知財求人 - 知財ポータルサイト「IP Force」
▶ ウニベルシテテット イ トロムソ−ノルゲス アークティスク ウニベルシテットの特許一覧
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】特許公報(B2)
(11)【特許番号】
(24)【登録日】2023-05-11
(45)【発行日】2023-05-19
(54)【発明の名称】カチオン性親油基を含むバルビツール酸誘導体
(51)【国際特許分類】
C07D 239/60 20060101AFI20230512BHJP
C07D 403/14 20060101ALI20230512BHJP
A61K 31/515 20060101ALI20230512BHJP
A61P 31/04 20060101ALI20230512BHJP
A61P 31/10 20060101ALI20230512BHJP
【ＦＩ】
C07D239/60
C07D403/14 CSP
A61K31/515
A61P31/04
A61P31/10
【請求項の数】
19
(21)【出願番号】P 2019553535
(86)(22)【出願日】2018-03-28
(65)【公表番号】
(43)【公表日】2020-04-23
(86)【国際出願番号】 EP2018058011
(87)【国際公開番号】W WO2018178198
(87)【国際公開日】2018-10-04
【審査請求日】2021-03-10
(31)【優先権主張番号】1705255.6
(32)【優先日】2017-03-31
(33)【優先権主張国・地域又は機関】GB
【前置審査】
(73)【特許権者】
【識別番号】518338943
【氏名又は名称】ウニベルシテテット イ トロムソ－ノルゲス アークティスク ウニベルシテット
(74)【代理人】
【識別番号】110001070
【氏名又は名称】弁理士法人エスエス国際特許事務所
(72)【発明者】
【氏名】ストローム， モルテン ベーマー
(72)【発明者】
【氏名】バイエル， アネット
(72)【発明者】
【氏名】エンゴヴィスト， スティグ オロヴ マグナス
(72)【発明者】
【氏名】パウルセン， マリアンヌ ハーゲンセン
(72)【発明者】
【氏名】アウスバッハー， ドミニク
【審査官】前田 憲彦
(56)【参考文献】
【文献】特開昭５３－０４６９７８（ＪＰ，Ａ）
【文献】特表２０１０－５３３７０１（ＪＰ，Ａ）
【文献】特公昭３７－０００９９２（ＪＰ，Ｂ１）
【文献】米国特許出願公開第２０１１／０２８８０５４（ＵＳ，Ａ１）
【文献】西独国特許出願公開第０１１００６３９（ＤＥ，Ａ）
【文献】特表２０１２－５２０７４５（ＪＰ，Ａ）
【文献】特表２００３－５２３９２５（ＪＰ，Ａ）
【文献】Edizione Scientifica，1974年，29(10)，P.757-785
【文献】Acta Chimica Academiae Scientiarum Hungaricae，1959年，18，P.395-406
【文献】Appl Biochem Biotechnol，2013年，171，P.2030-2039
【文献】International Conferenceon Advancements in Engineering and Technology，2015年，P.18-23
(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)
Ｃ０７Ｄ ２３９／
Ｃ０７Ｄ ４０３／
Ａ６１Ｋ ３１／
ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）
(57)【特許請求の範囲】
【請求項1】
式（Ｉ）の化合物又はその立体異性体、互変異性体若しくは溶媒和化合物であって、【化1】
式中、
Ｘは、ＣＨ2又はＣ＝Ｗであり、
Ｙは、ＣＨ2又はＣ＝Ｗであり、
Ｚは、結合、ＣＨ2又はＣ＝Ｗであり、
Ｗは、Ｎ、Ｏ又はＳであり、
各Ｒ1は、同じでも異なってもよく、２～１５個の非水素原子と、ｐＨ７において少なくとも＋１の正味の電荷を有する、少なくとも１個のカチオン性アミン基又はカチオン性イミン基とを含み、
各Ｒ 1 は、－Ｍ－Ｒｙとして定義され、
Ｍは、Ｃ 1 ～ 10 アルキル、Ｃ 2 ～ 10 アルケニル、Ｃ 2 ～ 10 アルキニル、Ｃ 1 ～ 10 ハロアルキル、Ｃ 1 ～ 10 アルコキシ、Ｃ 1 ～ 10 ハロアルコキシ、又はＣ 3 ～ 10 シクロアルキルであり、
Ｒｙは、－ＮＲ 3 + 、－ＮＲ－Ｃ（＝ＮＲ 2 + ）－ＮＲ 2 、－Ｎ（－Ｃ（＝ＮＲ 2 + ）－ＮＲ 2 ）－、又はカチオン性ピリジンであり、
Ｒは、Ｈ又はＣ 1 ～ 6 アルキルであり、
（ｉ）各Ｒ2は、同じでも異なってもよく、親油性であり、７～２０個の非水素かつ非フッ素である原子を含み、
各Ｒ 2 は、－Ｌ－Ｒｘとして定義され、
ＬはＣ 1 ～ 3 アルキルであり、
Ｒｘは、任意の置換基で置換されたフェニル、ナフチル、ピリジン又はキノリンであり、
前記任意の置換基は、ハロ、Ｃ 1 ～ 6 アルキル、Ｃ 1 ～ 6 アルコキシ、Ｃ 1 ～ 6 ハロアルキル、Ｃ 1 ～ 6 ハロアルコキシ、Ｃ 6 ～ 10 アリール、Ｃ 4 ～ 6 ヘテロアリール、Ｃ 3 ～ 6 シクロアルキル、及びＣ 3 ～ 6 ヘテロシクロアルキルからなる群から選択され；
あるいは、
（ｉｉ）前記Ｒ 2 同士は、前記式（Ｉ）の化合物が下記構造式で示される化合物になるように連結又は縮合し；
【化2】
【請求項2】
ＷがＯである、請求項１に記載の化合物。
【請求項3】
ＸがＣ＝Ｗであり、ＹがＣ＝Ｗであり、Ｚが結合又はＣ＝Ｗである、請求項１又は２に記載の化合物。
【請求項4】
Ｚが結合である、請求項３に記載の化合物。
【請求項5】
ＺがＣ＝Ｗである、請求項３に記載の化合物。
【請求項6】
前記化合物が式（ＩＩ）の化合物であり、【化3】
式中、Ｒ1及びＲ2は、請求項１に定義されたとおりである、
請求項１から５のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項7】
各Ｒ1は、３～１２個の非水素原子を含む、請求項１から６のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項8】
Ｒ1
は、－ＮＲ3
+又は－ＮＲ－Ｃ（＝ＮＲ2
+）－ＮＲ2を前記カチオン性基として含み、ＲはＨ、ＣＨ
3
又はＣＨ
2
ＣＨ
3
である、請求項１に記載の化合物。
【請求項9】
前記Ｒ
2
同士は連結も縮合もしていない、請求項１から８のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項10】
各Ｒ
2
は少なくとも８個の非水素かつ非フッ素である原子を含む、請求項９に記載の化合物。
【請求項11】
各Ｒ
2
は少なくとも９個の非水素かつ非フッ素である原子を含む、請求項１０に記載の化合物。
【請求項12】
各Ｒ
1
は同じであり、各Ｒ
1
は
【化4】
各Ｒ 2 は同じであり、各Ｒ 2 は－Ｌ－Ｒｘとして定義され、Ｒｘはハロ、ｔ－ブチル又は－ＣＦ 3 で任意で置換された、フェニル又はナフチルである、請求項１に記載の化合物。
【請求項13】
各Ｒ
1
は
【化5】
【請求項14】
前記化合物は
【化6】
【請求項15】
適切な希釈剤、担体又は賦形剤と混合して、請求項１から１４のいずれか一項に定義された式（Ｉ）の化合物を含む医薬組成物。
【請求項16】
療法に使用される、請求項１５に記載の医薬組成物。
【請求項17】
微生物感染症の処置に使用される、請求項１５又は１６に記載の医薬組成物。
【請求項18】
前記微生物感染症が細菌又は真菌感染症である、請求項１７に記載の医薬組成物。
【請求項19】
癌の処置に使用される、請求項１５又は１６に記載の医薬組成物。【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、例えば多耐性分離菌を含めたグラム陽性及びグラム陰性菌に対する、生理活性環状化合物及びそれらの抗微生物（ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ）剤としての使用に関する。
【背景技術】
【0002】
多耐性菌に起因する感染症は、過去２０～２５年にわたって社会の主要な関心事になった。耐性菌の世界的発生及び蔓延に対処する新しい抗微生物剤の開発が緊急に必要である。耐性菌は、現在、毎年、欧州の患者２５０００人の死をもたらし、最悪のシナリオによれば、有効な新薬が開発されなければ、２０５０年までに年間一千万人が死亡すると推定される。
【0003】
有望なクラスの抗微生物剤は、宿主防御ペプチドとしても知られるカチオン性抗微生物ペプチド（ＡＭＰ）である。ＡＭＰは、両親媒性であり、細菌の内膜及び／又は外膜を非受容体特異的様式で標的にすることによって独特の作用様式を有する。これらの分子は、細胞膜の脂質二重層と直接相互作用する。
【0004】
小型ＡＭＰのファルマコフォアモデルが、最近、β2,2－アミノ酸誘導体及びそれらを含むペプチドの設計に適用された。特許文献１は、細胞溶解性治療薬として使用するためにβ2,2－アミノ酸を取り込むペプチド、ペプチド模倣薬及びアミノ酸誘導体を開示する。これらの化合物は、広範な抗菌活性、例えばグラム陽性種とグラム陰性種の両方に対する活性を有する。しかし、グラム陽性及びグラム陰性種に対する活性が改善された化合物が依然として必要である。
【0005】
オイシンスチエラミド（ｅｕｓｙｎｓｔｙｅｌａｍｉｄｅｓ）は、北極海苔虫動物テゲラ（Ｔｅｇｅｌｌａ）（スピッツベルゲンシス（ｓｐｉｔｚｂｅｒｇｅｎｓｉｓ）及びオーストラリアのホヤ類のオイシンスチエラ ラテリシウス（Ｅｕｓｙｎｓｔｙｅｌａ ｌａｔｅｒｉｃｉｕｓ）を参照）から単離された抗微生物剤の一クラスであり、中程度の抗微生物活性を示す。オイシンスチエラミドの抗微生物活性は、非特許文献１に報告された。
【0006】
オイシンスチエラミドは、５員ジヒドロキシブチロラクタム環に結合した２個のカチオン性基（アミン又はグアニジン）及び２個の親油基からなる（図１参照）。オイシンスチエラミド中のカチオン性基及び親油基のこの両親媒性構造配列は、小型抗微生物ペプチド（ＡＭＰ）のファルマコフォアモデルに合致する。
【0007】
しかし、（一般に中程度にすぎない細胞傷害活性以外の）オイシンスチエラミドの問題は、ジヒドロキシブチロラクタム環の構造が３個の立体中心を有し、極めて複雑であり、したがってそれらの合成が複雑であることである。
【0008】
したがって、特に薬剤耐性菌株又は問題になる菌株に対して、良好な活性を示す抗生化合物の開発が必要とされている。
本発明者らは、オイシンスチエラミド又は小型ＡＭＰの模倣物と考えることができるある種のバルビツラートが良好な抗菌活性を有することを見いだした。これらの化合物は、２個のカチオン性基に更に連結された中心骨格にジェミナル結合した２個の親油基を含む。
本発明者らは、オイシンスチエラミド又は小型ＡＭＰの模倣物と考えることができるある種のバルビツラートが良好な抗菌活性を有することを見いだした。これらの化合物は、２個のカチオン性基に更に連結された中心骨格にジェミナル結合した２個の親油基を含む。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0009】
【文献】国際公開第２０１１／０５１６９２号
【非特許文献】
【0010】
【文献】Ｔａｄｅｓｓｅら、Ｊ．Ｎａｔ．Ｐｒｏｄ．２０１１、７４、８３７～８４１
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【0011】
したがって、本発明は、式（Ｉ）の化合物又はその立体異性体、互変異性体若しくは溶媒和化合物を提供する。
【0012】
【化1】
【0013】
式中、
Ｘは、ＣＨ2又はＣ＝Ｗであり、
Ｙは、ＣＨ2又はＣ＝Ｗであり、
Ｚは、結合、ＣＨ2又はＣ＝Ｗであり、
Ｗは、Ｎ、Ｏ又はＳであり、
各Ｒ1は、同じでも異なってもよく、ｐＨ７において少なくとも＋１の正味の電荷を有する少なくとも１個のカチオン性基を含み、
各Ｒ2は、同じでも異なってもよく、親油性であり、少なくとも７個の非水素かつ非フッ素である原子を含み、
あるいは、Ｒ2基が連結又は縮合して、合計で少なくとも１４個の非水素かつ非フッ素である原子、又は各基内の環式基同士が縮合している場合は少なくとも１２個の非水素かつ非フッ素である原子を有する親油基を形成し、
少なくとも１個のＲ2基は、環式基を含み、
化合物は、ｐＨ７において少なくとも＋２の正味の正電荷を有する。
Ｘは、ＣＨ2又はＣ＝Ｗであり、
Ｙは、ＣＨ2又はＣ＝Ｗであり、
Ｚは、結合、ＣＨ2又はＣ＝Ｗであり、
Ｗは、Ｎ、Ｏ又はＳであり、
各Ｒ1は、同じでも異なってもよく、ｐＨ７において少なくとも＋１の正味の電荷を有する少なくとも１個のカチオン性基を含み、
各Ｒ2は、同じでも異なってもよく、親油性であり、少なくとも７個の非水素かつ非フッ素である原子を含み、
あるいは、Ｒ2基が連結又は縮合して、合計で少なくとも１４個の非水素かつ非フッ素である原子、又は各基内の環式基同士が縮合している場合は少なくとも１２個の非水素かつ非フッ素である原子を有する親油基を形成し、
少なくとも１個のＲ2基は、環式基を含み、
化合物は、ｐＨ７において少なくとも＋２の正味の正電荷を有する。
【0014】
式（Ｉ）の化合物は、２個のカチオン性基に更に連結された中心環状骨格にジェミナル結合した２個の親油基を含む。中心骨格は、ジェミナル置換された親油基がカチオン性基に対して特定の配向を有する強固な両親媒性構造を確保する。両方の親油基は、同じ炭素に結合し、中心環の面の上下で配向することができる。
【0015】
本発明は、ＸがＣＨ2又はＣ＝Ｗであり、ＹがＣＨ2又はＣ＝Ｗであり、Ｚが結合、ＣＨ2又はＣ＝Ｗである、式（Ｉ）の化合物を提供する。
好ましくは、Ｘ、Ｙ及びＺの少なくとも１個がＣ＝Ｗである。例えば、ＸをＣ＝Ｗとすることができ、ＹをＣＨ2とすることができ、Ｚを結合又はＣＨ2とすることができる。より好ましくは、Ｘ、Ｙ及びＺの少なくとも２個がＣ＝Ｗである。例えば、Ｘ及びＹをＣ＝Ｗとすることができ、Ｚを結合、ＣＨ2又はＣ＝Ｗとすることができる。あるいは、Ｙ及びＺをＣ＝Ｗとすることができ、ＸをＣＨ2とすることができる。好ましくは、ＸとＹの両方がＣ＝Ｗであり、Ｚが結合又はＣ＝Ｗである。最も好ましくは、Ｘ、Ｙ及びＺのすべてがＣ＝Ｗ、特にＣ＝Ｏである。
好ましくは、Ｘ、Ｙ及びＺの少なくとも１個がＣ＝Ｗである。例えば、ＸをＣ＝Ｗとすることができ、ＹをＣＨ2とすることができ、Ｚを結合又はＣＨ2とすることができる。より好ましくは、Ｘ、Ｙ及びＺの少なくとも２個がＣ＝Ｗである。例えば、Ｘ及びＹをＣ＝Ｗとすることができ、Ｚを結合、ＣＨ2又はＣ＝Ｗとすることができる。あるいは、Ｙ及びＺをＣ＝Ｗとすることができ、ＸをＣＨ2とすることができる。好ましくは、ＸとＹの両方がＣ＝Ｗであり、Ｚが結合又はＣ＝Ｗである。最も好ましくは、Ｘ、Ｙ及びＺのすべてがＣ＝Ｗ、特にＣ＝Ｏである。
【0016】
（式Ｉの）本発明の化合物の好ましい環状骨格は、以下に示すように、バルビツラート又はヒダントインである。
したがって、本発明の好ましい化合物は、式（ＩＩ）の化合物である。
したがって、本発明の好ましい化合物は、式（ＩＩ）の化合物である。
【0017】
【化2】
【0018】
式中、Ｒ1及びＲ2は、本明細書に定義されたとおりである。
本発明の更に好ましい化合物は、式（ＩＩＩ）の化合物である。
本発明の更に好ましい化合物は、式（ＩＩＩ）の化合物である。
【0019】
【化3】
【0020】
式中、Ｒ1及びＲ2は、本明細書に定義されたとおりである。
Ｗは、窒素、酸素又は硫黄とすることができる。好ましくは、Ｗは、酸素又は硫黄である。より好ましくは、Ｗは、酸素である。
Ｗは、窒素、酸素又は硫黄とすることができる。好ましくは、Ｗは、酸素又は硫黄である。より好ましくは、Ｗは、酸素である。
【0021】
各Ｒ1基は、ｐＨ７において少なくとも＋１の正味の電荷を有する少なくとも１個のカチオン性基を含む。好ましくは、各Ｒ1基の正味の電荷は、ｐＨ７において＋１である。
各Ｒ1基は異なってもよいが、好ましくは各Ｒ1基は同じである。
各Ｒ1基は異なってもよいが、好ましくは各Ｒ1基は同じである。
【0022】
好ましくは、各Ｒ1基は、２～１５個の非水素原子を含む。より好ましくは、各Ｒ1基は、３～１２個の非水素原子を含む。最も好ましくは、各Ｒ1基は、５～８個の非水素原子を含む。
【0023】
カチオン性基は、一般に、カチオン性アミン基又はカチオン性イミン（イミニウム）基とすることができる。
したがって、カチオン性基は、好ましくは、－ＮＲ3 +、＝ＮＲ2 +、－ＮＲ2 +－及び＝ＮＲ+－の少なくとも１個を含むことができ、各Ｒは各々同じ又は異なり、Ｈ又はアルキルである。
したがって、カチオン性基は、好ましくは、－ＮＲ3 +、＝ＮＲ2 +、－ＮＲ2 +－及び＝ＮＲ+－の少なくとも１個を含むことができ、各Ｒは各々同じ又は異なり、Ｈ又はアルキルである。
【0024】
＝ＮＲ2
+基を含む基の例は、－ＮＲ－Ｃ（＝ＮＲ2
+）－ＮＲ2基又は－Ｎ（－Ｃ（＝ＮＲ2
+）－ＮＲ2）－基である。
－ＮＲ2 +－基を含む基の例は、カチオン性ピペリジン、ピペラジン、モルホリン、トリアジン、ピロリドン、イミダゾリジン、ピラゾリジンなどの４～６員飽和環である。
－ＮＲ2 +－基を含む基の例は、カチオン性ピペリジン、ピペラジン、モルホリン、トリアジン、ピロリドン、イミダゾリジン、ピラゾリジンなどの４～６員飽和環である。
【0025】
＝ＮＲ+－基を含む基の例は、カチオン性ジアジン、オキサジン、チアジン、ピリジン、ペンタゾール、テトラゾール、トリアゾール、フラザン、オキサジアゾール、チアジアゾール、ジチアゾール、チアゾール、イソチアゾール、ピラゾール、イミダゾール、オキサゾール、イソオキサゾール、ピロールなどの４～６員不飽和環である。
【0026】
好ましくは、カチオン性基は－ＮＲ3
+又は＝ＮＲ2
+を含み、各Ｒは各々同じ又は異なり、Ｈ又はアルキルである。より好ましくは、カチオン性基は－ＮＲ3
+又は－ＮＲ－Ｃ（＝ＮＲ2
+）－ＮＲ2を含み、各Ｒは各々同じ又は異なり、Ｈ又はアルキルである。
【0027】
好ましくは、ＲはＨ又はＣ1～6アルキルであり、より好ましくはＨ、ＣＨ3又はＣＨ2ＣＨ3である。最も好ましくは、ＲはＨ又はＣＨ3である。
カチオン性基は、好ましくは、カチオン性アミン基若しくはカチオン性グアニジン基、又はそのイソスター若しくはバイオイソスターとすることができる。より好ましくは、カチオン性基は、カチオン性アミン基又はカチオン性グアニジン基である。
カチオン性基は、好ましくは、カチオン性アミン基若しくはカチオン性グアニジン基、又はそのイソスター若しくはバイオイソスターとすることができる。より好ましくは、カチオン性基は、カチオン性アミン基又はカチオン性グアニジン基である。
【0028】
各Ｒ1基は、－Ｍ－Ｒyとして定義することができ、式中、
Ｍは、結合、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、アルコキシ、ハロアルコキシ、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル又はヘテロシクロアルキルであり、その各々は、任意で置換されていてもよく、
Ｒyは、上に列挙したものなどのカチオン性基を含む。
Ｍは、結合、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、アルコキシ、ハロアルコキシ、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル又はヘテロシクロアルキルであり、その各々は、任意で置換されていてもよく、
Ｒyは、上に列挙したものなどのカチオン性基を含む。
【0029】
好ましくは、Ｍは、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、アルコキシ又はハロアルコキシである。より好ましくは、Ｍは、アルキル、アルケニル又はアルキニル、最も好ましくはアルキルである。例えば、ＭはＣ2～8アルキル、Ｃ2～8アルケニル又はＣ2～8アルキニルとすることができる。最も好ましくは、Ｍは、Ｃ3～5アルキル、Ｃ3～5アルケニル又はＣ3～5アルキニル、特にＣ3～5アルキルである。
【0030】
したがって、好ましくは、各Ｒ1基は、
【0031】
【化4】
【0032】
であり、式中、
Ｒは、Ｈ又はアルキル、好ましくはＨ、ＣＨ3又はＣＨ2ＣＨ3、より好ましくはＨであり、
ｎは１～１０、好ましくは２～８、より好ましくは３～５である。
Ｒは、Ｈ又はアルキル、好ましくはＨ、ＣＨ3又はＣＨ2ＣＨ3、より好ましくはＨであり、
ｎは１～１０、好ましくは２～８、より好ましくは３～５である。
【0033】
好ましくは、ＲはＨ、ＣＨ3又はＣＨ2ＣＨ3であり、ｎは２～８である。
より好ましくは、ＲはＨであり、ｎは３～５である。
したがって、更により好ましくは、Ｒ1は、
より好ましくは、ＲはＨであり、ｎは３～５である。
したがって、更により好ましくは、Ｒ1は、
【0034】
【化5】
【0035】
である。
各Ｒ2基は、親油性であり、少なくとも７個の非水素かつ非フッ素である原子を含む。少なくとも１個のＲ2基が環式基を含むことも必須である。
各Ｒ2基は、親油性であり、少なくとも７個の非水素かつ非フッ素である原子を含む。少なくとも１個のＲ2基が環式基を含むことも必須である。
【0036】
各親油性Ｒ2基は、ヘテロ原子Ｏ、Ｎ又はＳを含むことができるが、一般にヘテロ原子Ｏ、Ｎ及びＳのうち1個のみであり、好ましくはそれは窒素である。各Ｒ2基は、好ましくは、２個以下の極性基（例えば、－Ｂｒ、－Ｉ又は－ＣＦ3）を有する。
【0037】
中心骨格にジェミナル結合したＲ2基は、連結又は縮合して、合計で少なくとも１４個の非水素かつ非フッ素である原子を有する親油基を形成することができる。一方のＲ2基からの１個以上の環式基が他方のＲ2基からの１個以上の環式基と縮合するときには、２個のＲ2基の非水素かつ非フッ素である原子の総数は少なくとも１２である。連結又は縮合したＲ2基の例としては、下記構造で示されるものが挙げられる。
【0038】
【化6】
【0039】
しかし、好ましくは、Ｒ2基は連結も縮合もしない。
Ｒ2基中に存在し得る非水素かつ非フッ素である原子の最大数は存在しない。しかし、Ｒ2基が大きすぎる場合、化合物はヒト赤血球に有毒になり得る。したがって、Ｒ2基の各々は、非水素かつ非フッ素である原子の最大数が２０、好ましくは１８、より好ましくは１５であり得る。
Ｒ2基中に存在し得る非水素かつ非フッ素である原子の最大数は存在しない。しかし、Ｒ2基が大きすぎる場合、化合物はヒト赤血球に有毒になり得る。したがって、Ｒ2基の各々は、非水素かつ非フッ素である原子の最大数が２０、好ましくは１８、より好ましくは１５であり得る。
【0040】
好ましくは、各Ｒ2基は、少なくとも８個の非水素かつ非フッ素である原子を含む。より好ましくは、各Ｒ2基は、少なくとも９個の非水素かつ非フッ素である原子を含む。一方のＲ2基が７個の非水素かつ非フッ素である原子を含む場合、他方のＲ2基は、好ましくは少なくとも８個、好ましくは少なくとも９個の非水素かつ非フッ素である原子を含む。
