6993224 食品の殺菌方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2021-12-13

(45)【発行日】2022-02-04

(54)【発明の名称】食品の殺菌方法

(51)【国際特許分類】

   A23L 3/349 20060101AFI20220128BHJP

   A23L 3/015 20060101ALI20220128BHJP

   A23L 3/3508 20060101ALI20220128BHJP

   A23L 3/375 20060101ALI20220128BHJP

   A23L 2/42 20060101ALI20220128BHJP

   C12G 3/04 20190101ALN20220128BHJP

   A23L 2/02 20060101ALN20220128BHJP

【ＦＩ】

A23L3/349 501

A23L3/015

A23L3/3508

A23L3/375

A23L2/00 N

C12G3/04

A23L2/02 A

【請求項の数】 5

(21)【出願番号】P 2017251688

(22)【出願日】2017-12-27

(65)【公開番号】P2019115308

(43)【公開日】2019-07-18

【審査請求日】2020-03-25

【前置審査】

(73)【特許権者】

【識別番号】309007911

【氏名又は名称】サントリーホールディングス株式会社

(74)【代理人】

【識別番号】110001818

【氏名又は名称】特許業務法人Ｒ＆Ｃ

(72)【発明者】

【氏名】芳原 和希

(72)【発明者】

【氏名】奥村 覚二

(72)【発明者】

【氏名】圖師 あかね

【審査官】戸来 幸男

(56)【参考文献】

【文献】凍結及び乾燥研究会会誌，1980年，vol.26，pp.169-175

【文献】食品機械装置，2001年，vol.38，no.10, pp.45-53

【文献】日本食品工業学会誌，1994年，vol.41, no.10，pp.687-701

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

Ａ２３Ｌ ２／００－３／５４

Ｃ１２Ｇ ３／００－３／０８

ＦＳＴＡ／ＣＡｐｌｕｓ／ＡＧＲＩＣＯＬＡ／ＢＩＯＳＩＳ／

ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ（ＳＴＮ）

ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）

Ｇｏｏｇｌｅ

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

食品とエタノールと有機酸とを含む混合物を－１０℃以下で凍結する凍結工程と、
凍結した前記混合物を１００～４００ＭＰａで保持する加圧工程と、を含み、
前記混合物中のエタノール含有率は０．０８～８重量％であり、
酵母を殺菌することを特徴とする食品の殺菌方法。

【請求項2】

前記加圧工程は１０分以内である請求項１に記載の食品の殺菌方法。

【請求項3】

前記混合物のｐＨは７．０未満である請求項１または２に記載の食品の殺菌方法。

【請求項4】

前記食品は果汁である請求項１～３のいずれか１項に記載の食品の殺菌方法。

【請求項5】

前記有機酸はクエン酸である請求項１～４のいずれか１項に記載の食品の殺菌方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、食品の殺菌方法に関する。

【背景技術】

【0002】

飲食品などは、一般に、有害な微生物の汚染により食中毒などの問題を引き起こすおそれがある。また、飲食品などの製品を保管および輸送するあいだに、微生物の働きによって生産者が意図しない発酵が起こることにより、製品の風味や香りに意図しない変化が起こるおそれがある。さらに、製品の包装形態が密封状態の場合は、発酵時に生じる二酸化炭素により容器の内圧が上昇し、容器の破損を招くおそれがある。したがって、飲食品などの製品の製造においては、飲食品などの中に存在する微生物を死滅させる方法、すなわち殺菌方法が必要とされる。

【0003】

飲食品などの中に存在する微生物を殺菌する方法としては、加熱による方法や、殺菌作用のある食品添加物による方法が、従来用いられてきた。しかし、これらの方法は飲食品などが本来持つ風味や香りを損なうか、あるいは、変化させるおそれがある。そのため、加熱や多量の添加物を伴わない殺菌方法が検討されてきた。

