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特許7165410組換え自己相補的アデノ随伴ウイルスを使用して疾患を治療するための方法及び組成物
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】特許公報(B2)
(11)【特許番号】
(24)【登録日】2022-10-26
(45)【発行日】2022-11-04
(54)【発明の名称】組換え自己相補的アデノ随伴ウイルスを使用して疾患を治療するための方法及び組成物
(51)【国際特許分類】
C12N 15/25 20060101AFI20221027BHJP
C12N 15/63 20060101ALI20221027BHJP
C12N 15/864 20060101ALI20221027BHJP
C12N 7/01 20060101ALI20221027BHJP
A61K 38/20 20060101ALI20221027BHJP
A61K 48/00 20060101ALI20221027BHJP
A61P 29/00 20060101ALI20221027BHJP
A61P 19/02 20060101ALI20221027BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20221027BHJP
【ＦＩ】
C12N15/25 ZNA
C12N15/63 Z
C12N15/864 100Z
C12N7/01
A61K38/20
A61K48/00
A61P29/00 101
A61P19/02
A61P43/00 121
【請求項の数】
38
(21)【出願番号】P 2019530369
(86)(22)【出願日】2017-08-18
(65)【公表番号】
(43)【公表日】2019-09-05
(86)【国際出願番号】 US2017047589
(87)【国際公開番号】W WO2018035451
(87)【国際公開日】2018-02-22
【審査請求日】2020-08-17
(31)【優先権主張番号】62/377,297
(32)【優先日】2016-08-19
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
【前置審査】
(73)【特許権者】
【識別番号】500360769
【氏名又は名称】ユニバーシティ オブ フロリダ リサーチ ファウンデーション，インコーポレイティド
(74)【代理人】
【識別番号】100078282
【弁理士】
【氏名又は名称】山本 秀策
(74)【代理人】
【識別番号】100113413
【弁理士】
【氏名又は名称】森下 夏樹
(72)【発明者】
【氏名】バートレット、ジェフリー、エス．
(72)【発明者】
【氏名】ギヴィッツァーニ， スティーブン シー．
【審査官】池上 京子
(56)【参考文献】
【文献】米国特許出願公開第２０１３／０２１７８６４（ＵＳ，Ａ１）
【文献】J Gene Med，2009年，vol.11, no.7，p.605-614
【文献】Molecular Therapy-Nucleic Acids，2013年，vol.2, e70，p.1-10
【文献】Gene Therapy，2004年，vol.11，p.581-590
(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)
Ｃ１２Ｎ １５／００－１５／９０
Ａ６１Ｋ ３８／００－３８／５８
ＣＡｐｌｕｓ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）
ＧｅｎＢａｎｋ／ＥＭＢＬ／ＤＤＢＪ／ＧｅｎｅＳｅｑ
(57)【特許請求の範囲】
【請求項1】
配列番号２の核酸配列と少なくとも９５％同一である核酸配列を含むコドン修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子。
【請求項2】
配列番号２の核酸配列と少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、または少なくとも９９％同一である核酸配列を含む、請求項１に記載のコドン修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子。
【請求項3】
配列番号２の核酸配列を含む、請求項１または２に記載のコドン修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子。
【請求項4】
配列番号５の核酸配列を含む、請求項２に記載のコドン修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子。
【請求項5】
配列番号３の核酸配列を含む、請求項２に記載のコドン修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子。
【請求項6】
配列番号４の核酸配列を含む、請求項２に記載のコドン修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子。
【請求項7】
前記コドン修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子が、配列番号６のアミノ酸配列を含むＩＬ－１Ｒａペプチドをコードする、請求項１～６のいずれか一項に記載のコドン修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子。
【請求項8】
請求項１～７のいずれか一項に記載のコドン修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子を含む核酸ベクター。
【請求項9】
前記コドン修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子に作動可能に連結されたプロモータをさらに含む、請求項８に記載の核酸ベクター。
【請求項10】
前記プロモータが、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）プロモータ、ＣＡＧプロモータ、ヒトβアクチンプロモータ、ハイブリッドβアクチンプロモータ、ＥＦ１プロモータ、Ｕ１ａプロモータ、Ｕ１ｂプロモータ、Ｔｅｔ誘導性プロモータ、ＶＰ１６－ＬｅｘＡプロモータ、ニワトリβアクチン（ＣＢＡ）プロモータ、ヒト伸長因子１αプロモータ、シミアンウイルス４０（ＳＶ４０）プロモータ、及び単純ヘルペスウイルスチミジンキナーゼプロモータ、およびＩＬ－１β／ＩＬ－６ハイブリッドプロモータからなる群から選択される、請求項９に記載の核酸ベクター。
【請求項11】
前記ＩＬ－１β／ＩＬ－６ハイブリッドプロモータが、配列番号７の核酸配列を含む、請求項１０に記載の核酸ベクター。
【請求項12】
逆方向末端反復配列をさらに含む、請求項８～１１のいずれか一項に記載の核酸ベクター。
【請求項13】
ＳＶ４０およびウシ成長ホルモン（ｂＧＨ）ポリアデニル化配列をさらに含む、請求項８～１２のいずれか一項に記載の核酸ベクター。
【請求項14】
ＳＶ４０スプライスドナー（ＳＤ）およびスプライスアクセプター（ＳＡ）部位をさらに含む、請求項８～１３のいずれか一項に記載の核酸ベクター。
【請求項15】
前記ベクターのコード領域が、二重鎖である、請求項８～１４のいずれか一項に記載の核酸ベクター。
【請求項16】
前記ベクターが、ｓｃ－ｒＡＡＶ２．５Ｈｕ－ＩＬ－１Ｒａを含む、請求項８～１５のいずれか一項に記載の核酸ベクター。
【請求項17】
前記ベクターが、配列番号１の核酸配列を含む、請求項１６に記載の核酸ベクター。
【請求項18】
請求項８～１７のいずれか一項に記載の核酸ベクターを含む組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）。
【請求項19】
前記核酸ベクターをカプシド形成するカプシドをさらに含む、請求項１８に記載のｒＡＡＶ。
【請求項20】
前記ｒＡＡＶが、自己相補的ｒＡＡＶである、請求項１８または１９に記載のｒＡＡＶ。
【請求項21】
前記カプシドが、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、もしくはＡＡＶ１１、またはその組み合わせの少なくとも一部を含む、請求項１８～２０のいずれか一項に記載のｒＡＡＶ。
【請求項22】
前記カプシドが、血清型ＡＡＶ２の少なくとも一部および血清型ＡＡＶ６の少なくとも一部を含む、請求項２１に記載のｒＡＡＶ。
【請求項23】
前記ｒＡＡＶが血清型２．５のｒＡＡＶである、請求項２１または２２に記載のｒＡＡＶ。
【請求項24】
請求項１８～２３のいずれか一項に記載のｒＡＡＶおよび薬学的に許容される担体を含む組成物。
【請求項25】
軟骨細胞または滑膜細胞へとＩＬ－１Ｒａペプチドを送達するための、請求項１８～２３のいずれか一項に記載のｒＡＡＶを含む組成物または請求項２４に記載の組成物であって、該組成物が、該軟骨細胞または滑膜細胞と接触させられることを特徴とする、組成物。
【請求項26】
軟骨細胞または滑膜細胞へとＩＬ－１Ｒａペプチドを送達するための医薬の製造における、請求項１８～２３のいずれか一項に記載のｒＡＡＶまたは請求項２４に記載の組成物の使用であって、該送達が、該軟骨細胞または滑膜細胞を、請求項１８～２３のいずれか一項に記載のｒＡＡＶまたは請求項２４または２５に記載の組成物と接触させることを含む、使用。
【請求項27】
前記軟骨細胞または滑膜細胞が、ヒト被験体における標的とした部位において見出される、請求項２６に記載の使用。
【請求項28】
インターロイキン１受容体アゴニスト（ＩＬ－１Ｒａ）ペプチドをそれを必要とするヒトに提供するための、請求項２４に記載の組成物であって、該組成物が、標的とする部位に導入されることを特徴とする、組成物。
【請求項29】
ヒトにおける変形性関節症または関節リウマチの症状を改善するための、請求項２４に記載の組成物であって、該組成物が、標的とする部位に導入されることを特徴とする、組成物。
【請求項30】
軟骨の修復を必要とするヒトにおいて軟骨を修復するための、請求項２４に記載の組成物であって、該組成物が、標的とする部位に導入されることを特徴とする、組成物。
【請求項31】
インターロイキン１受容体アゴニスト（ＩＬ－１Ｒａ）ペプチドを炎症領域に提供するための、請求項２４に記載の組成物であって、該組成物が、標的とする部位に導入されることを特徴とする、請求項２４に記載の組成物。
【請求項32】
前記ヒトが、変形性関節症または関節リウマチと診断されているか、または変形性関節症または関節リウマチを発症する危険性がある、請求項２７～３１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項33】
前記標的とする部位が、ヒトの関節、滑膜、滑膜下膜、関節包、腱、靭帯、軟骨、または関節周囲の筋肉である、請求項２７～３１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項34】
前記組成物が、直接関節内注射によって前記標的とする部位に導入されることを特徴とする、請求項２７～３１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項35】
前記組成物が最初に導入された時より後の時点で２回目に前記組成物が導入されることを特徴とする、請求項２７～３１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項36】
前記時点が少なくとも３ヶ月である、請求項３５に記載の組成物。
【請求項37】
前記組成物が、前記標的とする部位への二次療法と組み合わせて投与されることを特徴とする、請求項２７～３１のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項38】
前記二次療法が、グルココルチコイド、ヒアルロナン、多血小板血漿、組換えヒトＩＬ－１Ｒａ、またはそれらの組み合わせを含む、請求項３７に記載の組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
相互参照
本出願は、２０１６年８月１９日に出願された米国仮特許出願第６２／３７７，２９７号の優先権を主張するものであり、その明細書はその全体が参照により本明細書に組み込まれる。
本出願は、２０１６年８月１９日に出願された米国仮特許出願第６２／３７７，２９７号の優先権を主張するものであり、その明細書はその全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【0002】
配列表の参照
出願人は、ＣＡＬＩＭ＿１６＿０２＿ＰＣＴ＿Ｓｅｑｕｅｎｃｅ＿Ｌｉｓｔｉｎｇ＿ＳＴ２５．ｔｘｔと題された、規則１３ｔｅｒ．１（ａ）の下で提出されたＡｎｎｅｘ Ｃ／ＳＴ．２５テキストファイルの形式で記録されている情報が、提出された国際出願の一部を形成するものと同一であると主張する。配列表の内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
