特許7113042５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２，４－ジヒドロキシベンジル）－２，４－ジメトキシベンズアミドを含有する皮膚弾力増進又はシワ改善用組成物
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】特許公報(B2)
(11)【特許番号】
(24)【登録日】2022-07-27
(45)【発行日】2022-08-04
(54)【発明の名称】５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２，４－ジヒドロキシベンジル）－２，４－ジメトキシベンズアミドを含有する皮膚弾力増進又はシワ改善用組成物
(51)【国際特許分類】
A61K 8/42 20060101AFI20220728BHJP
A61K 31/166 20060101ALI20220728BHJP
A61P 17/18 20060101ALI20220728BHJP
A61P 39/06 20060101ALI20220728BHJP
A61Q 19/08 20060101ALI20220728BHJP
【ＦＩ】
A61K8/42
A61K31/166
A61P17/18
A61P39/06
A61Q19/08
【請求項の数】
4
【外国語出願】
(21)【出願番号】P 2020059918
(22)【出願日】2020-03-30
(62)【分割の表示】P 2017547091の分割
【原出願日】2016-03-29
(65)【公開番号】P2020114853
(43)【公開日】2020-07-30
【審査請求日】2020-04-28
(31)【優先権主張番号】10-2015-0045397
(32)【優先日】2015-03-31
(33)【優先権主張国・地域又は機関】KR
【前置審査】
(73)【特許権者】
【識別番号】506213681
【氏名又は名称】アモーレパシフィック コーポレーション
【氏名又は名称原語表記】ＡＭＯＲＥＰＡＣＩＦＩＣ ＣＯＲＰＯＲＡＴＩＯＮ
【住所又は居所原語表記】１００， Ｈａｎｇａｎｇ－ｄａｅｒｏ， Ｙｏｎｇｓａｎ－ｇｕ， Ｓｅｏｕｌ， Ｒｅｐｕｂｌｉｃ ｏｆ Ｋｏｒｅａ
(74)【代理人】
【識別番号】110000556
【氏名又は名称】特許業務法人 有古特許事務所
(72)【発明者】
【氏名】チュ， ヨン ヒョプ
(72)【発明者】
【氏名】ペク， フン ス
(72)【発明者】
【氏名】フヮン， ジョン ア
(72)【発明者】
【氏名】イ， ヘ クヮン
(72)【発明者】
【氏名】キム， ヨン ジン
(72)【発明者】
【氏名】シン， ホン ジュ
(72)【発明者】
【氏名】イ， ジョン フヮン
【審査官】池田 周士郎
(56)【参考文献】
【文献】特開２０００－２９０１７７（ＪＰ，Ａ）
【文献】特開２００８－２４７９０１（ＪＰ，Ａ）
【文献】特表２０１４－５２９５８３（ＪＰ，Ａ）
【文献】Van Thai Ha, et al.，NF-κB/AP-1-Targeted Inhibition of Macrophage-Mediated Inflammatory Responses by Depigmenting Compou，Mediators of Inflammation，2014年10月19日，vol.2014，pages 1-11
(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)
Ａ６１Ｋ ８／００－ ８／９９
Ａ６１Ｑ １／００－９０／００
Ａ６１Ｋ ３１／００－３１／３２７
Ａ６１Ｐ １７／００－１７／１８
Ａ６１Ｐ ３９／００－３９／０６
Ｃ０９Ｋ １５／００－１５／３４
Ａ２３Ｌ ３３／００－３３／２９
ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）
ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）
(57)【特許請求の範囲】
【請求項1】
下記の化学式１で表される５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシ ベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド、その薬学的に許容可能な塩、その水和物 又はその溶媒和物を有効成分として含む皮膚弾力増進又はシワ改善用組成物であって、
前記有効成分は、マトリックスメタロプロテアーゼ－１（Ｍａｔｒｉｘ ｍｅｔａｌｌｏｐ ｒｏｔｅａｓｅ－１、ＭＭＰ－１）の発現を抑制し、
前記有効成分は、前記組成物の全質量を基準に０．０１質量％～２０質量％の範囲である、
皮膚弾力増進又はシワ改善用組成物。
【化1】
【請求項2】
前記組成物はコラーゲン又はエラスチンを増進させる、請求項１に記載の皮膚弾力増進 又はシワ改善用組成物。
【請求項3】
前記組成物は抗老化作用を有する、請求項１又は２に記載の皮膚弾力増進又はシワ改善 用組成物。
【請求項4】
前記組成物は化粧料、食品、又は医薬組成物である、請求項１～３のいずれか一項に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本明細書は、５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシベンジル）－
２,４－ジメトキシベンズアミド及びこれを含む組成物の抗酸化及び抗老化用途に関する
。
２,４－ジメトキシベンズアミド及びこれを含む組成物の抗酸化及び抗老化用途に関する
。
【背景技術】
【0002】
すべての生物体は年を取りながら老化するが、皮膚も同じである。このような老化を遅延させようとする努力は絶えず続けられており、これに伴い、老化の本質が何であり老化がなぜ起きるのかについての疑問も絶えず提起されてきている。皮膚の老化は、その要因によって二種類に大別することができる。その一つは、皮膚の構造や生理的な機能が加齢に伴って減退し続ける自然老化（Ｉｎｔｒｉｎｓｉｃ ａｇｉｎｇ）であり、もう一つは、太陽光線などの累積した外部ストレスによって発生する外因性老化（Ｅｘｔｒｉｎｓｉｃ ａｇｉｎｇ）である。特に、太陽光は周知の老化原因の一つであって、長時間紫外線に露出した皮膚は角質層が厚くなり、皮膚の主な構成要素であるコラーゲンとエラスチンが変性して皮膚の弾力性を低下させるようにする。このように皮膚の老化現象は、様々な機能的・構造的変化を伴う。先ず、老化に伴う皮膚の構造的変化について検討すると、皮膚の構成成分である表皮、真皮、及び皮下組織の厚さが薄くなる。また、皮膚の弾力とハリを担う真皮組織の細胞外マトリックス（ＥＣＭ；ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕａｒ ｍａｔｒｉｘ）成分が変化するようになる。ＥＣＭは大きく二種類の成分から構成されている。その一つはＥＣＭ全体の約２～４％を占める弾性線維（ｅｌａｓｔｉｃ ｆｉｂｅｒ）であり、もう一つはＥＣＭ全体の約７０～８０％を占めているコラーゲンである。老化が進行するにつれ、皮膚の弾力性が大きく低下するが、これはコラーゲンやエラスチンの減少に起因する。このようなコラーゲンとエラスチンは様々な要因によって調節されるが、コラゲナーゼ（ｃｏｌｌａｇｅｎａｓｅ）やエラスターゼ（ｅｌａｓｔａｓｅ）のようなマトリックスメタロプロテアーゼ（ｍａｔｒｉｘ ｍｅｔａｌｌｏ ｐｒｏｔｅａｓｅ）の発現によって生成されたコラーゲンやエラスチンが分解し、結果として、皮膚内のコラーゲン含量が減少する現象が生じるようになる。真皮でコラーゲンやエラスチンが減少すると、皮膚の表皮が荒くなり老化現象である弾力減少が現れる。このような弾力減少の原因になるコラーゲンやエラスチンの減少を抑制しようとする目的から、様々な物質が開発され用いられてきており、特にレチノールやレチノイン酸などのレチノイドのシワ改善又は弾力改善効果は周知の事実である。
【0003】
また、老化と酸化作用との関連性は多くの研究を通して周知となった事実であり、特に、皮膚老化から誘発されるシワの生成や局所的な黒化現象も、このような酸化現象と密接な関連があると知られている。同じ年齢といっても年齢よりはるかに若く見える人がいる反面、ある人は実際の年齢よりはるかに老けて見える場合もある。皮膚のシワ生成及び局所的な黒化現象のような老化現象の原因としては、加齢などの内因性要因、骨格や筋肉の形、筋肉の持続的な弛緩や収縮による遺伝的な要因、及び環境汚染物質、ストレスなどによる環境的な要因に分類することができる。これらの多様な要因による皮膚老化現象によって角質形成細胞及び繊維細胞の分裂減少、コラーゲン合成の減少、ＭＭＰ生成の増加、メラニン生成のシグナル伝達増加などによるシワは増加し且つ皮膚の弾力は減少し、またシミ、ソバカス及び老人性色素斑が増加するようになる。特に、近年、研究を通して、健康な皮膚の場合はスーパーオキシドディスムターゼ（Ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ Ｄｉｓｍｕｔａｓｅ）、カタラーゼ（Ｃａｔａｌａｓｅ）に代表される生体抗酸化防御因子によってフリーラジカル（Ｆｒｅｅ Ｒａｄｉｃａｌ）が除去されているが、このような除去が完全になされないと、活性酸素（フリーラジカルの一種）による酸化作用が発生して皮膚細
