特開 2025-4983 薬物依存症の予防及び／又は治療組成物

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公開特許公報(A)

(11)【公開番号】P2025004983

(43)【公開日】2025-01-16

(54)【発明の名称】薬物依存症の予防及び／又は治療組成物

(51)【国際特許分類】

   A61K 31/404 20060101AFI20250108BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20250108BHJP

   A61P 25/36 20060101ALI20250108BHJP

   A61K 31/517 20060101ALI20250108BHJP

   A61K 31/18 20060101ALI20250108BHJP

【ＦＩ】

A61K31/404

A61P43/00 111

A61P25/36

A61K31/517

A61K31/18

【審査請求】未請求

【請求項の数】6

【出願形態】ＯＬ

(21)【出願番号】P 2023104932

(22)【出願日】2023-06-27

【新規性喪失の例外の表示】特許法第３０条第２項適用申請有り 日本薬学会第１４３年会予稿集 日本薬学会第１４３年会（２０２３年３月２６日）での発表スライド

(71)【出願人】

【識別番号】504160781

【氏名又は名称】国立大学法人金沢大学

(74)【代理人】

【識別番号】100088904

【弁理士】

【氏名又は名称】庄司 隆

(74)【代理人】

【識別番号】100124453

【弁理士】

【氏名又は名称】資延 由利子

(74)【代理人】

【識別番号】100135208

【弁理士】

【氏名又は名称】大杉 卓也

(72)【発明者】

【氏名】金田 勝幸

【テーマコード（参考）】

4C086

4C206

【Ｆターム（参考）】

4C086AA01

4C086AA02

4C086BC13

4C086BC50

4C086GA02

4C086GA07

4C086GA12

4C086MA01

4C086MA04

4C086MA10

4C086MA59

4C086NA14

4C086ZC39

4C086ZC42

4C206AA01

4C206AA02

4C206JA13

4C206MA01

4C206MA04

4C206MA13

4C206MA14

4C206MA79

4C206NA14

4C206ZC39

4C206ZC42

(57)【要約】

【課題】薬物依存症（特に、ストレスに起因するコカイン依存症）の予防及び／又は治療組成物を提供することである。
【解決手段】ストレスによる薬物欲求増大に関与するmPFC内アドレナリンα1受容体のサブタイプを特定して、さらに、該サブタイプの阻害剤は薬物依存症（特に、ストレスに起因するコカイン依存症）の治療に効果があることを見出して、本発明を完成した。
【選択図】なし

【特許請求の範囲】

【請求項1】

アドレナリンα1Ａ受容体阻害活性を有する化合物を有効成分として含む、薬物依存症の予防及び／又は治療組成物。

【請求項2】

前記アドレナリンα1Ａ受容体阻害活性を有する化合物が、1-(3-ヒドロキシプロピル)-5-[(2R)-2-({2-[2-(2,2,2-トリフルオロエトキシ)フェノキシ]エチル}アミノ)プロピル]-2,3-ジヒドロ-1H-インドール-7-カルボキサミド若しくは1-(4-アミノ-6,7-ジメトキシ-2-キナゾリニル)-4-(2-フラニルカルボニル)ピペラジン塩酸塩又はそれらの薬学的に許容される塩である、請求項１に記載の組成物。

【請求項3】

前記アドレナリンα1Ａ受容体阻害活性を有する化合物が、5-{(2R)-2-[2-(2-エトキシフェノキシ)エチルアミノ]プロピル}-2-メトキシベンゼンスルホンアミド一塩酸塩若しくは4-アミノ-2-[4-(テトラヒドロ-2-フロイル)-1-ピペラジニル]-6,7-ジメトキシキナゾリン塩酸塩二水和物又はそれらの薬学的に許容される塩である、請求項１に記載の組成物。

【請求項4】

前記薬物はコカインである、請求項１～３のいずれか１に記載の組成物。

【請求項5】

前記薬物依存症はストレスに起因する薬物依存症である、請求項４に記載の組成物。

【請求項6】

1-(3-ヒドロキシプロピル)-5-[(2R)-2-({2-[2-(2,2,2-トリフルオロエトキシ)フェノキシ]エチル}アミノ)プロピル]-2,3-ジヒドロ-1H-インドール-7-カルボキサミドを含む、経鼻投与用薬物依存症の予防及び／又は治療組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、薬物依存症の予防及び／又は治療組成物、特に、コカイン依存症の予防及び／又は治療組成物に関する。