出願人は、ＣＡＬＩＭ＿１６＿０２＿ＰＣＴ＿Ｓｅｑｕｅｎｃｅ＿Ｌｉｓｔｉｎｇ＿ＳＴ２５．ｔｘｔと題された、規則１３ｔｅｒ．１（ａ）の下で提出されたＡｎｎｅｘ Ｃ／ＳＴ．２５テキストファイルの形式で記録されている情報が、提出された国際出願の一部を形成するものと同一であると主張する。配列表の内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【0003】
本発明は、遺伝子治療及び遺伝子治療のための組成物、より具体的には組換え自己相補的アデノ随伴ウイルス（ｓｃ－ｒＡＡＶ）、及びｓｃ－ｒＡＡＶを使用して疾患又は疾患の症状を治療する方法に関する。
【背景技術】
【0004】
変形性関節症（ＯＡ）は、２，７００万人を超えるアメリカ人が罹患しており、高齢者における身体障害の主要な原因である。ＯＡを有する患者は死亡のリスクもより高い。我々の医療システムに対するＯＡのコストは、年間１，０００億ドルを超えると推定される。このような統計は、ＯＡが不治であり、治療に対して著しく抵抗性であるという事実を反映する。
【0005】
ＯＡの最も早期で支配的な症状は痛みである。これは通常、疾患過程の後期に起こり、その頃までに関節軟骨の喪失、肋軟骨下骨の硬化症、骨棘の形成、及び滑膜炎症を含む、罹患関節のかなりの構造的変化がしばしば存在する。膝関節では、半月板損傷も存在する。疾患の進行を停止又は逆転させる疾患修飾性変形性関節症薬（ＤＭＯＡＤ）が存在しないため、現在の治療法は緩和的である。現在のところ、疾患の過程に介入する有効な方法はないので、多くの患者は全関節置換術を必要とする段階まで進行する。これは、成功を収めている処置ではあるが、多大のリハビリテーションを伴う重大で費用のかかる手術を含む。多くの場合、機能不全になった人工関節を交換する再置換手術が必要である。
【0006】
ＤＭＯＡＤがないため、現在の標準治療は緩和的である。２０１２年に米国リウマチ学会（ＡＣＲ）及び２０１３年に米国整形外科学会（ＡＡＯＳ）によって発行された膝（このＩＮＤの対象関節）のＯＡを治療するための最新のガイドラインに反映されているように、治療への現在のアプローチは３つの漸進的カテゴリに分類される。非薬理学的療法には、患者教育及び自助、運動プログラム及び体重減少などの一連の戦略が含まれる。薬理学的療法には、アセトアミノフェン、非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、アヘン剤及びグルココルチコイド又はヒアルロン酸の関節内注射の使用が含まれる。ＮＳＡＩＤは、多くの患者に部分的な軽減をもたらすが、ＯＡを有する多くの個人が高齢であるので、現在の状況で特に懸念される上部消化管出血及び腎不全に関連する。グルココルチコイドの関節内注射は多くの場合速やかな緩和をもたらすが、その効果は通常数週間しか持続しない。グルココルチコイドの反復注射は、感染についての懸念及び持続的な高用量のグルココルチコイドが関節軟骨を損傷するという証拠のために、非現実的であり、禁忌である。ヒアルロン酸の関節内注射（粘性補給）の利益については議論がある；ＡＣＲはこの点に関して推奨しておらず、一方ＡＡＯＳはもはやこれを推奨していない。間葉系幹細胞（ＭＳＣ）及び多血小板血漿などの自己血製剤の関節内注射はますます普及しているが、ＯＡに関してはＦＤＡによって承認されていない。膝のＯＡの治療に関する変形性膝関節症研究会議の国際及び欧州リウマチ学会からの最新の勧告は、ＡＣＲ及びＡＡＯＳのものと大きくは異ならない。様々な機関の勧告は、ＯＡに対する治療選択肢の少なさと信頼性の高い有効な薬理学的介入の完全な欠如を強調している。治療法に何らかの応答がある場合でも、それは、疾患の進行ではなく、徴候と症状だけに対処するものである。治療がＯＡの症状及び進行を制御できない場合、外科的介入が適応され得る。
【0007】
関節鏡視下洗浄及び壊死組織切除は症状の軽減をもたらすために広く使用されてきたが、その効果はプラセボと同程度であるという証拠を受けて、その使用が減少している。膝関節の力を再調整するために時として骨切り術が行われ、その結果無傷の軟骨の領域によって負荷が生じる。この手段は、新たに体重を支える関節軟骨が侵食され、症状が再発するまで、数年間軽減をもたらすことができる。一般に、骨切り術は、人工膝関節の外科的移植までの時間を稼ぐ遅延策と見なされている。多くの患者が関節全置換術を必要とする段階まで進行し、米国では昨年７０万を超える人工膝関節が外科的に埋め込まれた。
【0008】
ＩＬ－１は、軟骨細胞軟骨溶解及び軟骨細胞によるマトリックス合成の抑制の両方の強力なメディエータである。同時に、これら２つの過程は軟骨に対して高度に破壊的である。ＩＬ－１はまた、軟骨形成を阻害するが、同時に骨棘の形成及び肋軟骨下骨の硬化症を説明する助けとなり得る骨形成分化のある種の局面を促進することも示されている。逆説的に、ＩＬ－１は破骨細胞活性も促進する。骨形成及び骨溶解の両方を刺激することによって、ＩＬ－１は、ＯＡの間に肋軟骨下骨に見られるように、骨代謝回転を増強する。最後に、ＩＬ－１は、ＯＡに見られる炎症性変化を引き起こすのに適した状況にある。その発熱活性は公知であり、ウサギの膝関節におけるほとんどないに等しいほど少量のＩＬ－１の発現が、顕著な滑膜炎を誘発するのに十分である。
【0009】
ＯＡを有するヒト関節から回収された軟骨を検討した際に、軟骨細胞によるＩＬ－１の産生が非常に上昇しており、自己分泌様式で持続することが見出された。さらに、細胞はＩＬ－１Ｒａを産生しなかった。これは、ＯＡにおけるその主要な生理学的阻害剤の不在下でのＩＬ－１による軟骨細胞の自己分泌及びパラ分泌活性化の増強を示唆する。ＯＡにおけるＩＬ－１に対する軟骨細胞の増強された応答性はまた、シグナル伝達受容体であるＩ型ＩＬ－１受容体のＯＡ軟骨細胞上での発現増加によっても示された。軟骨細胞によるＩＬ－１の局所産生及び消費は、なぜ滑液中のＩＬ－１の濃度がＯＡにおいてさえも低くなる傾向があるのかを説明するのに役立ち得る。また、遺伝子解析は、ＩＬ－１Ｒａ（ＩＬ１ＲＮ）をコードするヒト遺伝子中の一塩基多型（ＳＮＰ）及びある種のＯＡの発生率及び重症度と相関する調節エレメントを同定した。
【0010】
標的薬物送達は、関節疾患の関節内治療にとって重要な問題である。すべてのサイズの分子ならびに粒子は、リンパ管、滑膜下毛細血管、又はその両方を介して関節から速やかに除去される。これは、関節内で抗ＯＡ薬の持続的な治療用量を達成することを困難にする。これに対処するために、小分子を全身的に送達することはできるが、滑膜毛細血管の有窓内皮を横切る際のサイズ依存性制約のために、タンパク質をこの様式で送達することは困難である。さらに、全身送達は、非標的部位を高用量の治療薬にさらし、望ましくない副作用をもたらす。典型的には数時間の半減期を有する、関節からのタンパク質の急速な排出は、関節内送達を潜在的に無効にする。一例として、ＲＡの症状を治療するために組換えＩＬ－１Ｒａ（Ｋｉｎｅｒｅｔ，Ａｍｇｅｎ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ）を毎日の皮下注射によって送達する。しかしながら、毎日の送達は、注射と注射の間、ＩＬ－１Ｒａの治療血清レベルを維持することができない（Ｅｖａｎｓ ｅｔ ａｌ．，１９９６，Ｈｕｍａｎ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ，７：１２６１－１２９０；Ｅｖａｎｓ ｅｔ ａｌ．，２００５，ＰＮＡＳ １０２（２４）：８６９８－８７０３）。いくつかの研究は、ＯＡを治療するのにＩＬ－１Ｒａを導入するためにエクスビボ遺伝子導入を使用した。しかしながら、これらのアプローチは多くの時間と労力を要し、長期の遺伝子発現を提供するとは思われなかった（Ｆｒｉｓｂｉｅ ｅｔ ａｌ．，２００２，Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ ９（１）：１２－２０）。また、いくつかの研究は、変形性関節症を治療するためのＩＬ－１α及びＩＬ－１β（例えばＡＢＴ－９８１）を標的とする二重可変ドメイン免疫グロブリン（ＤＶＤ－Ｉｇ）の使用を記載している（Ｋａｍａｔｈ ｅｔ ａｌ．，２０１１，Ｏｓｔｅｏａｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｃａｒｔｉｌａｇｅ １９Ｓ１：Ｓ６４；Ｗａｎｇ ｅｔ ａｌ．，２０１５，Ｏｓｔｅｏａｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｃａｒｔｉｌａｇｅ ２３：Ａ３９８－３９９；Ｗａｎｇ ｅｔ ａｌ．，２０１４，Ｏｓｔｅｏａｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ ｃａｒｔｉｌａｇｅ ２２：Ｓ４６２－Ｓ４６３；Ｌａｃｙ ｅｔ ａｌ．，２０１５，ｍＡｂｓ ７（３）：６０５－６１９；Ｗｕ ｅｔ ａｌ．，２００９，ｍＡｂｓ １（４）：３３９－３４７；Ｗａｎｇ ｅｔ ａｌ．，２０１４，Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ａｂｓｔｒａｃｔｓ ＳＡＴ０４４８ ｐｇ．７５６；Ｇｏｓｓ ｅｔ ａｌ．，２０１４，Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ａｂｓｔｒａｃｔｓ ＳＡＴ０４４７ ｐｇ．７５５－７５６；米国特許出願公開第２０１５／００５０２３８号；Ｗａｎｇ ｅｔ ａｌ．，２０１４ ＡＣＲ／ＡＲＨＰ Ａｎｎｕａｌ Ｍｅｅｔｉｎｇ Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｎｕｍｂｅｒ ２２３７；Ｗａｎｇ ｅｔ ａｌ．，２０１５ ＡＣＲ／ＡＲＨＰ Ａｎｎｕａｌ Ｍｅｅｔｉｎｇ Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｎｕｍｂｅｒ ３１８）。しかしながら、これらのペプチドは、比較的短い半減期のために、反復全身導入（例えば２週間ごとに４回の投与又は４週間ごとに３回の投与、例えば皮下注射又は静脈内注入による）を必要とする（Ｗａｎｇ ｅｔ ａｌ．，２０１５，Ｏｓｔｅｏａｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ Ｃａｒｔｉｌａｇｅ ２３：Ａ３９８－３９９；Ｗａｎｇ ｅｔ ａｌ．，２０１４，Ｏｓｔｅｏａｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ ｃａｒｔｉｌａｇｅ ２２：Ｓ４６２－Ｓ４６３；Ｅｖａｎｓ ｅｔ ａｌ．，２００５，ＰＮＡＳ １０２（２４）：８６９８－８７０３）。
【0011】
本発明は、治療用遺伝子産物（例えばＩＬ－１Ｒａ）を標的とした部位（a location of interest）、例えば関節に持続的に送達するための方法及び組成物を特徴とする。本発明はまた、変形性関節症及び関節リウマチなどの、しかしこれらに限定されない疾患の症状を治療するための方法及び組成物を特徴とする。本発明はまた、個体（例えばヒト）に治療有効量の治療用遺伝子産物（例えばＩＬ－１Ｒａ）を提供するための方法及び組成物を特徴とする。方法及び組成物は、組換え自己相補的アデノ随伴ウイルス（ｓｃ－ｒＡＡＶ）を特徴とし得、ここでｓｃ－ｒＡＡＶは、遺伝子操作されたキャプシド及びキャプシド内にパッケージングされたベクター（例えばｓｃ－ｒＡＡＶベクター）を含む。ベクターは、プロモータ（例えば構成的プロモータ）に作動可能に連結された導入遺伝子（例えば標的とした部位のタンパク質、例えば治療用遺伝子産物、例えばＩＬ－１Ｒａ又はそのコドン改変型をコードするヌクレオチド配列）を含み得る。治療用遺伝子産物は、標的とした部位の位置、例えば関節に送達し得る。例えば、変形性関節症を治療するために、ｓｃ－ｒＡＡＶを直接関節内注射によって関節内の細胞（例えば軟骨細胞、滑膜細胞等）に導入し得る。本発明は、前述の疾患又は標的とした部位の位置（例えば関節）のいずれにも限定されない。
【0012】
Ｇｏｏｄｒｉｃｈ ｅｔ ａｌ．（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｔｈｅｒａｐｙ－Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ，２０１３，２：ｅ７０）が、ｓｃＡＡＶ送達ＩＬ－１Ｒａを用いて変形性関節症を治療する方法を一般的に開示していることが注目される。しかしながら、Ｇｏｏｄｒｉｃｈ ｅｔ ａｌ．は、特定のＩＬ－１Ｒａ配列、例えば本発明によるＩＬ－１Ｒａ配列を具体的に同定又は可能にしていない。特に、遺伝子治療の分野は、標的とした部位のタンパク質についての特定の遺伝子配列が効率的に発現されると想定することができない予測不可能な領域である。さらに、遺伝子治療はまた、ヒトと比較した動物モデルにおける有効性に関しても予測不可能であり、例えば特定の方法が動物モデルにおいて有効である場合に、それがヒトにおいて有効であると仮定することはできない。
