(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】特許公報(B2)
(11)【特許番号】
(24)【登録日】2022-07-29
(45)【発行日】2022-08-08
(54)【発明の名称】死亡率のリスク予測のためのバイオマーカー
(51)【国際特許分類】
G01N 33/68 20060101AFI20220801BHJP
【ＦＩ】
G01N33/68
【請求項の数】
23
(21)【出願番号】P 2020196889
(22)【出願日】2020-11-27
(62)【分割の表示】P 2017520381の分割
【原出願日】2015-10-28
(65)【公開番号】P2021043218
(43)【公開日】2021-03-18
【審査請求日】2020-12-25
(31)【優先権主張番号】14190836.8
(32)【優先日】2014-10-29
(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP
(31)【優先権主張番号】14192653.5
(32)【優先日】2014-11-11
(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP
(73)【特許権者】
【識別番号】591003013
【氏名又は名称】エフ．ホフマン－ラ ロシュ アーゲー
【氏名又は名称原語表記】Ｆ． ＨＯＦＦＭＡＮＮ－ＬＡ ＲＯＣＨＥ ＡＫＴＩＥＮＧＥＳＥＬＬＳＣＨＡＦＴ
(74)【代理人】
【識別番号】100118902
【弁理士】
【氏名又は名称】山本 修
(74)【代理人】
【識別番号】100106208
【弁理士】
【氏名又は名称】宮前 徹
(74)【代理人】
【識別番号】100196508
【弁理士】
【氏名又は名称】松尾 淳一
(74)【代理人】
【識別番号】100157923
【弁理士】
【氏名又は名称】鶴喰 寿孝
(72)【発明者】
【氏名】ラティーニ，ロベルト
(72)【発明者】
【氏名】マッソン，セルジェ
(72)【発明者】
【氏名】ブロック，ディルク
(72)【発明者】
【氏名】ツァウグ，クリスティアン
(72)【発明者】
【氏名】ディーターレ，トーマス
(72)【発明者】
【氏名】カイザー，エーデルガルト
(72)【発明者】
【氏名】カール，ヨハン
(72)【発明者】
【氏名】ロルニー，ヴィンツェント
(72)【発明者】
【氏名】ヴィーンヒューズ－テレン，ウルスラ－ヘンリケ
【審査官】西浦 昌哉
(56)【参考文献】
【文献】国際公開第２０１４／０４０７５９（ＷＯ，Ａ１）
【文献】特表２０１３－５３６４２５（ＪＰ，Ａ）
【文献】特表２０１０－５１７０２３（ＪＰ，Ａ）
【文献】米国特許出願公開第２０１２／０２８６１５７（ＵＳ，Ａ１）
【文献】米国特許出願公開第２０１３／０３３８０２７（ＵＳ，Ａ１）
【文献】特表２０１０－５２０４６９（ＪＰ，Ａ）
【文献】特表２０１２－５２４２８２（ＪＰ，Ａ）
【文献】特表２０１２－５０６０３１（ＪＰ，Ａ）
【文献】特表２０１１－５１９０３９（ＪＰ，Ａ）
【文献】CHUGH, S. et al，Pilot study identifying myosin heavy chain 7, desmin, insulin-like growth factor 7, and annexin A2 as circulating biomarkers of human heart failure，Proteomics，2013年05月28日，Vol.13/No.15，p.2324-2334
【文献】MOTIWALA, S.R. et al，Measurement of Novel Biomarkers to Predict Chronic Heart Failure Outcomes and Left Ventricular Remodeling，Journal of Cardiovascular Translational Reswarch，2013年12月06日，Vol.7，p.250-261
(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)
Ｇ０１Ｎ ３３／４８－３３／６８
ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）
(57)【特許請求の範囲】
【請求項1】
被験体が慢性心不全に迅速に進行するリスクおよび／または慢性心不全によって入院するリスクおよび／または死亡するリスクを予測するための方法であって：（ａ）異常な中層短縮率（異常なＭＦＳ）の存在または非存在を評価された被験体由来試料中のＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、ＢＮＰ型ペプチド、心臓トロポニン、可溶性ＳＴ２（ｓＳＴ２）、ＦＧＦ－２３（線維芽細胞増殖因子２３）、増殖分化因子１５（ＧＤＦ－１５）、細胞間接着分子１（ＩＣＡＭ－１）、およびアンギオポエチン－２（ＡＮＧ２）からなる群より選択される少なくとも１つのバイオマーカーのレベルを測定し、そして
（ｂ）前記の少なくとも１つのバイオマーカーのレベルを参照レベルと比較する
工程を含む、前記方法。
【請求項2】
ＢＮＰ型ペプチドがＢＮＰまたはＮＴ－プロＢＮＰであり、そして／または心臓トロポニンがトロポニンＴまたはトロポニンＩである、請求項１の方法。
【請求項3】
異常なＭＦＳが前記被験体に存在する、請求項１または２の方法。
【請求項4】
少なくとも１つのバイオマーカーが、ＢＮＰ型ペプチド、ｓＳＴ２、ＩＧＦＢＰ７、心臓トロポニンおよびＦＧＦ－２３からなる群より選択される、請求項１～３のいずれか一項の方法。
【請求項5】
被験体が慢性心不全に迅速に進行するリスクおよび／または慢性心不全によって入院するリスクおよび／または死亡するリスクを予測するための方法であって：
（ａ）左心室肥大（ＬＶＨ）の存在または非存在を評価された被験体由来試料中のＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、ＢＮＰ型ペプチド、可溶性ＳＴ２（ｓＳＴ２）、ＦＧＦ－２３（線維芽細胞増殖因子２３）、増殖分化因子１５（ＧＤＦ－１５）、および細胞間接着分子１（ＩＣＡＭ－１）からなる群より選択される少なくとも１つのバイオマーカーのレベルを測定し、そして
（ｂ）前記の少なくとも１つのバイオマーカーのレベルを参照レベルと比較する
工程を含む、前記方法。
【請求項6】
ＢＮＰ型ペプチドがＢＮＰまたはＮＴ－プロＢＮＰである、請求項５の方法。
【請求項7】
ＬＶＨが前記被験体に存在する、請求項５または６の方法。
【請求項8】
少なくとも１つのバイオマーカーが、ＩＧＦＢＰ７、ｓＳＴ２、ＦＧＦ－２３、およびＧＤＦ－１５からなる群より選択される、請求項５～７のいずれか一項の方法。
【請求項9】
前記被験体が心不全の症状を示さない、請求項１～８のいずれか一項の方法。
【請求項10】
前記被験体が、ＡＣＣ／ＡＨＡ分類にしたがって病期Ａまたは病期Ｂと分類される心不全を患う、請求項１～９のいずれか一項の方法。
【請求項11】
異常な中層短縮率の存在または非存在を評価し、そして前記被験体が左心室肥大を患わない、請求項１～１０のいずれか一項の方法。
【請求項12】
前記被験体が６５歳またはそれより高齢であり、前記被験体が７５歳またはそれより高齢であり、あるいは被験体が８０歳またはそれより高齢である、請求項１～１１のいずれか一項の方法。
【請求項13】
被験体がヒト被験体であり、そして／または試料が血液、血漿または血清試料である、請求項１～１２のいずれか一項の方法。
【請求項14】
３年のウィンドウ期間内で被験体が慢性心不全に進行するリスクおよび／または慢性心不全によって入院するリスクおよび／または死亡するリスクを予測する、請求項１～１３のいずれか一項の方法。
【請求項15】
参照レベルよりも高い少なくとも１つのバイオマーカーのレベルが、被験体が慢性心不全に迅速に進行するリスクおよび／または慢性心不全によって入院するリスクおよび／または死亡するリスクを有することを示すか、あるいは参照レベルよりも低い少なくとも１つのバイオマーカーのレベルが、被験体が慢性心不全に迅速に進行するリスクおよび／または慢性心不全によって入院するリスクおよび／または死亡するリスクを持たないことを示す、請求項３、４、および７～１４のいずれか一項の方法。
【請求項16】
被験体が慢性心不全に迅速に進行するリスクおよび／または慢性心不全によって入院するリスクおよび／または死亡するリスクを予測するための方法であって：（ａ）異常なＭＦＳを患う被験体由来の試料中のＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、ＢＮＰ型ペプチド、心臓トロポニン、可溶性ＳＴ２（ｓＳＴ２）、ＦＧＦ－２３（線維芽細胞増殖因子２３）、増殖分化因子１５（ＧＤＦ－１５）、細胞間接着分子１（ＩＣＡＭ－１）、およびアンギオポエチン－２（ＡＮＧ２）からなる群より選択される少なくとも１つのバイオマーカーのレベルを測定し、そして
（ｂ）前記の少なくとも１つのバイオマーカーのレベルを参照レベルと比較する
工程を含む、前記方法。
【請求項17】
被験体が慢性心不全に迅速に進行するリスクおよび／または慢性心不全によって入院するリスクおよび／または死亡するリスクを予測するための方法であって：
（ａ）ＬＶＨを患う被験体由来の試料中のＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、ＢＮＰ型ペプチド、可溶性ＳＴ２（ｓＳＴ２）、ＦＧＦ－２３（線維芽細胞増殖因子２３）、増殖分化因子１５（ＧＤＦ－１５）、および細胞間接着分子１（ＩＣＡＭ－１）からなる群より選択される少なくとも１つのバイオマーカーのレベルを測定し、そして
（ｂ）前記の少なくとも１つのバイオマーカーのレベルを参照レベルと比較する
工程を含む、前記方法。
【請求項18】
被験体が慢性心不全に迅速に進行するリスクおよび／または慢性心不全によって入院するリスクおよび／または死亡するリスクを予測するため、ａ）前記被験体から得た心臓の心エコー画像であって、前記被験体における異常なＭＦＳの存在または非存在を評価することを可能にする前記画像、あるいはｂ）前記被験体における異常なＭＦＳの存在または非存在を評価することを可能にする心エコーデバイスと組み合わせた、被験体試料中のＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、ＢＮＰ型ペプチド、心臓トロポニン、可溶性ＳＴ２（ｓＳＴ２）、ＦＧＦ－２３（線維芽細胞増殖因子２３）、増殖分化因子１５（ＧＤＦ－１５）、細胞間接着分子１（ＩＣＡＭ－１）、およびアンギオポエチン－２（ＡＮＧ２）からなる群より選択される少なくとも１つのバイオマーカーの使用。
【請求項19】
被験体が慢性心不全に迅速に進行するリスクおよび／または慢性心不全によって入院するリスクおよび／または死亡するリスクを予測するため、ａ）前記被験体から得た心臓の心エコー画像であって、前記被験体におけるＬＶＨの存在または非存在を評価することを可能にする前記画像、あるいはｂ）前記被験体におけるＬＶＨの存在または非存在を評価することを可能にする心エコーデバイスと組み合わせた、被験体試料中のＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、ＢＮＰ型ペプチド、可溶性ＳＴ２（ｓＳＴ２）、ＦＧＦ－２３（線維芽細胞増殖因子２３）、増殖分化因子１５（ＧＤＦ－１５）、および細胞間接着分子１（ＩＣＡＭ－１）からなる群より選択される少なくとも１つのバイオマーカーの使用。
【請求項20】
被験体が慢性心不全に迅速に進行するリスクおよび／または慢性心不全によって入院するリスクおよび／または死亡するリスクを予測するため、ａ）前記被験体から得た心臓の心エコー画像であって、前記被験体における異常なＭＦＳの存在または非存在を評価することを可能にする前記画像、あるいはｂ）前記被験体における異常なＭＦＳの存在または非存在を評価することを可能にする心エコーデバイスと組み合わせた、被験体試料中のＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、ＢＮＰ型ペプチド、心臓トロポニン、可溶性ＳＴ２（ｓＳＴ２）、ＦＧＦ－２３（線維芽細胞増殖因子２３）、増殖分化因子１５（ＧＤＦ－１５）、細胞間接着分子１（ＩＣＡＭ－１）、およびアンギオポエチン－２（ＡＮＧ２）からなる群より選択されるバイオマーカーに結合する少なくとも１つの結合剤の使用。
【請求項21】
被験体が慢性心不全に迅速に進行するリスクおよび／または慢性心不全によって入院するリスクおよび／または死亡するリスクを予測するため、ａ）前記被験体から得た心臓の心エコー画像であって、前記被験体におけるＬＶＨの存在または非存在を評価することを可能にする前記画像、あるいはｂ）前記被験体におけるＬＶＨの存在または非存在を評価することを可能にする心エコーデバイスと組み合わせた、被験体試料中のＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、ＢＮＰ型ペプチド、可溶性ＳＴ２（ｓＳＴ２）、ＦＧＦ－２３（線維芽細胞増殖因子２３）、増殖分化因子１５（ＧＤＦ－１５）、および細胞間接着分子１（ＩＣＡＭ－１）からなる群より選択されるバイオマーカーに結合する少なくとも１つの結合剤の使用。
【請求項22】
前記バイオマーカーがＢＮＰ型ペプチドおよびＩＧＦＢＰ７である、請求項１～１７のいずれか一項の方法、あるいは請求項１８～２１のいずれか一項の使用。
【請求項23】
被験体が６５歳またはそれより高齢である、請求項１～１７および２２のいずれか一項の方法、あるいは請求項１８～２２のいずれか一項の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、被験体が慢性心不全に迅速に進行するリスクおよび／または慢性心不全によって入院するリスクおよび／または死亡するリスクを予測するための方法に関する。該方法は、被験体試料中のＢＮＰ型ペプチド、ＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、心臓トロポニン、可溶性ＳＴ２（ｓＳＴ２）、ＦＧＦ－２３（線維芽細胞増殖因子２３）、増殖分化因子１５（ＧＤＦ－１５）、細胞間接着分子１（ＩＣＡＭ－１）、およびアンギオポエチン－２（ＡＮＧ２）からなる群より選択される少なくとも１つのバイオマーカーの決定に基づく。該方法は、（ｉ）異常な中層（ｍｉｄｗａｌｌ）短縮率または（ｉｉ）左心室肥大の存在または非存在の評価をさらに含むことも可能である。本発明にさらに想定されるのは、本発明を実施するために適応させたデバイスである。
