特許 7250103 血液検体を判定するための方法、装置及びコンピュータプログラム、並びに血液検体分析装置

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2023-03-23

(45)【発行日】2023-03-31

(54)【発明の名称】血液検体を判定するための方法、装置及びコンピュータプログラム、並びに血液検体分析装置

(51)【国際特許分類】

   G01N 33/86 20060101AFI20230324BHJP

   G01N 33/48 20060101ALI20230324BHJP

【ＦＩ】

G01N33/86

G01N33/48 K

【請求項の数】 14

(21)【出願番号】P 2021201840

(22)【出願日】2021-12-13

(62)【分割の表示】P 2020047781の分割

【原出願日】2015-03-31

(65)【公開番号】P2022027872

(43)【公開日】2022-02-14

【審査請求日】2021-12-13

(73)【特許権者】

【識別番号】505116781

【氏名又は名称】学校法人東日本学園

(73)【特許権者】

【識別番号】390014960

【氏名又は名称】シスメックス株式会社

(74)【代理人】

【識別番号】100065248

【弁理士】

【氏名又は名称】野河 信太郎

(74)【代理人】

【識別番号】100159385

【弁理士】

【氏名又は名称】甲斐 伸二

(74)【代理人】

【識別番号】100163407

【弁理士】

【氏名又は名称】金子 裕輔

(74)【代理人】

【識別番号】100166936

【弁理士】

【氏名又は名称】稲本 潔

(72)【発明者】

【氏名】熊野 穣

(72)【発明者】

【氏名】松尾 直彦

(72)【発明者】

【氏名】新井 信夫

(72)【発明者】

【氏名】家子 正裕

【審査官】草川 貴史

(56)【参考文献】

【文献】BRAUN, P.J. et al.，Properties of Optical Data from Activated Partial Thromboplastin Time and Prothrombin Time Assays，Thrombosis and Haemostasis，1997年，Vol. 78，pp. 1079-1087

【文献】福士顕，自動分析装置による血液凝固時間測定 －ACL TOPシリーズ、STACIA－，生物試料分析，2009年，Vol.32, No.5，pp. 408-416

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

Ｇ０１Ｎ ３３／４８－３３／９８

Ｇ０１Ｎ １／００－ １／４４

Ｇ０１Ｎ ２１／１７

ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）

ＣＡｐｌｕｓ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

被検血漿と正常血漿とを混合して混合血漿を調製する工程と、
前記混合血漿と凝固時間測定試薬とが混和されてなる測定試料に光を照射し、前記測定試料について、光量に関する光学的情報の経時的変化を示すデータを取得する工程と、
前記データに基づいて、凝固波形の微分に関するパラメータを少なくとも一つ取得する工程と、
取得した前記パラメータの値と所定の閾値とを比較する工程と、
を含み、前記所定の閾値が、凝固因子を欠損した血漿と、ループスアンチコアグラント(LA)又は凝固因子インヒビターを含む血漿とを区別する値である、血液検体の分析方法。

【請求項2】

前記所定の閾値が、凝固因子を欠損した血漿と、ループスアンチコアグラント(LA)を含む血漿又は凝固因子インヒビターを含む血漿とを区別する値である、請求項１に記載の血液検体の分析方法。

【請求項3】

前記光学的情報が、連続的又は断続的に測定された散乱光量、透過度又は吸光度であり、前記凝固波形が、前記散乱光量、透過度又は吸光度の経時的変化を表す波形である、請求項１又は２に記載の血液検体の分析方法。

【請求項4】

前記凝固波形の微分に関するパラメータが、最大凝固速度(|min 1|)、最大凝固加速度(|min 2|)、及び最大凝固減速度(max 2)からなる群より選択される少なくとも一つである、請求項１～３のいずれか１項に記載の血液検体の分析方法。

【請求項5】

前記比較する工程において、|min 1|を取得している場合は|min 1|の値と第１の閾値とを比較し、|min 2|を取得している場合は|min 2|の値と第２の閾値とを比較し、max 2を取得している場合はmax 2の値と第３の閾値とを比較する、請求項４に記載の血液検体の分析方法。

【請求項6】

|min 1|、|min 2|及びmax 2のうち、取得している値の少なくとも一つが、その値に対応する所定の閾値以上であるとき、前記被検血漿が、凝固因子を欠損した血漿である疑いがあると表示し、
|min 1|、|min 2|及びmax 2のうち、取得している値の全てが、その値に対応する所定の閾値より小さいとき、前記被検血漿が、LA又は凝固因子インヒビターを含む血漿である疑いがあると表示する工程をさらに含む、
請求項５に記載の血液検体の分析方法。

【請求項7】

前記凝固時間測定試薬が、プロトロンビン時間、活性化部分トロンボプラスチン時間、希釈プロトロンビン時間、希釈活性化部分トロンボプラスチン時間、カオリン凝固時間、希釈ラッセル蛇毒時間、トロンビン時間、及び希釈トロンビン時間からなる群より選択される少なくとも１種を測定するための試薬である、請求項１～６のいずれか１項に記載の血液検体の分析方法。

【請求項8】

血漿と凝固時間測定試薬とが混和されてなる測定試料を調製する測定試料調製部と、
調製された測定試料に光を照射し、前記測定試料から光量に関する光学的情報を取得する光学的情報取得部と、
制御部と、を備え、
前記制御部が、被検血漿と正常血漿とを混合した混合血漿と、前記試薬とが混和されてなる測定試料を調製するように前記測定試料調製部を制御し、
前記光学的情報の経時的変化を示すデータに基づいて、凝固波形の微分に関するパラメータを少なくとも一つ取得し、
前記パラメータの値と、凝固因子を欠損した血漿と、ループスアンチコアグラント(LA)又は凝固因子インヒビターを含む血漿とを区別する所定の閾値とを比較する、
血液検体分析装置。

【請求項9】

前記所定の閾値が、凝固因子を欠損した血漿と、ループスアンチコアグラント(LA)を含む血漿又は凝固因子インヒビターを含む血漿を区別する値である、請求項８に記載の血液検体分析装置。

【請求項10】

前記光学的情報が、連続的又は断続的に測定された散乱光量、透過度又は吸光度である、請求項８又は９に記載の血液検体分析装置。

【請求項11】

前記凝固波形の微分に関するパラメータが、最大凝固速度(|min 1|)、最大凝固加速度(|min 2|)、及び最大凝固減速度(max 2)からなる群より選択される少なくとも一つである、請求項８～１０のいずれか１項に記載の血液検体分析装置。

【請求項12】

前記制御部が、|min 1|を取得している場合は|min 1|の値と第１の閾値とを比較し、|min 2|を取得している場合は|min 2|の値と第２の閾値とを比較し、max 2を取得している場合はmax 2の値と第３の閾値とを比較する、請求項１１に記載の血液検体分析装置。

【請求項13】

表示部をさらに備え、
前記制御部が、
|min 1|、|min 2|及びmax 2のうち、取得している値の少なくとも一つが、その値に対応する所定の閾値以上であるとき、前記被検血漿が、凝固因子を欠損した血漿である疑いがあるとの情報を表示するように前記表示部を制御し、
|min 1|、|min 2|及びmax 2のうち、取得している値の全てが、その値に対応する所定の閾値より小さいとき、前記被検血漿が、LA又は凝固因子インヒビターを含む血漿である疑いがあるとの情報を表示するように前記表示部を制御する、
請求項１２に記載の血液検体分析装置。

【請求項14】

コンピュータが読み取り可能な媒体に記録されているコンピュータプログラムであって、下記のステップ：
被検血漿と正常血漿とを混合した混合血漿と、凝固時間測定試薬とが混和されてなる測定試料に光を照射することにより、前記測定試料について、光量に関する光学的情報の経時的変化を示すデータを取得するステップと、
取得した前記データに基づいて、凝固波形の微分に関するパラメータを少なくとも一つ取得するステップと、
取得した前記パラメータの値と、凝固因子を欠損した血漿と、ループスアンチコアグラント(LA)又は凝固因子インヒビターを含む血漿とを区別する所定の閾値とを比較するステップと、
を前記コンピュータに実行させる、血液検体の分析のためのコンピュータプログラム。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、血液検体を判定するための方法に関する。また、本発明は、血液検体を判定するための装置及びコンピュータプログラムに関する。さらに、本発明は、血液検体分析装置に関する。

【背景技術】

【0002】

血液検査の一つである凝固検査は、止血機構の状態を把握するために、血液の凝固時間を測定することにより行われる。凝固時間の延長が認められる場合、原因として、先天的な血液凝固因子の欠乏もしくは異常による先天性凝固障害、又は、凝固反応を阻害する自己抗体による後天性凝固阻害が疑われる。先天性凝固障害と後天性凝固阻害とは、凝固時間の延長を示した被検血漿と、正常血漿とを混合して得た試料の凝固時間を測定する試験(クロスミキシングテスト)で鑑別できる。すなわち、先天性凝固障害の場合は、正常血漿との混合により凝固時間の延長が是正されるが、後天性凝固障害の場合は、凝固時間の延長は是正されない。

【0003】

クロスミキシングテストでは、調製直後の試料及び37℃にて２時間インキュベートした試料について凝固時間を測定し、得られた各試料の凝固時間と、正常血漿と被検血漿との混合比率とをプロットしたグラフのパターン変化から、自己抗体である凝固因子インヒビター又はループスアンチコアグラント(ＬＡ)を含む検体と、凝固因子欠損患者由来の検体との鑑別が行われている。しかし、グラフのパターン変化を見分けることによる鑑別には経験が必要であり、熟練者でなければ鑑別が難しいケースも多い。

【0004】

近年、凝固の開始からフィブリン塊の形成までの全ての過程を評価するために、凝固波形の解析が着目されている。凝固波形とは、血液検体の凝固の進行に伴って生じる、該検体における光の透過性や散乱などの光学的特性の経時的変化を表す波形である。凝固波形の解析により、凝固の速度や加速度などの情報が得られる。例えば、特許文献１には、ワーファリンを投与された抗リン脂質抗体(ＬＡを含む)を保有する患者は、健常者に比べ、最大凝固加速度及び最大凝固減速度が異なっていることが記載されている。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0005】

【文献】特表２００５－５２０１７０号公報

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0006】

上記のとおり、凝固因子を欠損した検体と、凝固因子インヒビター又はＬＡを含む血液検体とは、クロスミキシングテストにより鑑別できるが、定量的評価ではない点で問題があった。さらに、クロスミキシングテストでは、被検血漿と正常血漿とを様々な比率で混合して調製した複数の測定試料を必要とするので、被検血漿の量が少ない場合は実施できない。そのため、一の測定試料からの測定データに基づいて、血液検体が凝固因子を欠損した検体の疑いがあるかを定量的に判定することを可能にする手段が望まれる。

