知財求人 - 知財ポータルサイト「IP Force」
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】特許公報(B2)
(11)【特許番号】
(24)【登録日】2023-03-20
(45)【発行日】2023-03-29
(54)【発明の名称】ウナギ目魚類仔魚を飼育する方法
(51)【国際特許分類】
A01K 61/10 20170101AFI20230322BHJP
【ＦＩ】
A01K61/10
【請求項の数】
5
(21)【出願番号】P 2019566983
(86)(22)【出願日】2019-01-10
(86)【国際出願番号】 JP2019000466
(87)【国際公開番号】W WO2019146410
(87)【国際公開日】2019-08-01
【審査請求日】2021-12-17
(31)【優先権主張番号】P 2018011279
(32)【優先日】2018-01-26
(33)【優先権主張国・地域又は機関】JP
(73)【特許権者】
【識別番号】393030626
【氏名又は名称】株式会社新日本科学
(74)【代理人】
【識別番号】100116850
【弁理士】
【氏名又は名称】廣瀬 隆行
(74)【代理人】
【識別番号】100165847
【弁理士】
【氏名又は名称】関 大祐
(72)【発明者】
【氏名】永田 良一
(72)【発明者】
【氏名】川上 優
【審査官】吉原 健太
(56)【参考文献】
【文献】特表２０１６－５２１５７０（ＪＰ，Ａ）
【文献】特開昭５１－０１８６９５（ＪＰ，Ａ）
【文献】Akihiro Okamura et al.，Growth and survival of eel leptocephali (Anguilla japonica) in low-salinity water，Aquaculture，2009年11月，296巻，p.367-372
(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)
Ａ０１Ｋ ６１／００ － ６３／１０
(57)【特許請求の範囲】
【請求項1】
塩分濃度が１０‰以上３８‰以下の環境でウナギ目魚類仔魚を飼育する方法であって，ウナギ目魚類仔魚が孵化してから前記ウナギ目魚類仔魚が開口するまでを第１期とし，
第１期の後前記ウナギ目魚類仔魚の全長が１０ｍｍとなるまでを第２期とした場合に，
第１期のうち少なくとも半分の期間を，塩分濃度が３４‰以上３６‰以下の環境で前記ウナギ目魚類仔魚を育成し，
第２期のうち少なくとも半分の期間を，塩分濃度が１０‰以上２８‰以下の環境で前記ウナギ目魚類仔魚を育成する，
方法であって，第２期の後前記ウナギ目魚類仔魚の全長が２０ｍｍとなるまでを第３期としたときに，
第３期のうち少なくとも半分の期間を，塩分濃度が２１‰以上３６‰以下の環境で前記ウナギ目魚類仔魚を育成する，
方法。
【請求項2】
請求項１に記載のウナギ目魚類仔魚を飼育する方法であって，第２期のうち少なくとも半分の期間を，塩分濃度が１６‰以上２５‰以下の環境で前記ウナギ目魚類仔魚を育成する，
方法。
【請求項3】
請求項１に記載のウナギ目魚類仔魚を飼育する方法であって，第１期の末日又は２日前から第２期の初日又は２日目にかけて塩分濃度を逓減させる方法。
【請求項4】
請求項１に記載のウナギ目魚類仔魚を飼育する方法であって，第３期のうち少なくとも半分の期間を，塩分濃度が２３‰以上２５‰以下の環境で前記ウナギ目魚類仔魚を育成する，
方法。
【請求項5】
請求項１に記載のウナギ目魚類仔魚を飼育する方法であって， 第２期の末日又は２日前から第３期の初日又は２日目にかけて塩分濃度を徐々に変化させる方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は，ウナギ目魚類仔魚を飼育する方法に関する。より詳しく説明すると，培養系の成分濃度を効果的に変化させるウナギ目魚類仔魚を飼育する方法に関する。
【背景技術】
【0002】
