7093161 糖尿病改善剤又は予防剤

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2022-06-21

(45)【発行日】2022-06-29

(54)【発明の名称】糖尿病改善剤又は予防剤

(51)【国際特許分類】

   A61K 36/064 20060101AFI20220622BHJP

   A23L 33/13 20160101ALI20220622BHJP

   A23L 33/145 20160101ALI20220622BHJP

   A61K 31/706 20060101ALI20220622BHJP

   A61P 3/10 20060101ALI20220622BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20220622BHJP

【ＦＩ】

A61K36/064

A23L33/13

A23L33/145

A61K31/706

A61P3/10

A61P43/00 105

A61P43/00 121

【請求項の数】 2

(21)【出願番号】P 2017113480

(22)【出願日】2017-06-08

(65)【公開番号】P2018203691

(43)【公開日】2018-12-27

【審査請求日】2020-06-08

(73)【特許権者】

【識別番号】519127797

【氏名又は名称】三菱商事ライフサイエンス株式会社

(74)【代理人】

【識別番号】100160978

【弁理士】

【氏名又は名称】榎本 政彦

(72)【発明者】

【氏名】佐伯 知美

(72)【発明者】

【氏名】深水 祐一郎

(72)【発明者】

【氏名】濱澤 和弘

【審査官】原口 美和

(56)【参考文献】

【文献】国際公開第２０１７／０２２７６８（ＷＯ，Ａ１）

【文献】米国特許出願公開第２００７／００８２３７３（ＵＳ，Ａ１）

【文献】Cell Metabolism，2011年，Vol. 14, No. 4，pp. 528-536

【文献】Cell Metabolism，2016年，Vol. 24, No. 6，pp. 795-806

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

Ａ６１Ｋ ３６／０６４

Ａ２３Ｌ ３３／１３

Ａ２３Ｌ ３３／１４５

Ａ６１Ｋ ３１／７０６

Ａ６１Ｐ ３／１０

Ａ６１Ｐ ４３／００

ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

β－ＮＭＮ含有酵母エキスを有効成分として含む筋肉組織におけるグルコース取り込み能上昇剤。

【請求項2】

β－ＮＭＮ含有酵母エキスを有効成分として含む筋肉組織におけるグルコース取り込み能下降抑制剤。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、糖尿病、さらには糖尿病に起因する様々な合併症の予防剤または改善剤に関する。

【背景技術】

【0002】

糖尿病は、血糖値やヘモグロビンＡ１ｃ（ＨｂＡ１ｃ）値が一定の基準を超えている状態をさす疾患である。糖尿病は、高血糖そのものによる症状を起こすこともあるほか、長期にわたると血中の高濃度のグルコースがそのアルデヒド基の反応性の高さのため血管内皮のタンパク質と結合する糖化反応を起こし、体中の微小血管が徐々に破壊されていき、糖尿病性神経障害、糖尿病性網膜症、糖尿病性腎症などに病態が進行していく場合がある。糖尿病の発症にかかわる因子は多岐にわたり確立した治療法はない。通常、運動・食事療法が行われているが、それ以外にも薬剤での治療や栄養補助食品などを利用した食事療法が求められている。さらに、糖尿病は、糖尿病性神経障害、糖尿病性網膜症、糖尿病性腎症へと進展する可能性があることから、より積極的な治療等が必要とされている。

【0003】

また、糖尿病は、インスリン抵抗性、肥満及び高脂血症を伴っていることが多く、他の生活習慣病などの治療を行っていることがあるため、合併症の治療を阻害しない改善をする必要もある。そのため、効果が高く、副作用の心配がなく、摂取が容易であり、長期間服用ができる糖尿病の治療効果のある機能性食品、サプリメントなども求められていた。