【0004】

このような殺菌方法として、たとえば、特開平２－１８６９６７号公報（特許文献１）には、０℃以下の食品に圧力１００～１００００ｋｇｆ／ｃｍ^２（すなわち９．８１～９８１ＭＰａ）を加えることを特徴とする食品の殺菌方法が開示されている。当該方法によれば、加熱による冷凍食品の解凍を伴うことなく、該冷凍食品を殺菌することができる。

【0005】

また、特開昭５８－１７０４７１号公報（特許文献２）には、急速冷凍による醸造酒の滅菌方法が開示されている。当該方法によれば、火入工程を伴わずに火落菌などの微生物を殺菌することができるため、醸造酒の持つ本来の香味が変化することを抑制できる。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0006】

【文献】特開平２－１８６９６７号公報

【文献】特開昭５８－１７０４７１号公報

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0007】

しかし、加圧を伴う殺菌に係る従来技術は、印加する圧力が比較的低い場合は、殺菌力の観点で改善の余地がある。特許文献１に開示された実施例によると、２５００～６５００ｋｇｆ／ｃｍ^２（２４５～６３７ＭＰａ）における殺菌効果は、生菌数が１～２桁減少する程度に留まっており、その殺菌力は不十分である。

【0008】

また、従来技術のうち、加圧や極低温のための特殊な設備を要する方法を採用すると、製造コストが増大するおそれがある。たとえば、特許文献２に記載の方法は、急速に冷凍するため、その冷却手段としてドライアイス‐アセトン（－７０℃）および液体窒素（－１４０℃）が例示されている。すなわち、当該方法を実施するに際しては－７０℃以下の極低温を実現する特殊な凍結設備が必要となるため、当該設備を設置、運転、および、保守、するために必要な費用が高くなる場合がある。

【0009】

上記課題に鑑み、加熱を伴わない殺菌方法であって、十分に高い殺菌能力を有し、低コストで実施できる殺菌方法の実現が望まれる。

【課題を解決するための手段】

【0010】

本発明の食品の殺菌方法は、食品とエタノールとを含む混合物を－１０℃以下で凍結する凍結工程と、凍結した前記混合物を１００～４００ＭＰａで保持する加圧工程と、を含み、前記混合物中のエタノール含有率は０．０８～８重量％であり、酵母を殺菌することを特徴とする。

【0011】

この殺菌方法によれば、加熱を伴わずに、十分に高い殺菌能力を実現することができる。凍結工程の温度が上記の範囲であると、一般的な冷凍保管または冷凍輸送に用いられる設備を用いて凍結を行うことができる。すなわち、極低温設備を必要としない。さらに、設備が共通することから、殺菌対象である食品を保管または輸送するあいだに同時に凍結を行うことができる。したがって、凍結工程のための新たな設備も、別途の期間も必要とせず、設備と期間との両面において効率的である。また、加圧工程の圧力が上記の範囲であると、圧力設備に求められる耐圧性能を比較的低いものにすることができ、設備費用を低減することができる。また、エタノールおよび圧力による殺菌効果と、有機酸による殺菌効果と、を相加的に用いることができるため、本発明の殺菌効果をさらに高めることができる。

【0012】

以下、本発明の好適な態様について説明する。ただし、以下に記載する好適な態様の例によって、本発明の範囲が限定される訳ではない。

【0013】

１つの態様として、前記加圧工程は１０分以内であると好適である。

【0014】

この構成によれば、前記加圧工程を比較的短期間にすることができるため、高圧を維持するために消費する電力を低減し、コストを低減することができる。また、殺菌工程に要する期間を比較的短期間にすることができるため、製造工程を短縮することができる。さらに、高圧下に保持することによる食品の変色および変性を防ぐことができる。

【0015】

１つの態様として、前記混合物のｐＨは７．０未満であると好適である。

【0016】

この構成によれば、本発明の殺菌効果をさらに高めることができる。

【0017】

１つの態様として、前記食品は果汁であると好適である。

【0018】

この構成によれば、本発明の殺菌方法を、果汁を原料とする製品の製造工程における原料の殺菌方法として用いることができる。

【0021】

１つの態様として、前記有機酸はクエン酸であると好適である。

【0022】

この構成によれば、本発明の殺菌効果をさらに高めることができる。また、本発明の殺菌方法により殺菌される食品を原料とする製品がクエン酸を含む場合は、殺菌のために添加されたクエン酸を製品の一部として利用できるため、当該クエン酸を取り除く工程を設ける必要が無い。