【0041】
したがって、各Ｒ2基は、好ましくは８～２０又は８～１５個の非水素かつ非フッ素である原子、より好ましくは９～２０又は９～１５個の非水素かつ非フッ素である原子を含み得る。
【0042】
各Ｒ2基は、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、アルコキシ、ハロアルコキシ、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル又はヘテロシクロアルキルから選択することができ、その各々は、任意で置換されていてもよい。好ましくは、Ｒ2は、任意で置換されたアリール又はヘテロアリール基を含む。例えば、Ｒ2は、任意で置換されたフェニル、ナフチル及びピリジン、好ましくは任意で置換されたフェニル又はナフチルを含むことができる。
【0043】
任意選択の置換基は、好ましくは以下からなる群から選択される。
ハロ、－ＣＮ、－Ｒ4ＮＯ2、－Ｒ4ＯＲ3、－Ｒ4（＝Ｏ）Ｒ3、－Ｒ4ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ3、－Ｒ4Ｏ2Ｒ3、－Ｒ4Ｎ（Ｒ3）2、－Ｒ4（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ3）2、－Ｒ4ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ3）2、－Ｒ4ＮＲ3（＝Ｏ）Ｒ3、－Ｒ4ＮＲ3（＝Ｏ）ＯＲ3、アルキル、アルケニル、アルキニル、ハロアルキル、アルコキシ、ハロアルコキシ、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル及びヘテロシクロアルキル、
式中、
Ｒ4は、結合又はアルキル、好ましくは結合又はＣ1～6アルキル、より好ましくは結合であり、
Ｒ3は、Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、アルコキシ、ハロアルコキシ、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル又はヘテロシクロアルキル、好ましくはＨ又はＣ1～6アルキル、より好ましくはＨである。
ハロ、－ＣＮ、－Ｒ4ＮＯ2、－Ｒ4ＯＲ3、－Ｒ4（＝Ｏ）Ｒ3、－Ｒ4ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ3、－Ｒ4Ｏ2Ｒ3、－Ｒ4Ｎ（Ｒ3）2、－Ｒ4（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ3）2、－Ｒ4ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ3）2、－Ｒ4ＮＲ3（＝Ｏ）Ｒ3、－Ｒ4ＮＲ3（＝Ｏ）ＯＲ3、アルキル、アルケニル、アルキニル、ハロアルキル、アルコキシ、ハロアルコキシ、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル及びヘテロシクロアルキル、
式中、
Ｒ4は、結合又はアルキル、好ましくは結合又はＣ1～6アルキル、より好ましくは結合であり、
Ｒ3は、Ｈ、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、アルコキシ、ハロアルコキシ、アリール、ヘテロアリール、シクロアルキル又はヘテロシクロアルキル、好ましくはＨ又はＣ1～6アルキル、より好ましくはＨである。
【0044】
より好ましい置換基は、ハロ、Ｃ1～6アルキル、Ｃ1～6アルコキシ、Ｃ1～6ハロアルキル、Ｃ1～6ハロアルコキシ、Ｃ6～10アリール、Ｃ4～6ヘテロアリール、Ｃ3～6シクロアルキル又はＣ3～6ヘテロシクロアルキルである。
【0045】
特に好ましい置換基としては、ハロ、Ｃ1～4アルキル、Ｃ1～4アルコキシ、Ｃ1～4ハロアルキル、Ｃ1～4ハロアルコキシ、フェニル及びナフチルが挙げられる。
最も好ましくは、置換基は、ハロ、ｔ－ブチル及び－ＣＦ3から選択される。最も好ましいハロ置換基は、Ｉ及びＢｒである。
最も好ましくは、置換基は、ハロ、ｔ－ブチル及び－ＣＦ3から選択される。最も好ましいハロ置換基は、Ｉ及びＢｒである。
【0046】
好ましくは、両方のＲ2基は、環式基を含む。この場合、各Ｒ2基は、－Ｌ－Ｒxとして定義することができ、式中、
Ｌは、結合、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、アルコキシ又はハロアルコキシであり、
Ｒxは、上記置換基のいずれかで任意で置換されたアリール、ヘテロアリール、シクロアルキル又はヘテロシクロアルキル基である。
Ｌは、結合、アルキル、アルケニル、アルキニル、ヘテロアルキル、アルコキシ又はハロアルコキシであり、
Ｒxは、上記置換基のいずれかで任意で置換されたアリール、ヘテロアリール、シクロアルキル又はヘテロシクロアルキル基である。
【0047】
好ましくは、ＬはＣ1～3アルキルである。より好ましくは、Ｌは－ＣＨ2－である。
各Ｒx基は、結合又は縮合、好ましくは縮合されていてもよい、２個以上の環式基を含むことができる。例えば、各Ｒx基は、任意で置換されたナフタレン環を含むことができる。
各Ｒx基は、結合又は縮合、好ましくは縮合されていてもよい、２個以上の環式基を含むことができる。例えば、各Ｒx基は、任意で置換されたナフタレン環を含むことができる。
【0048】
好ましくは、Ｒxは、任意で置換されたアリール又はヘテロアリール基である。例えば、Ｒxは、任意で置換されたフェニル、ナフチル及びピリジン、好ましくは任意で置換されたフェニル又はナフチルから選択することができる。
【0049】
好ましくは、Ｌは－ＣＨ2－であり、Ｒxは、ハロ、ｔ－ブチル又は－ＣＦ3で任意で置換されたフェニル又はナフチルである。
好ましいＲ2基を実施例に示す。
好ましいＲ2基を実施例に示す。
【0050】
両方のＲ2基は、合成の容易性のみからすれば、好ましくは同じである。しかし、一方のＲ2基は、上述したように、例えば－Ｌ－Ｒxで表される、環式基を組み込むことが望ましく、他方のＲ2基は、アルキル、アルケニル、アルキニル又はヘテロアルキルであることが望ましい場合もある。これらの基は、任意で分岐し、又は（上述したように）置換されているが、好ましくは線状及び非置換である。
【0051】
「アルキル」という用語は、直鎖飽和脂肪族炭化水素鎖及び分岐鎖飽和脂肪族炭化水素鎖を指す。好ましくは、アルキルとはＣ1～10アルキルを指す。アルキル基の例としては、メチル（Ｍｅ）、エチル（Ｅｔ）、プロピル（例えば、ｎ－プロピル及びイソプロピル）、ブチル（例えば、ｎ－ブチル、イソブチル、ｔ－ブチル）及びペンチル（例えば、ｎ－ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル）が挙げられるが、それらに限定されない。
【0052】
「アルケニル」という用語は、１個以上、好ましくは１又は２個の炭素－炭素二重結合を有する、直鎖炭化水素鎖構造及び分岐鎖炭化水素鎖構造を指す。好ましくは、アルケニルとはＣ2～10アルケニルを指す。アルケニル基の例としては、エテニル、１－プロペニル、２－プロペニル、２－ブテニル、３－ブテニル、２－ペンテニル、３－ペンテニル、４－ペンテニル、２－ヘキセニル、３－ヘキセニル、４－ヘキセニル、５－ヘキセニル、２－メチル－２－プロペニル及び４－メチル－３－ペンテニルが挙げられるが、それらに限定されない。
【0053】
「アルキニル」という用語は、１個以上、好ましくは１又は２個の炭素－炭素三重結合を有する、直鎖分岐鎖炭化水素鎖及び分岐鎖炭化水素鎖を指す。好ましくは、アルキニルとはＣ2～10アルキニルを指す。アルキニル基の例としては、エチニル、プロピニル及びプロパルギルが挙げられるが、それらに限定されない。
【0054】
「アルコキシ」という用語は、－Ｏ－アルキル基を指す。好ましくは、アルコキシとはＣ1～10アルコキシを指す。アルコキシ基の例としては、メトキシ、エトキシ、プロポキシ（例えば、ｎ－プロポキシ及びイソプロポキシ）及びｔ－ブトキシが挙げられるが、それらに限定されない。
【0055】
「ハロアルキル」という用語は、１個以上のハロゲン（フルオロ（Ｆ）、クロロ（Ｃｌ）、ブロモ（Ｂｒ）及びヨード（Ｉ））で置換された、直鎖飽和脂肪族炭化水素鎖及び分岐鎖飽和脂肪族炭化水素鎖を指す。好ましくは、ハロアルキルとはＣ1～10ハロアルキルを指す。ハロアルキル基の例としては、フルオロメチル、ジフルオロメチル、トリフルオロメチル、トリクロロメチル、ペンタフルオロエチル、ペンタクロロエチル、２，２，２－トリフルオロエチル、ヘプタフルオロプロピル及びヘプタクロロプロピルが挙げられるが、それらに限定されない。
【0056】
「ハロアルコキシ」という用語は、酸素架橋によって結合した、上で定義されたハロアルキル基を指す。好ましくは、ハロアルコキシはとＣ1～10ハロアルコキシを指す。ハロアルコキシ基の例としては、トリフルオロメトキシ、２，２，２－トリフルオロエトキシ及びペンタフルオロエトキシ（ｐｅｎｔａｆｌｕｏｒｏｔｈｏｘｙ）が挙げられるが、それらに限定されない。
【0057】
「シクロアルキル」という用語は、単環、二環又は多環環構造を含めて、環化アルキル基を指す。好ましくは、シクロアルキルとは、Ｃ3～10シクロアルキル、より好ましくはＣ3～6シクロアルキルを指す。シクロアルキル基の例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル及びノルボルニルが挙げられるが、それらに限定されない。
【0058】
「アリール」という用語は、例えば、フェニル、ナフチル及びフェナントレニルを含めて、単環又は多環芳香族炭化水素を指す。好ましくは、アリールとは、Ｃ6～12アリール、より好ましくはＣ6～10アリールを指す。
【0059】
「ヘテロシクロアルキル」という用語は、炭素原子とＮ、Ｏ及びＳからなる群から独立に選択される１、２、３又は４個のヘテロ原子とを含む単環、二環又は多環環構造を含めた環化アルキル基を指す。好ましくは、ヘテロシクロアルキルとは、Ｃ3～10ヘテロシクロアルキル、より好ましくはＣ3～6ヘテロシクロアルキルを指す。ヘテロシクロアルキル基の例としては、オキシラン、ピロリドン、テトラヒドロフラン、ピペリジン、ピペラジン、テトラヒドロピラン及びチアンが挙げられるが、それらに限定されない。
【0060】
「ヘテロアリール」という用語は、硫黄、酸素、窒素などのヘテロ原子環員を少なくとも１個含む単環及び多環芳香族炭化水素を指す。好ましくは、ヘテロアリールとは、Ｃ6～12ヘテロアリール、より好ましくはＣ6～10ヘテロアリールを指す。ヘテロアリール基の例としては、ピリジン、ピリミジン、ピラジン、ピリダジン、トリアジン、フラン、キノリン、イソキノリン、チオフェン、イミダゾール、チアゾール、インドール、ピロール、オキサゾール、ベンゾフラン、ベンゾチオフェン、ベンゾチアゾール、イソオキサゾール、ピラゾール、トリアゾール、テトラゾール、インダゾール、１，２，４－チアジアゾール、イソチアゾール、プリン、カルバゾール、ベンゾイミダゾール、インドリン、ベンゾジオキソラン及びベンゾジオキサンが挙げられるが、それらに限定されない。
【0061】
本明細書に記述されるように、本発明の化合物は抗微生物活性を示す。理論に拘泥するものではないが、本発明の化合物は、直接膜に影響する機序によって細胞傷害効果を発揮することができ、したがって、膜作用抗微生物剤と称することができると考えられる。これらの化合物は、溶解性である可能性があり、細胞膜を不安定化し、細胞膜に穿孔さえし得る。これは、標的細胞のタンパク質成分、例えば細胞表面受容体に作用する、又は相互作用する薬剤を上回る、明確な治療上の利点を提供することができる。変異は、抗生物質耐性をもたらす新形態の標的タンパク質を生成する可能性があるが、脂質膜に対する過激な変化が生じて細胞傷害効果を妨げる可能性はかなり低い。溶解効果は、極めて急速な細胞死を生じる可能性があり、したがって、細菌が増殖する機会を有する前に細菌を死滅させる利点がある。やはり、理論に拘泥するものではないが、本発明の分子は、カチオン性基の存在によって、細胞膜の負電荷リン脂質に誘引される可能性があり、親油基は、微生物（例えば、細菌又は真菌）細胞膜の正常な３次元脂質二重層構造を不安定化し得る可能性があると考えられる。この相互作用は、透過性を増加させ、膜の完全性を損ない、最終的に細胞溶解及び死をもたらす可能性がある。
【0062】
したがって、本発明は、微生物細胞膜の不安定化及び／又は透過化に使用される式（Ｉ）の化合物を提供する。「不安定化」とは、細菌の呼吸器系も損なう、膜の薄化、水、イオン又は代謝産物に対する膜透過性（一般にチャネルを含まない）の増加などを含めて、ただしそれらに限定されない、正常な３次元脂質二重層構造の撹乱を意味する。
【0063】
本発明は、療法に使用される、特に微生物感染症（例えば、細菌及び／又は真菌感染症）の処置に使用される、式（Ｉ）の化合物（又は式（Ｉ）の化合物を含む組成物若しくは製剤）も提供する。したがって、一態様においては、本発明は、細菌感染症の処置に使用される、本明細書に定義された化合物を提供する。別の一態様においては、本発明は、真菌感染症の処置に使用される、本明細書に定義された化合物も提供する。処置は予防処置を含む。
【0064】
本発明の好ましい化合物は、抗菌剤と抗真菌剤の両方として有効である。
あるいは、本発明は、式（Ｉ）の化合物の抗微生物剤（例えば、抗菌又は抗真菌剤）としての使用を提供する。
あるいは、本発明は、式（Ｉ）の化合物の抗微生物剤（例えば、抗菌又は抗真菌剤）としての使用を提供する。
【0065】
あるいは、本発明は、微生物感染症（例えば、細菌及び／又は真菌感染症）を処置する方法を提供する。該方法は、それを必要とする患者に治療有効量の本明細書に定義された本発明の化合物を投与することを含む。
【0066】
治療有効量は、臨床評価に基づいて決定され、容易に監視することができる。一般に、投与量は、標的微生物の全部若しくは一部を死滅させるのに、又は繁殖を防止する、若しくはそれらの繁殖率を低下させるのに、又は体に対するそれらの有害作用を減少させるのに、有効であるべきである。臨床医又は患者は、感染症に関連するパラメータ又は症候の１つ以上の改善を認めるべきである。
【0067】
あるいは、さらに、本発明は、微生物感染症（例えば、細菌及び／又は真菌感染症）を処置するための医薬品の製造における本明細書に定義された本発明の化合物の使用を提供する。
【0068】
上述したように、本発明の化合物は、細菌感染症の処置に使用することができる。こうした感染症としては、グラム陽性（Ｇ＋）細菌又はグラム陰性（Ｇ－）細菌による感染症が挙げられる。
【0069】
例えば、本発明の化合物は、大腸菌（Ｅｃ：Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）感染症、緑膿菌（Ｐａ：Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）感染症、黄色ブドウ球菌（Ｓａ：Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）感染症、コリネバクテリウム グルタミクム（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｇｌｕｔａｍｉｃｕｍ）（Ｃｇ）感染症、エンテロコッカス フェシウム（Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃｉｕｍ）感染症、アシネトバクター バウマニ（Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｂａｕｍａｎｎｉｉ）感染症及び／又は肺炎桿菌感染症の処置に使用することができる。
【0070】
本発明の化合物は、緑膿菌感染症に起因する嚢胞性線維症の処置に使用することもできる。
本発明の化合物は、肺炎クラミジア感染症の処置に使用することもできる。
本発明の化合物は、肺炎クラミジア感染症の処置に使用することもできる。
【0071】
本発明の化合物は、例えば免疫不全患者における、創傷治癒の改善及び／又は支援に使用することもできる。
上述したように、本発明の化合物は、真菌感染症の処置に使用することができる。例えば、本発明の化合物は、カンジダ アルビカンス（Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ）（Ｃａ）感染症、ロドトルラ種（Ｒｈ）感染症及び／又はオーレオバシジウム プルランス（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｐｕｌｌｕｌａｎｓ）（Ａｐ）感染症の処置に使用することができる。特に、本発明の化合物は、カンジダ アルビカンス（Ｃａ）感染症の処置に使用することができる。
上述したように、本発明の化合物は、真菌感染症の処置に使用することができる。例えば、本発明の化合物は、カンジダ アルビカンス（Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ）（Ｃａ）感染症、ロドトルラ種（Ｒｈ）感染症及び／又はオーレオバシジウム プルランス（Ａｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｐｕｌｌｕｌａｎｓ）（Ａｐ）感染症の処置に使用することができる。特に、本発明の化合物は、カンジダ アルビカンス（Ｃａ）感染症の処置に使用することができる。
【0072】
本発明に係る処置対象は、好ましくはヒトであるが、獣医学処置も企図される。
これらの処置は、別の抗微生物剤の同時投与を含むことができる。したがって、更なる一態様においては、本発明は、抗微生物感染症の処置又は防止において別々に、同時に又は逐次に使用するための組合せ調製物として、（ａ）式（Ｉ）の化合物及び（ｂ）更なる抗微生物剤を含むプロダクトを提供する。
これらの処置は、別の抗微生物剤の同時投与を含むことができる。したがって、更なる一態様においては、本発明は、抗微生物感染症の処置又は防止において別々に、同時に又は逐次に使用するための組合せ調製物として、（ａ）式（Ｉ）の化合物及び（ｂ）更なる抗微生物剤を含むプロダクトを提供する。
【0073】
こうした抗微生物化合物は、例えば農業又は家庭若しくは産業的状況において、微生物汚染されやすい材料の殺菌剤として、非治療用途（生体外用途）も有する。したがって、更なる一態様においては、本発明は、抗微生物剤、特に抗菌及び／又は抗真菌剤としての本発明の化合物の使用を提供する。存在する生存可能な細菌の数を減少させるために、又は細菌増殖若しくは繁殖を制限するために、環境若しくは農業の場所若しくはプロダクト、並びに食料品及び食糧生産場所、又は例えば病院環境における表面若しくは道具を本発明の１種以上の化合物で処理する方法は、本発明の更なる態様を構成する。
【0074】
本発明の化合物は、防汚、抗バイオフィルム（例えば、細菌又は真菌バイオフィルムに対する）及び／又は駆虫用途を有することもできる。したがって、本発明の化合物は、防汚剤、抗バイオフィルム剤（例えば、細菌又は真菌バイオフィルムに対する）及び／又は駆虫剤として使用することができる。したがって、本発明は、細菌又は真菌感染症の処置に使用される本明細書に定義された化合物であって、前記細菌又は真菌感染症がバイオフィルムの形態である、化合物を提供する。本発明は、寄生虫感染症の処置に使用される本明細書に定義された化合物も提供する。
【0075】
バイオフィルムは、細胞外高分子のマトリックス（当該技術分野で多糖外被としても知られる）で包囲された微生物の堆積物又は群集である。これらの細胞外高分子は、一般に多糖、特に生物自身によって産生される多糖であるが、それらは別の生体高分子も含み得る。バイオフィルムは、一般に、不活性である可能性がある、又は生命のある可能性がある表面に付着するが、バイオフィルムは互いに又は任意の界面において付着した微生物から発生し得ることも観察された。こうした増殖様式は、微生物を保護し、それらの除去又は根絶を困難にする。バイオフィルムは、感染症、汚染、付着、腐敗などの点で、商業的、産業的及び医学的に重大な問題を生じる。
【0076】
バイオフィルム環境における微生物は、抗微生物剤、例えば、抗生物質、抗真菌剤及び殺菌剤、並びに宿主免疫防御又はクリアランス機構に対して同じ感受性を示さない。この耐性は、細胞外マトリックスの障壁効果及び／又は微生物自体の表現型変化によると考えられる。バイオフィルム中の微生物はより遅く増殖し、その結果、抗微生物剤をより遅く吸収することも考えられる。
【0077】
したがって、バイオフィルム中で増殖する細菌は、しばしば、それらのプランクトン対応物よりも抗微生物剤に対して耐性がある。プランクトン様細菌の感受性試験は、抗微生物剤に対する医療器具関連感染症のインビボ耐性を予測できない可能性がある。
【0078】
したがって、活性な抗微生物剤であり、バイオフィルムとして存在する微生物に対してでもそれらの効果を発揮することができる、薬剤を提供することが特に有利である。この性質は、実施例において実証され、本発明の好ましい化合物は、バイオフィルムに対して有効であり、バイオフィルム形成を防止する。
【0079】
本発明の化合物は、抗癌（例えば、抗腫瘍）活性を有することもできる。したがって、一部の実施形態においては、本発明は、癌の処置に（例えば、固形腫瘍などの腫瘍の処置に）使用される本発明の化合物を提供する。したがって、本発明の化合物は、抗腫瘍剤として使用することができる。あるいは、本発明は、癌（例えば、腫瘍）を処置する方法を提供する。該方法は、それを必要とする患者に治療有効量の本明細書に定義された本発明の化合物を投与することを含む。あるいは、さらに、本発明は、癌（例えば、腫瘍）を処置するための医薬品の製造における本明細書に定義された本発明の化合物の使用を提供する。この性質は、実施例において実証され、本発明の好ましい化合物は、腫瘍に対して活性である。
【0080】
適切な希釈剤、担体又は賦形剤と混合して本発明の１種以上の化合物を含む製剤は、本発明の更なる一態様を構成する。こうした製剤は、とりわけ、医薬（獣医学を含む）目的とすることができる。適切な希釈剤、賦形剤及び担体は、当業者に知られている。
【0081】
本発明に係る組成物（製剤）、例えば、医薬組成物は、例えば、経口、経鼻、非経口、静脈内（ｉｎｔｒａｖｅｎａｌ）、局所又は直腸投与に適切な形態で存在することができる。本明細書では「医薬」という用語は、本発明の獣医学的適用を含む。
【0082】
本明細書に定義された活性化合物は、錠剤、コート錠、鼻腔噴霧剤、溶液剤、乳濁液剤、リポソーム剤、散剤、カプセル剤、徐放性剤形などの従来の薬理学的投与形態で存在することができる。
【0083】
局所投与用製剤は、好ましくは、ゲル剤、クリーム剤、ローション剤、ペースト剤、又は水よりも粘稠性が高い別の調製物の形態である。更なる局所適用用製剤としては、本発明の化合物を含浸させた包帯剤、ガーゼなどが挙げられる。こうした材料を含浸させるときには、本発明の化合物を含む調製物は、水よりも粘稠性が高い必要はない。従来の医薬品賦形剤及び通常の製造方法をこれらの形態の調製に使用することができる。
