特許7221217ＤＵＢ阻害剤としての活性を有するスルホンアミド置換シアノピロリジン
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】特許公報(B2)
(11)【特許番号】
(24)【登録日】2023-02-03
(45)【発行日】2023-02-13
(54)【発明の名称】ＤＵＢ阻害剤としての活性を有するスルホンアミド置換シアノピロリジン
(51)【国際特許分類】
C07D 207/12 20060101AFI20230206BHJP
A61K 31/40 20060101ALI20230206BHJP
A61K 31/4025 20060101ALI20230206BHJP
A61K 31/4155 20060101ALI20230206BHJP
A61K 31/4439 20060101ALI20230206BHJP
A61K 31/454 20060101ALI20230206BHJP
A61K 31/496 20060101ALI20230206BHJP
A61K 31/506 20060101ALI20230206BHJP
A61K 31/5383 20060101ALI20230206BHJP
A61P 1/16 20060101ALI20230206BHJP
A61P 3/00 20060101ALI20230206BHJP
A61P 3/10 20060101ALI20230206BHJP
A61P 9/10 20060101ALI20230206BHJP
A61P 11/00 20060101ALI20230206BHJP
A61P 13/12 20060101ALI20230206BHJP
A61P 17/00 20060101ALI20230206BHJP
A61P 19/02 20060101ALI20230206BHJP
A61P 21/00 20060101ALI20230206BHJP
A61P 25/00 20060101ALI20230206BHJP
A61P 25/02 20060101ALI20230206BHJP
A61P 25/14 20060101ALI20230206BHJP
A61P 25/16 20060101ALI20230206BHJP
A61P 25/28 20060101ALI20230206BHJP
A61P 27/02 20060101ALI20230206BHJP
A61P 29/00 20060101ALI20230206BHJP
A61P 31/06 20060101ALI20230206BHJP
A61P 31/10 20060101ALI20230206BHJP
A61P 31/12 20060101ALI20230206BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20230206BHJP
A61P 35/02 20060101ALI20230206BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20230206BHJP
C07D 401/12 20060101ALI20230206BHJP
C07D 401/14 20060101ALI20230206BHJP
C07D 403/12 20060101ALI20230206BHJP
C07D 487/04 20060101ALI20230206BHJP
C07D 498/04 20060101ALI20230206BHJP
【ＦＩ】
C07D207/12 CSP
A61K31/40
A61K31/4025
A61K31/4155
A61K31/4439
A61K31/454
A61K31/496
A61K31/506
A61K31/5383
A61P1/16
A61P3/00
A61P3/10
A61P9/10
A61P11/00
A61P13/12
A61P17/00
A61P19/02
A61P21/00
A61P25/00
A61P25/02
A61P25/14
A61P25/16
A61P25/28
A61P27/02
A61P29/00
A61P29/00 101
A61P31/06
A61P31/10
A61P31/12
A61P35/00
A61P35/02
A61P43/00 111
C07D401/12
C07D401/14
C07D403/12
C07D487/04 137
C07D498/04 111
【請求項の数】
23
(21)【出願番号】P 2019561718
(86)(22)【出願日】2018-05-30
(65)【公表番号】
(43)【公表日】2020-07-27
(86)【国際出願番号】 GB2018051454
(87)【国際公開番号】W WO2018220355
(87)【国際公開日】2018-12-06
【審査請求日】2021-05-28
(31)【優先権主張番号】1708652.1
(32)【優先日】2017-05-31
(33)【優先権主張国・地域又は機関】GB
(73)【特許権者】
【識別番号】517299582
【氏名又は名称】ミッション セラピューティクス リミティド
(74)【代理人】
【識別番号】100099759
【弁理士】
【氏名又は名称】青木 篤
(74)【代理人】
【識別番号】100123582
【弁理士】
【氏名又は名称】三橋 真二
(74)【代理人】
【識別番号】100117019
【弁理士】
【氏名又は名称】渡辺 陽一
(74)【代理人】
【識別番号】100141977
【弁理士】
【氏名又は名称】中島 勝
(74)【代理人】
【識別番号】100150810
【弁理士】
【氏名又は名称】武居 良太郎
(74)【代理人】
【識別番号】100182730
【弁理士】
【氏名又は名称】大島 浩明
(72)【発明者】
【氏名】マーティン リー ストックリー
(72)【発明者】
【氏名】マーク イアン ケンプ
(72)【発明者】
【氏名】アンドリュー マディン
(72)【発明者】
【氏名】マイケル デイビッド ウッドロー
【審査官】新留 素子
(56)【参考文献】
【文献】国際公開第２００９／１２９３７１（ＷＯ，Ａ１）
【文献】国際公開第２００９／１２９３７０（ＷＯ，Ａ１）
【文献】国際公開第２００９／１２９３６５（ＷＯ，Ａ１）
【文献】国際公開第２００９／０２６１９７（ＷＯ，Ａ１）
【文献】ACS Med. Chem. Lett.，2011年，Vol.2，pp.142-147
(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)
Ｃ０７Ｄ
Ａ６１Ｋ
Ａ６１Ｐ
ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）
(57)【特許請求の範囲】
【請求項1】
下記式（Ｉａ）【化1】
ｎは、０又は１であり；
１つのＲ１基及びＮＲ２が、隣接する環原子上に位置し、そして前記Ｒ１がＲ２と一緒に、Ｎ、Ｏ及びＳから独立して選択された１～２個のヘテロ原子（それらの少なくとも１つはＮである）を含む５～６員の複素環を形成し；
各Ｒ１は、存在する場合、ハロ、シアノ、ヒドロキシ、（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、（Ｃ１－Ｃ６）アルコキシ、ハロ（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、ハロ（Ｃ１－Ｃ６）アルコキシ、及び（Ｃ１－Ｃ６）アルコキシ（Ｃ１－Ｃ６）アルキルから独立して選択され；
Ｌ１は、共有結合及び（Ｃ１－Ｃ４）アルキレンから選択され；
Ｌ２は、共有結合、酸素原子、メチレン、ＯＣＨ２及び及びＮＨＣ（Ｏ）から選択され；
基「Ａ」は、フェニル環、及びＮ、Ｏ及びＳから独立して選択される１～３個のヘテロ原子を含む５～１０員の複素環から選択され、但し、式（Ｉａ）の化合物に関しては、Ｌ１が共有結合である場合、「Ａ」は環Ｃ原子を介してスルホンアミドに結合され；
基「Ｂ」は、フェニル、及びＮ、Ｏ及びＳから独立して選択される１～３個のヘテロ原子を含む５～６員の複素環から選択され；そして
各フェニル及び複素環は、ハロ、シアノ、ヒドロキシ、オキソ、（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、（Ｃ１－Ｃ６）アルコキシ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、及びＮＨＣ（Ｏ）（Ｃ１－Ｃ６）アルキルから独立して選択される１～２個の置換基により任意に置換され得る〕
の化合物、その互変異性体、又は前記化合物又は互変異性体の医薬的に許容できる塩。
【請求項2】
ｍが１又は２である、請求項１に記載の化合物。
【請求項3】
Ｒ１及びＮＲ２が隣接する環原子上に位置する場合、Ｒ１は、Ｒ２と一緒に、モルホリン、ピペリジン又はピロリジン環を形成し；そして存在する場合、他の各Ｒ１が、フルオロ、シアノ、メチル、メトキシ及びメトキシメチルから独立して選択される；
請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項4】
Ｌ１が、共有結合、メチレン及びエチレンから選択される、請求項１～３のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項5】
Ｌ２が、共有結合、酸素原子、メチレン、ＯＣＨ２、及びＮＨＣ（Ｏ）から選択される、請求項１～４のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項6】
基「Ａ」が、インダニル、フェニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、テトラリニル、ベンゾチアゾリル、イミダゾリル、イソオキサゾリル、ピペリジニル、ピラゾリル、ピリジル、ピリミジニル、チアゾリル、１，２，４－トリアゾリル、及びキノリニルから選択される、請求項１～５のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項7】
基「Ｂ」が、フェニル、オキサゾリル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピラゾリル、ピリジル、ピリミジニル、ピロリジニル、１，２－チアゾリジニル、及びチアゾリルから選択される、請求項１～６のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項8】
各フェニル及び複素環が、ハロ、シアノ、ヒドロキシ、オキソ、（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、（Ｃ１－Ｃ６）アルコキシ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、及びＮＨＣ（Ｏ）（Ｃ１－Ｃ６）アルキルから独立して選択された１～２個の置換基により任意に置換され得る、請求項１～７のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項9】
各フェニル及び複素環が、クロロ、フルオロ、シアノ、ヒドロキシ、オキソ、メチル、イソプロピル、メトキシ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、ＮＨＣ（Ｏ）イソブチルから独立して選択された１～２個の置換基により任意に置換され得る、請求項８に記載の化合物。
【請求項10】
ｍが１であり；Ｌ２が、共有結合であり；
基「Ａ」がフェニルであり、基「Ｂ」がピリジルであり；そして
各フェニル及びピリジル環が、クロロ、フルオロ、シアノ、ヒドロキシ、メチル、イソプロピル、メトキシ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、及びＮＨＣ（Ｏ）イソブチルから独立して選択された１～２個の置換基により任意に置換され得る、請求項１に記載の化合物。
【請求項11】
下記式（Ｉｂ）【化2】
ｎは、０又は１であり；
各Ｒ１は、ハロ、シアノ、ヒドロキシ、（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、（Ｃ１－Ｃ６）アルコキシ、ハロ（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、ハロ（Ｃ１－Ｃ６）アルコキシ、及び（Ｃ１－Ｃ６）アルコキシ（Ｃ１－Ｃ６）アルキルから独立して選択され；
Ｒ ３ は、水素、（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、及び（Ｃ１－Ｃ６）アルコキシ（Ｃ１－Ｃ６）アルキルから選択され；
Ｌ１は、共有結合、（Ｃ１－Ｃ４）アルキレン、及び（Ｃ２－Ｃ４）アルケニレンから選択され；
Ｌ２は、共有結合、（Ｃ１－Ｃ４）アルキレン、（Ｃ２－Ｃ４）アルケニレン、及び（Ｃ０－Ｃ３）アルキレン－Ｘ－（Ｃ０－Ｃ３）アルキレンから選択され；
Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、ＮＲ４、ＮＲ４Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）ＮＲ４、ＮＲ４Ｃ（Ｏ）ＮＲ５、Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）Ｏ、ＯＣ（Ｏ）、ＯＣ（Ｏ）Ｏ、ＳＯ２ＮＲ４、ＮＲ４ＳＯ２及びＮＲ４ＳＯ２ＮＲ５から選択され；
Ｒ４及びＲ５は、水素、（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、及び（Ｃ１－Ｃ６）アルコキシ（Ｃ１－Ｃ６）アルキルからそれぞれ独立して選択され；
基「Ａ」は、３～１０員の炭素環、及びＮ、Ｏ及びＳから独立して選択される１～４個のヘテロ原子を含む３～１０員の複素環から選択され；又は
Ａ－Ｌ１－Ｎ－Ｒ３は、Ｎ、Ｏ及びＳから独立して選択された１～４個のヘテロ原子（そのうち少なくとも１つはＮである）を含む３～１０員の複素環を任意に形成することができ；
基「Ｂ」は、３～１０員の炭素環、及びＮ、Ｏ及びＳから独立して選択される１～４個のヘテロ原子を含む３～１０員の複素環から選択され；そして
各炭素環及び複素環は、ハロ、シアノ、ヒドロキシ、オキソ、（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、（Ｃ１－Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ１－Ｃ６）アルコキシ（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、ハロ（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、ハロ（Ｃ１－Ｃ６）アルコキシ、ＮＨ（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、Ｎ（（Ｃ１－Ｃ６）アルキル）２、Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、Ｃ（Ｏ）Ｎ（（Ｃ１－Ｃ６）アルキル）２、ＮＨＣ（Ｏ）（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、Ｎ（Ｃ１－Ｃ６）アルキル）Ｃ（Ｏ）（Ｃ１－Ｃ６）アルキル）、Ｃ（Ｏ）（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、ＣＯ２Ｈ、ＣＯＮＨ２、ＳＯ２ＮＨ（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、及びＳＯ２Ｎ（（Ｃ１－Ｃ６）アルキル）２から独立して選択される１～４個の置換基により任意に置換され得る〕
の化合物、その互変異性体、又は前記化合物又は互変異性体の医薬的に許容できる塩。
【請求項12】
ｍが０、１又は２である、請求項１１に記載の化合物。
【請求項13】
各Ｒ１が、フルオロ、シアノ、メチル、メトキシ及びメトキシメチルから独立して選択され；Ｒ ３ が、水素及びメチルから選択される、請求項１１又は１２に記載の化合物。
【請求項14】
Ｌ１が、共有結合、メチレン及びエチレンから選択される、請求項１１～１３のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項15】
Ｌ２が、共有結合、酸素原子、メチレン、ＯＣＨ２、及びＮＨＣ（Ｏ）から選択される、請求項１１～１４のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項16】
基「Ａ」が、インダニル、フェニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、テトラリニル、ベンゾチアゾリル、イミダゾリル、イソオキサゾリル、ピペリジニル、ピラゾリル、ピリジル、ピリミジニル、チアゾリル、１，２，４－トリアゾリル、及びキノリニルから選択されるか；又はＡ－Ｌ１－Ｎ－Ｒ３が、アゼチジニル、イソインドリニル、ピペラジニル、ピペリジニル、テトラヒドロイソキノリニル、及び４，５，６，７－テトラヒドロピラゾロ[１，５－ａ]ピラジニルから選択される環を形成することができる、請求項１１～１５のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項17】
基「Ｂ」が、フェニル、オキサゾリル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピラゾリル、ピリジル、ピリミジニル、ピロリジニル、１，２－チアゾリジニル、及びチアゾリルから選択される、請求項１１～１６のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項18】
各炭素環及び複素環が、ハロ、シアノ、ヒドロキシ、オキソ、（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、（Ｃ１－Ｃ６）アルコキシ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、及びＮＨＣ（Ｏ）（Ｃ１－Ｃ６）アルキルから独立して選択された１～２個の置換基により任意に置換され得る、請求項１１～１７のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項19】
各炭素環及び複素環が、クロロ、フルオロ、シアノ、ヒドロキシ、オキソ、メチル、イソプロピル、メトキシ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、ＮＨＣ（Ｏ）イソブチルから独立して選択された１～２個の置換基により任意に置換され得る、請求項１８に記載の化合物。
【請求項20】
ｍが０又は１であり；ｎが０又は１であり；各Ｒ１が、フルオロ、シアノ、メチル、メトキシ及びメトキシメチルから独立して選択され；
Ｒ３が、水素及びメチルから選択され；
Ｌ１が、共有結合、メチレン及びエチレンから選択され；
Ｌ２が、共有結合、酸素原子及びメチレンから選択され；
基「Ａ」が、インダニル、フェニル、テトラリニル、ベンゾチアゾリル、ピペリジニル、ピラゾリル、ピリジル、ピリミジニル、チアゾリル、１，２，４－トリアゾリル、及びキノリニルから選択されるか；又は
Ａ－Ｌ１－Ｎ－Ｒ３が、アゼチジニル、イソインドリニル、ピペラジニル、ピペリジニル、テトラヒドロイソキノリニル、および４，５，６，７－テトラヒドロピラゾロ[１，５ ａ]ピラジニルから選択された環を形成することができ；
基「Ｂ」が、フェニル及びピリジルから選択され；そして
各炭素環及び複素環が、クロロ、フルオロ、ヒドロキシ及びメチルから独立して選択された１又は２個の置換基により任意に置換され得る、請求項１１に記載の化合物。
