配列が、配列番号７である、請求項３～１５のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項17】

前記プログラニュリンドメインが、天然に存在する配列である、請求項１～１６のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項18】

前記プログラニュリンドメインが、プログラニュリンの断片を含み、前記プログラニュリンの断片のアミノ酸配列が、配列番号２である、請求項１～１７のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項19】

前記プログラニュリンドメインのアミノ酸配列が、配列番号１である、請求項１～１８のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項20】

前記化合物が、配列番号２５、配列番号２６、又は配列番号２９によって与えられるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する重鎖を含む、請求項１～１９のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項21】

前記化合物が、配列番号１９、配列番号３２、又は配列番号３３によって与えられるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する軽鎖を含む、請求項１～２０のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項22】

前記化合物が、
（ａ）重鎖であって、前記重鎖のアミノ酸配列が、配列番号２５、配列番号２６、又は配列番号２９である、重鎖、及び
（ｂ）軽鎖であって、前記軽鎖のアミノ酸配列が、配列番号１９、配列番号３２、又は配列番号３３である、軽鎖、を含む、請求項１～２１のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項23】

前記化合物が、重鎖（ＨＣ）及び軽鎖（ＬＣ）を含み、前記ＨＣのアミノ酸配列が、配列番号２５であり、前記ＬＣのアミノ酸配列が、配列番号１９である、請求項１～２２のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項24】

前記化合物が、重鎖（ＨＣ）及び軽鎖（ＬＣ）を含み、前記ＨＣのアミノ酸配列が、配列番号２６であり、前記ＬＣのアミノ酸配列が、配列番号１９である、請求項１～２３のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項25】

前記化合物が、重鎖（ＨＣ）及び軽鎖（ＬＣ）を含み、前記ＨＣのアミノ酸配列が、配列番号２９であり、前記ＬＣのアミノ酸配列が、配列番号３２である、請求項１～２４のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項26】

前記化合物が、重鎖（ＨＣ）及び軽鎖（ＬＣ）を含み、前記ＨＣのアミノ酸配列が、配列番号２９であり、前記ＬＣのアミノ酸配列が、配列番号３３である、請求項１～２５のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項27】

配列番号２５によって与えられるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む化合物であって、好ましくは、配列番号２５によって与えられるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、化合物。

【請求項28】

前記化合物が、重鎖（ＨＣ）及び軽鎖（ＬＣ）を含み、前記ＨＣのアミノ酸配列が、配列番号２５であり、前記ＬＣのアミノ酸配列が、配列番号１９である、請求項２７に記載の化合物。

【請求項29】

配列番号２６によって与えられるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む化合物であって、好ましくは、配列番号２６によって与えられるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、化合物。

【請求項30】

前記化合物が、重鎖（ＨＣ）及び軽鎖（ＬＣ）を含み、前記ＨＣのアミノ酸配列が、配列番号２６であり、前記ＬＣのアミノ酸配列が、配列番号１９である、請求項２９に記載の化合物。

【請求項31】

プログラニュリン断片を含む化合物であって、前記プログラニュリン断片のアミノ酸配列が、配列番号２である、化合物。

【請求項32】

前記プログラニュリン断片が、１００残基～５００残基の長さである、請求項３１に記載の化合物。

【請求項33】

１１型神経系セロイドリポフスチン症、前頭側頭型認知症、アルツハイマー疾患、パーキンソン疾患、筋萎縮性側索硬化症、又はそれらの組み合わせの治療に使用するための、請求項１～３２のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項34】

障害を治療する方法に用いるための医薬組成物であって、
前記方法が、請求項１～３２のいずれか一項に記載の化合物を、それを必要とする患者に投与することを含み、
前記医薬組成物が、請求項１～３２のいずれか一項に記載の化合物を含む、医薬組成物。

【請求項35】

前記障害が、１１型神経系セロイドリポフスチン症、前頭側頭型認知症、アルツハイマー疾患、パーキンソン疾患、筋萎縮性側索硬化症、又はそれらの組み合わせである、請求項３４に記載の医薬組成物。

【請求項36】

治療で使用するための、請求項１～３２のいずれか一項に記載の化合物。

【請求項37】

１１型神経系セロイドリポフスチン症、前頭側頭型認知症、アルツハイマー疾患、パーキンソン疾患、筋萎縮性側索硬化症、又はそれらの組み合わせの治療に使用するための、請求項１～３２のいずれか一項に記載の化合物を含む医薬組成物。

【請求項38】

１１型神経系セロイドリポフスチン症、前頭側頭型認知症、アルツハイマー疾患、パーキンソン疾患、筋萎縮性側索硬化症、又はそれらの組み合わせの治療のための医薬の製造における、請求項１～３２のいずれか一項に記載の化合物の使用。

