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特許7280984（２Ｓ）－２－［（４Ｒ）－２－オキソ－４－プロピル－ピロリジン－１－イル］酪酸の調製のための酵素的プロセスおよびそのブリバラセタムへの変換
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】特許公報(B2)
(11)【特許番号】
(24)【登録日】2023-05-16
(45)【発行日】2023-05-24
(54)【発明の名称】（２Ｓ）－２－［（４Ｒ）－２－オキソ－４－プロピル－ピロリジン－１－イル］酪酸の調製のための酵素的プロセスおよびそのブリバラセタムへの変換
(51)【国際特許分類】
C07D 207/26 20060101AFI20230517BHJP
C12P 17/00 20060101ALI20230517BHJP
A61K 31/4015 20060101ALN20230517BHJP
A61P 25/08 20060101ALN20230517BHJP
【ＦＩ】
C07D207/26
C12P17/00
A61K31/4015
A61P25/08
【請求項の数】
4
【外国語出願】
(21)【出願番号】P 2022004669
(22)【出願日】2022-01-14
(65)【公開番号】P2022117945
(43)【公開日】2022-08-12
【審査請求日】2022-04-20
(31)【優先権主張番号】202141004400
(32)【優先日】2021-02-01
(33)【優先権主張国・地域又は機関】IN
(73)【特許権者】
【識別番号】521312282
【氏名又は名称】ディヴィズ・ラボラトリーズ・リミテッド
【氏名又は名称原語表記】ＤＩＶＩ’Ｓ ＬＡＢＯＲＡＴＯＲＩＥＳ ＬＴＤ．
【住所又は居所原語表記】１－７２／２３（Ｐ）／ＤＩＶＩＳ／３０３，Ｄｉｖｉ Ｔｏｗｅｒｓ，Ｃｙｂｅｒｈｉｌｌｓ，Ｇａｃｈｉｂｏｗｌｉ，Ｈｙｄｅｒａｂａｄ－５０００３２ Ｔｅｌａｎｇａｎａ，Ｉｎｄｉａ
(74)【代理人】
【識別番号】110000523
【氏名又は名称】アクシス国際弁理士法人
(72)【発明者】
【氏名】サチャンドラ・キラン・ディヴィ
(72)【発明者】
【氏名】マイソール・アスワタナラヤナ・ラオ
(72)【発明者】
【氏名】シャイク・ナウシャディン
【審査官】上條 のぶよ
(56)【参考文献】
【文献】国際公開第２０１８／０４２３９３（ＷＯ，Ａ１）
【文献】特表２０１８－５２３６３３（ＪＰ，Ａ）
【文献】中国特許出願公開第１０８１０１８２４（ＣＮ，Ａ）
【文献】国際公開第２００５／００９９３５（ＷＯ，Ａ１）
【文献】中国特許出願公開第１０１２８４８１１（ＣＮ，Ａ）
【文献】国際公開第２００９／００９１１７（ＷＯ，Ａ１）
【文献】国際公開第２０１９／０８７１７２（ＷＯ，Ａ１）
【文献】米国特許出願公開第２００６／０２５２１３４（ＵＳ，Ａ１）
(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)
Ｃ０７Ｄ ２０７／２６
Ｃ１２Ｐ １７／００
ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）
(57)【特許請求の範囲】
【請求項1】
式（Ｉ）を有する（２Ｓ）－２－［（４Ｒ）－２－オキソ－４－プロピル－ピロリジン－１－イル］ブタンアミド（ブリバラセタム）の製造方法であって、【化1】
【化2】
