▶ プリンストン ドラッグ ディスカバリー インコーポレイテッドの特許一覧
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】特許公報(B2)
(11)【特許番号】
(24)【登録日】2022-05-20
(45)【発行日】2022-05-30
(54)【発明の名称】プロテインキナーゼ阻害剤
(51)【国際特許分類】
C07D 417/12 20060101AFI20220523BHJP
A61K 31/506 20060101ALI20220523BHJP
A61K 45/00 20060101ALI20220523BHJP
A61P 17/06 20060101ALI20220523BHJP
A61P 19/02 20060101ALI20220523BHJP
A61P 25/00 20060101ALI20220523BHJP
A61P 29/00 20060101ALI20220523BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20220523BHJP
A61P 35/02 20060101ALI20220523BHJP
A61P 37/06 20060101ALI20220523BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20220523BHJP
C07D 417/14 20060101ALI20220523BHJP
【ＦＩ】
C07D417/12 CSP
A61K31/506
A61K45/00
A61P17/06
A61P19/02
A61P25/00
A61P29/00 101
A61P35/00
A61P35/02
A61P37/06
A61P43/00 111
A61P43/00 121
C07D417/14
【請求項の数】
17
(21)【出願番号】P 2019551918
(86)(22)【出願日】2017-12-12
(65)【公表番号】
(43)【公表日】2020-01-30
(86)【国際出願番号】 US2017065847
(87)【国際公開番号】W WO2018111893
(87)【国際公開日】2018-06-21
【審査請求日】2020-09-28
(31)【優先権主張番号】62/433,410
(32)【優先日】2016-12-13
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】62/539,785
(32)【優先日】2017-08-01
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(73)【特許権者】
【識別番号】519209428
【氏名又は名称】プリンストン ドラッグ ディスカバリー インコーポレイテッド
(74)【代理人】
【識別番号】110000855
【氏名又は名称】特許業務法人浅村特許事務所
(72)【発明者】
【氏名】ホー、カン
【審査官】阿久津 江梨子
(56)【参考文献】
【文献】特表２００６－５２３２１６（ＪＰ，Ａ）
【文献】米国特許出願公開第２００９／００７６０２５（ＵＳ，Ａ１）
【文献】特表２００６－５０３８６６（ＪＰ，Ａ）
【文献】特表２０１０－５０２７４２（ＪＰ，Ａ）
【文献】中国特許出願公開第１０４１５１３２１（ＣＮ，Ａ）
【文献】国際公開第２００８／１５０４４６（ＷＯ，Ａ１）
【文献】特表２０１２－５２９５１１（ＪＰ，Ａ）
【文献】国際公開第２００６／０９９４７４（ＷＯ，Ａ１）
【文献】Drug Metabolism and Disposition，2009年，Vol. 37, No. 6，pp. 1242-1250
(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)
Ｃ０７Ｄ ４１７／１２
Ａ６１Ｋ ３１／５０６
Ａ６１Ｋ ４５／００
Ａ６１Ｐ １７／０６
Ａ６１Ｐ １９／０２
Ａ６１Ｐ ２５／００
Ａ６１Ｐ ２９／００
Ａ６１Ｐ ３５／００
Ａ６１Ｐ ３５／０２
Ａ６１Ｐ ３７／０６
Ａ６１Ｐ ４３／００
Ｃ０７Ｄ ４１７／１４
ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）
(57)【特許請求の範囲】
【請求項1】
式ＩＩ：【化1】
の化合物、および／またはその塩、エナンチオマー若しくはエナンチオマー混合物であって、
式中、Ｗ１、Ｗ２、およびＷ３は、独立して水素または重水素であり；
Ｙは、Ｃ－Ｈまたは窒素であり；
Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は、独立して水素：ハロゲン；アルコキシルであって、メトキシ、エトキシ、プロピルオキシ若しくはｔｅｒｔ－ブトキシであるアルコキシル；直鎖Ｃ １ －Ｃ ６ アルキル若しくは分岐鎖Ｃ ３ －Ｃ ６ アルキル、またはＣ ２ －Ｃ ６ アルケニルであって、－ＯＨおよびアルコキシルから選択される１つ以上の置換基で置換されていてもよい直鎖Ｃ １ －Ｃ ６ アルキル若しくは分岐鎖Ｃ ３ －Ｃ ６ アルキル、またはＣ ２ －Ｃ ６ アルケニル；または任意に置換されたヘテロシクロであって、任意の置換基は、－ＮＲ７Ｒ６を含み、式中、Ｒ６およびＲ７は、独立して、水素、直鎖Ｃ １ －Ｃ ６ アルキル若しくは分岐鎖Ｃ ３ －Ｃ ６ アルキル、またはＣ ２ －Ｃ ６ アルケニルであり；
Ｘは、独立して水素、－（ＣＨ２）ｎ－ＯＲ５(式中、ｎは、０～４の整数であり、Ｒ５は、独立して、水素、直鎖Ｃ １ －Ｃ ６ アルキル若しくは分岐鎖Ｃ ３ －Ｃ ６ アルキル、またはＣ ２ －Ｃ ６ アルケニルである)、または－ＮＲ７Ｒ６(式中、Ｒ６およびＲ７は、独立して、水素、直鎖Ｃ １ －Ｃ ６ アルキル若しくは分岐鎖Ｃ ３ －Ｃ ６ アルキル、またはＣ ２ －Ｃ ６ アルケニルである)である、
化合物、および／またはその塩、エナンチオマー若しくはエナンチオマー混合物。
【請求項2】
式ＩＩＩ：【化2】
の化合物、および／またはその塩、エナンチオマー若しくはエナンチオマー混合物であって、
式中、Ｗ１、Ｗ２、およびＷ３は、独立して水素または重水素であり；
Ｙは、Ｃ－Ｈまたは窒素であり；
Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は、独立してＨ：ハロゲン；アルコキシルであって、メトキシ、エトキシ、プロピルオキシ、もしくはｔｅｒｔ－ブトキシであるアルコキシル；直鎖Ｃ １ －Ｃ ６ アルキル若しくは分岐鎖Ｃ ３ －Ｃ ６ アルキル；またはＣ ２ －Ｃ ６ アルケニルであって、－ＯＨおよびアルコキシルから選択される１つ以上の置換基で置換されていてもよい直鎖Ｃ １ －Ｃ ６ アルキル若しくは分岐鎖Ｃ ３ －Ｃ ６ アルキル、またはＣ ２ －Ｃ ６ アルケニル；または任意に置換されたヘテロシクロであって、任意の置換基は、－ＮＲ７Ｒ６を含み、式中、Ｒ６およびＲ７は、独立して水素、直鎖Ｃ １ －Ｃ ６ アルキル若しくは分岐鎖Ｃ ３ －Ｃ ６ アルキル、またはＣ ２ －Ｃ ６ アルケニルである、
化合物、および／またはその塩、エナンチオマー若しくはエナンチオマー混合物。
【請求項3】
Ｗ２が重水素であり、Ｗ１およびＷ３が水素である、請求項１または２に記載の化合物、および／またはその塩、エナンチオマー若しくはエナンチオマー混合物。
【請求項4】
【化3】
【化4】
【化5】
【化6】
、および／またはその塩、エナンチオマー若しくはエナンチオマー混合物である、請求項４に記載の化合物、および／またはその塩、エナンチオマー若しくはエナンチオマー混合物。
【請求項5】
Ｗ１、Ｗ２、およびＷ３がそれぞれ水素である、請求項１または２に記載の化合物、および／またはその塩、エナンチオマー若しくはエナンチオマー混合物。
【請求項6】
【化7】
【化8】
【化9】
【化10】
【化11】
、および／またはその塩、エナンチオマー若しくはエナンチオマー混合物である、請求項５に記載の化合物、および／またはその塩、エナンチオマー若しくはエナンチオマー混合物。
【請求項7】
請求項１から６の何れか一項に記載の化合物、および／またはその塩、エナンチオマー若しくはエナンチオマー混合物を含む、医薬組成物。
【請求項8】
プロテインキナーゼ媒介疾患または状態に罹患している対象を治療するための請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項9】
前記プロテインキナーゼ媒介疾患または状態が、自己免疫疾患または癌である、請求項８に記載の医薬組成物。
【請求項10】
前記自己免疫疾患が、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、移植拒絶反応、多発性硬化症（ＭＳ）、全身性硬化症（ＳＳｃ）、原発性シェーグレン症候群（ｐＳＳ）、慢性関節リウマチ（ＲＡ）、および乾癬のうちの少なくとも１つである、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項11】
前記癌が、フィラデルフィア染色体陽性（Ｐｈ＋）慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、フィラデルフィア染色体陽性急性リンパ芽球性白血病（Ｐｈ＋ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、濾胞性リンパ腫、辺縁帯リンパ腫、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、ワルデンストロームマクログロブリン血症（ＷＭ）、Ｔ細胞リンパ腫、および多発性骨髄腫のうちの少なくとも１つである、請求項９に記載の医薬組成物。
【請求項12】
【化12】
【化13】
【化14】
【化15】
【化16】
【化17】
【化18】
【化19】
、および／またはその塩、エナンチオマー若しくはエナンチオマー混合物を含む、請求項１１に記載の医薬組成物。
【請求項13】
前記プロテインキナーゼ媒介疾患または状態が、自己免疫疾患または癌である、請求項１２に記載の医薬組成物。
【請求項14】
前記自己免疫疾患が、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、移植拒絶反応、多発性硬化症（ＭＳ）、全身性硬化症（ＳＳｃ）、原発性シェーグレン症候群（ｐＳＳ）、慢性関節リウマチ（ＲＡ）、および乾癬のうちの少なくとも１つである、請求項１３に記載の医薬組成物。
【請求項15】
前記癌が、フィラデルフィア染色体陽性（Ｐｈ＋）慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、フィラデルフィア染色体陽性急性リンパ芽球性白血病（Ｐｈ＋ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、濾胞性リンパ腫、辺縁帯リンパ腫、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、ワルデンストロームマクログロブリン血症（ＷＭ）、Ｔ細胞リンパ腫、および多発性骨髄腫のうちの少なくとも１つである、請求項１３に記載の医薬組成物。
【請求項16】
少なくとも１つの追加の治療薬と併用して使用される、請求項７～１５のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項17】
前記少なくとも１つの治療薬が、化学療法薬、生物学的薬物、ステロイド、免疫抑制剤、または非ステロイド系抗炎症剤である、請求項１６に記載の医薬組成物。【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、新規の重水素化および非重水素化環状化学化合物、ならびにその塩、自己免疫および癌の疾患または状態などのプロテインキナーゼ媒介疾患または状態の治療におけるそのような化合物の使用方法、前記化合物の医薬組成物、ならびに前記化合物と同時投与された治療薬との併用治療に関する。
【背景技術】
【0002】
本明細書に提供される情報は、読者の理解を助けることだけを意図している。提供された情報も引用された参考文献も、本発明に対する先行技術であるとは認められない。
【0003】
ヒト疾患の発症の根底にある分子事象の同定は、特定の疾患の予防、管理、および治癒における改善された戦略の設計において大きな課題を提示している（Ｌａｈｉｒｙ Ｐ ｅｔ ａｌ．Ｋｉｎａｓｅ ｍｕｔａｔｉｏｎｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｄｉｓｅａｓｅ：ｉｎｔｅｒｐｒｅｔｉｎｇ ｇｅｎｏｔｙｐｅ－ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ．Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｇｅｎｅｔ．２０１０；１１（１）：６０－７４）。
【0004】
ヒト疾患における異常に制御されたプロテインチロシンキナーゼ（ＰＴＫ）の役割は、熱心な調査の主題である（Ｌａｈｉｒｙ ｉｄ．）。プロテインキナーゼは、細胞内シグナル伝達の調節因子であり、それらの機能的調節異常は、発癌、自己免疫反応、および他の多くの病態または病状において一般的である（Ｌａｈｉｒｙ ｉｄ．；Ｖａｒｇａｓ Ｌ ｅｔ ａｌ．Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｏｆ ＢＴＫ ａｎｄ ＩＴＫ：ｓｔａｔｅ ｏｆ ｔｈｅ ｎｅｗ ｄｒｕｇｓ ｆｏｒ ｃａｎｃｅｒ，ａｕｔｏｉｍｍｕｎｉｔｙ ａｎｄ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｄｉｓｅａｓｅｓ．Ｓｃａｎｄ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０１３；７８（２）：１３０－９；Ｎｏｂｅｌ ＭＥ ｅｔ ａｌ．Ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ：ｉｎｓｉｇｈｔｓ ｉｎｔｏ ｄｒｕｇ ｄｅｓｉｇｎ ｆｒｏｍ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ．Ｓｃｉｅｎｃｅ．２００４；３０３：１８００－１８０５）。ヒトゲノムは、配列および構造において保存されている触媒ドメインを共有するがそれらの触媒作用がどのように調節されるかにおいて顕著に異なる５００を超えるプロテインキナーゼをコードする（Ｍａｎｎｉｎｇ Ｇ ｅｔ ａｌ．Ｔｈｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅ ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ ｏｆ ｔｈｅ ｈｕｍａｎ ｇｅｎｏｍｅ．Ｓｃｉｅｎｃｅ．２００２；２９８：１９１２－１９３４；Ｎｏｂｅｌ ｉｄ．）。プロテインキナーゼは、細胞成長および増殖、細胞分化、細胞発生、細胞分裂、ストレス応答、転写調節、異常な有糸分裂誘発、血管新生、血管発達時の異常な内皮細胞－細胞または細胞－マトリックスの相互作用、炎症、Ｊｕｎ－Ｎ末端キナーゼ（ＪＮＫ）シグナル伝達、およびいくつかの他の細胞プロセスを含む、生理学的機能の制御または制御に関与する重要なシグナル伝達カスケードを調節する（Ｍａｎｎｉｎｇ ｉｄ）。プロテインキナーゼ阻害剤は、癌細胞において過活性プロテインキナーゼを阻害する有望な薬物として確立されている（Ｇｒｏｓｓ Ｓ ｅｔ ａｌ．Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｃａｎｃｅｒ ｗｉｔｈ ｋｉｎａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ．２０１５；１２５（５）：１７８０－１７８９；Ｖａｒｇａｓ ｉｄ）。
【0005】
キナーゼの部分的で非限定的なリストには、ＡＢＬ、ＡＣＫ、ＡＲＧ、ＢＬＫ、ＢＭＸ、ＢＲＫ、ＢＴＫ、ＣＳＫ、ＤＤＲ１、ＤＤＲ２、ＥＧＦＲ、ＥＰＨＡ１、ＦＧＲ、ＦＭＳ、ＦＲＫ、ＦＹＮ（アイソフォームａ）、ＦＹＮ（アイソフォームｂ）、ＨＣＫ、ＫＩＴ、ＬＣＫ、ＬＹＮａ、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、ＳＲＣ、ＳＲＭ、ＹＥＳ、ＰＩＫ３ＣＡ／ＰＩＫ３Ｒ１（Ｍａｎｎｉｎｇ ｉｄ）が含まれる。異常なキナーゼ活性は、良性および悪性の増殖性状態、ならびに免疫系および神経系の不適切な活性化から生じる疾患を含む多くの病態において観察されている。
【0006】
本発明の新規の化合物は、１つ以上のプロテインキナーゼの活性を阻害し、キナーゼ関連疾患または状態を治療するのに有用であると期待される。
【発明の概要】
【0007】
本発明は、一般にプロテインキナーゼに対して、特にプロテインキナーゼの阻害剤として活性な新規の重水素化および非重水素化環状化学化合物、ならびにそれらの塩に関する。さらに、治療有効量の新規の重水素化もしくは非重水素化環状化学化合物および／またはそれらの塩をそれを必要とするそのような哺乳動物に投与することによって、プロテインキナーゼ媒介疾患または状態を有する哺乳動物を治療する方法。
【0008】
一態様では、本発明は、式Ｉ：
を有する化合物、その全ての塩、プロドラッグ、エナンチオマー、およびエナンチオマー混合物を提供し；
式中、
Ｗ１、Ｗ２、およびＷ３は、独立して水素または重水素であり；
Ｙは、炭素または窒素であり；
Ｒ１は、
であり、
式中、
Ｑは、Ａを環の炭素原子に直接結合する単結合、またはＡを環の炭素原子に結合するメチレンもしくはエチレン基であり；
Ａは、
であり、
式中、
Ｙ１およびＹ２は、独立して炭素または窒素であり；
Ｚ１およびＺ２は、独立して水素、－（ＣＨ２）ｎ－ＯＲ５であり、式中、ｎは、０～４の整数であり、Ｒ５は、水素、低級アルキル、または低級アルケニルであるが、ただし、ｎが１であり、Ｒ５が水素であり、Ｒ１が－ピペリジニル基ではない場合を条件とし、かつｎが２であり、Ｒ５が水素であり、Ｒ１が１－ピペラジニル基である場合を条件とし、Ｗ２は、重水素および－ＮＲ５Ｒ６であり、式中、Ｒ５およびＲ６は、独立して水素、低級アルキル、または低級アルケニルであり；
Ｔ１およびＴ２は、独立して０～４の整数であるが、ただし、Ｔ１またはＴ２が０であり、－（ＣＨ２）Ｔ１または－（ＣＨ２）Ｔ２が、単結合であり、Ｔ１およびＴ２が同時に０ではない場合を条件とし；
Ｒ２およびＲ３は、独立して水素；ハロゲン；アルコキシル；低級アルキル、または低級アルケニルであり；低級アルキルまたは低級アルケニルは、－ＯＨおよびアルコキシルから選択される１つ以上の置換基で置換されていてもよく、アルコキシルは、メトキシ、エトキシ、プロピルオキシ、もしくはｔｅｒｔ－ブトキシ；または－ＮＲ５Ｒ６を含む置換ヘテロシクロであり、式中、Ｒ５およびＲ６は、独立して水素、低級アルキル、または低級アルケニルであり；
式中、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３の位置は、交換可能である。
【化1】
を有する化合物、その全ての塩、プロドラッグ、エナンチオマー、およびエナンチオマー混合物を提供し；
式中、
Ｗ１、Ｗ２、およびＷ３は、独立して水素または重水素であり；
Ｙは、炭素または窒素であり；
Ｒ１は、
【化2】
であり、
式中、
Ｑは、Ａを環の炭素原子に直接結合する単結合、またはＡを環の炭素原子に結合するメチレンもしくはエチレン基であり；
Ａは、
【化3】
であり、
式中、
Ｙ１およびＹ２は、独立して炭素または窒素であり；
Ｚ１およびＺ２は、独立して水素、－（ＣＨ２）ｎ－ＯＲ５であり、式中、ｎは、０～４の整数であり、Ｒ５は、水素、低級アルキル、または低級アルケニルであるが、ただし、ｎが１であり、Ｒ５が水素であり、Ｒ１が－ピペリジニル基ではない場合を条件とし、かつｎが２であり、Ｒ５が水素であり、Ｒ１が１－ピペラジニル基である場合を条件とし、Ｗ２は、重水素および－ＮＲ５Ｒ６であり、式中、Ｒ５およびＲ６は、独立して水素、低級アルキル、または低級アルケニルであり；
Ｔ１およびＴ２は、独立して０～４の整数であるが、ただし、Ｔ１またはＴ２が０であり、－（ＣＨ２）Ｔ１または－（ＣＨ２）Ｔ２が、単結合であり、Ｔ１およびＴ２が同時に０ではない場合を条件とし；
Ｒ２およびＲ３は、独立して水素；ハロゲン；アルコキシル；低級アルキル、または低級アルケニルであり；低級アルキルまたは低級アルケニルは、－ＯＨおよびアルコキシルから選択される１つ以上の置換基で置換されていてもよく、アルコキシルは、メトキシ、エトキシ、プロピルオキシ、もしくはｔｅｒｔ－ブトキシ；または－ＮＲ５Ｒ６を含む置換ヘテロシクロであり、式中、Ｒ５およびＲ６は、独立して水素、低級アルキル、または低級アルケニルであり；
式中、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３の位置は、交換可能である。
【0009】
一態様では、本発明は、式ＩＩ：
を有する化合物、その全ての塩、プロドラッグ、エナンチオマー、およびエナンチオマー混合物を提供し；
式中、Ｗ１、Ｗ２、およびＷ３は、独立して水素または重水素であり；
Ｙは、炭素または窒素であり；
Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は、独立して水素：ハロゲン；アルコキシル；低級アルキル；または低級アルケニルであり；低級アルキルまたは低級アルケニルは、－ＯＨおよびアルコキシルから選択される１つ以上の置換基で置換されていてもよく、アルコキシルは、メトキシ、エトキシ、プロピルオキシ、もしくはｔｅｒｔ－ブトキシ、または置換ヘテロシクロであり、置換されていてもよいは、－ＮＲ５Ｒ６を含み、式中、Ｒ５およびＲ６は、独立して、水素、低級アルキル、または低級アルケニルであり；
Ｘは、独立して水素、－（ＣＨ２）ｎ－ＯＲ５であり、式中、ｎは、０～４の整数であり、Ｒ５は、水素、低級アルキルもしくは低級アルケニル、または－ＮＲ５Ｒ６である。
【化4】
を有する化合物、その全ての塩、プロドラッグ、エナンチオマー、およびエナンチオマー混合物を提供し；
式中、Ｗ１、Ｗ２、およびＷ３は、独立して水素または重水素であり；
Ｙは、炭素または窒素であり；
Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は、独立して水素：ハロゲン；アルコキシル；低級アルキル；または低級アルケニルであり；低級アルキルまたは低級アルケニルは、－ＯＨおよびアルコキシルから選択される１つ以上の置換基で置換されていてもよく、アルコキシルは、メトキシ、エトキシ、プロピルオキシ、もしくはｔｅｒｔ－ブトキシ、または置換ヘテロシクロであり、置換されていてもよいは、－ＮＲ５Ｒ６を含み、式中、Ｒ５およびＲ６は、独立して、水素、低級アルキル、または低級アルケニルであり；
Ｘは、独立して水素、－（ＣＨ２）ｎ－ＯＲ５であり、式中、ｎは、０～４の整数であり、Ｒ５は、水素、低級アルキルもしくは低級アルケニル、または－ＮＲ５Ｒ６である。
【0010】
一態様では、本発明は、式ＩＩＩ：
を有する化合物、その全ての塩、プロドラッグ、エナンチオマー、およびエナンチオマー混合物を提供し；
式中、Ｗ１、Ｗ２、およびＷ３は、独立して水素または重水素であり；
Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は、独立してＨ：ハロゲン；アルコキシル；低級アルキル；または低級アルケニルであり；低級アルキルまたは低級アルケニルは、－ＯＨおよびアルコキシルから選択される１つ以上の置換基で置換されていてもよく、アルコキシルは、メトキシ、エトキシ、プロピルオキシ、もしくはｔｅｒｔ－ブトキシ、または置換ヘテロシクロであり、置換されていてもよいは、－ＮＲ５Ｒ６を含み、式中、Ｒ５およびＲ６は、独立して水素、低級アルキル、または低級アルケニルである。