特開２０１３－２３６５９８号公報には，飼育水の溶存酸素の濃度を調整するウナギ目魚類の飼育方法が記載されている。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0003】
【文献】特開２０１３－２３６５９８号公報
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0004】
一方，ウナギ目魚類は，孵化してから仔魚まで成長させることが極めて難しく，培養系の溶存酸素濃度（ＤＯ）を調整するのみでは，効果的にウナギ目魚類仔魚を飼育できない。このため，生存率が高いウナギ目魚類仔魚の飼育方法（ウナギ目魚類仔魚又はウナギ目魚類の製造方法）が望まれた。
【課題を解決するための手段】
【0005】
本発明は，基本的には，ウナギ目魚類仔魚が開口した後に培養系の塩分濃度を低い状態とすることで，効果的にウナギ目魚類仔魚を飼育できるという実施例による知見に基づく。
【0006】
本発明は，ウナギ目魚類仔魚を飼育する方法に関する。この方法は，基本的には，塩分濃度が１０‰以上３８‰以下の環境でウナギ目魚類仔魚を飼育する方法である。
ウナギ目魚類仔魚が孵化してからウナギ目魚類仔魚が開口するまでを第１期とする。そして， 第１期の後から，ウナギ目魚類仔魚の全長が１０ｍｍとなるまでを第２期とする。
その場合，第１期のうち少なくとも半分の期間を，塩分濃度が３４‰以上３６‰以下の環境でウナギ目魚類仔魚を育成する。そして，第２期のうち少なくとも半分の期間を，塩分濃度が１０‰以上２８‰以下の環境でウナギ目魚類仔魚を育成する。
ウナギ目魚類仔魚が孵化してからウナギ目魚類仔魚が開口するまでを第１期とする。そして， 第１期の後から，ウナギ目魚類仔魚の全長が１０ｍｍとなるまでを第２期とする。
その場合，第１期のうち少なくとも半分の期間を，塩分濃度が３４‰以上３６‰以下の環境でウナギ目魚類仔魚を育成する。そして，第２期のうち少なくとも半分の期間を，塩分濃度が１０‰以上２８‰以下の環境でウナギ目魚類仔魚を育成する。
【0007】
この方法は，第２期のうち少なくとも半分の期間を，塩分濃度が１６‰以上２５‰以下の環境でウナギ目魚類仔魚を育成するものが好ましい。
【0008】
この方法は，第１期の末日又は２日前から第２期の初日又は２日目にかけて塩分濃度を逓減させることが好ましい。
【0009】
次に，第２期の後からウナギ目魚類仔魚の全長が２０ｍｍとなるまでを第３期とする。
この場合，第３期のうち少なくとも半分の期間を，塩分濃度が２１‰以上３６‰以下の環境でウナギ目魚類仔魚を育成することが好ましい。第３期のうち少なくとも半分の期間を，塩分濃度が２３‰以上２５‰以下の環境でウナギ目魚類仔魚を育成するものがより好ましい。さらに，第２期の末日又は２日前から第３期の初日又は２日目にかけて塩分濃度を徐々に変化させるものが好ましい。
この場合，第３期のうち少なくとも半分の期間を，塩分濃度が２１‰以上３６‰以下の環境でウナギ目魚類仔魚を育成することが好ましい。第３期のうち少なくとも半分の期間を，塩分濃度が２３‰以上２５‰以下の環境でウナギ目魚類仔魚を育成するものがより好ましい。さらに，第２期の末日又は２日前から第３期の初日又は２日目にかけて塩分濃度を徐々に変化させるものが好ましい。
【発明の効果】
【0010】
実施例により実証された通り，本発明によれば，効果的にウナギ目魚類仔魚を飼育できる。
【図面の簡単な説明】
【0011】
【発明を実施するための形態】
【0012】
本発明は，ウナギ目魚類仔魚を飼育する方法に関する。この方法は，基本的には，塩分濃度が１０‰以上３８‰以下の環境でウナギ目魚類仔魚を飼育する方法である。
【0013】
ウナギ目魚類仔魚の生育期区分
本明細書では，ウナギ目魚類仔魚の生育期区分を以下の通り定義する。
ウナギ目魚類仔魚が孵化してからウナギ目魚類仔魚が開口するまで（給餌を行う前まで）を第１期とする。そして，第１期の後から，ウナギ目魚類仔魚の全長が１０ｍｍとなるまでを第２期とする。第２期の後からウナギ目魚類仔魚の全長が２０ｍｍとなるまでを第３期とする。
