▶ グローブテック イノヴェーション エスアールオーの特許一覧
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】特許公報(B2)
(11)【特許番号】
(24)【登録日】2022-12-12
(45)【発行日】2022-12-20
(54)【発明の名称】ペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物とその使用
(51)【国際特許分類】
A61K 31/499 20060101AFI20221213BHJP
A61K 31/198 20060101ALI20221213BHJP
A61K 38/03 20060101ALI20221213BHJP
A61K 38/16 20060101ALI20221213BHJP
A61K 38/06 20060101ALI20221213BHJP
A61K 38/07 20060101ALI20221213BHJP
A61K 9/06 20060101ALI20221213BHJP
A61K 47/42 20170101ALI20221213BHJP
A61K 47/44 20170101ALI20221213BHJP
A61K 47/36 20060101ALI20221213BHJP
A61K 47/30 20060101ALI20221213BHJP
A61K 47/32 20060101ALI20221213BHJP
A61P 17/02 20060101ALI20221213BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20221213BHJP
C07K 4/00 20060101ALN20221213BHJP
C07K 14/00 20060101ALN20221213BHJP
C07K 5/083 20060101ALN20221213BHJP
C07K 5/113 20060101ALN20221213BHJP
C07K 5/103 20060101ALN20221213BHJP
【ＦＩ】
A61K31/499
A61K31/198
A61K38/03
A61K38/16
A61K38/06 ZNA
A61K38/07
A61K9/06
A61K47/42
A61K47/44
A61K47/36
A61K47/30
A61K47/32
A61P17/02
A61P43/00 121
C07K4/00
C07K14/00
C07K5/083
C07K5/113
C07K5/103
【請求項の数】
12
(21)【出願番号】P 2021565146
(86)(22)【出願日】2020-01-20
(65)【公表番号】
(43)【公表日】2022-02-07
(86)【国際出願番号】 IB2020050418
(87)【国際公開番号】W WO2020152568
(87)【国際公開日】2020-07-30
【審査請求日】2021-12-02
(31)【優先権主張番号】PV2019-34
(32)【優先日】2019-01-21
(33)【優先権主張国・地域又は機関】CZ
【早期審査対象出願】
(73)【特許権者】
【識別番号】521322339
【氏名又は名称】グローブテック イノヴェーション エスアールオー
【氏名又は名称原語表記】ＧｌｏｂｅＴｅｃｈ Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎ ｓ．ｒ．ｏ．
(74)【代理人】
【識別番号】100139723
【弁理士】
【氏名又は名称】樋口 洋
(72)【発明者】
【氏名】クラール，ウラジミール
(72)【発明者】
【氏名】マルタセク，パヴェル
【審査官】春田 由香
(56)【参考文献】
【文献】特表２０１４－５３２７１３（ＪＰ，Ａ）
【文献】特表２０１６－５１６０２３（ＪＰ，Ａ）
【文献】国際公開第２０１７／１３６６００（ＷＯ，Ａ１）
【文献】Sklenar, Z. et al.，Formulation and release of alaptide from cellulose-based hydrogels，Acta Veterinaria Brno，2012年，Vol.81，p.301-306，doi:10.2754/avb201281030301
【文献】Opatrilova, R. et al.，In vitro permeation of micronized and nanonized alaptide from semisolid formulations，The Scientific World Journal，2013年，Vol.2013，Article ID 787283, 8 pages，doi:10.1155/2013/787283
【文献】Bacci, S. et al.，The pro-healing effect of exendin-4 on wounds produced by abrasion in normoglycemic mice，European Journal of Pharmacology，2015年，Vol.764，p.346-352，doi:10.1016/j.ejphar.2015.06.056
【文献】今堀 和友, 山川 民夫 監修，生化学辞典，第3版，株式会社 東京化学同人，p.624
(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)
Ａ６１Ｋ ３８／００－３８／５８
Ａ６１Ｋ ３１／００－３１／８０
Ａ６１Ｋ ９／００－ ９／７２
Ａ６１Ｋ ４７／００－４７／６９
Ａ６１Ｋ ８／００－ ８／９９
Ａ６１Ｑ １９／００－１９／１０
ＰｕｂＭｅｄ
ＣＡｐｌｕｓ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）
(57)【特許請求の範囲】
【請求項1】
皮膚欠損の局所的処置および／または局所的創傷治癒に使用するための、局所的治癒ペプチド成分の医薬混合物であって、スピロ環状ジケトピペラジンペプチド、ならびにアルギニンアミノ酸およびシステインアミノ酸を含み、前記スピロ環状ジケトピペラジンペプチドが、構造式：【化1】
【請求項2】
２～４０アミノ酸を有する線状ペプチドをさらに含む、請求項１に記載の皮膚欠損の局所的処置および／または局所的創傷治癒に使用するための医薬混合物。
【請求項3】
前記２～４０アミノ酸を有する線状ペプチドが、金属錯体ペプチドである、請求項２に記載の皮膚欠損の局所的処置および／または局所的創傷治癒に使用するための医薬混合物。
【請求項4】
前記金属錯体ペプチドがＣｕ－ＧＨＫである、請求項３に記載の皮膚欠損の局所的処置および／または局所的創傷治癒に使用するための医薬混合物。
【請求項5】
前記２～４０アミノ酸を有する線状ペプチドが、以下のアミノ酸の配列：ＧＨＫ、Ｃｕ－ＧＨＫ、Ｚｎ－ＧＨＫ、ＤＡＨＫ：を有するペプチドの群から選択される、請求項２に記載の皮膚欠損の局所的処置および／または局所的創傷治癒に使用するための医薬混合物。
【請求項6】
前記２～４０アミノ酸を有する線状ペプチドが、以下のアミノ酸の配列：ａ） Ｃｕ－ＧＨＫ
ｂ） ＤＡＨＫ
ｃ） Ｐａｌ－ＧＨＫ
ｄ） ＧＥＫＧ
ｅ） ＨＧＥＧＴＦＴＳＤＬＳＫＱＭＥＥＥＡＶＲＬＦＩＥＷＬＫＮＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ
を有するペプチドの群から選択される、請求項２に記載の皮膚欠損の局所的処置および／または局所的創傷治癒に使用するための医薬混合物。
【請求項7】
前記マトリックスが、タンパク質マトリックス、脂質マトリックス、糖類マトリックス、または合成高分子マトリックス、あるいはそれらの混合物である、請求項１～６のいずれか一項に記載の皮膚欠損の局所的処置および／または局所的創傷治癒に使用するための医薬混合物。
【請求項8】
タンパク質マトリックス、脂質マトリックス、または糖類マトリックス、あるいはそれらの混合物中に、マトリックス１グラムあたり０．１～５ｍｇの範囲の量で含まれる、請求項７に記載の皮膚欠損の局所的処置および／または局所的創傷治癒に使用するための医薬混合物。
【請求項9】
前記タンパク質マトリックスがコラーゲンを含む、請求項７に記載の皮膚欠損の局所的処置および／または局所的創傷治癒に使用するための医薬混合物。
【請求項10】
前記糖類マトリックスがキトサンおよび／またはヒアルロン酸を含む、請求項７に記載の皮膚欠損の局所的処置および／または局所的創傷治癒に使用するための医薬混合物。
【請求項11】
前記脂質マトリックスがレシチンを含む、請求項７に記載の皮膚欠損の局所的処置および／または局所的創傷治癒に使用するための医薬混合物。
【請求項12】
前記合成高分子マトリックスがポリアクリルアミドを含む、請求項７に記載の皮膚欠損の局所的処置および／または局所的創傷治癒に使用するための医薬混合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
創傷の局所または経皮投与および処置のための、および／または創傷治癒の改善のための医薬品および化粧品、製剤、および方法。活性物質がペプチドおよび他の生物学的成分である皮膚治療および処置。治癒が困難な創傷を含む創傷の治癒、美容医学、化粧品。
【背景技術】
【0002】
標準的な状況下では、急性創傷治癒の過程は３つの段階に分けられる。最初の炎症期とそれに続く組織の強力なリモデリングおよび増殖（増殖期）の後に、再上皮化、皮膚血管新生、および創傷閉鎖を伴う「成熟期」がさらに続く。再上皮化には、上皮組織、とりわけケラチノサイトの移動と増殖が含まれる。血管新生は、成長因子ポリペプチドを含む多数の可溶性サイトカイン、ならびに細胞と細胞マトリックスの相互作用によって調節される、既存の管からの新しい血管の形成である。慢性創傷は、通常、炎症状態に長期間とどまるため、標準的な急性創傷とは異なる処置プロファイルを有する。非治癒性創傷は、糖尿病や静脈うっ血のある患者、および動けない患者に最も頻繁に見られる。前述の事実を考慮すると、創傷治癒に関連する急性および慢性の状況に伴う上皮および血管の創傷の治癒メカニズムを安全かつ効果的に促進する新しい生体分子を提供することが望ましいであろう。
【0003】
慢性創傷は、通常、炎症状態に長期間とどまるため、標準的な急性創傷とは異なる処置プロファイルを有する。治癒が困難な創傷は、糖尿病や静脈血栓症の患者、および動けない患者に最も頻繁に見られる。前述の事実を考慮すると、創傷治癒に関連する急性および慢性の状況に伴う上皮および血管の創傷の治癒メカニズムを特異的に、安全かつ効果的に促進する新しい生体分子を提供することが望ましいであろう。
【0004】
糖尿病の人は皮膚の再生能力が非常に低い。糖尿病の皮膚関連の合併症により、乾燥し、ひび割れが生じやすく、さらに治癒が遅い皮膚がもたらされる。糖尿病の人は、遅くかつ不十分な皮膚の治癒に苦しむことがよくある。糖尿病患者における下肢切断の主な原因は下肢の痛みと潰瘍であり、現在、糖尿病患者の約１０％が生涯の間に切断を必要とする。切断の主な理由は、潰瘍の形成と現時点では不治である皮膚の損傷とに関連する感染症である。糖尿病の人の四肢切断の平均リスクは、糖尿病のない人の平均リスクと比較して１５倍高い。
【0005】