【0002】

（薬物依存）
コカイン、覚醒剤（メタンフェタミン、アンフェタミン）、合成麻薬ＭＤＭＡ（3,4-メチレンジオキシメタンフェタミン）、ヘロイン、ニコチン、アルコール、フェンサイクリジン、ケタミン、大麻、危険ドラッグなどの物質の繰り返し使用は、ヒトにおいて、依存を形成し、様々な精神障害及び神経障害を引き起こすことから、世界中で社会問題となっている。
日本では、危険ドラッグの使用に関連する事故や事件が大きな社会問題になっている。また、ラット、マウスなどの動物に覚醒剤を連続投与すると、惹起される異常行動が投与と共に増大する行動感作が観察される。覚醒剤を繰り返し投与すると、ヒトでは強い精神依存及び覚醒剤精神病を生じ、断薬後もストレス、飲酒や１回の薬物摂取により、覚醒剤精神病が再燃する。
これら依存性薬物の繰り返し投与により生じる薬物依存や精神症状の治療薬としては、現在、精神科領域で使用されている抗精神病薬、抗うつ薬などが使用されるが、一部の症状を抑えるだけであり、根本的に治療できる薬剤は無い。現在のところ、薬物依存症に有効な治療法は確立されていない。

【0003】

（ストレスによる薬物欲求増大のメカニズム）
本発明者らは、ストレスによってなぜ薬物（コカイン）に対する欲求が増大するのかを明らかにしている（参照：非特許文献１）。
麻薬や覚醒剤などによる薬物依存症の治療を困難にしているのは、一旦止めても再び薬物を摂取してしまう再燃である。再燃は、さまざまなきっかけによって引き起こされるが、ストレスはその重要な一因であることが分かっている。しかし、ストレスがなぜ再燃を引き起こすのか、つまり、ストレスによってなぜ薬物に対する欲求が増大するのかは従来分かっていなかった。

【0004】

本発明者らは、薬物欲求に関与することが示唆されている内側前頭前野（medialprefrontal cortex, mPFC）とストレスホルモンとも呼ばれるノルアドレナリン（noradrenaline, NA）に着目し、mPFC神経細胞での情報伝達と細胞の活動に対するNAの影響を調べたところ、NAは興奮性の神経情報伝達を顕著に増大させ，神経活動を上昇させることを発見した。さらに、マウスを用いてストレス負荷によってコカインに対する欲求が増大するモデルを作製し、このマウスのmPFCでNAの作用をブロックしたところ、ストレスによって増大したコカイン欲求が顕著に抑制されることが明らかになった。ストレスにより遊離されたNAがmPFCの過剰な興奮を引き起こし、これにより、コカインに対する欲求が増大されることを示した。

【0005】

アドレナリンα1Ａ受容体阻害活性を有する化合物がコカイン依存性の治療に効果があることは知られていない。

【先行技術文献】

【非特許文献】

【0006】

【非特許文献1】Neuropharmacology Volume166, April 2020,107968

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0007】

本発明の課題は、薬物依存症（特に、ストレスに起因するコカイン依存症）の予防及び／又は治療組成物を提供することである。

【課題を解決するための手段】

【0008】

本発明者らは、上記課題を解決するために、本発明者らが見出した知見（拘束ストレスによって放出されたNA（ノルアドレナリン）はアドレナリンα1受容体を介して内側前頭前野(mPFC)5層錐体細胞への興奮性神経伝達を促進し、拘束ストレスによるコカイン欲求増大に関与すること）を基にして、ストレスによる薬物欲求増大に関与するmPFC内アドレナリンα1受容体のサブタイプを特定して、さらに、該サブタイプの阻害剤は薬物依存症（特に、ストレスに起因するコカイン依存症）の治療に効果があることを見出して、本発明を完成した。

