特開 2025-56570 共凝集抑制剤及び共凝集抑制方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公開特許公報(A)

(11)【公開番号】P2025056570

(43)【公開日】2025-04-08

(54)【発明の名称】共凝集抑制剤及び共凝集抑制方法

(51)【国際特許分類】

   A61K 36/11 20060101AFI20250401BHJP

   A61P 1/02 20060101ALI20250401BHJP

   A61K 8/9741 20170101ALI20250401BHJP

   A61Q 11/00 20060101ALI20250401BHJP

【ＦＩ】

A61K36/11

A61P1/02

A61K8/9741

A61Q11/00

【審査請求】未請求

【請求項の数】3

【出願形態】ＯＬ

(21)【出願番号】P 2023166124

(22)【出願日】2023-09-27

(71)【出願人】

【識別番号】000100539

【氏名又は名称】アース製薬株式会社

(74)【代理人】

【識別番号】110002000

【氏名又は名称】弁理士法人栄光事務所

(72)【発明者】

【氏名】柳澤 孝俊

(72)【発明者】

【氏名】新居 沙織

【テーマコード（参考）】

4C083

4C088

【Ｆターム（参考）】

4C083AA111

4C083AA112

4C083AC622

4C083AD532

4C083CC41

4C083EE33

4C088AA18

4C088AC01

4C088BA08

4C088CA08

4C088NA14

4C088ZA67

(57)【要約】

【課題】歯面での歯周病関連細菌の共凝集を抑制することによって歯周病関連細菌の歯面への付着・定着を防止し、歯周病関連疾患の予防・改善に有用な口腔用製剤を提供すること。
【解決手段】スギナ抽出物を有効成分として含有する歯周病関連細菌の共凝集抑制剤とする。
【選択図】なし

【特許請求の範囲】

【請求項1】

スギナ抽出物を有効成分として含有する歯周病関連細菌の共凝集抑制剤。

【請求項2】

前記歯周病関連細菌がフソバクテリウム・ヌクレアタム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎｕｃｌｅａｔｕｍ）またはアグリゲイティバクター・アクチノミセテムコミタンス（Ａｇｇｒｅｇａｔｉｂａｃｔｅｒ ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｍｃｏｍｉｔａｎｓ）である、請求項１に記載の共凝集抑制剤。

【請求項3】

スギナ抽出物を有効成分として含有する口腔用組成物を口腔内に適用して、歯周病関連細菌が共凝集することを抑制する方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、共凝集抑制剤及び共凝集抑制方法に関する。

【背景技術】

【0002】

歯周病は、病原性細菌の歯面への付着、定着により発症へと向かう口腔内感染症である。歯周病関連細菌の歯面への定着機構は、先ず、唾液の薄膜（ペリクル）によって覆われたエナメル質表面に、ストレプトコッカス・オラリス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｏｒａｌｉｓ）、ストレプトコッカス・サングィニス（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｓａｎｇｕｉｓ）、ストレプトコッカス・ゴルドニィ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｇｏｒｄｏｎｉｉ）、アクチノマイセス・ナエスランディ（Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ ｎａｅｓｌｕｎｄｉｉ）等の初期定着細菌が吸着する。そして、これら初期定着細菌は増殖に伴って互いに共凝集を起こし、歯垢（プラーク）の形成を開始する。次いで、プラークの成熟化に伴い、微生物菌叢が通性嫌気性菌から偏性嫌気性菌へと遷移し、フソバクテリウム・ヌクレアタム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎｕｃｌｅａｔｕｍ）に代表される偏性嫌気性菌が初期定着細菌に共凝集する。そして、フソバクテリウム・ヌクレアタムにアグリゲイティバクター・アクチノミセテムコミタンス（Ａｇｇｒｅｇａｔｉｂａｃｔｅｒ ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｍｃｏｍｉｔａｎｓ）、ポルフィロモナス・ジンジバリス（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ）等の歯周病関連細菌が共凝集し、定着すると考えられている。

【0003】

共凝集は、細菌同士の非特異性静電気的相互作用やレクチン・レセプター型相互作用、粘着性多糖合成による付着作用、非特異性疎水的相互作用等によって引き起こされ、病原性細菌の歯面への定着においては、特に重要な役割を果たしている。