【請求項39】

請求項１～３２のいずれか一項に記載の化合物と、薬学的に許容される担体と、を含む医薬組成物。

【手続補正2】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】０１５６

【補正方法】変更

【補正の内容】

【0156】

ＴｆＲ１結合ドメイン相補性決定領域
配列番号５６－重鎖ＶＨ ＣＤＲ２－Ｎｏｒｔｈ
ＳＩＳＳＳＳＳＹＩＹ
配列番号５７－重鎖ＶＨ ＣＤＲ１－Ｋａｂａｔ
ＳＹＳＭＮ
配列番号５８－重鎖ＶＨ ＣＤＲ３－Ｋａｂａｔ
ＲＨＧＹＳＮＳＤＡＦＤＮ
配列番号５９－軽鎖カッパＣＤＲ１－Ｋａｂａｔ
ＲＡＳＱＧＩＳＨＹＬＶ
配列番号６０－軽鎖カッパＣＤＲ２－Ｋａｂａｔ
ＡＡＳＳＬＱＳ
配列番号６１－軽鎖カッパＣＤＲ３－Ｋａｂａｔ
ＬＱＨＮＳＹＰＷＴ
配列番号６２－重鎖ＶＨ ＣＤＲ１－ＩＭＧＴ
ＧＦＴＦＳＳＹＳ
配列番号６３－重鎖ＶＨ ＣＤＲ２－ＩＭＧＴ
ＩＳＳＳＳＳＹＩ
配列番号６４－重鎖ＶＨ ＣＤＲ３－ＩＭＧＴ
ＡＲＲＨＧＹＳＮＳＤＡＦＤＮ
配列番号６５－軽鎖カッパ鎖ＣＤＲ１－ＩＭＧＴ
ＱＧＩＳＨＹ
配列番号６６－軽鎖カッパ鎖ＣＤＲ２－ＩＭＧＴ
ＡＡＳ
配列番号６７－軽鎖カッパ鎖ＣＤＲ３－ＩＭＧＴ
ＬＱＨＮＳＹＰＷＴ
配列番号６８－重鎖ＶＨ ＣＤＲ１－Ｃｈｏｔｈｉａ
ＧＦＴＦＳＳＹ
配列番号６９－重鎖ＶＨ ＣＤＲ２－Ｃｈｏｔｈｉａ
ＳＳＳＳＳＹ
配列番号７０－重鎖ＶＨ ＣＤＲ３－Ｃｈｏｔｈｉａ
ＲＨＧＹＳＮＳＤＡＦＤＮ
配列番号７１－軽鎖カッパＣＤＲ１－Ｃｈｏｔｈｉａ
ＲＡＳＱＧＩＳＨＹＬＶ
配列番号７２－軽鎖カッパＣＤＲ２－Ｃｈｏｔｈｉａ
ＡＡＳＳＬＱＳ
配列番号７３－軽鎖カッパＣＤＲ３－Ｃｈｏｔｈｉａ
ＬＱＨＮＳＹＰＷＴ