現在採用されている慢性創傷の処置は、効果的な治療結果に到達することができない。これらの医薬品のほとんどは血管新生に焦点を当てているが、糖尿病は内皮機能障害を含むことが多い。再生治癒は、迅速かつ効果的な再上皮化を特徴とする。糖尿病患者における慢性創傷の新しいより効果的な処置が必要とされている。上皮細胞の不十分な移動は、非治癒性創傷の特徴であり、糖尿病はしばしば内皮機能障害を伴う。したがって、特にケラチノサイトが関与する再上皮化に焦点を当てることにより、現在採用されている処置の治療結果が改善される可能性がある。
【0006】
非治癒性の創傷および静脈瘤性潰瘍の現在採用されている処置は不十分である。皮膚の欠陥を処置する最適な方法はこれまで発見されていない。
【0007】
患者の自家細胞を利用した静脈性潰瘍の新しい処置方法が開発された。しかしながら、そのような処置は要求が厳しく、長引くものである。現在採用されている慢性創傷の処置は、効果的な治療結果に到達することができない。これらの医薬品のほとんどは血管新生に焦点を当てているが、糖尿病は内皮機能障害を含むことが多い。
【0008】
最近、創傷治癒を支援する様々な医薬品が開発されている。これらの例には、ベクラペルミン（Ｂｅｃｌａｐｅｒｍｉｎ）、ジョンソン・エンド・ジョンソン（Ｊｏｈｎｓｏｎ ＆ Ｊｏｈｎｓｏｎ）による遺伝子組み換え組換えＰＤＧＦ、またはＰＤＧＦとデキサメタゾンを含む哺乳動物組織の再生と回復のための医薬組成物（特許文献１）が含まれる。特許文献２は、ＴＧＦ－βを含む創傷治癒のための調製物を開示し、特許文献３および４は、ＦＧＦを含む創傷治癒のための調製物を開示する。前述の医薬品はすべて、成長因子、サイトカインまたはケモカイン、コラーゲンまたはヒアルロン酸である。これらの医薬品の欠点は、単一細胞タイプに特異的ではないことによる副作用である。
【0009】
ペプチドは制御効果を有し、これはペプチドが生細胞の挙動に影響を与えることができることを意味する。たとえば、皮膚再生のためのいくつかの細胞経路の天然のモジュレーターとしてのＧＨＫ（グリシル－Ｌ－ヒスチジル－Ｌ－リジン）ペプチドは、ヒトの血漿、唾液、および尿中に存在するが、その濃度は年齢とともに減少する。ＧＨＫは、銅などの皮膚の再生に必要な微量元素の摂取を促進する。このペプチドはＣｕ２＋と錯体を形成して作用し、創傷や皮膚の治癒を促進し、酵素プロセスに関与する（非特許文献１）。ＧＨＫは、コラーゲンおよびグリコサミノグリカンの合成と分解の両方を刺激し、メタロプロテアーゼおよびその阻害剤の活性を調節する。それは、コラーゲン、デルマタン硫酸、コンドロイチン硫酸、低分子プロテオグリカンまたはデコリンを刺激する。また、放射線療法後の線維芽細胞の複製活力の再生を促進する。この分子は、免疫細胞および内皮細胞を創傷部位に引き付ける。
【0010】
顔色（complexion）および／または皮膚の治療または美容処置に使用される他のペプチドの中には、受容体に直接結合するＰａｌ－Ｌｙｓ－Ｖａｌ－Ｌｙｓ－ＯＨ構造を有するシグナルペプチドＳｙｎ（登録商標）－Ｃｏｌｌ（パルミトイルトリペプチド－５）がある（非特許文献２）。さらに、デコリニル（Ｄｅｃｏｒｉｎｙｌ（商標））（テトラペプチド；非特許文献３）は、線維芽細胞を刺激してコラーゲンを産生させ、エラスチン、グリコサミノグリカン、プロテオグリカン、およびフィブロネクチンの増量を促す。ペプチドは神経伝達物質を阻害する：アルジレリン（Ａｒｇｉｒｅｌｉｎｅ）（登録商標）（次の構造を有する：Ｎ－アセチル－Ｌ－α－グルタミル－Ｌ－α－グルタミル－Ｌ－メチオニル－Ｌ－グルタミニル－Ｌ－アルギニル－Ｌ－アルギニンアミド）、Ｖｉａｌｏｘ（登録商標）（次の構造を有する：Ｈ－Ｇｌｙ－Ｐｒｏ－Ａｒｇ－Ｐｒｏ－Ａｌａ－ＮＨ２）、およびＳｙｎ（登録商標）－ａｋｅ（非特許文献３）は、筋肉活動の最小閾値を上げることにより、顔の筋肉の収縮を減らし、その結果、しわの形成を減らす。
【0011】
以下の酵素を阻害するペプチド：グリシン大豆タンパク質（プレレゲン（Ｐｒｅｒｅｇｅｎ（登録商標））；非特許文献４および５）およびセリシン（非特許文献３）は、受容体へのエージングプロセスに関与する酵素を直接的または間接的に阻害する（非特許文献２）。それらは線維芽細胞を刺激してコラーゲンを産生させ、エラスチン、グリコサミノグリカン、プロテオグリカン、フィブロネクチンの増量を促す。
【0012】
アラプチド（Ａｌａｐｔｉｄ）：８－メチル－６，９－ジアザスピロ［４．５］デカン－７，１０－ジオン、またはシクロ（Ｌ－アラニル－１－アミノ－１－シクロペンタンカルボニル）、Ｃ９Ｈ１４Ｎ２Ｏ２、Ｍｒ １８２．２ｇ／ｍｏｌ、ＣＡＳ：９００５８－２９－０：は、メラノサイトを刺激するホルモンＬ－プロリル－Ｌ－ロイシルグリシンアミドの放出を阻害する物質群（ＭＩＦ）に属する。治療薬としてのＭＩＦホルモン自体の使用は、その容易な酵素加水分解によって制限される。特にこの欠点を排除する目的で、一連のＭＩＦスピロ誘導体が調製された（特許文献５（Kasafirek E. et al. Cs. pat. 231 227, 1986）;特許文献６（1994）;特許文献７（Cs. pat. 260 899, 1989）。アラプチドは、酵素的安定性の観点とその薬力学的プロファイルの両方の観点から、最良の類似体として選択された。他の効果に加えて、アラプチドは実験動物モデルで有意な治療効果を有する物質として実証されている（特許文献８（Kasafirek E. et al. Cs. pat. 276 270, 1992））
【0013】
アラプチドは、メラノサイト刺激ホルモンの放出の阻害に悪影響を及ぼし、したがって表皮におけるメラノサイトの濃度を増加させる可能性がある。メラノサイトは、メラノソームとして知られる細胞小器官を介してケラチノサイトの形成および機能に大きな影響を与える（非特許文献６および７）。ケラチノサイトは、基底層から有棘層および顆粒層を経て角質層に移動し、そこで表皮の回復を促進する（非特許文献８）。
【0014】
アラプチドは、水や他のプロトン性溶媒への溶解度の値が低い化合物（ｌｏｇＰは－０．６７に等しい）である。この事実は、処置された創傷上の白い被覆の形で処置中にアラプチドが部分的に分離するなど、ある欠点をもたらす。製剤に溶解したアラプチドの濃度が低いと、角質層を介して吸収される活性物質の量が少なくなり得る。アラプチドナノ粒子の使用結果が最近公開されている；例えば、ＰＶ２０１１－２３２。生理学的環境におけるアラプチドの限られた溶解性は、その治癒可能性を完全に利用することを可能にしない。活性物質を含む液体形態の調製では、親水性媒体へのアラプチドの低い溶解度は、治癒対象部位でのアラプチドの部分的な分離につながり得る重大な欠点を表す。アラプチドの溶解度が低いことは、表皮の下層でのその吸収の低下の原因でもあり得る。
【0015】
アラプチドの効果は、例えば、セルロース系ヒドロゲルからのアラプチドの放出について記載する非特許文献９など、多くの刊行物から知られている。
【0016】
組織の再生のためのアミノ酸およびペプチドの使用はよく知られている。スポーツ関連の再生の目的で、例えば経口投与用に、アミノ酸をペプチドと組み合わせて、筋肉を再生する。アミノ酸およびペプチドは、皮膚の老化を防ぐ多くの化粧配合物にも含まれている。このような化粧品は、顔色／皮膚の乾燥を抑え、皮膚を保護して潤いを与え、その柔軟性と若々しい外観を改善し、表面的および深いしわを埋める。組織の再生を促進するアミノ酸およびペプチドの特性は知られているが、顔色／皮膚に関連して、それらは主に美容および美容医学によって強調されている。
【0017】
特許文献９は、特にしわの寄った皮膚または強い光傷害にさらされた皮膚の局所処置のための化粧組成物を開示する。化粧組成物は、トリペプチドからヘキサペプチドまでであるコラーゲン合成を刺激する薬剤、および細胞外マトリックスと線維芽細胞との間の相互作用を高める薬剤を含む。化粧組成物はまた、抽出物、ＵＶフィルター、保湿物質またはアミノ酸などの他の美容的活性物質も含み得る。
【0018】
特許文献１０は、アミノ酸、およびペプチドの銅との錯体を含む化粧組成物を開示する。この組成物は、ボディローションまたは化粧用ウェットワイプなどの化粧品に使用され、皮膚の乾燥を防ぎ、その保護を確実にする。
【0019】
特許文献１１は、治癒効果があるとされる少なくとも１つのアミノ酸を含む、銅とのペプチド錯体の水溶液を開示する。しかしながら、この水溶液は前述の文献で試験されておらず、この事実はそのような溶液の効力に関して疑念を生じさせる。
【0020】
特許文献１２は、ペプチドおよびアミノ酸を含むゼラチンマトリックスの組成物を開示する。このような製剤は、瘢痕形成を防ぐために、新鮮な創傷の近くに注射することによって適用される。組成物の試験は、婦人科手術の後に実施され、患者の切開部位を取り囲む粘膜に組成物が適用された。この処置は、試験した患者の粘膜の瘢痕を実際に減少させ、患者の妊娠成功の可能性を高めた。
【0021】
特許文献１３は、特許文献１２と同様の組成物を開示する。ただし、この文献では、この組成物は、骨、軟骨、靭帯、および腱を治癒するために使用される。ここでも組成物は注射によって適用される。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0022】
【文献】欧州特許出願公開第０５７５４８４号明細書
【文献】米国特許第５９８１６０６号明細書
【文献】米国特許第６８００２８６号明細書
【文献】米国特許第５１５５２１４号明細書
【文献】旧チェコスロバキア特許第２３１２２７号明細書
【文献】米国特許第５３１８９７３号明細書
【文献】旧チェコスロバキア特許第２６０８９９号明細書
【文献】旧チェコスロバキア特許第２７６２７０号明細書
【文献】欧州特許出願公開第１６４００４１号明細書
【文献】米国特許出願公開第２００５０２０９１３１号明細書
【文献】国際公開第０３／０３０９２６号
【文献】米国特許出願公開第２０１３０１０８７００号明細書
【文献】国際公開第２００５／０４２０４８号
【非特許文献】
【0023】
【文献】Gorouhi F, Maibach HI. Role of topical peptides in preventing or treating aged skin. Int J Cosmet Sci. 2009; 31: 327-345
【文献】Brzoska T, Bohm M, Lugering A, Loser K, Luger TA. Terminal signal: anti-inflammatory effects of melanocyte-stimulating hormone related peptides beyond the pharmacophore. Adv Exp Med Biol. 2010; 681: 107-116
【文献】Lupo MP, Cole AL. Cosmeceutical peptides. Dermatol Ther. 2007; 20: 343-349
【文献】Sudel KM, Venzke K, Mielke H, Breitenbach U, Mundt C, Jaspers S, et al. Novel aspects of intrinsic and extrinsic aging of human skin: beneficial effects of soy extract. Photochem Photobiol. 2005; 81: 581-587
【文献】Andre-Frei V, Perrier E, Augustin C, Damour O, Bordat P, Schumann K, et al. A comparison of biological activities of a new soya biopeptide studied in an in vitro skin equivalent model and human volunteers. Int J Cosmet Sci. 1999; 21: 299-311
