(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】特許公報(B2)
(11)【特許番号】
(24)【登録日】2022-07-21
(45)【発行日】2022-07-29
(54)【発明の名称】角膜創傷治癒および眼表面疾患のためのヒスタチン
(51)【国際特許分類】
A61K 38/12 20060101AFI20220722BHJP
A61P 27/02 20060101ALI20220722BHJP
A61P 29/00 20060101ALI20220722BHJP
A61P 31/00 20060101ALI20220722BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20220722BHJP
A61K 9/08 20060101ALI20220722BHJP
A61K 9/06 20060101ALI20220722BHJP
A61K 38/08 20190101ALI20220722BHJP
A61K 38/10 20060101ALI20220722BHJP
A61K 38/16 20060101ALI20220722BHJP
C12N 15/12 20060101ALN20220722BHJP
【ＦＩ】
A61K38/12 ZNA
A61P27/02
A61P29/00
A61P31/00
A61P43/00 121
A61K9/08
A61K9/06
A61K38/08
A61K38/10
A61K38/16
C12N15/12
【請求項の数】
9
【外国語出願】
(21)【出願番号】P 2020081263
(22)【出願日】2020-05-01
(62)【分割の表示】P 2018105539の分割
【原出願日】2013-05-10
(65)【公開番号】P2020143089
(43)【公開日】2020-09-10
【審査請求日】2020-05-30
(31)【優先権主張番号】61/648,845
(32)【優先日】2012-05-18
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】13/788,761
(32)【優先日】2013-03-07
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】13/788,803
(32)【優先日】2013-03-07
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(73)【特許権者】
【識別番号】520192119
【氏名又は名称】バイズス セラピューティクス，インク．
(74)【復代理人】
【識別番号】100208292
【弁理士】
【氏名又は名称】清原 直己
(74)【代理人】
【識別番号】100082072
【弁理士】
【氏名又は名称】清原 義博
(72)【発明者】
【氏名】サムバースキー，ロバート ピー．
(72)【発明者】
【氏名】バンダイン，ロバート ダブリュー．
(72)【発明者】
【氏名】コンドン，ピーター
【審査官】六笠 紀子
(56)【参考文献】
【文献】特表２０１５－５２６３８６（ＪＰ，Ａ）
【文献】特表平１１－５０８２３８（ＪＰ，Ａ）
【文献】特表２００２－５０８３９０（ＪＰ，Ａ）
【文献】国際公開第２００８／１３４８８２（ＷＯ，Ａ１）
【文献】国際公開第２００９／８７１１７（ＷＯ，Ａ１）
【文献】The Ocular Surface, 2004, vol.2, No.4, p.229-247
(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)
Ａ６１Ｋ ３８／００－３８／５８
Ｃ１２Ｎ １５／００
ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）
ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）
(57)【特許請求の範囲】
【請求項1】
眼表面疾患を治療するための医薬組成物であって、眼表面疾患が、ドライアイ、角膜潰瘍およびびらん、炎症性および感染性角膜炎および結膜炎、外科的介入、ならびに外傷からなる群から選択され、
前記医薬組成物は第１のペプチドを含み、前記眼表面疾患を治療するための方法は、治療上の量の医薬組成物を眼の表面に投与する工程を含み、
前記医薬組成物によって治療されていない眼の表面と比較して、前記医薬組成物が眼表面疾患の治癒を促進するように、前記医薬組成物の治療上の量が選択され、
前記第１のペプチドは、ｉ）環化したヒスタチン１と、ｉｉ）環化したヒスタチン２からなる群より選択される第１のヒスタチンを含む、医薬組成物。
【請求項2】
方法が、ヒスタチンを含む、組織接着剤、点眼液、ゲル剤、または軟膏剤を使用して医薬組成物を投与する工程を含むか、または方法が、患者に着用されたコンタクトレンズへとヒスタチンを組み込むことによって、医薬組成物を継続的に投与する工程を含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項3】
医薬組成物中の第１のペプチドの濃度が、およそ０．１μｇ／ｍｌからおよそ１０００ｍｇ／ｍｌの間であるか、またはおよそ０．１μｇ／ｍｌから１０μｇ／ｍｌの間である、請求項１または２に記載の医薬組成物。
【請求項4】
方法が、複数日にわたって少なくとも１日１回、
複数日にわたって少なくとも１日２回、
複数日にわたって少なくとも１日３回、
複数日にわたって最大で１時間ごとに、
７日間１日３回、
および５日間１日４回、から成る群から選択される回数、治療上の量の医薬組成物を、眼の表面に投与する工程を繰り返すことをさらに含む、請求項１乃至３のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項5】
ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．１、ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．２、ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．３、ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．４、ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．５、ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．６、ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．７、ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．８、ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．９、ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．