特許 7015331 ロフルミラストＮ－酸化物の吸入によって自己免疫、呼吸器性および炎症性の障害を処置する方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2022-01-25

(45)【発行日】2022-02-02

(54)【発明の名称】ロフルミラストＮ－酸化物の吸入によって自己免疫、呼吸器性および炎症性の障害を処置する方法

(51)【国際特許分類】

   A61K 31/4425 20060101AFI20220126BHJP

   A61K 9/72 20060101ALI20220126BHJP

   A61K 9/12 20060101ALI20220126BHJP

   A61K 9/08 20060101ALI20220126BHJP

   A61K 9/10 20060101ALI20220126BHJP

   A61P 37/06 20060101ALI20220126BHJP

   A61P 11/00 20060101ALI20220126BHJP

   A61P 29/00 20060101ALI20220126BHJP

   A61P 11/06 20060101ALI20220126BHJP

   A61P 11/08 20060101ALI20220126BHJP

   A61P 37/08 20060101ALI20220126BHJP

【ＦＩ】

A61K31/4425

A61K9/72

A61K9/12

A61K9/08

A61K9/10

A61P37/06

A61P11/00

A61P29/00

A61P11/06

A61P11/08

A61P37/08

【請求項の数】 20

【外国語出願】

(21)【出願番号】P 2020019696

(22)【出願日】2020-02-07

(62)【分割の表示】P 2018119732の分割

【原出願日】2014-01-28

(65)【公開番号】P2020079295

(43)【公開日】2020-05-28

【審査請求日】2020-03-06

(31)【優先権主張番号】354/CHE/2013

(32)【優先日】2013-01-28

(33)【優先権主張国・地域又は機関】IN

(31)【優先権主張番号】355/CHE/2013

(32)【優先日】2013-01-28

(33)【優先権主張国・地域又は機関】IN

(73)【特許権者】

【識別番号】515205381

【氏名又は名称】インコゼン・セラピューティクス・プライベート・リミテッド

(74)【代理人】

【識別番号】100108453

【弁理士】

【氏名又は名称】村山 靖彦

(74)【代理人】

【識別番号】100110364

【弁理士】

【氏名又は名称】実広 信哉

(74)【代理人】

【識別番号】100133400

【弁理士】

【氏名又は名称】阿部 達彦

(72)【発明者】

【氏名】スワループ・クマール・ヴァッカランカ

【審査官】古閑 一実

(56)【参考文献】

【文献】特表平０８－５１２０４１（ＪＰ，Ａ）

【文献】特表２００９－５２０７１１（ＪＰ，Ａ）

【文献】特表２００３－５０７４３５（ＪＰ，Ａ）

【文献】特表２００７－５３６３５０（ＪＰ，Ａ）

【文献】特表２００３－５３４３２８（ＪＰ，Ａ）

【文献】特表２００６－５０８９９４（ＪＰ，Ａ）

【文献】特表２００９－５１６６６２（ＪＰ，Ａ）

【文献】特表２００７－５２４６９９（ＪＰ，Ａ）

【文献】国際公開第２００４／０８４８９４（ＷＯ，Ａ１）

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

Ａ６１Ｋ ３１／００－３３／４４

Ａ６１Ｋ ９／００－ ９／７２

Ａ６１Ｐ １／００－４３／００

ＣＡｐｌｕｓ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

ロフルミラストＮ酸化物またはその薬学的に許容される塩を含む、それが必要な被験体において肺投与により自己免疫、呼吸器性または炎症性の疾患または状態を処置するための組成物であって、前記ロフルミラストＮ酸化物またはその薬学的に許容される塩が、約１０ミクロン以下（例えば、約０．１～約１０ミクロン、例えば約０．５～約５ミクロン）のｄ_５０またはｄ_９０を有しており、前記組成物がグリコピロニウムまたはレバトロペートを含まず、ロフルミラストＮ酸化物が以下の式

【化1】

を有する、組成物。

【請求項2】

前記ロフルミラストＮ酸化物またはその薬学的に許容される塩のｄ_５０またはｄ_９０が約１０ミクロン以下、約６ミクロン未満、または約１ミクロンと約６ミクロンとの間である、請求項１に記載の組成物。

【請求項3】

前記ロフルミラストＮ酸化物またはその薬学的に許容される塩のｄ_５０が約１ミクロンと約６ミクロンとの間である、請求項１に記載の組成物。

【請求項4】

定量吸入器（ＭＤＩ）またはドライパウダー吸入器（ＤＰＩ）に適する形態である、請求項１に記載の組成物。

【請求項5】

単一の活性成分としてロフルミラストＮ酸化物またはその薬学的に許容される塩を含む吸入可能なドライパウダーと生理学的に許容される薬理学的に不活性な固体の担体の粒子との形態である、請求項１に記載の組成物。

【請求項6】

単一の活性成分としてロフルミラストＮ酸化物またはその薬学的に許容される塩、噴霧剤ならびに、必要に応じて、１つ以上の共溶媒、薬学的に許容される担体および／または賦形剤を含んでいるエアロゾルの形態である、請求項１に記載の組成物。

【請求項7】

前記ロフルミラストＮ酸化物またはその薬学的に許容される塩が噴霧剤中の粒子の懸濁物の形態である、請求項１に記載の組成物。

【請求項8】

吸入により肺投与するための、請求項１に記載の組成物。

【請求項9】

ドライパウダー、溶液または懸濁物として吸入により肺投与するための、請求項１に記載の組成物。

【請求項10】

ドライパウダーとして肺投与するための、請求項９に記載の組成物。

【請求項11】

溶液または懸濁物として肺投与するための、請求項９に記載の組成物。

【請求項12】

ロフルミラストＮ酸化物またはその薬学的に許容される塩の約２０μｇ～約１２００μｇの単回用量を含む、請求項１に記載の組成物。

【請求項13】

ロフルミラストＮ酸化物またはその薬学的に許容される塩の約５０μｇ～約１０００μｇの単回用量を含む、請求項１に記載の組成物。

【請求項14】

ロフルミラストＮ酸化物またはその薬学的に許容される塩の約１００μｇ～約８００μｇの単回用量を含む、請求項１に記載の組成物。

【請求項15】

ロフルミラストＮ酸化物またはその薬学的に許容される塩の約１００μｇ、約２００μｇ、約４００μｇ、または約６００μｇの単回用量を含む、請求項１に記載の組成物。

【請求項16】

前記疾患または状態が喘息、ＣＯＰＤ、慢性閉塞性細気管支炎、急性気管支炎、慢性気管支炎、肺気腫、アレルギー性鼻炎および非アレルギー性鼻炎から選択される、請求項１～１５のいずれか１項に記載の組成物。

【請求項17】

前記疾患または状態が喘息である、請求項１～１６のいずれか１項に記載の組成物。

【請求項18】

前記疾患または状態がＣＯＰＤである、請求項１～１６のいずれか１項に記載の組成物。

【請求項19】

前記ロフルミラストＮ酸化物またはその薬学的に許容される塩が無水物、溶媒和物、または水和物である、請求項１～１８のいずれか１項に記載の組成物。

【請求項20】

単一の活性成分としてのロフルミラストＮ酸化物またはその薬学的に許容される塩を含む、それが必要な被験体において肺投与により自己免疫、呼吸器性または炎症性の疾患または状態を処置するための組成物であって、前記ロフルミラストＮ酸化物またはその薬学的に許容される塩が、約１０ミクロン以下（例えば、約０．１～約１０ミクロン、例えば約０．５～約５ミクロン）のｄ_５０またはｄ_９０を有し、ロフルミラストＮ酸化物が以下の式

【化2】

を有する、組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本出願は、各々、その全体が参照によって本明細書に援用される、２０１３年１月２８出願のインド特許出願番号３５４／ＣＨＥ／２０１３、および２０１３年１月２８日出願の同第３５５／ＣＨＥ／２０１３号の恩典を請求する。

【0002】

発明の分野
本発明は、自己免疫、呼吸器性および／または炎症性の疾患または状態、例えば、喘息、ＣＯＰＤ、ならびに肺の他のアレルギー性および／または炎症性の障害を、ロフルミラストＮ酸化物またはその薬学的に許容される塩の肺投与によって（例えば、吸入によって）処置する方法に関する。本発明はまた、この方法での使用のための薬学的組成物にも関する。

【背景技術】

【0003】

自己免疫、呼吸器性および炎症性の疾患、例えば、慢性の閉塞性の肺の障害（ＣＯＰＤ）および喘息は、免疫系の機能不全または過剰な活性に関連する慢性であり、かつ進行性である場合が多い疾患である。

【0004】

喘息は、小児の間では最も一般的な慢性の疾患であり、また数百万例の成人にも影響する。世界中で２億３５００万ほどの人がこの疾患に罹っている。

【0005】

ＣＯＰＤは高度に蔓延している状態であって、世界中の罹患状態および死亡の主な原因である。この疾患が進行するにつれて、ＣＯＰＤがある患者は高頻度に増悪する傾向になる場合があり、患者の不安、健康状態の悪化、肺機能の低下および死亡率の増大を生じる。呼吸機能を悪化するこれらのエピソードは、ヘルスケア利用、入院およびコストの増大につながる。より悪いことには、頻繁な増悪は、肺機能のより速い悪化に関連し、それによって平均余命が短くなる。

【0006】

ＣＯＰＤおよび喘息に加えて、肺の他のアレルギー性および／または炎症性障害としては、嚢胞性線維症および特発性肺線維症（ＩＰＦ）のような疾患が挙げられる。

【0007】

慢性閉塞性肺疾患のグローバルイニシアチブ（Ｇｌｏｂａｌ Ｉｎｉｔｉａｔｉｖｅ ｆｏｒ Ｃｈｒｏｎｉｃ Ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｖｅ Ｌｕｎｇ Ｄｉｓｅａｓｅ）（ＧＯＬＤ）の推奨によれば、ＣＯＰＤのファーストラインの治療は、長時間作用性のβ－アゴニストおよび長時間作用性のムスカリン性アンタゴニストおよび吸入コルチコステロイドである。しかし、これらの薬物は、その分子および細胞ベースを標的とするのではなく、疾患に関連する症状および増悪を低減する。従って、ＣＯＰＤ治療ではさらなる改善がやはり必要である。

【0008】

ＰＤＥ４インヒビターであるロフルミラスト（Ｄａｌｉｒｅｓｐ（登録商標））は、米国では、慢性気管支炎および増悪の既往をともなう重篤なＣＯＰＤを有する患者においてＣＯＰＤ増悪のリスクを低減するための経口療法として承認されている。

【0009】

２０１０年の４月には、ＦＤＡに対する肺アレルギー薬諮問委員会（Ｐｕｌｍｏｎａｒｙ－Ａｌｌｅｒｇｙ Ｄｒｕｇｓ Ａｄｖｉｓｏｒｙ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ）（ＰＡＤＡＣ）は、わずかな利益および有害事象についての可能性に起因して、ロフルミラスト承認に対して１０対５で反対に投票した。２０１１年の３月には、ＦＤＡは、当初追求されたものより狭い適応で、ロフルミラストを承認した（すなわち、慢性気管支炎および増悪の既往に関連する重篤なＣＯＰＤを有する患者でのＣＯＰＤ増悪のリスクを低減するための処置）。ロフルミラストは用量依存性の毒性を有すると報告されており、このせいでロフルミラストの高用量での使用は制限される。下の表は、ロフルミラストを投与されているうち少なくとも２％で生じ、かつプラシーボより多い有害事象（ＡＥ）を示す。

【0010】

【表A】

【0011】

Ｒ．Ｗ．Ｃｈａｐｍａｎら、Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，５７１，２１５－２２１（２００７）は、その治療指数を改善する企図でＢｒｏｗｎ Ｎｏｒｗａｙラットに対する吸入によるロフルミラストの投与を包含する実験を報告している。

【0012】

Ｄａｌｉｒｅｓｐのラベルによれば、ロフルミラストＮ酸化物は、ロフルミラストの活性な代謝物である。国際公開番号ＷＯ２００１／９００７６およびＷＯ２０１１／１６３４６９（両方とも本明細書において参照によって援用される）は、ロフルミラストＮ酸化物の調製および特定の使用を開示している。ロフルミラストおよびロフルミラストＮ酸化物についてのさらなる有効性、前臨床および臨床の情報は、Ａ．Ｈａｔｚｅｌｍａｎｎら、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，２９７，２６７－２７９，２００１；Ｃｅｎｔｅｒ Ｆｏｒ Ｄｒｕｇ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ Ａｎｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ Ｒｅｖｉｅｗ（ｓ） ｏｎ Ｒｏｆｌｕｍｉｌａｓｔ（出願番号：０２２５２２Ｏｒｉｇｌｓ０００）（米国のＦＤＡのウェブサイトにおいてオンラインで利用可能）；Ｄ．Ｓ．Ｂｕｎｄｓｃｈｕｈら、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，２９７，２８０－２９０，２００１；Ｒａｂｅら、Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，１６３５３～６７，２０１１；Ｚｕｚａｎａ Ｄｉａｍａｎｔら、Ｐｕｌｍｏｎａｒｙ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ＆ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ ２４，４（２０１１）３５３；およびＳ．Ｖｏｌｌｅｒｔら、Ｄｉａｂｅｔｏｌｏｇｉａ，５５，２７７９～２７８８，２０１２（各々が参照によって本明細書に援用される）に示される。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0013】

【文献】インド特許出願番号第３５４／ＣＨＥ／２０１３号

【文献】インド特許出願番号第３５５／ＣＨＥ／２０１３号

【文献】国際公開番号ＷＯ２００１／９００７６

【文献】国際公開番号ＷＯ２０１１／１６３４６９

【非特許文献】

【0014】

【文献】Ｒ．Ｗ．Ｃｈａｐｍａｎら、Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，５７１，２１５－２２１（２００７）

【文献】Ａ．Ｈａｔｚｅｌｍａｎｎら、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，２９７，２６７－２７９，２００１

【文献】Ｄ．Ｓ．Ｂｕｎｄｓｃｈｕｈら、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，２９７，２８０－２９０，２００１

【文献】Ｒａｂｅら、Ｂｒ．Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，１６３５３～６７，２０１１

【文献】Ｚｕｚａｎａ Ｄｉａｍａｎｔら、Ｐｕｌｍｏｎａｒｙ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ＆ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ ２４，４（２０１１）３５３

