【図1】 図１は、エンベロープウイルスの界面活性剤破壊の理論的な一般メカニズムを示している。レトロウイルスなどのエンベロープウイルスは、二十面体型のヌクレオカプシドを有し、宿主細胞およびウイルスに由来するウイルスのエンベロープによって保護されている。各界面活性剤分子は親水性の頭と疎水性の尾を持つことにより、両親媒性の構造を有している。この２つの部分によって、各界面活性剤の固有の特性である臨界ミセル濃度（ＣＭＣ）が決定される。界面活性剤モノマーは、特定のＣＭＣ未満でウイルスエンベロープ内に挿入され、宿主へのウイルスの付着を妨害する場合と妨害しない場合がある。一方、ＣＭＣ以上の濃度では、より多くの界面活性剤モノマーがエンベロープに挿入されてエンベロープが破壊され、その結果、ウイルスが宿主細胞表面の受容体に結合できなくなる。

【図2】 図２は、Ｎ－メチルグルカミド界面活性剤の疎水性（非極性）および親水性（極性）領域を示す。

【図3】 図３は、Ｎ－メチルグルカミド界面活性剤ホモログの二次元（２Ｄ）および三次元（３Ｄ）構造を示す。各化合物は、同様に、非環式の親水性グルコース糖部分に結合したアミドによって結合された８～１０個または１２個の炭素からなる疎水性脂肪酸鎖で構成されている。

【図4】 図４は、組換えＦＶＩＩＩ（ｒＦＶＩＩＩ）をＣＭＣ の０．５倍、１倍、２倍のＭｅｇａｘ ８、Ｍｅｇａ ９、Ｍｅｇａ １０およびＭｅｇａ １２と個別にインキュベートした場合、Ｘ－ＭｕＬＶが室温で３０分以内に完全に不活化されることを示している。

【図5】 図５は、組換えＦＶＩＩＩ（ｒＦＶＩＩＩ）がＣＭＣの１倍および２倍の各界面活性剤（Ｍｅｇａ ８、Ｍｅｇａ ９、Ｍｅｇａ １０、およびＭｅｇａ １２）と別々にインキュベートされた場合、Ｘ－ＭｕＬＶが２．０ ℃で３０分以内に完全に不活化されることを示している。

【図6】 図６は、組み換えＦＶＩＩＩ（ｒＦＶＩＩＩ）中２．０℃で３０分間インキュベートすると、０．３％（ｗ／ｖ）Ｍｅｇａ １０および０．３％（ｗ／ｖ）Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００によってＸ－ＭｕＬＶの完全な不活化が達成され、これら２つの界面活性剤が同等の潜在能力を有することを示している。

【図7】 図７は、組換えＦＶＩＩＩ（ｒＦＶＩＩＩ）が、２．０℃で水またはＭｅｇａ １０と２時間インキュベートした後でもその活性を維持することを示している。

【図8】 図８は、Ｘ－ＭｕＬＶおよび漸増濃度のＭｅｇａ １０とともに２．０℃で３０分間インキュベートされた組換えＦＶＩＩＩ（ｒＦＶＩＩＩ）の用量反応を示している。用量反応曲線は、この糖界面活性剤の濃度が増加するにつれて、Ｘ－ＭｕＬＶの力価が逆に、検出限界（ＬＯＤ）にまで減少しウイルスが検出されなかったことを示している。ｒＦＶＩＩＩ対照（Ｃｔｒｌ）の破線は、Ｘ－ＭｕＬＶのみとインキュベートしたｒＦＶＩＩＩの力価に対応している。

【図9】 図９は、Ｘ－ＭｕＬＶおよび０．３％（ｗ／ｖ）Ｍｅｇａ １０と共に２．０℃で０、５、１５、３０、６０、および１２０分間インキュベートした組換えＦＶＩＩＩ（ｒＦＶＩＩＩ）の動力学を示している。Ｍｅｇａ １０処理により、ウイルス力価の即時の低下（完全な不活化）が検出限界（ＬＯＤ）に達し、ウイルスは検出されなかった。これは、ｒＦＶＩＩＩのみおよび培地のみの対照とは対照的である。

【図10】 図１０は、０．０２％、０．１０％または０．２０％（ｗ／ｖ）Ｍｅｇａ １０を含むＸ－ＭｕＬＶの高力価ストックと共に２．０℃で０、５、３０、６０および１２０分間インキュベートした組換えＦＶＩＩＩ（ｒＦＶＩＩＩ）の動力学を示している。ウイルスの不活化が観察されなかった０．０２％（ｗ／ｖ）のＭｅｇａ １０、ｒＦＶＩＩＩおよび培地のみの対照サンプルとは対照的に、０．１０％（ｗ／ｖ）のＭｅｇａ １０はウイルス力価の低下をもたらし、０．２０％（ｗ／ｖ）はウイルス力価の即時の低下（完全な不活化）を引き起こし、５分以内に検出限界（ＬＯＤ）に達した。