【0023】

本発明によれば、加熱を伴わない殺菌方法であって、十分に高い殺菌能力を有し、低コストかつ短期間で実施できる殺菌方法が実現できる。この殺菌方法によれば、飲食品などが本来持つ風味や香りを損なうおそれがなく、安全性と高品質とを両立した食品の製造に寄与する。

【0024】

本発明のさらなる特徴と利点は、以下の例示的かつ非限定的な実施形態の説明によってより明確になるであろう。

【図面の簡単な説明】

【0025】

【図1】本発明に係る殺菌方法の一実施形態をあらわすフロー図。

【発明を実施するための形態】

【0026】

本発明に係る食品の殺菌方法の実施形態について、図面を参照して詳細に説明する。

【0027】

以下の実施形態では、本発明に係る食品の殺菌方法を、アルコール飲料の原料として用いられる食品の一例である果汁１の殺菌に適用した例について説明する。本実施形態の食品の殺菌方法は、図１に示すように、果汁１にエタノール２を加えて混合する混合工程１１と、混合工程１１で得られた混合物３を凍結させる凍結工程１２と、凍結させた混合物３を加圧下で保持する加圧工程１３と、を含む。これらの工程を経て殺菌された果汁１は、以降のアルコール飲料の製造工程（図示せず）へと送られる。

【0028】

まず、果汁１およびエタノール２を含む混合物３を得るための混合工程１１を行う。なお、果汁１は、クエン酸および水を含有する。混合工程１１としては、公知の混合方法を用いることができる。たとえば、撹拌翼を備える混合槽中に上記の各原料を投入し、撹拌翼を回転してこれらの原料を混合する方法であってよい。なお、混合工程１１により得られる混合物３に含まれるエタノール２およびクエン酸の含有率は、混合工程１１において投入する各原料の量を適宜選択することによって制御されうる。

【0029】

混合物３中のエタノール２の含有率は、０．０８～８重量％であることが好ましい。エタノール２の含有率が上記の範囲であると、良好な殺菌効果が得られる。エタノール２の含有率は、０．８～８重量％であることがより好ましく、４～８重量％であることがさらに好ましい。なお、混合物３は、エタノール２と、果汁１が含有する水と、を含むことから、エタノール水溶液としての性質を有する。

【0030】

混合物３中のクエン酸の含有率は、０．０１～１０重量％であることが好ましい。クエン酸の含有率が上記の範囲であると、殺菌効果をさらに高めることができる。クエン酸の含有率は、０．１～１０重量％であることがより好ましく、１～１０重量％であることがさらに好ましい。このとき、混合物３中のクエン酸の含有率が好適な範囲となるように、混合工程１１において果汁１にクエン酸を混合してもよい。なお、クエン酸は、殺菌効果をもたらす添加剤であるとともに、製造されるアルコール飲料の原料でもあるため、クエン酸を取り除く工程を設ける必要が無い。

【0031】

混合物３のｐＨは、７．０未満であることが好ましく、３．５未満であることがより好ましく、２．５未満であることがさらに好ましい。ｐＨが上記の範囲内であると、殺菌効果をさらに高めることができる。

【0032】

次に、混合工程１１により得られた混合物３を凍結させる凍結工程１２を行う。凍結工程１２に係る冷却設備は、公知のものを用いることができる。たとえば、冷凍保管設備であってよく、冷凍輸送設備であってよい。

【0033】

凍結工程１２における凍結温度は、－１０℃以下であることが好ましい。凍結温度が上記の範囲内であると、良好な殺菌効果が得られる。凍結温度は、－１５℃以下であることがより好ましい。凍結温度の下限は特に限定されないが、－５０℃以上であることが好ましく、－３０℃以上であることがより好ましく、－２５℃以上であることがさらに好ましい。凍結温度が上記の範囲であると、一般的な冷凍保管または冷凍輸送が行われる温度において凍結が可能である。

