知財求人 - 知財ポータルサイト「IP Force」
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】特許公報(B2)
(11)【特許番号】
(24)【登録日】2023-01-25
(45)【発行日】2023-02-02
(54)【発明の名称】殺菌・抗菌用組成物
(51)【国際特許分類】
A61K 33/34 20060101AFI20230126BHJP
A61K 31/30 20060101ALI20230126BHJP
A61K 31/198 20060101ALI20230126BHJP
A61P 31/04 20060101ALI20230126BHJP
A61P 29/00 20060101ALI20230126BHJP
【ＦＩ】
A61K33/34
A61K31/30
A61K31/198
A61P31/04
A61P29/00
【請求項の数】
3
(21)【出願番号】P 2021210632
(22)【出願日】2021-12-24
(62)【分割の表示】P 2017166172の分割
【原出願日】2017-08-15
(65)【公開番号】P2022046642
(43)【公開日】2022-03-23
【審査請求日】2021-12-24
(73)【特許権者】
【識別番号】399048401
【氏名又は名称】田島 基嗣
(74)【代理人】
【識別番号】100091502
【弁理士】
【氏名又は名称】井出 正威
(72)【発明者】
【氏名】田島 基嗣
【審査官】榎本 佳予子
(56)【参考文献】
【文献】特表２００６－５２６６６４（ＪＰ，Ａ）
【文献】国際公開第２０１７／０７９５８９（ＷＯ，Ａ１）
【文献】特開２００４－０５１６３５（ＪＰ，Ａ）
【文献】特開２０１３－１７０１６０（ＪＰ，Ａ）
【文献】豪国特許出願公開第２００４２０５０８６（ＡＵ，Ａ１）
(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)
Ａ６１Ｋ ３１／００－３３／４４
Ａ６１Ｐ １／００－４３／００
Ａ６１Ｋ８／００－８／９９
Ａ６１Ｑ１／００－９０／００
Ａ０１Ｎ１／００－６５／４８
Ａ０１Ｐ１／００－２３／００
ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）
ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）
(57)【特許請求の範囲】
【請求項1】
銅イオンとキレート剤との銅キレート錯体を含有し、前記キレート剤が、下記一般式（Ｉ）及び（ＩＩ）の少なくとも一つであることを特徴とする炎症部位の殺菌・除菌用組成物。【化1】
（式中、Ｘ１～Ｘ４は同一でも異なっていてもよく、それぞれ水素原子、アルカリ金属、アルカリ土類金属、及びカチオン性アンモニウム基からなる群より選ばれる１種を表している。）
【化2】
（式中、Ｙはアルキル基、カルボキシル基、スルホ基、アミノ基、水酸基、または水素原子を表し、Ｘ５～Ｘ７は同一でも異なっていてもよく、それぞれ水素原子、アルカリ金属、アルカリ土類金属、及びカチオン性アンモニウム基からなる群より選ばれる１種を表し、ｎは０から５の整数を表す。）
【請求項2】
前記銅キレート錯体が、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）銅キレート錯体、及び、Ｎ－（２－ヒドロキシエチル）エチレンジアミン－Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－三酢酸（ＨＥＤＴＡ）銅キレート錯体の少なくとも一つであることを特徴とする請求項１に記載の炎症部位の殺菌・除菌用組成物。
【請求項3】
前記銅キレート錯体を、銅が前記殺菌・除菌用組成物中に６２５ｐｐｍ以上となる量で含有する請求項１または２に記載の炎症部位の殺菌・除菌用組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、殺菌・抗菌用組成物に関する。