【図11】 図１１は、製造が異なるＭｅｇａ１０分子が、類似の再現可能な用量反応結果をもたらすことを示している。

【図12】 図１２は、組換えＦＶＩＩＩ（ｒＦＶＩＩＩ）でインキュベートしたときに、０．２および０．３（ｗ／ｖ）のＭｅｇａ １０で２．０℃、１５分以内にブタ偽狂犬病ウイルス（ＰＲＶ）が検出限界まで不活化されることを示している。

【図13】 図１３は、ウシウイルス性下痢ウイルス（ＢＶＤＶ）が、組換えＦＶＩＩＩ（ｒＦＶＩＩＩ）中で２．０℃で３０分インキュベートした場合、０．２、０．３、および０．４（ｗ／ｖ）のＭｅｇａ １０および１．０％（ｗ／ｖ）のＭｅｇａ ９によって、検出限界まで完全に不活化されることを示している。

【図14】 図１４は、ヒト免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）およびヒト血漿タンパク質溶液中で０．２、０．３、および０．４％（ｗ／ｖ）のＭｅｇａ １０とともに２．０℃で３０分間インキュベートすると、Ｘ－ＭｕＬＶが検出限界まで完全に不活化されることを示している。両方のタンパク質溶液は、それぞれが３０ ｍｇ／ｍＬの最終濃度になるように調製された。

【図15】 図１５は、Ｍｅｇａ １０（Ｍ１０）のみ、Ｔｗｅｅｎ ２０（Ｔｗ２０）のみ、および０．０５％（ｗ／ｖ）、０．１０％（ｗ／ｖ）、または０．３０の濃度のＭｅｇａ １０とＴｗ２０無し、または、０．０１％（ｗ／ｖ）、０．０２％（ｗ／ｖ）もしくは０．０６％（ｗ／ｖ）のＴｗ２０との混合物によるＸ－ＭｕＬＶの不活化を示している。０．３０％（ｗ／ｖ）０．３０％（ｗ／ｖ）Ｍ１０単独または０．３０％（ｗ／ｖ）Ｍ１０＋０．０６％（ｗ／ｖ）Ｔｗ２０混合物の濃度では、Ｘ－ＭｕＬＶは３０分以内に完全に不活化された。

【図16】 図１６は、Ｍｅｇａ １０（Ｍ１０）のみ、リン酸トリ（ｎ－ブチル）（ＴｎＢＰ）のみ、および０．０５％（ｗ／ｖ）または ０．３０％（ｗ／ｖ）の濃度のＭｅｇａ １０とＴｎＢＰ混合物による、Ｘ－ＭｕＬＶの不活化を示す。０．３０％（ｗ／ｖ）Ｍ１０単独または０．３０％（ｗ／ｖ）Ｍ１０＋０．３０％（ｗ／ｖ）ＴｎＢＰ混合物の濃度では、Ｘ－ＭｕＬＶは３０分以内に完全に不活化された。興味深いことに、０．０５％（ｗ／ｖ）Ｍ１０＋０．０５％（ｗ／ｖ）ＴｎＢＰにはウイルス力価の低下があり（完全な不活化ではない）、Ｍｅｇａ １０とＴｎＢＰの間に相乗効果があることを示している。その他の界面活性剤処理では、ウイルス力価はｒＦＶＩＩＩ対照（界面活性剤なし）と同等であり、ウイルスの不活化は生じなかった。

【図17】 図１７は、５５０ ｍＭ ＮａＣｌとの共存または不在における、０．０６％（ｗ／ｖ）、０．１０％（ｗ／ｖ）または０．２０％（ｗ／ｖ）のＭｅｇａ １０あるいは０．３０％（ｗ／ｖ）、０．５１％（ｗ／ｖ）または０．７１％（ｗ／ｖ）のＭｅｇａ ９によるＸ－ＭｕＬＶの不活化を示している。０．２０％（ｗ／ｖ）Ｍｅｇａ １０のみ、０．２０％（ｗ／ｖ）Ｍｅｇａ １０＋ＮａＣｌ、および５００ｍＭのＮａＣｌと共存または不在の０．７１％（ｗ／ｖ）Ｍｅｇａ ９の濃度で、Ｘ－ＭｕＬＶは有意に不活化された。０．１０％（ｗ／ｖ）Ｍｅｇａ １０＋５５０ ｍＭ ＮａＣｌおよび０．５１％（ｗ／ｖ）Ｍｅｇａ ９＋５００ ｍＭ ＮａＣｌにおいてウイルス力価が低下し、このことは、Ｍｅｇａ １０またはＭｅｇａ ９とＮａＣｌの間に相乗効果があることを示している。その他の界面活性剤処理では、ウイルス力価がｒＦＶＩＩＩ対照（界面活性剤なし）とＮａＣｌ対照（界面活性剤なし）と同等であり、ウイルスの不活化は生じなかった。