１０、ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．１１、ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．１２、ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．１３、ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．１４、ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．１５、ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．１６、ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．１７、ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．１８、ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．１９、ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．２０、ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．２１、ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．２２、ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．２３、ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．２４、ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．２５、ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．２６、ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．２７、ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．２８、ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．２９、ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．３０、ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．３１、ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．３２、ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．３３、およびＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．１乃至ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．３３の任意の組み合わせ、からなる群より選択されるアミノ酸配列を有する第２のペプチドをさらに含む、請求項１乃至４のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項6】
第１のペプチドおよび第２のペプチドがＬペプチドである、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項7】
第１のペプチドおよび第２のペプチドが環状ペプチドである、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項8】
第１のペプチドにおける第１のヒスタチンがａ）環化したヒスタチン１、および
ｂ）環化したヒスタチン２
からなる群より選択され、そして
第２のペプチドがＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．３０またはＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．３１より選択される、請求項５乃至７のいずれかに記載の医薬組成物。
【請求項9】
眼表面疾患を治療するための医薬組成物であって、眼表面疾患が、ドライアイ、角膜潰瘍およびびらん、炎症性および感染性角膜炎および結膜炎、外科的介入、ならびに外傷からなる群から選択され、
前記医薬組成物は第１のペプチドおよび第２のペプチドを含み、ここで、前記第１のペプチドは第１のヒスタチンを含み、前記第２のペプチドは第２のヒスタチンを含み、前記眼表面疾患を治療するための方法は、治療上の量の医薬組成物を眼の表面に投与する工程を含み、
医薬組成物によって治療されていない眼の表面と比較して前記医薬組成物が眼表面疾患の治癒を促進するように、前記医薬組成物の治療上の量が選択され、
前記第１のペプチドは、ｉ）環化したヒスタチン１、およびｉｉ）環化したヒスタチン２からなる群より選択される第１のヒスタチンを含み、
前記第２のペプチドがヒスタチン５を含む、医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【0001】
＜関連出願への言及＞
本出願は、考案の名称「ＨＩＳＴＡＴＩＮ ＦＯＲ ＣＯＲＮＥＡＬ ＷＯＵＮＤ ＨＥＡＬＩＮＧ ＡＮＤ ＯＣＵＬＡＲ ＳＵＲＦＡＣＥ ＤＩＳＥＡＳＥ」である、２０１３年３月７日に出願の、米国実用新案出願第１３／７８８，７６１、号および考案の名称「ＨＩＳＴＡＴＩＮ ＦＯＲ ＣＯＲＮＥＡＬ ＷＯＵＮＤ ＨＥＡＬＩＮＧ ＡＮＤ ＯＣＵＬＡＲ ＳＵＲＦＡＣＥ ＤＩＳＥＡＳＥ」である、２０１３年３月７日出願の、米国実用新案出願第１３／７８８，８０３号に開示された、１つ以上の発明を請求し、
その両方は、発明の名称「ＨＩＳＴＡＴＩＮ ＦＯＲ ＣＯＲＮＥＡＬ ＷＯＵＮＤ ＨＥＡＬＩＮＧ ＡＮＤ ＯＣＵＬＡＲ ＳＵＲＦＡＣＥ ＤＩＳＥＡＳＥ」である、２０１２年５月１８日に出願の、米国仮特許出願第６１／６４８，８４５号に開示された、１つ以上の発明を請求した。米国仮特許出願の３５ ＵＳＣ §１１９（ｅ）の下での利益は、本明細書によって請求され、前述の出願は、引用によって本明細書に組み込まれる。
本出願は、考案の名称「ＨＩＳＴＡＴＩＮ ＦＯＲ ＣＯＲＮＥＡＬ ＷＯＵＮＤ ＨＥＡＬＩＮＧ ＡＮＤ ＯＣＵＬＡＲ ＳＵＲＦＡＣＥ ＤＩＳＥＡＳＥ」である、２０１３年３月７日に出願の、米国実用新案出願第１３／７８８，７６１、号および考案の名称「ＨＩＳＴＡＴＩＮ ＦＯＲ ＣＯＲＮＥＡＬ ＷＯＵＮＤ ＨＥＡＬＩＮＧ ＡＮＤ ＯＣＵＬＡＲ ＳＵＲＦＡＣＥ ＤＩＳＥＡＳＥ」である、２０１３年３月７日出願の、米国実用新案出願第１３／７８８，８０３号に開示された、１つ以上の発明を請求し、
その両方は、発明の名称「ＨＩＳＴＡＴＩＮ ＦＯＲ ＣＯＲＮＥＡＬ ＷＯＵＮＤ ＨＥＡＬＩＮＧ ＡＮＤ ＯＣＵＬＡＲ ＳＵＲＦＡＣＥ ＤＩＳＥＡＳＥ」である、２０１２年５月１８日に出願の、米国仮特許出願第６１／６４８，８４５号に開示された、１つ以上の発明を請求した。米国仮特許出願の３５ ＵＳＣ §１１９（ｅ）の下での利益は、本明細書によって請求され、前述の出願は、引用によって本明細書に組み込まれる。