【発明の概要】
【0013】
本発明は、組換え自己相補的アデノ随伴ウイルス（ｓｃ－ｒＡＡＶ）を特徴とする。いくつかの実施形態では、ｓｃ－ｒＡＡＶは、遺伝子操作されたＡＡＶキャプシド及びキャプシド内にパッケージングされたベクターを含み、ここでベクターは、プロモータに作動可能に連結された修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子を含み、修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子は、配列番号２と少なくとも９５％同一である。いくつかの実施形態では、プロモータはＣＭＶプロモータを含む。いくつかの実施形態では、遺伝子操作されたキャプシドは、血清型ＡＡＶ２の少なくとも一部及び血清型ＡＡＶ６の少なくとも一部を含む。いくつかの実施形態では、遺伝子操作されたキャプシドは、血清型ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、又はそれらの組み合わせの少なくとも一部を含む。いくつかの実施形態では、ベクターは、ＳＶ４０及びウシ成長ホルモン（ｂＧＨ）ポリアデニル化配列をさらに含む。いくつかの実施形態では、ベクターは、ＳＶ４０スプライスドナー（ＳＤ）及びスプライスアクセプター（ＳＡ）部位をさらに含む。いくつかの実施形態では、ベクターはｓｃ－ｒＡＡＶ２．５Ｈｕ－ＩＬ－１Ｒａを含む。いくつかの実施形態では、ｓｃ－ｒＡＡＶは組成物の一部である。
【0014】
いくつかの実施形態では、ｓｃ－ｒＡＡＶは、遺伝子操作されたＡＡＶキャプシド及びキャプシド内にパッケージングされたベクターを含み、ここでベクターは、プロモータに作動可能に連結された修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子を含み、修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子は、配列番号６に従うＩＬ－１Ｒａタンパク質をコードする。
【0015】
本発明は、治療有効量のインターロイキン１受容体アゴニスト（ＩＬ－１Ｒａ）ペプチドを、それを必要とするヒト（例えば変形性関節症又は関節リウマチと診断されたか又はその危険性があるヒト）に提供する方法を特徴とする。いくつかの実施形態では、この方法は、本発明による組換え自己相補的アデノ随伴ウイルス（ｓｃ－ｒＡＡＶ）を含む組成物を標的とした部位の位置に導入する（例えば関節内注射によって）ことを含む。ｓｃ－ｒＡＡＶはベクターを標的とした部位の位置の細胞に形質導入し、ここで修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子は、ヒトに治療有効量の前記ＩＬ－１Ｒａペプチドを提供するように発現される。
【0016】
本発明はまた、ヒトにおける変形性関節症又は関節リウマチの症状を改善する方法を特徴とする。いくつかの実施形態では、この方法は、本発明による組換え自己相補的アデノ随伴ウイルス（ｓｃ－ｒＡＡＶ）を含む組成物を標的とした部位の位置に導入する（例えば直接関節内注射によって）ことを含む。ｓｃ－ｒＡＡＶはベクターを標的とした部位の位置の細胞に形質導入し、ここで修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子は、変形性関節症又は関節リウマチに関連する症状を改善するのに有効な量のＩＬ－１Ｒａペプチドをヒトに提供するように発現される。
【0017】
本発明はまた、軟骨の修復を必要とするヒト（例えば変形性関節症又は関節リウマチと診断されたか又は発症する危険性があるヒト）において軟骨を修復する方法を特徴とする。いくつかの実施形態では、この方法は、本発明による組換え自己相補的アデノ随伴ウイルス（ｓｃ－ｒＡＡＶ）を含む組成物を軟骨の位置に導入する（例えば直接関節内注射によって）ことを含む。ｓｃ－ｒＡＡＶは軟骨の位置の細胞にベクターを形質導入し、ここで修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子は、軟骨を修復するのに有効なＩＬ－１Ｒａペプチドをヒトに提供するように発現される。
【0018】
本発明はまた、インターロイキン１受容体アゴニスト（ＩＬ－１Ｒａ）ペプチドを炎症領域に提供する方法を特徴とする。いくつかの実施形態では、この方法は、本発明による組換え自己相補的アデノ随伴ウイルス（ｓｃ－ｒＡＡＶ）を含む組成物を炎症部位に導入する（例えば関節内注射によって）ことを含む。ｓｃ－ｒＡＡＶはベクターを炎症部位の細胞に形質導入し、ここで修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子は、炎症を軽減するのに有効な治療有効量のＩＬ－１Ｒａペプチドを炎症部位の細胞に提供するように発現される。
【0019】
いくつかの実施形態では、標的とした部位の位置は、ヒトの関節、滑膜、滑膜下膜、関節包、腱、靭帯、軟骨、又は関節周囲の筋肉である。いくつかの実施形態では、細胞は、軟骨細胞、滑膜細胞、又はそれらの組み合わせである。
【0020】
いくつかの実施形態では、方法は、この方法が最初に行われた時点より後の時点で２回目に実施される。いくつかの実施形態では、その時点は少なくとも３ヶ月である。いくつかの実施形態では、この方法は、組成物と組み合わせて標的とした部位の位置に二次療法（例えばグルココルチコイド、ヒアルロナン、多血小板血漿、組換えヒトＩＬ－１Ｒａ、又はそれらの組み合わせ）を同時導入することをさらに含む。
【0021】
本発明はまた、軟骨細胞又は滑膜細胞にＩＬ－１Ｒａペプチドを送達する方法を特徴とする。いくつかの実施形態では、この方法は、軟骨細胞又は滑膜細胞を、本発明による組換え自己相補的アデノ随伴ウイルス（ｓｃ－ｒＡＡＶ）、例えば血清型２の少なくとも一部及び血清型６の少なくとも一部を含む遺伝子操作されたアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）キャプシドならびにキャプシド内にパッケージングされたベクターと接触させることを含み、ここでベクターは、ＣＭＶプロモータに作動可能に連結された修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子を含み、修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子は配列番号２と少なくとも９５％同一である。ｓｃ－ｒＡＡＶはベクターを軟骨細胞又は滑膜細胞に形質導入し、修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子は軟骨細胞又は滑膜細胞にＩＬ－１Ｒａペプチドを提供するように発現される。
【0022】
前述の方法及び組成物（例えば、治療有効量のインターロイキン１受容体アゴニスト（ＩＬ－１Ｒａ）ペプチドをそれを必要とするヒトに提供する方法、ヒトにおける変形性関節症又は関節リウマチの症状を改善する方法、ＩＬ－１Ｒａペプチドを軟骨細胞又は滑膜細胞に送達する方法、組換え自己相補的アデノ随伴ウイルス（ｓｃ－ｒＡＡＶ）を含む組成物、ＣＭＶプロモータに作動可能に連結された修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子を含む組換え自己相補的アデノ随伴ウイルス（ｓｃ－ｒＡＡＶ）ベクター、軟骨の修復を必要とするイヌにおいて軟骨を修復する方法、炎症領域にインターロイキン１受容体アゴニスト（ＩＬ－１Ｒａ）ペプチドを提供する方法等）に関して、修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子は、配列番号２と少なくとも９５％同一であり得、配列番号６に従うＩＬ－１Ｒａをコードし得る。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
（項目１）
治療有効量のインターロイキン１受容体アゴニスト（ＩＬ－１Ｒａ）ペプチドを、それを必要とするヒトに提供する方法であって、組換え自己相補的アデノ随伴ウイルス（ｓｃ－ｒＡＡＶ）を含む組成物を標的とした部位の位置に導入することを含み、ここで前記ｓｃ－ｒＡＡＶが、
ａ．遺伝子操作されたＡＡＶキャプシド；及び
ｂ．前記キャプシド内にパッケージングされたベクターであって、プロモータに作動可能に連結された修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子を含み、前記修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子が配列番号２と少なくとも９５％同一である、ベクター
を含み、
ここで前記ｓｃ－ｒＡＡＶが前記ベクターを前記標的とした部位の位置の細胞に形質導入し、前記修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子が前記治療有効量の前記ＩＬ－１Ｒａペプチドを前記ヒトに提供するように発現される、
方法。
（項目２）
ヒトが、変形性関節症もしくは関節リウマチと診断されているか又は変形性関節症もしくは関節リウマチを発症する危険性がある、項目１に記載の方法。
（項目３）
標的とした部位の位置が、ヒトの関節、滑膜、滑膜下膜、関節包、腱、靭帯、軟骨、又は関節周囲の筋肉である、項目１に記載の方法。
（項目４）
組成物が直接関節内注射によって標的とした部位の位置に導入される、項目１に記載の方法。
（項目５）
細胞が軟骨細胞、滑膜細胞、又はそれらの組み合わせである、項目１に記載の方法。
（項目６）
方法が、前記方法が最初に行われた時点より後の時点で２回目に実施される、項目１に記載の方法。
（項目７）
時点が少なくとも３ヶ月である、項目１に記載の方法。
（項目８）
方法が、組成物と組み合わせて標的とした部位の位置に二次療法を同時導入することをさらに含む、項目１に記載の方法。
（項目９）
二次療法が、グルココルチコイド、ヒアルロナン、多血小板血漿、組換えヒトＩＬ－１Ｒａ、又はそれらの組み合わせを含む、項目８に記載の方法。
（項目１０）
プロモータがＣＭＶプロモータを含む、項目１に記載の方法。
（項目１１）
遺伝子操作されたキャプシドが、血清型ＡＡＶ２の少なくとも一部及び血清型ＡＡＶ６の少なくとも一部を含む、項目１に記載の方法。
（項目１２）
遺伝子操作されたキャプシドが、血清型ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、又はそれらの組み合わせの少なくとも一部を含む、項目１に記載の方法。
（項目１３）
ベクターがＳＶ４０及びウシ成長ホルモン（ｂＧＨ）ポリアデニル化配列をさらに含む、項目１に記載の方法。
（項目１４）
ベクターがＳＶ４０スプライスドナー（ＳＤ）及びスプライスアクセプター（ＳＡ）部位をさらに含む、項目１３に記載の方法。
（項目１５）
ベクターがｓｃ－ｒＡＡＶ２．５Ｈｕ－ＩＬ－１Ｒａを含む、項目１に記載の方法。
（項目１６）
ヒトにおける変形性関節症又は関節リウマチの症状を改善する方法であって、組換え自己相補的アデノ随伴ウイルス（ｓｃ－ｒＡＡＶ）を含む組成物を標的とした部位の位置に導入することを含み、ここで前記ｓｃ－ｒＡＡＶが、
ａ．遺伝子操作されたＡＡＶキャプシド；及び
ｂ．前記キャプシド内にパッケージングされたベクターであって、プロモータに作動可能に連結された修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子を含み、前記修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子が配列番号２と少なくとも９５％同一である、ベクター
を含み、
ここで前記ｓｃ－ｒＡＡＶが前記ベクターを前記標的とした部位の位置の細胞に形質導入し、前記修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子が、変形性関節症又は関節リウマチに関連する症状を改善するのに有効な量のＩＬ－１Ｒａペプチドをヒトに提供するように発現される、
方法。
（項目１７）
標的とした部位の位置が、ヒトの関節、滑膜、滑膜下膜、関節包、腱、靭帯、軟骨、又は関節周囲の筋肉である、項目１６に記載の方法。
（項目１８）
組成物が直接関節内注射によって標的とした部位の位置に導入される、項目１６に記載の方法。
（項目１９）
細胞が軟骨細胞、滑膜細胞、又はそれらの組み合わせである、項目１６に記載の方法。
（項目２０）
方法が、前記方法が最初に行われた時点より後の時点で２回目に実施される、項目１６に記載の方法。
（項目２１）
時点が少なくとも３ヶ月である、項目１６に記載の方法。
（項目２２）
方法が、組成物と組み合わせて標的とした部位の位置に二次療法を同時導入することをさらに含む、項目１６に記載の方法。
（項目２３）
二次療法が、グルココルチコイド、ヒアルロナン、多血小板血漿、組換えヒトＩＬ－１Ｒａ、又はそれらの組み合わせを含む、項目２２に記載の方法。
（項目２４）
プロモータがＣＭＶプロモータを含む、項目１６に記載の方法。