【背景技術】
【0002】
銅の殺菌・抗菌作用は昔から知られている。この銅の殺菌・抗菌作用を利用して様々な商品が考案されている。銅金属をそのまま使用できる場合であれば良いが、液体として使用する場合には、銅イオンとして作用させなければならず、銅イオンを単独で溶液中に長時間、留めておくことは困難で、時間経過と共に水酸化銅の形で沈殿してしまう。銅イオンは、１９８５年に文部省「環境科学」特別研究人体影響班によるサルでの長期実験で安全性が確認されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0003】
【文献】特開２００５－１７０７９７号公報
【文献】特開２００５－１２６４００号公報
【文献】特開２００９－１５５２９２号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0004】
しかしながら、従来の方法では、銅イオン単独では、銅イオンの存在が不安定なため、殺菌・抗菌効果が不十分な場合があり、より効果で、安全で新たな殺菌・抗菌用組成物が求められている。特許文献１に記載の技術は、金属塩として用いるため、殺菌力が低く、安定性に問題がある。また、特許文献２も金属化合物とキレート剤を別に使用しているため、殺菌力と安定性に問題がある。また更に、特許文献３においては、銅化合物と過酸化水素を含有することとなっているため、人体に直接的に使用するにあたって、安全性に欠ける。
【0005】
本発明は、上記事情に鑑みてなされたものであり、銅イオンとしての高い殺菌・抗菌効果を発揮し、かつ、安定性に優れ、人体に安全な殺菌・抗菌用組成物を提供することを課題とする。
【課題を解決するための手段】
【0006】
本発明の殺菌・抗菌用組成物は、銅イオンとのキレート剤が、下記、一般式（Ｉ）または（ＩＩ）の少なくともいずれか一つで、銅キレート錯体として含有することを特徴とする。
【0007】
【化1】
【0008】
（式中、Ｘ１～Ｘ４は同一でも異なっていてもよく、それぞれ水素原子、アルカリ金属、アルカリ土類金属、カチオン性アンモニウム基からなる群より選ばれる１種を表している。）
【化2】
【0009】
（式中、Ｙはアルキル基、カルボキシル基、スルホ基、アミノ基、水酸基、または水素原子を表し、Ｘ５～Ｘ７は同一でも異なっていてもよく、それぞれ水素原子、アルカリ金属、アルカリ土類金属、カチオン性アンモニウム基からなる群より選ばれる１種を表し、ｎは０から５の整数を表す。）
【発明の効果】
【0010】
本発明によれば、銅イオンとしての高い殺菌・抗菌効果を発揮し、かつ、安定性に優れ、人体に安全な殺菌・抗菌用組成物を提供することができる。
【0011】
生体中におけるウイルス及び細菌感染による炎症部位では、白血球が作用し、感染部位においてウイルス及び細菌と白血球との接近部位では強酸性を呈し、全体としてその炎症部位は酸性を呈する。
【0012】
また、一般式（Ｉ）または（ＩＩ）の水溶液中で陰イオンとなる－ＣＯＯ－の部分が酸性下においてはキレート能が低下する。
【0013】
そのため、炎症部位においては、該銅キレート錯体のキレート能が低下して、銅イオンがキレート剤から解放される。
【0014】
炎症が起こっている酸性部位でキレートが解かれ、銅イオンが炎症部位でウイルス及び細菌に対して殺菌や抗菌の作用をする。よって、該銅レート錯体による殺菌・抗菌用組成物を提供することができる。
【発明を実施するための形態】
【0015】
以下、本発明を詳細に説明する。
本発明の殺菌・抗菌用組成物は、銅イオンのキレート剤として、下記一般式（Ｉ）または（ＩＩ）のいずれかの構造の化合物（以下、化合物（Ａ）、（Ｂ）という。）であることを特徴とする。
本発明の殺菌・抗菌用組成物は、銅イオンのキレート剤として、下記一般式（Ｉ）または（ＩＩ）のいずれかの構造の化合物（以下、化合物（Ａ）、（Ｂ）という。）であることを特徴とする。