【技術分野】
【0002】
本発明は、創傷および疾患の治癒の分野に関する。より具体的には、本発明は、ヒスタチンを使用する、角膜創傷治癒および眼表面疾患の処置に関する。
【0003】
＜関連技術の記載＞
ヒスタチンは、唾液からの創傷治癒剤であるインビトロでの研究で示されてきた。より具体的には、引用によって本明細書に組み込まれる、ＷＯ ２００９／０８７１１７（およびその対応する米国特許公開２０１１／０１７８０１０）は、ヒスタチンのペプチドを特定し、これは、インビトロで創傷治癒特性を有した。ヒスタチン１（Ｈｓｔ－１）およびヒスタチン２（Ｈｓｔ－２）は、ヒトの唾液中の主要な創傷閉鎖因子として特定されてきた（引用によって本明細書に組み込まれる、Ｍｅｎｎｏ Ｊｏｈａｎｎｅｓ Ｏｕｄｈｏｆｆ， Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｃｅｎｔｒｅ ｆｏｒ Ｄｅｎｔｉｓｔｒｙ Ａｍｓｔｅｒｄａｍ （ＡＣＴＡ）， ＶＵ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ａｍｓｔｅｒｄａｍ ａｎｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ａｍｓｔｅｒｄａｍ， Ｔｈｅ Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ， ２０１０の論文、「Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ｏｆ ｔｈｅ Ｗｏｕｎｄ Ｈｅａｌｉｎｇ Ｃａｐａｃｉｔｙ ｏｆ Ｓａｌｉｖａｒｙ Ｈｉｓｔａｔｉｎｓ」）。特に創傷および疾患の治癒が適切に機能するために高度に調節される必要のある複合プロセスであるため、これらの研究はすべて、インビトロで行われ、治療上の又は臨床的な使用のための発見にはなり得ない。
ヒスタチンは、唾液からの創傷治癒剤であるインビトロでの研究で示されてきた。より具体的には、引用によって本明細書に組み込まれる、ＷＯ ２００９／０８７１１７（およびその対応する米国特許公開２０１１／０１７８０１０）は、ヒスタチンのペプチドを特定し、これは、インビトロで創傷治癒特性を有した。ヒスタチン１（Ｈｓｔ－１）およびヒスタチン２（Ｈｓｔ－２）は、ヒトの唾液中の主要な創傷閉鎖因子として特定されてきた（引用によって本明細書に組み込まれる、Ｍｅｎｎｏ Ｊｏｈａｎｎｅｓ Ｏｕｄｈｏｆｆ， Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｃｅｎｔｒｅ ｆｏｒ Ｄｅｎｔｉｓｔｒｙ Ａｍｓｔｅｒｄａｍ （ＡＣＴＡ）， ＶＵ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ａｍｓｔｅｒｄａｍ ａｎｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ａｍｓｔｅｒｄａｍ， Ｔｈｅ Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ， ２０１０の論文、「Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ｏｆ ｔｈｅ Ｗｏｕｎｄ Ｈｅａｌｉｎｇ Ｃａｐａｃｉｔｙ ｏｆ Ｓａｌｉｖａｒｙ Ｈｉｓｔａｔｉｎｓ」）。特に創傷および疾患の治癒が適切に機能するために高度に調節される必要のある複合プロセスであるため、これらの研究はすべて、インビトロで行われ、治療上の又は臨床的な使用のための発見にはなり得ない。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【0004】
ヒスタチンは、ヒトおよび他の動物における角膜創傷治癒に、および眼表面疾患の処置として使用され得る。例えば、ヒスタチンは、点眼剤、目のゲル剤、軟膏剤、接着剤に含まれるか、または（ポリマー）コンタクトレンズに埋め込まれ得る。
【0005】
１つの好ましい実施形態では、角膜創傷を処置する方法は、角膜創傷の部位に治療上の量のヒスタチンの少なくとも１つのペプチド断片を投与する工程を含む。ヒスタチンは、好ましくは、ヒスタチンを含む、点眼剤、ゲル剤、軟膏剤、組織接着剤を使用して、またはヒスタチンを、患者に着用されたコンタクトレンズへと組み込むことによって投与される。好ましい実施形態では、治療上の量のヒスタチンは、ヒスタチンによって処置されていない角膜創傷と比較して、創傷治癒を促進する。ヒスタチンのペプチド断片は、好ましくは、以下から成る群から選択される配列を含む：ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．１；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．２；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．３；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．４；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．５；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．６；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．７；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．８；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．９；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．１０；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．１１；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．１２；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．１３；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．１４；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．１５；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．１６；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．１７；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．１８；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．