特許 6991257 フローサイトメトリーシステム及び装置、該フローサイトメトリー装置を備えるインビトロ診断用分析装置、並びに、該フローサイトメトリーシステムを備える装置

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2021-12-09

(45)【発行日】2022-01-12

(54)【発明の名称】フローサイトメトリーシステム及び装置、該フローサイトメトリー装置を備えるインビトロ診断用分析装置、並びに、該フローサイトメトリーシステムを備える装置

(51)【国際特許分類】

   G01N 15/14 20060101AFI20220104BHJP

   G01N 33/48 20060101ALI20220104BHJP

【ＦＩ】

G01N15/14 D

G01N15/14 C

G01N33/48 M

【請求項の数】 16

(21)【出願番号】P 2020009074

(22)【出願日】2020-01-23

(62)【分割の表示】P 2016575760の分割

【原出願日】2015-06-23

(65)【公開番号】P2020073918

(43)【公開日】2020-05-14

【審査請求日】2020-02-18

(31)【優先権主張番号】14/56230

(32)【優先日】2014-06-30

(33)【優先権主張国・地域又は機関】FR

(73)【特許権者】

【識別番号】515124543

【氏名又は名称】アルテイオン

(74)【代理人】

【識別番号】110001427

【氏名又は名称】特許業務法人前田特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】ルソー アラン

【審査官】野田 華代

(56)【参考文献】

【文献】特開平０３－１９４４４４（ＪＰ，Ａ）

【文献】特開２０１１－０５９０４６（ＪＰ，Ａ）

【文献】特開２０００－２５８３３４（ＪＰ，Ａ）

【文献】実開平０３－０３６９４４（ＪＰ，Ｕ）

【文献】特開２０１１－２３２０３３（ＪＰ，Ａ）

【文献】実開昭６３－１３７８５５（ＪＰ，Ｕ）

【文献】特開平０５－２３２０１１（ＪＰ，Ａ）

【文献】特開２０１０－１６４５６５（ＪＰ，Ａ）

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

Ｇ０１Ｎ １５／００－１５／１４

Ｇ０１Ｎ ３３／４８

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

フローサイトメトリーシステム（４）であって、
測定チャンバ（１１）を少なくとも部分的に画定する測定セル（９）と、
上記測定チャンバ（１１）内に、分析対象の血液細胞の粒子流を噴射する噴射装置（１２）と、
上記測定チャンバ（１１）内に噴射された上記粒子流を、上記フローサイトメトリーシステムの外部に排出する排出装置（１３）と、
を備え、
上記噴射装置（１２）は、
上記測定チャンバ（１１）に流体的に接続された噴射口（１６）を有しかつ内側チャンバ（１５）を画定する噴射ノズル体（１４）と、
上記内側チャンバ（１５）内に開口し、上記血液細胞を含有する液体サンプルを、該内側チャンバに供給するように構成された第１の供給導管（１７）と、
上記内側チャンバ（１５）内に開口し、第１のシース流体を該内側チャンバに供給するように構成された第２の供給導管（１９）と、
を有し、
上記排出装置（１３）は、
上記測定チャンバ（１１）と流体的に接続され、該測定チャンバ内に噴射された上記粒子流を排出するように構成された排出導管（３１）
を有し、
上記噴射ノズル体（１４）及び上記第２の供給導管（１９）は、上記内側チャンバに導入された上記第１のシース流体が、該内側チャンバに導入された上記液体サンプルを流体力学的に被覆可能なように構成され、
上記測定チャンバ（１１）に流体的に接続され、第２のシース流体を上記測定チャンバに供給するように構成された第３の供給導管（３３）と、
上記血液細胞の少なくとも１つの光学的特性を測定する測定装置と、
を更に備え、
上記測定チャンバ（１１）及び上記第３の供給導管（３３）は、該測定チャンバ（１１）に導入された上記第２のシース流体が、該測定チャンバ（１１）内の上記粒子流を流体力学的に被覆可能なように構成され、
上記測定装置は、
上記測定チャンバ（１１）の方向に向けられかつ上記粒子流を横断可能な光ビームを放射するように構成された発光装置であって、該光ビームを発生させるための光源（４４）を有する少なくとも１つの発光装置（４２）と、
上記測定チャンバ（１１）からの光線を集光する少なくとも１つの集光装置（４３ａ～４３ｃ）と、
を有し、
上記少なくとも１つの集光装置（４３ａ～４３ｃ）は、上記測定セル（９）に関して互いに周方向にずれて配置された複数の集光装置（４３ａ～４３ｃ）を有し、
上記噴射装置（１２）、上記排出装置（１３）、上記少なくとも１つの発光装置（４２）、及び、上記複数の集光装置（４３ａ～４３ｃ）が取り付けられた、一部品からなる基準支持部（６）を更に備え、
上記基準支持部（６）は、上記測定セル（９）を収容する収容ハウジング（７）を画定するものであり、
上記測定セル（９）は、上記収容ハウジング（７）に対して流体的に分離されていると共に上記噴射装置（１２）と上記排出装置（１３）との間に密に挟まれており、
上記少なくとも１つの発光装置（４２）より放射された上記光ビームの向きを調整する向き調整装置（６１）を更に備え、
上記噴射ノズル体（１４）は、ノズル本体（１４ａ）と、噴射部材（１４ｂ）とを有し、
上記ノズル本体（１４ａ）は、電気絶縁材料で構成され、その一部が上記基準支持部（６）の挿通開口（８ａ）を通って延びており、
上記噴射部材（１４ｂ）は、上記ノズル本体（１４ａ）に取り付けられ、その内部に上記噴射口（１６）が形成されており、
上記排出導管（３１）は、上記測定チャンバ（１１）内まで部分的に延びて上記測定チャンバ（１１）内で開口する管状排出部を有し、当該管状排出部は上記噴射口（１６）と対向していることを特徴とするフローサイトメトリーシステム（４）。

【請求項2】

請求項１記載のフローサイトメトリーシステム（４）において、
上記少なくとも１つの発光装置（４２）は、上記光ビームを、上記測定チャンバ（１１）内で上記粒子流に集束させる集束装置（４５）を有することを特徴とするフローサイトメトリーシステム（４）。

【請求項3】

請求項２記載のフローサイトメトリーシステム（４）において、
上記集束装置（４５）は、
上記光ビームの光路に配置された光学集束エレメント（４９）が設けられた第１の取付部（４６）と、
上記光源（４４）が取り付けられた第２の取付部（４７）と、
を有し、
上記集束装置（４５）の上記第１及び第２の取付部（４６，４７）は、上記光ビームの光路に対して実質的に平行な第１の変位方向（Ｄ１）に沿って、互いに相対的に変位可能に構成され、
上記集束装置（４５）には、該集束装置（４５）の上記第１及び第２の取付部（４６，４７）の相対位置を、上記第１の変位方向（Ｄ１）に沿って調整する第１の調整エレメント（５７）が設けられていることを特徴とするフローサイトメトリーシステム（４）。

【請求項4】

請求項３記載のフローサイトメトリーシステム（４）において、
上記集束装置（４５）は、上記第１の取付部（４６）を上記基準支持部（６）に対して固定するための少なくとも１つの固定エレメント（５４）を更に有し、
上記集束装置（４５）の上記第２の取付部（４７）は、該集束装置（４５）の上記第１の取付部（４６）に対して可動に取り付けられていることを特徴とするフローサイトメトリーシステム（４）。

【請求項5】

請求項１記載のフローサイトメトリーシステム（４）において、
上記向き調整装置（６１）は、
上記基準支持部（６）と上記少なくとも１つの発光装置（４２）との間に配置され、少なくとも部分的に弾性変形可能な調整用クッション（６２）と、
上記調整用クッション（６２）を変形させることにより、上記少なくとも１つの発光装置（４２）より放射された上記光ビームの向きを調整する変形手段と、
を有することを特徴とするフローサイトメトリーシステム（４）。

【請求項6】

請求項３記載のフローサイトメトリーシステム（４）において、
上記少なくとも１つの発光装置（４２）より放射された上記光ビームの向きを調整する向き調整装置（６１）を更に備え、
上記向き調整装置（６１）は、
上記基準支持部（６）と上記少なくとも１つの発光装置（４２）との間に配置され、少なくとも部分的に弾性変形可能な調整用クッション（６２）と、
上記調整用クッション（６２）を変形させることにより、上記少なくとも１つの発光装置（４２）より放射された上記光ビームの向きを調整する変形手段と、
を有し、
上記集束装置（４５）の上記第１の取付部（４６）は、上記調整用クッション（６２）を支持する支承部（５２）を有することを特徴とするフローサイトメトリーシステム（４）。

【請求項7】

請求項４記載のフローサイトメトリーシステム（４）において、
上記少なくとも１つの発光装置（４２）より放射された上記光ビームの向きを調整する向き調整装置（６１）を更に備え、
上記向き調整装置（６１）は、
上記基準支持部（６）と上記少なくとも１つの発光装置（４２）との間に配置され、少なくとも部分的に弾性変形可能な調整用クッション（６２）と、
上記調整用クッション（６２）を変形させることにより、上記少なくとも１つの発光装置（４２）より放射された上記光ビームの向きを調整する変形手段と、
を有し、
上記集束装置（４５）の上記第１の取付部（４６）は、上記調整用クッション（６２）を支持する支承部（５２）を有し、
上記変形手段は、上記少なくとも１つの固定エレメント（５４）と上記第１の取付部（４６）の上記支承部（５２）とにより構成されていることを特徴とするフローサイトメトリーシステム（４）。