【化5】
を有する化合物、その全ての塩、プロドラッグ、エナンチオマー、およびエナンチオマー混合物を提供し；
式中、Ｗ１、Ｗ２、およびＷ３は、独立して水素または重水素であり；
Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は、独立してＨ：ハロゲン；アルコキシル；低級アルキル；または低級アルケニルであり；低級アルキルまたは低級アルケニルは、－ＯＨおよびアルコキシルから選択される１つ以上の置換基で置換されていてもよく、アルコキシルは、メトキシ、エトキシ、プロピルオキシ、もしくはｔｅｒｔ－ブトキシ、または置換ヘテロシクロであり、置換されていてもよいは、－ＮＲ５Ｒ６を含み、式中、Ｒ５およびＲ６は、独立して水素、低級アルキル、または低級アルケニルである。
【0011】
一態様では、本発明は、式ＩＶ：
を有する化合物、その全ての塩、プロドラッグ、エナンチオマー、およびエナンチオマー混合物を提供し：
式中、Ｗ２は、水素または重水素である。
【化6】
を有する化合物、その全ての塩、プロドラッグ、エナンチオマー、およびエナンチオマー混合物を提供し：
式中、Ｗ２は、水素または重水素である。
【0012】
一態様では、本発明は、式Ｖ：
を有する化合物、その全ての塩、プロドラッグ、エナンチオマー、およびエナンチオマー混合物を提供し：
式中、Ｗ２は、水素または重水素である。
【化7】
を有する化合物、その全ての塩、プロドラッグ、エナンチオマー、およびエナンチオマー混合物を提供し：
式中、Ｗ２は、水素または重水素である。
【0013】
例示的な化合物としては、以下の重水素化および非重水素化環状化学化合物が挙げられる。
【0014】
一態様では、本発明は、化合物Ｉ：
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【化8】
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【0015】
一態様では、本発明は、化合物ＩＩ：
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【化9】
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【0016】
一態様では、本発明は、化合物ＩＩＩ：
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【化10】
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【0017】
一態様では、本発明は、化合物ＩＶ：
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【化11】
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【0018】
一態様では、本発明は、化合物Ｖ：
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【化12】
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【0019】
一態様では、本発明は、化合物ＶＩ：
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【化13】
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【0020】
一態様では、本発明は、化合物ＶＩＩ：
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【化14】
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【0021】
一態様では、本発明は、化合物ＶＩＩＩ：
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【化15】
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【0022】
一態様では、本発明は、化合物ＩＸ：
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【化16】
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【0023】
一態様では、本発明は、化合物Ｘ：
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【化17】
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【0024】
一態様では、本発明は、化合物ＸＩ：
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【化18】
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【0025】
一態様では、本発明は、化合物ＸＩＩ：
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【化19】
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【0026】
一態様では、本発明は、化合物ＸＩＩＩ：
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【化20】
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【0027】
一態様では、本発明は、化合物ＸＩＶ：
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【化21】
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【0028】
一態様では、本発明は、動物またはヒトの対象におけるプロテインキナーゼ媒介疾患または状態を治療する方法であって、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、および／またはＶから選択される化合物のうちの１つ以上、好ましくは化合物Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、Ｘ、ＸＩ、ＸＩＩ、ＸＩＩＩ、および／またはＸＩＶ（化合物Ｉ～ＸＩＶ）のうちの１つ以上、より好ましくは化合物ＩＶ、Ｖ、Ｘ、および／またはＸＩの有効量を対象に投与することを伴う、方法を提供する。
【0029】
プロテインキナーゼ媒介疾患または状態は、自己免疫疾患または癌である。 好ましくは、自己免疫疾患は、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、移植拒絶反応、多発性硬化症（ＭＳ）、全身性硬化症（ＳＳｃ）、原発性シェーグレン症候群（ｐＳＳ）、慢性関節リウマチ（ＲＡ）、および乾癬のうちの少なくとも１つであり得る。好ましくは、癌は、フィラデルフィア染色体陽性（Ｐｈ＋）慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、フィラデルフィア染色体陽性急性リンパ芽球性白血病（Ｐｈ＋ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、濾胞性リンパ腫、辺縁帯リンパ腫、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、ワルデンストロームマクログロブリン血症（ＷＭ）、Ｔ細胞リンパ腫、および多発性骨髄腫のうちの少なくとも１つである。
【0030】
一態様では、本発明は、プロテインキナーゼ媒介疾患または状態に罹患している対象を治療する方法であって、少なくとも１つの追加の治療薬を式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、および／またはＶから選択される化合物のうちの１つ以上、好ましくは化合物Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、Ｘ、ＸＩ、ＸＩＩ、ＸＩＩＩ、および／またはＸＩＶ（化合物Ｉ～ＸＩＶ）、より好ましくは化合物ＩＶ、Ｖ、Ｘ、および／またはＸＩと併用して、プロテインキナーゼ媒介疾患または状態に罹患している対象に投与することを含む、方法を提供する。
【0031】
「治療する」または「療法」および同様の用語は、疾患または状態のうちの１つ以上の症状、すなわち適応症を予防、軽減、または改善する、および／または治療されている対象の生存を延長するのに有効な量で化合物を投与することを指す。「プロテインキナーゼ媒介疾患または状態」という用語は、プロテインキナーゼの生物学的機能が疾患もしくは状態の発達、経過、および／または症状に影響を与える疾患もしくは状態を指す。プロテインキナーゼ媒介疾患または状態は、その疾患または状態に対して、プロテインキナーゼ活性の調節がプラスの効果を提供する、すなわち本明細書に記載の化合物を含むプロテインキナーゼ阻害剤での治療が、疾患もしくは状態を有するまたはその危険性がある対象に対する治療上の利益をもたらす疾患または状態を含む。
【0032】
一態様では、本発明は、遊離形態もしくは薬学的に許容される塩形態で、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、および／またはＶから選択される化合物のうちの１つ以上、好ましくは化合物Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、Ｘ、ＸＩ、ＸＩＩ、ＸＩＩＩ、および／またはＸＩＶ（化合物Ｉ～ＸＩＶ）、より好ましくは化合物ＩＶ、Ｖ、Ｘ、および／またはＸＩの治療有効量、ならびに少なくとも１つの薬学的に許容される担体、賦形剤、および／または希釈剤を含む医薬組成物を提供する。
【0033】
本発明の化合物に関して、化合物または化合物の群には、そうでないことが明確に示されていない限り、そのような化合物の薬学的に許容される塩、プロドラッグ、ならびに全ての立体異性体およびそれらの混合物が含まれる。
【図面の簡単な説明】
【0034】
【図1】ヒト肝臓ミクロソームインキュベーションにおける化合物の代謝安定性を示す図である。代謝安定性は、ヒト肝臓ミクロソーム調製物とのインキュベーションにおける化合物Ｉ～ＸＩＩＩについて決定された。１μＭ濃度の個々の化合物Ｉ～ＸＩＩＩのインキュベーションを、３７℃で１０ｍＭ ＭｇＣｌ２、１ｍＭ ＮＡＤＰＨ、および２ｍＭ ＵＤＰＧＡを含有する０．１Ｍリン酸緩衝液中のヒト肝臓ミクロソーム（０．５ｍｇ／ｍＬ）を用いて最大１時間行った。特定の時点での濃度は、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳにより決定した。
【0035】
【図2】（上パネル）一緒に投与され、それぞれ２．５ｍｇ／ｋｇを投薬した化合物ＩＶおよびダサチニブの単回強制経口投薬後のＳｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙラットにおける化合物ＩＶおよびダサチニブの血漿濃度対時間プロファイルを示す図であり；（下パネル）一緒に投与され、それぞれ一緒に２．５ｍｇ／ｋｇを投薬した化合物ＩＩＩおよびＶの単回強制経口投薬後のＳｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙラットにおける化合物ＩＩＩおよびＶの血漿濃度対時間プロファイルを示す図である。
【0036】
【図3】（上パネル）一緒に投与され、それぞれ５ｍｇ／ｋｇを投薬した化合物ＸおよびＩＩＩの単回強制経口投薬後のＳｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙラットにおける化合物ＸおよびＩＩＩの血漿濃度対時間プロファイルを示す図であり；（下パネル）一緒に投与され、それぞれ一緒に５ｍｇ／ｋｇを投薬した化合物ＸＩおよびダサチニブの単回強制経口投薬後のＳｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙラットにおける化合物ＸＩおよびダサチニブの血漿濃度対時間プロファイルを示す図である。
【0037】
【図4】化合物Ｘおよびダサチニブを単回経口投薬として一緒に投与し、それぞれ５ｍｇ／ｋｇ（２－ｉｎ－１投薬、Ｎ＝３）で投薬したマウスにおける化合物Ｘおよびダサチニブについての肺組織濃度と血漿濃度対時間との平均比を示す図である。
【0038】
【図5】化合物ＸＩおよびダサチニブを単回経口投薬として一緒に投与し、それぞれ５ｍｇ／ｋｇ（２－ｉｎ－１投薬、Ｎ＝３）で投薬したマウスにおける化合物ＸＩおよびダサチニブについての肺組織濃度と血漿濃度対時間との平均比を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【0039】
定義
本明細書で使用されるとき、他に明確に示されない限り、以下の定義が適用される。
「化学構造」または「化学下部構造」とは、個々に識別可能な分子、分子の一部、例えば置換部分、置換されていてもよいコアなどを構成する任意の定義可能な原子または原子団を意味する。通常、配位子の化学下部構造は、配位子の標的分子への結合において役割を果たすことができ、または配位子の三次元形状、静電荷、および／もしくは立体配座特性に影響を与えることができる。
本明細書で使用されるとき、他に明確に示されない限り、以下の定義が適用される。
「化学構造」または「化学下部構造」とは、個々に識別可能な分子、分子の一部、例えば置換部分、置換されていてもよいコアなどを構成する任意の定義可能な原子または原子団を意味する。通常、配位子の化学下部構造は、配位子の標的分子への結合において役割を果たすことができ、または配位子の三次元形状、静電荷、および／もしくは立体配座特性に影響を与えることができる。
【0040】
「プロドラッグ」という用語は、インビボ投与時に、１つ以上の工程もしくはプロセスによって代謝されるか、またはそうでなければ生物学的、薬学的、もしくは治療的に活性な形態の化合物に変換される化合物である。プロドラッグを生成するために、薬学的に活性な化合物は、活性な化合物が代謝または加水分解プロセスによって再生されるように修飾される。
【0041】
「結合する」という用語は、標的と潜在的結合化合物との間の相互作用に関して、潜在的結合化合物が一般にタンパク質との会合と比較して統計的に有意な程度で標的と会合することを示す（すなわち、非特異的結合）。
【0042】
本明細書で使用されるとき、「調節すること」または「調節する」という用語は、生物学的活性、特にプロテインキナーゼなどの特定の生体分子に関連する生物学的活性を変える効果を指す。例えば、特定の生体分子のアゴニストまたはアンタゴニストは、その活性を増加させる（例えば、アゴニスト、活性化剤）、または減少させる（例えば、アンタゴニスト、阻害剤）ことによって、その生体分子、例えば酵素の活性を調節する。この種の活性は、典型的には、活性化剤または阻害剤について、それぞれ最大半値有効濃度（ＥＣ５０）または最大半値阻害濃度（ＩＣ５０）で示される。 さらに、阻害活性は、阻害パーセントおよび／またはＫｉで表すことができる。
【0043】
本発明の化合物に関連して本明細書で使用されるとき、「合成する」および同様の用語は、１つ以上の前駆体材料からの化学合成を意味する。さらに、「アッセイする」とは、実験条件の作成および実験条件の特定の結果に関するデータの収集を意味する。例えば、酵素は、検出可能な基質に作用するそれらの能力に基づいてアッセイすることができる。化合物または配位子は、特定の１つ以上の標的分子に結合するその能力に基づいてアッセイすることができる。
【0044】
「Ｄ」、「ｄ」、および「２Ｈ」は、重水素原子、水素の２倍の質量を有する水素の安定同位体（原子量２．０１４４）を指す。水素は、同位体の水素（１Ｈ）、重水素（２ＨまたはＤ）、およびトリチウム（３ＨまたはＴ）の混合物として自然に発生する。重水素の天然存在量は、約０．０１５％である。当業者は、水素原子を有する全ての化学化合物が実際にはＨおよびＤ同位体の混合物として存在し、約０．０１５％が重水素同位体であることを認識する。その天然存在比の０．０１５％を超えるように濃縮されている重水素のレベルを有する化合物は、それらの濃縮されていない対応物よりも不自然であると考えられ、その結果として新規であると考えられるべきである。本明細書における構造式および化合物中のＤは、０．０１５％を超える量でのＤの組み込みを指す。
【0045】
「低級アルキル」という用語は、当技術分野において認識されており、直鎖アルキル基および分岐鎖アルキル基を含む飽和脂肪族基を含む。特定の実施形態では、直鎖または分岐鎖アルキルは、その主鎖に約６個以下の炭素原子を有する（例えば、直鎖の場合はＣ１－Ｃ６、分岐鎖の場合はＣ３－Ｃ６）。
【0046】
「低級アルケニル」という用語は、本明細書でＣ２－Ｃ６アルケニルと呼ばれる、２～６個の炭素原子の直鎖または分岐鎖基などの、少なくとも１つの炭素－炭素二重結合を有する不飽和直鎖または分岐炭化水素を指す。
【0047】
「シクロアルキル」という用語は、アルキル、アルケニル、アルコキシル、置換されてもよいアミノ、ハロゲン、シアノ（－ＣＮ）、またはニトロ（－ＮＯ２）で置換されてもよい、Ｃ３－Ｃ７を含む脂肪族基の３～７員単環式環を指す。
【0048】
「アルコキシル」または「アルコキシ」という用語は、当技術分野において認識されており、それに結合した酸素ラジカルを有する、上で定義したようなアルキル基を指す。代表的なアルコキシル基としては、メトキシ、エトキシ、プロピルオキシ、ｔｅｒｔ－ブトキシなどが挙げられる。
【0049】
「ヘテロシクロ」、「ヘテロ環式」、または「ヘテロ環」という用語は、少なくとも１つの炭素原子含有環中に少なくとも１つのヘテロ原子（例えば、酸素（「Ｏ」）、硫黄（「Ｓ」）、または窒素（「Ｎ」））を有する５～１０個の原子を有する非芳香族（すなわち、「ヘテロシクロアルキル」）および芳香族（すなわち、「ヘテロアリール」）環式基を含む完全飽和または不飽和を指す。複素環基の各環は、１、２、３、または４個のヘテロ原子を有していてもよい。ヘテロ原子の窒素および硫黄は、任意に酸化されてもよく、窒素ヘテロ原子は、任意に四級化されてもよい。さらに、ヘテロシクロは、任意に、アミノ（－ＮＲ５Ｒ６）で置換されていてもよく、式中、Ｒ５およびＲ６は、独立して水素および／または低級アルキル、ヒドロキシル（－ＯＨ）、アルコキシル、低級アルキルもしくは低級アルケニルであり、低級アルキルまたは低級アルケニルは、－ＯＨまたはアルコキシル基で任意に、置換されていてもよい。
【0050】
「ハロゲン」は、クロロ（「Ｃｌ」）、フルオロ（「Ｆ」）、ブロモ（「Ｂｒ」）、またはヨード（「Ｉ」）を指す。
【0051】
本明細書で提供される化合物は、キラル中心を含有し得ることを理解すべきである。そのようなキラル中心は、（Ｒ）もしくは（Ｓ）配置のいずれかであり得るか、またはそれらの混合物であり得る。したがって、本明細書で提供される化合物は、エナンチオマー的に純粋であるか、またはラセミ混合物（約５０：５０のエナンチオマー比）を含むそれらの立体異性体もしくはジアステレオマー混合物であり得る。
【0052】
「薬学的に許容される」という用語は、示される材料が、治療される疾患または状態およびそれぞれの投与経路を考慮して、合理的に慎重な開業医に患者への材料の投与を回避させるような特性を有さないことを意味する。例えば、そのような材料は、例えば注射用に本質的に無菌であることが一般に必要とされる。
【0053】
「薬学的に許容される塩」という用語は、それらが投与される量および濃度において非毒性である塩を指す。そのような塩の調製は、化合物がその生理学的効果を発揮するのを妨げることなく化合物の物理的特性を変えることによって薬理学的使用を容易にすることができる。
【0054】
「薬学的に許容される組成物」という用語は、薬学的に活性な化合物および１つ以上の薬学的に許容される担体、賦形剤、ならびに／または希釈剤を指す。
【0055】
「治療的に有効」または「有効量」という用語は、単独で、もしくはさらなる用量と一緒に、および／または他の治療薬と組み合わせて、所望の応答を生じる調製物の量である。これは、疾患の進行を停止させること、または疾患もしくは状態の発症を遅らせること、または発症を防ぐことを伴い得るが、それはまた、疾患もしくは状態を一時的に遅くすることだけを意味し得る。
【0056】
「プロテインキナーゼ媒介疾患または状態」という用語は、プロテインキナーゼの生物学的機能が疾患もしくは状態の発達、経過、および／または症状に影響を与える疾患もしくは状態を指す。
【0057】
「変異体」という用語は、野生型タンパク質のアミノ酸配列と比較した場合のタンパク質中の単一または複数のアミノ酸の変化を指す。
【0058】
本明細書の説明および特許請求の範囲を通して、単語「ｃｏｍｐｒｉｓｅ（含む）」ならびに「ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ（含むこと）」および「ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ（含む）」のような単語の変形は、「含むがこれらに限定されない」ことを意味し、例えば他の添加剤、成分、整数、または工程を除外することを意図しない。
【0059】
本発明の化合物
一態様では、本発明は、式Ｉ：
を有する化合物、その全ての塩、プロドラッグ、エナンチオマー、およびエナンチオマー混合物を提供し；
式中、
Ｗ１、Ｗ２、およびＷ３は、独立して水素または重水素であり；
Ｙは、炭素または窒素であり；
Ｒ１は、
であり、
式中、
Ｑは、Ａを環の炭素原子に直接結合する単結合、またはＡを環の炭素原子に結合するメチレンもしくはエチレン基であり；
Ａは、
であり、
式中、
Ｙ１およびＹ２は、独立して炭素または窒素であり；Ｚ１およびＺ２は、独立して水素、－（ＣＨ２）ｎ－ＯＲ５であり、式中、ｎは、０～４の整数であり、Ｒ５は、水素、低級アルキル、または低級アルケニルであるが、ただし、ｎが１であり、Ｒ５が水素であり、Ｒ１が－ピペリジニル基ではない場合を条件とし、かつｎが２であり、Ｒ５が水素であり、Ｒ１が１－ピペラジニル基である場合を条件とし、Ｗ２は、重水素および－ＮＲ５Ｒ６であり、式中、Ｒ５およびＲ６は、独立して水素、低級アルキル、または低級アルケニルであり；Ｔ１およびＴ２は、独立して０～４の整数であるが、ただし、Ｔ１またはＴ２が０であり、－（ＣＨ２）Ｔ１または－（ＣＨ２）Ｔ２が、単結合であり、Ｔ１およびＴ２が同時に０ではない場合を条件とし；
Ｒ２およびＲ３は、独立して水素；ハロゲン；アルコキシル；低級アルキル、または低級アルケニルであり、低級アルキルまたは低級アルケニルは、－ＯＨおよびアルコキシルから選択される１つ以上の置換基で置換されていてもよく、式中、アルコキシルは、メトキシ、エトキシ、プロピルオキシ、またはｔｅｒｔ－ブトキシであり、または置換ヘテロシクロが、－ＮＲ５Ｒ６を含み、式中、Ｒ５およびＲ６は、独立して水素、低級アルキル、または低級アルケニルであり；
式中、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３の位置は、交換可能である。
