特許 7244487 ステロイド系誘導体ＦＸＲアゴニストの結晶又は非晶質、その製造方法及び使用

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2023-03-13

(45)【発行日】2023-03-22

(54)【発明の名称】ステロイド系誘導体ＦＸＲアゴニストの結晶又は非晶質、その製造方法及び使用

(51)【国際特許分類】

   C07J 43/00 20060101AFI20230314BHJP

   A61K 31/58 20060101ALI20230314BHJP

   A61P 3/06 20060101ALI20230314BHJP

   A61P 3/10 20060101ALI20230314BHJP

   A61P 9/10 20060101ALI20230314BHJP

   A61P 1/16 20060101ALI20230314BHJP

   A61P 13/02 20060101ALI20230314BHJP

   A61P 13/08 20060101ALI20230314BHJP

   A61P 3/04 20060101ALI20230314BHJP

【ＦＩ】

C07J43/00 CSP

A61K31/58

A61P3/06

A61P3/10

A61P9/10 101

A61P1/16

A61P13/02

A61P13/08

A61P3/04

【請求項の数】 40

(21)【出願番号】P 2020504099

(86)(22)【出願日】2018-07-26

(65)【公表番号】

(43)【公表日】2020-09-17

(86)【国際出願番号】 CN2018097161

(87)【国際公開番号】W WO2019020068

(87)【国際公開日】2019-01-31

【審査請求日】2021-07-20

(31)【優先権主張番号】201710619423.5

(32)【優先日】2017-07-26

(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN

(73)【特許権者】

【識別番号】516089784

【氏名又は名称】チア タイ ティエンチン ファーマシューティカル グループ カンパニー リミテッド

【氏名又は名称原語表記】Ｃｈｉａ Ｔａｉ Ｔｉａｎｑｉｎｇ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｇｒｏｕｐ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．

【住所又は居所原語表記】Ｎｏ．３６９ Ｙｕｚｈｏｕ Ｓｏｕｔｈ Ｒｄ．，Ｌｉａｎｙｕｎｇａｎｇ，Ｊｉａｎｇｓｕ ２２２０６２ Ｃｈｉｎａ

(74)【代理人】

【識別番号】110002860

【氏名又は名称】弁理士法人秀和特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】リ，シャオリン

(72)【発明者】

【氏名】シャオ，フアリン

(72)【発明者】

【氏名】リ，ペン

(72)【発明者】

【氏名】ヘ，ハイン

(72)【発明者】

【氏名】リ，ウェイドン

【審査官】早川 裕之

(56)【参考文献】

【文献】国際公開第２０１７／１２９１２５（ＷＯ，Ａ１）

【文献】国際公開第２０１９／０２００６７（ＷＯ，Ａ１）

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

Ｃ０７Ｊ ４３／００

Ａ６１Ｋ ３１／５８

Ａ６１Ｐ ３／０６

Ａ６１Ｐ ３／１０

Ａ６１Ｐ ９／１０

Ａ６１Ｐ １／１６

Ａ６１Ｐ １３／０２

Ａ６１Ｐ １３／０８

Ａ６１Ｐ ３／０４

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

Ｘ線回折パターンは、２θが５．９５°、１０．１０°、１５．１４°、１８．８３°、２０．２３°の回折ピークを有し、ただし、２θの誤差範囲は±０．２°であることを特徴とする、以下の式Ｉに示す化合物の結晶Ａ。

【化1】

【請求項2】

Ｘ線回折パターンは、２θが５．９５°、７．９５°、１０．１０°、１３．３２°、１５．１４°、１５．８５°、１８．８３°、２０．２３°の回折ピークを有し、ただし、２θの誤差範囲は±０．２°であることを特徴とする、請求項１に記載の結晶Ａ。

【請求項3】

Ｘ線回折パターンは、２θが５．９５°、７．９５°、１０．１０°、１３．３２°、１４．１７°、１５．１４°、１５．８５°、１８．８３°、１９．１８°、２０．２３°、２４．６９°の回折ピークを有し、ただし、２θの誤差範囲は±０．２°であることを特徴とする、請求項１に記載の結晶Ａ。

【請求項4】

前記結晶ＡはＨ_２Ｏ分子を含む、ことを特徴とする請求項１に記載の結晶Ａ。

【請求項5】

式Ｉの化合物に対する前記Ｈ_２Ｏ分子の当量比は、０．１～２．０ｅｑから選択される、ことを特徴とする請求項４に記載の結晶Ａ。

【請求項6】

式Ｉの化合物に対する前記Ｈ _２ Ｏ分子の当量比は、０．２～０．８ｅｑから選択される、ことを特徴とする請求項５に記載の結晶Ａ。

【請求項7】

Ｘ線回折パターンは、２θが５．９°、１０．１°、１５．１°、１８．８°、２０．２°の回折ピークを有し、ただし、２θの誤差範囲は±０．３°である、ことを特徴とする以下の式Ｉに示す化合物の結晶Ａ。

【化2】

【請求項8】

Ｘ線回折パターンは、２θが５．９°、７．９°、１０．１°、１３．３°、１５．１°、１５．８°、１８．８°、２０．２°の回折ピークを有し、ただし、２θの誤差範囲は±０．３°である、ことを特徴とする請求項７に記載の結晶Ａ。

【請求項9】

Ｘ線回折パターンは、２θが５．９°、７．９°、１０．１°、１３．３°、１４．１°、１５．１°、１５．８°、１８．８°、１９．１°、２０．２°、２４．６°の回折ピークを有し、ただし、２θの誤差範囲は±０．３°である、ことを特徴とする請求項７に記載の結晶Ａ。

【請求項10】

前記結晶ＡはＨ_２Ｏ分子を含む、ことを特徴とする請求項７に記載の結晶Ａ。

【請求項11】

式Ｉの化合物に対する前記Ｈ_２Ｏ分子の当量比は、０．１～２．０ｅｑから選択される、ことを特徴とする請求項１０に記載の結晶Ａ。

【請求項12】

式Ｉの化合物に対する前記Ｈ _２ Ｏ分子の当量比は、０．２～０．８ｅｑから選択される、ことを特徴とする請求項１１に記載の結晶Ａ。

【請求項13】

水、又は水を含む混合溶媒から選択される結晶溶媒に式Ｉに示す化合物を懸濁／溶解して撹拌する、ステップ１）と、
濾過し、そして任意選択的に洗浄する及び／又は乾燥させる、ステップ２）とを含む、請求項１又は請求項７に記載の式Ｉに示す化合物の結晶Ａの製造方法。

【請求項14】

前記水を含む混合溶媒における非水溶媒は、水相溶性の有機溶媒から選択される、ことを特徴とする請求項１３に記載の製造方法。

【請求項15】

前記水相溶性の有機溶媒は、Ｃ _１－４ アルコール、テトラヒドロフラン、アセトン、アセトニトリル又はＤＭＦから選択される、ことを特徴とする請求項１４に記載の製造方法。

【請求項16】

Ｘ線回折パターンは、２θが６．２１°、９．７７°、１０．７１°、１２．３３°、１３．０４°の回折ピークを有し、ただし、２θの誤差範囲は±０．２°である、ことを特徴とする以下の式Ｉに示す化合物の結晶Ｂ。

【化3】

【請求項17】

Ｘ線回折パターンは、２θが６．２１°、９．４９°、９．７７°、１０．７１°、１２．３３°、１３．０４°、１４．２９°、１５．１３°の回折ピークを有し、ただし、２θの誤差範囲は±０．２°である、ことを特徴とする請求項１６に記載の結晶Ｂ。

【請求項18】

Ｘ線回折パターンは、２θが６．２１°、９．００°、９．７７°、１０．７１°、１２．３３°、１３．０４°、１４．２９°、１４．７２°、１５．１３°、１５．５９°の回折ピークを有し、ただし、２θの誤差範囲は±０．２°である、ことを特徴とする請求項１６に記載の結晶Ｂ。

【請求項19】

前記結晶Ｂは酢酸エチル分子を含む、ことを特徴とする請求項１６に記載の結晶Ｂ。

【請求項20】

式Ｉの化合物に対する前記酢酸エチル分子の当量比は、０．１～０．５ｅｑから選択される、ことを特徴とする請求項１９に記載の結晶Ｂ。

【請求項21】

式Ｉの化合物に対する前記酢酸エチル分子の当量比は、０．２～０．４ｅｑから選択される、ことを特徴とする請求項２０に記載の結晶Ｂ。

【請求項22】

Ｘ線回折パターンは、２θが６．２°、９．７°、１０．７°、１２．３°、１３．０°の回折ピークを有し、ただし、２θの誤差範囲は±０．３°である、ことを特徴とする以下の式Ｉに示す化合物の結晶Ｂ。