なお，ウナギ目魚類仔魚が複数の場合は，第１期は，その半数が開口するまでの期間とすればよい。第２期及び第３期も同様である。例えば，第２期はウナギ目魚類仔魚の半数の全長が１０ｍｍ以上となるときまでとすればよいし，第３期はウナギ目魚類仔魚の半数の全長が２０ｍｍ以上となるときまでとすればよい。
本明細書では，ウナギ目魚類仔魚の生育期区分を以下の通り定義する。
ウナギ目魚類仔魚が孵化してからウナギ目魚類仔魚が開口するまで（給餌を行う前まで）を第１期とする。そして，第１期の後から，ウナギ目魚類仔魚の全長が１０ｍｍとなるまでを第２期とする。第２期の後からウナギ目魚類仔魚の全長が２０ｍｍとなるまでを第３期とする。
なお，ウナギ目魚類仔魚が複数の場合は，第１期は，その半数が開口するまでの期間とすればよい。第２期及び第３期も同様である。例えば，第２期はウナギ目魚類仔魚の半数の全長が１０ｍｍ以上となるときまでとすればよいし，第３期はウナギ目魚類仔魚の半数の全長が２０ｍｍ以上となるときまでとすればよい。
【0014】
第１期は，通常，孵化してから５～８日齢までである。
第２期は，通常，約４０日齢（例えば，２０～５０日齢，環境によって３５～４５日齢）までである。
第３期は，通常，約１００日齢（例えば，５０～１２０日齢，環境によって９０～１１０日齢）までである。
第２期は，通常，約４０日齢（例えば，２０～５０日齢，環境によって３５～４５日齢）までである。
第３期は，通常，約１００日齢（例えば，５０～１２０日齢，環境によって９０～１１０日齢）までである。
【0015】
ウナギ目魚類
ウナギ目魚類の例は，ウナギ，アナゴ，ハモ及びウツボである。これらの中ではウナギが好ましい。ウナギの例は，ニホンウナギ（Anguilla japonica），ヨーロッパウナギ（Anguilla anguilla），オオウナギ（Anguilla marmorata），及びアメリカウナギ（Anguilla rostrata）である。なお，ウナギ目魚類は，レプトケファルス幼生を経て成長するため，以下ではウナギを中心に説明するものの，他のウナギ目魚類についても同様に育成させることができる。ウナギ目魚類の仔魚は，レプトケファルス幼生とよばれる。自然界では，例えば，ニホンウナギ（Ａｎｇｕｉｌｌａ ｊａｐｏｎｉｃａ）が孵化してからシラスウナギまでに要する日数は，１６０－１８０日程度と考えられている。天然で採捕されるシラスウナギの全長が６０ｍｍ程度であることから，最大伸長期に達する，つまり変態可能な体サイズは全長６０ｍｍ以上と考えられる。一方，人工的に生産されたレプトケファルス幼生においては，変態可能なサイズは全長５０～６０ｍｍとされ，その体サイズにまで成長させるには，サメ卵飼料を用いて通常２００日以上もの長期飼育が必要であり，４００日以上要する個体もある。そうした種苗生産期間の長期化は生残率の低下や生産コストの上昇につながっていると懸念されている。
ウナギ目魚類の例は，ウナギ，アナゴ，ハモ及びウツボである。これらの中ではウナギが好ましい。ウナギの例は，ニホンウナギ（Anguilla japonica），ヨーロッパウナギ（Anguilla anguilla），オオウナギ（Anguilla marmorata），及びアメリカウナギ（Anguilla rostrata）である。なお，ウナギ目魚類は，レプトケファルス幼生を経て成長するため，以下ではウナギを中心に説明するものの，他のウナギ目魚類についても同様に育成させることができる。ウナギ目魚類の仔魚は，レプトケファルス幼生とよばれる。自然界では，例えば，ニホンウナギ（Ａｎｇｕｉｌｌａ ｊａｐｏｎｉｃａ）が孵化してからシラスウナギまでに要する日数は，１６０－１８０日程度と考えられている。天然で採捕されるシラスウナギの全長が６０ｍｍ程度であることから，最大伸長期に達する，つまり変態可能な体サイズは全長６０ｍｍ以上と考えられる。一方，人工的に生産されたレプトケファルス幼生においては，変態可能なサイズは全長５０～６０ｍｍとされ，その体サイズにまで成長させるには，サメ卵飼料を用いて通常２００日以上もの長期飼育が必要であり，４００日以上要する個体もある。そうした種苗生産期間の長期化は生残率の低下や生産コストの上昇につながっていると懸念されている。