一態様では、本発明は、式Ｉ：
【化22】
を有する化合物、その全ての塩、プロドラッグ、エナンチオマー、およびエナンチオマー混合物を提供し；
式中、
Ｗ１、Ｗ２、およびＷ３は、独立して水素または重水素であり；
Ｙは、炭素または窒素であり；
Ｒ１は、
【化23】
であり、
式中、
Ｑは、Ａを環の炭素原子に直接結合する単結合、またはＡを環の炭素原子に結合するメチレンもしくはエチレン基であり；
Ａは、
【化24】
であり、
式中、
Ｙ１およびＹ２は、独立して炭素または窒素であり；Ｚ１およびＺ２は、独立して水素、－（ＣＨ２）ｎ－ＯＲ５であり、式中、ｎは、０～４の整数であり、Ｒ５は、水素、低級アルキル、または低級アルケニルであるが、ただし、ｎが１であり、Ｒ５が水素であり、Ｒ１が－ピペリジニル基ではない場合を条件とし、かつｎが２であり、Ｒ５が水素であり、Ｒ１が１－ピペラジニル基である場合を条件とし、Ｗ２は、重水素および－ＮＲ５Ｒ６であり、式中、Ｒ５およびＲ６は、独立して水素、低級アルキル、または低級アルケニルであり；Ｔ１およびＴ２は、独立して０～４の整数であるが、ただし、Ｔ１またはＴ２が０であり、－（ＣＨ２）Ｔ１または－（ＣＨ２）Ｔ２が、単結合であり、Ｔ１およびＴ２が同時に０ではない場合を条件とし；
Ｒ２およびＲ３は、独立して水素；ハロゲン；アルコキシル；低級アルキル、または低級アルケニルであり、低級アルキルまたは低級アルケニルは、－ＯＨおよびアルコキシルから選択される１つ以上の置換基で置換されていてもよく、式中、アルコキシルは、メトキシ、エトキシ、プロピルオキシ、またはｔｅｒｔ－ブトキシであり、または置換ヘテロシクロが、－ＮＲ５Ｒ６を含み、式中、Ｒ５およびＲ６は、独立して水素、低級アルキル、または低級アルケニルであり；
式中、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３の位置は、交換可能である。
【0060】
好ましくはＷ２は、重水素または水素、より好ましくは水素であり、Ｗ１およびＷ３は、水素である。 Ｙは、好ましくは窒素である。 Ｒ２は、好ましくは低級アルキル、より好ましくはメチルである。 Ｒ３は、好ましくは低級アルキルまたは水素、より好ましくは水素である。 Ｒ１は、好ましくは置換または非置換の飽和５または６員窒素含有ヘテロシクロ環である。 置換または非置換の飽和５員窒素含有ヘテロシクロ環は、置換または非置換のピロリジン－１－イル、好ましくは３－ヒドロキシ－または３－アミノ－ピロリジン－１－イル、より好ましくは３－ヒドロキシピロリジン－１－イルであり得る。
【0061】
一態様では、本発明は、式ＩＩ：
を有する化合物、その全ての塩、プロドラッグ、エナンチオマー、およびエナンチオマー混合物を提供し：
式中、Ｗ１、Ｗ２、およびＷ３は、独立して水素または重水素であり；
Ｙは、炭素または窒素であり；
Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は、独立して水素：ハロゲン；アルコキシル；低級アルキル；または低級アルケニルであり；低級アルキルまたは低級アルケニルは、－ＯＨおよびアルコキシルから選択される１つ以上の置換基で置換されていてもよく、アルコキシルは、メトキシ、エトキシ、プロピルオキシ、もしくはｔｅｒｔ－ブトキシ、または置換ヘテロシクロであり、置換されていてもよいは、－ＮＲ５Ｒ６を含み、式中、Ｒ５およびＲ６は、独立して、水素、低級アルキル、または低級アルケニルであり；
Ｘは、独立して水素、－（ＣＨ２）ｎ－ＯＲ５であり、式中、ｎは、０～４の整数であり、Ｒ５は、水素、低級アルキルもしくは低級アルケニル、または－ＮＲ５Ｒ６である。
【化25】
を有する化合物、その全ての塩、プロドラッグ、エナンチオマー、およびエナンチオマー混合物を提供し：
式中、Ｗ１、Ｗ２、およびＷ３は、独立して水素または重水素であり；
Ｙは、炭素または窒素であり；
Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は、独立して水素：ハロゲン；アルコキシル；低級アルキル；または低級アルケニルであり；低級アルキルまたは低級アルケニルは、－ＯＨおよびアルコキシルから選択される１つ以上の置換基で置換されていてもよく、アルコキシルは、メトキシ、エトキシ、プロピルオキシ、もしくはｔｅｒｔ－ブトキシ、または置換ヘテロシクロであり、置換されていてもよいは、－ＮＲ５Ｒ６を含み、式中、Ｒ５およびＲ６は、独立して、水素、低級アルキル、または低級アルケニルであり；
Ｘは、独立して水素、－（ＣＨ２）ｎ－ＯＲ５であり、式中、ｎは、０～４の整数であり、Ｒ５は、水素、低級アルキルもしくは低級アルケニル、または－ＮＲ５Ｒ６である。
【0062】
好ましくはＷ２は、重水素または水素、より好ましくは水素であり、Ｗ１およびＷ３は、水素である。 Ｙは、好ましくは窒素である。 Ｒ２は、好ましくは低級アルキル、より好ましくはメチルである。 Ｒ３は、好ましくは低級アルキルまたは水素、より好ましくは水素である。 Ｒ４は、好ましくは低級アルキルまたは水素、より好ましくは水素である。 Ｘは、好ましくは水素、ヒドロキシル、またはアミン、より好ましくはヒドロキシルである。
【0063】
一態様では、本発明は、式ＩＩＩ：
を有する化合物、その全ての塩、プロドラッグ、エナンチオマー、およびエナンチオマー混合物を提供し：
式中、Ｗ１、Ｗ２、およびＷ３は、独立して水素または重水素であり；
Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は、独立してＨ：ハロゲン；アルコキシル；低級アルキル；または低級アルケニルであり；低級アルキルまたは低級アルケニルは、－ＯＨおよびアルコキシルから選択される１つ以上の置換基で置換されていてもよく、アルコキシルは、メトキシ、エトキシ、プロピルオキシ、もしくはｔｅｒｔ－ブトキシ、または置換ヘテロシクロであり、置換されていてもよいは、－ＮＲ５Ｒ６を含み、式中、Ｒ５およびＲ６は、独立して水素、低級アルキル、または低級アルケニルである。
【化26】
を有する化合物、その全ての塩、プロドラッグ、エナンチオマー、およびエナンチオマー混合物を提供し：
式中、Ｗ１、Ｗ２、およびＷ３は、独立して水素または重水素であり；
Ｒ２、Ｒ３、およびＲ４は、独立してＨ：ハロゲン；アルコキシル；低級アルキル；または低級アルケニルであり；低級アルキルまたは低級アルケニルは、－ＯＨおよびアルコキシルから選択される１つ以上の置換基で置換されていてもよく、アルコキシルは、メトキシ、エトキシ、プロピルオキシ、もしくはｔｅｒｔ－ブトキシ、または置換ヘテロシクロであり、置換されていてもよいは、－ＮＲ５Ｒ６を含み、式中、Ｒ５およびＲ６は、独立して水素、低級アルキル、または低級アルケニルである。
【0064】
好ましくはＷ２は、重水素または水素、より好ましくは水素であり、Ｗ１およびＷ３は、水素である。 Ｙは、好ましくは窒素である。 Ｒ２は、好ましくは低級アルキル、より好ましくはメチルである。Ｒ３は、好ましくは低級アルキルまたは水素、より好ましくは水素である。Ｒ４は、好ましくは低級アルキルまたは水素、より好ましくは水素である。
【0065】
一態様では、本発明は、式ＩＶ：
を有する化合物、その全ての塩、プロドラッグ、エナンチオマー、およびエナンチオマー混合物を提供し：
式中、Ｗ２は、水素または重水素である。
【化27】
を有する化合物、その全ての塩、プロドラッグ、エナンチオマー、およびエナンチオマー混合物を提供し：
式中、Ｗ２は、水素または重水素である。
【0066】
一態様では、本発明は、式Ｖ：
を有する化合物、その全ての塩、プロドラッグ、エナンチオマー、およびエナンチオマー混合物を提供し：
式中、Ｗ２は、水素または重水素である。
【化28】
を有する化合物、その全ての塩、プロドラッグ、エナンチオマー、およびエナンチオマー混合物を提供し：
式中、Ｗ２は、水素または重水素である。
【0067】
例示的な化合物
一態様では、本発明は、化合物Ｉ：
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
一態様では、本発明は、化合物Ｉ：
【化29】
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【0068】
一態様では、本発明は、化合物ＩＩ：
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【化30】
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【0069】
一態様では、本発明は、化合物ＩＩＩ：
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【化31】
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【0070】
一態様では、本発明は、化合物ＩＶ：
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【化32】
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【0071】
一態様では、本発明は、化合物Ｖ：
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【化33】
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【0072】
一態様では、本発明は、化合物ＶＩ：
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【化34】
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【0073】
一態様では、本発明は、化合物ＶＩＩ：
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【化35】
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【0074】
一態様では、本発明は、化合物ＶＩＩＩ：
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【化36】
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【0075】
一態様では、本発明は、化合物ＩＸ：
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【化37】
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【0076】
一態様では、本発明は、化合物Ｘ：
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【化38】
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【0077】
一態様では、本発明は、化合物ＸＩ：
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【化39】
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【0078】
一態様では、本発明は、化合物ＸＩＩ：
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【化40】
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【0079】
一態様では、本発明は、化合物ＸＩＩＩ：
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【化41】
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
【0080】
一態様では、本発明は、化合物ＸＩＶ：
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
プロテインキナーゼ標的および本発明の適応症
【化42】
の構造を有する化合物、その全ての塩、およびプロドラッグを提供する。
プロテインキナーゼ標的および本発明の適応症
【0081】
プロテインキナーゼは、多様な生物学的経路における生化学的シグナルの伝播において重要な役割を果たす。そのように、キナーゼは、小分子治療的介入のための重要な制御点を表す。５００を超えるキナーゼが記載されており、特定のキナーゼが広範囲の疾患または状態に関係しているとされている。一態様では、本発明は、限定はしないが、自己免疫疾患、過剰増殖性疾患、癌、心血管疾患、炎症性疾患、神経疾患、およびその他の疾患などの動物またはヒトの対象におけるプロテインキナーゼ媒介疾患または状態（すなわち適応症）を治療する方法を提供する。
【0082】
好ましくは、プロテインキナーゼ媒介疾患または状態は、自己免疫疾患または癌である。より好ましくは、自己免疫疾患は、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、移植拒絶反応、多発性硬化症（ＭＳ）、全身性硬化症（ＳＳｃ）、原発性シェーグレン症候群（ｐＳＳ）、慢性関節リウマチ（ＲＡ）、および乾癬のうちの少なくとも１つであり；癌は、フィラデルフィア染色体陽性（Ｐｈ＋）慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、フィラデルフィア染色体陽性急性リンパ芽球性白血病（Ｐｈ＋ＡＬＬ）、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、濾胞性リンパ腫、辺縁帯リンパ腫、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、ワルデンストロームマクログロブリン血症（ＷＭ）、Ｔ細胞リンパ腫、および多発性骨髄腫のうちの少なくとも１つである。
【0083】
別の態様では、本発明は、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、および／またはＶを有する１つ以上の化合物、好ましくは化合物Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、Ｘ、ＸＩ、ＸＩＩ、ＸＩＩＩ、および／またはＸＩＶ（化合物Ｉ～ＸＩＶ）のうちの１つ以上、より好ましくは化合物ＩＶ、Ｖ、Ｘ、および／またはＸＩのうちの１つ以上の有効投薬量を投与することによって、ＡＢＬ、ＡＣＫ、ＡＲＧ、ＢＬＫ、ＢＭＸ、ＢＲＫ、ＢＴＫ、ＣＳＫ、ＤＤＲ１、ＤＤＲ２、ＥＧＦＲ、ＥＰＨＡ１、ＦＧＲ、ＦＭＳ、ＦＲＫ、ＦＹＮ、ＨＣＫ、ＫＩＴ、ＬＣＫ、ＬＹＮ、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、ＳＲＣ、ＳＲＭ、ＹＥＳ、ＰＩＫ３ＣＡ／ＰＩＫ３Ｒ１からなる群から選択されるプロテインキナーゼの活性を調節するための方法を提供する。本文書では、キナーゼ命名法で使用される文字の大文字と小文字は、区別なく使用されている。
【0084】
別の態様では、本発明は、動物対象におけるプロテインキナーゼ媒介疾患または状態を治療するための方法を提供し、その方法は、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、および／またはＶを有する１つ以上の化合物、好ましくは化合物Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、Ｘ、ＸＩ、ＸＩＩ、ＸＩＩＩ、およびＸＩＶ（化合物Ｉ～ＸＩＶ）のうちの１つ以上、より好ましくは化合物ＩＶ、Ｖ、Ｘ、およびＸＩのうちの１つ以上を含む有効量の組成物を対象に投与することを伴う。
【0085】
一態様では、本発明は、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、および／またはＶを有する１つ以上の化合物、好ましくは化合物Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、Ｘ、ＸＩ、ＸＩＩ、ＸＩＩＩ、および／またはＸＩＶ（化合物Ｉ～ＸＩＶ）のうちの１つ以上、より好ましくは化合物ＩＶ、Ｖ、Ｘ、および／またはＸＩのうちの１つ以上の有効量を投与することによって、ＡＢＬ、ＡＣＫ、ＡＲＧ、ＢＬＫ、ＢＭＸ、ＢＲＫ、ＢＴＫ、ＣＳＫ、ＤＤＲ１、ＤＤＲ２、ＥＧＦＲ、ＥＰＨＡ１、ＦＧＲ、ＦＭＳ、ＦＲＫ、ＦＹＮ（アイソフォームａ）、ＦＹＮ（アイソフォームｂ）、ＨＣＫ、ＫＩＴ、ＬＣＫ、ＬＹＮａ、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、ＳＲＣ、ＳＲＭ、ＹＥＳ、ＰＩＫ３ＣＡ／ＰＩＫ３Ｒ１からなる群から選択されるプロテインキナーゼによって媒介される疾患または状態を治療するための方法を提供する。
【0086】
キナーゼ活性についてのいくつかの異なるアッセイが、活性モジュレーターを決定するためのおよび／または特定のキナーゼもしくはキナーゼ群に対するモジュレーターの特異性を決定するための試験に利用することができる。以下の実施例に記載されたアッセイに加えて、当業者は、特定の用途のために利用され得るかまたは改変され得る他のアッセイを知って理解するであろう。
【0087】
ＡＢＬ、ＡＢＬ（Ｅ２５５Ｋ）、ＡＣＫ、ＡＲＧ、ＢＬＫ、ＢＭＸ、ＢＲＫ、ＢＴＫ、ＣＳＫ、ＤＤＲ１、ＤＤＲ２、ＥＧＦＲ ＥＰＨＡ１、ＦＧＲ、ＦＭＳ、ＦＲＫ、ＦＹＮ、ＨＣＫ、ＫＩＴ、ＬＣＫ、ＬＹＮ、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、ＳＲＣ、ＳＲＭ、ＹＥＳ、およびＰＩＫ３ＣＡ／ＰＩＫ３Ｒ１を含む一連の選択されたプロテインキナーゼ（実施例１５参照）の阻害を測定するために一般に使用されるインビトロスクリーニングにおいて、化合物Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、Ｘ、ＸＩ、ＸＩＩ、およびＸＩＩＩは、とりわけＢＴＫ、ＢＭＸ、ＡＢＬ、ＡＢＬ（Ｅ２５５Ｋ）、ＳＲＣ、ＡＣＫ、ＡＲＧ、ＢＬＫ、ＤＤＲ２、ＥＰＨＡ、ＦＧＲ、ＦＭＳ、ＦＲＫ、ＦＹＮ、ＨＣＫ、ＬＣＫ、ＬＹＮ、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、ＹＥＳ、およびＰＩＫ３ＣＡ／ＰＩＫ３Ｒ１を阻害する強力な活性を示すことが見出された。
【0088】
一連のプロテインキナーゼ（実施例１５参照）の上記のインビトロスクリーニングにおいて、化合物Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、Ｘ、ＸＩ、ＸＩＩ、およびＸＩＩＩは、ＢＴＫ、ＢＭＸ、ＡＢＬ、ＡＢＬ（Ｅ２５５Ｋ）、ＳＲＣ、ＡＣＫ、ＡＲＧ、ＢＬＫ、ＤＤＲ２、ＥＰＨＡ１、ＦＧＲ、ＦＭＳ、ＦＲＫ、ＦＹＮ（アイソフォームａ）、ＨＣＫ、ＬＣＫ、ＬＹＮａ、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、ＹＥＳ、およびＰＩＫ３ＣＡ／ＰＩＫ３Ｒ１の１０ｎＭで５０％を超える阻害を示した。
【0089】
生物学的活性のさらなる試験として、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫細胞株ＳＵ－ＤＨＬ－４および慢性骨髄性白血病細胞株Ｋ－５６２を使用して本発明の化合物を細胞成長の阻害についてアッセイした（実施例１６参照）。この細胞ベースのアッセイでは、化合物Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、Ｘ、ＸＩ、ＸＩＩ、ＸＩＩＩ、およびＸＩＶのＩＣ５０値は、全て２０ｎＭ未満であった。
【0090】
化合物Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、Ｘ、ＸＩ、ＸＩＩ、ＸＩＩＩ、およびＸＩＶに対するプロテインキナーゼ標的としては、以下：ＡＢＬ、ＡＣＫ、ＡＲＧ、ＢＬＫ、ＢＭＸ、ＢＲＫ、ＢＴＫ、ＣＳＫ、ＤＤＲ１、ＤＤＲ２、ＥＧＦＲ、ＥＰＨＡ１、ＦＧＲ、ＦＭＳ、ＦＲＫ、ＦＹＮ、ＨＣＫ、ＫＩＴ、ＬＣＫ、ＬＹＮ、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、ＳＲＣ、ＳＲＭ、ＹＥＳ、およびＰＩＫ３ＣＡ／ＰＩＫ３Ｒ１が挙げられるが、これらに限定されない。
【0091】
Ｔｅｃファミリーのキナーゼは、Ｓｒｃファミリーキナーゼ（ＳＦＫ）後２番目に大きいクラスの細胞質プロテインチロシンキナーゼを形成し、５つの哺乳動物メンバー：Ｂｔｋ、Ｂｍｘ（Ｘ染色体上の骨髄キナーゼ、別名Ｅｔｋ）、Ｉｔｋ（ＩＬ－２誘導性Ｔ細胞キナーゼ）、Ｒｌｋ（休止リンパ球キナーゼ、別名Ｔｘｋ）、およびＴｅｃからなる（Ｈａｒｔｋａｍｐ ｅｔ ａｌ．Ｂｒｕｔｏｎ’ｓ ｔｙｒｏｓｉｎｅ ｋｉｎａｓｅ ｉｎ ｃｈｒｏｎｉｃ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ：ｆｒｏｍ ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ ｔｏ ｔｈｅｒａｐｙ．Ｉｎｔ Ｊ Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ Ｃｙｔｏｋｉｎｅ Ｍｅｄｉａｔ Ｒｅｓ．２０１５；７：２７－３４）。Ｔｅｃファミリーのキナーゼの大部分は、主に造血系において発現されるが、ＴｅｃおよびＢｍｘの両方はまた、それぞれ肝臓および内皮細胞のような間質組織においても発現される。細胞表面受容体の誘発によるＴｅｃファミリーキナーゼの活性化は、活性化ホスファチジルイノシトール－３キナーゼによって形成される脂質ホスファチジルイノシトール（３，４，５）Ｐ３とＰＨドメインとの相互作用によって媒介される、原形質膜へのタンパク質の再局在化を必要とする。その後のＳＦＫによるリン酸化およびチロシン２２３の自己リン酸化は、Ｔｅｃファミリーのキナーゼの完全な活性化をもたらす。
【0092】
ＢＴＫは、男性ではＸ連鎖無ガンマグロブリン血症、マウスではＸ連鎖免疫不全症を引き起こすＢＴＫ変異を有するＴｅｃファミリーのキナーゼの最もよく知られたメンバーである。ＢＴＫは、Ｂ細胞の発達、活性化、シグナル伝達、および生存の重要な調節因子である（Ｈａｒｔｋａｍｐ ｉｄ）。さらに、ＢＴＫは、他の多くの造血細胞シグナル伝達経路、例えばマクロファージにおけるトール様受容体（ＴＬＲ）およびサイトカイン受容体媒介ＴＮＦ－α産生、肥満細胞におけるＩｇＥ受容体（ＦｃｅｐｓｉｌｏｎＲｌ）シグナル伝達、Ｂ系統リンパ系細胞におけるＦａｓ／ＡＰＯ－１アポトーシスシグナル伝達の阻害、およびコラーゲン刺激血小板凝集において重要な役割を果たす。ＢＴＫおよび他のＴｅｃファミリーキナーゼのメンバーは、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、多発性硬化症（ＭＳ）、１型糖尿病（Ｔ１Ｄ）、全身性硬化症（ＳＳｃ）、原発性シェーグレン症候群（ｐＳＳ）、および慢性関節リウマチ（ＲＡ）などの自己免疫疾患において重要な役割を果たすことができる。ＢＴＫ阻害剤であるイブルチニブは、Ｂ細胞性悪性腫瘍、特に慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、およびワルデンストロームのマクログロブリン血症（ＷＭ）の患者において高い臨床活性を実証した。しかしながら、イブルチニブに対する耐性は、主にＢＴＫ変異酵素Ｃ４８１Ｓの開発により、イブルチニブ治療を受けている患者のサブグループにおいて実証されている（Ｗｏｙａｃｈ ＪＡ ｅｔ ａｌ．Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｂｒｕｔｏｎ’ｓ ｔｙｒｏｓｉｎｅ ｋｉｎａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｉｂｒｕｔｉｎｉｂ．Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ．２０１４；３７０（２４）：２２８６－９４）。
