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特許7112413ＰＤＥ１阻害剤としてのイミダゾピラジノン、ピラゾロピリミジノンおよびピラゾロピリジノン
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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】特許公報(B2)
(11)【特許番号】
(24)【登録日】2022-07-26
(45)【発行日】2022-08-03
(54)【発明の名称】ＰＤＥ１阻害剤としてのイミダゾピラジノン、ピラゾロピリミジノンおよびピラゾロピリジノン
(51)【国際特許分類】
   C07D 471/04 20060101AFI20220727BHJP
   A61K 31/444 20060101ALI20220727BHJP
   A61K 31/4985 20060101ALI20220727BHJP
   A61K 31/506 20060101ALI20220727BHJP
   A61K 31/519 20060101ALI20220727BHJP
   A61P 25/00 20060101ALI20220727BHJP
   A61P 25/14 20060101ALI20220727BHJP
   A61P 25/16 20060101ALI20220727BHJP
   A61P 25/18 20060101ALI20220727BHJP
   A61P 25/22 20060101ALI20220727BHJP
   A61P 25/24 20060101ALI20220727BHJP
   A61P 25/28 20060101ALI20220727BHJP
   A61P 43/00 20060101ALI20220727BHJP
   C07D 487/04 20060101ALI20220727BHJP
【ＦＩ】
C07D471/04 106H
A61K31/444
A61K31/4985
A61K31/506
A61K31/519
A61P25/00
A61P25/14
A61P25/16
A61P25/18
A61P25/22
A61P25/24
A61P25/28
A61P43/00 111
C07D471/04 CSP
C07D487/04 143
C07D487/04 144
【請求項の数】 5
(21)【出願番号】P 2019541882
(86)(22)【出願日】2017-10-17
(65)【公表番号】
(43)【公表日】2019-11-28
(86)【国際出願番号】 EP2017076481
(87)【国際公開番号】W WO2018073251
(87)【国際公開日】2018-04-26
【審査請求日】2020-10-12
(31)【優先権主張番号】PA201600643
(32)【優先日】2016-10-18
(33)【優先権主張国・地域又は機関】DK
(31)【優先権主張番号】PA201700191
(32)【優先日】2017-03-14
(33)【優先権主張国・地域又は機関】DK
【前置審査】
(73)【特許権者】
【識別番号】591143065
【氏名又は名称】ハー・ルンドベック・アクチエゼルスカベット
(74)【代理人】
【識別番号】100092783
【弁理士】
【氏名又は名称】小林 浩
(74)【代理人】
【識別番号】100120134
【弁理士】
【氏名又は名称】大森 規雄
(74)【代理人】
【識別番号】100156476
【弁理士】
【氏名又は名称】潮 太朗
(72)【発明者】
【氏名】ケーラー，ヤン
(72)【発明者】
【氏名】ラスムッセン，ラーズ，キーン
(72)【発明者】
【氏名】ランガード，モルテン
(72)【発明者】
【氏名】ジェシング，ミッケル
(72)【発明者】
【氏名】ヴィタル，パウロ，ジョージ，ヴィエイラ
(72)【発明者】
【氏名】ユール，カールステン
【審査官】谷尾 忍
(56)【参考文献】
【文献】特表２０１１－５１６４５４（ＪＰ，Ａ）
【文献】特表２０１２－５０２００８（ＪＰ，Ａ）
【文献】特表２０１２－５１５７６１（ＪＰ，Ａ）
【文献】特表２０１５－５３１４０１（ＪＰ，Ａ）
【文献】国際公開第２０１６／０５５６１８（ＷＯ，Ａ１）
【文献】特開平１１－２１７３８３（ＪＰ，Ａ）
【文献】特表２０１５－５２６３９４（ＪＰ，Ａ）
(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)
Ｃ０７Ｄ ４７１／０４
Ｃ０７Ｄ ４８７／０４
Ａ６１Ｋ ３１／４４４
Ａ６１Ｋ ３１／５１９
Ａ６１Ｋ ３１／４９８５
Ａ６１Ｋ ３１／５０６
ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）
(57)【特許請求の範囲】
【請求項1】
１． ５－メチル－６－［［４－（６－メチル－２－ピリジル）フェニル］メチル］－１－テトラヒドロピラン－４－イル－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－４－オン；
２． ５－メチル－６－［［４－（２－ピリジル）フェニル］メチル］－１－テトラヒドロピラン－４－イル－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－４－オン；
３． ５－メチル－６－［［４－（６－メチル－２－ピリジル）フェニル］メチル］－１－テトラヒドロピラン－４－イル－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－４－オン；
４． ６－［［４－（６－フルオロ－２－ピリジル）フェニル］メチル］－５－メチル－１－テトラヒドロピラン－４－イル－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－４－オン；
５． ６－［［４－（６－フルオロ－２－ピリジル）フェニル］メチル］－５－メチル－１－テトラヒドロピラン－４－イル－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－４－オン；
６． ５－メチル－６－［［４－（２－ピリジル）フェニル］メチル］－１－テトラヒドロピラン－４－イル－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－４－オン；
７． ７－［（４－メトキシフェニル）メチル］－６－［［４－（２－ピリジル）ピペラジン－１－イル］メチル］－３－テトラヒドロピラン－４－イル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン；
８． ７－［（４－メトキシフェニル）メチル］－６－［（４－フェニルピペラジン－１－イル）メチル］－３－テトラヒドロピラン－４－イル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン；
９． ７－［（４－メトキシフェニル）メチル］－６－［［４－（２－ピリジル）フェニル］メチル］－３－テトラヒドロピラン－４－イル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン；
１０． ６－［［４－（２－ピリジル）フェニル］メチル］－３－テトラヒドロピラン－４－イル－７Ｈ－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン；
１１． ７－メチル－６－［［４－（２－ピリジル）フェニル］メチル］－３－テトラヒドロピラン－４－イル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン；
１２． ７－エチル－６－［［４－（２－ピリジル）フェニル］メチル］－３－テトラヒドロピラン－４－イル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン；
１３． ７－メチル－６－［［４－（６－メチル－２－ピリジル）フェニル］メチル］－３－テトラヒドロピラン－４－イル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン；
１４． ６－［［４－（６－フルオロ－２－ピリジル）フェニル］メチル］－７－メチル－３－テトラヒドロピラン－４－イル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン；
１５． ６－［［４－［６－（ジフルオロメチル）－２－ピリジル］フェニル］メチル］－７－メチル－３－テトラヒドロピラン－４－イル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン；
１６． ６－［［４－（６－メトキシ－２－ピリジル）フェニル］メチル］－７－メチル－３－テトラヒドロピラン－４－イル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン；
１７． ６－［［４－（３－メトキシ－２－ピリジル）フェニル］メチル］－７－メチル－３－テトラヒドロピラン－４－イル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン；
１８． ７－メチル－６－［［４－（ｏ－トリル）フェニル］メチル］－３－テトラヒドロピラン－４－イル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン；
１９． ７－メチル－６－［（４－フェニルフェニル）メチル］－３－テトラヒドロピラン－４－イル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン；
２０． ７－メチル－６－（４－（１－メチル－１Ｈ－イミダゾール－４－イル）ベンジル）－３－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン；
２１． ６－［［４－（６－フルオロ－２－ピリジル）フェニル］メチル］－３－イソプロピル－７－メチル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン；
２２． ６－（４－（６－フルオロピリジン－２－イル）ベンジル）－７－メチル－３－プロピルイミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン；
２３． ３－エチル－６－（４－（６－フルオロピリジン－２－イル）ベンジル）－７－メチルイミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン；
２４． ７－メチル－６－（４－（ピラジン－２－イル）ベンジル）－３－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン；
２５． ６－（４－（６－フルオロピリジン－２－イル）ベンジル）－７－メチル－３－（２，２，２－トリフルオロエチル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン；
２６． ７－メチル－６－（４－（ピリミジン－４－イル）ベンジル）－３－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン；
２７． ６－（４－（６－フルオロピリジン－２－イル）ベンジル）－７－メチル－３－（テトラヒドロフラン－３－イル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン，Ｓ鏡像異性体；
２８． ６－（４－（６－フルオロピリジン－２－イル）ベンジル）－７－メチル－３－（テトラヒドロフラン－３－イル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン，Ｒ鏡像異性体；
２９． ６－（４－（６－フルオロピリジン－２－イル）ベンジル）－７－メチル－３－（２－メチルテトラヒドロフラン－３－イル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン，Ｓ，Ｓ－ジアステレオマー；
３０． ６－（４－（６－フルオロピリジン－２－イル）ベンジル）－７－メチル－３－（２－メチルテトラヒドロフラン－３－イル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン，Ｒ，Ｓ－ジアステレオマー；
３１． ６－（４－（６－フルオロピリジン－２－イル）ベンジル）－７－メチル－３－（２－メチルテトラヒドロフラン－３－イル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン，Ｓ，Ｒ－ジアステレオマー；
３２． ６－（４－（６－フルオロピリジン－２－イル）ベンジル）－７－メチル－３－（２－メチルテトラヒドロフラン－３－イル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン，Ｒ、Ｒ－ジアステレオマー；
からなる群から選択される化合物、またはこれらの化合物のいずれかの薬剤として許容される塩。
【請求項2】
請求項１に記載の化合物を含む医薬組成物。
【請求項3】
治療有効量の請求項１に記載の化合物と、１種または複数の薬剤として許容される担体、希釈剤または賦形剤とを含む医薬組成物。
【請求項4】
アルツハイマー病、パーキンソン病およびハンチントン病からなる群から選択される神経変性疾患の治療において使用するための、または注意欠陥多動障害（ＡＤＨＤ）、鬱病、不安、ナルコレプシー、認知障害および精神分裂病を伴う認知障害（ＣＩＡＳ）などの精神障害、もしくは下肢静止不能症候群などの他の脳疾患を治療するための、請求項１に記載の化合物を含む医薬組成物。
【請求項5】
アルツハイマー病、パーキンソン病およびハンチントン病からなる群から選択される神経変性疾患を治療するための、または注意欠陥多動障害（ＡＤＨＤ）、鬱病、不安、ナルコレプシー、認知障害および精神分裂病を伴う認知障害（ＣＩＡＳ）などの精神障害、もしくは下肢静止不能症候群などの他の脳疾患を治療するための医薬組成物であって、治療有効量の請求項１に記載の化合物を含む医薬組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、ＰＤＥ１酵素阻害剤である化合物と、特に神経変性疾患および精神障害を治療するための薬物としてのその使用とを提供する。本発明は、本発明の化合物を含む医薬組成物および本発明の化合物を用いて疾患を治療する方法も提供する。
【背景技術】
【0002】
第２メッセンジャー環状ヌクレオチド（ｃＮ）、環状アデノシン一リン酸（ｃＡＭＰ）および環状グアノシン一リン酸（ｃＧＭＰ）は、ｃＮ依存性プロテインキナーゼ（ＰＫＡおよびＰＫＧ）、ＥＰＡＣ（ｃＡＭＰにより活性化される交換タンパク質）、リンタンパク質ホスファターゼおよび／またはｃＮゲート型カチオンチャネルを調節することにより、細胞内シグナル伝達カスケードにおいて主要な役割を果たす。神経細胞において、これは、ｃＡＭＰおよびｃＧＭＰ依存性キナーゼの活性化を含み、シナプス伝達の急性的調節ならびに分化および生存に関与するタンパク質のその後のリン酸化を含む。ｃＡＭＰおよびｃＧＭＰの細胞内濃度は、シクラーゼの生合成の速度およびホスホジエステラーゼによる分解の速度によって厳密に調節される（ＰＤＥ、ＥＣ３．１．４．１７）。ＰＤＥは、３’－エステル結合の触媒加水分解によってｃＡＭＰ／ｃＧＭＰを不活性化し、不活性５’－一リン酸を形成するバイメタルヒドロラーゼである。ＰＤＥは、細胞における環状ヌクレオチドｃＡＭＰおよびｃＧＭＰを分解する唯一の手段を提供することから、ＰＤＥは、環状ヌクレオチドシグナル伝達において必須の役割を果たす。ＰＤＥの触媒活性は、すべての細胞において一連のｃＮ濃度にわたってｃＮの分解を提供し、その多様な調節メカニズムは、無数のシグナル伝達経路無数のシグナル伝達経路との統合およびクロストークを与える。特定のＰＤＥは、細胞内の別々の区画に標的化され、ｃＮレベルをコントロールし、様々なｃＮシグナロソームの微小環境を形作る（Ｓｈａｒｒｏｎ Ｈ．Ｆｒａｎｃｉｓ，Ｍｉｔｓｉ Ａ．Ｂｌｏｕｎｔ，ａｎｄ Ｊａｃｋｉｅ Ｄ．Ｃｏｒｂｉｎ．Ｐｈｙｓｉｏｌ Ｒｅｖ ２０１１，９１，６５１－６９０）。
【0003】
基質特異性に基づいて、ＰＤＥファミリーは、３つのグループ：１）ＰＤＥ４、ＰＤＥ７およびＰＤＥ８を含むｃＡＭＰ特異的ＰＤＥと、２）ｃＧＭＰ選択的酵素ＰＤＥ５およびＰＤＥ９と、３）二重基質ＰＤＥ、ＰＤＥ１、ＰＤＥ２、ＰＤＥ３ならびにＰＤＥ１０およびＰＤＥ１１とに分けることができる。
【0004】
前に挙げられたカルモジュリン刺激ＰＤＥ（ＣａＭ－ＰＤＥ）、ＰＤＥ１は、４つのＣａ２で錯体形成されたカルモジュリン（ＣａＭ、１６ｋＤａ Ｃａ２＋結合性タンパク質）を介してＣａ２＋依存的に調節されるという点で独特である（概説として、Ｓｈａｒｒｏｎ Ｈ．Ｆｒａｎｃｉｓ，Ｍｉｔｓｉ Ａ．Ｂｌｏｕｎｔ，ａｎｄ Ｊａｃｋｉｅ Ｄ．Ｃｏｒｂｉｎ．Ｐｈｙｓｉｏｌ Ｒｅｖ ２０１１，９１：６５１－６９０）。このように、ＰＤＥ１は、環状ヌクレオチドと細胞内Ｃａ２＋との間の興味深い調節の関連性を示す。ＰＤＥ１ファミリーは、３種類の遺伝子：ＰＤＥ１Ａ（ヒト染色体位置、ｈｃｌ：１２ｑ１３）、およびＰＤＥ１Ｂ（ヒト染色体位置、ｈｃｌ：１２ｑ１３）およびＰＤＥ１Ｃ（ｈｃｌ：７ｐ１４．３）によってコードされる。それらは、選択的プロモータを有し、選択的スプライシングによって多くのタンパク質を生じさせ、そのタンパク質は、調節特性、基質親和性、特異的活性、ＣａＭに対する活性化定数、組織分布および分子量が異なる。１０を超えるヒトアイソフォームが同定されている。その分子量は、１単量体につき５８～８６ｋＤａだけ異なる。Ｎ－末端調節ドメインは、２つのＣａ２＋／ＣａＭ結合ドメインおよび２つのリン酸化部位を含有し、異なるスプライスバリアントは、Ｎ－末端ドメインの異なるバリエーションを有し、それは、異なる生化学的機能を有する異なるアミノ酸配列のタンパク質を与え得る。ＰＤＥ１は、二重基質ＰＤＥであり、ＰＤＥ１Ｃサブタイプは、ｃＡＭＰおよびｃＧＭＰに対して等しい活性（Ｋｍ≒１～３μＭ）を有するが、サブタイプＰＤＥ１ＡおよびＰＤＥ１Ｂは、ｃＧＭＰに対して優先傾向を有する（ｃＧＭＰに対するＫｍ≒１～３μＭおよびｃＡＭＰに対するＫｍ≒１０～３０μＭ）。
【0005】
ＰＤＥ１サブタイプは、脳に非常に豊富にあり、特に線条体（ＰＤＥ１Ｂ）、海馬（ＰＤＥ１Ａ）および皮質（ＰＤＥ１Ａ）に位置し、この局在は、種にわたって保存される（Ａｍｙ Ｂｅｒｎａｒｄ ｅｔ ａｌ．Ｎｅｕｒｏｎ ２０１２，７３，１０８３－１０９９）。皮質において、ＰＤＥ１Ａは、主に皮質深層５および６（出力層）に存在しており、皮質深層に対する特異的マーカーとして使用される。ＰＤＥ１阻害剤は、二次メッセンジャーｃＮのレベルを増強し、神経興奮を高める。
【0006】
したがって、ＰＤＥ１は、好ましくは、神経系における細胞内シグナル伝達経路の調節の治療標的であり、ＰＤＥ１阻害剤は、二次メッセンジャーのｃＡＭＰ／ｃＧＭＰのレベルを高め、ニューロンプロセスを調節し、ニューロン可塑性関連遺伝子、神経栄養性因子および神経保護分子の発現を引き起こす。シナプス伝達の調節と共にこれらのニューロン可塑性強化特性により、ＰＤＥ１阻害剤は、多くの神経学的および精神医学的症状における治療薬としての良好な候補となる。動物モデルにおけるＰＤＥ１阻害剤の評価（概説として、例えば、Ｂｌｏｋｌａｎｄ ｅｔ ａｌ．Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｏｎ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｐａｔｅｎｔｓ ２０１２，２２（４），３４９－３５４；およびＭｅｄｉｎａ，Ａ．Ｅ．Ｆｒｏｎｔｉｅｒｓ ｉｎ Ｎｅｕｒｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ２０１１，５（Ｆｅｂ．），２１を参照されたい）では、例えば、アルツハイマー病、パーキンソン病およびハンチントン病などの神経疾患、ならびに例えば注意欠陥多動障害（ＡＤＨＤ）、鬱病、不安、ナルコレプシー、認知障害および精神分裂病に関連する認知障害（ＣＩＡＳ）などの精神障害および下肢静止不能症候群におけるＰＤＥ１阻害剤の治療的使用の潜在性を示唆している。女性の性的機能不全など、プロゲステロン－シグナル伝達の増強によって軽減され得る疾患においてＰＤＥ１阻害剤が有用であることを主張する特許出願も存在している（国際公開第２００８／０７００９５号パンフレット）。
【0007】
ＰＤＥ１阻害活性を有する種々の化学構造が同定されている。国際公開第２０１６／０５５６１８号パンフレットには、ＰＤＥ１阻害剤としてトリアゾロピラジノンが開示されており；国際公開第２０１６／０４２７７５号パンフレット、米国特許出願第２０１６／００８３３９１号明細書および米国特許出願第２０１６／００８３４００号明細書には、ＰＤＥ１阻害剤として三環系ラクタムが開示されており；かつ国際公開第２０１６／１４７６５９号パンフレットには、ＰＤＥ１阻害剤としてイミダゾトリアジノンが開示されている。
【0008】
国際公開第２０１３／０５３６９０号パンフレットおよび国際公開第２０１３／１１０７６８号パンフレットには、ＰＤＥ９阻害剤としてイミダゾピラジノンおよびイミダゾトリアジノンが開示されている。
【0009】
神経変性障害および／または精神障害の現在の治療法はすべての患者に効果があるわけではない。したがって、かかる疾患を治療するための代替法が依然として必要とされており、この目的のために、ＰＤＥ１阻害剤は優れた代替法であり得る。本発明は、既知のＰＤＥ１阻害剤の代替法としてＰＤＥ１阻害活性および良好な物理化学的性質を有する新規な二環式ラクタムを開示する。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【0010】
ＰＤＥ１酵素は、中枢神経系（ＣＮＳ）において発現され、その酵素により、この遺伝子ファミリーは、精神疾患および神経変性疾患の治療の新たな標的の魅力的な源となる。
【0011】
本発明の目的は、ＰＤＥ１阻害剤であり、かつそれ自体が神経変性疾患および精神障害の治療に有用である、化合物を提供することである。好ましくは、前記化合物は、ＰＤＥ９阻害に伴う潜在的に望ましくない作用を防ぐために、ＰＤＥ９阻害剤としての化合物と比べて、ＰＤＥ１阻害剤として少なくとも１０倍強い。
【0012】
したがって、本発明は、式（Ｉ）
【化1】

（式中、Ａ １ はＮであり、Ａ ２ はＣＨであり、かつＡ ３ はＮであり；または
Ａ １ はＣＨであり、Ａ ２ はＣＨであり、かつＡ ３ はＮであり；または
Ａ １ はＣＨであり、Ａ ２ はＮであり、かつＡ ３ はＣＨであり；
Ｒ １ は、水素、または直鎖状または分岐状Ｃ１～Ｃ８アルキル；または
Ｒ １ は、フェニルで置換されているメチルであり、前記フェニルは、ハロゲン、Ｃ１～Ｃ３アルキル、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、メトキシ、ジフルオロメトキシおよびトリフルオロメトキシからなる群から選択される１つまたは複数の置換基で１回または複数回にわたって任意選択的に置換されており；
Ｒ ２ は、フェニルまたはヘテロ芳香族基で４位にて置換されているフェニルであり；前記フェニル置換基または前記ヘテロ芳香族基が、メチル、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、メトキシ、ジフルオロメトキシおよびトリフルオロメトキシからなる群から選択される１つまたは複数の置換基で１回または複数回にわたって置換されていてもよく；または
Ｒ ２ は、フェニルまたはヘテロ芳香族基で４位にて置換されているピペラジン－１－イルであり；前記フェニル置換基または前記ヘテロ芳香族基が、メチル、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、メトキシ、ジフルオロメトキシおよびトリフルオロメトキシからなる群から選択される１つまたは複数の置換基で１回または複数回にわたって置換されていてもよく；
Ｒ ３ は、直鎖状または分岐状Ｃ２～Ｃ８アルキル、飽和単環式Ｃ３～Ｃ８シクロアルキル、オキセタニル、テトラヒドロフラニル，およびテトラヒドロピラニルからなる群から選択され；そのすべてが、メチル、フッ素、ヒドロキシ、シアノおよびメトキシからなる群から選択される１つまたは複数の置換基で１回または複数回にわたって置換されていてもよい）
の化合物またはその薬剤として許容される塩に関する。
【0013】
本発明によって包含される化合物への言及は、その化合物の遊離塩基および薬剤として許容される塩、例えば化合物の酸付加塩、化合物のラセミ混合物、または化合物の相当する鏡像異性体および／または光学異性体、ならびに化合物の多形および無定形形態ならびに互変異性型を包含する。さらに、本発明の化合物は、未溶媒和状態だけでなく、水、エタノールなどの薬剤として許容される溶媒との溶媒和状態で存在し得る。本発明は、化合物の溶媒和状態および未溶媒和状態の両方に関する。
【0014】