【請求項21】
下記：（３ａＲ、６ａＲ）‐１－（（４－（ピリジン－３－イル）フェニル）スルホニル）ヘキサヒドロピロロ[３，４－ｂ]ピロール－５（１Ｈ）－カルボニトリル;
ｒａｃ－（４ａＲ、７ａＲ）－４－トシルヘキサヒドロピロロ[３，４－ｂ][１，４]オキサジン－６（２Ｈ）－カルボニトリル;
ｒａｃ－（４ａＲ、７ａＳ）－４－（（４－メチルベンジル）スルホニル）ヘキサヒドロピロロ[３，４－ｂ][１，４]オキサジン－６（２Ｈ）－カルボニトリル;
Ｎ－（[１，１'－ビフェニル]－４－イル）－１－シアノピロリジン－３－スルホンアミド;
３－（（４－（４－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）スルホニル）ピロリジン－１－カルボニトリル;
（３－（（４－（ピリジン－２－イル）ピペラジン－１－イル）スルホニル）ピロリジン－１－カルボニトリル;
３－（（４－（ピリミジン－２－イル）ピペラジン－１－イル）スルホニル）ピロリジン－１－カルボニトリル;
３－（（４－（４－クロロフェニル）ピペリジン－１－イル）スルホニル）ピロリジン－１－カルボニトリル;
（Ｓ）－３－（（４－（４－クロロフェニル）ピペリジン－１－イル）スルホニル）ピロリジン－１－カルボニトリル;
（Ｒ）－３－（（４－（４－クロロフェニル）ピペリジン－１－イル）スルホニル）ピロリジン－１－カルボニトリル;
３－（（４－ベンジルピペリジン‐１－イル）スルホニル）ピロリジン‐１－カルボニトリル;
３－（（３－（４－クロロフェニル）アゼチジン－１－イル）スルホニル）ピロリジン－１－カルボニトリル;
（Ｓ）－３－（（３－（４－クロロフェニル）アゼチジン－１－イル）スルホニル）ピロリジン－１－カルボニトリル;
（Ｒ）－３－（（３－（４－クロロフェニル）アゼチジン－１－イル）スルホニル）ピロリジン－１－カルボニトリル;及び
３－（（３－フェノキシアゼチジン－１－イル）スルホニル）ピロリジン－１－カルボニトリル；
から選択される、請求項１に規定された式（Ｉａ）の化合物、又は請求項１１に規定された式（Ｉｂ）の化合物、その互変異性体、又は前記化合物又は互変異性体の医薬的に許容できる塩。
【請求項22】
医薬的に許容できる希釈剤又は担体と共に、請求項１～２１のいずれか１項に記載の式（Ｉａ）又は（Ｉｂ）の化合物、又はその互変異性体、又は前記化合物又は互変異性体の医薬的に許容できる塩を含む医薬組成物。
【請求項23】
医薬としての使用のための、請求項１～２１のいずれか１項に記載の式（Ｉａ）又は（Ｉｂ）の化合物、又はその互変異性体、又は前記化合物又は互変異性体の医薬的に許容できる塩。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、脱ユビキチン化酵素、特にユビキチンＣ末端ヒドロラーゼＬ１（ＵＣＨＬ１）及びユビキチンＣ末端ヒドロラーゼ３０又はユビキチン特異的ペプチダーゼ３０（ＵＳＰ３０）の阻害剤としての活性を有する種類のスルホンアミド置換シアノピロリジン、その使用、その調製方法、及び前記阻害剤を含む組成物に関する。それらの阻害剤は、癌、及びミトコンドリア機能障害を含む状態を含む種類の治療分野で有用である。
【背景技術】
【0002】
ユビキチンは、タンパク質基質に対して可逆的に結合され得る７６個のアミノ酸から成る小タンパク質である。タンパク質ユビキチン化は、細胞周期の進行、アポトーシス、細胞表面受容体の修飾、ＤＮＡ転写及びＤＮＡ修復の調節を含む多くの細胞機能を調節する。従って、ユビキチンプロテアソームシステムは、炎症、ウィルス感染、代謝機能障害、ＣＮＳ障害及び発癌を含む多くの疾患状態の病因に関係している（Clague et al., Physiol Rev 93:1289-1315, 2013）。
【0003】
ユビキチン及びユビキチン様タンパク質（Ｕｂｌ）は、脱ユビキチン化酵素（ＤＵＢ）と呼ばれるイソペプチダーゼによりタンパク質基質から切断される。約１００のＤＵＢがヒト細胞に存在し、配列相同性に基いてサブファミリーに分けられる：ユビキチンＣ末端加水分解酵素（ＵＣＨ）、ユビキチン特異的プロテアーゼ（ＵＳＰ）、卵巣腫瘍プロテアーゼ（ＯＴＵ）、マシャドジョセフィンドメインプロテアーゼ（ＭＪＤ）、ＪＡＢ１ / ＭＰＮ / ＭＯＶ３４メタロプロテアーゼ（ＪＡＭＭ）又はセントリン特異的プロテアーゼ（ＳＥＮＰ）。ＵＣＨＬ１，ＵＣＨＬ３、ＵＣＨＬ５及びＢＡＰ１から成るＵＣＨファミリーは、活性部位チオールを介して作用するシステインプロテアーゼである。ＵＣＨは、小タンパク質基質を優先的に切断し、ユビキチンの処理及びリサイクルに関与すると考えられる（Komander et al., Nat Rev Mol Cell Biol 10:550-563, 2009）。
【0004】
ＵＣＨＬ１は、哺乳類の脳、末梢神経系、卵巣及び精巣に発現が通常制限される２２３のアミノ酸タンパク質である。しかしながら、ＵＣＨＬ１の発現は、癌を含むいくつかの病理学的状態においてアップレギュレートされることが報告されている。ＵＣＨＬ１を過剰発現するトランスジェニックマウスは、悪性腫瘍、主にリンパ腫及び肺腫瘍になりやすく、このことは、ＵＣＨＬ１が癌遺伝子であることを示している（Hussain et al., Leukemia 24:1641-1655, 2010）。ＵＣＨＬ１の発癌機能は、腫瘍（乳房、結腸直腸、骨肉種及び膵臓を含む）でのＵＣＨＬ１発現が患者の生存と逆相関することを示す臨床研究によってさらに裏付けられている（Hurst-Kennedy et al., Biochem Res Int, 2012, Zheng et al., Cancer Lett 359:36-46）。従って、ＵＣＨＬ１の薬理学的阻害は、そのような癌の新規治療薬として役立つであろう。
【0005】
ユビキチンは、ミトコンドリアダイナミクスの主要な調節因子である。ミトコンドリアは、動的オルガネラであり、その生合成、融合及び分解インベントは、ミトフシンなどの多くの重要な因子のユビキチン化を介して翻訳後調節により調節される。パーキンなどのユビキチンリガーゼは、いくつかのミトコンドリアタンパク質をユビキチン化することが知られているが、最近まで、脱ユビキチン化酵素はとらえどことがないままである。ＵＳＰ３０は、ミトコンドリア外膜に見出される５１７のアミノ酸タンパク質である。それは、ミトコンドリアアドレス信号を担持する唯一の脱ユビキチン化酵素であり、そして多くのミトコンドリアタンパク質を脱ユビキチン化することが、示されている。ＵＳＰ３０はパーキンを介したマイトファジーに反対し、そしてＵＳＰ３０活性の低下がマイトファジーにおいてパーキンを介した欠陥を救済できることが実証されている。
【0006】
ミトコンドリア機能障害は、ミトコンドリア活性の低下及び酸化的リン酸化だけでなく、反応性酵素種（ＲＯＳ）生成の変調として、低められたミトコンドリア内容（マイトファジー又はミトコンドリア生合成）として定義され得る。従って、非常に多数の老化プロセス、及びそれらだけには阻害されないが以下を含む疾患におけるミトコンドリア機能障害の役割を示す：神経変性疾患（パーキンソン病（ＰＤ）、アルツハイマー病、ハンチントン病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、多発性硬化症）、癌、糖尿病、代謝障害、心血管疾患、精神疾患（統合失調症）、及び変形性関節症。
【0007】
例えば、パーキンソン病は、世界中で約１，０００万人が罹患しており（パーキンソン病財団）、そして黒質におけるドーパミン作動性ニューロンの損失により特徴づけられる。ＰＤの根底にある正確なメカニズムは不明であるが、しかしながら、ミトコンドリア機能障害が、ＰＤにおけるドーパミン作動性ニューロン感受性の重要な決定因子としてますます高く評価されており、そして家族性疾患及び散発性疾患、並びに毒素誘発性パーキンソニズムの特徴である。パーキンは、早期発症ＰＤに関係しているいくつかのタンパク質の１つである。ほとんどのＰＤ症例は、α－シヌクレインの欠損に関連付けられるが、パーキンソン症例の１０％は特定の遺伝子欠損に関連しており、その１つはユビキチンＥ３リガーゼパーキンにある。パーキン及びプロテインキナーゼＰＴＥＮ誘発性の推定キナーゼ１（ＰＩＮＫ１）は、損傷を受けたミトコンドリアのミトコンドリア膜タンパク質をユビキチン化するために協力し、結果として、マイトファジーをもたらす。マイトファジーの調節不全は高められた酸化ストレスをもたらし、これはＰＤの特徴として説明されて来た。従って、ＵＳＰ３０の阻害は、ＰＤの治療のための潜在的な戦略である可能性がある。例えば、低められた活動につながるパーキン変異を有するＰＤ患者は、ＵＳＰ３０の阻害により治療的に補償される可能性がある。
【0008】
ＵＳＰ３０の枯渇は、ミトコンドリアのマイトファジークリアランスを高め、そしてパーキン誘発性細胞死を高めることが報告されている。ＵＳＰ３０はまた、パーキン過剰発現とは無関係に、ＢＡＸ／ＢＡＫ－依存性アポトーシスを調節することも示されている。ＵＳＰ３０の枯渇は、パーキンの過剰発現を必要としないで、ＡＢＴ－７３７などのＢＨ－３模倣体に癌細胞を感作する。従って、抗アポトーシスの役割はＵＳＰ３０のためであることが実証されており、そして従って、ＵＳＰ３０は、抗癌治療のための潜在的な標的である。
【0009】
ユビキチン－プロテアソームシステムは、多発性骨髄腫の治療のためのプロテアソーム阻害剤ボルテゾミブ（Velcade（登録商標））の承認に続いて、癌の治療のための標的として関心を集めてきた。ボルテゾミブによる長期治療は、その関連する毒性及び薬剤耐性により制限される。しかしながら、ＤＵＢなどのプロテアソームの上流のユビキチン－プロテアソーム経路の特定の側面を標的とする治療戦略は、より耐用性が高いと予測される（Bedford et al., Nature Rev 10:29-46, 2011）。
【0010】
腎、肝及び肺線維症を含む繊維性疾患は、罹患率及び死亡率の主な原因であり、そして全ての組織及び器官系に影響を及ぼすことができる。線維症は、組織又は器官に対する急性又は慢性ストレスの結果であると思われ、細胞外マトリックスの沈着、血管／尿細管／管／気道の開通性の低下、及び最終的には器官不全をもたらす機能障害を特徴とする。多くの線維化状態は、ライフスタイル又は環境要因により促進されるが、しかしながら、一部の線維症は、遺伝的トリガーを介して開始されるか、又は実際、特発性（すなわち、既知の原因がない）と見なされる。特定の線維性疾患、例えば特発性肺線維症（ＩＰＦ）は、非特異的キナーゼ阻害剤（ニンテダニブ）、又は十分に特徴づけられた作用メカニズムのない薬物（ピルフェニドン）により治療され得る。器官線維症、例えば腎臓又は肝臓線維症についての他の治療法は、器官自体への圧力を軽減する（例えば、肝硬変についてのβ遮断薬、慢性腎臓疾患についてのアンジオテンシン受容体遮断薬）。グルコース及び食事管理などのライフスタイル要因への注意もまた、疾病の経過及び重症度に影響を及ぼすことができる。前臨床モデルは、ヒトの状態と一致する線維症病理学（例えば、コラーゲン沈着）をモデル化する能力を介して、潜在的な新規治療法を研究するために利用できる。前臨床モデルは、毒素媒介型（例えば、肺及び皮膚線維症のためのブレオマイシン）、外科手術（例えば、急性尿細管間質性線維症のための片側尿管閉塞モデル）、及び遺伝子型（例えば、糖尿病性腎症のための糖尿病（ｄｂ / ｄｂ）マウス）であり得る。例えば、示されたＩＰＦ治療（ニンテダニブ及びピルフェニドン）について以前に与えられた両方の例は、ブレオマイシン肺線維症モデルにおける有効性を示している。
【0011】
ミトコンドリア機能不全は、低められたＡＴＰ産生と共に、機能不全の下流の酸化ストレスが主要な病原性メディエーターである多くの線維性疾患に関与されている。前臨床モデルにおいては、マイトファジー経路の破壊（パーキン又はＰＩＮＫ１のいずれかの突然変異誘発又はノックアウトによる）は、高められた酸化ストレスの証拠と共に、肺線維症及び腎臓線維症を悪化させる。
【0012】
従って、ＵＳＰ３０又はＵＣＨＬ１の阻害が示される徴候の治療のために、ＵＣＨＬ１及びＵＳＰ３０などの１つ又は２以上のＤＵＢの阻害剤である化合物についての必要性がある。
【0013】
シアノ置換複素環の一連の誘導体は、ＰＣＴ出願国際公開第２０１６/０４６５３０号、第２０１６/１５６８１６号、第２０１７/００９６５０号、第２０１７/０９３７１８号、第２０１７/１０３６１４号、第２０１７/１４９３１３号、第２０１７/１０９４８８号、第２０１７/１４１０３６号、第２０１７/１６３０７８号、第２０１７/１５８３８１号、 第２０１７/１５８３８８号、ＰＣＴ/ＧＢ２０１７/０５２９７１、 ＰＣＴ/ＧＢ２０１７/０５２９４９、ＰＣＴ/ＧＢ２０１７/０５２８８０及びＰＣＴ/ＧＢ２０１７/０５２８８２において脱ユビキチン化酵素阻害剤として開示されている。Falgueyret et al., J.Med.Chem. 2001, 44, 94-104及びＰＣＴ出願国際公開第０１/７７０７３号は、カテロンシンＫ及びＬの阻害剤としてシアノピロリジンを言及しており、骨粗鬆症及び他の骨吸収関連状態の治療に潜在的な有用性を有する。ＰＣＴ出願国際公開第２０１５／１７９１９０号は、潰瘍性大腸炎及びクローン病の治療に潜在的な有用性を有するＮ－アシルエタノールアミン加水分解性酸アミダーゼ阻害剤を言及する。ＰＣＴ出願国際公開第２０１３／０３０２１８号は、ＵＳＰ７などのユビキチン特異的プロテアーゼの阻害剤としてのキナゾリン－４－オン化合物を言及しており、癌、神経変性疾患、炎症性障害及びウィルス感染の治療において潜在的な有用性を有する。ＰＣＴ出願国際公開第２０１５／０１７５０２号及び第２０１６／０１９２３７号は、自己免疫疾患、炎症性疾患及び癌などの疾患の治療に潜在的な有用性を有するＢｒｕｔｏｎチロシンキナーゼの阻害剤を言及する。Laine et al., ACS Med Chem Lett., 2011, 2, 132-147、 及びＰＣＴ出願国際公開第２００９/０２６１９７号、第２００９/１２９３６５号、第２００９/１２９３７０号及び第２００９/１２９３７１号は、ＣＯＰＤの治療に潜在的な有用性を有するカテプシンＣの阻害剤としてのシアノピロリジンを言及する。米国特許出願第２０００８／０３００２６８号は、チロシンキナーゼ受容体ＰＤＧＦＲの阻害剤としての多環芳香族化合物を言及している。Song et al., ACS Med Chem Lett., 2012, 3, 450-453は、カテプシンＬ阻害剤を言及している。Lonergan D.、ＰＣＴ出願国際公開第２０１５/１８３９８７号は、癌、線維症、自己免疫疾患又は状態、炎症性疾患又は状態、神経変性疾患又は状態、又は感染症を治療する方法における脱ユビキチン化酵素阻害剤及びヒト血清アルブミンを含む医薬組成物を言及する。Lonerganは、ＵＣＨＬ５/ＵＣＨ３７、ＵＳＰ４、ＵＳＰ９Ｘ、ＵＳＰ１１及び ＵＳＰ１５を含む脱ユビキチン化酵素が、ＴＧＦ－βシグナル伝達経路の調節に関与していると言われており、その破壊が神経変性及び線維性疾患、自己免疫機能障害及び癌を引起す。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【0014】
第１の側面によれば、本発明は、下記式（Ｉａ）及び（Ｉｂ）：
［式中、ｍは０～４であり；
ｎは、０又は１であり；
各Ｒ１は、ハロ、シアノ、ヒドロキシ、（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、（Ｃ１－Ｃ６）アルコキシ、ハロ（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、ハロ（Ｃ１－Ｃ６）アルコキシ、及び（Ｃ１－Ｃ６）アルコキシ（Ｃ１－Ｃ６）アルキルから独立して選択され；
Ｒ２及びＲ３は、水素、（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、及び（Ｃ１－Ｃ６）アルコキシ（Ｃ１－Ｃ６）アルキルから選択されるか；又はＲ１及びＮＲ２が隣接する環原子上に位置する場合、Ｒ１は、Ｒ２と一緒に、Ｎ、Ｏ及びＳから独立して選択される１～２個のヘテロ原子（そのうちの少なくとも１つはＮである）を含む５～６員の複素環を形成することができ；
Ｌ１は、共有結合、（Ｃ１－Ｃ４）アルキレン、及び（Ｃ２－Ｃ４）アルケニレンから選択され；
Ｌ２は、共有結合、（Ｃ１－Ｃ４）アルキレン、（Ｃ２－Ｃ４）アルケニレン、及び（Ｃ０－Ｃ３）アルキレン－Ｘ－（Ｃ０－Ｃ３）アルキレンから選択され；
Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、ＮＲ４、ＮＲ４Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）ＮＲ４、ＮＲ４Ｃ（Ｏ）ＮＲ５、Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）Ｏ、ＯＣ（Ｏ）、ＯＣ（Ｏ）Ｏ、ＳＯ２ＮＲ４、ＮＲ４ＳＯ２及びＮＲ４ＳＯ２ＮＲ５から選択され；
Ｒ４及びＲ５、水素、（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、及び（Ｃ１－Ｃ６）アルコキシ（Ｃ１－Ｃ６）アルキルからそれぞれ独立して選択され；
基「Ａ」は、３～１０員の炭素環、及びＮ、Ｏ及びＳから独立して選択される１～４個のヘテロ原子を含む３～１０頁の複素環から選択され、但し、式（Ｉａ）の化合物に関しては、Ｌ１が共有結合である場合、「Ａ」は環Ｃ原子を介してスルホンアミドに結合され；又は
Ａ－Ｌ１－Ｎ－Ｒ３は、Ｎ、Ｏ及びＳから独立して選択された１～４個のヘテロ原子（そのうち少なくとも１つはＮである）を含む３～１０員の複素環を任意に形成することができ；
基「Ｂ」は、３～１０員の炭素環、及びＮ、Ｏ及びＳから独立して選択される１～４個のヘテロ原子を含む３～１０員の複素環から選択され；そして
各炭素環及び複素環は、ハロ、シアノ、ヒドロキシ、オキソ、（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、（Ｃ１－Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ１－Ｃ６）アルコキシ（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、ハロ（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、ハロ（Ｃ１－Ｃ６）アルコキシ、ＮＨ（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、Ｎ（（Ｃ１－Ｃ６）アルキル）２、Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、Ｃ（Ｏ）Ｎ（（Ｃ１－Ｃ６）アルキル）２、ＮＨＣ（Ｏ）（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、Ｎ（Ｃ１－Ｃ６）アルキル）Ｃ（Ｏ）（Ｃ１－Ｃ６）アルキル）、Ｃ（Ｏ）（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、ＣＯ２Ｈ、ＣＯＮＨ２、ＳＯ２ＮＨ（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、及びＳＯ２Ｎ（（Ｃ１－Ｃ６）アルキル）２から独立して選択される１～４個の置換基により任意に置換され得る〕から選択される、哺乳類において有益な効果を生成するために、ＵＣＨＬ１又はＵＳＰ３０の阻害が、知られているか、又は示され得る障害又は状態の治療への使用のための式（Ｉ）の化合物、その互変異性体、又は前記化合物又は互変異性体の医薬的に許容できる塩を提供する。
