【図1】 [0013]虚血の２４時間前および４時間前に塩化亜鉛（ＺｎＣｌ２）を静脈内に与えたヒツジにおける、虚血６０分後の血清クレアチニンレベル（μｍｏｌ／Ｌ）（ｎ＝１～４；０．１～１０ｍｇ／ｋｇ体重のＺｎＣｌ２）。片側の腎摘出を受ける２４時間前および４時間前に、生理食塩水を静脈内に与えた、対照（ｎ＝４）（＊；ｐ＜０．０５、対照に対して）。

【図2】 [0014]虚血の２４時間前および４時間前にＺｎＣｌ２を静脈内に与えたヒツジにおける、虚血６０分後の血清尿素レベル（ｍｍｏｌ／Ｌ）（ｎ＝１～４；０．１～１０ｍｇ／ｋｇ体重のＺｎＣｌ）。片側の腎摘出を受ける２４時間前および４時間前に、生理食塩水を静脈内に与えた、対照（ｎ＝４）（＊；ｐ＜０．０５、対照に対して）。

【図3】 [0015]虚血の２４時間前および４時間前にＺｎＣｌ２（１０ｍｇ／ｋｇ体重）を静脈内に与えたヒツジにおける、血清クレアチニンおよび血清尿素レベルに対する、曲線下面積（ＡＵＣ）（＊＊；ｐ＜０．０５、対照に対して）。

【図4A】 [0016]虚血の２４時間前および４時間前にＺｎＣｌ２（１０ｍｇ／ｋｇ体重）、またはフラボノイド系酸化防止剤を静脈内に与えたヒツジにおける、虚血６０分後の血清クレアチニンおよび尿素レベル。片側の腎摘出を受ける２４時間前および４時間前に生理食塩水を静脈内に与えた対照（ｎ＝４）。

【図4B】 虚血の２４時間前および４時間前にＺｎＣｌ２（１０ｍｇ／ｋｇ体重）、またはフラボノイド系酸化防止剤を静脈内に与えたヒツジにおける、虚血６０分後の血清クレアチニンおよび尿素レベル。片側の腎摘出を受ける２４時間前および４時間前に生理食塩水を静脈内に与えた対照（ｎ＝４）。

【図4C】 虚血の２４時間前および４時間前にＺｎＣｌ２（１０ｍｇ／ｋｇ体重）、またはフラボノイド系酸化防止剤を静脈内に与えたヒツジにおける、虚血６０分後の血清クレアチニンおよび尿素レベル。片側の腎摘出を受ける２４時間前および４時間前に生理食塩水を静脈内に与えた対照（ｎ＝４）。

【図4D】 虚血の２４時間前および４時間前にＺｎＣｌ２（１０ｍｇ／ｋｇ体重）、またはフラボノイド系酸化防止剤を静脈内に与えたヒツジにおける、虚血６０分後の血清クレアチニンおよび尿素レベル。片側の腎摘出を受ける２４時間前および４時間前に生理食塩水を静脈内に与えた対照（ｎ＝４）。

【図5】 [0017]腎区動脈（Ａ）、および、その後の分析用に切除した腎組織（Ｂ）を介するヒト腎臓へのＺｎＣｌ２（５０μＭ）の灌流を示す。切除組織への血液供給は、ＺｎＣｌ２溶液が投与される腎動脈により提供された。

【図6】 [0018]ＺｎＣｌ２灌流されたヒト腎臓由来の組織での、低酸素誘導因子１－α（ＨＩＦ－１α）タンパク質発現（ｎ＝２）。タンパク質発現は、ウェスタンブロットにより測定された。結果は、生理食塩水灌流のヒト腎臓における、ＨＩＦ－１αタンパク質発現の百分率（％）として示される（ｎ＝２）。

【図7】 [0019]２４時間にわたってＺｎＣｌ２で処置した、不死化したヒト腎尿細管性のＨＫ－２腎細胞での、ＨＩＦ－１αタンパク質発現（ｎ＝３；５０μＭ）。サンプルは収集されて、ＨＩＦ－１αタンパク質発現は、ウェスタンブロットにより決定された。発現のレベルは、ハウスキーピング遺伝子、グリセルアルデヒド３－リン酸デヒドロゲナーゼ（ＧＡＰＤＨ）の発現に対して示される；＊；ｐ＜０．０５。

