特許 7151763 自動試料導入装置、クロマトグラフ、自動試料導入方法および分析方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2022-10-03

(45)【発行日】2022-10-12

(54)【発明の名称】自動試料導入装置、クロマトグラフ、自動試料導入方法および分析方法

(51)【国際特許分類】

   G01N 30/24 20060101AFI20221004BHJP

   G01N 30/06 20060101ALI20221004BHJP

   G01N 30/18 20060101ALI20221004BHJP

   G01N 35/10 20060101ALI20221004BHJP

【ＦＩ】

G01N30/24 E

G01N30/06 E

G01N30/18 E

G01N35/10 K

【請求項の数】 9

(21)【出願番号】P 2020521668

(86)(22)【出願日】2018-05-28

(86)【国際出願番号】 JP2018020411

(87)【国際公開番号】W WO2019229819

(87)【国際公開日】2019-12-05

【審査請求日】2020-11-11

(73)【特許権者】

【識別番号】000001993

【氏名又は名称】株式会社島津製作所

(74)【代理人】

【識別番号】100108523

【弁理士】

【氏名又は名称】中川 雅博

(74)【代理人】

【識別番号】100098305

【弁理士】

【氏名又は名称】福島 祥人

(74)【代理人】

【識別番号】100125704

【弁理士】

【氏名又は名称】坂根 剛

(74)【代理人】

【識別番号】100187931

【弁理士】

【氏名又は名称】澤村 英幸

(72)【発明者】

【氏名】井上 隆志

(72)【発明者】

【氏名】大垣内 誠

【審査官】高田 亜希

(56)【参考文献】

【文献】特開２００８－２６４６４０（ＪＰ，Ａ）

【文献】米国特許第０３７３８５３５（ＵＳ，Ａ）

【文献】特開２００６－２４２７２０（ＪＰ，Ａ）

【文献】特表２０１０－５３８８２７（ＪＰ，Ａ）

【文献】特開２００８－２５６５４０（ＪＰ，Ａ）

【文献】特開昭６３－０７１６５０（ＪＰ，Ａ）

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

Ｇ０１Ｎ ３０／００ －３０／９６

Ｂ０１Ｊ ２０／２８１－２０／２９２

Ｂ０１Ｆ ５／００

Ｇ０１Ｎ ３５／００ －３７／００

Ｂ０５Ｃ １７／００５

ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

ニードルと、
サンプルループと、
前記ニードルと前記サンプルループとの間に設けられたミキサと、
前記ニードルおよび前記ミキサを通して第１および第２の流体を順次前記サンプルループ内に吸引し、前記サンプルループ内に保持された前記第１および第２の流体を前記ミキサおよび前記ニードルを通して所定の注入ポートに注入する吸引注入切替機構とを備えた、自動試料導入装置。

【請求項2】

前記ニードルは、前記第１および第２の流体に挿入される先端部および前記サンプルループに連通する基端部を有し、
前記ミキサは前記ニードルの基端部に設けられ、
前記自動試料導入装置は、
前記ミキサを前記ニードルとともに移動させる移動機構をさらに備え、
前記移動機構は、前記ニードルの先端部が前記第１の流体に挿入されるように前記ニードルを前記ミキサとともに移動させ、前記ニードルの先端部が前記第２の流体に挿入されるように前記ニードルを前記ミキサとともに移動させ、前記ニードルの先端部が前記注入ポートに位置するように前記ニードルを前記ミキサとともに移動させる、請求項１記載の自動試料導入装置。

【請求項3】

前記ミキサはマイクロリアクタを含み、前記マイクロリアクタは、第１のポートと、第２のポートと、前記第１のポートと前記第２のポートとを連通させる微細管状流路とを含み、前記微細管状流路は複数の箇所で分岐するとともに複数の箇所で結合するように構成された、請求項１または２記載の自動試料導入装置。

【請求項4】

前記第１および第２の流体の一方は試料を含み、前記第１および第２の流体の他方は反応液を含む、請求項１～３のいずれか一項に記載の自動試料導入装置。

【請求項5】

請求項１～４のいずれか一項に記載の自動試料導入装置と、
前記注入ポートに接続された分析カラムと、
前記分析カラムを通過した前記第１および第２の流体の成分を検出する検出器とを備えた、クロマトグラフ。

