(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】特許公報(B2)
(11)【特許番号】
(24)【登録日】2022-03-02
(45)【発行日】2022-03-10
(54)【発明の名称】心不全の治療選択におけるバイオマーカー
(51)【国際特許分類】
G01N 33/68 20060101AFI20220303BHJP
G01N 33/53 20060101ALI20220303BHJP
A61P 9/04 20060101ALI20220303BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20220303BHJP
A61K 45/00 20060101ALI20220303BHJP
【ＦＩ】
G01N33/68
G01N33/53 D
A61P9/04
A61P43/00 111
A61K45/00
【請求項の数】
15
(21)【出願番号】P 2020142295
(22)【出願日】2020-08-26
(62)【分割の表示】P 2018092916の分割
【原出願日】2013-12-04
(65)【公開番号】P2021001894
(43)【公開日】2021-01-07
【審査請求日】2020-09-25
(31)【優先権主張番号】12195491.1
(32)【優先日】2012-12-04
(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP
(73)【特許権者】
【識別番号】591003013
【氏名又は名称】エフ．ホフマン－ラ ロシュ アーゲー
【氏名又は名称原語表記】Ｆ． ＨＯＦＦＭＡＮＮ－ＬＡ ＲＯＣＨＥ ＡＫＴＩＥＮＧＥＳＥＬＬＳＣＨＡＦＴ
(74)【代理人】
【識別番号】100118902
【弁理士】
【氏名又は名称】山本 修
(74)【代理人】
【識別番号】100106208
【弁理士】
【氏名又は名称】宮前 徹
(74)【代理人】
【識別番号】100120112
【氏名又は名称】中西 基晴
(72)【発明者】
【氏名】ツァウグ，クリスティアン
(72)【発明者】
【氏名】ブロック，ディルク
(72)【発明者】
【氏名】ヴィーンヒューズ－テレン，ウルスラ－ヘンリケ
(72)【発明者】
【氏名】ブルンナー，ハンス－ペーター
(72)【発明者】
【氏名】クラウゼ，フリーデマン
(72)【発明者】
【氏名】モーデル，ファービアーン
(72)【発明者】
【氏名】ロルニー，ヴィンツェント
【審査官】大瀧 真理
(56)【参考文献】
【文献】特表２０１１－５０１１１２（ＪＰ，Ａ）
【文献】特開２００７－１０６７６７（ＪＰ，Ａ）
【文献】米国特許出願公開第２０１０／０２６７０６２（ＵＳ，Ａ１）
【文献】岡本洋 他，4.心筋繊維化関連バイオマーカーとしてのオステオポンチンの意義，循環器科，2009年，Vol.65, No.2，pp.213-214
【文献】Hirofumi Soejima et al.，Circulation Journal，2007年，Vol.71，pp.1879-1884
(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)
Ｇ０１Ｎ ３３／４８ － ３３／９８
Ａ６１Ｐ ９／０４
Ａ６１Ｐ ４３／００
Ａ６１Ｋ ４５／００
(57)【特許請求の範囲】
【請求項1】
ベータアドレナリン受容体遮断薬（ベータ遮断薬）の投与に適格な被検体を同定する指標を提供する方法であって、以下を含む、前記方法：ａ）心不全に罹患している被検体からの試料において、少なくともバイオマーカーであるオステオポンチンまたはプロコラーゲン１型Ｎ末端プロペプチド（Ｐ１ＮＰ）の量を決定すること、ここで前記試料が血液、血清または血漿である、および、
ｂ）ステップａ）で決定した量を基準量と比較し、それによりベータ遮断薬の投与に適格な被検体を同定する指標が提供されること。
【請求項2】
被検体がヒトである、請求項１に記載の方法。
【請求項3】
投与が、ベータ遮断薬の投与開始、またはより高い投与量でのベータ遮断薬の投与である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項4】
基準量と比較して減少した前記バイオマーカーの量が、ベータ遮断薬の投与に適格な被検体の指標であり、および／または基準量と比較して増加した前記バイオマーカーの量が、ベータ遮断薬の投与に適格ではない被検体の指標である、請求項１～３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項5】
被検体が、ＡＣＣ／ＡＨＡ分類に従った心不全ステージＢ、ＣまたはＤに罹患している、請求項１～４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項6】
ベータ遮断薬の投与に適格な被検体を同定するための、心不全に罹患している被検体の試料における、バイオマーカーとしてのオステオポンチンまたはＰ１ＮＰの使用であって、前記試料が血液、血清または血漿である、前記使用。
【請求項7】
ベータ遮断薬の投与に適格な被検体を同定するための、心不全に罹患している被検体の試料における、オステオポンチンまたはＰ１ＮＰに特異的に結合する少なくとも１つの検出剤の使用であって、前記試料が血液、血清または血漿である、前記使用。
【請求項8】
請求項１～５のいずれか１項に記載の方法を実施するために適合させたデバイスであって、ａ）マーカーであるオステオポンチンまたはＰ１ＮＰに特異的に結合する検出剤を含む分析ユニットであって、心不全に罹患している被検体の試料において前記マーカーの量を決定するために適合させた前記ユニット、および、
ｂ）決定した量を基準量と比較し、それによりベータ遮断薬の投与に適格な被検体を同定するための分析ユニットであって、基準量を備えたデータベースおよび比較を実施するためのコンピューター実装されたアルゴリズムを含む前記ユニット、
を含む、前記デバイス。
【請求項9】
検出剤が、抗体またはその抗原結合フラグメントである、請求項７に記載の使用。
【請求項10】
試料が血液、血清もしくは血漿であり、および／または、被検体がヒトであり、および／または、被検体がＡＣＣ／ＡＨＡ分類に従った心不全ステージＢ、ＣまたはＤに罹患しているものであり、および／または、投与がベータ遮断薬の投与開始、もしくはより高い投与量でのベータ遮断薬の投与である、請求項６、７および９のいずれか１項に記載の使用。
【請求項11】
ベータ遮断薬が、セブトロール、アルプレノロール、アテノロール、ベタキソロール、ビソプロロール、ブプラノロール、カラゾロール、カルテオロール、カルベジロール、セリプロロール、メチプラノロール、メトプロロール、ナドロール、ネビボロール、オキシプレノロール、ペンブトロール、ピンドロール、プロプラノロール、ソタロール、タニロロール、およびチモロールからなる群から選択される、請求項６、７、９および１０のいずれか１項に記載の使用。
【請求項12】
ベータ遮断薬が、セブトロール、アルプレノロール、アテノロール、ベタキソロール、ビソプロロール、ブプラノロール、カラゾロール、カルテオロール、カルベジロール、セリプロロール、メチプラノロール、メトプロロール、ナドロール、ネビボロール、オキシプレノロール、ペンブトロール、ピンドロール、プロプラノロール、ソタロール、タニロロール、およびチモロールからなる群から選択される、請求項１～５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項13】
検出剤が、抗体またはその抗原結合フラグメントである、請求項８に記載のデバイス。
【請求項14】
試料が血液、血清もしくは血漿であり、および／または、被検体がヒトであり、および／または、被検体がＡＣＣ／ＡＨＡ分類に従った心不全ステージＢ、ＣまたはＤに罹患しているものであり、および／または、投与がベータ遮断薬の投与開始、もしくはより高い投与量でのベータ遮断薬の投与である、請求項８または１３に記載のデバイス。
【請求項15】
ベータ遮断薬が、セブトロール、アルプレノロール、アテノロール、ベタキソロール、ビソプロロール、ブプラノロール、カラゾロール、カルテオロール、カルベジロール、セリプロロール、メチプラノロール、メトプロロール、ナドロール、ネビボロール、オキシプレノロール、ペンブトロール、ピンドロール、プロプラノロール、ソタロール、タニロロール、およびチモロールからなる群から選択される、請求項８、１３および１４のいずれか１項に記載のデバイス。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、ベータアドレナリン受容体遮断薬（ベータ遮断薬）、アルドステロンアンタゴニスト、利尿薬、およびアンギオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害薬またはアンギオテンシン受容体遮断薬（ＡＲＢ）（後の２つはレニン－アンギオテンシン系の阻害薬と総称される）からなる群から選択される少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体を同定するための方法に関する。本方法は、心不全に罹患している被検体からの試料において、ＧＤＦ－１５（増殖分化因子１５）、エンドスタチン(endostatin)、ミメカン(mimecan)
、ＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、心臓トロポニン、ＢＮＰタイプのペプチド、尿酸、ガレクチン－３(Galectin-3)（Ｇａｌ３）、可溶性ＳＴ２（ｓＳＴ２）、ＰｌＧＦ、ｓＦｌｔ－１、Ｐ１ＮＰ、シスタチンＣ(Cystatin C)、プレアルブミン(Prealbumin)、およびトランスフェリン(Transferrin)からなる群から選択される少なくとも１種類のバイオマーカーの量を決定することに基づく。さらに、本方法は、こうして決定した量を基準量と比較する工程を含む。さらに本発明は、本発明の方法を実施するために適合させたキットおよびデバイスを想定する。本発明はまた、本明細書に開示する少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体を同定するためのシステム、および本明細書に開示する方法を実施する際に使用する試薬およびキットに関する。
、ＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、心臓トロポニン、ＢＮＰタイプのペプチド、尿酸、ガレクチン－３(Galectin-3)（Ｇａｌ３）、可溶性ＳＴ２（ｓＳＴ２）、ＰｌＧＦ、ｓＦｌｔ－１、Ｐ１ＮＰ、シスタチンＣ(Cystatin C)、プレアルブミン(Prealbumin)、およびトランスフェリン(Transferrin)からなる群から選択される少なくとも１種類のバイオマーカーの量を決定することに基づく。さらに、本方法は、こうして決定した量を基準量と比較する工程を含む。さらに本発明は、本発明の方法を実施するために適合させたキットおよびデバイスを想定する。本発明はまた、本明細書に開示する少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体を同定するためのシステム、および本明細書に開示する方法を実施する際に使用する試薬およびキットに関する。
【背景技術】
【0002】
近代医療の目的は、個人化または個別化された治療計画を提供することである。それらは、患者の個々のニーズまたはリスクを考慮に入れた治療計画である。個人化または個別化された治療計画は、有望な治療計画を決断することが要求される際の方策すら考慮されるべきである。
【0003】
心不全（ＨＦ）は主要な増大しつつある重大な健康問題である。米国で約５００万人の患者がＨＦを伴なっており、米国で毎年５００，０００人を超える患者がＨＦを伴なうと初めて診断され、毎年２５０，０００人を超える患者が主因としてのＨＦで死亡していると推定される。心不全（ＨＦ）は先進国における罹病および死亡の主因のひとつである。集団の高齢化および心血管疾患患者の長命化のため、ＨＦの発病率および有病率は増大している。
【0004】
心不全は、心室が血液を充満または排出する能力および血液／酸素の供給に対する身体の代謝要求を確保する能力を損なう何らかの構造性または機能性の心臓障害から生じる可能性のある、複雑な臨床症候群である。そのような場合、身体は要求される供給を維持するために、心筋の構造変化（たとえば肥大；最終的には線維症、アポトーシス、壊死に至る）および神経液性刺激（交感神経系およびレニン－アンギオテンシン－アルドステロン系の活性化）によって供給不足を代償しようとする。ＨＦは種々の重症度に分類される。
【0005】
ひとつの分類法は、いわゆるＮＹＨＡ(New York Heart Association)分類である。心不全患者は、ＮＹＨＡクラスＩ、ＩＩ、ＩＩＩおよびＩＶ、またはAmerican College of Cardiology and the American Heart Association（ＡＣＣ／ＡＨＡ）ステージＡ、Ｂ、ＣおよびＤに分類される。患者はその健康を完全には回復することができないと予想され、治療的処置の必要がある。ＮＹＨＡクラスＩの患者は、心血管疾患の明らかな症状をもたないが、既に機能障害の客観的証拠を備えている。ＮＹＨＡクラスＩＩの患者は、身体活動がわずかに制限される。ＮＹＨＡクラスＩＩＩの患者は、身体活動の顕著な制限を示す。ＮＹＨＡクラスＩＶの患者は、不快感なしにいかなる身体活動も行なうことができない。彼らは静止時に心不全の症状を示す。
【0006】
この機能分類法は、American College of Cardiology and the American Heart Association (参照：J. Am. Coll. Cardiol. 2001; 38; 2101-2113, 2005年に更新, 参照：J. Am. Coll. Cardiol. 2005; 46; el-e82)による、より最近の分類法によって補足される。４つのステージＡ、Ｂ、ＣおよびＤが規定される。心不全ステージＢ、ＣまたはＤを伴なう患者は、心臓に構造および機能の変化が既に生じている。患者はその健康を完全には回復することができないと予想され、治療的処置の必要がある。
【0007】
急性および慢性心不全にについての投薬および治療ガイドラインはESC Guidelines for
the diagnosis and treatment of acute and chronic heart failureに記載されている(European Heart Journal (2008) 29, 2388-2442)。得られる治療選択肢はＨＦを伴なう患者の罹病率および死亡率を低下させることができるが、これらの治療を受けるのに適格な患者の相対数は依然として不満足なほど低い(O'Donoghue M. & Braunwald E., Nat. Rev. Cardiol. 2010; 7: 13-20)。さらに、治療に適格な患者において、治療は主に原疾患ならびにＨＦの徴候および症状により、薬物の最大忍容性にまでガイドおよび調整されてきた（たとえば、ＮＹＨＡステージ、ＡＣＣ／ＡＨＡステージ、またはうっ血スコアにより）。
the diagnosis and treatment of acute and chronic heart failureに記載されている(European Heart Journal (2008) 29, 2388-2442)。得られる治療選択肢はＨＦを伴なう患者の罹病率および死亡率を低下させることができるが、これらの治療を受けるのに適格な患者の相対数は依然として不満足なほど低い(O'Donoghue M. & Braunwald E., Nat. Rev. Cardiol. 2010; 7: 13-20)。さらに、治療に適格な患者において、治療は主に原疾患ならびにＨＦの徴候および症状により、薬物の最大忍容性にまでガイドおよび調整されてきた（たとえば、ＮＹＨＡステージ、ＡＣＣ／ＡＨＡステージ、またはうっ血スコアにより）。
【0008】
ナトリウム利尿ペプチドマーカー、たとえばＢ型ナトリウム利尿ペプチド（ＢＮＰ）、またはそれのアミノ末端フラグメントであるＮ末端ｐｒｏＢＮＰ（ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰ）の測定が、収縮期ＨＦを伴なう患者の診断およびリスク層別化のための重要なツールとして浮上した(O'Donoghue M. & Braunwald E., Nat. Rev. Cardiol. 2010; 7: 13-20)。Ｂ
ＮＰ／ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰガイドによるＨＦ療法は、治療強化が必要な患者を同定でき、そのような強化のタイミングを指示することができる。しかし、ＢＮＰ／ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰガイドによるＨＦ療法は、患者に有益な可能性がある薬物の種類は指示しない。
ＮＰ／ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰガイドによるＨＦ療法は、治療強化が必要な患者を同定でき、そのような強化のタイミングを指示することができる。しかし、ＢＮＰ／ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰガイドによるＨＦ療法は、患者に有益な可能性がある薬物の種類は指示しない。
【0009】
たとえば、ＮＹＨＡクラスＩＩ、ＩＩＩまたはＩＶの重篤な症候性ＨＦを伴なう患者の心血管疾患の治療に対するスピロノラクトン(spironolactone)の有益な効果は周知であるが、これらの薬物は重篤な副作用（たとえば、高カリウム血症、不整脈、突然死、低血圧症、勃起不全、筋衰弱性、女性化乳房症、および胃炎）についても知られている。Williams et al. 2006 Clin. Cardiol. 29, 149-153。特に、高カリウム血症を発現するリスクは脅威である(D.N. Juurlink et.al. NEJM 2004; 351 543)。
【0010】
言い換えると、原疾患、臨床判定、およびＢＮＰ／ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰガイドによるＨＦ療法だけでは、治療選択または治療強化についての十分な情報が得られない。特定の治療を強化し、または逆に特定の治療もしくはその強化を避けるために、さらに新たなバイオマーカー、特に治療に対する応答を予測できるものまたは適切な治療の選択を補助するものが必要とされている。
【0011】
したがって、特定の心不全治療が有益であると思われる被検体または逆に特定の心不全治療から害を受けると思われる被検体を同定できるバイオマーカーが必要とされている。
ＩＧＦＢＰ系は細胞の増殖および分化において重要な役割を果たす。ＩＧＦ結合タンパク質７（＝ＩＧＦＢＰ－７）は、内皮細胞、血管平滑筋細胞、線維芽細胞、および上皮細胞により分泌されることが知られている３０－ｋＤａのモジュール状の糖タンパク質である(Ono, Y., et al., Biochem Biophys Res Comm 202 (1994) 1490-1496)。その文献では、この分子はＦＳＴＬ２；ＩＢＰ ７；ＩＧＦ結合タンパク質関連タンパク質Ｉ；ＩＧＦＢＰ ７；ＩＧＦＢＰ ７ｖ；ＩＧＦＢＰ ｒＰ１；ＩＧＦＢＰ７；ＩＧＦＢＰＲＰ１；インスリン様増殖因子結合タンパク質７；インスリン様増殖因子結合タンパク質７前駆体；ＭＡＣ２５；ＭＡＣ２５タンパク質；ＰＧＩ２刺激因子；およびＰＳＦまたはプロスタサイクリン刺激因子とも呼ばれている。低レベルのＩＧＦＢ－７はランダムなヒト血清中に検出され、血清レベルの増大はインスリン抵抗性と関連することが認められた(Lopez-Bermejo, A., et al., J. Clinical Endocrinology and Metabolism 88 (2003) 3401-3408, Lopez-Bermejo, A., et al., Diabetes 55 (2006) 2333-2339)。
ＩＧＦＢＰ系は細胞の増殖および分化において重要な役割を果たす。ＩＧＦ結合タンパク質７（＝ＩＧＦＢＰ－７）は、内皮細胞、血管平滑筋細胞、線維芽細胞、および上皮細胞により分泌されることが知られている３０－ｋＤａのモジュール状の糖タンパク質である(Ono, Y., et al., Biochem Biophys Res Comm 202 (1994) 1490-1496)。その文献では、この分子はＦＳＴＬ２；ＩＢＰ ７；ＩＧＦ結合タンパク質関連タンパク質Ｉ；ＩＧＦＢＰ ７；ＩＧＦＢＰ ７ｖ；ＩＧＦＢＰ ｒＰ１；ＩＧＦＢＰ７；ＩＧＦＢＰＲＰ１；インスリン様増殖因子結合タンパク質７；インスリン様増殖因子結合タンパク質７前駆体；ＭＡＣ２５；ＭＡＣ２５タンパク質；ＰＧＩ２刺激因子；およびＰＳＦまたはプロスタサイクリン刺激因子とも呼ばれている。低レベルのＩＧＦＢ－７はランダムなヒト血清中に検出され、血清レベルの増大はインスリン抵抗性と関連することが認められた(Lopez-Bermejo, A., et al., J. Clinical Endocrinology and Metabolism 88 (2003) 3401-3408, Lopez-Bermejo, A., et al., Diabetes 55 (2006) 2333-2339)。
【0012】
US20100285491には、心不全の評価におけるＩＧＦＢＰ－７の使用が開示されている。
それにはさらに、ＨＦに罹患している患者のための治療計画を選択するのにマーカーＩＧＦＢＰ－７を使用できることが開示されている。さらに、ＨＦ患者の経過観察に際してＩＧＦＢＰ－７レベル増大は有効なＨＦ治療についての陽性指標であると主張されている。
それにはさらに、ＨＦに罹患している患者のための治療計画を選択するのにマーカーＩＧＦＢＰ－７を使用できることが開示されている。さらに、ＨＦ患者の経過観察に際してＩＧＦＢＰ－７レベル増大は有効なＨＦ治療についての陽性指標であると主張されている。
【0013】
WO2008/015254には、心不全治療、好ましくはスピロノラクトンを含めたアルドステロ
ンアンタゴニストなどの医薬を用いる薬物ベースの治療に適格な被検体を同定する、ＧＤＦ－１５検出ベースの方法が開示されている。好ましくは、さらにＴｎＴまたはＮＴｐｒｏＢＮＰの検出がなされている。さらに、好ましくは基準量（好ましくは１２００ｐｇ／ｍｌ）より多いＧＤＦ－１５の量は心不全治療に適格な被検体の指標である。しかし、その文書にはどの薬物治療を考慮すべきか、あるいは投薬調整または治療強化を考慮すべきかどうかは開示されていない。
ンアンタゴニストなどの医薬を用いる薬物ベースの治療に適格な被検体を同定する、ＧＤＦ－１５検出ベースの方法が開示されている。好ましくは、さらにＴｎＴまたはＮＴｐｒｏＢＮＰの検出がなされている。さらに、好ましくは基準量（好ましくは１２００ｐｇ／ｍｌ）より多いＧＤＦ－１５の量は心不全治療に適格な被検体の指標である。しかし、その文書にはどの薬物治療を考慮すべきか、あるいは投薬調整または治療強化を考慮すべきかどうかは開示されていない。
【0014】
ミメカン（オステオグリシン(osteoglycin)とも呼ばれる）は、細胞外マトリックスの
多機能性成分である。ミメカンは、コラーゲン原線維形成、すなわち発生、組織修復および転移に際して必須であるプロセスの調節に関与することが示された(Tasheva et al., Mol. Vis. 8 (2002) 407-415)。それは骨形成に際してＴＧＦ－ベータ－１またはＴＧＦ－ベータ－２との組合わせで役割を果たす。ラットおよびヒトの心臓組織におけるトランスクリプトーム解析により、拡張性心筋障害におけるミメカンと左心室質量および細胞外リモデリングとの高い相関性が明らかになった(Petretto, E. et al., Nature Genetics 40 (2008) 546-552)。
多機能性成分である。ミメカンは、コラーゲン原線維形成、すなわち発生、組織修復および転移に際して必須であるプロセスの調節に関与することが示された(Tasheva et al., Mol. Vis. 8 (2002) 407-415)。それは骨形成に際してＴＧＦ－ベータ－１またはＴＧＦ－ベータ－２との組合わせで役割を果たす。ラットおよびヒトの心臓組織におけるトランスクリプトーム解析により、拡張性心筋障害におけるミメカンと左心室質量および細胞外リモデリングとの高い相関性が明らかになった(Petretto, E. et al., Nature Genetics 40 (2008) 546-552)。
【0015】
WO2011/012268には、個体から得られた体液試料中のミメカンを心不全の評価のために
使用することが開示されている。それはさらに、マーカーであるミメカンをＨＦに罹患している患者のための治療計画の選択に使用することに関する。さらに、それにはＨＦ患者の経過観察に際してミメカンのレベル増大は有効なＨＦ治療についての陽性指標であることが開示されている。しかし、その文書には、どの薬物治療を考慮すべきか、あるいは投薬調整または治療強化を考慮すべきかどうかは開示されていない。
使用することが開示されている。それはさらに、マーカーであるミメカンをＨＦに罹患している患者のための治療計画の選択に使用することに関する。さらに、それにはＨＦ患者の経過観察に際してミメカンのレベル増大は有効なＨＦ治療についての陽性指標であることが開示されている。しかし、その文書には、どの薬物治療を考慮すべきか、あるいは投薬調整または治療強化を考慮すべきかどうかは開示されていない。
【0016】
エンドスタチンは、最初はネズミ血管内皮腫からＸＶＩＩＩ型コラーゲンの２０ｋＤＡタンパク質分解フラグメントとして単離された(O'Reilly, M.S. et al., Cell 88 (1997)
277-285)。コラーゲンは、組織構造統合性の維持に主要な役割を果たす超分子凝集体を
形成する特徴的な三重らせん立体構造をもつ、細胞外マトリックスタンパク質のファミリーを表わす。過度のコラーゲン沈着は線維症をもたらして、周囲組織の正常な機能を攪乱する。エンドスタチンは、種々のタンパク質分解酵素の作用によりコラーゲンＸＶＩＩＩのアルファ１鎖から放出される(Ortega, N. and Werb, Z., Journal of Cell Science 115 (2002) 4201-4214)。エンドスタチンは血管形成および血管増殖の強力な阻害剤である。しかし、その文献には、どの薬物治療を考慮すべきか、あるいは投薬調整または治療強化を考慮すべきかどうかは開示されていない。
277-285)。コラーゲンは、組織構造統合性の維持に主要な役割を果たす超分子凝集体を
形成する特徴的な三重らせん立体構造をもつ、細胞外マトリックスタンパク質のファミリーを表わす。過度のコラーゲン沈着は線維症をもたらして、周囲組織の正常な機能を攪乱する。エンドスタチンは、種々のタンパク質分解酵素の作用によりコラーゲンＸＶＩＩＩのアルファ１鎖から放出される(Ortega, N. and Werb, Z., Journal of Cell Science 115 (2002) 4201-4214)。エンドスタチンは血管形成および血管増殖の強力な阻害剤である。しかし、その文献には、どの薬物治療を考慮すべきか、あるいは投薬調整または治療強化を考慮すべきかどうかは開示されていない。
【0017】
WO2010/124821には、心不全を評価するためにエンドスタチンを測定することが開示さ
れている。それはさらに、マーカーであるエンドスタチンをＨＦに罹患している患者のための治療計画の選択に使用することに関する。さらに、ＨＦ患者の経過観察に際してエンドスタチンのレベル増大は有効なＨＦ治療についての陽性指標であると主張されている。
れている。それはさらに、マーカーであるエンドスタチンをＨＦに罹患している患者のための治療計画の選択に使用することに関する。さらに、ＨＦ患者の経過観察に際してエンドスタチンのレベル増大は有効なＨＦ治療についての陽性指標であると主張されている。
【0018】
ＧＤＦ－１５（増殖分化因子１５）はトランスフォーミング増殖因子－βサイトカインスーパーファミリーのメンバーであり、最初はマクロファージ阻害性サイトカイン－１（
ＭＩＣ－１）として同定され、後に胎盤性トランスフォーミング増殖因子－βとも命名された(Bootcov 1997, Proc Natl Acad Sci 94:11514-11519; Tan 2000, Proc Natl Acad Sci 97:109-114)。ＧＤＦ－１５は心血管事象の強力な予測子および心血管合併症の指標として記載された(Brown, D. A. et al., 2002 The Lancet, 359: 2159-2163; US2003/0232385; Kempf 2006, Circ Res 98: 351-360)。Kempfらは、ＧＤＦ－１５の循環レベルがＣＨＦの重症度に関係があり、慢性心不全を伴なう患者において死亡のリスクを予測することを示した(Clinical Chemistry 53:2; 284-291 (2007); Am Coll Cardiol, 2007; 50:1054-1060)。
ＭＩＣ－１）として同定され、後に胎盤性トランスフォーミング増殖因子－βとも命名された(Bootcov 1997, Proc Natl Acad Sci 94:11514-11519; Tan 2000, Proc Natl Acad Sci 97:109-114)。ＧＤＦ－１５は心血管事象の強力な予測子および心血管合併症の指標として記載された(Brown, D. A. et al., 2002 The Lancet, 359: 2159-2163; US2003/0232385; Kempf 2006, Circ Res 98: 351-360)。Kempfらは、ＧＤＦ－１５の循環レベルがＣＨＦの重症度に関係があり、慢性心不全を伴なう患者において死亡のリスクを予測することを示した(Clinical Chemistry 53:2; 284-291 (2007); Am Coll Cardiol, 2007; 50:1054-1060)。
【0019】
WO2012/025355には、トロポニンＴおよびＧＤＦ－１５の検出をベースとする、スピロ
ノラクトンのようなアルドステロンアンタゴニストの投与を受けている心不全患者における治療モニタリングおよび治療適合のための方法が開示されている。その文書にはさらに、トロポニンＴ、ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰおよびＧＤＦ１５の検出により心不全患者における治療のモニタリングまたは適合が可能になることが開示されている。
ノラクトンのようなアルドステロンアンタゴニストの投与を受けている心不全患者における治療モニタリングおよび治療適合のための方法が開示されている。その文書にはさらに、トロポニンＴ、ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰおよびＧＤＦ１５の検出により心不全患者における治療のモニタリングまたは適合が可能になることが開示されている。
【0020】
WO2010/0070411には、ＧＤＦ－１５、ＮＴ－ｐｒｏＡＮＰ、ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰおよび心臓トロポニンの検出をベースとする、心不全に罹患している見掛け上は安定な被検体をモニタリングする方法が開示されている。さらにそれには、心不全に罹患しておりその生理状態が変化しつつある見掛け上は安定な被検体に、どの治療／投薬を適用すべきであるかを診断および／または決断する方法が開示されている。
【0021】
WO2009/047283には、ＢＮＰ、ｃＴｎＴ、および少なくとも１種類の炎症マーカー、オ
ステオポンチン（ＯＰＮ）、ＧＤＦ－１５、ＣＲＰの決定により、心筋梗塞後の被検体のリモデリングプロセスでどの治療または併用治療を適用すべきであるかを診断する方法が開示されている。それには≧５００ｐｇ／ｍｌのオステオポンチンレベルがＡＣＥ阻害薬、アンギオテンシン受容体アンタゴニスト、およびアルドステロンアンタゴニストの指標として記載されている。
ステオポンチン（ＯＰＮ）、ＧＤＦ－１５、ＣＲＰの決定により、心筋梗塞後の被検体のリモデリングプロセスでどの治療または併用治療を適用すべきであるかを診断する方法が開示されている。それには≧５００ｐｇ／ｍｌのオステオポンチンレベルがＡＣＥ阻害薬、アンギオテンシン受容体アンタゴニスト、およびアルドステロンアンタゴニストの指標として記載されている。
【0022】
Kubo et al. 2011 (Circulation J, 75, 919-926)には、ＢＮＰおよびトロポニンベー
スの検出をベースとする、肥大性心筋障害に罹患している患者における臨床悪化を予測するためのリスク予測が開示されている。評価された患者の多くは心不全に罹患していた。肥大性心筋障害を伴なう患者をモニタリングするために、それら２種類のマーカーの組合わせ測定が有用な可能性があると推論されている。
スの検出をベースとする、肥大性心筋障害に罹患している患者における臨床悪化を予測するためのリスク予測が開示されている。評価された患者の多くは心不全に罹患していた。肥大性心筋障害を伴なう患者をモニタリングするために、それら２種類のマーカーの組合わせ測定が有用な可能性があると推論されている。
【0023】
Fonarow et al. 2008 (Am J Cardiol, 101, 231-237)には、ＢＮＰおよびトロポニンの検出をベースとする、心不全に罹患している患者における死亡率予測が開示されている。
Mentz et al. 2011 (Circ J, 75(9):2031-7)には、ＮＴｐｒｏＢＮＰ検出をベースとする、心不全患者における治療のガイダンスおよびモニタリングのための方法が開示され、その際、治療は利尿薬、ＡＣＥ阻害薬、ベータ遮断薬、スピロノラクトン、ナイトレートまたはジゴキシンによる治療から選択される。
Mentz et al. 2011 (Circ J, 75(9):2031-7)には、ＮＴｐｒｏＢＮＰ検出をベースとする、心不全患者における治療のガイダンスおよびモニタリングのための方法が開示され、その際、治療は利尿薬、ＡＣＥ阻害薬、ベータ遮断薬、スピロノラクトン、ナイトレートまたはジゴキシンによる治療から選択される。
【0024】
Boehm et al. 2011 (Clin Res Cardiol, 100:973-981)は、ＮＴｐｒｏＢＮＰ検出をベ
ースとする、心不全患者における治療のガイダンスおよびモニタリングのための方法を概説している。それは、心不全治療をガイドするためにＢＮＰをトロポニンと組み合わせる可能性についても述べている。
ースとする、心不全患者における治療のガイダンスおよびモニタリングのための方法を概説している。それは、心不全治療をガイドするためにＢＮＰをトロポニンと組み合わせる可能性についても述べている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0025】
【文献】US20100285491
【文献】WO2008/015254
【文献】WO2011/012268
【文献】WO2010/124821
【文献】US2003/0232385
【文献】WO2012/025355
【文献】WO2010/0070411
【文献】WO2009/047283
【非特許文献】
【0026】
【文献】J. Am. Coll. Cardiol. 2001; 38; 2101-2113
【文献】J. Am. Coll. Cardiol. 2005; 46; el-e82
【文献】European Heart Journal (2008) 29, 2388-2442
【文献】O'Donoghue M. & Braunwald E., Nat. Rev. Cardiol. 2010; 7: 13-20
【文献】Williams et al. 2006, Clin. Cardiol. 29, 149-153
【文献】D.N. Juurlink et.al. NEJM 2004; 351 543
【文献】Ono, Y., et al., Biochem Biophys Res Comm 202 (1994) 1490-1496
【文献】Lopez-Bermejo, A., et al., J. Clinical Endocrinology and Metabolism 88 (2003) 3401-3408
【文献】Lopez-Bermejo, A., et al., Diabetes 55 (2006) 2333-2339
【文献】Tasheva et al., Mol. Vis. 8 (2002) 407-415
【文献】Petretto, E. et al., Nature Genetics 40 (2008) 546-552
【文献】O'Reilly, M.S. et al., Cell 88 (1997) 277-285
【文献】Ortega, N. and Werb, Z., Journal of Cell Science 115 (2002) 4201-4214
【文献】Bootcov 1997, Proc Natl Acad Sci 94:11514-11519
【文献】Tan 2000, Proc Natl Acad Sci 97:109-114
【文献】Brown, D. A. et al., 2002, The Lancet, 359: 2159-2163
【文献】Kempf 2006, Circ Res 98: 351-360
【文献】Kempf et al. Clinical Chemistry 53:2; 284-291 (2007)
【文献】Kempf et al. Am Coll Cardiol, 2007; 50:1054-1060
【文献】Kubo et al. 2011, Circulation J, 75, 919-926
【文献】Fonarow et al. 2008, Am J Cardiol, 101, 231-237
【文献】Mentz et al. 2011, Circ J, 75(9): 2031-2037
【文献】Boehm et al. 2011, Clin Res Cardiol, 100: 973-981
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0027】
本発明の基礎となる研究の観点において、有利なことに、ＧＤＦ－１５、エンドスタチン、ミメカン、ＩＧＦＢＰ７、心臓トロポニン、ＢＮＰタイプペプチド、尿酸、ガレクチン－３、可溶性ＳＴ２、ＰｌＧＦ、ｓＦｌｔ－１、Ｐ１ＮＰ、シスタチンＣ、プレアルブミンおよび／またはトランスフェリンの決定によって特定の心不全治療が有益であると思われる被検体を同定できることが示された。たとえば、ベータ遮断薬およびアルドステロンアンタゴニストの投与が特定のグループの患者のみに有益であり、他のグループにはその投与が有益ではないであろうということが示された。上記バイオマーカーの量を決定することにより、その治療が有益であると予想される被検体と、その治療が有益ではない被検体または有益な効果が無い状態での不必要な強化／増量のためその治療から副作用もしくは害すら受けると予想される被検体とを鑑別できる。
