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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】特許公報(B2)
(11)【特許番号】
(24)【登録日】2023-11-09
(45)【発行日】2023-11-17
(54)【発明の名称】ＴＹＫ２キナーゼ阻害剤
(51)【国際特許分類】
C07D 263/48 20060101AFI20231110BHJP
A61K 31/54 20060101ALI20231110BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20231110BHJP
A61P 29/00 20060101ALI20231110BHJP
A61P 37/06 20060101ALI20231110BHJP
【ＦＩ】
C07D263/48 CSP
A61K31/54
A61P43/00 111
A61P29/00
A61P37/06
【請求項の数】
15
(21)【出願番号】P 2021543577
(86)(22)【出願日】2019-10-07
(65)【公表番号】
(43)【公表日】2022-02-15
(86)【国際出願番号】 EP2019077118
(87)【国際公開番号】W WO2020074461
(87)【国際公開日】2020-04-16
【審査請求日】2022-09-15
(31)【優先権主張番号】1816369.1
(32)【優先日】2018-10-08
(33)【優先権主張国・地域又は機関】GB
(73)【特許権者】
【識別番号】514197980
【氏名又は名称】サリウム リミテッド
(74)【代理人】
【識別番号】110000855
【氏名又は名称】弁理士法人浅村特許事務所
(72)【発明者】
【氏名】リーダー、ジョン チャールズ
【審査官】土橋 敬介
(56)【参考文献】
【文献】特表２０１６－５２９２６４（ＪＰ，Ａ）
【文献】欧州特許出願公開第０２６３４１８５（ＥＰ，Ａ１）
【文献】国際公開第２０１８／０７３４３８（ＷＯ，Ａ１）
(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)
Ｃ０７Ｄ
Ａ６１Ｋ
ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）
(57)【特許請求の範囲】
【請求項1】
式（１）：【化1】
を有するかまたはその塩もしくは互変異性体である化合物であって、Ｒ１が水素またはフッ素である、化合物。
【請求項2】
請求項１に記載の化合物であって、Ｒ１が水素であり、前記化合物が式（２）：【化2】
を有するかまたはその塩もしくは互変異性体である、化合物。
【請求項3】
請求項１に記載の化合物であって、Ｒ１がフッ素であり、前記化合物が式（３）：【化3】
を有するかまたはその塩もしくは互変異性体である、化合物。
【請求項4】
非塩形態である、請求項１～３のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項5】
医薬における使用のための、請求項１～４のいずれか一項に記載の化合物を含む医薬組成物。
【請求項6】
ＴＹＫ２阻害剤としての使用のための、請求項１～４のいずれか一項に記載の化合物を含む医薬組成物。
【請求項7】
炎症性障害または免疫障害の処置のための、請求項１～４のいずれか一項に記載の化合物を含む医薬組成物。
【請求項8】
自己免疫疾患の処置のための、請求項１～４のいずれか一項に記載の化合物を含む医薬組成物。
【請求項9】
ＴＹＫ２キナーゼに対する活性を有する化合物を用いた処置に感受性のあるであろう疾患または容態に罹患しているかまたは罹患している危険にあるものとしてスクリーニンおよび決定された患者における疾患状態または容態の処置または予防のための、請求項１～４のいずれか一項に記載の化合物を含む、医薬組成物。
【請求項10】
前記化合物がさらなる治療薬と組み合わせて使用される、請求項５～９のいずれか一項に記載の医薬組成物。
【請求項11】
請求項１～４のいずれか一項に記載の化合物と医薬として許容され得る賦形剤とを含む、医薬組成物。
【請求項12】
式（１５）：【化4】
の化合物の、酸性条件の下での加水分解を含む、請求項１～４のいずれか一項に記載の化合物の調製のための方法であって、式中、Ｒ１ が水素またはフッ素である、方法。
【請求項13】
Ｒ１が水素である、請求項１２に記載の方法。
【請求項14】
式（１５）：【化5】
の化合物であって、式中、Ｒ１が水素またはフッ素である、化合物。
【請求項15】
Ｒ１が水素である、請求項１４に記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、ヤヌスキナーゼ阻害活性、特にＴＹＫ２キナーゼ阻害活性を有する化合物、該化合物を含有する医薬組成物、および自己免疫疾患などの種々の疾患の処置における該化合物の使用に関する。