【図8A】 [0020]（Ａ）塩化コバルト（ＣｏＣｌ２；１５０μＭ）、または塩化亜鉛（ＺｎＣｌ２；５０μＭ）に曝露した、ヒト腎癌腫細胞（ＡＣＨＮ）での、ＨＩＦ－１α、ＨＩＦ－２α、ＨＩＦ－３α、ｐＡＫＴ、およびｐＭＡＰＫタンパク質発現。結果は、ウェスタンブロットにより決定された、対照と比較したときの、ＺｎＣｌ２に曝露した４時間後のヒト腎癌腫細胞でのＨＩＦ－１αおよびＨＩＦ－２αタンパク質発現の増加を示す。（Ｂ）図８（Ａ）で示されるタンパク質発現データの定量化。（Ｃ）塩化コバルト（ＣｏＣｌ２；１５０μＭ）、または塩化亜鉛（ＺｎＣｌ２；５０μＭ）に曝露した正常なヒトの近位尿細管ＨＫ－２細胞での、ＨＩＦ－１α、ＨＩＦ－２α、ＨＩＦ－３α、ｐＡＫＴ、およびｐＭＡＰＫタンパク質発現。結果は、ウェスタンブロットにより決定された、対照と比較したときの、ＺｎＣｌ２に曝露した４時間後のヒト腎癌腫細胞でのＨＩＦ－１αおよびＨＩＦ－２αタンパク質発現の増加を示す。（Ｄ）図８（Ｃ）で示されるタンパク質発現データの定量化。

【図8B】 （Ａ）塩化コバルト（ＣｏＣｌ２；１５０μＭ）、または塩化亜鉛（ＺｎＣｌ２；５０μＭ）に曝露したヒト腎癌腫細胞（ＡＣＨＮ）での、ＨＩＦ－１α、ＨＩＦ－２α、ＨＩＦ－３α、ｐＡＫＴ、およびｐＭＡＰＫタンパク質発現。結果は、ウェスタンブロットにより決定された、対照と比較したときの、ＺｎＣｌ２に曝露した４時間後のヒト腎癌腫細胞でのＨＩＦ－１αおよびＨＩＦ－２αタンパク質発現の増加を示す。（Ｂ）図８（Ａ）で示されるタンパク質発現データの定量化。（Ｃ）塩化コバルト（ＣｏＣｌ２；１５０μＭ）、または塩化亜鉛（ＺｎＣｌ２；５０μＭ）に曝露した、正常なヒトの近位尿細管ＨＫ－２細胞での、ＨＩＦ－１α、ＨＩＦ－２α、ＨＩＦ－３α、ｐＡＫＴ、およびｐＭＡＰＫタンパク質発現。結果は、ウェスタンブロットにより決定された、対照と比較したときの、ＺｎＣｌ２に曝露した４時間後のヒト腎癌腫細胞でのＨＩＦ－１αおよびＨＩＦ－２αタンパク質発現の増加を示す。（Ｄ）図８（Ｃ）で示されるタンパク質発現データの定量化。

【図8C】 （Ａ）塩化コバルト（ＣｏＣｌ２；１５０μＭ）、または塩化亜鉛（ＺｎＣｌ２；５０μＭ）に曝露したヒト腎癌腫細胞（ＡＣＨＮ）での、ＨＩＦ－１α、ＨＩＦ－２α、ＨＩＦ－３α、ｐＡＫＴ、およびｐＭＡＰＫタンパク質発現。結果は、ウェスタンブロットにより決定された、対照と比較したときの、ＺｎＣｌ２に曝露した４時間後のヒト腎癌腫細胞でのＨＩＦ－１αおよびＨＩＦ－２αタンパク質発現の増加を示す。（Ｂ）図８（Ａ）で示されるタンパク質発現データの定量化。（Ｃ）塩化コバルト（ＣｏＣｌ２；１５０μＭ）、または塩化亜鉛（ＺｎＣｌ２；５０μＭ）に曝露した、正常なヒトの近位尿細管ＨＫ－２細胞での、ＨＩＦ－１α、ＨＩＦ－２α、ＨＩＦ－３α、ｐＡＫＴ、およびｐＭＡＰＫタンパク質発現。結果は、ウェスタンブロットにより決定された、対照と比較したときの、ＺｎＣｌ２に曝露した４時間後のヒト腎癌腫細胞でのＨＩＦ－１αおよびＨＩＦ－２αタンパク質発現の増加を示す。（Ｄ）図８（Ｃ）で示されるタンパク質発現データの定量化。