１９；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．２０；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．２１；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．２２；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．２３；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．２４；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．２５；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．２６；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．２７；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．２８；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．２９；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．３０；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．３１；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．３２；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．３３；およびＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．１乃至ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．３３の任意の組み合わせ。
【0006】
幾つかの好ましい実施形態では、ヒスタチンは、ａ）ヒスタチン５の少なくとも１つのペプチド断片、ｂ）ヒスタチン１の少なくとも１つのペプチド断片、ヒスタチン２の少なくとも１つのペプチド断片、またはヒスタチン１の少なくとも１つのペプチド断片およびヒスタチン２の少なくとも１つのペプチド断片の組み合わせを含む。他の好ましい実施形態では、ヒスタチンは、ヒスタチン１の少なくとも１つのペプチド断片、ヒスタチン２の少なくとも１つのペプチド断片、ヒスタチン５の少なくとも１つのペプチド断片であるか、またはヒスタチン１のペプチド断片、ヒスタチン２のペプチド断片、およびヒスタチン５のペプチド断片の任意の組み合わせである。
【0007】
他の好ましい実施形態では、ヒスタチンは、ヒスタチン１（ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．４）、ヒスタチン２（ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．５）、ヒスタチン５（ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．３０）であるか、またはヒスタチン１、ヒスタチン２、およびヒスタチン５の任意の組み合わせである。他の好ましい実施形態では、ヒスタチンは、ａ）ヒスタチン５（ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．３０）およびｂ）ヒスタチン１（ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．４）、ヒスタチン２（ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．５）、またはヒスタチン１およびヒスタチン２の組み合わせを含む。
【0008】
別の好ましい実施形態では、治療上の量のヒスタチンの少なくとも１つのペプチド断片は、眼表面疾患を処置するために眼表面に投与される。ヒスタチンは、好ましくは、ヒスタチンを含む、点眼剤、ゲル剤、軟膏剤、組織接着剤を使用して、またはヒスタチンを、患者に着用されたコンタクトレンズへと組み込むことによって投与される。好ましい実施形態では、治療上の量のヒスタチンは、ヒスタチンによって処置されていない眼表面疾患と比較して、眼表面疾患の治癒を促進する。ヒスタチンのペプチド断片は、好ましくは、以下から成る群から選択される配列を含む：ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．１；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．２；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．３；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．４；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．５；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．６；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．７；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．８；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．９；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．１０；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．１１；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．１２；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．１３；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．１４；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．１５；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．１６；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．１７；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．１８；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．１９；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．