特許 7266588 肝脂肪を低減させるためのノルウルソデオキシコール酸の使用

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2023-04-20

(45)【発行日】2023-04-28

(54)【発明の名称】肝脂肪を低減させるためのノルウルソデオキシコール酸の使用

(51)【国際特許分類】

   A61K 31/575 20060101AFI20230421BHJP

   A61P 1/16 20060101ALI20230421BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20230421BHJP

   A61K 45/00 20060101ALI20230421BHJP

   A61K 31/4418 20060101ALI20230421BHJP

   A61K 31/58 20060101ALI20230421BHJP

   A61K 31/56 20060101ALI20230421BHJP

   A61K 31/573 20060101ALI20230421BHJP

【ＦＩ】

A61K31/575

A61P1/16

A61P43/00 105

A61K45/00

A61P43/00 121

A61K31/4418

A61K31/58

A61K31/56

A61K31/573

【請求項の数】 19

(21)【出願番号】P 2020517804

(86)(22)【出願日】2018-09-28

(65)【公表番号】

(43)【公表日】2020-12-03

(86)【国際出願番号】 EP2018076461

(87)【国際公開番号】W WO2019063790

(87)【国際公開日】2019-04-04

【審査請求日】2021-07-08

(31)【優先権主張番号】17193777.4

(32)【優先日】2017-09-28

(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP

(73)【特許権者】

【識別番号】509274005

【氏名又は名称】ドクトル ファルク ファルマ ゲーエムベーハー

(74)【代理人】

【識別番号】100077012

【弁理士】

【氏名又は名称】岩谷 龍

(72)【発明者】

【氏名】プレルス，マルクス

(72)【発明者】

【氏名】グラインワルト，ローラント

(72)【発明者】

【氏名】トラウナー，ミヒャエル

(72)【発明者】

【氏名】フィッケルト，ペーター

【審査官】松本 淳

(56)【参考文献】

【文献】特表２０１３－５４４２６７（ＪＰ，Ａ）

【文献】志田隆史 他，Controlled Attenuation Parameterの肝脂肪量測定による非アルコール性脂肪性肝疾患の非侵襲的診断法の有用性について，超音波検査技術，2015年，Vol.40, No.2，pp.167-173

【文献】EU Clinical Trials Register[online]，2014年，検索日：２０２２年６月２１日、URL:https://www.clinicaltrialsregister.eu/ctr-search/trial/2013-004605-38/AT

【文献】BERAZA, N. et al，Nor-ursodeoxycholic acid reverses hepatocyte-specific nemo-dependent steatohepatitis，Gut，2011年，Vol.60，pp.387-396

【文献】HALILBASIC, E. et al，Nor-Ursodeoxycholic Acid as a Novel Therapeutic Approach for Cholestatic and Metabolic Liver Diseases，Dig Dis，2017年03月，Vol.35，pp.288-292

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

Ａ６１Ｋ ３１／００－３３／４４

Ａ６１Ｐ １／００－４３／００

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

脂肪肝の治療のための医薬の製造における、ノルウルソデオキシコール酸（Ｎｏｒ－ＵＤＣＡ）の使用であって、該治療が、ヒト患者にＮｏｒ－ＵＤＣＡの有効量を投与することを含むこと、該ヒト患者の肝臓の脂肪率が１０％より高いこと、前記ヒト患者に投与されるＮｏｒ－ＵＤＣＡの用量が７５０ｍｇ／日～２，５００ｍｇ／日であること、該脂肪肝が、脂肪性肝炎まで進行していないこと、および前記患者が原発性硬化性胆管炎に罹患していないか、原発性硬化性胆管炎と診断されたことがないことを特徴とするＮｏｒ－ＵＤＣＡの使用。

【請求項2】

前記患者が中等度の脂肪沈着または重度の脂肪沈着を有することを特徴とする、請求項１に記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡの使用。

【請求項3】

前記患者のアラニントランスアミナーゼ（ＡＬＴ）の血清濃度が、正常上限（ＵＬＮ）の０．８倍～４倍未満であることを特徴とする、請求項1又は２に記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡの使用。

【請求項4】

前記治療により、前記ＡＬＴの血清濃度がＵＬＮ未満に低下することを特徴とする、請求項１～３のいずれか１項に記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡの使用。

【請求項5】

前記治療により、前記ＡＬＴの血清濃度がＵＬＮの０．９倍以下に低下することを特徴とする、請求項１～４のいずれか１項に記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡの使用。

【請求項6】

前記治療により、前記ＡＬＴの血清濃度がＵＬＮの０．８倍以下に低下することを特徴とする、請求項１～５のいずれか１項に記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡの使用。

【請求項7】

前記患者のアスパラギン酸トランスアミナーゼ（ＡＳＴ）の血清濃度が、正常上限（ＵＬＮ）の４倍未満であることを特徴とする、請求項１～６のいずれか１項に記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡの使用。

【請求項8】

前記患者の肝臓の脂肪率が２０％より高いことを特徴とする、請求項１～７のいずれか１項に記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡの使用。

【請求項9】

前記治療により、前記患者の肝臓の脂肪率が少なくとも１０％低下することを特徴とする、請求項１～８のいずれか１項に記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡの使用。

【請求項10】

前記治療により、前記患者の肝臓の脂肪率が少なくとも２パーセントポイント低下することを特徴とする、請求項１～９のいずれか１項に記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡの使用。

【請求項11】

前記患者のボディマスインデックス（ＢＭＩ）が２５ｋｇ／ｍ^２を超えることを特徴とする、請求項１～１０のいずれか１項に記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡの使用。

【請求項12】

前記患者が肝線維症を有することを特徴とする、請求項１～１１のいずれか１項に記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡの使用。

【請求項13】

前記患者に投与されるＮｏｒ－ＵＤＣＡの用量が１，０００ｍｇ／日～１，５００ｍｇ／日であることを特徴とする、請求項１～１２のいずれか１項に記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡの使用。

【請求項14】

前記患者に投与されるＮｏｒ－ＵＤＣＡの用量が１，５００ｍｇ／日であることを特徴とする、請求項１～１３のいずれか１項に記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡの使用。

【請求項15】

前記患者に１日１回投与されることを特徴とする、請求項１～１４のいずれか１項に記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡの使用。

【請求項16】

前記患者に経口投与されることを特徴とする、請求項１～１５のいずれか１項に記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡの使用。

【請求項17】

前記治療が、Ｎｏｒ－ＵＤＣＡ以外の活性物質を投与することをさらに含むこと、ならびにＮｏｒ－ＵＤＣＡ以外の前記活性物質が、抗線維化剤、抗炎症剤、免疫調節剤、生物製剤、コレステロール低下物質、ロイコトリエンアンタゴニストおよびそれらの組み合わせからなる群から選択されることを特徴とする、請求項１～１６のいずれか１項に記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡの使用。

【請求項18】

Ｎｏｒ－ＵＤＣＡ以外の前記活性物質が、ピルフェニドン、フィブラート類、ブデソニド、フルチカゾン、フルニソリド、シクレソニド、モメタゾン、ベクロメタゾンおよびこれらの組み合わせからなる群から選択されることを特徴とする、請求項１７に記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡの使用。

【請求項19】

前記Ｎｏｒ－ＵＤＣＡが、粉末Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）において１１．９±０．２°、１４．４±０．２°、１５．３±０．２°、１５．８±０．２°および１６．６±０．２°（２θ）にピークを有する多形体であることを特徴とする、請求項１～１８のいずれか１項に記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡの使用。

【発明の詳細な説明】

【背景技術】

【0001】

脂肪肝とは、脂肪沈着の過程により肝細胞に過剰に脂肪が蓄積した病態（すなわち、細胞内の脂質の異常貯留）である。脂肪肝には複数の原因、例えば、アルコールの過剰摂取、薬物毒性、代謝障害、栄養上の理由などが考えられる。

【0002】

脂肪肝は肝臓の進行性の炎症（肝炎）へと移行する可能性があり、この肝炎は脂肪性肝炎と称される。このようなより重篤な病態は、アルコール性脂肪性肝炎または非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）と称される場合もある。ＮＡＳＨ患者は、さらに重篤化すると、肝線維症や最終的には肝硬変を発症する可能性もある。

【0003】

現在、脂肪肝の治療管理の選択肢は限られている。主なものとしては、減量や運動量の増加などの食習慣の変化や生活様式の改変が推奨されている。脂肪肝からＮＡＳＨへの進行を予防する維持療法で使用できる安全で有効な薬はない。様々な薬に対する研究がこれまで行われてきており、現在も進行中である。ピオグリタゾンでは好ましい効果が確認されており、脂肪沈着を改善することが示唆されている。

【0004】

天然の胆汁酸であるウルソデオキシコール酸（ＵＤＣＡ）は、ヒトの胆汁や血液にわずかに存在しており、肝疾患の治療薬として広く用いられている。ＵＤＣＡの最も重要な適応疾患領域の１つは、胆石の溶解や原発性胆汁性肝硬変（ＰＢＣ）の治療である。ＵＤＣＡは、細胞保護作用、膜安定化作用や抗アポトーシス作用を有する。