【0016】
ウナギ目魚類の飼育系
ウナギ目魚類を飼育するためには，ウナギ目魚類を飼育するために用いられている通常の容器（例えばアクリル製の容器）を用いればよい。ウナギ目魚類の飼育系については，公知の文献を適宜参照すればよい。本発明において，公知の飼料を適宜用いてもよい。
ウナギ目魚類を飼育するためには，ウナギ目魚類を飼育するために用いられている通常の容器（例えばアクリル製の容器）を用いればよい。ウナギ目魚類の飼育系については，公知の文献を適宜参照すればよい。本発明において，公知の飼料を適宜用いてもよい。
【0017】
飼育水には，甲状腺ホルモンや，ビタミン類及びその誘導体を加えても良い。ビタミン類の例は，ビタミンＡ，レチノイン酸及びビタミンＣである。特にレチノイン酸は甲状腺ホルモンとヘテロ２量体を形成するので有効であった。実際にこれらを投与したところ，ウナギ目魚類仔魚（特にウナギ仔魚）の育成が高まった。
【0018】
本発明の方法は，止水状態や流水下環境で行うことができる。水温は２０℃から２８℃の範囲で使用することが望ましい。さらに，２２℃から２６℃の範囲で使用することが望ましい。誘導中は，酸素などエアレーションを施しながら飼育をすることが望ましい。
【0019】
本発明の方法に用いる飼育水に含まれる水は，特に限定されない。水道水や地下水，温泉水，天然海水や，蒸留水や脱イオン水などを用いても良いし，上記水を基にした市販の人工海水を使用しても良い。
【0020】
ウナギ目魚類の飼育は，暗室内にて行うことが好ましい。以下，孵化後の飼育計画について説明する。
【0021】
第１期のうち少なくとも半分の期間を，塩分濃度が３４‰以上３６‰以下の環境でウナギ目魚類仔魚を育成する。塩分濃度は，３４‰以上３５‰以下でもよいし，３５‰以上３６‰以下でもよいし，３４．５‰以上３５．５‰以下でもよい。「少なくとも半分の期間」は，全体でもよいし，５０％以上９５％以下でも，６０％以上９０％以下でも，７０％以上８５％以下でもよい。なお，第１期中（特に第１期の初めから３日又は４日まで）の塩分濃度の変動（平均からのずれ）は，２０％以下（又は１０％以下）であることが好ましい。第１期の末日又は２日前から，塩分濃度を徐々に減らしてもよい。
【0022】
第２期は，第１期よりも塩分濃度を低くするものが好ましい。第２期の始め（例えば，初日まで，又は２日目まで）は，徐々に塩分濃度を低くしてもよい。第２期のうち少なくとも半分の期間を，塩分濃度が１０‰以上２８‰以下の環境でウナギ目魚類仔魚を育成する。第２期のうち少なくとも半分の期間を，塩分濃度が１６‰以上２５‰以下の環境でウナギ目魚類仔魚を育成するものが好ましい。塩分濃度は，１６‰以上２３‰以下でも，１７‰以上２３‰以下でも，１７‰以上２０‰以下でも，２０‰以上２５‰以下でも，２０‰以上２３‰以下でもよい。「少なくとも半分の期間」は，全体でもよいし，５０％以上９５％以下でも，６０％以上９０％以下でも，７０％以上８５％以下でもよい。第２期中（第２期の３日目以降末日の３日前までの期間）の塩分濃度の変動（平均からのずれ）は，２０％以下（又は１０％以下）であることが好ましい。
【0023】
過渡期
第１期の末日又は２日前から第２期の初日又は２日目にかけて塩分濃度を逓減させることが好ましい。
第１期の末日又は２日前から第２期の初日又は２日目にかけて塩分濃度を逓減させることが好ましい。
【0024】
第３期の塩分濃度は，第２期の塩分濃度より高いものが好ましい。第３期の始め（例えば，初日まで，又は２日目まで）は，徐々に塩分濃度を低くしてもよい。第３期のうち少なくとも半分の期間を，塩分濃度が２１‰以上３６‰以下の環境でウナギ目魚類仔魚を育成することが好ましい。第３期のうち少なくとも半分の期間を，塩分濃度が２３‰以上２５‰以下の環境でウナギ目魚類仔魚を育成するものがより好ましい。塩分濃度は，２３‰以上２４‰以下でもよいし，２４‰以上２５‰以下でもよいし，２３。５‰以上２４．５‰以下でもよい。「少なくとも半分の期間」は，全体でもよいし，５０％以上９５％以下でも，６０％以上９０％以下でも，７０％以上８５％以下でもよい。第３期中（第３期の３日目以降末日の３日前までの期間）の塩分濃度の変動（平均からのずれ）は，２０％以下（又は１０％以下）であることが好ましい。さらに，第２期の末日又は２日前から第３期の初日又は２日目にかけて塩分濃度を徐々に変化させるものが好ましい。