【0034】

凍結工程１２の持続時間は、混合物３の全体が凍結するのに十分な時間であれば、特に限定されない。たとえば、凍結工程１２の持続時間は１００時間以内であってよく、７０時間以内であることがより好ましく、４８時間以内であることがさらに好ましい。この範囲内であると殺菌工程に要する期間を短期間にすることができる。また、凍結工程１２の持続時間は２４時間以上であってよく、この範囲内であると混合物３の全体が十分に凍結するだろう。

【0035】

続いて、凍結させた混合物３を加圧下で保持する加圧工程１３を行う。加圧工程１３に係る加圧設備は、公知のものを用いることができ、たとえば食品用高圧処理装置であってよい。

【0036】

加圧工程１３における圧力は、１００～４００ＭＰａであることが好ましい。圧力が上記の範囲であると、十分な殺菌効果が得られるとともに、圧力設備に求められる耐圧性能を比較的低いものにすることができるため、設備費用を低減することができる。圧力は、１００～３００ＭＰａであることがより好ましく、１００～２００ＭＰａであることがさらに好ましい。

【0037】

加圧工程１３の持続時間は、１０分以内であることが好ましい。加圧工程１３の持続時間が上記の範囲内であると、前記加圧工程を短期間にすることができるため、高圧を維持するために消費する電力を低減し、コストを低減することができる。また、殺菌工程に要する期間を短期間にすることができるため、製造工程を短縮することができる。さらに、高圧下に保持することによる食品の変色および変性を防ぐことができる。加圧工程１３の持続時間は、５分以内であることがより好ましく、２分以内であることがさらに好ましい。

【0038】

ここで、第一の実施形態の食品の殺菌方法において、効果的に殺菌が行われる原理について説明する。なお、以降の説明においては、混合物３中におけるエタノール２の含有率を８重量％とした場合を例として説明する。

【0039】

エタノール水溶液は、その混合比率により異なる凝固点を有する。本実施形態における混合物３は、エタノール２を８重量％含み、その凝固点はおよそ－１０℃である。このとき混合物３を凍結温度－２０℃の環境下で凍結する（凍結工程１２）と、混合物３の温度が低下するのにしたがって、水のみが析出した固相と、混合物である液相とに分離する。固相に水のみが析出し、エタノール２は析出せず液相に残るため、液相のエタノール含有率は上昇する。最終的に、液相のエタノール含有率が、凝固点が－２０℃である（すなわち凍結温度と一致する）エタノール含有率である１６重量％に到達する。

【0040】

このように、エタノールを含む混合物を、そのエタノール含有率により決定される凝固点より低い凍結温度で凍結すると、液相のエタノール含有率が上昇する。すなわち、凍結によりエタノールが濃縮される。

【0041】

このとき、水が析出する過程において、混合物３中に含まれる微生物は液相に抽出される。したがって、液相には、濃縮されたエタノール２と微生物とが存在することになり、エタノール２の殺菌効果により微生物が殺菌される。ところで、エタノール含有率が高いほど、エタノール２による殺菌効果が高くなる。したがって、－２０℃に凍結された液相（エタノール含有率１６重量％）における殺菌効果は、凍結工程１２の前の混合物３（エタノール含有率８重量％）における殺菌効果より高い。言い換えれば、混合物３に本来含まれるエタノール２の量から期待されるよりも高い殺菌効果が、凍結することにより得られる、といえる。

【0042】

なお、本実施形態の食品の殺菌方法において殺菌の対象とする微生物類は、特に限定されないが、酵母、大腸菌、ブドウ球菌、および乳酸菌等、公知の微生物類であってよい。

【0043】

〔その他の実施形態〕
次に、本発明に係る食品の殺菌方法のその他の実施形態について説明する。なお、以下のそれぞれの実施形態で開示される構成は、矛盾が生じない限り、他の実施形態で開示される構成と組み合わせて適用することも可能である。