【0028】
本発明の基礎となる技術的課題は上記のニーズに応じるための手段および方法を提供す
ることであるとみることができる。
ることであるとみることができる。
【課題を解決するための手段】
【0029】
この技術的課題は、以下の特許請求の範囲および明細書に示す態様により解決される。
【図面の簡単な説明】
【0030】
【発明を実施するための形態】
【0031】
本発明は、心不全治療のための少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体を同定するための、下記を含む方法に関する：
ａ）心不全に罹患している被検体からの試料において少なくとも１種類のバイオマーカーの量を決定すること；および、
ｂ）ステップａ）で決定した少なくとも１種類のバイオマーカーの量（単数または複数）を基準量（単数または複数）と比較し、それにより前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体を同定すること。
ａ）心不全に罹患している被検体からの試料において少なくとも１種類のバイオマーカーの量を決定すること；および、
ｂ）ステップａ）で決定した少なくとも１種類のバイオマーカーの量（単数または複数）を基準量（単数または複数）と比較し、それにより前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体を同定すること。
【0032】
好ましくは、前記少なくとも１種類の医薬は、ベータ遮断薬、アルドステロンアンタゴニスト、利尿薬、およびレニン－アンギオテンシン系の阻害薬からなる群から選択される。
【0033】
好ましくは、前記少なくとも１種類のバイオマーカーは、ＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、ミメカン、オステオポンチン、エンドスタチン、ｓＦｌｔ－１（可溶性ｆｍｓ様チロシンキナーゼ１）、ＰｌＧＦ（胎盤性増殖因子）、心臓トロポニン、ＢＮＰタイプペプチド、尿酸、ＧＤＦ－１５（増殖分化因子１５）、ｓＳＴ２（可溶性ＳＴ２）、Ｇａｌ３（ガレクチン－３）、Ｐ１ＮＰ（プロコラーゲン１型Ｎ末端プロペプチド）、シスタチンＣ、プレアルブミン、およびトランスフェリンからなる群から選択される。
【0034】
したがって、本発明は、ベータ遮断薬、アルドステロンアンタゴニスト、利尿薬、およびレニン－アンギオテンシン系の阻害薬からなる群から選択される少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体を同定するための、下記を含む方法に関する：
ａ）心不全に罹患している被検体からの試料において、ＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、ミメカン、オステオポンチン、エンドスタチン、ｓＦｌｔ－１（可溶性ｆｍｓ様チロシンキナーゼ１）、ＰｌＧＦ（胎盤性増殖因子）、心臓トロポニン、ＢＮＰタイプペプチド、尿酸、ＧＤＦ－１５（増殖分化因子１５）、ｓＳＴ２（可溶性ＳＴ２）、Ｇａｌ３（ガレクチン－３）、Ｐ１ＮＰ（プロコラーゲン１型Ｎ末端プロペプチド）、シスタチンＣ、プレアルブミン、およびトランスフェリンからなる群から選択される少なくとも１種類のバイオマーカーの量を決定すること；および、
ｂ）ステップａ）で決定した量（単数または複数）を基準量（単数または複数）と比較し、それにより前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体を同定すること。
ａ）心不全に罹患している被検体からの試料において、ＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、ミメカン、オステオポンチン、エンドスタチン、ｓＦｌｔ－１（可溶性ｆｍｓ様チロシンキナーゼ１）、ＰｌＧＦ（胎盤性増殖因子）、心臓トロポニン、ＢＮＰタイプペプチド、尿酸、ＧＤＦ－１５（増殖分化因子１５）、ｓＳＴ２（可溶性ＳＴ２）、Ｇａｌ３（ガレクチン－３）、Ｐ１ＮＰ（プロコラーゲン１型Ｎ末端プロペプチド）、シスタチンＣ、プレアルブミン、およびトランスフェリンからなる群から選択される少なくとも１種類のバイオマーカーの量を決定すること；および、
ｂ）ステップａ）で決定した量（単数または複数）を基準量（単数または複数）と比較し、それにより前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体を同定すること。
【0035】
本発明方法の好ましい態様において、少なくとも１種類の医薬はアルドステロンアンタゴニストである。この場合、少なくとも１種類のバイオマーカーはＩＧＦＢＰ７、エンドスタチン、尿酸、ＢＮＰタイプペプチド、心臓トロポニン、ｓＦｌｔ－１、ＰｌＧＦ、ｓＳＴ２、Ｇａｌ－３およびシスタチンＣから選択される。好ましくは、上記バイオマーカ
ーのうち１種類のみの量を決定する。しかし、２種類以上の組合わせのバイオマーカーの量を決定することも考慮する。好ましい組合わせは、ｓ－Ｆｌｔ－１とＩＧＦＢＰ７；ｓ－Ｆｌｔ－１と心臓トロポニン；ｓ－Ｆｌｔ－１とＧａｌ－３；心臓トロポニンとＧａｌ－３；心臓トロポニンとＩＧＦＢＰ７；ＩＧＰＢＰ７とＧａｌ－３；およびこれらのマーカーとＢＮＰタイプペプチドの組合わせである。特に好ましい組合わせは、ＩＧＦＢＰ７とミメカンである。さらなる好ましい組合わせは、ＰｌＧＦとｓＦｌｔ－１の組合わせである。さらに、ＰｌＧＦの量－対－ｓＦｌｔ－１の量（またはｓＦｌｔ－１－対－ＰｌＧＦの量）の比を計算することを想定する。この場合、計算した比を基準比と比較する。
ーのうち１種類のみの量を決定する。しかし、２種類以上の組合わせのバイオマーカーの量を決定することも考慮する。好ましい組合わせは、ｓ－Ｆｌｔ－１とＩＧＦＢＰ７；ｓ－Ｆｌｔ－１と心臓トロポニン；ｓ－Ｆｌｔ－１とＧａｌ－３；心臓トロポニンとＧａｌ－３；心臓トロポニンとＩＧＦＢＰ７；ＩＧＰＢＰ７とＧａｌ－３；およびこれらのマーカーとＢＮＰタイプペプチドの組合わせである。特に好ましい組合わせは、ＩＧＦＢＰ７とミメカンである。さらなる好ましい組合わせは、ＰｌＧＦとｓＦｌｔ－１の組合わせである。さらに、ＰｌＧＦの量－対－ｓＦｌｔ－１の量（またはｓＦｌｔ－１－対－ＰｌＧＦの量）の比を計算することを想定する。この場合、計算した比を基準比と比較する。
【0036】
本発明方法の他の好ましい態様において、少なくとも１種類の医薬はベータ遮断薬である。この場合、少なくとも１種類のバイオマーカーは、好ましくはＩＧＦＢＰ７、ＧＤＦ－１５、エンドスタチン、ミメカン、ＢＮＰタイプペプチド、心臓トロポニン、オステオポンチン、ｓＦｌｔ－１およびＰ１ＮＰからなる群から選択される。好ましくは、１種類のバイオマーカーのみの量を決定する。しかし、２種類以上の組合わせのバイオマーカーの量を決定することも考慮する。好ましい組合わせは、ＧＤＦ－１５とエンドスタチン；ＧＤＦ－１５と心臓トロポニン；ＧＤＦ－１５とミメカン；ＧＤＦ－１５とｓＳＴ２；エンドスタチンと心臓トロポニン；エンドスタチンとミメカン；エンドスタチンとＩＧＦＢＰ７；ミメカンと心臓トロポニン；ミメカンとＩＧＦＢＰ７；心臓トロポニンとＩＧＦＢＰ７である。特に好ましい組合わせは、エンドスタチンとｓＦｌｔ－１である。さらなる好ましい組合わせは、エンドスタチンとＰｌＧＦである。
【0037】
本発明方法の他の好ましい態様において、少なくとも１種類の医薬はレニン－アンギオテンシン系の阻害薬である。この場合、少なくとも１種類のバイオマーカーは、好ましくはオステオポンチン、ＧＤＦ－１５、ＢＮＰタイプのペプチド、ｓＦｌｔ－１、心臓トロポニン、Ｇａｌ－３、尿酸、またはＩＧＦＢＰ７である。好ましくは、１種類のバイオマーカーの量を決定する。しかし、２種類以上の組合わせのバイオマーカーの量を決定することも考慮する。好ましい組合わせは、心臓トロポニンとＧａｌ－３、心臓トロポニンと尿酸、およびＧａｌ－３と尿酸である。さらなる好ましい組合わせは、オステオポンチンとｓＦｌｔ－１、ｓＦｌｔ－１と心臓トロポニン、およびオステオポンチンと心臓トロポニンである。
【0038】
本発明方法の他の好ましい態様において、少なくとも１種類の医薬は利尿薬である。この場合、少なくとも１種類のバイオマーカーは、好ましくはＧＤＦ－１５、エンドスタチン、ミメカン、ＢＮＰタイプのペプチド、尿酸、オステオポンチン、ＩＧＦＢＰ－７、Ｇａｌ－３、トランスフェリン、プレアルブミンからなる群から選択される。好ましくは、１種類のバイオマーカーのみの量を決定する。しかし、２種類以上の組合わせのバイオマーカーの量を決定することも考慮する。好ましい組合わせは、ＧＤＦ－１５とエンドスタチン；ＧＤＦ－１５とＢＮＰタイプのペプチド；ＧＤＦ－１５とミメカン；ＧＤＦ－１５とＧａｌ－３；エンドスタチンとＢＮＰタイプのペプチド；エンドスタチンとミメカン；エンドスタチンとＧａｌ－３；ミメカンとＢＮＰタイプのペプチド；ミメカンとＧａｌ－３；ＢＮＰタイプのペプチドとＧａｌ－３；ＢＮＰタイプのペプチドと尿酸；ＢＮＰタイプのペプチドとＩＧＦＢＰ－７；ＢＮＰタイプのペプチドとオステオポンチンである。特に尿酸とＧＤＦ－１５の組合わせを想定する。
【0039】
したがって、本発明は特に下記の方法を想定する：
アルドステロンアンタゴニストの投与に（すなわち、初回投与または強化、特に、より高い用量での投与に）適格な被検体を同定するための、下記を含む方法を考慮する：
ａ）心不全に罹患している被検体からの試料において、ＩＧＦＢＰ７、エンドスタチン、尿酸、ＢＮＰタイプのペプチド、心臓トロポニン、ｓＦｌｔ－１、ＰｌＧＦ、ｓＳＴ－２、Ｇａｌ－３およびシスタチンＣからなる群から選択される少なくとも１種類のバイオマーカーの量を決定すること；および、
ｂ）ステップａ）で決定した量（単数または複数）を基準量（単数または複数）と比較し、それにより前記アルドステロンの投与に適格な被検体を同定すること。
アルドステロンアンタゴニストの投与に（すなわち、初回投与または強化、特に、より高い用量での投与に）適格な被検体を同定するための、下記を含む方法を考慮する：
ａ）心不全に罹患している被検体からの試料において、ＩＧＦＢＰ７、エンドスタチン、尿酸、ＢＮＰタイプのペプチド、心臓トロポニン、ｓＦｌｔ－１、ＰｌＧＦ、ｓＳＴ－２、Ｇａｌ－３およびシスタチンＣからなる群から選択される少なくとも１種類のバイオマーカーの量を決定すること；および、
ｂ）ステップａ）で決定した量（単数または複数）を基準量（単数または複数）と比較し、それにより前記アルドステロンの投与に適格な被検体を同定すること。
【0040】
ある態様において、ＰｌＧＦおよびｓＦｌｔ－１の量をステップａ）で決定し、ＰｌＧＦの量－対－ｓＦｌｔ－１の量（またはｓＦｌｔ－１－対－ＰｌＧＦの量）の比をさらなるステップａ１）で計算し、こうして比較した比をステップｂ）で基準比と比較する。
【0041】
したがって、この方法は下記の工程を含むことができる：
ａ）心不全に罹患している被検体からの試料において、ＰｌＧＦおよびｓＦｌｔ－１の量を決定すること；
ａ１）ＰｌＧＦの量－対－ｓＦｌｔ－１の量（またはその逆）の比を計算すること；
ｂ）ステップａ１）で計算した比を基準比と比較し、それにより前記アルドステロンの投与に適格な被検体を同定すること。
ａ）心不全に罹患している被検体からの試料において、ＰｌＧＦおよびｓＦｌｔ－１の量を決定すること；
ａ１）ＰｌＧＦの量－対－ｓＦｌｔ－１の量（またはその逆）の比を計算すること；
ｂ）ステップａ１）で計算した比を基準比と比較し、それにより前記アルドステロンの投与に適格な被検体を同定すること。
【0042】
同様に、ベータ遮断薬の投与に（すなわち、初回投与または投与強化、特に、より高い用量での投与に）適格な被検体を同定するための、下記を含む方法を考慮する：
ａ）心不全に罹患している被検体からの試料において、ＩＧＦＢＰ７、ＧＤＦ－１５、エンドスタチン、ミメカン、ＢＮＰタイプのペプチド、心臓トロポニン、オステオポンチン、ｓＦｌｔ－１およびＰ１ＮＰからなる群から選択される少なくとも１種類のバイオマーカーの量を決定すること；および、
ｂ）ステップａ）で決定した量（単数または複数）を基準量（単数または複数）と比較し、それによりベータ遮断薬の投与に適格な被検体を同定すること。
ａ）心不全に罹患している被検体からの試料において、ＩＧＦＢＰ７、ＧＤＦ－１５、エンドスタチン、ミメカン、ＢＮＰタイプのペプチド、心臓トロポニン、オステオポンチン、ｓＦｌｔ－１およびＰ１ＮＰからなる群から選択される少なくとも１種類のバイオマーカーの量を決定すること；および、
ｂ）ステップａ）で決定した量（単数または複数）を基準量（単数または複数）と比較し、それによりベータ遮断薬の投与に適格な被検体を同定すること。
【0043】
さらに、レニン－アンギオテンシン阻害薬の投与に（すなわち、初回投与または投与強化、特に、より高い用量での投与に）適格な被検体を同定するための、下記を含む方法を想定する：
ａ）心不全に罹患している被検体からの試料において、オステオポンチン、ＧＤＦ－１５、ＢＮＰタイプのペプチド、ｓＦｌｔ－１、心臓トロポニン、Ｇａｌ－３、尿酸およびＩＧＦＢＰ７からなる群から選択される少なくとも１種類のバイオマーカーの量を決定すること；および、
ｂ）ステップａ）で決定した量（単数または複数）を基準量（単数または複数）と比較し、それによりレニン－アンギオテンシンの投与に適格な被検体を同定すること。
ａ）心不全に罹患している被検体からの試料において、オステオポンチン、ＧＤＦ－１５、ＢＮＰタイプのペプチド、ｓＦｌｔ－１、心臓トロポニン、Ｇａｌ－３、尿酸およびＩＧＦＢＰ７からなる群から選択される少なくとも１種類のバイオマーカーの量を決定すること；および、
ｂ）ステップａ）で決定した量（単数または複数）を基準量（単数または複数）と比較し、それによりレニン－アンギオテンシンの投与に適格な被検体を同定すること。
【0044】
本発明はまた、利尿薬の投与に（すなわち、初回投与または投与強化に）適格な被検体を同定するための、下記を含む方法を考慮する：
ａ）心不全に罹患している被検体からの試料において、ＩＧＦＢＰ７、心臓トロポニン、エンドスタチン、ミメカン、ＢＮＰタイプのペプチド、尿酸、オステオポンチン、Ｇａｌ－３、プレアルブミンおよびトランスフェリンからなる群から選択される少なくとも１種類のバイオマーカーの量を決定すること；および、
ｂ）ステップａ）で決定した量（単数または複数）を基準量（単数または複数）と比較し、それにより利尿薬の投与に適格な被検体を同定すること。
ａ）心不全に罹患している被検体からの試料において、ＩＧＦＢＰ７、心臓トロポニン、エンドスタチン、ミメカン、ＢＮＰタイプのペプチド、尿酸、オステオポンチン、Ｇａｌ－３、プレアルブミンおよびトランスフェリンからなる群から選択される少なくとも１種類のバイオマーカーの量を決定すること；および、
ｂ）ステップａ）で決定した量（単数または複数）を基準量（単数または複数）と比較し、それにより利尿薬の投与に適格な被検体を同定すること。
【0045】
好ましくは、被検体が少なくとも１種類の医薬の投与に適格であると同定するさらなるステップｃ）を実施することにより、被検体を少なくとも１種類の医薬の投与に適格であると同定することを含む。
【0046】
ある態様において、少なくとも１種類のバイオマーカーの量は、試料を各マーカーに特異的に結合する作用剤と接触させ、それにより前記作用剤と前記マーカーの間に複合体を形成させ、形成された複合体の量を検出し、それにより前記マーカーの量を測定すること
により測定される。バイオマーカーが尿酸である場合、前記バイオマーカーのレベルは、前記バイオマーカーを変換できる、たとえば尿酸を酸化できる、酵素または化合物と試料を接触させることにより測定できる。酵素は、尿酸から５－ヒドロキシイソ尿酸への酸化を触媒するウリカーゼ（ＥＣ １．７．３．３）であってもよい。化合物はリンタングステン酸であってもよい。
により測定される。バイオマーカーが尿酸である場合、前記バイオマーカーのレベルは、前記バイオマーカーを変換できる、たとえば尿酸を酸化できる、酵素または化合物と試料を接触させることにより測定できる。酵素は、尿酸から５－ヒドロキシイソ尿酸への酸化を触媒するウリカーゼ（ＥＣ １．７．３．３）であってもよい。化合物はリンタングステン酸であってもよい。
【0047】
下記のバイオマーカー－医薬の組合わせが最も好ましい態様である：
本発明の方法、使用、キット、システムおよびデバイスの好ましい態様において、バイオマーカーはＩＧＦＢＰ－７であり、医薬はベータ遮断薬である。
本発明の方法、使用、キット、システムおよびデバイスの好ましい態様において、バイオマーカーはＩＧＦＢＰ－７であり、医薬はベータ遮断薬である。
【0048】
他の好ましい態様において、バイオマーカーはミメカンであり、医薬はベータ遮断薬である。
他の好ましい態様において、バイオマーカーはオステオポンチンであり、医薬はレニン－アンギオテンシン系の阻害薬である。医薬がベータ遮断薬であることも想定される。
他の好ましい態様において、バイオマーカーはオステオポンチンであり、医薬はレニン－アンギオテンシン系の阻害薬である。医薬がベータ遮断薬であることも想定される。
【0049】
他の好ましい態様において、バイオマーカーはエンドスタチンであり、医薬はアルドステロンアンタゴニストである。
他の好ましい態様において、バイオマーカーはｓＦｌｔ－１であり、医薬はアルドステロンアンタゴニストである。バイオマーカーがｓＦｌｔ－１であり、医薬がレニン－アンギオテンシン系の阻害薬であることも好ましい。さらに、医薬がベータ遮断薬であることも想定される。
他の好ましい態様において、バイオマーカーはｓＦｌｔ－１であり、医薬はアルドステロンアンタゴニストである。バイオマーカーがｓＦｌｔ－１であり、医薬がレニン－アンギオテンシン系の阻害薬であることも好ましい。さらに、医薬がベータ遮断薬であることも想定される。
【0050】
他の好ましい態様において、バイオマーカーはＰｌＧＦであり、医薬はアルドステロンアンタゴニストである。
他の好ましい態様において、バイオマーカーは心臓トロポニンであり、医薬はレニン－アンギオテンシン系の阻害薬である。
他の好ましい態様において、バイオマーカーは心臓トロポニンであり、医薬はレニン－アンギオテンシン系の阻害薬である。
【0051】
他の好ましい態様において、バイオマーカーはＢＮＰタイプペプチドであり、医薬はレニン－アンギオテンシン系の阻害薬である。バイオマーカーがＢＮＰタイプペプチドであり、医薬がベータ遮断薬であることも好ましい。
【0052】
他の好ましい態様において、バイオマーカーは尿酸であり、医薬は利尿薬である。バイオマーカーが尿酸であり、医薬がレニン－アンギオテンシン系の阻害薬であることも好ましい。
【0053】
他の好ましい態様において、バイオマーカーはＧＤＦ－１５であり、医薬は利尿薬である。バイオマーカーがＧＤＦ－１５であり、医薬がレニン－アンギオテンシン系の阻害薬であることも好ましい。
【0054】
他の好ましい態様において、バイオマーカーはｓＳＴ２であり、医薬はアルドステロンアンタゴニストである。バイオマーカーがｓＳＴ２であり、医薬がベータ遮断薬であることも好ましい。
【0055】
他の好ましい態様において、バイオマーカーはＰ１ＮＰであり、医薬はベータ遮断薬である。
他の好ましい態様において、バイオマーカーはシスタチンＣであり、医薬はアルドステロンアンタゴニストである。
他の好ましい態様において、バイオマーカーはシスタチンＣであり、医薬はアルドステロンアンタゴニストである。
【0056】
他の好ましい態様において、バイオマーカーはプレアルブミンであり、医薬は利尿薬、たとえばループ利尿薬である。
他の好ましい態様において、バイオマーカーはＩＧＦＢＰ７であり、医薬はレニン－アンギオテンシン系の阻害薬である。
他の好ましい態様において、バイオマーカーはＩＧＦＢＰ７であり、医薬はレニン－アンギオテンシン系の阻害薬である。
【0057】
さらなる好ましいバイオマーカー／医薬の組合わせを実施例に開示する。
前記の本発明方法は、好ましくはエクスビボ法またはインビトロ法である。さらに、本方法は前記に明記した工程に追加した工程を含むことができる。たとえば、さらなる工程は、試料の前処理または本方法により得られた結果の評価に関するものであってもよい。本方法は手動で実施でき、あるいは自動化により支援できる。好ましくは、ステップ（ａ）および／または（ｂ）の全部または一部を自動化により支援できる；たとえば、ステップ（ａ）における決定に適したロボット装置およびセンサー装置、あるいはステップ（ｂ）におけるコンピューター実装した比較および／またはその比較に基づく評価。
前記の本発明方法は、好ましくはエクスビボ法またはインビトロ法である。さらに、本方法は前記に明記した工程に追加した工程を含むことができる。たとえば、さらなる工程は、試料の前処理または本方法により得られた結果の評価に関するものであってもよい。本方法は手動で実施でき、あるいは自動化により支援できる。好ましくは、ステップ（ａ）および／または（ｂ）の全部または一部を自動化により支援できる；たとえば、ステップ（ａ）における決定に適したロボット装置およびセンサー装置、あるいはステップ（ｂ）におけるコンピューター実装した比較および／またはその比較に基づく評価。
【0058】
したがって、本発明は、同様に好ましくは、ベータ遮断薬、アルドステロンアンタゴニスト、利尿薬、およびレニン－アンギオテンシン系の阻害薬からなる群から選択される少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体を同定するための、下記のものを含むシステムに関する：
ａ）被検体からの試料の一部を、ＧＤＦ－１５（増殖分化因子１５）、エンドスタチン、ミメカン、ＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、心臓トロポニン、ＢＮＰタイプのペプチド、尿酸、ガレクチン－３（Ｇａｌ－３）、可溶性ＳＴ２（ｓＳＴ２）、ＰｌＧＦ、ｓＦｌｔ－１、Ｐ１ＮＰ、シスタチンＣ、プレアルブミン、およびトランスフェリンからなる群から選択される少なくとも１種類のバイオマーカーに対する特異的結合親和性を含むリガンド（または２種類以上のバイオマーカーの量を決定する場合は複数のリガンド）とインビトロで接触させるように構成された分析ユニット；
ｂ）リガンド（単数または複数）と接触させた被検体からの試料の一部からの信号を検出するように構成された分析ユニット；
ｃ）プロセッサーを備え、かつ前記の分析ユニット類と作動可能な状態で連絡した、コンピューティングデバイス；および、
ｄ）プロセッサーが実行できる複数の指令、すなわち実行した際に少なくとも１種類のバイオマーカーの量を計算し、少なくとも１種類のバイオマーカーの量を基準量（または２種類以上のマーカーの量を決定する場合は複数の基準量）と比較し、それにより少なくとも１種類の医薬の投与に適格である被検体を同定するための指令を含む、非一過性の(non-transient)機械可読媒体。
ａ）被検体からの試料の一部を、ＧＤＦ－１５（増殖分化因子１５）、エンドスタチン、ミメカン、ＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、心臓トロポニン、ＢＮＰタイプのペプチド、尿酸、ガレクチン－３（Ｇａｌ－３）、可溶性ＳＴ２（ｓＳＴ２）、ＰｌＧＦ、ｓＦｌｔ－１、Ｐ１ＮＰ、シスタチンＣ、プレアルブミン、およびトランスフェリンからなる群から選択される少なくとも１種類のバイオマーカーに対する特異的結合親和性を含むリガンド（または２種類以上のバイオマーカーの量を決定する場合は複数のリガンド）とインビトロで接触させるように構成された分析ユニット；
ｂ）リガンド（単数または複数）と接触させた被検体からの試料の一部からの信号を検出するように構成された分析ユニット；
ｃ）プロセッサーを備え、かつ前記の分析ユニット類と作動可能な状態で連絡した、コンピューティングデバイス；および、
ｄ）プロセッサーが実行できる複数の指令、すなわち実行した際に少なくとも１種類のバイオマーカーの量を計算し、少なくとも１種類のバイオマーカーの量を基準量（または２種類以上のマーカーの量を決定する場合は複数の基準量）と比較し、それにより少なくとも１種類の医薬の投与に適格である被検体を同定するための指令を含む、非一過性の(non-transient)機械可読媒体。
【0059】
本明細書中で用いる用語“同定する”は、ある被検体が少なくとも１種類の医薬の投与に適格であると予想されるか否かを評価することを意味する。少なくとも１種類の医薬の投与に適格である被検体はその少なくとも１種類の医薬の投与が有益であると予想され、これに対し、少なくとも１種類の医薬の投与に適格ではない被検体は前記少なくとも１種類の医薬の投与から副作用もしくは害を受ける可能性があることを理解すべきである。特に、前記少なくとも１種類の医薬の投与により被検体の死亡のリスクが低下すれば、および／または特に試料を入手した後１８か月または３年のウインドウ期間内の被検体の入院のリスクが低下すれば、前記被検体にはその少なくとも１種類の医薬の投与が有益である。好ましくは、上記のリスク（単数または複数）が５％、より好ましくは１０％、よりさらに好ましくは１５％、最も好ましくは２０％低下する。好ましくは、本明細書中で述べる入院は心不全によるものでなければならない。
【0060】
これと対照的に、少なくとも１種類の医薬の投与に適格ではない被検体には前記少なくとも１種類の医薬の投与が有益ではないであろう（特に、有意には有益ではないであろう）。特に、前記少なくとも１種類の医薬の投与により被検体の死亡のリスクが低下しない（特に、有意には低下しない）ならば、および／または特に試料を入手した後１８か月または３年のウインドウ期間内の被検体の入院のリスクが低下しない（特に、有意には低下しない）ならば、および／または不都合な作用のリスクが増大すれば、その被検体には前記少なくとも１種類の医薬の投与が有益ではない。この場合、前記医薬を投与しなければ、不必要な医療費を避けることができる。さらに、投与から生じる可能性がある有害な副作用を避けることができる。
【0061】
したがって、少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体を同定することにより、被検体にその投与（すなわち、初回投与または投与強化、特に、より高い用量での投与）が有益であると予想されるか否かを評価できる。したがって、本発明はまた、本明細書の他の箇所に述べる工程に基づいて、少なくとも１種類の医薬の投与が有益であると予想される被検体を同定する方法に関する。
【0062】
当業者に理解されるように、ある被検体が少なくとも１種類の医薬の投与に適格であるかどうかの評価は、通常は評価される被検体の１００％について正確であることを意図しない。ただし、この用語は、統計学的に有意部分の被検体（たとえば、コホート試験におけるコホート）について評価が正確であることを要求する。ある部分が統計学的に有意であるかどうかは、多様な周知の統計学的評価ツール、たとえば信頼区間の決定、ｐ値の決定、スチューデントのｔ検定(Student’s t-test)、マン－ホイットニー検定(Mann-Whitney test)などを用いて、さらなる労苦なしに当業者が判定できる。詳細は、Dowdy and Wearden, Statistics for Research, John Wiley & Sons, New York 1983にある。好ましい信頼区間は、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％である。ｐ値は、好ましくは０．１、０．０５、０．０１、０．００５または０．０００１である。より好ましくは、集団の少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、または少なくとも９０％の被検体を本発明方法によって適正に同定できる。
【0063】
本発明に関して、ベータ遮断薬、アルドステロンアンタゴニスト、利尿薬、およびレニン－アンギオテンシン系の阻害薬からなる群から選択される少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体が同定される。
【0064】
本発明方法に関する“投与”とは、（ｉ）その少なくとも１種類の医薬の投与を開始すべきである（したがって、治療に加えるべきである）こと、または（ｉｉ）その少なくとも１種類の医薬をより高い用量で投与すべきである（したがって、増量すべきである）ことを意味する。
【0065】
本明細書中で用いる用語“用量”は、一日量を表わす。
最初の例（ｉ）では、被検体は前記少なくとも１種類の医薬を以前に投与されていないはずである。したがって、前記少なくとも１種類の医薬は試験試料を入手する前には被検体に投与されていないはずである。好ましくは、前記少なくとも１種類の医薬は、試験試料を入手する前の少なくとも３か月間、より好ましくは少なくとも６か月間は、被検体に投与されていない。
最初の例（ｉ）では、被検体は前記少なくとも１種類の医薬を以前に投与されていないはずである。したがって、前記少なくとも１種類の医薬は試験試料を入手する前には被検体に投与されていないはずである。好ましくは、前記少なくとも１種類の医薬は、試験試料を入手する前の少なくとも３か月間、より好ましくは少なくとも６か月間は、被検体に投与されていない。
【0066】
後の例（ｉｉ）では、被検体は前記少なくとも１種類の医薬で既に治療されているはずである（試料を入手する前に）。好ましくは、試験試料を入手する前に、少なくとも２週間、より好ましくは少なくとも２か月間、よりさらに好ましくは少なくとも６か月間、最も好ましくは少なくとも１年間、被検体は前記少なくとも１種類の医薬で治療されていた。好ましくは、前記少なくとも１種類の医薬の用量はこの期間中に変更されなかった。
【0067】
検査される被検体が前記少なくとも１種類の医薬で既に治療されており、被検体がより高い用量での前記医薬の投与に適格であるか（否か）、すなわちより高い用量の前記少なくとも１種類の医薬による治療を継続すべきであるかどうかを評価することが特に好まし
い。したがって、前記少なくとも１種類の医薬の用量を増加すべきであるかどうかを評価できる。
い。したがって、前記少なくとも１種類の医薬の用量を増加すべきであるかどうかを評価できる。
【0068】
まとめると、少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体は、前記少なくとも１種類の医薬の投与の開始に適格であり、あるいはより高い用量での前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格であり、これに対し、少なくとも１種類の医薬の投与に適格ではない被検体は、前記少なくとも１種類の医薬の投与の開始に適格ではなく（試験試料を入手する前に被検体が前記医薬で治療されていなかった場合）、あるいはより高い用量での前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格ではない（試験試料を入手する前に被検体が前記医薬で治療されていた場合）。したがって、ある被検体が前記医薬の投与に適格であれば、その医薬の投与を開始することができ、あるいはその医薬の用量を増加することができる。しかし、ある被検体が前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格でなければ、その医薬の投与を開始すべきではなく、あるいはより高い用量に増量すべきではない。したがって、被検体が前記医薬の投与に適格でなければ、試験試料を入手する前に被検体が前記医薬で治療されていた場合には、用量を変更せずに、特に用量を増加せずに、前記治療を継続すべきである。同様に好ましくは、ある医薬の投与に適格ではない被検体にはより低い用量の前記医薬を投与してもよい。
【0069】
本発明に関して述べる医薬は当技術分野で周知である；たとえばHeart Disease, 2008,
8th Edition, Eds. Braunwald, Elsevier Sounders, chapter 24、または ESC Guidelines for the diagnosis and treatment of acute and chronic heart failure (European Heart Journal (2008) 29, 2388-2442)に記載されている。
8th Edition, Eds. Braunwald, Elsevier Sounders, chapter 24、または ESC Guidelines for the diagnosis and treatment of acute and chronic heart failure (European Heart Journal (2008) 29, 2388-2442)に記載されている。
【0070】
ベータ遮断薬（しばしばベータアドレナリン遮断薬と呼ばれる）は、特にβ-アドレナ
リン受容体上において、内因性のカテコールアミン類であるエピネフリン(アドレナリン)およびノルエピネフリン（ノルアドレナリン）の作用を遮断する。好ましくは、ベータ遮断薬はセブトロール(cebutolol)、アルプレノロール(alprenolol)、アテノロール(atenolol)、ベタキソロール(betaxolol)、ビソプロロール(bisoprolol)、ブプラノロール(bupranolol)、カラゾロール(carazolol)、カルテオロール(carteolol)、カルベジロール(carvedilol)、セリプロロール(celiprolol)、メチプラノロール(metipranolol)、メトプロロール(metoprolol)、ナドロール(nadolol)、ネビボロール(nebivolol)、オキシプレノロール(oxprenolol)、ペンブトロール(penbutolol)、ピンドロール(pindolol)、プロプラノロール(propanolol)、ソタロール(sotalol)、タニロロール(tanilolol)、およびチモロール(timolol)からなる群から選択される。最も好ましいベータ遮断薬はアテノロール、カルベジロール、メトプロロール、およびビソプロロールである。
リン受容体上において、内因性のカテコールアミン類であるエピネフリン(アドレナリン)およびノルエピネフリン（ノルアドレナリン）の作用を遮断する。好ましくは、ベータ遮断薬はセブトロール(cebutolol)、アルプレノロール(alprenolol)、アテノロール(atenolol)、ベタキソロール(betaxolol)、ビソプロロール(bisoprolol)、ブプラノロール(bupranolol)、カラゾロール(carazolol)、カルテオロール(carteolol)、カルベジロール(carvedilol)、セリプロロール(celiprolol)、メチプラノロール(metipranolol)、メトプロロール(metoprolol)、ナドロール(nadolol)、ネビボロール(nebivolol)、オキシプレノロール(oxprenolol)、ペンブトロール(penbutolol)、ピンドロール(pindolol)、プロプラノロール(propanolol)、ソタロール(sotalol)、タニロロール(tanilolol)、およびチモロール(timolol)からなる群から選択される。最も好ましいベータ遮断薬はアテノロール、カルベジロール、メトプロロール、およびビソプロロールである。
【0071】
アルドステロンアンタゴニストは利尿薬のクラスに属し、ミネラロコルチコイド受容体においてアルドステロンの作用に拮抗する。それらはしばしば慢性心不全の管理のために補助療法として他の薬物と組み合わせて用いられる。好ましくは、アルドステロンアンタゴニストはエプレレノン(eplerenone)、スピロノラクトン(spironolactone)、カンレノン(canrenone)、メキシレノン(mexrenone)、プロレノン(prorenone)からなる群から選択さ
れる。特に好ましいアルドステロンアンタゴニストは、スピロノラクトン（７α－アセチルチオ－３－オキソ－１７α－プレグナ－４－エン－２１，１７－カルボラクトン）またはエプレレノン(eplerenone)である。
れる。特に好ましいアルドステロンアンタゴニストは、スピロノラクトン（７α－アセチルチオ－３－オキソ－１７α－プレグナ－４－エン－２１，１７－カルボラクトン）またはエプレレノン(eplerenone)である。
【0072】
利尿薬は、尿によるナトリウムおよび水の排出を増加させる利尿薬である。特に好ましい利尿薬は、ループ利尿薬またはチアジド系利尿薬である。
好ましくは、ループ利尿薬はそれらの有効性および迅速な作用開始のため用いられる。それらは腎臓の上行性ヘンレ係蹄(ascending loop of Henle)に作用する。好ましくは、
ループ利尿薬はフロセミド(furosemide)、アゾセミド(azosemide)、ブメタニド(bumetani
de)、ピレタニド(piretanide)、トラセミド(torasemide)、エタクリン酸(ethacrynic acid)、エトゾリン(etozolin)の群から選択される。特に、ループ利尿薬はフロセミドである。
好ましくは、ループ利尿薬はそれらの有効性および迅速な作用開始のため用いられる。それらは腎臓の上行性ヘンレ係蹄(ascending loop of Henle)に作用する。好ましくは、
ループ利尿薬はフロセミド(furosemide)、アゾセミド(azosemide)、ブメタニド(bumetani
de)、ピレタニド(piretanide)、トラセミド(torasemide)、エタクリン酸(ethacrynic acid)、エトゾリン(etozolin)の群から選択される。特に、ループ利尿薬はフロセミドである。
【0073】
好ましくは、チアジド系利尿薬はヒドロクロロチアジド(hydrochlorthiazide)およびクロルタリドン(chlortalidon)の群から選択される。特に好ましいチアジド系利尿薬はヒドロクロロチアジドである。
【0074】
レニン－アンギオテンシン系（ＲＡＳ）の阻害薬には、アンギオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害薬、アンギオテンシンＩＩ受容体遮断薬（ＡＲＢ、アンギオテンシンＩＩ受容体アンタゴニスト）、および直接的レニン阻害薬が含まれる。好ましくは、阻害薬はＡＣＥ阻害薬である。同様に好ましくは、阻害薬はアンギオテンシンＩＩ受容体遮断薬である。
【0075】
好ましくは、ＡＣＥ阻害薬はベナゼプリル(benazepril)、カプトプリル(captopril)、
シラザプリル(cilazapril)、エナラプリル(enalapril)、ホシノプリル(fosinopril)、リ
シノプリル(lisinopril)、モエキシプリル(moexipril)、ペリンドプリル(perindopril)、キナプリル(quinapril)、ラミプリル(ramipril)、スピラプリル(spirapril)、およびトランドラプリル(trandolapril)からなる群から選択される。特に好ましいＡＣＥ阻害薬は、カプトプリル、エナラプリル、リシノプリル、ラミプリル、またはトランドラプリルである。