胞及び組織の機能が低下し、これが原因で皮膚のシワ生成や局所的な黒化現象が促進されることが分かった。このような生体酸化反応性の強い活性酸素は、外因性要因（公害、ストレス）や内因性要因（生体内エネルギー代謝過程）で生成が促進され、脂肪質と結合して過酸化脂質という害になる物質を産生したりもする。前記過酸化脂質は、血管に作用して動脈硬化や血栓症をはじめとした各種の成人病を誘発させる。また、健康な皮膚と密接な関連があるコラーゲンの生成能力の低下及びこれらコラーゲン繊維の異常な絡まり合い現象が増加して皮膚弾力が顕著に低下し、皮膚保湿を担うヒアルロン酸や糖蛋白質の一種であるグリコサミノグリカンの生成量が顕著に低下することが報告されている。
胞及び組織の機能が低下し、これが原因で皮膚のシワ生成や局所的な黒化現象が促進されることが分かった。このような生体酸化反応性の強い活性酸素は、外因性要因（公害、ストレス）や内因性要因（生体内エネルギー代謝過程）で生成が促進され、脂肪質と結合して過酸化脂質という害になる物質を産生したりもする。前記過酸化脂質は、血管に作用して動脈硬化や血栓症をはじめとした各種の成人病を誘発させる。また、健康な皮膚と密接な関連があるコラーゲンの生成能力の低下及びこれらコラーゲン繊維の異常な絡まり合い現象が増加して皮膚弾力が顕著に低下し、皮膚保湿を担うヒアルロン酸や糖蛋白質の一種であるグリコサミノグリカンの生成量が顕著に低下することが報告されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0004】
【文献】大韓民国公開特許第１０－２０１３－００１５９５４号
【非特許文献】
【0005】
【文献】Photoaging and Tretinoin, S Kang., Dermatol Clin, 16 (2), 357-364, 1998
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0006】
一側面において、本発明は、毒性がなく且つ抗酸化と抗老化のいずれか一つ以上の活性に優れる組成物を提供することを目的とする。
【課題を解決するための手段】
【0007】
一側面において、本発明は、有効成分として、５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド、その異性体、その薬学的に許容可能な塩、そのプロドラッグ、その水和物又はその溶媒和物を含む抗酸化又は抗老化組成物を提供する。
【0008】
一具体例において、前記５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシベ
ンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド、その異性体、その薬学的に許容可能な塩、
そのプロドラッグ、その水和物又はその溶媒和物は、フリーラジカルを消去することができる。
ンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド、その異性体、その薬学的に許容可能な塩、
そのプロドラッグ、その水和物又はその溶媒和物は、フリーラジカルを消去することができる。
【0009】
他の具体例において、前記５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシ
ベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド、その異性体、その薬学的に許容可能な塩
、そのプロドラッグ、その水和物又はその溶媒和物は、マトリックスメタロプロテアーゼ－１（Ｍａｔｒｉｘ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅａｓｅ－１、ＭＭＰ－１）の発現を抑制することができる。
ベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド、その異性体、その薬学的に許容可能な塩
、そのプロドラッグ、その水和物又はその溶媒和物は、マトリックスメタロプロテアーゼ－１（Ｍａｔｒｉｘ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅａｓｅ－１、ＭＭＰ－１）の発現を抑制することができる。
【0010】
一側面において、本発明の組成物は化粧料、食品、又は医薬組成物である抗酸化又は抗老化組成物を提供する。
【発明の効果】
【0011】
本発明の一側面において、５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシ
ベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド、その異性体、その薬学的に許容可能な塩
、そのプロドラッグ、その水和物又はその溶媒和物を有効成分とする組成物は、毒性がなく且つ優れた抗酸化又は抗老化効果を奏することができる。
ベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド、その異性体、その薬学的に許容可能な塩
、そのプロドラッグ、その水和物又はその溶媒和物を有効成分とする組成物は、毒性がなく且つ優れた抗酸化又は抗老化効果を奏することができる。
【0012】
本発明の一側面に係る抗酸化組成物は、フリーラジカルを消去する効果がある。
【0013】
本発明の一側面に係る抗老化組成物は、マトリックスメタロプロテアーゼ－１（Ｍａｔｒｉｘ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅａｓｅ－１、ＭＭＰ－１）の発現を抑制する効果がある。
【図面の簡単な説明】
【0014】
【発明を実施するための形態】
【0015】
本発明の一側面において、５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシ
ベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド、その異性体、その薬学的に許容可能な塩
、そのプロドラッグ、その水和物又はその溶媒和物を有効成分として含む抗酸化組成物を提供する。具体的に、前記抗酸化は皮膚抗酸化であってよい。
ベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド、その異性体、その薬学的に許容可能な塩
、そのプロドラッグ、その水和物又はその溶媒和物を有効成分として含む抗酸化組成物を提供する。具体的に、前記抗酸化は皮膚抗酸化であってよい。
【0016】
本発明の一側面において、対象の抗酸化を増進させるための方法であって、前記方法は、５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド、その異性体、その薬学的に許容可能な塩、そのプロドラッグ、その水和物又はその溶媒和物の有効量を、これを必要とする対象に投与する段階を含む方法を提供する。
【0017】
本発明の一側面において、抗酸化を増進させるための組成物を製造するに際する、５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド、その異性体、その薬学的に許容可能な塩、そのプロドラッグ、その水和物又はその溶媒和物の用途を提供する。
【0018】
本発明の一側面において、抗酸化を増進させるための５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド、その異性体、その薬学的に許容可能な塩、そのプロドラッグ、その水和物又はその溶媒和物を提供する。
【0019】
具体的に、前記抗酸化は皮膚抗酸化であってよい。
【0020】
一具体例において、前記５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシベ
ンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド、その異性体、その薬学的に許容可能な塩、
そのプロドラッグ、その水和物又はその溶媒和物は、フリーラジカルを消去する抗酸化組成物を提供する。
ンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド、その異性体、その薬学的に許容可能な塩、
そのプロドラッグ、その水和物又はその溶媒和物は、フリーラジカルを消去する抗酸化組成物を提供する。
【0021】
本発明の他の側面において、５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキ
シベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド、その異性体、その薬学的に許容可能な
塩、そのプロドラッグ、その水和物又はその溶媒和物を有効成分として含む抗老化組成物を提供する。
シベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド、その異性体、その薬学的に許容可能な
塩、そのプロドラッグ、その水和物又はその溶媒和物を有効成分として含む抗老化組成物を提供する。
【0022】
本発明の他の側面において、対象の抗老化を増進させるための方法であって、前記方法
は、５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド、その異性体、その薬学的に許容可能な塩、そのプロドラッグ、その水和物又はその溶媒和物の有効量を、これを必要とする対象に投与する段階を含む方法を提供する。
は、５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド、その異性体、その薬学的に許容可能な塩、そのプロドラッグ、その水和物又はその溶媒和物の有効量を、これを必要とする対象に投与する段階を含む方法を提供する。
【0023】
本発明の他の側面において、抗老化を増進させるための組成物を製造するに際する、５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド、その異性体、その薬学的に許容可能な塩、そのプロドラッグ、その水和物又はその溶媒和物の用途を提供する。
【0024】
本発明の他の側面において、抗老化を増進させるための５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド、その異性体、その薬学的に許容可能な塩、そのプロドラッグ、その水和物又はその溶媒和物を提供する。
【0025】
一具体例において、前記５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシベ
ンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド、その異性体、その薬学的に許容可能な塩、
そのプロドラッグ、その水和物又はその溶媒和物は、マトリックスメタロプロテアーゼ－１（Ｍａｔｒｉｘ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅａｓｅ－１、ＭＭＰ－１）の発現を抑制する抗老化組成物を提供する。
ンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド、その異性体、その薬学的に許容可能な塩、
そのプロドラッグ、その水和物又はその溶媒和物は、マトリックスメタロプロテアーゼ－１（Ｍａｔｒｉｘ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅａｓｅ－１、ＭＭＰ－１）の発現を抑制する抗老化組成物を提供する。
【0026】
具体的に、前記抗老化は皮膚抗老化であってよい。
【0027】
本発明のまた他の側面において、５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒド
ロキシベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド、その異性体、その薬学的に許容可
能な塩、そのプロドラッグ、その水和物又はその溶媒和物を有効成分として含む皮膚弾力増進又はシワ改善用組成物を提供する。
ロキシベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド、その異性体、その薬学的に許容可
能な塩、そのプロドラッグ、その水和物又はその溶媒和物を有効成分として含む皮膚弾力増進又はシワ改善用組成物を提供する。
【0028】
本発明のまた他の側面において、対象の皮膚弾力の増進やシワを改善させるための方法であって、前記方法は、５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシベン
ジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド、その異性体、その薬学的に許容可能な塩、そ
のプロドラッグ、その水和物又はその溶媒和物の有効量を、これを必要とする対象に投与する段階を含む方法を提供する。
ジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド、その異性体、その薬学的に許容可能な塩、そ
のプロドラッグ、その水和物又はその溶媒和物の有効量を、これを必要とする対象に投与する段階を含む方法を提供する。
【0029】
本発明のまた他の側面において、皮膚弾力の増進やシワを改善させるための組成物を製造するに際する、５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシベンジル）
－２,４－ジメトキシベンズアミド、その異性体、その薬学的に許容可能な塩、そのプロ
ドラッグ、その水和物又はその溶媒和物の用途を提供する。
本発明のまた他の側面において、皮膚弾力の増進やシワを改善させるための５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド、その異性体、その薬学的に許容可能な塩、そのプロドラッグ、その水和物又はその溶媒和物を提供する。
－２,４－ジメトキシベンズアミド、その異性体、その薬学的に許容可能な塩、そのプロ
ドラッグ、その水和物又はその溶媒和物の用途を提供する。
本発明のまた他の側面において、皮膚弾力の増進やシワを改善させるための５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド、その異性体、その薬学的に許容可能な塩、そのプロドラッグ、その水和物又はその溶媒和物を提供する。
【0030】
本発明の他の側面において、前記抗酸化、抗老化、又は皮膚弾力の増進又はシワ改善用組成物は、化粧料、食品、又は医薬組成物である、抗酸化、抗老化、又は皮膚弾力増進又はシワ改善用組成物を提供する。
【0031】
本発明の一実施例において、本発明は、有効成分として、５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド、その異性体、その薬学的に許容可能な塩、そのプロドラッグ、その水和物又はその溶媒和物を含む組
成物である。
成物である。
【0032】
本発明の一側面において、下記の化学式１で表される製造方法は次のとおりである。
【0033】
【化1】
【0034】
本発明の一側面は、
ｉ）酸触媒下でヒドロキシ安息香酸とアダマンタ化合物とを反応させ、アダマンタニル－ヒドロキシ安息香酸を合成する段階；
ｉｉ）アダマンタニル－ヒドロキシ安息香酸とアルキルスルフェートを反応させ、アダマンタニル－アルコキシ安息香酸を合成する段階；及び
ｉｉｉ）アダマンタニルアルコキシ安息香酸とヒドロキシ基が置換されたアルキルフェニルアミンを反応させ、アダマンタン基が置換された安息香酸アミド化合物を合成する段階を含む、アダマンタン基が置換された安息香酸アミド化合物の製造方法を提供する。
ｉ）酸触媒下でヒドロキシ安息香酸とアダマンタ化合物とを反応させ、アダマンタニル－ヒドロキシ安息香酸を合成する段階；
ｉｉ）アダマンタニル－ヒドロキシ安息香酸とアルキルスルフェートを反応させ、アダマンタニル－アルコキシ安息香酸を合成する段階；及び
ｉｉｉ）アダマンタニルアルコキシ安息香酸とヒドロキシ基が置換されたアルキルフェニルアミンを反応させ、アダマンタン基が置換された安息香酸アミド化合物を合成する段階を含む、アダマンタン基が置換された安息香酸アミド化合物の製造方法を提供する。
【0035】
本発明の一側面に係るアダマンタン基が置換された安息香酸アミド化合物の製造方法は、下記反応式１で図式化することができる。
【0036】
【化2】
【0037】
前記反応式１中、
Ｒ１、Ｒ３、及びＲ４は、それぞれ水素、ヒドロキシ、Ｃ１～Ｃ５アルコキシ、Ｃ３～Ｃ６シクロアルコキシ、アリールオキシ、及びＣ１～Ｃ５ハロアルコキシからなる群から独立して選択され、