２０；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．２１；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．２２；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．２３；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．２４；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．２５；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．２６；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．２７；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．２８；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．２９；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．３０；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．３１；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．３２；ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．３３；およびＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．１乃至ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．３３の任意の組み合わせ。
【0009】
幾つかの好ましい実施形態では、ヒスタチンは、ａ）ヒスタチン５の少なくとも１つのペプチド断片、ｂ）ヒスタチン１の少なくとも１つのペプチド断片、ヒスタチン２の少なくとも１つのペプチド断片、またはヒスタチン１の少なくとも１つのペプチド断片およびヒスタチン２の少なくとも１つのペプチド断片の組み合わせを含む。他の好ましい実施形態では、ヒスタチンは、ヒスタチン１の少なくとも１つのペプチド断片、ヒスタチン２の少なくとも１つのペプチド断片、ヒスタチン５の少なくとも１つのペプチド断片であるか、またはヒスタチン１のペプチド断片、ヒスタチン２のペプチド断片、およびヒスタチン５のペプチド断片の任意の組み合わせである。他の好ましい実施形態では、ヒスタチンは、ヒスタチン１（ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．４）、ヒスタチン２（ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．５）、ヒスタチン５（ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．３０）であるか、またはヒスタチン１、ヒスタチン２、およびヒスタチン５の任意の組み合わせである。
【0010】
他の好ましい実施形態では、ヒスタチンは、ａ）ヒスタチン５（ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．３０）およびｂ）ヒスタチン１（ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．４）、ヒスタチン２（ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．５）、またはヒスタチン１およびヒスタチン２の組み合わせを含む。
【発明を実施するための形態】
【0011】
ヒスタチンは、直接的な抗感染活性、強力な抗炎症性特性を示す、ヒトおよびヒト以外の霊長類によってもたらされた自然発生の経口ペプチドであり、幾つかの組織と臓器の培養系で上皮創傷治癒を刺激する。研究施設では、この自然な物質を分離するための技術が開発され、創傷のための潜在的な局所処置をもたらしている。
【0012】
好ましい実施形態では、角膜創傷または眼表面疾患を処置するために、ヒスタチン１、２お、３、及び／又は５に隣接して存在する少なくとも８つのアミノ酸の少なくとも１つのアミノ酸配列を含むペプチドが、使用される。
【0013】
１つの好ましい実施形態では、角膜創傷を処置する方法は、角膜創傷の部位に治療上の量のヒスタチンペプチドの少なくとも一部分を投与する工程を含む。別の好ましい実施形態では、眼表面疾患を処置する方法は、眼表面に治療上の量のヒスタチンペプチドの少なくとも一部分を投与する工程を含む。眼表面疾患は、限定されないが、眼乾燥、角膜潰瘍形成および角膜びらん、炎症性および感染性の角膜炎および結膜炎、外科的介入および外傷を含み得る。
【0014】
ヒスタチンは、好ましくは、ヒスタチンを含む、点眼剤、ゲル剤、軟膏剤、組織接着剤を使用して、またはヒスタチンを、患者に着用されたコンタクトレンズへと組み込むことによって投与される。好ましい実施形態では、治療上の量のヒスタチンは、ヒスタチンによって処置されていない角膜創傷または眼表面疾患と比較して、創傷または眼表面疾患の治癒を促進する。
【0015】
幾つかの好ましい実施形態では、ヒスタチン濃度は、およそ０．１μｇ／ｍｌとおよそ１０００ｍｇ／ｍｌの間である。他の好ましい実施形態では、ヒスタチン濃度は、およそ０．１μｇ／ｍｌと１０μｇ／ｍｌの間である。幾つかの好ましい実施形態では、ヒスタチン濃度は、およそ１μΜ以上である。
【0016】
投与する工程は、１日当たり複数回及び／又は複数日にわたって繰り返され得る。１つの好ましい実施形態では、この工程は、複数日にわたって１日当たり少なくとも１回繰り返される。別の好ましい実施形態では、工程は、長期にわたって１日当たり少なくとも１回繰り返される。幾つかの好ましい実施形態では、工程は、複数日にわたって最大で１時間ごとに繰り返される。別の好ましい実施形態では、工程は、複数日にわたって１日当たり少なくとも２回繰り返される。また別の好ましい実施形態では、工程は、複数日にわたって、例えば７日間、少なくとも１日３回繰り返される。別の好ましい実施形態では、工程は、５日間１日当たり４回繰り返される。
【0017】
１つの好ましい実施形態では、ヒスタチンは、８乃至４４のアミノ酸を含むペプチドである。幾つかの実施形態では、ペプチドは、Ｌペプチドである。幾つかの実施形態では、ペプチドは、環状ペプチドである。
【0018】
幾つかの好ましい実施形態では、ヒスタチンペプチドのアミノ酸配列は、ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．１乃至ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．３３の１つ以上、またはこれらの配列の任意の組み合わせである。代替的な実施形態では、アミノ酸配列の１つ以上は、３つまでのアミノ酸の置換、欠失及び／又は挿入を有する。他の代替的な実施形態では、アミノ酸配列の１つ以上は、２つ以下のアミノ酸の置換、欠失及び／又は挿入を有する。他の代替的な実施形態では、アミノ酸配列の１つ以上は、１つのアミノ酸において置換、欠失、及び／又は挿入を有する。