【化4】

【請求項23】

Ｘ線回折パターンは、２θが６．２°、９．４°、９．７°、１０．７°、１２．３°、１３．０°、１４．２°、１５．１°の回折ピークを有し、ただし、２θの誤差範囲は±０．３°である、ことを特徴とする請求項２２に記載の結晶Ｂ。

【請求項24】

Ｘ線回折パターンは、２θが６．２°、９．０°、９．４°、９．７°、１０．７°、１２．３°、１３．０°、１４．２°、１４．７°、１５．１°、１５．５°の回折ピークを有し、ただし、２θの誤差範囲は±０．３°である、ことを特徴とする請求項２２に記載の結晶Ｂ。

【請求項25】

前記結晶Ｂは酢酸エチル分子を含む、ことを特徴とする請求項２２に記載の結晶Ｂ。

【請求項26】

式Ｉの化合物に対する前記酢酸エチル分子の当量比は、０．１～０．５ｅｑから選択される、ことを特徴とする請求項２５に記載の結晶Ｂ。

【請求項27】

式Ｉの化合物に対する前記酢酸エチル分子の当量比は、０．２～０．４ｅｑから選択される、ことを特徴とする請求項２６に記載の結晶Ｂ。

【請求項28】

式Ｉに示す化合物を酢酸エチルに懸濁／溶解する、ステップ１）と、
晶析させ、そして任意選択的に濾過し、洗浄する及び／又は乾燥させる、ステップ２）とを含む、ことを特徴とする請求項１６又は請求項２２に記載の式Ｉに示す化合物の結晶Ｂの製造方法。

【請求項29】

以下の式Ｉに示す化合物の固体非晶質物質。

【化5】

【請求項30】

メタノール、エタノール、ｎ－プロパノール、イソプロパノール、ｎ－ブタノール、イソブタノール、ｔ－ブタノール、テトラヒドロフラン、アセトン、ＤＭＦ又はこれらの混合溶媒から選択される無水溶媒において製造される、ことを特徴とする請求項２９に記載の固体非晶質物質。

【請求項31】

メタノール、エタノール、ｎ－プロパノール、イソプロパノール、ｎ－ブタノール、イソブタノール、ｔ－ブタノール、テトラヒドロフラン、アセトン、ＤＭＦ又はこれらの混合溶媒から選択される無水溶媒に式Ｉに示す化合物を溶解する、ステップ１）と、
冷却して固体を析出させる又は溶媒を完全に蒸発し、そして任意選択的に濾過し、洗浄する及び／又は乾燥させる、ステップ２）とを含む、ことを特徴とする請求項２９に記載の式Ｉに示す化合物の固体非晶質物質の製造方法。

【請求項32】

前記溶媒はエタノール又はイソプロパノールから選択される、ことを特徴とする請求項３１に記載の製造方法。

【請求項33】

有効量の、請求項１～請求項６のいずれか１項に記載の式Ｉに示す化合物の結晶Ａ、又は請求項７～請求項１２のいずれか１項に記載の式Ｉに示す化合物の結晶Ａを含む、ことを特徴とする医薬組成物。

【請求項34】

有効量の、請求項１６～請求項２１のいずれか１項に記載の式Ｉに示す化合物の結晶Ｂ、又は請求項２２～請求項２７のいずれか１項に記載の式Ｉに示す化合物の結晶Ｂを含む、ことを特徴とする医薬組成物。

【請求項35】

有効量の、請求項２９又は請求項３０に記載の式Ｉに示す化合物の固体非晶質物質を含
む、ことを特徴とする医薬組成物。

【請求項36】

ファルネソイドＸ受容体に関連する各種疾患と症状の治療又は予防に用いることを特徴とする請求項３３～請求項３５のいずれか１項に記載の医薬組成物。

【請求項37】

ファルネソイドＸ受容体に関連する各種の疾患と症状の治療又は予防のための医薬を製造するための、請求項１～請求項６のいずれか１項に記載の式Ｉに示す化合物の結晶Ａ、又は請求項７～請求項１２のいずれか１項に記載の式Ｉに示す化合物の結晶Ａの使用。

【請求項38】

ファルネソイドＸ受容体に関連する各種の疾患と症状の治療又は予防のための医薬を製造するための、請求項１６～請求項２１のいずれか１項に記載の式Ｉに示す化合物の結晶Ｂ、又は請求項２２～請求項２７のいずれか１項に記載の式Ｉに示す化合物の結晶Ｂの使用。

【請求項39】

ファルネソイドＸ受容体に関連する各種の疾患と症状の治療又は予防のための医薬を製造するための、請求項２９又は請求項３０に記載の式Ｉに示す化合物の固体非晶質物質の使用。

【請求項40】

前記ファルネソイドＸ受容体に関連する各種疾患と症状は、非アルコール性脂肪性肝疾患、非アルコール性脂肪性肝炎、原発性胆汁性肝硬変、胆汁うっ滞性肝疾患、慢性肝疾患、Ｃ型肝炎感染、アルコール性肝疾患、肝線維化、原発性硬化性胆管炎、胆石、胆道閉鎖症、下部尿路症状と良性前立腺過形成（ＢＰＨ）、尿路結石、肥満、２型糖尿病、アテローム性動脈硬化、動脈硬化症、高コレステロール血症、高脂血症が誘発する又は高コレステロール血症と高脂血症が誘発する肝機能障害を含む、ことを特徴とする請求項３７～請求項３９のいずれか１項に記載の使用。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本願は、医薬品化学分野に関し、具体的に、ステロイド系誘導体ＦＸＲアゴニストの結晶又は非晶質に関し、当該結晶又は非晶質の結晶組成物、医薬組成物、及びそれらの医薬品としての使用を含む。

【背景技術】

【0002】

ファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）はラット肝臓ｃＤＮＡライブラリーに同定されたオーファン核内受容体であり（BM. Forman,et al.,Cell 81:687-693(1995)）、昆虫脱皮ホ
ルモン受容体と密接に関係する。ＦＸＲはステロイド、レチノイド、甲状腺ホルモン受容体を含むリガンド－活性化転写因子核内受容体ファミリーのメンバーである（DJ.Mangelsdorf,et al.,Cell 83:841-850(1995)）。ノーザンブロッティング及びインサイチュ分析
によって、肝臓、腸、腎臓及び副腎におけるＦＸＲの大量発現が確認された（BM. Forman,et al.,Cell 81:687-693(1995)、W. Seol,et al.,Mol. Endocrinnol,9:72-85(1995)）。ＦＸＲは９－シス型レチノイン酸受容体（ＲＸＲ）とヘテロ二量体を形成してＤＮＡと結合する。ＦＸＲ／ＲＸＲヘテロ二量体はＡＧ（Ｇ／Ｔ）ＴＣＡを共有する２コピーの核内受容体ハーフサイトからなる成分と優先的に結合して、逆方向の反復を形成して単一ヌクレオチドによって分離される（ＩＲ－１モチーフ）（BM. Forman,et al.,Cell 81:687-693(1995)）。しかしながら、これらの化合物はマウス及びヒトのＦＸＲを活性化できない
ため、内因性ＦＸＲリガンドが自然由来であるかどうかは決定できない。一部の自然発生したコール酸は生理的濃度でＦＸＲとの結合後に活性化させる（国際出願第００３７０７７（Ａ１）号、２０００年６月２９日公表））。従って、ＦＸＲリガンドとしてのコール酸はケノデオキシコール酸（ＣＤＣＡ）、デオキシコール酸（ＤＣＡ）、リトコール酸（ＬＣＡ）、これらのコール酸のタウリンとグリシン共役物を含む。

【発明の概要】

【0003】

本願の一つの態様は、式Ｉに示す化合物の結晶Ａを提供し、

【化1】

結晶ＡのＸ線回折（ＸＲＰＤ）パターンは、２θが５．９５°、１０．１０°、１５．１４°、１８．８３°、２０．２３°の回折ピークを有し、典型的には、２θが５．９５°、７．９５°、１０．１０°、１３．３２°、１５．１４°、１５．８５°、１８．８３°、２０．２３°の回折ピークを有し、より典型的には、２θが５．９５°、７．９５°、１０．１０°、１３．３２°、１４．１７°、１５．１４°、１５．８５°、１８．８３°、１９．１８°、２０．２３°、２４．６９°の回折ピークを有し、さらに典型的には、２θが５．９５°、７．９５°、１０．１０°、１３．３２°、１４．１７°、１４．５８°、１５．１４°、１５．８５°、１８．２５°、１８．８３°、１９．１８°、２０．２３°、２４．６９°、２５．８１°の回折ピークを有し、ただし、２θの誤差範囲は±０．２°である。