【発明の概要】
【0002】
背景技術
現代医学の目的は、個人化または個別化治療措置を提供することである。これらは、患者の個々の必要性またはリスクを考慮に入れた治療措置である。個人化または個別化治療措置は、さらに、潜在的な治療措置に関して決定することが必要とされる場合の手段としても考慮されるべきである。
現代医学の目的は、個人化または個別化治療措置を提供することである。これらは、患者の個々の必要性またはリスクを考慮に入れた治療措置である。個人化または個別化治療措置は、さらに、潜在的な治療措置に関して決定することが必要とされる場合の手段としても考慮されるべきである。
【0003】
心不全（ＨＦ）は、主要なそして増大しつつある公衆衛生上の問題である。米国では、およそ５００万人の患者がＨＦを有し、毎年、５０万人を超える患者が初めてＨＦと診断され、そして毎年、米国で２５万人を超える患者が主因としてＨＦで死亡する。心不全（ＨＦ）は、先進国における罹患率および死亡率の主因の１つである。集団が加齢し、そして心臓血管疾患を持つ患者の寿命がより長くなっているため、ＨＦの発生率および罹患率は増加しつつある。
【0004】
心不全は、症候性または無症候性であってもよい。無症候性心不全の被験体のあるものは、慢性心不全へ迅速に進行し、そしてしたがって、心不全による入院および／または死亡のリスクが上昇していることが知られる（Ｎｅｅｌａｎｄら， Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ
ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｃａｒｄｉｏｌｏｇｙ Ｖｏｌ．
６１， Ｎｏ． ２， ２０１３）。これらの被験体を可能な限り早期に同定することが重要であり、これは、これによって、慢性心不全への進行を防止するかまたは遅延させる療法的手段が可能になるであろうためである。疾患の迅速な進行の同定および適切な療法的介入は、しかし、満たされていない、大きな医学的必要性である（Ｎｅｅｌａｎｄら）。
ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｃａｒｄｉｏｌｏｇｙ Ｖｏｌ．
６１， Ｎｏ． ２， ２０１３）。これらの被験体を可能な限り早期に同定することが重要であり、これは、これによって、慢性心不全への進行を防止するかまたは遅延させる療法的手段が可能になるであろうためである。疾患の迅速な進行の同定および適切な療法的介入は、しかし、満たされていない、大きな医学的必要性である（Ｎｅｅｌａｎｄら）。
【0005】
Ｎｅｅｌａｎｄらはまた、左心室肥大を有する患者における心臓マーカーを決定する。心臓マーカーの決定に基づいて、全体集団における高リスク群が同定可能である。
ＷＯ ２０１４／０４０７５９は、ＮＴ－プロＢＮＰおよび心臓トロポニンなどの心臓マーカーを、画像化に基づく診断評価に供するべき被験体の同定に使用することも可能であることを開示する。
ＷＯ ２０１４／０４０７５９は、ＮＴ－プロＢＮＰおよび心臓トロポニンなどの心臓マーカーを、画像化に基づく診断評価に供するべき被験体の同定に使用することも可能であることを開示する。
【0006】
Ｚａｐｏｌｓｋｉらは、血液透析患者において行った断面研究において、異常なＭＦＳ（中層短縮率）およびＮＴプロＢＮＰレベル上昇の関連を記載する。調べた患者は非常に重症である（Ｚａｐｏｌｓｋｉら， ＢＭＣ Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃ Ｄｉｓｏｒｄ． ２０１２， １２：１００）。
【0007】
Ｓａｔｙａｎらは、血液透析患者における死亡リスクの同定のため、異常なＭＦＳと組
み合わせたＮＴプロＢＮＰ上昇のデータを提供する（Ｓａｔｙａｎ Ｓ， Ｌｉｇｈｔ ＲＰ， Ａｇａｒｗａｌ Ｒ Ａｍ Ｊ Ｋｉｄｎｅｙ Ｄｉｓ． ２００７ Ｄｅｃ ；５０（６）：１００９－１９）。
み合わせたＮＴプロＢＮＰ上昇のデータを提供する（Ｓａｔｙａｎ Ｓ， Ｌｉｇｈｔ ＲＰ， Ａｇａｒｗａｌ Ｒ Ａｍ Ｊ Ｋｉｄｎｅｙ Ｄｉｓ． ２００７ Ｄｅｃ ；５０（６）：１００９－１９）。
【0008】
Ｍａｓｓｏｎらは、異常な中層短縮率を伴うＮＴ－プロＢＮＰなどのいくつかの循環バイオマーカーの組み合わせを調べる（Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ． Ｎｏｖｅｍｂｅｒ ２５， ２０１４； １３０：Ａ１２３５８要約１２３５８：異常な左心室中層短縮率および循環バイオマーカー上昇は、全集団における高齢者において、高死亡率を予測する）。
【0009】
好適なことに、本発明の根底にある研究の背景において、被験体試料中のＢＮＰ型ペプチド、ＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、心臓トロポニン、可溶性ＳＴ２（ｓＳＴ２）、ＦＧＦ－２３（線維芽細胞増殖因子２３）、増殖分化因子１５（ＧＤＦ－１５）、細胞間接着分子１（ＩＣＡＭ－１）、およびアンギオポエチン－２（ＡＮＧ２）からなる群より選択される少なくとも１つのバイオマーカーのレベル測定を、被験体が異常なＭＦＳを患っているかどうかの評価と組み合わせると、慢性心不全に迅速に進行するリスクがある被験体ならびに／あるいは慢性心不全による入院および／または死亡のリスクがある被験体の信頼性がある同定が可能になることが示されてきている。本発明の根底にある研究の背景において、被験体試料中のＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、可溶性ＳＴ２（ｓＳＴ２）、ＦＧＦ－２３（線維芽細胞増殖因子２３）、ＧＤＦ１５（増殖分化因子１５）からなる群より選択される少なくとも１つのバイオマーカーのレベル測定を、被験体がＬＶＨに罹患しているかどうかの評価と組み合わせると、慢性心不全に迅速に進行するリスクがある被験体ならびに／あるいは慢性心不全による入院および／または死亡のリスクがある被験体の信頼性がある同定が可能になることがさらに示されてきている。
【0010】
したがって、本発明は、被験体が慢性心不全に迅速に進行するリスクおよび／または慢性心不全によって入院するリスクおよび／または死亡するリスクを予測するための方法であって：
（ａ）前記被験体において
（ｉ）異常な中層短縮率（異常なＭＦＳ）の存在または非存在、および／または
（ｉｉ）左心室肥大（ＬＶＨ）の存在または非存在
を評価し、
（ｂ）被験体試料中のＢＮＰ型ペプチド、ＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、心臓トロポニン、可溶性ＳＴ２（ｓＳＴ２）、ＦＧＦ－２３（線維芽細胞増殖因子２３）、増殖分化因子１５（ＧＤＦ－１５）、細胞間接着分子１（ＩＣＡＭ－１）、およびアンギオポエチン－２（ＡＮＧ２）からなる群より選択される少なくとも１つのバイオマーカーのレベルを測定し、そして
（ｃ）前記の少なくとも１つのバイオマーカーのレベル（単数または複数）を参照レベル（単数または複数）と比較する
工程を含む、前記方法に関する。
（ａ）前記被験体において
（ｉ）異常な中層短縮率（異常なＭＦＳ）の存在または非存在、および／または
（ｉｉ）左心室肥大（ＬＶＨ）の存在または非存在
を評価し、
（ｂ）被験体試料中のＢＮＰ型ペプチド、ＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、心臓トロポニン、可溶性ＳＴ２（ｓＳＴ２）、ＦＧＦ－２３（線維芽細胞増殖因子２３）、増殖分化因子１５（ＧＤＦ－１５）、細胞間接着分子１（ＩＣＡＭ－１）、およびアンギオポエチン－２（ＡＮＧ２）からなる群より選択される少なくとも１つのバイオマーカーのレベルを測定し、そして
（ｃ）前記の少なくとも１つのバイオマーカーのレベル（単数または複数）を参照レベル（単数または複数）と比較する
工程を含む、前記方法に関する。
【0011】
好ましくは、リスクは、被験体が慢性心不全に迅速に進行するリスクおよび／または慢性心不全によって入院するリスクおよび／または死亡するリスクを予測するか、またはリスクの予測を提供する、さらなる工程ｄ）を実行することによって予測される。前記工程は、工程ａ）、ｂ）およびｃ）の結果に基づく。
【図面の簡単な説明】
【0012】
【図1】すべての患者においてバイオマーカー群（ＮＴプロＢＮＰ、ＭＦＳ）にしたがって層別化した死亡発生率。
【図2】すべての患者においてバイオマーカー群（ｃＴｎＴ、ＭＦＳ）にしたがって層別化した死亡発生率。
【図3】すべての患者においてバイオマーカー群（ＩＧＦＢＰ７、ＭＦＳ）にしたがって層別化した死亡発生率。
【図4】すべての患者においてバイオマーカー群（ｓＳＴ２、ＭＦＳ）にしたがって層別化した死亡発生率。
【図5】すべての患者においてバイオマーカー群（ＦＧＦ２３、ＭＦＳ）にしたがって層別化した死亡発生率。
【図6】正常ＬＶ重量を有する患者においてバイオマーカー群（ＮＴプロＢＮＰ、ＭＦＳ）にしたがって層別化した死亡発生率。
【図7】正常ＬＶ重量を有する患者においてバイオマーカー群（ｃＴｎＴ、ＭＦＳ）にしたがって層別化した死亡発生率。
【図8】正常ＬＶ重量を有する患者においてバイオマーカー群（ＩＧＦＢＰ７、ＭＦＳ）にしたがって層別化した死亡発生率。
【図9】正常ＬＶ重量を有する患者においてバイオマーカー群（ｓＳＴ２、ＭＦＳ）にしたがって層別化した死亡発生率。
【図10】正常ＬＶ重量を有する患者においてバイオマーカー群（ＦＧＦ２３、ＭＦＳ）にしたがって層別化した死亡発生率。
【図11】すべての患者においてバイオマーカー群（ＮＴプロＢＮＰ、ＩＧＦＢＰ７、ＬＶＨ）にしたがって層別化した死亡発生率。
【図12】すべての患者においてバイオマーカー群（ＮＴプロＢＮＰ、ＩＧＦＢＰ７、ＭＦＳ）にしたがって層別化した死亡発生率。
【発明を実施するための形態】
【0013】
本発明の方法は、好ましくはｅｘ ｖｉｖｏまたはｉｎ ｖｉｔｒｏ法である。さらに、明確に上述したものに加えた工程を含むことも可能である。例えば、さらなる工程は、試料の前処理、または方法によって得られる結果の評価であることも可能である。方法を手動で実施してもよいし、または自動化によって補助してもよい。好ましくは、測定工程、計算工程および比較工程は、全体として、または部分的に、自動化によって、例えば測定用の適切なロボットおよびセンサー装置、計算工程におけるデータプロセシングデバイス上にコンピュータ実装された計算アルゴリズム、あるいは比較工程におけるデータプロセシングデバイス上の比較および／または診断アルゴリズムによって、補助されてもよい。
【0014】
本発明にしたがって、被験体が慢性心不全に迅速に進行するリスクおよび／または慢性心不全によって入院するリスクおよび／または死亡するリスクを予測するものとする。したがって、そのリスクがある被験体またはそのリスクがない被験体を同定することも可能である。用語「リスクを予測する」は、本明細書において、好ましくは、被験体が慢性心不全に迅速に進行する可能性を評価すること、ならびに／あるいは慢性心不全による入院および／または死亡の可能性を評価することを指す。より好ましくは、特定の時間ウィンドウ内のリスク／可能性を予測する。本発明の好ましい態様において、予測ウィンドウは、好ましくは、少なくとも１年、少なくとも２年、少なくとも３年、少なくとも４年、少なくとも５年、または少なくとも１０年、あるいは任意の中間の時間範囲の間隔である。本発明の特定の好ましい態様において、予測ウィンドウは、好ましくは５年、より好ましくは４年、または最も好ましくは３年の間隔である。本発明の別の好ましい態様において、予測ウィンドウは、被験体の全寿命の範囲であろう。好ましくは、前記予測ウィンドウは、試験しようとする試料を得た時点から計算する。
【0015】
当業者に理解されるであろうように、こうした予測は、通常、被験体の１００％に関して正しいことは意図されない。しかし、該用語は、適切でそして正しい方式で、被験体の統計的に有意な部分に関して、予測を行うことが可能であることを必要とする。部分が統計的に有意であるかどうかは、多様な周知の統計評価ツール、例えば信頼区間の決定、ｐ
－値決定、スチューデントｔ検定、マン－ホイットニー検定等を用いて、当業者によって、さらなる面倒を伴わずに決定可能である。詳細は、ＤｏｗｄｙおよびＷｅａｒｄｅｎ， Ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ ｆｏｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ， Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ， Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ １９８３に見られる。好ましい信頼区間は、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％である。ｐ値は、好ましくは、０．１、０．０５、０．０１、０．００５、または０．０００１である。好ましくは、本発明によって想定される可能性は、増加した、正常のまたは減少したリスクの予測が、所定のコホートまたは集団の被験体の少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、または少なくとも９０％に関して正しいことを可能にする。該用語は、好ましくは、被験体集団における平均リスクに比較した際、被験体リスクが上昇しているかまたは減少しているかどうかを予測することに関する。
－値決定、スチューデントｔ検定、マン－ホイットニー検定等を用いて、当業者によって、さらなる面倒を伴わずに決定可能である。詳細は、ＤｏｗｄｙおよびＷｅａｒｄｅｎ， Ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ ｆｏｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ， Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ， Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ １９８３に見られる。好ましい信頼区間は、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％である。ｐ値は、好ましくは、０．１、０．０５、０．０１、０．００５、または０．０００１である。好ましくは、本発明によって想定される可能性は、増加した、正常のまたは減少したリスクの予測が、所定のコホートまたは集団の被験体の少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、または少なくとも９０％に関して正しいことを可能にする。該用語は、好ましくは、被験体集団における平均リスクに比較した際、被験体リスクが上昇しているかまたは減少しているかどうかを予測することに関する。
【0016】
用語「リスクを予測する」は、本明細書において、本発明の方法によって分析される被験体を、慢性心不全に迅速に進行するリスクおよび／または慢性心不全によって入院するリスクおよび／または死亡するリスクがある被験体群、あるいは慢性心不全に迅速に進行するリスクおよび／または慢性心不全によって入院するリスクおよび／または死亡するリスクがない被験体群のいずれかに割り当てる。リスクがある被験体は、好ましくは、慢性心不全に迅速に進行するリスクおよび／または慢性心不全によって入院するリスクおよび／または死亡するリスクが上昇している（特に予測ウィンドウ内で）被験体である。好ましくは、前記リスクは、被験体のコホート（すなわち被験体の群）における平均リスクに比較した際、上昇している。リスクがない被験体は、好ましくは、慢性心不全に迅速に進行するリスクおよび／または慢性心不全によって入院するリスクおよび／または死亡するリスクが減少している（特に予測ウィンドウ内で）被験体である。好ましくは、前記リスクは、被験体のコホート（すなわち被験体の群）における平均リスクに比較した際、減少している。したがって、本発明の方法は、上昇したリスクまたは減少したリスクの間を区別することが可能である。リスクがある被験体は、好ましくは３または４年の予測ウィンドウ内で、好ましくは１２％またはそれより高い、あるいはより好ましくは１５％またはそれより高い、あるいは最も好ましくは２０％またはそれより高い、慢性心不全に迅速に進行するリスクおよび／または慢性心不全によって入院するリスクおよび／または死亡するリスクを有する。リスクがない被験体は、好ましくは３または４年の予測ウィンドウ内で、好ましくは１０％またはそれより低い、より好ましくは８％またはそれより低い、あるいは最も好ましくは７％またはそれより低い、慢性心不全に迅速に進行するリスクおよび／または慢性心不全によって入院するリスクおよび／または死亡するリスクを有する。
【0017】
１つの態様において、入院のリスクを予測する。表現「入院」は、本明細書において、好ましくは、被験体が、病院に収容される、特に入院患者として収容されることを意味する。入院は、慢性心不全によるべきである。したがって、慢性心不全は、入院の原因であるものとする。１つの態様において、被験体が慢性心不全に迅速に進行するリスクを予測する。表現「慢性心不全に迅速に進行する」は、当業者によく理解される。慢性心不全に迅速に進行する被験体は、好ましくは、本明細書の別の箇所に記載するようなウィンドウ期間内に、慢性心不全に進行する被験体である。慢性心不全は、好ましくは、ＡＣＣ／ＡＨＡ分類（ＡＣＣ／ＡＨＡ分類に関しては、本明細書の別の箇所を参照されたい）にしたがって、病期ＣまたはＤと分類される心不全を意味する。試験しようとする被験体がＡＣＣ／ＡＨＡ分類にしたがって、病期Ａと分類される心不全を有する場合（または被験体が心不全を患っていない場合）、用語「慢性心不全」は、病期Ｂ、ＣまたはＤと分類される心不全を意味することも可能である。
【0018】
１つの態様において、死亡リスクを予測する。用語「死亡」は、本明細書において、好ましくは、任意の原因による死亡、そしてより好ましくは、心臓の原因による死亡、そして最も好ましくは、心不全による死亡に関する。
【0019】
句「予測を提供する」は、本明細書において、被験体試料における、本明細書に言及するようなバイオマーカーのレベルに関連して生成される情報またはデータを用いて、そして（ｉ）異常なＭＦＳまたは（ｉｉ）ＬＶＨの存在または非存在に関連づけて、本明細書に言及するようなリスクを予測することを指す。情報またはデータは、書面、口頭または電子の任意の型であることも可能である。いくつかの態様において、生成される情報またはデータの使用には、通信、提示、報告、保存、送達、移動、供給、伝達、分配、またはその組み合わせが含まれる。いくつかの態様において、通信、提示、報告、保存、送達、移動、供給、伝達、分配、またはその組み合わせは、計算デバイス、アナライザー装置またはその組み合わせによって実行される。いくつかのさらなる態様において、通信、提示、報告、保存、送達、移動、供給、伝達、分配、またはその組み合わせは、実験または医学専門職によって実行される。いくつかの態様において、情報またはデータには、参照レベル（単数または複数）に対する、バイオマーカー（単数または複数）のレベルの比較が含まれる。いくつかの態様において、情報またはデータには、被験体がリスクを有すると診断される指標が含まれる。
【0020】
「被験体」は、本明細書において、好ましくは哺乳動物である。哺乳動物には、限定されるわけではないが、家畜動物（例えばウシ、ヒツジ、ネコ、イヌ、およびウマ）、霊長類（例えばヒトおよび非ヒト霊長類、例えばサル（ｍｏｎｋｅｙ））、ウサギ、および齧歯類（例えばマウスおよびラット）が含まれる。好ましくは、被験体はヒト被験体である。好ましくは、被験体は６５歳またはそれより高齢であり、より好ましくは、被験体は７５歳またはそれより高齢であり、最も好ましくは、被験体は８０歳またはそれより高齢である。用語「被験体」および「患者」は、本明細書において、交換可能に用いられる。
【0021】
本発明の好ましい態様において、被験体は、心不全に関して見かけ上健康である。心不全に関して見かけ上健康である被験体は、好ましくは、心不全の症状を示さない（そしてしたがって、心不全に関して無症候性である）。心不全の症状を示さない被験体は、好ましくは身体活動に制限がなく、そして通常の身体活動が、過度の息切れ、疲労、または動悸を生じる。しかし、被験体がＡＣＣ／ＡＨＡ分類にしたがって病期ＡまたはＢと分類される心不全、特にＡＣＣ／ＡＨＡ分類にしたがって病期Ａまたは初期Ｂと分類される心不全を有することが想定される。
【0022】
ＡＣＣ／ＡＨＡ分類は、米国心臓病学会および米国心臓協会によって発展された心不全の分類である（分類に関しては、Ｊ． Ａｍ． Ｃｏｌｌ． Ｃａｒｄｉｏｌ． ２００１；３８；２１０１－２１１３， ２００５年改訂を参照されたい。本明細書にその全体が援用されるＪ． Ａｍ． Ｃｏｌｌ． Ｃａｒｄｉｏｌ． ２００５；４６；ｅ１－ｅ８２を参照されたい）。分類はまた、やはり本明細書に援用されるＭｕｒｅｄｄｕら， Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｈｅａｒｔ Ｆａｉｌｕｒｅ （２０１２） １４， ７１８－７２９にも記載される。４つの病期、Ａ、Ｂ、ＣおよびＤが定義される。病期ＡおよびＢはＨＦ（心不全）ではないが、「真の」ＨＦを発展させる前の患者の早期同定を補助すると見なされる。病期ＡおよびＢの患者は、ＨＦを発展させるリスク要因を持つ患者と定義するのが最適である。例えば、左心室（ＬＶ）機能障害、肥大、または幾何学的心室変形をいまだ示さない、冠動脈疾患、高血圧、または糖尿病を有する患者は、病期Ａと見なされるであろうし、一方、無症候性であるが、ＬＶ機能障害を示す患者は、病期Ｂと指定されるであろう。次いで、病期Ｃは、根底にある構造的心臓疾患に関連したＨＦの現在のまたは過去の症状を伴う患者（ＨＦ患者の大部分）を示し、そして病期Ｄは、真性の難治性ＨＦの患者を指定する。ＡＣＣ／ＡＨＡ分類および用語「心不全」はまた、その全体が本明細書に援用される、ＷＯ ２０１２／０２５３５５にも説明される。
【0023】
好ましくは、本発明の背景において、被験体は損なわれた腎機能を持たない。好ましくは被験体は、腎不全を患わず、特に被験体は急性、慢性および／または末期腎不全を患わない。したがって、被験体は、好ましくは、透析被験体ではない。
【0024】
被験体が損なわれた腎機能を示さないかどうかを評価する方法が当該技術分野に周知である。知られており、そして適切と見なされる任意の手段によって、腎障害を診断することも可能である。特に、糸球体濾過率（ＧＦＲ）によって、腎機能を評価することも可能である。例えば、Ｃｏｃｋｇｒｏｆｔ－ＧａｕｌｔまたはＭＤＲＤ公式によって、ＧＦＲを計算することも可能である（Ｌｅｖｅｙ １９９９， Ａｎｎａｌｓ ｏｆ Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ， ４６１－４７０）。ＧＦＲは、単位時間あたりに、腎糸球体毛細管からボウマン嚢内に濾過される液体の体積である。臨床的には、これは、しばしば、腎機能を決定するために用いられる。Ｃｏｃｋｇｒｏｆｔ Ｇａｕｌｔ公式またはＭＤＲＤ公式などの公式から得られるすべての計算は概算を送達し、そして血漿内にインスリンを注入することによる「真の」ＧＦＲではない。インスリンは糸球体濾過後には腎臓によって再吸収されないため、その排出速度は、糸球体フィルターを通過する水および溶質の濾過速度に正比例する。しかし、臨床診察においては、ＧＦＲを測定するためには、クレアチニンクリアランスが用いられる。クレアチニンは、内因性の分子であり、体において合成され、糸球体によって自由に濾過される（しかしまた、非常に少量、腎尿細管によって分泌される）。クレアチニンクリアランス（ＣｒＣｌ）は、したがって、ＧＦＲの近似値である。ＧＦＲは、典型的には、１分あたりのミリリットルで記録される（ｍＬ／分）。男性に関するＧＦＲの正常範囲は、９７～１３７ｍＬ／分であり、女性に関するＧＦＲの正常範囲は、８８～１２８ｍｌ／分である。したがって、腎機能障害を示さない被験体のＧＦＲは、この範囲内であることが特に意図される。さらに、前記被験体は、好ましくは、０．９ｍｇ／ｄｌより低い、より好ましくは１．１ｍｇ／ｄｌより低い、そして最も好ましくは、１．３ｍｇ／ｄｌより低い血液クレアチニンレベル（特に血清クレアチニンレベル）を有する。
【0025】
本発明の前述の方法の工程（ａ）は、２つの代替態様：（ｉ）および（ｉｉ）を含む。代替（ｉ）にしたがって、異常な中層短縮率（異常なＭＦＳ）の存在または非存在を評価する。代替（ｉｉ）にしたがって、左心室肥大（ＬＶＨ）の存在または非存在を評価する。
【0026】
本発明の方法の背景において、被験体のリスクは、被験体が左心室肥大を患う前であっても予測可能であることが示されてきている（態様（ｉ））。しかし、被験体がＬＶＨを患っている場合、リスクはまた信頼性をもって予測可能である（態様（ｉｉ））。
【0027】
前述の方法の工程（ａ）の態様（ｉ）を実行する場合、被験体は好ましくはＬＶＨを患わない。用語「左心室肥大」は当該技術分野に周知である。左心室肥大に関する詳細な概観は、例えば標準的な教科書に見出されうる（Ｓｗａｍｙ Ｃｕｒｒ Ｃａｒｄｉｏｌ Ｒｅｐ（２０１０）１２：２７７－２８２を参照されたい）。ＬＶＨは、心電図、心エコー、または心磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）によって、検出可能である。好ましくは、ＬＶＨは心エコーによって検出される。さらに、ＬＶＨ診断基準が当該技術分野に周知である（Ｍａｎｃｉａら， Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｈｅａｒｔ Ｊ． ２００７， ２８： １４６２， Ｄｉｅ Ｉｎｎｅｒｅ Ｍｅｄｉｚｉｎ： Ｒｅｆｅｒｅｎｚｗｅｒｋ ｆｕｅｒ ｄｅｎ Ｆａｃｈａｒｚｔ －Ｗｏｌｆｇａｎｇ Ｇｅｒｏｋ－ ２００７， ２９３ページ， Ｓｗａｍｙ Ｃｕｒｒ Ｃａｒｄｉｏｌ Ｒｅｐ（２０１０）１２：２７７－２８２）。用語「左心室肥大」（「ＬＶＨ」と略される）は、本明細書において、好ましくは、心室壁の肥厚に関連する。ＬＶＨは、好ましくは、心臓に対する慢性に増加した作業負荷に対する反応である。動脈性高血圧を患う患者において見出されるＬＶＨは、治療が必要な疾患である。本発明の背景において、リスクは、被験体がＬＶＨを患う前に予測される。したがって、試験される被験体は、好ましくはＬＶＨを患わない。ＬＶＨを患わない被験体は、好ましくは、正常左心室重量を有する。
【0028】
しかし、前述の方法の工程（ａ）の態様（ｉ）を実行する場合、被験体がＬＶＨを患っている可能性もあることもまた想定される。
ＬＶＨの診断、そしてしたがって左心室重量の評価には、好ましくは、当該技術分野に知られる公式にしたがった、左心室重量の計算とともに、隔壁直径、左心室後方壁厚および拡張期直径の測定が含まれる。ＬＶＨを診断するための特に好ましい基準が、例えば、ガイドラインに開示される（Ｍａｎｃｉａら， Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｈｅａｒｔ Ｊ． ２００７， ２８： １４６２）。好ましくは、ＬＶＨの診断、そしてしたがって左心室重量の評価には、Ｃｏｒｎｅｌｌ電圧基準、Ｃｏｒｎｅｌｌ積基準、Ｓｏｋｏｌｏｗ－Ｌｙｏｎ電圧基準またはＲｏｍｈｉｌｔ－Ｅｓｔｅｓポイントスコア系を用いる（例えば、Ｍａｎｃｉａら， Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｈｅａｒｔ Ｊ． ２００７， ２８：１４６２を参照されたい）。