シラザプリル(cilazapril)、エナラプリル(enalapril)、ホシノプリル(fosinopril)、リ
シノプリル(lisinopril)、モエキシプリル(moexipril)、ペリンドプリル(perindopril)、キナプリル(quinapril)、ラミプリル(ramipril)、スピラプリル(spirapril)、およびトランドラプリル(trandolapril)からなる群から選択される。特に好ましいＡＣＥ阻害薬は、カプトプリル、エナラプリル、リシノプリル、ラミプリル、またはトランドラプリルである。
【0076】
好ましくは、アンギオテンシンＩＩ受容体アンタゴニストはロサルタン(losartan)、バルサルタン(valsartan)、イルベサルタン(irbesartan)、カンデサルタン(candesartan)、オルメサルタン(olmesartan)、テルミサルタン(telmisartan)、およびエプロサルタン(eprosartan)からなる群から選択される。特に好ましいＡＲＢはバルサルタン、ロサルタン、カンデサルタン、またはテルミサルタンである。
【0077】
好ましい直接的レニン阻害薬はアリスキレン(aliskiren)である。
本明細書中で前記に述べたように、検査される被検体は、試験試料を入手した時点で既に前記少なくとも１種類の医薬で治療されていてもよい。したがって、本発明方法を実施することにより、より高い用量、すなわち試験試料を入手する前に投与された前記医薬の用量より高い用量の前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体が同定される。好ましくは、日用量をより高くすべきである。本発明に関して、用量を最高で５００％またはそれ以上増加させることが考慮される。好ましくは、試験試料を入手する前に投与された用量より少なくとも３０％、より好ましくは少なくとも５０％、よりさらに好ましくは少なくとも１００％、または最も好ましくは少なくとも２００％、用量を高くすべきである。
本明細書中で前記に述べたように、検査される被検体は、試験試料を入手した時点で既に前記少なくとも１種類の医薬で治療されていてもよい。したがって、本発明方法を実施することにより、より高い用量、すなわち試験試料を入手する前に投与された前記医薬の用量より高い用量の前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体が同定される。好ましくは、日用量をより高くすべきである。本発明に関して、用量を最高で５００％またはそれ以上増加させることが考慮される。好ましくは、試験試料を入手する前に投与された用量より少なくとも３０％、より好ましくは少なくとも５０％、よりさらに好ましくは少なくとも１００％、または最も好ましくは少なくとも２００％、用量を高くすべきである。
【0078】
前記方法に関して本明細書中で用いる用語“被検体(subject)”は、動物、好ましくは
哺乳動物、より好ましくはヒトに関する。本発明に関して、被検体が心不全（ＨＦ）に罹患していることを想定する。
哺乳動物、より好ましくはヒトに関する。本発明に関して、被検体が心不全（ＨＦ）に罹患していることを想定する。
【0079】
本明細書中で用いる用語“心不全”は、心臓の収縮期および／または拡張期機能障害であって、当業者に既知の心不全の顕性徴候が付随するものに関する。好ましくは、本明細書中で心不全は慢性心不全をも表わす。本発明による心不全には、顕性および／または進行性の心不全が含まれる。顕性心不全において、被検体は当業者に既知の心不全の症状を示す。
【0080】
ＨＦは種々の重症度に分類できる。
ＮＹＨＡ(New York Heart Association)分類法によれば、心不全患者はＮＹＨＡクラスＩ、ＩＩ、ＩＩＩおよびＩＶに属するものとして分類される。心不全を伴なう患者は、既にその心膜、心筋、冠動脈循環または心臓弁に構造および機能の変化が生じている。患者はその健康を完全には回復できないと予想され、治療処置の必要がある。ＮＹＨＡクラスＩの患者は、心血管疾患の明らかな症状をもたないが、既に機能障害の客観的証拠を備えている。ＮＹＨＡクラスＩＩの患者は、身体活動がわずかに制限される。ＮＹＨＡクラスＩＩＩの患者は、身体活動の顕著な制限を示す。ＮＹＨＡクラスＩＶの患者は、不快感なしにいかなる身体活動も行なうことができない。彼らは静止時に心不全の症状を示す。
ＮＹＨＡ(New York Heart Association)分類法によれば、心不全患者はＮＹＨＡクラスＩ、ＩＩ、ＩＩＩおよびＩＶに属するものとして分類される。心不全を伴なう患者は、既にその心膜、心筋、冠動脈循環または心臓弁に構造および機能の変化が生じている。患者はその健康を完全には回復できないと予想され、治療処置の必要がある。ＮＹＨＡクラスＩの患者は、心血管疾患の明らかな症状をもたないが、既に機能障害の客観的証拠を備えている。ＮＹＨＡクラスＩＩの患者は、身体活動がわずかに制限される。ＮＹＨＡクラスＩＩＩの患者は、身体活動の顕著な制限を示す。ＮＹＨＡクラスＩＶの患者は、不快感なしにいかなる身体活動も行なうことができない。彼らは静止時に心不全の症状を示す。
【0081】
この機能分類法は、American College of Cardiology and the American Heart Association (参照：J. Am. Coll. Cardiol. 2001; 38;2101-2113, 2005年に更新, 参照：J. Am. Coll. Cardiol. 2005; 46;el-e82)による、より最近の分類法によって補足される。４つのステージＡ、Ｂ、ＣおよびＤが規定される。ステージＡおよびＢはＨＦではないが、“実際に”ＨＦを発症する前に患者を早期同定するのに役立つと考えられる。ステージＡおよびＢの患者は、ＨＦを発症するリスク因子をもつ者と定義するのが最良である。たとえば、冠動脈疾患、高血圧症または糖尿病を伴なう患者であってまだ左心室（ＬＶ）機能障害、肥大、または心室の幾何学的変形を呈していない者はステージＡとみなされ、これに対し、無症候性ではあるがＬＶ肥大および／またはＬＶ機能障害を呈している患者はステージＢと表示されるであろう。次いでステージＣは根源となる構造性の心疾患に関連する現在または過去のＨＦの症状を伴なう患者を表わし（ＨＦを伴なう患者の大部分）、ステージＤは真に難治性のＨＦを伴なう患者を示す。
【0082】
本明細書中で用いる用語“心不全”は、特に、前記のＡＣＣ／ＡＨＡ分類のステージＢ、ＣおよびＤを表わす。これらのステージでは、被検体は心不全の典型的な症状を示す。したがって、心不全に罹患している被検体は、ＡＣＣ／ＡＨＡクラス分類のステージＢ、ＣまたはＤ、特にステージＣまたはＤに罹患している。同様に好ましくは、被検体をＮＹＨＡクラスＩＩ、ＩＩＩまたはＩＶ、特にクラスＩＩＩまたはＩＶに属すると分類することもできる。
【0083】
好ましくは、本発明に関して被検体は腎機能障害を伴なわない。好ましくは、被検体は腎不全に罹患していてはならず、特に被検体は急性、慢性および／または末期の腎不全に罹患していてはならない。さらに、被検体は、好ましくは腎性高血圧症に罹患していてはならない。被検体が腎機能障害を示すかどうかを評価する方法は当技術分野で周知である。腎障害は、適切であると思われるいずれか既知の手段により診断できる。特に、腎機能は糸球体濾過速度（ＧＦＲ）により評価できる。たとえば、ＧＦＲはコックグロフト－ゴールト(Cockgroft-Gault)式またはＭＤＲＤ式により計算できる(Levey 1999, Annals of Internal Medicine, 461-470)。ＧＦＲは、単位時間当たり腎糸球体毛細血管からボーマ
ン嚢内へ濾過される体液の体積である。臨床において、これは腎機能を判定するためにしばしば用いられる。コックグロフト－ゴールト式またはＭＤＲＤ式などの式から得られるすべての計算値は、イヌリンを血漿に注入することによって“真の”ＧＦＲではなく推定値を与える。イヌリンは糸球体濾過後に腎臓により再吸収されないので、それの排出速度は糸球体フィルターを通る水および溶質の濾過速度に正比例する。しかし、臨床実務では、クレアチニンクリアランスがＧＦＲの測定に用いられる。クレアチニンは内因性分子であり、体内で合成され、糸球体によって自由に濾過される（ただし、尿細管によってもごく少量排出される）。したがって、クレアチニンクリアランス（ＣｒＣｌ）はＧＦＲに近似する。ＧＦＲは一般にミリリットル／分（ｍＬ／分）で記録される。男性についてＧＦＲの正常範囲は９７～１３７ｍＬ／分であり、女性についてＧＦＲの正常範囲は８８～１２８ｍｌ／分である。したがって、特に、腎機能障害を示していない被検体のＧＦＲはこの範囲内にあると考えられる。さらに、その被検体は、好ましくは０．９ｍｇ／ｄｌより下、より好ましくは１．１ｍｇ／ｄｌより下、最も好ましくは１．３ｍｇ／ｄｌより下の血中クレアチニンレベル（特に、血清クレアチニンレベル）をもつ。
ン嚢内へ濾過される体液の体積である。臨床において、これは腎機能を判定するためにしばしば用いられる。コックグロフト－ゴールト式またはＭＤＲＤ式などの式から得られるすべての計算値は、イヌリンを血漿に注入することによって“真の”ＧＦＲではなく推定値を与える。イヌリンは糸球体濾過後に腎臓により再吸収されないので、それの排出速度は糸球体フィルターを通る水および溶質の濾過速度に正比例する。しかし、臨床実務では、クレアチニンクリアランスがＧＦＲの測定に用いられる。クレアチニンは内因性分子であり、体内で合成され、糸球体によって自由に濾過される（ただし、尿細管によってもごく少量排出される）。したがって、クレアチニンクリアランス（ＣｒＣｌ）はＧＦＲに近似する。ＧＦＲは一般にミリリットル／分（ｍＬ／分）で記録される。男性についてＧＦＲの正常範囲は９７～１３７ｍＬ／分であり、女性についてＧＦＲの正常範囲は８８～１２８ｍｌ／分である。したがって、特に、腎機能障害を示していない被検体のＧＦＲはこの範囲内にあると考えられる。さらに、その被検体は、好ましくは０．９ｍｇ／ｄｌより下、より好ましくは１．１ｍｇ／ｄｌより下、最も好ましくは１．３ｍｇ／ｄｌより下の血中クレアチニンレベル（特に、血清クレアチニンレベル）をもつ。
【0084】
好ましくは、被検体はＡＣＳ(acute coronary syndrome（急性冠動脈症候群）)に罹患
していない。本明細書中で用いる用語“ＡＣＳ”は、ＳＴＥＭＩ(ST-elevation myocardial infarction（ＳＴ上昇型心筋梗塞）)；ＮＳＴＥＭＩ(non ST-elevation myocardial infarction（非ＳＴ上昇型心筋梗塞）)および不安定狭心症を含む。検査される被検体がＡＣＳ歴をもたないことをさらに想定する。特に、被検体は本発明方法の実施前１か月の期間内（より厳密には、試料の入手前１か月の期間内）にＡＣＳに罹患していてはならない。
していない。本明細書中で用いる用語“ＡＣＳ”は、ＳＴＥＭＩ(ST-elevation myocardial infarction（ＳＴ上昇型心筋梗塞）)；ＮＳＴＥＭＩ(non ST-elevation myocardial infarction（非ＳＴ上昇型心筋梗塞）)および不安定狭心症を含む。検査される被検体がＡＣＳ歴をもたないことをさらに想定する。特に、被検体は本発明方法の実施前１か月の期間内（より厳密には、試料の入手前１か月の期間内）にＡＣＳに罹患していてはならない。
【0085】
前記のように、検査される被検体を本発明方法に関して述べる医薬で治療することができる。好ましくは、被検体を利尿薬、ベータ遮断薬、アルドステロンアンタゴニスト、および／またはレニン－アンギオテンシン系の阻害薬で治療する。この場合、本発明方法はより高い用量の医薬の投与に適格な被検体を同定でき、あるいはより高い用量の医薬の投与に適格ではない（好ましくは、用量を変更せずにその治療を継続できる）被検体を同定できる。
【0086】
用語“試料”は、体液の試料、分離した細胞の試料、または組織もしくは臓器からの試料を表わす。体液の試料は周知の手法により得ることができ、好ましくは血液、血漿、血清または尿の試料、より好ましくは血液、血漿または血清の試料を含む。組織または臓器の試料は、いずれかの組織または臓器から、たとえば生検により得ることができる。分離した細胞は、体液または組織もしくは臓器から、遠心分離またはセルソーティングなどの分離法により得ることができる。好ましくは、細胞、組織または臓器の試料は、本明細書中で述べるペプチドを発現または産生する細胞、組織または臓器から得られる。
【0087】
本明細書中で用いる用語“ＢＮＰタイプペプチド”は、ｐｒｅ－ｐｒｏＢＮＰ、ｐｒｏＢＮＰ、ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰ、およびＢＮＰを含む。ｐｒｅ－ｐｒｏペプチド（ｐｒｅ－ｐｒｏＢＮＰの場合は１３４個のアミノ酸）は短いシグナルペプチドを含み、それが酵素により開裂除去されてｐｒｏペプチド（ｐｒｏＢＮＰの場合は１０８個のアミノ酸）を放出する。このｐｒｏペプチドがさらに開裂して、Ｎ末端ｐｒｏペプチド（ＮＴ－ｐｒｏペプチド；ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰの場合は７６個のアミノ酸）と活性ホルモン（ＢＮＰの場合は３２個のアミノ酸）になる。好ましくは、本発明によるＢＮＰタイプペプチドは、ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰ、ＢＮＰ、およびそのバリアントである。ＢＮＰは活性ホルモンであり、それぞれの不活性カウンターパートＮＴ－ｐｒｏＢＮＰより短い半減期をもつ。ＢＮＰは血中で代謝され、これに対しＮＴ－ｐｒｏＢＮＰは無傷分子として血中を循環し、そのまま腎排出される。ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰのインビボ半減期は、ＢＮＰの半減期である２０分より１２０分長い(Smith 2000, J Endocrinol. 167: 239-46.)。予備分析ではＮＴ－ｐｒｏＢＮＰはより堅牢であり、試料を中央検査室へ容易に運搬できる(Mueller 2004, Clin Chem Lab Med 42: 942-4.)。血液試料を室温で数日間保存でき、あるいは回収損失なしに郵送または輸送できる。これと対照的に、ＢＮＰを室温または４℃で４８時間保存すると、少なくとも２０％の濃度損失が生じる(Mueller 前掲; Wu 2004, Clin Chem 50: 867-73.)。したがって、目的とするタイムコースまたは特性に応じて、活性形または不活性形のナトリウム利尿ペプチドのいずれかの測定が有利である可能性がある。本発明による最も好ましいナトリウム利尿ペプチドは、ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰまたはそのバリアントである。前記で簡単に考察したように、本発明に従って述べるヒトＮＴ－ｐｒｏＢＮＰは、好ましくはヒトＮＴ－ｐｒｏＢＮＰ分子のＮ末端部分に対応する長さ７６個のアミノ酸を含むポリペプチドである。ヒトのＢＮＰおよびＮＴ－ｐｒｏＢＮＰの構造は先行技術において既に詳細に記載されている；たとえば、WO 02/089657、WO 02/083913、またはBonow 前掲。好ましくは、本発明に用いるヒトＮＴ－ｐｒｏＢＮＰは、EP 0 648 228 B1に開示されるヒトＮＴ－ｐｒｏＢＮＰである。これらの先行技術文献を、それらに開示される特定のＮＴ－ｐｒｏＢＮＰおよびそのバリアントの特定の配列に関して本明細書に援用する。本発明に従って述べるＮＴ－ｐｒｏＢＮＰは、さらに、前記で考察したヒトＮＴ－ｐｒｏＢＮＰについての特定の配列の対立遺伝子バリアントおよび他のバリアントを包含する。具体的には、アミノ酸レベルで、ヒトＮＴ－ｐｒｏＢＮＰと、好ましくはヒトＮＴ－ｐｒｏＢＮＰの全長にわたって、少なくとも５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、９７％、９８％、または９９％同一であるバリアントポリペプチドが想定される。２つのアミノ酸配列間の同一度は前記に従って決定できる。同様に包含されるのは、ヒトＮＴ－ｐｒｏＢＮＰのアミノ酸配列と比較してアミノ酸の欠失、置換および／または付加をもつバリアントポリペプチドであり、ただし、それらのポリペプチドがＮＴ－ｐｒｏＢＮＰ特性をもつ限りにおいてである。本明細書中で述べるＮＴ－ｐｒｏＢＮＰ特性は、免疫学的および／または生物学的特性である。好ましくは、ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰバリアントはヒトＮＴ－ｐｒｏＢＮＰのものに匹敵する免疫学的特性（すなわち、エピトープ組成）をもつ。したがって、それらのバリアントは、ナトリウム利尿ペプチドの量を決定するために用いる前記の手段またはリガンドによって特異的に認識されるはずである。生物学的および／または免疫学的ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰ特性は、Karl et al. (Karl 1999, Scand J Clin Lab Invest 230:177-181)、Yeo et al. (Yeo 2003, Clinica Chimica Acta 338:107-115)に記載されるアッセイにより検出できる。
【0088】
用語“増殖分化因子－１５”または“ＧＤＦ－１５”は、トランスフォーミング増殖因子（ＴＧＦ）サイトカインスーパーファミリーのメンバーであるポリペプチドに関係する。用語ポリペプチド、ペプチドおよびタンパク質は本明細書全体において互換性をもって用いられる。ＧＤＦ－１５は最初はマクロファージ阻害性サイトカイン１としてクローニングされ、後に胎盤性トランスフォーミング増殖因子－１５、胎盤性骨形態形成タンパク質、非ステロイド系抗炎症薬活性化遺伝子１、および前立腺由来因子としても同定された(Bootcov 前掲; Hromas, 1997 Biochim Biophys Acta 1354:40-44; Lawton 1997, Gene 203:17-26; Yokoyama-Kobayashi 1997, J Biochem (Tokyo), 122:622-626; Paralkar 1998, J Biol Chem 273:13760-13767)。他のＴＧＦ関連サイトカインと同様に、ＧＤＦ－１５は不活性前駆タンパク質として合成され、それがジスルフィド結合ホモダイマー化を受ける。Ｎ末端ｐｒｏ－ペプチドがタンパク質分解開裂されると、ＧＤＦ－１５が約２８ｋＤａのダイマータンパク質として分泌される(Bauskin 2000, Embo J 19:2212-2220)。ＧＤＦ－１５のアミノ酸配列は、WO99/06445, WO00/70051, WO2005/113585, Bottner 1999, Gene 237: 105-111, Bootcov 前掲, Tan 前掲Baek 2001, Mol Pharmacol 59: 901-908, Hromas 前掲, Paralkar 前掲, Morrish 1996, Placenta 17:431-441 または Yokoyama-Kobayashi 前掲に開示されている。本明細書中で用いるＧＤＦ－１５は、前記特定のＧＤＦ－１５のバリアントをも包含する。そのようなバリアントは、少なくとも前記特定のＧＤＦ－１５ポリペプチドと同じ本質的な生物学的および免疫学的特性をもつ。特に、それらを本明細書に述べるものと同じ特異的アッセイ法、たとえばそのＧＤＦ－１５ポリペプチドを特異的に認識するポリクローナル抗体またはモノクローナル抗体を用いるＥＬＩＳＡアッセイにより検出できれば、それらは同じ本質的な生物学的および免疫学的特性を共有する。好ましいアッセイを付随する実施例に記載する。さらに、下記のことを理解すべきである：本発明に従って述べるバリアントは少なくとも１つのアミノ酸の欠失、置換および／または付加のため異なるアミノ酸配列をもつはずであり、その際、バリアントのアミノ酸配列はなお、その特定のＧＤＦ－１５ポリペプチドのアミノ配列と、好ましくはヒトＧＤＦ－１５のアミノ酸配列と、より好ましくはその特定のＧＤＦ－１５の、たとえばヒトＧＤＦ－１５の全長にわたって、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９２％、少なくとも約９５％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％，または少なくとも約９９％、同一である。２つのアミノ酸配列間の同一度は前記に従って決定できる。前記に述べたバリアントは、対立遺伝子バリアント、または他のいずれかの種特異的なホモログ(homolog)、パラログ(paralog)もしくはオルソログ(ortholog)であってもよい。
さらに、本明細書中で述べるバリアントには、その特定のＧＤＦ－１５ポリペプチドまたは前記タイプのバリアントの、フラグメントが含まれる；ただし、これらのフラグメントが前記に述べた本質的な免疫学的および生物学的特性をもつ限りにおいてである。そのようなフラグメントは、たとえばＧＤＦ－１５ポリペプチドの分解生成物であってもよい。さらに、翻訳後修飾、たとえばリン酸化またはミリスチル化のため異なるバリアントが含まれる。
さらに、本明細書中で述べるバリアントには、その特定のＧＤＦ－１５ポリペプチドまたは前記タイプのバリアントの、フラグメントが含まれる；ただし、これらのフラグメントが前記に述べた本質的な免疫学的および生物学的特性をもつ限りにおいてである。そのようなフラグメントは、たとえばＧＤＦ－１５ポリペプチドの分解生成物であってもよい。さらに、翻訳後修飾、たとえばリン酸化またはミリスチル化のため異なるバリアントが含まれる。
【0089】
インスリン様増殖因子結合タンパク質（ＩＧＦＢＰ）系は、細胞の増殖および分化に際して重要な役割を果たす。それは２種類のリガンドであるＩＧＦ－ＩおよびＩＧＦ－ＩＩ、２種類の受容体である１型および２型ＩＧＦ受容体、ならびに１９９５年現在で６種類のＩＧＦ結合タンパク質（ＩＧＦＢＰ）であるＩＧＦＢＰ－１～－６を含む(Jones, J.I., et al., Endocr. Rev. 16 (1995) 3-34)。最近、ＩＧＦＢＰファミリーは、ＩＧＦＢＰと有意の構造類似性をもつＩＧＦＢＰ関連タンパク質（ＩＧＦＢＰ－ｒＰ）を含むように拡張された(Hwa, V., et al., Endocr. Rev 20 (1999) 761-787)。したがって、ＩＧＦＢＰスーパーファミリーは、ＩＧＦに対する高い親和性をもつ６種類の一般的ＩＧＦＢＰ、ならびにＩＧＦＢＰの保存されたアミノ末端ドメインを共有するだけでなくＩＧＦおよびインスリンに対してもある程度の親和性を示す少なくとも１０種類のＩＧＦＢＰ－ｒＰを含む。ＩＧＦＢＰ－ｒＰは、多様な細胞機能、たとえば細胞増殖、細胞の接着および移動ならびに細胞外マトリックスの合成を制御する、一群のシステインリッチタンパク質である。さらに、これらのタンパク質は、組織の増殖および分化、リプロダクション、血管形成、創傷修復、炎症、線維形成、および腫瘍形成などの生物学的プロセスに関与している可能性がある(Hwa, V., et al., Endocr. Rev 20 (1999)761-787)。
【0090】
ＩＧＦ結合タンパク質７（＝ＩＧＦＢＰ７）は、内皮細胞、血管平滑筋細胞、線維芽細胞、および上皮細胞により分泌されることが知られている３０－ｋＤａのモジュール状の糖タンパク質である(Ono, Y., et al., Biochem Biophys Res Comm 202 (1994) 1490-1496)。その文献では、この分子はＦＳＴＬ２；ＩＢＰ ７；ＩＧＦ結合タンパク質関連タンパク質Ｉ；ＩＧＦＢＰ ７；ＩＧＦＢＰ ７ｖ；ＩＧＦＢＰ ｒＰ１；ＩＧＦＢＰ７；ＩＧＦＢＰＲＰ１；インスリン様増殖因子結合タンパク質７；インスリン様増殖因子結合タンパク質７前駆体；ＭＡＣ２５；ＭＡＣ２５タンパク質；ＰＧＩ２刺激因子；およびＰＳＦまたはプロスタサイクリン刺激因子とも呼ばれている。ノーザンブロット研究により、この遺伝子が心臓、脳、胎盤、肝臓、骨格筋、および膵臓を含めたヒト組織に広く発現することが明らかになった(Oh, Y., et al., J. Biol. Chem. 271 (1996) 30322-30325)。
【0091】
ＩＧＦＢＰ７は、最初は、正常な軟髄膜(leptomeningeal)細胞および哺乳動物上皮細胞にそれらのカウンターパート腫瘍細胞と比較して差別発現する遺伝子として同定され、髄膜腫関連ｃＤＮＡ（ＭＡＣ２５）と命名された(Burger, A.M., et al., Oncogene 16 (1998) 2459-2467)。発現したタンパク質は、腫瘍由来接着因子（後にアンギオモジュリン(angiomodulin)と名称変更された）(Sprenger, C.C., et al., Cancer Res 59 (1999) 2370-2375)、およびプロスタサイクリン刺激因子(Akaogi, K., et al., Proc Natl Acad Sci USA 93 (1996) 8384-8389)として、独立して精製された。それはさらに、Ｔ１Ａｌ２、すなわち乳癌においてダウンレギュレートされる遺伝子として報告された(StCroix, B., et al., Science 289 (2000) 1197-1202)。
【0092】
ＩＧＦＢＰ７ ｍＲＮＡの差別発現が、心疾患、腎疾患、炎症性疾患(US 6,709,855；Scios Inc.)および人工血管疾患(US 2006/0,003,338)を含めた種々の疾患に罹患している
患者において測定された。
患者において測定された。
【0093】
ＩＧＦＢＰ７のホルモン結合特性を調べるための多種多様なアッセイ法が記載され、使用されている。低親和性ＩＧＦ結合は、競合親和性架橋アッセイにより分析された。組換
えヒトｍａｃ２５タンパク質は、ＩＧＦ－Ｉおよび－ＩＩを特異的に結合する(Oh, Y., et al., J. Biol. Chem. 271 (1996) 20322-20325; Kim, H.S., et al., Proc. Natl. Acad. Sci USA94 (1997) 12981-12986.)。ＩＧＦＢＰ活性は、このタンパク質が放射性標識ＩＧＦを結合する能力をウェスタンリガンドブロット法で測定することによっても検出できる。
えヒトｍａｃ２５タンパク質は、ＩＧＦ－Ｉおよび－ＩＩを特異的に結合する(Oh, Y., et al., J. Biol. Chem. 271 (1996) 20322-20325; Kim, H.S., et al., Proc. Natl. Acad. Sci USA94 (1997) 12981-12986.)。ＩＧＦＢＰ活性は、このタンパク質が放射性標識ＩＧＦを結合する能力をウェスタンリガンドブロット法で測定することによっても検出できる。
【0094】
好ましくは、用語“ＩＧＦＢＰ７”はヒトＩＧＦＢＰ７を表わす。このタンパク質の配列は当技術分野で周知であり、たとえばＧｅｎＢａｎｋ（ＮＰ＿００１２４０７６４．１）によりアクセスできる。本明細書中で用いるＩＧＦＢＰ７は、好ましくはその特定のＩＧＦＢＰ７ポリペプチドのバリアントも包含する。用語”バリアント“の説明については前記を参照されたい。
【0095】
循環型ＩＧＦＢＰ７の免疫学的決定は最近行なわれた。低レベルのこの分析物がランダムなヒト血清において検出され、血清レベル増大がインスリン抵抗性と関連してみられた(Lopez-Bermejo, A., et al., J. Clinical Endocrinology and Metabolism 88 (2003) 3401-3408, Lopez-Bermejo, A., et al., Diabetes 55 (2006) 2333-2339)。
【0096】
用語“心臓トロポニン”は、前記の特定のトロポニン類の、すなわち好ましくはトロポニンＩの、より好ましくはトロポニンＴの、バリアントをも包含する。そのようなバリアントは、少なくともそれらの特定の心臓トロポニンと同じ本質的な生物学的および免疫学的特性をもつ。特に、それらを本明細書中で述べるものと同じ特異的アッセイ、たとえばそれらの心臓トロポニンを特異的に認識するポリクローナル抗体またはモノクローナル抗体を用いるＥＬＩＳＡアッセイにより検出できれば、それらは同じ本質的な生物学的および免疫学的特性を共有する。さらに、本発明に従って述べるバリアントは少なくとも１つのアミノ酸の置換、欠失および／または付加のため異なるアミノ酸配列をもつはずであり、その際、バリアントのアミノ酸配列はなお、好ましくは、特定のトロポニンのアミノ配列と、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９２％、少なくとも約９５％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％、同一であることを理解すべきである。バリアントは、対立遺伝子バリアント、または他のいずれかの種特異的なホモログ、パラログもしくはオルソログであってもよい。さらに、本明細書中で述べるバリアントには、特定の心臓トロポニンまたは前記タイプのバリアントの、フラグメントが含まれる；ただし、これらのフラグメントが前記の本質的な免疫学的および生物学的特性をもつ限りにおいてである。好ましくは、心臓トロポニンバリアントはヒトのトロポニンＴまたはトロポニンＩのものに匹敵する免疫学的特性（すなわち、エピトープ組成）をもつ。したがって、バリアントは心臓トロポニンの濃度を測定するために用いる前記の手段またはリガンドによって特異的に認識できるはずである。したがって、バリアントは心臓トロポニンの濃度を測定するために用いる前記の手段またはリガンドによって特異的に認識できるはずである。そのようなフラグメントは、たとえばトロポニンの分解生成物であってもよい。さらに、翻訳後修飾、たとえばリン酸化またはミリスチル化のため異なるバリアントが含まれる。好ましくは、トロポニンＩおよびそれのバリアントの生物学的特性は、インビボおよびインビトロでアクトミオシンＡＴＰアーゼを阻害する能力または血管形成を阻害する能力であり、それらは、たとえばMoses et al. 1999 PNAS USA 96 (6): 2645-2650)により記載されたアッセイに基づいて検出できる。好ましくは、トロポニンＴおよびそれのバリアントの生物学的特性は、トロポニンＣおよびＩと複合体を形成する能力、カルシウムイオンを結合する能力、またはトロポミオシンに結合する能力である：好ましくは、トロポニンＣ、ＩおよびＴの複合体、またはトロポニンＣ、トロポニンＩおよびトロポニンＴバリアントにより形成された複合体として存在する場合。低濃度の循環型心臓トロポニンを種々の状態の被検体において検出できることが知られているが、それらのそれぞれの役割および割合を理解するためにはさらなる研究が必要である(Masson et al., Curr Heart Fail Rep (2010) 7:15-21)。
【0097】
マーカーであるエンドスタチンは当技術分野で周知である。エンドスタチンは、最初にネズミ血管内皮腫からＸＶＩＩＩ型コラーゲンの２０ｋＤＡタンパク質分解フラグメントとして単離された(O'Reilly, M.S. et al., Cell 88 (1997) 277-285)。コラーゲンは、
組織構造統合性の維持に主要な役割を果たす超分子凝集体を形成する特徴的な三重らせんコンホメーションをもつ、細胞外マトリックスタンパク質のファミリーを表わす。過度のコラーゲン沈着は線維症をもたらして、周囲組織の正常な機能を攪乱する。コラーゲンＸＶＩＩＩは、中央三重らせんドメインに多数の介在配列をもち、主に基底膜にあるＣ末端にユニークな非三重らせんドメインをもつ、マルチプレキシン(Multiplexin)ファミリー
のコラーゲンのメンバーである。短いイソ形のコラーゲンＸＶＩＩＩのヒト型アルファ１鎖（ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ：Ｐ３９０６０）の配列は、たとえばWO2010/124821に開示され
ており、これをそれの開示内容全体について本明細書に援用する。
組織構造統合性の維持に主要な役割を果たす超分子凝集体を形成する特徴的な三重らせんコンホメーションをもつ、細胞外マトリックスタンパク質のファミリーを表わす。過度のコラーゲン沈着は線維症をもたらして、周囲組織の正常な機能を攪乱する。コラーゲンＸＶＩＩＩは、中央三重らせんドメインに多数の介在配列をもち、主に基底膜にあるＣ末端にユニークな非三重らせんドメインをもつ、マルチプレキシン(Multiplexin)ファミリー
のコラーゲンのメンバーである。短いイソ形のコラーゲンＸＶＩＩＩのヒト型アルファ１鎖（ＳｗｉｓｓＰｒｏｔ：Ｐ３９０６０）の配列は、たとえばWO2010/124821に開示され
ており、これをそれの開示内容全体について本明細書に援用する。
【0098】
エンドスタチンは、種々のタンパク質分解酵素の作用によりコラーゲンＸＶＩＩＩのアルファ１鎖から放出される(詳細については、Ortega, N. and Werb, Z., Journal of Cell Science 115 (2002) 4201-4214を参照－この報文の記載全体を本明細書に援用する)。本明細書中で用いるエンドスタチンは、WO2010/124821に開示されるようにコラーゲンＸＶＩＩＩのアミノ酸位置１３３７からアミノ酸位置１５１９までの範囲のコラーゲンＸＶＩＩＩフラグメントにより表わされる。コラーゲンＸＶＩＩＩのアルファ鎖のＣ末端のヒンジ領域は、幾つかのプロテアーゼ感受性部位を含み、好中球エラスターゼ、カテプシンおよびマトリックスメタロプロテイナーゼを含めた多数の酵素がコラーゲン鎖をこの領域で開裂することによりエンドスタチンを生成することが知られている。これらのプロテアーゼはエンドスタチンのみを放出するわけではなく、エンドスタチン配列を含む他のより大きなフラグメントも放出する可能性がある。当業者に明らかなように、そのようなより大きなフラグメントもエンドスタチンに対する免疫アッセイにより測定されるであろう。
【0099】
オステオポンチン（本明細書中で“ＯＰＮ”とも呼ぶ）は、骨シアロタンパク質Ｉ(bone sialoprotein I)（ＢＳＰ－１またはＢＮＳＰ）、初期Ｔリンパ球活性化(early T-lymphocyte activation)（ＥＴＡ－１）、分泌型リンタンパク質１(secreted phosphoprotein 1)（ＳＰＰ１）、２ａｒ、およびリケッチア抵抗性(Rickettsia resistance)（Ｒｉｃ）としても知られ、広範囲(extensive)二次構造を欠如する高負電荷の細胞外マトリックスタンパク質であるポリペプチドである。それは約３００個のアミノ酸（マウスでは２９７個；ヒトでは３１４個）から構成され、３３－ｋＤａの原始型(nascent)タンパク質として発現する；機能的に重要な開裂部位もある。ＯＰＮは翻訳後修飾を受ける可能性があり、これにより見掛け分子量が約４４ｋＤａに増大する。オステオポンチンの配列は当技術分野で周知である（ヒト オステオポンチン：ＵｎｉＰｒｏｔ Ｐ１０４５１，ＧｅｎＢａｎｋ ＮＰ＿０００５７３．１）。オステオポンチンは、正常な血漿、尿、乳汁および胆汁中にみられる(US 6,414,219; US 5,695,761; Denhardt, D.T. and Guo, X., FASEB J. 7 (1993) 1475-1482; Oldberg, A., et al., PNAS 83 (1986) 8819-8823; Oldberg, A., et al., J. Biol. Chem. 263 (1988) 19433-19436; Giachelli, CM., et al., Trends Cardiovasc. Med. 5 (1995) 88-95)。ヒトＯＰＮのタンパク質およびｃＤＮＡが単離および配列決定された(Kiefer M. C, et al., Nucl. Acids Res. 17 (1989) 3306)。ＯＰＮは、細胞接着、走化性、マクロファージ指向性インターロイキン－１０において機能する。ＯＰＮは多数のインテグリン受容体と相互作用することが知られている。ＯＰＮ発現増大が多数のヒト癌において報告されており、それのコグネイト受容体（ａｖ－ｂ３、ａｖ－ｂ５、およびａｖ－ｂｌインテグリン類、ならびにＣＤ４４）が同定された。Irby, R.B., et al., Clin. Exp. Metastasis 21 (2004) 515-523によるインビトロ研究は、内因性
ＯＰＮ発現（安定トランスフェクションによるもの）および外因性ＯＰＮ（培地に添加されたもの）の両方ともインビトロでヒト結腸癌細胞の運動性および浸潤能を増強すること
を示す。
ＯＰＮ発現（安定トランスフェクションによるもの）および外因性ＯＰＮ（培地に添加されたもの）の両方ともインビトロでヒト結腸癌細胞の運動性および浸潤能を増強すること
を示す。
【0100】
エンドスタチンは血管形成および血管増殖の強力な阻害剤である。エンドスタチンとサイトカインネットワークの関係は判定されていないが、エンドスタチンは広範な遺伝子の発現を変更できることが知られている(Abdollahi, A. et al., MoI. Cell 13 (2004) 649-663)。
【0101】
本明細書中で用いるエンドスタチンは、好ましくは特定のエンドスタチンポリペプチドのバリアントをも包含する。用語“バリアント”の説明については前記を参照されたい。
ミメカンは、ロイシンリッチ反復配列をもつ小プロテオグリカンであり、２９８個のアミノ酸を含む前駆体である。ミメカンの別名はＯＧＮ、オステオグリシン、ＯＧ、ＯＩＦ、ＳＬＲＲ３Ａである。
ミメカンは、ロイシンリッチ反復配列をもつ小プロテオグリカンであり、２９８個のアミノ酸を含む前駆体である。ミメカンの別名はＯＧＮ、オステオグリシン、ＯＧ、ＯＩＦ、ＳＬＲＲ３Ａである。
【0102】
ミメカンは、構造関連コアタンパク質をもつ分泌型の小ロイシンリッチプロテオグリカン(small leucine rich proteoglycan)（ＳＬＲＰ）ファミリーのメンバーである。すべ
てのＳＬＲＰが共有する共通の特徴は、コアタンパク質のＣ末端側半分にある縦列ロイシンリッチ反復配列(leucine-rich repeat)（ＬＲＲ）単位である。しかしＮ末端領域にお
いて、各クラスのＳＬＲＰは、保存されたスペーシングを備えたシステインクラスターを含むＬＲＲ Ｎ－ドメインと呼ばれるユニークドメインをもつ。クラスＩＩＩ ＳＬＲＰは６つのカルボキシル側ＬＲＲを含み、これにはミメカン、エピフィカン(epiphycan)、
およびオプチシン(opticin)が含まれる。
てのＳＬＲＰが共有する共通の特徴は、コアタンパク質のＣ末端側半分にある縦列ロイシンリッチ反復配列(leucine-rich repeat)（ＬＲＲ）単位である。しかしＮ末端領域にお
いて、各クラスのＳＬＲＰは、保存されたスペーシングを備えたシステインクラスターを含むＬＲＲ Ｎ－ドメインと呼ばれるユニークドメインをもつ。クラスＩＩＩ ＳＬＲＰは６つのカルボキシル側ＬＲＲを含み、これにはミメカン、エピフィカン(epiphycan)、
およびオプチシン(opticin)が含まれる。
【0103】