【0093】
チロシンキナーゼＢＭＸは、共有のＴＡＫ１－ＴＡＢ複合体を調節することによって、ＴＮＦおよび他のメディエーターによって誘発される炎症を調節するようである（Ｇｏｔｔａｒ－Ｇｕｉｌｌｉｅｒ Ｍ ｅｔ ａｌ．Ｔｈｅ ｔｙｒｏｓｉｎｅ ｋｉｎａｓｅ ＢＭＸ ｉｓ ａｎ ｅｓｓｅｎｔｉａｌ ｍｅｄｉａｔｏｒ ｏｆ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ ｉｎ ａ ｋｉｎａｓｅ－ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｍａｎｎｅｒ．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．２０１１；１８６（１０）：６０１４）。ＢＭＸキナーゼは、膠芽腫、前立腺癌、乳癌、および肺癌の病因において役割を果たし得る。ＢＭＸはまた、放射線と組み合わせた抗血管療法として、または化学療法剤に対する増感剤としての可能性を示している（Ｊａｒｂｏｅ ＪＳ ｅｔ ａｌ．Ｍｉｎｉ－ｒｅｖｉｅｗ：ｂｍｘ ｋｉｎａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｆｏｒ ｃａｎｃｅｒ ｔｈｅｒａｐｙ．Ｒｅｃｅｎｔ Ｐａｔ Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖ．２０１３；８（３）：２２８－３８）。
【0094】
Ｓｒｃファミリーキナーゼ（ＳＦＫ）は、Ｓｒｃ、Ｆｙｎ、Ｙｅｓ、Ｂｌｋ、Ｙｒｋ、Ｆｒｋ（別名Ｒａｋ）、Ｆｇｒ、Ｈｃｋ、Ｌｃｋ、Ｓｒｍ、およびＬｙｎを含む１１個の非受容体チロシンキナーゼからなる（Ｓｅｎ Ｂ，Ｊｏｈｎｓｏｎ ＦＭ．Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ＳＲＣ ｆａｍｉｌｙ ｋｉｎａｓｅｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｃａｎｃｅｒｓ．Ｊ Ｓｉｇｎａｌ Ｔｒａｎｓｄｕｃｔ．２０１１：ＩＤ８６５８１９）。Ｓｒｃは、ケラチノサイトに見られるのに対して、Ｂｌｋ、Ｆｇｒ、Ｈｃｋ、Ｌｃｋ、およびＬｙｎは、主に造血細胞に見られる。Ｆｒｋは、主に膀胱、乳房、脳、結腸、およびリンパ系細胞に発生する。Ｓｒｃファミリーキナーゼは、多くの細胞型において増殖および遊走反応に関与している。
【0095】
Ｓｒｃは、細胞シグナル伝達において多数の役割を果たす非受容体プロテインチロシンキナーゼである。Ｓｒｃは、細胞接着、成長、運動、および分化を含む多くの機能の制御に関与している。Ｓｒｃは、多くの細胞型において広く発現されており、細胞内に異なる位置を有することができる。多数のヒト悪性腫瘍がＳＲＣの発現および活性の増加を示しており、これはＳＲＣが発癌に密接に関与している可能性があることを示唆している。ＳＲＣ阻害剤ボスチニブは、フィラデルフィア染色体陽性（Ｐｈ＋）慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）の治療に使用されており、サラカチニブは、アルツハイマー病および統合失調症の治療の可能性が検討されている。
【0096】
ＡＢＬは、細胞分化、細胞分裂、細胞接着、およびストレス応答の過程に関係している細胞質および核プロテインチロシンキナーゼである（Ｈａｎｔｓｃｈｅｌ Ｏ．Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ，ｓｉｇｎａｌｉｎｇ，ａｎｄ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｏｆ ａｂｌ ｋｉｎａｓｅｓ ｉｎ ｃａｎｃｅｒ．Ｇｅｎｅｓ Ｃａｎｃｅｒ．２０１２；３：４３６－４６）。ＡＢＬ変異は、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、および急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）などの癌に関連している。イマチニブ、ダサチニブ、およびニロチニブなどのいくつかのＡＢＬ阻害剤が、ＣＭＬ、ＡＬＬ、およびＡＭＬの治療に使用されてきた。ＢＣＲ－ＡＢＬの強力な阻害剤であるダサチニブは、慢性期に新たに診断されたフィラデルフィア染色体陽性（Ｐｈ＋）慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、イマチニブを含む以前の療法に対する抵抗性または不耐性を有する慢性、加速、または骨髄性もしくはリンパ性芽球期のＰｈ＋ＣＭＬ、および以前の療法に対する抵抗性または不耐性を有するフィラデルフィア染色体陽性急性リンパ芽球性白血病（Ｐｈ＋ＡＬＬ）の治療に使用される。しかしながら、ダサチニブは、胸水および肺高血圧症などの重度の呼吸毒性と関連しており、これは肺組織におけるダサチニブ蓄積の結果であり得る（Ｑｕｉｎｔａｓ－Ｃａｒｄａｍａ Ａ，ｅｔ ａｌ．Ｐｌｅｕｒａｌ ｅｆｆｕｓｉｏｎ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｃｈｒｏｎｉｃ ｍｙｅｌｏｇｅｎｏｕｓ ｌｅｕｋｅｍｉａ ｔｒｅａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｄａｓａｔｉｎｉｂ ａｆｔｅｒ ｉｍａｔｉｎｉｂ ｆａｉｌｕｒｅ．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ．２００７；２５（２５）：３９０８－１４；Ｇｕｉｇｎａｂｅｒｔ Ｃ，ｅｔ ａｌ．Ｄａｓａｔｉｎｉｂ ｉｎｄｕｃｅｓ ｌｕｎｇ ｖａｓｃｕｌａｒ ｔｏｘｉｃｉｔｙ ａｎｄ ｐｒｅｄｉｓｐｏｓｅｓ ｔｏ ｐｕｌｍｏｎａｒｙ ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ．２０１６；１２６（９）：３２０７－１８）。
【0097】
ＬＣＫは、染色体Ｉｐ３４．３によってコードされる５７．９ｋＤａの膜関連非受容体チロシンキナーゼである。タンパク質構造は、ＳＨ３およびＳＨ２ドメインを含む。ＬＣＫ阻害剤は、急性リンパ芽球性白血病、Ｔ細胞リンパ腫、リンパ球減少症、腎臓癌、結腸癌、重症複合型免疫不全、多発性硬化症、炎症性腸、およびＩ型糖尿病の治療に有用であり得る。
【0098】
Ｆｒｋは、染色体６ｑ２１－ｑ２２．３によってコードされる５８．５ｋＤａのチロシンキナーゼである。構造は、ＳＨ２、ＳＨ３、およびチロシンキナーゼドメインを含む。Ｆｒｋの阻害は、Ｉ型糖尿病におけるβ細胞破壊を抑制する手段を提供する可能性がある。Ｆｒｋ阻害剤は、急性骨髄性白血病およびＩ型糖尿病の治療に有用であり得る。
【0099】
Ｆｙｎは、染色体６ｑ２１によってコードされる６０．６ｋＤａの非受容体チロシンキナーゼである。Ｆｙｎは、プロテインキナーゼＣおよびカルシウム調節のレベルで、ＦｙｎおよびＬｙｎ経路の相乗的合流における肥満細胞脱顆粒の調節に関与している。Ｆｙｎ阻害剤は、アルツハイマー病、統合失調症の治療、ならびに例えば黒色腫および扁平上皮癌における転移の予防に有用であり得る。
【0100】
ＨＣＫは、染色体２０ｑｌ １．２１によってコードされる５９．５ｋＤａのチロシンキナーゼである。タンパク質構造は、ＳＨ３、ＳＨ２、および二部キナーゼドメインを含む。ＨＣＫ阻害剤は、慢性骨髄性白血病および急性リンパ性白血病の治療に有用であり得る。
【0101】
Ｋｉｔは、染色体４ｑｌ２によってコードされる１０９．９ｋＤａの膜貫通チロシンキナーゼである。Ｋｉｔは、メラニン形成細胞、肥満細胞、生殖細胞、および造血細胞の発生に重要な役割を果たしている。Ｋｉｔの異常な発現および／または活性化は、種々の病理学的状態に関係している。Ｋｉｔ阻害剤は、肥満細胞腫瘍、小細胞肺癌、精巣癌、消化管間質腫瘍（ＧＩＳＴ）、膠芽腫、星状細胞腫、神経芽細胞腫、女性生殖管の癌腫、神経外胚葉性肉腫、結腸直腸癌、上皮内癌などの悪性腫瘍、神経線維腫症、急性骨髄性白血病、急性リンパ性白血病、慢性骨髄性白血病、肥満細胞症、黒色腫、およびイヌ肥満細胞腫に関連するシュワン細胞新生物、ならびに喘息、慢性関節リウマチ、アレルギー性鼻炎、多発性硬化症、炎症性腸症候群、移植拒絶反応、および好酸球増加症を含む炎症性疾患を治療するのに有用であり得る。
【0102】
ＬＣＫは、染色体Ｉｐ３４．３によってコードされる５７．９ｋＤａの膜関連非受容体チロシンキナーゼである。タンパク質構造は、ＳＨ３およびＳＨ２ドメインを含む。ＬＣＫ阻害剤は、急性リンパ芽球性白血病、Ｔ細胞リンパ腫、リンパ球減少症、腎臓癌、結腸癌、重症複合型免疫不全、多発性硬化症、炎症性腸、およびＩ型糖尿病の治療に有用であり得る。
【0103】
血小板由来成長因子受容体（ＰＤＧＦ－Ｒ）は、血小板由来成長因子（ＰＤＧＦ）ファミリーのメンバーのための細胞表面チロシンキナーゼ受容体である。ＰＤＧＦサブユニット－Ａおよび－Ｂは、細胞増殖、細胞分化、細胞成長および発生、ならびに癌を含む多くの疾患を調節する重要な因子である。ＰＤＧＦ－Ｒには、アルファおよびベータの２つの形態があり、それぞれ異なる遺伝子によってコードされている。ＰＤＧＦＲαは、染色体４ｑｌ２によってコードされる１２２．７ｋＤａの膜貫通チロシンキナーゼである（記号：ＰＤＧＦＲＡ）。ＰＤＧＦＲβは、染色体５ｑ３１－ｑ３２によってコードされる１２４．０ｋＤａの膜貫通チロシンキナーゼである（記号：ＰＤＧＦＲＢ）。ＰＤＧＦＲ阻害剤は、特発性好酸球増加症候群、慢性好酸球性白血病、神経膠腫、胃腸間質腫瘍（ＧＩＳＴ）、若年性骨髄単球性白血病、転移性髄芽腫、アテローム発生、および再狭窄などの様々な疾患の治療に有用であり得る。
【0104】
Ｙｅｓは、染色体１８ｐｌ １．３１－ｐｌ １．２１によってコードされる６０．８ｋＤａのチロシンキナーゼである（記号：ＹＥＳｌ）。Ｙｅｓの構造は、ＳＨ３およびＳＨ２ドメインとそれに続くＴＫドメインとを含む。ＹＥＳ癌遺伝子は、Ｙａｍａｇｕｃｈｉ肉腫ウイルス遺伝子と相同性があり、Ｙｅｓのアミノ酸配列は、ＲｏｕｓｓａｒｃｏｍａウイルスのＳＲＣ遺伝子産物のそれと高度の相同性を示す。Ｙｅｓキナーゼは、ニューロン、精子、血小板、および上皮細胞を含む複数の哺乳動物細胞型において高度に発現されている。標的キナーゼＹｅｓは、食道扁平上皮癌を含む様々な癌において増幅され過剰発現される。Ｙｅｓ阻害剤は、食道扁平上皮癌を含む癌の治療に有用であり得る。
【0105】
一態様では、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、およびＶの化合物、好ましくはそれらの塩、プロドラッグ、および／または異性体を含む、化合物Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、Ｘ、ＸＩ、ＸＩＩ、ＸＩＩＩ、およびＸＩＶ（化合物Ｉ～ＸＩＶ）は、特に疾患または状態が自己免疫疾患または癌である場合、キナーゼ媒介疾患または状態の治療のための医薬の調製に使用することができる。
【0106】
投与される式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、およびＶの化合物、それらの塩、プロドラッグ、および／または異性体を含む、化合物Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、Ｘ、ＸＩ、ＸＩＩ、ＸＩＩＩ、およびＸＩＶ（化合物Ｉ～ＸＩＶ）の量は、化合物のＩＣ５０；化合物の生物学的半減期；対象の年齢、大きさ、体重；および対象に関連した状態などの要因を考慮に入れた標準的な手順によって決定することができる。一般に、臨床試行における日常的な実験は、各治療薬および各投与プロトコルに対する最適な治療効果の特定の範囲を決定し、特定の患者への投与は、患者の状態および初回投与に対する反応性に応じて有効かつ安全な範囲内に調節される。しかしながら、最終的な投与プロトコルは、患者の年齢、性別、状態、および体格などの要因を考慮して、担当医の判断に従って調節される。一般に、活性化合物の用量は、１日当たり約０．０１ｍｇ／ｋｇ～１日当たり約１０００ｍｇ／ｋｇの範囲であり得る。本明細書に記載の化合物は、単回または複数回用量で投与することができる。
【0107】
前臨床薬物動態
インビトロ代謝安定性：ヒト肝臓ミクロソームにおけるインビトロ代謝安定性研究を化合物Ｉ～ＸＩＩＩおよびダサチニブについて実施した（実験条件については実施例１７参照）。この研究からの結果を図１および表１に示す。
インビトロ代謝安定性：ヒト肝臓ミクロソームにおけるインビトロ代謝安定性研究を化合物Ｉ～ＸＩＩＩおよびダサチニブについて実施した（実験条件については実施例１７参照）。この研究からの結果を図１および表１に示す。
【0108】
化合物Ｉ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、Ｘ、ＸＩ、ＸＩＩ、およびＸＩＩＩは、ダサチニブと比較して有意に高い安定性を示した。化合物Ｉ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、Ｘ、ＸＩ、ＸＩＩ、およびＸＩＩＩについてのインビトロｔ１／２は、ダサチニブについての１６分と比較して全て＞５９分であった。化合物Ｉ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、Ｘ、ＸＩ、ＸＩＩ、およびＸＩＩＩに関する代謝安定性のこの有意な増加は、予想外であった。より長いインビトロ代謝安定性半減期（ｔ１／２）は、ダサチンｂ（ｄａｓａｔｉｎｂ）と比較してこれらの化合物についてのより長いインビボヒト血漿ｔ１／２の指標である。したがって、これらの化合物は、ダサチニブと比較してより好ましい薬物動態プロファイル、特により長いｔ１／２、より長い作用期間、より少ない初回通過効果、およびより高い経口バイオアベイラビリティを有すると予想される。化合物Ｉ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、Ｘ、ＸＩ、ＸＩＩ、およびＸＩＩＩの固有クリアランスは、ダスタチニブの８８μＬ／分／ｍｇと比較して２４μＬ／分／ｍｇ未満であった。
【0109】
驚くべきことに、化合物ＩＩＩ、ダサチニブの重水素標識類似体は、ダサチニブと同様の代謝安定性を有することが見出された（図１、表１）。２－クロロ－６－メチルフェニル環の４位でのヒドロキシル化が酸化的代謝の経路であるヒト肝ミクロソームにおけるダサチニブの報告されたインビトロ代謝を考えると、これは予想外の発見であった（Ｃｈｒｉｓｔｏｐｈｅｒ ＬＪ ｅｔ ａｌ．Ｂｉｏｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ ［１４Ｃ］ｄａｓａｔｉｎｉｂ：ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｓｔｕｄｉｅｓ ｉｎ ｒａｔ，ｍｏｎｋｅｙ，ａｎｄ ｈｕｍａｎ ａｎｄ ｄｉｓｐｏｓｉｔｉｏｎ ａｆｔｅｒ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ ｔｏ ｒａｔｓ ａｎｄ ｍｏｎｋｅｙ．Ｄｒｕｇ Ｍｅｔａｂ．Ｄｉｓｐｏｓ．２００７；３６（７）：１３４１－１３５６）。
【0110】
化合物Ｉ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、Ｘ、ＸＩ、ＸＩＩ、およびＸＩＩＩは、ダサチニブと比較してヒト肝臓ミクロソームにおいて予想外に有意に増加した代謝安定性を示し、重水素置換は、ダサチニブと比較してさらなる予想外の結果をもたらした。
＊化合物Ｉ～ＸＩＩＩ（１μＭ）を、１０ｍＭ ＭｇＣｌ２、１ｍＭ ＮＡＤＰＨ、および２ｍＭ ＵＤＰＧＡを含有する０．１Ｍリン酸緩衝液中のヒト肝臓ミクロソーム（０．５ｍｇ／ｍＬ）と３７℃で６０分まで様々な時点でインキュベートした。様々な時点での残りの試験化合物の濃度をＬＣ－ＭＳ／ＭＳによって決定した。
【表1】
＊化合物Ｉ～ＸＩＩＩ（１μＭ）を、１０ｍＭ ＭｇＣｌ２、１ｍＭ ＮＡＤＰＨ、および２ｍＭ ＵＤＰＧＡを含有する０．１Ｍリン酸緩衝液中のヒト肝臓ミクロソーム（０．５ｍｇ／ｍＬ）と３７℃で６０分まで様々な時点でインキュベートした。様々な時点での残りの試験化合物の濃度をＬＣ－ＭＳ／ＭＳによって決定した。
【0111】
インビボ薬物動態学：化合物ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、Ｘ、ＸＩ、およびダサチニブのインビボ薬物動態学的プロファイルを、２－ｉｎ－１投薬の技術を使用して経口および静脈内投与後にＳｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラットにおいて調査した（実験条件については実施例１８参照）。化合物ＩＶをダサチニブと共に投薬し、化合物Ｖを化合物ＩＩＩと共に投薬し、化合物Ｘをダサチニブと共に投薬し、化合物ＸＩを化合物ＩＩＩと共に投薬した。結果を図２および３ならびに表２および３に示す。
Ｃｍａｘ－経口投薬後の血漿中最大濃度；Ｔｍａｘ－経口投薬後の最大血漿濃度までの時間；ＡＵＣｌａｓｔ－最後の検出可能な濃度までの血漿濃度対時間曲線下の面積；ＡＵＣｉｎｆ－時間無限大に外挿した血漿濃度対時間曲線下の面積；ｔ１／２－血漿濃度半減期；ＣＬ－血漿クリアランス；Ｖ－配給量；Ｆ（％）－正規化されたＡＵＣｉｎｆ（経口）対ＡＵＣｉｎｆ（静脈内）用量によって決定される経口バイオアベイラビリティパーセント。
Ｃｍａｘ－経口投薬後の血漿中最大濃度；Ｔｍａｘ－経口投薬後の最大血漿濃度までの時間；ＡＵＣｌａｓｔ－最後の検出可能な濃度までの血漿濃度対時間曲線下の面積；ＡＵＣｉｎｆ－時間無限大に外挿した血漿濃度対時間曲線下の面積；ｔ１／２－血漿濃度半減期；ＣＬ－血漿クリアランス；Ｖ－配給量；Ｆ（％）－正規化されたＡＵＣｉｎｆ（経口）対ＡＵＣｉｎｆ（静脈内）用量によって決定される経口バイオアベイラビリティパーセント。
【表2】
Ｃｍａｘ－経口投薬後の血漿中最大濃度；Ｔｍａｘ－経口投薬後の最大血漿濃度までの時間；ＡＵＣｌａｓｔ－最後の検出可能な濃度までの血漿濃度対時間曲線下の面積；ＡＵＣｉｎｆ－時間無限大に外挿した血漿濃度対時間曲線下の面積；ｔ１／２－血漿濃度半減期；ＣＬ－血漿クリアランス；Ｖ－配給量；Ｆ（％）－正規化されたＡＵＣｉｎｆ（経口）対ＡＵＣｉｎｆ（静脈内）用量によって決定される経口バイオアベイラビリティパーセント。
【表3】
Ｃｍａｘ－経口投薬後の血漿中最大濃度；Ｔｍａｘ－経口投薬後の最大血漿濃度までの時間；ＡＵＣｌａｓｔ－最後の検出可能な濃度までの血漿濃度対時間曲線下の面積；ＡＵＣｉｎｆ－時間無限大に外挿した血漿濃度対時間曲線下の面積；ｔ１／２－血漿濃度半減期；ＣＬ－血漿クリアランス；Ｖ－配給量；Ｆ（％）－正規化されたＡＵＣｉｎｆ（経口）対ＡＵＣｉｎｆ（静脈内）用量によって決定される経口バイオアベイラビリティパーセント。
【0112】
経口投与後、化合物ＩＶ、Ｖ、Ｘ、およびＸＩは、Ｃｍａｘが１５±５および７±７ｎｇ／ｍＬであるダサチニブ、ならびにＣｍａｘが９±６および１１±１１ｎｇ／ｍＬであるダサチニブの重水素類似体、化合物ＩＩＩと比較して、それぞれ驚くほど有意に高い８２±１３、３５±１９、９３±１０１、および１０２±８６ｎｇ／ｍＬのＣｍａｘ値を示した。化合物ＩＶ、Ｖ、Ｘ、およびＸＩの経口バイオアベイラビリティは、３．９±１および９．８±３．６パーセントバイオアベイラビリティ（Ｆ）のダサチニブの経口バイオアベイラビリティ、経口バイオアベイラビリティが６±０．９および７．２±４．２パーセントの化合物ＩＩＩと比較して、１８．９±６．７、１１．１±４．３、１８．９±２、および２４±３３．１パーセントバイオアベイラビリティであった。この研究の結果は、化合物ＩＶ、Ｖ、Ｘ、およびＸＩが、ダサチニブおよび化合物ＩＩＩよりも驚くほどはるかに低い静脈内血漿クリアランスを有することを示している。このデータは、化合物ＩＶ、Ｖ、Ｘ、およびＸＩがダサチニブまたは化合物ＩＩＩのいずれよりも有意により安定であり、有意に低い固有クリアランス値を有することを示したインビトロ代謝安定性データと一致する。
【0113】
さらに、化合物ＩＶ、Ｖ、Ｘ、およびＸＩは、ダサチニブおよび化合物ＩＩＩよりも驚くほど有意に低い静脈内分布量の値を有することが見出され、これらの化合物がダサチニブおよび化合物ＩＩＩと比較して組織に広く分布していないことを示唆する。さらに、これは、これらの化合物が薬物誘発臓器毒性に関してダサチニブよりも低い可能性を有することを示唆している。
【0114】
これらの結果は、化合物ＩＶ、Ｖ、Ｘ、およびＸＩを生成するためのピリミジン－４－イル基への化学置換が、ダサチニブと比較してこれらの新規の化合物の薬物動態プロファイルに予想外かつ有意な変化をもたらすことを示している。
【0115】
インビボ組織分布：強制経口によって投薬された化合物Ｘ、ＸＩ、およびダサチニブについて、肺組織対血漿中の親化合物濃度の比を決定するためにマウスで研究を実施した（実験条件については実施例１９参照）。結果を図４および５に示す。
【0116】
試験した全ての時点において、化合物ＸおよびＸＩは、ダサチニブと比較した場合、それらの血漿濃度と比較して肺組織中の親化合物濃度レベルの比が有意に低いことを示した（図４および５）。これらの結果は、化合物ＸおよびＸＩがダサチニブよりも肺組織中に分布が少ないことを示している。
【0117】
ダサチニブは、胸水および肺高血圧症などの深刻な呼吸器毒性と関連しており、これらは肺組織におけるダサチニブの蓄積に起因している（Ｑｕｉｎｔａｓ－Ｃａｒｄａｍａ Ａ ｅｔ ａｌ．Ｐｌｅｕｒａｌ ｅｆｆｕｓｉｏｎ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｃｈｒｏｎｉｃ ｍｙｅｌｏｇｅｎｏｕｓ ｌｅｕｋｅｍｉａ ｔｒｅａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｄａｓａｔｉｎｉｂ ａｆｔｅｒ ｉｍａｔｉｎｉｂ ｆａｉｌｕｒｅ．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ ２００７；２５（２５）：３９０８－１４；Ｗａｎｇ Ｘ ｅｔ ａｌ．Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｄｏｓｉｎｇ ｒｅｇｉｍｅｎ ｏｎ ｔｈｅ ｓａｆｅｔｙ ａｎｄ ｅｆｆｉｃａｃｙ ｏｆ ｄａｓａｔｉｎｉｂ：ｒｅｔｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ ｅｘｐｏｓｕｒｅ－ｒｅｓｐｏｎｓｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ａ Ｐｈａｓｅ ＩＩＩ ｓｔｕｄｙ．Ｃｌｉｎ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ，２０１３；５：８５－９７；Ｇｕｉｇｎａｂｅｒｔ Ｃ ｅｔ ａｌ．Ｄａｓａｔｉｎｉｂ ｉｎｄｕｃｅｓ ｌｕｎｇ ｖａｓｃｕｌａｒ ｔｏｘｉｃｉｔｙ ａｎｄ ｐｒｅｄｉｓｐｏｓｅｓ ｔｏ ｐｕｌｍｏｎａｒｙ ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ．Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ ２０１６；１２６（９）：３２０７－１８；Ｉｕｒｌｏ Ａ，ｅｔ ａｌ．Ｐｌｅｕｒａｌ ｅｆｆｕｓｉｏｎ ａｎｄ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｒｅｓｐｏｎｓｅ ｉｎ ｄａｓａｔｉｎｉｂ－ｔｒｅａｔｅｄ ｃｈｒｏｎｉｃ ｍｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋｅｍｉａ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｉｎ ａ ｒｅａｌ－ｌｉｆｅ Ｉｔａｌｉａｎ ｍｕｌｔｉｃｅｎｔｅｒ ｓｅｒｉｅｓ．Ａｎｎ Ｈｅｍａｔｏｌ．２０１７；Ｏｃｔ ２．Ｄｏｉ：１０．１００７／ｓｏｏ２７７－０１７－３１４４－１）。