【0084】
錠剤は、例えば、活性成分又は複数の活性成分を公知の賦形剤、例えば、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、ラクトースなどの希釈剤、コーンスターチ、アルギン酸などの崩壊剤、デンプン、ゼラチンなどの結合剤、ステアリン酸マグネシウム、タルカムなどの潤滑剤、及び／又はカルボキシポリメチレン、カルボキシメチルセルロース、酢酸フタル酸セルロース、ポリ酢酸ビニルなどの徐放性を得るための薬剤などと混合することによって製造することができる。
【0085】
錠剤は、必要に応じて、幾つかの層からなることができる。コート錠は、錠剤と同様に得られたコアを、錠剤コーティングに一般に使用される薬剤、例えば、ポリビニルピロリドン又はシェラック、アラビアゴム、タルカム、二酸化チタン又は糖で被覆することによって製造することができる。徐放性を得るために、又は配合禁忌を回避するために、コアも幾つかの層からなることができる。錠剤コートも徐放性を得るために幾つかの層からなることができ、その場合、錠剤について上記した賦形剤を使用することができる。
【0086】
器官特異的担体システムを使用することもできる。
注射液は、例えば、ｐ－ヒドロキシ安息香酸などの保存剤、又はＥＤＴＡなどの安定剤の添加などの従来の方法で製造することができる。溶液は、次いで、注射バイアル又はアンプルに充填される。
注射液は、例えば、ｐ－ヒドロキシ安息香酸などの保存剤、又はＥＤＴＡなどの安定剤の添加などの従来の方法で製造することができる。溶液は、次いで、注射バイアル又はアンプルに充填される。
【0087】
鼻腔噴霧剤は、同様に水溶液で処方することができ、エアロゾル噴霧剤と一緒に、又は手動圧縮手段を備えた、噴霧容器に充填される。１種又は数種の活性成分を含むカプセル剤は、例えば、活性成分をラクトース、ソルビトールなどの不活性担体と混合し、混合物をゼラチンカプセルに充填することによって製造することができる。
【0088】
適切な坐剤は、例えば、活性成分又は活性成分の組合せを、天然脂肪、ポリエチレングリコール、それらの誘導体などのこの目的のために想定される従来の担体と混合することによって製造することができる。
【0089】
活性化合物を含む単位用量は、好ましくは、抗微生物剤０．１～１０ｍｇ、例えば１～５ｍｇを含む。医薬組成物は、更に、別の抗微生物化合物などの別の細胞傷害性薬物を含めて、更なる活性成分を含むことができる。別の活性成分は、異なるタイプの抗生物質を含むことができる。
【0090】
生理活性化合物は、局所組成物に使用するときには、一般に、少なくとも０．１重量％の量で存在する。ほとんどの場合、本発明の化合物を１．０重量％を超える量で使用する必要はない。
【0091】
こうした組成物を全身（筋肉内、静脈内、腹腔内）に使用する際には、活性化合物は、生理活性分子の血清レベルが少なくとも約５μｇ／ｍｌになる量で存在することができる。一般に、血清レベルが５００μｇ／ｍｌを超える必要はない。好ましい血清レベルは、約１００ｕｇ／ｍｌである。こうした血清レベルは、用量１～約１０ｍｇ／ｋｇで全身投与される組成物中に生理活性化合物を組み込むことによって得ることができる。一般に、化合物（単数又は複数）を１００ｍｇ／ｋｇを超える用量で投与する必要はない。
【0092】
本明細書に記述されるように、本発明の分子は抗微生物活性を有する。
ここで、本発明を以下の図面を参照して以下の非限定的実施例によって説明する。
ここで、本発明を以下の図面を参照して以下の非限定的実施例によって説明する。
【図面の簡単な説明】
【0093】
【図1】オイシンスチエラミドの一般構造を示す図である。
【図2】式（Ｉ）の両親媒性バルビツラートの構造を示す図である。各化合物のカウンターイオンはＣＦ3ＯＯ-である。
【図3】式（Ｉ）の両親媒性バルビツラートの構造を示す図である。各化合物のカウンターイオンはＣＦ3ＯＯ-である。
【図4】式（Ｉ）の更なる対象化合物を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【実施例】
【0094】
実施例１
細菌参考菌株に対する抗微生物活性
２つのシリーズの両親媒性バルビツラートを下記方法によって調製した。
細菌参考菌株に対する抗微生物活性
２つのシリーズの両親媒性バルビツラートを下記方法によって調製した。
【0095】
シリーズ７は、２個のカチオン性アミノ基を有するバルビツラートからなり、シリーズ８は、２個のカチオン性グアニジン基を有するバルビツラートを包含した（図２及び３）。バルビツラートを最初に抗生物質感受性グラム陽性及びグラム陰性参考菌株に対する抗微生物活性についてスクリーニングした。結果を下表１に示す。
【0096】
【表1】
【0097】
a細菌参考菌株：
Ｓ．ａ－黄色ブドウ球菌ＡＴＣＣ９１４４，
Ｃ．ｇ－コリネバクテリウム グルタミクムＡＴＣＣ１３０３２，
Ｅ．ｃ－大腸菌ＡＴＣＣ２５９２２、及び
Ｐ．ａ－緑膿菌ＰＡ０１、ＤＳＭ１９８８０（ＡＴＣＣ１５６９２）。
Ｓ．ａ－黄色ブドウ球菌ＡＴＣＣ９１４４，
Ｃ．ｇ－コリネバクテリウム グルタミクムＡＴＣＣ１３０３２，
Ｅ．ｃ－大腸菌ＡＴＣＣ２５９２２、及び
Ｐ．ａ－緑膿菌ＰＡ０１、ＤＳＭ１９８８０（ＡＴＣＣ１５６９２）。
【0098】
b２当量のＣＦ3ＯＯ-、すなわち＋Ｍｗ２２８．０５を含む分子量
シリーズ７のアミンバルビツラートの場合、最小阻止濃度（ＭＩＣ：ｍｉｎｉｍｕｍ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ）値は、グラム陽性菌株黄色ブドウ球菌及びＣ．グルタミクムに対して０．２５～８μｇ／ｍＬの範囲であり、グラム陰性菌大腸菌及び緑膿菌に対して２～１６μｇ／ｍＬであった。
シリーズ７のアミンバルビツラートの場合、最小阻止濃度（ＭＩＣ：ｍｉｎｉｍｕｍ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ）値は、グラム陽性菌株黄色ブドウ球菌及びＣ．グルタミクムに対して０．２５～８μｇ／ｍＬの範囲であり、グラム陰性菌大腸菌及び緑膿菌に対して２～１６μｇ／ｍＬであった。
【0099】
したがって、グラム陰性菌よりもグラム陽性菌に対して高い抗微生物活性が一般に認められたが、シリーズ７の最も強力なアミンバルビツラートでも差はごくわずかであった。
最も強力なアミンバルビツラートは７（ｉｉｉ）であり、これは、２個の極めてかさ高い親油性３，５－ジ－ｔＢｕ－ベンジリック側鎖を有し、すべての参考菌株に対して０．２５～４μｇ／ｍＬの極めて低い範囲のＭＩＣ値を示した。
最も強力なアミンバルビツラートは７（ｉｉｉ）であり、これは、２個の極めてかさ高い親油性３，５－ジ－ｔＢｕ－ベンジリック側鎖を有し、すべての参考菌株に対して０．２５～４μｇ／ｍＬの極めて低い範囲のＭＩＣ値を示した。
【0100】
２種のバルビツラート７（ｉ）及び７（ｉｉ）は、参考菌株に対して１～８μｇ／ｍＬのＭＩＣ値を示す２番目に強力な誘導体であった。これらは、より小さい親油性側鎖を有し、側鎖サイズと抗微生物活性の相関を明らかにした。
【0101】
シリーズ７のアミンバルビツラートのグアニル化は、生成したシリーズ８のグアニジンバルビツラートの抗微生物活性を著しく増加させた。シリーズ８の極めて強力なグアニル化バルビツラートは、グラム陽性菌株黄色ブドウ球菌及びＣ．グルタミクムに対して＜０．１３～１μｇ／ｍＬの狭い範囲のＭＩＣ値を示し、グラム陰性菌大腸菌及び緑膿菌に対してＭＩＣ１～８μｇ／ｍＬであった。
【0102】
グアニル化バルビツラートは、それによって、グラム陽性参考菌株に対して高い効力を示し、等効力と考えられた。グラム陰性参考菌株に対する抗微生物活性は、８（ｉ）、８（ｉｉ）及び８（ｖ）が大腸菌及び緑膿菌に対してＭＩＣ値１～４μｇ／ｍＬの最も強力な誘導体であることを明らかにした。
【0103】
グアニジン類似体８（ｉｉｉ）（ＭＩＣ：４μｇ／ｍＬ）は、それに続き、極めて強力な極めてかさ高いアミンバルビツラート７（ｉｉｉ）の類似体であった。
３０種の多耐性臨床分離株に対する抗微生物活性
基質特異性拡張型β－ラクタマーゼ－カルバペネマーゼ（ＥＳＢＬ－ＣＡＲＢＡ）産生及びコリスチン耐性の分離株を含めて、グラム陽性及びグラム陰性菌の３０種の多耐性臨床分離株のパネルに対してもバルビツラートをスクリーニングした。
３０種の多耐性臨床分離株に対する抗微生物活性
基質特異性拡張型β－ラクタマーゼ－カルバペネマーゼ（ＥＳＢＬ－ＣＡＲＢＡ）産生及びコリスチン耐性の分離株を含めて、グラム陽性及びグラム陰性菌の３０種の多耐性臨床分離株のパネルに対してもバルビツラートをスクリーニングした。
【0104】
試験した化合物の抗微生物活性（ＭＩＣμｇ／ｍｌ）を下表２に示す。毒性をヒトＲＢＣに対する溶血活性（ＥＣ50μｇ／ｍｌ）及び個々の分離菌に対する選択指数（ＥＣ50／ＭＩＣ値）、（括弧中に記載）として示す。
【0105】
【表2-1】
【0106】
【表2-2】
【0107】
【表2-3】
【0108】
【表2-4】
【0109】
毒性はヒトＲＢＣに対して求め、選択指数（ＳＩ：ｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎｄｅｘ）は個々の分離菌に対するＭＩＣ値で割ったＲＢＣ ＥＣ50値として定義した。多耐性臨床分離株に対する抗微生物効力は、最も強力なバルビツラートでＭＩＣ２～４μｇ／ｍｌと低く、抗生物質感受性菌株に対しても同じ傾向であった。
【0110】
最も強力な広域スペクトルバルビツラートは、アミンバルビツラート７（ｉｉｉ）並びにグアニジンバルビツラート８（ｉ）、８（ｉｉ）、８（ｉｉｉ）及び８（ｖ）であった。グアニジン基は、アミンバルビツラートに比べて多数の極めて強力なグアニジンバルビツラートによってカチオン性基として有効であることが明らかであった。しかし、グアニジンバルビツラートの幾つかは、類似のアミンバルビツラートに比べてほぼ２倍のＲＢＣ毒性を示した。２種のカチオン性基と７種の親油性側鎖との相互作用は、それによって、抗微生物効力とＲＢＣ毒性の両方に影響した。
【0111】
７（ｉ）は、低い溶血活性（ＥＣ50 １４３μｇ／ｍｌ）を示し、黄色ブドウ球菌（Ｓ．ａｕｒｕｅｓ）、Ｅ．フェシウム及び大腸菌に対するその活性に関して１８～３６の良好なＳＩであった。
【0112】
３，５－二置換ベンジリック側鎖を有する３種のアミンバルビツラート７（ｉｉ）、７（ｖｉ）及び７（ｉｉｉ）のうち、極めてかさ高い７（ｉｉｉ）は、最も強力であり、全３０種の多耐性臨床分離株に対してＭＩＣ値が２～１６μｇ／ｍｌであった。
【0113】
残りの２種の３，５－二置換バルビツラートでは、７（ｉｉ）が７（ｖｉ）よりも強力であり、かさ高いベンジリック置換基としての２個の臭素原子は、２個のトリフルオロメチル基を有するよりも有効であることを示した。しかし、７（ｉｉ）の計算ＣｌｏｇＰは、より強力でない７（ｖｉ）の計算ＣｌｏｇＰよりも低く、側鎖の親油性効果が抗微生物効力に影響しただけでなく、恐らくは電子的効果も影響した。臭素化バルビツラート７（ｉｉ）は、黄色ブドウ球菌、Ｅ．フェシウム及び大腸菌に対してＭＩＣ値４～８μｇ／ｍｌで極めて強力であり、１０～２１のその高いＳＩによって、調製された最も有望なアミンバルビツラートであった。
【0114】
アミンバルビツラート７（ｉｖ）及び７（ｖ）は、ナフチルベースの側鎖を含み、どちらも黄色ブドウ球菌及びＥ．フェシウムのグラム陽性分離菌に対して最高の効力を示し、ＭＩＣ値４～１６μｇ／ｍｌであった。フッ素置換バルビツラート７（ｖ）は、Ｅ．フェシウムの分離菌に対して７（ｉｖ）よりも強力であった。差は、使用濃度勾配の１タイターステップであったが、７（ｉｖ）より高い７（ｖ）の側鎖ＣｌｏｇＰも反映した（表２）。ＥＣ50 ２４３μｇ／ｍｌの７（ｉｖ）とＥＣ50 １６０μｇ／ｍｌの７（ｖ）の両方の極めて低い溶血活性も重要であった。これは、グラム陽性分離菌に対して極めて高いＳＩ２０～４０を与えた。
【0115】
上述したように、バルビツラートのグアニル化は、シリーズ８の抗微生物効力と溶血活性の両方を増加させた。
グアニジン基が大きいほど、第一級アミン基よりもより複雑な静電気及び水素結合相互作用を形成し、それによってアニオン性リン脂質と両性イオン性リン脂質の両方と相互作用し得る。抗微生物活性及びＲＢＣ毒性の増加は、細菌膜の主成分であるアニオン性リン脂質と哺乳動物細胞構造の主成分である両性イオン性リン脂質の両方に結合するグアニジン基の能力によって説明され得る。
グアニジン基が大きいほど、第一級アミン基よりもより複雑な静電気及び水素結合相互作用を形成し、それによってアニオン性リン脂質と両性イオン性リン脂質の両方と相互作用し得る。抗微生物活性及びＲＢＣ毒性の増加は、細菌膜の主成分であるアニオン性リン脂質と哺乳動物細胞構造の主成分である両性イオン性リン脂質の両方に結合するグアニジン基の能力によって説明され得る。
【0116】
側鎖構造に関しては、シリーズ８のグアニジンバルビツラートではシリーズ７のアミンバルビツラートと同程度の効力が認められた。しかし、グアニジンシリーズ８は、アミンシリーズ７に比べてグラム陰性多耐性臨床分離株に対する抗微生物活性が大幅に増加した。４置換バルビツラート８（ｉ）は、肺炎桿菌及びＡ．バウマニのグラム陰性多耐性臨床分離株に対するＭＩＣ値が４～８μｇ／ｍｌであり、黄色ブドウ球菌、Ｅ．フェシウム及び大腸菌に対するＭＩＣ値が２～４μｇ／ｍｌであった。これは、類似のアミンバルビツラート７（ｉ）に比べて最高４倍の抗微生物活性向上であった。また、８（ｉ）の緑膿菌に対するより高い抗微生物活性（ＭＩＣ：８～１６μｇ／ｍｌ）が、カチオン性基をグアニジンに変えることによって得られた。
【0117】
シリーズ８のグアニジンバルビツラートのヒトＲＢＣに対する毒性レベルは、上述の特定の側鎖構造にも依存した。グアニジン８（ｉ）では、アミン７（ｉ）に比べて２倍のＲＢＣ毒性が認められた。しかし、８（ｉ）の溶血活性は依然として低く、ＥＣ50 ７７μｇ／ｍｌであり、多耐性黄色ブドウ球菌、Ｅ．フェシウム及び大腸菌に対するその高い効力に対して１９～３９の高いＳＩであった。
【0118】
試験した２種の３，５－二置換グアニジンバルビツラート８（ｉｉ）及び８（ｉｉｉ）のうち、８（ｉｉ）は、試験を通して調製された全体的に最も広域スペクトルのバルビツラートであり、グラム陽性及びグラム陰性菌３０種全ての多耐性臨床分離株に対してＭＩＣ値２～１６μｇ／ｍｌを示した。８（ｉｉ）の溶血活性（ＥＣ50：５６μｇ／ｍｌ）は、グアニジンバルビツラートで認められた毒性のほぼ２倍の増加及びその類似のアミン対応物７（ｉｉ）の溶血毒性（ＥＣ50：８３μｇ／ｍｌ）に比べて、予想よりも低かった。したがって、ベンジリック側鎖上のかさ高い置換基としての２個の臭素原子の有効性は、再度実証され、調製された最も有望な広域スペクトルバルビツラートとして８（ｉｉ）を示すものであった。
【0119】
極めてかさ高いバルビツラート８（ｉｉｉ）は、調製された最も強力な誘導体の一つであった。
２種のナフチルベースのグアニジンバルビツラート８（ｉｖ）及び８（ｖ）の抗微生物効力は、フッ素化８（ｖ）が３０種全ての多耐性臨床分離株に対してＭＩＣ値２～１６μｇ／ｍｌの広域スペクトルでの最高の活性を有することを示した。ヒトＲＢＣに対する毒性も８（ｖ）では低く（ＥＣ50：８８μｇ／ｍｌ）、最も有望な臭素化アミンバルビツラート７（ｉｉ）と同等であった。８（ｖ）の高い効力のために、それは、黄色ブドウ球菌、Ｅ．フェシウム及び大腸菌に対して１１～４４のより高いＳＩも示し、それによって、調製した全バルビツラートのうち黄色ブドウ球菌の多耐性臨床分離株に対して全体的に２番目に最も選択的な誘導体であった（ＳＩ：４４）。
２種のナフチルベースのグアニジンバルビツラート８（ｉｖ）及び８（ｖ）の抗微生物効力は、フッ素化８（ｖ）が３０種全ての多耐性臨床分離株に対してＭＩＣ値２～１６μｇ／ｍｌの広域スペクトルでの最高の活性を有することを示した。ヒトＲＢＣに対する毒性も８（ｖ）では低く（ＥＣ50：８８μｇ／ｍｌ）、最も有望な臭素化アミンバルビツラート７（ｉｉ）と同等であった。８（ｖ）の高い効力のために、それは、黄色ブドウ球菌、Ｅ．フェシウム及び大腸菌に対して１１～４４のより高いＳＩも示し、それによって、調製した全バルビツラートのうち黄色ブドウ球菌の多耐性臨床分離株に対して全体的に２番目に最も選択的な誘導体であった（ＳＩ：４４）。
【0120】
バルビツラート８（ｖ）は、グラム陰性菌の個々の分離菌に対しても最も選択的なバルビツラートの一つであった。より効力の低い類似体８（ｉｖ）は、黄色ブドウ球菌及びＥ．フェシウムに対するＭＩＣ値が８～１６μｇ／ｍｌであり、それによってそのアミン類似体７（ｉｖ）と等効力であった。大腸菌に対する８（ｉｖ）の効力は７（ｉｖ）よりも高いが、より高い溶血活性のために、グアニル化バルビツラート８（ｉｖ）のＳＩはアミンバルビツラート７（ｉｖ）よりも低かった。したがって、抗微生物活性よりもＲＢＣ毒性に対して強い効果が７（ｉｖ）から８（ｉｖ）へのグアニル化によって認められた。
【0121】
最終手段として用いられるカチオン性抗生物質コリスチンに対して耐性を示す肺炎桿菌Ｋ４７－２５、肺炎桿菌５０５３１６３３及びＡ．バウマニＫ６３－５８の３種の臨床分離株に対して、調べたすべての両親媒性バルビツラートが、コリスチン感受性臨床分離株に対するのと同じ範囲の抗微生物活性を示した。耐性の機序は、コリスチンの結合及び機構に影響するＬＰＳ組成及び電荷の変化を伴うと考えられるが、最も強力な本両親媒性バルビツラートの結合及び活性に対してはいかなる重大な影響もないと思われた。
【0122】
化学物質及び装置
すべての試薬及び溶媒を商業的供給源から購入し、そのまま使用した。ただし、出発材料１－（ブロモメチル）４－フルオロナフタレンについては、４－フルオロ－１－ナフトエ酸から文献の手順に従って合成した。
すべての試薬及び溶媒を商業的供給源から購入し、そのまま使用した。ただし、出発材料１－（ブロモメチル）４－フルオロナフタレンについては、４－フルオロ－１－ナフトエ酸から文献の手順に従って合成した。
【0123】
無水ＤＭＦは、４Å（４×１０-10ｍ）モレキュラーシーブと一緒に貯蔵して調製した。反応をＭｅｒｃｋプレコートシリカゲルプレート（６０Ｆ２５４）を用いた薄層クロマトグラフィ（ＴＬＣ：ｔｈｉｎ－ｌａｙｅｒ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ）によってモニターした。ＵＶ光を用いて、又は過マンガン酸カリウム若しくはホスホモリブデン酸（ＰＭＡ）に浸漬し、続いてヒートガンで軽く加熱して、可視化した。
【0124】
順相フラッシュクロマトグラフィを用いた精製を、Ｎｏｒｍａｌｓｉｌ６０、４０～６３ｍｍシリカゲルを用いた通常のカラムクロマトグラフィによって、又は自動順相フラッシュクロマトグラフィ（ヘプタン／ＥｔＯＡｃ）によって、Ｂｉｏｔａｇｅ ＳＰ－１付属のＳａｍｐｌｅｔ（登録商標）カートリッジ上にあらかじめ充填された試料を用いて行った。
【0125】
逆相（ＲＰ：ｒｅｖｅｒｓｅｄ－ｐｈａｓｅ）Ｃ１８カラムクロマトグラフィ（０．１％ＴＦＡを含む水／０．１％ＴＦＡを含むアセトニトリル）による反応物の精製も、Ｓａｍｐｌｅｔ（登録商標）カートリッジ上にあらかじめ充填された試料を用いて自動精製モジュール上で行った。分析ＲＰＨＰＬＣをＸＢｒｉｄｇｅ（商標）Ｃ１８ ５μｍ、４．６ｍｍ×２５０ｍｍカラムを備えたＷａｔｅｒｓ ２６９５ Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎｓ Ｍｏｄｕｌｅ上で行い、波長２１０～３１０ｎｍの範囲でＷａｔｅｒｓ ９９６ ＰＤＡ検出器を用いて波長２１４及び２５４ｎｍで分析した。どちらも０．１％ＴＦＡを含む水とアセトニトリルからなる移動相を用いて誘導体を溶出した。勾配は１０％アセトニトリル（３分間）で始め、続いて９０％アセトニトリルまで１７分間で直線勾配とした。流量は１ｍＬ／分であった。ＮＭＲスペクトルを５ｍｍ ＳｍａｒｔＰｒｏｂｅ ＢＢ／１Ｈ（ＢＢ＝１９Ｆ、３１Ｐ－１５Ｎ）を備えた４００ＭＨｚ Ｂｒｕｋｅｒ ＡｖａｎｃｅＩＩＩＨＤによって得た。データを以下のように表す：化学シフト、多重度（ｓ＝一重線、ｄ＝二重線、ｔ＝三重線、ｑ＝四重線、ｐ＝五重線、ｈ＝七重線、ｍ＝多重線）、結合定数（Ｊ、Ｈｚ）及び積分値。
【0126】
化学シフト（δ）を残留溶媒ピークに対するｐｐｍで報告する（ＣＤＣｌ3：δＨ７．２６及びδＣ７７．１６、ＣＤ３ＯＤ：δＨ３．３１及びδＣ４９．００）。正及び負イオンエレクトロスプレーイオン化質量分析法（ＥＳＩ－ＭＳ）をＴｈｅｒｍｏ ｅｌｅｃｔｒｏｎ ＬＴＱ Ｏｒｂｉｔｒａｐ ＸＬ分光計で行った。
【0127】
合成
置換バルビツラートの確立された合成法は、アルキル化マロン酸エステルと尿素の縮合、Ｎ－アルキル化尿素及びマロン酸ジエチルを用いた環化、バルビツール酸とアルデヒド又はケトンのクネーフェナーゲル縮合、並びにバルビツール酸のアルキル化を含む。しかし、後者の手順は、１、３及び５位のアルキル化に関して非選択的である。本発明者らは、ジアルキル化マロン酸エステルと尿素の縮合とそれに続くＮ－アルキル化が最も成功する戦略であることを見いだした。
置換バルビツラートの確立された合成法は、アルキル化マロン酸エステルと尿素の縮合、Ｎ－アルキル化尿素及びマロン酸ジエチルを用いた環化、バルビツール酸とアルデヒド又はケトンのクネーフェナーゲル縮合、並びにバルビツール酸のアルキル化を含む。しかし、後者の手順は、１、３及び５位のアルキル化に関して非選択的である。本発明者らは、ジアルキル化マロン酸エステルと尿素の縮合とそれに続くＮ－アルキル化が最も成功する戦略であることを見いだした。
【0128】
スキーム１に示すように、対称的に二置換されたマロン酸エステル３（ｉ）－（ｖｉ）を適切なベンジリックハライドを用いたジアルキル化によってマロン酸ジエチル２から得た後、ＤＭＦ中でＮａＨ又はＫ2ＣＯ3で処理して尿素で環化して、４（ｉ）－（ｖｉ）を収率７０～９２％で得た。乾燥状態が収率に必須であった。マロン酸エステル３（ｖｉ）の環化は、反応条件下での脱炭酸のために低収率（２７％）であった。５，５－二置換バルビツラート４（ｉ）－（ｖｉ）を塩基性条件（Ｋ2ＣＯ3のＤＭＦ溶液）下で過剰の１，４－ジブロモブタンでアルキル化して、Ｎ，Ｎ’－ジアルキル化アルキルブロミドバルビツラート５（ｉ）－（ｖｉ）を収率４０～９６％で得た。これらをＮａＮ3（２～３当量）を用いてＤＭＦ中で対応するアジド６（ｉ）－（ｖｉ）に転化した（収率６８～１００％）。ＮａＢＨ4及び触媒作用量のジチオールを用いてアジドをアミンに還元し、続いてＢｏｃ保護して、フラッシュクロマトグラフィ精製後にＢｏｃ保護ジアミンを得た。ＴＦＡを用いて脱保護して標的アミンバルビツラート７（ｉ）－（ｖｉ）を得た（分析Ｃ１８逆相ＨＰＬＣで測定して＞９５％純度）。アミンバルビツラート７（ｉ）－（ｖ）をＮ－Ｂｏｃ－１Ｈ－ピラゾール－１－カルボキサミジンを用いてＴＨＦ中でグアニル化し、Ｂｏｃ保護基を除去する前に精製した。Ｃ１８逆相フラッシュクロマトグラフィによって精製して、標的であるグアニル化バルビツラート８（ｉ）－（ｖ）のＴＦＡ塩を＞９５％純度で得た。
【0129】
【化7】
【0130】
