特許 7250015 抗ＨＢＶのテトラヒドロイソキサゾロ［４，３－ｃ］ピリジン類化合物

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2023-03-23

(45)【発行日】2023-03-31

(54)【発明の名称】抗ＨＢＶのテトラヒドロイソキサゾロ［４，３－ｃ］ピリジン類化合物

(51)【国際特許分類】

   C07D 498/04 20060101AFI20230324BHJP

   A61K 31/497 20060101ALI20230324BHJP

   A61K 31/437 20060101ALI20230324BHJP

   A61K 31/506 20060101ALI20230324BHJP

   A61K 31/444 20060101ALI20230324BHJP

   A61P 31/20 20060101ALI20230324BHJP

   A61P 1/16 20060101ALI20230324BHJP

【ＦＩ】

C07D498/04 101

C07D498/04 CSP

A61K31/497

A61K31/437

A61K31/506

A61K31/444

A61P31/20

A61P1/16

【請求項の数】 26

(21)【出願番号】P 2020526967

(86)(22)【出願日】2018-11-16

(65)【公表番号】

(43)【公表日】2021-02-12

(86)【国際出願番号】 CN2018115857

(87)【国際公開番号】W WO2019096241

(87)【国際公開日】2019-05-23

【審査請求日】2021-11-02

(31)【優先権主張番号】201711138922.9

(32)【優先日】2017-11-16

(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN

(31)【優先権主張番号】201810339723.2

(32)【優先日】2018-04-16

(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN

(73)【特許権者】

【識別番号】516089784

【氏名又は名称】チア タイ ティエンチン ファーマシューティカル グループ カンパニー リミテッド

【氏名又は名称原語表記】Ｃｈｉａ Ｔａｉ Ｔｉａｎｑｉｎｇ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｇｒｏｕｐ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．

【住所又は居所原語表記】Ｎｏ．３６９ Ｙｕｚｈｏｕ Ｓｏｕｔｈ Ｒｄ．，Ｌｉａｎｙｕｎｇａｎｇ，Ｊｉａｎｇｓｕ ２２２０６２ Ｃｈｉｎａ

(73)【特許権者】

【識別番号】516170819

【氏名又は名称】南京明徳新薬研発有限公司

【氏名又は名称原語表記】ＭＥＤＳＨＩＮＥ ＤＩＳＣＯＶＥＲＹ ＩＮＣ．

【住所又は居所原語表記】Ｒｏｏｍ ２１８， Ｎｏ．９ Ｇａｏｘｉｎ Ｒｏａｄ， Ｊｉａｎｇｂｅｉ Ｎｅｗ Ｄｉｓｔｒｉｃｔ Ｎａｎｊｉｎｇ， Ｊｉａｎｇｓｕ ２１００３２ Ｐ．Ｒ． Ｃｈｉｎａ

(74)【代理人】

【識別番号】110001195

【氏名又は名称】弁理士法人深見特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】呉 立 方

(72)【発明者】

【氏名】孫 飛

(72)【発明者】

【氏名】杜 金 華

(72)【発明者】

【氏名】丁 照 中

(72)【発明者】

【氏名】陳 曙 輝

(72)【発明者】

【氏名】張 喜 全

(72)【発明者】

【氏名】徐 宏 江

(72)【発明者】

【氏名】楊 玲

【審査官】柴田 昌弘

(56)【参考文献】

【文献】特表２０２１－５０６８５２（ＪＰ，Ａ）

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

Ｃ０７Ｄ ４９８／０４

Ａ６１Ｋ ３１／４９７

Ａ６１Ｋ ３１／４３７

Ａ６１Ｋ ３１／５０６

Ａ６１Ｋ ３１／４４４

Ａ６１Ｐ ３１／２０

Ａ６１Ｐ １／１６

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

次の式（Ｉ）：

【化1】

［式中、環Ａは６～１２員のアリールまたは５～６員のヘテロアリールであり、
各Ｒは、独立してＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＲ^ａＲ^ｂ、－Ｓ（＝Ｏ）_２ＮＲ^ａＲ^ｂ、－Ｓ（＝Ｏ）_２Ｒ^ｃ、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ^ｄ、Ｃ_１－６アルコキシ、または独立してＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、－ＯＨ、－ＮＨ_２および－ＣＮからなる群より選ばれる１、２または３個の置換基で任意に置換されているＣ_１－６アルキルであり、
ｎは０、１、２または３であり、
ＴはＮまたはＣＲ_３であり、
Ｒ_１およびＲ_５は、それぞれ独立してＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＲ^ａＲ^ｂ、Ｃ_１－３アルコキシ、またはＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、－ＯＨ、－ＮＨ_２、－ＣＮ、および－ＮＯ_２からなる群より独立して選ばれる１、２または３個の置換基で任意に置換されているＣ_１－３アルキルであり、
Ｒ_２およびＲ_４は、それぞれ独立してＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＲ^ａＲ^ｂ、Ｃ_１－６アルコキシ、またはＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、－ＯＨ、－ＮＨ_２、－ＣＮ、および－ＮＯ_２からなる群より独立して選ばれる１、２または３個の置換基で任意に置換されているＣ_１－６アルキルであり、
Ｒ_３はＦ、ＢｒまたはＣＮであり、
Ｒ^ａ、Ｒ^ｂ、Ｒ^ｃおよびＲ^ｄは、それぞれ独立してＨまたはＣ_１－６アルキルであり、
前記５～６員のヘテロアリールは、－Ｏ－、－Ｓ－、Ｎおよび－ＮＨ－からなる群より独立して選ばれる１、２または３個のヘテロ原子またはヘテロ原子団を含む。］で表される
化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体。

【請求項2】

前記環Ａは、フェニルまたは５～６員のヘテロアリールである、請求項１に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体。

【請求項3】

前記環Ａは、フェニル、チアゾリル、イソチアゾリル、ピラゾリル、ピロリル、ピラジニル、ピリミジニルまたはピリジニルである、請求項２に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体。

【請求項4】

前記Ｒ^ａ、Ｒ^ｂ、Ｒ^ｃおよびＲ^ｄは、それぞれ独立してＨ、－ＣＨ_３、－ＣＨ_２ＣＨ_３、－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３または－ＣＨ_２（ＣＨ_３）_２である、請求項１に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体。

【請求項5】

前記各Ｒは、独立してＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、－ＯＨ、－ＯＣＨ_３、－ＯＣＨ_２ＣＨ_３、－ＮＨ_２、－Ｎ（ＣＨ_３）_２、－Ｓ（＝Ｏ）_２ＮＨ_２、－Ｓ（＝Ｏ）_２ＣＨ_３、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＣＨ_３、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＣＨ_２ＣＨ_３、－ＣＨ_３、－ＣＨ_２ＣＨ_３、ＣＦ_３または－ＣＨ_２ＯＨである、請求項１または４に記載の化合物、その薬学的に許容される
塩またはその異性体。

【請求項6】

前記Ｒ_１およびＲ_５は、それぞれ独立してＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、－ＯＨ、－ＯＣＨ_３、－ＮＨ_２、－ＣＨ_３、－ＣＨ _２ Ｆ、－ＣＨＦ_２または－ＣＦ_３である、請求項１または４に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体。

【請求項7】

前記Ｒ_２およびＲ_４は、それぞれ独立してＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、－ＯＨ、－ＯＣＨ_３、－ＯＣＨ_２ＣＨ_３、－ＮＨ_２、－ＣＨ_３、－ＣＨ_２ＣＨ_３、－ＣＨ _２ Ｆ、－ＣＨＦ_２または－ＣＦ_３である、請求項１または４に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体。

【請求項8】

前記構成単位

【化2】

は、

【化3】

である、請求項１に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体。

【請求項9】

前記構成単位

【化4】

は、

【化5】

である、請求項８に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体。

【請求項10】

前記構成単位

【化6】

は、

【化7】

である、請求項９に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体。

【請求項11】

前記構成単位

【化8】

は、

【化9】

である、請求項１に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体。

【請求項12】

前記構成単位

【化10】

は、

【化11】

である、請求項１または１１に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体。

【請求項13】

前記構成単位

【化12】

は、

【化13】

である、請求項１２に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体。

【請求項14】

次の式（ＩＩ－ａ）または式（ＩＩＩ－ａ）：

【化14】

［式中、環Ａは請求項１～３または８～１０に定義の通りであり、
Ｒ_２およびＲ_４は請求項１または７に定義の通りであり、
Ｒは請求項１または５に定義の通りであり、
ｎは請求項１に定義される通りである。］で示される構造を備える、
請求項１～４および６～１０のいずれか一項に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体。

【請求項15】

次の式（ＩＩ－ａ－１）または式（ＩＩＩ－ａ－１）：

【化15】

［式中、環Ａは請求項１～３または８～１０に定義の通りであり、
Ｒ_２およびＲ_４は請求項１または７に定義の通りであり、
Ｒは請求項１または５に定義の通りであり、
ｎは請求項１に定義される通りである。］で示される構造を備える、
請求項１４に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体。

【請求項16】

次の式（ＩＩ－ｂ）、（ＩＩＩ－ｂ）または（ＩＩＩ－ｃ）：

【化16】

［式中、Ｔ_１およびＴ_２は、それぞれ独立してＮまたはＣＨであり、
Ｒ_２およびＲ_４は請求項１または７に定義の通りであり、
Ｒは請求項１または５に定義の通りであり、
ｎは請求項１に定義される通りである。］で示される構造を備える、
請求項１、５または７に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体

【請求項17】

次の式（ＩＩ－ｂ－１）、（ＩＩＩ－ｂ－１）または（ＩＩＩ－ｃ－１）：

【化17】

［式中、Ｔ_１およびＴ_２は、それぞれ独立してＮまたはＣＨであり、
Ｒ_２およびＲ_４は請求項１または７に定義の通りであり、
Ｒは請求項１または５に定義の通りであり、
ｎは請求項１に定義される通りである。］で示される構造を備える、
請求項１６に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体。

【請求項18】

次の式（ＩＩ－ｄ）、（ＩＩ－ｅ）、（ＩＩ－ｆ）、（ＩＩＩ－ｄ）、（ＩＩＩ－ｅ）、（ＩＩＩ－ｆ）または（ＩＩＩ－ｋ）：

【化18】

［式中、Ｒ_２およびＲ_４は請求項１または７に定義の通りであり、
Ｒは請求項１または５に定義の通りであり、
ｎは請求項１に定義される通りである。］で示される構造を備える、
請求項１６に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体。

【請求項19】

次の式（ＩＩ－ｄ－１）、（ＩＩ－ｅ－１）、（ＩＩ－ｆ－１）、（ＩＩＩ－ｄ－１）、（ＩＩＩ－ｅ－１）、（ＩＩＩ－ｆ－１）または（ＩＩＩ－ｋ－１）：

【化19】

［式中、Ｒ_２およびＲ_４は請求項１または７に定義の通りであり、
Ｒは請求項１または５に定義の通りであり、
ｎは請求項１に定義される通りである。］で示される構造を備える、
請求項１８に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体。

【請求項20】

次の式（ＩＩＩ－ｍ）：

【化20】

［式中、Ｒ_２およびＲ_４は請求項１または７に定義される通りである。］で示される構造を備える、
請求項１８に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体。

【請求項21】

次の式（ＩＩＩ－ｍ－１）：

【化21】

［式中、Ｒ_２およびＲ_４は請求項１または７に定義される通りである。］で示される構造を備える、
請求項２０に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体。

【請求項22】

次の式（ＩＩ－ｇ）～（ＩＩ－ｉ）または式（ＩＩＩ－ｇ）～（ＩＩＩ－ｉ）：

【化22】

［式中、Ｒ_２およびＲ_４は請求項１または７に定義の通りであり、
Ｒは請求項１または５に定義の通りであり、
ｎは請求項１に定義される通りである。］で示される構造を備える、
請求項１４に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体。

【請求項23】

次の式（ＩＩ－ｇ－１）～（ＩＩ－ｉ－１）または式（ＩＩＩ－ｇ－１）～（ＩＩＩ－ｉ－１）：

【化23】

［式中、Ｒ_２およびＲ_４は請求項１または７に定義の通りであり、
Ｒは請求項１または５に定義の通りであり、
ｎは請求項１に定義される通りである。］で示される構造を備える、
請求項２２に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体。

【請求項24】

次の式：

【化24】

で示される
化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体。

【請求項25】

活性成分としての治療有効量の請求項１～２４のいずれか一項に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体、および薬学的に許容される担体を含む、医薬組成物。

【請求項26】

抗Ｂ型肝炎薬の製造における、請求項１～２４のいずれか一項に記載の化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体または請求項２５に記載の医薬組成物の使用。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

（関連出願の相互参照）
本出願は、中国特許出願ＣＮ２０１７１１１３８９２２．９（出願日２０１７年１１月１６日）、および中国特許出願ＣＮ２０１８１０３３９７２３．２（出願日２０１８年０４月１６日）に基づき優先権を主張し、それらの出願の内容を全て本出願に援用する。

【0002】

本発明は、医薬品の分野に関し、具体的には、新規な抗ＨＢＶのテトラヒドロイソキサゾロ［４，３－ｃ］ピリジン類化合物、その製造方法およびそのＢ型肝炎の治療薬の製造における使用に関する。

【背景技術】

【0003】

ＷＨＯの統計によると、現在、世界中では約２．４億の人がＨＢＶ（Ｂ型肝炎ウィルス）に感染しており、それで直接にまたは間接的に起因して毎年約６８万人が死亡している。中国は７千万以上のＢ型肝炎の感染人口を抱えている大きな国となっている。ＨＢＶの長期間感染は、肝不全、肝硬変および肝癌等悪性疾患を引き起こす可能性がある。（Ｗｏｒｌｄ Ｈｅａｌｔｈ Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ， Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ： Ｗｏｒｌｄ Ｈｅａｌｔｈ Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ Ｆａｃｔ Ｓｈｅｅｔ （２０１６）．を参照する。）
現在、慢性Ｂ型肝炎の治療に承認されている従来の薬物は、ヌクレオシド（酸）化合物とインターフェロンのみである。ラミブジン、エンテカビル、テノホビル（エステル）などのヌクレオシド（酸）薬は、ＨＢＶ ＤＮＡ複製を阻害できるが、これらの薬はｃｃｃＤＮＡを排除できず、薬物使用中止後にしばしばリバウンドすることがある。患者は長期投薬を必要とし、一部の患者は薬剤耐性を示しやすくなっている。インターフェロン薬は、患者の免疫系を部分的に活性化し、身体の自己免疫作用を通じてＢ型肝炎ウイルスを阻害できるが、これらの薬には大きな副作用があり、患者の忍容性は十分ではない。より深刻なことに、インターフェロン治療に対する異なる集団の応答率には有意差はあるが、全体としての応答率は低かった（通常３０％未満）（Ｎａｔ． Ｒｅｖ． Ｇａｓｔｒｏ． Ｈｅｐａｔ． ８（２０１１），２７５－２８４）。