【0118】
したがって、血漿から肺組織への化合物ＸおよびＸＩの予想外に有意に低い分布は、これらの化合物が肺組織に蓄積する可能性が低いこと、したがってダサチニブと比較して薬物誘発性肺毒性の可能性が低いことを示唆する。
【0119】
併用療法
一態様では、投与される組成物は、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、および／またはＶのうちの１つ以上の化合物、好ましくは、それらの塩、プロドラッグ、および／または異性体を含む、化合物Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、Ｘ、ＸＩ、ＸＩＩ、ＸＩＩＩ、および／またはＸＩＶ（化合物Ｉ～ＸＩＶ）のうちの１つ以上、より好ましくは化合物ＩＶ、Ｖ、Ｘ、および／またはＸＩのうちの１つ以上を含む、本発明の複数の化合物、ならびに同じ疾患または状態に対して他の治療的に有効な薬物を含み得る複数の異なる薬理学的に活性な化合物を含み得、化合物は、疾患の徴候に対して相加的または相乗的な効果を有する。
一態様では、投与される組成物は、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、および／またはＶのうちの１つ以上の化合物、好ましくは、それらの塩、プロドラッグ、および／または異性体を含む、化合物Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、Ｘ、ＸＩ、ＸＩＩ、ＸＩＩＩ、および／またはＸＩＶ（化合物Ｉ～ＸＩＶ）のうちの１つ以上、より好ましくは化合物ＩＶ、Ｖ、Ｘ、および／またはＸＩのうちの１つ以上を含む、本発明の複数の化合物、ならびに同じ疾患または状態に対して他の治療的に有効な薬物を含み得る複数の異なる薬理学的に活性な化合物を含み得、化合物は、疾患の徴候に対して相加的または相乗的な効果を有する。
【0120】
１つの好ましい態様では、本発明は、動物またはヒトの対象におけるキナーゼ機能障害媒介疾患または状態を治療するための方法であって、同じ疾患または状態を治療するための１つ以上の他の療法と併用して、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、および／またはＶを有する１つ以上の化合物、好ましくは化合物Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、Ｘ、ＸＩ、ＸＩＩ、ＸＩＩＩ、および／またはＸＩＶ（化合物Ｉ～ＸＩＶ）のうちの１つ以上、より好ましくは化合物ＩＶ、Ｖ、Ｘ、および／またはＸＩのうちの１つ以上、それらの塩、プロドラッグ、および／または異性体の有効量を対象に投与することを伴う、方法を提供する。他の療法は、（外科手術などの）医療処置、治療薬、および／または放射線を含み得る。治療薬としては、化学療法剤、生物製剤、および免疫療法剤が挙げられる。併用療法は、本明細書に記載の化合物のうちの１つ以上と１つ以上の他の治療薬との異なる時点での投与または同時投与を含み得る。いくつかの実施形態では、投薬量は、本発明の化合物または組み合わせて使用される他の治療薬のうちの１つ以上に対して変更されてもよく、そのような変更は、化合物または単独で使用される療法に対する投薬量の減少である。
【0121】
併用での使用は、他の療法または薬物が、１、２、３、もしくは４～２４時間以内などの短期間内、またはそのような１～２日、２～４日、４～７日、もしくは１～４週間の長期間内の異なる時間に投与され得る他の医療処置、治療薬、および療法との使用を含むことが理解される。本発明の化合物の使用は、医療処置の前後に、短期間または長期間内に化合物が投与される、外科手術などの医療処置と併用して、対象に対して１回またはまれに実行することができる。
【0122】
投与
方法および化合物は、典型的には、キナーゼ媒介疾患または状態を有するヒト対象のための治療において使用される。しかしながら、それらはまた、他の動物対象における類似または同一の徴候を治療するためにも使用され得る。これに関連して、「対象」および「動物対象」などの用語は、ヒトおよびヒト以外の脊椎動物、すなわち、ヒト以外の霊長類、変種、および市販の動物、例えばウマ、ウシ、ブタ、ヒツジ、げっ歯類、ならびにペット、例えば、イヌおよびネコなどの哺乳動物を指す。
方法および化合物は、典型的には、キナーゼ媒介疾患または状態を有するヒト対象のための治療において使用される。しかしながら、それらはまた、他の動物対象における類似または同一の徴候を治療するためにも使用され得る。これに関連して、「対象」および「動物対象」などの用語は、ヒトおよびヒト以外の脊椎動物、すなわち、ヒト以外の霊長類、変種、および市販の動物、例えばウマ、ウシ、ブタ、ヒツジ、げっ歯類、ならびにペット、例えば、イヌおよびネコなどの哺乳動物を指す。
【0123】
式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、およびＶの化合物、好ましくは化合物Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、Ｘ、ＸＩ、ＸＩＩ、ＸＩＩＩ、および／またはＸＩＶ、より好ましくは化合物ＩＶ、Ｖ、Ｘ、およびＸＩは、場合によっては塩を形成してもよく、それらも本発明の範囲内である。本明細書で用いられるとき、「塩」という用語は、無機および／または有機の酸ならびに塩基と形成された酸性および／または塩基性の塩を意味する。
【0124】
例示的な酸付加塩としては、アセタート（例えば、酢酸またはトリハロ酢酸、例えばトリフルオロ酢酸で形成されたもの）、アジパート、アルギナート、アスコルバート、アスパルタート、ベンゾアート、シトラート、カンホラート、カンファースルホナート、シクロペンタンプロピオナート、ジグルコナート、ドデシルサルファート、エタンスルホナート、フマラート、グルコヘプタノアート、グリセロホスファート、ヘミサルファート、ヘプタノアート、ヘキサノアート、ヒドロクロライド、ヒドロブロマイド、２－ヒドロキシエタンスルホナート、ラクタート、マレアート、メタンスルホナート、ニコチナート、ニトラート、オキサラート、ペクチナート、ホスファート、ピクラート、サリチラート、プロピオナート、タルトラート、チオシアナート、トルエンスルホナートなどが挙げられる。
【0125】
例示的な塩基性塩としては、アンモニウム塩、ナトリウム、リチウム、およびカリウム塩などのアルカリ金属塩、カルシウムおよびマグネシウム塩などのアルカリ土類金属塩、ならびに有機塩基との塩（例えば有機アミン）などが挙げられる。
【0126】
化合物Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、Ｘ、ＸＩ、ＸＩＩ、ＸＩＩＩ、および／またはＸＩＶ（化合物Ｉ～ＸＩＶ）を含む式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、およびＶの化合物、それらの塩、プロドラッグ、および／または異性体は、静脈内、筋肉内、皮下、経口、経皮、経粘膜、直腸内、または吸入によって投与することができる。静脈内投与の場合、用量は、ボーラスまたは注入として投与し得る。
【0127】
経口使用のための医薬組成物は、例えば、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、および／またはＶのうちの１つ以上の化合物、好ましくは化合物Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、Ｘ、ＸＩ、ＸＩＩ、ＸＩＩＩ、および／またはＸＩＶのうちの１つ以上、より好ましくは化合物ＩＶ、Ｖ、Ｘ、および／またはＸＩのうちの１つ以上、それらの塩、プロドラッグ、および／または異性体を固体賦形剤と併用して、任意に得られた混合物を粉砕し、必要に応じて、好適な補助剤を添加した後に顆粒混合物を加工して錠剤または糖衣錠コアを得ることによって得られ得る。好適な賦形剤は、特に、ラクトース、スクロース、マンニトール、またはソルビトールを含む糖などの充填剤；セルロース製剤、例えば、トウモロコシデンプン、小麦デンプン、米デンプン、ポテトデンプン、ゼラチン、トラガカントゴム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム（ＣＭＣ）、および／またはポリビニルピロリドン（ＰＶＰ：ポビドン）である。必要に応じて、架橋ポリビニルピロリドン、寒天、もしくはアルギン酸などの崩壊剤、またはアルギン酸ナトリウムなどのその塩を添加してもよい。
【0128】
注射のためには、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、およびＶの化合物、好ましくは化合物Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、Ｘ、ＸＩ、ＸＩＩ、ＸＩＩＩ、およびＸＩＶ、より好ましくは化合物ＩＶ、Ｖ、Ｘ、およびＸＩ、それらの塩、プロドラッグ、および／または異性体は、滅菌液体溶液、好ましくは生理食塩水、ハンクス液、またはリンゲル液などの物理的に適合する緩衝液または溶液中に処方される。さらに、化合物は、固体形態で処方され、使用直前に再溶解または懸濁されてもよい。凍結乾燥形態も生成することができる。
【0129】
本明細書に記載の化合物の投与は、化学療法または放射線と同時にまたは連続して起こり得る。医学的な疾患または状態を治療するための他の治療薬または薬物の投与は、異なる投与経路または同じ投与経路によるものであり得ることが理解される。
【0130】
別の態様では、任意の投与経路に対する併用療法の使用は、任意の製剤で一緒に同じ投与経路によって送出されるか、または１時間、２時間、３時間、最大２４時間内に別々の製剤で一緒に投与されるか、または異なる投与経路によって送出される、本発明の化合物および１つ以上の他の薬物治療薬の送出を含む。
【0131】
本発明はまた、（ａ）本明細書に開示されている本発明の化合物である、遊離形態または薬学的に許容される塩形態の第１の薬物、および（ｂ）少なくとも１つの助剤を含む薬剤の組み合わせ、例えばキットを提供する。キットは、投与説明書を含み得る。
【0132】
一般的な合成方法
本発明はまた、本発明の新規な重水素濃縮化合物および非濃縮化合物を調製するためのプロセスも含む。記載された反応において、それらが最終生成物において望まれる場合、反応性官能基、例えばヒドロキシ、アミノ、イミノ、チオ、またはカルボキシ基を保護し、それらの反応への望ましくない関与を回避することが必要であり得る。従来の保護基を標準的な慣例に従って使用することができ、例えば、ＴＷ Ｇｒｅｅｎｅ ａｎｄ ＰＧＭ Ｗｕｔｓｉｎ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ，１９９１を参照のこと。
本発明はまた、本発明の新規な重水素濃縮化合物および非濃縮化合物を調製するためのプロセスも含む。記載された反応において、それらが最終生成物において望まれる場合、反応性官能基、例えばヒドロキシ、アミノ、イミノ、チオ、またはカルボキシ基を保護し、それらの反応への望ましくない関与を回避することが必要であり得る。従来の保護基を標準的な慣例に従って使用することができ、例えば、ＴＷ Ｇｒｅｅｎｅ ａｎｄ ＰＧＭ Ｗｕｔｓｉｎ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ，１９９１を参照のこと。
【0133】
例示的化合物を含む式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、およびＶの化合物は、一般に、当業者には理解されるように、以下のスキーム１（および他の適用可能なスキーム）の試薬に適切な修飾を行うことによって合成することができる。非重水素化中間体は、一般に市販されており、したがって適切な市販の中間体を使用して、例えば化合物７（例えばスキーム８～１４の化合物７Ｈを参照）で合成を開始することができることに留意されたい。
【0134】
化合物Ｉは、スキーム１に示す方法で合成することができる。
【化43】
【0135】
化学プロセスの初期工程は、４－ブロモ－２－クロロ－６－メチルアニリン（１）をアリルブロマイドと反応させて中間体２を形成することを伴う。約－７０℃の窒素ガス下で乾燥テトラヒドロフラン中の中間体２に、ｎ－ブチルリチウム（１モルの中間体２に対して約１．５モルのｎ－ブチルリチウム）を滴下する。約４０分後、中間リチウム錯体をｄ１－メタノール（ＣＨ３ＯＤ；９９％重水素、＃５５０５７４；ロット＃ＭＫＢＷ０３５５Ｖ、Ａｌｄｒｉｃｈ，Ｓｔ Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）でクエンチして、４位に重水素を選択的に組み込み、中間体３を得る。アリル保護基を標準的手順により除去してアニリン中間体４を得る。中間体４を塩化３－エトキシアクリロイルと反応させてアクリルアミド中間体５を形成し、次いでこれをＮ－ブロモスクシンイミドおよびチオ尿素で処理してチアゾール中間体６を形成する。チアゾール中間体６を塩基性水素化ナトリウムで処理し、続いて４，６－ジクロロ－２－メチルピリミジンを添加して、２－［（６－クロロ－２－メチルピリミジン－４－イル）アミノ］－Ｎ－（２－クロロ－４－ジュウテロ－６－メチルフェニル）チアゾール－５－カルボキサミド（中間体７）を形成する。中間体７をピペリジンおよびＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミンと反応させて所望の生成物化合物Ｉ（８）を形成する。
【0136】
化合物ＩＩは、スキーム２に示す方法で合成することができる。
【化44】
【0137】
化合物ＩＩの合成において、この方法の最初の６工程は、中間体７を生成するための化合物Ｉの合成において使用されたものと同一である。合成の最後の工程は、４－ヒドロキシピペリジンおよびＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミンを使用して中間体７と反応させて所望の生成物化合物ＩＩを形成する。
【0138】
化合物ＩＩＩは、スキーム３に示す方法で合成することができる。
【化45】
【0139】
化合物ＩＩＩの合成において、この方法の最初の６工程は、中間体７を生成するための化合物Ｉの合成において使用されたものと同一である。合成の最後の工程は、１－（２－ヒドロキシエチル）ピペラジン（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ；Ｓｔ Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）およびＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミンを使用して中間体７と反応させて所望の付加生成物化合物ＩＩＩを形成する。
【0140】
化合物ＩＶは、スキーム４に示す方法で合成することができる。
【化46】
【0141】
化合物ＩＶの合成において、この方法の最初の６工程は、中間体７を生成するための化合物Ｉの合成において使用されたものと同一である。中間体７を（Ｓ）－３－ヒドロキシピロリジンおよびＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミンと反応させて所望の生成物化合物ＩＶを形成する。
【0142】
化合物Ｖは、スキーム５に示す方法で合成することができる。
【化47】
【0143】
化合物Ｖの合成において、この方法の最初の６工程は、中間体７を生成するための化合物Ｉの合成において使用されたものと同一である。中間体７を（Ｒ）－３－ヒドロキシピロリジンおよびＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミンと反応させて所望の生成物化合物Ｖを形成する。
【0144】
化合物ＶＩは、スキーム６に示す方法で合成することができる。
【化48】
【0145】
化合物ＶＩの合成において、この方法の最初の６工程は、中間体７を生成するための化合物Ｉの合成において使用されたものと同一である。中間体７をジオキサン中でｔｅｒｔ－ブチル（Ｓ）－ピロリジン－３－イルカルバマートおよびＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミンと反応させて化合物３００－９８を形成する。化合物３００－９８を脱保護して生成物化合物ＶＩを得る。
【0146】
化合物ＶＩＩは、スキーム７に示す方法で合成することができる。
【化49】
【0147】
化合物ＶＩＩの合成において、この方法の最初の６工程は、中間体７を生成するための化合物Ｉの合成において使用されたものと同一である。中間体７をジオキサン中でｔｅｒｔ－ブチル（Ｒ）－ピロリジン－３－イルカルバマートおよびＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミンと反応させて化合物３００－１００を形成する。化合物３００－１００を脱保護して生成物化合物ＶＩＩを得る。
【0148】
化合物ＶＩＩＩは、スキーム８に示す方法で合成することができる。
【化50】
【0149】
化合物ＶＩＩＩの合成において、市販の中間体７Ｈ（Ｃｏｍｂｉ－Ｂｌｏｃｋｓ，Ｉｎｃ．，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）をジオキサン中でピペリジンおよびＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミンと反応させて所望の生成物化合物ＶＩＩＩを形成する。
【0150】
化合物ＩＸは、スキーム９に示す方法で合成することができる。
【化51】
【0151】
化合物ＩＸの合成において、市販の中間体７Ｈをジオキサン中の４－ヒドロキシピペリジンおよびＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミンと反応させて所望の生成物化合物ＩＸを形成する。
【0152】
化合物Ｘは、スキーム１０に示す方法で合成することができる。
【化52】
【0153】
化合物Ｘの合成において、市販の中間体７Ｈをジオキサン中の（Ｓ）－ピロリジン－３－オールヒドロクロライドおよびＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミンと反応させて所望の生成物化合物Ｘを形成する。
【0154】
化合物ＸＩは、スキーム１１に示す方法で合成することができる。
【化53】
【0155】
化合物Ｘの合成において、市販の中間体７Ｈをジオキサン中の（Ｒ）－ピロリジン－３－オールヒドロクロライドおよびＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミンと反応させて所望の生成物化合物ＸＩを形成する。
【0156】
化合物ＸＩＩは、スキーム１２に示す方法で合成することができる。
【化54】
【0157】
化合物ＸＩＩの合成において、市販の中間体７Ｈをジオキサン中のｔｅｒｔ－ブチル（Ｓ）－ピロリジン－３－イルカルバマートおよびＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミンと反応させて中間体３００－９２を形成する。中間体３００－９２を脱保護して化合物ＸＩＩを生成する。
【0158】
化合物ＸＩＩＩは、スキーム１３に示す方法で合成することができる。
【化55】
【0159】
化合物ＸＩＩＩの合成において、市販の中間体７Ｈをジオキサン中のｔｅｒｔ－ブチル（Ｒ）－ピロリジン－３－イルカルバミン酸およびＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミンと反応させて中間体３００－９２を形成する。中間体３００－９２を脱保護して化合物ＸＩＩを生成する。
【0160】
化合物ＸＩＶは、スキーム１４に示す方法で合成することができる。
【化56】
【0161】
化合物ＸＩＶの合成において、市販の中間体７Ｈをジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中でピロリジンおよびＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミンと反応させて化合物ＸＩＶを形成する。
【0162】
例
以下に本発明に関する実施例を説明する。より多くの場合において、代替の技術が使用され得る。実施例は、例示を意図したものであり、本発明の範囲を限定または限定するものではない。いくつかの例では、質量分析の結果は、ブロモまたはクロロ置換基を有する化合物など、化合物が分子中の原子の同位体分布に起因して２以上の値を有し得ることを示した。
例１
Ｎ－（２－クロロ－４－ジュウテリオ－６－メチル－フェニル）－２－［［２－メチル－６－（１－ピペリジル）ピリミジン－４－イル］アミノ］チアゾール－５－カルボキサミド（化合物Ｉ）の合成
以下に本発明に関する実施例を説明する。より多くの場合において、代替の技術が使用され得る。実施例は、例示を意図したものであり、本発明の範囲を限定または限定するものではない。いくつかの例では、質量分析の結果は、ブロモまたはクロロ置換基を有する化合物など、化合物が分子中の原子の同位体分布に起因して２以上の値を有し得ることを示した。
例１
Ｎ－（２－クロロ－４－ジュウテリオ－６－メチル－フェニル）－２－［［２－メチル－６－（１－ピペリジル）ピリミジン－４－イル］アミノ］チアゾール－５－カルボキサミド（化合物Ｉ）の合成
【0163】
Ｎ，Ｎ－ジアリル－４－ブロモ－２－クロロ－６－メチルアニリン（２）の調製：２５０ｍＬのフラスコに、０℃で４－ブロモ－２－クロロ－６－メチルアニリン（３ｇ、１３．６１ｍｍｏｌ）、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）（５０ｍＬ）、および炭酸ナトリウム（６．３７ｇ、６０．０９ｍｍｏｌ、４．４当量）を添加した。撹拌しながら、アリルブロマイド（９．４ｍＬ、１０８．６２ｍｍｏｌ、８当量）を０～５℃の窒素下で滴下した。添加後、混合物を室温で２０分間撹拌し、ＴＬＣ分析が出発物質の存在を示さなかったときに１２０℃の窒素下で３時間加熱した。次いで混合物を室温に冷却し、冷水に注ぎ入れ、続いて酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）（２×１５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブライン（３×１００ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（硫酸ナトリウム、Ｎａ２ＳＯ４）、減圧下で濃縮して黒褐色の液体残渣を得、これをカラムクロマトグラフィー（ヘキサンのみ）により精製して、淡褐色液体として化合物２（３．９ｇ、９５％）を得た。