【0004】

虫歯や歯周病の原因となる病原性細菌の歯垢への定着、繁殖を防ぐためには、細菌と細菌の共凝集を抑制することが有効であり、細菌の共凝集を抑制するための手段が種々検討されている。例えば、特許文献１には、エリスリトールを含む口腔細菌の共凝集抑制剤が開示されている。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0005】

【特許文献1】特開２００５－８５７９号公報

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0006】

エリスリトールは糖アルコールの一種であって、一般的には甘味料として知られる成分であるので、エリスリトールを共凝集抑制剤として配合した口腔用組成物は甘い味になることから、甘さが苦手な使用者には使いづらいものであった。また、甘味料はう蝕を想起させるため、歯周病関連細菌の共凝集抑制剤として用いる場合には、使用者に好ましくないイメージを与える懸念がある。

【0007】

そこで、本発明は、歯面での歯周病関連細菌の共凝集を抑制することによって歯周病関連細菌の歯面への付着・定着を防止し、歯周病関連疾患の予防・改善に有用な口腔用製剤を提供することを課題とする。

【課題を解決するための手段】

【0008】

本発明者らは鋭意検討を重ねた結果、スギナ抽出物に歯周病関連細菌の共凝集を抑制する効果があることを発見し、本発明を完成するに至った。

【0009】

すなわち本発明は、以下の（１）～（３）によって達成される。
（１）スギナ抽出物を有効成分として含有する歯周病関連細菌の共凝集抑制剤。
（２）前記歯周病関連細菌がフソバクテリウム・ヌクレアタム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎｕｃｌｅａｔｕｍ）またはアグリゲイティバクター・アクチノミセテムコミタンス（Ａｇｇｒｅｇａｔｉｂａｃｔｅｒ ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｍｃｏｍｉｔａｎｓ）である、前記（１）に記載の共凝集抑制剤。
（３）スギナ抽出物を有効成分として含有する口腔用組成物を口腔内に適用して、歯周病関連細菌が共凝集することを抑制する方法。

【発明の効果】

【0010】

本発明のスギナ抽出物を有効成分として含有する歯周病関連細菌の共凝集抑制剤により、歯周病関連細菌の共凝集を抑制できるので、スギナ抽出物を有効成分として含有する口腔用組成物を口腔内に適用することにより、歯垢（プラーク）の形成を抑制でき、虫歯や歯周病の予防ができる。

【図面の簡単な説明】

【0011】

【図1】試験例１で測定した対照例１、実施例１～４及び比較例１～３のＯＤ６００ｎｍにおける吸光度を示すグラフである。

【図2】試験例１の対照例１、実施例１～４及び比較例１～３の写真図である。

【図3】試験例２で測定した実施例５～１０と、試験例１の対照例１及び比較例１～３のＯＤ６００ｎｍにおける吸光度を示すグラフである。

【図4】試験例３で測定した対照例２及び実施例１１～１３及び比較例４のＯＤ６００ｎｍにおける吸光度を示すグラフである。

【発明を実施するための形態】

【0012】

以下、本発明の実施形態について更に詳しく説明する。

【0013】

本発明の歯周病関連細菌の共凝集抑制剤（以下、単に「共凝集抑制剤」ともいう。）は、スギナ抽出物を有効成分として含有する。
スギナ抽出物は、生薬の一種であるトクサ科（Ｅｑｕｉｓｅｔａｃｅａｅ）トクサ属（Ｅｑｕｉｓｅｔｕｍ）の植物であるスギナ（Ｅｑｕｉｓｅｔｕｍ ａｒｖｅｎｓｅ）から得られる抽出物（植物エキス）である。

【0014】

スギナ抽出物は、スギナの全草、茎部及び／又は葉部を抽出処理することにより得てもよいが、スギナの全草を抽出処理することにより得ることが好ましく、市販品を用いてもよい。抽出によりスギナ抽出物を得る方法は、溶媒抽出、超臨界抽出、水蒸気蒸留等が挙げられる。

【0015】

溶媒抽出処理に使用される抽出溶媒としては、例えば、水、アルコール類が挙げられ、アルコール類としては、例えば、メタノール、エタノール、プロピレングリコール、１，３－ブチレングリコール又はこれらの混液、もしくは１％尿素含有エタノール溶液、１％尿素含有１，３－ブチレングリコール溶液等が挙げられ、これらの溶媒により抽出して得られる抽出物を用いるのが好ましく、特に水、メタノール、エタノール、プロピレングリコール、１，３－ブチレングリコール又はこれらの混液により抽出して得られる抽出物を用いるのが好ましい。