【背景技術】
【0002】
プロテインキナーゼは、細胞内での広範な種々のシグナル伝達プロセスの制御の原因となる構造上関連する酵素の大きなファミリーを構成している（Ｈａｒｄｉｅ ａｎｄ Ｈａｎｋｓ（１９９５）Ｔｈｅ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｋｉｎａｓｅ Ｆａｃｔｓ Ｂｏｏｋ．Ｉ ａｎｄ ＩＩ，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）。該キナーゼは、該キナーゼがリン酸化する基質（例えば、タンパク質－チロシン、タンパク質－セリン／トレオニン、脂質など）によってファミリーへと分類することができる。これらのキナーゼファミリーの各々に概して相応する配列モチーフが同定されている（例えば、Ｈａｎｋｓ ａｎｄ Ｈｕｎｔｅｒ，ＦＡＳＥＢ Ｊ．，（１９９５）９．５７６－５９６、Ｋｎｉｇｈｔｏｎ，ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ，（１９９１）２５３，４０７－４１４、Ｈｉｌｅｓ，ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｌｌ，（１９９２）７０，４１９－４２９、Ｋｕｎｚ，ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｌｌ，（１９９３）７３，５８５－５９６、Ｇａｒｃｉａ－Ｂｕｓｔｏｓ，ｅｔ ａｌ．，ＥＭＢＯ Ｊ．，（１９９４）１３，２３５２－２３６１）。
【0003】
プロテインキナーゼは、該プロテインキナーゼの調節機序を特徴とすることができる。これらの機序には、例えば、自己リン酸化、他のキナーゼによるトランスリン酸化、タンパク質－タンパク質間相互作用、タンパク質－脂質間相互作用、およびタンパク質－ポリヌクレオチド間相互作用が含まれる。個々のプロテインキナーゼは、複数の機序によって調節されることができる。
【0004】
キナーゼは、リン酸基を標的タンパク質へ付加することによって、増殖、分化、アポトーシス、運動性、転写、翻訳、およびその他のシグナル伝達プロセスを含むがこれらに限定されない多くの異なる細胞プロセスを調節する。これらのリン酸化事象は、標的タンパク質の生物学的機能を調整または調節することができる分子のオン／オフスイッチとして作用する。標的タンパク質のリン酸化は、さまざまな細胞外シグナル（ホルモン、神経伝達物質、成長因子および分化因子など）、細胞周期事象、環境ストレスまたは栄養ストレスなどに応じて生じる。適切なプロテインキナーゼは、シグナル伝達経路において機能して、例えば、代謝酵素、調節タンパク質、受容体、細胞骨格タンパク質、イオンチャネルもしくはイオンポンプ、または転写因子を（直接的かまたは間接的のいずれかで）活性化または不活性化する。タンパク質リン酸化の制御の欠陥による制御されていないシグナル伝達は、例えば、炎症、癌、アレルギー／喘息、免疫系の疾患および容態、中枢神経系の疾患および容態、ならびに血管新生を含む多くの疾患に関係している。
【0005】
ヤヌスキナーゼ（ＪＡＫ）ファミリーは、細胞内の非受容体型チロシンキナーゼのファミリーであり、大きさは１２０～１４０ｋＤａの範囲であり、ＪＡＫ－ＳＴＡＴ経路を介してサイトカイン介在性シグナルを伝達する。該ＪＡＫファミリーは、免疫応答に関与する細胞の増殖および機能のサイトカイン依存性調節において役割を担っている。現在、４つの公知の哺乳動物ＪＡＫファミリーメンバーＪＡＫ１、ＪＡＫ２、ＪＡＫ３およびＴＹＫ２がある。ＪＡＫ１、ＪＡＫ２、およびＴＹＫ２は、汎存して発現するのに対し、ＪＡＫ３は骨髄系列およびリンパ系列において発現する。該ＪＡＫファミリーのメンバーは、多くのヘマトポエチンサイトカイン、受容体型チロシンキナーゼ、およびＧＰＣＲと関係する非受容体型チロシンキナーゼである。
【0006】
各ＪＡＫキナーゼタンパク質は、キナーゼドメインと触媒として不活性である偽キナーゼドメインとを有する。該ＪＡＫタンパク質は、サイトカイン受容体のアミノ末端のＦＥＲＭ（Ｂａｎｄ－４．１、エズリン、ラジキシン、モエシン）ドメインを経て該サイトカイン受容体へ結合する。サイトカインがサイトカイン受容体に結合した後、ＪＡＫは活性化されて該受容体をリン酸化し、それによってシグナル伝達分子、特にシグナル伝達因子兼転写活性化因子（ＳＴＡＴ）ファミリーのメンバーに対するドッキング部位を生成する（Ｙａｍａｏｋａ ｅｔ ａｌ，２００４．Ｔｈｅ Ｊａｎｕｓ ｋｉｎａｓｅｓ（Ｊａｋｓ）．Ｇｅｎｏｍｅ Ｂｉｏｌｏｇｙ ５（１２）：２５３）。
【0007】