【課題を解決するための手段】

【0007】

本発明の第１の態様によれば、血液検体の判定方法が提供される。この方法は、被検血漿と正常血漿とを混合して混合血漿を調製する工程と、この混合血漿と凝固時間測定試薬とが混和されてなる測定試料に光を照射し、測定試料から光量に関する光学的情報を取得する工程と、一の測定試料から取得した光学的情報に基づいて、上記被検血漿が、凝固因子を欠損した血漿である疑いがあるかを判定する工程とを含む。

【0008】

本発明の第２の態様によれば、血液検体の判定方法が提供される。この方法は、被検血漿と正常血漿とを混合して混合血漿を調製する工程と、被検血漿と凝固時間測定試薬とが混和されてなる第１測定試料、及び、混合血漿と凝固時間測定試薬とが混和されてなる第２測定試料に光を照射し、第１及び第２測定試料のそれぞれから光量に関する光学的情報を取得する工程と、第１測定試料から取得した取得した光学的情報に基づいて、第１測定試料の凝固時間を取得し、一の第２測定試料から取得した光学的情報に基づいて、第２測定試料の凝固波形の微分に関するパラメータの少なくとも一つを取得する工程と、凝固時間の延長が認められた被検血漿について、取得したパラメータの値に基づいて、上記被検血漿が、凝固因子を欠損した血漿である疑いがあるかを判定する工程とを含む。

【0009】

本発明の第３の態様によれば、血液検体分析装置が提供される。この装置は、血漿と凝固時間測定試薬とが混和されてなる測定試料を調製する測定試料調製部と、調製された測定試料に光を照射し、この測定試料から光量に関する光学的情報を取得する光学的情報取得部と、制御部とを備える。この装置では、制御部が、被検血漿と正常血漿とを混合した混合血漿と、上記試薬とが混和されてなる測定試料を調製するように測定試料調製部を制御し、光学的情報に基づいて、最大凝固速度(|min 1|)、最大凝固加速度(|min 2|)、及び最大凝固減速度(max 2)からなる群より選択される少なくとも一つのパラメータを取得し、パラメータの値と所定の閾値とを比較し、比較結果に基づいて、上記被検血漿についての参考情報を出力することを特徴とする。

【0010】

本発明の第４の態様によれば、血液検体分析装置が提供される。この装置は、血漿と凝固時間測定試薬とが混和されてなる測定試料を調製する測定試料調製部と、調製された測定試料に光を照射し、この測定試料から光量に関する光学的情報を取得する光学的情報取得部と、制御部とを備える。この装置では、制御部が、被検血漿と上記試薬とが混和されてなる第１測定試料、及び、上記被検血漿と正常血漿とを混合した混合血漿と、上記試薬とが混和されてなる第２測定試料を調製するように測定試料調製部を制御し、第１測定試料の光学的情報に基づいて、凝固時間を取得し、第２測定試料の光学的情報に基づいて、|min 1|、|min 2|、及びmax 2からなる群より選択される少なくとも一つのパラメータを取得し、取得した凝固時間と所定の時間とを比較し、凝固時間が前記所定の時間より長い場合に、パラメータの値と所定の閾値とを比較し、比較結果に基づいて、前記被検血漿についての参考情報を出力することを特徴とする。

【0011】

本発明の第５の態様によれば、プロセッサ及びこのプロセッサの制御下にあるメモリを含むコンピュータを備える、血液検体の判定のための装置を提供する。上記のメモリには、被検血漿と正常血漿とを混合した混合血漿と、凝固時間測定試薬とが混和されてなる測定試料から光量に関する光学的情報を取得するステップと、一の測定試料から取得した光学的情報に基づいて、上記被検血漿が、凝固因子を欠損した血漿である疑いがあるか又は凝固因子の欠損以外の凝固異常の原因を有する血漿である疑いがあるかを判定するステップとを、上記コンピュータに実行させるためのコンピュータプログラムが記録されている。

【0012】

本発明の第６の態様によれば、コンピュータが読み取り可能な媒体に記録されている、血液検体の判定のためのコンピュータプログラムを提供する。このコンピュータプログラムは、被検血漿と正常血漿とを混合した混合血漿と、凝固時間測定試薬とが混和されてなる測定試料から光量に関する光学的情報を取得するステップと、一の測定試料から取得した光学的情報に基づいて、上記被検血漿が、凝固因子を欠損した血漿である疑いがあるか又は凝固因子の欠損以外の凝固異常の原因を有する血漿である疑いがあるかを判定するステップとを、上記コンピュータに実行させることを特徴とする。

【発明の効果】

【0013】

本発明によれば、被験者の血液検体が、凝固因子を欠損した検体であるかについて、定量的に評価することを可能にする。

【図面の簡単な説明】

【0014】

【図1】正常血漿の凝固波形とその１次微分及び２次微分のグラフの一例である。

【図2】血液検体分析装置の外観の構成を示す斜視図である。

【図3】血液検体分析装置の測定部の内部を上側から見た場合の平面図である。

【図4】血液検体分析装置の測定部の構成を示す図である。

【図5】測定装置が備えるランプユニットの構成を示す図である。

【図6A】測定装置が備える検出部の構成を示す図である。

【図6B】測定装置が備える検出部の構成を示す図である。

【図6C】測定装置が備える検出部の構成を示す図である。

【図6D】測定装置が備える検出部の構成を示す図である。

【図7】血液検体分析装置の制御装置の機能構成を示す図である。

【図8】血液検体分析装置の制御装置のハードウェア構成を示す図である。

【図9】血液検体分析装置による血液検体の測定処理を示すフローチャートである。

【図10A】血液検体分析装置による血液検体の分析処理を示すフローチャートである。

【図10B】血液検体分析装置による血液検体の分析処理を示すフローチャートである。

【図10C】血液検体分析装置による血液検体の分析処理を示すフローチャートである。

【図10D】血液検体分析装置による血液検体の分析処理を示すフローチャートである。

【図10E】血液検体分析装置による血液検体の分析処理を示すフローチャートである。

【図11】血液検体分析装置による分析結果を表示する画面の一例を示す図である。

【図12A】正常血漿の|min 1|の値に対する各被検血漿の|min 1|の割合を示すグラフである。

【図12B】正常血漿の|min 2|の値に対する各被検血漿の|min 2|の割合を示すグラフである。

【図12C】正常血漿のmax 2の値に対する各被検血漿のmax 2の割合を示すグラフである。

【図13A】凝固因子欠損検体についてクロスミキシングテストを行ったときの即時型及び遅延型の凝固時間を示すグラフである。

【図13B】ＬＡ陽性検体についてクロスミキシングテストを行ったときの即時型及び遅延型の凝固時間を示すグラフである。

【図13C】凝固因子インヒビター陽性検体についてクロスミキシングテストを行ったときの即時型及び遅延型の凝固時間を示すグラフである。

【発明を実施するための形態】

【0015】

[１．血液検体の判定方法]
第１の態様に係る血液検体の判定方法(以下、単に「方法」ともいう)では、まず、被検血漿と正常血漿とを混合して混合血漿を調製する。

【0016】

本実施形態において、判定の対象となる血液検体である被検血漿は、被験者に由来する血漿であれば特に限定されないが、好ましくは、凝固異常の疑いのある被験者に由来する血漿である。凝固異常の疑いのある被検血漿としては、例えば、通常の凝固検査により凝固時間の延長が認められた血漿、及び、凝固異常の疑いのある者を含む複数の被験者から得た検体群などが挙げられる。血漿としては、血小板除去血漿が特に好ましい。なお、血小板は、遠心分離やフィルター分離など公知の手法により除去できる。

【0017】

本実施形態において、凝固異常の原因は特に限定されないが、例えば、凝固因子の欠損、凝固因子インヒビターの存在、ＬＡの存在、血液凝固に作用する薬剤の投与などが挙げられる。欠損が疑われる凝固因子は特に限定されないが、例えば、第Ｖ因子、第VII因子、第VIII因子、第IX因子、第Ｘ因子、第XI因子、第XII因子などが挙げられる。なお、本明細書では、「凝固因子の欠損」とは、血液において正常な凝固因子が存在しないか又は極めて少ないことを意味する。また、本明細書では、「凝固因子の欠損」には、凝固因子の異常も含まれる。凝固因子の異常としては、例えば、活性の欠如などが挙げられる。

【0018】

本実施形態において、凝固因子インヒビターは特に限定されないが、例えば、第VIII因子インヒビター、第IX因子インヒビター、第Ｖ因子インヒビターなどが挙げられる。血液凝固に作用する薬剤は特に限定されないが、例えば、ヘパリンやワーファリンなどが挙げられる。

【0019】

正常血漿は、健常者から得た血液から調製した血漿、または市販の正常血漿であればよい。市販の正常血漿としては、例えば、CRYOcheck Pooled Normal Plasma(Precision BioLogic Inc社)などが挙げられる。

【0020】

本実施形態に係る方法は、クロスミキシングテストの原理に基づいているので、被検血漿と正常血漿とを少なくとも一つの混合比で混合して得た検体(混合血漿)が用いられる。なお、本実施形態において、混合血漿は、測定の対象となる血液検体である。被検血漿と正常血漿との混合比率は、被検血漿の量などに応じて適宜決定すればよい。例えば、混合血漿における被検血漿の比率として、10、20、30、40、50、60、70、80及び90％(v/v)から少なくとも一つを選択できる。これらの中でも、被検血漿の比率が50％(v/v)の混合血漿を調製することが好ましい。なお、混合血漿は、一の被検血漿について一つであってもよいし、複数であってもよい。また、混合は、用手法で行ってもよいし、全自動凝固時間測定装置で行ってもよい。

【0021】

本実施形態に係る方法では、上記のようにして得られた混合血漿と、凝固時間測定試薬とが混和されてなる測定試料に光を照射し、この測定試料から光量に関する光学的情報を取得する。

【0022】

本実施形態において、凝固時間測定試薬(以下、単に「試薬」ともいう)は、当該技術において公知の測定原理に基づく凝固時間を測定するための試薬であればよい。例えば、プロトロンビン時間(PT)、活性化部分トロンボプラスチン時間(APTT)、希釈プロトロンビン時間(dPT)、希釈活性化部分トロンボプラスチン時間(dAPTT)、カオリン凝固時間(KCT)、希釈ラッセル蛇毒凝固時間(dRVVT)、トロンビン時間(TT)、及び希釈トロンビン時間(dTT)の少なくとも１種を測定するための試薬が挙げられる。これらの中でも、dAPTT測定試薬が好ましい。また、市販の凝固時間測定試薬及び試薬キットを用いてもよい。例えば、APTT測定試薬としては、トロンボチェックAPTT-SLA(シスメックス社)、トロンボチェックAPTT(シスメックス社)、Actin FSL(シスメックス社)などが知られている。

