特許 7123635 ピロロベンゾジアゼピンおよび標的コンジュゲート

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2022-08-15

(45)【発行日】2022-08-23

(54)【発明の名称】ピロロベンゾジアゼピンおよび標的コンジュゲート

(51)【国際特許分類】

   C07K 16/18 20060101AFI20220816BHJP

   A61K 31/5517 20060101ALI20220816BHJP

   A61K 31/7052 20060101ALI20220816BHJP

   A61K 38/05 20060101ALI20220816BHJP

   A61K 39/395 20060101ALI20220816BHJP

   A61K 47/60 20170101ALI20220816BHJP

   A61K 47/64 20170101ALI20220816BHJP

   A61K 47/68 20170101ALI20220816BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20220816BHJP

   A61P 35/02 20060101ALI20220816BHJP

   A61P 37/06 20060101ALI20220816BHJP

   C07D 519/00 20060101ALI20220816BHJP

   C07H 15/26 20060101ALI20220816BHJP

【ＦＩ】

C07K16/18

A61K31/5517

A61K31/7052

A61K38/05

A61K39/395 L

A61K39/395 N

A61K47/60

A61K47/64

A61K47/68

A61P35/00

A61P35/02

A61P37/06

C07D519/00 311

C07H15/26 CSP

【請求項の数】 13

【外国語出願】

(21)【出願番号】P 2018107170

(22)【出願日】2018-06-04

(62)【分割の表示】P 2014535897の分割

【原出願日】2012-10-12

(65)【公開番号】P2018150371

(43)【公開日】2018-09-27

【審査請求日】2018-06-29

【審判番号】

【審判請求日】2020-06-12

(31)【優先権主張番号】61/547,192

(32)【優先日】2011-10-14

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(73)【特許権者】

【識別番号】503188759

【氏名又は名称】シージェン インコーポレイテッド

(73)【特許権者】

【識別番号】508098350

【氏名又は名称】メドイミューン・リミテッド

【氏名又は名称原語表記】ＭｅｄＩｍｍｕｎｅ Ｌｉｍｉｔｅｄ

【住所又は居所原語表記】Ｍｉｌｓｔｅｉｎ Ｂｕｉｌｄｉｎｇ，Ｇｒａｎｔａ Ｐａｒｋ，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ ＣＢ２１ ６ＧＨ，Ｅｎｇｌａｎｄ

(74)【代理人】

【識別番号】110000523

【氏名又は名称】アクシス国際特許業務法人

(72)【発明者】

【氏名】スコット・ジェフリー

(72)【発明者】

【氏名】パトリック・バーク

(72)【発明者】

【氏名】フィリップ・ウィルソン・ハワード

【合議体】

【審判長】大熊 幸治

【審判官】冨永 保

【審判官】関 美祝

(56)【参考文献】

【文献】国際公開第２０１０／０４３８８０（ＷＯ，Ａ１）

【文献】特表２００８－５３６９０５（ＪＰ，Ａ）

【文献】特表２００７－５２５５３５（ＪＰ，Ａ）

【文献】国際公開第２０１１／０３８１５９（ＷＯ，Ａ２）

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

C07D

A61K

ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）、ＣＡｐｌｕｓ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

式ＩＶ：
Ｌ－（ＬＵ－Ｄ）_p （ＩＶ）
を有するコンジュゲートであって、
式（ＩＶ）中、
Ｌが、抗体および抗体の抗原結合フラグメントからなる群から選択されるリガンドユニットであり、前記抗原結合フラグメントが、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）₂、またはＦｖフラグメントであり、
ＬＵが、下記構造式（ＩＶａ’）または構造式（ＩＶｂ’）の構造を有するリンカーユニットであり、
－Ａ¹ _a－Ｌ¹ _s－Ｌ² _y－ （ＩＶａ’）
－Ａ ¹ －Ｌ ¹ －Ｌ ² － （ＩＶｂ’）
ここで－Ａ¹－は、下記の

【化1】

の構造を有し、式中のアスタリスクはＬ¹への付着点を示し、波線は前記リガンドユニットへの付着点を示し、下付きのｎが０から６であるか、

【化2】

の構造を有し、式中のアスタリスクはＬ¹への付着点を示し、波線は前記リガンドユニットへの付着点を示し、下付きのｎが０から６であるか、

【化3】

の構造を有し、式中のアスタリスクはＬ¹への付着点を示し、波線は前記リガンドユニットへの付着点を示し、下付きのｎが０もしくは１であり、下付きのｍが０から３０であるか、もしくは、

【化4】

の構造を有し、式中のアスタリスクはＬ¹への付着点を示し、波線は前記リガンドユニットへの付着点を示し、下付きのｎが０もしくは１であり、下付きのｍが０から３０であり、
また構造式（ＩＶａ’）のＬ¹が、－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－、－Ｖａｌ－Ａｌａ－、－Ｖａｌ－Ｌｙｓ－、－Ａｌａ－Ｌｙｓ－、－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－、－Ｐｈｅ－Ｃｉｔ－、－Ｌｅｕ－Ｃｉｔ－、－Ｉｌｅ－Ｃｉｔ－、－Ｐｈｅ－Ａｒｇ－、および－Ｔｒｐ－Ｃｉｔ－からなる群から選択されるジペプチドであり、
構造式（ＩＶａ’）のＬ² は、下記構造

【化5】

もしくは

【化6】

を有し、式中のアスタリスクは前記Ｄへの付着点を示し、波線は前記Ｌ¹への付着点を示し、Ｙは、－ＮＨ－であり、下付きのｎは０または１であり、Ｅは、ＯまたはＳであり、Ｄ’は、ＮまたはＣＨであり、Ｆは、ＮまたはＣＨであるか、あるいは、
構造式（ＩＶｂ’）のＬ¹およびＬ²は、下記の

【化7】

の構造を有し、式中のアスタリスクは前記Ｄへの付着点を示し、波線は前記Ａ¹への付着点を示し、Ｙは、－ＮＨ－であり、Ｅは、グルクロン酸であり、および、
下付きのａは、１または２であり、
構造式（ＩＶａ’）において下付きのｓが０、１、または２であってかつ下付きのｙが０、１、または２であり、
下付きのｐが、１から２０であり；
前記Ｄが、

【化8】

からなる群から選択され、
Ｄ１、Ｄ４、およびＤ６において、
（ａ）Ｒ¹⁰が、Ｈであり、Ｒ¹¹が、ＯＨ、ＯＲ^Aであり、Ｒ^Aが、飽和Ｃ_1-4アルキルであるか；
（ｂ）Ｒ¹⁰およびＲ¹¹が、それらが結合されている窒素原子と炭素原子との間に、窒素－炭素二重結合を形成するか；または、
（ｃ）Ｒ¹⁰が、Ｈであり、Ｒ¹¹が、ＳＯ_zＭであり、下付きのｚが、２もしくは３であり、Ｍが、一価の薬学的に許容され得るカチオンであるか、もしくは、両方のＭが共に、二価の薬学的に許容され得るカチオンであり、および、
前記アスタリスクは、前記リンカーユニットへの付着点を示す、
コンジュゲートまたはその薬学的に許容され得る塩もしくは溶媒和物。

【請求項2】

Ｒ¹⁰およびＲ¹¹が、窒素－炭素二重結合を形成する、請求項１に記載のコンジュゲート。

【請求項3】

Ａ¹が、

【化9】

であり、前記アスタリスクが、前記Ｌ¹への付着点を示し、前記波線が、前記リガンドユニットへの付着点を示し、ｎが、０から６である、請求項１に記載のコンジュゲート。

【請求項4】

ｎが、５である、請求項３に記載のコンジュゲート。

【請求項5】

Ｌ¹が、－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－、－Ｖａｌ－Ａｌａ－、－Ｖａｌ－Ｌｙｓ－、－Ａｌａ－Ｌｙｓ－、および－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－からなる群から選択される、請求項１に記載のコンジュゲート。

【請求項6】

Ｌ¹が、バリン－アラニン、バリン－シトルリンおよびフェニルアラニン－リジンからなる群から選択される、請求項５に記載のコンジュゲート。

【請求項7】

増殖性疾患または自己免疫疾患を処置するために使用される請求項１から６のいずれか一項に記載のコンジュゲート。

【請求項8】

前記増殖性疾患が、血液学的な悪性腫瘍である、請求項７に記載のコンジュゲート。

【請求項9】

前記血液学的な悪性腫瘍が、白血病およびリンパ腫のうちから選択される、請求項８に記載のコンジュゲート。

【請求項10】

前記増殖性疾患が、肺ガン、肺小細胞ガン、胃腸ガン、腸ガン、結腸ガン、乳ガン腫、卵巣ガン腫、前立腺ガン、精巣ガン、肝臓ガン、腎臓ガン、膀胱ガン、膵臓ガン、脳ガン、肉腫、骨肉腫、カポジ肉腫またはメラノーマである、請求項７に記載のコンジュゲート。

【請求項11】

式Ｖ：
ＬＵ－Ｄ （Ｖ）
の化合物であって、
式（Ｖ）中、ＬＵが、リンカーユニットであり、
前記リンカーユニットが、下記構造式
Ｇ¹－Ｌ¹－Ｌ²－
を有し、
Ｇ¹が、

【化10】

の構造を有し、式中のアスタリスクは、前記Ｌ¹への付着点を示し、下付きのｎは０から６であるか、

【化11】

の構造を有し、式中のアスタリスクは、前記Ｌ¹への付着点を示し、下付きのｎは０から６であるか、

【化12】

の構造を有し、式中のアスタリスクは、前記Ｌ¹への付着点を示し、下付きのｎは、０または１であり、下付きのｍは、０から３０であるか、もしくは、

【化13】

の構造を有し、式中のアスタリスクは、前記Ｌ¹への付着点を示し、下付きのｎは、０または１であり、
Ｌ¹は、－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－、－Ｖａｌ－Ａｌａ－、－Ｖａｌ－Ｌｙｓ－、－Ａｌａ－Ｌｙｓ－、－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－、－Ｐｈｅ－Ｃｉｔ－、－Ｌｅｕ－Ｃｉｔ－、－Ｉｌｅ－Ｃｉｔ－、－Ｐｈｅ－Ａｒｇ－、および－Ｔｒｐ－Ｃｉｔ－からなる群から選択されるジペプチドであり、
Ｌ²は結合であるか、または下記構造

【化14】

または

【化15】

を有し、式中のアスタリスクは前記Ｄへの付着点を示し、波線は前記Ｌ¹への付着点を示し、Ｙは、－ＮＨ－であり、下付きのｎは０または１であり、Ｅは、ＯまたはＳであり、Ｄ’は、ＮまたはＣＨであり、Ｆは、ＮまたはＣＨであり、
Ｄが、

【化16】

からなる群から選択され、
Ｄ１、Ｄ４、およびＤ６において、
（ａ）Ｒ¹⁰が、Ｈであり、Ｒ¹¹が、ＯＨ、ＯＲ^Aであり、Ｒ^Aが、飽和Ｃ_1-4アルキルであるか；
（ｂ）Ｒ¹⁰およびＲ¹¹が、それらが結合されている窒素原子と炭素原子との間に、窒素－炭素二重結合を形成するか；または、
（ｃ）Ｒ¹⁰が、Ｈであり、Ｒ¹¹が、ＳＯ_zＭであり、下付きのｚが、２もしくは３であり、Ｍが、一価の薬学的に許容され得るカチオンであるか、もしくは、両方のＭが共に、二価の薬学的に許容され得るカチオンであり、および、
前記アスタリスクは、前記リンカーユニットへの付着点を示す、
化合物またはその薬学的に許容され得る塩もしくは溶媒和物。

【請求項12】

Ｇ¹が、下記の

【化17】

または

【化18】

からなる群から選択される、請求項１１に記載の化合物。

【請求項13】

前記Ｌ¹が、－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－、－Ｖａｌ－Ａｌａ－、－Ｖａｌ－Ｌｙｓ－、－Ａｌａ－Ｌｙｓ－、および－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－からなる群から選択される、請求項１１に記載の化合物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、ピロロベンゾジアゼピン（ＰＢＤ）、具体的には、各モノマーユニットにおいて、Ｃ２－Ｃ３二重結合および前記Ｃ２位にアリール基を有するピロロベンゾジアゼピン二量体、ならびに標的コンジュゲートへのその包含に関する。

【背景技術】

【0002】

一部のピロロベンゾジアゼピン（ＰＢＤ）は、特定のＤＮＡ配列を認識し、同ＤＮＡに結合する能力を有する。好ましい配列は、ＰｕＧＰｕである。最初のＰＢＤ抗腫瘍抗生物質であるアントラマイシンは、１９６５年に発見された（Ｌｅｉｍｇｒｕｂｅｒ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，８７，５７９３－５７９５（１９６５）；Ｌｅｉｍｇｒｕｂｅｒ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，８７，５７９１－５７９３（１９６５））（非特許文献１および２）。ついで、多くの天然由来のＰＢＤが報告され、１０より多くの合成経路が、各種の類似体に対して開発された（Ｔｈｕｒｓｔｏｎ，ｅｔ ａｌ．，Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．１９９４，４３３－４６５（１９９４）；Ａｎｔｏｎｏｗ，Ｄ．ａｎｄ Ｔｈｕｒｓｔｏｎ，Ｄ．Ｅ．，Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．２０１１ １１１（４），２８１５－２８６４））（非特許文献３および４）。ファミリーメンバーとしては、アベイマイシン（Ｈｏｃｈｌｏｗｓｋｉ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，４０，１４５－１４８（１９８７））（非特許文献５）、チカマイシン（Ｋｏｎｉｓｈｉ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，３７，２００－２０６（１９８４））（非特許文献６）、ＤＣ－８１（特開昭５８－１８０４８７号公報（特許文献１）、Ｔｈｕｒｓｔｏｎ，ｅｔ ａｌ．，Ｃｈｅｍ．Ｂｒｉｔ．，２６，７６７－７７２（１９９０）；Ｂｏｓｅ，ｅｔ ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，４８，７５１－７５８（１９９２）（非特許文献７および８）、マゼトラマイシン（Ｋｕｍｉｎｏｔｏ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，３３，６６５－６６７（１９８０））（非特許文献９）、ネオトラマイシンＡおよびＢ（Ｔａｋｅｕｃｈｉ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，２９，９３－９６（１９７６））（非特許文献１０）、ポロトラマイシン（Ｔｓｕｎａｋａｗａ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，４１，１３６６－１３７３（１９８８））（非特許文献１１）、プロトラカルシン（Ｓｈｉｍｉｚｕ，ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，２９，２４９２－２５０３（１９８２）；Ｌａｎｇｌｅｙ ａｎｄ Ｔｈｕｒｓｔｏｎ，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，５２，９１－９７（１９８７））（非特許文献１２および１３）、シバノマイシン（ＤＣ－１０２）（Ｈａｒａ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，４１，７０２－７０４（１９８８）；Ｉｔｏｈ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，４１，１２８１－１２８４（１９８８））（非特許文献１４および１５）、シビロマイシン（Ｌｅｂｅｒ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１１０，２９９２－２９９３（１９８８））（非特許文献１６）および、トママイシン（Ａｒｉｍａ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，２５，４３７－４４４（１９７２））（非特許文献１７）があげられる。ＰＢＤは、一般構造：

【化1】

である。

【0003】

前記ＰＢＤは、その芳香環Ａおよびピロロ環Ｃの両方における置換基の数、種類および位置、ならびに、前記Ｃ環の飽和度合いにおいて異なる。Ｂ環には、ＤＮＡのアルキル化を担う求電子中心である、Ｎ１０－Ｃ１１位に、イミン（Ｎ＝Ｃ）、カルビノールアミン（ＮＨ－ＣＨ（ＯＨ））またはカルビノールアミンメチルエーテル（ＮＨ－ＣＨ（ＯＭｅ））のいずれかが存在する。公知の天然物は全て、キラルＣ１１ａ位において、（Ｓ）－型（コンフィグレーション）を有する。キラルＣ１１ａ位は、前記Ｃ環からＡ環に向かって見た場合、右回りの捻じれを与える。これは、Ｂ－型ＤＮＡの小溝に対して、イソらせん性（ｉｓｏｈｅｌｉｃｉｔｙ）に適した三次元形状を与え、結合部位におけるぴったり合うフィットをもたらす（Ｋｏｈｎ，Ｉｎ Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ ＩＩＩ．Ｓｐｒｉｎｇｅｒ－Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ｐｐ．３－１１（１９７５）；Ｈｕｒｌｅｙ ａｎｄ Ｎｅｅｄｈａｍ－ＶａｎＤｅｖａｎｔｅｒ，Ａｃｃ．Ｃｈｅｍ．Ｒｅｓ．，１９，２３０－２３７（１９８６））（非特許文献１８および１９）。前記小溝に付加体を形成するその能力は、それらが、ＤＮＡプロセシングを妨げることを可能にするため、抗腫瘍剤としてのその使用を可能にする。

【0004】

これらの分子における生物学的活性が、２つのＰＢＤユニットを、そのＣ８／Ｃ’－ヒドロキシル官能基により、フレキシブルなアルキレンリンカーを介して、互いに結合させることにより、増強し得ることが以前に開示された（Ｂｏｓｅ，Ｄ．Ｓ．，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１１４，４９３９－４９４１（１９９２）；Ｔｈｕｒｓｔｏｎ，Ｄ．Ｅ．，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，６１，８１４１－８１４７（１９９６））（非特許文献２０および２１）。前記ＰＢＤ二量体は、配列選択的なＤＮＡ損傷、例えば、回帰性の５’－Ｐｕ－ＧＡＴＣ－Ｐｙ－３’ストランド間架橋を形成すると考えらえる（Ｓｍｅｌｌｉｅ，Ｍ．，ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，４２，８２３２－８２３９（２００３）；Ｍａｒｔｉｎ，Ｃ．，ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，４４，４１３５－４１４７）（非特許文献２２および２３）。前記ストランド間架橋が、その生物学的活性を主に担うと考えられる。ＰＢＤ二量体の一例である、ＳＧ２０００（ＳＪＧ－１３６）：

【化2】

は、最近、腫瘍学の分野において、第ＩＩ相臨床試験に入っている（Ｇｒｅｇｓｏｎ，Ｓ．，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，４４，７３７－７４８（２００１）；Ａｌｌｅｙ，Ｍ．Ｃ．，ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，６４，６７００－６７０６（２００４）；Ｈａｒｔｌｅｙ，Ｊ．Ａ．，ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，６４，６６９３－６６９９（２００４））（非特許文献２４から２６）。

【0005】

もっと最近、本発明者らは、以前に国際公開第２００５／０８５２５１号パンフレット（特許文献２）において、Ｃ２アリール置換基を有する二量体ＰＢＤ化合物、例えば、ＳＧ２２０２（ＺＣ－２０７）：

【化3】

、および国際公開第２００６／１１１７５９号パンフレット（特許文献３）において、このようなＰＢＤ化合物の重亜硫酸塩、例えば、ＳＧ２２８５（ＺＣ－４２３）：

【化4】

を開示した。

【0006】

これらの化合物は、非常に有用な細胞傷害性薬物であることが示された（Ｈｏｗａｒｄ，Ｐ．Ｗ．，ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．（２００９），１９（２２），６４６３－６４６６，ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｂｍｃｌ．２００９．０９．０１２）（非特許文献２７）。

【0007】

これらの非常に強力な化合物が、ＤＮＡを架橋する方法で作用するために、これらの分子が、対称的に製造されている。これは、予め形成された二量体リンケージを有するＰＢＤ部分を同時に構築することによるか、または、予め構築されているＰＢＤ部分を、前記二量体結合基と反応させるかのいずれかによる、容易な合成を提供する。

【0008】

国際公開第２０１０／０４３８８０号パンフレット（特許文献４）には、各モノマーのＣ２位にアリール基を有する、非対称の二量体ＰＢＤ化合物が開示されている。これらのアリール基の１つは、別の部分に化合物を結合させるためのアンカーを提供するように設計された置換基を有する。２０１１年４月１５日に出願された、同時係属の国際出願ＰＣＴ／ＵＳ２０１１／０３２６６４号には、標的コンジュゲートにおけるこれらのＰＢＤ二量体化合物の包含が開示されている。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0009】

【文献】特開昭５８－１８０４８７号公報

【文献】国際公開第２００５／０８５２５１号パンフレット

【文献】国際公開第２００６／１１１７５９号パンフレット

【文献】国際公開第２０１０／０４３８８０号パンフレット

【非特許文献】

【0010】

【文献】Ｌｅｉｍｇｒｕｂｅｒ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，８７，５７９３－５７９５（１９６５）

【文献】Ｌｅｉｍｇｒｕｂｅｒ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，８７，５７９１－５７９３（１９６５）

【文献】Ｔｈｕｒｓｔｏｎ，ｅｔ ａｌ．，Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．１９９４，４３３－４６５（１９９４）

【文献】Ａｎｔｏｎｏｗ，Ｄ．ａｎｄ Ｔｈｕｒｓｔｏｎ，Ｄ．Ｅ．，Ｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．２０１１ １１１（４），２８１５－２８６４）

【文献】Ｈｏｃｈｌｏｗｓｋｉ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，４０，１４５－１４８（１９８７）

【文献】Ｋｏｎｉｓｈｉ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，３７，２００－２０６（１９８４）

【文献】Ｔｈｕｒｓｔｏｎ，ｅｔ ａｌ．，Ｃｈｅｍ．Ｂｒｉｔ．，２６，７６７－７７２（１９９０）

【文献】Ｂｏｓｅ，ｅｔ ａｌ．，Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ，４８，７５１－７５８（１９９２）

【文献】Ｋｕｍｉｎｏｔｏ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，３３，６６５－６６７（１９８０）

【文献】Ｔａｋｅｕｃｈｉ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，２９，９３－９６（１９７６）

【文献】Ｔｓｕｎａｋａｗａ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，４１，１３６６－１３７３（１９８８）

【文献】Ｓｈｉｍｉｚｕ，ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，２９，２４９２－２５０３（１９８２）

【文献】Ｌａｎｇｌｅｙ ａｎｄ Ｔｈｕｒｓｔｏｎ，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，５２，９１－９７（１９８７）

【文献】Ｈａｒａ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，４１，７０２－７０４（１９８８）

【文献】Ｉｔｏｈ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，４１，１２８１－１２８４（１９８８）

【文献】Ｌｅｂｅｒ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１１０，２９９２－２９９３（１９８８）

【文献】Ａｒｉｍａ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，２５，４３７－４４４（１９７２）

【文献】Ｋｏｈｎ，Ｉｎ Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ ＩＩＩ．Ｓｐｒｉｎｇｅｒ－Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ｐｐ．３－１１（１９７５）

【文献】Ｈｕｒｌｅｙ ａｎｄ Ｎｅｅｄｈａｍ－ＶａｎＤｅｖａｎｔｅｒ，Ａｃｃ．Ｃｈｅｍ．Ｒｅｓ．，１９，２３０－２３７（１９８６）

【文献】Ｂｏｓｅ，Ｄ．Ｓ．，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１１４，４９３９－４９４１（１９９２）

【文献】Ｔｈｕｒｓｔｏｎ，Ｄ．Ｅ．，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，６１，８１４１－８１４７（１９９６）

【文献】Ｓｍｅｌｌｉｅ，Ｍ．，ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，４２，８２３２－８２３９（２００３）

【文献】Ｍａｒｔｉｎ，Ｃ．，ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，４４，４１３５－４１４７）

【文献】Ｇｒｅｇｓｏｎ，Ｓ．，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，４４，７３７－７４８（２００１）

【文献】Ａｌｌｅｙ，Ｍ．Ｃ．，ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，６４，６７００－６７０６（２００４）

【文献】Ｈａｒｔｌｅｙ，Ｊ．Ａ．，ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，６４，６６９３－６６９９（２００４）

【文献】Ｈｏｗａｒｄ，Ｐ．Ｗ．，ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．（２００９），１９（２２），６４６３－６４６６，ｄｏｉ：１０．１０１６／ｊ．ｂｍｃｌ．２００９．０９．０１２

【発明の概要】

【0011】

本発明者らは、標的コンジュゲートに包含するための、更なる特異的な非対称の二量体ＰＢＤ化合物を開発した。これらの化合物は、その調製および使用に利点を有し、特にその生物学的特性およびコンジュゲートの合成ならびにこれらのコンジュゲートの生物学的特性に利点を有し得る。

【0012】

本発明は、

【化5】

からなる群から選択される、化合物または、その薬学的に許容され得る塩もしくは溶媒和物を含む。

【0013】

Ｃ１からＣ６中、
（ａ）Ｒ¹⁰が、Ｈであり、Ｒ¹¹が、ＯＨまたはＯＲ^Aであり、Ｒ^Aが、飽和Ｃ_1-4アルキルであるか；または、
（ｂ）Ｒ¹⁰およびＲ¹¹が、それらが結合されている窒素原子と炭素原子との間に、窒素－炭素二重結合を形成するか；または、
（ｃ）Ｒ¹⁰が、Ｈであり、Ｒ¹¹が、ＳＯ_zＭであり、ｚが、２もしくは３であり、Ｍが、一価の薬学的に許容され得るカチオンであるか、もしくは、両方のＭが共に、二価の薬学的に許容され得るカチオンであるかのいずれかである。

【0014】

本発明の第２の態様は、増殖性疾患を処置するための医薬の製造における、本発明の第１の態様の化合物の使用を提供する。前記第２の態様は、増殖性疾患の処置に使用するための、本発明の第１の態様の化合物も提供する。

【0015】

当業者であれば、候補コンジュゲートが、具体的な細胞種のいずれかに関する増殖性症状を処置するかどうかを、直ちに決定することができる。例えば、具体的な化合物により提供された活性を評価するのに都合よく使用され得るアッセイは、以下の実施例に記載されている。

【0016】

本発明の第３の態様は、
（ａ）Ｒ¹⁰が、カルバメート窒素保護基であり、Ｒ¹¹が、Ｏ－Ｐｒｏｔ^Oであり、Ｐｒｏｔ^Oが、酸素保護基であるか；または、
（ｂ）Ｒ¹⁰が、ヘミアミナール窒素保護基であり、Ｒ¹¹が、オキソ基であるか；
のいずれかであることを除いて、本発明の第１の態様に基づく化合物を含む。

【0017】

本発明の第４の態様は、第３の態様の化合物または、その薬学的に許容され得る塩もしくは溶媒和物から、前記イミン結合を脱保護することにより、第１の態様の化合物または、その薬学的に許容され得る塩もしくは溶媒和物を製造する方法を含む。

【0018】

本発明の非対称の二量体ＰＢＤ化合物は、対称的な二量体ＰＢＤ化合物を製造するのに、以前から使用されたものとは、異なる戦略により製造される。具体的には、本発明者らは、別々の方法工程において、各Ｃ２置換基を、対称的なＰＢＤ二量体コアに付加することを含む方法を開発した。したがって、本発明の第５の態様は、少なくとも１つの以下に記載される方法工程を含む、本発明の第１または第３の態様の化合物を製造する方法を提供する。

【0019】

第６の態様では、本発明は、標的化剤に結合されているＰＢＤの二量体を含むコンジュゲートに関する。前記コンジュゲートにおいて、前記ＰＢＤ二量体は、本願明細書に記載の化合物または、その薬学的に許容され得る塩もしくは溶媒和物である（上記）。
一部の実施形態では、前記コンジュゲートは、下記式ＩＶ：
Ｌ－（ＬＵ－Ｄ）_p （ＩＶ）
または、その薬学的に許容され得る塩もしくは溶媒和物を有する。式（ＩＶ）中、Ｌは、リガンドユニット（すなわち、標的化剤）であり、ＬＵは、リンカーユニットであり、および、Ｄは、ＰＢＤ二量体であるドラッグユニットである（以下を参照のこと。）。下付きのｐは、１から２０である。したがって、前記コンジュゲートは、少なくとも１つのドラッグユニットに、リンカーユニットにより共有結合されているリガンドユニットを含む。以下により完全に記載されている前記リガンドユニットは、標的部分に結合する標的化剤である。前記リガンドユニットは、例えば、細胞成分に特異的に結合することができるか（細胞結合剤）、または、対象となる他の標的分子に特異的に結合することができる。したがって、本発明は、例えば、種々のガンおよび自己免疫疾患の処置のための方法も提供する。これらの方法は、前記リガンドユニットが、標的分子に特異的に結合する標的化剤である、コンジュゲートの使用を包含する。前記リガンドユニットは、例えば、タンパク質、ポリペプチドまたはペプチド、例えば、抗体、抗体の抗原結合フラグメント、または他の結合剤、例えば、Ｆｃ融合タンパク質であり得る。

【0020】

本発明のコンジュゲートでは、前記ＰＢＤ二量体Ｄは、

【化6】

または、その薬学的に許容され得る塩もしくは溶媒和物からなる群から選択される。Ｄ１からＤ６中、Ｒ¹⁰およびＲ¹¹は、前記第１の態様に規定の通りであり、および、前記アスタリスクは、前記リンカーユニットへの付着点を示す。

【0021】

前記ドラッグの充填は、リガンドユニット（例えば、抗体）あたりのドラッグ分子の数であるｐで表される。ドラッグの充填は、リガンドユニット（例えば、ＡｂまたはｍＡｂ）あたりに、１から２０個のドラッグユニット（Ｄ）の範囲であり得る。組成物に関して、ｐは、前記組成物におけるコンジュゲートの平均ドラッグ充填を表し、ｐは、１から２０の範囲である。