【0004】

一方、β‐ニコチンアミドモノヌクレオチド（β－ＮＭＮ）は生体内のサルベージ経路の中核物質であるNicotinamide Adenine Dinucleotide （ＮＡＤ）の中間代謝物である。β－ＮＭＮ投与によるＮＡＤ増加に伴う、Sirt１に代表される「サーチュイン遺伝子 （長寿遺伝子）」の活性化による抗老化 （アンチエイジング）を示す。近年、β－ＮＭＮが関わる機能として、「サーカディアンクロックへの関与 （非特許文献１）」、「脂質や糖代謝異常の改善 （非特許文献２）」、「老化によるミトコンドリア機能の改善 （非特許文献３）」、「虚血再灌流からの心臓の保護 （非特許文献４）」、「老化による神経幹細胞の減少抑制 （非特許文献５）」、「エピジェネティク抑制による糖尿病性アルブミン尿の抑制 （非特許文献６）」などが報告されている。このように、糖代謝、糖尿病や神経変性疾患、心疾患など老化現象に関わるさまざまな生体現象は、β－ＮＭＮがサーチュイン活性のトリガーになることで抑制することができ、最終的には生命の延命に繋がるとされている。

【0005】

また、酵母は、各種食品等に使用されており、トルラ酵母（Candida utilis）は、アメリカ食品医薬品局 （ＦＡＤ）より高い栄養機能性と食経験からの安全性が評価されている食用酵母である。このことより、長年にわたって医薬品やサプリメント、調味料などに有効活用されており、β－ＮＭＮ含有酵母エキスについても食品への利用が知られている（特許文献１）。しかし、β－ＮＭＮ含有酵母エキスが糖尿病の改善又は予防に有効であることは、知られていなかった。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0006】

【文献】国際公開ＷＯ２０１７／０２２７６８

【非特許文献】

【0007】

【文献】Ramsey, KM . et al. Circadian clock feedback cycle through NAMPT-mediated NAD+ biosynthesis . Science. 2009, 324(5927), P. 651-654.

【文献】J, Yoshino . et al. Nicotinamide Mononucleotide, a Key NAD+Intermediate, Treats the Pathophysiology of Diet- and Age-Induced Diabetes in Mice . Cell Metab. 2011, 14(4), P. 528-536.

【文献】Ana, P. Gomes . et al. Declining NAD+ Induces a Pseudohypoxic State Disrupting Nuclear-Mitochondrial Communication during Aging . Cell.2013, 155(7), P. 1624-1638.

【文献】T, Yamamoto . et al. Nicotinamide mononucleotide, an intermediate of NAD+ synthesis, protects the heart from ischemia and reperfusion .PLoS One. 2014, 9(6), e98972.

【文献】Liana, R Stein . et al. Specific ablation of Nampt in adultneural stem cells recapitulates their functional defects during aging . EMBOJ. 2014, 33(12), P. 1321-1340

【文献】K, Hasegawa . et al. Renal tubular Sirt1 attenuates diabeticalbuminuria by epigenetically suppressing Claudin-1 overexpression in podoc ytes . Nat Med. 2013, 19(11), P. 1496-1504

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0008】

本願は、糖尿病、さらには糖尿病に起因する様々な合併症の予防剤または改善剤を提供することを課題とする。

【課題を解決するための手段】

【0009】

本願発明者らは、β－ＮＭＮ含有酵母エキスが、糖尿病、さらには糖尿病に起因する様々な合併症の予防または改善する効果を有することを見出し、本発明を完成させた。

【0010】

本発明は、以下の通りである。
（１）β－ＮＭＮ含有酵母エキスを有効成分として含む糖尿病改善剤。
（２）β－ＮＭＮ含有酵母エキスを有効成分として含む糖尿病予防剤。
（３）糖尿病改善用β－ＮＭＮ含有酵母エキス。
（４）糖尿病予防用β－ＮＭＮ含有酵母エキス。

【発明の効果】

【0011】

本発明の糖尿病改善剤又は予防剤は、糖尿病に対して、血中の高濃度のグルコースを低減して高血糖を改善するために有効に用いることができ、さらに糖尿病性神経障害、糖尿病性網膜症、糖尿病性腎症への進展を予防又は改善する作用を有する。さらに、本願発明は、食品として用いられている酵母エキスを予防剤又は改善剤として利用できるため、通常の食品だけでなく、介護食等の食品にも添加することが可能となり、摂取が容易となる利点がある。