【文献】Ｓ．Ｖｏｌｌｅｒｔら、Ｄｉａｂｅｔｏｌｏｇｉａ，５５，２７７９～２７８８，２０１２

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0015】

現在利用可能な介入治療にかかわらず、喘息およびＣＯＰＤのような呼吸器障害は、重要で満たされていない医学的必要性を有する疾患分類のままである。有害事象が少なく、治療がさらに有効である治療が必要である。

【課題を解決するための手段】

【0016】

発明の要旨
本発明は、自己免疫、呼吸器性および／または炎症性の疾患または状態を、有効量のロフルミラストＮ酸化物またはその薬学的に許容される塩の肺投与によって（例えば、吸入によって）処置する方法を提供する。なんら特定の理論に結び付けられるものではないが、本発明者らは、ロフルミラストＮ酸化物の肺投与が、ロフルミラストＮ酸化物およびロフルミラストの低い血漿レベルを生じ、従って、ロフルミラストの経口投与よりも副作用が少ないという理論を立てる。さらに、ロフルミラストＮ酸化物の肺送達は、ロフルミラストの経口送達よりも広い治療濃度域を有する。これによって、薬物をより低用量で投与すること、および／または有害事象が少なないままで薬物投与計画を長くさせることが可能になる。

【0017】

この疾患または状態は、喘息、ＣＯＰＤ、慢性閉塞性細気管支炎、慢性気管支炎、またはアレルギー性もしくは非アレルギー性の鼻炎であってもよい。好ましい実施形態では、この疾患または状態は、喘息またはＣＯＰＤである。

【0018】

ロフルミラストＮ酸化物（またはその薬学的に許容される塩）は、ドライパウダー、溶液または懸濁物の形態で吸入によって投与されてもよい。一実施形態では、ロフルミラストＮ酸化物は、ドライパウダーとして投与される。別の実施形態では、ロフルミラストＮ酸化物は、溶液として、または懸濁物として投与される。ロフルミラストＮ酸化物は、例えば、定量吸入器（ＭＤＩ）を用いて投与されてもまたはドライパウダー吸入器（ＤＰＩ）を用いて投与されてもよい。あるいは、ロフルミラストＮ酸化物は、ネブライザー（例えば、超音波ネブライザー）で投与されてもよい。

【0019】

一実施形態では、ロフルミラストＮ酸化物は、約５μｇ～約２０００μｇの単回用量として投与される。別の実施形態では、ロフルミラストＮ酸化物は、約２０μｇ～約１２００μｇの単回用量として投与される。ロフルミラストＮ酸化物の１つ以上の用量が１日に投与されてもよい。

【0020】

さらに別の実施形態では、ロフルミラストＮ酸化物は、約５０μｇ～約１０００μｇの単回用量として、例えば、約１００μｇ～約８００μｇの単回用量、例えば、約１００μｇ、約２００μｇ、約４００μｇまたは約６００μｇの単回用量として投与される。

【0021】

本発明はまた、ロフルミラストＮ酸化物および必要に応じて１つ以上の薬学的に許容される担体および／または賦形剤を含んでいる肺投与（例えば、吸入による）に適切な薬学的組成物に関する。この薬学的組成物は、喘息またはＣＯＰＤの処置のためなど、本明細書に記載の処置の方法において用いられ得る。

【0022】

この薬学的組成物は、活性成分としてロフルミラストＮ酸化物と、必要に応じて生理学的に許容される、薬理学的に不活性な固体の担体の粒子とを含んでいる吸入可能なドライパウダーの形態であってもよい。１つの好ましい実施形態では、ロフルミラストＮ酸化物粒子は、微粉末化された形態である。

【0023】

さらに別の実施形態は、活性成分としてロフルミラストＮ酸化物またはその薬学的に許容される塩、噴霧剤、ならびに必要に応じて１つ以上の共溶媒、薬学的に許容される担体および／または賦形剤を含んでいる肺投与のために適切なエアロゾルの形態である薬学的組成物である。

【0024】

なお別の実施形態は、ロフルミラストＮ酸化物またはその薬学的に許容される塩の粒子の懸濁物（例えば、ロフルミラストＮ酸化物の微粉末化された粒子）を噴霧剤中に含んでいる肺投与のために適切なエアロゾルの形態である薬学的組成物である。

【0025】

なお別の実施形態は、ロフルミラストＮ酸化物を含んでいる薬学的組成物を含む定量吸入器（ＭＤＩ）またはドライパウダー吸入器（ＤＰＩ）である。

【0026】

本明細書に記載される任意の方法または組成物では、ロフルミラストＮ酸化物は、約１０ミクロン未満の粒径（例えば、ｄ_５０またはｄ_９０）を有し得る。好ましい実施形態では、ロフルミラストＮ酸化物は、約１０ミクロン以下、好ましくは約６ミクロン未満、さらに好ましくは約１～約６ミクロンの質量中央径、ｄ_５０またはｄ_９０を有する。さらに別の実施形態では、ロフルミラストＮ酸化物は、約１０ミクロン未満（例えば、約０．１～約１０ミクロン、例えば約０．５～約５ミクロン）の質量中央粒径ｄ_５０またはｄ_９０を有する。

【0027】

ロフルミラストＮ酸化物は、無水物、溶媒和物、水和物または薬学的に許容される酸あるいは塩基との塩の形態であってもよい。本明細書に記載の任意の方法または組成物のさらなる実施形態では、ロフルミラストＮ酸化物は、第二の活性剤、例えば、１つ以上のロイコトリエンレセプターアンタゴニスト、例としては、ＬＴＤ４－アンタゴニスト、コルチコステロイド、Ｈ１レセプターアンタゴニスト、β２アドレナリン受容体アゴニスト、ＣＯＸ－２選択性インヒビター、スタチン、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、Ｍ２および／またはＭ３アンタゴニスト、ベータミメティックス、追加のＰＤＥ４－インヒビター、ＥＧＦＲ－インヒビター、ＣＣＲ３－インヒビター、ｉＮＯＳ－インヒビター、ＳＹＫ－インヒビター、グルココルチコイド、δ２アゴニスト、ｐ３８キナーゼインヒビター、ＮＫ１レセプターアンタゴニスト、または任意の前述の任意の組み合わせと組み合わされてもよい。

【0028】

本明細書に記載の任意の方法または組成物の好ましい実施形態では、ロフルミラストＮ酸化物は、長時間作用性β２アゴニスト（ＬＡＢＡ）、Ｍ３アンタゴニスト、コルチコステロイド、およびそれらの任意の組み合わせから選択される第二の活性成分と組み合わされる。

【図面の簡単な説明】

【0029】

【図1】雌のウイスターラットの気管支肺胞洗浄液（ＢＡＬＦ）中のＬＰＳ誘発性の好中球増加症の阻害に対する、経口的に投与されたビヒクルおよびロフルミラスト（ＲＦＬ）（０．３、１、３、および１０ｍｇ／ｋｇ）の効果を示している散布図である（実施例３Ｂ．Ａ）。

【図2】雌のウイスターラットのＢＡＬＦ中のＬＰＳ誘発性の好中球増加症の阻害に対する、気管内に（ＩＴ）投与されたロフルミラスト（ＲＦＬ）（１０、３０および１００μｇ／ｋｇ）の効果を示している散布図である（実施例３Ｂ．Ａ）。

【図3】雌のウイスターラットのＢＡＬＦ中のＬＰＳ誘発性の好中球増加症の阻害に対する、気管内に（ＩＴ）投与されたロフルミラストＮ酸化物（Ｎ酸化物）（１０、３０および１００μｇ／ｋｇ）の効果を示している散布図である（実施例３Ｂ．Ａ）。

【図4A】ＢＡＬＢ／ｃマウスにおける煙草の煙誘発性の細胞浸潤で観察された、経口的に投与されたロフルミラスト（ＲＦＬ）（１、３および１０ｍｇ／ｋｇ（１日２回））の効果を示している散布図である（実施例３Ｂ．Ｂ）。

【図4B】ＢＡＬＢ／ｃマウスにおける煙草の煙誘発性の細胞浸潤で観察された、経口的に投与されたロフルミラスト（ＲＦＬ）（１、３および１０ｍｇ／ｋｇ（１日２回））の効果を示している散布図である（実施例３Ｂ．Ｂ）。

【図5A】鼻腔内に投与されたロフルミラストＮ酸化物（Ｎ酸化物）（０．００３、０．０３、０．３および３ｇ／ｋｇ（鼻腔内））後のＢＡＬＢ／ｃマウスにおける４日での煙草の煙誘発性の細胞浸潤ＣＯＰＤモデルにおける、それぞれマクロファージおよび好中球の数を示している散布図である（実施例３Ｂ．Ｂ）。

【図5B】鼻腔内に投与されたロフルミラストＮ酸化物（Ｎ酸化物）（０．００３、０．０３、０．３および３ｇ／ｋｇ（鼻腔内））後のＢＡＬＢ／ｃマウスにおける４日での煙草の煙誘発性の細胞浸潤ＣＯＰＤモデルにおける、それぞれマクロファージおよび好中球の数を示している散布図である（実施例３Ｂ．Ｂ）。

【発明を実施するための形態】

【0030】

発明の詳細な説明
本発明の方法は、少量の活性な化合物を用いて呼吸器性および炎症性の疾患および状態の処置を可能にする、ならびに／または呼吸器性および炎症性の疾患および状態の処置をより効率的な方式で長期間にわたって可能にする。本発明の方法はまた、ロフルミラストＮ酸化物の経口投与の際に期待されるよりもロフルミラストまたはロフルミラストＮ酸化物の全身的な副作用を低下することも可能にする。

【0031】

ロフルミラストＮ酸化物は以下の式を有する：

【化1】

【0032】

ロフルミラストＮ酸化物は、薬学的に許容される塩の形態であってもよい。適切な薬学的に許容される塩としては限定するものではないが、Ｌｉ、Ｎａ、Ｋ、Ｃａ、Ｍｇ、Ｆｅ、Ｃｕ、Ｚｎ、およびＭｎのような無機塩基由来の塩；Ν，Ν’－ジアセチルエチレンジアミン、グルカミン、トリエチルアミン、コリン、水酸化物、ジシクロヘキシルアミン、メトホルミン、ベンジルアミン、トリアルキルアミン、およびチアミンなどの有機塩基の塩；アルキルフェニルアミン、グリシノール、およびフェニルグリシノールなどのキラル塩基の塩；グリシン、アラニン、バリン、ロイシン、イソロイシン、ノルロイシン、チロシン、シスチン、システイン、メチオニン、プロリン、ヒドロキシプロリン、ヒスチジン、オルニチンン、リジン、アルギニン、およびセリンのような天然のアミノ酸の塩；ＭｅＩおよび（Ｍｅ）_２ＳＯ_４のような、アルキルハライドおよびアルキルサルフェートとの本発明の化合物の四級アンモニウム塩；Ｄ－異性体または置換アミノ酸のような非天然アミノ酸の塩；グアニンの塩；ならびに置換グアニジンの塩であって、置換基がニトロ、アミノ、アルキル、アルケニル、アルキニル、アンモニウムから選択される塩、または置換アンモニウム塩およびアルミニウム塩が挙げられる。適切な塩としてはまた、酸付加塩であって、必要に応じて、例えば、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩、過塩素酸塩、ホウ酸塩、ヒドロハライド、酢酸塩、酒石酸塩、マレイン酸塩、クエン酸塩、フマル酸塩、コハク酸塩、パモ酸塩、メタンスルホン酸塩、安息香酸塩、サリチル酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、アスコルビン酸塩、グリセロリン酸塩、およびケトグルタル酸塩が挙げられる。

【0033】

本明細書において分子量等の物理的性質に対し、または化学式等の化学的性質に対して範囲が使用される場合、その中の範囲および特定の実施形態のすべての組み合わせおよび副組み合わせが、含まれるものとする。「約」という用語は、数値または数値範囲について述べている場合、言及されている数値または数値範囲が、実験上のばらつきの範囲内（または統計的な実験誤差内）の近似であることを意味し、従って、この数値または数値範囲は、記載された数値または数値範囲から、例えば、１％～１５％異なってもよい。「含んでいる（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語（および「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅまたはｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）または有している（ｈａｖｉｎｇ）または包含している（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」などの関連語）は、記載された特徴「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔ ｏｆ）」または「から本質的になる（ｃｏｎｓｉｓｔ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ）」実施形態、例えば、任意の物質の組成、組成物、方法またはプロセスなどの実施形態を包含する。

【0034】

「有効量」または「治療上有効な量」という用語は、限定はされないが、下記で定義されるような疾患の処置を含む、意図されている用途を達成するのに十分な本明細書に記載のロフルミラストＮ酸化物の量を指す。治療有効量は、意図されている用途（インビトロまたはインビボ）、または治療を受けている被験体および疾患状態、例えば、被験体の体重および年齢、疾患状態の重症度、投与様式などによって異なる場合があり、この量は、当業者によって容易に決定され得る。この用語はまた、標的細胞における特定の応答、例えば血小板粘着および／または細胞遊走の減少を誘発するであろう用量にも当てはまる。具体的な用量は、選択された吸入によるロフルミラストＮ酸化物の特定の投与法（例えば、噴霧化、吸入用エアロゾル、または吸入用ドライパウダーによる）、従うべき投与計画、他の化合物と併せて投与されるかどうか、投与のタイミング、それが投与される組織、およびそれを運搬する物理的送達系に応じて変化するであろう。

【0035】

本明細書において用いる場合、「処置、治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」、「処置、治療すること（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」という用語は、限定するものではないが、治療利益および／または予防効果を含む有益な、または所望の結果を得るためのアプローチを指す。治療効果が意味するものは、処置されている基礎疾患の根絶または改善である。また、治療効果は、患者が未だ基礎疾患を患っているかにはかかわらず、この患者においてある改善が確認されるように、その基礎疾患に伴う生理的症状のうちの１つ以上が根絶または改善されることによっても達成される。予防効果を目的として、この組成物は、この疾患の診断がなされていない場合であっても、特定の疾患を発症する危険性がある患者に対して投与されても、または疾患の生理的症状のうちの１つ以上を報告している患者に対して投与されてもよい。

【0036】

「治療効果（ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｅｆｆｅｃｔ）」とは、本明細書において用いる場合、上記の治療効果（ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｂｅｎｅｆｉｔ）および／または予防効果を包含する。予防効果としては、疾患もしくは状態の発生を遅延もしくは除去すること、疾患もしくは状態の症状の発現を遅延もしくは除去すること、疾患もしくは状態の進行を遅延、停止、もしくは逆行させること、またはその任意の組み合わせが包含される。