【0009】

本発明は以下の通りである。
１．アドレナリンα1Ａ受容体阻害活性を有する化合物を有効成分として含む、薬物依存症の予防及び／又は治療組成物。
２．前記アドレナリンα1Ａ受容体阻害活性を有する化合物が、1-(3-ヒドロキシプロピル)-5-[(2R)-2-({2-[2-(2,2,2-トリフルオロエトキシ)フェノキシ]エチル}アミノ)プロピル]-2,3-ジヒドロ-1H-インドール-7-カルボキサミド若しくは1-(4-アミノ-6,7-ジメトキシ-2-キナゾリニル)-4-(2-フラニルカルボニル)ピペラジン塩酸塩又はそれらの薬学的に許容される塩である、前項１に記載の組成物。
３．前記アドレナリンα1Ａ受容体阻害活性を有する化合物が、5-{(2R)-2-[2-(2-エトキシフェノキシ)エチルアミノ]プロピル}-2-メトキシベンゼンスルホンアミド一塩酸塩若しくは4-アミノ-2-[4-(テトラヒドロ-2-フロイル)-1-ピペラジニル]-6,7-ジメトキシキナゾリン塩酸塩二水和物又はそれらの薬学的に許容される塩である、前項１に記載の組成物。
４．前記薬物はコカインである、前項１～３のいずれか１に記載の組成物。
５．前記薬物依存症はストレスに起因する薬物依存症である、前項４に記載の組成物。
６．1-(3-ヒドロキシプロピル)-5-[(2R)-2-({2-[2-(2,2,2-トリフルオロエトキシ)フェノキシ]エチル}アミノ)プロピル]-2,3-ジヒドロ-1H-インドール-7-カルボキサミドを含む、経鼻投与用薬物依存症の予防及び／又は治療組成物。

【発明の効果】

【0010】

本発明の治療組成物は、ストレスに起因するコカイン依存症の治療効果を有する。

【図面の簡単な説明】

【0011】

【図1】（１）社会的敗北ストレスを負荷した（SD）コカイン条件付けマウス及び社会的敗北ストレスを負荷していない（Non-SD）コカイン条件付けマウスの作製手順。（２）社会的敗北ストレスが薬物欲求増大に与える影響の確認結果。（実施例２）

【図2】（１）プラゾシン（Pra）又は生理食塩水（Veh）をmPFC内局所投与された社会的敗北ストレスを負荷した（SD）コカイン条件付けマウス、並びにプラゾシン（Pra）又は生理食塩水（Veh）をmPFC内局所投与された社会的敗北ストレスを負荷していない（Non-SD）コカイン条件付けマウスの作製手順。「AP : +1.7 mm ML : ±0.3 mm DV : -2.4 mm」は、薬物を局所投与する目的のマウス脳座標を意味する。（２）プラゾシンのmPFC内局所投与が薬物欲求増大に与える影響の確認結果。（実施例３）各スポットは、実際に投与された薬物の位置を意味する。

【図3】（１）ホールセルパッチクランプ法の手順。（２）ボルテージクランプ記録法の手順。（実施例４）

【図4】（１）ホールセルパッチクランプ法によるNAを適用した全体の代表トレース。（２）（１）の印をつけた部位における拡大トレース。（３）ボルテージクランプ記録法によるFrequency、Amplitude、holding currentの記録結果。（実施例４）

【図5】（１）3つのmPFC内アドレナリンα1受容体サブタイプに対するアンタゴニストを適用したホールセルパッチクランプ法の概念図。（２）ホールセルパッチクランプ法による3つのmPFC内アドレナリンα1受容体サブタイプに対するアンタゴニストを適用した全体の代表トレース。（３）（２）の印をつけた部位における拡大トレース。（４）ボルテージクランプ記録法によるFrequency、Amplitude、holding currentの記録結果。（実施例５）

【図6】（１）α_1B-AR及びα_1D-ARに対するアンタゴニストを適用したホールセルパッチクランプ法の概念図。（２）ホールセルパッチクランプ法によるα_1B-AR及びα_1D-ARに対するアンタゴニストを適用した全体の代表トレース。（３）（２）の印をつけた部位における拡大トレース。（４）ボルテージクランプ記録法によるFrequency、Amplitude、holding currentの記録結果。（実施例５）

【図7】（１）α_1A-AR及びα_1D-ARに対するアンタゴニストを適用したホールセルパッチクランプ法の概念図。（２）ホールセルパッチクランプ法によるα_1A-AR及びα_1D-ARに対するアンタゴニストを適用した全体の代表トレース。（３）（２）の印をつけた部位における拡大トレース。（４）ボルテージクランプ記録法によるFrequency、Amplitude、holding currentの記録結果。（実施例５）