【0044】

上記の実施形態では、殺菌対象とする食品が果汁１である場合を例として説明した。しかし、殺菌対象とする食品は果汁に限定されず、たとえば果実、野菜、肉、魚介であってもよい。このとき、果実の態様は特に限定されず、果実の全体、果実の皮、果実の実、果実を切断したもの、果実を粉砕したもの、または、これらの中から選ばれる２つ以上の混合物、であってよい。果実を粉砕する場合の粉砕方法は公知の方法を用いることができるが、凍結粉砕することが好ましい。

【0045】

上記の実施形態では殺菌対象とする食品が果汁１であり、すなわち、食品がクエン酸を含有する場合を例として説明した。しかし、殺菌対象とする食品は有機酸を含有しないものであってもよい。食品が有機酸を含有するか否かに関わらず、混合物における有機酸の含有率が好ましい範囲となるように、混合工程において食品に有機酸を混合してよい。

【0046】

上記の実施形態では、混合物３が果汁１およびエタノール２を含み、果汁１がクエン酸を含有する場合を例として説明した。しかし、有機酸はクエン酸に限定されず、クエン酸、リンゴ酸、フマル酸、酒石酸、安息香酸、乳酸、アスコルビン酸からなる群から選ばれる有機酸であってもよく、複数の有機酸の混合物であってもよい。混合物は、さらに、他の任意の成分、たとえば、糖、防腐剤、酸化防止剤、ｐＨ調整剤を含んでいてもよく、含んでいなくてもよい。また、上記の各成分に水を加えて混合物中の成分の濃度を調整してもよい。

【0047】

上記の実施形態では、公知の混合方法である混合工程１１によって混合物３を得る場合を例として説明した。しかし、混合物は必ずしも混合工程によって得られる必要はない。たとえば、糖を含む混合物を醸造すると、糖の一部がエタノールに変換された醸造生成物が得られるので、これを混合物として用いてもよい。

【0048】

その他の構成に関しても、本明細書において開示された実施形態は全ての点で例示であって、本発明の範囲はそれらによって限定されることはないと理解されるべきである。当業者であれば、本発明の趣旨を逸脱しない範囲で、適宜改変が可能であることを容易に理解できるであろう。したがって、本発明の趣旨を逸脱しない範囲で改変された別の実施形態も、当然、本発明の範囲に含まれる。

【実施例】

【0049】

以下に実施例を挙げて本発明を説明するが、本発明は以下の実施例のみに限定されるものではない。

【0050】

〔供試菌〕
以下の実施例に示す試験において、供試菌として、過去に工場から検出され、Ｌ乾燥の状態でストックした酵母を用いた。

【0051】

〔試薬〕
以下の実施例に示す試験において、次の試薬を用いた。
エタノール ：ナカライテスク社製、グレードＥＰ、純度９９．５
クエン酸 ：ナカライテスク社製、グレードＥＰ、純度≧９９．０
緩衝液（ｐＨ３．５）：ナカライテスク社製、クエン酸とリン酸二水素ナトリウムにて調製、濃度０．１３Ｍ
緩衝液（ｐＨ７．０）：ナカライテスク社製、クエン酸とリン酸二水素ナトリウムにて調製、濃度０．１８Ｍ

【0052】

〔果汁〕
市販のグレープフルーツを直接圧搾（スーパーハンドジューサー ＴＷ－００１）により搾汁し、ｐＨ３．３のグレープフルーツ果汁を得た。

【0053】

〔植菌工程〕
試料液（単体または混合物）を９．９ｍＬ採取し、１０^９個／ｍＬに調整した供試菌０．１ｍＬを加えて均一に混合し、植菌液を得た。

【0054】

〔凍結工程〕
植菌液１０ｍＬを、庫内の温度が－２０±４℃に保たれた冷凍保管設備（ホシザキ社製、業務用冷凍冷蔵庫）の庫内に７２時間保持し、凍結試料を得た。

【0055】

〔冷蔵工程〕
植菌液１０ｍＬを、庫内の温度が４±１℃に保たれた冷蔵保管設備（ホシザキ社製、業務用冷凍冷蔵庫）の庫内に７２時間保持し、冷蔵試料を得た。

【0056】

〔加圧工程〕
凍結試料または冷蔵試料１０ｍＬを、庫内の環境が２００ＭＰａ、１０℃に保たれた加圧設備（神戸製鋼所社製、研究開発用高圧処理装置）の庫内に１０分間保持し、測定試料を得た。