【0016】
化合物（Ａ）は、下記一般式（Ｉ）で示される。
【0017】
【化3】
【0018】
化合物（Ａ）において、Ｘ１～Ｘ４は同一でも異なっていてもよく、それぞれ水素原子、アルカリ金属、アルカリ土類金属、カチオン性アンモニウム基からなる群より選ばれる１種を表す。
Ｘ１～Ｘ４が上記のものであると、本発明の殺菌・除菌用組成物を水に溶解すると、この化合物（Ａ）は、－ＣＯＯＸ１、－ＣＯＯＸ２、－ＣＯＯＸ３、－ＣＯＯＸ４が電離して、それぞれ－ＣＯＯ－となり、陰イオンを生成する。そして、この陰イオンの－ＣＯＯ－の部分が銅元素と錯形成可能となる。
好ましくは、Ｘ１～Ｘ４はいずれもナトリウムまたはカリウムである。なお、Ｘ１～Ｘ４のうちの１種以上がアルカリ土類金属Ｍである場合には、その部分は－ＣＯＯＭと示されることとなる。
Ｘ１～Ｘ４が上記のものであると、本発明の殺菌・除菌用組成物を水に溶解すると、この化合物（Ａ）は、－ＣＯＯＸ１、－ＣＯＯＸ２、－ＣＯＯＸ３、－ＣＯＯＸ４が電離して、それぞれ－ＣＯＯ－となり、陰イオンを生成する。そして、この陰イオンの－ＣＯＯ－の部分が銅元素と錯形成可能となる。
好ましくは、Ｘ１～Ｘ４はいずれもナトリウムまたはカリウムである。なお、Ｘ１～Ｘ４のうちの１種以上がアルカリ土類金属Ｍである場合には、その部分は－ＣＯＯＭと示されることとなる。
【0019】
化合物（Ａ）の具体例としては、エチレンジアミン四酢酸二水素二ナトリウムなどが挙げられる。
【0020】
化合物（Ｂ）は、下記一般式（ＩＩ）で示される。
【0021】
【化4】
【0022】
化合物（Ｂ）において、Ｙはアルキル基、カルボキシル基、スルホ基、アミノ基、水酸基、または水素原子を表し、Ｘ５～Ｘ７は同一でも異なっていてもよく、それぞれ水素原子、アルカリ金属、アルカリ土類金属、カチオン性アンモニウム基からなる群より選ばれる１種を表す。
Ｘ５～Ｘ７が上記のものである場合、本発明の殺菌・除菌用組成物を洗濯時に水に溶解すると、この化合物（Ｂ）は、－ＣＯＯＸ５、－ＣＯＯＸ６、－ＣＯＯＸ７が電離して、それぞれ－ＣＯＯ－となり、陰イオンを生成する。そして、この陰イオンの－ＣＯＯ－の部分が銅元素と錯形成可能となる。
好ましくは、Ｘ５～Ｘ７はいずれもナトリウムまたはカリウムである。なお、Ｘ５～Ｘ７のうちの１種以上がアルカリ土類金属Ｍである場合には、その部分は－ＣＯＯＭと示されることとなる。また、ｎは０から５の整数を表し、好ましくは０から２である。
Ｘ５～Ｘ７が上記のものである場合、本発明の殺菌・除菌用組成物を洗濯時に水に溶解すると、この化合物（Ｂ）は、－ＣＯＯＸ５、－ＣＯＯＸ６、－ＣＯＯＸ７が電離して、それぞれ－ＣＯＯ－となり、陰イオンを生成する。そして、この陰イオンの－ＣＯＯ－の部分が銅元素と錯形成可能となる。
好ましくは、Ｘ５～Ｘ７はいずれもナトリウムまたはカリウムである。なお、Ｘ５～Ｘ７のうちの１種以上がアルカリ土類金属Ｍである場合には、その部分は－ＣＯＯＭと示されることとなる。また、ｎは０から５の整数を表し、好ましくは０から２である。
【0023】
化合物（Ｂ）の具体例としては、Ｎ－（２－ヒドロキシエチル）エチレンジアミン－Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－三酢酸三ナトリウムなどが挙げられる。
【0024】
なお、殺菌効果とは、表面に存在する菌数を減少させる効果を示し、抗菌効果とは、表面に付着した菌の増殖を抑制する効果を示す。
【0025】
銅イオンをエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）又は、Ｎ－（２－ヒドロキシエチル）エチレンジアミン－Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－三酢酸（ＨＥＤＴＡ）の少なくともいずれか一つで、銅キレート錯体とした塩は、銅が抗菌組成物中に６２５ｐｐｍ以上となるように配合すると好ましく、１０００ｐｐｍ以上であると更に好ましく、１２５０ｐｐｍ以上であると特に好ましい。