【図8】（１）α_1A-AR及びα_1B-ARに対するアンタゴニストを適用したホールセルパッチクランプ法の概念図。（２）ホールセルパッチクランプ法によるα_1A-AR及びα_1B-ARに対するアンタゴニストを適用した全体の代表トレース。（３）（２）の印をつけた部位における拡大トレース。（４）ボルテージクランプ記録法によるFrequency、Amplitude、holding currentの記録結果。（実施例５）

【図9】（１）α_1A-ARに対するアゴニストを適用したホールセルパッチクランプ法の概念図。（２）ホールセルパッチクランプ法によるα_1A-ARに対するアゴニストを適用した全体の代表トレース。（３）（２）の印をつけた部位における拡大トレース。（４）ボルテージクランプ記録法によるFrequency、Amplitude、holding currentの記録結果。（実施例５）

【図10】（１）シロドシン（Silo）又は生理食塩水（Veh）をmPFC内局所投与された社会的敗北ストレスを負荷した（SD）コカイン条件付けマウス、並びにシロドシン（Silo）又は生理食塩水（Veh）をmPFC内局所投与された社会的敗北ストレスを負荷していない（Non-SD）コカイン条件付けマウスの作製手順。（２）シロドシンのmPFC内局所投与が薬物欲求増大に与える影響の確認結果。（実施例６）

【図11】（１）A61603（A61）又は生理食塩水（Veh）をmPFC内局所投与されたコカイン条件付けマウスの作製手順。（２）A61603のmPFC内局所投与が薬物欲求増大に与える影響の確認結果。（実施例７）

【図12】（１）シロドシン（Silo）又は生理食塩水（Veh）を経鼻投与された社会的敗北ストレスを負荷した（SD）コカイン条件付けマウス、並びにシロドシン（Silo）又は生理食塩水（Veh）を経鼻投与された社会的敗北ストレスを負荷していない（Non-SD）コカイン条件付けマウスの作製手順。（２）シロドシンの経鼻投与が薬物欲求増大に与える影響の確認結果。（実施例８）

【発明を実施するための形態】

【0012】

（薬物依存症の予防及び／又は治療組成物）
本発明の対象は、アドレナリンα1Ａ受容体阻害活性を有する化合物を含有する薬物依存症の予防及び／又は治療組成物に関する。特に、本発明の薬物依存症の予防及び／又は治療組成物は、薬物依存症の予防、再発予防、軽減、又は治療に有効なアドレナリンα1Ａ受容体阻害活性を有する化合物を含有する。以下に詳細に説明する。
また、本発明の組成物とは、各種剤（治療・予防剤）、食品（サプリメント、飲料）、治療組成物、食品組成物等を含む。

【0013】

（薬物依存症）
本発明での薬物依存症は、薬物の精神的な作用（効果）に依存する精神依存を特徴とする。薬物依存症の原因となる薬物としては、コカイン、覚醒剤（メタンフェタミン、アンフェタミン）、合成麻薬ＭＤＭＡ、モルヒネ、ニコチン、アルコール、フェンサイクリジン、ケタミン、ベンゾジアゼピン類、大麻、危険ドラッグ等(各種の塩を含む)を例示できるが、本発明が対象とする薬物依存症はこれらの薬物に関連するものに限られない。

【0014】

（アドレナリンα1Ａ受容体阻害活性を有する化合物）
本発明での「アドレナリンα1Ａ受容体阻害活性を有する化合物」は、本発明の効果を奏するのであればどのような形態でも良い。例えば、アドレナリンα1Ａ受容体阻害活性を有する化合物に加えて、該化合物の薬学的に許容される塩も対象とする。薬学的に許容される塩は、置換基の種類によって、酸付加塩又は塩基との塩を形成する場合がある。具体的には、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸等の無機酸や、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、フマル酸、マレイン酸、乳酸、リンゴ酸、マンデル酸、酒石酸、ジベンゾイル酒石酸、ジトルオイル酒石酸、クエン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、p-トルエンスルホン酸、アスパラギン酸、グルタミン酸等の有機酸との酸付加塩等が挙げられる。

【0015】

さらに、本発明のアドレナリンα1Ａ受容体阻害活性を有する化合物又は上記の薬学的に許容される塩は、各種の水和物や溶媒和物及び結晶多形の物質も含む。
加えて、安全性や臨床的経験を考慮して、公知のアドレナリンα1Ａ受容体阻害剤（特に、前立腺肥大治療薬等）を使用することができる。