スキーム１．条件：ａ）条件：ａ）ＡｒＣＨ2Ｂｒ、Ｋ2ＣＯ3又はＮａＨ、ＤＭＦ、Ｒ．Ｔ．、ｂ）１０当量尿素（無水）、ＮａＨ、ＤＭＦ（無水）、Ｒ．Ｔ．、ｃ）１０当量１，４－ジブロモブタン、４当量Ｋ2ＣＯ3、ＤＭＦ（無水）、Ｒ．Ｔ．、１８～４８時間、ｄ）３当量ＮａＮ3、ＤＭＦ（無水）、ｅ）ＮａＢＨ4、１，３－ジメルカプトプロパン、ＴＨＦ：イソプロパノール１：１、Ｒ．Ｔ．、ｆ）ｉ．Ｂｏｃ2Ｏ、Ｒ．Ｔ．、ｉｉ．ＣＨ2Ｃｌ2：ＴＦＡ、ｈ）ｉ．Ｎ－Ｂｏｃ－１Ｈ－ピラゾール－１－カルボキサミジン、ＴＨＦ、Ｒ．Ｔ．、ｉｉ．ＣＨ2Ｃｌ2：ＴＦＡ。
【0131】
詳細な合成
ジアルキル化マロン酸エステル－３（ｉ）－（ｖｉ）
一般的手順：ＤＭＦ（約１００ｍｇ／ｍＬ）中のマロン酸ジエチルとＣｓ2ＣＯ3（２．１～２．２当量）又はＫ2ＣＯ3（３当量）の撹拌溶液にハロゲン化アルキル（２当量）を添加した。反応物を室温で終夜撹拌し続けた。反応混合物をＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）で希釈し、水（２５ｍＬ）、５％ＬｉＣｌ水溶液（３×２５ｍＬ）及び塩水（２５ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮した。粗生成物をＣＨ2Ｃｌ2（２０ｍＬ）に溶解し、Ｃｅｌｉｔｅ上に吸着させた。生成物をシリカカラム上で１～５％ＥｔＯＡｃペンタン溶液を移動相として用いて精製した。
ジアルキル化マロン酸エステル－３（ｉ）－（ｖｉ）
一般的手順：ＤＭＦ（約１００ｍｇ／ｍＬ）中のマロン酸ジエチルとＣｓ2ＣＯ3（２．１～２．２当量）又はＫ2ＣＯ3（３当量）の撹拌溶液にハロゲン化アルキル（２当量）を添加した。反応物を室温で終夜撹拌し続けた。反応混合物をＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）で希釈し、水（２５ｍＬ）、５％ＬｉＣｌ水溶液（３×２５ｍＬ）及び塩水（２５ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮した。粗生成物をＣＨ2Ｃｌ2（２０ｍＬ）に溶解し、Ｃｅｌｉｔｅ上に吸着させた。生成物をシリカカラム上で１～５％ＥｔＯＡｃペンタン溶液を移動相として用いて精製した。
【0132】
ジエチル２，２－ビス（４－ｔｅｒｔ－ブチルベンジル）マロナート－３（ｉ）
一般的手順に従って、ＤＭＦ（２５ｍＬ）中のマロン酸ジエチル（３．４３ｇ、２１．４ｍｍｏｌ）とＫ2ＣＯ3（８．８ｇ、６４．２ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に１－（ブロモメチル）－４－ｔｅｒｔ－ブチルベンゼン（１０ｇ、４４ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で終夜撹拌し続けた。反応混合物をＥｔＯＡｃ（８０ｍＬ）で希釈し、水（３×５０ｍＬ）、５％ＬｉＣｌ水溶液（５０ｍＬ）及び塩水（５０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮した。粗生成物をジクロロメタン（２０ｍＬ）に溶解し、Ｃｅｌｉｔｅ上に吸着させた。生成物をシリカカラム上で１～５％ＥｔＯＡｃペンタン溶液を移動相として用いて精製して、３（ｉ）（８．８０ｇ、９０％）を白色固体として得た。
一般的手順に従って、ＤＭＦ（２５ｍＬ）中のマロン酸ジエチル（３．４３ｇ、２１．４ｍｍｏｌ）とＫ2ＣＯ3（８．８ｇ、６４．２ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に１－（ブロモメチル）－４－ｔｅｒｔ－ブチルベンゼン（１０ｇ、４４ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で終夜撹拌し続けた。反応混合物をＥｔＯＡｃ（８０ｍＬ）で希釈し、水（３×５０ｍＬ）、５％ＬｉＣｌ水溶液（５０ｍＬ）及び塩水（５０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮した。粗生成物をジクロロメタン（２０ｍＬ）に溶解し、Ｃｅｌｉｔｅ上に吸着させた。生成物をシリカカラム上で１～５％ＥｔＯＡｃペンタン溶液を移動相として用いて精製して、３（ｉ）（８．８０ｇ、９０％）を白色固体として得た。
【0133】
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.28 (d, J = 8.3 Hz, 4H), 7.11 (d, J = 8.4 Hz, 4H), 4.10 (q, J = 7.1 Hz, 4H), 3.19 (s, 4H), 1.30 (s, 18H), 1.14 (t, J = 7.1 Hz, 6H).
13i) NMR (101 MHz, CDCl3): δ 171.2, 149.7, 133.4, 129.9, 125.2, 61.2, 60.4, 38.6, 34.5, 31.5, 14.0.
HRMS-ESI: C29H40NaO4 + [M+Na]+ 計算値: 475.2818, 実測値: 475.2795.
13i) NMR (101 MHz, CDCl3): δ 171.2, 149.7, 133.4, 129.9, 125.2, 61.2, 60.4, 38.6, 34.5, 31.5, 14.0.
HRMS-ESI: C29H40NaO4 + [M+Na]+ 計算値: 475.2818, 実測値: 475.2795.
【0134】
ジエチル２，２－ビス（３，５－ジブロモベンジル）マロナート－３（ｉｉ）
一般的手順に従って、ＤＭＦ（５ｍＬ）中のマロン酸ジエチル（４６０ｍｇ、２．９ｍｍｏｌ）とＣｓ2ＣＯ3（２．０ｇ、６．３７ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に１，３－ジブロモ－５（ブロモメチル）ベンゼン（２ｇ、６．０ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で終夜撹拌し続けた。反応混合物をＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）で希釈し、水（２５ｍＬ）、５％ＬｉＣｌ水溶液（３×２５ｍＬ）及び塩水（２５ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮した。粗生成物をＣＨ2Ｃｌ2（２０ｍＬ）に溶解し、Ｃｅｌｉｔｅ上に吸着させた。生成物をシリカカラム上で１～５％ＥｔＯＡｃペンタン溶液を移動相として用いて精製して、３（ｉｉ）（１．１７ｇ、６１％）を白色固体として得た。
一般的手順に従って、ＤＭＦ（５ｍＬ）中のマロン酸ジエチル（４６０ｍｇ、２．９ｍｍｏｌ）とＣｓ2ＣＯ3（２．０ｇ、６．３７ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に１，３－ジブロモ－５（ブロモメチル）ベンゼン（２ｇ、６．０ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で終夜撹拌し続けた。反応混合物をＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）で希釈し、水（２５ｍＬ）、５％ＬｉＣｌ水溶液（３×２５ｍＬ）及び塩水（２５ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮した。粗生成物をＣＨ2Ｃｌ2（２０ｍＬ）に溶解し、Ｃｅｌｉｔｅ上に吸着させた。生成物をシリカカラム上で１～５％ＥｔＯＡｃペンタン溶液を移動相として用いて精製して、３（ｉｉ）（１．１７ｇ、６１％）を白色固体として得た。
【0135】
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.56 (t, J = 1.8 Hz, 2H), 7.24 (d, J = 1.8 Hz, 4H), 4.15 (q, J = 7.1 Hz, 4H), 3.11 (s, 4H), 1.20 (t, J = 7.2 Hz, 6H).
13i) NMR (101 MHz, CDCl3): δ 170.0, 139.9, 132.8, 132.0, 122.7, 61.9, 60.0, 39.3, 13.9.
HRMS-ESI: C21H20Br4NaO4 + [M+Na]+ 計算値: 674.7987, 実測値: 674.7961
13i) NMR (101 MHz, CDCl3): δ 170.0, 139.9, 132.8, 132.0, 122.7, 61.9, 60.0, 39.3, 13.9.
HRMS-ESI: C21H20Br4NaO4 + [M+Na]+ 計算値: 674.7987, 実測値: 674.7961
【0136】
ジエチル２，２－ビス（ナフタレン－２－イル－メチル）マロナート－３（ｉｖ）
０℃の１５ｍＬ ＣＨ2Ｃｌ2中のマロン酸ジエチル（３．４４ｇ、２１．５ｍｍｏｌ）の撹拌溶液にＤＢＵ（３．３ｍＬ、２２．６ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を５分間撹拌した後、２－（ブロモメチル）ナフタレン（ｎａｐｈｔａｌｅｎｅ）（５ｇ、２２．６ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温にし、終夜撹拌した。反応物を濃縮し、粗生成物を褐色オイルとして単離した。オイルをＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）に溶解し、水（２×３０ｍＬ）、１０％クエン酸（３０ｍＬ）、１０％ＮａＨＣＯ3（３０ｍＬ）及び塩水（３０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮して、ほぼ純粋なモノアルキル化マロン酸ジエチル４．８３ｇを得た。０℃の無水ＴＨＦ（１５ｍＬ）中のＮａＨ（７７４ｍｇ、３２，２ｍｍｏｌ）懸濁液にジエチル２－（ナフタレン－２－イルメチル）マロナート（４，８ｇ）をＴＨＦ（１５ｍＬ）溶液として滴下した。生成した混合物を１０分間撹拌した後、２－ナフチル（ｎａｐｈｔｙｌ）メチルブロミド（５ｇ、２２．６ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温にし、終夜撹拌した。反応混合物を氷浴中で冷却し、過剰のＮａＨを１０％クエン酸溶液でクエンチし、反応混合物を濃縮した。次いで、粗生成物をＥｔＯＡｃに溶解し、１０％クエン酸溶液（３×３０ｍＬ）、１０％ＮａＨＣＯ3溶液（２×３０ｍＬ）及び塩水（３０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮して、粗製物３（ｉｖ）（７．３５ｇ、７８％）を得た。
０℃の１５ｍＬ ＣＨ2Ｃｌ2中のマロン酸ジエチル（３．４４ｇ、２１．５ｍｍｏｌ）の撹拌溶液にＤＢＵ（３．３ｍＬ、２２．６ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を５分間撹拌した後、２－（ブロモメチル）ナフタレン（ｎａｐｈｔａｌｅｎｅ）（５ｇ、２２．６ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温にし、終夜撹拌した。反応物を濃縮し、粗生成物を褐色オイルとして単離した。オイルをＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）に溶解し、水（２×３０ｍＬ）、１０％クエン酸（３０ｍＬ）、１０％ＮａＨＣＯ3（３０ｍＬ）及び塩水（３０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮して、ほぼ純粋なモノアルキル化マロン酸ジエチル４．８３ｇを得た。０℃の無水ＴＨＦ（１５ｍＬ）中のＮａＨ（７７４ｍｇ、３２，２ｍｍｏｌ）懸濁液にジエチル２－（ナフタレン－２－イルメチル）マロナート（４，８ｇ）をＴＨＦ（１５ｍＬ）溶液として滴下した。生成した混合物を１０分間撹拌した後、２－ナフチル（ｎａｐｈｔｙｌ）メチルブロミド（５ｇ、２２．６ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温にし、終夜撹拌した。反応混合物を氷浴中で冷却し、過剰のＮａＨを１０％クエン酸溶液でクエンチし、反応混合物を濃縮した。次いで、粗生成物をＥｔＯＡｃに溶解し、１０％クエン酸溶液（３×３０ｍＬ）、１０％ＮａＨＣＯ3溶液（２×３０ｍＬ）及び塩水（３０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮して、粗製物３（ｉｖ）（７．３５ｇ、７８％）を得た。
【0137】
1HNMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.85-7.80 (m, 2H), 7.77 (d, J = 8.1 Hz, 4H), 7.65 (d, J = 1.7 Hz, 2H), 7.49-7.43 (m, 4H), 7.32 (dd, J = 8.5, 1.7 Hz, 2H), 4.14 (q, J = 7.1 Hz, 4H), 3.45 (s, 4H), 1.14 (t, J = 7.1 Hz, 6H). HRMS-ESI: C29H29O4 + [M+H]+ 計算値: 441.2060, 実測値: 441.2059.
【0138】
ジエチル２，２－ビス（（４－フルオロナフタレン－１－イル－メチル）マロナート－３（ｖ）
一般的手順に従って、ＤＭＦ（１０ｍＬ）中のマロン酸ジエチル（１．３ｇ、８．１６ｍｍｏｌ）とＫ2ＣＯ3（３．３６ｇ、２４．３ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に４－Ｆ－ナフト－１－イルブロモメタン（４ｇ、１６．７ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で終夜撹拌し続けた。反応混合物をＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）で希釈し、水（３×２０ｍＬ）、５％ＬｉＣｌ水溶液（２０ｍＬ）及び塩水（２０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮した。丸底フラスコ中で褐色固体粗生成物を温ＥｔＯＨに溶解し、アルミナ箔で蓋をし、４日間室温で放置した。１時間静置すると、生成物が褐色溶液から白色固体（１．６ｇ、４１％）として析出した。
一般的手順に従って、ＤＭＦ（１０ｍＬ）中のマロン酸ジエチル（１．３ｇ、８．１６ｍｍｏｌ）とＫ2ＣＯ3（３．３６ｇ、２４．３ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に４－Ｆ－ナフト－１－イルブロモメタン（４ｇ、１６．７ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で終夜撹拌し続けた。反応混合物をＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）で希釈し、水（３×２０ｍＬ）、５％ＬｉＣｌ水溶液（２０ｍＬ）及び塩水（２０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮した。丸底フラスコ中で褐色固体粗生成物を温ＥｔＯＨに溶解し、アルミナ箔で蓋をし、４日間室温で放置した。１時間静置すると、生成物が褐色溶液から白色固体（１．６ｇ、４１％）として析出した。
【0139】
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.18-8.08 (m, 2H), 8.05-7.95 (m, 2H), 7.57-7.46 (m, 4H), 7.36 (dd, J = 8.0, 5.5 Hz, 2H), 7.04 (dd, J = 10.2, 8.0 Hz, 2H), 3.81 (s, 4H), 3.75 (q, J = 7.2 Hz, 4H), 0.85 (t, J = 7.1 Hz, 6H). 13i) NMR (101 MHz, CDCl3): δ 171.3, 158.1 (d, J = 251.4 Hz), 134.2 (d, J = 4.2 Hz), 128.9 (d, J = 4.6 Hz), 127.6 (d, J = 8.2 Hz), 126.8, 125.9 (d, J = 2.1 Hz), 124.1-123.9 (m), 121.2 (d, J = 6.0 Hz), 108.9 (d, J = 19.7 Hz), 61.5, 59.8, 35.5, 13.6. HRMS-ESI: C29H26(iv)2NaO4 + [M+Na]+ 計算値: 499.1691, 実測値: 499.1689. 4.2.2.
【0140】
ジエチル２，２－ビス（３，５－ビス（トリフルオロメチル）ベンジル）マロナート－３（ｖｉ）
一般的手順に従って、ＤＭＦ（５ｍＬ）中のＤＥＭ（４９０ｍｇ、３．１ｍｍｏｌ）とＣｓ2ＣＯ3（２．２ｇ、６．８３ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に１－（ブロモメチル）－３，５－ビス（トリフルオロメチル）ベンゼン（２ｇ、６．５１ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で終夜撹拌し続けた。反応混合物をＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）で希釈し、水（２５ｍＬ）、５％ＬｉＣｌ水溶液（３×２５ｍＬ）及び塩水（２５ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮した。粗生成物をＣＨ2Ｃｌ2（２０ｍＬ）に溶解し、Ｃｅｌｉｔｅ上に吸着させた。生成物をシリカカラム上で１～５％ＥｔＯＡｃペンタン溶液を移動相として用いて精製して、３（ｖｉ）（０．８９ｇ、６３％）を白色固体として得た。
一般的手順に従って、ＤＭＦ（５ｍＬ）中のＤＥＭ（４９０ｍｇ、３．１ｍｍｏｌ）とＣｓ2ＣＯ3（２．２ｇ、６．８３ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に１－（ブロモメチル）－３，５－ビス（トリフルオロメチル）ベンゼン（２ｇ、６．５１ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で終夜撹拌し続けた。反応混合物をＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）で希釈し、水（２５ｍＬ）、５％ＬｉＣｌ水溶液（３×２５ｍＬ）及び塩水（２５ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮した。粗生成物をＣＨ2Ｃｌ2（２０ｍＬ）に溶解し、Ｃｅｌｉｔｅ上に吸着させた。生成物をシリカカラム上で１～５％ＥｔＯＡｃペンタン溶液を移動相として用いて精製して、３（ｖｉ）（０．８９ｇ、６３％）を白色固体として得た。
【0141】
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.79 (s, 2H), 7.71-7.54 (m, 4H), 4.10 (q, J = 7.1 Hz, 4H), 3.32 (s, 4H), 1.13 (t, J = 7.1 Hz, 6H).
13i) NMR (101 MHz, CDCl3): δ 169.8, 138.5, 131.8 (q, J = 33.3 Hz), 130.9-130.2 (m), 123.3 (q, J = 272.7 Hz), 121.5 (p, J = 3.9 Hz), 62.2, 60.3, 40.3, 13.8.
HRMS-ESI: C25H19F12O4-[M-H]- 計算値: 611.1098, 実測値: 611.1097
13i) NMR (101 MHz, CDCl3): δ 169.8, 138.5, 131.8 (q, J = 33.3 Hz), 130.9-130.2 (m), 123.3 (q, J = 272.7 Hz), 121.5 (p, J = 3.9 Hz), 62.2, 60.3, 40.3, 13.8.
HRMS-ESI: C25H19F12O4-[M-H]- 計算値: 611.1098, 実測値: 611.1097
【0142】
５，５－ビス（４－ｔｅｒｔ－ブチルベンジル）ピリミジン－２，４，６（１Ｈ，３Ｈ，５Ｈ）－トリオン－４（ｉ）
無水ＤＭＦ（２０ｍＬ）中の室温の尿素（６．６３ｇ、１１０ｍｍｏｌ）の撹拌溶液にＮａＨ（６６０ｍｇ、２７．５ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を５分間撹拌した。３（ｉ）（５（ｖ）、１１ｍｍｏｌ）の無水ＤＭＦ（２０ｍＬ）溶液を反応混合物に滴下し、反応物を終夜撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）で希釈し、１０％クエン酸（１００ｍＬ）、１０％ＮａＨＣＯ3（５０ｍＬ）、塩水（５０ｍＬ）、水（２０ｍＬ）及び塩水（２×５０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮した。粗生成物を自動フラッシュクロマトグラフィ（ヘプタン／ＥｔＯＡｃ）で精製して、生成物４（ｉ）４．０９ｇ（８８％）を白色粉末として得た。
無水ＤＭＦ（２０ｍＬ）中の室温の尿素（６．６３ｇ、１１０ｍｍｏｌ）の撹拌溶液にＮａＨ（６６０ｍｇ、２７．５ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を５分間撹拌した。３（ｉ）（５（ｖ）、１１ｍｍｏｌ）の無水ＤＭＦ（２０ｍＬ）溶液を反応混合物に滴下し、反応物を終夜撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）で希釈し、１０％クエン酸（１００ｍＬ）、１０％ＮａＨＣＯ3（５０ｍＬ）、塩水（５０ｍＬ）、水（２０ｍＬ）及び塩水（２×５０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮した。粗生成物を自動フラッシュクロマトグラフィ（ヘプタン／ＥｔＯＡｃ）で精製して、生成物４（ｉ）４．０９ｇ（８８％）を白色粉末として得た。
【0143】
1H NMR (400 MHz, MeOD4): δ 7.26 (d, J = 7.7 Hz, 2H), 7.05 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 3.31 (s, 6H, overlap MeOD), 1.24 (s, 18H). 13i) NMR (101 MHz, MeOD4): δ 174.2, 151.5*, 133.5, 130.4, 126.4, 61.4, 45.0, 35.3, 31.7. *２つのシグナルの重複を想定 HRMS-ESI: C26H31N2O3 - [M-H]- 計算値: 419.2340, 実測値: 419.2335.