【0019】
ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．４のペプチドは、ヒスタチン１（Ｈｓｔ－１）としても知られる。このアミノ酸配列での第１セリンが、フォスフォセリンであり得ることに留意されたい。ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．５のペプチドは、ヒスタチン２（Ｈｓｔ－１のアミノ酸１２－３８にも相当する、Ｈｓｔ－２）としても知られる。ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．６のペプチドは、ヒスタチン３（Ｈｓｔ－３）としても知られる。ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．３０のペプチドは、ヒスタチン５（Ｈｓｔ－５）としても知られる。これらのアミノ酸配列の各々の部分および断片は、本明細書に記載される実施形態において創傷閉鎖を促進するために、限定されないが、（ヒスタチン１、ヒスタチン２およびヒスタチン３に対する）ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．１－３、７－２９および（ヒスタチン５に対する）ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．３２を含んで、単独で又は組み合わせて使用され得る。アミノ酸のＬ立体異性体が、本明細書に記載されるアミノ酸配列のためには好ましいが、Ｄ立体異性体が代替的に使用されてもよい。代替的に、（ヒスタチン１のすべてを含む）ソルターゼ（ｓｏｒｔａｓｅ）を環化したヒスタチンである、これらのヒスタチンおよび他のアミノ酸を含むアミノ酸配列、例えばＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．３３は、本明細書に記載される実施形態において使用され得る。任意のヒスタチン配列は、環化され得、本明細書に記載される実施形態において使用され得る。
【0020】
幾つかの好ましい実施形態は、角膜創傷または眼表面疾患を処置するために、Ｈｓｔ－５からのアミノ酸配列と組み合わせてＨｓｔ－１及び／又はＨｓｔ－２からのアミノ酸配列を使用する。これらの実施形態では、Ｈｓｔ－１及び／又はＨｓｔ－２からの１つ以上のアミノ酸配列が選択され、Ｈｓｔ－５からの１つ以上のアミノ酸配列が選択される。幾つかの実施形態では、全長ヒスタチン１（ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．４）、全長ヒスタチン２（ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．５）、及び／又は全長ヒスタチン５（ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．３０）が使用され得る。他の実施形態では、Ｈｓｔ－１、Ｈｓｔ－２、及び／又はＨｓｔ－５の部分が使用され得る。例えば、ヒスタチン１のアミノ酸２０－３２と相当する、ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．２９は、幾つかの実施形態において創傷閉鎖に使用するための好ましいアミノ酸配列であり得る。他の例では、創傷閉鎖のためのコアモチーフ（ｃｏｒｅ ｍｏｔｉｆ）として現われるヒスタチン１およびヒスタチン２のペプチド断片である、ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．３２を含むペプチドが使用され得る。Ｈｓｔ－１およびＨｓｔ－２からの他の好ましい配列は、限定されないが、ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．８、ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．９、およびＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．１３を含む。別の例として、ヒスタチン５の断片（引用によって本明細書に組み込まれる、Ｇｕｓｍａｎ ｅｔ ａｌ， 「Ｓａｌｉｖａｒｙ Ｈｉｓｔａｔｉｎ ５ ｉｓ ａｎ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｏｂ Ｂｏｔｈ Ｈｏｓｔ ａｎｄ Ｂａｃｔｅｒｉａｌ Ｅｎｚｙｍｅｓ Ｉｍｐｌｉｃａｔｅｄ ｉｎ Ｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌ Ｄｉｓｅａｓｅ」， Ｉｎｆｅｃｔ． Ｉｍｍｕｎ． ２００１， ６９（３）： １４０２， ｐｐ． １４０２－１４０８）である、ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．３１が、好ましくは、ヒスタチン１またはヒスタチン２またはその断片と組み合わせて使用され得る。他の好ましい実施形態では、Ｈｓｔ－１またはＨｓｔ－２の断片は、全長Ｈｓｔ－５（ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．３０）または全長Ｈｓｔ－１（ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．４）とともに使用され、あるいはＨｓｔ－２（ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．５）は、Ｈｓｔ－５（例えば、ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．３１）の断片とともに使用される。また他の実施形態では、Ｈｓｔ－１及び／又はＨｓｔ－２の断片、全長Ｈｓｔ－１及び／又はＨｓｔ－２、Ｈｓｔ－５の断片、または全長Ｈｓｔ－５の任意の組み合わせが使用され得る。幾つかの好ましい実施形態では、使用されるＨｓｔ－５ペプチドの濃度は、およそ１μΜ以上である。
【0021】
本明細書に記載されるアミノ酸およびペプチドは、幾つかの実施形態で保護基によって保護された、少なくとも１つの官能基（例えば、アミン及び／又はカルボン酸基）を含み得る。ペプチドが、組織、皮膚または創傷に適用されるため、ペプチドの保護された形態は、分解に抵抗することが好ましいかもしれない。保護の形態は、生物学的に適合性である且つ薬学的使用と適合性がある必要がある。幾つかの例は、限定されないが、アミノ末端のアシル化またはアセチル化、カルボキシ末端の環化またはアミド化またはエステル化を含む。したがって、本明細書に記載されるペプチドは、保護された形態で使用され得る。
【0022】
本明細書に記載されるペプチドは、従来の化学合成、酵素的合成、または当該技術分野で既知の他の方法によって作られ得る。
【0023】
