(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】特許公報(B2)
(11)【特許番号】
(24)【登録日】2022-08-03
(45)【発行日】2022-08-12
(54)【発明の名称】カランコエ属におけるウドンコ病耐性遺伝子
(51)【国際特許分類】
C12N 15/57 20060101AFI20220804BHJP
A01H 6/00 20180101ALI20220804BHJP
C12N 5/04 20060101ALI20220804BHJP
C12N 9/66 20060101ALI20220804BHJP
【ＦＩ】
C12N15/57
A01H6/00
C12N5/04
C12N9/66 ZNA
【請求項の数】
6
(21)【出願番号】P 2017564798
(86)(22)【出願日】2016-02-29
(65)【公表番号】
(43)【公表日】2018-03-29
(86)【国際出願番号】 EP2016054220
(87)【国際公開番号】W WO2016139178
(87)【国際公開日】2016-09-09
【審査請求日】2018-08-31
【審判番号】
【審判請求日】2020-05-21
(31)【優先権主張番号】15157519.8
(32)【優先日】2015-03-04
(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP
(73)【特許権者】
【識別番号】517309157
【氏名又は名称】デュメン・グループ・ベー・フェー
【氏名又は名称原語表記】ＤＵＭＭＥＮ ＧＲＯＵＰ Ｂ．Ｖ．
【住所又は居所原語表記】Ｃｏｌｄｅｎｈｏｖｅｌａａｎ ６，２６７８ ＰＳ Ｄｅ Ｌｉｅｒ，Ｔｈｅ Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ
(74)【代理人】
【識別番号】110000523
【氏名又は名称】アクシス国際特許業務法人
(72)【発明者】
【氏名】イサーク・ヨハネス・フリーランデル
(72)【発明者】
【氏名】チュンティン・ラン
(72)【発明者】
【氏名】パウルス・コルネリス・マリス
(72)【発明者】
【氏名】ロジャー・アドリアヌス・ペーテルス
【合議体】
【審判長】福井 悟
【審判官】長井 啓子
【審判官】宮岡 真衣
(56)【参考文献】
【文献】米国植物特許発明第６８７８（ＵＳ，Ｐ）
【文献】特表２０１４－５１３９２２（ＪＰ，Ａ）
【文献】特開２０１４－３９８０（ＪＰ，Ａ）
【文献】Ｃｈｏ，Ｓ．Ｅ．ｅｔ ａｌ．，Ｆｉｒｓｔ Ｒｅｐｏｒｔ ｏｆ Ｐｏｗｄｅｒｙ Ｍｉｌｄｅｗ Ｃａｕｓｅｄ ｂｙ Ｅｒｙｓｉｐｈｅ ｓｅｄｉ ｏｎ Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｂｌｏｓｓｆｅｌｄｉａｎａ ｉｎ Ｋｏｒｅａ，［ｏｎｌｉｎｅ］，Ｐｌａｎｔ Ｄｉｓ．，２０１２年１０月２２日，Ｖｏｌ．９６，ｐ．１７０１，［ｒｅｔｒｉｅｖｅｄ ｏｎ ２０１９－０６－１９］，Ｉｎｔｅｒｎｅｔ，ＵＲＬ，ｈｔｔｐｓ：／／ａｐｓｊｏｕｒｎａｌｓ．ａｐｓｎｅｔ．ｏｒｇ／ｄｏｉ１０．１０９４／ＰＤＩＳ－０６－１２－０５７０－ＰＤＮ
(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)
C12N 15/00 - 15/90
C12N 9/00 - 9/99
A01H 1/00 - 17/00
A01N 1/00 - 65/48
A01P 1/00 - 23/00
ＣＡＰｌｕｓ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ／ＷＰＩＤＳ（ＳＴＮ）
ＵｎｉＰｒｏｔ／ＧｅｎｅＳｅｑ
ＧｅｎＢａｎｋ／ＥＭＢＬ／ＤＤＢＪ／ＧｅｎｅＳｅｑ
ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０／ＪＭＥＤＰｌｕｓ（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）
ＰｕｂＭｅｄ
(57)【特許請求の範囲】
【請求項1】
配列番号１のタンパク質と比較して、カランコエ植物のチオエステラーゼ又はチオエステラーゼ様タンパク質にアミノ酸の置換を含むタンパク質を含むカランコエ植物、そのプロトプラスト又は植物部分であって、該アミノ酸の置換が配列番号１の２２位及び２３位でのアミノ酸トレオニンのアラニンへのアミノ酸置換であり、該カランコエ植物、そのプロトプラスト又は植物部分がウドンコ病に対して耐性である、カランコエ植物、そのプロトプラスト又は植物部分。
【請求項2】
前記タンパク質が配列番号２のタンパク質である、請求項１に記載のカランコエ植物、そのプロトプラスト又は植物部分。
【請求項3】
前記タンパク質がアミノ酸配列モチーフ「ＰＡＴＡＡＥＳＴ」を含む、請求項１又は２に記載のカランコエ植物、そのプロトプラスト又は植物部分。
【請求項4】
配列番号３の６４位のＡからＧの核酸置換及び６７位のＡからＧの核酸置換を有する核酸を含むカランコエ植物、そのプロトプラスト又は植物部分であって、該カランコエ植物、そのプロトプラスト又は植物部分がウドンコ病に対して耐性である、カランコエ植物、そのプロトプラスト又は植物部分。
【請求項5】
前記カランコエ植物、そのプロトプラスト又は植物部分がウドンコ病原菌Ｏｉｄｉｕｍ ｋａｌａｎｃｈｏｅａｅに対して耐性である、請求項１～４のいずれかに記載のカランコエ植物、そのプロトプラスト又は植物部分。
【請求項6】
前記カランコエ植物、そのプロトプラスト又は植物部分がＫａｌａｎｃｈｏｅ ａｄｅｌａｅ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ａｒｂｏｒｅｓｃｅｎｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｂｅａｕｖｅｒｄｉｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｂｅｈａｒｅｎｓｉｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｂｅｎｔｉｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｂｌｏｓｓｆｅｌｄｉａｎａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｂｏｕｖｅｔｉｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｂｒａｃｔｅａｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｃａｍｐａｎｕｌａｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｃｒｅｎａｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｃｒｕｎｄａｌｌｉｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｄａｉｇｒｅｍｏｎｔｉａｎａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｄｅｌａｇｏｅｎｓｉｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｄｉｎｋｌａｇｅｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｅｒｉｏｐｈｙｌｌａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｆａｒｉｎａｃｅａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｆｅｄｔｓｃｈｅｎｋｏｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｆｉｇｕｅｒｅｉｄｏｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｆｌａｍｍｅａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｇａｓｔｏｎｉｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｇｌａｕｃｅｓｃｅｎｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｇｒａｃｉｌｉｐｅｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｇｒａｎｄｉｄｉｅｒｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｇｒａｎｄｉｆｌｏｒａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｈｉｌｄｅｂｒａｎｔｉｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｊｏｎｇｍａｎｓｉｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｋｅｗｅｎｓｉｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｌａｃｉｎｉａｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｌａｅｔｉｖｉｒｅｎｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｌａｔｅｒｉｔｉａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｌａｘｉｆｌｏｒａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｌｉｎｅａｒｉｆｏｌｉａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｌｏｎｇｉｆｌｏｒａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｌｕｃｉａｅ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｍａｃｒｏｃｈｌａｍｙｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｍａｎｇｉｎｉｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｍａｒｎｉｅｒｉａｎａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｍａｒｍｏｒａｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｍｉｌｌｏｔｔｉｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｍｉｎｉａｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｎｙｉｋａｅ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｏｂｔｕｓａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｏｒｇｙａｌｉｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｐｅｌｔａｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｐｅｔｉｔｉａｎａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｐｉｎｎａｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｐｏｒｐｈｙｒｏｃａｌｙｘ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｐｕｂｅｓｃｅｎｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｐｕｍｉｌａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｑｕａｒｔｉｎｉａｎａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｒｈｏｍｂｏｐｉｌｏｓａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｒｏｂｕｓｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｒｏｌａｎｄｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｒｏｓｅｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｓｃｈｉｚｏｐｈｙｌｌａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｓｅｒｒａｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｓｅｘａｎｇｕｌａｒｉｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｓｔｒｅｐｔａｎｔｈａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｓｕａｒｅｚｅｎｓｉｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｓｙｎｓｅｐａｌａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｓｙｎｓｅｐａｌａ ｆ．ｄｉｓｓｅｃｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｔｈｙｒｓｉｆｌｏｒａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｔｏｍｅｎｔｏｓａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｔｕｂｉｆｌｏｒａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｕｎｉｆｌｏｒａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｖｅｌｕｔｉｎａ及びＫａｌａｎｃｈｏｅ ｖｉｇｕｉｅｒｉ；好ましくはＫ．ｂｌｏｓｓｆｅｌｄｉａｎａ、Ｋ．ｌａｃｉｎｉａｔａ、Ｋ．ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｋ．ａｒｏｍａｔｉｃａ、Ｋ．ｐｕｂｅｓｃｅｎｓ、Ｋ．ｇｒａｎｄｉｆｌｏｒａ、Ｋ．ｃｉｔｒｉｎａ、Ｋ．ａｍｂｏｌｅｎｓｉｓ、Ｋ．ｆａｕｓｔｉｉ、Ｋ．ｓｃｈｕｍａｃｈｅｒｉｉ、Ｋ．ｐｒｉｔｗｉｔｚｉｉ、Ｋ．ｆｌａｍｍｅａ、Ｋ．ｆｉｇｕｅｒｅｄｏｉ、Ｋ．ｒａｕｈｉｉ、Ｋ．ｏｂｔｕｓａ、Ｋ．ｐｕｍｉｌａ、Ｋ．ｍａｒｍｏｒａｔａ、Ｋ．ｐｏｒｐｈｙｒｏｃａｌｕｘ、Ｋ．ｊｏｎｇｍａｎｓｉｉ、Ｋ．ｐｉｎｎａｔａ、Ｋ．ｄｉａｇｒｅｍｏｎｔｉａｎａ、Ｋ．ｇｒａｃｉｌｉｐｅｓ、Ｋ．ｃａｍｐａｎｕｌａｔａ、Ｋ．ｌａｔｉｓｅｐｅｌａ、Ｋ．ｃｏｃｃｉｎｅａ、Ｋ．ｆｅｄｔｓｃｈｅｎｋｏｉ、Ｋ．ｔｕｂｉｆｌｏｒａ、Ｋ．ｄｅｃｕｍｂｅｎｓ、Ｋ．ｍａｎｇｉｎｉｉ、Ｋ．ｏｒｇｙａｌｉｓ、Ｋ．ｃｒｅｎａｔａ、Ｋ．ｔｏｍｅｎｔｏｓａ及びそれらの雑種よりなる群から選択される装飾的な花がさくカランコエ植物よりなる群から選択される、請求項１～５のいずれかに記載のカランコエ植物、そのプロトプラスト又は植物部分。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、カランコエ属に属する植物に、ウドンコ病耐性表現型又はウドンコ病耐性を付与することができるタンパク質に関する。このウドンコ病耐性は、好ましくは、Ｏｉｄｉｕｍ ｋａｌａｎｃｈｏｅａｅが原因病原体である、ウドンコ病菌感染に対する耐性である。本発明は、このタンパク質をコードする核酸配列又はｃＤＮＡ配列及び遺伝子に関するものでもある。さらに、本発明は、本願所定のタンパク質、核酸配列及び遺伝子の、ウドンコ病耐性カランコエ属植物、例えばＯｉｄｉｕｍ ｋａｌａｎｃｈｏｅａｅ耐性カランコエ植物を選択するための使用、並びに、本願所定のタンパク質、本願所定のｃＤＮＡのｍＲＮＡ形態又は本願所定の遺伝子を含むウドンコ病耐性カランコエ植物、例えばＯｉｄｉｕｍ ｋａｌａｎｃｈｏｅａｅ耐性カランコエ植物に関する。
【背景技術】
【0002】
カランコエ（Ｋａｌａｎｃｈｏｅ）は、アカマツ科の熱帯性多肉植物のうち約１２５種の属である。この属のうちの１種のみがアメリカに由来し、５６種がアフリカ南部及び東部に由来し、６０種がマダガスカルに由来することが知られている。カランコエ属植物は南東アジア及び中国でも見られる。
【0003】
カランコエ属に属する既知種は、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ａｄｅｌａｅ；Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ａｒｂｏｒｅｓｃｅｎｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｂｅａｕｖｅｒｄｉｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｂｅｈａｒｅｎｓｉｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｂｅｎｔｉｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｂｌｏｓｓｆｅｌｄｉａｎａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｂｏｕｖｅｔｉｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｂｒａｃｔｅａｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｃａｍｐａｎｕｌａｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｃｒｅｎａｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｃｒｕｎｄａｌｌｉｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｄａｉｇｒｅｍｏｎｔｉａｎａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｄｅｌａｇｏｅｎｓｉｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｄｉｎｋｌａｇｅｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｅｒｉｏｐｈｙｌｌａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｆａｒｉｎａｃｅａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｆｅｄｔｓｃｈｅｎｋｏｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｆｉｇｕｅｒｅｉｄｏｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｆｌａｍｍｅａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｇａｓｔｏｎｉｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｇｌａｕｃｅｓｃｅｎｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｇｒａｃｉｌｉｐｅｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｇｒａｎｄｉｄｉｅｒｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｇｒａｎｄｉｆｌｏｒａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｈｉｌｄｅｂｒａｎｔｉｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｊｏｎｇｍａｎｓｉｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｋｅｗｅｎｓｉｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｌａｃｉｎｉａｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｌａｅｔｉｖｉｒｅｎｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｌａｔｅｒｉｔｉａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｌａｘｉｆｌｏｒａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｌｉｎｅａｒｉｆｏｌｉａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｌｏｎｇｉｆｌｏｒａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｌｕｃｉａｅ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｍａｃｒｏｃｈｌａｍｙｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｍａｎｇｉｎｉｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｍａｒｎｉｅｒｉａｎａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｍａｒｍｏｒａｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｍｉｌｌｏｔｔｉｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｍｉｎｉａｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｎｙｉｋａｅ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｏｂｔｕｓａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｏｒｇｙａｌｉｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｐｅｌｔａｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｐｅｔｉｔｉａｎａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｐｉｎｎａｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｐｏｒｐｈｙｒｏｃａｌｙｘ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｐｕｂｅｓｃｅｎｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｐｕｍｉｌａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｑｕａｒｔｉｎｉａｎａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｒｈｏｍｂｏｐｉｌｏｓａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｒｏｂｕｓｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｒｏｌａｎｄｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｒｏｓｅｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｓｃｈｉｚｏｐｈｙｌｌａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｓｅｒｒａｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｓｅｘａｎｇｕｌａｒｉｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｓｔｒｅｐｔａｎｔｈａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｓｕａｒｅｚｅｎｓｉｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｓｙｎｓｅｐａｌａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｓｙｎｓｅｐａｌａ ｆ． ｄｉｓｓｅｃｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｔｈｙｒｓｉｆｌｏｒａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｔｏｍｅｎｔｏｓａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｔｕｂｉｆｌｏｒａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｕｎｉｆｌｏｒａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｖｅｌｕｔｉｎａ及びＫａｌａｎｃｈｏｅ ｖｉｇｕｉｅｒｉである。
【0004】
ほとんどのカランコエ属植物は、低木又は多年生の草本植物であるが、少数は毎年又は隔年である。最も大きなマダガスカル産Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｂｅｈａｒｅｎｓｉｓ植物は６メートルに達する場合があるが、ほとんどの種は１メートル未満である。カランコエ属植物は、花弁の内側表面に新たな細胞を成長させて花弁を外方向に移動させることによって花を開き、花弁の外側に新たな細胞を成長させて花を閉じることを特徴とする。
【0005】
カランコエ属植物は、一般に観賞用の室内園芸植物及び岩石庭園向け植物や水生庭園向け植物として栽培されている。カランコエ属植物は、増殖の容易さ、水が少なくて済むこと、及び典型的には栄養生長をはるかに上回って房に生じる広範囲の花色のため人気がある。ブリオフィラム（Ｂｒｙｏｐｈｙｌｌｕｍ）の区分（以前は独立の属であった）は、「着生植物」のＫａｌａｎｃｈｏｅ ｐｉｎｎａｔａなどの種を包含する。これらの植物では、新たな個体は、葉に沿ったくぼみに肉芽又は子芽としても知られる小植物体として栄養的に発育する。これらの若い植物は最終的に落ちて根をはる。花をつけて種をつけるこの属の種には雄株が見つかっていないため、一般に数千株の母と呼ばれている。
【0006】
他のベンケイソウ（Ｃｒａｓｓｕｌａｃｅａｅ）科（Ｔｙｌｅｃｏｄｏｎ、Ｃｏｔｙｌｅｄｏｎ及びＡｄｒｏｍｉｓｃｈｕｓ属など）と共通して、カランコエ種には、特に放牧動物において心臓に対する中毒症を引き起こす可能性のあるブファジエノイド強心配糖体が含まれている。これは南アフリカのカルー地域内における多くのカランコエ種の原産範囲で特に問題であり、そこで生じる動物の疾患はクリンププエク病（縮小症）又は子宮内膜症として知られている。同様の中毒症がオーストラリアでも起きている。
【0007】
伝統医学では、カランコエ種は、感染症、リウマチ及び炎症などの病気を治療するために使用されてきた。また、カランコエ抽出物は免疫抑制効果も有する。Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｐｉｎｎａｔａは、トリニダード・トバゴでは、伝統的な高血圧治療薬として使用されていると記録されている。
【0008】
ウドンコ病は、それ自体が特に生植物上で生じる微細な菌糸（真菌の菌糸）からなる、薄く表面的な通常は白っぽい成長物として現れる。園芸において、ウドンコ病は、一般に、Ｅｒｙｓｉｐｈａｌｅｓ目に属する真菌によって引き起こされる病気である。「ウドンコ病」という名称は、一般的にはカビの成長を意味するものとして使用することができる。当該技術分野では、ウドンコ病はベト病とも呼ばれ、用語ウドンコ病及びベト病は、本明細書において区別なく使用する。
【0009】
カランコエはウドンコ病の影響を特に受けやすい。ウドンコ病は、一般的に植物の生育に有害ではないが、植物が見苦しくて魅力的でなくなることで、植物育種家にとって大きな経済的損失を招くおそれがある。
【0010】
カランコエ属でのカビ感染の主な症状は、葉、芽、茎、新芽及び花に白いタルカムパウダー状の成長物が存在することである。ウドンコ病のカビは若くて柔らかい葉に感染しやすいが、古い葉にも同様に感染する。ウドンコ病に関連する他の症状としては、葉の黄変、葉の壊死、葉の巻き、葉の歪み及び早期の葉の落下が挙げられる。ウドンコ病菌に感染したカランコエは、発育が妨げられた状態になる場合が多い。重度のウドンコ病菌感染は、最終的に植物全体を覆うことになる。カビ感染の予防は、培養制御方法や殺菌剤によって達成できる。