【請求項6】

ニードルおよびミキサを通してサンプルループ内に第１の流体を吸引するステップと、
前記ニードルおよび前記ミキサを通して前記サンプルループ内に第２の流体を吸引することにより前記第１および第２の流体を混合するステップと、
前記サンプルループ内に保持された前記第１および第２の流体を前記ミキサおよび前記ニードルを通して所定の注入ポートに注入するステップとを含む、自動試料導入方法。

【請求項7】

前記ニードルは、前記第１および第２の流体に挿入される先端部および前記サンプルループに連通する基端部を有し、前記ミキサは前記ニードルの基端部に設けられ、
前記第１の流体を吸引する前に、移動機構により前記ニードルの先端部が前記第１の流体に挿入されるように前記ニードルを前記ミキサとともに移動させるステップと、
前記第２の流体を吸引する前に、前記移動機構により前記ニードルの先端部が前記第２の流体に挿入されるように前記ニードルを前記ミキサとともに移動させるステップと、
前記第１および第２の流体が前記注入ポートに注入される前に、前記ニードルの先端部が前記注入ポートに位置するように前記移動機構により前記ニードルを前記ミキサとともに移動させるステップとをさらに含む、請求項６記載の自動試料導入方法。

【請求項8】

前記ミキサはマイクロリアクタを含み、前記マイクロリアクタは、第１のポートと、第２のポートと、前記第１のポートと前記第２のポートとを連通させる微細管状流路とを含み、前記微細管状流路は複数の箇所で分岐するとともに複数の箇所で結合するように構成され、
前記第１の流体を吸引するステップは、前記第１の流体を前記ニードル、前記第１のポート、前記微細管状流路および前記第２のポートを通して前記サンプルループ内に吸引することを含み、
前記第２の流体を吸引するステップは、前記第２の流体を前記ニードル、前記第１のポート、前記微細管状流路および前記第２のポートを通して前記サンプルループ内に吸引することを含み、
前記第１および第２の流体を前記注入ポートに注入するステップは、前記サンプルループ内に保持された前記第１および第２の流体を前記第２のポート、前記微細管状流路、前記第１のポートおよび前記ニードルを通して前記注入ポートに注入することを含む、請求項６または７記載の自動試料導入方法。

【請求項9】

請求項６～８のいずれか一項に記載の自動試料導入方法を実行するステップと、
前記注入ポートに注入された前記第１および第２の流体を分析カラムに導くステップと、
前記分析カラムを通過した前記第１および第２の流体の成分を検出器により検出するステップとを備えた、クロマトグラフィによる分析方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、自動試料導入装置、それを備えたクロマトグラフ、自動試料導入方法、およびそれを用いたクロマトグラフィによる分析方法に関する。

【背景技術】

【0002】

例えば、液体クロマトグラフの試料注入口（注入ポート）に試料を自動的に注入する自動試料導入装置が用いられる。自動試料導入装置は、試料注入装置またはオートサンプラとも呼ばれる。特許文献１には、全量注入方式の自動試料導入装置が記載されている。

【文献】特開２００６－２４２７２０号公報

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0003】

自動試料導入装置により試料、希釈溶媒および誘導体化試薬等がサンプルループに吸引される。サンプルループ内の試料、希釈溶媒および誘導体化試薬等は液体クロマトグラフの注入ポートに注入される。この場合、試料、希釈溶媒および誘導体化試薬等が十分に混合されないと、分析結果の再現性が低下し、または試料の誘導体化が不十分となる。

【0004】

特許文献１に記載された自動試料導入装置では、試料を収容する試料瓶（以下、第１の瓶と呼ぶ。）、試薬を収容する試料瓶（以下、第２の瓶と呼ぶ。）および空の試料瓶（以下、第３の瓶と呼ぶ。）が用意される。第１の瓶内の試料がニードルを通してサンプルループに吸引された後、吸引された試料が第３の瓶に注入される。その後、第２の瓶内の試薬がニードルを通してサンプルループに吸引された後、吸引された試薬が第３の瓶に吐出される。それにより、第３の瓶内で試料と試薬とが混合される。第３の瓶内の混合された試料および試薬がニードルを通してサンプルループに吸引される。ニードルが注入ポートの上方に移動し、サンプルループ内の混合された試料および試薬がニードルを通して注入ポートに注入される。