【0004】

ＨＢＶ感染患者では、ＨＢＶの連続複製の鋳型とする、安定した共有結合閉環状ＤＮＡ、すなわちｃｃｃＤＮＡが宿主の肝細胞核内に形成されている。全てのサブゲノムＲＮＡ（ｓｇＲＮＡ）およびプレゲノムＲＮＡ（ｐｇＲＮＡ）は、それぞれｃｃｃＤＮＡの転写によって形成される。細胞核から出た後、ｓｇＲＮＡはプロテインＸと他の３つのエンベロープタンパク質に翻訳され、ｐｇＲＮＡはコアタンパク質とウイルスポリメラーゼに翻訳される。ＰｇＲＮＡは、ポリメラーゼの作用下でコアタンパク質と自己集合して、ヌクレオカプシドに取り囲まれたＲＮＡを形成する。ヌクレオカプシドでは、ｐｇＲＮＡがＤＮＡのマイナス鎖に逆転写され、それによってＤＮＡのプラス鎖がさらに合成されてｒｃＤＮＡが形成される。一方では、ヌクレオカプシドに取り囲まれたｒｃＤＮＡは再び殻を取り除いて細胞核に入り、ｃｃｃＤＮＡをさらに増幅させ、他方では、エンベロープタンパク質と再結合し、小胞体を通して細胞を放出して新しいＨＢＶを形成した。ＨＢＶの複製サイクルでは、ヌクレオカプシド合成がＨＢＶゲノム複製プロセスの重要なステップであり、ウイルスＤＮＡの合成は、ヌクレオカプシド内でのみ特異的に発生する。ヌクレオカプシドのアセンブリは、ＨＢＶの多様性を制限する進化的制限プロセスであり、微妙な分子障害にも非常に敏感である。異なるＨＢＶウィルス遺伝子型と薬剤耐性菌に対する新しい治療法の開発のために、ヌクレオカプシドの合成と分解プロセスに作用する標的は極めて有望である。いくつかのヌクレオカプシド関連抗ＨＢＶ化合物が報告されている。ＮＶＲ ３－７７８ （ＷＯ ２０１５１０９１３０Ａ１）、ＪＮＪ－５６１３６３７９、ＧＬＳ－４ ＪＨＳなどのいくつかの関連化合物のそれぞれは臨床研究段階にある。

【発明の概要】

【0005】

一態様によれば、本発明は、次の式（Ｉ）：

【化1】

［式中、環Ａは６～１２員のアリールまたは５～６員のヘテロアリールであり、
各Ｒは、独立してＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＲ^ａＲ^ｂ、－Ｓ（＝Ｏ）_２ＮＲ^ａＲ^ｂ、－Ｓ（＝Ｏ）_２Ｒ^ｃ、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ^ｄ、Ｃ_１－６アルコキシ、またはＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、－ＯＨ、－ＯＣＨ_３、－ＮＨ_２および－ＣＮからなる群より独立して選ばれる１、２または３個の置換基で任意に置換されているＣ_１－６アルキルであり、
ｎは０、１、２または３であり、
ＴはＮまたはＣＲ_３であり、
Ｒ_１およびＲ_５は、それぞれ独立してＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＲ^ａＲ^ｂ、Ｃ_１－３アルコキシ、またはＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、－ＯＨ、－ＮＨ_２、－ＣＮ、および－ＮＯ_２からなる群より独立して選ばれる１、２または３個の置換基で任意に置換されているＣ_１－３アルキルであり、
Ｒ_２およびＲ_４は、それぞれ独立してＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＲ^ａＲ^ｂ、Ｃ_１－６アルコキシ、またはＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、－ＯＨ、－ＮＨ_２、－ＣＮ、および－ＮＯ_２からなる群より独立して選ばれる１、２または３個の置換基で任意に置換されているＣ_１－６アルキルであり、
Ｒ_３はＦ、ＢｒまたはＣＮであり、
Ｒ^ａ、Ｒ^ｂ、Ｒ^ｃおよびＲ^ｄは、それぞれ独立してＨまたはＣ_１－６アルキルであり、
前記５～６員のヘテロアリールは、－Ｏ－、－Ｓ－、Ｎおよび－ＮＨ－からなる群より独立して選ばれる１、２または３個のヘテロ原子またはヘテロ原子団を含む。］
で表される化合物（式Ｉの化合物）、その薬学的に許容される塩またはその異性体を提供する。

【0006】

本発明に係るいくつかの実施形態において、各Ｒは、独立してＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＲ^ａＲ^ｂ、－Ｓ（＝Ｏ）_２ＮＲ^ａＲ^ｂ、－Ｓ（＝Ｏ）_２Ｒ^ｃ、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ^ｄ、Ｃ_１－６アルコキシ、またはＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、－ＯＨ、－ＮＨ_２および－ＣＮからなる群より独立して選ばれる１、２または３個の置換基で任意に置換されているＣ_１－６アルキルであり、他の変数は本発明で定義される通りである。

【0007】

本発明に係るいくつかの実施形態において、上記環Ａは、フェニルまたは５～６員のヘテロアリールであり、他の変数は本発明で定義される通りである。

【0008】

本発明に係るいくつかの実施形態において、上記環Ａは、フェニル、チアゾリル、イソチアゾリル、ピラゾリル、ピロリル、ピラジニル、ピリミジニルまたはピリジニルであり、他の変数は本発明で定義される通りである。

【0009】

本発明に係るいくつかの実施形態において、上記Ｒ^ａ、Ｒ^ｂ、Ｒ^ｃおよびＲ^ｄは、それぞれ独立してＨ、－ＣＨ_３、－ＣＨ_２ＣＨ_３、－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_３または－ＣＨ_２（ＣＨ_３）_２であり、他の変数は本発明で定義される通りである。

【0010】

本発明に係るいくつかの実施形態において、上記各Ｒは、独立してＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、－ＯＨ、－ＯＣＨ_３、－ＯＣＨ_２ＣＨ_３、－ＮＨ_２、－Ｎ（ＣＨ_３）_２、－Ｓ（＝Ｏ）_２ＮＨ_２、－Ｓ（＝Ｏ）_２ＣＨ_３、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＣＨ_３、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＣＨ_２ＣＨ_３、－ＣＨ_３、－ＣＨ_２ＣＨ_３、ＣＦ_３または－ＣＨ_２ＯＨであり、他の変数は本発明で定義される通りである。

【0011】

本発明に係るいくつかの実施形態において、上記各Ｒは、独立してＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、Ｃ_１－３アルコキシまたはＣ_１－３アルキルであり、他の変数は本発明で定義される通りである。

【0012】

本発明に係るいくつかの実施形態において、上記各Ｒは、独立してＦ、Ｃｌ、ＣＮまたはメトキシであり、他の変数は本発明で定義される通りである。

【0013】

本発明に係るいくつかの実施形態において、上記ｎは０、１または２であり、他の変数は本発明で定義される通りである。

【0014】

本発明に係るいくつかの実施形態において、上記Ｒ_１およびＲ_５は、それぞれ独立してＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、－ＯＨ、－ＯＣＨ_３、－ＮＨ_２、－ＣＨ_３、－ＣＨ _２ Ｆ、－ＣＨＦ_２または－ＣＦ_３であり、他の変数は本発明で定義される通りである。

【0015】

本発明に係るいくつかの実施形態において、上記Ｒ_１およびＲ_５は、それぞれ独立してＨであり、他の変数は本発明で定義される通りである。

【0016】

本発明に係るいくつかの実施形態において、上記Ｒ_２およびＲ_４は、それぞれ独立してＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、－ＯＨ、－ＮＨ_２、Ｃ_１－３アルコキシ、またはＦ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉからなる群より独立して選ばれる１、２または３個の置換基で任意に置換されているＣ_１－３アルキルであり、他の変数は本発明で定義される通りである。

【0017】

本発明に係るいくつかの実施形態において、上記Ｒ_２およびＲ_４は、それぞれ独立してＨ、Ｆ、Ｃｌ、ＣＮ、または２個のＦ（Ｆ原子）で任意に置換されているメチルであり、他の変数は本発明で定義される通りである。

【0018】

本発明に係るいくつかの実施形態において、上記Ｒ_２およびＲ_４は、それぞれ独立してＨ、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、－ＯＨ、－ＯＣＨ_３、－ＯＣＨ_２ＣＨ_３、－ＮＨ_２、－ＣＨ_３、－ＣＨ_２ＣＨ_３、－ＣＨ _２ Ｆ、－ＣＨＦ_２または－ＣＦ_３であり、他の変数は本発明で定義される通りである。

【0019】

本発明に係るいくつかの実施形態において、上記構成単位

【化2】

は、

【化3】

であり、Ｒ、ｎおよびその他の変数は本発明で定義される通りであり、本発明に係るいくつかの実施形態において、上記構成単位

【化4】

は、

【化5】

であり、Ｒ、ｎおよびその他の変数は本発明で定義される通りである。

【0020】

本発明に係るいくつかの実施形態において、上記構成単位

【化6】

は、

【化7】

であり、Ｒおよびその他の変数は本発明で定義される通りである。

【0021】

本発明に係るいくつかの実施形態において、上記構成単位

【化8】

は、

【化9】

であり、他の変数は本発明で定義される通りである。

【0022】

本発明に係るいくつかの実施形態において、上記構成単位

【化10】

は、

【化11】

であり、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４、Ｒ_５、およびその他の変数は本発明で定義される通りである。

【0023】

本発明に係るいくつかの実施形態において、上記構成単位

【化12】

は、

【化13】

であり、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４、およびその他の変数は本発明で定義される通りである。

【0024】

本発明に係るいくつかの実施形態において、上記構成単位

【化14】

は、

【化15】

であり、Ｒ_２、Ｒ_４、およびその他の変数は本発明で定義される通りである。

【0025】

本発明に係るいくつかの実施形態において、上記構成単位

【化16】

は、

【化17】

であり、他の変数は本発明で定義される通りである。

【0026】

本発明に係るいくつかの実施形態において、上記化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体は、次の式（Ｉ－１）で示される構造を備える。

【化18】

［式中、環Ａ、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_４、Ｒ_５、Ｒ、ｎ、Ｔ、または構成単位

【化19】

は、本発明で定義される通りである。］

【0027】

本発明に係るいくつかの実施形態において、上記化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体は、次の式（ＩＩ－ａ）または式（ＩＩＩ－ａ）で示される構造を備える。

【化20】

［式中、環Ａ、Ｒ_２、Ｒ_４、Ｒ、ｎ、または構成単位

【化21】

は、本発明で定義される通りである。］

【0028】

本発明に係るいくつかの実施形態において、上記化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体は、次の式（ＩＩ－ａ－１）または式（ＩＩＩ－ａ－１）で示される構造を備える。

【化22】

［式中、環Ａ、Ｒ_２、Ｒ_４、Ｒ、ｎ、または構成単位

【化23】

は、本発明で定義される通りである。］

【0029】

本発明に係るいくつかの実施形態において、上記化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体は、次の式（ＩＩ－ｂ）、（ＩＩ－ｃ）、（ＩＩＩ－ｂ）または（ＩＩＩ－ｃ）で示される構造を備える。

【化24】

［式中、Ｔ_１およびＴ_２は、それぞれ独立してＮまたはＣＨであり、Ｒ_２、Ｒ_４、Ｒおよびｎは、本発明で定義される通りである。］

【0030】

本発明に係るいくつかの実施形態において、上記化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体は、次の式（ＩＩ－ｂ－１）、（ＩＩ－ｃ－１）、（ＩＩＩ－ｂ－１）または（ＩＩＩ－ｃ－１）で示される構造を備える。

【化25】

［式中、Ｔ_１およびＴ_２は、それぞれ独立してＮまたはＣＨであり、Ｒ_２、Ｒ_４、Ｒおよびｎは、本発明で定義される通りである。］

【0031】

本発明に係るいくつかの実施形態において、上記化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体は、次の式（ＩＩ－ｄ）、（ＩＩ－ｅ）、（ＩＩ－ｆ）、（ＩＩ－ｋ）、（ＩＩＩ－ｄ）、（ＩＩＩ－ｅ）、（ＩＩＩ－ｆ）または（ＩＩＩ－ｋ）で示される構造を備える。

【化26】

［式中、Ｒ_２、Ｒ_４、Ｒおよびｎは、本発明で定義される通りである。］

【0032】

本発明に係るいくつかの実施形態において、上記化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体は、次の式（ＩＩ－ｄ－１）、（ＩＩ－ｅ－１）、（ＩＩ－ｆ－１）、（ＩＩ－ｋ－１）、（ＩＩＩ－ｄ－１）、（ＩＩＩ－ｅ－１）、（ＩＩＩ－ｆ－１）または（ＩＩＩ－ｋ－１）で示される構造を備える。

【化27】

［式中、Ｒ_２、Ｒ_４、Ｒおよびｎは、本発明で定義される通りである。］

【0033】

本発明に係るいくつかの実施形態において、上記化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体は、次の式（ＩＩ－ｍ）または（ＩＩＩ－ｍ）で示される構造を備える。

【化28】

［式中、Ｒ_２およびＲ_４は、本発明で定義される通りである。］

【0034】

本発明に係るいくつかの実施形態において、上記化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体は、次の式（ＩＩ－ｍ－１）または（ＩＩＩ－ｍ－１）で示される構造を備える。

【化29】

［式中、Ｒ_２およびＲ_４は、本発明で定義される通りである。］

【0035】

本発明に係るいくつかの実施形態において、上記化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体は、次の式（ＩＩ－ｇ）～（ＩＩ－ｉ）または式（ＩＩＩ－ｇ）～（ＩＩＩ－ｉ）で示される構造を備える。

【化30】

［式中、Ｒ_２、Ｒ_４、Ｒおよびｎは、本発明で定義される通りである。］

【0036】

本発明に係るいくつかの実施形態において、上記化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体は、次の式（ＩＩ－ｊ）～（ＩＩ－ｎ）または式（ＩＩＩ－ｊ）～（ＩＩＩ－ｎ）で示される構造を備える。

【化31】

［式中、Ｒ_２、Ｒ_４、Ｒおよびｎは、本発明で定義される通りである。］

【0037】

本発明に係るいくつかの実施形態において、上記化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体は、次の式（ＩＩ－ｇ－１）～（ＩＩ－ｉ－１）または式（ＩＩＩ－ｇ－１）～（ＩＩＩ－ｉ－１）で示される構造を備える。

【化32】

［式中、Ｒ_２、Ｒ_４、Ｒおよびｎは、本発明で定義される通りである。］

【0038】

本発明に係るいくつかの実施形態において、上記化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体は、次の式（ＩＩ－ｊ－１）～（ＩＩ－ｎ－１）または式（ＩＩＩ－ｊ－１）～（ＩＩＩ－ｎ－１）で示される構造を備える。

【化33】

［式中、Ｒ_２、Ｒ_４、Ｒおよびｎは、本発明で定義される通りである。］

【0039】

本発明に係るいくつかの実施形態において、上記化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体は、

【化34】

から選ばれる。

【0040】

本発明に係るいくつかの実施形態において、上記化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体は、

【化35】

から選ばれる。

【0041】

また、本発明のいくつかの実施形態は、上記変数の任意の組合せからなるものがある。

【0042】

別の様態によれば、さらに、本発明は、活性成分としての治療有効量の上記化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体、および薬学的に許容される担体を含む、医薬組成物を提供する。