一実施形態において、本発明は、治療に使用される式（Ｉ）による化合物に関する。
【0015】
一実施形態において、本発明は、アルツハイマー病、パーキンソン病およびハンチントン病からなる群から選択される神経変性疾患の治療に使用するための、または注意欠陥多動障害（ＡＤＨＤ）、鬱病、不安、ナルコレプシー、認知障害および精神分裂病を伴う認知障害（ＣＩＡＳ）などの精神障害もしくは下肢静止不能症候群などの他の脳疾患を治療するための、式（Ｉ）による化合物に関する。
【0016】
一実施形態において、本発明は、式（Ｉ）による化合物と、１種または複数の薬剤として許容される担体または賦形剤と、を含む医薬組成物に関する。
【0017】
一実施形態において、本発明は、アルツハイマー病、パーキンソン病およびハンチントン病からなる群から選択される神経変性疾患を治療するための、または注意欠陥多動障害（ＡＤＨＤ）、鬱病、不安、ナルコレプシー、認知障害および精神分裂病を伴う認知障害（ＣＩＡＳ）などの精神障害もしくは下肢静止不能症候群などの他の脳疾患を治療するための方法であって、治療有効量の式（Ｉ）による化合物を、それを必要とする患者に投与することを含む方法に関する。
【0018】
定義
ＰＤＥ１酵素：
ＰＤＥ１アイソザイムファミリーは、多くのスプライスバリアントＰＤＥ１アイソフォームを含む。それには３つのタブタイプ、ＰＤＥ１Ａ、ＰＤＥ１ＢおよびＰＤＥ１Ｃがあり、種々のアイソフォームにさらに分けられる。本発明に関連して、ＰＤＥ１およびＰＤＥ１酵素は、同義であり、別段の指定がない限り、ＰＤＥ１Ａ、ＰＤＥ１ＢおよびＰＤＥ１Ｃ酵素ならびにそのアイソフォームを意味する。
【0019】
ＰＤＥ１阻害剤およびＰＤＥ９阻害剤：
本発明に関連して、化合物は、３種のＰＤＥ１アイソフォームのいずれかのＩＣ５０レベルに達するのに必要な量が１０マイクロモル以下、好ましくは９マイクロモル未満、例えば８マイクロモル以下、７マイクロモル以下、６マイクロモル以下、５マイクロモル以下、４マイクロモル以下、３マイクロモル以下、さらに好ましくは２マイクロモル以下、１マイクロモル以下、特に５００ｎＭ以下である場合にＰＤＥ１阻害剤であるとみなされる。本発明の一部の化合物は、ＰＤＥ１Ｂアイソフォームに対する選択性を示し、それは、前記化合物がＰＤＥ１Ａおよび／またはＰＤＥ１Ｃ阻害剤としてよりもＰＤＥ１Ｂ阻害剤として強力であることを意味する。好ましい実施形態において、前記化合物は、ＰＤＥ１Ａおよび／またはＰＤＥ１Ｃ阻害剤と比べて、ＰＤＥ１Ｂ阻害剤として少なくとも２倍、３倍、４倍または５倍強力である。好ましい実施形態において、ＰＤＥ１ＢのＩＣ５０レベルに達するのに必要なＰＤＥ１阻害剤の必要量は、４００ｎＭ以下、例えば３００ｎＭ以下、２００ｎＭ以下、１００ｎＭ以下、またはさらには８０ｎＭ以下、例えば５０ｎＭ以下、例えば２５ｎＭ以下である。ＰＤＥ１Ｂアイソフォームに対する選択性は、ＰＤＥ１Ａおよび／またはＰＤＥ１Ｃ阻害に伴う潜在的に望ましくない作用を防ぎ得る。
【0020】
好ましい実施形態において、本発明の化合物は、ＰＤＥ９阻害剤と比べて、ＰＤＥ１阻害剤として少なくとも１０倍強力であり、つまり、３つのＰＤＥ１アイソフォームのうちの１つまたは複数のＩＣ５０レベルに達するのに必要な化合物の量は、ＰＤＥ９酵素のＩＣ５０レベルに達するのに必要な同じ化合物の量と比べて少なくとも１０倍少ない。
【0021】
置換基：
本発明に関連して、「任意選択的に置換されている」とは、指示される部位が置換されていてもされていなくてもよく、置換されている場合、一、二、または三置換されていることを意味する。「任意選択的に置換されている」部位に対して置換基が示されていない場合、その位置に水素原子が保持されていると理解される。
【0022】
本発明に関連して使用される「ハロ」および「ハロゲン」という用語は、同義で使用され、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素を意味する。
【0023】
所定の範囲は、「－」（ダッシュ）または「～」で区別なく示され、例えば、「Ｃ１－Ｃ３アルキル」という用語は、「Ｃ１～Ｃ３アルキル」に等しい。
【0024】
「Ｃ１～Ｃ３アルキル」、「Ｃ１～Ｃ４アルキル」、「Ｃ１～Ｃ５アルキル」、「Ｃ１～Ｃ６アルキル」、「Ｃ１～Ｃ７アルキル」および「Ｃ１～Ｃ８アルキル」という用語は、炭素原子１～８個までを有する直鎖状（すなわち枝分かれしていない）または分岐状飽和炭化水素を意味する。かかる群の例としては、限定されないが、メチル、エチル、１－プロピル、２－プロピル、１－ブチル、２－ブチル、２－メチル－２－プロピル、２－メチル－１－ブチル、ｎ－ヘキシル、ｎ－ヘプチルおよびｎ－オクチルが挙げられる。
【0025】
飽和単環式Ｃ３～Ｃ８シクロアルキルという用語は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチルおよびシクロオクチルを意味する。
【0026】
「ヘテロ芳香族基」という用語は、１～５個の炭素原子と、酸素、窒素および硫黄から選択される１つまたは複数のヘテロ原子と、を含有する５または６員芳香族単環式環を意味する。例としては、５および６員ヘテロ芳香族基、例えば、限定されないがピリジニル、ピリミジニル、ピラジニル、イミダゾリルおよびオキサジアゾリルが挙げられる。特に、ピリジニルが言及される。
【0027】
「Ｃ１～Ｃ３アルコキシ」という用語は、式－ＯＲ’の部位を意味し、Ｒ’は、上記で定義されるＣ１～Ｃ３アルキルを示す。
【0028】
異性型および互変異性型
本発明の化合物が１つまたは複数のキラル中心を含有する場合、別段の指定がない限り、化合物のいずれへの言及も鏡像異性体またはジアステレオマーとして純粋な化合物、およびいずれかの割合の鏡像異性体またはジアステレオマーの混合物を包含する。
【0029】
１つのキラル中心を有する本発明の化合物が、「異性体１」または「異性体２」という接尾文字で示されている場合、前記鏡像異性体は、Ｓ鏡像異性体またはＲ鏡像異性体のいずれかであり得ると理解される。すなわち、「鏡像異性体１」は、Ｓ鏡像異性体またはＲ鏡像異性体のいずれかであり得、かつ「鏡像異性体２」は、Ｓ鏡像異性体またはＲ鏡像異性体のいずれかであり得る。異性体１と異性体２との両方がある化合物に対して例示されている場合、一方は、Ｓ鏡像異性体であり、もう一方は、Ｒ鏡像異性体である。１つのキラル中心を有する本発明の化合物についての絶対立体配置は、Ｘ線結晶学または振動円二色性分光法または当業者に公知の他の方法によって決定することができる。同様に、２つのキラル中心を有する本発明の化合物が、「異性体１」、「異性体２」、「異性体３」または「異性体４」という接尾文字で示されている場合、前記ジアステレオマーは、Ｓ，Ｓ－ジアステレオマー、Ｒ，Ｓ－ジアステレオマー、Ｓ，Ｒ－ジアステレオマー、またはＲ、Ｒ－ジアステレオマーのいずれかであり得ると理解される。つまり、「異性体１」は、Ｓ，Ｓ－ジアステレオマー、Ｒ，Ｓ－ジアステレオマー、Ｓ，Ｒ－ジアステレオマー、またはＲ，Ｒ－ジアステレオマーのいずれかであり得、かつ「異性体２」は、Ｓ，Ｓ－ジアステレオマー、Ｒ，Ｓ－ジアステレオマー、Ｓ，Ｒ－ジアステレオマー、またはＲ，Ｒ－ジアステレオマーなどのいずれかであり得る。４つすべてのジアステレオマー（異性体１～４）が、２つのキラル中心を有する化合物に対して例示されている場合、１つは、Ｓ，Ｓ－ジアステレオマーであり、１つはＲ，Ｓ－ジアステレオマーであり、１つはＳ，Ｒ－ジアステレオマーであり、かつ１つはＲ，Ｒ－ジアステレオマーである。２つのキラル中心を有する本発明の化合物についての絶対立体配置は、Ｘ線結晶学または当業者に公知の他の方法によって決定することができる。
【0030】
さらに、本発明の化合物の一部は、異なる互変異性型で存在することができ、その化合物が形成することができる互変異性型は、本発明の範囲内に包含される。
【0031】
薬剤として許容される塩：
本発明の化合物は、一般に、遊離物質としてまたは薬剤として許容されるその塩として利用される。式（Ｉ）の化合物が遊離塩基を含有する場合、従来の手法で式（Ｉ）の遊離塩基の溶液または懸濁液を等モルの薬剤として許容される酸で処理することにより、かかる塩が製造される。適切な有機酸および無機酸の代表的な例は、以下に記載される。
【0032】
本発明に関連して、薬剤として許容される塩は、非毒性、すなわち生理学的に許容される塩を表すことが意図される。薬剤として許容される塩という用語は、無機酸および／または有機酸で形成される塩、例えば塩化水素酸、臭化水素酸、リン酸、亜硝酸、硫酸、安息香酸、クエン酸、グルコン酸、乳酸、マレイン酸、コハク酸、酒石酸、酢酸、プロピオン酸、シュウ酸、マレイン酸、フマル酸、グルタミン酸、ピログルタミン酸、サリチル酸、サリチル酸およびスルホン酸、例えばメタンスルホン酸、エタンスルホン酸、トルエンスルホン酸およびベンゼンスルホン酸を含む。上記に示す酸の一部は、二酸または三酸、すなわちリン酸、硫酸、フマル酸およびマレイン酸など、２または３個の酸性水素を含有する酸である。
【0033】
薬剤として許容される塩を形成するのに有用な酸のその他の例は、例えば、Ｓｔａｈｌ ａｎｄ Ｗｅｒｍｕｔｈ（Ｅｄｓ），Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ｓａｌｔｓ．Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ，ａｎｄ ｕｓｅ，Ｗｉｌｅｙ－ＶＣＨ２００８に記載されている。
【0034】
治療有効量：
本発明に関連して、化合物の「治療有効量」のという用語は、前記化合物の投与を含む治療的介入において所定の疾患およびその合併症の臨床症状を緩和するか、阻止するか、または部分的に阻止するのに十分な量を意味する。これを達成するのに適した量は、「治療有効量」と定義される。それぞれの目的に有効な量は、疾患または損傷の重症度ならびに対象の体重および全身状態に応じて異なる。適切な投薬量の決定は、熟練した医師の一般の技術の範囲内にすべてある通常の実験を用いて、値のマトリックスを構築し、そのマトリックスにおける様々なポイントを試験することによって達成されることが理解されるであろう。
【0035】
治療および処置：
本発明に関連して、「治療」または「処置」は、疾患の臨床症状を緩和するか、阻止するか、部分的に阻止するかまたはその進行を遅らせる目的のための患者の管理およびケアを示すことが意図される。治療されるべき患者は、好ましくは、哺乳動物、特にヒトである。
【0036】
投与経路
医薬組成物は、経口、直腸、経鼻、口腔、舌下、経皮および非経口（例えば、皮下、筋肉内および静脈内）などの適切な経路による投与用に特に製剤化されることができ、経口経路が好ましい。
【0037】
その経路は、処置される対象の全身状態および年齢、処置される状態の性質ならびに活性成分に応じて異なると理解される。
【0038】
医薬製剤および賦形剤：
以下において、「賦形剤」または「薬剤として許容される賦形剤」という用語は、限定されないが、充填剤、付着防止剤、結合剤、コーティング、着色剤、崩壊剤、風味、流動促進剤（ｇｌｉｄａｎｔ）、滑沢剤、保存剤、吸着剤、甘味料、溶媒、賦形剤（ｖｅｈｉｃｌｅ）および補助剤などの医薬品賦形剤を意味する。
【0039】
本発明は、本明細書において実験セクションで開示される化合物の１つなど、式（Ｉ）の化合物を含む医薬組成物も提供する。本発明は、式（Ｉ）の化合物を含む医薬組成物を製造するプロセスも提供する。本発明による医薬組成物は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ，Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，２２ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ（２０１２），Ｅｄｉｔｅｄ ｂｙ Ａｌｌｅｎ，Ｌｏｙｄ Ｖ．，Ｊｒ．に開示される技術など、従来の技術に従って、薬剤として許容される賦形剤を用いて製剤化され得る。
【0040】
経口投与用の医薬組成物としては、錠剤、カプセル剤、粉剤および顆粒などの固形経口剤形；ならびに液剤、乳剤、懸濁剤およびシロップ剤などの液体経口剤形、ならびに適切な液体に溶解または懸濁される粉末および顆粒が挙げられる。
【0041】
固形経口剤形は、個々の単位（例えば、錠剤またはハードもしくはソフトカプセル剤）として提供されることができ、それぞれが所定の量の活性成分、好ましくは１種または複数の適切な賦形剤を含有する。適切な場合、固形剤形は、腸溶コーティングなどのコーティングを用いて製造してもよく、または当技術分野でよく知られている方法に従って遅延性もしくは徐放性などの活性成分の放出制御を提供するように製剤化することもできる。適切な場合、固形剤形は、例えば、口腔内分散性錠剤など、唾液中で崩壊する剤形であることもできる。
【0042】
固形経口剤形に適した賦形剤の例としては、限定されないが、微結晶性セルロース、トウモロコシデンプン、ラクトース、マンニトール、ポビドン、クロスカルメロースナトリウム、ショ糖、シクロデキストリン、タルカム、ゼラチン、ペクチン、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸およびセルロースの低級アルキルエーテルが挙げられる。同様に、固形製剤は、モノステアリン酸グリセリンまたはヒプロメロースなど、当技術分野で公知の遅延性または徐放性製剤用の賦形剤を含み得る。固体材料が経口投与のために使用される場合、製剤は、例えば、活性成分を固形賦形剤と混合し、続いてその混合物を従来の錠剤化機器で圧縮することによって製造してもよく、または例えば粉末状、ペレット状もしくはミニ錠剤状の製剤をハードカプセル内に入れてもよい。固形賦形剤の量は、大幅に異なるが、通常、投薬単位あたり約２５ｍｇ～約１ｇの範囲である。
【0043】
液体経口剤形は、例えば、エリキシル剤、シロップ剤、経口ドロップ剤または液体充填カプセル剤として提供され得る。液体経口剤形は、水性または非水性液中の溶液または懸濁液用の粉末としても提供され得る。液体経口剤形に適した賦形剤の例としては、限定されないが、エタノール、プロピレングリコール、グリセロール、ポリエチレングリコール、ポロキサマー、ソルビトール、ポリソルベート、モノグリセリドおよびジグリセリド、シクロデキストリン、ヤシ油、パーム油および水が挙げられる。液体経口剤形は、例えば、水性または非水性液中に活性成分を溶解もしくは懸濁することにより、または水中油型もしくは油中水型液体エマルジョンに活性成分を組み込むことにより製造され得る。
【0044】
着色剤、風味および保存剤などの更なる賦形剤が固形および液体経口製剤に使用され得る。
【0045】
非経口投与用の医薬組成物としては、注射または注入用の滅菌水溶液および非水溶液、分散液、懸濁液またはエマルジョン、注射または注入用の濃縮物ならびに使用前に注射または注入用に滅菌溶液または分散液に溶解される滅菌粉末が挙げられる。非経口製剤に適した賦形剤の例としては、限定されないが、水、ヤシ油、パーム油およびシクロデキストリンの溶液が挙げられる。水性製剤は、必要に応じて適切に緩衝化し、十分な生理食塩水またはグルコースで等張性を付与されるべきである。
【0046】
他のタイプの医薬組成物としては、坐剤、吸入剤、クリーム剤、ゲル剤、経皮パッチ、植込錠および口腔内または舌下投与用の製剤が挙げられる。
【0047】
医薬製剤に使用される賦形剤は、意図する投与経路に適合し、活性成分と適合性であることが必須である。
【0048】
用量：
一実施形態において、本発明の化合物は、１日あたり約０．００１～約１００ｍｇ／ｋｇ体重の量で投与される。特に、１日量は、１日あたり０．０１～約５０ｍｇ／ｋｇ体重の範囲であり得る。正確な投薬量は、処置すべき対象の頻度および投与形式、性別、年齢、体重および全身状態、処置すべき状態の性質および重症度、処置されるべき付随する疾患、処置の所望の効果ならびに当業者に公知の他の因子に応じて異なる。
【0049】
成人の一般的な経口投薬量は、本発明の化合物０．１～１０００ｍｇ／日の範囲であり、例えば１～５００ｍｇ／日、１～１００ｍｇ／日または１～５０ｍｇ／日の範囲である。好都合には、本発明の化合物は、約０．１～５００ｍｇ、例えば１０ｍｇ、５０ｍｇ、１００ｍｇ、１５０ｍｇ、２００ｍｇまたは２５０ｍｇの量で前記化合物を含有する単位剤形で投与される。
【発明を実施するための形態】
【0050】
本発明の発明者らは、ＰＤＥ１阻害剤である化合物を同定し、それ自体は、神経変性障害および精神障害の治療に有用である。したがって、本発明は、哺乳動物、好ましくはヒトの治療において薬物として使用するための、ＰＤＥ１の阻害に有効な式（Ｉ）の化合物を提供する。
【0051】
本発明は、式（Ｉ）の化合物または薬剤として許容されるその塩、ならびに神経変性疾患または精神障害であり得る脳疾患の治療に使用するための、かかる化合物を含有する医薬組成物を提供する。好ましい実施形態において、その神経変性疾患は、アルツハイマー病、パーキンソン病およびハンチントン病からなる群から選択される。他の好ましい実施形態において、その精神障害は、注意欠陥多動障害（ＡＤＨＤ）、鬱病、不安、ナルコレプシー、認知障害および精神分裂病を伴う認知障害（ＣＩＡＳ）からなる群から選択される。他の脳障害としては、例えば、下肢静止不能症候群が挙げられる。
【0052】
本発明は、神経変性障害または精神障害であり得る脳疾患を治療する方法であって、前記哺乳動物に薬学的に有効な量の式（Ｉ）の化合物または薬剤として許容されるその塩を投与することを含む方法をさらに提供する。本発明に従って治療することができる神経変性疾患の例としては、アルツハイマー病、パーキンソン病およびハンチントン病が挙げられ、その方法は、治療有効量の式（Ｉ）の化合物を対象に投与することを含む。本発明に従って治療することができる精神障害の例としては、注意欠陥多動障害（ＡＤＨＤ）、鬱病、ナルコレプシー、認知障害および精神分裂病を伴う認知障害（ＣＩＡＳ）が挙げられる。治療される他の脳障害としては、例えば、下肢静止不能症候群が挙げられる。
【0053】
本発明の実施形態
以下において、本発明の実施形態が開示される。第１実施形態は、Ｅ１で示され、第２実施形態は、Ｅ２で示される。
【0054】
Ｅ１．式（Ｉ）による化合物
【化2】

（式中、Ａ １ はＮであり，Ａ ２ はＣＨであり、かつＡ ３ はＮであり；または
Ａ １ はＣＨであり、Ａ ２ はＣＨであり、かつＡ ３ はＮであり；または
Ａ １ はＣＨであり、Ａ ２ はＮであり、かつＡ ３ はＣＨであり；
Ｒ １ は、水素、または直鎖状または分岐状Ｃ１～Ｃ８アルキルであり；または
Ｒ １ は、フェニルで置換されているメチルであり、前記フェニルは、ハロゲン、Ｃ１～Ｃ３アルキル、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、メトキシ、ジフルオロメトキシおよびトリフルオロメトキシからなる群から選択される１つまたは複数の置換基で１回または複数回にわたって任意選択的に置換されており；
Ｒ ２ は、フェニルまたはヘテロ芳香族基で４位にて置換されているフェニルであり；前記フェニル置換基または前記ヘテロ芳香族基が、メチル、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、メトキシ、ジフルオロメトキシおよびトリフルオロメトキシからなる群から選択される１つまたは複数の置換基で１回または複数回にわたって置換されていてもよく；または
Ｒ ２ は、フェニルまたはヘテロ芳香族基で４位にて置換されているピペラジン－１－イルであり；前記フェニル置換基または前記ヘテロ芳香族基が、メチル、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、メトキシ、ジフルオロメトキシおよびトリフルオロメトキシからなる群から選択される１つまたは複数の置換基で１回または複数回にわたって置換されていてもよく；
Ｒ ３ は、直鎖状または分岐状Ｃ２～Ｃ８アルキル、飽和単環式Ｃ３～Ｃ８シクロアルキル、オキセタニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロピラニルからなる群から選択され；そのすべてが、メチル、フッ素、ヒドロキシ、シアノおよびメトキシからなる群から選択される１つまたは複数の置換基で１回または複数回にわたって置換されていてもよい）
またはその薬剤として許容される塩。
【0055】
Ｅ２．Ａ１がＮであり、Ａ２がＣであり、かつＡ３がＮである、実施形態１による化合物。
【0056】
Ｅ３．Ａ１がＣであり、Ａ２がＣであり、かつＡ３がＮである、実施形態１による化合物。
【0057】
Ｅ４．Ａ１がＣであり、Ａ２がＮであり、かつＡ３がＣである、実施形態１による化合物。
【0058】
Ｅ５．Ａ１がＮであり、Ａ２がＣであり、かつＡ３がＮであり；またはＡ１がＣであり、Ａ２がＣであり、かつＡ３がＮである、実施形態１による化合物。
【0059】
Ｅ６．Ａ１がＣであり、Ａ２がＣであり、かつＡ３がＮであり；またはＡ１がＣであり、Ａ２がＮであり、かつＡ３がＣである、実施形態１による化合物。
【0060】
Ｅ７．Ａ１がＮであり、Ａ２がＣであり、かつＡ３がＮであり；またはＡ１がＣであり、Ａ２がＮであり、かつＡ３がＣである、実施形態１による化合物。
【0061】
Ｅ８．Ｒ１が水素である、実施形態１から７のいずれかによる化合物。
【0062】
Ｅ９．Ｒ１が水素以外である、実施形態１から７のいずれかによる化合物。
【0063】
Ｅ１０．Ｒ１が直鎖状または分岐状Ｃ１～Ｃ８アルキルである、実施形態１から７のいずれかによる化合物。
【0064】
Ｅ１１．Ｒ１がメチルまたはエチルである、実施形態１０による化合物。
【0065】
Ｅ１２．Ｒ１が、フェニルで置換されているメチルであり、前記フェニルが、ハロゲン、Ｃ１～Ｃ３アルキルおよびメトキシからなる群から選択される１つまたは複数の置換基で１回または複数回にわたって任意選択的に置換されている、実施形態１から７のいずれかによる化合物。
【0066】
Ｅ１３．Ｒ１が、フェニルで置換されているメチルであり、前記フェニルが、メトキシで１回置換されている、実施形態１２による化合物。
【0067】
Ｅ１４．Ｒ ２ が、フェニルまたはヘテロ芳香族基で４位にて置換されているフェニルであり；前記フェニル置換基または前記ヘテロ芳香族基が、メチル、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、メトキシ、ジフルオロメトキシおよびトリフルオロメトキシからなる群から選択される１つまたは複数の置換基で１回または複数回にわたって置換されていてもよい、実施形態１から１３のいずれかによる化合物。
【0068】
Ｅ１５．Ｒ ２ が、メチル、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、メトキシ、ジフルオロメトキシおよびトリフルオロメトキシからなる群から選択される１つまたは複数の置換基で１回または複数回にわたって置換されていてもよいヘテロ芳香族基で４位にて置換されているフェニルである、実施形態１４による化合物。
【0069】
Ｅ１６．前記ヘテロ芳香族基が、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニルおよびイミダゾリルから選択される、実施形態１４～１５のいずれかによる化合物。
【0070】
Ｅ１７．前記ヘテロ芳香族基が２－ピリジニルである、実施形態１６による化合物。
【0071】
Ｅ１８．Ｒ ２ が、フェニルで４位にて置換されているフェニルであり、前記フェニル置換基が、メチル、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、メトキシ、ジフルオロメトキシおよびトリフルオロメトキシからなる群から選択される１つまたは複数の置換基で１回または複数回にわたって置換されていてもよい、実施形態１４による化合物。
【0072】
Ｅ１９．Ｒ ２ が、フェニルまたはヘテロ芳香族基で４位にて置換されているピペラジン－１－イルであり；前記フェニル置換基または前記ヘテロ芳香族基が、メチル、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、メトキシ、ジフルオロメトキシおよびトリフルオロメトキシからなる群から選択される１つまたは複数の置換基で１回または複数回にわたって置換されていてもよい、実施形態１～１３のいずれかによる化合物。
【0073】
Ｅ２０．Ｒ ２ が、メチル、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、メトキシ、ジフルオロメトキシおよびトリフルオロメトキシからなる群から選択される１つまたは複数の置換基で１回または複数回にわたって置換されていてもよいヘテロ芳香族基で４位にて置換されているピペラジン－１－イルである、実施形態１９による化合物。
【0074】
Ｅ２１．前記ヘテロ芳香族基が、ピリジニル、ピリミジニル、ピラジニルおよびイミダゾリルから選択される、実施形態１９～２０のいずれかによる化合物。
【0075】
Ｅ２２．前記ヘテロ芳香族基が２－ピリジニルである、実施形態２１による化合物。
【0076】
