特許 7218306 神経変性疾患を治療するための組成物

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2023-01-27

(45)【発行日】2023-02-06

(54)【発明の名称】神経変性疾患を治療するための組成物

(51)【国際特許分類】

   C07D 205/04 20060101AFI20230130BHJP

   A61K 31/397 20060101ALI20230130BHJP

   C07D 405/04 20060101ALI20230130BHJP

   C07D 211/22 20060101ALI20230130BHJP

   C07D 211/46 20060101ALI20230130BHJP

   C07D 211/48 20060101ALI20230130BHJP

   C07D 401/04 20060101ALI20230130BHJP

   C07D 211/20 20060101ALI20230130BHJP

   C07D 491/107 20060101ALI20230130BHJP

   C07D 309/14 20060101ALI20230130BHJP

   C07D 211/26 20060101ALI20230130BHJP

   C07D 295/033 20060101ALI20230130BHJP

   C07D 295/073 20060101ALI20230130BHJP

   C07D 211/10 20060101ALI20230130BHJP

   C07D 211/38 20060101ALI20230130BHJP

   C07D 295/205 20060101ALI20230130BHJP

   C07D 211/18 20060101ALI20230130BHJP

   C07D 207/12 20060101ALI20230130BHJP

   C07D 295/096 20060101ALI20230130BHJP

   C07D 211/58 20060101ALI20230130BHJP

   C07D 295/192 20060101ALI20230130BHJP

   C07D 295/26 20060101ALI20230130BHJP

   C07D 405/12 20060101ALI20230130BHJP

   C07D 241/08 20060101ALI20230130BHJP

   C07D 211/52 20060101ALI20230130BHJP

   C07D 207/08 20060101ALI20230130BHJP

   C07D 207/16 20060101ALI20230130BHJP

   C07D 207/06 20060101ALI20230130BHJP

   A61K 31/453 20060101ALI20230130BHJP

   A61K 31/445 20060101ALI20230130BHJP

   A61K 31/4545 20060101ALI20230130BHJP

   A61K 31/438 20060101ALI20230130BHJP

   A61K 31/496 20060101ALI20230130BHJP

   A61K 31/495 20060101ALI20230130BHJP

   A61K 31/5377 20060101ALI20230130BHJP

   A61K 31/5375 20060101ALI20230130BHJP

   A61K 31/40 20060101ALI20230130BHJP

   A61K 31/4453 20060101ALI20230130BHJP

   A61K 31/454 20060101ALI20230130BHJP

   A61K 31/4525 20060101ALI20230130BHJP

   A61K 31/401 20060101ALI20230130BHJP

   A61P 25/28 20060101ALI20230130BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20230130BHJP

【ＦＩ】

C07D205/04 CSP

A61K31/397

C07D405/04

C07D211/22

C07D211/46

C07D211/48

C07D401/04

C07D211/20

C07D491/107

C07D309/14

C07D211/26

C07D295/033

C07D295/073

C07D211/10

C07D211/38

C07D295/205

C07D211/18

C07D207/12

C07D295/096

C07D211/58

C07D295/192

C07D295/26

C07D405/12

C07D241/08

C07D211/52

C07D207/08

C07D207/16

C07D207/06

A61K31/453

A61K31/445

A61K31/4545

A61K31/438

A61K31/496

A61K31/495

A61K31/5377

A61K31/5375

A61K31/40

A61K31/4453

A61K31/454

A61K31/4525

A61K31/401

A61P25/28

A61P43/00 111

【請求項の数】 16

(21)【出願番号】P 2019563101

(86)(22)【出願日】2018-05-15

(65)【公表番号】

(43)【公表日】2020-07-02

(86)【国際出願番号】 US2018032726

(87)【国際公開番号】W WO2018213281

(87)【国際公開日】2018-11-22

【審査請求日】2021-05-07

(31)【優先権主張番号】62/506,226

(32)【優先日】2017-05-15

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(73)【特許権者】

【識別番号】511245064

【氏名又は名称】コグニション セラピューティクス インク．

(74)【代理人】

【識別番号】100104411

【弁理士】

【氏名又は名称】矢口 太郎

(72)【発明者】

【氏名】リシュトン、ギルバート エム．

(72)【発明者】

【氏名】ルック、ゲイリー シー．

(72)【発明者】

【氏名】カタラノ、スーザン エム．

【審査官】伊佐地 公美

(56)【参考文献】

【文献】欧州特許出願公開第００００２２２２（ＥＰ，Ａ１）

【文献】特開平０９－１８３７８０（ＪＰ，Ａ）

【文献】特開昭５９－００５１５８（ＪＰ，Ａ）

【文献】特開平０２－２１５７８９（ＪＰ，Ａ）

【文献】特開平０１－３０５０８５（ＪＰ，Ａ）

【文献】特開２００２－３５６４７１（ＪＰ，Ａ）

【文献】特表２００２－５３３４４０（ＪＰ，Ａ）

【文献】特開平０６－３２１７８１（ＪＰ，Ａ）

【文献】特開平０７－１４５１４７（ＪＰ，Ａ）

【文献】特表２０１４－５２４４８２（ＪＰ，Ａ）

【文献】特表２００７－５０２８２８（ＪＰ，Ａ）

【文献】Armyanskii Khimicheskii Zhurnal，1971年，Vol. 24，pp. 798-801

【文献】DATABASE REGISTRY [ONLINE] Retrieved from STN，2016年09月02日，検索日:10 MAR 2022, RN Nos.; 1984991-92-5, 1543217-46-4, 1541594-68-6, 1541471-02-6, 1536268-88-8, 1531279-45-4, 1528523-10-5, 1526633-14-6, 1522619-67-5, 1521882-47-2, 1521585-20-5, 1521381-69-0, 1517697-16-3, 1517114-80-5, 1514206-73-5, 1509394-87-9, 1509245-68-4, 1508644-16-3, 1507257-93-3, 1506535-99-4, 1502724-29-9, 1500563-88-1.

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

Ｃ０７Ｄ

Ａ６１Ｋ

Ａ６１Ｐ

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩であって、

【化1】

式中、
Ｒ^ａ、Ｒ^ｂ、Ｒ^ｃ、Ｒ^ｄ、およびＲ^ｅのそれぞれは、Ｈ、ヒドロキシル、ハロ、アルキル、アルコキシ、ＣＦ_３、ＳＯ_２ＣＨ_３、およびモルホリノからなる群から独立して選択され、
Ｒ^１は、水素、アルキル、フェニル、または－ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ_３）_２からなる群から選択され、及び
Ｒ^２は、
（ａ）

【化2】

からなる群から選択される、
（ｂ）

【化3】

であって、
式中、
Ｒ ^８ は、水素、ヒドロキシル、スルホニル、任意に置換されたＣ _１ －Ｃ _１０ アルキル、任意に置換されたＣ _５ －Ｃ _１０ アリール、任意に置換されたＣ _５ －Ｃ _１０ ヘテロアリール、任意に置換されたＣ _３ －Ｃ _１０ シクロアルキル、及び任意に置換されたＣ _３ －Ｃ _１０ ヘテロシクロアルキルである、
（ｃ）

【化4】

からなる群から選択される、または、
（ｄ）

【化5】

からなる群から選択され、
式中、
Ｒ ^９ は、水素、ヒドロキシル、スルホニル、任意に置換されたＣ _１ －Ｃ _１０ アルキル、任意に置換されたＣ _５ －Ｃ _１０ アリール、任意に置換されたＣ _５ －Ｃ _１０ ヘテロアリール、任意に置換されたＣ _３ －Ｃ _１０ シクロアルキル、および任意に置換されたＣ _３ －Ｃ _１０ ヘテロシクロアルキルからなる群から独立して選択される、
ものである、任意に置換された環状アミノ基である、化合物。

【請求項2】

【化6】

またはその薬学的に許容される塩からなる群から選択される、化合物。

【請求項3】

請求項１記載の化合物において、

【化7】

またはその薬学的に許容される塩から成る群から選択される、化合物。

【請求項4】

請求項１、２、または３のいずれか１項記載の化合物またはその薬学的に許容される塩、及び薬学的に許容される担体または希釈剤を含む、医薬組成物。

【請求項5】

請求項４記載の医薬組成物において、前記化合物は、

【化8】

またはその薬学的に許容される塩からなる群から選択される、化合物。

【請求項6】

それを必要とする対象に、請求項４または５記載の医薬組成物の治療有効量を投与することによってアルツハイマー病を治療するための組成物。

【請求項7】

請求項４または５記載の医薬組成物の治療的有効量を投与することによって、認知機能低下を示す、または認知機能低下を示すリスクのある被験者の認知機能低下を抑制するための組成物。

【請求項8】

それを必要とする対象に、請求項４または５記載の医薬組成物の治療有効量を投与することによって、神経細胞に対するアミロイドベータ効果を阻害するための組成物。

【請求項9】

それを必要とする対象に、請求項４または５記載の医薬組成物の治療有効量を投与することによって、アルツハイマー病の軽度認知障害を治療するための組成物。

【請求項10】

アルツハイマー病の治療のための薬剤の製造における請求項１、２、または３のいずれか１項に記載の化合物の使用。

【請求項11】

請求項１０記載の使用において、前記化合物は、

【化9】

またはその薬学的に許容される塩からなる群から選択される、使用。

【請求項12】

アルツハイマー病の治療に使用するための、請求項１、２、または３のいずれか１項に記載の化合物。

【請求項13】

請求項１２記載の化合物において、

【化10】

またはその薬学的に許容される塩からなる群から選択される、化合物。

【請求項14】

医学療法で使用するための請求項１、２、または３のいずれか１項に記載の化合物。

【請求項15】

請求項１４記載の化合物であって、

【化11】

またはその薬学的に許容される塩からなる群から選択される、化合物。

【請求項16】

請求項１、２、または３のいずれか１項に記載の化合物またはその医薬上許容される塩の治療有効量と、医薬上許容される担体または希釈剤とを含む、医薬組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本出願は、２０１７年５月１５日出願された「神経変性疾患を治療するための組成物」という名称の米国仮特許出願第６２／５０６，２２６号の優先権を主張し、その開示はその全体が参照により組み込まれる。

【背景技術】

【0002】

本発明は、米国国立衛生研究所の国立老化研究所からの助成金、助成金番号Ｕ０１ＡＧ０４７０５９の下で、米国政府からの支援を受けて行われた。米国政府は本発明に一定の権利を有する。
この出願の発明に関連する先行技術文献情報としては、以下のものがある（国際出願日以降国際段階で引用された文献及び他国に国内移行した際に引用された文献を含む）。
（先行技術文献）
（特許文献）
（特許文献１） 米国特許出願公開第２００８／０１９３５７４号明細書
（特許文献２） 米国特許出願公開第２０１１／００９２５５４号明細書
（特許文献３） 国際公開第２０１５／１１１６９２３号

【発明の概要】

【課題を解決するための手段】

【0003】

様々な実施形態は、新規化合物、そのような化合物を含む医薬組成物、および神経細胞のシナプス損失を阻害または回復し、神経細胞の膜輸送変化を調節し、認知低下および神経変性疾患および障害を治療する方法を提供する。

【0004】

本開示のいくつかの実施形態は、式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩を対象とする：

【化1】

式中、
Ｒ^ａ、Ｒ^ｂ、Ｒ^ｃ、Ｒ^ｄ、およびＲ^ｅのそれぞれは、Ｈ、ヒドロキシル、ハロ、アルキル、アルコキシ、ＣＦ_３、ＳＯ_２ＣＨ_３、およびモルホリノからなる群から独立して選択され、
Ｒ^１は、水素、アルキル、フェニル、または－ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ_３）_２からなる群から選択され、および
Ｒ^２は、任意に置換された環状アミノ基である。

【0005】

本開示のいくつかの実施形態は、

【化2】

からなる群から選択される化合物に関する。

【0006】

本明細書の実施形態は、本明細書に記載の任意の実施形態による化合物、またはその薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される担体または希釈剤を含む医薬組成物を記載する。

【0007】

いくつかの実施形態は、本明細書に記載の任意の実施形態による治療有効量の化合物または医薬組成物を対象に投与することを含む、アルツハイマー病（ＡＤ）を治療する方法を記載する。

【0008】

いくつかの実施形態は、本明細書に記載の任意の実施形態による治療有効量の化合物または医薬組成物を投与することを含む、認知低下を示す、または示すリスクのある被験者の認知低下を抑制する方法を説明する。

【0009】

いくつかの実施形態は、本明細書に記載の任意の実施形態による医薬組成物の治療有効量を、それを必要とする対象に投与することを含む、神経細胞に対するアミロイドベータ効果を阻害する方法を記載する。

【0010】

いくつかの実施形態は、本明細書に記載の任意の実施形態による治療有効量の医薬組成物を対象に投与することを含む、それを必要とする対象のアルツハイマー病の軽度認知障害を治療する方法を説明する。

【0011】

いくつかの実施形態は、アルツハイマー病の治療のための薬剤の製造における、本明細書に記載の任意の実施形態による化合物の使用を説明する。

【0012】

いくつかの実施形態は、アルツハイマー病の治療に使用するための、本明細書に記載の任意の実施形態による化合物を記載する。

【0013】

いくつかの実施形態は、医学療法で使用するための、本明細書に記載の任意の実施形態による化合物を記載する。

【0014】

いくつかの実施形態は、治療有効量の本明細書に記載の任意の実施形態による化合物、その薬学的に許容される塩、および薬学的に許容される担体または希釈剤を含む医薬組成物を記載する。

【0015】

本発明は、記載される特定のプロセス、組成物、または方法論に限定されず、これらは変化する可能性があるように記載される。説明で使用される用語は、特定のバージョンまたは実施形態を説明することのみを目的としており、本発明の範囲を限定することを意図するものではない。別に定義されない限り、本明細書で使用されるすべての技術用語および科学用語は、当業者によって一般に理解されるのと同じ意味を有する。本明細書で言及されるすべての出版物は、その全体が参照により組み込まれる。本明細書のいかなるものも、本発明が先行発明のためにそのような開示に先行する権利を与えられないことの承認として解釈されるべきではない。

【0016】

定義
値の範囲が提供される場合、その範囲の上限と下限の間の各介在値と、その記載された範囲内の他の記載または介在値は本開示に含まれることが意図される。たとえば、１μｍから８μｍの範囲が記載されている場合、２μｍ、３μｍ、４μｍ、５μｍ、６μｍ、および７μｍも明示的に開示されることが意図される。

【0017】

本明細書の様々な場所で、本開示の化合物の置換基は、グループまたは範囲で開示される。本開示の実施形態は、そのようなグループおよび範囲のメンバーのありとあらゆる個々のサブコンビネーションを含むことが特に意図される。例えば、「Ｃ_１－６アルキル」という用語は、個別に開示することを特に意図しており、例えば、ｍｅｔｈｙｌ （Ｃ_１ ａｌｋｙｌ）、ｅｔｈｙｌ（Ｃ_２ ａｌｋｙｌ）、ｐｒｏｐｙｌ（Ｃ_３ ａｌｋｙｌ），ｂｕｔｙｌ（Ｃ_４ ａｌｋｙｌ）、ｐｅｎｔｙｌ（Ｃ_５ ａｌｋｙｌ）、及び ｈｅｘｙｌ（Ｃ_６ ａｌｋｙｌ）でありまた、ｅ．ｇ．Ｃ_１－Ｃ_２ ａｌｋｙｌ、Ｃ_１－Ｃ_３ ａｌｋｙｌ、Ｃ_１－Ｃ_４ ａｌｋｙｌ、Ｃ_２－Ｃ_３ ａｌｋｙｌ、Ｃ_２－Ｃ_４ ａｌｋｙｌ、Ｃ_３－Ｃ_６ ａｌｋｙｌ、Ｃ_４－Ｃ_５ ａｌｋｙｌ、およびＣ_５－Ｃ_６ ａｌｋｙｌである。

【0018】

本明細書で使用される冠詞「ａ」および「ａｎ」は、特に明記しない限り、「１つ以上」または「少なくとも１つ」を意味する。すなわち、不定冠詞「ａ」または「ａｎ」による本発明の任意の要素への言及は、複数の要素が存在する可能性を排除しない。

【0019】

本明細書で使用する場合、「約」という用語は、使用されている数字の数値のプラスまたはマイナス１０％を意味する。したがって、約５０ｍＬは、４５ｍＬ～５５ｍＬの範囲を意味する。

【0020】

「Ａベータ種」または「Ａβ」には、Ａベータモノマー、Ａベータオリゴマー、またはＡベータペプチド（モノマー、ダイマーまたはポリマー形態）と他の可溶性ペプチドまたはタンパク質との複合体、アミロイド前駆体タンパク質の加工製品を含む他の可溶性Ａベータアセンブリー等の可溶性アミロイドペプチド含有成分を含む組成物が含まれる。可溶性Ａβオリゴマーは神経毒性であることが知られる。Ａβ１－４２ダイマーでさえ、マウス海馬スライスのシナプス可塑性を損なうことが知られる。当技術分野で知られる１つの理論では、天然のＡβ１－４２モノマーは神経保護と考えられ、Ａβモノマーの可溶性Ａβオリゴマーへの自己会合は神経毒性に必要である。ただし、特定のＡβ変異モノマー（北極変異（Ｅ２２Ｇ））は、家族性アルツハイマー病に関連すると報告される。

【0021】

具体的に示されない限り、用語「活性成分」は、本明細書に記載される任意の実施形態による化合物を指すと理解されるべきである。

【0022】

「投与」または「投与」などは、本開示の化合物と併用する場合、本明細書に記載の実施形態のいずれかによる化合物または医薬組成物を治療を必要とする対象に提供することを指す。好ましくは、対象は哺乳動物、より好ましくはヒトである。本発明は、本発明の医薬組成物を単独で、または別の治療薬と組み合わせて投与することを含む。本発明の医薬組成物が別の治療薬と組み合わせて投与される場合、本発明の医薬組成物および他の治療薬は、同時にまたは異なる時間に投与することが可能である。

【0023】

「アゴニスト」という用語は、その存在により、受容体の天然リガンドの存在から生じる生物学的活性と同じである受容体の生物学的活性をもたらす化合物を指す。

【0024】

本明細書で使用される「アルカノイル」または「アルキルカルボニル」という用語は、カルボニルラジカルに結合したアルキル基を指すことを意味する。アルカノイルの例は

【化3】

である。

【0025】

本明細書で使用する「アルキル」という用語は、直鎖または分岐鎖である飽和炭化水素基を指すことを意味する。アルキル基の例には、メチル（Ｍｅ）、エチル（Ｅｔ）、プロピル（ｎ－プロピルおよびイソプロピルなど）、ブチル（ｎ－ブチル、イソブチル、ｔ－ブチルなど）、ペンチル（ｎ－ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル）などであるが、これらに限定されない。アルキル基は、１～約２０、２～約２０、１～約１０、１～約８、１～約６、１～約４、または１～約３個の炭素原子を含み得る。「Ｃ_１－Ｃ_１０アルキル」または「Ｃ_１－１０アルキル」は、Ｃ_１、Ｃ_２、Ｃ_３、Ｃ_４、Ｃ_５、Ｃ_６、Ｃ_７、Ｃ_８、Ｃ_９、およびＣ_１０アルキル基を含むことを意図する。さらに、例えば、「Ｃ_１－Ｃ_６アルキル」または「Ｃ_１－６アルキル」は、１から６個の炭素原子を有するアルキルを意味する。「アルキレン」という用語は、二価のアルキル結合基を指す。アルキレンの例はメチレン（ＣＨ_２）である。

【0026】

本明細書で使用される「アルケニル」は、鎖に沿った任意の安定点で生じ得る１つ以上、好ましくは１から３の炭素－炭素二重結合を有する直鎖または分岐構造の炭化水素鎖を含むことを意図する。例えば、「Ｃ_２－Ｃ_６アルケニル」または「Ｃ_２－６アルケニル」（またはアルケニレン）は、Ｃ_２、Ｃ_３、Ｃ_４、Ｃ_５、およびＣ_６アルケニル基を含むことを意図する。アルケニルの例には、エテニル、１－プロペニル、２－プロペニル、２－ブテニル、３－ブテニル、２－ペンテニル、３－ペンテニル、４－ペンテニル、２－ヘキセニル、３－ヘキセニル、４－ヘキセニル、５－ヘキセニル、２－メチル－２－プロペニル、および４－メチル－３－ペンテニルが含まれるが、これらに限定されない。

【0027】

「アルコキシ」または「アルキルオキシ」という用語は、－Ｏ－アルキル基を指す。「Ｃ_１－Ｃ_６アルコキシ」または「Ｃ_１－６アルコキシ」（またはアルキルオキシ）は、Ｃ_１、Ｃ_２、Ｃ_３、Ｃ_４、Ｃ_５、およびＣ_６のアルコキシ基を含むことを意図する。アルコキシ基の例には、これらに限定されないが、メトキシ、エトキシ、プロポキシ（例えば、ｎ－プロポキシおよびイソプロポキシ）、およびｔ－ブトキシが含まれる。

【0028】

「アルコキシアルコキシ」という用語は、アルコキシ基に結合したアルコキシ基を指す。アルコキシ基の例には、－Ｏ－（ＣＨ_２）_２－ＯＣＨ_３が含まれる。

【0029】

本明細書で使用される「アルキニル」は、鎖に沿った任意の安定点で生じ得る１つ以上、好ましくは１から３の炭素－炭素三重結合を有する直鎖または分岐構造の炭化水素鎖を含むものとする。例えば、「Ｃ_２－Ｃ_６アルキニル」には、エチニル、プロピニル、ブチニル、ペンチニル、ヘキシニルなどのＣ_２、Ｃ_３、Ｃ_４、Ｃ_５、およびＣ_６アルキニル基が含まれる。

【0030】

本明細書において、「アミロイドベータ効果」、例えば「非致死性アミロイドベータ効果」または「Ａベータオリゴマー効果」とは、Ａベータ種と接触する細胞に対する効果、特に非致死効果を指す。例えば、ニューロン細胞が可溶性アミロイドベータ（「Ａベータ」）オリゴマーと接触すると、オリゴマーはインビトロでニューロン細胞のサブセット上のシナプスのサブセットに結合することが発見された。この結合は、例えばｉｎ ｖｉｔｒｏでのＡベータオリゴマーの結合を測定するアッセイで定量化することができる。別の文書化されたＡベータ種の効果はシナプス数の減少であり、これはヒト海馬で約１８％と報告されており（Ｓｃｈｅｆｆ ｅｔ ａｌ、２００７）、（例えば、シナプス数を測定するアッセイにおいて）定量化することができる。別の例として、神経細胞がアミロイドベータ（「Ａベータ」）オリゴマーと接触すると、膜輸送が調節され、膜輸送の変化が起こることが発見された。この異常は、これに限定されないが、ＭＴＴアッセイなどの多くのアッセイで視覚化できる。例えば、黄色のテトラゾリウム塩は細胞にエンドサイトーシスされ、塩はエンドソーム経路の小胞内にある酵素によって不溶性の紫色のホルマザンに還元される。紫色のホルマザンのレベルは、培養中の活発に代謝する細胞の数を反映しており、ホルマザンの量の減少は、培養中の細胞死または代謝毒性の尺度として採用される。黄色のテトラゾリウム塩と接触した細胞を顕微鏡で観察すると、細胞を埋める細胞内小胞に紫色のホルマザンが最初に見える。時間が経つにつれて、ベシクルはエキソサイトーシスされ、不溶性ホルマザンが水性媒体環境にさらされると、ホルマザンは細胞膜の外表面に針状結晶として沈殿する。Ａベータ種のさらに他の効果には、新しい記憶および記憶喪失を形成する能力の低下などの認識低下が含まれ、これはｉｎ ｖｉｖｏで動物モデルを使用するアッセイで測定できる。いくつかの実施形態において、Ａベータ効果は、例えば、膜輸送アッセイ、シナプス喪失アッセイなどのインビトロアッセイ、またはＡベータオリゴマー媒介シグマ－２受容体活性化で見られるような、カスパーゼ－３のＡベータオリゴマー誘発シナプス機能不全、またはＡベータ誘発神経機能障害、Ａベータ媒介長期増強（ＬＴＰ）、または行動アッセイにおける認知低下、またはそれを必要とする患者の減少から選択される。

【0031】

いくつかの態様において、試験化合物は、神経細胞に対する可溶性Ａベータオリゴマー種に関連する効果をネガティブコントロールと比較して、約１０％以上、好ましくは１５％、好ましくは２０％以上阻害できる場合、認知低下またはそれに関連する疾患の治療に有効であると言われる。いくつかの実施形態では、陽性対照と比較して、アミロイド前駆体タンパク質媒介効果の処理産物を約１０％超、好ましくは１５％超、好ましくは２０％超阻害できる場合、試験薬剤は有効であると言われる。本明細書は、ニューロン代謝の異常やシナプス数の減少など、Ａベータ種の非致死作用の抑制に焦点を当てているが、これらは認知機能と相関することが示されており、さらに時間の経過とともに、減少をもたらすと予想される（未治療の被験者と比較して）アミロイド病変の下流で測定可能な症状、特に１）フルオロベタピル、ＰｉｔｔＢまたはその他の造影剤などのアミロイド造影剤によって測定される原線維またはプラークの蓄積、２）で検出されるグルコース代謝低下によって測定されるシナプス損失または細胞死ＦＤＧ－ＰＥＴ、３）脳脊髄液、脳生検、またはＥＬＩＳＡによって患者から得られた血漿でのイメージングまたはタンパク質／代謝産物の検出により検出可能な脳または身体のタンパク質発現または代謝産物量の変化（レベルおよび／またはＡベータ４２、リン酸化タウ、ＥＬＩＳＡで測定した総タウ、またはＥで検出可能なタンパク質発現変化のパターンＬＩＳＡパネル）、４）ＭＲＩで検出可能な血管浮腫または微小出血の存在により測定される脳血管異常、および画像技術により検出可能なその他の症状、および５）ＡＤＡＳ－Ｃｏｇ、ＭＭＳＥなどの投与された認知検査により測定される認知喪失、ＣＢＩＣまたはその他の認知テスト機器である。

【0032】

本明細書で使用される「動物」という用語には、ヒト、ならびに野生動物、実験動物、家畜動物、農場動物およびペットなどの非ヒト脊椎動物が含まれるが、これらに限定されない。

【0033】

「拮抗薬」という用語は、化合物、抗体、またはフラグメント、受容体の生物学的活性の大きさが減少するの存在のような実体を指す。特定の実施形態において、アンタゴニストの存在は、受容体の生物学的活性の完全な阻害をもたらす。本明細書で使用される場合、用語「シグマ－２受容体アンタゴニスト」は、Ａベータ効果、例えば、Ａベータオリゴマー誘導シナプス機能障害をブロックするという点で、シグマ－２受容体で「機能的アンタゴニスト」として作用する化合物を記述するために使用される。例えば、膜輸送アッセイ、シナプス喪失アッセイ、またはカスパーゼ－３のＡベータオリゴマー媒介シグマ－２受容体活性化、または行動アッセイ、またはそれを必要としている患者におけるｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイで見られる。機能的アンタゴニストは、例えば、シグマ－２受容体へのＡベータオリゴマーの結合を阻害することにより、または間接的に、シグマ－２受容体に結合するＡベータオリゴマーから生じる下流シグナル伝達を妨害することにより作用し得る。

【0034】

本明細書で使用する「アリール」とは、例えば、フェニル、ナフチル、アントラセニル、フェナントレニル、インダニル、インデニルなどの単環式または多環式（例えば、２、３または４つの縮合環を有する）芳香族炭化水素を指す。いくつかの実施形態では、アリール基は６～約２０個の炭素原子を有する。いくつかの実施形態では、アリール基は５から約１０個の炭素原子を有する。

【0035】

本明細書で使用する「アリールアルキル」とは、アルキルラジカルに結合したアリール基を指す。好ましい実施形態では、アルキルはＣ_１－６アルキルである。

【0036】

本明細書で使用される「アロイル」または「アリールカルボニル」という用語は、カルボニルラジカルに結合したアリール基を指す。アロイルの例には、ベンゾイルが含まれるが、これに限定されない。

【0037】

本明細書で使用する「脳透過性」という用語は、薬物、抗体または断片が血液脳関門を通過する能力を指す。いくつかの実施形態では、動物の薬物動態（ｐＫ）研究、例えば、マウスの薬物動態／血液脳関門研究を使用して、脳浸透性を決定または予測することができる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の任意の実施形態による化合物または医薬組成物の様々な濃度を、例えば３、１０および３０ｍｇ／ｋｇ、例えば経口で投与することができる。５日間、さまざまなｐＫ特性が、たとえば動物モデルで測定される。いくつかの実施形態では、用量に関連する血漿および脳のレベルが決定される。いくつかの実施形態では、脳Ｃｍａｘ＞１００、３００、６００、１０００、１３００、１６００、または１９００ｎｇ／ｍＬである。いくつかの実施形態では、良好な脳透過性は、＞０．１、＞０．３、＞０．５、＞０．７、＞０．８、＞０．９、好ましくは＞１、より好ましくは＞２、＞５、または＞１０の脳／血漿比として定義される。他の実施形態では、良好な脳浸透性は、所定の期間後にＢＢＢを通過する投与量の約０．１％、１％、５％より大きく、約１０％より大きく、および好ましくは約１５％を超えると定義される。特定の実施形態では、用量は経口（経口）投与される。他の実施形態では、ｐＫ特性を測定する前に、用量を静脈内（ｉ．ｖ．）投与する。薬物動態アッセイおよび脳透過性は、実施例７に記載される。

【0038】

本明細書で使用する場合、「認知機能低下」は、動物の認知機能の負の変化であり得る。例えば、認知機能低下には、記憶喪失（行動記憶の喪失など）、新しい記憶の取得の失敗、混乱、判断力の低下、人格の変化、見当識障害、またはそれらの組み合わせが含まれるが、これらに限定されない。したがって、認知機能低下の治療に有効な化合物は、長期神経増強（ＬＴＰ）または長期神経抑制（ＬＴＤ）、または電気生理学的に測定されたシナプス可塑性のバランス、神経変性の抑制、治療、および／または軽減；一般的なアミロイドーシスの抑制、治療、および／または軽減；アミロイド産生、アミロイド集合、アミロイド凝集、およびアミロイドオリゴマー結合の１つまたは複数の阻害、治療、軽減、ニューロン細胞に対するＡｂｅｔａ種の１つまたは複数の非致死効果の抑制、治療、および／または軽減（シナプス喪失または機能不全、異常な膜輸送など）、およびその任意の組み合わせを回復することにより有効になる。さらに、その化合物は、軽度のアルツハイマー病、ダウン症候群、血管性認知症（脳アミロイド血管障害および脳卒中を含むアルツハイマー病（ＡＤ）、Ａベータ関連神経変性疾患および障害の治療にも有効であり得る）、レビー小体型認知症、ＨＩＶ認知症、軽度認知障害（ＭＣＩ）、年齢関連記憶障害（ＡＡＭＩ）、加齢性認知機能低下（ＡＲＣＤ）、前臨床アルツハイマー病（ＰＣＡＤ）、および認知障害なし認知症（ＣＩＮＤ）を含むがこれらに限定されない。

【0039】

本明細書で使用する場合、用語「接触する」とは、２つのペプチドまたは１つのタンパク質と別のタンパク質または小分子などの他の分子との間の非共有相互作用などの相互作用のような分子間（または細胞または細胞膜などの高次構造を有する分子）を、分子間を可能にする距離内にまとめるまたは結合することを指す。いくつかの実施形態では、接触または結合した分子が共通の溶媒に混合され、自由に会合することができる溶液中で接触が起こる。いくつかの実施形態では、接触は、細胞内またはそうでなければ細胞内または無細胞環境で起こり得る。いくつかの実施形態では、無細胞環境は、細胞から生成された溶解物である。いくつかの実施形態では、細胞溶解物は、全細胞溶解物、核溶解物、細胞質溶解物、およびそれらの組み合わせであり得る。いくつかの実施形態において、無細胞溶解物は、核抽出および単離から得られた溶解物であり、細胞集団の核は細胞から除去され、次いで溶解される。いくつかの実施形態では、核は溶解されないが、それでも無細胞環境であると見なされる。分子は、ボルテックス、振とうなどの混合によって一緒にすることができる。

【0040】

本明細書で使用される「環状アミノ」または「環状アミノ基」という用語は、窒素ラジカルを含むヘテロシクロアルキルまたはヘテロアリール基であり、したがって窒素原子を介した結合を可能にする。グループは次の式で表すことができる。