【請求項8】

請求項１～７のいずれか１つに記載のフローサイトメトリーシステム（４）において、
上記複数の集光装置（４３ａ～４３ｃ）は、
第１の光学集光エレメント（７８）を有する第１の取付部（７５）と、
少なくとも１つの第２の光学集光エレメント（８６）を有する第２の取付部（７６）と、
を有し、
上記複数の集光装置（４３ａ～４３ｃ）の上記第１及び第２の取付部（７５，７６）は、第２の変位方向に沿って、互いに相対的に変位可能に構成され、
上記複数の集光装置（４３ａ～４３ｃ）には、該複数の集光装置（４３ａ～４３ｃ）の上記第１及び第２の取付部（７５，７６）の相対位置を、上記第２の変位方向に沿って調整する第２の調整エレメント（８７）が設けられていることを特徴とするフローサイトメトリーシステム（４）。

【請求項9】

請求項８記載のフローサイトメトリーシステム（４）において、
上記複数の集光装置（４３ａ～４３ｃ）は、該集光装置の上記第１の取付部（７５）を上記基準支持部（６）に対して固定するための少なくとも１つの固定エレメント（８３）を更に有し、該集光装置の上記第２の取付部（７６）が、該集光装置の上記第１の取付部に対して可動に取り付けられていることを特徴とするフローサイトメトリーシステム（４）。

【請求項10】

請求項８又は９記載のフローサイトメトリーシステム（４）において、
上記少なくとも１つの第２の光学集光エレメント（８６）は、少なくとも１つの集光用光ファイバを有することを特徴とするフローサイトメトリーシステム（４）。

【請求項11】

請求項１～１０のいずれか１つに記載のフローサイトメトリーシステム（４）において、
上記血液細胞が上記噴射口（１６）を通過することにより生じる、電気インピーダンスの変動を測定する電気インピーダンス変動測定手段を備え、
上記電気インピーダンス変動測定手段は、上記噴射口（１６）の両側にそれぞれ配置された第１及び第２電極（９１，９２）を有し、
上記第１及び第２電極（９１，９２）は、上記粒子流と電気的に接触するように構成されていることを特徴とするフローサイトメトリーシステム（４）。

【請求項12】

請求項１～１１のいずれか１つに記載のフローサイトメトリーシステム（４）において、
上記少なくとも１つの発光装置（４２）は、上記噴射口（１６）と上記光ビームとの間の距離が、実質的に、上記排出導管（３１）と上記噴射口（１６）との間の距離の１／３以下になるように配置されることを特徴とするフローサイトメトリーシステム（４）。

【請求項13】

請求項１～１２のいずれか１つに記載のフローサイトメトリーシステム（４）において、
上記基準支持部（６）は、金属製であり、
上記測定セル（９）、上記噴射装置（１２）及び上記排出装置（１３）は、電気絶縁材料で構成されることを特徴とするフローサイトメトリーシステム（４）。

【請求項14】

請求項１～１３のいずれか１つに記載のフローサイトメトリーシステム（４）を少なくとも１つ備えることを特徴とするフローサイトメトリー装置（２）。

【請求項15】

請求項１４記載のフローサイトメトリー装置（２）を備えることを特徴とするインビトロ診断用分析装置（９７）。

【請求項16】

請求項１～１３のいずれか１つに記載のフローサイトメトリーシステム（４）と、該フローサイトメトリーシステムが取り付けられる調整台（３）とを備えた装置であって、
上記調整台（３）は、上記基準支持部（６）に対する上記発光装置（４２）の位置を、平行移動によって調整する少なくとも１つの第１の平行移動調整装置（６４）を有することを特徴とする装置。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、生物学的粒子を分析するためのフローサイトメトリーシステムに関する。

【背景技術】

【0002】

特許文献１に開示されているフローサイトメトリーシステムは、
測定チャンバを少なくとも部分的に画定する測定セルと、
上記測定チャンバ内に、分析対象の生物学的粒子の粒子流を噴射する噴射装置と、
上記測定チャンバ内に噴射された上記粒子流を、上記フローサイトメトリーシステムの外部に排出する排出装置と、
上記生物学的粒子の少なくとも１つの光学的特性を測定する測定装置と、
を備える。

【0003】

上記噴射装置は、
上記測定チャンバに流体的に接続された噴射口を有しかつ内側チャンバを画定する噴射ノズル体と、
上記内側チャンバ内に開口し、上記生物学的粒子を懸濁状態で含有する液体サンプルを、該内側チャンバに供給するように構成された第１の供給導管と、
上記内側チャンバ内に開口し、第１のシース流体を該内側チャンバに供給するように構成された第２の供給導管と、
を有し、上記噴射ノズル体及び上記第２の供給導管は、上記内側チャンバに導入された上記第１のシース流体が、該内側チャンバに導入された上記液体サンプルを流体力学的に被覆可能（シース可能）なように構成されている。

【0004】

上記測定装置は、
上記測定チャンバの方向に向けられかつ上記粒子流を横断可能な光ビームを放射するように構成された発光装置であって、該光ビームを発生させるための光源を有する発光装置と、
上記測定チャンバからの光線、具体的には、測定チャンバに導入されて上記光ビームを横切る生物学的粒子のそれぞれが拡散又は回折した光線を集光する集光装置と、
を有する。

【0005】

分析対象の生物学的粒子を含有する液体サンプルを流体力学的に被覆することにより、該液体サンプルの広がりを噴射口の通過前に抑制することができ、したがって、生物学的粒子の位置を制限することができて、粒子流を測定チャンバ内の中央に位置させるように最適化することができる。これにより、入射光ビームと生物学的粒子流との相対的な位置合わせが容易になり、この結果、分析対象である生物学的粒子の光学的特性測定の質を向上させることができる。

【0006】

また、特許文献１に記載のフローサイトメトリーシステムは、測定セルによって画定された測定チャンバの容積が小さいので、反応液の消費を抑制することができる。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0007】

【文献】仏国特許出願公開第２６５３８８５号明細書

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0008】

しかし、上記のようなフローサイトメトリーシステムでは、入射光ビームを生物学的粒子流に位置合わせするために、複雑かつ面倒な調整装置を使用しなければならない。

【0009】

また、上記のようなフローサイトメトリーシステムに使用される調整装置の精度は十分なものではない。したがって、上記のようなフローサイトメトリーシステムを使用して行われる測定には、改善の余地があるといえる。

【0010】

本発明は、上記欠点の一部又は全てを克服することを目的とする。

【0011】

具体的には、本発明の基礎をなす技術的課題は、簡単で経済的な構造を有しかつ信頼できる光学的測定を行い得るフローサイトメトリーシステムを提供することにある。

【課題を解決するための手段】

【0012】

上記の目的を達成するために、本発明では、生物学的粒子を分析するための、以下のようなフローサイトメトリーシステムが提供される。

【0013】

すなわち、本発明のフローサイトメトリーシステムは、
測定チャンバを少なくとも部分的に画定する測定セルと、
上記測定チャンバ内に、分析対象の生物学的粒子の粒子流を噴射する噴射装置と、
上記測定チャンバ内に噴射された上記粒子流を、上記フローサイトメトリーシステムの外部に排出する排出装置と、
を備え、
上記噴射装置は、
上記測定チャンバに流体的に接続された噴射口を有しかつ内側チャンバを画定する噴射ノズル体と、
上記内側チャンバ内に開口し、上記生物学的粒子を懸濁状態で含有する液体サンプルを、該内側チャンバに供給するように構成された第１の供給導管と、
上記内側チャンバ内に開口し、第１のシース流体を該内側チャンバに供給するように構成された第２の供給導管と、
を有し、
上記排出装置は、
上記測定チャンバと流体的に接続され、該測定チャンバ内に噴射された上記粒子流を排出するように構成された排出導管
を有し、
上記噴射ノズル体及び上記第２の供給導管は、上記内側チャンバに導入された上記第１のシース流体が、該内側チャンバに導入された上記液体サンプルを流体力学的に被覆可能なように構成され、
上記測定チャンバに流体的に接続され、第２のシース流体を上記測定チャンバに供給するように構成された第３の供給導管と、
上記生物学的粒子の少なくとも１つの光学的特性を測定する測定装置と、
を更に備え、
上記測定チャンバ及び上記第３の供給導管は、該測定チャンバに導入された上記第２のシース流体が、該測定チャンバ内の上記粒子流を流体力学的に被覆可能なように構成され、
上記測定装置は、
上記測定チャンバの方向に向けられかつ上記粒子流を横断可能な光ビームを放射するように構成された発光装置であって、該光ビームを発生させるための光源を有する少なくとも１つの発光装置と、
上記測定チャンバからの光線を集光する少なくとも１つの集光装置と、
を有し、
上記少なくとも１つの集光装置は、上記測定セルに関して互いに周方向にずれて配置された複数の集光装置を有し、
上記噴射装置、上記排出装置、上記少なくとも１つの発光装置、及び、上記複数の集光装置が取り付けられた、一部品からなる基準支持部を更に備え、
上記基準支持部は、上記測定セル収容する収容ハウジングを画定するものであり、
上記測定セルは、上記収容ハウジングに対して流体的に分離されていると共に上記噴射装置と上記排出装置との間に密に挟まれている。