Ｅ２３．Ｒ ２ が、フェニルで４位にて置換されているピペラジン－１－イルであり、前記フェニル置換基が、メチル、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、メトキシ、ジフルオロメトキシおよびトリフルオロメトキシからなる群から選択される１つまたは複数の置換基で１回または複数回にわたって置換されていてもよい、実施形態１９による化合物。
【0077】
Ｅ２４．前記フェニル置換基または前記ヘテロ芳香族基が、メチル、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノ、メトキシ、ジフルオロメトキシおよびトリフルオロメトキシからなる群から選択される置換基で１回置換されている、実施形態１４～２３のいずれかによる化合物。
【0078】
Ｅ２５．前記ハロゲンがフッ素である、実施形態１４～２４のいずれかによる化合物。
【0079】
Ｅ２６．前記１つまたは複数の置換基が、メチル、ジフルオロメチル、フッ素およびメトキシから選択される、実施形態１４～２３のいずれかによる化合物。
【0080】
Ｅ２７．前記置換基が、メチル、ジフルオロメチル、フッ素およびメトキシから選択される、実施形態２４による化合物。
【0081】
Ｅ２８．前記フェニル置換基または前記ヘテロ芳香族基が未置換である、実施形態１４～２３のいずれかによる化合物。
【0082】
Ｅ２９．Ｒ ３ が、Ｃ２～Ｃ３アルキル、オキセタニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロピラニルから選択され；そのすべてが、メチル、フッ素、ヒドロキシ、シアノおよびメトキシからなる群から選択される１つまたは複数の置換基で１回または複数回にわたって置換されていてもよい、実施形態１～２８のいずれかによる化合物。
【0083】
Ｅ３０．Ｒ３が、直鎖状または分岐状Ｃ２～Ｃ８アルキル、飽和単環式Ｃ３～Ｃ８シクロアルキル、オキセタニル、テトラヒドロフラニルおよびテトラヒドロピラニルからなる群から選択され；そのすべてが未置換である、実施形態１～２８のいずれかによる化合物。
【0084】
Ｅ３１．Ｒ３が、未置換Ｃ２～Ｃ３アルキル、オキセタニル、テトラヒドロフラニル、およびテトラヒドロピラニルから選択される、実施形態１～２８のいずれかによる化合物。
【0085】
Ｅ３２．Ｒ３が、１つまたは複数のフッ素で任意選択的に置換されているＣ２～Ｃ３アルキルである、実施形態１～２８のいずれかによる化合物。
【0086】
Ｅ３３．Ｒ３が、未置換テトラヒドロピラニルである、実施形態１～２８のいずれかによる化合物。
【0087】
Ｅ３４．Ｒ３が、メチルで任意選択的に置換されているテトラヒドロフラニルである、実施形態１～２８のいずれかによる化合物。
【0088】
Ｅ３５．Ｒ ２ が、フェニルまたはピリジニルで４位にて置換されているフェニルであり；前記フェニル置換基または前記ピリジニルが、メチル、フルオロメチル、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノおよびメトキシからなる群から選択される１つまたは複数の置換基で１回または複数回にわたって置換されていてもよい、実施形態１～１３のいずれかによる化合物。
【0089】
Ｅ３６．Ｒ ２ が、フェニルまたはピリジニルで４位にて置換されているピペラジン－１－イルであり；前記フェニル置換基または前記ピリジニルが、メチル、フルオロメチル、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノおよびメトキシからなる群から選択される１つまたは複数の置換基で１回または複数回にわたって置換されていてもよい、実施形態１～１３のいずれかによる化合物。
【0090】
Ｅ３７．前記ヘテロ芳香族基が２－ピリジニルである、実施形態３６による化合物。
【0091】
Ｅ３８．前記１つまたは複数の置換基が、メチル、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、フッ素、メトキシ、ジフルオロメトキシおよびトリフルオロメトキシから選択される、実施形態３５～３７のいずれかによる化合物。
【0092】
Ｅ３９．
１．５－メチル－６－［［４－（６－メチル－２－ピリジル）フェニル］メチル］－１－テトラヒドロピラン－４－イル－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－４－オン；
２．５－メチル－６－［［４－（２－ピリジル）フェニル］メチル］－１－テトラヒドロピラン－４－イル－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－４－オン；
３．５－メチル－６－［［４－（６－メチル－２－ピリジル）フェニル］メチル］－１－テトラヒドロピラン－４－イル－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－４－オン；
４．６－［［４－（６－フルオロ－２－ピリジル）フェニル］メチル］－５－メチル－１－テトラヒドロピラン－４－イル－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－４－オン；
５．６－［［４－（６－フルオロ－２－ピリジル）フェニル］メチル］－５－メチル－１－テトラヒドロピラン－４－イル－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－４－オン；
６．５－メチル－６－［［４－（２－ピリジル）フェニル］メチル］－１－テトラヒドロピラン－４－イル－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－４－オン；
７．７－［（４－メトキシフェニル）メチル］－６－［［４－（２－ピリジル）ピペラジン－１－イル］メチル］－３－テトラヒドロピラン－４－イル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン；
８．７－［（４－メトキシフェニル）メチル］－６－［（４－フェニルピペラジン－１－イル）メチル］－３－テトラヒドロピラン－４－イル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン；
９．７－［（４－メトキシフェニル）メチル］－６－［［４－（２－ピリジル）フェニル］メチル］－３－テトラヒドロピラン－４－イル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン；
１０．６－［［４－（２－ピリジル）フェニル］メチル］－３－テトラヒドロピラン－４－イル－７Ｈ－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン；
１１．７－メチル－６－［［４－（２－ピリジル）フェニル］メチル］－３－テトラヒドロピラン－４－イル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン；
１２．７－エチル－６－［［４－（２－ピリジル）フェニル］メチル］－３－テトラヒドロピラン－４－イル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン；
１３．７－メチル－６－［［４－（６－メチル－２－ピリジル）フェニル］メチル］－３－テトラヒドロピラン－４－イル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン；
１４．６－［［４－（６－フルオロ－２－ピリジル）フェニル］メチル］－７－メチル－３－テトラヒドロピラン－４－イル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン；
１５．６－［［４－［６－（ジフルオロメチル）－２－ピリジル］フェニル］メチル］－７－メチル－３－テトラヒドロピラン－４－イル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン；
１６．６－［［４－（６－メトキシ－２－ピリジル）フェニル］メチル］－７－メチル－３－テトラヒドロピラン－４－イル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン；
１７．６－［［４－（３－メトキシ－２－ピリジル）フェニル］メチル］－７－メチル－３－テトラヒドロピラン－４－イル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン；
１８．７－メチル－６－［［４－（ｏ－トリル）フェニル］メチル］－３－テトラヒドロピラン－４－イル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン；
１９．７－メチル－６－［（４－フェニルフェニル）メチル］－３－テトラヒドロピラン－４－イル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン；
２０．７－メチル－６－（４－（１－メチル－１Ｈ－イミダゾール－４－イル）ベンジル）－３－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン；
２１．６－［［４－（６－フルオロ－２－ピリジル）フェニル］メチル］－３－イソプロピル－７－メチル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン；
２２．６－（４－（６－フルオロピリジン－２－イル）ベンジル）－７－メチル－３－プロピルイミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン；
２３．３－エチル－６－（４－（６－フルオロピリジン－２－イル）ベンジル）－７－メチルイミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン；
２４．７－メチル－６－（４－（ピラジン－２－イル）ベンジル）－３－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン；
２５．６－（４－（６－フルオロピリジン－２－イル）ベンジル）－７－メチル－３－（２，２，２－トリフルオロエチル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン；
２６．７－メチル－６－（４－（ピリミジン－４－イル）ベンジル）－３－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン；
２７．６－（４－（６－フルオロピリジン－２－イル）ベンジル）－７－メチル－３－（テトラヒドロフラン－３－イル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン，異性体１；
２８．６－（４－（６－フルオロピリジン－２－イル）ベンジル）－７－メチル－３－（テトラヒドロフラン－３－イル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン，異性体２；
２９．６－（４－（６－フルオロピリジン－２－イル）ベンジル）－７－メチル－３－（２－メチルテトラヒドロフラン－３－イル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン，異性体１；
３０．６－（４－（６－フルオロピリジン－２－イル）ベンジル）－７－メチル－３－（２－メチルテトラヒドロフラン－３－イル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン，異性体２；
３１．６－（４－（６－フルオロピリジン－２－イル）ベンジル）－７－メチル－３－（２－メチルテトラヒドロフラン－３－イル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン，異性体３；
３２．６－（４－（６－フルオロピリジン－２－イル）ベンジル）－７－メチル－３－（２－メチルテトラヒドロフラン－３－イル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン，異性体４；
からなる群から選択される実施形態１による化合物、またはこれらの化合物のいずれかの薬剤として許容される塩。
【0093】
Ｅ４０．
１０．６－［［４－（２－ピリジル）フェニル］メチル］－３－テトラヒドロピラン－４－イル－７Ｈ－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン；である実施形態１による化合物、またはその薬剤として許容される塩。
【0094】
Ｅ４１．「ＰＤＥ１阻害アッセイ」のセクションに記載のように決定された１０マイクロモル以下、５マイクロモル以下、例えば４マイクロモル以下、例えば３マイクロモル以下、例えば２マイクロモル以下、例えば１マイクロモル以下、例えば５００ｎＭ以下、例えば４００ｎＭ以下、例えば３００ｎＭ以下、例えば２００ｎＭ以下、例えば１００ｎＭ以下のＰＤＥ１Ａ、ＰＤＥ１ＢまたはＰＤＥ１Ｃ ＩＣ５０値を有する、実施形態１～４０のいずれか１つによる化合物。
【0095】
Ｅ４２．治療法に使用するための、実施形態１～４０のいずれか１つによる化合物。
【0096】
Ｅ４３．薬物として使用するための、実施形態１～４０のいずれか１つによる化合物。
【0097】
Ｅ４４．治療有効量の実施形態１～４０のいずれか１つの化合物と、１種または複数の薬剤として許容される担体、希釈剤または賦形剤とを含む医薬組成物。
【0098】
Ｅ４５．アルツハイマー病、パーキンソン病およびハンチントン病からなる群から選択される神経変性疾患の治療において使用するための、または注意欠陥多動障害（ＡＤＨＤ）、鬱病、不安、ナルコレプシー、認知障害および精神分裂病を伴う認知障害（ＣＩＡＳ）などの精神障害もしくは下肢静止不能症候群などの他の脳疾患を治療するための、実施形態１～４０のいずれかの化合物。
【0099】
Ｅ４６．アルツハイマー病、パーキンソン病およびハンチントン病からなる群から選択される神経変性疾患を治療するための、または注意欠陥多動障害（ＡＤＨＤ）、鬱病、不安、ナルコレプシー、認知障害および精神分裂病を伴う認知障害（ＣＩＡＳ）などの精神障害もしくは下肢静止不能症候群などの他の脳疾患を治療するための方法であって、治療有効量の実施形態１～４０のいずれかによる化合物を、それを必要とする患者に投与することを含む方法。
【0100】
Ｅ４７．アルツハイマー病、パーキンソン病およびハンチントン病からなる群から選択される神経変性疾患を治療するための、または注意欠陥多動障害（ＡＤＨＤ）、鬱病、不安、ナルコレプシー、認知障害および精神分裂病を伴う認知障害（ＣＩＡＳ）などの精神障害もしくは下肢静止不能症候群などの他の脳疾患を治療するための薬物を製造するための、実施形態１～４０のいずれかによる化合物の使用。
【0101】
本明細書に記載の刊行物、特許出願および特許を含むすべての参考文献は、その全体として、かつ各参考文献が個々におよび具体的に参照により組み込まれるかのように示されかつその全体が記載されているのと同程度に（法律によって認められる最大限度まで）参照により本明細書に組み込まれる。
【0102】
見出しおよび小見出しは、本明細書において便宜的に使用され、本発明を限定するものと決して解釈されるべきではない。
【0103】
本明細書におけるいずれかのおよびすべての実施例または例示的な用語（「例えば（ｆｏｒ ｉｎｓｔａｎｃｅ）」、「例えば（ｆｏｒ ｅｘａｍｐｌｅ）」、「例として」および「例えば（ｓｕｃｈ ａｓ）」など）の使用は、単に本発明をより明確にすることが意図され、別段の指定がない限り、本発明の範囲を限定するものではない。
【0104】
本明細書での特許文献の引用および組み込みは、単に便宜的に行われ、かかる特許文献の有効性、特許性および／または法的強制力に関するいかなる見解も反映するものではない。
【0105】
本発明は、適用可能な法律によって認められる通り、本明細書に添付される特許請求の範囲に記載された主題のすべての修正形態および均等物を包含する。
【0106】
本発明の化合物
【0107】
【表1】
【0108】
【表2】
【0109】
【表3】
【0110】
【表4】
【0111】
表１は、本発明の化合物によってＰＤＥ１の阻害のＩＣ５０値を示す。ＩＣ５０値は、指定の基質濃度でＰＤＥ１酵素の阻害５０％に達するのに必要な化合物の濃度（ｎＭ）を意味する。表１は、１０μＭでのＰＤＥ９受容体の阻害の値も示す。
【0112】
ＰＤＥ１およびＰＤＥ９アッセイは、実験セクションに記述される。
【0113】
実験セクション
本発明の化合物の製造 － 一般的な方法
【化3】
式（Ｉ）の化合物は、有機化学分野で公知の合成方法と共に、または当業者によく知られた修正形態と共に、以下に記載の方法によって製造される。本明細書で使用される出発原料は、市販されており、または当技術分野で公知の慣例的な方法、例えばＣｏｍｐｅｎｄｉｕｍ ｏｆ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ Ｍｅｔｈｏｄｓ，Ｖｏｌ．Ｉ－ＸＩＩＩ（Ｗｉｌｅｙ－Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ出版、ＩＳＳＮ：１９３４－４７８３）などの標準参考図書に記載の方法によって製造することができる。好ましい方法としては、限定されないが、以下の方法が挙げられる。
【0114】
そのスキームは、本発明の化合物の合成に有用な方法を表す。それらは、本発明の範囲を決して限定するものではない。
【0115】
方法１：
【化4】
式中、Ｒ１、およびＲ３は、式Ｉについて記載の通りであり；Ｒは、メチルまたはエチルなどのアルキル基であり；Ｒ４はフェニルまたはヘテロ芳香族基であり；そのすべてが、メチル、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノまたはメトキシからなる群から選択される１つまたは複数の置換基で１回または複数回にわたって置換され得て；かつＲ５が、水素であるか、または２つのＲ５が連結して、４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロランなどの環状ボロン酸エステルを形成し；かつＸが、塩素、臭素またはヨウ素などのハロゲンである。
【0116】
一般式ＩＩの化合物（スキーム１）は、文献（Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２００９，５２，７９４９）に記載のように製造することができる。一般式ＩＶの化合物は、カリウムｔ－ブトキシドなどの塩基の存在下にて、一般式ＩＩの化合物と一般式ＩＩＩの化合物の反応によって製造することができる。一般式ＶＩの化合物は、限定されないが、炭酸カリウムまたは炭酸セシウムなどの塩基の存在下にて一般式ＩＶの化合物を一般式Ｖの化合物で処理することによって製造することができる。一般式ＶＩＩの化合物は、ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）（［１，１’－ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ））などのパラジウム触媒および酢酸カリウムなどの塩基の存在下にて、一般式ＶＩの化合物を４，４，４’，４’，５，５，５’，５’－オクタメチル－２，２’－ビ（１，３，２－ジオキサボロラン）などの試薬と反応させることによって製造することができる。ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）などのパラジウム触媒および炭酸セシウムなどの塩基の存在下にて、一般式ＶＩＩの化合物を一般式ＶＩＩＩの化合物と反応させると、一般式Ｉａの化合物が得られる。その代わりに、ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）（［１，１’－ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ））などのパラジウム触媒および炭酸セシウムなどの塩基の存在下にて、一般式ＶＩの化合物を一般式ＶＩＩＩａの化合物と反応させて、一般式Ｉａの化合物を得ることができる。
【0117】
方法２：
【化5】
式中、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は式Ｉについて上述の通りである。
【0118】
一般式Ｉａの化合物（Ｒ１は水素である）（スキーム２）は、カリウムｔ－ブトキシドなどの塩基の存在下にて、一般式ＩＩの化合物と一般式ＩＩＩ（スキーム２）の化合物を反応させることによって製造することができる。一般式Ｉａの化合物（Ｒ１は水素ではない）は、限定されないが、炭酸カリウムまたは炭酸セシウムなどの塩基の存在下にて一般式Ｉａの化合物（Ｒ１は水素である）を一般式Ｖの化合物で処理することによって製造することができる。
【0119】
方法３：
【化6】
式中、Ｒ１およびＲ３は式Ｉについて上述の通りであり；Ｒは、メチルまたはエチルなどのアルキル基であり；Ｒ４は、フェニルまたはヘテロ芳香族基であり；そのすべてが、メチル、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノまたはメトキシからなる群から選択される１つまたは複数の置換基で１回または複数回にわたって置換され得て；かつＲ５は水素であるか、または２つのＲ５が連結して、４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロランなどの環状ボロン酸エステルを形成し；かつＸは、塩素、臭素またはヨウ素などのハロゲンである。
【0120】
一般式Ｘ（スキーム３）の化合物は、一般式ＩＸの化合物を酢酸アンモニウムで処理することによって製造することができる。一般式ＸおよびＸＩの化合物をナトリウムエトキシドなどの塩基で処理することによって、一般式ＸＩＩの化合物が生成される。一般式ＸＩＩの化合物をジクロロホスホリルベンゼンなどの試薬で処理することによって、一般式ＸＩＩＩの化合物が生成され、その化合物は、限定されないが、炭酸カリウムまたは炭酸セシウムなどの塩基の存在下にて、一般式Ｖの化合物でアルキル化して、一般式ＸＩＶの化合物が生成され得る。一般式ＸＩＶの化合物のエステル部位の還元によって、一般式ＸＶの化合物が生成される。一般式ＸＶの化合物を一般式ＸＶＩのヒドラジンと反応させることによって、一般式ＸＶＩＩの化合物が生成され、その後、ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）などのパラジウム触媒および酢酸カリウムなどの塩基の存在下にて、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’－オクタメチル－２，２’－ビ（１，３，２－ジオキサボロラン）などの試薬と反応させることによって、一般式ＸＶＩＩＩの化合物が生成される。ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）などのパラジウム触媒および炭酸セシウムなどの塩基の存在下にて、一般式ＸＶＩＩＩの化合物を一般式ＶＩＩＩの化合物と反応させることによって、一般式Ｉｂの化合物（スキーム３）が生成される。その代わりとして、ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）（［１，１’－ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ））などのパラジウム触媒および炭酸セシウムなどの塩基の存在下にて、一般式ＸＶＩＩの化合物を一般式ＶＩＩＩａの化合物と反応させて、一般式Ｉｂ（スキーム３）の化合物が生成される。
【0121】
方法４：
【化7】
式中、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は式Ｉについて上述の通りであり；Ｒは、メチルまたはエチルなどのアルキル基であり；かつＸは、塩素、臭素またはヨウ素などのハロゲンである。
【0122】
一般式ＸＸの化合物（スキーム４）は、一般式ＸＩＸの化合物を酢酸アンモニウムで処理することによって製造することができる。一般式ＸＸおよびＸＩの化合物をナトリウムエトキシドなどの塩基で処理することによって、一般式ＸＸＩの化合物が生成される。一般式ＸＸＩの化合物をジクロロホスホリルベンゼンなどの試薬で処理することによって、一般式ＸＸＩＩの化合物が生成され、限定されないが、炭酸カリウムまたは炭酸セシウムなどの塩基の存在下にて、一般式Ｖの化合物でアルキル化され得る。一般式ＸＸＩＩＩの化合物のエステル部位を還元することによって、一般式ＸＸＩＶの化合物が生成される。一般式ＸＸＩＶの化合物を一般式ＸＶＩのヒドラジンと反応させることによって、一般式Ｉｂの化合物（スキーム４）が生成される。
【0123】
方法５：
【化8】
式中Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は式Ｉについて上述の通りであり；Ｒ５は水素であるか、または２つのＲ５が連結して、４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロランなどの環状ボロン酸エステルを形成し；かつＸは、塩素、臭素またはヨウ素などのハロゲンである。
