特許 7176798 インダゾールキナーゼ阻害剤及びその使用

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2022-11-14

(45)【発行日】2022-11-22

(54)【発明の名称】インダゾールキナーゼ阻害剤及びその使用

(51)【国際特許分類】

   A61K 31/4439 20060101AFI20221115BHJP

   A61K 31/444 20060101ALI20221115BHJP

   A61K 31/4545 20060101ALI20221115BHJP

   A61K 31/496 20060101ALI20221115BHJP

   A61K 31/506 20060101ALI20221115BHJP

   A61P 1/00 20060101ALI20221115BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20221115BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20221115BHJP

   C07D 417/04 20060101ALN20221115BHJP

   C07D 417/14 20060101ALN20221115BHJP

【ＦＩ】

A61K31/4439

A61K31/444

A61K31/4545

A61K31/496

A61K31/506

A61P1/00

A61P35/00

A61P43/00 111

C07D417/04

C07D417/14

【請求項の数】 19

(21)【出願番号】P 2021523586

(86)(22)【出願日】2018-11-12

(65)【公表番号】

(43)【公表日】2022-01-17

(86)【国際出願番号】 CN2018115025

(87)【国際公開番号】W WO2020087565

(87)【国際公開日】2020-05-07

【審査請求日】2021-06-29

(31)【優先権主張番号】201811299323.X

(32)【優先日】2018-11-02

(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN

(73)【特許権者】

【識別番号】519365388

【氏名又は名称】安徽中科拓苒▲薬▼物科学研究有限公司

(74)【代理人】

【識別番号】100122471

【弁理士】

【氏名又は名称】籾井 孝文

(74)【代理人】

【識別番号】100150212

【弁理士】

【氏名又は名称】上野山 温子

(72)【発明者】

【氏名】▲劉▼ 静

(72)【発明者】

【氏名】▲劉▼ 青松

(72)【発明者】

【氏名】▲劉▼ 学松

(72)【発明者】

【氏名】王 ▲ベイ▼蕾

(72)【発明者】

【氏名】▲陳▼ 程

(72)【発明者】

【氏名】▲斉▼ 紫平

(72)【発明者】

【氏名】王 文超

(72)【発明者】

【氏名】王 俊杰

(72)【発明者】

【氏名】▲蒋▼ 宗儒

(72)【発明者】

【氏名】汪 文亮

(72)【発明者】

【氏名】▲其▼ 爽

(72)【発明者】

【氏名】王 黎

【審査官】新留 素子

(56)【参考文献】

【文献】特表２０１３－５２６５４２（ＪＰ，Ａ）

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

Ａ６１Ｋ

Ａ６１Ｐ

Ｃ０７Ｄ

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

式（Ｉ）：

【化1】

（式中、
Ｘは－（ＣＨ＝ＣＨ）_ｍ－であり、ここで、ｍは０又は１であり、
Ｙは－ＮＨ－又は－（ＣＨ_２）_ｎ－からなる群から選択され、ここでｎは０～３の整数であり、
Ｒ_１は、１個～３個の独立したＲ_４基で任意に置換されたフェニル、１個～３個の独立したＲ_４基で任意に置換されたピリジニル、１個～３個の独立したＲ_４基で任意に置換されたピラゾリル、及び１個～３個の独立したＲ_４基で任意に置換されたピリミジニルからなる群から選択され、
Ｒ_２は、水素及びＣ_１～６アルキルからなる群から選択され、
Ｒ_３は、１個又は２個の独立したＲ_５基で任意に置換されたＣ_１～６アルキル、Ｃ_１～６アルキルアミノ、並びに１個～３個の独立したＲ_４基で任意に置換されたフェニル、１個～３個の独立したＲ_４基で任意に置換されたナフチル、１個～３個の独立したＲ_４基で任意に置換されたピリジニル、１～３個の独立したＲ_４基で任意に置換されたピペラジニル、及び１～３個の独立したＲ_４基で任意に置換されたピペリジルからなる群から選択され、
Ｒ_４は、ハロゲン、アミノ、Ｃ_１～６アルキル、Ｃ_３～６シクロアルキル、Ｃ_１～６ハロアルキル、Ｃ_１～６アルコキシ、Ｃ_１～６ヒドロキシアルキル、Ｃ_１～６アルキルアミノ、Ｃ_２～６アルキルアミド、（４－メチルピペラジン－１－イル）メチル、モルホリノメチル、モルホリニル、４－メチルピペラジン－１－イル、４－ピペリジル、及び４－テトラヒドロピラニルからなる群から独立して選択され、
Ｒ_５は、アミノ、ヒドロキシル、及びＣ_１～６アルキルチオからなる群から独立して選択される）の化合物、又はその薬学的に許容可能な塩若しくは溶媒和物を含む、ｃＫＩＴ、ＦＬＴ３、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、及び／又はＶＥＧＦＲ２のキナーゼ活性を阻害するためのキナーゼ阻害剤。

【請求項2】

Ｘは－（ＣＨ＝ＣＨ）－である、請求項１に記載のキナーゼ阻害剤。

【請求項3】

Ｙは直接結合又は－ＣＨ_２－である、請求項１に記載のキナーゼ阻害剤。

【請求項4】

Ｒ_１は、１個～３個の独立したＲ_４基で任意に置換されたフェニル基、ピリジニル基、ピラゾリル基、及びピリミジニル基からなる群から選択され、Ｒ_４はハロゲン、アミノ、Ｃ_１～６アルキル、Ｃ_１～６ハロアルキル、Ｃ_１～６アルコキシ、及び（４－メチルピペラジン－１－イル）メチルからなる群から独立して選択される、請求項１に記載のキナーゼ阻害剤。

【請求項5】

Ｒ_１は、メチル、アミノ又はハロゲンで任意に置換されたフェニル基、２－ピリジニル基、３－ピリジニル基、４－ピラゾリル基、及び５－ピリミジニル基からなる群から選択される、請求項４に記載のキナーゼ阻害剤。

【請求項6】

Ｒ_２は水素又はメチルである、請求項１に記載のキナーゼ阻害剤。

【請求項7】

Ｒ_３は、１個又は２個の独立したＲ_５基で任意に置換されたＣ_１～６アルキル、Ｃ_１～６アルキルアミノ、並びに１個～３個の独立したＲ_４基で任意に置換されたフェニル基、ナフチル基、ピリジニル基、ピペラジニル基及びピペリジル基からなる群から選択され、Ｒ_４は、ハロゲン、アミノ、Ｃ_１～６アルキル、Ｃ_１～６ハロアルキル、Ｃ_１～６アルコキシ、及び（４－メチルピペラジン－１－イル）メチルからなる群から独立して選択され、Ｒ_５は、アミノ、ヒドロキシル、及びメチルチオからなる群から独立して選択される、請求項１に記載のキナーゼ阻害剤。

【請求項8】

Ｒ_３は、アミノ、ヒドロキシ又はメチルチオで任意に置換されたＣ_１～６アルキル；ジメチルアミノ；メチルで任意に置換されたＮ－ピペラジニル；ハロゲン、トリフルオロメチル又はメトキシで任意に置換されたフェニル；ナフチル；４－ピリジニル；３－ピペリジル；及びメチルで任意に置換された４－ピペリジルからなる群から選択される、請求項７に記載のキナーゼ阻害剤。

【請求項9】

Ｙが直接結合である場合、Ｒ_３は、アミノ、ヒドロキシ又はメチルチオで任意に置換されたＣ_１～６アルキル、及び４－ピリジニルからなる群から選択され、Ｙが－ＣＨ_２－である場合、Ｒ_３は、メトキシで任意に置換されたフェニル、メチルで任意に置換されたＮ－ピペラジニル、及びメチルで任意に置換された４－ピペリジルからなる群から選択される、請求項１に記載のキナーゼ阻害剤。

【請求項10】

前記化合物が以下の化合物からなる群から選択される、請求項１に記載のキナーゼ阻害剤。

【表1】

【表2】

【表3】

【請求項11】

請求項１～１０のいずれか一項に記載のキナーゼ阻害剤と、薬学的に許容可能な担体又は賦形剤と、任意に他の治療剤とを含む、ｃＫＩＴ、ＦＬＴ３、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、及び／又はＶＥＧＦＲ２の活性に関連する疾患、障害又は疾病の処置又は未然防止のための医薬組成物。

【請求項12】

ｃＫＩＴ、ＦＬＴ３、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、及び／又はＶＥＧＦＲ２のキナーゼ活性を阻害するための薬物の調製における、請求項１～１０のいずれか一項に記載のキナーゼ阻害剤の使用。

【請求項13】

突然変異型ｃＫＩＴ／Ｔ６７０Ｉのキナーゼ活性を阻害するための薬物の調製における、請求項１～１０のいずれか一項に記載のキナーゼ阻害剤の使用。

【請求項14】

ｃＫＩＴ、ＦＬＴ３、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、及び／又はＶＥＧＦＲ２の活性に関連する疾患、障害又は疾病の処置又は未然防止のための薬物の調製における、請求項１～１０のいずれか一項に記載のキナーゼ阻害剤の使用。

【請求項15】

突然変異型ｃＫＩＴ／Ｔ６７０Ｉの活性に関連する疾患、障害又は疾病の処置又は未然防止のための薬物の調製における、請求項１～１０のいずれか一項に記載のキナーゼ阻害剤の使用。

【請求項16】

前記疾患、障害又は疾病は、ｃＫＩＴ－Ｔ６７０Ｉ突然変異型消化管間質腫瘍である、請求項１５に記載の使用。

【請求項17】

突然変異型ｃＫＩＴ／Ｔ６７０Ｉのキナーゼ活性を阻害するための、請求項１～１０のいずれか一項に記載のキナーゼ阻害剤。

【請求項18】

ｃＫＩＴ、ＦＬＴ３、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、及び／又はＶＥＧＦＲ２の活性に関連する疾患、障害又は疾病の処置又は未然防止のための、請求項１～１０のいずれか一項に記載のキナーゼ阻害剤。

【請求項19】

前記疾患、障害又は疾病はｃＫＩＴ－Ｔ６７０Ｉ突然変異型消化管間質腫瘍である、請求項１８に記載のＰＤＧＦＲキナーゼ阻害剤。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本出願は、キナーゼ阻害剤、並びにかかるキナーゼ阻害剤を使用してキナーゼ活性を阻害するための方法及び使用に関する。より具体的には、本発明は、ｃＫＩＴ（特に突然変異型ｃＫＩＴ／Ｔ６７０Ｉ）、ＦＬＴ３（突然変異型ＦＬＴ３－ＩＴＤを含む）、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、及び／又はＶＥＧＦＲ２のキナーゼ活性を阻害することができる阻害剤に関する。

【背景技術】

【0002】

消化管間質腫瘍（ＧＩＳＴ：Gastrointestinal Stromal Tumors）は、消化管の最も一般的な間葉系腫瘍である。ＧＩＳＴの発生率は約１／１０００００～２／１０００００であり、全ての消化管腫瘍の１％～３％を占めている。この疾患は中高年に多く見られ、発症年齢の中央値は５０歳～６５歳であり、４０歳より前にはまれではあるが、子供でも報告されている。現在、ＧＩＳＴは悪性挙動の可能性がある腫瘍であると考えられており、その生物学的挙動を予測することは困難である。ＧＩＳＴは消化管のどの部分でも発生する可能性があり、胃で最も多く（６０％～７０％）、次いで小腸（２０％～３０％）であり、食道、結腸、及び直腸での発生率は１０％未満であり、また腹膜の網（omentum）及び腸間膜でも発生する可能性がある。

【0003】

臨床研究によると、消化管間質腫瘍の病因は、それらの遺伝的分子分類（genetic molecular classification）に基づいて、ｃＫＩＴ突然変異型（８０％～８５％）、ＰＤＧＦＲα突然変異型（５％～１０％）、及びｃＫＩＴ野生型（１０％）のＧＩＳＴという３つのカテゴリーに分けることができる。消化管間質腫瘍の病因は、ｃＫＩＴタンパク質（ＣＤ１１７）シグナル伝達経路の活性化に関連している。ネコ線維肉腫ウイルスから単離されたｖＫＩＴ遺伝子のホモログである癌原遺伝子ｃＫＩＴは、ヒト第４染色体（４ｑ１２－１３）に位置し、長さは約９０ｋｂであって、２１個のエクソン及び２０個のイントロンで構成されており、進化の過程で高度に保存されている。ｃＫＩＴタンパク質は、細胞膜に位置する受容体型チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）であって、相対分子量は１４５０００であり、細胞表面の抗原決定基によってＣＤ１１７と名付けられている。ｃＫＩＴタンパク質はＲＴＫファミリーの３番目のタイプに属しており、これは、５つの免疫グロブリン様ドメイン（Ｄ１～Ｄ５）と、１つの膜貫通ドメインと、膜近傍ドメイン（near membrane domain）（ＪＭＤ）及びチロシンキナーゼ（ＴＫ）ドメインを含む１つの細胞質領域とからなる。ＴＫドメインは、アデノシン三リン酸（ＡＴＰ）ドメイン（ＴＫ１）とホスホトランスフェラーゼドメイン（ＴＫ２）とに分けられる。リガンド幹細胞因子（ＳＣＦ）は細胞外ドメインと合わさって二量体を形成し、細胞質領域のＴＫドメインでチロシンの自己リン酸化を引き起こすことにより、様々な下流エフェクターの自己リン酸化を更に誘導し、様々なシグナルの送達が完了する。主なシグナル伝達経路には、ＰＩ３Ｋシグナル伝達経路、ＪＡＫ－ＳＴＡＴシグナル伝達経路、Ｒａｓ－Ｅｒｋシグナル伝達経路、Ｓｒｃファミリーキナーゼシグナル伝達経路、及びＰＬＣシグナル伝達経路等があり、最終的に細胞の増殖、分裂、並びに組織の成長及び生存を促進する。