【0041】

【化4】

は、窒素、硫黄および酸素から選択される０～３個の追加のヘテロ原子を含む複素環または複素芳香環である。

【0042】

本明細書で使用される「シクロアルカノイル」または「シクロアルキルカルボニル」という用語は、カルボニルラジカルに結合したシクロアルキル基を記述することを意味する。シクロアルカノイルの例には、

【化5】

を含むが、これらに限定されない。

【0043】

本明細書で使用する「シクロアルキル」は、最大２０個の環形成炭素原子を含む環化アルキル、アルケニル、およびアルキニル基を含む非芳香族環状炭化水素を指す。シクロアルキル基には、単環式または多環式（例えば、２、３、または４つの縮合環を有する）環系ならびにスピロ環系が含まれ得る。シクロアルキル基は、３から約１５、３から約１０、３から約８、３から約６、４から約６、３から約５、または５から約６の環形成炭素原子を含むことができる。シクロアルキル基の環形成炭素原子は、オキソまたはスルフィドによって場合により置換されていても良い。シクロアルキル基の例には、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロペンテニル、シクロヘキセニル、シクロヘキサジエニル、シクロヘプタトリエニル、ノルボルニル、ノルピニル、ノルカルニル、アダマンチルなどが含まれるが、これらに限定されない。シクロアルキルの定義には、シクロアルキル環に融合した（すなわち、共通の結合を有する）１つ以上の芳香環を有する部分、例えば、シクロペンタン、シクロペンテン、シクロヘキサンなどのベンゾまたはチエニル誘導体（例えば２，３－ジヒドロ－１Ｈ－インデン－１－イル、または１Ｈ－インデン－２（３Ｈ）－オン－１－イル）である。好ましくは、「シクロアルキル」は、最大２０個の環形成炭素原子を含む環化アルキル基を指す。シクロアルキルの例には、好ましくは、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、アダマンチルなどが含まれる。

【0044】

「シクロアルキルアルキル」という用語は、アルキルラジカルに結合したシクロアルキル基を指す。好ましい実施形態では、アルキルはＣ_１－６アルキルである。

【0045】

本明細書では、「薬物様特性」という用語を使用して、脳透過性、代謝安定性および／または血漿安定性を含む、投与時の化合物の薬物動態特性および安定性特性を説明する。

【0046】

本明細書で使用される「有効量」という用語は、特定の障害または病理学的プロセスの少なくとも１つの症状またはパラメーターの測定可能な阻害をもたらす量を指す。例えば、Ａベータオリゴマーの存在下で測定可能なほど低いシナプス減少を提供する本明細書に記載の任意の実施形態による開示化合物の量は、アミロイド病理の臨床症状が少なくともすぐに変化していなくても病理過程を減少させるため、有効量とみなされる。

【0047】

本明細書で使用する「ハロ」または「ハロゲン」には、フッ素、塩素、臭素、およびヨウ素が含まれる。

【0048】

本明細書で使用される「ハロアルコキシ」は、酸素架橋を介して結合した、指定数の炭素原子を有する本明細書で定義されるハロアルキル基を表す。例えば、「Ｃ_１－Ｃ_６ハロアルコキシ」または「Ｃ_１－６ハロアルコキシ」は、Ｃ_１、Ｃ_２、Ｃ_３、Ｃ_４、Ｃ_５、およびＣ_６ハロアルコキシ基を含むことを意図する。ハロアルコキシ基の例はＯＣＦ_３です。本明細書で使用される「トリハロメトキシ」は、３つのハロゲン置換基を有するメトキシ基を指す。トリハロメトキシ基の例には、－ＯＣＦ_３、－ＯＣＣｌＦ_２、－ＯＣＣｌ_３などが含まれるが、これらに限定されない。

【0049】

本明細書で使用される「ハロアルキル」は、１つ以上のハロゲンで置換された特定数の炭素原子を有する分岐および直鎖飽和脂肪族炭化水素基の両方を含むことを意図する。ハロアルキル基の例には、ＣＦ_３、Ｃ_２Ｆ_５、ＣＨＦ_２、ＣＣｌ_３、ＣＨＣｌ_２、Ｃ_２Ｃｌ_５、ＣＨ_２ＣＦ_３などが含まれるが、これらに限定されない。

【0050】

本明細書で使用される「ヘテロアリール」基は、最大２０個の環形成原子を有し、硫黄、酸素、または窒素などの少なくとも１個のヘテロ原子環員（環形成原子）を有する芳香族複素環を指す。いくつかの実施形態において、ヘテロアリール基は、硫黄、酸素、および窒素からそれぞれ独立して選択される少なくとも１つまたは複数のヘテロ原子環形成原子を有する。ヘテロアリール基には、単環式および多環式（例えば、２、３、または４つの縮合環を有する）系が含まれる。ヘテロアリール基の例には、これに限定されないが、ピリジル（別名ピリジニル）、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、トリアジニル、フリル、キノリル、イソキノリル、チエニル、イミダゾリル、チアゾリル、インドリル、ピリル（別名アカピロリル）、オキサゾリル、ベンゾフリル、ベンゾチアゾニル、ベンズ、イソオキサゾリル、ピラゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、インダゾリル、１，２，４－チアジアゾリル、イソチアゾリル、ベンゾチエニル、プリニル、カルバゾリル、ベンズイミダゾリル、インドリニルなどを含む。いくつかの実施形態では、ヘテロアリール基は１～約２０個の炭素原子を有し、さらなる実施形態では、環形成原子として、約１～約５個、約１～約４個、約１～約３個、約１～約２個の炭素原子を有する。一部の実施形態では、ヘテロアリール基は、３～約１４、３～約７、または５～６個の環形成原子を含む。いくつかの実施形態では、ヘテロアリール基は、１～約４、１～約３、または１～２個のヘテロ原子を有する。

【0051】

本明細書で使用される「ヘテロシクロアルコキシ」という用語は、－Ｏ－ヘテロシクロアルキル基を指す。ヘテロシクロアルコキシ基の例は、

【化6】

である。

【0052】

本明細書で使用される「ヘテロシクロアルキル」または「ヘテロシクリル」は、環形成炭素原子の１つまたは複数が環化アルキル、アルケニル、およびアルキニル基を含む最大２０個の環形成原子を有する非芳香族ヘテロシクリル基を指すＯ、Ｎ、またはＳ原子などのヘテロ原子に置き換えられる。ヘテロシクロアルキル基は、単環式でも多環式（例えば、縮合系とスピロ系の両方）でも良い。例えば、「ヘテロシクロアルキル」基には、モルホリノ、チオモルホリノ、ピペラジニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロチエニル、２，３－ジヒドロベンゾフリル、１，３－ベンゾジオキソール、ベンゾ－１，４－ジオキサン、ピペリジニル、ピロリジニル、イソオキサゾリジニル、イソチアゾリジニル、ピラゾリジニル、オキサゾリジニル、チアゾリジニル、イミダゾリジニル、ピロリジン－２－オン－３－イルなど。ヘテロシクロアルキル基の環形成炭素原子およびヘテロ原子は、オキソまたはスルフィドで場合により置換されていても良い。例えば、環形成Ｓ原子は、１または２個のオキソで置換され得る（すなわち、Ｓ（Ｏ）またはＳ（Ｏ）_２を形成する）。例えば、環を形成するＣ原子は、オキソにより置換され得る（すなわち、カルボニルを形成する）。ヘテロシクロアルキルの定義には、非芳香族複素環、例えばピリジニル、チオフェニル、フタルイミジル、ナフタリミジル、およびインドリン、イソインドリン、イソインドリン－１－オン－３－イル、４，５，６，７－テトラヒドロチエノ［２，３－ｃ］ピリジン－５－イル、５，６－ジヒドロチエノ［２，３－ｃ］ピリジン－７（４Ｈ）－オン－５－イルおよび３，４－ジヒドロイソキノリン－１（２Ｈ）－オン－３イル基などの複素環のベンゾ誘導体に融合した（すなわち、共通の結合を有する）１つ以上の芳香環を有する部分も含まれる。ヘテロシクロアルキル基の環形成炭素原子およびヘテロ原子は、オキソまたはスルフィドで場合により置換されていても良い。いくつかの実施形態では、ヘテロシクロアルキル基は、２～約２０個の炭素原子または３～２０個の炭素原子を有する。いくつかの実施形態において、ヘテロシクロアルキル基は、３～約１４、３～約７、または５～６個の環形成原子を含む。いくつかの実施形態では、ヘテロシクロアルキル基は１～４個のヘテロ原子を有する。いくつかの実施形態では、ヘテロシクロアルキル基は０～３個の二重結合を含む。いくつかの実施形態では、ヘテロシクロアルキル基は０～２個の三重結合を含む。

【0053】

本出願において、「高親和性」という用語は、６００ｎＭ未満、５００ｎＭ、４００ｎＭ、３００ｎＭ、２００ｎＭ、１５０ｎＭ未満、１００ｎＭ、８０ｎＭ未満、６０ｎＭ未満、または、例えば、シグマ－１およびシグマ－２受容体部位の両方に対する化合物の結合親和性を測定するＷｅｂｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ（ＵＳＡ）８３：８７８４－８７８８（１９８６）（その参照により本明細書に組み込まれる）により開示された［３Ｈ］－ＤＴＧに対するシグマ受容体結合アッセイにおいて、または好ましくは５０ｎＭ未満のＫｉ値を示す化合物を意味するものとする。

【0054】

「ヒドロキシル」および「ヒドロキシ」という用語は、ＯＨ基を意味するために交換可能に使用される。

【0055】

「改善する」という用語は、開示が提供、適用、または投与される組織の特性および／または物理的属性のいずれかを変更することを伝えるために使用される。「改善する」という用語は、病状と併せて使用することもでき、その結果、病状が「改善」されると、病状に関連する症状または身体的特徴は、減少、減少、排除、遅延、回避される。

【0056】

「阻害」という用語には、封鎖、特定の結果またはプロセスの回避、または逆の結果またはプロセスの回復が含まれる。本開示の化合物の投与による予防または治療に関して、「阻害する」には、症状の発症に対する保護（部分的または全体的）または遅延、症状の緩和、または疾患、状態または障害に対する保護、減少または排除が含まれる。

【0057】

「人身売買障害の抑制」という用語は、細胞、好ましくは神経細胞における可溶性Ａβオリゴマー誘導膜人身売買障害を遮断する能力を指す。輸送不足を阻害できる化合物は、ＥＣ_５０＜２０μＭ、１５μＭ未満、１０μＭ未満、５μＭ未満、好ましくは１μＭ未満の膜輸送アッセイで、さらに少なくとも５０％、例えば、実施例６に記載されているように、可溶性Ａベータオリゴマー誘発膜輸送欠損のＡベータオリゴマー効果の好ましくは少なくとも６０％、より好ましくは少なくとも７０％の最大阻害である。

【0058】

「ｌｏｇ Ｐ」という用語は、化合物の分配係数を指す。分配係数は、２つの溶液相（オクタノールと水など）のそれぞれにおける非イオン化化合物の濃度の比率である。イオン化可能な溶質化合物の分配係数を測定するには、水相のｐＨを調整して、化合物の主な形がイオン化されないようにする。溶媒中の非イオン化溶質化合物の濃度比の対数はｌｏｇ Ｐと呼ばれる。ｌｏｇＰは親油性の尺度である。例えば、

である。

【0059】

本明細書で使用する「代謝安定性」という用語は、化合物が初回通過代謝（経口投与された薬物の腸および肝臓の分解または結合）に耐える能力を指す。これは、例えば、化合物をマウスまたはヒトの肝ミクロソームに曝露することにより、インビトロで評価することができる。一部の実施形態では、良好な代謝安定性とは、化合物をマウスまたはヒト肝ミクロソームに曝露した際のｔ_１／２＞５分、＞１０分、＞１５分、＞２０分、および好ましくは＞３０分を指す。いくつかの実施形態において、良好な代謝安定性は、＜３００ｕＬ／分／ｍｇ、好ましくは＜２００ｕＬ／分／ｍｇ、より好ましくは＜１００ｕＬ／分／ｍｇの固有クリアランス速度（Ｃｌ_ｉｎｔ）を指す。

【0060】

ｎが整数である「ｎ員」という用語は、典型的に、環形成原子の数がｎである部分の環形成原子の数を表す。例えば、ピリジンは６員のヘテロアリール環の例であり、チオフェンは５員のヘテロアリール基の例である。

【0061】

本明細書で使用される「天然リガンド」という用語は、インビボでタンパク質、受容体、膜脂質または他の結合パートナーに結合できるか、またはインビトロで複製される、対象に存在するリガンドを指す。天然リガンドは、起源が合成であっても良いが、被験者に人間の介入がなくても自然に存在しなければならない。たとえば、Ａベータオリゴマーは人間の被験者に存在することが知られている。したがって、被験者に見られるＡベータオリゴマーは、天然のリガンドと見なされる。Ａｂｅｔａオリゴマーの結合パートナーへの結合は、組換えまたは合成技術を使用してｉｎ ｖｉｔｒｏで複製できるが、Ａｂｅｔａオリゴマーは、Ａｂｅｔａオリゴマーの調製または製造方法に関係なく、天然のリガンドと見なされる。同じ結合パートナーにも結合できる合成小分子は、対象に存在しない場合、天然のリガンドではない。例えば、本明細書に記載されている化合物は、通常被験者に存在しないため、天然のリガンドとはみなされないだろう。

【0062】

本明細書で使用する「神経細胞」という用語は、単一の細胞または細胞集団を指すために使用することができる。いくつかの実施形態では、神経細胞は初代神経細胞である。いくつかの実施形態では、神経細胞は不死化または形質転換された神経細胞または幹細胞である。初代神経細胞は、グリア細胞などの他の種類の神経細胞に分化できない神経細胞です。幹細胞は、グリアなどのニューロンと細胞の他のタイプの神経細胞に分化できる細胞である。いくつかの実施形態では、アッセイは、グリア細胞を含まない少なくとも１つの神経細胞を含む組成物を利用する。いくつかの実施形態では、組成物は、約３０％、２５％、２０％、１５％、１０％、５％、または１％未満のグリア細胞を含み、これはＡベータを内在化および蓄積することが知られる。一次神経細胞は、動物の脳の任意の領域に由来する。いくつかの実施形態では、神経細胞は海馬または皮質細胞である。グリア細胞の存在は、任意の方法で判断できる。いくつかの実施形態では、グリア細胞はＧＦＡＰの存在により検出され、ニューロンはＭＡＰ２に対する抗体で陽性に染色することにより検出することができる。

【0063】

本明細書で使用される場合、「任意に置換された」という用語は、置換が任意であることを意味し、したがって、非置換および置換原子および部分の両方を含む。「置換された」原子または部分は、指定された原子または部分の通常の原子価を超えない限り、指定された原子または部分上の任意の水素を示された置換基群からの選択に置き換えることができることを示し、置換の結果として安定した化合物となる。例えば、メチル基（つまり、ＣＨ_３）が必要に応じて置換される場合、炭素原子上の最大３つの水素原子を置換基で置き換えることができる。置換基には、アルカノイル、アルコキシ、アルコキシアルキル、（アルコキシ）アルコキシアルキル、アルコキシカルボニル、アルキル、アリールオキシ、アリーロイル、シクロアルカノイル、置換または非置換Ｃ_３－Ｃ_１０シクロアルキル、－ＯＣ（Ｏ）ＮＣＨ（ＣＨ_３）_２、（Ｎ、Ｎ－ジメチルアミノ）ピリジニル、（Ｎ、Ｎ－ジメチルアミノ）スルホニル、ハロ、ヘテロシクリル、（ヘテロシクリル）アルコキシアルキル、ヘテロシクロアルキル、ヒドロキシル、ヒドロキシアルキル、メチルピペリジニル、メチルスルホニル、メチルスルホニルフェニル、モルホリニルピリジニル、置換されていても良いＣ_１－Ｃ_１０アルキル、置換されていてもよいＣ_５－Ｃ_１０アリール、置換されていても良いＣ_３－Ｃ_１０ヘテロアリール、ペルフルオロアルキル、フェニル、ピペリジニル、ピロリジニルピリジニル、テトラヒドロピラニル、ＣＦ_３が含まれるが、これらに限定されない。例えば、置換アルキル基は、アルキル基上の１つ以上の水素原子は、これらに限定されないがハロ、ヒドロキシル、アルコキシ、ヘテロシクロアルコキシ、アルコキシアルコキシ、Ｃ（Ｏ）ＯＭｅ、およびＣ（Ｏ）ＯＥｔから選択される置換基と置換される。例えば、置換アリール基は、アリール基上の１つ以上の水素原子が、－ＳＯ_２Ｍｅまたはフェニル基から選択されるがこれらに限定されない置換基で置換されることを示す。例えば、置換ヘテロアリール基は、ヘテロアリール基上の１つ以上の水素原子が、ヘテロシクロアルキル、ヘテロアリール、Ｎ、Ｎ－ジメチルアミノから選択されるが、これらに限定されない置換基で置換されることを示す。例えば、置換ヘテロシクロアルキル基は、ヘテロシクロアルキル基上の１つ以上の水素原子が、ヘテロシクロアルキル、ヘテロアリール、Ｎ、Ｎ－ジメチルアミノ、ヒドロキシル、アルコキシ、アルコキシカルボニル、アルキルから選択されるがこれらに限定されない置換基で置換されることを示す、アリール、スルホニル、ジメチルアミノスルホニル、アロイル、シクロアルカノイル、アルカノイルおよび－ＯＣ（Ｏ）ＮＣＨ（ＣＨ_３）_２の場合によっては、例えばヘテロシクリルまたはアルキル基の同じ炭素上の２つの水素原子が基で置換され、例えば、

【化7】

である。

【0064】

「部分アゴニスト」という用語は、その存在により、受容体の天然リガンドの存在から生じるものと同じタイプであるが、より低い大きさの受容体の生物活性をもたらす化合物を指す。

【0065】

「薬学的に許容される」という句は、一般に安全かつ非毒性とみなされる分子実体および組成物を指す。特に、本開示の医薬組成物に使用される薬学的に許容される担体、希釈剤または他の賦形剤は、生理学的に許容可能であり、他の成分と適合し、通常、患者に投与された時、アレルギーまたは同様の有害な反応（例えば、胃の不調、めまいなど）を生じない。好ましくは、本明細書で使用される「薬学的に許容される」という用語は、連邦政府または州政府の規制当局によって承認された、または動物、より具体的にはヒトで使用するための米国薬局方または他の一般的に認められた薬局方にリストされていることを意味する。

【0066】

本明細書で使用される「薬学的に許容される塩」という語句は、哺乳動物での使用に安全かつ有効であり、所望の生物活性を有する本開示の化合物の塩を含む。薬学的に許容される塩には、本開示の化合物または本開示の方法に従って特定された化合物に存在する酸性または塩基性基の塩が含まれる。薬学的に許容される酸付加塩には、塩酸塩、臭化水素酸塩、ヨウ化水素酸塩、硝酸塩、硫酸塩、重硫酸塩、リン酸塩、酸性リン酸塩、イソニコチン酸塩、酢酸塩、乳酸塩、サリチル酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、パントテン酸塩、重酒石酸塩、アスコルビン酸塩、コハク酸塩が含まれますが、これらに限定されませんマレイン酸塩、ゲンチジン酸塩、フマル酸塩、グルコン酸塩、グルカロン酸塩、サッカリン酸塩、ギ酸塩、安息香酸塩、グルタミン酸塩、メタンスルホン酸塩、エタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ｐ－トルエンスルホン酸塩およびパモ酸塩（すなわち、１，１'－メチレン－ビス－（２－ヒドロキシ－３－ナフトエート））塩を含む。本開示の特定の化合物は、様々なアミノ酸と薬学的に許容される塩を形成することができる。適切な塩基塩には、アルミニウム、カルシウム、リチウム、マグネシウム、カリウム、ナトリウム、亜鉛、鉄およびジエタノールアミン塩が含まれるが、これらに限定されない。薬学的に許容される塩基付加塩も、有機アミンなどのアミンで形成される。適切なアミンの例は、Ｎ、Ｎ'－ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロカイン、コリン、ジエタノールアミン、ジシクロヘキシルアミン、エチレンジアミン、Ｎ－メチルグルカミン、およびプロカインである。

【0067】

本明細書で使用される「薬学的に許容される担体」という用語には、リン酸緩衝生理食塩水、水、油／水または水／油乳濁液などの乳濁液、および様々なタイプの湿潤などの標準的な医薬担体のいずれかが含まれるエージェントを含む。この用語には、米国連邦政府の規制当局によって承認された、または人間を含む動物での使用について米国薬局方にリストされているエージェントも含まれる。

【0068】

「選択性」または「選択的」という用語は、非シグマ受容体と比較したシグマ受容体、例えばシグマ－２受容体に対する化合物（Ｋｉ）の結合親和性の違いを指す。この化合物は、シナプスニューロンのシグマ受容体に対して高い選択性を持つ。シグマ－２受容体またはシグマ－２とシグマ－１受容体の両方のＫｉは、非シグマ受容体のＫｉと比較される。いくつかの実施形態では、化合物は選択的シグマ－２受容体アンタゴニストまたはシグマ－１受容体リガンドであり、少なくとも１０倍、２０倍、３０倍、５０倍、７０倍、１００倍、５００倍以上の親和性、異なる受容体での結合解離定数Ｋｉ値、またはＩＣ_５０値、または結合定数の比較によって評価される非シグマ受容体と比較したシグマ受容体への結合に対する有する。既知のアッセイプロトコルを使用して、例えば、Ｃｈｅｎｇ ａｎｄ Ｐｒｕｓｏｆｆ（１９７３）（Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．２２，３０９９－３１０８）、または本明細書に具体的に記載されているとおりである。

【0069】

本明細書で使用する「血漿安定性」という用語は、例えば、ヒドロラーゼおよびエステラーゼなどの酵素による、血漿中の化合物の分解を指す。さまざまなｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイを使用できまる。試験化合物は、さまざまな期間にわたって血漿中でインキュベートされる。各時点で残っている親化合物（分析物）の割合は、血漿安定性を反映する。安定性が低いと、生物学的利用能が低くなる傾向がある。良好な血漿安定性は、３０分後に５０％を超える検体、４５分後に５０％を超える検体、および６０分後に５０％を超える検体が残っていると定義できる。

【0070】

「シグマ－２リガンド」とは、シグマ－２受容体に結合する化合物を指し、アゴニスト、アンタゴニスト、部分アゴニスト、逆アゴニスト、およびこの受容体またはタンパク質の他のリガンドの単なる競合物を含む。

【0071】

「シグマ－２受容体アンタゴニスト化合物」という用語は、測定可能な量でシグマ－２受容体に結合し、シグマ－２受容体バインディングに起因するオリゴマー誘導シナプス機能不全に対するＡベータ効果に関して機能的アンタゴニストとして作用する化合物を指す。

【0072】

「対象」、「個体」または「患者」という用語は互換的に使用され、本明細書で使用される場合、ヒトおよび非ヒト動物を含むことを意図する。人間以外の動物には、ただし非ヒト霊長類、羊、犬、猫、牛など馬等の哺乳類が好まれるが、非ヒト霊長類、ヒツジ、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ニワトリ、両生類、爬虫類などの哺乳類および非哺乳類等のすべての脊椎動が含まれる。好ましい被験者には、ヒト患者が含まれる。本方法は、本明細書に記載の疾患または障害を有するヒト患者を治療するのに特に適する。

【0073】

「試験化合物」は、任意の試験で試験されている本明細書に記載の任意の実施形態による化合物である。試験には、生体内または生体外の試験、コンピューターモデルまたはシミュレーション、仮想薬物試験、幹細胞および遺伝学的試験法、非侵襲的画像技術などが含まれる。

【0074】

本明細書で使用する場合、「治療薬」という用語は、対象の望ましくない状態または疾患を治療、治療、改善、保護、または改善するために利用される薬剤を意味する。

【0075】

本明細書に記載の任意の実施形態による化合物、その薬学的に許容される塩または医薬組成物の「治療有効量」は、特定の疾患または障害の少なくとも１つの症状またはパラメーターに選択効果をもたらすのに十分な量である。治療効果は、客観的（すなわち、何らかの試験またはマーカーで測定可能）または主観的（すなわち、被験者が効果の兆候を示す、または効果を感じる、または医師が変化を観察する）であり得る。本明細書に記載の任意の実施形態による化合物の治療有効量は、０．０１ｍｇ／ｋｇ～約５００ｍｇ／ｋｇ、約０．０１～約２５０ｍｇ／ｋｇ、約０．０１～約２５ｍｇ／ｋｇ、約０．０５ｍｇ／ｋｇ～約２０ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約４００ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約２００ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約２５ｍｇ／ｋｇ、約０．１～約１０ｍｇ／ｋｇ、約０．２から約５ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇから約３００ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇから約１００ｍｇ／ｋｇ、体重であり得る。本明細書で企図される効果には、必要に応じて、医学的治療および／または予防的治療の両方が含まれる。治療効果および／または予防効果を得るために本開示に従って投与される化合物の特定の用量は、例えば、投与される化合物、投与経路、他の活性物質の同時投与、症例を取り巻く特定の状況によって決定される成分、治療されている状態、使用されている特定の化合物の活性、使用されている特定の組成、患者の年齢、体重、健康状態、性別および食事。投与時間、投与経路、使用される特定の化合物の排泄速度、および治療期間を含む。投与される治療上有効な量は、前述の関連する状況および健全な医学的判断の行使に照らして医師によって決定される。本明細書に記載の任意の実施形態による化合物の治療有効量は、典型的には、生理学的に許容される賦形剤組成物で投与されたときに、組織内で有効な全身濃度または局所濃度を達成するのに十分な量である。単回投与または分割投与でヒトまたは他の動物に投与される本明細書に記載の任意の実施形態による化合物の総１日用量は、例えば約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約５００ｍｇ／ｋｇ、約０．０１～約２５０ｍｇ／ｋｇ、約０．０１～約２５ｍｇ／ｋｇ、約０．０５ｍｇ／ｋｇ～約２０ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約４００ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約２００ｍｇ／ｋｇ、約０．１ｍｇ／ｋｇから約２５ｍｇ／ｋｇ、約０．１から約１０ｍｇ／ｋｇ、約０．２から約５ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇから約３００ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇから約１００ｍｇ／ｋｇ、１日あたりの体重であり得る。本明細書に記載の任意の実施形態の単回投与医薬組成物は、日用量を構成するためにそのような量またはその約数を含んでも良い。例えば、本明細書に記載の任意の実施形態による化合物は、１日１回、２回、３回、または４回など、１日１～４回のレジメンで投与することができる。いくつかの実施形態では、本明細書に開示される任意の実施形態による化合物の治療有効量は、約０．０１から約２５ｍｇ／ｋｇ／日の範囲であり得る。いくつかの実施形態では、治療有効量は、体重の約０．０１ｍｇ／ｋｇ体重、体重の約０．１ｍｇ／ｋｇ体重、体重の約０．２ｍｇ／ｋｇ体重、体重の約０．３ｍｇ／ｋｇ体重の下限の間である。０．４ｍｇ／ｋｇ体重、約０．５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．６０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．７０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．８０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．９０ｍｇ／ｋｇ体重体重、約１ｍｇ／ｋｇ体重、約２．５ｍｇ／ｋｇ体重、約５ｍｇ／ｋｇ体重、約７．５ｍｇ／ｋｇ体重、約１０ｍｇ／ｋｇ体重、約１２．５ｍｇ／ｋｇ体重、約１５ｍｇ／ｋｇ体重、約１７．５ｍｇ／ｋｇ体重、約２０ｍｇ／ｋｇ体重、約２２．５ｍｇ／ｋｇ体重、および約２５ｍｇ／ｋｇ体重体重；上限は２５ｍｇ／ｋｇ体重、約２２．５ｍｇ／ｋｇ体重、約２０ｍｇ／ｋｇ体重、約１７．５ｍｇ／ｋｇ体重、約１５ｍｇ／ｋｇ体重、約１２．５ｍｇ／ｋｇ体重、約１０ｍｇ／ｋｇ体重、約７．５ｍｇ／ｋｇ体重、約５ｍｇ／ｋｇ体重、約２．５ｍｇ／ｋｇ体重、約１ｍｇ／ｋｇ体重体重、約０．９ｍｇ／ｋｇ体重、約０．８ｍｇ／ｋｇ体重、約０．７ｍｇ／ｋｇ体重、約０．６ｍｇ／ｋｇ体重、約０．５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．４ｍｇ／ｋｇ体重、約０．３ｍｇ／ｋｇ体重、約０．２ｍｇ／ｋｇ体重、約０．１ｍｇ／ｋｇ体重、および約０．０１ｍｇ／ｋｇ体重であり得る。いくつかの実施形態では、治療有効量は約０．１ｍｇ／ｋｇ／日から約１０ｍｇ／ｋｇ／日である。いくつかの実施形態では、治療有効量は約０．２および約５ｍｇ／ｋｇ／日である。いくつかの実施形態では、本開示による治療計画は、そのような治療を必要とする患者への投与を含み、通常は約１ｍｇ～約５０００ｍｇ、約１０ｍｇ～約２０００ｍｇ、約１０ｍｇ～約２００ｍｇ、約２０～約１０００ｍｇ、約２０～約５００ｍｇ、約２０～約４００ｍｇ、約４０～約８００ｍｇ、約５０ｍｇ～約５００ｍｇ、約８０～約１６００ｍｇおよび約５０ｍｇの化合物本明細書に開示される任意の実施形態、または薬学的に許容されるその塩、１日あたり単回または複数回投与。いくつかの実施形態では、治療有効量は、５０ｍｇ～５００ｍｇの合計１日用量である。いくつかの実施形態では、一日量は、下限が約５０ｍｇ、約５５ｍｇ、約６０ｍｇ、約６５ｍｇ、約７０ｍｇ、約７５ｍｇ、約８０ｍｇ、約８５ｍｇ、約９０ｍｇ、約９５ｍｇ、約１００ｍｇ、約１０５ｍｇ、約１１０ｍｇ、約１１５ｍｇ；約１２０ｍｇ、約１２５ｍｇ、約１３０ｍｇ、約１３５ｍｇ、約１４０ｍｇ、約１４５ｍｇ、約１５０ｍｇ、約１５５ｍｇ、約１６０ｍｇ、約１６５ｍｇ、約１７０ｍｇ、約１７５ｍｇ、約１８０ｍｇ、約１８５ｍｇ、約１９０ｍｇ、約１９５ｍｇ、約２００ｍｇ、約２０５ｍｇ、約２１０ｍｇ、約２１５ｍｇ；約２２０ｍｇ、約２２５ｍｇ、約２３０ｍｇ、約２３５ｍｇ、約２４０ｍｇ、約２４５ｍｇ、約２５０ｍｇ、約２５５ｍｇ、約２６０ｍｇ、約２６５ｍｇ、約２７０ｍｇ、約２７５ｍｇ、約２８０ｍｇ、約２８５ｍｇ、約２９０ｍｇ、約２９５ｍｇ、３００ｍｇ、約３０５ｍｇ、約３１０ｍｇ、約３１５ｍｇ。約３２０ｍｇ、約３２５ｍｇ、約３３０ｍｇ、約３３５ｍｇ、約３４０ｍｇ、約３４５ｍｇ、約３５０ｍｇ、約３５５ｍｇ、約３６０ｍｇ、約３６５ｍｇ、約３７０ｍｇ、約３７５ｍｇ、約３８０ｍｇ、約３８５ｍｇ、約３９０ｍｇ、約３９５、約４００ｍｇ、約４０５ｍｇ、約４１０ｍｇ、約４１５ｍｇ。約４２０ｍｇ、約４２５ｍｇ、約４３０ｍｇ、約４３５ｍｇ、約４４０ｍｇ、約４４５ｍｇ、約４５０ｍｇ、約４５５ｍｇ、約４６０ｍｇ、約４６５ｍｇ、約４７０ｍｇ、約４７５ｍｇ、約４８０ｍｇ、約４８５ｍｇ、約４９０ｍｇ、約４９５ｍｇ、および約５００ｍｇおよび上限約５００ｍｇ、約４９５ｍｇ、約４９０ｍｇ、約４８５ｍｇ、約４８０ｍｇ、約４７５ｍｇ、約４７０ｍｇ、約４６５ｍｇ、約４６０ｍｇ、約４５５ｍｇ、約４５０ｍｇ、約４４５ｍｇ、約４４０ｍｇ、約４３５ｍｇ、約４３０ｍｇ、約４２５ｍｇ、約４２０ｍｇ、約４１５ｍｇ、約４１０ｍｇ、約４０５ｍｇ、約４００ｍｇ、約３９５ｍｇ、約３９０ｍｇ、約３８５ｍｇ、約３８０ｍｇ、約３７５ｍｇ、約３７０ｍｇ、約３６５ｍｇ、約３６０ｍｇ、約３５５ｍｇ、約３５０ｍｇ、約３４５ｍｇ、約３４０ｍｇ、約３３５ｍｇ、約３３０ｍｇ、約３２５ｍｇ、約３２０ｍｇ、約３１５ｍｇ、約３１０ｍｇ、約３０５ｍｇ、約３００ｍｇ、約２９５ｍｇ、約２９０ｍｇ、約２８５ｍｇ、約２８０ｍｇ、約２７５ｍｇ、約２７０ｍｇ、約２６５ｍｇ、約２６０ｍｇ、約２５５ｍｇ、約２５０ｍｇ、約２４５ｍｇ、約２４０ｍｇ、約２３５ｍｇ、約２３０ｍｇ、約２２５ｍｇ、約２２０ｍｇ、約２１５ｍｇ、約２１０ｍｇ、約２０５ｍｇ、２００ｍｇ、約１９５ｍｇ、約１９０ｍｇ、約１８５ｍｇ、約１８０ｍｇ、約１７５ｍｇ、約１７０ｍｇ、約１６５ｍｇ、約１６０ｍｇ、約１５５ｍｇ、約１５０ｍｇ、約１４５ｍｇ、約１４０ｍｇ、約１３５ｍｇ、約１３０ｍｇ、約１２５ｍｇ、約１２０ｍｇ、約１１５ｍｇ、約１１０ｍｇ、約１０５ｍｇ、約１００ｍｇ、約９５ｍｇ、約９０ｍｇ；本明細書の任意の実施形態による化合物約８５ｍｇ、約８０ｍｇ、約７５ｍｇ、約７０ｍｇ、約６５ｍｇ、約６０ｍｇ、約５５ｍｇ、および約５０ｍｇであり得る。いくつかの実施形態では、総１日用量は約５０ｍｇから１５０ｍｇである。いくつかの実施形態において、総１日用量は約５０ｍｇから２５０ｍｇである。いくつかの実施形態では、総１日用量は約５０ｍｇから３５０ｍｇである。いくつかの実施形態では、総１日用量は約５０ｍｇから４５０ｍｇである。いくつかの実施形態では、総１日用量は約５０ｍｇである。本開示の医薬製剤は、障害を治療するのに有効な化合物の全量を必ずしも含む必要はなく、そのような有効量は、そのような医薬製剤の複数の分割用量の投与により到達できるため理解される。化合物は、１日１回、２回、３回、または４回など、１日１～４回のレジメンで投与されても良い。