【化1】
ｎは、０又は１であり；
各Ｒ１は、ハロ、シアノ、ヒドロキシ、（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、（Ｃ１－Ｃ６）アルコキシ、ハロ（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、ハロ（Ｃ１－Ｃ６）アルコキシ、及び（Ｃ１－Ｃ６）アルコキシ（Ｃ１－Ｃ６）アルキルから独立して選択され；
Ｒ２及びＲ３は、水素、（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、及び（Ｃ１－Ｃ６）アルコキシ（Ｃ１－Ｃ６）アルキルから選択されるか；又はＲ１及びＮＲ２が隣接する環原子上に位置する場合、Ｒ１は、Ｒ２と一緒に、Ｎ、Ｏ及びＳから独立して選択される１～２個のヘテロ原子（そのうちの少なくとも１つはＮである）を含む５～６員の複素環を形成することができ；
Ｌ１は、共有結合、（Ｃ１－Ｃ４）アルキレン、及び（Ｃ２－Ｃ４）アルケニレンから選択され；
Ｌ２は、共有結合、（Ｃ１－Ｃ４）アルキレン、（Ｃ２－Ｃ４）アルケニレン、及び（Ｃ０－Ｃ３）アルキレン－Ｘ－（Ｃ０－Ｃ３）アルキレンから選択され；
Ｘは、Ｏ、Ｓ、ＳＯ、ＳＯ２、ＮＲ４、ＮＲ４Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）ＮＲ４、ＮＲ４Ｃ（Ｏ）ＮＲ５、Ｃ（Ｏ）、Ｃ（Ｏ）Ｏ、ＯＣ（Ｏ）、ＯＣ（Ｏ）Ｏ、ＳＯ２ＮＲ４、ＮＲ４ＳＯ２及びＮＲ４ＳＯ２ＮＲ５から選択され；
Ｒ４及びＲ５、水素、（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、及び（Ｃ１－Ｃ６）アルコキシ（Ｃ１－Ｃ６）アルキルからそれぞれ独立して選択され；
基「Ａ」は、３～１０員の炭素環、及びＮ、Ｏ及びＳから独立して選択される１～４個のヘテロ原子を含む３～１０頁の複素環から選択され、但し、式（Ｉａ）の化合物に関しては、Ｌ１が共有結合である場合、「Ａ」は環Ｃ原子を介してスルホンアミドに結合され；又は
Ａ－Ｌ１－Ｎ－Ｒ３は、Ｎ、Ｏ及びＳから独立して選択された１～４個のヘテロ原子（そのうち少なくとも１つはＮである）を含む３～１０員の複素環を任意に形成することができ；
基「Ｂ」は、３～１０員の炭素環、及びＮ、Ｏ及びＳから独立して選択される１～４個のヘテロ原子を含む３～１０員の複素環から選択され；そして
各炭素環及び複素環は、ハロ、シアノ、ヒドロキシ、オキソ、（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、（Ｃ１－Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ１－Ｃ６）アルコキシ（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、ハロ（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、ハロ（Ｃ１－Ｃ６）アルコキシ、ＮＨ（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、Ｎ（（Ｃ１－Ｃ６）アルキル）２、Ｃ（Ｏ）ＮＨ（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、Ｃ（Ｏ）Ｎ（（Ｃ１－Ｃ６）アルキル）２、ＮＨＣ（Ｏ）（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、Ｎ（Ｃ１－Ｃ６）アルキル）Ｃ（Ｏ）（Ｃ１－Ｃ６）アルキル）、Ｃ（Ｏ）（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、Ｃ（Ｏ）Ｏ（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、ＣＯ２Ｈ、ＣＯＮＨ２、ＳＯ２ＮＨ（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、及びＳＯ２Ｎ（（Ｃ１－Ｃ６）アルキル）２から独立して選択される１～４個の置換基により任意に置換され得る〕から選択される、哺乳類において有益な効果を生成するために、ＵＣＨＬ１又はＵＳＰ３０の阻害が、知られているか、又は示され得る障害又は状態の治療への使用のための式（Ｉ）の化合物、その互変異性体、又は前記化合物又は互変異性体の医薬的に許容できる塩を提供する。
【0015】
特にことわらない限り、その対応するニ価の基を含むアルキル、アルケニル及びアルコキシ基は、直鎖又は分岐鎖であり、そして１～６個の炭素原子及び典型的には、１～４個の炭素原子を含む。アルキルの例としては、メチル、エチル、ｎ－プロピル、イソプロピル、ｎ－ブチル、イソブチル、ｓｅｃ－ブチル、ペンチル及びヘキシルを含む。アルコキシの例としては、メトキシ、エトキシ、イソプロポキシ及びｎ－ブトキシを含む。
【0016】
ハロとは、フルオロ、クロロ、ブロモ又はヨード、特にフルオロ又はクロロを意味する。
【0017】
ハロアルキル及びハロアルコキシ基は、１又は２以上のハロ置換基を含むことができる。例としては、トリフルオロメチル及びトリフルオロメトキシを含む。
【0018】
炭素環式環は、単環式又はニ環式の飽和、部分的飽和又は芳香族であっても良い。炭素環式基の例としては、シクロプロピル、シクロペンチル、シクロヘキシル、インダニル、インデニル、ナフチル、フェニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、及びテトラリニルを含む。
【0019】
複素環は、縮合二環式、飽和、部分的飽和又は芳香族を含む単環式又はニ環式であっても良い。複素環の例としては、以下を含む：アゼチジニル、フリル、チエニル、ピロリル、ピロリニル、ピロリジニル、イミダゾリル、ジオキソラニル、オキサゾリル、チアゾリル、イミダゾリル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、ピラゾリル、ピラゾリニル、ピラゾリジニル、イソオキサゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、トリアゾリル、チアゾリジニル、チアジアゾリル、ピラニル、ピリジル、ピペリジニル、ジオキサニル、モルホリノ、ジチアニル、チオモルホリノ、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、ピペラジニル、スルホラニル、テトラゾリル、トリアジニル、アゼピニル、オキサゼピニル、チアゼピニル、ジアゼピニル、チアゾリニル、ベンズイミダゾリル、ベンゾオキサゾリル、イミダゾピリジニル、ベンゾオキサジニル、ベンゾチアジニル、オキサゾロピリジニル、ベンゾフラニル、キノリニル、キナゾリニル、キノキサリニル、ジヒドロキナゾリニル、ベンゾチアゾリル、フタルイミド、ベンゾフラニル、ベンゾジアゼピニル、インドリル、イソインドリニル、イソインドリル、テトラヒドロイソキノリニル、及びテトラヒドロピラゾロピラジニル。
【0020】
特にことわらない限り、置換されたという用語は、１又は２以上の定義された基により置換されることを意味する。基が複数の選択肢から選択される場合、選択された基は、同じであっても又は異なっていても良い。この用語は、独立して、複数の置換基が複数の可能な置換基から選択される場合、それらの置換基は同じであってもまたは異なっていても良いことを意味する。
【0021】
本発明への使用のための式（Ｉ）の化合物の好ましい実施形態が、以下に定義される。
【0022】
好ましくは、ｍは０、１、２、３及び４から選択される。より好ましくは、ｍは０、１又は２である。
【0023】
好ましくは、各Ｒ１は独立して、ハロ、シアノ、ヒドロキシ、メチル、エチル、イソプロピル、メトキシ、エトキシ、メトキシメチル、及びメトキシエチルから選択される。
【0024】
より好ましくは、Ｒ１は独立して、フルオロ、シアノ、メチル及びメトキシから選択される。
【0025】
好ましくは、Ｒ２及びＲ３は、水素、メチル、エチル、イソプロピル、メトキシ、エトキシ、メトキシメチル、及びメトキシエチルから選択される。
【0026】
より好ましくは、Ｒ２及びＲ３は、水素及びメチルから選択される。
【0027】
式（Ｉａ）の化合物において、Ｒ１基及びＮＲ２の１つは、隣接する環原子上に位置することができる。この実施形態によれば、前記Ｒ１は、Ｒ２と一緒に、Ｎ、Ｏ及びＳから独立して選択された１～２個のヘテロ原子（少なくとも１つはＮである）を含む５～６員の複素環を形成できる。
【0028】
好ましくは、Ｒ１は、Ｒ２と一緒に、Ｎ、Ｏ及びＳから独立して選択された１～２個のヘテロ原子（少なくとも１つはＮである）を含む５～６員の複素環を形成できる。より好ましくは、Ｒ１は、Ｒ２と一緒に、モルホリン、ピペリジン又はピロリジン環を形成する。
【0029】
好ましくは、Ｌ１は、共有結合、メチレン、エチレン、プロピレン、イソプロピレン、エテニル、及びアリルから選択される。より好ましくは、Ｌ１は、共有結合、メチレン及びエチレンから選択される。
【0030】
好ましくは、Ｌ２は、共有結合、メチレン、エチレン、プロピレン、イソプロピレン、エテニル、アリル、及び（Ｃ０－ Ｃ１）アルキレン－Ｘ－（（Ｃ０－ Ｃ１）アルキレンから選択される。
【0031】
好ましくは、Ｘは、Ｏ、ＮＲ４、ＮＲ４Ｃ（Ｏ）、及びＣ（Ｏ）ＮＲ４から選択される。
【0032】
好ましくは、Ｒ４及びＲ５は、それぞれ独立して、水素、メチル、エチル、イソプロピル、メトキシ、エトキシ、メトキシメチル、及びメトキシエチルから選択される。より好ましくは、Ｒ４及びＲ５は、それぞれ独立して、水素及びメチルから選択される。
【0033】
最も好ましくは、Ｌ２は、共有結合、酸素原子、メチレン、ＯＣＨ２、及びＮＨＣ（Ｏ）から選択される。
【0034】
１つの好ましい実施形態によれば、基「Ａ」は６～１０員の炭素環、及びＮ、Ｏ及びＳから独立して選択された１～３個のヘテロ原子を含む５～１０員の複素環から選択された任意に置換された環である。
【0035】
より好ましくは、基「Ａ」は、インダニル、フェニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、テトラリニル、ベンゾチアゾリル、イミダゾリル、イソオキサゾリル、ピペリジニル、ピラゾリル、ピリジル、ピリミジニル、チアゾリル、１，２，４－トリアゾリル、及びキノリニルから選択された任意に置換された環である。
【0036】
別の好ましい実施形態によれば、Ａ－Ｌ１－Ｎ－Ｒ３は、Ｎ、Ｏ及びＳから独立して選択された１～３個のヘテロ原子（この中の少なくとも１つはＮである）を含む任意に置換された４～１０員の複素環を形成する。
【0037】
より好ましくは、Ａ－Ｌ１－Ｎ－Ｒ３は、アゼチジニル、イソインドリニル、ピペラジニル、ピペリジニル、テトラヒドロイソキノリニル、及び４，５，６，７－テトラヒドロピラゾロ[１，５ ａ]ピラジニルから選択された任意に置換された環を形成する。
【0038】
好ましくは、基「Ａ」の各炭素環及び複素環、並びにＡ－Ｌ１－Ｎ－Ｒ３から形成される環は、ハロ、シアノ、ヒドロキシ、オキソ、（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、（Ｃ１－Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ１－Ｃ６）アルコキシ（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、ハロ（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、ハロ（Ｃ１－Ｃ６）アルコキシ、及びＮＨＣ（Ｏ）（Ｃ１－Ｃ６）アルキルから独立して選択された１～４個の置換基により任意に置換され得る。
【0039】
より好ましくは、基「Ａ」の任意の置換基、及びＡ－Ｌ１－Ｎ－Ｒ３から形成される環は、ハロ、シアノ、ヒドロキシ、オキソ、メチル、エチル、イソプロピル、メトキシ、エトキシ、メトキシメチル、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、及びＮＨＣ（Ｏ）イソブチルから独立して選択される。
【0040】
最も好ましくは、基「Ａ」及びＡ－Ｌ１－Ｎ－Ｒ３から形成される環は、クロロ、フルオロ、シアノ、メチル、イソプロピル、メトキシ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、及びＮＨＣ（Ｏ）イソブチル独立して選択された１～２個の置換基により任意に置換され得る。
【0041】
好ましくは、基「Ｂ」は、６～１０員の炭素環、及びＮ、Ｏ及びＳから独立して選択された１～４個のヘテロ原子を含む５～１０員の複素環から選択された任意に置換された環である。
【0042】
より好ましくは、基「Ｂ」は、フェニル、及びＮ、Ｏ及びＳから独立して選択された１～３個のヘテロ原子を含む５～６員の複素環から選択された任意に置換された環である。
【0043】
さらにより好ましくは、基「Ｂ」は、フェニル、オキサゾリル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピラゾリル、ピリジル、ピリミジニル、ピロリジニル、1,2-チアゾリジニル、及びチアゾリルから選択された任意に置換された環である。
【0044】
好ましくは、基「Ｂ」の各炭素環及び複素環は、ハロ、シアノ、ヒドロキシ、オキソ、（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、（（Ｃ１－Ｃ６）アルコキシ、（Ｃ１－Ｃ６）アルコキシ（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、ハロ（Ｃ１－Ｃ６）アルキル、ハロ（Ｃ１－Ｃ６）アルコキシから独立して選択された１～４個の置換基により任意に置換され得る。
【0045】
より好ましくは、基「Ｂ」の任意の置換基は、ハロ、シアノ、ヒドロキシ、オキソ、メチル、エチル、イソプロピル、メトキシ、エトキシ、メトキシメチル、トリフルオロメチル、及びトリフルオロメトキシから独立して選択される。
【0046】
最も好ましくは、基「Ｂ」は、クロロ、フルオロ、オキソ、メチル、メトキシ、及びＣＦ３から独立して選択された１～２個の置換基により任意に選択され得る。
【0047】
１つの好ましい実施形態によれば、本発明への使用のために式（Ｉ）の化合物は、下記式（Ｉａ）：
［式中、
ｍは、０、１又は２であり；
ｎは、０又は１であり；
各Ｒ１は、フルオロ、シアノ、メチル及びメトキシから独立して選択され；
Ｌ１は、共有結合、メチレン及びエチレンから選択され；
Ｌ２は、共有結合、酸素原子、メチレン、ＯＣＨ２及びＮＨＣ（Ｏ）から選択され；
基「Ａ」は、６～１０員の炭素環、及びＮ、Ｏ及びＳから独立して選択された１～３個のヘテロ原子を含む５～１０員の複素環から選択され、それぞれは、クロロ、フルオロ、シアノ、メチル、イソプロピル、メトキシ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、及びＮＨＣ（Ｏ）イソブチルから独立して選択された１～２個の置換基により任意に置換され得；そして
基「Ｂ」は、フェニル、及びＮ、Ｏ及びＳから独立して選択された１～３個のヘテロ原子を含む５～６員の複素環から選択され、それぞれは、クロロ、フルオロ、オキソ、メチル、メトキシ及びＣＦ３から独立して選択された１～２個の置換基により任意に置換され得る］で表される化合物、その互変異性体、又は前記化合物又は互変異性体の医薬敵に許容される塩である。
【化2】
ｍは、０、１又は２であり；
ｎは、０又は１であり；
各Ｒ１は、フルオロ、シアノ、メチル及びメトキシから独立して選択され；
Ｌ１は、共有結合、メチレン及びエチレンから選択され；
Ｌ２は、共有結合、酸素原子、メチレン、ＯＣＨ２及びＮＨＣ（Ｏ）から選択され；
基「Ａ」は、６～１０員の炭素環、及びＮ、Ｏ及びＳから独立して選択された１～３個のヘテロ原子を含む５～１０員の複素環から選択され、それぞれは、クロロ、フルオロ、シアノ、メチル、イソプロピル、メトキシ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、及びＮＨＣ（Ｏ）イソブチルから独立して選択された１～２個の置換基により任意に置換され得；そして
基「Ｂ」は、フェニル、及びＮ、Ｏ及びＳから独立して選択された１～３個のヘテロ原子を含む５～６員の複素環から選択され、それぞれは、クロロ、フルオロ、オキソ、メチル、メトキシ及びＣＦ３から独立して選択された１～２個の置換基により任意に置換され得る］で表される化合物、その互変異性体、又は前記化合物又は互変異性体の医薬敵に許容される塩である。
【0048】
別の好ましい実施形態によれば、本発明への使用のために式（Ｉ）の化合物は、下記式（Ｉａ）：
［式中、
ｍは、１又は２であり；
ｎは、０又は１であり；
Ｒ１基及びＮＲ２の１つは、隣接する環原子上に位置し、そして前記Ｒ１は、Ｒ２と一緒に、Ｎ、Ｏ及びＳから独立して選択された１又は２個のヘテロ原子（それらの少なくとも１つはＮである）を含む５～６員の複素環を形成し；
Ｌ１は、共有結合、メチレン及びエチレンから選択され；
Ｌ２は、共有結合、酸素原子、メチレン、ＯＣＨ２及びＮＨＣ（Ｏ）から選択され；
基「Ａ」は、６～１０員の炭素環、及びＮ、Ｏ及びＳから独立して選択された１～３個のヘテロ原子を含む５～１０員の複素環から選択され、それぞれは、クロロ、フルオロ、シアノ、メチル、イソプロピル、メトキシ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、及びＮＨＣ（Ｏ）イソブチルから独立して選択された１～２個の置換基により任意に置換され得；そして
基「Ｂ」は、フェニル、及びＮ、Ｏ及びＳから独立して選択された１～３個のヘテロ原子を含む５～６員の複素環から選択され、それぞれは、クロロ、フルオロ、オキソ、メチル、メトキシ及びＣＦ３から独立して選択された１～２個の置換基により任意に置換され得る］で表される化合物、その互変異性体、又は前記化合物又は互変異性体の医薬敵に許容される塩である。
【化3】
ｍは、１又は２であり；
ｎは、０又は１であり；
Ｒ１基及びＮＲ２の１つは、隣接する環原子上に位置し、そして前記Ｒ１は、Ｒ２と一緒に、Ｎ、Ｏ及びＳから独立して選択された１又は２個のヘテロ原子（それらの少なくとも１つはＮである）を含む５～６員の複素環を形成し；
Ｌ１は、共有結合、メチレン及びエチレンから選択され；
Ｌ２は、共有結合、酸素原子、メチレン、ＯＣＨ２及びＮＨＣ（Ｏ）から選択され；
基「Ａ」は、６～１０員の炭素環、及びＮ、Ｏ及びＳから独立して選択された１～３個のヘテロ原子を含む５～１０員の複素環から選択され、それぞれは、クロロ、フルオロ、シアノ、メチル、イソプロピル、メトキシ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、及びＮＨＣ（Ｏ）イソブチルから独立して選択された１～２個の置換基により任意に置換され得；そして
基「Ｂ」は、フェニル、及びＮ、Ｏ及びＳから独立して選択された１～３個のヘテロ原子を含む５～６員の複素環から選択され、それぞれは、クロロ、フルオロ、オキソ、メチル、メトキシ及びＣＦ３から独立して選択された１～２個の置換基により任意に置換され得る］で表される化合物、その互変異性体、又は前記化合物又は互変異性体の医薬敵に許容される塩である。
【0049】
別の好ましい実施形態によれば、本発明への使用のための式（Ｉ）の化合物は、下記式（Ｉｂ）；
［式中、
ｍは、０、１又は２であり；
ｎは、０又は１であり；