【0005】

ＵＤＣＡの誘導体である２４－ノルウルソデオキシコール酸（Ｎｏｒ－ＵＤＣＡ）は、物理化学的性質が改変されたＵＤＣＡ類似化合物である。Ｎｏｒ－ＵＤＣＡとＵＤＣＡは構造上類似しているが、哺乳動物に投与した際に異なる特性を示す。Ｎｏｒ－ＵＤＣＡは、ＵＤＣＡとは異なり、アシル補酵素Ａシンセターゼの基質としての適性が低く、タウリンやグリシンによるＮ－アシルアミド化をほとんど受けない。ｉｎ ｖｉｖｏ実験により、胆汁うっ滞性肝疾患の動物モデルでＮｏｒ－ＵＤＣＡの有効性が示されている（国際公開第２００６／１１９８０３号Ａ１）。また、国際公開第２００６／１１９８０３号Ａ１では、Ｎｏｒ－ＵＤＣＡの抗炎症活性が報告されており、それゆえに、アルコール性脂肪性肝炎、非アルコール性脂肪性肝炎およびウイルス性肝炎を含む様々な肝炎を治療するためのＮｏｒ－ＵＤＣＡの使用が請求項に記載されている。

【0006】

Ｈａｌｉｂａｓｉｃら（２０１７） Ｄｉｇ Ｄｉｓ ３５：２８８－２９２では、胆汁うっ滞性肝障害および代謝性肝障害の新規の治療法としてのＮｏｒ－ＵＤＣＡの最近の進展について概説されており、特に原発性硬化性胆管炎（ＰＳＣ）に関して重点的に記載されている。

【0007】

Ｓｔｅｉｎａｃｈｅｒら（２０１７） Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ ｖｏｌ． ６６； Ｓ９５－Ｓ３３２； Ａｂｓｔｒａｃｔ ＴＨＵ－３８５では、肥満症および脂肪過多症のマウスモデルにおいて、Ｎｏｒ－ＵＤＣＡにより肝損傷および代謝状態が改善されることが報告されている。この文献には、ＡＬＴ値が大幅に低下するとの記載がある。しかし、使用したマウスモデルは、通常、ＡＬＴ値が非常に高いことから、実際にＡＬＴ値が正常上限（ＵＬＮ）以下のレベルまで低下した可能性は低いと考えられる。

【0008】

Ｓｔｅｉｎａｃｈｅｒら（２０１５） Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ ｖｏｌ． ６２ ｎｕｍｂｅｒ １ （Ｓｕｐｐｌ．） ｐａｇｅ ６８９Ａ， Ａｂｓｔｒａｃｔ ９７７では、Ｎｏｒ－ＵＤＣＡにより、肝損傷が抑制され、肥満症および脂肪過多症のマウスモデルにおいてグルコース感受性が改善されることが報告されている。使用したマウスモデルは、通常、ＡＬＴ値が非常に高い。この文献には、ＡＬＴ値が大幅に低下するとの記載がある。しかし、使用したマウスモデルでは、通常、ＡＬＴ値が非常に高いことから、実際にＡＬＴ値が正常上限（ＵＬＮ）以下のレベルまで低下した可能性は低いと考えられる。

【0009】

Ｂｅｌｏｎｏｖｓｋａｙａら（２０１３） Ｅｋｓｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ’ｎａｙａ Ｉ Ｋｌｉｎｉｃｈｅｓｋａｙａ Ｆａｒｍａｋｏｌｏｇｉｙａ ｖｏｌ．７６， ｎｏ． １：２５－２９では、実験的なアルコール性脂肪性肝炎における新規のＵＤＣＡ誘導体の予防的投与に関する研究が報告されている。この文献では、肝臓のトリグリセリドの蓄積を予防する効果は、ＵＤＣＡよりもＮｏｒ－ＵＤＣＡの方がはるかに高いことが示されている。この文献は、脂肪過多症の治療に関するものではなく、実験的なアルコール性脂肪性肝炎の発症に対するＵＤＣＡ誘導体の予防効果に関するものである。

【0010】

Ｒａｔｚｉｕ （２０１２） Ｃｌｉｎｉｃｓ ａｎｄ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ｉｎ Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ ｖｏｌ．１５， ｎｏ．２： Ｓ４１－Ｓ４５では、ＵＤＣＡを用いたＮＡＳＨの治療について論じられている。Ｒａｔｚｉｕらは、新規のＵＤＣＡ誘導体の前臨床モデルにおける有効性が期待できることに加えて、この新規のＵＤＣＡ誘導体を臨床試験で検証する価値がありそうであることについても言及している。

【0011】

脂肪性肝炎まで進行していない脂肪肝に対する治療的処置が求められている。

【発明の概要】

【課題を解決するための手段】

【0012】

本願の発明者らは、驚くべきことに、Ｎｏｒ－ＵＤＣＡの投与により、肝脂肪を有意に低減させることができることを見出した。したがって、Ｎｏｒ－ＵＤＣＡは、脂肪肝を患う患者の肝臓の脂肪率を減少させるのに適している。特に、この効果は、炎症の徴候または肝炎が見られない患者にも認められる。また、５００ｍｇ／日より高い用量のＮｏｒ－ＵＤＣＡを投与した場合に、治療として最も有効であることも分かった。さらに驚くべきことに、アラニントランスアミナーゼ（ＡＬＴ）値が正常上限（ＵＬＮ）未満である軽度の脂肪過多症の患者でも、この処置による予防効果による恩恵が受けられることも分かった。また、本発明者らは、Ｎｏｒ－ＵＤＣＡが、（アポトーシスのマーカーまたはネクローシスのマーカーとして公知である）サイトケラチン１８フラグメントの血清濃度を低下させる作用があることを見出した。したがって、本発明は、以下の項［１］～［６５］に記載の内容に関する。