【0014】

発光装置と集光装置とを、基準支持部と呼ばれる同じ支持部に取り付けることにより、発光装置及び集光装置の安定性と相対位置決め精度とが向上し、その結果、実施される光学的測定の信頼度が高まる。

【0015】

また、噴射装置と排出装置とを１つの基準支持部に取り付けることにより、低精度で成型又はオーバーモールドされた部品によって、噴射装置及び排出装置を構成することができる。その結果、本発明のフローサイトメトリーシステムの製造コストを低減することができる。

【0016】

尚、測定チャンバ内で粒子流を被覆することで、測定チャンバ内を通過する間、この粒子流を安定的に中央に位置（集中）させることができる。

【0017】

本発明の一実施形態によると、上記少なくとも１つの発光装置は、レーザー光線を放射するように設けられる。

【0018】

本発明の一実施形態によると、上記少なくとも１つの発光装置は、上記光ビームを、上記測定チャンバ内で上記粒子流に集束させる集束装置を有する。

【0019】

本発明の一実施形態によると、上記集束装置は、
上記光ビームの光路に配置された光学集束エレメントが設けられた第１の取付部と、
上記光源が取り付けられた第２の取付部と、
を有し、上記集束装置の第１及び第２の取付部は、上記光ビームの光路に対して実質的に平行な第１の変位方向に沿って、互いに相対的に変位可能に構成され、上記集束装置には、該集束装置の上記第１及び第２の取付部の相対位置を、上記第１の変位方向に沿って調整する、微動ネジのような第１の調整エレメントが設けられている。

【0020】

本発明の一実施形態によると、上記光学集束エレメントは、集束レンズを含む。

【0021】

本発明の一実施形態によると、上記集束装置は、上記第１の取付部を上記基準支持部に対して固定するための少なくとも１つの固定エレメントを更に有し、該集束装置の上記第２の取付部が、該集束装置の上記第１の取付部に対して可動に取り付けられている。

【0022】

本発明の一実施形態によると、上記少なくとも１つの固定エレメントは、少なくとも１本の固定ネジを含む。

【0023】

本発明の一実施形態によると、上記集束装置の上記第１の取付部がガイド導管を画定し、このガイド導管内に、該集束装置の上記第２の取付部の少なくとも一部が摺動可能に取り付けられる。

【0024】

本発明の一実施形態によると、上記第１の調整エレメントは、上記集束装置の上記第１の取付部に形成された第１のネジ穴と協働するよう設けられた第１のネジ部と、該集束装置の上記第２の取付部に形成された第２のネジ穴と協働するよう設けられた第２のネジ部とを有する。第１及び第２のネジ部には、ピッチが互いに異なるネジ山が設けられる。

【0025】

本発明の一実施形態によると、上記フローサイトメトリーシステムは、上記少なくとも１つの発光装置より放射された上記光ビームの向きを調整する向き調整装置を更に備える。この向き調整装置は、角度調整装置とも呼ばれる。

【0026】

本発明の一実施形態によると、上記向き調整装置は、上記光ビームの光路が上記粒子流の流動方向に対して実質的に垂直に延びるように、上記少なくとも１つの発光装置より放射された光ビームの向きを調整する。

【0027】

本発明の一実施形態によると、上記向き調整装置は、
上記基準支持部と上記少なくとも１つの発光装置との間に配置され、少なくとも部分的に弾性変形可能な調整用クッションと、
上記調整用クッションを変形させることにより、上記少なくとも１つの発光装置より放射された上記光ビームの向きを調整する変形手段と、
を有する。

【0028】

本発明の一実施形態によると、上記調整用クッションは環状のものである。例えば、上記調整用クッションは、上記発光装置の少なくとも一部が通って延びる中央経路を画定する。

【0029】

本発明の一実施形態によると、上記集束装置の上記第１の取付部は、上記調整用クッションを支持する支承部を有する。

【0030】

本発明の一実施形態によると、上記第１の取付部の上記支承部は、上記少なくとも１つの固定エレメントが挿通される挿通孔を有する。

【0031】

本発明の一実施形態によると、上記変形手段は、上記少なくとも１つの固定エレメントと上記第１の取付部の上記支承部とにより構成されている。

【0032】

本発明の一実施形態によると、上記調整用クッションは、上記少なくとも１つの固定エレメントが挿通される挿通孔を有する。

【0033】

本発明の一実施形態によると、上記少なくとも１つの集光装置は、
第１の光学集光エレメントを有する第１の取付部と、
少なくとも１つの第２の光学集光エレメントを有する第２の取付部と、
を有し、上記少なくとも１つの集光装置の上記第１及び第２の取付部は、第２の変位方向に沿って、互いに相対的に変位可能に構成され、上記少なくとも１つの集光装置には、該少なくとも１つの集光装置の上記第１及び第２の取付部の相対位置を、上記第２の変位方向に沿って調整する、微動ネジのような第２の調整エレメントが設けられている。

【0034】

本発明の一実施形態によると、上記少なくとも１つの集光装置は、該集光装置の上記第１の取付部を上記基準支持部に対して固定するための少なくとも１つの固定エレメントを更に有し、該集光装置の上記第２の取付部が、該集光装置の上記第１の取付部に対して可動に取り付けられている。

【0035】

本発明の一実施形態によると、上記集光装置の上記第１の取付部は、ガイド導管を画定し、このガイド導管内に、該集光装置の上記第２の取付部の少なくとも一部が摺動可能に取り付けられている。

【0036】

本発明の一実施形態によると、上記第２の調整エレメントは、上記集光装置の上記第１の取付部に形成された第１のネジ穴と協働するよう設けられた第１のネジ部と、該集光装置の上記第２の取付部に形成された第２のネジ穴と協働するよう設けられた第２のネジ部とを有する。第１及び第２のネジ部には、ピッチが互いに異なるネジ山が設けられる。

【0037】

本発明の一実施形態によると、上記第１の光学集光エレメントは、例えばコリメータを形成する光学レンズを含む。

【0038】

本発明の一実施形態によると、上記少なくとも１つの第２の光学集光エレメントは、少なくとも１つの集光用光ファイバを含む。

【0039】

本発明の一実施形態によると、上記集光装置の上記第２の取付部は、複数の集光用光ファイバを有する。本発明の一実施形態によると、上記集光装置の上記第２の取付部は、１つの集光用中央光ファイバと、複数の集光用周辺光ファイバとを有する。例えば、上記集光用中央光ファイバは、入射光ビームの光路に沿って測定チャンバから出射された光線、すなわち、０°の角度の光線を集光するように構成され、上記複数の集光用周辺光ファイバは、例えば１５°よりも小さい角度で測定チャンバから出射された光線を集光するように構成されている。例えば、上記集光装置の上記第２の取付部は、４°の範囲内の角度で測定チャンバから出射された光線を集光するように構成された集光用周辺光ファイバを少なくとも１つ有していてもよく、９°の範囲内の角度で測定チャンバから出射された光線を集光するように構成された集光用周辺光ファイバを少なくとも１つ有していてもよい。

【0040】

本発明の一実施形態によると、上記フローサイトメトリーシステムは、上記生物学的粒子が上記噴射口を通過することにより生じる、電気インピーダンスの変動を測定する電気インピーダンス変動測定手段を更に備え、該電気インピーダンス変動測定手段は、上記噴射口の両側にそれぞれ配置された第１及び第２電極を有し、該第１及び第２電極は、上記粒子流と電気的に接触して、上記噴射口を通る電界を発生させるように構成されている。このような電気インピーダンス変動測定手段により、上記噴射口を通過する生物学的粒子の数をカウントすることができるとともに、生物学的粒子の大きさ、具体的には体積を測定することができる。

【0041】

本発明の一実施形態によると、上記測定装置は、上記測定セルに関して、具体的には、上記粒子流の軸の周囲で、互いに周方向にずれて配置された複数の集光装置を有する。

【0042】

本発明の一実施形態によると、上記少なくとも１つの集光装置は、上記測定セルを挟んで、実質的に上記発光装置とは反対側に配置されている。

【0043】

本発明の一実施形態によると、上記フローサイトメトリーシステムは、上記測定セルに関して、具体的には、上記粒子流の軸の周囲で、互いに周方向にずれて配置された複数の発光装置を備える。

【0044】

本発明の一実施形態によると、上記排出装置は、上記第３の供給導管に加えて、上記測定チャンバと流体的に接続された排出導管を有する。この排出導管は、該測定チャンバ内に噴射された上記粒子流を排出するように構成される。この構成により、複数の流体入口と複数の流体出口とを基準支持部に対して実質的に対称に配置することができ、この結果、本発明のフローサイトメトリーシステムの組立てを容易なものとし、さらには上記複数の流体入口及び流体出口へのアクセスをより容易にすることができる。また、上記構成により、噴射装置及び排出装置の製造が容易になる。なぜなら、排出装置を構成する部品を、同じ金型、又は、その形状に適合可能なインサート又は部品を備える金型から、製造することができるからである。

【0045】

本発明の一実施形態によると、上記フローサイトメトリーシステムは、上記測定チャンバ内に噴射された第２のシース流体の圧力が、上記内側チャンバ内に噴射された第１のシース流体の圧力よりも低くなるように構成される。

【0046】

本発明の一実施形態によると、上記噴射装置は、上記内側チャンバに流体的に接続された第１の吐出導管を有する。この第１の吐出導管は、該内側チャンバ内の内容物を上記フローサイトメトリーシステムの外部に吐出するように構成される。具体的に、この第１の吐出導管は、上記第２の供給導管を介して上記内側チャンバに導入された第１の洗浄流体を、上記フローサイトメトリーシステムの外部に吐出するように構成される。