【文献】McGrath J.A., Eady R.A., Pope F.M. Rook's textbook of dermatology, 7th ed. Blackwell Publishing, 2004, pp.3-7
【文献】James W., Berger T. Elston D. Andrews' diseases of the skin: Clinical dermatology, 10th ed. Saunders, 2005, pp. 5-6
【文献】Watt F.M. The epidermal keratinocyte. BioEssays 1988, 8, 163-167
【文献】Sklenar, Zbynek, et al. “Formulation and release of alaptide from cellulose-based hydrogels.”, Acta Veterinaria Brno 81.3 (2013): 301-306
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【0024】
本発明は、治癒が困難な糖尿病性創傷を含めて、創傷の迅速な治癒において驚くべき効力（efficacy）を示し、ペプチドと、以下の成分：ペプチド（２～４０アミノ酸）；アミノ酸（Ｌ－、Ｄ－またはラセミ体の、アルギニンおよび／またはシステイン）：の少なくとも１つとの組み合わせに基づく、ペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物を開示する。前述の成分の混合物は、個別に適用された成分よりも、動物モデルおよびヒトにおける創傷治癒で最大１００％高いｉｎ ｖｉｖｏでの効力を有することが実証されている。
【0025】
局所的治癒ペプチド成分（topically curative peptide component）の混合物中のアミノ酸は、亜酸化窒素（ＮＯ）またはスルファン（Ｈ２Ｓ）のドナー（供与体）として働く。
【0026】
ペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物は、少なくとも１つのペプチドを０．００１～５０ｍｇ／ｍｌ（またはｇ）のマトリックスまたは製剤の範囲の濃度で含む。ペプチドの濃度が０．００１ｍｇ／ｍｌ（またはｇ）のマトリックス以上で治療効果が得られるが、ペプチドの濃度が５０ｍｇ／ｍｌ（またはｇ）のマトリックスを超えて増加すると所望の治療効果をもたらさないことがｉｎ ｖｉｖｏ試験に基づいて実証されている。
【0027】
製剤のｐＨ値は３．０～９．０の範囲である。好ましくは、製剤は、製剤適用前に、少なくとも２０ｍＭ、より好ましくは５０ｍＭ～１００ｍＭまで、そして最も好ましくは少なくとも１２０ｍＭのイオン強度を有する。
【0028】
ペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物は、化粧品的または薬学的に許容される１つの溶媒中、あるいは、水、エタノール、プロパノール、イソプロパノール、プロピレングリコール、ブチレングリコール、ジプロピレングリコール、エトキシル化またはプロポキシル化ジグリコール、環状ポリオールなどの化粧品的または薬学的に許容される溶媒の混合物中に溶解させることができる。ペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物は、好ましくは、リポソームなどの医薬または化粧品ベクターを用いて溶解させることができ、あるいは局所的治癒ペプチド成分の混合物は、粉末有機ポリマー、またはタルクもしくはベントナイトなどの粉末ミネラルに吸着させることができる。一般に、局所的治癒ペプチド成分の混合物は、任意の化粧品的または薬学的に許容されるベクター中に固定され得る。
【0029】
ペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物は、他の活性物質、化粧品的または薬学的に活性な物質と組み合わせて使用することができる。最終製剤は、顔色／皮膚のケアに焦点を当てた美容目的で、あるいは医薬品として使用される。製剤は若返りおよび活性化の特性を有する。
【0030】
ペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物は、シグナルまたは保護基（ｔＢｏｃ、タグ）などの他の基を有するペプチドを含み得る。ペプチドはまた、他の活性物質を担持するものなど、ナノ粒子および／またはリポソームに関連するものであってよい。ペプチドはまた、グリコシル化、ペグ化（ＰＥＧ化）、アセチル化、メチル化、ユビキチン化、ヒドロキシル化、パルミトイル化、リン酸化またはその他によって修飾されていてもよいが、そのような修飾がペプチドの治癒特性に影響を及ぼさないことを条件とする。
【0031】
驚くべきことに、小さなペプチド（１２アミノ酸未満の配列）は、完全長の天然タンパク質よりも創傷治癒の改善に関してより効果的であることが発見された。さらに、そのような効力の増強は、完全長ペプチドのすべてのフラグメントによって共有されるわけではないことが発見された。驚くべきことに、本発明者らは、本発明によるペプチドが完全長タンパク質よりも創傷治癒においてより効果的であり、そのような効力の増強が創傷の自然治癒に使用される完全長の治癒ペプチドおよびタンパク質のすべてのフラグメントにより共有されるわけではないことを実証した。さらに、ペプチドと、アミノ酸または他のペプチドとの組み合わせは、処置に使用される個々のペプチドよりも治癒においてより高い効力を示した。
【0032】
さらに、ペプチド金属錯体（peptide metalocomplex）にＣｕまたはＺｎが存在すると、金属が存在しないペプチドによる処置と比較して、効力が５～１０％高まることが発見された；局所的治癒ペプチド成分の混合物は、好ましくは、塩基性ペプチドおよびその金属錯体の両方を含む。このような調製物の治癒効果は、ペプチドまたはペプチド金属錯体のいずれかを含む調製物の治癒効果と比較して、８～１２％高まる。局所的治癒ペプチドの混合物は、好ましくは、Ｃｕ－ＧＨＫペプチド金属錯体を含み、Ｃｕ－ＧＨＫは、天然の自己物質であるが、その量は、年齢とともに減少する。このため、怪我や慢性創傷の処置は、年齢が高くなるほど難しくなる。ペプチド金属錯体を含むペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物は、特に非治癒性創傷の場合に増強された効力を示す。
【0033】
金属錯体は、ペプチドが無水メタノール（ＭｅＯＨ）またはアセトニトリルに溶解または懸濁され、金属（好ましくはＣｕ２＋またはＺｎ２＋）の濃縮溶液が２当量塩基（好ましくはナトリウムメトキシド（ＭｅＯＮａ）または別の強塩基）とともに混合物に添加される、単純な合成によって実験室環境で調製される。混合物は周囲温度で４０～１２０分間撹拌される。次に、それぞれのペプチド金属錯体が抽出および乾燥される。乾燥ペプチド金属錯体は、ペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物の多くの実施形態で使用される。
【0034】
ペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物は、線維芽細胞および上皮細胞（ケラチノサイトなど）の増殖性成長を刺激し、実験動物およびヒトの志願者における創傷治癒過程全体にプラスの効果をもたらす。試験段階において、ペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物が効果的にしわを埋め、顔色を若返らせ、しみ（dark spot）やあざを明るくし、そばかすやあざの除去などの美容整形後の傷跡の形成を防ぐことも発見された。ペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物は、火傷の処置のため、外科手術および顕微手術後、一般的な損傷で、または擦過射部位（grazed site）などの損傷した皮膚のより広い領域にも使用されている。
【0035】
研究中に、前述の組み合わせ中のアラプチド（Ａｌａｐｔｉｄ）などのジケトピペラジンスピロ環状ペプチド（diketopiperazine spirocyclic peptide）が、抗菌効果も有する濃度で真皮細胞の成長を大幅に改善する特性を有することも実証された。この大きな利点は、特に、敗血症および感染が創傷の治癒を妨げる主要な障害である、治癒が困難な、炎症を起こしたまたは糖尿病性の創傷において利用することができる。
【0036】
さらに、ペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物は、創傷での細胞間物質の分解および沈着の制御により、急性創傷および慢性創傷の両方の治癒において役割を果たすメタロプロテアーゼの機能にも影響を与えることが実証された。ペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物は、創傷部位のメタロプロテアーゼのレベルを高め、それにより、創傷での細胞間物質の分解が加速され、創傷の治癒が可能になる。
【0037】
ペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物には、２つの主要なグループの治癒タンパク質、すなわちジケトピペラジンスピロ環状ペプチド（diketopiperazine spirocyclic peptide）および線状ペプチドが使用された。どちらのグループも、天然と合成に分けることができる。ＧＨＫペプチド（Ｇｌｙ－Ｈｉｓ－Ｌｙｓ）またはＤＡＨＫペプチド（Ａｓｐ－Ａｌａ－Ｈｉｓ－Ｌｙｓ）などの天然ペプチドは、皮膚の再生に重要な役割を果たす。それらは皮膚細胞の増殖、それらの再生および寿命に影響を及ぼす。天然ペプチドと合成ペプチドの組み合わせが好ましいことが実証されている。合成タンパク質の例として、ＣＡＲタンパク質またはジケトピペラジンペプチド（例えば、アラプチド）を挙げることができる。ジケトピペラジンペプチドとＧＨＫペプチド／Ｃｕ－ＧＨＫペプチドの１：１の比率での組み合わせは、非常に有益であることが実証されている。アルギニンと組み合わせたＧＨＫペプチド／Ｃｕ－ＧＨＫペプチド混合物の性能は実証されており、同程度に好ましいと思われ、そのような混合物での処置は、ジケトピペラジン＋ＧＨＫ／Ｃｕ－ＧＨＫの混合物での処置と比較して約１／１０長くかかる。少なくとも２つのタイプのジケトピペラジンペプチドの混合物も処置に好ましい。治癒が困難な創傷の場合、２つのジケトピペラジンの組み合わせは、１つのジケトピペラジンを個別に適用するよりも最大７０％効果が高い。また、タンパク質（好ましくは、コラーゲン、フィブリノーゲンまたはエラスチン）の存在下でのＧＨＫタンパク質／Ｃｕ－ＧＨＫタンパク質とアルギニンとの組み合わせが有益であることが実証されている。糖尿病性創傷などの治癒が困難な創傷の場合、ペプチドの混合物に、ＮＯのドナー（供与体）としてアルギニンなどのアミノ酸、および／または、Ｈ２Ｓのドナー（供与体）としてアミノ酸のシステインを添加することが好ましい。アミノ酸の添加は効力の改善をもたらす。
【0038】
ペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物に使用されるジケトピペラジンペプチドは、次の一般式により説明することができる：