【0013】

項［１］
脂肪肝の治療に使用するためのノルウルソデオキシコール酸（Ｎｏｒ－ＵＤＣＡ）であって、該治療が、ヒト患者にＮｏｒ－ＵＤＣＡの有効量を投与することを含むこと、および該ヒト患者の肝臓の脂肪率が１０％より高いことを特徴とするＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［２］
脂肪肝の治療に使用するためのＮｏｒ－ＵＤＣＡであって、該治療が、ヒト患者にＮｏｒ－ＵＤＣＡの有効量を投与することを含むことを特徴とするＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［３］
前記患者が中等度の脂肪肝を有することを特徴とする、項［１］または［２］に記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［４］
前記患者が重度の脂肪肝を有することを特徴とする、項［１］または［２］に記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［５］
前記患者のアラニントランスアミナーゼ（ＡＬＴ）の血清濃度が、正常上限（ＵＬＮ）の４倍未満であり、例えば、ＵＬＮの０．８倍～４倍未満であることを特徴とする、先行する項のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［６］
前記患者のＡＬＴの血清濃度が、ＵＬＮの３倍未満であり、例えば、ＵＬＮの０．８倍～３倍未満であることを特徴とする、先行する項のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［７］
前記患者のＡＬＴの血清濃度が、ＵＬＮの２倍未満であり、例えば、ＵＬＮの０．８倍～２倍未満であることを特徴とする、先行する項のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［８］
前記患者のＡＬＴの血清濃度が、ＵＬＮ以下であり、例えば、ＵＬＮの０．８倍～１倍であることを特徴とする、先行する項のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［９］
前記患者のアスパラギン酸トランスアミナーゼ（ＡＳＴ）の血清濃度が、ＵＬＮの４倍未満であることを特徴とする、先行する項のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［１０］
前記患者のＡＳＴの血清濃度が、ＵＬＮの３倍未満であることを特徴とする、先行する項のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［１１］
前記患者のＡＳＴの血清濃度が、ＵＬＮの２倍未満であることを特徴とする、先行する項のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［１２］
前記患者のＡＳＴの血清濃度が、ＵＬＮ以下であることを特徴とする、先行する項のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［１３］
前記患者の肝臓の脂肪率が少なくとも１２％であり、例えば、１２％～５０％であることを特徴とする、先行する項のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［１４］
前記患者の肝臓の脂肪率が少なくとも１５％であり、例えば、１５％～４０％であることを特徴とする、先行する項のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［１５］
前記患者の肝臓の脂肪率が少なくとも２０％であり、例えば、２０％～３０％であることを特徴とする、先行する項のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［１６］
前記肝臓の脂肪率が磁気共鳴画像法または磁気共鳴分光法（ＭＲＳ）で測定されることを特徴とする、先行する項のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［１７］
前記治療により、前記患者の肝臓の脂肪率が少なくとも１パーセントポイント低下することを特徴とする、先行する項のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［１８］
前記治療により、前記患者の肝臓の脂肪率が少なくとも２パーセントポイント低下することを特徴とする、先行する項のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［１９］
前記治療により、前記患者の肝臓の脂肪率が少なくとも３パーセントポイント低下することを特徴とする、先行する項のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［２０］
前記治療により、前記患者の肝臓の脂肪率が少なくとも４パーセントポイント低下することを特徴とする、先行する項のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［２１］
前記治療により、前記患者の肝臓の脂肪率が少なくとも５パーセントポイント低下することを特徴とする、先行する項のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［２２］
前記患者の肝臓の脂肪率の低下が１２週間以内に生じることを特徴とする、項１７～２１のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［２３］
前記患者の肝臓の脂肪率が磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）で測定されることを特徴とする、先行する項のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［２４］
前記患者のボディマスインデックス（ＢＭＩ）が２５ｋｇ／ｍ^２を超えることを特徴とする、先行する項のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［２５］
前記患者のボディマスインデックス（ＢＭＩ）が２６ｋｇ／ｍ^２を超えることを特徴とする、先行する項のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［２６］
前記患者のボディマスインデックス（ＢＭＩ）が２７ｋｇ／ｍ^２を超えることを特徴とする、先行する項のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［２７］
前記患者のボディマスインデックス（ＢＭＩ）が２８ｋｇ／ｍ^２を超えることを特徴とする、先行する項のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［２８］
前記患者のボディマスインデックス（ＢＭＩ）が２９ｋｇ／ｍ^２を超えることを特徴とする、先行する項のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［２９］
前記患者のボディマスインデックス（ＢＭＩ）が３０ｋｇ／ｍ^２を超えることを特徴とする、先行する項のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［３０］
前記患者が肝線維症を有することを特徴とする、先行する項のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［３１］
前記患者の肝臓が炎症の徴候を示していないこと、および／または前記患者が肝炎を有していないことを特徴とする、先行する項のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［３２］
前記患者に投与されるＮｏｒ－ＵＤＣＡの用量が７５０ｍｇ／日～２，５００ｍｇ／日であることを特徴とする、先行する項のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［３３］
前記患者に投与されるＮｏｒ－ＵＤＣＡの用量が１，０００ｍｇ／日～２，０００ｍｇ／日であり、好ましくは１，２５０ｍｇ／日～１，７５０ｍｇ／日、最も好ましくは約１，５００ｍｇ／日であることを特徴とする、先行する項のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［３４］
前記患者に１日１回投与されることを特徴とする、先行する項のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［３５］
前記治療が、Ｎｏｒ－ＵＤＣＡ以外の活性物質を投与することをさらに含むこと、ならびにＮｏｒ－ＵＤＣＡ以外の前記活性物質が、抗線維化剤、抗炎症剤、免疫調節剤、生物製剤、コレステロール低下物質、ロイコトリエンアンタゴニスト、ＰＰＡＲα／δアゴニスト、ＣＣＲ２／５阻害剤、ＡＳＢＴ阻害剤およびそれらの組み合わせからなる群から選択されることを特徴とする、先行する項のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［３６］
Ｎｏｒ－ＵＤＣＡ以外の前記活性物質が、ピルフェニドン、フィブラート類、ＦＸＲアゴニストおよびそれらの組み合わせからなる群から選択される抗線維化剤であることを特徴とする、項［３５］に記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［３７］
Ｎｏｒ－ＵＤＣＡ以外の前記活性物質が、非ステロイド系抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）、コルチコステロイドおよびそれらの組み合わせからなる群から選択される抗炎症剤であることを特徴とする、項［３５］に記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［３８］
前記ＮＳＡＩＤが、アセチルサリチル酸、セレコキシブ、デクスケトプロフェン、ジクロフェナク、ジフルニサル、エトドラク、エトリコキシブ、フェノプロフェン、フィロコキシブ、フルルビプロフェン、イブプロフェン、インドメタシン、ケトプロフェン、ケトロラック、リコフェロン、ロルノキシカム、ロキソプロフェン、ルミラコキシブ、メクロフェナム酸、メフェナム酸、メロキシカム、ナブメトン、ナプロキセン、ニメスリド、オキサプロジン、パレコキシブ、ピロキシカム、ロフェコキシブ、サルサラート、スリンダク、テノキシカム、トルフェナム酸、バルデコキシブおよびこれらの組み合わせからなる群から選択されることを特徴とする、項［３７］に記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［３９］
前記コルチコステロイドが、ブデソニド、フルチカゾン、フルニソリド、シクレソニド、モメタゾン、ベクロメタゾンおよびこれらの組み合わせからなる群から選択されることを特徴とする、項［３７］に記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［４０］
Ｎｏｒ－ＵＤＣＡ以外の前記活性物質が、アザチオプリン、６－メルカプトプリン、シクロスポリンＡ、タクロリムス、メトトレキサートおよびこれらの組み合わせからなる群から選択される免疫調節剤である、項［３５］に記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［４１］
Ｎｏｒ－ＵＤＣＡ以外の前記活性物質が、スタチン類、コレステロール吸収阻害剤（例えば、エゼチミブ）、金属イオン封鎖剤、ナイアシンおよびそれらの組み合わせからなる群から選択されるコレステロール低下物質である、項［３５］に記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［４２］
前記スタチンが、アトルバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、ピタバスタチン、プラバスタチン、ロスバスタチン、シンバスタチンおよびこれらの組み合わせからなる群から選択されることを特徴とする、項［４１］に記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［４３］
Ｎｏｒ－ＵＤＣＡ以外の前記活性物質が、ＴＮＦ－αアンタゴニスト、接着分子アンタゴニスト（例えば、ベドリズマブ、エトロリズマブ）、ＪＡＫ阻害剤（例えば、トファシチニブ）およびそれらの組み合わせからなる群から選択される生物製剤である、項［３５］に記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［４４］
Ｎｏｒ－ＵＤＣＡ以外の前記活性物質が、アダリムマブ、インフリキシマブ、ゴリムマブ、エタネルセプト、セルトリズマブおよびこれらの組み合わせからなる群から選択されるＴＮＦ－αアンタゴニストである、項［３５］に記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［４５］
Ｎｏｒ－ＵＤＣＡ以外の前記活性物質が、モンテルカスト、ザフィルルカスト、メクロフェナム酸塩、ジロイトンおよびこれらの組み合わせからなる群から選択されるロイコトリエンアンタゴニストである、項［３５］に記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［４６］
前記ヒト患者に経口投与されることを特徴とする、先行する項のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［４７］
前記ヒト患者がさらに２型糖尿病に罹患していることを特徴とする、先行する項のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［４８］
前記ヒト患者がさらに高血圧症に罹患していることを特徴とする、先行する項のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［４９］
前記ヒト患者がさらに高コレステロール血症に罹患していることを特徴とする、先行する項のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［５０］
前記ヒト患者がさらに高脂血症に罹患していることを特徴とする、先行する項のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［５１］
前記ヒト患者がさらに脂質異常症に罹患していることを特徴とする、先行する項のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［５２］
前記ヒト患者がさらに脾腫に罹患していることを特徴とする、先行する項のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［５３］
前記ヒト患者がさらに肥満症に罹患していることを特徴とする、先行する項のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［５４］
前記Ｎｏｒ－ＵＤＣＡが化学的に純粋な多形体であること、化学的不純物の総量が０．５ｗｔ％未満であること、および前記多形体の粒子の少なくとも６０％が粒径＜１０μｍであることを特徴とする、先行する項のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［５５］
前記多形体中の化学的不純物の総量が０．１ｗｔ％未満、好ましくは０．０５ｗｔ％未満であることを特徴とする、項［５４］に記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［５６］
前記多形体が熱力学的に安定であることを特徴とする、項［５４］または［５５］に記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［５７］
前記Ｎｏｒ－ＵＤＣＡが無水物であることを特徴とする、項［５４］～［５６］のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［５８］
前記多形体が、粉末Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）において１１．９±０．２°、１４．４±０．２°、１５．３±０．２°、１５．８±０．２°および１６．６±０．２°（２θ）にピークを有することを特徴とする、項［５４］～［５７］のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［５９］
前記多形体が、国際公開第２０１２／０７２６８９号Ａ１の図５に示されるＸＲＰＤパターンを有することを特徴とする、項［５４］～［５８］のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［６０］
前記多形体が、検出可能な量の非晶質Ｎｏｒ－ＵＤＣＡを含まないことを特徴とする、項［５４］～［５９］のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［６１］
前記多形体の体積加重平均粒径Ｄ５０が１０μｍ未満であることを特徴とする、項［５４］～［６０］のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［６２］
前記多形体の体積加重平均粒径Ｄ９５が３０μｍ未満であることを特徴とする、項［５４］～［６１］のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［６３］
前記ヒト患者が成人であり、好ましくは１８～７５歳の成人であることを特徴とする、先行する項のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡ。
項［６４］
項［１］～［５３］のいずれかまたは項［６３］に記載の脂肪肝の治療のための医薬の製造における、項［５４］～［６２］のいずれかに記載のＮｏｒ－ＵＤＣＡの使用。
項［６５］
肝脂肪の低減に使用するためのＮｏｒ－ＵＤＣＡであって、該使用が、先行する項のいずれかに記載の治療を含んでいてもよいことを特徴とする、Ｎｏｒ－ＵＤＣＡ。

【発明を実施するための形態】

【0014】

本発明は、肝臓の脂肪率が１０％より高い患者の脂肪肝を治療するためのＮｏｒ－ＵＤＣＡの使用に関する。前記治療は、ヒト患者に、有効量のＮｏｒ－ＵＤＣＡと、任意で少なくとも１つのさらなる活性物質を投与することを含む。

【0015】

Ｎｏｒ－ＵＤＣＡ
本明細書において、Ｎｏｒ－ＵＤＣＡは、２４－ノルウルソデオキシコール酸という化合物を表す。この化合物は以下の構造式を有する。

【化1】

【0016】

本発明において使用されるＮｏｒ－ＵＤＣＡおよびその調製は特に限定されない。好ましくは、Ｎｏｒ－ＵＤＣＡは、国際公開第２０１２／０７２６８９号Ａ１に記載の方法と同様にして調製される結晶の形態である。好ましい実施形態において、Ｎｏｒ－ＵＤＣＡまたはその薬学的に許容される塩の純粋な多形体が使用される。この多形体は、熱力学的に安定していることが好ましい。Ｎｏｒ－ＵＤＣＡまたはその薬学的に許容される塩の多形体は、通常、無水物である。すなわち、この多形体結晶は実質的に水を含まない。前記結晶中の水量は、結晶の全重量に対して、通常１％未満であり、好ましくは０．５％未満、より好ましくは０．１％未満である。前記多形体は、粉末Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）において、通常、１１．９±０．２°、１４．４±０．２°、１５．３±０．２°、１５．８±０．２°および１６．６±０．２°（２θ）にピークを有することを特徴とする。好ましくは、前記多形体が、国際公開第２０１２／０７２６８９号Ａ１の図５に示されるような「Ａ型」のＸＲＰＤパターンを有することを特徴とする。国際公開第２０１２／０７２６８９号Ａ１の開示内容は、本明細書において明示的に参照され、その開示内容の全体が本明細書に援用される。