【発明を実施するための形態】

【0012】

以下、本発明を詳細に説明する。
本願発明において、糖尿病とは、妊娠糖尿病、若年発症成人型糖尿病、持続性糖尿病、ステロイド糖尿病、Ｉ型糖尿病あるいはＩＩ型糖尿病を含むいずれの病態でもよく、好ましくはＩＩ型糖尿病である。

【0013】

本願発明において、糖尿病の改善とは、糖尿病を悪化させないということである。また糖尿病性神経障害、糖尿病性網膜症、糖尿病性腎症などの疾病の治療効果を指す。具体的には、例えば筋肉組織におけるグルコース取り込み能の上昇又は下降抑制を指している。また、本願発明において、糖尿病の予防とは、例えば筋肉組織における、グルコース取り込み能の上昇又は下降抑制を指している。なお、筋肉組織は体内で最も糖の消費量が多い組織であり、筋肉組織へのグルコース取り込み能とＩＩ型糖尿病との関係は良く知られている。

【0014】

本発明でいうβ－ＮＭＮ含有酵母エキスは、β－ＮＭＮを含有した酵母エキスであり、医薬品又は食品として使用できる方法で取得されれば、特に制限はない。例えば、国際公開ＷＯ２０１７／０２２７６８号に開示された製造方法を用いて得ることができ、「ハイチオンエキスＹＨ８」（興人ライフサイエンス社製）を基質に、通常用いられる酵素処理でＮＡＤをβ－ＮＭＮに変換したものなどが挙げられる。さらに、β‐ＮＭＮ含有酵母エキスから精製したβ‐ＮＭＮを、本発明のβ‐ＮＭＮ含有酵母エキスの代替として用いることもできる。精製法は、イオン交換樹脂等を用いた、一般的に採用できる精製法が利用できる。

【0015】

本発明の糖尿病改善剤または予防剤の有効成分は、β－ＮＭＮ含有酵母エキスであるため、β－ＮＭＮ含有酵母エキスをそのまま糖尿病改善剤または予防剤として投与することもできる。また、β‐ＮＭＮのサーチュイン活性を低下させない又はβ‐ＮＭＮのサーチュイン活性を増加させる他の素材との混合物にして投与してもよい。例えば、賦形剤、希釈剤となるマルチトール、ソルビトール、澱粉などである。糖尿病改善剤または予防剤の形態は、特に制限されず、β－ＮＭＮ含有酵母エキスを含有するものであれば、固形状、油状、溶液状など何れのものでもよい。

【0016】

本発明に係るβ－ＮＭＮ含有酵母エキスの投与方法は特に限定されず、経口投与、静脈内、腹膜内もしくは皮下投与等の非経口投与をあげることができる。具体的には、錠剤、散剤、顆粒剤、丸剤、懸濁剤、乳剤、浸剤・剤、カプセル剤、シロップ剤、液剤、エリキシル剤、エキス剤、チンキ剤、流エキス剤等の経口剤、又は注射剤、点滴剤、クリーム剤、坐剤等の非経口剤のいずれでもよい。

【0017】

本発明の投与量は、β‐ＮＭＮの活性が発現される量を投与すればよい。ヒトに投与する場合の投与量および投与回数は、投与形態、被投与者の年齢、体重等により異なる。

【0018】

本発明の糖尿病改善剤または予防剤は、医薬品だけでなく、食料品、飲料品、嗜好品、機能性食品、栄養補助食品、サプリメントとしても摂取可能である。ヒトが摂取する場合の摂取量および摂取回数は、摂取形態、被摂取者の年齢、体重等により異なる。