【0026】
該銅キレート錯体の作用場のｐＨ値は、０～６．０が好ましく、０～４．０であると更に好ましい。
【0027】
下記に錯体化の具体的方法の例について説明するが、特に制限されるものではない。
【実施例】
【0028】
実施例１
＜エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）銅キレート錯体水溶液作成＞
既に銅イオンとエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）でキレートされているキレストＣｕ（キレスト株式会社製）を用いて調整し作成した溶液を作成する。
水はイオン交換水を用いた。
銅濃度として、
（Ａ－１）２００ｐｐｍは、
キレストＣｕを０．１６ｇ取り、を注入して１００ｍｌとする溶液。
（Ｂ－１）５００ｐｐｍは、
キレストＣｕを０．４ｇ取り、水を注入して１００ｍｌとする溶液。
（Ｃ－１）６２５ｐｐｍは、
キレストＣｕを０．５ｇ取り、水を注入して１００ｍｌとする溶液。
（Ｄ－１）１０００ｐｐｍは、
キレストＣｕを０．８ｇ取り、水を注入して１００ｍｌとする溶液。
（Ｅ－１）１２５０ｐｐｍは、
キレストＣｕを１．０ｇ取り、水を注入して１００ｍｌとする溶液。
（Ｆ－１）１５００ｐｐｍは、
キレストＣｕを１．２ｇ取り、水を注入して１００ｍｌとする溶液。
をそれぞれ作成した。
＜エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）銅キレート錯体水溶液作成＞
既に銅イオンとエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）でキレートされているキレストＣｕ（キレスト株式会社製）を用いて調整し作成した溶液を作成する。
水はイオン交換水を用いた。
銅濃度として、
（Ａ－１）２００ｐｐｍは、
キレストＣｕを０．１６ｇ取り、を注入して１００ｍｌとする溶液。
（Ｂ－１）５００ｐｐｍは、
キレストＣｕを０．４ｇ取り、水を注入して１００ｍｌとする溶液。
（Ｃ－１）６２５ｐｐｍは、
キレストＣｕを０．５ｇ取り、水を注入して１００ｍｌとする溶液。
（Ｄ－１）１０００ｐｐｍは、
キレストＣｕを０．８ｇ取り、水を注入して１００ｍｌとする溶液。
（Ｅ－１）１２５０ｐｐｍは、
キレストＣｕを１．０ｇ取り、水を注入して１００ｍｌとする溶液。
（Ｆ－１）１５００ｐｐｍは、
キレストＣｕを１．２ｇ取り、水を注入して１００ｍｌとする溶液。
をそれぞれ作成した。
【0029】
＜ｐＨ３．０の希塩酸作成＞
ｐＨメーターで測定しながら、１００ｍＬのイオン交換水に１Ｎの塩酸をパスツールピペットで１滴ずつ入れていきｐＨ３．０の塩酸を作成する。
ｐＨメーターで測定しながら、１００ｍＬのイオン交換水に１Ｎの塩酸をパスツールピペットで１滴ずつ入れていきｐＨ３．０の塩酸を作成する。
【0030】
大腸菌は、酸に対して非常に耐性が高い、そのため酸性下の殺菌力評価に大腸菌を用いた。
【0031】
「殺菌力評価」
殺菌・抗菌用組成物が、銅濃度といて、比較例は０質量％、上記で調整した（Ａ－１）、（Ｂ－１）、（Ｃ－１）、（Ｄ－１）、（Ｅ－１）、（Ｆ－１）の溶液から試験液として８．９ｍＬをそれぞれ取り、ｐＨ３．０の希塩酸１ｍＬを各試験液に加え、さらに各試験液へ菌数が１００個／ｍＬとなるように調整された大腸菌母液（ＩＦＯ３９７２）０．１ｍＬを添加し、均一に攪拌した。１０分後に１ｍＬ採取し、９ｍＬのＳＣＤＬＰ培地（Ｓｏｙｂｅａｎ－Ｃａｓｅｉｎ Ｄｉｇｅｓｔ Ｂｒｏｔｈ ｗｉｔｈ Ｌｅｃｔｉｎ ＆ Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ ８０：和光純薬工業株式会社製）に加え、１０倍希釈液とした。得られた希釈液をさらに１０倍に希釈する操作を４回繰り返し、１０倍から１０００００倍の希釈を得た。これら各希釈液から１．０ｍＬをシャーレに採取し、ＳＣＤＬＰ寒天培地（Ｓｏｙｂｅａｎ－Ｃａｓｅｉｎ Ｄｉｇｅｓｔ Ａｇｅｒ ｗｉｔｈ Ｌｅｃｔｉｎ ＆ Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ ８０：和光純薬工業株式会社製）１５ｍＬを加えて均一化し、３７℃で２日間培養した後、コロニー数７０～３００の範囲にあるものを選んでコロニーをカウントして生存菌数を求め、初菌数の対数値と試験後の生存菌数の対数値との差を殺菌数とした。