（項目２５）
遺伝子操作されたキャプシドが、血清型ＡＡＶ２の少なくとも一部及び血清型ＡＡＶ６の少なくとも一部を含む、項目１６に記載の方法。
（項目２６）
遺伝子操作されたキャプシドが、血清型ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、又はそれらの組み合わせの少なくとも一部を含む、項目１６に記載の方法。
（項目２７）
ベクターがＳＶ４０及びウシ成長ホルモン（ｂＧＨ）ポリアデニル化配列をさらに含む、項目１６に記載の方法。
（項目２８）
ベクターがＳＶ４０スプライスドナー（ＳＤ）及びスプライスアクセプター（ＳＡ）部位をさらに含む、項目２７に記載の方法。
（項目２９）
ベクターがｓｃ－ｒＡＡＶ２．５Ｈｕ－ＩＬ－１Ｒａを含む、項目１６に記載の方法。
（項目３０）
軟骨細胞又は滑膜細胞にＩＬ－１Ｒａペプチドを送達する方法であって、前記軟骨細胞又は滑膜細胞を、
ａ．血清型２の少なくとも一部及び血清型６の少なくとも一部を含む遺伝子操作されたアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）キャプシド；ならびに
ｂ．前記キャプシド内にパッケージングされたベクターであって、ＣＭＶプロモータに作動可能に連結された修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子を含み、前記修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子が配列番号２と少なくとも９５％同一である、ベクター；
を含む組換え自己相補的アデノ随伴ウイルス（ｓｃ－ｒＡＡＶ）と接触させることを含み、
ここで前記ｓｃ－ｒＡＡＶが前記ベクターを前記軟骨細胞又は滑膜細胞に形質導入し、及び前記修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子が前記軟骨細胞又は滑膜細胞にＩＬ－１Ｒａペプチドを提供するように発現される、
方法。
（項目３１）
ベクターがｓｃ－ｒＡＡＶ２．５Ｈｕ－ＩＬ－１Ｒａを含む、項目３０に記載の方法。
（項目３２）
ベクターがＳＶ４０及びウシ成長ホルモン（ｂＧＨ）ポリアデニル化配列をさらに含む、項目３０に記載の方法。
（項目３３）
ベクターがＳＶ４０スプライスドナー（ＳＤ）及びスプライスアクセプター（ＳＡ）部位をさらに含む、項目３０に記載の方法。
（項目３４）
組換え自己相補的アデノ随伴ウイルス（ｓｃ－ｒＡＡＶ）を含む組成物であって、ここで前記ｓｃ－ｒＡＡＶが、
ａ．血清型２の少なくとも一部及び血清型６の少なくとも一部を含む遺伝子操作されたキャプシド；ならびに
ｂ．前記キャプシド内にパッケージングされたベクターであって、ＣＭＶプロモータに作動可能に連結された修飾ＩＬ－１Ｒａペプチドをコードする核酸配列を含み、前記修飾ＩＬ－１Ｒａペプチドをコードする前記核酸配列が配列番号２と少なくとも９０％同一である、ベクター
を含む、組成物。
（項目３５）
ベクターがＳＶ４０及びウシ成長ホルモン（ｂＧＨ）ポリアデニル化配列をさらに含む、項目３４記載の組成物。
（項目３６）
ベクターがＳＶ４０スプライスドナー（ＳＤ）及びスプライスアクセプター（ＳＡ）部位をさらに含む、項目３５に記載の組成物。
（項目３７）
ベクターがｓｃ－ｒＡＡＶ２．５Ｈｕ－ＩＬ－１Ｒａを含む、項目３４に記載の組成物。
（項目３８）
ＣＭＶプロモータに作動可能に連結された修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子を含み、前記修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子が配列番号２と少なくとも９５％同一である、組換え自己相補的アデノ随伴ウイルス（ｓｃ－ｒＡＡＶ）ベクター。
（項目３９）
ＳＶ４０及びウシ成長ホルモン（ｂＧＨ）ポリアデニル化配列をさらに含む、項目３８に記載のベクター。
（項目４０）
ＳＶ４０スプライスドナー（ＳＤ）及びスプライスアクセプター（ＳＡ）部位をさらに含む、項目３９に記載のベクター。
（項目４１）
ｓｃ－ｒＡＡＶ２．５Ｈｕ－ＩＬ－１Ｒａを含む、項目３８に記載のベクター。
（項目４２）
軟骨の修復を必要とするヒトにおいて軟骨を修復する方法であって、組換え自己相補的アデノ随伴ウイルス（ｓｃ－ｒＡＡＶ）を含む組成物を軟骨の位置に導入することを含み、ここで前記ｓｃ－ｒＡＡＶが、
ａ．遺伝子操作されたＡＡＶキャプシド；及び
ｂ．前記キャプシド内にパッケージングされたベクターであって、プロモータに作動可能に連結された修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子を含み、前記修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子が配列番号２と少なくとも９５％同一である、ベクター
を含み、
ここで前記ｓｃ－ｒＡＡＶが前記ベクターを前記軟骨の位置の細胞に形質導入し、前記修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子が軟骨を修復するのに有効なＩＬ－１Ｒａペプチドをヒトに提供するように発現される、
方法。
（項目４３）
ヒトが、変形性関節症もしくは関節リウマチと診断されているか又は変形性関節症もしくは関節リウマチを発症する危険性がある、項目４２に記載の方法。
（項目４４）
組成物が直接関節内注射によって軟骨の位置に導入される、項目４２に記載の方法。
（項目４５）
細胞が軟骨細胞、滑膜細胞、又はそれらの組み合わせである、項目４２に記載の方法。
（項目４６）
方法が、前記方法が最初に行われた時点より後の時点で２回目に実施される、項目４２に記載の方法。
（項目４７）
時点が少なくとも３ヶ月である、項目４２に記載の方法。
（項目４８）
方法が、組成物と組み合わせて軟骨の位置に二次療法を同時導入することをさらに含む、項目４２に記載の方法。
（項目４９）
二次療法が、グルココルチコイド、ヒアルロナン、多血小板血漿、組換えヒトＩＬ－１Ｒａ、又はそれらの組み合わせを含む、項目４８に記載の方法。
（項目５０）
プロモータがＣＭＶプロモータを含む、項目４２に記載の方法。
（項目５１）
遺伝子操作されたキャプシドが、血清型ＡＡＶ２の少なくとも一部及び血清型ＡＡＶ６の少なくとも一部を含む、項目４２に記載の方法。
（項目５２）
遺伝子操作されたキャプシドが、血清型ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、又はそれらの組み合わせの少なくとも一部を含む、項目４２に記載の方法。
（項目５３）
ベクターがｓｃ－ｒＡＡＶ２．５Ｈｕ－ＩＬ－１Ｒａを含む、項目４２に記載の方法。
（項目５４）
炎症領域にインターロイキン１受容体アゴニスト（ＩＬ－１Ｒａ）ペプチドを提供する方法であって、組換え自己相補的アデノ随伴ウイルス（ｓｃ－ｒＡＡＶ）を含む組成物を炎症部位に導入することを含み、ここで前記ｓｃ－ｒＡＡＶが、
ａ．遺伝子操作されたＡＡＶキャプシド；及び
ｂ．前記キャプシド内にパッケージングされたベクターであって、プロモータに作動可能に連結された修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子を含み、前記修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子が配列番号２と少なくとも９５％同一である、ベクター
を含み、
ここで前記ｓｃ－ｒＡＡＶが前記ベクターを前記炎症部位の細胞に形質導入し、前記修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子が炎症を軽減するのに有効な治療有効量のＩＬ－１Ｒａペプチドを前記炎症部位の前記細胞に提供するように発現される、
方法。
（項目５５）
炎症部位がヒトの関節、滑膜、滑膜下膜、関節包、腱、靭帯、軟骨、又は関節周囲の筋肉である、項目５４に記載の方法。
（項目５６）
組成物が直接関節内注射によって炎症部位に導入される、項目５４に記載の方法。
（項目５７）
細胞が軟骨細胞、滑膜細胞、又はそれらの組み合わせである、項目５４に記載の方法。
（項目５８）
プロモータがＣＭＶプロモータを含む、項目５４に記載の方法。
（項目５９）
遺伝子操作されたキャプシドが、血清型ＡＡＶ２の少なくとも一部及び血清型ＡＡＶ６の少なくとも一部を含む、項目５４に記載の方法。
（項目６０）
遺伝子操作されたキャプシドが、血清型ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、又はそれらの組み合わせの少なくとも一部を含む、項目５４に記載の方法。
（項目６１）
ベクターがｓｃ－ｒＡＡＶ２．５Ｈｕ－ＩＬ－１Ｒａを含む、項目５４に記載の方法。
（項目６２）
治療有効量のインターロイキン１受容体アゴニスト（ＩＬ－１Ｒａ）を、それを必要とするヒトに提供する方法であって、組換え自己相補的アデノ随伴ウイルス（ｓｃ－ｒＡＡＶ）を含む組成物を標的とした部位の位置に導入することを含み、ここで前記ｓｃ－ｒＡＡＶが、
ａ．遺伝子操作されたＡＡＶキャプシド；及び
ｂ．前記キャプシド内にパッケージングされたベクターであって、プロモータに作動可能に連結された修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子を含み、前記修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子が配列番号６に従うＩＬ－１Ｒａをコードする、ベクター
を含み、
ここで前記ｓｃ－ｒＡＡＶが前記ベクターを前記標的とした部位の位置の細胞に形質導入し、ＩＬ－１Ｒａが前記治療有効量の前記ＩＬ－１Ｒａを前記ヒトに提供するように発現される、
方法。
（項目６３）
ヒトにおける変形性関節症又は関節リウマチの症状を改善する方法であって、組換え自己相補的アデノ随伴ウイルス（ｓｃ－ｒＡＡＶ）を含む組成物を標的とした部位の位置に導入することを含み、ここで前記ｓｃ－ｒＡＡＶが、
ａ．遺伝子操作されたＡＡＶキャプシド；及び
ｂ．前記キャプシド内にパッケージングされたベクターであって、プロモータに作動可能に連結された修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子を含み、前記修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子が配列番号６に従うＩＬ－１Ｒａをコードする、ベクター
を含み、
ここで前記ｓｃ－ｒＡＡＶが前記ベクターを前記標的とした部位の位置の細胞に形質導入し、ＩＬ－１Ｒａが、変形性関節症又は関節リウマチに関連する症状を改善するのに有効な量のＩＬ－１Ｒａを前記ヒトに提供するように発現される、
方法。
（項目６４）
軟骨細胞又は滑膜細胞にＩＬ－１Ｒａペプチドを送達する方法であって、前記軟骨細胞又は滑膜細胞を、
ａ．血清型２の少なくとも一部及び血清型６の少なくとも一部を含む遺伝子操作されたアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）キャプシド；ならびに
ｂ．前記キャプシド内にパッケージングされたベクターであって、ＣＭＶプロモータに作動可能に連結された修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子を含み、前記修飾ＩＬ－１Ｒａが配列番号６に従うＩＬ－１Ｒａをコードする、ベクター
を含む組換え自己相補的アデノ随伴ウイルス（ｓｃ－ｒＡＡＶ）と接触させることを含み、
ここで前記ｓｃ－ｒＡＡＶが前記ベクターを前記軟骨細胞又は滑膜細胞に形質導入し、及びＩＬ－１Ｒａが前記軟骨細胞又は滑膜細胞にＩＬ－１Ｒａを提供するように発現される、
方法。
（項目６５）
組換え自己相補的アデノ随伴ウイルス（ｓｃ－ｒＡＡＶ）を含む組成物であって、ここで前記ｓｃ－ｒＡＡＶが、
ａ．血清型２の少なくとも一部及び血清型６の少なくとも一部を含む遺伝子操作されたキャプシド；ならびに
ｂ．前記キャプシド内にパッケージングされたベクターであって、ＣＭＶプロモータに作動可能に連結された修飾ＩＬ－１Ｒａペプチドをコードする核酸配列を含み、前記核酸配列が配列番号６に従うＩＬ－１Ｒａをコードする、ベクター
を含む、組成物。
（項目６６）
軟骨の修復を必要とするヒトにおいて軟骨を修復する方法であって、組換え自己相補的アデノ随伴ウイルス（ｓｃ－ｒＡＡＶ）を含む組成物を軟骨の位置に導入することを含み、ここで前記ｓｃ－ｒＡＡＶが、
ａ．遺伝子操作されたＡＡＶキャプシド；及び
ｂ．前記キャプシド内にパッケージングされたベクターであって、プロモータに作動可能に連結された修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子を含み、前記修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子が配列番号６に従うＩＬ－１Ｒａをコードする、ベクター
を含み、
