特許7174758IP Force 特許公報全文掲載

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＜相互参照＞ 本出願は、２０１７年７月１４日に出願された米国仮出願第６２／５３２，８００号と、２０１７年７月１９日に出願された米国仮出願第６２／５３４，６３１号の利益を主張するものであり、当該文献はそれぞれ、全体として参照により本明細書に組み込まれる。

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この特許公報に記載されている図面[図面の簡単な説明]から抜粋

本発明の新しい特徴は、とりわけ明細書と添付の特許請求の範囲内に明記される。本発明の特徴および利点のさらなる理解は、本発明の原理が用いられる実施形態を説明する以下の詳細な説明と、以下の添付図面とを引用することによって得られるであろう。
【図1A】 臍帯から間質幹細胞を単離するための例示的なゲート戦略を示す。
【図1B】 試験された臍帯細胞集団におけるＣＤ３９とＣＤ３６２（ＳＤＣ２）発現の例示的な分析を示す。二重陽性細胞は太字のボックスと矢印で強調される。
【図1C】 ＣＤ３６２＋対ＣＤ３９＋／ＣＤ３６２＋細胞の相対的な集団割合を示す。
【図1D】 ＣＤ３６２＋／ＣＤ３９＋細胞での例示的なコロニー形成アッセイを示す。
【図1E】 選別されていない（野生型）細胞での例示的なコロニー形成アッセイを示す。
【図2A】 骨髄からのＣＤ３９＋／ＣＤ３６２＋細胞の代表的なゲーティング制御と同定を示す（太字の四角形によって強調される）。
【図2B】 ＣＤ３９＋／ＣＤ３６２＋細胞対ＣＤ３９ｈｉ／ＣＤ３６２＋細胞の相対的な集団割合を示す。
【図2C】 選別されていない細胞、ＣＤ３９－／ＣＤ３６２＋細胞、ＣＤ３９＋／ＣＤ３６２＋細胞、ＣＤ３９＋／ＣＤ３６２－細胞、および二重陰性コロニー形成アッセイの表形式の結果を示す。
【図3A】 ヒト骨髄からのＣＤ３９＋／ＣＤ３６２＋細胞の同定のための代表的なＭｉｌｔｅｎｙｉ ＭＡＣＳＱｕａｎｔ Ｔｙｔｏ選別ゲートおよび分析を示す（太字の四角形で強調された）。
【図3B】 ヒト骨髄からのＭｉｌｔｅｎｙｉ ＭＡＣＳＱｕａｎｔ ＴｙｔｏソートとＢＤ ＦＡＣＳＡｒｉａ細胞選別機の両方を使用して、選別されていない細胞、ＣＤ３９－／ＣＤ３６２＋細胞、ＣＤ３９＋／ＣＤ３６２＋細胞、ＣＤ３９ｈｉ／ＣＤ３６２＋、ＣＤ３９＋／ＣＤ３６２－細胞、および二重陰性細胞のコロニー形成アッセイの表形式の結果を示す。
【図4】 隣接する細胞によるエキソソームの合成、放出、および取り込みを例証する。
【図5】 透過型電子顕微鏡による、ＳＤＣ２＋間葉系間質細胞（ＭＳＣ）に由来するエキソソームによるＳＤＣ２発現を示す。
【図6】 ウェスタンブロットによる、ＳＤＣ２＋間葉系間質細胞（ＭＳＣ）に由来するエキソソームによるＳＤＣ２発現を示す。
【図7】 ＡＲＤＳのラットモデルにおける、ＰＢＳビヒクル、ヒト間葉系幹細胞、またはエキソソームにより処置されたラットの動脈ＦＩ ０．３を示す。
【図8】 ＡＲＤＳのラットモデルにおける、ＰＢＳビヒクル、ヒト間葉系幹細胞、またはエキソソームにより処置されたラットの動脈ＦＩ １．０を示す。
【図9】 ＡＲＤＳのラットモデルにおける、ＰＢＳビヒクル、骨髄（ＢＭ）エキソソーム、あるいはヒト臍帯（ＨＵＣ）エキソソームで処置されたラットの動脈ＦＩ ０．３を示す。