【0005】

上記の方法では、空の第３の瓶を用いて試料と試薬とを混合する工程が必要であるため、複数の流体を混合して注入ポートに注入するために時間がかかる。

【0006】

本発明の目的は、少ない工程数で複数の流体を十分に混合して注入ポートに注入することが可能な自動試料導入装置、クロマトグラフ、自動試料導入方法およびクロマトグラフィによる分析方法を提供することである。

【課題を解決するための手段】

【0007】

本発明の一局面に従う自動試料導入装置は、ニードルと、サンプルループと、ニードルとサンプルループとの間に設けられたミキサと、ニードルおよびミキサを通して第１および第２の流体を順次サンプルループ内に吸引し、サンプルループ内に保持された第１および第２の流体をミキサおよびニードルを通して所定の注入ポートに注入する吸引注入切替機構とを備える。

【0008】

その自動試料導入装置においては、ニードルおよびミキサを通して第１の流体がサンプルループ内に吸引される。この場合、第１の流体の一部がミキサ内に残留する。次に、ニードルおよびミキサを通して第２の流体がサンプルループ内に吸引される。このとき、第２の流体がミキサを通過する際にミキサ内に残留する第１の流体と混合される。したがって、サンプルループ内に混合された第１および第２の流体が保持される。その後、サンプルループ内の第１および第２の流体がミキサおよびニードルを通して注入ポートに注入される。このとき、第１および第２の流体がミキサ内で再度十分に混合される。したがって、予め第１の流体と第２の流体とを混合する工程が不要となる。その結果、少ない工程数で複数の流体を十分に混合して注入ポートに注入することが可能となる。

【0009】

ニードルは、第１および第２の流体に挿入される先端部およびサンプルループに連通する基端部を有し、ミキサはニードルの基端部に設けられ、自動試料導入装置は、ミキサをニードルとともに移動させる移動機構をさらに備え、移動機構は、ニードルの先端部が第１の流体に挿入されるようにニードルをミキサとともに移動させ、ニードルの先端部が第２の流体に挿入されるようにニードルをミキサとともに移動させ、ニードルの先端部が注入ポートに位置するようにニードルをミキサとともに移動させてもよい。

【0010】

この場合、ミキサはニードルとともに移動するので、ニードルとミキサとの間に流路を設ける必要がなく、またはニードルとミキサとの間の流路を短くすることが可能となる。したがって、第２の流体の吸引後に、ミキサを通過せずにニードル内および流路内に残留する第２の流体の量を低減することが可能となる。

【0011】

ミキサはマイクロリアクタを含み、マイクロリアクタは、第１のポートと、第２のポートと、第１のポートと第２のポートとを連通させる微細管状流路とを含み、微細管状流路は複数の箇所で分岐するとともに複数の箇所で結合するように構成されてもよい。この場合、ミキサを小型化することが可能であるとともに、第１および第２の流体をミキサ内で十分に混合することが可能となる。

【0012】

第１および第２の流体の一方は試料を含み、第１および第２の流体の他方は反応液を含んでもよい。この場合、試料および反応液の吸引時および注入時に試料と反応液とを十分に混合することができる。

【0013】

本発明の他の局面に従うクロマトグラフは、上記の自動試料導入装置と、注入ポートに接続された分析カラムと、分析カラムを通過した第１および第２の流体の成分を検出する検出器とを備える。

【0014】

そのクロマトグラフにおいては、自動試料導入装置により少ない工程数で複数の流体を十分に混合して注入ポートに注入することが可能となる。したがって、クラマトグラフィによる分析結果の再現性が向上する。

【0015】

本発明のさらに他の局面に従う自動試料導入方法は、ニードルおよびミキサを通してサンプルループ内に第１の流体を吸引するステップと、ニードルおよびミキサを通してサンプルループ内に第２の流体を吸引することにより第１および第２の流体を混合するステップと、サンプルループ内に保持された第１および第２の流体をミキサおよびニードルを通して所定の注入ポートに注入するステップとを含む。