【0023】

本実施形態において、測定試料は、用いる試薬の測定原理に応じて公知の手法により、血漿と試薬とを混和して調製すればよい。例えば、血漿と試薬との反応時間は、通常１分以上10分以下であり、好ましくは３分以上５分以下である。温度条件は、通常25℃以上45℃以下であり、好ましくは35℃以上38℃以下である。測定試料の調製は、用手法で行ってもよいし、全自動凝固時間測定装置で行ってもよいが、全自動凝固時間測定装置で行うことが好ましい。全自動凝固時間測定装置としては、例えば、CS-5100(シスメックス社)、CS-2400(シスメックス社)、CS-2000i(シスメックス社)が挙げられる。なお、測定試料は、一の被検血漿について一つであってもよいし、複数であってもよい。

【0024】

本実施形態において、測定試料に照射する光は、凝固時間の測定に通常用いられる光であればよく、例えば、波長が660 nm近傍、好ましくは660 nmの光が挙げられる。光源は特に限定されないが、例えば、発光ダイオード、ハロゲンランプなどが挙げられる。

【0025】

上記の光源から測定試料に光を照射することにより、該測定試料から散乱光及び透過光が生じる。本実施形態では、光量に関する光学的情報として、例えば、散乱光量又は透過光量に関する情報が挙げられ、散乱光強度、透過度、吸光度などが好ましい。

【0026】

本実施形態では、測定条件は特に限定されないが、光の照射と、光量に関する光学的情報の取得は、測定の開始(血漿と試薬の混和時)から凝固反応の終了(フィブリン塊の形成)まで連続的又は断続的に行うことが好ましい。このように、凝固の全過程にわたって連続的又は断続的に測定された光量に関する光学的情報(例えば、散乱光強度、透過度又は吸光度)に基づけば、凝固過程の任意の時点又は時間において、後述の凝固波形の微分に関するパラメータを取得することが可能となる。なお、光の照射と、光量に関する光学的情報の取得は、全自動測定装置により行ってもよい。そのような装置としては、例えば、全自動血液凝固測定装置のCSシリーズ(シスメックス株式会社)などが挙げられる。

【0027】

従来のクロスミキシングテストでは、混合血漿に占める被検血漿の割合を変化させたとき、混合血漿の凝固時間がどのように変化するかを観察して、被検血漿の凝固異常の原因について判定を行う。それゆえ、従来のクロスミキシングテストでは、判定のために、被検血漿と正常血漿とを種々の比率で混合して複数の測定試料を調製し、これらの凝固時間を取得する必要がある。これに対して、本実施形態に係る方法では、後述のように、一の測定試料から取得した光学的情報に基づいて、被検血漿について判定を行うことができる。

【0028】

本実施形態では、被検血漿が一つの場合、該被検血漿から調製した混合血漿から、一の測定試料を調製してもよい。なお、一の被検血漿から複数の混合血漿を調製している場合、いずれの混合血漿から一の測定試料を調製するかは特に限定されない。本実施形態では、被検血漿が複数の場合、それぞれの被検血漿から調製した混合血漿から、それぞれの被検血漿に由来する一の測定試料を調製してもよい。すなわち、複数の被検血漿のそれぞれについて、対になる一の測定試料が調製される。なお、複数の被検血漿から調製した混合血漿の間で、被検血漿と正常血漿との混合比率は同じであってもよいし、異なっていてもよいが、同じであることが好ましい。

【0029】

本実施形態に係る方法では、一の測定試料から取得した光学的情報に基づいて、上記の被検血漿が、凝固因子を欠損した血漿である疑いがあるかを判定する。なお、本実施形態では、一の被検血漿について測定試料が複数ある場合、いずれか一つの測定試料から取得した光学的情報を判定に用いればよい。

【0030】

好ましい実施形態では、一の測定試料から取得した光学的情報に基づいて、凝固波形の微分に関するパラメータを少なくとも一つ取得する。本実施形態において、凝固波形は、光量に関する光学的情報(例えば、散乱光量、透過度又は吸光度)の経時的変化を表す波形である。図１を参照して、凝固波形及びその波形解析について説明する。図１の凝固波形(上段のグラフ)において、a点は測定開始点であり、b点はフィブリン析出(凝固の開始)点であり、a-bは凝固時間を表す。c点は凝固の中点であり、d点は凝固の終点であり、e点は測定の終点である。凝固波形を微分(１次微分)すると、凝固速度が算出される(図１の中段のグラフ参照)。なお、凝固波形のc点は１次微分の最大値に当たる。凝固速度を微分(２次微分)すると、凝固加速度が算出される(図１の下段のグラフ参照)。なお、本実施形態に係る方法では、凝固時間及び凝固波形の取得は任意である。

【0031】

本実施形態において、凝固波形の微分に関するパラメータは、一の測定試料から取得した光学的情報に基づいて得られる、凝固速度、凝固加速度及び凝固減速度の少なくとも一つを示す値であれば、特に限定されない。ここで、凝固速度を示す値は、凝固波形の一次微分から得ることができる値に相当し、凝固加速度を示す値及び凝固減速度を示す値は、凝固波形の二次微分から得ることができる値に相当する。そのようなパラメータとしては、例えば、|min 1|、|min 2|及びmax 2が挙げられる。|min 1|とは、凝固波形の一次微分の最小値の絶対値であり、最大凝固速度を表す。|min 2|とは、凝固波形の二次微分の最小値の絶対値であり、最大凝固加速度を表す。max 2とは、凝固波形の二次微分の最大値であり、最大凝固減速度を表す。なお、|min 1|、|min 2|及びmax 2という用語自体は、当該技術において公知である。また、凝固波形の微分に関するパラメータは、これらの値を２つ以上組み合わせて得られる値であってもよく、例えば、|min 1|、|min 2|及びmax 2から選択される少なくとも２つの値の和、差、積、比などが挙げられる。

【0032】

同じ測定試料から凝固時間も取得している場合は、凝固波形の微分に関するパラメータは、凝固波形の一次微分又は二次微分から取得される値と、凝固時間とを組み合わせて得られる値でもよい。そのような値としては、例えば、|min 1|、|min 2|及びmax 2から選択される少なくとも一つの値と凝固時間の値の和、差、積、比などが挙げられる。

【0033】

本実施形態では、取得したパラメータの値に基づいて、被検血漿が、凝固因子を欠損した血漿である疑いがあるかを判定できる。判定は、取得したパラメータの値と、そのパラメータに対応する所定の閾値とを比較し、その比較結果に基づいて行うことが好ましい。例えば、|min 1|を取得している場合は|min 1|の値と第１の閾値とを比較し、|min 2|を取得している場合は|min 2|の値と第２の閾値とを比較し、max 2を取得している場合はmax 2の値と第３の閾値とを比較して、その比較結果に基づいて判定できる。具体的には、|min 1|、|min 2|及びmax 2のうち、取得している値の少なくとも一つが、その値に対応する所定の閾値以上であるとき、被検血漿は、凝固因子を欠損した血漿である疑いがあると判定できる。一方、|min 1|、|min 2|及びmax 2のうち、取得している値の全てが、その値に対応する所定の閾値より小さいとき、被検血漿は、凝固因子の欠損以外の凝固異常の原因を有する血漿である疑いがあると判定できる。

【0034】

凝固波形の微分に関するパラメータとして、|min 1|、|min 2|及びmax 2のいずれか一つを取得している場合、例えば、以下のようにして判定できる：
・|min 1|の値と第１の閾値とを比較して、|min 1|の値が第１の閾値以上であるとき、被検血漿は、凝固因子を欠損した血漿である疑いがあると判定する。反対に、|min 1|の値が第１の閾値より小さいとき、被検血漿は、凝固因子の欠損以外の凝固異常の原因を有する血漿である疑いがあると判定する。
・|min 2|の値と第２の閾値とを比較して、|min 2|の値が第２の閾値以上であるとき、被検血漿は、凝固因子を欠損した血漿である疑いがあると判定する。反対に、|min 2|の値が第２の閾値より小さいとき、被検血漿は、凝固因子の欠損以外の凝固異常の原因を有する血漿である疑いがあると判定する。
・max 2の値と第３の閾値とを比較して、max 2の値が第３の閾値以上であるとき、被検血漿は、凝固因子を欠損した血漿である疑いがあると判定する。反対に、max 2の値が第３の閾値より小さいとき、被検血漿は、凝固因子の欠損以外の凝固異常の原因を有する血漿である疑いがあると判定する。

【0035】

凝固波形の微分に関するパラメータとして、|min 1|、|min 2|及びmax 2のいずれか２つを取得している場合、例えば、以下のようにして判定できる：
・|min 1|の値と第１の閾値とを比較し、|min 2|の値と第２の閾値とを比較して、|min 1|の値が第１の閾値以上であるか、又は、|min 2|の値が第２の閾値以上であるとき、被検血漿は、凝固因子を欠損した血漿である疑いがあると判定する。反対に、|min 1|の値が第１の閾値より小さく、且つ、|min 2|の値が第２の閾値より小さいとき、被検血漿は、凝固因子の欠損以外の凝固異常の原因を有する血漿である疑いがあると判定する。
・|min 1|の値と第１の閾値とを比較し、max 2の値と第３の閾値とを比較して、|min 1|の値が第１の閾値以上であるか、又は、max 2の値が第３の閾値以上であるとき、被検血漿は、凝固因子を欠損した血漿である疑いがあると判定する。反対に、|min 1|の値が第１の閾値より小さく、且つ、max 2の値が第３の閾値より小さいとき、被検血漿は、凝固因子の欠損以外の凝固異常の原因を有する血漿である疑いがあると判定する。
・|min 2|の値と第２の閾値とを比較し、max 2の値と第３の閾値とを比較して、|min 2|の値が第２の閾値以上であるか、又は、max 2の値が第３の閾値以上であるとき、被検血漿は、凝固因子を欠損した血漿である疑いがあると判定する。反対に、|min 2|の値が第２の閾値より小さく、且つ、max 2の値が第３の閾値より小さいとき、被検血漿は、凝固因子の欠損以外の凝固異常の原因を有する血漿である疑いがあると判定する。

【0036】

凝固波形の微分に関するパラメータとして、|min 1|、|min 2|及びmax 2の３つを取得している場合、例えば、次のようにして判定できる。|min 1|の値と第１の閾値とを比較し、|min 2|の値と第２の閾値とを比較し、max 2の値と第３の閾値とを比較して、|min 1|の値が第１の閾値以上であるか、又は、|min 2|の値が第２の閾値以上であるか、又は、max 2の値が第３の閾値以上であるとき、被検血漿は、凝固因子を欠損した血漿である疑いがあると判定する。反対に、|min 1|の値が第１の閾値より小さく、且つ、|min 2|の値が第２の閾値より小さく、且つ、max 2の値が第３の閾値より小さいとき、被検血漿は、凝固因子の欠損以外の凝固異常の原因を有する血漿である疑いがあると判定する。