本発明は、以下の態様を含む。
＜１＞
（ａ）プログラニュリンドメインと、
（ｂ）トランスフェリン受容体１（ＴｆＲ１）結合ドメインであって、重鎖可変領域（ＶＨ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、前記ＶＨが、重鎖相補性決定領域（ＨＣＤＲ）ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を含み、前記ＶＬが、軽鎖相補性決定領域（ＬＣＤＲ）ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を含む、ＴｆＲ１結合ドメインと、
を含む、化合物であって、
ＨＣＤＲ１のアミノ酸配列が、配列番号４５であり、
ＨＣＤＲ２のアミノ酸配列が、配列番号４６であり、
ＨＣＤＲ３のアミノ酸配列が、配列番号４７であり、
ＬＣＤＲ１のアミノ酸配列が、配列番号４８であり、
ＬＣＤＲ２のアミノ酸配列が、配列番号４９であり、
ＬＣＤＲ３のアミノ酸配列が、配列番号５０である、化合物。
＜２＞
前記化合物が、アルブミン結合ドメインを更に含み、前記アルブミン結合ドメインが、相補性決定領域（ＣＤＲ）ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含み、
ＣＤＲ１のアミノ酸配列が、配列番号５１であり、
ＣＤＲ２のアミノ酸配列が、配列番号５２であり、
ＣＤＲ３のアミノ酸配列が、配列番号５３である、＜１＞に記載の化合物。
＜３＞
前記ＴｆＲ１結合ドメインが、第１のリンカーを用いて前記プログラニュリンドメインに連結され、前記アルブミン結合ドメインが、第２のリンカーを用いて前記プログラニュリンドメイン又は前記ＴｆＲ１結合ドメインに連結されている、＜２＞に記載の化合物。
＜４＞
前記化合物が、式：
Ｙ－Ｌ _１ －Ｘ－Ｌ _２ －Ｚ又はＺ－Ｌ _２ －Ｙ－Ｌ _１ －Ｘの化合物であり、
式中、Ｘが、前記プログラニュリンドメインであり、
Ｙが、前記ＴｆＲ１結合ドメインであり、
Ｚが、前記アルブミン結合ドメインであり、
Ｌ _１ が、前記第１のリンカーであり
Ｌ _２ が、前記第２のリンカーである、＜２＞又は＜３＞に記載の化合物。
＜５＞
前記化合物が、式：
Ｙ－Ｌ _１ －Ｘ－Ｌ _２ －Ｚの化合物であり、
前記ＴｆＲ１結合ドメインが、前記プログラニュリンドメインのＮ末端で前記プログラニュリンドメインに連結され、前記アルブミン結合ドメインが、前記プログラニュリンドメインのＣ末端で前記プログラニュリンに連結されている、＜４＞に記載の化合物。
＜６＞
前記ＴｆＲ１結合ドメイン及び前記アルブミン結合ドメインが、二量体を形成していない、＜２＞～＜５＞のいずれかに記載の化合物。
＜７＞
前記ＴｆＲ１結合ドメインが、Ｆａｂ領域であり、前記第１のリンカーが、前記ＴｆＲ１結合ドメインの重鎖又は前記ＴｆＲ１結合ドメインの軽鎖に結合している、＜３＞～＜６＞のいずれかに記載の化合物。
＜８＞
前記ＴｆＲ１結合ドメインが、ヒトＴｆＲ１受容体に対して約１ｎＭ～約１００ｎＭ、約５ｎＭ～２０ｎＭ未満、又は約１０ｎＭの親和性を有する、＜１＞～＜７＞のいずれかに記載の化合物。
＜９＞
前記ＴｆＲ１結合ドメインが、
（ａ）重鎖であって、前記重鎖のアミノ酸配列が、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、又は配列番号１８である、重鎖、及び
（ｂ）軽鎖であって、前記軽鎖のアミノ酸配列が、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、又は配列番号２２である、軽鎖、を含む、＜１＞～＜８＞のいずれかに記載の化合物。
＜１０＞
前記ＴｆＲ１結合ドメインが、重鎖（ＨＣ）及び軽鎖（ＬＣ）を含み、前記ＨＣのアミノ酸配列が、配列番号１５であり、前記ＬＣのアミノ酸配列が、配列番号１９である、＜１＞～＜９＞のいずれかに記載の化合物。
＜１１＞
前記アルブミン結合ドメインが、Ｖ _Ｈ Ｈ抗体断片である、＜２＞～＜１０＞のいずれかに記載の化合物。
＜１２＞
前記アルブミン結合ドメインが、Ｌ _２ を介して前記プログラニュリンドメインの前記Ｃ末端に結合している、＜３＞～＜１１＞のいずれかに記載の化合物。
＜１３＞
前記アルブミン結合ドメインのアミノ酸配列が、配列番号２３又は配列番号２４である、＜１＞～＜２２＞のいずれかに記載の化合物。
＜１４＞
Ｌ _１ 及びＬ _２ が、独立して、共有結合、ペプチドリンカー、ＰＥＧリンカー、ジスルフィド結合、チオアセタール結合、又はチオエステル結合から選択される、＜３＞～＜１３＞のいずれかに記載の化合物。
＜１５＞
Ｌ _１ 及びＬ _２ が、同一である、＜３＞～＜１４＞のいずれかに記載の化合物。
＜１６＞
Ｌ _１ 及びＬ _２ のアミノ酸配列が、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２、配列番号１３、又は配列番号１４であり、好ましくは、Ｌ _１ 及びＬ _２ のアミノ酸配列が、配列番号７である、＜３＞～＜１５＞のいずれかに記載の化合物。
＜１７＞
前記プログラニュリンドメインが、天然に存在する配列である、＜１＞～＜１６＞のいずれかに記載の化合物。