【0043】

別の様態によれば、さらに、本発明は、上記化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体、およびその上記医薬組成物の、抗Ｂ型肝炎薬の製造における使用を提供する。

【0044】

別の様態によれば、さらに、本発明は、上記化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体、およびその上記医薬組成物の、Ｂ型肝炎の予防または治療における使用を提供する。

【0045】

別の様態によれば、さらに、本発明は、治療有効量の上記化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体、およびその上記医薬組成物を、それを必要とする（該治療または予防の）哺乳動物（好ましくは、ヒト）に投与することを含む、Ｂ型肝炎の治療または予防方法を提供する。

【0046】

別の様態によれば、さらに、本発明は、Ｂ型肝炎の治療または予防に使用するための上記化合物、その薬学的に許容される塩またはその異性体、およびその上記医薬組成物を提供する。

【0047】

本発明は、新規なＨＢＶ阻害剤に関し、その親コア構造は先行技術と区別される。本発明に係る化合物は、ＨＢＶ ＤＮＡ複製活性の阻害を示す。
定義および説明

【0048】

特に断らない限り、本発明における下記の用語およびフレーズは、次の意味を有する。ある１つの特定の用語やフレーズは、特に定義されない場合、不確定または不明確とが認定されておらず、一般的な意味とが理解されるべきである。本明細書に商品名が現れた場合、その対応の商品またはその活性成分を示すことである。

【0049】

ここで採用されている用語「薬学的に許容される」とは、それらの化合物、材料、組成物および／または剤形に対し、信頼性を有する医学的判断の範囲においてヒトおよび動物の組織とを接触して使用することに適用するが、過剰な毒性、刺激性、アレルギー性の反応、または他の問題や合併症がなく、合理的な利益／リスクの比率とをバランスすることを意味する。

【0050】

用語「薬学的に許容される塩」とは、本発明の化合物の塩を意味し、本発明に発見された、特定の置換基を有する化合物と相対的に無毒の酸またはアルカリとによって調製されるものである。本発明における化合物に、比較的酸性官能基を含む場合、純粋な溶媒または適当な不活性溶媒に、十分な塩基量でこれらの化合物とを接触する方式で塩基付加塩を取得する。比較的塩基性官能基を含む場合、純粋な溶媒または適当な不活性溶媒に十分な酸量でこれらの化合物とを接触する方式で酸付加塩を取得する。本発明における幾つか特定の化合物は、塩基性の官能基と酸性の官能基を含むため、任意の塩基付加塩または酸付加塩に変換されることができる。

【0051】

本発明に係る薬学的に許容される塩は、酸基または塩基含有親化合物から通常の化学方法により合成される可能性がある。一般的には、このような塩の調製方法は、水や有機溶媒または両者の混合物に、遊離酸または遊離塩基の形態のこれらの化合物と適当の化学量論の塩基または酸とを反応させて調製することである。

【0052】

本発明の化合物は、特定の幾何異性体または立体異性体の形態で存在する可能である。本発明に想定された全ての化合物は、シスおよびトランス異性体、（－）－および（＋）－鏡像異性体、（Ｒ）－および（Ｓ）－鏡像異性体、ジアステレオマー、（Ｄ）－異性体、（Ｌ）－異性体と、それらのラセミ体混合物および他の混合物とを含み、例えば、鏡像異性体またはジアステレオマーに富む混合物である。これらの混合物は、いずれも本発明の範囲に含まれる。アルキルなどの置換基に他の不斉炭素原子が存在してもよい。これらの異性体の全ておよびそれらの混合物は、いずれも本発明の範囲に含まれる。

【0053】

特に断らない限り、用語「鏡像異性体」または「光学異性体」とは、互いに鏡像関係にある立体異性体を意味する。

【0054】

特に断らない限り、用語「ジアステレオマー」とは、分子が２つ以上のキラル中心を備え、分子が互いに鏡像関係ではない立体異性体を意味する。

【0055】

特に断らない限り、「（＋）」は右旋を表し、「（－）」は左旋を表し、「（±）」はラセミを表す。

【0056】

【化36】

【0057】

特に断らない限り、用語「１種の異性体に富む」、「異性体に富む」、「１種の鏡像異性体に富む」または「鏡像異性体に富む」とは、そのうちの１種の異性体または鏡像異性体の含有量が１００％未満であり、且つ、当該異性体または鏡像異性体の含有量が６０％以上であり、または７０％以上、または８０％以上、または９０％以上、または９５％以上、または９６％以上、または９７％以上、または９８％以上、または９９％以上、または９９．５％以上、または９９．６％以上、または９９．７％以上、または以上９９．８％以上、または９９．９％以上であることを意味する。
特に断らない限り、用語「異性体過剰」または「鏡像異性体過剰」とは、２種の異性体または２種の鏡像異性体の相対百分率間の差を意味する。例えば、一方の異性体または鏡像異性体の含有量が９０％、他方の異性体または鏡像異性体の含有量が１０％である場合、異性体または鏡像異性体過剰（ｅｅ値）は８０％である。

【0058】

キラル合成またはキラル試薬、あるいは他の通常の技術により、光学活性の（Ｒ）－および（Ｓ）－異性体、並びにＤおよびＬ異性体を調製することができる。本発明のある化合物の１種の鏡像異性体を取得しようとする場合、不斉合成、またはキラル補助剤を有する誘導作用により調製することができ、取得されたジアステレオマー混合物を分離し、補助基を切断させて所望の純粋な鏡像異性体を提供する。あるいは、分子に塩基性官能基（例えば、アミノ基）または酸性官能基（例えば、カルボキシル基）を含む場合、適当な光学活性の酸または塩基によりジアステレオマー塩を形成し、次に本分野に周知の通常法によりジアステレオマーを分割し、その後、回収して純粋な鏡像異性体を得る。なお、鏡像異性体とジアステレオマーとの分離は、通常、クロマトグラフィーにより完成され、前記クロマトグラフィーは、キラル固定相を採用し、且つ必要に応じて化学誘導体化法と組み合わせる（例えば、アミンによりカルバミン酸塩を生成する。）。

【0059】

本発明の化合物は、当該化合物を構成する１つ以上の原子の上に、不自然な割合の原子同位体を含むことができる。例えば、放射性同位体で化合物を標識することができ、例えば三重水素（^３Ｈ）、ヨウ素－１２５（^１２５Ｉ）またはＣ－１４（^１４Ｃ）が挙げられる。さらに、例えば、水素を重水素で置き換えて重水素化薬物を形成できる。重水素と炭素から形成される結合は、一般的な水素と炭素から形成される結合よりも強力である。非重水素化薬物に比べると、重水素化薬物は、毒性や副作用を低減し、薬物安定性を高め、薬物有効性を高め、薬物生物学的半減期を延長させるという利点がある。本発明に係る化合物の全ての同位体構成の変更は、放射性であるか否かを問わず、いずれも本発明の範囲に含まれる。

【0060】

用語「薬学的に許容される担体（キャリア）」は、本発明の有効量の活性物質を配送でき、活性物質の生物活性を干渉せず、且つ宿主（ホスト）または患者に対する毒性・副作用を持たない任意の製剤または担体媒体を意味する。典型的な担体は、水、油、野菜、および鉱物質、クリームベース、洗剤ベース、軟膏ベース等を含む。これらのベースは、懸濁剤、粘着付与剤、経皮吸収促進剤等を含む。これらの製剤は、化粧品の分野または一部の医薬品分野の当業者にとって周知である。

【0061】

用語「賦形剤」は、有効な薬物組成物の調製に必要な担体（キャリア）、希釈剤、および／または媒体を意味する。

【0062】

用語「含む／含有する（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」、およびそれらの英語の変形（例えば「ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ」や「ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ」など）は、いずれも開放（オープンエンド）式の、包含式の意味、すなわち「…を含むが、これらに限定されない」として解釈されるべきである。

【0063】

用語「治療」とは、本発明に記載の化合物または製剤を投与して疾患又は前記疾患関連の１つ以上の症状を予防、緩和したり、解消したりすることを意味し、且つ
（ｉ） 哺乳類において疾患または疾患状態の発生を予防し、特に、当該哺乳類が前記疾患状態に罹りやすいが、そのような疾患状態にすでに罹患していることがまだ診断されていない場合、予防することと、
（ｉｉ） 疾患または疾患状態を阻害し、すなわちその発生・進行を阻害することと、
（ｉｉｉ） 疾患または疾患状態を緩和し、すなわち疾患または疾患状態を減退させることとを含む。

【0064】

薬物または薬理活性剤について、用語「有効量」または「治療有効量」は、無毒なのに望ましい効果を達成可能な薬物・薬剤の十分な投与量を意味する。本発明に係る経口剤形について、組成物における１種の活性物質の「有効量」とは、当該組成物におけるその他の活性物質と併用する際に望ましい効果を達成するために必要な投与量を意味する。有効量の決定は、個人差があり、受験者の年齢および一般的な状況に依存し、具体的な活性物質にも依存して変化し、個別のケースに適合な有効量は、当業者により通常の実験に基づいて決定される。

【0065】

用語「活性成分」、「治療剤」、「活性物質」または「活性剤」は、標的の不調（障害）、病気または病症を効果的に治療可能な化学実体（ｃｈｅｍｉｃａｌ ｅｎｔｉｔｙ）を意味する。

【0066】

「任意の（ｏｐｔｉｏｎａｌ）」または「任意に／必要に応じて（ｏｐｔｉｏｎａｌｌｙ）（してもよい）」とは、その後に記載の状況が出現する可能性があり、必ず出現することではなく、かつ当該説明の内容には、前記事項または状況が発生する場合と発生しない場合とを含むことを意味する。

【0067】

用語「～で置換されている／置換された」とは、特定原子の電子価状態が正常であり且つ置換されている化合物が安定的なものであれば、特定原子における任意の１つ以上の、重水素および水素の変異体を含んでもよい水素原子が置換基に置換されていることを意味する。置換基がオキソまたはケト（すなわち、＝Ｏ）である場合、２つの水素原子が置換されていることを意味する。オキソ置換は、芳香族基に発生しない。用語「任意に置換されている／必要に応じて置換された」とは、置換されたとしてもよく、置換されていなくてもよく、特に断らない限り、化学的に達成できるという前提の下で、置換基の種類や数が任意であってもよいことを意味する。

【0068】

本明細書に記載のＣ_ｍ－ｎとは、この部分が所定範囲内の整数の炭素原子を有することを意味する。例えば、「Ｃ_１－６」とは、当該基が１個の炭素原子、２個の炭素原子、３個の炭素原子、４個の炭素原子、５個の炭素原子、または６個の炭素原子を有し得ることを意味する。例えば、「Ｃ_１－３」とは、当該基が１個の炭素原子、２個の炭素原子、３個の炭素原子を有し得ることを意味する。

【0069】

任意の変数（例えば、Ｒ）は、化合物の組成や構造に１回以上現れる場合、その各状況における定義がそれぞれ独立している。そのため、例えば、１個の基は０～２個のＲで置換される場合、前記基は、必要に応じて多くとも２個のＲで置換されてもよく、且つ各状況におけるＲは、いずれも独立して選択肢を持っている。また、置換基および／またはその変異体の組み合わせは、このような組合せが安定な化合物をもたらす場合のみ許可される。

【0070】

ある置換基が存在しない場合、例えば、Ａ－ＸのＸが存在しない場合は、その置換基が存在しなく、前記例の構造が実際にＡであることを意味する。

【0071】

例示された置換基についてどの原子を介して、置換された基に接続されているかを指定していない場合、このような置換基がその任意の原子を介して結合してもよい。例えば、置換基としてのピリジルは、ピリジン環上の任意の炭素原子を介して、置換された基に結合してもよい。列挙された連結基が連結方向を指定していない場合、連結方向は任意の方向であり、例えば、

【化37】

における連結基Ｌが－Ｍ－Ｗ－である場合、－Ｍ－Ｗ－は環Ａと環Ｂを、左から右への読み取り順序と同じ方向に連結して

【化38】

に形成してもよく、左から右への読み取り順序とは逆の方向に連結して

【化39】

に形成してもよい。前記連結基、置換基および／またはその変異体の組み合わせは、このような組合せが安定な化合物をもたらす場合のみ許可される。

【0072】

特に断らない限り、用語「ヘテロ」は、ヘテロ原子、またはヘテロ原子団（即ち、ヘテロ原子含有原子団である）を示し、炭素（Ｃ）および水素（Ｈ）以外の原子並びにそれらのヘテロ原子含有原子団、例えば、酸素（Ｏ）、窒素（Ｎ）、硫黄（Ｓ）、珪素（Ｓｉ）、ゲルマニウム（Ｇｅ）、アルミニウム（Ａｌ）、ホウ素（Ｂ）、－Ｏ－、－Ｓ－、＝Ｏ、＝Ｓ、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（＝Ｏ）－、－Ｃ（＝Ｓ）－、－Ｓ（＝Ｏ）、－Ｓ（＝Ｏ）_２－、および必要に応じて置換された－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｈ）－、－Ｎ（Ｈ）－、－Ｃ（＝ＮＨ）－、－Ｓ（＝Ｏ）_２Ｎ（Ｈ）－または－Ｓ（＝Ｏ）Ｎ（Ｈ）－を含む。

【0073】

特に断らない限り、環における原子の数は、通常、環の員数として定義され、例えば、「５～７員環」とは、５～７個の原子を環状に配列してなる「環」を意味する。

【0074】

特に断らない限り、「環（シクロ）」は、置換もしくは無置換のシクロアルキル基、ヘテロシクロアルキル基、シクロアルケニル基、ヘテロシクロアルケニル基、シクロアルキニル基、ヘテロシクロアルキニル基、アリール基、ヘテロアリール基を示す。いわゆる環は、単環、連結環（ｌｉｎｋｅｄ ｒｉｎｇ（環と環が直接つながっているもの））、スピロ環、縮合環、または架橋環を含む。特に断らない限り、当該環は、必要に応じて１～３個のヘテロ原子を含む。そのため、「５～７員環」には、例えばフェニル、ピリジニルおよびピぺリジニルを含む。一方、用語「５～７員ヘテロシクロアルキル環」には、ピリジニルおよびピぺリジニルを含むが、フェニルを含まない。用語「環」にも、少なくとも１つの環を有する環系を含み、その中の「環」のいずれも独立して上記定義に合致する。