【0047】

本発明の一実施形態によると、上記フローサイトメトリーシステムは、上記第１の吐出導管に流体的に接続された第１の吐出弁を更に備える。この第１の吐出弁は、上記内側チャンバから上記第１の吐出導管を介して上記フローサイトメトリーシステムの外部へと向かう流体の流れを止める閉鎖位置と、上記内側チャンバから上記第１の吐出導管を介して上記フローサイトメトリーシステムの外部へと流体を流す開放位置との間で可動に構成される。

【0048】

本発明の一実施形態によると、少なくとも１つの上記排出装置が、上記測定チャンバに流体的に接続された第２の排出導管を有する。この第２の排出導管は、該測定チャンバ内の内容物を上記フローサイトメトリーシステムの外部に排出するように構成される。具体的に、この第２の排出導管は、上記第３の供給導管を介して上記測定チャンバに導入された第２の洗浄用流体、及び、該内側チャンバを出て上記噴射口を通過する測定対象の上記粒子流を、上記フローサイトメトリーシステムの外部に排出するように構成される。

【0049】

本発明の一実施形態によると、上記フローサイトメトリーシステムは、第２の吐出導管に流体的に接続された第２の吐出弁を更に備える。この第２の吐出弁は、上記測定チャンバから上記第２の吐出導管を介して上記フローサイトメトリーシステムの外部へと向かう流体の流れを止める閉鎖位置と、上記測定チャンバから上記第２の吐出導管を介して上記フローサイトメトリーシステムの外部へと流体を流す開放位置との間で可動に構成される。

【0050】

本発明の一実施形態によると、上記第１の吐出弁及び／又は上記第２の吐出弁は、電磁弁である。

【0051】

本発明の一実施形態によると、上記基準支持部は、少なくとも１つの第１の挿通開口と、第２の挿通開口と、第３の挿通開口と、少なくとも１つの第４の挿通開口とを有する。上記少なくとも１つの第１の挿通開口を通って上記発光装置の少なくとも一部が延び、上記第２の挿通開口を通って上記少なくとも１つの集光装置の少なくとも一部が延び、上記第３の挿通開口を通って上記噴射装置の少なくとも一部が延び、上記少なくとも１つの第４の挿通開口を通って上記排出装置の少なくとも一部が延びる。これら第１乃至第４の挿通開口は、上記収容ハウジング内に開口している。

【0052】

本発明の一実施形態によると、上記第１及び第２の供給導管は、上記内側チャンバ内に開口する第１及び第２の端部をそれぞれ有し、該第２の端部は、該第１の端部よりも、上記噴射口から離れている。

【0053】

本発明の一実施形態によると、上記第１の供給導管は、上記内側チャンバ内に開口する第１の管状供給部を有し、上記第２の供給導管は、上記内側チャンバ内に開口する第２の管状供給部を有する。該第２の管状供給部は、該第１の管状供給部を囲むように延びている。例えば、これら第１及び第２の管状供給部は、互いに同軸状に延びていてもよい。

【0054】

本発明の一実施形態によると、上記第３の供給導管の測定チャンバ側の端部は、上記排出導管の測定チャンバ側の端部よりも、上記噴射口から離れている。

【0055】

本発明の一実施形態によると、上記排出導管は、上記測定チャンバ内に開口する管状排出部を有し、上記第３の供給導管は、上記測定チャンバに流体的に接続された第３の管状供給部を有する。この第３の管状供給部は、上記管状排出部を囲むように延びている。例えば、上記管状排出部と上記第３の管状供給部とは、同軸状に延びていてもよい。

【0056】

本発明の一実施形態によると、上記第１の供給導管は、上記噴射口に対向して開口している。

【0057】

本発明の一実施形態によると、上記測定セルは、上記収容ハウジングに対して流体的に分離されている。

【0058】

本発明の一実施形態によると、上記測定セルは、上記噴射装置と上記排出装置との間に密に挟まれている。

【0059】

本発明の一実施形態によると、上記測定セルは、上記発光装置から放射された光ビームを、少なくとも部分的に透過させる。

【0060】

本発明の一実施形態によると、上記測定セルは、電気絶縁材料で構成される。

【0061】

本発明の一実施形態によると、上記噴射装置及び上記排出装置は、電気絶縁材料で構成される。

【0062】

本発明の一実施形態によると、上記発光装置は、上記光ビームの光路が、上記粒子流の流動方向に対して実質的に垂直になるように配置される。

【0063】

本発明の一実施形態によると、上記排出装置は、上記測定セルを挟んで上記噴射装置とは反対側に位置するように、上記基準支持部に取り付けられる。

【0064】

本発明の一実施形態によると、上記少なくとも１つの発光装置及び上記少なくとも１つの集光装置は、上記粒子流の流動方向に対して実質的に垂直な平面内で延びる。

【0065】

本発明の一実施形態によると、上記測定装置は、上記少なくとも１つの集光装置に対応しかつ該少なくとも１つの集光装置により集光された光線によって決定される測定信号を出力部から出力する少なくとも１つの検出エレメントを有する。例えば、上記少なくとも１つの検出エレメントは、フォトダイオードや光電子増倍管のような光検出器により構成される。

【0066】

本発明の一実施形態によると、上記分析対象の生物学的粒子は、生物学的細胞、特に、白血球や赤血球のような血液細胞、又は、血小板や、酵母、菌類、胞子、微生物、バクテリア等からなる。上記生物学的粒子は、結晶のようなエレメントからなっていてもよい。

【0067】

本発明の一実施形態によると、上記噴射ノズル体は、ルビー又は合成サファイアといった噴射部材を有し、この噴射部材に上記噴射口が形成される。尚、上記噴射口は、上記噴射ノズル体に直接的に形成されてもよい。

【0068】

本発明の一実施形態によると、上記発光装置は、上記噴射口と上記光ビームとの間の距離が、実質的に、上記排出導管と上記噴射口との間の距離の１／３以下になるように配置される。

【0069】

本発明の一実施形態によると、上記発光装置は、上記噴射口と上記光ビームとの間の距離が、実質的に、上記排出導管と上記噴射口との間の距離の１／２以下になるように配置される。

【0070】

本発明の一実施形態によると、上記第１のシース流体及び／又は上記第２のシース流体は、生理学的液体のような希釈液である。

【0071】

本発明の一実施形態によると、上記第１の洗浄流体及び／又は上記第２の洗浄流体は、生理学的液体のような希釈液である。

【0072】

また、本発明は、上記フローサイトメトリーシステムを少なくとも１つ備えるフローサイトメトリー装置に関する。

【0073】

本発明の一実施形態によると、上記フローサイトメトリー装置は、少なくとも１つの検出エレメントの出力部から出力された上記測定信号をフィルタにかけて前置増幅する前置増幅ユニットを備える。例えば、このような前置増幅ユニットは、信号入力電子基板を有し、この信号入力電子基板上に、上記少なくとも１つの検出エレメントが固定される。

【0074】

本発明の一実施形態によると、上記前置増幅ユニットは、筐体内に取り付けられる。

【0075】

本発明の一実施形態によると、上記フローサイトメトリー装置は、上記第１の吐出弁及び／又は上記第２の吐出弁の開閉を制御するために設けられた制御装置を備える。

【0076】

さらに、本発明は、上記少なくとも１つのフローサイトメトリー装置を備えたインビトロ診断用分析装置に関する。例えば、このようなインビトロ診断用分析装置は、仏国特許出願公開第２９９８０５７号明細書に記載の装置に類似するものであってもよい。

【0077】

本発明の一実施形態によると、上記インビトロ診断用分析装置は、上記少なくとも１つの検出エレメントにより供給された上記測定信号を分析する処理ユニットを備える。この処理ユニットは、例えば、上記生物学的粒子を識別及び／又は特定するために、具体的には、上記生物学的粒子の構造及び／又は形状を判定するために設けられる。上記処理ユニットは、例えば、上記生物学的粒子の濃度及び／又は分布を判定するために設けられるとともに、例えば、白血球中のリンパ球、単球、好中球、好酸球、及び好塩基球の濃度及び／又は分布を判定するために設けられてもよい。

【0078】

さらに、本発明は、本発明に係る上記フローサイトメトリーシステムと、このフローサイトメトリーシステムを取り付けられる調整台とを備えた装置に関する。この調整台は、上記基準支持部に対する上記発光装置の位置を、平行移動によって調整する少なくとも１つの第１の平行移動調整装置を有する。

【0079】

本発明の一実施形態によると、上記第１の平行移動調整装置は、上記基準支持部に対する上記発光装置の位置を、上記粒子流の流動方向に対して垂直な少なくとも１つの第１の平行移動調整方向に沿って、平行移動によって調整する。

【0080】

本発明の一実施形態によると、上記第１の平行移動調整装置は、上記基準支持部に対する上記発光装置の位置を、上記粒子流の流動方向に対して平行な第２の平行移動調整方向に沿って、平行移動によって調整する。

【0081】

本発明の一実施形態によると、上記第１の平行移動調整装置は、
上記調整台の支持部分に固定された、支持トレーのような第１の固定部と、
上記第１の平行移動調整方向に沿って、上記第１の固定部に対して平行移動可能に取り付けられた支持エレメントと、
上記発光装置に接続されるとともに、上記第２の平行移動調整方向に沿って、上記支持エレメントに対して平行移動可能に取り付けられた第２の固定部と、
を有する。