【0004】

本願のいくつかの実施形態において、結晶ＡのＸ線回折（ＸＲＰＤ）パターンは、２θ
が５．９°、１０．１°、１５．１°、１８．８°、２０．２°の回折ピークを有し、典型的には、２θが５．９°、７．９°、１０．１°、１３．３°、１５．１°、１５．８°、１８．８°、２０．２°を有し、より典型的には、２θが５．９°、７．９°、１０．１°、１３．３°、１４．１°、１５．１°、１５．８°、１８．８°、１９．１°、２０．２°、２４．６°の回折ピークを有し、さらに典型的には、２θが５．９°、７．９°、１０．１°、１３．３°、１４．１°、１４．５°、１５．１°、１５．８°、１８．２°、１８．８°、１９．１°、２０．２°、２４．６°、２５．８°の回折ピークを有し、ただし、２θの誤差範囲は±０．３°であり、好ましくは±０．２°である。

【0005】

本願のいくつかの実施形態において、本願に係る結晶ＡのＸ線回折ピークは、次に示す特徴を有する。

【表1】

ただし、２θの誤差範囲は±０．３°であり、好ましくは±０．２°である。

【0006】

本願のいくつかの実施形態において、前記結晶ＡのＸ線回折パターンは図１に示すとおりである。

【0007】

本願のいくつかの実施形態において、前記結晶ＡのＤＳＣパターンは図２に示すとおりである。

【0008】

本願のいくつかの実施形態において、前記結晶ＡのＴＧＡパターンは図３に示すとおりである。

【0009】

本願のいくつかの実施形態において、本願に係る結晶Ａの別のＸ線回折ピークは、次に示す特徴を有する。

【表2】

ただし、２θの誤差範囲は±０．３°であり、好ましくは±０．２°である。

【0010】

本願のいくつかの実施形態において、前記結晶Ａの別のＸ線回折パターンは、図４に示すとおりである。

【0011】

本願のいくつかの実施形態において、前記結晶Ａの別のＤＳＣパターンは、図５に示すとおりである。

【0012】

本願のいくつかの実施形態において、前記結晶Ａの別のＴＧＡパターンは、図６に示すとおりである。

【0013】

本願のいくつかの実施形態において、前記結晶ＡはＨ_２Ｏ分子を含み、式Ｉの化合物に対するＨ_２Ｏ分子の当量比（モル量で計算）は、０．１～２．０ｅｑから選択される。いくつかの実施形態において、好ましくは０．１～１．０ｅｑ、０．２～０．８ｅｑ、０．３～０．７ｅｑ又は０．４～０．６ｅｑである。いくつかの実施形態において、好ましくは０．１ｅｑ、０．２ｅｑ、０．３ｅｑ、０．４ｅｑ、０．５ｅｑ、０．６ｅｑ、０．７ｅｑ、０．８ｅｑ、０．９ｅｑ、１．０ｅｑ、１．１ｅｑ、１．２ｅｑ、１．３ｅｑ、１．４ｅｑ、１．５ｅｑ、１．６ｅｑ、１．７ｅｑ、１．８ｅｑ、１．９ｅｑ又は２．０ｅｑであるか、前記任意の２つの数値からなる範囲から選択され、例えば、０．２～０．８ｅｑ、０．３～０．７ｅｑ、０．４～０．６ｅｑ、０．６～１．０ｅｑ、０．７～０．８ｅｑ、０．８～１．２ｅｑ、０．９～１．１ｅｑ、１．３～１．７ｅｑ、１．４～１．６ｅｑ、０．４～１．８ｅｑ、０．６～１．４ｅｑ又は０．８～１．２ｅｑから選択される。

【0014】

さらに、本願は結晶Ａの製造方法を提供し、当該方法は以下のステップ１）と、２）とを含む。
１）水、又は水を含む混合溶媒から選択される結晶溶媒に式Ｉに示す化合物を懸濁／溶解して、攪拌する。
２）濾過し、そして任意選択的に洗浄する且つ／又は乾燥させる。

【0015】

本願のいくつかの実施形態において、前記結晶Ａの製造方法において、前記水を含む混
合溶媒における非水溶媒は、水相溶性の有機溶媒から選択される。好ましくは、前記水相溶性の有機溶媒はＣ_１－４アルコール、テトラヒドロフラン、アセトン、アセトニトリル又はＤＭＦから選択され、好ましくはメタノール、エタノール、ｎ－プロパノール、イソプロパノール、ｎ－ブタノール、イソブタノール又はｔ－ブタノールから選択され、より好ましくはエタノールに選択される。

【0016】

本願のいくつかの実施形態において、前記結晶Ａの製造方法において、水を含む混合溶媒における水相溶性の有機溶媒と水は、任意の可能な比率であってもよい。いくつかの実施形態において、体積量で計算すると、前記水相溶性の有機溶媒と水の比率は、０．１：１～１０：１から選択され、好ましくは０．２：１～８：１、０．４：１～６：１、０．５：１～５：１、０．６：１～３：１又は０．８：１～２：１から選択される。

【0017】

本願のいくつかの実施形態において、前記結晶Ａの製造方法において、結晶溶媒の使用量は比較的広い範囲から選択できる。いくつかの実施形態において、式Ｉに示す化合物１ｇに対応する結晶溶媒の使用量（体積単位ｍＬで計算）は、０．１ｍＬ～１００ｍＬから選択され、好ましくは１ｍＬ～５０ｍＬから選択され、より好ましくは２ｍＬ～２０ｍＬから選択される。

【0018】

本願のいくつかの実施形態において、前記結晶Ａの製造方法において、結晶時の反応温度は、比較的広い範囲から選択できる。いくつかの実施形態において、ステップ１）は、１０～８０℃の範囲から選択される温度で行われ、好ましくは２０～６０℃で行われ、より好ましくは２５～５０℃行われる。

【0019】

さらに、本願は、式Ｉに示す化合物を含む結晶Ａの結晶組成物を提供する。本願のいくつかの実施形態において、式Ｉに示す化合物の結晶Ａは結晶組成物の重量の５０％以上を占め、好ましくは８０％以上を占め、より好ましくは９０％以上を占め、さらに好ましくは９５％以上を占める。

【0020】

さらに、本願は式Ｉに示す化合物の結晶Ａを含む医薬組成物を提供し、当該医薬組成物は有効量の式Ｉに示す化合物の結晶Ａ、又は式Ｉに示す化合物の結晶Ａを含む結晶組成物を含む。また、当該医薬組成物は薬学的に許容される担体、賦形剤及び／又は媒体を含むか、又は含まなくてもよい。

【0021】

さらに、本願はファルネソイドＸ受容体に関連する各種の疾患と症状の治療又は予防のための医薬を製造するための、式Ｉに示す化合物の結晶Ａ、又は上記結晶組成物又は上記医薬組成物の使用を提供する。

【0022】

さらに、本願は、適用対象の哺乳類に対する治療有効量の上記式Ｉに示す化合物の結晶Ａ、又は上記結晶組成物又は上記医薬組成物の投与を含む、ファルネソイドＸ受容体に関連する各種の疾患と症状の治療もしくは予防方法、又は使用を提供する。

【0023】

さらに、本願はファルネソイドＸ受容体に関連する各種の疾患と症状の治療又は予防のための上記式Ｉに示す化合物の結晶Ａ、又は上記結晶組成物、又は上記医薬組成物を提供する。

【0024】

本願のもう一つの態様は、式Ｉに示す化合物の結晶Ｂを提供し、

【化2】

結晶ＢのＸ線回折（ＸＲＰＤ）パターンは、２θが６．２１°、９．７７°、１０．７１°、１２．３３°、１３．０４°の回折ピークを有し、典型的には、２θが６．２１°、９．４９°、９．７７°、１０．７１°、１２．３３°、１３．０４°、１４．２９°、１５．１３°の回折ピークを有し、より典型的には、２θが６．２１°、９．００°、９．７７°、１０．７１°、１２．３３°、１３．０４°、１４．２９°、１４．７２°、１５．１３°、１５．５９°の回折ピークを有し、さらに典型的には、２θが６．２１°、９．００°、９．７７°、１０．７１°、１２．３３°、１３．０４°、１４．２９°、１４．７２°、１５．１３°、１５．５９°、１８．１４°、２０．０９°、２１．４１°の回折ピークを有し、ただし、２θの誤差範囲は±０．２°である。

【0025】

本願のいくつかの実施形態において、結晶ＢのＸ線回折（ＸＲＰＤ）パターンは、２θが６．２°、９．７°、１０．７°、１２．３°、１３．０°の回折ピークを有し、典型的には、２θが６．２°、９．４°、９．７°、１０．７°、１２．３°、１３．０°、１４．２°、１５．１°の回折ピークを有し、より典型的には、２θが６．２°、９．０°、９．４°、９．７°、１０．７°、１２．３°、１３．０°、１４．２°、１４．７°、１５．１°、１５．５°の回折ピークを有し、さらに典型的には、２θが６．２°、９．０°、９．４°、９．７°、１０．７°、１２．３°、１３．０°、１４．２°、１４．７°、１５．１°、１５．５°、１８．１°、２０．０°、２１．４°の回折ピークを有し、ただし、２θの誤差範囲は±０．３°であり、好ましくは±０．２°である。