ＬＶＨの診断、そしてしたがって左心室重量の評価には、好ましくは、当該技術分野に知られる公式にしたがった、左心室重量の計算とともに、隔壁直径、左心室後方壁厚および拡張期直径の測定が含まれる。ＬＶＨを診断するための特に好ましい基準が、例えば、ガイドラインに開示される（Ｍａｎｃｉａら， Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｈｅａｒｔ Ｊ． ２００７， ２８： １４６２）。好ましくは、ＬＶＨの診断、そしてしたがって左心室重量の評価には、Ｃｏｒｎｅｌｌ電圧基準、Ｃｏｒｎｅｌｌ積基準、Ｓｏｋｏｌｏｗ－Ｌｙｏｎ電圧基準またはＲｏｍｈｉｌｔ－Ｅｓｔｅｓポイントスコア系を用いる（例えば、Ｍａｎｃｉａら， Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｈｅａｒｔ Ｊ． ２００７， ２８：１４６２を参照されたい）。
【0029】
被験体が男性である場合、以下が当てはまる：被験体は、男性被験体の左心室重量指数が、好ましくは１０５ｇ／ｍ２に等しいかまたはそれより低い、あるいはより好ましくは１１０ｇ／ｍ２に等しいかまたはそれより低い、あるいは最も好ましくは１１５ｇ／ｍ２に等しいかまたはそれより低い場合、正常な左心室重量を有する（そしてしたがってＬＶＨを患っていない）と見なされる。被験体が女性である場合、以下が当てはまる：被験体は、被験体の左心室重量指数が、好ましくは８５ｇ／ｍ２に等しいかまたはそれより低い、あるいはより好ましくは９０ｇ／ｍ２に等しいかまたはそれより低い、あるいは最も好ましくは９６ｇ／ｍ２に等しいかまたはそれより低い場合、正常な左心室重量を有すると見なされる。正常な左心室重量を有する被験体はＬＶＨを患わないことが理解されるものとする（例えば、Ｄｒａｚｎｅｒ ＭＨ， Ｄｒｉｅｓ ＤＬ， Ｐｅｓｈｏｃｋ ＲＭ， Ｃｏｏｐｅｒ ＲＳ， Ｋｌａｓｓｅｎ Ｃ， Ｋａｚｉ Ｆ，Ｗｉｌｌｅｔｔ Ｄ， Ｖｉｃｔｏｒ ＲＧ． 左心室肥大は、一般集団において、白人よりも黒人においてより蔓延している：ダラス心臓研究 Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ． ２００５；４６：１２４－１２９）。
【0030】
本発明の方法の工程（ａ）、態様（ｉ）において、異常な中層短縮率（異常なＭＦＳ）の存在または非存在が評価されるものとする。したがって、被験体が異常なＭＦＳを患うかどうかを評価する。異常なＭＦＳを患わない被験体は正常ＭＦＳを有する。
【0031】
表現「中層短縮率」は、当該技術分野に周知である（本明細書において、「ＭＦＳ」と略される）。ＭＦＳは、ＬＶ機能不全の初期徴候であり、ＬＶ中層短縮率減少である。好ましくは、中層短縮率は、１５％より低い場合、異常と見なされる。このカットオフポイントは、ＨＦの設定において参照値として用いられてきており、そして高血圧被験体における予後関連が立証されてきている（Ｍｕｒｒｅｄｕら， Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｈｅａｒｔ Ｆａｉｌｕｒｅ（２０１２）１４， ７１８－７２９を参照されたい）。やはり好ましくは、中層短縮率は、１４％または１３％より低い場合、異常と見なされる。さらに、中層短縮率は、１５％より高い（またはそれに等しい）場合、正常と見なされる。やはり好ましくは、中層短縮率は、１６％または１７％より高い場合、正常と見なされる。
【0032】
中層短縮率（またはＬＶＨ）を決定する方法、そしてしたがって、被験体における異常な中層短縮率（またはＬＶＨ）の存在または非存在を評価する方法は、当該技術分野に周知である。好ましくは、評価は、試験しようとする被験体から得られる心臓の心エコー画像に基づく。画像は、異常な中層短縮率（またはＬＶＨ）の存在または非存在を評価することを可能にするはずである。これらは、適切であるようにみえる任意の心エコー技術、
特にＭモード心エコー、２Ｄスペックルトラッキング心エコー、ドップラー心エコー、または二次元（２Ｄ）心エコーによって得られることも可能である。
特にＭモード心エコー、２Ｄスペックルトラッキング心エコー、ドップラー心エコー、または二次元（２Ｄ）心エコーによって得られることも可能である。
【0033】
１つの態様において、中層短縮率は、その全開示内容に関して、本明細書に援用される、Ｓｈｉｍｉｚｕらによって記載されるような２シェル筒状モデルから計算可能である（Ｓｈｉｍｉｚｕ Ｇ， Ｈｉｒｏｔａ Ｙ， Ｋｉｔａ Ｙ， Ｋａｗａｍｕｒａ， Ｋ， Ｓａｉｔｏ Ｔ， Ｇａａｓｃｈ ＷＨ． 全身動脈性高血圧における左心室中層力学 Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ １９９１；８３：１６７６－８４）。この方法は、慣用的な中層法を洗練したものであり、そして理論的周囲中層線維または心筋リングの短縮を反映するデータを提供する。該方法は、心周期を通じて左心室重量が一定であることを仮定し、そして内壁および外壁の肥厚率が等しいという仮定を必要としない。ＭＦＳの決定はまた、Ｍａｙｅｔらによって、またはＳｈｉｍｉｚｕらの先の論文においても記載され、これらはすべて本明細書に援用される（例えば、Ｍａｙｅｔら， Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ． ２０００；３６：７５５－７５９； Ｓｈｉｍｉｚｕ Ｇ， Ｚｉｌｅ ＭＲ， Ｂｌａｕｓｔｅｉｎ ＡＳ， Ｇａａｓｃｈ ＷＨ． 左心室肥大を伴う患者における左心室充満および中層線維伸長：慣用的な中層測定による線維速度の過大評価。 Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ． １９８５；７１：２６６－２７２、またはＳｈｉｍｉｚｕ Ｇ， Ｃｏｎｒａｄ ＣＨ， Ｇａａｓｃｈ ＷＨ． 左心室肥大を伴う患者における左心室充満および中層線維伸長の位相面分析 Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ． １９８７；７５（ｓｕｐｐｌ ｌ）：Ｉ－３４－Ｉ－３９を参照されたい）。さらに、ＭＦＳの決定は、ｄｅ Ｓｉｍｏｎｅら（ＪＡＣＣ， １９９４， Ｖｏｌ． ２３（６）：１４４４－５１）によって記載されてきており、これもまたその全体が本明細書に援用される。別の態様において、ＭＦＳはＭｕｒｒｅｄｄｕら（Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｈｅａｒｔ Ｆａｉｌｕｒｅ（２０１２）１４， ７１８－７２９）によって記載されるように評価される。好ましくは、ＭＦＳは、本明細書において、Ｓｈｉｍｉｚｕによって１９８７年または１９８５年に記載されるような方法にしたがって決定され、より好ましくは、ＭＦＳは、Ｍａｙｅｔらにしたがって決定され、さらにより好ましくは、ＭＦＳはｄｅ Ｓｉｍｏｎｅにしたがって決定され、そして最も好ましくは、ＭＦＳはＭｕｒｅｄｄｕによって記載されるように決定される。
【0034】
実施例セクションにさらに記載するように、本明細書に言及するような少なくとも１つのバイオマーカーのレベルの測定は、異常なＭＦＳを患う被験体において、特に好適である（図もまた参照されたい）。異常なＭＦＳを有する被験体において、少なくとも１つのバイオマーカーの測定は、リスクがある被験体およびリスクがない被験体の間の非常に信頼性がある区別を可能にする。実施例セクションにおける結果は、被験体が非常に低いリスクを有するが、異常な中層短縮率を患う可能性もあることを示す。しかし、また、異常なＭＦＳを患い、そして非常に高リスクである被験体もいる。本明細書に言及するような、少なくとも１つのバイオマーカーの決定は、高リスクおよび低リスクを有する被験体を同定することを可能にする。
【0035】
本明細書に言及するようないくつかのバイオマーカー（特にＢＮＰ型ペプチド、特にＮＴ－プロＢＮＰ、ｓＳＴ２、ＩＧＦＢＰ７、心臓トロポニン、特にｃＴｎＴ、および／またはＦＧＦ２３）の区別する能力は、正常心室重量を有するが、異常なＭＦＳを有する被験体において特に好適である。したがって、工程（ａ）の態様（ｉ）を実行する場合、少なくとも１つのバイオマーカーは、好ましくはＢＮＰ型ペプチド、ｓＳＴ２、ＩＧＦＢＰ７、心臓トロポニンおよび／またはＦＧＦ２３である。好ましくは、マーカーはｓＳＴ２であり、より好ましくは、マーカーはＩＧＦＢＰ７であり、最も好ましくは、マーカーはＮＴ－プロＢＮＰである。さらに、マーカーがトロポニンＴまたはＦＧＦ２３であることもまた好ましい。バイオマーカーＧＤＦ－１５および／またはもまた測定可能であることもまた理解されるものとする。
【0036】
１つの態様において、異常なＭＦＳの存在または非存在が評価された後に、工程ｂ）を実行することも可能である。特に、異常なＭＦＳを患う被験体において、工程ｂ）を実行することも可能である。したがって、本発明の方法は、工程ａ）での評価に基づいて、異常な中層短縮率を患う被験体を選択する工程ａ１）をさらに含むことも可能である。したがって、少なくとも１つのバイオマーカーのレベルを、異常なＭＦＳを患う被験体において測定する。
【0037】
あるいは、少なくとも１つのバイオマーカーのレベルを第一の工程として測定することも可能である。その後、異常な中層短縮率の存在を評価する。
本発明の方法の工程（ａ）、態様（ｉｉ）において、ＬＶＨの存在または非存在を評価するものとする。したがって、被験体がＬＶＨを患うかどうかを評価する。ＬＶＨを患わない被験体は、正常左心室重量を有する（本明細書の別の箇所に概略する通り）。
本発明の方法の工程（ａ）、態様（ｉｉ）において、ＬＶＨの存在または非存在を評価するものとする。したがって、被験体がＬＶＨを患うかどうかを評価する。ＬＶＨを患わない被験体は、正常左心室重量を有する（本明細書の別の箇所に概略する通り）。
【0038】
前述の方法の工程（ａ）の態様（ｉｉ）を実行する場合、少なくとも１つのバイオマーカーは、好ましくは、ＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、可溶性ＳＴ２（ｓＳＴ２）、ＦＧＦ－２３（線維芽細胞増殖因子２３）、およびＧＤＦ１５（増殖分化因子１５）より選択される。特に、少なくとも１つのバイオマーカーは、ＩＧＦＢＰ－７および／またはｓＳＴ２である。しかし、残りのマーカー、例えばＮＴ－プロＢＮＰもまた決定することも可能である。バイオマーカーの好ましい組み合わせ（患者の特性）は以下の通りである：
・ＩＧＦＢＰ７＋ＢＮＰ型ペプチド、特にＮＴプロＢＮＰ
・ＳＴ２＋ＢＮＰ型ペプチド、特にＮＴプロＢＮＰ
・ＦＧＦ２３＋ＢＮＰ型ペプチド、特にＮＴプロＢＮＰ
・ＩＧＦＢＰ７＋ＳＴ２
・年齢＋ＢＮＰ型ペプチド、特にＮＴプロＢＮＰ
・年齢＋ＮＴプロＢＮＰ＋ｃＴｎ、特にｈｓ－ｃＴｎＴ
「年齢」は、好ましくは、試験しようとする被験体が６５歳またはそれより高齢であることを意味する。
・ＩＧＦＢＰ７＋ＢＮＰ型ペプチド、特にＮＴプロＢＮＰ
・ＳＴ２＋ＢＮＰ型ペプチド、特にＮＴプロＢＮＰ
・ＦＧＦ２３＋ＢＮＰ型ペプチド、特にＮＴプロＢＮＰ
・ＩＧＦＢＰ７＋ＳＴ２
・年齢＋ＢＮＰ型ペプチド、特にＮＴプロＢＮＰ
・年齢＋ＮＴプロＢＮＰ＋ｃＴｎ、特にｈｓ－ｃＴｎＴ
「年齢」は、好ましくは、試験しようとする被験体が６５歳またはそれより高齢であることを意味する。
【0039】
別の好ましい組み合わせは、好ましくは左心室肥大（ＬＶＨ）の存在または非存在の評価と組み合わせた、ＢＮＰ型ペプチド、特にＮＴプロＢＮＰ、およびＩＧＦＢＰ７、特に高齢被験体におけるもの（特に被験体が６５歳またはそれより高齢である場合）である。
【0040】
別の好ましい組み合わせは、異常なＭＦＳの存在または非存在の評価と組み合わせた、ＢＮＰ型ペプチド、特にＮＴプロＢＮＰ、およびＩＧＦＢＰ７、特に高齢被験体におけるもの（特に被験体が６５歳またはそれより高齢である場合）である。
【0041】
用語「試料」は、体液試料、分離された細胞の試料、あるいは組織または臓器由来の試料を指す。体液試料は、周知の技術によって得られることも可能であり、そしてこれには、血液、血漿、血清、尿、リンパ液、痰、腹水、あるいは任意の他の体性分泌物またはその派生物が含まれる。組織または臓器試料は、例えば、生検によって任意の組織または臓器から得られうる。特に、試料が血液、血清、または血漿試料であることが想定される。
【0042】
本発明にしたがって、本明細書に言及するような少なくとも１つのバイオマーカーのレベルを測定するものとする。用語「少なくとも１つ」は、１または１より多くを意味する。好ましくは、本発明の背景において、１、２、３、４、５、６、７、または８のバイオマーカーのレベルを測定する。
【0043】
さらに、少なくとも１つのさらなるバイオマーカーのレベルは測定されるレベルであり
、そして少なくとも１つのさらなるバイオマーカーの測定されるレベルを、参照レベルと比較することが想定される。好ましくは、少なくとも１つのさらなるバイオマーカーはＰｌＧＦ（胎盤増殖因子）である。より好ましくは、少なくとも１つのさらなるバイオマーカーはＭＭＰ２（マトリックスメタロプロテイナーゼ－２）である。ＭＭＰ２（７２ｋＤａ ＩＶ型コラゲナーゼおよびゼラチナーゼＡとしても知られる）は、ヒトにおいてＭＭＰ２遺伝子にコードされる酵素である（ヒトＭＭＰ２の配列に関しては、例えばＵｎｉｐｒｏｔ（Ｐ０８２５３）を参照されたい）。
、そして少なくとも１つのさらなるバイオマーカーの測定されるレベルを、参照レベルと比較することが想定される。好ましくは、少なくとも１つのさらなるバイオマーカーはＰｌＧＦ（胎盤増殖因子）である。より好ましくは、少なくとも１つのさらなるバイオマーカーはＭＭＰ２（マトリックスメタロプロテイナーゼ－２）である。ＭＭＰ２（７２ｋＤａ ＩＶ型コラゲナーゼおよびゼラチナーゼＡとしても知られる）は、ヒトにおいてＭＭＰ２遺伝子にコードされる酵素である（ヒトＭＭＰ２の配列に関しては、例えばＵｎｉｐｒｏｔ（Ｐ０８２５３）を参照されたい）。
【0044】
さらに、リスク評価のために被験体の単数または複数のさらなる特性、好ましくは年齢または性別（性）、特に年齢および性別（性）を評価することが想定される。好ましくは、リスクは、比較工程に基づいて、そして患者の特性（単数または複数）（例えば年齢および性）に基づいて予測される。より好ましくは、リスクは比較工程に基づいて、異常なＭＦＳおよび／またはＬＶＨの存在または非存在に基づいて（特にＭＦＳおよび／またはＬＶＨの存在に基づいて）、そして患者特性（単数または複数）（例えば年齢および性）に基づいて予測される。