【0016】

その自動試料導入方法によれば、第１および第２の流体の吸引時および第１および第２の流体の注入時に第１および第２の流体がミキサを通過する。その結果、少ない工程数で複数の流体を十分に混合して注入ポートに注入することが可能となる。

【0017】

ニードルは、第１および第２の流体に挿入される先端部およびサンプルループに連通する基端部を有し、ミキサはニードルの基端部に設けられ、自動試料導入方法は、第１の流体を吸引する前に、移動機構によりニードルの先端部が第１の流体に挿入されるようにニードルをミキサとともに移動させるステップと、第２の流体を吸引する前に、移動機構によりニードルの先端部が第２の流体に挿入されるようにニードルをミキサとともに移動させるステップと、第１および第２の流体が注入ポートに注入される前に、ニードルの先端部が注入ポートに位置するように移動機構によりニードルをミキサとともに移動させるステップとをさらに含んでもよい。

【0018】

この場合、ミキサを通過せずにニードル内および流路内に残留する第２の流体の量を低減することが可能となる。

【0019】

ミキサはマイクロリアクタを含み、マイクロリアクタは、第１のポートと、第２のポートと、第１のポートと第２のポートとを連通させる微細管状流路とを含み、微細管状流路は複数の箇所で分岐するとともに複数の箇所で結合するように構成され、第１の流体を吸引するステップは、第１の流体をニードル、第１のポート、微細管状流路および第２のポートを通してサンプルループ内に吸引することを含み、第２の流体を吸引するステップは、第２の流体をニードル、第１のポート、微細管状流路および第２のポートを通してサンプルループ内に吸引することを含み、第１および第２の流体を所定の注入ポートに注入するステップは、サンプルループ内に保持された第１および第２の流体を第２のポート、微細管状流路、第１のポートおよびニードルを通して注入ポートに注入することを含んでもよい。

【0020】

この場合、ミキサを小型化することが可能であるとともに、第１および第２の流体をミキサ内で十分に混合することが可能である。

【0021】

本発明のさらに他の局面に従うガスクロマトグラフィによる分析方法は、上記の自動試料導入方法を実行することにより第１および第２の流体を分析カラムに導くステップと、分析カラムを通過した第１および第２の流体の成分を検出器により検出するステップとを備える。

【0022】

その分析方法によれば、少ない工程数で複数の流体を十分に混合して注入ポートに注入することが可能となる。したがって、クラマトグラフィによる分析結果の再現性が向上する。

【発明の効果】

【0023】

本発明によれば、少ない工程数で複数の流体を十分に混合して注入ポートに注入することが可能となる。

【図面の簡単な説明】

【0024】

【図1】図１は本発明の一実施の形態に係るクロマトグラフの構成および試料吸引動作を示す模式図である。

【図2】図２は図１のクロマトグラフにおける試料注入動作を示す模式図である。

【図3】図３は主として図１および図２の自動試料導入装置の動作を示すフローチャートである。

【図4】図４は主として図１および図２の自動試料導入装置の動作を示すフローチャートである。

【発明を実施するための形態】

【0025】

以下、本発明の実施の形態に係る自動試料導入装置、それを備えたクロマトグラフ、自動試料導入方法、およびそれを用いた分析方法について図面を参照しながら詳細に説明する。

【0026】

（１）クロマトグラフの構成
図１は本発明の一実施の形態に係るクロマトグラフの構成および試料吸引動作を示す模式図である。図２は図１のクロマトグラフにおける試料注入動作を示す模式図である。

【0027】

図１のクロマトグラフ１００は、液体クロマトグラフであり、自動試料導入装置１、分析カラム２、検出器３、脱気ユニット２０、洗浄液ボトル２１、移動相貯留槽４１ａ，４１ｂ、脱気ユニット４２、送液ポンプ４３ａ，４３ｂ、ミキサ４４および制御装置５を備える。自動試料導入装置１は、ニードル１１、ミキサ１２、移動機構１３およびサンプルループ１４を含む。また、自動試料導入装置１は、高圧バルブ１５、注入ポート１６、洗浄ポート１７、計量ポンプ１８、低圧バルブ１９を含む。