【実施例】
【0025】
以下，実施例を用いて本発明を具体的に説明する。本発明は，以下の実施例から当業者が適宜変更を行ったものや公知技術を組み合わせたものも含む。
【0026】
（孵化仔魚の準備）
人為催熟によって得られたニホンウナギの卵と精子を人工授精した。受精後，卵割が認められた卵を受精卵とした。受精卵を，２５℃，塩分濃度３４～３５‰の人工海水を用いて，１００Ｌ（リットル）パンライト水槽内で飼育した。約１．５日後に，複数のウナギが孵化した。このようにしてウナギ仔魚を得た。
人為催熟によって得られたニホンウナギの卵と精子を人工授精した。受精後，卵割が認められた卵を受精卵とした。受精卵を，２５℃，塩分濃度３４～３５‰の人工海水を用いて，１００Ｌ（リットル）パンライト水槽内で飼育した。約１．５日後に，複数のウナギが孵化した。このようにしてウナギ仔魚を得た。
【0027】
（試験方法：第１期の最適化）
３０‰および３５‰に調整した人工海水を２種類の５００ｍＬビーカーに準備し，そこへウナギ仔魚を各５０尾収容し，２５℃インキュベーター内で飼育した。
３０‰および３５‰に調整した人工海水を２種類の５００ｍＬビーカーに準備し，そこへウナギ仔魚を各５０尾収容し，２５℃インキュベーター内で飼育した。
【0028】
（種苗評価）
５日齢仔魚の正常個体と奇形個体計測した。
１）尾部が折れている，
２）下顎が閉じていない，又は
３）頭部欠損した仔魚を奇形仔魚と判定した。
５日齢仔魚の正常個体と奇形個体計測した。
１）尾部が折れている，
２）下顎が閉じていない，又は
３）頭部欠損した仔魚を奇形仔魚と判定した。
【0029】
結果
図１に，３０‰および３５‰に調整した人工海水を用いて孵化後のウナギを飼育した後の５日齢仔魚の正常個体の出現率を示す。図１に示される通り，３０‰の人工海水で飼育した仔魚は，正常率が８．０％だったのに対し，３５‰人工海水で飼育した仔魚は，正常率が９６．０％と高い結果を示した。このことから，孵化仔魚から摂餌開始までの仔魚飼育は，３５‰程度の高濃度海水を用いることが適していると考えられた。
図１に，３０‰および３５‰に調整した人工海水を用いて孵化後のウナギを飼育した後の５日齢仔魚の正常個体の出現率を示す。図１に示される通り，３０‰の人工海水で飼育した仔魚は，正常率が８．０％だったのに対し，３５‰人工海水で飼育した仔魚は，正常率が９６．０％と高い結果を示した。このことから，孵化仔魚から摂餌開始までの仔魚飼育は，３５‰程度の高濃度海水を用いることが適していると考えられた。
【0030】
（孵化仔魚の準備）
人為催熟によって得られたニホンウナギの卵と精子を人工授精した。受精後，卵割が認められた卵を受精卵として，２５℃，塩分濃度３４－３５‰の人工海水を用いて，１００Ｌパンライト水槽内で受精卵を飼育した。約１．５日後に，孵化した仔魚を得た。
人為催熟によって得られたニホンウナギの卵と精子を人工授精した。受精後，卵割が認められた卵を受精卵として，２５℃，塩分濃度３４－３５‰の人工海水を用いて，１００Ｌパンライト水槽内で受精卵を飼育した。約１．５日後に，孵化した仔魚を得た。
【0031】
（摂餌開始仔魚の準備）
孵化したウナギ仔魚を，２０Ｌクライゼル水槽に移し替え，２５℃，塩分濃度３４－３５‰人工海水で飼育を行った。孵化後６日齢となった正常な仔魚を，５Ｌボール型水槽に２００尾移送した。
孵化したウナギ仔魚を，２０Ｌクライゼル水槽に移し替え，２５℃，塩分濃度３４－３５‰人工海水で飼育を行った。孵化後６日齢となった正常な仔魚を，５Ｌボール型水槽に２００尾移送した。
【0032】
（試験方法：第１期を最適化した後の第２期の最適化）