【0082】

このような第１の平行移動調整装置によって、上記発光装置の位置調整が容易かつ正確にでき、したがって、上記粒子流に対する上記光ビームの最適な位置合わせを確実に行うことができる。

【0083】

本発明の一実施形態によると、上記支持エレメントは、第１の支持分岐部と第２の支持分岐部とを有する支持ブラケットである。該第１の支持分岐部は、上記第１の平行移動調整方向に沿って、上記第１の固定部に対して平行移動可能に取り付けられ、上記第２の固定部は、上記第２の平行移動調整方向に沿って、上記第２の支持分岐部に対して平行移動可能に取り付けられる。

【0084】

本発明の一実施形態によると、上記フローサイトメトリーシステムは、上記基準支持部に取り付けられかつ上記発光装置が取り付けられた第１の固定分岐部と、上記第２固定部に固定された第２の固定分岐部とを有する固定ブラケットを備える。

【0085】

本発明の一実施形態によると、上記調整用クッションは、上記集束装置の上記第１の取付部と上記固定ブラケットの一部との間に位置している。

【0086】

本発明の一実施形態によると、上記第１の平行移動調整装置は、微動平行移動調整装置である。

【0087】

本発明の一実施形態によると、上記フローサイトメトリーシステムは、上記第１の固定分岐部を上記基準支持部に固定するための少なくとも１本の固定ネジを有し、上記第１の固定分岐部は、上記少なくとも１本の固定ネジを挿通可能な少なくとも１つの挿通孔を有する。本発明の一実施形態によると、この挿通孔は楕円形であるか、又は、該挿通孔の寸法が固定ネジの本体の寸法よりも大きい。

【0088】

本発明の一実施形態によると、上記調整台は、上記基準支持部に対する上記少なくとも１つの集光装置の位置を平行移動によって調整する少なくとも１つの第２の平行移動調整装置を更に有する。

【0089】

本発明の一実施形態によると、上記第２の平行移動調整装置は、上記基準支持部に対する上記集光装置の位置を、上記粒子流の流動方向に対して垂直な少なくとも１つの第１の平行移動調整方向に沿って、平行移動によって調整する。

【0090】

本発明の一実施形態によると、上記第２の平行移動調整装置は、上記基準支持部に対する上記集光装置の位置を、上記粒子流の流動方向に対して平行な第２の平行移動調整方向に沿って、平行移動によって調整する。

【0091】

本発明の一実施形態によると、上記第２の平行移動調整装置は、
上記調整台の支持部分に固定された第１の固定部と、
上記第１の平行移動調整方向に沿って、上記第１の固定部に対して平行移動可能に取り付けられた支持エレメントと、
上記集光装置に接続されるとともに、上記第２の平行移動調整方向に沿って、上記支持エレメントに対して平行移動可能に取り付けられた第２の固定部と、
を有する。

【0092】

本発明の一実施形態によると、上記第２の平行移動調整装置における上記支持エレメントは、第１の支持分岐部と第２の支持分岐部とを有する支持ブラケットである。該第１の支持分岐部は、上記第１の平行移動調整方向に沿って、上記第１の固定部に対して平行移動可能に取り付けられ、上記第２の固定部は、上記第２の平行移動調整方向に沿って、上記第２の支持分岐部に対して平行移動可能に取り付けられる。

【0093】

本発明の一実施形態によると、上記フローサイトメトリーシステムは、少なくとも１つの集光装置に対応する少なくとも１つの固定ブラケットを備える。この固定ブラケットは、上記基準支持部に取り付けられかつ上記集光装置が取り付けられた第１の固定分岐部と、上記第２の固定部に固定された第２の固定分岐部とを有する。

【0094】

本発明の一実施形態によると、上記第２の平行移動調整装置は、微動平行移動調整装置である。

【0095】

本発明の一実施形態によると、上記フローサイトメトリーシステムは、上記集光装置が固定された上記第１の固定分岐部を上記基準支持部に固定するための少なくとも１本の固定ネジを有し、この第１の固定分岐部は、上記少なくとも１本の固定ネジを挿通可能な少なくとも１つの挿通孔を有する。本発明の一実施形態によると、この挿通孔は楕円形であるか、又は、該挿通孔の寸法が、対応する固定ネジの本体の寸法よりも大きい。

【0096】

いずれの場合も、添付の概略図を参照しての以下の説明により、本発明がより理解されるであろう。添付の図面には、本発明のフローサイトメトリーシステムの２つの実施形態が非限定的な例として示されている。

【図面の簡単な説明】

【0097】

【図1】本発明の第１実施形態に係るフローサイトメトリーシステムを２つ備えたフローサイトメトリー装置を示す斜視図である。

【図2】図１に示すフローサイトメトリーシステムの斜視図である。

【図3】図２に示すフローサイトメトリーシステムの一部を示す斜視図である。

【図4】図２に示すフローサイトメトリーシステムの平面図である。

【図5】図４のＶ－Ｖ線に沿った断面図である。

【図6】図５の詳細を示す拡大図である。

【図7】図５の詳細を示す拡大図である。

【図8】図４のVIII－VIII線に沿った断面図である。

【図9】図８の詳細を示す拡大図である。

【図10】図８の詳細を示す拡大図である。

【図11】図８の詳細を示す拡大図である。

【図12】図２に示すフローサイトメトリーシステムに属する集光装置の一部を示す正面図である。

【図13】調整台に配設されたフローサイトメトリーシステムの一部を示す斜視図である。

【図14】調整台に配設されたフローサイトメトリーシステムの一部を示す斜視図である。

【図15】調整台に配設されたフローサイトメトリーシステムの一部を示す斜視図である。

【図16】本発明に係るインビトロ診断用分析装置の前面を示す斜視図である。

【図17】本発明に係るインビトロ診断用分析装置の背面を示す斜視図である。

【図18】本発明の第２実施形態に係るフローサイトメトリーシステムを示す断面図である。

【図19】本発明の第２実施形態に係るフローサイトメトリーシステムを示す断面図である。

【発明を実施するための形態】

【0098】

図１～図１５は、生物学的粒子、及び血液細胞のような生物学的細胞の分析のための、サイトメトリック測定装置とも呼ばれるフローサイトメトリー装置２の第１実施形態を示す図である。

【0099】

図１に示すように、フローサイトメトリー装置２は、少なくとも１つのフローサイトメトリーシステム４を備える。このフローサイトメトリーシステム４は、サイトメトリック測定ヘッドとも呼ばれる。図１に示す実施形態では、フローサイトメトリー装置２は、２つのフローサイトメトリーシステム４を備える。尚、フローサイトメトリー装置２は、フローサイトメトリーシステム４を１つだけ備えていてもよく、２つよりも多く備えていてもよい。

【0100】

フローサイトメトリーシステム４は、例えば金属製の一部品からなる支持部６（基準支持部に相当）を有する。この支持部６は、平行六面体であって、収容ハウジング７を画定する。支持部６の６つの外側面には、６つの挿通開口８ａ～８ｆがそれぞれ形成されている。

【0101】

フローサイトメトリーシステム４は、測定チャンバ１１を少なくとも部分的に画定する測定セル９と、生物学的粒子流Ｆを測定チャンバ１１内に噴射する噴射装置１２と、測定チャンバ１１内に噴射された生物学的粒子流Ｆをフローサイトメトリーシステム４の外部に排出する排出装置１３とを更に備える。

【0102】

図５及び図８に示すように、測定セル９は環状のものであって、噴射装置１２と排出装置１３との間に密に挟まれている。測定セル９は、支持部６により画定された収容ハウジング７内に収容されているとともに、収容ハウジング７に対して流体的に分離されている。測定セル９は、好適には、透光性の電気絶縁材料、例えば、ポリメチルメタクリル樹脂のようなプラスチック材料で構成される。

【0103】

噴射装置１２及び排出装置１３は、それぞれ、支持部６における相対向する２つの外側面、例えば上側の外側面及び下側の外側面に固定される。

【0104】

図６及び図９に具体的に示すように、噴射装置１２は、内側チャンバ１５を画定する噴射ノズル体１４を有する。この噴射ノズル体１４の上端は、噴射口１６に嵌合されている。噴射口１６は、測定チャンバ１１内に開口するとともに、内側チャンバ１５と測定チャンバ１１とを流体的に接続するように設けられている。

【0105】

図１～図１５に示す実施形態では、噴射ノズル体１４はノズル本体１４ａを有し、このノズル本体１４ａは、プラスチック材料のような電気絶縁材料で構成され、その一部が支持部６の挿通開口８ａを通って延びている。噴射ノズル体１４は、ノズル本体１４ａに取り付けられた、内部に上記噴射口１６が形成された噴射部材１４ｂを更に有する。例えば、噴射部材１４ｂは、ルビー又は合成サファイアで構成されていてもよく、プラスチック材料で構成されていてもよい。本発明の変形例では、噴射口１６は、ノズル本体１４に直接形成されていてもよい。

【0106】

噴射装置１２は、分析対象の生物学的粒子を懸濁状態で含有する液体サンプルを内側チャンバ１５に供給するように構成された管状の供給導管１７を更に有する。供給導管１７は、部分的に内側チャンバ１５内で延び、その上端１８が、噴射口１６の近傍において当該噴射口１６と対向するように、内側チャンバ１５内に開口している。