殺菌・抗菌用組成物が、銅濃度といて、比較例は０質量％、上記で調整した（Ａ－１）、（Ｂ－１）、（Ｃ－１）、（Ｄ－１）、（Ｅ－１）、（Ｆ－１）の溶液から試験液として８．９ｍＬをそれぞれ取り、ｐＨ３．０の希塩酸１ｍＬを各試験液に加え、さらに各試験液へ菌数が１００個／ｍＬとなるように調整された大腸菌母液（ＩＦＯ３９７２）０．１ｍＬを添加し、均一に攪拌した。１０分後に１ｍＬ採取し、９ｍＬのＳＣＤＬＰ培地（Ｓｏｙｂｅａｎ－Ｃａｓｅｉｎ Ｄｉｇｅｓｔ Ｂｒｏｔｈ ｗｉｔｈ Ｌｅｃｔｉｎ ＆ Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ ８０：和光純薬工業株式会社製）に加え、１０倍希釈液とした。得られた希釈液をさらに１０倍に希釈する操作を４回繰り返し、１０倍から１０００００倍の希釈を得た。これら各希釈液から１．０ｍＬをシャーレに採取し、ＳＣＤＬＰ寒天培地（Ｓｏｙｂｅａｎ－Ｃａｓｅｉｎ Ｄｉｇｅｓｔ Ａｇｅｒ ｗｉｔｈ Ｌｅｃｔｉｎ ＆ Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ ８０：和光純薬工業株式会社製）１５ｍＬを加えて均一化し、３７℃で２日間培養した後、コロニー数７０～３００の範囲にあるものを選んでコロニーをカウントして生存菌数を求め、初菌数の対数値と試験後の生存菌数の対数値との差を殺菌数とした。
【0032】
（殺菌力評価基準）
比較例の場合と比較して、以下の４段階で殺菌力を評価した。
・大腸菌に対する抗菌効果基準
×：殺菌数１桁未満。
△：殺菌数２桁未満。
○：殺菌数２桁以上だが、全滅には至らない。
◎：残存菌数０（全滅）。
結果を表１に示す。
比較例の場合と比較して、以下の４段階で殺菌力を評価した。
・大腸菌に対する抗菌効果基準
×：殺菌数１桁未満。
△：殺菌数２桁未満。
○：殺菌数２桁以上だが、全滅には至らない。
◎：残存菌数０（全滅）。
結果を表１に示す。
【0033】
【表1】
【0034】
実施例１－２
歯周病患者１０人に対して１２５０ｐｐｍのエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）銅キレート錯体水溶液にて、朝夕２回、洗口して２週間後の経過を診た。
歯周病患者１０人に対して１２５０ｐｐｍのエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）銅キレート錯体水溶液にて、朝夕２回、洗口して２週間後の経過を診た。
【0035】
結果、すべての患者で改善がみられた。
効果（改善） 判定
◎：大いにある → ８名
○：あり → １名
△：有無判定困難 → １名
×：なし → ０名
また副反応は０名でした。
効果（改善） 判定
◎：大いにある → ８名
○：あり → １名
△：有無判定困難 → １名
×：なし → ０名
また副反応は０名でした。
【0036】
実施例２
＜Ｎ－（２－ヒドロキシエチル）エチレンジアミン－Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－三酢酸（ＨＥＤＴＡ）銅キレート錯体水溶液作成＞
Ｎ－（２－ヒドロキシエチル）エチレンジアミン－Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－三酢酸三ナトリウム二水和物（東京化成工業株式会社製）８．１６ｇをイオン交換水にて１Ｌに溶解する。該溶液を有限会社エルアンドアール製の銅イオン水生成器「銅しましょ」にて７時間通電して、２４時間放置後、ろ過し、１５００ｐｐｍの銅－ＨＥＤＴＡキレート水溶液を１Ｌ作成。