【0004】

現在、伝統的な外科的処置法として、消化管間質腫瘍の処置には依然として外科手術が最も重要な方法であり、近年の標的薬剤の出現により、ＧＩＳＴの処置に新たな段階が開かれている。これまでのところ、ＧＩＳＴの処置に臨床的に使用されているｃＫＩＴキナーゼ阻害剤としては、主にNovartis製のイマチニブ（ｃＫＩＴ／ＢＣＲ－ＡＢＬ／ＰＤＧＦＲ）及びPfizer製のスニチニブ（ｃＫＩＴ／ＢＣＲ－ＡＢＬ／ＰＤＧＦＲ／ＶＥＧＦＲ２／ＦＬＴ３）が含まれる。イマチニブは、ＧＩＳＴの処置に使用された最初のＩＩ型キナーゼ阻害剤である。スニチニブは、２００６年にＦＤＡによって承認されたＩ型ｃＫＩＴキナーゼ阻害剤である。加えて、ｃＫＩＴ活性を有するＩＩ型キナーゼ阻害剤としては、レゴラフェニブ、ニロチニブ、マスチニブ、ソラフェニブ等が含まれる。これらの小分子阻害剤はマルチターゲット阻害剤であり、ニロチニブ及びマスチニブはＴ６７０Ｉ変異を克服できない。ｃＫＩＴ活性を持つ２つの小分子阻害剤である、Bayerが開発したレゴラフェニブ及びソラフェニブは、ｃＫＩＴ－Ｔ６７０Ｉ突然変異に対して一定の活性を有するが、どちらもｃＫＩＴに加えてマルチターゲット阻害剤であり、ＦＬＴ３／ＰＤＧＦＲ／ＦＧＦＲ／ＶＥＧＦＲ２／ＲＥＴ／ＲＡＦ等の様々なキナーゼにも強い影響を及ぼす。アキシチニブはPfizerが開発したマルチターゲット小分子阻害剤であり、ｃＫＩＴ、ＢＣＲ－ＡＢＬ、ＶＥＧＦＲ２及びその他のキナーゼに対する阻害活性も有している。加えて、ポナチニブもｃＫＩＴキナーゼに対して強力な阻害活性を持ち、同時にｃＫＩＴ－Ｔ６７０Ｉ突然変異によって引き起こされる薬剤耐性を克服することができるが、ＡＢＬ／ＰＤＧＦＲ／ＲＥＴ／ＣＳＦ１Ｒ／ＦＧＦＲ／ＶＥＧＦＲ／ＦＧＦＲ／ＲＥＴ等の様々なキナーゼのマルチターゲット阻害剤である。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0005】

本発明は、主に、イマチニブの薬剤耐性突然変異ｃＫＩＴ－Ｔ６７０Ｉに対して強力な阻害効果を有する新規構造を持つ阻害剤を見出す。

【課題を解決するための手段】

【0006】

本発明は、式（Ｉ）：

【化1】

（式中、
Ｘは－（ＣＨ＝ＣＨ）_ｍ－であり、ここで、ｍは０又は１であり、
Ｙは－ＮＨ－又は－（ＣＨ_２）_ｎ－からなる群から選択され、ここでｎは０～３の整数であり、
Ｒ_１は、１個～３個の独立したＲ_４基で任意に置換されたフェニル、１個～３個の独立したＲ_４基で任意に置換されたピリジニル、１個～３個の独立したＲ_４基で任意に置換されたピラゾリル、及び１個～３個の独立したＲ_４基で任意に置換されたピリミジニルからなる群から選択され、
Ｒ_２は、水素及びＣ_１～６アルキルからなる群から選択され、
Ｒ_３は、１個又は２個の独立したＲ_５基で任意に置換されたＣ_１～６アルキル、Ｃ_１～６アルキルアミノ、並びに１個～３個の独立したＲ_４基で任意に置換されたフェニル、１個～３個の独立したＲ_４基で任意に置換されたナフチル、１個～３個の独立したＲ_４基で任意に置換されたピリジニル、１～３個の独立したＲ_４基で任意に置換されたピペラジニル、及び１～３個の独立したＲ_４基で任意に置換されたピペリジルからなる群から選択され、
Ｒ_４は、ハロゲン、アミノ、Ｃ_１～６アルキル、Ｃ_３～６シクロアルキル、Ｃ_１～６ハロアルキル、Ｃ_１～６アルコキシ、Ｃ_１～６ヒドロキシアルキル、Ｃ_１～６アルキルアミノ、Ｃ_２～６アルキルアミド、（４－メチルピペラジン－１－イル）メチル、モルホリノメチル、モルホリニル、４－メチルピペラジン－１－イル、４－ピペリジル、及び４－テトラヒドロピラニルからなる群から独立して選択され、
Ｒ_５は、アミノ、ヒドロキシル、及びＣ_１～６アルキルチオからなる群から独立して選択される）の化合物、又はその薬学的に許容可能な塩、溶媒和物、エステル、酸、代謝物若しくはプロドラッグを含む、選択的なキナーゼ阻害剤を提供する。

【0007】

好ましい実施の形態では、Ｘは－（ＣＨ＝ＣＨ）－である。

【0008】

別の好ましい実施の形態では、Ｙは直接結合又は－ＣＨ_２－である。

【0009】

別の好ましい実施の形態では、Ｒ_１は、１個～３個の独立したＲ_４基で任意に置換されたフェニル基、ピリジニル基、ピラゾリル基、及びピリミジニル基からなる群から選択され、Ｒ_４はハロゲン、アミノ、Ｃ_１～６アルキル、Ｃ_１～６ハロアルキル、Ｃ_１～６アルコキシ、及び（４－メチルピペラジン－１－イル）メチルからなる群から独立して選択され、Ｒ_１は、より好ましくは、メチル、アミノ又はハロゲンで任意に置換されたフェニル基、２－ピリジニル基、３－ピリジニル基、４－ピラゾリル基、及び５－ピリミジニル基であり、Ｒ_１は、特に好ましくは、２－ピリジニルである。

【0010】

別の好ましい実施の形態では、Ｒ_２は水素又はメチルである。

【0011】

別の好ましい実施の形態では、Ｒ_３は、１個又は２個の独立したＲ_５基で任意に置換されたＣ_１～６アルキル、Ｃ_１～６アルキルアミノ、並びに１個～３個の独立したＲ_４基で任意に置換されたフェニル基、ナフチル基、ピリジニル基、ピペラジニル基、及びピペリジル基からなる群から選択され、ここで、Ｒ_４は、ハロゲン、アミノ、Ｃ_１～６アルキル、Ｃ_１～６ハロアルキル、Ｃ_１～６アルコキシ、及び（４－メチルピペラジン－１－イル）メチルからなる群から独立して選択され、Ｒ_５は、アミノ、ヒドロキシル、及びメチルチオからなる群から独立して選択され、Ｒ_３は、より好ましくは、アミノ、ヒドロキシ又はメチルチオで任意に置換されたＣ_１～６アルキル；ジメチルアミノ；メチルで任意に置換されたＮ－ピペラジニル；ハロゲン、トリフルオロメチル又はメトキシで任意に置換されたフェニル；ナフチル；４－ピリジニル；３－ピペリジル；及びメチルで任意に置換された４－ピペリジルであり、Ｒ_３は、特に好ましくは、メチル、２－プロピル、１－アミノ－３－メチルチオ－プロピル、１－アミノ－３－メチル－ブチル、メチル置換Ｎ－ピペラジニル、メトキシ置換フェニル、４－ピリジニル、又は４－ピペリジルである。

【0012】

特に好ましい実施の形態では、Ｙが直接結合である場合、Ｒ_３は、アミノ、ヒドロキシ又はメチルチオで任意に置換されたＣ_１～６アルキル、及び４－ピリジニルからなる群から選択され、Ｙが－ＣＨ_２－である場合、Ｒ_３は、メトキシで任意に置換されたフェニル、メチルで任意に置換されたＮ－ピペラジニル、及びメチルで任意に置換された４－ピペリジルからなる群から選択される。

【0013】

別の態様では、本発明はまた、本発明のキナーゼ阻害剤と、薬学的に許容可能な担体又は賦形剤と、任意に他の治療剤とを含む、医薬組成物に関する。

【0014】

他の態様では、本発明はまた、細胞又は被験体においてｃＫＩＴ（特に突然変異型ｃＫＩＴ／Ｔ６７０Ｉ）、ＦＬＴ３（突然変異型ＦＬＴ３－ＩＴＤを含む）、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、及び／又はＶＥＧＦＲ２のキナーゼ活性を低下又は阻害するための方法、及びそのためのキナーゼ阻害剤の使用、又はそのための該キナーゼ阻害剤を含む医薬組成物に関する。

【0015】

更に別の態様では、本発明はまた、被験体においてｃＫＩＴ（特に突然変異型ｃＫＩＴ／Ｔ６７０Ｉ）、ＦＬＴ３（突然変異型ＦＬＴ３－ＩＴＤを含む）、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、及び／又はＶＥＧＦＲ２の活性に関連する疾患を未然防止（preventing：予防）又は処置（treating：治療）するための方法、及びそのためのキナーゼ阻害剤の使用、又はそのための該キナーゼ阻害剤を含む医薬組成物に関する。

【図面の簡単な説明】

【0016】

【図1】図１ａは、ｔｅｌ－ｃＫＩＴ／Ｔ６７０Ｉ－ＢａＦ３細胞腫瘍移植マウスモデルにおける投与後のマウスの体重に対する化合物９及びスニチニブの効果を示す図であり、図１ｂは、ｔｅｌ－ｃＫＩＴ／Ｔ６７０Ｉ－ＢａＦ３細胞腫瘍移植マウスモデルにおける化合物９及びスニチニブの腫瘍抑制効果を示す図である。

【図2】図２ａは、ＧＩＳＴ－Ｔ１－Ｔ６７０Ｉ細胞腫瘍移植マウスモデルにおける投与後のマウスの体重に対する化合物９及びスニチニブの効果を示す図であり、図２ｂはＧＩＳＴ－Ｔ１－Ｔ６７０Ｉ細胞腫瘍移植マウスモデルにおける化合物９及びスニチニブの腫瘍抑制効果を示す図である。

【発明を実施するための形態】

【0017】

用語
特段の規定がない限り、本明細書で使用される全ての技術用語及び科学用語は、特許請求の範囲に記載の主題が属する技術分野における当業者によって通常理解されるのと同じ意味を有する。

【0018】

特段の指示がない限り、本発明では、当業者の技能範囲内の質量分析、ＮＭＲ、ＨＰＬＣ、タンパク質化学、生化学、組換えＤＮＡ技術及び薬理学の慣例的な方法が使用される。特段の規定が示されない限り、本明細書に記載される分析化学、合成有機化学並びに創薬化学及び医薬品化学に関連して使用される命名法、並びにそれらの実験手順及び技術は、当該技術分野で既知のものである。上述の技術及び手順は一般に、当該技術分野でよく知られ、本明細書全体にわたって引用及び議論される様々な一般的な参考文献及びより具体的な参考文献に記載される慣例的な方法で実施することができる。

【0019】

「アルキル」という用語は、分岐状アルキル又は直鎖状アルキルであってもよい脂肪族炭化水素基を指す。構造に応じて、アルキル基は、一価基又は二価基（すなわち、アルキレン基）であり得る。本発明では、アルキル基は、好ましくは１個～８個の炭素原子を有するアルキル、より好ましくは１個～６個の炭素原子を有する「低級アルキル」、更により好ましくは１個～４個の炭素原子を有するアルキルである。典型的なアルキル基には、限定されるものではないが、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル等が含まれる。本明細書で言及される「アルキル」は、アルキルの取り得るあらゆる立体配置及び立体配座を包含し、例えば本明細書で言及される「プロピル」は、ｎ－プロピル及びイソプロピルを包含することを意図し、本明細書で言及される「ブチル」は、ｎ－ブチル、イソブチル及び第三級ブチルを包含することを意図し、本明細書で言及される「ペンチル」は、ｎ－ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ｔｅｒｔ－ペンチル及びペンタ－３－イル等を包含することを意図するものと理解されるべきである。