【0011】
カランコエにおいてウドンコ病を防除するための培養ベースの方法及び殺菌剤の両方には欠点がある。例えば、培養ベースの方法は、カランコエ属植物の商業的成長及び培養には実用的ではなく、また、殺菌剤の欠点としては、殺菌剤による選択圧による環境への影響及びウドンコ病耐性病原菌の発生などが一般的に知られている。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0012】
カビ感染の経済的な影響を考慮すると、依然としてカランコエ育種の分野においては、ウドンコ病耐性カランコエ植物、特に、ウドンコ病原菌Ｏｉｄｉｕｍ ｋａｌａｎｃｈｏｅａｅに対して耐性であるカランコエ植物に対するニーズがある。当該技術分野では、Ｏｉｄｉｕｍ ｋａｌａｎｃｈｏｅａｅ、Ｏｉｄｉｕｍ ｋａｌａｎｃｈｏｅａｅは、Ｏｉｄｉｕｍｋａｌａｎｃｈｏeｓ又はＯｉｄｉｕｍ ｃａｌａｎｃｈｏｅａｅとも呼ばれている。
【0013】
本発明の目的は、特に、当該分野における上記ニーズを満たすことである。
【課題を解決するための手段】
【0014】
他の目的のうち、上記目的は、チオエステラーゼ又はチオエステラーゼ様タンパク質を与えるウドンコ病又はベト病耐性をコードするウドンコ病耐性遺伝子を提供することを通じて本発明によって達成される。
【0015】
具体的には、第１の態様によれば、上記の目的は、とりわけ、配列番号１のタンパク質又はそれと８０％の配列同一性を有するタンパク質と比較して、カランコエ植物のチオエステラーゼ又はチオエステラーゼ様タンパク質に１以上のアミノ酸の置換、欠失又は挿入を含むタンパク質であって、該１以上のアミノ酸の置換、欠失又は挿入によって、配列番号１又はそれと８０％の配列同一性を有するタンパク質を含むカランコエ植物と比較して、カランコエ植物におけるウドンコ病耐性が増大したタンパク質を提供することによる本発明によって達成される。
【0016】
ここで、このタンパク質は、ウドンコ病耐性、特に、ウドンコ病原体であるＯｉｄｉｕｍ ｋａｌａｎｃｈｏｅａｅに対する耐性を付与する、同定された第１タンパク質についてＲＯＫ－１タンパク質と示すことができる。
【0017】
このウドンコ病耐性、特にＯｉｄｉｕｍ ｋａｌａｎｃｈｏｅａｅに対する耐性の増大は、コードする遺伝子がホモ接合性で存在するかヘテロ接合性で存在するかにかかわらず観察される。
【0018】
本発明において、８０％～９９％の配列同一性の割合とは、対応するタンパク質がカランコエ植物においてウドンコ病耐性を付与する条件下で、８１％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％又は９８％などを意味する。
【0019】
本明細書で使用するときに、適切なアラインメント後の配列同一性とは、それぞれ配列番号１又は配列番号３の全長にわたる同一のアミノ酸又は核酸のパーセンテージをいう。
【0020】
本発明のこの態様の特に好ましい実施形態によれば、本願所定のタンパク質は、配列番号１のアミノ酸１～５０に１以上のアミノ酸の置換、欠失又は挿入を含む。本発明者は、驚くべきことに、ウドンコ病耐性表現型、例えば、ウドンコ病原菌Ｏｉｄｉｕｍ ｋａｌａｎｃｈｏｅａｅに対する耐性が特に配列番号１のＮ末端領域の修飾によって付与されることを見出した。本発明は、好ましくは配列番号１の２２位及び／又は２３位でのアミノ酸置換、より好ましくは配列番号１の２２位及び／又は２３位でのアミノ酸トレオニンの置換、最も好ましくは配列番号１の２２位及び／又は２３位でのアミノ酸トレオニンのアミノ酸アラニンによる置換に関する。
【0021】
本発明のさらに別の特に好ましい実施形態によれば、本願所定のタンパク質のアミノ酸配列は、配列番号２に示されるアミノ酸配列である。
【0022】
最も好ましい実施形態によれば、本発明に係るタンパク質は、アミノ酸配列モチーフ「ＰＡＴＡＡＥＳＴ」を含む。これに対し、ウドンコ病耐性を付与しないタンパク質は、例えばアミノ酸配列モチーフ「ＰＡＴＴＴＥＳＴ」を含む。
【0023】
本発明の第1の態様の好ましい実施形態によれば、カランコエ植物は、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ａｄｅｌａｅ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ａｒｂｏｒｅｓｃｅｎｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｂｅａｕｖｅｒｄｉｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｂｅｈａｒｅｎｓｉｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｂｅｎｔｉｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｂｌｏｓｓｆｅｌｄｉａｎａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｂｏｕｖｅｔｉｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｂｒａｃｔｅａｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｃａｍｐａｎｕｌａｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｃｒｅｎａｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｃｒｕｎｄａｌｌｉｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｄａｉｇｒｅｍｏｎｔｉａｎａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｄｅｌａｇｏｅｎｓｉｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｄｉｎｋｌａｇｅｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｅｒｉｏｐｈｙｌｌａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｆａｒｉｎａｃｅａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｆｅｄｔｓｃｈｅｎｋｏｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｆｉｇｕｅｒｅｉｄｏｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｆｌａｍｍｅａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｇａｓｔｏｎｉｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｇｌａｕｃｅｓｃｅｎｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｇｒａｃｉｌｉｐｅｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｇｒａｎｄｉｄｉｅｒｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｇｒａｎｄｉｆｌｏｒａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｈｉｌｄｅｂｒａｎｔｉｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｊｏｎｇｍａｎｓｉｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｋｅｗｅｎｓｉｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｌａｃｉｎｉａｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｌａｅｔｉｖｉｒｅｎｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｌａｔｅｒｉｔｉａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｌａｘｉｆｌｏｒａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｌｉｎｅａｒｉｆｏｌｉａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｌｏｎｇｉｆｌｏｒａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｌｕｃｉａｅ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｍａｃｒｏｃｈｌａｍｙｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｍａｎｇｉｎｉｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｍａｒｎｉｅｒｉａｎａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｍａｒｍｏｒａｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｍｉｌｌｏｔｔｉｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｍｉｎｉａｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｎｙｉｋａｅ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｏｂｔｕｓａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｏｒｇｙａｌｉｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｐｅｌｔａｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｐｅｔｉｔｉａｎａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｐｉｎｎａｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｐｏｒｐｈｙｒｏｃａｌｙｘ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｐｕｂｅｓｃｅｎｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｐｕｍｉｌａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｑｕａｒｔｉｎｉａｎａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｒｈｏｍｂｏｐｉｌｏｓａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｒｏｂｕｓｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｒｏｌａｎｄｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｒｏｓｅｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｓｃｈｉｚｏｐｈｙｌｌａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｓｅｒｒａｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｓｅｘａｎｇｕｌａｒｉｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｓｔｒｅｐｔａｎｔｈａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｓｕａｒｅｚｅｎｓｉｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｓｙｎｓｅｐａｌａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｓｙｎｓｅｐａｌａ ｆ．ｄｉｓｓｅｃｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｔｈｙｒｓｉｆｌｏｒａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｔｏｍｅｎｔｏｓａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｔｕｂｉｆｌｏｒａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｕｎｉｆｌｏｒａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｖｅｌｕｔｉｎａ及びＫａｌａｎｃｈｏｅ ｖｉｇｕｉｅｒｉ；好ましくは、Ｋ．ｂｌｏｓｓｆｅｌｄｉａｎａ、Ｋ．ｌａｃｉｎｉａｔａ、Ｋ．ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｋ．ａｒｏｍａｔｉｃａ、Ｋ．ｐｕｂｅｓｃｅｎｓ、Ｋ．ｇｒａｎｄｉｆｌｏｒａ、Ｋ．ｃｉｔｒｉｎａ、Ｋ．ａｍｂｏｌｅｎｓｉｓ、Ｋ．ｆａｕｓｔｉｉ、Ｋ．ｓｃｈｕｍａｃｈｅｒｉｉ、Ｋ．ｐｒｉｔｗｉｔｚｉｉ、Ｋ．ｆｌａｍｍｅａ、Ｋ．ｆｉｇｕｅｒｅｄｏｉ、Ｋ．ｒａｕｈｉｉ、Ｋ．ｏｂｔｕｓａ、Ｋ．ｐｕｍｉｌａ、Ｋ．ｍａｒｍｏｒａｔａ、Ｋ．ｐｏｒｐｈｙｒｏｃａｌｕｘ、Ｋ．ｊｏｎｇｍａｎｓｉｉ、Ｋ．ｐｉｎｎａｔａ、Ｋ．ｄｉａｇｒｅｍｏｎｔｉａｎａ、Ｋ．ｇｒａｃｉｌｉｐｅｓ、Ｋ．ｃａｍｐａｎｕｌａｔａ、Ｋ．ｌａｔｉｓｅｐｅｌａ、Ｋ．ｃｏｃｃｉｎｅａ、Ｋ．ｆｅｄｔｓｃｈｅｎｋｏｉ、Ｋ．ｔｕｂｉｆｌｏｒａ、Ｋ．ｄｅｃｕｍｂｅｎｓ、Ｋ．ｍａｎｇｉｎｉｉ、Ｋ．ｏｒｇｙａｌｉｓ、Ｋ．ｃｒｅｎａｔａ、Ｋ．ｔｏｍｅｎｔｏｓａ及びそれらの雑種よりなる群から選択される装飾的な花がさくカランコエ植物よりなる群から選択される。
【0024】
第２の態様によれば、本発明は、本願所定のタンパク質をコードする核酸配列に関し、好ましくは、この核酸配列は、配列番号３の６４位及び／又は６７位に核酸置換を有し、例えば、ＡのＧによる置換を有し、より好ましくは、この核酸配列は、配列番号４又は配列番号５又は配列番号６に示される配列を有する。
【0025】
第３の態様によれば、本発明は、本願所定の核酸配列に転写されることのできる遺伝子及びタンパク質に関する。したがって、本発明は、適切な条件下でｍＲＮＡを転写するための鋳型であることのできる遺伝子を包含し、このｍＲＮＡは、その後本願所定のタンパク質配列に翻訳される。
【0026】
第４の態様によれば、本発明は、本発明のタンパク質、核酸配列又は遺伝子の、ウドンコ病耐性Ｋａｌａｎｃｈｏｅ植物を選択するための使用に関する。このような選択は、例えば、ハイブリダイゼーション、ＰＣＲ、ＥＬＩＳＡ、制限分析又はノーザン／サザンブロットによって、Ｏｉｄｉｕｍ Ｋａｌａｎｃｈｏｅａｅ耐性カランコエ植物などのウドンコ病耐性カランコエ植物を好ましくは発育の初期段階で同定し、それによって既存及び新規のカランコエ植物の育種プロセスを容易にすることを含むことができる。
【0027】
本発明の使用方法は、好ましくは、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ａｄｅｌａｅ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ａｒｂｏｒｅｓｃｅｎｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｂｅａｕｖｅｒｄｉｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｂｅｈａｒｅｎｓｉｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｂｅｎｔｉｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｂｌｏｓｓｆｅｌｄｉａｎａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｂｏｕｖｅｔｉｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｂｒａｃｔｅａｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｃａｍｐａｎｕｌａｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｃｒｅｎａｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｃｒｕｎｄａｌｌｉｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｄａｉｇｒｅｍｏｎｔｉａｎａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｄｅｌａｇｏｅｎｓｉｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｄｉｎｋｌａｇｅｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｅｒｉｏｐｈｙｌｌａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｆａｒｉｎａｃｅａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｆｅｄｔｓｃｈｅｎｋｏｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｆｉｇｕｅｒｅｉｄｏｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｆｌａｍｍｅａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｇａｓｔｏｎｉｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｇｌａｕｃｅｓｃｅｎｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｇｒａｃｉｌｉｐｅｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｇｒａｎｄｉｄｉｅｒｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｇｒａｎｄｉｆｌｏｒａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｈｉｌｄｅｂｒａｎｔｉｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｊｏｎｇｍａｎｓｉｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｋｅｗｅｎｓｉｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｌａｃｉｎｉａｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｌａｅｔｉｖｉｒｅｎｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｌａｔｅｒｉｔｉａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｌａｘｉｆｌｏｒａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｌｉｎｅａｒｉｆｏｌｉａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｌｏｎｇｉｆｌｏｒａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｌｕｃｉａｅ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｍａｃｒｏｃｈｌａｍｙｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｍａｎｇｉｎｉｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｍａｒｎｉｅｒｉａｎａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｍａｒｍｏｒａｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｍｉｌｌｏｔｔｉｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｍｉｎｉａｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｎｙｉｋａｅ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｏｂｔｕｓａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｏｒｇｙａｌｉｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｐｅｌｔａｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｐｅｔｉｔｉａｎａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｐｉｎｎａｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｐｏｒｐｈｙｒｏｃａｌｙｘ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｐｕｂｅｓｃｅｎｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｐｕｍｉｌａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｑｕａｒｔｉｎｉａｎａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｒｈｏｍｂｏｐｉｌｏｓａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｒｏｂｕｓｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｒｏｌａｎｄｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｒｏｓｅｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｓｃｈｉｚｏｐｈｙｌｌａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｓｅｒｒａｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｓｅｘａｎｇｕｌａｒｉｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｓｔｒｅｐｔａｎｔｈａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｓｕａｒｅｚｅｎｓｉｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｓｙｎｓｅｐａｌａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｓｙｎｓｅｐａｌａ ｆ．ｄｉｓｓｅｃｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｔｈｙｒｓｉｆｌｏｒａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｔｏｍｅｎｔｏｓａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｔｕｂｉｆｌｏｒａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｕｎｉｆｌｏｒａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｖｅｌｕｔｉｎａ ａｎｄ Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｖｉｇｕｉｅｒｉ；好ましくは、Ｋ．ｂｌｏｓｓｆｅｌｄｉａｎａ、Ｋ．ｌａｃｉｎｉａｔａ、Ｋ．ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｋ．ａｒｏｍａｔｉｃａ、Ｋ．ｐｕｂｅｓｃｅｎｓ、Ｋ．ｇｒａｎｄｉｆｌｏｒａ、Ｋ．ｃｉｔｒｉｎａ、Ｋ．ａｍｂｏｌｅｎｓｉｓ、Ｋ．ｆａｕｓｔｉｉ、Ｋ．ｓｃｈｕｍａｃｈｅｒｉｉ、Ｋ．ｐｒｉｔｗｉｔｚｉｉ、Ｋ．ｆｌａｍｍｅａ、Ｋ．ｆｉｇｕｅｒｅｄｏｉ、Ｋ．ｒａｕｈｉｉ、Ｋ．ｏｂｔｕｓａ、Ｋ．ｐｕｍｉｌａ、Ｋ．ｍａｒｍｏｒａｔａ、Ｋ．ｐｏｒｐｈｙｒｏｃａｌｕｘ、Ｋ．ｊｏｎｇｍａｎｓｉｉ、Ｋ．ｐｉｎｎａｔａ、Ｋ．ｄｉａｇｒｅｍｏｎｔｉａｎａ、Ｋ．ｇｒａｃｉｌｉｐｅｓ、Ｋ．ｃａｍｐａｎｕｌａｔａ、Ｋ．ｌａｔｉｓｅｐｅｌａ、Ｋ．ｃｏｃｃｉｎｅａ、Ｋ．ｆｅｄｔｓｃｈｅｎｋｏｉ、Ｋ．ｔｕｂｉｆｌｏｒａ、Ｋ．ｄｅｃｕｍｂｅｎｓ、Ｋ．ｍａｎｇｉｎｉｉ、Ｋ．ｏｒｇｙａｌｉｓ、Ｋ．ｃｒｅｎａｔａ、Ｋ．ｔｏｍｅｎｔｏｓａ及びそれらの雑種よりなる群から選択される装飾的な花がさくカランコエ植物よりなる群から選択されるウドンコ病耐性カランコエ植物の選択に使用される。
【0028】
第５の態様によれば、本発明は、本願所定のタンパク質、本願所定の核酸配列又は本願所定の遺伝子を含む植物、プロトプラスト又は植物部分に関する。本発明の植物、プロトプラスト又は植物部分は、好ましくは、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ａｄｅｌａｅ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ａｒｂｏｒｅｓｃｅｎｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｂｅａｕｖｅｒｄｉｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｂｅｈａｒｅｎｓｉｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｂｅｎｔｉｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｂｌｏｓｓｆｅｌｄｉａｎａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｂｏｕｖｅｔｉｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｂｒａｃｔｅａｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｃａｍｐａｎｕｌａｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｃｒｅｎａｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｃｒｕｎｄａｌｌｉｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｄａｉｇｒｅｍｏｎｔｉａｎａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｄｅｌａｇｏｅｎｓｉｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｄｉｎｋｌａｇｅｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｅｒｉｏｐｈｙｌｌａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｆａｒｉｎａｃｅａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｆｅｄｔｓｃｈｅｎｋｏｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｆｉｇｕｅｒｅｉｄｏｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｆｌａｍｍｅａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｇａｓｔｏｎｉｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｇｌａｕｃｅｓｃｅｎｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｇｒａｃｉｌｉｐｅｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｇｒａｎｄｉｄｉｅｒｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｇｒａｎｄｉｆｌｏｒａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｈｉｌｄｅｂｒａｎｔｉｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｊｏｎｇｍａｎｓｉｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｋｅｗｅｎｓｉｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｌａｃｉｎｉａｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｌａｅｔｉｖｉｒｅｎｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｌａｔｅｒｉｔｉａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｌａｘｉｆｌｏｒａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｌｉｎｅａｒｉｆｏｌｉａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｌｏｎｇｉｆｌｏｒａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｌｕｃｉａｅ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｍａｃｒｏｃｈｌａｍｙｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｍａｎｇｉｎｉｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｍａｒｎｉｅｒｉａｎａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｍａｒｍｏｒａｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｍｉｌｌｏｔｔｉｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｍｉｎｉａｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｎｙｉｋａｅ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｏｂｔｕｓａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｏｒｇｙａｌｉｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｐｅｌｔａｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｐｅｔｉｔｉａｎａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｐｉｎｎａｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｐｏｒｐｈｙｒｏｃａｌｙｘ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｐｕｂｅｓｃｅｎｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｐｕｍｉｌａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｑｕａｒｔｉｎｉａｎａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｒｈｏｍｂｏｐｉｌｏｓａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｒｏｂｕｓｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｒｏｌａｎｄｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｒｏｓｅｉ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｓｃｈｉｚｏｐｈｙｌｌａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｓｅｒｒａｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｓｅｘａｎｇｕｌａｒｉｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｓｔｒｅｐｔａｎｔｈａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｓｕａｒｅｚｅｎｓｉｓ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｓｙｎｓｅｐａｌａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｓｙｎｓｅｐａｌａ ｆ．ｄｉｓｓｅｃｔａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｔｈｙｒｓｉｆｌｏｒａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｔｏｍｅｎｔｏｓａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｔｕｂｉｆｌｏｒａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｕｎｉｆｌｏｒａ、Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｖｅｌｕｔｉｎａ ａｎｄ Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｖｉｇｕｉｅｒｉ；好ましくはＫ．ｂｌｏｓｓｆｅｌｄｉａｎａ、Ｋ．ｌａｃｉｎｉａｔａ、Ｋ．ｒｏｔｕｎｄｉｆｏｌｉａ、Ｋ．ａｒｏｍａｔｉｃａ、Ｋ．ｐｕｂｅｓｃｅｎｓ、Ｋ．ｇｒａｎｄｉｆｌｏｒａ、Ｋ．ｃｉｔｒｉｎａ、Ｋ．ａｍｂｏｌｅｎｓｉｓ、Ｋ．ｆａｕｓｔｉｉ、Ｋ．ｓｃｈｕｍａｃｈｅｒｉｉ、Ｋ．ｐｒｉｔｗｉｔｚｉｉ、Ｋ．ｆｌａｍｍｅａ、Ｋ．ｆｉｇｕｅｒｅｄｏｉ、Ｋ．ｒａｕｈｉｉ、Ｋ．ｏｂｔｕｓａ、Ｋ．ｐｕｍｉｌａ、Ｋ．ｍａｒｍｏｒａｔａ、Ｋ．ｐｏｒｐｈｙｒｏｃａｌｕｘ、Ｋ．ｊｏｎｇｍａｎｓｉｉ、Ｋ．ｐｉｎｎａｔａ、Ｋ．ｄｉａｇｒｅｍｏｎｔｉａｎａ、Ｋ．ｇｒａｃｉｌｉｐｅｓ、Ｋ．ｃａｍｐａｎｕｌａｔａ、Ｋ．ｌａｔｉｓｅｐｅｌａ、Ｋ．ｃｏｃｃｉｎｅａ、Ｋ．ｆｅｄｔｓｃｈｅｎｋｏｉ、Ｋ．ｔｕｂｉｆｌｏｒａ、Ｋ．ｄｅｃｕｍｂｅｎｓ、Ｋ．ｍａｎｇｉｎｉｉ、Ｋ．ｏｒｇｙａｌｉｓ、Ｋ．ｃｒｅｎａｔａ、Ｋ．ｔｏｍｅｎｔｏｓａ及びそれらの雑種よりなる群から選択される装飾的な花がさくカランコエ植物よりなる群から選択される植物から選択される又は得られる。
【0029】
本発明を、本発明の特に好ましい実施形態の以下の例においてさらに詳細に説明する。この例では、以下の図を参照する。
【図面の簡単な説明】
【0030】
【発明を実施するための形態】
【0031】
［実施例］
Ｏｉｄｉｕｍ Ｋａｌａｎｃｈｏｅａｅウドンコ病耐性Ｃａｌａｎｃｈｏｅ ｂｌｏｓｓｆｅｌｄｉａｎａ親植物（代表的な種子を、２０１５年３月２日に英国Ａｂｅｒｄｅｅｎ ＡＢ２１ ９ＹＡ Ｂｕｃｋｓｂｕｒｎ、Ｃｒａｉｂｓｔｏｎｅ ＥｓｔａｔｅのＮＣＩＭＢ Ｆｅｒｇｕｓｏｎ Ｂｕｉｌｄｉｎｇに寄託番号ＮＣＩＭＢ ４２３７９で寄託した）を、ウドンコ病感受性Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｂｌｏｓｓｆｅｌｄｉａｎａ植物と交配させ、分離子孫を得た。子孫について、約４週齢の植物にＯｉｄｉｕｍ Ｋａｌａｎｃｈｏｅａｅを感染させることによりＯｉｄｉｕｍ Ｋａｌａｎｃｈｏｅａｅ耐性をアッセイした。その後、感染後の植物を以下の条件下で約４週間にわたって成長させた：
温度：日中２０℃／夜間１８℃；
相対湿度：日中６０％／夜間８０％；
１日の長さ：２０時間（１０００～２０００ルクスの間の強さを有する人工光）。
Ｏｉｄｉｕｍ Ｋａｌａｎｃｈｏｅａｅウドンコ病耐性Ｃａｌａｎｃｈｏｅ ｂｌｏｓｓｆｅｌｄｉａｎａ親植物（代表的な種子を、２０１５年３月２日に英国Ａｂｅｒｄｅｅｎ ＡＢ２１ ９ＹＡ Ｂｕｃｋｓｂｕｒｎ、Ｃｒａｉｂｓｔｏｎｅ ＥｓｔａｔｅのＮＣＩＭＢ Ｆｅｒｇｕｓｏｎ Ｂｕｉｌｄｉｎｇに寄託番号ＮＣＩＭＢ ４２３７９で寄託した）を、ウドンコ病感受性Ｋａｌａｎｃｈｏｅ ｂｌｏｓｓｆｅｌｄｉａｎａ植物と交配させ、分離子孫を得た。子孫について、約４週齢の植物にＯｉｄｉｕｍ Ｋａｌａｎｃｈｏｅａｅを感染させることによりＯｉｄｉｕｍ Ｋａｌａｎｃｈｏｅａｅ耐性をアッセイした。その後、感染後の植物を以下の条件下で約４週間にわたって成長させた：
温度：日中２０℃／夜間１８℃；
相対湿度：日中６０％／夜間８０％；
１日の長さ：２０時間（１０００～２０００ルクスの間の強さを有する人工光）。
【0032】
次いで、植物を、ウドンコ病感受性／耐性について１～９のスケールで視覚的にスコア付けし、ここで、１は完全にウドンコ病感受性であり、９は完全なウドンコ病耐性（目に見える感染がない）を示す。
【0033】
子孫の分析から、観察されたウドンコ病耐性表現型がチオエステラーゼタンパク質又はチオエステラーゼ様タンパク質をコードする遺伝子のコード配列の６４位及び６７位での２つのヌクレオチド置換と相関することが示された。図１に示すように、両方のヌクレオチド置換は、チオエステラーゼタンパク質又はチオエステラーゼ様タンパク質のＮ末端領域にアミノ酸置換をもたらした。
【0034】
上記分離母集団におけるウドンコ病表現型の分析を以下の表１及び図２にまとめる。
【0035】
【表1-1】
【0036】
【表1-2】
【0037】
配列表
<110> FIDES B.V.