ペプチドは、好ましくは、少なくとも８つのアミノ酸を含む。１つの好ましい実施形態では、ペプチドは、８乃至４４の範囲のアミノ酸を含むが、ペプチドは、代替的に、４４を超えるアミノ酸を含んでもよい。
【0024】
＜インビボ研究＞
角膜創傷治癒のためのヒスタチンの効果の研究は、動物モデル（すなわちウサギ）を利用する。ヒスタチンは、幾つかの組織および臓器の培養系での治癒を刺激する、自然に生成された物質である。これらの研究の結果は、ヒスタチンが、角膜創傷のための著しい用量依存的な促進された治癒活性を有していることを実証している。
角膜創傷治癒のためのヒスタチンの効果の研究は、動物モデル（すなわちウサギ）を利用する。ヒスタチンは、幾つかの組織および臓器の培養系での治癒を刺激する、自然に生成された物質である。これらの研究の結果は、ヒスタチンが、角膜創傷のための著しい用量依存的な促進された治癒活性を有していることを実証している。
【0025】
限定されないが、眼乾燥、角膜潰瘍形成および角膜びらん、炎症性および感染性の角膜炎および結膜炎、外科的介入、および外傷を含む、眼表面疾患はすべて、感染、疼痛、および減少視力の増加したリスクを結果としてもたらす、角膜および結膜の細胞壁の完全性の破壊につながる。ヒスタチンは、眼表面の外傷／損傷および伝染病の処置に使用され得る。
【0026】
膜（角膜上皮）の外側層は、環境に対する物的障壁として機能し、それ故、感染性の及び／又は毒性の薬剤が組織を感染させる／組織に影響を及ぼすのを防ぐための防衛線としても役立つ。損傷が角膜の表面へ生じるときに、角膜上皮は、創傷治癒プロセスの先頭に立つ（例えば、Ｋｌｙｃｅ ＳＤ， Ｃｒｏｓｓｏｎ ＣＥ． "Ｔｒａｎｓｐｏｒｔ ｐｒｏｃｅｓｓｅｓ ａｃｒｏｓｓ ｔｈｅ ｒａｂｂｉｔ ｃｏｒｎｅａｌ ｅｐｉｔｈｅｌｉｕｍ： ａ ｒｅｖｉｅｗ"． Ｃｕｒｒ Ｅｙｅ Ｒｅｓ． １９８５；４：３２３－３３１ ａｎｄ Ｌｕ Ｌ， Ｗａｎｇ Ｌ， Ｓｈｅｌｌ Ｂ． "ＵＶ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｓｉｇｎａｌｉｎｇ ｐａｔｈｗａｙｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｃｏｒｎｅａｌ ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ ｃｅｌｌ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ"． Ｉｎｖｅｓｔ Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ Ｖｉｓ Ｓｃｉ． ２００３；４４：５１０２－５１０９を参照し、その両方が引用によって本明細書に組み込まれる）。
【0027】
本明細書に開示される研究は、ニュージーランドホワイトのウサギの眼表面に対するヒスタチンの創傷治癒効果を評価する且つ定量化する。
【0028】
簡潔な方法論：
上皮の欠損は、１２匹のニュージーランドホワイトのウサギの右眼（右眼（ｏｃｕｌｕｓ ｄｅｘｔｅｒ）、ＯＤ）において作り出される。動物規定により、両側性の創傷は許可されていない。上皮の欠損が作られた後に、ウサギは、処置群へと無作為化される。２つの（２）群が、以下の異なる環化されたヒスタチン濃度で処置される：眼病用の人工涙液の調剤へと溶解され、毎日３回点眼薬としてウサギに送達された、Ｏ．１ｇ／ｍｌおよび１０μｇ／ｍｌ。限定されないが、Ｈｓｔ－１（ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．４）、Ｈｓｔ－２（ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．５）、Ｈｓｔ－３（ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．６）、Ｈｓｔ－５（ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．３０）、およびソルターゼを環化したヒスタチン（ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．３３）を含む、アミノ酸配列ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．１乃至ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．３３を含む、当該技術分野で既知のヒスタチンが、これらの研究または処置プロトコルで使用され得る。１つの（１）群が、不活性の／非活性の製剤（対照）によって処置される。この対照群は、他の２つの群と同一であるが、ヒスタチンなしで、同じビヒクルを受けるべきである。市販の人工涙液は、好ましくは、ビヒクルとして機能する。最初の研究は、３つの（３）群に１群当たり４匹の（４）動物で、合計１２匹のウサギを含んだ。
上皮の欠損は、１２匹のニュージーランドホワイトのウサギの右眼（右眼（ｏｃｕｌｕｓ ｄｅｘｔｅｒ）、ＯＤ）において作り出される。動物規定により、両側性の創傷は許可されていない。上皮の欠損が作られた後に、ウサギは、処置群へと無作為化される。２つの（２）群が、以下の異なる環化されたヒスタチン濃度で処置される：眼病用の人工涙液の調剤へと溶解され、毎日３回点眼薬としてウサギに送達された、Ｏ．１ｇ／ｍｌおよび１０μｇ／ｍｌ。限定されないが、Ｈｓｔ－１（ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．４）、Ｈｓｔ－２（ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．５）、Ｈｓｔ－３（ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．６）、Ｈｓｔ－５（ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．３０）、およびソルターゼを環化したヒスタチン（ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．３３）を含む、アミノ酸配列ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．１乃至ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．３３を含む、当該技術分野で既知のヒスタチンが、これらの研究または処置プロトコルで使用され得る。１つの（１）群が、不活性の／非活性の製剤（対照）によって処置される。この対照群は、他の２つの群と同一であるが、ヒスタチンなしで、同じビヒクルを受けるべきである。市販の人工涙液は、好ましくは、ビヒクルとして機能する。最初の研究は、３つの（３）群に１群当たり４匹の（４）動物で、合計１２匹のウサギを含んだ。
【0029】
群は、７日間、３回／日（ＴＩＤ）で、薬剤（ヒスタチンまたは人工涙液の不活性の／非活性の製剤のいずれか）によって処置される。各々のウサギ群は、好ましくは、感染を予防するために、モキシフロキサシン（ｍｏｘｉｆｌｏｘｉｃｉｎ）で処置される。