Ｒ２は、水素、Ｃ１～Ｃ５アルキル、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキル、アリル、及びＣ１～Ｃ５ハロアルキルからなる群から選択され、ｎは１～５から選択された整数である。
Ｒ１、Ｒ３、及びＲ４は、それぞれ水素、ヒドロキシ、Ｃ１～Ｃ５アルコキシ、Ｃ３～Ｃ６シクロアルコキシ、アリールオキシ、及びＣ１～Ｃ５ハロアルコキシからなる群から独立して選択され、
Ｒ２は、水素、Ｃ１～Ｃ５アルキル、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキル、アリル、及びＣ１～Ｃ５ハロアルキルからなる群から選択され、ｎは１～５から選択された整数である。
【0038】
本発明の他の一側面に係るアダマンタン基が置換された安息香酸アミド化合物の製造方法は、
ｉ）酸触媒の存在下でジヒドロキシ安息香酸とアダマンタン化合物を反応させ、アダマンタニル－ジヒドロキシ安息香酸を合成する段階；
ｉｉ）水酸化塩の存在下でアダマンタニル－ジヒドロキシ安息香酸とジアルキルスルフェートを反応させ、アダマンタニル－ヒドロキシ－アルコキシ安息香酸又はアダマンタニル－ティアルコキシ安息香酸を合成する段階；及び
ｉ）酸触媒の存在下でジヒドロキシ安息香酸とアダマンタン化合物を反応させ、アダマンタニル－ジヒドロキシ安息香酸を合成する段階；
ｉｉ）水酸化塩の存在下でアダマンタニル－ジヒドロキシ安息香酸とジアルキルスルフェートを反応させ、アダマンタニル－ヒドロキシ－アルコキシ安息香酸又はアダマンタニル－ティアルコキシ安息香酸を合成する段階；及び
【0039】
ｉｉｉ）アダマンタニル－ヒドロキシ－アルコキシ安息香酸又はアダマンタニル－ティアルコキシ安息香酸とヒドロキシ基が置換されたベンジルアミン又はフェネチルアミンを反応させ、アダマンタン基が置換された安息香酸アミド化合物を合成する段階を含んでいてよい。
【0040】
本発明のまた他の一側面に係るアダマンタン基が置換された安息香酸アミド化合物の製造方法は、
ｉ）ジクロロメタン溶媒で酢酸と硫酸触媒存在下で２,４－ジヒドロキシ安息香酸と１
－アダマンタノルを室温で反応させ、５－アダマンタニル－２,４－ジヒドロキシ安息香
酸を合成する段階；
ｉｉ）水酸化ナトリウム又は水酸化カリウムの存在下で５－アダマンタニル－２,４－
ジヒドロキシ安息香酸とジメチルスルフェートを反応させ、５－アダマンタニル－２－ヒドロキシ－４－メトキシ安息香酸又は５－アダマンタニル－２,４－ジメトキシ安息香酸
を合成する段階；及び
ｉｉｉ）Ｎ－ヒドロキシコハク酸イミド（ＨＯＳｕ）、Ｎ,Ｎ'－ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）の存在下で５－アダマンタニル－２－ヒドロキシ－４－メトキシ安息香酸又は５－アダマンタニル－２,４－ジメトキシ安息香酸とヒドロキシ基が置換され
たベンジルアミン又はフェネチルアミンを反応させ、アダマンタン基が置換された安息香酸アミド化合物を合成する段階を含んでいてよい。
ｉ）ジクロロメタン溶媒で酢酸と硫酸触媒存在下で２,４－ジヒドロキシ安息香酸と１
－アダマンタノルを室温で反応させ、５－アダマンタニル－２,４－ジヒドロキシ安息香
酸を合成する段階；
ｉｉ）水酸化ナトリウム又は水酸化カリウムの存在下で５－アダマンタニル－２,４－
ジヒドロキシ安息香酸とジメチルスルフェートを反応させ、５－アダマンタニル－２－ヒドロキシ－４－メトキシ安息香酸又は５－アダマンタニル－２,４－ジメトキシ安息香酸
を合成する段階；及び
ｉｉｉ）Ｎ－ヒドロキシコハク酸イミド（ＨＯＳｕ）、Ｎ,Ｎ'－ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）の存在下で５－アダマンタニル－２－ヒドロキシ－４－メトキシ安息香酸又は５－アダマンタニル－２,４－ジメトキシ安息香酸とヒドロキシ基が置換され
たベンジルアミン又はフェネチルアミンを反応させ、アダマンタン基が置換された安息香酸アミド化合物を合成する段階を含んでいてよい。
【0041】
前記製造過程を経て製造された５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロ
キシベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド、その異性体、その薬学的に許容可能
な塩、そのプロドラッグ、その水和物又はその溶媒和物は、抗酸化及び抗老化の効果がある。
キシベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド、その異性体、その薬学的に許容可能
な塩、そのプロドラッグ、その水和物又はその溶媒和物は、抗酸化及び抗老化の効果がある。
【0042】
本発明の一側面において、抗酸化及び抗老化効果のある５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド、その異性体、その薬学的に許容可能な塩、そのプロドラッグ、その水和物又はその溶媒和物を有効成分として含む組成物が提供される。
【0043】
本発明の一側面に係る組成物は、組成物の全重量を基準に０．０１質量％～２０質量％の範囲の前記化合物、その異性体、その薬学的に許容可能な塩、そのプロドラッグ、その水和物又はその溶媒和物を含んでいてよい。
【0044】
一観点において、前記５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシベン
ジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド、その異性体、その薬学的に許容可能な塩、そ
のプロドラッグ、その水和物又はその溶媒和物は、組成物の全重量を基準に０．０１質量％以上、０．０２質量％以上、０．０３質量％以上、０．０４質量％以上、０．０５質量％以上、０．１質量％以上、０．２質量％以上、０．３質量％以上、０．４質量％以上、０．５質量％以上、０．６質量％以上、０．７質量％以上、０．８質量％以上、０．９質量％以上、１．０質量％以上、２．０質量％以上、３．０質量％以上、４．０質量％以上
、４．１質量％以上、４．２質量％以上、４．３質量％以上４．４質量％以上、４．５質量％以上、４．６質量％以上、４．７質量％以上、４．８質量％以上、４．９質量％以上、又は５．０質量％以上であってよい。
ジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド、その異性体、その薬学的に許容可能な塩、そ
のプロドラッグ、その水和物又はその溶媒和物は、組成物の全重量を基準に０．０１質量％以上、０．０２質量％以上、０．０３質量％以上、０．０４質量％以上、０．０５質量％以上、０．１質量％以上、０．２質量％以上、０．３質量％以上、０．４質量％以上、０．５質量％以上、０．６質量％以上、０．７質量％以上、０．８質量％以上、０．９質量％以上、１．０質量％以上、２．０質量％以上、３．０質量％以上、４．０質量％以上
、４．１質量％以上、４．２質量％以上、４．３質量％以上４．４質量％以上、４．５質量％以上、４．６質量％以上、４．７質量％以上、４．８質量％以上、４．９質量％以上、又は５．０質量％以上であってよい。
【0045】
一観点において、前記５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシベン
ジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド、その異性体、その薬学的に許容可能な塩、そ
のプロドラッグ、その水和物又はその溶媒和物は、組成物の全重量を基準に２０質量％以下、１９．５質量％以下、１９質量％以下、１８質量％以下、１７質量％以下、１６質量％以下、１５質量％以下、１４質量％以下、１３質量％以下、１２質量％以下、１１質量％以下、１０質量％以下、９質量％以下、８質量％以下、７質量％以下、６質量％以下、５．９質量％以下、５．８質量％以下、５．７質量％以下、５．６質量％以下、５．５質量％以下、５．４質量％以下、５．３質量％以下、５．２質量％以下、又は５．１質量％以下であってよい。
ジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド、その異性体、その薬学的に許容可能な塩、そ
のプロドラッグ、その水和物又はその溶媒和物は、組成物の全重量を基準に２０質量％以下、１９．５質量％以下、１９質量％以下、１８質量％以下、１７質量％以下、１６質量％以下、１５質量％以下、１４質量％以下、１３質量％以下、１２質量％以下、１１質量％以下、１０質量％以下、９質量％以下、８質量％以下、７質量％以下、６質量％以下、５．９質量％以下、５．８質量％以下、５．７質量％以下、５．６質量％以下、５．５質量％以下、５．４質量％以下、５．３質量％以下、５．２質量％以下、又は５．１質量％以下であってよい。