（ｃ）前記工程（ｂ）の酸性化層を、ジクロロメタン、酢酸エチル、酢酸イソプロピルからなる群より選択した有機溶媒で抽出し、＞９５％のキラル純度を有する式（ＩＩＩ）の（２Ｓ）－２－［（４Ｒ）－２－オキソ－４－プロピル－ピロリジン－１－イル］酪酸を得る工程と、
【化3】
を備える、製造方法。
【請求項2】
前記工程（ａ）において、前記反応が７．０～７．８のｐＨで行われる、請求項１に記載の製造方法。
【請求項3】
前記反応の間、ｐＨは、水酸化アンモニウムの５～１０％溶液を加えることによって維持される、請求項２に記載の製造方法。
【請求項4】
前記工程（ａ）において、前記反応は、２０～３５℃の温度で行われる、請求項１に記載の製造方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、てんかんおよび関連する中枢神経系障害を治療するのに有用な薬物であるブリバラセタムを調製するための改善された製造方法に関する。
【背景技術】
【0002】
ブリバラセタム（Ｂｒｉｖａｒａｃｅｔａｍ）は化学的に（２Ｓ）－２－［（４Ｒ）－２－オキソ－４－プロピル－ピロリジン－１－イル］ブタンアミド（Ｉ）であり、次の構造を有している。
【化1】
【0003】
ブリバラセタムとその調製方法は、国際公開第０１／６２７２６号（スキーム１）で最初に開示された。５－ヒドロキシ－４－プロピル－フラン－２－オンは、還元的アミノ化によって（Ｓ）－２－アミノブチルアミドと縮合し、それに続くさらなる還元により、ラセミ体のブリバラセタムが生成される。ラセミ体のブリバラセタムは、キラルクロマトグラフィーを使用して分離される。
【化2】
【0004】
米国特許第８，３３８，６２１号明細書の実施例５には、（Ｒ）－４－プロピル－ピロリジン－２－オンを（Ｒ）－２－ブロモ酪酸と縮合することによる、９５．９％（２Ｓ，４Ｓ）および４．１％（２Ｓ，４Ｒ）の異性体を有する（Ｓ）－２－［（Ｓ）４－プロピル－２－オキソピロリジン－１－イル］酪酸の生成が記載される（スキーム２）。このようにして得られた酸は、アンモニアとの反応、続いてキラルクロマトグラフィーにより、ブリバラセタムを与える。
【化3】
【0005】
米国特許第８，９５７，２２６Ｂ２の実施例３には、ブリバラセタムの合成が記載され、そこでは、テトラヒドロフラン中において、塩基として水素化ナトリウムを使用して（Ｒ）－４－プロピル－ピロリジン－２－オンをラセミ体の２－ブロモ酪酸のメチルエステルと縮合させ、その結果、（ＲＳ）－２－（（２）－２－オキソ－４－プロピルピロリジン－１－イル）酪酸メチルエステルが生成され、それに続く水酸化アンモニウムとの反応により、ラセミ体のブリバラセタムが生成されることが記載されている。ラセミ混合物は、キラルクロマトグラフィーを使用して分離され、ブリバラセタムが得られる（スキーム３）。
【化4】
【0006】
鏡像異性的に純粋なブリバラセタムを得るための上記報告された製造方法は、工業規模では適切ではないキラルクロマトグラフィーの使用を伴う。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0007】
本発明の目的は、キラルクロマトグラフィーを使用せずに鏡像異性的に純粋なブリバラセタムを調製するための製造方法を提供することである。
【0008】
本発明の一態様によれば、（スキーム４）の各工程、