【0075】

特に断らない限り、用語「ヒドロカルビル（炭化水素基）」とは、炭素と水素の２種類の原子のみを含む官能基を意味し、用語「ヒドロカルビル」またはその下位概念（例えば、アルキル、アルケニル、アルキニル、アリールなど）自体、あるいは他の置換基の一部として表される直鎖状、分岐鎖状または環状の炭化水素原子団またはその組み合わせは、完全飽和のもの（例えばアルキル）であっても、一価または多価不飽和のもの（例えばアルケニル、アルキニル、アリール）であってもよく、一置換または多置換のものであってもよく、１価（例えばメチル）、二価（例えばメチレン）または多価（例えばメチレン）であってもよく、二価または多価の原子団を含んでもよく、指定数の炭素原子を持っている（例えば、Ｃ_１－Ｃ_１２は１～１２個の炭素を表し、Ｃ_１－１２はＣ_１、Ｃ_２、Ｃ_３、Ｃ_４、Ｃ_５、Ｃ_６、Ｃ_７、Ｃ_８、Ｃ_９、Ｃ_１０、Ｃ_１１およびＣ_１２から選ばれ、Ｃ_３－１２はＣ_３、Ｃ_４、Ｃ_５、Ｃ_６、Ｃ_７、Ｃ_８、Ｃ_９、Ｃ_１０、Ｃ_１１およびＣ_１２から選ばれる）。「炭素水素基（ヒドロカルビル）」は、脂肪族炭化水素基および芳香族炭化水素基を含むが、これらに限定されるものではない。前記脂肪族炭化水素基は、鎖状および環状を含み、具体的には、アルキル基、アルケニル基、アルキニル基を含むが、これらに限定されるものではない。前記芳香族炭化水素基は、６～１２員の芳香族炭化水素基、例えばベンゼン、ナフタレン等を含むが、これらに限定されるものではない。いくつかの実施形態において、用語「炭素水素基（ヒドロカルビル）」は、直鎖や分岐鎖の原子団、またはそれらの組み合わせを示し、完全飽和のものであっても、一価または多価不飽和のものでもよく、二価および多価の原子団を含んでもよい。飽和炭化水素の原子団の例としては、メチル、エチル、ｎ－プロピル、ｉ－プロピル、ｎ－ブチル、ｔ－ブチル、イソブチル、ｓ－ブチル、ｉ－ブチル、シクロヘキシル、（シクロヘキシル）メチル、シクロプロピルメチル、およびｎ－ペンチル、ｎ－ヘキシル、ｎ－ヘプチル、ｎ－オクチル等の原子団の同族体や異性体を含むが、これらに限定されるものではない。不飽和アルキルは、１つ以上の二重結合または三重結合を有し、その例として、ビニル、２－プロペニル、ブテニル、クロチル、２－イソペンテニル、２－ブタジエニル、２，４－ペンタジエニル、３－（１，４－ペンタジエニル）、エチニル、１－プロピニルおよび３－プロピニル、３－ブチニル、並びに、より高次の同族体および異性体を含むが、これらに限定されるものではない。

【0076】

特に断りのない限り、用語「アルキル」とは、直鎖または分岐鎖の飽和炭化水素基を示すために用いられ、一置換（例えば、－ＣＨ_２Ｆ）または多置換（例えば、－ＣＦ_３）のものであってもよく、そして一価（例えば、メチル）、二価（例えば、メチレン）または多価（例えば、メチン）のものであってもよい。アルキルの例には、メチル（Ｍｅ）、エチル（Ｅｔ）、プロピル（例えば、ｎ－プロピルおよびｉ－プロピル）、ブチル（例えば、ｎ－ブチル、ｉ－ブチル、ｓ－ブチル、ｔ－ブチル）、ペンチル（例えば、ｎ－ペンチル、ｉ－ペンチル、ネオペンチル）などを含む。

【0077】

特に断らない限り、用語「ハロ」（「ハロゲン化」）や「ハロゲン」とは、それらの自体またはその他の１つの置換基の一部として、フッ素、塩素、臭素、またはヨウ素原子を意味する。また、用語「ハロアルキル基」とは、モノハロアルキル基およびポリハロアルキル基を含むことを意味する。例えば、用語「ハロ（Ｃ_１－Ｃ_４）アルキル基」とは、トリフルオロメチル基、２，２，２－トリフルオロエチル基、４－クロロブチル、および３－ブロモプロピル等を含むが、これらに限定されるものではないことを意味する。特に断りのない限り、ハロアルキルの例としては、トリフルオロメチル、トリクロロメチル、ペンタフルオロエチル、およびペンタクロロエチルを含むが、これらに限定されるものではない。

【0078】

用語「アルコキシ」は、酸素橋を介して結合した特定の数の炭素原子を有する上記アルキルを指し、特に断りのない限り、Ｃ_１－６アルコキシはＣ_１、Ｃ_２、Ｃ_３、Ｃ_４、Ｃ_５、およびＣ_６アルコキシを含む。アルコキシの例としては、メトキシ、エトキシ、ｎ－プロポキシ、ｉ－プロポキシ、ｎ－ブチルオキシ、ｎ－ブトキシ、ｓ－ブトキシ、ｔ－ブトキシ、ｎ－ペントキシとＳ－ペントキシを含むが、これらに限定されるものではない。

【0079】

特に断りのない限り、用語「アリール」は、多価不飽和芳香族炭化水素置換基を表し、一置換または多置換のものであってもよく、そして一価、二価または多価のものであってもよく、単環式または多環式（好ましくは、１～３個の環であって、少なくとも１個の環は芳香族である）であってもよく、それらは一緒に縮合されたり共有結合されたりしている。例えば、用語「ヘテロアリール」は、１、２、３、または４個のヘテロ原子、または１、２、３、または４個からなる任意数値範囲のヘテロ原子を含むアリール（または環）を意味する。一実施形態において、ヘテロ原子はＢ、Ｎ、ＯおよびＳから選ばれ、その中で、必要に応じて、窒素原子および硫黄原子は酸化され、窒素原子は４級化される。ヘテロアリール基は、ヘテロ原子を介して分子の残り部分に接続されてもよい。アリールまたはヘテロアリールの非制限的な実施例は、フェニル、ナフチル、ビフェニル、ピロリル、ピラゾリル、イミダゾリル、ピラジニル、オキサゾリル、フェニル－オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、フラニル、チエニル、ピリジル、ピリミジニル、ベンゾチアゾリル、プリニル、ベンズイミダゾリル、インドリル、インドリル、イソキノリニル、キノキサリニル、キノリニル、１－ナフチル、２－ナフチル、４－ビフェニル、１－ピロリル、２－ピロリル、３－ピロリル、３－ピラゾリル、２－ピラゾリル、４－ピラゾリル、ピラジニル、２－オキサゾリル、４－オキサゾリル、２－フェニル－４－オキサゾリル、５－オキサゾリル、３－イソオキサゾリル、４－イソオキサゾリル、５－イソオキサゾリル、２－チアゾリル、４－チアゾリル、５－チアゾリル、２－フラニル、３－フラニル、２－チエニル、３－チエニル、２－ピリジル、３－ピリジル、４－ピリジル、２－ピリミジニル、４－ピリミジニル、５－ベンゾチアゾリル、プリニル、２－ベンゾチアゾリル、５－インドリル、１－イソキノリニル、５－イソキノリニル、２－キノキサリニル、５－キノキサリニル、３－キノリニル、および６－キノリニルを含む。上記のいずれの１つのアリールおよびヘテロアリールの環系の置換基は、後述の許容される置換基から選ばれる。

【0080】

用語「脱離基」は、置換反応（例えば、求核置換反応）によって他の種類の官能基または原子に置換され得る官能基または原子を意味する。例えば、典型的な脱離基は、トリフルオロメタンスルホン酸エステルと、塩素、臭素、ヨウ素と、メタンスルホン酸エステル、トルエンスルホン酸エステル、ｐ－ブロモベンゼンスルホン酸エステル、ｐ－トルエンスルホン酸エステル等のようなスルホン酸エステル基と、アセトキシ、トリフルオロアセトキシ等のようなアシルオキシ基などの基を含む。

【0081】

用語「保護基」は、「アミノ保護基」、「ヒドロキシル保護基（水酸基保護基）」、「チオール保護基（メルカプト保護基）」を含むが、これらに限定されるものではない。用語「アミノ基保護基」は、アミノ基の窒素位置での副反応の発生を阻止することに好適に用いられる保護基を意味する。典型的なアミノ保護基は、ホルミル基と、アルカノイル基（例えば、アセチル基、トリクロロアセチル基、またはトリフルオロアセチル基）のようなアシル基と、ｔ－ブトキシカルボニル（Ｂｏｃ）のようなアルコキシカルボニル基と、ベンジルオキシカルボニル基（Ｃｂｚ）および９－フルオレニルメトキシカルボニル基（Ｆｍｏｃ）のようなアリールメトキシカルボニル基と、ベンジル基（Ｂｎ）、トリチル基（Ｔｒ）、１，１－ジ－（４’－メトキシフェニル）メチル基のようなアリールメチル基と、トリメチルシリル基（ＴＭＳ）およびｔ－ブチルジメチルシリル基（ＴＢＳ）のようなシリル等とを含むが、これらに限定されるものではない。用語「ヒドロキシル保護基」は、ヒドロキシル基の副反応の発生を阻止することに好適に用いられる保護基を意味する。用語「ヒドロキシル保護基」は、ヒドロキシルの副反応の発生を阻止することに好適に用いられる保護基を意味する。典型的なヒドロキシル保護基は、メチル、エチルおよびｔ－ブチルのようなアルキルと、アルカノイル（例えば、アセチル）のようなアシルと、ベンジル（Ｂｎ）、ｐ－メトキシベンジル（ＰＭＢ）、９－フルオレニルメチル（Ｆｍ）およびジフェニルメチル（ｄｉｐｈｅｎｙｌｍｅｔｈｙｌ：ＤＰＭ）のようなアリールメチルと、トリメチルシリル（ＴＭＳ）およびｔ－ブチルジメチルシリル（ＴＢＳ）のようなシリル等とを含むが、これらに限定されるものではない。

【0082】

本発明に係る化合物は、下記に記載の具体的な実施形態およびその他の化学合成方法との組合せてなった実施形態、並びに当業者にとってよく知られた均等な形態を含む、当業者にとってよく知られている多種類の合成方法により調製することができる。好ましい実施形態には本発明の実施例を含むが、これらに限定されるものではない。
本発明で使用される溶媒は、市販により入手することができる。

【0083】

本発明は、下記の略語（頭字語）が使用されており、ＤＭＦはＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドを表し、Ｎａ_２ＣＯ_３は炭酸ナトリウムを表し、Ｋ_２ＣＯ_３は炭酸カリウムを表し、Ｃｓ_２ＣＯ_３は炭酸セシウムを表し、ＣｕＩはヨウ化第一銅を表し、ＭｅＩはヨードメタンを表し、ＥｔＯＡｃは酢酸エチルを表し、ＥＡは酢酸エチルを表し、ＴＨＦはテトラヒドロフランを表し、ＬｉＨＭＤＳはリチウムヘキサメチルジシラジドを表し、ＭｅＯＨはメタノールを表し、ＤＣＭはジクロロメタンを表し、ＤＭＳＯはジメチルスルホキシドを表し、ＰＥは石油エーテルを表し、ＥｔＯＨはエタノールを表し、ＩＰＡはイソプロパノールを表し、ＣＨ_３ＣＮはアセトニトリルを表し、ＭＴＢＥはメチル（ｔｅｒｔ－ブチル）エーテルを表し、ＴＦＡはトリフルオロ酢酸を表し、ＮＨ_３・Ｈ_２Ｏはアンモニア水を表し、ＴＥＡはトリエチルアミンを表し、ＤＩＰＥＡはＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミンを表し、Ｂｏｃ_２Ｏは二炭酸ジ－ｔｅｒｔ－ブチルを表し、Ｂｏｃはｔ－ブトキシカルボニル（アミノ保護基の１つ）を表し、ＮＨ_２ＯＨ・ＨＣｌはヒドロキシルアミンの塩酸塩を表し、Ｐｄ（ＰＰｈ_２）Ｃｌ_２はビス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（ＩＩ）ジクロリドを表し、ＤＭＰはデス－マーチン（試薬Ｄｅｓｓ－Ｍａｒｔｉｎ試薬）を表し、ＰＩＦＡはビス（トリフルオロアセトキシ）ヨードベンゼンを表し、ＥＤＴＡはエチレンジアミン四酢酸二ナトリウムを表し、ＬＣＭＳは液体質量分析クロマトグラフィーを表し、ＨＰＬＣは液体クロマトグラフィーを表し、ＳＦＣ超臨界流体クロマトグラフィーを表し、ＰＯは経口投与（例えば、経口強制投与）を表し、ＩＶは静脈内投与を表し、ＱＤは１日１回投与を表し、ＢＩＤは１日２回投与を表し、ＭＰＫはｍｇ／ｋｇを表し、Ｔ_１／２は半減期を表し、Ｖｄｓｓは定常状態における見かけの分布容積を表し、ＣＬはクリアランス率を表し、ＡＵＣ_{０－２４ｈ}は投与後０～２４時間の血中濃度－時間曲線下面積を表し、Ｃ_ｍａｘは最高血中濃度を表し、Ｔ_ｍａｘは最高血中濃度到達時間を表す。

【図面の簡単な説明】

【0084】

【図1】実施例６の化合物をマウスに投与してから１～７日間各試験群のマウスの単位体積あたりの血漿におけるＬｏｇ（ＨＢＶ ＤＮＡコピー数）の変化を示すグラフである。

【図2】実施例６の化合物をマウスに投与してから７日目の各試験群のマウスの単位重量あたりの肝臓組織におけるＬｏｇ（ＨＢＶ ＤＮＡコピー数）のレベルを示すグラフである。

【図3】実施例２３の化合物をマウスに投与してから１～７日間各試験群のマウスの単位体積あたりの血漿におけるＬｏｇ（ＨＢＶ ＤＮＡコピー数）の変化を示すグラフである。

【図4】実施例２３の化合物をマウスに投与してから７日目の各試験群のマウスの単位重量あたりの肝臓組織におけるＬｏｇ（ＨＢＶ ＤＮＡコピー数）のレベルを示すグラフである。

【発明を実施するための形態】

【0085】

以下、実施例により本発明を詳細に説明し、本発明に対していかなる限定を意味するものではない。本明細書で本発明を詳細に説明し、具体な実施形態をも開示したが、当業者にとって本発明の精神および範囲から逸脱することなく本発明の具体的な実施形態に対する様々な変更や修正は、明らかであろう。

【0086】

中間体の製造
中間体Ａ－１

【化40】

中間体Ａ－１は次の方法で製造される。

【化41】

０℃でクロロギ酸フェニル（５８．５４ｇ、４６．８３ｍＬ）を、３，４，５－トリフルオロアニリン（５０．００ｇ）およびピリジン（２９．５８ｇ、３０．１８ｍＬ）を溶解させたジクロロメタン（３００ｍＬ）溶液に徐々に滴下した。反応混合物を２５℃で３時間撹拌し後、水２５０ｍＬを加えてクエンチすると、白色の沈殿物を析出した。当該沈殿物を濾過した後、減圧乾燥して、中間体Ａ－１を得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ：７．４６－７．３９（ｍ，２Ｈ），７．３２－７．２７（ｍ，１Ｈ），７．２１－７．１１（ｍ，４Ｈ），４．８２（ｂｒ． ｓ．，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２６８ ［Ｍ＋Ｈ^＋］。