【0022】

一部の実施形態では、ｐは、リガンドユニットあたりに約１から約８個のドラッグユニットである。一部の実施形態では、ｐは、１である。一部の実施形態では、ｐは、２である。一部の実施形態では、ｐは、リガンドユニットあたりに約２から約８個のドラッグユニットである。一部の実施形態では、ｐは、リガンドユニットあたりに、約２から約６、２から約５または２から約４のドラッグユニットである。一部の実施形態では、ｐは、リガンドユニットあたりに、約２、約４、約６または約８個のドラッグユニットである。

【0023】

コンジュゲート反応からの調製におけるリガンドユニットあたりのドラッグユニットの平均数は、従来の手段、例えば、質量分析法、ＥＬＩＳＡアッセイおよびＨＰＬＣにより特徴付けられ得る。ｐに関して、コンジュゲートの定量分布が決定されてもよい。一部の例では、ｐが特定の値である場合、他のドラッグ充填によるコンジュゲートからの、均質なコンジュゲートの分離、精製および特徴決定は、逆相ＨＰＬＣまたは電気泳動等の手段により達成され得る。

【0024】

第７の態様では、本発明は、結合ユニットに結合されているＰＢＤ二量体（上記を参照のこと。）を含む、リンカー－ドラッグ化合物（すなわち、ドラッグ－リンカー）に関する。これらのドラッグ－リンカーは、標的化剤に結合されるＰＢＤ二量体を含むコンジュゲートを合成するための中間体として使用され得る。

【0025】

これらのドラッグ－リンカーは、式Ｖ：
ＬＵ－Ｄ （Ｖ）
または、その薬学的に許容され得る本発明の第６の態様に規定の塩もしくは溶媒和物を有する。式（Ｖ）中、ＬＵは、リンカーユニットであり、Ｄは、ＰＢＤ二量体であるドラッグユニットである。

【図面の簡単な説明】

【0026】

【図1】図１は、本発明の２つのコンジュゲートによる処理後の平均腫瘍体積における効果を示す。

【発明を実施するための形態】

【0027】

定義
薬学的に許容され得るカチオン
薬学的に許容され得る一価および二価のカチオンは、例えば、その全体が、全ての目的に関して、参照により本願明細書に取り込まれる、Ｂｅｒｇｅ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．，６６，１－１９（１９７７）に記載されている。
前記薬学的に許容され得るカチオンは、無機でもよいし、または、有機でもよい。

【0028】

薬学的に許容され得る一価の無機カチオンとしては、例えば、制限されず、アルカリ金属イオン、例えば、Ｎａ⁺およびＫ⁺があげられる。薬学的に許容され得る二価の無機カチオンとしては、例えば、制限されず、アルカリ土類カチオン、例えば、Ｃａ²⁺およびＭｇ²⁺があげられる。薬学的に許容され得る有機カチオンとしては、例えば、制限されず、アンモニウムイオン（すなわち、ＮＨ₄ ⁺）および置換されているアンモニウムイオン（例えば、ＮＨ₃Ｒ⁺、ＮＨ₂Ｒ₂ ⁺、ＮＨＲ₃ ⁺、ＮＲ₄ ⁺）があげられる。一部の適切な置換されているアンモニウムイオンは、例えば、エチルアミン、ジエチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、トリエチルアミン、ブチルアミン、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペラジン、ベンジルアミン、フェニルベンジルアミン、コリン、メグルミンおよびトロメタミン、ならびにアミノ酸、例えば、リジンおよびアルギニンに由来するものである。一般的な四級アンモニウムイオンは、例えば、Ｎ（ＣＨ₃）₄ ⁺である。

【0029】

基
本願明細書で使用する時、「飽和Ｃ_1-4アルキル」の用語は、１から４個の炭素原子を有する炭化水素化合物の炭素原子から水素原子を除去することにより得られる一価の部分に関する。前記炭化水素化合物は、脂肪族でもよいし、または、脂環式でもよい。同様に、本願明細書で使用する時、「飽和Ｃ_1-2アルキル」の用語は、１から２個の炭素原子を有する炭化水素化合物、すなわち、メチルまたはエチルの炭素原子から水素原子を除去することにより得られる一価の部分に関する。

【0030】

飽和のアルキル基としては、例えば、制限されず、メチル（Ｃ₁）、エチル（Ｃ₂）、プロピル（Ｃ₃）およびブチル（Ｃ₄）があげられる。

【0031】

飽和の直鎖状アルキル基としては、例えば、制限されず、メチル（Ｃ₁）、エチル（Ｃ₂）、ｎ－プロピル（Ｃ₃）およびｎ－ブチル（Ｃ₄）があげられる。

【0032】

飽和の分岐鎖状アルキル基としては、例えば、ｉｓｏ－プロピル（Ｃ₃）、ｉｓｏ－ブチル（Ｃ₄）、ｓｅｃ－ブチル（Ｃ₄）およびｔｅｒｔ－ブチル（Ｃ₄）があげられる。

【0033】

オキソ（ケト、－オン）：＝Ｏ。
酸素保護基：「酸素保護基」の用語は、ヒドロキシ基をマスクする部分を意味し、これらは、当該分野において周知である。数多くの適切な基が、その全体が、全ての目的に関して、参照により本願明細書に取り込まれる、Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．ａｎｄ Ｗｕｔｓ，Ｇ．Ｍ．，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，３^rd Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，１９９９の２３から２００頁に記載されている。具体的な対象の分類としては、シリルエーテル（例えば、ＴＭＳ、ＴＢＤＭＳ）、置換されているメチルエーテル（例えば、ＴＨＰ）およびエステル（例えば、アセテート）があげられる。

【0034】

カルバメート窒素保護基：「カルバメート窒素保護基」の用語は、イミン結合における窒素をマスクする部分に関し、これらは、当該分野において周知である。これらの基は、下記化学構造：

【化7】

【0035】

前記化学構造中、Ｒ’¹⁰は、以下に規定のＲである。数多くの適切な基が、その全体が、全ての目的に関して、参照により本願明細書に取り込まれる、Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．ａｎｄ Ｗｕｔｓ，Ｇ．Ｍ．，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，３^rd Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．， １９９９の５０３から５４９頁に記載されている。

【0036】

ヘミアミナール窒素保護基：「ヘミアミナール窒素保護基」の用語は、下記化学構造：

【化8】

を有する基に関する。前記化合構造中、Ｒ’¹⁰は、上記規定のＲである。数多くの適切な基が、その全体が、全ての目的に関して、参照により本願明細書に取り込まれる、Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．ａｎｄ Ｗｕｔｓ，Ｇ．Ｍ．，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，３^rd Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，１９９９にアミド保護基として６３３から６４７頁に記載されている。

【0037】

Ｒ
Ｒは、場合により置換されているＣ_1-12アルキル、Ｃ_3-20ヘテロシクリルおよびＣ_5-20アリールの基から選択される。

【0038】

本願明細書で使用する時、「場合により置換されている」の用語は、置換されていなくてもよいし、または、置換されていてもよい元の基に関する。

【0039】

特に断らない限り、本願明細書で使用する時、「置換されている」の用語は、１つ以上の置換基を有する元の基に関する。「置換基」の用語は、本願明細書において、従来の意味で使用され、元の基に共有的に付着される化学部分、または必要に応じて、元の基に縮合される化学部分を意味する。幅広い各種の置換基が周知であり、それを形成および各種の元の基内に導入するための方法も周知である。

【0040】

置換基は、例えば、以下に、より詳細に記載される。
Ｃ_1-12アルキル：本願明細書で使用する時、「Ｃ_1-12アルキル」の用語は、１から１２個の炭素原子を有する炭化水素化合物の炭素原子から水素原子を除去することにより得られる一価の部分に関する。前記炭化水素化合物は、脂肪族でもよいし、または、脂環式でもよく、飽和でもよいし、または不飽和（例えば、部分的に不飽和、完全に不飽和）でもよい。本願明細書で使用する時、「Ｃ_1-4アルキル」の用語は、１から４個の炭素原子を有する炭化水素化合物の炭素原子から水素原子を除去することにより得られる一価の部分に関する。前記炭化水素化合物は、脂肪族でもよいし、または、脂環式でもよく、飽和でもよいし、または不飽和（例えば、部分的に不飽和、完全に不飽和）でもよい。同様に、本願明細書で使用する時、「Ｃ_1-2アルキル」の用語は、１から２個の炭素原子を有する炭化水素化合物、すなわち、メチルまたはエチルの炭素原子から水素原子を除去することにより得られる一価の部分に関する。

【0041】

このため、「アルキル」の用語は、以下に記載される、部分集合であるアルケニル、アルキニル、シクロアルキル等を含む。

【0042】

飽和のアルキル基としては、例えば、制限されず、メチル（Ｃ₁）、エチル（Ｃ₂）、プロピル（Ｃ₃）、ブチル（Ｃ₄）、ペンチル（Ｃ₅）、ヘキシル（Ｃ₆）およびヘプチル（Ｃ₇）があげられる。

【0043】

飽和の直鎖状アルキル基としては、例えば、制限されず、メチル（Ｃ₁）、エチル（Ｃ₂）、ｎ－プロピル（Ｃ₃）、ｎ－ブチル（Ｃ₄）、ｎ－ペンチル（アミル）（Ｃ₅）、ｎ－ヘキシル（Ｃ₆）およびｎ－ヘプチル（Ｃ₇）があげられる。

【0044】

飽和の分岐鎖状アルキル基としては、例えば、ｉｓｏ－プロピル（Ｃ₃）、ｉｓｏ－ブチル（Ｃ₄）、ｓｅｃ－ブチル（Ｃ₄）、ｔｅｒｔ－ブチル（Ｃ₄）、ｉｓｏ－ペンチル（Ｃ₅）およびｎｅｏ－ペンチル（Ｃ₅）があげられる。

【0045】

Ｃ_2-12アルケニル：本願明細書で使用する時、「Ｃ_2-12アルケニル」の用語は、１つ以上の炭素－炭素二重結合を有するアルキル基に関する。

【0046】

不飽和のアルケニル基としては、例えば、制限されず、エテニル（ビニル、－ＣＨ＝ＣＨ₂）、１－プロペニル（－ＣＨ＝ＣＨ－ＣＨ₃）、２－プロペニル（アリル、－ＣＨ－ＣＨ＝ＣＨ₂）、イソプロペニル（１－メチルビニル、－Ｃ（ＣＨ₃）＝ＣＨ₂）、ブテニル（Ｃ₄）、ペンテニル（Ｃ₅）およびヘキセニル（Ｃ₆）があげられる。

【0047】

Ｃ_2-12アルキニル：本願明細書で使用する時、「Ｃ_2-12アルキニル」の用語は、１つ以上の炭素－炭素三重結合を有するアルキル基に関する。

【0048】

不飽和のアルキニル基としては、例えば、制限されず、エチニル（－Ｃ≡ＣＨ）および２－プロピニル（プロパルギル、－ＣＨ₂－Ｃ≡ＣＨ）があげられる。

【0049】

Ｃ_3-12シクロアルキル：本願明細書で使用する時、「Ｃ_3-12シクロアルキル」の用語は、シクリル基でもあるアルキル基；すなわち、環状炭化水素（炭素環式）化合物の脂環式環原子から水素原子を除去することにより得られる一価の部分に関する。前記部分は、３から７個の炭素原子、例えば、３から７個の環原子を有する。

【0050】

シクロアルキル基としては、例えば、制限されず、
飽和の単環式炭化水素化合物：シクロプロパン（Ｃ₃）、シクロブタン（Ｃ₄）、シクロペンタン（Ｃ₅）、シクロヘキサン（Ｃ₆）、シクロヘプタン（Ｃ₇）、メチルシクロプロパン（Ｃ₄）、ジメチルシクロプロパン（Ｃ₅）、メチルシクロブタン（Ｃ₅）、ジメチルシクロブタン（Ｃ₆）、メチルシクロペンタン（Ｃ₆）、ジメチルシクロペンタン（Ｃ₇）およびメチルシクロヘキサン（Ｃ₇）；
不飽和の単環式炭化水素化合物：シクロプロペン（Ｃ₃）、シクロブテン（Ｃ₄）、シクロペンテン（Ｃ₅）、シクロヘキセン（Ｃ₆）、メチルシクロプロペン（Ｃ₄）、ジメチルシクロプロペン（Ｃ₅）、メチルシクロブテン（Ｃ₅）、ジメチルシクロブテン（Ｃ₆）、メチルシクロペンテン（Ｃ₆）、ジメチルシクロペンテン（Ｃ₇）およびメチルシクロヘキセン（Ｃ₇）；ならびに、
飽和の多環式炭化水素化合物：ノルカラン（Ｃ₇）、ノルピナン（Ｃ₇）、ノルボルナン（Ｃ₇）に由来するものがあげられる。

【0051】

Ｃ_3-20ヘテロシクリル：本願明細書で使用する時、「Ｃ_3-20ヘテロシクリル」の用語は、複素環化合物の環原子から水素原子を除去することにより得られる一価の部分に関する。前記部分は、３から２０個の環原子を有し、その内の１から１０個が、環のヘテロ原子である。好ましくは、各環は、３から７個の環原子を有し、その内の１から４個が、環のヘテロ原子である。

【0052】

この文脈において、接頭辞（例えば、Ｃ_3-20、Ｃ_3-7、Ｃ_5-6等）は、炭素原子またはヘテロ原子であるかに関わらず、環原子の数、または、環原子の数の範囲を意味する。例えば、本願明細書で使用する時、「Ｃ_5-6ヘテロシクリル」の用語は、５または６個の環原子を有するヘテロシクリル基に関する。

【0053】

単環式のヘテロシクリル基としては、例えば、制限されず、
Ｎ₁：アジリジン（Ｃ₃）、アゼチジン（Ｃ₄）、ピロリジン（テトラヒドロピロール）（Ｃ₅）、ピロリン（例えば、３－ピロリン、２，５－ジヒドロピロール）（Ｃ₅）、２Ｈ－ピロールもしくは３Ｈ－ピロール（イソピロール、イソアゾール）（Ｃ₅）、ピペリジン（Ｃ₆）、ジヒドロピリジン（Ｃ₆）、テトラヒドロピリジン（Ｃ₆）、アゼピン（Ｃ₇）；
Ｏ₁：オキシラン（Ｃ₃）、オキセタン（Ｃ₄）、オキソラン（テトラヒドロフラン）（Ｃ₅）、オキソール（ジヒドロフラン）（Ｃ₅）、オキサン（テトラヒドロピラン）（Ｃ₆）、ジヒドロピラン（Ｃ₆）、ピラン（Ｃ₆）、オキセピン（Ｃ₇）；
Ｓ₁：チイラン（Ｃ₃）、チエタン（Ｃ₄）、チオラン（テトラヒドロチオフェン）（Ｃ₅）、チアン（テトラヒドロチオピラン）（Ｃ₆）、チエパン（Ｃ₇）；
Ｏ₂：ジオキソラン（Ｃ₅）、ジオキサン（Ｃ₆）およびジオキセパン（Ｃ₇）；
Ｏ₃：トリオキサン（Ｃ₆）；
Ｎ₂：イミダゾリジン（Ｃ₅）、ピラゾリジン（ジアゾリジン）（Ｃ₅）、イミダゾリン（Ｃ₅）、ピラゾリン（ジヒドロピラゾール）（Ｃ₅）、ピペラジン（Ｃ₆）；
Ｎ₁Ｏ₁：テトラヒドロオキサゾール（Ｃ₅）、ジヒドロオキサゾール（Ｃ₅）、テトラヒドロイソキサゾール（Ｃ₅）、ジヒドロイソキサゾール（Ｃ₅）、モルホリン（Ｃ₆）、テトラヒドロオキサジン（Ｃ₆）、ジヒドロオキサジン（Ｃ₆）、オキサジン（Ｃ₆）；
Ｎ₁Ｓ₁：チアゾリン（Ｃ₅）、チアゾリジン（Ｃ₅）、チオモルホリン（Ｃ₆）；
Ｎ₂Ｏ₁：オキサジアジン（Ｃ₆）；
Ｏ₁Ｓ₁：オキサチオール（Ｃ₅）およびオキサチアン（チオキサン）（Ｃ₆）；ならびに、
Ｎ₁Ｏ₁Ｓ₁：オキサチアジン（Ｃ₆）に由来するものがあげられる。

【0054】

置換されている単環式ヘテロシクリル基としては、例えば、環型の単糖類、例えば、フラノース（Ｃ₅）、例えば、アラビノフラノース、リキソフラノース、リボフラノースおよびキシロフラノース、ならびに、ピラノース（Ｃ₆）、例えば、アロピラノース、アルトロピラノース、グルコピラノース、マンノピラノース、グロピラノース、イドピラノース、ガラクトピラノースおよびタロピラノースに由来するものがあげられる。

【0055】

Ｃ_5-20アリール：本願明細書で使用する時、「Ｃ_5-20アリール」の用語は、芳香族化合物の芳香族環原子から水素原子を除去することにより得られる一価の部分に関し、前記部分は、３から２０個の環原子を有する。本願明細書で使用する時、「Ｃ_5-7アリール」の用語は、芳香族化合物の芳香族環原子から水素原子を除去することにより得られる一価の部分に関し、前記部分は、５から７個の環原子を有する。本願明細書で使用する時、「Ｃ_5-10アリール」の用語は、芳香族化合物の芳香族環原子から水素原子を除去することにより得られる一価の部分に関し、前記部分は、５から１０個の環原子を有する。好ましくは、各環は、５から７個の環原子を有する。

【0056】

この文脈において、接頭辞（例えば、Ｃ_3-20、Ｃ_5-7、Ｃ_5-6、Ｃ_5-10等）は、炭素原子またはヘテロ原子であるかに関わらず、環原子の数、または、環原子の数の範囲を意味する。例えば、本願明細書で使用する時、「Ｃ_5-6アリール」の用語は、５または６個の環原子を有するアリール基に関する。

【0057】

「カルボアリール基」のように、前記環原子が、全て炭素原子でもよい。
カルボアリール基としては、例えば、制限されず、ベンゼン、（すなわち、フェニル）（Ｃ₆）、ナフタレン（Ｃ₁₀）、アズレン（Ｃ₁₀）、アントラセン（Ｃ₁₄）、フェナントレン（Ｃ₁₄）、ナフタセン（Ｃ₁₈）およびピレン（Ｃ₁₆）に由来のものがあげられる。

【0058】

縮合環を含み、その内の少なくとも１つが芳香族環であるアリール基としては、例えば、制限されず、インダン（例えば、２，３－ジヒドロ－１Ｈ－インデン）（Ｃ₉）、インデン（Ｃ₉）、イソインデン（Ｃ₉）、テトラリン（１，２，３，４－テトラヒドロナフタレン（Ｃ₁₀）、アセナフテン（Ｃ₁₂）、フルオレン（Ｃ₁₃）、フェナレン（Ｃ₁₃）、アセフェナントレン（Ｃ₁₅）およびアセアントレン（Ｃ₁₆）に由来する基があげられる。

【0059】

または、前記環原子は、「ヘテロアリール基」のように、１つ以上のヘテロ原子を含んでもよい。単環式のヘテロアリール基としては、例えば、制限されず、
Ｎ₁：ピロール（アゾール）（Ｃ₅）、ピリジン（アジン）（Ｃ₆）；
Ｏ₁：フラン（オキソール）（Ｃ₅）；
Ｓ₁：チオフェン（チオール）（Ｃ₅）；
Ｎ₁Ｏ₁：オキサゾール（Ｃ₅）、イソキサゾール（Ｃ₅）、イソキサジン（Ｃ₆）；
Ｎ₂Ｏ₁：オキサジアゾール（フラザン）（Ｃ₅）；
Ｎ₃Ｏ₁：オキサトリアゾール（Ｃ₅）；
Ｎ₁Ｓ₁：チアゾール（Ｃ₅）、イソチアゾール（Ｃ₅）；
Ｎ₂：イミダゾール（１，３－ジアゾール）（Ｃ₅）、ピラゾール（１，２－ジアゾール）（Ｃ₅）、ピリダジン（１，２－ジアジン）（Ｃ₆）、ピリミジン（１，３－ジアジン）（Ｃ₆）（例えば、シトシン、チミン、ウラシル）、ピラジン（１，４－ジアジン）（Ｃ₆）；
Ｎ₃：トリアゾール（Ｃ₅）、トリアジン（Ｃ₆）；ならびに、
Ｎ₄：テトラゾール（Ｃ₅）に由来するものがあげられる。

【0060】

縮合環を含むヘテロアリールとしては、例えば、制限されず：
ベンゾフラン（Ｏ₁）、イソベンゾフラン（Ｏ₁）、インドール（Ｎ₁）、イソインドール（Ｎ₁）、インドリジン（Ｎ₁）、インドリン（Ｎ₁）、イソインドリン（Ｎ₁）、プリン（Ｎ₄）（例えば、アデニン、グアニン）、ベンズイミダゾール（Ｎ₂）、インダゾール（Ｎ₂）、ベンズオキサゾール（Ｎ₁Ｏ₁）、ベンズイソキサゾール（Ｎ₁Ｏ₁）、ベンゾジオキソール（Ｏ₂）、ベンゾフラザン（Ｎ₂Ｏ₁）、ベンゾトリアゾール（Ｎ₃）、ベンゾチオフラン（Ｓ₁）、ベンゾチアゾール（Ｎ₁Ｓ₁）、ベンゾチアジアゾール（Ｎ₂Ｓ）に由来するＣ₉（２縮合環を含む）；
クロメン（Ｏ₁）、イソクロメン（Ｏ₁）、クロマン（Ｏ₁）、イソクロマン（Ｏ₁）、ベンゾジオキサン（Ｏ₂）、キノリン（Ｎ₁）、イソキノリン（Ｎ₁）、キノリジン（Ｎ₁）、ベンゾキサジン（Ｎ₁Ｏ₁）、ベンゾジアジン（Ｎ₂）、ピリドピリジン（Ｎ₂）、キノキサリン（Ｎ₂）、キナゾリン（Ｎ₂）、シンノリン（Ｎ₂）、フタラジン（Ｎ₂）、ナフチリジン（Ｎ₂）、プテリジン（Ｎ₄）に由来するＣ₁₀（２縮合環を含む）；
ベンゾジアゼピン（Ｎ₂）に由来するＣ₁₁（２縮合環を含む）；
カルバゾール（Ｎ₁）、ジベンゾフラン（Ｏ₁）、ジベンゾチオフェン（Ｓ₁）、カルボリン（Ｎ₂）、ペリミジン（Ｎ₂）、ピリドインドール（Ｎ₂）に由来するＣ₁₃（３縮合環を含む）；ならびに、
アクリジン（Ｎ₁）、キサンテン（Ｏ₁）、チオキサンテン（Ｓ₁）、オキサントレン（Ｏ₂）、フェノキサチイン（Ｏ₁Ｓ₁）、フェナジン（Ｎ₂）、フェノキサジン（Ｎ₁Ｏ₁）、フェノチアジン（Ｎ₁Ｓ₁）、チアントレン（Ｓ₂）、フェナントリジン（Ｎ₁）、フェナントロリン（Ｎ₂）、フェナジン（Ｎ₂）に由来するＣ₁₄（３縮合環を含む）があげられる。

【0061】

単独であるか、または、別の置換基の一部であるかに関わらず、上記基は、それ自体が場合により、それらおよび、以下に列記される更なる置換基から選択される１つ以上の基で置換されていてもよい。

【0062】

ハロ：－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒおよび－Ｉ。
ヒドロキシ：－ＯＨ。

【0063】

エーテル：－ＯＲ、前記ＯＲ中、Ｒは、エーテル置換基、例えば、Ｃ_1-7アルキル基（以下に記載される、Ｃ_1-7アルコキシ基とも言う）、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基（Ｃ_3-20ヘテロシクリルオキシ基とも言う）または、Ｃ_5-20アリール基（Ｃ_5-20アリールオキシ基とも言う）、好ましくは、Ｃ_1-7アルキル基である。

【0064】

アルコキシ：－ＯＲ、前記ＯＲ中、Ｒは、アルキル基、例えば、Ｃ_1-7アルキル基である。Ｃ_1-7アルコキシ基としては、例えば、制限されず、－ＯＭｅ（メトキシ）、－ＯＥｔ（エトキシ）、－Ｏ（ｎＰｒ）（ｎ－プロポキシ）、－Ｏ（ｉＰｒ）（イソプロポキシ）、－Ｏ（ｎＢｕ）（ｎ－ブトキシ）、－Ｏ（ｓＢｕ）（ｓｅｃ－ブトキシ）、－Ｏ（ｉＢｕ）（イソブトキシ）および－Ｏ（ｔＢｕ）（ｔｅｒｔ－ブトキシ）があげられる。

【0065】

アセタール：－ＣＨ（ＯＲ¹）（ＯＲ²）、前記－ＣＨ（ＯＲ¹）（ＯＲ²）中、Ｒ¹およびＲ²は、独立して、アセタール置換基、例えば、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、Ｃ_1-7アルキル基であるか、または、「環状」アセタール基の場合、Ｒ¹およびＲ²は、それらが付着されている前記２つの酸素原子と、それらが付着されている炭素原子と互いにまとまって、４から８個の環原子を有する複素環を形成している。アセタール基としては、例えば、制限されず、－ＣＨ（ＯＭｅ）₂、－ＣＨ（ＯＥｔ）₂および－ＣＨ（ＯＭｅ）（ＯＥｔ）があげられる。

【0066】

ヘミアセタール：－ＣＨ（ＯＨ）（ＯＲ¹）、前記－ＣＨ（ＯＨ）（ＯＲ¹）中、Ｒ¹は、ヘミアセタール置換基、例えば、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、Ｃ_1-7アルキル基である。ヘミアセタール基としては、例えば、制限されず、－ＣＨ（ＯＨ）（ＯＭｅ）および－ＣＨ（ＯＨ）（ＯＥｔ）があげられる。

【0067】

ケタール：－ＣＲ（ＯＲ¹）（ＯＲ²）、前記－ＣＲ（ＯＲ¹）（ＯＲ²）中、Ｒ¹およびＲ²は、アセタールについて規定の通りである。Ｒは、水素以外のケタール置換基、例えば、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、Ｃ_1-7アルキル基である。ケタール基としては、例えば、制限されず、－Ｃ（Ｍｅ）（ＯＭｅ）₂、－Ｃ（Ｍｅ）（ＯＥｔ）₂、－Ｃ（Ｍｅ）（ＯＭｅ）（ＯＥｔ）、－Ｃ（Ｅｔ）（ＯＭｅ）₂、－Ｃ（Ｅｔ）（ＯＥｔ）₂および－Ｃ（Ｅｔ）（ＯＭｅ）（ＯＥｔ）があげられる。

【0068】

ヘミケタール：－ＣＲ（ＯＨ）（ＯＲ¹）、前記－ＣＲ（ＯＨ）（ＯＲ¹）中、Ｒ¹は、ヘミアセタールについて規定の通りである。Ｒは、水素以外のヘミケタール置換基、例えば、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、Ｃ_1-7アルキル基である。ヘミケタール基としては、例えば、制限されず、－Ｃ（Ｍｅ）（ＯＨ）（ＯＭｅ）、－Ｃ（Ｅｔ）（ＯＨ）（ＯＭｅ）、－Ｃ（Ｍｅ）（ＯＨ）（ＯＥｔ）および－Ｃ（Ｅｔ）（ＯＨ）（ＯＥｔ）があげられる。

【0069】

オキソ（ケト、－オン）：＝Ｏ。
チオン（チオケトン）：＝Ｓ。

【0070】

イミノ（イミン）：＝ＮＲ、前記＝ＮＲ中、Ｒは、イミノ置換基、例えば、水素、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、水素またはＣ_1-7アルキル基である。エステル基としては、例えば、制限されず、＝ＮＨ、＝ＮＭｅ、＝ＮＥｔおよび＝ＮＰｈがあげられる。

【0071】

ホルミル（カルバルデヒド、カルボキシアルデヒド）：－Ｃ（＝Ｏ）Ｈ。
アシル（ケト）：－Ｃ（＝Ｏ）Ｒ、前記－Ｃ（＝Ｏ）Ｒ中、Ｒは、アシル置換基、例えば、Ｃ_1-7アルキル基（Ｃ_1-7アルキルアシルまたはＣ_1-7アルカノイルとも言う）、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基（Ｃ_3-20ヘテロシクリルアシルとも言う）またはＣ_5-20アリール基（Ｃ_5-20アリールアシルとも言う）、好ましくは、Ｃ_1-7アルキル基である。アシル基としては、例えば、制限されず、－Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ₃（アセチル）、－Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ₂ＣＨ₃（プロピオニル）、－Ｃ（＝Ｏ）Ｃ（ＣＨ₃）₃（ｔ－ブチリル）および－Ｃ（＝Ｏ）Ｐｈ（ベンゾイル、フェノン）があげられる。

【0072】

カルボキシ（カルボン酸）：－Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ。
チオカルボキシ（チオカルボン酸）：－Ｃ（＝Ｓ）ＳＨ。
チオロカルボキシ（チオロカルボン酸）：－Ｃ（＝Ｏ）ＳＨ。
チオノカルボキシ（チオノカルボン酸）：－Ｃ（＝Ｓ）ＯＨ。