【化1】
【0039】
一般構造：
【化2】
【0040】
具体的な化学物質の例：
【化3】
【0041】
（Ｓ）－異性体：
【化4】
【0042】
一般構造：
【化5】
【0043】
具体的な化学物質の例：
【化6】
【0044】
ペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物には、次のようなジケトピペラジンタンパク質の誘導体も使用された：
構造化学名：８－メチル－６，９－ジアザスピロ［４．５］デカン－７，１０－ジオン、および構造式：
を有するアラプチド（Ａｌａｐｔｉｄ）；アラプチド－ＣＤ複合体（Ａｌａｐｔｉｄ－ＣＤ ｃｏｍｐｌｅｘ）；６－メチル－メチルアラプチド（６－ｍｅｔｈｙｌ－ＭｅＡｌａｐｔｉｄ）；６，９－ジメチルアラプチド（６，９－ｄｉ－ＭｅＡｌａｐｔｉｄ）、６－エチルアラプチド（６－ＥｔＡｌａｐｔｉｄ）；６－ヘキシルアラプチド（６－ｈｅｘｙｌＡｌａｐｔｉｄ）；９－エチルアラプチド（９－ｅｔｈｙｌＡｌａｐｔｉｄ）；６－パルアラプチド、６－パルミトイル８－メチル－６，９－ジアザスピロ［４．５］デカン－７，１０－ジオン（６－Ｐａｌ ａｌａｐｔｉｄｅ）。
構造化学名：８－メチル－６，９－ジアザスピロ［４．５］デカン－７，１０－ジオン、および構造式：
【化7】
【0045】
ペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物には、以下のアミノ酸配列または使用名を有する線状ペプチドも使用された：
ａ） Ｃｕ－ＧＨＫ
ｂ） ＤＡＨＫ
ｃ） カルノシンＡＨ
ｄ） ＰＬＧ
ｅ） ＴＦＡ－ＶＷＶ－ＯＨ
ｆ） ＫＤＩ－シトルリン
ｇ） Ｐａｌ－ＧＨＫ
ｈ） Ｐａｌ－ＧＱＰＲ
ｉ） ＫＲＦＫ
ｊ） Ｐａｌ－ＫＶＫ－ｂｉｓＴＦＡ
ｋ） Ｐａｌ－ＫＴＴＫＳ－ＯＨ
ｌ） Ｐａｌ－ＧＱＰＲ
ｍ） Ｐａｌ－ＶＧＶＡＰＧ
ｎ） ＧＥＫＧ
ｏ） ＰＫＥＫ
ｐ） ＦＶＡＰＦＰ
ｑ） Ｍｎ－ＧＨＫ
ｒ） ＧＰＲＰＡ
ｓ） ＹＡＧＦＬ
ｔ） ＡＰ－Ｄａｂ－ＮＨＢｎ－２－アセテート
ｕ） エキセジン（Ｅｘｅｎｄｉｎ）－４ ＨＧＥＧＴＦＴＳＤＬＳＫＱＭＥＥＥＡＶＲＬＦＩＥＷＬＫＮＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ
ｖ） ＹＶＳＰＧＭＫＮＶＮＷＷＳＨＷＷＨＡＴＤ
ｗ） Ｘ－ＮＨ－ＧＰＡＧ－ＣＯ－Ｙ（Ｘ＝Ｈ、Ｂｏｃ、Ｆｍｏｃ、Ｍｅ、Ｅｔ；Ｙ＝ＯＨ、ＯＭｅ、ＯＥｔ、ＯＮａ、ＯＫ、ＯＮＨ４）
ｘ） ＶＹＹＶＧＲＫ
ｙ） ｃ［ＷＣＫＰＫＰＫＰＲＣＨ－ＮＨ２］）
ｚ） ＱＨＲＥＤＧＳ
ａａ） ＹＧＲＲＲＲＲＱＲＲＲＰ
ｂｂ） Ｈ－ＬＥＰＰＰＬＫＰＡＤＡＬＧＶ－ＯＨ
ｃｃ） ＡＧ３０ ＭＬＳＬＩＦＬＨＲＬＫＳＭＲＫＲＬＤＲＫＬＲＬＷＨＲＫＮＹＰ
ｄｄ） ＡＧ３０／５Ｃ ＭＬＫＬＩＦＬＨＲＬＫＲＭＲＫＲＬＫＲＫＬＲＬＷＨＲＫＲＹＫ
ｅｅ） ＡＨ９０ ＡＴＡＷＤＦＧＰＨＧＬＬＰＩＲＰＩＲＩＲＰＬＣＧ
ｆｆ） ＣＷ４９ ＡＰＦＲＭＧＩＣＴＴＮ
ｇｇ） Ｃｙｓ－ＫＲ１２ ＫＲＩＶＫＲＩＫＫＷＬＲ
ｈｈ） エスクレチン（Ｅｓｃｕｌｅｎｔｉｎ）－１ａ（１－２１） ＧＩＦＳＫＬＡＧＫＫＩＫＮＬＬＩＳＧＬＫＧ
ｉｉ） ｈＢＤ－１ ＤＨＹＮＣＶＳＳＧＧＱＣＬＹＳＡＣＰＩＦＴＫＩＱＧＴＣＹＲＧＫＡＫＣＣＫ
ｊｊ） ｈＢＤ－２ ＧＩＧＤＰＶＴＣＬＫＳＧＡＩＣＨＰＶＦＣＰＲＲＹＫＱＩＧＴＣＧＬＰＧＴＫＣＣＫＫＰ
ｋｋ） ヒスタチン－１ ＤＳＨＥＫＲＨＨＧＹＲＲＫＦＨＥＫＨＨＳＨＲＥＦＰＦＹＧＤＹＧＳＮＹＬＹＤＮ
ｌｌ） ヒスタチン－２ ＲＫＦＨＥＫＨＨＳＨＲＥＦＰＦＹＧＤＹＧＳＮＹＬＹＤＮ
ｍｍ） ヒスタチン－３ ＤＳＨＡＫＲＨＨＧＹＫＲＫＦＨＥＫＨＨＳＨＲＧＹＲＳＮＹＬＹＤＮ
ｎｎ） ＩＤＲ－１０１８ ＶＲＬＩＶＡＶＲＩＷＲＲ
ｏｏ） ＬＬ－３７ ＬＬＧＤＦＦＲＫＳＫＥＫＩＧＫＥＦＫＲＩＶＱＲＩＫＤＦＬＲＮＬＶＰＲＴＥＳ
ｐｐ） Ｐｅｐ１９－２．５ ＧＣＫＫＹＲＲＦＲＷＫＦＫＧＫＦＷＦＷＧ
ｑｑ） ＰＬＬ－３７ ＰＬＬＧＤＦＦＲＫＳＫＥＫＩＧＫＥＦＫＲＩＶＱＲＩＫＤＦＬＲＮＬＶＰＲＴＥＳ
ｒｒ） ＳＨＡＰ１ ＡＰＫＡＭＫＬＬＫＫＬＬＫＬＱＫＫＧＩ
ｓｓ） ＳＲ－０００７ ＭＬＫＬＩＦＬＨＲＬＫＲＭＲＫＲＬＫＲＫ
ｔｔ） ＳＲ－０３７９ ＭＬＫＬＩＦＬＨＲＬＫＲＭＲＫＲＬｋＲＫ
ｕｕ） テンポリン（Ｔｅｍｐｏｒｉｎ）Ａ ＦＬＰＬＩＧＲＶＬＳＧＩＬ
ｖｖ） テンポリン（Ｔｅｍｐｏｒｉｎ）Ｂ ＬＬＰＩＶＧＮＬＬＫＳＬＬ
ａ） Ｃｕ－ＧＨＫ
ｂ） ＤＡＨＫ
ｃ） カルノシンＡＨ
ｄ） ＰＬＧ
ｅ） ＴＦＡ－ＶＷＶ－ＯＨ
ｆ） ＫＤＩ－シトルリン
ｇ） Ｐａｌ－ＧＨＫ
ｈ） Ｐａｌ－ＧＱＰＲ
ｉ） ＫＲＦＫ
ｊ） Ｐａｌ－ＫＶＫ－ｂｉｓＴＦＡ
ｋ） Ｐａｌ－ＫＴＴＫＳ－ＯＨ
ｌ） Ｐａｌ－ＧＱＰＲ
ｍ） Ｐａｌ－ＶＧＶＡＰＧ
ｎ） ＧＥＫＧ
ｏ） ＰＫＥＫ
ｐ） ＦＶＡＰＦＰ
ｑ） Ｍｎ－ＧＨＫ
ｒ） ＧＰＲＰＡ
ｓ） ＹＡＧＦＬ
ｔ） ＡＰ－Ｄａｂ－ＮＨＢｎ－２－アセテート
ｕ） エキセジン（Ｅｘｅｎｄｉｎ）－４ ＨＧＥＧＴＦＴＳＤＬＳＫＱＭＥＥＥＡＶＲＬＦＩＥＷＬＫＮＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ
ｖ） ＹＶＳＰＧＭＫＮＶＮＷＷＳＨＷＷＨＡＴＤ
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ｘ） ＶＹＹＶＧＲＫ
ｙ） ｃ［ＷＣＫＰＫＰＫＰＲＣＨ－ＮＨ２］）
ｚ） ＱＨＲＥＤＧＳ
ａａ） ＹＧＲＲＲＲＲＱＲＲＲＰ
ｂｂ） Ｈ－ＬＥＰＰＰＬＫＰＡＤＡＬＧＶ－ＯＨ
ｃｃ） ＡＧ３０ ＭＬＳＬＩＦＬＨＲＬＫＳＭＲＫＲＬＤＲＫＬＲＬＷＨＲＫＮＹＰ
ｄｄ） ＡＧ３０／５Ｃ ＭＬＫＬＩＦＬＨＲＬＫＲＭＲＫＲＬＫＲＫＬＲＬＷＨＲＫＲＹＫ
ｅｅ） ＡＨ９０ ＡＴＡＷＤＦＧＰＨＧＬＬＰＩＲＰＩＲＩＲＰＬＣＧ
ｆｆ） ＣＷ４９ ＡＰＦＲＭＧＩＣＴＴＮ
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ｈｈ） エスクレチン（Ｅｓｃｕｌｅｎｔｉｎ）－１ａ（１－２１） ＧＩＦＳＫＬＡＧＫＫＩＫＮＬＬＩＳＧＬＫＧ
ｉｉ） ｈＢＤ－１ ＤＨＹＮＣＶＳＳＧＧＱＣＬＹＳＡＣＰＩＦＴＫＩＱＧＴＣＹＲＧＫＡＫＣＣＫ
ｊｊ） ｈＢＤ－２ ＧＩＧＤＰＶＴＣＬＫＳＧＡＩＣＨＰＶＦＣＰＲＲＹＫＱＩＧＴＣＧＬＰＧＴＫＣＣＫＫＰ
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ｌｌ） ヒスタチン－２ ＲＫＦＨＥＫＨＨＳＨＲＥＦＰＦＹＧＤＹＧＳＮＹＬＹＤＮ
ｍｍ） ヒスタチン－３ ＤＳＨＡＫＲＨＨＧＹＫＲＫＦＨＥＫＨＨＳＨＲＧＹＲＳＮＹＬＹＤＮ
ｎｎ） ＩＤＲ－１０１８ ＶＲＬＩＶＡＶＲＩＷＲＲ
ｏｏ） ＬＬ－３７ ＬＬＧＤＦＦＲＫＳＫＥＫＩＧＫＥＦＫＲＩＶＱＲＩＫＤＦＬＲＮＬＶＰＲＴＥＳ
ｐｐ） Ｐｅｐ１９－２．５ ＧＣＫＫＹＲＲＦＲＷＫＦＫＧＫＦＷＦＷＧ
ｑｑ） ＰＬＬ－３７ ＰＬＬＧＤＦＦＲＫＳＫＥＫＩＧＫＥＦＫＲＩＶＱＲＩＫＤＦＬＲＮＬＶＰＲＴＥＳ
ｒｒ） ＳＨＡＰ１ ＡＰＫＡＭＫＬＬＫＫＬＬＫＬＱＫＫＧＩ
ｓｓ） ＳＲ－０００７ ＭＬＫＬＩＦＬＨＲＬＫＲＭＲＫＲＬＫＲＫ
ｔｔ） ＳＲ－０３７９ ＭＬＫＬＩＦＬＨＲＬＫＲＭＲＫＲＬｋＲＫ
ｕｕ） テンポリン（Ｔｅｍｐｏｒｉｎ）Ａ ＦＬＰＬＩＧＲＶＬＳＧＩＬ
ｖｖ） テンポリン（Ｔｅｍｐｏｒｉｎ）Ｂ ＬＬＰＩＶＧＮＬＬＫＳＬＬ
【0046】
ペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物は、好ましくは、溶液、懸濁液、乳濁液、軟膏、バーム、チンキ剤、エリキシル剤、パッチ、包帯（bandage）、被覆材料（dressing material）、アルギン酸塩被覆材または湿布、局所溶液、注入液または外科的洗浄液の形態であり得る。前述の形態のマトリックスは、好ましくはタンパク質を含む。
【0047】
ペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物は、好ましくは、ゲルマトリックスと配合して創傷に適用される。ゲルマトリックスは、１：１の重量比のタンパク質および糖類成分と、Ｃａ２＋、Ｍｇ２＋、およびＺｎ２＋（好ましくは酢酸カルシウム、酢酸亜鉛または酢酸マグネシウムの形態）を含む緩衝水溶液とを含む。ゲルのｐＨ値は、好ましくは３～９の範囲である。陽イオンの存在のおかげで、コラーゲンとの錯体形成および／または陽イオン制御ゲル化のいずれかによってゲルが形成される。タンパク質成分は、好ましくは、コラーゲン、スプリットコラーゲン、フィブリノーゲン、スプリットフィブリノーゲン、エラスチン、スプリットエラスチン、ゼラチン、加水分解ゼラチン、ＢＳＡなどである。糖類成分は、好ましくは、ヒアルロン酸、ペクチン、アルギン酸塩、カラギーナン、アルギン酸、酸化型および非酸化型のセルロース、セルロース誘導体（例えば、カルボキシメチルセルロースおよびその塩）、他のカルボキシル化糖類、キトサン、カプリル酸ソルビタン、亜麻仁ガム、ペクチン酸塩、ならびに他のオリゴ糖類および多糖類などである。マトリックスはまた、ポリアクリルアミド、ポリ乳酸・グリコール酸共重合体（またはポリ（乳酸－ｃｏ－グリコール酸））（ＰＬＧＡ）およびポリ乳酸（ＰＬＡ）などの合成ポリマーによって形成され得る。
【0048】
ゲルマトリックスは、皮膚の水和、栄養補給および調整（tuning）を提供し、慢性創傷、褥瘡、糖尿病性合併症の処置ならびにレーザーおよび美容整形後の処置のために、ペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物と組み合わせて使用するのに好ましい。さらに、ゲルマトリックスは、ペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物と組み合わせて、しわを伸ばし、新しいしわの形成を減速させ、肌の老化（complexion ageing）の過程を効果的に減速させ、皮膚細胞を刺激してコラーゲンおよびエラスチンを生成し、肌の色を明るくしかつ均一にする。ペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物を配合して創傷に適用されるゲルは、好ましくは無菌である。
【0049】
マトリックスはまた、水中油型または油中水型であってよく、ペプチドおよび／またはアミノ酸および／またはタンパク質は、好ましくは脂質相に存在する。脂質相は、好ましくは、ホスファチジルコリンまたは他のレシチンも含む。レシチンは、好ましくは、亜酸化窒素、ペプチド、またはその両方を含むリポソームまたはミセルまたは他の構造の形態で組成物中に存在する。好ましくは、ペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物のためのマトリックスは、皮膚（例えば怪我をした）に塗布または噴霧することができるゲル、クリーム、ローション、軟膏、溶液、固体「スティック」などの形態である。
【0050】