【0020】

「アルコキシ」という用語は、アルキルが本明細書で規定されるものである－Ｏ－アルキル基を指す。典型的なアルコキシ基には、限定されるものではないが、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシ、ペンチルオキシ、ヘキシルオキシ等が含まれる。

【0021】

「アルコキシアルキル」という用語は、本明細書で規定されるアルコキシで置換された、本明細書で規定されるアルキル基を指す。

【0022】

「シクロアルキル」という用語は、炭素及び水素のみを含む単環式基又は多環式基を指す。シクロアルキル基には、３個～１２個の環原子を有する基が含まれる。構造に応じて、シクロアルキル基は、一価基又は二価基（例えば、シクロアルキレン基）であり得る。本発明では、シクロアルキル基は、好ましくは３個～８個の炭素原子を有するシクロアルキル、より好ましくは３個～６個の炭素原子を有する「低級シクロアルキル」である。シクロアルキルの例には、限定されるものではないが、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル、シクロペンテニル、シクロヘキセニル、シクロヘプテニル、及びアダマンチルが含まれる。

【0023】

「アルキル（シクロアルキル）」又は「シクロアルキルアルキル」という用語は、本明細書で規定されるシクロアルキルで置換された、本明細書で規定されるアルキル基を指す。シクロアルキルアルキルの非限定的な例としては、シクロプロピルメチル、シクロブチルメチル、シクロペンチルメチル、シクロヘキシルメチル等が含まれる。

【0024】

「芳香族」という用語は、４ｎ＋２個（ここで、ｎは整数である）のπ電子を含む非局在化π電子系を有する平面環を指す。芳香族環は５個、６個、７個、８個、９個又は１０個以上の原子によって形成され得る。芳香族炭化水素は任意に置換されていてもよい。「芳香族」という用語には、炭素環式アリール（例えば、フェニル）基及びヘテロ環式アリール（又は「ヘテロアリール」又は「ヘテロ芳香族」）基（例えば、ピリジン）の両方が含まれる。その用語には、単環式基又は縮合環型多環式基（すなわち、隣接した炭素原子の対を共有する環）が含まれる。

【0025】

本明細書で使用される場合に、「アリール」という用語は、環を形成する原子の各々が炭素原子である芳香族環を指す。アリール環は５個、６個、７個、８個、９個又は１０個以上の炭素原子によって形成され得る。アリール基は任意に置換されていてもよい。アリール基の例には、限定されるものではないが、フェニル、ナフタレニル、フェナントレニル、アントラセニル、フルオレニル及びインデニルが含まれる。構造に応じて、アリール基は、一価基又は二価基（すなわち、アリーレン基）であり得る。

【0026】

「アリールオキシ」という用語は、アリールが本明細書で規定されるものである－Ｏ－アリールを指す。

【0027】

「ヘテロアリール」という用語は、窒素、酸素及び硫黄から選択される１個以上の環ヘテロ原子を含むアリール基を指す。Ｎ含有「ヘテロアリール」部分は、環の骨格原子の少なくとも１つが窒素原子である芳香族基を指す。構造に応じて、ヘテロアリール基は、一価基又は二価基（すなわち、ヘテロアリーレン基）であり得る。ヘテロアリール基の例には、限定されるものではないが、ピリジニル、イミダゾリル、ピリミジニル、ピラゾリル、トリアゾリル、ピラジニル、テトラゾリル、フリル、チエニル、イソオキサゾリル、チアゾリル、オキサゾリル、イソチアゾリル、ピロリル、キノリニル、イソキノリニル、インドリル、ベンズイミダゾリル、ベンゾフリル、インダゾリル、インドリジニル、フタラジニル、ピリダジニル、イソインドリル、プテリジニル、プリニル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、フリル、ベンゾフリル、ベンゾチオフェニル、ベンゾチアゾリル、ベンゾキサゾリル、キナゾリニル、ナフチリジニル、フロピリジニル等が含まれる。

【0028】

「アルキル（アリール）」又は「アラルキル」という用語は、本明細書で規定されるアリールで置換された、本明細書で規定されるアルキル基を指す。非限定的なアルキル（アリール）基には、ベンジル、フェネチル等が含まれる。

【0029】

「アルキル（ヘテロアリール）」又は「ヘテロアリールアルキル」という用語は、本明細書で規定されるヘテロアリールで置換された、本明細書で規定されるアルキル基を指す。

【0030】

本明細書で使用される場合に、「ヘテロアルキル」という用語は、１個以上の骨格鎖原子がヘテロ原子、例えば酸素、窒素、硫黄、ケイ素、リン又はそれらの組合せである、本明細書で規定されるアルキル基を指す。ヘテロアルキル基の任意の内部位置に又はヘテロアルキル基が分子の残部に結合されている位置に、１個以上のヘテロ原子が配置されていてもよい。

【0031】

本明細書で使用される場合に、「ヘテロシクロアルキル」又は「ヘテロシクリル」という用語は、環を形成する１個以上の原子が窒素、酸素及び硫黄から選択されるヘテロ原子である非芳香族環を指す。ヘテロシクロアルキル環は３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個又は１０個以上の原子によって形成され得る。ヘテロシクロアルキル環は、任意に置換されていてもよい。ヘテロシクロアルキルの例には、限定されるものではないが、ラクタム、ラクトン、環状イミド、環状チオイミド、環状カルバメート、テトラヒドロチオピラン、４Ｈ－ピラン、テトラヒドロピラン、ピペリジン、１，３－ジオキシン、１，３－ジオキサン、１，４－ジオキシン、１，４－ジオキサン、ピペラジン、１，３－オキサチアン、１，４－オキサチイン、１，４－オキサチアン、テトラヒドロ－１，４－チアジン、２Ｈ－１，２－オキサジン、マレイミド、スクシンイミド、バルビツール酸、チオバルビツール酸、ジオキソピペラジン、ヒダントイン、ジヒドロウラシル、モルホリン、トリオキサン、ヘキサヒドロ－１，３，５－トリアジン、テトラヒドロチオフェン、テトラヒドロフラン、ピロリン、ピロリジン、イミダゾリジン、ピロリドン、ピラゾリン、ピラゾリジン、イミダゾリン、イミダゾリジン、１，３－ジオキソール、１，３－ジオキソラン、１，３－ジチオール、１，３－ジチオラン、イソオキサゾリン、イソオキサゾリジン、オキサゾリン、オキサゾリジン、オキサゾリジノン、チアゾリン、チアゾリジン、及び１，３－オキサチオランが含まれる。構造に応じて、ヘテロシクロアルキル基は、一価基又は二価基（すなわち、ヘテロシクロアルキレン基）であり得る。

【0032】

「アルキル（ヘテロシクロアルキル）」又は「ヘテロシクロアルキルアルキル」という用語は、本明細書で規定されるヘテロシクロアルキルで置換された、本明細書で規定されるアルキル基を指す。

【0033】

「アルコキシ（ヘテロシクロアルキル）」又は「ヘテロシクロアルキルアルコキシ」という用語は、本明細書で規定されるヘテロシクロアルキルで置換された、本明細書で規定されるアルコキシ基を指す。

【0034】

「ハロ」又は「ハロゲン」という用語は、フルオロ、クロロ、ブロモ及びヨードを指す。

【0035】

「ハロアルキル」、「ハロアルコキシ」及び「ハロへテロアルキル」という用語には、少なくとも１個の水素がハロゲン原子で置き換えられているアルキル構造、アルコキシ構造及びヘテロアルキル構造が含まれる。２個以上の水素原子がハロゲン原子と置き換えられている或る特定の実施形態では、それらのハロゲン原子は互いに同じ又は異なっている。

【0036】

「ヒドロキシ」という用語は、－ＯＨ基を指す。

【0037】

本明細書で使用される場合に、「シアノ」という用語は、－ＣＮ基を指す。

【0038】

「エステル」という用語は、式－ＣＯＯＲの化学部分を指し、Ｒは、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール（環炭素を介して結合）及び複素環（環炭素を介して結合）の中から選択される。

【0039】

「アミノ」という用語は、－ＮＨ_２基を指す。

【0040】

「アミノアシル」という用語は、－ＣＯ－ＮＨ_２基を指す。

【0041】

「アミド」（amide）又は「アミド」（amido）という用語は、－ＮＲ－ＣＯ－Ｒ’（ここで、Ｒ及びＲ’は、それぞれ独立して水素又はアルキルである）を指す。

【0042】

「アルキルアミノ」という用語は、１つ又は２つのアルキル基で更に置換されたアミノ置換基、特に基－ＮＲＲ’（ここで、Ｒ及びＲ’は、それぞれ独立して水素又は低級アルキルからなる群から選択されるが、但し、－ＮＲＲ’は－ＮＨ_２ではない）を指す。「アルキルアミノ」には、－ＮＨ_２の窒素が少なくとも１個のアルキル基に結合されている化合物の基が含まれる。アルキルアミノ基の例には、限定されるものではないが、メチルアミノ、エチルアミノ等が含まれる。「ジアルキルアミノ」には、－ＮＨ_２の窒素が少なくとも２つの追加のアルキル基に結合されている基が含まれる。ジアルキルアミノ基の例には、限定されるものではないが、ジメチルアミノ、ジエチルアミノ等が含まれる。

【0043】

「アリールアミノ」及び「ジアリールアミノ」という用語は、１つ又は２つのアリール基で更に置換されたアミノ置換基、特に基－ＮＲＲ’（ここで、Ｒ及びＲ’は、それぞれ独立して水素、低級アルキル又はアリールから選択され、かつＮは、それぞれ少なくとも１つ又は２つのアリール基に結合される）を指す。

【0044】

「シクロアルキルアミノ」という用語は、本明細書で規定される１つ又は２つのシクロアルキル基で更に置換されたアミノ置換基を指す。

【0045】

「ヘテロアルキルアミノ」という用語は、本明細書で規定される１つ又は２つのヘテロアルキル基で更に置換されたアミノ置換基を指す。

【0046】

本明細書の「アラルキルアミノ」という用語は、基－ＮＲＲ’（ここで、Ｒは低級アラルキルであり、かつＲ’は水素、低級アルキル、アリール又は低級アラルキルである）を指す。

【0047】

「ヘテロアリールアミノ」という用語は、本明細書で規定される１つ又は２つのヘテロアリール基で更に置換されたアミノ置換基を指す。

【0048】

「ヘテロシクロアルキルアミノ」という用語は、本明細書で規定されるヘテロシクロアルキルで置換された、本明細書で規定されるアミノ基を指す。

【0049】

「アルキルアミノアルキル」という用語は、本明細書で規定されるアルキルアミノで置換された、本明細書で規定されるアルキル基を指す。

【0050】

「アミノアルキル」という用語は、１つ以上のアミノ基で更に置換されたアルキル置換基を指す。

【0051】

「アミノアルコキシ」という用語は、１つ以上のアミノ基で更に置換されたアルコキシ置換基を指す。

【0052】

「ヒドロキシアルキル」（hydroxyalkyl）又は「ヒドロキシルアルキル」（hydroxyl alkyl）という用語は、１つ以上のヒドロキシ基で更に置換されたアルキル置換基を指す。

【0053】

「シアノアルキル」という用語は、１つ以上のシアノ基で更に置換されたアルキル置換基を指す。

【0054】

「アシル」という用語は、有機又は無機の酸素酸からヒドロキシル基を除去した後に残る一価の原子基を指し、一般式はＲ－Ｍ（Ｏ）－（ここで、Ｍは通常Ｃである）である。

【0055】

「カルボニル」という用語は、二重結合を介して炭素原子及び酸素原子によって形成される有機官能基（Ｃ＝Ｏ）である。

【0056】

「アルカノイル」又は「アルキルカルボニル」という用語は、アルキル基で更に置換されたカルボニル基を指す。典型的なアルカノイル基には、限定されるものではないが、アセチル、プロピオニル、ブチリル、バレリル、ヘキサノイル等が含まれる。

【0057】

「アリールカルボニル」という用語は、本明細書で規定されるアリールで置換された、本明細書で規定されるカルボニル基を指す。

【0058】

「アルコキシカルボニル」という用語は、アルコキシ基で更に置換されたカルボニル基を指す。

【0059】

「ヘテロシクロアルキルカルボニル」という用語は、ヘテロシクロアルキル基で更に置換されたカルボニル基を指す。

【0060】

「アルキルアミノカルボニル」、「シクロアルキルアミノカルボニル」、「アリールアミノカルボニル」、「アラルキルアミノカルボニル」及び「ヘテロアリールアミノカルボニル」という用語はそれぞれ、本明細書で規定されるアルキルアミノ、シクロアルキルアミノ、アリールアミノ、アラルキルアミノ又はヘテロアリールアミノでそれぞれ置換された、本明細書で規定されるカルボニル基を指す。