【0087】

中間体Ａ－２

【化42】

中間体Ａ－２は、中間体Ａ－１の製造方法を参照して３，４，５－トリフルオロアニリンの代わりに３－シアノ－４－フルオロアニリンを使用して製造できる。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ：７．８５－７．７４（ｍ，１Ｈ），７．６７（ｄｄ，Ｊ ＝ ３．８，８．３ Ｈｚ，１Ｈ），７．４６－７．４１（ｍ，２Ｈ），７．３１－７．１８（ｍ，５Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２５７ ［Ｍ＋Ｈ^＋］。

【0088】

中間体Ａ－３

【化43】

中間体Ａ－３は、中間体Ａ－１の製造方法を参照して３，４，５－トリフルオロアニリンの代わりに３－クロロ－４－フルオロアニリンを使用して製造できる。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ：７．６４（ｄ，Ｊ ＝ ４．３ Ｈｚ，１Ｈ），７．５１－７．３８（ｍ，３Ｈ），７．３２－７．２９（ｍ，１Ｈ），７．２２－７．１０（ｍ，３Ｈ），６．９５（ｂｒ． ｓ．，１Ｈ）；ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２６６ ［Ｍ＋Ｈ^＋］。

【0089】

中間体Ａ－４

【化44】

中間体Ａ－４は、中間体Ａ－１の製造方法を参照して３，４，５－トリフルオロアニリンの代わりに３－メチル－４－フルオロアニリンを使用して製造できる。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ：７．４９－７．３３（ｍ，３Ｈ），７．２８－７．１５（ｍ，４Ｈ），７．０３－６．９３（ｍ，１Ｈ），６．９６（ｂｒ．ｓ．，１Ｈ），２．２９（ｓ，３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２４６ ［Ｍ＋Ｈ^＋］。

【0090】

中間体Ａ－５

【化45】

中間体Ａ－５は、中間体Ａ－１の製造方法を参照して３，４，５－トリフルオロアニリンの代わりに２－クロロ－４－アミノピリジンを使用して製造できる。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ：８．１９（ｄ，Ｊ ＝ ５．６ Ｈｚ，１Ｈ），７．４６（ｄ，Ｊ ＝ １．６ Ｈｚ，２Ｈ），７．３８－７．３１（ｍ，２Ｈ），７．２５－７．２０（ｍ，２Ｈ），７．１０（ｄ，Ｊ ＝ ７．７ Ｈｚ，２Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２４９ ［Ｍ＋Ｈ^＋］。

【0091】

中間体Ａ－６

【化46】

中間体Ａ－６は、中間体Ａ－１の製造方法を参照して３，４，５－トリフルオロアニリンの代わりに３，４－ジフルオロアニリンを使用して製造できる。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ：７．５５－７．４７（ｍ，１Ｈ），７．４５－７．４０（ｍ，２Ｈ），７．３２－７．２６（ｍ，２Ｈ），７．２１－７．２０（ｍ，１Ｈ），７．１７－７．０１（ｍ，３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２５０ ［Ｍ＋Ｈ^＋］。

【0092】

実施例１

【化47】

実施例１の製造：

【化48】

【0093】

ステップＡ：化合物１－２の合成
０℃で、化合物１－１（３．００ｇ）のジクロロメタン（３０ｍＬ）溶液に塩化オキサリル（５．４０ｇ、４２．５２ｍｏｌ）を加え、続いて１～２滴のＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミドを加えた。当該反応混合物を室温まで自然的に昇温し、１４時間撹拌して続けた後、減圧濃縮して化合物１－２の粗生成物を得た。

【0094】

ステップＢ：化合物１－３の合成
－７０℃で、窒素保護下でＮ－Ｂｏｃ－（Ｓ）－２－メチル－４－ピペリドン（０．５０ｇ）をエーテル（８ｍＬ）に溶解し、続いてリチウムヘキサメチルジシラジド（２．３４ｍＬ、１ｍｏｌ／Ｌ）を加えた。反応混合物を－７０℃で０．５時間撹拌した後、化合物１－２（３７４．０４ｍｇ）のエーテル（２ｍＬ）溶液を系に滴下した。反応液を室温まで自然的に昇温し、３時間撹拌して続けた。反応液を１ｍｏｌ／Ｌの塩酸（４０ｍＬ）に注ぎ、酢酸エチル（２５ｍＬ×２）で抽出した。有機相を合わせて飽和食塩水（４０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後、濾液を減圧濃縮して化合物１－３の粗生成物を得た。

【0095】

ステップＣ：化合物１－４の合成
撹拌しながら、エタノール２．５ｍＬに、化合物１－３（３００．００ｍｇ、粗生成物）、塩酸ヒドロキシルアミン（３３４．６９ｍｇ）およびピリジン（２．５ｍＬ）を順次加えた。反応混合物を１００℃まで徐々に昇温し、該温度で１時間撹拌した。自然冷却後、減圧蒸留し、残渣を酢酸エチル（３０ｍＬ）で希釈し、そして１ｍｏｌ／Ｌ塩酸（２０ｍＬ）および飽和食塩水（２０ｍＬ）で順次洗浄した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後、濾液を減圧濃縮した。残渣を分取クロマトグラフィー（展開液：石油エーテル：酢酸エチル＝２：１）により分離して化合物１－４を得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ：８．６３－８．４８（ｍ，１Ｈ），７．９２（ｄｄ，Ｊ ＝ ４．２，８．６ Ｈｚ，１Ｈ），７．６０－７．４５（ｍ，１Ｈ），５．９６－４．７９（ｍ，１Ｈ），４．５８－４．２１（ｍ，１Ｈ），３．２９－３．０５（ｍ，１Ｈ），３．０２－２．７２（ｍ，２Ｈ），１．５９－１．３５（ｍ，１２Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ：３３４ ［Ｍ＋Ｈ^＋］。

【0096】

ステップＤ：化合物１－５の合成
室温で、化合物１－４（９３．００ｍｇ）を、塩酸／１，４－ジオキサン溶液（４ｍｏｌ／Ｌ、５ｍＬ）に加えた。当該反応混合物を室温で０．５時間撹拌した後、減圧蒸留して粗生成物である化合物１－５（塩酸塩）を得、次のステップの反応に直接使用した。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２３４ ［Ｍ＋Ｈ^＋］。

【0097】

ステップＥ：実施例１の合成
室温で、化合物１－５（塩酸塩、７５．００ｍｇ）をＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド２ｍＬに溶解し、続いてＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１０７．８２ｍｇ）および中間体Ａ－１（７４．３１ｍｇ）を順次加えた。反応混合物を７０℃で１時間撹拌し後、３０ｍＬ水に徐々に注ぎ、その後酢酸エチル（２０ｍＬ×２）で抽出した。有機相を合わせて飽和食塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後、濾液を減圧濃縮した。残渣を分取高速液体クロマトグラフィー（分離カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｃ１８、１５０×３０ｍｍ×４μｍ、移動相：［水（０．２２５％トリフルオロ酢酸）－アセトニトリル］、Ｂ％：５０％～８０％、１０．５ｍｉｎ）により精製して実施例１のものを得た。
^１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ：８．６３（ｄ，Ｊ ＝ ２．８ Ｈｚ，１Ｈ），８．００－７．９６（ｍ，１Ｈ），７．７８－７．７５（ｍ，１Ｈ），７．３４－７．１４（ｍ，２Ｈ），５．２９（ｄ，Ｊ ＝ １７．５ Ｈｚ，１Ｈ），４．９５（ｑｕｉｎ，Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ，１Ｈ），４．５０（ｄ，Ｊ ＝ １７．４ Ｈｚ，１Ｈ），３．０６（ｄｄ，Ｊ ＝ ５．７，１６．４ Ｈｚ，１Ｈ），２．８７（ｄｄ，Ｊ ＝ １．２，１６．３ Ｈｚ，１Ｈ），１．２２（ｄ，Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ，３Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４０７ ［Ｍ＋Ｈ^＋］。

【0098】

実施例２

【化49】

実施例２の製造は、実施例１における５－フルオロピリジン２－カルボン酸の代わりに安息香酸を使用した以外、実施例１の製造プロセスＡ～Ｅを参照して行うことができる。粗生成物を分取ＳＦＣ（ＳＦＣ分離法： 分離カラム：ＤＡＩＣＥＬ ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ ＡＳ－Ｈ（仕様：２５０ｍｍ×３０ｍｍ、粒径：５μｍ）、移動相：［０．１％ ＮＨ_３・Ｈ_２Ｏ、ＥｔＯＨ］、Ｂ％：３０％～３０％、７．８ｍｉｎ）により分離して実施例２のものを得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ：７．８６－７．７７（ｍ，２Ｈ），７．６９－７．４８（ｍ，３Ｈ），７．３６－７．２１（ｍ，２Ｈ），５．２１（ｄ，Ｊ ＝ １５．９４ Ｈｚ，１Ｈ），４．６５－４．４７（ｍ，２Ｈ），３．１７－３．０２（ｍ，１Ｈ），２．９０（ｄｄ，Ｊ ＝ １．４４，１６．３８ Ｈｚ，１Ｈ），１．２７（ｄ，Ｊ ＝ ６．９０ Ｈｚ，３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３８８ ［Ｍ＋Ｈ^＋］。

【0099】

実施例３

【化50】

実施例３の製造は、実施例１における５－フルオロピリジン２－カルボン酸の代わりに２－フルオロ安息香酸を使用した以外、実施例１の製造プロセスＡ～Ｅを参照して行うことができる。粗生成物を分取ＳＦＣ（ＳＦＣ分離法：分離カラム：ＤＡＩＣＥＬ ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ ＡＤ（仕様：２５０ｍｍ×３０ｍｍ、粒径：１０μｍ）、移動相：［０．１％ＮＨ_３・Ｈ_２Ｏ、ＭｅＯＨ］、Ｂ％：２０％～２０％、４．０ｍｉｎ）により分離して実施例３のものを得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ：７．８１（ｄｔ，Ｊ ＝ １．６３，７．５３ Ｈｚ，１Ｈ），７．６７－７．５４（ｍ，１Ｈ），７．４３－７．２０（ｍ，４Ｈ），５．１０（ｄ，Ｊ ＝ １６．６９ Ｈｚ，１Ｈ），４．９２－４．７８（ｍ，１Ｈ），４．３８（ｄ，Ｊ ＝ １６．８１ Ｈｚ，１Ｈ），３．１０（ｄｄ，Ｊ ＝ ５．９０，１６．５６ Ｈｚ，１Ｈ），２．９１（ｄ，Ｊ ＝ １６．３１ Ｈｚ，１Ｈ），１．２９（ｄ，Ｊ ＝ ６．９０ Ｈｚ，３Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４０６ ［Ｍ＋Ｈ^＋］。

【0100】

実施例４

【化51】

実施例４の製造は、実施例１における５－フルオロピリジン２－カルボン酸の代わりに３－フルオロ安息香酸を使用した以外、実施例１の製造プロセスＡ～Ｅを参照して行うことができる。粗生成物を分取ＳＦＣ（ＳＦＣ分離法： 分離カラム：ＤＡＩＣＥＬ ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ ＡＳ（仕様：２５０ｍｍ×５０ｍｍ、粒子径：１０μｍ）、移動相：［０．１％ ＮＨ_３・Ｈ_２Ｏ、ＩＰＡ］、Ｂ％：５０％～５０％、１．９ｍｉｎ）により分離して実施例４のものを得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ：７．６２－７．５６（ｍ，２Ｈ），７．５２（ｄｄ，Ｊ ＝ １．３，８．７ Ｈｚ，１Ｈ），７．３１－７．２１（ｍ，３Ｈ），５．１６（ｄ，Ｊ ＝ １６．１ Ｈｚ，１Ｈ），４．９９（ｑｕｉｎ，Ｊ ＝ ６．３ Ｈｚ，１Ｈ），４．４９（ｄ，Ｊ ＝ １６．１ Ｈｚ，１Ｈ），３．０９－３．００（ｍ，１Ｈ），２．９２－２．８３（ｍ，１Ｈ），１．２３（ｄ，Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ，３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４０６ ［Ｍ＋Ｈ^＋］。

【0101】

実施例５

【化52】

実施例５の製造は、実施例１における５－フルオロピリジン２－カルボン酸の代わりに４－フルオロ安息香酸を使用した以外、実施例１の製造プロセスＡ～Ｅを参照して行うことができる。粗生成物を分取ＳＦＣ（ＳＦＣ分離法： 分離カラム：ＤＡＩＣＥＬ ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ ＡＳ－Ｈ（仕様：２５０ｍｍ×３０ｍｍ、粒径：５μｍ）、移動相：［０．１％ ＮＨ_３・Ｈ_２Ｏ、ＥｔＯＨ］、Ｂ％：３０％～３０％、４．２ｍｉｎ）により分離して実施例５のものを得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ：７．９０－７．８０（ｍ，２Ｈ），７．４２－７．２３（ｍ，４Ｈ），５．２４－５．１４（ｍ，１Ｈ），５．０１（ｑｕｉｎ，Ｊ ＝ ６．３ Ｈｚ，１Ｈ），４．５０（ｄ，Ｊ ＝ １６．１ Ｈｚ，１Ｈ），３．０８（ｄｄ，Ｊ ＝ ５．８，１６．３ Ｈｚ，１Ｈ），２．８９（ｄｄ，Ｊ ＝ １．２，１６．４ Ｈｚ，１Ｈ），１．２６（ｄ，Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ，３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４０６ ［Ｍ＋Ｈ^＋］。

【0102】

実施例６

【化53】

実施例６の製造は、実施例１における５－フルオロピリジン２－ジフルオロ安息香酸の代わりに２，４－ジフルオロ安息香酸を使用した以外、実施例１の製造プロセスＡ～Ｅを参照して行うことができる。粗生成物を分取ＳＦＣ（ＳＦＣ分離法： 分離カラム：ＤＡＩＣＥＬ ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ ＡＳ（仕様：２５０ｍｍ×３０ｍｍ、粒径：１０μｍ）、移動相：［０．１％ ＮＨ_３・Ｈ_２Ｏ、ＩＰＡ］、Ｂ％：３０％～３０％、９ｍｉｎ）により分離して実施例６のものを得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ：７．８６－７．７５（ｍ，１Ｈ），７．２６－７．１４（ｍ，４Ｈ），５．０５（ｄ，Ｊ ＝ １６．４ Ｈｚ，１Ｈ），４．９３（ｑｕｉｎ，Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ，１Ｈ），４．３８－４．２７（ｍ，１Ｈ），３．０６（ｄｄ，Ｊ ＝ ５．９，１６．４ Ｈｚ，１Ｈ），２．９１－２．８２（ｍ，１Ｈ），１．２５（ｄ，Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ，３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４２４ ［Ｍ＋Ｈ^＋］。