【0107】

噴射装置１２は、シース流体を内側チャンバ１５に供給するように構成された供給導管１９を更に有する。噴射ノズル体１４と供給導管１９とは、内側チャンバ１５に導入された液体サンプルが、噴射口１６を通過する前に、供給導管１９を介して内側チャンバ１５に導入されたシース流体によって流体力学的に被覆（シース）され得るように構成されている。このような流体力学的被覆は、液体サンプルの液圧的又は流体力学的な集束とも呼べるものである。

【0108】

図１～図１５に示す実施形態では、噴射装置１２は、ノズル本体１４ａの下面にしっかりと取り付けられた供給部材２１を有する。供給導管１９は、供給部材２１に取り付けられた管状インサートにより構成された第１の導管部１９ａと、第１の導管部１９ａに流体的に接続された管状の第２の導管部１９ｂとを有する。例えば、供給部材２１は、電気絶縁材料、具体的にはプラスチック材料で構成されていてもよい。例えば、第２の導管部１９ｂは、供給部材２１に形成されていてもよく、或いは、供給部材２１に取り付けられた管状インサートにより形成されていてもよい。例えば、第１の導管部１９ａを形成する管状インサートは、オーバーモールドされていてもよい。

【0109】

図１～図１５に示す実施形態では、第１の導管部１９ａは、供給部材２１から突出しかつシース流体の第１供給源（図示せず）と接続される端部を有する。第２の導管部１９ｂは、内側チャンバ１５内で、供給導管１７を囲むように延びている。供給導管１７と第２の導管部１９ｂとは、互いに同軸状に延びている。第２の導管部１９ｂの上端２２は、内側チャンバ１５内に開口している。第２の導管部１９ｂの上端２２は、供給導管１７の上端１８よりも、噴射口１６から離れている。

【0110】

図１～図１５に示す実施形態では、供給導管１７は、供給部材２１に形成された挿通孔を通って延びる端部を有する。供給導管１７の該端部は、供給部材２１から突出し、液体サンプルの供給源（図示せず）と接続されるように構成されている。

【0111】

図５及び図６に示すように、噴射装置１２は、内側チャンバ１５に流体的に接続された吐出導管２６を更に有する。この吐出導管２６は、内側チャンバ１５内の内容物をフローサイトメトリーシステム４の外部に吐出するように構成されている。具体的には、吐出導管２６は、供給導管１９を介して内側チャンバ１５に導入された洗浄流体を、フローサイトメトリーシステム４の外部に吐出するように構成されている。

【0112】

図１～図１５に示す実施形態では、吐出導管２６の一方の端部は、例えば内側チャンバ１５の基底部において内側チャンバ１５内に開口する。吐出導管２６は、ノズル本体１４ａに取り付けられた管状インサートにより構成されている。吐出導管２６の他方の端部は、ノズル本体１４ａから突出している。

【0113】

フローサイトメトリー装置２は、吐出導管２６に流体的に接続された第１の吐出弁（図示せず）を更に備える。この第１の吐出弁は、内側チャンバ１５から吐出導管２６を介してフローサイトメトリーシステム４の外部へと向かう流体の流れを止める閉鎖位置と、内側チャンバ１５から吐出導管２６を介してフローサイトメトリーシステム４の外部へと流体を流す開放位置との間で可動に構成されている。

【0114】

排出装置１３は、支持部６を支持しかつ内側チャンバ２９を画定する排出部材２８を有する。内側チャンバ２９は、測定チャンバ１１内に開口する。排出部材２８の一部は、支持部６の挿通開口８ｂを通って延びている。例えば、排出部材２８は、電気絶縁材料、具体的には、プラスチック材料で構成されていてもよい。

【0115】

排出装置１３は、測定チャンバ１１に流体的に接続された管状の排出導管３１を更に有する。この排出導管３１は、測定チャンバ１１内に噴射された生物学的粒子流Ｆをフローサイトメトリーシステム４の外部に排出するように構成されている。排出導管３１は、部分的に内側チャンバ２９内で延び、その下端３２が、噴射口１６と対向するように、測定チャンバ１１内に開口している。

【0116】

排出装置１３は、測定チャンバ１１に流体的に接続されかつ測定チャンバ１１にシース流体を供給するように構成された供給導管３３を更に有する。測定チャンバ１１と供給導管３３とは、測定チャンバ１１を流れる生物学的粒子流Ｆが、供給導管３３を介して測定チャンバ１１に導入されたシース流体によって流体力学的に被覆（シース）され得るように構成されている。

【0117】

図１～図１５に示す実施形態では、排出装置１３は、排出部材２８の上面にしっかりと取り付けられた供給部材３４を有する。供給導管３３は、供給部材３４に取り付けられた管状インサートにより構成された第１の導管部３３ａと、該第１の導管部３３ａに流体的に接続された第２の管状導管部３３ｂとを有する。例えば、供給部材３４は、電気絶縁材料、具体的にはプラスチック材料で構成されていてもよい。例えば、第２の導管部３３ｂは、供給部材３４に形成されていてもよく、或いは、供給部材３４に取り付けられた管状インサートにより形成されていてもよい。例えば、第１の導管部３３ａを形成する管状インサートは、オーバーモールドされていてもよい。

【0118】

図１～図１５に示す実施形態では、第１の導管部３３ａは、供給部材３４から突出しかつシース流体の第２供給源（図示せず）と接続される端部を有する。第２の導管部３３ｂの一部は、内側チャンバ２９内で、排出導管３１を囲むように延びている。排出導管３１と第２の導管部３３ｂとは、互いに同軸状に延びている。第２の導管部３３ｂの下端３５は、内側チャンバ２９内に開口している。第２の導管部３３ｂの下端３５は、排出導管３１の下端３２よりも、噴射口１６から離れている。

【0119】

本発明の或る実施形態では、フローサイトメトリーシステム４は、供給導管３３を介して測定チャンバ１１内に噴射されたシース流体の圧力が、供給導管１９を介して内側チャンバ１５内に噴射されたシース流体の圧力よりも低くなるように構成されている。

【0120】

図１～図１５に示す実施形態では、排出導管３１は、供給部材３４に形成された挿通孔を通って延びかつ供給部材３４から突出する端部を有する。

【0121】

本発明の或る実施形態では、ノズル本体１４ａ、供給部材２１、排出部材２８及び供給部材３４のそれぞれが、成型により製造される。

【0122】

図５及び図７に示すように、排出装置１３は、測定チャンバ１１に流体的に接続された吐出導管４０を更に有する。この吐出導管４０は、測定チャンバ１１の内容物をフローサイトメトリーシステム４の外部に吐出するように構成されている。具体的には、吐出導管４０は、供給導管３３を介して測定チャンバ１１に導入された洗浄流体を、フローサイトメトリーシステム４の外部に吐出するように構成されている。

【0123】

図１～図１５に示す実施形態では、吐出導管４０は、内側チャンバ２９内に開口するとともに、排出部材２８に取り付けられた管状インサートにより構成されている。吐出導管４０は、内側チャンバ２９を介して、測定チャンバ１１に流体的に接続されている。

【0124】

フローサイトメトリー装置２は、吐出導管４０に流体的に接続された第２の吐出弁（図示せず）を更に備える。この第２の吐出弁は、測定チャンバ１１から吐出導管４０を介してフローサイトメトリーシステム４の外部へと向かう流体の流れを止める閉鎖位置と、測定チャンバ１１から吐出導管４０を介してフローサイトメトリーシステム４の外部へと流体を流す開放位置との間で可動に構成されている。

【0125】

フローサイトメトリーシステム４は、分析対象の生物学的粒子の少なくとも１つの光学的特性を測定する測定装置を備える。

【0126】

図１～図１５に示す実施形態では、測定装置は、測定チャンバ１１の方向に向けられる光ビームを放射する発光装置４２を有する。上記光ビームは、測定チャンバ１１に導入された生物学的粒子流を横断可能な、すなわち、生物学的粒子流と交差可能な光ビームである。測定装置は、生物学的粒子流の周囲で、互いに周方向にずれて配置された複数の集光装置４３ａ，４３ｂ，４３ｃを更に有する。これら複数の集光装置４３ａ，４３ｂ，４３ｃは、測定チャンバ１１から出射された光線を集光する。尚、測定装置は、例えば、生物学的粒子流の周囲で互いに周方向にずれて配置された複数の発光装置と、１つのみ又は複数の集光装置とを有するものであってもよい。

【0127】

発光装置４２及び集光装置４３ａ～４３ｃは、支持部６の側面に取り付けられていて、生物学的粒子流Ｆの流動方向に対して実質的に垂直な面内で延びている。例えば、集光装置４３ａは、測定セル９を挟んで、発光装置４２と対向するように配置されている。集光装置４３ｂ，４３ｃは、測定セル９を挟んで、発光装置４２に対して垂直に配置されている。発光装置４２及び収集装置４３ａ～４３ｃは、それぞれ部分的に、支持部６の挿通開口８ｃ～８ｆを通って延びている。

【0128】

発光装置４２は、上記光ビームを発生させるための光源４４を有する。例えば、光源４４は、レーザー光線を発生させるためのレーザー源により構成されていてもよい。

【0129】

発光装置４２は、光源４４が放射した光ビームを、測定チャンバ１１内で生物学的粒子流Ｆに集束させる集束装置４５を有する。

【0130】

図１～図１５に示した実施形態では、集束装置４５は、支持部６に対して固定されるように構成された第１の取付部４６と、光源４４が取り付けられた第２の取付部４７とを有する。第２の取付部４７は、上記光ビームの光路に対して平行な変位方向Ｄ１に沿って、第１の取付部４６に対して平行移動可能に取り付けられている。