【0073】

イミド酸：－Ｃ（＝ＮＨ）ＯＨ。
ヒドロキサム酸：－Ｃ（＝ＮＯＨ）ＯＨ。

【0074】

エステル（カルボキシレート、カルボン酸エステル、オキシカルボニル）：－Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ、前記－Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ中、Ｒは、エステル置換基、例えば、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、Ｃ_1-7アルキル基である。エステル基としては、例えば、制限されず、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＣＨ₃、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＣＨ₂ＣＨ₃、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＣ（ＣＨ₃）₃および－Ｃ（＝Ｏ）ＯＰｈがあげられる。

【0075】

アシルオキシ（逆エステル）：－ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ、前記－ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ中、Ｒは、アシルオキシ置換基、例えば、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、Ｃ_1-7アルキル基である。アシルオキシ基としては、例えば、制限されず、－ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ₃（アセトキシ）、－ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ₂ＣＨ₃、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｃ（ＣＨ₃）₃、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｐｈおよび－ＯＣ（＝Ｏ）ＣＨ₂Ｐｈがあげられる。

【0076】

オキシカルボイルオキシ：－ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲ、前記－ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲ中、Ｒは、エステル置換基、例えば、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、Ｃ_1-7アルキル基である。エステル基としては、例えば、制限されず、－ＯＣ（＝Ｏ）ＯＣＨ₃、－ＯＣ（＝Ｏ）ＯＣＨ₂ＣＨ₃、－ＯＣ（＝Ｏ）ＯＣ（ＣＨ₃）₃および－ＯＣ（＝Ｏ）ＯＰｈがあげられる。

【0077】

アミノ：－ＮＲ¹Ｒ²、前記－ＮＲ¹Ｒ²中、Ｒ¹およびＲ²は、独立して、アミノ置換基、例えば、水素、Ｃ_1-7アルキル基（Ｃ_1-7アルキルアミノまたはジ－Ｃ_1-7アルキルアミノとも言う）、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、ＨまたはＣ_1-7アルキル基であるか、または、「環状」アミノ基の場合、Ｒ¹およびＲ²は、それらが付着されている前記窒素原子と互いにまとまって、４から８個の環原子を有する複素環を形成している。アミノ基は、一級（－ＮＨ₂）、二級（－ＮＨＲ¹）または三級（－ＮＨＲ¹Ｒ²）でもよいし、カチオンの状態において、四級（－⁺ＮＲ¹Ｒ²Ｒ³）でもよい。アミノ基としては、例えば、制限されず、－ＮＨ₂、－ＮＨＣＨ₃、－ＮＨＣ（ＣＨ₃）₂、－Ｎ（ＣＨ₃）₂、－Ｎ（ＣＨ₂ＣＨ₃）₂および－ＮＨＰｈがあげられる。環状アミノ基としては、例えば、制限されず、アジリジノ、アゼチジノ、ピロリジノ、ピペリジノ、ピペラジノ、モルホリノおよびチオモルホリノがあげられる。

【0078】

アミド（カルバモイル、カルバミル、アミノカルボニル、カルボキシアミド）：－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ¹Ｒ²、前記－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ¹Ｒ²中、Ｒ¹およびＲ²は、独立して、アミノ基について規定のアミノ置換基である。アミド基としては、例えば、制限されず、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ₂、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＣＨ₃、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ₃）₂、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＣＨ₂ＣＨ₃および－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ₂ＣＨ₃）₂、ならびに、Ｒ¹およびＲ²が、それらが付着されている前記窒素原子と互いにまとまって、複素環構造、例えば、ピペリジノカルボニル、モルホリノカルボニル、チオモルホリノカルボニルおよびピペラジノカルボニルを形成しているアミド基があげられる。

【0079】

チオアミド（チオカルバミル）：－Ｃ（＝Ｓ）ＮＲ¹Ｒ²、前記－Ｃ（＝Ｓ）ＮＲ¹Ｒ²中、Ｒ¹およびＲ²は、独立して、アミノ基について規定のアミノ置換基である。アミド基としては、例えば、制限されず、－Ｃ（＝Ｓ）ＮＨ₂、－Ｃ（＝Ｓ）ＮＨＣＨ₃、－Ｃ（＝Ｓ）Ｎ（ＣＨ₃）₂および－Ｃ（＝Ｓ）ＮＨＣＨ₂ＣＨ₃があげられる。

【0080】

アシルアミド（アシルアミノ）：－ＮＲ¹Ｃ（＝Ｏ）Ｒ²、前記－ＮＲ¹Ｃ（＝Ｏ）Ｒ²中、Ｒ¹は、アミド置換基、例えば、水素、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、水素またはＣ_1-7アルキル基である。Ｒ²は、アシル置換基、例えば、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、水素またはＣ_1-7アルキル基である。アシルアミド基としては、例えば、制限されず、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ₃、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＣＨ₂ＣＨ₃および－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｐｈがあげられる。Ｒ¹およびＲ²は共に、例えば、スクシンイミジル、マレイミジルおよびフタルイミジルのような、環状構造を形成し得る。

【0081】

【化9】

【0082】

アミノカルボニルオキシ：－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲ¹Ｒ²、前記－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＲ¹Ｒ²中、Ｒ¹およびＲ²は、独立して、アミノ基について規定のアミノ置換基である。アミノカルボニルオキシ基としては、例えば、制限されず、－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ₂、－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨＭｅ、－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＭｅ₂および－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＥｔ₂があげられる。

【0083】

ウレイド：－Ｎ（Ｒ¹）ＣＯＮＲ²Ｒ³、前記－Ｎ（Ｒ¹）ＣＯＮＲ²Ｒ³中、Ｒ²およびＲ³は、独立して、アミノ基について規定のアミノ置換基である。Ｒ¹は、ウレイド置換基、例えば、水素、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、水素またはＣ_1-7アルキル基である。ウレイド基としては、例えば、制限されず、－ＮＨＣＯＮＨ₂、－ＮＨＣＯＮＨＭｅ、－ＮＨＣＯＮＨＥｔ、－ＮＨＣＯＮＭｅ₂、－ＮＨＣＯＮＥｔ₂、－ＮＭｅＣＯＮＨ₂、－ＮＭｅＣＯＮＨＭｅ、－ＮＭｅＣＯＮＨＥｔ、－ＮＭｅＣＯＮＭｅ₂および－ＮＭｅＣＯＮＥｔ₂があげられる。

【0084】

グアノジノ：－ＮＨ－Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ₂。
テトラゾリル：４つの窒素原子と１つの炭素原子とを有する５員の芳香環。

【0085】

【化10】

【0086】

イミノ：＝ＮＲ、前記＝ＮＲ中、Ｒは、イミノ置換基、例えば、水素、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、ＨまたはＣ_1-7アルキル基である。イミノ基としては、例えば、制限されず、＝ＮＨ、＝ＮＭｅおよび＝ＮＥｔがあげられる。

【0087】

アミジン（アミジノ）：－Ｃ（＝ＮＲ）ＮＲ₂、前記－Ｃ（＝ＮＲ）ＮＲ₂中、各Ｒは、アミジン置換基、例えば、水素、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、ＨまたはＣ_1-7アルキル基である。アミジン基としては、例えば、制限されず、－Ｃ（＝ＮＨ）ＮＨ₂、－Ｃ（＝ＮＨ）ＮＭｅ₂および－Ｃ（＝ＮＭｅ）ＮＭｅ₂があげられる。

【0088】

ニトロ：－ＮＯ₂。
ニトロソ：－ＮＯ。
アジド：－Ｎ₃。

【0089】

シアノ（ニトリル、カーボニトリル）：－ＣＮ。
イソシアノ：－ＮＣ。
シアナト：－ＯＣＮ。
イソシアナト：－ＮＣＯ。

【0090】

チオシアノ（チオシアナト）：－ＳＣＮ。
イソチオシアノ（イソチオシアナト）：－ＮＣＳ。
スルフヒドリル（チオール、メルカプト）：－ＳＨ。

【0091】

チオエーテル（スルフィド）：－ＳＲ、前記－ＳＲ中、Ｒは、チオエーテル置換基、例えば、Ｃ_1-7アルキル基（Ｃ_1-7アルキルチオ基とも言う）、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、Ｃ_1-7アルキル基である。Ｃ_1-7アルキルチオ基としては、例えば、制限されず、－ＳＣＨ₃および－ＳＣＨ₂ＣＨ₃があげられる。

【0092】

ジスルフィド：－ＳＳ－Ｒ、前記－ＳＳ－Ｒ中、Ｒは、ジスルフィド置換基、例えば、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、Ｃ_1-7アルキル基（本願明細書では、Ｃ_1-7アルキルジスルフィドとも言う）である。Ｃ_1-7アルキルジスルフィド基としては、例えば、制限されず、－ＳＳＣＨ₃および－ＳＳＣＨ₂ＣＨ₃があげられる。

【0093】

スルフィン（スルフィニル、スルホキシド）：－Ｓ（＝Ｏ）Ｒ、前記－Ｓ（＝Ｏ）Ｒ中、Ｒは、スルフィン置換基、例えば、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、Ｃ_1-7アルキル基である。スルフィン基としては、例えば、制限されず、－Ｓ（＝Ｏ）ＣＨ₃および－Ｓ（＝Ｏ）ＣＨ₂ＣＨ₃があげられる。

【0094】

スルホン（スルホニル）：－Ｓ（＝Ｏ）₂Ｒ、前記－Ｓ（＝Ｏ）₂Ｒ中、Ｒは、スルホン置換基、例えば、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、Ｃ_1-7アルキル基、例えば、フッ素化もしくは全フッ素置換されたＣ_1-7アルキル基である。スルホン基としては、例えば、制限されず、－Ｓ（＝Ｏ）₂ＣＨ₃（メタンスルホニル、メシル）、－Ｓ（＝Ｏ）₂ＣＦ₃（トリフリル）、－Ｓ（＝Ｏ）₂ＣＨ₂ＣＨ₃（エシル）、－Ｓ（＝Ｏ）₂Ｃ₄Ｆ₉（ノナフリル）、－Ｓ（＝Ｏ）₂ＣＨ₂ＣＦ₃（トレシル）、－Ｓ（＝Ｏ）₂ＣＨ₂ＣＨ₂ＮＨ₂（タウリル）、－Ｓ（＝Ｏ）₂Ｐｈ（フェニルスルホニル、ベシル）、４－メチルフェニルスルホニル（トシル）、４－クロロフェニルスルホニル（クロシル）、４－ブロモフェニルスルホニル（ブロシル）、４－ニトロフェニル（ノシル）、２－ナフタレンスルホナート（ナプシル）および５－ジメチルアミノ－ナフタレン－１－イルスルホナート（ダンシル）があげられる。

【0095】

スルフィン酸（スルフィノ）：－Ｓ（＝Ｏ）ＯＨ、－ＳＯ₂Ｈ。
スルホン酸（スルホ）：－Ｓ（＝Ｏ）₂ＯＨ、－ＳＯ₃Ｈ。

【0096】

スルフィナート（スルフィン酸エステル）：－Ｓ（＝Ｏ）ＯＲ；前記－Ｓ（＝Ｏ）ＯＲ中、Ｒは、スルフィナート置換基、例えば、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、Ｃ_1-7アルキル基である。スルフィナート基としては、例えば、制限されず、－Ｓ（＝Ｏ）ＯＣＨ₃（メトキシスルフィニル；メチルスルフィナート）および－Ｓ（＝Ｏ）ＯＣＨ₂ＣＨ₃（エトキシスルフィニル；エチルスルフィナート）があげられる。

【0097】

スルホナート（スルホン酸エステル）：－Ｓ（＝Ｏ）₂ＯＲ、前記－Ｓ（＝Ｏ）₂ＯＲ中、Ｒは、スルホナート置換基、例えば、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、Ｃ_1-7アルキル基である。スルホナート基としては、例えば、制限されず、－Ｓ（＝Ｏ）₂ＯＣＨ₃（メトキシスルホニル；メチルスルホナート）および－Ｓ（＝Ｏ）₂ＯＣＨ₂ＣＨ₃（エトキシスルホニル；エチルスルホナート）があげられる。

【0098】

スルフィニルオキシ：－ＯＳ（＝Ｏ）Ｒ、前記－ＯＳ（＝Ｏ）Ｒ中、Ｒは、スルフィニルオキシ置換基、例えば、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、Ｃ_1-7アルキル基である。スルフィニルオキシ基としては、例えば、制限されず、－ＯＳ（＝Ｏ）ＣＨ₃および－ＯＳ（＝Ｏ）ＣＨ₂ＣＨ₃があげられる。

【0099】

スルホニルオキシ：－ＯＳ（＝Ｏ）₂Ｒ、前記－ＯＳ（＝Ｏ）₂Ｒ中、Ｒは、スルホニルオキシ置換基、例えば、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、Ｃ_1-7アルキル基である。スルホニルオキシ基としては、例えば、制限されず、－ＯＳ（＝Ｏ）₂ＣＨ₃（メシレート）および－ＯＳ（＝Ｏ）₂ＣＨ₂ＣＨ₃（エシレート）があげられる。

【0100】

サルフェート：－ＯＳ（＝Ｏ）₂ＯＲ：前記－ＯＳ（＝Ｏ）₂ＯＲ中、Ｒは、サルフェート置換基、例えば、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、Ｃ_1-7アルキル基である。サルフェート基としては、例えば、制限されず、－ＯＳ（＝Ｏ）₂ＯＣＨ₃および－ＳＯ（＝Ｏ）₂ＯＣＨ₂ＣＨ₃があげられる。

【0101】

スルファミル（スルファモイル；スルフィン酸アミド；スルフィナミド）：－Ｓ（＝Ｏ）ＮＲ¹Ｒ²、前記－Ｓ（＝Ｏ）ＮＲ¹Ｒ²中、Ｒ¹およびＲ²は、独立して、アミノ基について規定のアミノ置換基である。スルファミル基としては、例えば、制限されず、－Ｓ（＝Ｏ）ＮＨ₂、－Ｓ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ₃）、－Ｓ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ₃）₂、－Ｓ（＝Ｏ）ＮＨ（ＣＨ₂ＣＨ₃）、－Ｓ（＝Ｏ）Ｎ（ＣＨ₂ＣＨ₃）₂および－Ｓ（＝Ｏ）ＮＨＰｈがあげられる。

【0102】

スルホンアミド（スルフィンアモイル；スルホン酸アミド；スルホンアミド）：－Ｓ（＝Ｏ）₂ＮＲ¹Ｒ²、前記－Ｓ（＝Ｏ）₂ＮＲ¹Ｒ²中、Ｒ¹およびＲ²は、独立して、アミノ基について規定のアミノ置換基である。スルホンアミド基としては、例えば、制限されず、－Ｓ（＝Ｏ）₂ＮＨ₂、－Ｓ（＝Ｏ）₂ＮＨ（ＣＨ₃）、－Ｓ（＝Ｏ）₂Ｎ（ＣＨ₃）₂、－Ｓ（＝Ｏ）₂ＮＨ（ＣＨ₂ＣＨ₃）、－Ｓ（＝Ｏ）₂Ｎ（ＣＨ₂ＣＨ₃）₂および－Ｓ（＝Ｏ）₂ＮＨＰｈがあげられる。

【0103】

スルファミノ：－ＮＲ¹Ｓ（＝Ｏ）₂ＯＨ、前記－ＮＲ¹Ｓ（＝Ｏ）₂ＯＨ中、Ｒ¹は、アミノ基について規定のアミノ置換基である。スルファミノ基としては、例えば、制限されず、－ＮＨＳ（＝Ｏ）₂ＯＨおよび－Ｎ（ＣＨ₃）Ｓ（＝Ｏ）₂ＯＨがあげられる。

【0104】

スルホンアミノ：－ＮＲ¹Ｓ（＝Ｏ）₂Ｒ、前記－ＮＲ¹Ｓ（＝Ｏ）₂Ｒ中、Ｒ¹は、アミノ基について規定のアミノ置換基である。Ｒは、スルホンアミノ置換基、例えば、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、Ｃ_1-7アルキル基である。スルホンアミノ基としては、例えば、制限されず、－ＮＨＳ（＝Ｏ）₂ＣＨ₃および－Ｎ（ＣＨ₃）Ｓ（＝Ｏ）₂Ｃ₆Ｈ₅があげられる。

【0105】

スルフィンアミノ：－ＮＲ¹Ｓ（＝Ｏ）Ｒ、前記－ＮＲ¹Ｓ（＝Ｏ）Ｒ中、Ｒ¹は、アミノ基について規定のアミノ置換基である。Ｒは、スルフィンアミノ置換基、例えば、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、Ｃ_1-7アルキル基である。スルフィンアミノ基としては、例えば、制限されず、－ＮＨＳ（＝Ｏ）ＣＨ₃および－Ｎ（ＣＨ₃）Ｓ（＝Ｏ）Ｃ₆Ｈ₅があげられる。

【0106】

ホスフィノ（ホスフィン）：－ＰＲ₂、前記－ＰＲ₂中、Ｒは、ホスフィノ置換基、例えば、－Ｈ、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、－Ｈ、Ｃ_1-7アルキル基またはＣ_5-20アリール基である。ホスフィノ基としては、例えば、制限されず、－ＰＨ₂、－Ｐ（ＣＨ₃）₂、－Ｐ（ＣＨ₂ＣＨ₃）₂、－Ｐ（ｔ－Ｂｕ）₂および－Ｐ（Ｐｈ）₂があげられる。

【0107】

ホスホ：－Ｐ（＝Ｏ）₂。
ホスフィニル（ホスフィンオキシド）：－Ｐ（＝Ｏ）Ｒ₂、前記－Ｐ（＝Ｏ）Ｒ₂中、Ｒは、ホスフィニル置換基、例えば、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、Ｃ_1-7アルキル基またはＣ_5-20アリール基である。ホスフィニル基としては、例えば、制限されず、－Ｐ（＝Ｏ）（ＣＨ₃）₂、－Ｐ（＝Ｏ）（ＣＨ₂ＣＨ₃）₂、－Ｐ（＝Ｏ）（ｔ－Ｂｕ）₂および－Ｐ（＝Ｏ）（Ｐｈ）₂があげられる。

【0108】

ホスホン酸（ホスホノ）：－Ｐ（＝Ｏ）（ＯＨ）₂。
ホスホナート（ホスホノエステル）：－Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲ）₂、前記－Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲ）₂中、Ｒは、ホスホナート置換基、例えば、－Ｈ、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、－Ｈ、Ｃ_1-7アルキル基またはＣ_5-20アリール基である。ホスホナート基としては、例えば、制限されず、－Ｐ（＝Ｏ）（ＯＣＨ₃）₂、－Ｐ（＝Ｏ）（ＯＣＨ₂ＣＨ₃）₂、－Ｐ（＝Ｏ）（Ｏ－ｔ－Ｂｕ）₂および－Ｐ（＝Ｏ）（ＯＰｈ）₂があげられる。

【0109】

リン酸（ホスホノオキシ）：－ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＨ）₂。
ホスフェート（ホスホノオキシエステル）：－ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲ）₂、前記－ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲ）₂中、Ｒは、ホスフェート置換基、例えば、－Ｈ、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、－Ｈ、Ｃ_1-7アルキル基またはＣ_5-20アリール基である。ホスフェート基としては、例えば、制限されず、－ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＣＨ₃）₂、－ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＣＨ₂ＣＨ₃）₂、－ＯＰ（＝Ｏ）（Ｏ－ｔ－Ｂｕ）₂および－ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＰｈ）₂があげられる。

【0110】

亜リン酸：－ＯＰ（ＯＨ）₂。
ホスファイト：－ＯＰ（ＯＲ）₂、前記－ＯＰ（ＯＲ）₂中、Ｒは、ホスファイト置換基、例えば、－Ｈ、Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、－Ｈ、Ｃ_1-7アルキル基またはＣ_5-20アリール基である。ホスファイト基としては、例えば、制限されず、－ＯＰ（ＯＣＨ₃）₂、－ＯＰ（ＯＣＨ₂ＣＨ₃）₂、－ＯＰ（Ｏ－ｔ－Ｂｕ）₂および－ＯＰ（ＯＰｈ）₂があげられる。

【0111】

ホスホラミダイト：－ＯＰ（ＯＲ¹）－ＮＲ² ₂、前記－ＯＰ（ＯＲ¹）－ＮＲ² ₂中、Ｒ¹およびＲ²は、ホスホラミダイト置換基、例えば、－Ｈ、（場合により置換されている）Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、－Ｈ、Ｃ_1-7アルキル基またはＣ_5-20アリール基である。ホスホラミダイト基としては、例えば、制限されず、－ＯＰ（ＯＣＨ₂ＣＨ₃）－Ｎ（ＣＨ₃）₂、－ＯＰ（ＯＣＨ₂ＣＨ₃）－Ｎ（ｉ－Ｐｒ）₂および－ＯＰ（ＯＣＨ₂ＣＨ₂ＣＮ）－Ｎ（ｉ－Ｐｒ）₂があげられる。

【0112】

ホスホラミデート：－ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲ¹）－ＮＲ² ₂、前記－ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲ¹）－ＮＲ² ₂中、Ｒ¹およびＲ²は、ホスホラミデート置換基、例えば、－Ｈ、（場合により置換されている）Ｃ_1-7アルキル基、Ｃ_3-20ヘテロシクリル基またはＣ_5-20アリール基、好ましくは、－Ｈ、Ｃ_1-7アルキル基またはＣ_5-20アリール基である。ホスホラミデート基としては、例えば、制限されず、－ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＣＨ₂ＣＨ₃）－Ｎ（ＣＨ₃）₂、－ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＣＨ₂ＣＨ₃）－Ｎ（ｉ－Ｐｒ）₂および－ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＣＨ₂ＣＨ₂ＣＮ）－Ｎ（ｉ－Ｐｒ）₂があげられる。

【0113】

コンジュゲート
本発明は、リンカーユニットを介して、リガンドユニットに結合されるＰＢＤ二量体を含むコンジュゲートを提供する。一実施形態では、前記リンカーユニットは、ストレッチャユニット（Ａ）、特異性ユニット（Ｌ¹）およびスペーサユニット（Ｌ²）を含む。前記リンカーユニットは、前記リガンドユニット（Ｌ）に、一方端で結合されており、前記ＰＢＤ二量体化合物（Ｄ）に、他方端で結合されている。

【0114】

一態様では、このようなコンジュゲートは、以下に、式ＩＶａ：
Ｌ－（Ａ¹ _a－Ｌ¹ _s－Ｌ² _y－Ｄ）_p （ＩＶａ）
または、その薬学的に許容され得る塩もしくは溶媒和物で示される。式ＩＶａ中：Ｌは、前記リガンドユニットであり；および、－Ａ¹ _a－Ｌ¹ _s－Ｌ² _y－は、リンカーユニット（ＬＵ）であり、前記リンカーユニット中、－Ａ¹－は、ストレッチャユニットであり、ａは、１または２であり、－Ｌ¹－は、特異性ユニットであり、ｓは、０から１２の範囲の整数であり、－Ｌ²－は、スペーサユニットであり、ｙは、０、１または２であり；－Ｄは、ＰＢＤ二量体であり；および、ｐは、１から２０である。

【0115】

別の態様では、このようなコンジュゲートは、以下に、式ＩＶｂ：

【化11】

として示される。および
Ｌ－（Ａ¹ _a－Ｌ² _y（－Ｌ¹ _s）－Ｄ）_p （ＩＶｂ）
としても示され、または、その薬学的に許容され得る塩もしくは溶媒和物で示される。式ＩＶｂ中：Ｌは、前記リガンドユニットであり；および、－Ａ¹ _a－Ｌ¹ _s（Ｌ² _y）－は、リンカーユニット（ＬＵ）であり、前記リンカーユニット中、－Ａ¹－は、ストレッチャユニット（Ｌ²）に結合されているストレッチャユニットであり、ａは、１または２であり、－Ｌ¹－は、ストレッチャユニット（Ｌ²）に結合されている特異性ユニットであり、ｓは、０から１２の範囲の整数であり、－Ｌ²－は、スペーサユニットであり、ｙは、０、１または２であり；－Ｄは、ＰＢＤ二量体であり；および、ｐは、１から２０である。

【0116】

選択
下記選択が、上記本発明の全ての態様に適用されてもよいし、または、単独の態様に関連し得る。前記選択は、任意の組み合わせで互いに組み合わせられてもよい。

【0117】

一実施形態では、前記コンジュゲートは、式：
Ｌ－（Ａ¹ _a－Ｌ¹ _s－Ｌ² _y－Ｄ）_p
Ｌ－（Ａ¹ _a－Ｌ_s ¹－Ｄ）_p、
Ｌ－（Ａ¹－Ｌ¹－Ｄ）_pもしくは
Ｌ－（Ａ¹－Ｄ）_p
または、その薬学的に許容され得る塩もしくは溶媒和物を有する。前記式中、Ｌ、Ａ¹、ａ、Ｌ¹、ｓ、Ｌ²、Ｄ、ｙおよびｐは、上記の通りである。

【0118】

一実施形態では、前記リガンドユニット（Ｌ）は、標的細胞の表面上の標的分子に特異的に結合する、細胞結合剤（ＣＢＡ）である。典型的な式は、以下に示される。

【0119】

【化12】

【0120】

前記式中、前記アスタリスクは、前記ドラッグユニット（Ｄ）への付着点を示し、ＣＢＡは、前記細胞結合剤であり、Ｌ¹は、特異性ユニットであり、Ａ¹は、前記細胞結合剤に、Ｌ¹を結合させるストレッチャユニットであり、Ｌ²は、スペーサユニットであり、前記スペーサユニットは、共有結合、自壊性基であるか、－ＯＣ（＝Ｏ）－と共に自壊性基を形成し、Ｌ²は、任意選択である。－ＯＣ（＝Ｏ）－は、必要に応じて、Ｌ¹またはＬ²の一部であると見なしてもよい。

【0121】

別の実施形態では、前記リガンドユニット（Ｌ）は、標的細胞の表面上の標的分子に特異的に結合する、細胞結合剤（ＣＢＡ）である。典型的な式は、以下に示される。

【0122】

ＣＢＡ－Ａ¹ _a－Ｌ¹ _s－Ｌ² _y－^*

【0123】

前記式中、前記アスタリスクは、前記ドラッグユニット（Ｄ）への付着点を示し、ＣＢＡは、前記細胞結合剤であり、Ｌ¹は、特異性ユニットであり、Ａ¹は、前記細胞結合剤に、Ｌ¹を結合させるストレッチャユニットであり、Ｌ²は、共有結合または自壊性基であるスペーサユニットであり、および、ａは、１または２であり、ｓは、０、１または２であり、ｙは、０または１または２である。

【0124】

上記で説明した実施形態では、Ｌ¹は、開裂性の特異性ユニットであることができ、自壊性基が存在する場合、開裂された時点で、自壊性基（または、複数の自壊性基）であるＬ²を活性化する、「トリガー」と呼ばれ得る。前記特異性ユニットＬ¹が開裂された場合、または、Ｌ¹とＬ²との間の結合（すなわち、前記共有結合）が開裂された場合、前記自壊基は、前記ドラッグユニット（Ｄ）を遊離する。

【0125】

別の実施形態では、前記リガンドユニット（Ｌ）は、標的細胞の表面上の標的分子に特異的に結合する、細胞結合剤（ＣＢＡ）である。典型的な式は、以下に示される。

【0126】

【化13】

【0127】

前記式中、前記アスタリスクは、前記ドラッグ（Ｄ）への付着点を示し、ＣＢＡは、前記細胞結合剤であり、Ｌ¹は、Ｌ²に結合されている特異性ユニットであり、Ａ¹は、前記細胞結合剤に、Ｌ²を結合させるストレッチャユニットであり、Ｌ²は、自壊性基であり、ａは、１または２であり、ｓは、１または２であり、ｙは、１または２である。

【0128】

本願明細書に記載の種々の実施形態では、Ｌ¹およびＬ²の性質は、広く変化させ得る。これらの基は、その特徴に基づき選択される。前記特徴は、前記コンジュゲートが生じる部位における条件により、部分的に決定され得る。特異性ユニットＬ¹が開裂性である場合、Ｌ¹の構造および／または配列は、それが、前記標的部位（例えば、前記標的細胞）に存在する酵素の作用により開裂されるように、選択される。ｐＨ（例えば、酸または塩基に不安定）、温度、または放射線（光に不安定）の変化による開裂性のＬ¹ユニットが、使用されてもよい。還元または酸化の条件下において開裂性のＬ¹ユニットも、前記コンジュゲートへの使用が見出され得る。

【0129】

一部の実施形態では、Ｌ¹は、１つのアミノ酸またはアミノ酸の連続配列を含んでもよい。前記アミノ酸配列は、酵素のための標的基質でもよい。

【0130】

一実施形態では、Ｌ¹は、前記酵素の作用による開裂性である。一実施形態では、前記酵素は、エステラーゼまたはペプチダーゼである。例えば、Ｌ¹は、リソソームのプロテアーゼ、例えば、カテプシンにより開裂され得る。

【0131】

一実施形態では、Ｌ²が存在し、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－と共に、単数または複数の自壊性基を形成する。一部の実施形態では、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－も、自壊性基である。

【0132】

一実施形態では、Ｌ¹が前記酵素の作用により開裂性（自壊性）である場合、Ｌ²が存在し、前記酵素が、Ｌ¹とＬ²との間の結合を開裂させる。これにより、前記自壊性基（または、複数の自壊性基）が、前記ドラッグユニットを遊離する。