【0124】
限定されないが炭酸カリウムなどの例示される塩基の存在下にて、α－ハロゲン化ケトンを一般式ＸＸＶＩの化合物と反応させることによって、市販のメチル１Ｈ－イミダゾール－５－カルボキシレートＸＸＶ（ＣＡＳ：１７３２５－２６－７）から、一般式ＸＸＶＩＩの化合物（スキーム５）を製造することができる。限定されないが、アゾビスイソブチロニトリル（ＡＩＢＮ）によって例示されるラジカル開始剤の存在下にて、限定されないが、Ｎ－ブロモスクシンイミド（ＮＢＳ）などの例示される臭素化剤でイミダゾールＸＸＶＩＩを処理することによって、イミダゾールＸＸＶＩＩＩが生成される。一般式ＸＸＩＸの化合物は、イミダゾールＸＸＶＩＩＩを酢酸アンモニウムで処理することによって形成される。限定されないが、鈴木・宮浦（Ｓｕｚｕｋｉ－Ｍｉｙａｕｒａ）クロスカップリング反応により例示される標準クロスカップリング反応条件を用いて、中間体ＸＸＩＸから一般式ＸＸＸＩの化合物を製造することができる。クロスカップリング反応のかかる条件は、限定されないが：一般式ＸＸＸのボロン酸エステル、塩基として炭酸カリウム、および触媒としてＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）；を使用する条件が例示される。一部の実施例において、Ｒ３は不飽和炭素間結合を含有し、それは、当業者に公知の条件下での水素化によって還元され得る。限定されないが、炭酸カリウムまたは炭酸セシウムなどの塩基の存在下にて、一般式ＸＸＸＩの化合物を一般式Ｖの化合物でアルキル化して、一般式ＸＸＸＩＩの化合物を生成することができる。限定されないが、アゾビスイソブチロニトリル（ＡＩＢＮ）により例示されるラジカル開始剤の存在下にて、限定されないが、Ｎ－ブロモスクシンイミド（ＮＢＳ）により例示される臭素化剤で一般式ＸＸＸＩＩの化合物を処理することによって、一般式ＸＸＸＩＩＩの化合物が生成される。ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）などのパラジウム触媒および炭酸カリウムなどの塩基の存在下にて、一般式ＸＸＸＩＩＩの化合物を一般式ＸＸＸＩＶの化合物と反応させることによって、一般式Ｉｃの化合物が生成される。
【0125】
方法６：
【化9】
式中、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は式Ｉについて上述の通りであり；かつＸは、塩素、臭素またはヨウ素などのハロゲンである。
【0126】
一般式Ｉｃの化合物（Ｒ１は水素である）（スキーム６）は、一般式Ｉｃの化合物（Ｒ１はｐ－メトキシベンジル（ＰＭＢ）である）をトリフルオロ酢酸などの酸で処理することによって製造することができる。一般式Ｉｃの化合物（Ｒ１は水素である）は、限定されないが、炭酸カリウムまたは炭酸セシウムなどの塩基の存在下にて、一般式Ｖの化合物でアルキル化して、一般式Ｉｃの化合物を生成することができる。
【0127】
方法７：
【化10】
Ｒ１およびＲ３は、式Ｉについて上述の通りであり；Ｒ４は、フェニルまたはヘテロ芳香族基であり；そのすべてが、メチル、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノまたはメトキシからなる群から選択される１つまたは複数の置換基で１回または複数回にわたって置換され得て；Ｒ５は水素であるか、または２つのＲ５が連結して、４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロランなどの環状ボロン酸エステルを形成し；かつＸは、塩素、臭素またはヨウ素などのハロゲンである。
【0128】
限定されないが、炭酸カリウムなど例示される塩基の存在下にて、一般式ＸＸＸＶを有するα－ハロゲン化ケトンと反応させることによって、市販のメチル１Ｈ－イミダゾール－５－カルボキシレートＸＸＶ（ＣＡＳ：１７３２５－２６－７）から、化合物ＸＸＸＶＩＩ（スキーム７）を製造することができる。イミダゾールＸＸＸＶＩＩを一般式ＸＸＸＶＩのアミンで処理することによって、一般式ＸＸＸＶＩＩＩの化合物が生成される。一般式ＸＸＸＶＩＩＩの化合物をテトラメチルピペリジニルマグネシウムクロリド－塩化リチウム（ＴＭＰＭｇＣｌ・ＬｉＣｌ）などの塩基で処理し、続いてヨウ素と反応させることによって、一般式ＸＸＸＩＸの化合物が生成される。限定されないが、鈴木・宮浦クロスカップリング反応などにより例示される標準クロスカップリング反応条件を用いて、中間体ＸＸＸＩＸから一般式ＸＬの化合物を製造することができる。クロスカップリング反応のかかる条件は、限定されないが：一般式ＸＸＸのボロン酸エステル、塩基として炭酸カリウム、および触媒としてＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）；を使用する条件が例示される。ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）などのパラジウム触媒および酢酸カリウムなどの塩基の存在下にて、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’－オクタメチル－２，２’－ビ（１，３，２－ジオキサボロラン）などの試薬と一般式ＸＬの化合物を反応させることによって、一般式ＸＬＩの化合物が生成される。ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）などのパラジウム触媒および炭酸セシウムなどの塩基の存在下にて、一般式ＸＬＩの化合物を一般式ＶＩＩＩの化合物と反応させることによって、一般式Ｉｃの化合物が生成される。その代わりとして、ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）（［１，１’－ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン］ジクロロパラジウム（ＩＩ））などのパラジウム触媒および炭酸セシウムなどの塩基の存在下にて、一般式ＸＬの化合物を一般式ＶＩＩＩａの化合物と反応させて、一般式Ｉｃの化合物を生成することができる。一部の実施例において、Ｒ３は不飽和炭素間結合を含有し、それは、当業者に公知の条件下での水素化によって還元され得る。
【0129】
方法８：
【化11】
式中、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は式Ｉについて上述の通りであり；Ｒ４は、フェニルまたはヘテロ芳香族基であり；そのすべてが、メチル、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノまたはメトキシからなる群から選択される１つまたは複数の置換基で１回または複数回にわたって置換され得る。
【0130】
一般式Ｉｄの化合物は、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミンなどの塩基の存在下にて、一般式ＸＸＸＩＩＩの化合物を一般式ＸＬＩＩの化合物と反応させることによって得られる。
【0131】
方法９：
【化12】
式中、Ｒ１、Ｒ２、およびＲ３は式Ｉについて上述の通りであり；Ｒ４は、フェニルまたはヘテロ芳香族基であり；そのすべてが、メチル、ハロゲン、ヒドロキシ、シアノまたはメトキシからなる群から選択される１つまたは複数の置換基で１回または複数回にわたって置換され得て；かつＲ５は水素であるか、または２つのＲ５が連結して、４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロランなどの環状ボロン酸エステルを形成し；Ｒ６が、ヒドロキシ、塩素またはＲ３ＣＯ２－であり；かつＸは、塩素、臭素またはヨウ素などのハロゲンである。
【0132】
化合物ＸＬＩＶは、ヨウ化銅（Ｉ）の存在下にて亜硝酸イソアミルおよびヨウ化メチレンなどの試薬で化合物ＸＬＩＩＩを処理することによって製造することができる。ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）などのパラジウム触媒および炭酸カリウムなどの塩基の存在下にて化合物ＸＬＩＶを化合物ＸＬＶと反応させることによって、化合物ＸＬＶＩが生成される。ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）などのパラジウム触媒および酢酸カリウムなどの塩基の存在下にて４，４，４’，４’，５，５，５’，５’－オクタメチル－２，２’－ビ（１，３，２－ジオキサボロラン）などの試薬と化合物ＸＬＶＩの化合物を反応させることによって、一般式ＸＬＶＩＩの化合物が生成される。限定されないが、鈴木・宮浦クロスカップリング反応などにより例示される標準クロスカップリング反応条件を用いて、中間体ＸＬＶＩＩから一般式ＸＬＶＩＩＩの化合物を製造することができる。クロスカップリング反応のかかる条件は、限定されないが：一般式ＶＩＩＩの化合物、塩基として酢酸カリウム、および触媒としてＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２；を使用する条件が例示される。炭素担持パラジウムなどの触媒の存在下にて水素で処理することによって、一般式ＸＬＶＩＩＩの化合物のシアノ部位の還元を達成して、一般式ＸＬＩＸの化合物を生成することができる。トリエチルアミンなどの塩基の存在下にて一般式Ｌのカルボン酸クロリドまたはカルボン酸無水物で一般式ＸＬＩＸの化合物を処理するか、あるいはＨＡＴＵ（１－［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］－１Ｈ－１，２，３－トリアゾロ［４，５－ｂ］ピリジニウム３－オキシドヘキサフルオロホスフェート）などのアミドカップリング試薬の存在下にて、一般式Ｌのカルボン酸で一般式ＸＬＩＸの化合物を処理することによって、一般式ＬＩの化合物が生成される。一般式Ｉｃの化合物（Ｒ１は水素である）は、一般式ＬＩの化合物を塩化ホスホリルなどの試薬で処理し、続いて塩酸水溶液などの加水分解条件にかけることによって得ることができる。一般式Ｉｃの化合物（Ｒ１は水素である）は、一般式Ｖの化合物を、限定されないが炭酸カリウムまたは炭酸セシウムなどの塩基の存在下にてアルキル化して、一般式Ｉｃの化合物（Ｒ１は水素ではない）が生成される。
【0133】
ＬＣ－ＭＳ法
方法Ａ：Ｗａｔｅｒｓ Ａｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ－ＭＳを使用した。カラム：Ａｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ ＢＥＨ Ｃ１８ １．７μｍ；２．１×５０ｍｍ；カラム温度：６０℃；溶媒システム：Ａ＝水／トリフルオロ酢酸（９９．９６５：０．０３５）およびＢ＝アセトニトリル／水／トリフルオロ酢酸（９４．９６５：５：０．０３５）；方法：直線勾配溶出（１．０分でＡ：Ｂ＝９０：１０～０：１００、流量１．２ｍＬ／分）。
【0134】
方法Ｂ：ＥＬＳ検出器を備えたＡｇｉｌｅｎｔ １２００ＬＣＭＳシステムを使用した。カラム：Ｗａｔｅｒｓ ＸＢｒｉｄｇｅ ＳｈｉｅｌｄＲＰ１８、２．１×５０ｍｍ、５μｍ；カラム温度：４０℃；溶媒システム：Ａ＝水／アンモニア（９９．９５：０．０５）およびＢ＝アセトニトリル；方法：直線勾配溶出（４．０分でＡ：Ｂ＝９５：５～０：１００、流量０．８ｍＬ／分）。
【0135】
方法Ｃ：ＥＬＳ検出器を備えたＡｇｉｌｅｎｔ １２００ＬＣＭＳシステムを使用した。Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ－Ｃ１８、５μｍ；２．０×５０ｍｍ；カラム温度：５０℃；溶媒システム：Ａ＝水／トリフルオロ酢酸（９９．９：０．１）およびＢ＝アセトニトリル／トリフルオロ酢酸（９９．９５：０．０５）；方法：直線勾配溶出（４．０分でＡ：Ｂ＝９９：１～０：１００、流量０．８ｍＬ／分）。
【0136】
方法Ｄ：ＥＬＳ検出器を備えたＡｇｉｌｅｎｔ １２００ＬＣＭＳシステムを使用した。Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ－Ｃ１８、５μｍ；２．０×５０ｍｍ；カラム温度：５０℃；溶媒システム：Ａ＝水／トリフルオロ酢酸（９９．９：０．１）およびＢ＝アセトニトリル／トリフルオロ酢酸（９９．９５：０．０５）；方法：直線勾配溶出（４．０分でＡ：Ｂ＝９０：１０～０：１００、流量０．８ｍＬ／分）。
【0137】
分取超臨界流体クロマトグラフィー（ＳＦＣ）をＴｈａｒ８０装置で行った。例示される条件は、限定されないが：粒径２０μｍのカラムＡＤ２５０×３０ｍｍ；カラム温度：３８℃、移動相：超臨界ＣＯ２／ＥｔＯＨ（０．２％ＮＨ３Ｈ２Ｏ）＝４５／５５であり得る。
【0138】
中間体：
エチル３－アミノ－４－（４－ブロモフェニル）ブト－２－エノエートの製造
【化13】
無水エタノール（５０ｍＬ）中のエチル４－（４－ブロモフェニル）－３－オキソブタノエート（５ｇ，１７．５ｍｍｏｌ）の溶液に、ＮＨ４ＯＡｃ（６．７６ｇ，８７．７ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を８０℃で３時間加熱した。その混合物を濃縮し、残留物を酢酸エチル（５０ｍＬ）と水（５０ｍＬ）の間に分配した。有機層を水（５０ｍＬ）、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮して、エチル３－アミノ－４－（４－ブロモフェニル）ブト－２－エノエート（５ｇ）が生成された。
【0139】
エチル６－（４－ブロモベンジル）－４－ヒドロキシ－２－オキソ－１，２－ジヒドロピリジン－３－カルボキシレートの製造
【化14】
Ｎａ（２９１ｍｇ，１２．７ｍｍｏｌ）をエタノール（７ｍＬ）に添加した。ナトリウムすべてが反応するまで、混合物を攪拌した。得られた溶液にマロン酸ジエチル（１．７８ｇ，１１．１ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で１時間攪拌した。次いで、エタノール（３ｍＬ）中のエチル３－アミノ－４－（４－ブロモフェニル）ブト－２－エノエート（３ｇ，１０．６ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。混合物を１３０℃で１５時間加熱した。混合物を室温に冷却し、氷水（２０ｇ）に注いだ。２Ｎ ＨＣｌによって混合物をｐＨ＝２に酸性化し、濾過し、濾過ケークを水（５０ｍＬ）で洗浄し、真空下にて乾燥させて、エチル６－（４－ブロモベンジル）－４－ヒドロキシ－２－オキソ－１，２－ジヒドロピリジン－３－カルボキシレート（３ｇ）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６ ４００ＭＨｚ）：δ １２．３７（ｂｒ，１Ｈ），１１．５６（ｂｒ，１Ｈ），７．５３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．２９（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），５．７２（ｓ，１Ｈ），４．２３（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），３．７４（ｓ，２Ｈ），１．２６（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）．
【0140】
エチル６－（４－ブロモベンジル）－４－クロロ－２－オキソ－１，２－ジヒドロピリジン－３－カルボキシレートの製造
【化15】
ジクロロホスホリルベンゼン（１３．９ｇ，７１．２７ｍｍｏｌ，１０ｍＬ）中のエチル６－（４－ブロモベンジル）－４－ヒドロキシ－２－オキソ－１，２－ジヒドロピリジン－３－カルボキシレート（１ｇ，２．８４ｍｍｏｌ）の溶液を６０℃で１６時間加熱した。混合物を室温に冷却し、氷水（２０ｇ）に添加した。混合物のｐＨを飽和ＮａＨＣＯ３水溶液によってｐＨ＝７に調整し、酢酸エチル（３０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層を水（３０ｍＬ）、ブライン（３０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。シリカゲル上でフラッシュクロマトグラフィー（酢酸エチルと石油エーテルの勾配を用いた）によって残留物を精製し、エチル６－（４－ブロモベンジル）－４－クロロ－２－オキソ－１，２－ジヒドロピリジン－３－カルボキシレート（０．６ｇ）を得た。
【0141】
エチル６－（４－ブロモベンジル）－４－クロロ－１－メチル－２－オキソ－１，２－ジヒドロピリジン－３－カルボキシレートの製造
【化16】
無水ＤＭＦ（２０ｍＬ）中のエチル６－（４－ブロモベンジル）－４－クロロ－２－オキソ－１，２－ジヒドロピリジン－３－カルボキシレート（２．２３ｇ，６．０２ｍｍｏｌ）の溶液に、ヨウ化メチル（８１２ｍｇ，５．７２ｍｍｏｌ）およびＮａ２ＣＯ３（１．２８ｇ，１２．０ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で２時間攪拌した。水（３０ｍＬ）を添加した。混合物を酢酸エチル（５０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層を水（５０ｍＬ×２）、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。シリカゲル上でフラッシュクロマトグラフィー（酢酸エチルと石油エーテルの勾配を用いた）によって残留物を精製し、エチル６－（４－ブロモベンジル）－４－クロロ－１－メチル－２－オキソ－１，２－ジヒドロピリジン－３－カルボキシレート（１．２ｇ）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３ ４００ＭＨｚ）：δ ７．５０（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．０２（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），６．０４（ｓ，１Ｈ），４．４１（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），３．９１（ｓ，２Ｈ），３．４０（ｓ，３Ｈ），１．３８（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）．
【0142】
６－（４－ブロモベンジル）－４－クロロ－１－メチル－２－オキソ－１，２－ジヒドロピリジン－３－カルバルデヒドの製造
【化17】
無水ＴＨＦ（１０ｍＬ）中のエチル６－（４－ブロモベンジル）－４－クロロ－１－メチル－２－オキソ－１，２－ジヒドロピリジン－３－カルボキシレート（１．２０ｇ，３．１２ｍｍｏｌ）の溶液に、水素化ジイソブチルアルミニウム（ＤＩＢＡＬ－Ｈ）（６．２４ｍＬ）（トルエン中で１Ｍ）を－７８℃で添加した。混合物を－７８℃で２時間攪拌した。飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（１０ｍＬ）を添加した。セライトを通して混合物を濾過し、濾液を酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層を水（２０ｍＬ）、ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。シリカゲル上でフラッシュクロマトグラフィー（酢酸エチルと石油エーテルの勾配を用いた）によって残留物を精製し、６－（４－ブロモベンジル）－４－クロロ－１－メチル－２－オキソ－１，２－ジヒドロピリジン－３－カルバルデヒド（０．６ｇ）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３ ４００ＭＨｚ）：δ １０．３０（ｓ，１Ｈ），７．４５（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），６．９７（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），６．００（ｓ，１Ｈ），３．８８（ｓ，２Ｈ），３．４１（ｓ，３Ｈ）．
【0143】
６－（４－ブロモベンジル）－５－メチル－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）－１Ｈ－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－４（５Ｈ）－オンの製造
【化18】
２－メトキシエタノール（３ｍＬ）中の６－（４－ブロモベンジル）－４－クロロ－１－メチル－２－オキソ－１，２－ジヒドロピリジン－３－カルバルデヒド（３００ｍｇ，０．８８ｍｍｏｌ）の溶液に、（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）ヒドラジン塩酸塩（２６９ｍｇ，１．７６ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（４４６ｍｇ，４．４０ｍｍｏｌ）を添加した。マイクロ波照射下にて、混合物を１７０℃で１時間加熱した。混合物を濃縮し、水（２０ｍＬ）を添加した。混合物を酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層を水（２０ｍＬ）、ブライン（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。シリカゲル上でフラッシュクロマトグラフィー（酢酸エチルと石油エーテルの勾配を用いた）によって残留物を精製し、６－（４－ブロモベンジル）－５－メチル－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）－１Ｈ－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－４（５Ｈ）－オン（２００ｍｇ）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３ ４００ＭＨｚ）：δ ８．１６（ｓ，１Ｈ），７．４８（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．０４（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），６．２４（ｓ，１Ｈ），４．４０－４．３６（ｍ，１Ｈ），４．１７－４．１３（ｍ，２Ｈ），４．０２（ｓ，２Ｈ），３．５７（ｔ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，２Ｈ），２．４２－２．３１（ｍ，２Ｈ），３．４２（ｓ，３Ｈ），１．９５－１．９２（ｍ，２Ｈ）．
【0144】
５－メチル－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）－６－（４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ベンジル）－１Ｈ－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－４（５Ｈ）－オンの製造
【化19】
ジオキサン（２ｍＬ）中の６－（４－ブロモベンジル）－５－メチル－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）－１Ｈ－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－４（５Ｈ）－オン（５０ｍｇ，０．１２ｍｍｏｌ）の溶液に、４，４，４’，４’，５，５，５’，５’－オクタメチル－２，２’－ビ（１，３，２－ジオキサボロラン）（４７ｍｇ，０．１９ｍｍｏｌ）、ＫＯＡｃ（３７ｍｇ，０．３７ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（９ｍｇ，０．０１ｍｍｏｌ）を添加した。混合物をＮ２で脱気し、１００℃で１６時間加熱した。混合物を３０℃に冷却した。ジオキサン（２ｍＬ）中の５－メチル－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）－６－（４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ベンジル）－１Ｈ－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－４（５Ｈ）－オン（５９ｍｇ）の溶液を次の工程に直接使用した。
【0145】
７－［（４－メトキシフェニル）メチル］－６－メチル－３－テトラヒドロピラン－４－イル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オンの製造
【化20】