【0164】
Ｎ，Ｎ－ジアリル－２－クロロ－４－ジュウテロ－６－メチルアニリン（３）の調製：－７０℃の窒素下でテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）（４０ｍＬ）中の化合物２（２ｇ、６．６５ｍｍｏｌ）の溶液へｎ－ブチルリチウム２．５Ｍ溶液（４ｍｌ、１０ｍｍｏｌ）を滴下した。添加後、混合物を－７０℃で４０分間撹拌し、次いで重水素化メタノール（ＭｅＯＤ）（２ｍＬ、４９．２ｍｍｏｌ、９９％重水素、＃５５０５７４；ロット＃ＭＫＢＷ０３５５Ｖ、Ａｌｄｒｉｃｈ，Ｓｔ Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）を滴下することによってクエンチした。 。次いで、薄層クロマトグラフ（ＴＬＣ）分析（ヘキサンのみ）が反応が完了したことを示したときに、反応混合物を４０分かけて－７０℃から－２０℃まで撹拌した。混合物を冷水（１００ｍＬ）に注ぎ入れ、続いてＥｔＯＡｃ（２×１００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、減圧下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ヘキサンのみ、次いでＥｔＯＡｃ：ヘキサン；１：２０）で精製して、化合物３（１．３８ｇ、９３％）を淡黄色の液体として得た。１Ｈ核磁気共鳴（ＮＭＲ）（ＣＤＣｌ３）：７．２０（ｓ、１Ｈ）、７．０９（ｓ、１Ｈ）、５．９５（ｍ、２Ｈ）、５．２１～５．２０（ｍ、４Ｈ）、３．７９（ｄ、４Ｈ）、２．４１（ｓ、３Ｈ）。１Ｈ ＮＭＲは、化合物３の４位にプロトンシグナルがないことを示した。
【0165】
２－クロロ－４－ジュウテロ－６－メチルアニリン（４）の調製：ＤＣＭ（１３０ｍＬ）中のアニリン３（３ｇ、１３．３１ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、Ｎ，Ｎ－ジメチルバルビツール酸（８．３ｇ、５３．１６ｍｍｏｌ、４当量）およびＰｄ（ＰＰｈ３）４（０．５ｇ、０．４３ｍｍｏｌ、０．０３２当量）を添加した。混合物を窒素下で４時間加熱還流した。ＴＬＣ分析（ＥｔＯＡｃ：ヘキサン；１：９）は、反応が完了したことを示した。混合物を室温に冷却した後、減圧下で濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃ（１２０ｍＬ）に溶解し、有機層を１０％重炭酸ナトリウム（ＮａＨＣＯ３）溶液（４×６０ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：ヘキサン；１：９）で精製して、所望のアニリン４（１．６７ｇ、８８％）を薄茶色の液体として得た。
【0166】
Ｎ－（２－クロロ－４－ジュウテロ－６－メチルフェニル）－３－エトキシアクリルアミド（５）の調製：０～５℃の化合物４（４６０ｍｇ、３．２３ｍｍｏｌ）、ピリジン（０．４ｍＬ、４．９５ｍｍｏｌ、１．５当量）、およびＴＨＦ（２５ｍＬ）の混合物に、塩化３－エトキシアクリロイル（６６６ｍｇ、４．９５ｍｍｏｌ、１．５当量）を滴下した。添加後、混合物を室温の窒素下で一晩撹拌した。ＴＬＣ分析（ＥｔＯＡｃ：ヘキサン；１：２）は、出発物質がないことを示した。ＥｔＯＡｃ（８０ｍＬ）および水（８０ｍＬ）を混合物に添加し、有機層を分離し、１Ｎ塩酸（ＨＣｌ）溶液、水、および５％ＮａＨＣＯ３溶液で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮して、化合物５を白色固体として得、これを精製することなく次の工程に使用した。
【0167】
２－アミノ－Ｎ－（２－クロロ－４－ジュウテロ－６－メチルフェニル）チアゾール－５－カルボキサミド（６）の調製：アクリルアミド５（９００ｍｇ、３．７４ｍｍｏｌ）、１，４－ジオキサン（７ｍＬ）、および水（７ｍＬ）の混合物に、０℃でＮ－ブロモスクシンイミド（７３０ｍｇ、４．１０ｍｍｏｌ、１．１当量）を添加した。スラリーを室温で３時間撹拌した。チオ尿素（２８５ｍｇ、３．７５ｍｍｏｌ、１当量）を添加し、混合物を８０℃に加熱した。３時間後、混合物を室温に冷却し、続いて濃水酸化アンモニウム溶液（１ｍＬ）を添加した。撹拌後、ＥｔＯＡｃ（８０ｍＬ）および水（８０ｍＬ）を混合物に添加した。有機層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ（８０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を水で洗浄し、乾燥させ（Ｎａ２ＳＯ４）、濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ－ヘキサン、１：４～１：２）にかけて、化合物６（０．８２ｇ、８２％）を薄茶色の固体として得た。液体クロマトグラフィー質量分析（ＬＣ－ＭＳ）分析は、２６９．１４（Ｍ＋Ｈ）にプロトン化された親イオンを示した。
【0168】
２－［（６－クロロ－２－メチルピリミジン－４－イル）アミノ］－Ｎ－（２－クロロ－４－ジュウテロ－６－メチルフェニル）チアゾール－５－カルボキサミド（７）の調製：０℃の水素化ナトリウム（６０％、６７ｍｇ、１．６７ｍｍｏｌ）とＴＨＦ（１５ｍＬ）との混合物に、化合物６（１５０ｍｇ、０．５６ｍｍｏｌ）を少しずつ添加した。混合物を０℃で３０分間撹拌し、４，６－ジクロロ－２－メチルピリミジン（１０９ｍｇ、０．６７ｍｍｏｌ、１．２当量）の溶液を滴下した。得られた混合物を室温で３時間撹拌したところＬＣ－ＭＳ分析が出発物質がないことを示した。混合物を濃縮して粗化合物７を得、これを精製することなく次の工程に使用した。
【0169】
Ｎ－（２－クロロ－４－ジュウテロ－６－メチルフェニル）－２－［［２－メチル－６－（ピペリジン－１－イル）ピリミジン－４－イル］アミノ］チアゾール－５－カルボキサミド（８、化合物Ｉ）の調製：ジオキサン（１０ｍＬ）中の粗化合物７（約０．５６ｍｍｏｌ）の混合物に、室温でピペリジン（１４３ｍｇ、１．６８ｍｍｏｌ、３当量）およびＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ）（２１７ｍｇ、１．６８ｍｍｏｌ、３当量）を添加した。混合物を８５～９０℃の窒素下で２０時間撹拌した。ＬＣ－ＭＳ分析は、生成物ピークを示した。混合物は、透明な溶液ではなかった。混合物を濃縮乾固し、２０％ＨＰＬＣグレードの水を含有する５０ｍＬのアセトニトリルに懸濁した。次いで、混合物を４０００ｒｐｍで１５分間遠心分離した。ペレットをアセトニトリルに再懸濁し、４０００ｒｐｍで１５分間再度遠心分離した。最終ペレットを窒素下で乾燥させ、目的化合物Ｉ（化合物８）の灰白色の固体として回収した（１２ｍｇ）。最終生成物の純度は、液体クロマトグラフ紫外質量分析（ＬＣ－ＵＶ－ＭＳ）により９５％超であると決定された。ＬＣ－ＭＳ：４４４．１４（Ｍ＋Ｈ）；１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６）：１１．５２（ｓ、１Ｈ、ＮＨ）、９．８２（ｓ、１Ｈ、ＮＨ）、８．１８（ｓ、１Ｈ）、７．３９（ｓ、１Ｈ）、７．２１（ｓ、１Ｈ）、６．００（ｓ、１Ｈ）、３．５５（ｍ、４Ｈ）、３．２２（ｓ、３Ｈ）、２．４３（ｓ、３Ｈ）、１．６５（ｍ、６Ｈ）。１Ｈ ＮＭＲは、化合物Ｉの４位にプロトンシグナルがないことを示した。
例２
Ｎ－（２－クロロ－４－ジュウテリオ－６－メチル－フェニル）－２－［［６－（４－ヒドロキシ－１－ピペリジル）－２－メチル－ピリミジン－４－イル］アミノ］チアゾール－５－カルボキサミド（化合物ＩＩ）の調製
例２
Ｎ－（２－クロロ－４－ジュウテリオ－６－メチル－フェニル）－２－［［６－（４－ヒドロキシ－１－ピペリジル）－２－メチル－ピリミジン－４－イル］アミノ］チアゾール－５－カルボキサミド（化合物ＩＩ）の調製
【0170】
スキーム２に示す合成手順によって、２－［（６－クロロ－２－メチルピリミジン－４－イル）アミノ］－Ｎ－（２－クロロ－４－ジュウテロ－６－メチルフェニル）チアゾール－５－カルボキサミド（７）から出発して、化合物ＩＩを合成した。
【0171】
２－［（６－クロロ－２－メチルピリミジン－４－イル）アミノ］－Ｎ－（２－クロロ－４－ジュウテロ－６メチルフェニル）チアゾール－５－カルボキサミド（７）は、実施例１に記載の４－ブロモ－２－クロロ－６－メチルアニリンから出発して６工程で調製した。
【0172】
Ｎ－（２－クロロ－４－ジュウテロ－６－メチルフェニル）－２－［［２－メチル－６－（４－ヒドロキシピペリジン－１－イル）ピリミジン－４－イル］アミノ］チアゾール－５－カルボキサミド（化合物ＩＩ）の調製：ジオキサン（１０ｍＬ）中の粗化合物７（約０．５６ｍｍｏｌ）の混合物に、室温で４－ヒドロキシピペリジン（１７０ｍｇ、１．６８ｍｍｏｌ、３当量）およびＤＩＥＡ（２１７ｍｇ、１．６８ｍｍｏｌ、３当量）を添加した。混合物を８５～９０℃の窒素下で２０時間撹拌した。ＬＣ－ＭＳ分析は、生成物ピークを示した。混合物は、透明な溶液ではなかった。混合物を濃縮乾固し、続いて５０ｍＬのアセトニトリルに懸濁した。混合物を４０００ｒｐｍで１５分間遠心分離した。ペレットをメタノールに溶解し、カラムクロマトグラフィー（メタノール塩化メチレン、１：９）で精製した。化合物ＩＩのみを含有するカラムクロマトグラフ画分を合わせて窒素流下で乾燥させ、目的化合物ＩＩ（１７ｍｇ）の灰白色の固体として回収した。最終生成物の純度は、ＬＣ－ＵＶ－ＭＳにより９５％以上であると決定された。ＬＣ－ＭＳ：４６０．１４（Ｍ＋Ｈ）；１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６）：１１．４２（ｓ、１Ｈ．ＮＨ）、９．８３（ｓ、１Ｈ、ＮＨ）、８．１９（ｓ、１Ｈ）、７．４０（ｓ、１Ｈ）、７．２４（ｓ、１Ｈ）、６．０５（ｓ、１Ｈ）、４．７８（ｓ、１Ｈ）、３．９５（ｍ、２Ｈ）、３．７５（ｍ、１Ｈ）、３．２２（ｓ、３Ｈ）、３．１８（ｍ、２Ｈ）、２．４３（ｓ、３Ｈ）、１．８５（ｍ、２Ｈ）、１．３５（ｍ、２Ｈ）。１Ｈ ＮＭＲは、化合物ＩＩの４位にプロトンシグナルがないことを示した。
例３
Ｎ－（２－クロロ－４－ジュウテロ－６－メチルフェニル）－２－［［２－メチル－６－（４－（２－ヒドロキシエチル）ピペリジン－１－イル）ピリミジン－４－イル］アミノ］チアゾール－５－カルボキサミド（化合物ＩＩＩ）の調製
例３
Ｎ－（２－クロロ－４－ジュウテロ－６－メチルフェニル）－２－［［２－メチル－６－（４－（２－ヒドロキシエチル）ピペリジン－１－イル）ピリミジン－４－イル］アミノ］チアゾール－５－カルボキサミド（化合物ＩＩＩ）の調製
【0173】
粗化合物７（約０．５６ｍｍｏｌ）およびジオキサン（１０ｍＬ）の混合物に、室温で４－（２－ヒドロキシエチル）ピペリジン（２１９ｍｇ、１．６８ｍｍｏｌ、３当量）およびＤＩＥＡ（２１７ｍｇ、１．６８ｍｍｏｌ、３当量）を添加した。次いで、混合物を８５～９０℃の窒素下で２０時間撹拌した。ＬＣ－ＭＳ分析は、生成物ピークを示した。混合物は、透明な溶液ではなかった。混合物を室温に冷却し、減圧下で濃縮乾固し、２０％ＨＰＬＣグレードの水を含有する５０ｍＬのアセトニトリルに懸濁した。次いで、混合物を４０００ｒｐｍで１５分間遠心分離した。ペレットをアセトニトリルに再懸濁して、４０００ｒｐｍで１５分間再度遠心分離した。最終ペレットを窒素下で乾燥し、灰白色の固体として、目的化合物ＩＩＩの灰白色の固体（約４０ｍｇ）として回収した。ＬＣ－ＭＳ：４８９．１６（Ｍ＋Ｈ）；１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６）：１１．４２（ｓ、１Ｈ．ＮＨ）、９．８３（ｓ、１Ｈ、ＮＨ）、８．２０（ｓ、１Ｈ）、７．４０（ｓ、１Ｈ）、７．２４（ｓ、１Ｈ）、６．０５（ｓ、１Ｈ）、４．４２（ｍ、１Ｈ）、３．３５（ｍ、２Ｈ）、２．４８（ｍ、８Ｈ）、２．４０（ｓ、３Ｈ）、２．１５（ｍ、２Ｈ）。
例４
Ｎ－（２－クロロ－４－ジュウテロ－６－メチルフェニル）－２－［［２－メチル－６－（（Ｓ）－３－ヒドロキシピロリジン－１－イル）ピリミジン－４－イル］アミノ］チアゾール－５－カルボキサミド（化合物ＩＶ）の調製
例４
Ｎ－（２－クロロ－４－ジュウテロ－６－メチルフェニル）－２－［［２－メチル－６－（（Ｓ）－３－ヒドロキシピロリジン－１－イル）ピリミジン－４－イル］アミノ］チアゾール－５－カルボキサミド（化合物ＩＶ）の調製
【0174】
粗化合物７（約０．５６ｍｍｏｌ）およびジオキサン（１０ｍＬ）の混合物に、室温で（Ｓ）－ピロリジン－３－オールヒドロクロライド（２０８ｍｇ、１．６８ｍｍｏｌ、３当量）およびＤＩＥＡ（４００ｍｇ、３．１ｍｍｏｌ、５．５当量）を添加した。次いで、混合物を８５～９０℃の窒素下で６時間撹拌した。ＬＣ－ＭＳ分析は、生成物ピークを示した。混合物は、透明な溶液ではなかった。混合物を室温に冷却し、減圧下で濃縮乾固し、得られた残渣をアセトニトリル５０ｍＬに懸濁し、４０００ｒｐｍで１５分間遠心分離した。次いで、ペレットを冷却した８０％アセトニトリルに懸濁し、４０００ｒｐｍで１５分間遠心分離した。ペレットを冷却した８０％アセトニトリルに再懸濁し、１５分間４０００ｒｐｍで遠心分離した。上清を合わせて濃縮乾固させて、目的化合物ＩＶ（約６０ｍｇ）を灰白色の固体として得た。ＬＣ－ＭＳ：４４６（Ｍ＋Ｈ）；１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６）：１１．４０（ｓ、１Ｈ．ＮＨ）、９．８３（ｓ、１Ｈ、ＮＨ）、８．１９（ｓ、１Ｈ）、７．４０（ｓ、１Ｈ）、７．２４（ｓ、１Ｈ）、５．８０（ｓ、１Ｈ）、４．９８（ｓ、１Ｈ）、４．３５（ｓ、１Ｈ）、２．５３（ｓ、３Ｈ）、２．２０（ｓ、２Ｈ）、２．１２（ｓ、２Ｈ）、１．８５（ｍ、２Ｈ）。
例５
Ｎ－（２－クロロ－４－ジュウテロ－６－メチルフェニル）－２－［［２－メチル－６－（（Ｒ）－３－ヒドロキシピロリジン－１－イル）ピリミジン－４－イル］アミノ］チアゾール－５－カルボキサミド（化合物Ｖ）の調製
例５
Ｎ－（２－クロロ－４－ジュウテロ－６－メチルフェニル）－２－［［２－メチル－６－（（Ｒ）－３－ヒドロキシピロリジン－１－イル）ピリミジン－４－イル］アミノ］チアゾール－５－カルボキサミド（化合物Ｖ）の調製
【0175】
粗化合物７（約０．５６ｍｍｏｌ）およびジオキサン（１０ｍＬ）の混合物に、室温で（Ｒ）－ピロリジン－３－オールヒドロクロライド（２０８ｍｇ、１．６８ｍｍｏｌ、３当量）およびＤＩＥＡ（４００ｍｇ、３．１ｍｍｏｌ、５．５当量）を添加した。次いで、混合物を８５～９０℃の窒素下で６時間撹拌した。ＬＣ－ＭＳ分析は、生成物ピークを示した。混合物は、透明な溶液ではなかった。混合物を室温に冷却し、減圧下で濃縮乾固し、得られた残渣をアセトニトリル５０ｍＬに懸濁し、４０００ｒｐｍで１５分間遠心分離した。次いで、ペレットを冷却した８０％アセトニトリルに懸濁し、４０００ｒｐｍで１５分間遠心分離した。ペレットを冷却した８０％アセトニトリルに再懸濁し、１５分間４０００ｒｐｍで遠心分離した。上清を合わせて濃縮乾固させて、目的化合物Ｖ（約１０３ｍｇ）を灰白色の固体として得た。ＬＣ－ＭＳ：４４６（Ｍ＋Ｈ）；１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６）：１１．４０（ｓ、１Ｈ．ＮＨ）、９．８３（ｓ、１Ｈ、ＮＨ）、８．１９（ｓ、１Ｈ）、７．４０（ｓ、１Ｈ）、７．２４（ｓ、１Ｈ）、５．８０（ｓ、１Ｈ）、４．９８（ｓ、１Ｈ）、４．３５（ｓ、１Ｈ）、２．５３（ｓ、３Ｈ）、２．２０（ｓ、２Ｈ）、２．１２（ｓ、２Ｈ）、１．８５（ｍ、２Ｈ）。
例６
Ｎ－（２－クロロ－４－デュテロ－６－メチルフェニル）－２－［［２－メチル－６－（（Ｓ）－３－アミノピロリジン－１－イル）ピリミジン－４－イル］アミノ］チアゾール－５－カルボキサミド（化合物ＶＩ、３００－１０１）の調製
例６
Ｎ－（２－クロロ－４－デュテロ－６－メチルフェニル）－２－［［２－メチル－６－（（Ｓ）－３－アミノピロリジン－１－イル）ピリミジン－４－イル］アミノ］チアゾール－５－カルボキサミド（化合物ＶＩ、３００－１０１）の調製
【0176】
Ｎ－（２－クロロ－４－ジュウテロ－６－メチルフェニル）－２－［［２－メチル－６－（（Ｓ）－３－アミノピロリジン－１－イル）ピリミジン－４－イル］アミノ］チアゾール－５－カルボキサミド（化合物ＶＩＩ、３００－１０１）の調製。３００－９７（２００ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）およびジオキサン（８ｍＬ）の混合物に、室温でｔｅｒｔ－ブチル（Ｓ）－ピロリジン－３－イルカルバマート（１８６ｍｇ、１ｍｍｏｌ、２当量）およびＤＩＥＡ（１４７ｍｇ、１．１４ｍｍｏｌ、２当量）を添加した。次いで、混合物を９０～９１℃の窒素下で１２時間撹拌した。ＬＣ－ＭＳ分析は、生成物ピークを示した。混合物を室温に冷却し、減圧下で濃縮し、メタノール（４ｍＬ）を添加した後、混合物を再濃縮して中間体３００－１００を灰色固体として得た。ＬＣ－ＭＳ：５４５．１２（Ｍ＋Ｈ）。
【0177】
粗試料（３００－１００）にＤＣＭ（４ｍＬ）を添加した。混合物を５℃に冷却し、次いでＴＦＡ－ＤＣＭの混合物（１：１、５ｍＬ）を滴下した。添加後、混合物を室温で３時間撹拌し、減圧下で濃縮した。残渣をメタノール（４ｍＬ）と混合し、続いてトリエチルアミン（２ｍＬ）を添加し、しばらく撹拌した。混合物を濃縮乾固し、次いで５０ｍＬの蒸留水に懸濁し、４０００ｒｐｍで１５分間遠心分離した。ペレットを５０ｍＬの蒸留水で再懸濁し、次いで１５分間４０００ｒｐｍで遠心分離した。ペレットを１００ｍＬの８０％アセトニトリルでさらに懸濁し、４０００ｒｐｍで１５分間遠心分離した。上清を蒸発乾固させて、目的化合物ＶＩ（３００－１０１）（約１０８ｍｇ）を灰白色の固体として得た。ＬＣ－ＭＳ：４４５（Ｍ＋Ｈ）；１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６）：９．８３（ｓ、１Ｈ、ＮＨ）、８．１９（ｓ、１Ｈ）、７．３０（ｓ、１Ｈ）、７．１９（ｓ、１Ｈ）、５．８０（ｓ、１Ｈ）、３．６０－３．３５（ｍ、２Ｈ）、２．４３（ｓ、３Ｈ）、２．２０（ｓ、２Ｈ）、２．１２（ｓ、２Ｈ）、１．８５（ｍ、２Ｈ）。
例７
Ｎ－（２－クロロ－４－ジュウテロ－６－メチルフェニル）－２－［［２－メチル－６－（（Ｒ）－３－アミノピロリジン－１－イル）ピリミジン－４－イル］アミノ］チアゾール－５－カルボキサミド（化合物ＶＩＩ、３００－９９）の調製
例７
Ｎ－（２－クロロ－４－ジュウテロ－６－メチルフェニル）－２－［［２－メチル－６－（（Ｒ）－３－アミノピロリジン－１－イル）ピリミジン－４－イル］アミノ］チアゾール－５－カルボキサミド（化合物ＶＩＩ、３００－９９）の調製
【0178】
２－［（６－クロロ－２－メチルピリミジン－４－イル）アミノ］－Ｎ－（２－クロロ－４－ジュウテロ－６－メチルフェニル）チアゾール－５－カルボキサミド（３００－９７）の調製。出発物質３００－７７－２（２００ｍｇ、０．７４ｍｍｏｌ）、４，６－ジクロロ－２－メチルピリミジン（１４７ｍｇ、０．９０ｍｍｏｌ、１．２当量）、およびＴＨＦ（４ｍＬ）の撹拌混合物に、０～５℃でナトリウムｔｅｒｔ－ブトキシドのＴＨＦ溶液（２Ｍ、１．３１ｍＬ、２．６２ｍｍｏｌ、３．５当量）を滴下した。添加後、混合物を室温で１．５時間撹拌し、０～５℃に再冷却した。２Ｎ ＨＣｌ溶液（１ｍＬ）を滴下した。混合物を１５分間撹拌し、減圧下で濃縮した。残渣をＥｔＯＡｃ－ヘキサン（１：１）と混合し、５分間撹拌した。固体を濾過し、ＥｔＯＡ－ヘキサン（１：１）で洗浄し、乾燥させて黄色の固体（２１０ｍｇ）を得、これを精製することなく次の工程に使用した。ＬＣ－ＭＳ：３９５．０３（Ｍ＋Ｈ）。
【0179】
Ｎ－（２－クロロ－４－デュテロ－６－メチルフェニル）－２－［［２－メチル－６－（（Ｒ）－３－アミノピロリジン－１－イル）ピリミジン－４－イル］アミノ］チアゾール－５－カルボキサミド（化合物ＶＩ、３００－９９）の調製。３００－９７（２００ｍｇ、０．５１ｍｍｏｌ）およびジオキサン（８ｍＬ）の混合物に、室温でｔｅｒｔ－ブチル（Ｒ）－ピロリジン－３－イルカルバマート（１８６ｍｇ、１ｍｍｏｌ、２当量）およびＤＩＥＡ（１４７ｍｇ、１．１４ｍｍｏｌ、２当量）を添加した。次いで、混合物を９０～９１℃の窒素下で１２時間撹拌した。ＬＣ－ＭＳ分析は、生成物ピークを示した。混合物を室温に冷却し、減圧下で濃縮した。メタノール（４ｍＬ）を添加後、混合物を再濃縮して中間体３００－９８を灰色固体として得た。ＬＣ－ＭＳ：５４５．１２（Ｍ＋Ｈ）。
【0180】
粗試料（３００－９８）にジクロロメタン（ＤＣＭ）（４ｍＬ）を添加した。混合物を５℃に冷却し、次いでトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）－ＤＣＭ（１：１、５ｍＬ）の混合物を滴下した。添加後、混合物を室温で３時間撹拌し、減圧下で濃縮した。残渣をメタノール（４ｍＬ）と混合し、続いてトリエチルアミン（２ｍＬ）を添加して撹拌した。混合物を濃縮乾固し、次いで５０ｍＬの蒸留水に懸濁し、４０００ｒｐｍで１５分間遠心分離した。ペレットを５０ｍＬの蒸留水で再懸濁し、次いで１５分間４０００ｒｐｍで遠心分離した。ペレットを１００ｍＬの８０％アセトニトリルでさらに懸濁し、４０００ｒｐｍで１５分間遠心分離した。上清を蒸発乾固させて、目的化合物ＶＩＩ（３００－９９）を灰白色の固体（約１０５ｍｇ）として得た。ＬＣ－ＭＳ：４４５（Ｍ＋Ｈ）；１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６）：９．８３（ｓ、１Ｈ、ＮＨ）、８．１９（ｓ、１Ｈ）、７．３０（ｓ、１Ｈ）、７．１９（ｓ、１Ｈ）、５．８０（ｓ、１Ｈ）、３．６０－３．３５（ｍ、２Ｈ）、２．４３（ｓ、３Ｈ）、２．２０（ｓ、２Ｈ）、２．１２（ｓ、２Ｈ）、１．８５（ｍ、２Ｈ）。
例８
Ｎ－（２－クロロ－６－メチルフェニル）－２－［［２－メチル－６－（ピペリジン－１－イル）ピリミジン－４－イル］アミノ］チアゾール－５－カルボキサミド（化合物ＶＩＩＩ、Ｈ－２０）の調製
例８
Ｎ－（２－クロロ－６－メチルフェニル）－２－［［２－メチル－６－（ピペリジン－１－イル）ピリミジン－４－イル］アミノ］チアゾール－５－カルボキサミド（化合物ＶＩＩＩ、Ｈ－２０）の調製
【0181】
Ｎ－（２－クロロ－６－メチルフェニル）－２－［［２－メチル－６－（ピペリジン－１－イル）ピリミジン－４－イル］アミノ］チアゾール－５－カルボキサミド（化合物ＶＩＩＩ、Ｈ－２０）の調製。出発物質７Ｈ（１５０ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）、ジオキサン（８ｍＬ）の混合物に、室温でピペリジン（９７ｍｇ、１．１４ｍｍｏｌ、３当量）およびＤＩＥＡ（１４７ｍｇ、１．１４ｍｍｏｌ、３当量）を添加した。混合物を９０～９１℃の窒素下で１５時間撹拌した。ＬＣ－ＭＳ分析は、生成物ピークを示した。混合物は、透明な溶液ではなかった。混合物を濃縮乾固し、２０％ＨＰＬＣグレードの水を含有する５０ｍＬのアセトニトリルに懸濁した。次いで、混合物を４０００ｒｐｍで１５分間遠心分離した。ペレットをアセトニトリルに再懸濁して、４０００ｒｐｍで１５分間再度遠心分離した。最終ペレットを窒素下で乾燥させて、目的化合物ＶＩＩＩ（Ｈ－２０）（約１２９ｍｇ）を灰白色の固体として得た。ＬＣ－ＭＳ：４４３．１４（Ｍ＋Ｈ）；１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６）：１１．５２（ｓ、１Ｈ．ＮＨ）、９．８２（ｓ、１Ｈ、ＮＨ）、８．１８（ｓ、１Ｈ）、７．３９（ｍ、１Ｈ）、７．２１（ｍ、２Ｈ）、６．００（ｓ、１Ｈ）、３．５５（ｍ、４Ｈ）、３．２２（ｓ、３Ｈ）、２．４３（ｓ、３Ｈ）、１．６５（ｍ、６Ｈ）。