調製されたペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物は、創傷治癒の加速において高い効力を達成する。この結果は、治癒に使用される短縮ペプチド鎖に基づいており、またＮＯおよびＨ２Ｓのドナーを添加することによる。ペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物は、健康な患者における治癒に必要な時間を標準処置と比較してほぼ３分の１（８週間から３週間）に短縮し、慢性皮膚欠損のある病気の患者では治癒に必要な時間を７分の１（２０週間から３週間）に短縮する；慢性的に炎症を起こした創傷を有する一部の患者では、ペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物は、切断術対象の他の方法では維持できない症例での処置を可能にする。実施例１によるペプチド成分の混合物を含む調製物（ペプチド＋Ａｒｇ＋Ｃｙｓ）を使用して、そのような製剤で治癒した創傷および／または皮膚欠損は、マウスモデルでは平均３週間で、健康な患者では３週間で治癒し、糖尿病患者では、治癒は３～７週間で達成された。実施例２および３によるペプチド＋Ａｒｇ／Ｃｙｓに基づく調製物、または実施例５、６、および７によるペプチド＋ペプチド＋Ａｒｇ＋Ｃｙｓに基づく調製物を用いて、創傷は、マウスモデルでは４週間で、健康な患者では４週間で治癒し、治癒が困難な創傷の場合、治癒は４～９週間で達成された。実施例４による調製物ペプチド＋ペプチドを用いて、マウスモデルの創傷は平均５週間で治癒し、健康な患者では５週間で治癒し、治癒が困難な創傷の治癒は５～１２週間かかった。実施例８Ａによる調製物、すなわち、ゲルマトリックス中にペプチド自体を加えた対照群（アラプチドをモデルとして使用した）では、マウスモデルの創傷は平均して７週間で治癒し、健康な患者では７週間で治癒し、治癒が困難な創傷の治癒には７～２０週間かかった。実施例８Ｂによる調製物、すなわちゲルマトリックス自体を適用した対照群では、マウスモデルの創傷は平均して８週間で治癒し、健康な患者では８週間で治癒し、治癒が困難な創傷の治癒には８～２０週間かかった；ただし、完全に治癒したのは１人の患者だけであった。実施例８Ｃによる調製物、すなわち処置なしの対照群では、マウスモデルの創傷は平均して８週間で治癒し、健康な患者では８週間で治癒し、治癒が困難な創傷の治癒は５人のうち１人の患者でのみ完了し、すなわち、３１週間で、試験したすべての対象に赤い斑点が残ったままであった。
【図面の簡単な説明】
【0051】
【図1-1】マウスモデルで使用される選択された製剤の比較
【図2】実施例１Ｂに記載された調製物によるマウスでの実験的創傷治癒の２１日目の４０倍拡大の組織学的画像
【図3】実施例２に記載の調製物によるマウスでの実験的創傷治癒の２８日目の４０倍拡大の組織学的画像
【図4】実施例７に記載の調製物によるマウスでの実験的創傷治癒の２８日目の４０倍拡大の組織学的画像
【図5】実施例８Ｂに記載の調製物によるマウスでの実験的創傷治癒の５０日目の４０倍拡大の組織学的画像
【図6】選択された患者に使用された選択された調製物の比較
【図7】選択された調製物を使用した創傷治癒の表
【図8】選択された調製物を使用した創傷治癒のグラフ
【実施例】
【0052】
実施例１
ペプチド金属錯体の調製
Ｃｕ－ＧＨＫ
１．５ｇのＧＨＫを５０ｍｌの１００％メタノールに周囲温度で懸濁させ、連続的に攪拌しながら、０．２５ｇの酢酸銅（ＣｕＯＡｃ）を５ｍｌの水溶液および５ｍｌのＭｅＯＮａ（１Ｍ）の形態で添加した。混合物を周囲温度で１３０ｒｐｍの速度で１２０分間撹拌した。次に、ペプチド金属錯体を抽出して乾燥させた。
ペプチド金属錯体の調製
Ｃｕ－ＧＨＫ
１．５ｇのＧＨＫを５０ｍｌの１００％メタノールに周囲温度で懸濁させ、連続的に攪拌しながら、０．２５ｇの酢酸銅（ＣｕＯＡｃ）を５ｍｌの水溶液および５ｍｌのＭｅＯＮａ（１Ｍ）の形態で添加した。混合物を周囲温度で１３０ｒｐｍの速度で１２０分間撹拌した。次に、ペプチド金属錯体を抽出して乾燥させた。
【0053】
調製物の製造－ペプチド＋Ａｒｇ＋Ｃｙｓ
１Ａ １％Ｃｕ－ＧＨＫワセリン
１ｇの粉末ＧＨＫペプチド（Ｇｌｙ－Ｈｉｓ－Ｌｙｓ）、０．３ｇの粉末Ｌ－アルギニン、および０．１ｇの粉末Ｌ－システインを、９８．６ｇの薬用ワセリンに３０００ｒｐｍで混合した。Ｃｕ－ＧＨＫペプチドの含有量が１％の調製物を調製した。
１Ａ １％Ｃｕ－ＧＨＫワセリン
１ｇの粉末ＧＨＫペプチド（Ｇｌｙ－Ｈｉｓ－Ｌｙｓ）、０．３ｇの粉末Ｌ－アルギニン、および０．１ｇの粉末Ｌ－システインを、９８．６ｇの薬用ワセリンに３０００ｒｐｍで混合した。Ｃｕ－ＧＨＫペプチドの含有量が１％の調製物を調製した。
【0054】
１Ｂ １％Ｃｕ－ＧＨＫマトリックスゲル
１ｇの粉末Ｃｕ－ＧＨＫペプチド（Ｇｌｙ－Ｈｉｓ－Ｌｙｓ）、０．３ｇの粉末Ｌ－アルギニン、および０．１ｇの粉末Ｌ－システインを、コラーゲン７ｇ、ペクチン７ｇ、および５％酢酸カルシウムを含むｐＨ７のリン酸緩衝液８６ｇからなるゲルマトリックスに混合した。ゲルマトリックスの成分を一緒に混合し、マグネチックスターラーを使用して３００ｒｐｍで５分間、次に１３０ｒｐｍでさらに２５分間撹拌した。次に、Ｃｕ－ＧＨＫペプチドとＬ－Ａｒｇをゲルマトリックスに添加し、混合物を２，０００ｒｐｍでさらに５分間撹拌した。
１ｇの粉末Ｃｕ－ＧＨＫペプチド（Ｇｌｙ－Ｈｉｓ－Ｌｙｓ）、０．３ｇの粉末Ｌ－アルギニン、および０．１ｇの粉末Ｌ－システインを、コラーゲン７ｇ、ペクチン７ｇ、および５％酢酸カルシウムを含むｐＨ７のリン酸緩衝液８６ｇからなるゲルマトリックスに混合した。ゲルマトリックスの成分を一緒に混合し、マグネチックスターラーを使用して３００ｒｐｍで５分間、次に１３０ｒｐｍでさらに２５分間撹拌した。次に、Ｃｕ－ＧＨＫペプチドとＬ－Ａｒｇをゲルマトリックスに添加し、混合物を２，０００ｒｐｍでさらに５分間撹拌した。
【0055】
１Ｃ １．２％ＧＨＫワセリン
１．２ｇの粉末ＧＨＫペプチド（Ｇｌｙ－Ｈｉｓ－Ｌｙｓ）、０．３ｇの粉末Ｌ－アルギニン、および０．１ｇの粉末Ｌ－システインを、９８．６ｇの薬用ワセリンに３０００ｒｐｍで混合した。ＧＨＫペプチドの含有量が１％の調製物を調製した。
１．２ｇの粉末ＧＨＫペプチド（Ｇｌｙ－Ｈｉｓ－Ｌｙｓ）、０．３ｇの粉末Ｌ－アルギニン、および０．１ｇの粉末Ｌ－システインを、９８．６ｇの薬用ワセリンに３０００ｒｐｍで混合した。ＧＨＫペプチドの含有量が１％の調製物を調製した。
【0056】
１Ｄ １％ＤＡＨＫ（１：０．３：０．１）ワセリン
１ｇの粉末ＤＡＨＫペプチド（Ａｓｐ－Ａｌａ－Ｈｉｓ－Ｌｙｓ）、０．３５ｇの粉末Ｌ－アルギニン、および０．１ｇの粉末Ｌ－システインを、９８．６ｇの薬用ワセリンに３，０００ｒｐｍで混合した。ＤＡＨＫペプチドの含有量が１％の調製物を調製した。
１ｇの粉末ＤＡＨＫペプチド（Ａｓｐ－Ａｌａ－Ｈｉｓ－Ｌｙｓ）、０．３５ｇの粉末Ｌ－アルギニン、および０．１ｇの粉末Ｌ－システインを、９８．６ｇの薬用ワセリンに３，０００ｒｐｍで混合した。ＤＡＨＫペプチドの含有量が１％の調製物を調製した。
【0057】
１Ｅ ０．５％ＤＡＨＫマトリックス軟膏
０．５ｇの粉末ＤＡＨＫペプチド（Ａｓｐ－Ａｌａ－Ｈｉｓ－Ｌｙｓ）、０．１５ｇの粉末Ｄ－アルギニン、および０．０８ｇの粉末Ｄ－システインを、以下からなるマトリックスに混合した：流動パラフィン８．０ｇ、硬質パラフィン１２．０ｇ、ステアリルアルコール２．０ｇ、プロピレングリコール５．５ｇ、Ｓｌｏｖａｓｏｌ ２４３０（１－（２－メトキシイソプロポキシ）－２－プロパノール）３．０ｇ、カルボメラ（Ｃａｒｂｏｍｅｒａ）０．５ｇ、トリエタノールアミン０．６ｇ、メチルパラベン０．２ｇ、プロピルパラベン０．０５ｇ、および精製水６７．６５ｇ。
０．５ｇの粉末ＤＡＨＫペプチド（Ａｓｐ－Ａｌａ－Ｈｉｓ－Ｌｙｓ）、０．１５ｇの粉末Ｄ－アルギニン、および０．０８ｇの粉末Ｄ－システインを、以下からなるマトリックスに混合した：流動パラフィン８．０ｇ、硬質パラフィン１２．０ｇ、ステアリルアルコール２．０ｇ、プロピレングリコール５．５ｇ、Ｓｌｏｖａｓｏｌ ２４３０（１－（２－メトキシイソプロポキシ）－２－プロパノール）３．０ｇ、カルボメラ（Ｃａｒｂｏｍｅｒａ）０．５ｇ、トリエタノールアミン０．６ｇ、メチルパラベン０．２ｇ、プロピルパラベン０．０５ｇ、および精製水６７．６５ｇ。
【0058】
混合物を５０００回転で２時間撹拌した。
【0059】
すべての成分を、０．５％のＤＡＨＫペプチドを含むエマルジョンに均質化した。
【0060】
１Ｆ １％アラプチドワセリン
１ｇの粉末アラプチド、０．４ｇの粉末Ｌ－アルギニン、および０．１ｇの粉末Ｌ－システインを、９８．６ｇの薬用ワセリンに３，０００ｒｐｍで混合した。アラプチドの含有量が１％の調製物を調製した。
１ｇの粉末アラプチド、０．４ｇの粉末Ｌ－アルギニン、および０．１ｇの粉末Ｌ－システインを、９８．６ｇの薬用ワセリンに３，０００ｒｐｍで混合した。アラプチドの含有量が１％の調製物を調製した。
【0061】
１Ｇ ５％アラプチドマトリックスエマルジョン
５ｇの粉末アラプチドを４ｇの精製ココナッツオイルに混合し、乳化剤を添加し、混合物を水８２ｇと混合した。乳化剤は、９ｇの９％トリデシルアルコールエトキシレートから構成された。
５ｇの粉末アラプチドを４ｇの精製ココナッツオイルに混合し、乳化剤を添加し、混合物を水８２ｇと混合した。乳化剤は、９ｇの９％トリデシルアルコールエトキシレートから構成された。
【0062】
乳化剤の存在下で、２つの非混和性液体を混合した。得られた多分散エマルジョンを２ｇの粉末ラセミアルギニンおよび０．５ｇの粉末ラセミシステインと混合し、さらに周囲温度および３０００ｒｐｍでホモジナイザーにおいて均質化した。均質化により、調製したエマルジョンの安定性が向上した。アラプチドの含有量が５％のエマルジョンを調製した。
【0063】
１Ｈ ２％エキセンジン－４ワセリン
２ｇの粉末エキセンジン－４、０．３ｇの粉末Ｌ－アルギニン、および０．１ｇの粉末Ｌ－システインを、９８．６ｇの薬用ワセリンに３，０００ｒｐｍで混合した。エキセンジン－４の含有量が２％の調製物を調製した。
２ｇの粉末エキセンジン－４、０．３ｇの粉末Ｌ－アルギニン、および０．１ｇの粉末Ｌ－システインを、９８．６ｇの薬用ワセリンに３，０００ｒｐｍで混合した。エキセンジン－４の含有量が２％の調製物を調製した。
【0064】
１Ｉ １％ ３－メチル－１，４－ジアザスピロ［５．６］ドデカン－２，５－ジオンワセリン
１ｇの粉末３－メチル－１，４－ジアザスピロ［５．６］ドデカン－２，５－ジオン、０．３ｇの粉末Ｌ－アルギニン、および０．１ｇの粉末Ｌ－システインを、９８．６ｇの薬用ワセリンに３，０００ｒｐｍで混合した。３－メチル－１，４－ジアザスピロ［５．６］ドデカン－２，５－ジオンの含有量が１％の調製物を調整した。
１ｇの粉末３－メチル－１，４－ジアザスピロ［５．６］ドデカン－２，５－ジオン、０．３ｇの粉末Ｌ－アルギニン、および０．１ｇの粉末Ｌ－システインを、９８．６ｇの薬用ワセリンに３，０００ｒｐｍで混合した。３－メチル－１，４－ジアザスピロ［５．６］ドデカン－２，５－ジオンの含有量が１％の調製物を調整した。
【0065】
１Ｊ １％ ＧＥＫＧワセリン
１ｇの粉末ＧＥＫＧ、０．５ｇの粉末Ｌ－アルギニン、および０．２ｇの粉末Ｌ－システインを、９８．６ｇの薬用ワセリンに３，０００ｒｐｍで混合した。ＧＥＫＧの含有量が１％の調製物を調製した。
１ｇの粉末ＧＥＫＧ、０．５ｇの粉末Ｌ－アルギニン、および０．２ｇの粉末Ｌ－システインを、９８．６ｇの薬用ワセリンに３，０００ｒｐｍで混合した。ＧＥＫＧの含有量が１％の調製物を調製した。
【0066】
実施例２
調製物の製造－ペプチド＋Ａｒｇ
１％ Ｚｎ－ＧＨＫマトリックスゲル