各Ｒ１は、フルオロ、シアノ、メチル及びメトキシから独立して選択され；
Ｌ２は、共有結合、酸素原子、メチレン、ＯＣＨ２及びＮＨＣ（Ｏ）から選択され；
Ａ－Ｌ１－Ｎ－Ｒ３は、Ｎ、Ｏ及びＳから独立して選択された１～３個のヘテロ原子（それらの少なくとも１つはＮである）を含む４～１０員の複素環を形成し、それらは、クロロ、フルオロ、シアノ、メチル、イソプロピル、メトキシ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、及びＮＨＣ（Ｏ）イソブチルから独立して選択された１～２個の置換基により任意に置換され得：そして
基「Ｂ」は、フェニル、及びＮ、Ｏ及びＳから独立して選択された１～３個のヘテロ原子を含む５～６員の複素環から選択され、それぞれは、クロロ、フルオロ、オキソ、メチル、メトキシ及びＣＦ３から独立して選択された１～２個の置換基により任意に置換され得る］で表される化合物、その互変異性体、又は前記化合物又は互変異性体の医薬敵に許容される塩である。
【化4】
ｍは、０、１又は２であり；
ｎは、０又は１であり；
各Ｒ１は、フルオロ、シアノ、メチル及びメトキシから独立して選択され；
Ｌ２は、共有結合、酸素原子、メチレン、ＯＣＨ２及びＮＨＣ（Ｏ）から選択され；
Ａ－Ｌ１－Ｎ－Ｒ３は、Ｎ、Ｏ及びＳから独立して選択された１～３個のヘテロ原子（それらの少なくとも１つはＮである）を含む４～１０員の複素環を形成し、それらは、クロロ、フルオロ、シアノ、メチル、イソプロピル、メトキシ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、及びＮＨＣ（Ｏ）イソブチルから独立して選択された１～２個の置換基により任意に置換され得：そして
基「Ｂ」は、フェニル、及びＮ、Ｏ及びＳから独立して選択された１～３個のヘテロ原子を含む５～６員の複素環から選択され、それぞれは、クロロ、フルオロ、オキソ、メチル、メトキシ及びＣＦ３から独立して選択された１～２個の置換基により任意に置換され得る］で表される化合物、その互変異性体、又は前記化合物又は互変異性体の医薬敵に許容される塩である。
【0050】
本発明への使用のための式（Ｉ）の好ましい化合物、その互変異性体、又は前記化合物又は互変異性体の医薬的に許容できる塩は、下記から選択される：
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－［１，１’－ビフェニル］ －２－スルホンアミド（実施例１）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－［１，１’－ビフェニル］ －４－スルホンアミド（実施例２）;
（Ｒ）－Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－［１，１’－ビフェニル] －４－スルホンアミド（実施例３）;
（Ｓ）－Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－［１，１’－ビフェニル] －４－スルホンアミド（実施例４）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）ベンゼンスルホンアミド（実施例５）;
（Ｓ）－Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）ベンゼンスルホンアミド（実施例６）;
（Ｒ）－Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）ベンゼンスルホンアミド（実施例７）;
（４－（ベンジルオキシ）－Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）ベンゼンスルホンアミド（実施例８）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－４－（ピリミジン－５－イル）ベンゼンスルホンアミド（実施例９）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－４－（４－メチルピペラジン－１－イル）ベンゼンスルホンアミド（実施例１０）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－５－フェニルピリジン－２－スルホンアミド（実施例１１）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－４'－フルオロ－[１，１'－ビフェニル] －４－スルホンアミド（実施例１２）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－４－（ピリジン－４－イル）ベンゼンスルホンアミド（実施例１３）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－４－（ピペリジン－１－イル）ベンゼンスルホンアミド（実施例１４）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－４－（１－メチル－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）ベンゼンスルホンアミド（実施例１５）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－６－フェノキシピリジン－３－スルホンアミド（実施例１６）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－５－フルオロ－２－メチルベンゼンスルホンアミド（実施例１７）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－４－イソプロピルベンゼンスルホンアミド（実施例１８）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－４－（（５－（トリフルオロメチル）ピリジン－２－イル）オキシ）ベンゼンスルホンアミド（実施例１９）;
（Ｒ）－Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－Ｎ－メチル－４－（ピリジン－３－イル）ベンゼンスルホンアミド（実施例２０）;
（３ａＲ、６ａＲ）－１－（（４－（ピリジン－３－イル）フェニル）スルホニル）ヘキサヒドロピロロ[３，４－ｂ]ピロール－５（１Ｈ）－カルボニトリル（実施例２１）;
ｒａｃ－（４ａＲ、７ａＲ）－４－トシルヘキサヒドロピロロ[３，４－ｂ] [１，４]オキサジン-６（２Ｈ）－カルボニトリル（実施例２２）;
ｒａｃ－（４ａＲ、７ａＳ）－４－（（４－メチルベンジル）スルホニル）ヘキサヒドロピロロ[３，４－ｂ] [１，４]オキサジン－６（２Ｈ）－カルボニトリル（実施例２３）
Ｎ－（５－（Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）スルファモイル）ピリジン－２－イル）－１－メチル－１Ｈ－ピラゾール－５－カルボキサミド（実施例２４）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－Ｎ－メチル－４－（（５－（トリフルオロメチル）ピリジン－２－イル）オキシ）ベンゼンスルホンアミド（実施例２５）;
Ｎ－（[１，１'－ビフェニル] －４－イル）－１－シアノピロリジン－３－スルホンアミド（実施例２６）;
３－（（４－（４－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）スルホニル）ピロリジン‐１－カルボニトリル（実施例２７）;
（３－（（４－（ピリジン－２－イル）ピペラジン－１－イル）スルホニル）ピロリジン‐１－カルボニトリル（実施例２８）;
３－（（４－（ピリミジン－２－イル）ピペラジン－１－イル）スルホニル）ピロリジン‐１－カルボニトリル（実施例２９）;
３－（（４－（４－クロロフェニル）ピペリジン－１－イル）スルホニル）ピロリジン‐１－カルボニトリル（実施例３０）;
（Ｓ）－３－（（４－（４－クロロフェニル）ピペリジン‐１－イル）スルホニル）ピロリジン‐１－カルボニトリル（実施例３１）;
（Ｒ）－３－（（４－（４－クロロフェニル）ピペリジン－１－イル）スルホニル）ピロリジン‐１－カルボニトリル（実施例３２）;
３－（（４－ベンジルピペリジン‐１－イル）スルホニル）ピロリジン‐１－カルボニトリル（実施例３３）;
３－（（３－（４－クロロフェニル）アゼチジン－１－イル）スルホニル）ピロリジン－１－カルボニトリル（実施例３４）;
（Ｓ）－３－（（３－（４－クロロフェニル）アゼチジン－１－イル）スルホニル）ピロリジン‐１－カルボニトリル（実施例３５）;
（Ｒ）－３－（（３－（４－クロロフェニル）アゼチジン－１－イル）スルホニル）ピロリジン‐１－カルボニトリル（実施例３６）;及び
３－（（３－フェノキシアゼチジン－１－イル）スルホニル）ピロリジン－１－カルボニトリル（実施例３７）。
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－［１，１’－ビフェニル］ －２－スルホンアミド（実施例１）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－［１，１’－ビフェニル］ －４－スルホンアミド（実施例２）;
（Ｒ）－Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－［１，１’－ビフェニル] －４－スルホンアミド（実施例３）;
（Ｓ）－Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－［１，１’－ビフェニル] －４－スルホンアミド（実施例４）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）ベンゼンスルホンアミド（実施例５）;
（Ｓ）－Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）ベンゼンスルホンアミド（実施例６）;
（Ｒ）－Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）ベンゼンスルホンアミド（実施例７）;
（４－（ベンジルオキシ）－Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）ベンゼンスルホンアミド（実施例８）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－４－（ピリミジン－５－イル）ベンゼンスルホンアミド（実施例９）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－４－（４－メチルピペラジン－１－イル）ベンゼンスルホンアミド（実施例１０）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－５－フェニルピリジン－２－スルホンアミド（実施例１１）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－４'－フルオロ－[１，１'－ビフェニル] －４－スルホンアミド（実施例１２）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－４－（ピリジン－４－イル）ベンゼンスルホンアミド（実施例１３）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－４－（ピペリジン－１－イル）ベンゼンスルホンアミド（実施例１４）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－４－（１－メチル－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）ベンゼンスルホンアミド（実施例１５）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－６－フェノキシピリジン－３－スルホンアミド（実施例１６）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－５－フルオロ－２－メチルベンゼンスルホンアミド（実施例１７）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－４－イソプロピルベンゼンスルホンアミド（実施例１８）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－４－（（５－（トリフルオロメチル）ピリジン－２－イル）オキシ）ベンゼンスルホンアミド（実施例１９）;
（Ｒ）－Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－Ｎ－メチル－４－（ピリジン－３－イル）ベンゼンスルホンアミド（実施例２０）;
（３ａＲ、６ａＲ）－１－（（４－（ピリジン－３－イル）フェニル）スルホニル）ヘキサヒドロピロロ[３，４－ｂ]ピロール－５（１Ｈ）－カルボニトリル（実施例２１）;
ｒａｃ－（４ａＲ、７ａＲ）－４－トシルヘキサヒドロピロロ[３，４－ｂ] [１，４]オキサジン-６（２Ｈ）－カルボニトリル（実施例２２）;
ｒａｃ－（４ａＲ、７ａＳ）－４－（（４－メチルベンジル）スルホニル）ヘキサヒドロピロロ[３，４－ｂ] [１，４]オキサジン－６（２Ｈ）－カルボニトリル（実施例２３）
Ｎ－（５－（Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）スルファモイル）ピリジン－２－イル）－１－メチル－１Ｈ－ピラゾール－５－カルボキサミド（実施例２４）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－Ｎ－メチル－４－（（５－（トリフルオロメチル）ピリジン－２－イル）オキシ）ベンゼンスルホンアミド（実施例２５）;
Ｎ－（[１，１'－ビフェニル] －４－イル）－１－シアノピロリジン－３－スルホンアミド（実施例２６）;
３－（（４－（４－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）スルホニル）ピロリジン‐１－カルボニトリル（実施例２７）;
（３－（（４－（ピリジン－２－イル）ピペラジン－１－イル）スルホニル）ピロリジン‐１－カルボニトリル（実施例２８）;
３－（（４－（ピリミジン－２－イル）ピペラジン－１－イル）スルホニル）ピロリジン‐１－カルボニトリル（実施例２９）;
３－（（４－（４－クロロフェニル）ピペリジン－１－イル）スルホニル）ピロリジン‐１－カルボニトリル（実施例３０）;
（Ｓ）－３－（（４－（４－クロロフェニル）ピペリジン‐１－イル）スルホニル）ピロリジン‐１－カルボニトリル（実施例３１）;
（Ｒ）－３－（（４－（４－クロロフェニル）ピペリジン－１－イル）スルホニル）ピロリジン‐１－カルボニトリル（実施例３２）;
３－（（４－ベンジルピペリジン‐１－イル）スルホニル）ピロリジン‐１－カルボニトリル（実施例３３）;
３－（（３－（４－クロロフェニル）アゼチジン－１－イル）スルホニル）ピロリジン－１－カルボニトリル（実施例３４）;
（Ｓ）－３－（（３－（４－クロロフェニル）アゼチジン－１－イル）スルホニル）ピロリジン‐１－カルボニトリル（実施例３５）;
（Ｒ）－３－（（３－（４－クロロフェニル）アゼチジン－１－イル）スルホニル）ピロリジン‐１－カルボニトリル（実施例３６）;及び
３－（（３－フェノキシアゼチジン－１－イル）スルホニル）ピロリジン－１－カルボニトリル（実施例３７）。
【0051】
第２の側面によれば、本発明は、本発明の第１の側面及びその好ましい実施形態に関して本明細書で定義されるように、下記式（Ｉａ）：
で表される化合物、その互変異性体、又は前記化合物又は互変異性体の医薬的に許容できる塩を提供し、上記式（Ｉａ）中、
（ｉ）ｍは１～４であり；そして
Ｒ１基及びＮＲ２の１つは、隣接する環原子上に位置し、そして前記Ｒ１は、Ｒ２と一緒に、Ｎ、Ｏ及びＳから独立して選択された１～２個のヘテロ原子（その少なくとも１つはＮである）を含む～５～６員の複素環を形成し；
（ｉｉ）ｎは０であり；そして
基「Ａ」は、Ｎ、Ｏ及びＳから独立して選択された１～４個のヘテロ原子を含む３～１０員の複素環であり；但し、式（Ｉａ）の化合物に関して、Ｌ１が共有結合である場合、「Ａ」は環Ｃ原子を介してスルホンアミドに結合され；
但し、（ａ）ｍが０である場合、Ｒ２は（Ｃ１－Ｃ６）アルキル及び（Ｃ１－Ｃ６）アルコキシ（Ｃ１－Ｃ６）アルキルから選択され、そして好ましくはメチルであり；
（ｉｉｉ）ｍは０であり；
ｎは０であり；
Ｒ２は水素であり；そして
各炭素環及び複素環は、シアノ、ヒドロキシ、オキソ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、及びＮＨＣ（Ｏ）イソブチルから独立して選択された少なくとも１～２個の置換基により置換され；
（ｉｖ）ｎは１であり；そして
基「Ｂ」は、Ｎ、Ｏ及びＳから独立して選択された１～４個のヘテロ原子を含む置換された３～１０員の複素環であり；
（ｖ）ｎは０であり；そして
基「Ａ」は、Ｎ、Ｏ及びＳから独立して選択された１～４個のヘテロ原子を含む３～１０員の複素環であり；但し、式（Ｉａ）の化合物に関して、Ｌ１が共有結合である場合、「Ａ」は環Ｃ原子を介してスルホンアミドに結合され；
但し；
（ａ）ｍが０である場合、Ｒ２は水素であり；そして
（ｂ）ｍが１～４である場合、Ｒ２は（Ｃ１－Ｃ６）アルキル及び（Ｃ１－Ｃ６）アルコキシ（Ｃ１－Ｃ６）アルキルから選択され、そして好ましくは、メチルである。
【化5】
（ｉ）ｍは１～４であり；そして
Ｒ１基及びＮＲ２の１つは、隣接する環原子上に位置し、そして前記Ｒ１は、Ｒ２と一緒に、Ｎ、Ｏ及びＳから独立して選択された１～２個のヘテロ原子（その少なくとも１つはＮである）を含む～５～６員の複素環を形成し；
（ｉｉ）ｎは０であり；そして
基「Ａ」は、Ｎ、Ｏ及びＳから独立して選択された１～４個のヘテロ原子を含む３～１０員の複素環であり；但し、式（Ｉａ）の化合物に関して、Ｌ１が共有結合である場合、「Ａ」は環Ｃ原子を介してスルホンアミドに結合され；
但し、（ａ）ｍが０である場合、Ｒ２は（Ｃ１－Ｃ６）アルキル及び（Ｃ１－Ｃ６）アルコキシ（Ｃ１－Ｃ６）アルキルから選択され、そして好ましくはメチルであり；
（ｉｉｉ）ｍは０であり；
ｎは０であり；
Ｒ２は水素であり；そして
各炭素環及び複素環は、シアノ、ヒドロキシ、オキソ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、及びＮＨＣ（Ｏ）イソブチルから独立して選択された少なくとも１～２個の置換基により置換され；
（ｉｖ）ｎは１であり；そして
基「Ｂ」は、Ｎ、Ｏ及びＳから独立して選択された１～４個のヘテロ原子を含む置換された３～１０員の複素環であり；
（ｖ）ｎは０であり；そして
基「Ａ」は、Ｎ、Ｏ及びＳから独立して選択された１～４個のヘテロ原子を含む３～１０員の複素環であり；但し、式（Ｉａ）の化合物に関して、Ｌ１が共有結合である場合、「Ａ」は環Ｃ原子を介してスルホンアミドに結合され；
但し；
（ａ）ｍが０である場合、Ｒ２は水素であり；そして
（ｂ）ｍが１～４である場合、Ｒ２は（Ｃ１－Ｃ６）アルキル及び（Ｃ１－Ｃ６）アルコキシ（Ｃ１－Ｃ６）アルキルから選択され、そして好ましくは、メチルである。
【0052】
本発明の第２の側面の好ましい実施形態によれば、式（Ｉａ）［（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、（ｉｖ）及び（ｖ）］の化合物に関して、
Ｌ１は、共有結合、メチレン及びエチレンから選択され；そして