【0026】

本願のいくつかの実施形態において、本願に係る結晶ＢのＸ線回折ピークは、次に示す特徴を有する。

【表3】

ただし、２θの誤差範囲は±０．３°であり、好ましくは±０．２°である。

【0027】

本願のいくつかの実施形態において、前記結晶ＢのＸ線回折パターンは、図７に示すとおりである。

【0028】

本願のいくつかの実施形態において、前記結晶ＢのＤＳＣパターンは、図８に示すとおりである。

【0029】

本願のいくつかの実施形態において、前記結晶ＢのＴＧＡパターンは、図９に示すとおりである。

【0030】

本願のいくつかの実施形態において、前記結晶Ｂは酢酸エチル分子を含み、式Ｉの化合物に対する酢酸エチル分子の当量比（モル量で計算）は０．１～０．５ｅｑから選択され、好ましくは０．２～０．４ｅｑから選択され、より好ましくは０．２５～０．３５ｅｑから選択され、さらに好ましくは０．２５ｅｑ、０．２６ｅｑ、０．２７ｅｑ、０．２８ｅｑ、０．２９ｅｑ、０．３０ｅｑ、０．３１ｅｑ、０．３２ｅｑ、０．３３ｅｑ、０．３４ｅｑ又は０．３５ｅｑから選択される。

【0031】

さらに、本願は結晶Ｂの製造方法を提供し、当該方法は以下のステップ１）と、２）とを含む。
１）式Ｉに示す化合物を酢酸エチルに懸濁／溶解する。
２）析晶させ、そして任意選択的に濾過し、洗浄する且つ／又は乾燥させる。

【0032】

本願のいくつかの実施形態において、前記結晶Ｂの製造方法において、結晶溶媒の使用量は比較的広い範囲から選択できる。いくつかの実施形態において、式Ｉに示す化合物１ｇに対応する結晶溶媒の使用量（体積単位ｍＬで計算）は、０．１ｍＬ～１００ｍＬから選択され、好ましくは１ｍＬ～５０ｍＬから選択され、より好ましくは２ｍＬ～２０ｍＬから選択される。

【0033】

さらに、本願は式Ｉに示す化合物の結晶Ｂを含む結晶組成物を提供する。本願のいくつ
かの実施形態において、式Ｉに示す化合物の結晶Ｂは結晶組成物の重量の５０％以上を占め、好ましくは８０％以上を占め、より好ましくは９０％以上を占め、さらに好ましくは９５％以上を占める。

【0034】

さらに、本願は式Ｉに示す化合物の結晶Ｂを含む医薬組成物を提供し、当該医薬組成物は有効量の式Ｉに示す化合物の結晶Ｂ、又は式Ｉに示す化合物の結晶Ｂを含む結晶組成物を含む。また、当該医薬組成物は薬学的に許容される担体、賦形剤及び／又は媒体を含むか、又は含まなくてもよい。

【0035】

さらに、本願はファルネソイドＸ受容体に関連する各種の疾患と症状の治療又は予防のための医薬を製造するための、式Ｉに示す化合物の結晶Ｂ、又は上記結晶組成物又は上記医薬組成物の使用を提供する。

【0036】

さらに、本願は、適用対象の哺乳類に対する治療有効量の上記式Ｉに示す化合物の結晶Ｂ、又は上記結晶組成物、又は上記医薬組成物の投与を含むファルネソイドＸ受容体に関連する各種の疾患と症状の治療もしくは予防方法又は使用を提供する。

【0037】

さらに、本願はファルネソイドＸ受容体に関連する各種の疾患と症状の治療又は予防のための上記式Ｉに示す化合物の結晶Ｂ、又は上記結晶組成物、又は上記医薬組成物を提供する。

【0038】

本願のもう一つの態様は、式Ｉに示す化合物の固体非晶質を提供する。

【化3】

【0039】

本願のいくつかの実施形態において、前記式Ｉに示す化合物の固体非晶質のＸＲＰＤには、典型的な回折ピークがなく、図１０に記載のとおりであってもよい。

【0040】

本願のいくつかの実施形態において、前記式Ｉに示す化合物の固体非晶質のＭＤＳＣパターンは、図１１に示すとおりである。

【0041】

本願のいくつかの実施形態において、前記式Ｉに示す化合物の固体非晶質のＴＧＡパターンは、図１２に示すとおりである。

【0042】

本願のいくつかの実施形態において、前記式Ｉに示す化合物の固体非晶質は、メタノール、エタノール、ｎ－プロパノール、イソプロパノール、ｎ－ブタノール、イソブタノール、ｔ－ブタノール、テトラヒドロフラン、アセトン、ＤＭＦ又はこれらの混合溶媒から選択される無水溶媒において製造される。いくつかの実施形態において、好ましくは、前記溶媒はエタノール又はイソプロパノールから選択される。

【0043】

さらに、本願は式Ｉに示す化合物の固体非晶質の製造方法を提供し、当該方法は、以下のステップ１）と、２）とを含む。
１）メタノール、エタノール、ｎ－プロパノール、イソプロパノール、ｎ－ブタノール
、イソブタノール、ｔ－ブタノール、テトラヒドロフラン、アセトン、ＤＭＦ又はこれらの混合溶媒から選択される無水溶媒に式Ｉに示す化合物を溶解する。
２）冷却して固体を析出させる又は溶媒を完全に蒸発し、そして任意選択的に濾過し、洗浄する且つ／又は乾燥させる。

【0044】

本願のいくつかの実施形態において、前記式Ｉに示す化合物の固体非晶質の製造方法のステップ１）において、好ましくは、前記溶媒はエタノール又はイソプロパノールである。

【0045】

本願のいくつかの実施形態において、前記式Ｉに示す化合物の固体非晶質の製造方法において、前記溶媒の使用量は比較的広い範囲から選択できる。いくつかの実施形態において、式Ｉに示す化合物１ｇに対する前記溶媒の使用量（体積単位ｍＬで計算）は０．１ｍＬ～１００ｍＬから選択され、好ましくは１ｍＬ～５０ｍＬから選択され、より好ましくは２ｍＬ～２０ｍＬから選択される。

【0046】

さらに、本願は式Ｉに示す化合物の固体非晶質を含む医薬組成物を提供し、当該医薬組成物は有効量の式Ｉに示す化合物の固体非晶質を含む。また、当該医薬組成物は薬学的に許容される担体、賦形剤及び／又は媒体を含むか、又は含まなくてもよい。

【0047】

さらに、本願はファルネソイドＸ受容体に関連する各種の疾患と症状の治療又は予防のための医薬を製造するための、式Ｉに示す化合物の固体非晶質又は上記医薬組成物の使用を提供する。

【0048】

さらに、本願は適用対象の哺乳類に対する治療有効量の上記式Ｉに示す化合物の固体非晶質又は上記医薬組成物の投与を含むファルネソイドＸ受容体に関連する各種の疾患と症状の治もしくは予防方法又は使用を提供する。

【0049】

本願において、前記ファルネソイドＸ受容体に関連する各種疾患と症状は、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、原発性胆汁性肝硬変（ＰＢＣ）、胆汁うっ滞性肝疾患、慢性肝疾患、Ｃ型肝炎感染、アルコール性肝疾患、肝線維化、原発性硬化性胆管炎（ＰＳＣ）、胆石、胆道閉鎖症、下部尿路症状と良性前立腺過形成（ＢＰＨ）、尿路結石、肥満症、２型糖尿病、アテローム性動脈硬化、動脈硬化症、高コレステロール血症、高脂血症が誘発する又は高コレステロール血症と高脂血症が誘発する肝機能障害を含む。

【0050】

本願において、Ｘ線回折パターンは下記の事項にて測定される。装置：Ｂｒｕｋｅｒ Ｄ８ ＡＤＶＡＮＣＥ Ｘ線回折装置；方法：ターゲット：Ｃｕ：Ｋ－α；波長λ＝１．５４１７９Å；管電圧Ｖｏｌｔａｇｅ：４０ｋＶ；発散スリット：０．６０ｍｍ；検出器スリット：１０．５０ｍｍ；発散制限スリット：７．１０ｍｍ；管電流：４０ｍＡ；走査範囲：４°～４０°；走査速度：１ステップ０．１２秒、１ステップ０．０２°；試料トレイ回転数：１５ｒｐｍ。