【0016】

得られた抽出物は、そのままの状態で使用してもよく、乾燥させて使用してもよい。また、必要に応じて、得られた抽出物に精製、及び濃縮処理等を施してもよい。精製処理としては、例えば濾過またはイオン交換樹脂や活性炭カラム等を用いた吸着、脱色、及び分離といった処理を例示できる。また、濃縮処理としては、エバポレーター等の常法を例示できる。また、これらに対して更に凍結乾燥等の乾燥処理を施してもよく、更に従来公知の方法に従って粉末化させてもよい。また、このようにして得た抽出物を、必要に応じて水やエタノール等に溶解して用いてもよい。

【0017】

スギナ抽出物の市販品としては、例えば、「スギナ抽出液ＢＧ」（丸善製薬株式会社製）、「スギナ抽出液」（丸善製薬株式会社製）、「すぎな抽出液」（香栄興業株式会社製）等が挙げられる。

【0018】

スギナ抽出物は、１種を単独で用いてもよいし、抽出部位や抽出方法の異なるスギナ抽出物を２種以上組み合わせて用いてもよい。

【0019】

スギナ抽出物は、共凝集抑制剤中、固形分に換算したときに、０．００００１ｗ／ｖ％以上含まれるように含有させるのが好ましい。共凝集抑制剤中のスギナ抽出物の含有量が固形分換算で０．００００１ｗ／ｖ％以上であると、口腔内に適用した際に本発明の所望の効果が得られる。
スギナ抽出物の含有量は、固形分換算で０．０００１ｗ／ｖ％以上であるのがより好ましく、０．００１ｗ／ｖ％以上がさらに好ましい。また共凝集抑制剤中のスギナ抽出物は、固形分換算で、１ｗ／ｖ％以下であるのが好ましく、０．１ｗ／ｖ％以下がより好ましく、０．０５ｗ／ｖ％以下がさらに好ましい。

【0020】

本発明の共凝集抑制剤には、本発明の効果を阻害しない範囲において、口腔用に適用される他の任意成分を含んでいてもよい。任意成分としては、例えば、溶剤、殺菌剤、抗炎症剤、歯石予防剤、ｐＨ調整剤、防腐剤、界面活性剤、色素、香料等が挙げられる。

【0021】

溶剤としては、例えば、精製水、イオン交換水等の水；エタノール等の低級一価アルコール、グリセリン、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール等の多価アルコール等が挙げられる。

【0022】

殺菌剤としては、例えば、塩化セチルピリジニウム、塩化ベンゼトニウム、塩化ベンザルコニウム等の第四級アンモニウム塩、ヒノキチオール、トリクロサン、イソプロピルメチルフェノール、チモール、塩酸アルキルジアミノエチルグリシン液等が挙げられる。

【0023】

抗炎症剤としては、例えば、グリチルリチン酸及びその誘導体、トラネキサム酸及びその誘導体、アミノカプロン酸及びその誘導体、アラントイン及びその誘導体、アスコルビン酸及びその誘導体、アズレン、アズレンスルホン酸及びその誘導体、ジヒドロコレステロール、エピジヒドロコレステリン、酢酸トコフェロール、ニコチン酸トコフェロール、塩化リゾチーム等が挙げられる。

【0024】

歯石予防剤としては、例えば、リン酸塩、ポリリン酸塩、メトキシエチレン無水マレイン酸共重合体、塩化亜鉛、有機酸亜鉛等が挙げられる。

【0025】

ｐＨ調整剤としては、例えば、リン酸一ナトリウム、リン酸二ナトリウム等のリン酸ナトリウム塩、クエン酸ナトリウム、クエン酸、グルコノ－δ－ラクトン、グルコン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素ナトリウム、水酸化ナトリウム及びこれらの水和物等が挙げられる。