【0076】

「治療的表現型」という用語は、ｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイにおける行動の有効性を予測する化合物の活性のパターンを記述するために使用される。（１）ｓｉｇｍａ－２受容体に高親和性で選択的に結合し、（２）ニューロンにおけるＡｂｅｔａオリゴマー誘発効果に関して機能的拮抗薬として作用する化合物は、（治療的表現型）ｉ）Ａβ誘発性膜輸送欠損をブロックまたは軽減する。（ｉｉ）Ａβ誘導シナプス損失をブロックまたは低減し、（ｉｉｉ）Ａｂｅｔａオリゴマーの非存在下で人身売買またはシナプス数に影響を与えない。ｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイにおけるこの活性パターンは「治療的表現型」と呼ばれ、行動の有効性を予測する。

【0077】

「治療プロファイル」という用語は、治療表現型に適合し、脳透過性（血液脳関門を通過する能力）、血漿安定性、代謝安定性が良好な化合物を表すために使用される。

【0078】

「組織」という用語は、特定の機能の実行において統合される同様に特殊化された細胞の集合体を指す。

【0079】

本明細書で使用する「治療する」、「治療した」、または「治療する」という用語は、治療的治療および予防的または予防的手段の両方を指し、目的は（部分的または全体的）または減速（例えば、望ましくない生理学的状態、障害または疾患の発症を軽減または延期する、または部分的または全体的な回復またはパラメーター、値、機能または異常のあるまたは異常になる結果の低下などの有益または望ましい臨床結果を得る本開示の目的のために、有益なまたは望ましい臨床結果には、症状の緩和が含まれるが、これらに限定されない。状態、障害または疾患の程度または活力または発達速度の低下；状態、障害または疾患の状態の安定化（すなわち、悪化しない）、病状、障害または疾患の発症の遅延または進行の遅延；状態、障害または病状の改善；寛解（部分的または全体的）、実際の臨床症状の即時の軽減、または状態、障害または疾患の増強または改善につながるかどうか。治療は、過度のレベルの副作用なしに、臨床的に重要な反応を誘発しようとする。治療には、治療を受けない場合に予想される生存期間と比較した生存期間の延長も含まれる。

【0080】

ヒトアミロイドベータおよびシグマ－２拮抗薬
アミロイドベータの過剰産生と蓄積は、アルツハイマー病の病理学的特徴である。ヒトアミロイドベータ（Ａｂｅｔａ）は、アルツハイマー病患者の脳に見られる不溶性アミロイドプラーク沈着物の主成分です。プラークは、Ａベータの繊維状凝集体で構成される。アミロイドベータ原線維は、アルツハイマー病の進行した段階に関連する。

【0081】

初期のアルツハイマー病の認知的特徴は、新しい記憶を形成することができないことである。初期の記憶喪失は、可溶性Ａβオリゴマーによって引き起こされるシナプス障害と考えられる。これらのオリゴマーは、シナプス可塑性の古典的な実験パラダイムである長期増強をブロックし、ＡＤ脳組織およびトランスジェニックＡＤモデルで著しく上昇する。初期の記憶喪失は、ニューロンの死の前のシナプス不全から生じ、シナプス不全は原線維ではなく可溶性Ａβオリゴマーの作用に由来すると仮定されてきた。Ｌａｃｏｒ ｅｔ ａｌ．，Ｓｙｎａｐｔｉｃ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｂｙ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ'ｓ－ｒｅｌａｔｅｄ ａｍｙｌｏｉｄ β ｏｌｉｇｏｍｅｒｓ，Ｊ． Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２００４，２４（４５）：１０１９１－１０２００．

【0082】

Ａベータは、ニューロンのシナプスに集中していることがわかっている、内在性膜タンパク質、アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）の切断産物である。Ａベータの可溶性形態はアルツハイマー病患者の脳と組織に存在し、それらの存在は疾患の進行と相関する。Ｙｕ ｅｔ ａｌ．，２００９，Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｓｏｌｕｂｌｅ ａｍｙｌｏｉｄ ｂｅｔａ－ｐｅｐｔｉｄｅ ｏｌｉｇｏｍｅｒ，Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，４８（９）：１８７０－１８７７．可溶性アミロイドβオリゴマーは、学習と記憶をブロックする神経シナプスの変化を誘発することが実証される。

【0083】

より小さく、可溶性のＡβオリゴマーは、正常なシナプス可塑性に重要な多くのシグナル伝達経路を妨害し、最終的に脊椎とシナプスの損失をもたらします。Ｓｅｌｋｏｅ ｅｔ ａｌ．，２００８，Ｓｏｌｕｂｌｅ ｏｌｉｇｏｍｅｒｓ ｏｆ ｔｈｅ ａｍｙｌｏｉｄ ｂｅｔａ－ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｍｐａｉｒ ｓｙｎａｐｔｉｃ ｐｌａｓｔｉｃｉｔｙ ａｎｄ ｂｅｈａｖｉｏｒ，Ｂｅｈａｖ Ｂｒａｉｎ Ｒｅｓ １９２（１）：１０６－１１３．アルツハイマー病はシナプス可塑性疾患として始まり、持続します。

【0084】

可溶性Ａβオリゴマーの存在は、アルツハイマー病前の脳の早期の認知機能低下の原因であると考えられる。アミロイドベータオリゴマーがニューロンシナプスで結合し、シグマ－２受容体がニューロンとグリアにかなりの量で存在することが知られる。

【0085】

シグマ受容体は、組織および状態に関連したいくつかの異なるタンパク質シグナル伝達複合体に関与する多機能アダプター／シャペロンタンパク質である。シグマ２受容体は、脳およびさまざまな末梢組織で低レベルで発現する。（Ｗａｌｋｅｒ ｅｔ ａｌ．，１９９０ Ｓｉｇｍａ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ：ｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｒｅｖ．４２：３５５－４０２）。Ｓｉｇｍａ－２受容体は、ヒトの海馬と皮質に存在する。シグマ２受容体は、腫瘍細胞増殖のバイオマーカーとしても以前に検証された。（Ｍａｃｈ ｅｔ ａｌ．，Ｓｉｇｍａ－２ ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ ａｓ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ ｏｆ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｉｎ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．５７：１５６－１６１，１９９７）。

【0086】

Ｓｉｇｍａ－２受容体は、ヘム結合、チトクロームＰ４５０代謝、コレステロール合成、プロゲステロンシグナル伝達、アポトーシス、膜輸送など、多くのシグナル伝達経路に関与する。シグマ受容体結合部位／シグナル伝達経路のサブセットのみがＡＤのオリゴマーシグナル伝達に関連する。現在、シグマ－２受容体のノックアウトは利用できず、シグマ－２配列のヒト変異は神経変性の状況で研究されていない。

【0087】

シグマ－２受容体は、ラット肝臓のシグマ－２受容体を不可逆的に標識する光親和性プローブＷＣ－２１の使用により、ラット肝臓のプロゲステロン受容体膜成分１（ＰＧＲＭＣ１）として最近同定された。Ｘｕ ｅｔ ａｌ． Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ＰＧＲＭＣ１ ｐｒｏｔｅｉｎ ｃｏｍｐｌｅｘ ａｓ ｔｈｅ ｐｕｔａｔｉｖｅ ｓｉｇｍａ－２ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｂｉｎｄｉｎｇ ｓｉｔｅ．Ｎａｔｕｒｅ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ ２、記事番号３８０、２０１１年７月５日、参照により本明細書に組み込まれる。ＰＧＲＭＣ１（プロゲステロン受容体膜成分１）は、２０１１年８月にＸｕらによってシグマ－２受容体活性の重要な２５ｋＤａ成分として同定される。ＰＧＲＭＣ１は、ｓｉｇｍａ－１タンパク質と相同性のない単一の膜貫通タンパク質である。ファミリーメンバーにはＰＧＲＭＣ２とニューデシンが含まれる。ＰＧＲＭＣ１には、シトクロムｂ５ヘム結合ドメインが含まれる。ＰＧＲＭＣ１は、Ｓ１タンパク質と相同性のない単一の膜貫通タンパク質である。家族にはＰＧＲＭＣ２とニューデシンが含まれる。ＰＧＲＭＣ１には、シトクロムｂ５ヘム結合ドメインが含まれる。内因性ＰＧＲＭＣ１リガンドには、プロゲステロン／ステロイド、コレステロール代謝産物、グルココルチコイド、およびヘムが含まれる。ＰＧＲＭＣ１は、異なる細胞内位置の異なるタンパク質複合体に関連するシャペロン／アダプターとして機能する（Ｃａｈｉｌｌ ２００７．プロゲステロン受容体膜成分１：統合的レビュー。ＰＧＲＭＣ１は、ヘムに還元活性を結合し、ＣＹＰ４５０タンパク質と複合体を形成し（レドックス反応の調節）、ＰＡＩＲＢＰ１と関連し、アポトーシスのプロゲステロンブロックを仲介し、Ｉｎｓｉｇ－１とＳＣＡＰと関連して、低コレステロールに応答してＳＲＥ関連の遺伝子転写を誘導する。Ｃ．ｅｌｅｇａｎｓのホモログＶＥＭ１はＵＮＣ－４０／ＤＣＣと結合して軸索ガイダンスを仲介する。ＰＧＲＭＣ１には、２つのＳＨ２ターゲット配列、ＳＨ３ターゲット配列、チロシンキナーゼ部位、２つの好酸性キナーゼ部位（ＣＫ２）、およびＥＲＫ１とＰＤＫ１のコンセンサス結合部位が含まれる。ＰＧＲＭＣ１には、膜輸送（小胞輸送、カルベオリン含有ピットのクラスリン依存性エンドサイトーシス）に関与するいくつかのＩＴＡＭシーケンスが含まれる。

【0088】

理論に拘束されるわけではないが、シグマ－２受容体はニューロンのＡベータオリゴマーの受容体であることが提案される。プリオンタンパク質、インスリン受容体、ベータアドレナリン受容体およびＲＡＧＥ（最終糖化産物の受容体）を含む可溶性Ａベータオリゴマーの様々な受容体が文献で提案される。）Ｌａｕｒeｎ，Ｊ．ｅｔ ａｌ，２００９， Ｎａｔｕｒｅ，４５７（７２３３）：１１２８－１１３２；Ｔｏｗｎｓｅｎｄ，Ｍ．ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２００７，２８２：３３３０５－３３３１２；Ｓｔｕｒｃｈｌｅｒ，Ｅ．ｅｔ ａｌ，２００８，Ｊ．Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２８（２０）：５１４９－５１５８．実際、多くの研究者は、Ａベータオリゴマーが複数の受容体タンパク質に結合する可能性があると考える。理論に拘束されることなく、本発明者らは、ニューロンに位置する（必ずしも排他的ではない）Ａベータオリゴマーの追加の受容体を仮定する。

【0089】

理論に縛られることなく、Ａベータオリゴマーはシグマタンパク質複合体に結合し、異常な人身売買とシナプス損失を引き起こすシグマ受容体アゴニストである。本明細書において、ニューロンにおけるこの相互作用および／またはシグマ受容体機能に拮抗する本明細書に記載の化合物は、Ａβオリゴマーと競合またはそうでなければ干渉し、ニューロン応答を正常に戻すことが実証される。そのような化合物は、機能性シグマ－２受容体拮抗薬と見なされる。

【0090】

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の任意の実施形態の化合物は、可溶性Ａβオリゴマー誘導シナプス喪失の阻害、および膜輸送アッセイにおける可溶性Ａβオリゴマー誘導欠損の阻害に関して、神経細胞の機能的アンタゴニストとして作用し得る。シグマ－２受容体で高い親和性を示す。また、他の非シグマ受容体と比較して、１つ以上のシグマ受容体に対して高い選択性を持つ。優れた薬物のような特性を示す。

【0091】

いくつかの実施形態では、本明細書に詳述される特定のインビトロアッセイ基準を満たす機能的アンタゴニストとして作用する本明細書に記載の任意の実施形態による化合物は、１つまたは複数の関連動物行動モデルにおいて行動効力を示すか、行動効力を有すると予測される。いくつかの実施形態において、行動効力は、１０ｍｇ／ｋｇ ｐ．ｏ．以下で決定される。

【0092】

本明細書に記載の本発明において有用な行動効力を予測するインビトロアッセイプラットフォームは、特に米国特許第９，７９６，６７２号で当技術分野で公知であり、その全体が参照により本明細書に組み入れられる。インビトロアッセイプラットフォームによれば、本明細書に記載の任意の実施形態の化合物は、シグマ－２受容体に高い親和性で結合し得る。ニューロンにおけるＡベータオリゴマー誘導効果に対する機能的拮抗薬として機能する。中枢ニューロンのＡベータオリゴマー誘導シナプス損失を阻害するか、ニューロンへのＡベータオリゴマー結合を減少させてシナプス損失を抑制する。Ａベータオリゴマーの不在下での人身売買やシナプス数には影響しない。インビトロアッセイにおける活性のこのパターンは、「治療的表現型」と呼ばれる。本明細書に記載の任意の実施形態による化合物の、Ａベータオリゴマーの非存在下で正常な機能に影響を与えることなく成熟ニューロンにおけるＡベータオリゴマー効果をブロックする能力は、治療表現型の基準を満たす。治療的表現型を有する本明細書に記載の任意の実施形態の化合物は、Ａベータオリゴマー誘発性シナプス機能障害を遮断することができる。

【0093】

いくつかの態様において、本明細書に記載の任意の態様による化合物は、シグマ－２アンタゴニスト活性、シグマ－２受容体に対する高い親和性、および可溶性Ａベータオリゴマー結合またはＡベータオリゴマー誘導シナプス機能不全を遮断する能力を示す。

【0094】

いくつかの態様において、本明細書に記載の任意の態様による化合物は、血液脳関門を通過する能力を増強するように設計される。

【0095】

いくつかの態様において、本明細書に記載の任意の態様による化合物は、可溶性Ａベータオリゴマーとシグマ－２受容体との間の結合を遮断する。

【0096】

いくつかの態様において、本明細書に記載の任意の態様による化合物は、シグマ－２受容体に対して高い親和性を示す。

【0097】

本発明の実施形態は、神経変性疾患および認知低下の治療に有用な本明細書に記載の任意の実施形態による化合物、そのような化合物および薬学的に許容される担体、賦形剤、または希釈剤を含む医薬組成物、ならびに神経変性疾患および認知の治療方法に関する。そのような化合物および医薬組成物を薬学的に許容される量で投与することにより低下する。

【0098】

本発明の化合物
様々な実施形態は、式Ｉの化合物：

【化8】

またはその薬学的に許容される塩に関する。

【0099】

式Ｉの置換基Ｒ^ａ、Ｒ^ｂ、Ｒ^ｃ、Ｒ^ｄおよびＲ^ｅはそれぞれ、Ｈ、ヒドロキシル、ハロ、アルキル、アルコキシ、ＣＦ_３、ＳＯ_２ＣＨ_３、およびモルホリノからなる群から独立して選択される。

【0100】

式Ｉの置換基Ｒ１は、水素、アルキル、フェニル、または－ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ_３）_２からなる群から選択される。

【0101】

式Ｉの置換基Ｒ^２は、任意に置換される環状アミノ基である。

【0102】

いくつかの態様において、式Ｉの置換基Ｒ^ａ、Ｒ^ｂ、Ｒ^ｃ、Ｒ^ｄおよびＲ^ｅのそれぞれは、Ｈ、ヒドロキシル、Ｃｌ、Ｆ、メチル、－ＯＣＨ_３、－ＯＣ（ＣＨ_３）_３、Ｏ－ＣＨ（ＣＨ_３）_２、ＣＦ_３、ＳＯ_２ＣＨ_３、およびモルホリノからなる群から独立して選択される。

【0103】

いくつかの態様において、式Ｉの置換基Ｒ^ａ、Ｒ^ｂ、Ｒ^ｃ、Ｒ^ｄおよびＲ^ｅのそれぞれは、Ｈ、Ｃｌ、Ｆ、およびＣＦ_３からなる群より独立して選択される。

【0104】

いくつかの態様において、式Ｉの置換基Ｒ^ａ、Ｒ^ｂ、Ｒ^ｄおよびＲ^ｅはそれぞれ独立してＨおよびＲ^ｃであり、Ｈ、ヒドロキシル、ハロ、アルキル、アルコキシ、ＣＦ_３、ＳＯ_２ＣＨ_３、およびモルホリノからなる群から選択される。

【0105】

いくつかの実施形態では、式Ｉの置換基Ｒ^ａ、Ｒ^ｂ、Ｒ^ｄおよびＲ^ｅはそれぞれ独立してＨおよびＲ^ｃであり、Ｈ、ヒドロキシル、Ｃｌ、Ｆ、メチル、－ＯＣＨ_３、－ＯＣ（ＣＨ_３）_３、Ｏ－ＣＨ（ＣＨ_３）_２、ＣＦ_３、ＳＯ_２ＣＨ_３、およびモルホリノからなる群から選択される。

【0106】

いくつかの態様において、式Ｉの置換基Ｒ^ａ、Ｒ^ｂ、Ｒ^ｄおよびＲ^ｅはそれぞれ独立してＨおよびＲ^ｃであり、Ｈ、Ｃｌ、Ｆ、およびＣＦ_３からなる群より選択される。

【0107】

様々な態様において、Ｒ^２は、窒素原子を介して式Ｉの脂肪族鎖に結合している環に窒素を含むヘテロシクロアルキルまたはヘテロアリールである。いくつかの実施形態では、例えば、Ｒ^２は、

【化9】

などから選択される任意に置換された環状アミノ基であり、
ここで、各窒素含有ヘテロシクロアルキルまたはヘテロアリールは、ヒドロキシル、ハロ、ＣＦ_３、アルコキシ、アリールオキシ、任意に置換されたＣ_１－Ｃ_１０アルキル、任意に置換されたＣ_５－Ｃ_１０アリール、任意に置換されたＣ_３－Ｃ_１０ヘテロアリール、置換または非置換Ｃ_３－Ｃ_１０シクロアルキルまたはヘテロシクロアルキルから選択される１つ以上の置換基で任意に置換され得る。

【0108】

様々な実施形態において、Ｒ^２は、任意に置換されたアジリジニル、任意に置換されたピロリジニル、任意に置換されたイミジゾリジニル、任意に置換されたピペリジニル、任意に置換されたピペラジニル、任意に置換されたオキソピペラジニル、および任意に置換されたモルホリニルからなる群から選択される。

【0109】

いくつかの実施形態では、Ｒ^２が置換環状アミノである場合、環状アミノ基の１つ以上の水素原子は、アルカノイル、アルコキシ、アルコキシアルキル、（アルコキシ）アルコキシアルキル、アルコキシカルボニル、アルキル、アリールオキシから選択される基で置換される、アリーロイル、シクロアルカノイル、－ＯＣ（Ｏ）ＮＣＨ（ＣＨ_３）_２、（Ｎ、Ｎ－ジメチルアミノ）ピリジニル、（Ｎ、Ｎ－ジメチルアミノ）スルホニル、ハロ、ヘテロシクリル、（ヘテロシクリル）アルコキシアルキル、ヒドロキシル、ヒドロキシアルキル、メチルピペリジニル、メチルスルホニル、メチルスルホニルフェニル、モルホリニルピリジニル、ペルフルオロアルキル、フェニル、ピペリジニル、ピロリジニルピリジニル、テトラヒドロピラニル、ＣＦ_３、いくつかの実施形態では、環状アミノ基の同じ炭素上の２つの水素原子は、スピロ化合物を形成するために

【化10】

から選択される化合物で置き換えられる。

【0110】

いくつかの態様において、Ｒ^２は、ピロリジニルまたはアルコキシアルキル、アルコキシカルボニル、アルキル、ヒドロキシル、およびヒドロキシアルキルからなる群より選択される１つ以上の置換基で置換された置換ピロリジニルである。いくつかの実施形態では、Ｒ^２は、アルコキシアルキル、アルコキシカルボニル、アルキル、ヒドロキシル、およびヒドロキシアルキルからなる群から選択される単一の置換基で置換された置換ピロリジニルである。一部の実施形態では、Ｒ^２は、ヒドロキシル、ヒドロキシメチル、メトキシメチル、メトキシカルボニルおよびメチルからなる群から選択される単一の置換基で置換された置換ピロリジニルである。

【0111】

いくつかの態様において、Ｒ^２は、ピペリジニル、またはアルコキシ、アルコキシアルキル、（アルコキシ）アルコキシアルキル、アルコキシカルボニル、アルキル、アリールオキシ、－ＯＣ（Ｏ）ＮＣＨ（ＣＨ３）_２、（Ｎ、Ｎ－ジメチルアミノ）ピリジニル、ハロ、ヘテロシクリル、（ヘテロシクリル）アルコキシアルキル、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキル、メチルピペリジニル、メチルスルホニルフェニル、モルホリニルピリジニル、ペルフルオロアルキル、フェニル、ピペリジニル、ピロリジニルピリジニル、テトラヒドロピラニル、およびＣＦ_３からなる群から選択される１つ以上の置換基で置換された置換ピペリジニルである。いくつかの実施形態では、Ｒ^２は、ピペリジニルまたはアルコキシ、アルコキシアルキル、（アルコキシ）アルコキシアルキル、アルコキシカルボニル、アルキル、アリールオキシ、－ＯＣ（Ｏ）ＮＣＨ（ＣＨ_３）_２からなる群から選択される単一の置換基で置換された置換ピペリジニルである。いくつかの実施形態では、Ｒ^２は、ピペリジニルまたはアルコキシ、アルコキシアルキル、（アルコキシ）アルコキシアルキル、アルコキシカルボニル、アルキル、アリールオキシ、－ＯＣ（Ｏ）ＮＣＨ（ＣＨ_３）_２、Ｎ、Ｎ－ジメチルアミノ）ピリジニル、ハロ、ヘテロシクリル、（ヘテロシクリル）アルコキシアルキル、ヒドロキシル、ヒドロキシアルキル、メチルピペリジニル、メチルスルホニルフェニル、モルホリニルピリジニル、ペルフルオロアルキル、フェニル、ピペリジニル、ピロリジニルピリジニル、テトラヒドロピラニル、およびＣＦ_３からなる群から選択される単一の置換基で置換された置換ピペリジニルである。一部の実施形態において、Ｒ^２は、ピペリジニルまたはメチル、イソプロピル、イソブチル、ＣＦ_３、ヒドロキシメチル、ヒドロキシエチル、（イソプロピルオキシ）エチル、－（ＣＨ_２）_２Ｏ（ＣＨ_２）_２ＯＣＨ_３－（ＣＨ_２）_３ＯＣＨ_３、－Ｃ（Ｏ）ＯＭｅ、－Ｃ（Ｏ）ＯＥｔ、ヒドロキシル、メトキシ、イソプロピルオキシ、フェニルオキシ、Ｆ、エトキシ、フェニル、からなる群から選択される単一の置換基で置換された置換ピペリジニルであり、

【化11】

一部の実施形態では、Ｒ^２は、ピペリジニルまたはピペリジニルの４位で、アルコキシ、アルコキシアルキル、（アルコキシ）アルコキシアルキル、アルコキシカルボニル、アルキル、アリールオキシ、－ＯＣ（Ｏ）ＮＣＨ（ＣＨ_３）_２、（Ｎ、Ｎ－ジメチルアミノ）ピリジニル、ハロ、ヘテロシクリル、（ヘテロシクリル）アルコキシアルキル、ヒドロキシル、ヒドロキシアルキル、メチルピペリジニル、メチルスルホニルフェニル、モルホリニルピリジニル、ペルフルオロアルキル、フェニル、ピペリジニル、ピロリジニルピリジニル、テトラヒドロピラニル、およびＣＦ_３からなる群から選択される単一の置換基で置換された置換ピペリジニルである。いくつかの実施形態では、Ｒ^２は、ピペリジニルまたはピペリジニルの４位でメチル、イソプロピル、イソブチル、ＣＦ_３、ヒドロキシメチル、ヒドロキシエチル、（イソプロピルオキシ）エチル、－（ＣＨ_２）_２Ｏ（ＣＨ_２）_２ＯＣＨ_３、－（ＣＨ_２）_３ＯＣＨ_３、－Ｃ（Ｏ）ＯＭｅ、－Ｃ（Ｏ）ＯＥｔ、ヒドロキシル、メトキシ、イソプロピルオキシ、フェニルオキシ、Ｆ、エトキシ、フェニル、

【化12】

からなる群から選択される単一の置換基で置換された置換ピペリジニルである。

【0112】

いくつかの態様において、Ｒ^２は、アルコキシアルキル、アルキル、－ＯＣ（Ｏ）ＮＣＨ（ＣＨ_３）_２、ヒドロキシル、フェニルからなる群から独立して選択されるピペリジニルの同じ炭素上の２つの置換基で置換されたピペリジニルまたは置換ピペリジニルである。一部の実施形態では、Ｒ^２は、ピペリジニル、またはアルコキシアルキル、アルキル、－ＯＣ（Ｏ）ＮＣＨ（ＣＨ_３）_２、ヒドロキシル、およびフェニルからなる群から独立して選択されるピペリジニルの４位で２つの置換基で置換された置換ピペリジニルである。いくつかの実施形態では、Ｒ^２は、ピペリジニル、またはヒドロキシルおよびメチル；ヒドロキシルおよびエチル；ヒドロキシルおよび－（ＣＨ_２）_２ＯＣＨ_３；ヒドロキシルおよびフェニル；メチルおよびフェニル；メチルおよび－ＯＣ（Ｏ）ＮＣＨ（ＣＨ_３）_２；およびブチルおよび－ＯＣ（Ｏ）ＮＣＨ（ＣＨ_３）_２からなる群から選択される４位で２つの置換基で置換された置換ピペリジニルである。。いくつかの実施形態では、ピペリジニルの同じ炭素上の２つの水素原子は、スピロ化合物を形成するために、

【化13】

から選択される化合物で置き換えられる。いくつかの実施形態では、ピペリジニルの４位の２つの水素原子は、スピロ化合物を形成するために、

【化14】

から選択される化合物で置き換えられる。

【0113】

いくつかの態様において、Ｒ^２は、ピペラジニル、またはアルカノイル、アルコキシカルボニル、アリーロイル、シクロアルカノイル、（Ｎ、Ｎ－ジメチルアミノ）スルホニル、ヘテロシクリル、メチルスルホニル、およびフェニルからなる群から選択される１つ以上の置換基で置換された置換ピペラジニルである。一部の実施形態において、Ｒ^２は、アルカノイル、アルコキシカルボニル、アリーロイル、シクロアルカノイル、（Ｎ、Ｎ－ジメチルアミノ）スルホニル、ヘテロシクリル、メチルスルホニル、およびフェニルからなる群から選択される単一の置換基で置換された置換ピペラジニルである。一部の実施形態では、Ｒ^２は、－Ｃ（Ｏ）ＯＣ（ＣＨ_３）_３、－Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）_２、－Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ_２ＣＨ_３、－Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ_３、フェニル、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ_３、－Ｃ（Ｏ）Ｐｈ、－ＳＯ_２Ｍｅ、－ＳＯ_２Ｎ（ＣＨ_３）_２

【化15】

からなる群から選択される単一の置換基で置換された置換ピペラジニルである。一部の実施形態において、Ｒ^２は、－Ｃ（Ｏ）ＯＣ（ＣＨ_３）_３、－Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）_２、－Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ_２ＣＨ_３、－Ｃ（Ｏ）ＯＣＨ_３、フェニル、－Ｃ（Ｏ）ＣＨ_３、－Ｃ（Ｏ）Ｐｈ、－ＳＯ_２Ｍｅ、－ＳＯ_２Ｎ（ＣＨ_３）_２、

【化16】

からなる群から選択される４位で単一の置換基で置換された置換ピペラジニルである。

【0114】

特定の態様において、Ｒ^２は式：

【化17】

の置換ピペジニルであり、Ｒ^３は水素またはＣ_１－Ｃ_８アルキルであり、Ｒ^４は水素、ヒドロキシル、ハロゲン、ＣＦ_３、アルコキシ、アリールオキシ、任意に置換されたＣ_１－Ｃ_１０アルキル、任意に置換されたＣ_５－Ｃ_１０アリール、任意に置換されたＣ_３－Ｃ_１０ヘテロアリール、任意に置換されたＣ_３－Ｃ_１０シクロアルキルまたは任意に置換されたＣ_３－Ｃ_１０ヘテロシクロアルキルである。

【0115】

ある態様において、Ｒ^２は、

【化18】

であり、式中、Ｒ^５およびＲ^６はそれぞれ独立して、水素、ヒドロキシル、スルホニル、ジアルキルアミノ、任意に置換されたＣ_１－Ｃ_１０アルキル、任意に置換されたＣ_５－Ｃ_１０アリール、任意に置換されたＣ_３－Ｃ_１０ヘテロアリール、任意に置換されたＣ_３－Ｃ_１０シクロアルキルまたは任意に置換されたＣ_３－Ｃ_１０ヘテロシクロアルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ^５は水素、ジアルキルアミノ、またはＣ_３－Ｃ_１０ヘテロシクロアルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ^５は水素、ジアルキルアミノ、ピロリジニルまたはモルホリニルである。いくつかの実施形態では、Ｒ^６はスルホニルである。いくつかの実施形態では、Ｒ^６はメチルスルホニルである。