クラスＩおよびＩＩのメンバー、たとえばデコリン(decorin)、ビグリカン(biglycan)
、ルーメカン(lumecan)およびフィブロモジュリン(fibromodulin)についてのマウスノッ
クアウト体からの機能試験は、ＳＬＲＰ欠損マウスが異常なコラーゲン原線維形成に起因する広範な一連の欠陥を呈することを示し、これはこれらのＳＬＲＰがコラーゲンマトリックスの樹立および維持に重要な役割を果たすことを示唆する(Ameye, L. and Young, M.F., Glycobiology 12 (2002) 107R-116R)。クラスＩＩＩミメカンはコラーゲン細線維の異常も引き起こした(Tasheva, E.S. et al., MoI. Vis. 8 (2002) 407-415)。
、ルーメカン(lumecan)およびフィブロモジュリン(fibromodulin)についてのマウスノッ
クアウト体からの機能試験は、ＳＬＲＰ欠損マウスが異常なコラーゲン原線維形成に起因する広範な一連の欠陥を呈することを示し、これはこれらのＳＬＲＰがコラーゲンマトリックスの樹立および維持に重要な役割を果たすことを示唆する(Ameye, L. and Young, M.F., Glycobiology 12 (2002) 107R-116R)。クラスＩＩＩミメカンはコラーゲン細線維の異常も引き起こした(Tasheva, E.S. et al., MoI. Vis. 8 (2002) 407-415)。
【0104】
ミメカンは細胞外マトリックスの多機能成分である。それは多様な他のタンパク質（ＩＧＦ２、ＩＫＢＫＧ、ＩＦＮＢｌ、ＩＮＳＲ、ＣＨＵＫ、ＩＫＢＫＢ、ＮＦＫＢＩＡ、ＩＬｌ ５、Ｃｄ３、レチノイン酸、ＡＰＰ、ＴＮＦ、リポ多糖、ｃ－ａｂｌ癌遺伝子１、受容体型チロシンキナーゼ、ｖ－ｓｒｃ肉腫ウイルス癌遺伝子）に結合する。これらの多様な結合活性は、ミメカンが多くの組織において多様な機能を発揮する能力に寄与している可能性がある。
【0105】
ミメカンは角膜、骨、皮膚、およびさらに他の組織に見出された。それの発現パターンは種々の病的状態で変化する。ミメカンの生物学的役割に関するデータの量は増加しているにもかかわらず、それの機能はまだ明らかではない。ミメカンは、発生、組織修復、および転移に際して必須のプロセスであるコラーゲン原線維形成の調節に関与することが示された(Tasheva et al., MoI. Vis. 8 (2002) 407-415)。それは骨形成に際してＴＧＦ－ベータ－１またはＴＧＦ－ベータ－２との組合わせで役割を果たす。
【0106】
ヒト ミメカンポリペプチドの配列は当技術分野で周知であり、たとえばＧｅｎＢａｎｋ寄託番号ＮＰ＿０５４７７６．１ ＧＩ：７６６１７０４でアセスできる。さらに、その配列はWO2011/012268に開示されている。本明細書中で用いるミメカンは、好ましくは
特定のミメカンポリペプチドのバリアントをも包含する。用語“バリアント”の説明については前記を参照されたい。本発明に関して、ミメカンは、好ましくはWO2011/012268の
記載に従って決定される。
特定のミメカンポリペプチドのバリアントをも包含する。用語“バリアント”の説明については前記を参照されたい。本発明に関して、ミメカンは、好ましくはWO2011/012268の
記載に従って決定される。
【0107】
本明細書中で用いる用語“可溶性Ｆｌｔ－１”または“ｓＦｌｔ－１”（可溶性ｆｍｓ様チロシンキナーゼ－１）は、可溶性形態のＶＥＧＦ受容体Ｆｌｔ１であるポリペプチドを表わす。それはヒト臍帯静脈内皮細胞の調整培地中で同定された。内因性の可溶性Ｆｌｔ１（ｓＦｌｔ１）受容体は、クロマトグラフィー的および免疫学的に組換えヒトｓＦｌｔ１に類似し、それに匹敵する高い親和性で［１２５Ｉ］ＶＥＧＦを結合する。ヒトｓＦｌｔ１は、インビトロでＫＤＲ／Ｆｌｋ－１の細胞外ドメインと共にＶＥＧＦ安定化された複合体を形成することが示されている。好ましくは、ｓＦｌｔ１はヒトｓＦｌｔ１を表わす。より好ましくは、ヒトｓＦｌｔ１はＧｅｎｂａｎｋ寄託番号Ｐ１７９４８，ＧＩ：１２５３６１に示されるＦｌｔ－１のアミノ酸配列から推論できる。マウスｓＦｌｔ１のアミノ酸配列はＧｅｎｂａｎｋ寄託番号ＢＡＡ２４４９９．１，ＧＩ：２８０９０７１に示されている。
【0108】
本明細書中で用いる用語“ｓＦｌｔ－１”は、上記の特定のｓＦｌｔ－１ポリペプチドのバリアントをも包含する。そのようなバリアントは、少なくともその特定のｓＦｌｔ－１ポリペプチドと同じ本質的な生物学的および免疫学的特性をもつ。特に、それらを本明細書に述べるものと同じ特異的アッセイ法、たとえばそのｓＦｌｔ－１ポリペプチドを特異的に認識するポリクローナル抗体またはモノクローナル抗体を用いるＥＬＩＳＡアッセイにより検出できれば、それらは同じ本質的な生物学的および免疫学的特性を共有する。用語“バリアント”のより詳細な説明については前記を参照されたい。
【0109】
本明細書中で用いる用語“ＰｌＧＦ”（胎盤増殖因子）は、胎盤由来増殖因子を表わし、それは１４９アミノ酸長さのポリペプチドであり、ヒト血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）の血小板由来増殖因子様の領域に対して高度に相同性である（５３％の同一性）。ＶＥＧＦと同様に、ＰｌＧＦはインビトロおよびインビボで血管形成活性をもつ。たとえば、トランスフェクションしたＣＯＳ－１細胞に由来するＰｌＧＦの生物学的および機能的な特性解明により、それはインビトロで内皮細胞増殖を刺激することができるグリコシル化されたダイマー状の分泌タンパク質であることが明らかになった(Maqlione1993, Oncogene 8(4):925-31)。好ましくは、ＰｌＧＦはヒトＰｌＧＦ、より好ましくはＧｅｎｅｂａｎｋ寄託番号Ｐ４９７６３，ＧＩ：１７３８０５５３（Ｇｅｎｅｂａｎｋは米国ＮＣＢＩからwww.ncbi.nlm.nih.gov/entrezで入手できる）に示されるアミノ酸配列をもつヒトＰｌＧ
Ｆを表わす。
Ｆを表わす。
【0110】
本発明方法に関して、特にヒトのペプチドまたはポリペプチドの量を決定することを想定する。
尿酸は被検生物におけるプリン代謝の最終産物である。ＩＵＰＡＣ名は７，９－ジヒドロ－３Ｈ－プリン－２，６，８－トリオンである。この化合物はしばしばウレート、リチン酸(Lithic acid)、２，６，８－トリオキシプリン、２，６，８－トリヒドロキシプリ
ン、２，６，８－トリオキソプリン、１Ｈ－プリン－２，６，８－トリオールとも呼ばれる（化合物の式Ｃ５Ｈ４Ｎ４Ｏ３，ＰｕｂＣｈｅｍ ＣＩＤ １１７５，ＣＡＳ番号６９－９３－２）。
尿酸は被検生物におけるプリン代謝の最終産物である。ＩＵＰＡＣ名は７，９－ジヒドロ－３Ｈ－プリン－２，６，８－トリオンである。この化合物はしばしばウレート、リチン酸(Lithic acid)、２，６，８－トリオキシプリン、２，６，８－トリヒドロキシプリ
ン、２，６，８－トリオキソプリン、１Ｈ－プリン－２，６，８－トリオールとも呼ばれる（化合物の式Ｃ５Ｈ４Ｎ４Ｏ３，ＰｕｂＣｈｅｍ ＣＩＤ １１７５，ＣＡＳ番号６９－９３－２）。
【0111】
尿酸測定は、腎不全、痛風、白血病、乾癬、飢餓または他の消耗状態を含めた多数の腎障害および代謝障害の、および細胞毒を投与されている患者の、診断および治療に用いられる。尿酸の酸化が、このプリン代謝産物を定量決定するための２つの方法の基礎となる。１方法は、リンタングステン酸をアルカリ性溶液中でタングステンブルーに還元し、これを測光法で測定するものである。PraetoriusおよびPoulsonが記載する第２の方法は、尿酸を酸化するために酵素ウリカーゼを用いる；この方法では化学的酸化に固有の干渉が排除される(Praetorius E, Poulsen H. Enzymatic Determination of Uric Acid with Detailed Directions. Scandinav J Clin Lab Investigation 1953;3:273-280)。ウリカーゼは、尿酸消費のＵＶ測定を伴なう方法に、または比色アッセイが得られる他の酵素と組み合わせて使用できる。他の方法は、Townら(Town MH, Gehm S, Hammer B, Ziegenhorn J. J Clin Chem Clin Biochem 1985;23:591)が開発した比色法である。試料をまず、アスコルビン酸オキシダーゼおよび清澄化系を含有する試薬混合物と共にインキュベートする。この試験系では、試料中に存在するアスコルビン酸があればそれを予備反応で排除することが重要である；これにより、後続のＰＯＤ指示薬反応との何らかのアスコルビン酸干渉が除かれる。開始試薬を添加すると、ウリカーゼによる尿酸の酸化が開始する。
【0112】
本発明に関して、尿酸は適切と思われるいずれかの方法により決定できる。好ましくは、このバイオマーカーは前記方法により決定される。より好ましくは、尿酸は前記の比色法のわずかな改変を適用することにより決定される。この反応では、ペルオキシドがペルオキシダーゼ（ＰＯＤ）、Ｎ－エチル－Ｎ－（２－ヒドロキシ－３－スルホプロピル）－３－メチルアニリン（ＴＯＯＳ）、および４－アミノフェナゾンの存在下で反応して、キノン－ジイミン色素を形成する。生じた赤色の強度は尿酸濃度に比例し、測光法で決定される。
【0113】
ガレクチン－３（Ｇａｌ－３）は、構造的にユニークな、ベータ－ガラクシド結合レクチンファミリーのメンバーである。ガレクチン－３の発現は、マクロファージ、好中球およびマスト細胞を含めた上皮細胞および炎症細胞と関連づけられた。ガレクチン－３は心不全において重要である多様な生物学的プロセスに関与することが示唆され、これには筋線維芽細胞増殖、線維形成、組織修復、心臓リモデリングおよび炎症が含まれる。ガレクチン－３は約３０ｋＤａであり、すべてのガレクチン類と同様に、β－ガラクトシド類の特異的結合を可能にするアミノ酸約１３０個の炭水化物－認識－結合ドメイン(carbohydrate-recognition-binding domain)（ＣＲＤ）を含む。ガレクチン－３は単一遺伝子ＬＧＡＬＳ３によりコードされる。それは、アミノ酸約１３０個の単一Ｃ末端ＣＲＤに連結した短いアミノ酸セグメントの縦列反復配列をもつＮ末端ドメイン（合計１１０～１３０個のアミノ酸）を含む。それは、核、細胞質、ミトコンドリア、細胞表面、および細胞外空間に発現する。このタンパク質は、下記の生物学的プロセスに関与することが示された：細胞接着、細胞の活性化および化学誘引、細胞の増殖および分化、細胞周期、ならびにアポトーシス。ガレクチン－３レベルの増大は、急性非代償性心不全および慢性心不全の両集団において、より高い死亡リスクと有意に関連することが見出された(たとえば、DeFilippi C, Christenson R, Shah R, et al. (2009). Clinical validation of a novel assay for galectin-3 for risk assessment in acutely destabilized heart failureを参照)。
【0114】
ガレクチン－３のタンパク質配列は当技術分野で周知である；たとえば、ｕｎｉｐｒｏｔ寄託番号Ｐ１７９３１（バージョン５，２００８年１１月２５日）、ＧｅｎＢａｎｋ寄託番号ＮＰ＿００２２９７．２ ＮＭ＿００２３０６．３を参照。
【0115】
ＳＴ２は、機械的ストレス条件下で心臓線維芽細胞および心筋細胞により産生されるＩＬ－１受容体ファミリーのメンバーである。ＳＴ２はインターロイキン－１受容体ファミリーのメンバーであり、膜結合イソ形および可溶性イソ形（ｓＳＴ２）の両方で存在する。本発明に関しては、可溶性ＳＴ２の量を測定すべきである(参照：Dieplinger et al. (Clinical Biochemistry, 43, 2010: 1169 to 1170)。インターロイキン１受容体様１またはＩＬ１ＲＬ１としても知られるＳＴ２は、ヒトにおいてＩＬ１ＲＬ１遺伝子によりコードされる。ヒトＳＴ２ポリペプチドの配列は当技術分野で周知であり、たとえばＧｅｎＢａｎｋによりアクセスできる；参照：ＮＰ＿００３８４７．２ ＧＩ：２７８９４３２８。可溶性ＳＴ２（ｓＳＴ２）は、ＩＬ－３３を結合し、そうでなければ心臓保護性である細胞膜結合型ＳＴ２によるＩＬ－３３のシグナル伝達作用を阻止することにより、デコイ受容体として機能すると考えられる。
【0116】
マーカーであるシスタチンＣは、当技術分野で周知である。シスタチンＣはＣＳＴ３遺伝子によりコードされ、すべての有核細胞によって一定速度で産生され、ヒトにおける産生速度は全生涯にわたって著しく一定である。循環からの排除はほぼすべて糸球体濾過による。この理由で、シスタチンＣの血清濃度は１～５０歳の年齢範囲では筋量および性別とは無関係である。したがって、血漿および血清中のシスタチンＣはより感度の高いＧＦＲマーカーとして提唱された。ヒトシスタチンＣポリペプチドの配列はＧｅｎｂａｎｋによりアセスできる（たとえば、寄託番号ＮＰ＿００００９０．１を参照）。このバイオマーカーは、粒子増強型イムノタービディメトリーアッセイにより決定できる。ヒトシスタチンＣは、抗シスタチンＣ抗体でコートしたラテックス粒子と共に凝集する。この凝集体をタービディメトリーにより決定する。
【0117】
マーカーであるプレアルブミンは当業者に周知である。それは肝細胞で合成されるトリプトファンリッチタンパク質であり、５５０００ダルトンのモル質量をもつ。アノードへのそれの拡散速度が大きいため、８．６のｐＨでアルブミンの前に相対量＜２．５％の電気泳動バンドが現われる。それの機能は、低分子量のレチノール結合タンパク質（２１０００ダルトン未満のモル質量）を結合して輸送し、それらの糸球体濾過を阻止することである。循環型プレアルブミンのうち３０～５０％がレチノール結合タンパク質により複合体形成する。さらに、それはチロキシン（Ｔ４）を結合して輸送するにもかかわらず、このホルモンに対するそれの親和性はチロキシン結合グロブリンのものより低い。ヒト プレアルブミンポリペプチドの配列はＧｅｎｂａｎｋ（たとえば、寄託番号ＮＰ＿０００３６２．１を参照）によりアセスできる。プレアルブミンの決定には多様な方法、たとえば放射免疫拡散（ＲＩＤ）、ネフェメメトリーおよびタービディメトリーを利用できる。
【0118】
トランスフェリン（しばしば、セロトランスフェリン(Serotransferrin)またはベータ
－１金属結合グロブリンとも呼ばれる）は、分子量７９５７０ダルトンをもつ糖タンパク質である。それは、Ｎ－グリコシド連結した２つのオリゴ糖鎖を含むポリペプチド鎖からなる。トランスフェリンは鉄結合性輸送タンパク質であり、１つのアニオン（通常はバイカーボネート）の結合に付随して２つのＦｅ３＋イオンを結合できる。トランスフェリンの決定には、放射免疫拡散、ネフェメメトリーおよびタービディメトリーを含めた多様な方法を利用できる。トランスフェリンの配列は当技術分野で周知である；たとえば、Schaeffer et al. Gene 56:109-116(1987)、またはＵｎｉｐｒｏｔ寄託番号Ｐ０２７８７、特にバージョン１７８を参照）。
－１金属結合グロブリンとも呼ばれる）は、分子量７９５７０ダルトンをもつ糖タンパク質である。それは、Ｎ－グリコシド連結した２つのオリゴ糖鎖を含むポリペプチド鎖からなる。トランスフェリンは鉄結合性輸送タンパク質であり、１つのアニオン（通常はバイカーボネート）の結合に付随して２つのＦｅ３＋イオンを結合できる。トランスフェリンの決定には、放射免疫拡散、ネフェメメトリーおよびタービディメトリーを含めた多様な方法を利用できる。トランスフェリンの配列は当技術分野で周知である；たとえば、Schaeffer et al. Gene 56:109-116(1987)、またはＵｎｉｐｒｏｔ寄託番号Ｐ０２７８７、特にバージョン１７８を参照）。
【0119】
Ｐ１ＮＰ（プロコラーゲン１型Ｎ末端プロペプチド）は、骨形成のマーカーである。それは１型コラーゲン沈着の特異的指標である。それはトリマー型構造体として放出されるが、分解してモノマーになる。好ましくは、総Ｐ１ＮＰ量（総プロコラーゲン１型Ｎ末端プロペプチド）を測定する。
【0120】
本明細書中に述べるペプチドまたはポリペプチド、特にＧＤＦ－１５（増殖分化因子１５）、エンドスタチン、ミメカン、ＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、心臓トロポニン、ＢＮＰタイプのペプチド、Ｇａｌ３（ガレクチン－３）、ｓＳＴ２（可溶性ＳＴ２）、ｓＦｌｔ－１、ＰｌＧＦ、Ｐ１ＮＰ、シスタチンＣ、またはプレアルブミンの量の決定は、量または濃度を、好ましくは半定量的または定量的に測定することに関する。測定は直接的または間接的に行なうことができる。
【0121】
尿酸の量を決定する方法は本明細書中で先に記載した。バイオマーカーがペプチドまたはポリペプチド、たとえばＧＤＦ－１５（増殖分化因子１５）、エンドスタチン、ミメカン、ＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、心臓トロポニン、ＢＮＰタイプのペプチド、尿酸、Ｇａｌ３（ガレクチン－３）、またはｓＳＴ２（可溶性ＳＴ２）、ｓＦｌｔ－
１、ＰｌＧＦ、Ｐ１ＮＰ、シスタチンＣ、またはプレアルブミンである場合、下記を適用する：
直接測定は、ペプチドまたはポリペプチド自体から得られる信号であってその強度が試料中に存在するペプチドの分子数と直接相関する信号に基づいて、ペプチドまたはポリペプチドの量または濃度を測定することに関する。そのような信号 －本明細書中で時には強度信号と呼ぶ－ は、たとえばペプチドまたはポリペプチドの特異的な物理的または化学的特性の強度値を測定することによって得ることができる。間接測定には、二次成分（すなわち、そのペプチドまたはポリペプチド自体ではない成分）または生物学的読出し系、たとえば測定可能な細胞応答、リガンド、標識、または酵素反応生成物から得られる信号を測定することが含まれる。
１、ＰｌＧＦ、Ｐ１ＮＰ、シスタチンＣ、またはプレアルブミンである場合、下記を適用する：
直接測定は、ペプチドまたはポリペプチド自体から得られる信号であってその強度が試料中に存在するペプチドの分子数と直接相関する信号に基づいて、ペプチドまたはポリペプチドの量または濃度を測定することに関する。そのような信号 －本明細書中で時には強度信号と呼ぶ－ は、たとえばペプチドまたはポリペプチドの特異的な物理的または化学的特性の強度値を測定することによって得ることができる。間接測定には、二次成分（すなわち、そのペプチドまたはポリペプチド自体ではない成分）または生物学的読出し系、たとえば測定可能な細胞応答、リガンド、標識、または酵素反応生成物から得られる信号を測定することが含まれる。
【0122】
本発明によれば、ペプチドまたはポリペプチドの量の決定は、試料中のペプチドの量を決定するためのあらゆる既知手段により達成できる。それらの手段には、イムノアッセイ、および標識分子を多様なサンドイッチ、競合その他のアッセイ様式で利用できる方法が含まれる。そのようなアッセイ法は、好ましくは、決定すべきペプチドまたはポリペプチドを特異的に認識する検出剤、たとえば抗体に基づく。検出剤は、ペプチドまたはポリペプチドの存在または非存在の指標となる信号を直接的または間接的に発することができるべきである。さらに、信号強度を、好ましくは試料中に存在するポリペプチドの量に直接的または間接的（たとえば、反比例）に相関させることができる。さらに他の適切な方法は、ペプチドまたはポリペプチドに特異的な物理的または化学的特性、たとえばそれの厳密な分子質量またはＮＭＲスペクトルを測定することを含む。それらの方法は、好ましくはバイオセンサー、イムノアッセイに連携した光学機器、バイオチップ、分析機器、たとえば質量分析計、ＮＭＲ分析器、またはクロマトグラフィー機器を含む。さらに、方法にはマイクロプレートＥＬＩＳＡベースの方法、全自動またはロボット式イムノアッセイ（たとえば、Ｅｌｅｃｓｙｓ（商標）分析器で得られる）、ＣＢＡ（酵素によるコバルト結合アッセイ(Cobalt Binding Assay)；たとえば、Ｒｏｃｈｅ－Ｈｉｔａｃｈｉ（商標）分析器で得られる）、およびラテックス凝集アッセイ（たとえば、Ｒｏｃｈｅ－Ｈｉｔａｃｈｉ（商標）分析器で得られる）が含まれる。
【0123】
好ましくは、ペプチドまたはポリペプチドの量の決定は、下記のステップを含む：（ａ）その強度がペプチドまたはポリペプチドの量の指標となる細胞応答を誘発できる細胞を、適切な期間、そのペプチドまたはポリペプチドと接触させ、（ｂ）細胞応答を測定する。細胞応答を測定するために、試料または処理済み試料を、好ましくは細胞培養物に添加し、細胞内または細胞外応答を測定する。細胞応答には、測定可能なレポーター遺伝子発現、または物質、たとえばペプチド、ポリペプチドもしくは小分子の分泌を含めることができる。この発現または物質は、ペプチドまたはポリペプチドの量に相関する強度信号を発すべきである。
【0124】
同様に好ましくは、ペプチドまたはポリペプチドの量の決定は、試料中のペプチドまたはポリペプチドから得られる特異的な強度信号を測定するステップを含む。前記のように、そのような信号は、質量スペクトルにみられるペプチドもしくはポリペプチドに特異的なｍ／ｚ変数で観察される信号強度、またはペプチドもしくはポリペプチドに特異的なＮＭＲスペクトルであってもよい。
【0125】
ペプチドまたはポリペプチドの量の決定は、好ましくは下記のステップを含むことができる：（ａ）ペプチドを特異的リガンドと接触させ、（ｂ）（場合により）結合していないリガンドを分離し、（ｃ）結合したリガンドの量を測定する。
【0126】
好ましい態様によれば、これらの接触、分離および測定のステップは、本明細書に開示するシステムの分析ユニットにより実施できる。若干の態様によれば、それらの工程は前
記システムの単一の分析ユニットにより、または互いに作動可能な状態で連絡する２以上の分析ユニットにより実施できる。たとえば、特定の態様によれば、本明細書に開示するシステムは、接触および分離のステップを実施するための第１分析ユニット、ならびに第１分析ユニットに輸送ユニット（たとえば、ロボットアーム）によって作動可能な状態で接続して測定ステップを実施する第２分析ユニットを含むことができる。
記システムの単一の分析ユニットにより、または互いに作動可能な状態で連絡する２以上の分析ユニットにより実施できる。たとえば、特定の態様によれば、本明細書に開示するシステムは、接触および分離のステップを実施するための第１分析ユニット、ならびに第１分析ユニットに輸送ユニット（たとえば、ロボットアーム）によって作動可能な状態で接続して測定ステップを実施する第２分析ユニットを含むことができる。
【0127】
結合したリガンド、特にリガンドまたはリガンド／ペプチド複合体は、強度信号を発するであろう。本発明による結合には、共有結合および非共有結合の両方が含まれる。本発明によるリガンドは、本明細書に記載するペプチドまたはポリペプチドに結合するいずれかの化合物、たとえばペプチド、ポリペプチド、核酸、または小分子であってもよい。好ましいリガンドには、抗体、核酸、ペプチドまたはポリペプチド、たとえば前記のペプチドまたはポリペプチドに対する受容体または結合パートナー、およびそのフラグメント（前記ペプチドに対する結合ドメインを含むもの）、ならびにアプタマー、たとえば核酸アプタマーまたはペプチドアプタマーが含まれる。そのようなリガンドを作成する方法は当技術分野で周知である。たとえば、適切な抗体またはアプタマーの同定および作成は供給業者によっても提供される。当業者は、より高い親和性または特異性を備えたそのようなリガンドの誘導体を開発する方法に精通している。たとえば、核酸、ペプチドまたはポリペプチドにランダム変異を導入することができる。これらの誘導体を、次いで当技術分野で既知のスクリーニング法、たとえばファージディスプレー法に従って、結合について試験することができる。本明細書中で述べる抗体には、ポリクローナル抗体およびモノクローナル抗体の両方、ならびに抗原またはハプテンを結合できるそのフラグメント、たとえばＦｖ、ＦａｂおよびＦ（ａｂ）２フラグメントが含まれる。本発明には、一本鎖抗体、および目的とする抗原特異性を示す非ヒト－ドナー抗体のアミノ酸配列をヒト－アクセプター抗体の配列と組み合わせたヒト化ハイブリッド抗体も含まれる。ドナー配列は通常は少なくともドナーの抗原結合性アミノ酸残基を含むであろうが、ドナー抗体の他の構造関連および／または機能関連アミノ酸残基も含むことができる。そのようなハイブリッドは、当技術分野で周知である幾つかの方法で作成できる。好ましくは、リガンドまたは作用剤は前記のペプチドまたはポリペプチドに特異的に結合する。本発明による特異的結合は、リガンドまたは作用剤が、分析すべき試料中に存在する他のペプチド、ポリペプチドまたは物質に実質的に結合（それらと“交差反応”）すべきではないことを意味する。好ましくは、特異的に結合されるペプチドまたはポリペプチドは、他のいずれかの関連ペプチドまたはポリペプチドより少なくとも３倍高い、より好ましくは少なくとも１０倍高い、よりさらに好ましくは少なくとも５０倍高い親和性で結合されるべきである。非特異的結合は、たとえばウェスタンブロット上でのそれのサイズに従って、または試料中での相対的に高いそれの存在量によって、それをなお明白に識別および測定できるならば許容できる。リガンドの結合は、当技術分野で周知であるいずれかの方法により測定できる。好ましくは、その方法は半定量的または定量的である。ポリペプチドまたはペプチドの決定に適したさらに他の手法を以下に記載する。
【0128】
第１に、リガンドの結合は、直接的に、たとえばＮＭＲまたは表面プラズモン共鳴により測定できる。リガンド結合の測定は、好ましい態様によれば、本明細書に開示するシステムの分析ユニットにより実施される。その後、測定した結合の量を、本明細書に開示するシステムのコンピューティングデバイスにより計算することができる。第２に、リガンドが、目的とするペプチドまたはポリペプチドの酵素活性の基質としても作用するならば、その酵素反応生成物を測定してもよい（たとえば、プロテアーゼの量は開裂した基質の量をたとえばウェスタンブロットで測定することにより測定できる）。あるいは、リガンドが酵素特性そのものを示す場合があり、その“リガンド／ペプチドまたはポリペプチド”複合体、すなわちそれぞれペプチドまたはポリペプチドが結合したリガンドを、強度信号の発生により検出可能にする適切な基質と接触させることができる。酵素反応生成物の測定のためには、好ましくは基質の量は飽和状態である。反応前に基質を検出可能な標識で標識化することもできる。好ましくは、適切な期間、試料を基質と接触させる。適切な期間は、検出可能な量、好ましくは測定可能な量の生成物が生成するのに必要な時間を表わす。生成物の量を測定する代わりに、一定の（たとえば、検出可能な）量の生成物が出現するのに必要な時間を測定することができる。第３に、リガンドの検出および測定を可能にする標識にリガンドを共有結合または非共有結合させてもよい。標識化は、直接法または間接法により実施できる。直接標識化は、標識をリガンドに直接（共有または非共有）結合させることを伴なう。間接標識化は、二次リガンドを一次リガンドに（共有または非共有）結合させることを伴なう。二次リガンドは一次リガンドに特異的に結合すべきである。この二次リガンドは、適切な標識とカップリングさせることができ、および／または二次リガンドに結合する三次リガンドのターゲット（レセプター）であってもよい。二次、三次またはよりさらに高次のリガンドの使用は、信号を増強するためにしばしば採用される。適切な二次およびより高次のリガンドには、抗体、二次抗体、および周知のストレプトアビジン－ビオチン系（Ｖｅｃｔｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｉｎｃ．）を含めることができる。リガンドまたは基質に、当技術分野で既知である１以上のタグを“タグ付け”することもできる。その際、そのようなタグはより高次のリガンドにとってのターゲットであってもよい。適切なタグには、ビオチン、ジゴキシゲニン、Ｈｉｓ－タグ、グルタチオン－Ｓ－トランスフェラーゼ、ＦＬＡＧ、ＧＦＰ、ｍｙｃ－タグ、インフルエンザＡウイルス－ヘマグルチニン（ＨＡ）、マルトース結合タンパク質などが含まれる。ペプチドまたはポリペプチドの場合、タグは好ましくはＮ末端および／またはＣ末端にある。適切な標識は、適切な検出法により検出できるいずれかの標識である。代表的な標識には、金粒子、ラテックスビーズ、アクリダン(acridan)エステル、ルミノール、ルテニウム、酵素活性標識、放射性標識、磁性標識（たとえば、常磁性および超常磁性標識を含む“磁性ビーズ”）、および蛍光標識が含まれる。酵素活性標識には、たとえば西洋わさびペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼ、ベータ－ガラクトシダーゼ、ルシフェラーゼ、およびその誘導体が含まれる。検出に適した基質には、ジ－アミノ－ベンジジン（ＤＡＢ）、３，３’－５，５’－テトラメチルベンジジン、ＮＢＴ－ＢＣＩＰ（４－ニトロブルーテトラゾリウムクロリドおよび５－ブロモ－４－クロロ－３－インドリル－ホスフェート；既製原液としてＲｏｃｈｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓから入手できる）、ＣＤＰ－Ｓｔａｒ（商標）（Ａｍｅｒｓｈａｍ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）、ＥＣＦ（商標）（Ａｍｅｒｓｈａｍ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）が含まれる。適切な酵素－基質の組合わせは、有色反応生成物、蛍光または化学発光を生じることができ、それらを当技術分野で既知の方法に従って測定できる（たとえば、感光性フィルムまたは適切なカメラシステムを用いて）。酵素反応の測定については、前記に挙げた基準を同様に適用する。代表的な蛍光標識には、蛍光タンパク質（たとえば、ＧＦＰおよびそれの誘導体）、Ｃｙ３、Ｃｙ５、テキサスレッド、フルオレセイン、およびＡｌｅｘａ色素（たとえば、Ａｌｅｘａ ５６８）が含まれる。さらに他の蛍光標識を、たとえばＭｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ（オレゴン州）から入手できる。蛍光標識としての量子ドットの使用も考慮される。代表的な放射性標識には、３５Ｓ、１２５Ｉ、３２Ｐ、３３Ｐなどが含まれる。放射性標識は、いずれか既知の適切な方法、たとえば感光性フィルムまたはホスフォイメージャー(phosphor imager)により検出できる。本発明による適切な測定法には、下記のものも含まれる：沈降法（特に免疫沈降法）、電気化学発光（電気的に発生する化学発光）、ＲＩＡ（ラジオイムノアッセイ）、ＥＬＩＳＡ（酵素結合イムノソルベントアッセイ)、サンドイッチ酵素免疫試験、電気化学発光サンドイッチイムノアッセイ(electrochemiluminescence sandwich immunoassay)（ＥＣＬＩＡ）、解離増強型ランタニド蛍光イムノアッセイ(dissociation-enhanced lanthanide fluoro immuno assay)（ＤＥＬＦＩＡ）、シンチレーション近接アッセイ（ＳＰＡ）、タービディメトリー（濁度測定）、ネフェロメトリー（比濁分析）、ラテックス増強型タービディメトリーもしくはネフェロメトリー、または固相免疫試験。当技術分野で周知であるさらに他の方法（たとえば、ゲル電気泳動、２Ｄゲル電気泳動、ＳＤＳポリアクリルアミドゲル電気泳動（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）、ウェスタンブロット法、および質量分析）を、単独で、または前記の標識法もしくは他の検出法と組み合わせて使用できる。
【0129】
ペプチドまたはポリペプチドの量は、同様に好ましくは下記により決定できる：（ａ）前記に明記したペプチドまたはポリペプチドに対するリガンドを含む固体支持体を、そのペプチドまたはポリペプチドを含む試料と接触させ、そして（ｂ）支持体に結合しているペプチドまたはポリペプチドの量を測定する。好ましくは核酸、ペプチド、ポリペプチド、抗体およびアプタマーからなる群から選択されるリガンドは、好ましくは固体支持体上に固定化された形態で存在する。固体支持体を作成するための材料は当技術分野で周知であり、特に市販のカラム材料、ポリスチレンビーズ、ラテックスビーズ、磁性ビーズ、コロイド金属粒子、ガラスおよび／またはシリコンのチップおよび表面、ニトロセルロースのストリップ、膜、シート、デュラサイト(duracyte)、反応トレーのウェルおよび壁、プラスチックチューブなどを含む。リガンドまたは作用剤を多種多様なキャリヤーに結合させることができる。周知のキャリヤーの例には、ガラス、ポリスチレン、ポリ塩化ビニル、ポリプロピレン、ポリエチレン、ポリカーボネート、デキストラン、ナイロン、アミロース、天然および改質セルロース、ポリアクリルアミド、アガロース、および磁鉄鉱が含まれる。本発明の目的に関して、キャリヤーの性質は可溶性または不溶性のいずれであってもよい。それらのリガンドを固定／固定化するのに適した方法は周知であり、イオン性、疎水性、共有結合性の相互作用などが含まれるが、これらに限定されない。本発明に従ってアレイとして“懸濁アレイ”を用いることも考慮される(Nolan 2002, Trends Biotechnol. 20(1): 9-12)。そのような懸濁アレイには、キャリヤー、たとえばマクイロビーズまたはマイクロスフェアが懸濁状態で存在する。アレイは、種々のリガンドを保有する、おそらく標識された種々のマクイロビーズまたはマイクロスフェアからなる。そのようなアレイを調製する方法、たとえば固相化学および光不安定保護基に基づくものが一般に知られている(US 5,744,305)。
【0130】
好ましくは、本明細書中で述べる個々のバイオマーカーの量は実施例のセクションの記載に従って決定される。
本明細書中で用いる用語“量”は、バイオマーカーの絶対量、そのバイオマーカーの相対量または濃度、およびそれらに相関するかまたはそれらから誘導できるいずれかの数値またはパラメーターを包含する。そのような数値またはパラメーターは、それらのペプチドから直接測定により得られるあらゆる特異的な物理的または化学的特性からの強度信号値、たとえば質量スペクトルまたはＮＭＲスペクトルにおける強度値を含む。さらに、本明細書の他の箇所に明記する間接測定により得られるすべての数値またはパラメーター、たとえばペプチドに応答した生物学的読出し系から決定される応答レベル、または特異的に結合したリガンドから得られる強度信号が包含される。前記の量またはパラメーターに相関する数値はあらゆる標準的数学操作によっても得られることを理解すべきである。本発明の好ましい態様によれば、“量”の決定は開示するシステムにより行なわれ、それによればそのシステムの１以上の分析ユニットにより実施される接触および測定の工程に基づいてコンピューティングデバイスが“量”を決定する。
本明細書中で用いる用語“量”は、バイオマーカーの絶対量、そのバイオマーカーの相対量または濃度、およびそれらに相関するかまたはそれらから誘導できるいずれかの数値またはパラメーターを包含する。そのような数値またはパラメーターは、それらのペプチドから直接測定により得られるあらゆる特異的な物理的または化学的特性からの強度信号値、たとえば質量スペクトルまたはＮＭＲスペクトルにおける強度値を含む。さらに、本明細書の他の箇所に明記する間接測定により得られるすべての数値またはパラメーター、たとえばペプチドに応答した生物学的読出し系から決定される応答レベル、または特異的に結合したリガンドから得られる強度信号が包含される。前記の量またはパラメーターに相関する数値はあらゆる標準的数学操作によっても得られることを理解すべきである。本発明の好ましい態様によれば、“量”の決定は開示するシステムにより行なわれ、それによればそのシステムの１以上の分析ユニットにより実施される接触および測定の工程に基づいてコンピューティングデバイスが“量”を決定する。
【0131】
本明細書中で用いる用語“比較する”は、分析すべき試料が含むバイオマーカー、特にペプチドまたはポリペプチドの量を、本明細書の他の箇所に明記する適切な基準源と比較することを包含する。本明細書中で用いる比較するとは、対応するパラメーターまたは数値の比較を表わすことを理解すべきである；たとえば、絶対量を絶対基準量と比較し、一方で濃度を基準濃度と比較し、あるいは試験試料から得られる強度信号を標準試料の同じタイプの強度信号と比較する。本発明方法のステップ（ｂ）に述べる比較は、手動で、またはコンピューター支援により実施できる。したがって、本発明方法のステップ（ｂ）に述べる比較は、（たとえば、本明細書に開示するシステムの）コンピューティングデバイスにより実施できる。たとえばその量と基準の数値を互いに比較し、その比較は、比較のためのアルゴリズムを実行するコンピュータープログラムによって自動的に実施できる。
その評価を行なうコンピュータープログラムは、目的とする評価を適切な出力フォーマットで提供するであろう。コンピューター支援による比較のために、決定した量の数値を、データベースに記憶された適切な基準に対応する数値とコンピュータープログラムにより比較することができる。コンピュータープログラムはさらに比較の結果を評価することができ、すなわち目的とする評価を適切な出力フォーマットで自動的に提供する。コンピューター支援による比較のために、決定した量の数値を、データベースに記憶された適切な基準に対応する数値とコンピュータープログラムにより比較することができる。コンピュータープログラムはさらに比較の結果を評価することができ、すなわち目的とする評価を適切な出力フォーマットで自動的に提供する。その結果は、好ましくは、本明細書の他の箇所に述べる少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体を同定するための補助として採用できる。
その評価を行なうコンピュータープログラムは、目的とする評価を適切な出力フォーマットで提供するであろう。コンピューター支援による比較のために、決定した量の数値を、データベースに記憶された適切な基準に対応する数値とコンピュータープログラムにより比較することができる。コンピュータープログラムはさらに比較の結果を評価することができ、すなわち目的とする評価を適切な出力フォーマットで自動的に提供する。コンピューター支援による比較のために、決定した量の数値を、データベースに記憶された適切な基準に対応する数値とコンピュータープログラムにより比較することができる。コンピュータープログラムはさらに比較の結果を評価することができ、すなわち目的とする評価を適切な出力フォーマットで自動的に提供する。その結果は、好ましくは、本明細書の他の箇所に述べる少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体を同定するための補助として採用できる。
【0132】
本明細書中で用いる用語“基準量”（または基準比）は、好ましくは、被検体を本発明の方法に関して述べるその少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体のグループまたはその少なくとも１種類の医薬の投与に適格ではない被検体のグループのいずれかに配属できる量を表わす。したがって、基準量（または基準比）は、少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体の同定を可能にすべきである。