【0017】

Ｎｏｒ－ＵＤＣＡの多形体は、単一の多形体であることが好ましく、すなわち、本質的に単一の多形体からなるか、多形体として純粋であるか、あるいはその両方であることが好ましい。前記多形体中の非晶質のＮｏｒ－ＵＤＣＡの量は、通常無視できる程度の量である。好ましくは、本発明の多形体中の非晶質のＮｏｒ－ＵＤＣＡは、例えば、ＸＲＰＤで検出できないレベルである。より好ましくは、前記多形体は、非晶質のＮｏｒ－ＵＤＣＡを実質的に含まない。最も好ましくは、本発明の多形体は、非晶質のＮｏｒ－ＵＤＣＡを全く含まない。本発明の多形体中のＡ型の多形体の量は、Ｎｏｒ－ＵＤＣＡの全重量に対して、好ましくは少なくとも９９％、より好ましくは少なくとも９９．５％、さらに好ましくは少なくとも９９．９％、最も好ましくは実質的に１００％である。

【0018】

前記多形体の粒径分布は、前記結晶の少なくとも６０％が１０μｍ未満の粒径を有する粒径分布であることが好ましい。前記多形体は、Ｄ５０が１０μｍ未満であることが好ましい。例えば、Ｄ５０は０．５μｍ～１０μｍの範囲であってもよく、好ましくは１μｍ～９μｍ、より好ましくは２μｍ～８μｍ、最も好ましくは３μｍ～７μｍである。前記多形体は、Ｄ９０が３０μｍ未満であることが好ましい。例えば、Ｄ９０は２μｍ～３０μｍの範囲であってもよく、好ましくは５μｍ～２５μｍ、より好ましくは８μｍ～２０μｍ、最も好ましくは１０μｍ～１８μｍである。前記多形体は、Ｄ９５が３０μｍ未満であることが好ましい。例えば、Ｄ９５は３μｍ～３０μｍの範囲であってもよく、好ましくは６μｍ～２８μｍ、より好ましくは９μｍ～２５μｍ、最も好ましくは１０μｍ～２０μｍである。

【0019】

Ｄ５０、Ｄ９０およびＤ９５はそれぞれ、体積基準で測定された粒径分布の中央値または第５０百分位数、第９０百分位数および第９５百分位数を示す。すなわち、Ｄ５０（Ｄ９０；Ｄ９５）が示す数値は、粒径分布において、この数値以下の粒径の粒子の累積体積が５０％（９０％；９５％）であることを意味する。

【0020】

粒径分布は、ヨーロッパ薬局方（Ｐｈ．Ｅｕｒ．）第６．６版 ２．９．３１節に準拠して測定することができる。好ましくはＭａｌｖｅｒｎ ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ社製Ｍａｓｔｅｒｓｉｚｅｒ ２０００を用いて測定する。その評価は、通常、フラウンホーファーモデルに基づいて行われる。

【0021】

脂肪肝の患者
治療対象となるヒト患者は脂肪肝を有する。脂肪肝は、肝細胞の少なくとも５％に細胞内脂肪が認められる状態と定義される。より具体的には、脂肪肝は、ヘマトキシリン・エオジンで染色した組織切片で肝細胞の少なくとも５％に大滴性の脂肪沈着が認められる病態として組織学的に定義することができる。脂肪沈着はその程度に基づいてグレード０～３で評価することができる：グレード０（正常）＝肝細胞の＜５％；グレード１（軽度）＝肝細胞の５％～３３％；グレード２（中等度）＝肝細胞の３４％～６６％；グレード３（重度）＝肝細胞の少なくとも６７％で肉眼的な脂肪沈着が特徴的に認められる（Ｋｌｅｉｎｅｒら， Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ ２００５， ４１， １３１３－１３２１）。脂肪肝は、肝生検の組織学的検査、超音波検査、ＣＴ検査または磁気共鳴画像法により診断することができる。

【0022】

この実施形態において、治療対象となる患者は、さらに、肝臓の脂肪率が１０％より高い患者である。肝臓の脂肪率は、後述する本明細書の実施例３に記載の方法と同様にして、ＭＲＩまたはＭＲＳにより測定することができる。好ましくは、肝臓の脂肪率はＭＲＩにより測定される。ＭＲＩ測定法は、Ｄｉｘｏｎ，Ｗ．Ｔ．， Ｒａｄｉｏｌｏｇｙ １９８４， １５３， １８９－１９４にも記載されている。特定の一実施形態において、肝臓の脂肪率は、ＭＲＩで測定されるプロトン密度脂肪率（ＰＤＦＦ）である。この方法により、固有の組織特性に基づき、客観的で定量的かつ標準化された、肝臓の脂肪のＭＲＩ測定を行うことができる（Ｈｉｎｅｓｅｔら，“Ｔ１ ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ， Ｔ２^＊ ｃｏｒｒｅｃｔｅｄ ｃｈｅｍｉｃａｌ ｓｈｉｆｔ ｂａｓｅｄ ｆａｔ－ｗａｔｅｒ ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｍｕｌｔｉ－ｐｅａｋ ｆａｔ ｓｐｅｃｔｒａｌ ｍｏｄｅｌｉｎｇ ｉｓ ａｎ ａｃｃｕｒａｔｅ ａｎｄ ｐｒｅｃｉｓｅ ｍｅａｓｕｒｅ ｏｆ ｈｅｐａｔｉｃ ｓｔｅａｔｏｓｉｓ”． Ｊ． Ｍａｇｎ． Ｒｅｓｏｎ． Ｉｍａｇｉｎｇ ２０１１， ３３， ８７３－８８１；およびＭｅｉｓａｍｙら， “Ｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｅｐａｔｉｃ ｓｔｅａｔｏｓｉｓ ｗｉｔｈ Ｔ１－ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ， Ｔ２^＊－ｃｏｒｒｅｃｔｅｄ ＭＲ ｉｍａｇｉｎｇ ｗｉｔｈ ｓｐｅｃｔｒａｌ ｍｏｄｅｌｉｎｇ ｏｆ ｆａｔ： ｂｌｉｎｄｅｄ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｗｉｔｈ ＭＲ ｓｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙ”． Ｒａｄｉｏｌｏｇｙ ２０１１， ２５８， ７６７－７７５．を参照のこと）。

【0023】

別の一実施形態において、前記患者の肝臓の脂肪率は、１２％より高い値、１５％より高い値、または２０％より高い値である。例えば、前記肝臓の脂肪率は、少なくとも１６％、少なくとも１７％、少なくとも１８％、少なくとも１９％、少なくとも２０％、少なくとも２１％、少なくとも２２％、少なくとも２３％、少なくとも２４％、または少なくとも２５％であってよい。

【0024】

別の一実施形態において、プロトン磁気共鳴分光法（^１Ｈ－ＭＲＳ）により測定される、治療対象の患者の肝臓のトリグリセリド含有量は、少なくとも６％、少なくとも８％、少なくとも１０％、少なくとも１２％、少なくとも１５％、または少なくとも２０％である。この方法により、肝臓の脂肪量を正確かつ再現性よく測定することができる（例えば、Ｂｏｈｔｅら， Ｅｕｒ． Ｒａｄｉｏｌ． ２０１１， ２１， ８７－９７を参照のこと）。

【0025】

本発明における治療対象の疾患は、アルコールの過剰摂取（男性：＞３０ｇ／日、女性：＞２０ｇ／日）、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、自己免疫性肝炎、鉄過剰症、薬物および毒物のいずれにも起因しない脂肪肝として定義される非アルコール性脂肪肝であることが好ましい。

【0026】

一実施形態において、本発明における治療対象のヒト患者は、アルコール性脂肪性肝炎または非アルコール性脂肪性肝炎に罹患していないか、アルコール性脂肪性肝炎または非アルコール性脂肪性肝炎と診断されたことがない患者である。肝臓で炎症が生じていないことは、肝生検の組織学的検査、または非侵襲的手法、例えばトランジェントエラストグラフィーにより確認することができる。

【0027】

別の一実施形態において、前記患者は、動脈硬化症に罹患していないか、動脈硬化症と診断されたことがない患者である。

【0028】

別の一実施形態において、本発明における治療対象のヒト患者は、原発性硬化性胆管炎（ＰＳＣ）、原発性胆汁性肝硬変（ＰＢＣ）、進行性家族性肝内胆汁うっ滞症、具体的には１型、２型および３型の進行性家族性肝内胆汁うっ滞症、嚢胞性線維症、薬物性胆汁うっ滞症、慢性ウイルス性肝炎（Ｂ型、Ｃ型、Ｄ型）、アルコール性脂肪性肝炎、非アルコール性脂肪性肝炎、自己免疫性肝炎、ヘモクロマトーシス、ウィルソン病ならびにα１－アンチトリプシン（ＡＴ）欠損症からなる群から選択される病態に罹患していないか、これらの病態と診断されたことがない患者である。これらの病態の診断は当業者には周知である。