Ｌ２は、共有結合である。
Ｌ１は、共有結合、メチレン及びエチレンから選択され；そして
Ｌ２は、共有結合である。
【0053】
本発明の第２の側面の好ましい実施形態によれば、式（Ｉａ）［Ｉ］の化合物に関して、
ｍは１であり；
Ｌ１は、共有結合、メチレン及びエチレンから選択され；
Ｌ２は、共有結合であり；
基「Ａ」は、フェニルであり；
基「Ｂ」は、ピリジルであり；
各フェニル及びピリジル環は、クロロ、フルオロ、シアノ、ヒドロキシ、メチル、イソプロピル、メトキシ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、ＮＨＣ（Ｏ）イソブチルから独立して選択された１～２個の置換基により任意に置換され得る。
ｍは１であり；
Ｌ１は、共有結合、メチレン及びエチレンから選択され；
Ｌ２は、共有結合であり；
基「Ａ」は、フェニルであり；
基「Ｂ」は、ピリジルであり；
各フェニル及びピリジル環は、クロロ、フルオロ、シアノ、ヒドロキシ、メチル、イソプロピル、メトキシ、ＣＦ３、ＯＣＦ３、ＮＨＣ（Ｏ）イソブチルから独立して選択された１～２個の置換基により任意に置換され得る。
【0054】
本発明の第２の側面の好ましい実施形態によれば、式（Ｉａ）［ｉｖ］の化合物に関して、
基「Ｂ」は、クロロ、フルオロ、オキソ、メチル、メトキシ、及びＣＦ３から独立して選択された１～２個の置換基により置換される。
基「Ｂ」は、クロロ、フルオロ、オキソ、メチル、メトキシ、及びＣＦ３から独立して選択された１～２個の置換基により置換される。
【0055】
本発明の第２の側面による式（Ｉ）の好ましい化合物、その互変異性体、又は前記化合物又は互変異性体の医薬的に許容できる塩は、以下から選択される：
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－［１，１’－ビフェニル］ －２－スルホンアミド（実施例１）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－［１，１’－ビフェニル］ －４－スルホンアミド（実施例２）;
（Ｒ）－Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－［１，１’－ビフェニル] －４－スルホンアミド（実施例３）;
（Ｓ）－Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－［１，１’－ビフェニル] －４－スルホンアミド（実施例４）;
（４－（ベンジルオキシ）－Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）ベンゼンスルホンアミド（実施例８）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－４－（ピリミジン－５－イル）ベンゼンスルホンアミド（実施例９）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－４－（４－メチルピペラジン－１－イル）ベンゼンスルホンアミド（実施例１０）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－５－フェニルピリジン－２－スルホンアミド（実施例１１）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－４－（ピリジン－４－イル）ベンゼンスルホンアミド（実施例１３）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－４－（ピペリジン－１－イル）ベンゼンスルホンアミド（実施例１４）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－４－（１－メチル－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）ベンゼンスルホンアミド（実施例１５）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－６－フェノキシピリジン－３－スルホンアミド（実施例１６）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－４－イソプロピルベンゼンスルホンアミド（実施例１８）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－４－（（５－（トリフルオロメチル）ピリジン－２－イル）オキシ）ベンゼンスルホンアミド（実施例１９）;
（Ｒ）－Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－Ｎ－メチル－４－（ピリジン－３－イル）ベンゼンスルホンアミド（実施例２０）;
（３ａＲ、６ａＲ）－１－（（４－（ピリジン－３－イル）フェニル）スルホニル）ヘキサヒドロピロロ[３，４－ｂ]ピロール－５（１Ｈ）－カルボニトリル（実施例２１）;
ｒａｃ－（４ａＲ、７ａＲ）－４－トシルヘキサヒドロピロロ[３，４－ｂ] [１，４]オキサジン-６（２Ｈ）－カルボニトリル（実施例２２）;
ｒａｃ－（４ａＲ、７ａＳ）－４－（（４－メチルベンジル）スルホニル）ヘキサヒドロピロロ[３，４－ｂ] [１，４]オキサジン－６（２Ｈ）－カルボニトリル（実施例２３）
Ｎ－（５－（Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）スルファモイル）ピリジン－２－イル）－１－メチル－１Ｈ－ピラゾール－５－カルボキサミド（実施例２４）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－Ｎ－メチル－４－（（５－（トリフルオロメチル）ピリジン－２－イル）オキシ）ベンゼンスルホンアミド（実施例２５）。
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－［１，１’－ビフェニル］ －２－スルホンアミド（実施例１）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－［１，１’－ビフェニル］ －４－スルホンアミド（実施例２）;
（Ｒ）－Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－［１，１’－ビフェニル] －４－スルホンアミド（実施例３）;
（Ｓ）－Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－［１，１’－ビフェニル] －４－スルホンアミド（実施例４）;
（４－（ベンジルオキシ）－Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）ベンゼンスルホンアミド（実施例８）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－４－（ピリミジン－５－イル）ベンゼンスルホンアミド（実施例９）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－４－（４－メチルピペラジン－１－イル）ベンゼンスルホンアミド（実施例１０）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－５－フェニルピリジン－２－スルホンアミド（実施例１１）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－４－（ピリジン－４－イル）ベンゼンスルホンアミド（実施例１３）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－４－（ピペリジン－１－イル）ベンゼンスルホンアミド（実施例１４）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－４－（１－メチル－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）ベンゼンスルホンアミド（実施例１５）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－６－フェノキシピリジン－３－スルホンアミド（実施例１６）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－４－イソプロピルベンゼンスルホンアミド（実施例１８）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－４－（（５－（トリフルオロメチル）ピリジン－２－イル）オキシ）ベンゼンスルホンアミド（実施例１９）;
（Ｒ）－Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－Ｎ－メチル－４－（ピリジン－３－イル）ベンゼンスルホンアミド（実施例２０）;
（３ａＲ、６ａＲ）－１－（（４－（ピリジン－３－イル）フェニル）スルホニル）ヘキサヒドロピロロ[３，４－ｂ]ピロール－５（１Ｈ）－カルボニトリル（実施例２１）;
ｒａｃ－（４ａＲ、７ａＲ）－４－トシルヘキサヒドロピロロ[３，４－ｂ] [１，４]オキサジン-６（２Ｈ）－カルボニトリル（実施例２２）;
ｒａｃ－（４ａＲ、７ａＳ）－４－（（４－メチルベンジル）スルホニル）ヘキサヒドロピロロ[３，４－ｂ] [１，４]オキサジン－６（２Ｈ）－カルボニトリル（実施例２３）
Ｎ－（５－（Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）スルファモイル）ピリジン－２－イル）－１－メチル－１Ｈ－ピラゾール－５－カルボキサミド（実施例２４）;
Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－Ｎ－メチル－４－（（５－（トリフルオロメチル）ピリジン－２－イル）オキシ）ベンゼンスルホンアミド（実施例２５）。
【0056】
第３の側面によれば、本発明は、本発明の第１の側面及びその好ましい実施形態に関して本明細書において定義されたような、下記式（Ｉｂ）：
で表される化合物、その互変異性体、又は前記化合物又は互変異性体の医薬的に許容できる塩を提供する。
【化6】
【0057】
本発明の第３の側面の好ましい実施形態によれば、
ｍは０又は１であり；
ｎは０又は１であり；
各Ｒ１は、フルオロ、シアノ、メチル、メトキシ及びメトキシメチルから独立して選択され；
Ｒ３は、水素及びメチルから選択され；
Ｌ１は、共有結合、メチレン及びエチレンから選択され；
Ｌ２は、共有結合、酵素原子及びメチレンから選択され；
基「Ａ」は、インダニル、フェニル、テトラリニル、ベンゾチアゾリル、ピペリジニル、ピラゾリル、ピリジル、ピリミジニル、チアゾリル、１，２，４－トリアゾリル、及びキノリニルから選択され；又は
Ａ－Ｌ１―Ｎ―Ｒ３は、アゼチジニル、イソインドリニル、ピペラジニル、ピペリジニル、テトラヒドロイソキノリニル、及び４，５，６，７－テトラヒドロピラゾロ[１，５ ａ]ピラジニルから選択された環を形成でき；
基「Ｂ」は、フェニル及び－ピリジルから選択され；そして
各炭素環及び複素環は、クロロ、フルオロ、ヒドロキシ及びメチルから独立して選択された１～２個の置換基により任意に置換され得る。
ｍは０又は１であり；
ｎは０又は１であり；
各Ｒ１は、フルオロ、シアノ、メチル、メトキシ及びメトキシメチルから独立して選択され；
Ｒ３は、水素及びメチルから選択され；
Ｌ１は、共有結合、メチレン及びエチレンから選択され；
Ｌ２は、共有結合、酵素原子及びメチレンから選択され；
基「Ａ」は、インダニル、フェニル、テトラリニル、ベンゾチアゾリル、ピペリジニル、ピラゾリル、ピリジル、ピリミジニル、チアゾリル、１，２，４－トリアゾリル、及びキノリニルから選択され；又は
Ａ－Ｌ１―Ｎ―Ｒ３は、アゼチジニル、イソインドリニル、ピペラジニル、ピペリジニル、テトラヒドロイソキノリニル、及び４，５，６，７－テトラヒドロピラゾロ[１，５ ａ]ピラジニルから選択された環を形成でき；
基「Ｂ」は、フェニル及び－ピリジルから選択され；そして
各炭素環及び複素環は、クロロ、フルオロ、ヒドロキシ及びメチルから独立して選択された１～２個の置換基により任意に置換され得る。
【0058】
本発明の第３の側面に従っての式（Ｉ）の好ましい化合物、その互変異性体、又は前記化合物又は互変異体の医薬的に許容される塩は、以下から選択される：
Ｎ－（[１，１'－ビフェニル] －４－イル）－１－シアノピロリジン－３－スルホンアミド（実施例２６）;
３－（（４－（４－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）スルホニル）ピロリジン‐１－カルボニトリル（実施例２７）;
（３－（（４－（ピリジン－２－イル）ピペラジン－１－イル）スルホニル）ピロリジン‐１－カルボニトリル（実施例２８）;
３－（（４－（ピリミジン－２－イル）ピペラジン－１－イル）スルホニル）ピロリジン‐１－カルボニトリル（実施例２９）;
３－（（４－（４－クロロフェニル）ピペリジン－１－イル）スルホニル）ピロリジン‐１－カルボニトリル（実施例３０）;
（Ｓ）－３－（（４－（４－クロロフェニル）ピペリジン‐１－イル）スルホニル）ピロリジン‐１－カルボニトリル（実施例３１）;
（Ｒ）－３－（（４－（４－クロロフェニル）ピペリジン－１－イル）スルホニル）ピロリジン‐１－カルボニトリル（実施例３２）;
３－（（４－ベンジルピペリジン‐１－イル）スルホニル）ピロリジン‐１－カルボニトリル（実施例３３）;
３－（（３－（４－クロロフェニル）アゼチジン－１－イル）スルホニル）ピロリジン－１－カルボニトリル（実施例３４）;
（Ｓ）－３－（（３－（４－クロロフェニル）アゼチジン－１－イル）スルホニル）ピロリジン‐１－カルボニトリル（実施例３５）;
（Ｒ）－３－（（３－（４－クロロフェニル）アゼチジン－１－イル）スルホニル）ピロリジン‐１－カルボニトリル（実施例３６）;及び
３－（（３－フェノキシアゼチジン－１－イル）スルホニル）ピロリジン－１－カルボニトリル（実施例３７）。
Ｎ－（[１，１'－ビフェニル] －４－イル）－１－シアノピロリジン－３－スルホンアミド（実施例２６）;
３－（（４－（４－フルオロフェニル）ピペラジン－１－イル）スルホニル）ピロリジン‐１－カルボニトリル（実施例２７）;
（３－（（４－（ピリジン－２－イル）ピペラジン－１－イル）スルホニル）ピロリジン‐１－カルボニトリル（実施例２８）;
３－（（４－（ピリミジン－２－イル）ピペラジン－１－イル）スルホニル）ピロリジン‐１－カルボニトリル（実施例２９）;
３－（（４－（４－クロロフェニル）ピペリジン－１－イル）スルホニル）ピロリジン‐１－カルボニトリル（実施例３０）;
（Ｓ）－３－（（４－（４－クロロフェニル）ピペリジン‐１－イル）スルホニル）ピロリジン‐１－カルボニトリル（実施例３１）;
（Ｒ）－３－（（４－（４－クロロフェニル）ピペリジン－１－イル）スルホニル）ピロリジン‐１－カルボニトリル（実施例３２）;
３－（（４－ベンジルピペリジン‐１－イル）スルホニル）ピロリジン‐１－カルボニトリル（実施例３３）;
３－（（３－（４－クロロフェニル）アゼチジン－１－イル）スルホニル）ピロリジン－１－カルボニトリル（実施例３４）;
（Ｓ）－３－（（３－（４－クロロフェニル）アゼチジン－１－イル）スルホニル）ピロリジン‐１－カルボニトリル（実施例３５）;
（Ｒ）－３－（（３－（４－クロロフェニル）アゼチジン－１－イル）スルホニル）ピロリジン‐１－カルボニトリル（実施例３６）;及び
３－（（３－フェノキシアゼチジン－１－イル）スルホニル）ピロリジン－１－カルボニトリル（実施例３７）。
【0059】
さらなる側面によれば、本発明は、本発明の第２又は第３の側面のいずれかに従っての式（Ｉａ）又は（Ｉｂ）の化合物、その互変異性体、又は前記化合物又は互変異性体の医薬的に許容できる塩を、医薬的に許容できる希釈剤又は担体と共に含む医薬組成物を提供する。
【0060】
本発明の医薬組成物は、任意の医薬的に許容される担体、アジュバント又はビークルと組合される本発明のいずれかの化合物を含む。医薬的に許容できる担体の例は、当業者に知られており、そして以下を含むが、但しそれらだけには限定されない：投与様式及び剤形の性質に依存して、保存剤、充填剤、崩壊剤、湿潤剤、乳化剤、懸濁化剤、甘味料、風味剤、芳香剤、抗菌剤、抗真菌剤、潤滑剤及び分散剤。組成物は、例えば錠剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、エリキシル剤、ロゼンジ、座薬、シロップ、及び懸濁液及び溶液を含む液体製剤の形で存在することができる。本明細書における用語「医薬組成物」とは、活性剤を含み、そしてさらに、１又は２以上の医薬的に許容できる担体を含む組成物を意味する。組成物はさらに、投与様式及び剤型の性質に存在して、例えば希釈剤、アジュバント、賦形剤、ビヒクル、保存剤、充填剤、崩壊剤、湿潤剤、乳化剤、懸濁剤、甘味料、風味剤、芳香剤、抗菌剤、抗真菌剤、潤滑剤及び分散剤から選択された成分を含むことができる。
【0061】
式（Ｉ）の化合物は、特にＵＣＨＬ１又はＵＳＰ３０のいずれか、又は両方を含む脱ユビキチン化酵素の阻害剤である。
【0062】
さらなる側面によれば、本発明は、本発明の第２又は第３の側面のいずれかに従っての医薬として使用のための式（Ｉａ）又は（Ｉｂ）の化合物、その互変異性体、又は前記化合物又は互変異性体の医薬的に許容できる塩を提供する。
【0063】
さらなる側面によれば、本発明は、ＵＣＨＬ１又はＵＳＰ３０が哺乳類において有益な効果を生むことが知られているか、又は示されている障害又は状態の治療方法を提供し、ここで前記方法は、治療的有効量の本発明の第１、第２及び第３の側面のいずれか１つに従って、本明細書に定義されるような式（Ｉ）の化合物、その互変異性体、又は前記化合物又は互変異性体の医薬的に許容できる塩を、前記哺乳類に投与することを含む。
【0064】
さらなる側面によれば、本発明は、ＵＣＨＬ１又はＵＳＰ３０が哺乳類において有益な効果を生むことが知られているか、又は示されている障害又は状態の治療のための薬剤の調製への、本発明の第１、第２及び第３の側面のいずれか１つに従って、本明細書に定義されるような式（Ｉ）の化合物、その互変異性体、又は前記化合物又は互変異性体の医薬的に許容できる塩の使用を提供する。
【0065】
本発明の全ての側面の１つの好ましい実施形態によれば、障害又は状態は、ＵＣＨＬ１の阻害が有益な効果をもたらすことが知られているか、又は示され得るものである。
【0066】
より好ましい実施形態によれば、ＵＣＨＬ１活性の恩恵を受ける障害又は状態は、以下から選択される：癌、神経変性障害（例えば、アルツハイマー病、パーキンソン病）、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、炎症、ＭＥＲＳ 又は ＳＡＲＳを含むウイルス感染、ＴＢを含む細菌感染、代謝障害、及び線維症。好ましい癌は、例えば、以下を含む：乳房、卵巣、前立腺、肺、腎臓、胃、結腸、精巣、頭頸部、膵臓、脳、黒色腫、骨又は組織器官の他の癌及び血液細胞の癌、例えばリンパ腫及び白血病、多発性骨髄腫、結腸直腸癌、及び非小細胞肺癌。
【0067】