【実施例】

【0019】

以下に実施例を挙げて本発明をさらに詳細に説明するが、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。

【0020】

［実施例１］
（ラット筋芽細胞（Ｌ６細胞）におけるグルコース取り込み活性測定）
ラット筋芽細胞（Ｌ６細胞）を用いて、さらに本発明の効果を確認した。Ｌ６細胞を、１０％牛胎児血清を含むＤ‐ＭＥＭ培地で９６ウェルプレートに播種（１×１０^３ ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌ）し、４８時間前培養した（５％ ＣＯ_２、３７℃）後、２％馬血清を含むＤ‐ＭＥＭ培地に交換して９６時間培養（５％ ＣＯ_２、３７℃）して分化を誘導させた。続いて、０．２％ＢＳＡを含む無血清のＭＥＭ培地に交換して１６時間同調培養（５％ ＣＯ_２、３７℃）した後、ＫＲＰＨバッファーでウェルを洗浄し、１００μＭの２－ＮＢＤＧを含むＫＲＰＨバッファー（０．１％ＢＳＡ含有）に溶解したサンプル溶液を１００μＬ加え、２０分間インキュベート（５％ ＣＯ_２、３７℃）した。酵母エキスを含まない溶液をコントロールとした。その後、溶液を、氷冷したＫＲＰＨバッファー１００μＬと交換して反応を停止させ、マイクロプレートリーダーを用いて細胞内に取り込まれた蛍光性グルコース類似体である２－ＮＢＤＧの蛍光強度を、励起波長４７０ ｎｍ、検出波長５５０ ｎｍで測定した。グルコース取り込み活性は、コントロールの蛍光強度（Ｆ_Ｃ）を１００としたときの、サンプル溶液を反応させた場合の蛍光強度（Ｆ_Ｓ）の割合として、以下の式により求めた。
グルコース取り込み活性（％）＝Ｆ_Ｓ／Ｆ_Ｃ×１００
なお、サンプル溶液には、β－ＮＭＮ含量が０．６７質量％の酵母エキス（終濃度１ｍｇ／ｍＬ）を用いた。この酵母エキスは、「ハイチオンエキスＹＨ８」（興人ライフサイエンス社製）を基質に、酵素処理でＮＡＤをβ－ＮＭＮに変換したものである。なお、ＮＡＤ含量は０．０３％であった。

【0021】

β－ＮＭＮ含量が０．６７質量％の酵母エキス（終濃度１ｍｇ／ｍＬ）を用いた場合、グルコース取り込み活性は１５４％で、有意にグルコース取り込み活性が上昇した。

【0022】

［比較例１］
サンプル溶液にβ－ＮＭＮ含量が０．００質量％の酵母エキス（終濃度１ｍｇ／ｍＬ）を用いたこと以外は、実施例１と同様に行った。なお、この酵母エキスは、実施例１で用いた「ハイチオンエキスＹＨ８」（興人ライフサイエンス社製）そのものである。ＮＡＤ含量は０．８７％であった。β－ＮＭＮ含量が０．００質量％の酵母エキス（終濃度１ｍｇ／ｍＬ）のグルコース取り込み活性を測定したところ、１０６％で有意なグルコース取り込み活性は認められなかった。

【0023】

［確認試験１］
サンプル溶液にβ－ＮＭＮ（ＳＩＧＭＡ社製）（終濃度０．６７質量％）を用いたこと以外は、実施例１と同様に行った。β－ＮＭＮ（ＳＩＧＭＡ社製）（終濃度０．６７質量％）を用いた場合、グルコース取り込み活性は１５５％で、有意にグルコース取り込み活性が上昇した。

【0024】

［確認試験２］
サンプル溶液にインスリン（終濃度１００ ｎＭ）を用いたこと以外は、実施例１と同様に行った。ポジティブコントロールであるインスリン（終濃度１００ ｎＭ）のグルコース取り込み活性は１４５％で、有意にグルコース取り込み活性が上昇した。

【0025】

本実施例の結果から、β－ＮＭＮ含有酵母エキスは、ラット筋芽細胞においてグルコースの取り込みを促進する事が示唆され、糖尿病への有効性が確認された。従って、本発明のβ－ＮＭＮ含有酵母エキスは糖尿病、さらには糖尿病に起因する様々な合併症の予防に対して有効であると考えられる。