１ｇの粉末Ｚｎ－ＧＨＫペプチド（Ｇｌｙ－Ｈｉｓ－Ｌｙｓ）および０．２ｇの粉末Ｄ－アルギニンを、ゼラチン７ｇ、カラギーナン７ｇ、および５％酢酸亜鉛を含むｐＨ７のリン酸緩衝液８６ｇからなるゲルマトリックスに混合した。ゲルマトリックスの成分を一緒に混合し、マグネチックスターラーを使用して３００ｒｐｍで５分間、次に１３０ｒｐｍでさらに２５分間撹拌した。次に、Ｚｎ－ＧＨＫペプチドおよびＬ－Ａｒｇをゲルマトリックスに添加し、混合物を２，０００ｒｐｍでさらに５分間撹拌した。
調製物の製造－ペプチド＋Ａｒｇ
１％ Ｚｎ－ＧＨＫマトリックスゲル
１ｇの粉末Ｚｎ－ＧＨＫペプチド（Ｇｌｙ－Ｈｉｓ－Ｌｙｓ）および０．２ｇの粉末Ｄ－アルギニンを、ゼラチン７ｇ、カラギーナン７ｇ、および５％酢酸亜鉛を含むｐＨ７のリン酸緩衝液８６ｇからなるゲルマトリックスに混合した。ゲルマトリックスの成分を一緒に混合し、マグネチックスターラーを使用して３００ｒｐｍで５分間、次に１３０ｒｐｍでさらに２５分間撹拌した。次に、Ｚｎ－ＧＨＫペプチドおよびＬ－Ａｒｇをゲルマトリックスに添加し、混合物を２，０００ｒｐｍでさらに５分間撹拌した。
【0067】
実施例３
調製物の製造－ペプチド＋Ｃｙｓ
１％ ＤＡＨＫマトリックスゲル
１ｇの粉末ＤＡＨＫペプチドおよび０．２ｇの粉末Ｌ－アルギニンを、ゼラチン２ｇ、キトサン１ｇ、ヒアルロン酸１ｇおよびコラーゲン３ｇ、カラギーナン７ｇ、および５％酢酸マグネシウムを含むｐＨ７のリン酸緩衝液８６ｇからなるゲルマトリックスに混合した。ゲルマトリックスの成分を一緒に混合し、マグネチックスターラーを使用して３００ｒｐｍで５分間、次に１３０ｒｐｍでさらに２５分間撹拌した。次に、ＤＡＨＫペプチドおよびＬ－Ａｒｇをゲルマトリックスに添加し、混合物を２，０００ｒｐｍでさらに５分間撹拌した。
調製物の製造－ペプチド＋Ｃｙｓ
１％ ＤＡＨＫマトリックスゲル
１ｇの粉末ＤＡＨＫペプチドおよび０．２ｇの粉末Ｌ－アルギニンを、ゼラチン２ｇ、キトサン１ｇ、ヒアルロン酸１ｇおよびコラーゲン３ｇ、カラギーナン７ｇ、および５％酢酸マグネシウムを含むｐＨ７のリン酸緩衝液８６ｇからなるゲルマトリックスに混合した。ゲルマトリックスの成分を一緒に混合し、マグネチックスターラーを使用して３００ｒｐｍで５分間、次に１３０ｒｐｍでさらに２５分間撹拌した。次に、ＤＡＨＫペプチドおよびＬ－Ａｒｇをゲルマトリックスに添加し、混合物を２，０００ｒｐｍでさらに５分間撹拌した。
【0068】
実施例４
調製物の製造－溶液中のペプチド＋ペプチド
４Ａ ＧＨＫ＋アラプチド溶液
１．５ｇの粉末ＧＨＫタンパク質および１ｇの粉末アラプチドを、９７．５ｇの精製水中で撹拌した。混合物を５，０００ｒｐｍで１５分間撹拌した。毎回使用する前に、混合物を３，０００ｒｐｍで２分間撹拌した。
調製物の製造－溶液中のペプチド＋ペプチド
４Ａ ＧＨＫ＋アラプチド溶液
１．５ｇの粉末ＧＨＫタンパク質および１ｇの粉末アラプチドを、９７．５ｇの精製水中で撹拌した。混合物を５，０００ｒｐｍで１５分間撹拌した。毎回使用する前に、混合物を３，０００ｒｐｍで２分間撹拌した。
【0069】
４Ｂ ＧＨＫ＋ＤＡＨＫ溶液
１ｇの粉末ＧＨＫおよび１ｇの粉末ＤＡＨＫを９８ｇの精製水中で撹拌した。混合物を４，５００ｒｐｍで１０分間撹拌した。毎回使用する前に、混合物を３，０００ｒｐｍで１分間撹拌した。
１ｇの粉末ＧＨＫおよび１ｇの粉末ＤＡＨＫを９８ｇの精製水中で撹拌した。混合物を４，５００ｒｐｍで１０分間撹拌した。毎回使用する前に、混合物を３，０００ｒｐｍで１分間撹拌した。
【0070】
４Ｃ アラプチド＋４，６，７－トリエチル－４，７－ジアザスピロ［２．５］オクタン－５，８－ジオン溶液
１ｇの粉末アラプチドおよび１．５ｇの粉末４，６，７－トリエチル－４，７－ジアザスピロ［２．５］オクタン－５，８－ジオンを、９７．５ｇの精製水中で撹拌した。混合物を５，０００ｒｐｍで２０分間撹拌した。毎回使用する前に、混合物を３，０００ｒｐｍで２分間撹拌した。
１ｇの粉末アラプチドおよび１．５ｇの粉末４，６，７－トリエチル－４，７－ジアザスピロ［２．５］オクタン－５，８－ジオンを、９７．５ｇの精製水中で撹拌した。混合物を５，０００ｒｐｍで２０分間撹拌した。毎回使用する前に、混合物を３，０００ｒｐｍで２分間撹拌した。
【0071】
実施例５
調製物の製造－ペプチド＋ペプチド＋Ａｒｇマトリックスゲル
１ｇの粉末ＤＡＨＫペプチドおよび１ｇの粉末ＧＨＫペプチド、ならびに０．２ｇの粉末Ｌ－アルギニンを、加水分解ゼラチン６ｇ、ＢＳＡ１ｇ、カルボキシメチルセルロース５ｇ、ヒアルロン酸２ｇ、および５％酢酸カルシウムを含むｐＨ６のホウ酸緩衝液８６ｇからなるゲルマトリックス中に混合した。ゲルマトリックスの成分を一緒に混合し、マグネチックスターラーを使用して３００ｒｐｍで５分間、次に１３０ｒｐｍでさらに２５分間撹拌した。次に、ＤＡＨＫペプチド、ＧＨＫペプチド、およびＬ－Ａｒｇをゲルマトリックスに添加し、混合物を３，０００ｒｐｍでさらに５分間撹拌した。
調製物の製造－ペプチド＋ペプチド＋Ａｒｇマトリックスゲル
１ｇの粉末ＤＡＨＫペプチドおよび１ｇの粉末ＧＨＫペプチド、ならびに０．２ｇの粉末Ｌ－アルギニンを、加水分解ゼラチン６ｇ、ＢＳＡ１ｇ、カルボキシメチルセルロース５ｇ、ヒアルロン酸２ｇ、および５％酢酸カルシウムを含むｐＨ６のホウ酸緩衝液８６ｇからなるゲルマトリックス中に混合した。ゲルマトリックスの成分を一緒に混合し、マグネチックスターラーを使用して３００ｒｐｍで５分間、次に１３０ｒｐｍでさらに２５分間撹拌した。次に、ＤＡＨＫペプチド、ＧＨＫペプチド、およびＬ－Ａｒｇをゲルマトリックスに添加し、混合物を３，０００ｒｐｍでさらに５分間撹拌した。
【0072】
実施例６
調製物の製造－ペプチド＋ペプチド＋Ｃｙｓマトリックスゲル
１ｇの粉末ＤＡＨＫペプチドおよび１ｇの粉末アラプチド、ならびに０．２ｇの粉末Ｌ－システインを、スプリットエラスタン３ｇ、加水分解ゼラチン１ｇ、ＢＳＡ３ｇ、カルボキシメチルセルロース５ｇ、カラギーナン１ｇ、アルギン酸１ｇ、および１％酢酸亜鉛を含むｐＨ７．５のホウ酸緩衝液８６ｇからなるゲルマトリックス中に混合した。ゲルマトリックスの成分を一緒に混合し、マグネチックスターラーを使用して４００ｒｐｍで１５分間、次に１３０ｒｐｍでさらに２５分間撹拌した。次に、ＤＡＨＫペプチド、アラプチド、およびＬ－Ｃｙｓをゲルマトリックスに添加し、混合物を５，０００ｒｐｍでさらに２分間撹拌した。
調製物の製造－ペプチド＋ペプチド＋Ｃｙｓマトリックスゲル
１ｇの粉末ＤＡＨＫペプチドおよび１ｇの粉末アラプチド、ならびに０．２ｇの粉末Ｌ－システインを、スプリットエラスタン３ｇ、加水分解ゼラチン１ｇ、ＢＳＡ３ｇ、カルボキシメチルセルロース５ｇ、カラギーナン１ｇ、アルギン酸１ｇ、および１％酢酸亜鉛を含むｐＨ７．５のホウ酸緩衝液８６ｇからなるゲルマトリックス中に混合した。ゲルマトリックスの成分を一緒に混合し、マグネチックスターラーを使用して４００ｒｐｍで１５分間、次に１３０ｒｐｍでさらに２５分間撹拌した。次に、ＤＡＨＫペプチド、アラプチド、およびＬ－Ｃｙｓをゲルマトリックスに添加し、混合物を５，０００ｒｐｍでさらに２分間撹拌した。
【0073】
実施例７
調製物の製造－ペプチド＋ペプチド＋Ａｒｇ＋Ｃｙｓマトリックスゲル
１ｇの粉末ＧＨＫペプチドおよび１ｇの粉末アラプチドおよび０．５ｇの粉末Ｌ－アルギニン、および０．２ｇのＬ－システインを、スプリットコラーゲン６ｇ、フィブリノーゲン１ｇ、オキソセルロース４ｇ、アルギン酸塩１ｇ、ペクチン酸塩１ｇ、亜麻仁ガム１ｇ、および１％酢酸亜鉛を含むｐＨ７のリン酸緩衝液８６ｇからなるゲルマトリックス中に混合した。ゲルマトリックスの成分を一緒に混合し、マグネチックスターラーを使用して４００ｒｐｍで１５分間、次に１３０ｒｐｍでさらに２５分間撹拌した。次に、ＤＡＨＫペプチド、アラプチド、およびＬ－Ｃｙｓをゲルマトリックスに添加し、混合物を５，０００ｒｐｍでさらに２分間撹拌した。
調製物の製造－ペプチド＋ペプチド＋Ａｒｇ＋Ｃｙｓマトリックスゲル
１ｇの粉末ＧＨＫペプチドおよび１ｇの粉末アラプチドおよび０．５ｇの粉末Ｌ－アルギニン、および０．２ｇのＬ－システインを、スプリットコラーゲン６ｇ、フィブリノーゲン１ｇ、オキソセルロース４ｇ、アルギン酸塩１ｇ、ペクチン酸塩１ｇ、亜麻仁ガム１ｇ、および１％酢酸亜鉛を含むｐＨ７のリン酸緩衝液８６ｇからなるゲルマトリックス中に混合した。ゲルマトリックスの成分を一緒に混合し、マグネチックスターラーを使用して４００ｒｐｍで１５分間、次に１３０ｒｐｍでさらに２５分間撹拌した。次に、ＤＡＨＫペプチド、アラプチド、およびＬ－Ｃｙｓをゲルマトリックスに添加し、混合物を５，０００ｒｐｍでさらに２分間撹拌した。
【0074】
実施例８
８Ａ 調製物の製造－ペプチドマトリックスゲル
３ｇの粉末アラプチドを、コラーゲン４ｇ、スプリットコラーゲン３ｇ、ヒアルロン酸１ｇ、アルギン酸塩３ｇ、カラギーナン３ｇ、および３％酢酸マグネシウムを含むｐＨ６．５の酢酸緩衝液８６ｇからなるゲルマトリックス中に混合した。ゲルマトリックスの成分を一緒に混合し、マグネチックスターラーを使用して４００ｒｐｍで１５分間、次に１３０ｒｐｍでさらに２５分間撹拌した。次に、アラプチドをゲルマトリックスに添加し、混合物を５，０００ｒｐｍでさらに５分間撹拌した。
８Ａ 調製物の製造－ペプチドマトリックスゲル
３ｇの粉末アラプチドを、コラーゲン４ｇ、スプリットコラーゲン３ｇ、ヒアルロン酸１ｇ、アルギン酸塩３ｇ、カラギーナン３ｇ、および３％酢酸マグネシウムを含むｐＨ６．５の酢酸緩衝液８６ｇからなるゲルマトリックス中に混合した。ゲルマトリックスの成分を一緒に混合し、マグネチックスターラーを使用して４００ｒｐｍで１５分間、次に１３０ｒｐｍでさらに２５分間撹拌した。次に、アラプチドをゲルマトリックスに添加し、混合物を５，０００ｒｐｍでさらに５分間撹拌した。
【0075】
８Ｂ 調製物の製造－マトリックスゲル
対照ゲルマトリックスは、コラーゲン７ｇ、ペクチン７ｇ、および５％酢酸カルシウムを含むｐＨ７のリン酸緩衝液８６ｇから調製した。ゲルマトリックスの成分を一緒に混合し、マグネチックスターラーを使用して３００ｒｐｍで５分間、次に１３０ｒｐｍでさらに２５分間撹拌した。次に、ゲルマトリックスを２，０００ｒｐｍでさらに１分間撹拌した。
対照ゲルマトリックスは、コラーゲン７ｇ、ペクチン７ｇ、および５％酢酸カルシウムを含むｐＨ７のリン酸緩衝液８６ｇから調製した。ゲルマトリックスの成分を一緒に混合し、マグネチックスターラーを使用して３００ｒｐｍで５分間、次に１３０ｒｐｍでさらに２５分間撹拌した。次に、ゲルマトリックスを２，０００ｒｐｍでさらに１分間撹拌した。
【0076】
実施例９
個々の調製物の効力の試験
効力を比較するために、個々の実施例に基づく調製物を、薬用ワセリンと混合することによって標準化された濃度で製造した。このアプローチにより、試験製剤の一様性が保証された。さらに、製造したすべての製剤を試験した。図７および８は、個々の試験群での創傷の完全な治癒に必要なｉｎ ｖｉｖｏの日数を示す。所与の群の調製物を表す選択された製剤が示されている。結果は、製剤の効果が、使用されるペプチドとは無関係であるが、特定の比率でのペプチドとアミノ酸の組み合わせに依存することを示す。調製物の効力を比較するために、近交系実験用マウスの動物モデルを選択し、滅菌メスを使用して腹腔内に人工創傷をつくった。各実験対象に、長さ約１ｃｍ、深さ約３ｍｍの２つの傷を生じさせた。マウスモデルでの試験に続いて、健康な負傷した患者、ならびに糖尿病の負傷した患者および／または非治癒性の創傷を有する患者で試験を実施した。健康な患者の場合、特に顕微手術に起因する創傷、糖尿病患者では、治癒が困難な創傷、静脈性潰瘍、褥瘡性潰瘍および瘻孔が関係した。マウスおよび患者の試験群は、常に５匹または５人の試験対象を含んでいた。創傷に、毎日０．００２ｇのペプチド、すなわち１日に０．２ｇの１％ペプチド製剤を適用した。マウスでの試験は２４時間ごとに評価され、患者での試験は患者自身によって毎日記録された－創傷の簡単な説明と共に写真が毎日撮影された。記録は、後で主治医によって評価された。