【0045】
好ましい態様において、バイオマーカーのレベルを組み合わせて測定する。したがって、１より多いレベルを測定する。さらに、患者の特性（単数または複数）とバイオマーカー（単数または複数）の組み合わせが想定される。好ましい組み合わせを図１１および図１２、そして特に、実施例セクションの表１に示し、特に、ＢＮＰ型ペプチド、特にＮＴプロＢＮＰおよびＩＧＦＢＰ７と、それぞれＬＶＨまたはＭＦＳの評価の組み合わせが好ましい。さらに好ましい組み合わせを実施例セクションの表２に示す。
【0046】
バイオマーカー（および患者特性）のさらに好ましい組み合わせは：
・ＢＮＰ型ペプチド、特にＮＴプロＢＮＰ、および心臓トロポニン、特にｃＴｎＴ
・ＩＧＦＢＰ７およびＢＮＰ型ペプチド、特にＮＴ－プロＢＮＰ
・ＩＧＦＢＰ７およびＳＴ２
・ＳＴ２およびＢＮＰ型ペプチド、特にＮＴ－プロＢＮＰ
・ＧＤＦ１５およびＢＮＰ型ペプチド、特にＮＴ－プロＢＮＰ
・ＦＧＦ２３およびＢＮＰ型ペプチド、特にＮＴ－プロＢＮＰ
・年齢およびＢＮＰ型ペプチド、特にＮＴ－プロＢＮＰ
・年齢、心臓トロポニン、特にｃＴｎＴ（トロポニンＴ）およびＢＮＰ型ペプチド、特にＮＴ－プロＢＮＰ
である。
・ＢＮＰ型ペプチド、特にＮＴプロＢＮＰ、および心臓トロポニン、特にｃＴｎＴ
・ＩＧＦＢＰ７およびＢＮＰ型ペプチド、特にＮＴ－プロＢＮＰ
・ＩＧＦＢＰ７およびＳＴ２
・ＳＴ２およびＢＮＰ型ペプチド、特にＮＴ－プロＢＮＰ
・ＧＤＦ１５およびＢＮＰ型ペプチド、特にＮＴ－プロＢＮＰ
・ＦＧＦ２３およびＢＮＰ型ペプチド、特にＮＴ－プロＢＮＰ
・年齢およびＢＮＰ型ペプチド、特にＮＴ－プロＢＮＰ
・年齢、心臓トロポニン、特にｃＴｎＴ（トロポニンＴ）およびＢＮＰ型ペプチド、特にＮＴ－プロＢＮＰ
である。
【0047】
さらに好ましい組み合わせは：年齢および／または（特におよび）性別と組み合わされた、心臓トロポニン、特にＴｎＴ、ＦＧＦ２３、ＢＮＰ型ペプチド、特にＮＴプロＢＮＰ、ＩＧＦＢＰ７、ｓＳＴ２、およびＧＤＦ１５より選択されるバイオマーカーより選択される少なくとも１つのバイオマーカーである。
【0048】
用語、本明細書に言及するようなマーカーレベルを「測定する」（本明細書において、「決定する」とも称される）は、適切な方法を使用して、バイオマーカーを定量化して、例えば試料中のバイオマーカーレベルを決定することを指す。
【0049】
本発明と関連して測定すべきバイオマーカーは、タンパク質バイオマーカーである。レベルを測定する方法、およびしたがってタンパク質バイオマーカーの量を決定する方法は、当該技術分野に周知であり、そして例えば本明細書にその全体が援用されるＷＯ ２０１４／０４０７５９に記載される。特に１５ページ１５行から１９ページ２５行を参照されたい。
【0050】
１つの態様において、試料を、それぞれのマーカーに特異的に結合する結合剤と接触させ、それによって剤および前記マーカーの間の複合体を形成し、形成された複合体のレベルを検出し、そしてそれによって前記マーカーのレベルを測定する工程によって、少なくとも１つのバイオマーカーのレベルを測定する。
【0051】
好ましくは、結合剤は、本明細書に言及するようなバイオマーカーに特異的に結合する。好ましい結合剤には、抗体、核酸、ペプチドまたはポリペプチド、例えば該ペプチドまたはポリペプチドに関する受容体または結合パートナー、および該ペプチドに対する結合ドメインを含むその断片、ならびにアプタマー、例えば核酸またはペプチドアプタマー、特に抗体が含まれる。本明細書に言及するような抗体には、ポリクローナルおよびモノクローナル抗体の両方、ならびに抗原またはハプテンに結合可能な、その断片、例えばＦｖ、ＦａｂおよびＦ（ａｂ）２断片が含まれる。本発明にはまた、一本鎖抗体、および望ましい抗原特異性を示す非ヒトドナー抗体のアミノ酸配列を、ヒトアクセプター抗体の配列と組み合わせた、ヒト化ハイブリッド抗体も含まれる。用語「特異的結合」または「特異的に結合する」は、結合対分子が、他の分子に有意に結合しない条件下で、互いに結合を示す、結合反応を指す。用語「特異的結合」または「特異的に結合する」は、バイオマーカーとしてタンパク質またはペプチドを指す場合、結合剤が、少なくとも１０－７Ｍのアフィニティで、対応するバイオマーカーに結合する、結合反応を指す。用語「特異的結合」または「特異的に結合する」は、好ましくは、ターゲット分子に対して少なくとも１０－８Ｍまたはさらにより好ましくは少なくとも１０－９Ｍのアフィニティを指す。用語「特異的」または「特異的に」は、試料中に存在する他の分子が、ターゲット分子に特異的な結合剤に有意には結合しないことを示すよう用いられる。好ましくは、ターゲット分子以外の分子に結合するレベルは、ターゲット分子に対するアフィニティのわずか１０％またはそれ未満、より好ましくはわずか５％またはそれ未満の結合アフィニティを生じる。
【0052】
第三に、結合剤を、共有的にまたは非共有的に、結合剤の検出および測定を可能にする標識にカップリングすることも可能である。標識を、直接または間接的方法によって行ってもよい。直接標識は、標識を結合剤に直接（共有的または非共有的に）カップリングする工程を含む。間接的標識は、第一の結合剤に二次結合剤を（共有的または非共有的に）結合させる工程を含む。二次結合剤は、第一の結合剤に特異的に結合しなければならない。前記の二次結合剤を、適切な標識にカップリングさせてもよいし、そして／または前記の二次結合剤は該二次結合剤に結合する三次結合剤のターゲット（レセプター）であってもよい。
【0053】
本明細書に言及するようなバイオマーカーは当該技術分野に周知である。
脳ナトリウム利尿ペプチド（Ｂｒａｉｎ Ｎａｔｒｉｕｒｅｔｉｃ Ｐｅｐｔｉｄｅ）型ペプチド（本明細書において、またＢＮＰ型ペプチドとも称される）は、好ましくは、プレプロＢＮＰ、プロＢＮＰ、ＮＴ－プロＢＮＰ、およびＢＮＰからなる群より選択される。プレプロペプチド（プレプロＢＮＰの場合は１３４アミノ酸）は、短いシグナルペプチドを含み、該シグナルペプチドは、酵素的に切断されて、プロペプチドを放出する（プロＢＮＰの場合は１０８アミノ酸）。プロペプチドは、さらに切断されてＮ末端プロペプチド（ＮＴ－プロペプチド、ＮＴ－プロＢＮＰの場合は７６アミノ酸）となり、そして活性ホルモン（ＢＮＰの場合は３２アミノ酸）となる。好ましくは、本発明にしたがった脳ナトリウム利尿ペプチドは、ＮＴ－プロＢＮＰ、ＢＮＰ、およびその変異体である。ＢＮＰは活性ホルモンであり、そしてそれぞれの不活性対応物ＮＴ－プロＢＮＰよりも短い半減期を有する。好ましくは、脳ナトリウム利尿ペプチド型ペプチドは、ＢＮＰ（脳ナトリウム利尿ペプチド）であり、そしてより好ましくはＮＴ－プロＢＮＰ（プロホルモン脳ナトリウム利尿ペプチドのＮ末端）である。
脳ナトリウム利尿ペプチド（Ｂｒａｉｎ Ｎａｔｒｉｕｒｅｔｉｃ Ｐｅｐｔｉｄｅ）型ペプチド（本明細書において、またＢＮＰ型ペプチドとも称される）は、好ましくは、プレプロＢＮＰ、プロＢＮＰ、ＮＴ－プロＢＮＰ、およびＢＮＰからなる群より選択される。プレプロペプチド（プレプロＢＮＰの場合は１３４アミノ酸）は、短いシグナルペプチドを含み、該シグナルペプチドは、酵素的に切断されて、プロペプチドを放出する（プロＢＮＰの場合は１０８アミノ酸）。プロペプチドは、さらに切断されてＮ末端プロペプチド（ＮＴ－プロペプチド、ＮＴ－プロＢＮＰの場合は７６アミノ酸）となり、そして活性ホルモン（ＢＮＰの場合は３２アミノ酸）となる。好ましくは、本発明にしたがった脳ナトリウム利尿ペプチドは、ＮＴ－プロＢＮＰ、ＢＮＰ、およびその変異体である。ＢＮＰは活性ホルモンであり、そしてそれぞれの不活性対応物ＮＴ－プロＢＮＰよりも短い半減期を有する。好ましくは、脳ナトリウム利尿ペプチド型ペプチドは、ＢＮＰ（脳ナトリウム利尿ペプチド）であり、そしてより好ましくはＮＴ－プロＢＮＰ（プロホルモン脳ナトリウム利尿ペプチドのＮ末端）である。
【0054】
用語「心臓トロポニン」は、心臓の細胞、そして好ましくは心内膜下細胞において発現
されるすべてのトロポニン・アイソフォームを指す。これらのアイソフォームは、例えば、Ａｎｄｅｒｓｏｎ １９９５， Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ， ｖｏｌ． ７６， ｎｏ． ４：６８１－６８６およびＦｅｒｒｉｅｒｅｓ １９９８， Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， ４４：４８７－４９３に記載されるように、当該技術分野において、よく特徴付けられる。好ましくは、心臓トロポニンは、トロポニンＴおよび／またはトロポニンＩであり、そして最も好ましくは、トロポニンＴである。
されるすべてのトロポニン・アイソフォームを指す。これらのアイソフォームは、例えば、Ａｎｄｅｒｓｏｎ １９９５， Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ， ｖｏｌ． ７６， ｎｏ． ４：６８１－６８６およびＦｅｒｒｉｅｒｅｓ １９９８， Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， ４４：４８７－４９３に記載されるように、当該技術分野において、よく特徴付けられる。好ましくは、心臓トロポニンは、トロポニンＴおよび／またはトロポニンＩであり、そして最も好ましくは、トロポニンＴである。
【0055】
ＩＧＦ結合タンパク質７（＝ＩＧＦＢＰ７）は、内皮細胞、血管平滑筋細胞、線維芽細胞、および上皮細胞によって分泌されることが知られる３０ｋＤａのモジュラー糖タンパク質である（Ｏｎｏ， Ｙ．ら， Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ｒｅｓ Ｃｏｍｍ
２０２（１９９４）１４９０－１４９６）。好ましくは、用語「ＩＧＦＢＰ７」は、ヒトＩＧＦＢＰ７を指す。該タンパク質の配列は、当該技術分野において周知であり、そして例えばＧｅｎＢａｎｋ（ＮＰ＿００１２４０７６４．１）を通じてアクセス可能である。
２０２（１９９４）１４９０－１４９６）。好ましくは、用語「ＩＧＦＢＰ７」は、ヒトＩＧＦＢＰ７を指す。該タンパク質の配列は、当該技術分野において周知であり、そして例えばＧｅｎＢａｎｋ（ＮＰ＿００１２４０７６４．１）を通じてアクセス可能である。
【0056】
ＳＴ２は、「インターロイキン１受容体様１」としても知られ、機械的ストレス条件下で、心臓線維芽細胞および心筋細胞によって産生される、ＩＬ－１受容体ファミリーのメンバーである。ＳＴ２は、インターロイキン－１受容体ファミリーメンバーであり、そして膜結合アイソフォームおよび可溶性アイソフォーム（ｓＳＴ２）の両方で存在する。本発明の背景において、可溶性ＳＴ２の量が決定されるものとする（Ｄｉｅｐｌｉｎｇｅｒら（Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， ４３， ２０１０： １１６９～１１７０）。ＳＴ２はまた、インターロイキン１受容体様１またはＩＬ１ＲＬＩとして知られ、ヒトにおいて、ＩＬ１ＲＬＩ遺伝子によってコードされる。ヒトＳＴ２ポリペプチドの配列は、当該技術分野において周知であり、そして例えば、ＧｅｎＢａｎｋを通じてアクセス可能である。ＮＰ＿００３８４７．２ ＧＩ：２７８９４３２８を参照されたい。
【0057】
バイオマーカー、線維芽細胞増殖因子－２３（「ＦＧＦ－２３」と略される）は当該技術分野において周知である。ＦＧＦ－２３は、リン酸カルシウムおよびビタミンＤ代謝の制御における重要な因子であり、そして心臓血管事象の重要な決定因子であるＬＶ肥大の病因形成において、原因となる役割を有する。好ましくは、ＦＧＦ－２３はヒトＦＧＦ－２３である。ヒトＦＧＦ－２３の配列は、当該技術分野に周知であり、例えばアミノ酸配列は、ＧｅｎＢａｎｋ寄託番号ＮＭ＿０２０６３８．１ ＧＩ：１０１９０６７３を通じてアクセス可能である。さらに、該配列はまた、Ｓｈｉｍａｄａら， ２００１， ＰＮＡＳ， ｖｏｌ． ９８（１１）６５００～６５０５ページにも開示される。
【0058】
用語「増殖分化因子－１５」または「ＧＤＦ－１５」は、トランスフォーミング増殖因子（ＴＧＦ）サイトカイン・スーパーファミリーのメンバーであるポリペプチドに関する。用語、ポリペプチド、ペプチドおよびタンパク質は、本明細書を通じて、交換可能に用いられる。ＧＤＦ－１５は、元来、マクロファージ阻害性サイトカイン１としてクローニングされ、そして後にまた、胎盤トランスフォーミング増殖因子－１５、胎盤骨形態形成タンパク質、非ステロイド性抗炎症薬剤活性化遺伝子１、および前立腺由来因子としても同定された（Ｂｏｏｔｃｏｖ 前引用箇所； Ｈｒｏｍａｓ， １９９７ Ｂｉｏｃｈｉｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ １３５４：４０－４４； Ｌａｗｔｏｎ １９９７， Ｇｅｎｅ ２０３： １７－２６； Ｙｏｋｏｙａｍａ－Ｋｏｂａｙａｓｈｉ １９９７， Ｊ Ｂｉｏｃｈｅｍ （Ｔｏｋｙｏ）， １２２：６２２－６２６； Ｐａｒａｌｋａｒ １９９８， Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２７３： １３７６０－１３７６７）。ＧＤＦ－１５のアミノ酸配列は、ＷＯ９９／０６４４５、ＷＯ００／７００５１、ＷＯ２００５／１１３５８５、Ｂｏｔｔｎｅｒ １９９９， Ｇｅｎｅ ２３７： １０５－１１１、Ｂｏｏｔｃｏｖ 前引用箇所、Ｔａｎ 前引用箇所、Ｂａｅｋ ２００１， Ｍｏｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ ５９： ９０１－９０８、Ｈｒｏｍａｓ 前引用箇所、Ｐａｒａｌｋａｒ 前引用箇所、Ｍｏｒｒｉｓｈ １９９６， Ｐｌａｃｅｎｔａ １７：４３１－４４１に開示される。
【0059】
細胞間接着分子－１（ＩＣＡＭ－１；しばしばまたＣＤ５４とも称される）は、典型的には内皮細胞および免疫系細胞上に発現される、膜貫通糖タンパク質である。ＩＣＡＭ－１の構造は、大量のグリコシル化によって特徴付けられ、そして５つの免疫グロブリン（Ｉｇ）様ドメインを形成する細胞外部分からなる。これらのドメインは、単一の膜貫通領域および短い細胞質テールに付着される。ＩＣＡＭ－１のいくつかのリガンドが記載されてきており；ＣＤ１１ａ／ＣＤ１８、またはＣＤ１１ｂ／ＣＤ１８型のインテグリンに結合し、そしてまた、ライノウイルスによって受容体として利用される。ヒトＩＣＡＭ－１のアミノ酸配列は、好ましくは、ＵｎｉＰｒｏｔエントリーＰ０５３６２に提供される。本発明にしたがって言及されるＩＣＡＭ－１は、前記の特定の配列のアレル変異体および他の変異体をさらに含む。