【0037】

本実施形態では、上記の第１、第２及び第３の閾値などの各パラメータに対応する所定の閾値は特に限定されない。例えば、凝固因子欠損検体、ＬＡ陽性検体及び凝固因子インヒビター陽性検体について、凝固波形の微分に関する種々のパラメータのデータを蓄積することにより、各パラメータに対応する閾値を経験的に設定できる。あるいは、凝固因子欠損検体群と、凝固因子の欠損以外の凝固異常の原因を有する検体群のそれぞれについて、凝固波形の微分に関する種々のパラメータの値を取得し、両群を明確に区別可能な値を所定の閾値として設定してもよい。

【0038】

別の実施形態においては、混合血漿についての凝固波形の微分に関するパラメータに加えて、被検血漿の凝固時間を取得し、凝固時間の延長が認められる被検血漿について上記の判定を行うことができる。この実施形態では、凝固時間に基づいて、凝固異常の疑いのある被検血漿を選別して判定することができる。以下に、この実施形態(第２の態様)に係る血液検体の判定方法について説明する。

【0039】

本実施形態に係る方法では、まず、被検血漿と正常血漿とを混合して混合血漿を調製する。被検血漿及び正常血漿は、第１の態様に係る方法について述べたことと同様である。

【0040】

次いで、本実施形態に係る方法では、被検血漿と凝固時間測定試薬とが混和されてなる第１測定試料、及び、混合血漿と凝固時間測定試薬とが混和されてなる第２測定試料に光を照射し、第１及び第２測定試料のそれぞれから光量に関する光学的情報を取得する。第１測定試料は、混合血漿に代えて被検血漿を用いることを除いて、第１の態様に係る方法の測定試料と同様にして調製できる。本実施形態において、凝固時間測定試薬、第２測定試料の調製、及び光量に関する光学的情報の取得についての詳細は、第１の態様に係る方法について述べたことと同様である。

【0041】

本実施形態では、第１測定試料から取得した光学的情報に基づいて、第１測定試料の凝固時間を取得し、一の第２測定試料から取得した光学的情報に基づいて第２測定試料の凝固波形の微分に関するパラメータの少なくとも一つを取得する。凝固波形の微分に関するパラメータの取得に関する詳細は、第１の態様に係る方法について述べたことと同様である。ここで、第１測定試料の凝固時間(すなわち、被検血漿の凝固時間)を取得する方法自体は、当該技術において公知である。よって、当業者は、用いる凝固時間測定試薬の測定原理に応じて、第１測定試料の凝固時間を適宜取得できる。

【0042】

本実施形態では、凝固時間の延長が認められた被検血漿について、取得したパラメータの値に基づいて、凝固因子を欠損した血漿である疑いがあるかを判定できる。なお、判定の手順及び各パラメータに対応する所定の閾値などに関する詳細は、第１の態様に係る方法について述べたことと同様である。

【0043】

本実施形態において、第１測定試料の凝固時間が延長しているか否かは、取得した凝固時間と、所定の時間とを比較し、比較結果に基づいて決定することが好ましい。例えば、取得した凝固時間が所定の時間よりも長いとき、被検血漿は、凝固時間の延長が認められる血漿であると決定できる。一方、取得した凝固時間が所定の凝固時間以下のとき、被検血漿は、凝固時間の延長が認められない血漿であると決定できる。

【0044】

所定の時間は、正常血漿の凝固時間が好ましい。正常血漿としては、例えば、健常者に由来する血漿、又は市販の正常血漿などが挙げられる。そのような正常血漿の凝固時間は、被検血漿と同様にして実際に測定した凝固時間であってもよいし、用いる凝固時間測定試薬の測定原理において正常値又は基準値として知られている凝固時間であってもよい。

【0045】

なお、本実施形態において、凝固時間の延長が認められなかった被検血漿には、凝固異常の疑いはないと考えられる。

【0046】

上記の第１又は第２の態様に係る方法では、被検血漿が、凝固因子の欠損以外の凝固異常の原因を有する血漿である疑いがあると判定した場合、取得したパラメータの値に基づいて、被検血漿におけるＬＡ又は凝固因子インヒビターについての情報をさらに取得できる。

【0047】

例えば、|min 1|を取得している場合は|min 1|の値と第４の閾値とを比較し、|min 2|を取得している場合は|min 2|の値と第５の閾値とを比較し、max 2を取得している場合はmax 2の値と第６の閾値とを比較して、その比較結果に基づいて、被検血漿が、ＬＡを含む血漿の疑いがあるか又は凝固因子インヒビターを含む血漿の疑いがあるかについて判定できる。具体的には、|min 1|、|min 2|及びmax 2のうち、取得している値の少なくとも一つが、その値に対応する所定の閾値以上であるとき、被検血漿は、ＬＡを含む血漿の疑いがあると判定できる。反対に、|min 1|、|min 2|及びmax 2のうち、取得している値の全てが、その値に対応する所定の閾値より小さいとき、被検血漿は、凝固因子インヒビターを含む血漿の疑いがあると判定できる。

【0048】

凝固波形の微分に関するパラメータとして、|min 1|、|min 2|及びmax 2のいずれか一つを取得している場合、例えば、以下のようにして判定できる：
・|min 1|の値と第４の閾値とを比較して、|min 1|の値が第４の閾値以上であるとき、被検血漿は、ＬＡを含む血漿である疑いがあると判定する。反対に、|min 1|の値が第４の閾値より小さいとき、被検血漿は、凝固因子インヒビターを含む血漿である疑いがあると判定する。
・|min 2|の値と第５の閾値とを比較して、|min 2|の値が第５の閾値以上であるとき、被検血漿は、ＬＡを含む血漿である疑いがあると判定する。反対に、|min 2|の値が第５の閾値より小さいとき、被検血漿は、凝固因子インヒビターを含む血漿である疑いがあると判定する。
・max 2の値と第６の閾値とを比較して、max 2の値が第６の閾値以上であるとき、被検血漿は、ＬＡを含む血漿である疑いがあると判定する。反対に、max 2の値が第６の閾値より小さいとき、被検血漿は、凝固因子インヒビターを含む血漿である疑いがあると判定する。

【0049】

凝固波形の微分に関するパラメータとして、|min 1|、|min 2|及びmax 2のいずれか２つを取得している場合、例えば、以下のようにして判定できる：
・|min 1|の値と第４の閾値とを比較し、|min 2|の値と第５の閾値とを比較して、|min 1|の値が第４の閾値以上であるか、又は、|min 2|の値が第５の閾値以上であるとき、被検血漿は、ＬＡを含む血漿である疑いがあると判定する。反対に、|min 1|の値が第４の閾値より小さく、且つ、|min 2|の値が第５の閾値より小さいとき、被検血漿は、凝固因子インヒビターを含む血漿である疑いがあると判定する。
・|min 1|の値と第４の閾値とを比較し、max 2の値と第６の閾値とを比較して、|min 1|の値が第４の閾値以上であるか、又は、max 2の値が第６の閾値以上であるとき、被検血漿は、ＬＡを含む血漿である疑いがあると判定する。反対に、|min 1|の値が第４の閾値より小さく、且つ、max 2の値が第６の閾値より小さいとき、被検血漿は、凝固因子インヒビターを含む血漿である疑いがあると判定する。
・|min 2|の値と第５の閾値とを比較し、max 2の値と第６の閾値とを比較して、|min 2|の値が第５の閾値以上であるか、又は、max 2の値が第６の閾値以上であるとき、被検血漿は、ＬＡを含む血漿である疑いがあると判定する。反対に、|min 2|の値が第５の閾値より小さく、且つ、max 2の値が第６の閾値より小さいとき、被検血漿は、凝固因子インヒビターを含む血漿である疑いがあると判定する。

【0050】

凝固波形の微分に関するパラメータとして、|min 1|、|min 2|及びmax 2の３つを取得している場合、例えば、次のようにして判定できる。|min 1|の値と第４の閾値とを比較し、|min 2|の値と第５の閾値とを比較し、max 2の値と第６の閾値とを比較して、|min 1|の値が第４の閾値以上であるか、又は、|min 2|の値が第５の閾値以上であるか、又は、max 2の値が第６の閾値以上であるとき、被検血漿は、ＬＡを含む血漿である疑いがあると判定する。反対に、|min 1|の値が第４の閾値より小さく、且つ、|min 2|の値が第５の閾値より小さく、且つ、max 2の値が第６の閾値より小さいとき、被検血漿は、凝固因子インヒビターを含む血漿である疑いがあると判定する。

【0051】

本実施形態では、上記の第４、第５及び第６の閾値などの各パラメータに対応する所定の閾値は特に限定されない。例えば、ＬＡ陽性検体及び凝固因子インヒビター陽性検体について、凝固波形の微分に関する種々のパラメータのデータを蓄積することにより、各パラメータに対応するこれらの閾値を経験的に設定できる。あるいは、ＬＡ陽性検体群と、凝固因子インヒビター陽性検体群とのそれぞれについて、凝固波形の微分に関する種々のパラメータの値を取得し、両群を明確に区別可能な値を所定の閾値として設定してもよい。

【0052】

[２．血液検体分析装置、血液検体の判定のための装置及びコンピュータプログラム]
以下に、本実施形態に係る血液検体分析装置の一例を、図面を参照して説明する。しかし、本実施形態はこの例のみに限定されない。図２に示されるように、血液検体分析装置１０は、測定試料の調製及び光学的測定を行う測定装置５０と、測定装置５０により取得された測定データを分析すると共に測定装置５０に指示を与える制御装置４０とを備える。測定装置５０は、測定試料からの光量に関する光学的情報を取得する測定部２０と、測定部２０の前方に配置された検体搬送部３０とを備える。

【0053】

測定部２０には、蓋２０ａ及び２０ｂと、カバー２０ｃと、電源ボタン２０ｄが設けられている。ユーザは、蓋２０ａを開けて、試薬テーブル１１及び１２(図３参照)に設置されている試薬容器１０３を新たな試薬容器１０３と交換したり、また、別の試薬容器１０３を新たに追加したりすることができる。試薬容器１０３には、収容する試薬の種類と、試薬に付与されたシリアルナンバーからなる試薬ＩＤとを含むバーコードが印刷されたバーコードラベル１０３ａが貼付されている。