水槽に人工海水を注水し，容積を５Ｌとした。塩分濃度が３３－３５‰である通常濃度区と，塩分濃度が１６－１８‰である低濃度区の２つの試験区を準備した。ニホンウナギレプトケファルス幼生を２つの水槽に馴致させた。その後，アブラツノザメ卵を基本とした飼料３ｍL相当の飼料をピペットで水槽底面に投与し給餌を開始した。給餌期間中は，１５分間止水した。１５分経過後，１分間に０．４から０．５Ｌの流量で底面に残った餌を洗い流した。上記の作業を２時間おきに計５回繰り返した。給餌時間は，７時，９時，１１時，１３時，及び１５時とした。５回給餌後は，同型の水槽にニホンウナギレプトケファルス幼生を移し替えた。給餌以外の時間帯は，１分間に０．４から０．５Ｌの流量で注水し続けた。給餌期間中はすべて２５℃の人工海水を循環濾過しながら飼育を継続した。
水槽に人工海水を注水し，容積を５Ｌとした。塩分濃度が３３－３５‰である通常濃度区と，塩分濃度が１６－１８‰である低濃度区の２つの試験区を準備した。ニホンウナギレプトケファルス幼生を２つの水槽に馴致させた。その後，アブラツノザメ卵を基本とした飼料３ｍL相当の飼料をピペットで水槽底面に投与し給餌を開始した。給餌期間中は，１５分間止水した。１５分経過後，１分間に０．４から０．５Ｌの流量で底面に残った餌を洗い流した。上記の作業を２時間おきに計５回繰り返した。給餌時間は，７時，９時，１１時，１３時，及び１５時とした。５回給餌後は，同型の水槽にニホンウナギレプトケファルス幼生を移し替えた。給餌以外の時間帯は，１分間に０．４から０．５Ｌの流量で注水し続けた。給餌期間中はすべて２５℃の人工海水を循環濾過しながら飼育を継続した。
【0033】
（種苗評価）
３０日間給餌飼育を行い，その間の死亡数を計測し，３５日齢時点での全長と体高を実体顕微鏡下で測定した。なお，通常濃度区については，実験を３度行った。
３０日間給餌飼育を行い，その間の死亡数を計測し，３５日齢時点での全長と体高を実体顕微鏡下で測定した。なお，通常濃度区については，実験を３度行った。
【0034】
結果：
図２に，通常濃度区（３３－３５‰）と低濃度区（１６－１８‰）で飼育したニホンウナギ仔魚の全長と体高を示す。グラフは，平均±標準偏差をもって示している。図中，イニシャルは，給餌開始時を示し，ｎは個体数を示す。図３に，通常濃度区（３３－３５‰）と低濃度区（１６－１８‰）で飼育したニホンウナギ仔魚生残率の推移を示す。通常濃度区については，３回行ったそれぞれの実験の結果を示す。図２に示されるように，３０日飼育終了時の，全長および体高は，通常濃度区（３３－３５‰）と低濃度区（１６－１８‰）との間に有意な差は認められなかった。一方，図３に示されるように，低濃度区は常に通常濃度区よりも減耗率が低く，試験終了時は，通常濃度区の生存率が２２－２９％であったのに対し，低濃度区の生存率は約６９％であった。このため，給餌後の所定期間は，培養系の塩分濃度を著しく下げることにより，生存率が飛躍的に高まることが分かった。
図２に，通常濃度区（３３－３５‰）と低濃度区（１６－１８‰）で飼育したニホンウナギ仔魚の全長と体高を示す。グラフは，平均±標準偏差をもって示している。図中，イニシャルは，給餌開始時を示し，ｎは個体数を示す。図３に，通常濃度区（３３－３５‰）と低濃度区（１６－１８‰）で飼育したニホンウナギ仔魚生残率の推移を示す。通常濃度区については，３回行ったそれぞれの実験の結果を示す。図２に示されるように，３０日飼育終了時の，全長および体高は，通常濃度区（３３－３５‰）と低濃度区（１６－１８‰）との間に有意な差は認められなかった。一方，図３に示されるように，低濃度区は常に通常濃度区よりも減耗率が低く，試験終了時は，通常濃度区の生存率が２２－２９％であったのに対し，低濃度区の生存率は約６９％であった。このため，給餌後の所定期間は，培養系の塩分濃度を著しく下げることにより，生存率が飛躍的に高まることが分かった。
【0035】
（仔魚の準備）
上記の低濃度区（１６－１８‰）で飼育した個体を用いて，次の生育期における最適条件を模索した。
上記の低濃度区（１６－１８‰）で飼育した個体を用いて，次の生育期における最適条件を模索した。
【0036】