【0060】
マーカー「アンギオポエチン２」（ＡＮＧ２）は当該技術分野に周知である（例えばＳａｒａｈ Ｙ． Ｙｕａｎ； Ｒｏｂｅｒｔ Ｒ． Ｒｉｇｏｒ（２０１０年９月３０日）． Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ Ｂａｒｒｉｅｒ Ｆｕｎｃｔｉｏｎ． Ｍｏｒｇａｎ ＆ Ｃｌａｙｐｏｏｌ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ． ＩＳＢＮ ９７８－１－６１５０４－１２０－６）を参照されたい。アンギオポエチン２は胚および出生後血管形成において役割を果たす血管増殖因子ファミリーの一部である。アンギオポエチン－２は、内皮細胞中のバイベル・パラーデ小体で産生され、そして保存され、そしてＴＥＫチロシンキナーゼアンタゴニストとして作用する。アンギオポエチン－２は、慢性透析を受けている小児における初期心臓血管疾患に関するマーカーである（Ｓｈｒｏｆｆら（２０１３）． 「循環アンギオポエチン－２は、慢性透析を受けている小児における初期心臓血管疾患に関するマーカーである」 ＰＬｏＳ ＯＮＥ ８ （２）：ｅ５６２７３）。ＡＮＧ２の配列には、例えば、ＵｎｉＰｒｏｔを通じてアクセス可能である（寄託番号Ｏ１５１２３を参照されたい）。
【0061】
用語「レベル」は、本明細書において、本明細書に言及するようなバイオマーカーの絶対量、前記バイオマーカーの相対量または濃度、ならびにこれらに相関するかまたはこれらから派生しうる任意の値またはパラメータを含む。
【0062】
用語「比較すること」は、本明細書において、個体または患者由来の試料におけるバイオマーカーのレベルを、本明細書の別の箇所に明記するバイオマーカーの参照レベルと比較することを指す。本明細書において、比較することは、通常、対応するパラメータまたは値の比較を指し、例えば絶対量を絶対参照量と比較する一方、濃度を参照濃度と比較するか、または試料中のバイオマーカーから得られる強度シグナルを参照試料から得られる同じタイプの強度シグナルと比較すると理解されるものとする。比較を、手動で、またはコンピュータ補助比較で実行してもよい。個体または患者由来の試料中のバイオマーカーの測定されるまたは検出されるレベルおよび参照レベルの値を、例えば互いに比較してもよいし、そして比較のためのアルゴリズムを実行するコンピュータプログラムによって、前記比較が自動的に実行されてもよい。
【0063】
用語「参照レベル」は当該技術分野に周知である。好ましい参照レベルは、当業者によって、さらなる面倒を伴わずに決定可能である。好ましくは、用語「参照レベル」は、本明細書において、それぞれのバイオマーカーに関して、あらかじめ決定された値を指す。この背景において、「レベル」は絶対量、相対量または濃度、ならびにこれらに相関するかまたはこれらに由来しうる任意の値またはパラメータを含む。好ましくは、参照レベルは、被験体を、慢性心不全に迅速に進行するリスクおよび／または慢性心不全によって入院するリスクおよび／または死亡するリスクを有する被験体群に、あるいは慢性心不全に迅速に進行するリスクおよび／または慢性心不全によって入院するリスクおよび／または死亡するリスクを持たない被験体群に割り当てることを可能にするレベルである。したがって、参照レベルは、（慢性心不全に迅速に進行するリスクおよび／または慢性心不全によって入院するリスク）および／または死亡するリスクを有するまたはこうしたリスクを持たない被験体の間の区別を可能にするものとする。
【0064】
当業者が認識するであろうように、参照レベルがあらかじめ決定されており、そして例えば特異性および／または感度に関してルーチンの必要条件を満たすように設定される。これらの必要条件は、例えば取締機関によって多様でありうる。例えば、アッセイ感度または特異性が、それぞれ、特定の制限、例えばそれぞれ８０％、９０％、９５％または９８％に設定されなければならない可能性もある。これらの必要条件はまた、陽性または陰性予測値に関しても定義されうる。にもかかわらず、本発明に提供する解説に基づいて、当業者は、こうした必要条件を満たす参照レベルに到達することが常に可能であろう。１つの態様において、参照レベルは、リスクがある患者（または患者群）由来の参照試料（単数または複数）において決定される。別の態様において、参照は、（慢性心不全に迅速に進行するおよび／または慢性心不全によって入院するおよび／または死亡する）リスクのない患者（または患者群）由来の参照試料（単数または複数）において決定される。参照レベルは、１つの態様において、患者が属する疾患実体由来の参照試料においてあらかじめ決定されている。特定の態様において、参照レベルは、例えば、調べた疾患実体における値の全体の分布の２５％～７５％の間の任意の割合に設定可能である。他の態様において、参照レベルは、例えば、調べている疾患実体由来の参照試料における値の全体の分布から決定されるような、中央値、三分位数または四分位数に設定されることも可能である。１つの態様において、参照レベルは、調べる疾患実体における値の全体の分布から決定されるような中央値に設定される。参照レベルは、年齢、性別または下位集団などの多様な生理学的パラメータ、ならびに本明細書に言及するバイオマーカーの決定に用いる手段に応じて多様でありうる。１つの態様において、参照試料は、本発明の方法に供される個体または患者由来の試料と本質的に同じタイプの細胞、組織、臓器または体液供給源に由来し、例えば本発明にしたがって、個体におけるバイオマーカーのレベルを決定する試料として血液が用いられる場合、参照レベルもまた、血液またはその一部において決定される。
【0065】
好ましくは、以下がアルゴリズムとして適用される：
好ましくは、参照レベル（単数または複数）より高い少なくとも１つのバイオマーカーのレベル（単数または複数）は、被験体が慢性心不全に迅速に進行するリスクおよび／または慢性心不全によって入院するリスクおよび／または死亡するリスクを有することを示す。やはり好ましくは、参照レベル（単数または複数）より低い少なくとも１つのバイオマーカーのレベル（単数または複数）は、被験体が慢性心不全に迅速に進行するリスクおよび／または慢性心不全によって入院するリスクおよび／または死亡するリスクを持たないことを示す。
好ましくは、参照レベル（単数または複数）より高い少なくとも１つのバイオマーカーのレベル（単数または複数）は、被験体が慢性心不全に迅速に進行するリスクおよび／または慢性心不全によって入院するリスクおよび／または死亡するリスクを有することを示す。やはり好ましくは、参照レベル（単数または複数）より低い少なくとも１つのバイオマーカーのレベル（単数または複数）は、被験体が慢性心不全に迅速に進行するリスクおよび／または慢性心不全によって入院するリスクおよび／または死亡するリスクを持たないことを示す。
【0066】
前述のアルゴリズムは、特に、本発明の方法の工程ａ）において、異常なＭＦＳまたはＬＶＨの存在が評価されている場合、すなわち、工程ａ）において、被験体が異常なＭＦＳまたはＬＶＨを患うと評価されている場合に、当てはまる。
【0067】
特定の態様において、用語「参照レベルより大きい」または「参照レベルより高い」は、参照レベルと比較した際に、本明細書記載の方法によって決定される、参照レベルより高い個体または患者由来の試料中のバイオマーカーのレベル、あるいは５％、１０％、２０％、２５％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％、１００％またはそれより高い全体の増加を指す。特定の態様において、用語、増加は、個体または患者由来の試料におけるバイオマーカーレベルの増加であって、例えば参照試料からあらかじめ決定した参照レベルに比較した際、少なくとも約１．５、１．７５、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、４０、５０、６０、７０、７５、８０、９０、または１００倍高い、前記増加を指す。特定の態様において、用語「参照レベルより低い」または「未満」は、本明細書において、参照レベルと比較した際に、本明細書記載の方法によって決定される、参照レベルより低い個体または患者由来の試料中のバイオマーカーのレベル、あるいは５％、１０％、２０％、２５％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％またはそれより高い全体の減少を指す。特定の態様において、用語、減少は、個体または患者由来の試料におけるバイオマーカーのレベルの減少であって、減少したレベルが例えば参照試料からあらかじめ決定した参照レベルの、最大約０．９、０．８、０．７、０．６、０．５、０．４、０．３、０．２、０．１、０．０５、または０．０１倍である、前記減少を指す。
【0068】
好ましい参照レベルは、当業者によって、さらなる面倒を伴わずに決定可能である。参照レベルは、年齢依存性であることも可能である。しかし、これは当業者によって考慮される。例えば、参照レベルは、被験体集団において、中央値レベルであることも可能である。本明細書に開示するマーカーに関する好ましい参照レベルを表３中の実施例セクションに示す。望ましい感度および特異性に応じて、参照レベルは異なることも可能である。
【0069】
本発明の方法の好ましい態様において、前記方法は、被験体が慢性心不全に迅速に進行するリスクおよび／または慢性心不全によって入院するリスクおよび／または死亡するリスクを有すると予測される場合、少なくとも１つの適切な療法を推奨し、そして／または開始する工程をさらに含む。したがって、本発明はまた、治療法にも関する。
【0070】
好ましくは、本発明の背景において用いられるような用語「療法」は、ライフスタイル変化、食餌療法、体に対する介入、ならびに医薬品治療、すなわち薬物（単数または複数）での治療を含む。
【0071】
治療に適した薬物は、当該技術分野に周知であり、例えばＨｅａｒｔ Ｄｉｓｅａｓｅ， ２００８， 第８版， Ｂｒａｕｎｗａｌｄ監修， Ｅｌｓｅｖｉｅｒ Ｓｏｕｎｄｅｒｓ、第２４章（心不全に関して）、および第４１章（高血圧に関して）を参照されたい。これらの治療は、本発明の一部である。好ましくは、こうした薬物投与は、被験体が慢性心不全に迅速に進行するリスクおよび／または慢性心不全によって入院するリスクおよび／または死亡するリスクを減少させることを目的とする。好ましくは、薬物は、アンギオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤、アンギオテンシン受容体アンタゴニスト（ＡＲＢ）、アルドステロン・アンタゴニスト、利尿剤、およびベータ遮断剤からなる群より選択される。特に、薬物はアンギオテンシン受容体アンタゴニスト、またはＡＣＥ阻害剤である。
【0072】
好ましい利尿剤は、ループ利尿剤、チアジドおよびチアジド様利尿剤である。好ましいベータ遮断剤は、プロプレノロール、メトプロロール、ビソプロロール、カルベジロール、ブシンドロール、およびネビボロールである。好ましいＡＣＥ阻害剤には、エナラプリル、カプトプリル、ラミプリル、およびトランドラプリルである。好ましいアンギオテンシン受容体アンタゴニストはロサルタン、バルサルタン、イルベサルタン、カンデサルタン、テルミサルタン、およびエプロサルタンである。好ましいアルドステロン・アンタゴニストは、エプレロン、スピロノラクトン、カンレノン、メクスレノンおよびプロレノンである。好ましいカルシウム・アンタゴニストは、ジヒドロピリジン、ベラパミル、およびジルチアゼムである。
【0073】
ライフスタイル変化には、禁煙、アルコール消費の減少、身体的活動の増加、体重減少、ナトリウム（塩）制限、体重管理および健康な食生活、毎日の魚油、塩制限が含まれる。
【0074】
さらに好ましい療法は、全開示内容に関して、本明細書に援用される、Ｆｒｏｈｌｉｃｈら（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｈｙｐｅｒｔｅｎｓｉｏｎ ２０１１， ２９：１７－２６）に開示される。特に、この参考文献の２１および２２ページを参照されたい。
【0075】
本明細書の以下に提供する定義は、変更すべきところは変更して、本発明の以下の態様に当てはまる。
本発明はまた、被験体が慢性心不全に迅速に進行するリスクおよび／または慢性心不全によって入院するリスクおよび／または死亡するリスクを予測するため、ａ）前記被験体から得た心臓の心エコー画像であって、前記被験体における（ｉ）異常なＭＦＳ、および／または（ｉｉ）ＬＶＨの存在または非存在を評価することを可能にする前記画像、あるいはｂ）前記被験体における（ｉ）異常なＭＦＳ、および／または（ｉｉ）ＬＶＨの存在または非存在を評価することを好ましくは可能にする心エコーデバイスと組み合わせた、被験体試料中のＢＮＰ型ペプチド、ＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、心臓トロポニン、可溶性ＳＴ２（ｓＳＴ２）、ＦＧＦ－２３（線維芽細胞増殖因子２３）、増殖分化因子１５（ＧＤＦ－１５）、細胞間接着分子１（ＩＣＡＭ－１）、およびアンギオポエチン－２（ＡＮＧ２）からなる群より選択される少なくとも１つのバイオマーカーの使用にも関する。
本発明はまた、被験体が慢性心不全に迅速に進行するリスクおよび／または慢性心不全によって入院するリスクおよび／または死亡するリスクを予測するため、ａ）前記被験体から得た心臓の心エコー画像であって、前記被験体における（ｉ）異常なＭＦＳ、および／または（ｉｉ）ＬＶＨの存在または非存在を評価することを可能にする前記画像、あるいはｂ）前記被験体における（ｉ）異常なＭＦＳ、および／または（ｉｉ）ＬＶＨの存在または非存在を評価することを好ましくは可能にする心エコーデバイスと組み合わせた、被験体試料中のＢＮＰ型ペプチド、ＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、心臓トロポニン、可溶性ＳＴ２（ｓＳＴ２）、ＦＧＦ－２３（線維芽細胞増殖因子２３）、増殖分化因子１５（ＧＤＦ－１５）、細胞間接着分子１（ＩＣＡＭ－１）、およびアンギオポエチン－２（ＡＮＧ２）からなる群より選択される少なくとも１つのバイオマーカーの使用にも関する。