【0133】

存在する場合、Ｌ¹およびＬ²は、
－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－ＮＨＣ（＝Ｏ）－、－ＯＣ（＝Ｏ）－、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ－、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨおよび－Ｏ－（グリコシド結合）から選択される結合により結合され得る。

【0134】

Ｌ²に結合するＬ¹のアミノ基は、アミノ酸のＮ－末端であるか、または、アミノ酸側鎖、例えば、リジンのアミノ酸側鎖のアミノ基に由来し得る。

【0135】

Ｌ²に結合するＬ¹のカルボキシル基は、アミノ酸のＣ－末端であるか、または、アミノ酸側鎖、例えば、グルタミン酸のアミノ酸側鎖のカルボキシル基に由来し得る。

【0136】

Ｌ²に結合するＬ¹のヒドロキシ基は、アミノ酸側鎖、例えば、セリンのアミノ酸側鎖のヒドロキシ基に由来し得る。

【0137】

一実施形態では、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－およびＬ²は共に、基：

【化14】

を形成する。前記基中、前記アスタリスクは、前記ドラッグユニットへの付着点を示し、前記波線は、前記Ｌ¹への付着点を示し、Ｙは、－Ｎ（Ｈ）－、－Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｈ）－または－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－であり、ｎは、０から３である。前記フェニレン環は、場合により、本願明細書に記載の、１、２または３つの置換基で置換されている。

【0138】

一実施形態では、Ｙは、ＮＨである。
一実施形態では、ｎは、０または１である。好ましくは、ｎは、０である。

【0139】

ＹがＮＨである場合、ｎは、０であり、前記自壊性基は、ｐ－アミノベンジルカルボニルリンカー（ＰＡＢＣ）と呼ばれ得る。

【0140】

前記自壊性基は、前記リンカーにおける遠隔部が活性化された際、（ｎ＝０に関して、）以下に示される方向に沿って進行して、前記ドラッグユニット（すなわち、前記非対称ＰＢＤ）の遊離を可能にするであろう。

【0141】

【化15】

【0142】

前記アスタリスクは、前記ドラッグへの付着を示し、Ｌ^*は、前記リンカー残部の活性型であり、前記遊離されたドラッグユニットは示されていない。これらの基は、前記ドラッグから活性化部位を分離する利点を有する。

【0143】

別の実施形態では、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－およびＬ²は互いに、

【化16】

から選択される基を形成する。前記基中、前記アスタリスク、前記波線、Ｙおよびｎは、上記の通りである。各フェニレン環は、場合により、本願明細書に記載の、１、２または３つの置換基で置換されている。一実施形態では、前記Ｙ置換基を有する前記フェニレン環は、場合により、置換されており、前記Ｙ置換基を有さない前記フェニレン環は、置換されていない。

【0144】

別の実施形態では、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－およびＬ²は共に、

【化17】

から選択される基を形成する。前記基中、前記アスタリスク、前記波線、Ｙおよびｎは、上記の通りである。Ｅは、Ｏ、ＳまたはＮＲであり、Ｄは、Ｎ、ＣＨ、またはＣＲであり、Ｆは、Ｎ、ＣＨまたはＣＲである。

【0145】

一実施形態では、Ｄは、Ｎである。
一実施形態では、Ｄは、ＣＨである。
一実施形態では、Ｅは、ＯまたはＳである。
一実施形態では、Ｆは、ＣＨである。

【0146】

好ましい実施形態では、Ｌ¹とＬ²との間の共有結合は、カテプシンに不安定な（例えば、開裂性の）結合である。

【0147】

一実施形態では、Ｌ¹は、ジペプチドを含む。前記ジペプチドにおけるアミノ酸は、天然のアミノ酸および非天然のアミノ酸の任意の組み合わせであり得る。一部の実施形態では、前記ジペプチドは、天然のアミノ酸を含む。前記リンカーが、カテプシンに不安定なリンカーである場合、前記ジペプチドは、カテプシン媒介性開裂に対する作用部位である。その結果、前記ジペプチドは、カテプシンに対する認識部位である。

【0148】

一実施形態では、ジペプチドにおける基－Ｘ₁－Ｘ₂－、－ＮＨ－Ｘ₁－Ｘ₂－ＣＯ－は、－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－、－Ｖａｌ－Ａｌａ－、－Ｖａｌ－Ｌｙｓ－、－Ａｌａ－Ｌｙｓ－、－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－、－Ｐｈｅ－Ｃｉｔ－、－Ｌｅｕ－Ｃｉｔ－、－Ｉｌｅ－Ｃｉｔ－、－Ｐｈｅ－Ａｒｇ－および－Ｔｒｐ－Ｃｉｔ－から選択される。Ｃｉｔは、シトルリンである。このようなジペプチドでは、－ＮＨ－は、Ｘ₁のアミノ基であり、ＣＯは、Ｘ₂のカルボニル基である。

【0149】

好ましくは、前記ジペプチドにおける基－Ｘ₁－Ｘ₂－、－ＮＨ－Ｘ₁－Ｘ₂－ＣＯ－は、－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－、－Ｖａｌ－Ａｌａ－、－Ｖａｌ－Ｌｙｓ－、－Ａｌａ－Ｌｙｓ－および－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－から選択される。

【0150】

最も好ましくは、前記ジペプチドにおける基－Ｘ₁－Ｘ₂－、－ＮＨ－Ｘ₁－Ｘ₂－ＣＯ－は、－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－、－Ｖａｌ－Ｃｉｔまたは－Ｖａｌ－Ａｌａ－である。

【0151】

対象となる他のジペプチドの組み合わせとしては、－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－、－Ｐｒｏ－Ｐｒｏ－および－Ｖａｌ－Ｇｌｕ－があげられる。

【0152】

他のジペプチドの組み合わせ、例えば、その全体が、全ての目的に関して、参照により本願明細書に取り込まれる、Ｄｕｂｏｗｃｈｉｋ ｅｔ ａｌにより記載されたものが使用されてもよい。

【0153】

一実施形態では、前記アミノ酸側鎖は、必要に応じて、化学的に保護される。前記側鎖の保護基は、以下に記載の基であり得る。保護されたアミノ酸配列は、酵素により開裂可能である。例えば、Ｂｏｃ側鎖保護されたＬｙｓ残基を含むジペプチド配列は、カテプシンにより開裂可能である。

【0154】

前記アミノ酸の側鎖に関する保護基は、当該分野において周知であり、Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍのカタログに記載されている。更なる保護基の戦略は、Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ， Ｇｒｅｅｎｅ ａｎｄ Ｗｕｔｓにおける、保護基から始められる。
有用な側鎖保護基は、反応性の側鎖官能基を有するアミノ酸について、以下に示される。

【0155】

Ａｒｇ：Ｚ、Ｍｔｒ、Ｔｏｓ；
Ａｓｎ：Ｔｒｔ、Ｘａｎ；
Ａｓｐ：Ｂｚｌ、ｔ－Ｂｕ；
Ｃｙｓ：Ａｃｍ、Ｂｚｌ、Ｂｚｌ－ＯＭｅ、Ｂｚｌ－Ｍｅ、Ｔｒｔ；
Ｇｌｕ：Ｂｚｌ、ｔ－Ｂｕ；
Ｇｌｎ：Ｔｒｔ、Ｘａｎ；
Ｈｉｓ：Ｂｏｃ、Ｄｎｐ、Ｔｏｓ、Ｔｒｔ；
Ｌｙｓ：Ｂｏｃ、Ｚ－Ｃｌ、Ｆｍｏｃ、Ｚ；
Ｓｅｒ：Ｂｚｌ、ＴＢＤＭＳ、ＴＢＤＰＳ；
Ｔｈｒ：Ｂｚ；
Ｔｒｐ：Ｂｏｃ；
Ｔｙｒ：Ｂｚｌ、Ｚ、Ｚ－Ｂｒ。

【0156】

一実施形態では、－Ｘ₂－は、前記ドラッグユニットに、間接的に結合される。このような実施形態では、前記スペーサユニットＬ²が存在する。

【0157】

一実施形態では、－Ｘ₂－は、前記ドラッグユニットに、直接結合される。このような実施形態では、前記スペーサユニットＬ²は存在しない。

【0158】

一実施形態では、前記ジペプチドは、自壊性基（または、複数の自壊性基）（前記スペーサユニット）との組み合わせで使用される。前記自壊性基（または、複数の自壊性基）は、－Ｘ₂－に結合されてもよい。

【0159】

自壊性基が存在する場合、－Ｘ₂－は、前記自壊性基に直接結合される。一実施形態では、－Ｘ₂－は、前記自壊性基の基Ｙに結合される。好ましくは、前記基－Ｘ₂－ＣＯ－は、Ｙに結合され、Ｙは、ＮＨである。

【0160】

一実施形態では、－Ｘ₁－は、Ａ¹に直接結合される。好ましくは、前記基ＮＨ－Ｘ₁－（前記Ｘ₁のアミノ末端）は、Ａ¹に結合される。Ａ¹は、官能基－ＣＯ－を含み得るため、－Ｘ₁－とアミド結合を形成する。

【0161】

一実施形態では、Ｌ¹およびＬ²は－ＯＣ（＝Ｏ）－と共に、基－Ｘ₁－Ｘ₂－ＰＡＢＣ－を含む。前記ＰＡＢＣ基は、前記ドラッグユニットに直接結合される。一実施形態では、前記自壊性基および前記ジペプチドは共に、基Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－ＰＡＢＣ－を形成する。前記基は、以下に説明される。

【0162】

【化18】

【0163】

前記アスタリスクは、前記ドラッグユニットへの付着点を示し、前記波線は、前記Ｌ¹の残部への付着点または前記Ａ¹への付着点を示す。好ましくは、前記波線は、前記Ａ¹への付着点を示す。

【0164】

または、前記自壊性基および前記ジペプチドは共に、基Ｖａｌ－Ａｌａ－ＰＡＢＣ－を形成する。前記基は、以下に説明される。

【0165】

【化19】

【0166】

前記アスタリスクおよび前記波線は、上記規定の通りである。

【0167】

別の実施形態では、Ｌ¹およびＬ²は、－ＯＣ（＝Ｏ）－と共に、

【化20】

を表し、前記アスタリスクは、前記ドラッグユニットへの付着点を示し、前記波線は、前記Ａ¹への付着点を示す。Ｙは、共有結合または官能基であり、Ｅは、開裂に感受性であることで、自壊性基を活性化する基である。

【0168】

Ｅは、前記基が、例えば、光または酵素作用による開裂に感受性であるように選択される。Ｅは、－ＮＯ₂またはグルクロン酸（例えば、β－グルクロン酸）でもよい。前者は、ニトロレダクターゼの作用に、後者は、β－グルクロニダーゼの作用に、感受性であり得る。

【0169】

前記基Ｙは、共有結合でもよい。
前記基Ｙは、－Ｃ（＝Ｏ）－、－ＮＨ－、－Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－ＮＨＣ（＝Ｏ）－、－ＯＣ（＝Ｏ）－、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ－、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＣ（＝Ｏ）－、ＳＯ₂および－Ｓ－から選択される官能基でもよい。

【0170】

前記基Ｙは、好ましくは、－ＮＨ－、－ＣＨ₂－、－Ｏ－および－Ｓ－である。

【0171】

一部の実施形態では、Ｌ¹およびＬ²は、－ＯＣ（＝Ｏ）－と共に、

【化21】

を表し、前記アスタリスクは、前記ドラッグユニットへの付着点を示し、前記波線は、前記Ａへの付着点を示す。Ｙは、共有結合または官能基であり、Ｅは、グルクロン酸（例えば、β－グルクロン酸）である。Ｙは、好ましくは、－ＮＨ－から選択される官能基である。

【0172】

一部の実施形態では、Ｌ¹およびＬ²は共に、

【化22】

を表し、前記アスタリスクは、前記Ｌ²の残部または前記ドラッグユニットへの付着点を示し、前記波線は、前記Ａ¹への付着点を示し、Ｙは、共有結合または官能基であり、Ｅは、グルクロン酸（例えば、β－グルクロン酸）である。Ｙは、好ましくは、－ＮＨ－、－ＣＨ₂－、－Ｏ－および－Ｓ－から選択される官能基である。

【0173】

一部の更なる実施形態では、Ｙは、上記説明の官能基である。前記官能基は、アミノ酸に結合され、前記アミノ酸は、前記ストレッチャユニットＡ¹に結合される。一部の実施形態では、アミノ酸は、β－アラニンである。このような実施形態では、前記アミノ酸は、前記ストレッチャユニットの一部と同等と見なされる。

【0174】

前記特異性ユニットＬ¹および前記リガンドユニットは、前記ストレッチャユニットを介して、間接的に結合される。

【0175】

Ｌ¹およびＡ¹は、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－ＮＨＣ（＝Ｏ）－、－ＯＣ（＝Ｏ）－、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ－、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ－および－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ－から選択される結合により結合されてもよい。

【0176】

一実施形態では、前記基Ａ¹は、

【化23】

であり、前記アスタリスクは、前記Ｌ¹、Ｌ²またはＤへの付着点を示し、前記波線は、前記リガンドユニットへの付着点を示し、ｎは、０から６である。一実施形態では、ｎは、５である。

【0177】

一実施形態では、前記基Ａ¹は、

【化24】

であり、前記アスタリスクは、前記Ｌ¹、Ｌ²またはＤへの付着点を示し、前記波線は、前記リガンドユニットへの付着点を示し、ｎは、０から６である。一実施形態では、ｎは、５である。

【0178】

一実施形態では、前記基Ａ¹は、

【化25】

であり、前記アスタリスクは、前記Ｌ¹、Ｌ²またはＤへの付着点を示し、前記波線は、前記リガンドユニットへの付着点を示し、ｎは、０または１であり、ｍは、０から３０である。好ましい実施形態では、ｎは、１であり、ｍは、０から１０、１から８、好ましくは４から８、最も好ましくは４または８である。

【0179】

一実施形態では、前記基Ａ¹は、

【化26】

であり、前記アスタリスクは、前記Ｌ¹、Ｌ²またはＤへの付着点を示し、前記波線は、前記リガンドユニットへの付着点を示し、ｎは、０または１であり、ｍは、０から３０である。好ましい実施形態では、ｎは、１であり、ｍは、０から１０、１から８、好ましくは４から８、最も好ましくは４または８である。

【0180】

一実施形態では、前記基Ａ¹は、

【化27】

であり、前記アスタリスクは、前記Ｌ¹、Ｌ²またはＤへの付着点を示し、前記波線は、前記リガンドユニットへの付着点を示し、ｎは、０から６である。一実施形態では、ｎは、５である。

【0181】

一実施形態では、前記基Ａ¹は、

【化28】

であり、前記アスタリスクは、前記Ｌ¹、Ｌ²またはＤへの付着点を示し、前記波線は、前記リガンドユニットへの付着点を示し、ｎは、０から６である。一実施形態では、ｎは、５である。

【0182】

一実施形態では、前記基Ａ¹は、

【化29】

であり、前記アスタリスクは、前記Ｌ¹、Ｌ²またはＤへの付着点を示し、前記波線は、前記リガンドユニットへの付着点を示し、ｎは、０または１であり、ｍは、０から３０である。好ましい実施形態では、ｎは、１であり、ｍは、０から１０、１から８、好ましくは４から８、最も好ましくは４または８である。

【0183】

一実施形態では、前記基Ａ¹は、

【化30】

であり、前記アスタリスクは、前記Ｌ¹、Ｌ²またはＤへの付着点を示し、前記波線は、前記リガンドユニットへの付着点を示し、ｎは、０または１であり、ｍは、０から３０である。好ましい実施形態では、ｎは、１であり、ｍは、０から１０、１から８、好ましくは４から８、最も好ましくは４または８である。

【0184】

一実施形態では、前記リガンドユニットとＡ¹との間の結合は、前記リガンドユニットのチオール残基と、Ａ¹のマレイミド基とによる。

【0185】

一実施形態では、前記リガンドユニットとＡ¹との間の結合は、

【化31】

であり、前記アスタリスクは、前記Ａ¹、Ｌ¹、Ｌ²またはＤの残部への付着点を示し、前記波線は、前記リガンドユニットの残部への付着点を示す。この実施形態では、前記Ｓ原子は、典型的には、前記リガンドユニットに由来する。

【0186】

上記各実施形態では、以下に示される代替となる官能基が、前記マレイミドに由来する基に代えて使用されてもよい。

【0187】

【化32】

【0188】

前記波線は、前述のように、前記リガンドユニットへの付着点を示し、前記アスタリスクは、前記Ａ¹基の残部、またはＬ¹、Ｌ²もしくはＤへの結合を示す。

【0189】

一実施形態では、前記マレイミドに由来する基は、基：

【化33】

により置き替えられる。前記波線は、前記リガンドユニットへの付着点を示し、前記アスタリスクは、前記Ａ¹基の残部、またはＬ¹、Ｌ²もしくはＤへの結合を示す。

【0190】

一実施形態では、前記マレイミドに由来する基は、場合により、リガンドユニット（例えば、細胞結合剤）と共に、Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ－、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－ＮＨＣ（＝Ｏ）－、－ＯＣ（＝Ｏ）－、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ－、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｏ－、－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ－、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＣ（＝Ｏ）－、－Ｓ－、－Ｓ－Ｓ－、－ＣＨ₂Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ₂－、＝Ｎ－ＮＨ－および－ＮＨ－Ｎ＝から選択される基で置き替えられる。

【0191】

前記カルボニル基が、－ＮＨ－に結合される場合、これらの中でも、－Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ₂－が、特に好ましくあり得る。

【0192】

一実施形態では、前記マレイミドに由来する基は、場合により、前記リガンドユニットと共に、

【化34】

から選択される基で置き替えられる。前記波線は、前記リガンドユニットへの付着点、または、前記Ａ¹基の残部への結合のいずれかを示し、前記アスタリスクは、前記リガンドユニットへの他の付着点、または、前記Ａ¹基の残部への他の結合を示す。

【0193】

前記細胞結合剤にＬ¹を結合させるのに適切な他の基は、国際公開第２００５／０８２０２３号パンフレットに記載されている。

【0194】

一実施形態では、前記ストレッチャユニットＡ¹が存在し、前記特異性ユニットＬ¹が存在し、スペーサユニットＬ²が存在しない。このため、Ｌ¹および前記ドラッグユニットが、結合を介して直接結合される。同等にこの実施形態では、Ｌ²は、結合である。

【0195】

Ｌ¹およびＤは、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ＜、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ＜および－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｎ＜から選択される結合により結合されてもよい。Ｎ＜は、Ｄの一部である。

【0196】

一実施形態では、Ｌ¹およびＤは、好ましくは、結合：－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ＜により結合される。

【0197】

一実施形態では、Ｌ¹は、ジペプチドを含み、前記ジペプチドの一方端は、Ｄに結合される。前述のように、前記ジペプチドのアミノ酸は、天然のアミノ酸および非天然のアミノ酸の任意の組み合わせであり得る。一部の実施形態では、前記ジペプチドは、天然のアミノ酸を含む。前記リンカーが、カテプシンに不安定なリンカーである場合、前記ジペプチドは、カテプシン媒介性開裂に対する作用部位である。ついで、前記ジペプチドは、カテプシンに対する認識部位である。

【0198】

一実施形態では、前記ジペプチドにおける基－Ｘ₁－Ｘ₂－、－ＮＨ－Ｘ₁－Ｘ₂－ＣＯ－は、－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－、－Ｖａｌ－Ａｌａ－、－Ｖａｌ－Ｌｙｓ－、－Ａｌａ－Ｌｙｓ－、－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－、－Ｐｈｅ－Ｃｉｔ－、－Ｌｅｕ－Ｃｉｔ－、－Ｉｌｅ－Ｃｉｔ－、－Ｐｈｅ－Ａｒｇ－および－Ｔｒｐ－Ｃｉｔ－から選択される。Ｃｉｔは、シトルリンである。このようなジペプチドでは、－ＮＨ－は、Ｘ₁のアミノ基であり、ＣＯは、Ｘ₂のカルボニル基である。

【0199】

好ましくは、前記ジペプチドにおける基－Ｘ₁－Ｘ₂－、－ＮＨ－Ｘ₁－Ｘ₂－ＣＯ－は、－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－、－Ｖａｌ－Ａｌａ－、－Ｖａｌ－Ｌｙｓ－、－Ａｌａ－Ｌｙｓ－および－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－から選択される。

【0200】

最も好ましくは、前記ジペプチドにおける基－Ｘ₁－Ｘ₂－、－ＮＨ－Ｘ₁－Ｘ₂－ＣＯ－は、－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－または－Ｖａｌ－Ａｌａ－である。

【0201】

対象となる他のジペプチドの組み合わせとしては、－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－、－Ｐｒｏ－Ｐｒｏ－および－Ｖａｌ－Ｇｌｕ－があげられる。

【0202】

他のジペプチドの組み合わせは、例えば、上記のものが使用されてもよい。

【0203】

一実施形態では、Ｌ¹－Ｄは、

【化35】

であり、－ＮＨ－Ｘ₁－Ｘ₂－ＣＯは、前記ジペプチドであり、－Ｎ＜は、前記ドラッグユニットの一部であり、前記アスタリスクは、前記ドラッグユニットの残部への付着点を示し、前記波線は、前記Ｌ¹の残部への付着点または前記Ａ¹への付着点を示す。好ましくは、前記波線は、前記Ａ¹への付着点を示す。

【0204】

一実施形態では、前記ジペプチドは、バリン－アラニンであり、Ｌ¹－Ｄは、

【化36】

であり、前記アスタリスク、－Ｎ＜および前記波線は、上記の通りである。
一実施形態では、前記ジペプチドは、フェニルアラニン－リジンであり、Ｌ¹－Ｄは、

【化37】

であり、前記アスタリスク、－Ｎ＜および前記波線は、上記の通りである。

【0205】

一実施形態では、前記ジペプチドは、バリン－シトルリンである。

【0206】

一実施形態では、前記基Ａ¹－Ｌ¹は、

【化38】

であり、前記アスタリスクは、前記Ｌ²またはＤへの付着点を示し、前記波線は、前記リガンドユニットへの付着点を示し、ｎは、０から６である。一実施形態では、ｎは、５である。

【0207】

一実施形態では、前記基Ａ¹－Ｌ¹は、

【化39】

であり、前記アスタリスクは、前記Ｌ²またはＤへの付着点を示し、前記波線は、前記リガンドユニットへの付着点を示し、ｎは、０から６である。一実施形態では、ｎは、５である。

【0208】

一実施形態では、前記基Ａ¹－Ｌ¹は、

【化40】

であり、前記アスタリスクは、前記Ｌ²またはＤへの付着点を示し、前記波線は、前記リガンドユニットへの付着点を示し、ｎは、０または１であり、ｍは、０から３０である。好ましい実施形態では、ｎは、１であり、ｍは、０から１０、１から８、好ましくは４から８、最も好ましくは４または８である。

【0209】

一実施形態では、前記基Ａ¹－Ｌ¹は、

【化41】

であり、前記アスタリスクは、前記Ｌ²またはＤへの付着点を示し、前記波線は、前記リガンドユニットへの付着点を示し、ｎは、０または１であり、ｍは、０から３０である。好ましい実施形態では、ｎは、１であり、ｍは、０から１０、１から７、好ましくは３から７、最も好ましくは３または７である。

【0210】

一実施形態では、前記基Ａ¹－Ｌ¹は、

【化42】

であり、前記アスタリスクは、前記Ｌ²またはＤへの付着点を示し、前記波線は、前記リガンドユニットへの付着点を示し、ｎは、０から６である。一実施形態では、ｎは、５である。

【0211】

一実施形態では、前記基Ａ¹－Ｌ¹は、

【化43】

であり、前記アスタリスクは、前記Ｌ²またはＤへの付着点を示し、前記波線は、前記リガンドユニットへの付着点を示し、ｎは、０から６である。一実施形態では、ｎは、５である。

【0212】

一実施形態では、前記基Ａ¹－Ｌ¹は、

【化44】

であり、前記アスタリスクは、前記Ｌ²またはＤへの付着点を示し、前記波線は、前記リガンドユニットへの付着点を示し、ｎは、０または１であり、ｍは、０から３０である。好ましい実施形態では、ｎは、１であり、ｍは、０から１０、１から８、好ましくは４から８、最も好ましくは４または８である。

【0213】

一実施形態では、前記基Ａ¹－Ｌ¹は、

【化45】

であり、前記アスタリスクは、前記Ｌ²またはＤへの付着点を示し、前記波線は、前記リガンドユニットへの付着点を示し、ｎは、０または１であり、ｍは、０から３０である。好ましい実施形態では、ｎは、１であり、ｍは、０から１０、１から８、好ましくは４から８、最も好ましくは４または８である。

【0214】

一実施形態では、前記基Ｌ－Ａ¹－Ｌ¹は、

【化46】

であり、前記アスタリスクは、前記Ｌ²またはＤへの付着点を示し、Ｓは、前記リガンドユニットの硫黄基であり、前記波線は、前記リガンドユニットの残部への付着点を示し、ｎは、０から６である。一実施形態では、ｎは、５である。

【0215】

一実施形態では、前記基Ｌ－Ａ¹－Ｌ¹は、

【化47】

であり、前記アスタリスクは、前記Ｌ²またはＤへの付着点を示し、Ｓは、前記リガンドユニットの硫黄基であり、前記波線は、前記リガンドユニットの残部への付着点を示し、ｎは、０から６である。一実施形態では、ｎは、５である。

【0216】

一実施形態では、前記基Ｌ－Ａ¹－Ｌ¹は、

【化48】

であり、前記アスタリスクは、前記Ｌ²またはＤへの付着点を示し、Ｓは、前記リガンドユニットの硫黄基であり、前記波線は、前記リガンドユニットの残部への付着点を示し、ｎは、０または１であり、ｍは、０から３０である。好ましい実施形態では、ｎは、１であり、ｍは、０から１０、１から８、好ましくは４から８、最も好ましくは４または８である。

【0217】

一実施形態では、前記基Ｌ－Ａ¹－Ｌ¹は、

【化49】

であり、前記アスタリスクは、前記Ｌ²またはＤへの付着点を示し、前記波線は、前記リガンドユニットへの付着点を示し、ｎは、０または１であり、ｍは、０から３０である。好ましい実施形態では、ｎは、１であり、ｍは、０から１０、１から７、好ましくは４から８、最も好ましくは４または８である。

【0218】

一実施形態では、前記基Ｌ－Ａ¹－Ｌ¹は、

【化50】

であり、前記アスタリスクは、前記Ｌ²またはＤへの付着点を示し、前記波線は、前記リガンドユニットの残部への付着点を示し、ｎは、０から６である。一実施形態では、ｎは、５である。

【0219】

一実施形態では、前記基Ｌ－Ａ¹－Ｌ¹は、

【化51】

であり、前記アスタリスクは、前記Ｌ²またはＤへの付着点を示し、前記波線は、前記リガンドユニットの残部への付着点を示し、ｎは、０から６である。一実施形態では、ｎは、５である。

【0220】

一実施形態では、前記基Ｌ－Ａ¹－Ｌ¹は、

【化52】

であり、前記アスタリスクは、前記Ｌ²またはＤへの付着点を示し、前記波線は、前記リガンドユニットの残部への付着点を示し、ｎは、０または１であり、ｍは、０から３０である。好ましい実施形態では、ｎは、１であり、ｍは、０から１０、１から８、好ましくは４から８、最も好ましくは４または８である。

【0221】

一実施形態では、前記基Ｌ－Ａ¹－Ｌ¹は、

【化53】

であり、前記アスタリスクは、前記Ｌ²またはＤへの付着点を示し、前記波線は、前記リガンドユニットの残部への付着点を示し、ｎは、０または１であり、ｍは、０から３０である。好ましい実施形態では、ｎは、１であり、ｍは、０から１０、１から８、好ましくは４から８、最も好ましくは４または８である。

【0222】

一実施形態では、前記ストレッチャユニットは、アセトアミドユニットであり、式：

【化54】

を有し、前記アスタリスクは、前記ストレッチャユニット、Ｌ¹またはＤの残部への付着点を示し、前記波線は、前記リガンドユニットへの付着点を示す。

【0223】

リンカー－ドラッグ
他の実施形態では、リンカー－ドラッグ化合物が、リガンドユニットへの結合のために提供される。一実施形態では、前記リンカー－ドラッグ化合物は、細胞結合剤への結合のために設計される。

【0224】

一実施形態では、前記ドラッグリンカー化合物は、式：

【化55】

を有し、前記アスタリスクは、前記ドラッグユニット（Ｄ、上記規定）への付着点を示し、Ｇ¹は、リガンドユニットへの結合を形成するためのストレッチャ基（Ａ¹）であり、Ｌ¹は、特異性ユニットであり、Ｌ²（スペーサユニット）は、共有結合であるか、または、－ＯＣ（＝Ｏ）－と共に、自壊性基（または、複数の自壊性基）を形成する。

【0225】

別の実施形態では、前記ドラッグリンカー化合物は、式：
Ｇ¹－Ｌ¹－Ｌ²－_*
を有し、前記アスタリスクは、前記ドラッグユニット（Ｄ）への付着点を示し、Ｇ¹は、リガンドユニットへの結合を形成するためのストレッチャ基（Ａ¹）であり、Ｌ¹は、特異性ユニットであり、Ｌ²（スペーサユニット）は、共有結合または自壊性基（または、複数の自壊性基）である。