（ｉ）ラセミ体の（２ＲＳ）－２－［（４Ｒ）－２－オキソ－４－プロピル－ピロリジン－１－イル］酪酸メチルエステル（ＩＩ）を、（２Ｓ）－２－［（４Ｒ）－２－オキソ－４－プロピル－ピロリジン－１－イル］酪酸（ＩＩＩ）に、バチルス・リケニフォルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）由来のプロテアーゼを用いて変換する工程と、
（ｉｉ）式（ＩＩＩ）の遊離酸をアミドに変換してブリバラセタム（Ｉ）を得る工程と、
を含む、ブリバラセタムの調製のための製造方法が提供される。
（ｉ）ラセミ体の（２ＲＳ）－２－［（４Ｒ）－２－オキソ－４－プロピル－ピロリジン－１－イル］酪酸メチルエステル（ＩＩ）を、（２Ｓ）－２－［（４Ｒ）－２－オキソ－４－プロピル－ピロリジン－１－イル］酪酸（ＩＩＩ）に、バチルス・リケニフォルミス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｉｃｈｅｎｉｆｏｒｍｉｓ）由来のプロテアーゼを用いて変換する工程と、
（ｉｉ）式（ＩＩＩ）の遊離酸をアミドに変換してブリバラセタム（Ｉ）を得る工程と、
を含む、ブリバラセタムの調製のための製造方法が提供される。
【0009】
本発明の別の態様は、化合物（ＩＩＩ）を塩基の存在下でクロロギ酸エチルおよびアンモニアと反応させることを含む、化合物（ＩＩＩ）をブリバラセタム（Ｉ）に変換するための製造方法を提供することである。
【化5】
【発明を実施するための形態】
【0010】
本発明は、
（ｉ）ラセミ体の（２ＲＳ）－２－［（４Ｒ）－２－オキソ－４－プロピル－ピロリジン－１－イル］酪酸メチルエステル（ＩＩ）をバチルス・リケニフォルミス由来のプロテアーゼと反応させることにより（２Ｓ）－２－［（４Ｒ）－２－オキソ－４－プロピル－ピロリジン－１－イル］酪酸（ＩＩＩ）に変換する工程と、
（ｉｉ）式（ＩＩＩ）の遊離酸をアミドに変換してブリバラセタム（Ｉ）を得る工程と、を含む、ブリバラセタムの調製のための新規の酵素的製造方法を提供する。
（ｉ）ラセミ体の（２ＲＳ）－２－［（４Ｒ）－２－オキソ－４－プロピル－ピロリジン－１－イル］酪酸メチルエステル（ＩＩ）をバチルス・リケニフォルミス由来のプロテアーゼと反応させることにより（２Ｓ）－２－［（４Ｒ）－２－オキソ－４－プロピル－ピロリジン－１－イル］酪酸（ＩＩＩ）に変換する工程と、
（ｉｉ）式（ＩＩＩ）の遊離酸をアミドに変換してブリバラセタム（Ｉ）を得る工程と、を含む、ブリバラセタムの調製のための新規の酵素的製造方法を提供する。
【0011】
必要な出発化合物である（２ＲＳ）－２－［（４Ｒ）－２－オキソ－４－プロピル－ピロリジン－１－イル］酪酸メチルエステル（ＩＩ）は、米国特許第８，３３８，６２１号明細書の実施例５に記載されている方法で調製することができ、実施例５では、（Ｒ）－４－プロピル－ピロリジン－２－オンを、（Ｒ）－２－ブロモ酪酸の代わりの（Ｒ，Ｓ）－２－ブロモ酪酸と縮合し、続いてメタノールおよび硫酸を用いてエステル化することが記載されている。
【0012】
（ＩＩＩ）のキラル純度は（Ｒ）－４－プロピル－ピロリジン－２－オンのキラル純度に従属することに注意することが重要である。したがって、化合物（ＩＩ）中の不要な異性体の（２ＲＳ）－２－［（４Ｓ）－２－オキソ－４－プロピル－ピロリジン－１－イル］酪酸メチルエステルの存在を制限内に保つために、使用される（Ｒ）－４－プロピル－ピロリジン－２－オンは、高い鏡像体純度（＞９８％）を有しなければならない。
【0013】