【0029】

前記患者のＡＬＴの血清濃度は、通常、正常上限（ＵＬＮ）の４倍未満である。好ましくは、前記ＡＬＴの血清濃度は、ＵＬＮの３倍未満、ＵＬＮの２倍未満、またはＵＬＮ以下である。ＡＬＴのＵＬＮは、男性成人では５０Ｕ／Ｌ、女性成人では３５Ｕ／Ｌである。前記ＡＬＴの血清濃度は、治療の過程で、少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも１５％、または少なくとも２０％低下することが好ましい。さらに好ましくは、前記ＡＬＴの血清濃度は、治療の過程で、ＵＬＮ未満に低下する。さらに好ましい一実施形態において、前記ＡＬＴの血清濃度は、治療の過程で、ＵＬＮの０．８倍以下に低下する。一実施形態において、ＡＬＴの血清濃度がＵＬＮの１．５倍を超える値である治療対象の患者において、治療により、ＡＬＴの血清濃度がＵＬＮの１．５倍未満に低下する。別の一実施形態において、ＡＬＴの血清濃度がＵＬＮを超える値である治療対象の患者において、治療により、ＡＬＴの血清濃度がＵＬＮ未満に低下する。さらに別の一実施形態において、ＡＬＴの血清濃度がＵＬＮの０．８倍を超える値である治療対象の患者において、治療により、ＡＬＴの血清濃度がＵＬＮの０．８倍未満に低下する。

【0030】

本明細書において、「成人」という用語は、１８歳以上のヒトを表す。本明細書において、治療中、すなわち「治療の過程で」確認または達成された特定の効果について言及する場合、特別の定めがない限り、治療期間は１２週間である。

【0031】

前記患者のＡＳＴの血清濃度は、通常、正常上限（ＵＬＮ）の４倍未満である。好ましくは、前記ＡＳＴの血清濃度は、ＵＬＮの３倍未満、ＵＬＮの２倍未満、またはＵＬＮ以下である。ＡＳＴのＵＬＮは、男性成人では５０Ｕ／Ｌ、女性成人では３５Ｕ／Ｌである。前記ＡＳＴの血清濃度は、治療の過程で、ＵＬＮ未満に低下することが好ましい。前記ＡＳＴの血清濃度は、治療の過程で、少なくとも５％、少なくとも１０％、または少なくとも１５％低下することも好ましい。

【0032】

一実施形態において、前記患者のγ－グルタミルトランスペプチダーゼ（ＧＧＴ）の血清濃度はＵＬＮを超える値である。ＧＧＴのＵＬＮは、男性成人では７１Ｕ／Ｌ、女性成人では４２Ｕ／Ｌである。前記ＧＧＴの血清濃度は、治療の過程で、少なくとも５％、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、または少なくとも２５％低下することが好ましい。特定の一実施形態において、前記ＧＧＴの血清濃度は、治療の過程で、ＵＬＮ未満に低下する。

【0033】

前記患者のアルカリホスファターゼ（ＡＰ）の血清濃度は、通常、ＵＬＮ未満である。ＡＰのＵＬＮは、男性成人では１２９Ｕ／Ｌ、女性成人では１０４Ｕ／Ｌである。前記ＡＰの血清濃度は、治療の過程で上昇しないことが好ましい。

【0034】

一実施形態において、前記患者は重度の脂肪沈着を有する。別の一実施形態において、前記患者は中等度の脂肪沈着を有する。さらに別の一実施形態において、前記患者は軽度の脂肪沈着を有する。脂肪肝のグレード（軽度、中等度または重度）は先に記載した通りであり、肝生検の組織学的検査により確認することができる。

【0035】

本発明の治療の過程で、前記肝臓の脂肪率は、２５％未満、２０％未満、１８％未満、１６％、１４％未満、１２％未満、１０％未満、８％未満、または６％未満に低下し得る。別の一実施形態において、前記肝臓の脂肪率は、当該治療により、治療開始時の数値に対して少なくとも５％、少なくとも１０％、または少なくとも１５％低下する。別の一実施形態において、前記肝臓の脂肪率は、当該治療により、治療開始時のパーセント数値から少なくとも１パーセントポイント、少なくとも２パーセントポイント、少なくとも３パーセントポイント、少なくとも４パーセントポイント、または少なくとも５パーセントポイント低下する。例えば、前記肝臓の脂肪率が２０％から１８％に低下した場合は、「１８％に低下」、「１０％低下」または「２パーセントポイント低下」と表記する。これらの違いは、肝臓の脂肪率の低下を、低下後のパーセント数値で示すか、低下分をパーセント単位で表すか、低下分をパーセントポイント単位で表すかの違いに過ぎない。

【0036】

別の一実施形態において、治療対象の患者のサイトケラチン１８（Ｍ６５）の血清濃度は、７５０Ｕ／ｍｌ未満、６００Ｕ／ｍｌ未満、５００Ｕ／ｍｌ未満、４００Ｕ／ｍｌ未満、３００Ｕ／ｍｌ未満、または２５０Ｕ／ｍｌ未満である。サイトケラチン１８のＭ６５フラグメントの濃度は、公知の方法、例えば、酵素結合免疫吸着検定法（ＥＬＩＳＡ）により測定することができる。

【0037】

別の一実施形態において、治療対象の患者のサイトケラチン１８（Ｍ３０）の血清濃度は、５００Ｕ／ｍｌ未満、４００Ｕ／ｍｌ未満、３００Ｕ／ｍｌ未満、２００Ｕ／ｍｌ未満、または１５０Ｕ／ｍｌ未満である。サイトケラチン１８のＭ３０フラグメントの濃度は、公知の方法、例えば、ＥＬＩＳＡにより測定することができる。

【0038】

可溶性形態のサイトケラチン１８の血清濃度は、ＮＡＳＨ患者で上昇することが報告されている。具体的には、切断により生じるＭ３０フラグメントはアポトーシスのマーカーとして、Ｍ６５フラグメントはネクローシスのマーカーとして認知されている。本発明者らは、Ｎｏｒ－ＵＤＣＡが、Ｍ３０フラグメントおよびＭ６５フラグメントの血清濃度を低下させる作用があることを見出した。

【0039】

サイトケラチン１８（Ｍ６５）の血清濃度は、本発明の治療の過程で、治療開始時の数値に対して少なくとも３％、少なくとも５％、少なくとも７％、または少なくとも１０％低下し得る。

【0040】

サイトケラチン１８（Ｍ３０）の血清濃度は、本発明の治療の過程で、治療開始時の数値に対して少なくとも３％、少なくとも５％、少なくとも７％、または少なくとも１０％低下し得る。

【0041】

本発明の治療対象の患者は、好ましくはヒト成人、より好ましくは１８～７５歳のヒト患者である。

【0042】

本発明の治療対象のヒト患者の体重は、通常４０ｋｇ～２００ｋｇ、好ましくは５０ｋｇ～１５０ｋｇ、より好ましくは６０ｋｇ～１２０ｋｇである。

【0043】

本発明の治療対象の患者のＢＭＩは、通常、２５ｋｇ／ｍ^２を超える値である。別の実施形態において、前記患者のＢＭＩは、少なくとも２６ｋｇ／ｍ^２、少なくとも２７ｋｇ／ｍ^２、少なくとも２８ｋｇ／ｍ^２、少なくとも２９ｋｇ／ｍ^２、または少なくとも３０ｋｇ／ｍ^２であってもよい。ＢＭＩは、体重（ボディマス）を身長の２乗で除した値と定義されており、キログラム単位で表される体重とメートル単位で表される身長から得られる値であるため、ｋｇ／ｍ^２の単位で一般に表記される。

【0044】

一実施形態において、音響放射力インパルス（ＡＲＦＩ）により測定される、前記患者の肝硬度はステージ２以上である。これは、１．３４ｍ／ｓを超えるせん断弾性波速度に相当する。ＡＲＦＩにより測定される肝硬度のステージは、後述の実施例２に定義されている。別の一実施形態において、ＡＲＦＩにより測定される、前記患者の肝硬度はステージ３以上である。さらに別の一実施形態において、ＡＲＦＩにより測定される、前記患者の肝硬度はステージ４である。さらに別の一実施形態において、ＡＲＦＩにより測定される肝硬度は、治療の過程で、１ステージ低下する（すなわち、ステージ２からステージ０／１になるか、ステージ３からステージ２になるか、またはステージ４からステージ３になる）。好ましくは、ＡＲＦＩにより測定される肝硬度は、治療の過程で、ステージ０／１に低下する。特定の一実施形態において、治療前にステージ２であった患者は、治療終了時にステージ０／１になる。

【0045】

ＡＲＦＩは、例えば肝臓などの組織の局所的な機械的性質を調べる音波検査法である。短時間の音響パルスを特定の関心領域付近で発生させて、組織に局所的に機械的振動を付与すると、組織変位が生じ、加振部位からせん断波が発生する。このせん断波の伝搬速度（メートル毎秒の単位で表される）を算出することにより、肝臓組織の粘弾性特性の評価が可能になる。組織の弾性が大きければ（組織が軟らかければ）、組織変位量は大きくなる。これにより定量的な評価が可能になる。せん断波伝搬速度は組織弾性率の平方根に比例するため、肝臓が硬いほど、記録されるせん断弾性波速度は大きくなる。硬度が高いということは、肝臓の健康状態が悪いことを示す。

【0046】

医薬組成物および治療
本発明のＮｏｒ－ＵＤＣＡは、通常、医薬組成物として投与され、該医薬組成物は、薬学的に許容される適当な添加剤を１以上含んでいてもよい。

【0047】

本発明のＮｏｒ－ＵＤＣＡは、経口投与用に製剤化することが可能であり、Ｎｏｒ－ＵＤＣＡの経口投与用製剤は、薬学的に許容される担体、補助剤、添加剤および／またはビヒクルをさらに含む。