【0076】
本発明はまた、被験体が慢性心不全に迅速に進行するリスクおよび／または慢性心不全によって入院するリスクおよび／または死亡するリスクを予測するため、ａ）前記被験体から得た心臓の心エコー画像であって、前記被験体における（ｉ）異常なＭＦＳ、および／または（ｉｉ）ＬＶＨの存在または非存在を評価することを可能にする前記画像、あるいはｂ）前記被験体における（ｉ）異常なＭＦＳ、および／または（ｉｉ）ＬＶＨの存在または非存在を評価することを好ましくは可能にする心エコーデバイスと組み合わせた、被験体試料中のＢＮＰ型ペプチド、ＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、心臓トロポニン、可溶性ＳＴ２（ｓＳＴ２）、ＦＧＦ－２３（線維芽細胞増殖因子２３）、増殖分化因子１５（ＧＤＦ－１５）、細胞間接着分子１（ＩＣＡＭ－１）、およびアンギオポエチン－２（ＡＮＧ２）からなる群より選択されるバイオマーカーに結合する少なくとも１つの結合剤の使用にも関する。
【0077】
好ましくは、本明細書に言及するような心エコー装置は、（ｉ）異常なＭＦＳおよび／または（ｉｉ）ＬＶＨの存在または非存在の評価に用いられる。
用語「結合剤」は、上に定義されている。好ましくは、結合剤は、本明細書に言及するようなバイオマーカーに特異的に結合する。より好ましくは、結合剤は、抗体またはその断片である。少なくとも１つの結合剤を使用してもよい。１より多いバイオマーカーのレベルを決定する場合、１より多い結合剤を用いる。例えば、ＢＮＰ型ペプチドおよびＩＧＦＢＰ７のレベルを測定する場合、ＢＮＰ型ペプチドに結合する結合剤およびＩＧＦＢＰ７に結合する結合剤を用いる。
用語「結合剤」は、上に定義されている。好ましくは、結合剤は、本明細書に言及するようなバイオマーカーに特異的に結合する。より好ましくは、結合剤は、抗体またはその断片である。少なくとも１つの結合剤を使用してもよい。１より多いバイオマーカーのレベルを決定する場合、１より多い結合剤を用いる。例えば、ＢＮＰ型ペプチドおよびＩＧＦＢＰ７のレベルを測定する場合、ＢＮＰ型ペプチドに結合する結合剤およびＩＧＦＢＰ７に結合する結合剤を用いる。
【0078】
さらに、本発明の方法を実行するために適応されたデバイスであって
ａ）被験体試料中のＢＮＰ型ペプチド、ＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、心臓トロポニン、可溶性ＳＴ２（ｓＳＴ２）、ＦＧＦ－２３（線維芽細胞増殖因子２３）、増殖分化因子１５（ＧＤＦ－１５）、細胞間接着分子１（ＩＣＡＭ－１）、およびアンギオポエチン－２（ＡＮＧ２）からなる群より選択される少なくとも１つのマーカーのレベルを測定するため、少なくとも１つの結合剤を含むアナライザー装置、
ｂ）被験体が（ｉ）異常なＭＦＳおよび／または（ｉｉ）ＬＶＨを患うかどうかの情報
を入力するためのデータ入力手段、および
ｃ）測定レベル（単数または複数）を参照レベル（単数または複数）と比較し、それによって、測定レベル（単数または複数）を参照レベル（単数または複数）と比較した結果に基づいて、そして被験体が（ｉ）異常なＭＦＳおよび／または（ｉｉ）ＬＶＨを患うかどうかの情報に基づいて、被験体が慢性心不全に迅速に進行するリスクおよび／または慢性心不全によって入院するリスクおよび／または死亡するリスクを予測するための評価装置であって、参照レベル（単数または複数）を含むデータベースおよび比較を実行するためのコンピュータ実装アルゴリズムを含む、前記装置
を含む、前記デバイスを提供する。
ａ）被験体試料中のＢＮＰ型ペプチド、ＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、心臓トロポニン、可溶性ＳＴ２（ｓＳＴ２）、ＦＧＦ－２３（線維芽細胞増殖因子２３）、増殖分化因子１５（ＧＤＦ－１５）、細胞間接着分子１（ＩＣＡＭ－１）、およびアンギオポエチン－２（ＡＮＧ２）からなる群より選択される少なくとも１つのマーカーのレベルを測定するため、少なくとも１つの結合剤を含むアナライザー装置、
ｂ）被験体が（ｉ）異常なＭＦＳおよび／または（ｉｉ）ＬＶＨを患うかどうかの情報
を入力するためのデータ入力手段、および
ｃ）測定レベル（単数または複数）を参照レベル（単数または複数）と比較し、それによって、測定レベル（単数または複数）を参照レベル（単数または複数）と比較した結果に基づいて、そして被験体が（ｉ）異常なＭＦＳおよび／または（ｉｉ）ＬＶＨを患うかどうかの情報に基づいて、被験体が慢性心不全に迅速に進行するリスクおよび／または慢性心不全によって入院するリスクおよび／または死亡するリスクを予測するための評価装置であって、参照レベル（単数または複数）を含むデータベースおよび比較を実行するためのコンピュータ実装アルゴリズムを含む、前記装置
を含む、前記デバイスを提供する。
【0079】
用語「デバイス」は、本明細書において、本発明の方法にしたがった診断を可能にするように、互いに機能可能であるように連結された上述の装置を含む系に関する。アナライザー装置に使用可能な好ましい結合剤は、本明細書中の別の箇所に開示される。アナライザー装置は、好ましくは、そのレベルを測定しようとするバイオマーカーを含む試料に接触させるべき固体支持体上に固定された形で、前記剤を含む。さらに、アナライザー装置はまた、バイオマーカー（単数または複数）に特異的に結合した検出剤のレベルを測定する検出装置を含むことも可能である。測定したレベル（単数または複数）を、評価装置に伝達してもよい。
【0080】
いくつかの態様にしたがって、アナライザー装置は、試料での分析物、例えばマーカーの光学検出のために設定されることも可能である。光学検出のために設定された例示的なアナライザー装置は、電磁エネルギーを電気シグナルに変換するために設定されたデバイスを含み、該デバイスは、単一および多要素またはアレイ光学検出装置の両方を含む。本開示にしたがって、光学検出装置は、光学的電磁シグナルを監視し、そして光学経路中に位置する試料における分析物の存在および／または濃度の指標となる、ベースラインシグナルに比較した、電気出口シグナルまたは反応シグナルを提供することが可能である。
【0081】
前記評価装置は、好ましくは、データプロセシング要素、例えばコンピュータまたは計算デバイスを含む。好ましくは、前記要素は、前記レベル（単数または複数）の参照レベル（単数または複数）への比較を実行して、比較結果に基づいて、そして被験体が異常な中層短縮率を患うかどうかの情報に基づいて、被験体が慢性心不全に迅速に進行するリスクおよび／または慢性心不全によって入院するリスクおよび／または死亡するリスクを予測するための実装アルゴリズムを有する。結果は、パラメータ診断生データの出力として提供されうる。これらのデータは、通常、臨床医による解釈を必要とするであろうことが理解されるものとする。しかし、やはり想定されるのは、出力が、解釈に専門医を必要としないプロセシングされた診断生データを含む、エキスパート系デバイスである。
【0082】
上記から、本開示のいくつかの態様にしたがって、本明細書に開示し、そして記載する方法のいくつかの工程の部分を、計算デバイスによって行うことも可能であることになる。計算デバイスは、例えば、汎用コンピュータまたはポータブル計算デバイスであることも可能である。本明細書開示の方法の１またはそれより多い工程を実行するため、例えばネットワークを通じてまたはデータをトランスファーする他の方法を通じて、多数の計算デバイスを一緒に用いてもよいこともまた理解されるべきである。計算デバイスは、メモリへのアクセスを有する。メモリは、コンピュータ読み取り可能媒体であり、そして例えば計算デバイスとともにローカルに位置するか、またはネットワークを通じて計算デバイスにアクセス可能である、単一の記憶デバイスまたは多数の記憶デバイスを含むことも可能である。計算デバイスはまた、出力デバイスにアクセスを有することも可能である。例示的な出力デバイスには、例えば、ファックス装置、ディスプレイ、プリンタ、およびファイルが含まれる。本開示のいくつかの態様にしたがって、計算デバイスは、本明細書に開示する方法の１またはそれより多い工程を実行することも可能であり、そしてその後、出力デバイスを通じて、方法の結果、徴候、比、または他の要因に関連する出力を提供することも可能である。
【0083】
本開示の態様にしたがって、ソフトウェアには、計算デバイスのプロセッサによって実行された際、本明細書に開示する方法の１またはそれより多い工程を実行可能な命令が含まれてもよい。命令のいくつかは、他の機械の操作を制御するシグナルを生じるように適応していてもよく、そしてしたがって、これらの制御シグナルを通じて作動して、コンピュータ自体から遠く離れて素材を変換することも可能である。
【0084】
本明細書の以下に提供する定義は、変更すべきところは変更して、本発明の以下の態様に当てはまる。
さらに、本発明は、被験体が慢性心不全に迅速に進行するリスクおよび／または慢性心不全によって入院するリスクおよび／または死亡するリスクを予測するための方法であって：
（ａ）（ｉ）異常なＭＦＳおよび／または（ｉｉ）ＬＶＨを患う被験体由来の試料中のＢＮＰ型ペプチド、ＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、心臓トロポニン、可溶性ＳＴ２（ｓＳＴ２）、ＦＧＦ－２３（線維芽細胞増殖因子２３）、増殖分化因子１５（ＧＤＦ－１５）、細胞間接着分子１（ＩＣＡＭ－１）、およびアンギオポエチン－２（ＡＮＧ２）からなる群より選択される少なくとも１つのバイオマーカーのレベルを測定し、そして
（ｂ）前記の少なくとも１つのバイオマーカーのレベルを参照レベルと比較する
工程を含む、前記方法に関する。
さらに、本発明は、被験体が慢性心不全に迅速に進行するリスクおよび／または慢性心不全によって入院するリスクおよび／または死亡するリスクを予測するための方法であって：
（ａ）（ｉ）異常なＭＦＳおよび／または（ｉｉ）ＬＶＨを患う被験体由来の試料中のＢＮＰ型ペプチド、ＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、心臓トロポニン、可溶性ＳＴ２（ｓＳＴ２）、ＦＧＦ－２３（線維芽細胞増殖因子２３）、増殖分化因子１５（ＧＤＦ－１５）、細胞間接着分子１（ＩＣＡＭ－１）、およびアンギオポエチン－２（ＡＮＧ２）からなる群より選択される少なくとも１つのバイオマーカーのレベルを測定し、そして
（ｂ）前記の少なくとも１つのバイオマーカーのレベルを参照レベルと比較する
工程を含む、前記方法に関する。
【0085】
好ましくは、被験体が慢性心不全に迅速に進行するリスクおよび／または慢性心不全によって入院するリスクおよび／または死亡するリスクを予測する、さらなる工程ｃ）を実行することによって、リスクを予測する。前記工程は、工程ｂ）の結果に基づく。
【0086】
異常なＭＦＳ（代替（ｉ））を患う被験体は、ＬＶＨを患っていてもまたはいなくてもよい。特に、被験体がＬＶＨを患わないことが想定される。
代替（ｉ）および（ｉｉ）の好ましいバイオマーカーおよびバイオマーカー組み合わせを本明細書の別の箇所に開示する。さらに、参照レベルならびに好ましい診断アルゴリズムを本明細書の別の箇所に記載する。好ましくは、参照レベル（単数または複数）より高い少なくとも１つのバイオマーカーのレベル（単数または複数）は、被験体が慢性心不全に迅速に進行するリスクおよび／または慢性心不全によって入院するリスクおよび／または死亡するリスクを有することを示す。やはり好ましくは、参照レベル（単数または複数）より低い少なくとも１つのバイオマーカーのレベル（単数または複数）は、被験体が慢性心不全に迅速に進行するリスクおよび／または慢性心不全によって入院するリスクおよび／または死亡するリスクを持たないことを示す。
代替（ｉ）および（ｉｉ）の好ましいバイオマーカーおよびバイオマーカー組み合わせを本明細書の別の箇所に開示する。さらに、参照レベルならびに好ましい診断アルゴリズムを本明細書の別の箇所に記載する。好ましくは、参照レベル（単数または複数）より高い少なくとも１つのバイオマーカーのレベル（単数または複数）は、被験体が慢性心不全に迅速に進行するリスクおよび／または慢性心不全によって入院するリスクおよび／または死亡するリスクを有することを示す。やはり好ましくは、参照レベル（単数または複数）より低い少なくとも１つのバイオマーカーのレベル（単数または複数）は、被験体が慢性心不全に迅速に進行するリスクおよび／または慢性心不全によって入院するリスクおよび／または死亡するリスクを持たないことを示す。
【0087】
本発明はまた、被験体が慢性心不全に迅速に進行するリスクおよび／または慢性心不全によって入院するリスクおよび／または死亡するリスクを予測するため、（ｉ）異常なＭＦＳ、および／または（ｉｉ）ＬＶＨを患う被験体試料中のＢＮＰ型ペプチド、ＩＧＦＢＰ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、心臓トロポニン、可溶性ＳＴ２（ｓＳＴ２）、ＦＧＦ－２３（線維芽細胞増殖因子２３）、増殖分化因子１５（ＧＤＦ－１５）、細胞間接着分子１（ＩＣＡＭ－１）、およびアンギオポエチン－２（ＡＮＧ２）からなる群より選択される少なくとも１つのバイオマーカーの使用にも関する。
【0088】
本発明はまた、被験体が慢性心不全に迅速に進行するリスクおよび／または慢性心不全によって入院するリスクおよび／または死亡するリスクを予測するため、（ｉ）異常なＭＦＳ、および／または（ｉｉ）ＬＶＨを患う被験体試料中のＢＮＰ型ペプチド、ＩＧＦＢ
Ｐ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、心臓トロポニン、可溶性ＳＴ２（ｓＳＴ２）、ＦＧＦ－２３（線維芽細胞増殖因子２３）、増殖分化因子１５（ＧＤＦ－１５）、細胞間接着分子１（ＩＣＡＭ－１）、およびアンギオポエチン－２（ＡＮＧ２）からなる群より選択されるバイオマーカーに結合する少なくとも１つの結合剤の使用にも関する。