ＤＭＦ（４０ｍＬ）中の６－メチル－３－テトラヒドロピラン－４－イル－７Ｈ－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン（４．５０ｇ，１９．３ｍｍｏｌ）および１－（クロロメチル）－４－メトキシ－ベンゼン（３．９３ｇ，２５．１ｍｍｏｌ，３．４２ｍＬ）の溶液に、Ｃｓ２ＣＯ３（１２．５７ｇ，３８．５８ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を６０℃で１２時間攪拌した。反応混合物を減圧下にて濃縮し、ＤＭＦを除去した。フラッシュシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチルと石油エーテルの勾配を用いた）によって残留物を精製し、７－［（４－メトキシフェニル）メチル］－６－メチル－３－テトラヒドロピラン－４－イル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン（５．７０ｇ）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３ ４００ＭＨｚ）：δ ７．９２（ｓ，１Ｈ），７．１６（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），６．８５（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ），６．７３（ｓ，１Ｈ），５．１７（ｓ，２Ｈ），４．１３－４．１１（ｍ，２Ｈ），３．７８（ｓ，３Ｈ），３．５８（ｔ，Ｊ＝１１．６Ｈｚ，２Ｈ），３．１１－３．０５（ｍ，１Ｈ），２．２０－２．０８（ｍ，５Ｈ），１．９０－１．８６（ｍ，２Ｈ）．
【0146】
６－（ブロモメチル）－７－（４－メトキシベンジル）－３－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オンの製造
【化21】
ＣＨＣｌ３（２２０ｍＬ）中の７－［（４－メトキシフェニル）メチル］－６－メチル－３－テトラヒドロピラン－４－イル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン（５．２０ｇ，１４．７ｍｍｏｌ）の溶液に、ＡＩＢＮ（４８３ｍｇ，２．９４ｍｍｏｌ）およびＮＢＳ（２．４９ｇ，１３．９７ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を５０℃で１２時間攪拌した。反応混合物を水（３０ｍＬ）で希釈し、ジクロロメタン（１００ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層をブライン（３０ｍＬ）で洗浄し、無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、濃縮した。シリカゲル上でカラムクロマトグラフィー（酢酸エチルと石油エーテルの勾配を用いた）によって残留物を精製し、６－（ブロモメチル）－７－（４－メトキシベンジル）－３－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン（２ｇ）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３ ４００ＭＨｚ）：δ ７．９６（ｓ，１Ｈ），７．１６（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．０５（ｓ，１Ｈ），６．８６（ｄ，Ｊ＝９．２Ｈｚ，２Ｈ），５．４２（ｓ，２Ｈ），４．２１（ｓ，２Ｈ），４．１５－４．１２（ｍ，２Ｈ），３．７８（ｓ，３Ｈ），３．５８（ｔ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，２Ｈ），３．１４－３．０８（ｍ，１Ｈ），２．１８－２．０９（ｍ，２Ｈ），１．９０－１．８７（ｍ，２Ｈ）．
【0147】
６－［（４－ブロモフェニル）メチル］－１－テトラヒドロピラン－４－イル－５Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－４－オンの製造
【化22】
無水ＴＨＦ（２００ｍＬ）中の５－アミノ－１－テトラヒドロピラン－４－イル－ピラゾール－４－カルボキサミド（４．７８ｇ，２２．７ｍｍｏｌ）の溶液に、メチル２－（４－ブロモフェニル）アセテート（７．８１ｇ，３４．１ｍｍｏｌ）およびＴＨＦ（４５ｍＬ）中のｔ－ＢｕＯＫ（１Ｍ，４５ｍＬ）を添加した。混合物を８０℃で１６時間攪拌した。混合物を水（３０ｍＬ）でクエンチし、ＨＣｌ（１Ｎ，水溶液）でｐＨ＝７に調整した。混合物を濾過した。濾過ケークを水（２０ｍＬ×３）で洗浄し、６－［（４－ブロモフェニル）メチル］－１－テトラヒドロピラン－４－イル－５Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－４－オン（５ｇ）を得た。
【0148】
６－［（４－ブロモフェニル）メチル］－５－メチル－１－テトラヒドロピラン－４－イル－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－４－オンの製造
【化23】
ＣＨ３ＣＮ（１５０ｍＬ）中の６－［（４－ブロモフェニル）メチル］－１－テトラヒドロピラン－４－イル－５Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－４－オン（４．３３ｇ，１１．１２ｍｍｏｌ）およびヨードメタン（１．７４ｇ，１２．２ｍｍｏｌ，０．７６ｍＬ）の溶液に、Ｃｓ２ＣＯ３（７．２５ｇ，２２．２ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で２時間攪拌した。混合物を真空下で濃縮した。残留物を水（５０ｍＬ）で希釈した。残留物を濾過した。濾過ケークを水（５０ｍＬ×２）で洗浄し、６－［（４－ブロモフェニル）メチル］－５－メチル－１－テトラヒドロピラン－４－イル－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－４－オン（２．１５ｇ）を得た。
【0149】
５－メチル－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）－６－（４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ベンジル）－１，５－ジヒドロ－４Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－４－オンの製造
【化24】
ジオキサン（５ｍＬ）中の６－［（４－ブロモフェニル）メチル］－５－メチル－１－テトラヒドロピラン－４－イル－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－４－オン（２００ｍｇ，０．５０ｍｍｏｌ）および４，４，４’，４’，５，５，５’，５’－オクタメチル－２，２’－ビ（１，３，２－ジオキサボロラン）（１８９ｍｇ，０．７４ｍｍｏｌ）の溶液に、ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）（３６ｍｇ，０．０５０ｍｍｏｌ）およびＫＯＡｃ（１４６ｍｇ，１．４９ｍｍｏｌ）を添加した。混合物をＮ２で３回脱気し、パージした。混合物を１００℃で１６時間攪拌した。混合物を真空下で濃縮して、５－メチル－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）－６－（４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ベンジル）－１，５－ジヒドロ－４Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－４－オン（２２３ｍｇ）を得た。
【0150】
メチル１－（２－オキソプロピル）－１Ｈ－イミダゾール－５－カルボキシレートの製造
【化25】
アセトン（４００ｍＬ）中のメチル１Ｈ－イミダゾール－５－カルボキシレート（２０ｇ，０．１６ｍｏｌ）、１－クロロプロパン－２－オン（２２ｇ，０．２４ｍｏｌ）、および炭酸カリウム（４４ｇ，０．３２ｍｏｌ）の混合物を３０℃で１２時間攪拌した。反応混合物を真空下で濃縮し、残留物を酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈し、水（５０ｍＬ×３）で洗浄した。有機層をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空下で濃縮した。石油エーテルと酢酸エチルの勾配を用いたフラッシュクロマトグラフィーによって、残留物を精製し、メチル１－（２－オキソプロピル）－１Ｈ－イミダゾール－５－カルボキシレート（１０ｇ）を得た。
【0151】
メチル２－ブロモ－１－（２－オキソプロピル）－１Ｈ－イミダゾール－５－カルボキシレートの製造
【化26】
クロロホルム（１００ｍＬ）中のメチル１－（２－オキソプロピル）－１Ｈ－イミダゾール－５－カルボキシレート（１０ｇ，５５ｍｍｏｌ）、Ｎ－ブロモスクシンイミド（１２．７ｇ，７１．４ｍｍｏｌ）およびアゾビスイソブチロニトリル（１．８ｇ，１１ｍｍｏｌ）の混合物を５０℃で１２時間攪拌した。混合物を真空下で濃縮した。石油エーテルと酢酸エチルの勾配を用いたフラッシュクロマトグラフィーによって、残留物を精製し、メチル２－ブロモ－１－（２－オキソプロピル）－１Ｈ－イミダゾール－５－カルボキシレート（１３ｇ）を得た。
【0152】
３－ブロモ－６－メチルイミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オンの製造
【化27】
１，４－ジオキサン（１５０ｍＬ）中のメチル２－ブロモ－１－（２－オキソプロピル）－１Ｈ－イミダゾール－５－カルボキシレート（１４ｇ，５０ｍｍｏｌ）および酢酸アンモニウム（１６．５ｇ，２１５ｍｍｏｌ）の混合物を６０℃で１２時間攪拌した。次いで、混合物を９０℃にてさらに２４時間攪拌した。反応混合物を真空下で濃縮し、残留物を酢酸エチル（６００ｍＬ）で希釈し、水（１００ｍＬ×３）で洗浄した。合わせた有機相を無水Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、真空下にて濃縮した。石油エーテルと酢酸エチルの勾配を用いたフラッシュクロマトグラフィーによって、残留物を精製し、３－ブロモ－６－メチルイミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン（４．８ｇ）を得た。
【0153】
３－（３，６－ジヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）－６－メチルイミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オンの製造
【化28】
１，４－ジオキサン（４０ｍＬ）中の３－ブロモ－６－メチルイミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン（４．５ｇ，２０ｍｍｏｌ）、２－（３，６－ジヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）－４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン（４．９７ｇ，２３．７ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（２．９ｇ，３．９５ｍｍｏｌ）、炭酸カリウム（５．５ｇ，３９ｍｍｏｌ）および水（１０ｍＬ）の混合物を１００℃で１２時間攪拌した。混合物を濾過し、濾液を真空内で濃縮した。ジクロロメタンとメタノールの勾配を用いて、シリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィーによって残留物を精製し、３－（３，６－ジヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）－６－メチルイミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン（４．０ｇ）を得た。
【0154】
６－メチル－３－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オンの製造
【化29】
テトラヒドロフラン（１５ｍＬ）中の３－（３，６－ジヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）－６－メチルイミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン（４．０ｇ，１７ｍｍｏｌ）および１０％Ｐｄ／Ｃ（３００ｍｇ）の混合物を、水素雰囲気下にて１５℃で７時間攪拌した。反応混合物を濾過し、濾液を真空下で濃縮して、６－メチル－３－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン（３．５ｇ）を得た。
【0155】
１－ブロモ－３－（４－ブロモフェニル）プロパン－２－オンの製造
【化30】
ＡｃＯＨ（３０ｍＬ）中の１－（４－ブロモフェニル）プロパン－２－オン（２５ｇ，１１７ｍｍｏｌ）の溶液およびＨＢｒ水溶液（１５ｍＬ）を、ＡｃＯＨ（５０ｍＬ）中のＢｒ２（３７．５ｇ，２３５ｍｍｏｌ，１２．１ｍＬ）の溶液一滴ずつで処理し、反応混合物を室温で４時間攪拌した。その後、アセトン（１５０ｍＬ）を添加し、混合物を室温で１２時間攪拌した。混合物を濃縮した。シリカゲル上でのカラムクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝１００：０～９０：１０）によって残留物を精製し、１－ブロモ－３－（４－ブロモフェニル）プロパン－２－オン（４０ｇ）を得た。
【0156】
メチル１－（３－（４－ブロモフェニル）－２－オキソプロピル）－１Ｈ－イミダゾール－５－カルボキシレートの製造
【化31】
ＣＨ３ＣＮ（１５０ｍＬ）中のメチル１Ｈ－イミダゾール－５－カルボキシレート（１４ｇ，１１１ｍｍｏｌ）、１－（４－ブロモフェニル）プロパン－２－オン（３５．７ｇ，１２２ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（３０．７ｇ，２２２ｍｍｏｌ）の混合物を３０℃で４時間攪拌した。混合物を酢酸エチル（２００ｍＬ）で希釈し、水（１００ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層を飽和ＮａＣｌ水溶液（１００ｍＬ×２）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下にて濃縮した。シリカゲル上でのカラムクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝３：１～０：１）によって残留物を精製し、メチル１－（３－（４－ブロモフェニル）－２－オキソプロピル）－１Ｈ－イミダゾール－５－カルボキシレート（５．６ｇ）を得た。
【0157】
６－（４－ブロモベンジル）－７－メチルイミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オンの製造
【化32】
密閉チューブ内でキシレン（３ｍＬ）中のメチル１－（３－（４－ブロモフェニル）－２－オキソプロピル）－１Ｈ－イミダゾール－５－カルボキシレート（１ｇ，２．９７ｍｍｏｌ）およびＣＨ３ＮＨ２（ＴＨＦ中で２Ｍ，３７．０７ｍＬ）を１４０℃で３２時間攪拌した。混合物を濃縮し、シリカゲル上でのカラムクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝３：１～０：１）によって残留物を精製し、６－（４－ブロモベンジル）－７－メチルイミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン（３４４ｍｇ）を得た。
【0158】
６－（４－ブロモベンジル）－３－ヨード－７－メチルイミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オンの製造
【化33】
ＴＨＦ（４ｍＬ）中の６－［（４－ブロモフェニル）メチル］－７－メチル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン（３４４ｍｇ，１．０８ｍｍｏｌ）の溶液に、ＴＭＰＭｇＣｌ・ＬｉＣｌ（２，２，６，６－テトラメチルピペリジニルマグネシウムクロリド－塩化リチウム錯体）（１Ｍ ＴＨＦ，３．２４ｍＬ）を－４０℃で添加した。混合物を－４０℃で１時間攪拌した。次いで、ＴＨＦ（２ｍＬ）中のＩ２（１．３７ｇ，５．４１ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を－４０℃で２時間攪拌した。飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（２０ｍＬ）を０℃で添加することによって、混合物をクエンチし、次いで酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈し、水（２０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層をブライン（２０ｍＬ×２）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、減圧下にて濃縮して、６－（４－ブロモベンジル）－３－ヨード－７－メチルイミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン（４６０ｍｇ）を得た。
【0159】
６－（４－ブロモベンジル）－３－（３，６－ジヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）－７－メチルイミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オンの製造
【化34】
ジオキサン（０．８ｍＬ）および水（０．２ｍＬ）中の６－（４－ブロモベンジル）－３－ヨード－７－メチルイミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン（５２０ｍｇ，１．１７ｍｍｏｌ）、２－（３，６－ジヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）－４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン（２４６ｍｇ，１．１７ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（４３ｍｇ，０．０５９ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（４８６ｍｇ，３．５１ｍｍｏｌ）の混合物を６０℃で２時間攪拌した。混合物を濃縮し、シリカゲル上でのカラムクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝３：１～０：１）によって残留物を精製し、６－（４－ブロモベンジル）－３－（３，６－ジヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）－７－メチルイミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン（２１０ｍｇ）を得た。
【0160】
３－（３，６－ジヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）－７－メチル－６－（４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ベンジル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オンの製造
【化35】
ジオキサン（３ｍＬ）中の６－（４－ブロモベンジル）－３－（３，６－ジヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）－７－メチルイミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン（６０ｍｇ，０．１５ｍｍｏｌ）、４，４，５，５－テトラメチル－２－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）－１，３，２－ジオキサボロラン（３８ｍｇ，０．１５ｍｍｏｌ）、ＫＯＡｃ（４４ｍｇ，０．４５ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（５ｍｇ，０．００７ｍｍｏｌ）の混合物をＮ２で脱気し、１００℃で１６時間攪拌した。混合物を濃縮し、水（５ｍＬ）と酢酸エチル（１５ｍＬ）の間に分配した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮し、残留物を得て、それを次の工程に直接使用した。
【0161】
５－ヨード－３－メトキシピラジン－２－カルボニトリルの製造
【化36】
ＴＨＦ（１００ｍＬ）中の５－アミノ－３－メトキシ－ピラジン－２－カルボニトリル（６．１ｇ，４１ｍｍｏｌ）およびＣＨ２Ｉ２（１３ｇ，４９ｍｍｏｌ）の溶液に、亜硝酸イソアミル（７．０ｇ，６１ｍｍｏｌ）およびＣｕＩ（８．５ｇ，４５ｍｍｏｌ）をＮ２雰囲気下にて添加した。混合物を７５℃で１８時間攪拌した。混合物を濾過し、残留物をジクロロメタン（５０ｍＬ×２）で洗浄し、合わせた濾液を濃縮した。シリカゲル上でのフラッシュクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝３０：１）によって粗生成物を精製し、５－ヨード－３－メトキシ－ピラジン－２－カルボニトリル（７．４ｇ）を得た。
【0162】
２－（４－ブロモベンジル）－４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロランの製造
【化37】
ＤＭＦ（１５０ｍＬ）中の１－ブロモ－４－（ブロモメチル）ベンゼン（１０ｇ，４０ｍｍｏｌ）、４，４，５，５－テトラメチル－２－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）－１，３，２－ジオキサボロラン（１５ｇ，６０ｍｍｏｌ）、ＣｕＩ（７６２ｍｇ，４ｍｍｏｌ）、ＰＰｈ３（１．６ｇ，６．０ｍｍｏｌ）およびリチウムメトキシド（３．０ｇ，８０ｍｍｏｌ）の混合物をＮ２で３回脱気し、パージし、混合物をＮ２雰囲気下にて３０℃で１８時間攪拌した。混合物を濾過し、酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で残留物を洗浄し、合わせた濾液を氷水（２００ｍＬ）に注ぎ、次いで酢酸エチル（７５ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。シリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝２０：１）によって粗生成物を精製し、２－（４－ブロモベンジル）－４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン（４．４ｇ）を得た。
【0163】
５－［（４－ブロモフェニル）メチル］－３－メトキシ－ピラジン－２－カルボニトリルの製造
【化38】
ジオキサン（１６ｍＬ）およびＨ２Ｏ（８ｍＬ）中の５－ヨード－３－メトキシ－ピラジン－２－カルボニトリル（１．０ｇ，３．８ｍｍｏｌ，）、２－［（４－ブロモフェニル）メチル］－４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン（２．３ｇ，７．７ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（２８０ｍｇ，０．４０ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（１．０ｇ，７．７ｍｍｏｌ）の混合物をＮ２で３回脱気し、パージし、混合物をＮ２雰囲気下にて５０℃で１８時間攪拌した。水（３０ｍＬ）を添加し、混合物を酢酸エチル（３０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をブライン（１０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。シリカゲルでのフラッシュクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝２０：１）によって粗生成物を精製し、５－［（４－ブロモフェニル）メチル］－３－メトキシ－ピラジン－２－カルボニトリル（４００ｍｇ）を得た。
【0164】
３－メトキシ－５－（４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ベンジル）ピラジン－２－カルボニトリルの製造
【化39】