（試験方法：第１期及び第２期を最適化した後の第３期の最適化）
３５日齢のウナギ仔魚約５０尾を５Ｌ型ボール型水槽で飼育を行った。アブラツノザメ卵を基本とした飼料３ｍL相当の飼料をピペットで水槽底面に投与し給餌を開始した。給餌期間中は１５分間止水した。１５分経過後，１分間に０．４から０．５Lの流量で底面に残った餌を洗い流した。上記の作業を２時間おきに計５回繰り返した。給餌時間は，７時，９時，１１時，１３時，及び１５時とした。５回給餌後は，同型の水槽にニホンウナギレプトケファルス幼生を移し替えた。給餌以外の時間帯は，１分間に０．４から０．５Lの流量で注水し続けた。給餌期間中はすべて２５℃低濃度人工海水（１６－１８‰）を循環濾過しながら飼育を継続した。８０日齢に到達した時点で，低濃度（１６－１８‰）から，人工海水濃度を約２５‰になるように１週間かけて濃度を移行させた。その後，上記と同じ給餌環境を用いて飼育を継続した。その間の人工海水は２５℃であり，２３－２５‰濃度（中濃度人工海水）で推移させた。
３５日齢のウナギ仔魚約５０尾を５Ｌ型ボール型水槽で飼育を行った。アブラツノザメ卵を基本とした飼料３ｍL相当の飼料をピペットで水槽底面に投与し給餌を開始した。給餌期間中は１５分間止水した。１５分経過後，１分間に０．４から０．５Lの流量で底面に残った餌を洗い流した。上記の作業を２時間おきに計５回繰り返した。給餌時間は，７時，９時，１１時，１３時，及び１５時とした。５回給餌後は，同型の水槽にニホンウナギレプトケファルス幼生を移し替えた。給餌以外の時間帯は，１分間に０．４から０．５Lの流量で注水し続けた。給餌期間中はすべて２５℃低濃度人工海水（１６－１８‰）を循環濾過しながら飼育を継続した。８０日齢に到達した時点で，低濃度（１６－１８‰）から，人工海水濃度を約２５‰になるように１週間かけて濃度を移行させた。その後，上記と同じ給餌環境を用いて飼育を継続した。その間の人工海水は２５℃であり，２３－２５‰濃度（中濃度人工海水）で推移させた。
【0037】
結果：
低濃度人工海水（１６－１８‰）は，５０－６０日齢から，並行飼育していた通常濃度の仔魚よりも相対的に見て明らかに成長遅延が認められた。このため，低濃度人工海水から中濃度人工海水（２３－２５‰）へ培養系を変化させた。その後の成長は回復傾向を示し，１２４日齢時点で，全長３６．２ｍｍを最大個体としたレプトケファルス幼生が生産された。図４に，低中濃度を併用した飼育法によって得られた１２４日齢仔魚の全長を示す。図４に示される通り低中濃度を併用した飼育法により，ウナギ仔魚の平均全長が３０ｍｍ程度に成長した。
低濃度人工海水（１６－１８‰）は，５０－６０日齢から，並行飼育していた通常濃度の仔魚よりも相対的に見て明らかに成長遅延が認められた。このため，低濃度人工海水から中濃度人工海水（２３－２５‰）へ培養系を変化させた。その後の成長は回復傾向を示し，１２４日齢時点で，全長３６．２ｍｍを最大個体としたレプトケファルス幼生が生産された。図４に，低中濃度を併用した飼育法によって得られた１２４日齢仔魚の全長を示す。図４に示される通り低中濃度を併用した飼育法により，ウナギ仔魚の平均全長が３０ｍｍ程度に成長した。
【0038】
（孵化仔魚の準備）
人為催熟によって得られたニホンウナギの卵と精子を人工授精した。受精後，卵割が認められた卵を受精卵とした。２５℃，塩分濃度３４～３５‰の人工海水を用いて，１００Ｌパンライト水槽内で，受精卵を飼育した。約１．５日後に，孵化した仔魚を得た。
人為催熟によって得られたニホンウナギの卵と精子を人工授精した。受精後，卵割が認められた卵を受精卵とした。２５℃，塩分濃度３４～３５‰の人工海水を用いて，１００Ｌパンライト水槽内で，受精卵を飼育した。約１．５日後に，孵化した仔魚を得た。
【0039】
（摂餌開始仔魚の準備）
孵化した仔魚を，２０Ｌクライゼル水槽に移し替え，２５℃，塩分濃度３４～３５‰の人工海水で飼育した。孵化後６日齢となり，奇形仔魚の出現頻度が少ないか，又は奇形仔魚がいないことを確認した。その後，５Ｌボール型水槽に２００尾のウナギ仔魚を移送した。