＜Ｎ－（２－ヒドロキシエチル）エチレンジアミン－Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－三酢酸（ＨＥＤＴＡ）銅キレート錯体水溶液作成＞
Ｎ－（２－ヒドロキシエチル）エチレンジアミン－Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－三酢酸三ナトリウム二水和物（東京化成工業株式会社製）８．１６ｇをイオン交換水にて１Ｌに溶解する。該溶液を有限会社エルアンドアール製の銅イオン水生成器「銅しましょ」にて７時間通電して、２４時間放置後、ろ過し、１５００ｐｐｍの銅－ＨＥＤＴＡキレート水溶液を１Ｌ作成。
【0037】
上記１５００ｐｐｍの銅－ＨＥＤＴＡキレート水溶液を用いて下記の濃度に調整し作成する。
銅濃度として、
（Ａ－２）３００ｐｐｍは、
該銅－ＨＥＤＴＡキレート水溶液を５倍に希釈し１００ｍｌとする溶液。
（Ｂ－２）５００ｐｐｍは、
該銅－ＨＥＤＴＡキレート水溶液を３倍に希釈し１００ｍｌとする溶液。
（Ｃ－２）７５０ｐｐｍは、
該銅－ＨＥＤＴＡキレート水溶液を２倍に希釈し１００ｍｌとする溶液。
（Ｄ－２）１０００ｐｐｍは、
該銅－ＨＥＤＴＡキレート水溶液を１．５倍に希釈し１００ｍｌとする溶液。
（Ｅ－２）１２５０ｐｐｍは、
該銅－ＨＥＤＴＡキレート水溶液を１．２倍に希釈し１００ｍｌとする溶液。
（Ｆ－２）１５００ｐｐｍは、
該銅－ＨＥＤＴＡキレート水溶液を１００ｍｌとする溶液。
をそれぞれ作成した。
銅濃度として、
（Ａ－２）３００ｐｐｍは、
該銅－ＨＥＤＴＡキレート水溶液を５倍に希釈し１００ｍｌとする溶液。
（Ｂ－２）５００ｐｐｍは、
該銅－ＨＥＤＴＡキレート水溶液を３倍に希釈し１００ｍｌとする溶液。
（Ｃ－２）７５０ｐｐｍは、
該銅－ＨＥＤＴＡキレート水溶液を２倍に希釈し１００ｍｌとする溶液。
（Ｄ－２）１０００ｐｐｍは、
該銅－ＨＥＤＴＡキレート水溶液を１．５倍に希釈し１００ｍｌとする溶液。
（Ｅ－２）１２５０ｐｐｍは、
該銅－ＨＥＤＴＡキレート水溶液を１．２倍に希釈し１００ｍｌとする溶液。
（Ｆ－２）１５００ｐｐｍは、
該銅－ＨＥＤＴＡキレート水溶液を１００ｍｌとする溶液。
をそれぞれ作成した。
【0038】
＜ｐＨ３．０の希塩酸作成＞
ｐＨメーターで測定しながら、１００ｍＬのイオン交換水に１Ｎの塩酸をパスツールピペットで１滴ずつ入れていきｐＨ３．０の塩酸を作成する。
ｐＨメーターで測定しながら、１００ｍＬのイオン交換水に１Ｎの塩酸をパスツールピペットで１滴ずつ入れていきｐＨ３．０の塩酸を作成する。
【0039】
大腸菌は、酸に対して非常に耐性が高い、そのため酸性下の殺菌力評価に大腸菌を用いた。
【0040】
「殺菌力評価」
殺菌・抗菌用組成物が、銅濃度といて、比較例は０質量％、上記で調整した（Ａ－２）
、（Ｂ－２）、（Ｃ－２）、（Ｄ－２）、（Ｅ－２）、（Ｆ－２）の溶液から試験液として８．９ｍＬをそれぞれ取り、ｐＨ３．０の希塩酸１ｍＬを各試験液に加え、さらに各試験液へ菌数が１００個／ｍＬとなるように調整された大腸菌母液（ＩＦＯ３９７２）０．１ｍＬを添加し、均一に攪拌した。１０分後に１ｍＬ採取し、９ｍＬのＳＣＤＬＰ培地（Ｓｏｙｂｅａｎ－Ｃａｓｅｉｎ Ｄｉｇｅｓｔ Ｂｒｏｔｈ ｗｉｔｈ Ｌｅｃｔｉｎ ＆ Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ ８０：和光純薬工業株式会社製）に加え、１０倍希釈液とした。得られた希釈液をさらに１０倍に希釈する操作を４回繰り返し、１０倍から１０００００倍の希釈を得た。これら各希釈液から１．０ｍＬをシャーレに採取し、ＳＣＤＬＰ寒天培地（Ｓｏｙｂｅａｎ－Ｃａｓｅｉｎ Ｄｉｇｅｓｔ Ａｇｅｒ ｗｉｔｈ Ｌｅｃｔｉｎ ＆ Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ ８０：和光純薬工業株式会社製）１５ｍＬを加えて均一化し、３７℃で２日間培養した後、コロニー数７０～３００の範囲にあるものを選んでコロニーをカウントして生存菌数を求め、初菌数の対数値と試験後の生存菌数の対数値との差を殺菌数とした。