【0028】

サンプルラック３０には、複数の試料容器３１，３２，３３が載置される。本実施の形態では、試料容器３１に液体の試料（実試料）が収容され、試料容器３２に誘導体化試薬等の反応液が収容され、試料容器３３は希釈用の緩衝液または希釈用の有機溶媒等が収容される。試料が例えばアミノ酸を含む場合には、誘導体化試薬として例えばＯＰＡ（オルトフタルアルデヒド）が用いられる。本実施の形態では、試料が第１の流体に相当し、反応液が第２の流体に相当する。複数の試料容器３１，３２，３３は例えばバイアルである。

【0029】

ニードル１１の基端部（上端部）には小型のミキサ１２が取り付けられている。ニードル１１は、ミキサ１２とともに、移動機構１３により水平方向および垂直方向に移動可能に設けられる。ミキサ１２は、例えばマイクロリアクタにより構成される低容量のマイクロミキサである。

【0030】

ミキサ１２は、第１のポートｐ１および第２のポートｐ２を有する。第１のポートｐ１と第２のポートｐ２との間には、複数の微細管状流路が形成される。複数の微細管状流路は複数の箇所で分岐するとともに複数の箇所で結合するように構成されている。ミキサ１２の第１のポートｐ１はニードル１１に連通し、第２のポートｐ２はサンプルループ１４に連通する。

【0031】

高圧バルブ１５は、複数のポートａ～ｆを有するロータリ式バルブである。この高圧バルブ１５は、ロード状態とインジェクション状態とに切り替えられる。ロード状態では、図１に太い実線で示されるように、ポートａ，ｂが連通し、ポートｃ，ｄが連通し、ポートｅ，ｆが連通する。インジェクション状態では、図２に太い実線で示すように、ポートｂ，ｃが連通し、ポートｄ，ｅが連通し、ポートｆ，ａが連通する。

【0032】

サンプルループ１４の他端は高圧バルブ１５のポートａに接続されている。注入ポート１６は高圧バルブ１５のポートｄに接続されている。高圧バルブ１５のポートｃはドレインバルブ２２に接続されている。

【0033】

低圧バルブ１９は、複数のポートｇ～ｍを有するロータリ式バルブである。高圧バルブ１５のポートｂは低圧バルブ１９のポートｈに接続されている。洗浄ポート１７は低圧バルブ１９のポートｉに接続されている。

【0034】

計量ポンプ１８は、例えば２つの吸引・吐出口を有するシリンジポンプである。計量ポンプ１８の一方の吸引・吐出口は低圧バルブ１９のポートｇに接続されている。計量ポンプ１８の他方の吸引・吐出口は低圧バルブ１９のポートｍに接続されている。洗浄液ボトル２１は脱気ユニット２０を通して低圧バルブ１９のポートｋに接続されている。

【0035】

移動相貯留槽４１ａ，４１ｂには、それぞれ異なる種類の移動相溶媒が貯留される。ミキサ４４は、２つの入力ポートおよび１つの出力ポートを有する。移動相貯留槽４１ａ，４１ｂは、脱気ユニット４２および送液ポンプ４３ａ，４３ｂを通してミキサ４４の一方および他方の入力ポートにそれぞれ接続されている。ミキサ４４の出力ポートは、高圧バルブ１５のポートｆに接続されている。

【0036】

高圧バルブ１５のポートｅは分析カラム２に接続され、分析カラム２には検出器３が接続されている。検出器３は、分析カラム２に供給された試料の成分を検出する。制御装置５は、ＣＰＵ（中央演算処理装置）、ＲＡＭ（ランダムアクセスメモリ）、ＲＯＭ（リードオンリメモリ）および記憶装置等を含むコンピュータである。この制御装置５は、自動試料導入装置１の移動機構１３および計量ポンプ１８の動作、高圧バルブ１５および低圧バルブ１９の切り替え、ならびに検出器３の動作を制御する。本実施の形態では、高圧バルブ１５、計量ポンプ１８、低圧バルブ１９、送液ポンプ４３ａ，４３ｂおよび制御装置５が吸引注入切替機構を構成する。