【0051】

なお、Ｘ線回折パターンにおいて、結晶化合物から得た回折パターンは、特定の結晶形に対して特徴的なものであり、そのバンド（特に小さい角度において）の相対強度は結晶条件、粒径及び他の測定条件の差異による優先配向効果によって変化する可能性がある。そのため、回折ピークの相対強度に対応する結晶形は特徴的なものではなく、既知の結晶形と同一のものであるかどうかを判断する際、ピークの相対強度ではなく相対位置に注目すべきである。また、任意の確定された結晶形において、ピークの位置に微小な誤差が存在し得ることは、結晶学の分野では周知された事実である。例えば、試料の分析時における温度の変化、試料の移動、又は装置の標定などにより、ピークの位置は移動する可能性
があり、２θ値の測定誤差は約±０．３°又は±０．２°になる可能性もある。従って、各種の結晶形構造を決定する際、この誤差も考慮に含めるべきである。ＸＲＰＤパターンにおいて、通常２θ角又は面間隔ｄでピーク位置を表す。両者にはｄ＝λ／２ｓｉｎθという簡単な変換関係がある。ここで、ｄは面間隔、λは入射Ｘ線の波長、θは回折角である。同一種類の化合物の同一種類の結晶形の場合、そのＸＲＰＤパターンにおけるピーク位置は全体的に類似性を有し、相対強度の誤差が大きいという可能性がある。なお、混合物を同定する際、含有量の低減などの要素により回折線の一部欠失が生じる可能性があるが、このような場合、高純度の試料に観察された全てのバンドではなく、１つのバンドだけで結晶が同定されるという可能性がある。本分野で周知のように、当該ピーク相対強度（Ｉ％）はピーク高さ（Ｈｅｉｇｈｔ）に基づいて算出できる、又はピーク面積（Ａｒｅａ）に基づいて算出できる。本願において、典型的には、ピーク高さ（Ｈｅｉｇｈｔ）に基づいて算出する。

【0052】

本願において、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）は下記の事項にて行われる。装置：ＴＡ Ｑ２０００示差走査熱量計。方法：試料（１ｍｇ以内）をＤＳＣアルミニウム製試料パンに入れて、５０ｍＬ／分Ｎ_２の条件において、１０℃／分（又は５℃／分）の昇温速度で、試料を３０℃（室温）から３００℃（又は３５０℃）に加熱するように測定する。

【0053】

本願において、温度変調示差走査熱量測定（ＭＤＳＣ）は、下記の事項にて行われる。装置：ＴＡ Ｑ２０００示差走査熱量計。方法：試料（２ｍｇ以内）をＤＳＣアルミニウム製試料パンに入れて、在５０ｍＬ／分Ｎ_２の条件において、２℃／分の昇温速度、昇温幅２℃、周期６０秒で、試料を０℃から２００℃に加熱するように測定する。

【0054】

なお、ＤＳＣは、結晶構造の変化又は結晶融解により結晶が熱を吸収又は放出する場合の温度差を測定するために利用される。同一種類の化合物の同一種類の結晶形の場合、連続的に分析する過程で、温度差及び融点誤差は、典型的に約５℃以内にある。一つの化合物が特定のＤＳＣピーク又は融点を有するというのは、当該ＤＳＣピーク又は融点±５℃を指す。ＤＳＣは異なる結晶形を識別するための補助的な方法として利用できる。特定の結晶形は、当該温度差によって特徴的に認識できる。

【0055】

本願において、熱重量分析（ＴＧＡ）は下記事項にて行われる。装置：ＴＡ Ｑ５０００熱重量分析計。方法：試料（２～５ｍｇ）をＴＧＡ用白金製試料パンに入れて、２５ｍＬ／分Ｎ_２の条件において、１０℃／分の昇温速度で、試料を室温から３００℃に、又は重量が２０％減少するまで加熱するように測定する。

【0056】

なお、医薬の結晶形を製造する際、医薬分子が溶媒分子と接触する過程で、外部条件と内部要因により溶媒分子と化合物分子が共晶を形成して固体物質の中に残留される状況は避けられにくく、これによって溶媒和物が形成される。具体的には、定比溶媒和物及び不定比溶媒和物を含む。当該溶媒和物も本発明の範囲に含まれる。

【0057】

本願において、結晶に溶媒分子が含まれる場合、式Ｉの化合物に対する溶媒分子の当量比（モル量で計算）でこれを表す。例えば、式Ｉの化合物に対するＨ_２Ｏ分子の当量比（モル量で計算）が０．１～２．０ｅｑから選択される場合、当該結晶において、式Ｉの化合物とＨ_２Ｏ分子のモル量の比は１：０．１～２．０から選択されることを指す。

【0058】

本願において、用語「医薬組成物」とは、本願化合物と、本分野で一般的に使用される生理活性化合物を生物体（例えば、ヒト）に輸送するための担体、賦形剤及び／又は媒体とからなる１種以上の製剤を指す。医薬組成物は、生物体に対する本願化合物の投与を容易にするためのものである。

【0059】

用語「担体」は、細胞又は組織への特定化合物の導入を容易にするための化合物として定義される。例えば、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）は、特定の有機化合物を生物体の細胞又は組織に投与しやすいようにできるため、通常担体として使用される。

【0060】

「薬学的に許容される担体」は、国家薬品管理機関によって使用の許可を与えられたヒト又は家畜に使用可能な賦活剤、賦形剤、流動化剤、甘味剤、希釈剤、防腐剤、染料／着色剤、調味剤、界面活性剤、湿潤剤、分散剤、懸濁剤、安定化剤、等張化剤、溶媒又は乳化剤を含むが、これらに限定されない。

【0061】

「治療有効量」とは、本願化合物の量を指す。哺乳類、好ましくはヒトに投与される場合、次に定義されたように、哺乳類、好ましくはヒトにおけるウイルス感染の治療を実現できる。「治療有効量」に係る本願化合物の量は、化合物、疾患の状態又はその程度、投与方式及び治療対象の哺乳類の年齢に応じて異なっているが、当業者がその知識又は本発明に記載の内容によって决定してもよい。

【0062】

本願で使用される溶媒はいずれも市販品であり、さらに精製せずにそのまま使用できる。反応は一般的に不活性窒素ガスにおいて、無水溶媒の中で行われる。

【発明の効果】

【0063】

本願に係る式Ｉに示す化合物の結晶Ａ及び結晶Ｂは、純度が高い、結晶度が高い、安定性に優れる、吸湿性が低い等の利点を有する。本願に係る式Ｉに示す化合物の固体非晶質は、吸湿が低いという利点を有する。また、本願に係る式Ｉに示す化合物結晶Ａ、結晶Ｂ及び固体非晶質の製造方法は操作しやすく、溶媒が安価なもので入手しやすく、結晶化のための条件が穏やかであるため、産業化された生産に適する。

【図面の簡単な説明】

【0064】

【図1】図１は、式Ｉに示す化合物の結晶Ａ（実施例２の方法１）のＸＲＰＤパターンである。

【図2】図２は、式Ｉに示す化合物の結晶Ａ（実施例２の方法１）のＤＳＣパターンである。

【図3】図３は、式Ｉに示す化合物の結晶Ａ（実施例２の方法１）のＴＧＡパターンである。

【図4】図４は、式Ｉに示す化合物の結晶Ａ（実施例２の方法２）のＸＲＰＤパターンである。

【図5】図５は、式Ｉに示す化合物の結晶Ａ（実施例２の方法２）のＤＳＣパターンである。

【図6】図６は、式Ｉに示す化合物の結晶Ａ（実施例２の方法２）のＴＧＡパターンである。

【図7】図７は、式Ｉに示す化合物の結晶ＢのＸＲＰＤパターンである。

【図8】図８は、式Ｉに示す化合物の結晶ＢのＤＳＣパターンである。

【図9】図９は、式Ｉに示す化合物の結晶ＢのＴＧＡパターンである。

【図10】図１０は、式Ｉに示す化合物の固体非晶質のＸＲＰＤパターンである。

【図11】図１１は、式Ｉに示す化合物の固体非晶質のＭＤＳＣパターンである。

【図12】図１２は、式Ｉに示す化合物の固体非晶質のＴＧＡパターンである。

【実施例】

【0065】

以下記載の実施例は、本願に係る技術的解決手段に関する、さらなる非限定的詳細な説明である。本発明の範囲を限定するためのものではなく、本発明に係る例示的な説明と典型的例に過ぎない。本願で使用される溶媒、試薬及び原料等はいずれも市販されている化学用又は分析用の製品である。

【0066】

実施例１ 式Ｉの化合物の製造
ステップ１－１ 式３の化合物の製造

【化4】

２５℃で、メタノール（３３Ｌ）を５０Ｌ反応器に加え、基質２（３．３３０ｋｇ、８．２３ｍｏｌ）を反応器に加えて、ｐ－トルエンスルホン酸一水和物（１５６．６ｇ、０．８２３ｍｏｌ）を加え、反応液を６０℃に加熱して、当該温度で１２時間攪拌した。ＴＬＣによって反応を監視して、原料が消失したことが示され、ＨＰＬＣによって約１００％の産物が生成したことが示された。反応液を室温に冷却して、飽和炭酸水素ナトリウム溶液でｐＨ値を約９に調節して、溶液を遠心脱水して粗生成物を得て、酢酸エチル（３０Ｌ）で粗生成物を溶解し、飽和炭酸水素ナトリウム溶液（９Ｌ）と、水（９Ｌ）と、飽和食塩水（９Ｌ）とを順に使用して洗浄した。有機相を遠心脱水して製品を得た。産物の性状は褐色の油状液体である。