【0048】

経口投与用の固体剤形としては、錠剤、好ましくは発泡性錠剤またはチュアブル錠、カプセル剤、丸剤、散剤および粒剤が挙げられる。このような固体剤形には、Ｎｏｒ－ＵＤＣＡとともに、ショ糖、マンニトール、ソルビトール、デンプンおよびデンプン誘導体、セルロースおよびセルロース誘導体（例えば、微結晶セルロース）、リン酸二カルシウム、ラクトース、コロイド状無水シリカ、タルク、滑沢剤（例えば、ステアリン酸マグネシウム、マクロゴール）、崩壊剤ならびに緩衝剤などの通常用いられる製剤用物質が配合されていてもよい。Ｎｏｒ－ＵＤＣＡが胃酸および胃の中の酵素による影響を受けないように、錠剤および丸剤に腸溶性コーティングを施すことも可能である。

【0049】

本発明のＮｏｒ－ＵＤＣＡを含む剤形は、当該活性化合物と反応しない慣用の添加剤、好ましくは、薬学的に許容される有機または無機の担体物質をさらに含んでいてもよい。好適な薬学的に許容される担体としては、例えば、水、塩溶液、アルコール、油、好ましくは植物油、ポリエチレングリコール、ゼラチン、ラクトース、アミロース、ステアリン酸マグネシウム、界面活性剤、香油、脂肪酸モノグリセリドおよび脂肪酸ジグリセリド、石油エーテル脂肪酸エステル、ヒドロキシメチルセルロース、ポリビニルピロリドンなどが挙げられる。本発明の医薬製剤は滅菌処理を施してもよく、所望により、当該活性化合物と有害な反応を生じない助剤、例えば、滑沢剤、防腐剤、安定化剤、湿潤剤、乳化剤、浸透圧に影響を与える塩類、緩衝剤、着色料、香味料および／または芳香剤などを配合することができる。非経口用途において特に好適なビヒクルは、溶液、好ましくは油性溶液または水性溶液からなり、懸濁液、エマルジョンまたはインプラントからなっていてもよい。

【0050】

送達システムとして、様々な送達システムが知られており、これらを本発明のＮｏｒ－ＵＤＣＡの投与に使用することができる。送達システムの例としては、リポソーム、エマルジョン、マイクロ粒子、マイクロカプセルおよびマクロ顆粒への封入が挙げられる。必要な用量を、シングルユニット型の剤形として、または徐放型剤形として投与することが可能である。また、必要な用量を、コーティングを施したマルチプルユニット型の剤形、即時放出型、徐放型、持続放出型または長期放出型の剤形に調製し、マトリックス製剤などとして投与してもよい。

【0051】

本発明のＮｏｒ－ＵＤＣＡの生物学的利用率を向上させるために、当該製剤を、適当な添加剤または適当な薬剤、例えば、リン脂質もしくは界面活性剤などの存在下、磨砕、粉砕およびスプレー乾燥などの慣用の手法を用いて微粉末化してもよい。しかし、本発明のＮｏｒ－ＵＤＣＡ多形体は既に適当な粒径を有しているため、特別な一実施形態においては磨砕や粉砕は不要である。

【0052】

本発明のＮｏｒ－ＵＤＣＡは、薬学的に許容される塩の形態で製剤化してもよい。本発明のＮｏｒ－ＵＤＣＡの薬学的に許容される塩としては、好ましくは金属塩、特にアルカリ金属塩、さらにその他の薬学的に許容される塩も挙げられる。薬学的に許容される塩基付加塩としては、リチウム、カルシウム、マグネシウム、カリウム、ナトリウムおよび亜鉛から形成される金属塩、または第一級アミン、第二級アミン、第三級アミンおよび環状アミンから形成される有機塩が挙げられる。

【0053】

本発明の医薬組成物は、Ｎｏｒ－ＵＤＣＡの有効量と、薬学的に許容される担体および／または薬学的に許容される添加剤とを含むことが好ましい。

【0054】

本発明のＮｏｒ－ＵＤＣＡの用量は特に限定されないが、１日当たりの用量は５００ｍｇより高い用量であることが好ましく、例えば７５０～２，５００ｍｇ／日、１，０００～２，０００ｍｇ／日、または１，２５０～１，７５０ｍｇ／日であり、例えば１，５００ｍｇ／日である。これらの用量を、１日１回投与することが好ましいが、複数回（少なくとも２回、３回、４回、５回または１０回）に分けて投与することも可能である。本発明の剤または医薬組成物は、１週間より長い期間、好ましくは４週間より長い期間、より好ましくは６ヶ月より長い期間、最も好ましくは１年より長い期間、特に脂肪肝の解消まで投与してもよい。

【0055】

併用療法
Ｎｏｒ－ＵＤＣＡまたはその塩は、薬学的に許容される担体と組み合わせて、本明細書に記載の剤形で投与することが可能であるが、当然のことながら、１以上のその他の有効成分（例えば、ウルソデオキシコール酸、またはスリンダク、イブプロフェンなどのＮＳＡＩＤ）と組み合わせてもよく、そのような有効成分としては、治療対象の疾患もしくはそれに類似した疾患に対して有効であることが知られているもの（例えば、ウルソデオキシコール酸）、または別の疾患に対して有効であることが知られているものが挙げられる。ここで、別の疾患とは、肝疾患の結果として生じる疾患、またはメタボリックシンドロームもしくは２型糖尿病などの病態の結果として生じる疾患であることが好ましい。

【0056】

本発明における併用治療は、複数の活性物質を混合して、またはこれらの活性物質を別々の剤形として投与することを含みうる。また、本発明における併用治療は、活性物質を同時に、または時間間隔をあけて、例えば、逐次的に投与することを含みうる。

【0057】

本発明の治療は、Ｎｏｒ－ＵＤＣＡ以外の活性物質を投与することを含みうる。Ｎｏｒ－ＵＤＣＡ以外の活性物質は、抗線維化剤、抗炎症剤、免疫調節剤、生物製剤、コレステロール低下物質、ロイコトリエンアンタゴニストおよびそれらの組み合わせからなる群から選択される。

【0058】

好適な抗線維化剤としては、セニクリビロック、エラフィブラノル、ピルフェニドン、フィブラート類、ＦＸＲアゴニスト（例えば、オベチコール酸）およびこれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。フィブラート類としては、クロフィブラートアルミニウム、ベザフィブラート、シプロフィブラート、コリンフェノフィブラート、クリノフィブラート、クロフィブレート、クロフィブリド、フェノフィブラート、ゲムフィブロジル、ロニフィブラート、シンフィブラートおよびこれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。

【0059】

好適な抗炎症剤としては、ＮＳＡＩＤ、コルチコステロイドおよびそれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。ＮＳＡＩＤは、アセチルサリチル酸、セレコキシブ、デクスケトプロフェン、ジクロフェナク、ジフルニサル、エトドラク、エトリコキシブ、フェノプロフェン、フィロコキシブ、フルルビプロフェン、イブプロフェン、インドメタシン、ケトプロフェン、ケトロラック、リコフェロン、ロルノキシカム、ロキソプロフェン、ルミラコキシブ、メクロフェナム酸、メフェナム酸、メロキシカム、ナブメトン、ナプロキセン、ニメスリド、オキサプロジン、パレコキシブ、ピロキシカム、ロフェコキシブ、サルサラート、スリンダク、テノキシカム、トルフェナム酸、バルデコキシブおよびこれらの組み合わせからなる群から選択することができる。コルチコステロイドは、ブデソニド、フルチカゾン、フルニソリド、シクレソニド、モメタゾン、ベクロメタゾンおよびこれらの組み合わせからなる群から選択することができる。

【0060】

好適な免疫調節剤としては、アザチオプリン、６－メルカプトプリン、シクロスポリンＡ、タクロリムス、メトトレキサートおよびこれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。

【0061】

好適な生物製剤としては、ＴＮＦ－αアンタゴニスト（例えば、アダリムマブ、インフリキシマブ、ゴリムマブ、エタネルセプトまたはセルトリズマブ）、接着分子アンタゴニスト（例えば、ベドリズマブ、エトロリズマブ）、ＪＡＫ阻害剤（例えば、トファシチニブ）およびそれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。

【0062】

好適なコレステロール低下物質としては、スタチン類、コレステロール吸収阻害剤（例えば、エゼチミブ）、金属イオン封鎖剤、ナイアシンおよびそれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。好適なスタチン類としては、アトルバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、ピタバスタチン、プラバスタチン、ロスバスタチン、シンバスタチンおよびこれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。

【0063】

好適なロイコトリエンアンタゴニストとしては、モンテルカスト、ザフィルルカスト、メクロフェナム酸塩、ジロイトンおよびこれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。

【0064】

本発明の別の態様は、肝脂肪を低減させるためのＮｏｒ－ＵＤＣＡの使用である。この態様の好ましい実施形態は、上述の本発明の別の態様に関して記載した好ましい実施形態と同様である。

【0065】

本発明のさらに別の態様は、肝脂肪の低減が必要な患者にＮｏｒ－ＵＤＣＡの有効量を投与することを含む、肝脂肪を低減する方法である。この態様の好ましい実施形態は、上述の本発明の別の態様に関して記載した好ましい実施形態と同様である。