【0016】

具体的には、以下の化合物を例示することができる。
（１）シロドシン
1-(3-ヒドロキシプロピル)-5-[(2R)-2-({2-[2-(2,2,2-トリフルオロエトキシ)フェノキシ]エチル}アミノ)プロピル]-2,3-ジヒドロ-1H- インドール-7-カルボキサミド
1-(3-hydroxypropyl)-5-[(2R)-({2-[2-[2-(2,2,2-trifluoroethoxy)phenoxy]ethyl}amino)propyl]indoline-7-carboxamide
（２）プラゾシン塩酸塩
1-(4-アミノ-6,7-ジメトキシ-2-キナゾリニル)-4-(2-フラニルカルボニル)ピペラジン 塩酸塩
1-(4-Amino-6,7-dimethoxy-quinazolin-2-yl)-4-(2-furoyl)piperazinemonohydrochloride
（３）タムスロシン塩酸塩
5-{(2R)-2-[2-(2-エトキシフェノキシ)エチルアミノ]プロピル}-2-メトキシベンゼンスルホンアミド一塩酸塩
5-{(2R)-2-[2-(2-Ethoxyphenoxy)ethylamino]propyl}-2-methoxybenzenesulfonamidemonohydrochloride
（４）テラゾシン塩酸塩水和物
4-Amino-2-[4-(tetrahydro-2-furoyl)-1-piperazinyl]-6,7-dimethoxyquinazolinehydrochloride dihydrate
4-アミノ-2-[4-(テトラヒドロ-2-フロイル)-1-ピペラジニル]-6,7-ジメトキシキナゾリン塩酸塩二水和物

【0017】

（本発明の薬物依存症の予防及び／又は治療組成物の投与方法）
本発明の薬物依存症の予防及び／又は治療組成物は、非経口的に投与することができる。非経口投与は、注射による脳内（脳室内）、静脈内、筋肉内、又は皮下への投与、スプレーやエアロゾルなどを用いた経鼻腔や口腔などの経粘膜投与、坐剤などを用いた直腸投与、パッチやリニメントやゲルなどを用いた経皮投与などを挙げることができる。好ましくは、経鼻腔投与、注射による脳内（脳室内）を挙げることができる。
なお、局所投与である経鼻投与は、全身投与と比較して、副作用が少ないと考えられる。

【0018】

（本発明の薬物依存症の予防及び／又は治療組成物の構成）
本発明の薬物依存症の予防及び／又は治療組成物は、薬物依存症の予防及び／又は治療用サプリメント、薬物依存症の予防及び／又は治療用等として、利用されることができる。
本発明の薬物依存症の予防及び／又は治療組成物は、有効成分であるアドレナリンα1Ａ受容体阻害活性を有する化合物に加え、薬物依存の治療効果がある他の薬効成分も含んでも良い。
また、これら薬効成分の他に、適宜、投与形態などに応じて、当業者によく知られた適切な薬学的に許容される担体を含有していてもよい。薬学的に許容される担体としては、抗酸化剤、安定剤、防腐剤、矯味剤、着色料、溶解剤、可溶化剤、界面活性剤、乳化剤、消泡剤、粘度調整剤、ゲル化剤、吸収促進剤、分散剤、賦形剤、及びｐＨ調整剤などを例示できる。

【0019】

（本発明の薬物依存症の予防及び／又は治療組成物の調製方法）
本発明の薬物依存症の予防及び／又は治療組成物を注射用製剤として調製する場合は、溶液剤又は懸濁剤の製剤の形態が好ましい。
経鼻腔や口腔などの経粘膜投与用の場合は、粉末、滴剤、又はエアロゾル剤の製剤の形態が好ましい。直腸投与用の場合は、クリ－ム又は坐薬のような半固形剤の製剤の形態が好ましい。
注射用製剤は担体として、例えば、アルブミンなどの血漿由来タンパク、グリシンなどのアミノ酸、及びマンニトールなどの糖を加えることができ、さらに緩衝剤、溶解補助剤、及び等張剤などを添加することもできる。また、水溶製剤又は凍結乾燥製剤として使用する場合、凝集を防ぐためにＴｗｅｅｎ（登録商標）８０、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）２０などの界面活性剤を添加するのが好ましい。
さらに、注射用製剤以外の非経口投与剤形は、蒸留水又は生理食塩液、ポリエチレングリコ－ルのようなポリアルキレングリコ－ル、植物起源の油、及び水素化したナフタレンなどを含有してもよい。
例えば、坐薬のような直腸投与用の製剤は、一般的な賦形剤として、例えば、ポリアキレングリコ－ル、ワセリン、及びカカオ油脂などを含有する。膣用製剤では、胆汁塩、エチレンジアミン塩、及びクエン酸塩などの吸収促進剤を含有してもよい。吸入用製剤は固体でもよく、賦形剤として、例えば、ラクト－スを含有してもよく、さらに、経鼻腔滴剤は水又は油溶液であってもよい。