最初に、シュードモナス・フルオレッセンス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ）（ＥＣ．３．１．１．３４、Ａｍａｎｏ製）のリパーゼやカンジダ・アンタークティカ（Ｃａｎｄｉｄａ ａｎｔａｒｃｔｉｃａ）（Ｌｉｐａｓｅ Ｂ、ＥＣ．３．１．１．３、Ｎｏｖｏｚｙｍｅｓ製）のリパーゼなどのさまざまな市販のエステラーゼ酵素が研究された。しかしながら、それらは両方ともエステル（ＩＩ）を加水分解することができなかった。次に、クラスＥＣ．３．４．２１に属するセリンプロテアーゼは、アミダーゼ活性に加えて、乱交雑エステラーゼ活性を示すため、研究された。バチルス・リケニフォルミス（アルカラーゼ）由来の市販されているプロテアーゼがラセミ体のエステル（ＩＩ）を選択的に加水分解し、高い鏡像体純度で（２Ｓ）－２－［（４Ｒ）－２－オキソ－４－プロピル－ピロリジン－１－イル］酪酸（ＩＩＩ）を生成することができたことは喜ばしいことであった。別のプロテアーゼであるスブチリシンカールスバーグ（ｓｕｂｔｉｌｉｓｉｎ Ｃａｒｌｓｂｅｒｇ）（細菌アルカリプロテアーゼ、ＥＣ．３．４．２１．６２）も選択的に（ＩＩ）を加水分解したが、アルカラーゼと比較して収量は低かった。
【0014】
反応は、リン酸緩衝液（０．２Ｍ、７．２ｐＨ）中、２７（±２）℃で、（２ＲＳ）－２－［（４Ｒ）－４－プロピル－２－オキソピロリジン－１－イル］酪酸メチルエステル（ＩＩ）を撹拌し、アルカラーゼ（バチルス・リケニフォルミス由来のプロテアーゼ、ＥＣ．３．４．２１．６２、Ｓｉｇｍａ製、製品番号：Ｐ４８６０、２．５８Ｕ／ｇ）を添加し、撹拌を約８～１２時間続けることにより行った。反応中、ｐＨ Ｓｔａｔを使用して１０％水酸化アンモニウム溶液を加えることによりｐＨを維持した。水酸化アンモニウムの消費が止まったとき、反応の完了が反映された。反応後、反応混合物を、ｎ－ヘキサン、ｎ－ヘプタン、およびジイソプロピルエーテルからなる群より選択される有機溶媒で抽出して、未反応の化合物（ＩＩ）を除去した。水層を５Ｎ ＨＣｌを使用してｐＨ２．０に酸性化し、ジクロロメタン、酢酸エチル、および酢酸イソプロピルからなる群より選択される有機溶媒で抽出した。有機層を水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。減圧下で有機層を濃縮すると、高い化学的およびキラル純度の（２Ｓ）－２－［（４Ｒ）－２－オキソ－４－プロピルピロリジン－１－イル］ブタン酸（ＩＩＩ）が得られる。
【0015】
反応時間が約１２時間より長いと非酵素的加水分解によりキラル純度が低下する。反応時間が短い（＜８時間）と収率が低下する。ｐＨ７未満では低い収率となり、ｐＨ８超では生成物のキラル純度が低くなることが観察された。最適な反応温度は約２５～３５℃である。４０～４５℃では収率と純度の両方が低下し、１０℃ではより低い収率が得られた。最適な酵素負荷は２０％ｗ／ｗであることがわかった。
化合物（ＩＩＩ）とアンモニアとの反応は、混合無水物の形成を通じてカルボキシ基を活性化するクロロギ酸エチルの存在下で実施することができる。反応は、トリエチルアミンまたはＮ－メチルモルホリンなどの有機塩基の存在下でガス状アンモニアを使用して、－１０～－２０℃の間の温度で、ジクロロメタンなどの適当な溶媒中で実施することができる。反応後、濾過により塩を除去する。有機濾液を炭酸カリウムの溶液で洗浄して、未反応の化合物（ＩＩＩ）を除去した。有機層を濃縮した後、得られた残留物を酢酸イソプロピル中でスラリー化する。固体を濾過すると、キラル純度の高いブリバラセタム（Ｉ）が得られる。