線維症とは、外傷、炎症、組織修復、免疫反応、細胞過形成及び新生物に続いて起こる細胞マトリックス成分の蓄積を意味する。本発明の化合物及び組成物により治療され得る線維性障害は、とりわけ、以下を含む：主要な器官の疾患に関連する線維症/線維性疾患、例えば間質性肺疾患（ＩＬＤ）、肝硬変、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）及び非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）（肝線維症）、腎臓病（腎線維症）、心臓又は血管疾患（心臓線維症）及び 目の疾患; 線維増殖性疾患、例えば、全身性および局所性強皮症、ケロイド及び肥厚性瘢痕、アテローム性動脈硬化症、再狭窄、デュピュイトラン拘縮；外傷に伴う瘢痕、例えば外科的合併症、化学療法薬による薬物誘発性線維症（例えば、ブレオマイシン誘発性線維症）、放射線誘発性線維症、偶発的な損傷及び火傷）; 後腹膜線維症（オーモンド病）;及び通常腎移植後の腹膜透析を受けている患者における腹膜線維症/腹膜瘢痕。例えば、Wynn, Thomas A., “Fibrotic disease and the TH1/TH2 paradigm”, Nat Rev Immunol. 2004 August ; 4(8): 583-594を参照のこと。従って、本発明は、主要器官、肺、肝臓、腎臓、心臓、皮膚、目、胃腸管、腹膜、骨髄、等の及び／又はそれらに関連する線維症／線維性障害、及び本明細書に記載される他の疾患／障害の治療方法、及び前記方法に使用される化合物及び組成物に関する。
【0068】
間質性肺疾患（ＩＬＤ）は、肺炎症及び線維症が病理の採集的な共通経路である障害、例えばサルコイドーシス、珪肺症、薬物反応、感染症、コラーゲン血管疾患、例えば関節リウマチ及び全身性硬化症（強皮症）を含む。肺の線維性障害は、例えば肺線維症、特発性肺線維症（ＩＰＦ）、通常の間質性肺炎（ＵＩＰ）、間質性肺疾患、原因不明の線維化肺胞炎（ＣＦＡ）、閉塞性細気管支炎、及び気管支拡張症を含む。
【0069】
特発性肺線維症（ＩＰＦ）は、ＩＬＤの最も一般的なタイプであり、そして原因は分かっていない。
【0070】
肝硬変はＩＬＤと同様の原因があり、そして例えば、ウイルス性肝炎、住血吸虫症及び慢性アルコール中毒に関連した肝硬変を含む。
【0071】
腎臓病は、腎臓を損傷し、そして瘢痕化させ、進行性の機能喪失及びまた高血圧症を引起す糖尿病に関連している可能性がある。腎線維症は、慢性腎疾患（ＣＫＤ）から末期腎疾患（ＥＳＲＤ）まで、腎疾患のいずれの段階でも発生する可能性がある。腎線維症は、線維性応答を促進する腎機能に対して多大な負担をかける、高血圧又は糖尿病などの心血管疾患の結果として発症する可能性がある。しかしながら、腎線維症はまた、特発性（既知の原因はない）であり、そして特定の遺伝的ミトコンドリア病もまた、腎線維症の症状及び関連する症状を示している。
【0072】
心臓病は、心臓のポンピングする能力を損なう可能性がある瘢痕組織をもたらす。目の疾患は、例えば黄斑変性症、及び視力を損なう可能性ある網膜及び硝子体網膜症を含む。
【0073】
好ましい実施形態によれば、本発明は、特発性肺線維症（ＩＰＦ）の治療に関する。
【0074】
別の好ましい実施形態によれば、本発明は、腎線維症の治療に関する。
【0075】
本発明の全ての側面の別の好ましい実施形態によれば、障害又は状態は、ＵＳＰ３０の阻害が有益な効果をもたらすことが知られているか、又は示され得るものである。
【0076】
より好ましい実施形態によれば、ＵＳＰ３０活性から恩恵を受ける障害又は状態は、癌及びミトコンドリア機能障害から選択される。好ましい癌は、例えば以下を含む：乳房、卵巣、前立腺、肺、腎臓、胃、結腸、精巣、頭頸部、膵臓、脳、黒色腫、骨又は組織器官の他の癌、及び血液細胞の癌、例えばリンパ腫及び白血病、多発性骨髄腫、結腸直腸癌、及び非小細胞肺癌。
【0077】
ミトコンドリア機能障害を伴う状態は、マイトファジー欠損を含む状態、ミトコンドリアＤＮＡにおける突然変異を含む状態、ミトコンドリア酸化ストレスを含む状態、ミトコンドリア膜電位の欠陥を含む状態、ミトコンドリア生合成、ミトコンドリア形状又は形態の欠陥を含む状態及びリソソーム蓄積障害を含む状態から選択され得る。
【0078】
特に、ミトコンドリア機能不全を含む状態は、以下から選択され得る：多発性硬化症（ＭＳ）、ミトコンドリアミオパチー、脳症、乳酸アシドーシス、及び脳卒中様エピソード（ＭＥＬＡＳ）症候群; レーバーの遺伝性視神経障害（ＬＨＯＮ）;癌、 神経障害、運動失調、網膜色素変性症-母性遺伝リー症候群（ＮＡＲＰ－ＭＩＬＳ）; ダノン病; 糖尿病; 糖尿病性腎症; 代謝障害; 心不全; 心筋梗塞につながる虚血性心疾患; 精神疾患、統合失調症、例えば精神疾患; 多重スルファターゼ欠損症（ＭＳＤ）; ムコリピドーシスII（ＭＬ II）; ムコリピドーシスIII（ＭＬ III）; ムコリピドーシスＩＶ（ＭＬ ＩＶ）; ＧＭ１－ガングリオシドーシス（ＧＭ１）; 神経セロイドリポフスチン症（ＮＣＬ１）; アルパース病; バース症候群; ベータ酸化欠陥; カルニチン－アシル－カルニチン欠乏症；カルニチン欠乏症; クレアチン欠乏症候群; 補酵素Ｑ１０欠乏症；複合体I欠乏; 複合体IIの欠乏; 複合体III欠乏; 複合体IV欠乏; 複合体V欠乏; ＣＯＸ欠乏; 慢性進行性外眼筋麻痺症候群（ＣＰＥＯ）; ＣＰＴ Ｉ欠乏; ＣＰＴ II欠乏; グルタル酸尿症II型; カーンズ・セイヤー症候群; 乳酸アシドーシス; 長鎖アシルＣｏＡデヒドロゲナーゼ欠損症（ＬＣＨＡＤ）; リー病又は症候群; 致死性乳児心筋症（ＬＩＣ）; かさ病; グルタル酸尿症II型; 中鎖アシルＣｏＡデヒドロゲナーゼ欠損症（ＭＣＡＤ）; ミオクローヌス癲癇及びラグレッドファイバー（ＭＥＲＲＦ）症候群; ミトコンドリア細胞変性; ミトコンドリア劣性運動失調症候群; ミトコンドリアＤＮＡ枯渇症候群; 筋尿腸疾患及び脳症; ピアソン症候群; ピルビン酸デヒドロゲナーゼ欠乏; ピルビン酸カルボキシラーゼ欠乏; ＰＯＬＧ突然変異; 中/短鎖３－ヒドロキシアシル－ＣｏＡデヒドロゲナーゼ（Ｍ / ＳＣＨＡＤ）欠損; 及び、非常に長鎖のアシルＣｏＡデヒドロゲナーゼ（ＶＬＣＡＤ）欠乏。
【0079】
ミトコンドリア機能障害を含む状態は、ＣＮＳ障害、ＣＮＳ障害、例えば神経変性疾患であり得る。
【0080】
神経変性疾患は、パーキンソン病（ＰＤ）、アルツハイマー病、筋萎縮性側索硬化症（ＡＬＳ）、ハンチントン病、虚血、脳卒中、レビー小体型認知症、及び前頭側頭型認知症を含むが、但し、それらだけに限定されない。本発明の化合物は、α－シヌクレイン、パーキン及びＰＩＮＫ１の変異に関連するＰＤ、パーキンが変異している常染色体劣性若年性パーキンソン病（ＡＲ－ＪＰ）を含む（但しそれらだけには限定されない）パーキンソン病の治療において有用である。
【0081】
本明細書に記載されるような本発明の化合物又はその医薬組成物は、１又は２以上の追加の剤を含むことができる。化合物は、追加の抗腫瘍剤、例えば化学療法薬物又は他の調節タンパク質の阻害剤と組合され得る。１つの実施形態によれば、追加の抗腫瘍治療剤は、ＰＡＲＰ（ポリＡＤＰリボースポリメラーゼ）阻害剤、ＢＲＣＡ２阻害剤及びＡＴＭ阻害剤から選択される。別の実施形態によれば、ＰＡＲＰ（ポリＡＤＰリボースポリメラーゼ）阻害剤は、阻害性ＲＮＡ（ＲＮＡｉ）分子（ＰＡＲＰｉ）である。さらなる実施形態によれば、ＰＡＲＰ阻害剤は、ニパリブ（ＢＳＩ ２０１）、オラパリブ（ＡＺＤ－２２８１）、ルカパリブ（ＡＧ０１４６９９、ＰＦ－０１３６７３３８）及びベリパリブ（ＡＢＴ－８８８）、ＭＫ－４８２７、ＣＥＰ－９７２２、Ｅ７０１６（ＧＰＩ－２１０１６）、ＬＴ－６７３、ＭＰ－ １２４、ＮＭＳ－Ｐ１１８の１つ又は複数から選択され得る。さらなる実施形態によれば、追加の抗腫瘍剤は、化学療法剤である。化学療法剤は、オラパリブ、マイトマイシンＣ、シスプラチン、カルボプラチン、オキサリプラチン、電離放射線（ＩＲ）、カンプトテシン、イリノテカン、トポテカン、テモゾロミド、タキサン、５－フルオロピリミジン、ゲムシタビン、およびドキソルビシンから選択され得る。
【0082】
式（Ｉ）（式中、ｎは０であり、そして「Ａ」はハロにより任意に置換された炭素環であり；又はｎは０であり、Ｌ１は結合であり、そして基「Ａ」は非置換の飽和複素環である）で表される化合物；又は他方では、式（Ｉａ）以外の式（Ｉ）（（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、（ｉｖ）及び（ｖ））で表される化合物に関しては、以下から選択された癌に使用される：乳房、卵巣、前立腺、肺、腎臓、胃、結腸、精巣、頭頸部、膵臓、脳、黒色腫、骨又は組織器官の他の癌及び血液細胞の癌、例えばリンパ腫及び白血病、多発性骨髄腫、結腸直腸癌、および非小細胞肺癌。
【0083】
さらに、又は他方では、式（Ｉａ）以外の式（Ｉ）（（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、（ｉｖ）及び（ｖ））で表される化合物に関しては、障害又は状態は、神経変性障害、ウィルス又は細菌感染、及び代謝障害から選択され得、そして代謝障害は好ましくは、神経変性障害である。
【0084】
本発明の医薬組成物は、任意の適切に効果的な方法で、例えば錠剤、糖衣錠、粉末、エリキシル剤、シロップ、懸濁液、スプレー、吸入剤、錠剤、ロゼンジ、エマルジョン、溶液、カシェ剤、顆粒およびカプセルを含む液体製剤を含む（但しそれらだけには限定されない）任意の経口的に許容される剤形で経口投与され得る。そのような剤形は、医薬製剤の分野において公知の技法に従って調製される。スプレー又は吸入剤の形である場合、医薬組成物は、経鼻投与される。この目的のための適切な製剤は、当業者に知られている。
【0085】
本発明の医薬組成物は、注射により投与されても良く、そしてリポソーム製剤を含む注射用無菌液体製剤の形であっても良い。本発明の医薬組成物はまた、直腸投与用の座薬の形であっても良い。それらは、医薬組成物が室温で固体であり、そして活性化合物の放出を可能にするために室温で液体であるよう処方される。
【0086】
化合物の有効用量の大きさは、もちろん、治療されるべき状態の重症度の性質及び投与経路により変化するであろう。適切な投与量の選択は、医師の権限の範囲内である。毎日の用量範囲は、ヒト及び非ヒト動物の体重１ｋｇ当たり約１０μｇ～約１００ｍｇであり、そして一般的には、１用量当たり体重１ｋｇ当たり約１０μｇ～３０ｍｇであり得る。上記用量は、１日当たり１～３回投与され得る。
【0087】
さらなる側面によれば、本発明は、本発明の第２の側面に従っての式（Ｉａ）（（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、（ｉｖ）及び（ｖ））の化合物の調製方法を提供し、前記方法は、式（IIIa）のスルホンアミドを得るために、式（Ｖ）（式中、ＰＧは保護基、例えばＢＯＣ又はＣＢＺでアル）のアミンと、式（ＩＶ）の化合物とを反応させることを含む。さらに、式（IIIa）の１つの化合物は、ブロモ－アリール又はブロモ－ヘテロアリール基のＳｕｚｕｋｉカップを介して、式（IIIa）の別の化合物に転換され得る。スルホンアミド（IIIa）は、標準方法を用いて保護解除され、アミン（IIa）が得られ、これは次に、臭化シアンと反応せしめられ、式（Ｉａ）の化合物が得られる。
【化7】
【0088】
さらなる側面によれば、本発明は、式（IIa）又は（IIIa）の中間体を提供し、前記式中、ＰＧは保護基、好ましくはＢＯＣ又はＣＢＺであり、そしてｍ、ｎ、Ｒ１、Ｒ２、Ｌ１、Ｌ２及び基「Ａ」及び基「Ｂ」は、式（Ｉａ）（（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、（ｉｖ）及び（ｖ））の化合物、その互変異性体、又は前記化合物又は互変異性体について本明細書において定義去る通りである。
【0089】
さらなる側面によれば、本発明は、本発明の第３の側面に従っての式（Ｉｂ）の化合物の調製方法を提供し、前記方法は、式（IIIｂ）のスルホンアミドを得るために、式（ＶＩ）のアミンと、式（ＶII）（式中、ＰＧは保護基、例えばＢＯＣ又はＣＢＺである）の化合物とを反応させることを含む。さらに、式（IIIｂ）の１つの化合物は、ブロモ－アリール又はブロモ－ヘテロアリール基のＳｕｚｕｋｉカップリングを介して、式（IIIｂ）の別の化合物に転換され得る。スルホンアミド（IIIｂ）は、標準方法を用いて保護解除され、アミン（IIｂ）が得られ、次にこれは、臭化シアンと反応せしめられ、式（Ｉｂ）の化合物が得られる。
【化8】
【0090】
さらなる側面によれば、本発明は、式（IIｂ）又は（IIIｂ）の中間体を提供し、前記式中、ＰＧは保護基、好ましくはＢＯＣ又はＣＢＺであり、そしてｍ、ｎ、Ｒ１、Ｒ２、Ｌ１、Ｌ２及び基「Ａ」及び基「Ｂ」は、式（Ｉｂ）（（ｉ）、（ｉｉ）、（ｉｉｉ）、（ｉｖ）及び（ｖ））の化合物、その互変異性体、又は前記化合物又は互変異性体について本明細書において定義去る通りである。
【0091】
式（Ｉ）の化合物の医薬的に許容できる塩は、その酸付加塩及び塩基付加塩（二塩を含む）を含む。
【0092】
適切な酸付加塩は、非毒性塩を形成する酸から形成される。
【0093】
例としては、以下を含む：酢酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベシル酸塩、重炭酸塩/炭酸塩、重硫酸塩、カムシル酸塩、クエン酸塩、エジシル酸塩、エシル酸塩、フマル酸塩、グルセプト酸塩、グルコン酸塩、グルクロン酸、ヒベン酸塩、塩酸塩/塩化物、臭化水素酸塩/臭化物、ヨウ化水素酸塩/ヨウ化物、リン酸水素塩、Ｄ 及びＬ－乳酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メシル酸塩、メチル硫酸塩、２－ナプチル酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オロチン酸塩、パルミチン酸塩、リン酸塩、サッカリン酸塩、ステアリン酸塩、コハク酸塩、Ｄ－及びＬ－酒石酸塩、及びトシレート塩。
【0094】
適切な塩基塩は、非毒性塩を形成する塩基から形成される。例としては、以下を含む：アルミニウム、アンモニウム、アルギニン、ベンザチン、カルシウム、コリン、ジエチルアミン、ジオラミン、グリシン、リジン、マグネシウム、メグルミン、オラミン、カリウム、ナトリウム、トロメタミン及び亜鉛塩。
【0095】
適切な塩についての再考については、Stahl and Wermuth, Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use, Wiley-VCH, Weinheim, Germany (2002)を参照のこと。
【0096】
式（Ｉ）の化合物の医薬的に許容できる塩は、式（Ｉ）の化合物の溶液と、必要に応じて所望の酸又は塩基を一緒に混合することにより、容易に調製され得る。塩は溶液から沈殿し、そして濾過により集められるか、又は溶媒の蒸発により回収され得る。
【0097】
本発明による医薬的に許容できる溶媒和物は、結晶化の溶媒が同位体置換され得る水和物及び溶媒和物、例えばＤ２Ｏ、アセトン－ｄ６、ＤＭＳＯ－ｄ６を含む。
【0098】
また、本発明の範囲内には、前述の溶媒和物とは対照的に、薬物及び宿主が非化学量論量で存在する、クラストレート、すなわち薬物－宿主包接複合体がある。そのような複合体の再考については、J.Pharm Sci, 64 (8), 1269-1288 by Haleblian (August 1975)を参照のこと。
【0099】
以下、式（Ｉ）の化合物への全ての言及は、その塩、及び式（Ｉ）の化合物及びその塩の溶媒和物及び包接化合物を言及する。
【0100】
本発明は、上記で定義されたような式（Ｉ）の化合物の全ての多形体を含む。
【0101】
また、式（Ｉ）の化合物のいわゆる「プロドラッグ」も本発明の範囲内にある。従って、それ自体ほとんどか又は全く薬理学的活性を有さない式（Ｉ）の化合物の特定の誘導体は、体内又は体上への投与に基いて代謝される場合、所望の活性を有する式（Ｉ）の化合物を生じさせる。そのような誘導体は、「プロドラッグ」と呼ばれる。
【0102】
本発明のプロドラッグは、例えば式（Ｉ）の化合物に存在する適切な官能基を、例えば"Design of Prodrugs" by H Bundgaard (Elsevier, 1985)に記載されるような「プロ成分」として当業者に知られている特定成分により置換することにより生成され得る。
【0103】
最終的に、式（Ｉ）の特定の化合物は、それ自体、式（Ｉ）の他の化合物として作用することができる。
【0104】
窒素原子を含む式（Ｉ）の化合物の特定の誘導体は、その対応するＮ－オキシドを形成することができ、そしてそのような化合物もまた、本発明の範囲内である。
【0105】
１又は２以上の不斉炭素原子を含む式（Ｉ）の化合物は、複数の光学異性体として存在し得る。式（Ｉ）の化合物がアルケニル又はアルケニレン基を含む場合、幾何学的シス／トランス（又はＺ／Ｅ）異性体が可能であり、そして化合物が例えばケト又はオキシム基を含む場合、互変異性異性（互変異性）が発生する可能性がある。単一の化合物が、複数のタイプの異性を示す場合がある。
【0106】
複数タイプの異性を示す化合物、及びその１又は２以上の混合物を含む、式（Ｉ）の化合物の全ての光学異性体、幾何学的異性体及び互変異性形は、本発明の範囲内に含まれる。
【0107】
シス／トランス異性体は、当業者に周知の従来の技法、例えば分別結晶化及びクロマトグラフィーにより分離され得る。
【0108】
個々の立体異性体の調製／単離のための従来の技法は、適切な光学的に純粋な前駆体の変換、例えばキラルＨＰＬＣを用いてのラセミ体（又は塩又は誘導体のラセミ体）の分割、又はラセミ体と適切な光学的活性酸又は塩基、例えば酒石酸との反応により形成されるジアステレオマー塩の分別結晶化を含む。
【0109】
本発明はまた、式（Ｉ）の化合物の医薬的に許容できる全ての同位体変形を含む。同位体変形とは、少なくとも１つの原子が同じ原子番号を有するが、しかし自然界で通常見出される原子質量とは異なる原子質量を有する原子により置換されているものとして定義される。
【0110】
本発明の化合物に含めるのに適切な同位体の例は、水素の同位体、例えば２Ｈ及び３Ｈ、炭素の同位体、例えば１３Ｃ及び１４Ｃ、窒素の同位体、例えば１５Ｎ、酸素の同位体、例えば１７Ｏ及び１８Ｏ、リンの同位体、例えば３２Ｐ、硫黄の同位体、例えば３５Ｓ、弗素の同位体、例えば１８Ｆ及び塩素の同位体、例えば３６Ｃｌを含む。
【0111】
本発明の化合物の同位体、例えば重水素による置換は、高い代謝安定性、例えば高められたインビボ半減期、又は低められた用量必要条件に起因する特定の治療上の利点を付与し、そして従って、いくつかの状況下では好ましい。
【0112】
式（Ｉ）の化合物の特定の同位体変形、例えば放射性同位体を組込むそれらの変形は、薬物及び／又は基質組織分布研究において有用である。放射性同位体トリチウム及び１４Ｃは、それらの組込みの容易性及び検出の容易な手段の観点からこの目的のために特に有用である。
【0113】
式（Ｉ）の化合物の同位体変形は一般的に、当業者に知られている従来の技法により、又は適切な試薬の適切な同位体変形を用いる付随する実施例及び調製に記載される方法に類似する方法により調製され得る。
【発明を実施するための形態】
【0114】
合成方法論
式（Ｉ）の化合物は、国際公開第０１/７７０７３号、第２００９/０２６１９７号、第２００９/１２９３６５号、第２００９/１２９３７０号及び 第２００９/１２９３７１号に記載される一般的な知識及び手順を用いて当業者により調製され得る。
式（Ｉ）の化合物は、国際公開第０１/７７０７３号、第２００９/０２６１９７号、第２００９/１２９３６５号、第２００９/１２９３７０号及び 第２００９/１２９３７１号に記載される一般的な知識及び手順を用いて当業者により調製され得る。
【0115】