【0037】

「被験体」または「患者」という用語は本明細書において用いられる場合、哺乳動物、例えばヒトなどの任意の動物を指す。本明細書に記載の方法および組成物は、ヒトの治療および獣医学的応用の両方において有用であり得る。いくつかの実施形態では、患者は哺乳動物であり、一部の実施形態では、患者はヒトである。獣医学の目的に関しては、「被験体」または「患者」という用語は、限定するものではないが、ウシ、ヒツジ、ブタ、ウマ、およびヤギを含む家畜；イヌおよびネコなどの愛玩動物；外来のおよび／または動物園の動物；マウス、ラット、ウサギ、モルモット、およびハムスターを含む実験動物；ならびにニワトリ、シチメンチョウ、アヒル、およびガチョウなどの家禽を包含する。

【0038】

「炎症応答」とは、本明細書において用いる場合、発赤、熱、腫脹および疼痛（すなわち、炎症）によって特徴づけられ、典型的には組織の傷害または破壊を伴う。炎症応答は通常、組織の傷害または破壊によって誘導される限局性防御応答であり、この応答は、傷害性物質および傷害組織の両方を破壊する、希釈する、または囲む（ｗａｌｌ ｏｆｆ）（隔離する）ように働く。炎症応答は特に、白血球の流入および／または白血球（例えば、好中球）の走化性と関係している。炎症応答は、病原性の生物体およびウイルスによる感染、心筋梗塞または脳卒中後の外傷または再灌流などの非感染性手段、外来抗原に対する免疫応答、および自己免疫疾患に起因し得る。本発明による方法およびロフルミラストＮ酸化物を用いた処置に適している炎症応答には、特異的な防御システムの反応と関連する状態、および非特異的な防御システムの反答と関連する状態が包含される。

【0039】

本発明の方法としては、炎症性細胞の活性化と関連する状態の処置のための方法が含まれる。「炎症性細胞の活性化」とは、刺激（限定するものではないが、サイトカイン、抗原または自己抗体を含む）による増殖性細胞応答の誘導、可溶性メディエーター（限定するものではないが、サイトカイン、活性酸素、酵素、プロスタノイド、または血管作用性アミンを含む）の産生、または炎症性細胞（限定するものではないが、単球、マクロファージ、Ｔリンパ球、Ｂリンパ球、顆粒球（好中球、好塩基球、および好酸球を含む多形核白血球）、マスト細胞、樹状細胞、ランゲルハンス細胞、および内皮細胞を含む）中での新しいもしくは増加したメディエーター（限定するものではないが、主要組織適合抗原または細胞接着分子を含む）の細胞表面発現を指す。これらの細胞におけるこれらの表現型の１つまたは組み合わせの活性化が、炎症性状態の惹起、永続化、または増悪の一因となり得ることは、当業者には明らかであろう。

【0040】

「アレルギー性疾患」とは、本明細書において用いる場合、アレルギーに起因する任意の症状、組織の損傷、または組織機能の喪失を指す。

【0041】

「関節炎疾患」とは、本明細書において用いる場合、様々な病因に起因する関節の炎症性病変によって特徴づけられる任意の疾患を指す。

【0042】

本発明の薬学的組成物は、コルチコステロイドを含んでもよい。同様に、本明細書に記載の方法は、コルチコステロイドと同時処置されてもよいし、および／または同時投与されてもよい。ロフルミラストＮ酸化物およびコルチコステロイドは同じ組成物中であってもよいし、または同時投与される別の組成物中であってもよい。適切なコルチコステロイドとしては、限定するものではないが、デキサメタゾン、フルチカゾン、フロ酸フルチカゾン、プレドニゾロン、ベタメタゾン、ブデソニド、モメタゾン、モメタゾンフロ酸塩、トリアムシノロン アセトニド、シクレソニド、ＴＰＩ－１０２０、ベクロメタゾン、ベクロメタゾン ジプロピオネート、プレドニゾン、デフラザコート、ヒドロコルチゾン、ＱＡＥ－３９７、フルニソリド、およびそれらの任意の組み合わせが挙げられる。

【0043】

本発明の薬学的組成物は、第二の成分、例えば、１つ以上のＬＡＢＡ（長時間作用性β_２アゴニスト）、Ｍ３アンタゴニスト、コルチコステロイドおよび前述のいずれかの任意の組み合わせを含んでもよい。同様に、本明細書に記載される方法は、このような第二の成分との同時処置および／または同時投与を含んでもよい。ロフルミラストＮ酸化物および第二の成分は、同じ組成物中であってもよいし、または同時投与される別の組成物中であってもよい。

【0044】

また本発明は、任意の疾患の予防または処置のための方法であって、ここではＰＤＥ４レセプターの活性が関係しており、ＰＤＥ４レセプター活性の阻害が所望され、この方法が、その必要な患者に対して治療上有効な量のロフルミラストＮ酸化物を単独で、またはＬＡＢＡ（長時間作用性β_２アゴニスト）、Ｍ３アンタゴニストおよび／またはコルチコステロイドから選択される第二のコンパクティブ（ｃｏｍｐａｃｔｉｖｅ）剤と組み合わせて投与することを包含する、方法を提供する。

【0045】

ＰＤＥ４レセプターの活性およびＰＤＥ４レセプターの阻害が関係する疾患としては、例えば、喘息およびＣＯＰＤのような気道閉塞によって特徴づけられる気道の疾患が挙げられる。

【0046】

本発明はまた、ロフルミラストＮ酸化物を含んでいる単回用量または複数回用量のドライパウダー吸入器、定量吸入器またはソフトミストネブライザーであり得る装置にも関する。

【0047】

また本発明は、ロフルミラストＮ酸化物の薬学的組成物を単独で、または追加の活性成分と組み合わせて、１つ以上の薬学的に許容される担体および／または賦形剤と混合して含んでいるキット、ならびに単回用量または複数回用量のドライパウダー吸入器、定量吸入器またはソフトミストネブライザーであり得る装置にも関する。

【0048】

気道では、環状ヌクレオチドの、特にｃＡＭＰの細胞内レベルの上昇に対する生理学的応答は、肥満細胞、マクロファージ、Ｔリンパ球、好酸球および好中球などの免疫および炎症促進性の細胞の活性の抑制につながり、その結果ＩＬ－Ｉ、ＩＬ－３および腫瘍壊死因子α（ＴＮＦ－α）などのサイトカインを含む炎症性メディエーターの放出の減少を生じる。またこれは、気道平滑筋弛緩および浮腫の減少にもつながる。

【0049】

ロフルミラストＮ酸化物などのＰＤＥ－４インヒビターは、ｎＭ範囲でＰＤＥ４酵素に対してインビトロで阻害活性を示し、かつＣＯＰＤの動物モデルにおいて気管内投与の際に肺で顕著な活性を示す。またそれらは、肺で徐放性の肺レベルを示し、血漿中で検出不能であり、これは短い全身作用の指標である。

【0050】

本明細書に示されるような気道の疾患の処置のためには、ロフルミラストＮ酸化物を吸入によって投与する。吸入可能な調製物としては例えば、吸入可能な粉末、噴霧剤含有の定量エアロゾルおよび噴霧剤なしの吸入可能な処方物が挙げられる。

【0051】

ドライパウダーとしての投与のために、公知の単回または複数回用量の吸入器を利用してもよい。ドライパウダーは、ゼラチン、プラスチックもしくは他のカプセル、カートリッジまたはブリスターパック中に、あるいはリザーバー中に充填されてもよい。一般にはロフルミラストＮ酸化物に対して化学的に不活性な希釈剤または担体、例えば、ラクトースまたは吸引性フラクション（ｒｅｓｐｉｒａｂｌｅ ｆｒａｃｔｉｏｎ）を改善するために適切な任意の他の添加物を本発明の粉末化した化合物に添加してもよい。

【0052】

ヒドロフルオロアルカンのような噴霧剤ガスを含んでいる吸入エアロゾルは、溶液中または分散型のいずれかでロフルミラストＮ酸化物を含んでもよい。また噴霧剤由来の処方物は、他の成分、例えば、共溶媒、安定化剤および必要に応じて他の賦形剤も含んでよい。

【0053】

ロフルミラストＮ酸化物を含んでいる噴霧剤なしの吸入可能な処方物は、水性、アルコール性または水アルコール性の媒体中の溶液または懸濁液の形態であってもよく、それらは公知のジェットネブライザーもしくは超音波ネブライザーによって送達されてもよいし、またはＲｅｓｐｉｍａｔ（登録商標）のようなソフトミストネブライザーによって送達されてもよい。

【0054】

ロフルミラストＮ酸化物は、単独の活性成分として投与されてもよいし、または例えば、限定するものではないが、β_２－アゴニスト、コルチコステロイドおよびＭ３アンタゴニストのような呼吸障害の処置に現在用いられているものを含む１つ以上の他の薬学的な活性成分と組み合わせて投与されてもよい。

【0055】

ロフルミラストＮ酸化物の投与量は、処置されるべき特定の疾患、症状の重篤度、投与間隔の頻度、利用されるロフルミラストＮ酸化物、ロフルミラストＮ酸化物の有効性、毒性プロフィール、および薬物動態学的プロフィールを含む種々の要因に依存し得る。

【0056】

有利には、ロフルミラストＮ酸化物は吸入経路によって投与され得る。ロフルミラストＮ酸化物の投薬量は好ましくは、約０．０１～約２０ｍｇ／日、例えば、約０．１～約１０ｍｇ／日である。さらに好ましくは、この投薬量は約０．１～約５ｍｇ／日である。

【0057】

好ましくは、ロフルミラストＮ酸化物は単独で、または他の活性成分と組み合わせて、喘息、慢性気管支炎および慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）のような任意の閉塞性の呼吸器疾患の予防、処置、阻害または抑制のために投与されてもよい。

【0058】

ロフルミラストＮ酸化物は、ＰＤＥ４酵素の活性が関与しており、ＰＤＥ４酵素活性の阻害が望ましい任意の疾患、またはＰＤＥ４活性によって媒介される疾患状態（例えば、ＰＤＥ４が過剰発現されるかまたは過活性である疾患状態）の予防および／または処置のために投与されてもよい。

【0059】

このような疾患の例としては、限定するものではないが、アレルギー性の疾患状態、例えば、アトピー性皮膚炎、じんま疹、アレルギー性鼻炎、アレルギー性結膜炎、春季カタル、好酸球性肉芽腫、乾癬、炎症性関節炎、関節リウマチ、敗血性ショック、潰瘍性大腸炎、クローン病、心筋および脳の再かん流傷害、慢性糸球体腎炎、内毒素性ショック、嚢胞性線維症、特発性肺線維症（ＩＰＦ） 動脈再狭窄、アテローム性動脈硬化症、角化症、リウマチ様脊椎炎、変形性関節症、熱感、真性糖尿病、塵肺症、毒性およびアレルギー性接触湿疹、アトピー性湿疹、脂漏性湿疹、単純苔癬、日焼け、肛門性器部のそう痒、円形脱毛症、肥厚性瘢痕、円板状紅斑性狼瘡、全身性エリテマトーデス、毛包性および広範な領域の膿皮症、内因性および外因性のざ瘡、酒さ、ベーチェット病、アナフィラキシー性紫斑病 腎炎、炎症性腸疾患、白血病、多発性硬化症、胃腸病、および自己免疫疾患が挙げられる。

【0060】

またこのような疾患の例としては、神経および精神の障害、例えば、アルツハイマー病、多発性硬化症、筋委縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、多系統委縮症（ＭＳＡ）、統合失調症、パーキンソン病、ハンチントン病、ピック病、抑うつ、脳卒中、および脊髄損傷が挙げられる。

【0061】

薬学的組成物
本発明の一態様は、吸入可能なドライパウダーの形態でロフルミラストＮ酸化物を含んでいる薬学的処方物を提供し、ここでこの処方物は、活性成分としてロフルミラストＮ酸化物の微粉末化された粒子、および生理学的に許容される薬理学的に不活性な固体の担体の粒子を含む。本発明以前には、ロフルミラストＮ酸化物が吸入に適切な微粉末化された粒子として調製され得ることは公知ではなかった。

【0062】

別の態様によれば、本発明は、本明細書に記載の任意の実施形態の吸入可能なドライパウダーを含んでいるドライパウダー吸入器を提供する。

【0063】

本発明のさらなる態様は、ある疾患であってＰＤＥ４酵素が関与しており、ＰＤＥ４酵素活性の阻害が望ましい疾患、またはＰＤＥ４活性によって媒介される疾患状態の予防および／または処置のための使用のため、ならびに具体的には喘息または慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）のような炎症性または閉塞性の気道疾患の予防および／または処置のための使用のための本発明の吸入可能なドライパウダーを指す。

【0064】

本発明の別の態様は、喘息または慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）などの炎症性または閉塞性の気道疾患を予防、処置、阻害または抑制するための方法を指し、この方法は、本明細書に記載の任意の実施形態による治療上有効な量の吸入可能なドライパウダーの吸入による投与を包含する。

【0065】

本発明の別の態様は、本明細書に記載される任意の実施形態による吸入可能なドライパウダーを含んでいるパッケージ、およびドライパウダー吸入器に関する。

【0066】

「単回の治療上有効な用量」とは、吸入器の作動の際に吸入によって１回で投与される活性成分の量を意味する。「単回の治療上有効な用量」は、１回以上の作動、好ましくは、吸入器の１回の作動（ショット）で送達され得る。「作動」とは、単回の活動による（例えば、機械的または呼吸による）装置からの活性成分の放出を意味する。

【0067】

おおまかに言えば、粒子の粒径は、レーザー回折により、体積直径（ｖｏｌｕｍｅ ｄｉａｍｅｔｅｒ）として公知の特徴的な球相当径を測定することによって定量される。またこの粒径は、例えば、ふるい分析器のような適切な公知の装置によって質量直径を測定することによっても定量され得る。

【0068】

体積直径（ＶＤ）は、粒子の密度による質量直径（ｍａｓｓ ｄｉａｍｅｔｅｒ）（ＭＤ）に関連する（粒子についてサイズ非依存性密度を想定する）。

【0069】

粒径は、質量直径（ＭＤ）の立場から表現されてもよく、粒径分布は、以下に関して表現される：ｉ）質量中央径（ＭＭＤ）、これは粒子のそれぞれ重量あたり、または容積あたり５０％の直径に相当する、およびｉｉ）ＭＤ（それぞれ、粒子の１０％および９０％のミクロン）。ＭＭＤおよび平均粒径という用語は、交換可能に用いられる。粒径の測定では、ｄ_９０、ｄ_５０およびｄ_１０はそれぞれ、その物質の９０％、５０％および１０％が、特定されたミクロンのサイズ未満であることを意味する。