【0133】
そのような基準量（または比）は、これらのグループを互いに分離する閾値量であってもよい。同定は、計算“量”（または比）と基準または閾値との比較に基づいて、本明細書に開示するシステムのコンピューティングデバイスにより提供できる。たとえば、システムのコンピューティングデバイスは、被検体の同定を指示する言語、記号または数値の形の指標を提供できる。
【0134】
個々の被検体に適用できる基準量（または基準比）は、種々の生理学的パラメーター、たとえば年齢、性別または亜集団に応じて、および本明細書中で述べるポリペプチドまたはペプチドの決定に用いる手段に応じて、異なる可能性がある。適切な基準量は、試験試料と一緒に、すなわち同時または逐次に分析される標準試料から決定できる。
【0135】
基準量（または比）は、原則として、統計の標準法を適用することにより、被検体のコホートにつき前記のように特定のバイオマーカーについての平均(averageまたはmean)値
に基づいて計算できる。特に、ある事象（またはそうではないこと）を診断することを目的とした方法などの試験の精度は、それの受信者操作特性(receiver-operating characteristics)（ＲＯＣ）によって最も良く記述できる(特に、Zweig 1993, Clin. Chem. 39:561-577を参照)。ＲＯＣグラフは、決定閾値を観察データの全範囲にわたって連続的に変化させることから得られる感度と特異度のすべての対のプロットである。診断方法の臨床性能は、それの精度、すなわちそれが被検体を特定の予後または診断に正確に配属する能力に依存する。ＲＯＣプロットは、区別を行なうのに適した全範囲の閾値について感度を１－特異度に対してプロットすることにより、２つの分布間のオーバーラップを指示する。ｙ軸には感度、または真の陽性画分があり、これは真の陽性試験結果の数と偽陰性試験結果の数の積に対する真の陽性試験結果の数の比として定義される。これは、ある疾患または状態の存在下での陽性度とも言われている。それは専ら罹患サブグループから計算される。ｘ軸には偽陽性画分、または１－特異度があり、これは真の陰性結果の数と偽陽性結果の数の積に対する偽陽性結果の数の比として定義される。それは特異度の指数であり、完全に非罹患サブグループから計算される。真の陽性画分と偽陽性画分は２つの異なるサブグループからの試験結果を用いて完全に分離して計算されるので、ＲＯＣプロットはそのコホートにおけるその事象の罹病率とは無関係である。ＲＯＣプロット上の各点は、特定の決定閾値に対応する感度／－特異度の対を表わす。完全識別を伴なう試験（結果の２つの分布にオーバーラップがない）は、上左隅を通るＲＯＣプロットをもち、その際、真の陽性画分は１．０、すなわち１００％（完全感度）であり、偽陽性画分は０（完全特異度）である。識別されない試験についての理論的プロット（２グループについての結果が同一分布）は、下左隅から上右隅への４５°の対角線である。大部分のプロットはこれら両極端の間にある。ＲＯＣプロットが完全に４５°の対角線の下側にあれば、これは“陽性度”についての基準を“より大”から“より小”に逆転することによって容易に対処され、あるいはその逆も成り立つ。定性的に、プロットが上左隅に近づくほど、その試験の全般的精度は高くなる。希望する信頼区間に応じて、本明細書に述べる投与に適格な被検体を同定できる閾値を、それぞれ感度と特異度の適正なバランスでＲＯＣ曲線から導くことができる。したがって、好ましくはそのコホートについて前記のようにＲＯＣを確立し、それから閾値量を導くことにより、前記の本発明方法に使用する基準、すなわち本明細書に述べる投与に適格な被検体またはその投与に適格ではない被検体を識別できる閾値を作成できる。診断方法のための希望する感度および特異度に応じて、ＲＯＣプロットによって適切な閾値を導くことができる。
に基づいて計算できる。特に、ある事象（またはそうではないこと）を診断することを目的とした方法などの試験の精度は、それの受信者操作特性(receiver-operating characteristics)（ＲＯＣ）によって最も良く記述できる(特に、Zweig 1993, Clin. Chem. 39:561-577を参照)。ＲＯＣグラフは、決定閾値を観察データの全範囲にわたって連続的に変化させることから得られる感度と特異度のすべての対のプロットである。診断方法の臨床性能は、それの精度、すなわちそれが被検体を特定の予後または診断に正確に配属する能力に依存する。ＲＯＣプロットは、区別を行なうのに適した全範囲の閾値について感度を１－特異度に対してプロットすることにより、２つの分布間のオーバーラップを指示する。ｙ軸には感度、または真の陽性画分があり、これは真の陽性試験結果の数と偽陰性試験結果の数の積に対する真の陽性試験結果の数の比として定義される。これは、ある疾患または状態の存在下での陽性度とも言われている。それは専ら罹患サブグループから計算される。ｘ軸には偽陽性画分、または１－特異度があり、これは真の陰性結果の数と偽陽性結果の数の積に対する偽陽性結果の数の比として定義される。それは特異度の指数であり、完全に非罹患サブグループから計算される。真の陽性画分と偽陽性画分は２つの異なるサブグループからの試験結果を用いて完全に分離して計算されるので、ＲＯＣプロットはそのコホートにおけるその事象の罹病率とは無関係である。ＲＯＣプロット上の各点は、特定の決定閾値に対応する感度／－特異度の対を表わす。完全識別を伴なう試験（結果の２つの分布にオーバーラップがない）は、上左隅を通るＲＯＣプロットをもち、その際、真の陽性画分は１．０、すなわち１００％（完全感度）であり、偽陽性画分は０（完全特異度）である。識別されない試験についての理論的プロット（２グループについての結果が同一分布）は、下左隅から上右隅への４５°の対角線である。大部分のプロットはこれら両極端の間にある。ＲＯＣプロットが完全に４５°の対角線の下側にあれば、これは“陽性度”についての基準を“より大”から“より小”に逆転することによって容易に対処され、あるいはその逆も成り立つ。定性的に、プロットが上左隅に近づくほど、その試験の全般的精度は高くなる。希望する信頼区間に応じて、本明細書に述べる投与に適格な被検体を同定できる閾値を、それぞれ感度と特異度の適正なバランスでＲＯＣ曲線から導くことができる。したがって、好ましくはそのコホートについて前記のようにＲＯＣを確立し、それから閾値量を導くことにより、前記の本発明方法に使用する基準、すなわち本明細書に述べる投与に適格な被検体またはその投与に適格ではない被検体を識別できる閾値を作成できる。診断方法のための希望する感度および特異度に応じて、ＲＯＣプロットによって適切な閾値を導くことができる。
【0136】
診断アルゴリズム、すなわちある医薬の投与を開始すべきか否か、または医薬の用量を増加させる（“増量する(uptritrate)”）べきか否かを実施例のセクションに開示する。以下に好ましい診断アルゴリズムをまとめる：
少なくとも１種類の医薬がベータ遮断薬であり、かつ少なくとも１種類のバイオマーカーがエンドスタチン、ミメカン、ＧＤＦ－１５、心臓トロポニンおよび／またはＢＮＰタイプのペプチドであれば、好ましくは下記を適用する：
好ましくは、基準量（単数または複数）と比較して増加した試験試料中のバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体の指標であり、および／または基準量（単数または複数）と比較して減少したバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格ではない被検体の指標である。
少なくとも１種類の医薬がベータ遮断薬であり、かつ少なくとも１種類のバイオマーカーがエンドスタチン、ミメカン、ＧＤＦ－１５、心臓トロポニンおよび／またはＢＮＰタイプのペプチドであれば、好ましくは下記を適用する：
好ましくは、基準量（単数または複数）と比較して増加した試験試料中のバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体の指標であり、および／または基準量（単数または複数）と比較して減少したバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格ではない被検体の指標である。
【0137】
より好ましくは、検査される被検体は既にベータ遮断薬で治療されている。この場合、基準量（単数または複数）と比較して増加したバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）はより高い用量での前記医薬の投与に適格な被検体の指標であり、および／または基準量（単数または複数）と比較して減少したバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）はより高い用量での前記医薬の投与に適格ではない被検体の指標である。
【0138】
少なくとも１種類の医薬がベータ遮断薬であり、かつバイオマーカーがＩＧＦＢＰ７、Ｐ１ＮＰ、ｓＦｌｔ－１またはオステオポンチンであれば、好ましくは下記を適用する：
好ましくは、基準量（単数または複数）と比較して減少した試験試料中のバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）は前記ベータ遮断薬の投与に適格な被検体の指標であり、および／または基準量（単数または複数）と比較して増加したバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）は前記ベータ遮断薬の投与に適格ではない被検体の指標である。特に、基準量（単数または複数）と比較して減少した試験試料中のバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）は前記ベータ遮断薬の投与に適格な被検体の指標である。
好ましくは、基準量（単数または複数）と比較して減少した試験試料中のバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）は前記ベータ遮断薬の投与に適格な被検体の指標であり、および／または基準量（単数または複数）と比較して増加したバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）は前記ベータ遮断薬の投与に適格ではない被検体の指標である。特に、基準量（単数または複数）と比較して減少した試験試料中のバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）は前記ベータ遮断薬の投与に適格な被検体の指標である。
【0139】
より好ましくは、検査される被検体は既にベータ遮断薬で治療されている。この場合、基準量（単数または複数）と比較して減少した試験試料中のバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）はより高い用量での前記医薬の投与に適格な被検体の指標であり、および／または基準量（単数または複数）と比較して増加したバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）はより高い用量での前記医薬の投与に適格ではない被検体の指標である。特に、基準量（単数または複数）と比較して減少した試験試料中のバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）はより高い用量での前記ベータ遮断薬の投与に適格な被検体の指標である。
【0140】
少なくとも１種類の医薬がアルドステロンアンタゴニストであり、かつ少なくとも１種類のバイオマーカーがＩＧＦＢＰ７、心臓トロポニン、Ｇａｌ－３、シスタチンＣ、ＰｌＧＦ、ＧＤＦ－１５および／またはｓＳＴ２であれば、好ましくは下記を適用する：
好ましくは、基準量（単数または複数）と比較して増加した試験試料中のバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体の指標であり、および／または基準量（単数または複数）と比較して減少したバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格ではない被検体の指標である。
好ましくは、基準量（単数または複数）と比較して増加した試験試料中のバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体の指標であり、および／または基準量（単数または複数）と比較して減少したバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格ではない被検体の指標である。
【0141】
より好ましくは、検査される被検体は既にアルドステロンアンタゴニストで治療されている。この場合、基準量（単数または複数）と比較して増加したバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）はより高い用量での前記医薬の投与に適格な被検体の指標であり、および／または基準量（単数または複数）と比較して減少したバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）はより高い用量での前記医薬（単数または複数）の投与に適格ではない被検体の指標である。
【0142】
ＰｌＧＦの量－対－ｓＦｌｔ－１の量の比を決定するのであれば、下記の診断アルゴリズムを適用する：
好ましくは、基準比と比較して増大した試験試料中のＰｌＧＦの量－対－ｓＦｌｔ－１の量の比はそのアルドステロンアンタゴニストの投与に適格な被検体の指標であり、および／または基準比と比較して低下した比はそのアルドステロンアンタゴニストの投与に適格ではない被検体の指標である。
好ましくは、基準比と比較して増大した試験試料中のＰｌＧＦの量－対－ｓＦｌｔ－１の量の比はそのアルドステロンアンタゴニストの投与に適格な被検体の指標であり、および／または基準比と比較して低下した比はそのアルドステロンアンタゴニストの投与に適格ではない被検体の指標である。
【0143】
より好ましくは、検査される被検体は既にアルドステロンアンタゴニストで治療されている。この場合、基準比と比較して増大した試験試料中のＰｌＧＦの量－対－ｓＦｌｔ－１の量の比はより高い用量での前記アルドステロンアンタゴニストの投与に適格な被検体の指標であり、および／または基準比と比較して低下した比はより高い用量での前記アルドステロンアンタゴニストの投与に適格ではない被検体の指標である。
【0144】
少なくとも１種類の医薬がアルドステロンアンタゴニストであり、かつ少なくとも１種類のバイオマーカーがエンドスタチン、尿酸および／またはｓＦｌｔ－１であれば、好ましくは下記を適用する：
好ましくは、基準量（単数または複数）と比較して減少した試験試料中のバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体の指標であり、および／または基準量（単数または複数）と比較して増加したバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格ではない被検体の指標である。
好ましくは、基準量（単数または複数）と比較して減少した試験試料中のバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体の指標であり、および／または基準量（単数または複数）と比較して増加したバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格ではない被検体の指標である。
【0145】
より好ましくは、検査される被検体は既にアルドステロンアンタゴニストで治療されている。この場合、基準量（単数または複数）と比較して減少したバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）はより高い用量での前記医薬の投与に適格な被検体の指標であり、および／または基準量（単数または複数）と比較して増加したバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）はより高い用量での前記医薬の投与に適格ではない被検体の指標である。
【0146】
少なくとも１種類の医薬がレニン－アンギオテンシン系の阻害薬であり、かつ少なくとも１種類のバイオマーカーがＧＤＦ－１５、心臓トロポニン、尿酸、ＢＮＰタイプのペプチドおよび／またはオステオポンチンであれば、好ましくは下記を適用する：
好ましくは、基準量（単数または複数）と比較して増加した試験試料中のバイオマーカ
ー（単数または複数）の量（単数または複数）は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体の指標であり、および／または基準量（単数または複数）と比較して減少したバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格ではない被検体の指標である。
好ましくは、基準量（単数または複数）と比較して増加した試験試料中のバイオマーカ
ー（単数または複数）の量（単数または複数）は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体の指標であり、および／または基準量（単数または複数）と比較して減少したバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格ではない被検体の指標である。
【0147】
より好ましくは、検査される被検体は既にレニン－アンギオテンシン系の阻害薬で治療されている。この場合、基準量（単数または複数）と比較して増加したバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）はより高い用量での前記医薬の投与に適格な被検体の指標であり、および／または基準量（単数または複数）と比較して減少したバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）はより高い用量での前記医薬の投与に適格ではない被検体の指標である。
【0148】
少なくとも１種類の医薬が利尿薬であり、かつ少なくとも１種類のバイオマーカーが、ＩＧＦＢＰ７、エンドスタチン、ミメカン、ＧＤＦ－１５、プレアルブミン、トランスフェリン、ＢＮＰタイプのペプチド、および尿酸からなる群から選択されれば、好ましくは下記を適用する：
好ましくは、基準量（単数または複数）と比較して増加した試験試料中のバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格ではない被検体の指標であり、および／または基準量（単数または複数）と比較して減少したバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体の指標である。
好ましくは、基準量（単数または複数）と比較して増加した試験試料中のバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格ではない被検体の指標であり、および／または基準量（単数または複数）と比較して減少したバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体の指標である。
【0149】
より好ましくは、検査される被検体は既に利尿薬で治療されている。この場合、基準量（単数または複数）と比較して増加したバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）はより高い用量での前記医薬の投与に適格ではない被検体の指標であり、基準量（単数または複数）と比較して減少した試験試料中のバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）はより高い用量での前記医薬の投与に適格ではない被検体の指標であり、および／または基準量（単数または複数）と比較して減少したバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）はより低い用量での前記医薬の投与に適格な被検体の指標である。
【0150】
少なくとも１種類の医薬がレニン－アンギオテンシン系の阻害薬であり、かつ少なくとも１種類のバイオマーカーがｓＦｌｔ－１および／またはＩＧＦＢＰ７であれば、好ましくは下記を適用する：
好ましくは、基準量と比較して増加した試験試料中のバイオマーカーの量は前記医薬の投与に適格ではない被検体の指標であり、および／または基準量と比較して増加したバイオマーカーの量は前記医薬の投与に適格な被検体の指標である。
好ましくは、基準量と比較して増加した試験試料中のバイオマーカーの量は前記医薬の投与に適格ではない被検体の指標であり、および／または基準量と比較して増加したバイオマーカーの量は前記医薬の投与に適格な被検体の指標である。
【0151】
より好ましくは、検査される被検体は既にレニン－アンギオテンシン系の阻害薬で治療されている。この場合、基準量と比較して増加したバイオマーカーの量はより高い用量での前記医薬の投与に適格ではない被検体の指標であり、および／または基準量と比較して減少したバイオマーカーの量はより高い用量での前記医薬の投与に適格な被検体の指標である。
【0152】
基準量を、前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格であることが分かっている被検体または被検体グループから、および／または前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格ではないことが分かっている被検体または被検体グループから導くことも好ましい。
【0153】
この場合、好ましい診断アルゴリズムは下記のものである：
少なくとも１種類の医薬がベータ遮断薬であり、かつ少なくとも１種類のバイオマーカ
ーがエンドスタチン、ミメカン、ＧＤＦ－１５、心臓トロポニンおよび／またはＢＮＰタイプのペプチドであれば、好ましくは下記を適用する：
好ましくは、基準量はその少なくとも１種類の医薬の投与に適格であることが分かっている被検体または被検体グループから導かれ、その際、基準量（単数または複数）と比較して本質的に同一であるかまたは増加した試験試料中のバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体の指標であり、ならびに／あるいは基準量は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格ではないことが分かっている被検体または被検体グループから導かれ、その際、基準量（単数または複数）と比較して本質的に同一であるかまたは減少した試験試料中のバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格ではない被検体の指標である。
少なくとも１種類の医薬がベータ遮断薬であり、かつ少なくとも１種類のバイオマーカ
ーがエンドスタチン、ミメカン、ＧＤＦ－１５、心臓トロポニンおよび／またはＢＮＰタイプのペプチドであれば、好ましくは下記を適用する：
好ましくは、基準量はその少なくとも１種類の医薬の投与に適格であることが分かっている被検体または被検体グループから導かれ、その際、基準量（単数または複数）と比較して本質的に同一であるかまたは増加した試験試料中のバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体の指標であり、ならびに／あるいは基準量は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格ではないことが分かっている被検体または被検体グループから導かれ、その際、基準量（単数または複数）と比較して本質的に同一であるかまたは減少した試験試料中のバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格ではない被検体の指標である。
【0154】
少なくとも１種類の医薬がベータ遮断薬であり、かつバイオマーカーがＩＧＦＢＰ７、Ｐ１ＮＰ、ｓＦｌｔ－１および／またはオステオポンチンであれば、好ましくは下記を適用する：
好ましくは、ＩＧＦＢＰ７、Ｐ１ＮＰ、ｓＦｌｔ－１および／またはオステオポンチンについての基準量は、そのベータ遮断薬の投与に適格であることが分かっている被検体または被検体グループから導かれ、その際、基準量と比較して本質的に同一であるかまたは減少した試験試料中のＩＧＦＢＰ７、Ｐ１ＮＰ、ｓＦｌｔ－１および／またはオステオポンチンの量は、前記ベータ遮断薬の投与に適格な被検体の指標であり、ならびに／あるいは基準量はその少なくとも１種類の医薬の投与に適格ではないことが分かっている被検体または被検体グループから導かれ、その際、基準量と比較して本質的に同一であるかまたは増加した試験試料中のＩＧＦＢＰ７、Ｐ１ＮＰ、ｓＦｌｔ－１および／またはオステオポンチンの量は、前記ベータ遮断薬の投与に適格ではない被検体の指標である。
好ましくは、ＩＧＦＢＰ７、Ｐ１ＮＰ、ｓＦｌｔ－１および／またはオステオポンチンについての基準量は、そのベータ遮断薬の投与に適格であることが分かっている被検体または被検体グループから導かれ、その際、基準量と比較して本質的に同一であるかまたは減少した試験試料中のＩＧＦＢＰ７、Ｐ１ＮＰ、ｓＦｌｔ－１および／またはオステオポンチンの量は、前記ベータ遮断薬の投与に適格な被検体の指標であり、ならびに／あるいは基準量はその少なくとも１種類の医薬の投与に適格ではないことが分かっている被検体または被検体グループから導かれ、その際、基準量と比較して本質的に同一であるかまたは増加した試験試料中のＩＧＦＢＰ７、Ｐ１ＮＰ、ｓＦｌｔ－１および／またはオステオポンチンの量は、前記ベータ遮断薬の投与に適格ではない被検体の指標である。
【0155】
少なくとも１種類の医薬がアルドステロンアンタゴニストであり、かつ少なくとも１種類のバイオマーカーがＩＧＦＢＰ７、シスタチンＣ、心臓トロポニン、Ｇａｌ－３、ＰｌＧＦ、ＧＤＦ－１５および／またはｓＳＴ２であれば、好ましくは下記を適用する：
好ましくは、基準量は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格であることが分かっている被検体または被検体グループから導かれ、その際、基準量（単数または複数）と比較して本質的に同一であるかまたは増加した試験試料中のバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体の指標であり、および／または基準量は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格ではないことが分かっている被検体または被検体グループから導かれ、その際、基準量（単数または複数）と比較して本質的に同一であるかまたは減少した試験試料中のバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格ではない被検体の指標である。
好ましくは、基準量は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格であることが分かっている被検体または被検体グループから導かれ、その際、基準量（単数または複数）と比較して本質的に同一であるかまたは増加した試験試料中のバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体の指標であり、および／または基準量は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格ではないことが分かっている被検体または被検体グループから導かれ、その際、基準量（単数または複数）と比較して本質的に同一であるかまたは減少した試験試料中のバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格ではない被検体の指標である。
【0156】
少なくとも１種類の医薬がアルドステロンアンタゴニストであり、かつ少なくとも１種類のバイオマーカーがエンドスタチン、尿酸および／またはｓＦｌｔ－１であれば、好ましくは下記を適用する：
好ましくは、基準量は前記少なくとも１種類の医薬（すなわち、アルドステロンアンタゴニスト）の投与に適格であることが分かっている被検体または被検体グループから導かれ、その際、基準量（単数または複数）と比較して本質的に同一であるかまたは減少した試験試料中のバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体の指標であり、および／または基準量は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格ではないことが分かっている被検体または被検体グループから導かれ、その際、基準量（単数または複数）と比較して本質的に同一であるかまたは増加した試験試料中のバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格ではない被検体の指標である。
好ましくは、基準量は前記少なくとも１種類の医薬（すなわち、アルドステロンアンタゴニスト）の投与に適格であることが分かっている被検体または被検体グループから導かれ、その際、基準量（単数または複数）と比較して本質的に同一であるかまたは減少した試験試料中のバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体の指標であり、および／または基準量は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格ではないことが分かっている被検体または被検体グループから導かれ、その際、基準量（単数または複数）と比較して本質的に同一であるかまたは増加した試験試料中のバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格ではない被検体の指標である。
【0157】
より好ましくは、検査される被検体は既にアルドステロンアンタゴニストで治療されている。この場合、基準量（単数または複数）と比較して増加したバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）はより高い用量での前記医薬の投与に適格ではない被検体の指標であり、および／または基準量（単数または複数）と比較して減少したバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）はより高い用量での前記医薬の投与に適格ではない被検体の指標である。
【0158】
少なくとも１種類の医薬がレニン－アンギオテンシン系の阻害薬であり、かつ少なくとも１種類のバイオマーカーがＧＤＦ－１５、心臓トロポニン、尿酸、ＢＮＰタイプのペプチドおよび／またはオステオポンチンであれば、好ましくは下記を適用する：
好ましくは、これらのバイオマーカー（単数または複数）についての基準量（単数または複数）は、前記レニン－アンギオテンシン系の阻害薬の投与に適格であることが分かっている被検体または被検体グループから導かれ、その際、基準量と比較して本質的に同一であるかまたは増加した試験試料中の両バイオマーカーの量は、前記レニン－アンギオテンシン系の阻害薬の投与に適格な被検体の指標であり、および／または基準量は前記レニン－アンギオテンシン系の阻害薬の投与に適格ではないことが分かっている被検体または被検体グループから導かれ、その際、ｉ）心臓トロポニンについての基準量と比較して本質的に同一であるかまたは減少した試験試料中の心臓トロポニンの量、あるいはｉｉ）基準量と比較して本質的に同一および／または減少した試験試料中の両バイオマーカーの量は、前記レニン－アンギオテンシン系の阻害薬の投与に適格ではない被検体の指標である。
好ましくは、これらのバイオマーカー（単数または複数）についての基準量（単数または複数）は、前記レニン－アンギオテンシン系の阻害薬の投与に適格であることが分かっている被検体または被検体グループから導かれ、その際、基準量と比較して本質的に同一であるかまたは増加した試験試料中の両バイオマーカーの量は、前記レニン－アンギオテンシン系の阻害薬の投与に適格な被検体の指標であり、および／または基準量は前記レニン－アンギオテンシン系の阻害薬の投与に適格ではないことが分かっている被検体または被検体グループから導かれ、その際、ｉ）心臓トロポニンについての基準量と比較して本質的に同一であるかまたは減少した試験試料中の心臓トロポニンの量、あるいはｉｉ）基準量と比較して本質的に同一および／または減少した試験試料中の両バイオマーカーの量は、前記レニン－アンギオテンシン系の阻害薬の投与に適格ではない被検体の指標である。
【0159】
少なくとも１種類の医薬が利尿薬であり、かつ少なくとも１種類のバイオマーカーが、エンドスタチン、ミメカン、ＧＤＦ－１５、プレアルブミン、トランスフェリン、ＢＮＰタイプのペプチド、および尿酸からなる群から選択されれば、好ましくは下記を適用する：
好ましくは、基準量は前記少なくとも１種類の医薬（すなわち、利尿薬）の投与に適格であることが分かっている被検体または被検体グループから導かれ、その際、基準量（単数または複数）と比較して本質的に同一であるかまたは減少した試験試料中のバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体の指標であり、ならびに／あるいは基準量は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格ではないことが分かっている被検体または被検体グループから導かれ、その際、基準量（単数または複数）と比較して本質的に同一であるかまたは減少した試験試料中のバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格ではない被検体の指標である。
好ましくは、基準量は前記少なくとも１種類の医薬（すなわち、利尿薬）の投与に適格であることが分かっている被検体または被検体グループから導かれ、その際、基準量（単数または複数）と比較して本質的に同一であるかまたは減少した試験試料中のバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体の指標であり、ならびに／あるいは基準量は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格ではないことが分かっている被検体または被検体グループから導かれ、その際、基準量（単数または複数）と比較して本質的に同一であるかまたは減少した試験試料中のバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格ではない被検体の指標である。
【0160】
同様に好ましくは、基準量は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格ではないことが分かっている被検体または被検体グループから導かれ、その際、基準量（単数または複数）と比較して本質的に同一であるかまたは増加した試験試料中のバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）は、より低い用量での前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体の指標である。
【0161】
より好ましくは、検査される被検体は既に利尿薬で治療されている。この場合、基準量（単数または複数）と比較して増加したバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）はより高い用量での前記医薬の投与に適格ではない被検体の指標であり、および／または基準量（単数または複数）と比較して減少したバイオマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）はより高い用量での前記医薬の投与に適格ではない被検体の指標である。
【0162】
少なくとも１種類の医薬がレニン－アンギオテンシン系の阻害薬であり、かつ少なくとも１種類のバイオマーカーがｓＦｌｔ－１および／またはＩＧＦＢＰ７であれば、好ましくは下記を適用する：
好ましくは、基準量は、前記レニン－アンギオテンシン系の阻害薬の投与に適格であることが分かっている被検体または被検体グループから導かれ、その際、基準量と比較して本質的に同一であるかまたは減少した試験試料中のｓＦｌｔ－１および／またはＩＧＦＢＰ７の量は、前記レニン－アンギオテンシン系の阻害薬の投与に適格な被検体の指標であり、および／または基準量は前記レニン－アンギオテンシン系の阻害薬の投与に適格ではないことが分かっている被検体または被検体グループから導かれ、その際、基準量と比較して本質的に同一であるかまたは増加した試験試料中のｓＦｌｔ－１および／またはＩＧＦＢＰ７の量は、前記レニン－アンギオテンシン系の阻害薬の投与に適格ではない被検体の指標である。
好ましくは、基準量は、前記レニン－アンギオテンシン系の阻害薬の投与に適格であることが分かっている被検体または被検体グループから導かれ、その際、基準量と比較して本質的に同一であるかまたは減少した試験試料中のｓＦｌｔ－１および／またはＩＧＦＢＰ７の量は、前記レニン－アンギオテンシン系の阻害薬の投与に適格な被検体の指標であり、および／または基準量は前記レニン－アンギオテンシン系の阻害薬の投与に適格ではないことが分かっている被検体または被検体グループから導かれ、その際、基準量と比較して本質的に同一であるかまたは増加した試験試料中のｓＦｌｔ－１および／またはＩＧＦＢＰ７の量は、前記レニン－アンギオテンシン系の阻害薬の投与に適格ではない被検体の指標である。
【0163】
本発明に関して適用するのに好ましい基準量は、実施例に記載するものである。さらに好ましい基準量は下記のものである：
・ＧＤＦ－１５：約３０００～約５０００ｎｇ／ｍｌの範囲内、特に４０００ｎｇ／ｍｌ
・エンドスタチン：約２３０～約２７０ｎｇ／ｍｌの範囲内、特に２５０ｎｇ／ｍｌ
・ミメカン：約３０～約７０ｎｇ／ｍｌの範囲内、特に５０ｎｇ／ｍｌ
・ＩＧＦＢＰ７：約７０～約１３０ｎｇ／ｍｌの範囲内、特に１００ｎｇ／ｍｌ
・ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰ：約２５００～約３５００ｐｇ／ｍｌの範囲内、特に約３０００ｐｇ／ｍｌ
・トロポニン：約２２～約３０ｎｇ／ｍｌの範囲内、特に２６ｎｇ／ｍｌ
・尿酸：約５～約１０ｎｇ／ｍｌの範囲内、特に７．３ｎｇ／ｍｌ
・Ｇａｌ３（ガレクチン－３）：約２６～約３８ｎｇ／ｍｌの範囲内、特に３１．６ｎｇ／ｍｌ
・オステオポンチン：約８０～約１２０ｎｇ／ｍｌの範囲内、特に１００ｎｇ／ｍｌ
・ｓＳＴ２（可溶性ＳＴ２）：約３０～約３８ｎｇ／ｍｌの範囲内、特に３４．０ｎｇ／ｍｌ
・ｓＦＬＴ－１：約８５～約１１１ｎｇ／ｍｌの範囲内、特に９８ｎｇ／ｍｌ
・ＰｌＧＦ：約１５～約３１ｎｇ／ｍｌの範囲内、特に２０．７ｎｇ／ｍｌ
・Ｐ１ＮＰ：約２９．０ｎｇ／ｍｌ～約４３．５ｎｇ／ｍｌの範囲内、特に３６．７２ｎｇ／ｍｌ