【0116】

ある態様において、Ｒ^２は：

【化19】

であり、式中、Ｒ^３ａは、水素およびＣ_１－Ｃ_８アルキルからなる群から選択され、ｎは０、１、２から選択された整数である。

【0117】

いくつかの実施形態では、Ｒ^２は、

【化20】

である。

【0118】

ある態様において、Ｒ^２は任意に置換されたモルホリニルである。いくつかの実施形態では、Ｒ^２はモルホリニルである。

【0119】

いくつかの実施形態では、Ｒ^２ｏｒは、次式の任意に置換されたピペラジニルである。

【化21】

（式中、Ｒ^７は水素、ヒドロキシル、スルホニル、ジアルキルアミノスルホニル、アルコキシカルボニル、アシル、ベンゾイル、シクロアルキルカルボニル、任意に置換されたＣ_１－Ｃ_１０アルキル、任意に置換されたＣ_５－Ｃ_１０アリール、任意に置換されたＣ_３－Ｃ_１０ヘテロアリール、任意に置換されたＣ_３－Ｃ_１０シクロアルキルまたは任意に置換されたＣ_３－Ｃ_１０ヘテロシクロアルキルである。いくつかの実施形態では、Ｒ^７は、スルホニル、ジアルキルアミノスルホニル、アルコキシカルボニル、アシル、ベンゾイル、シクロアルキルカルボニル、Ｃ_５－Ｃ_１０アリールまたは任意に置換されたＣ_３－Ｃ_１０ヘテロシクロアルキルである。

【0120】

いくつかの態様において、Ｒ^２は

【化22】

である。

【0121】

様々な態様において、Ｒ^２は任意に置換されたピロリジニルである：

【化23】

式中、Ｒ^８は水素、ヒドロキシル、スルホニル、任意に置換されたＣ_１－Ｃ_１０アルキル、任意に置換されたＣ_５－Ｃ_１０アリール、任意に置換されたＣ_３－Ｃ_１０ヘテロアリール、任意に置換されたＣ_３－Ｃ_１０シクロアルキルまたは任意に置換されたＣ_３－Ｃ_１０ヘテロシクロアルキルである。一部の実施形態において、Ｒ^８は、水素、ヒドロキシルまたは任意に置換されたＣ_１～Ｃ_１０アルキルである。

【0122】

いくつかの態様において、Ｒ^２は：

【化24】

である。

【0123】

いくつかの態様において、Ｒ^２は任意に置換された二環式環または任意に置換された縮合環である。例えば、いくつかの実施形態では、Ｒ^２は、

【化25】

からなる群から選択され、
式中、Ｒ^９は水素、ヒドロキシル、スルホニル、任意に置換されたＣ_１－Ｃ_１０アルキル、任意に置換されたＣ_５－Ｃ_１０アリール、任意に置換されたＣ_３－Ｃ_１０ヘテロアリール、任意に置換されたＣ_３－Ｃ_１０シクロアルキルまたは任意に置換されたＣ_３－Ｃ_１０ヘテロシクロアルキルである。

【0124】

ある態様において、Ｒ^２は、

【化26】

であり、式中、Ｒ^１１ａ、Ｒ^１１ｂ、Ｒ^１１ｃ、およびＲ^１１ｄのそれぞれは、水素、ヒドロキシ、スルホニル、任意に置換されたＣ_１－Ｃ_１０アルキル、任意に置換されたＣ_５－Ｃ_１０アリール、任意に置換されたＣ_３－Ｃ_１０ヘテロアリール、任意に置換されたＣ_３－Ｃ_１０シクロアルキルまたは任意に置換されたＣ_３－Ｃ_１０ヘテロシクロアルキルから独立して選択される。特定の実施形態では、Ｒ^２は、

【化27】

である。

【0125】

本明細書に開示されるいくつかの実施形態は、各Ｒ^ａ、Ｒ^ｂ、Ｒ^ｃ、Ｒ^ｄおよびＲ^ｅが、Ｒ^ａ、Ｒ^ｂ、Ｒ^ｃ、Ｒ^ｄおよびＲ^ｅのそれぞれについて本明細書に開示される任意の実施形態から選択される化合物を記載する。Ｒ^１は、Ｒ^１について本明細書に開示されている任意の実施形態から選択される。Ｒ^２は、Ｒ^２について本明細書に開示された任意の実施形態から選択される。

【0126】

いくつかの実施形態は、

【化28】

から選択される化合物に関する。

【0127】

いくつかの実施形態は、

【化29】

からなる群から選択される化合物に関する。

【0128】

さらなる態様は、式ＩＩの化合物：

【化30】

またはその薬学的に許容される塩に関する。

【0129】

式ＩＩのそれぞれの置換基Ｒ^ｆ、Ｒ^ｇ、Ｒ^ｈ、Ｒ^ｉおよびＲ^ｊは、Ｈ、ヒドロキシル、ハロ、アルキル、アルコキシ、ＣＦ_３、ＳＯ_２ＣＨ_３、およびモルホリノからなる群から独立して選択される。

【0130】

式ＩＩの置換基Ｒ^１０は、任意に置換された環状アミノ基であり、ｍは０から３の整数である。

【0131】

いくつかの態様において、式ＩＩのそれぞれの置換基Ｒ^ｆ、Ｒ^ｇ、Ｒ^ｈ、Ｒ^ｉおよびＲ^ｊは、Ｈ、ヒドロキシル、およびアルコキシからなる群より独立して選択される。いくつかの実施形態では、式ＩＩのそれぞれの置換基Ｒ^ｆ、Ｒ^ｇ、Ｒ^ｈ、Ｒ^ｉおよびＲ^ｊは、Ｈ、ヒドロキシル、およびメトキシからなる群から独立して選択される。いくつかの実施形態では、それぞれの置換基Ｒ^ｆ、Ｒ^ｇ、およびＲ^ｊはＨであり、それぞれのＲ^ｇ、およびＲ^ｈは、ヒドロキシル、またはメトキシから独立して選択される。

【0132】

一部の実施形態において、Ｒ^１０は、任意に置換されたアジリジニル、任意に置換されたピロリジニル、任意に置換されたイミジゾリジニル、任意に置換されたピペリジニル、任意に置換されたピペラジニル、任意に置換されたオキソピペラジニル、または任意に置換されたモルホリニル、および任意の個々の置換または非置換ピペリジニルであるまたは、非置換モルホリニル、置換または非置換ピペラジニル、置換または非置換ピロリジニル、置換または非置換二環式、または式Ｉに関して上述した置換または非置換縮合環である。

【0133】

いくつかの態様において、Ｒ^１０は、以下のような任意に置換された縮合環である：

【化31】

式中、Ｒ^１１ｅ、Ｒ^１１ｆ、Ｒ^１１ｇ、およびＲ^１１ｈのそれぞれは、水素、ヒドロキシ、スルホニル、任意に置換されたＣ_１－Ｃ_１０アルキル、任意に置換されたＣ_５－Ｃ_１０アリール、任意に置換されたＣ_３－Ｃ_１０ヘテロアリール、任意に置換されたＣ_３－Ｃ_１０シクロアルキル、または任意に置換されたＣ_３－Ｃ_１０ヘテロシクロアルキルから独立して選択される。特定の実施形態では、Ｒ^１０は、

【化32】

ではなく、ｍが２の場合である。

【0134】

ある態様において、Ｒ^１０は、

【化33】

である。

【0135】

いくつかの実施形態は、式ＩＩａ：

【化34】

の化合物を記載する。

【0136】

それぞれの置換基Ｒ^ｋおよびＲ^１は、Ｈ、ヒドロキシル、ハロ、アルキル、アルコキシ、ＣＦ_３、ＳＯ_２ＣＨ_３、およびモルホリノからなる群から独立して選択される。

【0137】

置換基Ｒ^１２は、アリールオキシ、アルケニルオキシ、アルコキシ、アミノアルキル、Ｎ、Ｎ－ジメチルアミノアルキル、ピロリジニル、ｎ－メチルピロリジニル、Ｎ－アシルピロリジニル、カルボキシアミノアルキル、ヒドロキシアルキル、－Ｏ（ＣＨ_２）_２ＯＣ（Ｏ）ＣＨ_３、

【化35】

からなる群から選択される。

【0138】

いくつかの態様において、それぞれの置換基Ｒ^ｋおよびＲ^ｌは、Ｈ、ヒドロキシルおよびメトキシからなる群より独立して選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ^１はメトキシであり、Ｒ^ｋはヒドロキシルである。

【0139】

いくつかの態様において、置換基Ｒ^１２はフェニルオキシ、－ＯＣＨ_２ＣＨ＝ＣＨ_２、メトキシ、－ＣＨ_２ＮＨ_２、－ＣＨ（ＮＨ_２）ＣＨ_３、－ＣＨ_２Ｎ（Ｍｅ）_２、－ＣＨ（ＣＨ_３）Ｎ（Ｍｅ）_２、－ＣＨ_２ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_３、－ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ_３、－Ｏ（ＣＨ_２）_２ＯＣ（Ｏ）ＣＨ_３、

【化36】

からなる群から選択される。

【0140】

いくつかの実施形態は、以下からなる群から選択される化合物を説明する。

【化37】

【0141】

いくつかの実施形態は、

【化38】

からなる群から選択される化合物を説明する。

【0142】

追加の態様には、本明細書に記載の任意の態様による化合物の塩、溶媒和物、立体異性体、プロドラッグ、および活性代謝産物が含まれる。

【0143】

いくつかの実施形態は、本明細書に記載の任意の実施形態による化合物の遊離塩基形態に関する。他の実施形態は、例えば、遊離塩基の薬学的に許容される酸付加塩または薬学的に許容される付加塩を含むそのような化合物の塩を含む。薬学的に許容される酸付加塩の例には、硝酸、リン酸、硫酸、または臭化水素酸、ヨウ化水素酸、フッ化水素酸、リンに由来する塩、ならびに脂肪族モノおよびジカルボン酸などの非毒性有機酸に由来する塩、フェニル置換アルカン酸、ヒドロキシルアルカン酸、アルカン二酸、芳香族酸、脂肪族および芳香族スルホン酸、および酢酸、マレイン酸、コハク酸、またはクエン酸が含まれるが、これらに限定されない。そのような塩の非限定的な例には、ナパジシル酸塩、ベシル酸塩、硫酸塩、ピロ硫酸塩、重硫酸塩、亜硫酸塩、重亜硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩、リン酸一水素、リン酸二水素、メタリン酸塩、ピロリン酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、プロピオン酸塩、カプリル酸塩、イソ酪酸塩、シュウ酸塩、マロン酸塩、コハク酸塩、スベレート、セバケート、フマル酸塩、マレイン酸塩、マンデル酸塩、安息香酸塩、クロロ安息香酸塩、メチル安息香酸塩、ジニトロ安息香酸塩、フタル酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、トルエンスルホン酸塩、フェニル酢酸塩、クエン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、酒石酸塩、メタンスルホン酸塩などから由来する塩に限定されないが、これらを含む。上記の化合物の追加の塩形態には、アルギン酸塩などのアミノ酸の塩、およびグルコン酸、ガラクツロン酸の塩が含まれる（例えば、Ｂｅｒｇｅ，ｅｔ ａｌ．"Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ，"Ｊ．Ｐｈａｒｍａ．Ｓｃｉ．１９７７；６６：１を参照）。

【0144】

薬学的に許容される塩基付加塩は、アルカリ金属およびアルカリ土類金属または有機アミンなどの金属またはアミンで形成される。カチオンとして使用される金属の例は、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウムなどである。適切なアミンの例には、Ｎ、Ｎ'－ジベンジルエチレンジアミン、クロロプロカイン、コリン、ジエタノールアミン、ジシクロヘキシルアミン、エチレンジアミン、Ｎ－メチルグルカミン、およびプロカインが含まれる。前記酸性化合物の塩基付加塩は、遊離酸形態を十分な量の所望の塩基と接触させて、従来の方法で塩を生成することにより調製される。遊離酸型は、塩型を酸と接触させ、遊離酸を単離することにより再生され得る。

【0145】

様々な実施形態は、総塩および部分塩、すなわち、上記の化合物または塩の酸１モル当たり１、２または３当量、好ましくは２当量の塩基、１、２または３当量、好ましくは１当量の塩、本明細書に記載の任意の実施形態による化合物の塩基のモル当たりの酸である。典型的には、本明細書に記載の任意の実施形態による化合物の薬学的に許容される塩は、必要に応じて所望の酸または塩基を使用することにより容易に調製することができる。塩は溶液から沈殿し、ろ過によって収集されるか、溶媒の蒸発によって回収される。例えば、塩酸などの酸の水溶液を、本明細書に記載の任意の実施形態による化合物の水性懸濁液に加え、得られた混合物を蒸発乾固（凍結乾燥）させて、酸付加塩を固体として得ることができる。あるいは、本明細書に記載される任意の実施形態による化合物は、適切な溶媒、例えばイソプロパノールなどのアルコールに溶解されても良く、酸は同じ溶媒または別の適切な溶媒に添加されても良い。次に、得られた酸付加塩を直接沈殿させるか、またはジイソプロピルエーテルやヘキサンなどの極性の低い溶媒を加えて沈殿させ、ろ過で分離する。

【0146】

多くの有機化合物は、それらが反応するか、沈殿または結晶化する溶媒と錯体を形成できる。これらの複合体は「溶媒和物」として知られている。例えば、水との複合体は「水和物」として知られる。様々な実施形態は、本明細書に記載の任意の実施形態による化合物の溶媒和物を含む。いくつかの実施形態では、これらの化合物の塩は溶媒和物を形成できる。

【0147】

さらなる態様には、本明細書に記載の任意の態様による化合物のＮ－オキシドが含まれる。Ｎ－オキシドには、そうでなければ非置換のｓｐ^２Ｎ原子を含む複素環が含まれる。そのようなＮ－オキシドの例には、ピリジルＮ－オキシド、ピリミジルＮ－オキシド、ピラジニルＮ－オキシドおよびピラゾリルＮ－オキシドが含まれる。

【0148】

本明細書に記載される任意の実施形態による化合物は、１つ以上のキラル中心を有してもよく、個々の置換基の性質に応じて、それらは幾何異性体も有し得る。したがって、実施形態には、本明細書に記載の任意の実施形態による化合物の立体異性体、ジアステレオマー、および鏡像異性体が含まれる。キラル化合物は、個々のエナンチオマーまたはエナンチオマーの混合物として存在できる。鏡像異性体の等しい割合を含む混合物は「ラセミ混合物」と呼ばれる。鏡像異性体の不均等な部分を含む混合物は、ＲまたはＳ化合物の「鏡像異性体過剰」（ｅｅ）を有すると説明される。混合物中の１つの鏡像異性体の過剰は、多くの場合、鏡像異性体過剰率で表される。エナンチオマーの比率は、エナンチオマーの混合物が平面偏光を回転させる度合いを個々の光学的に純粋なＲおよびＳ化合物と比較する「光学純度」によって定義することもできる。化合物はまた、本明細書に記載の化合物の実質的に純粋な（＋）または（－）鏡像異性体であり得る。いくつかの実施形態では、組成物は、１つの鏡像異性体の少なくとも９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％である実質的に純粋な鏡像異性体を含むことができる。特定の実施形態において、組成物は、少なくとも９９．５％の１つの鏡像異性体である実質的に純粋な鏡像異性体を含み得る。

【0149】

上記の説明は、本明細書に記載の任意の実施形態による化合物のすべての個々の異性体を包含し、明細書および特許請求の範囲における特定の化合物の説明または命名は、個々の鏡像異性体およびその混合物の両方を含むものとする。立体化学の決定および立体異性体の分割または定位合成の方法は、当技術分野で周知である。ジアステレオマーは、物理的特性と化学反応性の両方が異なる。ジアステレオマーの混合物は、溶解度、分別結晶化またはクロマトグラフィー特性、例えば薄層クロマトグラフィー、カラムクロマトグラフィーまたはＨＰＬＣに基づいてエナンチオマーペアに分離できる。ジアステレオマーの複雑な混合物をエナンチオマーに精製するには、通常２つのステップが必要である。最初のステップでは、上記のように、ジアステレオマーの混合物を鏡像異性体のペアに分割する。第２のステップでは、鏡像異性体ペアをさらに精製して、一方または他方の鏡像異性体が濃縮された組成物、またはより好ましくは純粋な鏡像異性体を含む組成物に分割する。エナンチオマーの分割には通常、溶媒またはカラムマトリックスのよなキラル試薬との反応または分子相互作用が必要である。分割は、例えば、鏡像異性体の混合物、例えばラセミ混合物を、第２の薬剤、すなわち分割剤の純粋な鏡像異性体との反応によりジアステレオマーの混合物に変換することにより達成され得る。次に、２つの結果のジアステレオマー生成物を分離できる。分離されたジアステレオマーは、最初の化学変換を逆にすることにより、純粋なエナンチオマーに再変換される。

【0150】

エナンチオマーの分割は、キラル物質への非共有結合の違い、例えばホモキラル吸着剤のクロマトグラフィーによっても達成できる。エナンチオマーとクロマトグラフィー吸着剤との間の非共有結合により、ジアステレオマー複合体が確立され、クロマトグラフィーシステムの可動状態と結合状態で異なる分配が行われる。したがって、２つのエナンチオマーはクロマトグラフィーシステム内をカラム、異なるレートで、それらの分離を可能にながら移動する。

【0151】

さらなる実施形態は、本明細書に記載の任意の実施形態による化合物のプロドラッグ、すなわち、哺乳動物対象に投与されたときにインビボで本明細書に記載の実施形態のいずれかによる活性化合物を放出する化合物を含む。プロドラッグは、薬理学的に活性であるか、より典型的には代謝変換により薬理学的に活性な薬剤に変換される不活性な化合物である。本明細書に記載の任意の実施形態に係る化合物のプロドラッグは、本明細書に記載の任意の実施形態に係る化合物に存在する官能基を、ｉｎ ｖｉｖｏで切断して親化合物を放出できるように修飾することにより調製される。生体内では、プロドラッグは生理学的条件下で化学変化を容易に受け（例えば、天然の酵素によって加水分解または作用を受け）、薬理学的に活性な薬剤の放出をもたらす。プロドラッグには、ヒドロキシル、アミノ、またはカルボキシ基が、それぞれ遊離ヒドロキシル、アミノ、またはカルボキシ基を再生するために生体内で切断され得る任意の基に結合する、本明細書に記載の任意の実施形態による化合物が含まれる。プロドラッグの例には、これらに限定されないが、本明細書に記載の任意の実施形態による化合物のエステル（例えば、酢酸塩、ギ酸塩、および安息香酸塩誘導体）、または生理学的ｐＨにもたらされるか酵素作用により変換される他の誘導体が含まれるアクティブな親薬物。適切なプロドラッグ誘導体の選択および調製の従来の手順は、当技術分野で説明されている（例えば、Ｂｕｎｄｇａａｒｄ．Ｄｅｓｉｇｎ ｏｆ Ｐｒｏｄｒｕｇｓ．Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，１９８５を参照）。

【0152】

本発明は、単離された化合物も包含する。単離された化合物とは、混合物中に存在する化合物の少なくとも１０％、好ましくは少なくとも２０％、より好ましくは少なくとも５０％、最も好ましくは少なくとも８０％を表す化合物を指す。

【0153】

いくつかの態様において、本明細書に記載の任意の態様による化合物の１つまたは複数の水素原子は、重水素で置き換えられる。生理活性化合物の重水素化は、代謝結果にプラスの影響を与えながら、対応する水素の薬理学的プロファイルを保持するという利点を提供することが十分に確立される。本明細書に記載の任意の実施形態による化合物において、１つ以上の水素を重水素で選択的に置換することにより、すべての水素の対応物と比較した場合の化合物の安全性、忍容性、および有効性を改善できる可能性がある。

【0154】

重水素を化合物に取り込む方法は十分に確立される。当技術分野で確立された代謝研究を使用して、本明細書に記載の任意の実施形態による化合物を試験して、同位体が代謝されない重水素同位体の選択的配置部位を特定できる。さらに、これらの研究は、重水素原子が配置される場所として代謝部位を特定する。

【0155】

医薬組成物
いくつかの実施形態は、本明細書に記載のいずれかの実施形態による化合物、その薬学的に許容される塩、その溶媒和物、その立体異性体、そのプロドラッグ、またはその活性代謝産物を含む。および薬学的に許容される担体または希釈剤を含む医薬組成物を記載する。薬学的組成物は、薬学分野で周知の方法で調製することができ、局所または全身治療が望ましいかどうか、および治療する領域に応じて、さまざまな経路で投与することができる。

【0156】

本明細書の任意の実施形態に記載の化合物をバルク物質として投与することは可能であるが、例えば、活性剤が医薬との混合物である医薬製剤、意図された投与経路および標準的な薬務に関して選択された許容可能な担体、で化合物を提示することが好ましい。

【0157】

特に、本開示は、本明細書に記載の任意の実施形態による治療有効量の少なくとも１つの化合物、および場合により薬学的に許容される担体を含む薬学的組成物を提供する。

【0158】

組み合わせ
本開示の医薬組成物および方法について、本明細書に記載の任意の実施形態による化合物は、他の療法および／または活性剤と組み合わせて使用され得る。

【0159】

いくつかの態様において、本明細書に記載の任意の態様による化合物は、コリンエステラーゼ阻害剤、Ｎ－メチル－Ｄ－アスパラギン酸（ＮＭＤＡ）グルタミン酸受容体アンタゴニスト、ベータアミロイド特異的抗体、ベータセクレターゼ１（ＢＡＣＥ１、ベータ部位アミロイド前駆体タンパク質切断酵素１）阻害剤、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦアルファ）モジュレーター、静脈内免疫グロブリン（ＩＶＩＧ）、またはプリオンタンパク質アンタゴニストの１またはそれ以上と組み合わせることができる。いくつかの実施形態では、化合物は、タクリン（ＣＯＧＮＥＸ（商標登録）；Ｓｃｉｅｌｅ）、ドネペジル（ＡＲＩＣＥＰＴ（商標登録）；Ｐｆｉｚｅｒ）、リバスチグミン（ＥＸＥＬＯＮ（商標登録）；Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、またはガランタミン（ＲＡＺＡＤＹＮＥ（商標登録）；Ｏｒｔｈｏ－ＭｃＮｅｉｌ－Ｊａｎｓｓｅｎ）から選択されるコリンエステラーゼ阻害剤と組み合わされる。いくつかの実施形態では、化合物は、脊髄周囲エタネルセプト（ＥＮＢＲＥＬ（登録商標）、Ａｍｇｅｎ／Ｐｆｉｚｅｒ）であるＴＮＦαモジュレーターと組み合わされる。一部の実施形態では、化合物は、バピネズマブ（ファイザー）、ソラネズマブ（リリー）、ＰＦ－０４３６０３６５（ファイザー）、ＧＳＫ９３３７７６（グラクソスミスクライン）、ガンマガード（バクスター）またはオクタガム（オクタファーマ）から選択されるベータアミロイド特異的抗体と組み合わされる。いくつかの実施形態では、化合物は、メマンチンであるＮＭＤＡ受容体アンタゴニスト（ＮＡＭＥＮＤＡ（登録商標）；Ｆｏｒｅｓｔ）と組み合わされる。いくつかの実施形態では、ＢＡＣＥ１阻害剤はＭＫ－８９３１（メルク）である。いくつかの実施形態において、化合物は、Ｍａｇｇａ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｎｅｕｒｏｉｎｆｌａｍ ２０１０，７：９０，Ｈｕｍａｎ ｉｎｔｒａｖｅｎｏｕｓ ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ ｐｒｏｖｉｄｅｓ ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ ａｇａｉｎｓｔ Ａｂ ｔｏｘｉｃｉｔｙ ｂｙ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ｉｎ ａ ｍｏｕｓｅ ｍｏｄｅｌ ｏｆ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ'ｓ ｄｉｓｅａｓｅ，ａｎｄ Ｗｈａｌｅｙ ｅｔ ａｌ．，２０１１，Ｈｕｍａｎ Ｖａｃｃｉｎｅｓ ７：３，３４９－３５６、新興抗体製品およびニコチアナ製造；それぞれを参照により本明細書に組み込まれる。いくつかの実施形態では、化合物は、Ｓｔｒｉｔｔｍａｔｔｅｒ ｅｔ ａｌ．、ＵＳ２０１０／０２９１０９０の参照により本明細書に組み込まれ、これに開示されているように、プリオンタンパク質アンタゴニストと組み合わされる。

【0160】

したがって、本開示は、さらなる態様において、本明細書に記載の任意の実施形態による少なくとも１つの化合物、またはその薬学的に許容される誘導体、第二の活性剤、そして、必要に応じて、薬学的に許容される担体を含む医薬組成物を提供する。

【0161】

同じ製剤で組み合わせる場合、２つ以上の化合物は安定であり、互いにおよび製剤の他の成分と適合性でなければならないことが理解されるだろう。別々に製剤化される場合、それらは、当技術分野でそのような化合物について知られているような方法で、任意の便利な製剤で提供されても良い。

【0162】

保存料、安定剤、染料および香味料は、本明細書に記載の任意の医薬組成物で提供されても良い。防腐剤の例には、安息香酸ナトリウム、アスコルビン酸、およびｐ－ヒドロキシ安息香酸のエステルが含まれる。酸化防止剤と懸濁剤も使用できる。

【0163】

モノクローナル抗体またはフラグメントなどの生物学的製剤を含む組み合わせに関して、適切な賦形剤を使用して、一般に非経口投与、たとえば静脈内投与のために、凝集を防ぎ、低エンドトキシンの溶液中の抗体またはフラグメントを安定化させる。例えば、Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｉｓｓｕｅｓ ｆｏｒ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ， Ｄａｕｇｈｅｒｔｙ ｅｔ ａｌ．，ｉｎ Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｔｒｅｎｄｓ ｉｎ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ａｎｄ Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇ，Ｐａｒｔ ４，２０１０，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ ｐｐ １０３－１２９．を参照。

【0164】

本明細書に記載の任意の実施形態による化合物は、湿式粉砕などの既知の粉砕手順を使用して粉砕して、錠剤形成および他の製剤タイプに適した粒径を得ることができる。化合物の微細に分割された（ナノ粒子）調製物は、当技術分野で知られているプロセスによって調製することができ、例えば、ＷＯ０２／００１９６（ＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ Ｂｅｅｃｈａｍ）を参照。

【0165】

本明細書に記載の任意の実施形態による化合物、またはその薬学的に許容される塩、その溶媒和物、その立体異性体、そのプロドラッグ、またはその活性代謝産物は、任意の投与経路用に製剤化できる。

【0166】

投与経路および単位剤形
投与（送達）の経路には、経口（例えば、錠剤、カプセル、または摂取可能な溶液として）、局所、粘膜（例えば、鼻スプレーとして）または吸入用のエアロゾル）、非経口（例えば、注射可能な形態による）、胃腸、脊髄内、腹腔内、筋肉内、静脈内、脳室内、または他のデポ投与の１つまたは複数が含まれるが、これらに限定されない。

【0167】

したがって、本明細書に記載の任意の実施形態による医薬組成物には、投与様式用に特に処方された形態のものが含まれる。特定の実施形態では、本開示の医薬組成物は、経口送達に適した形態で製剤化される。いくつかの実施形態では、化合物は経口送達に適した経口で生体利用可能な化合物である。他の実施形態では、本開示の医薬組成物は、非経口送達に適した形態で製剤化される。

【0168】

本明細書に記載の任意の実施形態による化合物は、ヒトまたは獣医学で使用するための任意の便利な方法で投与するために製剤化することができ、したがって、本開示は、人間または獣医学での使用に適用されて、その範囲内に、本明細書に記載の任意の実施形態による化合物を含む医薬組成物を含む。そのような医薬組成物は、１つ以上の適切な担体の助けを借りて、従来の方法で使用するために提示されても良い。治療用途に許容される担体は製薬分野で周知であり、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ'ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．（Ａ．Ｒ．Ｇｅｎｎａｒｏ ｅｄｉｔ．１９８５）に記載される。医薬担体の選択は、意図された投与経路および標準的な医薬慣行に関して選択することができる。医薬組成物は、担体に加えて、任意の適切な結合剤、潤滑剤、懸濁剤、コーティング剤、および／または可溶化剤を含み得る。

【0169】

異なる送達システムに応じて、異なる医薬組成物／製剤要件があり得る。すべての化合物を同じ経路で投与する必要があるわけではないことを理解されたい。同様に、医薬組成物が複数の活性成分を含む場合、それらの成分は異なる経路で投与されても良い。例として、本開示の医薬組成物は、ミニポンプを使用して、または粘膜経路により、例えば、吸入または摂取可能な溶液用の鼻スプレーまたはエアロゾルとして、または医薬組成物が非経口的に送達されるように製剤化され得る例えば、静脈内、筋肉内、または皮下経路による送達のために、注射可能な形態で処方される。あるいは、製剤は、複数の経路で送達されるように設計されても良い。

【0170】

本明細書に記載の任意の実施形態による化合物と抗体または抗体断片分子との組み合わせは、多くの経路のいずれかによって製剤化および投与することができ、適応症または治療に治療的に有効な濃度または求められた目的のために投与される。この目的を達成するために、当技術分野で知られているさまざまな許容可能な賦形剤を使用して抗体を製剤化することができる。典型的には、抗体は注射、例えば静脈内注射により投与される。この投与を達成する方法は、当業者に知られている。例えば、Ｇｏｋａｒｎ ｅｔ ａｌ．，２００８，Ｊ Ｐｈａｒｍ Ｓｃｉ ９７（８）：３０５１－３０６６（参照により本明細書に組み込まれる）は、様々な高濃度抗体自己緩衝製剤を記載している。たとえば、ｐＨ５．０の５．２５％ソルビトール中の５０ｍｇ／ｍＬｍＡｂなどの自己緩衝製剤のモノクローナル抗体；または５％ソルビトール、０．０１％ポリソルベート２０、ｐＨ５．２中の６０ｍｇ／ｍＬ ｍＡｂ；または、従来の緩衝製剤、例えば、ｐＨ５．０の５．２５％ソルビトール、２５または５０ｍＭ酢酸、グルタミン酸またはコハク酸中の５０ｍｇ／ｍＬｍＡｂ１。または、１０ｍＭ酢酸またはグルタミン酸、５．２５％ソルビトール、０．０１％ポリソルベート２０、ｐＨ５．２で６０ｍｇ／ｍＬである。当技術分野で知られているように、他の低濃度製剤を使用することができる。

【0171】

本開示のいくつかの化合物は、血液脳関門を通過するため、例えば、全身（例えば、静脈内、皮下、経口、粘膜、経皮経路）または局所的方法（例えば、頭蓋内）を含む様々な方法で投与することができる。本明細書に記載の任意の実施形態による化合物が胃腸粘膜を介して粘膜に送達される場合、胃腸管を通過する間、安定性を維持できるはずである。例えば、タンパク質分解に耐性があり、酸性ｐＨで安定であり、胆汁の界面活性剤効果に耐性がなければならない。例えば、経口投与用に調製された本明細書に記載の任意の実施形態による化合物は、腸溶コーティング層でコーティングされても良い。腸溶性コーティング層材料は、水または適切な有機溶媒のいずれかに分散または溶解させることができる。腸溶性コーティング層ポリマーとして、以下の１つまたは複数を別々にまたは組み合わせて使用することができる。例えば、メタクリル酸共重合体、酢酸フタル酸セルロース、酢酸酪酸セルロース、酢酸フタル酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース、酢酸コハク酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース、酢酸フタル酸ポリビニル、酢酸トリメリット酸セルロース、カルボキシメチルエチルセルロース、シェラックまたは他の適切な腸溶性コーティング層ポリマーの溶液または分散液が使用される。いくつかの実施形態では、水性腸溶コーティング層はメタクリル酸コポリマーである。

【0172】

適切な場合、本明細書に記載の任意の実施形態による医薬組成物は、吸入により、皮膚パッチの使用により、デンプンまたはラクトースなどの賦形剤を含む錠剤の形態で、またはカプセルまたは胚珠単独で経口投与することができる。または賦形剤との混合物、または香味剤または着色剤を含むエリキシル、溶液または懸濁液の形で、または非経口的に、例えば静脈内、筋肉内または皮下に注射することができる。頬側または舌下投与のために、本明細書に記載の任意の実施形態による医薬組成物は、従来の方法で製剤化できる錠剤またはロゼンジの形態で投与することができる。

【0173】

本明細書に記載の任意の実施形態による医薬組成物が非経口投与される場合、そのような投与は、本開示の化合物の静脈内、動脈内、くも膜下腔内、脳室内、頭蓋内、筋肉内または皮下投与;および/または輸液技術を使用しての投与、または並行しての投与を非限定的に含む。抗体または断片は、通常、非経口的に、例えば静脈内に投与される。