【0070】

粒径のレーザー回折測定は、乾式法（ここでは気流中の化合物／塩の懸濁物が、レーザービームを横切る）を用いてもよいし、または湿式法（ここではイソオクタン（例えば、化合物がイソオクタンに可溶性である場合）または水中の０．１％Ｔｗｅｅｎ８０のような液体分散媒体中の化合物／塩の懸濁物が、レーザービームを横切る）を用いてもよい。レーザー回折では、粒径は、例えば、Ｍａｌｖｅｒｎ ＭａｓｔｅｒｓｉｚｅｒまたはＳｙｍｐａｔｅｃ装置を用いて測定され得る。例えば、レーザー回折による粒径測定および／または分析は、以下のいずれかまたは全て（好ましくは全て）を用い得る：Ｍａｌｖｅｒｎ Ｍａｓｔｅｒｓｉｚｅｒロングベッドバージョン、水に含有される０．１％のＴｗｅｅｎ８０の分散媒体、約１５００ｒｐｍの撹拌速度、最終分散および分析の前の約３分の超音波処理、３００ＲＦ（Ｒｅｖｅｒｓｅ Ｆｏｕｒｉｅｒ）レンズ、および／またはＭａｌｖｅｒｎソフトウェアによるＦｒａｕｎｈｏｆｅｒ算出。他に特定しない限り、全てのｄ５０およびｄ９０測定を、湿式法を用いてレーザー回折によって測定する。

【0071】

「吸引性フラクション」という表現は、患者の深部肺に到達する活性粒子のパーセンテージの指数を指す。また吸引性フラクションは、微粒子画分とも呼ばれ、一般的な薬局方に報告されている手順によって、Ｍｕｌｔｉｓｔａｇｅ Ｃａｓｃａｄｅ ＩｍｐａｃｔｏｒまたはＭｕｌｔｉ Ｓｔａｇｅ Ｌｉｑｕｉｄ Ｉｍｐｉｎｇｅｒ（ＭＬＳＩ）などの適切なインビトロの装置を用いて評価される。これは、送達される用量と微粒子の質量（もとは微粒子用量）との間の比で算出される。３０％を超える吸引性フラクションは、良好な吸入性能の指数である。

【0072】

送達される用量は、装置中の累積的な沈着から算出されるが、微粒子質量は、粒子＜４．７ミクロンに相当する、フィルター（ＡＦ）に対するステージ３（Ｓ３）上の沈着から算出される。「正確な治療上有効な用量の活性成分」という表現は、送達される平均の１日用量と平均の放出用量との間の変動が１５％以下、好ましくは１０％未満である処方物を指す。

【0073】

一態様では、本発明の組成物は、ロフルミラストＮ酸化物の微粉末化された粒子、および生理学的に許容される薬理学的に不活性な固体の担体の粒子を含んでいる吸入可能なドライパウダーの形態の薬学的処方物である。

【0074】

本発明による組成物は、吸入器からの吸入による投与の場合、治療上有効な単回用量（本明細書において以降では単回用量）のロフルミラストＮ酸化物が約５μｇ～約２０００μｇ、例えば、約２０μｇ～約１２００μｇ、例えば、約５０μｇ～約１０００μｇ、約１００μｇ～約８００μｇ、または約１００μｇ～約６００μｇを含むような量で、活性成分を含む。

【0075】

好ましい実施形態によれば、この単回用量は約１００～約３００μｇであってもよいが、別の好ましい実施形態によれば；この単回用量は約２００～約８００μｇ、さらに好ましくは約３００μｇ～約６００μｇ含まれてもよい。他の実施形態では、この単回用量は約１００μｇ、約２００μｇ、約４００μｇまたは約６００μｇであってもよい。

【0076】

この単回用量は、患者の疾患および状態（体重、性別、年齢）の種類および重篤度に依存し、１日に１回以上、好ましくは１日に１回または２回投与されるものとする。

【0077】

ロフルミラストＮ酸化物を含んでいる薬学的組成物の１日用量は約１００μｇ～約２０００μｇ、好ましくは約２００μｇ～約１０００μｇ、さらに好ましくは約２００μｇ～約８００μｇ、それよりさらに好ましくは約１００μｇ～約６００μｇを含むものとする。

【0078】

一実施形態では、この一日用量は、１回投与で到達されても、または２回投与で到達されてもよい。

【0079】

別の実施形態では、この一日用量は、１回投与で到達され、吸入器の１回の作動で送達され得る。

【0080】

別の実施形態では、この一日用量は、１回投与で到達され、吸入器の２回以上の作動、好ましくは２回の作動で送達され得る。

【0081】

別の実施形態では、この一日用量は、２回の投与で到達され、吸入器の１回の作動で送達され得る。

【0082】

別の実施形態では、この一日用量は、２回の投与で到達され、吸入器の２回以上の作動、好ましくは２回の作動で送達され得る。

【0083】

本発明による処方物中のロフルミラストＮ酸化物の粒子は好ましくは、微細に粉砕された（微粉末化）形態であり、すなわち、それらの質量中央径は、一般には約１０ミクロン以下、好ましくは約６ミクロン未満であるものとし、さらに好ましくは約１～約６ミクロンに含まれるものとする。

【0084】

活性成分は、公知の方法を用いて、例えば、粉砕、直接沈殿、噴霧乾燥、凍結乾燥または超臨界流体によって所望の粒径に生成され得る。

【0085】

担体粒子は、任意の生理学的に許容される薬理学的に不活性な物質、または吸入使用に適切な物質の組み合わせからできていてもよい。

【0086】

例えば、担体粒子は、糖アルコール類；ポリオール類、例えば、ソルビトール、マンニトールおよびキシリトール、ならびに結晶性の糖、例としては、単糖類および二糖類；無機の塩、例えば、塩化ナトリウムおよび炭酸カルシウム；有機の塩、例えば、乳酸ナトリウム；ならびに他の有機化合物、例えば、尿素、多糖類、例えば、デンプンおよびその誘導体；オリゴ糖類、例えばシクロデキストリンおよびデキストリンから選択され得る。

【0087】

有利には、担体粒子は、結晶性の糖、例えば、グルコースもしくはアラビノースなどの単糖、またはマルトース、サッカロース、デキストロースもしくはラクトースなどの二糖からできている。

【0088】

本明細書に記載される処方物は、公知の方法によって調製され得る。一般には、このプロセスは以下の工程を包含する：
ｉ）活性成分および担体を一緒に微粒子化する工程；ならびにｉｉ）得られた共微粒子化された混合物を凝集および球状化に供する工程。

【0089】

あるいは、このプロセスは以下の工程を包含する：
ｉ）活性成分および担体を別々に微粒子化する工程；ｉｉ）微粒子化された成分を混合する工程；ならびにｉｉｉ）得られた混合物を凝集および球状化に供する工程。

【0090】

本発明の処方物がある規則的な混合物の形態である場合、これは、吸入装置の作動の際に担体粒子からの活性な粒子の放出を促進し得、それによって吸引性フラクションを改善する添加物質を有利に含み得る。

【0091】

担体の粗粒子の表面に結合されることが好ましい追加の物質とは、担体粒子とは異なる物質である。

【0092】

この添加物質はアミノ酸であってもよく、好ましくは、ロイシン、イソロイシン、リジン、バリン、メチオニン、およびフェニルアラニンから選択される。この添加物は、アミノ酸の誘導体の塩、例えば、アスパルテームまたはアセフルファムカリウムであってもよい。

【0093】

あるいは、添加物質は、１つ以上の水溶性の界面活性物質、例えば、レシチン、具体的には大豆レシチンを含んでもよい。

【0094】

本発明の特定の実施形態では、添加物質は、ステアリン酸およびその塩、例えば、ステアリン酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、フマル酸ステアリルナトリウム、ステアリルアルコール、スクロースモノパルミタートからなる群より選択される１つ以上の潤滑剤を含んでもよいし、またはそれらからなってもよい。

【0095】

他の可能性のある添加物質としては、滑石、二酸化チタン、二酸化アルミニウム、および二酸化ケイ素が挙げられる。

【0096】

有利には、この添加粒子は、約３５ミクロン未満の出発平均粒径またはｄ_５０を有する。好ましくは、それらは１約５ミクロンを超えない、さらに好ましくは約１０ミクロンを超えない平均粒径またはｄ_５０を有する。

【0097】

添加物質の至適量は、その添加物質の化学的組成および他の特性に依存する。一般には、添加物の量は、処方物の総量に基づいて約１０重量％を超えない。特定の実施形態では、添加物質の量は、処方物の総重量に基づいて約５重量％を超えない、好ましくは約２重量％を超えない、約１重量％を超えない、または約０．５重量％を超えない。一般には、添加物質の量は、処方物の総重量に基づいて少なくとも０．０１重量％である。

【0098】

規則的な混合物の形態である本発明の処方物はまた、約１５ミクロン以下、好ましくは約１０ミクロン以下、それよりさらに好ましくは約６ミクロン以下の質量中央径（ＭＭＤ）を有する生理学的に許容される薬理学的に不活性な物質の微粒子を含んでもよい。

【0099】

生理学的に許容される薬理学的に不活性な物質の微粒子のパーセンテージは、処方物の総量の約０．１～約４０％に有利に含まれる。

【0100】

好ましくは、この粗粒子および微粒子は、同じ生理学的に許容される薬理学的に不活性な物質から構成されている。

【0101】

本発明による規則的な混合物の形態の処方物は、公知の方法に応じて調製されてもよい。適切な方法は、担体の粗粒子、任意の微細な担体粒子および添加粒子を一緒に混合する工程と、微細に粉砕されたロフルミラストＮ酸化物をこの得られた混合物に最終的に添加する工程とを包含し得る。本発明による好ましい処方物は、国際公開番号ＷＯ２００１／７８６９３に報告される方法によって調製されてもよい。

【0102】

微小粒子中に包埋される添加物質の存在は、公知の方法によって、例えば、微量熱量測定に連結された電子走査顕微鏡によって検出され得る。

【0103】

本発明の処方物はさらに、呼吸疾患の予防および／または処置に有用な他の治療剤、例えば、サルブタモール、サルメテロール、およびビランテロールなどのβ２アゴニスト、プロピオン酸フルチカゾンまたはフロ酸フルチカゾン、フルニソリド、モメタゾンフロ酸塩、ロフレポニドおよびシクレソニドなどのコルチコステロイド、臭化イプラトロピウム、オキシトロピウム臭化物、臭化チオトロピウム、オキシブチニンなどの抗コリン剤または抗ムスカリン剤、ならびにそれらの組み合わせを含んでもよい。

【0104】

本明細書に記載されるドライパウダー処方物は、全ての慣習的なドライパウダー吸入器、例えば、単位用量または複数回用量の吸入器で用いられてもよい。

【0105】

例えば、本発明の処方物は、硬性のゼラチンカプセル中に充填され、次にＡｅｒｏｌｉｚｅｒ（商標）のような単位用量吸入器に充填されてもよい。代替的に、粉末としての処方物は、国際公開番号ＷＯ２００４／０１２８０１に記載されるもののような粉末リザーバーを備える複数回用量の吸入器に充填されてもよい。

【0106】

本発明はまた、医薬としての使用のための、前に記載の処方物のいずれか１つに関する。

【0107】

一態様では、本発明は、加圧定用量吸入器（Ｐｒｅｓｓｕｒｉｚｅｄ Ｍｅｔｅｒｅｄ Ｄｏｓｅ Ｉｎｈａｌｅｒ）（ｐＭＤＩ）によるエアロゾル投与に適切な、（本明細書において以降ではｐＭＤＩ処方物と呼ぶ）、ロフルミラストＮ酸化物および噴霧剤を含んでいる薬学的処方物を提供する。

【0108】

特定の実施形態では、ｐＭＤＩ処方物は、エアロゾル処方物の投与の際に肺への活性成分の吸入を可能にするように、噴霧剤中の微粉末化されたロフルミラストＮ酸化物の粒子の懸濁物の形態であってもよい。

【0109】

有利には、活性成分の粒子は、約１０ミクロン未満、好ましくは約１～約１０ミクロンの範囲、さらに好ましくは約１～約６ミクロンの質量中央径（ＭＭＤ）を有するものである。

【0110】

任意の加圧液化（ｐｒｅｓｓｕｒｅ－ｌｉｑｕｅｆｉｅｄ）噴霧剤、好ましくはヒドロフルオロアルカン（ＨＦＡ）噴霧剤を用いてもよい。ＨＦＡ噴霧剤の適切な例としては、限定するものではないが、１，１，１，２－テトラフルオロエタン（ＨＦＡ１３４ａ）、１，１，１，２，３，３，３－ヘプタフルオロ－プロパン（ＨＦＡ２２７）およびそれらの混合物が挙げられる。

【0111】

特定の実施形態では、噴霧剤はＨＦＡ１３４ａを含んでもよいが、他の実施形態では、噴霧剤はＨＦＡ２２７、またはその混合物を任意の比で含んでもよい。

【0112】

ある特定の実施形態では、懸濁物ｐＭＤＩ処方物は、バルブの潤滑としても機能し得るサーファクタントを含む。

【0113】

適切なサーファクタントは当該分野で公知であり、これには例えば、ソルビタンエステル類、例えば、ソルビタントリオレエート、ソルビタンモノラウレート、ソルビタンモノオレエートおよびそれらのエトキシル化誘導体、例えば、ポリソルベート２０、ポリソルベート８０；エチレンオキシド／プロピレンオキシドコポリマー、および他の剤、例えば、天然または合成のレシチン、オレイン酸、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、好ましくはＰＶＰ（Ｋ２５）およびポリビニルアルコール、オリーブ油、モノラウリン酸グリセリル、コーン油、綿実油またはヒマワリ種子油、ミリスチン酸イソプロピル、オレイルアルコール、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート、オレイルポリオキシエチレン（２）エーテル、ステアリルポリオキシエチレン（２）エーテル、ラウリルポリオキシエチレン（４）エーテル、オキシエチレンおよびオキシプロピレンのブロックコポリマー、ジエチレングリコールジオレエート、テトラヒドロフルフリル１オレエート、エチルオレエート、グリセリルモノオレエート、モノステアリン酸グリセリル、グリセリルモノリシノレート、セチルアルコール、ステアリルアルコール、セチルピリジニウムクロライド、エチレンオキシド／プロピレンオキシドコポリマーおよびエトキシル化アルコール、例えば、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）３００－１０００、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、Ａｎｔａｒｏｘ、Ｂｒｉｊ、および前述の任意の組み合わせが挙げられる。