【0057】

〔解凍工程〕
凍結試料１０ｍＬを、大気圧、室温２５℃で３０分間保持し、測定試料を得た。

【0058】

〔生菌数分析〕
測定試料０．１ｍＬを採取し、これを無菌水で希釈して希釈検体とした。滅菌ピペットを用いて当該希釈検体０．１ｍＬを固化させ、表面を乾燥させた寒天培地上にコンラージ棒で均等に塗抹した。３５℃に保持したインキュベータで９６時間の培養を行った。
培養後の培地について、生じたコロニーの数を測定し、得られた測定値に検体調製時の希釈倍率を乗じて測定試料１ｍＬあたりの菌数Ｎを算出した。殺菌工程前の試料について同様の方法で測定した検体１ｍＬあたりの菌数をＮ_０とし、殺菌工程後の菌数の対数減少値ＬＲＶ（Ｄ）を、以下の数式（Ｉ）に従って算出した。
ＬＲＶ（Ｄ）＝Ｌｏｇ_１０（Ｎ_０／Ｎ） （Ｉ）

【0059】

〔実施例１〕
グレープフルーツ果汁（ｐＨ３．３）８．９ｍＬとエタノール１．０ｍＬとを均一に混合し、エタノールを８重量％含む混合物を得た。当該混合物に対し、前記植菌工程、前記凍結工程、前記加圧工程を順に実施し、測定試料を得た。当該測定試料について、前記の方法により生菌数分析を実施し、ＬＲＶ（Ｄ）値を得た。

【0060】

〔実施例２〕
緩衝液（ｐＨ３．５）８．９ｍＬとエタノール１．０ｍＬとを均一に混合し、エタノールを８重量％含み、クエン酸を４．７重量％含む混合物を得た。当該混合物に対し、前記植菌工程、前記凍結工程、前記加圧工程を順に実施し、測定試料を得た。当該測定試料について、前記の方法により生菌数分析を実施し、ＬＲＶ（Ｄ）値を得た。

【0061】

〔実施例３〕
緩衝液（ｐＨ７．０）８．９ｍＬとエタノール１．０ｍＬとを均一に混合し、エタノールを８重量％含み、クエン酸を１．２重量％含む混合物を得た。当該混合物に対し、前記植菌工程、前記凍結工程、前記加圧工程を順に実施し、測定試料を得た。当該測定試料について、前記の方法により生菌数分析を実施し、ＬＲＶ（Ｄ）値を得た。

【0062】

〔比較例１－１〕
グレープフルーツ果汁（ｐＨ３．３）１０ｍＬに対し、前記植菌工程、前記凍結工程、前記加圧工程を順に実施し、測定試料を得た。当該測定試料について、前記の方法により生菌数分析を実施し、ＬＲＶ（Ｄ）値を得た。

【0063】

〔比較例１－２〕
実施例１において、前記加圧工程に替えて前記解凍工程を実施し、加圧工程を経ない測定試料を得た。当該測定試料について、前記の方法により生菌数分析を実施し、ＬＲＶ（Ｄ）値を得た。

【0064】

〔比較例１－３〕
実施例１において、前記凍結工程に替えて前記冷蔵工程を実施し、凍結工程を経ない測定試料を得た。当該測定試料について、前記の方法により生菌数分析を実施し、ＬＲＶ（Ｄ）値を得た。

【0065】

〔比較例１－４〕
比較例１において、前記加圧工程に替えて前記解凍工程を実施し、加圧工程を経ない測定試料を得た。当該測定試料について、前記の方法により生菌数分析を実施し、ＬＲＶ（Ｄ）値を得た。