【0131】

図８に示すように、第１の取付部４６は、ガイド導管を画定する管状のガイド部４８を有する。ガイド部４８には、上記光ビームの光路に配置された光学集束エレメント４９が設けられている。例えば、この光学集束エレメント４９は、集束レンズ５１を有する。

【0132】

第１の取付部４６は、ガイド部４８から径方向に延びる環状の支承部５２を更に有する。この支承部５２は、第１の取付部４６を支持部６に固定するための固定ネジ５４が挿通される複数の挿通孔５３を有する。例えば、複数の挿通孔５３は、第１の取付部４６の延設方向に延びる軸の周囲で互いに周方向にずれて配置される。図１～図１５に示す実施形態では、第１の取付部４６は、互いに周方向に等角度でずれて配置された３つの挿通孔５３（３本の固定ネジ５４）を有する。

【0133】

第２の取付部４７は、第１の取付部４６が画定する上記ガイド導管内に摺動可能に取り付けられた管状の被ガイド部５５を有する。この被ガイド部５５はハウジングを画定し、このハウジング内に光源４４が取り付けられている。例えば、被ガイド部５５は、光学集束エレメント４９に対向するように配置された開口を有し、光源４４の発光部が、この開口を通って延びる。

【0134】

第２の取付部４７は、被ガイド部５５から径方向に延びる環状部５６を更に有する。

【0135】

集束装置４５は、第１の取付部と第２の取付部との相対位置を変位方向Ｄ１に沿って調整する微動調整エレメント５７を更に有する。図１～図１５に示す実施形態では、この微動調整エレメント５７は、集束装置４５の第１の取付部４６に形成された第１のネジ穴５８と協働するよう設けられた第１のネジ部５７ａと、集束装置４５の第２の取付部４７に形成された第２のネジ穴５９と協働するよう設けられた第２のネジ部５７ｂとを有する。第１及び第２のネジ部５７ａ，５７ｂには、ピッチが互いに異なるネジ山が設けられている。

【0136】

フローサイトメトリーシステム４は、角度調整装置とも呼ばれる向き調整装置６１を更に備える。この配き調整装置６１は、発光装置が放射する光ビームの向き又は角度を調整して、光ビームの光路が生物学的粒子流Ｆの流動方向に対して実質的に垂直に延びるようにするために設けられている。

【0137】

向き調整装置６１は、集束装置４５における第１の取付部４６の支承部５２と支持部６との間に配置された環状の調整用クッション６２を有する。この調整用クッション６２は、少なくとも部分的に弾性変形可能である。

【0138】

図１～図１５に示す実施形態では、調整用クッション６２は、第１の取付部４６のガイド部４８が通って延びる中央経路を画定する。また、調整用クッション６２は、上記複数の固定ネジ５４がそれぞれ挿通される複数の挿通孔６３を有する。

【0139】

このような調整用クッション６２の配置及び構成により、オペレータは、調整用クッション６２を弾性変形させる複数の固定ネジ５４を締める及び／又は緩めるだけで、光源４４が放射する光ビームの向きを容易に調整することができる。

【0140】

図１３及び図１５に具体的に示すように、フローサイトメトリーシステム４は、発光装置４２の位置調整を行う目的で、ベース部材５を介して調整台３に固定されていてもよい。この調整台３は、支持部６に対する発光装置４２の位置を平行移動によって調整する第１の平行移動調整装置６４を有する。この位置調整は、生物学的粒子流Ｆの流動方向に対して垂直な第１の平行移動調整方向Ｄ２と、生物学的粒子流Ｆの流動方向に対して平行な第２の平行移動調整方向Ｄ３とに沿って行われる。

【0141】

第１の平行移動調整装置６４は、調整台３のトレーに固定された第１の固定部材６５を有する。第１の平行移動調整装置６４は、互いに垂直な第１の支持分岐部６６ａ及び第２の支持分岐部６６ｂを含む支持ブラケット６６を更に有する。第１の支持分岐部６６ａは、第１の平行移動調整方向Ｄ２に沿って平行移動可能に、第１の固定部材６５に取り付けられている。

【0142】

第１の平行移動調整装置６４は、発光装置４２が取り付けられる第２の固定部材６７を更に有する。第２の固定部材６７は、固定部６８を有し、この固定部６８が、第２の平行移動調整方向Ｄ３に沿って平行移動可能に、支持ブラケット６６の第２の支持分岐部６６ｂに取り付けられている。

【0143】

第１の平行移動調整装置６４は、第１の固定部材６５に対する支持ブラケット６６の位置を調整するために設けられた微動ネジ７１と、支持ブラケット６６に対する固定部６８の位置を調整するために設けられた微動ネジ７２とを更に有する。

【0144】

フローサイトメトリーシステム４は、支持部６に固定されかつ発光装置４２が取り付けられる第１の固定分岐部６９ａと、上記固定部６８に固定される第２の固定分岐部６９ｂとを有する固定ブラケット６９を更に備える。

【0145】

フローサイトメトリーシステム４は、固定ブラケット６９の第１の固定分岐部６９ａを支持部６に固定するために設けられた複数の固定ネジ７３を更に有し、第１の固定分岐部６９ａは、複数の固定ネジ７３がそれぞれ挿通される複数の挿通孔７４を有する。図１～図１５に示す実施形態では、各挿通孔７４の寸法は、対応する固定ネジ７３の本体の寸法よりも大きい。

【0146】

支持部６に対する発光装置４２の位置を正確に調整するためには、すなわち、測定チャンバ１１内で光ビームが生物学的粒子流Ｆを確実にかつ最適に横断するようにするためには、オペレータは、まず、フローサイトメトリーシステム４を調整台３上に配設し、第２の固定分岐部６９ｂを固定部６８に固定してから、固定ネジ７４を緩める。次いで、微動ネジ７１を操作して光ビームの位置を水平方向に調整するとともに、微動ネジ７２を操作して光ビームの位置を垂直方向に調整し、最後に、固定ネジ７４を締めることにより、固定ブラケット６９を支持部６に対して固定する。このように、第１の平行移動調整装置６４によって、発光装置４２の位置の平行移動調整を容易に行うことができる。

【0147】

図１～図１５に示す実施形態では、調整用クッション６２は、固定ブラケット６９の第１の固定分岐部６９ａと集束装置４５の第１の取付部４６との間に介在している。

【0148】

図５及び図８に示すように、集光装置４３ａ，４３ｂ，４３ｃは、それぞれ、支持部６に対して固定された第１の取付部７５と、上記変位方向に沿って第１の取付部７５に対して平行移動可能に取り付けられた第２の取付部７６とを有する。

【0149】

図１～図１５に示す実施形態では、各集光装置の第１の取付部７５は、ガイド導管を画定する管状のガイド部７７を有する。このガイド部７７には、測定セル９の近傍に配置された光学集光エレメント７８が設けられている。例えば、この光学集光エレメント７８は、光学レンズ７９を有する。

【0150】

各集光装置の第１の取付部７５は、対応するガイド部から径方向に延びる環状の支承部８１を更に有する。各支承部８１は、対応する第１の取付部７５を支持部６に対して固定するために設けられた固定ネジ８３を挿通させるための複数の挿通孔８２を有する。例えば、各支承部８１に設けられた複数の挿通孔８２は、対応する第１の取付部７５が延びる方向に延びる軸の周囲で、互いに周方向にずれて配置されている。図１～図１５に示す実施形態では、各第１の取付部７５は、互いに周方向に等角度でずれて配置された３つの挿通孔８３（３本の固定ネジ８３）を有する。

【0151】

第２の取付部７６は、第１の取付部７５が画定するガイド導管内に摺動可能に取り付けられた管状の被ガイド部８４と、この被ガイド部８４から径方向に延びる環状部８５とを有する。被ガイド部８４には、その測定セル９側に端壁８４ａが設けられている。この端壁８４ａには、集光用光ファイバ８６が取り付られた取付用開口８４ｂが少なくとも１つ形成されている。

【0152】

集光装置４３ａ～４３ｃのそれぞれは、対応する集光装置の第１の取付部７５と第２の取付部７６との相対位置を、対応する上記変位方向に沿って調整する微動調整要素８７を更に備える。図１～図１５に示す実施形態では、各微動調整要素８７は、対応する第１の取付部７５に形成された第１のネジ穴８８と協働するよう設けられた第１のネジ部８７ａと、対応する第２の取付部７６に形成された第２のネジ穴８９と協働するよう設けられた第２のネジ部８７ｂとを有する。第１及び第２のネジ部８７ａ，８７ｂには、ピッチが互いに異なるネジ山が設けられている。

【0153】

図１～図１５に示す実施形態では、図２に具体的に示すように、集光装置４３ａは、複数の集光用光ファイバ、具体的には、集光用中央光ファイバ８６ａと、集光用周辺光ファイバ８６ｂ，８６ｃとを有する。例えば、集光用中央光ファイバ８６ａは、入射光ビームの光路に沿って測定チャンバ１１から出射された光線、すなわち、０°の角度の光線を集光するように構成され、少なくとも１つの集光用周辺光ファイバ８６ｂは、４°の範囲内の角度で測定チャンバ１１から出射された光線を集光するように構成され、少なくとも１つの集光用周辺光ファイバ８６ｃは、９°の範囲内の角度で測定チャンバ１１から出射された光線を集光するように構成されている。例えば、集光装置４３ａは、４°の範囲内の角度で測定チャンバ１１から出射された光線を集光するように構成された集光用周辺光ファイバ８６ｂを複数有していてもよく、９°の範囲内の角度で測定チャンバ１１から出射された光線を集光するように構成された集光用周辺光ファイバ８６ｃを複数有していてもよい。