・シスタチンＣ：約１．２０ｍｇ／ｌ～約２．３ｍｇ／ｌの範囲内、特に１．７６ｍｇ／ｌ
・プレアルブミン：約０．１１ｇ／ｌ～約０．２７ｇ／ｌの範囲内、特に０．１９ｇ／ｌ
・トランスフェリン：約２．１５ｇ／ｌ～約２．８０ｇ／ｌの範囲内、特に２．４８ｇ／ｌ
ＰｌＧＦ－対－ｓＦｌｔ－１の比を計算する場合、基準比は特に約０．１７～約０．２９の範囲である。ある態様において、基準比は０．２３である。
・ＧＤＦ－１５：約３０００～約５０００ｎｇ／ｍｌの範囲内、特に４０００ｎｇ／ｍｌ
・エンドスタチン：約２３０～約２７０ｎｇ／ｍｌの範囲内、特に２５０ｎｇ／ｍｌ
・ミメカン：約３０～約７０ｎｇ／ｍｌの範囲内、特に５０ｎｇ／ｍｌ
・ＩＧＦＢＰ７：約７０～約１３０ｎｇ／ｍｌの範囲内、特に１００ｎｇ／ｍｌ
・ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰ：約２５００～約３５００ｐｇ／ｍｌの範囲内、特に約３０００ｐｇ／ｍｌ
・トロポニン：約２２～約３０ｎｇ／ｍｌの範囲内、特に２６ｎｇ／ｍｌ
・尿酸：約５～約１０ｎｇ／ｍｌの範囲内、特に７．３ｎｇ／ｍｌ
・Ｇａｌ３（ガレクチン－３）：約２６～約３８ｎｇ／ｍｌの範囲内、特に３１．６ｎｇ／ｍｌ
・オステオポンチン：約８０～約１２０ｎｇ／ｍｌの範囲内、特に１００ｎｇ／ｍｌ
・ｓＳＴ２（可溶性ＳＴ２）：約３０～約３８ｎｇ／ｍｌの範囲内、特に３４．０ｎｇ／ｍｌ
・ｓＦＬＴ－１：約８５～約１１１ｎｇ／ｍｌの範囲内、特に９８ｎｇ／ｍｌ
・ＰｌＧＦ：約１５～約３１ｎｇ／ｍｌの範囲内、特に２０．７ｎｇ／ｍｌ
・Ｐ１ＮＰ：約２９．０ｎｇ／ｍｌ～約４３．５ｎｇ／ｍｌの範囲内、特に３６．７２ｎｇ／ｍｌ
・シスタチンＣ：約１．２０ｍｇ／ｌ～約２．３ｍｇ／ｌの範囲内、特に１．７６ｍｇ／ｌ
・プレアルブミン：約０．１１ｇ／ｌ～約０．２７ｇ／ｌの範囲内、特に０．１９ｇ／ｌ
・トランスフェリン：約２．１５ｇ／ｌ～約２．８０ｇ／ｌの範囲内、特に２．４８ｇ／ｌ
ＰｌＧＦ－対－ｓＦｌｔ－１の比を計算する場合、基準比は特に約０．１７～約０．２９の範囲である。ある態様において、基準比は０．２３である。
【0164】
好ましくは、前記に述べた基準量（比）は、本明細書中に述べるこれらのグループを互いに分離する閾値量（比）である。
本発明に関して、ある被検体がある医薬の投与に適格であるかどうかを評価するために２種類以上のバイオマーカーを決定する場合、特に個々のバイオマーカーの決定量を個々のバイオマーカーについての基準量と比較することを想定する。たとえば、バイオマーカーＩＧＦＢＰ７の量はＩＧＦＢ７についての基準量と比較すべきであり、バイオマーカーミメカンの量はミメカンについての基準量と比較すべきであり、バイオマーカーエンドスタチンの量はエンドスタチンの基準量と比較すべきであり、バイオマーカーｓＦｌｔ－１の量はｓＦｌｔ－１の基準量と比較すべきである、など。この場合、診断。さらに、２種類以上のバイオマーカーを決定する場合、本明細書中に述べる個々のバイオマーカーについての診断アルゴリズムを組み合わせるのが好ましい。
本発明に関して、ある被検体がある医薬の投与に適格であるかどうかを評価するために２種類以上のバイオマーカーを決定する場合、特に個々のバイオマーカーの決定量を個々のバイオマーカーについての基準量と比較することを想定する。たとえば、バイオマーカーＩＧＦＢＰ７の量はＩＧＦＢ７についての基準量と比較すべきであり、バイオマーカーミメカンの量はミメカンについての基準量と比較すべきであり、バイオマーカーエンドスタチンの量はエンドスタチンの基準量と比較すべきであり、バイオマーカーｓＦｌｔ－１の量はｓＦｌｔ－１の基準量と比較すべきである、など。この場合、診断。さらに、２種類以上のバイオマーカーを決定する場合、本明細書中に述べる個々のバイオマーカーについての診断アルゴリズムを組み合わせるのが好ましい。
【0165】
さらに、本発明は、心不全の治療のための少なくとも１種類の医薬で被検体を治療する、下記を含む方法に関する：
ａ）心不全に罹患している被検体からの試料において、本発明の方法に関して前記に述べた少なくとも１種類のバイオマーカーの量を決定すること；および
ｂ）ステップａ）で決定した少なくとも１種類のバイオマーカーの量（単数または複数）を基準量（単数または複数）と比較し、それにより前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体を同定すること；
ｃ）被検体を少なくとも１種類の医薬の投与に適格であると同定すること；
ｄ）前記少なくとも１種類の医薬をその被検体に投与すること。
ａ）心不全に罹患している被検体からの試料において、本発明の方法に関して前記に述べた少なくとも１種類のバイオマーカーの量を決定すること；および
ｂ）ステップａ）で決定した少なくとも１種類のバイオマーカーの量（単数または複数）を基準量（単数または複数）と比較し、それにより前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体を同定すること；
ｃ）被検体を少なくとも１種類の医薬の投与に適格であると同定すること；
ｄ）前記少なくとも１種類の医薬をその被検体に投与すること。
【0166】
医薬は前記に開示したものである。投与は前記少なくとも１種類の医薬の投与の開始であってもよく、あるいはより高い用量での前記少なくとも１種類の医薬の投与であってもよい。
【0167】
ステップｃ）は比較ステップｂ）の結果に基づく。診断アルゴリズムは本明細書の他の箇所に開示される。
本発明の基礎となる研究に関して、単一バイオマーカーの使用により幾つかの医薬クラスの投与に関して決定を行なうのが可能であることが示された。したがって、本発明の方法は特に単一バイオマーカーの使用により被検体が２種類以上の医薬の投与に適格であるかどうかを評価することを想定する。
本発明の基礎となる研究に関して、単一バイオマーカーの使用により幾つかの医薬クラスの投与に関して決定を行なうのが可能であることが示された。したがって、本発明の方法は特に単一バイオマーカーの使用により被検体が２種類以上の医薬の投与に適格であるかどうかを評価することを想定する。
【0168】
したがって、本発明方法の好ましい態様において、２種類以上の医薬の投与、特に２または３種類の医薬の投与に適格である被検体を同定する。好ましい態様は下記のものである：
バイオマーカーがＧＤＦ－５である場合、医薬は好ましくは下記のものである：
ｉ．ベータ遮断薬およびレニン－アンギオテンシン系の阻害薬
ｉｉ．ベータ遮断薬および利尿薬
ｉｉｉ．レニン－アンギオテンシン系の阻害薬および利尿薬、または
ｉｖ．ベータ遮断薬、レニン－アンギオテンシン系の阻害薬、および利尿薬。
バイオマーカーがＧＤＦ－５である場合、医薬は好ましくは下記のものである：
ｉ．ベータ遮断薬およびレニン－アンギオテンシン系の阻害薬
ｉｉ．ベータ遮断薬および利尿薬
ｉｉｉ．レニン－アンギオテンシン系の阻害薬および利尿薬、または
ｉｖ．ベータ遮断薬、レニン－アンギオテンシン系の阻害薬、および利尿薬。
【0169】
バイオマーカーがＩＧＦＢＰ７である場合、医薬は好ましくはベータ遮断薬およびアルドステロンアンタゴニストである。同様に、医薬は好ましくはベータ遮断薬、アルドステロンアンタゴニストおよび利尿薬である。さらに、医薬がベータ遮断薬、アルドステロンアンタゴニスト、利尿薬、およびレニン－アンギオテンシン系の阻害薬であることを想定する。
【0170】
バイオマーカーがミメカンである場合、医薬は好ましくはベータ遮断薬および利尿薬である。
バイオマーカーがエンドスタチンである場合、医薬は好ましくは下記のものである：
ｉ．ベータ遮断薬およびアルドステロンアンタゴニスト
ｉｉ．ベータ遮断薬および利尿薬
ｉｉｉ．アルドステロンアンタゴニストおよび利尿薬、または
ｉｖ．ベータ遮断薬、アルドステロンアンタゴニスト、および利尿薬。
バイオマーカーがエンドスタチンである場合、医薬は好ましくは下記のものである：
ｉ．ベータ遮断薬およびアルドステロンアンタゴニスト
ｉｉ．ベータ遮断薬および利尿薬
ｉｉｉ．アルドステロンアンタゴニストおよび利尿薬、または
ｉｖ．ベータ遮断薬、アルドステロンアンタゴニスト、および利尿薬。
【0171】
バイオマーカーが心臓トロポニンである場合、医薬は好ましくは下記のものである：
ｉ．ベータ遮断薬およびアルドステロンアンタゴニスト
ｉｉ．ベータ遮断薬およびレニン－アンギオテンシン系の阻害薬
ｉｉｉ．アルドステロンアンタゴニストおよびレニン－アンギオテンシン系の阻害薬、または
ｉｖ．ベータ遮断薬、アルドステロンアンタゴニスト、およびレニン－アンギオテンシン系の阻害薬。
ｉ．ベータ遮断薬およびアルドステロンアンタゴニスト
ｉｉ．ベータ遮断薬およびレニン－アンギオテンシン系の阻害薬
ｉｉｉ．アルドステロンアンタゴニストおよびレニン－アンギオテンシン系の阻害薬、または
ｉｖ．ベータ遮断薬、アルドステロンアンタゴニスト、およびレニン－アンギオテンシン系の阻害薬。
【0172】
バイオマーカーが尿酸である場合、医薬は好ましくは下記のものである：
ｉ．利尿薬およびアルドステロンアンタゴニスト
ｉｉ．利尿薬およびレニン－アンギオテンシン系の阻害薬
ｉｉｉ．アルドステロンアンタゴニストおよびレニン－アンギオテンシン系の阻害薬、または
ｉｖ．利尿薬、アルドステロンアンタゴニスト、およびレニン－アンギオテンシン系の阻害薬。
ｉ．利尿薬およびアルドステロンアンタゴニスト
ｉｉ．利尿薬およびレニン－アンギオテンシン系の阻害薬
ｉｉｉ．アルドステロンアンタゴニストおよびレニン－アンギオテンシン系の阻害薬、または
ｉｖ．利尿薬、アルドステロンアンタゴニスト、およびレニン－アンギオテンシン系の阻害薬。
【0173】
したがって、本発明は、２または３種類の医薬の投与に適格な被検体を同定するための、下記を含む方法に関する：
ａ）心不全に罹患している被検体からの試料においてＧＤＦ－１５（増殖分化因子１５）の量を決定する；および
ｂ）工程ａ）で決定した量を基準量と比較し、それによりそれらの医薬の投与に適格な被検体を同定する；
その際、それら２または３種類の医薬は下記のものである：
ｉ．ベータ遮断薬およびレニン－アンギオテンシン系の阻害薬
ｉｉ．ベータ遮断薬および利尿薬
ｉｉｉ．レニン－アンギオテンシン系の阻害薬および利尿薬、または
ｉｖ．ベータ遮断薬、レニン－アンギオテンシン系の阻害薬、および利尿薬。
ａ）心不全に罹患している被検体からの試料においてＧＤＦ－１５（増殖分化因子１５）の量を決定する；および
ｂ）工程ａ）で決定した量を基準量と比較し、それによりそれらの医薬の投与に適格な被検体を同定する；
その際、それら２または３種類の医薬は下記のものである：
ｉ．ベータ遮断薬およびレニン－アンギオテンシン系の阻害薬
ｉｉ．ベータ遮断薬および利尿薬
ｉｉｉ．レニン－アンギオテンシン系の阻害薬および利尿薬、または
ｉｖ．ベータ遮断薬、レニン－アンギオテンシン系の阻害薬、および利尿薬。
【0174】
さらに、本発明は、２種類の医薬の投与に適格な被検体を同定するための、下記を含む方法に関する：
ａ）心不全に罹患している被検体からの試料においてＩＧＦＢＰ７の量を決定すること；および
ｂ）ステップａ）で決定した量を基準量（単数または複数）と比較し、それによりそれらの医薬の投与に適格な被検体を同定すること；
その際、それら２種類の医薬はベータ遮断薬およびアルドステロンアンタゴニストである。
ａ）心不全に罹患している被検体からの試料においてＩＧＦＢＰ７の量を決定すること；および
ｂ）ステップａ）で決定した量を基準量（単数または複数）と比較し、それによりそれらの医薬の投与に適格な被検体を同定すること；
その際、それら２種類の医薬はベータ遮断薬およびアルドステロンアンタゴニストである。
【0175】
さらに、本発明は、２種類の医薬の投与に適格な被検体を同定するための、下記を含む方法に関する：
ａ）心不全に罹患している被検体からの試料においてミメカンの量を決定すること；および
ｂ）ステップａ）で決定した量を基準量（単数または複数）と比較し、それによりそれらの医薬の投与に適格な被検体を同定すること；
その際、それら２種類の医薬はベータ遮断薬および利尿薬である。
ａ）心不全に罹患している被検体からの試料においてミメカンの量を決定すること；および
ｂ）ステップａ）で決定した量を基準量（単数または複数）と比較し、それによりそれらの医薬の投与に適格な被検体を同定すること；
その際、それら２種類の医薬はベータ遮断薬および利尿薬である。
【0176】
したがって、本発明は、２または３種類の医薬の投与に適格な被検体を同定するための、下記を含む方法に関する：
ａ）心不全に罹患している被検体からの試料において心臓トロポニンの量を決定すること；および
ｂ）ステップａ）で決定した量を基準量と比較し、それによりそれらの医薬の投与に適格な被検体を同定すること；
その際、それら２または３種類の医薬は下記のものである：
ｉ．ベータ遮断薬およびアルドステロンアンタゴニスト
ｉｉ．ベータ遮断薬およびレニン－アンギオテンシン系の阻害薬、
ｉｉｉ．アルドステロンアンタゴニストおよびレニン－アンギオテンシン系の阻害薬、または
ｉｖ．ベータ遮断薬、アルドステロンアンタゴニスト、およびレニン－アンギオテンシン系の阻害薬。
ａ）心不全に罹患している被検体からの試料において心臓トロポニンの量を決定すること；および
ｂ）ステップａ）で決定した量を基準量と比較し、それによりそれらの医薬の投与に適格な被検体を同定すること；
その際、それら２または３種類の医薬は下記のものである：
ｉ．ベータ遮断薬およびアルドステロンアンタゴニスト
ｉｉ．ベータ遮断薬およびレニン－アンギオテンシン系の阻害薬、
ｉｉｉ．アルドステロンアンタゴニストおよびレニン－アンギオテンシン系の阻害薬、または
ｉｖ．ベータ遮断薬、アルドステロンアンタゴニスト、およびレニン－アンギオテンシン系の阻害薬。
【0177】
したがって、本発明は、２または３種類の医薬の投与に適格な被検体を同定するための、下記を含む方法に関する：
ａ）心不全に罹患している被検体からの試料においてエンドスタチンの量を決定すること；および
ｂ）ステップａ）で決定した量を基準量（単数または複数）と比較し、それによりそれらの医薬の投与に適格な被検体を同定すること；
その際、それら２または３種類の医薬は下記のものである：
ｉ．ベータ遮断薬およびアルドステロンアンタゴニスト
ｉｉ．ベータ遮断薬および利尿薬
ｉｉｉ．アルドステロンアンタゴニストおよび利尿薬、または
ｉｖ．ベータ遮断薬、アルドステロンアンタゴニスト、および利尿薬。
ａ）心不全に罹患している被検体からの試料においてエンドスタチンの量を決定すること；および
ｂ）ステップａ）で決定した量を基準量（単数または複数）と比較し、それによりそれらの医薬の投与に適格な被検体を同定すること；
その際、それら２または３種類の医薬は下記のものである：
ｉ．ベータ遮断薬およびアルドステロンアンタゴニスト
ｉｉ．ベータ遮断薬および利尿薬
ｉｉｉ．アルドステロンアンタゴニストおよび利尿薬、または
ｉｖ．ベータ遮断薬、アルドステロンアンタゴニスト、および利尿薬。
【0178】
単一バイオマーカーの量の決定に基づいて２種類以上の医薬の投与に適格である被検体を同定する場合、基準量に関して下記を適用すべきである：
好ましくは、種々の医薬についてステップｂ）に述べた基準量は、個々のマーカーについて同一であってもよい。したがって、本発明方法のステップａ）で決定したバイオマーカーの量を、好ましくは単一の基準量、したがって個々のマーカーについて被検体がその２または３種類の医薬の投与に適格であるか否かを評価できる基準量（すなわち、すべての医薬に適用される基準量）と比較する。同様に好ましくは、種々の医薬に関する個々のバイオマーカーについての基準量は異なってもよい；すなわち、それは医薬特異的であってもよい。したがって、本発明方法のステップａ）で決定したバイオマーカーの量を、好ましくは２または３種類の基準量と比較する。したがって、２種類の医薬の投与に適格である被検体を同定する場合、そのバイオマーカーの量を２種類の基準量と比較すべきである。同様に、３種類の医薬の投与に適格である被検体を同定する場合、そのバイオマーカーの量を３種類の基準量と比較すべきである。それら個々の基準量は医薬特異的であろう。したがって、種々の医薬についての個々の基準量（単一マーカーに関して）を適用できる。たとえば、ベータ遮断薬およびアルドステロンアンタゴニストの投与に適格である被検体を同定すべき場合、ステップａ）で決定したバイオマーカーの量を、ｉ）ベータ遮断薬の投与に適格である被検体を同定するための前記バイオマーカーについての基準量、およびｉｉ）アルドステロンアンタゴニストの投与に適格である被検体を同定するためのそのバイオマーカーについての基準量と比較すべきである（これは、たとえばバイオマーカーがＩＧＦＢＰ７である場合に当てはまる）。たとえば、ベータ遮断薬および利尿薬の投与に適格である被検体を同定すべき場合、ステップａ）で決定したバイオマーカーの量を、ｉ）ベータ遮断薬の投与に適格である被検体を同定するためのそのバイオマーカーについての基準量、およびｉｉ）利尿薬の投与に適格である被検体を同定するためのそのバイオマーカーについての基準量と比較すべきである（これは、バイオマーカーがミメカンである場合に当てはまる）。
好ましくは、種々の医薬についてステップｂ）に述べた基準量は、個々のマーカーについて同一であってもよい。したがって、本発明方法のステップａ）で決定したバイオマーカーの量を、好ましくは単一の基準量、したがって個々のマーカーについて被検体がその２または３種類の医薬の投与に適格であるか否かを評価できる基準量（すなわち、すべての医薬に適用される基準量）と比較する。同様に好ましくは、種々の医薬に関する個々のバイオマーカーについての基準量は異なってもよい；すなわち、それは医薬特異的であってもよい。したがって、本発明方法のステップａ）で決定したバイオマーカーの量を、好ましくは２または３種類の基準量と比較する。したがって、２種類の医薬の投与に適格である被検体を同定する場合、そのバイオマーカーの量を２種類の基準量と比較すべきである。同様に、３種類の医薬の投与に適格である被検体を同定する場合、そのバイオマーカーの量を３種類の基準量と比較すべきである。それら個々の基準量は医薬特異的であろう。したがって、種々の医薬についての個々の基準量（単一マーカーに関して）を適用できる。たとえば、ベータ遮断薬およびアルドステロンアンタゴニストの投与に適格である被検体を同定すべき場合、ステップａ）で決定したバイオマーカーの量を、ｉ）ベータ遮断薬の投与に適格である被検体を同定するための前記バイオマーカーについての基準量、およびｉｉ）アルドステロンアンタゴニストの投与に適格である被検体を同定するためのそのバイオマーカーについての基準量と比較すべきである（これは、たとえばバイオマーカーがＩＧＦＢＰ７である場合に当てはまる）。たとえば、ベータ遮断薬および利尿薬の投与に適格である被検体を同定すべき場合、ステップａ）で決定したバイオマーカーの量を、ｉ）ベータ遮断薬の投与に適格である被検体を同定するためのそのバイオマーカーについての基準量、およびｉｉ）利尿薬の投与に適格である被検体を同定するためのそのバイオマーカーについての基準量と比較すべきである（これは、バイオマーカーがミメカンである場合に当てはまる）。
【0179】
個々の医薬と組み合わせた個々のバイオマーカーについての診断アルゴリズムは、本明細書の他の箇所に述べてある。さらに、好ましい基準量を前記に述べた。それらの診断アルゴリズムおよび好ましい基準量は、好ましくは、単一バイオマーカーの量の決定に基づいて２または３種類の医薬の投与に適格である被検体を同定すべき場合にも当てはまる。２または３種類の医薬の投与に適格である被検体を同定すべきである場合、それらの医薬と組み合わせた個々のバイオマーカーについて本明細書中で前記に述べた診断アルゴリズムを組み合わせる。
【0180】
たとえば、バイオマーカーＩＧＦＢＰ７に関しては下記を適用する：
好ましくは、基準量（特に、ベータ遮断薬の投与に適格な被検体を同定するための基準量）と比較して減少した試験試料中のバイオマーカーの量は前記ベータ遮断薬の投与に適格な被検体の指標であり、および／または基準量と比較して増加した前記バイオマーカーの量は前記ベータ遮断薬の投与に適格ではない被検体の指標である；これに対し、基準量（特に、アルドステロンアンタゴニストの投与に適格な被検体を同定するための基準量）と比較して増加した試験試料中のバイオマーカーの量は前記アルドステロンアンタゴニストの投与に適格な被検体の指標であり、および／または基準量と比較して減少した前記バイオマーカーの量は前記アルドステロンアンタゴニストの投与に適格ではない被検体の指標である。
好ましくは、基準量（特に、ベータ遮断薬の投与に適格な被検体を同定するための基準量）と比較して減少した試験試料中のバイオマーカーの量は前記ベータ遮断薬の投与に適格な被検体の指標であり、および／または基準量と比較して増加した前記バイオマーカーの量は前記ベータ遮断薬の投与に適格ではない被検体の指標である；これに対し、基準量（特に、アルドステロンアンタゴニストの投与に適格な被検体を同定するための基準量）と比較して増加した試験試料中のバイオマーカーの量は前記アルドステロンアンタゴニストの投与に適格な被検体の指標であり、および／または基準量と比較して減少した前記バイオマーカーの量は前記アルドステロンアンタゴニストの投与に適格ではない被検体の指標である。
【0181】
あるいは、ベータ遮断薬の投与に適格な被検体を同定するためのバイオマーカーＩＧＦＢＰ７に関する基準量は、前記ベータ遮断薬の投与に適格であることが分かっている被検体または被検体グループから導かれ、その際、基準量と比較して本質的に同一であるかまたは減少した試験試料中のＩＧＦＢＰ７の量は、前記ベータ遮断薬の投与に適格な被検体の指標であり、および／またはベータ遮断薬の投与に適格な被検体を同定するための基準量は前記ベータ遮断薬の投与に適格ではないことが分かっている被検体または被検体グループから導かれ、その際、基準量と比較して本質的に同一であるかまたは増加した試験試料中のＩＧＦＢＰ７の量は、前記ベータ遮断薬の投与に適格ではない被検体の指標である；これに対し、アルドステロンアンタゴニストの投与に適格な被検体を同定するためのＩＧＦＢＰ７に関する基準量は、前記アルドステロンアンタゴニストの投与に適格であることが分かっている被検体または被検体グループから導かれ、その際、基準量と比較して本質的に同一であるかまたは増加した試験試料中のＩＧＦＢＰ７の量は、前記アルドステロンアンタゴニストの投与に適格な被検体の指標であり、および／またはアルドステロンアンタゴニストの投与に適格な被検体を同定するためのＩＧＦＢＰ７に関する基準量は前記アルドステロンアンタゴニストの投与に適格ではないことが分かっている被検体または被検体グループから導かれ、その際、基準量と比較して本質的に同一であるかまたは減少した試験試料中のＩＧＦＢＰ７の量は、前記アルドステロンアンタゴニストの投与に適格ではない被検体の指標である。
【0182】
本発明のある観点において、ベータ遮断薬、アルドステロンアンタゴニスト、利尿薬、およびレニン－アンギオテンシン系の阻害薬からなる群から選択される少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体を同定するための補助を確立する方法を考慮し、その方法は下記を含む：
ａ）ＧＤＦ－１５（増殖分化因子１５）、エンドスタチン、ミメカン、ＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、心臓トロポニン、ＢＮＰタイプのペプチド、尿酸、Ｇａｌ３（ガレクチン－３）、オステオポンチン、ｓＳＴ２（可溶性ＳＴ２）、ｓＦｌｔ－１、ＰｌＧＦ、Ｐ１ＮＰ、シスタチンＣ、プレアルブミン、およびトランスフェリンからなる群から選択される少なくとも１種類のマーカーの量を下記により決定する：（ｉ）その少なくとも１種類のマーカーに特異的に結合する検出剤（単数または複数）とと試料を、その検出剤と試料からの少なくとも１種類のマーカーとの複合体を形成させるのに十分な期間、接触させ、（ｉｉ）形成された複合体の量を測定し、その際、形成された複合体の量は試料中に存在する少なくとも１種類のマーカーの量に比例し、そして（ｉｉｉ）形成された複合体の量を試料中に存在する少なくとも１種類のマーカーの量を反映する少なくとも１種類のマーカーの量に換算すること；
ｂ）その量を基準と比較すること；および、
ｃ）ステップｂ）で行なった比較の結果に基づいて、前記少なくとも１種類の医薬の投
与に適格な被検体を同定するための補助を確立すること。
ａ）ＧＤＦ－１５（増殖分化因子１５）、エンドスタチン、ミメカン、ＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、心臓トロポニン、ＢＮＰタイプのペプチド、尿酸、Ｇａｌ３（ガレクチン－３）、オステオポンチン、ｓＳＴ２（可溶性ＳＴ２）、ｓＦｌｔ－１、ＰｌＧＦ、Ｐ１ＮＰ、シスタチンＣ、プレアルブミン、およびトランスフェリンからなる群から選択される少なくとも１種類のマーカーの量を下記により決定する：（ｉ）その少なくとも１種類のマーカーに特異的に結合する検出剤（単数または複数）とと試料を、その検出剤と試料からの少なくとも１種類のマーカーとの複合体を形成させるのに十分な期間、接触させ、（ｉｉ）形成された複合体の量を測定し、その際、形成された複合体の量は試料中に存在する少なくとも１種類のマーカーの量に比例し、そして（ｉｉｉ）形成された複合体の量を試料中に存在する少なくとも１種類のマーカーの量を反映する少なくとも１種類のマーカーの量に換算すること；
ｂ）その量を基準と比較すること；および、
ｃ）ステップｂ）で行なった比較の結果に基づいて、前記少なくとも１種類の医薬の投
与に適格な被検体を同定するための補助を確立すること。
【0183】
本発明の他の観点において、ベータ遮断薬、アルドステロンアンタゴニスト、利尿薬、およびレニン－アンギオテンシン系の阻害薬からなる群から選択される少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体を同定する補助を確立するための、下記のものを含むシステムを考慮する：
ａ）ＧＤＦ－１５（増殖分化因子１５）、エンドスタチン、ミメカン、ＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、心臓トロポニン、ＢＮＰタイプのペプチド、尿酸、Ｇａｌ３（ガレクチン－３）、オステオポンチン、ｓＳＴ２（可溶性ＳＴ２）、ｓＦｌｔ－１、ＰｌＧＦ、Ｐ１ＮＰ、シスタチンＣ、プレアルブミン、およびトランスフェリンからなる群から選択される少なくとも１種類のマーカーに特異的に結合する検出剤（単数または複数）と試料を、前記検出剤と試料からの少なくとも１種類のマーカーとの複合体を形成させるのに十分な期間、接触させるように構成された分析ユニット；
ｂ）形成された複合体の量を測定するように構成された分析ユニット；その際、形成された複合体の量は試料中に存在する少なくとも１種類のマーカーの量に比例する；
ｃ）プロセッサーを備え、かつ前記の分析ユニット類と作動可能な状態で連絡した、コンピューティングデバイス；および、
ｄ）プロセッサーが実行できる複数の指令、すなわち実行した際に、形成された複合体の量を試料中に存在する少なくとも１種類のマーカーの量を反映する少なくとも１種類のマーカーの量に換算し、前記量を基準量と比較し、前記基準との比較の結果に基づいて、前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体を同定する補助を確立するための指令を含む、非一過性の機械可読媒体。
ａ）ＧＤＦ－１５（増殖分化因子１５）、エンドスタチン、ミメカン、ＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、心臓トロポニン、ＢＮＰタイプのペプチド、尿酸、Ｇａｌ３（ガレクチン－３）、オステオポンチン、ｓＳＴ２（可溶性ＳＴ２）、ｓＦｌｔ－１、ＰｌＧＦ、Ｐ１ＮＰ、シスタチンＣ、プレアルブミン、およびトランスフェリンからなる群から選択される少なくとも１種類のマーカーに特異的に結合する検出剤（単数または複数）と試料を、前記検出剤と試料からの少なくとも１種類のマーカーとの複合体を形成させるのに十分な期間、接触させるように構成された分析ユニット；
ｂ）形成された複合体の量を測定するように構成された分析ユニット；その際、形成された複合体の量は試料中に存在する少なくとも１種類のマーカーの量に比例する；
ｃ）プロセッサーを備え、かつ前記の分析ユニット類と作動可能な状態で連絡した、コンピューティングデバイス；および、
ｄ）プロセッサーが実行できる複数の指令、すなわち実行した際に、形成された複合体の量を試料中に存在する少なくとも１種類のマーカーの量を反映する少なくとも１種類のマーカーの量に換算し、前記量を基準量と比較し、前記基準との比較の結果に基づいて、前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体を同定する補助を確立するための指令を含む、非一過性の機械可読媒体。
【0184】
適切な検出剤は、ある観点において、本発明の方法により検査すべき被検体の試料中の少なくとも１種類のマーカーに特異的に結合する抗体、すなわちＧＤＦ－１５（増殖分化因子１５）、エンドスタチン、ミメカン、ＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、心臓トロポニン、ＢＮＰタイプのペプチド、尿酸、Ｇａｌ３（ガレクチン－３）、オステオポンチン、ｓＳＴ２（可溶性ＳＴ２）、ｓＦｌｔ－１、ＰｌＧＦ、Ｐ１ＮＰ、シスタチンＣ、プレアルブミン、およびトランスフェリンに結合する検出剤であってもよい。適用できる他の検出剤は、ある観点において、試料中の少なくとも１種類のマーカーに特異的に結合するアプタマーであってもよい。さらに他の観点において、検出剤と少なくとも１種類のマーカーの間に形成された複合体から、形成された複合体の量を測定する前に試料を分離する。したがって、ある観点において、検出剤を固体支持体に固定化してもよい。さらに他の観点において、固体支持体上に形成された複合体から洗浄溶液の適用により試料を分離することができる。形成された複合体は試料中に存在する少なくとも１種類のマーカーの量に比例すべきである。適用する検出剤の特異度および／または感度が試料中に含まれる特異的に結合できる少なくとも１種類のマーカーの比例度を規定することは理解されるであろう。決定を実施できる方法についてのさらなる詳細は本明細書の他の箇所にもある。形成された複合体の量を、試料中に実際に存在する量を反映する少なくとも１種類のマーカーの量に換算すべきである。そのような量は、ある観点において、本質的に試料中に存在する量であってもよく、あるいは他の観点において、形成された複合体と元の試料中に存在する量との関係のため、その一定割合である量であってもよい。
【0185】
前記方法のさらに他の観点において、ステップａ）は分析ユニット、ある観点において、本明細書の他の箇所に定める分析ユニットにより実施できる。
本発明方法のある観点において、ステップａ）で決定した量（単数または複数）を基準と比較する。ある観点において、基準は本明細書の他の箇所に定める基準である。さらに他の観点において、基準は複合体の測定量と元の試料中に存在する量との比例関係を考慮に入れる。したがって、本発明方法のある観点に適用する基準は、用いた検出剤の限界を反映するように採用された人為的基準である。他の観点において、比較を実施する際に、
たとえば決定量と基準の数値を実際に比較する前に、決定量についての正規化および／または補正計算の工程を含めることにより、その関係を考慮に入れることもできる。この場合も、決定量についての正規化および／または補正計算のステップは、用いた検出剤の限界が適正に反映されるように比較ステップを採用する。ある観点において、比較は自動的に、たとえばコンピューターシステムなどにより支援して実施される。
本発明方法のある観点において、ステップａ）で決定した量（単数または複数）を基準と比較する。ある観点において、基準は本明細書の他の箇所に定める基準である。さらに他の観点において、基準は複合体の測定量と元の試料中に存在する量との比例関係を考慮に入れる。したがって、本発明方法のある観点に適用する基準は、用いた検出剤の限界を反映するように採用された人為的基準である。他の観点において、比較を実施する際に、
たとえば決定量と基準の数値を実際に比較する前に、決定量についての正規化および／または補正計算の工程を含めることにより、その関係を考慮に入れることもできる。この場合も、決定量についての正規化および／または補正計算のステップは、用いた検出剤の限界が適正に反映されるように比較ステップを採用する。ある観点において、比較は自動的に、たとえばコンピューターシステムなどにより支援して実施される。
【0186】
その少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体を同定するための補助は、本明細書の他の箇所に述べるように、ステップｂ）で実施した比較に基づいて、投与に適格な被検体グループまたは投与に適格ではない被検体グループのいずれかに被検体を配属することにより確立される。既に本明細書の他の箇所で考察したように、検査した被検体の配属は検査した症例の１００％において正確でなければならないわけではない。さらに、検査した被検体が配属される被検体グループは、それらが統計学的考慮、すなわち本発明の方法をそれに基づいて操作すべき一定の前選択した尤度(degree of likelihood)に基づいて確立されるという点で、人為的グループである。本発明のある観点において、本明細書に記載および開示するように、前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体を同定するための補助は、自動的に、たとえばコンピューティングデバイスなどにより支援して確立される。
【0187】
本発明方法のある観点において、本方法はさらに、本明細書の他の箇所に詳細に述べるようにステップｃ）で確立された結果に従って被検体を推奨および／または管理し、ならびに／あるいは疾患モニタリングの集中度を適合させるステップを含む。
【0188】
前記方法のある観点において、ステップｂ）および／またはｃ）は、本明細書の他の箇所に述べる１以上の分析ユニットにより実施される。
本発明はまた、ベータ遮断薬、アルドステロンアンタゴニスト、利尿薬、およびレニン－アンギオテンシン系の阻害薬からなる群から選択される少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体を同定するための、心不全に罹患している被検体の試料における、ｉ）ＧＤＦ－１５（増殖分化因子１５）、エンドスタチン、ミメカン、ＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、心臓トロポニン、ＢＮＰタイプのペプチド、尿酸、Ｇａｌ３（ガレクチン－３）、オステオポンチン、ｓＳＴ２（可溶性ＳＴ２）、ｓＦｌｔ－１、ＰｌＧＦ、Ｐ１ＮＰ、シスタチンＣ、プレアルブミン、およびトランスフェリンからなる群から選択される少なくとも１種類のバイオマーカー、および／またはｉｉ）ＧＤＦ－１５（増殖分化因子１５）、エンドスタチン、ミメカン、ＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、心臓トロポニン、ＢＮＰタイプのペプチド、尿酸、Ｇａｌ３（ガレクチン－３）、オステオポンチン、ｓＳＴ２（可溶性ＳＴ２）、ｓＦｌｔ－１、ＰｌＧＦ、Ｐ１ＮＰ、シスタチンＣ、プレアルブミン、およびトランスフェリンからなる群から選択されるバイオマーカーに特異的に結合する検出剤の使用に関する。
本発明はまた、ベータ遮断薬、アルドステロンアンタゴニスト、利尿薬、およびレニン－アンギオテンシン系の阻害薬からなる群から選択される少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体を同定するための、心不全に罹患している被検体の試料における、ｉ）ＧＤＦ－１５（増殖分化因子１５）、エンドスタチン、ミメカン、ＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、心臓トロポニン、ＢＮＰタイプのペプチド、尿酸、Ｇａｌ３（ガレクチン－３）、オステオポンチン、ｓＳＴ２（可溶性ＳＴ２）、ｓＦｌｔ－１、ＰｌＧＦ、Ｐ１ＮＰ、シスタチンＣ、プレアルブミン、およびトランスフェリンからなる群から選択される少なくとも１種類のバイオマーカー、および／またはｉｉ）ＧＤＦ－１５（増殖分化因子１５）、エンドスタチン、ミメカン、ＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、心臓トロポニン、ＢＮＰタイプのペプチド、尿酸、Ｇａｌ３（ガレクチン－３）、オステオポンチン、ｓＳＴ２（可溶性ＳＴ２）、ｓＦｌｔ－１、ＰｌＧＦ、Ｐ１ＮＰ、シスタチンＣ、プレアルブミン、およびトランスフェリンからなる群から選択されるバイオマーカーに特異的に結合する検出剤の使用に関する。
【0189】
本発明はまた、ベータ遮断薬、アルドステロンアンタゴニスト、利尿薬、およびレニン－アンギオテンシン系の阻害薬からなる群から選択される少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体を同定する医薬組成物または診断薬組成物の製造のための、ｉ）ＧＤＦ－１５（増殖分化因子１５）、エンドスタチン、ミメカン、ＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、心臓トロポニン、ＢＮＰタイプのペプチド、尿酸、Ｇａｌ３（ガレクチン－３）、オステオポンチン、ｓＳＴ２（可溶性ＳＴ２）、ｓＦｌｔ－１、ＰｌＧＦ、Ｐ１ＮＰ、シスタチンＣ、プレアルブミン、およびトランスフェリンからなる群から選択される少なくとも１種類のバイオマーカー、および／またはｉｉ）ＧＤＦ－１５（増殖分化因子１５）、エンドスタチン、ミメカン、ＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、心臓トロポニン、ＢＮＰタイプのペプチド、尿酸、Ｇａｌ３（ガレクチン－３）、オステオポンチン、ｓＳＴ２（可溶性ＳＴ２）、ｓＦｌｔ－１、ＰｌＧＦ、Ｐ１ＮＰ、シスタチンＣ、プレアルブミン、およびトランスフェリンからなる群から選択されるバイオマーカーに特
異的に結合する検出剤の使用に関する。
異的に結合する検出剤の使用に関する。
【0190】
さらに本発明は、ベータ遮断薬、アルドステロンアンタゴニスト、利尿薬、およびレニン－アンギオテンシン系の阻害薬からなる群から選択される少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体を同定するための、ＧＤＦ－１５（増殖分化因子１５）、エンドスタチン、ミメカン、ＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、心臓トロポニン、ＢＮＰタイプのペプチド、尿酸、Ｇａｌ３（ガレクチン－３）、オステオポンチン、ｓＳＴ２（可溶性ＳＴ２）、ｓＦｌｔ－１、ＰｌＧＦ、Ｐ１ＮＰ、シスタチンＣ、プレアルブミン、およびトランスフェリンからなる群から選択される少なくとも１種類のバイオマーカー、および／またはｉｉ）ＧＤＦ－１５（増殖分化因子１５）、エンドスタチン、ミメカン、ＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、心臓トロポニン、ＢＮＰタイプのペプチド、尿酸、Ｇａｌ３（ガレクチン－３）、オステオポンチン、ｓＳＴ２（可溶性ＳＴ２）、ｓＦｌｔ－１、ＰｌＧＦ、Ｐ１ＮＰ、シスタチンＣ、プレアルブミン、およびトランスフェリンからなる群から選択されるバイオマーカーに特異的に結合する検出剤に関する。前記少なくとも１種類のバイオマーカーまたは前記少なくとも１種類の検出剤はキットに収容されていてもよい。