【0061】

「アルキルカルボニルアルキル」又は「アルカノイルアルキル」という用語は、アルキルカルボニル基で更に置換されたアルキル基を指す。

【0062】

「アルキルカルボニルアルコキシ」又は「アルカノイルアルコキシ」という用語は、アルキルカルボニル基で更に置換されたアルコキシを指す。

【0063】

「ヘテロシクロアルキルカルボニルアルキル」という用語は、ヘテロシクロアルキルカルボニル基で更に置換されたアルキル基を指す。

【0064】

「スルフヒドリル」という用語は、－ＳＨ基を指す。「アルキルチオ」という用語は、本明細書で規定されるアルキルで置換された、本明細書で規定されるスルフヒドリル基を指す。

【0065】

「スルホン」又は「スルホニル」という用語は、ヒドロキシルを失った後のスルホン酸の官能基を指し、具体的には、－Ｓ（＝Ｏ）_２－基を指す。

【0066】

「スルホキシド」又は「スルフィニル」という用語は、－Ｓ（＝Ｏ）－を指す。

【0067】

「アミノスルホン」又は「アミノスルホニル」という用語は、－Ｓ（＝Ｏ）_２－ＮＨ_２基を指す。

【0068】

「アルキルスルホキシド」又は「アルキルスルフィニル」という用語は、－Ｓ（＝Ｏ）－Ｒ（ここで、Ｒはアルキルである）を指す。

【0069】

「アルキルスルホン」又は「アルキルスルホニル」という用語は、－Ｓ（＝Ｏ）_２－Ｒ（ここで、Ｒはアルキルである）を指す。

【0070】

「アルキルアミノスルホン」という用語は、本明細書で規定されるアルキルアミノで置換された、本明細書で規定されるスルホン基を指す。

【0071】

「アルキルスルホンアミノ」又は「シクロアルキルスルホンアミノ」という用語は、本明細書で規定されるアルキルスルホン又はシクロアルキルスルホンで置換された、本明細書で規定されるアミノ基を指す。

【0072】

「シクロアルキルスルホン」及び「シクロアルキルスルホニル」という用語は、－Ｓ（＝Ｏ）_２－Ｒ（ここで、Ｒはシクロアルキルである）を指す。

【0073】

「アルキルスルホンアミド」及び「シクロアルキルスルホンアミド」という用語は、－ＮＨ－Ｓ（＝Ｏ）_２－Ｒ（ここで、Ｒは、それぞれアルキル及びシクロアルキルである）を指す。

【0074】

「第四級アンモニウム基」という用語は、－Ｎ^＋ＲＲ’Ｒ’’（ここで、Ｒ、Ｒ’及びＲ’’は、それぞれ独立して１個～８個の炭素原子を有するアルキル基から選択される）を指す。

【0075】

「任意に」という用語は、続いて記載される１つ以上の事象が起こっても又は起こらなくてもよいことを意味し、起こる１つ以上の事象と起こらない事象の両方を含む。「任意に置換された」又は「置換された」という用語は、言及される基が、アルキル、シクロアルキル、アリール、ヘテロアリール、ヘテロシクリル、ヒドロキシ、アルコキシ、シアノ、ハロ、アミド、ニトロ、ハロアルキル、アミノ、メチルスルホニル、アルキルカルボニル、アルコキシカルボニル、ヘテロアリールアルキル、ヘテロシクロアルキルアルキル、アミノアシル、アミノ保護基等からなる群から個々に独立して選択される１つ以上の更なる基で置換され得ることを意味する。これらのうち、アミノ保護基は、ピバロイル、ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル、ベンジルオキシカルボニル、９－フルオレニルメトキシカルボニル、ベンジル、ｐ－メトキシベンジル、アリルオキシカルボニル、及びトリフルオロアセチル等からなる群から選択されることが好ましい。

【0076】

本明細書で使用される「チロシンプロテインキナーゼ（ＴＰＫ）」という用語は、アデノシン三リン酸（ＡＴＰ）からタンパク質上のチロシン残基へのγ－リン酸の転移を触媒し、様々なタンパク質基質のチロシン残基のリン酸化を触媒し得ることで細胞の成長、増殖、及び分化に重要な影響を及ぼすキナーゼの一種である。

【0077】

本明細書で使用される、キナーゼを「阻害する」、キナーゼを「阻害している」又はキナーゼの「阻害剤」という用語は、ホスホトランスフェラーゼ活性の阻害について言及している。

【0078】

本明細書に開示される化合物の「代謝物」は、化合物が代謝されるときに形成されるその化合物の誘導体である。「活性代謝物」という用語は、化合物が代謝されるときに形成される化合物の生物学的に活性な誘導体を指す。本明細書で使用される「代謝される」という用語は、生物が特定の物質を変化させる過程（限定されるものではないが、加水分解反応及び酵素によって触媒される反応、例えば酸化反応を含む）を合わせたものを指す。したがって、酵素は化合物に特定の構造変化をもたらし得る。例えば、シトクロムＰ４５０は、様々な酸化的反応及び還元的反応を触媒するのに対して、ウリジン二リン酸グルクロニルトランスフェラーゼは、活性化グルクロン酸分子を芳香族アルコール基、脂肪族アルコール基、カルボン酸基、アミン基及び遊離スルフヒドリル基に転移することを触媒する。代謝についての更なる情報は、The Pharmacological Basis of Therapeutics, 9th Edition, McGraw-Hill (1996)から入手することができる。本明細書に開示される化合物の代謝物は、宿主への化合物の投与及び宿主からの組織試料の分析、又はｉｎ ｖｉｔｒｏでの肝細胞と一緒の化合物のインキュベート及び得られた化合物の分析のいずれかによって同定することができる。両方の方法は当該技術分野でよく知られている。幾つかの実施形態では、化合物の代謝物は酸化的過程によって形成され、対応するヒドロキシ含有化合物に相当する。幾つかの実施形態では、化合物は薬理学的に活性な代謝物に代謝される。本明細書で使用される「調節する」という用語は、標的と直接的又は間接的のいずれかで相互作用させて、標的の活性を高めること、標的の活性を阻害すること、標的の活性を限定すること、又は標的の活性を延長することを例としてのみ含む、標的の活性を変化させることを意味する。

【0079】

本明細書で使用される場合に、「標的タンパク質」という用語は、選択的結合化合物によって結合することができるタンパク質分子又はタンパク質の一部を指す。或る特定の実施形態では、標的タンパク質は、チロシンキナーゼＫＩＴ（野生型若しくは様々な突然変異型、又はそれらの組合せ）、ＡＢＬ（野生型若しくは様々な突然変異型、又はそれらの組合せ）、ＥＧＦＲ（野生型若しくは様々な突然変異型、又はそれらの組合せ）、ＦＬＴ３（野生型若しくは様々な突然変異型、又はそれらの組合せ）、ＶＥＧＦＲ２（野生型若しくは様々な突然変異型、又はそれらの組合せ）、ＲＥＴ（野生型若しくは様々な突然変異型、又はそれらの組合せ）、ＰＤＧＦＲα（野生型若しくは様々な突然変異型、又はそれらの組合せ）、ＰＤＧＦＲβ（野生型若しくは様々な突然変異型、又はそれらの組合せ）、ＢＣＲ／ＡＢＬ（野生型若しくは様々な突然変異型、又はそれらの組合せ）、ＦＧＦＲ１（野生型若しくは様々な突然変異型、又はそれらの組合せ）、ＦＧＦＲ２（野生型若しくは様々な突然変異型、又はそれらの組合せ）、ＦＧＦＲ３（野生型若しくは様々な突然変異型、又はそれらの組合せ）、ＦＧＦＲ４（野生型若しくは様々な突然変異型、又はそれらの組合せ）である。

【0080】

本明細書で使用される場合に、ＩＣ_５０は、阻害の応答を測定するアッセイにおいて、最大応答の５０％阻害を達成する特定の試験化合物の量、濃度又は投与量を指す。

【0081】

本明細書で使用される場合に、ＥＣ_５０は、特定の試験化合物によって誘導、誘発又は増強される特定の応答の最大発現の５０％で用量依存性応答を惹起する試験化合物の投与量、濃度又は量を指す。

【0082】

本明細書で使用される場合に、ＧＩ_５０は５０％の細胞の成長阻害に必要な薬剤濃度、すなわち、５０％の細胞（癌細胞等）の成長を薬剤によって阻害又は制御することができる薬剤濃度を指す。

【0083】

本発明の新規キナーゼ阻害剤
本発明は、式（Ｉ）：

【化2】

（式中、
Ｘは－（ＣＨ＝ＣＨ）_ｍ－であり、ここで、ｍは０又は１であり、ｍが０の場合、Ｘは直接結合を表し、
Ｙは、－ＮＨ－又は－（ＣＨ_２）_ｎ－からなる群から選択され、ここで、ｎは０～３の整数であり、ｎが０の場合、Ｙは直接結合を表し、
Ｒ_１は、１個～３個の独立したＲ_４基で任意に置換されたアリール基及びヘテロアリール基からなる群から選択され、
Ｒ_２は、水素及びＣ_１～６アルキルからなる群から選択され、
Ｒ_３は、１個～２個の独立したＲ_５基で任意に置換されたＣ_１～６アルキル、Ｃ_１～６アルキルアミノ、並びに１個～３個の独立したＲ_４基で任意に置換されたアリール基、ヘテロアリール基及びヘテロシクリル基からなる群から選択され、
Ｒ_４は、ハロゲン、アミノ、Ｃ_１～６アルキル、Ｃ_３～６シクロアルキル、Ｃ_１～６ハロアルキル、Ｃ_１～６アルコキシ、Ｃ_１～６ヒドロキシアルキル、Ｃ_１～６アルキルアミノ、Ｃ_２～６アルキルアミド、（４－メチルピペラジン－１－イル）メチル、モルホリノメチル、モルホリニル、４－メチルピペラジン－１－イル、４－ピペリジル、及び４－テトラヒドロピラニルからなる群から独立して選択され、
Ｒ_５は、アミノ、ヒドロキシル、及びＣ_１～６アルキルチオからなる群から独立して選択される）の化合物、又はその薬学的に許容可能な塩、溶媒和物、エステル、酸、代謝物若しくはプロドラッグを含む新規キナーゼ阻害剤を提供する。

【0084】

好ましい実施形態では、Ｘは－（ＣＨ＝ＣＨ）－である。

【0085】

別の好ましい実施形態では、Ｙは直接結合又は－ＣＨ_２－である。

【0086】

別の好ましい実施形態では、Ｒ_１は、１個～３個の独立したＲ_４基で任意に置換されたフェニル基、ピリジニル基、ピラゾリル基、及びピリミジニル基からなる群から選択され、Ｒ_４はハロゲン、アミノ、Ｃ_１～６アルキル、Ｃ_１～６ハロアルキル、Ｃ_１～６アルコキシ、及び（４－メチルピペラジン－１－イル）メチルからなる群から独立して選択され、Ｒ_１は、より好ましくは、メチル、アミノ又はハロゲンで任意に置換されたフェニル基、２－ピリジニル基、３－ピリジニル基、４－ピラゾリル基、及び５－ピリミジニル基であり、Ｒ_１は、特に好ましくは、２－ピリジニルである。

【0087】

別の好ましい実施形態では、Ｒ_２は水素又はメチルである。

【0088】

別の好ましい実施形態では、Ｒ_３は、１個又は２個の独立したＲ_５基で任意に置換されたＣ_１～６アルキル、Ｃ_１～６アルキルアミノ、並びに１個～３個の独立したＲ_４基で任意に置換されたフェニル基、ナフチル基、ピリジニル基、ピペラジニル基、及びピペリジル基からなる群から選択され、ここで、Ｒ_４は、ハロゲン、アミノ、Ｃ_１～６アルキル、Ｃ_１～６ハロアルキル、Ｃ_１～６アルコキシ、及び（４－メチルピペラジン－１－イル）メチルからなる群から独立して選択され、Ｒ_５は、アミノ、ヒドロキシル、及びメチルチオからなる群から独立して選択され、Ｒ_３は、より好ましくは、アミノ、ヒドロキシ又はメチルチオで任意に置換されたＣ_１～６アルキル；ジメチルアミノ；メチルで任意に置換されたＮ－ピペラジニル；ハロゲン、トリフルオロメチル又はメトキシで任意に置換されたフェニル；ナフチル；４－ピリジニル；３－ピペリジル；及びメチルで任意に置換された４－ピペリジルであり、Ｒ_３は、特に好ましくは、メチル、２－プロピル、１－アミノ－３－メチルチオ－プロピル、１－アミノ－３－メチル－ブチル、メチル置換Ｎ－ピペラジニル、メトキシ置換フェニル、４－ピリジニル、又は４－ピペリジルである。

【0089】

特に好ましい実施形態では、Ｙが直接結合である場合、Ｒ_３は、アミノ、ヒドロキシ又はメチルチオで任意に置換されたＣ_１～６アルキル、及び４－ピリジニルからなる群から選択され、Ｙが－ＣＨ_２－である場合、Ｒ_３は、メトキシで任意に置換されたフェニル、メチルで任意に置換されたＮ－ピペラジニル、及びメチルで任意に置換された４－ピペリジルからなる群から選択される。