【0144】
５，５－ビス（３，５－ジブロモベンジル）ピリミジン－２，４，６－（１Ｈ，３Ｈ，５Ｈ）－トリオン－４（ｉｉ）
尿素（１．８３ｇ、２．７９ｍｍｏｌ）の無水ＤＭＦ（１５ｍＬ）撹拌溶液にＮａＨ（１８３ｍｇ、７．６ｍｍｏｌ）を添加し、生成した溶液を１０分間撹拌した後、３（ｉｉ）（２．０ｇ、３．０５ｍｍｏｌ）を添加した。生成した混合物を終夜撹拌した。反応物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈し、１０％クエン酸溶液（３×２５ｍＬ）、１０％ＮａＨＣＯ3（２×３０ｍＬ）及び塩水（３０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮した。白色固体をクロロホルム（２５ｍＬ）に溶解し、再度濃縮し、フラッシュクロマトグラフィによって精製して、４（ｉｉ）（１．５２ｇ、８８％）を得た。
尿素（１．８３ｇ、２．７９ｍｍｏｌ）の無水ＤＭＦ（１５ｍＬ）撹拌溶液にＮａＨ（１８３ｍｇ、７．６ｍｍｏｌ）を添加し、生成した溶液を１０分間撹拌した後、３（ｉｉ）（２．０ｇ、３．０５ｍｍｏｌ）を添加した。生成した混合物を終夜撹拌した。反応物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈し、１０％クエン酸溶液（３×２５ｍＬ）、１０％ＮａＨＣＯ3（２×３０ｍＬ）及び塩水（３０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮した。白色固体をクロロホルム（２５ｍＬ）に溶解し、再度濃縮し、フラッシュクロマトグラフィによって精製して、４（ｉｉ）（１．５２ｇ、８８％）を得た。
【0145】
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.82 (NH, s, 2H), 7.58 (t, J = 1.8 Hz, 2H), 7.21 (d, J = 1.5 Hz, 4H), 3.32 (s, 4H). 13i) NMR (101 MHz, CDCl3): δ 170.0, 146.4, 137.7, 134.2, 131.5, 123.6, 59.9, 43.4. HRMS-ESI: C18H11 79Br4N2O3-[M-H]- 計算値: 618.7509, 実測値: 618.7501.
【0146】
５，５－ビス（（ナフタレン－２－イル）メチル）ピリミジン－２，４，６（１Ｈ，３Ｈ，５Ｈ）－トリオン－４（ｉｖ）
ＮａＨ（９ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）を尿素（９１ｍｇ、１．４９ｍｍｏｌ）の無水ＤＭＦ（３ｍＬ）撹拌溶液に室温で添加した。反応混合物を１０分間撹拌放置した後、３（ｉｖ）（６６ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）を徐々に添加し、反応物を終夜撹拌放置した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）で希釈し、水（４×２０ｍＬ）、続いて塩水（２０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮した。粗生成物をＣＨＣｌ3に溶解し、Ｃｅｌｉｔｅ上に吸着させた後、シリカカラム上で０～５％ＥｔＯＡｃのＣＨＣｌ3溶液を移動相として用いて精製して、４（ｉｖ）（５０ｍｇ、８２％）を得た。
ＮａＨ（９ｍｇ、０．３７ｍｍｏｌ）を尿素（９１ｍｇ、１．４９ｍｍｏｌ）の無水ＤＭＦ（３ｍＬ）撹拌溶液に室温で添加した。反応混合物を１０分間撹拌放置した後、３（ｉｖ）（６６ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）を徐々に添加し、反応物を終夜撹拌放置した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）で希釈し、水（４×２０ｍＬ）、続いて塩水（２０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮した。粗生成物をＣＨＣｌ3に溶解し、Ｃｅｌｉｔｅ上に吸着させた後、シリカカラム上で０～５％ＥｔＯＡｃのＣＨＣｌ3溶液を移動相として用いて精製して、４（ｉｖ）（５０ｍｇ、８２％）を得た。
【0147】
1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.76-7.70 (m, 4H), 7.69 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.62 (s, 2H), 7.44-7.36 (m, 4H), 7.26 (dd, J = 8.4, 1.7 Hz, 2H), 3.60 (s, 4H). 13i) NMR (101 MHz, CD3OD): δ 173.2, 149.5, 133.8, 133.1, 132.8, 129.1, 128.7, 128.1, 127.9, 127.8, 126.6, 126.4, 60.8, 45.1. HRMS-ESI: C26H19N2O3-[M-H]- 計算値: 407.1417, 実測値: 407.1400.
【0148】
５，５－ビス（（４－フルオロナフタレン－１－イル）メチル）ピリミジン－２，４，６（１Ｈ，３Ｈ，５Ｈ）－トリオン－４（ｖ）
尿素（６３０ｍｇ、１０．４９ｍｍｏｌ）の無水ＤＭＦ（４ｍＬ）撹拌溶液にＮａＨ（７６ｍｇ、３．１６ｍｍｏｌ）を添加し、生成した溶液を１０分間撹拌した後、３（ｖ）（５００ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ）を徐々に添加した。生成した混合物を終夜撹拌した。反応混合物を２５ｍＬ ＥｔＯＡｃで希釈し、４×５０ｍＬ水、続いて２０ｍＬ塩水で洗浄した。有機相をＮａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮した。粗生成物をＣＨＣｌ3に溶解し、Ｃｅｌｉｔｅ上に吸着させた後、シリカカラム上で０～５％ＥｔＯＡｃのＣＨＣｌ3溶液を移動相として用いて精製して、４（ｖ）（４３０ｍｇ、９２％）を得た。
尿素（６３０ｍｇ、１０．４９ｍｍｏｌ）の無水ＤＭＦ（４ｍＬ）撹拌溶液にＮａＨ（７６ｍｇ、３．１６ｍｍｏｌ）を添加し、生成した溶液を１０分間撹拌した後、３（ｖ）（５００ｍｇ、１．０５ｍｍｏｌ）を徐々に添加した。生成した混合物を終夜撹拌した。反応混合物を２５ｍＬ ＥｔＯＡｃで希釈し、４×５０ｍＬ水、続いて２０ｍＬ塩水で洗浄した。有機相をＮａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮した。粗生成物をＣＨＣｌ3に溶解し、Ｃｅｌｉｔｅ上に吸着させた後、シリカカラム上で０～５％ＥｔＯＡｃのＣＨＣｌ3溶液を移動相として用いて精製して、４（ｖ）（４３０ｍｇ、９２％）を得た。
【0149】
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.23 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 8.14-8.04 (m, 2H), 7.64-7.49 (m, 4H), 7.46 (s, 2H), 7.29-7.26 (m, 2H), 7.00 (dd, J = 9.9, 8.1 Hz, 2H), 4.05 (s, 4H). 13i) NMR (101 MHz, CDCl3): δ 171.4, 158.7 (d, J = 253.3 Hz), 146.8, 133.3 (d, J = 4.5 Hz), 128.0 (d, J = 8.7 Hz), 127.4, 126.7 (d, J = 4.7 Hz), 126.5 (d, J = 1.9 Hz), 124.4-124.1 (m), 121.3 (d, J = 6.2 Hz), 109.1 (d, J = 20.1 Hz), 59.8, 40.0. HRMS-ESI: C26H19N2O3-[M-H]- 計算値: 407.1401, 実測値: 407.1414 4.2.3.
【0150】
５，５－ビス（３，５－ビス（トリフルオロメチル）ベンジル）ピリミジン－２，４，６（１Ｈ，３Ｈ，５Ｈ）－トリオン－４（ｖｉ）
尿素（１．３ｇ、２１．６ｍｍｏｌ）の２０ｍＬ無水ＤＭＦ溶液にＮａＨ（１２８ｍｇ、５．３ｍｍｏｌ）を添加し、生成した溶液を１０分間撹拌した後、３（ｖｉ）（１．０ｇ、１．７ｍｍｏｌ）を添加した。生成した混合物を終夜撹拌した。反応物をＥｔＯＡｃ９（５０ｍＬ）で希釈し、１０％クエン酸溶液（３×３０ｍＬ）、１０％ＮａＨＣＯ3（２×２０ｍＬ）及び塩水（３０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮した。粗製物を自動フラッシュクロマトグラフィによって精製して、生成物４（ｖｉ）（０．２７ｇ、２７％）を白色粉末として得た。
尿素（１．３ｇ、２１．６ｍｍｏｌ）の２０ｍＬ無水ＤＭＦ溶液にＮａＨ（１２８ｍｇ、５．３ｍｍｏｌ）を添加し、生成した溶液を１０分間撹拌した後、３（ｖｉ）（１．０ｇ、１．７ｍｍｏｌ）を添加した。生成した混合物を終夜撹拌した。反応物をＥｔＯＡｃ９（５０ｍＬ）で希釈し、１０％クエン酸溶液（３×３０ｍＬ）、１０％ＮａＨＣＯ3（２×２０ｍＬ）及び塩水（３０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮した。粗製物を自動フラッシュクロマトグラフィによって精製して、生成物４（ｖｉ）（０．２７ｇ、２７％）を白色粉末として得た。
【0151】
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.82 (s, 2H), 7.73 (s, 2H), 7.62-7.57 (m, 4H), 3.57 (s, 4H). 13i) NMR (101 MHz, CDCl3): δ 169.8, 146.1, 136.3, 132.6 (q, J = 33.6 Hz), 130.4-129.7 (m), 122.0 (q, J = 272.8 Hz), 122.9-122.2 (m), 59.9, 43.5. HRMS-ESI: C22H11F12N2O3-[M-H]- 計算値: 579.0584, 実測値: 579.0583.
【0152】
１，３－ビス（４－ブロモブチル）－５，５－ビス（４－ｔｅｒｔ－ブチルベンジル）－ピリミジン－２，４，６（１Ｈ，３Ｈ，５Ｈ）－トリオン－５（ｉ）
室温の４（ｉ）（３．８８ｇ、９．２３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５０ｍＬ）撹拌溶液にＫ2ＣＯ3（５．１２ｇ、３７ｍｍｏｌ）及び１，４－ジブロモブタン（１０．９ｍＬ、９２．５ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を終夜撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈し、水（１００ｍＬ）で洗浄した。粗生成物を自動フラッシュクロマトグラフィで精製して、生成物５（ｉ）（２．６０ｇ、４０％）を白色粉末として得た。
室温の４（ｉ）（３．８８ｇ、９．２３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５０ｍＬ）撹拌溶液にＫ2ＣＯ3（５．１２ｇ、３７ｍｍｏｌ）及び１，４－ジブロモブタン（１０．９ｍＬ、９２．５ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を終夜撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で希釈し、水（１００ｍＬ）で洗浄した。粗生成物を自動フラッシュクロマトグラフィで精製して、生成物５（ｉ）（２．６０ｇ、４０％）を白色粉末として得た。
【0153】
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.22 (d, J = 7.8 Hz, 4H), 6.98 (d, J = 7.9 Hz, 4H), 3.60 (t, J = 6.9 Hz, 4H), 3.41 (s, 4H), 3.33 (t, J = 6.4 Hz, 4H), 1.56 (p, J = 7.3 Hz, 4H), 1.42 (p, J = 7.7 Hz, 4H), 1.25 (s, 18H). 13i) NMR (101 MHz, CDCl3): δ 170.9, 150.7, 149.9, 131.9, 129.2, 125.5, 60.7, 45.0, 40.7, 34.5, 32.9, 31.4, 29.5, 26.2. HRMS-ESI: C34H46 79Br2N2NaO3 + [M+Na]+ 計算値: 711.1774, 実測値: 711.1773.
【0154】
１，３－ビス（４－ブロモブチル）－５，５－ビス（３，５－ジブロモベンジル）－ピリミジン－２，４，６－（１Ｈ，３Ｈ，５Ｈ）－トリオン－５（ｉｉ）
４（ｉｉ）（３００ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（６ｍＬ）撹拌溶液にＫ2ＣＯ3（２６５ｍｇ、１．９２ｍｍｏｌ）及び１，４－ジブロモブタン（０．５７ｍＬ、４．８１ｍｍｏｌ）を添加した。完了がＴＬＣ（５％ＥｔＯＡｃのＣＨＣｌ3溶液）によって示されるまで反応物を撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（２５ｍＬ）で希釈し、Ｋ2ＣＯ3を濾過除去した。有機相を１０％クエン酸溶液（３０ｍＬ）、ＮａＨＣＯ3（３０ｍＬ）、水（３×３０ｍＬ）及び塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮して、オイルを得た。オイルは、徐々に白色結晶になった。粗生成物をＣＨＣｌ3（３０ｍＬ）に溶解し、Ｃｅｌｉｔｅ上に吸着させた後、シリカカラム上でペンタン：ＣＨ2Ｃｌ2（７：３～１：１）を用いて精製して、５（ｉｉ）（３４７ｍｇ、８０％）を白色粉末として得た。
４（ｉｉ）（３００ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（６ｍＬ）撹拌溶液にＫ2ＣＯ3（２６５ｍｇ、１．９２ｍｍｏｌ）及び１，４－ジブロモブタン（０．５７ｍＬ、４．８１ｍｍｏｌ）を添加した。完了がＴＬＣ（５％ＥｔＯＡｃのＣＨＣｌ3溶液）によって示されるまで反応物を撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（２５ｍＬ）で希釈し、Ｋ2ＣＯ3を濾過除去した。有機相を１０％クエン酸溶液（３０ｍＬ）、ＮａＨＣＯ3（３０ｍＬ）、水（３×３０ｍＬ）及び塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮して、オイルを得た。オイルは、徐々に白色結晶になった。粗生成物をＣＨＣｌ3（３０ｍＬ）に溶解し、Ｃｅｌｉｔｅ上に吸着させた後、シリカカラム上でペンタン：ＣＨ2Ｃｌ2（７：３～１：１）を用いて精製して、５（ｉｉ）（３４７ｍｇ、８０％）を白色粉末として得た。
【0155】
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.54 (d, J = 1.8 Hz, 2H), 7.14 (d, J = 1.7 Hz, 4H), 3.65 (t, J = 7.4 Hz, 4H), 3.38 (t, J = 6.7 Hz, 4H), 3.33 (s, 4H), 1.77-1.61 (m, 4H), 1.58-1.43 (m, 4H). 13i) NMR (101 MHz, CDCl3): δ 169.9, 149.1, 138.4, 133.9, 131.3, 123.4, 59.9, 44.2, 41.3, 32.7, 30.0, 26.7. HRMSESI: C26H26 79Br3 81Br3ClN2O3 - [M+Cl]- 計算値: 928.6671, 実測値: 928.6669
【0156】
１，３－ビス（４－ブロモブチル）－５，５－ビス（３，５－ジ－ｔｅｒｔ－ブチルベンジル）－ピリミジン－２，４，６（１Ｈ，３Ｈ，５Ｈ）－トリオン－５（ｉｉｉ）
４（ｉｉｉ）（０．８６ｇ、１．６２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ撹拌溶液１０にＫ2ＣＯ3（１．２ｇ、８．９ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を５分間撹拌した後、１，４－ジブロモブタン（１．７６ｍＬ、１４．８ｍｍｏｌ）を添加した。完了がＴＬＣ（５％ＥｔＯＡｃのＣＨＣｌ3溶液）によって示されるまで反応物を撹拌した。次いで、反応混合物をＥｔＯＡｃ（１５ｍＬ）で希釈し、Ｋ2ＣＯ3を濾過除去した。有機相を１０％クエン酸溶液（３０ｍＬ）、ＮａＨＣＯ3（３０ｍＬ）、水（３×３０ｍＬ）及び塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮した。粗製物を自動フラッシュクロマトグラフィによって精製して、生成物５（ｉｉｉ）（０．６４ｇ、７４％）を得た。
４（ｉｉｉ）（０．８６ｇ、１．６２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ撹拌溶液１０にＫ2ＣＯ3（１．２ｇ、８．９ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を５分間撹拌した後、１，４－ジブロモブタン（１．７６ｍＬ、１４．８ｍｍｏｌ）を添加した。完了がＴＬＣ（５％ＥｔＯＡｃのＣＨＣｌ3溶液）によって示されるまで反応物を撹拌した。次いで、反応混合物をＥｔＯＡｃ（１５ｍＬ）で希釈し、Ｋ2ＣＯ3を濾過除去した。有機相を１０％クエン酸溶液（３０ｍＬ）、ＮａＨＣＯ3（３０ｍＬ）、水（３×３０ｍＬ）及び塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮した。粗製物を自動フラッシュクロマトグラフィによって精製して、生成物５（ｉｉｉ）（０．６４ｇ、７４％）を得た。
【0157】
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.26 (t, J = 1.9 Hz, 2H), 6.89 (d, J = 1.8 Hz, 4H), 3.59* (t, J = 7.5 Hz, 4H), 3.46 (s, 4H), 3.23 (t, J = 6.7 Hz, 4H), 1.51 (p, J = 6.8 Hz, 4H), 1.35-1.23 (m, 40H). 13i) NMR (101 MHz, CDCl3): δ 171.0, 151.1, 150.0, 134.4, 123.7, 121.5, 60.5, 46.5, 40.9, 34.8, 32.4, 31.6, 29.7, 26.5. *歪んだ三重線 HRMS-ESI: C42H62 79Br2KN2O3 + [M+K]+ 計算値: 839.2759, 実測値: 839.2725.
【0158】
１，３－ビス（４－ブロモブチル）－５，５－ビス（ナフタレン－２－イル－メチル）－ピリミジン－２，４，６（１Ｈ，３Ｈ，５Ｈ）－トリオン－５（ｉｖ）
４（ｉｖ）（２００ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）及びＫ2ＣＯ3（２７３ｍｇ、１．９５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（４ｍＬ）撹拌懸濁液に１，４－ジブロモブタン（０．５７ｍＬ、４．９ｍｍｏｌ）を添加した。完了がＴＬＣ（５％ＥｔＯＡｃのＣＨＣｌ3溶液）によって示されるまで反応物を撹拌した。次いで、反応混合物をＥｔＯＡｃ（２５ｍＬ）で希釈し、Ｋ2ＣＯ3を濾過除去した。有機相を１０％クエン酸溶液（３０ｍＬ）、ＮａＨＣＯ3（３０ｍＬ）、水（３×３０ｍＬ）及び塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮した。粗生成物をＣＨＣｌ3（３０ｍＬ）に溶解し、Ｃｅｌｉｔｅ上に吸着させた後、シリカカラム上で０～５％ＥｔＯＡｃのＣＨＣｌ3溶液を用いて精製して、５（ｉｖ）（３４７ｍｇ、８０％）を白色粉末として得た。
４（ｉｖ）（２００ｍｇ、０．４９ｍｍｏｌ）及びＫ2ＣＯ3（２７３ｍｇ、１．９５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（４ｍＬ）撹拌懸濁液に１，４－ジブロモブタン（０．５７ｍＬ、４．９ｍｍｏｌ）を添加した。完了がＴＬＣ（５％ＥｔＯＡｃのＣＨＣｌ3溶液）によって示されるまで反応物を撹拌した。次いで、反応混合物をＥｔＯＡｃ（２５ｍＬ）で希釈し、Ｋ2ＣＯ3を濾過除去した。有機相を１０％クエン酸溶液（３０ｍＬ）、ＮａＨＣＯ3（３０ｍＬ）、水（３×３０ｍＬ）及び塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮した。粗生成物をＣＨＣｌ3（３０ｍＬ）に溶解し、Ｃｅｌｉｔｅ上に吸着させた後、シリカカラム上で０～５％ＥｔＯＡｃのＣＨＣｌ3溶液を用いて精製して、５（ｉｖ）（３４７ｍｇ、８０％）を白色粉末として得た。
【0159】
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.75 (dd, J = 9.4, 6.4 Hz, 4H), 7.70 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.57 (s, 2H), 7.48-7.42 (m, 4H), 7.18 (dd, J = 8.5, 1.7 Hz, 2H), 3.68 (s, 4H), 3.53 (t, J = 6.7 Hz, 4H), 2.99 (t, J = 6.2 Hz, 4H), 1.35-1.19 (m, 8H). 13i) NMR (101 MHz, CDCl3): δ 170.9, 149.6, 133.3, 132.7, 132.5, 128.8, 128.5, 127.8, 127.7, 127.2, 126.6, 126.3, 60.8, 45.8, 40.9, 32.8, 29.5, 26.3. HRMSESI: C34H34 79Br2N2NaO3 + [M+Na]+ 計算値: 699.0827, 実測値: 699.0839.
【0160】
１，３－ビス（４－ブロモブチル）－５，５－ビス（４－Ｆ－ナフタレン－１－イルメチル）ピリミジン－２，４，６（１Ｈ，３Ｈ，５Ｈ）－トリオン－５（ｖ）
４（ｖ）（２４２ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）及びＫ2ＣＯ3（３００ｍｇ、２．１７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）撹拌懸濁液に１，４－ジブロモブタン（０．６４ｍＬ、５．４ｍｍｏｌ）を添加した。反応物をＴＬＣで調べ（ＣＨＣｌ3 生成物Ｒｆ０．７４、出発材料Ｒｆ０．１１）、出発材料の痕跡が見えなくなったら、反応混合物をＥｔＯＡｃ（２５ｍＬ）で希釈し、Ｋ2ＣＯ3を濾過除去した。有機相を１０％クエン酸溶液（３０ｍＬ）、ＮａＨＣＯ3（３０ｍＬ）、水（３×３０ｍＬ）及び塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮して、粗製物をオイルとして得た。粗生成物をＣＨＣｌ3（３０ｍＬ）に溶解し、Ｃｅｌｉｔｅ上に吸着させた後、シリカカラム上でＣＨＣｌ3を移動相として用いて精製して、５（ｖ）（２３７ｍｇ、６１％）を白色固体として得た。
４（ｖ）（２４２ｍｇ、０．５４ｍｍｏｌ）及びＫ2ＣＯ3（３００ｍｇ、２．１７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（５ｍＬ）撹拌懸濁液に１，４－ジブロモブタン（０．６４ｍＬ、５．４ｍｍｏｌ）を添加した。反応物をＴＬＣで調べ（ＣＨＣｌ3 生成物Ｒｆ０．７４、出発材料Ｒｆ０．１１）、出発材料の痕跡が見えなくなったら、反応混合物をＥｔＯＡｃ（２５ｍＬ）で希釈し、Ｋ2ＣＯ3を濾過除去した。有機相を１０％クエン酸溶液（３０ｍＬ）、ＮａＨＣＯ3（３０ｍＬ）、水（３×３０ｍＬ）及び塩水（３０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮して、粗製物をオイルとして得た。粗生成物をＣＨＣｌ3（３０ｍＬ）に溶解し、Ｃｅｌｉｔｅ上に吸着させた後、シリカカラム上でＣＨＣｌ3を移動相として用いて精製して、５（ｖ）（２３７ｍｇ、６１％）を白色固体として得た。
【0161】
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.23 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 8.08 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.63 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 7.54 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 7.23 (dd, J = 8.0, 5.5 Hz, 2H), 7.00 (dd, J = 9.8, 8.1 Hz, 2H), 4.06 (s, 4H), 3.33 (t, J = 7.2 Hz, 4H), 3.05 (t, J = 6.6 Hz, 4H), 1.34-1.12 (m, 4H), 1.08-0.90 (m, 4H). 13i) NMR (101 MHz, CDCl3): δ 170.96, 158.5 (d, J = 253.3 Hz), 149.4, 133.2 (d, J = 4.4 Hz), 128.0 (d, J = 8.4 Hz), 127.4 (d, J = 4.7 Hz), 127.2, 126.4 (d, J = 2.1 Hz), 124.8 (d, J = 2.7 Hz), 124.1 (d, J = 15.7 Hz), 121.1 (d, J = 6.0 Hz), 108.9 (d, J = 20.0 Hz), 60.0, 40.9, 40.7, 32.7, 29.3, 25.9. HRMSESI: C34H32 79Br2F2N2NaO3 + [M+Na]+ 計算値: 735.0639, 実測値: 735.0622. 4.2.4.