【0174】

注射または注入に適した本明細書に記載の任意の実施形態による医薬組成物は、必要に応じてそのような製剤の調製のため、注入または注射に適した滅菌溶液または分散液に調整された活性成分を含む滅菌水溶液、分散液または滅菌粉末の形態であり得る。この調製物は、リポソームにカプセル化されていても良い。すべての場合において、最終製剤は、生産および保管条件下で無菌、液体、および安定でなければならない。保存安定性を改善するために、そのような製剤は、微生物の成長を防ぐための防腐剤を含んでも良い。微生物の作用の防止は、さまざまな抗菌剤および抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、または吸収酸の添加により達成することができる。多くの場合、体液、特に血液の浸透圧と同様の浸透圧を確保するために、等張物質、例えば糖、緩衝液、塩化ナトリウムが推奨される。そのような注射可能な混合物の長期吸収は、モノステアリン酸アルミニウムまたはゼラチンなどの吸収遅延剤の導入によって達成することができる。

【0175】

分散液は、グリセリン、液体ポリエチレングリコール、トリアセチン油、およびそれらの混合物などの液体担体または中間体で調製することができる。液体担体または中間体は、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコールなど）、植物油、非毒性グリセリンエステルおよびそれらの適切な混合物を含む溶媒または液体分散媒であり得る。リポソームの生成、分散液の場合の適切な粒子サイズの投与、または界面活性剤の添加により、適切な流動性が維持され得る。

【0176】

非経口投与の場合、本明細書に記載の任意の実施形態による化合物は、他の物質、例えば、溶液を血液と等張にするのに十分な塩またはグルコースを含む滅菌水溶液の形態で最もよく使用される。水溶液は、必要に応じて適切に緩衝化（３～９のｐＨが望ましい）する必要がある。滅菌条件下での適切な非経口製剤の調製は、当業者に周知の標準的な製薬技術により容易に達成される。

【0177】

無菌注射液は、本明細書に記載の任意の実施形態による化合物を適切な溶媒および前述の担体の１つまたは複数と混合し、その後無菌濾過することにより調製することができる。滅菌注射液の調製に使用するのに適した滅菌粉末の場合、好ましい調製方法は、真空乾燥および凍結乾燥を含み、化合物の粉末混合物および滅菌溶液のその後の調製のための所望の賦形剤を提供する。

【0178】

本明細書に記載の任意の実施形態による化合物は、注射（例えば、静脈内ボーラス注射または注入による、または筋肉内、皮下またはくも膜下腔内経路による）によるヒトまたは獣医学での使用のために製剤化することができ、アンプル、または他の単位用量容器、または必要に応じて防腐剤を追加した複数用量容器で、単位用量形態で提示することができる。注射用医薬組成物は、油性または水性ビヒクル中の懸濁液、溶液、または乳濁液の形態であり得、懸濁剤、安定剤、可溶化剤および／または分散剤などの製剤化剤を含み得る。あるいは、活性成分は、使用前に、適切なビヒクル、例えば、無菌の発熱物質を含まない水で再構成するための無菌粉末形態であっても良い。

【0179】

本明細書に記載の任意の実施形態による化合物は、即時、遅延、修飾、持続、パルスまたは制御－リリースアプリケーションのために、錠剤、カプセル、トローチ、胚珠、エリキシル、溶液または懸濁液の形態で投与することができる。

【0180】

本明細書に記載の任意の実施形態による化合物は、使用前に水または他の適切な車両で再構成するため、経口または口腔投与に適した形態、例えば、溶液、ゲル、シロップ、または懸濁液、または乾燥粉末の形態で、ヒトまたは獣医用に提示することもできる。錠剤、カプセル、ロゼンジ、トローチ、トローチ、丸薬、ボーラス、粉末、ペースト、顆粒、弾丸またはプレミックス製剤などの固体医薬組成物も使用できる。経口使用のための固体および液体医薬組成物は、当技術分野で周知の方法に従って調製することができる。そのような医薬組成物はまた、固体または液体形態であり得る１つまたは複数の薬学的に許容される担体および賦形剤を含んでも良い。

【0181】

錠剤は、微結晶性セルロース、乳糖、クエン酸ナトリウム、炭酸カルシウム、二塩基性リン酸カルシウムおよびグリシンなどの賦形剤、デンプン（好ましくはトウモロコシ、ジャガイモまたはタピオカデンプン）などの崩壊剤、デンプングリコール酸ナトリウム、クロスカルメロースナトリウムおよび特定の複合体、およびケイ酸塩、およびポリビニルピロリドン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、ヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ）、ショ糖、ゼラチン、アカシアなどの造粒バインダーを含むことができる。

【0182】

さらに、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、ベヘン酸グリセリルおよびタルクなどの潤滑剤が含まれても良い。

【0183】

本明細書に記載の任意の実施形態による医薬組成物は、急速または制御放出錠剤、微粒子、ミニ錠剤、カプセル、小袋、および経口溶液または懸濁液、またはそれらの調製のための粉末の形態で経口投与することができる。経口製剤は、結合剤、充填剤、緩衝剤、潤滑剤、流動促進剤、色素、崩壊剤、着臭剤、甘味料、界面活性剤、離型剤、付着防止剤およびコーティングなどの様々な標準的な医薬担体および賦形剤を任意に含んでも良い。いくつかの賦形剤は、例えば、結合剤および崩壊剤の両方として作用するなど、医薬組成物において複数の役割を果たし得る。

【0184】

本明細書に記載の任意の実施形態による経口医薬組成物用の薬学的に許容される崩壊剤の例には、デンプン、アルファ化デンプン、デンプングリコール酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、クロスカルメロースナトリウム、微結晶セルロース、アルギン酸塩、樹脂、界面活性剤、発泡性組成物、水性ケイ酸アルミニウムおよび架橋ポリビニルピロリドンが含まれるが、これらに限定されない。

【0185】

本明細書に記載の任意の実施形態による経口医薬組成物用の薬学的に許容される結合剤の例には、アカシア、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロースまたはヒドロキシエチルセルロースなどのセルロース誘導体、ゼラチン、グルコース、デキストロース、キシリトール、ポリメタクリレート、ポリビニルピロリドン、ソルビトール、デンプン、アルファ化デンプン、トラガカント、キサンチン樹脂、アルギン酸塩、ケイ酸マグネシウムアルミニウム、ポリエチレングリコールまたはベントナイトが含まれるが、これに限定されない。

【0186】

本明細書に記載の任意の実施形態による経口医薬組成物用の薬学的に許容される充填剤の例には、ラクトース、アンヒドロラクトース、ラクトース一水和物、スクロース、デキストロース、マンニトール、ソルビトール、デンプン、セルロース（特に微結晶セルロース）、リン酸ジヒドロまたは無水カルシウム、炭酸カルシウムおよび硫酸カルシウムが含まれるが、これらに限定されない。

【0187】

本明細書に記載の任意の実施形態による医薬組成物に有用な薬学的に許容される潤滑剤の例には、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ポリエチレングリコール、エチレンオキシドのポリマー、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸マグネシウム、ナトリウムオレイン酸塩、ステアリルフマル酸ナトリウム、コロイド状二酸化ケイ素が含まれるが、これらに限定されない。

【0188】

本明細書に記載の任意の実施形態による経口医薬組成物に適した薬学的に許容される着臭剤の例には、合成芳香および油、花、果物（例えば、バナナ、リンゴ、、サワーチェリー、モモ）およびそれらの組み合わせ、および同様の香りが含まれる。それらの使用は多くの要因に依存し、最も重要なのは、医薬組成物を服用する集団に対する感覚受容性の受容性である。

【0189】

本明細書に記載の任意の実施形態による経口医薬組成物に適した薬学的に許容される色素の例には、二酸化チタン、ベータカロチンおよびグレープフルーツ果皮の抽出物などの合成および天然色素が含まれるが、これらに限定されない。

【0190】

嚥下を促進し、放出特性を変更し、外観を改善し、および／または医薬組成物の味を隠すために通常使用される、本明細書に記載の任意の実施形態による経口医薬組成物に有用な薬学的に許容されるコーティングの例には、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロースおよびアクリレート－メタクリレート共重合体に限定されない。

【0191】

本明細書に記載の任意の実施形態による経口医薬組成物のための薬学的に許容される甘味料の適切な例には、アスパルテーム、サッカリン、サッカリンナトリウム、シクラミン酸ナトリウム、キシリトール、マンニトール、ソルビトール、乳糖およびスクロースが含まれるが、これらに限定されない。

【0192】

薬学的に許容される緩衝液の適切な例には、クエン酸、クエン酸ナトリウム、重炭酸ナトリウム、二塩基性リン酸ナトリウム、酸化マグネシウム、炭酸カルシウムおよび水酸化マグネシウムが含まれるが、これらに限定されない。

【0193】

薬学的に許容される界面活性剤の適切な例には、ラウリル硫酸ナトリウムおよびポリソルベートが含まれるが、これらに限定されない。

【0194】

同様のタイプの固体組成物も、ゼラチンカプセルの充填剤として使用することができる。これに関して好ましい賦形剤には、ラクトース、デンプン、セルロース、乳糖または高分子量ポリエチレングリコールが含まれる。水性懸濁液および／またはエリキシルの場合、薬剤は、さまざまな甘味剤または香味剤、色素または染料、乳化剤および／または懸濁剤、および水、エタノール、プロピレングリコールおよびグリセリンなどの希釈剤、およびそれらの組み合わせと組み合わせることができる。

【0195】

示されるように、本明細書に記載の任意の実施形態による化合物は、鼻腔内または吸入により投与することができ、乾燥粉末吸入器または加圧容器、ポンプ、スプレーまたはネブライザーからのエアロゾルスプレー提示の形態で便利に送達される適切な推進剤、例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、１，１，１，２－テトラフルオロエタン（ＨＦＡ １３４ＡＴ）または１，１，１，２，３，３，３－ヘプタフルオロプロパン（ＨＦＡ）などのハイドロフルオロアルカンの使用２２７ＥＡ）、二酸化炭素またはその他の適切なガスでる。加圧エアロゾルの場合、計量単位を送達するためのバルブを提供することにより、投与単位を決定することができる。加圧容器、ポンプ、スプレーまたはネブライザーは、例えばエタノールと噴射剤の混合物を溶媒として使用して、活性化合物の溶液または懸濁液を含むことができ、さらに潤滑剤、例えばトリオレイン酸ソルビタンを含むことができる。

【0196】

吸入器または吸入器で使用するためのカプセルおよびカートリッジ（例えば、ゼラチン製）は、本明細書に記載の任意の実施形態による化合物の粉末混合物、および乳糖またはデンプンなどの適切な粉末基剤を含むように製剤化することができる。

【0197】

吸入による局所投与の場合、本明細書に記載の任意の実施形態による化合物は、ネブライザーを介してヒトまたは獣医学で使用するために送達することができる。

【0198】

本開示の医薬組成物は、体積あたり０．０１から９９％の重量の活性物質を含むことができる。例えば、局所投与の場合、医薬組成物は一般に０．０１～１０％、より好ましくは０．０１～１％の活性物質を含む。

【0199】

本明細書に記載の任意の実施形態による化合物は、小さな単層ベシクル、大きな単層ベシクルおよび多層ベシクルなどのリポソーム送達システムの形態で投与することもできる。リポソームは、コレステロール、ステアリルアミン、ホスファチジルコリンなどのさまざまなリン脂質から形成できる。

【0200】

本明細書に記載の任意の実施形態による医薬組成物または単位剤形は、毒性または特定の患者の副作用を最小限に抑える一方で、化合物または単位剤形の投与量は、基礎疾患の状態、個人の状態、体重、性別、年齢、投与方法などのさまざまな要因によって異なる場合がある。患者に投与される正確な量は、障害の状態と重症度、および患者の身体状態によって異なる。任意の症状またはパラメーターの測定可能な改善は、当業者によって決定されるか、患者から医師に報告される。任意の症状またはパラメーターの臨床的または統計的に有意な減弱または改善が本開示の範囲内であることが理解されだろう。臨床的に有意な減弱または改善とは、患者および／または医師が知覚できることを意味する。

【0201】

いくつかの態様において、投与される化合物の量は、約０．０１から約２５ｍｇ／ｋｇ／日の範囲であり得る。一般に、毎日０．０１～２５ｍｇ／ｋｇ体重の用量レベルが患者、例えばヒトに投与される。いくつかの実施形態では、治療有効量は、体重の約０．０１ｍｇ／ｋｇ体重、体重の約０．１ｍｇ／ｋｇ体重、体重の約０．２ｍｇ／ｋｇ体重、体重の約０．３ｍｇ／ｋｇ体重の下限の間である。いくつかの実施形態では、治療有効量は約０．１ｍｇ／ｋｇ／日から約１０ｍｇ／ｋｇ、０．４ｍｇ／ｋｇ体重、約０．５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．６０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．７０ ｍｇ／ｋｇ体重、約０．８０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．９０ｍｇ／ｋｇ体重体重、約１ｍｇ／ｋｇ体重、約２．５ｍｇ／ｋｇ体重、約５ｍｇ／ｋｇ体重、約７．５ｍｇ／ｋｇ体重、約１０ｍｇ／ｋｇ体重、約１２．５ｍｇ／ｋｇ体重、約１５ｍｇ／ｋｇ体重、約１７．５ｍｇ／ｋｇ体重、約２０ｍｇ／ｋｇ体重、約２２．５ｍｇ／ｋｇ体重、および約２５ ｍｇ／ｋｇ体重体重；上限は２５ｍｇ／ｋｇ体重、約２２．５ｍｇ／ｋｇ体重、約２０ｍｇ／ｋｇ体重、約１７．５ｍｇ／ｋｇ体重、約１５ｍｇ／ｋｇ体重、約１２．５ｍｇ／ｋｇ体重、約１０ｍｇ／ｋｇ体重、約７．５ｍｇ／ｋｇ体重、約５ｍｇ／ｋｇ体重、約２．５ｍｇ／ｋｇ体重、約１ｍｇ／ｋｇ体重体重、約０．９ｍｇ／ｋｇ体重、約０．８ｍｇ／ｋｇ体重、約０．７ｍｇ／ｋｇ体重、約０．６ｍｇ／ｋｇ体重、約０．５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．４ｍｇ／ｋｇ体重、約０．３ｍｇ／ｋｇ体重、約０．２ｍｇ／ｋｇ体重、約０．１ｍｇ／ｋｇ体重、および約０．０１ ｍｇ／ｋｇ体重である。いくつかの実施形態では、治療有効量は約０．２および約５ｍｇ／ｋｇ／日である。本開示の医薬製剤は、障害を治療するのに有効な化合物の全量を必ずしも含む必要はなく、そのような有効量は、そのような医薬製剤の複数の分割用量の投与により到達できるため理解される。化合物は、１日１回、２回、３回、または４回など、１日１～４回のレジメンで投与されても良い。

【0202】

本開示のいくつかの実施形態では、本明細書に記載の任意の実施形態による化合物は、通常約１０～約２００ｍｇの化合物を含むカプセルまたは錠剤に製剤化される。いくつかの実施形態では、カプセルまたは錠剤は、本明細書の任意の実施形態による化合物の約１０ｍｇ、約１５ｍｇ、約２０ｍｇ、約２５ｍｇ、約３０ｍｇ、約３５ｍｇ、約４０ｍｇ、約４５ｍｇ、約５０ｍｇ、５５ｍｇ、約６０ｍｇ、約６５ｍｇ、約７０ｍｇ、約７５ｍｇ、約８０ ｍｇ、約８５ｍｇ、約９０ｍｇ、約９５ｍｇ、約１００ｍｇ、約１０５ｍｇ、約１１０ｍｇ、約１１５ｍｇ；約１２０ｍｇ、約１２５ｍｇ、約１３０ｍｇ、約１３５ｍｇ、約１４０ｍｇ、約１４５ｍｇ、約１５０ｍｇ、約１５５ｍｇ、約１６０ｍｇ、約１６５ｍｇ、約１７０ｍｇ、約１７５ｍｇ、約１８０ｍｇ、約１８５ｍｇ、約１９０ｍｇ、約１９５ｍｇ、および約２００ｍｇ、約２００ｍｇ、約１９５ｍｇ、約１９０ｍｇ、約１８５ｍｇ、約１８０ｍｇ、約１７５ｍｇ、約１７０ｍｇ、約１６５ｍｇ、約１６０ｍｇ、約１５５ｍｇ、約１５０ｍｇ、約１４５ｍｇ、約１４０ｍｇ、約１３５ｍｇ、約１３０ｍｇ、約１２５ｍｇ、約１２０ｍｇ、約１１５ｍｇ、約１１０ｍｇ、約１０５ｍｇ、約１００ｍｇ、約９５ｍｇ、約９０ｍｇ；約８５ｍｇ、約８０ｍｇ、約７５ｍｇ、約７０ｍｇ、約６５ｍｇ、約６０ｍｇ、約５５ｍｇ、約５０ｍｇ、約４５ｍｇ、約４０ｍｇ、約３５ｍｇ、約３０ｍｇ、約２５ｍｇ、約２０ｍｇ、約１５ｍｇ、および約１０ｍｇの下限の値を含む。

【0203】

いくつかの態様において、本明細書の任意の態様による化合物は、５０ｍｇ～５００ ｍｇの総１日用量で患者に投与される。いくつかの実施形態では、一日量は、本明細書の任意の実施形態による化合物の下限が約５０ｍｇ、約５５ｍｇ、約６０ｍｇ、約６５ｍｇ、約７０ｍｇ、約７５ｍｇ、約８０ｍｇ、約８５ｍｇ、約９０ｍｇ、約９５ｍｇ、約１００ｍｇ、約１０５ｍｇ、約１１０ｍｇ、約１１５ｍｇ、約１２０ｍｇ、約１２５ｍｇ、約１３０ｍｇ、約１３５ｍｇ、約１４０ｍｇ、約１４５ｍｇ、約１５０ｍｇ、約１５５ｍｇ、約１６０ｍｇ、約１６５ｍｇ、約１７０ｍｇ、約１７５ ｍｇ、約１８０ｍｇ、約１８５ｍｇ、約１９０ｍｇ、約１９５ｍｇ、約２００ｍｇ、約２０５ｍｇ、約２１０ｍｇ、約２１５ｍｇ。約２２０ｍｇ、約２２５ｍｇ、約２３０ｍｇ、約２３５ｍｇ、約２４０ｍｇ、約２４５ｍｇ、約２５０ｍｇ、約２５５ｍｇ、約２６０ｍｇ、約２６５ｍｇ、約２７０ｍｇ、約２７５ｍｇ、約２８０ｍｇ、約２８５ｍｇ、約２９０ｍｇ、約２９５ｍｇ、３００ｍｇ、約３０５ｍｇ、約３１０ｍｇ、約３１５ｍｇ。約３２０ｍｇ、約３２５ｍｇ、約３３０ｍｇ、約３３５ｍｇ、約３４０ｍｇ、約３４５ｍｇ、約３５０ｍｇ、約３５５ｍｇ、約３６０ｍｇ、約３６５ｍｇ、約３７０ｍｇ、約３７５ｍｇ、約３８０ｍｇ、約３８５ｍｇ、約３９０ｍｇ、約３９５、約４００ｍｇ、約４０５ｍｇ、約４１０ｍｇ、約４１５ｍｇ。約４２０ｍｇ、約４２５ｍｇ、約４３０ ｍｇ、約４３５ｍｇ、約４４０ｍｇ、約４４５ ｍｇ、約４５０ ｍｇ、約４５５ｍｇ、約４６０ｍｇ、約４６５ｍｇ、約４７０ｍｇ、約４７５ｍｇ、約４８０ｍｇ、約４８５ｍｇ、約４９０ｍｇ、約４９５ｍｇ、および約５００ｍｇ、および約５００ｍｇの上限、約４９５ｍｇ、約４９０ｍｇ、約４８５ｍｇ、約４８０ｍｇ、約４７５ｍｇ、約４７０ｍｇ、約４６５ｍｇ、約４６０ｍｇ、約４５５ｍｇ、約４５０ｍｇ、約４４５ｍｇ、約４４０ｍｇ、約４３５ｍｇ、約４３０ｍｇ、約４２５ｍｇ、約４２０ｍｇ、約４１５ｍｇ、約４１０ｍｇ、約４０５ｍｇ、約４００ｍｇ、約３９５ｍｇ、約３９０ｍｇ、約３８５ｍｇ、約３８０ｍｇ、約３７５ｍｇ 、約３７０ｍｇ、約３６５ｍｇ、約３６０ｍｇ、約３５５ｍｇ、約３５０ｍｇ、約３４５ｍｇ、約３４０ｍｇ、約３３５ｍｇ、約３３０ｍｇ、約３２５ｍｇ、約３２０ｍｇ、約３１５ｍｇ、約３１０ｍｇ、約３０５ｍｇ、約３００ｍｇ、約２９５ｍｇ、約２９０ｍｇ、約２８５ｍｇ、約２８０ｍｇ、約２７５ｍｇ、約２７０ｍｇ、約２６５ｍｇ、約２６０ｍｇ、約２５５ｍｇ、約２５０ｍｇ、約２４５ｍｇ、約２４０ｍｇ、約２３５ｍｇ、約２３０ｍｇ、約２２５ｍｇ、約２２０ｍｇ、約２１５ｍｇ、約２１０ｍｇ、約２０５ｍｇ、２００ｍｇ、約１９５ｍｇ、約１９０ｍｇ、約１８５ｍｇ、約１８０ｍｇ、約１７５ｍｇ、約１７０ｍｇ、約１６５ｍｇ、約１６０ｍｇ、約１５５ｍｇ、約１５０ｍｇ、約１４５ｍｇ、約１４０ｍｇ、約１３５ｍｇ、約１３０ｍｇ、約１２５ｍｇ、約１２０ｍｇ、約１１５ｍｇ、約１１０ｍｇ、約１０５ｍｇ、約１００ｍｇ、約９５ｍｇ、約９０ｍｇ、約８５ｍｇ、約８０ｍｇ、約７５ｍｇ、約７０ｍｇ、約６５ｍｇ、約６０ｍｇ、約５５ｍｇ、および約５０ｍｇを含む。いくつかの実施形態では、総１日用量は約５０ｍｇから１５０ｍｇである。いくつかの実施形態では、総１日用量は約５０ｍｇから２５０ｍｇである。いくつかの実施形態では、総１日用量は約５０ｍｇから３５０ｍｇである。いくつかの実施形態では、総１日用量は約５０ｍｇから４５０ｍｇである。いくつかの実施形態では、総１日用量は約５０ｍｇである。

【0204】

非経口投与用の医薬組成物は、総医薬組成物の１００重量％に基づいて、本明細書に記載の任意の実施形態による約０．０１重量％から約１００重量％の活性化合物を含む。

【0205】

一般に、経皮剤形は、剤形の総重量１００％に対して、約０．０１重量％～約１００重量％の本明細書に記載の任意の実施形態による活性化合物を含む。

【0206】

医薬組成物または単位剤形は、１日１回投与で投与されてもよく、または１日総投与量は分割投与で投与されても良い。さらに、障害の治療のための別の化合物の同時投与または連続投与が望ましい場合がある。この目的のために、組み合わされた有効成分は単純な投与単位に処方される。

【0207】

本明細書に記載される任意の実施形態による化合物は、例えば、参照により本明細書に組み込まれる、または本明細書に記載されるＷＯ２０１３／０２９０５７に概説される一般的な方法により調製され得る。

【0208】

本明細書に開示される任意の実施形態による化合物は、本明細書に提供される一般的な方法および特定の合成例に従って合成することができる。

【0209】

本明細書に記載の任意の実施形態による化合物の調製に使用される中間体の保護された誘導体を使用することが望ましい場合があることは、当業者には理解されるだろう。官能基の保護および脱保護は、当技術分野で知られている方法によって実施することができる（例えば、Ｇｒｅｅｎ ａｎｄ Ｗｕｔｓ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ．Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９９９．）。ヒドロキシまたはアミノ基は、ヒドロキシまたはアミノ保護基で保護されています。アミノ保護基は、従来の技術により除去され得る。例えば、アルカノイル、アルコキシカルボニルおよびアロイル基などのアシル基は、加溶媒分解により、例えば酸性または塩基性条件下での加水分解により除去され得る。アリールメトキシカルボニル基（例、ベンジルオキシカルボニル）は、木炭上のパラジウムなどの触媒の存在下での水素化分解によって切断される。

【0210】

標的化合物の合成は、当業者に周知の標準的な技術を使用して、最後から２番目の中間体に存在する可能性のある保護基を除去することにより完了する。次いで、脱保護された最終生成物は、必要に応じて、シリカゲルクロマトグラフィー、シリカゲル上でのＨＰＬＣなどの標準技術を使用して、または再結晶により精製される。

【0211】

使用方法
いくつかの態様において、本開示は、本明細書に記載の任意の態様による化合物の投与により、ニューロン細胞のＡβ種への曝露に関連するシナプス数減少または膜輸送異常を阻害する方法を提供する。

【0212】

いくつかの実施形態では、本開示は、認知機能低下および／または神経変性疾患、例えば、本明細書に記載の任意の実施形態による化合物を患者におけるアルツハイマー病または軽度認知障害（ＭＣＩ）を有する患者に投与することを含む。

【0213】

いくつかの態様において、神経変性疾患は、加齢性記憶障害（ＡＡＭＩ）、加齢関連認知低下（ＡＲＣＤ）、興奮性シヌクレイノパチー、アルツハイマー病（ＡＤ）、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）認知症、常染色体－優性パーキンソン病、認知障害認知症（ＣＩＮＤ）、認知症、レビー小体型認知症（ＤＬＢ）としても知られるびまん性レビー小体病（ＤＬＢＤ）、レビー小体の存在を特徴とする障害または状態、ダウン症候群、ジスキネジア、ＨＩＶ認知症、ハンチントン病、偶発性ＬＢＤ、遺伝性ＬＢＤ、レビー小体嚥下障害、軽度認知障害（ＭＣＩ）、多発性硬化症、多系統萎縮症（ＭＳＡ）、オリーブ橋小脳萎縮症、パーキンソン病（ＰＤ）、前臨床アルツハイマー病（ＰＣＡＤ）、精神病、精神病自律神経障害、恥ずかしがり症候群、線条体変性、シヌクレイノパチー、アルツハイマー病とパーキンソン病および／またはＭＳＡの合併、血管性認知症、疾患、障害ｏα－シヌクレインの異常な発現、安定性、活性および／または細胞プロセシングに関連する状態、レビー小体の存在を特徴とする疾患、障害または状態、およびそれらの組み合わせから選択される。

【0214】

いくつかの実施形態では、認知機能低下および／または神経変性疾患、例えばアルツハイマー病などの神経障害を抑制または治療する方法は、記憶喪失、混乱、判断障害、人格変化、見当識障害、および言語スキルの喪失からなる群から選択される認知低下の１つまたは複数の症状を抑制または治療することを含む。いくつかの実施形態において、この方法は、Ａベータオリゴマーにより媒介されるかまたは関連する疾患または障害または状態を阻害または治療することを含む。

【0215】

いくつかの実施形態では、認知機能低下および／または神経変性疾患、例えばアルツハイマー病などの神経障害を抑制または治療する方法は、（ｉ）長期増強（ＬＴＰ）、長期抑圧（ＬＴＤ）、または電気生理学的測定によって検出可能なシナプス可塑性またはその他の認知機能の負の変化の定義上記の用語；および／または（ｉｉ）神経変性の抑制または治療；および／または（ｉｉｉ）一般的なアミロイドーシスの阻害または治療、および／または（ｉｖ）アミロイド産生、アミロイド集合、アミロイド凝集、アミロイドオリゴマー結合、およびアミロイド沈着の１つまたは複数を阻害または治療；および／または（ｖ）ニューロン細胞に対する１つまたは複数のＡベータオリゴマーの効果、特に非致死的効果を阻害、治療、および／または軽減する。

【0216】

いくつかの実施形態では、認知機能低下および／または神経変性疾患、例えばアルツハイマー病などの神経障害を抑制、治療、および／または軽減する方法は、１つまたは複数のアミロイド産生、アミロイド集合、ニューロン細胞に対するＡβオリゴマーの１つまたは複数の活性／効果、アミロイド凝集、アミロイド結合、およびアミロイド沈着の抑制、治療、および／または軽減を含む。

【0217】

いくつかの態様において、認知低下および／または神経変性疾患、例えば、アルツハイマー病などの神経変性疾患を阻害、治療、および／または軽減する方法は、ニューロン細胞に対する１つまたは複数のＡベータオリゴマーの１つまたは複数の活性／効果を阻害、治療、および／または軽減することを含む。

【0218】

いくつかの態様において、ニューロン細胞、アミロイド凝集およびアミロイド結合に対するＡベータオリゴマーの１つまたは複数の活性／効果は、膜輸送またはシナプス数に対するＡベータオリゴマーの効果である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の任意の実施形態による化合物は、膜輸送またはシナプス数またはＡベータオリゴマー結合に対するＡベータオリゴマーの効果を阻害する。

【0219】

いくつかの態様において、本開示は、Ａベータオリゴマー毒性、特に非致死的Ａベータオリゴマー効果に関連するプロテオパシー疾患を治療する方法を提供する。いくつかの実施形態では、この方法は、そのようなプロテオパシー疾患を有する対象を、本明細書に記載の任意の実施形態による化合物、またはシグマ－２受容体に結合するものを含む医薬組成物と接触させることを含む。

【0220】

いくつかの態様において、プロテオパシー疾患は、ＭＣＩ、ダウン症候群、黄斑変性症またはアルツハイマー病などのＡβタンパク質の増加を特徴とするＣＮＳプロテオパチーである。

【0221】

いくつかの態様において、本開示は、本明細書に記載の任意の態様による化合物を投与することにより、１つまたは複数の軽度認知障害（ＭＣＩ）または認知症を治療する方法を提供する。いくつかの実施形態では、本開示は、ＭＣＩおよび認知症を治療する方法を提供する。

【0222】

いくつかの実施形態では、本開示は、本明細書に記載の任意の実施形態による化合物を投与することによりアルツハイマー病を治療する方法を提供する。

【0223】

いくつかの実施形態では、本開示は、本明細書に記載の任意の実施形態による化合物で個体を治療し、対象の細胞を部分的または全体的に、ＡベータオリゴマーのようなＡベータ種によって悪影響を受ける機能に関して正常な表現型に回復させる方法を提供する。例は、シナプス数の減少および膜輸送の異常であり、これらは、本明細書に記載のアッセイを含むさまざまな方法によって測定することができる。正常な表現型は、例えば、正常な膜輸送であり得る。いくつかの実施形態では、正常な表現型は正常な認知能力である。「正常な」表現型は、被験者の結果を正常な被験者のサンプルと比較することで決定できる。サンプルは、１人の被験者または１つのサンプルと同じくらい小さくても、１０を超えるサンプルまたは被験者でもよく、ノルムは複数の被験者に基づいて計算される平均である。

【0224】

いくつかの態様において、本明細書に記載の任意の態様による化合物は、一般に、ニューロンに対するＡベータ効果を阻害する。いくつかの実施形態では、上記の化合物は、約１００μＭ、約５０μＭ、約２０μＭ、約１５μＭ、約１０μＭ、約５μＭ、約１μＭ、約５００ｎＭ未満のＡベータ効果の阻害のＩＣ５０を有する。ニューロン（脳内のニューロンなど）、アミロイドアセンブリまたはその破壊、およびアミロイド（アミロイドオリゴマーを含む）結合、およびアミロイド沈着に対する約１００ｎＭ、約５０ｎＭ、または約１０ｎＭを有する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の任意の実施形態による化合物は、ニューロン（中枢神経系ニューロンなど）での約１００μＭ未満、約５０μＭ、約２０μＭ、約１５μＭ、約１０μＭ、約５μＭ、約１μＭ、約５００ｎＭ、約１００ｎＭ、約５０ｎＭ、または約１０ｎＭのオリゴマーなどのＡβ種の活性／効果の阻害についてＩＣ５０を有し得る。