【0114】

本発明によるｐＭＤＩ処方物中に存在し得るサーファクタントの量は、通常は約０．００１～約３．０％（ｗ／ｗ）、好ましくは約０．００５～約１．０％（ｗ／ｗ）の範囲である。

【0115】

必要に応じて、ｐＭＤＩ処方物は共溶媒を含んでもよい。適切な共溶媒としては、限定するものではないが、１つ以上のヒドロキシル基または他の極性基を含む極性の化合物が挙げられる。例えば、適切な共溶媒としては、アルコール、例えば、エタノール、好ましくは無水エタノール、イソプロパノール；グリコール、例えば、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコールまたはグリセロール；グリコールエーテル；およびポリオキシエチレンアルコール、またはそれらの任意の組み合わせが挙げられる。

【0116】

一実施形態では、共溶媒は無水エタノールである。好ましい実施形態では、無水エタノールは、約２０％（ｗ／ｗ）未満、好ましくは約１５％未満、さらに好ましくは約１％～約５％（ｗ／ｗ）、最も好ましくは約１％（ｗ／ｗ）または約５％（ｗ／ｗ）の濃度で用いられる。

【0117】

他の実施形態では、本発明によるｐＭＤＩ処方物は、さらに追加の賦形剤を含んでもよい。追加の賦形剤の例としては、糖、例えば、ラクトース、アミノ酸、例えば、アラニン、ベタイン、システイン、および／または抗酸化物質、例えば、アスコルビン酸、クエン酸、エデト酸ナトリウム、エデト酸、トコフェロール、ブチルヒドロキシトルエン、ブチルヒドロキシアニソールおよびパルミチン酸アスコルビルが挙げられる。

【0118】

賦形剤に対する薬物の重量比は一般には、約１：０．１～約１：１００の範囲である。

【0119】

本発明の薬学的なｐＭＤＩ処方物は、ロフルミラストＮ酸化物を約０．０２～約０．７％（ｗ／ｗ）、好ましくは約０．０５～約０．５％の量で、共溶媒を約１～約５％（ｗ／ｗ）の量で、および１つ以上のサーファクタントを約０．００１％～約３％（ｗ／ｗ）の量で含んでもよい。

【0120】

本発明による懸濁物ｐＭＤＩ処方物を調製するために、ロフルミラストＮ酸化物を当該分野で公知の方法によって微粉末化して、活性物質を、５μｍ以下およびより好ましくは３μｍ以下などのｄ_５０またはｄ_９０など、吸入のために適切な典型的な粒子サイズを有する粒子の形態で調製する。

【0121】

別の局面によれば、本発明は、本発明の薬学的処方物を充填されたキャニスター、および活性成分の毎日の治療上有効な用量を送達するための定量バルブを含んでいるｐＭＤＩを提供する。

【0122】

本発明のｐＭＤＩ処方物をｐＭＤＩに充填する。ｐＭＤＩは、定量バルブを取り付けられたキャニスターを含む。定量バルブの作動によって、ごく一部の噴霧生成物を被験体に放出することが可能になる。

【0123】

一実施形態では、この処方物は、約２５μｌ～約１００μｌの容積を送達できる定量バルブによって作動される。

【0124】

有利には、処方物を充填されたＭＤＩ装置は、用量カウンターを装備されてもよい。

【0125】

従来のバルク製造法および公知の機械を、充填されたキャニスターの市販の生成物についての大規模バッチの調製のために使用してもよい。

【0126】

例えば、本発明によるｐＭＤＩ懸濁物処方物は、冷却された噴霧剤または必要に応じて噴霧剤および必要に応じてさらに賦形剤の事前混合されたブレンドへ活性成分を添加すること、次いで適切なミキサーを用いて得られた懸濁物を分散することによって調製され得る。ホモジナイゼーション後、懸濁物をＭＤＩキャニスターに充填してもよく、このキャニスターはキャニスターに定量バルブを圧接することによって閉じられる。

【0127】

あるいは、活性成分および必要に応じてさらに賦形剤を、容器に添加してもよい。次いで液化された噴霧剤を加圧下で容器に導入し、活性成分を、適切なミキサーおよびホモジナイザーを用いて分散してホモジナイズする。ホモジナイゼーション後、バルク処方物を、バルブ・ツー・バルブの移行法を用いることによって個々のＭＤＩキャニスターに移してもよい。

【0128】

あるいは、共溶媒は、存在する場合、室圧で容器に導入される。活性成分および任意のさらなる賦形剤は、適切なホモジナイザーを用いて添加され、ホモジナイズされる。エタノール懸濁物は、撹拌下で保持される。次いで、エタノールのバルクを開放キャニスター中に投与する。バルブを缶の上に置いて圧接する。最終的に、キャニスターは、バルブを通じて最終溶液処方物を加圧充填される。

【0129】

本発明によるｐＭＤＩ処方物は、用いられる定量バルブの容積次第で、１ｍｌあたり約０．１ｍｇ～約５０ｍｇのロフルミラストＮ酸化物、好ましくは１ｍｌあたり約０．５ｍｇ～約２５ｍｇのロフルミラストＮ酸化物を含んでもよい。

【0130】

微粉末化されたロフルミラストＮ酸化物および噴霧剤の粒子を含んでいる懸濁物の形態のｐＭＤＩ処方物は、活性成分を、吸入器からの吸入による投与の場合、ロフルミラストＮ酸化物の毎日の治療上有効な用量（本明細書において以降では一日用量）が約５μｇ～約２０００μｇ、好ましくは約２０μｇ～約１５００μｇ、さらにより好ましくは約５０μｇ～約１０００μｇ、それよりさらに好ましくは約６０μｇ～約８００μｇ、なおさらに好ましくは約２００μｇ～約６００μｇであるような量で含む。

【0131】

好ましい実施形態によれば、単回用量は約１００μｇ～約３００μｇである。別の好ましい実施形態によれば、単回用量は約２００μｇ～約８００μｇ、さらに好ましくは約３００μｇ～約６００μｇである。

【0132】

さらなる実施形態では、単回用量は約１００μｇ、約２００μｇ、約４００μｇまたは約６００μｇであってもよい。

【0133】

単回用量は、患者の疾患の種類および重篤度ならびに条件（体重、性別、年齢）に依存して、１日に１回以上、好ましくは１日に１回投与される。

【0134】

１日用量は、薬学的組成物が含まれる吸入器の１回または２回またはそれを超える作動（ショット）で送達されてもよい。例えば、４００μｇの１日用量は４００μｇの１ショットで投与されてもよいし、または２００μｇ用量の２ショットとして投与されてもよい。

【0135】

別の態様では、ロフルミラストＮ酸化物を、溶解するかまたは懸濁して、単回用量または複数回用量のバイアル処方物のいずれかとして利用可能な、噴霧型の水溶液または懸濁液（ここで噴霧処方物と呼ばれる）を得てもよい。

【0136】

噴霧処方物は、適切な緩衝液および／または等張性剤を用いてｐＨおよび／または等張性を調節されてもよく、必要に応じて、またこれは、安定化剤および／または保存剤を含んでもよい。

【0137】

また本発明は、ネブライザーにより活性成分の一日治療用量を送達するための本明細書に記載のような噴霧処方物を充填された単回用量または複数回用量のバイアルを提供する。

【0138】

本発明の噴霧による投与のためのすぐ使用できる調製物の形態での液体の、噴霧剤なしの薬学的処方物は、ロフルミラストＮ酸化物を、１日用量が約３５μｇ～約７０００μｇ、好ましくは約７０μｇ～約３５００μｇ、なおさらに好ましくは約１７５μｇ～約２８００μｇ、なおさらに好ましくは約２８０μｇ～約２１００μｇ、なおさらに好ましくは約３５０μｇ～約１７５０μｇであるような量を含む。

【0139】

好ましい実施形態によれば、単回用量は約３５０μｇ～約７００μｇに含まれてもよいが、別の好ましい実施形態によれば、単回用量は約７００μｇ～約１４００μｇに含まれてもよい。

【0140】

さらなる実施形態では、単回用量は約３５０μｇ、約７００μｇまたは１４００μｇであってもよい。

【0141】

処方物は好ましくは、すぐ使用できる処方物として用いられる。

【0142】

別の実施形態では、この噴霧処方物はまた、溶液中の再構成のための単位用量で凍結乾燥された形態であってもよい。この実施形態では、凍結乾燥された調製物の単回用量は、使用前に再構成されてもよい。

【0143】

また、これらの噴霧処方物は、複数回用量のバイアル、または好ましくは、単回投薬投与のための単回用量バイアルなどの適切な容器中に分配されてもよい。このような単回用量バイアルは事前滅菌されてもよく、または好ましくは、「吹き込み、充填および密閉」技術を用いて無菌的に充填されてもよい（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｂｒｅｖｅｔｔｉａｎｇｅｌａ．ｃｏｍを参照のこと）。この充填は好ましくは不活性雰囲気下で行われる。

【0144】

溶液処方物は濾過によって有利に滅菌され得る。

【0145】

単回用量バイアルは好ましくは２ｍｌの容積である。懸濁物処方のためには、滅菌プロセスは、公知の技術を通じて行われる。

【0146】

これらの処方物は、ジェットネブライザー、超音波ネブライザー、メッシュ振動（ｍｅｓｈ－ｖｉｂｒａｔｉｎｇ）ネブライザー、ソフトミスト（ｓｏｆｔ－ｍｉｓｔ）ネブライザー、例えば、Ｒｅｓｐｉｍａｔ（登録商標）などのような適切な噴霧装置を用いる投与を意図している。

【0147】

また本発明は、単回用量投与のためのバイアル中に充填される本明細書に記載のような噴霧処方物およびネブライザーを含んでいるキットにも関する。

【0148】

本発明の全てのｐＭＤＩおよび噴霧処方物はさらに、呼吸器障害の処置で用いられる治療剤などの他の治療剤、例えば、コルチコステロイド、例えば、トリアムシノロンアセトニド、プロピオン酸フルチカゾン、フロ酸フルチカゾン、フルニソリド、モメタゾンフロ酸塩、ロフレポニドおよびシクレソニド；抗コリン性剤または抗ムスカリン性剤、例えば、臭化イプラトロピウム、オキシトロピウム臭化物、臭化グリコピロニウムおよび臭化チオトロピウム；長時間作用性β_２アゴニスト、例えば、ビランテロール、インダカテロール、ミルベテロール、サルブタモール、レバルブテロール、テルブタリン、ＡＺＤ－３１９９、ＢＩ－１７４４－ＣＬ、ＬＡＳ－１００９７７、バンブテロール、イソプロテレノール、プロカテロール、クレンブテロール、レプロテロール、フェノテロールおよびＡＳＦ－１０２０、ならびにそれらの塩を含んでもよい。

【0149】

本発明はまた、医薬としての使用のための、前に記載の処方物のいずれか１つに関する。

【0150】

さらなる態様では、本発明は、喘息または慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）などの炎症性または閉塞性の気道疾患の予防および／または処置における使用のために、前に記載の処方物のいずれか１つを含む。

【0151】

さらなる態様では、本発明は、喘息または慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）などの炎症性または閉塞性の気道疾患の予防および／または処置における、前に記載の処方物のいずれか１つの使用を包含する。

【0152】

なおさらなる態様では、本発明は、前に記載の処方物の１つの有効量の吸入による投与を包含する、喘息または慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）などの炎症性または閉塞性の気道疾患を予防および／または処置する方法を包含する。

【0153】

本発明の全ての処方物の投与は、喘息または慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）などの呼吸性疾患の軽度、中度または重度の急性または慢性の症状の予防および／もしくは処置のため、または予防的処置のために適応され得る。慢性閉塞性細気管支炎および慢性気管支炎のような、炎症および粘液の存在の結果としての末梢気道の閉塞によって特徴付けられる他の呼吸器障害もまた、この種の処方物によって利益がある場合がある。

【0154】

本発明のさらなる実施形態は、呼吸器および炎症性の疾患または状態（特にここでこの気道および炎症性の疾患および状態が喘息、アレルギー性および非アレルギー性の鼻炎ならびにＣＯＰＤから選択される）の処置における使用のための本発明による薬学的組成物に関する。

【0155】

本明細書に記載の任意の方法または組成物のさらなる実施形態では、ロフルミラストＮ酸化物は、例えば、ＬＴＤ４－アンタゴニストを含むロイコトリエンレセプターアンタゴニスト、コルチコステロイド、Ｈ１レセプターアンタゴニスト、β２アドレナリン受容体アゴニスト、ＣＯＸ－２選択性インヒビター、スタチン、非ステロイド性抗炎症薬（「ＮＳＡＩＤ」）、Ｍ２および／またはＭ３アンタゴニスト、ベータミメティックス、追加のＰＤＥ４－インヒビター、ＥＧＦＲ－インヒビター、ＣＣＲ３－インヒビター、ｉＮＯＳ－インヒビター、ＳＹＫ－インヒビター、グルココルチコイド、δ２アゴニスト、ｐ３８キナーゼインヒビター、ＮＫ１レセプターアンタゴニストおよびそれらの任意の組み合わせから選択される第二の活性剤と組み合わされる。