【0067】

^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ３．６６（ｓ，３Ｈ），３．６１－３．４９（ｍ，１Ｈ），２．７４－２．６６（ｍ，１Ｈ），２．４８－２．３３（ｍ，２Ｈ），２．２４－２．１５（ｍ，１Ｈ），２．０７－１．６１（ｍ，１３Ｈ），１．５４－１．４０（ｍ，３Ｈ），１．３１－１．０７（ｍ，６Ｈ），１．０２－０．７７（ｍ，９Ｈ），０．６９（ｓ，３Ｈ）。

【0068】

ステップ１－２ 式４の化合物の製造

【化5】

ジクロロメタン（３０Ｌ）で式３の化合物（３１００ｇ）を溶解して、イミダゾール（５２９．４ｇ）と、トリエチルアミン（７８６．８ｇ）とを順に加え、反応器内で冷却した（内部温度は５℃）。当該温度でＴＢＤＰＳＣｌ（２１４０ｇ）を徐々に滴下し、滴下する過程で温度が１０℃を超えないように注意し、滴下完了後に室温で反応液を攪拌して１６時間反応させた。ＴＬＣによって原料が完全に反応したことが示されると、反応液に水１５Ｌを徐々に滴下して、反応をクエンチした。静置して、反応液が分層すると、下層のジクロロメタン相を取り出して、飽和食塩水（１０Ｌ）でジクロロメタン相を洗浄し、有機相を濃縮させて産物を得た。産物の性状は褐色の油状液体である。

【0069】

^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ７．６９－７．６３（ｍ，４Ｈ），７．
４５－７．３４（ｍ，６Ｈ），３．７７（ｂｒ ｔ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，１Ｈ），３．６９（ｓ，３Ｈ），３．５４－３．４４（ｍ，１Ｈ），２．５７（ｑ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，１Ｈ），２．４６（ｂｒ ｄｄ，Ｊ＝３．０，１４．６Ｈｚ，１Ｈ），２．３６－２．２１（ｍ，２Ｈ），２．０８－１．６７（ｍ，９Ｈ），１．６２－１．１７（ｍ，１２Ｈ），１．１２－０．８７（ｍ，１４Ｈ），０．７０－０．６２（ｍ，６Ｈ）。

【0070】

ステップ１－３ 式５の化合物の製造

【化6】

１５℃で、テトラヒドロフラン（１０Ｌ）を５０Ｌ反応器に加え、Ｎ_２で保護して反応器にＬｉＡｌＨ_４（２３５ｇ、６．２ｍｏｌ）を加えて、反応液を内部温度が５℃になるまで冷却した。テトラヒドロフランで式４の化合物（２．０４ｋｇ）を溶解して、ＬｉＡｌＨ_４のテトラヒドロフラン溶液に徐々に滴下して、約２時間３０分で滴下を完了した。１５℃で反応液を２時間攪拌し、ＴＬＣによって反応を監視して、原料が消失したことが示された。反応液にＨ_２Ｏ（２３５ｍＬ）を徐々に滴下して反応をクエンチして、さらにテトラヒドロフラン溶液（２０Ｌ）を加え、１５％ＮａＯＨ溶液（２３５ｍＬ）を反応液に徐々に滴下えして、１２時間攪拌した。反応液を濾過して、ジクロロメタン（３Ｌ）でフィルターケーキを洗浄して、濾液を遠心脱水して、油状物質を得た。ＤＣＭ（１５Ｌ）で油状物質を溶解して、水（５Ｌ）及び飽和食塩水（５Ｌ）で有機相をそれぞれ１回洗浄し、濾液を遠心脱水して、白色固体（１．８ｋｇ）を得た。反応液を室温（約１６℃）に冷却して、飽和炭酸水素ナトリウム溶液でｐＨ値を約９に調節し、溶液を（少量が残るように）遠心脱水して粗生成物を得て、酢酸エチル（３０Ｌ）で粗生成物を溶解し、飽和炭酸水素ナトリウム溶液（９Ｌ）と、水（９Ｌ）と、飽和食塩水（９Ｌ）とで順に洗浄した。有機相を遠心脱水して製品を得た。産物の性状は褐色の油状液体である。

【0071】

^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ７．６４－７．５８（ｍ，４Ｈ），７．３７－７．２５（ｍ，６Ｈ），３．６８－３．５２（ｍ，３Ｈ），３．３８－３．２８（ｍ，１Ｈ），１．９１－１．０３（ｍ，２５Ｈ），１．０２－０．９３（ｍ，１１Ｈ），０．８８（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，３Ｈ），０．７２－０．６４（ｍ，６Ｈ），０．５７（ｓ，３Ｈ）。

【0072】

ステップ１－４ 式６の化合物の製造

【化7】

式５の化合物（３．５２ｋｇ、５．５８ｍｏｌ）の無水ジクロロメタン（３５Ｌ）溶液にイミダゾール（１．１４ｋｇ、１６．７３ｍｏｌ）を加えた。５℃で、反応系にクロロトリメチルシラン（１７７０ｍＬ、１３．９５ｍｏｌ）を滴下して、２時間で滴下を完了
した。１５℃で反応系を３時間攪拌した。ＴＬＣによって反応がほぼ完了したことを検出した。１５℃で反応系に水１０Ｌを加えて、攪拌し、分液した。水１０Ｌと、飽和食塩水１０Ｌとを順に使用してそれぞれ有機相を１回洗浄した。

【0073】

有機相を約５Ｌに濃縮させて、溶液にエタノール３０Ｌを加えた。１５℃で、溶液に炭酸カリウム（１．９３ｋｇ、１３．９５ｍｏｌ）を加えた。１５℃で反応系を１４時間攪拌した。ＴＬＣによって反応がほぼ完了したことを検出した。反応液を濾過して、ジクロロメタン３Ｌでフィルターケーキをリンスした。濾液を濃縮させて、油状物質を得た。ジクロロメタン２０Ｌで油状物質を溶解して、水１０Ｌと、飽和食塩水１０Ｌとを順に使用してそれぞれ１回洗浄した。無水硫酸ナトリウム３ｋｇで有機相を乾燥させて、濾過した。シリカゲルカラムクロマトグラフィー（１００～２００メッシュ、２３０ｍｍ×８００ｍｍ）によって精製し、ｎ－ヘプタン：酢酸エチル＝３０：１～２０：１にて溶出した。目的化合物６を得た（３．２０ｋｇ、純度８７％）。

【0074】

^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：δ７．７７－７．６４（ｍ，４Ｈ），７．４５－７．３２（ｍ，６Ｈ），３．７８－３．５６（ｍ，３Ｈ），３．４３－３．３１（ｍ，１Ｈ），１．９８－１．１３（ｍ，２４Ｈ），１．０７（ｓ，９Ｈ），０．９７（ｄ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，３Ｈ），０．８３－０．７４（ｍ，４Ｈ），０．６８－０．５５（ｍ，６Ｈ），０．１７－０．０５（ｍ，９Ｈ）。

【0075】

ステップ１－５ 式８の化合物の製造

【化8】

反応器に式６の化合物（２４９８．０ｇ、３．１０ｍｏｌ）を加えて、ＴＨＦ（１２．５Ｌ）で溶解し、内部温度を５～１０℃に制限して、徐々にｔ－ＢｕＯＮａ（６１４．２ｇ、６．２０ｍｏｌ）を加え、約４０分間で加え終えたら、１０分間攪拌して、２０～２３℃に昇温して１時間３０分攪拌して、５～１０℃に冷却した。内部温度を保持して、反応液に式７の化合物のＴＨＦ溶液（１２．５Ｌ、６．２０ｍｏＬ、１０７３．１ｇ）を滴下して、６０℃に昇温した。１時間３０分攪拌して、ＴＬＣ及びＨＰＬＣによって完全に反応したことが検出されると、２０℃に冷却した。水２５Ｌを加えてクエンチし、酢酸エチルで（２５Ｌ×２）抽出して、有機相を合わせて、飽和食塩水で（２５Ｌ×３）洗浄した。遠心脱水して油状の粗生成物を得た。粗生成物をアセトン２．５Ｌに溶解して、３つの１０Ｌ三口フラスコに合計で６．６×３Ｌのメタノールを加えた。内部温度を－１０～－１５℃に制限して、粗生成物溶液を徐々に滴下して、攪拌すると、大量の固体が析出した。濾過し、メタノール３．０Ｌでフィルターケーキを洗浄して、黄色の固体を得た（乾燥されていない）。黄色固体にメタノール１８．０Ｌを加えて、一晩スラリー化させた。濾過して、メタノール３．０Ｌでフィルターケーキを洗浄して、黄色の固体を得て（乾燥されていない）、黄色固体にメタノール１８．０Ｌを加え、一晩スラリー化させて濾過した。メタノール２．０Ｌでフィルターケーキを洗浄した。２４時間真空乾燥させて、黄色固体２５２２．０ｇ、すなわち式８の化合物を得た（２５２２．０ｇ、収率９０％、純度９２．９％）。