ジオキサン（４０ｍＬ）中の５－［（４－ブロモフェニル）メチル］－３－メトキシ－ピラジン－２－カルボニトリル（４００ｍｇ，１．３０ｍｍｏｌ）、４，４，５，５－テトラメチル－２－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）－１，３，２－ジオキサボロラン（５０３ｍｇ，２．００ｍｍｏｌ，）、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（１４５ｍｇ，０．２００ｍｍｏｌ）およびＫＯＡｃ（３８９ｍｇ，４．００ｍｍｏｌ）の混合物をＮ２で３回脱気し、パージし、混合物をＮ２雰囲気下にて１００℃で２．５時間攪拌した。混合物を濃縮した。シリカゲルでのカラムクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝１０：１）によって残留物を精製し、３－メトキシ－５－［［４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）フェニル］メチル］ピラジン－２－カルボニトリル（３００ｍｇ）を得た。
【0165】
５－［［４－（６－フルオロ－２－ピリジル）フェニル］メチル］－３－メトキシ－ピラジン－２－カルボニトリルの製造
【化40】
ジオキサン（３０ｍＬ）中の３－メトキシ－５－［［４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）フェニル］メチル］ピラジン－２－カルボニトリル（３００ｍｇ，０．９０ｍｍｏｌ）、２－ブロモ－６－フルオロ－ピリジン（３０１ｍｇ，１．７０ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（９４ｍｇ，０．１０ｍｍｏｌ，）、Ｋ２ＣＯ３（２３６ｍｇ，１．７０ｍｍｏｌ）の混合物をＮ２で３回脱気し、パージし、次いで混合物をＮ２雰囲気下にて５０℃で２４時間攪拌した。混合物を濾過し、残留物を酢酸エチル（１０ｍＬ×２）で洗浄し、合わせた有機層を濃縮した。シリカゲルでのカラムクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝５：１）によって残留物を精製し、５－［［４－（６－フルオロ－２－ピリジル）フェニル］メチル］－３－メトキシ－ピラジン－２－カルボニトリル（２００ｍｇ）を得た。
【0166】
［５－［［４－（６－フルオロ－２－ピリジル）フェニル］メチル］－３－メトキシ－ピラジン－２－イル］メタンアミンの製造
【化41】
酢酸エチル（１５ｍＬ）およびＡｃＯＨ（３ｍＬ）中の５－［［４－（６－フルオロ－２－ピリジル）フェニル］メチル］－３－メトキシ－ピラジン－２－カルボニトリル（２２０ｍｇ，０．７００ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ２下にてＰｄ／Ｃ（湿潤，１０％，２２ｍｇ）を添加した。懸濁液を真空下で脱気し、数回にわたってＨ２でパージした。混合物をＨ２（１５ｐｓｉ）下にて３０℃で２８時間攪拌した。混合物を水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層を水（１０ｍＬ）、ブライン（１０ｍＬ×２）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空下にて濃縮して、［５－［［４－（６－フルオロ－２－ピリジル）フェニル］メチル］－３－メトキシ－ピラジン－２－イル］メタンアミン（１８０ｍｇ）を得た。
【0167】
Ｎ－（（５－（４－（６－フルオロピリジン－２－イル）ベンジル）－３－メトキシピラジン－２－イル）メチル）イソブチルアミドの製造
【化42】
ＴＨＦ（２ｍＬ）中の［５－［［４－（６－フルオロ－２－ピリジル）フェニル］メチル］－３－メトキシ－ピラジン－２－イル］メタンアミン（１５０ｍｇ，０．５ｍｍｏｌ）および２－メチルプロパノイルクロリド（１９７ｍｇ，１．８５ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｎ２下にてトリエチルアミン（４６８ｍｇ，４．６ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を３０℃で１時間攪拌した。混合物を水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層を水（１０ｍＬ）、ブライン（１０ｍＬ×２）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空下で濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー（石油エーテル／酢酸エチル＝３：１）によって残留物を精製し、Ｎ－（（５－（４－（６－フルオロピリジン－２－イル）ベンジル）－３－メトキシピラジン－２－イル）メチル）イソブチルアミド（４０ｍｇ）を得た。
【0168】
６－［［４－（６－フルオロ－２－ピリジル）フェニル］メチル］－３－イソプロピル－７Ｈ－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オンの製造
【化43】
ジオキサン（３ｍＬ）中のＮ－（（５－（４－（６－フルオロピリジン－２－イル）ベンジル）－３－メトキシピラジン－２－イル）メチル）イソブチルアミド（３０ｍｇ，０．０８ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｎ２下にてＰＯＣｌ３（２３ｍｇ，０．１５ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を８０℃で４時間攪拌した。混合物のｐＨをｐＨ＝７～８に調整し、水（２０ｍＬ）で希釈し、酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で抽出した。合わせた有機層を水（１０ｍＬ）、ブライン（１０ｍＬ×２）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥させ、真空下にて濃縮して、６－［［４－（６－フルオロ－２－ピリジル）フェニル］メチル］－３－イソプロピル－７Ｈ－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン（３０ｍｇ）を得た。
【0169】
同様な手法で、以下の化合物が２工程にわたって製造された：
［５－［［４－（６－フルオロ－２－ピリジル）フェニル］メチル］－３－メトキシ－ピラジン－２－イル］メタンアミンおよびブタノイルクロリドから、６－（４－（６－フルオロピリジン－２－イル）ベンジル）－３－プロピルイミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン、
［５－［［４－（６－フルオロ－２－ピリジル）フェニル］メチル］－３－メトキシ－ピラジン－２－イル］メタンアミンおよびプロパノイルクロリドから、３－エチル－６－（４－（６－フルオロピリジン－２－イル）ベンジル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン。
【0170】
［５－［［４－（６－フルオロ－２－ピリジル）フェニル］メチル］－３－メトキシ－ピラジン－２－イル］メタンアミンおよび３，３，３－トリフルオロプロパノイルクロリドから、６－（４－（６－フルオロピリジン－２－イル）ベンジル）－３－（２，２，２－トリフルオロエチル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン。
【0171】
［５－［［４－（６－フルオロ－２－ピリジル）フェニル］メチル］－３－メトキシ－ピラジン－２－イル］メタンアミン、テトラヒドロフラン－３－カルボン酸およびＨＡＴＵから、６－（４－（６－フルオロピリジン－２－イル）ベンジル）－３－（テトラヒドロフラン－３－イル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン。
【0172】
［５－［［４－（６－フルオロ－２－ピリジル）フェニル］メチル］－３－メトキシ－ピラジン－２－イル］メタンアミンおよび２－メチルテトラヒドロフラン－３－カルボニルクロライドから、６－（４－（６－フルオロピリジン－２－イル）ベンジル）－３－（２－メチルテトラヒドロフラン－３－イル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン。
【0173】
４－（トリメチルスタニル）ピリミジンの製造
【化44】
ピリミジン－４－オール（１．０ｇ，１０．４ｍｍｏｌ）とＰＯＢｒ３（３．３ｇ，１１．５ｍｍｏｌ）との混合物を１００℃で４時間攪拌した。３０℃に冷却し、氷水（２０ｇ）に注ぎ、ｐＨ＝７になるまでＮａＨＣＯ３水溶液を添加し、ジクロロメタン（１５ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相を水で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４で乾燥させ、濾過し、真空下で濃縮して、４－ブロモピリミジン（７００ｍｇ）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３；４００ＭＨｚ）：δ ８．９７（ｓ，１Ｈ），８．５２（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），７．５７（ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ）．
【0174】
ジオキサン（１０ｍＬ）中の４－ブロモピリミジン（５００ｍｇ，３．２ｍｍｏｌ）、１，１，１，２，２，２－ヘキサメチルジスタンナン（１．９ｇ，５．８０ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ＰＰｈ３）４（３６４ｍｇ，０．３２ｍｍｏｌ）の溶液を１１０℃で１時間攪拌した。セライトを添加し、減圧下にて混合物を濃縮して乾燥状態にした。カラムクロマトグラフィー（Ａｌ２Ｏ３，石油エーテル／酢酸エチル＝１：０～０：１）によって残留物を精製して、４－（トリメチルスタニル）ピリミジン（４００ｍｇ）を得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３；４００ＭＨｚ）：δ ９．２５（ｓ，１Ｈ），８．５１（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ），７．４９（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ），０．３９（ｓ，９Ｈ）．
【実施例】
【0175】
本発明の化合物
実施例１
５－メチル－６－［［４－（６－メチル－２－ピリジル）フェニル］メチル］－１－テトラヒドロピラン－４－イル－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－４－オン
【化45】
ジオキサン（２ｍＬ）中の５－メチル－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）－６－（４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ベンジル）－１Ｈ－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－４（５Ｈ）－オン（５５ｍｇ，０．１２ｍｍｏｌ）、２－ブロモ－６－メチル－ピリジン（３１ｍｇ，０．１８ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（９ｍｇ，０．０１２ｍｍｏｌ）、Ｃｓ２ＣＯ３（８０ｍｇ，０．２４ｍｍｏｌ）および水（１ｍＬ）の混合物を１００℃で３時間攪拌した。混合物を真空下にて濃縮した。分取ＴＬＣ（石油エーテル／酢酸エチル＝０：１）によって残留物を精製し、５－メチル－６－［［４－（６－メチル－２－ピリジル）フェニル］メチル］－１－テトラヒドロピラン－４－イル－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－４－オンを得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３ ４００ＭＨｚ）：δ ８．１８（ｓ，１Ｈ），７．９８（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．６６（ｑ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．５１（ｄ，Ｊ＝７．６，１Ｈ），７．２９－７．２７（ｍ，２Ｈ），７．１３（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），６．２５（ｓ，１Ｈ），４．４２－４．３６（ｍ，１Ｈ），４．１７－４．１２（ｍ，４Ｈ），３．６１－３．５５（ｍ，２Ｈ），３．４９（ｓ，３Ｈ），２．６４（ｓ，３Ｈ），２．３９－２．３２（ｍ，２Ｈ），１．９５－１．９１（ｍ，２Ｈ）．ＬＣ－ＭＳ：ｔＲ＝１．７１５ｍｉｎ（方法Ｃ），ｍ／ｚ＝４１５．１［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0176】
以下の化合物を実施例１と同様な手法で製造した：
実施例２
５－メチル－６－［［４－（２－ピリジル）フェニル］メチル］－１－テトラヒドロピラン－４－イル－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－４－オン
【化46】
５－メチル－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）－６－（４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ベンジル）－１，５－ジヒドロ－４Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－４－オンおよび２－ブロモピリジンから製造された。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３ ４００ＭＨｚ）：δ ８．７１－８．６９（ｍ，１Ｈ），８．０９（ｓ，１Ｈ），７．９８（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．７９－７．７０（ｍ，２Ｈ），７．３３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．２３－７．２５（ｍ，１Ｈ），４．９１－４．８５（ｍ，１Ｈ），４．３０（ｓ，２Ｈ），４．１７－４．１４（ｍ，２Ｈ），３．６６－３．５９（ｍ，２Ｈ），３．５０（ｓ，３Ｈ），２．４４－２．３７（ｍ，２Ｈ），１．９９－１．９６（ｍ，２Ｈ）．ＬＣ－ＭＳ：ｔＲ＝１．７４６ｍｉｎ（方法Ｃ），ｍ／ｚ＝４０２．０［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0177】
実施例３
５－メチル－６－［［４－（６－メチル－２－ピリジル）フェニル］メチル］－１－テトラヒドロピラン－４－イル－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－４－オン
【化47】
５－メチル－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）－６－（４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ベンジル）－１，５－ジヒドロ－４Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－４－オンおよび２－ブロモ－６－メチルピリジンから製造された。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３ ４００ＭＨｚ）：δ ８．０９（ｓ，１Ｈ），７．９７（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．６５（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．５０（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．３１（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），７．１２（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），４．９１－４．８５（ｍ，１Ｈ），４．２９（ｓ，２Ｈ），４．１７－４．１５（ｍ，２Ｈ），３．６３（ｔ，Ｊ＝１１．６Ｈｚ，２Ｈ），３．４９（ｓ，３Ｈ），２．６３（ｓ，３Ｈ），２．４６－２．３７（ｍ，２Ｈ），１．９９－１．９６（ｍ，２Ｈ）．ＬＣ－ＭＳ：ｔＲ＝１．７１７ｍｉｎ（方法Ｃ），ｍ／ｚ＝４１６．１［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0178】
実施例４
６－［［４－（６－フルオロ－２－ピリジル）フェニル］メチル］－５－メチル－１－テトラヒドロピラン－４－イル－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－４－オン
【化48】
５－メチル－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）－６－（４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ベンジル）－１，５－ジヒドロ－４Ｈ－ピラゾロ［３，４－ｄ］ピリミジン－４－オンおよび２－ブロモ－６－フルオロピリジンから製造された。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３ ４００ＭＨｚ）：δ ８．０８（ｓ，１Ｈ），７．９９（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．８９－７．８３（ｍ，１Ｈ），７．６２－７．６０（ｍ，１Ｈ），７．３３（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），６．８９－６．７４（ｍ，１Ｈ），４．９０－４．８４（ｍ，１Ｈ），４．２９（ｓ，２Ｈ），４．１６－４．１３（ｍ，２Ｈ），３．６２（ｔ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，２Ｈ），３．４９（ｓ，３Ｈ），２．４５－２．３６（ｍ，２Ｈ），１．９８－１．９５（ｍ，２Ｈ）．ＬＣ－ＭＳ：ｔＲ＝２．６１０ｍｉｎ（方法Ｃ），ｍ／ｚ＝４２０．０［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0179】
実施例５
６－［［４－（６－フルオロ－２－ピリジル）フェニル］メチル］－５－メチル－１－テトラヒドロピラン－４－イル－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－４－オン
【化49】
５－メチル－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）－６－（４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ベンジル）－１Ｈ－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－４（５Ｈ）－オンおよび２－ブロモ－６－フルオロピリジンから製造された。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３ ４００ＭＨｚ）：δ ８．１８（ｓ，１Ｈ），７．９９（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．８９（ｑ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．６１（ｄｄ，Ｊ＝２．４，７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．２９－７．２７（ｍ，２Ｈ），６．８９（ｄｄ，Ｊ＝３．２，８．４Ｈｚ，１Ｈ），６．２８（ｓ，１Ｈ），４．４３－４．３５（ｍ，１Ｈ），４．１７－４．１２（ｍ，４Ｈ），３．５６（ｔ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，２Ｈ），３．４７（ｓ，３Ｈ），２．４１－２．３２（ｍ，２Ｈ），１．９５－１．９２（ｍ，２Ｈ）．ＬＣ－ＭＳ：ｔＲ＝２．６１４ｍｉｎ（方法Ｃ），ｍ／ｚ＝４１９．０［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0180】
実施例６
５－メチル－６－［［４－（２－ピリジル）フェニル］メチル］－１－テトラヒドロピラン－４－イル－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－４－オン
【化50】
５－メチル－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）－６－（４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ベンジル）－１Ｈ－ピラゾロ［４，３－ｃ］ピリジン－４（５Ｈ）－オンおよび２－ブロモ－ピリジンから製造された。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３ ４００ＭＨｚ）：δ ８．７２－８．７０（ｍ，１Ｈ），８．１８（ｓ，１Ｈ），８．０１－７．９８（ｍ，２Ｈ），７．７８－７．７４（ｍ，２Ｈ），７．２９（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．２７－７．２４（ｍ，１Ｈ），６．２７（ｓ，１Ｈ），４．４２－４．３６（ｍ，１Ｈ），４．１７－４．１３（ｍ，４Ｈ），３．５７（ｄｔ，Ｊ＝２．０，１２．０Ｈｚ，２Ｈ），３．４９（ｓ，３Ｈ），２．４０－２．３５（ｍ，２Ｈ），１．９６－１．９２（ｍ，２Ｈ）．ＬＣ－ＭＳ：ｔＲ＝１．７７７ｍｉｎ（方法Ｃ），ｍ／ｚ＝４０１．０［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0181】
実施例７
７－［（４－メトキシフェニル）メチル］－６－［［４－（２－ピリジル）ピペラジン－１－イル］メチル］－３－テトラヒドロピラン－４－イル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン
【化51】
６－（ブロモメチル）－７－（４－メトキシベンジル）－３－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン（５２ｍｇ，０．０９１ｍｍｏｌ）および１－（ピリジン－２－イル）ピペラジン（６０．４ｍｇ，０．０５４ｍＬ，０．３７０ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（２．５ｍＬ）に溶解し、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（０．０８ｍＬ，０．４５８ｍｍｏｌ）を添加した。マイクロ波条件下にて反応混合物を１００℃で１５分間加熱した。分取ＨＰＬＣによって精製した後、７－［（４－メトキシフェニル）メチル］－６－［［４－（２－ピリジル）ピペラジン－１－イル］メチル］－３－テトラヒドロピラン－４－イル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オンを単離した。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３ ５００ＭＨｚ）：δ ８．２１（ｍ，１Ｈ），７．９５（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），７．５１（ｔ，Ｊ＝７．９Ｈｚ，１Ｈ），７．１６（ｍ，２Ｈ），６．８６（ｍ，３Ｈ），６．６６（ｍ，２Ｈ），５．５４（ｓ，２Ｈ），４．１５（ｍ，２Ｈ），３．７９（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，３Ｈ），３．６１（ｍ，６Ｈ），３．２５（ｓ，２Ｈ），３．０７（ｍ，１Ｈ），２．６０（ｔ，Ｊ＝４．９Ｈｚ，４Ｈ），２．１７（ｍ，２Ｈ），１．８６（ｍ，２Ｈ）．ＬＣ－ＭＳ：ｔＲ＝０．５１ｍｉｎ（方法Ａ），ｍ／ｚ＝５１５．２［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0182】
以下の化合物を実施例７と同様な手法で製造した：
実施例８
７－［（４－メトキシフェニル）メチル］－６－［（４－フェニルピペラジン－１－イル）メチル］－３－テトラヒドロピラン－４－イル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン
【化52】