【0046】
前記５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド、その異性体、その薬学的に許容可能な塩、そのプロドラッグ、その水和物又はその溶媒和物が前記範囲内で含まれる場合、本発明の意図した効果を奏するうえで適切であるだけでなく、組成物の安定性や安全性をいずれも満たすことができ、且つコスト対比効果の面でも前記範囲で含むことが好適である。具体的に、５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド、その異性体、その薬学的に許容可能な塩、そのプロドラッグ、その水和物又はその溶媒和物が前記範囲内で含まれる場合、毒性なしで効果的に抗酸化及び抗老化効能を得ることができる。
【0047】
一実施例において、前記組成物は、化粧料、食品、又は医薬組成物であってよい。
【0048】
本明細書に係る薬学組成物は、経口又は非経口の種々の剤形であってよい。製剤化する場合には、通常用いる充填剤、増量剤、結合剤、湿潤剤、崩壊剤、界面活性剤などの希釈剤又は賦形剤を用いて調剤される。経口投与のための固形製剤には、錠剤、丸剤、散剤、顆粒剤、軟質又は硬質のカプセル剤などが含まれ、これらの固形製剤は、一つ以上の化合物に少なくとも一つ以上の賦形剤、例えば、デンプン、炭酸カルシウム、スクロース（ｓｕｃｒｏｓｅ）又はラクトース（ｌａｃｔｏｓｅ）、ゼラチンなどを混ぜて調剤される。また、単純な賦形剤の他、ステアリン酸マグネシウム、タルクなどのような滑沢剤も用いられる。経口投与のための液状製剤としては、懸濁剤、内用液剤、乳剤、シロップ剤などが該当するが、多用される単純希釈剤である水、流動パラフィンの他、種々の賦形剤、例えば、湿潤剤、甘味剤、芳香剤、保存剤などが含まれていてよい。非経口投与のための製剤には、滅菌された水溶液、非水性溶剤、懸濁剤、乳剤、凍結乾燥製剤、座薬が含まれる。非水性溶剤、懸濁溶剤としては、プロピレングリコール（ｐｒｏｐｙｌｅｎｅ ｇｌｙｃｏｌ）、ポリエチレングリコール、オリーブオイルのような植物性油、オレイン酸エチルのような注射可能なエステルなどが用いられていてよい。座薬の基材としては、ウィテップゾール（ｗｉｔｅｐｓｏｌ）、マクロゴ－ル、ツイーン（ｔｗｅｅｎ）６１、カカオ脂、ラウリン脂、グリセロゼラチンなどが用いられていてよい。
【0049】
本発明に係る組成物の薬学的投与形態は、これらの薬学的に許容可能な塩の形態でも用いられていてよく、また単独で、或いは他の薬学的活性化合物との結合だけでなく適当な集合で用いられていてよい。前記塩としては、薬学的に許容されるものであれば特に限定されず、例えば、塩酸、硫酸、硝酸、リン酸、フッ化水素酸、臭化水素酸、蟻酸、酢酸、酒石酸、乳酸、クエン酸、フマル酸、マレイン酸、コハク酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、トルエンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸などを用いていてよい。
【0050】
本発明に係る組成物は、目的に応じて非経口投与又は経口投与をすることができ、一日に体重１ｋｇ当たり０．０１～５００ｍｇ、好ましくは０．１～１００ｍｇの投与量となるように１～数回に分けて投与していてよい。特定の患者に対する投与用量は、患者の体重、年齢、性別、健康状態、食餌、投与時間、投与方法、排泄率、疾患の重症度に応じて変えていてよい。
【0051】
本発明に係る薬学組成物は、それぞれ通常の方法にて散剤、顆粒剤、錠剤、軟質又は硬質カプセル剤、懸濁液、エマルジョン、シロップ、エアロゾルなどの経口型剤形、軟膏、クリームなどの外用剤、座薬、注射剤及び滅菌注射溶液などをはじめとした薬剤学的製剤に適合したいずれの形態でも剤形化して使用されていてよい。
【0052】
本発明に係る組成物は、ラット、ハツカネズミ、家畜、ヒトなどの哺乳動物に非経口、経口などの様々な経路から投与されていてよく、投与のあらゆる方式は予想できるが、例えば、経口、直腸、又は静脈、筋肉、皮下、子宮内硬膜又は脳血管内（ｉｎｔｒａｃｅｒｅｂｒｏｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒ）注射によって投与されていてよい。
【0053】
本発明の一側面において、食品組成物は健康機能食品組成物であってよい。
【0054】
本明細書に係る食品組成物の剤形は特に限定されないが、例えば、錠剤、顆粒剤、粉末剤、ドリンク剤のような液剤、キャラメル、ゲル、バーなどに剤形化されていてよい。各剤形の食品組成物は、有効成分の他、当該分野において通常的に用いられる成分を剤形又は使用目的に応じて当業者が困難なく適宜選定して配合していてよく、他の原料と同時に適用する場合、相乗効果が生じることがある。
【0055】
本明細書に係る食品組成物において、前記有効成分の投与量の決定は、当業者の水準内にあり、その１日投与用量は、例えば、０．１ｍｇ／ｋｇ／日～５０００ｍｇ／ｋｇ／日、より具体的には、１ｍｇ／ｋｇ／日～５００ｍｇ／ｋｇ／日であってよいが、これに制限されるものではなく、投与しようとする対象の年齢、健康状態、合併症などの多様な要因によって変わることがある。
【0056】
本明細書に係る食品組成物は、例えば、チューインガム、キャラメル製品、キャンディ類、氷菓子類、菓子類などの各種の食品類、清涼飲料、ミネラルウォーター、アルコール飲料などの飲料製品、ビタミンやミネラルなどを含む健康機能性食品類であってよい。
【0057】
前記したものの他、本発明の一側面に係る食品組成物は、様々な栄養剤、ビタミン、鉱物（電解質）、合成風味剤及び天然風味剤などの風味剤、着色剤及び増進剤（チーズ、チョコレートなど）、ペクチン酸及びその塩、アルギン酸及びその塩、有機酸、保護性コロイド増粘剤、ｐＨ調節剤、安定化剤、防腐剤、グリセリン、アルコール、炭酸飲料に用いられる炭酸化剤などを含んでいてよい。その他、本発明に係る機能性食品組成物は、天然果物ジュース及び果物ジュース飲料、並びに野菜飲料の製造のための果肉を含んでいてよい。このような成分は、独立して、又は組み合わせて用いていてよい。これらの添加剤の比率はさして重要ではないが、本発明の組成物１００重量部当たり０～約２０重量部の範囲で含まれるのが一般的である。
【0058】
前記化粧品組成物は、その剤形が特に限定されず、目的とするところに応じて適宜選択すればよい。例えば、スキンローション、スキンソフナー、スキントナー、アストリンゼント、ローション、ミルクローション、モイスチャーローション、栄養ローション、マッサージクリーム、栄養クリーム、モイスチャークリーム、ハンドクリーム、ファウンデーション、エッセンス、栄養エッセンス、パック、石鹸、クレンジングフォーム、クレジングローション、クレンジングクリーム、ボディーローション、及びボディークレンザーか
らなる群より選択されたいずれか一つ以上の剤形で製造されていてよいが、これらに制限されるものではない。
らなる群より選択されたいずれか一つ以上の剤形で製造されていてよいが、これらに制限されるものではない。
【0059】
本発明の剤形が、ペースト、クリーム、又はゲルである場合は、担体成分として、動物繊維、植物繊維、ワックス、パラフィン、デンプン、トラガカント、セルロース誘導体、ポリエチレングリコール、シリコン、ベントナイト、シリカ、タルク、又は酸化亜鉛などが用いられていてよい。
【0060】
本発明の剤形が、パウダー又はスプレーである場合は、担体成分として、ラクトース、タルク、シリカ、水酸化アルミニウム、ケイ酸カルシウム、又はポリアミドパウダーが用いられていてよく、特にスプレーである場合は、更に、クロロフルオロハイドロカーボン、プロパン／ブータン、又はジメチルエーテルのような推進剤を含んでいてよい。
【0061】
本発明の剤形が、溶液又は乳濁液の場合は、担体成分として、溶媒、溶媒和剤、又は乳濁化剤が用いられ、例えば、水、エタノール、イソプロパノール、エチルカーボネート、酢酸エチル、ベンジルアルコール、安息香酸ベンジル、プロピレングリコール、１,３－
ブチルグリコールオイル、グリセロール脂肪族エステル、ポリエチレングリコール、又はソルビタンの脂肪酸エステルがある。
ブチルグリコールオイル、グリセロール脂肪族エステル、ポリエチレングリコール、又はソルビタンの脂肪酸エステルがある。
【0062】
本発明の剤形が懸濁液である場合は、担体成分として、水、エタノール、又はプロピレングリコールのような液状希釈剤、エトキシル化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレンソルビトールエステル、及びポリオキシエチレンソルビタンエステルのような懸濁剤、微結晶性セルロース、アルミニウムメタヒドロキシド、ベントナイト、寒天、又はトラガカントなどが用いられていてよい。