例９
Ｎ－（２－クロロ－６－メチルフェニル）－２－［［２－メチル－６－（４－ヒドロキシピペリジン－１－イル）ピリミジン－４－イル］アミノ］チアゾール－５－カルボキサミド（化合物ＩＸ、Ｈ－２１）の調製
例９
Ｎ－（２－クロロ－６－メチルフェニル）－２－［［２－メチル－６－（４－ヒドロキシピペリジン－１－イル）ピリミジン－４－イル］アミノ］チアゾール－５－カルボキサミド（化合物ＩＸ、Ｈ－２１）の調製
【0182】
Ｎ－（２－クロロ－６－メチルフェニル）－２－［［２－メチル－６－（４－ヒドロキシピペリジン－１－イル）ピリミジン－４－イル］アミノ］チアゾール－５－カルボキサミド（Ｈ－２１）の調製。出発物質７Ｈ（１５０ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）およびジオキサン（８ｍＬ）の混合物に、室温で４－ヒドロキシピペリジン（１１５ｍｇ、１．１４ｍｍｏｌ、３当量）およびＤＩＥＡ（１４７ｍｇ、１．１４ｍｍｏｌ、３当量）を添加した。次いで、混合物を９０～９２℃の窒素下で１０時間撹拌した。ＬＣ－ＭＳ分析は、生成物ピークを示した。混合物は、透明な溶液ではなかった。混合物を濃縮乾固し、２０％ＨＰＬＣグレードの水を含有する５０ｍＬのアセトニトリルに懸濁した。次いで、混合物を４０００ｒｐｍで１５分間遠心分離した。ペレットをアセトニトリルに再懸濁して、４０００ｒｐｍで１５分間再度遠心分離した。最終ペレットを窒素下で乾燥させて、目的化合物ＩＸ（Ｈ－２１）（１３０ｍｇ）を灰白色の固体として得た。ＬＣ－ＭＳ：４５９．１４（Ｍ＋Ｈ）；１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６）：１１．４２（ｓ、１Ｈ．ＮＨ）、９．８３（ｓ、１Ｈ、ＮＨ）、８．１９（ｓ、１Ｈ）、７．４０（ｍ、１Ｈ）、７．２４（ｍ、２Ｈ）、６．０５（ｓ、１Ｈ）、４．７８（ｓ、１Ｈ）、３．９５（ｍ、２Ｈ）、３．７５（ｍ、１Ｈ）、３．２２（ｓ、３Ｈ）、３．１８（ｍ、２Ｈ）、２．４３（ｓ、３Ｈ）、１．８５（ｍ、２Ｈ）、１．３５（ｍ、２Ｈ）。
例１０
Ｎ－（２－クロロ－６－メチルフェニル）－２－［［２－メチル－６－（（Ｓ）－３－ヒドロキシピロリジン－１－イル）ピリミジン－４－イル］アミノ］チアゾール－５－カルボキサミド（化合物Ｘ、Ｈ－３１、３００－８９）の調製
例１０
Ｎ－（２－クロロ－６－メチルフェニル）－２－［［２－メチル－６－（（Ｓ）－３－ヒドロキシピロリジン－１－イル）ピリミジン－４－イル］アミノ］チアゾール－５－カルボキサミド（化合物Ｘ、Ｈ－３１、３００－８９）の調製
【0183】
Ｎ－（２－クロロ－６－メチルフェニル）－２－［［２－メチル－６－（（Ｓ）－３－ヒドロキシピロリジン－１－イル）ピリミジン－４－イル］アミノ］チアゾール－５－カルボキサミド（化合物ＸＩ、Ｈ－３１、３００－８９）の調製。出発物質７Ｈ（１５０ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）およびジオキサン（８ｍＬ）の混合物に、室温で（Ｓ）－ピロリジン－３－オールヒドロクロライド（１４１ｍｇ、１．１４ｍｍｏｌ、３当量）およびＤＩＥＡ（２４５ｍｇ、１．９０ｍｍｏｌ、５当量）を添加した。次いで、混合物を９０～９２℃の窒素下で１２時間撹拌した。ＬＣ－ＭＳ分析は、生成物ピークを示した。混合物は、透明な溶液ではなかった。混合物を室温に冷却し、減圧下で濃縮乾固し、得られた残渣をアセトニトリル５０ｍＬに懸濁し、４０００ｒｐｍで１５分間遠心分離した。次いで、ペレットを冷却した８０％アセトニトリルに懸濁し、４０００ｒｐｍで１５分間遠心分離した。ペレットを冷却した８０％アセトニトリルに再懸濁し、１５分間４０００ｒｐｍで遠心分離した。上清を合わせて濃縮乾固させて、目的化合物Ｘ（Ｈ－３１）（１０５ｍｇ）を灰白色の固体として得た。ＬＣ－ＭＳ：４４５（Ｍ＋Ｈ）；１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６）：１１．４０（ｓ、１Ｈ．ＮＨ）、９．８３（ｓ、１Ｈ、ＮＨ）、８．１９（ｓ、１Ｈ）、７．４０（ｍ、１Ｈ）、７．２４（ｍ、２Ｈ）、５．８０（ｓ、１Ｈ）、４．９８（ｓ、１Ｈ）、４．３５（ｓ、１Ｈ）、２．５３（ｓ、３Ｈ）、２．２０（ｓ、２Ｈ）、２．１２（ｓ、２Ｈ）、１．８５（ｍ、２Ｈ）。
例１１
Ｎ－（２－クロロ－６－メチルフェニル）－２－［［２－メチル－６－（（Ｒ）－３－ヒドロキシピロリジン－１－イル）ピリミジン－４－イル］アミノ］チアゾール－５－カルボキサミド（化合物ＸＩ、Ｈ－３０、３００－８７）の調製
例１１
Ｎ－（２－クロロ－６－メチルフェニル）－２－［［２－メチル－６－（（Ｒ）－３－ヒドロキシピロリジン－１－イル）ピリミジン－４－イル］アミノ］チアゾール－５－カルボキサミド（化合物ＸＩ、Ｈ－３０、３００－８７）の調製
【0184】
Ｎ－（２－クロロ－６－メチルフェニル）－２－［［２－メチル－６－（（Ｒ）－３－ヒドロキシピロリジン－１－イル）ピリミジン－４－イル］アミノ］チアゾール－５－カルボキサミド（化合物Ｘ、Ｈ－３０、３００－８７）の調製。出発物質７Ｈ（１５０ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）およびジオキサン（８ｍＬ）の混合物に、室温で（Ｒ）－ピロリジン－３－オール（１００ｍｇ、１．１ｍｍｏｌ、３当量）およびＤＩＥＡ（１４７ｍｇ、１．１４ｍｍｏｌ、３当量）を添加した。次いで、混合物を９０～９２℃の窒素下で１２時間撹拌した。ＬＣ－ＭＳ分析は、生成物ピークを示した。混合物は、透明な溶液ではなかった。混合物を室温に冷却し、減圧下で濃縮乾固し、得られた残渣をアセトニトリル５０ｍＬに懸濁し、４０００ｒｐｍで１５分間遠心分離した。次いで、ペレットを冷却した８０％アセトニトリルに懸濁し、４０００ｒｐｍで１５分間遠心分離した。ペレットを冷却した８０％アセトニトリルに再懸濁し、１５分間４０００ｒｐｍで遠心分離した。上清を合わせて濃縮乾固させて、目的化合物ＸＩ（Ｈ－３０）（約７５ｍｇ）を灰白色の固体として得た。ＬＣ－ＭＳ：４４５（Ｍ＋Ｈ）；１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６）：１１．４０（ｓ、１Ｈ．ＮＨ）、９．８３（ｓ、１Ｈ、ＮＨ）、８．１９（ｓ、１Ｈ）、７．４０（ｍ、１Ｈ）、７．２４（ｍ、２Ｈ）、５．８０（ｓ、１Ｈ）、４．９８（ｓ、１Ｈ）、４．３５（ｓ、１Ｈ）、２．５３（ｓ、３Ｈ）、２．２０（ｓ、２Ｈ）、２．１２（ｓ、２Ｈ）、１．８５（ｍ、２Ｈ）。
例１２
Ｎ－（２－クロロ－６－メチルフェニル）－２－［［２－メチル－６－（（Ｓ）－３－アミノピロリジン－１－イル）ピリミジン－４－イル］アミノ］チアゾール－５－カルボキサミド（化合物ＸＩＩ、Ｈ－４１、３００－９３）の調製
例１２
Ｎ－（２－クロロ－６－メチルフェニル）－２－［［２－メチル－６－（（Ｓ）－３－アミノピロリジン－１－イル）ピリミジン－４－イル］アミノ］チアゾール－５－カルボキサミド（化合物ＸＩＩ、Ｈ－４１、３００－９３）の調製
【0185】
Ｎ－（２－クロロ－６－メチルフェニル）－２－［［２－メチル－６－（（Ｓ）－３－アミノピロリジン－１－イル）ピリミジン－４－イル］アミノ］チアゾール－５－カルボキサミド（Ｈ－４１、３００－９３）の調製。出発物質７Ｈ（１５０ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）およびジオキサン（８ｍＬ）の混合物に、室温でｔｅｒｔ－ブチル（Ｓ）－ピロリジン－３－イルカルバマート（１４２ｍｇ、０．７６ｍｍｏｌ、２当量）およびＤＩＥＡ（１４７ｍｇ、１．１４ｍｍｏｌ、３当量）を添加した。次いで、混合物を９０～９１℃の窒素下で１０時間撹拌した。ＬＣ－ＭＳ分析は、生成物ピークを示した。混合物を室温に冷却し、減圧下で濃縮した。メタノール（４ｍＬ）を添加後、混合物を再濃縮して中間体３００－９２を灰色固体として得た。ＬＣ－ＭＳ：５４４．１２（Ｍ＋Ｈ）。
【0186】
粗試料（３００－９２）にＤＣＭ（４ｍＬ）を添加した。混合物を５℃に冷却し、次いでＴＦＡ－ＤＣＭの混合物（１：１、５ｍＬ）を滴下した。添加後、混合物を室温で３時間撹拌し、減圧下で濃縮した。残渣をメタノール（４ｍＬ）と混合し、続いてＴＥＡ（２ｍＬ）を添加し、しばらく撹拌した。混合物を濃縮乾固し、次いで５０ｍＬの蒸留水に懸濁し、４０００ｒｐｍで１５分間遠心分離した。ペレットを５０ｍＬの蒸留水で再懸濁し、次いで１５分間４０００ｒｐｍで遠心分離した。ペレットを１００ｍＬの８０％アセトニトリルでさらに懸濁し、４０００ｒｐｍで１５分間遠心分離した。上清を蒸発乾固させて、目的化合物ＸＩＩ（Ｈ－４１）を灰白色の固体（約８８ｍｇ）として得た。ＬＣ－ＭＳ：４４４（Ｍ＋Ｈ）；１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６）：９．８３（ｓ、１Ｈ、ＮＨ）、８．１９（ｓ、１Ｈ）、７．４０（ｍ、１Ｈ）、７．２４（ｍ、２Ｈ）、５．８０（ｓ、１Ｈ）、３．６０－３．３５（ｍ、２Ｈ）、２．５３（ｓ、３Ｈ）、２．２０（ｓ、２Ｈ）、２．１２（ｓ、２Ｈ）、１．８５（ｍ、２Ｈ）。
例１３
Ｎ－（２－クロロ－６－メチルフェニル）－２－［［２－メチル－６－（（Ｒ）－３－アミノピロリジン－１－イル）ピリミジン－４－イル］アミノ］チアゾール－５－カルボキサミド（化合物ＸＩＩＩ、Ｈ－４０、３００－９１）の調製
例１３
Ｎ－（２－クロロ－６－メチルフェニル）－２－［［２－メチル－６－（（Ｒ）－３－アミノピロリジン－１－イル）ピリミジン－４－イル］アミノ］チアゾール－５－カルボキサミド（化合物ＸＩＩＩ、Ｈ－４０、３００－９１）の調製
【0187】
Ｎ－（２－クロロ－６－メチルフェニル）－２－［［２－メチル－６－（（Ｒ）－３－アミノピロリジン－１－イル）ピリミジン－４－イル］アミノ］チアゾール－５－カルボキサミド（化合物ＸＩＩ、Ｈ－４０、３００－９１）の調製。出発物質７Ｈ（１５０ｍｇ、０．３８ｍｍｏｌ）およびジオキサン（８ｍＬ）の混合物に、室温でｔｅｒｔ－ブチル（Ｒ）－ピロリジン－３－イルカルバマート（１４２ｍｇ、０．７６ｍｍｏｌ、２当量）およびＤＩＥＡ（１４７ｍｇ、１．１４ｍｍｏｌ、３当量）を添加した。次いで、混合物を９０～９１℃の窒素下で１２時間撹拌した。ＬＣ－ＭＳ分析は、生成物ピークを示した。混合物を室温に冷却し、減圧下で濃縮した。メタノール（４ｍＬ）を添加後、混合物を再濃縮して中間体３００－９０を灰色固体として得た。ＬＣ－ＭＳ：５４４．１２（Ｍ＋Ｈ）。
【0188】
粗試料（３００－９０）にＤＣＭ（４ｍＬ）を添加した。混合物を５℃に冷却し、次いでＴＦＡ－ＤＣＭの混合物（１：１、５ｍＬ）を滴下した。添加後、混合物を室温で３時間撹拌し、減圧下で濃縮した。残渣をメタノール（４ｍＬ）と混合し、続いてトリメチルアミン（ＴＥＡ）（２ｍＬ）を添加し、しばらく撹拌した。混合物を濃縮乾固し、次いで５０ｍＬの蒸留水に懸濁し、４０００ｒｐｍで１５分間遠心分離した。ペレットを５０ｍＬの蒸留水で再懸濁し、次いで１５分間４０００ｒｐｍで遠心分離した。ペレットを１００ｍＬの８０％アセトニトリルでさらに懸濁し、４０００ｒｐｍで１５分間遠心分離した。上清を蒸発乾固させて、目的化合物ＸＩＩＩ（Ｈ－４０）を灰白色の固体として得た（約９６ｍｇ）。ＬＣ－ＭＳ：４４４（Ｍ＋Ｈ）；１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６）：９．８３（ｓ、１Ｈ、ＮＨ）、８．１９（ｓ、１Ｈ）、７．４０（ｍ、１Ｈ）、７．２４（ｍ、２Ｈ）、５．８０（ｓ、１Ｈ）、３．６０－３．３５（ｍ、２Ｈ）、２．５３（ｓ、３Ｈ）、２．２０（ｓ、２Ｈ）、２．１２（ｓ、２Ｈ）、１．８５（ｍ、２Ｈ）。
例１４
Ｎ－（２－クロロ－６－メチルフェニル）－２－［［２－メチル－６－（ピロリジン－１－イル）ピリミジン－４－イル］アミノ］チアゾール－５－カルボキサミド（化合物ＸＩＶ、Ｈ－５０）の調製
例１４
Ｎ－（２－クロロ－６－メチルフェニル）－２－［［２－メチル－６－（ピロリジン－１－イル）ピリミジン－４－イル］アミノ］チアゾール－５－カルボキサミド（化合物ＸＩＶ、Ｈ－５０）の調製
【0189】
Ｎ－（２－クロロ－６－メチルフェニル）－２－［［２－メチル－６－（ピロリジン－１－イル）ピリミジン－４－イル］アミノ］チアゾール－５－カルボキサミド（Ｈ－５０）の調製：出発物質７Ｈ（３００ｍｇ、０．７６ｍｍｏｌ）およびＤＭＳＯ（１０ｍＬ）の混合物に、室温でピロリジン（１６２ｍｇ、２．２８ｍｍｏｌ、３当量）およびＤＩＥＡ（２９４ｍｇ、２．２８ｍｍｏｌ、３当量）およびＤＭＡＰ（３ｍｇ）を添加した。次いで、混合物を窒素下で１１０℃に加熱し、１１０℃で１５時間撹拌した。ＬＣ－ＭＳ分析は、完全な反応を示した。混合物を濃縮乾固し、次いで５０ｍＬの蒸留水に懸濁し、４０００ｒｐｍで１５分間遠心分離した。ペレットを５０ｍＬの蒸留水で再懸濁し、次いで１５分間４０００ｒｐｍで遠心分離した。ペレットを１００ｍＬの８０％アセトニトリルでさらに懸濁し、４０００ｒｐｍで１５分間遠心分離した。上清を蒸発乾固させて、目的化合物ＸＩＶ（Ｈ－５０）を灰白色の固体（約３１４ｍｇ）として得た。ＬＣ－ＭＳ：４２９（Ｍ＋Ｈ）；１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６）：１１．５２（ｓ、１Ｈ．ＮＨ）、９．８２（ｓ、１Ｈ、ＮＨ）、８．１８（ｓ、１Ｈ）、７．３９（ｍ、１Ｈ）、７．２１（ｍ、２Ｈ）、５．７９（ｓ、１Ｈ）、３．３５（ｍ、４Ｈ）、２．３９（ｓ、３Ｈ）、２．２３（ｓ、３Ｈ）、１．９０（ｍ、４Ｈ）。
【0190】
例１５
プロテインキナーゼ阻害研究
Ｃａｒｎａ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｉｎｃ（Ｎａｔｉｃｋ、ＭＡ）によるオフチップモビリティシフトアッセイ（ＭＳＡ）をキナーゼ活性および阻害の測定に使用した。
１）５μＬの４倍化合物溶液、５μＬの４倍基質／ＡＴＰ／金属溶液、および１０μＬの２倍キナーゼ溶液を、アッセイ緩衝液（２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、０．０１％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００、２ｍＭ ＤＴＴ、ｐＨ７．５）を用いて調製し、混合して、室温で１または５時間（キナーゼに応じて）ポリプロピレン３８４ウェルマイクロプレートのウェル中でインキュベートした。
２）７０μＬの反応停止緩衝液（ＱｕｉｃｋＳｃｏｕｔ Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ Ａｓｓｉｓｔ ＭＳＡ；Ｃａｒｎａ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）をウェルに添加した。
３）反応混合物をＬａｂＣｈｉｐシステム（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）に適用し、生成物および基質ペプチドピークを分離し定量した。
４）キナーゼ反応は、生成物（Ｐ）および基質（Ｓ）ペプチドのピーク高さから計算された生成物比（Ｐ／（Ｐ＋Ｓ））によって評価された。
５）Ｃａｒｎａ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｉｎｃ（ＢＭＡ ３Ｆ，１－５－５ Ｍｉｎａｔｏｊｉｍａ－Ｍｉｎａｍｉｍａｃｈｉ，Ｃｈｕｏ－ｋｕ， Ｋｏｂｅ ６５０－００４７，Ｊａｐａｎ；ｗｗｗ．ｃａｒｎａｂｉｏ．ｃｏｍ）のアッセイプロトコルに従って反応条件を追跡した。
６）データ分析：反応対照（完全反応混合物）の読み出し値を０％阻害として設定し、バックグラウンド（酵素（－））の読み出し値を１００％阻害として設定し、次いで各試験溶液の阻害率を計算した。
プロテインキナーゼ阻害研究
Ｃａｒｎａ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｉｎｃ（Ｎａｔｉｃｋ、ＭＡ）によるオフチップモビリティシフトアッセイ（ＭＳＡ）をキナーゼ活性および阻害の測定に使用した。
１）５μＬの４倍化合物溶液、５μＬの４倍基質／ＡＴＰ／金属溶液、および１０μＬの２倍キナーゼ溶液を、アッセイ緩衝液（２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、０．０１％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００、２ｍＭ ＤＴＴ、ｐＨ７．５）を用いて調製し、混合して、室温で１または５時間（キナーゼに応じて）ポリプロピレン３８４ウェルマイクロプレートのウェル中でインキュベートした。
２）７０μＬの反応停止緩衝液（ＱｕｉｃｋＳｃｏｕｔ Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ Ａｓｓｉｓｔ ＭＳＡ；Ｃａｒｎａ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）をウェルに添加した。
３）反応混合物をＬａｂＣｈｉｐシステム（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）に適用し、生成物および基質ペプチドピークを分離し定量した。
４）キナーゼ反応は、生成物（Ｐ）および基質（Ｓ）ペプチドのピーク高さから計算された生成物比（Ｐ／（Ｐ＋Ｓ））によって評価された。
５）Ｃａｒｎａ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｉｎｃ（ＢＭＡ ３Ｆ，１－５－５ Ｍｉｎａｔｏｊｉｍａ－Ｍｉｎａｍｉｍａｃｈｉ，Ｃｈｕｏ－ｋｕ， Ｋｏｂｅ ６５０－００４７，Ｊａｐａｎ；ｗｗｗ．ｃａｒｎａｂｉｏ．ｃｏｍ）のアッセイプロトコルに従って反応条件を追跡した。
６）データ分析：反応対照（完全反応混合物）の読み出し値を０％阻害として設定し、バックグラウンド（酵素（－））の読み出し値を１００％阻害として設定し、次いで各試験溶液の阻害率を計算した。
【0191】
化合物Ｉは、以下の組換えキナーゼに対して１ｎＭで＞５０％の阻害を示した：ＡＢＬ、ＡＢＬ（Ｅ２５５Ｋ）、ＡＣＫ、ＡＲＧ、ＢＬＫ、ＢＭＸ、ＢＴＫ、ＤＤＲ２、ＥＰＨＡ１、ＦＧＲ、ＦＭＳ、ＦＲＫ、ＦＹＮ（アイソフォームａ）、ＨＣＫ、ＬＣＫ、ＬＹＮａ、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、ＳＲＣ、ＹＥＳ。化合物Ｉは、それぞれ約０．２、０．５、および１．４ｎＭのＩＣ５０で、組換えＢＴＫ、ＡＣＫ、およびＰＤＧＦＲα活性の濃度依存的阻害を示した。化合物Ｉは、組換えＰＩＫ３ＣＡ／ＰＩＫ３Ｒ１活性を約１２ｎＭのＩＣ５０で阻害した。
【0192】
化合物Ｉは、以下の組換えキナーゼに対して１０ｎＭで＞５０％の阻害を示した：ＹＥＳ、ＦＲＫ、ＳＲＣ、ＬＹＮａ、ＦＭＳ、ＢＭＸ、ＡＢＬ、ＦＹＮ（アイソフォームｂ）、ＦＧＲ、ＨＣＫ、ＦＹＮ（アイソフォームａ）、ＬＣＫ、ＤＤＲ２、ＡＲＧ、ＡＢＬ（Ｅ２５５Ｋ）、ＢＴＫ、ＥＰＨＡ１、ＢＬＫ、ＡＣＫ、ＳＲＭ、ＰＤＧＦＲβ、ＰＩＫ３ＣＡ／ＰＩＫ３Ｒ１、ＰＤＧＦＲα、ＣＳＫ、ＫＩＴ（Ｄ８１６Ｖ）、ＫＩＴ（Ｄ８１６Ｙ）、ＢＲＫ。
【0193】
化合物Ｉは、以下の組換えキナーゼに対して１０ｎＭで＜５０％の阻害を示した：ＰＤＧＦＲα（Ｖ５６１Ｄ）、ＤＤＲ１、ＫＩＴ、ＫＩＴ（Ｖ５６０Ｇ）、ＨＥＲ４、ＫＩＴ（Ｄ８１６Ｅ）、ＥＧＦＲ（Ｌ８５８Ｒ）、ＫＩＴ（Ｖ６５４Ａ）、ＰＤＧＦＲα（Ｄ８４２Ｖ）、ＥＧＦＲ、ＥＧＦＲ（Ｌ８６１Ｑ）、ＥＧＦＲ（ｄ７４６－７５０）、ＪＡＫ１、ＲＥＴ、ＲＥＴ（Ｓ８９１Ａ）、ＦＧＦＲ３、ＡＬＫ、ＷＮＫ３、ＲＥＴ（Ｙ７９１Ｆ）、ＢＲＡＦ（Ｖ６００Ｅ）、ＲＡＦ１、ＲＯＣＫ１、ＡｕｒＡ、ＭＡＰ２Ｋ２、ＲＥＴ（Ｍ９１８Ｔ）、ＫＤＲ、ＦＧＦＲ２、Ｅｒｋ１、ＥＧＦＲ（Ｔ７９０Ｍ）、ＲＥＴ（Ｇ６９１Ｓ）、ＰＤＧＦＲα（Ｔ６７４Ｉ）、ｐ３８α、ＨＥＲ２、ＪＡＫ３、ＭＡＰ２Ｋ１、ｐ３８β、ＥＧＦＲ（Ｔ７９０Ｍ／Ｌ８５８Ｒ）、ＦＬＴ１、ＢＲＡＦ、ＫＩＴ（Ｔ６７０Ｉ）、ＭＥＴ、ｓｋＭＬＣＫ、ＭＮＫ１、ＭＳＴ１、ＰＫＤ１、ＪＡＫ２、ＹＥＳ（Ｔ３４８Ｉ）、ＦＧＦＲ１、ＥＧＦＲ（ｄ７４６－７５０／Ｔ７９０Ｍ）。
【0194】
化合物ＩＩは、以下の組換えキナーゼに対して１ｎＭで＞５０％の阻害を示した：ＳＲＣ、ＹＥＳ、ＬＣＫ、ＨＣＫ、ＢＴＫ、ＬＹＮａ、ＦＲＫ、ＦＹＮ（アイソフォームａ）、ＦＹＮ（アイソフォームｂ）、ＴＥＣ、ＢＭＸ、ＬＹＮｂ、ＡＢＬ、ＦＧＲ、ＦＭＳ、ＢＬＫ、ＥＰＨＡ１、ＡＢＬ（Ｅ２５５Ｋ）。化合物ＩＩは、以下の組換えキナーゼに対して１ｎＭで＜５０％の阻害を示した：ＰＤＧＦＲβ、ＰＤＧＦＲα、ＰＩＫ３ＣＡ／ＰＩＫ３Ｒ１、ＫＩＴ、ＫＩＴ（Ｖ５６０Ｇ）、ＥＧＦＲ、ＨＥＲ２、ＹＥＳ（Ｔ３４８Ｉ）、ＩＴＫ、ｐ３８α、ＡＢＬ（Ｔ３１５Ｉ）、ＲＡＦ１、ｐ３８β、ＢＲＡＦ。化合物ＩＩは、＜１ｎＭのＩＣ５０で、組換えＢＴＫ活性の濃度依存的阻害を示した。
【0195】
化合物ＩＩは、以下の組換えキナーゼに対して１０ｎＭで＞５０％の阻害を示した：ＢＴＫ、ＰＤＧＦＲβ、ＫＩＴ（Ｖ５６０Ｇ）、ＰＤＧＦＲα、ＫＩＴ。化合物ＩＩは、以下の組換えキナーゼに対して１０ｎＭで＜５０％の阻害を示した：ＰＩＫ３ＣＡ／ＰＩＫ３Ｒ１、ＥＧＦＲ、ｐ３８α、ＲＡＦ１、ＨＥＲ２、ｐ３８β、ＢＲＡＦ。
【0196】
化合物ＩＩは、以下の組換えキナーゼに対して１００ｎＭで＞５０％の阻害を示した：ＰＤＧＦＲα、ＫＩＴ（Ｖ５６０Ｇ）、ＫＩＴ、ＰＤＧＦＲβ、ＥＧＦＲ。化合物ＩＩは、以下の組換えキナーゼに対して１００ｎＭで＜５０％の阻害を示した：ｐ３８α、ＲＡＦ１、ＰＩＫ３ＣＡ／ＰＩＫ３Ｒ１、ＨＥＲ２、ｐ３８β、ＢＲＡＦ。
【0197】
化合物ＩＶは、以下の組換えキナーゼに対して１ｎＭで＞５０％の阻害を示した：ＳＲＣ、ＹＥＳ、ＬＣＫ、ＨＣＫ、ＢＴＫ、ＬＹＮａ、ＴＥＣ、ＢＭＸ、ＡＢＬ、ＡＢＬ（Ｅ２５５Ｋ）。
【0198】
化合物Ｖは、以下の組換えキナーゼに対して１ｎＭで＞５０％の阻害を示した：ＳＲＣ、ＹＥＳ、ＬＣＫ、ＨＣＫ、ＢＴＫ、ＬＹＮａ、ＴＥＣ、ＢＭＸ、ＡＢＬ、ＡＢＬ（Ｅ２５５Ｋ）。
【0199】
化合物ＶＩは、以下の組換えキナーゼに対して１ｎＭで＞５０％の阻害を示した：ＳＲＣ、ＹＥＳ、ＬＣＫ、ＨＣＫ、ＢＴＫ、ＬＹＮａ、ＴＥＣ、ＢＭＸ、ＡＢＬ、ＡＢＬ（Ｅ２５５Ｋ）。
【0200】
化合物ＶＩＩは、以下の組換えキナーゼに対して１ｎＭで＞５０％の阻害を示した：ＳＲＣ、ＹＥＳ、ＬＣＫ、ＨＣＫ、ＢＴＫ、ＬＹＮａ、ＴＥＣ、ＢＭＸ、ＡＢＬ、ＡＢＬ（Ｅ２５５Ｋ）。
【0201】
化合物ＶＩＩＩは、以下の組換えキナーゼに対して１ｎＭで＞５０％の阻害を示した：ＳＲＣ、ＹＥＳ、ＬＣＫ、ＨＣＫ、ＢＴＫ、ＬＹＮａ、ＴＥＣ、ＢＭＸ、ＡＢＬ、ＡＢＬ（Ｅ２５５Ｋ）。
【0202】
化合物ＩＸは、以下の組換えキナーゼに対して１ｎＭで＞５０％の阻害を示した：ＳＲＣ、ＹＥＳ、ＬＣＫ、ＨＣＫ、ＢＴＫ、ＬＹＮａ、ＴＥＣ、ＢＭＸ、ＡＢＬ、ＡＢＬ（Ｅ２５５Ｋ）。
【0203】
化合物Ｘは、以下の組換えキナーゼに対して１ｎＭで＞５０％の阻害を示した：ＳＲＣ、ＹＥＳ、ＬＣＫ、ＨＣＫ、ＢＴＫ、ＬＹＮａ、ＴＥＣ、ＢＭＸ、ＡＢＬ、ＡＢＬ（Ｅ２５５Ｋ）。化合物Ｘは、組換えＡＢＬ、ＡＢＬ（Ｅ２５５Ｋ）、ＢＴＫ、およびＢＴＫ（Ｃ４８１Ｓ）活性の濃度依存性阻害をそれぞれ＜１ｎＭのＩＣ５０値で示した。
【0204】