【0090】

本明細書では、様々な可変部について上記の基のあらゆる組合せが考慮される。当業者であれば、化学的に安定であり、当該技術分野で知られる技術だけでなく本明細書に示される技術によっても合成することができる化合物を得るために、本明細書に示される化合物における置換基及び置換パターンを選択することができると理解される。

【0091】

好ましい実施形態では、本発明の阻害剤は、下記表１の化合物、又はそれらの薬学的に許容可能な塩、溶媒和物、エステル、酸、代謝物若しくはプロドラッグを含む。

【0092】

【表1-1】

【表1-2】

【0093】

本明細書には、新規のキナーゼ阻害剤が記載される。これらの化合物の薬学的に許容可能な塩、溶媒和物、エステル、酸、薬学的に活性な代謝物及びプロドラッグも本明細書に記載される。

【0094】

追加の実施形態又は更なる実施形態では、本明細書に記載される化合物は、それを必要とする生物に投与することで、代謝されて代謝物を生じ、その後に代謝物が使用されて、所望の治療効果を含む所望の効果がもたらされる。

【0095】

本明細書に記載される化合物は、薬学的に許容可能な塩として形成され得る及び／又は使用され得る。薬学的に許容可能な塩の種類には、限定されるものではないが、（１）化合物の遊離塩基形態を、塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸、メタリン酸等の薬学的に許容可能な無機酸、又は酢酸、プロピオン酸、ヘキサン酸、シクロペンタンプロピオン酸、グリコール酸、ピルビン酸、乳酸、マロン酸、リンゴ酸、クエン酸、コハク酸、マレイン酸、酒石酸、フマル酸、トリフルオロ酢酸、安息香酸、３－（４－ヒドロキシベンゾイル）安息香酸、ケイ皮酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、１，２－エタンジスルホン酸、２－ヒドロキシエタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、トルエンスルホン酸、４－メチルビシクロ－［２．２．２］－オクタ－２－エン－１－カルボン酸、２－ナフタレンスルホン酸、酢酸ｔｅｒｔ－ブチル、グルコヘプトン酸、４，４’－メチレンビス－（３－ヒドロキシ－２－エン－１－カルボン酸）、３－フェニルプロピオン酸、トリメチル酢酸、ラウリル硫酸、グルコン酸、グルタミン酸、サリチル酸、ヒドロキシナフトエ酸、ステアリン酸、ムコン酸等の有機酸と反応することにより生成される酸付加塩；（２）親化合物に存在する酸性プロトンが、金属イオン、例えばアルカリ金属イオン（例えば、リチウムイオン、ナトリウムイオン、カリウムイオン）、アルカリ土類金属イオン（例えば、マグネシウムイオン又はカルシウムイオン）、若しくはアルミニウムイオンに置き換わるか、又は有機塩基若しくは無機塩基と配位結合する場合に生成される塩基付加塩が含まれる。許容可能な有機塩基には、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、トリメチルアミン、Ｎ－メチルグルカミン等が含まれる。許容可能な無機塩基には、水酸化アルミニウム、水酸化カルシウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウム、水酸化ナトリウム等が含まれる。

【0096】

薬学的に許容可能な塩の対応する対イオンは、限定されるものではないが、イオン交換クロマトグラフィー、イオンクロマトグラフィー、キャピラリー電気泳動、誘導結合プラズマ、原子吸光分析、質量分析又はそれらの任意の組合せを含む様々な方法を使用して分析及び特定され得る。

【0097】

塩は、以下の技術：濾過、非溶媒による沈殿後の濾過、溶媒の蒸発又は水溶液の場合は凍結乾燥の少なくとも１つを使用することによって回収される。

【0098】

薬学的に許容可能な塩、多形体及び／又は溶媒和物のスクリーニング及び特性決定は、限定されるものではないが、熱分析、Ｘ線回折、分光法、顕微鏡法及び元素分析を含む様々な技術を使用して行うことができる。使用される様々な分光技術には、限定されるものではないが、ラマン、ＦＴＩＲ、ＵＶＩＳ及びＮＭＲ（液体状態及び固体状態）が含まれる。様々な顕微鏡法技術には、限定されるものではないが、ＩＲ顕微鏡法及びラマン顕微鏡法が含まれる。

【0099】

本発明の医薬組成物
本発明はまた、少なくとも１つの式（Ｉ）の化合物、又は該化合物の薬学的に許容可能な塩、溶媒和物、エステル、酸、薬学的に活性な代謝物若しくはプロドラッグと、薬学的に許容可能な担体又は賦形剤と、任意に他の治療剤とを含む医薬組成物を提供する。

【0100】

処置の過程で、上記化合物は、単独で、又は１つ以上の他の治療剤と組み合わせて使用され得る。本発明の化合物を含む薬物は、注射、経口、吸入、直腸及び経皮投与のうち少なくとも１つを介して患者に投与され得る。他の治療剤は、免疫抑制剤（例えば、タクロリムス、シクロスポリン、ラパマイシン、メトトレキサート、シクロホスファミド、アザチオプリン、メルカプトプリン、ミコフェノール酸、又はＦＴＹ７２０）、グルココルチコイド（例えば、プレドニゾン、酢酸コルチゾン、プレドニゾロン、メチルプレドニゾロン、デキサメタゾン、ベタメタゾン、トリアムシノロン、ベクロメタゾン、酢酸フルドロコルチゾン、酢酸デオキシコルチコステロン、アルドステロン）、非ステロイド性抗炎症剤（例えば、サリチル酸塩、アリールアルカン酸、２－アリールプロピオン酸、Ｎ－アリールアントラニル酸、オキシカム、コキシブ、又はスルホンアニリド）、アレルギーワクチン、抗ヒスタミン剤、抗ロイコトリエン剤、β－アゴニスト、テオフィリン、抗コリン作動薬、又は他の選択的キナーゼ阻害剤（例えば、ｍＴＯＲ阻害剤、ｃ－Ｍｅｔ阻害剤）又はｈｅｒ２抗体から選択され得る。また、他の治療剤はまたラパマイシン、クリゾチニブ、タモキシフェン、ラロキシフェン、アナストロゾール、エキセメスタン、レトロゾール、ハーセプチン（商標）（トラスツズマブ）、グリベック（商標）（イマチニブ）、タキソール（商標）（パクリタキセル）、シクロホスファミド、ロバスタチン、ミノシン（Minosine）、シタラビン、５－フルオロウラシル（５－ＦＵ）、メトトレキサート（ＭＴＸ）、タキソテール（商標）（ドセタキセル）、ゾラデックス（商標）（ゴセレリン）、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ノコダゾール、テニポシド、エトポシド、ジェムザール（商標）（ゲムシタビン）、エポチロン、ナベルビン、カンプトテシン、ダウノニビシン（Daunonibicin）、ダクチノマイシン、ミトキサントロン、アムサクリン、ドキソルビシン（アドリアマイシン）、エピルビシン又はイダルビシンであってもよい。或いは、他の治療剤は、Ｇ－ＣＳＦ（顆粒球コロニー刺激因子）等のサイトカインであってもよい。或いは、他の治療剤は、例えば、限定されるものではないが、ＣＭＦ（シクロホスファミド、メトトレキサート及び５－フルオロウラシル）、ＣＡＦ（シクロホスファミド、アドリアマイシン及び５－フルオロウラシル）、ＡＣ（アドリアマイシン及びシクロホスファミド）、ＦＥＣ（５－フルオロウラシル、エピルビシン及びシクロホスファミド）、ＡＣＴ若しくはＡＴＣ（アドリアマイシン、シクロホスファミド及びパクリタキセル）、又はＣＭＦＰ（シクロホスファミド、メトトレキサート、５－フルオロウラシル及びプレドニゾン）であってもよい。

【0101】

本発明の実施形態では、患者が本発明に従って処置される場合、所与の作用物質の量は、特定の投与計画、疾患又は疾病の種類及びその重症度、処置を必要とする被験体又は宿主の個性（例えば、体重）等の要因に応じて変動することとなるが、例えば、投与される特定の作用物質、投与経路、処置される疾病、及び処置される被験体又は宿主を含む、症例を取り巻く特定の状況に従って、当該技術分野で既知の方式で定型的に決定することができる。一般に、成人の処置に採用される用量は、典型的には、１日当たり０．０２ｍｇ～５０００ｍｇの範囲、例えば１日当たり約１ｍｇ～１５００ｍｇである。所望の用量は、単回用量で、又は同時に（又は短期間にわたって）若しくは適切な間隔で、例えば１日当たり２回、３回、４回又はそれ以上の部分用量（sub-doses）として投与される分割用量として適宜表記され得る。上記の投与量範囲が示されているものの、当業者には、具体的な有効量は患者の疾病及び医師の判断に応じて適切に調節され得ることが理解されるであろう。

【0102】

本発明の医薬品の使用
本発明のキナーゼ阻害剤は、細胞若しくは被験体においてｃＫＩＴ（特に突然変異型ｃＫＩＴ／Ｔ６７０Ｉ）、ＦＬＴ３（突然変異型ＦＬＴ３－ＩＴＤを含む）、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、及び／又はＶＥＧＦＲ２のキナーゼ活性を低下若しくは阻害するために使用される、及び／又は被験体においてｃＫＩＴ（特に突然変異型ｃＫＩＴ／Ｔ６７０Ｉ）、ＦＬＴ３（突然変異型ＦＬＴ３－ＩＴＤを含む）、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、及び／又はＶＥＧＦＲ２の活性に関連する障害を未然防止若しくは処置するために使用される、式（Ｉ）の化合物、又はその薬学的に許容可能な塩、溶媒和物、エステル、酸、代謝物若しくはプロドラッグ、又は医薬組成物を含む。

【0103】

式（Ｉ）の化合物、又はその薬学的に許容可能な塩、溶媒和物、エステル、酸、代謝物若しくはプロドラッグ、又は医薬組成物は、固形腫瘍（良性又は特に悪性のタイプを含む）、特に肉腫、消化管間質腫瘍（ＧＩＳＴ）、結腸直腸癌、急性骨髄芽球性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、腫瘍（neoplasia）、甲状腺癌、全身性肥満細胞症、好酸球増多症候群、線維症、エリテマトーデス、移植片対宿主病、神経線維腫症、肺高血圧症、アルツハイマー病、精上皮腫、未分化胚細胞腫、肥満細胞腫瘍、肺癌、気管支癌、精巣上皮内腫瘍、黒色腫、乳癌、神経芽細胞腫、甲状腺乳頭癌／甲状腺濾胞癌、悪性リンパ腫、非ホジキンリンパ腫、多発性内分泌腫瘍症２型、褐色細胞腫、甲状腺癌、副甲状腺過形成／副甲状腺腫、結腸癌、結腸直腸腺腫、卵巣癌、前立腺癌、神経膠芽細胞腫、脳腫瘍、悪性神経膠腫、膵臓癌、悪性胸膜内皮腫、血管芽細胞腫、血管腫、腎臓癌、肝臓癌、副腎癌、膀胱癌、胃癌、直腸癌、膣癌、子宮頸癌、子宮内膜癌、多発性骨髄腫、頭頸部腫瘍、並びに他の増殖性の疾病等、又はそれらの組合せからなる群から選択される１つ以上の疾患の処置、未然防止又は改善のために使用され得る。消化管間質腫瘍（ＧＩＳＴ）、結腸直腸癌、急性骨髄芽球性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、甲状腺癌等、又はそれらの組合せの処置に特に好ましい。最も好ましくは、本発明の阻害剤又はその医薬組成物は、消化管間質腫瘍、特にｃＫＩＴ－Ｔ６７０Ｉ突然変異型消化管間質腫瘍の処置又は未然防止に使用することができる。

【0104】

式（Ｉ）の化合物、又はその薬学的に許容可能な塩、溶媒和物、エステル、酸、代謝物若しくはプロドラッグ、又は医薬組成物は、関節炎、リウマチ性関節症、骨関節炎、狼瘡、関節リウマチ、炎症性腸疾患、乾癬性関節炎、骨関節炎、スティル病、若年性関節炎、糖尿病、重症筋無力症、橋本甲状腺炎、オード甲状腺炎（Ord's hyroiditis）、グレーブス病、シェーグレン症候群、多発性硬化症、ギランバレー症候群、急性散在性脳脊髄炎、アジソン病、眼球クローヌス・ミオクローヌス運動失調、強直性脊椎炎、抗リン脂質抗体症候群、再生不良性貧血、自己免疫性肝炎、セリアック病、グッドパスチャー症候群、特発性血小板減少性紫斑病、視神経炎、強皮症、原発性胆汁性肝硬変、ライター症候群、高安動脈炎、側頭動脈炎、温式自己免疫性溶血性貧血、ウェゲナー肉芽腫症、乾癬、汎発性脱毛症、ベーチェット病、慢性疲労、家族性自律神経失調症、子宮内膜症、間質性膀胱炎、神経筋緊張症、強皮症又は外陰部痛からなる群から選択される自己免疫疾患の処置、未然防止又は改善のために使用され得る。