<120> MILDEW RESISTANCE GENE IN KALANCHOE
<130> 4/2SX76/7
<150> EP 15157519.8
<151> 2015-03-04
<160> 6
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 197
<212> PRT
<213> Kalanchoe blossfeldiana
<400> 1
Met Arg Ser Gly Thr Ile Cys Val Ile Asn Gly Lys Cys Gly Ser Ile
1 5 10 15
His Arg Pro Ala Thr Thr Thr Glu Ser Thr Ser Lys Lys Ser Asn Thr
20 25 30
Pro Leu Thr His Arg Ser Asn Ser Asp Arg Ser Leu Met Asp Leu Glu
35 40 45
Ala Val Lys Gln Leu Leu Glu Lys Gly Asp Ser Glu Ser Gln Gln Ala
50 55 60
Ile Asp Ser Met Arg Ser Arg Phe Phe Glu Pro Phe Met Met Ala Gly
65 70 75 80
Leu Lys Val Glu Arg Val Glu Pro Gly Arg Leu Ile Cys Ser Met Lys
85 90 95
Val Pro Ala Arg Leu Leu Asn Ala Gly Gly Phe Leu His Gly Gly Ala
100 105 110
Thr Ala Thr Leu Val Asp Leu Val Gly Ser Ala Ala Ile Phe Thr Ala
115 120 125
Gly Ala Thr Val Thr Gly Val Ser Val Glu Ile Ser Val Ser Tyr Leu
130 135 140
Asp Ala Ala Phe Glu Gly Glu Glu Val Glu Ile Glu Ala Arg Val Leu
145 150 155 160
Arg Val Gly Lys Ala Val Gly Val Val Ser Val Glu Ile Arg Lys Lys
165 170 175
Gly Ser Gly Lys Ile Val Ala Gln Gly Arg His Thr Lys Tyr Leu Ala
180 185 190
Val Ala Ser Lys Leu
195
<210> 2
<211> 197
<212> PRT
<213> Kalanchoe blossfeldiana
<400> 2
Met Arg Ser Gly Thr Ile Cys Val Ile Asn Gly Lys Cys Gly Ser Ile
1 5 10 15
His Arg Pro Ala Thr Ala Ala Glu Ser Thr Ser Lys Lys Ser Asn Thr
20 25 30
Pro Leu Thr His Arg Ser Asn Ser Asp Arg Ser Leu Met Asp Leu Glu
35 40 45
Ala Val Lys Gln Leu Leu Glu Lys Gly Asp Ser Glu Ser Gln Gln Ala
50 55 60
Ile Asp Ser Met Arg Ser Arg Phe Phe Glu Pro Phe Met Met Ala Gly
65 70 75 80
Leu Lys Val Glu Arg Val Glu Pro Gly Arg Leu Ile Cys Ser Met Lys
85 90 95
Val Pro Ala Arg Leu Leu Asn Ala Gly Gly Phe Leu His Gly Gly Ala
100 105 110
Thr Ala Thr Leu Val Asp Leu Val Gly Ser Ala Ala Ile Phe Thr Ala
115 120 125
Gly Ala Thr Val Thr Gly Val Ser Val Glu Ile Ser Val Ser Tyr Leu
130 135 140
Asp Ala Ala Phe Glu Gly Glu Glu Val Glu Ile Glu Ala Arg Val Leu
145 150 155 160
Arg Val Gly Lys Ala Val Gly Val Val Ser Val Glu Ile Arg Lys Lys
165 170 175
Gly Ser Gly Lys Ile Val Ala Gln Gly Arg His Thr Lys Tyr Leu Ala
180 185 190
Val Ala Ser Lys Leu
195
<210> 3
<211> 594
<212> DNA
<213> Kalanchoe blossfeldiana
<400> 3
atgagatccg ggacgatttg tgtaataaac ggaaagtgtg gaagcatcca caggccagca 60
acaacaacag aatctacatc gaaaaaatcg aacacrcctt tgactcatcg atcgaactcc 120
gaccggtctc tgatggatct ggaagcagtg aagcagttgc tggagaaggg agacagcgaa 180
agccagcaag cgatcgactc gatgcgctca cggttcttcg agccgttcat gatggcaggg 240
ctgaaggtgg agagggtgga gccagggagg ctgatctgca gcatgaaggt gccggcgcgg 300
ctgctgaacg cgggagggtt cctgcacggg ggagcgacgg cgacgctggt ggatctggtg 360
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gtgtcgtatc tggacgcggc gttcgagggg gaggaggtgg agatcgaggc gcgggtgctg 480
agggtgggga aggcggtggg ggtcgtcagc gttgagattc ggaagaaggg ragtgggaag 540
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<210> 4
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<120> MILDEW RESISTANCE GENE IN KALANCHOE
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<150> EP 15157519.8
<151> 2015-03-04
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<170> PatentIn version 3.5
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<213> Kalanchoe blossfeldiana
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1 5 10 15
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20 25 30
Pro Leu Thr His Arg Ser Asn Ser Asp Arg Ser Leu Met Asp Leu Glu
35 40 45
Ala Val Lys Gln Leu Leu Glu Lys Gly Asp Ser Glu Ser Gln Gln Ala
50 55 60
Ile Asp Ser Met Arg Ser Arg Phe Phe Glu Pro Phe Met Met Ala Gly
65 70 75 80
Leu Lys Val Glu Arg Val Glu Pro Gly Arg Leu Ile Cys Ser Met Lys
85 90 95
Val Pro Ala Arg Leu Leu Asn Ala Gly Gly Phe Leu His Gly Gly Ala
100 105 110
Thr Ala Thr Leu Val Asp Leu Val Gly Ser Ala Ala Ile Phe Thr Ala
115 120 125
Gly Ala Thr Val Thr Gly Val Ser Val Glu Ile Ser Val Ser Tyr Leu
130 135 140
Asp Ala Ala Phe Glu Gly Glu Glu Val Glu Ile Glu Ala Arg Val Leu
145 150 155 160
Arg Val Gly Lys Ala Val Gly Val Val Ser Val Glu Ile Arg Lys Lys
165 170 175
Gly Ser Gly Lys Ile Val Ala Gln Gly Arg His Thr Lys Tyr Leu Ala
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Val Ala Ser Lys Leu
195
<210> 2
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<213> Kalanchoe blossfeldiana
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<213> Kalanchoe blossfeldiana
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<213> Kalanchoe blossfeldiana
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attgtggcgc aggggcggca caccaagtat ctggctgtgg ccagcaagct gtag 594
【図1】
【図2】
【配列表】