６－（ブロモメチル）－７－（４－メトキシベンジル）－３－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オンおよび１－（フェニル）ピペラジンから製造された。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３ ５００ＭＨｚ）：δ ７．９６（ｄ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ），７．３１（ｍ，２Ｈ），７．１７（ｍ，２Ｈ），６．９６（ｍ，２Ｈ），６．９１（ｍ，１Ｈ），６．８６（ｍ，３Ｈ），５．５４（ｓ，２Ｈ），４．１２（ｍ，２Ｈ），３．８０（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，３Ｈ），３．６２（ｄｄ，Ｊ＝１２．９，１０．８Ｈｚ，２Ｈ），３．２５（ｄｄ，Ｊ＝１０．４，５．９Ｈｚ，６Ｈ），３．１２（ｍ，１Ｈ），２．６６（ｑ，Ｊ＝４．７，３．５Ｈｚ，４Ｈ），２．１７（ｍ，２Ｈ），１．９１（ｄ，Ｊ＝１３．９Ｈｚ，２Ｈ）．ＬＣ－ＭＳ：ｔＲ＝０．６３ｍｉｎ（方法Ａ），ｍ／ｚ＝５１４．２［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0183】
実施例９
７－［（４－メトキシフェニル）メチル］－６－［［４－（２－ピリジル）フェニル］メチル］－３－テトラヒドロピラン－４－イル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン
【化53】
６つの同一の反応を並行して行った：ジオキサン（４０ｍＬ）および水（１．５０ｍＬ）中の６－（ブロモメチル）－７－（４－メトキシベンジル）－３－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン（５００ｍｇ，１．１６ｍｍｏｌ）、２－（４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）フェニル）ピリジン（４８９ｍｇ，１．７４ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（３２１ｍｇ，２．３２ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（１７０ｍｇ，０．２３ｍｍｏｌ）の混合物をＮ２で３回脱気し、パージし、次に混合物をＮ２雰囲気下にて１００℃で１２時間攪拌した。６つの反応混合物を合わせ、減圧下にて濃縮し、ジオキサンおよび水を除去した。シリカゲル（酢酸エチル）上での分取ＴＬＣ、続いて分取ＨＰＬＣによって残留物を精製し、７－［（４－メトキシフェニル）メチル］－６－［［４－（２－ピリジル）フェニル］メチル］－３－テトラヒドロピラン－４－イル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オンを得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３ ４００ＭＨｚ）：δ ８．７１（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ），８．０１（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），７．９７（ｓ，１Ｈ），７．８１－７．２３（ｍ，２Ｈ），７．２９（ｓ，２Ｈ），７．２７（ｓ，１Ｈ），７．１１（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），６．８７（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），６．７６（ｓ，１Ｈ），５．０３（ｓ，２Ｈ），４．１２－４．１０（ｍ，２Ｈ），３．８４（ｓ，２Ｈ），３．８０（ｓ，３Ｈ），３．５５（ｔ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，２Ｈ），３．１０－３．０４（ｍ，１Ｈ），２．１９－２．０９（ｍ，２Ｈ），１．９０－１．８７（ｍ，２Ｈ）．ＬＣ－ＭＳ：ｔＲ＝０．４９ｍｉｎ（方法Ａ），ｍ／ｚ＝５０７．１［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0184】
実施例１０
６－［［４－（２－ピリジル）フェニル］メチル］－３－テトラヒドロピラン－４－イル－７Ｈ－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン
【化54】
７－［（４－メトキシフェニル）メチル］－６－［［４－（２－ピリジル）フェニル］メチル］－３－テトラヒドロピラン－４－イル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン（２００ｍｇ，０．３９ｍｍｏｌ）をトリフルオロ酢酸（１５ｍＬ）に添加した。混合物を１００℃で６日間攪拌した。減圧下にて反応混合物を濃縮した。分取ＨＰＬＣによって残留物を精製し、６－［［４－（２－ピリジル）フェニル］メチル］－３－テトラヒドロピラン－４－イル－７Ｈ－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オンを得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３ ４００ＭＨｚ）：δ ８．７７（ｓ，１Ｈ），８．７１－８．７０（ｍ，１Ｈ），７．９９（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），７．９１（ｓ，１Ｈ），７．８０－７．７１（ｍ，２Ｈ），７．４１（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．２７－７．２５（ｍ，１Ｈ），６．７６（ｓ，１Ｈ），４．１３－４．１１（ｍ，２Ｈ），３．８４（ｓ，２Ｈ），３．５９－３．５６（ｍ，２Ｈ），３．１１－３．０６（ｍ，１Ｈ），２．１８－２．０７（ｍ，２Ｈ），１．８９－１．８６（ｍ，２Ｈ）．ＬＣ－ＭＳ：ｔＲ＝１．７８４ｍｉｎ（方法Ｂ），ｍ／ｚ＝３８７．１［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0185】
実施例１１
７－メチル－６－［［４－（２－ピリジル）フェニル］メチル］－３－テトラヒドロピラン－４－イル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン
【化55】
ＭｅＣＮ（３ｍＬ）中の６－［［４－（２－ピリジル）フェニル］メチル］－３－テトラヒドロピラン－４－イル－７Ｈ－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン（６７ｍｇ，０．１７ｍｍｏｌ）およびＣＨ３Ｉ（０．０２２ｍＬ，０．３５ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｃｓ２ＣＯ３（１１３ｍｇ，０．３５ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を室温で１６時間攪拌した。反応混合物を減圧下にて濃縮し、ＭｅＣＮを除去した。シリカゲル上でのカラムクロマトグラフィー（メタノール／ジクロロメタン＝０～２％）によって、残留物を精製し、７－メチル－６－［［４－（２－ピリジル）フェニル］メチル］－３－テトラヒドロピラン－４－イル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オンを得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３ ４００ＭＨｚ）：δ ８．７１（ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，１Ｈ），８．０１（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），７．９１（ｓ，１Ｈ），７．８０－７．７２（ｍ，２Ｈ），７．３４（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．２９－７．２７（ｍ，１Ｈ），６．８０（ｓ，１Ｈ），４．１１（ｄ，Ｊ＝１１．６Ｈｚ，２Ｈ），３．９８（ｓ，２Ｈ），３．５５（ｔ，Ｊ＝５．８Ｈｚ，２Ｈ），３．３４（ｓ，３Ｈ），３．１１－３．０５（ｍ，１Ｈ），２．１８－２．０８（ｍ，２Ｈ），１．９０－１．８７（ｍ，２Ｈ）．ＬＣ－ＭＳ：ｔＲ＝１．５３６ｍｉｎ（方法Ｃ），ｍ／ｚ＝４０１．２［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0186】
以下の化合物を実施例１１と同様な手法で製造した：
実施例１２
７－エチル－６－［［４－（２－ピリジル）フェニル］メチル］－３－テトラヒドロピラン－４－イル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン
【化56】
６－［［４－（２－ピリジル）フェニル］メチル］－３－テトラヒドロピラン－４－イル－７Ｈ－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オンおよびヨウ化エチルから製造された。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３ ４００ＭＨｚ）：δ ８．６８（ｄ，Ｊ＝４．０Ｈｚ，１Ｈ），７．９９（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），７．８８（ｓ，１Ｈ），７．７８－７．７１（ｍ，２Ｈ），７．３２（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），７．２５－７．２３（ｍ，１Ｈ），６．７３（ｓ，１Ｈ），４．０９（ｄ，Ｊ＝１１．６Ｈｚ，２Ｈ），３．９５（ｓ，２Ｈ），３．８７（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），３．５４（ｔ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，２Ｈ），３．０４（ｔ，Ｊ＝１１．２Ｈｚ，１Ｈ），２．１４－２．０６（ｍ，２Ｈ），１．８７－１．８４（ｍ，２Ｈ），１．１６（ｔ，Ｊ＝９．８Ｈｚ，３Ｈ）．ＬＣ－ＭＳ：ｔＲ＝１．６４３ｍｉｎ（方法Ｃ），ｍ／ｚ＝４１５．２［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0187】
以下の化合物を実施例９と同様な手法で製造した：
実施例１３
７－メチル－６－［［４－（６－メチル－２－ピリジル）フェニル］メチル］－３－テトラヒドロピラン－４－イル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン
【化57】
６－（ブロモメチル）－７－（４－メトキシベンジル）－３－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オンおよび２－メチル－６－（４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）フェニル）ピリジンＴＦＡ塩から製造された。１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６ ６００ＭＨｚ）：δ ８．０９－８．０５（ｍ，３Ｈ），７．９３（ｂｒｓ，２Ｈ），７．８２（ｓ，１Ｈ），７．４６（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），７．１３（ｂｒｓ，１Ｈ），４．１１（ｓ，２Ｈ），３．９９（ｄｔ，Ｊ＝１１．５，３．３Ｈｚ，２Ｈ），３．５５－３．４２（ｍ，３Ｈ），３．１８（ｓ，３Ｈ），２．５５（ｓ，３Ｈ），１．９０－１．８２（ｍ，４Ｈ）．ＬＣ－ＭＳ：ｔＲ＝０．３３ｍｉｎ（方法Ａ），ｍ／ｚ＝４１５．１［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0188】
実施例１４
６－［［４－（６－フルオロ－２－ピリジル）フェニル］メチル］－７－メチル－３－テトラヒドロピラン－４－イル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン
【化58】
６－（ブロモメチル）－７－（４－メトキシベンジル）－３－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オンおよび２－フルオロ－６－（４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）フェニル）ピリジンＴＦＡ塩から製造された。１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ－ｄ６ ６００ＭＨｚ）：δ ８．１－８．００（ｍ，４Ｈ），７．９５－７．９１（ｍ，１Ｈ），７．８５－７．８０（ｓ，１Ｈ），７．４９－７．４４（ｍ，２Ｈ），７．３７（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），６．３５（ｂｒｓ，１Ｈ），４．１１（ｓ，１Ｈ），３．９９（ｄｔ，Ｊ＝１１．５，３．３Ｈｚ，２Ｈ），３．５５－３．４２（ｍ，３Ｈ），３．１８（ｓ，３Ｈ），１．８８－１．８２（ｍ，４Ｈ）．ＬＣ－ＭＳ：ｔＲ＝０．５６ｍｉｎ（方法Ａ），ｍ／ｚ＝４１９．０［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0189】
実施例１５
６－［［４－［６－（ジフルオロメチル）－２－ピリジル］フェニル］メチル］－７－メチル－３－テトラヒドロピラン－４－イル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン
【化59】
ジオキサン（１ｍＬ）、水（０．４ｍＬ）中の３－（３，６－ジヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）－７－メチル－６－（４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ベンジル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン（６７ｍｇ，０．１５ｍｍｏｌ）、Ｃｓ２ＣＯ３（１４６ｍｇ，０．４５ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ｄｐｐｆ）Ｃｌ２（５．４８ｍｇ，０．００７ｍｍｏｌ）、２－ブロモ－６－（ジフルオロメチル）ピリジン（３１ｍｇ，０．１５ｍｍｏｌ）の混合物をＮ２雰囲気下にて１００℃で４時間攪拌した。混合物を濃縮し、酢酸エチル（２０ｍＬ）で残留物を抽出した。有機相をＮａ２ＳＯ４で乾燥させ、濃縮した。シリカゲル上での分取ＴＬＣ（酢酸エチル）によって残留物を精製し、６－（４－（６－（ジフルオロメチル）ピリジン－２－イル）ベンジル）－３－（３，６－ジヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）－７－メチルイミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン（３６ｍｇ）を得た。メタノール（１ｍＬ）中の６－（４－（６－（ジフルオロメチル）ピリジン－２－イル）ベンジル）－３－（３，６－ジヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）－７－メチルイミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン（３６ｍｇ，０．０８ｍｏｌ）、Ｐｄ／Ｃ（１０％，８ｍｇ）の混合物をＨ２雰囲気（１５ｐｓｉ）下にて室温で５時間攪拌した。混合物を濾過し、濃縮した。分取ＨＰＬＣによって残留物を精製し、６－［［４－［６－（ジフルオロメチル）－２－ピリジル］フェニル］メチル］－７－メチル－３－テトラヒドロピラン－４－イル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オンを得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３ ４００ＭＨｚ）：δ ８．０５（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ），７．９６－７．８９（ｍ，２Ｈ），７．８７－７．８１（ｍ，１Ｈ），７．６２（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．３５（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ），６．８２（ｓ，１Ｈ），６．７１（ｔ，Ｊ＝５５．２Ｈｚ，１Ｈ），４．１７－４．０６（ｍ，２Ｈ），３．９９（ｓ，２Ｈ），３．５７（ｄｔ，Ｊ＝２．４，１２Ｈｚ，２Ｈ），３．３３（ｓ，３Ｈ），３．１６－３．０１（ｍ，１Ｈ），２．２２－２．０１（ｍ，２Ｈ），１．９１－１．８７（ｍ，２Ｈ）．ＬＣ－ＭＳ：ｔＲ＝２．４１５ｍｉｎ（方法Ｃ），ｍ／ｚ＝４５１．０［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0190】
以下の化合物を実施例１５と同様な手法で製造した：
実施例１６
６－［［４－（６－メトキシ－２－ピリジル）フェニル］メチル］－７－メチル－３－テトラヒドロピラン－４－イル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン
【化60】
３－（３，６－ジヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）－７－メチル－６－（４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ベンジル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オンおよび２－ブロモ－６－メトキシ－ピリジンから製造された。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３ ４００ＭＨｚ）：δ ８．０７－８．０５（ｍ，２Ｈ），７．９１（ｓ，１Ｈ），７．６７－７．６３（ｍ，１Ｈ），７．３５－７．３０（ｍ，３Ｈ），６．８２（ｓ，１Ｈ），６．７２（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ），４．１３－４．１０（ｍ，２Ｈ），４．０４（ｓ，３Ｈ），３．９７（ｓ，２Ｈ）３．６０－３．５４（ｍ，２Ｈ），３．３３（ｓ，３Ｈ），３．１２－３．０６（ｍ，１Ｈ），２．１７－２．０９（ｍ，２Ｈ），１．９０－１．８７（ｍ，２Ｈ）．ＬＣ－ＭＳ：ｔＲ＝２．４０３ｍｉｎ（方法Ｃ），ｍ／ｚ＝４３１．１［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0191】
実施例１７
６－［［４－（３－メトキシ－２－ピリジル）フェニル］メチル］－７－メチル－３－テトラヒドロピラン－４－イル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン
【化61】
３－（３，６－ジヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）－７－メチル－６－（４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ベンジル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オンおよび２－ブロモ－３－メトキシピリジンから製造された。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３ ４００ＭＨｚ）：δ ８．３２（ｄ，Ｊ＝１．２，４．４Ｈｚ，１Ｈ），７．９３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．９０（ｓ，１Ｈ），７．３３－７．２８（ｍ，４Ｈ），６．８０（ｓ，１Ｈ），４．１１－４．１０（ｍ，２Ｈ），３．９７（ｓ，２Ｈ），３．８９（ｓ，３Ｈ），３．６０－３．５５（ｍ，２Ｈ），３．３５（ｓ，３Ｈ），３．１１－３．０５（ｍ，１Ｈ），２．１８－２．０７（ｍ，２Ｈ），１．９０－１．８６（ｍ，２Ｈ）．ＬＣ－ＭＳ：ｔＲ＝１．８４ｍｉｎ（方法Ｃ），ｍ／ｚ＝４３１．０［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0192】
実施例１８
７－メチル－６－［［４－（ｏ－トリル）フェニル］メチル］－３－テトラヒドロピラン－４－イル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン
【化62】
３－（３，６－ジヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）－７－メチル－６－（４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ベンジル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オンおよび１－ブロモ－２－メチル－ベンゼンから製造された。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３ ４００ＭＨｚ）：δ ７．９０（ｓ，１Ｈ），７．３５－７．３３（ｍ，２Ｈ），７．２９－７．２８（ｍ，４Ｈ），７．２４－７．２１（ｍ，２Ｈ），６．７６（ｓ，１Ｈ），４．１３－４．１１（ｍ，２Ｈ），３．９７（ｓ，２Ｈ），３．５８－３．５６（ｍ，２Ｈ），３．３８（ｓ，３Ｈ），３．０９－２．０２（ｍ，１Ｈ），２．２７（ｓ，３Ｈ），２．１３－２．１０（ｍ，２Ｈ），１．９０－１．８６（ｍ，２Ｈ）．ＬＣ－ＭＳ：ｔＲ＝２．４０７ｍｉｎ（方法Ｄ），ｍ／ｚ＝４１４．０［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0193】
実施例１９
７－メチル－６－［（４－フェニルフェニル）メチル］－３－テトラヒドロピラン－４－イル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン
【化63】
６－（４－ブロモベンジル）－３－（３，６－ジヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）－７－メチルイミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オンおよびフェニルボロン酸から製造された。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３ ４００ＭＨｚ）：δ ７．９１（ｓ，１Ｈ），７．６１－７．５８（ｍ，４Ｈ），７．４８－７．４５（ｍ，２Ｈ），７．４０－７．３０（ｍ，１Ｈ），７．３０－７．２８（ｍ，２Ｈ），６．８０（ｓ，１Ｈ），４．１４－４．１１（ｍ，２Ｈ），３．９６（ｓ，２Ｈ），３．５６（ｄｔ，Ｊ＝２．０，１１．６Ｈｚ，２Ｈ），３．３５（ｓ，３Ｈ），３．１１－３．０４（ｍ，１Ｈ），２．１５－２．１１（ｍ，２Ｈ），１．９１－１．８７（ｍ，２Ｈ）．ＬＣ－ＭＳ：ｔＲ＝２．２３３ｍｉｎ（方法Ｄ），ｍ／ｚ＝４００．１［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0194】
実施例２０
７－メチル－６－（４－（１－メチル－１Ｈ－イミダゾール－４－イル）ベンジル）－３－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン
【化64】
３－（３，６－ジヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）－７－メチル－６－（４－（４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン－２－イル）ベンジル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オンおよび４－ブロモ－１－メチル－１Ｈ－イミダゾールから製造された。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３ ４００ＭＨｚ）：δ ７．８９（ｓ，１Ｈ），７．７６（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．５０（ｓ，１Ｈ），７．２３－７．２０（ｍ，３Ｈ），６．７５（ｓ，１Ｈ），４．１２－４．１０（ｍ，２Ｈ），３．９１（ｓ，２Ｈ），３．７５（ｓ，３Ｈ），３．５９－２．５３（ｍ，２Ｈ），３．３４（ｓ，３Ｈ），３．１０－２．０２（ｍ，１Ｈ），２．１７－２．０６（ｍ，２Ｈ），１．９０－１．８４（ｍ，２Ｈ）．ＬＣ－ＭＳ：ｔＲ＝１．５６５ｍｉｎ（方法Ｃ），ｍ／ｚ＝４０４．０［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0195】