【0020】

（本発明の薬物依存症の予防及び／又は治療組成物の投与形態）
本発明の薬物依存症の予防及び／又は治療組成物の正確な投与量及び投与計画は、個々の治療対象毎の所要量、治療方法、疾病又は必要性の程度などに依存して調整できる。投与量は、具体的には年齢、体重、一般的健康状態、性別、食事、投与時間、投与方法、排泄速度、薬物の組合せ、及び患者の病状などに応じて決めることができ、さらに、その他の要因を考慮して決定してもよい。
本発明の薬物依存症の予防及び／又は治療組成物中に含まれる有効成分の１日の投与量は、患者の状態や体重、化合物の種類、投与経路などによって異なる。例えば、有効成分量として、非経口投与の場合は、約０．０１～１００ｍｇ／人／日、好ましくは０．１～５０ｍｇ／人／日、より好ましくは約０．５～１．０ｍｇ／人／日で投与されることが望ましい。

【0021】

具体的には、以下の化合物の投与形態を例示することができる。
シロドシンは、０．０１～１００ｍｇ／人／日、好ましくは１０～５０ｍｇ／人／日で経鼻投与（スプレー噴霧）等されることを例示することができる。

【0022】

以下、本発明の理解を深めるために実施例及び比較例を示して本発明を具体的に説明するが、これらは本発明の範囲を限定するものではない。
全ての動物実験は金沢大学動物実験委員会の承認（承認番号：AP-204167号）を得て実施した。

【実施例0023】

（材料及び方法）
マウス（雄性C57BL/6Jマウス（8－12週齢）及び雄性ICRマウス（8週齢以上））を、三協ラボサービス株式会社北陸営業所から入手して飼育した。コカインは、武田薬品工業株式会社から入手した。その他の試薬は、市販品を使用した。

【0024】

CPPスコアを測定するためのコカイン条件付け場所嗜好性試験は、pre test、conditioning、及びpost testの３つのセッションから構成される試験薬物の報酬効果を評価する試験法であり、文献（Neuropharmacology,166, 107968, doi:10.1016/j.neuropharm.2020.107968.）の記載を基にして、実施された。簡潔には、pre testではマウスをBoxに入れ、白と黒の2つのサイドの滞在時間（秒）を計測し、その後4日間のconditioningにてコカインへの条件付け（3 mg/kg、i.p.、4日間）を行い、post testで再度マウスにボックス内を探索させ、各サイドの滞在時間を計測した。post testにおけるコカイン条件付けサイドの滞在時間からpre testにおけるコカイン条件付けサイドの滞在時間を差し引いた差をCPPスコアとして算出し、この値が大きいほどコカインに対する欲求が大きいと判断した。また、post testの直前に攻撃用の大型のICRマウスに試験対象のC57BL/6Jマウスを5分間攻撃させ、急性SD（Social Defeat；社会的敗北）ストレスを負荷した。

【実施例0025】

（社会的敗北ストレスが薬物欲求増大に与える影響の確認）
拘束ストレスが薬物（コカイン）欲求を増大させることが知られている（参照：文献「Neuropharmacology Volume166, April 2020, 107968」）。そこで、本実施例では、社会的敗北ストレスが薬物欲求増大に与える影響を確認した。

【0026】

図１（１）に記載の工程に従って、post test直前に試験マウスをICRのホームケージに入れ社会的敗北ストレスを負荷し、社会的敗北ストレスを負荷した（SD）コカイン条件付けマウス、及び社会的敗北ストレスを負荷していない（Non-SD）コカイン条件付けマウスのCPPスコアを測定した。測定結果を図１（２）に示す。

【0027】

図１（２）の結果により、社会的敗北ストレスの負荷によってコカインCPPが増大することを確認し、ストレスによって薬物欲求が増大することを確認した。