【0037】

（２）自動試料導入装置の動作
図３および図４は主として図１および図２の自動試料導入装置１の動作を示すフローチャートである。次に、図３を参照しながら主として自動試料導入装置１の動作を説明する。

【0038】

まず、図１に示すように、制御装置５は、高圧バルブ１５をロード状態に切り替える（ステップＳ１）。それにより、ポートａ，ｂが連通し、ポートｃ，ｄが連通し、ポートｅ，ｆが連通する。低圧バルブ１９のポートｍはポートｈに連通する。

【0039】

移動相貯留槽４１ａ，４１ｂ内の２種類の移動相溶媒は、送液ポンプ４３ａ，４３ｂにより脱気ユニット４２を通して太い実線で示すようにミキサ４４の両方の入力ポートに供給される。ミキサ４４において混合された移動相溶媒は、太い実線で示すように、高圧バルブ１５のポートｆおよびポートｅを通して分析カラム２に供給される。

【0040】

移動機構１３は、ニードル１１をミキサ１２とともに試料容器３１の上方に移動させた後（ステップＳ２）、下降させることにより、ニードル１１の先端部を試料容器３１内の試料に挿入する（ステップＳ３）。この状態で、計量ポンプ１８が図１に点線で示される経路での吸引動作を行う。具体的には、計量ポンプ１８がニードル１１およびミキサ１２を通してサンプルループ１４内に試料容器３１内の試料を吸引する（ステップＳ４）。それにより、サンプルループ１４内に試料が保持される。このとき、試料の一部がミキサ１２内の微細管状流路に残留する。

【0041】

次に、移動機構１３がニードル１１をミキサ１２とともに試料容器３２の上方に移動させた後（ステップＳ５）、下降させることにより、ニードル１１の先端部を試料容器３２内の反応液に挿入する（ステップＳ６）。この状態で、計量ポンプ１８がニードル１１およびミキサ１２を通してサンプルループ１４に試料容器３２内の反応液を吸引する（ステップＳ７）。このとき、反応液がミキサ１２を通過する際に微細管状流路内に残留する試料と混合される。したがって、サンプルループ１４内には、試料と反応液との混合液が保持される。

【0042】

次いで、移動機構１３がニードル１１をミキサ１２とともに注入ポート１６の上方に移動させた後（ステップＳ８）、下降させることにより、ニードル１１の先端部を注入ポート１６に挿入する（ステップＳ９）。

【0043】

その後、図２に示すように、制御装置５は、高圧バルブ１５をインジェクション状態に切り替える（ステップＳ１０）。それにより、ポートｂ，ｃが連通し、ポートｄ，ｅが連通し、ポートｆ，ａが連通する。送液ポンプ４３ａ，４３ｂは、ミキサ４４から導出される２種類の移動相溶媒の混合液を高圧バルブ１５のポートｆおよびポートａを通してサンプルループ１４に供給する。それにより、送液ポンプ４３ａ，４３ｂは、サンプルループ１４内に保持された試料と反応液との混合液をミキサ１２を通してニードル１１の先端部から注入ポート１６に注入する（ステップＳ１１）。このとき、試料と反応液との混合液がミキサ１２内の微細管状流路を通過することにより試料と反応液とが十分に混合される。

【0044】

注入ポート１６内に注入された混合液は、分析カラム２に供給される。検出器３は、分析カラム２を通過した混合液の成分を検出する（ステップＳ１２）。このようにして、液体クロマトグラフィによる試料の分析が行われる。

【0045】

上記のステップＳ７において吸引される反応液の一部はミキサ１２を通過せずにニードル１１内に残る。ニードル１１内に残った反応液は試料と混合されないが、試料と十分に混合された反応液がサンプルループ１４内に存在するので、分析カラム２での分析に支障が生じない。

【0046】

なお、上記のステップＳ７の後に、試料容器３３内の希釈用の緩衝液または有機溶媒等がニードル１１により吸引されてもよい。具体的には、移動機構１３がニードル１１をミキサ１２とともに試料容器３３の上方に移動させた後、下降させることにより、ニードル１１の先端部を試料容器３３内の緩衝液または有機溶媒等に挿入する。この状態で、ニードル１１内に残った反応液がミキサ１２を通過するまで、計量ポンプ１８がニードル１１を通して試料容器３３内の緩衝液または有機溶媒等を吸引する。それにより、ニードル１１内に試料と混合されない反応液が残ることが防止される。