【0054】

ユーザは、蓋２０ｂを開けて、ランプユニット２７(図３参照)を交換できる。また、ユーザは、カバー２０ｃを開けて、ピアサ１７ａ(図３参照)を交換できる。検体搬送部３０は、検体ラック１０２に支持された検体容器１０１を、ピアサ１７ａによる吸引位置まで搬送する。検体容器１０１は、ゴム製の蓋１０１ａにより密封されている。

【0055】

血液検体分析装置１０を使用する場合、ユーザは、まず、測定部２０の電源ボタン２０ｄを押して測定部２０を起動させ、制御装置４０の電源ボタン４３９を押して制御装置４０を起動させる。制御装置４０が起動すると、表示部４１にログオン画面が表示される。ユーザは、ログオン画面にユーザ名及びパスワードを入力して制御装置４０にログオンし、血液検体分析装置１０の使用を開始する。

【0056】

測定装置の構成について、以下に説明する。図３に示されるように、測定部２０は、試薬テーブル１１及び１２と、キュベットテーブル１３と、バーコードリーダ１４と、キュベット供給部１５と、キャッチャ１６と、検体分注アーム１７と、試薬分注アーム１８と、緊急検体セット部１９と、光ファイバ２１と、検出部２２と、キュベット移送部２３と、加温部２４と、廃棄口２５と、流体部２６と、ランプユニット２７とを備えている。

【0057】

(測定試料調製部)
試薬テーブル１１及び１２とキュベットテーブル１３は、それぞれ、円環形状を有し、回転可能に構成されている。試薬テーブル１１及び１２は試薬収納部に相当し、ここには試薬容器１０３が載せ置かれる。試薬テーブル１１及び１２に載せ置かれた試薬容器１０３のバーコードは、バーコードリーダ１４により読み取られる。バーコードから読み取られた情報(試薬の種類、試薬ＩＤ)は、制御装置４０に入力され、ハードディスク４３４(図８参照)に格納される。また、試薬テーブル１１及び／又は１２には、混合検体の調製のための正常血液検体が収容された試薬容器１０３が載せ置かれてもよい。

【0058】

キュベットテーブル１３には、キュベット１０４を支持可能な複数の孔からなる支持部１３ａが形成されている。ユーザによってキュベット供給部１５に投入された新しいキュベット１０４は、キュベット供給部１５により順次移送され、キャッチャ１６によりキュベットテーブル１３の支持部１３ａに設置される。

【0059】

検体分注アーム１７と試薬分注アーム１８には、それぞれ、上下移動及び回転移動できるようステッピングモータが接続されている。検体分注アーム１７の先端には、検体容器１０１の蓋１０１ａを穿刺できるよう先端が鋭利に形成されたピアサ１７ａが設置されている。試薬分注アーム１８の先端にはピペット１８ａが設置されている。ピペット１８ａの先端は、ピアサ１７ａと異なり平坦に形成されている。また、ピペット１８ａには、静電容量式の液面検知センサ２１３(図４参照)が接続されている。

【0060】

検体搬送部３０(図２参照)によって検体容器１０１が所定位置に搬送されると、ピアサ１７ａが、検体分注アーム１７の回転移動により検体容器１０１の真上に位置付けられる。そして、検体分注アーム１７が下方向に移動され、ピアサ１７ａが検体容器１０１の蓋１０１ａを貫通し、検体容器１０１に収容されている血液検体が、ピアサ１７ａにより吸引される。緊急を要する血液検体が緊急検体セット部１９にセットされている場合、ピアサ１７ａは、検体搬送部３から供給される検体に割り込んで、緊急を要する血液検体を吸引する。ピアサ１７ａにより吸引された血液検体は、キュベットテーブル１３上の空のキュベット１０４に吐出される。

【0061】

血液検体が吐出されたキュベット１０４は、キュベット移送部２３のキャッチャ２３ａにより、キュベットテーブル１３の支持部１３ａから、加温部２４の支持部２４ａに移送される。加温部２４は、支持部２４ａに設置されたキュベット１０４に収容されている血液検体を、所定の温度(例えば37℃)で一定時間加温する。加温部２４による血液検体の加温が終了すると、このキュベット１０４は、キャッチャ２３ａによって再び把持される。そして、このキュベット１０４は、キャッチャ２３ａにより把持されたまま所定位置に位置付けられ、この状態で、ピペット１８ａにより吸引された試薬がキュベット１０４内に吐出される。

【0062】

ピペット１８ａによる試薬の分注では、まず、試薬テーブル１１及び１２が回転され、測定項目に対応する試薬を収容する試薬容器１０３が、ピペット１８ａによる吸引位置に搬送される。そして、原点位置を検知するためのセンサに基づいて、ピペット１８ａの上下方向の位置が原点位置に位置付けられた後、液面検知センサ２１３によりピペット１８ａの下端が試薬の液面に接触するまで、ピペット１８ａが下降される。ピペット１８ａの下端が試薬の液面に接触すると、必要な量の試薬を吸引できる程度に、さらにピペット１８ａが下降される。そして、ピペット１８ａの下降が停止され、ピペット１８ａにより試薬が吸引される。ピペット１８ａにより吸引された試薬は、キャッチャ２３ａによって把持されたキュベット１０４に吐出される。そして、キャッチャ２３ａの振動機能により、キュベット１０４内の血液検体と試薬が攪拌される。これにより、測定試料の調製が行われる。その後、測定試料を収容するキュベット１０４は、キャッチャ２３ａにより、検出部２２の支持部２２ａに移送される。

【0063】

(光学的情報取得部)
ランプユニット２７は、検出部２２による光学的信号の検出に用いられる複数種類の波長の光を供給する。図５を参照して、ランプユニット２７の構成の一例を説明する。ランプユニット２７は光源に相当し、ハロゲンランプ２７ａと、ランプケース２７ｂと、集光レンズ２７ｃ～２７ｅと、円盤形状のフィルター部２７ｆと、モータ２７ｇと、光透過型のセンサ２７ｈと、光ファイバカプラ２７ｉとを備える。

【0064】

ランプユニット２７からの光は、光ファイバ２１を介して、検出部２２に供給される。検出部２２には、穴状の支持部２２ａが複数設けられており、各支持部２２ａには、キュベット１０４が挿入可能となっている。各支持部２２ａには、それぞれ、光ファイバ２１の端部が装着され、支持部２２ａに支持されたキュベット１０４に光ファイバ２１からの光が照射可能となっている。検出部２２は、光ファイバ２１を介して、ランプユニット２７から供給される光をキュベット１０４に照射し、キュベット１０４を透過する光(又はキュベット１０４からの散乱光)の光量を検出する。

【0065】

図６Ａ～Ｄを参照して、検出部２２に配された複数の支持部２２ａのうちの一つの構成の例を示すが、他の支持部２２ａも同様の構成を有する。図６Ａを参照して、検出部２２には、光ファイバ２１の先端が挿入される円形の穴２２ｂが形成される。さらに、検出部２２には、穴２２ｂを支持部２２ａに連通させる円形の連通孔２２ｃが形成されている。穴２２ｂの径は、連通孔２２ｃの径よりも大きい。穴２２ｂの端部には、光ファイバ２１からの光を集光するレンズ２２ｄが配置されている。さらに、支持部２２ａ内壁面には、連通孔２２ｃに対向する位置に孔２２ｆが形成される。この孔２２ｆの奥に、光検出器２２ｇが配置されている。光検出器２２ｇは受光部に相当し、受光光量に応じた電気信号を出力する。レンズ２２ｄを透過した光は、連通孔２２ｃ、支持部２２ａ及び孔２２ｆを介して、光検出器２２ｇの受光面に集光される。光ファイバ２１は、端部が穴２２ｂに挿入された状態で、板ばね２２ｅによって抜け止めされる。

【0066】

図６Ｂを参照して、支持部２２ａにキュベット１０４が支持されると、レンズ２２ｄによって集光された光は、キュベット１０４およびキュベット１０４に収容された試料を透過して、光検出器２２ｇに入射する。試料において血液凝固反応が進むと、試料の濁度が上昇する。これに伴い、試料を透過する光の光量(透過光量)が減少し、光検出器２２ｇの検出信号のレベルが低下する。

【0067】

図６Ｃを参照して、散乱光を用いる場合の検出部２２の構成を説明する。支持部２２ａの内側面において、連通孔２２ｃと同じ高さの位置に、孔２２ｈが設けられる。この孔２２ｈの奥に、光検出器２２ｉが配置される。支持部２２ａにキュベット１０４が挿入され、光ファイバ２１から光が出射されると、キュベット１０４内の測定試料によって散乱された光が、孔２２ｈを介して光検出器２２ｉに照射される。この例では、光検出器２２ｉからの検出信号は、測定試料による散乱光の強度を示す。また、図６Ｄに示されるように、測定試料を透過する透過光と、測定試料により散乱される散乱光との両方を検出できるようにしてもよい。

【0068】

上記のように、検出部２２は、ランプユニット２７から供給される光をキュベット１０４に照射し、測定試料からの光学的情報を取得する。取得された光学的情報は、制御装置４０に送信される。制御装置４０は、光学的情報に基づいて分析を行い、分析結果を表示部４１に表示する。

【0069】

測定終了後、不要となったキュベット１０４は、キュベットテーブル１３により搬送され、キャッチャ１６により廃棄口２５に廃棄される。なお、測定動作の際に、ピアサ１７ａとピペット１８ａは、流体部２６から供給される洗浄液などの液体により、適宜洗浄される。

【0070】

測定装置のハードウェア構成について、以下に説明する。図４に示されるように、測定部２０は、制御部２００と、ステッピングモータ部２１１と、ロータリーエンコーダ部２１２と、液面検知センサ２１３と、センサ部２１４と、機構部２１５と、取得部２１６と、バーコードリーダ１４と、ランプユニット２７を含む。

【0071】

制御部２００は、ＣＰＵ２０１と、メモリ２０２と、通信インターフェース２０３と、Ｉ／Ｏインターフェース２０４を含んでいる。ＣＰＵ２０１は、メモリ２０２に記憶されているコンピュータプログラムを実行する。メモリ２０２は、ＲＯＭ、ＲＡＭ、ハードディスクなどからなる。また、ＣＰＵ２０１は、通信インターフェース２０３を介して、検体搬送部３０を駆動させると共に、制御装置４０との間で指示信号及びデータの送受信を行う。また、ＣＰＵ２０１は、Ｉ／Ｏインターフェース２０４を介して、測定部２０内の各部を制御すると共に、各部から出力された信号を受信する。

【0072】

ステッピングモータ部２１１は、試薬テーブル１１及び１２と、キュベットテーブル１３と、キャッチャ１６と、検体分注アーム１７と、試薬分注アーム１８と、キュベット移送部２３を、それぞれ駆動するためのステッピングモータを含んでいる。ロータリーエンコーダ部２１２は、ステッピングモータ部２１１に含まれる各ステッピングモータの回転変位量に応じたパルス信号を出力するロータリーエンコーダを含んでいる。