【図8D】 （Ａ）塩化コバルト（ＣｏＣｌ２；１５０μＭ）、または塩化亜鉛（ＺｎＣｌ２；５０μＭ）に曝露したヒト腎癌腫細胞（ＡＣＨＮ）での、ＨＩＦ－１α、ＨＩＦ－２α、ＨＩＦ－３α、ｐＡＫＴ、およびｐＭＡＰＫタンパク質発現。結果は、ウェスタンブロットにより決定された、対照と比較したときの、ＺｎＣｌ２に曝露した４時間後のヒト腎癌腫細胞でのＨＩＦ－１αおよびＨＩＦ－２αタンパク質発現の増加を示す。（Ｂ）図８（Ａ）で示されるタンパク質発現データの定量化。（Ｃ）塩化コバルト（ＣｏＣｌ２；１５０μＭ）、または塩化亜鉛（ＺｎＣｌ２；５０μＭ）に曝露した、正常なヒトの近位尿細管ＨＫ－２細胞での、ＨＩＦ－１α、ＨＩＦ－２α、ＨＩＦ－３α、ｐＡＫＴ、およびｐＭＡＰＫタンパク質発現。結果は、ウェスタンブロットにより決定された、対照と比較したときの、ＺｎＣｌ２に曝露した４時間後のヒト腎癌腫細胞でのＨＩＦ－１αおよびＨＩＦ－２αタンパク質発現の増加を示す。（Ｄ）図８（Ｃ）で示されるタンパク質発現データの定量化。

【図9】 [0021]ヒツジにおける、腎臓の虚血再灌流障害後の血清クレアチニンおよび尿素レベル。ヒツジは、一側性腎摘出を行い、腎虚血を６０分間行った後、再灌流した。血清クレアチニン（Ａ；μｍｏｌ／Ｌ）、および血清尿素（Ｂ；ｍｍｏｌ／Ｌ）は、Ｚｎ処置の前（ベースライン）、虚血の前（第０日）、および再灌流後７日間に測定した。ヒツジは、２４時間のみ、もしくは４時間のみのいずれかでの０．５ｍｇ／ｋｇのＺｎＣｌ２の単回用量で、または、虚血６０分の前の２４時間および４時間での２回用量で予備調整された。データは、平均±ＳＥＭ値（ｎ＝４、２４時間のみの群ｎ＝１を除く）として表す。虚血の２４時間前に１回、４時間前にもう１回の２回用量として投与される０．５ｍｇ／ｋｇのＺｎＣｌ２は、虚血の２４時間前のみ、または４時間前のみのいずれかに与えられる単回用量と比較して、経時的なクレアチニン上昇を著しく低下させた（ｐ＜０．０５）。

【図10】 [0022]ヒツジにおける、腎臓の虚血再灌流障害後の血清クレアチニンおよび尿素レベル。ヒツジは、一側性腎摘出を行い、腎虚血を６０分間行った後、再灌流した。ヒツジは、２４時間のみ、もしくは４時間のみのいずれかでの０．５ｍｇ／ｋｇのＺｎＣｌ２の単回用量で、または、虚血６０分の前の２４時間および４時間での２回用量で、予備調整された。データは、平均±ＳＥＭ値（ｎ＝４、２４時間のみの群ｎ＝１を除く）として表す。虚血の２４時間前に１回、４時間前にもう１回の２回用量として投与される０．５ｍｇ／ｋｇのＺｎＣｌ２は、虚血の２４時間前のみ、または４時間前のみのいずれかに与えられる単回用量と比較して、経時的なクレアチニン（Ａ）または尿素（Ｂ）上昇のいずれかを発現させた虚血性負荷量（曲線下面積）を著しく低下させた（ｐ＜０．０５）。

【図11A】 [0023]心筋の持続的な虚血再灌流障害後のヒツジの左心室の環の断面。危険にさらされている心筋層の領域（淡い、エバンスブルー非染色、Ａ）に対する、代表的なデジタル写真（塩化トリフェニルテトラゾリウム（ＴＴＣ）染色、Ｂ）。未処置のヒツジと比較した場合、白色領域がないのは、亜鉛の予備調整による、心筋の虚血再灌流障害に対する保護を示す。

【図11B】 心筋の持続的な虚血再灌流障害後のヒツジの左心室の環の断面。危険にさらされている心筋層の領域（淡い、エバンスブルー非染色、Ａ）に対する、代表的なデジタル写真（塩化トリフェニルテトラゾリウム（ＴＴＣ）染色、Ｂ）。未処置のヒツジと比較した場合、白色領域がないのは、亜鉛の予備調整による、心筋の虚血再灌流障害に対する保護を示す。