【実施例】

【0066】

以下に記載の二重盲検ランダム化プラセボ対照フェーズＩＩ臨床試験を実施した。

【0067】

主な組入基準：
－以下の３つの判定基準の少なくとも１つに該当することで定義されるＮＡＦＬＤである。
（１）過去４週間以内に超音波画像診断法（少なくともステージ１）、またはその他の画像診断法、例えば、磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）、化学シフトイメージング（ＣＳＩ）および／または磁気共鳴分光法（ＭＲＳ）（脂肪率＞１０％）などによって脂肪肝が認められている。
（２）過去４週間以内のＣＡＰ（制御減衰量パラメーター）フィブロスキャンで少なくともグレード１（＞１０％）の脂肪沈着が認められている。
（３）過去５年以内の事前生検で診断の確定につながる組織学的所見が認められている。
－ＡＬＴが＞０．８ＵＬＮである。
－２型糖尿病の患者の場合は、以下のＡＤＡ判定基準の少なくとも１つに該当することで診断されている必要がある。
（１）随時血糖濃度が＞２００ｍｇ／ｄｌである。
（２）空腹時血糖値が＞１２６ｍｇ／ｄｌ（７．０ｍｍｏｌ／ｌ）である。
（３）７５ｇ経口ブドウ糖負荷試験で負荷後２時間後の血糖値が＞２００ｍｇ／ｄｌである。
（４）ＨｂＡ１ｃが≧６．５％である。

【0068】

主な除外基準：
－スクリーニング実施前１年以内に連続３ヶ月を超える期間にわたる相当量（女性の場合＞平均２０ｇ／ｄ、男性の場合＞平均３０ｇ／ｄ）のアルコール摂取歴があるか、アルコール性疾患歴がある。
－以下の合併肝疾患の既往歴を有するか、現在罹患している。
・Ｂ型肝炎またはＣ型肝炎の血清学的検査で陽性（ＨＢｓ Ａｇ＋、抗ＨＢｃ＋、抗ＨＣＶ＋；抗ＨＢｃ＋のみを満たす患者の場合、ＨＢＶ－ＤＮＡが陰性であれば試験に組み入れられる場合がある）
・原発性胆汁性肝硬変（ＡＭＡ陽性）
・原発性硬化性胆管炎
・ウィルソン病
・ヘモクロマトーシス
・自己免疫性肝炎
・α１ＡＴ欠損症
・公知の胆管閉塞症
・薬物性肝疾患
・肝癌（疑いまたは確定）
－Ｃｈｉｌｄ－ＰｕｇｈスコアのグレードＡより上位の肝硬変を併存している。
－スクリーニング実施時および／またはベースライン診察時のＨｂＡ１ｃが≧９．５％であることで定義されるコントロール不良な糖尿病である。
－スクリーニング実施時および／またはベースライン診察時のＡＳＴまたはＡＬＴが＞４×ＵＬＮである。

【0069】

非アルコール性脂肪肝の臨床診断がなされた患者の無作為割付を行い、１２週間の治療および４週間の経過観察を行った。患者は３群に分けられた。第１群は、１日当たり１，５００ｍｇのＮｏｒ－ＵＤＣＡ（２５０ｍｇのＮｏｒ－ＵＤＣＡを含有するカプセル剤を６錠）を服用した。第２群は、１日当たり５００ｍｇのＮｏｒ－ＵＤＣＡ（２５０ｍｇのＮｏｒ－ＵＤＣＡを含有するカプセル剤を２錠と２５０ｍｇのプラセボを含有するカプセル剤を４錠）を服用した。第３群は、２５０ｍｇのプラセボを含有するカプセル剤を６錠服用した。

【0070】

Ｎｏｒ－ＵＤＣＡは、国際公開第２０１２／０７２６８９号Ａ１に記載の方法と同様にして調製した。

【0071】

記録のための診察は、以下の通り略記するものとする。
Ｖ１＝スクリーニング時の診察（ベースラインの２０～１０日前）
Ｖ２＝ベースライン診察（０週目）
Ｖ３＝中間診察（２週目）
Ｖ４＝中間診察（４週目）
Ｖ５＝中間診察（８週目）
Ｖ６＝治療終了（ＥＯＴ）時／中止時の診察（１２週目）
Ｖ７＝経過観察（ＦＵ）時の診察（ＥＯＴ時／中止時の診察の４週間後）

【0072】

各治療群は以下の通り略記するものとする。
Ｎ１５００＝経口用２５０ｍｇ Ｎｏｒ－ＵＤＣＡカプセル剤×６錠
Ｎ５００＝経口用２５０ｍｇ Ｎｏｒ－ＵＤＣＡカプセル剤×２錠および２５０ｍｇプラセボカプセル剤×４錠
プラセボ＝２５０ｍｇプラセボカプセル剤×６錠

【0073】

治験対象患者の内訳およびベースラインの人口統計学的データの詳細は下表の通りである。

【0074】

【表1】

【0075】

【表2】

【0076】

実施例１：肝臓の超音波検査
方法：
超音波検査を、Ｖ１の４週間前からＶ１までの期間の任意の時点、Ｖ１の１週間後およびＶ６において実施した。具体的には以下の項目について検査を行った。
－肝臓：サイズ、エコー輝度、総合所見（正常、異常（臨床的に重大でない）、異常（臨床的に重大））
－脂肪肝は以下のステージに従って４段階で評価した：
・脂肪沈着なし／軽微な脂肪沈着：
正常な肝臓のエコー像が描出される場合は、脂肪沈着なしとする。肝臓のエコー輝度が右腎臓よりわずかに高く、肝臓内の血管壁および横隔膜のエコー輝度が高く、これらを十分に視認できる場合は、軽微な脂肪沈着と判断する。
・軽度の脂肪沈着：
肝臓のエコー輝度が右腎臓よりやや高く、肝臓内の血管壁の視認性が少し悪く、片側の横隔膜の反射が減少していることを特徴とする。
・中等度の脂肪沈着：
肝臓のエコー輝度が右腎臓よりやや高く、肝臓内の血管壁の視認性が悪く、片側の横隔膜の反射が減少していることを特徴とする。
・重度の脂肪沈着：
肝臓のエコー輝度が右腎臓より顕著に高く、肝臓内の血管壁が視認できず、片側の横隔膜の反射が顕著に減少していることを特徴とする。
肝臓のスコア化は、影響が最も大きい部位で行った。

【0077】

結果：
結果を表３にまとめた。１，５００ｍｇのＮｏｒ－ＵＤＣＡを服用した群において、重度の脂肪沈着を有する患者のパーセンテージは２０．３％から１０．９％に減少した。５００ｍｇのＮｏｒ－ＵＤＣＡを服用した群では、重度の脂肪沈着を有する患者のパーセンテージは２７．３％から１６．７％に減少した。プラセボ群では、重度の脂肪沈着を有する患者のパーセンテージにほぼ変化はなかった。

【0078】

この結果から、Ｎｏｒ－ＵＤＣＡが、脂肪肝、特に重度の脂肪肝の治療に有効であることが分かる。

【0079】

【表3】

【0080】

実施例２：治験期間中のフィブロスキャンまたはＡＲＦＩによる肝硬度
方法：
Ａ）実施が可能な場合は、フィブロスキャン検査を、Ｖ１の４週間前からＶ１までの期間の任意の時点、Ｖ１の１週間後およびＶ６において実施した。この測定に際しては、患者は絶食であることが求められる。

【0081】

肝硬度測定／トランジェントエラストグラフィー
フィブロスキャンは、振動制御トランジェントエラストグラフィーにより脂肪肝の検出を行う非侵襲性装置（Ｅｃｈｏｓｅｎｓ社、フランス）である。この装置の構成は、超音波システムと、これに連結した加振器からなっている。この装置から得られる信号により、走査した組織の硬度を算出し、疾患の程度を評価することができる。肝弾性度の測定結果は、硬度（ｋＰａ）と完遂率（％）で示される。

【0082】

測定中、制御せん断波の伝搬中に超高速パルスエコーシーケンスが発振される（６ｋＨｚのパルス繰返周波数）。捕捉にかかる時間はわずか８０ｍｓであり、せん断波の伝搬により肝臓で生じたひずみが、連続する超音波の系列データから標準的な自己相関法により計測される。硬度値はｋＰＡの単位で得られる。

【0083】

肝硬度は、２つのプローブのいずれか（ＭプローブまたはＸＬプローブ）を用いて測定し、以下に示す各ステージの閾値を参照して記録した。
Ｍプローブ：
ステージ０／１（すなわち＜ステージ２）：＜７．０ｋＰａ（閾値）
ステージ≧２：≧７．０ｋＰａ
ステージ≧３：≧８．８ｋＰａ
ステージ＝４：≧１０．３ｋＰａ
ＸＬプローブ：
ステージ０／１（すなわち＜ステージ２）：＜６．２ｋＰａ（閾値）
ステージ≧２：≧６．２ｋＰａ
ステージ≧３：≧７．２ｋＰａ
ステージ＝４：≧７．９ ｋＰａ

【0084】

Ｂ）実施が可能な場合は、音響放射力インパルスイメージング（ＡＲＦＩ）検査を、Ｖ１の４週間前からＶ１までの期間の任意の時点、Ｖ１の１週間後およびＶ６において実施した。ＡＲＦＩ測定値は、以下に示す各ステージの閾値を参照して記録した。
ステージ０／１（すなわち＜ステージ２）：＜１．３４ｍ／ｓ（閾値）
ステージ≧２：≧１．３４ｍ／ｓ
ステージ≧３：≧１．５５ｍ／ｓ
ステージ＝４：≧１．８ｍ／ｓ