【0073】

液面検知センサ２１３は、試薬分注アーム１８の先端に設置されたピペット１８ａに接続されており、ピペット１８ａの下端が試薬の液面に接触したことを検知する。センサ部２１４は、ピペット１８ａの上下方向の位置が原点位置に位置付けられたことを検知するセンサと、電源ボタン２０ｄが押されたことを検知するセンサを含んでいる。機構部２１５は、キュベット供給部１５と、緊急検体セット部１９と、加温部２４と、流体部２６を駆動するための機構と、ピアサ１７ａとピペット１８ａによる分注動作が可能となるようピアサ１７ａとピペット１８ａに圧力を供給する空圧源を含んでいる。取得部２１６は、検出部２２を含んでいる。

【0074】

制御装置４０の構成について、以下に説明する。図２に示されるように、制御装置４０は、表示部４１と、入力部４２と、コンピュータ本体４３とから構成されている。制御装置４０は、測定部２０から光学的情報を受信する。そして、制御装置４０のプロセッサは、光学的情報に基づいて、凝固波形の微分に関するパラメータを算出する。また、制御装置４０のプロセッサは、光学的情報に基づいて凝固時間を算出してもよい。そして、制御装置４０のプロセッサは、血液検体の判定のためのコンピュータプログラムを実行する。よって、制御装置４０は、血液検体の判定のための装置としても機能する。

【0075】

制御装置４０の機能構成について、図７に示されるように、制御装置４０は、取得部４０１と、記憶部４０２と、算出部４０３と、判定部４０４と、出力部４０５とを備える。取得部４０１は、測定部２０と、ネットワークを介して通信可能に接続されている。出力部４０５は、表示部４１と通信可能に接続されている。

【0076】

取得部４０１は、測定部２０から送信された光学的情報を取得する。記憶部４０２は、凝固波形の微分に関する各種パラメータの値を算出するための式、及び判定に必要な所定の閾値などを記憶する。また、記憶部４０２は、凝固時間を算出するための式及び所定の凝固時間(例えば、凝固時間の基準値又は正常値)を記憶していてもよい。算出部４０３は、取得部４０１で取得された情報を用い、記憶部４０２に記憶された式にしたがって、各種パラメータの値を算出する。判定部４０４は、算出部４０３によって算出されたパラメータの値が、記憶部４０２に記憶された所定の閾値よりも小さいか否かを判定する。出力部４０５は、判定部４０４による判定結果を、血液検体についての参考情報として出力する。

【0077】

図８に示されるように、制御装置４０のコンピュータ本体４３は、ＣＰＵ４３１と、ＲＯＭ４３２と、ＲＡＭ４３３と、ハードディスク４３４と、読出装置４３５と、入出力インターフェース４３６と、通信インターフェース４３７と、画像出力インターフェース４３８と、電源ボタン４３９とを備える。ＣＰＵ４３１、ＲＯＭ４３２、ＲＡＭ４３３、ハードディスク４３４、読出装置４３５、入出力インターフェース４３６、通信インターフェース４３７、画像出力インターフェース４３８及び電源ボタン４３９は、バス４４０によって通信可能に接続されている。

【0078】

ＣＰＵ４３１は、ＲＯＭ４３２に記憶されているコンピュータプログラム及びＲＡＭ４３３にロードされたコンピュータプログラムを実行する。ＣＰＵ４３１がアプリケーションプログラムを実行することにより、上述した各機能ブロックが実現される。これにより、コンピュータシステムが、血液検体を判定するための判定装置としての端末として機能する。

【0079】

ＲＯＭ４３２は、マスクＲＯＭ、ＰＲＯＭ、ＥＰＲＯＭ、ＥＥＰＲＯＭなどによって構成されている。ＲＯＭ４３２には、ＣＰＵ４３１によって実行されるコンピュータプログラム及びこれに用いるデータが記録されている。

【0080】

ＲＡＭ４３３は、ＳＲＡＭ、ＤＲＡＭなどによって構成されている。ＲＡＭ４３３は、ＲＯＭ４３２及びハードディスク４３４に記録されているコンピュータプログラムの読み出しに用いられる。また、ＲＡＭ４３３は、これらのコンピュータプログラムを実行するときに、ＣＰＵ４３１の作業領域としても利用される。

【0081】

ハードディスク４３４は、オペレーティングシステム、ＣＰＵ４３１に実行させるためのアプリケーションプログラム(血液検体の判定のためのコンピュータプログラム)などのコンピュータプログラム、当該コンピュータプログラムの実行に用いるデータ、及び制御装置４０の設定内容がインストールされている。

【0082】

読出装置４３５は、フレキシブルディスクドライブ、ＣＤ－ＲＯＭドライブ、ＤＶＤ－ＲＯＭドライブなどによって構成されている。読出装置４３５は、ＣＤ、ＤＶＤなどの可搬型記録媒体４４１に記録されたコンピュータプログラムまたはデータを読み出すことができる。

【0083】

入出力インターフェース４３６は、例えば、ＵＳＢ、ＩＥＥＥ１３９４、ＲＳ－２３２Ｃなどのシリアルインターフェイスと、ＳＣＳＩ、ＩＤＥ、ＩＥＥＥ１２８４などのパラレルインターフェイスと、Ｄ／Ａ変換器、Ａ／Ｄ変換器などからなるアナログインターフェイスとから構成されている。入出力インターフェース４３６には、キーボード、マウスなどの入力部４２が接続されている。ユーザは入力部４２を介して指示を入力し、入出力インターフェース４３６は、入力部４２を介して入力された信号を受け付ける。

【0084】

通信インターフェース４３７は、例えば、Ethernet(登録商標)インターフェースなどである。制御装置４０は、通信インターフェース４３７により、プリンタへの印刷データの送信が可能である。通信インターフェース４３７は測定部２０に接続されており、ＣＰＵ４３１は、通信インターフェース４３７を介して、測定部２０との間で指示信号及びデータの送受信を行う。

【0085】

画像出力インターフェース４３８は、ＬＣＤ、ＣＲＴなどで構成される表示部４１に接続されている。画像出力インターフェース４３８は、画像データに応じた映像信号を表示部４１に出力し、表示部４１は、画像出力インターフェース４３８から出力された映像信号に基づいて画像を表示する。

【0086】

図４を参照して、測定動作の際、測定部２０のＣＰＵ２０１は、検出部２２(図３参照)から出力された検出信号をデジタル化したデータ(光学的情報)を、メモリ２０２に一時格納する。メモリ２０２の記憶領域は、支持部２２ａ毎にエリア分割される。各エリアには、対応する支持部２２ａに支持されたキュベット１０４に対して所定波長の光を照射したときに取得されるデータ(光学的情報)が、順次格納される。こうして、所定の測定時間にわたって順次、データがメモリ２０２に格納される。測定時間が経過すると、ＣＰＵ２０１は、メモリ２０２に対するデータの格納を中止し、格納したデータを、通信インターフェース２０３を介して制御装置４０に送信する。制御装置４０は、受信したデータを処理して解析を行い、解析結果を表示部４１に表示する。

【0087】

測定部２０における処理は、主として測定部２０のＣＰＵ２０１の制御の下で行われ、制御装置４０における処理は、主として制御装置４０のＣＰＵ４３１の制御の下で行われる。図９を参照して、測定処理が開始されると、測定部２０は、正常血漿が収容された試薬容器１０３から所定量の正常血漿を吸引して、これを空のキュベット１０４に分注する。そして、測定部２０は、検体搬送部により搬送された検体容器１０１から所定量の被検血漿を吸引し、これを、正常血漿が入っているキュベット１０４に分注して攪拌することにより、混合血漿を調製する(ステップＳ１１)。なお、被検血漿についても測定する場合、測定部２０は、検体容器１０１から被検血漿を吸引し、これを、キュベットテーブル１３上の空のキュベット１０４に分注する。また、正常血漿についても測定する場合、測定部２０は、試薬収容部に収容された正常血漿が入った試薬容器１０３から正常血漿を吸引し、これを、キュベットテーブル１３上の空のキュベット１０４に分注する。

【0088】

次いで、測定部２０は、血漿が分注されたキュベット１０４を加温部２４に移送して、キュベット１０４内の血漿を所定温度(例えば37℃)に加温し、その後、キュベット１０４に試薬を添加して、測定試料を調製する(ステップＳ１２)。測定部２０は、キュベット１０４に試薬を添加した時点から時間の計測を開始する。

【0089】

その後、測定部２０は、試薬が添加されたキュベット１０４を検出部２２に移送し、キュベット１０４に光を照射して測定試料を測定する(ステップＳ１３)。この測定では、波長660 nmの光に基づくデータ(散乱光量又は透過光量)が、測定時間の間、順次、メモリ２０２に格納される。このとき、データは、試薬添加時点からの経過時間に対応付けられた状態でメモリ２０２に格納される。そして、測定時間が経過すると、測定部２０は、測定を中止し、メモリ２０２に格納された測定結果(データ)を制御装置４０に送信する(ステップＳ１４)。これにより、制御装置４０が測定部２０から測定結果(データ)を受信すると(ステップＳ２１：ＹＥＳ）、制御装置４０は、受信した測定結果に対して分析処理を実行する(ステップＳ２２)。すなわち、制御装置４０は、測定試料について、凝固波形の微分に関するパラメータ(|min 1|、|min 2|及びmax 2)の算出と、該パラメータに基づく判定とを行う。なお、制御装置４０は、測定試料の凝固時間及び凝固波形も算出してもよい。また、制御装置４０は、被検血漿から調製した測定試料の凝固時間に基づいて、被検血漿について、凝固時間の延長が認められるか否かの判定を行ってもよい。分析処理を行った後、制御装置４０は、分析結果の表示処理を実行する(ステップＳ２３)。

【0090】

図１０Ａを参照して、凝固波形の微分に関するパラメータを一つ用いる場合の処理のフローを説明する。ここでは、測定試料からの光量に関する光学的情報から、凝固波形の微分に関するパラメータの値として|min 1|の値を取得し、取得した値と、対応する所定の閾値とを比較して血液検体の判定を行なう場合を例として説明する。しかし、本実施形態は、この例のみに限定されるものではない。この例においては、|min 1|に代えて、|min 2|又はmax 2の値を取得して判定を行ってもよい。