【0226】

Ｌ¹およびＬ²は、上記の通りである。Ａ¹への結合への言及は、ここでは、Ｇ¹への結合への言及と理解され得る。

【0227】

一実施形態では、Ｌ¹は、アミノ酸を含む場合、そのアミノ酸の側鎖は、保護されてもよい。任意の適切な保護基が使用され得る。一実施形態では、前記側鎖の保護基は、存在する場合、前記化合物における他の保護基により除去可能である。他の実施形態では、前記保護基は、存在する場合、前記分子における他の保護基に対して直交でもよい。

【0228】

アミノ酸側鎖に適した保護基としては、Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍのカタログ２００６／２００７に記載の基があげられる。カテプシンに不安定なリンカーに使用するための保護基は、Ｄｕｂｏｗｃｈｉｋ ｅｔ ａｌにも記載されている。

【0229】

本発明の特定の実施形態では、前記基Ｌ¹としては、Ｌｙｓアミノ酸残基があげられる。このアミノ酸の側鎖は、ＢｏｃまたはＡｌｌｏｃ保護基により保護されてもよい。Ｂｏｃ保護基が、最も好ましい。

【0230】

前記官能基Ｇ¹は、リガンドユニット（例えば、細胞結合剤）との反応において、結合基を形成する。

【0231】

一実施形態では、前記官能基Ｇ¹は、前記リガンドユニット上の適切な基との反応のための、アミノ、カルボン酸、ヒドロキシ、チオールまたはマレイミドの基であるか、または、同基を含む。好ましい実施形態では、Ｇ¹は、マレイミド基を含む。

【0232】

一実施形態では、前記基Ｇ¹は、アルキルマレイミド基である。この基は、前記細胞結合剤に存在する、例えば、抗体に存在する、チオール基、特に、システインのチオール基との反応に適している。

【0233】

一実施形態では、前記基Ｇ¹は、

【化56】

であり、前記アスタリスクは、前記Ｌ¹、Ｌ²またはＤへの付着点を示し、ｎは、０から６である。一実施形態では、ｎは、５である。

【0234】

一実施形態では、前記基Ｇ¹は、

【化57】

であり、前記アスタリスクは、前記Ｌ¹、Ｌ²またはＤへの付着点を示し、ｎは、０から６である。一実施形態では、ｎは、５である。

【0235】

一実施形態では、前記基Ｇ¹は、

【化58】

であり、前記アスタリスクは、前記Ｌ¹、Ｌ²またはＤへの付着点を示し、ｎは、０または１であり、ｍは、０から３０である。好ましい実施形態では、ｎは、１であり、ｍは、０から１０、１から２、好ましくは４から８、最も好ましくは４または８である。

【0236】

一実施形態では、前記基Ｇ¹は、

【化59】

であり、前記アスタリスクは、前記Ｌ¹、Ｌ¹、Ｌ²またはＤへの付着点を示し、ｎは、０または１であり、ｍは、０から３０である。好ましい実施形態では、ｎは、１であり、ｍは、０から１０、１から８、好ましくは４から８、最も好ましくは４または８である。

【0237】

一実施形態では、前記基Ｇ¹は、

【化60】

であり、前記アスタリスクは、前記Ｌ¹、Ｌ²またはＤへの付着点を示し、ｎは、０から６である。一実施形態では、ｎは、５である。

【0238】

一実施形態では、前記基Ｇ¹は、

【化61】

であり、前記アスタリスクは、前記Ｌ¹、Ｌ²またはＤへの付着点を示し、ｎは、０から６である。一実施形態では、ｎは、５である。

【0239】

一実施形態では、前記基Ｇ¹は、

【化62】

であり、前記アスタリスクは、前記Ｌ¹、Ｌ²またはＤへの付着点を示し、ｎは、０または１であり、ｍは、０から３０である。好ましい実施形態では、ｎは、１であり、ｍは、０から１０、１から２、好ましくは４から８、最も好ましくは４または８である。

【0240】

一実施形態では、前記基Ｇ¹は、

【化63】

であり、前記アスタリスクは、前記Ｌ¹、Ｌ²またはＤへの付着点を示し、ｎは、０または１であり、ｍは、０から３０である。好ましい実施形態では、ｎは、１であり、ｍは、０から１０、１から８、好ましくは４から８、最も好ましくは４または８である。

【0241】

上記各実施形態では、以下に示される代替となる官能基が、前記マレイミド基に代えて使用されてもよい。

【0242】

【化64】

【0243】

前記アスタリスクは、前記Ｇ基の残部への結合を示す。

【0244】

一実施形態では、前記マレイミドに由来する基は、基：

【化65】

により置き替えられる。前記アスタリスクは、前記Ｇ基の残部への結合を示す。

【0245】

一実施形態では、前記マレイミド基は、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＨ、－ＯＨ、－ＮＨ₂、－ＳＨ、－Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ₂Ｘ（Ｘは、Ｃｌ、ＢｒまたはＩである。）、－ＣＨＯ、－ＮＨＮＨ₂、－Ｃ≡ＣＨおよび－Ｎ₃（アジド）から選択される基で置き替えられる。

【0246】

特に、前記カルボニル基が、－ＮＨ－に結合される場合、これらの中でも、－Ｃ（＝Ｏ）ＣＨ₂Ｘが、好ましい。

【0247】

一実施形態では、Ｌ¹が存在し、Ｇ¹は、－ＮＨ₂、－ＮＨＭｅ、－ＣＯＯＨ、－ＯＨまたは－ＳＨである。

【0248】

一実施形態では、Ｌ¹が存在し、Ｇ¹は、－ＮＨ₂または－ＮＨＭｅである。各基は、Ｌ¹のアミノ酸配列におけるＮ－末端であり得る。

【0249】

一実施形態では、Ｌ¹が存在し、Ｇ¹は、－ＮＨ₂であり、Ｌ¹は、上記アミノ酸配列－Ｘ₁－Ｘ₂－である。

【0250】

一実施形態では、Ｌ¹が存在し、Ｇ¹は、ＣＯＯＨである。この基は、Ｌ¹のアミノ酸配列におけるＣ－末端であり得る。
一実施形態では、Ｌ¹が存在し、Ｇ¹は、ＯＨである。
一実施形態では、Ｌ¹が存在し、Ｇ¹は、ＳＨである。

【0251】

前記基Ｇ¹は、１つの官能基から別のものに変換可能である。一実施形態では、Ｌ¹が存在し、Ｇ¹は、－ＮＨ₂である。この基は、マレイミド基を含む別の基Ｇ¹に変換可能である。例えば、前記基－ＮＨ₂は、上記で示したマレイミドを含む、Ｇ¹基における酸または活性化酸（例えば、Ｎ－スクシンイミド型）と反応し得る。
したがって、前記基Ｇ¹は、リガンドユニットとの反応に、より適切な官能基に変換され得る。

【0252】

上記のように、一実施形態では、Ｌ¹が存在し、Ｇ¹は、－ＮＨ₂、－ＮＨＭｅ、－ＣＯＯＨ、－ＯＨまたは－ＳＨである。更なる実施形態では、これらの基は、化学的に保護された形態で提供される。このため、前記化学的に保護された形態は、官能基により提供される前記リンカーに対する前駆体である。

【0253】

一実施形態では、Ｇ¹は、化学的に保護された形態における－ＮＨ₂である。前記基は、カルバメート保護基で保護され得る。前記カルバメート保護基は、Ａｌｌｏｃ、Ｆｍｏｃ、Ｂｏｃ、Ｔｒｏｃ、Ｔｅｏｃ、ＣｂｚおよびＰＮＺからなる群から選択され得る。

【0254】

好ましくは、Ｇ¹は、－ＮＨ₂である場合、前記－ＮＨ₂は、ＡｌｌｏｃまたはＦｍｏｃの基で保護される。

【0255】

一実施形態では、Ｇ¹は、－ＮＨ₂である場合、前記－ＮＨ₂は、Ｆｍｏｃ基で保護される。

【0256】

一実施形態では、前記保護基は、キャッピング基における前記カルバメート保護基と同様である。

【0257】

一実施形態では、前記保護基は、前記キャッピング基における前記カルバメート保護基と同様でない。この実施形態では、前記保護基は、前記キャッピング基における前記カルバメート保護基を除去しない条件下において除去可能であることが好ましい。

【0258】

前記化学的な保護基は、リガンドユニットに対する結合を形成する官能基を提供するために除去され得る。その結果、場合により、この官能基は、上記別の官能基に変換され得る。

【0259】

一実施形態では、前記活性基は、アミンである。このアミンは、好ましくは、ペプチドのＮ末端アミンであり、本発明の好ましいジペプチドにおけるＮ末端アミンであり得る。

【0260】

前記活性基は、リガンドユニットへの結合を形成することを目的とする官能基を産生するために反応し得る。

【0261】

他の実施形態では、前記リンカーユニットは、前記活性基を有するリンカーユニットに対する前駆体である。この実施形態では、前記リンカーユニットは、前記活性基を含み、前記活性基は、保護基経由で保護される。前記保護基は、前記活性基を有するリンカーユニットを提供するために、除去されてもよい。

【0262】

前記活性基がアミンである場合、前記保護基は、アミン保護基、例えば、Ｇｒｅｅｎ ａｎｄ Ｗｕｔｓに記載のものであり得る。

【0263】

前記保護基は、存在する場合、好ましくは、前記リンカーユニットにおける他の保護基に対して直交している。

【0264】

一実施形態では、前記保護基は、前記キャッピング基に対して直交している。このため、前記キャッピング基を残しながら、前記活性基の保護基は、除去可能である。他の実施形態では、前記保護基および前記キャッピング基は、前記キャッピング基を除去するのに使用されるものと同じ条件下で除去可能である。

【0265】

一実施形態では、前記リンカーユニットは、

【化66】

であり、前記アスタリスクは、前記ドラッグユニットへの付着点を示し、前記波線は、前記リンカーユニットの残部への付着点、場合により、または、前記Ｇ¹への付着点を示す。好ましくは、前記波線は、前記Ｇ¹への付着点を示す。

【0266】

一実施形態では、前記リンカーユニットは、

【化67】

であり、前記アスタリスクおよび前記波線は、上記規定の通りである。

【0267】

Ｌ¹と前記細胞結合剤との間の結合の形成に使用するのに適切な他の官能基は、国際公開第２００５／０８２０２３号パンフレットに記載されている。

【0268】

リガンドユニット
前記リガンドユニットは、任意の種類でもよく、標的分子に特異的に結合するタンパク質、ポリペプチド、ペプチドおよび非ペプチド剤を含む。一部の実施形態では、前記リガンドユニットは、タンパク質、ポリペプチドまたはペプチドでもよい。一部の実施形態では、前記リガンドユニットは、環状ポリペプチドでもよい。これらのリガンドユニットは、少なくとも１つの標的分子結合部位を含む、抗体もしくは抗体のフラグメント、リンホカイン、ホルモン、成長因子または、標的に特異的に結合し得る、任意の他の細胞結合分子もしくは物質を含み得る。本願明細書では、前記リガンドユニットは、「結合剤」または「標的剤」とも呼ばれる。

【0269】

「特異的に結合する」および「特異的に結合すること」の用語は、所定の分子（例えば、抗原）に対する、抗体または他のタンパク質、ポリペプチドもしくはペプチドの結合を意味する。典型的には、前記抗体または他の分子は、少なくとも約１×１０⁷Ｍ^-1の親和性で結合し、前記所定の分子に対して、前記所定の分子または密接に関連する分子以外の非特異的な分子（例えば、ＢＳＡ、カゼイン）に対するその結合親和性より、少なくとも２倍大きい親和性で結合する。

【0270】

リガンドユニットとしては、例えば、その全体が、全ての目的に関して、本願明細書に取り込まれる、国際公開第２００７／０８５９３０号パンフレットにおいて、使用するために記載されている剤があげられる。

【0271】

一部の実施形態では、前記リガンドユニットは、細胞上の細胞外標的に結合する、細胞結合剤である。このような細胞結合剤は、タンパク質、ポリペプチド、ペプチドまたは非ペプチド剤であり得る。一部の実施形態では、前記細胞結合剤は、タンパク質、ポリペプチドまたはペプチドでもよい。一部の実施形態では、前記細胞結合剤は、環状ポリペプチドでもよい。前記細胞結合剤は、抗体または抗体の抗原結合フラグメントでもよい。このため、一実施形態では、本発明は、抗体－ドラッグ－コンジュゲート（ＡＤＣ）を提供する。

【0272】

一実施形態では、前記抗体は、モノクローナル抗体；キメラ抗体；ヒト化抗体；完全にヒトの抗体；または一本鎖抗体である。前記抗体の一実施形態は、生物学的活性を有するこれらの抗体の１つのフラグメントである。このようなフラグメントとしては、例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）₂およびＦｖフラグメントがあげられる。

【0273】

前記抗体は、二重特異性抗体、ドメイン抗体（ＤＡＢ）または一本鎖抗体でもよい。

【0274】

一実施形態では、前記抗体は、モノクローナル抗体である。

【0275】

本発明に使用する抗体としては、その全体が、全ての目的に関して、参照により本願明細書に取り込まれる、国際公開第２００５／０８２０２３号パンフレットに記載の抗体があげられる。腫瘍関連抗原用の抗体が、特に好ましい。当該分野において公知のそれらの抗原としては、例えば、制限されず、国際公開第２００５／０８２０２３号パンフレットに提示される、腫瘍関連抗原があげられる。例えば、４１－５５頁を参照のこと。

【0276】

一部の実施形態では、前記コンジュゲートは、その細胞表面抗原を介して腫瘍細胞を標的とするように設計される。前記抗原は、異常なタイミングもしくは細胞種で、過剰発現または発現のいずれかがされている、細胞表面抗原でもよい。好ましくは、前記標的抗原は、増殖性細胞（好ましくは、腫瘍細胞）のみで発現される。ただし、これは、実際には稀にしか見られない。結果として、標的抗原は、通常、増殖性組織と健康な組織との間の異なる発現に基づいて選択される。

【0277】

抗体は、標的特異的な腫瘍関連抗原、例えば、Ｃｒｉｐｔｏ、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ３０、ＣＤ３３、糖タンパク質ＮＭＢ、ＣａｎＡｇ、Ｈｅｒ２（ＥｒｂＢ２／Ｎｅｕ）、ＣＤ５６（ＮＣＡＭ）、ＣＤ７０、ＣＤ７９、ＣＤ１３８、ＰＳＣＡ、ＰＳＭＡ（前立腺特異的膜抗原）、ＢＣＭＡ、Ｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ、ＥｐｈＢ２、メラノトランスフェリン、Ｍｕｃ１６およびＴＭＥＦＦ２に対して生じている。本願明細書において提供されるいずれかの実施形態において、前記リガンドユニットは、前記Ｃｒｉｐｔｏ抗原、ＣＤ１９抗原、ＣＤ２０抗原、ＣＤ２２抗原、ＣＤ３０抗原、ＣＤ３３抗原、糖タンパク質ＮＭＢ、ＣａｎＡｇ抗原、Ｈｅｒ２（ＥｒｂＢ２／Ｎｅｕ）抗原、ＣＤ５６（ＮＣＡＭ）抗原、ＣＤ７０抗原、ＣＤ７９抗原、ＣＤ１３８抗原、ＰＳＣＡ、ＰＳＭＡ（前立腺特異的膜抗原）、ＢＣＭＡ、Ｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ、ＥｐｈＢ２、メラノトランスフェリン、Ｍｕｃ１６抗原またはＴＭＥＦＦ２抗原に対して特異的に結合するモノクローナル抗体であり得る。

【0278】

前記リガンドユニットは、前記リンカーユニットに結合される。一実施形態では、前記リガンドユニットは、存在する場合、前記リンカーユニットのＡに結合される。

【0279】

一実施形態では、前記リガンドユニットと前記リンカーユニットとの間の結合は、チオエーテル結合による。

【0280】

一実施形態では、前記リガンドユニットと前記リンカーユニットとの間の結合は、ジスルフィド結合による。

【0281】

一実施形態では、前記リガンドユニットと前記リンカーユニットとの間の結合は、アミド結合による。

【0282】

一実施形態では、前記リガンドユニットと前記リンカーユニットとの間の結合は、エステル結合による。

【0283】

一実施形態では、前記リガンドユニットと前記リンカーとの間の結合は、前記リガンドユニットのシステイン残基におけるチオール基と、前記リンカーユニットのマレイミド基との間で形成される。

【0284】

前記リガンドユニットのシステイン残基は、結合を形成するために、前記リンカーユニットの官能基との反応に利用可能でもよい。他の実施形態では、例えば、前記リガンドユニットが抗体である場合、前記抗体のチオール基は、鎖内ジスルフィド結合に関与してもよい。これらの鎖内結合は、前記リンカーユニットの官能基との反応の前に、例えば、前記抗体をＤＴＴで処理することにより、遊離のチオール基に変換されてもよい。

【0285】

一部の実施形態では、前記システイン残基は、前記抗体の重鎖または軽鎖に導入される。抗体の重鎖または軽鎖に、置換により挿入されるシステインの位置としては、その全体が、全ての目的に関して、参照により本願明細書に取り込まれる、公開された米国出願番号２００７－００９２９４０号および国際公開第２００８／０７０５９３号パンフレットに記載のものがあげられる。

【0286】

処置方法
本発明の化合物およびコンジュゲートは、治療方法に使用され得る。処置を必要とする対象に、治療的に有効量の、本願明細書に開示される化合物またはそのコンジュゲートを投与することを含む、処置方法も提供される。「治療的に有効量」の用語は、患者に対して、利点を示すのに十分な量である。このような利点は、少なくとも１つの兆候の少なくとも改善であり得る。投与される実際の量ならびに投与の速度およびタイムコースは、処置される性質および重症度により決まるであろう。処置の処方、例えば、用量の決定は、一般医および他の医師の責任内である。

【0287】

化合物またはコンジュゲートは、単独または、処置される症状に応じて、同時または連続のいずれかで、他の処置との組み合わせで投与され得る。処置および治療としては、例えば、制限されず、化学療法（活性剤、例えば、薬剤の投与）；手術；および放射線療法があげられる。

【0288】

本発明に基づく、および本発明に基づいて使用するための、薬学的組成物は、前記活性成分、すなわち、本願明細書に開示される化合物またはそのコンジュゲートに加えて、薬学的に許容され得る賦形剤、キャリア、バッファー、安定剤または、当業者に周知の他の材料を含んでもよい。このような材料は、非毒性であるべきであり、前記活性成分の効能を妨げないべきである。前記キャリアまたは他の材料の正確な性質は、投与経路により決まるであろう。前記投与経路は、経口または注射、例えば、皮膚、皮下または静脈内でもよい。

【0289】

経口投与用の薬学的組成物は、錠剤、カプセル剤、粉末または液体の形態であり得る。錠剤は、固体状のキャリアまたは補助剤を含んでもよい。液体状の薬学的組成物は、一般的には、液体状のキャリア、例えば、水、石油、動物もしくは植物のオイル、鉱油または合成油を含む。生理食塩水、デキストロースまたは他の糖類の溶液またはグリコール、例えば、エチレングリコール、プロピレングリコールもしくはポリエチレングリコールが含まれてもよい。カプセル剤は、固体状のキャリア、例えば、ゼラチンを含んでもよい。

【0290】

静脈内、皮膚もしくは皮下の注射または苦痛の部位での注射に関して、前記活性成分は、発熱物質を含まず、適切なｐＨ、等張性および安定性を有する、非経口的に許容され得る水溶液の形態であろう。当業者は、等張性の媒体、例えば、塩化ナトリウム注射剤、リンゲル液、乳酸リンゲル液を使用して、適切な溶液を調製することが十分に可能である。保存剤、安定剤、バッファー、抗酸化剤および／または他の添加剤が、必要に応じて含まれてもよい。

【0291】

前記化合物およびコンジュゲートは、増殖性疾患および自己免疫疾患を処置するのに使用され得る。「増殖性疾患」の用語は、望ましくない過剰もしくは異常な細胞の、望ましくなく、または、制御できない細胞増殖、例えば、ｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｉｎ ｖｉｖｏに関わらず、腫瘍性増殖または過形成増殖に関する。

【0292】

増殖性の症状としては、例えば、制限されず、良性、前悪性および悪性の細胞増殖、例えば、制限されず、新生物および腫瘍（例えば、組織細胞種、グリオーマ、星状細胞種、骨腫）、ガン（例えば、肺ガン、肺小細胞ガン、胃腸ガン、腸ガン、結腸ガン、乳ガン腫、卵巣ガン腫、前立腺ガン、精巣ガン、肝臓ガン、腎臓ガン、膀胱ガン、膵臓ガン、脳ガン、肉腫、骨肉腫、カポジ肉腫またはメラノーマ）、白血病、乾癬、骨疾患、（例えば、結合組織の）線維増殖性障害ならびにアテローム硬化症があげられる。他の対象となるガンとしては、制限されず、血液学的；悪性腫瘍、例えば、白血病およびリンパ腫、例えば、非ホジキンリンパ腫ならびに、亜型、例えば、ＤＬＢＣＬ、辺縁体、マントル層および小胞、ホジキンリンパ腫、ＡＭＬならびにＢ細胞またはＴ細胞由来の他のガンがあげられる。

【0293】

自己免疫疾患としては、例えば、下記：関節リウマチ、自己免疫脱髄性疾患（例えば、多発性硬化症、アレルギー性脳脊髄炎）、乾癬性関節炎、内分泌性眼障害、脳膜ブドウ膜炎、全身性エリテマトーデス、重症筋無力症、グレーブス病、糸球体腎炎、自己免疫肝臓障害、炎症性腸疾患（例えば、クローン病）、アナフィラキシー、アレルギー性反応、シェーグレン症候群、Ｉ型糖尿病、原発性胆汁性肝硬変、ウェゲナー肉芽腫症、線維筋痛症、多発筋炎、皮膚真菌症、多発性内分泌障害、シュミット症候群、自己免疫ブドウ膜炎、アジソン病、副腎炎、甲状腺炎、橋本病、自己免疫甲状腺疾患、悪性貧血、胃萎縮、慢性肝炎、ルポイド肝炎、アテローム硬化症、亜急性皮膚エリテマトーデス、上皮小体機能低下症、ドレスラー症候群、自己免疫血小板減少症、特発性血小板減少性紫斑病、溶血性貧血、尋常性天疱瘡、天疱瘡、ヘルペス性皮膚炎、円形脱毛症、類天疱瘡、強皮症、全身性進行性硬化症、ＣＲＥＳＴ症候群（石灰沈着症、レイノー現象、食道運動障害、手指硬化症および毛細血管拡張症）、男性および女性の自己免疫性不妊、硬直性脊椎炎、潰瘍性大腸炎、混合性結合組織疾患、結節性多発動脈炎、全身性壊死性血管炎、アトピー性皮膚炎、アトピー性鼻炎、グッドパスチャ症候群、シャーガス病、サルコイドーシス、リウマチ熱、喘息、反復流産、抗リン脂質症候群、農夫肺、多発性紅斑、心切開術後症候群、クッシング症候群、自己免疫性慢性活動性肝炎、愛鳥家肺、中毒性表皮剥離症、アルポート症候群、肺胞炎、アレルギー性肺胞炎、線維化肺胞症、間質性肺炎、結節性紅斑、壊疽性膿皮症、輸血反応、高安動脈炎、多発筋痛、側頭動脈炎、住血吸虫症、巨細胞性動脈炎、回虫症、アスペルギルス症、サムター症候群、皮膚炎、リンパ腫様肉芽腫症、ベーチェット病、カプラン症候群、川崎病、デング熱、脳脊髄炎、心内膜炎、心内膜心筋線維症、眼内炎、持久性隆起性紅斑、乾癬、胎児赤芽球症、好酸球性筋膜炎、シャルマン症候群、フェルティ症候群、フィラリア症、毛様体炎、慢性毛様体炎、異時性毛様体炎、フックス毛様体炎、ＩｇＡ腎症、ヘノッホ－シェーンライン紫斑病、移植片対宿主病、移植拒絶、心筋症、イートン－ランバート症候群、再発性多発性軟骨炎、クリオグロブリン血症、ヴァルデンストローム・マクログロブリン血症、エバンス症候群および自己免疫性腺機能不全があげられる。

【0294】

一部の実施形態では、前記自己免疫疾患は、Ｂリンパ球の障害（例えば、全身性エリテマトーデス、グッドパスチャ症候群、関節リウマチおよびＩ型糖尿病）、Ｔｈ１－リンパ球の障害（例えば、関節リウマチ、多発性硬化症、乾癬、シェーグレン症候群、橋本病、グレーブス病、原発性胆汁性肝硬変、ウェゲナー肉芽腫症、結核症もしくは移植片対宿主病）または、Ｔｈ２－リンパ球の障害（例えば、アトピー性皮膚炎、全身性エリテマトーデス、アトピー性喘息、鼻炎結膜炎、アレルギー性鼻炎、オーメン症候群、全身性硬化症もしくは慢性移植片対宿主病）である。一般的に、樹状性細胞による障害は、Ｔｈ－１リンパ球またはＴｈ－２リンパ球の障害による。一部の実施形態では、前記自己免疫障害は、Ｔ細胞媒介性免疫不全である。

【0295】

一部の実施形態では、投与される前記コンジュゲートの量は、投与あたりに約０．０１から約１０ｍｇ／ｋｇの範囲である。一部の実施形態では、投与される前記コンジュゲートの量は、投与あたりに約０．０１から約５ｍｇ／ｋｇの範囲である。一部の実施形態では、投与される前記コンジュゲートの量は、投与あたりに約０．０５から約５ｍｇ／ｋｇの範囲である。一部の実施形態では、投与される前記コンジュゲートの量は、投与あたりに約０．１から約５ｍｇ／ｋｇの範囲である。一部の実施形態では、投与される前記コンジュゲートの量は、投与あたりに約０．１から約４ｍｇ／ｋｇの範囲である。一部の実施形態では、投与される前記コンジュゲートの量は、投与あたりに約０．０５から約３ｍｇ／ｋｇの範囲である。一部の実施形態では、投与される前記コンジュゲートの量は、投与あたりに約０．１から約３ｍｇ／ｋｇの範囲である。一部の実施形態では、投与される前記コンジュゲートの量は、投与あたりに約０．１から約２ｍｇ／ｋｇの範囲である。

【0296】

他の形態を含む
特に断らない限り、周知のイオン、塩、溶媒和物およびこれらの置換基の保護型は、上記に含まれる。例えば、カルボン酸（－ＣＯＯＨ）への言及は、アニオン（カルボキシレート）型（－ＣＯＯ^-）、その塩または溶媒和物および従来の保護型も含む。同様に、アミノ基への言及は、プロトン化された形態（－Ｎ⁺ＨＲ¹Ｒ²）、前記アミノ基の塩または溶媒和物、例えば、塩化水素塩、ならびにアミノ基の従来の保護型も含む。同様に、ヒドロキシル基への言及は、アニオン型（－Ｏ^-）、その塩または溶媒和物および従来の保護型も含む。

【0297】

塩
前記活性化合物の対応する塩、例えば、薬学的に許容され得る塩を調製、精製および／または取り扱うのが、都合がよく、または、望ましい場合がある。薬学的に許容され得る塩は、例えば、Ｂｅｒｇｅ，ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．，６６，１－１９（１９７７）に記載されている。

【0298】

例えば、前記化合物がアニオン性であるか、または、アニオン性であり得る官能基（例えば、－ＣＯＯＨが、－ＣＯＯ^-であり得る。）を有する場合には、塩は、適切なカチオンとで形成されてもよい。適切な無機カチオンとしては、例えば、制限されず、アルカリ金属イオン、例えば、Ｎａ⁺およびＫ⁺、アルカリ土類カチオン、例えば、Ｃａ²⁺およびＭｇ²⁺、ならびに、他のカチオン、例えば、Ａｌ⁺³があげられる。適切な有機カチオンとしては、例えば、制限されず、アンモニウムイオン（すなわち、ＮＨ₄ ⁺）および置換されているアンモニウムイオン（例えば、ＮＨ₃Ｒ⁺、ＮＨ₂Ｒ₂ ⁺、ＮＨＲ₃ ⁺、ＮＲ₄ ⁺）があげられる。一部の適切な置換されているアンモニウムイオンは、例えば、エチルアミン、ジエチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、トリエチルアミン、ブチルアミン、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペラジン、ベンジルアミン、フェニルベンジルアミン、コリン、メグルミンおよびトロメタミンならびに、アミノ酸、例えば、リジンおよびアルギニン由来のものである。一般的な四級アンモニウムイオンは、例えば、Ｎ（ＣＨ₃）₄ ⁺である。

【0299】

前記化合物がカチオン性であるか、または、カチオン性であり得る官能基（例えば、－ＮＨ₂が、－ＮＨ₃ ⁺であり得る。）を有する場合には、塩は、適切なアニオンとで形成されてもよい。適切な無機アニオンとしては、例えば、制限されず、下記の無機酸：塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硫酸、亜硫酸、硝酸、亜硝酸、リン酸および亜リン酸に由来するものがあげられる。