【0162】
１，３－ビス（４－ブロモブチル）－５，５－ビス（３，５－ビス（トリフルオロメチル）－ベンジル）ピリミジン－２，４，６（１Ｈ，３Ｈ，５Ｈ）－トリオン－５（ｖｉ）
４（ｖｉ）（０．８６４ｇ、１．５７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２０ｍＬ）撹拌溶液にＫ2ＣＯ3（１．２３３ｇ、８．９３ｍｍｏｌ）及び１，４－ジブロモブタン（１．７６ｍＬ、１４．９ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を４８時間撹拌し、ＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）で希釈し、水（３×２０ｍＬ）、５％ＬｉＣｌ溶液（３×２０）及び塩水（２０ｍＬ）で洗浄した。粗生成物を自動フラッシュクロマトグラフィで精製して、５（ｖｉ）（０．６４ｇ、５０％）を白色粉末として得た。
４（ｖｉ）（０．８６４ｇ、１．５７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２０ｍＬ）撹拌溶液にＫ2ＣＯ3（１．２３３ｇ、８．９３ｍｍｏｌ）及び１，４－ジブロモブタン（１．７６ｍＬ、１４．９ｍｍｏｌ）を添加した。反応混合物を４８時間撹拌し、ＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）で希釈し、水（３×２０ｍＬ）、５％ＬｉＣｌ溶液（３×２０）及び塩水（２０ｍＬ）で洗浄した。粗生成物を自動フラッシュクロマトグラフィで精製して、５（ｖｉ）（０．６４ｇ、５０％）を白色粉末として得た。
【0163】
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.79 (s, 2H), 7.53 (s, 4H), 3.59 (s, 4H), 3.57-3.51 (m, 4H), 3.26 (t, J = 6.8 Hz, 4H), 1.67-1.55 (m, 4H), 1.43-1.29 (m, 4H). 13i) NMR (101 MHz, CDCl3): δ 169.4, 148.4, 136.9, 132.2 (q, J = 33.6 Hz), 130.0-129.4 (m), 122.9 (q, J = 272.9 Hz), 122.1 (p, J = 3.8 Hz), 59.7, 44.3, 41.1, 31.7, 29.6, 26.1. HRMS-ESI: C30H26 79Br3F12N2O3-[M+Br]- 計算値: 926.9308, 実測値: 926.9308.
【0164】
１，３－ビス（４－アジドブチル）－５，５－ビス（４－ｔｅｒｔ－ブチルベンジル）－ピリミジン－２，４，６（１Ｈ，３Ｈ，５Ｈ）－トリオン－６（ｉ）
臭化物５（ｉ）（２．４０ｇ、３．４７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１５ｍＬ）撹拌溶液にＮａＮ3（６７８ｍｇ、１０．４ｍｍｏｌ）を添加し、１８時間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈し、水（４×５０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮した。粗生成物６（ｉ）を透明オイル（２．１６ｇ、１００％）として単離した。
臭化物５（ｉ）（２．４０ｇ、３．４７ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１５ｍＬ）撹拌溶液にＮａＮ3（６７８ｍｇ、１０．４ｍｍｏｌ）を添加し、１８時間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈し、水（４×５０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮した。粗生成物６（ｉ）を透明オイル（２．１６ｇ、１００％）として単離した。
【0165】
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.20 (d, J = 7.7 Hz, 4H), 6.97 (d, J = 7.8 Hz, 4H), 3.59 (s, 4H), 3.40 (s, 4H), 3.21 (s, 4H), 1.37-1.28 (m, 8H), 1.24 (s, 18H). 13i) NMR (101 MHz, CDCl3): δ 171.0, 150.8, 150.0, 132.0, 129.3, 125.5, 60.7, 50.9, 45.1, 41.1, 34.6, 31.4, 26.0, 24.8. HRMS-ESI: C34H46N8O3Na+ [M+Na]+ 計算値: 637.3577, 実測値: 637.3583.
【0166】
１，３－ビス（４－アジドブチル）－５，５－ビス（３，５－ジブロモベンジル）ピリミジン－２，４，６－（１Ｈ，３Ｈ，５Ｈ）－トリオン－６（ｉｉ）
５（ｉｉ）（２３９ｍｇ、０，２６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３ｍＬ）撹拌溶液にＮａＮ3（５２ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ）を添加した。完了がＴＬＣ（５％ＥｔＯＡｃのＣＨＣｌ3溶液）によって示されるまで反応物を撹拌した。次いで、反応混合物をＥｔＯＡｃ（１５ｍＬ）で希釈し、水（２×２０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮した。粗生成物をＣＨＣｌ3に溶解し、Ｃｅｌｉｔｅ上に吸着させた後、シリカカラム上で０～５％ＥｔＯＡｃのＣＨＣｌ3溶液を用いて精製して、６（ｉｉ）（１９４ｍｇ、９１％）を得た。
５（ｉｉ）（２３９ｍｇ、０，２６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３ｍＬ）撹拌溶液にＮａＮ3（５２ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ）を添加した。完了がＴＬＣ（５％ＥｔＯＡｃのＣＨＣｌ3溶液）によって示されるまで反応物を撹拌した。次いで、反応混合物をＥｔＯＡｃ（１５ｍＬ）で希釈し、水（２×２０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮した。粗生成物をＣＨＣｌ3に溶解し、Ｃｅｌｉｔｅ上に吸着させた後、シリカカラム上で０～５％ＥｔＯＡｃのＣＨＣｌ3溶液を用いて精製して、６（ｉｉ）（１９４ｍｇ、９１％）を得た。
【0167】
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.54 (s, 2H), 7.14 (s, 4H), 3.73-3.58 (m, 4H), 3.33 (s, 4H), 3.31-3.22 (m, 4H), 1.58-1.29 (m, 8H). 13i) NMR (101 MHz, CDCl3): δ 169.9, 149.1, 138.4, 133.8, 131.4, 123.3, 59.9, 50.9, 44.2, 41.6, 26.1, 25.3. HRMS-ESI: C26H26 79Br4(ii)lN8O3 - [M+Cl]- 計算値: 848.8555, 実測値: 848.8564.
【0168】
１，３－ビス（４－アジドブチル）－５，５－ビス（３，５－ジ－ｔｅｒｔ－ブチルベンジル）ピリミジン－２，４，６－（１Ｈ，３Ｈ，５Ｈ）－トリオン－６（ｉｉｉ）
５（ｉｉｉ）（６３０ｍｇ、１１ ０．７８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）撹拌溶液にＮａＮ3（１４０ｍｇ、２．１５ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を終夜撹拌した。全部の転化がＭＳによって確認されたら、反応混合物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈し、水４×５０ｍＬで洗浄した。有機相をＮａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮して、粗生成物６（ｉｉｉ）（４６３ｍｇ、８０％）を得た。
５（ｉｉｉ）（６３０ｍｇ、１１ ０．７８ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１０ｍＬ）撹拌溶液にＮａＮ3（１４０ｍｇ、２．１５ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を終夜撹拌した。全部の転化がＭＳによって確認されたら、反応混合物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈し、水４×５０ｍＬで洗浄した。有機相をＮａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮して、粗生成物６（ｉｉｉ）（４６３ｍｇ、８０％）を得た。
【0169】
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.25 (t, J = 1.9 Hz, 2H), 6.87 (d, J = 1.7 Hz, 4H), 3.56 (t, J = 7.2 Hz, 4H), 3.45 (s, 4H), 3.14 (t, J = 6.5 Hz, 4H), 1.25 (s, 44H). 13i) NMR (101 MHz, CDCl3): δ 171.1, 151.1, 150.0, 134.4, 123.8, 121.6, 60.6, 50.8, 46.5, 41.3, 34.8, 31.6, 25.9, 25.1. HRMS-ESI: C42H62N8NaO3 + [M+Na]+ 計算値: 749.4838, 実測値: 749.4838.
【0170】
１，３－ビス（４－アジドブチル）－５，５－ビス（ナフタレン－２－イル）ピリミジン－２，４，６－（１Ｈ，３Ｈ，５Ｈ）－トリオン－６（ｉｖ）
５（ｉｖ）（５０９ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３ｍＬ）撹拌溶液にＮａＮ3（１４６ｍｇ、２．２５ｍｍｏｌ）を添加した。完了がＴＬＣ（５％ＥｔＯＡｃのＣＨＣｌ3溶液）によって示されるまで反応物を撹拌した。次いで、反応混合物をＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）で希釈し、水（３×２０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮した。粗生成物をＣＨＣｌ3に溶解し、Ｃｅｌｉｔｅ上に吸着させた後、シリカカラム上で０～５％ＥｔＯＡｃのＣＨＣｌ3溶液を用いて精製して、６（ｉｖ）（１９４ｍｇ、９１％）を得た。
５（ｉｖ）（５０９ｍｇ、０．７５ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３ｍＬ）撹拌溶液にＮａＮ3（１４６ｍｇ、２．２５ｍｍｏｌ）を添加した。完了がＴＬＣ（５％ＥｔＯＡｃのＣＨＣｌ3溶液）によって示されるまで反応物を撹拌した。次いで、反応混合物をＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）で希釈し、水（３×２０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮した。粗生成物をＣＨＣｌ3に溶解し、Ｃｅｌｉｔｅ上に吸着させた後、シリカカラム上で０～５％ＥｔＯＡｃのＣＨＣｌ3溶液を用いて精製して、６（ｉｖ）（１９４ｍｇ、９１％）を得た。
【0171】
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.80-7.71 (m, 4H), 7.68 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.57 (s, 2H), 7.51-7.41 (m, 4H), 7.17 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 3.68 (s, 4H), 3.52 (t, J = 7.0 Hz, 4H), 2.85 (t, J = 6.6 Hz, 4H), 1.14 (p, J = 7.4 Hz, 4H), 1.02 (p, J = 7.0 Hz, 4H). 13i) NMR (101 MHz, CDCl3): δ 170.9, 149.6, 133.4, 132.7, 132.5, 128.8, 128.5, 127.8, 127.7, 127.2, 126.6, 126.3, 60.8, 50.7, 45.8, 41.2, 25.8, 24.9. HRMS-ESI: C34H34N8NaO3 + [M+Na]+ 計算値: 625.2646, 実測値: 625.2647.
【0172】
１，３－ビス（４－アジドブチル）－５，５－ビス（（４－フルオロナフタレン－１－イル）メチル）ピリミジン－２，４，６－（１Ｈ，３Ｈ，５Ｈ）－トリオン－６（ｖ）
５（ｖ）（１６６ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３ｍＬ）撹拌溶液にＮａＮ3（４５ｍｇ、０．６９ｍｍｏｌ）を添加した。完了がＴＬＣ（ＣＨＣｌ3）によって示されるまで反応物を終夜撹拌した。次いで、反応混合物をＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）で希釈し、水（３×３０ｍＬ）及び塩水（３０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮して、６（ｖ）（１４２ｍｇ、９５％）を得た。
５（ｖ）（１６６ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（３ｍＬ）撹拌溶液にＮａＮ3（４５ｍｇ、０．６９ｍｍｏｌ）を添加した。完了がＴＬＣ（ＣＨＣｌ3）によって示されるまで反応物を終夜撹拌した。次いで、反応混合物をＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）で希釈し、水（３×３０ｍＬ）及び塩水（３０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮して、６（ｖ）（１４２ｍｇ、９５％）を得た。
【0173】
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.23 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 8.08 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.62 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 7.54 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 7.22 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 6.98 (t, J = 9.0 Hz, 2H), 4.06 (s, 4H), 3.33 (t, J = 6.8 Hz, 4H), 2.94 (t, J = 6.4 Hz, 4H), 1.10-0.74 (m, 8H). 13i) NMR (101 MHz, CDCl3): δ 170.9, 158.5 (d, J = 253.4 Hz), 149.4, 133.2 (d, J = 4.4 Hz), 127.9 (d, J = 8.5 Hz), 127.4 (d, J = 4.6 Hz), 127.2, 126.4 (d, J = 1.9 Hz), 124.8 (d, J = 2.6 Hz), 124.1 (d, J = 15.7 Hz), 121.1 (d, J = 6.1 Hz), 108.8 (d, J = 20.0 Hz), 60.0, 50.7, 41.1, 40.7, 25.6, 24.4. HRMS-ESI: C34H32ClF2N8O3-[M+Cl]- 計算値: 673.2259, 実測値: 673.2259 4.2.5.
【0174】
１，３－ビス（４－アジドブチル）－５，５－ビス（３，５－ビス（トリフルオロメチル）－ベンジル）ピリミジン－２，４，６－（１Ｈ，３Ｈ，５Ｈ）－トリオン－６（ｖｉ）
５（ｖｉ）（１０１ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍＬ）撹拌溶液にＮａＮ3（２３ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を終夜撹拌した。全部の転化がＭＳによって確認されたら、反応混合物をＥｔＯＡｃ（１５ｍＬ）で希釈し、水（３×２０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮して、粗製６（ｖｉ）（６３ｍｇ、６８％）を白色粉末として得た。
５（ｖｉ）（１０１ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１ｍＬ）撹拌溶液にＮａＮ3（２３ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を終夜撹拌した。全部の転化がＭＳによって確認されたら、反応混合物をＥｔＯＡｃ（１５ｍＬ）で希釈し、水（３×２０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮して、粗製６（ｖｉ）（６３ｍｇ、６８％）を白色粉末として得た。
【0175】
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.78 (s, 2H), 7.53 (s, 4H), 3.59 (s, 4H), 3.57-3.48 (m, 4H), 3.19 (t, J = 6.7 Hz, 4H), 1.42-1.31 (m, 4H), 1.31-1.20 (m, 4H). 13i) NMR (101 MHz, CDCl3): δ 169.6, 148.6, 137.0, 132.3 (q, J = 33.6 Hz), 129.9, 123.0 (q, J = 272.9 Hz), 122.8-121.9 (m), 59.8, 50.6, 44.5, 41.6, 26.0, 24.9. HRMS-ESI: C30H26(ii)lF12N8O3-[M+Cl]- 計算値: 809.1630, 実測値: 809.1622.
【0176】
１，３－ビス（４－アミノブチル）－５，５－ビス（４－ｔｅｒｔブチルベンジル）ピリミジン－２，４，６（１Ｈ，３Ｈ，５Ｈ）－トリオン－７（ｉ）
６（ｉ）（２．１６ｇ、３．５２ｍｍｏｌ）及びＥｔ３Ｎ（０．９８ｍＬ、７．０５ｍｍｏｌ）のｉ－ＰｒＯＨ：ＴＨＦ（１：１、１０ｍＬ）撹拌溶液に１，３－プロパンジチオール（０．１ｍＬ、０．９９ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を５分間撹拌した後、ＮａＢＨ4（２７０ｍｇ、７．１４ｍｍｏｌ）を添加した。７２時間の反応時間後、Ｂｏｃ２Ｏ（１．６９ｇ、７．７４ｍｍｏｌ）及びＫ2ＣＯ3（１．９４ｇ、１４．０ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を１８時間撹拌し、蒸発させた後、ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）及び水（１５ｍＬ）を添加し、３０分間撹拌した。有機相を水（３×１５ｍＬ）及び塩水（１５ｍＬ）で洗浄し、濃縮した。生成した粗製物を自動フラッシュクロマトグラフィによって精製し、蒸発させた。Ｂｏｃ保護中間体をＣＨ2Ｃｌ2（１０ｍＬ）中のＴＦＡ（２．２ｍＬ、２８．７ｍｍｏｌ）を用いて１８時間脱保護した。反応混合物を濃縮し、粗生成物をＲＰ自動フラッシュクロマトグラフィによって精製し、凍結乾燥させて、７（ｉ）（３６７ｍｇ、８５％）をＴＦＡ塩として得た。
６（ｉ）（２．１６ｇ、３．５２ｍｍｏｌ）及びＥｔ３Ｎ（０．９８ｍＬ、７．０５ｍｍｏｌ）のｉ－ＰｒＯＨ：ＴＨＦ（１：１、１０ｍＬ）撹拌溶液に１，３－プロパンジチオール（０．１ｍＬ、０．９９ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を５分間撹拌した後、ＮａＢＨ4（２７０ｍｇ、７．１４ｍｍｏｌ）を添加した。７２時間の反応時間後、Ｂｏｃ２Ｏ（１．６９ｇ、７．７４ｍｍｏｌ）及びＫ2ＣＯ3（１．９４ｇ、１４．０ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を１８時間撹拌し、蒸発させた後、ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）及び水（１５ｍＬ）を添加し、３０分間撹拌した。有機相を水（３×１５ｍＬ）及び塩水（１５ｍＬ）で洗浄し、濃縮した。生成した粗製物を自動フラッシュクロマトグラフィによって精製し、蒸発させた。Ｂｏｃ保護中間体をＣＨ2Ｃｌ2（１０ｍＬ）中のＴＦＡ（２．２ｍＬ、２８．７ｍｍｏｌ）を用いて１８時間脱保護した。反応混合物を濃縮し、粗生成物をＲＰ自動フラッシュクロマトグラフィによって精製し、凍結乾燥させて、７（ｉ）（３６７ｍｇ、８５％）をＴＦＡ塩として得た。
【0177】
1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.25 (d, J = 7.1 Hz, 4H), 6.98 (d, J = 7.2 Hz, 4H), 3.62-3.53 (m, 4H), 3.39 (s, 4H), 2.87 (t, J = 7.4 Hz, 4H), 1.55-1.36 (m, 4H), 1.36-1.15 (m, 22H). 13i) NMR (101 MHz, CD3OD): δ 172.3, 163.0 (q, J = 34.4 Hz, TFA), 151.9, 151.0, 133.5, 130.3, 126.5, 118.2 (q, J = 292.8 Hz, TFA), 61.9, 45.9, 41.7, 40.0, 35.3, 31.7, 25.6, 25.5. HRMS-ESI: C34H51N4O3 + [M+H]+ 計算値: 563.3956, 実測値: 563.3934.
【0178】
１，３－ビス（４－アミノブチル）－５，５－ビス（３，５－ジブロモベンジル）メチル）－ピリミジン－２，４，６（１Ｈ，３Ｈ，５Ｈ）－トリオン－７（ｉｉ）
６（ｉｉ）（８１０ｍｇ、０．９９ｍｍｏｌ）及びＥｔ３Ｎ（０．３２ｍＬ、２．２９ｍｍｏｌ）のｉ－ＰｒＯＨ：ＴＨＦ（１：１、５ｍＬ）撹拌溶液に１，３－プロパンジチオール（０．２０ｍＬ、１．９９ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を５分間撹拌した後、ＮａＢＨ4（９０ｍｇ、２．３７ｍｍｏｌ）を添加した。４８時間の反応時間後、Ｂｏｃ２Ｏ（６５０ｍｇ、２．９７ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を１８時間撹拌し、蒸発させた。粗製混合物にＥｔＯＡｃ（１５ｍＬ）及び水（１５ｍＬ）を添加し、３０分間撹拌した。有機相を水（３×１５ｍＬ）及び塩水（１５ｍＬ）で洗浄し、濃縮した。生成した粗製物を自動フラッシュクロマトグラフィによって精製し、蒸発させた。Ｂｏｃ保護中間体をＣＨ2Ｃｌ2（５ｍＬ）中のＴＦＡ（２ｍＬ、２６ｍｍｏｌ）を用いて１８時間脱保護した。反応混合物を濃縮し、粗生成物をＲＰ自動フラッシュクロマトグラフィによって精製し、凍結乾燥させて、７（ｉｉ）（３７４ｍｇ、３８％）をＴＦＡ塩として得た。
６（ｉｉ）（８１０ｍｇ、０．９９ｍｍｏｌ）及びＥｔ３Ｎ（０．３２ｍＬ、２．２９ｍｍｏｌ）のｉ－ＰｒＯＨ：ＴＨＦ（１：１、５ｍＬ）撹拌溶液に１，３－プロパンジチオール（０．２０ｍＬ、１．９９ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を５分間撹拌した後、ＮａＢＨ4（９０ｍｇ、２．３７ｍｍｏｌ）を添加した。４８時間の反応時間後、Ｂｏｃ２Ｏ（６５０ｍｇ、２．９７ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を１８時間撹拌し、蒸発させた。粗製混合物にＥｔＯＡｃ（１５ｍＬ）及び水（１５ｍＬ）を添加し、３０分間撹拌した。有機相を水（３×１５ｍＬ）及び塩水（１５ｍＬ）で洗浄し、濃縮した。生成した粗製物を自動フラッシュクロマトグラフィによって精製し、蒸発させた。Ｂｏｃ保護中間体をＣＨ2Ｃｌ2（５ｍＬ）中のＴＦＡ（２ｍＬ、２６ｍｍｏｌ）を用いて１８時間脱保護した。反応混合物を濃縮し、粗生成物をＲＰ自動フラッシュクロマトグラフィによって精製し、凍結乾燥させて、７（ｉｉ）（３７４ｍｇ、３８％）をＴＦＡ塩として得た。
【0179】
1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.66 (s, 2H), 7.23 (s, 4H), 3.68 (t, J = 7.7 Hz, 4H), 3.43 (s, 4H), 3.08-2.82 (m, 4H), 1.76-1.48 (m, 4H), 1.49-1.32 (m, 4H). 13i) NMR (101 MHz, CD3OD): δ 171.2, 163.01 (q, J = 34.4 Hz, TFA), 150.4, 140.5, 134.5, 132.7, 124.1, 118.24 (q, J = 293.3 Hz, TFA). 61.2, 44.8, 42.2, 40.3, 26.3, 25.8. HRMS-ESI: C26H31 79Br4N4O3 + [M+H]+ 計算値: 762.9124, 実測値: 762.9124.