＜１８＞
前記プログラニュリンドメインが、プログラニュリンの断片を含み、前記プログラニュリンの断片のアミノ酸配列が、配列番号２である、＜１＞～＜１７＞のいずれかに記載の化合物。
＜１９＞
前記プログラニュリンドメインのアミノ酸配列が、配列番号１である、＜１＞～＜１８＞のいずれかに記載の化合物。
＜２０＞
前記化合物が、配列番号２５、配列番号２６、又は配列番号２９によって与えられるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する重鎖を含む、＜１＞～＜１９＞のいずれかに記載の化合物。
＜２１＞
前記化合物が、配列番号１９、配列番号３２、又は配列番号３３によって与えられるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する軽鎖を含む、＜１＞～＜２０＞のいずれかに記載の化合物。
＜２２＞
前記化合物が、
（ａ）重鎖であって、前記重鎖のアミノ酸配列が、配列番号２５、配列番号２６、又は配列番号２９である、重鎖、及び
（ｂ）軽鎖であって、前記軽鎖のアミノ酸配列が、配列番号１９、配列番号３２、又は配列番号３３である、軽鎖、を含む、＜１＞～＜２１＞のいずれかに記載の化合物。
＜２３＞
前記化合物が、重鎖（ＨＣ）及び軽鎖（ＬＣ）を含み、前記ＨＣのアミノ酸配列が、配列番号２５であり、前記ＬＣのアミノ酸配列が、配列番号１９である、＜１＞～＜２２＞のいずれかに記載の化合物。
＜２４＞
前記化合物が、重鎖（ＨＣ）及び軽鎖（ＬＣ）を含み、前記ＨＣのアミノ酸配列が、配列番号２６であり、前記ＬＣのアミノ酸配列が、配列番号１９である、＜１＞～＜２３＞のいずれかに記載の化合物。
＜２５＞
前記化合物が、重鎖（ＨＣ）及び軽鎖（ＬＣ）を含み、前記ＨＣのアミノ酸配列が、配列番号２９であり、前記ＬＣのアミノ酸配列が、配列番号３２である、＜１＞～＜２４＞のいずれかに記載の化合物。
＜２６＞
前記化合物が、重鎖（ＨＣ）及び軽鎖（ＬＣ）を含み、前記ＨＣのアミノ酸配列が、配列番号２９であり、前記ＬＣのアミノ酸配列が、配列番号３３である、＜１＞～＜２５＞のいずれかに記載の化合物。
＜２７＞
配列番号２５によって与えられるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む化合物であって、好ましくは、配列番号２５によって与えられるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、化合物。
＜２８＞
前記化合物が、重鎖（ＨＣ）及び軽鎖（ＬＣ）を含み、前記ＨＣのアミノ酸配列が、配列番号２５であり、前記ＬＣのアミノ酸配列が、配列番号１９である、＜２７＞に記載の化合物。
＜２９＞
配列番号２６によって与えられるアミノ酸配列に対して少なくとも９０％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む化合物であって、好ましくは、配列番号２６によって与えられるアミノ酸配列に対して少なくとも９５％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む、化合物。
＜３０＞
前記化合物が、重鎖（ＨＣ）及び軽鎖（ＬＣ）を含み、前記ＨＣのアミノ酸配列が、配列番号２６であり、前記ＬＣのアミノ酸配列が、配列番号１９である、＜２９＞に記載の化合物。
＜３１＞
プログラニュリン断片を含む化合物であって、前記プログラニュリン断片のアミノ酸配列が、配列番号２である、化合物。
＜３２＞
前記プログラニュリン断片が、１００残基～５００残基の長さである、＜３１＞に記載の化合物。
＜３３＞
１１型神経系セロイドリポフスチン症、前頭側頭型認知症、アルツハイマー疾患、パーキンソン疾患、筋萎縮性側索硬化症、又はそれらの組み合わせの治療に使用するための、＜１＞～＜３２＞のいずれかに記載の化合物。
＜３４＞
障害を治療する方法であって、＜１＞～＜３２＞のいずれかに記載の化合物を、それを必要とする患者に投与することを含む、方法。
＜３５＞
前記障害が、１１型神経系セロイドリポフスチン症、前頭側頭型認知症、アルツハイマー疾患、パーキンソン疾患、筋萎縮性側索硬化症、又はそれらの組み合わせである、＜３４＞に記載の方法。
＜３６＞
治療で使用するための、＜１＞～＜３２＞のいずれかに記載の化合物。
＜３７＞
１１型神経系セロイドリポフスチン症、前頭側頭型認知症、アルツハイマー疾患、パーキンソン疾患、筋萎縮性側索硬化症、又はそれらの組み合わせの治療に使用するための、＜１＞～＜３２＞のいずれかに記載の化合物を含む医薬組成物。
＜３８＞
１１型神経系セロイドリポフスチン症、前頭側頭型認知症、アルツハイマー疾患、パーキンソン疾患、筋萎縮性側索硬化症、又はそれらの組み合わせの治療のための医薬の製造における、＜１＞～＜３２＞のいずれかに記載の化合物の使用。
＜３９＞
＜１＞～＜３２＞のいずれかに記載の化合物と、薬学的に許容される担体と、を含む組成物。
＜４０＞
１１型神経系セロイドリポフスチン症、前頭側頭型認知症、アルツハイマー疾患、パーキンソン疾患、筋萎縮性側索硬化症、又はそれらの組み合わせの治療のための、＜１＞～＜３２＞のいずれかに記載の化合物の使用。

【外国語明細書】