【0300】

適切な有機アニオンとしては、例えば、制限されず、下記の有機酸：２－アセトキシ安息香酸、酢酸、アスコルビン酸、アスパラギン酸、安息香酸、カンファースルホン酸、桂皮酸、クエン酸、エデト酸、エタンジスルホン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、グルコヘプトン酸、グルコン酸、グルタミン酸、グリコール酸、ヒドロキシマレイン酸、ヒドロキシナフタレンカルボン酸、イセチオン酸、乳酸、ラクトビオン酸、ラウリル酸、マレイン酸、リンゴ酸、メタンスルホン酸、粘液酸、オレイン酸、シュウ酸、パルミチン酸、パモン酸、パントテン酸、フェニル酢酸、フェニルスルホン酸、プロピオン酸、ピルビン酸、サリチル酸、ステアリン酸、コハク酸、スルファニル酸、酒石酸、トルエンスルホン酸および吉草酸に由来するものがあげられる。適切なポリマー性有機アニオンとしては、例えば、制限されず、下記のポリマー酸：タンニン酸、カルボキシメチルセルロースに由来するものがあげられる。

【0301】

溶媒和物
前記活性化合物の対応する溶媒和物を調製、精製および／または取り扱うのが、都合がよく、または、望ましい場合がある。本願明細書において、「溶媒和物」の用語は、媒質（例えば、活性化合物、活性化合物の塩）と溶媒との錯体を意味する、従来の意味で使用される。前記溶媒が水の場合、前記溶媒和物は、便宜上、水和物、例えば、一水和物、二水和物、三水和物等を意味し得る。

【0302】

カルビノールアミン
本発明は、前記ＰＢＤ部分のイミン結合に溶媒が付加する化合物を含み、これは以下に説明され、ここで、前記溶媒は水またはアルコール（Ｒ^AＯＨ、Ｒ^Aが、Ｃ_1-4アルキルである。）である。

【0303】

【化68】

【0304】

これらの型は、前記ＰＢＤにおけるカルビノールアミンおよびカルビノールアミンエーテル型と言うことができる。これらの平衡のバランスは、化合物が見出される条件および前記部分自体の性質により決まる。

【0305】

これらの具体的な化合物は、例えば、凍結乾燥により、固体状で単離され得る。

【0306】

異性体
特定の化合物は、１つ以上の具体的な幾何学型、光学型、鏡像型、ジアステレオ異性型、エピマー型、アトロプ型、立体異性型、互変異性型、立体構造型またはアノマー型、例えば、制限されず、ｃｉｓ－およびｔｒａｎｓ－型；Ｅ－およびＺ－型；ｃ－、ｔ－およびｒ－型；ｅｎｄｏ－およびｅｘｏ－型；Ｒ－、Ｓ－およびｍｅｓｏ－型；Ｄ－およびＬ－型；ｄ－およびｌ－型；（＋）および（－）型；ケト－、エノール－およびエノレート型；ｓｙｎ－およびａｎｔｉ－型；シンクリナル－およびアンチクリナル－型；α－およびβ－型；アキシャルおよびエカトリアル型；ｂｏａｔ－、ｃｈａｉｒ－、ｔｗｉｓｔ－、ｅｎｖｅｌｏｐｅ－およびｈａｌｆｃｈａｉｒ－型；ならびに、それらの組み合わせの型で存在してもよい。以下、まとめて「異性体」（または「異性型」）と言う。

【0307】

互変異性型に関して以下に説明する場合以外は、本願明細書で使用する時、構造（または構造）異性体（すなわち、空間における単に原子の位置よりもむしろ、原子間の結合が異なる異性体）は、「異性体」の用語から特に除外されることに留意するべきである。例えば、メトキシ基、－ＯＣＨ₃への言及は、その構造異性体である、ヒドロキシメチル基、－ＣＨ₂ＯＨへの言及として理解されるべきではない。同様に、オルト－クロロフェニルへの言及は、その構造異性体である、メタ－クロロフェニルへの言及として理解されるべきではない。ただし、構造の分類への言及は、その分類内にある構造的異性型を十分に含み得る（例えば、Ｃ_1-7アルキルは、ｎ－プロピルおよびｉｓｏ－プロピルを含み；ブチルは、ｎ－、ｉｓｏ－、ｓｅｃ－およびｔｅｒｔ－ブチルを含み；メトキシフェニルは、オルト－、メタ－およびパラ－メトキシフェニルを含む。）。

【0308】

上記除外は、互変異性型、例えば、ケト－、エノール－およびエノレート型、例えば、下記互変異対における場合、ケト／エノール（以下に説明）、イミン／エナミン、アミド／イミノアルコール、アミジン／アミジン、ニトロソ／オキシム、チオケトン／エネチオール、Ｎ－ニトロソ／ヒドロキシアゾおよびニトロ／ａｃｉ－ニトロには関連しない。

【0309】

【化69】

【0310】

１つ以上の同位体置換を有する化合物が、「異性体」の用語に特に含まれることに留意すべきである。例えば、Ｈは、任意の同位体型、例えば、¹Ｈ、²Ｈ（Ｄ）および³Ｈ（Ｔ）でもよく；Ｃは、任意の同位体型、例えば、¹²Ｃ、¹³Ｃおよび¹⁴Ｃでもよく；Ｏは、任意の同位体型、例えば、¹⁶Ｏおよび¹⁸Ｏ；等でもよい。

【0311】

特に断らない限り、特定の化合物への言及は、全てのこのような異性型、例えば、（全体的にまたは部分的に）ラセミおよびそれらの他の混合物を含む。このような異性型を調製（例えば、非対称合成）および分離（例えば、分別結晶およびクロマトグラフの手段）をするための方法は、当該分野において公知であるか、または、本願明細書で教示される方法もしくは公知の手法における公知の方法を採用することにより直ちに取得されるかのいずれかである。

【0312】

一般的な合成経路
前記ＰＢＤ化合物の合成は、下記参考文献において広く記載されている。その記載は、その全体が、全ての目的に関して、参照により本願明細書に取り込まれる。
ａ）国際公開第００／１２５０８号パンフレット（１４から３０頁）；
ｂ）国際公開第２００５／０２３８１４号パンフレット（３から１０頁）；
ｃ）国際公開第２００４／０４３９６３号パンフレット（２８から２９頁）；および、
ｄ）国際公開第２００５／０８５２５１号パンフレット（３０から３９頁）。

【0313】

合成経路
Ｒ¹⁰およびＲ¹¹が、それらが結合されている窒素原子と炭素原子との間に、窒素－炭素二重結合を形成している場合、本発明の化合物は、式２：

【化70】

の化合物から合成され得る。

【0314】

式２中、ｎは、０または１であり、Ｒ²およびＲ¹²は、以下の表に示されるように、本発明の化合物におけるＣ２芳香族基を表す。

【0315】

【表1】

Ｐｒｏｔ^Nは合成のための窒素保護基であり、Ｐｒｏｔ^Oは合成のための酸素保護基またはオキソ基であり、標準的な方法でイミン結合を脱保護される。

【0316】

産生された前記化合物は、使用される溶媒に応じて、そのカルビノールアミン型またはカルビノールアミンエーテル型であり得る。例えば、Ｐｒｏｔ^NがＴｒｏｃであり、Ｐｒｏｔ^Oが合成用の酸素保護基である場合には、前記脱保護は、Ｃｄ／Ｐｂカップリングを使用して行われて、本発明の化合物を産生する。Ｐｒｏｔ^NがＳＥＭまたは類似する基であり、Ｐｒｏｔ^Oがオキソ基である場合には、前記オキソ基は、還元により除去され得る。前記還元は、保護されたカルビノールアミン中間体をもたらし、ついで、前記中間体は、水の除去後に、前記ＳＥＭ保護基を除去するのに処理され得る。式２の化合物の還元は、例えば、スーパーヒドリドまたはリチウムテトラボロヒドリドによりなされ得る。一方、前記ＳＥＭ保護基を除去するのに適切な手段は、シリカゲルによる処理である。

【0317】

式２の化合物は、式３ａ：

【化71】

の化合物から合成され得る。

【0318】

式３ａ中、Ｒ²、Ｐｒｏｔ^NおよびＰｒｏｔ^Oは、Ｒ¹²を含む有機金属誘導体、例えば、有機ホウ素誘導体をカップリングすることによる、式２の化合物について規定の通りである。前記有機ホウ素誘導体は、ボロナートまたはボロン酸であり得る。

【0319】

式２の化合物は、式３ｂ：

【化72】

の化合物から合成され得る。

【0320】

式３ｂ中、Ｒ¹²、Ｐｒｏｔ^NおよびＰｒｏｔ^Oは、Ｒ²を含む有機金属誘導体、例えば、有機ホウ素誘導体をカップリングすることによる、式２の化合物について規定の通りである。前記有機ホウ素誘導体は、ボロナートまたはボロン酸であり得る。

【0321】

式３ａおよび３ｂの化合物は、式４：

【化73】

の化合物から合成され得る。

【0322】

式４中、Ｐｒｏｔ^NおよびＰｒｏｔ^Oは、Ｒ²またはＲ¹²を含む約一価（例えば、０．９または１から１．１または１．２）の有機金属誘導体、例えば、有機ホウ素誘導体をカップリングすることによる、式２の化合物について規定の通りである。

【0323】

上記カップリングは、通常、パラジウム触媒、例えば、Ｐｄ（ＰＰｈ₃）₄、Ｐｄ（ＯＣＯＣＨ₃）₂、ＰｄＣｌ₂、Ｐｄ₂（ｄｂａ）₃の存在下で行われる。前記カップリングは、標準的な条件下で行われてもよいし、または、マイクロ波条件下で行われてもよい。

【0324】

前記２つのカップリング工程は、通常、連続的に行われる。前記２つの工程は、前記２つの工程間で、精製して行われてもよいし、または、精製することなく行われてもよい。精製が行われない場合には、前記２つの工程は、同じ反応容器で行われてもよい。精製は、通常、第２のカップリング工程後に必要とされる。望ましくない副産物からの前記化合物の精製は、カラムクロマトグラフィーまたはイオン交換分離により行われてもよい。

【0325】

Ｐｒｏｔ^Oがオキソ基であり、Ｐｒｏｔ^NがＳＥＭである前記式４の化合物の合成は、その全体が、全ての目的に関して、参照により本願明細書に取り込まれる、国際公開第００／１２５０８号パンフレットに詳細に記載されている。具体的には、２４頁のスキーム７が参照され、上記化合物は、中間体Ｐとして示される。この合成法は、その全体が、全ての目的に関して、国際公開第２００４／０４３９６３号パンフレットにも記載されている。その全体が、全ての目的に関して、参照により本願明細書に取り込まれる、国際公開第２０１０／０４３８８０号パンフレット（３６から４５頁）における、化合物８ａおよび８ｂの合成についても、さらに参照される。

【0326】

Ｐｒｏｔ^Oが合成用の保護された酸素基である前記式４の化合物の合成は、国際公開第２００５／０８５２５１号パンフレットに記載されている。前記合成は、その全体が、全ての目的に関して、参照により本願明細書に取り込まれる。

【0327】

Ｒ¹⁰およびＲ^10’がＨであり、Ｒ¹¹およびＲ^11’がＳＯ_zＭである、本発明の化合物は、Ｒ¹⁰およびＲ¹¹が、それらが結合されている窒素原子と炭素原子との間に、窒素－炭素二重結合を、適切な重亜硫酸塩またはスルフィン酸塩を付加し、続けて、適切な精製工程により形成する、本発明の化合物から合成され得る。更なる方法は、参照により本願明細書に取り込まれる、英国特許第２０５３８９４号明細書に記載されている。

【0328】

本発明の一部の実施形態では、前記式２の化合物が、前記ドラッグリンカー化合物の合成に使用される場合がある。これらの実施形態では、前記Ｎ１０／Ｃ１１の保護基の除去は、前記ドラッグリンカー化合物の合成中に生じ得る。

【0329】

合成用の窒素保護基
合成用の窒素保護基は、当該分野において周知である。本発明では、具体的な対象の保護基は、カルバメート窒素保護基およびヘミアミナール窒素保護基である。

【0330】

カルバメート窒素保護基は、下記化学構造：

【化74】

を有し、前記化学構造中、Ｒ’¹⁰は、上記規定のＲである。数多くの適切な基が、その全体が、全ての目的に関して、参照により本願明細書に取り込まれる、Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．ａｎｄ Ｗｕｔｓ，Ｇ．Ｍ．，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ， ３^rd Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，１９９９の５０３から５４９頁に記載されている。

【0331】

特に好ましい保護基としては、Ｔｒｏｃ、Ｔｅｏｃ、Ｆｍｏｃ、ＢＯＣ、Ｄｏｃ、Ｈｏｃ、ＴｃＢＯＣ、１－Ａｄｏｃおよび２－Ａｄｏｃがあげられる。

【0332】

他の可能性のある基は、ニトロベンジルオキシカルボニル（例えば、４－ニトロベンジルオキシカルボニル）および２－（フェニルスルホニル）エトキシカルボニルである。

【0333】

パラジウム触媒により除去され得る保護基、例えば、Ａｌｌｏｃは、好ましくない。

【0334】

ヘミアミナール窒素保護基は、下記化学構造：

【化75】

を有し、前記化学構造中、Ｒ’¹⁰は、上記規定のＲである。数多くの適切な基が、その全体が、全ての目的に関して、参照により本願明細書に取り込まれる、Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．ａｎｄ Ｗｕｔｓ，Ｇ．Ｍ．，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，３^rd Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，１９９９にアミド保護基として６３３から６４７頁に記載されている。本願明細書に開示の基は、本発明の化合物に適用され得る。このような基としては、制限されず、ＳＥＭ、ＭＯＭ、ＭＴＭ、ＭＥＭ、ＢＯＭ、ニトロまたはメトキシ置換されているＢＯＭ、Ｃｌ₃ＣＣＨ₂ＯＣＨ₂－があげられる。

【0335】

合成用の保護されている酸素基
合成用の保護されている酸素基は、当該分野において周知である。数多くの適切な酸素保護基が、その全体が、全ての目的に関して、参照により本願明細書に取り込まれる、Ｇｒｅｅｎｅ，Ｔ．Ｗ．ａｎｄ Ｗｕｔｓ，Ｇ．Ｍ．，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，３^rd Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，１９９９の２３から２００頁に記載されている。

【0336】

具体的な対象の分類としては、シリルエーテル、メチルエーテル、アルキルエーテル、ベンジルエーテル、エステル、アセテート、ベンゾエート、カーボネートおよびスルホネートがあげられる。

【0337】

好ましい酸素保護基としては、アセテート、ＴＢＳおよびＴＨＰがあげられる。

【0338】

ドラッグコンジュゲートの合成
本願明細書に記載のＰＢＤ二量体を含むコンジュゲートは、本願明細書において提供される教示と組み合わせて、当業者の知識を使用して調製され得る。例えば、リンカーは、米国特許第６，２１４，３４５、７，４９８，２９８号明細書および国際公開第２００９／０１１７５３１号パンフレットに記載されており、それらは、その全体が、全ての目的に関して、参照により本願明細書に、それぞれ取り込まれる。他のリンカーは、本願明細書で引用される参考文献に基づくか、または、当業者に公知のものに基づいて調製され得る。

【0339】

リンカー－ドラッグ化合物は、当該分野において公知の方法に基づいて、本願明細書において提供される教示と組み合わせて、調製され得る。例えば、前記リンカーユニットの活性基への、（前記ＰＢＤ二量体ドラッグユニットの）アミン系のＸ置換基の結合は、一般的には、米国特許第６，２１４，３４５および７，４９８，２９８号明細書；ならびに国際公開第２００９－０１１７５３１号パンフレットに記載の方法に基づいて、または、当業者に公知の他のものに基づいて行われ得る。

【0340】

抗体は、Ｄｏｒｏｎｉｎａ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２００３，２１，７７８－７８４に記載のリンカー－ドラッグ化合物にコンジュゲートされ得る。簡潔に、ｐＨ７．４での、５０ｍＭ ホウ酸ナトリウムを含むＰＢＳにおける抗体（４－５ｍｇ／ｍＬ）を、トリス（カルボキシエチル）ホスフィン・塩酸（ＴＣＥＰ）により、３７℃で還元する。鎖間のジスルフィドを還元する前記反応の進行は、５，５’－ジチオビス（２－ニトロ安息香酸）との反応によりモニターされ、所望のレベルのチオール／ｍＡｂが達成されるまで続けられる。ついで、前記還元された抗体を、０℃に冷却し、抗体チオールあたりに、１．５当量のマレイミドドラッグ－リンカーによりアルキル化させる。１時間後、前記反応を、５当量のＮ－アセチルシステインの添加により停止させる。停止させたドラッグ－リンカーを、ＰＤ－１０カラムにおいてゲルろ過により除去する。ついで、前記ＡＤＣを、０．２２μｍのシリンジフィルタを通して滅菌ろ過する。タンパク質濃度は、それぞれ２８０ｎｍおよび３２９ｎｍでのスペクトル分析により、２８０ｎｍでのドラッグ吸光の寄与を補正して測定され得る。サイズ排除クロマトグラフィーを、抗体凝集の度合いを決定するのに使用し得る。ＲＰ－ＨＰＬＣを、残ったＮＡＣ－停止ドラッグ－リンカーのレベルを決定するのに使用し得る。

【0341】

導入されたシステイン残基を含む抗体は、その全体が、全ての目的に関して、参照により本願明細書に取り込まれる、国際公開第２００８／０７０５９３号パンフレットに記載のように、または、下記のように、リンカー－ドラッグ化合物にコンジュゲートされ得る。重鎖に導入されたシステイン残基を含む抗体を、１０当量のＴＣＥＰおよび１ｍＭ ＥＤＴＡを添加し、１Ｍ Ｔｒｉｓバッファー（ｐＨ９．０）でｐＨを７．４に調節することにより、完全に還元させる。３７℃で１時間インキュベートした後、前記反応を２２℃に冷却し、３０当量のデヒドロアスコルビン酸を添加して、前記還元状態において、導入されたシステインを遊離させながら、選択的に、元のジスルフィドを再度酸化させる。前記ｐＨを、１Ｍ Ｔｒｉｓバッファー（ｐＨ３．７）で６．５に調節し、前記反応を、２２℃で１時間進行させる。ついで、前記溶液のｐＨを、１Ｍ Ｔｒｉｓバッファー（ｐＨ９．０）を添加することにより、再度７．４に上昇させる。ＤＭＳＯにおける３．５当量の前記ＰＢＤドラッグリンカーを、前記反応に添加する前に、プロピレングリコールで希釈するために、適切な容器に入れる。前記ＰＢＤドラッグリンカーの溶解性を維持するために、まず、前記抗体自体を、プロピレングリコールで、３３％の最終濃度に希釈する（例えば、前記抗体の溶液を、６０ｍＬの反応容量とし、３０ｍＬのプロピレングリコールを添加した。）。この同じ容量のプロピレングリコール（この例では、３０ｍＬ）を、希釈剤として、前記ＰＢＤドラッグリンカーに添加する。混合後、プロピレングリコールにおける前記ＰＢＤドラッグリンカーの溶液を、前記コンジュゲートを生じさせるために、前記抗体の溶液に添加する。プロピレングリコールの最終濃度は、５０％である。前記反応を３０分間進行させ、ついで、５当量のＮ－アセチルシステインの添加により停止させる。前記ＡＤＣを、３０ｋＤのメンブレンを通す限外ろ過により精製する（前記反応に使用されるプロピレングリコールの濃度は、その唯一の目的が、水性媒体における前記ドラッグリンカーの溶解性を維持することである場合、任意の具体的なＰＢＤに対して低下させ得ることに留意すべきである。）。

【0342】

ハロ－アセタミド系リンカー－ドラッグ化合物に関して、コンジュゲートは、一般的には、下記のように行われ得る。１０ｍＭ Ｔｒｉｓ（ｐＨ７．４）、５０ｍＭ ＮａＣｌおよび２ｍＭ ＤＴＰＡにおける、（前記重鎖に導入されたシステインを有する）還元された抗体および再度酸化された抗体の溶液に、０．５容量のプロピレングリコールを添加する。ジメチルアセタミドにおけるアセタミド系リンカー－ドラッグ化合物の１０ｍＭ溶液を、コンジュゲートの直前に調製する。前記抗体溶液に添加する際、当量のプロピレングリコールを、６倍のモル濃度過剰の前記リンカー－ドラッグ化合物に添加する。前記リンカー－ドラッグの希釈溶液を、前記抗体溶液に添加し、１Ｍ Ｔｒｉｓ（ｐＨ９）を使用して、ｐＨを８－８．５に調節する。前記コンジュゲート反応を、３７℃で４５分間進行させる。逆相ＰＬＲＰ－Ｓクロマトグラフィーを還元および変性することにより、前記コンジュゲートを検証する。過剰のリンカー－ドラッグ化合物を、Ｑｕａｄｒａｓｉｌ ＭＰ樹脂で除去し、前記バッファーを、ＰＤ－１０脱塩カラムを使用して、１０ｍＭ Ｔｒｉｓ（ｐＨ７．４）、５０ｍＭ ＮａＣｌおよび５％プロピレングリコールに交換する。

【0343】

ドラッグリンカーに関する実例となる合成スキーム
下記スキームは、ドラッグリンカーを合成するための経路の実例となる。

【0344】

スキームＡ

【化76】

【0345】

Ｒ^2’は、前記ＮＨ₂基に前記ＰＢＤコアを結合させる（上記規定の）Ｒ²の一部を表す（化合物Ｃ１に関して、前記ＮＨ₂基は、ＮＨＭｅで置き替えられる。）。ｎは、上記規定の通りである。

【0346】

グルクロニドリンカー中間体Ｓ１（参考文献：Ｊｅｆｆｒｅｙ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００６，１７，８３１－８４０）を、ジクロロメタン中で、－７８℃において、ジホスゲンで処理して、グルクロニドクロロホルメートを取得し得る。ついで、前記グルクロニドクロロホルメートを、滴下して添加することにより、ＣＨ₂Ｃｌ₂に溶解させたＰＢＤ二量体Ｓ２と反応させる。前記反応を、２時間にわたって０℃に温めた後に、抽出により、化合物Ｓ３を収集するであろう。（０℃に冷却した）ＭｅＯＨ、テトラヒドロフランおよび水の等量の溶媒混合物におけるＳ３の溶液を、水酸化リチウム・一水和物で、４時間処置した後、氷酢酸と反応させ、化合物Ｓ４を収集するであろう。マレイミドカプロイルＮＨＳエステルを、ＤＭＦにおけるＳ４の溶液に添加した後、ジイソプロピルエチルアミンを添加し、室温で窒素下において、２時間攪拌することにより、所望のドラッグリンカーＳ５を収集するであろう。

【0347】

実施例２、３、４、６、７および８の方法は、本発明の全てのＰＢＤ化合物に採用され得る。

【0348】

更なる選択
下記の選択が、上記本発明の全ての態様に適用されてもよいし、または、単独の態様に関連してもよい。前記選択は、任意の組み合わせで互いに組み合わせられてもよい。

【0349】

Ｒ¹⁰がカルバメート窒素保護基である場合、好ましくは、Ｔｅｏｃ、ＦｍｏｃおよびＴｒｏｃでもよく、より好ましくは、Ｔｒｏｃでもよい。

【0350】

Ｒ¹¹がＯ－Ｐｒｏｔ^Oである場合、Ｐｒｏｔ^Oは、酸素保護基であり、Ｐｒｏｔ^Oは、好ましくは、ＴＢＳまたはＴＨＰでもよく、より好ましくは、ＴＢＳでもよい。

【0351】

Ｒ¹⁰がヘミアミナール窒素保護基である場合、好ましくは、ＭＯＭ、ＢＯＭまたはＳＥＭでもよく、より好ましくは、ＳＥＭでもよい。

【0352】

コンジュゲート
（ａ）本発明のコンジュゲートとしては、例えば、式：
ＣＢＡ－Ａ¹－Ｌ¹－^*
のものがあげられ、前記式中、前記アスタリスクは、前記ＰＢＤ二量体（Ｄ）または前記スペーサユニットへの付着点を示し、ＣＢＡは、前記細胞結合剤であり、Ｌ¹は、酵素の作用により開裂可能な特異性ユニットであり、Ａ¹は、前記細胞結合剤に、Ｌ¹を結合させるストレッチャユニットである。

【0353】

（ｂ）本発明のコンジュゲートとしては、例えば、式：
ＣＢＡ－Ａ¹－Ｌ¹－^*
のものがあげられ、前記式中、前記アスタリスクは、前記ＰＢＤ二量体（Ｄ）への付着点を示し、ＣＢＡは、前記細胞結合剤であり、Ａ¹は、前記細胞結合剤に、Ｌ¹を結合させるストレッチャユニットであり、Ｌ¹は、カテプシンの作用により開裂可能な特異性ユニットであり、Ｌ¹は、ジペプチドであり、Ｌ¹は、カテプシンの作用により開裂可能なジペプチドであるか、または、Ｌ¹は、－Ｐｈｅ－Ｌｙｓ－、－Ｖａｌ－Ａｌａ－、－Ｖａｌ－Ｌｙｓ－、－Ａｌａ－Ｌｙｓ－および－Ｖａｌ－Ｃｉｔ－から選択されるジペプチドである。

【0354】

本発明の好ましいコンジュゲートとしては、（ａ）および（ｂ）に記載のもののいずれかがあげられ、（ａ）および（ｂ）中、Ａ¹は、

【化77】

であり、前記アスタリスクは、前記Ｌ¹への付着点を示し、前記波線は、前記ＣＢＡへの付着点を示し、ｎは、０から６である（好ましくは、ｎは５である。）。

【0355】

本発明の好ましいコンジュゲートとしては、前記リンカーユニットが、

【化78】

のものがあげられ、前記波線は、前記リガンドユニット（例えば、抗体）への付着点を示し、前記アスタリスクは、Ｄへの付着点を示す。

【0356】

特に好ましい実施形態では、前記コンジュゲート全てに関して、前記抗体と前記リンカーユニットとの間の結合は、前記抗体のシステイン残基におけるチオール基と、前記リンカーユニットのマレイミド基との間で形成される。

【0357】

特に好ましい実施形態では、前記好ましいコンジュゲート全てに関して、前記抗体は、Ｃｒｉｐｔｏ抗原、ＣＤ１９抗原、ＣＤ２０抗原、ＣＤ２２抗原、ＣＤ３０抗原、ＣＤ３３抗原、糖タンパク質ＮＭＢ、ＣａｎＡｇ抗原、Ｈｅｒ２（ＥｒｂＢ２／Ｎｅｕ）抗原、ＣＤ５６（ＮＣＡＭ）抗原、ＣＤ７０抗原、ＣＤ７９抗原、ＣＤ１３８抗原、ＰＳＣＡ、ＰＳＭＡ（前立腺特異的膜抗原）、ＢＣＭＡ、Ｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ、ＥｐｈＢ２、メラノトランスフェリン、Ｍｕｃ１６抗原またはＴＭＥＦＦ２抗原に対して特異的に結合するモノクローナル抗体である。

【実施例】

【0358】

実施例
実施例１に関する一般的な実験方法
旋光度を、ＡＤＰ２２０旋光計（Ｂｅｌｌｉｎｇｈａｍ Ｓｔａｎｌｅｙ Ｌｔｄ．）において測定した。濃度（ｃ）を、ｇ／１００ｍＬとして得た。融点を、デジタル融点装置（Ｅｌｅｃｔｒｏｔｈｅｒｍａｌ）を使用して測定した。ＩＲスペクトルを、Ｐｅｒｋｉｎ－Ｅｌｍｅｒスペクトル１０００ＦＴ ＩＲ分光計において記録した。¹Ｈおよび¹³Ｃ ＮＭＲスペクトルを、Ｂｒｕｋｅｒ Ａｖａｎｃｅ ＮＭＲ分光計を使用して、それぞれ、４００および１００ＭＨｚにおいて、３００Ｋで取得した。化学シフトを、ＴＭＳ（δ＝０．０ｐｐｍ）と比較して報告する。シグナルを、ヘルツ（Ｈｚ）として与えられるカップリング定数により、ｓ（シングレット）、ｄ（ダブレット）、ｔ（トリプレット）、ｄｔ（ダブルトリプレット）、ｄｄ（ダブルダブレット）、ｄｄｄ（ダブルダブルダブレット）またはｍ（マルチプレット）として指定する。質量分析（ＭＳ）データを、Ｗａｔｅｒｓ ２９９６ ＰＤＡを含むＷａｔｅｒｓ ２６９５ ＨＰＬＣと組み合わせられた、Ｗａｔｅｒｓ Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ ＺＱ機器を使用して収集する。使用したＷａｔｅｒｓ Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ ＺＱのパラメータを、キャピラリー（ｋＶ）、３．３８；コーン（Ｖ）、３５；抽出器（Ｖ）、３．０；ソース温度（℃）、１００；脱溶媒和温度（℃）、２００；コーン流速（Ｌ／時間）、５０；脱溶媒和速度（Ｌ／時間）、２５０とした。高解像能質量分析（ＨＲＭＳ）データを、ポジティブＷ－モードにおいて、前記機器内に試料を導入するための金属コートされたホウケイ酸ガラスチップを使用して、Ｗａｔｅｒｓ Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ ＱＴＯＦグローバルにおいて記録した。薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）を、シリカゲルアルミニウム板（Ｍｅｒｃｋ ６０、Ｆ₂₅₄）上で行った。フラッシュクロマトグラフィーは、シリカゲル（Ｍｅｒｃｋ ６０、２３０－４００メッシュＡＳＴＭ）を使用した。ＨＯＢｔ（ＮｏｖａＢｉｏｃｈｅｍ）および固体支持試薬（Ａｒｇｏｎａｕｔ）に関する以外は、全ての他の薬品および溶媒を、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈから購入し、更なる精製をすることなく提供されたまま使用した。無水溶媒を、乾燥した窒素雰囲気下で、適切な乾燥剤の存在下において、蒸留することにより調製し、４Åの分子ふるいまたはナトリウムワイヤにおいて保存した。石油エーテルは、４０－６０℃で沸騰する留分を意味する。