殺菌・抗菌用組成物が、銅濃度といて、比較例は０質量％、上記で調整した（Ａ－２）
、（Ｂ－２）、（Ｃ－２）、（Ｄ－２）、（Ｅ－２）、（Ｆ－２）の溶液から試験液として８．９ｍＬをそれぞれ取り、ｐＨ３．０の希塩酸１ｍＬを各試験液に加え、さらに各試験液へ菌数が１００個／ｍＬとなるように調整された大腸菌母液（ＩＦＯ３９７２）０．１ｍＬを添加し、均一に攪拌した。１０分後に１ｍＬ採取し、９ｍＬのＳＣＤＬＰ培地（Ｓｏｙｂｅａｎ－Ｃａｓｅｉｎ Ｄｉｇｅｓｔ Ｂｒｏｔｈ ｗｉｔｈ Ｌｅｃｔｉｎ ＆ Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ ８０：和光純薬工業株式会社製）に加え、１０倍希釈液とした。得られた希釈液をさらに１０倍に希釈する操作を４回繰り返し、１０倍から１０００００倍の希釈を得た。これら各希釈液から１．０ｍＬをシャーレに採取し、ＳＣＤＬＰ寒天培地（Ｓｏｙｂｅａｎ－Ｃａｓｅｉｎ Ｄｉｇｅｓｔ Ａｇｅｒ ｗｉｔｈ Ｌｅｃｔｉｎ ＆ Ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ ８０：和光純薬工業株式会社製）１５ｍＬを加えて均一化し、３７℃で２日間培養した後、コロニー数７０～３００の範囲にあるものを選んでコロニーをカウントして生存菌数を求め、初菌数の対数値と試験後の生存菌数の対数値との差を殺菌数とした。
【0041】
（殺菌力評価基準）
比較例の場合と比較して、以下の４段階で殺菌力を評価した。
・大腸菌に対する抗菌効果基準
×：殺菌数１桁未満。
△：殺菌数２桁未満。
○：殺菌数２桁以上だが、全滅には至らない。
◎：残存菌数０（全滅）。
結果を表２に示す。
比較例の場合と比較して、以下の４段階で殺菌力を評価した。
・大腸菌に対する抗菌効果基準
×：殺菌数１桁未満。
△：殺菌数２桁未満。
○：殺菌数２桁以上だが、全滅には至らない。
◎：残存菌数０（全滅）。
結果を表２に示す。
【0042】
【表2】
【0043】
実施例２－２
歯周病患者１０人に対して１２５０ｐｐｍのＮ－（２－ヒドロキシエチル）エチレンジアミン－Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－三酢酸（ＨＥＤＴＡ）銅キレート錯体水溶液にて、朝夕２回、洗口して２週間後の経過を診た。
歯周病患者１０人に対して１２５０ｐｐｍのＮ－（２－ヒドロキシエチル）エチレンジアミン－Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－三酢酸（ＨＥＤＴＡ）銅キレート錯体水溶液にて、朝夕２回、洗口して２週間後の経過を診た。
【0044】
結果、すべての患者で改善がみられた。
効果（改善） 判定
◎：大いにある → ６名
○：あり → ２名
△：有無判定困難 → ２名
×：なし → ０名
また副反応は０名でした。
効果（改善） 判定
◎：大いにある → ６名
○：あり → ２名
△：有無判定困難 → ２名
×：なし → ０名
また副反応は０名でした。
【産業上の利用可能性】
【0045】
本発明によれば、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）銅キレート錯体、Ｎ－（２－ヒドロキシエチル）エチレンジアミン－Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－三酢酸（ＨＥＤＴＡ）銅キレート錯体が、人体に対して抗生物質を用いることなく殺菌・抗菌することができ、そのため耐性菌を増やすことがなく、副作用が少なくない殺菌・抗菌組成物を提供することができる。