ここで前記ｓｃ－ｒＡＡＶが前記ベクターを前記軟骨の位置の細胞に形質導入し、ＩＬ－１Ｒａが軟骨を修復するのに有効なＩＬ－１Ｒａを前記ヒトに提供するように発現される、
方法。
（項目６７）
炎症領域にインターロイキン１受容体アゴニスト（ＩＬ－１Ｒａ）ペプチドを提供する方法であって、組換え自己相補的アデノ随伴ウイルス（ｓｃ－ｒＡＡＶ）を含む組成物を炎症部位に導入することを含み、ここで前記ｓｃ－ｒＡＡＶが、
ａ．遺伝子操作されたＡＡＶキャプシド；及び
ｂ．前記キャプシド内にパッケージングされたベクターであって、プロモータに作動可能に連結された修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子を含み、前記修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子が配列番号６に従うＩＬ－１Ｒａをコードする、ベクター
を含み、
ここで前記ｓｃ－ｒＡＡＶが前記ベクターを前記炎症部位の細胞に形質導入し、ＩＬ－１Ｒａが、炎症を軽減するのに有効な治療有効量のＩＬ－１Ｒａを前記炎症部位の前記細胞に提供するように発現される、
方法。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
（項目１）
治療有効量のインターロイキン１受容体アゴニスト（ＩＬ－１Ｒａ）ペプチドを、それを必要とするヒトに提供する方法であって、組換え自己相補的アデノ随伴ウイルス（ｓｃ－ｒＡＡＶ）を含む組成物を標的とした部位の位置に導入することを含み、ここで前記ｓｃ－ｒＡＡＶが、
ａ．遺伝子操作されたＡＡＶキャプシド；及び
ｂ．前記キャプシド内にパッケージングされたベクターであって、プロモータに作動可能に連結された修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子を含み、前記修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子が配列番号２と少なくとも９５％同一である、ベクター
を含み、
ここで前記ｓｃ－ｒＡＡＶが前記ベクターを前記標的とした部位の位置の細胞に形質導入し、前記修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子が前記治療有効量の前記ＩＬ－１Ｒａペプチドを前記ヒトに提供するように発現される、
方法。
（項目２）
ヒトが、変形性関節症もしくは関節リウマチと診断されているか又は変形性関節症もしくは関節リウマチを発症する危険性がある、項目１に記載の方法。
（項目３）
標的とした部位の位置が、ヒトの関節、滑膜、滑膜下膜、関節包、腱、靭帯、軟骨、又は関節周囲の筋肉である、項目１に記載の方法。
（項目４）
組成物が直接関節内注射によって標的とした部位の位置に導入される、項目１に記載の方法。
（項目５）
細胞が軟骨細胞、滑膜細胞、又はそれらの組み合わせである、項目１に記載の方法。
（項目６）
方法が、前記方法が最初に行われた時点より後の時点で２回目に実施される、項目１に記載の方法。
（項目７）
時点が少なくとも３ヶ月である、項目１に記載の方法。
（項目８）
方法が、組成物と組み合わせて標的とした部位の位置に二次療法を同時導入することをさらに含む、項目１に記載の方法。
（項目９）
二次療法が、グルココルチコイド、ヒアルロナン、多血小板血漿、組換えヒトＩＬ－１Ｒａ、又はそれらの組み合わせを含む、項目８に記載の方法。
（項目１０）
プロモータがＣＭＶプロモータを含む、項目１に記載の方法。
（項目１１）
遺伝子操作されたキャプシドが、血清型ＡＡＶ２の少なくとも一部及び血清型ＡＡＶ６の少なくとも一部を含む、項目１に記載の方法。
（項目１２）
遺伝子操作されたキャプシドが、血清型ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、又はそれらの組み合わせの少なくとも一部を含む、項目１に記載の方法。
（項目１３）
ベクターがＳＶ４０及びウシ成長ホルモン（ｂＧＨ）ポリアデニル化配列をさらに含む、項目１に記載の方法。
（項目１４）
ベクターがＳＶ４０スプライスドナー（ＳＤ）及びスプライスアクセプター（ＳＡ）部位をさらに含む、項目１３に記載の方法。
（項目１５）
ベクターがｓｃ－ｒＡＡＶ２．５Ｈｕ－ＩＬ－１Ｒａを含む、項目１に記載の方法。
（項目１６）
ヒトにおける変形性関節症又は関節リウマチの症状を改善する方法であって、組換え自己相補的アデノ随伴ウイルス（ｓｃ－ｒＡＡＶ）を含む組成物を標的とした部位の位置に導入することを含み、ここで前記ｓｃ－ｒＡＡＶが、
ａ．遺伝子操作されたＡＡＶキャプシド；及び
ｂ．前記キャプシド内にパッケージングされたベクターであって、プロモータに作動可能に連結された修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子を含み、前記修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子が配列番号２と少なくとも９５％同一である、ベクター
を含み、
ここで前記ｓｃ－ｒＡＡＶが前記ベクターを前記標的とした部位の位置の細胞に形質導入し、前記修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子が、変形性関節症又は関節リウマチに関連する症状を改善するのに有効な量のＩＬ－１Ｒａペプチドをヒトに提供するように発現される、
方法。
（項目１７）
標的とした部位の位置が、ヒトの関節、滑膜、滑膜下膜、関節包、腱、靭帯、軟骨、又は関節周囲の筋肉である、項目１６に記載の方法。
（項目１８）
組成物が直接関節内注射によって標的とした部位の位置に導入される、項目１６に記載の方法。
（項目１９）
細胞が軟骨細胞、滑膜細胞、又はそれらの組み合わせである、項目１６に記載の方法。
（項目２０）
方法が、前記方法が最初に行われた時点より後の時点で２回目に実施される、項目１６に記載の方法。
（項目２１）
時点が少なくとも３ヶ月である、項目１６に記載の方法。
（項目２２）
方法が、組成物と組み合わせて標的とした部位の位置に二次療法を同時導入することをさらに含む、項目１６に記載の方法。
（項目２３）
二次療法が、グルココルチコイド、ヒアルロナン、多血小板血漿、組換えヒトＩＬ－１Ｒａ、又はそれらの組み合わせを含む、項目２２に記載の方法。
（項目２４）
プロモータがＣＭＶプロモータを含む、項目１６に記載の方法。
（項目２５）
遺伝子操作されたキャプシドが、血清型ＡＡＶ２の少なくとも一部及び血清型ＡＡＶ６の少なくとも一部を含む、項目１６に記載の方法。
（項目２６）
遺伝子操作されたキャプシドが、血清型ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、又はそれらの組み合わせの少なくとも一部を含む、項目１６に記載の方法。
（項目２７）
ベクターがＳＶ４０及びウシ成長ホルモン（ｂＧＨ）ポリアデニル化配列をさらに含む、項目１６に記載の方法。
（項目２８）
ベクターがＳＶ４０スプライスドナー（ＳＤ）及びスプライスアクセプター（ＳＡ）部位をさらに含む、項目２７に記載の方法。
（項目２９）
ベクターがｓｃ－ｒＡＡＶ２．５Ｈｕ－ＩＬ－１Ｒａを含む、項目１６に記載の方法。
（項目３０）
軟骨細胞又は滑膜細胞にＩＬ－１Ｒａペプチドを送達する方法であって、前記軟骨細胞又は滑膜細胞を、
ａ．血清型２の少なくとも一部及び血清型６の少なくとも一部を含む遺伝子操作されたアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）キャプシド；ならびに
ｂ．前記キャプシド内にパッケージングされたベクターであって、ＣＭＶプロモータに作動可能に連結された修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子を含み、前記修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子が配列番号２と少なくとも９５％同一である、ベクター；
を含む組換え自己相補的アデノ随伴ウイルス（ｓｃ－ｒＡＡＶ）と接触させることを含み、
ここで前記ｓｃ－ｒＡＡＶが前記ベクターを前記軟骨細胞又は滑膜細胞に形質導入し、及び前記修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子が前記軟骨細胞又は滑膜細胞にＩＬ－１Ｒａペプチドを提供するように発現される、
方法。
（項目３１）
ベクターがｓｃ－ｒＡＡＶ２．５Ｈｕ－ＩＬ－１Ｒａを含む、項目３０に記載の方法。
（項目３２）
ベクターがＳＶ４０及びウシ成長ホルモン（ｂＧＨ）ポリアデニル化配列をさらに含む、項目３０に記載の方法。
（項目３３）
ベクターがＳＶ４０スプライスドナー（ＳＤ）及びスプライスアクセプター（ＳＡ）部位をさらに含む、項目３０に記載の方法。
（項目３４）
組換え自己相補的アデノ随伴ウイルス（ｓｃ－ｒＡＡＶ）を含む組成物であって、ここで前記ｓｃ－ｒＡＡＶが、
ａ．血清型２の少なくとも一部及び血清型６の少なくとも一部を含む遺伝子操作されたキャプシド；ならびに
ｂ．前記キャプシド内にパッケージングされたベクターであって、ＣＭＶプロモータに作動可能に連結された修飾ＩＬ－１Ｒａペプチドをコードする核酸配列を含み、前記修飾ＩＬ－１Ｒａペプチドをコードする前記核酸配列が配列番号２と少なくとも９０％同一である、ベクター
を含む、組成物。
（項目３５）
ベクターがＳＶ４０及びウシ成長ホルモン（ｂＧＨ）ポリアデニル化配列をさらに含む、項目３４記載の組成物。
（項目３６）
ベクターがＳＶ４０スプライスドナー（ＳＤ）及びスプライスアクセプター（ＳＡ）部位をさらに含む、項目３５に記載の組成物。
（項目３７）
ベクターがｓｃ－ｒＡＡＶ２．５Ｈｕ－ＩＬ－１Ｒａを含む、項目３４に記載の組成物。
（項目３８）
ＣＭＶプロモータに作動可能に連結された修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子を含み、前記修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子が配列番号２と少なくとも９５％同一である、組換え自己相補的アデノ随伴ウイルス（ｓｃ－ｒＡＡＶ）ベクター。
（項目３９）
ＳＶ４０及びウシ成長ホルモン（ｂＧＨ）ポリアデニル化配列をさらに含む、項目３８に記載のベクター。
（項目４０）
ＳＶ４０スプライスドナー（ＳＤ）及びスプライスアクセプター（ＳＡ）部位をさらに含む、項目３９に記載のベクター。
（項目４１）
ｓｃ－ｒＡＡＶ２．５Ｈｕ－ＩＬ－１Ｒａを含む、項目３８に記載のベクター。
（項目４２）
軟骨の修復を必要とするヒトにおいて軟骨を修復する方法であって、組換え自己相補的アデノ随伴ウイルス（ｓｃ－ｒＡＡＶ）を含む組成物を軟骨の位置に導入することを含み、ここで前記ｓｃ－ｒＡＡＶが、
ａ．遺伝子操作されたＡＡＶキャプシド；及び
ｂ．前記キャプシド内にパッケージングされたベクターであって、プロモータに作動可能に連結された修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子を含み、前記修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子が配列番号２と少なくとも９５％同一である、ベクター
を含み、
ここで前記ｓｃ－ｒＡＡＶが前記ベクターを前記軟骨の位置の細胞に形質導入し、前記修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子が軟骨を修復するのに有効なＩＬ－１Ｒａペプチドをヒトに提供するように発現される、
方法。
（項目４３）
ヒトが、変形性関節症もしくは関節リウマチと診断されているか又は変形性関節症もしくは関節リウマチを発症する危険性がある、項目４２に記載の方法。
（項目４４）
組成物が直接関節内注射によって軟骨の位置に導入される、項目４２に記載の方法。
（項目４５）
細胞が軟骨細胞、滑膜細胞、又はそれらの組み合わせである、項目４２に記載の方法。
（項目４６）
方法が、前記方法が最初に行われた時点より後の時点で２回目に実施される、項目４２に記載の方法。
（項目４７）
時点が少なくとも３ヶ月である、項目４２に記載の方法。
（項目４８）
方法が、組成物と組み合わせて軟骨の位置に二次療法を同時導入することをさらに含む、項目４２に記載の方法。
（項目４９）
二次療法が、グルココルチコイド、ヒアルロナン、多血小板血漿、組換えヒトＩＬ－１Ｒａ、又はそれらの組み合わせを含む、項目４８に記載の方法。
（項目５０）
プロモータがＣＭＶプロモータを含む、項目４２に記載の方法。
（項目５１）
遺伝子操作されたキャプシドが、血清型ＡＡＶ２の少なくとも一部及び血清型ＡＡＶ６の少なくとも一部を含む、項目４２に記載の方法。
（項目５２）
遺伝子操作されたキャプシドが、血清型ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、又はそれらの組み合わせの少なくとも一部を含む、項目４２に記載の方法。
（項目５３）
ベクターがｓｃ－ｒＡＡＶ２．５Ｈｕ－ＩＬ－１Ｒａを含む、項目４２に記載の方法。