【0191】
本明細書中で用いる用語“検出剤”は、試料中に存在するバイオマーカーポリペプチド（単数または複数）を特異的に認識してそれに結合することができる作用剤を表わす。さらに、前記作用剤は、当該作用剤とバイオマーカーにより形成された複合体の直接検出または間接検出を可能にするものでなければならない。直接検出は、前記作用剤に検出可能な標識を含有させることにより達成できる。間接標識化は、バイオマーカーおよび検出剤を含む複合体に特異的に結合するさらなる作用剤により達成でき、その際、このさらなる作用剤は検出可能な信号を発することができるものである。検出剤として使用できる適切な化合物は当技術分野で周知である。好ましくは、検出剤はバイオマーカーに特異的に結合する抗体またはアプタマーである。用語“抗体”は本明細書の他の箇所に記載されている。
【0192】
本発明の好ましい態様によれば、本発明の方法を実施するために適合させた、下記のものを含むデバイスが提供される：
ａ）ＧＤＦ－１５（増殖分化因子１５）、エンドスタチン、ミメカン、ＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、心臓トロポニン、ＢＮＰタイプのペプチド、尿酸、Ｇａｌ３（ガレクチン－３）、オステオポンチン、ｓＳＴ２（可溶性ＳＴ２）、ｓＦｌｔ－１、ＰｌＧＦ、Ｐ１ＮＰ、シスタチンＣ、プレアルブミン、およびトランスフェリンからなる群から選択されるマーカーに特異的に結合する検出剤（単数または複数）を含む分析ユニットであって、心不全に罹患している被検体の試料においてこれらのマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）を決定するために適合させたユニット；および、
ｂ）決定した量（単数または複数）を基準量（単数または複数）と比較し、それによりベータ遮断薬、アルドステロンアンタゴニスト、利尿薬、およびレニン－アンギオテンシン系の阻害薬からなる群から選択される少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体を同定するための分析ユニットであって、基準量（単数または複数）を備えたデータベースおよび比較を実施するためのコンピューター実装されたアルゴリズムを含むユニット。
ａ）ＧＤＦ－１５（増殖分化因子１５）、エンドスタチン、ミメカン、ＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、心臓トロポニン、ＢＮＰタイプのペプチド、尿酸、Ｇａｌ３（ガレクチン－３）、オステオポンチン、ｓＳＴ２（可溶性ＳＴ２）、ｓＦｌｔ－１、ＰｌＧＦ、Ｐ１ＮＰ、シスタチンＣ、プレアルブミン、およびトランスフェリンからなる群から選択されるマーカーに特異的に結合する検出剤（単数または複数）を含む分析ユニットであって、心不全に罹患している被検体の試料においてこれらのマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）を決定するために適合させたユニット；および、
ｂ）決定した量（単数または複数）を基準量（単数または複数）と比較し、それによりベータ遮断薬、アルドステロンアンタゴニスト、利尿薬、およびレニン－アンギオテンシン系の阻害薬からなる群から選択される少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体を同定するための分析ユニットであって、基準量（単数または複数）を備えたデータベースおよび比較を実施するためのコンピューター実装されたアルゴリズムを含むユニット。
【0193】
好ましい基準量およびアルゴリズムは本明細書の他の箇所に開示されている。
本発明の好ましい態様は、ベータ遮断薬、アルドステロンアンタゴニスト、利尿薬、およびレニン－アンギオテンシン系の阻害薬からなる群から選択される少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体を同定するためのシステムを含む。システムの例には、化学反応もしくは生物反応の結果を検出するために、または化学反応もしくは生物反応の進行をモニターするために用いられる、臨床化学分析計、凝固化学分析計、免疫化学分析計、尿分析計、核酸分析計が含まれる。より具体的には、本明細書に開示する代表的システムに
は、ＲｏｃｈｅのＥｌｅｃｓｙｓ（商標）システムおよびＣｏｂａｓ（登録商標）ｅイムノアッセイ分析計、ＡｂｂｏｔｔのＡｒｃｈｉｔｅｃｔ（商標）およびＡｘｓｙｍ（商標）分析計、ＳｉｅｍｅｎｓのＣｅｎｔａｕｒ（商標）およびＩｍｍｕｌｉｔｅ（商標）分析計、ならびにＢｅｃｋｍａｎ ＣｏｕｌｔｅｒのＵｎｉＣｅｌ（商標）およびＡｃｅｓｓ（商標）分析計などを含めることができる。
本発明の好ましい態様は、ベータ遮断薬、アルドステロンアンタゴニスト、利尿薬、およびレニン－アンギオテンシン系の阻害薬からなる群から選択される少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体を同定するためのシステムを含む。システムの例には、化学反応もしくは生物反応の結果を検出するために、または化学反応もしくは生物反応の進行をモニターするために用いられる、臨床化学分析計、凝固化学分析計、免疫化学分析計、尿分析計、核酸分析計が含まれる。より具体的には、本明細書に開示する代表的システムに
は、ＲｏｃｈｅのＥｌｅｃｓｙｓ（商標）システムおよびＣｏｂａｓ（登録商標）ｅイムノアッセイ分析計、ＡｂｂｏｔｔのＡｒｃｈｉｔｅｃｔ（商標）およびＡｘｓｙｍ（商標）分析計、ＳｉｅｍｅｎｓのＣｅｎｔａｕｒ（商標）およびＩｍｍｕｌｉｔｅ（商標）分析計、ならびにＢｅｃｋｍａｎ ＣｏｕｌｔｅｒのＵｎｉＣｅｌ（商標）およびＡｃｅｓｓ（商標）分析計などを含めることができる。
【0194】
システムの態様には、本明細書の開示内容を実施するために用いる１以上の分析ユニットを含めることができる。本明細書に開示するシステムの分析ユニットは、既知のように有線接続、Ｂｌｕｅｔｏｏｔｈ（登録商標）、ＬＡＮＳ、または無線信号のいずれかにより、本明細書に開示するコンピューティングデバイスと作動可能な状態で連絡している。さらに、本明細書の開示によれば、分析ユニットは、診断の目的で試料の検出、たとえば定性および／または定量評価の一方または両方を実施する独立型装置または大型機器内のモジュールを含むことができる。たとえば、分析ユニットは試料および／または試薬のピペッティング、投入、混合を実施または支援することができる。分析ユニットは、アッセイを行なう試薬を保持するための試薬保持ユニットを含むことができる。試薬は、たとえば個々の試薬または一群の試薬を収容した容器またはカセットの形態で、貯蔵コンパートメントまたはコンベヤー内の適宜な受器または位置に置いた状態に配置することができる。検出試薬は、試料と接触させる固体支持体に固定化された形態であってもよい。さらに、分析ユニットは、個々の分析に最適化できる処理および／または検出の構成要素を含むことができる。
【0195】
若干の態様によれば、分析ユニットは、試料について分析物、たとえばマーカーを光学検出するために構成できる。光学検出のために構成された代表的な分析ユニットは、電磁エネルギーを電気信号に変換するために構成されたデバイスを含み、それには単一素子および多重素子またはアレイ状の光学検出器が共に含まれる。本明細書の開示によれば、光学検出器は光電磁信号をモニターし、そして光路に配置された試料中の分析物の存在および／または濃度の指標となる電気的な出力信号または応答信号をベースライン信号に対比して提供することができる。そのようなデバイスには、たとえば下記のものも含めることができる：アバランシェフォトダイオード(avalanche photodiode)を含むフォトダイオード、フォトトランジスター、光伝導検出器、リニアセンサーアレイ、ＣＣＤ検出器、ＣＭＯＳアレイ検出器を含むＣＭＯＳ検出器、光電子増倍管、および光電子増倍管アレイ。特定の態様によれば、光学検出器、たとえばフォトダイオードまたは光電子増倍管は、信号の調整または処理用の追加エレクトロニクスを含むことができる。たとえば、光学検出器は少なくとも１つの前置増幅器、フィルター回路、または集積回路を含むことができる。適切な前置増幅器には、たとえば積分型、トランスインピーダンス型、および電流利得型(current gain)（カレントミラー(current mirror)）の前置増幅器が含まれる。
【0196】
さらに、本明細書の開示による１以上の分析ユニットは、光を発するための光源を含むことができる。たとえば、分析ユニットの光源は、試験試料について分析物濃度を測定するための、またはエネルギー移動（たとえば、蛍光共鳴エネルギー移動による、または酵素の触媒作用による）を可能にするための、少なくとも１つの発光素子（たとえば、発光ダイオード、電源付き輻射線源、たとえば白熱電球、エレクトロルミネセントランプ、気体放電ランプ、高輝度放電ランプ、レーザー）からなることができる。
【0197】
さらに、このシステムの分析ユニットは、１以上の保温ユニット（たとえば、試料または試薬を、特定した温度または温度範囲に保持するためのもの）を含むことができる。若干の態様において、分析ユニットは、試料に反復温度サイクルを施してその試料について増幅生成物の量の変化をモニターするためのサーモサイクラー（リアルタイムサーモサイクラーを含む）を含むことができる。
【0198】
加えて、本明細書に開示するシステムの分析ユニットは、反応器またはキュベットへの供給ユニットを含むことができ、あるいはそれに作動可能な状態で接続していてもよい。代表的な供給ユニットには、試料および／または試薬を反応器へ送達するための液体操作ユニット、たとえばピペッティングユニットが含まれる。ピペッティングユニットは、再利用可能な可洗ニードル、たとえばスチールニードル、または使い捨てピペットティップを含むことができる。分析ユニットは、さらに１以上の混合ユニット、たとえば液体を入れたキュベットを振とうするためのシェーカー、またはキュベットもしくは試薬容器内の液体を混合するための混合パドルを含むことができる。
【0199】
以上から、本明細書に開示する若干の態様によれば、本明細書に開示および記載した方法の幾つかの工程の一部をコンピューティングデバイスにより実施できることが分かる。コンピューティングデバイスは、たとえば汎用コンピューターまたはポータブルコンピューティングデバイスであってもよい。本明細書に開示する方法の１以上の工程を実施するために、多数のコンピューティングデバイスを、たとえばネットワークまたは他のデータ移送方法を介して一緒に使用できることも理解すべきである。代表的なコンピューティングデバイスには、デスクトップコンピューター、ラップトップコンピューター、パーソナルデータアシスタント(personal data assistant)（“ＰＤＡ”）、たとえばＢＬＡＣＫＢＥＲＲＹ（登録商標）銘柄のデバイス、セル方式デバイス、タブレットコンピューター、サーバーなどが含まれる。一般に、コンピューティングデバイスは複数の指令（たとえば、ソフトウェアのプログラム）を実行できるプロセッサーを含む。
【0200】
コンピューティングデバイスはメモリーにアクセスできる。メモリーはコンピューター可読媒体であり、単一記憶デバイスまたは多重記憶デバイスを含むことができ、それらはコンピューティングデバイスと共に局所に配置され、あるいはたとえばネットワークを介してコンピューティングデバイスにアクセス可能であってもよい。コンピューター可読媒体はコンピューティングデバイスがアクセスできる入手可能ないかなる媒体であってもよく、これには持久性(volatile)および非持久性(non-volatile)の両方の媒体が含まれる。さらに、コンピューター可読媒体はリムーバブル媒体および非リムーバブル媒体のうちの一方または両方であってもよい。たとえば、限定ではなく、コンピューター可読媒体はコンピューター記憶媒体を含むことができる。代表的なコンピューター記憶媒体には下記のものが含まれるが、それらに限定されない：ＲＡＭ、ＲＯＭ、ＥＥＰＲＯＭ、フラッシュメモリーまたは他のいずれかの記憶テクノロジー、ＣＤ－ＲＯＭ、ディジタル多目的ディスク(Digital Versatile Disk)（ＤＶＤ）もしくは他の光ディスク記憶媒体、磁気カセット、磁気テープ、磁気ディスク記憶デバイスもしくは他の磁気記憶デバイス、またはコンピューティングデバイスによりアクセスしてコンピューティングデバイスのプロセッサーにより実行できる複数の指令を記憶させるために使用できる他のいずれかの媒体。
【0201】
本明細書に開示する態様によれば、ソフトウェアは、コンピューティングデバイスのプロセッサーにより実行された際に本明細書に開示する方法の１以上の工程を実施できる指令を含むことができる。若干の指令は、他の機械の操作を制御する信号を発するように適合させることができ、こうしてそれらの制御信号によりコンピューター自体から遠く離れた資料を変換する操作を行なうことができる。これらの記述および表現は、データ処理技術分野の専門家が、たとえば彼らの作業の内容を最も効率的に他の当業者へ伝達するために用いる手段である。
【0202】
複数の指令は、目的とする結果を導く自己矛盾しない一連の工程であると一般に考えられるアルゴリズムをも含むことができる。これらの工程は、理学的量の理学的操作を必要とするものである。通常は（必然的ではないが）これらの量は、記憶、転送、変換、結合、比較その他の形で操作できる電気的または磁気的なパルスまたは信号の形をとる。それは時には、主に、これらの信号をそのような信号が出現または発生する理学的な事項または発現に対する基準としての数値、文字、ディスプレーデータ、番号などとして表わすための共用化という理由で、好都合になる。ただし、これらおよび類似の用語はすべて適宜な理学的量と関連づけるべきものであり、ここではこれらの量に適用される便宜的なラベルとして用いられるにすぎないことを留意すべきである。本明細書に開示する若干の態様によれば、本明細書に開示する１種類以上のマーカーの決定量と適切な基準との比較を実施するためのアルゴリズムは、指令を実行することによって具体化および実施される。それらの結果を、パラメトリック診断生データの出力として、または絶対量もしくは相対量として得ることができる。本明細書に開示するシステムの多様な態様によれば、“診断”は本明細書に開示するシステムのコンピューティングデバイスにより、計算“量”と基準または閾値との比較に基づいて提供できる。たとえば、あるシステムのコンピューティングデバイスは、特定の診断を指示する言語、記号または数値の形の指標を提供できる。
【0203】
コンピューティングデバイスは、出力デバイスにもアクセスできる。代表的な出力デバイスには、たとえばファックス機、ディスプレー、プリンター、およびファイルが含まれる。本明細書に開示する若干の態様によれば、コンピューティングデバイスは本明細書に開示する方法の１以上の工程を実施し、その後、本方法の結果、指示、比または他のファクターに関係する出力を出力デバイスにより提供することができる。
【0204】
最後に、本発明は、好ましくは本発明の方法を実施するために適合させたキットであって、ＧＤＦ－１５（増殖分化因子１５）、エンドスタチン、ミメカン、ＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、心臓トロポニン、ＢＮＰタイプのペプチド、尿酸、Ｇａｌ３（ガレクチン－３）、オステオポンチン、ｓＳＴ２（可溶性ＳＴ２）、ｓＦｌｔ－１、ＰｌＧＦ、Ｐ１ＮＰ、シスタチンＣ、プレアルブミン、およびトランスフェリンからなる群から選択されるマーカーに特異的に結合する少なくとも１種類の検出剤、標準品、および前記方法を実施するための指示を含む、キットに関する。
【0205】
本明細書中で用いる用語“キット”は、前記構成要素の集合体であって、好ましくは個別に、または単一容器内で提供されるものを表わす。容器は本発明の方法を実施するための指示をも含む。これらの指示は、マニュアルの形であってもよく、あるいはコンピューターまたはデータ処理デバイスに実装した際に本発明の方法において述べた比較を実施してそれに従って診断を確立することができるコンピュータープログラムコードにより提供されてもよい。コンピュータープログラムコードは、データ記憶媒体もしくはデバイス、たとえば光学記憶媒体（たとえば、コンパクトディスク）上に、または直接にコンピューターもしくはデータ処理デバイス上に提供されてもよい。さらにキットは、本明細書中で前記に定めた基準のための少なくとも１つの標準品、すなわち本明細書中に述べるバイオマーカーについて基準量となる前決定量を含む溶液を含むであろう。
【0206】
若干の態様において、本明細書に開示するキットは、開示された方法を実施するための少なくとも１つの構成要素、またはパッケージされた組合わせの構成要素類を含む。“パッケージされた組合わせ”とは、それらのキットが本明細書に開示する１以上の構成要素、たとえばプローブ（たとえば、抗体）、対照、緩衝液、試薬（たとえば、コンジュゲートおよび／または基質）、指示などの組合わせを収容した単一のパッケージを備えていることを意味する。単一の容器を収容したキットも“パッケージされた組合わせ”の定義に含まれる。ある態様において、キットは少なくとも１種類のプローブ、たとえば抗体（本明細書に開示するバイオマーカーのエピトープに対して特異的な親和性をもつもの）を含む。たとえば、キットは、蛍光体で標識した抗体、または融合タンパク質の構成員子である抗体を含むことができる。キットにおいて、プローブは固定化されていてもよく、特定のコンホメーションで固定化されていてもよい。たとえば、固定化されたプローブは、ターゲットタンパク質を特異的に結合するために、試料中のターゲットタンパク質を検出するために、および／またはターゲットタンパク質を試料から分離するために、キットに備えることができる。
【0207】
若干の態様によれば、キットは、固定化されていてもよい少なくとも１種類のプローブを少なくとも１つの容器内に含む。キットは、場合により固定化された複数のプローブを１以上の容器内に含むこともできる。たとえば、複数のプローブが、たとえば単一の容器内または別個の容器内（その際、各容器は単一のプローブを収容している）に存在してもよい。
【0208】
若干の態様において、キットは１種類以上の固定化されていないプローブおよび１以上の固体支持体（固定化されたプローブを含むもの、または含まないもの）を含むことができる。そのような若干の態様は、１種類以上のプローブを固体支持体に固定化するのに必要な試薬および補充用品の一部または全部、あるいは固定化されたプローブを試料中の特定のタンパク質に結合させるのに必要な試薬および補充用品の一部または全部を含むことができる。
【0209】
特定の態様において、単一プローブ（同一プローブの複数コピーを含む）を単一の固体支持体に固定化し、単一容器に入れて提供することができる。他の態様において、それぞれが異なるターゲットタンパク質または異なる形態の単一のターゲットタンパク質（たとえば、特異的エピトープ）に対して特異的な２種類以上のプローブを、単一容器に入れて提供する。そのような若干の態様において、ある固定化されたプローブを複数の異なる容器に入れて提供することができ（たとえば、１回用形態）、あるいは複数種類の固定化されたプローブを複数の異なる容器に入れて提供することができる。さらなる態様において、プローブ類を複数の異なるタイプの固体支持体に固定化することができる。固定化されたプローブ（単数または複数）と容器（単数または複数）のいかなる組合わせも本明細書に開示するキットについて考慮され、目的用途に適したキットを達成するためにそのいずれかの組合わせを選択できる。
【0210】
キットの容器は、たとえばプローブ（たとえば、抗体）、対照、緩衝液、および試薬（たとえば、コンジュゲートおよび／または基質）を含めた本明細書に開示する１以上の構成要素をパッケージおよび／または収容するのに適したいかなる容器であってもよい。適切な材料にはガラス、プラスチック、厚紙その他の紙製品、木材、金属、およびそのいずれかのアロイが含まれるが、これらに限定されない。ある態様において、容器は固定化されたプローブ（単数または複数）を完全に包み込んでもよく、あるいは粉塵、油などによる汚染、および露光を最小限に抑えるために、プローブを覆うだけでもよい。若干のさらなる態様において、キットは単一の容器または複数の容器を含むことができ、複数の容器が存在する場合、各容器は他のすべての容器と同一であってもよく、他の容器と異なってもよく、あるいは他のすべての容器ではなく一部の容器と異なってもよい。
【0211】
本発明の好ましい態様
以下に本発明の好ましい態様を開示する。定義および説明を、必要な変更を加えて適用する。
以下に本発明の好ましい態様を開示する。定義および説明を、必要な変更を加えて適用する。
【0212】
１．少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体を同定するための、下記を含む方法：
ａ）心不全に罹患している被検体からの試料において少なくとも１種類のバイオマーカーの量を決定すること；および
ｂ）ステップａ）で決定した量を基準量と比較し、それにより前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体を同定すること；
その際、前記医薬はベータ遮断薬であり、前記バイオマーカーはＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）またはミメカンである。
ａ）心不全に罹患している被検体からの試料において少なくとも１種類のバイオマーカーの量を決定すること；および
ｂ）ステップａ）で決定した量を基準量と比較し、それにより前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体を同定すること；
その際、前記医薬はベータ遮断薬であり、前記バイオマーカーはＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）またはミメカンである。
【0213】
２．ベータ遮断薬、アルドステロンアンタゴニスト、利尿薬、およびレニン－アンギオテンシン系の阻害薬からなる群から選択される少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体を同定するための、下記を含む方法：
ａ）心不全に罹患している被検体からの試料において、ＧＤＦ－１５（増殖分化因子１５）、エンドスタチン、ミメカン、ＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、心臓トロポニン、ＢＮＰタイプのペプチド、尿酸、Ｇａｌ３（ガレクチン－３）、オステオポンチン、ＰｌＧＦ、ｓＦｌｔ－１、ｓＳＴ２（可溶性ＳＴ２）、Ｐ１ＮＰ、シスタチンＣ、プレアルブミン、およびトランスフェリンからなる群から選択される少なくとも１種類のバイオマーカーの量を決定すること；および、
ｂ）ステップａ）で決定した量を基準量（単数または複数）と比較し、それにより前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体を同定すること；
特に、その際、
ｉ）バイオマーカーはオステオポンチンであり、医薬はレニン－アンギオテンシン系の阻害薬である；
ｉｉ）バイオマーカーはエンドスタチンであり、医薬はアルドステロンアンタゴニストである；
ｉｉｉ）バイオマーカーはｓＦｌｔ－１であり、医薬はアルドステロンアンタゴニストおよび／またはレニン－アンギオテンシン系の阻害薬である；
ｉｖ）バイオマーカーはＰｌＧＦであり、医薬はアルドステロンアンタゴニストである；
ｖ）バイオマーカーは心臓トロポニンであり、医薬はレニン－アンギオテンシン系の阻害薬である；
ｖｉ）バイオマーカーはＢＮＰタイプのペプチドであり、医薬はレニン－アンギオテンシン系の阻害薬および／またはベータ遮断薬である；
ｖｉｉ）バイオマーカーは尿酸であり、医薬は利尿薬および／またはレニン－アンギオテンシン系の阻害薬である；
ｖｉｉｉ）バイオマーカーはＧＤＦ－１５であり、医薬は利尿薬および／またはレニン－アンギオテンシン系の阻害薬である；
ｉｘ）バイオマーカーはｓＳＴ２であり、医薬はアルドステロンアンタゴニストおよび／またはベータ遮断薬である；
ｘ）バイオマーカーはＩＧＦＢＰ７であり、医薬はレニン－アンギオテンシン系の阻害薬である；
ｘｉ）バイオマーカーはＰ１ＮＰであり、医薬はベータ遮断薬である；
ｘｉｉ）バイオマーカーはシスタチンＣであり、医薬はアルドステロンアンタゴニストである；
ｘｉｉｉ）バイオマーカーはプレアルブミンであり、医薬は利尿薬である；
ｘｉｖ）バイオマーカーはトランスフェリンであり、医薬は利尿薬である；および／または
ｘｖ）バイオマーカーはＰｌＧＦおよびｓＦｌｔ－１であり、医薬はアルドステロンアンタゴニストであり、その際、ＰｌＧＦの量－対－ｓＦｌｔ－１の量（またはその逆）の比を計算し、その比を基準量で計算する。
ａ）心不全に罹患している被検体からの試料において、ＧＤＦ－１５（増殖分化因子１５）、エンドスタチン、ミメカン、ＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、心臓トロポニン、ＢＮＰタイプのペプチド、尿酸、Ｇａｌ３（ガレクチン－３）、オステオポンチン、ＰｌＧＦ、ｓＦｌｔ－１、ｓＳＴ２（可溶性ＳＴ２）、Ｐ１ＮＰ、シスタチンＣ、プレアルブミン、およびトランスフェリンからなる群から選択される少なくとも１種類のバイオマーカーの量を決定すること；および、
ｂ）ステップａ）で決定した量を基準量（単数または複数）と比較し、それにより前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体を同定すること；
特に、その際、
ｉ）バイオマーカーはオステオポンチンであり、医薬はレニン－アンギオテンシン系の阻害薬である；
ｉｉ）バイオマーカーはエンドスタチンであり、医薬はアルドステロンアンタゴニストである；
ｉｉｉ）バイオマーカーはｓＦｌｔ－１であり、医薬はアルドステロンアンタゴニストおよび／またはレニン－アンギオテンシン系の阻害薬である；
ｉｖ）バイオマーカーはＰｌＧＦであり、医薬はアルドステロンアンタゴニストである；
ｖ）バイオマーカーは心臓トロポニンであり、医薬はレニン－アンギオテンシン系の阻害薬である；
ｖｉ）バイオマーカーはＢＮＰタイプのペプチドであり、医薬はレニン－アンギオテンシン系の阻害薬および／またはベータ遮断薬である；
ｖｉｉ）バイオマーカーは尿酸であり、医薬は利尿薬および／またはレニン－アンギオテンシン系の阻害薬である；
ｖｉｉｉ）バイオマーカーはＧＤＦ－１５であり、医薬は利尿薬および／またはレニン－アンギオテンシン系の阻害薬である；
ｉｘ）バイオマーカーはｓＳＴ２であり、医薬はアルドステロンアンタゴニストおよび／またはベータ遮断薬である；
ｘ）バイオマーカーはＩＧＦＢＰ７であり、医薬はレニン－アンギオテンシン系の阻害薬である；
ｘｉ）バイオマーカーはＰ１ＮＰであり、医薬はベータ遮断薬である；
ｘｉｉ）バイオマーカーはシスタチンＣであり、医薬はアルドステロンアンタゴニストである；
ｘｉｉｉ）バイオマーカーはプレアルブミンであり、医薬は利尿薬である；
ｘｉｖ）バイオマーカーはトランスフェリンであり、医薬は利尿薬である；および／または
ｘｖ）バイオマーカーはＰｌＧＦおよびｓＦｌｔ－１であり、医薬はアルドステロンアンタゴニストであり、その際、ＰｌＧＦの量－対－ｓＦｌｔ－１の量（またはその逆）の比を計算し、その比を基準量で計算する。
【0214】
３．投与が、前記少なくとも１種類の医薬の投与開始、またはより高い投与量での前記少なくとも１種類の医薬の投与である、態様１または２の方法。
４．被検体がヒトである、態様１～３のいずれか１つの方法。
４．被検体がヒトである、態様１～３のいずれか１つの方法。
【0215】
５．試料が血液、血清または血漿である、態様１～４のいずれか１つの方法。
６．態様１～５のいずれか１つの方法：
・バイオマーカーはＩＧＦＢＰ７、Ｐ１ＮＰ、ｓＦｌｔ－１および／またはオステオポ
ンチンであり、医薬はベータ遮断薬である；
・バイオマーカーはエンドスタチンおよび／またはｓＦｌｔ－１であり、医薬はアルドステロンアンタゴニストである；
・バイオマーカーは尿酸および／またはＧＤＦ－１５であり、医薬は利尿薬である；および／または
・バイオマーカーはｓＦｌｔ－１および／またはＩＧＦＢＰ７であり、医薬はレニン－アンギオテンシン系の阻害薬である；
その際、基準量と比較して減少した少なくとも１種類のバイオマーカーの量は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体の指標であり、および／または基準量と比較して増加した少なくとも１種類のバイオマーカーの量は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格ではない被検体の指標である。
６．態様１～５のいずれか１つの方法：
・バイオマーカーはＩＧＦＢＰ７、Ｐ１ＮＰ、ｓＦｌｔ－１および／またはオステオポ
ンチンであり、医薬はベータ遮断薬である；
・バイオマーカーはエンドスタチンおよび／またはｓＦｌｔ－１であり、医薬はアルドステロンアンタゴニストである；
・バイオマーカーは尿酸および／またはＧＤＦ－１５であり、医薬は利尿薬である；および／または
・バイオマーカーはｓＦｌｔ－１および／またはＩＧＦＢＰ７であり、医薬はレニン－アンギオテンシン系の阻害薬である；
その際、基準量と比較して減少した少なくとも１種類のバイオマーカーの量は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体の指標であり、および／または基準量と比較して増加した少なくとも１種類のバイオマーカーの量は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格ではない被検体の指標である。
【0216】
７．態様１～６のいずれか１つの方法：
・バイオマーカーはミメカン、ＢＮＰタイプのペプチド、および／またはｓＳＴ２であり、医薬はベータ遮断薬である；
・バイオマーカーはオステオポンチン、心臓トロポニン、ＢＮＰタイプのペプチド、尿酸、および／またはＧＤＦ－１５であり、医薬はレニン－アンギオテンシン系の阻害薬である；および／または
・バイオマーカーはｓＳＴ２、シスタチンＣおよび／またはＰｌＧＦであり、医薬はアルドステロンアンタゴニストである；
その際、基準量と比較して増加した少なくとも１種類のバイオマーカーの量は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体の指標であり、および／または基準量と比較して減少した少なくとも１種類のバイオマーカーの量は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格ではない被検体の指標である。
・バイオマーカーはミメカン、ＢＮＰタイプのペプチド、および／またはｓＳＴ２であり、医薬はベータ遮断薬である；
・バイオマーカーはオステオポンチン、心臓トロポニン、ＢＮＰタイプのペプチド、尿酸、および／またはＧＤＦ－１５であり、医薬はレニン－アンギオテンシン系の阻害薬である；および／または
・バイオマーカーはｓＳＴ２、シスタチンＣおよび／またはＰｌＧＦであり、医薬はアルドステロンアンタゴニストである；
その際、基準量と比較して増加した少なくとも１種類のバイオマーカーの量は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体の指標であり、および／または基準量と比較して減少した少なくとも１種類のバイオマーカーの量は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格ではない被検体の指標である。
【0217】
８．バイオマーカーはＩＧＦＢＰ－７であり、その方法はベータ遮断薬およびアルドステロンアンタゴニストの投与に適格な被検体を同定するためのものである、態様１～７のいずれか１つの方法。
【0218】
９．ステップａ）で決定したＩＧＦＢＰ７の量を、ステップｂ）で、ｉ）単一の基準量、またはｉｉ）ベータ遮断薬の投与に適格な被検体を同定するためのＩＧＦＢＰ７の基準量およびアルドステロンアンタゴニストの投与に適格な被検体を同定するためのＩＧＦＢＰ７の基準量と比較する、態様８の方法。
【0219】
１０．基準量と比較して減少した試験試料中のバイオマーカーの量はベータ遮断薬の投与に適格な被検体の指標であり、および／または基準量と比較して増加したバイオマーカーの量はベータ遮断薬の投与に適格ではない被検体の指標であり、
基準量と比較して増加した試験試料中のバイオマーカーの量はアルドステロンアンタゴニストの投与に適格な被検体の指標であり、および／または基準量と比較して減少したバイオマーカーの量はアルドステロンアンタゴニストの投与に適格ではない被検体の指標である、
態様８および９の方法。
基準量と比較して増加した試験試料中のバイオマーカーの量はアルドステロンアンタゴニストの投与に適格な被検体の指標であり、および／または基準量と比較して減少したバイオマーカーの量はアルドステロンアンタゴニストの投与に適格ではない被検体の指標である、
態様８および９の方法。
【0220】
１１．被検体がＡＣＣ／ＡＨＡ分類に従った心不全ステージＢ、ＣまたはＤに罹患している、態様１～１０のいずれか１つの方法。
１２．ｉ）少なくとも１種類の医薬はアルドステロンアンタゴニストであり、少なくとも１種類のバイオマーカーはＧＤＦ－１５、ＩＧＦＢＰ７、心臓トロポニン、尿酸およびＧａｌ３からなる群から選択され、あるいはｉｉ）少なくとも１種類の医薬はベータ遮断薬であり、少なくとも１種類のバイオマーカーはエンドスタチン、ミメカン、心臓トロポニン、ＢＮＰタイプのペプチド、およびｓＳＴ２からなる群から選択され、あるいはｉｉ
ｉ）少なくとも１種類の医薬はレニン－アンギオテンシン系の阻害薬であり、少なくとも１種類のバイオマーカーは心臓トロポニン、ＢＮＰタイプのペプチド、オステオポンチンおよび／または尿酸からなる群から選択される、態様２の方法。
１２．ｉ）少なくとも１種類の医薬はアルドステロンアンタゴニストであり、少なくとも１種類のバイオマーカーはＧＤＦ－１５、ＩＧＦＢＰ７、心臓トロポニン、尿酸およびＧａｌ３からなる群から選択され、あるいはｉｉ）少なくとも１種類の医薬はベータ遮断薬であり、少なくとも１種類のバイオマーカーはエンドスタチン、ミメカン、心臓トロポニン、ＢＮＰタイプのペプチド、およびｓＳＴ２からなる群から選択され、あるいはｉｉ
ｉ）少なくとも１種類の医薬はレニン－アンギオテンシン系の阻害薬であり、少なくとも１種類のバイオマーカーは心臓トロポニン、ＢＮＰタイプのペプチド、オステオポンチンおよび／または尿酸からなる群から選択される、態様２の方法。
【0221】
１３．基準量と比較して増加した少なくとも１種類のバイオマーカーの量は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体の指標であり、および／または基準量と比較して減少した少なくとも１種類のバイオマーカーの量は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格ではない被検体の指標である、態様１２の方法。
【0222】
１４．少なくとも１種類の医薬は利尿薬であり、バイオマーカーはエンドスタチン、ミメカン、ＧＤＦ－１５、尿酸、および／またはＢＮＰタイプのペプチドである、態様２の方法。
【0223】
１５．基準量と比較して減少した少なくとも１種類のバイオマーカーの量は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体の指標であり、および／または基準量と比較して増加した少なくとも１種類のバイオマーカーの量は前記少なくとも１種類の医薬の投与に適格ではない被検体の指標である、態様１４の方法。
【0224】
１６．ベータ遮断薬、アルドステロンアンタゴニスト、利尿薬、およびレニン－アンギオテンシン系の阻害薬からなる群から選択される少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体を同定するための、心不全に罹患している被検体の試料における、ｉ）ＧＤＦ－１５（増殖分化因子１５）、エンドスタチン、ミメカン、ＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、心臓トロポニン、ＢＮＰタイプのペプチド、尿酸、Ｇａｌ３（ガレクチン－３）、オステオポンチンおよびｓＳＴ２（可溶性ＳＴ２）、ｓＦｌｔ－１、ＰｌＧＦ、Ｐ１ＮＰ、シスタチンＣ、プレアルブミン、およびトランスフェリンからなる群から選択される少なくとも１種類のバイオマーカー、またはｉｉ）ナトリウム利尿ペプチドに特異的に結合する少なくとも１種類の検出剤、および／またはＧＤＦ－１５（増殖分化因子１５）、エンドスタチン、ミメカン、ＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、心臓トロポニン、ＢＮＰタイプのペプチド、尿酸、Ｇａｌ３（ガレクチン－３）、オステオポンチン、ｓＦｌｔ－１、ＰｌＧＦ、ｓＳＴ２（可溶性ＳＴ２）、Ｐ１ＮＰ、シスタチンＣ、プレアルブミン、およびトランスフェリンからなる群から選択されるバイオマーカーに特異的に結合する検出剤の使用。
【0225】
１７．態様１～１２のいずれか１つの方法を実施するために適合させた、下記のものを含むデバイス：
ａ）ＧＤＦ－１５（増殖分化因子１５）、エンドスタチン、ミメカン、ＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、心臓トロポニン、ＢＮＰタイプのペプチド、尿酸、Ｇａｌ３（ガレクチン－３）、オステオポンチン、ｓＦｌｔ－１、ＰｌＧＦ、ｓＳＴ２（可溶性ＳＴ２）、Ｐ１ＮＰ、シスタチンＣ、プレアルブミン、およびトランスフェリンからなる群から選択されるマーカーに特異的に結合する検出剤（単数または複数）を含む分析ユニットであって、心不全に罹患している被検体の試料においてこれらのマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）を決定するために適合させたユニット；および
ｂ）決定した量（単数または複数）を基準量（単数または複数）と比較し、それによりベータ遮断薬、アルドステロンアンタゴニスト、利尿薬、およびレニン－アンギオテンシン系の阻害薬からなる群から選択される少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体を同定するための分析ユニットであって、基準量（単数または複数）を備えたデータベースおよび比較を実施するためのコンピューター実装されたアルゴリズムを含むユニット。