【0156】

本発明における使用のための適切なβ２アゴニストとしては、限定するものではないが、アルフォルモテロール、バンブテロール、ビトルテロール、ブロキサテロール（ｂｒｏｘａｔｅｒｏｌ）、カルブテロール（ｃａｒｂｕｔｅｒｏｌ）、クレンブテロール、ドペキサミン、フェノテロール、フォルモテロール、ヘキソプレナリン、イブテロール、イソエタリン、イソプレナリン、レボサルブタモール、マブテロール、メルアドリン、メタプロテレノール、ノロミロール（ｎｏｌｏｍｉｒｏｌｅ）、オルシプレナリン、ピルブテロール、プロカテロール、レプロテロール、リトドリン、リモテロール、サルブタモール、サルメファモール、サルメテロール、シベナデット、ソテネロット、スルフォンテロール（ｓｕｌｆｏｎｔｅｒｏｌ）、テルブタリン、チアラミド、ツロブテロール、ＧＳＫ－５９７９０１、ＧＳＫ－１５９７９７、ＧＳＫ－６７８００７、ＧＳＫ－６４２４４４、ＧＳＫ－１５９８０２、ＨＯＫＵ－８１、（－）－２－［７（Ｓ）－［２（Ｒ）－ヒドロキシ－２－（４－ヒドロキシフェニル）エチルアミノ］－５，６，７，８－テトラヒドロ－２－ナフチルオキシ］－Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド塩酸塩一水和物、カルモテロール、ＱＡＢ－１４９および５－［２－（５，６－ジエチルインダン－２－イルアミノ）－１－ヒドロキシエチル］－８－ヒドロキシ－１Ｈ－キノリン－２－オン、４－ヒドロキシ－７－［２－｛［２－｛［３－（２－フェニルエトキシ）プロピル］スルホニル｝エチル］アミノ｝エチル］－２（３Ｈ）－ベンゾチアゾロン、１－（１－フルオロ－４－ヒドロキシフェニル）－２－［４－（１－ベンゾイミダゾリル）－２－メチル－２－ブチルアミノ］エタノール、１－［３－（４－メトキシベンジルアミノ）－４－ヒドロキシフェニル］－２－［４－（１－ベンゾイミダゾリル）－２－メチル－２－ブチルアミノ］エタノール、１－［２Ｈ－５－ヒドロキシ－３－オキソ－４Ｈ－１，４－ベンズオキサジン－８－イル］－２－［３－（４－Ｎ，Ｎ－ジメチルアミノフェニル）－２－メチル－２－プロピルアミノ］エタノール、１－［２Ｈ－５－ヒドロキシ－３－オキソ－４Ｈ－１，４－ベンズオキサジン－８－イル］－２－［３－（４－メトキシフェニル）－２－メチル－２－プロピルアミノ］エタノール、１－［２Ｈ－５－ヒドロキシ－３－オキソ－４Ｈ－１，４－ベンズオキサジン－８－イル］－２－［３－（４－ｎ－ブチルオキシフェニル）－２－メチル－２－プロピルアミノ］エタノール、１－［２Ｈ－５－ヒドロキシ－３－オキソ－４Ｈ－１，４－ベンズオキサジン－８－イル］－２－｛４－［３－（４－メトキシフェニル）－１，２，４－トリアゾル－３－イル］－２－メチル－２－ブチルアミノ｝エタノール、５－ヒドロキシ－８－（１－ヒドロキシ－２－イソプロピルアミノブチル）－２Ｈ－１，４－ベンズオキサジン－３－（４Ｈ）－オン、１－（４－アミノ－３－クロロ－５－トリフルオロメチルフェニル）－２－ｔｅｒｔ－ブチルアミノ）エタノール、１－（４－エトキシカルボニルアミノ－３－シアノ－５－フルオロフェニル）－２－（ｔｅｒｔ－ブチルアミノ）エタノール、およびそれらの組み合わせ（各々は、必要に応じて、それらのラセミ体、エナンチオマー、ジアステレオマー、または混合物の形態であり、また必要に応じて薬理学的に適合性の酸付加塩の形である）が挙げられる。

【0157】

本発明における使用のための適切なコルチコステロイドおよびグルココルチコイドとしては、限定するものではないが、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、デキサメサゾン、ナフロコート（ｎａｆｌｏｃｏｒｔ）、デフラザコート、ハロプレドン酢酸塩、ブデソニド、ベクロメタゾン二プロピオン酸塩、ヒドロコルチゾン、トリアムシノロンアセトニド、フルオシノロンアセトニド、フルオシノニド、クロコルトロンピバル酸塩、メチルプレドニゾロンアセポナート、パルミチン酸デキサメサゾン、チプレダン、ヒドロコルチゾンアセポナート、プレドニカルベート、二プロピオン酸アルクロメタゾン、ハロメタゾン、メチルプレドニゾロンスレプタネート（ｓｕｌｅｐｔａｎａｔｅ）、モメタゾンフロ酸塩、リメキソロン、ファルネシル酸プレドニゾロン、シクレソニド、プロピオン酸デプロドン、プロピオン酸フルチカゾン、プロピオン酸ハロベタゾール、エタボン酸ロテプレドノール、ベタメタゾン酪酸塩プロピオン酸塩、フルニソリド、プレドニゾン、デキサメサゾンリン酸ナトリウム塩、トリアムシノロン、ベタメタゾン１７－吉草酸塩、ベタメタゾン、ベタメタゾン二プロピオン酸塩、ヒドロコルチゾン酢酸塩、ヒドロコルチゾンナトリウムコハク酸塩、プレドニゾロンリン酸ナトリウム塩、ヒドロコルチゾンプロブテート（ｐｒｏｂｕｔａｔｅ）およびそれらの組み合わせが挙げられる。

【0158】

本発明における使用のための適切なＬＴＤ４アンタゴニストとしては、限定するものではないが、トメルカスト（ｔｏｍｅｌｕｋａｓｔ）、イブジラスト、ポビルカスト、プランルカスト水和物、ザフィルカスト、リトルカスト（ｒｉｔｏｌｕｋａｓｔ）、ベルルカスト（ｖｅｒｌｕｋａｓｔ）、スルカスト（ｓｕｌｕｋａｓｔ）、シナルカスト、イラルカストナトリウム、モンテルカストナトリウム、４－［４－［３－（４－アセチル－３－ヒドロキシ－２－プロピルフェノキシ）プロピルスルホニル］フェニル］－４－オキソ酪酸、［［５－［［３－（４－アセチル－３－ヒドロキシ－２－プロピルフェノキシ）プロピル］チオ］－１，３，４－チアジアゾル－２－イル］チオ］酢酸、９－［（４－アセチル－３－ヒドロキシ－２－ｎ－プロピルフェノキシ）メチル］－３－（１Ｈ－テトラゾール－５－イル）－４Ｈ－ピリド［１，２－ａ］ピリミジン－４－オン、５－［３－［２－（７－クロロキノリン－２－イル）ビニル］フェニル］－８－（Ｎ，Ｎ－ジメチルカルバモイル）－４，６－ジチアオクタン酸ナトリウム塩；３－［１－［３－［２－（７－クロロキノリン－２－イル）ビニル］フェニル］－１－［３－（ジメチルアミノ）－３－オキソプロピルスルファニル］メチルスルファニル］プロピオン酸ナトリウム塩、６－（２－シクロヘキシルエチル）－［１，３，４］チアジアゾロ［３，２－ａ］－１，２，３－トリアゾロ［４，５－ｄ］ピリミジン－９（１Ｈ）－オン、４－［６－アセチル－３－［３－（４－アセチル－３－ヒドロキシ－２－プロピルフェニルチオ）プロポキシ］－２－プロピルフェノキシ］酪酸、（Ｒ）－３－メトキシ－４－［１－メチル－５－［Ｎ－（２－メチル－４，４，４－トリフルオロブチル）カルバモイル］インドル－３－イルメチル］－Ｎ－（２－メチルフェニルスルホニル）ベンズアミド、（Ｒ）－３－［２－メトキシ－４－［Ｎ－（２－メチルフェニルスルホニル）カルバモイル］ベンジル］－１－メチル－Ｎ－（４，４，４－トリフルオロ－２－メチルブチル）インドール－５－カルボキサミド、（＋）－４（Ｓ）－（４－カルボキシフェニルチオ）－７－［４－（４－フェノキシブトキシ）フェニル］－５（Ｚ）－ヘプテン酸、国際出願番号ＰＣＴ／ＥＰ０３／１２５８１の化合物、およびそれらの組み合わせが挙げられる。

【0159】

本発明における使用のためのｅｇｆｒ－キナーゼの適切なインヒビターとしては、限定するものではないが、パリフェルミン、セツキシマブ、ゲフィチニブ、レピフェルミン、エルロチニブ塩酸塩、カネルチニブ（ｃａｎｅｒｔｉｎｉｂ）二塩酸塩、ラパチニブ、Ｎ－［４－（３－クロロ－４－フルオロフェニルアミノ）－３－シアノ－７－エトキシキノリン－６－イル］－４－（ジメチルアミノ）－２（Ｅ）－ブテンアミド、およびそれらの組み合わせが挙げられる。

【0160】

本発明における使用のための適切なｐ３８キナーゼインヒビターとしては、限定するものではないが、クロルメチアゾールエジシレート（ｅｄｉｓｙｌａｔｅ）、ドラマピモド（ｄｏｒａｍａｐｉｍｏｄ）、５－（２，６－ジクロロフェニル）－２－（２，４－ジフルオロフェニルスルファニル）－６Ｈ－ピリミド［３，４－ｂ］ピリダジン－６－オン、４－アセトアミド－Ｎ－（ｔｅｒｔ－ブチル）ベンズアミド、ＳＣＩＯ－４６９（Ｃｌｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｔｈｅｒ ２００４，７５（２）の抄訳に記載）、ＰＩＩ－７およびＶＸ－７０２（Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ ２００３，１０８（１７，補遺４）、抄訳 ８８２に記載）、およびそれらの組み合わせが挙げられる。

【0161】

本発明における使用のための適切なＮＫ１－受容体アンタゴニストとしては、限定するものではないが、ノルピタンチウムベシル酸塩、ダピタント、ラネピタント、ボフォピタント（ｖｏｆｏｐｉｔａｎｔ）塩酸塩、アプレピタント、エズロピタント、Ｎ－［３－（２－ペンチルフェニル）プロピオニル］－スレオニル－Ｎ－メチル－２，３－デヒドロチロシル－ロイシル－Ｄ－フェニルアラニル－アロ－スレオニル－アスパラギニル－セリンＣ－１．７－Ｏ－３．１ラクトン、１－メチルインドール－３－イルカルボニル－［４（Ｒ）－ヒドロキシ］－Ｌ－プロリル－［３－（２－ナフチル）］－Ｌ－アラニンＮ－ベンジル－Ｎ－メチルアミド、（＋）－（２Ｓ，３Ｓ）－３－［２－メトキシ－５－（トリフルオロメトキシ）ベンジルアミノ］－２－フェニルピペリジン、（２Ｒ，４Ｓ）－Ｎ－［１－［３，５－ビス（トリフルオロメチル）ベンゾイル］－２－（４－クロロベンジル）ピペリジン－４－イル］キノリン－４－カルボキサミド、３－［２（Ｒ）－［１（Ｒ）－［３，５－ビス（トリフルオロメチル）フェニル］エトキシ］－３（Ｓ）－（４－フルオロフェニル）モルホリン－４－イルメチル］－５－オキソ－４，５－ジヒドロ－１Ｈ－１，２，４－トリアゾール－１－ホスフィン酸ビス（Ｎ－メチル－Ｄ－グルカミン）塩；［３－［２（Ｒ）－［１（Ｒ）－［３，５－ビス（トリフルオロメチル）フェニル］エトキシ］－３（Ｓ）－（４－フルオロフェニル）－４－モルホリニルメチル］－２，５－ジヒドロ－５－オキソ－１Ｈ－１，２，４－トリアゾル－１－イル］ホスホン酸１－デオキシ－１－（メチルアミノ）－Ｄ－グルシトール（１：２）塩、１’－［２－［２（Ｒ）－（３，４－ジクロロフェニル）－４－（３，４，５－トリメトキシベンゾイル）モルホリン－２－イル］エチル］スピロ［ベンゾ［ｃ］チオフェン－１（３Ｈ）－４’－ピペリジン］２（Ｓ）－オキシド塩酸塩および化合物ＣＳ－００３（Ｅｕｒ Ｒｅｓｐｉｒ Ｊ ２００３，２２（補遺４５）：抄訳Ｐ２６６４に記載）およびそれらの組み合わせが挙げられる。

【0162】

本発明における使用のための適切なＮＳＡＩＤとしては、限定するものではないが、アセクロフェナク、アセメタシン、アセチルサリチル酸、アルクロフェナク、アルミノプロフェン、アンフェナク、アンピロキシカム、アムトルメチングアシル（Ａｍｔｏｌｍｅｔｉｎｇｕａｃｉｌ）、アニロラク（Ａｎｉｒｏｌａｃ）、アントラフェニン（ａｎｔｒａｆｅｎｉｎ）、アザプロパゾン、ベノリラート、ベルモプロフェン（Ｂｅｒｍｏｐｒｏｆｅｎ）、ビンダリト（ｂｉｎｄａｒｉｔ）、ブロムフェナク、ブクロキシン酸（ｂｕｃｌｏｘｉｓ ａｃｉｄ）、ブコローム、ブフェキサマク、ブマジゾン、ブチブフェン（ｂｕｔｉｂｕｆｅｎ）、ブチキシラト（Ｂｕｔｉｘｉｒａｔ）、カルバサラートカルシウム、カルプロフェン（ｃａｒｐｒｏｆｅｎ）、トリサルチル酸コリンマグネシウム、セレコキシブ、シンメタシン（Ｃｉｎｍｅｔａｃｉｎ）、シンノキシカム（Ｃｉｎｎｏｘｉｃａｍ）、クリダナク、クロブザリト（Ｃｌｏｂｕｚａｒｉｔ）デボキサメト（Ｄｅｂｏｘａｍｅｔ）、デクスイブプロフェン、デクスケトプロフェン、ジクロフェナク、ジフルニサル、ドロキシカム、エルテナク（Ｅｔｅｎａｃ）、エンフェナム酸（Ｅｆｅｎａｍｓａｅｕｒｅ） エテルサラト（Ｅｔｅｒｓａｌａｔ）、エトドラク、エトフェナメート、エトリコキシブ、フェクロブゾン（Ｆｅｃｌｏｂｕｚｏｎ）、フェルビナク、フェンブフェン、フェンクロフェナク、フェノプロフェン、フェンチアザク、フェプラジノール（Ｆｅｐｒａｄｉｎｏｌ） フェプラゾン（Ｆｅｐｒａｚｏｎ）、フロブフェン（Ｆｌｏｂｕｆｅｎ）、フロクタフェニン、フルフェナム酸（ｆｌｕｆｅｎａｍ ａｃｉｄ）、フルノキサプロフェン、フルルビプロフェン、フルルビプロフェンアキセチル、フロフェナク（Ｆｕｒｏｆｅｎａｃ）、フルプロフェン（Ｆｕｒｐｒｏｆｅｎ）、グルカメタシン（Ｇｌｕｃａｍｅｔａｃｉｎ）、イブフェナク、イブプロフェン、インドブフェン、インドメタシン、インドメタシンフラネシル（Ｉｎｄｏｍｅｔａｃｉｎ ｆａｒｎｅｓｉｌ）、インドプロフェン、イソキセパク、イソキシカム、ケトプロフェン、ケトロラク、ロベンザリット、ロナゾラク、ロルノキシカム、ロキソプロフェン、ルミラコキシブ、メクロフェナミック（ｍｅｃｌｏｆｅｎａｍｉｃ）、メクロフェン、メフェナム酸（ｍｅｆｅｎａｍ ａｃｉｄ）、メロキシカム、メサラジン、ミロプロフェン（Ｍｉｒｏ Ｐｒｏｆｅｎ）、モフェゾラク、ナブメトン、ナプロキセン、ニフルミク酸（ｎｉｆｌｕｍｉｃ ａｃｉｄ）、オルサラジン、オキサプロジン、オキシピナク、オキシペンブタゾン、パレコキシブ、フェニルブタゾン、ペルビプロフェン（Ｐｅｌｂｉｐｒｏｆｅｎ）、ピメプロフェン（Ｐｉｍｅｐｒｏｆｅｎ）、ピラゾラク（Ｐｉｒａｚｏｌａｃ）、ピロキシカム、ピルプロフェン、プラノプロフェン、プリフェロン（Ｐｒｉｆｅｌｏｎ）、プリノモド（Ｐｒｉｎｏｍｏｄ）、プログルメタシン、プロカゾン、プロチジン酸（Ｐｒｏｔｉｚｉｎｓａｅｕｒｅ）、ロフェコキシブ、ロマザリト（Ｒｏｍａｚａｒｉｔ）、サリチルアミド、サリチル酸、サルミステイン（Ｓａｌｍｉ Ｓｔｅｉｎ）、サルナセジン（Ｓａｌｎａｃｅｄｉｎ）、サルサラート、スリンダク、スドキシカム、スプロフェン、タルニフルマト（Ｔｌｎｉｆｌｕｍａｔ）、テニダップ、テノサル（Ｔｎｏｓａｌ）、テノキシカム、テポキサリン（ｔｅｐｏｘａｌｉｎ）、チアプロフェン酸（ｔｉａｐｒｏｆｅｎｉｃ ａｃｉｄ）、タラミド（Ｔａｒａｍｉｄ）、チルノプロフェンアルバメル（Ｔｉｌｎｏｐｒｏｆｅｎａｒｂａｍｅｌ）、チメガジン（ｔｉｍｅｇａｄｉｎ）、チノリジン、チオピナク（Ｔｉｏｐｉｎａｃ）、トルフェナム酸、トルメチン、ウフェナマート、バルデコキシブ（ｖａｌｄｅｃｏｘｉｂ）、キモプロフェン（Ｘｉｍｏｐｒｏｆｅｎ）、ザルトプロフェン、ゾリプロフェン（Ｚｏｌｉｐｒｏｆｅｎ）およびそれらの組み合わせが挙げられる。

【0163】

本明細書に記載される組み合わせは、ホスホジエステラーゼ４（ＰＤＥ４）の同時の、併用のまたは連続した阻害により寛解し易い任意の障害の処置に用いられ得る。従って、本発明は、これらの障害の処置の方法、およびこれらの障害の処置のための医薬の製造における本発明の併用の使用も包含する。

【0164】

このような障害の好ましい例は、呼吸性の疾患、例えば、喘息、急性もしくは慢性の気管支炎、肺気腫、または慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）であり、ここでは気管支拡張剤の使用が有益な効果を有すると期待される。

【0165】

ロフルミラストＮ酸化物の微粉末化
１つの好ましい実施形態では、吸入によって投与されるロフルミラストＮ酸化物は、微粉末化される。微粉末化は、機械的な衝撃によって（例えば、ハンマーミル、ピンミルまたはビーズミリングのようなミルの使用によって）または液体エネルギーを介した衝撃によって（例えば、ジェットミリングまたはスパイラルジェットミルもしくは流動床ジェットミルの使用によって）行われてもよい。微粉末化および微粉末化過程の追加の詳細は、Ｓｐｒｉｎｇ ２００５ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇ ａｎｄ Ｐａｃｋａｇｉｎｇ Ｓｏｕｒｃｅｒａｒｔｉｃｌｅ（Ｊ． Ｍ Ｌａｒｒａｎによる），Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ，「Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ｐｏｗｄｅｒ Ｍｉｃｒｏｎｉｚａｔｉｏｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｙ ｂｙ Ｈｏｋｏｓａｗａ Ｍｉｃｒｏｎ Ｐｏｗｄｅｒ Ｓｙｓｔｅｍ」； 微粉末化についてのＷｉｋｉｐｅｄｉａ項目；Ｇ．Ｇｉａｎｏｌａ，「Ｍｉｃｒｏｎｉｚａｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍｓ－Ｉｎｎｏｖａｔｉｖｅ Ｅｑｕｉｐｍｅｎｔ Ｄｅｓｉｇｎ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ」（Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇに提示）（Ｓｏｍｅｒｓｅｔ，ＮＪ，２０１２）およびＲ．Ｓｍｉｔｈ，「Ｍｉｃｒｏｎｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ａｃｔｉｖｅ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ ｔｏ Ｎａｎｏｍｅｔｅｒ Ｓｃａｌｅ」、（Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇに提示）（Ｓｏｍｅｒｓｅｔ，ＮＪ，２０１２）に示される。

【0166】

下に示されるのは、Ａｌｐｉｎｅ Ｓｐｉｒａｌ Ｊｅｔ Ｍｉｌｌ （ＨＯＳＯＫＡＷＡ）を用いるロフルミラストＮ酸化物の微粉末化のために用いられる例示的な方法である。この過程は以下の工程を包含した
●１５ｇｍのロフルミラストＮ酸化物を秤量した。
●圧縮空気供給用のメインノブを開放した。
●ベンチャー（ｖｅｎｔｕｒｅ）圧力を６．０バールに、リング圧力を０．５バールに調節した。
●ロフルミラストＮ酸化物を約２００ｍｇ／分の供給速度でホッパーを通じて手動的に添加した。
●微粉末化の完了後、メイン空気供給ノブをオフに回して、微粉末化されたロフルミラストＮ酸化物を収集した。
収率：約９．０ｇ（約６０％の収率）。Ｄ_９０の粒径分布（Ｐａｒｔｉｃｌｅ Ｓｉｚｅ Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ）（ＰＳＤ）：３．０２１μｍ； Ｄ_５０：１．５６４μｍおよびＤ_１０：０．７７７μｍ。

【0167】

実施例
本発明はここで、以下の非限定的な実施例によってさらに例示される。

【0168】

下の実験では、ロフルミラスト－Ｎ酸化物を低用量で吸入によって効率的に送達して、経口的に投与されるロフルミラストについて観察されるもの以上の生物学的効果を達成し得ることが示される。

【0169】

実施例１：ロフルミラストおよびロフルミラストＮ酸化物の肺ミクロソーム安定性
ラット、イヌおよびヒトの肺ミクロソームを用いて代謝安定性研究を行った。ラット、イヌおよびヒトの肺ミクロソームを用いる研究のためのプロトコール（Ｘｅｎｏｔｅｃｈ，ＵＳＡ由来）を下に示す。

【0170】

０．４ｍｇのタンパク質を、リン酸塩緩衝液（ｐＨ約７．４）中に含まれる２ｍＭのＮＡＤＰＨ（補因子）とともに１５分間３７０℃でプレインキュベートし、次いで１μΜのテスト品目を添加し、さらに６０分間三連でインキュベートした。その反応混合物を、内部標準を含有するメタノールを用いて終わらせて、さらに遠心分離して、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳによって上清中に残る試験品目を分析した。残留する親化合物のパーセントを、０分で終わらせた同様のサンプルと比較して算出した。表１は、肺の代謝安定性データを示す。

【表1】

【0171】

実施例２：薬物動態学的（ＰＫ）研究
気管内（ＩＴ）経路による肺動態
雄および雌のウイスターラットを秤量して、種々の時点で群に無作為化した。ロフルミラストＮ酸化物を、気管内投与のための適切なビヒクル中の懸濁物として調製した。気管内投薬のために、動物をケタミン（５０ｍｇ／ｋｇ；ｉ．ｐ．）で麻酔して、ロフルミラストＮ酸化物をラット用Ｉｎｔｒａｔｒａｃｈｅａｌ Ｍｉｃｒｏｓｐｒａｙｅｒ（登録商標）Ａｅｒｏｓｏｌｉｚｅｒを介して０．５ｍｌのガラスシリンジ（Ｍｏｄｅｌ ＩＡ－１Ｂ－Ｒ－ＧＬ５００）（Ｐｅｎｎ Ｃｅｎｔｕｒｙ，ＵＳ）を用いて投与した。０．５ｍｌ／ｋｇの容積レベルを、ラットの気道系に１．０ｍｇ／ｋｇの用量で単回用量のおよび複数回用量の研究のために投与した。動物を正常な規則的食餌条件下で維持して、ラットの咀嚼食餌はその研究全体にわたって自由に提供した。血液および肺のサンプル（全ての収集は各々の動物から各々１５０μｌ）をサンプリングスケジュールに従って収集した。血液サンプルを眼窩静脈叢から、抗凝固剤としてＥＤＴＡ二カリウムを含有する微量遠心管中に収集した。血液サンプルを直ちに１０００ｇの速度で４℃で１０分間遠心分離して、分離した血漿サンプルを－８０℃より下で凍結して分析まで保管した。全てのサンプル中のロフルミラストＮ酸化物の血漿および肺での濃度を、確立した方法のとおりＬＣ－ＭＳ／ＭＳ（Ｘ－Ｃａｌｉｂｕｒ２．０．７ソフトウェアを用いる）によって分析した。定量下限（ＬＯＱ）未満のサンプルを、生データ中で定量限界未満（ＢＬＱ）（ｂｅｌｏｗ ｌｅｖｅｌ ｏｆ ｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ）と呼び、結果を適宜作表した。薬物動態学的パラメーターＣ_ｍａｘ、ＡＵＣ_０－ｔ、ＡＵＣ_０－∞、Ｔ_ｍａｘ、ｔ_１／２、Ｋｅｌ、ＶＺおよびＣＬＺを、ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ（Ｐｈｏｅｎｉｘ６．１ソフトウェア）を用いて、上の濃度について推定して、結果を作表した。血漿の薬物動態パラメーターを、濃度データからｎｇ／ｍｌとして算出した。Ｃ_ｍａｘおよびＡＵＣ値は、それぞれｎｇ／ｍｌおよびｎｇ・ｈ／ｍｌとして報告した。肺の薬物動態学的パラメーターを、濃度データからｎｇ／ｇとして算出した。Ｃ_ｍａｘおよびＡＵＣ値は、それぞれｎｇ／ｇおよびｎｇ－ｈ／ｇを単位として報告した。肺対血漿の濃度比を、１に等しい血漿密度を仮定することによって算出した。ロフルミラストＮ酸化物の時間－平均血漿濃度プロットを、Ｇｒａｐｈ ｐａｄ Ｐｒｉｓｍ ５．０２ソフトウェアを用いて行った。表２は、単回および複数回用量の研究についての肺および血漿の動態を示す。

【0172】

【表2】

【0173】

実施例３：吸入研究
吸入研究のために、ロフルミラストＮ酸化物を懸濁物として投与する。ロフルミラストＮ酸化物（１００ｍｇ）を乳鉢に入れて、重量測定希釈における適切な溶媒の添加後に粉砕して微細な懸濁液を得る。

【0174】

吸入懸濁物投与のためには、動物をプレキシガラスチャンバに入れて、ロフルミラストＮ酸化物に（適切な濃度で）３０分間、エアロゾルの形態で、適切な流速で（Ｌ／分）Ｐｉｓｔｏｎ Ｎｅｂｕｌｉｚｅｒ（Ｉｎｆｉ－Ｎｅｂ，ＵＳＡ）を用いて、曝した。

【0175】

ドライパウダー吸入投与のために、動物をケタミン（５０ｍｇ／ｋｇ；ｉ．ｐ．（腹腔内））で麻酔し、次いでその動物に微粉末化されたロフルミラストＮ酸化物と適切な担体の混合物を粉末の形態で、気管内通気法（Ｐｅｎｎ Ｃｅｎｔｕｒｙガス注入パウダー送達デバイス（ＤＰ－４，ＵＳ）を用いる）を介して投与する。

【0176】

実施例３Ａ：インビトロの生物学的研究
ＭＨ－Ｓ（マウス肺胞マクロファージ）細胞におけるリポポリサッカライド（ＬＰＳ）誘発性ＴＮＦα：
ＭＨ－Ｓとは、ＬＰＳによる誘発の際に大量のＴＮＦαを分泌するマウスの肺胞マクロファージ細胞株である。細胞は１ウェルあたり１５０，０００個の細胞で播種される。種々の濃度のロフルミラストＮ酸化物をＬＰＳの添加の１５分前に添加する。ＬＰＳ（１μｇ／ｍｌ）を添加し、次いで４時間インキュベートする。上清をインキュベーション期間の終わりに収集して、ＴＮＦαを、ＥＬＩＳＡキットを用いて推定する。阻害パーセントおよびＩＣ_５０値を決定する。

【0177】

ＴＨＰ－１（ヒト単球）細胞におけるＬＰＳ誘発性ＴＮＦα：ＴＨＰ－１とは、内因性のｐＡＫＴレベルが上昇しており、ＬＰＳによる誘発の際に大量のＴＮＦαを分泌する単球性細胞株である。細胞は、１ウェルあたり１５０，０００個の細胞で播種される。種々の濃度のロフルミラストＮ酸化物を添加する。ＬＰＳ（１μｇ／ｍｌ）を添加し、次いで４時間インキュベートする。上清をインキュベーション期間の終わりに収集して、ＴＮＦαを、ＥＬＩＳＡキットを用いて推定する。阻害パーセントおよびＩＣ_５０値を決定する。

【0178】

ヒト全血におけるＣｏｎ Ａ＋ＰＭＡ誘発性ＩＦＮγ：新鮮に収集したヒトの全血（ＨＷＢ）を培地で希釈して、所望の濃度のインヒビターとともに１５分間インキュベートする。サイトカイン放出をコンカナバリン（Ｃｏｎｃａｎａｖａｌｉｎ）Ａ（２５μｇ／ｍｌ）＋酢酸ミリスチン酸ホルボール（５０ｎｇ／ｍｌ）の添加で誘発する。上清を２０時間後に収集して、ＩＦＮγを、ＥＬＩＳＡキットを用いて推定する。阻害パーセントおよびＩＣ_５０値を決定する。