【0047】

また、ステップＳ４の試料の吸引後およびステップＳ７の反応液の吸引後に、ニードル１１が洗浄ポート１７に挿入されることによりニードル１１の外周面が洗浄されてもよい。洗浄ポート１７には、予め洗浄液が収容されている。洗浄液ボトル２１から洗浄ポート１７への洗浄液の供給時には、低圧バルブ１９のポートｍがポートｋに連通するように低圧バルブ１９が切り替えられる。計量ポンプ１８が洗浄液ボトル２１内の洗浄液を脱気ユニット２０を通して吸引する。その後、低圧バルブ１９のポートｍがポートｉに連通するように低圧バルブ１９が切り替えられる。計量ポンプ１８は、吸引した洗浄液をポートｍおよびポートｉを通して洗浄ポート１７に供給する。

【0048】

（３）実施の形態の効果
本実施の形態に係る自動試料導入装置１および自動試料導入方法によれば、試料および反応液がニードル１１により順次吸引される際に試料および反応液がミキサ１２を通過する。それにより、ミキサ１２内で試料および反応液が混合され、試料と反応液との混合液がサンプルループ１４内に保持される。試料と反応液との混合液が注入ポート１６に注入される際に試料と反応液との混合液がミキサ１２を通過する。それにより、ミキサ１２内で試料と反応液とが再度十分に混合される。したがって、予め試料と反応液とを混合する工程が不要となる。その結果、少ない工程数で試料と反応液とを十分に混合して注入ポート１６に注入することが可能となる。

【0049】

また、本実施の形態では、ミキサ１２がニードル１１の基端部に取り付けられているので、ニードル１１とミキサ１２とを接続する流路が不要となる。したがって、反応液の吸引後に、ミキサ１２を通過せずにニードル１１および流路に残留する反応液の量を低減することが可能となる。

【0050】

さらに、本実施の形態では、ミキサ１２がマイクロリアクタにより構成されるので、ミキサ１２の小型化が可能であり、かつ小型のミキサ１２により試料と反応液とを十分に混合することが可能となる。また、ミキサ１２をニードル１１とともに容易に移動させることができるので、移動機構１３の構成が大型化および複雑化しない。したがって、自動試料導入装置１の大型化が防止される。

【0051】

これらの結果、本実施の形態に係るクロマトグラフ１００およびクロマトグラフィによる分析方法によれば、分析結果の再現性が向上する。また、反応液が誘導体化試薬の場合には、誘導体化率が向上する。

【0052】

（４）他の実施の形態
上記実施の形態では、ミキサ１２がニードル１１に取り付けられているが、ニードル１１とミキサ１２とが配管等の流路で接続されていてもよい。このような構成では、反応液の一部がミキサ１２を通過せずにニードル１１内および流路内に残る。この場合、反応液の吸引後に緩衝液等を吸引することによりニードル１１内および流路内に残る反応液がミキサ１２を通過することが可能となる。

【0053】

上記実施の形態では、ミキサ１２がマイクロリアクタにより構成されるが、ミキサ１２が他の構成を有してもよい。

【0054】

上記実施の形態では、第１および第２の流体が試料および反応液であるが、第１および第２の流体が２種類の試料であってもよい。また、第１および第２の流体の少なくとも一方が気体であってもよい。さらに、上記実施の形態では、２種類の流体が混合されるが３種類以上の流体が混合されてもよい。

【0055】

上記実施の形態では、ミキサ１２がニードル１１とともに移動されるが、ミキサ１２が固定され、ニードル１１のみが移動してもよい。

【0056】

上記実施の形態では、試料がサンプルループ１４に吸引された後に反応液がサンプルループ１４に吸引されるが、反応液がサンプルループ１４に吸引された後に試料がサンプルループ１４に吸引されてもよい。

【0057】

上記実施の形態に係る自動試料導入装置１は液体クロマトグラフに適用されるが、自動試料導入装置１がガスクロマトグラフに適用されてもよい。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】