【0026】

防腐剤としては、例えば、パラオキシ安息香酸エステル、安息香酸ナトリウム、ソルビン酸カリウム、フェノキシエタノール等が挙げられる。

【0027】

界面活性剤としては、ノニオン性界面活性剤、カチオン性界面活性剤、アニオン性界面活性剤又は両性界面活性剤が挙げられ、具体的には、ノニオン性界面活性剤としては、グリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、脂肪酸ジエタノールアミド、脂肪酸モノグリセライド、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、アルキルグルコシド、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンブロックコポリマー等が挙げられ、カチオン性界面活性剤としては、ポリオキシエチレンアルキルアミン・脂肪酸アミド等が挙げられ、アニオン性界面活性剤としては、硫酸エステル塩、α－オレフィンスルホン酸塩、スルホコハク酸塩、Ｎ－アシルアミノ酸塩、アシル化メチルタウリン塩等が挙げられ、両性界面活性剤としては、酢酸ベタイン型両性界面活性剤、イミダゾリン型両性界面活性剤等が挙げられる。

【0028】

色素としては、例えば、青色１号、青色２号、青色２０１号、黄色４号、黄色５号、黄色２０２（１）号、黄色２０３号、赤色３号、赤色１０２号、赤色１０４号、赤色１０５号、緑色３号、緑色２０１号等が挙げられる。

【0029】

香料としては、例えば、ペパーミント油、スペアミント油、ハッカ油、ユーカリ油、クローブ油、タイム油、ローズマリー油、レモン油、ジンジャー油、ライム油、カシア油、カルダモン油、ラベンダー油、シナモン油等の天然精油、Ｌ－メントール、Ｌ－カルボン、カルバクロール、オイゲノール、アネトール、１，８－シネオール、チモール、バニリン、ピネン、３－Ｌ－メントキシプロパン－１，２－ジオール、サリチル酸メチル等の香料成分、これらの混合物、天然香料、調合香料、合成香料等が挙げられる。

【0030】

上記した他の任意成分は、口腔内に適用したときに細菌の共凝集を促進してしまうものがある。例えば、抗炎症成分であるトラネキサム酸は細菌を共凝集させやすく、本発明の共凝集抑制剤を共に配合することで細菌同士の共凝集を起こさせ難くできるので、口腔内を清潔に保つことができ、トラネキサム酸の抗炎症効果を損なうことがない。

【0031】

本発明の共凝集抑制剤は、口腔内に存在する細菌であれば特に制限なく共凝集を抑制できるが、初期定着細菌に別の細菌が共凝集するのを効果的に抑制できる。初期定着細菌に共凝集する歯周病関連細菌として、例えば、フソバクテリウム・ヌクレアタム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎｕｃｌｅａｔｕｍ）、ポルフィロモナス・ジンジバリス（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓ ｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ）タンネレラ（バクテロイデス）・フォルシチア（Ｔａｎｎｅｒｅｌｌａ （Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ） ｆｏｒｓｙｔｈｉａ）、トレポネマ・デンティコラ（Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ ｄｅｎｔｉｃｏｌａ）、プレボテラ・インターメディア（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａ）、カンピロバクター・レクタス（Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ ｒｅｃｔｕｓ）、アクチノバシラス・アクチノミセテムコミタンス（Ａｃｔｉｎｏｂａｃｉｌｌｕｓ ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｍｃｏｍｉｔａｎｓ）、アクチノマイセス・ビスコーサス（Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓ ｖｉｓｃｏｓｕｓ）、アグリゲイティバクター・アクチノミセテムコミタンス（Ａｇｇｒｅｇａｔｉｂａｃｔｅｒ ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｍｃｏｍｉｔａｎｓ）、セレノモナス・スプチゲナ（Ｓｅｌｅｎｏｍｏｎａｓ ｓｐｕｔｉｇｅｎａ）等が挙げられ、中でも、フソバクテリウム・ヌクレアタムまたはアグリゲイティバクター・アクチノミセテムコミタンスの共凝集を好適に抑制できる。

【0032】

本発明の共凝集抑制剤は、口腔用組成物として口腔内に適用できる。製剤形態としては、例えば、液状、ジェル状、ペースト状、クリーム状、錠剤等の固形状、顆粒状や細粒等の粉末状、カプセル状、ソフトカプセル状等が挙げられる。中でも、スギナ抽出物を口腔内に均一に処理できるため、液体製剤が好ましい。液体製剤としては、例えば、うがい薬（含嗽薬とも称する。）、液体歯磨剤、洗口液、マウススプレー等が挙げられる。

【0033】

なお、本明細書において、「液体」とは、流動性を有しており、２０℃における粘度が２０ｍＰａ・ｓ以下、好ましくは１０ｍＰａ・ｓ以下であるものをいう。ここで、粘度は、市販の回転式粘度計（例えば、東機産業株式会社製Ｂ型粘度計）を使用して測定できる。

【0034】

本発明はまた、スギナ抽出物を有効成分として含有する口腔用組成物を口腔内に適用して、歯周病関連細菌が共凝集することを抑制する方法を提供するものであり、上記した本発明の共凝集抑制剤を口腔用組成物として用いることができる。

【0035】

口腔用組成物中、スギナ抽出物を、固形分に換算したときに、０．００００１ｗ／ｖ％以上含まれるように含有させるのが好ましく、０．０００１ｗ／ｖ％以上がより好ましく、０．００１ｗ／ｖ％以上がさらに好ましい。また口腔用組成物中のスギナ抽出物は、固形分換算で、１ｗ／ｖ％以下であるのが好ましく、０．１ｗ／ｖ％以下がより好ましく、０．０５ｗ／ｖ％以下がさらに好ましい。

【0036】

口腔用組成物を口腔内に適用する際の使用方法としては、口腔用組成物が洗口液の場合は、液体口腔用組成物５～２５ｍＬを口に含み、１５～６０秒間、口腔内でゆすぐようにして使用する。これにより、本発明の液体口腔用組成物を口腔内に十分ゆきわたらせて、歯周病関連細菌の共凝集抑制効果を発揮できる。

【実施例0037】

以下、下記試験例により更に説明するが、本発明は下記例に制限されるものではない。

【0038】

＜試験例１：対照例１、実施例１～４、比較例１～３＞
（試験方法）
１．試験検体の作製
Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎｕｃｌｅａｔｕｍ（ＡＴＣＣ２３７３６、以下「Ｆｎ」と称する。）を１０ｍＬのＢＨＩ（Ｂｒａｉｎ Ｈｅａｒｔ Ｉｎｆｕｓｉｏｎ）液体培地にて、３７℃で２４～４８時間、嫌気条件で前培養して、Ｆｎ前培養液を得た。
同様にして、Ａｇｇｒｅｇａｔｉｂａｃｔｅｒ ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｍｃｏｍｉｔａｎｓ（ＡＴＣＣ３３３８４、以下「Ａａ）と称する。）をＢＨＩ液体培地で培養したＡａ前培養液を得た。
Ｆｎ前培養液及びＡａ前培養液をそれぞれ遠心管に移し、５０００ｒｐｍ、１０分間で遠心分離し、その上澄み液を除去し、５ｍＬのバッファー（Ｔｒｉｓ（１ｍｍｏｌ／Ｌ）、塩化カルシウム（０．１ｍｍｏｌ／Ｌ）、塩化マグネシウム（０．１ｍｍｏｌ／Ｌ）、塩化ナトリウム（０．１５ｍｏｌ／Ｌ）、ｐＨ８．０）を加えて、再度５０００ｒｐｍ、１０分間で遠心分離し、上澄み液を除去し、さらにバッファーを加え、分光光度計における６００ｎｍにおける吸光度ＯＤ_６００＝０．５のＦｎ懸濁液及びＡａ懸濁液を得た。
次に、９６穴ウェル丸底プレートに、スギナ抽出物及び／又はトラネキサム酸を表１に記載の最終濃度となるように注入し、そこにＦｎ懸濁液１００μＬ及びＡａ懸濁液１００μＬを注入して試験検体とした。スギナ抽出物は、丸善製薬株式会社製「スギナ抽出液ＢＧ」（スギナの全草から５０容量％１，３－ブチレングリコール溶液にて抽出したもの）を滅菌水とブチレングリコールを質量比で５０：５０の割合で混合した混合液で希釈し、検体中のスギナ抽出物の濃度が固形分換算で表１記載のとおりになるように加えた。トラネキサム酸は、トラネキサム酸水溶液を用い、検体中のトラネキサム酸の最終濃度が表１記載のとおりになるように加えた。各例につき、３穴を使用し、３検体ずつ作製した。
なお、対照例１として、滅菌水とブチレングリコールを質量比で５０：５０の割合で混合した混合液４μＬをプレートに注入し、そこにＦｎ懸濁液１００μＬ及びＡａ懸濁液１００μＬを注入して試験検体とした。対照例１は３検体作製した。