【図10】 ＡＲＤＳのラットモデルにおける、ＰＢＳビヒクル、骨髄（ＢＭ）エキソソーム、あるいはヒト臍帯（ＨＵＣ）エキソソームで処置されたラットの動脈ＦＩ １．０を示す。
【図11】 ＡＲＤＳのラットモデルにおける、ＰＢＳビヒクル、ヒト間葉系幹細胞、またはエキソソームにより処置されたラットの気管支肺胞洗浄（ＢＡＬ）細菌負荷を示す。
【図12】 ＡＲＤＳのラットモデルにおける、ＰＢＳビヒクル、ヒト間葉系幹細胞、またはエキソソームにより処置されたラットの気管支肺胞洗浄（ＢＡＬ）総細胞数を示す。
【図13】 ＡＲＤＳのラットモデルにおける、ＰＢＳビヒクル、ヒト間葉系幹細胞、またはエキソソームにより処置されたラットの気管支肺胞洗浄（ＢＡＬ）好中球数を示す。
【図14】 ＡＲＤＳのラットモデルにおける、ＰＢＳビヒクル、ヒト間葉系幹細胞、またはエキソソームにより処置されたラットの静肺コンプライアンスを示す。
【図15】 ＡＲＤＳのラットモデルにおける、ＰＢＳビヒクル、ヒト間葉系幹細胞、またはエキソソームにより処置されたラットの肺の湿潤／乾燥比を示す。
【図16】 無血清培地またはエキソソームで４８時間かけて処置されたＡ５４９細胞を用いるスクラッチアッセイからの結果を示す。
【図17】 Ａ５４９細胞、プレート１を用いるスクラッチアッセイの結果を示す。
【図18】 無血清培地、または限外濾過により精製されたエキソソームで処置された細胞におけるＩＬ１β刺激による、ＮＦκＢレポーター遺伝子活性化の棒グラフを示す。
【図19】 無血清培地、または限外濾過により精製されたエキソソームで処置された細胞におけるＩＬ１β刺激による、ＮＦκＢレポーター遺伝子活性化の散布図を示す。
【図20】 無血清培地、または超遠心分離により精製されたエキソソームで処置された細胞におけるＩＬ１β刺激による、ＮＦκＢレポーター遺伝子活性化の棒グラフを示す。
【図21】 無血清培地、または超遠心分離により精製されたエキソソームで処置された細胞におけるＩＬ１β刺激による、ＮＦκＢレポーター遺伝子活性化の散布図を示す。
【図22】 ＡＲＤＳのラットモデルにおける、ＰＢＳビヒクル、ヒト間葉系幹細胞（１０ｍｉｌｌ／ｋｇ）、あるいはエキソソーム（２００μｇ、ＩＶ）で処置されたラットの動脈 ＦＩ ０．３を示す。
【図23】 ＡＲＤＳのラットモデルにおける、ＰＢＳビヒクル、ヒト間葉系幹細胞（１０ｍｉｌｌ／ｋｇ）、あるいはエキソソーム（２００μｇ、ＩＶ）で処置されたラットの動脈 ＦＩ １．０を示す。
【図24】 ＡＲＤＳのラットモデルにおける、ＰＢＳビヒクル、ヒト間葉系幹細胞（１０ｍｉｌｌ／ｋｇ）、あるいはエキソソーム（２００μｇ、ＩＶ）で処置されたラットの静肺コンプライアンスを示す。
【図25】 ＡＲＤＳのラットモデルにおける、ＰＢＳビヒクル、ヒト間葉系幹細胞（１０ｍｉｌｌ／ｋｇ）、あるいはエキソソーム（２００μｇ、ＩＶ）で処置されたラットの気管支肺胞洗浄（ＢＡＬ）細菌負荷を示す。
【図26】 ＡＲＤＳのラットモデルにおける、ＰＢＳビヒクル、ヒト間葉系幹細胞（１０ｍｉｌｌ／ｋｇ）、あるいはエキソソーム（２００μｇ、ＩＶ）で処置されたラットの気管支肺胞洗浄（ＢＡＬ）総細胞数を示す。
【図27】 ＡＲＤＳのラットモデルにおける、ＰＢＳビヒクル、ヒト間葉系幹細胞（１０ｍｉｌｌ／ｋｇ）、あるいはエキソソーム（２００μｇ、ＩＶ）で処置されたラットの気管支肺胞洗浄（ＢＡＬ）好中球数を示す。

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