孵化した仔魚を，２０Ｌクライゼル水槽に移し替え，２５℃，塩分濃度３４～３５‰の人工海水で飼育した。孵化後６日齢となり，奇形仔魚の出現頻度が少ないか，又は奇形仔魚がいないことを確認した。その後，５Ｌボール型水槽に２００尾のウナギ仔魚を移送した。
【0040】
（試験方法：第１期を最適化した後の第２期の最適化）
クライゼル型水槽に人工海水を注水し，容積を５Ｌとした。塩分濃度が３３～３５‰である通常濃度区と，塩分濃度が２３～２５‰である中濃度区の２種類の試験区を準備した。なお，中濃度区については２つ同様の実験を行った。ニホンウナギレプトケファルス幼生を２つの水槽に馴致させた。その後，アブラツノザメ卵を基本とした飼料３ｍL相当の飼料をピペットで水槽底面に投与し給餌を開始した。給餌期間中は１５分間止水した。１５分経過後，１分間に０．６から０．８Ｌの流量で底面に残った餌を洗い流した。上記の作業を２時間おきに計５回繰り返した。給餌時間は，７時，９時，１１時，１３時，及び１５時とした。５回給餌後は，同型の水槽にニホンウナギレプトケファルス幼生を移し替えた。給餌以外の時間帯は，１分間に０．６から０．８Lの流量で注水し続けた。給餌期間中はすべて２５℃の人工海水を循環濾過しながら飼育を継続した。
クライゼル型水槽に人工海水を注水し，容積を５Ｌとした。塩分濃度が３３～３５‰である通常濃度区と，塩分濃度が２３～２５‰である中濃度区の２種類の試験区を準備した。なお，中濃度区については２つ同様の実験を行った。ニホンウナギレプトケファルス幼生を２つの水槽に馴致させた。その後，アブラツノザメ卵を基本とした飼料３ｍL相当の飼料をピペットで水槽底面に投与し給餌を開始した。給餌期間中は１５分間止水した。１５分経過後，１分間に０．６から０．８Ｌの流量で底面に残った餌を洗い流した。上記の作業を２時間おきに計５回繰り返した。給餌時間は，７時，９時，１１時，１３時，及び１５時とした。５回給餌後は，同型の水槽にニホンウナギレプトケファルス幼生を移し替えた。給餌以外の時間帯は，１分間に０．６から０．８Lの流量で注水し続けた。給餌期間中はすべて２５℃の人工海水を循環濾過しながら飼育を継続した。
【0041】
（種苗評価）
３０日間給餌飼育を行い，その間の死亡数を計測し，３５日齢時点での全長と体高を実体顕微鏡下で測定した。
３０日間給餌飼育を行い，その間の死亡数を計測し，３５日齢時点での全長と体高を実体顕微鏡下で測定した。
【0042】
結果：
図５に，通常濃度区（３３－３５‰）と中濃度区（２３－２５‰）で飼育したニホンウナギ仔魚の全長と体高を示す。グラフは，平均値±標準偏差値である。図６に，通常濃度区（３３－３５‰）と中濃度区（２３－２５‰）で飼育したニホンウナギ仔魚生残率の推移を示す。図５に示される通り，３０日飼育終了時の全長および体高は，通常濃度区（３３－３５‰）と中濃度区（２３～２５‰）との間に有意な差は認められなかった。図６に示される通り，中濃度区は常に通常濃度区よりも減耗率が低く，試験終了時は，通常濃度区の生存率が１．５％であったのに対して，中濃度区の生存率は２７％，及び３９％であった。このように中濃度区による飼育では，通常濃度区よりも高い生残率が認められた。
図５に，通常濃度区（３３－３５‰）と中濃度区（２３－２５‰）で飼育したニホンウナギ仔魚の全長と体高を示す。グラフは，平均値±標準偏差値である。図６に，通常濃度区（３３－３５‰）と中濃度区（２３－２５‰）で飼育したニホンウナギ仔魚生残率の推移を示す。図５に示される通り，３０日飼育終了時の全長および体高は，通常濃度区（３３－３５‰）と中濃度区（２３～２５‰）との間に有意な差は認められなかった。図６に示される通り，中濃度区は常に通常濃度区よりも減耗率が低く，試験終了時は，通常濃度区の生存率が１．５％であったのに対して，中濃度区の生存率は２７％，及び３９％であった。このように中濃度区による飼育では，通常濃度区よりも高い生残率が認められた。
【産業上の利用可能性】
【0043】
本発明は水産業において利用されうる。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】