【0103】

実施例７

【化54】

実施例７の製造は、実施例１における５－フルオロピリジン２－カルボン酸の代わりに２－メトキシ安息香酸を使用した以外、実施例１の製造プロセスＡ～Ｅを参照して行うことができる。粗生成物を分取ＳＦＣ（ＳＦＣ分離法： 分離カラム：ＤＡＩＣＥＬ ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ ＡＤ（仕様：２５０ｍｍ×３０ｍｍ、粒子径：１０μｍ）、移動相：［０．１％ ＮＨ_３・Ｈ_２Ｏ、ＭｅＯＨ］、Ｂ％：３０％～３０％、２．５ｍｉｎ）により分離して実施例７のものを得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ：７．６０（ｄｄ，Ｊ ＝ １．６，７．６ Ｈｚ，１Ｈ），７．５３－７．４５（ｍ，１Ｈ），７．２５－７．１２（ｍ，３Ｈ），７．０７（ｔ，Ｊ ＝ ７．５ Ｈｚ，１Ｈ），４．９９（ｄ，Ｊ ＝ １６．６ Ｈｚ，１Ｈ），４．９４－４．８８（ｍ，１Ｈ），４．２４（ｄ，Ｊ ＝ １６．６ Ｈｚ，１Ｈ），３．９４（ｓ，３Ｈ），３．０４（ｄｄ，Ｊ ＝ ５．９，１６．４ Ｈｚ，１Ｈ），２．８３（ｄｄ，Ｊ ＝ １．０，１６．３ Ｈｚ，１Ｈ），１．２６（ｄ，Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ，３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４１８ ［Ｍ＋Ｈ^＋］。

【0104】

実施例８

【化55】

実施例８の製造は、実施例１における５－フルオロピリジン２－カルボン酸の代わりに３－メトキシ安息香酸を使用した以外、実施例１の製造プロセスＡ～Ｅを参照して行うことができる。粗生成物を分取ＳＦＣ（ＳＦＣ分離法： 分離カラム：ＤＡＩＣＥＬ ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ ＡＤ（仕様：２５０ｍｍ×３０ｍｍ、粒子径：１０μｍ）、移動相：［０．１％ ＮＨ_３・Ｈ_２Ｏ、ＥｔＯＨ］、Ｂ％：３０％～３０％、３．０ｍｉｎ）により分離して実施例８のものを得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）：δ ７．５１－７．４３（ｍ，１Ｈ），７．３４－７．２３（ｍ，４Ｈ），７．０７（ｄｄ，Ｊ ＝ ２．１，８．２ Ｈｚ，１Ｈ），５．１５（ｄ，Ｊ ＝ １６．１ Ｈｚ，１Ｈ），４．９７（ｑｕｉｎ，Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ，１Ｈ），４．４７（ｄ，Ｊ ＝ １６．０ Ｈｚ，１Ｈ），３．８８（ｓ，３Ｈ），３．０５（ｄｄ，Ｊ ＝ ５．７，１６．３ Ｈｚ，１Ｈ），２．８６（ｄｄ，Ｊ ＝ １．１，１６．３ Ｈｚ，１Ｈ），１．２４（ｄ，Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ，３Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４１８ ［Ｍ＋Ｈ^＋］。

【0105】

実施例９

【化56】

実施例９の製造は、実施例１における５－フルオロピリジン２－カルボン酸の代わりに４－メトキシ安息香酸を使用した以外、実施例１の製造プロセスＡ～Ｅを参照して行うことができる。粗生成物を分取ＳＦＣ（ＳＦＣ分離法： 分離カラム：ＤＡＩＣＥＬ ＣＨＩＲＡＬＣＥＬ ＯＤ（仕様：２５０ｍｍ×５０ｍｍ、粒子径：１０μｍ）、移動相：［０．１％ ＮＨ_３・Ｈ_２Ｏ、ＩＰＡ］、Ｂ％：３０％～３０％、４．２ｍｉｎ）により分離して実施例９のものを得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ：７．７５（ｄ，Ｊ ＝ ８．９ Ｈｚ，２Ｈ），７．３３－７．２５（ｍ，２Ｈ），７．１４（ｄ，Ｊ ＝ ９．０ Ｈｚ，２Ｈ），５．１６（ｄ，Ｊ ＝ １５．８ Ｈｚ，１Ｈ），５．０５－４．９７（ｍ，１Ｈ），４．４８（ｄ，Ｊ ＝ １５．９ Ｈｚ，１Ｈ），３．９０（ｓ，３Ｈ），３．０６（ｄｄ，Ｊ ＝ ５．６，１６．４ Ｈｚ，１Ｈ），２．８７（ｄ，Ｊ ＝ １６．３ Ｈｚ，１Ｈ），１．２６（ｄ，Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ，３Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４１８ ［Ｍ＋Ｈ^＋］。

【0106】

実施例１０

【化57】

実施例１０の製造は、実施例１における５－フルオロピリジン２－カルボン酸の代わりに３－シアノ安息香酸を使用した以外、実施例１の製造プロセスＡ～Ｅを参照して行うことができる。粗生成物を分取ＳＦＣ（ＳＦＣ分離法： 分離カラム：ＤＡＩＣＥＬ ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ ＡＤ（仕様：２５０ｍｍ×３０ｍｍ、粒径：１０μｍ）、移動相：［０．１％ ＮＨ_３・Ｈ_２Ｏ、ＩＰＡ］、Ｂ％：３０％～３０％、３．１ｍｉｎ）により分離して実施例１０のものを得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ：８．１７－８．０６（ｍ，２Ｈ），７．８８（ｄ，Ｊ ＝ ７．８ Ｈｚ，１Ｈ），７．８１－７．７２（ｍ，１Ｈ），７．３３－７．２２（ｍ，２Ｈ），５．２３（ｄ，Ｊ ＝ １６．３ Ｈｚ，１Ｈ），５．０８－４．９６（ｍ，１Ｈ），４．６２－４．５８（ｍ，１Ｈ），３．０９（ｄｄ，Ｊ ＝ ５．７，１６．４ Ｈｚ，１Ｈ），２．９１（ｄｄ，Ｊ ＝ １．３，１６．３ Ｈｚ，１Ｈ），１．２６（ｄ，Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ，３Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４１３ ［Ｍ＋Ｈ^＋］。

【0107】

実施例１１

【化58】

実施例１１の製造は、実施例１における５－フルオロピリジン２－カルボン酸の代わりに３－クロロ安息香酸を使用した以外、実施例１の製造プロセスＡ～Ｅを参照して行うことができる。粗生成物を分取ＳＦＣ（ＳＦＣ分離法： 分離カラム：ＤＡＩＣＥＬ ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ ＡＳ－Ｈ（仕様：２５０ｍｍ×３０ｍｍ、粒径：５μｍ）、移動相：［０．１％ ＮＨ_３・Ｈ_２Ｏ、ＭｅＯＨ］、Ｂ％：３５％～３５％、５ｍｉｎ）により分離して実施例１１のものを得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ：７．７１－７．５５（ｍ，２Ｈ），７．５１－７．３８（ｍ，２Ｈ），７．１６（ｄｄ，Ｊ ＝ ６．３，１０．３ Ｈｚ，２Ｈ），５．０８（ｄ，Ｊ ＝ １６．０ Ｈｚ，１Ｈ），４．９４－４．８２（ｍ，１Ｈ），４．５０－４．３７（ｍ，１Ｈ），３．０４－２．９１（ｍ，１Ｈ），２．７８（ｂｒ． ｄ，Ｊ ＝ １６．４ Ｈｚ，１Ｈ），１．１４（ｄ，Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ，３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４２２ ［Ｍ＋Ｈ^＋］。

【0108】

実施例１２

【化59】

実施例１２の製造は、実施例１における５－フルオロピリジン２－カルボン酸の代わりに４－クロロ安息香酸を使用した以外、実施例１の製造プロセスＡ～Ｅを参照して行うことができる。粗生成物を分取ＳＦＣ（ＳＦＣ分離法： 分離カラム：ＤＡＩＣＥＬ ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ ＡＳ－Ｈ（仕様：２５０ｍｍ×３０ｍｍ、粒径：５μｍ）、移動相：［０．１％ ＮＨ_３・Ｈ_２Ｏ、ＥｔＯＨ］、Ｂ％：３０％～３０％、８．３ｍｉｎ）により分離して実施例１２のものを得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ：７．７３－７．６３（ｍ，２Ｈ），７．５２－７．４５（ｍ，２Ｈ），７．１７（ｄｄ，Ｊ ＝ ６．３６，１０．２７ Ｈｚ，２Ｈ），５．０８（ｄ，Ｊ ＝ １６．１４ Ｈｚ，１Ｈ），４．９４－４．８４（ｍ，１Ｈ），４．３９（ｄ，Ｊ ＝ １６．０２ Ｈｚ，１Ｈ），２．９６（ｄｄ，Ｊ ＝ ５．７５，１６．３８ Ｈｚ，１Ｈ），２．７８（ｄｄ，Ｊ ＝ １．２８，１６．３２ Ｈｚ，１Ｈ），１．１４（ｄ，Ｊ ＝ ６．９７ Ｈｚ，３Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４２２ ［Ｍ＋Ｈ^＋］。

【0109】

実施例１３

【化60】

実施例１３の製造は、実施例１における５－フルオロピリジン－２－カルボン酸の代わりにピラジン－２－カルボン酸を使用した以外、実施例１の製造プロセスＡ～Ｅを参照して行うことができる。粗生成物を分取ＳＦＣ（ＳＦＣ分離法： 分離カラム：ＤＡＩＣＥＬ ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ ＡＳ－Ｈ（仕様：２５０ｍｍ×３０ｍｍ、粒径：５μｍ）、移動相：［０．１％ ＮＨ_３・Ｈ_２Ｏ、ＭｅＯＨ］、Ｂ％：６０％～６０％、４．５ｍｉｎ）により分離して実施例１３のものを得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ：９．１７（ｄ，Ｊ ＝ １．５ Ｈｚ，１Ｈ），８．８１（ｄｄ，Ｊ ＝ １．６，２．４ Ｈｚ，１Ｈ），８．６７（ｄ，Ｊ ＝ ２．５ Ｈｚ，１Ｈ），７．３２－７．２２（ｍ，２Ｈ），５．３７（ｄ，Ｊ ＝ １７．６ Ｈｚ，１Ｈ），５．０３－４．９６（ｍ，１Ｈ），４．５７（ｄ，Ｊ ＝ １７．７ Ｈｚ，１Ｈ），３．１２（ｄｄ，Ｊ ＝ ５．８，１６．４ Ｈｚ，１Ｈ），２．９４（ｄｄ，Ｊ ＝ １．４，１６．４ Ｈｚ，１Ｈ），１．２６（ｄ，Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ，３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３９０ ［Ｍ＋Ｈ^＋］。

【0110】

実施例１４

【化61】

実施例１４の製造は、実施例１における５－フルオロピリジン２－カルボン酸の代わりにチアゾール－５－カルボン酸を使用した以外、実施例１の製造プロセスＡ～Ｅを参照して行うことができる。粗生成物を分取ＳＦＣ（ＳＦＣ分離法： 分離カラム：ＤＡＩＣＥＬ ＣＨＩＲＡＬＣＥＬ ＯＤ（仕様：２５０ｍｍ×３０ｍｍ、粒子径：１０μｍ）、移動相：［０．１％ ＮＨ_３・Ｈ_２Ｏ、ＭｅＯＨ］、Ｂ％：３０％～３０％、２．３ｍｉｎ）により分離して実施例１４のものを得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ：９．１２（ｓ，１Ｈ），８．２６（ｓ，１Ｈ），７．２４－７．１１（ｍ，２Ｈ），５．０３（ｄ，Ｊ＝ １６．３８ Ｈｚ，１Ｈ），４．９０（ｔ，Ｊ ＝ ６．７２ Ｈｚ，１Ｈ），４．３３（ｄ，Ｊ ＝ １６．３８ Ｈｚ，１Ｈ），３．０２－２．９２（ｍ，１Ｈ），２．７９（ｄｄ，Ｊ ＝ １．４１，１６．４４ Ｈｚ，１Ｈ），１．１４（ｄ，Ｊ ＝ ６．８５ Ｈｚ，３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３９５ ［Ｍ＋Ｈ^＋］。

【0111】

実施例１５

【化62】

実施例１５の製造は、実施例１における５－フルオロピリジン２－カルボン酸の代わりにチアゾール－４－カルボン酸を使用した以外、実施例１の製造プロセスＡ～Ｅを参照して行うことができる。粗生成物を分取ＳＦＣ（ＳＦＣ分離法： 分離カラム：ＤＡＩＣＥＬ ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ ＡＤ（仕様：２５０ｍｍ×３０ｍｍ、粒径：１０μｍ）、移動相：［０．１％ ＮＨ_３・Ｈ_２Ｏ、ＩＰＡ］、Ｂ％：３０％～３０％、３．０ｍｉｎ）により分離して実施例１５のものを得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ：９．２０（ｄ，Ｊ ＝ ２．０ Ｈｚ，１Ｈ），８．１８（ｄ，Ｊ ＝ １．９ Ｈｚ，１Ｈ），７．３７－７．２１（ｍ，２Ｈ），５．３０（ｄ，Ｊ ＝ １６．８ Ｈｚ，１Ｈ），５．０５－４．９５（ｍ，１Ｈ），４．５２（ｄ，Ｊ ＝ １６．８ Ｈｚ，１Ｈ），３．０９（ｄｄ，Ｊ ＝ ５．７，１６．４ Ｈｚ，１Ｈ），２．９０（ｄ，Ｊ ＝ １６．３ Ｈｚ，１Ｈ），１．２６（ｄ，Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ，３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３９５ ［Ｍ＋Ｈ^＋］。

【0112】

実施例１６

【化63】

実施例１６の製造は、実施例１における５－フルオロピリジン２－カルボン酸の代わりにチアゾール－２－カルボン酸を使用した以外、実施例１の製造プロセスＡ～Ｅを参照して行うことができる。粗生成物を分取ＳＦＣ（ＳＦＣ分離法： 分離カラム：ＤＡＩＣＥＬ ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ ＡＳ－Ｈ（仕様：２５０ｍｍ×３０ｍｍ、粒径：５μｍ）、移動相：［０．１％ ＮＨ_３・Ｈ_２Ｏ、ＭｅＯＨ］、Ｂ％：３５％～３５％、６．３ｍｉｎ）により分離して実施例１６のものを得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ：９．０１（ｓ，１Ｈ），７．７５（ｄ，Ｊ ＝ ４．８ Ｈｚ，１Ｈ），７．１６（ｄｄ，Ｊ ＝ ６．４，１０．３ Ｈｚ，２Ｈ），５．２１（ｄ，Ｊ ＝ １７．２ Ｈｚ，１Ｈ），４．９３－４．８４（ｍ，１Ｈ），４．５０－４．４１（ｍ，１Ｈ），３．０５－２．９５（ｍ，１Ｈ），２．８０（ｄ，Ｊ ＝ １６．５ Ｈｚ，１Ｈ），１．１４（ｄ，Ｊ＝ ６．８ Ｈｚ，３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３９５ ［Ｍ＋Ｈ^＋］。

【0113】

実施例１７

【化64】

実施例１７の製造は、実施例１における５－フルオロピリジン２－カルボン酸の代わりにイソチアゾール－４－カルボン酸を使用した以外、実施例１の製造プロセスＡ～Ｅを参照して行うことができる。粗生成物を分取ＳＦＣ（ＳＦＣ分離法： 分離カラム：ＤＡＩＣＥＬ ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ ＡＤ（仕様：２５０ｍｍ×３０ｍｍ、粒径：１０μｍ）、移動相：［０．１％ ＮＨ_３・Ｈ_２Ｏ、ＩＰＡ］、Ｂ％：３０％～３０％、３０ｍｉｎ）により分離して実施例１７のものを得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ：９．４０（ｓ，１Ｈ），９．００（ｓ，１Ｈ），７．３３－７．２７（ｍ，２Ｈ），５．１８（ｄ，Ｊ ＝ １６．０ Ｈｚ，１Ｈ），５．０８－５．００（ｍ，１Ｈ），４．５０（ｄ，Ｊ ＝ １６．０ Ｈｚ，１Ｈ），３．０８（ｄｄ，Ｊ ＝ ５．７，１６．４ Ｈｚ，１Ｈ），２．９４－２．８８（ｍ，１Ｈ），１．２５（ｄ，Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ，３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３９５ ［Ｍ＋Ｈ^＋］。

【0114】

実施例１８

【化65】

実施例１８の製造は、実施例１における５－フルオロピリジン２－カルボン酸の代わりにイソチアゾール－３－カルボン酸を使用した以外、実施例１の製造プロセスＡ～Ｅを参照して行うことができる。粗生成物を分取ＳＦＣ（ＳＦＣ分離法： 分離カラム：ＤＡＩＣＥＬ ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ ＡＤ－Ｈ（仕様：２５０ｍｍ×３０ｍｍ、粒径：５μｍ）、移動相：［０．１％ ＮＨ_３・Ｈ_２Ｏ、ＭｅＯＨ］、Ｂ％：３５％～３５％、２．１ｍｉｎ）により分離して実施例１８のものを得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ：８．００（ｄ，Ｊ ＝ ３．２ Ｈｚ，１Ｈ），７．７５（ｄ，Ｊ ＝ ３．２ Ｈｚ，１Ｈ），７．２０－７．１３（ｍ，２Ｈ），５．１８（ｄ，Ｊ ＝ １７．２ Ｈｚ，１Ｈ），４．９２－４．８５（ｍ，１Ｈ），４．５１－４．３７（ｍ，１Ｈ），３．０４－２．９６（ｍ，１Ｈ），２．８５－２．７８（ｍ，１Ｈ），１．１４（ｄ，Ｊ ＝ ７．０ Ｈｚ，３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３９５ ［Ｍ＋Ｈ^＋］。

【0115】

実施例１９

【化66】

実施例１９の製造方法は、実施例１における５－フルオロピリジン２－カルボン酸の代わりに２，４－ジフルオロ安息香酸を使用し、中間体Ａ－１の代わりに中間体Ａ－２を使用した以外、実施例１の製造プロセスＡ～Ｅを参照して行うことができる。粗生成物を分取ＳＦＣ（ＳＦＣ分離法： 分離カラム：ＤＡＩＣＥＬ ＣＨＩＲＡＬＣＥＬ ＯＪ（仕様：２５０ｍｍ×３０ｍｍ、粒子径：１０μｍ）、移動相：［０．１％ ＮＨ_３・Ｈ_２Ｏ、ＥｔＯＨ］、Ｂ％：２５％～２５％、２．４ｍｉｎ）により分離して実施例１９のものを得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ：７．８９－７．７６（ｍ，２Ｈ），７．７２－７．６４（ｍ，１Ｈ），７．２９－７．１６（ｍ，３Ｈ），５．０８（ｄ，Ｊ ＝ １６．４ Ｈｚ，１Ｈ），４．９６（ｑｕｉｎ，Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ，１Ｈ），４．３６（ｄ，Ｊ ＝ １６．６ Ｈｚ，１Ｈ），３．０８（ｄｄ，Ｊ＝５．８，１６．４ Ｈｚ，１Ｈ），２．９３－２．８５（ｍ，１Ｈ），１．２７（ｄ，Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ，３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４１３ ［Ｍ＋Ｈ^＋］。

【0116】

実施例２０

【化67】

実施例２０の製造方法は、実施例１における５－フルオロピリジン２－カルボン酸の代わりに２，４－ジフルオロ安息香酸を使用し、中間体Ａ－１の代わりに中間体Ａ－３を使用した以外、実施例１の製造プロセスＡ～Ｅを参照して行うことができる。粗生成物を分取ＳＦＣ（ＳＦＣ分離法： 分離カラム：ＤＡＩＣＥＬ ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ ＡＳ（仕様：２５０ｍｍ×５０ｍｍ、粒子径：１０μｍ）、移動相：［０．１％ ＮＨ_３・Ｈ_２Ｏ、ＭｅＯＨ］、Ｂ％：４０％～４０％、１．９ｍｉｎ）により分離して実施例２０のものを得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ：７．８５－７．７９（ｍ，１Ｈ），７．５９（ｄｄ，Ｊ ＝ ２．６，６．８ Ｈｚ，１Ｈ），７．３６－７．０８（ｍ，４Ｈ），５．０９（ｄｄ，Ｊ ＝ １．１，１６．６ Ｈｚ，１Ｈ），４．９７－４．９４（ｍ，１Ｈ），４．３６（ｄｄ，Ｊ ＝ １．５，１６．６ Ｈｚ，１Ｈ），３．１０（ｄｄ，Ｊ ＝ ５．９，１６．４ Ｈｚ，１Ｈ），２．９０（ｄｄ，Ｊ ＝ １．３，１６．４ Ｈｚ，１Ｈ），１．２８（ｄ，Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ，３Ｈ）。
ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４２２ ［Ｍ＋Ｈ^＋］。

【0117】

実施例２１

【化68】

実施例２１の製造は、実施例１における５－フルオロピリジン２－カルボン酸の代わりに２，４－ジフルオロ安息香酸を使用し、中間体Ａ－１の代わりに中間体Ａ－４を使用した以外、実施例１の製造プロセスＡ～Ｅを参照して行うことができる。粗生成物を分取ＳＦＣ（ＳＦＣ分離法： 分離カラム：ＤＡＩＣＥＬ ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ ＡＤ（仕様：２５０ｍｍ×３０ｍｍ、粒子径：１０μｍ）、移動相：［０．１％ ＮＨ_３・Ｈ_２Ｏ、ＥｔＯＨ］、Ｂ％：２０％～２０％、５．５ｍｉｎ）により分離して実施例２１のものを得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ：７．８７－７．８３（ｍ，１Ｈ），７．３０－７．１０（ｍ，４Ｈ），６．９６－６．９４（ｍ， １Ｈ），５．０９（ｄ，Ｊ ＝ １６．６ Ｈｚ，１Ｈ），５．０２－４．９４（ｍ，１Ｈ），４．３５（ｄ，Ｊ ＝ １６．４ Ｈｚ，１Ｈ），３．１６－３．０６（ｍ，１Ｈ），２．８９（ｄ，Ｊ ＝ １６．４ Ｈｚ，１Ｈ），２．２４（ｓ，３Ｈ），１．２８（ｄ，Ｊ ＝ ６．９ Ｈｚ，３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４０２ ［Ｍ＋Ｈ^＋］。

【0118】

実施例２２

【化69】

実施例２２の製造は、実施例１における５－フルオロピリジン２－カルボン酸の代わりに２，４－ジフルオロ安息香酸を使用し、中間体Ａ－１の代わりに中間体Ａ－５を使用した以外、実施例１の製造プロセスＡ～Ｅを参照して行うことができる。粗生成物を分取ＳＦＣ（ＳＦＣ分離法： 分離カラム：ＤＡＩＣＥＬ ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ ＡＤ（仕様：２５０ｍｍ×５０ｍｍ、粒子径：１０μｍ）、移動相：［０．１％ ＮＨ_３・Ｈ_２Ｏ、ＭｅＯＨ］、Ｂ％：３０％～３０％、１．８ｍｉｎ）により分離して実施例２２のものを得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ：８．００（ｄ，Ｊ ＝ ５．９ Ｈｚ，１Ｈ），７．７７－７．６９（ｍ，１Ｈ），７．５３（ｄ，Ｊ ＝ １．７ Ｈｚ，１Ｈ），７．３１（ｄｄ，Ｊ ＝ １．８，５．７ Ｈｚ，１Ｈ），７．１６－７．０６（ｍ，２Ｈ），４．９９（ｄ，Ｊ ＝ １６．５ Ｈｚ，１Ｈ），４．９０－４．８３（ｍ，１Ｈ），４．２７（ｄ，Ｊ ＝ １６．６ Ｈｚ，１Ｈ），２．９９（ｄｄ，Ｊ ＝ ５．９，１６．５ Ｈｚ，１Ｈ），２．７９（ｄ，Ｊ ＝ １６．５ Ｈｚ，１Ｈ），１．１７（ｄ，Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ，３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：４０５ ［Ｍ＋Ｈ^＋］。

【0119】

実施例２３

【化70】

実施例２３の製造：

【化71】

【0120】

ステップＡ： 化合物２３－２の合成
０℃で、化合物２３－１（５０．０ｇ）および炭酸カリウム（７７．５３ｇ）のアセトニトリル（５００ｍＬ）溶液に３－ブロモプロピン（６６．７３ｇ）を滴下した。当該反応混合物を室温まで自然的に昇温し、１２時間撹拌して続けた後、減圧濃縮して残渣を得た。当該残渣を水で希釈し、そして酢酸エチルで抽出し、有機相を合わせて飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後、濾液を減圧濃縮して化合物２３－２の粗生成物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：１２８ ［Ｍ＋Ｈ^＋］。

【0121】

ステップＢ：化合物２３－３の合成
室温で、化合物２３－２（５２．０ｇ）のテトラヒドロフラン（５００ｍＬ）溶液に炭酸カリウム（２６．５６ｇ）およびＢｏｃ_２Ｏ（４１．９４ｇ）を加えた。当該反応液を１８℃で１２時間撹拌した後、固形物を濾過して除去し、濾液を収集して減圧濃縮した。得られた残渣を酢酸エチル（８００ｍＬ）に溶解し、当該有機相を水、飽和クエン酸溶液および飽和炭酸水素ナトリウム溶液で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後、濾液を減圧濃縮して化合物２３－３の粗生成物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２２８ ［Ｍ＋Ｈ^＋］。

【0122】

ステップＣ：化合物２３－４の合成
０℃で、化合物２３－３（４０．０ｇ）のジクロロメタン（４００ｍＬ）溶液に、デスマーチン試薬（８２．１０ｇ）をバッチで加えた。当該反応液混合物を室温まで自然に昇温し、２時間撹拌し後、体積比１：１の飽和炭酸水素ナトリウム溶液および飽和チオ硫酸ナトリウム溶液で２回洗浄し、さらに飽和炭酸水素ナトリウム溶液および飽和食塩水で有機相を順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後、濾液を減圧濃縮して化合物２３－４の粗生成物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２２６ ［Ｍ＋Ｈ^＋］。

【0123】

ステップＤ：化合物２３－５の合成
室温で、化合物２３－４（４２．０ｇ）のエタノール（４００ｍＬ）および水（４０ｍＬ）の混合溶液に酢酸ナトリウム（２２．９４ｇ）および塩酸ヒドロキシルアミン（１６．８４ｇ）を加えた。当該反応混合物を室温で１２時間撹拌した後、減圧濃縮してエタノールを除去して残渣を得た。当該残渣を酢酸エチルで溶解した後、水および飽和食塩水で順次洗浄し、さらに無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した後、濾液を減圧濃縮して化合物２３－５の粗生成物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２４１ ［Ｍ＋Ｈ^＋］。

【0124】

ステップＥ：化合物２３－６の合成
室温で、化合物２３－５（３００ｍｇ）および２－ヨードピリミジン（２５７．１６ｍｇ）のＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（８ｍＬ）溶液に、ヨウ化第一銅（１１．８９ｍｇ）、トリエチルアミン（２５２．６６ｍｇ）およびビストリフェニルホスフィンパラジウムジクロリド（４３．８１ｍｇ）を加えた。窒素保護下で当該反応混合物を１２℃で１２時間撹拌した。反応液を酢酸エチルで希釈した後濾過し、濾液を減圧濃縮し、残渣を分取クロマトグラフィーにより分離して化合物２３－６を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３１９ ［Ｍ＋Ｈ^＋］。

【0125】

ステップＦ：化合物２３－７の合成
室温で、化合物２３－６（１８０ｍｇ）のメタノール（４ｍＬ）および水（０．８ｍＬ）の混合溶液に、ビス（トリフルオロアセトキシ）ヨードベンゼン（２９１．７６ｍｇ）をバッチで加えた。当該反応混合物を１０～２０℃で０．５時間撹拌した後、水２０ｍＬで希釈し、そして酢酸エチルで抽出した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ，濾過し、濾液を減圧濃縮し、残渣を分取クロマトグラフィーにより分離して化合物２３－７を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３１７ ［Ｍ＋Ｈ^＋］。

【0126】

ステップＧ：化合物２３－８の合成
化合物２３－７（９０ｍｇ）を、塩酸のジオキサン溶液（４ｍｏｌ／Ｌ、４ｍＬ）に溶解し、当該反応混合物を２０℃で０．５時間撹拌した後、減圧濃縮して化合物２３－８の粗生成物を得た。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：２１７ ［Ｍ＋Ｈ^＋］。

【0127】

ステップＨ：実施例２３の合成
室温で、化合物２３－８（６１．５２ｍｇ）のＮ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（２ｍＬ）溶液にＮ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（１１０．３１ｍｇ）および中間体Ａ－２（７２．９０ｍｇ）を加えた。該反応混合物を７０℃で１時間撹拌した。反応液を水２０ｍＬで希釈した後、酢酸エチルで抽出した。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過した。濾液を減圧濃縮した後、残渣を分取高速液体クロマトグラフィー（分離カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｓｙｎｅｒｇｉ Ｃ１８、１５０×３０ｍｍ×４μｍ、移動相：［水（０．２２５％トリフルオロ酢酸）－アセトニトリル］、Ｂ％：３５％～６５％、１０ｍｉｎ）により精製して実施例２３のものを得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤ）δ：８．９７（ｄ，Ｊ ＝ ５．０ Ｈｚ，２Ｈ），７．８３（ｄｄ，Ｊ ＝ ２．８，５．６ Ｈｚ， １Ｈ），７．７５－７．７１ （ｍ，１Ｈ），７．５２（ｔ，Ｊ ＝ ５．０ Ｈｚ，１Ｈ），７．３０（ｔ，Ｊ ＝ ９．０ Ｈｚ，１Ｈ），５．４２（ｄ，Ｊ ＝ １７．９ Ｈｚ， １Ｈ），５．０１（ｑｕｉｎ，Ｊ ＝ ６．４ Ｈｚ，１Ｈ），４．５９（ｄ，Ｊ ＝ １７．７ Ｈｚ，１Ｈ），３．１４（ｄｄ，Ｊ ＝ ５．７，１６．４ Ｈｚ，１Ｈ），２．９５ （ｄｄ，Ｊ ＝ １．２，１６．４ Ｈｚ，１Ｈ），１．２７（ｄ，Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ，３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３７９ ［Ｍ＋Ｈ^＋］。