【0154】

図１～図１５に示す実施形態では、集光装置４３ｂ，４３ｃのそれぞれは、集光用中央光ファイバを１つだけ有する。

【0155】

調整台３は、それぞれが集光装置４３ａ～４３ｃのうちの１つに対応するように構成された３つの平行移動調整装置６４’を更に有する。図１～図１５に示す実施形態では、これら平行移動調整装置６４’は、発光装置４２に対応するように構成された平行移動調整装置６４と同じものである。

【0156】

各平行移動調整装置６４’は、調整台３のトレーに固定された第１の固定部材６５’と、互いに垂直な第１の支持分岐部６６ａ’及び第２の支持分岐部６６ｂ’を含む支持ブラケット６６’とを有する。各支持ブラケット６６’の第１の支持分岐部６６ａ’は、生物学的粒子流Ｆの流動方向に対して垂直な第１の平行移動調整方向に沿って平行移動可能に、対応する第１の固定部材６５’に取り付けられている。

【0157】

各平行移動調整装置６４’は、対応する集光装置を取り付けるように構成された第２の固定部材６７’を更に有する。各平行移動調整装置６４’の第２の固定部材６７’は固定部６８’を有し、この固定部６８’が、生物学的粒子流Ｆの流動方向に対して平行な第２の平行移動調整方向に沿って平行移動可能に、対応する支持ブラケット６６’の第２の支持分岐部６６ｂ’に取り付けられている。

【0158】

各平行移動調整装置６４’は、対応する第１の固定部材６５’に対する当該平行移動調整装置６４’の支持ブラケット６６’の位置を調整するために設けられた微動ネジ７１’と、対応する支持ブラケット６６’に対する当該平行移動調整装置６４’の固定部６８’の位置を調整するために設けられた微動ネジ７２’とを更に有する。

【0159】

フローサイトメトリーシステム４は、各集光装置に対応する固定ブラケット６９’を更に備える。各固定ブラケット６９’は、支持部６に固定されかつ対応する集光装置が取り付けられた第１の固定分岐部６９ａ’と、対応する固定部６８’に固定された第２の固定分岐部６９ｂ’とを有する。

【0160】

フローサイトメトリーシステム４は、各固定ブラケット６９’の第１の固定分岐部６９ａ’を支持部６に固定するために設けられた複数の固定ネジ７３’を更に有し、各第１の固定分岐部６９ａ’は、複数の固定ネジ７３’がそれぞれ挿通される複数の挿通孔７４’を有する。図１～図１５に示す実施形態では、各挿通孔７４’の寸法は、対応する固定ネジ７３’の本体の寸法よりも大きい。

【0161】

支持部６に対する集光装置４３ａ～４３ｃの各々の位置を正確に調整するためには、すなわち、測定チャンバ１１から出射された光線を確実にかつ最適に集光するためには、オペレータは、まず、フローサイトメトリーシステム４を調整台３上に配設し、第２の固定分岐部６９ｂ’をそれぞれ、固定部６８’に固定してから、各平行移動調整装置６４’に対応する固定ネジ７４’を緩める。次いで、微動ネジ７１’を操作して複数の集光装置の位置を水平方向に調整するとともに、微動ネジ７２’を操作して複数の集光装置の位置を垂直方向に調整し、最後に、固定ネジ７４’を締めることにより、複数の固定ブラケット６９’を支持部６に対して固定する。このように、平行移動調整装置６４’によって、集光装置４３ａ～４３ｃの位置の平行移動調整を容易に行うことができる。

【0162】

上記測定装置は、それぞれが集光装置４３ａ～４３ｃに対応する複数の検出エレメント９０を更に有する。各検出エレメント９０は、対応する集光装置により集光された光線によって決定される測定信号を出力部から出力するように構成されている。生物学的粒子の一つ一つが入射光ビームを通過する際、各検出エレメント９０により出力部から出力される測定信号は、例えば、当該生物学的粒子に吸収された光の量、又は、当該生物学的粒子により再放射された光の量に比例する。例えば、各検出エレメント９０は、フォトダイオードや光電子増倍管のような光検出器により構成される。

【0163】

フローサイトメトリー装置２は、複数の検出エレメント９０の出力部から出力された測定信号をフィルタにかけて前置増幅する前置増幅ユニット９４を更に備える。具体的に、前置増幅ユニット９４は、信号入力電子基板９５を有し、この信号入力電子基板９５上に、検出エレメント９０が固定されている。

【0164】

フローサイトメトリー装置２は、特にフローサイトメトリーシステム４、検出エレメント９０及び前置増幅ユニット９４を収容する筐体９６を更に備える。

【0165】

フローサイトメトリーシステム４は、生物学的粒子が噴射口１６を通過することにより生じる、電気インピーダンスの変動を測定する電気インピーダンス変動測定装置を更に備える。例えば、この電気インピーダンス変動測定装置は、噴射口１６の両側にそれぞれ配置された第１及び第２の電極９１，９２を有する。これら第１及び第２の電極９１，９２は、生物学的粒子流Ｆと電気的に接触して、噴射口１６を通る電界を発生させるように構成されている。このような電気インピーダンス変動測定装置により、噴射口１６を通過する生物学的粒子数をカウントすることができるとともに、生物学的粒子の大きさ、具体的には、生物学的粒子の体積を測定することができる。このような電気インピーダンス変動測定装置の作用は、当業者に公知であるので、詳細には説明しない。しかし、生物学的粒子の一つ一つが噴射口１６を通過することにより、当該生物学的粒子の大きさ又は体積に比例しかつ生物学的粒子数の電気的カウントを可能にする電気パルスが発生することは、指摘しておく。

【0166】

図１６及び図１７は、例えば全血検査のような血液検査を実施するためのインビトロ診断用分析装置９７を示す。具体的に、このような分析装置９７は、フローサイトメトリー装置２と、各検出エレメント９０からの測定信号を分析する処理ユニット９８とを備える。

【0167】

例えば、処理ユニット９８は、検出エレメント９０から供給された測定信号から、生物学的粒子を識別及び／又は特定するために、具体的には、生物学的粒子の構造及び／又は形状を判定するために設けられている。処理ユニット９８は、生物学的粒子の濃度及び／又は分布を判定する目的でも設けられ得る。このような処理ユニット９８は、当業者に公知であるので、詳細には説明しない。

【0168】

図１８及び図１９は、本発明の第２実施形態に係るフローサイトメトリーシステム４を示す。このフローサイトメトリーシステム４と、図１～図１５に示したフローサイトメトリーシステム４との主な相違点は、供給部材２１が、互いに異なる第１及び第２の供給部材２１ａ，２１ｂにより構成されている点、供給部材３４が、互いに異なる第１及び第２の供給部材３４ａ，３４ｂにより構成されている点、第１の導管部１９ａが、第１の供給部材２１ａに形成されている点、吐出導管２６が、ノズル本体１４ａに形成されている点、第１の導管部３３ａが、第１の供給部材３４ａに形成されている点、及び、吐出導管４０が、排出部材２８に形成されている点である。

【0169】

この第２実施形態では、噴射装置１２は、第１の導管部１９ａに流体的に接続されかつ第１の供給部材２１ａに取り付けられた第１の端部装着部材２３と、液体サンプルの供給源に接続されるように構成されかつ第２の供給部材２１ｂに取り付けられた第２の端部装着部材２５と、吐出導管２６に流体的に接続されかつノズル本体１４ａに取り付けられた第３の端部装着部材２７とを有する。この第２実施形態では、排出装置１３は、シース流体の第２の供給源に接続されるように構成されかつ第１の供給部材３４ａに取り付けられた第１の端部装着部材３６と、排出導管３１に流体的に接続されかつ第２の供給部材３４ｂに取り付けられた第２の端部装着部材３８と、吐出導管４０に流体的に接続されかつ排出部材２８に取り付けられた第３の端部装着部材４１を備える。

【0170】

本発明の図示しない別の実施形態では、上記電気インピーダンス変動測定装置の上記第１及び第２の電極が、供給導管１７及び排出導管３１により構成されていてもよく、或いは、第２の導管部１９ｂ及び第２の導管部３３ｂにより構成されていてもよい。

【0171】

本発明の図示しない別の実施形態では、測定装置は、生物学的粒子流の周囲で互いに周方向にずれて配置された２つの発光装置４２と、これら発光装置４２にそれぞれ対応して設けられた２組の集光装置とを有していてもよい。これら２組のそれぞれは、例えば、互いに周方向にずれて配置された３つの集光装置４３ａ～４３ｃを含む。このような実施形態では、支持部６の形状は、例えば、八角形であってもよい。このような実施形態では、２つ発光装置４２が、互いに異なる光源を有していてもよい。例えば、２つの発光装置４２のうちの一方が、青色レーザービームを放射し、他方が赤色レーザービームを放射するように構成されていてもよい。

【0172】

本発明は、上記フローサイトメトリーシステムの上記例示した単独の実施形態に限定されるものではなく、これら実施形態のすべての変形例を包含することは言うまでもない。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】

【図14】

【図15】

【図16】

【図17】

【図18】

【図19】