【0063】
本発明の剤形が界面活性剤含有クレンジングである場合は、担体成分として、脂肪族アルコールスルフェート、脂肪族アルコールエーテルスルフェート、スルホサクシネートモノエステル、イセチオン酸、イミダゾリウム誘導体、メチルタウレート、サルコシネート、脂肪酸アミドエーテルスルフェート、アルキルアミドベタイン、脂肪族アルコール、脂肪酸グリセリド、脂肪酸ジエタノールアミド、植物性油、ラノリン誘導体、又はエトキシル化グリセロール脂肪酸エステルなどが用いられていてよい。
【0064】
前記有効成分の含量は特に制限されないが、組成物の総質量を基準として０．０１～２０質量％の範囲で含まれていてよい。前記有効成分が前記含量を満たす場合、副作用なしで優れた効能を奏することができる。
【0065】
前記化粧品組成物には機能性添加物及び一般的な化粧品組成物に含まれる成分が更に含まれていてよい。前記機能性添加物としては、水溶性ビタミン、油溶性ビタミン、高分子ペプチド、高分子多糖、スピンゴ脂質、及び海草エキスからなる群より選択された成分を含んでいてよい。
【0066】
本発明の化粧品組成物にはまた、前記機能性添加物と共に必要に応じて一般的な化粧品組成物に含まれる成分を配合してもよい。その他含まれる配合成分としては、油脂成分、保湿剤、エモリエント剤、界面活性剤、有機及び無機顔料、有機粉体、紫外線吸収剤、防腐剤、殺菌剤、酸化防止剤、植物抽出物、ｐＨ調整剤、アルコール、色素、香料、血行促進剤、冷感剤、制汗剤、精製水などが挙げられる。
【0067】
以下、実施例及び実験例を挙げて本発明の構成及び効果をより具体的に説明する。なお、これらの実施例及び実験例は、本発明についての理解を助けるために単に例示の目的から提供されたものであるに過ぎず、本発明の範疇及び範囲がこれらによって制限されるも
のではない。
のではない。
【0068】
［実施例］５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミドの製造
５－アダマンタン－１－イル－２,４－ジメトキシ安息香酸（０．６３４ｇ）、Ｎ－ヒ
ドロキシコハク酸イミド（０．２４ｇ）、Ｎ,Ｎ'－ジシクロヘキシルカルボジイミド（０．４３ｇ）をジオキサン（１０ｍＬ）に溶かして１２時間攪拌する。生成された固体をろ過し、そのろ過液を２,４－ジヒドロキシベンジルアミン臭素酸塩（０．５４ｇ）、中炭
酸ナトリウム（０．１８ｇ）、水（２ｍＬ）の混合溶液に滴下し、５０℃で２時間攪拌する。反応が終わった後、溶液の温度を室温に下げてから、１０％のＨＣｌ溶液で中和し、エチルアセテート（５０ｍＬ）で洗い流す。有機溶液層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過して、減圧濃縮した後、カラムクロマトグラフィーにて分離して、白色固体の目的物０．１４ｇを収得する。
５－アダマンタン－１－イル－２,４－ジメトキシ安息香酸（０．６３４ｇ）、Ｎ－ヒ
ドロキシコハク酸イミド（０．２４ｇ）、Ｎ,Ｎ'－ジシクロヘキシルカルボジイミド（０．４３ｇ）をジオキサン（１０ｍＬ）に溶かして１２時間攪拌する。生成された固体をろ過し、そのろ過液を２,４－ジヒドロキシベンジルアミン臭素酸塩（０．５４ｇ）、中炭
酸ナトリウム（０．１８ｇ）、水（２ｍＬ）の混合溶液に滴下し、５０℃で２時間攪拌する。反応が終わった後、溶液の温度を室温に下げてから、１０％のＨＣｌ溶液で中和し、エチルアセテート（５０ｍＬ）で洗い流す。有機溶液層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過して、減圧濃縮した後、カラムクロマトグラフィーにて分離して、白色固体の目的物０．１４ｇを収得する。
【0069】
前記白色固体をＮＭＲ分析で確認した結果、下記のようなシグナルを確認し、白色固体が５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミドであることを確認することができた。
【0070】
1H NMR(300MHz, DMSO-d6) δ 9.67 (s, 1H), 9.13 (s, 1H), 8.51 (m, 1H), 7.78 (m,1H), 6.92 (d, 1H, J = 8.1 Hz), 6.66 (s, 1H), 6.27 (s, 1H), 6.16 (d, 1H, J = 8.1 Hz), 4.30 (d, 2H, J = 5.4 Hz), 3.93 (s, 3H), 3.88 (s, 3H), 1.98 (s, 9H), 1.71 (s,
6H)
6H)
【0071】
以下、本発明の一効果について様々な実験例を挙げて説明するが、これは例示的なものに過ぎず、本発明の権利範囲を制限するものではない。
【0072】
細胞培養
ＲＡＷ２６４．７ ｃｅｌｌｓ（マウスマクロファージ細胞株（ｍｕｒｉｎｅ ｍａｒｃｒｏｐｈａｇｅ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅ）としてのＡＴＣＣ（Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ、ＭＤ、ＵＳＡ）から購入）を、３７℃、５％のＣＯ２下、ＦＢＳ（１０％ ｈｅａｔ－ｉｎａｃｔｉｖａｔｅｄ ｆｅｔａｌ ｂｏｖｉｎｅ ｓｅｒｕｍ；Ｇｉｂｃｏ,Ｇｒａｎｄ
Ｉｓｌａｎｄ、ＮＹ、ＵＳＡ）、ｇｌｕｔａｍｉｎｅ、ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ（ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ ａｎｄ ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｉｎ）下で補強したＲＰＭＩ １６４０培地で培養した。
ＲＡＷ２６４．７ ｃｅｌｌｓ（マウスマクロファージ細胞株（ｍｕｒｉｎｅ ｍａｒｃｒｏｐｈａｇｅ ｃｅｌｌ ｌｉｎｅ）としてのＡＴＣＣ（Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ、ＭＤ、ＵＳＡ）から購入）を、３７℃、５％のＣＯ２下、ＦＢＳ（１０％ ｈｅａｔ－ｉｎａｃｔｉｖａｔｅｄ ｆｅｔａｌ ｂｏｖｉｎｅ ｓｅｒｕｍ；Ｇｉｂｃｏ,Ｇｒａｎｄ
Ｉｓｌａｎｄ、ＮＹ、ＵＳＡ）、ｇｌｕｔａｍｉｎｅ、ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ（ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ ａｎｄ ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｉｎ）下で補強したＲＰＭＩ １６４０培地で培養した。
【0073】
すべての実験で細胞はセルスクレーパーで剥がした。実験で２×１０６ｃｅｌｌｓ／ｍＬの濃度で培養したとき、死んだ細胞の比率は１％以下であった（トリパンブルー分染法（Ｔｒｙｐａｎ ｂｌｕｅ ｄｙｅ ｅｘｃｌｕｓｉｏｎ）で確認した）。
【0074】
［実験例１］５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシベンジル）－
２,４－ジメトキシベンズアミドの細胞毒性試験
５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミドの抗炎症評価のために、適正な抽出物処理濃度を確認するために実験に使用した細胞における５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシベンジ
ル）－２,４－ジメトキシベンズアミドの濃度別の細胞毒性を確認した。
２,４－ジメトキシベンズアミドの細胞毒性試験
５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミドの抗炎症評価のために、適正な抽出物処理濃度を確認するために実験に使用した細胞における５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシベンジ
ル）－２,４－ジメトキシベンズアミドの濃度別の細胞毒性を確認した。
【0075】
継代培養中であったＲａｗ２６４．７ ｃｅｌｌをウェルプレートに１×１０６ｃｅｌｌ／ｗｅｌｌになるように細胞を敷いた。１８時間細胞を培養した後、５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド（図１において「ＡＰ７３６」という）の濃度が０～３０μＭになるように試料処理を施し