（項目５４）
炎症領域にインターロイキン１受容体アゴニスト（ＩＬ－１Ｒａ）ペプチドを提供する方法であって、組換え自己相補的アデノ随伴ウイルス（ｓｃ－ｒＡＡＶ）を含む組成物を炎症部位に導入することを含み、ここで前記ｓｃ－ｒＡＡＶが、
ａ．遺伝子操作されたＡＡＶキャプシド；及び
ｂ．前記キャプシド内にパッケージングされたベクターであって、プロモータに作動可能に連結された修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子を含み、前記修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子が配列番号２と少なくとも９５％同一である、ベクター
を含み、
ここで前記ｓｃ－ｒＡＡＶが前記ベクターを前記炎症部位の細胞に形質導入し、前記修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子が炎症を軽減するのに有効な治療有効量のＩＬ－１Ｒａペプチドを前記炎症部位の前記細胞に提供するように発現される、
方法。
（項目５５）
炎症部位がヒトの関節、滑膜、滑膜下膜、関節包、腱、靭帯、軟骨、又は関節周囲の筋肉である、項目５４に記載の方法。
（項目５６）
組成物が直接関節内注射によって炎症部位に導入される、項目５４に記載の方法。
（項目５７）
細胞が軟骨細胞、滑膜細胞、又はそれらの組み合わせである、項目５４に記載の方法。
（項目５８）
プロモータがＣＭＶプロモータを含む、項目５４に記載の方法。
（項目５９）
遺伝子操作されたキャプシドが、血清型ＡＡＶ２の少なくとも一部及び血清型ＡＡＶ６の少なくとも一部を含む、項目５４に記載の方法。
（項目６０）
遺伝子操作されたキャプシドが、血清型ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３、ＡＡＶ４、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ７、ＡＡＶ８、ＡＡＶ９、ＡＡＶ１０、ＡＡＶ１１、又はそれらの組み合わせの少なくとも一部を含む、項目５４に記載の方法。
（項目６１）
ベクターがｓｃ－ｒＡＡＶ２．５Ｈｕ－ＩＬ－１Ｒａを含む、項目５４に記載の方法。
（項目６２）
治療有効量のインターロイキン１受容体アゴニスト（ＩＬ－１Ｒａ）を、それを必要とするヒトに提供する方法であって、組換え自己相補的アデノ随伴ウイルス（ｓｃ－ｒＡＡＶ）を含む組成物を標的とした部位の位置に導入することを含み、ここで前記ｓｃ－ｒＡＡＶが、
ａ．遺伝子操作されたＡＡＶキャプシド；及び
ｂ．前記キャプシド内にパッケージングされたベクターであって、プロモータに作動可能に連結された修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子を含み、前記修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子が配列番号６に従うＩＬ－１Ｒａをコードする、ベクター
を含み、
ここで前記ｓｃ－ｒＡＡＶが前記ベクターを前記標的とした部位の位置の細胞に形質導入し、ＩＬ－１Ｒａが前記治療有効量の前記ＩＬ－１Ｒａを前記ヒトに提供するように発現される、
方法。
（項目６３）
ヒトにおける変形性関節症又は関節リウマチの症状を改善する方法であって、組換え自己相補的アデノ随伴ウイルス（ｓｃ－ｒＡＡＶ）を含む組成物を標的とした部位の位置に導入することを含み、ここで前記ｓｃ－ｒＡＡＶが、
ａ．遺伝子操作されたＡＡＶキャプシド；及び
ｂ．前記キャプシド内にパッケージングされたベクターであって、プロモータに作動可能に連結された修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子を含み、前記修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子が配列番号６に従うＩＬ－１Ｒａをコードする、ベクター
を含み、
ここで前記ｓｃ－ｒＡＡＶが前記ベクターを前記標的とした部位の位置の細胞に形質導入し、ＩＬ－１Ｒａが、変形性関節症又は関節リウマチに関連する症状を改善するのに有効な量のＩＬ－１Ｒａを前記ヒトに提供するように発現される、
方法。
（項目６４）
軟骨細胞又は滑膜細胞にＩＬ－１Ｒａペプチドを送達する方法であって、前記軟骨細胞又は滑膜細胞を、
ａ．血清型２の少なくとも一部及び血清型６の少なくとも一部を含む遺伝子操作されたアデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）キャプシド；ならびに
ｂ．前記キャプシド内にパッケージングされたベクターであって、ＣＭＶプロモータに作動可能に連結された修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子を含み、前記修飾ＩＬ－１Ｒａが配列番号６に従うＩＬ－１Ｒａをコードする、ベクター
を含む組換え自己相補的アデノ随伴ウイルス（ｓｃ－ｒＡＡＶ）と接触させることを含み、
ここで前記ｓｃ－ｒＡＡＶが前記ベクターを前記軟骨細胞又は滑膜細胞に形質導入し、及びＩＬ－１Ｒａが前記軟骨細胞又は滑膜細胞にＩＬ－１Ｒａを提供するように発現される、
方法。
（項目６５）
組換え自己相補的アデノ随伴ウイルス（ｓｃ－ｒＡＡＶ）を含む組成物であって、ここで前記ｓｃ－ｒＡＡＶが、
ａ．血清型２の少なくとも一部及び血清型６の少なくとも一部を含む遺伝子操作されたキャプシド；ならびに
ｂ．前記キャプシド内にパッケージングされたベクターであって、ＣＭＶプロモータに作動可能に連結された修飾ＩＬ－１Ｒａペプチドをコードする核酸配列を含み、前記核酸配列が配列番号６に従うＩＬ－１Ｒａをコードする、ベクター
を含む、組成物。
（項目６６）
軟骨の修復を必要とするヒトにおいて軟骨を修復する方法であって、組換え自己相補的アデノ随伴ウイルス（ｓｃ－ｒＡＡＶ）を含む組成物を軟骨の位置に導入することを含み、ここで前記ｓｃ－ｒＡＡＶが、
ａ．遺伝子操作されたＡＡＶキャプシド；及び
ｂ．前記キャプシド内にパッケージングされたベクターであって、プロモータに作動可能に連結された修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子を含み、前記修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子が配列番号６に従うＩＬ－１Ｒａをコードする、ベクター
を含み、
ここで前記ｓｃ－ｒＡＡＶが前記ベクターを前記軟骨の位置の細胞に形質導入し、ＩＬ－１Ｒａが軟骨を修復するのに有効なＩＬ－１Ｒａを前記ヒトに提供するように発現される、
方法。
（項目６７）
炎症領域にインターロイキン１受容体アゴニスト（ＩＬ－１Ｒａ）ペプチドを提供する方法であって、組換え自己相補的アデノ随伴ウイルス（ｓｃ－ｒＡＡＶ）を含む組成物を炎症部位に導入することを含み、ここで前記ｓｃ－ｒＡＡＶが、
ａ．遺伝子操作されたＡＡＶキャプシド；及び
ｂ．前記キャプシド内にパッケージングされたベクターであって、プロモータに作動可能に連結された修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子を含み、前記修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子が配列番号６に従うＩＬ－１Ｒａをコードする、ベクター
を含み、
ここで前記ｓｃ－ｒＡＡＶが前記ベクターを前記炎症部位の細胞に形質導入し、ＩＬ－１Ｒａが、炎症を軽減するのに有効な治療有効量のＩＬ－１Ｒａを前記炎症部位の前記細胞に提供するように発現される、
方法。
【0023】
文脈、本明細書、及び当業者の知識から明らかであるように、本明細書に記載される任意の特徴又は特徴の組み合わせは、そのような組み合わせに含まれる特徴が互いに矛盾しない限り、本発明の範囲内に含まれる。本発明のさらなる利点及び態様は、以下の詳細な説明及び特許請求の範囲において明らかである。
【図面の簡単な説明】
【0024】
【発明を実施するための形態】
【0025】
用語
他に説明がない限り、本明細書で使用されるすべての技術用語及び科学用語は、開示されている発明が属する技術分野の当業者によって一般に理解されるのと同じ意味を有する。単数形の用語「１つの」、及び「その」は、文脈上明らかに異なる指示がない限り、複数の指示対象を含む。同様に、文脈上明らかに異なる指示がない限り、「又は」という語は「及び」を含むことが意図されている。「含む」は、「包含する」を意味する。したがって、「Ａ又はＢを含む」は、「Ａを含む」又は「Ｂを含む」又は「Ａ及びＢを含む」を意味する。
他に説明がない限り、本明細書で使用されるすべての技術用語及び科学用語は、開示されている発明が属する技術分野の当業者によって一般に理解されるのと同じ意味を有する。単数形の用語「１つの」、及び「その」は、文脈上明らかに異なる指示がない限り、複数の指示対象を含む。同様に、文脈上明らかに異なる指示がない限り、「又は」という語は「及び」を含むことが意図されている。「含む」は、「包含する」を意味する。したがって、「Ａ又はＢを含む」は、「Ａを含む」又は「Ｂを含む」又は「Ａ及びＢを含む」を意味する。
【0026】
本開示の実施形態の実施及び／又は試験に適した方法及び材料を以下に記載する。そのような方法及び材料は例示にすぎず、限定することを意図するものではない。本明細書に記載のものと類似又は等価の他の方法及び材料を使用することができる。例えば、本開示が関連する技術分野において周知の従来の方法は、例えば、その開示全体が参照により本明細書に組み込まれる、Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，２ｄ ｅｄ．，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，１９８９；Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，３ｄ ｅｄ．，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｐｒｅｓｓ，２００１；Ａｕｓｕｂｅｌ ｅｔ ａｌ．，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｇｒｅｅｎｅ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ，１９９２（ａｎｄ Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｓ ｔｏ ２０００）；Ａｕｓｕｂｅｌ ｅｔ ａｌ．，Ｓｈｏｒｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ：Ａ Ｃｏｍｐｅｎｄｉｕｍ ｏｆ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｆｒｏｍ Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，４ｔｈ ｅｄ．，Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，１９９９；Ｈａｒｌｏｗ ａｎｄ Ｌａｎｅ，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，１９９０；及びＨａｒｌｏｗ ａｎｄ Ｌａｎｅ，Ｕｓｉｎｇ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，１９９９を含む、様々な一般的及びより特定の参考文献に記載されている。
【0027】
本明細書中で言及されるすべての刊行物、特許出願、特許、及び他の参考文献は、その全体が参照により組み込まれる。
【0028】
開示されている技術を実施又は試験するために、本明細書に記載されているものと類似又は等価の方法及び材料を使用することができるが、適切な方法及び材料を以下に記載する。材料、方法、及び例は例示にすぎず、限定することを意図するものではない。
【0029】
本開示の様々な実施形態の検討を容易にするために、以下の特定の用語の説明を提供する：
【0030】
アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）、組換えＡＡＶ（ｒＡＡＶ）、及び組換え自己相補的ＡＡＶ（ｓｃ－ｒＡＡＶ）：ＡＡＶはパルボウイルス科（Ｐａｒｖｏｖｉｒｉｄａｅ）の小型ウイルス（２０ｎｍ）である。ＡＡＶが疾患を引き起こすことは知られていない。ＡＡＶは、低い免疫原性、非分裂細胞を有効に形質導入する能力、ならびに種々の細胞及び組織型を感染させる能力を有することが示されていることを含む様々な理由で、最近遺伝子治療に使用されている。組換えＡＡＶ（ｒＡＡＶ）は天然のウイルスコード配列を含まない。組換えＡＡＶ ＤＮＡは、約４６００ヌクレオチド長の一本鎖分子としてウイルスキャプシド中にパッケージングされている。ウイルスによる細胞の感染に続いて、細胞の分子機構は一本鎖ＤＮＡを二本鎖形態に変換する。二本鎖ＤＮＡ型のみが、含まれる１つ又は複数の遺伝子をＲＮＡに転写する細胞のタンパク質に対して有用である。自己相補的ＡＡＶ（ｓｃ－ｒＡＡＶ）は、分子内二本鎖ＤＮＡ鋳型を形成することができる、ｒＡＡＶの遺伝子操作形態である。したがって、感染すると、ｓｃ－ｒＡＡＶの２つの相補的な半分が会合して、即時の複製及び合成の準備ができている１つの二本鎖ＤＮＡ単位を形成する。