【0091】

まず、ステップＳ１０１において、制御装置４０の取得部４０１は、測定部２０から受信したデータ(散乱光量又は透過光量)に基づいて、光学的情報(散乱光強度、又は透過度もしくは吸光度)を取得する。次に、ステップＳ１０２において、算出部４０３は、取得部４０１が取得した光学的情報から、記憶部４０２に記憶された凝固波形の微分に関するパラメータを算出するための式にしたがって、|min 1|の値を算出する。好ましくは、混合血漿から調製された一の測定試料の光学的情報から、上記パラメータを算出する。なお、凝固時間及び凝固波形は後述の判定の処理には利用されないが、算出部４０３は、取得部４０１が取得した光学的情報から凝固時間及び凝固波形をさらに算出してもよい。

【0092】

ステップＳ１０３において、判定部４０４は、算出部４０３で算出された|min 1|の値と、記憶部４０２に記憶された第１の閾値とを用いて、被検血漿が、凝固因子を欠損した血漿である疑いがあるかを判定する。ここで、|min 1|の値が第１の閾値よりも小さくないとき(すなわち、|min 1|の値が第１の閾値以上であるとき)、処理はステップＳ１０４に進行する。ステップＳ１０４において、判定部４０４は、被検血漿が、凝固因子を欠損した血漿である疑いがあるとの判定結果を出力部４０５に送信する。一方、|min 1|の値が第１の閾値よりも小さいとき、処理はステップＳ１０５に進行する。ステップＳ１０５において、判定部４０４は、被検血漿が、凝固因子の欠損以外の凝固異常の原因を有する血漿である疑いがあるとの判定結果を出力部４０５に送信する。なお、|min 2|の値を用いる場合は|min 2|の値と第２の閾値とを比較し、max 2の値を用いる場合はmax 2の値と第３の閾値とを比較する。

【0093】

ステップＳ１０６において、出力部４０５は、判定結果を出力し、表示部４１に表示させたり、プリンタに印刷させたりする。あるいは、音声で出力してもよい。これにより、判定結果を、被検血漿についての参考情報としてユーザに提供できる。

【0094】

被検血漿の凝固時間と所定の時間とを比較するステップをさらに含む場合のフローを、図１０Ｂを参照して説明する。ここでは、被検血漿から調製した測定試料(第１測定試料)からの光量に関する光学的情報から凝固時間を取得し、凝固時間が所定の時間より長い場合に、混合血漿から調製した測定試料(第２測定試料)の光量に関する光学的情報から取得した|min 1|の値と、対応する所定の閾値とを比較して被検血漿の判定を行なう場合を例として説明する。しかし、本実施形態は、この例のみに限定されるものではない。この例においては、|min 1|に代えて、|min 2|又はmax 2の値を取得して判定を行ってもよい。

【0095】

まず、ステップＳ２０１において、制御装置４０の取得部４０１は、測定部２０から受信したデータに基づいて、第１及び第２測定試料の光学的情報を取得する。次に、ステップＳ２０２において、算出部４０３は、取得部４０１が取得した第１測定試料の光学的情報から、記憶部４０２に記憶された凝固時間を算出するための式にしたがって、被検血漿の凝固時間(Clotting Time：以下、「ＣＴ」ともいう)を算出する。また、算出部４０３は、取得部４０１が取得した第２測定試料の光学的情報から、記憶部４０２に記憶された凝固波形の微分に関するパラメータを算出するための式にしたがって、混合血漿の|min 1|の値を算出する。好ましくは、混合血漿から調製された一の第２測定試料の光学的情報から、上記パラメータを算出する。算出部４０３は、取得部４０１が取得した光学的情報から凝固波形をさらに算出してもよい。

【0096】

ステップＳ２０３において、判定部４０４は、算出部４０３で算出されたＣＴと、所定の時間とを比較する。ここで、所定の時間は、記憶部４０２に予め記憶された正常血漿の凝固時間であってもよいし、正常血漿について被検血漿と同様に測定して算出された凝固時間であってもよい。ステップＳ２０３において、ＣＴが所定の時間よりも長いとき、処理はステップＳ２０４に進行する。一方、ＣＴが所定の時間よりも長くないとき(すなわち、ＣＴが所定の時間以下であるとき)、処理はステップＳ２０５に進行する。ステップＳ２０５において、判定部４０４は、被検血漿は凝固時間の延長が認められない血漿であるとの判定結果を出力部４０５に送信する。

【0097】

ステップＳ２０４において、判定部４０４は、算出部４０３で算出された|min 1|の値と、記憶部４０２に記憶された第１の閾値と比較する。ここで、|min 1|の値が第１の閾値よりも小さくないとき(すなわち、|min 1|の値が第１の閾値以上であるとき)、処理はステップＳ２０６に進行する。一方、|min 1|の値が第１の閾値よりも小さいとき、処理はステップＳ２０７に進行する。なお、ステップ２０６及び２０７については、それぞれ上記のステップ１０４及び１０５について述べたことと同様である。そして、判定部４０４は、判定結果を出力部４０５に送信する。ステップＳ２０８については、上記のステップ１０６について述べたことと同様である。

【0098】

図１０Ｃを参照して、凝固波形の微分に関するパラメータを２つ用いる場合の処理のフローを説明する。ここでは、測定試料からの光量に関する光学的情報から、|min 1|及び|min 2|の値を取得し、取得した値と、対応する所定の閾値とを比較して血液検体の判定を行なう場合を例として説明する。しかし、本実施形態は、この例のみに限定されるものではない。この例においては、|min 1|及び|min 2|のいずれか一方に代えて、max 2の値を取得して判定を行ってもよい。また、この例においては、被検血漿の凝固時間と所定の時間とを比較する工程をさらに含み、凝固時間が所定の時間より長い場合に、取得したパラメータの値と、対応する所定の閾値とを比較して血液検体の判定を行ってもよい。また、凝固時間が所定の時間以下である場合に、被検血漿は凝固時間の延長が認められない検体であるとの判定結果を出力してもよい。

【0099】

まず、ステップＳ３０１において、制御装置４０の取得部４０１は、測定部２０から受信したデータに基づいて、光学的情報を取得する。次に、ステップＳ３０２において、算出部４０３は、取得部４０１が取得した光学的情報から、記憶部４０２に記憶された凝固波形の微分に関するパラメータを算出するための式にしたがって、|min 1|及び|min 2|の値を算出する。算出部４０３は、取得部４０１が取得した光学的情報から凝固時間及び凝固波形をさらに算出してもよい。

【0100】

ステップＳ３０３において、判定部４０４は、算出部４０３で算出された|min 1|の値と、記憶部４０２に記憶された第１の閾値とを比較する。ここで、|min 1|の値が第１の閾値よりも小さいとき、処理はステップＳ３０４に進行する。ステップＳ３０４において、判定部４０４は、算出部４０３で算出された|min 2|の値と、記憶部４０２に記憶された第２の閾値と比較する。ここで、|min 2|の値が第２の閾値よりも小さいとき、処理はステップＳ３０５に進行する。ステップＳ３０５において、判定部４０４は、被検血漿が、凝固因子の欠損以外の凝固異常の原因を有する血漿である疑いがあるとの判定結果を出力部４０５に送信する。

【0101】

一方、ステップＳ３０３において、|min 1|の値が第１の閾値よりも小さくないとき(すなわち、|min 1|の値が第１の閾値以上であるとき)、処理はステップＳ３０６に進行する。また、ステップＳ３０４において、|min 2|の値が第２の閾値よりも小さくないとき(すなわち、|min 2|の値が第２の閾値以上であるとき)、処理はステップＳ３０６に進行する。ステップＳ３０６において、判定部４０４は、被検血漿が、凝固因子を欠損した血漿である疑いがあるとの判定結果を出力部４０５に送信する。なお、本実施形態においては、ステップＳ３０３とステップＳ３０４との処理は順番を任意に入れ替えることができる。ステップＳ３０７については、上記のステップ１０６について述べたことと同様である。

【0102】

図１０Ｄを参照して、凝固波形の微分に関するパラメータを３つ用いる場合の処理のフローを説明する。ここでは、測定試料からの光量に関する光学的情報から、|min 1|、|min 2|及びmax 2の値を取得し、取得した値と、対応する所定の閾値とを比較して血液検体の判定を行なう場合を例として説明する。しかし、本実施形態は、この例のみに限定されるものではない。この例においては、被検血漿の凝固時間と所定の時間とを比較する工程をさらに含み、凝固時間が所定の時間より長い場合に、取得したパラメータの値と、対応する所定の閾値とを比較して血液検体の判定を行ってもよい。また、凝固時間が所定の時間以下である場合に、被検血漿は凝固時間の延長が認められない検体であるとの判定結果を出力してもよい。

【0103】

まず、ステップＳ４０１において、制御装置４０の取得部４０１は、測定部２０から受信したデータに基づいて、光学的情報を取得する。次に、ステップＳ４０２において、算出部４０３は、取得部４０１が取得した光学的情報から、記憶部４０２に記憶された凝固波形の微分に関するパラメータを算出するための式にしたがって、|min 1|、|min 2|及びmax 2の値を算出する。算出部４０３は、取得部４０１が取得した光学的情報から凝固時間及び凝固波形をさらに算出してもよい。

【0104】

ステップＳ４０３において、判定部４０４は、算出部４０３で算出された|min 1|の値と、記憶部４０２に記憶された第１の閾値とを比較する。ここで、|min 1|の値が第１の閾値よりも小さいとき、処理はステップＳ４０４に進行する。ステップＳ４０４において、判定部４０４は、算出部４０３で算出された|min 2|の値と、記憶部４０２に記憶された第２の閾値と比較する。ここで、|min 2|の値が第２の閾値よりも小さいとき、処理はステップＳ４０５に進行する。ステップＳ４０５において、判定部４０４は、算出部４０３で算出されたmax 2の値と、記憶部４０２に記憶された第３の閾値と比較する。ここで、max 2の値が第３の閾値よりも小さいとき、処理はステップＳ４０６に進行する。ステップＳ４０６において、判定部４０４は、被検血漿が、凝固因子の欠損以外の凝固異常の原因を有する血漿である疑いがあるとの判定結果を出力部４０５に送信する。

【0105】

一方、ステップＳ４０３において、|min 1|の値が第１の閾値よりも小さくないとき(すなわち、|min 1|の値が第１の閾値以上であるとき)、処理はステップＳ４０７に進行する。また、ステップＳ４０４において、|min 2|の値が第２の閾値よりも小さくないとき(すなわち、|min 2|の値が第２の閾値以上であるとき)、処理はステップＳ４０７に進行する。また、ステップＳ４０５において、max 2の値が第３の閾値よりも小さくないとき(すなわち、max 2の値が第３の閾値以上であるとき)、処理はステップＳ４０７に進行する。ステップＳ４０７において、判定部４０４は、被検血漿が、凝固因子を欠損した血漿である疑いがあるとの判定結果を出力部４０５に送信する。なお、本実施形態においては、ステップＳ４０３と、ステップＳ４０４と、ステップＳ４０５との処理は順番を任意に入れ替えることができる。ステップＳ４０８については、上記のステップ１０６について述べたことと同様である。