【0359】

一般的なＬＣ／ＭＳの条件：前記ＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ Ａｌｌｉａｎｃｅ ２６９５）を、水（Ａ）（ギ酸０．１％）およびアセトニトリル（Ｂ）（ギ酸０．１％）の移動相を使用して行った。勾配：１．０分の間、開始組成 ５％ Ｂ、ついで、３分以内に、５％ Ｂから９５％ Ｂ。前記組成を、９５％ Ｂで０．５分間保持し、ついで、０．３分で５％ Ｂに戻した。総勾配実行時間を、５分とした。流速３．０ｍＬ／分、前記質量分析計内を通過する０デッドボリュームのＴ継手により、４００μＬを分割した。波長検出は、２２０から４００ｎｍの範囲とする。機能種：ダイオードアレイ（５３５スキャン）。カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標）Ｏｎｙｘ Ｍｏｎｏｌｉｔｈｉｃ Ｃ１８ ５０×４．６０ｍｍ。

【0360】

実施例１

【化79】

【0361】

（ａ）（Ｓ）－２－（４－メトキシフェニル）－７－メトキシ－８－（３－（（Ｓ）－７－メトキシ－２－（トリフルオロメチルスルホニル）－５，１１－ジオキソ－１０－（（２－（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）－５，１０，１１，１１ａ－テトラヒドロ－１Ｈ－ピロロ［２，１－ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン－８－イルオキシ）ペントキシオキシ）－１０－（（２－（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）－１Ｈ－ピロロ［２，１－ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン－５，１１（１０Ｈ，１１ａＨ）－ジオン（２）
トルエン／エタノール／水（１０ｍＬ／５ｍＬ／５ｍＬ）における、１，１’－［［（ペンタン－１，５－ジイル）ジオキシ］ビス（１１ａＳ）－７－メトキシ－２－［［（トリフルオロメチル）スルホニル］オキシ］－１０－（（２－（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）－１，１０，１１，１１ａ－テトラヒドロ－５Ｈ－ピロロ［２，１－ｃ］［１，４］ベンゾジアゼピン－５，１１－ジオン］（１）（国際公開第２０１０／０４３８８０号パンフレットにおける化合物８ｂ）（１８５ｍｇ、１．６２ｍｍｏｌ、１．０当量）、４－メトキシフェニルボロン酸（２３４ｍｇ、１．５４ｍｍｏｌ、０．９５当量）およびＮａ₂ＣＯ₃（２７４ｍｇ、２．５９ｍｍｏｌ、１．６当量）の攪拌・脱気した混合物に、テトラキス－ｔｒｉｓ－フェニルホスフィン・パラジウム錯体（３８ｍｇ、３．２３×１０^-5ｍｏｌ、０．０２当量）を添加した。前記反応混合物を、アルゴン雰囲気下において、室温で３時間攪拌した。前記反応混合物を、酢酸エチルで希釈し、水性部分を分離した。有機部分を、水、飽和塩水で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ₄）、減圧下で蒸発させた。フラッシュカラムクロマトグラフィー［勾配溶出、酢酸エチル３０％／ｎ－ヘキサン７０％から、酢酸エチル８０％／ｎ－ヘキサン２０％］による精製により、黄色の泡状物質として、生成物を取得した（０．７ｇ、３９％）。分析データ：ＲＴ ３．９７分；ＭＳ（ＥＳ⁺） ｍ／ｚ（相対強度）１１０３（［Ｍ＋Ｈ］⁺、１００）。

【0362】

（ｂ）（Ｓ）－２－（４－（アミノメチル）フェニル）－７－メトキシ－８－（５－（（（Ｓ）－７－メトキシ－２－（４－メトキシフェニル）－５，１１－ジオキソ－１０－（（２－（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）－５，１０，１１，１１ａ－テトラヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２－ａ］［１，４］ジアゼピン－８－イル）オキシ）ペンチル）オキシ）－１０－（（２－（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２－ａ］［１，４］ジアゼピン－５，１１（１０Ｈ，１１ａＨ）－ジオン（３）
トルエン／エタノール／水（２０ｍＬ／１０ｍＬ／１０ｍＬ）における、前記メトキシトリフラート（２）（７００ｍｇ、０．６３ｍｍｏｌ、１．０当量）、４－アミノメチルフェニルボロン酸（１９０ｍｇ、１．０１５ｍｍｏｌ、１．６当量）およびＮａ₂ＣＯ₃（３０３ｍｇ、２．８５ｍｍｏｌ、４．５当量）の攪拌・脱気した混合物に、テトラキス－ｔｒｉｓ－フェニルホスフィン・パラジウム錯体（３０ｍｇ、２．５×１０^-5ｍｏｌ、０．０４当量）を添加した。前記反応混合物を、アルゴン雰囲気下において、７５℃で３時間加熱した。前記反応混合物を、酢酸エチルで希釈し、水性部分を分離した。有機部分を、水、飽和塩水で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ₄）、減圧下で蒸発させて、褐色の泡状物質として、粗製生物を取得した。フラッシュカラムクロマトグラフィー［勾配溶出、酢酸エチル５０％／ｎ－ヘキサン５０％から、酢酸エチル１００％］による精製により、生成物を取得した（０．５５ｇ、８２％）。分析データ：ＲＴ ３．４８分；ＭＳ（ＥＳ⁺）ｍ／ｚ（相対強度）１０６０（［Ｍ＋Ｈ］⁺、１００）。

【0363】

実施例２に関する一般的な実験方法
全ての商業的に利用可能な無水溶媒を、更なる精製をすることなく使用した。分析用薄層クロマトグラフィーを、シリカゲル ６０ Ｆ２５４アルミニウムシート（ＥＭＤ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ、Ｇｉｂｂｓｔｏｗｎ、ＮＪ）上で行った。ラジアルクロマトグラフィーを、Ｃｈｒｏｍａｔｏｔｒｏｎ装置（Ｈａｒｒｉｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ、Ｐａｌｏ Ａｌｔｏ、ＣＡ）において行った。分析用ＨＰＬＣを、Ｖａｒｉａｎ ＰｒｏＳｔａｒ ３３０ ＰＤＡ検出器で構成されたＶａｒｉａｎ ＰｒｏＳｔａｒ ２１０溶媒輸送システムにおいて行った。試料を、Ｃ１２ Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｉ ２．０×１５０ｍｍ、４μｍ、８０Åの逆相カラムで溶出した。前記酸性の移動相は、両方とも０．０５％のトリフルオロ酢酸または０．１％のギ酸のいずれか（各化合物について示される）を含むアセトニトリルおよび水からなった。注入後１分での５％ 酸性アセトニトリルから、１１分で９５％までの直線勾配、続けて、１５分まで均一濃度の９５％ アセトニトリル（流速＝１．０ｍＬ／分）で、化合物を溶出した。ＬＣ－ＭＳを、Ｃ１２ Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｉ ２．０×１５０ｍｍ、４μｍ、８０Åの逆相カラムを備える、ＨＰ Ａｇｉｌｅｎｔ １１００ ＨＰＬＣ機器に、インターフェースで接続されたＺＭＤ Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ質量分析計において行った。前記酸性の溶出は、１０分にわたる、０．１％ 水性ギ酸における５％から９５％へのアセトニトリルの直線勾配、続けて、５分間の均一濃度の９５％ アセトニトリルからなった（流速＝０．４ｍＬ／分）。調製用ＨＰＬＣを、Ｖａｒｉａｎ ＰｒｏＳｔａｒ ３３０ ＰＤＡ検出器で構成されたＶａｒｉａｎ ＰｒｏＳｔａｒ ２１０溶媒輸送システムにおいて行った。生成物を、Ｃ１２ Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｉ １０．０×２５０ｍｍ、４μｍ、８０Åの逆相カラムで、水における０．１％ ギ酸（溶媒Ａ）およびアセトニトリルにおける０．１％ ギ酸（溶媒Ｂ）で溶出して精製した。前記精製法は、下記溶媒Ｂに対する溶媒Ａの勾配：０から５分まで、９０：１０；５分から８０分まで、９０：１０から１０：９０；続けて、５分間、均一濃度の１０：９０からなった。流速は、２５４ｎｍでのモニタリングにより、４．６ｍＬ／分とした。ＮＭＲスペクトルデータを、Ｖａｒｉａｎ Ｍｅｒｃｕｒｙ ４００ＭＨｚ分光計において収集した。カップリング定数（Ｊ）を、ヘルツにおいて報告する。

【0364】

実施例２

【化80】

【0365】

（ａ）アリル（（Ｓ）－１－（（（Ｓ）－１－（（４－（（Ｓ）－７－メトキシ－８－（５－（（（Ｓ）－７－メトキシ－２－（４－メトキシフェニル）－５，１１－ジオキソ－１０－（（２－（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）－５，１０，１１，１１ａ－テトラヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２－ａ］［１，４］ジアゼピン－８－イル）オキシ）ペンチル）オキシ）－５，１１－ジオキソ－１０－（（２－（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）－５，１０，１１，１１ａ－テトラヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２－ａ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）ベンジル）アミノ）－１－オキソプロパン－２－イル）アミノ）－３－メチル－１－オキソブタン－２－イル）カルバメート（４）
１０ｍＬのフラスコに、ａｌｌｏｃ－Ｖａｌ－Ａｌａ（１５ｍｇ、５７μｍｏｌ）、ＥＥＤＱ（１７ｍｇ、６９μｍｏｌ）および０．７２ｍＬの無水ＣＨ₂Ｃｌ₂を充填した。メタノール（４０μＬ）を、溶解を促進するために添加した。前記混合物を、窒素下において、１５分間攪拌した。ついで、ＳＥＭ－ジラクタムベンジルアミン３（４０ｍｇ、３８μｍｏｌ）を添加し、前記反応を、室温で４時間攪拌した。その時点で、ＬＣ－ＭＳにより生成物への変換が証明された。前記反応を濃縮し、最少量のＣＨ₂Ｃｌ₂に溶解し、１ｍｍのＣｈｒｏｍａｔｏｔｒｏｎプレート上で、ラジアルクロマトグラフィーにより精製し、ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＭｅＯＨの混合物（１００：０から９０：１０ ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＭｅＯＨ）により溶出して、４（４２ｍｇ、８５％）を提供した。ＬＣ－ＭＳ：ｔ_R １５．５０分、ｍ／ｚ（ＥＳ⁺）実測値１３１５．１（Ｍ＋Ｈ）⁺。

【0366】

（ｂ） アリル （（Ｓ）－１－（（（Ｓ）－１－（（４－（（Ｓ）－７－メトキシ－８－（５－（（（Ｓ）－７－メトキシ－２－（４－メトキシフェニル）－５－オキソ－５，１１ａ－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２－ａ］［１，４］ジアゼピン－８－イル）オキシ）ペンチル）オキシ）－５－オキソ－５，１１ａ－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２－ａ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）ベンジル）アミノ）－１－オキソプロパン－２－イル）アミノ）－３－メチル－１－オキソブタン－２－イル）カルバメート（５）
４（４０ｍｇ、３０μｍｏｌ）および無水ＴＨＦ（０．６ｍＬ）を、１０ｍＬの火炎乾燥させたフラスコに充填し、－７８℃に冷却した。リチウムトリエチルボロヒドリド（６０μＬの１Ｍ ＴＨＦ溶液）を、滴下して添加した。前記反応を、窒素下において、－７８℃で２時間攪拌した。その時点で、おおよそ５０％の変換が、ＬＣ－ＭＳにより証明された。ついで、更なる３０μｌの還元剤を添加し、さらに２時間攪拌を継続した。その時点で、前記反応が完了した。ついで、前記反応を、１ｍＬの水を添加することにより停止させ、室温に温め、ついで、２５ｍＬの塩水で希釈し、２５ｍＬのジクロロメタンで３回抽出した。前記組み合わせた有機物を、塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、蒸発乾固させた。クロロホルム（０．７５ｍＬ）、エタノール（２ｍＬ）および水（０．３ｍＬ）に、得られた残渣を溶解し、８００ｍｇのシリカゲルを添加して、粘性のスラリーを取得した。前記スラリーを密封し、室温で４日間攪拌した。その時点で、ＴＬＣ分析により、イミン５への変換が証明された。ついで、前記シリカゲルをろ過し、前記ろ液に更なるＰＢＤの吸光が観察されなくなるまで、クロロホルムにおける１０％ メタノールで、複数回洗浄した。ついで、前記組み合わせた有機物を、塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、蒸発乾固させた。ついで、残渣を、最少量のＣＨ₂Ｃｌ₂に溶解し、１ｍｍのｃｈｒｏｍａｔｏｔｒｏｎプレート上で、ラジアルクロマトグラフィーにより精製し、ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＭｅＯＨの混合物（１００：０から９０：１０ ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＭｅＯＨ）により溶出して、３（１９ｍｇ、６１％）を提供した。分析用ＨＰＬＣ：ｔ_R １１．９９分。ＬＣ－ＭＳ：ｔ_R １２．７６分、ｍ／ｚ（ＥＳ⁺） 実測値１０２２．４（Ｍ＋Ｈ）⁺。

【0367】

（ｃ） ６－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロロ－１－イル）－Ｎ－（（Ｓ）－１－（（（Ｓ）－１－（（４－（（Ｓ）－７－メトキシ－８－（５－（（（Ｓ）－７－メトキシ－２－（４－メトキシフェニル）－５－オキソ－５，１１ａ－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２－ａ］［１，４］ジアゼピン－８－イル）オキシ）ペンチル）オキシ）－５－オキソ－５，１１ａ－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２－ａ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）ベンジル）アミノ）－１－オキソプロパン－２－イル）アミノ）－３－メチル－１－オキソブタン－２－イル）ヘキサンアミド（６）
Ａｌｌｏｃ－保護されたジイミンＰＢＤ５（１９ｍｇ、１９μｍｏｌ）を、火炎乾燥させたフラスコに添加し、無水ジクロロメタン（１．９ｍＬ）に溶解させた。トリフェニルホスフィン（０．２５ｍｇ、１μｍｏｌ）、ピロリジン（３．１μＬ、３８μＬ）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（０．５ｍｇ、０．５μｍｏｌ）を添加した。ついで、前記反応を、窒素下において、室温で３０分間攪拌した。その時点で、ＬＣ－ＭＳにより完全なａｌｌｏｃ脱保護が証明された。前記反応を、１ｍｍのｃｈｒｏｍａｔｏｔｒｏｎプレート上に直接充填し、ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＭｅＯＨの混合物（１００：０から８０：２０ ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＭｅＯＨ）により溶出して、遊離アミンを提供した（１４ｍｇ、７９％）。分析用ＨＰＬＣ：ｔ_R ９．３２分。ＬＣ－ＭＳ：ｔ_R １１．６１分、ｍ／ｚ（ＥＳ⁺） 実測値９３８．５（Ｍ＋Ｈ）⁺。ついで、前記遊離アミンを、無水ＤＭＦ（０．３７ｍＬ）に溶解し、マレイミドカプロイルＮＨＳエステルを添加し（６．９ｍｇ、２２μｍｏｌ）、続けて、ジイソプロピルエチルアミン（１３μＬ、７５μＬ）を添加した。前記反応を、室温で３時間攪拌した。その時点で、ＬＣ－ＭＳにより開始材料の完全な消費が証明された。前記反応混合物を、ジクロロメタンで希釈し、１ｍｍのｃｈｒｏｍａｔｏｔｒｏｎプレート上で、ラジアルクロマトグラフィーにより精製し、ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＭｅＯＨの混合物（１００：０から９０：１０ ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＭｅＯＨ）により溶出して、４（１５ｍｇ、８９％）を提供した。分析用ＨＰＬＣ：ｔ_R １１．６３分。ＬＣ－ＭＳ：ｔ_R １２．７３分、ｍ／ｚ（ＥＳ⁺）実測値１１３２．１（Ｍ＋Ｈ）⁺。

【0368】

実施例３－７に関する一般的な実験方法
全ての商業的に利用可能な無水溶媒を、更なる精製をすることなく使用した。分析用薄層クロマトグラフィーを、シリカゲル ６０ Ｆ２５４アルミニウムシート（ＥＭＤ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ、Ｇｉｂｂｓｔｏｗｎ、ＮＪ）上で行った。ラジアルクロマトグラフィーを、Ｃｈｒｏｍａｔｏｔｒｏｎ装置（Ｈａｒｒｉｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ、Ｐａｌｏ Ａｌｔｏ、ＣＡ）において行った。分析用ＨＰＬＣを、Ｖａｒｉａｎ ＰｒｏＳｔａｒ ３３０ ＰＤＡ検出器で構成されたＶａｒｉａｎ ＰｒｏＳｔａｒ ２１０溶媒輸送システムにおいて行った。試料を、Ｃ１２ Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｉ ２．０×１５０ｍｍ、４μｍ、８０Åの逆相カラムで溶出した。前記酸性の移動相は、両方とも０．０５％のトリフルオロ酢酸または０．１％のギ酸のいずれか（各化合物に関して示される）を含むアセトニトリルおよび水からなった。注入後１分での５％ 酸性アセトニトリルから、１１分で９５％までの直線勾配、続けて、１５分まで均一濃度の９５％ アセトニトリル（流速＝１．０ｍＬ／分）で、化合物を溶出した。ＬＣ－ＭＳを、Ｃ１２ Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｉ ２．０×１５０ｍｍ、４μｍ、８０Åの逆相カラムを備える、ＨＰ Ａｇｉｌｅｎｔ １１００ ＨＰＬＣ機器に、インターフェースで接続されたＺＭＤ Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ質量分析計において行った。前記酸性の溶出は、１０分にわたる、０．１％ ギ酸水溶液における５％から９５％へのアセトニトリルの直線勾配、続けて、５分間の均一濃度の９５％ アセトニトリルからなった（流速＝０．４ｍＬ／分）。調製用ＨＰＬＣを、Ｖａｒｉａｎ ＰｒｏＳｔａｒ ３３０ ＰＤＡ検出器で構成されたＶａｒｉａｎ ＰｒｏＳｔａｒ ２１０溶媒輸送システムにおいて行った。生成物を、Ｃ１２ Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｉ １０．０×２５０ｍｍ、４μｍ、８０Åの逆相カラムで、水における０．１％ ギ酸（溶媒Ａ）およびアセトニトリルにおける０．１％ ギ酸（溶媒Ｂ）で溶出して精製した。前記精製法は、溶媒Ｂに対する溶媒Ａの下記勾配：０から５分まで、９０：１０；５分から８０分まで、９０：１０から１０：９０；続けて、５分間、均一濃度の１０：９０からなった。流速は、２５４ｎｍでのモニタリングにより、４．６ｍＬ／分とした。ＮＭＲスペクトルデータを、Ｖａｒｉａｎ Ｍｅｒｃｕｒｙ ４００ＭＨｚ分光計において収集した。カップリング定数（Ｊ）を、ヘルツにおいて報告する。

【0369】

実施例３

【化81】

【0370】

（ａ）（Ｓ）－２－（４－（アミノメチル）フェニル）－７－メトキシ－８－（（５－（（（Ｓ）－７－メトキシ－２－（４－メトキシフェニル）－５－オキソ－５，１１ａ－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２－ａ］［１，４］ジアゼピン－８－イル）オキシ）ペンチル）オキシ）－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２－ａ］［１，４］ジアゼピン－５（１１ａＨ）－オン（７）
無水テトラヒドロフラン（ＴＨＦ、１．９ｍＬ）に溶解したＳＥＭジラクタム３（１００ｍｇ、９４μｍｏｌ、１当量）を、火炎乾燥させたフラスコに充填し、－７８℃に冷却した。リチウムトリエチルボロヒドリド（０．１９ｍＬの、ＴＨＦにおける１Ｍ溶液、１８８μｍｏｌ、２当量）を、滴下して添加した。前記反応を、窒素下において、１時間攪拌した。その時点で、生成物への不完全な変換が、ＬＣにより証明された。さらに０．１ｍＬの還元剤を添加し、前記反応を、さらに１時間攪拌した。前記反応を、水（３ｍＬ）を添加することにより停止させ、室温に温め、ついで、塩水（２５ｍＬ）で希釈し、ジクロロメタン（２５ｍＬ）で３回抽出した。前記組み合わせた有機物を、塩水（２５ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、蒸発乾固させた。ジクロロメタン（２．４ｍＬ）、エタノール（６．２ｍＬ）および水（０．９ｍＬ）の混合物に、残渣を溶解し、シリカゲル（２．４ｇ）を添加した。得られたスラリーを、室温で３日間攪拌した。その時点で、ＴＬＣ分析により、イミン７への変換が証明された。前記スラリーを焼成ガラスロートによりろ過し、前記ろ液に更なるＰＢＤの吸光が観察されなくなるまで、前記シリカゲルケーキを、クロロホルムにおける１０％ メタノールで洗浄した。前記ろ液の濃縮により、７０ｍｇの粗製のイミン二量体７が提供された。それを分割し、４０ｍｇを、精製に進めた。前記材料を、最少量のジクロロメタンに溶解し、１ｍｍのｃｈｒｏｍａｔｏｔｒｏｎプレート上でのラジアルクロマトグラフィーにより精製し、ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＭｅＯＨ混合物（１００：０から８０：２０）で溶出して、７（１１ｍｇ、分割した材料からの２７％）を提供した。ＴＬＣ：Ｒ_f＝０．２１、ＣＨ₂Ｃｌ₂における２０％ ＭｅＯＨ、ＬＣ－ＭＳ：ｔ_R １１．３０分、ｍ／ｚ（ＥＳ⁺） 実測値７６８．３（Ｍ＋Ｈ）⁺。

【0371】

（ｂ）４－（（Ｓ）－２（（Ｓ）－２－（６－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロロ－１－イル）ヘキサンアミド）－３－メチルブタンアミド）－５－ウレイドペンタンアミド）ベンジル ４－（（Ｓ）－７－メトキシ－８－（５－（（（Ｓ）－７－メトキシ－２－（４－メトキシフェニル）－５－オキソ－５，１１ａ－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２－ａ］［１，４］ジアゼピン－８－イル）オキシ）ペンチル）オキシ）－５－オキソ－５，１１ａ－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２－ａ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）ベンジルカルバメート（９）
無水ジメチルホルムアミド（０．２ｍＬ）に溶解したベンジルアミン７（７．３ｍｇ、９．５μｍｏｌ、１当量）を、火炎乾燥させたフラスコに充填した。マレイミドカプロイル－バリン－シトルリン－ＰＡＢ－ＯＣＯ－ｐＮＰ（Ｄｕｂｏｗｃｈｉｋ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００２，１３，８５５－８６９）（７ｍｇ、９．５μｍｏｌ、１当量）を添加し、続けて、ジイソプロピルエチルアミン（１６．５μＬ、９５μｍｏｌ、１０当量）を添加した。ついで、前記反応を、窒素雰囲気下において、室温で攪拌した。１．５時間後に、ＬＣにより生成物への変換が証明された。前記反応を、ジクロロメタンで希釈し、１ｍｍのｃｈｒｏｍａｔｏｔｒｏｎプレート上に直接充填し、ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＭｅＯＨの混合物（１００：０から８０：２０）により溶出して、精製されたドラッグリンカー９（９．３ｍｇ、７２％）を提供した。ＴＬＣ：Ｒ_f＝０．２４、ＣＨ₂Ｃｌ₂における１０％ ＭｅＯＨ、ＬＣ－ＭＳ：ｔ_R １２．６１分、ｍ／ｚ（ＥＳ⁺） 実測値１３６６．８（Ｍ＋Ｈ）⁺。

【0372】

実施例４

【化82】

【0373】

（ａ）（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）－２－（２－（３－（（（（９Ｈ－フルオレン－９－イル）メトキシ）カルボニル）アミノ）プロパンアミド）－４－（（（（４－（（Ｓ）－７－メトキシ－８－（（５－（（（Ｓ）－７－メトキシ－２－（４－メトキシフェニル）－５－オキソ－５，１１ａ－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２－ａ］［１，４］ジアゼピン－８－イル）オキシ）ペンチル）オキシ）－５－オキソ－５，１１ａ－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２－ａ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）ベンジル）カルバモイル）オキシ）メチル）フェノキシ）－６－メチルテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－３，４，５－トリイル トリアセテート（１２）
無水テトラヒドロフラン（０．８ｍＬ）に溶解したＳＥＭジラクタム３（４０ｍｇ、３８μｍｏｌ、１当量）を、火炎乾燥させたフラスコに充填し、－７８℃に冷却した。リチウムトリエチルボロヒドリド（８０μＬの、ＴＨＦにおける１Ｍ溶液、７６μｍｏｌ、２当量）を、滴下して添加した。前記反応を、窒素下において、１．５時間攪拌した。その時点で、生成物への不完全な変換が、ＬＣにより証明された。さらに４０μＬの還元剤を添加し、前記反応を、さらに１時間攪拌した。前記反応を、水（１ｍＬ）を添加することにより停止させ、室温に温め、ついで、塩水（２５ｍＬ）で希釈し、ジクロロメタン（２５ｍＬ）で３回抽出した。前記組み合わせた有機物を、塩水（２５ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、蒸発乾固させた。ＳＥＭカルビノールアミン１０（３９ｍｇ）を、更なる精製をすることなく進めた。活性化したグルクロニドリンカー１１（Ｊｅｆｆｒｅｙ ｅｔ ａｌ．， Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， ２００６， １７， ８３１－８４０）（３８ｍｇ、４２μｍｏｌ、１．１当量）を、無水ジメチルホルムアミド（０．６ｍＬ）に溶解し、１０（３９ｍｇ、３７μｍｏｌ、１当量）を含むフラスコに添加した。ジイソプロピルエチルアミン（１３μＬ、７４μｍｏｌ、２当量）を添加した。前記反応を、窒素下において、室温で攪拌した。１．５時間後に、ＬＣ－ＭＳによりカップリング生成物への変換が証明された。前記反応を、塩水（２５ｍＬ）で希釈し、ジクロロメタン（２５ｍＬ）で３回抽出した。前記組み合わせた有機物を、塩水（２５ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、蒸発乾固させた。クロロホルム（０．７ｍＬ）、エタノール（１．２５ｍＬ）および水（０．１７ｍＬ）の混合物に、得られた残渣を溶解し、シリカゲル（１ｇ）を添加した。得られたスラリーを、室温で３日間攪拌した。ＴＬＣ分析により、ドラッグ－リンカー１２への変換が証明された。その時点で、前記スラリーを焼成ガラスロートによりろ過し、前記ろ液に更なるＰＢＤの吸光が観察されなくなるまで、前記シリカゲルケーキを、クロロホルムにおける１０％ メタノールで洗浄した。前記ろ液の濃縮により、粗製生物１２が提供された。前記材料を、最少量のジクロロメタンに溶解し、１ｍｍのｃｈｒｏｍａｔｏｔｒｏｎプレート上でのラジアルクロマトグラフィーにより精製し、ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＭｅＯＨ混合物（１００：０から８０：２０）で溶出して、１２（２５ｍｇ、３６％）を提供した。ＬＣ－ＭＳ：ｍ／ｚ（ＥＳ⁺） 実測値１５４２．９（Ｍ＋Ｈ）⁺。

【0374】

（ｂ） （２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｒ）－６－（２－（３－アミノプロパンアミド）－４－（（（（４－（（Ｓ）－７－メトキシ－８－（（５－（（（Ｓ）－７－メトキシ－２－（４－メトキシフェニル）－５－オキソ－５，１１ａ－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２－ａ］［１，４］ジアゼピン－８－イル）オキシ）ペンチル）オキシ）－５－オキソ－５，１１ａ－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２－ａ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）ベンジル）カルバモイル）オキシ）メチル）フェノキシ）－３，４，５－トリヒドロキシテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－カルボン酸（１３）
保護されているグルクロニドリンカー１２（２５ｍｇ、１６μｍｏｌ、１当量）を、メタノール（０．５ｍＬ）およびテトラヒドロフラン（０．５ｍＬ）に溶解し、０℃に冷却した。水酸化リチウム・一水和物（４ｍｇ、９６μｍｏｌ、６当量）を、水（０．５ｍＬ）に溶解し、前記反応に滴下して添加した。ついで、前記反応を室温に温め、ＬＣ－ＭＳでモニターした。２時間後に、０．４ｍＬの水における更なるＬｉＯＨ（３．２ｍｇ、７６μｍｏｌ、４．８当量）を反応に添加し、生成物への変換をさらに行った。氷酢酸（１１μＬ、１９５μｍｏｌ、１２当量）を添加し、続けて、１ｍＬのジメチルスルホキシドを添加した。ついで、揮発性の溶媒を、ロータリーエバポレーションにより除去した。粗製生物を、調製用ＨＰＬＣで精製して、脱保護されたグルクロニドリンカー１３を提供した（２ｍｇ、１１％）。ＬＣ－ＭＳ：ｔ_R １１．５４分、ｍ／ｚ（ＥＳ⁺） 実測値１１８０．０（Ｍ＋Ｈ）⁺。