【0105】

化合物の調製
式（Ｉ）の化合物を、当業者に既知の標準的な合成技術を使用して、又は当該技術分野で既知の方法を本明細書に記載される方法と組み合わせて使用して合成することができる。また、本明細書に提示される溶媒、温度、及び他の反応条件は、当業者に応じて変化し得る。更なるガイドとして、以下の合成方法も利用することができる。

【0106】

反応を、本明細書に記載の化合物を提供するために直線的な順序で用いることができ、又はそれらを使用して、本明細書に記載の及び／又は当該技術分野で既知の方法によってその後結合される断片を合成することができる。

【0107】

或る特定の実施形態では、本明細書に記載されるキナーゼ阻害剤化合物の作製方法及び使用方法が本明細書で提供される。或る特定の実施形態では、本明細書に記載される化合物は、以下の合成スキームを使用して合成することができる。適切な代替の出発材料を使用することにより、以下に記載されるのと類似の方法論を使用して化合物を合成することができる。

【0108】

本明細書に記載される化合物の合成に使用される出発材料は、合成されても又は商業的供給源から入手されてもよい。本明細書に記載される化合物及び種々の置換基を有する他の関連化合物は、当業者に知られる技術及び材料を使用して合成することができる。本明細書に開示される化合物の通常の調製方法は、当該分野で既知の反応から導き出すことができ、その反応は、本明細書に示される分子に様々な部分を導入するために当業者によって認識されるであろう適切な試薬及び条件を使用することによって変更され得る。

【0109】

所望であれば、限定されるものではないが、濾過、蒸留、結晶化、クロマトグラフィー等を含む慣例的な技術を使用して反応生成物を単離及び精製することができる。このような生成物は、物理定数及びスペクトルデータを含む慣例的な手段を使用して特性決定され得る。

【0110】

式（Ｉ）の化合物の調製に向けた合成アプローチの非限定的な例は、以下の合成経路に示されている。

【実施例】

【0111】

実施例１：（Ｅ）－Ｎ－（４－メチル－５－（３－（２－（ピリジン－２－イル）ビニル）－１Ｈ－インダゾール－６－イル）チアゾール－２－イル）－４－（（４－メチルピペラジン－１－イル）メチル）ベンズアミド

【化3】

【0112】

Ｎ－（４－メチルチアゾール－２－イル）アセトアミド：４－メチルチアゾール－２－アミン（２ｇ）を１００ｍＬ容の丸底フラスコに添加し、次いで、無水ジクロロメタン（５０ｍＬ）、トリエチルアミン（３．９ｍＬ）を添加し、塩化アセチル（１．５ｍＬ）をゆっくりと滴下して加えた。反応系を、気体アルゴン保護下、室温で４時間反応させた。反応後、系内の溶媒を減圧下での蒸留により乾燥させ、得られたものを飽和重炭酸ナトリウムでｐＨ１０超に中和し、次いで酢酸エチルで抽出した。有機相を水及び飽和食塩水でそれぞれ洗浄し、次いで無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。有機相を濾過して減圧下での蒸留によって乾燥させ、粗生成物を得た。粗生成物を加圧シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、純粋な生成物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）＋：１５７．０５。

【0113】

（Ｅ）－Ｎ－（４－メチル－５－（３－（２－（ピリジン－２－イル）ビニル）－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－６－イル）チアゾール－２－イル）アセトアミド：Ｎ－（４－メチルチアゾール－２－イル）アセトアミド（１．０ｇ）を丸底フラスコに添加し、次いでジメチルスルホキシド（２０ｍＬ）、（Ｅ）－６－ヨード－３－（２－（ピリジン－２－イル）ビニル）－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール（３．１ｇ）、パラジウムテトラキストリフェニルホスフィン（０．３７ｇ）及び炭酸セシウム（６．２グラム）を添加した。反応系を１３０℃に加熱し、気体アルゴン保護下で１４時間反応させた。反応後、系内の溶媒を減圧下での蒸留により乾燥させ、得られたものを水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。有機相を水及び飽和食塩水でそれぞれ洗浄し、次いで無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。有機相を濾過し、減圧下での蒸留により乾燥させて、粗生成物を得た。粗生成物を加圧シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、純粋な生成物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）＋：４６０．１８。

【0114】

（Ｅ）－４－メチル－５－（３－（２－（ピリジン－２－イル）ビニル）－１Ｈ－インダゾール－６－イル）チアゾール－２－アミン：（Ｅ）－Ｎ－（４－メチル－５－（３－（２－（ピリジン－２－イル）ビニル）－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－６－イル）チアゾール－２－イル）アセトアミド（２．０ｇ）、エタノール（２０ｍＬ）及び６ｍｏｌ／リットル塩酸（１５ｍＬ）を１００ｍＬ容の丸底フラスコに添加した。反応系を９０℃に加熱し、気体アルゴン保護下で１４時間反応させた。反応後、系内の溶媒を減圧下での蒸留により乾燥させ、得られたものを飽和重炭酸ナトリウムでｐＨ１０超に中和すると固体が沈殿し、それを濾過して粗生成物を得た。粗生成物を酢酸エチルで洗浄して、純粋な生成物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）＋：３３４．１１。

【0115】

ｔｅｒｔ－ブチル（Ｅ）－６－（２－アミノ－４－メチルチアゾール－５－イル）－３－（２－（ピリジン－２－イル）ビニル）－１Ｈ－インダゾール－１－カルボキサミド：（Ｅ）－４－メチル－５－（３－（２－（ピリジン－２－イル）ビニル）－１Ｈ－インダゾール－６－イル）チアゾール－２－アミン（１ｇ）を５０ｍＬ容の丸底フラスコに添加し、次いで無水Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）、トリエチルアミン（０．９ｍＬ）、及び二炭酸ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（１．０ｇ）を添加した。反応系を、気体アルゴン保護下、室温で４時間反応させた。反応後、系内の溶媒を減圧下での蒸留により乾燥させ、得られたものを飽和重炭酸ナトリウムでｐＨ１０超に中和し、次いで水相を酢酸エチルで抽出した。有機相を水及び飽和食塩水でそれぞれ洗浄し、次いで無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。有機相を濾過し、減圧下での蒸留により乾燥させて、粗生成物を得た。粗生成物を加圧シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、純粋な生成物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）＋：４３４．１７。

【0116】

（Ｅ）－Ｎ－（４－メチル－５－（３－（２－（ピリジン－２－イル）ビニル）－１Ｈ－インダゾール－６－イル）チアゾール－２－イル）－４－（（４－メチルピペラジン－１－イル）メチル）ベンズアミド（１）：ｔｅｒｔ－ブチル（Ｅ）－６－（２－アミノ－４－メチルチアゾール－５－イル）－３－（２－（ピリジン－２－イル）ビニル）－１Ｈ－インダゾール－１－カルボキサミド（０．０５ｇ）を丸底フラスコに添加し、次いでＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）、４－（（４－メチルピペラジン－１－イル）メチル）安息香酸（０．０３ｇ）、２－（７－ベンゾトリアゾールオキシド）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウレアヘキサフルオロホスフェート（０．０７ｇ）及びトリエチルアミン（０．０３ｍＬ）を添加した。反応系を、気体アルゴン保護下、室温で１４時間撹拌した。反応後、系内の溶媒を減圧下での蒸留により乾燥させ、得られたものを水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。有機相を水及び飽和食塩水でそれぞれ洗浄し、次いで無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。有機相を濾過し、減圧下での蒸留により乾燥させて、粗生成物を得た。

【0117】

粗生成物を無水ジクロロメタン（２ｍＬ）に溶解し、トリフルオロ酢酸（１ｍＬ）を添加した。反応系を、気体アルゴン保護下、室温で１４時間撹拌した。反応後、系内の溶媒を減圧下での蒸留により乾燥させ、得られたものを水で希釈し、飽和重炭酸ナトリウム溶液でｐＨ１０超に中和した。水相を酢酸エチルで抽出し、有機相を水及び飽和食塩水でそれぞれ洗浄し、次いで無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。有機相を濾過し、減圧下での蒸留により乾燥させて、粗生成物を得た。粗生成物を加圧シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物１を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）＋：５５０．２４。

【0118】

実施例２：（Ｅ）－４－クロロ－Ｎ－（４－メチル－５－（３－（２－（ピリジン－２－イル）ビニル）－１Ｈ－インダゾール－６－イル）チアゾール－２－イル）－３－（トリフルオロメチル）ベンズアミド

【化4】

【0119】

実施例１に記載されたものと同様の工程を使用して実施例２の合成を行った。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）＋：５４０．０９。

【0120】

実施例３：（Ｅ）－Ｎ－（４－メチル－５－（３－（２－（ピリジン－２－イル）ビニル）－１Ｈ－インダゾール－６－イル）チアゾール－２－イル）－２－（３－（トリフルオロメチル）フェニル）アセトアミド

【化5】

【0121】

実施例１に記載されたものと同様の工程を使用して実施例３の合成を行った。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）＋：５２０．１４。

【0122】

実施例４：（Ｅ）－Ｎ－（４－メチル－５－（３－（２－（ピリジン－２－イル）ビニル）－１Ｈ－インダゾール－６－イル）チアゾール－２－イル）イソニコチンアミド

【化6】

【0123】

実施例１に記載されたものと同様の工程を使用して実施例４の合成を行った。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）＋：４３９．１４。

【0124】

実施例５：（Ｅ）－Ｎ－（５－（３－（２－（ピリジン－２－イル）ビニル）－１Ｈ－インダゾール－６－イル）チアゾール－２－イル）アセトアミド

【化7】

【0125】

実施例１に記載されたものと同様の工程を使用して実施例５の合成を行った。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）＋：３６１．１１。

【0126】

実施例６：（Ｅ）－Ｎ－（４－メチル－５－（３－（２－（ピリジン－２－イル）ビニル）－１Ｈ－インダゾール－６－イル）チアゾール－２－イル）－３－（トリフルオロメチル）ベンズアミド

【化8】

【0127】

実施例１に記載されたものと同様の工程を使用して実施例６の合成を行った。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）＋：５０６．１３。

【0128】

実施例７：（Ｅ）－Ｎ－（４－メチル－５－（３－（２－（ピリジン－２－イル）ビニル）－１Ｈ－インダゾール－６－イル）チアゾール－２－イル）－２－（ナフタレン－１－イル）アセトアミド

【化9】

【0129】

実施例１に記載されたものと同様の工程を使用して実施例７の合成を行った。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）＋：５０２．１７。

【0130】

実施例８：（Ｅ）－２－（３，４－メトキシフェニル）－Ｎ－（４－メチル－５－（３－（２－（ピリジン－２－イル）ビニル）－１Ｈ－インダゾール－６－イル）チアゾール－２－イル）アセトアミド

【化10】

【0131】

実施例１に記載されたものと同様の工程を使用して実施例８の合成を行った。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）＋：５１２．１８。

【0132】

実施例９：（Ｅ）－Ｎ－（４－メチル－５－（３－（２－（ピリジン－２－イル）ビニル）－１Ｈ－インダゾール－６－イル）チアゾール－２－イル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）アセトアミド

【化11】

【0133】

実施例１に記載されたものと同様の工程を使用して実施例９の合成を行った。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）＋：４７４．２１。

【0134】

実施例１０：（Ｅ）－２－（３－クロロフェニル）－Ｎ－（４－メチル－５－（３－（２－（ピリジン－２－イル）ビニル）－１Ｈ－インダゾール－６－イル）チアゾール－２－イル）アセトアミド

【化12】

【0135】

実施例１に記載されたものと同様の工程を使用して実施例１０の合成を行った。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）＋：４８６．１２。

【0136】

実施例１１：（Ｅ）－Ｎ－（４－メチル－５－（３－（２－（ピリジン－２－イル）ビニル）－１Ｈ－インダゾール－６－イル）チアゾール－２－イル）－２－（ピペリジン－４－イル）アセトアミド

【化13】

【0137】

実施例１に記載されたものと同様の工程を使用して実施例１１の合成を行った。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）＋：４５９．２０。

【0138】

実施例１２：（Ｅ）－２－（ジメチルアミノ）－Ｎ－（４－メチル－５－（３－（２－（ピリジン－２－イル）ビニル）－１Ｈ－インダゾール－６－イル）チアゾール－２－イル）アセトアミド

【化14】

【0139】

実施例１に記載されたものと同様の工程を使用して実施例１２の合成を行った。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）＋：４１９．１７。

【0140】

実施例１３：（Ｅ）－Ｎ－（４－メチル－５－（３－（２－（ピリジン－２－イル）ビニル）－１Ｈ－インダゾール－６－イル）チアゾール－２－イル）－２－（ピペリジン－３－イル）アセトアミド