化合物（ＩＩＩ）とアンモニアとの反応は、混合無水物の形成を通じてカルボキシ基を活性化するクロロギ酸エチルの存在下で実施することができる。反応は、トリエチルアミンまたはＮ－メチルモルホリンなどの有機塩基の存在下でガス状アンモニアを使用して、－１０～－２０℃の間の温度で、ジクロロメタンなどの適当な溶媒中で実施することができる。反応後、濾過により塩を除去する。有機濾液を炭酸カリウムの溶液で洗浄して、未反応の化合物（ＩＩＩ）を除去した。有機層を濃縮した後、得られた残留物を酢酸イソプロピル中でスラリー化する。固体を濾過すると、キラル純度の高いブリバラセタム（Ｉ）が得られる。
【0016】
本発明の実施形態は、以下の実施例にさらに記載されており、これらは、本発明の範囲を限定することを決して意図していない。
【実施例】
【0017】
化学的純度は、以下の条件下でＨＰＬＣを使用して決定された。
カラム：Ｉｎｅｒｔｓｉｌ ＯＤＳ ３Ｖ、２５０×４．６ｍｍ、５μｍ
移動相：アセトニトリル：バッファー（０．１％過塩素酸）（９０：１０Ｖ／Ｖ）；流量：１．０ｍＬ／分
カラム温度：３０℃
検出：２１５ｎｍ
エナンチオマー純度は、以下の条件下でＨＰＬＣを使用して決定された。
カラム：ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ－ＡＤＨ ２５０×４．６ｍｍ ５μｍ
移動相ｎ－ヘキサン：イソプロピルアルコール：ジエチルアミン（８５：１５：０．１ｍＬ）、流速：１．０ｍＬ／分
カラム温度：３０℃
検出：２１５ｎｍ
カラム：Ｉｎｅｒｔｓｉｌ ＯＤＳ ３Ｖ、２５０×４．６ｍｍ、５μｍ
移動相：アセトニトリル：バッファー（０．１％過塩素酸）（９０：１０Ｖ／Ｖ）；流量：１．０ｍＬ／分
カラム温度：３０℃
検出：２１５ｎｍ
エナンチオマー純度は、以下の条件下でＨＰＬＣを使用して決定された。
カラム：ＣＨＩＲＡＬＰＡＫ－ＡＤＨ ２５０×４．６ｍｍ ５μｍ
移動相ｎ－ヘキサン：イソプロピルアルコール：ジエチルアミン（８５：１５：０．１ｍＬ）、流速：１．０ｍＬ／分
カラム温度：３０℃
検出：２１５ｎｍ
【0018】
実施例１：（２ＲＳ）－２－［（４Ｒ）－４－プロピル－２－オキソピロリジン－１－イル］酪酸メチルエステル（ＩＩ）の調製：
５０ｍＬのテトラヒドロフラン中の水素化ナトリウム（６０％油性分散液、７．５４ｇ、０．３１４４ｍｏｌ）の混合物に、３０ｍＬのテトラヒドロフラン中の（Ｓ）－４－プロピルピロリジン－２－オン（１０．０ｇ、０．０７８６ｍｏｌ）の溶液を、０～５℃で加えた。混合物に、２０ｍＬのテトラヒドロフラン中の２－ブロモブタン酸（１５．７５ｇ、０．０９４ｍｏｌ）の溶液を加えた。反応混合物を温め、室温で１０～１２時間撹拌した。混合物を砕いた氷に注ぎ、過剰の水素化ナトリウムを分解した。テトラヒドロフランを減圧下で蒸留し、水性残留物を塩酸を使用して０～５℃でｐＨ２．０に調整した。残留物を酢酸イソプロピル（２５ｍＬ×３）で抽出した。有機層を濃縮して、（２ＲＳ）－２－［（４Ｒ）－４－プロピル－２－オキソピロリジン－１－イル］酪酸を無色の固体として得た（１５．８ｇ、９４．２％）。
５０ｍＬのテトラヒドロフラン中の水素化ナトリウム（６０％油性分散液、７．５４ｇ、０．３１４４ｍｏｌ）の混合物に、３０ｍＬのテトラヒドロフラン中の（Ｓ）－４－プロピルピロリジン－２－オン（１０．０ｇ、０．０７８６ｍｏｌ）の溶液を、０～５℃で加えた。混合物に、２０ｍＬのテトラヒドロフラン中の２－ブロモブタン酸（１５．７５ｇ、０．０９４ｍｏｌ）の溶液を加えた。反応混合物を温め、室温で１０～１２時間撹拌した。混合物を砕いた氷に注ぎ、過剰の水素化ナトリウムを分解した。テトラヒドロフランを減圧下で蒸留し、水性残留物を塩酸を使用して０～５℃でｐＨ２．０に調整した。残留物を酢酸イソプロピル（２５ｍＬ×３）で抽出した。有機層を濃縮して、（２ＲＳ）－２－［（４Ｒ）－４－プロピル－２－オキソピロリジン－１－イル］酪酸を無色の固体として得た（１５．８ｇ、９４．２％）。