【0066】

〔比較例１－５〕
比較例１において、前記凍結工程に替えて前記冷蔵工程を実施し、凍結工程を経ない測定試料を得た。当該測定試料について、前記の方法により生菌数分析を実施し、ＬＲＶ（Ｄ）値を得た。

【0067】

〔比較例２－１〕
クエン酸を５．３重量％含む水溶液である緩衝液（ｐＨ３．５）１０ｍＬに対し、前記植菌工程、前記凍結工程、前記加圧工程を順に実施し、測定試料を得た。当該測定試料について、前記の方法により生菌数分析を実施し、ＬＲＶ（Ｄ）値を得た。
〔比較例２－２〕
実施例２において、前記加圧工程に替えて前記解凍工程を実施し、加圧工程を経ない測定試料を得た。当該測定試料について、前記の方法により生菌数分析を実施し、ＬＲＶ（Ｄ）値を得た。

【0068】

〔比較例２－３〕
実施例２において、前記凍結工程に替えて前記冷蔵工程を実施し、凍結工程を経ない測定試料を得た。当該測定試料について、前記の方法により生菌数分析を実施し、ＬＲＶ（Ｄ）値を得た。

【0069】

〔比較例２－４〕
比較例２－１において、前記加圧工程に替えて前記解凍工程を実施し、加圧工程を経ない測定試料を得た。当該測定試料について、前記の方法により生菌数分析を実施し、ＬＲＶ（Ｄ）値を得た。

【0070】

〔比較例２－５〕
比較例２－１において、前記凍結工程に替えて前記冷蔵工程を実施し、凍結工程を経ない測定試料を得た。当該測定試料について、前記の方法により生菌数分析を実施し、ＬＲＶ（Ｄ）値を得た。

【0071】

〔比較例３－１〕
クエン酸を１．３重量％含む水溶液である緩衝液（ｐＨ７．０）１０ｍＬに対し、前記植菌工程、前記凍結工程、前記加圧工程を順に実施し、測定試料を得た。当該測定試料について、前記の方法により生菌数分析を実施し、ＬＲＶ（Ｄ）値を得た。

【0072】

〔比較例３－２〕
実施例３において、前記加圧工程に替えて前記解凍工程を実施し、加圧工程を経ない測定試料を得た。当該測定試料について、前記の方法により生菌数分析を実施し、ＬＲＶ（Ｄ）値を得た。

【0073】

〔比較例３－３〕
実施例３において、前記凍結工程に替えて前記冷蔵工程を実施し、凍結工程を経ない測定試料を得た。当該測定試料について、前記の方法により生菌数分析を実施し、ＬＲＶ（Ｄ）値を得た。

【0074】

〔比較例３－４〕
比較例３－１において、前記加圧工程に替えて前記解凍工程を実施し、加圧工程を経ない測定試料を得た。当該測定試料について、前記の方法により生菌数分析を実施し、ＬＲＶ（Ｄ）値を得た。

【0075】

〔比較例３－５〕
比較例３－１において、前記凍結工程に替えて前記冷蔵工程を実施し、凍結工程を経ない測定試料を得た。当該測定試料について、前記の方法により生菌数分析を実施し、ＬＲＶ（Ｄ）値を得た。

【0076】

〔グレープフルーツ果汁における殺菌効果〕
実施例１および比較例１－１～１－５の結果を表１に示した。エタノールを添加し、かつ、凍結工程および加圧工程を実施する実施例１が、最も高い殺菌効果を示した。

【表1】

【0077】

〔緩衝液における殺菌効果〕
実施例２、３および比較例２－１～２－５、３－１～３－５の結果を表２に示した。エタノールを添加し、かつ、凍結工程および加圧工程を実施する実施例２、３が、高い殺菌効果を示した。

【表2】

【産業上の利用可能性】

【0078】

本発明は、たとえば、酒類および清涼飲料水の原料とする果汁の殺菌に利用することができる。

【図1】