た。８時間又は２４時間培養器で培養した。細胞毒性効果は、通常のＭＴＴ法にて行った。培養の最後３時間前に１０μＬのＭＴＴ{３－［４,５－ｄｉｍｅｔｈｙｌｔｈｉａｚｏｌ－２－ｙｌ］－２,５－ｄｉｐｈｅｎｙｌｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ ｂｒｏｍｉｄｅ}溶液（１０ｍｇ／ｍＬ ｉｎ ｐｈｏｓｐｈａｔｅ－ｂｕｆｆｅｒｅｄ ｓａｌｉｎｅ、ｐＨ７．４）を各ウェルに添加した。１５％ ＳＤＳ（ｓｏｄｉｕｍ ｄｏｄｅｃｙｌ ｓｕｌｆａｔｅ）を各ウェルに添加して反応を終了させた後、ホルマザン結晶を溶解した。次いで、マイクロプレートリーダー上で５７０ｎｍ吸光度を測定した。
た。８時間又は２４時間培養器で培養した。細胞毒性効果は、通常のＭＴＴ法にて行った。培養の最後３時間前に１０μＬのＭＴＴ{３－［４,５－ｄｉｍｅｔｈｙｌｔｈｉａｚｏｌ－２－ｙｌ］－２,５－ｄｉｐｈｅｎｙｌｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ ｂｒｏｍｉｄｅ}溶液（１０ｍｇ／ｍＬ ｉｎ ｐｈｏｓｐｈａｔｅ－ｂｕｆｆｅｒｅｄ ｓａｌｉｎｅ、ｐＨ７．４）を各ウェルに添加した。１５％ ＳＤＳ（ｓｏｄｉｕｍ ｄｏｄｅｃｙｌ ｓｕｌｆａｔｅ）を各ウェルに添加して反応を終了させた後、ホルマザン結晶を溶解した。次いで、マイクロプレートリーダー上で５７０ｎｍ吸光度を測定した。
【0076】
その結果を図１に示した。５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシ
ベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミドは、１０及び２０μＭの濃度で８時間及び
２４時間Ｒａｗ２６４．７細胞に対して毒性を示さず、１００％近くの細胞生存率を確認し、また３０μＭMの濃度でも２４時間培養したとき、８０％近くの細胞生存率を確認し
た。
ベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミドは、１０及び２０μＭの濃度で８時間及び
２４時間Ｒａｗ２６４．７細胞に対して毒性を示さず、１００％近くの細胞生存率を確認し、また３０μＭMの濃度でも２４時間培養したとき、８０％近くの細胞生存率を確認し
た。
【0077】
［実験例２］５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシベンジル）－
２,４－ジメトキシベンズアミドの抗酸化評価（ＤＰＰＨ評価）
ＤＰＰＨフリーラジカル消去評価法は次のように行った。
２,４－ジメトキシベンズアミドの抗酸化評価（ＤＰＰＨ評価）
ＤＰＰＨフリーラジカル消去評価法は次のように行った。
【0078】
実施例で製造された５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシベンジ
ル）－２,４－ジメトキシベンズアミド（図２において「ＡＰ７３６」という）を０～２
００μｇ／ｍｌの濃度で調節した反応物とＤＰＰＨのメタノール溶液（０．２ｍＭ）を３０分間培養（ｉｎｃｕｂａｔｉｏｎ）し、その溶液の吸光度を５１７ｎｍで測定した。消去能は下記の数学式１のようにｃｏｎｔｒｏｌ ＤＰＰＨ ｓｏｌｕｔｉｏｎ（１００％）と比較した値を％と表示した。
ル）－２,４－ジメトキシベンズアミド（図２において「ＡＰ７３６」という）を０～２
００μｇ／ｍｌの濃度で調節した反応物とＤＰＰＨのメタノール溶液（０．２ｍＭ）を３０分間培養（ｉｎｃｕｂａｔｉｏｎ）し、その溶液の吸光度を５１７ｎｍで測定した。消去能は下記の数学式１のようにｃｏｎｔｒｏｌ ＤＰＰＨ ｓｏｌｕｔｉｏｎ（１００％）と比較した値を％と表示した。
【0079】
【数1】
【0080】
測定結果を図２に示した。ｙ軸はＤＰＰＨラジカル消去活性％を、ｘ軸は試料の濃度を表し、５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド（図２において「ＡＰ７３６」という）の濃度の増加に伴いラジカル消去％が増加したことを示し、参考物質としては強力な抗酸化剤であるｖｉｔａｍｉｎ
Ｃと比較した。前記実験の結果、５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒド
ロキシベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド（図２において「ＡＰ７３６」とい
う）は抗酸化剤の役割を果たし得るものと判断された。特に、安定性の面において、ｖｉｔａｍｉｎ Ｃに比べて優れた長所があると予想される。
Ｃと比較した。前記実験の結果、５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒド
ロキシベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド（図２において「ＡＰ７３６」とい
う）は抗酸化剤の役割を果たし得るものと判断された。特に、安定性の面において、ｖｉｔａｍｉｎ Ｃに比べて優れた長所があると予想される。
【0081】
［実験例３］５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシベンジル）－
２,４－ジメトキシベンズアミドの抗老化評価（ＭＭＰ－１ ａｓｓａｙ）
２,４－ジメトキシベンズアミドの抗老化評価（ＭＭＰ－１ ａｓｓａｙ）
【0082】
試料の抗老化効能を確認するために、紫外線（ＵＶ）により誘導されるマトリックスメタロプロテアーゼ－１（Ｍａｔｒｉｘ ｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅａｓｅ－１、ＭＭＰ－１）の発現をどれくらい抑制できるかを調べる実験を行った。
【0083】
ヒト線維芽細胞（ＨＳ６８ ｃｅｌｌｓ、ＡＴＣＣ（Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ、ＭＤ、ＵＳ
Ａ）から購入）をウェルプレートに各ウェル当たり７．５×１０４ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌで敷いた後、１０％ ＦＢＳを含むＤＭＥＭ（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ'ｓ Ｍｏｄｉｆｉｅｄ
Ｅａｇｌｅ'ｓ ｍｅｄｉｕｍ）を利用して２４時間培養した後、ＰＢＳ（Ｐｈｏｓｐ
ａｔｅ－ｂｕｆｆｅｒｅｄ ｓａｌｉｎｅ）で洗い流してからＰＢＳ ０．５ｍｌを入れ、紫外線を照射して、ＭＭＰ－１の発現を誘導した。Ｓｅｒｕｍ－Ｆｒｅｅ ＤＭＥＭに変えた後に実施例で製造された５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキ
シベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド（図３において「ＡＰ７３６」という）
処理を施し、一定時間（４８時間）の培養後に上層液を取り、その上層液の量をＭＭＰ－１ ＥＬＩＳＡ Ｋｉｔを利用して測定した。
Ａ）から購入）をウェルプレートに各ウェル当たり７．５×１０４ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌで敷いた後、１０％ ＦＢＳを含むＤＭＥＭ（Ｄｕｌｂｅｃｃｏ'ｓ Ｍｏｄｉｆｉｅｄ
Ｅａｇｌｅ'ｓ ｍｅｄｉｕｍ）を利用して２４時間培養した後、ＰＢＳ（Ｐｈｏｓｐ
ａｔｅ－ｂｕｆｆｅｒｅｄ ｓａｌｉｎｅ）で洗い流してからＰＢＳ ０．５ｍｌを入れ、紫外線を照射して、ＭＭＰ－１の発現を誘導した。Ｓｅｒｕｍ－Ｆｒｅｅ ＤＭＥＭに変えた後に実施例で製造された５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキ
シベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド（図３において「ＡＰ７３６」という）
処理を施し、一定時間（４８時間）の培養後に上層液を取り、その上層液の量をＭＭＰ－１ ＥＬＩＳＡ Ｋｉｔを利用して測定した。
【0084】
すなわち、ヒト真皮線維芽細胞株であるＨＳ６８ ｃｅｌｌｓに紫外線処理を施してＭＭＰ－１の発現量を増加させた後、それぞれの試料に処理を施してその発現量が減少したか否かを調べた。
【0085】
実験結果を図３に示した。ｘ軸は何の処理も施していないｃｏｎｔｒｏｌ群（ｙ軸１００％基準）と紫外線処理（ＮＴ）を施したときの発現量の増加（２００％）を示し、これにＭＭＰ－１発現を阻害すると知られているレチノイン酸（ＲＡ）処理を施した場合、発現量の減少が見られ、同様に、５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキ
シベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド（図３において「ＡＰ７３６」という）
の濃度を０．１、０．５、１μＭに増加させたときにＭＭＰ－１が減少する傾向を見せた。すなわち、実験例１において確認したのと同様、細胞毒性のない範囲で５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド（図３において「ＡＰ７３６」という）はＭＭＰ－１の発現を抑制した結果を示している。
シベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド（図３において「ＡＰ７３６」という）
の濃度を０．１、０．５、１μＭに増加させたときにＭＭＰ－１が減少する傾向を見せた。すなわち、実験例１において確認したのと同様、細胞毒性のない範囲で５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド（図３において「ＡＰ７３６」という）はＭＭＰ－１の発現を抑制した結果を示している。
【0086】
以下、前記したように本発明の一側面に係る抗酸化又は抗老化効果のある組成物の剤形例について説明するか、他の様々な剤形への応用も可能であり、且つ、これらは本発明を限定するためのものではなく、単に具体的に説明するためのものである。
【0087】
［剤形例１］健康食品
【0088】
５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド................１０ｍｇ
ビタミン混合物
ビタミンＡアセテート..............７０μｇ
ビタミンＥ.......................１．０ｍｇ
ビタミンＢ１.....................０．１３ｍｇ
ビタミンＢ２.....................０．１５ｍｇ
ビタミンＢ６.....................０．５ｍｇ
ビタミンＢ１２...................０．２μｇ
ビタミンＣ.......................１０ｍｇ
ビオチン.........................１０μｇ
ニコチン酸アミド.................１．７ｍｇ
葉酸.............................５０μｇ
パントテン酸カルシウム...........０．５ｍｇ
無機質混合物
硫酸第１鉄.......................１．７５ｍｇ
酸化亜鉛.........................０．８２ｍｇ
炭酸マグネシウム.................２５．３ｍｇ
第１リン酸カリウム...............１５ｍｇ
第２リン酸カルシウム.............５５ｍｇ
クエン酸カリウム.................９０ｍｇ
炭酸カルシウム...................１００ｍｇ
塩化マグネシウム.................２４．８ｍｇ
ビタミン混合物
ビタミンＡアセテート..............７０μｇ
ビタミンＥ.......................１．０ｍｇ
ビタミンＢ１.....................０．１３ｍｇ
ビタミンＢ２.....................０．１５ｍｇ
ビタミンＢ６.....................０．５ｍｇ
ビタミンＢ１２...................０．２μｇ
ビタミンＣ.......................１０ｍｇ
ビオチン.........................１０μｇ
ニコチン酸アミド.................１．７ｍｇ
葉酸.............................５０μｇ
パントテン酸カルシウム...........０．５ｍｇ
無機質混合物
硫酸第１鉄.......................１．７５ｍｇ
酸化亜鉛.........................０．８２ｍｇ
炭酸マグネシウム.................２５．３ｍｇ
第１リン酸カリウム...............１５ｍｇ
第２リン酸カルシウム.............５５ｍｇ
クエン酸カリウム.................９０ｍｇ
炭酸カルシウム...................１００ｍｇ
塩化マグネシウム.................２４．８ｍｇ
【0089】
前記のビタミン及びミネラル混合物の組成比は、比較的に健康食品に適合した成分を好適な実施例にて混合組成したが、その配合比は任意に変形実施してもよい。
【0090】
［剤形例２］健康飲料
５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド................１０ｍｇ
クエン酸..........................１０００ｍｇ
オリゴ糖..........................１００ｇ
タウリン..........................１ｇ
精製水............................残量
５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド................１０ｍｇ
クエン酸..........................１０００ｍｇ
オリゴ糖..........................１００ｇ
タウリン..........................１ｇ
精製水............................残量
【0091】
通常の健康飲料の製造方法により前記成分を混合してから、約１時間、８５℃で攪拌加熱した後、調製された溶液をろ過して滅菌する。
【0092】
［剤形例３］錠剤
５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド１ｍｇ、大豆抽出物５０ｍｇ、ブドウ糖１００ｍｇ、紅参抽出物５０ｍｇ、デンプン９６ｍｇ、及びマグネシウムステアレート４ｍｇを混合し、３０％エタノールを４０ｍｇ添加して顆粒を造粒した後、６０℃で乾燥し、打錠機を利用して錠剤に打錠する。
５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド１ｍｇ、大豆抽出物５０ｍｇ、ブドウ糖１００ｍｇ、紅参抽出物５０ｍｇ、デンプン９６ｍｇ、及びマグネシウムステアレート４ｍｇを混合し、３０％エタノールを４０ｍｇ添加して顆粒を造粒した後、６０℃で乾燥し、打錠機を利用して錠剤に打錠する。
【0093】
［剤形例４］顆粒剤
５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド１ｍｇ、大豆抽出物５０ｍｇ、ブドウ糖１００ｍｇ、及びデンプン６００ｍｇを混合し、３０％エタノールを１００ｍｇ添加して顆粒を造粒した後、６０℃で乾燥し、分包充填した。
５－アダマンタン－１－イル－Ｎ－（２,４－ジヒドロキシベンジル）－２,４－ジメトキシベンズアミド１ｍｇ、大豆抽出物５０ｍｇ、ブドウ糖１００ｍｇ、及びデンプン６００ｍｇを混合し、３０％エタノールを１００ｍｇ添加して顆粒を造粒した後、６０℃で乾燥し、分包充填した。
【0094】
［剤形例５］化粧水
下記の表１に表した組成にて通常の方法により化粧水を製造する。
下記の表１に表した組成にて通常の方法により化粧水を製造する。
【0095】
【表1】
【0096】
［剤形例６］栄養クリーム
下記の表２に表した組成にて通常の方法により栄養クリームを製造する。
下記の表２に表した組成にて通常の方法により栄養クリームを製造する。
【0097】
【表2】
【0098】
［剤形例７］マッサージクリーム
下記の表３に表した組成にて通常の方法によりマッサージクリームを製造する。
下記の表３に表した組成にて通常の方法によりマッサージクリームを製造する。
【0099】
【表3】
【0100】
［剤形例８］パック
下記の表４に表した組成にて通常の方法によりパックを製造する。
下記の表４に表した組成にて通常の方法によりパックを製造する。
【0101】
【表4】
【0102】
［剤形例９］ゲル
下記の表５に表した組成にて通常の方法によりゲルを製造する。
下記の表５に表した組成にて通常の方法によりゲルを製造する。
【0103】
【表5】
【0104】
［剤形例１０］軟膏
下記の表６に記載された組成にて通常の方法により軟膏を製造した。
下記の表６に記載された組成にて通常の方法により軟膏を製造した。
【0105】
【表6】
【図1】
【図2】
【図3】