【0076】

^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ＝８．２５（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），７．７３（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），７．６３－７．５１（ｍ，４Ｈ），
７．３３－７．２１（ｍ，６Ｈ），４．４８－４．２７（ｍ，２Ｈ），３．５０（ｓ，１Ｈ），３．３１－３．１８（ｍ，１Ｈ），１．９８－１．０３（ｍ，２７Ｈ），０．９５（ｓ，９Ｈ），０．７３－０．６４（ｍ，４Ｈ），０．５８－０．４６（ｍ，６Ｈ），０．００（ｓ，９Ｈ）。

【0077】

ステップ２－２ 式９の化合物の製造

【化9】

反応器（２０Ｌ）に式８の化合物（２５２０．０ｇ、２．７９ｍｏｌ）と、ＥｔＯＨ（１３．０Ｌ）とを加え、攪拌して溶解させ、内部温度を１０℃以内に制限して、ＮａＯＨ（２２３２．０ｇ、５５．８ｍｏｌ）の水溶液（１３．０Ｌ）を数回に分けて加えた。温度を１０５℃に上げ、２.８時間攪拌した。ＴＬＣ及びＨＰＬＣによって完全に反応した
ことが検出されると、反応液を１０℃に冷却して、２時間静置し、底部に固体が析出した。上清から１９．５Ｌを除去して、反応液に水３９．０Ｌを加えて、内部温度を１２℃に制限して、３６時間攪拌した。濾過して、水６．０Ｌと、アセトニトリル６．０Ｌとで固体を洗浄して、アセトニトリル１０．０Ｌで２時間スラリー化させて、濾過すると、固体を得た。アセトン１２．０Ｌで１６時間スラリー化させ、濾過して、固体を得た。アセトン１２．０Ｌで再度１６時間スラリー化させた。濾過して、製品を乾燥させて、白色固体２３３２．３ｇの式９の化合物を得た。（２３３２．３ｇ、収率９４．７％、純度９９．７％）。

【0078】

^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ_４）δ＝８．４８（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），８．０７（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），７．５５（ｂｒ ｄｄ，Ｊ＝６．５，１２．５Ｈｚ，４Ｈ），７．４１－７．１１（ｍ，６Ｈ），４．５２－４．１５（ｍ，２Ｈ），３．５４（ｂｒ ｓ，１Ｈ），３．３４－３．２２（ｍ，１Ｈ），２．０４－１．１４（ｍ，２８Ｈ），０．９３（ｓ，９Ｈ），０．６９（ｓ，４Ｈ），０．６０－０．４３（ｍ，６Ｈ），０．００（ｓ，９Ｈ）。

【0079】

ステップ２－３ 式Ｉの化合物の製造

【化10】

反応器（５０Ｌ）に式９の化合物（２３３０．３ｇ、２．６５ｍｍｏｌ）を加え、ＴＨＦ（２４．０Ｌ）を加えて溶解させた。内部温度を１０℃に制限して、濃ＨＣｌ（１０．０Ｌ、１２０．００ｍｏｌ）を徐々に滴下して、２時間で１３℃に昇温させて（室温）で９０時間攪拌した。ＴＬＣによって検出して、８～１０℃で水酸化ナトリウム溶液７５Ｌ（６０００ｇ）を徐々に滴下してｐＨを１０に調節し、半時間攪拌してメチルｔ－ブチルエーテルで（３０Ｌ×４）抽出し、濃ＨＣｌ（３０００ｍＬ）でｐＨを５に調節して、酢
酸エチルで（３０Ｌ×２）抽出し、水で有機相を（３０Ｌ×４）洗浄し、有機相を濃縮させて、産物１３５０ｇを得た。酢酸エチル２．０Ｌとｎ－ヘプタン５．０Ｌの混合溶媒で当該産物を一晩スラリー化させ、濾過して、産物１２８０ｇを得た。酢酸エチル９．０Ｌを加えて加熱して（８０℃）清澄化させた後、徐々に室温（１０℃）に冷却して、式Ｉの化合物１２２２ｇを得た。

【0080】

^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，メタノール－ｄ_４）δ＝８．６９（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），８．２３（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），４．６７－４．３０（ｍ，２Ｈ），３．６７（ｂｒ ｓ，１Ｈ），３．３４－３．２２（ｍ，１Ｈ），２．１０－１．１１（ｍ，２５Ｈ），１．０９－０．９７（ｍ，３Ｈ），０．９６－０．８６（ｍ，６Ｈ），０．７３（ｓ，３Ｈ）。

【0081】

当該ステップで得た産物は、式Ｉに示す化合物の結晶Ｂである。その典型的なＸＲＰＤパターン、ＤＳＣパターン、ＴＧＡパターンはそれぞれ図７、図８、図９に示すとおりである。

【0082】

実施例２ 式Ｉに示す化合物の結晶Ａ
方法１：
式Ｉの化合物５８ｇをエタノール（２２５ｍＬ）と水（１７５ｍＬ）の混合溶媒に懸濁させて、４５℃で１８時間攪拌して、大量の白色固体が生成すると、濾過して、フィルターケーキを乾燥させて産物４８ｇを得た。

【0083】

方法２：
式Ｉの化合物２００ｍｇを水（２ｍＬ）に加えて懸濁液を調製して、４０℃で１日半攪拌した後、温度を５０℃に調整して引き続き１日攪拌し、試料を遠心分離して３０℃の真空乾燥器に入れて乾燥させて産物を得た。

【0084】

式Ｉの化合物の結晶Ａの典型的なＸＲＰＤパターン、ＤＳＣパターン、ＴＧＡパターンはそれぞれ図１、図２、図３に示すとおりである（実施例２の方法１）。

【0085】

式Ｉの化合物の結晶Ａの別の典型的なＸＲＰＤパターン、ＤＳＣパターン、ＴＧＡパターンはそれぞれ図４、図５、図６に示すとおりである（実施例２の方法２）。

【0086】

実施例３ 式Ｉに示す化合物の固体非晶質
式Ｉの化合物１２２ｇを無水エタノール（５００ｍＬ）に溶解して、１５℃で３０分間攪拌し、溶液を加熱して清澄化させた後、遠心脱水して、オイルポンプで吸引して固体の重量が変わらなくなると、白色固体１１９ｇを得た。

【0087】

式Ｉに示す化合物の固体非晶質の典型的なＸＲＰＤパターンは図８に示すとおりである。

【0088】

実験例１ 結晶Ａの固体の安定性試験
１）４０℃（開放）、２）６０℃（開放）、３）室温／９２．５％ＲＨ（開放）、４）室温／７５％ＲＨ（開放）、５）４０℃／７５％ＲＨ（開放）、６）６０℃／７５％ＲＨ（開放）といった条件における結晶Ａの固体の安定性を調べた。前記室温は２０～３０℃から選択された。

【0089】

適量の結晶Ａ試料を秤量してガラス試料瓶の底部に置いて、薄く広げた。上記条件において設置された試料は、いずれもアルミ箔で瓶口を密封し、試料が外部空気と充分に接触するように、アルミ箔に小さな穴を開けた。５日目、１０日目にサンプルを採取してＸＲ
ＰＤ検出を行い、検出結果を０日の初期検出結果と比較すると、いずれも結晶形試料は変化しなかった結果であった。

【0090】

実験例２ 結晶Ｂの固体の安定性試験
１）室温／９２．５％ＲＨ（開放）、２）室温／７５％ＲＨ（開放）、３）４０℃／７５％ＲＨ（開放）、４）６０℃／７５％ＲＨ（開放）といった条件における結晶Ｂの固体の安定性を調べた。前記室温は２０～３０℃から選択された。

【0091】

適量の結晶Ｂ試料を秤量してガラス試料瓶の底部に置いて、薄く広げた。上記条件において設置された試料は、いずれもアルミ箔で瓶口を密封し、試料が外部空気と充分に接触するように、アルミ箔に小さな穴を開けた。５日目、１０日目にサンプルを採取してＸＲＰＤ検出を行い、検出結果を０日の初期検出結果と比較すると、いずれも結晶形試料は変化しなかった結果であった。

【0092】

実験例３ 式Ｉに示す化合物の固体非晶質固体の安定性試験
１）室温／７５％ＲＨ（開放）、２）４０℃／７５％ＲＨ（開放）、３）６０℃／７５％ＲＨ（開放）といった条件における式Ｉに示す化合物の固体非晶質固体の安定性を調べた。前記室温は２０～３０℃から選択された。