Ｐ７（ＩＧＦ結合タンパク質７）、心臓トロポニン、可溶性ＳＴ２（ｓＳＴ２）、ＦＧＦ－２３（線維芽細胞増殖因子２３）、増殖分化因子１５（ＧＤＦ－１５）、細胞間接着分子１（ＩＣＡＭ－１）、およびアンギオポエチン－２（ＡＮＧ２）からなる群より選択されるバイオマーカーに結合する少なくとも１つの結合剤の使用にも関する。
【0089】
上に言及するすべての参考文献は、その全開示内容、ならびに上記説明に明確に言及する特定の開示内容に関して、本明細書に援用される。
【実施例】
【0090】
以下の実施例は本発明を例示するものとする。これらはしかし、本発明の範囲を限定するとは見なされないものとする。
実施例１：
いくつかの循環バイオマーカーと、不都合な転帰を伴う、前臨床収縮不全の初期心エコー指標である異常な中層短縮率（ＭＦＳ）の組み合わせを調べた。
実施例１：
いくつかの循環バイオマーカーと、不都合な転帰を伴う、前臨床収縮不全の初期心エコー指標である異常な中層短縮率（ＭＦＳ）の組み合わせを調べた。
【0091】
多様なバイオマーカー（ＮＴプロＢＮＰ、ＩＣＡＭ１、ｃＴＮＴ、ＦＧＦ２３、ＩＧＦＢＰ７、ＭＭＰ２、ＰＬＧＦ、ｅセレクチン、ＧＤＦ１５、ＳＴ２、ガレクチン－３，ビタミンＤ、ＣＲＰ、シスタチンＣ、ＯＰＮ、Ｐ１ＮＰ、ミメカン、エンドスタチン、プロＡＮＰ、ＡＮＧ２）の循環レベルを、ＰＲＥＤＩＣＴＯＲ研究から選択した５５０の高齢個体（年齢６５～８４歳）において測定した。参加者は、臨床検査および中央測定ＭＦＳを伴う包括的ドップラー心エコーのため、心臓センターに委ねられた。すべての原因の死亡の絶対数は、管理データの記録連結から４６［３９～５４］ヶ月後の追跡期間中央値で利用可能であった。死亡は３６例で記録された。
【0092】
ＬＶ中層機能不全の個体（ＭＦＳ＜１５％）は、正常機能を持つものよりも、ＮＴ－プロＢＮＰ、ｃＴｎＴ、ＩＧＦＢＰ７、ｓＳＴ２、ＧＤＦ１５、ＩＣＡＭ１またはＦＧＦ２３のより高いレベルを有した。異常なＭＦＳおよび上昇したＮＴ－プロＢＮＰを持つ個体の間の相対死亡発生率は（＞７５年齢および性別特異的パーセンタイル）は、１４．２９％対１，９６％（異常なＭＦＳ、低ＮＴ－プロＢＮＰ）、６．２２％（正常ＭＦＳ、高ＮＴ－プロＢＮＰ）および０．８５％（正常ＭＦＳ、低ＮＴ－プロＢＮＰ）であった（図１）。
【0093】
ｃＴｎＴ（＞３ｎｇ／Ｌ）に関する対応する値は、１４．０９、０，０、４，６５および３％であった（図２）。中央値濃度を超える、ＩＧＦＢＰ７に関する対応する値は、１５，８５、２，９４、６，８７および１，３６％であった（図３）。中央値濃度を超える、ｓＳＴ２に関する対応する値は、１５，８９、４，８２、６，１３および２，０３％であった（図４）。中央値濃度を超える、ＦＧＦ２３に関する対応する値は、１４，０４、６，５８、６，９および１，８３％であった（図５）。
【0094】
性別、年齢、ｅＧＦＲおよび高血圧歴に関して調整した後、異常なＭＦＳ、および上昇したＮＴプロＢＮＰ、ＩＧＦＢＰ７、ＦＧＦ２３、ＧＤＦ１５、ＩＣＡＭ１、ＡＮＧ２またはｓＳＴ２を有する被験体は、正常ＭＦＳおよび低いＮＴプロＢＮＰ、ＩＧＦＢＰ７、ＦＧＦ２３、ＧＤＦ１５、ＩＣＡＭ１、ＡＮＧ２またはｓＳＴ２を有するものに比較して、死亡率のより高いリスクを有した。
【0095】
ＮＴプロＢＮＰに関してハザード比（ＨＲ）＝１１．４（ｐ＝０．００２）、ＳＴ２に関してＨＲ＝６．１（ｐ＝０．００５）、ＩＣＡＭ１に関してＨＲ＝７．４（ｐ＝０．００２）、アンギオポエチン２に関してＨＲ＝３．２（ｐ＝０．０２）、ＩＧＦＢＰ７に関してＨＲ＝６．５（ｐ＝０．００２）、ＦＧＦ２３に関してＨＲ＝７．４６（ｐ＝０．００２）、ＧＤＦ１５に関してＨＲ＝７．３９（ｐ＝０．００２）（表１）。
【0096】
ＭＦＳを伴い、ＬＶ収縮機能の初期の改変と組み合わされた、循環ＮＴプロＢＮＰ、ｃＴｎＴ、ＩＧＦＢＰ７、ＦＧＦ２３、ＧＤＦ１５、ＩＣＡＭ１、ＡＮＧ２またはｓＳＴ２の上昇は、年齢６５歳またはそれより高齢である一般集団において、死亡するより高いリスクを有する、個体の下位群を同定する。
【0097】
性別、年齢、ｅＧＦＲおよび高血圧歴に関して調整した後、上昇したＳＴ２またはＩＧＦＢＰ７またはＧＤＦ１５またはＦＧＦ２３と組み合わせて、異常なＭＦＳおよび上昇したＮＴプロＢＮＰを有する被験体は、正常ＭＦＳおよび低ＮＴプロＢＮＰ、ＳＴ２、ＦＧＦ２３、ＧＤＦ１５、ＩＧＦＢＰ７を有するものと比較して、より高い死亡率のリスクを有した。ＮＴプロＢＮＰおよびＩＧＦＢＰ７に関して、ＨＲ＝２０．０１、ＮＴプロＢＮＰおよびＳＴ２に関してＨＲ＝１９．０７、ＮＴプロＢＮＰおよびＦＧＦ２３に関して１０．５４、ＮＴプロＢＮＰおよびＧＤＦ１５に関してＨＲ＝１２．６２（表１）。性別、年齢、ｅＧＦＲおよび高血圧歴に関して調整した後、上昇したＳＴ２と組み合わせて、異常なＭＦＳおよび上昇したＩＧＦＢＰ７を有する被験体は、正常ＭＦＳおよび低ＩＧＦＢＰ７および低ＳＴ２を有するものと比較して、より高い死亡率のリスクを有した。ＩＧＦＢＰ７およびＳＴ２に関してＨＲ＝１７．９６（表１）。
【0098】
上昇した循環ＮＴプロＢＮＰは、異常なＭＦＳと組み合わせて測定した際、不都合な転帰への最も顕著な関連を示した（表１）。上昇した循環ＮＴプロＢＮＰは、上昇した循環ＩＧＦＢＰ７および異常なＭＦＳまたはＬＶＨのいずれかと組み合わせて測定した際、不都合な転帰／死亡率に最も顕著な関連を示した（図１１および１２、表１）。
【0099】
性別、年齢、ｅＧＦＲおよび高血圧歴に関して調整した後、異常なＭＦＳおよび上昇したＮＴプロＢＮＰ、Ａｎｇ２、ＩＣＡＭ１、ＩＧＦＢＰ７、ｓＳＴ２、ＧＤＦ１５およびＦＧＦ２３を有する被験体は、死亡率に関して有意により高いリスクを有することが見出された（表１）。
【0100】
対照的に、本研究に含まれたいくつかの他のバイオマーカーは、異常なＭＦＳと組み合わせて測定した際、ＣＶ／ＨＦに関連する不都合な転帰に関してより高いリスクを有する高齢者集団における下位群を同定するために適しているとは見出されなかった。
【0101】
上昇したＣＲＰ、ＣｙｓＣ，ビタミンＤおよびプロＡＮＰは、異常なＭＦＳを持つ被験体における死亡のより高いリスクと顕著に関連することは見出されなかった。性別、年齢、ｅＧＦＲおよび高血圧歴に関して調整した後、異常なＭＦＳおよび上昇したＣＲＰ、ＣｙｓＣ、プロＡＮＰ、ビタミンＤを有する被験体は、異常なＭＦＳを持たず、そしてそれぞれのバイオマーカーが低レベルである被験体と比較して、死亡率の有意により高いリスクを持たないことが見出された（表１）。
【0102】
実施例２：
実施例１に言及するようなバイオマーカーと異常なＭＦＳの組み合わせを、正常左心室重量を有するＰＲＥＤＩＣＴＯＲ研究の参加者から得た試料のサブセットにおいて、さらに調べた。
実施例１に言及するようなバイオマーカーと異常なＭＦＳの組み合わせを、正常左心室重量を有するＰＲＥＤＩＣＴＯＲ研究の参加者から得た試料のサブセットにおいて、さらに調べた。
【0103】
ＬＶ中層機能不全（ＭＦＳ＜１５％）を有する個体は、正常機能を持つものよりより高いレベルのＮＴ－プロＢＮＰ、ｃＴｎＴ、ＩＧＦＢＰ７、ｓＳＴ２またはＦＧＦ２３を有した。異常なＭＦＳおよび上昇したＮＴ－プロＢＮＰを有する個体の死亡の相対発生率（＞７５年齢および性別特異的パーセンタイル）は、１３．５１％対０％（異常なＭＦＳ、低ＮＴ－プロＢＮＰ）、６．７７％（正常ＭＦＳ、高ＮＴ－プロＢＮＰ）および１．０６％（正常ＭＦＳ、低ＮＴ－プロＢＮＰ）であった（図６）。中央値濃度を超えるＩＧＦＢＰ７に関する対応する値は、１６，０％、６．９３％および１．９％であった（図８）。
【0104】
異常なＭＦＳおよび上昇したｃＴｎＴ（＞３ｎｇ／Ｌ）を有する個体の間の死亡の絶対数は、５対０（異常なＭＦＳ、低ｃＴｎＴ）、８（正常ＭＦＳ、高ｃＴｎＴ）および２（正常ＭＦＳ、低ｃＴｎＴ）であった（図７）。中央値濃度を超えるｓＳＴ２に関する対応する数値は、３、２、９および１であった。中央値濃度を超えるＦＧＦ２３に関する対応する数値は、５、０、７および３であった（図９）（図１０）。
【0105】
ＭＦＳを伴い、ＬＶ収縮機能の早期改変と組み合わされた、循環ＮＴプロＢＮＰ、ｃＴｎＴ、ＩＧＦＢＰ７、ＦＧＦ２３またはｓＳＴ２の上昇は、ＣＶ／ＨＦ関連入院／死亡および／またはすべての原因の死亡のより高いリスクを有する、正常左心室重量を持つ年齢６５歳またはそれより高齢の一般集団における個体の下位群を同定する。
【0106】
対照的に、本研究に含まれるいくつかの他のバイオマーカーは、正常ＬＶ重量を有する被験体における異常なＭＦＳと組み合わせて測定した際、ＣＶ／ＨＦに関連する不都合な転帰のより高いリスクを有する、高齢集団における下位群を同定するためには、適しているとは見出されなかった。
【0107】
実施例３
不都合な転帰を伴う、前臨床構造的心疾患の早期心エコー指標である左心室肥大と、いくつかの循環バイオマーカーの組み合わせを調べた。
不都合な転帰を伴う、前臨床構造的心疾患の早期心エコー指標である左心室肥大と、いくつかの循環バイオマーカーの組み合わせを調べた。
【0108】
ＰＲＥＤＩＣＴＯＲ研究より選択した５５０人の高齢個体（年齢６５～８４歳）において、ＮＴ－プロＢＮＰ、ＩＣＡＭ－１、ＳＴ２、ｈｓＣＲＰ、シスタチンＣ、プロＡＮＰ、ビタミンＤ、ＦＧＦ２３、ＧＤＦ１５およびＩＧＦＢＰ７の循環レベルを測定した。死亡の絶対数は、管理データの記録連結から４６［３９～５４］ヶ月後の追跡期間中央値で利用可能であった。死亡は３６例で記録された。
【0109】
ＬＶＨを有する個体は、正常機能を有するものよりも、より高いレベルのＮＴ－プロＢＮＰおよびＩＧＦＢＰ７を有した。ＬＶＨ、上昇したＮＴプロＢＮＰ（＞７５年齢および性別特異的パーセンタイル）および上昇したＩＧＦＢＰ７（中央値濃度を超える）を有する個体間の相対死亡発生率は、１９．１５％対０％（ＬＶＨ、低ＮＴプロＢＮＰ、低ＩＧＦＢＰ７）、１３．７９％（ＬＶＨなし、高ＮＴプロＢＮＰ、高ＩＧＦＢＰ７）および１．０８％（ＬＶＨなし、低ＮＴプロＢＮＰ、低ＩＧＦＢＰ７）であった（図１１）。異常なＭＦＳ、上昇したＮＴプロＢＮＰ（＞７５年齢および性別特異的パーセンタイル）および上昇したＩＧＦＢＰ７（中央値濃度を超える）を有する個体間の相対死亡発生率は、１７％対３％であった（異常なＭＦＳなし、低ＮＴプロＢＮＰ、低ＩＧＦＢＰ７）。
【0110】
ＬＶＨと組み合わされた循環ＮＴプロＢＮＰおよびＩＧＦＢＰ７の上昇は、年齢６５歳またはそれより高齢である一般集団において、死亡するより高いリスクを有する、個体の下位群を同定する。
【0111】
ＬＶＨと組み合わされた循環ＮＴプロＢＮＰおよびＩＧＦＢＰ７の両方の上昇は、年齢６５歳またはそれより高齢である一般集団において、死亡するより高いリスクを有する、個体の下位群を同定する。
【0112】
性別、年齢、ｅＧＦＲおよび高血圧歴に関して調整した後、ＬＶＨおよび上昇したＮＴプロＢＮＰおよびＩＧＦＢＰ７を有する被験体は、ＬＶＨを持たず、そして低ＩＧＦＢＰ７、ＮＴプロＢＮＰであるものに比較して、ＣＶ／ＨＦ関連入院／死亡のより高いリスクを有した。
【0113】
ＬＶＨと組み合わされた循環ＮＴプロＢＮＰ、ＩＧＦＢＰ－７、ＩＣＡＭ－１、ＦＧＦ２３、ＧＤＦ１５またはｓＳＴ２の上昇は、年齢６５歳またはそれより高齢である一般集団において、ＣＶ／ＨＦ関連入院／死亡および／またはすべての原因の死亡のより高いリスクを有した。
【0114】
性別、年齢、ｅＧＦＲおよび高血圧歴に関して調整した後、ＬＶＨおよび上昇したＦＧＦ２３、ＧＤＦ１５、ＩＣＡＭ１、またはｓＳＴ２を有する被験体は、正常ＬＶ重量および低ＦＧＦ２３、ＧＤＦ１５、ＩＣＡＭ１またはｓＳＴ２を有するものと比較して、死亡のより高いリスクを有した。
【0115】
ＳＴ２に関してハザード比（ＨＲ）＝３．５（ｐ＝０．０８）、ＩＣＡＭ１に関してＨＲ＝５．５（ｐ＝０．００９）、ＦＧＦ２３に関してＨＲ＝４．９（ｐ＝０．０１）、ＧＤＦ１５に関してＨＲ＝５．８３（ｐ＝０．０３）（表２）。
【0116】
性別、年齢、ｅＧＦＲおよび高血圧歴に関して調整した後、上昇したＳＴ２またはＩＧＦＢＰ７またはＧＤＦ１５またはＦＧＦ２３と組み合わされた、ＬＶＨおよび上昇したＮＴプロＢＮＰを有する被験体は、正常ＬＶ重量および低ＮＴプロＢＮＰ、ＳＴ２、ＦＧＦ２３、ＧＤＦ１５、ＩＧＦＢＰ７を有するものと比較して、より高い死亡リスクを有した。ＮＴプロＢＮＰおよびＩＧＦＢＰ７に関してＨＲ＝９．８、ＮＴプロＢＮＰおよびＳＴ２に関してＨＲ＝１１．９、ＮＴプロＢＮＰおよびＦＧＦ２３に関してＨＲ＝８．３、ＮＴプロＢＮＰおよびＧＤＦ１５に関してＨＲ＝７．１（表２）。性別、年齢、ｅＧＦＲおよび高血圧歴に関して調整した後、上昇したＳＴ２と組み合わされた、ＬＶＨおよび上昇したＩＧＦＢＰ７を有する被験体は、正常ＭＦＳおよび低ＩＧＦＢＰ７および低ＳＴ２を有するものと比較して、より高い死亡リスクを有した。ＩＧＦＢＰ７およびＳＴ２に関してＨＲ＝５．７（表２）。
【0117】
対照的に、本研究に含まれるいくつかの他のバイオマーカーは、ＬＶＨを有する被験体で測定した際、ＣＶ／ＨＦに関連する不都合な転帰のより高いリスクを有する高齢集団中の下位群を同定するためには、適しているとは見出されなかった。
【0118】
上昇したＣＲＰ、ＣｙｓＣ，ビタミンＤおよびプロＡＮＰは、ＬＶＨを有する被験体において、死亡のより高いリスクと顕著に関連するとは見出されなかった。性別、年齢、ｅＧＦＲおよび高血圧歴に関して調整した後、ＬＶＨおよび上昇したＣＲＰ、ＣｙｓＣ、プロＡＮＰ、ビタミンＤを有する被験体は、ＬＶＨを持たず、そして低いそれぞれのバイオマーカーレベルを有するものと比較して、死亡の有意により高いリスクを有するとは見出されなかった（表２）。
【0119】
表１：異常なＭＦＳおよび上昇した濃度のバイオマーカーを有する被験体における、死亡率に関する多変数Ｃｏｘモデル
【0120】
【表1】
【0121】
表２：ＬＶＨおよび上昇した濃度のバイオマーカーを有する被験体における、死亡率に関する多変数Ｃｏｘモデル
【0122】
【表2】
【0123】
表３：ＬＶＨまたは異常なＭＦＳと組み合わせた、上昇したバイオマーカーおよび死亡に関連するすべての研究で用いた参照レベル
【0124】
【表3】
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10】
【図11】
【図12】