【0225】

本明細書に記載の任意の実施形態による化合物は、シグマ－２受容体に特異的に結合することによりＡベータ効果を阻害し得る。化合物は、シグマ－１およびシグマ－２受容体の両方に結合できるにもかかわらず、シグマ－１受容体よりも少なくとも１０％高い結合親和性で結合する場合、シグマ－２受容体に「特異的」であると言える。そのような実施形態の化合物は、シグマ－１受容体よりシグマ－２受容体の方が少なくとも１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、１００％、２００％、３００％、４００％、５００％、または１０００％大きい特異性を示し得る。

【0226】

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の任意の実施形態による化合物による、アミロイド（アミロイドオリゴマーを含む）などのニューロン（脳のニューロンなど）に対するオリゴマーなどのＡベータ種の効果の１つまたは複数による阻害の割合）シナプスへの結合、およびＡベータオリゴマーによって媒介される膜輸送の異常は、１０ｎＭから１０μＭの濃度の測定で、約１％から約２０％、約２０％から約５０％、約１％から約５０％、または約１％から約８０％であり得る。阻害は、例えば、アミロイドベータ種への曝露前後のニューロンのシナプス数を定量化するか、本明細書に記載の任意の実施形態による化合物およびＡベータ種の両方の存在下でシナプス数を定量化することにより評価することができる。本明細書に記載の任意の実施形態による化合物は、Ａベータ種曝露と同時に、または先行または後続する。別の例として、膜輸送を決定し、エキソサイトーシスの速度と範囲、エンドサイトーシスの速度と範囲、またはＡベータ種の存在下および非存在下で、本明細書に記載の任意の実施形態による化合物の存在下および非存在下での細胞代謝の他の指標を測定する１つ以上のパラメーターを比較することにより、阻害を評価できる。

【0227】

いくつかの態様において、本開示は、本明細書に記載の任意の態様による標識化合物を使用して、動物のベータアミロイド関連認知低下を測定する方法を提供する。いくつかの実施形態では、この方法は、動物を本明細書に記載の任意の実施形態による標識化合物と接触させ、シグマ－２の活性または発現を測定することを含む。いくつかの実施形態において、この方法は、動物におけるシグマ－２活性または発現を、ベータアミロイド誘発性認知低下を有することが知られている動物と比較することを含む。活動または発現が、ベータアミロイドによって誘導される認知機能低下があることが知られている動物と同じである場合、その動物は同じレベルの認知機能低下があると言われる。動物は、ベータアミロイド誘発性認知低下のさまざまな段階の既知の活動または発現の類似性に従ってランク付けすることができる。本明細書に記載の任意の実施形態による任意の化合物は、標識化合物がインビボで使用できるように標識することができる。

【0228】

いくつかの態様において、アッセイは、本明細書に記載の任意の態様による化合物がシグマ－２受容体に結合できるかどうかを決定するために使用される。いくつかの実施形態では、方法は、可溶性Ａβオリゴマー誘導シナプス喪失の阻害に関して可溶性Ａβオリゴマー誘導神経毒性を阻害することにより、シグマ－２受容体に結合する化合物がシグマ－２受容体で機能的アンタゴニストとして作用するかどうかを決定することをさらに含む、および可溶性Ａβオリゴマーの阻害は、膜輸送アッセイにおける欠損を誘発した。

【0229】

アミロイドβモノマー、オリゴマー、フィブリル、およびタンパク質に関連するアミロイドｓｃｒｅｅｎｉｎｇ（「タンパク質複合体」）、およびより一般的には、アミロイドβアセンブリを含む、アミロイドｏｆの任意の形態を、本開示によるスクリーニング方法およびアッセイの実施において使用することができる。例えば、スクリーニング方法は、米国特許出願第１３／０２１，８７２号に開示されているように、様々な形態の可溶性アミロイドαオリゴマーを使用することができる。米国特許公開２０１０／０２４０８６８；国際特許出願ＷＯ／２００４／０６７５６１；国際特許出願ＷＯ／２０１０／０１１９４７；米国特許公開２００７００９８７２１；米国特許公開２０１００２０９３４６；国際特許出願ＷＯ／２００７／００５３５９；米国特許公開２００８００４４３５６；米国特許公開２００７０２１８４９１；ＷＯ／２００７／１２６４７３；米国特許公開２００５００７４７６３；国際特許出願ＷＯ／２００７／１２６４７３、国際特許出願ＷＯ／２００９／０４８６３１、および米国特許公開２００８００４４４０６、米国特許第７，９０２，３２８号および米国特許第６，２１８，５０６号であり、これらはそれぞれ参照により本明細書に組み込まれる。

【0230】

アミロイドβのモノマーまたはオリゴマーを含むアミロイドβフォームは、任意のソースから取得できる。例えば、いくつかの実施形態では、市販のアミロイドβモノマーおよび／またはアミロイドβオリゴマーを水溶液で使用しても良く、他の実施形態では、タンパク質水溶液で使用されるアミロイβモノマーおよび／またはアミロイドβオリゴマーを任意の数の既知の技術を使用して、当業者によって単離および精製される。一般に、様々な実施形態のタンパク質およびアミロイドβの水溶液の調製に使用されるアミロイドβモノマーおよび／またはアミロイドβオリゴマーは、水溶液に可溶性であり得る。したがって、水溶液のタンパク質とアミロイドβの両方が可溶性である可能性がある。

【0231】

追加されるアミロイドβは、どのアイソフォームでも良い。例えば、いくつかの実施形態では、アミロイドβモノマーはアミロイドβ１－４２であっても良く、他の実施形態では、アミロイドβモノマーはアミロイドβ１－４０であっても良い。さらに他の実施形態では、アミロイドβは、アミロイドβ１－３９またはアミロイドβ１－４１であっても良い。したがって、様々な実施形態のアミロイドＡは、アミロイドＡの任意のＣ末端アイソフォームを包含し得る。さらに他の実施形態は、Ｎ末端がほつれているアミロイドβを含み、いくつかの実施形態では、上記のアミロイドβＣ末端異性体のいずれかのＮ末端は、アミノ酸２、３、４、５、または６であり得る例えば、アミロイドβ１－４２はアミロイドβ２－４２、アミロイドβ３－４２、アミロイドβ４－４２、またはアミロイドβ５－４２およびそれらの混合物を包含しても良く、同様に、アミロイドβ１－４０はアミロイドβ２－４０、アミロイドβ３－４０、アミロイドβ４－４０、またはアミロイドβ５－４０を包含しても良い。

【0232】

様々な実施形態で使用されるアミロイドβ形態は、野生型、すなわち、大部分の集団によってインビボで合成されるアミロイドβのアミノ酸配列、またはいくつかの実施形態ではアミロイドと同一のアミノ酸配列を有し、いくつかの実施形態では、アミロイドβは変異アミロイドβであっても良い。実施形態は、特定の様々な変異アミロイドαに限定されない。例えば、いくつかの実施形態では、水溶液に導入されるアミロイドαは、例えば「オランダ」（Ｅ２２Ｑ）変異または「北極」（Ｅ２２Ｇ）変異を有するアミロイドαなどの既知の変異を含んでも良い。そのような変異モノマーには、例えば、アルツハイマー病、アミロイドβの家族性形態にかかりやすい個体の集団から単離されたアミロイドβの形態などの天然に生じる突然変異が含まれ得る。他の実施形態では、変異アミロイドβモノマーは分子技術を使用して、特定の変異を持つアミロイドβ変異体を生成することにより合成的に生成される。さらに他の実施形態では、変異アミロイドβモノマーは、例えば、ランダムに生成されたアミロイドα変異体に見られる変異体など、以前に同定されていない変異を含んでも良い。本明細書で使用される「アミロイドＡ」という用語は、野生型のアミロイドＡおよび変異型のいずれかのアミロイドＡの両方を包含することを意味する。

【0233】

いくつかの態様において、タンパク質水溶液中のアミロイドαは、単一のアイソフォームのものであっても良い。他の実施形態では、アミロイドαの様々なＣ末端アイソフォームおよび／またはアミロイドαの様々なＮ末端アイソフォームを組み合わせて、タンパク質水溶液で提供できるアミロイドα混合物を形成することができる。さらに他の実施形態では、アミロイドβは、タンパク質含有水溶液に加えられ、インサイチュで切断されるアミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）に由来する場合があり、そのような実施形態では、アミロイドβの様々なアイソフォームが溶液内に含まれ得る。アミロイドβを添加した後、水溶液内でＮ末端のフラッシングおよび／またはＣ末端アミノ酸の除去が発生する場合がある。したがって、本明細書に記載されるように調製された水溶液は、単一のアイソフォームが最初に溶液に加えられた場合でさえ、さまざまなアミロイドβアイソフォームを含み得る。

【0234】

水溶液に添加されるアミロイドβモノマーは、生体組織などの天然源から単離されても良く、他の実施形態では、アミロイドβは、トランスジェニックマウスまたは培養細胞などの合成源に由来しても良い。いくつかの実施形態では、モノマー、オリゴマー、またはそれらの組み合わせを含むアミロイドβ型は、認知機能低下またはアルツハイマー病などのそれに関連する疾患と診断された正常な被験者および／または患者から単離される。いくつかの実施形態では、アミロイドβモノマー、オリゴマー、またはそれらの組み合わせは、正常な被験者または病気の患者から単離されたＡベータ集合体である。いくつかの実施形態では、Ａベータ集合体は高分子量であり、例えば、１００ＫＤａ以上である。いくつかの実施形態では、Ａベータ集合体は中間分子量１０から１００ＫＤａである。一部の実施形態では、Ａベータ集合体は１０ｋＤａ未満である。

【0235】

いくつかの実施形態のアミロイドＡオリゴマーは、「オリゴマー」の一般的に使用される定義と一致する任意の数のアミロイドＡモノマーから構成され得る。例えば、いくつかの実施形態において、アミロイドＡオリゴマーは約２～約３００約２～約２５０、約２～約２００個のアミロイドαモノマー、および他の実施形態では、アミロイドαオリゴマーは、約２～約１５０、約２～約１００、約２～約５０、または約２～約２５、アミロイドβモノマーを含む。いくつかの実施形態では、アミロイドβオリゴマーは、２つ以上のモノマーを含んでも良い。様々な実施形態のアミロイドβオリゴマーは、モノマーの確認に基づいて、アミロイドβフィブリルおよびアミロイドβプロトフィブリルと区別され得る。特に、アミロイドβオリゴマーのアミロイドβモノマーは、一般にβプリーツシートからなる球状であるのに対し、フィブリルおよびプロトフィブリルのアミロイドβモノマーの二次構造は平行βシートである。

【0236】

実施例
実施例１および２は、以下に記載される実験に使用され得るＡベータオリゴマー調製物を記載する。膜輸送およびオリゴマー結合／シナプス減少アッセイで使用される特定の調製物、ならびに以下に記載される生体内アッセイで使用される調製物は、それぞれ関連する実施例に記載される。

【0237】

例１：アミロイドβオリゴマーの調製
アミロイドβが結合する可能性のある水溶性タンパク質の環境である神経組織でアミロイドβがオリゴマー化する可能性のある条件を再現して、アミロイドβオリゴマーおよび原線維のより疾患関連の構造状態を特定した。水溶性タンパク質は、超遠心分離によりラットの脳から調製された。具体的には、氷上のラット脳組織に、脳組織１グラムあたり５容量のＴＢＳバッファー（２０ｍＭ Ｔｒｉｓ－ＨＣＬ、ｐＨ７．５、３４ｍＭ ＮａＣｌおよび完全プロテアーゼ阻害剤カクテル（Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ）を添加した。ホモジナイズされた脳組織は、その後、１５０，０００ｘｇで４℃（４０，０００ｒｐｍ Ｔｙ６５）で１時間遠心分離された。浮遊物（浮遊ミエリンとペレットの上０．５ｃｍの間）が除去され、アリコートが凍結された。－７５℃でペレットをＴＢＳに再懸濁し、元の容量に再懸濁し、－７５℃でアリコートで凍結した。合成、単量体ヒトアミロイドβ１－４２をこの混合物に加えて、１．５ｕＭアミロイドβの最終濃度を得て、溶液を４℃で２４時間インキュベートした。線維状集合体を除去するために５，８００ｇで１０分間の混合物の遠心分離を実施し、次いで６Ｅ１０共役アガローススピンカラム（Ｐｉｅｒｃｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙ）を使用して２４時間免疫沈降を実施した。その後、溶出したアミロイドβオリゴマーをＭＡＬＤＩ－Ｔｏｆ質量分析にかけ、サンプルの内容物を特定した。

【0238】

タンパク質含有溶液中で自己会合したするアミロイドβは、２２，５９９Ｄａ、５サブユニット５量体および３１，９５０Ｄａ、７サブユニット、７ｍｅｒのサブユニット集合体を形成する。４９，２９１Ｄａの別のピークは１２サブユニット、１２ｍｅｒを表すが、これはアミロイドβ１２ｍｅｒの正確な分子量ではない。特に、４５１８Ｄａまたは９０３６Ｄａのいずれにも、アミロイドβモノマーおよびダイマーを表すピークは観察されない。ただし、９，８８２Ｄａおよび１４，７３１Ｄａのピークは、それぞれ７８６Ｄａ（または２ｘ３９３Ｄａ）の脂質またはタンパク質に関連するアミロイドβ二量体、および３ｘ３９３Ｄａの脂質またはタンパク質に関連するアミロイドβ三量体を表す。さらに、１９，６８６Ｄａのピークの存在は、３量体複合体と４９５４Ｄａのラットアミロイドβフラグメントが関与している可能性があるアセンブリ状態を示す。したがって、これらのデータは、小さな脂質またはタンパク質とアミロイドβの二量体および三量体との関連を反映している可能性があり、生理学的システムに特有の立体構造状態のアセンブリを指図する可能性がある。

【0239】

実施例２ベータアミロイドオリゴマーの調製
ラット脳可溶性タンパク質の混合物中の１．５ｕＭ単量体ヒトアミロイドβ１－４２の溶液を、実施例１に記載のように４℃で２４時間インキュベートした。その後、この溶液をスペクトルを取る前にトリフルオロエタノール（ＴＦＥ）で処理した。ＴＦＥでは、組み立てられたタンパク質構造と非共有結合したタンパク質複合体が変性タンパク質に解離し、組み立てられたオリゴマーに関連するピークが消えると予想される。上記で特定された９８２２Ｄａ、１４，７３１Ｄａ、３１，９５０Ｄａ、および４９，２９１Ｄａのピークを含む、実施例１で観察されたタンパク質ピークの大部分は消失した。ただし、４５１８Ｄａに豊富なピークが観察され、これはアミロイドβモノマーピークを表す。４９５４．７のピークは明らかであり、これはアミロイドβ１－４６と同様のより長いベータフラグメントを表している可能性がある。追加のピークが７０８６Ｄａで観察される。これは、２５５０Ｄａの共有結合したタンパク質に関連するアミロイドβモノマーに相当する可能性のある、実施例１に記載の調製物には存在しなかった。

【0240】

実施例３：ヒトＡＤ脳組織からのベータアミロイドオリゴマーの単離
ＴＢＳ可溶性抽出物：組織病理学的分析によりＢｒａａｋ Ｓｔａｇｅ Ｖ／ＶＩアルツハイマー病（ＡＤ）であると特徴付けられたヒト患者の死後脳組織のサンプルは、病院の脳組織バンクから入手した。年齢および性別が一致したＡＤおよび正常組織標本を、１ｍＭ ＥＤＴＡおよび１ｍｇ／ｍｌ完全プロテアーゼ阻害剤カクテル（Ｓｉｇｍａ Ｐ８３４０）を含む２０ｍＭ Ｔｒｉｓ－ＨＣＬ、１３７ｍＭ ＮａＣｌ、ｐＨ７．６で０．１５ｇｍ組織／ｍｌに希釈し、ホモジナイズした。組織ホモジネートの超遠心分離は、Ｂｅｃｋｍａｎ Ｏｐｔｉｍａ ＸＬ－８０Ｋ Ｕｌｔｒａｃｅｎｔｒｉｆｕｇｅで１０５，０００ｇで１時間実施した。得られたＴＢＳ可溶性画分をプロテインＡおよびプロテインＧアガロースカラム（Ｐｉｅｒｃｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ）を使用して免疫枯渇させ、次にＡｍｉｃｏｎ Ｕｌｔｒａ ３、１０および１００ｋＤａ ＮＭＷＣＯフィルター（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）でサイズ分画した。

【0241】

免疫沈降：サイズ分画および免疫枯渇ＴＢＳ可溶性抽出物を、適切なＮＭＷＣＯ Ａｍｉｃｏｎ Ｕｌｔｒａフィルターで約２００ｕｌに濃縮した。濃縮ＴＢＳ可溶性抽出物をＴＢＳサンプル緩衝液（Ｐｉｅｒｃｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ）で４００ｕｌまで希釈し、５８００ｇで１０分間遠心分離して原線維を除去した。次に、得られた上清を６Ｅ１０結合アガロースビーズで４℃で一晩免疫沈降させた後、高浸透圧のジェントル溶出バッファー（Ｐｉｅｒｃｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌ）を使用して抗原溶出し、Ａβ含有タンパク質種を単離した。

【0242】

ＭＡＬＤＩ－質量分析：免疫分離されたベータアミロイドは、Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ（ＡＢＩ）Ｖｏｙａｇｅｒ ＤＥ－Ｐｒｏ ＭＡＬＤＩ－Ｔｏｆ機器を使用して質量分析にかけられた。サンプルは、分析のターゲット分子量範囲に応じて、α－シアノ－４－ヒドロキシケイ皮酸（ＣＨＣＡ）、シナピン酸（ＳＡ）、６－アザ－２－チオチミン（ＡＴＴ）などのさまざまなマトリックスタイプを使用して分析した。機器は、可変抽出遅延とともに線形陽イオンモードで実行された。蓄積されていないスペクトルは、取得ごとに「ホットスポット」の１００ショットを表し、蓄積スペクトルは、取得ごとに２００レーザーショットの各スポットの１２の個別の領域で表された。

【0243】

データ分析：データ収集と分析は、ＶｏｙａｇｅｒのＤａｔａ Ｅｘｐｌｏｒｅｒソフトウェアパッケージを使用して実行された。質量スペクトルの標準処理には、Ｓ／Ｎ比の変動に加えて、スペクトルの平滑化とベースライン減算関数が含まれた。

【0244】

Ａｂ定量のためのＥＬＩＳＡ：修正サンドイッチＥＬＩＳＡ技術を使用して、免疫沈降ＴＢＳ可溶性画分を「総」ＡベータおよびＡベータオリゴマー濃度の両方について分析した。簡単に説明すると、６Ｅ１０および４Ｇ８でコーティングされたＮｕｎｃ ＭａｘｉＳｏｒｐ ９６ウェルプレートをＡｂｅｔａ含有サンプルとインキュベートし、ビオチン化４Ｇ８検出抗体でプローブした。Ｓｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎ－ＨＲＰ（Ｒｏｃｋｌａｎｄ）とのインキュベーションに続いて、ＢｉｏＴＥｋ Ｓｙｎｅｒｇｙ ＨＴプレートリーダーでａベータの比色検出（ＯＤ ４５０）を可能にするテトラメチルベンジジン（ＴＭＢ）基質の開発した。検量線の作成にはモノマーＡベータ １－４２を使用し、ＧＥＮ ５ソフトウェアとともに免疫沈降サンプルのＡベータレベルの定量化を許可した。
実施例４：受容体結合アッセイ

【0245】

特定の化合物は、そのアゴニストまたはアンタゴニストの結合または作用をブロックすることにより、いくつかの受容体との相互作用について試験された。一部の化合物は、既知の細胞受容体またはシグナル伝達タンパク質と直接相互作用するかどうかを確認するためにテストされた。化合物は、細胞株で過剰発現されたまたは組織から単離された所定のヒト受容体の既知のアゴニストまたはアンタゴニストの結合を置換する能力について試験することができる。化合物はまた、所定のヒト受容体のアゴニストまたはアンタゴニストにより誘導される下流シグナル伝達を遮断する能力についても試験できる。化合物は、１００種類の既知の受容体での作用を試験できる。ＣＮＳに関連する受容体のごく一部のみで比活性が生じることが望まし。

【0246】

同じプロトコルを使用して、膜輸送データが表１に示されているいくつかの化合物を、シグマ－２受容体の認識についてテストした。特定の化合物は、シグマ－２受容体に優先的に結合する。

【0247】

競合放射性リガンド結合アッセイ１
Ｓｉｇｍａ－１の結合では、１００μＭ～１ ｎＭのさまざまな濃度の試験化合物を使用して、８ｎＭ［３Ｈ］（＋）ペンタゾシンをＪｕｒｋａｔ細胞膜の内因性受容体から置き換えた（Ｇａｎａｐａｔｈｙ ＭＥ ｅｔ ａｌ．１９９１，Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．２８９：２５１－２６０）。１０μＭハロペリドールを使用して、非特異的結合を定義した。Ｓｉｇｍａ－２受容体の場合、１００μＭ～１ｎＭのさまざまな濃度の試験化合物を使用して、５ｎＭ［３Ｈ］１，３－Ｄｉ－（２－ｔｏｌｙｌ）ｇｕａｎｉｄｉｎｅをＳｉｇｍａ－１受容体をマスクするための３００ｎＭ（＋）ペンタゾシンの存在下で、ラット大脳皮質の膜上の内因性受容体から置換した。（Ｂｏｗｅｎ ＷＤ，ｅｔ ａｌ．１９９３，Ｍｏｌ．Ｎｅｕｒｏｐｈａｒｍｃｏｌ ３：１１７－１２６）。１０μＭハロペリドールを使用して、非特異的結合を定義した。Ｂｒａｎｄｅｌ １２Ｒセルハーベスターを使用してＷｈａｔｍａｎ ＧＦ／Ｃフィルターで迅速にろ過した後、氷冷バッファーで２回洗浄して反応を終了した。乾燥したフィルターディスクの放射能は、液体シンチレーションアナライザー（Ｔｒｉ－Ｃａｒｂ ２９００ＴＲ；ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ Ｌｉｆｅ ａｎｄ Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ））を使用して測定した。置換曲線をプロットし、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ Ｉｎｃ．、カリフォルニア州サンディエゴ）を使用して、受容体サブタイプの試験化合物のＫｉ値を決定した。特異的結合の割合は、総結合（１分あたりの崩壊）と非特異的結合（１分あたりの崩壊）の差を総結合（１分あたりの崩壊）で除算することによって決定した。

【0248】

シグマ－１およびシグマ－２受容体の親和性は、シグマ－１受容体および［３Ｈ］１，３－Ｄｉ－（シグマ－２受容体からの変位を測定するための３００ｎＭ（＋）ペンタゾシンの存在下での２－トリル）グアニジンを使った公開研究から通常得られる。

【0249】

競合的放射性リガンド結合アッセイ２
シグマ－１およびシグマ－２受容体での試験化合物の親和性は、異なる既知の標識シグマ－２またはシグマ－１リガンドの置換によっても決定された。ろ過アッセイは、以前に公開された手順に従って実施した（Ｘｕ，ｅｔ ａｌ．，２００５）。試験化合物をＮ、Ｎ－ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）またはエタノールに溶解し、１５０ｍＭ ＮａＣｌおよび１００ｍＭ ＥＤＴＡを含む５０ｍＭ Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ ｐＨ７．４緩衝液で希釈した。膜ホモジネートは、シグマ－１結合アッセイではモルモットの脳から、シグマ－２結合アッセイではラットの肝臓から作製された。膜ホモジネートを５０ｍＭ Ｔｒｉｓ－ＨＣｌバッファー、ｐＨ８．０で希釈し、濃度０．１ｎＭ～１０ｕＭの放射性リガンドと試験化合物を含む９６ウェルプレートで、総容量１５０ｕＬで２５°Ｃでインキュベートした。インキュベーションが完了した後、９６チャンネルトランスファーピペット（フィッシャーサイエンティフィック、ピッツバーグ、ペンシルバニア州）を使用して１５０μＬの氷冷洗浄バッファー（１０ｍＭ Ｔｒｉｓ ＨＣｌ、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、ｐＨ７．４）と採取したサンプルは、１００μＬの５０ｍＭ Ｔｒｉｓ－ＨＣＩバッファーをあらかじめ浸しておいた９６ウェルファイバーグラスフィルタープレート（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ、Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ、ＭＡ）で迅速にろ過しました。各フィルターは、２００μＬの氷冷洗浄バッファー（１０ｍＭ Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、ｐＨ７．４）で４回洗浄した。Ｗａｌｌａｃ １４５０ ＭｉｃｒｏＢｅｔａ液体シンチレーションカウンター（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ、マサチューセッツ州ボストン）を使用して、結合放射能を定量した。

【0250】

モルモット脳膜ホモジネート（～３００ｕｇタンパク質）および～５ｎＭ［３Ｈ］（＋）－ペンタゾシン（３４．９Ｃｉ／ｍｍｏｌ、Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ、Ｂｏｓｔｏｎ、ＭＡ）を使用して、シグマ－１受容体結合アッセイを実施した。インキュベーション時間は室温で９０分だった。非特異的結合は、１０μＭの冷たいハロペリドールを含むサンプルから決定された。

【0251】

ラット肝臓膜ホモジネート（～３００ｕｇタンパク質）および～２ｎＭ ｓｉｇｍａ－２高選択性放射性リガンド［３Ｈ］ＲＨＭ－１のみ（他のブロッカーなし）（Ａｍｅｒｉｃａ Ｒａｄｉｏｌａｂｅｌｅｄ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ Ｉｎｃセントルイス、ミズーリ州）、～１０ｎＭ［３Ｈ］ＤＴＧ（５８．１Ｃｉ／ｍｍｏｌ、パーキンエルマー、ボストン、マサチューセッツ州）または～１０ｎＭ［３Ｈ］ハロペリドール（Ａｍｅｒｉｃａ Ｒａｄｉｏｌａｂｅｌｅｄ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ Ｉｎｃ．、セントルイス、ミズーリ州）シグマ－１部位をブロックする１ｕＭ（＋）－ペンタゾシンの存在、インキュベーション時間は［３Ｈ］ＲＨＭ－１では６分、室温で［３Ｈ］ＤＴＧおよび［３Ｈ］ハロペリドールでは１２０分だった。非特異的結合は、１０ｕＭの冷たいハロペリドールを含むサンプルから決定された。

【0252】

競合的阻害実験のデータを非線形回帰分析を使用してモデル化し、放射性リガンドの特異的結合の５０％を阻害する阻害剤の濃度（ＩＣ５０値）を決定した。結合親和性、Ｋｉ値は、ＣｈｅｎｇおよびＰｒｕｓｏｆｆの方法を使用して計算された。モルモットの脳の［３Ｈ］（＋）－ペンタゾシンに使用されるＫｄ値は７．８９ｎＭであり、ラット肝臓の［３Ｈ］ＲＨＭ－１と［３Ｈ］ＤＴＧはそれぞれ０．６６ｎＭと３０．７３ｎＭだった。標準化合物のハロペリドールは、品質保証のために使用されました。例示的な化合物のシグマ－２受容体での親和性データを表１に示す。

【0253】

いくつかの実施形態において、本明細書の任意の実施形態による化合物、またはその薬学的に許容される塩は、本明細書で提供されるシグマ－２受容体結合アッセイプロトコルに従って試験した場合、１，０００ｎＭ以下、７５０ｎＭ以下、５００ｎＭ、２５０ｎＭ超、１００ｎＭ以下、５０ｎＭ以下、２５ｎＭ以下、または１０ｎＭ以下のシグマ－２受容体結合親和性Ｋｉを示す。

【0254】

実施例５：膜輸送アッセイにおける神経細胞に対するＡベータオリゴマー効果の阻害
本明細書に記載の任意の実施形態による化合物を、細胞に対するアミロイドベータ効果を阻害する能力について試験した。化合物は一般に、膜輸送／エキソサイトーシスアッセイ（ＭＴＴアッセイ）によって測定されるアミロイドベータ効果を阻害することができた。結果を表１に示す。このアッセイの原理は次のとおりである。

【0255】

広範囲の細胞死ではなく、シナプスおよび記憶障害がアルツハイマー病の初期段階で支配的であるため、これらの変化を測定するアッセイは、オリゴマー活性の小分子阻害剤を発見するのに特に適する。ＭＴＴアッセイは、培養物の毒性の尺度として頻繁に使用されます。黄色のテトラゾリウム塩は細胞によってエンドサイトーシスされ、エンドソーム経路で不溶性の紫色ホルマザンに還元される。紫色のホルマザンのレベルは、培養中の活発に代謝する細胞の数を反映しており、ホルマザンの量の減少は、培養中の細胞死または代謝毒性の尺度として採用される。顕微鏡で観察すると、紫色のホルマザンが最初に細胞を埋める細胞内小胞に見える。時間が経つにつれて、ベシクルはエキソサイトーシスされ、不溶性ホルマザンが水性媒体環境にさらされると、ホルマザンは細胞膜の外表面に針状結晶として沈殿する。ＬｉｕとＳｃｈｕｂｅｒｔ（'９７）は、エンドサイトーシス率に影響を与えずに、ホルマザンの減少によるエキソサイトーシス率を選択的に加速することにより、細胞が亜ベータオリゴマーの亜致死レベルに応答することを発見した。本発明者らは、培養中の成熟した一次ニューロンでこれらの観察結果を複製し、自動化された顕微鏡検査および画像処理によりこれらの形態学的変化を定量化した。これらの状況下では、減少したホルマザンの総量に全体的な変化はなく、その形成速度の変化および／または細胞からの排出の変化を反映する形態の単純な変化がある。本発明者らは、このアッセイが細胞死を引き起こさない低レベルのオリゴマーに敏感であるという以前の発見を確認した（Ｌｉｕ ａｎｄ Ｓｃｈｕｂｅｒｔ'０４，Ｈｏｎｇ ｅｔ ａｌ．，'０７）。実際、ＬＴＰの阻害につながる少量のオリゴマーは細胞死を引き起こさず（Ｔｏｎｇ ｅｔ ａｌ．，'０４）、培養中（または脳スライス）のホルマザンの総量を変えることは期待されていない。

【0256】

他の研究者が示唆した証拠は、膜輸送により媒介されるニューロン表面受容体発現のＡベータオリゴマー媒介減少が、シナプス可塑性（ＬＴＰ）、したがって学習および記憶の電気生理学的測定のオリゴマー阻害の基礎であることを示唆する（Ｋａｍｅｎｅｔｚ ｅｔ ａｌ．，'０３，Ｈｓｅｉｈ ｅｔ ａｌ．，'０６）。ホルマザンの形態学的変化を介してオリゴマーによって誘導される膜輸送速度変化を測定することは、細胞株でＡベータオリゴマー遮断薬を発見するために使用される（Ｍａｅｚａｗａ ｅｔ ａｌ．，'０６，Ｌｉｕ ａｎｄ Ｓｃｈｕｂｅｒｔ'９７，'０４，'０６，Ｒａｎａ ｅｔ ａｌ．，'０９，Ｈｏｎｇ ｅｔ ａｌ．，'０８）ｉｎ ｖｉｖｏでげっ歯類のＡベータ脳レベルを低下させる（Ｈｏｎｇ ｅｔ ａｌ．，'０９）。エキソサイトーシスアッセイ／ＭＴＴアッセイの同様の手順は、文献に記載される。例えば、Ｌｉｕ Ｙ，ｅｔ．ａｌ．，Ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ ｂｉｏａｃｔｉｖｅ ａｍｙｌｏｉｄ ｂｅｔａ ｐｅｐｔｉｄｅ ｓｐｅｃｉｅｓ ｉｎ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ'ｓ ｄｉｓｅａｓｅ．Ｊ Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．２００４ Ｎｏｖ；９１（３）：６４８－５６；Ｌｉｕ Ｙ，ａｎｄ Ｓｃｈｕｂｅｒｔ Ｄ．"Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃ ａｍｙｌｏｉｄ ｐｅｐｔｉｄｅｓ ｉｎｈｉｂｉｔ ｃｅｌｌｕｌａｒ ３－（４，５－ｄｉｍｅｔｈｙｌｔｈｉａｚｏｌ－２－ｙｌ）－２，５－ｄｉｐｈｅｎｙｌｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ ｂｒｏｍｉｄｅ（ＭＴＴ）ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ ｂｙ ｅｎｈａｎｃｉｎｇ ＭＴＴ ｆｏｒｍａｚａｎ ｅｘｏｃｙｔｏｓｉｓ．"Ｊ Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．１９９７ Ｄｅｃ；６９（６）：２２８５－９３；とＬｉｕ Ｙ，及びＳｃｈｕｂｅｒｔ Ｄ．"Ｔｒｅａｔｉｎｇ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ'ｓ ｄｉｓｅａｓｅ ｂｙ ｉｎａｃｔｉｖａｔｉｎｇ ｂｉｏａｃｔｉｖｅ ａｍｙｌｏｉｄ ｂｅｔａ ｐｅｐｔｉｄｅ" Ｃｕｒｒ．Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ Ｒｅｓ．２００６ Ａｐｒ；３（２）：１２９－３５。したがって、アプローチは有効である。