ａ）ＧＤＦ－１５（増殖分化因子１５）、エンドスタチン、ミメカン、ＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、心臓トロポニン、ＢＮＰタイプのペプチド、尿酸、Ｇａｌ３（ガレクチン－３）、オステオポンチン、ｓＦｌｔ－１、ＰｌＧＦ、ｓＳＴ２（可溶性ＳＴ２）、Ｐ１ＮＰ、シスタチンＣ、プレアルブミン、およびトランスフェリンからなる群から選択されるマーカーに特異的に結合する検出剤（単数または複数）を含む分析ユニットであって、心不全に罹患している被検体の試料においてこれらのマーカー（単数または複数）の量（単数または複数）を決定するために適合させたユニット；および
ｂ）決定した量（単数または複数）を基準量（単数または複数）と比較し、それによりベータ遮断薬、アルドステロンアンタゴニスト、利尿薬、およびレニン－アンギオテンシン系の阻害薬からなる群から選択される少なくとも１種類の医薬の投与に適格な被検体を同定するための分析ユニットであって、基準量（単数または複数）を備えたデータベースおよび比較を実施するためのコンピューター実装されたアルゴリズムを含むユニット。
【0226】
前記に引用するすべての参考文献を、それらの開示内容全体および前記で明白に言及した具体的な開示内容に関して本明細書に援用する。
【実施例】
【0227】
本発明を以下の実施例により説明する；それらは本発明の範囲を制限または限定するためのものではない。
実施例１：アッセイ法
以下のマーカーを血漿において決定した：
トロポニンＴは、Ｒｏｃｈｅの電気化学発光ＥＬＩＳＡサンドイッチ試験 ＥｌｅｃｓｙｓトロポニンＴ ｈｓ(high sensitive（高感度）)ＳＴＡＴ(Short Turn Around Time
（短いターンアラウンド時間）)アッセイを用いて決定された。この試験は、ヒト心臓ト
ロポニンＴを特異的に指向する２種類のモノクローナル抗体を用いる。これらの抗体は、２８８個のアミノ酸からなる心臓トロポニンＴタンパク質の中央部分にある２つのエピトープ（アミノ酸位置１２５－１３１および１３６－１４７）を認識する。このｈｓ－ＴｎＴアッセイは、３～１００００ｐｇ／ｍＬの範囲のトロポニンＴレベルの測定が可能である。
実施例１：アッセイ法
以下のマーカーを血漿において決定した：
トロポニンＴは、Ｒｏｃｈｅの電気化学発光ＥＬＩＳＡサンドイッチ試験 ＥｌｅｃｓｙｓトロポニンＴ ｈｓ(high sensitive（高感度）)ＳＴＡＴ(Short Turn Around Time
（短いターンアラウンド時間）)アッセイを用いて決定された。この試験は、ヒト心臓ト
ロポニンＴを特異的に指向する２種類のモノクローナル抗体を用いる。これらの抗体は、２８８個のアミノ酸からなる心臓トロポニンＴタンパク質の中央部分にある２つのエピトープ（アミノ酸位置１２５－１３１および１３６－１４７）を認識する。このｈｓ－ＴｎＴアッセイは、３～１００００ｐｇ／ｍＬの範囲のトロポニンＴレベルの測定が可能である。
【0228】
ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰは、血漿試料においてＲｏｃｈｅの電気化学発光ＥＬＩＳＡサンドイッチ試験 Ｅｌｅｃｓｙｓ ｐｒｏＢＮＰ ＩＩ ＳＴＡＴ（短いターンアラウンド時間）アッセイを用いて測定された。この試験は、ｐｒｏＢＮＰ（１－１０８）のＮ末端部分（１－７６）にあるエピトープ類を認識する２種類のモノクローナル抗体を用いる。
【0229】
血清および血漿試料中のＧＤＦ－１５の濃度を決定するために、ポリクローナル、ＧＤＦ－１５アフィニティークロマトグラフィー精製ヤギ抗ヒトＧＤＦ－１５ ＩｇＧ抗体（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓから（ＡＦ９５７））を用いるＥｌｅｃｓｙｓ基本型試験を採用した。各実験において、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓからの組換えヒトＧＤＦ－１５（９５７－ＧＤ／ＣＦ）を用いて標準曲線を作成した。新しいバッチまたは組換えＧＤＦ－１５タンパク質についての結果を、標準血漿試料において試験し、１０％を超える偏差はいずれもこのアッセイについての調整係数の導入により補正した。同じ患者からの血清試料と血漿試料におけるＧＤＦ－１５測定値は、最終的な希釈係数について補正した後、実質的に同一の結果を与えた。このアッセイの検出限界は２００ｐｇ／ｍｌであった。
【0230】
ヒトの血清または血漿中のＩＧＦＢＰ７の検出のために、サンドイッチＥＬＩＳＡを用いた。抗原の捕獲および検出のために、アリコートの抗ＩＧＦＢＰ７ポリクローナル抗体（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓから（カタログ番号：ＡＦ １３３４））を、それぞれビオチンおよびジゴキシゲニンとコンジュゲートさせた。
【0231】
ストレプトアビジンでコートした９６ウェルマイクロタイタープレートを、１００ｐｉのビオチニル化－抗ＩＧＦＢＰ７ポリクローナル抗体と共に６０分間、１×ＰＢＳ溶液中、１ｐｇ／ｍ１でインキュベートした。インキュベーション後、プレートを１×ＰＢＳ＋０．０２％ Ｔｗｅｅｎ－２０で３回洗浄し、ＰＢＳ＋１％ ＢＳＡ（ウシ血清アルブミン）でブロックし、次いで再び１×ＰＢＳ＋０．０２％ Ｔｗｅｅｎ－２０で３回洗浄した。ウェルを次いで１．５時間、それぞれ標準抗原としての組換えＩＧＦＢＰ７の系列希釈液、または患者もしくは対照個体からの希釈した血清もしくは血漿試料（１：５０）のいずれかと共にインキュベートした。ＩＧＦＢＰ７の結合後、プレートを１×ＰＢＳ＋０．０２％ Ｔｗｅｅｎ－２０で３回洗浄した。結合したＩＧＦＢＰ７の特異的検出のために、ウェルを１００μｌのジゴキシゲニル化－抗ＩＧＦＢＰ７ポリクローナル抗体と共に６０分間、１×ＰＢＳ＋１％ ＢＳＡ中、１μｇ／ｍｌでインキュベートした。その後、プレートを３回洗浄して、結合していない抗体を除去した。次の工程で、ウェルを７５ｍＵ／ｍｌの抗ジゴキシゲニン－ＰＯＤコンジュゲート（Ｒｏｃｈｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ ＧｍｂＨ，ドイツ、マンハイム，カタログＮｏ．１６３３７１６）と共に６０分間、１×ＰＢＳ＋１％ ＢＳＡ中でインキュベートした。プレートを続いて同じ緩衝液で６回洗浄した。抗原－抗体複合体の検出のために、ウェルを１００μｌのＡＢＴＳ溶液（Ｒｏｃｈｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ ＧｍｂＨ，ドイツ、マンハイム，カタログＮｏ．１１６８５７６７）と共にインキュベートし、１５分後に４０５および４９２ｎｍにおける光学濃度（ＯＤ）をＥＬＩＳＡリーダーで測定した。
【0232】
Ｇａｌ－３は、ＢＧＭ ガレクチン－３アッセイ（ＢＧ ｍｅｄｉｃｉｎｅ，米国メリーランド州ウォルサム）を用いて決定された。それは、血清またはＥＤＴＡ－血漿中のガレクチン－３を、マイクロタイタープレートプラットホーム上でガレクチン－３に対する２種類のモノクローナル抗体を用いる酵素結合イムノソルベントアッセイ（ＥＬＩＳＡ）により定量測定する。１種類のラット モノクローナル抗マウス ガレクチン－３抗体をマイクロタイタープレートのウェルの表面にコートして試料中のガレクチン－３分子を結合する捕獲抗体として用い、一方で、他方のマウス モノクローナル抗ヒト ガレクチン－３抗体は溶液状で供給され、捕獲抗体に結合したガレクチン－３分子を検出するためのトレーサー抗体として機能する。
【0233】
ヒト血清または血漿中のミメカンの検出のために、サンドイッチＥＬＩＳＡを用いた。抗原の捕獲および検出のために、アリコートの抗ミメカン ポリクローナル抗体（Ｒ＆Ｄ
Ｓｙｓｔｅｍｓから（カタログ番号：ＡＦ ２６６０））を、それぞれビオチンおよびジゴキシゲニンとコンジュゲートさせる。ストレプトアビジンでコートした９６ウェルマイクロタイタープレートを、１００μｌのビオチニル化－抗ミメカン ポリクローナル抗体と共に６０分間、１×ＰＢＳ溶液中、０．２μｇ／ｍｌでインキュベートする。インキュベーション後、プレートを１×ＰＢＳ＋０．０２％ Ｔｗｅｅｎ－２０で３回洗浄し、ＰＢＳ＋２％ ＢＳＡ（ウシ血清アルブミン）で４５分間ブロックし、次いで再び１×ＰＢＳ＋０．０２％ Ｔｗｅｅｎ－２０で３回洗浄する。ウェルを次いで１時間、１００μｌのそれぞれ標準抗原としての組換えミメカンの系列希釈液、または患者もしくは対照個体からの希釈した血清もしくは血漿試料（１：５，１×ＰＢＳ＋１％ＢＳＡ中）のいずれかと共にインキュベートする。ミメカンの結合後、プレートを１×ＰＢＳ＋０．０２％ Ｔｗｅｅｎ－２０で３回洗浄する。結合したミメカンの特異的検出のために、ウェルを１００μｌのジゴキシゲニル化－抗ミメカン ポリクローナル抗体と共に４５分間、１×ＰＢＳ＋１％ ＢＳＡ中、０．２μｇ／ｍｌでインキュベートする。その後、プレートを３回洗浄して、結合していない抗体を除去する。次の工程で、ウェルを７５ｍＵ／ｍｌの抗ジゴキシゲニン－ＰＯＤコンジュゲート（Ｒｏｃｈｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ ＧｍｂＨ，ドイツ、マンハイム，カタログＮｏ．１６３３７１６）１００μｌと共に３０分間、１×ＰＢＳ＋１％ ＢＳＡ中でインキュベートする。プレートを続いて前記と同じ洗浄用緩衝液で６回洗浄する。抗原－抗体複合体の検出のために、ウェルを１００μｌのＡＢＴＳ溶液（Ｒｏｃｈｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ ＧｍｂＨ，ドイツ、マンハイム，カタログＮｏ．１１６８５７６７）と共にインキュベートし、１５分後に４０５および４９２ｎｍにおける光学濃度（ＯＤ）をＥＬＩＳＡリーダーで測定する。
Ｓｙｓｔｅｍｓから（カタログ番号：ＡＦ ２６６０））を、それぞれビオチンおよびジゴキシゲニンとコンジュゲートさせる。ストレプトアビジンでコートした９６ウェルマイクロタイタープレートを、１００μｌのビオチニル化－抗ミメカン ポリクローナル抗体と共に６０分間、１×ＰＢＳ溶液中、０．２μｇ／ｍｌでインキュベートする。インキュベーション後、プレートを１×ＰＢＳ＋０．０２％ Ｔｗｅｅｎ－２０で３回洗浄し、ＰＢＳ＋２％ ＢＳＡ（ウシ血清アルブミン）で４５分間ブロックし、次いで再び１×ＰＢＳ＋０．０２％ Ｔｗｅｅｎ－２０で３回洗浄する。ウェルを次いで１時間、１００μｌのそれぞれ標準抗原としての組換えミメカンの系列希釈液、または患者もしくは対照個体からの希釈した血清もしくは血漿試料（１：５，１×ＰＢＳ＋１％ＢＳＡ中）のいずれかと共にインキュベートする。ミメカンの結合後、プレートを１×ＰＢＳ＋０．０２％ Ｔｗｅｅｎ－２０で３回洗浄する。結合したミメカンの特異的検出のために、ウェルを１００μｌのジゴキシゲニル化－抗ミメカン ポリクローナル抗体と共に４５分間、１×ＰＢＳ＋１％ ＢＳＡ中、０．２μｇ／ｍｌでインキュベートする。その後、プレートを３回洗浄して、結合していない抗体を除去する。次の工程で、ウェルを７５ｍＵ／ｍｌの抗ジゴキシゲニン－ＰＯＤコンジュゲート（Ｒｏｃｈｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ ＧｍｂＨ，ドイツ、マンハイム，カタログＮｏ．１６３３７１６）１００μｌと共に３０分間、１×ＰＢＳ＋１％ ＢＳＡ中でインキュベートする。プレートを続いて前記と同じ洗浄用緩衝液で６回洗浄する。抗原－抗体複合体の検出のために、ウェルを１００μｌのＡＢＴＳ溶液（Ｒｏｃｈｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ ＧｍｂＨ，ドイツ、マンハイム，カタログＮｏ．１１６８５７６７）と共にインキュベートし、１５分後に４０５および４９２ｎｍにおける光学濃度（ＯＤ）をＥＬＩＳＡリーダーで測定する。
【0234】
ヒトの血清または血漿中のエンドスタチンの測定のために、市販のサンドイッチＥＬＩＳＡ（Ｑｕａｎｔｉｋｉｎｅ ヒト エンドスタチン イムノアッセイ，カタログ番号ＤＮＳＴＯ，Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）を用いた。製造業者が示した指示に従って測定を実施する。
【0235】
ｓＳＴ２は、Ｃｒｉｔｉｃａｌ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ（米国カリフェルニア州サンディエゴ）からのＰｒｅｓａｇｅ（商標） ＳＴ２アッセイを用いて測定された。このアッセイは、血清または血漿中のＳＴ２を測定するための９６ウェルプレート様式の定量サンドイッチ モノクローナルＥＬＩＳＡである。抗ＳＴ２抗体でコートしたプレートの適宜なウェルに希釈血漿を装填し、指定された時間、インキュベートした。試薬をプレートから洗浄除去し、追加試薬を添加し、続いて洗浄除去する一連の工程の後、最後に比色測定試薬を添加して生じた信号を４５０ｎｍにおいて分光法で測定することにより分析物を検出した。
【0236】
バイオマーカーであるミメカンは、WO2011/012268の記載に従って決定された。
ＰｌＧＦおよびｓＦｌｔ１は、それぞれＰｌＧＦおよびｓＦｌｔ１に対して特異的な２種類の抗体を用いるＥＬＥＣＳＹＳイムノアッセイを用いて試験された。この試験は、ＥＬＥＣＳＹＳ ２０１０およびｃｏｂｒａ ｅ４１１およびｃｏｂｒａ ｅ６０１を含めた種々のＲｏｃｈｅ分析計を用いて自動的に実施できる。この試験は、ＰｌＧＦに関して３ｐｇ／ｍｌの感度をもつ。ｓＦｌｔ－１は１０～８５，０００ｐｇ／ｍｌの量である。
ＰｌＧＦおよびｓＦｌｔ１は、それぞれＰｌＧＦおよびｓＦｌｔ１に対して特異的な２種類の抗体を用いるＥＬＥＣＳＹＳイムノアッセイを用いて試験された。この試験は、ＥＬＥＣＳＹＳ ２０１０およびｃｏｂｒａ ｅ４１１およびｃｏｂｒａ ｅ６０１を含めた種々のＲｏｃｈｅ分析計を用いて自動的に実施できる。この試験は、ＰｌＧＦに関して３ｐｇ／ｍｌの感度をもつ。ｓＦｌｔ－１は１０～８５，０００ｐｇ／ｍｌの量である。
【0237】
プレアルブミンは、Ｒｏｃｈｅ／Ｈｉｔａｃｈｉ ｃｏｂａｓ ｃシステム（ＡＣＮ ７１０をｃ ３１１／５０１分析計に；ＡＣＮ ８７１０をｃ ５２０分析計に；カタログＮｏ．２０７６４６５５ ３２２）で、ヒト血清中のプレアルブミンの定量決定のためのインビトロ試験を用いて試験された。このアッセイはイムノタービディメトリーアッセイである。ヒト プレアルブミンは特異的な抗血清と共に沈殿を形成し、それをタービディメトリーにより決定する。
【0238】
シスタチンＣは、Ｒｏｃｈｅ自動臨床化学分析計（Ｒｏｃｈｅ／Ｈｉｔａｃｈｉ ９１７に、ＭＯＤＵＬＡＲ Ｐ分析計：ＡＣＮ ４３１，カタログＮｏ．０４９７５７７４ １９０）で、ヒトの血清および血漿中のシスタチンＣのインビトロ定量決定のためのイムノタービディメトリーアッセイの使用により用いられた。ヒト シスタチンＣは、抗シスタチンＣ抗体でコートしたラテックス粒子と共に凝集する。この凝集体を５４６ｎｍでタービディメトリーにより決定する。
【0239】
実施例２：患者コホート／結果
ＴＩＭＥ－ＣＨＦ試験からの例：ＧＤＦ－１５、ＴｎＴ－ｈｓ、尿酸、エンドスタチン、ＩＧＦＢＰ－７、ミメカン、ｓＳＴ２、ガレクチン－３およびオステオポンチンのレベルを、ＴＩＭＥ－ＣＨＦランダム化試験からのｎ＝４５０の患者の試料において決定した（年齢６０歳以上；ＨＦのために入院する前の１年以内に、収縮期ＨＦ（駆出分画≦４５％）、ＮＹＨＡクラスＩＩ以上、および正常上限の２倍以上のＮＴｐｒｏＢＮＰレベルを伴なう）。ＴＩＭＥ－ＣＨＦ試験はBNP-Guided vs Symptom-Guided Heart Failure Therapy JAMA, 2009; 301 (4):383-392に記載されている。
ＴＩＭＥ－ＣＨＦ試験からの例：ＧＤＦ－１５、ＴｎＴ－ｈｓ、尿酸、エンドスタチン、ＩＧＦＢＰ－７、ミメカン、ｓＳＴ２、ガレクチン－３およびオステオポンチンのレベルを、ＴＩＭＥ－ＣＨＦランダム化試験からのｎ＝４５０の患者の試料において決定した（年齢６０歳以上；ＨＦのために入院する前の１年以内に、収縮期ＨＦ（駆出分画≦４５％）、ＮＹＨＡクラスＩＩ以上、および正常上限の２倍以上のＮＴｐｒｏＢＮＰレベルを伴なう）。ＴＩＭＥ－ＣＨＦ試験はBNP-Guided vs Symptom-Guided Heart Failure Therapy JAMA, 2009; 301 (4):383-392に記載されている。
【0240】
ベースラインで、大部分の患者は推奨ＨＦ療法であるＡＣＥ阻害薬またはアンギオテンシンＩＩ受容体遮断薬、β－遮断薬、利尿薬を投与されていた。
これらのバイオマーカーをベースラインおよび６か月後に測定した。次表に示す数値は“転帰不良”患者（死亡、反復入院）の％である。測定したバイオマーカーにより、ベータ遮断薬、アルドステロンアンタゴニスト、利尿薬、および／またはレニン－アンギオテンシン系の阻害薬の用量増加または投与間隔短縮および／または治療への特定の医薬の追加が有益であると予想される患者を同定できるかどうかを分析した。この分析のために、患者を、ｉ）増加した用量の医薬を投与された被検体および／または追加医薬を投与された被検体のグループ、およびｉｉ）治療計画を修正しなかった被検体のグループに分けた。さらなる段階で、これら２グループをそれぞれ各バイオマーカーレベル（中央値より下／閾値より上）に基づくグループに分けた。結果を表１に示す。
これらのバイオマーカーをベースラインおよび６か月後に測定した。次表に示す数値は“転帰不良”患者（死亡、反復入院）の％である。測定したバイオマーカーにより、ベータ遮断薬、アルドステロンアンタゴニスト、利尿薬、および／またはレニン－アンギオテンシン系の阻害薬の用量増加または投与間隔短縮および／または治療への特定の医薬の追加が有益であると予想される患者を同定できるかどうかを分析した。この分析のために、患者を、ｉ）増加した用量の医薬を投与された被検体および／または追加医薬を投与された被検体のグループ、およびｉｉ）治療計画を修正しなかった被検体のグループに分けた。さらなる段階で、これら２グループをそれぞれ各バイオマーカーレベル（中央値より下／閾値より上）に基づくグループに分けた。結果を表１に示す。
【0241】
【表1】
【0242】
表１に示す結果の説明：たとえば、ベースラインで２５０より下のエンドスタチン値をもち、最初の６か月間に増量したベータ遮断薬（ＢＢ）を投与された患者は、増量しなかった場合の２０．８％と比較して２０．４％の事象率をもつ。これに対し、２５０より上のエンドスタチンレベル患者においては事象率に有意差があった（ｐ＜０．０５）；ＢＢを増量した患者では２９．６％であったが、ＢＢを増量しなかった患者では４９．１％であった。
【0243】
ｐ－値：
＊ ０．１～０．２
＊＊ ０．０５～０．１
＊＊＊ ０．０１～０．０５
＊＊＊＊ ＜０．０１
関数型主成分分析(functional principal component analysis)（ｆＰＣＡ）を用いて
データをさらに分析した。ｆＰＣＡは複雑な薬物投与データのディメンジョナリティー(dimensionality)を低減して、種々の時点（ベースライン以後）でのマーカーレベルと転帰についての相互作用分析を可能にする。この場合、下記のものを表わす３つの主成分を用いた：１）試験中の薬物の全用量レベル（最も重要な成分）、２）試験中に薬物用量を増加または減少させる動向、および３）薬物用量を最初は増加させ、次いで減少させる動向、または最初は減少させ、次いで増加させる動向。ベースラインでの階層化分析（従来の分析）に優るｆＰＣＡの利点および補足情報は、それによりベースライン以後の時点でのマーカーと薬物の相互作用が明らかになることである。したがって、追加の相互作用および治療応答予測を評価できる。ｆＰＣＡの成分を、次いで上記と同じエンドポイントを用いて、中央マーカーレベルでの相互作用および治療応答予測、ならびに転帰について調べた。転帰および相互作用の強さを次表に示す。これらの結果により、これまでに見出された多数の相互作用が確認され、さらなるマーカー－薬物組合わせが示唆される。
＊ ０．１～０．２
＊＊ ０．０５～０．１
＊＊＊ ０．０１～０．０５
＊＊＊＊ ＜０．０１
関数型主成分分析(functional principal component analysis)（ｆＰＣＡ）を用いて
データをさらに分析した。ｆＰＣＡは複雑な薬物投与データのディメンジョナリティー(dimensionality)を低減して、種々の時点（ベースライン以後）でのマーカーレベルと転帰についての相互作用分析を可能にする。この場合、下記のものを表わす３つの主成分を用いた：１）試験中の薬物の全用量レベル（最も重要な成分）、２）試験中に薬物用量を増加または減少させる動向、および３）薬物用量を最初は増加させ、次いで減少させる動向、または最初は減少させ、次いで増加させる動向。ベースラインでの階層化分析（従来の分析）に優るｆＰＣＡの利点および補足情報は、それによりベースライン以後の時点でのマーカーと薬物の相互作用が明らかになることである。したがって、追加の相互作用および治療応答予測を評価できる。ｆＰＣＡの成分を、次いで上記と同じエンドポイントを用いて、中央マーカーレベルでの相互作用および治療応答予測、ならびに転帰について調べた。転帰および相互作用の強さを次表に示す。これらの結果により、これまでに見出された多数の相互作用が確認され、さらなるマーカー－薬物組合わせが示唆される。
【0244】
結果を下記の表に示す。
【0245】
【表2】
【0246】
ＩＧＦＢＰ７についての結果：データ評価により、ベースラインで基準値より下のＩＧＦＢＰ－７レベル（この試験では＜１００ｎｇ／ｍＬ）（他のバイオマーカーとは無関係に）をもつ患者にはスピロノラクトンの追加または増量が有益ではないことが示された。ＩＧＦＢＰ－７レベルが基準値より上であれば（この試験では＞１００ｎｇ／ｍＬ，カットオフを決定すべきである；年齢依存性，若い集団ほど通常はより低いレベルがみられる）、アルドステロンアンタゴニスト（たとえば、スピロノラクトン）および／またはベータ遮断薬を追加または増量すべきである。第２グループの１８か月生存率は改善されたが、第１グループでは生存率は変化しない。
【0247】
ＧＤＦ－１５についての結果：データ評価により、ベースラインで基準値より下のＧＤＦ－１５レベル（この試験では＜４０００ｐｇ／ｍＬ）（他のバイオマーカーとは無関係
に）をもつ患者にはβ－遮断薬またはアルドステロンアンタゴニスト（たとえば、スピロノラクトン）の追加投与または増量が有益ではなく、一方、基準値より上のＧＤＦ－１５レベル（この試験では＞４０００ｐｇ／ｍＬ）をもつ患者にはβ－遮断薬またはアルドステロンアンタゴニストの追加または増量が有益である可能性のあることが示された。第２グループの１８か月生存率は改善されたが、第１グループでは生存率は変化しない。
に）をもつ患者にはβ－遮断薬またはアルドステロンアンタゴニスト（たとえば、スピロノラクトン）の追加投与または増量が有益ではなく、一方、基準値より上のＧＤＦ－１５レベル（この試験では＞４０００ｐｇ／ｍＬ）をもつ患者にはβ－遮断薬またはアルドステロンアンタゴニストの追加または増量が有益である可能性のあることが示された。第２グループの１８か月生存率は改善されたが、第１グループでは生存率は変化しない。
【0248】
エンドスタチンについての結果：データ評価により、ベースラインで基準値より下のエンドスタチンレベル（この試験では＜２５０ｎｇ／ｍＬ）（他のバイオマーカーとは無関係に）をもつ患者にはβ－遮断薬の追加投与または増量が有益ではないことが示された。既にβ－遮断薬を投与されていた患者は維持すべきであるが、用量を増加する必要はない。基準値より上のエンドスタチンレベル（この試験では＞２５０ｎｇ／ｍＬ）をもつ患者にはβ－遮断薬の追加投与が有益である可能性がある。さらに、利尿薬の増量を避けるべきである。第２グループの１８か月生存率は改善されたが、第１グループでは生存率は変化しない。
【0249】
ミメカンについての結果：データ評価により、ベースラインで基準値より下のミメカンレベル（この試験では＜５０ｎｇ／ｍＬ）（他のバイオマーカーとは無関係に）をもつ患者にはβ－遮断薬の追加投与または増量が有益ではないことが示された。ミメカンレベルが基準値より上であれば（この試験では＞５０ｎｇ／ｍＬ）、β－遮断薬を追加するか、あるいはβ－遮断薬の用量を増加すべきである。さらに、利尿薬の増量を避けるべきである。
【0250】
ＮＴｐｒｏＢＮＰについての結果：データ評価により、ベースラインで基準値より上のＮＴｐｒｏＢＮＰ（この試験では＞３０００ｐｇ／ｍＬ）をもつ患者には利尿薬の追加または増量が有益ではないことが示された。
【0251】
ｓＳＴ２についての結果：データ評価により、ベースラインで基準値より上のｓＳＴ２（この試験では＞３４．０ｇ／ｍＬ）をもつ患者にはβ－遮断薬の追加または増量が有益であることが示された。
【0252】
Ｇａｌ－３についての結果：データ評価により、ベースラインで基準値より下のＧａｌ－３（この試験では＜３１．６ｇ／ｍＬ）をもつ患者にはレニン－アンギオテンシン系の阻害薬の追加または増量が有益であることが示された。
【0253】
ｓＦｌｔ－１についての結果：データ評価により、ベースラインで基準値より下のｓＦｌｔ－１（この試験では＜９８ｇ／ｍＬ）をもつ患者にはＲＡＳ阻害薬および／またはアルドステロンアンタゴニストの追加または増量が有益であることが示された。
【0254】
ＰｌＧＦについての結果：データ評価により、ベースラインで基準値より上のｓＦｌｔ－１（この試験では＞２０．７ｇ／ｍＬ）をもつ患者にはアルドステロンアンタゴニストの追加または増量が有益であることが示された。
【0255】
オステオポンチンについての結果：データ評価により、ベースラインで基準値より上のオステオポンチン（この試験では＞１００ｇ／ｍＬ）をもつ患者には利尿薬治療の追加または増量が有益ではないことが示された。
【0256】
以下の結論を引き出すことができる：
・エンドスタチンが基準量より上であれば、ＢＢを追加し、および／またはそれらの用量を増加すべきである。さらに、アルドステロンアンタゴニストおよび／または利尿薬の増量を避けるべきである。
・エンドスタチンが基準量より上であれば、ＢＢを追加し、および／またはそれらの用量を増加すべきである。さらに、アルドステロンアンタゴニストおよび／または利尿薬の増量を避けるべきである。
【0257】
・ミメカンが基準量より上であれば、ＢＢを追加し、および／またはＢＢの用量を増加すべきである。さらに、利尿薬の増量を避けるべきである。
・ＩＧＦＢＰ７が基準量より下であれば、ＢＢを追加し、または増量すべきである。ＩＧＦＢＰ７が基準量より上であれば、アルドステロンアンタゴニストを追加または増量すべきである。
・ＩＧＦＢＰ７が基準量より下であれば、ＢＢを追加し、または増量すべきである。ＩＧＦＢＰ７が基準量より上であれば、アルドステロンアンタゴニストを追加または増量すべきである。
【0258】
・ＩＧＦＢＰ７が基準量より下であれば、アルドステロンアンタゴニストおよびＲＡＳ阻害薬を追加または増量すべきではない。
・ＧＤＦ－１５が基準量より上であれば、ＢＢ、ＲＡＳ阻害薬およびアルドステロンアンタゴニストを追加または増量すべきである。これに対し、利尿薬を追加すべきではなく、あるいは利尿薬を増量すべきではない。
・ＧＤＦ－１５が基準量より上であれば、ＢＢ、ＲＡＳ阻害薬およびアルドステロンアンタゴニストを追加または増量すべきである。これに対し、利尿薬を追加すべきではなく、あるいは利尿薬を増量すべきではない。
【0259】
・ｃＴｎＴ－ｈｓが中央量より上であれば、ＲＡＳ阻害薬、ＢＢ化合物またはアルドステロンアンタゴニストを増量でき、一方、ｃＴｎＴ－ｈｓが中央量より下であればこれを行なうべきではない。
【0260】
・尿酸が中央量より上であれば、ＲＡＳ阻害化合物を増量できる。さらに、利尿薬および／またはアルドステロンアンタゴニストの増量を避けるべきである。
・基準値より上のＮＴｐｒｏＢＮＰ（この試験では＞３０００ｐｇ／ｍＬ）をもつ患者には利尿薬の増量は有益ではないが、ＲＡＳ阻害薬およびＢＢは増量すべきである。基準値より下のＮＴｐｒｏＢＮＰ（この試験では＜３０００ｐｇ／ｍＬ）をもつ患者にはＲＡＳ阻害薬の増量は有益ではない。
・基準値より上のＮＴｐｒｏＢＮＰ（この試験では＞３０００ｐｇ／ｍＬ）をもつ患者には利尿薬の増量は有益ではないが、ＲＡＳ阻害薬およびＢＢは増量すべきである。基準値より下のＮＴｐｒｏＢＮＰ（この試験では＜３０００ｐｇ／ｍＬ）をもつ患者にはＲＡＳ阻害薬の増量は有益ではない。
【0261】
・Ｇａｌ－３が中央量より上であれば、アルドステロンアンタゴニストを追加および／または増量すべきである。
・オステオポンチンが中央量より上であれば、ＲＡＳ阻害薬を追加および／または増量すべきである。オステオポンチンが中央量より下であれば、ＢＢ化合物を追加および／または増量すべきである。
・オステオポンチンが中央量より上であれば、ＲＡＳ阻害薬を追加および／または増量すべきである。オステオポンチンが中央量より下であれば、ＢＢ化合物を追加および／または増量すべきである。
【0262】
・ｓＦｌｔ－１が基準量（この試験では中央値を用いた）より下であれば、ＲＡＳ阻害薬、ＢＢ化合物および／またはアルドステロンアンタゴニストを追加および／または増量すべきである。
【0263】
・ＰＬＧＦが基準量（たとえば中央値）より上であれば、アルドステロンアンタゴニストを追加および／または増量すべきである。
・ｓＳＴ２が基準量（たとえば中央値）より上であれば、アルドステロンアンタゴニストおよび／またはベータ遮断薬を追加および／または増量すべきである。
・ｓＳＴ２が基準量（たとえば中央値）より上であれば、アルドステロンアンタゴニストおよび／またはベータ遮断薬を追加および／または増量すべきである。
【0264】
・Ｐ１ＮＰが基準量（たとえば中央値）より下であれば、ベータ遮断薬を追加および／または増量すべきである。
・プレアルブミンが基準量（たとえば中央値）より上であれば、利尿薬を追加すべきではなく、用量を減少させるべきであり、あるいは増量すべきではない。
・プレアルブミンが基準量（たとえば中央値）より上であれば、利尿薬を追加すべきではなく、用量を減少させるべきであり、あるいは増量すべきではない。
【0265】
・トランスフェリンが基準量（たとえば中央値）より上であれば、利尿薬を追加すべきではなく、用量を減少させるべきであり、あるいは増量すべきではない。
・シスタチンＣが基準量（たとえば中央値）より下であれば、アルドステロンアンタゴニストを追加または増量すべきではなく、高い用量を減少させるべきである。
・シスタチンＣが基準量（たとえば中央値）より下であれば、アルドステロンアンタゴニストを追加または増量すべきではなく、高い用量を減少させるべきである。
【0266】
・ＰＬＧＦ／ｓＦｌｔ－１比が基準比（たとえば中央値）より上であれば、アルドステ
ロンアンタゴニストを追加し、または用量を増加すべきである。
したがって、上記にまとめた診断アルゴリズムを適用することにより、前記の医薬の投与（すなわち、初回投与、またはより高い用量での投与、“増量”）に適格な被検体を同定できる。適切な基準量は本明細書の記載に従って決定できる。をもつ患者
実施例３：個体症例研究
クラスＣ心不全を伴なう８９歳の男性患者は、低用量のクロルタリドン(chlortalidon)（２５ｍｇ／日）、エナラプリル(enalapril)（５ｍｇ／日）、およびメトプロロール(metoprolol)（２５ｍｇ／日）を投与されている。この患者はＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルの増大を伴なう心不全進行の徴候を示す。患者は喘息も伴なっており、担当医はＢＢを増量すべきかどうか迷っている。患者から得た血漿試料においてミメカンを決定する。ミメカン値は８０ｐｇ／ｍＬより上である。エナラプリル（２０ｍｇ／日に）およびメトプロロール（１００ｍｇ／日）の逐次増量により治療を強化する。これに対し、クロルタリドンは増量しない。患者は試験終了まで安定を維持し、転帰良好である（死亡または入院はない）。
ロンアンタゴニストを追加し、または用量を増加すべきである。
したがって、上記にまとめた診断アルゴリズムを適用することにより、前記の医薬の投与（すなわち、初回投与、またはより高い用量での投与、“増量”）に適格な被検体を同定できる。適切な基準量は本明細書の記載に従って決定できる。をもつ患者
実施例３：個体症例研究
クラスＣ心不全を伴なう８９歳の男性患者は、低用量のクロルタリドン(chlortalidon)（２５ｍｇ／日）、エナラプリル(enalapril)（５ｍｇ／日）、およびメトプロロール(metoprolol)（２５ｍｇ／日）を投与されている。この患者はＮＴ－ｐｒｏＢＮＰレベルの増大を伴なう心不全進行の徴候を示す。患者は喘息も伴なっており、担当医はＢＢを増量すべきかどうか迷っている。患者から得た血漿試料においてミメカンを決定する。ミメカン値は８０ｐｇ／ｍＬより上である。エナラプリル（２０ｍｇ／日に）およびメトプロロール（１００ｍｇ／日）の逐次増量により治療を強化する。これに対し、クロルタリドンは増量しない。患者は試験終了まで安定を維持し、転帰良好である（死亡または入院はない）。
【0267】
クラスＣ心不全を伴なう９０歳の女性患者は、合わせて固定量のヒドロクロロチアジド(hydrochlorothiazide)（１２．５ｍｇ／日）およびバルサルタン(valsartan)（８０ｍｇ／日）ならびにアテノロロール(atenololol)（１００ｍｇ／日）の組合わせを投与されている。この患者には過去に代償不全および入院のエピソードがあった。最終来院時には患者の運動不耐性が悪化しており、６分間歩行テストは３か月前の最終来院と比較して歩行距離が短縮していた。患者から得た血漿試料においてＮＴ－ＰｒｏＢＮＰおよびＩＧＦＢＰ－７を測定する。ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰ値は１０００ｐｇ／ｍＬより上であり、ＩＧＦＢＰ－７値は１００ｐｇ／ｍｌより上である。患者は時々カリウムレベルの増大を呈しているので、担当医はスピロノラクトン(spironolactone)を安全に追加できるかどうか確信がない。治療を強化し、血清カリウムレベルを緊密にモニターしながらスピロノラクトンを２５ｍｇ／日から開始して追加し、後に１００ｍｇ／日まで増量する。その結果、ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰ値は１０００ｐｇ／ｍＬより下にまで低下する。患者は試験終了まで安定を維持し、転帰良好である（死亡または入院はない）。
【0268】
クラスＤ心不全を伴なう９３歳の男性患者は、ヒドロクロロチアジド（２５ｍｇ／日）およびバルサルタン（１６０ｍｇ／日）ならびにビソプロロール(bisoprolol)（２．５ｍｇ／日）を投与されている。この患者には過去に代償不全および長期入院のエピソードがあった。過去の来院に際して、患者から得た血漿試料においてＮＴ－ＰｒｏＢＮＰおよびＩＧＦＢＰ－７を測定している。ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰ値は１０００ｐｇ／ｍＬより上であり、ＩＧＦＢＰ－７値は１００ｐｇ／ｍｌより下である。担当医はスピロノラクトンを追加しない。代わりに、ビソプロロールを１０ｍｇ／日に増量することにより治療を強化する。患者は試験終了まで安定を維持し、転帰良好である（死亡または入院はない）。
【0269】
クラスＢ心不全を伴なう７０歳の女性患者は、カプトプリル(captopril)（２×６．２
５ｍｇ／日）を投与されている。患者は１０か月間は安定であったが、ＴＶを観ながらポテトチップ１袋を食べ尽くした後に急性心不全のため入院した。計画前来院時に、患者から得た血漿試料においてＧＤＦ－１５およびｃＴｎＴｈｓを測定している。ＧＤＦ－１５値は４０００ｐｇ／ｍＬより上であり、ｃＴｎＴ－ｈｓは中央値より上である。治療を強化するためにベータ遮断薬であるメトプロロールおよびアルドステロンアンタゴニストであるスピロノラクトンの追加を選択する。患者は、めまいおよび低血圧のためさらに１回だけ入院した。
５ｍｇ／日）を投与されている。患者は１０か月間は安定であったが、ＴＶを観ながらポテトチップ１袋を食べ尽くした後に急性心不全のため入院した。計画前来院時に、患者から得た血漿試料においてＧＤＦ－１５およびｃＴｎＴｈｓを測定している。ＧＤＦ－１５値は４０００ｐｇ／ｍＬより上であり、ｃＴｎＴ－ｈｓは中央値より上である。治療を強化するためにベータ遮断薬であるメトプロロールおよびアルドステロンアンタゴニストであるスピロノラクトンの追加を選択する。患者は、めまいおよび低血圧のためさらに１回だけ入院した。
【0270】
クラスＣ心不全を伴なう７７歳の男性の菜食主義患者は、バルサルタン（１６０ｍｇ／日）およびカルベジロール(carvedilol)（１２．５ｍｇ／日）を投与されている。患者は過去５か月間は安定であったが、急性呼吸困難、ラ音および頻脈を伴なう代償不全状態で
救急部に到着している。患者から得た血漿試料において尿酸およびＧａｌ－３を測定する。尿酸およびＧａｌ－３は中央値より下である。担当医はカルベジロールを５０ｍｇ／日に増量することにより治療を強化する。さらに、スピロノラクトンを２５ｍｇ／日から開始して追加し、後に５０ｍｇ／日まで増量する。患者は１か月間は安定を維持したが、次いで浮腫、心房細動、呼吸困難および咳を発症する。病院への途中で患者は突然死のため死亡する。
救急部に到着している。患者から得た血漿試料において尿酸およびＧａｌ－３を測定する。尿酸およびＧａｌ－３は中央値より下である。担当医はカルベジロールを５０ｍｇ／日に増量することにより治療を強化する。さらに、スピロノラクトンを２５ｍｇ／日から開始して追加し、後に５０ｍｇ／日まで増量する。患者は１か月間は安定を維持したが、次いで浮腫、心房細動、呼吸困難および咳を発症する。病院への途中で患者は突然死のため死亡する。
【0271】
結論：
本発明は、心不全に罹患している患者に有益であると予想される薬物治療の選択方法を提供する。本方法は、治療に対する応答を予測し、および／または適切な治療もしくは治療強化の選択を補助する。先行技術および従来のバイオマーカーガイドによる心不全対処法と比較して、本発明は治療選択および投薬のための多様なマーカーの具体的な目標レベルおよび具体的な指示を提供する。本発明はまた、患者に有益になるように、また逆に患者に有害な可能性のある治療を避けるように、薬物治療の同定および使用を改善する。したがって、本発明は心不全患者における死亡率および罹病率の低下を目的とする。
本発明は、心不全に罹患している患者に有益であると予想される薬物治療の選択方法を提供する。本方法は、治療に対する応答を予測し、および／または適切な治療もしくは治療強化の選択を補助する。先行技術および従来のバイオマーカーガイドによる心不全対処法と比較して、本発明は治療選択および投薬のための多様なマーカーの具体的な目標レベルおよび具体的な指示を提供する。本発明はまた、患者に有益になるように、また逆に患者に有害な可能性のある治療を避けるように、薬物治療の同定および使用を改善する。したがって、本発明は心不全患者における死亡率および罹病率の低下を目的とする。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】