【0085】

結果：
表４に示すように、１，５００ｍｇのＮｏｒ－ＵＤＣＡを服用した群において、肝硬度がステージ０または１の患者のパーセンテージは５５．６％から６７．５％に増加した。一方、５００ｍｇのＮｏｒ－ＵＤＣＡを服用した群とプラセボ群では、肝硬度がステージ０／１の患者のパーセンテージは減少した。

【0086】

肝硬度が高いほど肝臓の状態が悪いことを示していることから、これらの結果は、１日当たり１，５００ｍｇのＮｏｒ－ＵＤＣＡの投与により肝臓機能が改善されることを示唆している。

【0087】

【表4】

【0088】

実施例３：ＭＲＩおよび／またはＭＲＳで測定した肝臓の脂肪率
方法：
実施が可能な場合は、磁気共鳴画像法／分光法（ＭＲＩ／ＭＲＳ）による検査を、Ｖ１の４週間前からＶ１までの期間の任意の時点、Ｖ１の１週間後およびＶ６において実施した。ＭＲＩ、ＭＲＳのいずれも、ＭＲを利用して肝臓の信号を水の成分と脂肪の成分に分離する方法である。水のプロトンと脂肪の主要なプロトンに対応する共鳴周波数は異なるため、スペクトルの軌跡から直接定量化することができる。

【0089】

下記の等式を用いて、化学シフトイメージング（ＣＳＩ）データから得られる肝臓の脂肪率を算出する。
ＣＳＩ 肝臓の脂肪率_未補正＝ＳＩ_同位相－ＳＩ_逆位相／２×ＳＩ_同位相

【0090】

脂肪含有量に依存しない信号強度差を考慮して、肝臓の測定を行う際に同じ画像内にある脾臓にも関心領域を設けた。（脾臓の測定値を用いて）補正した信号強度による肝臓の脂肪率を算出するために、上記の等式を以下のように変形する。
ＣＳＩ 肝臓の脂肪率_脾臓補正＝
（ＳＩ_{同位相 肝臓}／ＳＩ_脾臓）－（ＳＩ_{逆位相 肝臓}／ＳＩ_脾臓）／２×（ＳＩ_{同位相 肝臓}／ＳＩ_脾臓）

【0091】

計算で肝臓の平均脂肪率がマイナスの値になった場合は、マイナスの値をとることはないとの理由から、脂肪率０とみなした。

【0092】

ＭＲＳは１．５テスラまたは３．０テスラで実施して、肝臓のトリグリセリド含有量（％）を測定した。

【0093】

結果：
ＭＲＩで測定した肝臓の平均脂肪率は、１，５００ｍｇのＮｏｒ－ＵＤＣＡを服用した群で２１．３％から１６．３％に低下した。５００ｍｇ服用群とプラセボ群では、肝臓の脂肪率の実質的な減少は認められなかった（表５を参照のこと）。

【0094】

【表5】

【0095】

実施例４：肝臓酵素
方法：
肝臓酵素値に対するＮｏｒ－ＵＤＣＡの効果を、ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＧＧＴ、ＡＰおよび血清ビリルビンの推移から評価した。また、ＡＬＴ、ＡＳＴおよびＧＧＴの正常上限（ＵＬＮ）に基づいて事前に定めたアウトカム基準による治療効果も調べた。

【0096】

ＡＬＴ、ＡＳＴ、ＧＧＴ、ＡＰおよび血清ビリルビンの血清濃度は、既に確立されている標準的な実験室的手法により測定した。

【0097】

結果：
上記の肝臓酵素パラメーターＡＬＴ、ＡＳＴおよびＧＧＴに関して、Ｎｏｒ－ＵＤＣＡによる治療効果が認められた。Ｖ２からＶ６－ＬＯＣＦまでの期間のＡＬＴの平均の絶対値変化量は治療群間で大幅に異なっており、Ｎ１５００群では統計学的に有意な減少が見られ（－１７．２Ｕ／ｌ）、Ｎ５００群では中程度の減少が見られ（－７．０Ｕ／ｌ）、プラセボ群ではわずかな上昇が見られた（５．３Ｕ／ｌ）。

【0098】

また、ＡＳＴの変化量（Ｎ１５００：－８．７Ｕ／ｌ、Ｎ５００：－３．８Ｕ／ｌ、プラセボ：－０．９Ｕ／ｌ）およびＡＬＴ／ＡＳＴ比の変化量（Ｎ１５００：－０．１４、Ｎ５００：－０．０５、プラセボ：０．１０）に関しては、中程度の用量依存性が見られた。

【0099】

ＧＧＴの推移に関しては、Ｎｏｒ－ＵＤＣＡによる治療効果が明確に示され、用量依存性も見られた。Ｎ１５００群の患者では、Ｖ２時の１７８．８Ｕ／ｌから、Ｖ６－ＬＯＣＦで１１１．７Ｕ／ｌへと明らかなＧＧＴの減少が認められた。一方、Ｎ５００群ではＧＧＴ値はごくわずかな減少にとどまり（Ｖ２：１４４．７Ｕ／ｌ、Ｖ６－ＬＯＣＦ：１３７．６Ｕ／ｌ）、プラセボ群ではＧＧＴ値はほぼ変化しなかった（Ｖ２：１５０．０Ｕ／ｌ、Ｖ６－ＬＯＣＦ：１５２．９Ｕ／ｌ）。

【0100】

ＡＰ値および血清ビリルビン値の推移においては、Ｎ１５００、Ｎ５００、プラセボの３群間に関連する差は見られなかった。

【0101】

ＡＬＴのアウトカム基準に関しては、ベースライン時にＡＬＴ＞０．８ＵＬＮの患者のうちＡＬＴ≦０．８ＵＬＮとなった割合（Ｎ１５００：１７．５％、Ｎ５００：１４．８％、プラセボ：５．２％）、ベースライン時にＡＬＴ＞１．０ＵＬＮの患者のうちＡＬＴ＜ＵＬＮとなった割合（Ｎ１５００：３５．７％、Ｎ５００：１６．９％、プラセボ：７．５％）、ベースライン時にＡＬＴ＞１．５ＵＬＮの患者のうちＡＬＴ＜１．５ＵＬＮとなった割合（Ｎ１５００：５３．１％、Ｎ５００：３７．９％、プラセボ：２４．１％）から、Ｎｏｒ－ＵＤＣＡの治療効果が明確に示され、用量依存性も見られた。

【0102】

ＡＳＴに関しては、ＡＳＴ＞０．３３ＵＬＮ～≦０．６７ＵＬＮという基準に対して、治療群間で用量依存的な差が見られた（Ｎ１５００：３２．７％、Ｎ５００：２６．４％、プラセボ：６．９％）。また、ＡＳＴ＜ＵＬＮという基準を満たした患者の割合（Ｎ１５００：５４．５％、Ｎ５００：２７．３％、プラセボ：３７．９％）およびＡＳＴ＜１．５ＵＬＮという基準を満たした患者の割合（Ｎ１５００：７５．０％、Ｎ５００：５０．０％、プラセボ：６６．７％）から分かるように、これらの基準を満たした患者の割合は、Ｎ５００群またはプラセボ群よりＮ１５００群で高かった。

【0103】

ＡＬＴおよび／またはＡＳＴの≧１５％減少という組合せ基準に関して改善が見られた患者数は、Ｎｏｒ－ＵＤＣＡ群の方がプラセボ群より多かった（Ｎ１５００：７１．６％、Ｎ５００：４９．３％、プラセボ：３５．９％）。

【0104】

Ｎｏｒ－ＵＤＣＡの用量依存的な効果は、ＧＧＴ＞０．３３ＵＬＮ～≦０．６７ＵＬＮというアウトカム基準に関しても見られた（Ｎ１５００：２１．６％、Ｎ５００：１３．０％、プラセボ：７．４％）。ＧＧＴ≦ＵＬＮという基準に関しては、この基準を満たした患者の割合はＮ１５００群で最も高く（３１．０％）、Ｎ５００群（１２．２％）とプラセボ群（１４．０％）との間では関係のある差は見られなかった。

【0105】

治験期間中のＦＡＳの肝臓酵素値の推移を表５に記載した。

【0106】

【表6】

【0107】

実施例５：治験期間中のサイトケラチン１８
Ｖ２時のサイトケラチン１８（Ｍ３０フラグメント）の平均値は、いずれの治療群でも同程度であった（Ｎ１５００：３３３．７Ｕ／ｌ、Ｎ５００：３８９．４Ｕ／ｌ、プラセボ：３５７．６Ｕ／ｌ）。治験期間を通して、サイトケラチン１８の数値はすべての治療群で同程度に減少した（Ｎ１５００：－３０．３Ｕ／ｌ、Ｎ５００：－３４．４Ｕ／ｌ、プラセボ：－２９．３Ｕ／ｌ）。

【0108】

また、Ｖ２時のサイトケラチン１８（Ｍ６５フラグメント）の平均値も、すべての群で同程度であった（Ｎ１５００：５１９．９Ｕ／ｌ、Ｎ５００：５９０．２Ｕ／ｌ、プラセボ：５８４．２Ｕ／ｌ）。治験期間を通して、サイトケラチン１８の平均値はすべての群で減少したが、減少幅は、Ｎ５００群（－１０６．０Ｕ／ｌ）がＮ１５００群（－８０．６Ｕ／ｌ）やプラセボ群（－３４．６Ｕ／ｌ）より大きかった。