【0257】

本エキソサイトーシスアッセイは、ｉｎ ｖｉｔｒｏで３週間成長した成熟した初代ニューロン培養での使用に適応した。参照によりその全体が本明細書に組み込まれるＷＯ ２０１１／１０６７８５を参照されたい。Ａｂｅｔａオリゴマーは、Ｃｅｌｌｏｍｉｃｓ ＶＴＩ自動顕微鏡システムを使用した画像処理で測定した場合、減少した紫色のホルマザンで満たされた細胞内小胞（涙点）の量の用量依存的減少を引き起こす。ビヒクルのみに曝露した培養神経細胞の顕微鏡写真は、ホルマザンで満たされた小胞を示す。ビヒクルとＡベータオリゴマーにさらされた神経細胞の顕微鏡写真では、ホルマザンで満たされた小胞がかなり少なく、代わりに細胞外環境に遭遇すると結晶に沈殿するエキソサイトーシスされたホルマザンが示される。Ａベータオリゴマーの量を増やすと、最終的に明白な毒性が生じる。したがって、アッセイで使用される神経活性Ａベータオリゴマーの濃度は、細胞死を引き起こす濃度よりもはるかに低い。本発明者らは、抗Ａベータ抗体の添加によりＡベータオリゴマーの効果がブロックされるが、抗体単独ではそれ自体には効果がないことを示すことにより、アッセイが有効であることを確認した（データは示していない）。この方法で構成された場合、アッセイは、これらの化合物がオリゴマーの破壊、ニューロンへのオリゴマー結合の阻害、またはオリゴマー結合によって開始されるシグナル伝達機構の反作用を介して作用するかどうかにかかわらず、Ａｂｅｔａオリゴマーの非致死効果を阻害する化合物を検出することができる。

【0258】

結果の生成に使用された方法は、膜輸送／エキソサイトーシス（ＭＴＴ）アッセイで以下のとおりである。

【0259】

Ｅ１８ Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙラット胚の初代海馬ニューロンを、ＮＢ培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）の３８４ウェルプレートに最適濃度で播種した。ニューロンは培養中に３週間維持され、ＮＢメディアにＮ２サプリメント（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を週に２回供給した。これらのニューロンは、成熟した脳のニューロンに特徴的なシナプスタンパク質の完全な補体を発現し、活動依存性の電気シグナル伝達の複雑なネットワークを示す。このような文化のニューロンとグリアは、無傷の脳回路との優れたレジストレーションを示す分子シグナル伝達ネットワークを有しており、このため、学習と記憶のモデルシステムとして２０年以上にわたって使用された（例：Ｋａｅｃｈ Ｓ，Ｂａｎｋｅｒ Ｇ．Ｃｕｌｔｕｒｉｎｇ ｈｉｐｐｏｃａｍｐａｌ ｎｅｕｒｏｎｓ．Ｎａｔ Ｐｒｏｔｏｃ．２００６；１（５）：２４０６－１５．Ｅｐｕｂ ２００７ Ｊａｎ １１；Ｓｅｅ ａｌｓｏ Ｃｒａｉｇ ＡＭ，Ｇｒａｆ ＥＲ，Ｌｉｎｈｏｆｆ ＭＷ．Ｈｏｗ ｔｏ ｂｕｉｌｄ ａ ｃｅｎｔｒａｌ ｓｙｎａｐｓｅ：ｃｌｕｅｓ ｆｒｏｍ ｃｅｌｌ ｃｕｌｔｕｒｅ．Ｔｒｅｎｄｓ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２００６ Ｊａｎ；２９（１）：８－２０．Ｅｐｕｂ ２００５ Ｄｅｃ ７．Ｒｅｖｉｅｗ）。

【0260】

試験化合物を１００ｕＭ～０．００１ｎＭの範囲の濃度で細胞に加え、続いてビヒクルまたはＡベータオリゴマー調製物（総Ａベータタンパク質濃度３μＭ）を加え、５％ＣＯ_２で３７℃で１～２４時間インキュベートした。ＭＴＴ試薬（３－（４，５－ｄｉｍｅｔｈｙｌｔｈｉｚａｏｌ－２ｙｌ）－２，５ｄｉｐｈｅｎｙｌ ｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ ｂｒｏｍｉｄｅ）（Ｒｏｃｈｅ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ）をリン酸緩衝生理食塩水で５ｍｇ／ｍＬに再構成した。ＭＴＴ標識試薬１０μＬを各ウェルに添加し、３７ｏＣで１時間インキュベートしてからイメージング下。エキソサイトーシスは、自動化された顕微鏡検査および画像処理によって評価され、エンドサイトーシスおよびエキソサイトーシスされたホルマザンの量を定量化した。

【0261】

各アッセイプレートは、各プレート上でＡベータオリゴマーを使用して、または使用せずに化合物がテストされるようにフォーマットされた。この設計により、スクリーニングカスケードの初期段階で（一次スクリーニングのレベルで）毒性または代謝的に活性な化合物が排除される。ホルマザンの減少は、細胞内小胞で最初に見られた。最終的なホルマザンエキソサイトーシスはＡベータオリゴマーを介して加速された。

【0262】

有効濃度の活性試験化合物の存在下では、膜輸送の変化がブロックされ、細胞はビヒクルで処理されたニューロンと見分けがつかなくなる。さらに、場合によっては、試験化合物のこの効果は、細胞をＡベータオリゴマーに曝露する前または後に試験化合物を添加するかどうかに依存しないようであり、これは治療効果および予防効果を示す。活性試験化合物の適切な濃度は、このアッセイで見られるＡベータオリゴマーの膜輸送効果をブロックします。本明細書に記載の任意の実施形態による化合物の上昇用量は、シグマ－２受容体の選択的高親和性アゴニストであり、オリゴマー効果を停止し、培養物をビヒクル処理培養物のように見せる。

【0263】

Ａβオリゴマー毒性の阻害に有効なシグマ－２受容体の選択的高親和性アゴニストである、本明細書に記載の任意の実施形態による化合物は、アルツハイマー病で見られる。

【0264】

合成Ａｂｅｔａオリゴマーは膜輸送アッセイで投与され、８２０ｎＭのＥＣ５０を示した。Ａベータの各濃度は、各テスト化合物のいくつかの濃度に対してテストされた。活性化合物は、ＥＣ５０をほぼ２桁右にシフトした。データが古典的な線形および非線形モデルに適合した場合、データはシルド分析（１のヒルスロープｎＨ）で線形であり、これは化合物が膜輸送を媒介する標的に対するオリゴマーと化合物の間で真の薬理学的競合を示すことを示す。

【0265】

アルツハイマー病患者の脳に由来するＡベータオリゴマーは、試験化合物に対して投与することができ、化合物への曝露により右方向へのシフトも示されると予想される。具体的には、有効用量で、活性試験化合物は、合成およびヒトのアルツハイマー病患者由来のオリゴマーの両方と薬理学的な競合を示す。

【0266】

実験制御
公表された方法に従って作成されたＡベータ１－４２オリゴマーを陽性対照として使用した。［例えばＤａｈｌｇｒｅｎ ｅｔ ａｌ．，"Ｏｌｉｇｏｍｅｒｉｃ ａｎｄ ｆｉｂｒｉｌｌａｒ ｓｐｅｃｉｅｓ ｏｆ ａｍｙｌｏｉｄ－ｂｅｔａ ｐｅｐｔｉｄｅｓ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌｌｙ ａｆｆｅｃｔ ｎｅｕｒｏｎａｌ ｖｉａｂｉｌｉｔｙ"Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ．２００２ Ａｕｇ ３０；２７７（３５）：３２０４６－５３．Ｅｐｕｂ ２００２ Ｊｕｎ １０．；ＬｅＶｉｎｅ Ｈ ３ｒｄ．"Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ'ｓ ｂｅｔａ－ｐｅｐｔｉｄｅ ｏｌｉｇｏｍｅｒ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ａｔ ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ"Ａｎａｌ Ｂｉｏｃｈｅｍ．２００４ Ｄｅｃ １；３３５（１）：８１－９０；Ｓｈｒｅｓｔｈａ ｅｔ．ａｌ，"Ａｍｙｌｏｉｄ ｂｅｔａ ｐｅｐｔｉｄｅ ａｄｖｅｒｓｅｌｙ ａｆｆｅｃｔｓ ｓｐｉｎｅ ｎｕｍｂｅｒ ａｎｄ ｍｏｔｉｌｉｔｙ ｉｎ ｈｉｐｐｏｃａｍｐａｌ ｎｅｕｒｏｎｓ"Ｍｏｌ Ｃｅｌｌ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２００６ Ｎｏｖ；３３（３）：２７４－８２． Ｅｐｕｂ ２００６ Ｓｅｐ ８；Ｐｕｚｚｏ ｅｔ ａｌ．，"Ａｍｙｌｏｉｄ－ｂｅｔａ ｐｅｐｔｉｄｅ ｉｎｈｉｂｉｔｓ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｎｉｔｒｉｃ ｏｘｉｄｅ／ｃＧＭＰ／ｃＡＭＰ－ｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅ ｅｌｅｍｅｎｔ－ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎ ｐａｔｈｗａｙ ｄｕｒｉｎｇ ｈｉｐｐｏｃａｍｐａｌ ｓｙｎａｐｔｉｃ ｐｌａｓｔｉｃｉｔｙ"Ｊ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２００５ Ｊｕｌ ２０；２５（２９）：６８８７－９７；Ｂａｒｇｈｏｒｎ ｅｔ ａｌ．，"Ｇｌｏｂｕｌａｒ ａｍｙｌｏｉｄ ｂｅｔａ－ｐｅｐｔｉｄｅ ｏｌｉｇｏｍｅｒ－ａ ｈｏｍｏｇｅｎｏｕｓ ａｎｄ ｓｔａｂｌｅ ｎｅｕｒｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｎ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ'ｓ ｄｉｓｅａｓｅ"Ｊ Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．２００５ Ｎｏｖ；９５（３）：８３４－４７．Ｅｐｕｂ ２００５ Ａｕｇ ３１；Ｊｏｈａｎｓｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｐｈｙｓｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ'ｓ ｄｉｓｅａｓｅ－ｒｅｌａｔｅｄ ｐｅｐｔｉｄｅｓ Ａ ｂｅｔａ １－４２ Ａｒｃｔｉｃ ａｎｄ Ａ ｂｅｔａ １－４２ｗｔ．ＦＥＢＳ Ｊ．２００６ Ｊｕｎ；２ ７３（１２）：２６１８－３０］および脳由来Ａｂｅｔａオリゴマー（例えば、Ｗａｌｓｈ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒａｌｌｙ ｓｅｃｒｅｔｅｄ ｏｌｉｇｏｍｅｒｓ ｏｆ ａｍｙｌｏｉｄ ｂｅｔａ ｐｒｏｔｅｉｎ ｐｏｔｅｎｔｌｙ ｉｎｈｉｂｉｔ ｈｉｐｐｏｃａｍｐａｌ ｌｏｎｇ－ｔｅｒｍ ｐｏｔｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｉｎ ｖｉｖｏ．Ｎａｔｕｒｅ（２００２）．４１６，５３５－５３９；Ｌｅｓｎｅ ｅｔ ａｌ．，Ａ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｍｙｌｏｉｄ－ｂｅｔａ ｐｒｏｔｅｉｎ ａｓｓｅｍｂｌｙ ｉｎ ｔｈｅ ｂｒａｉｎ ｉｍｐａｉｒｓ ｍｅｍｏｒｙ．Ｎａｔｕｒｅ．２００６ Ｍａｒ １６；４４０（７０８２）：３５２－７； Ｓｈａｎｋａｒ ｅｔ ａｌ，Ａｍｙｌｏｉｄ－ｂｅｔａ ｐｒｏｔｅｉｎ ｄｉｍｅｒｓ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｄｉｒｅｃｔｌｙ ｆｒｏｍ Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ'ｓ ｂｒａｉｎｓ ｉｍｐａｉｒ ｓｙｎａｐｔｉｃ ｐｌａｓｔｉｃｉｔｙ ａｎｄ ｍｅｍｏｒｙ．Ｎａｔ Ｍｅｄ．２００８ Ａｕｇ；１４（８）：８３７－４２．Ｅｐｕｂ ２００８ Ｊｕｎ ２２）。上記の特許文献に記載され、その全体が参照により組み込まれている特許文献に記載されている調製物を含む、任意のＡベータオリゴマー調製物をこのアッセイまたは対照として使用できることに留意すべきである。

【0267】

特にアルツハイマー病患者の脳から単離されたオリゴマー製剤を含む、さまざまな異なるＡベータオリゴマー製剤が膜輸送アッセイにおいてＡベータ効果を引き起こすことが実証された。

【0268】

界面活性剤を使用せずに、死後のヒト海馬または前頭前野からオリゴマーを単離し、６ｐＭｏｌａｒのＫｄで用量依存的に膜輸送を阻害した。ヒトアルツハイマー病患者由来のＡｂｅｔａオリゴマー（１３７ｐＭ）は、媒体と比較して膜輸送の統計的に有意な抑制をもたらす。化合物４－（３－（４－（トリフルオロメチル）ベンジルアミノ）ブチル）－２－メトキシフェノールは、ＡＤ脳由来Ａベータオリゴマーによって誘発される膜輸送不足を排除するが、Ａベータの非存在下で投与した場合、人身売買には影響しない。

【0269】

さまざまなＡｂｅｔａオリゴマー製剤の効力は異なるが（たとえば、ネイティブのアルツハイマー分離株は、試験した合成製剤のいずれよりも強力です－データは示さない）、結果は定性的に同じである：オリゴマーが媒介する病態は、本明細書の任意の実施形態によると、シグマ－２機能的アンタゴニストとして作用する。

【0270】

初代ニューロン培養
最適な細胞密度は、読み出しとしてエキソサイトーシスアッセイを使用し、培養中のニューロンに対するグリアの相対的割合の免疫組織化学分析を使用して、Ａβオリゴマーに対する細胞応答に基づいて決定される。培養は、神経組織とグリア（グリア細胞）である培養の割合を監視するために、免疫組織化学および画像処理ベースの定量化により毎週監視される。インビトロで２１日のスクリーニング年齢で、２０％を超えるグリア（ＧＦＡＰ陽性）とニューロン（１：５０００（濃度変数）のＭＡＰ２に対する（ニワトリポリクローナル）抗体（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）で陽性に染色）を含む培養物（２１ ＤＩＶ）は拒否される。

【0271】

Ａベータオリゴマー製剤
ヒトアミロイドペプチド１－４２は、品質管理分析に応じてロット選択を行いながら、カリフォルニアペプチドなどの多くの販売業者から入手した。オリゴマー調製物の品質管理は、オリゴマーのサイズ範囲と相対濃度を決定するウェスタンと、毒性なしでエキソサイトーシスの加速を確認するＭＴＴアッセイで構成される。ＤＮＡ結合ブルー色素ＤＡＰＩ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）で視覚化された核形態の定量化を介して、各画像ベースのアッセイで毒性を監視した。断片化された核は後期のアポトーシスにあると見なされ（ＭａｊｎｏおよびＪｏｒｉｓ'９５）、テストは拒否される。ニューロンに標準の１．５μＭ濃度で異常なペプチドサイズ範囲または重大な毒性を生じるペプチドロットも拒否される。

【0272】

プレートベースのコントロール－再フォーマットされたプレートが、ビークルとＡベータオリゴマーで処理されたニューロン間で統計的に有意な最小２倍の分離を達成すると、アッセイの最適化は完了したとみなされた（ｐ＜０．０１、スチューデントｔ検定、不等分散）プレート間のＣＶが１０％を超えない、日常的な基準である。
統計ソフトウェアと分析

【0273】

データ処理と分析は、Ｃｅｌｌｏｍｉｃｓ ＶＴＩ画像分析ソフトウェアとＳＴＯＲＥ自動化データベースソフトウェアによって達成された。培養３週間後のダイナミックレンジが低く、ニューロンのウェル間変動が大きいため、ペアワイズチューキークラマー分析で統計的比較を行い、化合物＋ＡベータオリゴマーとＡベータ単独および化合物単独の分離の重要性を車両から判断する。成熟した初代ニューロンが成人の脳の電気生理学的に媒介されたシグナル伝達ネットワークをより厳密に近似する能力は、このスクリーニング戦略を正当化する。偽陰性を最小限に抑える多数の複製スクリーニングウェルに対してパワー解析を設定した（例：Ｎ＝４）。本開示の試験化合物は、膜輸送に対するＡベータオリゴマーの効果を著しく逆転させるが、ニューロン代謝自体には影響を及ぼさない。

【0274】

本明細書に記載の任意の実施形態による選択された化合物は、Ａベータオリゴマー添加の前に本明細書に記載のＭＴＴアッセイで投与され、示されたＥＣ５０でＡベータオリゴマー誘発膜輸送欠損を遮断することが示された。具体的には、これらの結果は、化合物がマイクロモル濃度でニューロン細胞の膜輸送に対するＡベータオリゴマーの活性／効果をブロック／軽減することを示す。表１の特定の化合物は、示されたＥＣ５０でＡベータオリゴマーによるエキソサイトーシスの促進をブロックすることが示された。したがって、表１の化合物は、膜輸送のＡベータオリゴマーを介した変化を大幅にブロックした。これらの結果は、化合物がニューロン細胞に対するＡベータオリゴマーの活性／効果をブロック／軽減し、本明細書に記載の任意の実施形態による化合物を使用して、Ａベータオリゴマーが誘発する膜輸送異常をブロックできることを示す。

【0275】

いくつかの実施形態において、本明細書に記載の任意の実施形態による化合物は、本明細書で提供される膜輸送アッセイプロトコルに従って試験した場合、２０μＭ以下、１５μＭ以下、１０μＭ以下、５ｕＭ以下、１ｕＭ以下、１ｕＭ以下、０．５ｕＭ以下のＥＣ５０で、Ａベータオリゴマー誘発膜輸送欠損を阻害する。

【0276】

実施例６：薬物動態および代謝安定性研究
最初の薬物動態研究は、マウスのミクロソーム、マウス肝ミクロソーム、ＭＬＭで実施された。この研究は、Ｏｂａｃｈ，Ｒ．Ｓ ｅｔ ａｌ．（１９９７）Ｊ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｅｘｐ．Ｔｈｅｒ．，２８３：４６－５８によって実施され、これは参照により本明細書に組み込まれる。ＭＬＭアッセイにおける化合物の半減期（ｔ１／２）を表１に示す。

【0277】

いくつかの態様において、本明細書に記載の任意の態様による化合物、またはその薬学的に許容される塩は、本明細書に提供されるマウス肝臓ミクロソーム（ＭＬＭ）アッセイにおいて少なくとも５分、少なくとも１０分、少なくとも２５分、少なくとも５０分、少なくとも１００分、または少なくとも２００分の半減期（ｔ１／２）を示す。

【0278】

結果は、試験した化合物のいくつかがマウス肝臓ミクロソームで実質的に長い半減期を有していたことを示す。この結果は、これらの化合物の経口投与後の生物学的利用能が大きくなることを示す。同じ化合物が、上記の膜輸送アッセイおよび本明細書で言及されるそれらの活性により試験された。

【0279】

試験化合物の固有クリアランスの速度が速かった場合、実質的な初回通過代謝が示唆されます。薬物動態特性を改善するために、化合物は代謝安定性を高め、薬物様特性を改善するように設計された。候補化合物の代謝および肝安定性を決定するために、ミクロソーム安定性実験および血漿安定性実験が実施された。いくつかの実施形態において、インビトロミクロソーム安定性は、標準化合物、４－（３－（４－（トリフルオロメチル）ベンジルアミノ）ブチル）－２－メトキシフェノール、１６のマウス肝臓ミクロソームｔ1/2（ｍｉｎ）の初期リード化合物に正規化された。本発明の化合物は、この初期のリード化合物よりも優れている。

【0280】

２回目のＰＫ研究はｉｎ ｖｉｖｏで実施することができ、以下のように、さまざまな経路で急性または慢性的に投与された試験化合物の血漿レベルと脳レベルの測定が含まれる。

【0281】

ＨＰＬＣ－ＭＳ最適化
各試験化合物の溶液を調製し、一定速度でシリンジポンプを介してＴＳＱ Ｑｕａｎｔｕｍ分光計（Ｆｉｓｈｅｒ Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）ソースに注入する。フルスキャンＭＳ（質量分析）分析が行われ、全イオン電流クロマトグラムと対応する質量スペクトルが、正と負の両方のイオン化モードで各試験化合物について生成される。ＭＳ／ＭＳのプリカーサイオンは、それぞれのイオン量の関数として、正または負の質量スペクトルから選択される。さらに、定量分析で使用する適切な選択されたフラグメンテーション反応を決定するために、プロダクトイオンＭＳ／ＭＳ分析が実行される。最終的な反応モニタリングパラメータは、成分の複雑な混合物内に存在する場合に試験化合物を定量化する能力を最大化するように選択される。各テスト化合物に使用する特定のＳＲＭトランジションを特定した後、ＴＳＱ量子化合物最適化ワークスペースの自動化プロトコルを使用して検出パラメーターを最適化する。最後に、ＬＣ－ＭＳ分析に使用するクロマトグラフィー条件は、適切なＬＣカラムでの分析物の注入と分離によって識別され、必要に応じて勾配条件の調整が実行される。

【0282】

ＩＶ投与の処方：
ｐＨ７．４のリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）への試験化合物の溶解度は、最初に目視検査により評価される。化合物が目標濃度で溶解する場合、ＰＢＳが媒体として使用される。（化合物がＰＢＳに完全に溶解しない場合、ＩＶ投与に適合する他の媒体を評価できます。そのような媒体には、ＤＭＳＯ、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ ４００）、ソルトールＨＳ １５、およびクレモホールＥＬが含まれる。）単回ボーラス、１０ｍｇ／ｋｇの試験化合物を静脈内投与する。

【0283】

ＰＯ投与用の製剤：ＰＢＳへの試験化合物の溶解度が最初に評価される。化合物が目標濃度で溶解する場合、ＰＢＳが媒体として使用される。（ＤＭＳＯ／Ｓｏｌｕｔｏｌ ＨＳ１５／ＰＢＳ（５／５／９０、ｖ／ｖ／ｖ）、またはＤＭＳＯ／１％メチルセルロース（５／９５、ｖ／ｖ）は、それぞれの濃度で試験化合物がＰＢＳに完全に溶解しない場合に使用できる。）

【0284】

プラズマの直線性
血漿のアリコートに、指定された濃度の試験化合物をスパイクする。スパイクされたサンプルは、アセトニトリル沈殿を使用して処理され、ＨＰＬＣ－ＭＳまたはＨＰＬＣ－ＭＳ／ＭＳで分析される。ピーク面積と濃度の検量線が作成される。定量下限（ＬＬＱ）とともに、アッセイの報告可能な線形範囲が決定される。

【0285】

血漿サンプルの定量的バイオ分析
血漿サンプルはアセトニトリル沈殿を使用して処理され、ＨＰＬＣ－ＭＳまたはＨＰＬＣ－ＭＳ／ＭＳで分析される。プラズマ較正曲線が生成された。薬物を含まない血漿のアリコートに、指定の濃度レベルで試験化合物をスパイクする。スパイクされた血漿サンプルは、同じ手順を使用して未知の血漿サンプルと一緒に処理される。通常、処理された血漿サンプル（乾燥抽出物）は、ＨＰＬＣ－ＭＳまたはＨＰＬＣ－ＭＳ／ＭＳ分析まで凍結（－２０°Ｃ）で保存される。乾燥した抽出物を適切な溶媒に再構成し、遠心分離後にＨＰＬＣ－ＭＳまたはＨＰＬＣ－ＭＳ／ＭＳで分析した。ピーク面積が記録され、未知の血漿サンプル中の試験化合物の濃度は、それぞれの検量線を使用して決定される。定量下限（ＬＬＱ）とともに、アッセイの報告可能な線形範囲が決定される。

【0286】

この研究で使用される動物は、通常、それぞれ体重２０～３０ｇのオスのＣ５７ＢＬ／６マウス、または体重１８０～２５０ｇのオスのＳｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙラットである。各投与条件および各時点で３匹の動物を治療するため、各動物は１回の採血のみを受ける。皮下化合物投与は、腹腔内注射により達成された。経口投与は胃管栄養法によって行われる。静脈内投与は頸静脈カテーテルを介して行われる。

【0287】

様々な濃度での化合物投与後、血漿サンプルは、例えば、１０、３０、６０、１２０、２４０、３６０、４８０、および１４４０分で収集される。

【0288】

マウスおよびラットからの血漿サンプル採取

【0289】

心臓穿刺（マウス）または頸静脈カテーテル（ラット）による採血のために、動物を全身吸入麻酔（３％イソフルラン）下で鎮静させる。血液アリコート（３００－４００μＬ）をリチウムヘパリンでコーティングされたチューブに集め、穏やかに混合し、氷上で保持し、収集から１時間以内に４℃で１５分間、２，５００ｘｇで遠心分離する。その後、血漿を採取し、さらに処理するまで－２０℃で凍結する。

【0290】

動物の投与設計－生体内ＰＫ－カニューレが挿入されていない、絶食していない動物

【0291】

グループ１：ＳＣ、ｎ＝各時点で３匹の動物（合計２４匹）または

【0292】

ＩＶ、各時点でｎ＝３匹（合計２４匹）

【0293】

グループ２：ＰＯ、ｎ＝３の時点ごとの動物（合計２４匹の動物）

【0294】

グループ３：対照動物（薬物を含まない血液用）、ｎ＝５マウス

【0295】

各動物は、１回の採血と１回の脳採取の対象となる。

【0296】

動物からの脳サンプル収集
採血直後、動物を断頭し、脳全体を素早く取り出し、冷生理食塩水（０．９％ＮａＣｌ、ｇ／ｍＬ）で洗い流し、表面血管系を破裂させ、ガーゼで吸い取り乾燥させ、重量を量り、さらに処理するまで収集から１時間以内氷上に置く。各脳は、Ｐｏｗｅｒ Ｇｅｎ １２５を使用して、氷上で１０秒間、１．５ｍＬの冷リン酸緩衝生理食塩水、ｐＨ７．４（マウス＝１．５ｍＬ、ラット＝）でホモジナイズされる。各脳の脳ホモジネートは、次の処理まで－２０°Ｃで保存される。

【0297】

脳サンプルの直線性
脳ホモジネートのアリコートに、指定濃度の試験化合物をスパイクされる。各脳アリコートに、等量の冷却２６％（ｇ／ｍＬ）中性デキストラン（Ｓｉｇｍａからの平均分子量６５，０００－８５，０００、カタログ番号Ｄ－１３９０）溶液を添加して、１３％の最終デキストラン濃度を取得する。ホモジネートを５４０００ｘｇで４℃で１５分間遠心分離する。その後、上清をアセトニトリル沈殿を使用して処理し、ＨＰＬＣ－ＭＳ／ＭＳで分析する。ピーク対濃度ｉの検量線を作成した。定量下限（ＬＬＱ）とともに、アッセイの報告可能な線形範囲が決定される。

【0298】

脳サンプルの定量分析
各脳ホモジネートアリコートに、等量の冷却された２６％（ｇ／ｍＬ）の中性デキストラン（Ｓｉｇｍａからの平均分子量６５，０００－８５，０００、カタログ番号Ｄ－１３９０）溶液を加えて、１３％の最終デキストラン濃度を得る。ホモジネートを５４０００ｘｇで４℃で１５分間遠心分離する。その後、上清をアセトニトリル沈殿を使用して処理し、ＨＰＬＣ－ＭＳ／ＭＳで分析する。脳の較正曲線が生成される。薬物を含まない脳ホモジネートのアリコートに、指定の濃度レベルで試験化合物をスパイクする。スパイクされた脳ホモジネートサンプルは、同じ手順を使用して未知の脳ホモジネートサンプルと一緒に処理される。処理された脳サンプルは、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ分析まで－２０°Ｃで保存される。ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ分析では、ピーク面積が記録され、未知の脳サンプル中のテスト化合物の濃度がそれぞれの検量線を使用して決定された。アッセイの報告可能な線形範囲は、定量下限（ＬＬＱ）とともに決定された。

【0299】

脳の透過性
脳（ｎｇ／ｇ組織）および血漿（ｎｇ／ｍＬ）の試験化合物の濃度、ならびに各時点での脳濃度と血漿濃度の比は、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳおよび上記のように報告される。

【0300】

薬物動態
時間に対する化合物の血漿濃度のプロットが作成される。経口およびＳＣ投与後の化合物の基本的な薬物動態パラメーター（ＡＵＣｌａｓｔ、ＡＵＣＩＮＦ、Ｔ１／２、Ｔｍａｘ、およびＣｍａｘ）は、ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ（Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ）を使用した血漿データの非コンパートメント分析（ＮＣＡ）から取得される。非コンパートメント分析では、薬物または代謝物の特定のコンパートメントモデルを仮定する必要はない。ＮＣＡでは、血漿濃度－時間曲線下の面積の測定に台形規則を適用できる（Ｇａｂｒｉｅｌｓｓｏｎ，Ｊ．ａｎｄ Ｗｅｉｎｅｒ，Ｄ．Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｏｄｙｎａｍｉｃ Ｄａｔａ Ａｎａｌｙｓｉｓ：Ｃｏｎｃｅｐｔｓ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ．Ｓｗｅｄｉｓｈ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｅｓｓ．１９９７）。

【0301】

報告された用語の定義
曲線下面積（ＡＵＣ）－全身循環に到達する未変化薬物の総量の測定。曲線の下の領域は、濃度と時間をプロットし、各台形の増分領域を合計することによって計算された幾何学的な測定値である。

【0302】

ＷｉｎＮｏｎｌｉｎには、面積を計算するための２つの計算方法がある。線形台形法と線形対数台形法である。線形台形法は、濃度－時間曲線の下降部分に偏った結果を与え、ＡＵＣを過大評価する可能性があるため、ＷｉｎＮｏｎｌｉｎはＡＵＣの計算に線形対数オプションを提供する。デフォルトでは、対数線形台形法を使用して、残りの血漿濃度－時間曲線のＴｍａｘ後の面積を測定する。

【0303】

ＡＵＣｌａｓｔ：投与時から最後の観察時までの曲線下の面積で、定量限界よりも大きかった。

【0304】

ＡＵＣＩＮＦ：外挿された投与時から無限大までの曲線下面積。

【0305】

Ｃｍａｘ－行う時間と最後に観察された時間の間に薬物の経口または非ＩＶ投与後に得られた最大血漿薬物濃度。

【0306】

Ｔｍａｘ－薬物投与後数分で記録される最大観察血漿濃度（Ｃｍａｘ）の時間。

【0307】

Ｔ１／２－ＩＶ投与と非ＩＶ投与の両方からの終末消失半減期。

【0308】

ここで、ラムダＺ（ｚ）は、血漿濃度－時間曲線の末端（対数線形）部分に関連付けられた１次速度定数である。ｚは、時間対ログ濃度の線形回帰によって推定される。

【0309】

結果は、特定の試験化合物が０．１～０．５ｍｇ／ｋｇの範囲の用量で急性または慢性（毎日５日以上）投与した場合、良好な生物学的利用能と脳透過性を示すことを示すと予想される。この方法で、選択した試験化合物の経口バイオアベイラビリティを評価する。