【0179】

末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）におけるＣｏｎ Ａ＋ＰＭＡ誘発性ＩＦＮγ：全血由来のＰＢＭＣを、Ｈｉｓｔｏｐａｑｕｅを用いる密度勾配によって単離して、所望の濃度のインヒビターとともに１５分間インキュベートする。サイトカイン放出をコンカナバリンＡ（２５μｇ／ｍｌ）＋酢酸ミリスチン酸ホルボール（５０ｎｇ／ｍｌ）の添加で誘発する。上清を２０時間後に収集して、ＩＦＮγを、ＥＬＩＳＡキットを用いて推定する。阻害パーセントおよびＩＣ_５０値を決定する。

【0180】

実施例３Ｂ：インビボの生物学的研究
Ａ．雌のＳｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙラットモデルにおけるリポポリサッカライド（ＬＰＳ）誘発性の肺好中球増加
好中球（ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌａ）の過大な補充およびその後の活性化は、重篤な喘息、慢性閉塞性肺疾患、嚢胞性線維症、および急性呼吸窮迫症候群のような気道および肺におけるいくつかの炎症性の疾患の発達および経過について重要であると考えられる。好中球増加（ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌａ）がこれらの疾患に寄与する機序は、好中球エラスターゼのようなタンパク質分解性酵素および遊離の活性酸素の放出を含み得る。放出された場合、これらの化合物は、気管支収縮、気管支の過敏性、過剰分泌、上皮の損傷、および気道の組織再構築を生じ得る。

【0181】

ロフルミラストを、経口投与のための適切なビヒクル中の懸濁物として調製した。気管内投与のために、ロフルミラストまたはロフルミラストＮ酸化物は、ドライパウダー混合物として調製し、ドライパウダー吸入器（Ｉｎｓｕｆｆｌａｔｏｒ）（Ｐｅｎｎ－Ｃｅｎｔｕｒｙ，ＵＳＡ）を用いることによって投与した。動物をケタミンで麻酔して、ＬＰＳ溶液を、ロフルミラスト（経口的に０．３、１、３、および１０ｍｇ／ｋｇの用量で）の１時間後、またはロフルミラスト（１０、３０および１００μｇ／ｋｇ ｉ．ｔ．（気管内）の用量で）の３０分後、またはロフルミラストＮ酸化物投与（１０、３０および１００μｇ／ｋｇ，ｉ．ｔの用量で）の３０分後に気管内に投与した。ＬＰＳ滴下６時間後、動物を麻酔下で放血し、次いで気管にカニューレ挿入して、肺をヘパリン化ＰＢＳ（１単位／ｍｌ）の５ｍｌのアリコートを用い気管カニューレを通じて４回洗浄した（総容積２０ｍｌ）。ＢＡＬ（気管支肺胞洗浄）液を、総細胞および白血球数についてアッセイするまで２～８℃で保管した。気管支肺胞液を遠心分離して（５００×ｇで１０分間）、次いで得られた細胞ペレットを０．５ｍｌのヘパリン化生理食塩水中に再懸濁した。白血球の総数を、血球計数器を用いてＢＡＬ液中で決定して、１×１０^６細胞／ｍｌに調節した。種々の細胞数を手技的に算出した。１００マイクロリットルの細胞懸濁物を、サイトスピン３を用いて遠心分離して細胞スメアを調製した。この細胞スメアを、血液染色溶液を用いて鑑別のために染色し、スライドを顕微鏡で観察して、それらの形態学的特徴に従って好酸球を特定した。細胞スメアの３００の白血球の中で各々の細胞種の数を決定してパーセンテージとして表した。各々のＢＡＬ液中の好中球の総数を算出した。

【0182】

ロフルミラストおよびロフルミラストＮ酸化物を気管内に（ｉ．ｔ）、１００、３０、および１０ｇ／ｋｇ用量で、それぞれ１：２００；１：５００；および１：１０００の薬物：ラクトース混合物として投与した。

【0183】

ｉ．ロフルミラストの有効用量
ロフルミラストは経口投与の際に、０．３、１、３および１０ｍｇ／ｋｇで、コントロール群と比較して好中球浸潤において用量依存性の阻害を示した。結果を図１に示す。阻害パーセントは、それぞれ、７．８９％、４３．４６％、６８．０２％、および９２．２１％であり、５０％阻害（ＥＤ_５０）用量は１．８ｍｇ／ｋｇであった。

【0184】

ロフルミラストは気管内投与の際に、１０、３０および１００μｇ／ｋｇで、コントロール群と比較して好中球浸潤において用量依存性の阻害を示した。結果を図２に示す。阻害パーセントは、それぞれ、３１．７６％、６０．４７％、および６４．４０％であり、５０％阻害（ＥＤ_５０）用量は２６μｇ／ｋｇであった。

【0185】

ｉｉ．ロフルミラストＮ酸化物の有効量。
ロフルミラストＮ酸化物は気管内投与の際に、１０、３０および１００μｇ／ｋｇで、コントロール群と比較して好中球浸潤において用量依存性の阻害を示した。結果を図３に示す。阻害パーセントは、それぞれ、３７．５２％、４９．６６％、および６９．４８％であって、５０％阻害（ＥＤ_５０）用量は２７μｇ／ｋｇであった。

【0186】

Ｂ．雌のＢａｌｂ／ｃマウスにおける急性の煙草の煙誘発性の細胞浸潤
動物を実験の開始前に７日間順化させた。その動物を、その体重に基づいて種々の群に無作為に分布させた。ロフルミラストの経口投与のため、およびロフルミラストＮ酸化物の鼻腔内投与のため、ロフルミラストまたはロフルミラストＮ酸化物を適切なビヒクル中の懸濁物として調製した。１日目、マウスにロフルミラストＮ酸化物またはロフルミラストを投与し、１時間後、その動物を全身暴露ボックスに入れた。１日および２日目に、そのマウスを６本の煙草の主流煙に、そして３日目および４日目には８本の煙草の主流煙に曝した。各々の煙草の煙に対する暴露を１０分間続けた（タバコは最初の２分で完全に燃え尽き、続いて動物のベンチレーターで気流に、次いで２０分間新鮮な部屋の空気に曝された）。二本目の煙草の後ごとに、新鮮な部屋の空気への暴露を伴う追加の２０分間の中断を行った。コントロールの動物を室温チャンバに曝した。１日目～４日目に、動物にロフルミラストＮ酸化物またはロフルミラストを投与した。５日目に、最後の煙草の煙（ｃｉｇａｒｅｔｔｅ ｓｍｏｋｅ）（ＣＳ）暴露の２４時間後、その動物を麻酔下で放血して、気管にカニューレを挿入し、肺をヘパリン化ＰＢＳ（１単位／ｍｌ）の０．５ｍｌのアリコートを用い気管カニューレを通じて４回洗浄した（総容積２０ｍｌ）。収集した気管支肺胞液（ＢＡＬ）を遠心分離して、総細胞および白血球数のためにアッセイするまで２～８℃で保管した。ＢＡＬ液を遠心分離（５００×ｇで１０分間）して、得られた細胞ペレットを０．５ｍｌのヘパリン化生理食塩水中に再懸濁した。白血球の総数をＢＡＬ液中で決定して、１×１０^６細胞／ｍｌに調節した。種々の細胞数を手技的に、ディフクイック染色によって算出した。４０マイクロリットルの細胞懸濁物を、サイトスピン３を用いて遠心分離して細胞スメアを調製した。この細胞スメアを、血液染色溶液を用いて鑑別のために染色し、顕微鏡で観察して、それらの形態学的特徴に従って細胞種を特定した。細胞スメアの３００の白血球のうち各々の細胞種の数を決定してパーセンテージとして表し、各々のＢＡＬ液中の好中球およびマクロファージの数を算出した。

【0187】

ロフルミラストおよびロフルミラストＮ酸化物をポリソルベート８０（１％ｖ／ｖ）およびメチルセルロース（ＭＣ）（０．５％ｗ／ｖ）中の懸濁物として、それぞれ経口投与および鼻腔内投与のために用いた。

【0188】

ｉ．ロフルミラストの有効用量
ロフルミラストは経口投与の際に、１、３および１０ｍｇ／ｋｇで、コントロール群と比較してマクロファージ浸潤において用量依存性の阻害を示した。阻害パーセントは、それぞれ、２２．２％、５１．００％、および６９．１１％であり、５０％阻害（ＥＤ_５０）用量は３．５ｍｇ／ｋｇであった。好中球浸潤における用量依存性の阻害を観察し、阻害パーセントはそれぞれ、７０．８５％、７３．６９％、および８３．０１％であり、５０％阻害（ＥＤ_５０）用量は１．７５ｍｇ／ｋｇであった。マクロファージおよび好中球についての結果をそれぞれ、図４Ａおよび図４Ｂに示す。

【0189】

ｉｉ．ロフルミラストＮ酸化物の有効量。
ロフルミラストＮ酸化物は鼻腔内投与の際に、０．００３、０．０３、０．３および３ｍｇ／ｋｇで、コントロール群と比較してマクロファージ浸潤において用量依存性の阻害を示した。阻害パーセントは、それぞれ、５０．６８％、５５．１０％、６２．７９％および６３．３５％であって、５０％阻害（ＥＤ_５０）用量は０．０４９ｍｇ／ｋｇであった。好中球浸潤における用量依存性の阻害を観察し、阻害パーセントはそれぞれ、２６．６０％、５９．２８％、６６．４９％および７２．０８％であった。５０％阻害（ＥＤ_５０）用量は０．０３８ｍｇ／ｋｇであった。マクロファージおよび好中球についての結果をそれぞれ、図５Ａおよび図５Ｂに示す。

【0190】

Ｃ．雄のモルモットにおけるオボアルブミン誘発性の肺好酸球増加症
気道炎症および過敏反応性（ＡＨＲ）は、気管支喘息の顕著な特徴であって、識別性の特徴である。事前感作されたマウスの同じアレルゲンによる刺激は、優先的な好酸球浸潤を伴う気道炎症を誘発し、結果としてＡＨＲを誘発する。気道音の神経制御の変化および気道上皮剥離に関連する肺の好酸球増加および気道の再構築は、喘息におけるＡＨＲに寄与し得る。

【0191】

隔離期間の後、０．３ｍＬの血液サンプルを眼窩静脈から、眼窩後神経叢法によって、各々の個々の動物から収集して、細胞分析器（ＡＤＶＩＡ ２１２０、Ｓｉｅｍｅｎｓ）で分析する。それらの総細胞カウントに基づいて、モルモットを無作為化して、種々の群に分ける。識別のために消せないマーキングペンで耳介にマークする。０日目に、体重を記録して、次いでその動物を５０μｇのオボアルブミンおよび１０ｍｇのミョウバン溶液（１ｍＬ）を用いて腹腔内で感作する。７日目および１４日目に、上記の感作プロトコールを繰り返す。ロフルミラストＮ酸化物を、適切なビヒクル中の懸濁物としてまたはドライパウダー混合物として調製する。ロフルミラストＮ酸化物またはビヒクルを、エアロゾル懸濁物によってまたはドライパウダー吹き込みによって投与する。１８日目に、動物をロフルミラストＮ酸化物で処置する。１９日目および２０日目に、動物をロフルミラストＮ酸化物で処置して、１分あたり０．２ｍｌの流速の超音波ネブライザーを用いて０．５％（ｗ／ｖ）のオボアルブミンに１０分間曝す。２１日目に、絶食させた動物をロフルミラストＮ酸化物で処置し、投与１５分後、動物に１％（ｗ／ｖ）のオボアルブミン溶液を１０分間噴霧する。コントロール群の動物を０．５％（ｗ／ｖ）のメチルセルロース（ビヒクル）で処置する。ニセのコントロール群は、０、７および１４日に１０ｍｇのミョウバンで感作し、１９、２０および２１日に同じ噴霧速度を用いて生理食塩水溶液に曝す。ＯＶＡチャレンジの２４時間後、血液サンプルおよびＢＡＬ液を収集する。サンプルを、血液分析器（ＡＤ ＶＩＡ ２１２０、Ｓｉｅｍｅｎｓ）を用いて総細胞数について分析し、白血球数の計測を手技的に行う。

【0192】

実施例４：安全性および毒性
経口投与によるロフルミラストに比較して吸入によるロフルミラストＮ酸化物の安全性を決定するために、７日および１４日の反復用量の安全性研究を、下の表５に示されるプロトコールに従って行う。

【0193】

【表5】

【0194】

結果を表６に示す。

【表6】

【0195】

ロフルミラストＮ酸化物の気管内投与は、有意な毒性を示したロフルミラストの経口投与に比較して安全であることが見出された。

【0196】

ロフルミラストＮ酸化物（１０００μｇ／ｋｇ）の気管内投与は、安全であることが見出され、２７μｇ／ｋｇというそのＥＤ_５０に基づいて３７倍を超える有意な治療濃度域を呈する。対照的に、ロフルミラスト（１０ｍｇ／ｋｇ）の経口投与では、１．８ｍｇ／ｋｇというそのＥＤ_５０を考えれば、治療指数はより低かった（すなわち、これは５．５倍でさえ毒性である）。

【0197】

ロフルミラストＮ酸化物に関連する代謝安定性、薬物動態、インビボ有効性および安全性研究についての前述のデータによって、吸入によるロフルミラストＮ酸化物の投与が、ロフルミラストの経口投与に比較した場合、安全性の有意な改善を伴う所望の治療効果を有することが示される。

【0198】

本明細書において、具体的実施形態を参照しながら本発明を説明してきたが、これらの実施形態は、単に本発明の原理および応用の例示であることが理解されるべきである。従って、上記の趣旨および本発明の範囲から逸脱することなく、例示的実施形態に多くの改変を行い得ること、および他の構成が考案され得ることが理解されるべきである。添付の特許請求の範囲が本発明の範囲を定義していること、ならびにこれらの請求項およびそれらの等価物の範囲内の方法および構造はそれらによってカバーされることが意図される。

【0199】

本出願において引用される全ての刊行物、特許および特許出願は、各々の個々の刊行物、特許または特許出願が、参照により本明細書に援用されることが具体的および個々に示されるのと同じ程度まで、参照により本明細書に援用される。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4A】

【図4B】

【図5A】

【図5B】