【0030】
その後、角膜創傷は、蛍光染、蛍光細隙灯のバイオマイクロ写真撮影およびコンピューター化された領域決定によって、ヒスタチンの角膜創傷治癒能力に関して毎日評価される。評価者は、ウサギに与えられた治療上の処置に対してマスクされる（ｍａｓｋｅｄ）。
治癒後、各群から２匹の（２）動物が安楽死させられ、角膜が、組織学的処理（獣医の組織病理学者による続く評価を伴うＨ＆Ｅ染色）のために集められる。異なる処置群と対照との間の治癒に違いが証明される場合にのみ、組織採取後の病理組織学的分析を行う決定が下される。研究終了時に（研究は、好ましくは、７日間継続する）、残りの動物は安楽死させられる。
治癒後、各群から２匹の（２）動物が安楽死させられ、角膜が、組織学的処理（獣医の組織病理学者による続く評価を伴うＨ＆Ｅ染色）のために集められる。異なる処置群と対照との間の治癒に違いが証明される場合にのみ、組織採取後の病理組織学的分析を行う決定が下される。研究終了時に（研究は、好ましくは、７日間継続する）、残りの動物は安楽死させられる。
【0031】
＜結果＞
上述の方法論を使用する第１研究からのデータは、表１に示される。この研究で使用するヒスタチンは、環化したヒスタチン１であった。使用するヒスタチン１は、アミノ酸配列ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．３３を有するソルターゼを環化したヒスタチンであり、その中で、「Ｃ末端」Ｔは、「Ｎ末端」Ｇに連結される。表２は、３つの群の各々に対する、創傷の１時間後のサイズのおよそのパーセンテージとしての、（標準偏差のない）ｍｍサイズ値を示す。ウサギの角膜の病理学的分析は、毒性を示さなかった。
上述の方法論を使用する第１研究からのデータは、表１に示される。この研究で使用するヒスタチンは、環化したヒスタチン１であった。使用するヒスタチン１は、アミノ酸配列ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．３３を有するソルターゼを環化したヒスタチンであり、その中で、「Ｃ末端」Ｔは、「Ｎ末端」Ｇに連結される。表２は、３つの群の各々に対する、創傷の１時間後のサイズのおよそのパーセンテージとしての、（標準偏差のない）ｍｍサイズ値を示す。ウサギの角膜の病理学的分析は、毒性を示さなかった。
【0032】
【表1】
【0033】
【表2】
【0034】
ヒスタチンが、角膜創傷の著しい用量依存的な促進された治癒活性を実証していることを、上記の結果は示している。表２は、表１からの標準偏差考慮に入れていないが、０．１μｇ／ｍｌまたは１０μｇ／ｍｌのヒスタチンで処置した創傷が、データが収集された時間点の各々でより速く治癒した（より収縮した）ことを、パーセントが明白に示している。これらの結果は、インビボでの動物研究を使用して行われたその種の第１結果である。
【0035】
ヒトおよび他の動物において角膜創傷治癒または眼表面疾患の治癒を促進するために、ヒスタチンおよびペプチド部分またはヒスタチンのペプチド断片が使用され得る。好ましい実施形態では、ヒスタチン１（Ｈｓｔ－１）、ヒスタチン２（Ｈｓｔ－２）、ヒスタチン５（Ｈｓｔ－５）、Ｈｓｔ１、Ｈｓｔ２、またはＨｓｔ５のペプチド断片、またはその任意の組み合わせが使用され得る。他の実施形態では、ヒスタチン３（Ｈｓｔ－３）またはヒスタチン２（Ｄ－Ｈｓｔ－２）のＤエナンチオマー、またはそのペプチド断片が使用され得る。ヒスタチンのいずれかの任意の組み合わせが使用され得る。好ましい実施形態では、０．１μｇ／ｍｌから１０００ｍｇ／ｍｌの間のヒスタチン濃度が使用され得る。アミノ酸配列ＳＥＱ．ＩＤ．ＮＯ．１－３３を有するペプチド、当該技術分野で既知のヒスタチン、ＷＯ ２００９／０８７１１７に開示されるペプチド、またはＤｒ． Ｍｅｎｎｏ Ｊｏｈａｎｎｅｓ Ｏｕｄｈｏｆｆ ｓ ｔｈｅｓｉｓ，"Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ｏｆ ｔｈｅ Ｗｏｕｎｄ－Ｈｅａｌｉｎｇ Ｃａｐａｃｉｔｙ ｏｆ Ｓａｌｉｖａｒｙ Ｈｉｓｔａｔｉｎｓ"， ２０１０， ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｏｒａｌ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ ｔｈｅ Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｃｅｎｔｒｅ ｆｏｒ Ｄｅｎｔｉｓｔｒｙ Ａｍｓｔｅｒｄａｍ （ＡＣＴＡ）， ＶＵ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ａｍｓｔｅｒｄａｍ ａｎｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ａｍｓｔｅｒｄａｍ， Ｔｈｅ Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ（引用によって本明細書に組み込まれる）に開示されるペプチが使用され得る。
【0036】
１つの好ましい実施形態では、ヒスタチン５（Ｈｓｔ－５）と組み合わせたヒスタチン１（Ｈｓｔ－１）またはヒスタチン２（Ｈｓｔ－２）、Ｈｓｔ－５のペプチド断片と組み合わせたＨｓｔ－１またはＨｓｔ－２のペプチド断片、あるいは任意の組み合わせが使用される。Ｈｓｔ－５は、マトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）の生成を阻害する。
【0037】
Ｈｓｔ－１／Ｈｓｔ－２の治癒特性とＨｓｔ－５阻害のＭＭＰとの組み合わせは、非常に有効であるはずである。幾つかの好ましい実施形態では、少なくともおよそ１μΜのＨｓｔ－５の濃度、またはＨｓｔ－５の断片が使用される。
【0038】
角膜創傷または眼表面疾患を有するヒトまたは他の動物にヒスタチンが投与され得る。投与の幾つかの方法は、限定されないが、ヒスタチンを、点眼剤、ゲル剤または軟膏剤へと組み込む工程、角膜損傷を一時的に密封するために使用される組織接着剤へとヒスタチンを組み込む工程、またはヒスタチンを（ポリマー）コンタクトレンズへと組み込む工程を含む。
【0039】
ヒスタチンは、治療結果をもたらすために、任意の数日間、毎日の処置の任意の組み合わせで投与され得る。１つの好ましい実施形態では、ヒスタチンは、複数日にわたっての少なくとも１日に１回投与される。別の好ましい実施形態では、ヒスタチンは、（長時間にわたって）長期にわたって少なくとも１日に１回投与される。別の好ましい実施形態では、工程は、複数日にわたって又は長期にわたって、２、３、４、５回またはそれ以上、あるいは１時間ごとに繰り返され得る。一例では、ヒスタチンは、７日間１日３回繰り返される。別の実施例では、ヒスタチンは、５日間１日４回投与される。
【0040】
したがって、本明細書に記載される本発明の実施形態が、本発明の原理の適用の単に例示にすぎないことを理解されたい。例証される実施形態の詳細に対する本明細書での引用は、請求の範囲を制限するようには意図されておらず、それら自体が本発明にとって不可欠であると見なされるこれらの特徴を詳述している。
【配列表】