【0375】

（ｃ） （２Ｓ，３Ｓ，４Ｓ，５Ｒ，６Ｓ）－６－（２－（３－（６－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロロ－１－イル）ヘキサンアミド）プロパンアミド）－４－（（（（４－（（Ｓ）－７－メトキシ－８－（（５－（（（Ｓ）－７－メトキシ－２－（４－メトキシフェニル）－５－オキソ－５，１１ａ－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２－ａ］［１，４］ジアゼピン－８－イル）オキシ）ペンチル）オキシ）－５－オキソ－５，１１ａ－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２－ａ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）ベンジル）カルバモイル）オキシ）メチル）フェノキシ）－３，４，５－トリヒドロキシテトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－カルボン酸（１４）
グルクロニドリンカー１３（２ｍｇ、１．７μｍｏｌ、１当量）、マレイミドカプロン酸 Ｎ－ヒドロキシスクシンイミドエステル（０．８ｍｇ、２．６μｍｏｌ、１．５当量）および無水ジメチルホルムアミド（８５μＬ）を、火炎乾燥させたフラスコに充填した。ジイソプロピルエチルアミン（１．５μＬ、８．５μｍｏｌ、５当量）を添加した。ついで、前記反応を、窒素下において室温で攪拌した。２時間後、ＨＰＬＣにより、生成物への変換が証明された。前記反応を、ジメチルスルホキシドに希釈し、調製用ＨＰＬＣにより精製して、ＰＢＤグルクロニドリンカー１４を提供した（１．４ｍｇ、６１％）。ＬＣ－ＭＳ：ｔ_R １２．３０分、ｍ／ｚ（ＥＳ⁺） 実測値１３７３．７（Ｍ＋Ｈ）⁺。

【0376】

実施例５

【化83】

【0377】

（ａ）（Ｓ）－８－（（５－（（（Ｓ）－２－（４－アミノフェニル）－７－メトキシ－５，１１－ジオキソ－１０－（（２－（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）－５，１０，１１，１１ａ－テトラヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２－ａ］［１，４］ジアゼピン－８－イル）オキシ）ペンチル）オキシ）－７－メトキシ－５，１１－ジオキソ－１０－（（２－（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）－５，１０，１１，１１ａ－テトラヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２－ａ］［１，４］ジアゼピン－２－イル トリフルオロメタンスルホナート（１５）
トルエン（６．５ｍＬ）、エタノール（３．２ｍＬ）および水（３．２ｍＬ）に溶解させたビストリフラート１（５００ｍｇ、４３７μｍｏｌ、１当量）を、フラスコに充填した。前記攪拌溶液に、４－アミノフェニルボロン酸ピナコールエステル（８７ｍｇ、３９８μｍｏｌ、０．９１当量）、炭酸ナトリウム（２１３ｍｇ、２．０ｍｍｏｌ、４．６当量）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（２０ｍｇ、１７．５μｍｏｌ、０．０４当量）を添加した。前記反応を、ＬＣ－ＭＳでモニターしながら、窒素下において、室温で激しく攪拌した。３時間後、前記反応は、所望の生成物へのおおよそ５０％の変換に進行していた。前記反応を濃縮し、ついで、酢酸エチル（１００ｍＬ）と水（１００ｍＬ）との間で分離した。ついで、有機層を、水（１００ｍＬ）、塩水（１００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、蒸発乾固させて、粗製のアニリントリフラート１５を提供した。フラッシュクロマトグラフィーにより、ヘキサン：酢酸エチルの混合物（６０：４０から３０：７０）で溶出して、前記粗製生物を精製して、純粋なアニリントリフラート１５を提供した（１１８ｍｇ、２５％）。ＴＬＣ：Ｒ_f＝０．４３、酢酸エチルにおける２５％ ヘキサン。ＬＣ－ＭＳ：ｔ_R ８．３０分、ｍ／ｚ（ＥＳ⁺） 実測値１０８８．２（Ｍ＋Ｈ）⁺。

【0378】

（ｂ）（Ｓ）－２－（４－アミノフェニル）－８－（（５－（（（Ｓ）－２－（４－（３－（ジメチルアミノ）プロポキシ）フェニル）－７－メトキシ－５，１１－ジオキソ－１０－（（２－（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）－５，１０，１１，１１ａ－テトラヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２－ａ］［１，４］ジアゼピン－８－イル）オキシ）ペンチル）オキシ）－７－メトキシ－１０－（（２－（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２－ａ］［１，４］ジアゼピン－５，１１（１０Ｈ，１１ａＨ）－ジオン（１６）
トルエン（０．７ｍＬ）、エタノール（２．３ｍＬ）および水（０．３ｍＬ）に溶解させたアニリントリフラート１５（１１８ｍｇ、１０９μｍｏｌ、１当量）を、フラスコに充填した。前記攪拌溶液に、４－［３－（ジメチルアミノ）プロピルオキシ］フェニルボロン酸ピナコールエステル（４３ｍｇ、１４２μｍｏｌ、１．３当量）、炭酸ナトリウム（５３ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ、４．６当量）およびテトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（５ｍｇ、４．４μｍｏｌ、０．０４当量）を添加した。前記反応を、ＬＣ－ＭＳでモニターしながら、窒素下において、室温で激しく攪拌した。４時間後、前記反応は、完了に達した。前記反応を濃縮し、ついで、酢酸エチル（２５ｍＬ）と水（２５ｍＬ）との間で分離した。水層を、酢酸エチル（２５ｍＬ）で２回抽出した。ついで、有機層を、水（５０ｍＬ）、塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、蒸発乾固させて、粗製のＳＥＭジラクタム１６を提供した。フラッシュクロマトグラフィーにより、ヘキサン：酢酸エチルの混合物（５０：５０から０：１００）で溶出して、前記粗製生物を精製して、純粋な生成物１６を提供した（７８ｍｇ、６４％）。ＴＬＣ：Ｒ_f＝０．３８、ＣＨ₂Ｃｌ₂における２０％ メタノール。ＬＣ－ＭＳ：ｍ／ｚ（ＥＳ⁺） 実測値１１１７．８（Ｍ＋Ｈ）⁺。
¹Ｈ ＮＭＲ（ｄ７－ＤＭＦ）δ（ｐｐｍ） ０．００（ｓ，１８Ｈ），０．９０（ｍ，４Ｈ），１．７４（ｍ，３Ｈ），１．９６（ｍ，６Ｈ），２．２１（ｓ，６Ｈ），２．４４（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ），３．２５（ｍ，２Ｈ），３．６２（ｍ，４Ｈ），３．８０（ｍ，２Ｈ），３．９６（ｓ，６Ｈ），４．１１（ｔ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，２Ｈ），４．２０（ｍ，３Ｈ），４．９２（ｍ，２Ｈ），５．３１（ｄｄ，Ｊ＝６，１０Ｈｚ，２Ｈ），５．４８（ｍ，４Ｈ），６．７３（ｔ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．０１（ｔ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，２Ｈ），７．２９（ｍ，３Ｈ），７．４０（ｍ，４Ｈ），７．４７（ｍ，１Ｈ），７．５６（ｔ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ）。

【0379】

（ｃ）（Ｓ）－２－（４－アミノフェニル）－８－（（５－（（（Ｓ）－２－（４－（３－（ジメチルアミノ）プロポキシ）フェニル）－７－メトキシ－５－オキソ－５，１１ａ－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２－ａ］［１，４］ジアゼピン－８－イル）オキシ）ペンチル）オキシ）－７－メトキシ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２－ａ］［１，４］ジアゼピン－５（１１ａＨ）－オン（１７）
無水テトラヒドロフラン（１．３ｍＬ）に溶解させたＳＥＭジラクタム１６（７０ｍｇ、６３μｍｏｌ、１当量）を、火炎乾燥させたフラスコに充填し、－７８℃に冷却した。リチウムトリエチルボロヒドリド（０．１３ｍＬの、ＴＨＦにおける１Ｍ溶液、１２６μｍｏｌ、２当量）を、滴下して添加した。前記反応を、窒素下において、１．５時間攪拌した。その時点で、生成物への不完全な変換が、ＬＣにより証明された。さらに、６５μＬの還元剤を添加し、前記反応を、さらに１時間攪拌した。前記反応を、水（１ｍＬ）を添加することにより停止させ、室温に温め、ついで、塩水（２５ｍＬ）で希釈し、ジクロロメタン（２５ｍＬ）で３回抽出した。前記組み合わせた有機物を、塩水（２５ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、蒸発乾固させた。ジクロロメタン（１．２ｍＬ）、エタノール（３．２ｍＬ）および水（０．５ｍＬ）の混合物に、残渣を溶解し、シリカゲル（１．６ｇ）を添加した。得られたスラリーを、室温で４日間攪拌した。ＴＬＣ分析により、イミン二量体１７への変換が証明された時点で、前記スラリーを焼成ガラスロートによりろ過し、前記ろ液に更なるＰＢＤの吸光が観察されなくなるまで、前記シリカゲルケーキを、クロロホルムにおける１０％ メタノールで洗浄した。前記ろ液の濃縮により、粗製のイミン二量体１７が提供された。前記材料を、最少量のジクロロメタンに溶解し、１ｍｍのｃｈｒｏｍａｔｏｔｒｏｎプレート上でのラジアルクロマトグラフィーにより精製し、ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＭｅＯＨ混合物（１００：０から６０：４０）で溶出して、１７（３１ｍｇ、６０％）を提供した。ＬＣ－ＭＳ：ｔ_R １１．１４分、ｍ／ｚ（ＥＳ⁺）実測値８２５．４（Ｍ＋Ｈ）⁺。

【0380】

実施例６

【化84】

Ｎ－（４－（（Ｓ）－８－（（５－（（（Ｓ）－２－（４－（３－（ジメチルアミノ）プロポキシ）フェニル）－７－メトキシ－５－オキソ－５，１１ａ－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２－ａ］［１，４］ジアゼピン－８－イル）オキシ）ペンチル）オキシ）－７－メトキシ－５－オキソ－５，１１ａ－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２－ａ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）フェニル）－６－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロロ－１－イル）－ヘキサンアミド（１８）
０．３３ｍＬの、無水ジクロロメタンにおける５％ メタノールに溶解させたマレイミドカプロン酸（５．２ｍｇ、２５μｍｏｌ、１．５当量）を、火炎乾燥させたフラスコに充填した。前記酸を、Ｎ－エトキシカルボニル－２－エトキシ－１，２－ジヒドロキノリン（７．３ｍｇ、３０μｍｏｌ、１．８当量）の添加により予め活性化させ、続けて、窒素下において、室温で１５分間攪拌した。ついで、前記活性化された酸を、ＰＢＤ二量体１７（１３．５ｍｇ、１６μｍｏｌ、１当量）を含む火炎乾燥させたフラスコに添加した。前記反応を、窒素下において、室温で４時間攪拌した。その時点で、ＬＣ－ＭＳにより生成物への変換が証明された。前記材料を、ジクロロメタンに希釈し、１ｍｍのｃｈｒｏｍａｔｏｔｒｏｎプレート上でのラジアルクロマトグラフィーにより精製し、ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＭｅＯＨ混合物（１００：０から８０：２０）で溶出して、１８（７．３ｍｇ、４４％）を提供した。ＬＣ－ＭＳ：ｔ_R ９．０９分、ｍ／ｚ（ＥＳ⁺） 実測値１０１８．３（Ｍ＋Ｈ）⁺。

【0381】

実施例７

【化85】

Ｎ－（（Ｓ）－１－（（（Ｓ）－１（（４－（（Ｓ）－８－（５－（（（Ｓ）－２－（４－（３－（ジメチルアミノ）プロポキシ）フェニル）－７－メトキシ－５－オキソ－５，１１ａ－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２－ａ］［１，４］ジアゼピン－８－イル）オキシ）ペンチル）オキシ）－７－メトキシ－５－オキソ－５，１１ａ－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２－ａ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）フェニル）アミノ）－１－オキソプロパン－２－イル）アミノ）－３－メチル－１－オキソブタン－２－イル）－６－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロロ－１－イル）ヘキサンアミド（１９）
０．３３ｍＬの、無水ジクロロメタンにおける５％ メタノールに溶解させた、マレイミドカプロイル－バリン－アラニンリンカー（国際公開第２０１１／１３０６１３号パンフレットの実施例１３における化合物３６）（９ｍｇ、２４μｍｏｌ、１．５当量）を、火炎乾燥させたフラスコに充填した。前記酸を、Ｎ－エトキシカルボニル－２－エトキシ－１，２－ジヒドロキノリン（７．１ｍｇ、２９μｍｏｌ、１．８当量）の添加により予め活性化させ、続けて、窒素下において、室温で１５分間攪拌した。ついで、前記活性化された酸を、ＰＢＤ二量体１７（１３ｍｇ、１６μｍｏｌ、１当量）を含む火炎乾燥させたフラスコに添加した。前記反応を、窒素下において、室温で７時間攪拌した。その時点で、ＬＣ－ＭＳにより生成物への変換が証明された。前記材料を、ジクロロメタンに希釈し、１ｍｍのｃｈｒｏｍａｔｏｔｒｏｎプレート上でのラジアルクロマトグラフィーにより精製し、ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＭｅＯＨ混合物（１００：０から８０：２０）で溶出して、１９（５．１ｍｇ、２７％）を提供した。ＬＣ－ＭＳ：ｔ_R ９．０９分、ｍ／ｚ（ＥＳ⁺） 実測値１１８８．４（Ｍ＋Ｈ）⁺。

【0382】

実施例８

【化86】

【0383】

（ａ）２－（４－（２，５，８，１１－テトラオキサトリデカン－１３－イルオキシ）フェニル）－４，４，５，５－テトラメチル－１，３，２－ジオキサボロラン（２１）
４－ヒドロキシフェニルボロン酸ピナコールエステル（８８０ｍｇ、４ｍｍｏｌ）、ブロモメチルテトラエチレングリコール（１．６ｇ、６ｍｍｏｌ）およびＤＭＦ（１０ｍＬ）の混合物に、Ｃｓ₂ＣＯ₃（１．５ｇ；８ｍｍｏｌ）を添加した。前記反応混合物を、約６５時間攪拌し、酢酸エチル（１００ｍＬ）に注いだ。前記混合物を、０．１Ｎ ＨＣｌ（２００ｍＬ）、水（３×１００ｍＬ）および塩水（５０ｍＬ）で洗浄した。有機相を、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させ、静かに移して濃縮することにより、褐色のオイルを取得した。前記オイルを、ヘキサンにおける５０％ 酢酸エチル、続けて、１００％ 酢酸エチルで溶出して、２ｍｍのラジアルｃｈｒｏｍａｔｏｔｒｏｎプレートにおいて精製して、１．２１ｇ（７４％）を取得した。
ＮＭＲ（ｄ６－ＤＭＳＯ，４００ＭＨｚ）□ ７．５９（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ），６．９３（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ），４．１１（ｔ，Ｊ＝４．７Ｈｚ，２Ｈ），３．７３（ｍ，２Ｈ），３．６０－３．４５（ｍ，１４Ｈ），３．４１（ｍ，２Ｈ），３．２３（ｓ，３Ｈ），１．２７（ｓ，１２Ｈ）；
ＬＣ－ＭＳ：ｍ／ｚ（ＥＳ⁺） 実測値４３３．６４（Ｍ＋Ｎａ）⁺。

【0384】

（ｂ）（Ｒ）－２－（４－（２，５，８，１１－テトラオキサトリデカン－１３－イルオキシ）フェニル）－８－（（５－（（（Ｒ）－２－（４－アミノフェニル）－７－メトキシ－５，１１－ジオキソ－１０－（（２－（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）－５，１０，１１，１１ａ－テトラヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２－ａ］［１，４］ジアゼピン－８－イル）オキシ）ペンチル）オキシ）－７－メトキシ－１０－（（２－（トリメチルシリル）エトキシ）メチル）－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２－ａ］［１，４］ジアゼピン－５，１１（１０Ｈ，１１ａＨ）－ジオン（２２）
トルエン（２ｍＬ）およびエタノール（１ｍＬ）の混合物における、モノトリフラート１５（２００ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）およびＴＥＧボロン酸エステル（１１１ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）の混合物に、２Ｍ Ｎａ₂ＣＯ₃（０．５ｍＬ）およびテトラキスＰｄ（６ｍｇ、０．０５４ｍｍｏｌ）を添加した。室温で３時間攪拌した後、前記反応混合物を、酢酸エチルに注ぎ、水（３×５０ｍＬ）および塩水（５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させた。前記溶液を静かに移し、濃縮し、ついで、ジクロロメタンにおける５％ メタノールで溶出する、２ｍｍのラジアルｃｈｒｏｍａｔｏｔｒｏｎプレートにおいて精製した。これにより、黄色の固形物として、２０７ｍｇ（９４％）を取得した。
¹Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃，４００ＭＨｚ）□ ７．３９－７．３４（ｍ，７Ｈ），７．２６（ｍ，２Ｈ），６．８９（ｄ，Ｊ＝９．０Ｈｚ，２Ｈ），６．６６（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，２Ｈ），４．７０（ｄｄ，Ｊ＝１０．２，２．０Ｈｚ，２Ｈ），４．１８－４．０３（ｍ，８Ｈ），３．９３（ｓ，３Ｈ），３．９０－３．６２（ｍ，２１Ｈ），３．５５（ｄｄ，Ｊ＝５．１，３．２Ｈｚ，２Ｈ）３．３８（ｓ，３Ｈ），３．１２（ｐｅｎｔ，Ｊ＝５．０Ｈ，２Ｈ），２．０５（ｍ，６Ｈ），１．７２（ｍ，２Ｈ），１．０（ｍ，４Ｈ），０．３（ｓ，１８Ｈ）；
ＬＣ－ＭＳ：ｍ／ｚ（ＥＳ＋）実測値１２２２．９８（Ｍ＋Ｈ）⁺。

【0385】

（ｃ）（Ｒ）－２－（４－（２，５，８，１１－テトラオキサトリデカン－１３－イルオキシ）フェニル）－８－（（５－（（（Ｒ）－２－（４－アミノフェニル）－７－メトキシ－５－オキソ－５，１１ａ－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２－ａ］［１，４］ジアゼピン－８－イル）オキシ）ペンチル）オキシ）－７－メトキシ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２－ａ］［１，４］ジアゼピン－５（１１ａＨ）－オン（２３）
－７８℃でのＴＨＦ（１０ｍＬ）における前記ＳＥＭジラクタム（２０７ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）の混合物に、スーパーヒドリド（ＴＨＦにおける１Ｎ溶液としてのＬｉＨＢＥｔ₄、０．３４ｍＬ、０．３４ｍｍｏｌ）を添加した。前記反応混合物を、おおよそ２時間攪拌した。その時点で、前記反応混合物のＬＣ－ＭＳ分析により、一還元された材料が未だに存在する状態で、完全に還元されたＳＥＭ－カルビノールアミン中間体への、おおよそ５０％の変換が証明された。さらに一定量のスーパーヒドリド（０．３４ｍＬ、０．３４ｍｍｏｌ）を添加し、前記反応を、－７８℃で更に１時間攪拌した。ＬＣ－ＭＳ検査により、前記反応が、未だに完全に進行していなかったことが証明された。このため、３回目の一定量のスーパーヒドリド（０．３４ｍＬ、０．３４ｍｍｏｌ）を添加し、前記反応混合物を、－８０℃の冷凍庫に、１６時間置いた。ついで、前記反応混合物を、水（５ｍＬ）で反応を停止させ、大気温度に温め、酢酸エチル（１００ｍＬ）に注いだ。塩水での洗浄後、前記混合物を、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させた。有機相を静かに移し、減圧下で濃縮し、ついで、エタノール（１４ｍＬ）、ジクロロメタン（５ｍＬ）、水（７ｍＬ）およびシリカゲル（５ｇ）の混合物で、７２時間処理した。前記混合物を、フリットガラスロートを通してろ過し、前記溶液を減圧下で濃縮する前に、ジクロロメタンにおける１０％ メタノールで、複数回洗浄した。前記混合物を、ジクロロメタンにおける５％ メタノールで溶出する、２ｍｍのラジアルｃｈｒｏｍａｔｏｔｒｏｎプレートにおいて精製して、４６ｍｇ（２９％）を取得した。ＬＣ－ＭＳ：ｍ／ｚ （ＥＳ＋） 実測値９３０．８５（Ｍ＋Ｈ）⁺。

【0386】

（ｄ）Ｎ－（（Ｓ）－１－（（（Ｓ）－１－（（４－（（Ｒ）－８－（（５－（（（Ｒ）－２－（４－（２，５，８，１１－テトラオキサトリデカン－１３－イルオキシ）フェニル）－７－メトキシ－５－オキソ－５，１１ａ－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２－ａ］［１，４］ジアゼピン－８－イル）オキシ）ペンチル）オキシ）－７－メトキシ－５－オキソ－５，１１ａ－ジヒドロ－１Ｈ－ベンゾ［ｅ］ピロロ［１，２－ａ］［１，４］ジアゼピン－２－イル）フェニル）アミノ）－１－オキソプロパン－２－イル）アミノ）－３－メチル－１－オキソブタン－２－イル）－６－（２，５－ジオキソ－２，５－ジヒドロ－１Ｈ－ピロール－１－イル）ヘキサンアミド（２４）
０℃でのジクロロメタンでの５％ メタノール（１ｍＬ）におけるｍｃ－ｖａｌ－ａｌａ－ＯＨ（５０ｍｇ、０．１２９ｍｍｏｌ）の混合物に、ＥＥＤＱ（３２ｍｇ、０．１２９ｍｍｏｌ）を添加した。前記混合物を、１５分間攪拌し、ついで、ジクロロメタンにおける５％ メタノール（１ｍＬ）における、前記アニリン（４４ｍｇ、０．０４４ｍｍｏｌ）の溶液を添加した。前記反応混合物を、３時間攪拌し、ジクロロメタン（２ｍＬ）で希釈し、２ｍｍのラジアルｃｈｒｏｍａｔｏｔｒｏｎプレート上に直接吸引させた。生成物を、ジクロロメタンにおける、２．５％から５％ メタノールの勾配で溶出して、２２．５ｍｇ（４０％）を取得した：ＬＣ－ＭＳ：ｍ／ｚ（ＥＳ⁺） 実測値１２９４（Ｍ＋Ｈ）⁺。

【0387】

実施例９－ＰＢＤ二量体コンジュゲートの調製
導入されたシステインを含む抗体：重鎖の２３９位にシステイン残基を含むＣＤ７０に対する抗体を、１０当量のＴＣＥＰおよび１ｍＭ ＥＤＴＡを添加し、１Ｍ Ｔｒｉｓバッファー（ｐＨ９．０）でｐＨを７．４に調節することにより、完全に還元させた。３７℃で１時間インキュベートした後、前記反応を２２℃に冷却し、３０当量のデヒドロアスコルビン酸を添加して、前記還元状態におけるシステイン２３９を遊離させながら、選択的に、元のジスルフィドを再度酸化させた。前記ｐＨを、１Ｍ Ｔｒｉｓバッファー（ｐＨ３．７）で６．５に調節し、前記反応を、２２℃で１時間進行させた。ついで、前記溶液のｐＨを、１Ｍ Ｔｒｉｓバッファー（ｐＨ９．０）を添加することにより、再度７．４に上昇させた。ＤＭＳＯにおける３．５当量の前記ＰＢＤドラッグリンカーを、前記反応に添加する前に、プロピレングリコールで希釈するために、適切な容器に入れた。前記ＰＢＤドラッグリンカーの溶解性を維持するために、まず、前記抗体自体を、プロピレングリコールで、３３％の最終濃度に希釈した（例えば、前記抗体の溶液を、６０ｍＬの反応容量とし、３０ｍＬのプロピレングリコールを添加した。）。ついで、この同じ容量のプロピレングリコール（この実施例では、３０ｍＬ）を、希釈剤として、前記ＰＢＤドラッグリンカーに添加した。混合後、プロピレングリコールにおける前記ＰＢＤドラッグリンカーの溶液を、前記コンジュゲートを生じさせるために、前記抗体の溶液に添加した。プロピレングリコールの最終濃度は、５０％である。前記反応を３０分間進行させ、ついで、５当量のＮ－アセチルシステインの添加により停止させた。ついで、前記ＡＤＣを、３０ｋＤのメンブレンを通す限外ろ過により精製した（前記反応に使用されるプロピレングリコールの濃度は、その唯一の目的が、水性媒体における前記ドラッグリンカーの溶解性を維持することである場合、任意の具体的なＰＢＤに対して低下させ得ることに留意すべきである。）。

【0388】

実施例１０－選択されたコンジュゲートのｉｎ ｖｉｔｒｏ活性の決定
選択された抗体ドラッグコンジュゲートのｉｎ ｖｉｔｒｏ細胞毒活性を、レザズリン（Ｓｉｇｍａ、Ｓｔ． Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ、ＵＳＡ）還元アッセイ（参考文献：Ｄｏｒｏｎｉｎａ ｅｔ ａｌ．， Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ， ２００３， ２１， ７７８－７８４）を使用して評価した。前記抗体ドラッグコンジュゲートを、上記のように調製した。

【0389】

前記９６時間アッセイに関して、対数増殖期の培養細胞を、２０％ ＦＢＳを添加した、１５０μＬのＲＰＭＩ１６４０を含む、９６ウェルプレートにおいて、２４時間播種した。細胞培養培地における段階希釈のＡＤＣを、４×作業濃度で調製した。５０μＬの各希釈を、前記９６ウェルプレートに添加した。ＡＤＣの添加後、前記細胞を、試験物と、３７℃で４日間培養した。ついで、レザズリンを、５０μＭの最終濃度を達成するように、各ウェルに添加した。前記プレートを、３７℃で４時間、さらにインキュベートした。ついで、前記プレートを、Ｆｕｓｉｏｎ ＨＴプレートリーダー（Ｐａｃｋａｒｄ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、Ｍｅｒｉｄｉｅｎ、ＣＴ、ＵＳＡ）において、それぞれ、５３０および５９０ｎｍの励起および発光の波長により、染料の減少の程度に関して読み取った。ここでは、３回反復で決定されたＩＣ₅₀値を、未処理コントロールと比較して、細胞増殖における５０％減少をもたらす濃度と規定する。

【0390】

以下の表を参照して、９６時間アッセイを使用したＡＤＣのｉｎ ｖｉｔｒｏ細胞毒性を示す。前記ＡＤＣを、抗原陽性および抗原陰性の細胞株に対して試験した。ｈ１Ｆ６は、以下に記載のヒト化抗ＣＤ７０抗体である。

【0391】

Ｉｎ Ｖｉｔｒｏ活性

【0392】

【表2】

【0393】

【表3】

【0394】

【表4】

【0395】

実施例１１：選択されたコンジュゲートのＩｎ Ｖｉｖｏ細胞毒性の決定
全ての研究を、実験動物管理公認協会により完全に認定された施設において、動物実験委員会に基づいて行った。まず、前記コンジュゲートが異種移植実験用に選択された用量で許容されることを確認するために、ＡＤＣ耐容性を評価した。ＢＡＬＢ／ｃマウスを、０．５Ｍ アルギニンおよび０．０１％ Ｔｗｅｅｎ２０を含むＰＢＳに配合されたＡＤＣで、濃度を向上させて処理した。処置後の体重減少および罹患の表面上のサインに関して、マウスをモニターした。２０％より大きい体重減少を経験したもの、または、罹患のサインを示したものは、安楽死させた。前記使用した抗体は、２３９位でセリンに対する点変異置換システインを有する、ＣＤ７０抗体、ヒト化ｈ１Ｆ６ ＩｇＧ１（その全体が、全ての目的に関して、参照により取り込まれる、国際公開第２００６／１１３９０９号パンフレット）とした。前記ドラッグユニットへのコンジュゲートは、２３９位における導入されたシステインによる。平均２つのドラッグを、抗体あたりに充填した。
ｉｎ ｖｉｖｏにおける治療実験を、ＣＤ７０＋腎細胞ガン腫を有するマウスにおける異種移植モデルにおいて行った。腫瘍（Ｃａｋｉ－１）フラグメントを、ヌードマウスの右わき腹に移植した。マウスを、各群が平均１００ｍｍ³付近を有する研究群（ｎ＝５（７８６－０））にランダム化した。前記ＡＤＣまたはコントロールを、示した投与計画に基づいて投与した。時間関数としての腫瘍体積を、式（Ｌ×Ｗ²）／２を使用して決定した。腫瘍体積が１０００ｍｍ³に達した時点で、動物を安楽死させた。移植後１００日付近で、持続的退行を示すマウスを終了させた。

【0396】

図１を参照して、ＣＤ７０＋腎細胞ガン腫モデルにおけるｈ１Ｆ６－化合物１８およびｈ１Ｆ６－化合物１９のコンジュゲートを使用した、処理研究の結果を示す。投与を、ｑ７ｄ×２で行った。前記図において、×は未処理であり、黒四角は０．１ｍｇ／ｋｇでのｈ１Ｆ６３ｃ－１８による処理であり、白四角は、０．３ｍｇ／ｋｇでのｈ１Ｆ６３ｃ－１８による処理であり、黒三角は、１ｍｇ／ｋｇでのｈ１Ｆ６３ｃ－１９による処理であり、白三角は、３ｍｇ／ｋｇでのｈ１Ｆ６３ｃ－１９による処理である。

【0397】

ｈ１Ｆ６－化合物６コンジュゲートによるマウス耐容性実験の結果は、１ｍｇ／ｋｇのＡＤＣの１回投与が、３０日以上で体重減少または罹患を示さないことにより、十分に耐用性があることが証明された。

【図1】