個々の調製物の効力の試験
効力を比較するために、個々の実施例に基づく調製物を、薬用ワセリンと混合することによって標準化された濃度で製造した。このアプローチにより、試験製剤の一様性が保証された。さらに、製造したすべての製剤を試験した。図７および８は、個々の試験群での創傷の完全な治癒に必要なｉｎ ｖｉｖｏの日数を示す。所与の群の調製物を表す選択された製剤が示されている。結果は、製剤の効果が、使用されるペプチドとは無関係であるが、特定の比率でのペプチドとアミノ酸の組み合わせに依存することを示す。調製物の効力を比較するために、近交系実験用マウスの動物モデルを選択し、滅菌メスを使用して腹腔内に人工創傷をつくった。各実験対象に、長さ約１ｃｍ、深さ約３ｍｍの２つの傷を生じさせた。マウスモデルでの試験に続いて、健康な負傷した患者、ならびに糖尿病の負傷した患者および／または非治癒性の創傷を有する患者で試験を実施した。健康な患者の場合、特に顕微手術に起因する創傷、糖尿病患者では、治癒が困難な創傷、静脈性潰瘍、褥瘡性潰瘍および瘻孔が関係した。マウスおよび患者の試験群は、常に５匹または５人の試験対象を含んでいた。創傷に、毎日０．００２ｇのペプチド、すなわち１日に０．２ｇの１％ペプチド製剤を適用した。マウスでの試験は２４時間ごとに評価され、患者での試験は患者自身によって毎日記録された－創傷の簡単な説明と共に写真が毎日撮影された。記録は、後で主治医によって評価された。
【0077】
実施例１による調製物、すなわちペプチド＋Ａｒｇ＋Ｃｙｓが使用された場合に、加速された創傷治癒の最良の効果が達成されたことが発見された。さらに、ゲルマトリックス中の製剤は、ワセリンマトリックス中の治癒ペプチド成分の混合物の製剤と比較して、相乗効果を有することが実証された。ゲルマトリックス中の製剤は、創傷のより迅速な治癒を提供する。実施例１の製剤で処置した創傷は、マウスモデルでは平均３週間で治癒し、健康な患者では３週間で治癒し、治癒が困難な創傷の治癒には３～７週間かかった。実施例２、３、および７による調製物では、マウスモデルの創傷は平均４週間で治癒し、健康な患者では４週間で治癒し、治癒が困難な創傷の治癒には４～９週間かかった。実施例４による調製物では、マウスモデルの創傷は平均５週間で治癒し、健康な患者では５週間で治癒し、治癒が困難な創傷の治癒には５～１２週間かかった。実施例５および６による調製物では、マウスモデルの創傷は平均４週間で治癒し、健康な患者では４週間で治癒し、治癒が困難な創傷の治癒には４～８週間かかった。実施例８Ａによる調製物、すなわち、ゲルマトリックス中にペプチド自体を添加した対照群（アラプチドをモデルとして使用した）では、マウスモデルの創傷は平均７週間で治癒し、健康な患者では７週間で治癒し、治癒が困難な創傷治癒には７～２０週間かかった。実施例８Ｂによる調製物、すなわちゲルマトリックス自体を適用した対照群では、マウスモデルの創傷は平均８週間で治癒し、健康な患者では８週間で治癒し、治癒が困難な創傷の治癒には８～２０週間かかった；ただし、完全に治癒したのは１人の患者だけであった。実施例８Ｃによる調製物、すなわち処置なしの対照群では、マウスモデルの創傷は平均８週間で治癒し、健康な患者では８週間で治癒し、治癒が困難な創傷の治癒は５人のうち１人の患者でのみ完了し、すなわち、３１週間で、試験したすべての対象に赤い斑点が残ったままであった。
【0078】
実施例１０
１０Ａ 実施例１Ｂによる調製物の効果、アンチエイジング、しわ伸ばし
３０～６０歳の３５人の女性の群で試験した。試験前に、すべての女性の顔の写真を、レンズＣａｎｏｎ ＥＦ １００ ２，８Ｌ ＵＳＭを備えたカメラＣａｎｏｎ ５Ｄ ｍａｒｋ ＩＩＩ（フルフレーム）によって撮影した。写真は、顔を５００Ｗの出力を持つ３つのスタジオ照明器具に曝して、シャッター１１、ＩＳＯ １００で撮影した。群を対照と試験対象に分けた。対照群にはプラセボ調製物を適用し、試験対象群には実施例１Ｂによる調製物を適用した。プラセボは、ペプチドとアミノ酸を添加していないゲルマトリックスであった。
１０Ａ 実施例１Ｂによる調製物の効果、アンチエイジング、しわ伸ばし
３０～６０歳の３５人の女性の群で試験した。試験前に、すべての女性の顔の写真を、レンズＣａｎｏｎ ＥＦ １００ ２，８Ｌ ＵＳＭを備えたカメラＣａｎｏｎ ５Ｄ ｍａｒｋ ＩＩＩ（フルフレーム）によって撮影した。写真は、顔を５００Ｗの出力を持つ３つのスタジオ照明器具に曝して、シャッター１１、ＩＳＯ １００で撮影した。群を対照と試験対象に分けた。対照群にはプラセボ調製物を適用し、試験対象群には実施例１Ｂによる調製物を適用した。プラセボは、ペプチドとアミノ酸を添加していないゲルマトリックスであった。
【0079】
女性に、実施例１Ｂによる調製物を１日２回、６週間適用した。試験の完了後、女性の顔を再び記録し、すなわち、女性の顔の写真をマクロレンズカメラで撮影した。試験前後の各女性の写真を画像分析によって比較した。１日２回の６週間の適用で、平均で７０％のしわ伸ばし（wrinkle smoothing）が達成されたが、対照群では、おそらくゲルマトリックスによって提供される水和のせいで、８％のしわ伸ばしが達成された。
【0080】
１０Ｂ 実施例７による調製物の効果、アンチエイジング、しわ伸ばし
２８～５９歳の３５人の女性の群で試験した。試験前に、すべての女性の顔の写真を、レンズＣａｎｏｎ ＥＦ １００ ２，８Ｌ ＵＳＭを備えたカメラＣａｎｏｎ ５Ｄ ｍａｒｋ ＩＩＩ（フルフレーム）によって撮影した。写真は、顔を５００Ｗの出力を持つ３つのスタジオ照明器具に曝して、シャッター１１、ＩＳＯ １００で撮影した。女性に、実施例７の調製物を１日２回、６週間適用した。試験完了後、女性の顔を再び記録し、すなわち、女性の顔の写真をマクロレンズカメラで撮影した。試験前後の各女性の写真を比較した。１日２回の６週間の適用で、平均で６２％のしわ伸ばしが達成された。
２８～５９歳の３５人の女性の群で試験した。試験前に、すべての女性の顔の写真を、レンズＣａｎｏｎ ＥＦ １００ ２，８Ｌ ＵＳＭを備えたカメラＣａｎｏｎ ５Ｄ ｍａｒｋ ＩＩＩ（フルフレーム）によって撮影した。写真は、顔を５００Ｗの出力を持つ３つのスタジオ照明器具に曝して、シャッター１１、ＩＳＯ １００で撮影した。女性に、実施例７の調製物を１日２回、６週間適用した。試験完了後、女性の顔を再び記録し、すなわち、女性の顔の写真をマクロレンズカメラで撮影した。試験前後の各女性の写真を比較した。１日２回の６週間の適用で、平均で６２％のしわ伸ばしが達成された。
【0081】
産業上の利用可能性
創傷、火傷、非治癒性および糖尿病性創傷の治癒を促進するための調製物、美容医学および化粧品。
最後に、本発明の好ましい実施態様を項分け記載する。
［実施態様１］
ペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物であって、以下の群：２～４０アミノ酸からなるペプチド、アルギニンアミノ酸、システインアミノ酸：からの少なくとも２つのペプチド成分を含み、前記ペプチド成分の少なくとも１つは２～４０アミノ酸からなるペプチドであり、前記２～４０アミノ酸からなるペプチドは線状ペプチドまたはスピロ環状ジケトピペラジンペプチドであることを特徴とする、ペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物。
［実施態様２］
２～４０アミノ酸からなるペプチド、アルギニンアミノ酸、およびシステインアミノ酸を含むことを特徴とする、実施態様１に記載のペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物。
［実施態様３］
線状ペプチド、スピロ環状ジケトピペラジンペプチド、アルギニンアミノ酸、およびシステインアミノ酸を含むことを特徴とする、実施態様２に記載のペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物。
［実施態様４］
少なくとも１つの２～４０アミノ酸からなるペプチドが、金属錯体ペプチドであることを特徴とする、実施態様１に記載のペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物。
［実施態様５］
前記金属錯体ペプチドがＣｕ－ＧＨＫであることを特徴とする、実施態様４に記載のペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物。
［実施態様６］
前記線状ペプチドが、以下のアミノ酸の配列：ＧＨＫ、Ｃｕ－ＧＨＫ、Ｚｎ－ＧＨＫ、ＤＡＨＫ：を有する群から選択されることを特徴とする、実施態様１に記載のペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物。
［実施態様７］
線状ペプチドおよびスピロ環状ジケトピペラジンペプチドを含むことを特徴とする、実施態様１に記載のペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物。
［実施態様８］
線状ペプチドの混合物を含むことを特徴とする、実施態様１に記載のペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物。
［実施態様９］
スピロ環状ジケトピペラジンペプチドの混合物を含むことを特徴とする、実施態様１に記載のペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物。
［実施態様１０］
前記スピロ環状ジケトピペラジンペプチドが、一般式：
を有することを特徴とする、実施態様１に記載のペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物。
［実施態様１１］
前記スピロ環状ジケトピペラジンペプチドが、以下の構造式：
を有するアラプチド（８－メチル－６，９－ジアザスピロ［４．５］デカン－７，１０－ジオン）であることを特徴とする、実施態様１に記載のペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物。
［実施態様１２］
前記線状ペプチドが、以下のアミノ酸の配列を有する群から選択されることを特徴とする、実施態様１に記載のペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物：
ａ） Ｃｕ－ＧＨＫ
ｂ） ＤＡＨＫ
ｃ） Ａｌａ－Ｈｉｓ
ｄ） ＰＬＧ
ｅ） ＴＦＡ－ＶＷＶ－ＯＨ
ｆ） ＫＤＩ－シトルリン
ｇ） Ｐａｌ－ＧＨＫ
ｈ） Ｐａｌ－ＧＱＰＲ
ｉ） ＫＲＦＫ
ｊ） Ｐａｌ－ＫＶＫ－ｂｉｓＴＦＡ
ｋ） Ｐａｌ－ＫＴＴＫＳ－ＯＨ
ｌ） Ｐａｌ－ＧＱＰＲ
ｍ） Ｐａｌ－ＶＧＶＡＰＧ
ｎ） ＧＥＫＧ
ｏ） ＰＫＥＫ
ｐ） ＦＶＡＰＦＰ
ｑ） Ｍｎ－ＧＨＫ
ｒ） ＧＰＲＰＡ
ｓ） ＹＡＧＦＬ
ｔ） ＡＰ－Ｄａｂ－ＮＨＢｎ－２－アセテート
ｕ） ＨＧＥＧＴＦＴＳＤＬＳＫＱＭＥＥＥＡＶＲＬＦＩＥＷＬＫＮＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ
ｖ） ＹＶＳＰＧＭＫＮＶＮＷＷＳＨＷＷＨＡＴＤ
ｗ） Ｘ－ＮＨ－ＧＰＡＧ－ＣＯ－Ｙ（Ｘ＝Ｈ、Ｂｏｃ、Ｆｍｏｃ、Ｍｅ、Ｅｔ；Ｙ＝ＯＨ、ＯＭｅ、ＯＥｔ、ＯＮａ、ＯＫ、ＯＮＨ ４ ），