【0093】

適量の非晶質試料を秤量して、それぞれ異なる仕様のガラス試料瓶の底部に置いて、薄く広げた。上記条件において設置された試料は、いずれもアルミ箔で瓶口を密封し、試料が外部空気と充分に接触するように、アルミ箔に小さな穴を開けた。１０日目、１か月後にサンプルを採取して検出を行い、検出結果を０日の初期検出結果と比較した。ＸＲＰＤ検出結果では、試料に明らかな変化がないことが確認された。

【0094】

実験例４ 吸湿性実験
下記の方法と条件で、結晶Ａ及び式Ｉに示す化合物の固体非晶質に対し動的水蒸気吸着測定（Ｄｙｎａｍｉｃ Ｖａｐｏｒ Ｓｏｒｐｔｉｏｎ、ＤＶＳ）分析を行った。試料（１０～１５ｍｇ）を秤量して試料トレイに入れる。装置型番：ＳＭＳ ＤＶＳ Ａｄｖａｎｔａｇｅ動的水蒸気吸着測定装置、温度：２５℃、平衡：ｄｍ／ｄｔ＝０．０１％／分（最短：１０分間、最長：１８０分間）、乾燥：０％ＲＨで１２０分間乾燥、ＲＨ（％）測定勾配：１０％、ＲＨ（％）測定勾配範囲：０％～９０％～０％。次のように吸湿性を分類している。

【0095】

【表4】

【0096】

結果により、１）結晶Ａは２５±１℃及び８０±２％ＲＨにおける吸湿による重量増加が０．８３５％であり、やや吸湿性があること、２）式Ｉに示す化合物の固体非晶質は２
５±１℃及び８０±２％ＲＨにおける吸湿による重量増加が１．７７５％であり、やや吸湿性があることが判明した。

【0097】

実験例５：インビトロアッセイ
ＦＸＲ生化学実験
実験目的：
化学増幅型ルミネッセンスプロキシミティホモジニアスアッセイ（ａｌｐｈａｓｃｒｅｅｎ）により化合物のＦＸＲ結合反応に対する活性化作用を検出する。

【0098】

実験材料：
１．タンパク質：グルタチオン－Ｓ－転移酵素で標識されたＦＸＲヒトタンパク質（インビトロジェン社提供）
２．共活性化因子：ビオチンで標識されたステロイド受容体補助因子（アナスペック社提供）
３．検出試薬：化学増幅型ルミネッセンスプロキシミティホモジニアスアッセイ（ａｌｐｈａｓｃｒｅｅｎ）検出キット（パーキンエルマー社提供）

【0099】

実験方法：
１．化合物の希釈：被験化合物の４０μＭのＤＭＳＯ溶液を調製して、化合物を３倍希釈して１０の濃度を設定した。参照化合物の４００μＭのＤＭＳＯ溶液を調製して、１．５倍希釈して１０の濃度を設定した。希釈されたＤＭＳＯ溶液を各ウェル１５０ｎＬで３８４マイクロプレートのウェルに加えた。

【0100】

２．グルタチオン－Ｓ－転移酵素で標識されたＦＸＲヒトタンパク質及びビオチンで標識されたステロイド受容体補助因子をそれぞれ、濃度０．４ｎＭ及び濃度３０ｎＭの混合溶液として調製した。各ウェル１５μＬで３８４マイクロプレートのウェルに加えた。室温で１時間インキュベートした。

【0101】

４．化学増幅型ルミネッセンスプロキシミティホモジニアスアッセイ（ａｌｐｈａｓｃｒｅｅｎ）検出キット内の受容体ビーズ混合液を１２５倍希釈して、各ウェル７．５μＬで３８４マイクロプレートのウェルに加えた。実験過程において暗所条件で操作した。室温で１時間インキュベートした。

【0102】

５．化学増幅型ルミネッセンスプロキシミティホモジニアスアッセイ（ａｌｐｈａｓｃｒｅｅｎ）検出キット内の供与体ビーズ混合液を１２５倍希釈して、各ウェル７．５μＬで３８４マイクロプレートのウェルに加えた。実験過程において暗所条件で操作した。室温で１時間インキュベートした。

【0103】

６．ＥＣ_５０測定：Ｅｎｖｉｓｉｏｎプレートリーダーを使用して波長６８０ｎｍにて励起させ、５２０～６２０ｎｍにおける吸収信号を読み取った。

【0104】

７．データ分析：Ｐｒｉｓｍ ５．０でデータを分析して、化合物の活性化作用ＥＣ_５０値を算出した。化合物の最大信号値と参照化合物の最大信号値との比値を、化合物の活性化効力パーセンテージ（Ｅｆｆｉｃａｃｙ）とした。

【0105】

ＦＸＲ細胞実験
実験目的：
β－ラクタマーゼレポーター遺伝子を利用して化合物の細胞機能活性に対する影響を検出する。

【0106】

実験材料：
１．細胞株：ＦＸＲ ＨＥＫ ２９３Ｔ ＤＡ
２．細胞培地：ＤＭＥＭ培地に１０％血清及びペニシリン／ストレプトマイシン（１×）添加
３．検出試薬：ＧｅｎｅＢＬＡｚｅｒ（登録商標）レポーター遺伝子検出キット（インビトロジェン社提供）

【0107】

実験方法：
１．化合物の希釈：被験化合物の１００μＭのＤＭＳＯ溶液を調製して、化合物を３倍希釈して１０の濃度を設定した。参照化合物の１００μＭのＤＭＳＯ溶液を調製して、１．３倍希釈して１０の濃度を設定した。希釈されたＤＭＳＯ溶液を各ウェル２００ｎＬで３８４マイクロプレートのウェルに加えた。

【0108】

２．細胞接種：ＦＸＲ ＨＥＫ ２９３Ｔ ＤＡ細胞を蘇生させて、培地で再懸濁させ、密度が５×１０^５個／ｍＬになるように希釈して、各ウェル４０μＬで３８４マイクロプレートのウェルに加えた。

【0109】

３． ３７℃と５％ＣＯ_２の条件において、３８４マイクロプレートを１６時間培養した。

【0110】

４．１ｍＭのＬｉｖｅＢＬＡｚｅｒ（登録商標）－ＦＲＥＴ Ｂ／Ｇ（ＣＣＦ４－ＡＭ）基質６μＬをＢ溶液６０μＬ及びＣ溶液９３４μＬと混合させて、各ウェル８μＬで３８４マイクロプレートのウェルに加えた。

【0111】

５．室温下の暗所条件で、３８４マイクロプレートを２時間インキュベートした。

【0112】

６．ＥＣ_５０測定：Ｅｎｖｉｓｉｏｎプレートリーダーを使用して波長４０９ｎｍにて励起させ、４６０ｎｍ及び５３０ｎｍにおける吸収信号を読み取った。

【0113】

７．データ分析：Ｐｒｉｓｍ ５．０でデータを分析して、化合物の活性化作用ＥＣ_５０値を算出した。被験化合物の最大信号値と参照化合物（ケノデオキシコール酸、ＣＤＣＡ）の最大信号値との比値を、化合物の活性化効力パーセンテージ（Ｅｆｆｉｃａｃｙ）とした。

【0114】

【表5】

【0115】

結論：本願化合物はＦＸＲ受容体に対し顕著なアゴニスト作用を有し、細胞レベルにおいてもＦＸＲ受容体に対して比較的顕著なアゴニスト作用を有する。

【0116】

実験例６：インビボアッセイ
単独投与マウスの薬物動態学研究：
Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ雄マウス１２匹を、１群６匹でランダムに２群に分けた。群１は静脈投与群として、２ｍｇ／ｋｇ、２ｍＬ／ｋｇ尾静脈注射投与した（溶媒は１０％ＨＰｂＣ
Ｄ水溶液で、医薬の溶解度が好ましくない場合は、共溶媒を加える）。群２は経口投与群として、１０ｍｇ／ｋｇ、１０ｍＬ／ｋｇ胃内投与した（溶媒は０．５％ＨＰＭＣ水溶液）。静脉投与群は投与後０．０８３、０．２５、０．５、１、２、４、６、８、２４時間に血漿試料を採取した（Ｋ_２－ＥＤＴＡで抗凝固）。経口投与群は投与後０．２５、０．５、１、２、４、６、８、２４時間に血漿試料を採取した。各群の６匹の動物に対し、同一の時刻には３匹の血液サンプルを採取し、１回目の３匹の採取と２回目の３匹の採取は交互に実施した。ＬＣ－ＭＳ／ＭＳを利用して血漿試料分析を行った。血漿濃度と時間の関係性を示すグラスをプロットし、Ｐｈｏｅｎｉｘ ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ ６．３でＰＫパラメータを算出した。

【0117】

【表6】

【0118】

結論：表２に示すように、同一用量の経口投与後、式Ｉの化合物の最高血中濃度は参照化合物オベチコール酸を上回り、血中濃度時間曲線下面積も参照化合物オベチコール酸を上回っている。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】