【0019】
上記の酸（１０ｇ、０．０４６ｍｏｌ）を１００ｍＬのメタノールに溶解した。これに濃硫酸（０．４５ｇ、０．００４５ｍｏｌ）を加え、室温で１２時間維持した。溶液を減圧下で濃縮した。残留物に５０ｍＬの冷水を加え、ジクロロメタン（２５ｍＬ×３）で抽出した。ジクロロメタン溶液を飽和重炭酸ナトリウム溶液、続いて水で洗浄した。無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、溶液を減圧下で濃縮して、９．２ｇの（２ＲＳ）－２－［（４Ｒ）－４－プロピル－２－オキソピロリジン－１－イル］酪酸メチルエステル（ＩＩ）を黄色がかった油として得た（収率＝８６．３８％、Ｇ．Ｃ：９９．４％）。
【0020】
実施例２：（２Ｓ）－２－［（４Ｒ）－２－オキソ－４－プロピルピロリジン－１－イル］ブタン酸（ＩＩＩ）の調製：
リン酸カリウム緩衝液（１２０ｍＬ、０．２Ｍ、ｐＨ７．２）の溶液に、１２．０ｇ（０．０５２８ｍｏｌ）の（２ＲＳ）－２－［（４Ｒ）－４－プロピル－２－オキソピロリジン－１－イル］酪酸メチルエステル（ＩＩ）を添加し、２７（±２）℃で撹拌した。反応混合物に２．４ｇアルカラーゼ（バチルス・リケニフォルミス由来のプロテアーゼ、ＥＣ．３．４．２１．６２、Ｓｉｇｍａ製、製品番号：Ｐ４８６０、２．５８Ｕ／ｇ）を加え、ｐＨ Ｓｔａｔの補助で１０％水酸化アンモニウム溶液を使用してｐＨを７．２に維持しながら約１０時間撹拌した。反応混合物をｎ－ヘキサンで抽出して、未反応の出発物質（不要な異性体）を回収した。水層のｐＨを５Ｎ ＨＣｌを使用して２．０に調整し、酢酸イソプロピルで抽出した。有機層を水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下での有機層の濃縮は、４．８３ｇの（２Ｓ）－２－［（４Ｒ）－２－オキソ－４－プロピルピロリジン－１－イル］ブタン酸を与えた。収率＝８０．５％、純度９９．３％（ＨＰＬＣ）、キラル純度：９９．４％（ＨＰＬＣ）。
リン酸カリウム緩衝液（１２０ｍＬ、０．２Ｍ、ｐＨ７．２）の溶液に、１２．０ｇ（０．０５２８ｍｏｌ）の（２ＲＳ）－２－［（４Ｒ）－４－プロピル－２－オキソピロリジン－１－イル］酪酸メチルエステル（ＩＩ）を添加し、２７（±２）℃で撹拌した。反応混合物に２．４ｇアルカラーゼ（バチルス・リケニフォルミス由来のプロテアーゼ、ＥＣ．３．４．２１．６２、Ｓｉｇｍａ製、製品番号：Ｐ４８６０、２．５８Ｕ／ｇ）を加え、ｐＨ Ｓｔａｔの補助で１０％水酸化アンモニウム溶液を使用してｐＨを７．２に維持しながら約１０時間撹拌した。反応混合物をｎ－ヘキサンで抽出して、未反応の出発物質（不要な異性体）を回収した。水層のｐＨを５Ｎ ＨＣｌを使用して２．０に調整し、酢酸イソプロピルで抽出した。有機層を水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。減圧下での有機層の濃縮は、４．８３ｇの（２Ｓ）－２－［（４Ｒ）－２－オキソ－４－プロピルピロリジン－１－イル］ブタン酸を与えた。収率＝８０．５％、純度９９．３％（ＨＰＬＣ）、キラル純度：９９．４％（ＨＰＬＣ）。