【0039】

２．共凝集の評価
上記で作製したプレートを卓上撹拌機（大洋化学工業株式会社製「ＴＡＩＹＯ ＭＩＣＲＯ ＭＩＸＥＲ」）で１５秒撹拌、１５秒静置のサイクルを５分間繰り返し、５分間静置後、プレートの側面を手で持ち、２０秒間小さな円を描くようにプレートを動かして手撹拌を行った後、室温（２０～２５℃）で静置した。
１６時間後に再度手撹拌を行い、室温で静置し、対照例１の凝集が目視でも確認できることを確認後（再攪拌から５～９時間後）にプレートリーダー（Ｔｈｅｒｍｏ ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ製「ＭＵＬＴＩＳＫＡＮ ＧＯ」）を用いて各ウェルの６００ｎｍにおける吸光度ＯＤ_６００を測定し、各例において３検体の平均値を求めた。

【0040】

対照例１と比較して、ＯＤ_６００が０．００５以上低下しているものを共凝集抑制効果があると判断した。より具体的には、共凝集の抑制効果を、対照例１と比較した時のＯＤ_６００の値が０．００５以上０．０２０未満低下しているものを「〇」、０．０２０以上低下しているものを「◎」、０．００５未満の低下あるいはＯＤ_６００が対照例１よりも大きくなったものを「×」と評価した。

【0041】

結果を表１及び図１～２に示す。

【0042】

【表1】

【0043】

＜試験例２：実施例５～１０＞
試験例１において、スギナ抽出物及びトラネキサム酸の最終濃度を表２に記載のとおりになるようにした以外は、試験例１と同様にして共凝集の評価を行った。
結果を、表２及び図３に示す。なお、表２及び図３には、比較のために試験例１の対照例１及び比較例１～３の結果も示す。

【0044】

【表2】

【0045】

試験例１及び試験例２より、対照例１は吸光度ＯＤ_６００が０．２０９であり、フソバクテリウム・ヌクレアタム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｎｕｃｌｅａｔｕｍ）とアグリゲイティバクター・アクチノミセテムコミタンス（Ａｇｇｒｅｇａｔｉｂａｃｔｅｒ ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｍｃｏｍｉｔａｎｓ）との共凝集が見られた。そして、トラネキサム酸を含む比較例１～３は対照例１に比べて共凝集が促進された結果となり、図２に示すようにプレートの底に凝集物が沈殿した。
これに対し、スギナ抽出物を加えた実施例１～３は対照例１に比べて吸光度ＯＤ_６００が顕著に小さく、スギナ抽出物によりフソバクテリウム・ヌクレアタムとアグリゲイティバクター・アクチノミセテムコミタンスの共凝集が抑制されたことがわかった。また、比較例１と実施例４～５との比較、比較例２と実施例６～７との比較、及び比較例３と実施例８～１０との比較より、トラネキサム酸を配合していてもスギナ抽出物を含むことで細菌の共凝集が抑制されることがわかった。

【0046】

＜試験例３：対照例２、実施例１１～１３、比較例４＞
試験例１において、トラネキサム酸の代わりにグリチルリチン酸ジカリウムを使用して、スギナ抽出物とグリチルリチン酸ジカリウムを表３に記載の最終濃度となるように調整した以外は、試験例１と同様に行った。
なお、グリチルリチン酸ジカリウムは、グリチルリチン酸ジカリウム水溶液を用い、検体中のグリチルリチン酸ジカリウムの濃度がグリチルリチン酸に換算した濃度で表３記載のとおりになるように加えた。

【0047】

結果を表３及び図４に示す。

【0048】

【表3】

【0049】

試験例３より、対照例２とグリチルリチン酸ジカリウムを含む比較例４の吸光度ＯＤ_６００は、ほぼ同じであり、グリチルリチン酸ジカリウムは細菌の共凝集には影響のないものであることがわかった。グリチルリチン酸ジカリウムとスギナ抽出物を含む実施例１１～１３は、対照例２、比較例４に比べて吸光度ＯＤ_６００が顕著に小さく、試験例３からもスギナ抽出物により細菌の共凝集が抑制されることがわかった。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】