【0180】
１，３－ビス（４－アミノブチル）－５，５－ビス（３，５－ジ－ｔｅｒｔ－ブチルベンジル）－ピリミジン－２，４，６（１Ｈ，３Ｈ，５Ｈ）－トリオン－７（ｉｉｉ）
６（ｉｉｉ）（４０５ｍｇ、０．５５ｍｏｌ）及びＥｔ３Ｎ（０．１６ｍＬ、１．１５ｍｍｏｌ）のｉ－ＰｒＯＨ：ＴＨＦ（１：１、６ｍＬ）撹拌溶液に１，３－プロパンジチオール（０．１２ｍＬ、１．１５ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を５分間撹拌した後、ＮａＢＨ4（４４ｍｇ、１．１６ｍｍｏｌ）を添加した。７２時間の反応時間後、Ｂｏｃ２Ｏ（４９０ｍｇ、２．２５ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を更に一晩撹拌した後、ＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）及び水（１０ｍＬ）で希釈し、１時間撹拌した。有機相を水（３×１５ｍＬ）及び塩水（１５ｍＬ）で洗浄し、濃縮した。生成した粗製物を自動フラッシュクロマトグラフィによって精製し、蒸発させた。Ｂｏｃ保護中間体をＣＨ2Ｃｌ2（５ｍＬ）中のＴＦＡ（１．７ｍＬ、２２．２ｍｍｏｌ）を用いて６時間脱保護した。反応混合物を濃縮し、粗生成物をＲＰ自動フラッシュクロマトグラフィによって精製し、凍結乾燥させて、７（ｉｉｉ）（１５４ｍｇ、３１％）をＴＦＡ塩として得た。
６（ｉｉｉ）（４０５ｍｇ、０．５５ｍｏｌ）及びＥｔ３Ｎ（０．１６ｍＬ、１．１５ｍｍｏｌ）のｉ－ＰｒＯＨ：ＴＨＦ（１：１、６ｍＬ）撹拌溶液に１，３－プロパンジチオール（０．１２ｍＬ、１．１５ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を５分間撹拌した後、ＮａＢＨ4（４４ｍｇ、１．１６ｍｍｏｌ）を添加した。７２時間の反応時間後、Ｂｏｃ２Ｏ（４９０ｍｇ、２．２５ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を更に一晩撹拌した後、ＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）及び水（１０ｍＬ）で希釈し、１時間撹拌した。有機相を水（３×１５ｍＬ）及び塩水（１５ｍＬ）で洗浄し、濃縮した。生成した粗製物を自動フラッシュクロマトグラフィによって精製し、蒸発させた。Ｂｏｃ保護中間体をＣＨ2Ｃｌ2（５ｍＬ）中のＴＦＡ（１．７ｍＬ、２２．２ｍｍｏｌ）を用いて６時間脱保護した。反応混合物を濃縮し、粗生成物をＲＰ自動フラッシュクロマトグラフィによって精製し、凍結乾燥させて、７（ｉｉｉ）（１５４ｍｇ、３１％）をＴＦＡ塩として得た。
【0181】
1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.31 (t, J = 1.5 Hz, 2H), 6.89 (d, J = 1.6 Hz, 4H), 3.59 (t*, 4H), 3.44 (s, 4H), 2.78 (t*, 4H), 1.40 (p, J = 7.7 Hz, 4H), 1.26 (s, 36H), 1.17 (p, J = 7.6 Hz, 4H). 13i) NMR (101 MHz, CD3OD): δ 172.3, 162.8 (q, J = 34.7 Hz, TFA), 152.3, 151.1, 135.8, 124.7, 122.6, 118.1 (q, J = 292.5 Hz, TFA), 61.8, 47.3, 42.0, 39.9, 35.6, 31.9, 25.9, 25.5. *ゆがんだ三重線 HRMS-ESI: C42H67N4O3 + [M+H]+ 計算値: 675.5211, 実測値: 675.5211.
【0182】
１，３－ビス（４－アミノブチル）－５，５－ビス（ナフタレン－２－イル－メチル）－ピリミジン－２，４，６（１Ｈ，３Ｈ，５Ｈ）－トリオン－７（ｉｖ）
６（ｉｖ）（４３８ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ）及びＥｔ３Ｎ（０．２２ｍＬ、１．５９ｍｍｏｌ）のｉ－ＰｒＯＨ：ＴＨＦ（１：１、４ｍＬ）撹拌溶液に１，３－プロパンジチオール（０．１ｍＬ、０．９９ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を５分間撹拌した後、ＮａＢＨ4（６８ｍｇ、１．８１ｍｍｏｌ）を添加した。７２時間の反応時間後、Ｂｏｃ２Ｏ（３３３ｍｇ、１．５３ｍｍｏｌ）及びＮａＨＣＯ3（２４４ｍｇ、２．９０ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を１８時間撹拌した後、Ｃｅｌｉｔｅパッドに通して濾過し、濃縮した。生成した粗製物を自動フラッシュクロマトグラフィによって精製し、蒸発させた。Ｂｏｃ保護中間体（３０５ｍｇ）をＣＨ2Ｃｌ2（５ｍＬ）中のＴＦＡ（２ｍＬ、２６．１ｍｍｏｌ）を用いて脱保護した。ＭＳが完全な脱保護を示したら、反応混合物を濃縮し、粗生成物をＲＰ自動フラッシュクロマトグラフィによって精製し、凍結乾燥させて、７（ｉｖ）（２８７ｍｇ、９０％）をＴＦＡ塩として得た。
６（ｉｖ）（４３８ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ）及びＥｔ３Ｎ（０．２２ｍＬ、１．５９ｍｍｏｌ）のｉ－ＰｒＯＨ：ＴＨＦ（１：１、４ｍＬ）撹拌溶液に１，３－プロパンジチオール（０．１ｍＬ、０．９９ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を５分間撹拌した後、ＮａＢＨ4（６８ｍｇ、１．８１ｍｍｏｌ）を添加した。７２時間の反応時間後、Ｂｏｃ２Ｏ（３３３ｍｇ、１．５３ｍｍｏｌ）及びＮａＨＣＯ3（２４４ｍｇ、２．９０ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を１８時間撹拌した後、Ｃｅｌｉｔｅパッドに通して濾過し、濃縮した。生成した粗製物を自動フラッシュクロマトグラフィによって精製し、蒸発させた。Ｂｏｃ保護中間体（３０５ｍｇ）をＣＨ2Ｃｌ2（５ｍＬ）中のＴＦＡ（２ｍＬ、２６．１ｍｍｏｌ）を用いて脱保護した。ＭＳが完全な脱保護を示したら、反応混合物を濃縮し、粗生成物をＲＰ自動フラッシュクロマトグラフィによって精製し、凍結乾燥させて、７（ｉｖ）（２８７ｍｇ、９０％）をＴＦＡ塩として得た。
【0183】
1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.90-7.68 (m, 6H), 7.60 (s, 2H), 7.52-7.43 (m, 4H), 7.19 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 3.70 (s, 4H), 3.59-3.50 (m, 4H), 2.56-2.37 (m, 4H), 1.30-0.96 (m, 8H). 13i) NMR (101 MHz, CD3OD): δ 172.2, 162.8 (q, J = 35.2 Hz, TFA), 151.0, 134.7, 134.1, 134.0, 129.9, 129.4, 128.8, 128.7, 128.2, 127.6, 127.3, 118.1 (d, J = 292.3 Hz, TFA), 62.0, 46.6, 41.7, 39.8, 25.6, 25.5. HRMS-ESI: C34H39N4O3 + [M+H]+ 計算値: 551.3017, 実測値: 551.3020.
【0184】
１，３－ビス（４－アミノブチル）－５，５－ビス（（４－フルオロナフタレン－１－イル）メチル）ピリミジン－２，４，６（１Ｈ，３Ｈ，５Ｈ）－トリオン－７（ｖ）
６（ｖ）（６７ｍｇ、０．１０５ｍｍｏｌ）及びＥｔ３Ｎ（０．０３ｍＬ、０．２１ｍｍｏｌ）のｉ－ＰｒＯＨ：ＴＨＦ（１：１、４ｍＬ）撹拌溶液に１，３－プロパンジチオール（０．１ｍＬ、０．９９ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を５分間撹拌した後、ＮａＢＨ4（８ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を添加した。７２時間の反応時間後、Ｂｏｃ２Ｏ（４８ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）及びＮａＨＣＯ3（３５ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を１８時間撹拌した後、Ｃｅｌｉｔｅパッドに通して濾過し、濃縮した。生成した粗製物を自動フラッシュクロマトグラフィによって精製し、蒸発させた。Ｂｏｃ保護中間体（７２ｍｇ）をＣＨ2Ｃｌ2（５ｍＬ）中のＴＦＡ（０．２ｍＬ、２．６１ｍｍｏｌ）を用いて脱保護した。ＭＳが完全な脱保護を示したら、反応混合物を濃縮し、粗生成物をＲＰ自動フラッシュクロマトグラフィによって精製し、凍結乾燥させて、７（ｖ）（８２ｍｇ、８９％）をＴＦＡ塩として得た。
６（ｖ）（６７ｍｇ、０．１０５ｍｍｏｌ）及びＥｔ３Ｎ（０．０３ｍＬ、０．２１ｍｍｏｌ）のｉ－ＰｒＯＨ：ＴＨＦ（１：１、４ｍＬ）撹拌溶液に１，３－プロパンジチオール（０．１ｍＬ、０．９９ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を５分間撹拌した後、ＮａＢＨ4（８ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）を添加した。７２時間の反応時間後、Ｂｏｃ２Ｏ（４８ｍｇ、０．２２ｍｍｏｌ）及びＮａＨＣＯ3（３５ｍｇ、０．４２ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を１８時間撹拌した後、Ｃｅｌｉｔｅパッドに通して濾過し、濃縮した。生成した粗製物を自動フラッシュクロマトグラフィによって精製し、蒸発させた。Ｂｏｃ保護中間体（７２ｍｇ）をＣＨ2Ｃｌ2（５ｍＬ）中のＴＦＡ（０．２ｍＬ、２．６１ｍｍｏｌ）を用いて脱保護した。ＭＳが完全な脱保護を示したら、反応混合物を濃縮し、粗生成物をＲＰ自動フラッシュクロマトグラフィによって精製し、凍結乾燥させて、７（ｖ）（８２ｍｇ、８９％）をＴＦＡ塩として得た。
【0185】
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.34 (d, J = 7.9 Hz, 2H), 8.07 (d, J = 7.7 Hz, 2H), 7.74-7.53 (m, 4H), 7.38-7.19 (m, 2H), 7.08 (t, J = 8.9 Hz, 2H), 4.13 (s, 4H), 3.39-3.33 (m, 4H), 2.60 (t, J = 6.8 Hz, 4H), 1.20-1.00 (m, 4H), 0.94-0.71 (m, 4H). 13i) NMR (101 MHz, CDCl3): δ 172.2, 163.11 (q, J = 34.1 Hz, TFA), 159.6 (d, J = 251.5 Hz), 150.8, 134.5 (d, J = 4.4 Hz), 129.3 (d, J = 4.5 Hz), 128.4 (d, J = 8.5 Hz), 128.2, 127.6 (d, J = 1.1 Hz), 126.3 (d, J = 2.4 Hz), 125.2 (d, J = 15.6 Hz), 121.5 (d, J = 6.2 Hz), 118.23 (q, J = 292.8 Hz, TFA), 109.76 (d, J = 20.2 Hz), 61.0, 41.7, 41.3, 39.9, 25.3, 25.1. HRMS-ESI: C34H37(iv)2N4O3 + [M+H]+ 計算値: 587.2828, 実測値: 587.2828. 4.2.6.
【0186】
１，３－ビス（４－アミノブチル）－５，５－ビス（３，５－ビス（トリフルオロメチル）－ピリミジン－２，４，６（１Ｈ，３Ｈ，５Ｈ）－トリオン－７（ｖｉ）
６（ｖｉ）（６３ｍｇ、０．８１μｍｏｌ）及びＥｔ３Ｎ（０．０３４ｍＬ、０．２４ｍｍｏｌ）のｉ－ＰｒＯＨ：ＴＨＦ（１：１、２ｍＬ）撹拌溶液に１，３－プロパンジチオール（０．１０ｍＬ、０．９９ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を５分間撹拌した後、ＮａＢＨ4（９２ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）を１２添加した。４８時間の反応時間後、Ｂｏｃ２Ｏ（７０ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）及びＫ2ＣＯ3（４５ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を更に一晩撹拌した後、ＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）及び水（１０ｍＬ）で希釈し、１時間撹拌した。有機相を水（３×１５ｍＬ）及び塩水（１５ｍＬ）で洗浄し、濃縮した。生成した粗製物を自動フラッシュクロマトグラフィによって精製し、蒸発させた。Ｂｏｃ保護中間体をＣＨ2Ｃｌ2（５ｍＬ）中のＴＦＡ（２ｍＬ、２６ｍｍｏｌ）を用いて１８時間脱保護した。反応混合物を濃縮し、粗生成物をＲＰ自動フラッシュクロマトグラフィによって精製し、凍結乾燥させて、７（ｖｉ）（１２ｍｇ、１６％）をＴＦＡ塩として得た。
６（ｖｉ）（６３ｍｇ、０．８１μｍｏｌ）及びＥｔ３Ｎ（０．０３４ｍＬ、０．２４ｍｍｏｌ）のｉ－ＰｒＯＨ：ＴＨＦ（１：１、２ｍＬ）撹拌溶液に１，３－プロパンジチオール（０．１０ｍＬ、０．９９ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を５分間撹拌した後、ＮａＢＨ4（９２ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）を１２添加した。４８時間の反応時間後、Ｂｏｃ２Ｏ（７０ｍｇ、０．３２ｍｍｏｌ）及びＫ2ＣＯ3（４５ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を更に一晩撹拌した後、ＥｔＯＡｃ（１０ｍＬ）及び水（１０ｍＬ）で希釈し、１時間撹拌した。有機相を水（３×１５ｍＬ）及び塩水（１５ｍＬ）で洗浄し、濃縮した。生成した粗製物を自動フラッシュクロマトグラフィによって精製し、蒸発させた。Ｂｏｃ保護中間体をＣＨ2Ｃｌ2（５ｍＬ）中のＴＦＡ（２ｍＬ、２６ｍｍｏｌ）を用いて１８時間脱保護した。反応混合物を濃縮し、粗生成物をＲＰ自動フラッシュクロマトグラフィによって精製し、凍結乾燥させて、７（ｖｉ）（１２ｍｇ、１６％）をＴＦＡ塩として得た。
【0187】
1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.93 (s, 2H), 7.68 (s, 4H), 3.71 (s, 4H), 3.61-3.54 (m, 4H), 2.87-2.80 (m, 4H), 1.57-1.46 (m, 4H), 1.33-1.22 (m, 4H). 13i) NMR (101 MHz, CD3OD) δ 170.9, 150.1, 139.4, 133.0 (q, J = 33.4 Hz, TFA), 131.6-131.1 (m), 124.6 (q, J = 272.1 Hz, TFA), 123.0, 61.1, 44.8, 42.3, 40.0, 25.9, 25.7. HRMS-ESI: C30H31F12N4O3 + [M+H]+ 計算値: 723.2197, 実測値: 723.2161.
【0188】
１，１’－（４，４’－（５，５－ビス（４－ｔｅｒｔ－ブチルベンジル）－２，４，６－トリオキソジヒドロピリミジン－１，３（２Ｈ，４Ｈ）－ジイル）ビス（ブタン－４，１－ジイル））ジグアニジン－８（ｉ）
ＴＨＦ（２ｍＬ）中の７（ｉ）（１２９ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）のＴＦＡ塩の撹拌溶液にＮａＨＣＯ3（６８ｍｇ、０．８１ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ’－ビス－Ｂｏｃ－１－グアニルピラゾール（２００ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で４８時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、粗生成物をＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）に溶解し、１０％クエン酸溶液（２×２０ｍＬ）、１０％ＮａＨＣＯ3溶液（２０ｍＬ）及び塩水（２０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮した。粗生成物を自動フラッシュクロマトグラフィによって精製し、生成したＢｏｃ保護中間体をＣＨ2Ｃｌ2中のＴＦＡ（１ｍＬ）を用いて１８時間脱保護した。反応混合物を濃縮し、粗製物をＲＰ自動フラッシュクロマトグラフィによって精製し、凍結乾燥させて、８（ｉ）（１６ｍｇ、１１％）を白色粉末として得た。
ＴＨＦ（２ｍＬ）中の７（ｉ）（１２９ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）のＴＦＡ塩の撹拌溶液にＮａＨＣＯ3（６８ｍｇ、０．８１ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ’－ビス－Ｂｏｃ－１－グアニルピラゾール（２００ｍｇ、０．６４ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を室温で４８時間撹拌した。反応混合物を濃縮し、粗生成物をＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）に溶解し、１０％クエン酸溶液（２×２０ｍＬ）、１０％ＮａＨＣＯ3溶液（２０ｍＬ）及び塩水（２０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮した。粗生成物を自動フラッシュクロマトグラフィによって精製し、生成したＢｏｃ保護中間体をＣＨ2Ｃｌ2中のＴＦＡ（１ｍＬ）を用いて１８時間脱保護した。反応混合物を濃縮し、粗製物をＲＰ自動フラッシュクロマトグラフィによって精製し、凍結乾燥させて、８（ｉ）（１６ｍｇ、１１％）を白色粉末として得た。
【0189】
1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.24 (d, J = 8.3 Hz, 4H), 6.98 (d, J = 8.3 Hz, 4H), 3.58 (t, J = 6.7 Hz, 4H), 3.39 (s, 4H), 3.13 (t, J = 6.6 Hz, 4H), 1.39-1.29 (m, 8H), 1.24 (s, 18H). 13i) NMR (101 MHz, CD3OD) δ 172.4, 162.4 (q, J = 35.6 Hz, TFA), 158.7, 151.9, 151.2, 133.4, 130.3, 126.4, 117.9 (q, J = 291.5 Hz, TFA), 61.9, 45.9, 42.0, 41.9, 35.3, 31.7, 26.8, 25.8. HRMS-ESI: C36H55N8O3 + [M+H]+ 計算値: 647.4393, 実測値: 647.4378.
【0190】
１，１’－（４，４’－（５，５－ビス（３，５－ジブロモベンジル）－２，４，６－トリオキソジヒドロピリミジン－１，３（２Ｈ，４Ｈ）－ジイル）ビス（ブタン－４，１－ジイル））ジグアニジン－８（ｉｉ）
ＴＨＦ（５ｍＬ）中の７（ｉｉ）（３６０ｍｇ、０．３６２ｍｍｏｌ）のＴＦＡ塩の撹拌溶液にＮａＨＣＯ3（２４０ｍｇ、２．８６ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ’－ビス－Ｂｏｃ－１－グアニルピラゾール（５６４ｍｇ、１．８２ｍｍｏｌ）を添加した。ＭＳが完全なグアニル化を示したら、反応混合物を濾過し、濃縮した。粗生成物をＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）に溶解し、塩水（２×２０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮した。粗生成物を自動フラッシュクロマトグラフィによって精製し、生成したＢｏｃ保護中間体をＣＨ2Ｃｌ2（２ｍＬ）中のＴＦＡ（０．２ｍＬ）を用いて１８時間脱保護した。反応混合物を濃縮し、粗製物をＲＰ自動フラッシュクロマトグラフィによって精製し、凍結乾燥させて、８（ｉｉ）（４４ｍｇ、１１％）を白色粉末として得た。
ＴＨＦ（５ｍＬ）中の７（ｉｉ）（３６０ｍｇ、０．３６２ｍｍｏｌ）のＴＦＡ塩の撹拌溶液にＮａＨＣＯ3（２４０ｍｇ、２．８６ｍｍｏｌ）及びＮ，Ｎ’－ビス－Ｂｏｃ－１－グアニルピラゾール（５６４ｍｇ、１．８２ｍｍｏｌ）を添加した。ＭＳが完全なグアニル化を示したら、反応混合物を濾過し、濃縮した。粗生成物をＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）に溶解し、塩水（２×２０ｍＬ）で洗浄した。有機相をＮａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮した。粗生成物を自動フラッシュクロマトグラフィによって精製し、生成したＢｏｃ保護中間体をＣＨ2Ｃｌ2（２ｍＬ）中のＴＦＡ（０．２ｍＬ）を用いて１８時間脱保護した。反応混合物を濃縮し、粗製物をＲＰ自動フラッシュクロマトグラフィによって精製し、凍結乾燥させて、８（ｉｉ）（４４ｍｇ、１１％）を白色粉末として得た。
【0191】
1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.65 (t, J = 1.8 Hz, 2H), 7.22 (d, J = 1.7 Hz, 4H), 3.67 (t, J = 7.2 Hz, 4H), 3.42 (s, 4H), 3.20 (t, J = 6.7 Hz, 4H), 1.52-1.36 (m, 8H). 13i) NMR (101 MHz, CD3OD): δ 171.3, 163.0 (q, J = 34.6 Hz, TFA), 158.6, 150.5, 140.5, 134.5, 132.6, 124.1, 118.2 (q, J = 292.7 Hz, TFA), 61.2, 44.9, 42.6, 42.1, 27.0, 26.4. HRMS-ESI: C28H35 79Br2 81Br2N8O3 + [M+H]+ 計算値: 850.9525, 実測値: 850.9532.
【0192】
１，１’－（４，４’－（５，５－ビス（３，５－ジ－ｔｅｒｔ－ブチルベンジル）－２，４，６－トリオキソジヒドロピリミジン－１，３（２Ｈ，４Ｈ）－ジイル）ビス（ブタン－４，１－ジイル））－ジグアニジン－８（ｉｉｉ）
ＴＨＦ（３ｍＬ）中の７（ｉｉｉ）（１１８ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）のＴＦＡ塩の撹拌溶液にＮ，Ｎ’－ビス－Ｂｏｃ－１－グアニルピラゾール（２４５ｍｇ、０．７９ｍｍｏｌ）及びＮａＨＣＯ3（４９ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）を添加し、ＴＬＣ（ＣＨＣｌ3）が完全な転化を示すまで室温で撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（５ｍＬ）で希釈し、１０％クエン酸溶液及び塩水で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮した。粗製物を自動フラッシュクロマトグラフィによって精製し、生成したＢｏｃ保護中間体をＣＨ2Ｃｌ2（１．５ｍＬ）中のＴＦＡ（１．５ｍＬ）を用いて４時間脱保護した。反応混合物を濃縮し、粗製物をＲＰ自動フラッシュクロマトグラフィによって精製し、凍結乾燥させて、８（ｉｉｉ）（４４ｍｇ、３４％）を白色粉末として得た。
ＴＨＦ（３ｍＬ）中の７（ｉｉｉ）（１１８ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）のＴＦＡ塩の撹拌溶液にＮ，Ｎ’－ビス－Ｂｏｃ－１－グアニルピラゾール（２４５ｍｇ、０．７９ｍｍｏｌ）及びＮａＨＣＯ3（４９ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）を添加し、ＴＬＣ（ＣＨＣｌ3）が完全な転化を示すまで室温で撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（５ｍＬ）で希釈し、１０％クエン酸溶液及び塩水で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮した。粗製物を自動フラッシュクロマトグラフィによって精製し、生成したＢｏｃ保護中間体をＣＨ2Ｃｌ2（１．５ｍＬ）中のＴＦＡ（１．５ｍＬ）を用いて４時間脱保護した。反応混合物を濃縮し、粗製物をＲＰ自動フラッシュクロマトグラフィによって精製し、凍結乾燥させて、８（ｉｉｉ）（４４ｍｇ、３４％）を白色粉末として得た。
【0193】
1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.30 (t, J = 1.8 Hz, 2H), 6.89 (d, J = 1.8 Hz, 4H), 3.58* (t, J = 7.5 Hz, 4H), 3.44 (s, 4H), 3.06 (t, J = 7.0 Hz, 4H), 1.38-1.14 (m, 44H). 13i) NMR (101 MHz, CD3OD): δ 172.4, 162.8 (q, J = 35.2 Hz, TFA), 158.6, 152.3, 151.3, 135.8, 124.6, 122.6, 118.0 (q, J = 292.3 Hz, TFA), 61.7, 47.3, 42.4, 41.8, 35.6, 31.9, 26.7, 26.2. *ゆがんだ三重線 HRMS-ESI: C44H71N8O3 + [M+H]+ 計算値: 759.5644, 実測値: 759.5637.
【0194】
１，１’－（４，４’－（５，５－ビス（ナフタレン－２－イルメチル）－２，４，６－トリオキソジヒドロピリミジン－１，３（２Ｈ，４Ｈ）－ジイル）ビス（ブタン－４，１－ジイル））－ジグアニジン－８（ｉｖ）
ＴＨＦ（４ｍＬ）中の７（ｉｖ）（５４ｍｇ、０．０６９ｍｍｏｌ）のＴＦＡ塩の撹拌溶液にＮ，Ｎ’－ビス－Ｂｏｃ－１－グアニルピラゾール（６３ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）及びＮａＨＣＯ3（４１ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）を添加し、ＴＬＣ（ＣＨＣｌ3）が完全な転化を示すまで室温で撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（５ｍＬ）で希釈し、１０％クエン酸溶液（２×１０ｍＬ）及び塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮した。Ｂｏｃ保護中間体をＣＨＣｌ3に溶解し、Ｃｅｌｉｔｅ上に吸着させた後、シリカカラム上でＣＨＣｌ3を移動相として用いて精製した。ＴＬＣが完全な転化を示すまで、Ｂｏｃ保護中間体（合計１０４ｍｇのうち６４ｍｇ、０．０５７ｍｍｏｌ）をＣＨ2Ｃｌ2（４ｍＬ）中のＴＦＡ（０．２ｍＬ）を用いて脱保護した。反応混合物を濃縮し、ＲＰ自動フラッシュクロマトグラフィによって精製し、凍結乾燥させて、８（ｉｖ）（６０ｍｇ、９９％）を白色粉末として得た。
ＴＨＦ（４ｍＬ）中の７（ｉｖ）（５４ｍｇ、０．０６９ｍｍｏｌ）のＴＦＡ塩の撹拌溶液にＮ，Ｎ’－ビス－Ｂｏｃ－１－グアニルピラゾール（６３ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）及びＮａＨＣＯ3（４１ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）を添加し、ＴＬＣ（ＣＨＣｌ3）が完全な転化を示すまで室温で撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（５ｍＬ）で希釈し、１０％クエン酸溶液（２×１０ｍＬ）及び塩水（１０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮した。Ｂｏｃ保護中間体をＣＨＣｌ3に溶解し、Ｃｅｌｉｔｅ上に吸着させた後、シリカカラム上でＣＨＣｌ3を移動相として用いて精製した。ＴＬＣが完全な転化を示すまで、Ｂｏｃ保護中間体（合計１０４ｍｇのうち６４ｍｇ、０．０５７ｍｍｏｌ）をＣＨ2Ｃｌ2（４ｍＬ）中のＴＦＡ（０．２ｍＬ）を用いて脱保護した。反応混合物を濃縮し、ＲＰ自動フラッシュクロマトグラフィによって精製し、凍結乾燥させて、８（ｉｖ）（６０ｍｇ、９９％）を白色粉末として得た。
【0195】
1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 7.85-7.69 (m, 6H), 7.59 (s, 2H), 7.53-7.40 (m, 4H), 7.20 (dd, J = 8.4, 1.8 Hz, 2H), 3.69 (s, 4H), 3.54 (t, J = 7.1 Hz, 4H), 2.80 (t, J = 7.1 Hz, 4H), 1.21-1.08 (m, 4H), 1.08-0.98 (m, 4H). 13i) NMR (101 MHz, CD3OD): δ 172.3, 163.1 (q, J = 34.3 Hz, TFA), 158.5, 151.0, 134.7, 134.1, 134.0, 129.8, 129.4, 128.7, 128.6, 128.3, 127.6, 127.3, 118.2 (q, J = 293.0 Hz, TFA), 62.0, 46.6, 42.1, 41.8, 26.6, 25.9. HRMS-ESI: C36H43N8O3 + [M+H]+ 計算値: 635.3450, 実測値: 635.3448.
【0196】
１，１’－（４，４’－（５，５－ビス（（４－フルオロナフタレン－１－イル）メチル）－２，４，６－トリオキソジヒドロピリミジン－１，３（２Ｈ，４Ｈ）－ジイル）ビス（ブタン－４，１－ジイル））ジグアニジン－８（ｖ）
ＴＨＦ（３ｍＬ）中の７（ｖ）（３５ｍｇ、４３μｍｏｌ）のＴＦＡ塩の撹拌溶液にＮ，Ｎ’－ビス－Ｂｏｃ－１－グアニルピラゾール（３８ｍｇ、１２２μｍｏｌ）及びＮａＨＣＯ3（２５ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）を添加し、ＴＬＣ（ＣＨＣｌ3）が完全な転化を示すまで室温で撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（５ｍＬ）で希釈し、１０％クエン酸溶液及び塩水で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮した。Ｂｏｃ保護中間体をＣＨＣｌ3に溶解し、Ｃｅｌｉｔｅ上に吸着させた後、シリカカラム上でＣＨＣｌ3を移動相として用いて精製した。ＴＬＣが完全な転化を示すまで、Ｂｏｃ保護中間体（合計９５ｍｇのうち４１ｍｇ、０．０３８ｍｍｏｌ）をＣＨ2Ｃｌ2（４ｍＬ）中のＴＦＡ（０．１ｍＬ）を用いて脱保護した。反応混合物を濃縮し、ＲＰ自動フラッシュクロマトグラフィによって精製し、凍結乾燥させて、８（ｖ）（２０ｍｇ、５２％）を白色粉末として得た。
ＴＨＦ（３ｍＬ）中の７（ｖ）（３５ｍｇ、４３μｍｏｌ）のＴＦＡ塩の撹拌溶液にＮ，Ｎ’－ビス－Ｂｏｃ－１－グアニルピラゾール（３８ｍｇ、１２２μｍｏｌ）及びＮａＨＣＯ3（２５ｍｇ、０．２９ｍｍｏｌ）を添加し、ＴＬＣ（ＣＨＣｌ3）が完全な転化を示すまで室温で撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（５ｍＬ）で希釈し、１０％クエン酸溶液及び塩水で洗浄し、Ｎａ2ＳＯ4を用いて脱水し、濾過し、濃縮した。Ｂｏｃ保護中間体をＣＨＣｌ3に溶解し、Ｃｅｌｉｔｅ上に吸着させた後、シリカカラム上でＣＨＣｌ3を移動相として用いて精製した。ＴＬＣが完全な転化を示すまで、Ｂｏｃ保護中間体（合計９５ｍｇのうち４１ｍｇ、０．０３８ｍｍｏｌ）をＣＨ2Ｃｌ2（４ｍＬ）中のＴＦＡ（０．１ｍＬ）を用いて脱保護した。反応混合物を濃縮し、ＲＰ自動フラッシュクロマトグラフィによって精製し、凍結乾燥させて、８（ｖ）（２０ｍｇ、５２％）を白色粉末として得た。
【0197】
1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 8.32 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 8.06 (d, J = 7.9 Hz, 2H), 7.71-7.55 (m, 4H), 7.25 (dd, J = 8.0, 5.5 Hz, 2H), 7.06 (dd, J = 10.2, 8.1 Hz, 2H), 4.12 (s, 4H), 3.35 (t, J = 7.2 Hz, 4H), 2.87 (t, J = 7.1 Hz, 4H), 1.00 (p, J = 7.2 Hz, 4H), 0.86 (p, J = 7.4, 6.8 Hz, 4H). 13i) NMR (101 MHz, CD3OD): δ 172.2, 163.1 (q, J = 34.1 Hz, TFA), 159.6 (d, J = 251.6 Hz), 158.5, 150.9, 134.5 (d, J = 4.3 Hz), 129.2 (d, J = 4.6 Hz), 128.9 (d, J = 8.5 Hz), 128.2, 127.6 (d, J = 1.6 Hz), 126.2 (d, J = 2.5 Hz), 125.2 (d, J = 15.8 Hz), 121.5 (d, J = 6.2 Hz), 118.2 (q, J = 292.8 Hz, TFA), 109.7 (d, J = 20.2 Hz), 60.9, 42.1, 41.8, 41.4, 26.5, 25.4. HRMS-ESI: C36H41F2N8O3 + [M+H]+ 計算値: 671.3264, 実測値: 671.3244.
【0198】
生物学的試験法
最小阻止濃度（ＭＩＣ）アッセイ
試験誘導体の検量線用溶液を１００％ＤＭＳＯまで調製し、－２０℃で貯蔵した。必要に応じて、溶液を試験前に４０～８０℃に加熱して、完全な溶解を促進した。調製したすべての希釈液に再蒸留水を使用した。試験シリーズにおけるＤＭＳＯの最終濃度は１％以下にし、アッセイ結果に影響を及ぼさないようにした。Ｉｇｕｍｎｏｖａら（Ｂｉｏｏｒｇ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ、２０１６、２４（２２）、５８８４～５８９４）によって記述された修正を含む、Ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ、「Ｍｅｔｈｏｄｓ ｆｏｒ Ｄｉｌｕｔｉｏｎ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｓｉｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ Ｔｅｓｔｓ ｆｏｒ Ｂａｃｔｅｒｉａ Ｔｈａｔ Ｇｒａｗ Ａｅｒｏｂｉｃａｌｌｙ」、Ａｐｐｒｏｖｅｄ Ｓｔａｎｄａｒｄ Ｍ０７－Ａ９、２０１２年版に従って、微量希釈感受性試験をＭＩＣ測定に使用した。
最小阻止濃度（ＭＩＣ）アッセイ
試験誘導体の検量線用溶液を１００％ＤＭＳＯまで調製し、－２０℃で貯蔵した。必要に応じて、溶液を試験前に４０～８０℃に加熱して、完全な溶解を促進した。調製したすべての希釈液に再蒸留水を使用した。試験シリーズにおけるＤＭＳＯの最終濃度は１％以下にし、アッセイ結果に影響を及ぼさないようにした。Ｉｇｕｍｎｏｖａら（Ｂｉｏｏｒｇ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ、２０１６、２４（２２）、５８８４～５８９４）によって記述された修正を含む、Ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ、「Ｍｅｔｈｏｄｓ ｆｏｒ Ｄｉｌｕｔｉｏｎ Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ Ｓｉｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ Ｔｅｓｔｓ ｆｏｒ Ｂａｃｔｅｒｉａ Ｔｈａｔ Ｇｒａｗ Ａｅｒｏｂｉｃａｌｌｙ」、Ａｐｐｒｏｖｅｄ Ｓｔａｎｄａｒｄ Ｍ０７－Ａ９、２０１２年版に従って、微量希釈感受性試験をＭＩＣ測定に使用した。
【0199】
手短に述べると、細菌接種材料をミュラーヒントンブロス（ＭＨＢ、Ｄｉｆｃｏ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、ＵＳＡ）で約２．５～３×１０４細胞／ｍＬに調節し、ポリスチレン９６ウェル平底マイクロプレート（ＮＵＮＣ、Ｒｏｓｋｉｌｄｅ、デンマーク）中で試験誘導体と１：１の比でインキュベートした。正の増殖対照（試験誘導体なし）及び負の対照（細菌なし）を含んだ。参照抗生物質はオキシテトラサイクリン塩酸塩（Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ、Ｓａｉｎｔ Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ、ＵＳＡ）であった。３５℃に設定された恒温器中に置かれたＥｎＶｉｓｉｏｎマイクロプレートリーダー（Ｐｅｒｋｉｎ－Ｅｌｍｅｒ、Ｔｕｒｋｕ、フィンランド）中でマイクロプレートを４８時間インキュベートした。ＯＤ600測定によって求めた細菌増殖がない最低誘導体濃度としてＭＩＣ値を定義した。全誘導体は３つずつ並行して試験した。
【0200】
臨床分離株に対する抗微生物スクリーニング
ＭＩＣを以下の幾つかの例外を含めて上で説明したように求めた。試験誘導体の検量線用溶液は、室温で貯蔵された濃ＤＭＳＯ貯蔵物から調製した。細菌接種材料の密度を４０倍にして１～１．２×１０６細胞／ｍＬとした。腸球菌をＢｒａｉｎ Ｈｅａｒｔ Ｉｎｆｕｓｉｏｎブロス（ＢＨＩＢ、Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、ＵＳＡ）中でインキュベートした。マイクロプレートを２４時間インキュベートし、誘導体を４つ並行して試験した。
ＭＩＣを以下の幾つかの例外を含めて上で説明したように求めた。試験誘導体の検量線用溶液は、室温で貯蔵された濃ＤＭＳＯ貯蔵物から調製した。細菌接種材料の密度を４０倍にして１～１．２×１０６細胞／ｍＬとした。腸球菌をＢｒａｉｎ Ｈｅａｒｔ Ｉｎｆｕｓｉｏｎブロス（ＢＨＩＢ、Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、ＵＳＡ）中でインキュベートした。マイクロプレートを２４時間インキュベートし、誘導体を４つ並行して試験した。
【0201】
溶血活性の測定
新鮮な採血血液のヘパリン処置画分（１０００ＩＵ／ｍＬ）を用いて溶血を測定した。ＥＤＴＡ含有試験管（Ｖａｃｕｔｅｓｔ（登録商標）、ＫＩＭＡ、Ａｒｚｅｒｇｒａｎｄｅ、イタリア）に収集した血液をヘマトクリット（ｈｃｔ）の測定に使用した。ヘパリン処置血液を予熱ＰＢＳで３回洗浄し、最終ｈｃｔ４％に調節した。ＤＭＳＯ（５０ｍＭ）中の誘導体を９６ウェルポリプロピレンＶ底プレート（ＮＵＮＣ、Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｏｓｌｏ、ノルウェー）に添加し、段階希釈した。試験濃度範囲は、５００－４μＭ、ＤＭＳＯ含有量≦１％であった。１％ＴｒｉｔｏｎＸ－１００溶液を１００％溶血の正の対照として使用した。負の対照として１％ＤＭＳＯのＰＢＳ緩衝溶液を含んだ。ＤＭＳＯ毒性の徴候は検出されなかった。ＲＢＣ（１％ｖ／ｖ最終濃度）をウェルプレートに添加し、３７℃、８００ｒｐｍで１時間インキュベートした。遠心分離（５分間、３０００ｇ）後、各ウェル１００μＬを９６ウェル平底プレートに移し、吸光度をマイクロプレートリーダー（ＶｅｒｓａＭａｘ（商標）、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ、Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ、ＣＡ、ＵＳＡ）を用いて５４５ｎｍで測定した。溶血率は、ＰＢＳのバックグラウンドで補正して、誘導体処理試料と界面活性剤処理試料の吸光度比として計算した。３つの独立した実験を行い、ＥＣ50値を平均として示す。
新鮮な採血血液のヘパリン処置画分（１０００ＩＵ／ｍＬ）を用いて溶血を測定した。ＥＤＴＡ含有試験管（Ｖａｃｕｔｅｓｔ（登録商標）、ＫＩＭＡ、Ａｒｚｅｒｇｒａｎｄｅ、イタリア）に収集した血液をヘマトクリット（ｈｃｔ）の測定に使用した。ヘパリン処置血液を予熱ＰＢＳで３回洗浄し、最終ｈｃｔ４％に調節した。ＤＭＳＯ（５０ｍＭ）中の誘導体を９６ウェルポリプロピレンＶ底プレート（ＮＵＮＣ、Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｏｓｌｏ、ノルウェー）に添加し、段階希釈した。試験濃度範囲は、５００－４μＭ、ＤＭＳＯ含有量≦１％であった。１％ＴｒｉｔｏｎＸ－１００溶液を１００％溶血の正の対照として使用した。負の対照として１％ＤＭＳＯのＰＢＳ緩衝溶液を含んだ。ＤＭＳＯ毒性の徴候は検出されなかった。ＲＢＣ（１％ｖ／ｖ最終濃度）をウェルプレートに添加し、３７℃、８００ｒｐｍで１時間インキュベートした。遠心分離（５分間、３０００ｇ）後、各ウェル１００μＬを９６ウェル平底プレートに移し、吸光度をマイクロプレートリーダー（ＶｅｒｓａＭａｘ（商標）、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ、Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ、ＣＡ、ＵＳＡ）を用いて５４５ｎｍで測定した。溶血率は、ＰＢＳのバックグラウンドで補正して、誘導体処理試料と界面活性剤処理試料の吸光度比として計算した。３つの独立した実験を行い、ＥＣ50値を平均として示す。
【0202】
実施例２
本発明に係る更なる対象化合物を図４に示す。
実施例３－抗バイオフィルム活性
表皮ブドウ球菌を使用して、バイオフィルム形成を阻害する試験化合物の効果を評価した。トリプシンソイブロス（ＴＳ、Ｍｅｒｃｋ、Ｄａｒｍｓｔａｄｔ、ドイツ）を増殖培地として使用した。
本発明に係る更なる対象化合物を図４に示す。
実施例３－抗バイオフィルム活性
表皮ブドウ球菌を使用して、バイオフィルム形成を阻害する試験化合物の効果を評価した。トリプシンソイブロス（ＴＳ、Ｍｅｒｃｋ、Ｄａｒｍｓｔａｄｔ、ドイツ）を増殖培地として使用した。
【0203】
ＴＳ中で終夜増殖した表皮ブドウ球菌の培養物を１％グルコースを含む新しいＴＳで希釈した（１：１００）。５０μＬ一定分量を９６ウェルマイクロタイタープレートに移し、異なる濃度で水に溶解した試験化合物５０μＬを添加した。３７℃で終夜インキュベーション後、菌液を慎重に廃棄した後、ウェルを水で洗浄した。プレートを乾燥し、バイオフィルムを５５℃で１時間インキュベーションして固定した後、表面に付着した細胞を０．１％クリスタルバイオレット（１００μＬ）で５分間染色した。クリスタルバイオレット溶液を除去し、プレートを水で再度洗浄し、５５℃で１時間乾燥させた。７０％エタノール７０μＬを添加後、プレートを室温で１０分間インキュベートした。
【0204】
プレートを視覚的に検査することによってバイオフィルム形成を観察した。バイオフィルム形成が見られない最低濃度としてＭＩＣを定義した。
水５０μＬで希釈した表皮ブドウ球菌懸濁液を正の対照として使用し、水５０μＬを含むスタフィロコッカス ヘモリチカス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｓ）懸濁液５０μＬを負の対照として使用した。水５０μＬとＴＳ５０μＬの混合物をアッセイ対照として使用した。
水５０μＬで希釈した表皮ブドウ球菌懸濁液を正の対照として使用し、水５０μＬを含むスタフィロコッカス ヘモリチカス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｓ）懸濁液５０μＬを負の対照として使用した。水５０μＬとＴＳ５０μＬの混合物をアッセイ対照として使用した。
【0205】
【表3】
【0206】
実施例４－Ａ２０５８細胞に対する抗癌活性
ヒトコーカサス人転移性黒色腫（Ａ２０５８、ＡＴＣＣ ＣＲＬ－１１１４７）細胞に７２時間暴露後に試験化合物の細胞傷害性を評価した。
ヒトコーカサス人転移性黒色腫（Ａ２０５８、ＡＴＣＣ ＣＲＬ－１１１４７）細胞に７２時間暴露後に試験化合物の細胞傷害性を評価した。
【0207】
Ａ２０５８細胞を終夜増殖し（２，０００細胞／ウェル）、次いでゲンタマイシン（１０μｇ／ｍＬ）、非必須アミノ酸（１％）、ピルビン酸ナトリウム（１ｍＭ）、Ｌ－アラニル－Ｌグルタミン（２ｍＭ）を補充した、ただしＦＢＳを補充しないＭＥＭ Ｅａｒｌｅで希釈した試験化合物（濃度範囲）（総体積１００μｌ）と一緒に２４時間インキュベートした。ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ９６（登録商標）ＡＱｕｅｏｕｓ Ｏｎｅ Ｓｏｌｕｔｉｏｎ Ｒｅａｇｅｎｔ（Ｐｒｏｍｅｇａ、Ｍａｄｉｓｏｎ、ＷＩ、ＵＳＡ）１０μＬを添加し、次いでプレートを更に１時間インキュベートした。
【0208】
吸光度をＤＴＸ８８０Ｍｕｌｔｉｍｏｄｅ Ｄｅｔｅｃｔｏｒによって４８５ｎｍで測定した。結果を負（アッセイ培地）及び正（ＴｒｉｔｏｎＸ－１００、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ）の対照と比較して生存％として計算した。
【0209】
【表4】
【0210】
化合物９（下記）も試験し、ＩＣ５０値２．９μｇ／ｍｌであることがわかった。
【0211】
【化8】
【0212】
実施例４
「Ｂｕｃｈｅｒｅｒ－Ｂｅｒｇｓ ｒｅａｃｔｉｏｎ ｆｏｒ ｈｙｄａｎｔｏｉｎ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」に従うヒダントインの合成法は、当該技術分野でよく知られている（例えば、Ｂｕｃｈｅｒｅｒ，Ｈ．Ｔ．、Ｂｒａｎｄｔ，Ｗ．Ｊ．Ｐｒａｋｔ．Ｃｈｅｍ．１９３４、１４０、１２９、Ｂｕｃｈｅｒｅｒ，Ｈ．Ｔ．、Ｓｔｅｉｎｅｒ，Ｗ．Ｊ．Ｐｒａｋｔ．Ｃｈｅｍ．１９３４、１４０、２９１、及びＢｕｃｈｅｒｅｒ，Ｈ．Ｔ．、Ｌｉｅｂ，Ｖ．Ａ．Ｊ．Ｐｒａｋｔ．Ｃｈｅｍ．１９３４、１４１、５）。
「Ｂｕｃｈｅｒｅｒ－Ｂｅｒｇｓ ｒｅａｃｔｉｏｎ ｆｏｒ ｈｙｄａｎｔｏｉｎ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ」に従うヒダントインの合成法は、当該技術分野でよく知られている（例えば、Ｂｕｃｈｅｒｅｒ，Ｈ．Ｔ．、Ｂｒａｎｄｔ，Ｗ．Ｊ．Ｐｒａｋｔ．Ｃｈｅｍ．１９３４、１４０、１２９、Ｂｕｃｈｅｒｅｒ，Ｈ．Ｔ．、Ｓｔｅｉｎｅｒ，Ｗ．Ｊ．Ｐｒａｋｔ．Ｃｈｅｍ．１９３４、１４０、２９１、及びＢｕｃｈｅｒｅｒ，Ｈ．Ｔ．、Ｌｉｅｂ，Ｖ．Ａ．Ｊ．Ｐｒａｋｔ．Ｃｈｅｍ．１９３４、１４１、５）。
【0213】
以下に示すこの方法は、式（ＩＩＩ）の化合物の合成に使用することができる。特に、下記スキーム２に示すように、前駆体ヒダントインは、適切な置換カルボニル化合物をシアン化カリウム（ＫＣＮ）及び炭酸アンモニウム［（ＮＨ４）２ＣＯ３］と反応させることによって、又は複数成分反応においてシアノヒドリン及び炭酸アンモニウムから、調製することができる。
【0214】
【化9】
【0215】
カチオン性Ｒ1基を導入するために、化合物７（ｉ）～８（ｖ）（すなわち式（ＩＩ）の化合物）の合成のための上記同じ方法を使用することができる。一つの可能な合成を下記スキーム３に示す。
【0216】
【化10】
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