【0031】
発現：核酸配列のタンパク質への翻訳。タンパク質は、発現されて細胞内に留まり、細胞表面膜の成分となり得るか、又は細胞外マトリックスもしくは培地に分泌され得る。
【0032】
作動可能に連結された：第一の核酸配列が第二の核酸配列と機能的な関係に置かれている場合、第一の核酸配列は第二の核酸配列と作動可能に連結されている。例えば、プロモータがコード配列の転写又は発現に影響を及ぼす場合、そのプロモータはコード配列に作動可能に連結されている。
【0033】
薬学的に許容されるビヒクル：薬学的に許容される担体（ビヒクル）、例えば溶液は、従来のものであり得るが、従来のビヒクルに限定されない。例えば、Ｅ．Ｗ．Ｍａｒｔｉｎ，Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ，１５ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ（１９７５）及びＤ．Ｂ．Ｔｒｏｙ，ｅｄ．Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ＆Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ ＭＤ ａｎｄ Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，ＰＡ，２１ｓｔ Ｅｄｉｔｉｏｎ（２００６）は、１つ以上の治療用化合物又は分子の薬学的送達に適した組成物及び製剤を記載する。一般に、担体の性質は、使用されている特定の投与様式に依存する。生物学的に中性の担体に加えて、投与される医薬組成物は、湿潤剤又は乳化剤、防腐剤及びｐＨ緩衝剤等のような少量の非毒性補助物質、例えば酢酸ナトリウム又はソルビタンモノラウラートを含み得る。
【0034】
疾患を予防する、治療する、管理する、又は改善する：疾患を「予防する」とは、疾患の完全な発症を抑制することを意味し得る。「治療する」とは、疾患又は病理学的状態の徴候又は症状が発現し始めた後にそれを改善する治療的介入を意味し得る。「管理する」とは、疾患又は状態の徴候又は症状を悪化させない治療的介入を意味し得る。「改善する」とは、疾患又は状態の徴候又は症状の数又は重症度の減少を意味し得る。
【0035】
配列同一性：２つ以上の核酸配列間の同一性（又は類似性）は、配列間の同一性又は類似性によって表される。配列同一性は、同一性パーセントに関して測定することができる；パーセンテージが高いほど、配列はより同一である。配列類似性は、類似性パーセント（これは保存的アミノ酸置換を考慮に入れる）に関して測定することができる；パーセンテージが高いほど、配列はより類似している。比較のための配列のアラインメントの方法は当技術分野において周知である。様々なプログラム及びアラインメントアルゴリズムが、Ｓｍｉｔｈ＆Ｗａｔｅｒｍａｎ，Ａｄｖ．Ａｐｐｌ．Ｍａｔｈ．２：４８２，１９８１；Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ＆Ｗｕｎｓｃｈ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４８：４４３，１９７０；Ｐｅａｒｓｏｎ＆Ｌｉｐｍａｎ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８５：２４４４，１９８８；Ｈｉｇｇｉｎｓ＆Ｓｈａｒｐ，Ｇｅｎｅ，７３：２３７－４４，１９８８；Ｈｉｇｇｉｎｓ＆Ｓｈａｒｐ，ＣＡＢＩＯＳ ５：１５１－３，１９８９；Ｃｏｒｐｅｔ ｅｔ ａｌ．，Ｎｕｃ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１６：１０８８１－９０，１９８８；Ｈｕａｎｇ ｅｔ ａｌ．Ｃｏｍｐｕｔｅｒ Ａｐｐｌｓ．ｉｎ ｔｈｅ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ ８，１５５－６５，１９９２；及びＰｅａｒｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｍｅｔｈ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏ．２４：３０７－３１，１９９４に記載されている。Ａｌｔｓｃｈｕｌ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：４０３－１０，１９９０は、配列アラインメント方法及び相同性計算の詳細な考察を提示している。ＮＣＢＩの基本的局所アラインメント検索ツール（ＢＬＡＳＴ）（Ａｌｔｓｃｈｕｌ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：４０３－１０，１９９０）は、配列解析プログラムｂｌａｓｔｐ、ｂｌａｓｔｎ、ｂｌａｓｔｘ、ｔｂｌａｓｔｎ及びｔｂｌａｓｔｘと関連して使用するために、国立バイオテクノロジーセンター（ＮＣＢＩ、国立医学図書館、Ｂｕｉｌｄｉｎｇ ３８Ａ，Ｒｏｏｍ ８Ｎ８０５，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ ２０８９４）を含むいくつかの情報源から、及びインターネット上で入手可能である。さらなる情報はＮＣＢＩウェブサイトで見出すことができる。ＢＬＡＳＴＮは核酸配列を比較するために使用でき、一方ＢＬＡＳＴＰはアミノ酸配列を比較するために使用し得る。２つの比較した配列が相同性を共有する場合、指定された出力ファイルは、それらの相同性の領域を整列された配列として提示する。２つの比較した配列が相同性を共有しない場合、指定された出力ファイルは整列された配列を提示しない。ＢＬＡＳＴ様アラインメントツール（ＢＬＡＴ）も、核酸配列を比較するために使用し得る（Ｋｅｎｔ，Ｇｅｎｏｍｅ Ｒｅｓ．１２：６５６－６６４，２００２）。ＢＬＡＴは、Ｋｅｎｔ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ（Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ，ＣＡ）含むいくつかの情報源から、及びインターネット上で（ｇｅｎｏｍｅ．ｕｃｓｃ．ｅｄｕ）入手可能である。一旦整列されると、同一のヌクレオチド又はアミノ酸残基が両方の配列中に存在する位置の数を数えることによってマッチの数が決定される。配列同一性パーセントは、同定された配列に示された配列の長さ、又は連結された長さ（例えば同定された配列に示された配列からの１００個の連続するヌクレオチド又はアミノ酸残基）によってマッチの数を除し、続いて得られた値に１００を乗じることによって決定される。例えば、１５５４個のヌクレオチドを有する試験配列と整列させたとき、１１６６個のマッチを有する核酸配列は、試験配列と７５．０パーセント同一である（１１６６÷１５５４×１００＝７５．０）。配列同一性パーセントの値は、最も近い小数点第１位に丸められる。
【0036】
治療有効量：特定の薬剤で治療される被験体において所望の効果を達成するのに十分なその薬剤の量。そのような薬剤はＩＬ－１Ｒａを含み得る。例えば、ＩＬ－１Ｒａの治療有効量は、変形性関節症又は関節リウマチの症状を予防、治療、又は改善するのに十分な量であり得る。被験体を予防、改善、及び／又は治療するために有用な薬剤の治療有効量は、治療される被験体、疾病の種類及び重症度、ならびに治療用組成物の投与方法に依存する。
【0037】
形質導入：形質導入細胞は、分子生物学的技術によって核酸分子が導入されている細胞である。本明細書で使用される場合、形質導入という用語は、ウイルス又はウイルスベクターによるトランスフェクション、プラスミドベクターによる形質転換、ならびにエレクトロポレーション、リポフェクション、及び粒子銃加速による裸のＤＮＡの導入を含む、核酸分子をそのような細胞に導入し得るすべての技術を包含する。そのような細胞はしばしば形質転換細胞と呼ばれる。
【0038】
ベクター：宿主細胞に導入され、それによって形質転換された宿主細胞を産生する核酸分子。ベクターは、複製起点などの、宿主細胞内で複製することを可能にする核酸配列を含み得る。ベクターは、宿主細胞内で複製することを可能にする核酸配列を欠いていてもよい。ベクターはまた、標的とした部位の遺伝子、１つ以上の選択可能なマーカー遺伝子、当技術分野で公知の他の遺伝要素、又は任意の他の適切な挿入物を含み得る。
【0039】
本発明は、治療用遺伝子産物（例えばＩＬ－１Ｒａ）を標的とした部位の位置、例えば関節に持続的に送達するための方法及び組成物を特徴とする。本発明はまた、変形性関節症又は関節リウマチなどの、しかしこれらに限定されない疾患の症状を治療するための方法及び組成物を特徴とする。本発明はまた、個体（例えばヒト）に治療有効量の治療用遺伝子産物（例えばＩＬ－１Ｒａ）を提供するための方法及び組成物を特徴とする。方法及び組成物は、組換え自己相補的アデノ随伴ウイルス（ｓｃ－ｒＡＡＶ）を特徴とし得、ここでｓｃ－ｒＡＡＶは、遺伝子操作されたキャプシド及びキャプシド内にパッケージングされたベクター（ｓｃ－ｒＡＡＶベクター）を含む。ベクターは、プロモータ（例えば構成的プロモータ）に作動可能に連結された導入遺伝子（例えば標的とした部位のタンパク質、例えば治療用遺伝子産物、例えばＩＬ－１Ｒａ又はその改変型をコードするヌクレオチド配列、）を含み得る。
【0040】
前述のように、本発明は、組換え自己相補的アデノ随伴ウイルス（ｓｃ－ｒＡＡＶ）ベクターを含む組成物を特徴とする。ｓｃ－ｒＡＡＶベクターの非限定的な例は、以下の表１の配列番号１に示されている。配列番号１のｓｃ－ｒＡＡＶベクターは修飾ＩＬ－１Ｒａ遺伝子を含む。いくつかの実施形態では、ベクターはＳＶ４０ポリアデニル化配列を含む。いくつかの実施形態では、ベクターはウシ成長ホルモン（ｂＧＨ）ポリアデニル化配列を含む。いくつかの実施形態では、ベクターはＳＶ４０スプライスドナー（ＳＤ）及びスプライスアクセプター（ＳＡ）部位を含む。ｓｃ－ｒＡＡＶベクターは配列番号１に限定されない。
【0041】
ｓｃ－ｒＡＡＶベクターは、標的とした部位のペプチドをコードする核酸を含む。いくつかの実施形態では、核酸は、配列番号２と少なくとも９０％同一である。いくつかの実施形態では、核酸は、配列番号２と少なくとも９２％同一である。いくつかの実施形態では、核酸は、配列番号２と少なくとも９４％同一である。いくつかの実施形態では、核酸は配列番号２と少なくとも９５％同一である。いくつかの実施形態では、核酸は、配列番号２と少なくとも９６％同一である。いくつかの実施形態では、核酸は配列番号２と少なくとも９７％同一である。いくつかの実施形態では、核酸は、配列番号２と少なくとも９８％同一である。いくつかの実施形態では、核酸は配列番号２と少なくとも９９％同一である。そのような核酸配列の非限定的な例は、以下の表１に見出すことができる。例えば、配列番号３は、配列番号２と約９８％同一である修飾ヒトＩＬ－１Ｒａの配列である；配列番号４は、配列番号２と約９９％同一である修飾ヒトＩＬ－１Ｒａの配列である；及び（表１中の太字は、配列番号２と比較したヌクレオチド置換であり、コドンに下線を付していることに留意されたい）。
【表1-1】
【表1-2】
【表1-3】
【表1-4】
【0042】
いくつかの実施形態では、ＩＬ－１Ｒａ挿入物によってコードされるＩＬ－１Ｒａペプチドは、ＩＬ－１Ｒａを含む（以下の表２の配列番号６参照）。
【表2】
【0043】
導入遺伝子（例えば標的とした部位のタンパク質をコードするヌクレオチド配列）は、プロモータに作動可能に連結されている。いくつかの実施形態では、プロモータはサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）プロモータを含む。本発明はＣＭＶプロモータに限定されず、任意の適切なプロモータ又は種々のプロモータの一部を特徴とし得る。プロモータの例には、ＣＭＶプロモータ、ハイブリッドＣＭＶプロモータ、ＣＡＧプロモータ、ヒトβアクチンプロモータ、ハイブリッドβアクチンプロモータ、ＥＦ１プロモータ、Ｕ１ａプロモータ、Ｕ１ｂプロモータ、Ｔｅｔ誘導性プロモータ、ＶＰ１６－ＬｅｘＡプロモータ、ニワトリβアクチン（ＣＢＡ）プロモータ、ヒト伸長因子１αプロモータ、シミアンウイルス４０（ＳＶ４０）プロモータ、及び単純ヘルペスウイルスチミジンキナーゼプロモータが含まれる。
【0044】
いくつかの実施形態では、プロモータはハイブリッドプロモータを含む。一例として、表３は、ＩＬ－１β／ＩＬ－６ハイブリッドプロモータを示す（ｖａｎ ｄｅ Ｌｏｏ ｅｔ ａｌ．，２００４，Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒａｐｙ １１：５８１－５９０も参照のこと）。本発明はまた、表３に示すハイブリッドプロモータに限定されない。