実施例２１
６－［［４－（６－フルオロ－２－ピリジル）フェニル］メチル］－３－イソプロピル－７－メチル－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン
【化65】
ＴＨＦ（５ｍＬ）中の６－［［４－（６－フルオロ－２－ピリジル）フェニル］メチル］－３－イソプロピル－７Ｈ－イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８－オン（２５ｍｇ，０．０７ｍｍｏｌ）およびＭｅＩ（２０ｍｇ，０．１４ｍｍｏｌ）の混合物に、Ｎ２下にてＫ２ＣＯ３（１９ｍｇ，０．１４ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を５０℃で１４時間攪拌した。混合物を濾過し、酢酸エチルによって洗浄し、真空内で濃縮した。分取ＨＰＬＣによって残留物を精製して、６－（４－（６－フルオロピリジン－２－イル）ベンジル）－３－イソプロピル－７－メチルイミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オンを得た。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３ ４００ＭＨｚ）：δ ８．０４－８．０２（ｍ，２Ｈ），７．８９－７．８４（ｍ，２Ｈ），７．６５－７．６３（ｍ，１Ｈ），７．３５－７．３３（ｍ，２Ｈ），６．９１－６．８９（ｍ，１Ｈ），６．７４（ｓ，１Ｈ），３．９７（ｓ，２Ｈ），３．３４（ｓ，３Ｈ），３．１５－３．１２（ｍ，１Ｈ），１．４０（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，６Ｈ）．ＬＣ－ＭＳ：ｔＲ＝２．０６２ｍｉｎ（方法Ｃ），ｍ／ｚ＝３７７．０［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0196】
実施例２２
６－（４－（６－フルオロピリジン－２－イル）ベンジル）－７－メチル－３－プロピルイミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン
【化66】
実施例２１と同様な手法で６－（４－（６－フルオロピリジン－２－イル）ベンジル）－３－プロピルイミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オンおよびヨウ化メチルから、実施例２２を製造した。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３ ４００ＭＨｚ）：δ ８．０２（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．８９－７．８６（ｍ，２Ｈ），７．６４（ｄｄ，Ｊ＝２．４，７．２Ｈｚ，１Ｈ），７．３４（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），６．９０（ｄｄ，Ｊ＝３．２，８．０Ｈｚ，１Ｈ），６．７２（ｓ，１Ｈ），３．９７（ｓ，２Ｈ），３．３４（ｓ，３Ｈ），２．８１（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ），１．８８－１．８２（ｍ，２Ｈ），１．０１（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）．ＬＣ－ＭＳ：ｔＲ＝２．１４８ｍｉｎ（方法Ｃ），ｍ／ｚ＝３７７．０［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0197】
実施例２３
３－エチル－６－（４－（６－フルオロピリジン－２－イル）ベンジル）－７－メチルイミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン
【化67】
実施例２１と同様な手法で３－エチル－６－（４－（６－フルオロピリジン－２－イル）ベンジル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オンおよびヨウ化メチルから、実施例２３を製造した。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３ ４００ＭＨｚ）：δ ８．０２（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．８８－７．８４（ｍ，２Ｈ），７．６３（ｄｄ，Ｊ＝２．４，７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．３４（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），６．９０（ｄｄ，Ｊ＝２．８，８．０Ｈｚ，１Ｈ），６．７０（ｓ，１Ｈ），３．９７（ｓ，２Ｈ），３．３４（ｓ，３Ｈ），２．８４（ｑ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ），１．４１（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，３Ｈ）．ＬＣ－ＭＳ：ｔＲ＝２．０３ｍｉｎ（方法Ｃ），ｍ／ｚ＝３６３．０［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0198】
実施例２４
７－メチル－６－（４－（ピラジン－２－イル）ベンジル）－３－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン
【化68】
実施例１５と同様な手法で６－（４－ブロモベンジル）－３－（３，６－ジヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）－７－メチルイミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オンおよび２－（トリメチルスタニル）ピラジンから、実施例２４を製造した。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３ ４００ＭＨｚ）：δ ９．０４（ｄ，Ｊ＝１．２Ｈｚ，１Ｈ），８．６６－８．６５（ｍ，１Ｈ），８．５５（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），８．０４（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），７．９１（ｓ，１Ｈ），７．３９（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），６．８４（ｓ，１Ｈ），４．１３－４．１１（ｍ，２Ｈ），４．００（ｓ，２Ｈ），３．５７（ｄｔ，Ｊ＝２．０，１１．６Ｈｚ，２Ｈ），３．３３（ｓ，３Ｈ），３．１２－３．０７（ｍ，１Ｈ），２．１５－２．１１（ｍ，２Ｈ），１．９１－１．８８（ｍ，２Ｈ）．ＬＣ－ＭＳ：ｔＲ＝１．８４ｍｉｎ（方法Ｃ），ｍ／ｚ＝４０２．０［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0199】
実施例２５
６－（４－（６－フルオロピリジン－２－イル）ベンジル）－７－メチル－３－（２，２，２－トリフルオロエチル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン
【化69】
実施例２１と同様な手法で６－（４－（６－フルオロピリジン－２－イル）ベンジル）－３－（２，２，２－トリフルオロエチル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オンおよびヨウ化メチルから、実施例２５を製造した。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３ ４００ＭＨｚ）：δ ８．０３（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ），７．９６（ｓ，１Ｈ），７．９０－７．８４（ｍ，１Ｈ），７．６４（ｄｄ，Ｊ＝２．４，７．４Ｈｚ，１Ｈ），７．３３（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，２Ｈ），６．９０（ｄｄ，Ｊ＝２．８，８．０Ｈｚ，１Ｈ），６．７９（ｓ，１Ｈ），３．９８（ｓ，２Ｈ），３．７７（ｑ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，２Ｈ），３．３７（ｓ，３Ｈ）．ＬＣ－ＭＳ：ｔＲ＝２．６７１ｍｉｎ（方法Ｃ），ｍ／ｚ＝４１７．０［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0200】
実施例２６
７－メチル－６－（４－（ピリミジン－４－イル）ベンジル）－３－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン
【化70】
実施例１５と同様な手法で６－（４－ブロモベンジル）－３－（３，６－ジヒドロ－２Ｈ－ピラン－４－イル）－７－メチルイミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オンおよび４－（トリメチルスタニル）ピリミジンから、実施例２６を製造した。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３ ４００ＭＨｚ）：δ ９．２８（ｄ，Ｊ＝１．２，１Ｈ），８．７９（ｄ，Ｊ＝４．２Ｈｚ，１Ｈ），８．１１（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．９１（ｓ，１Ｈ），７．７１（ｄｄ，Ｊ＝１．２，４．０Ｈｚ，１Ｈ），７．３８（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），６．８３（ｓ，１Ｈ），４．１３－４．１０（ｍ，２Ｈ），４．００（ｓ，２Ｈ），３．５９－３．５３（ｍ，２Ｈ），３．１２（ｓ，３Ｈ），３．１２－３．０６（ｍ，１Ｈ），２．１８－２．０８（ｍ，２Ｈ），１．９０－１．８６（ｍ，２Ｈ）．ＬＣ－ＭＳ：ｔＲ＝１．８５９ｍｉｎ（方法Ｃ），ｍ／ｚ＝４０２．０［Ｍ＋Ｈ］＋．
【0201】
実施例２７
６－（４－（６－フルオロピリジン－２－イル）ベンジル）－７－メチル－３－（テトラヒドロフラン－３－イル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン，異性体１
【化71】
実施例２１と同様な手法で６－（４－（６－フルオロピリジン－２－イル）ベンジル）－３－（テトラヒドロフラン－３－イル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オンおよびヨウ化メチルから、実施例２７を製造した。そして、２つの鏡像異性体を分取ＳＦＣおよびＨＰＬＣで分離した。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３ ４００ＭＨｚ）：δ ８．０３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．９２－７．８３（ｍ，２Ｈ），７．６４（ｄｄ，Ｊ＝１．９，７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．３４（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），６．９１（ｄｄ，Ｊ＝２．９，７．９Ｈｚ，１Ｈ），６．７６（ｓ，１Ｈ），４．１９－４．１３（ｍ，１Ｈ），４．１０－３．９１（ｍ，５Ｈ），３．６２（ｑｕｉｎ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），３．３６（ｓ，３Ｈ），２．３８（ｑ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ）．ＬＣ－ＭＳ：ｔＲ＝２．３０２ｍｉｎ（方法Ｃ），ｍ／ｚ＝４０５．０［Ｍ＋Ｈ］＋．ＳＦＣ－ＭＳ：ｔＲ＝３．７２４ｍｉｎ．ｅｅ％＝１００％．［α］Ｄ ２０＋６．０（ｃ＝０．２０，ＭｅＯＨ）．
【0202】
実施例２８
６－（４－（６－フルオロピリジン－２－イル）ベンジル）－７－メチル－３－（テトラヒドロフラン－３－イル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン，異性体２
【化72】
実施例２１と同様な手法で６－（４－（６－フルオロピリジン－２－イル）ベンジル）－３－（テトラヒドロフラン－３－イル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オンおよびヨウ化メチルから、実施例２８を製造した。そして、２つの鏡像異性体を分取ＳＦＣおよびＨＰＬＣで分離した。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３ ４００ＭＨｚ）：δ ８．０３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．９１－７．８３（ｍ，２Ｈ），７．６４（ｄｄ，Ｊ＝２．１，７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．３４（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，２Ｈ），６．９１（ｄｄ，Ｊ＝２．９，７．９Ｈｚ，１Ｈ），６．７６（ｓ，１Ｈ），４．１９－４．１３（ｍ，１Ｈ），４．１０－３．９１（ｍ，５Ｈ），３．６２（ｑｕｉｎ，Ｊ＝７．７Ｈｚ，１Ｈ），３．３６（ｓ，３Ｈ），２．３８（ｑ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，２Ｈ）．ＬＣ－ＭＳ：ｔＲ＝２．２８６ｍｉｎ（方法Ｃ），ｍ／ｚ＝４０５．０［Ｍ＋Ｈ］＋．ＳＦＣ：ｔＲ＝４．０３１ｍｉｎ．ｅｅ％＝９５．５４％．［α］Ｄ ２０－６．０（ｃ＝０．２０，ＭｅＯＨ）．
【0203】
実施例２９
６－（４－（６－フルオロピリジン－２－イル）ベンジル）－７－メチル－３－（２－メチルテトラヒドロフラン－３－イル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン，異性体１
【化73】
実施例２１と同様な手法で６－（４－（６－フルオロピリジン－２－イル）ベンジル）－３－（２－メチルテトラヒドロフラン－３－イル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オンおよびヨウ化メチルから、実施例２９を製造した。そして、２つの立体異性体をＳＦＣで分離した。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３ ４００ＭＨｚ）：δ ８．０３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．９１－７．８５（ｍ，２Ｈ），７．６４（ｄｄ，Ｊ＝２．０，７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．３４（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），６．９１（ｄｄ，Ｊ＝２．８，８．０Ｈｚ，１Ｈ），６．７０（ｓ，１Ｈ），４．２３－４．１８（ｍ，１Ｈ），４．０９－４．０２（ｍ，２Ｈ），３．９７（ｓ，２Ｈ），３．３７（ｓ，３Ｈ），３．０２（ｑ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），２．４４－２．３８（ｍ，２Ｈ），１．２９（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，３Ｈ）．ＬＣ－ＭＳ：ｔＲ＝２．３３ｍｉｎ（方法Ｃ），ｍ／ｚ＝４１９．０［Ｍ＋Ｈ］＋．ＳＦＣ－ＭＳ：ｔＲ＝５．５８ｍｉｎ，ｅｅ％＝１００％．［α］Ｄ ２０＋５．０（ｃ＝０．２０，ジクロロメタン）．
【0204】
実施例３０
６－（４－（６－フルオロピリジン－２－イル）ベンジル）－７－メチル－３－（２－メチルテトラヒドロフラン－３－イル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン，異性体２
【化74】
実施例２１と同様な手法で６－（４－（６－フルオロピリジン－２－イル）ベンジル）－３－（２－メチルテトラヒドロフラン－３－イル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オンおよびヨウ化メチルから、実施例３０を製造した。そして、立体異性体をＳＦＣで分離した。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３ ４００ＭＨｚ）：δ ８．０３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．９１－７．８７（ｍ，２Ｈ），７．６４（ｄｄ，Ｊ＝２．４，７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．３４（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），６．９０（ｄｄ，Ｊ＝３．２，８．０Ｈｚ，１Ｈ），６．７７（ｓ，１Ｈ），４．２５－４．１９（ｍ，２Ｈ），３．９６（ｓ，２Ｈ），３．８５－３．８１（ｍ，１Ｈ），３．６６－３．６４（ｍ，１Ｈ），３．３７（ｓ，３Ｈ），２．６８－２．６３（ｍ，１Ｈ），２．４３－２．３８（ｍ，１Ｈ），０．８７（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，３Ｈ）．ＬＣ－ＭＳ：ｔＲ＝２．２５ｍｉｎ（方法Ｃ），ｍ／ｚ＝４１９．０［Ｍ＋Ｈ］＋．ＳＦＣ－ＭＳ：ｔＲ＝５．６７ｍｉｎ，ｅｅ％＝１００％．［α］Ｄ ２０－１３９．０（ｃ＝０．２０，ジクロロメタン）．
【0205】
実施例３１
６－（４－（６－フルオロピリジン－２－イル）ベンジル）－７－メチル－３－（２－メチルテトラヒドロフラン－３－イル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン，異性体３
【化75】
実施例２１と同様な手法で６－（４－（６－フルオロピリジン－２－イル）ベンジル）－３－（２－メチルテトラヒドロフラン－３－イル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オンおよびヨウ化メチルから、実施例３１を製造した。そして、立体異性体をＳＦＣで分離した。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３ ４００ＭＨｚ）：δ ８．０３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．９２－７．８７（ｍ，２Ｈ），７．６４（ｄｄ，Ｊ＝２．０，７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．３４（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），６．９１（ｄｄ，Ｊ＝２．８，７．６Ｈｚ，１Ｈ），６．７０（ｓ，１Ｈ），４．２３－４．１８（ｍ，１Ｈ），４．０８－４．０２（ｍ，２Ｈ），３．９７（ｓ，２Ｈ），３．３７（ｓ，３Ｈ），３．０２（ｑ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），２．４４－２．３８（ｍ，２Ｈ），１．２９（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，３Ｈ）．ＬＣ－ＭＳ：ｔＲ＝２．３４ｍｉｎ（方法Ｃ），ｍ／ｚ＝４１９．０［Ｍ＋Ｈ］＋．ＳＦＣ－ＭＳ：ｔＲ＝５．９９ｍｉｎ，ｅｅ％＝９９．２３％．［α］Ｄ ２０－１７．０（ｃ＝０．２０，ジクロロメタン）．
【0206】
実施例３２
６－（４－（６－フルオロピリジン－２－イル）ベンジル）－７－メチル－３－（２－メチルテトラヒドロフラン－３－イル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オン，異性体４
【化76】
実施例２１と同様な手法で６－（４－（６－フルオロピリジン－２－イル）ベンジル）－３－（２－メチルテトラヒドロフラン－３－イル）イミダゾ［１，５－ａ］ピラジン－８（７Ｈ）－オンおよびヨウ化メチルから、実施例３２を製造した。そして、立体異性体をＳＦＣで分離した。１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ３ ４００ＭＨｚ）：δ ８．０３（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．９１－７．８７（ｍ，２Ｈ），７．６４（ｄｄ，Ｊ＝２．８，７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．３３（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，２Ｈ），６．９０（ｄｄ，Ｊ＝３．２，８．０Ｈｚ，１Ｈ），６．７７（ｓ，１Ｈ），４．２５－４．１９（ｍ，２Ｈ），３．９６（ｓ，２Ｈ），３．８５－３．８１（ｍ，１Ｈ），３．６６－３．６４（ｍ，１Ｈ），３．３７（ｓ，３Ｈ），２．６８－２．６３（ｍ，１Ｈ），２．４３－２．３８（ｍ，１Ｈ），０．８７（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，３Ｈ）．ＬＣ－ＭＳ：ｔＲ＝２．２５ｍｉｎ（方法Ｃ），ｍ／ｚ＝４１９．０［Ｍ＋Ｈ］＋．ＳＦＣ－ＭＳ：ｔＲ＝６．８４ｍｉｎ，ｅｅ％＝１００％．［α］Ｄ ２０＋１０３．０（ｃ＝０．２０，ジクロロメタン）．
【0207】
生体外（Ｉｎ ｖｉｔｒｏ）試験
ＰＤＥ１阻害アッセイ
ＰＤＥ１Ａ、ＰＤＥ１ＢおよびＰＤＥ１Ｃアッセイを以下の通りに実施した：固定量のＰＤＥ１酵素（環状ヌクレオチド基質の２０～２５％の転化に十分な）、バッファー（５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ（４－（２－ヒドロキシエチル）－１－ピペラジンエタンスルホン酸）ｐＨ７．６；１０ｍＭ ＭｇＣｌ２；０．０２％ Ｔｗｅｅｎ２０）、０．１ｍｇ／ｍｌ ＢＳＡ（ウシ血清アルブミン）、１５ｎＭトリチウム標識化ｃＡＭＰ、および可変量の阻害剤を含有する試料６０μＬでアッセイを行った。環状ヌクレオチド基質を添加することによって反応を開始し、ケイ酸イットリウムＳＰＡビーズ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）２０μＬ（０．２ｍｇ）と混合することによって反応が停止される前に室温で１時間反応を進行させた。Ｗａｌｌａｃ １４５０ Ｍｉｃｒｏｂｅｔａ計数器においてプレートがカウントされる前にビーズを暗所で１時間沈降させた。阻害されていないコントロール（１００％）に対して、測定シグナルを活性度に変換し、ＸｌＦｉｔ（モデル２０５、ＩＤＢＳ）を使用してＩＣ５０を計算した。
【0208】
ＰＤＥ９阻害アッセイ
ＰＤＥ９アッセイは例えば、以下の通りに行われ得る：固定量の関連するＰＤＥ酵素（環状ヌクレオチド基質の２０～２５％の転化に十分な）、バッファー（５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、ｐＨ７．６；１０ｍＭ ＭｇＣｌ２；０．０２％ Ｔｗｅｅｎ２０）、０．１ｍｇ／ｍｌ ＢＳＡ、３Ｈ標識環状ヌクレオチド基質２２５ｐＣｉ、最終濃度５ｎＭとなるトリチウム標識化ｃＡＭＰ、および可変量の阻害剤を含有する試料６０μＬでアッセイが行われる。環状ヌクレオチド基質を添加することによって反応が開始され、ケイ酸イットリウムＳＰＡビーズ（Ａｍｅｒｓｈａｍ）１５μＬ（８ｍｇ／ｍＬ）と混合することによって反応が停止される前に、室温で１時間反応を進行させる。Ｗａｌｌａｃ １４５０ Ｍｉｃｒｏｂｅｔａ計数器においてプレートがカウントされる前に、ビーズを暗所で１時間沈降させる。阻害されていないコントロール（１００％）に対して、測定シグナルを活性度に変換し、ＸｌＦｉｔ拡張をＥＸＣＥＬに用いて、ＩＣ５０を計算し得る。
【0209】
本発明の文脈において、１０ｎＭ ３Ｈ－ｃＡＭＰの２０～２５％を転化するのに十分なＰＤＥ９、最終濃度１５ｎＭとなる３Ｈ標識ｃＧＭＰ、および阻害剤１０μＭを含有するアッセイバッファー６０μＬ（５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ，ｐＨ７．６；１０ｍＭ ＭｇＣｌ２；０．０２％ Ｔｗｅｅｎ２０）でアッセイを実施した。１時間インキュベートした後、ケイ酸イットリウムＳＰＡビーズ（Ａｍｅｒｓｈａｍ）（８ｍｇ／ｍＬ）１５μＬを添加することによって反応が停止された。Ｗａｌｌａｃ １４５０ Ｍｉｃｒｏｂｅｔａ計数器においてプレートがカウントされる前に、ビーズを暗所で１時間沈降させた。
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