【0106】

図１０Ｅを参照して、被検血漿が、凝固因子の欠損以外の凝固異常の原因を有する血漿である疑いがあると判定されたときに、取得したパラメータの値に基づいて、被検血漿が、ＬＡを含む血漿の疑いがあるか、又は凝固因子インヒビターを含む血漿の疑いがあるかをさらに判定する処理のフローを説明する。ここでは、|min 1|の値が第１の閾値よりも小さいとき、さらに、|min 1|の値と第４の閾値とを比較して、比較結果に基づいて、被検血漿が、ＬＡを含む血漿の疑いがあるか、又は凝固因子インヒビターを含む血漿の疑いがあるかを判定する場合を例として説明する。しかし、本実施形態は、この例のみに限定されるものではない。この例においては、|min 1|に代えて、|min 2|又はmax 2の値を取得して判定を行ってもよい。また、複数のパラメータを用いて、血液検体の判定を行ってもよい。さらに、被検血漿の凝固時間と所定の時間とを比較する工程をさらに含み、凝固時間が所定の時間より長い場合に、取得したパラメータの値と、対応する所定の閾値とを比較して血液検体の判定を行ってもよい。また、凝固時間が所定の時間以下である場合に、被検血漿は凝固時間の延長が認められない検体であるとの判定結果を出力してもよい。

【0107】

図１０Ｅに示されるステップ５０１～５０４については、図１０Ａのステップ１０１～１０４について述べたことと同様である。ステップ５０３において、|min 1|の値が第１の閾値よりも小さいとき、処理はステップＳ５０５に進行する。ステップＳ５０５において、判定部４０４は、|min 1|の値と、記憶部４０２に記憶された第４の閾値とを用いて、被検血漿が、ＬＡを含む血漿である疑いがあるか又は凝固因子インヒビターを含む血漿の疑いがあるかを判定する。ここで、|min 1|の値が第４の閾値よりも小さくないとき(すなわち、|min 1|の値が第４の閾値以上であるとき)、処理はステップＳ５０６に進行する。ステップＳ５０６において、判定部４０４は、被検血漿が、ＬＡを含む血漿である疑いがあるとの判定結果を出力部４０５に送信する。一方、|min 1|の値が第４の閾値よりも小さいとき、処理はステップＳ５０７に進行する。ステップＳ５０７において、判定部４０４は、被検血漿が、凝固因子インヒビターを含む血漿である疑いがあるとの判定結果を出力部４０５に送信する。なお、|min 2|の値を用いる場合は|min 2|の値と第５の閾値とを比較し、max 2の値を用いる場合はmax 2の値と第６の閾値とを比較する。ステップＳ５０８については、上記のステップ１０６について述べたことと同様である。

【0108】

分析結果を表示する画面の一例として、図１１を参照して、プロトロンビン時間測定試薬を用いて混合血漿の凝固過程を分析した結果を表示する画面について説明する。画面Ｄ１は、検体番号を表示する領域Ｄ１１と、測定項目名を表示する領域Ｄ１２と、詳細画面を表示させるためのボタンＤ１３と、測定日時を表示するための領域Ｄ１４と、測定結果を表示する領域Ｄ１５と、解析情報を表示する領域Ｄ１６と、凝固波形及びそれを微分したグラフを表示する領域Ｄ１７を含む。

【0109】

領域Ｄ１５には、測定項目と測定値が表示される。領域Ｄ１５において、「PT sec」は、プロトロンビン時間である。領域Ｄ１５には、プロトロンビン時間(PT sec)の他、プロトロンビン時間を所定のパラメータ値に変換した値(PT %、PT R、PT INR)が表示されてもよい。

【0110】

領域Ｄ１６には、解析項目と参考情報が表示される。領域Ｄ１６において、「Index」は、判定に用いた凝固波形の微分に関するパラメータの値である。「Cutoff(参考)」は、判定に用いたパラメータ値に対応する所定の閾値である。「判定(参考)」は、血液検体分析装置による判定結果であり、被検血漿が、凝固因子を欠損した血漿である疑いがあることを示す。なお、疾患の診断は、この判定結果だけでなく、他の検査結果などの情報も考慮して行われることが望ましい。よって、本実施形態に係る血液検体分析装置による判定結果及び所定の閾値が参考情報であることを示すために、「(参考)」と表示している。図１１では、判定結果を「凝固因子欠損の疑い」という文字で表示しているが、フラグなどの記号や図形標識で表示してもよい。あるいは、判定結果を音声で出力してもよい。

【0111】

以下に、本発明を実施例により詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されない。

【実施例】

【0112】

実施例1
凝固波形の微分に関するパラメータに基づいて、凝固因子欠損検体、ＬＡ陽性検体及び凝固因子インヒビター陽性検体を鑑別することが可能であるか否かを検討した。

【0113】

(１)試薬
凝固時間測定試薬として、APTT試薬のトロンボチェックAPTT-SLA(シスメックス株式会社)及びトロンボチェック20 mM塩化カルシウム液(シスメックス株式会社)を用いた。また、正常血漿として、クロスミキシングテスト用正常血漿のCRYOcheck Pooled Normal Plasma(Precision BioLogic Inc社)を用い、精度管理用コントロール試料として、コアグトロールIX及びコアグトロールIIX(シスメックス株式会社)を用いた。

【0114】

(２)被検血漿
被検血漿として、第Ｖ因子欠損患者の血漿(３例)、第VIII因子欠損患者の血漿(４例)、ＬＡ陽性患者の血漿(８例)及び凝固第VIII因子インヒビター陽性患者の血漿(５例)を用いた。

【0115】

(３)測定
試料の調製及び測定には、全自動血液凝固測定装置CS-2400(シスメックス株式会社)を用いた。上記の各被検血漿と正常血漿とを５：５の割合で混合して、被検血漿の比率が50％(v/v)の混合血漿を合計で50μLとなるように反応キュベットに分注し、37℃で１分間加温した。ここに、予め37℃で加温した上記のAPTT試薬(50μL)を添加して、37℃で３分間反応させた。そして、20 mM塩化カルシウム液(50μL)を混合して、透過度を420秒間連続的に測定した。また、正常血漿についても同様に測定した。

【0116】

(４)解析結果
得られた透過度の経時的変化に基づいて、凝固波形の微分に関するパラメータとして|min 1|、|min 2|及びmax 2を算出した。正常血漿の|min 1|、|min 2|及びmax 2の値に対する各被検血漿の|min 1|、|min 2|及びmax 2の割合(％)を算出し、グラフにプロットした。得られたグラフを図１２Ａ～Ｃに示す。

【0117】

図１２Ａ～Ｃに示されるように、|min 1|、|min 2|及びmax 2のいずれについても、凝固因子欠損検体群の方が、ＬＡ陽性検体群及び凝固因子インヒビター陽性検体群よりも高いことがわかる。|min 1|、|min 2|及びmax 2のいずれについても、凝固因子欠損検体群の最低値と、ＬＡ陽性検体群及び凝固因子インヒビター陽性検体群の最高値との間には隔たりが認められたことから、各パラメータについて、凝固因子欠損検体と、ＬＡ陽性検体及び凝固因子インヒビター陽性検体とを切り分ける閾値の設定が可能であることが示唆される。さらに、|min 1|、|min 2|及びmax 2のいずれについても、ＬＡ陽性検体群の方が、凝固因子インヒビター陽性検体群よりも高いことがわかる。これらのことから、凝固波形の微分に関するパラメータに基づいて、凝固因子欠損検体、ＬＡ陽性検体及び凝固因子インヒビター陽性検体を定量的に鑑別できることが示された。これらのパラメータは定量的指標であるので、熟練者でなくても検体の明確な判定が可能と考えられる。

【0118】

比較例： クロスミキシングテストによる検体の判定
この比較例では、凝固因子欠損検体、ＬＡ陽性検体及び凝固因子インヒビター陽性検体のそれぞれについて、クロスミキシングテストを行い、得られたグラフパターンから凝固異常の原因を鑑別することを試みた。

【0119】

(１)試薬及び検体
この参考例で用いた試薬、被検血漿、正常血漿及び精度管理用コントロール試料は、実施例１と同じである。

【0120】

(２)測定
即時型のグラフパターンを得るために、正常血漿と被検血漿とを９：１、８：２、５：５、２：８、及び１：９の各比率で混合して混合血漿を得た。そして、正常血漿、被検血漿及び調製した各混合血漿の凝固時間を測定した。なお、血漿の混合、測定試料の調製及び凝固時間の測定はCS-2400(シスメックス株式会社)により行った。また、遅延型のグラフパターンを得るために、測定では、正常血漿と被検血漿とを用手法により上記の比率で混合して混合血漿を得た。そして、正常血漿、被検血漿及び調製した各混合血漿を37℃で２時間インキュベートした。その後、測定試料の調製及び凝固時間の測定をCS-2400(シスメックス株式会社)により行った。各測定試料について得られた凝固時間を、正常血漿と被検血漿との混合比率をＸ軸とし、凝固時間をＹ軸とするグラフにプロットした。

【0121】

(３)解析結果
凝固因子欠損検体、ＬＡ陽性検体及び凝固因子インヒビター陽性検体のそれぞれについて、即時型及び遅延型のグラフパターンを図１３Ａ～Ｃに示した。図１３Ａ～Ｃに示されるように、凝固因子欠損検体は、即時型と遅延型とのグラフパターンの変化に基づいて、ＬＡ陽性検体及び凝固因子インヒビター陽性検体と鑑別可能であることがわかる。しかし、グラフパターンの変化に基づく鑑別は、定量性に乏しく、実験操作も煩雑である。図１３Ｂ及びＣに示されるように、ＬＡ陽性検体及び凝固因子インヒビター陽性検体のグラフパターンの変化は類似していた。よって、グラフパターンの変化による両者の鑑別は定性的評価にならざるを得ず、熟練者でない場合は判定が困難であることがわかる。

【符号の説明】

【0122】

１０ 血液検体分析装置
１１、１２ 試薬テーブル(試薬収容部)
２０ 測定部
２２ｇ、２２ｉ 光検出器(受光部)
２７ ランプユニット(光源)
３０ 検体搬送部
４０ 制御装置(制御部)
４１ 表示部
４２ 入力部
４３ コンピュータ本体
５０ 測定装置(測定試料調製部及び光学的情報取得部)

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6A】

【図6B】

【図6C】

【図6D】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10A】

【図10B】

【図10C】

【図10D】

【図10E】

【図11】

【図12A】

【図12B】

【図12C】

【図13A】

【図13B】

【図13C】