化合物ＸＩは、以下の組換えキナーゼに対して１ｎＭで＞５０％の阻害を示した：ＳＲＣ、ＹＥＳ、ＬＣＫ、ＨＣＫ、ＢＴＫ、ＬＹＮａ、ＴＥＣ、ＢＭＸ、ＡＢＬ、ＡＢＬ（Ｅ２５５Ｋ）。化合物ＸＩは、組換えＡＢＬ、ＡＢＬ（Ｅ２５５Ｋ）、ＢＴＫ、およびＢＴＫ（Ｃ４８１Ｓ）活性の濃度依存的阻害をそれぞれ１ｎＭ未満のＩＣ５０値で示した。
【0205】
化合物ＸＩＩは、以下の組換えキナーゼに対して１ｎＭで＞５０％の阻害を示した：ＳＲＣ、ＹＥＳ、ＬＣＫ、ＨＣＫ、ＢＴＫ、ＬＹＮａ、ＴＥＣ、ＢＭＸ、ＡＢＬ、ＡＢＬ（Ｅ２５５Ｋ）。
【0206】
化合物ＸＩＩＩは、以下の組換えキナーゼに対して１ｎＭで＞５０％の阻害を示した：ＳＲＣ、ＹＥＳ、ＬＣＫ、ＨＣＫ、ＢＴＫ、ＬＹＮａ、ＴＥＣ、ＢＭＸ、ＡＢＬ、ＡＢＬ（Ｅ２５５Ｋ）。
【0207】
例１６
細胞阻害アッセイ
ＳＵ－ＤＨＬ－４（ＡＴＣＣ（登録商標）ＣＲＬ－２９５７（商標））、Ｋ－５６２（ＡＴＣＣ（登録商標）ＣＣＬ－２４３（商標））、およびＭｉｎｏ（ＡＴＣＣ（登録商標）ＣＲＬ－３０００（商標））の細胞株は、アメリカンタイプカルチャーコレクション（ＡＴＣＣ，Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ）から購入した。ＳＵ－ＤＨＬ－４細胞およびＭｉｎｏ細胞は、Ｔ－７５フラスコに１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）（Ｇｉｂｃｏ，Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）（完全培地）を補充したＡＴＣＣ処方ＲＰＭＩ－１６４０培地（ＡＴＣＣ）中、飽和湿度の５％ＣＯ２下の３７℃で増殖した。Ｋ－５６２細胞は、Ｔ－７５フラスコに１０％ＦＢＳ（Ｇｉｂｃｏ，Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）（完全培地）を補充したＡＴＣＣ調合イスコフ改変ダルベッコ培地（ＩＭＤＭ）中、飽和湿度の５％ＣＯ２下の３７℃で増殖した。細胞が約１×１０６細胞／ｍＬの濃度まで増殖したら、それらを各細胞株について対応する完全培地で２．５－５×１０４細胞／ｍＬに希釈した。細胞懸濁液のアリコート２００μＬを様々な濃度の試験化合物１μＬを予め添加した９６ウェルプレートのウェルに添加し、プレートを飽和湿度の５％ＣＯ２下の３７℃で４８時間インキュベートした。細胞培養の最後に、ＰｒｅｓｔｏＢｌｕｅ（登録商標）Ｃｅｌｌ Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ試薬（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）のアリコート１０μＬをウェルに添加し、プレートを３７℃で約６０分間インキュベートした。５７０および６００ｎｍにおける吸収をＳｐｅｃｔｒａＭａｘＭｉｃｒｏｐｌａｔｅリーダー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ）を用いて測定した。５７０ｎｍにおける吸光度を６００ｎｍにおける吸光度に対して正規化した。５７０ｎｍでの正規化吸光度を、メジアン効果プロット法に従ってＩＣ５０計算に使用した（ＴＣ Ｃｈｏｕ．Ｔｈｅｏｒｅｔｉｃａｌ ｂａｓｉｓ，ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｄｅｓｉｇｎ，ａｎｄ ｃｏｍｐｕｔｅｒｉｚｅｄ ｓｉｍｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｙｎｅｒｇｉｓｍ ａｎｄ ａｎｔａｇｏｎｉｓｍ ｉｎ ｄｒｕｇ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｓｔｕｄｉｅｓ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｒｅｖ．２００６；５８：６２１－６８１）。
細胞阻害アッセイ
ＳＵ－ＤＨＬ－４（ＡＴＣＣ（登録商標）ＣＲＬ－２９５７（商標））、Ｋ－５６２（ＡＴＣＣ（登録商標）ＣＣＬ－２４３（商標））、およびＭｉｎｏ（ＡＴＣＣ（登録商標）ＣＲＬ－３０００（商標））の細胞株は、アメリカンタイプカルチャーコレクション（ＡＴＣＣ，Ｍａｎａｓｓａｓ，ＶＡ）から購入した。ＳＵ－ＤＨＬ－４細胞およびＭｉｎｏ細胞は、Ｔ－７５フラスコに１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）（Ｇｉｂｃｏ，Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）（完全培地）を補充したＡＴＣＣ処方ＲＰＭＩ－１６４０培地（ＡＴＣＣ）中、飽和湿度の５％ＣＯ２下の３７℃で増殖した。Ｋ－５６２細胞は、Ｔ－７５フラスコに１０％ＦＢＳ（Ｇｉｂｃｏ，Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）（完全培地）を補充したＡＴＣＣ調合イスコフ改変ダルベッコ培地（ＩＭＤＭ）中、飽和湿度の５％ＣＯ２下の３７℃で増殖した。細胞が約１×１０６細胞／ｍＬの濃度まで増殖したら、それらを各細胞株について対応する完全培地で２．５－５×１０４細胞／ｍＬに希釈した。細胞懸濁液のアリコート２００μＬを様々な濃度の試験化合物１μＬを予め添加した９６ウェルプレートのウェルに添加し、プレートを飽和湿度の５％ＣＯ２下の３７℃で４８時間インキュベートした。細胞培養の最後に、ＰｒｅｓｔｏＢｌｕｅ（登録商標）Ｃｅｌｌ Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ試薬（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）のアリコート１０μＬをウェルに添加し、プレートを３７℃で約６０分間インキュベートした。５７０および６００ｎｍにおける吸収をＳｐｅｃｔｒａＭａｘＭｉｃｒｏｐｌａｔｅリーダー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ）を用いて測定した。５７０ｎｍにおける吸光度を６００ｎｍにおける吸光度に対して正規化した。５７０ｎｍでの正規化吸光度を、メジアン効果プロット法に従ってＩＣ５０計算に使用した（ＴＣ Ｃｈｏｕ．Ｔｈｅｏｒｅｔｉｃａｌ ｂａｓｉｓ，ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｄｅｓｉｇｎ，ａｎｄ ｃｏｍｐｕｔｅｒｉｚｅｄ ｓｉｍｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｙｎｅｒｇｉｓｍ ａｎｄ ａｎｔａｇｏｎｉｓｍ ｉｎ ｄｒｕｇ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｓｔｕｄｉｅｓ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｒｅｖ．２００６；５８：６２１－６８１）。
【0208】
化合物Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、Ｘ、ＸＩ、ＸＩＩ、ＸＩＩＩ、およびＸＩＶは、それぞれ、＜１５ｎＭのＩＣ５０値でＳＵ－ＤＨＬ－４の成長の濃度依存的阻害を示した。
【0209】
化合物Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、Ｘ、ＸＩ、ＸＩＩ、ＸＩＩＩ、およびＸＩＶは、それぞれ、＜２ｎＭのＩＣ５０値でＫ５６２細胞の成長の濃度依存的阻害を示した。
【0210】
化合物Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、ＶＩ、ＶＩＩ、ＶＩＩＩ、ＩＸ、Ｘ、ＸＩ、ＸＩＩ、ＸＩＩＩ、およびＸＩＶは、それぞれ、＜５０ｎＭのＩＣ５０値でＭｉｎｏの成長の濃度依存的阻害を示した。
【0211】
例１７
代謝安定性
肝臓ミクロソームにおける代謝安定性：試験化合物およびダサチニブを、１０ｍＭ ＭｇＣｌ２、１ｍＭ ＮＡＤＰＨ、および２ｍＭ ＵＤＰＧＡを含有する０．１Ｍリン酸緩衝液中、３７℃で０～６０分の範囲の時点で、ヒト肝臓ミクロソーム（０．５ｍｇ／ｍＬ）（Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｉｎｃ．，Ｔｅｗｋｓｂｕｒｙ、ＭＡ）中で１μＭの濃度でインキュベートした（図１参照）。ダサチニブ（ＨＹ１０１８１／ＣＳ０１００、３０２９６２－４９－８、バッチ番号：１３０４４）は、ＭｅｄＣｈｅｍＥｘｐｒｅｓｓ ＵＳＡ（Ｍｏｎｍｏｕｔｈ Ｊｕｎｃｔｉｏｎ，ＮＪ）から購入した。様々な時点でのインキュベーション反応を、１００ｎＭのレセルピンを含有する２倍容量のアセトニトリルを添加することによってクエンチした。クエンチしたインキュベーション試料を４０００ＲＰＭで１０分間遠心分離し、上清をＬＣ／ＭＳ／ＭＳ分析のために注入した。ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ分析は、Ｓｈｉｍａｄｚｕ Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅ ＵＦＬＣＸＲ ２０シリーズ（ＣＢＭ－２０Ａ制御装置、２つのＬＣ－２０ＡＤＸＲ溶媒送出ユニット、ＳＩＬ－２０ＡＣ ＨＴオートサンプラー、ＣＴＯ－２０Ａカラムオーブン、およびＳＰＤ－２０Ａ ＵＶ検出器を含む）と一体となったＡＢ Ｓｃｉｅｘ ４０００ ＱトラップＬＣ／ＭＳ／ＭＳシステムで行った。２つの溶媒系：０．１％ギ酸を含有する水中２ｍＭ酢酸アンモニウム（Ａ）およびメタノール（Ｂ）で溶出するＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｃｏｌｕｍｂｕｓカラム（Ｃ１８、４μｍ、５０×２ｍｍ）で試料を２５％Ｂで始まる直線勾配で分離した。ＬＣ／ＭＳ／ＭＳデータを取得するために、ポジティブモードでのエレクトロスプレーイオン化を使用した。インビトロｔ１／２および内在性クリアランスは、以前に報告された方法を使用して計算した（Ｏｂａｔｃｈ Ｓ．Ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｃｌｅａｒａｎｃｅ ｏｆ ｔｗｅｎｔｙ－ｎｉｎｅ ｄｒｕｇｓ ｆｒｏｍ ｈｅｐａｔｉｃ ｍｉｃｒｏｓｏｍａｌ ｉｎｔｒｉｎｓｉｃ ｃｌｅａｒａｎｃｅ ｄａｔａ：Ａｎ ｅｘａｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｈａｌｆ－ｌｉｆｅ ａｐｐｒｏａｃｈ ａｎｄ ｎｏｎｓｐｅｃｉｆｉｃ ｂｉｎｄｉｎｇ ｔｏ ｍｉｃｒｏｓｏｍｅｓ．Ｄｒｕｇ Ｍｅｔａｂ Ｄｉｓｐｏｓ．１９９９；２７（１１）：１３５０－９）。
代謝安定性
肝臓ミクロソームにおける代謝安定性：試験化合物およびダサチニブを、１０ｍＭ ＭｇＣｌ２、１ｍＭ ＮＡＤＰＨ、および２ｍＭ ＵＤＰＧＡを含有する０．１Ｍリン酸緩衝液中、３７℃で０～６０分の範囲の時点で、ヒト肝臓ミクロソーム（０．５ｍｇ／ｍＬ）（Ｃｏｒｎｉｎｇ Ｉｎｃ．，Ｔｅｗｋｓｂｕｒｙ、ＭＡ）中で１μＭの濃度でインキュベートした（図１参照）。ダサチニブ（ＨＹ１０１８１／ＣＳ０１００、３０２９６２－４９－８、バッチ番号：１３０４４）は、ＭｅｄＣｈｅｍＥｘｐｒｅｓｓ ＵＳＡ（Ｍｏｎｍｏｕｔｈ Ｊｕｎｃｔｉｏｎ，ＮＪ）から購入した。様々な時点でのインキュベーション反応を、１００ｎＭのレセルピンを含有する２倍容量のアセトニトリルを添加することによってクエンチした。クエンチしたインキュベーション試料を４０００ＲＰＭで１０分間遠心分離し、上清をＬＣ／ＭＳ／ＭＳ分析のために注入した。ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ分析は、Ｓｈｉｍａｄｚｕ Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅ ＵＦＬＣＸＲ ２０シリーズ（ＣＢＭ－２０Ａ制御装置、２つのＬＣ－２０ＡＤＸＲ溶媒送出ユニット、ＳＩＬ－２０ＡＣ ＨＴオートサンプラー、ＣＴＯ－２０Ａカラムオーブン、およびＳＰＤ－２０Ａ ＵＶ検出器を含む）と一体となったＡＢ Ｓｃｉｅｘ ４０００ ＱトラップＬＣ／ＭＳ／ＭＳシステムで行った。２つの溶媒系：０．１％ギ酸を含有する水中２ｍＭ酢酸アンモニウム（Ａ）およびメタノール（Ｂ）で溶出するＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｃｏｌｕｍｂｕｓカラム（Ｃ１８、４μｍ、５０×２ｍｍ）で試料を２５％Ｂで始まる直線勾配で分離した。ＬＣ／ＭＳ／ＭＳデータを取得するために、ポジティブモードでのエレクトロスプレーイオン化を使用した。インビトロｔ１／２および内在性クリアランスは、以前に報告された方法を使用して計算した（Ｏｂａｔｃｈ Ｓ．Ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｃｌｅａｒａｎｃｅ ｏｆ ｔｗｅｎｔｙ－ｎｉｎｅ ｄｒｕｇｓ ｆｒｏｍ ｈｅｐａｔｉｃ ｍｉｃｒｏｓｏｍａｌ ｉｎｔｒｉｎｓｉｃ ｃｌｅａｒａｎｃｅ ｄａｔａ：Ａｎ ｅｘａｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｈａｌｆ－ｌｉｆｅ ａｐｐｒｏａｃｈ ａｎｄ ｎｏｎｓｐｅｃｉｆｉｃ ｂｉｎｄｉｎｇ ｔｏ ｍｉｃｒｏｓｏｍｅｓ．Ｄｒｕｇ Ｍｅｔａｂ Ｄｉｓｐｏｓ．１９９９；２７（１１）：１３５０－９）。
【0212】
例１８
薬物動態
薬物動態：化合物ＩＶおよびダサチニブ（２－ｉｎ－１）の両方を、静脈内投与用に２．５％ＤＭＳＯ、２０％プロピレングリコール３００、および８％デキストロース溶液（５０％）を含有する水中に０．２ｍｇ／ｍＬ（各化合物）の濃度で、ならびに経口投与用に５％ＤＭＳＯ、２０％プロピレングリコール３００、および１０％デキストロース溶液（５０％）を含有する水中０．２５ｍｇ／ｍＬ（各化合物）の濃度で溶解した。化合物Ｖおよび化合物ＩＩＩ（２－ｉｎ－１）の両方を、静脈内投与用に２．５％ＤＭＳＯ、２０％プロピレングリコール３００、および８％デキストロース溶液（５０％）を含有する水中に０．２ｍｇ／ｍＬ（各化合物）の濃度で、ならびに経口投与用に５％ＤＭＳＯ、２０％プロピレングリコール３００、および１０％デキストロース溶液（５０％）を含有する水中０．２５ｍｇ／ｍＬ（各化合物）の濃度で溶解した。化合物Ｘおよびダサチニブ（２－ｉｎ－１）を両方とも、静脈内投与用に２．５％ＤＭＳＯ、３０％プロピレングリコール３００、および１０％デキストロース溶液（５０％）を含有する水中に０．２ｍｇ／ｍＬ（各化合物）の濃度で、ならびに経口投与用に５％ＤＭＳＯ、５０％プロピレングリコール３００、および１０％Ｓｏｌｕｔｏｌ（登録商標）ＨＳ １５（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ）を含有する水中０．５ｍｇ／ｍＬ（各化合物）の濃度で溶解した。化合物ＸＩおよび化合物ＩＩＩ（２－ｉｎ－１）の両方を、静脈内投与用に２．５％ＤＭＳＯ、３０％プロピレングリコール３００、および１０％デキストロース溶液（５０％）を含有する水中に０．２ｍｇ／ｍＬ（各化合物）の濃度で、ならびに経口投与用に５％ＤＭＳＯ、５０％プロピレングリコール、および１０％Ｓｏｌｕｔｏｌ（登録商標）ＨＳ １５を含有する水中０．５ｍｇ／ｍＬ（各化合物）の濃度で溶解した。
薬物動態
薬物動態：化合物ＩＶおよびダサチニブ（２－ｉｎ－１）の両方を、静脈内投与用に２．５％ＤＭＳＯ、２０％プロピレングリコール３００、および８％デキストロース溶液（５０％）を含有する水中に０．２ｍｇ／ｍＬ（各化合物）の濃度で、ならびに経口投与用に５％ＤＭＳＯ、２０％プロピレングリコール３００、および１０％デキストロース溶液（５０％）を含有する水中０．２５ｍｇ／ｍＬ（各化合物）の濃度で溶解した。化合物Ｖおよび化合物ＩＩＩ（２－ｉｎ－１）の両方を、静脈内投与用に２．５％ＤＭＳＯ、２０％プロピレングリコール３００、および８％デキストロース溶液（５０％）を含有する水中に０．２ｍｇ／ｍＬ（各化合物）の濃度で、ならびに経口投与用に５％ＤＭＳＯ、２０％プロピレングリコール３００、および１０％デキストロース溶液（５０％）を含有する水中０．２５ｍｇ／ｍＬ（各化合物）の濃度で溶解した。化合物Ｘおよびダサチニブ（２－ｉｎ－１）を両方とも、静脈内投与用に２．５％ＤＭＳＯ、３０％プロピレングリコール３００、および１０％デキストロース溶液（５０％）を含有する水中に０．２ｍｇ／ｍＬ（各化合物）の濃度で、ならびに経口投与用に５％ＤＭＳＯ、５０％プロピレングリコール３００、および１０％Ｓｏｌｕｔｏｌ（登録商標）ＨＳ １５（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ）を含有する水中０．５ｍｇ／ｍＬ（各化合物）の濃度で溶解した。化合物ＸＩおよび化合物ＩＩＩ（２－ｉｎ－１）の両方を、静脈内投与用に２．５％ＤＭＳＯ、３０％プロピレングリコール３００、および１０％デキストロース溶液（５０％）を含有する水中に０．２ｍｇ／ｍＬ（各化合物）の濃度で、ならびに経口投与用に５％ＤＭＳＯ、５０％プロピレングリコール、および１０％Ｓｏｌｕｔｏｌ（登録商標）ＨＳ １５を含有する水中０．５ｍｇ／ｍＬ（各化合物）の濃度で溶解した。
【0213】
Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙラット（体重約２７５～３００ｇ、Ｎ＝３）に上記投薬溶液を５ｍＬ／ｋｇで静脈内投薬し、１０ｍＬ／ｋｇで経口投薬した。血液試料を、抗凝固剤としてＥＤＴＡを含有するチューブに、投与後０、０．２５（静脈内のみ）、０．５、１、２、４、８、１０、および２４時間で収集し、血漿試料を遠心分離によって調製した。血漿試料を、内部標準として１００ｎＭのレセルピンを含有する３倍容量のアセトニトリルと混合し、４０００ＲＰＭで１５分間遠心分離した。Ｓｈｉｍａｄｚｕ Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅ ＵＦＬＣＸＲ ２０シリーズ（ＣＢＭ－２０Ａ制御装置、２つのＬＣ－２０ＡＤＸＲ溶媒送出ユニット、ＳＩＬ－２０ＡＣ ＨＴオートサンプラー、ＣＴＯ－２０Ａカラムオーブン、およびＳＰＤ－２０Ａ ＵＶ検出器を含む）と一体となったＡＢ Ｓｃｉｅｘ ４０００ ＱトラップＬＣ／ＭＳ／ＭＳシステムで行われるＬＣ／ＭＳ／ＭＳ分析に上清を注入した。 ２つの溶媒系：０．１％ギ酸を含有する水中２ｍＭ酢酸アンモニウム（Ａ）およびメタノール（Ｂ）で溶出するＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｃｏｌｕｍｂｕｓカラム（Ｃ１８、４μｍ、５０×２ｍｍ）で試料を２５％Ｂで始まる直線勾配で分離した。ＬＣ／ＭＳ／ＭＳデータを取得するために、ポジティブモードでのエレクトロスプレーイオン化を使用した。化合物ＩＩＩ、ＩＶ、Ｖ、Ｘ、ＸＩ、およびダサチニブの血漿濃度をそれぞれ標準曲線を使用して定量した。
【0214】
例１９
組織分布
肺組織および血漿濃度比：化合物Ｘおよびダサチニブ（２－ｉｎ－１）の両方を５％ＤＭＳＯ、および５０％プロピレングリコール３００、および９％Ｓｏｌｕｔｏｌ（登録商標）ＨＳ １５を含有する水中に０．５ｍｇ／ｍＬ（各化合物）の濃度で溶解した。化合物ＸＩおよびダサチニブ（２－ｉｎ－１）の両方を５％ＤＭＳＯ、２０％プロピレングリコール３００を含有する水中に０．５ｍｇ／ｍＬ（各化合物）の濃度で溶解した。
ＣＤ－１マウス（約体重３０ｇ、Ｎ＝３）を１０ｍＬ／ｋｇで強制経口により投薬した。化合物Ｘの投与後１、２、４、１０時間、化合物ＸＩの投薬前、投薬後１、２、３、８、１０、および２４時間後に抗凝固剤としてＥＤＴＡを含有する試験管に血液試料を収集した。血漿試料は、遠心分離によって調製した。肺試料も上記の各時点で収集した。肺試料を４×蒸留水（ｖ／ｗ）中でホモジナイズした。血漿試料および均質化された肺組織試料を、内部標準として１００ｎＭのレセルピンを含有する３倍容量のアセトニトリルと混合し、４０００ＲＰＭで１５分間遠心分離した。Ｓｈｉｍａｄｚｕ Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅ ＵＦＬＣＸＲ ２０シリーズ（ＣＢＭ－２０Ａ制御装置、２つのＬＣ－２０ＡＤＸＲ溶媒送出ユニット、ＳＩＬ－２０ＡＣ ＨＴオートサンプラー、ＣＴＯ－２０Ａカラムオーブン、およびＳＰＤ－２０Ａ ＵＶ検出器を含む）と一体となったＡＢ Ｓｃｉｅｘ ４０００ ＱトラップＬＣ／ＭＳ／ＭＳシステムで行われるＬＣ／ＭＳ／ＭＳ分析に上清を注入した。２つの溶媒系：０．１％ギ酸を含有する水中２ｍＭ酢酸アンモニウム（Ａ）およびメタノール（Ｂ）で溶出するＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｃｏｌｕｍｂｕｓカラム（Ｃ１８、４μｍ、５０×２ｍｍ）で試料を２５％で始まる直線勾配で分離した。ＬＣ／ＭＳ／ＭＳデータを取得するために、ポジティブモードでのエレクトロスプレーイオン化を使用した。化合物Ｘ、ＸＩ、およびダサチニブの血漿および組織濃度は、それぞれ標準曲線を使用して決定した。
組織分布
肺組織および血漿濃度比：化合物Ｘおよびダサチニブ（２－ｉｎ－１）の両方を５％ＤＭＳＯ、および５０％プロピレングリコール３００、および９％Ｓｏｌｕｔｏｌ（登録商標）ＨＳ １５を含有する水中に０．５ｍｇ／ｍＬ（各化合物）の濃度で溶解した。化合物ＸＩおよびダサチニブ（２－ｉｎ－１）の両方を５％ＤＭＳＯ、２０％プロピレングリコール３００を含有する水中に０．５ｍｇ／ｍＬ（各化合物）の濃度で溶解した。
ＣＤ－１マウス（約体重３０ｇ、Ｎ＝３）を１０ｍＬ／ｋｇで強制経口により投薬した。化合物Ｘの投与後１、２、４、１０時間、化合物ＸＩの投薬前、投薬後１、２、３、８、１０、および２４時間後に抗凝固剤としてＥＤＴＡを含有する試験管に血液試料を収集した。血漿試料は、遠心分離によって調製した。肺試料も上記の各時点で収集した。肺試料を４×蒸留水（ｖ／ｗ）中でホモジナイズした。血漿試料および均質化された肺組織試料を、内部標準として１００ｎＭのレセルピンを含有する３倍容量のアセトニトリルと混合し、４０００ＲＰＭで１５分間遠心分離した。Ｓｈｉｍａｄｚｕ Ｐｒｏｍｉｎｅｎｃｅ ＵＦＬＣＸＲ ２０シリーズ（ＣＢＭ－２０Ａ制御装置、２つのＬＣ－２０ＡＤＸＲ溶媒送出ユニット、ＳＩＬ－２０ＡＣ ＨＴオートサンプラー、ＣＴＯ－２０Ａカラムオーブン、およびＳＰＤ－２０Ａ ＵＶ検出器を含む）と一体となったＡＢ Ｓｃｉｅｘ ４０００ ＱトラップＬＣ／ＭＳ／ＭＳシステムで行われるＬＣ／ＭＳ／ＭＳ分析に上清を注入した。２つの溶媒系：０．１％ギ酸を含有する水中２ｍＭ酢酸アンモニウム（Ａ）およびメタノール（Ｂ）で溶出するＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｃｏｌｕｍｂｕｓカラム（Ｃ１８、４μｍ、５０×２ｍｍ）で試料を２５％で始まる直線勾配で分離した。ＬＣ／ＭＳ／ＭＳデータを取得するために、ポジティブモードでのエレクトロスプレーイオン化を使用した。化合物Ｘ、ＸＩ、およびダサチニブの血漿および組織濃度は、それぞれ標準曲線を使用して決定した。
【0215】
本明細書に記載された実施例および実施形態は、例示目的のみのためであり、それを考慮した様々な修正または変更が当業者に示唆され、本出願の趣旨および範囲ならびに添付の特許請求の範囲の範囲内に含まれるべきである。本明細書に引用された全ての刊行物、特許、および特許出願は、参照により本明細書に組み込まれる。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