【化15】

【0141】

実施例１に記載されたものと同様の工程を使用して実施例１３の合成を行った。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）＋：４５９．２０。

【0142】

実施例１４：（Ｅ）－Ｎ－（４－メチル－５－（３－（２－（ピリジン－２－イル）ビニル）－１Ｈ－インダゾール－６－イル）チアゾール－２－イル）ピペリジン－４－カルボキサミド

【化16】

【0143】

実施例１に記載されたものと同様の工程を使用して実施例１４の合成を行った。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）＋：４４５．１８。

【0144】

実施例１５：（Ｅ）－２－アミノ－Ｎ－（４－メチル－５－（３－（２－（ピリジン－２－イル）ビニル）－１Ｈ－インダゾール－６－イル）チアゾール－２－イル）－４－（メチルチオ）ブタンアミド

【化17】

【0145】

実施例１に記載されたものと同様の工程を使用して実施例１５の合成を行った。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）＋：４６５．１６。

【0146】

実施例１６：（Ｅ）－１－メチル－Ｎ－（４－メチル－５－（３－（２－（ピリジン－２－イル）ビニル）－１Ｈ－インダゾール－６－イル）チアゾール－２－イル）ピペリジン－４－カルボキサミド

【化18】

【0147】

実施例１に記載されたものと同様の工程を使用して実施例１６の合成を行った。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）＋：４５８．２０。

【0148】

実施例１７：（Ｅ）－２－アミノ－Ｎ－（４－メチル－５－（３－（２－（ピリジン－２－イル）ビニル）－１Ｈ－インダゾール－６－イル）チアゾール－２－イル）プロピオンアミド

【化19】

【0149】

実施例１に記載されたものと同様の工程を使用して実施例１７の合成を行った。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）＋：４０５．１５。

【0150】

実施例１８：（Ｅ）－２－アミノ－４－メチル－Ｎ－（４－メチル－５－（３－（２－（ピリジン－２－イル）ビニル）－１Ｈ－インダゾール－６－イル）チアゾール－２－イル）ペンタンアミド

【化20】

【0151】

実施例１に記載されたものと同様の工程を使用して実施例１８の合成を行った。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）＋：４４７．２０。

【0152】

実施例１９：（Ｅ）－Ｎ－（４－メチル－５－（３－（２－（ピリジン－２－イル）ビニル）－１Ｈ－インダゾール－６－イル）チアゾール－２－イル）イソブタンアミド

【化21】

【0153】

実施例１に記載されたものと同様の工程を使用して実施例１９の合成を行った。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）＋：４０４．１６。

【0154】

実施例２０：（Ｅ）－２－アミノ－Ｎ－（４－メチル－５－（３－（２－（ピリジン－２－イル）ビニル）－１Ｈ－インダゾール－６－イル）チアゾール－２－イル）－３－フェニルプロピオンアミド

【化22】

【0155】

実施例１に記載されたものと同様の工程を使用して実施例２０の合成を行った。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）＋：４８１．１８。

【0156】

実施例２１：Ｎ－（４－メチル－５－（３－（１－メチル－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）－１Ｈ－インダゾール－６－イル）チアゾール－２－イル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）アセトアミド

【化23】

【0157】

２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－Ｎ－（４－メチルチアゾール－２－イル）アセトアミド（２１ａ）：４－メチルチアゾール－２－アミン（１．０ｇ）を丸底フラスコに添加し、次いでＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）、２－（４－メチルピペラジン－１－イル）酢酸（１．５ｇ）、２－（７－ベンゾトリアゾールオキシド）－Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトラメチルウレアヘキサフルオロホスフェート（５．０ｇ）及びトリエチルアミン（２．５ｍＬ）を添加した。反応系を、気体アルゴン保護下、室温で１４時間撹拌した。反応後、系内の溶媒を減圧下での蒸留により乾燥させ、得られたものを水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。有機相を水及び飽和食塩水でそれぞれ洗浄し、次いで無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。有機相を濾過して減圧下での蒸留によって乾燥させ、粗生成物を得た。粗生成物を加圧シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、純粋な生成物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）＋：２５５．１３。

【0158】

Ｎ－（４－メチル－５－（１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－６－イル）チアゾール－２－イル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）アセトアミド（２１ｂ）：２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－Ｎ－（４－メチルチアゾール－２－イル）アセトアミド（１．０ｇ）を丸底フラスコに添加し、次いでジメチルスルホキシド（１０ｍＬ）、６－ヨード－１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール（１．３ｇ）、テトラキストリフェニルホスフィンパラジウム（０．４５ｇ）及び炭酸セシウム（３．８ｇ）を添加した。反応系を１３０℃に加熱し、気体アルゴン保護下で１４時間反応させた。反応後、系内の溶媒を減圧下での蒸留により乾燥させ、得られたものを水で希釈し、酢酸エチルで抽出した。有機相を水及び飽和食塩水でそれぞれ洗浄し、次いで無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。有機相を濾過し、減圧下での蒸留により乾燥させて、粗生成物を得た。粗生成物を加圧シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、純粋な生成物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）＋：４５５．２３。

【0159】

Ｎ－（５－（１Ｈ－インダゾール－６－イル）－４－メチルチアゾール－２－イル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）アセトアミド（２１ｃ）：Ｎ－（４－メチル－５－（１－（テトラヒドロ－２Ｈ－ピラン－２－イル）－１Ｈ－インダゾール－６－イル）チアゾール－２－イル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）アセトアミド（１．０ｇ）、エタノール（１０ｍＬ）、及び６ｍｏｌ／リットル塩酸（５ｍＬ）を５０ｍＬ容の丸底フラスコに添加した。反応系を９０℃に加熱し、気体アルゴン保護下で１４時間反応させた。反応後、系内の溶媒を減圧下での蒸留により乾燥させ、得られたものを飽和重炭酸ナトリウムでｐＨ１０超に中和すると固体が沈殿し、それを濾過して粗生成物を得た。粗生成物を酢酸エチルで洗浄して、純粋な生成物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）＋：３７１．１７。

【0160】

Ｎ－（５－（３－ヨード－１Ｈ－インダゾール－６－イル）－４－メチルチアゾール－２－イル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）アセトアミド（２１ｄ）：
Ｎ－（５－（１Ｈ－インダゾール－６－イル）－４－メチルチアゾール－２－イル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）アセトアミド（０．６ｇ）を５０ｍＬ容の丸底フラスコに添加し、次いで、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）、ヨウ素（０．８ｇ）及び水酸化カリウム（０．４ｇ）を添加した。反応系を、気体アルゴン保護下、室温で８時間撹拌した。反応後、系内の溶媒を減圧下での蒸留により乾燥させ、得られたものを水で希釈し、水相を酢酸エチルで抽出し、有機相を水及び飽和食塩水でそれぞれ洗浄し、次いで無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。有機相を濾過し、減圧下での蒸留により乾燥させて、粗生成物を得た。粗生成物を加圧シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、純粋な生成物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）＋：４９７．０６。

【0161】

Ｎ－（５－（１－アセチル－３－ヨード－１Ｈ－インダゾール－６－イル）－４－メチルチアゾール－２－イル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）アセトアミド（２１ｅ）：Ｎ－（５－（３－ヨード－１Ｈ－インダゾール－６－イル）－４－メチルチアゾール－２－イル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）アセトアミド（０．５ｇ）を５０ｍＬ容の丸底フラスコに添加し、次いで無水ジクロロメタン（１０ｍＬ）、トリエチルアミン（０．３ｍＬ）、及び塩化アセチル（０．１ｇ）を添加した。反応系を、アルゴン保護下、室温で４時間反応させた。反応後、系内の溶媒を減圧下での蒸留により乾燥させ、得られたものを飽和重炭酸ナトリウムでｐＨ１０超に中和し、次いで酢酸エチルで抽出した。有機相を水及び飽和食塩水でそれぞれ洗浄し、次いで無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。有機相を濾過し、減圧下での蒸留により乾燥させて、粗生成物を得た。粗生成物を加圧シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、純粋な生成物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）＋：５３８．０７。

【0162】

Ｎ－（４－メチル－５－（３－（１－メチル－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）－１Ｈ－インダゾール－６－イル）チアゾール－２－イル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）アセトアミド（２１）：Ｎ－（５－（１－アセチル－３－ヨード－１Ｈ－インダゾール－６－イル）－４－メチルチアゾール－２－イル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）アセトアミド（０．１ｇ）を丸底フラスコに添加し、次いで１，４－ジオキサン（１０ｍＬ）、水（２ｍＬ）、（１－メチル－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）ホウ酸（０．０３ｇ）、テトラキストリフェニルホスフィンパラジウム（０．０２ｇ）及び炭酸カリウム（０．０７ｇ）を添加した。反応系を８０℃に加熱し、気体アルゴン保護下で１４時間反応させた。反応後、系内の溶媒を減圧下での蒸留により乾燥させ、得られたものを水で希釈し、次いで酢酸エチルで抽出した。有機相を水及び飽和食塩水でそれぞれ洗浄し、次いで無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。有機相を濾過し、減圧下での蒸留により乾燥させて、粗生成物を得た。粗生成物を加圧シリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物２１を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）＋：４５１．２１。

【0163】

実施例２２：（Ｅ）－２－ヒドロキシル－４－メチル－Ｎ－（４－メチル－５－（３－（２－（ピリジン－２－イル）ビニル）－１Ｈ－インダゾール－６－イル）チアゾール－２－イル）ペンタンアミド

【化24】

【0164】

実施例１に記載されたものと同様の工程を使用して実施例２２の合成を行った。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）＋：４４８．１８。

【0165】

実施例２３：Ｎ－（５－（３－（２－アミノピリミジン－５－イル）－１Ｈ－インダゾール－６－イル）－４－メチルチアゾール－２－イル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）アセトアミド

【化25】

【0166】

実施例２１に記載されたものと同様の工程を使用して実施例２３の合成を行った。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）＋：４６４．２０。

【0167】

実施例２４：Ｎ－（４－メチル－５－（３－（ピリジン－３－イル）－１Ｈ－インダゾール－６－イル）チアゾール－２－イル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）アセトアミド

【化26】

【0168】

実施例２１に記載されたものと同様の工程を使用して実施例２４の合成を行った。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）＋：４４８．１９。

【0169】

実施例２５：Ｎ－（５－（３－（５－フルオロピリジン－３－イル）－１Ｈ－インダゾール－６－イル）－４－メチルチアゾール－２－イル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）アセトアミド

【化27】

【0170】

実施例２１に記載されたものと同様の工程を使用して実施例２５の合成を行った。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）＋：４６６．１８。

【0171】

実施例２６：Ｎ－（５－（３－（３－フルオロフェニル）－１Ｈ－インダゾール－６－イル）－４－メチルチアゾール－２－イル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）アセトアミド

【化28】

【0172】

実施例２１に記載されたものと同様の工程を使用して実施例２６の合成を行った。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）＋：４６５．１９。

【0173】

実施例２７：（Ｅ）－Ｎ－（４－メチル－５－（３－（２－（ピリジン－２－イル）ビニル）－１Ｈ－インダゾール－６－イル）チアゾール－２－イル）－２－（１－メチルピペリジン－４－イル）アセトアミド

【化29】

【0174】

実施例１に記載されたものと同様の工程を使用して実施例２７の合成を行った。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）＋：４７３．２１。

【0175】

実施例２８：Ｎ－（４－メチル－５－（３－（ピリジン－３－イル）－１Ｈ－インダゾール－６－イル）チアゾール－２－イル）－２－（３－（トリフルオロメチル）フェニル）アセトアミド

【化30】

【0176】

実施例２１に記載されたものと同様の工程を使用して実施例２８の合成を行った。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）＋：４９４．１３。

【0177】

実施例２９：（Ｅ）－１－（４－メチル－５－（３－（２－（ピリジン－２－イル）ビニル）－１Ｈ－インダゾール－６－イル）チアゾール－２－イル）－３－（３－（トリフルオロメチル）フェニル）ウレア

【化31】

【0178】

実施例１に記載されたものと同様の工程を使用して実施例２９の合成を行った。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）＋：５２１．１４。

【0179】

実施例３０：（Ｅ）－Ｎ－（４－メチル－５－（３－（２－（ピリジン－２－イル）ビニル）－１Ｈ－インダゾール－６－イル）チアゾール－２－イル）アセトアミド

【化32】

【0180】

実施例１に記載されたものと同様の工程を使用して実施例３０の合成を行った。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ（Ｍ＋１）＋：３７６．１３。

【0181】

実施例３１：癌細胞増殖に対する効果
癌細胞の成長に対する本発明の化合物の効果を試験することにより（表２）、癌細胞の増殖に対する本明細書中の化合物の阻害効果及び癌細胞の増殖を阻害する際のそれらの選択性を更に評価した。