【0128】

実施例２４

【化72】

実施例２４の製造は、実施例２３における中間体Ａ－２の代わりに中間体Ａ－３を使用した以外、実施例２３の製造プロセスＡ～Ｅを参照して行うことができる。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ：９．０４（ｄ，Ｊ ＝ ４．９ Ｈｚ，２Ｈ），９．０１（ｓ，１Ｈ），７．７４（ｄｄ，Ｊ ＝ ２．４，６．８ Ｈｚ，１Ｈ），７．６０（ｔ，Ｊ ＝ ４．９ Ｈｚ，１Ｈ），７．４４－７．４０（ｍ，１Ｈ），７．３５－７．２７（ｍ，１Ｈ），５．３６（ｄ，Ｊ ＝ １８．０ Ｈｚ，１Ｈ），４．９８－４．８３（ｍ，１Ｈ），４．３６（ｄ，Ｊ ＝ １８．０ Ｈｚ，１Ｈ），３．１２－２．９９（ｍ，１Ｈ），２．９４－２．８３（ｍ，１Ｈ），１．１６（ｄ，Ｊ ＝ ６．８ Ｈｚ，３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３８８ ［Ｍ＋Ｈ^＋］。

【0129】

実施例２５

【化73】

実施例２５の製造は、実施例２３における中間体Ａ－２の代わりに中間体Ａ－１を使用した以外、実施例２３の製造プロセスＡ～Ｅを参照して行うことができる。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ：８．８６（ｄ，Ｊ ＝ ４．８９ Ｈｚ，２Ｈ），７．２９（ｔ，Ｊ ＝ ４．８９ Ｈｚ，１Ｈ），７．０８（ｄｄ，Ｊ ＝ ６．０５，９．４８ Ｈｚ，２Ｈ），６．４５（ｓ，１Ｈ），５．０７（ｄ，Ｊ ＝ １６．７５ Ｈｚ，１Ｈ），５．０５－４．９４（ｍ，１Ｈ），４．５５（ｄ，Ｊ ＝ １６．８７ Ｈｚ，１Ｈ），３．１０－３．００（ｍ，１Ｈ），２．９４－２．８５（ｍ，１Ｈ），１．１７（ｄ，Ｊ ＝ ６．９７ Ｈｚ， ３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３９０ ［Ｍ＋Ｈ^＋］。

【0130】

実施例２６

【化74】

実施例２６の製造は、実施例２３における中間体Ａ－２の代わりに中間体Ａ－６を使用した以外、実施例２３の製造プロセスＡ～Ｅを参照して行うことができる。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ：９．０３（ｓ，３Ｈ），７．６０（ｓ，２Ｈ），７．４３－７．０９（ｍ，２Ｈ），５．３６（ｄ，Ｊ ＝ １７．９ Ｈｚ，１Ｈ），４．９０（ｓ，１Ｈ），４．３６（ｄ，Ｊ ＝ １８．１ Ｈｚ，１Ｈ），３．０６（ｄ，Ｊ ＝ １２．１ Ｈｚ，１Ｈ），２．８９（ｄ，Ｊ ＝ １６．４ Ｈｚ，１Ｈ），１．１５（ｄ，Ｊ ＝ ５．４ Ｈｚ，３Ｈ）。ＭＳ（ＥＳＩ）ｍ／ｚ：３７２ ［Ｍ＋Ｈ^＋］。

【0131】

活性測定
１． ｉｎ ｖｉｔｒｏ抗ＨＢＶ活性測定
１） ＨｅｐＧ２．２．１５細胞１００μＬを、９６ウェル細胞培養プレートに、１．２×１０^５細胞／ウェルで播種し、細胞を３７℃、５％二酸化炭素（ＣＯ_２）のインキュベーターで一晩培養した。２日目に、ＤＭＳＯで３倍の勾配で被検化合物を稀釈し、合計８つの濃度に希釈した後、さらに培地で化合物を１００倍に希釈し、希釈した化合物１００μＬを取って細胞含有培養プレートに加え、最終体積２００μＬになり、ＤＭＳＯの最終濃度０．５％になり、２つの重複ウエルを使用した。細胞を３７℃、５％ ＣＯ_２のインキュベーターで３日間培養した。５日目に、同じ濃度の化合物を含む新鮮な培地を細胞培養プレートの培養液と交換した。培養が８日目に達した時に、細胞培養プレートの上清を収集し、ＨＢＶ ＤＮＡを抽出するために用いる。

【0132】

２） リアルタイム定量ＰＣＲによるＨＢＶ ＤＮＡの検出： ＱＩＡａｍｐ ９６ ＤＮＡ Ｂｌｏｏｄ Ｋｉｔセットで上清における全ＤＮＡを抽出し、ＨＢＶ特異性プライマーおよびプローブを用いた定量ＰＣＲによりＨＢＶ ＤＮＡ含有量を検出した。２０μＬのＰＣＲプレミックス溶液と、５μＬのＨＢＶ ＤＮＡサンプルまたはＨＢＶプラスミド標準試料を定量ＰＣＲプレートに加えて反応させた。ＨＢＶプラスミド標準試料を１０倍の勾配で１０^７～１０コピー数／μＬの７つの濃度に希釈した。定量ＰＣＲ反応手順は次の通りであり、予備変性を９５℃で１０分間行い、変性を９５℃で１５秒間行い、６０℃で１分間反応させ、このようなサイクルを４０回繰り返した。次の式により各ウェルのＨＢＶ ＤＮＡの阻害率を計算し、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェアを使用して化合物の阻害率データに対して非線形性フィッティング分析を行い、化合物のＥＣ_５０値を得た。

【0133】

ＨＢＶ ＤＮＡ阻害率％＝（１－サンプルＨＢＶ ＤＮＡコピー数／ＤＭＳＯ対照ＨＢＶ ＤＮＡコピー数）×１００％
試験結果を次の表１に示す。

【0134】

【表1】

２．マウスの薬物動態学的研究
本実験は、マウスへの単回静脈内投与または強制経口投与後に化合物の薬物動態学的挙動を評価することを目的としている。静脈内投与では、化合物が０．５ｍｇ／ｍＬの清澄溶液として調製され、溶媒が５％ ＤＭＳＯ／５％ １２－ヒドロキシステアレート（ｓｏｌｕｔｏｌ）／９０％水である。強制経口投与では、化合物が２ｍｇ／ｍＬの懸濁液として調製され、溶媒が０．５％カルボキシメチルセルロースナトリウム／０．２％ Ｔｗｅｅｎ ８０／９９．３％水である。

【0135】

血漿中の化合物の濃度は高速液体クロマトグラフィー－タンデム質量分析（ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ）により測定された。化合物および内部標準（ジクロフェナク）の保持時間、クロマトグラムの収集およびクロマトグラムの統合は、ソフトウェアＡｎａｌｙｓｔ（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を用いて処理され、データ統計は、ソフトウェアＷａｔｓｏｎ ＬＩＭＳ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）またはＡｎａｌｙｓｔ（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を用いて処理された。サンプル中の分析物の濃度単位はｎｇ／ｍＬであり、有効数字３桁が保持され、パーセンテージで表された全ての値（例えば、％偏差および％変化係数など）は、いずれも小数点以下１桁まで保持されている。各校正曲線（検量線）には、少なくとも６つの濃度レベルが含まれている。校正標準試料の調製は品質管理（ＱＣ）サンプルと異なるソースからの原液（ストック液）を使用する必要がある。校正標準試料の計算濃度と表示値との偏差が±１５．０％を超える（定量下限が±２０．０％を超える）場合、このような標準試料は回帰分析から除外する必要がある。除外された校正標準試料は２５％未満である必要があり、各校正曲線には少なくとも許容標準を満たす６つの校正標準試料が含まれている。定量下限および定量上限の校正標準試料を除外する必要がある場合、当該分析物バッチの定量上限および下限は、それに応じて増減されている。

【0136】

ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ^ＴＭ Ｖｅｒｓｉｏｎ ６．３（Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ， Ｍｏｕｎｔａｉｎ Ｖｉｅｗ， ＣＡ）薬動学的ソフトウェアの非コンパートメントモデルを用いて血漿濃度を処理し、線形対数台形法を用いて薬物動態パラメータを計算した。計算される薬物動態パラメータは、（データが許可されている）静脈注射群のＴ_１／２、Ｖｄｓｓ、ＣＬ、ＡＵＣ_{０－２４ｈ}、強制経口投与群のＣ_ｍａｘ、Ｔ_ｍａｘ、ＡＵＣ_{０－２４ｈ}、生物学的利用率（Ｆ％）が含まれるがこれらに限定されていない。
本発明の実施例のマウスにおける関連する薬物動態パラメータは、次の表２に示す。

【0137】

【表2】

【0138】

３． マウス尾静脈は高圧水注射によるＨＢＶ ＤＮＡプラスミドモデルｉｎ ｖｉｖｏの活性測定
この研究は、高圧尾静脈注射によるマウスモデルを通じて、マウスｉｎ ｖｉｖｏにおけるＨＢＶに対する化合物（実施例６）の阻害効果を測定することを目的としている。本実験には、６～７週齢であった雌のＢＡＢＬ／ｃマウスが使用された。ＨＢＶプラスミドＤＮＡは、ｐＡＡＶ２－ＨＢＶ１．３ ｍｅｒを使用してＱｉａｇｅｎ ＥｎｄｏＦｒｅｅ Ｐｌａｓｍｉｄ Ｇｉｇａキットにより濃度１０００ｎｇ／μＬで抽出した。使用する前に、通常の生理食塩水で希釈して使用するまで４℃で保存した。

【0139】

３．１ 動物の群分け（グループ化）
実験動物の群分けは次の表３に示す。

【表3】

【0140】

３．２ 薬物の調製
薬物の調製は、次の表４に示す。

【表4】

３．３ 投与スケジュール

【表5】

【0141】

３．４ 非エンドポイント採血の血液サンプルの収集と移送
１日目、３日目、５日目に、当日の１回目の投与後約４時間で各マウスから全血１００μＬを採取し、ヘパリンナトリウムを入れたチューブに全血を収集し、４℃で遠心分離し、７０００ｒｐｍで１０分間遠心分離し、上清を採取し、即ち血漿を得た。血漿を－８０℃の冷凍庫に保存し、ドライアイスの凍結条件下で分析実験室へ輸送して検出する。

【0142】

３．５ マウス血漿におけるＨＢＶ ＤＮＡ含有量の定量ＰＣＲによる検出
１） 血漿におけるＤＮＡを抽出し、ＱＩＡａｍｐ ９６ ＤＮＡ Ｂｌｏｏｄ Ｋｉｔの説明書を参考して実験手順を行った。

【0143】

２） マウス血漿におけるＨＢＶ ＤＮＡ含有量の定量ＰＣＲによる検出
ｑＰＣＲ反応混合物を調製した（表６を参照）。ｑＰＣＲ反応混合物、サンプルおよび標準試料を９６ウェル反応プレートに加えた。その中で、標準試料はＤ型ＨＢＶ全長配列を含むプラスミドＤＮＡであり、標準試料を１０^７コピー数／μＬから、１０倍の勾配で希釈し、順次１０^６～１０^１コピー数／μＬのＤＮＡ標準試料を得た。ＰＣＲ反応：９５℃で１０分間、９５℃で１５秒間、６０℃で１分間、４０サイクル。

【0144】

【表6】

【0145】

３．６ マウス肝臓におけるＨＢＶ ＤＮＡ含有量の定量ＰＣＲによる検出
１） 全肝臓ＤＮＡの抽出
肝臓組織を取り、組織グラインダーで均質化した。遠心分離後上清を取って新規な遠心分離管に移し、プロテイナーゼＫ消化液を加えて３時間消化した。得られた混合物を冷却した後、ＲＮＡ酵素Ａ（ＲＮＡｓｅ Ａ）を加えて３０分間インキュベートした。ＲＮＡ酵素Ａで処理された混合液を等体積のフェノールクロロホルムイソアミルアルコールで２回抽出して残留タンパク質を除去した。上清を新しい遠心分離管に移し、イソプロパノールを加えてＤＮＡを沈殿させた。ＤＮＡ沈殿物を７０％エタノールで２回洗浄した。沈殿物を風乾し、ＴＥ（１０ ｍＭ Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ、ｐＨ８．０、１ｍＭ ＥＤＴＡ）を加えてＤＮＡを溶解した。
２） マウス肝臓におけるＨＢＶ ＤＮＡ含有量の定量ＰＣＲによる検出
ＮａｎｏｄｒｏｐでＤＮＡ濃度を測定し、全てのサンプルのＤＮＡ濃度を１０ｎｇ／μＬに調整した。サンプル５μＬを定量ＰＣＲ反応系に加えて定量ＰＣＲを行った。
ＨＢＶ ＤＮＡ含有量＝ＨＢＶプライマーにより検出されたＤＮＡ含有量－ｐＡＡＶ２プライマーにより検出されたＤＮＡ含有量。

【0146】

３．７ 実験結果
１） 各試験群のマウスに対してそれぞれ投与後１日目、３日目、５日目、７日目に血液サンプルを収集し、そのＨＢＶ ＤＮＡ濃度の検出値（Ｌｏｇ ＨＢＶ ＤＮＡ）を次の表７に示す。

【表7】

この結果を図１に示す。

【0147】

２） 投与７日間後、各試験群の動物の肝組織におけるＨＢＶ ＤＮＡ濃度の検出値（Ｌｏｇ ＨＢＶ ＤＮＡ）を次の表８に示す。

【表8】

この結果を図２に示す。

【0148】

４． マウス尾静脈は高圧水注射によるＨＢＶ ＤＮＡプラスミドモデルｉｎ ｖｉｖｏの活性測定
この研究は、高圧尾静脈注射によるマウスモデルを通じて、マウスｉｎ ｖｉｖｏにおけるＨＢＶに対する化合物（実施例２３）の阻害効果を測定することを目的としている。本実験には、６～７週齢であった雌のＢＡＢＬ／ｃマウスが使用された。ＨＢＶプラスミドＤＮＡは、ｐＡＡＶ２－ＨＢＶ１．３ ｍｅｒを使用してＱｉａｇｅｎ ＥｎｄｏＦｒｅｅ Ｐｌａｓｍｉｄ Ｇｉｇａキットにより濃度１０００ｎｇ／μＬで抽出した。使用する前に、正常生理食塩水で希釈して使用するまで４℃で保存した。

【0149】

４．１ 動物の群分け
実験動物の群分けは次の表９に示す。

【表9】

【0150】

４．２ 薬物の調製
薬物の調製は、次の表１０に示す。

【表10】

【0151】

４．３ 投与スケジュール

【表11】

【0152】

４．４ 実験結果
１） 各試験群のマウスに対してそれぞれ投与後１日目、３日目、５日目、７日目に血液サンプルを収集し、そのＨＢＶ ＤＮＡ濃度の検出値（Ｌｏｇ ＨＢＶ ＤＮＡ）を次の表１２に示す。

【表12】

この結果を図３に示す。

【0153】

２） 投与７日間後、各試験群の動物の肝組織におけるＨＢＶ ＤＮＡ濃度の検出値（Ｌｏｇ ＨＢＶ ＤＮＡ）を次の表１３に示す。

【表13】

この結果を図４に示す。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】