【表3】
【0045】
いくつかの実施形態では、ｓｃ－ｒＡＡＶベクターはキャプシド内にパッケージングされている。いくつかの実施形態では、キャプシドは、ＡＡＶ血清型１（ＡＡＶ１）、ＡＡＶ血清型２（ＡＡＶ２）、ＡＡＶ血清型３（ＡＡＶ３）、ＡＡＶ血清型４（ＡＡＶ４）、ＡＡＶ血清型５（ＡＡＶ５）、ＡＡＶ血清型６（ＡＡＶ６）、それらの誘導体、又はそれらの組み合わせの少なくとも一部を含む。例えば、いくつかの実施形態では、キャプシドは、ＡＡＶ血清型２の少なくとも一部及びＡＡＶ血清型６の少なくとも一部、例えばＡＡＶ２．５を含む。
【0046】
組成物、例えばｓｃ－ｒＡＡＶを含む組成物は、標的とした部位の位置（例えばヒトの体内）の細胞に導入し得る。例えば、いくつかの実施形態では、変形性関節症の症状を治療する場合、直接関節内注射によって関節内の細胞（例えば軟骨細胞、滑膜細胞、例えばＡ型、Ｂ型等）に組成物を導入し得る。いくつかの実施形態では、組成物は、ヒトの関節、滑膜、滑膜下膜、関節包、腱、靭帯、軟骨、又は関節周囲の筋肉に投与される。本発明は、前述の疾患（例えば変形性関節症）、投与手段（例えば関節内注射）、標的とした部位の位置（例えば関節）、又は細胞型（例えば軟骨細胞、滑膜細胞）に限定されない。例えば、いくつかの実施形態では、形質導入し得る他の細胞型は、間葉系幹細胞を含み得る。
【0047】
ｓｃ－ｒＡＡＶはベクターを細胞に形質導入し、修飾ＩＬ－１Ｒａペプチドが発現される。いくつかの実施形態では、ＩＬ－１Ｒａペプチドは、変形性関節症又は関節リウマチなどの様々な疾患に関連する症状を改善するのに有効な治療有効量の前記修飾ＩＬ－１Ｒａペプチドをヒトに提供するように発現される。
【0048】
いくつかの実施形態では、組成物（例えばｓｃ－ｒＡＡＶ）の導入は１回行われる。いくつかの実施形態では、組成物（例えばｓｃ－ｒＡＡＶ）の導入は、２回、例えば１回目と１回目に続く２回目に行われる。いくつかの実施形態では、組成物の導入は２回より多く、例えば３回、４回、５回等で行われる。組成物の２回目の導入は、方法が最初に行われた時点より後の時点、例えば３ヶ月、４ヶ月後、５ヶ月後、６ヶ月後、７ヶ月後、８ヶ月後、９ヶ月後、１０ヶ月後、１１ヶ月後、１年後、１年よりさらに後等に行われ得る。
【0049】
組成物は任意の適切な医薬組成物を含み得る。いくつかの実施形態では、組成物は緩衝液を含む。いくつかの実施形態では、緩衝液はリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）を含む。いくつかの実施形態では、組成物はソルビトール、例えば５％ソルビトールをさらに含む。いくつかの実施形態では、組成物は塩、例えばＮａＣｌをさらに含む。塩の濃度は、任意の適切な濃度、例えば３５０ｍＭのＮａＣｌ、３５０ｍＭを超えるＮａＣｌ、３５０ｍＭ未満等であり得る。
【0050】
いくつかの実施形態では、組成物（例えばｓｃ－ｒＡＡＶ）は二次療法と同時投与される。いくつかの実施形態では、二次療法は、ＯＡもしくはＲＡの治療薬、又は疾患の症状を治療するための他の任意の適切な療法を含む。ＯＡに対する二次療法の非限定的な例には、グルココルチコイド、ヒアルロナン（粘性補給）、多血小板血漿、及び組換えヒトＩＬ－１Ｒａ（Ａｎａｋｉｎｒａ；Ｋｉｎｅｒｅｔ（登録商標））が含まれる。例えば、いくつかの実施形態では、ｓｃ－ｒＡＡＶはグルココルチコイド又は多血小板血漿と同時投与される。
【0051】
以下の米国特許の開示は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる：米国特許出願公開第２００８／０１８７５７６号、米国特許出願公開第２００９／０１０４１５５号、韓国特許出願公開第２０１２０４１１３９号、日本特許出願公開第２０１５５１８８１６号、国際公開第２０１３１５１６７２号、国際公開第２００８０８８８９５号、米国特許第８５２９８８５号、米国特許第７０３７４９２号、米国特許出願公開第２００７０１２８１７７号、米国特許第６４９１９０７号、米国特許第８９９９９４８号、米国特許出願公開第２０１５０２１８５８６号、米国特許第７８９２８２４号、米国特許出願公開第２０１３０２９５６１４号、日本特許出願公開第２００２５３８７７０号、日本特許出願公開第２０１０５１６２５２号、韓国特許出願公開第２００２０２７４５０号、韓国特許出願公開第２００３０２８０８０号、米国特許第６４８２６３４号、米国特許出願公開第２００９０１０５１４８号、米国特許出願公開第２０１２０２３２１３０号、米国特許出願公開第２０１４０２３４２５５号、米国特許第５７５６２８３号、米国特許第６０８３７１６号、国際公開第２００２０３８７８２号、国際公開第２００７０３９６９９号、国際公開第２０１２０４７０９３号、国際公開第２０１４１７０４７０号、国際公開第２０１５０１８８６０号、国際公開第２０１５０４４２９２号、国際公開第２０１５１５８７４９号、米国特許第７４５２６９６号、米国特許第６９４３１５３号、米国特許第６４２９００１号、国際公開第２０１５０３１３９２号、国際公開第２００４０９２２１１号。
【0052】
例１
例１は、本発明のｓｃ－ｒＡＡＶ（ＩＬ－１Ｒａをコードする）の投与を記載する。本発明は例１の開示に限定されない。５人の患者が、本発明のｓｃ－ｒＡＡＶの投与を検討する臨床試験に参加する。患者は以下の通りである：（１）右膝に変形性関節症を有する６５歳の男性；（２）左膝に変形性関節症を有する５９歳の男性；（３）左膝に変形性関節症を有する５８歳の女性；（４）右膝に変形性関節症を有する５１歳の男性；及び（５）右膝に変形性関節症を有する４８歳の男性。それぞれの患者に、各膝あたり１×１０１２個のウイルス遺伝子の関節内注射によってｓｃ－ｒＡＡＶを投与する。ＩＬ－１Ｒａは軟骨細胞及び滑膜細胞において発現される。患者１は、２週間以内にＯＡに関連する症状の改善を述べている。患者２は、１週間以内にＯＡに関連する症状の改善を述べている。患者３は、５週間以内にＯＡに関連する症状の改善を述べている。患者４は、１週間以内にＯＡに関連する症状の改善を述べている。６週の時点で、患者５はＯＡに関連する症状の改善を述べていない。
例１は、本発明のｓｃ－ｒＡＡＶ（ＩＬ－１Ｒａをコードする）の投与を記載する。本発明は例１の開示に限定されない。５人の患者が、本発明のｓｃ－ｒＡＡＶの投与を検討する臨床試験に参加する。患者は以下の通りである：（１）右膝に変形性関節症を有する６５歳の男性；（２）左膝に変形性関節症を有する５９歳の男性；（３）左膝に変形性関節症を有する５８歳の女性；（４）右膝に変形性関節症を有する５１歳の男性；及び（５）右膝に変形性関節症を有する４８歳の男性。それぞれの患者に、各膝あたり１×１０１２個のウイルス遺伝子の関節内注射によってｓｃ－ｒＡＡＶを投与する。ＩＬ－１Ｒａは軟骨細胞及び滑膜細胞において発現される。患者１は、２週間以内にＯＡに関連する症状の改善を述べている。患者２は、１週間以内にＯＡに関連する症状の改善を述べている。患者３は、５週間以内にＯＡに関連する症状の改善を述べている。患者４は、１週間以内にＯＡに関連する症状の改善を述べている。６週の時点で、患者５はＯＡに関連する症状の改善を述べていない。
【0053】
例２
例２は、本発明のｓｃ－ｒＡＡＶ（ＩＬ－１Ｒａをコードする）の１回目の投与及び一定期間後の本発明の同じｓｃ－ｒＡＡＶの２回目の投与を記載する。本発明は例２の開示に限定されない。５５歳の男性は右膝に変形性関節症を呈する。前記男性の医師は、本発明のｓｃ－ｒＡＡＶベクター（ＩＬ－１Ｒａをコードする）の単回関節内注射を行う。患者の症状は２ヶ月以内に解消される。６ヶ月後、医師は、本発明の同じｓｃ－ｒＡＡＶベクター（ＩＬ－１Ｒａをコードする）の２回目の（単回）関節内注射を行う。患者の症状は、２回目の注射から６ヶ月後もまだ存在しない。
例２は、本発明のｓｃ－ｒＡＡＶ（ＩＬ－１Ｒａをコードする）の１回目の投与及び一定期間後の本発明の同じｓｃ－ｒＡＡＶの２回目の投与を記載する。本発明は例２の開示に限定されない。５５歳の男性は右膝に変形性関節症を呈する。前記男性の医師は、本発明のｓｃ－ｒＡＡＶベクター（ＩＬ－１Ｒａをコードする）の単回関節内注射を行う。患者の症状は２ヶ月以内に解消される。６ヶ月後、医師は、本発明の同じｓｃ－ｒＡＡＶベクター（ＩＬ－１Ｒａをコードする）の２回目の（単回）関節内注射を行う。患者の症状は、２回目の注射から６ヶ月後もまだ存在しない。
【0054】
例３
例３は、本発明のｓｃ－ｒＡＡＶ（ＩＬ－１Ｒａをコードする）の１回目の投与及び一定期間後の１回目のｓｃ－ｒＡＡＶとは異なる本発明のｓｃ－ｒＡＡＶ（ＩＬ－１Ｒａをコードする）の２回目の投与を記載する。本発明は例３の開示に限定されない。４９歳の女性は右足首に変形性関節症を呈する。前記女性の医師は、本発明のｓｃ－ｒＡＡＶベクター（ＩＬ－１Ｒａをコードする）の単回関節内注射を行う。患者の症状は５ヶ月以内に改善したが、解消されてはいない。６ヶ月後、医師は、本発明の異なるｓｃ－ｒＡＡＶベクター（ＩＬ－１Ｒａをコードする）の２回目の（単回）関節内注射を行う。２回目の注射から６ヶ月後に、患者の症状は解消される。
例３は、本発明のｓｃ－ｒＡＡＶ（ＩＬ－１Ｒａをコードする）の１回目の投与及び一定期間後の１回目のｓｃ－ｒＡＡＶとは異なる本発明のｓｃ－ｒＡＡＶ（ＩＬ－１Ｒａをコードする）の２回目の投与を記載する。本発明は例３の開示に限定されない。４９歳の女性は右足首に変形性関節症を呈する。前記女性の医師は、本発明のｓｃ－ｒＡＡＶベクター（ＩＬ－１Ｒａをコードする）の単回関節内注射を行う。患者の症状は５ヶ月以内に改善したが、解消されてはいない。６ヶ月後、医師は、本発明の異なるｓｃ－ｒＡＡＶベクター（ＩＬ－１Ｒａをコードする）の２回目の（単回）関節内注射を行う。２回目の注射から６ヶ月後に、患者の症状は解消される。
【0055】
例４
例４は、本発明のｓｃ－ｒＡＡＶ（ＩＬ－１Ｒａをコードする）と二次療法との同時投与を記載する。本発明は例４の開示に限定されない。６８歳の男性は、左膝に変形性関節症を呈する。前記男性の医師は、本発明のｓｃ－ｒＡＡＶベクター（ＩＬ－１Ｒａをコードする）及び多血小板血漿の両方の単回関節内注射を行う。患者の症状は２ヶ月以内に解消される。
例４は、本発明のｓｃ－ｒＡＡＶ（ＩＬ－１Ｒａをコードする）と二次療法との同時投与を記載する。本発明は例４の開示に限定されない。６８歳の男性は、左膝に変形性関節症を呈する。前記男性の医師は、本発明のｓｃ－ｒＡＡＶベクター（ＩＬ－１Ｒａをコードする）及び多血小板血漿の両方の単回関節内注射を行う。患者の症状は２ヶ月以内に解消される。
【0056】
本明細書に記載されたものに加えて、本発明の様々な変更が前述の記載から当業者に明らかであろう。そのような変更もまた、添付の特許請求の範囲の範囲内に含まれることが意図されている。本出願において引用される各参考文献は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【0057】
本発明の実施形態を示し、説明してきたが、添付の特許請求の範囲を超えない変更を加え得ることは当業者には容易に明らかであろう。特許請求の範囲に記載された参照番号は例示的であり、特許庁による検討を容易にするためだけのものであって、いかなる意味においても限定ではない。いくつかの実施形態では、本特許出願に提示されている図面は、角度、寸法比等を含めて一定の縮尺で描かれている。いくつかの実施形態では、図面は代表的なものにすぎず、特許請求の範囲は図面の寸法によって限定されない。いくつかの実施形態では、「含む」という語句を使用して本明細書に記載される本発明の説明は、「からなる」と説明され得る実施形態を含み、したがって、「からなる」という語句を使用して本発明の１つ以上の実施形態を特許請求するための書面による説明要件を満たす。
【0058】
以下の特許請求の範囲に列挙されるいずれの参照番号も、単に本特許出願の検討を容易にするためのものであり、例示であって、いかなる意味においても特許請求の範囲を図面中の対応する参照番号を有する特定の特徴に限定することを意図しない。
【配列表フリーテキスト】
【0059】
配列表１ ＜２２３＞修飾ヒトＩＬ１Ｒａ挿入物及びＳａｃＩＩ／ＮｏｔＩ制限部位を有するウイルス配列全体を含むＨｕ－ＩＬ－１Ｒａプラスミドの配列
配列表２ ＜２２３＞修飾ヒトＩＬ－１Ｒａ挿入物
配列表３ ＜２２３＞修飾ヒトＩＬ－１Ｒａ挿入物（配列番号２と９８％同一；
配列表４ ＜２２３＞修飾ヒトＩＬ－１Ｒａ挿入物（配列番号２と９９％同一；
配列表５ ＜２２３＞修飾ヒトＩＬ－１Ｒａ挿入物（配列番号２と９５％同一；
配列表７ ＜２２３＞ＩＬ－１β／ＩＬ－６ハイブリッドプロモータ
配列表２ ＜２２３＞修飾ヒトＩＬ－１Ｒａ挿入物
配列表３ ＜２２３＞修飾ヒトＩＬ－１Ｒａ挿入物（配列番号２と９８％同一；
配列表４ ＜２２３＞修飾ヒトＩＬ－１Ｒａ挿入物（配列番号２と９９％同一；
配列表５ ＜２２３＞修飾ヒトＩＬ－１Ｒａ挿入物（配列番号２と９５％同一；
配列表７ ＜２２３＞ＩＬ－１β／ＩＬ－６ハイブリッドプロモータ
【図1】
【配列表】