【0021】
実施例３：（２Ｓ）－２－［（４Ｒ）－２－オキソ－４－プロピルピロリジン－１－イル］ブタン酸（ＩＩＩ）の調製：
実験は、ｐＨ７．２の代わりにｐＨ７．８とする以外、実施例２に記載されているように実施した。収率＝７６．３％、純度９９．１％（ＨＰＬＣ）、キラル純度：９８．９％（ＨＰＬＣ）。
実験は、ｐＨ７．２の代わりにｐＨ７．８とする以外、実施例２に記載されているように実施した。収率＝７６．３％、純度９９．１％（ＨＰＬＣ）、キラル純度：９８．９％（ＨＰＬＣ）。
【0022】
実施例４：（２Ｓ）－２－［（４Ｒ）－２－オキソ－４－プロピルピロリジン－１－イル］ブタン酸（ＩＩＩ）の調製：
実験は、温度を２７（±２）℃の代わりに３５（±２）℃とする以外、実施例２に記載されているように実施した。収率＝７８．４％、純度９９．２％（ＨＰＬＣ）、キラル純度：９９．３％（ＨＰＬＣ）
実験は、温度を２７（±２）℃の代わりに３５（±２）℃とする以外、実施例２に記載されているように実施した。収率＝７８．４％、純度９９．２％（ＨＰＬＣ）、キラル純度：９９．３％（ＨＰＬＣ）
【0023】
実施例５：（２Ｓ）－２－［（４Ｒ）－２－オキソ－４－プロピルピロリジン－１－イル］ブタン酸（ＩＩＩ）の調製：
実験は実施例２に記載のように実施し、反応を８時間実施した。収率＝７５％、純度９９．５％（ＨＰＬＣ）、キラル純度：９９．４％（ＨＰＬＣ）
実験は実施例２に記載のように実施し、反応を８時間実施した。収率＝７５％、純度９９．５％（ＨＰＬＣ）、キラル純度：９９．４％（ＨＰＬＣ）
【0024】
実施例６：ブリバラセタム（Ｉ）の調製：
１００ｍＬのジクロロメタン中の１０ｇ（０．０４６ｍｏｌ）の（２Ｓ）－２－（（Ｒ）－２－オキソ－４－プロピルピロリジン－１－イル）ブタン酸（ＩＩＩ）およびトリエチルアミン（７．１ｇ、０．０７ｍｏｌ）の冷却溶液に、クロロギ酸エチル５．５４ｇ（０．０５ｍｏｌ）を－１５℃で滴下して加えた。３０分間撹拌した後、アンモニアガスを通過させ、混合物を－１５℃で２時間撹拌し、２５～３０℃で１時間撹拌した。塩を濾過し、濾液を炭酸カリウムの溶液（１０％溶液、５０ｍＬ×２）で洗浄して、未反応の（ＩＩＩ）を除去した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮して無色の固体を得た。それを酢酸イソプロピル（１５ｍＬ）中で０～５℃で３０分間スラリー化し、濾過して、８．７９ｇの（Ｉ）を無色の固体として得た（収率＝８８％、ＨＰＬＣ：９９．６、キラルＨＰＬＣ：９９．８％）。
１００ｍＬのジクロロメタン中の１０ｇ（０．０４６ｍｏｌ）の（２Ｓ）－２－（（Ｒ）－２－オキソ－４－プロピルピロリジン－１－イル）ブタン酸（ＩＩＩ）およびトリエチルアミン（７．１ｇ、０．０７ｍｏｌ）の冷却溶液に、クロロギ酸エチル５．５４ｇ（０．０５ｍｏｌ）を－１５℃で滴下して加えた。３０分間撹拌した後、アンモニアガスを通過させ、混合物を－１５℃で２時間撹拌し、２５～３０℃で１時間撹拌した。塩を濾過し、濾液を炭酸カリウムの溶液（１０％溶液、５０ｍＬ×２）で洗浄して、未反応の（ＩＩＩ）を除去した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮して無色の固体を得た。それを酢酸イソプロピル（１５ｍＬ）中で０～５℃で３０分間スラリー化し、濾過して、８．７９ｇの（Ｉ）を無色の固体として得た（収率＝８８％、ＨＰＬＣ：９９．６、キラルＨＰＬＣ：９９．８％）。