【0182】

本実施例では、ヒト消化管間質腫瘍細胞株ＧＩＳＴ－Ｔ１（野生型Ｃ－ＫＩＴ遺伝子を発現する）（コスモ・バイオ株式会社（日本）から購入）、ヒト消化管間質腫瘍細胞株ＧＩＳＴ－Ｔ１－Ｔ６７０Ｉ（Ｃ－ＫＩＴ－Ｔ６７０Ｉ突然変異遺伝子を発現する）（ＣＲＩＳＰＲ技術を用いて本発明者らの研究室で構築）、マウス初代Ｂ細胞ＢａＦ３（ＡＴＣＣから購入）を使用した。加えて、本実施例では、マウスＴｅｌ－ｃＫｉｔ－ＢａＦ３（Ｃ－ＫＩＴ野生型キナーゼを安定して発現する）、マウスＴｅｌ－ｃＫｉｔ／Ｔ６７０Ｉ－ＢａＦ３（ｃＫＩＴ Ｔ６７０Ｉ突然変異型キナーゼを安定して発現する）、マウスＴｅｌ－ＰＤＧＦＲα－ＢａＦ３（ＰＤＧＦＲαキナーゼを安定して発現する）、マウスＴｅｌ－ＰＤＧＦＲβ－ＢａＦ３（ＰＤＧＦＲβキナーゼを安定して発現する）、マウスＴｅｌ－ＶＥＧＦＲ２－ＢａＦ３（ＶＥＧＦＲ２キナーゼを安定して発現する）、マウスＴｅｌ－ＦＬＴ３－ＢａＦ３（ＦＬＴ３キナーゼを安定して発現する）も使用した。上記の細胞株はいずれも本発明者らの研究室で構築した。構築方法は次の通りであった：ヒトＣ－ＫＩＴ、Ｃ－ＫＩＴ Ｔ６７０Ｉ、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、ＶＥＧＦＲ２、ＦＬＴ３キナーゼ領域配列をそれぞれＰＣＲにより増幅し、Ｎ末端ＴＥＬ断片及び／又はＮＰＭ断片及び／又はＴＰＲ断片をそれぞれ有するＭＳＣＶ－Ｐｕｒｏベクター（Clontechから購入）に挿入して、レトロウイルス法によりマウスＢａＦ３細胞に安定的に移入し、そしてＩＬ－３成長因子を除去し、最終的にＣ－ＫＩＴ、Ｃ－ＫＩＴ／Ｔ６７０Ｉ、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、ＶＥＧＦＲ２、ＦＬＴ３に応じてタンパク質が移入された細胞株を得た。ＧＩＳＴ－Ｔ１－Ｔ６７０Ｉ（Ｃ－ＫＩＴ－Ｔ６７０Ｉ突然変異遺伝子を発現する）細胞株を本発明者らの研究室で構築した。構築方法は次の通りであった：ＫＩＴ遺伝子のＴ６７０部位付近を標的とするｓｇＲＮＡを、マサチューセッツ工科大学のZhang Feng研究所のＣＲＩＳＰＲ設計ツール（ＵＲＬ：crispr.mit.edu）によって設計し、ｐＳｐＣａｓ９（ＢＢ）－２Ａ－Ｐｕｒｏベクター（米国のAddgene）にクローニングし、得られたベクター及びＴ６７０部位付近にＴ６７０Ｉ突然変異を有する一本鎖オリゴヌクレオチドを細胞にコトランスフェクトし、抗生物質で選択した後希釈し、９６ウェルプレートにおいて単一細胞で培養して、細胞のＴ６７０部位を、サンガーシーケンシング法によって配列決定して検証した。

【0183】

本実施例では、様々な濃度（ＤＭＳＯ中、０．０００５０８μＭ、０．００１５２μＭ、０．００４５７μＭ、０．０１３７μＭ、０．０４１１μＭ、０．１２３μＭ、０．３７０μＭ、１．１１μＭ、３．３３μＭ、１０μＭ）の本発明の化合物及び対照化合物であるアキシチニブ（中国のMedChem Expressから購入）を上述の細胞に添加し、これを７２時間インキュベートし、インキュベートした細胞をＣＣＫ－８細胞生存率検出キット（中国上海のBeibo Biological Companyから購入）で検出し（ＣＣＫ－８は生細胞内の脱水素酵素によって水溶性の高い黄色のホルマザン生成物に還元され得て、生成されるホルマザンの量は生細胞の数に比例する）、生細胞の数をマイクロプレートリーダーによって定量した。そして、各化合物及び対照化合物のＧＩ５０を計算した（結果を表２及び表３に示した）。

【0184】

表２に示される実験結果は、本発明の化合物が、突然変異型ｃＫＩＴ－Ｔ６７０Ｉ、ＶＥＧＦＲ２、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、及びＦＬＴ３に対して一定の阻害効果を有しており、特にｃＫＩＴ野生型と比較した場合、突然変異型ｃＫＩＴ－Ｔ６７０Ｉに対してより強い阻害効果を有することを示した。アキシチニブと比較すると、本発明の好ましい化合物は、突然変異型ｃＫＩＴ－Ｔ６７０Ｉに対して同等又はより強い阻害活性を有していたが、野生型ｃＫＩＴに対しては比較的弱い阻害活性を有していた。ｃＫＩＴ野生型は、正常な造血幹細胞の初期発生において非常に重要な役割を果たした。したがって、不要な場合、ｃＫＩＴキナーゼの阻害は機構的（mechanistic）毒性を引き起こし、ＦＬＴ３とｃＫＩＴの同時阻害は骨髄抑制毒性を引き起こすことが文献で報告されていた。また、アキシチニブは雌性の親ＢａＦ３細胞に対して一定の抑制効果があり、野生型ｃＫＩＴと突然変異型ｃＫＩＴ－Ｔ６７０Ｉとの間に選択性はなく、本発明の化合物は、突然変異型ｃＫＩＴ－Ｔ６７０Ｉと野生型ｃＫＩＴと雌性の親ＢａＦ３細胞との間で明らかな選択的阻害を示し、これは、本発明の好ましい化合物が、野生型ｃＫＩＴ及びＦＬＴ３の阻害による骨髄抑制毒性の問題を引き起こすことなく突然変異型ｃＫＩＴ－Ｔ６７０Ｉを阻害したことを示した。

【0185】

【表2】

【0186】

表３に示すように、消化管間質腫瘍細胞株ＧＩＳＴ－Ｔ１及び本発明者らの研究室で構築したイマチニブに耐性の突然変異型ＧＩＳＴ－Ｔ１－Ｔ６７０Ｉ細胞株に対する、本発明の化合物７及び化合物９と対照化合物イマチニブ（中国のMedChem Expressから購入）の効果を試験すると、本発明の化合物は、イマチニブ感受性消化管間質腫瘍に対して強力な阻害効果を有するだけでなく、イマチニブ耐性ＧＩＳＴ－Ｔ１－Ｔ６７０Ｉに対しても強力な阻害効果を有することがわかった。これは、本発明の化合物が、Ｔ６７０Ｉ突然変異を伴う消化管間質腫瘍を処置するために使用することができることを示した。

【0187】

【表3】

【0188】

実施例３２：動物実験
本実施例では、ＴＥＬ－ｃＫＩＴ／Ｔ６７０Ｉ－ＢａＦ３及びＧＩＳＴ－Ｔ１－Ｔ６７０Ｉのマウスモデルにおける化合物９の実験結果をそれぞれ試験した。

【0189】

実験工程は次のとおりである。
（１）４週齢～６週齢のＢａｌｂ／ｃ雌性マウスをBeijing Weitong Lihua Experimental Animal Co., Ltd.から購入し、ＳＰＦレベルの実験室で飼育した。飲料水及び寝わらをオートクレーブ滅菌した。マウスに対する全ての操作を無菌条件下で行った。
（２）０日目に、約５×１０^６のＴＥＬ－ｃＫＩＴ／Ｔ６７０Ｉ－ＢａＦ３細胞又は５×１０^６のＧＩＳＴ－Ｔ１－Ｔ６７０Ｉ細胞を、それぞれ、全てのマウスの左背部に皮下注射した。
（３）ＴＥＬ－ｃＫＩＴ／Ｔ６７０Ｉ－ＢａＦ３のマウスモデルでは、６日目から開始して、対応するマウスにメチルセルロース（ＨＫＩ）ビヒクル（マウス５匹）；マウスの体重で１０ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ、４０ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇの用量の化合物９（各５匹のマウス）；マウスの体重で４０ｍｇ／ｋｇの用量のスニチニブ（中国のMedChemExpressから購入）（マウス５匹）を毎日経口投与した。ＧＩＳＴ－Ｔ１－Ｔ６７０Ｉのマウスモデルでは、１５日目から開始して、対応するマウスにメチルセルロース（ＨＫＩ）ビヒクル（マウス５匹）；マウスの体重で２０ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ、４０ｍｇ／ｋｇの用量の化合物９（各５匹のマウス）；マウスの体重で４０ｍｇ／ｋｇの用量のスニチニブ（マウス５匹）を毎日経口投与した。
（４）６日目（ＴＥＬ－ｃＫＩＴ／Ｔ６７０Ｉ－ＢａＦ３のマウスモデル）及び１５日目（ＧＩＳＴ－Ｔ１－Ｔ６７０Ｉのマウスモデル）から開始して、皮下腫瘍の長さ／幅をノギスで毎日測定し、マウスの体重を毎日記録して、マウスの体重に対する化合物９の効果をそれぞれ判定した。
（５）腫瘍体積の計算方法：長さ×幅×幅／２ｍｍ^３を用いて、内皮下腫瘍の成長傾向を計算した。

【0190】

実験結果を図１ａ及び図１ｂ並びに図２ａ及び図２ｂに示した。化合物９は、ＴＥＬ－ｃＫＩＴ／Ｔ６７０Ｉ－ＢａＦ３及びＧＩＳＴ－Ｔ１－Ｔ６７０Ｉのマウス腫瘍モデルにおいて４０ｍｇ／ｋｇの用量でマウス腫瘍に対して一定の阻害効果を示し、処置日数の増加に伴い、マウス腫瘍に対する化合物９の阻害効果はますます顕著になり、腫瘍阻害率は８０％と高かった。１００ｍｇ／ｋｇの化合物９を使用した場合、腫瘍阻害率は、ＴＥＬ－ｃＫＩＴ／Ｔ６７０Ｉ－ＢａＦ３マウスモデルにおいて投与後１１日目に１００％に達した。４０ｍｇ／ｋｇの化合物９を使用した場合、ＧＩＳＴ－Ｔ１－Ｔ６７０Ｉマウスモデルでの投与後２８日目の腫瘍阻害率は８４．３％であった。化合物９は、マウスにおいて腫瘍成長を効果的に阻害しただけでなく、マウスの体重にも影響を及ぼさず、化合物９が動物投与に適していることを示している。これはまた、本発明のＣＫＩＴ／Ｔ６７０Ｉ阻害剤化合物が、Ｔ６７０Ｉ突然変異を伴う消化管間質腫瘍を処置するために使用され得ることを証明した。

【0191】

本発明は、細胞若しくは被験体におけるｃＫＩＴ（特に突然変異型ｃＫＩＴ／Ｔ６７０Ｉ）、ＦＬＴ３（突然変異型ＦＬＴ３－ＩＴＤを含む）、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、及び／又はＶＥＧＦＲ２のキナーゼ活性の低下若しくは阻害において使用することができる、及び／又は被験体におけるｃＫＩＴ（特に突然変異型ｃＫＩＴ／Ｔ６７０Ｉ）、ＦＬＴ３（突然変異型ＦＬＴ３－ＩＴＤを含む）、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、及び／又はＶＥＧＦＲ２の活性に関連する障害の未然防止若しくは処置において使用することができる新規キナーゼ阻害剤化合物を提供する。したがって、該新規キナーゼ阻害剤化合物を対応する薬物として調製することができ、産業上の利用可能性がある。

【0192】

産業上の利用可能性
本発明は、細胞若しくは被験体におけるｃＫＩＴ（特に突然変異型ｃＫＩＴ／Ｔ６７０Ｉ）、ＦＬＴ３（突然変異型ＦＬＴ３－ＩＴＤを含む）、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、及び／又はＶＥＧＦＲ２のキナーゼ活性の低下若しくは阻害において使用することができる、及び／又は被験体におけるｃＫＩＴ（特に突然変異型ｃＫＩＴ／Ｔ６７０Ｉ）、ＦＬＴ３（突然変異型ＦＬＴ３－ＩＴＤを含む）、ＰＤＧＦＲα、ＰＤＧＦＲβ、及び／又はＶＥＧＦＲ２の活性に関連する障害の未然防止若しくは処置において使用することができる新規キナーゼ阻害剤化合物を提供する。したがって、該新規キナーゼ阻害剤化合物を対応する薬物として調製することができ、産業上の利用可能性がある。

【0193】

本発明を本明細書で詳細に説明してきたが、本発明はそれに限定されるものではなく、当業者であれば、本発明の原理に基づいて変更を加えることができ、したがって、本発明の原理に従うあらゆる変更は、本発明の保護範囲内であると理解されるべきである。

【図1】

【図2】