【0310】

実施例８：ｈＥＲＧ阻害のインビトロ試験
標準アッセイでｈＥＲＧ阻害のｉｎ ｖｉｔｒｏ試験を実施した（Ｈａｖｅｒｋａｍｐ Ｗ，Ｂｒｅｉｔｈａｒｄｔ Ｇ，Ｃａｍｍ ＡＪ，Ｊａｎｓｅ ＭＪ，Ｒｏｓｅｎ ＭＲ，Ａｎｔｚｅｌｅｖｉｔｃｈ Ｃ，Ｅｓｃａｎｄｅ Ｄ，Ｆｒａｎｚ Ｍ，Ｍａｌｉｋ Ｍ，Ｍｏｓｓ Ａ ａｎｄ Ｓｈａｈ Ｒ．（２０００）Ｅｕｒ Ｈｅａｒｔ Ｊ ２１ （１５）；１２１６－３１）。ｈＥＲＧ阻害の試験化合物の結果（ＩＣ５０、ｎＭ）を表１に示す。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の任意の実施形態による化合物、またはその薬学的に許容される塩は、３００ｎＭを超えるＩＣ５０で、最小限のｈＥＲＧ阻害を示す。５００ｎＭを超える、１，０００ｎＭを超える、３，０００ｎＭを超える、５，０００ｎＭを超える、１０，０００を超える、または２０，０００ｎＭを超える。特定の実施形態において、本明細書に記載の任意の実施形態による化合物、またはその薬学的に許容される塩は、最小限のｈＥＲＧ阻害を示し、５，０００ｎＭを超える、１０，０００を超える、または２０，０００ｎＭを超えるＩＣ５０を示す。

【0311】

ｌｏｇＰ、膜輸送（ｕＭ）、シグマ－２受容体親和性、マウス肝臓ミクロソームにおけるシグマ－１受容体親和性ミクロソーム安定性（ＭＬＭ）（ｔ１／２、分）に関する本明細書に記載の特定の化合物の総合結果、ｔ１／２をＣＴに正規化した）１０９１４およびｉｎ ｖｉｔｒｏ毒性カリウムチャネルｈＥＲＧ（ＩＣ５０、ｎＭ）を表１に示す。

【表1】

【0312】

合成例
実施例Ｓｙｎ１：実施例化合物９の調製：

【化39】

化合物Ｓ１－２の調製のための一般的な手順

【化40】

【0313】

三つ口フラスコに、マグネシウム（９．３９ｇ、３９１．０９ｍｍｏｌ、１．１ ｅｑ）とヨウ素粒を入れた。その後、ＴＨＦ（８００ｍＬ）中の化合物Ｓ１－１（８０ｇ、３５５．５４ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ）の１５パーセント容量を窒素雰囲気下で混合物に加え、黄褐色が消えるまで攪拌した混合物を７０ｏＣに加熱してから攪拌しましたその温度でさらに６時間、ＴＨＦ中の化合物Ｓ１－２（０．４４Ｍ）の溶液を得て、次のステップで直接使用した。
化合物Ｓ１－４の調製のための一般的な手順

【化41】

【0314】

化合物Ｓ１－２（３２０ミリモル、１．０当量）のＴＨＦ（５００ｍＬ）溶液に、ＣｕＣｌ（３．１７ｇ、３２ミリモル、０．１当量）を加えた。溶液を０℃に冷却したら、化合物Ｓ１－３（６４ｇ、３２０ｍｍｏｌ、１．０当量）を滴下した。反応混合物を室温で３時間撹拌し、飽和ＮＨ_４Ｃｌ溶液でクエンチし、酢酸エチルで抽出した。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、真空下で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＡ、５０：１～１０：１）で精製し、表題化合物Ｓ１－４（５１ｇ、４６％）を得た。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ７．５７－７．４９（ｍ、４Ｈ）、４．０８－４．０３（ｍ、４Ｈ）、３．８０（ｄ、Ｊ＝２．４Ｈｚ、１Ｈ）、１．６２－１．５８（ｍ、６Ｈ）、１．１３－１．０９（ｍ、６Ｈ）
ＴＬＣ：ＰＥ／ＥＡ＝１０：１、ＵＶ２５４ｎｍ
Ｒｆ（化合物Ｓ１－４）＝０．５
化合物Ｓ１－５の調製の一般手順

【化42】

【0315】

化合物Ｓ１－４（５１ｇ、１４７．２５ｍｍｏｌ、１．０当量）のＭｅＯＨ（３００ｍＬ）溶液に、１Ｎ ＮａＯＨ水溶液（７３６ｍＬ、７３６．２５ｍｍｏｌ、５．０当量）を加えた。反応混合物を９０℃で３時間撹拌した後、室温に冷却した。混合物を１ＮＨＣｌ溶液でｐＨ４～５まで酸性化し、酢酸エチルで抽出した。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、真空下で濃縮して、化合物Ｓ１－５（４０ｇ、９４％）を得て、これをさらに精製することなく次のステップで直接使用した。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ７．５７－７．５５（ｍ、２Ｈ）、７．５０－７．４８（ｍ、２Ｈ）、３．８６（ｓ、１Ｈ）、１．５９（ｓ、６Ｈ）；
ＴＬＣ：ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１０：１、ＵＶ２５４ｎｍ
Ｒｆ（化合物Ｓ１－５）＝０．５
化合物Ｓ１－６の調製のための一般的な手順

【化43】

【0316】

化合物Ｓ１－５（４０ｇ、１３７．８２ｍｍｏｌ、１．０当量）のＤＭＳＯ（２００ｍＬ）溶液を１５０℃で２時間撹拌し、酢酸エチルで希釈し、水、ブラインで洗浄した。次いで、有機相をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、真空下で濃縮して、表題化合物Ｓ１－６（３０ｇ、８８％）を得て、これをさらに精製することなく直接使用した。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ７．５７－７．５５（ｍ、２Ｈ）、７．４８－７．４５（ｍ、２Ｈ）、２．６７（ｓ、２Ｈ）、１．４９－１．４６（ｍ、６Ｈ）；
ＴＬＣ：ＤＣＭ／ＭｅＯＨ＝１０：１、ＵＶ２５４ｎｍ
Ｒｆ（化合物Ｓ１－５）＝０．４
Ｒｆ（化合物Ｓ１－６）＝０．８
化合物Ｓ１－８の調製のための一般的な手順

【化44】

【0317】

ＴＨＦ（５００ｍＬ）中の化合物Ｓ１－６（３０ｇ、１２１．８４ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液にＨＯＢｔ（１９．８ｇ、１４６．２ｍｍｏｌ、１．２当量）、ＥＤＣＩ（２８ｇ、１４６．２１ｍｍｏｌ、１．２ｅｑ）、ＴＥＡ（３７ｇ、３６５．５２ｍｍｏｌ、３．０ｅｑ）、および化合物Ｓ１－７（２３．７７ｇ、２４３．６８ｍｍｏｌ、２．０ｅｑ）。反応物を室温で一晩撹拌し、次に水でクエンチし、酢酸エチルで抽出した。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濃縮して粗生成物を得、これをシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＡ、１０：１～３：１）で精製して化合物Ｓ１－８（３１ｇ、８８％）を得た）。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ７．５６－７．５４（ｍ、２Ｈ）、７．５０－７．４７（ｍ、２Ｈ）、３．５９（ｓ、３Ｈ）、３．０６（ｓ、３Ｈ）、２．７８（ｓ、２Ｈ）、１．４９（ｓ、６Ｈ）；
ＴＬＣ：ＰＥ／ＥＡ＝３：１、ＵＶ２５４ｎｍ
Ｒｆ（化合物Ｓ１－６）＝０．４
Ｒｆ（化合物Ｓ１－８）＝０．８
化合物Ｓ１－１０の調製のための一般的な手順

【化45】

【0318】

三口フラスコに、マグネシウム（８．０ｇ、３３１．３９ミリモル、１．１ｅｑ）とヨウ素粒を入れた。その後、ＴＨＦ（３００ｍＬ）中の化合物Ｓ１－９（４０．６７ｇ、３０１．２６ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ）の１５％体積を窒素雰囲気下で混合物に加え、黄褐色が消えるまで攪拌した混合物を７０ｏＣに加熱し、溶液をその温度でさらに６時間撹拌して、ＴＨＦ中の化合物Ｓ１－１０（１．０Ｍ）の溶液を得、これを次のステップで直接使用した。
化合物Ｓ－１１の調製のための一般的な手順

【化46】

【0319】

化合物Ｓ１－８（３１ｇ、１０７．１６ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ）のＴＨＦ（２００ｍＬ）溶液に、０℃で化合物Ｓ１－１０（１．０Ｍ、２１５ｍＬ、２１４．３２ｍｍｏｌ、２．０ｅｑ）を加えた。反応物を室温で３時間撹拌した。次に、混合物を飽和ＮＨ_４Ｃｌ溶液でクエンチし、エーテルで抽出し、有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、真空濃縮して粗生成物を得、これをシリカゲル（ＰＥ）でのカラムクロマトグラフィーにより精製して粗化合物Ｓ－を得た。１１（２８．９ｇ、９５％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ７．５６－７．５４（ｍ、２Ｈ）、７．４７－７．４５（ｍ、２Ｈ）、７．７５（ｍ、１Ｈ）、２．７５（ｓ、２Ｈ）、２．０１－１．９９（ｍ、３Ｈ）、１．７４－１．７３（ｍ、３Ｈ）、１．４４－１．４２（ｍ、６Ｈ）；
ＴＬＣ：ＰＥ／ＥＡ＝１０：１、ＵＶ２５４ｎｍ
Ｒｆ（化合物Ｓ１－８）＝０．５
Ｒｆ（化合物Ｓ１－１１）＝０．９
実施例９の調製の一般的手順

【化47】

【0320】

化合物Ｓ１－１１（２．４ｇ、８．４４ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ）、化合物Ｓ１－１２（１．４３ｇ、８．４４ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ）およびＴｉ（ＥｔＯ）４（７．７ｇ、３３．７６ｍｍｏｌ、４．０ｅｑ）の混合物）ＴＨＦ（１００ｍＬ）中、窒素雰囲気下で７０℃で一晩撹拌した。次に、混合物を室温まで冷却し、ＮａＢＨ_４（１．２３ｇ、３３．７６ｍｍｏｌ、４．０当量）を加えた。添加完了後、混合物を室温で３時間撹拌した。次に、水を加え、酢酸エチルで抽出し、ろ過した。有機相をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、真空で濃縮した。残渣をシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＡ、１０：１～１：１）で精製して、化合物実施例９を得、これをＨＣｌ／ＥＡ（２．０Ｍ、１０ｍＬ）に溶解した。混合物を室温で２時間撹拌し、濃縮して、実施例９ＨＣｌ（６００ｍｇ、１５％）を油として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤ_３ＯＤ）δ７．６０－７．５２（ｍ、４Ｈ）、４．７０－４．６７（ｍ、１Ｈ）、３．９５－３．９２（ｍ、２Ｈ）、３．７９－３．７３（ｍ、１Ｈ）、３．６１－３．５９（ｍ、１Ｈ）、２．８１－２．７３（ｍ、２Ｈ）、２．３８－２．２２（ｍ、２Ｈ）、１．９８（ｓ、６Ｈ）、１．６４－１．６１（ｍ、２Ｈ）、１．４６－１．４３（ｍ、１２Ｈ）、１．３１－１．２８（ｍ、６Ｈ）；
ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋＝４３８．５
例Ｓｙｎ２：例化合物２６２の調製：

【化48】

化合物Ｓ２－７の調製のための一般的な手順

【化49】

【0321】

０℃に冷却した無水ＴＨＦ（４．５Ｌ）中の化合物Ｓ２－６（４５０ｇ、１．８３ｍｏｌ、１．０ｅｑ）の溶液に、１ＭＢＨ_３（２．７５Ｌ、２．７４５ｍｏｌ、１．５ｅｑ）の溶液を滴下し加えた。混合物を室温で１６時間撹拌した。ＴＬＣにより反応をモニターした。無色の均一な反応混合物を０℃に冷却し、ＭｅＯＨ（２Ｌ）、続いて水（１Ｌ）を注意深く加えた。次に、ＭｅＯＨおよびＴＨＦを真空下で除去した。混合物をＤＣＭ（３ｘ１Ｌ）で抽出し、合わせた有機抽出物をブライン（１Ｌ）で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮乾固させて粗化合物Ｓ２－７（３４０ｇ、８０％）無色のオイルとして。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）：δ７．５７（ｄ、Ｊ＝８．０ Ｈｚ、２Ｈ）、７．４７（ｄ、Ｊ＝８．４Ｈｚ、２Ｈ）、３．４７（ｔ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、２Ｈ）、１．９８（ｔ、Ｊ＝７．２Ｈｚ、２Ｈ）、１．２９（ｓ、６Ｈ）。
化合物Ｓ２－９の調製のための一般的な手順

【化50】

【0322】

化合物Ｓ２－７（２９６ｇ、１．２７ｍｏｌ、１．０ｅｑ）の溶液をＣＨ_３ＣＮ（３．６Ｌ）、ＮＭＩ（１０．３ｇ、１２７ｍｍｏｌ、０．１ｅｑ）、ＴＥＭＰＯ（９．８ｇ、６３ｍｍｏｌ、０．０５ｅｑ）およびＢＰｙ（９．７ｇ、６３ｍｍｏｌ、０．０５ｅｑ）を加えた後、Ｃｕ（ＰＦ６）（ＭｅＣＮ）４（２３．５ｇ、６３ｍｍｏｌ、０．０５ｅｑ）を加えました。混合物を酸素雰囲気下で４時間撹拌した。ＴＬＣにより反応をモニターした。混合物を水（２Ｌ）に注ぎ、ＤＣＭ（３ｘ２Ｌ）で抽出した。合わせた抽出物を水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、濃縮して、化合物Ｓ２－９（２８１ｇ、９６％）を暗緑色の油として得た。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）：δ９．５４（ｓ、１Ｈ）、７．６１（ｄ、Ｊ＝７．６Ｈｚ、２Ｈ）、７．５１（ｄ、Ｊ＝７．６Ｈｚ、２Ｈ）、２．６６（ｓ、２Ｈ）、１．４９（ｓ、６Ｈ）。
ＴＬＣ：ＰＥ／ＥＡ＝２０：１、ＵＶ２５４ｎｍ
Ｒｆ（化合物Ｓ２－７）＝０．１
Ｒｆ（Ｓ２－９）＝０．８
化合物Ｓ２－１１Ｒの調製のための一般的な手順

【化51】

【0323】

化合物Ｓ２－９（１５０ｇ、６５２．５ｍｍｏｌ、１．０当量）のＴＨＦ（７５０ｍＬ）溶液、化合物Ｓ２－１０Ｒ（１１８．９６ｇ、９７８．７７ｍｍｏｌ、１．５当量）およびＴｉ（ＯＥｔ）４（７４．４ｇ、３２６．２ミリモル、０．５当量）を加えた。混合物を室温で一晩撹拌した後、水（２４ｇ、１．３ｍｏｌ）でクエンチし、セライトパッドで濾過し、酢酸エチルで希釈し、ブライン、水で洗浄した。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濃縮して粗生成物を得、これをシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＡ、５：１）で精製して、化合物Ｓ２－１１Ｒ（１６５ｇ、７５．９％）を得た。
ＴＬＣ：ＰＥ／ＥＡ＝３：１、ＵＶ２５４ｎｍ
Ｒｆ（化合物Ｓ２－９）＝０．６
Ｒｆ（化合物Ｓ２－１１Ｒ）＝０．５
化合物Ｓ２－１２の調製のための一般的な手順

【化52】

【0324】

三口フラスコに、マグネシウム（３１．９ｇ、１．３ｍｏｌ、１．１ｅｑ）とヨウ素粒を入れた。次に、ＴＨＦ（１．５Ｌ）中の化合物Ｓ２－３１（１４９ｇ、１．２ｍｏｌ、１．０ｅｑ）の１５％体積を窒素雰囲気下で混合物に加え、黄褐色が消えるまで攪拌した混合物を７０ｏＣに加熱した。次に、残りの溶液を滴下し、さらに６時間撹拌して、ＴＨＦ中の化合物Ｓ２－１２（１．０Ｍ）の溶液を得、これを次のステップで直接使用した。
化合物Ｓ２－１３Ｒの調製のための一般的な手順

【化53】

【0325】

化合物Ｓ２－１１Ｒ（１２０ｇ、３５９．９ミリモル、１．０当量）のＴＨＦ（８０ｍＬ）溶液に、化合物Ｓ２－１２（１０８０ｍＬ、５３９．９ミリモル、１．５０当量、０．５Ｍ）を０℃で加えた。５℃。室温で一晩撹拌した後、反応をＮＨ_４Ｃｌでクエンチし、酢酸エチルで抽出した。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濃縮して粗生成物を得、これをシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＡ、１０：１～３：１）で精製して化合物Ｓ２－１３Ｒ（６９．１ｇ、４９．３％）を得た。

【0326】

化合物Ｓ２－１３Ｒ（６９．１ｇ）をエーテル／ヘキサン（１／１）（３０ｍＬ）で４～８ｏＣで最大２日間再結晶し、白色固体（２５．６ｇ、３７％）を得た。を使用して、実施例２６２を９９％ｅｅで生成した。母液をエーテル／ヘキサン（１／１）（２０ｍＬ）で再結晶して、白色固体（１５．１ｇ）を得た。
ＴＬＣ：ＰＥ／ＥＡ＝３：１、ＵＶ２５４ｎｍ
Ｒｆ（化合物Ｓ２－１１Ｒ）＝０．５
Ｒｆ（化合物Ｓ２－１３Ｒ）＝０．３
化合物Ｓ２－１４Ｒの調製の一般手順

【化54】

【0327】

化合物Ｓ２－１３Ｒ（３４．６ｇ、８８．８ｍｍｏｌ、１．０当量）を丸底フラスコに加えた。次に、ＨＣｌのＥｔＯＡｃ溶液（９０ｍＬ、２Ｎ、２当量）を加えた。２時間撹拌した後、約８０ｍＬの溶媒を真空下で除去した。混合物をエーテル（２０ｍＬ）で希釈し、白色固体を化合物Ｓ２－１４Ｒ塩酸塩としてろ過した。塩酸塩をＨ_２Ｏ（３０ｍＬ）に溶解し、Ｎａ_２ＣＯ_３の飽和水溶液でｐＨ１０にアルカリ化した。次に、エーテル（３０ｍＬｘ３）で抽出し、乾燥（Ｎａ_２ＳＯ_４）し、濃縮して無色の油（２０．２ｇ７９．７％）を得た。
ＴＬＣ：ＰＥ／ＥＡ＝３：１、ＵＶ２５４ｎｍ
Ｒｆ（化合物Ｓ２－１３Ｒ）＝０．３
Ｒｆ（化合物Ｓ２－１４Ｒ）＝０．１
例示化合物２６２の調製のための一般手順

【化55】

【0328】

ＡＣＮ（４８ｍＬ）中の化合物Ｓ２－１４Ｒ（４．８ｇ、１６．８ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ）の溶液に、化合物Ｓ２－１５（８．３５ｇ、１６．８ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ）およびＫ２ＣＯ３（４．４６ｇ、３３．６ｍｍｏｌ、２．０ｅｑ）。８５ｏＣで一晩攪拌した後、反応をＨ２Ｏ（５０ｍＬ）で停止し、酢酸エチル（４０ｍＬｘ３）で抽出しました。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濃縮して粗生成物を得、これをシリカゲル上のカラムクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＡ、１０：１～３：１）で精製して、フリーベースとして化合物実施例２６２（５．１ｇ６９％）を与える。キラルＨＰＬＣでｅｅ％は９９％であると決定された。遊離塩基をＨＣｌ／ＥＡ（１．３Ｍ、５０ｍＬ）に溶解した。混合物を室温で２時間撹拌し、濃縮して、実施例２６２ＨＣｌ（５．５ｇ、６９％）を白色の固体として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤ_３ＯＤ）δ７．６０－７．５２（ｍ、４Ｈ）、４．７０－４．６７（ｍ、１Ｈ）、３．９５－３．９２（ｍ、２Ｈ）、３．７９－３．７３（ｍ、１Ｈ）、３．６１－３．５９（ｍ、１Ｈ）、２．８１－２．７３（ｍ、２Ｈ）、２．３８－２．２２（ｍ、２Ｈ）、１．９８（ｓ、６Ｈ）、１．６４－１．６１（ｍ、２Ｈ）、１．４６－１．４３（ｍ、１２Ｈ）、１．３１－１．２８（ｍ、６Ｈ）；
ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋＝４３８．５
化合物２－１５の調製のための一般手順

【化56】

【0329】

化合物Ｓ２－１６（５．０ｇ、２６．６ｍｍｏｌ、１．０ｅｑ）のＤＣＭ（５０ｍＬ）溶液に、化合物ＴｓＣｌ（２０．２ｇ、１０６．２ｍｍｏｌ、４．０ｅｑ）およびピリジン（８．４ｇ、１０６．２ｍｍｏｌ、４．０ｅｑ）を加えた。室温で一晩撹拌した後、反応をＨ_２Ｏ（１００ｍＬ）でクエンチし、酢酸エチル（４０ｍＬｘ３）で抽出した。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濃縮して粗生成物を得、これをシリカゲルのカラムクロマトグラフィー（ＰＥ／ＥＡ、１０：１～３：１）で精製して化合物Ｓ２－１５（５．４ｇ ４０．９％）を得た。
例Ｓｙｎ３：例化合物１４の調製：

【化57】

例示化合物１４の調製のための一般手順

【化58】

【0330】

ＭｅＯＨ（６００ｍＬ）中の化合物Ｓ３－９（６０．０ｇ、０．２６ｍｏｌ、１．０当量）および化合物Ｓ３－１０（３０．０ｇ、０．２６ｍｏｌ、１．０当量）の混合物にＮａＢＨ_４（３９．６ｇ、１．０４ｍｏｌ、４．０ｅｑ）を加えた。混合物を窒素雰囲気下で室温で３時間撹拌した。次に、ブラインを加え、溶液を酢酸エチルで抽出した。有機相を合わせ、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、真空で濃縮した。残渣をカラムクロマトグラフィーにより精製して、化合物実施例１４（４５．１ｇ、５２％）を得た。
ＴＬＣ：ＤＣＭ：ＭｅＯＨ＝１０：１
Ｒｆ（例１４）＝０．２
例示化合物１４ ＨＣｌの調製のための一般手順

【化59】

【0331】

ＨＣｌ／ＥＡ（２．５Ｍ、１６０ｍＬ）中の実施例１４の混合物（６５ｇ、０．２ｍｏｌ）。室温で２時間撹拌した。濁った混合物を濃縮して、実施例１４のＨＣｌ（６８ｇ、９４％）を白色の固体として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤ_３ＯＤ）：δｐｐｍ７．６７－７．６１（ｍ、４Ｈ）、３．３１－３．３（ｍ、３Ｈ）、３．１５－３．１１（ｍ、２Ｈ）、２．８５－２．７９（ｍ、２Ｈ）、２．１７－２．１２（ｍ、２Ｈ）、１．８２－１．７６（ｍ、２Ｈ）、１．４３（ｓ、６Ｈ）、１．２７（ｓ、３Ｈ）。
ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋＝３３０．２０
実施例Ｓｙｎ４：実施例化合物１７の調製：

【化60】

【0332】

化合物Ｓ４－１１（３００ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ、１．０当量）、化合物Ｓ４－１２（１５０ｍｇ、１．３ｍｍｏｌ、１．０当量）およびＮａＢＨ_４（１９７ｍｇ、５．２ｍｍｏｌ、４．０当量）のＭｅＯＨ（１０ｍＬ）を窒素雰囲気下で室温で３時間撹拌した。次にａｑ。ＮａＣｌを加え、酢酸エチルで抽出し、ろ過した。有機相をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、真空で濃縮した。残渣をプレＴＬＣにより精製して、化合物実施例１７を得、これをＨＣｌ／ＥＡ（１．３Ｍ、１０ｍＬ）に溶解した。混合物を室温で２時間撹拌し、濃縮して、実施例１７のＨＣｌ（１４４．１ｍｇ、３１．４％）を白色の固体として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤ_３ＯＤ）：δ７．７５－７．６０（ｍ、４Ｈ）、４．０７－４．０３（ｍ、１Ｈ）、３．６３－３．５７（ｍ、１Ｈ）、３．３４－３．３０（ｍ、６Ｈ）、３．１６－３．０９（ｍ、２Ｈ）、２．８７－２．８３（ｍ、２Ｈ）、２．１９－２．１４（ｍ、２Ｈ）、１．４３（ｓ、６Ｈ）；
ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋＝３１６．４
実施例Ｓｙｎ５：実施例化合物３０７の調製：

【化61】

【0333】

化合物Ｓ５－９（３．５４ｇ、１５．３８ｍｍｏｌ、１．０当量）のＭｅＯＨ（６０ｍＬ）溶液に、化合物Ｓ５－１０（３．０ｇ、１６．９ｍｍｏｌ、１．１当量）および２滴のＡｃＯＨを加えた。反応混合物を室温で２時間撹拌した。ＮａＢＨ_４（２．３３ｇ、６１．５５ｍｍｏｌ、４．０当量）を加えた後、反応混合物を室温で２時間撹拌した。Ｈ２Ｏ（２０ｍＬ）で反応停止し、ろ過し、ＥＡ（２０ｍＬｘ３）で抽出し、濃縮して残留物を得、カラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ＝１：１）で精製して、化合物実施例３０７（１．３ｇ、２１．６％）。
ＴＬＣ：ＤＣＭ：ＥＡ：ＭｅＯＨ＝１：１：０．１
Ｒ_ｆ（化合物Ｓ５－９）＝０．９
Ｒ_ｆ（化合物例３０７）＝０．３
実施例３０７ＨＣｌの調製のための一般手順

【化62】

【0334】

化合物ＥＡ（５ｍＬ）中の化合物例３０７（１．９ｇ、４．８５ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、ＥＡ／ＨＣｌ（２．５Ｍ、６ｍＬ、３．０当量）を加えた。反応混合物を室温で３０分間撹拌した。反応混合物を濃縮して、実施例３０７のＨＣｌ（２．１ｇ、１００％）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ７．６２－７．６０（ｍ、２Ｈ）、７．５０－７．４７（ｍ、４Ｈ）、７．４６－７．３１（ｍ、２Ｈ）、７．２８（ｍ、２Ｈ）、３．３２（ｍ、２Ｈ）、３．１３（ｍ、２Ｈ）、２．６４（ｍ、２Ｈ）、２．３２（ｍ、２Ｈ）、１．６７（ｍ、３Ｈ）、１．３９（ｍ、６Ｈ）；
ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋＝３９２．６
実施例Ｓｙｎ６：実施例化合物１９１の調製：

【化63】

【0335】

化合物Ｓ６－９（５．４ｇ、２３．６８ｍｍｏｌ、１．０当量）のＭｅＯＨ（１００ｍＬ）溶液に、化合物Ｓ６－１２（３．０ｇ、２６ｍｍｏｌ、１．１当量）および２滴のＡｃＯＨを加えた。反応混合物を室温で２時間撹拌した。ＮａＢＨ_４（３．５８ｇ、９４．７１ｍｍｏｌ、４．０当量）を加えた後、反応混合物を室温で２時間撹拌した。Ｈ_２Ｏ（３０ｍＬ）で反応を停止し、ろ過し、ＥＡ（３０ｍＬｘ３）で抽出し、濃縮して残渣を得、これをカラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ＝１：１）で精製し、実施例１９１（３．４ ｇ、４４％）。
ＴＬＣ：ＤＣＭ：ＥＡ：ＭｅＯＨ＝１：１：０．１
Ｒｆ（化合物Ｓ６－９）＝０．９
Ｒｆ（例１９１）＝０．３
実施例１９１ＨＣｌの調製のための一般手順

【化64】

【0336】

ＥＡ（１０ｍＬ）中の実施例１９１（３．４ｇ、１０．３３ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、ＥＡ／ＨＣｌ（２．５Ｍ、８．９ｍＬ、２．０当量）を加えた。反応混合物を室温で３０分間撹拌した。反応混合物を濃縮して、実施例１９１のＨＣｌ（３．５ｇ、９３％）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ７．６０－７．５８（ｍ、２Ｈ）、７．４９－７．４７（ｍ、２Ｈ）、３．５６（ｓ、１Ｈ）、３．２５（ｓ、３Ｈ）、３．１９（ｍ、２Ｈ）、２．８０（ｍ、２Ｈ）、２．５９（ｍ、２Ｈ）、２．３９（ｍ、２Ｈ）、２．３０（ｍ、２Ｈ）、１．９３（ｍ、２Ｈ）、１．３７（ｓ、６Ｈ）；
ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋＝３３０．２
実施例Ｓｙｎ７：実施例化合物３１７の調製：

【化65】

【0337】

化合物Ｓ７－９（５．４６ｇ、２３．７ミリモル、１．０当量）のＭｅＯＨ（１００ｍＬ）溶液に、化合物Ｓ７－１４（３．０ｇ、２６ミリモル、１．１当量）および２滴のＡｃＯＨを加えた。反応混合物を室温で２時間撹拌した。ＮａＢＨ_４（３．５８ｇ、９４．６３ｍｍｏｌ、４．０当量）を加えた後、反応混合物を室温で２時間撹拌した。Ｈ_２Ｏ（３０ｍＬ）で反応停止し、ろ過し、ＥＡ（３０ｍＬｘ３）で抽出し、濃縮して残渣を得、カラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ＝１：１）で精製して、実施例３１７（２．１ｇ、２７％）。
ＴＬＣ：ＤＣＭ：ＥＡ：ＭｅＯＨ＝１：１：０．１
Ｒｆ（化合物Ｓ７－９）＝０．９
Ｒｆ（例３１７）＝０．３
実施例３１７のＨＣｌの調製のための一般的な手順

【化66】

【0338】

ＥＡ（１０ｍＬ）中の実施例３１７（２．１ｇ、６．３７ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、ＥＡ／ＨＣｌ（２．５Ｍ、６ｍＬ、２．０当量）を加えた。反応混合物を室温で３０分間撹拌した。反応混合物を濃縮して、実施例３１７のＨＣｌ（２．１ｇ、９１％）を得た。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ１２．１７（ｍ、１Ｈ）、７．６１－７．５９（ｍ、２Ｈ）、７．５０－７．４８（ｍ、２Ｈ）、４．１６－４．１３（ｍ、１Ｈ）、３．９０－３．８６（ｍ、１Ｈ））、３．５５－３．５３（ｍ、１Ｈ）、３．３３（ｍ、１Ｈ）、３．２３（ｓ、３Ｈ）、２．６３－２．５９（ｍ、２Ｈ）、２．５１（ｍ、１Ｈ）、２．２３（ｍ、１Ｈ）、２．１９－１．９０（ｍ、４Ｈ）、１．３９－１．３７（ｍ、６Ｈ）；
ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋＝３３０．６
実施例Ｓｙｎ８：実施例化合物３０６の調製：

【化67】

【0339】

ＭｅＯＨ（８０ｍＬ）中の化合物Ｓ８－９（３．０８ｇ、１３．３ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、化合物Ｓ８－１６（２．０ｇ、１７．３６ｍｍｏｌ、１．１当量）および２滴のＡｃＯＨを添加した。反応混合物を室温で２時間撹拌した。ＮａＢＨ_４（２．０２ｇ、５３．４ｍｍｏｌ、４．０当量）を加えた後、反応混合物を室温で２時間撹拌した。Ｈ_２Ｏ（３０ｍＬ）で反応を停止し、ろ過し、ＥＡ（３０ｍＬｘ３）で抽出し、濃縮して残渣を得、これをカラムクロマトグラフィー（ＰＥ：ＥＡ＝１：１）で精製し、実施例３０６（１．２ｇ、２７％）。
ＴＬＣ：ＤＣＭ：ＥＡ：ＭｅＯＨ＝１：１：０．１
Ｒｆ（化合物Ｓ８－９）＝０．９
Ｒｆ（例３０６）＝０．３
実施例３０６ＨＣｌの調製の一般手順

【化68】

【0340】

ＥＡ（５ｍＬ）中の実施例３０６（２．０ｇ、２６．０７ｍｍｏｌ、１．０当量）の溶液に、ＥＡ／ＨＣｌ（２．５Ｍ、５ｍＬ、２．０当量）を加えた。反応混合物を室温で３０分間撹拌した。反応混合物を濃縮して、実施例３０６ＨＣｌ（２．２８ｇ、１００％）を得た。^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ、ＣＤＣｌ_３）δ１２．７５（ｍ、１Ｈ）、７．６０－７．５８（ｍ、２Ｈ）、７．４９－７．４７（ｍ、２Ｈ）、３．５３－３．５１（ｍ、２Ｈ）、２．６３－２．６０（ｍ、２Ｈ）、２．５３－２．５０（ｍ、２Ｈ）、２．３４－２．３０（ｍ、２Ｈ）、２．０５（ｍ、４Ｈ）、２．００（ｍ、１Ｈ）、１．９７－１．８８（ｍ、２Ｈ）、１．３８（ｓ、６Ｈ）；
ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋＝３３０．３