式（Ｉ）の化合物はまた、下記のようにして調製され得る。必要に応じて、スキーム内の個々の変換は異なる順序で完結され得る。以下のスキームは、一般的な合成方法を記載し、それにより、本発明の中間体及び標的化合物が調製され得る。追加の代表的化合物及びその立体異性体、ラセミ混合物、ジアステレオマー及び鏡像異性体は、一般的なスキームに従って調製された中間体及び当業者に知られている試薬を用いて合成され得る。鏡像異性体は、標準技法、例えばキラルＨＰＬＣを用いて、例えばカラムＣＨＩＲＡＬＡＲＴ ＳＡ ２５０ｘ４．６mm ５ μｍを用いて分離され得る。
【0116】
全ての化合物は、液体クロマトグラフィー－質量分析（ＬＣＭＳ）又は１Ｈ ＮＭＲ、又は両方により特徴付けられた。
【0117】
略語：
ＢＯＣ tert-ブチルオキシカルボニル
ＣＡＳ Chemical Abstractsサービス
d ダブレット（NMRシグナル）
ＤＣＭ ジクロロメタン
ＤＩＰＥＡ ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＡ ジメチルアセトアミド
ＤＭＦ Ｎ、Ｎ－ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ ジメチルスルホキシド
dppf １，１'－ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン
ＥＤＣ １－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド
ＥＳ エレクトロスプレー
ＥｔＯＡｃ 酢酸エチル
Ｆｍｏｃ フルオレニルメチルオキシカルボニル
Fmoc-OSu ９－フルオレニルメチルN-スクシンイミジルカーボネート
ｈ 時間
ＨＡＴＵ １－ [ビス（ジメチルアミノ）メチレン] －１Ｈ－１,２,３－トリア
ゾロ[4，５－ｂ]ピリジニウム３－オキシドヘキサフルオロホスフェート
ＨＯＢｔ １－ヒドロキシベンゾトリアゾール
ＨＰＬＣ 高速液体クロマトグラフィー
ＩＰＡ イソプロピルアルコール
ＬＣＭＳ 液体クロマトグラフィー質量スペクトル
ｍ マルチプレット（NMRシグナル）
ＭｅＣＮ アセトニトリル
ＭＳ マススペクトル
min 分
rt 室温
ＲＴ 保持時間
s シングレット（ＮＭＲシグナル）
ＳＦＣ 超臨界流体クロマトグラフィー
Ｔ３Ｐ ２，４，６－トリプロピル－１,３,５,２,４,６－トリオキサトリホ
スホリナン－２,４,６－三酸化物
ＴＥＡ トリエチルアミン
ＴＦＡ トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ テトラヒドロフラン
ｗ/ｖ 体積当たりの重量
ＢＯＣ tert-ブチルオキシカルボニル
ＣＡＳ Chemical Abstractsサービス
d ダブレット（NMRシグナル）
ＤＣＭ ジクロロメタン
ＤＩＰＥＡ ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＡ ジメチルアセトアミド
ＤＭＦ Ｎ、Ｎ－ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ ジメチルスルホキシド
dppf １，１'－ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン
ＥＤＣ １－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド
ＥＳ エレクトロスプレー
ＥｔＯＡｃ 酢酸エチル
Ｆｍｏｃ フルオレニルメチルオキシカルボニル
Fmoc-OSu ９－フルオレニルメチルN-スクシンイミジルカーボネート
ｈ 時間
ＨＡＴＵ １－ [ビス（ジメチルアミノ）メチレン] －１Ｈ－１,２,３－トリア
ゾロ[4，５－ｂ]ピリジニウム３－オキシドヘキサフルオロホスフェート
ＨＯＢｔ １－ヒドロキシベンゾトリアゾール
ＨＰＬＣ 高速液体クロマトグラフィー
ＩＰＡ イソプロピルアルコール
ＬＣＭＳ 液体クロマトグラフィー質量スペクトル
ｍ マルチプレット（NMRシグナル）
ＭｅＣＮ アセトニトリル
ＭＳ マススペクトル
min 分
rt 室温
ＲＴ 保持時間
s シングレット（ＮＭＲシグナル）
ＳＦＣ 超臨界流体クロマトグラフィー
Ｔ３Ｐ ２，４，６－トリプロピル－１,３,５,２,４,６－トリオキサトリホ
スホリナン－２,４,６－三酸化物
ＴＥＡ トリエチルアミン
ＴＦＡ トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ テトラヒドロフラン
ｗ/ｖ 体積当たりの重量
【0118】
分析方法ＬＣＭＳ
【表1】
【0119】
【表2】
【0120】
【表3】
【0121】
【表4】
【0122】
【表5】
【0123】
【表6】
【0124】
一般方法Ａ
ａ．トリエチルアミン、ＤＣＭ、０℃ －ｒｔ、４８ｈ; ｂ. ＴＦＡ、ＤＣＭ又は ６Ｎ ＨＣｌ、ＭｅＯＨ、１００℃、１６ｈ; ｃ. ＣＮＢｒ、ＮａＨＣＯ３、ＤＭＦ、０℃－ｒｔ、２ｈ。
【化9】
【0125】
一般方法Ｂ
ａ．ＴＦＡオリエチルアミン、ＤＣＭ、ｒｔ、３０ 分; b. ＲＢ（ＯＨ）２、ＰｄＣｌ２（ＰＰｈ３）２、ＮａＣＯ３、ＤＭＦ、１００℃、３ｈ 又は Ｒ (アミン)、ＮａＯｔＢｕ、Ｐｄ２ｄｂａ３、２－(ジシクロヘキシルホスフィノ) ビフェニル、トルエン、８０℃、２ｈ; c.ＴＦＡ、ＤＣＭ、ｒｔ、２ｈ; d. ＣＮＢｒ、Ｋ２ＣＯ３、ＴＨＦ、ｒｔ、１ ｈ。
【化10】
【0126】
一般方法Ｃ
ａ．Ｆｍｏｃ－ＯＳｕ; b. ＨＣｌ、ジオキサン; c. ＣＮＢｒ、ＮａＨＣＯ３; d. ピペリジン; e. ＲＳＯ２Ｃｌ、ジエチルアミン、ＤＣＭ。
【化11】
【0127】
一般方法Ｄ
ａ．Ｒ’Ｒ”ＮＨ、トリエチルアミン、ＤＣＭ; b. ＴＦＡ, ＤＣＭ; c. ＣＮＢｒ、ＮａＨＣＯ３。
【化12】
【実施例】
【0128】
表１における化合物を、一般方法Ａに従って合成した。
【化13】
【0129】
【表7-1】
【表7-2】
【0130】
表２における化合物を、一般方法Ｂに従って合成した。
【化14】
【0131】
【表8-1】
【表8-2】
【0132】
表３における化合物を、一般方法Ｃに従って合成した。
【化15】
【0133】
【表9】
【0134】
実施例２０：（Ｒ）－Ｎ－（1－シアノピロリジン－3－イル）－Ｎ－メチル－4－（ピリジン－3－イル）ベンゼンスルホンアミド
【化16】
【0135】
工程１：tert-ブチル（Ｒ）－３－（（４－ブロモ－Ｎ－メチルフェニル）スルホンアミド）ピロリジン－1－カルボキシレート
【化17】
【0136】
ＴＨＦ中、ｔｅｒｔ－ブチル（Ｒ）－３－（メチルアミオ）ピロリジン－１－カルボキシレート（ＣＡＳ番号１９９３３６－８３－９、Ｃａｍｂｉ Ｂｌｏｃｋから入手できる）（０．５００ｇ、２．５０ｍモル）の攪拌溶液に、窒素下で０℃でＴＥＡ（０．７５６ｇ、７．４９ｍモル）を添加し、そして同じ温度で１０分間、攪拌した。ＴＨＦ（１ｍｌ）中、４－ブロモベンゼンスルホニルクロリド（ＣＡＳ 番号 ９８－５８－８、Ｃｏｍｂｉ－ｂｌｏｃｋｓから入手できる）（０．６３６ ｇ、２．５０ ｍモル）の溶液、０℃で反応混合物にゆっくり添加した。反応混合物を、室温で１時間、攪拌した。得られる反応混合物を、水（３０ｍｌ）により希釈し、そしてＥｔＯＡｃ（３×２０ｍｌ）により抽出した。組合わされた有機相を、無水硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮し、tert-ブチル（Ｒ）－３－（（４－ブロモ－Ｎ－メチルフェニル）スルホンアミド）－ピロリジン－１－カルボキシレート［１．００ｇ、９５．５％（粗）］。ＬＣＭＳ: 方法 Ｃ、２．４２７ 分、ＭＳ: ＥＳ＋３６３．１、３６５．１ （Ｍ－５６）。
【0137】
工程２：tert-ブチル（Ｒ）－３－（（Ｎ－メチル－４－（ピリジン－３－イル）フェニル）スルホンアミド）ピロリジン－１－カルボキシレート
【化18】
【0138】
ＤＭＦ－水（３：２；５ｍｌ）中、tert-ブチル（Ｒ）－３－（（４－ブロモ－Ｎ－メチルフェニル）スルホンアミド）ピロリジン－1－カルボキシレート（１．０ｇ、２．３９ｍモル）及びピリジン－３－ボロン酸（ＣＡＳ番号１６９２－２５－７、ｃｏｍｂｉ－Ｂｌｏｃｋｓから入手できる）の混合物に、Ｎ２ＣＯ３（０．５０５ｇ、４．７７ｍモル）を添加した。得られる混合物を１５～２０分間、脱気した（反応溶液に窒素をパージすることにより）。テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（Ｏ）（０．２７５ｇ、０．２４ｍモル）を、反応溶液中に添加し、そして得られる混合物を１１０℃で１６時間、攪拌した。反応混合物を室温に冷却し、そして水（１１０ｍｌ）により希釈し、そしてＥｔＯＡｃ（３×５０ｍｌ）により抽出した。組合わされた有機抽出物を、無水硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮し、tert-ブチル（Ｒ）－３－（（Ｎ－メチル－４－（ピリジン－３－イル）フェニル）スルホンアミド）ピロリジン－１－カルボキシレート（０．５ｇ、１．１９９ｍモル）を、粗塊状物として得た。ＬＣＭＳ: 方法 Ｃ、２．０３５ 分、ＭＳ: ＥＳ＋ ４１８．３。
【0139】
工程３：（Ｒ）－Ｎ－メチル－４－（ピリジン－３－イル）－Ｎ－（ピロリジン－３－イル）ベンゼンスルホンアミドＴＦＡ塩
【化19】
【0140】
ＤＣＭ（５ｍｌ）中、（Ｒ）－３－（（Ｎ－メチル－４－（ピリジン－３－イル）フェニル）スルホンアミド）ピロリジン－１－化ルボキシレート（０．４ｇ、０．９６モル）の溶液に、０℃でＴＦＡ（１ｍｌ）を添加し、そして得られる溶液を室温で４時間、攪拌した。反応混合物を、減圧下で濃縮した。粗物をジエチルエーテル（２×１０ｍｌ）で共沸蒸留し、そして減圧下で乾燥し、（Ｒ）－Ｎ－メチル－４－（ピリジン－３－イル）－Ｎ－（ピロリジン－３－イル）ベンゼンスルホンアミドＴＦＡ塩（０．４ｇ、定量的）を得た。ＬＣＭＳ: 方法 Ｃ、１．３７７ 分、ＭＳ: ＥＳ＋ ３１８．３。
【0141】
工程４：（Ｒ）－Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－Ｎ－メチル－４－（ピリジン－３－イル）－ベンゼンスルホンアミド
ＴＨＦ（５ｍｌ）中、（Ｒ）－Ｎ－メチル－４－（ピリジン－３－イル）－Ｎ－（ピロリジン－３－イル）ベンゼンスルホンアミドＴＦＡ塩（０．４００ｇ、０．９３ｍモル）の攪拌溶液に、Ｋ２ＣＯ３（０．３８４ｇ、２．７８ｍモル）を０℃で添加した。ＣＮＢｒ（０．１１８ｇ、１．１１ｍモル）を、０℃で反応混合物中に添加した。反応混合物を、室温で１時間、攪拌した。得られる反応混合物を、水（５０ｍｌ）中に注ぎ、そしてＥｔＯＡｃ（３×５０ｍｌ）により抽出した。組合わされた有機抽出物を、硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮した。得られる残渣を、Ｃｏｍｂｉ－フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ；ＤＣＭ中、２．５％メタノールにより溶離された）により精製し、標記化合物（０．０８０ｇ、０．２３ｍモル）を得た。ＬＣＭＳ: 方法 Ｂ、３．０９６ 分、ＭＳ: ＥＳ＋ ３４３．１ [Ｍ＋１]; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm: 9.00 (d, J=2 Hz, 1H), 8.66 (dd, J=4.8, 1.2 Hz, 1H), 8.19 (dt, J=8.0, 1.6 Hz, 1H), 8.01 (d, J=8.8 Hz, 2H), 7.93 (d, J=8.4 Hz, 2H), 7.57 - 7.54 (m, 1H), 4.64-4.60 (m, 1H), 3.45 - 3.40 (m, 2H), 3.33 - 3.29 (m, 1H), 3.20 -3.15 (m, 1H), 2.72 (s, 3H), 1.88 - 1.83 (m, 1H), 1.79 - 1.73 (m, 1H)。
ＴＨＦ（５ｍｌ）中、（Ｒ）－Ｎ－メチル－４－（ピリジン－３－イル）－Ｎ－（ピロリジン－３－イル）ベンゼンスルホンアミドＴＦＡ塩（０．４００ｇ、０．９３ｍモル）の攪拌溶液に、Ｋ２ＣＯ３（０．３８４ｇ、２．７８ｍモル）を０℃で添加した。ＣＮＢｒ（０．１１８ｇ、１．１１ｍモル）を、０℃で反応混合物中に添加した。反応混合物を、室温で１時間、攪拌した。得られる反応混合物を、水（５０ｍｌ）中に注ぎ、そしてＥｔＯＡｃ（３×５０ｍｌ）により抽出した。組合わされた有機抽出物を、硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮した。得られる残渣を、Ｃｏｍｂｉ－フラッシュカラムクロマトグラフィー（シリカ；ＤＣＭ中、２．５％メタノールにより溶離された）により精製し、標記化合物（０．０８０ｇ、０．２３ｍモル）を得た。ＬＣＭＳ: 方法 Ｂ、３．０９６ 分、ＭＳ: ＥＳ＋ ３４３．１ [Ｍ＋１]; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm: 9.00 (d, J=2 Hz, 1H), 8.66 (dd, J=4.8, 1.2 Hz, 1H), 8.19 (dt, J=8.0, 1.6 Hz, 1H), 8.01 (d, J=8.8 Hz, 2H), 7.93 (d, J=8.4 Hz, 2H), 7.57 - 7.54 (m, 1H), 4.64-4.60 (m, 1H), 3.45 - 3.40 (m, 2H), 3.33 - 3.29 (m, 1H), 3.20 -3.15 (m, 1H), 2.72 (s, 3H), 1.88 - 1.83 (m, 1H), 1.79 - 1.73 (m, 1H)。
【0142】
実施例２１：（３ａＲ、６ａＲ）－１－（（４－（ピリジン－３－イル）フェニル）スルホニル）ヘキサヒドロピロロ[３，４－ｂ]ピロール－５（１Ｈ）－カルボニトリル
【化20】
【0143】
工程１：ｔｅｒｔ－ブチルｒａｃ－（３ａＲ、６ａＲ）－１－（（４－ブロモフェニル）スルホニル）ヘキサヒドロピロロ[[３，４－ｂ]ピロール－５（１Ｈ）－カルボキシレート
【化21】
【0144】
ＴＨＦ（１０ｍｌ）中、４－ブロモベンゼンスルホニルクロリド（ＣＡＳ番号９８－５８－８、Ａｌｆａ Ａｅｓａｒから入手できる）（０．２ｇ、０．７８ｍモル）及びｔｅｒｔ－ブチルｒａｃ－（３ａＳ、６ａＳ）－ヘキサヒドロピロロ［３，４－ｂ］ピロール－５（１Ｈ）－カルボキシレート（ＣＡＳ番号１８０９７５－５１－３、Ｅｎａｍｉｎｅから入手できる）（０．１６６ｇ、０．７８ｍモル）の攪拌溶液に周囲温度でＫ２ＣＯ３（０．３２４ｇ、２．３５ｍモル）を添加した。反応混合物を、室温で８時間、攪拌した。得られる反応混合物を、水（２００ｍｌ）により希釈し、そしてジエチルエーテル（３×１００ｍｌ）により抽出した。組合わされた有機抽出物を、無水硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮し、ｔｅｒｔ－ブチルｒａｃ－（３ａＲ、６ａＲ）－１－（（４－ブロモフェニル）スルホニル）ヘキサヒドロピロロ[[３，４－ｂ]ピロール－５（１Ｈ）－カルボキシレート（０．３５０ｇ、定量的）を粗塊状物として得た。ＬＣＭＳ: 方法 Ｃ、２．６６７ 分、ＭＳ: ＥＳ＋ ４４８．３ [Ｍ＋１]。
【0145】
工程２：ｔｅｒｔ－ブチル（３ａＲ、６ａＲ）－１－（（４－（ピリジン－３－イル）フェニル）スルホニル）ヘキサヒドロピロロ－[３，４－ｂ]ピロール-５（１Ｈ）－カルボキシレート
【化22】
【0146】
ＤＭＦ－水（４：１；１７．５ｍｌ）中、ｔｅｒｔ－ブチルｒａｃ－（３ａＲ、６ａＲ）－１－（（４－ブロモフェニル）スルホニル）ヘキサヒドロピロロ[[３，４－ｂ]ピロール－５（１Ｈ）－カルボキシレート（０．３５０ｇ、０．８１ｍモル）、ピリジン－３－ボロン酸（ＣＡＳ番号１６９２－２５－１、Ｃｏｍｂｉｂｌｏｃｋｓから入手できる）（０．１２０ｇｍ、０．９８ｍモル）の混合物に、Ｋ２ＣＯ３（０．２２４ｇ、１．６２ｍモル）を添加した。反応混合物を、３０分間、脱気した（溶液を通して窒素をパージすることにより）。ＰｄＣｌ２（ｄｐｐｆ）（０．０６０ｇ、０．０８ｍモル）を、反応混合物中に添加し、そして得られる混合物を８０℃で２時間、攪拌した。反応混合物を室温に冷却し、飽和水性ＮａＨＣＯ３（３５０ｍｌ）により希釈し、そしてＥｔＯＡｃ（３×２００ｍｌ）により抽出した。組合わされた有機相を、硫酸ナトリウム上で乾燥し、濾過し、そして減圧下で濃縮した。得られる残渣を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ中、３％メタノールにより溶離する）により精製し、ｔｅｒｔ－ブチル（３ａＲ、６ａＲ）－１－（（４－（ピリジン－３－イル）フェニル）スルホニル）ヘキサヒドロピロロ－[３，４－ｂ]ピロール-５（１Ｈ）－カルボキシレート（０．３５０ｇ、０．８２ｍモル）を得た。ＬＣＭＳ: 方法Ｃ、２．１６０ 分、ＭＳ: ＥＳ＋４３０．５。
【0147】
工程３：ｒａｃ－（３ａＲ、６ａＲ）－１－（（４－（ピリジン－３－イル）フェニル）スルホニル）オクタヒドロピロロ[３，４－ｂ]ピロールＴＦＡ塩
【化23】
【0148】
ＤＣＭ（２０ｍｌ）中、ｔｅｒｔ－ブチル（３ａＲ、６ａＲ）－１－（（４－（ピリジン－３－イル）フェニル）スルホニル）ヘキサヒドロピロロ－[３，４－ｂ]ピロール-５（１Ｈ）－カルボキシレート（０．３５０ｇ、０．８２ｍモル）の攪拌溶液に、０℃でＴＦＡ（２ｍｌ）を添加した。反応混合物を、室温で２時間、攪拌した。反応混合物を減圧下で濃縮した。粗残渣をジエチルエーテル（３×１０ｍｌ）により、さらに共沸蒸留し、そして減圧下で乾燥し、ｒａｃ－（３ａＲ、６ａＲ）－１－（（４－（ピリジン－３－イル）フェニル）スルホニル）オクタヒドロピロロ[３，４－ｂ]ピロールＴＦＡ塩（０．２１０ｇ、定量的）を、粗塊状物として得た。ＬＣＭＳ: 方法Ｃ、１．４７２ 分、ＭＳ: ＥＳ＋３３０．２９。
【0149】
工程４：（３ａＲ、６ａＲ）－１－（（４－（ピリジン－３－イル）フェニル）スルホニル）ヘキサヒドロピロロ[３，４－ｂ]ピロール－５（１Ｈ）－カルボニトリル
【化24】
【0150】
ＴＨＦ（２０ｍｌ）中、ｒａｃ－（３ａＲ、６ａＲ）－１－（（４－（ピリジン－３－イル）フェニル）スルホニル）オクタヒドロピロロ[３，４－ｂ]ピロールＴＦＡ塩（０．２００ｇ、０．４５モル）の攪拌溶液に、Ｋ２ＣＯ３（０．３３３ｇ、２．４１ｍモル）を０℃、続いてＣＮＢｒ（０．０５１ｇ、０．４８ｍモル）を同じ温度で添加した。反応混合物を室温で１時間、攪拌した。得られる反応混合物を減圧下で濃縮し、そして得られる残渣を、フラッシュカラムクロマトグラフィー（ＤＣＭ中、３．０％メタノールにより溶離する）により精製し、標記化合物（０．１５０ｇ、０．４２３ｍモル）を得た。ＬＣＭＳ: 方法Ａ、３．６９８ 分、ＭＳ: ＥＳ＋３５４．９ [Ｍ＋１]；1H NMR (400 MHz, DMSO-D6): 8.96 (d, J = 2Hz, 1 H), 8.65 - 8.64 (m, 1 H), 8.19 - 8.17 (m, 1 H), 8.02 (d, J, 8.4 Hz, 2 H), 7.95 (d, J = 8.8 Hz, 2 H), 7.54 - 7.57 (m, 1 H), 4.05 - 4.01 (m, 1 H), 3.58 (d, J=7.2Hz, 2 H), 3.56 - 3.48 (m, 1 H), 3.41 - 3.28 (m, 1 H), 3.35 (dd, J = 10.0 & 6.0 Hz, 1 H), 3.18 - 3.14 (m, 1 H), 1.74 - 1.62 (m, 1 H), 1.65 - 1.71 (m, 2 H)。
【0151】