ｘ） ＶＹＹＶＧＲＫ
ｙ） ｃ［ＷＣＫＰＫＰＫＰＲＣＨ－ＮＨ２］）
ｚ） ＱＨＲＥＤＧＳ
ａａ） ＹＧＲＲＲＲＲＱＲＲＲＰ
ｂｂ） Ｈ－ＬＥＰＰＰＬＫＰＡＤＡＬＧＶ－ＯＨ
ｃｃ） ＭＬＳＬＩＦＬＨＲＬＫＳＭＲＫＲＬＤＲＫＬＲＬＷＨＲＫＮＹＰ
ｄｄ） ＭＬＫＬＩＦＬＨＲＬＫＲＭＲＫＲＬＫＲＫＬＲＬＷＨＲＫＲＹＫ
ｅｅ） ＡＴＡＷＤＦＧＰＨＧＬＬＰＩＲＰＩＲＩＲＰＬＣＧ
ｆｆ） ＡＰＦＲＭＧＩＣＴＴＮ
ｇｇ） ＫＲＩＶＫＲＩＫＫＷＬＲ
ｈｈ） ＧＩＦＳＫＬＡＧＫＫＩＫＮＬＬＩＳＧＬＫＧ
ｉｉ） ＤＨＹＮＣＶＳＳＧＧＱＣＬＹＳＡＣＰＩＦＴＫＩＱＧＴＣＹＲＧＫＡＫＣＣＫ
ｊｊ） ＧＩＧＤＰＶＴＣＬＫＳＧＡＩＣＨＰＶＦＣＰＲＲＹＫＱＩＧＴＣＧＬＰＧＴＫＣＣＫＫＰ
ｋｋ） ＤＳＨＥＫＲＨＨＧＹＲＲＫＦＨＥＫＨＨＳＨＲＥＦＰＦＹＧＤＹＧＳＮＹＬＹＤＮ
ｌｌ） ＲＫＦＨＥＫＨＨＳＨＲＥＦＰＦＹＧＤＹＧＳＮＹＬＹＤＮ
ｍｍ） ＤＳＨＡＫＲＨＨＧＹＫＲＫＦＨＥＫＨＨＳＨＲＧＹＲＳＮＹＬＹＤＮ
ｎｎ） ＶＲＬＩＶＡＶＲＩＷＲＲ
ｏｏ） ＬＬＧＤＦＦＲＫＳＫＥＫＩＧＫＥＦＫＲＩＶＱＲＩＫＤＦＬＲＮＬＶＰＲＴＥＳ
ｐｐ） ＧＣＫＫＹＲＲＦＲＷＫＦＫＧＫＦＷＦＷＧ
ｑｑ） ＰＬＬＧＤＦＦＲＫＳＫＥＫＩＧＫＥＦＫＲＩＶＱＲＩＫＤＦＬＲＮＬＶＰＲＴＥＳ
ｒｒ） ＡＰＫＡＭＫＬＬＫＫＬＬＫＬＱＫＫＧＩ
ｓｓ） ＭＬＫＬＩＦＬＨＲＬＫＲＭＲＫＲＬＫＲＫ
ｔｔ） ＭＬＫＬＩＦＬＨＲＬＫＲＭＲＫＲＬＫＲＫ
ｕｕ） ＦＬＰＬＩＧＲＶＬＳＧＩＬ
ｖｖ） ＬＬＰＩＶＧＮＬＬＫＳＬＬ。
［実施態様１３］
タンパク質または脂質または糖類または合成高分子のマトリックスあるいはそれらの混合物中に、マトリックス１グラムあたり０．００１～５０ｍｇの範囲の量で含まれることを特徴とする、実施態様１に記載のペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物。
［実施態様１４］
タンパク質または脂質または糖類のマトリックスあるいはそれらの混合物中に、マトリックス１グラムあたり０．１～５ｍｇの範囲の量で含まれることを特徴とする、実施態様１３に記載のペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物。
［実施態様１５］
前記タンパク質マトリックスがコラーゲンを含むことを特徴とする、実施態様１３に記載のペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物。
［実施態様１６］
前記糖類マトリックスがキトサンおよび／またはヒアルロン酸を含むことを特徴とする、実施態様１３に記載のペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物。
［実施態様１７］
前記脂質マトリックスがレシチンを含むことを特徴とする、実施態様１３に記載のペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物。
［実施態様１８］
前記合成高分子マトリックスがポリアクリルアミドを含むことを特徴とする、実施態様１３に記載のペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物。
［実施態様１９］
皮膚欠損の処置に使用するため、および／または創傷治癒および／または皮膚再生のための、実施態様１に記載のペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物。
創傷、火傷、非治癒性および糖尿病性創傷の治癒を促進するための調製物、美容医学および化粧品。
最後に、本発明の好ましい実施態様を項分け記載する。
［実施態様１］
ペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物であって、以下の群：２～４０アミノ酸からなるペプチド、アルギニンアミノ酸、システインアミノ酸：からの少なくとも２つのペプチド成分を含み、前記ペプチド成分の少なくとも１つは２～４０アミノ酸からなるペプチドであり、前記２～４０アミノ酸からなるペプチドは線状ペプチドまたはスピロ環状ジケトピペラジンペプチドであることを特徴とする、ペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物。
［実施態様２］
２～４０アミノ酸からなるペプチド、アルギニンアミノ酸、およびシステインアミノ酸を含むことを特徴とする、実施態様１に記載のペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物。
［実施態様３］
線状ペプチド、スピロ環状ジケトピペラジンペプチド、アルギニンアミノ酸、およびシステインアミノ酸を含むことを特徴とする、実施態様２に記載のペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物。
［実施態様４］
少なくとも１つの２～４０アミノ酸からなるペプチドが、金属錯体ペプチドであることを特徴とする、実施態様１に記載のペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物。
［実施態様５］
前記金属錯体ペプチドがＣｕ－ＧＨＫであることを特徴とする、実施態様４に記載のペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物。
［実施態様６］
前記線状ペプチドが、以下のアミノ酸の配列：ＧＨＫ、Ｃｕ－ＧＨＫ、Ｚｎ－ＧＨＫ、ＤＡＨＫ：を有する群から選択されることを特徴とする、実施態様１に記載のペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物。
［実施態様７］
線状ペプチドおよびスピロ環状ジケトピペラジンペプチドを含むことを特徴とする、実施態様１に記載のペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物。
［実施態様８］
線状ペプチドの混合物を含むことを特徴とする、実施態様１に記載のペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物。
［実施態様９］
スピロ環状ジケトピペラジンペプチドの混合物を含むことを特徴とする、実施態様１に記載のペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物。
［実施態様１０］
前記スピロ環状ジケトピペラジンペプチドが、一般式：
【化8】
［実施態様１１］
前記スピロ環状ジケトピペラジンペプチドが、以下の構造式：
【化9】
［実施態様１２］
前記線状ペプチドが、以下のアミノ酸の配列を有する群から選択されることを特徴とする、実施態様１に記載のペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物：
ａ） Ｃｕ－ＧＨＫ
ｂ） ＤＡＨＫ
ｃ） Ａｌａ－Ｈｉｓ
ｄ） ＰＬＧ
ｅ） ＴＦＡ－ＶＷＶ－ＯＨ
ｆ） ＫＤＩ－シトルリン
ｇ） Ｐａｌ－ＧＨＫ
ｈ） Ｐａｌ－ＧＱＰＲ
ｉ） ＫＲＦＫ
ｊ） Ｐａｌ－ＫＶＫ－ｂｉｓＴＦＡ
ｋ） Ｐａｌ－ＫＴＴＫＳ－ＯＨ
ｌ） Ｐａｌ－ＧＱＰＲ
ｍ） Ｐａｌ－ＶＧＶＡＰＧ
ｎ） ＧＥＫＧ
ｏ） ＰＫＥＫ
ｐ） ＦＶＡＰＦＰ
ｑ） Ｍｎ－ＧＨＫ
ｒ） ＧＰＲＰＡ
ｓ） ＹＡＧＦＬ
ｔ） ＡＰ－Ｄａｂ－ＮＨＢｎ－２－アセテート
ｕ） ＨＧＥＧＴＦＴＳＤＬＳＫＱＭＥＥＥＡＶＲＬＦＩＥＷＬＫＮＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ
ｖ） ＹＶＳＰＧＭＫＮＶＮＷＷＳＨＷＷＨＡＴＤ
ｗ） Ｘ－ＮＨ－ＧＰＡＧ－ＣＯ－Ｙ（Ｘ＝Ｈ、Ｂｏｃ、Ｆｍｏｃ、Ｍｅ、Ｅｔ；Ｙ＝ＯＨ、ＯＭｅ、ＯＥｔ、ＯＮａ、ＯＫ、ＯＮＨ ４ ），
ｘ） ＶＹＹＶＧＲＫ
ｙ） ｃ［ＷＣＫＰＫＰＫＰＲＣＨ－ＮＨ２］）
ｚ） ＱＨＲＥＤＧＳ
ａａ） ＹＧＲＲＲＲＲＱＲＲＲＰ
ｂｂ） Ｈ－ＬＥＰＰＰＬＫＰＡＤＡＬＧＶ－ＯＨ
ｃｃ） ＭＬＳＬＩＦＬＨＲＬＫＳＭＲＫＲＬＤＲＫＬＲＬＷＨＲＫＮＹＰ
ｄｄ） ＭＬＫＬＩＦＬＨＲＬＫＲＭＲＫＲＬＫＲＫＬＲＬＷＨＲＫＲＹＫ
ｅｅ） ＡＴＡＷＤＦＧＰＨＧＬＬＰＩＲＰＩＲＩＲＰＬＣＧ
ｆｆ） ＡＰＦＲＭＧＩＣＴＴＮ
ｇｇ） ＫＲＩＶＫＲＩＫＫＷＬＲ
ｈｈ） ＧＩＦＳＫＬＡＧＫＫＩＫＮＬＬＩＳＧＬＫＧ
ｉｉ） ＤＨＹＮＣＶＳＳＧＧＱＣＬＹＳＡＣＰＩＦＴＫＩＱＧＴＣＹＲＧＫＡＫＣＣＫ
ｊｊ） ＧＩＧＤＰＶＴＣＬＫＳＧＡＩＣＨＰＶＦＣＰＲＲＹＫＱＩＧＴＣＧＬＰＧＴＫＣＣＫＫＰ
ｋｋ） ＤＳＨＥＫＲＨＨＧＹＲＲＫＦＨＥＫＨＨＳＨＲＥＦＰＦＹＧＤＹＧＳＮＹＬＹＤＮ
ｌｌ） ＲＫＦＨＥＫＨＨＳＨＲＥＦＰＦＹＧＤＹＧＳＮＹＬＹＤＮ
ｍｍ） ＤＳＨＡＫＲＨＨＧＹＫＲＫＦＨＥＫＨＨＳＨＲＧＹＲＳＮＹＬＹＤＮ
ｎｎ） ＶＲＬＩＶＡＶＲＩＷＲＲ
ｏｏ） ＬＬＧＤＦＦＲＫＳＫＥＫＩＧＫＥＦＫＲＩＶＱＲＩＫＤＦＬＲＮＬＶＰＲＴＥＳ
ｐｐ） ＧＣＫＫＹＲＲＦＲＷＫＦＫＧＫＦＷＦＷＧ
ｑｑ） ＰＬＬＧＤＦＦＲＫＳＫＥＫＩＧＫＥＦＫＲＩＶＱＲＩＫＤＦＬＲＮＬＶＰＲＴＥＳ
ｒｒ） ＡＰＫＡＭＫＬＬＫＫＬＬＫＬＱＫＫＧＩ
ｓｓ） ＭＬＫＬＩＦＬＨＲＬＫＲＭＲＫＲＬＫＲＫ
ｔｔ） ＭＬＫＬＩＦＬＨＲＬＫＲＭＲＫＲＬＫＲＫ
ｕｕ） ＦＬＰＬＩＧＲＶＬＳＧＩＬ
ｖｖ） ＬＬＰＩＶＧＮＬＬＫＳＬＬ。
［実施態様１３］
タンパク質または脂質または糖類または合成高分子のマトリックスあるいはそれらの混合物中に、マトリックス１グラムあたり０．００１～５０ｍｇの範囲の量で含まれることを特徴とする、実施態様１に記載のペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物。
［実施態様１４］
タンパク質または脂質または糖類のマトリックスあるいはそれらの混合物中に、マトリックス１グラムあたり０．１～５ｍｇの範囲の量で含まれることを特徴とする、実施態様１３に記載のペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物。
［実施態様１５］
前記タンパク質マトリックスがコラーゲンを含むことを特徴とする、実施態様１３に記載のペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物。
［実施態様１６］
前記糖類マトリックスがキトサンおよび／またはヒアルロン酸を含むことを特徴とする、実施態様１３に記載のペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物。
［実施態様１７］
前記脂質マトリックスがレシチンを含むことを特徴とする、実施態様１３に記載のペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物。
［実施態様１８］
前記合成高分子マトリックスがポリアクリルアミドを含むことを特徴とする、実施態様１３に記載のペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物。
［実施態様１９］
皮膚欠損の処置に使用するため、および／または創傷治癒および／または皮膚再生のための、実施態様１に記載のペプチド成分の皮膚再生および治癒混合物。
【図1-1】
【図1-2】
【図1-3】
【図1-4】
【図1-5】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【配列表】