実施例２２:ｒａｃ－（４ａＲ、７ａＲ）－４－トシルヘキサヒドロピロロ[３，４－ｂ] [１，４]オキサジン－６（２Ｈ）－カルボニトリル
【化25】
【0152】
標記化合物を、工程ａにおけるピロロ［３，４－ｂ］－１，４－オキサジン－６（２Ｈ）－カルボン酸、ヘキサヒドロ－１，１－ジメチルエチルエステル、（４ａＲ、７ａＳ）を用いて、一般方法Ａにより合成した。ＬＣＭＳ: 方法Ｄ、２．５９１ 分、ＭＳ: ＥＳ＋３４５．１ [Ｍ＋１]。
【0153】
実施例２３：ｒａｃ－（４ａＲ、７ａＳ）－４－（（４－メチルベンジル）スルホニル）ヘキサヒドロピロロ[３，４－ｂ] [１，４]オキサジン－６（２Ｈ）－カルボニトリル
【化26】
【0154】
標記化合物を、工程ａにおけるピロロ［３，４－ｂ］－１，４－オキサジン－６（２Ｈ）－カルボン酸、ヘキサヒドロ－１，１－ジメチルエチルエステル、（４ａＲ、７ａＳ）を用いて、一般方法Ａにより合成した。ＬＣＭＳ: 方法Ｄ、２．５９１ 分、ＭＳ: ＥＳ＋３２２．４ [Ｍ＋１]。
【0155】
実施例２４：Ｎ－（５－（Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）スルファモイル）ピリジン－２－イル）－１－メチル－１Ｈ－ピラゾール－５－カルボキサミド
【化27】
【0156】
工程１：ピリジン－２－アミンを、クロロスルホン酸において１５０℃に加熱し、６－アミノピリジン－３－スルホニルクロリドを得、この祖生成物を次の反応に使用した。
【0157】
工程２：６－アミノピリジン－３－スルホニルクロリドを、一般方法Ａ、工程ａを用いて、ｔｅｒｔ－ブチル－３－アミノピロリジン－１－カルボキシレートに添加し、ｔ－ブチル３－（（６－アミノピリジン）－３－スルホンアミド）ピロリジン－１－カルボキシレートを得た。
【0158】
工程３：ｔ－ブチル３－（（６－アミノピリジン）－３－スルホンアミド）ピロリジン-1-カルボキシレート及び１－メチル－１Ｈ－ピラゾール－５－カルボン酸を、酢酸エチル、トリエチルアミン及びＴＨＦ中、５０％Ｔ３Ｐと共に３０時間、７０℃に加熱し、ｔｅｒｔ－ブチル３－（（６－（１－メチル－１Ｈ－ピラゾール－５－カルボキサミド）ピリジン）－３－スルホンアミド）ピロリジン－１－カルボキシレートを得た。
【0159】
工程４：標記化合物を、一般方法Ａ、工程ｂ－ｃの手順に従って合成した。ＬＣＭＳ: 方法Ｂ、２．９９８ 分、ＭＳ: ＥＳ＋３７６．１３ [Ｍ＋１]；1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.32 (s, 1 H), 8.77 (d, J = 2.4Hz, 1 H), 8.37 (d, J = 8.4Hz, 1 H), 8.24 - 8.26 (m, 2 H), 7.55 (d, J = 2 Hz, 1 H), 7.34 (d, J = 2 Hz, 1 H), 4.1 (s, 3 H), 3.78 - 3.82 (m, 1 H), 3.31 - 3.46 (m, 3 H), 3.09 - 3.12 (m,1 H), 1.88 -1.99 (m, 1 H),1.66 - 1.74 (m,1 H)。
【0160】
実施例２５：Ｎ－（１－シアノピロリジン－３－イル）－Ｎ－メチル－４－（（５－（トリフルオロメチル）ピリジン－２－イル）オキシ）ベンゼンスルホンアミド
【化28】
【0161】
標記化合物を、工程ａにおけるｔｅｒｔ－ブチル３－（メチルアミノ）ピロリジン－１－カルボキシレートを用いて、一般方法Ｃにより合成した。ＬＣＭＳ: 方法Ｄ、３．０４６ 分、ＭＳ: ＥＳ＋４２７．２ [Ｍ＋１]。
【0162】
表４における化合物を、一般方法Ｄに従って合成した。
【化29】
【0163】
【表10】
【0164】
本発明の化合物生物学的活性
略語：
ＴＡＭＲＡ カルボキシテトラメチルローダミン
ＰＣＲ ポリメラーゼ連鎖反応
ＰＢＳ リン酸緩衝生理食塩水
ＥＤＴＡ エチレンジアミン四酢酸
Ｔｒｉｓ ２－アミノ－２－（ヒドロキシメチル）－１,３－プロパンジオール
ＮＰ－４０ Nonidet P-40、オクチルフェノキシポリエトキシエタノール
ＢＳＡ ウシ血清アルブミン
ＰＮＳ 末梢神経系
ＢＨ３ Ｂｃｌ－２相同性ドメイン３
ＰＴＥＮ ホスファターゼとテンシンホモログ
略語：
ＴＡＭＲＡ カルボキシテトラメチルローダミン
ＰＣＲ ポリメラーゼ連鎖反応
ＰＢＳ リン酸緩衝生理食塩水
ＥＤＴＡ エチレンジアミン四酢酸
Ｔｒｉｓ ２－アミノ－２－（ヒドロキシメチル）－１,３－プロパンジオール
ＮＰ－４０ Nonidet P-40、オクチルフェノキシポリエトキシエタノール
ＢＳＡ ウシ血清アルブミン
ＰＮＳ 末梢神経系
ＢＨ３ Ｂｃｌ－２相同性ドメイン３
ＰＴＥＮ ホスファターゼとテンシンホモログ
【0165】
インビトロＵＣＨＬ１阻害アッセイ
ＵＣＨＬ１の発現及び精製
ＵＣＬ１コンストラクトを、ＰＣＲ増幅し、そしてＮ末端ＦＬＡＧ標識を有するｐＦＬＡＧ－ＣＭＶ－６ａベクター（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ）にクローニングした。ＨＥＫ２９３Ｔ細胞を、ＴｒａｎｓＩＴ－ＬＴ１トランスフェクション試薬（Ｍｉｒｕｓ）を用いて、その製造業者の説明書に従って、ＦＬＡＧ－ＵＣＨＬ１によりトランスフェクトした。細胞を、トランスフェクションの４０時間後、収穫した。細胞をＰＢＳにより１度、洗浄し、そして溶解緩衝液（５０ｍＭの Ｔｒｉｓ、ｐＨ ７．５、１５０ｍＭ のＮａＣｌ、３ｍＭの ＥＤＴＡ、０．５%ＮＰ４０、１０%グリセロール、５ｍＭのベータメルカプトエタノール、プロテアーゼ阻害剤（complete mini, Roche）及びホスファターゼ阻害剤（PhosSTOP mini、Roche））中に掻き取った。溶解物を氷上で３０分間インキュベートし、そして４℃で１０分間、１２００ｒｐｍで遠心分離した。可溶性上清液を、低塩緩衝液（２０ｍＭの Ｔｒｉｓ、ｐＨ ７．５、１５０ｍＭ のＮａＣｌ、０．５ｍＭ のＥＤＴＡ、５ｍＭのベータメルカプトエタノール）において平衡化されたＦＬＡＧ親和性樹脂（EZview Rad ANTI-FLAG M2 親和性ゲル、 Sigma-Aldrich）に添加し、そして４℃で時間、回転下でインキュベートした。樹脂を２０００ｒｐｍで２時間、回転し、そして上清液を除いた。樹脂を、低塩緩衝液により２度、及び高塩緩衝液（２０ｍＭの Ｔｒｉｓ、ｐＨ ７．５、５００ｍＭ のＮａＣｌ、０．５ｍＭ のＥＤＴＡ、５ｍＭのベータメルカプトエタノール、プロテアーゼ阻害剤（complete mini, Roche）及びホスファターゼ阻害剤（PhosSTOP mini、Roche））により１度、洗浄した。結合されたＵＣＨＬ１を溶出するために、溶出緩衝液（１０ｍＭの Ｔｒｉｓ、ｐＨ ７．５、１５０ｍＭ のＮａＣｌ、０．５ｍＭ のＥＤＴＡ、１０%グリセロール、０．５%ＮＰ４０、５ｍＭのベータメルカプトエタノール、０．１５mg/ｍｌの ３ｘ ＦＬＡＧペプチド(Sigma-Aldrich)）を、樹脂に添加し、そして４℃で２．５時間、回転しながらインキュベートした。樹脂を４０００ｒｐｍで３０秒間、遠心分離し、そして精製されたＦＬＡＧ－ＵＣＨＬ１を含む上清液を除き、そして－８０℃で貯蔵した。
ＵＣＨＬ１の発現及び精製
ＵＣＬ１コンストラクトを、ＰＣＲ増幅し、そしてＮ末端ＦＬＡＧ標識を有するｐＦＬＡＧ－ＣＭＶ－６ａベクター（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ）にクローニングした。ＨＥＫ２９３Ｔ細胞を、ＴｒａｎｓＩＴ－ＬＴ１トランスフェクション試薬（Ｍｉｒｕｓ）を用いて、その製造業者の説明書に従って、ＦＬＡＧ－ＵＣＨＬ１によりトランスフェクトした。細胞を、トランスフェクションの４０時間後、収穫した。細胞をＰＢＳにより１度、洗浄し、そして溶解緩衝液（５０ｍＭの Ｔｒｉｓ、ｐＨ ７．５、１５０ｍＭ のＮａＣｌ、３ｍＭの ＥＤＴＡ、０．５%ＮＰ４０、１０%グリセロール、５ｍＭのベータメルカプトエタノール、プロテアーゼ阻害剤（complete mini, Roche）及びホスファターゼ阻害剤（PhosSTOP mini、Roche））中に掻き取った。溶解物を氷上で３０分間インキュベートし、そして４℃で１０分間、１２００ｒｐｍで遠心分離した。可溶性上清液を、低塩緩衝液（２０ｍＭの Ｔｒｉｓ、ｐＨ ７．５、１５０ｍＭ のＮａＣｌ、０．５ｍＭ のＥＤＴＡ、５ｍＭのベータメルカプトエタノール）において平衡化されたＦＬＡＧ親和性樹脂（EZview Rad ANTI-FLAG M2 親和性ゲル、 Sigma-Aldrich）に添加し、そして４℃で時間、回転下でインキュベートした。樹脂を２０００ｒｐｍで２時間、回転し、そして上清液を除いた。樹脂を、低塩緩衝液により２度、及び高塩緩衝液（２０ｍＭの Ｔｒｉｓ、ｐＨ ７．５、５００ｍＭ のＮａＣｌ、０．５ｍＭ のＥＤＴＡ、５ｍＭのベータメルカプトエタノール、プロテアーゼ阻害剤（complete mini, Roche）及びホスファターゼ阻害剤（PhosSTOP mini、Roche））により１度、洗浄した。結合されたＵＣＨＬ１を溶出するために、溶出緩衝液（１０ｍＭの Ｔｒｉｓ、ｐＨ ７．５、１５０ｍＭ のＮａＣｌ、０．５ｍＭ のＥＤＴＡ、１０%グリセロール、０．５%ＮＰ４０、５ｍＭのベータメルカプトエタノール、０．１５mg/ｍｌの ３ｘ ＦＬＡＧペプチド(Sigma-Aldrich)）を、樹脂に添加し、そして４℃で２．５時間、回転しながらインキュベートした。樹脂を４０００ｒｐｍで３０秒間、遠心分離し、そして精製されたＦＬＡＧ－ＵＣＨＬ１を含む上清液を除き、そして－８０℃で貯蔵した。
【0166】
ＵＣＨＬ１生化学的動態アッセイ
反応を、２１μｌの最終反応量で、黒い３８４ウェルプレート（小容量、Ｇｒｅｉｎｅｒ ７８４０７６）において二度反復して実施した。ＵＣＨＬ１を反応緩衝液（２０ｍＭ のＴｒｉｓ、ｐＨ ７．５、１００ｍＭの ＮａＣｌ、０．０５%Ｔｗｅｅｎ ２０、０．５mg / ｍｌ のＢＳＡ、５ｍＭのベータメルカプトエタノール）により０、０．０１、０．０５、０．１、０．５及び１μｌ／ウェルに希釈した。緩衝液を、最適温度、ｐＨ、還元剤、塩、インキュベーション時間及び洗剤のために最適化した。反応を、蛍光偏光基質としてイソペプチド結合を介してユビキチンに結合される５０ｎＭのＴＡＭＲＡ標識ペプチドの添加により開始した。反応物を室温でインキュベートし、そして２分ごとに１２０分間、読み取った。読み取りを、Ｐｈｅｒａｓｔａｒ Ｐｌｕｓ (ＢＭＧ Ｌａｂｔｅｃｈ)上で行った。λ励起５４０ｎｍ；λ放射５９０ｎｍ。
反応を、２１μｌの最終反応量で、黒い３８４ウェルプレート（小容量、Ｇｒｅｉｎｅｒ ７８４０７６）において二度反復して実施した。ＵＣＨＬ１を反応緩衝液（２０ｍＭ のＴｒｉｓ、ｐＨ ７．５、１００ｍＭの ＮａＣｌ、０．０５%Ｔｗｅｅｎ ２０、０．５mg / ｍｌ のＢＳＡ、５ｍＭのベータメルカプトエタノール）により０、０．０１、０．０５、０．１、０．５及び１μｌ／ウェルに希釈した。緩衝液を、最適温度、ｐＨ、還元剤、塩、インキュベーション時間及び洗剤のために最適化した。反応を、蛍光偏光基質としてイソペプチド結合を介してユビキチンに結合される５０ｎＭのＴＡＭＲＡ標識ペプチドの添加により開始した。反応物を室温でインキュベートし、そして２分ごとに１２０分間、読み取った。読み取りを、Ｐｈｅｒａｓｔａｒ Ｐｌｕｓ (ＢＭＧ Ｌａｂｔｅｃｈ)上で行った。λ励起５４０ｎｍ；λ放射５９０ｎｍ。
【0167】
ＵＣＨＬ１生化学ＩＣ５０アッセイ
希釈プレートを、９６ウェルポリプロピレンＶ底プレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ番号６５１２０１）において５０％ＤＭＳＯで、最終濃度の２１倍（最終濃度１００μＭで２１００μＭ）に調製した。典型的な８点希釈シリーズは、３０、１０、３、１、０．３、０．１、０．０３、０．０１μＭ最終である。反応を、２１μｌの最終反応量で、黒い３８４ウェルプレート（小容量、Ｇｒｅｉｎｅｒ ７８４０７６）において二度反復して実施した。１μｌの５０％ＤＭＳＯ又は希釈された化合物のいずれかをプレートに添加した。ＵＣＨＬ１を反応緩衝液（２０ｍＭ のＴｒｉｓ、ｐＨ ７．５、１００ｍＭの ＮａＣｌ、０．０５%Ｔｗｅｅｎ ２０、０．５mg / ｍｌ のＢＳＡ、５ｍＭのベータメルカプトエタノール）により０．０５μｌ／ウェルに希釈し、そして１０μｌの希釈されたＵＣＨＬ１を化合物に添加した。酵素及び化合物を、室温で３０分間インキュベートした。反応を、蛍光偏光基質としてイソペプチド結合を介してユビキチンに結合される５０ｎＭのＴＡＭＲＡ標識ペプチドの添加により開始した。反応物を、基質の添加の後、及び室温での２時間のインキュベーションの直後、読み取った。読み取りを、Ｐｈｅｒａｓｔａｒ Ｐｌｕｓ (ＢＭＧ Ｌａｂｔｅｃｈ)上で行った。λ励起５４０ｎｍ；λ放射５９０ｎｍ。
希釈プレートを、９６ウェルポリプロピレンＶ底プレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ番号６５１２０１）において５０％ＤＭＳＯで、最終濃度の２１倍（最終濃度１００μＭで２１００μＭ）に調製した。典型的な８点希釈シリーズは、３０、１０、３、１、０．３、０．１、０．０３、０．０１μＭ最終である。反応を、２１μｌの最終反応量で、黒い３８４ウェルプレート（小容量、Ｇｒｅｉｎｅｒ ７８４０７６）において二度反復して実施した。１μｌの５０％ＤＭＳＯ又は希釈された化合物のいずれかをプレートに添加した。ＵＣＨＬ１を反応緩衝液（２０ｍＭ のＴｒｉｓ、ｐＨ ７．５、１００ｍＭの ＮａＣｌ、０．０５%Ｔｗｅｅｎ ２０、０．５mg / ｍｌ のＢＳＡ、５ｍＭのベータメルカプトエタノール）により０．０５μｌ／ウェルに希釈し、そして１０μｌの希釈されたＵＣＨＬ１を化合物に添加した。酵素及び化合物を、室温で３０分間インキュベートした。反応を、蛍光偏光基質としてイソペプチド結合を介してユビキチンに結合される５０ｎＭのＴＡＭＲＡ標識ペプチドの添加により開始した。反応物を、基質の添加の後、及び室温での２時間のインキュベーションの直後、読み取った。読み取りを、Ｐｈｅｒａｓｔａｒ Ｐｌｕｓ (ＢＭＧ Ｌａｂｔｅｃｈ)上で行った。λ励起５４０ｎｍ；λ放射５９０ｎｍ。
【0168】
ＵＣＨＬ１生化学ＩＣ５０アッセイにおける典型的な化合物の活性
範囲：
Ａ＜０．１μＭ;
０．１＜Ｂ＜１μＭ;
１＜Ｃ＜１０μＭ;
１０μＭ＜Ｄ＜１００μＭ
範囲：
Ａ＜０．１μＭ;
０．１＜Ｂ＜１μＭ;
１＜Ｃ＜１０μＭ;
１０μＭ＜Ｄ＜１００μＭ
【0169】
【表11】
【0170】
インビトロＵＳＰ３０阻害アッセイ
ＵＳＰ３０生化学動態アッセイ。反応を、２１μｌの最終反応量で、黒い３８４ウェルプレート（小容量、Ｇｒｅｉｎｅｒ ７８４０７６）において二度反復して実施した。ＵＳＰ３０ ＣＤ (５７－５１７、 シャープ ６４－００５７－０５０ Ｕｂｉｑｕｉｇｅｎｔ)を、反応緩衝液（４０ｍＭ のＴｒｉｓ、ｐＨ ７．５、０．００５%Ｔｗｅｅｎ ２０、０．５mg / ｍｌ のＢＳＡ、５ｍＭのベータメルカプトエタノール）により０、０．００５、０．０１、０．０５、０．１、及び０．５μｌ／ウェルに希釈した。緩衝液を、最適温度、ｐＨ、還元剤、塩、インキュベーション時間及び洗剤のために最適化した。反応を、蛍光偏光基質としてイソペプチド結合を介してユビキチンに結合される５０ｎＭのＴＡＭＲＡ標識ペプチドの添加により開始した。反応物を室温でインキュベートし、そして２分ごとに１２０分間、読み取った。読み取りを、Ｐｈｅｒａｓｔａｒ Ｐｌｕｓ (ＢＭＧ Ｌａｂｔｅｃｈ)上で行った。λ励起５４０ｎｍ；λ放射５９０ｎｍ。
ＵＳＰ３０生化学動態アッセイ。反応を、２１μｌの最終反応量で、黒い３８４ウェルプレート（小容量、Ｇｒｅｉｎｅｒ ７８４０７６）において二度反復して実施した。ＵＳＰ３０ ＣＤ (５７－５１７、 シャープ ６４－００５７－０５０ Ｕｂｉｑｕｉｇｅｎｔ)を、反応緩衝液（４０ｍＭ のＴｒｉｓ、ｐＨ ７．５、０．００５%Ｔｗｅｅｎ ２０、０．５mg / ｍｌ のＢＳＡ、５ｍＭのベータメルカプトエタノール）により０、０．００５、０．０１、０．０５、０．１、及び０．５μｌ／ウェルに希釈した。緩衝液を、最適温度、ｐＨ、還元剤、塩、インキュベーション時間及び洗剤のために最適化した。反応を、蛍光偏光基質としてイソペプチド結合を介してユビキチンに結合される５０ｎＭのＴＡＭＲＡ標識ペプチドの添加により開始した。反応物を室温でインキュベートし、そして２分ごとに１２０分間、読み取った。読み取りを、Ｐｈｅｒａｓｔａｒ Ｐｌｕｓ (ＢＭＧ Ｌａｂｔｅｃｈ)上で行った。λ励起５４０ｎｍ；λ放射５９０ｎｍ。
【0171】
ＵＳＰ３０生化学ＩＣ５０アッセイ
希釈プレートを、９６ウェルポリプロピレンＶ底プレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ番号６５１２０１）において５０％ＤＭＳＯで、最終濃度の２１倍（最終濃度１００μＭで２１００μＭ）に調製した。典型的な８点希釈シリーズは、１００、３０、１０、３、１、０．３、０．１、０．０３μＭ最終である。反応を、２１μｌの最終反応量で、黒い３８４ウェルプレート（小容量、Ｇｒｅｉｎｅｒ ７８４０７６）において二度反復して実施した。１μｌの５０％ＤＭＳＯ又は希釈された化合物のいずれかをプレートに添加した。ＵＳＰ３０を反応緩衝液（４０ｍＭ のＴｒｉｓ、ｐＨ ７．５、０．００５%Ｔｗｅｅｎ ２０、０．５mg / ｍｌ のＢＳＡ、５ｍＭのベータメルカプトエタノール）により０．０５μｌ／ウェルに希釈し、そして１０μｌの希釈されたＵＳＰ３０を化合物に添加した。酵素及び化合物を、室温で３０分間インキュベートした。反応を、蛍光偏光基質としてイソペプチド結合を介してユビキチンに結合される５０ｎＭのＴＡＭＲＡ標識ペプチドの添加により開始した。反応物を、基質の添加の後、及び室温での２時間のインキュベーションの直後、読み取った。読み取りを、Ｐｈｅｒａｓｔａｒ Ｐｌｕｓ (ＢＭＧ Ｌａｂｔｅｃｈ)上で行った。λ励起５４０ｎｍ；λ放射５９０ｎｍ。
希釈プレートを、９６ウェルポリプロピレンＶ底プレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ番号６５１２０１）において５０％ＤＭＳＯで、最終濃度の２１倍（最終濃度１００μＭで２１００μＭ）に調製した。典型的な８点希釈シリーズは、１００、３０、１０、３、１、０．３、０．１、０．０３μＭ最終である。反応を、２１μｌの最終反応量で、黒い３８４ウェルプレート（小容量、Ｇｒｅｉｎｅｒ ７８４０７６）において二度反復して実施した。１μｌの５０％ＤＭＳＯ又は希釈された化合物のいずれかをプレートに添加した。ＵＳＰ３０を反応緩衝液（４０ｍＭ のＴｒｉｓ、ｐＨ ７．５、０．００５%Ｔｗｅｅｎ ２０、０．５mg / ｍｌ のＢＳＡ、５ｍＭのベータメルカプトエタノール）により０．０５μｌ／ウェルに希釈し、そして１０μｌの希釈されたＵＳＰ３０を化合物に添加した。酵素及び化合物を、室温で３０分間インキュベートした。反応を、蛍光偏光基質としてイソペプチド結合を介してユビキチンに結合される５０ｎＭのＴＡＭＲＡ標識ペプチドの添加により開始した。反応物を、基質の添加の後、及び室温での２時間のインキュベーションの直後、読み取った。読み取りを、Ｐｈｅｒａｓｔａｒ Ｐｌｕｓ (ＢＭＧ Ｌａｂｔｅｃｈ)上で行った。λ励起５４０ｎｍ；λ放射５９０ｎｍ。
【0172】
ＵＳＰ３０生化学ＩＣ５０アッセイにおける典型的な化合物の活性
範囲：
Ａ＜０．１μＭ;
０．１＜Ｂ＜１μＭ;
１＜Ｃ＜１０μＭ;
１０μＭ＜Ｄ＜１００μＭ
範囲：
Ａ＜０．１μＭ;
０．１＜Ｂ＜１μＭ;
１＜Ｃ＜１０μＭ;
１０μＭ＜Ｄ＜１００μＭ
【0173】
【表12】