哺乳動物では、ＪＡＫ１、ＪＡＫ２、およびＴＹＫ２が汎存して発現する。ＴＹＫ２は、インターロイキン１２、インターロイキン２３、ならびにＩ型およびＩＩＩ型インターフェロン受容体のシグナル伝達兼転写活性化因子（ＳＴＡＴ）依存性遺伝子発現ならびに機能的応答を活性化する（Ｐａｐｐ ｅｔ ａｌ．，Ｔｈｅ Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，１２ Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ ２０１８，ＤＯＩ：１０．１０５６／ＮＥＪＭｏａ１８０６３８２およびそこに引用される参考文献）これらのサイトカイン経路は、乾癬を含む免疫介在性障害と関係する病理学的プロセスに関与しており、ヤヌスキナーゼ（ＪＡＫ）１（ＪＡＫ１）、ＪＡＫ１およびＪＡＫ３の組み合わせ、ＪＡＫ２、または他のシグナル伝達キナーゼによって駆動される応答とは異なると報告されている（Ｐａｐｐ ｅｔ ａｌ．，同上）。
【0008】
２つのサブユニットｐ１９およびｐ４０から構成されるインターロイキン２３（ＩＬ－２３）は、ＩＬ－１７Ａ、ＩＬ－１７Ｆ、ＩＬ－６、およびＴＮＦαなどの炎症誘発性サイトカインを産生するＴｈ１７細胞の生存および増殖に不可欠であると考えられている（国際公開第２０１４／０７４６６号およびそこに引用されている参考文献を参照されたい）。これらのサイトカインは、関節リウマチ、多発性硬化症、炎症性腸疾患、狼瘡を含む、多くの自己免疫疾患の病理学的状態を介在する上で重要であると報告されている。
【0009】
ＩＬ－２３は、ＩＬ－１２Ｒβ１およびＩＬ－２３Ｒから構成されるヘテロ二量体受容体を経て作用する。
【0010】
ＩＬ－１２は、ＩＬ－２３と共通のｐ４０サブユニットに加えて、ｐ３５サブユニットを含有し、ＩＬ－１２Ｒ１βおよびＩＬ－１２Ｒβ２から構成されるヘテロ二量体受容体を経て作用する。ＩＬ－１２は、Ｔｈ１細胞の発達と、ＭＨＣ発現を刺激すること、ＩｇＧ下位クラスへのＢ細胞のクラスの切り替え、およびマクロファージの活性化によって免疫において重要な役割を担っているサイトカインであるＩＦＮｙの分泌とに不可欠である（Ｇｒａｃｉｅ，Ｊ．Ａ．ｅｔ ａｌ．，’’Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－１２ ｉｎｄｕｃｅｓ ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ－ｇａｍｍａ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｓｗｉｔｃｈｉｎｇ ｏｆ ＩｇＧ ａｌｌｏａｎｔｉｂｏｄｙ ｓｕｂｃｌａｓｓ’’，Ｅｕｒ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ，２６：１２１７－１２２１（１９９６）、Ｓｃｈｒｏｄｅｒ，Ｋ．ｅｔ ａｌ．，’’Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ－ｇａｍｍａ：ａｎ ｏｖｅｒｖｉｅｗ ｏｆ ｓｉｇｎａｌｓ，ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ａｎｄ ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ’’，Ｊ．Ｌｅｕｋｏｃ．Ｂｉｏｌ，７５（２）：１６３－１８９（２００４））。
【0011】
ＴＹＫ２は、ＩＬ－１２受容体およびＩＬ－２３受容体においてＩＬ－１２Ｒβ１サブユニットと会合している。
【0012】
自己免疫におけるｐ４０含有サイトカインの重要性は、ｐ４０、ｐ１９、またはＩＬ－２３Ｒのいずれかが欠損しているマウスがとりわけ、多発性硬化症、関節リウマチ、炎症性腸疾患、狼瘡および乾癬のモデルにおける疾患から保護されるという発見によって実証されている（Ｋｙｔｔａｒｉｓ，Ｖ．Ｃ．ｅｔ ａｌ，’’Ｃｕｔｔｉｎｇ ｅｄｇｅ：ＩＬ－２３ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｐｒｅｖｅｎｔｓ ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｌｕｐｕｓ ｎｅｐｈｒｉｔｉｓ ｉｎ Ｃ５７ＢＬ／６－ｌｐｒ／ｌｐｒ ｍｉｃｅ’’，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ，１８４：４６０５－４６０９（２０１０）、Ｈｏｎｇ，Ｋ．ｅｔ ａｌ，’’ＩＬ－１２，ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔｌｙ ｏｆ ＩＦＮ－ｇａｍｍａ，ｐｌａｙｓ ａ ｃｒｕｃｉａｌ ｒｏｌｅ ｉｎ ｔｈｅ ｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓ ｏｆ ａ ｍｕｒｉｎｅ ｐｓｏｒｉａｓｉｓ ｌｉｋｅ ｓｋｉｎ ｄｉｓｏｒｄｅｒ’’，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ，１６２：７４８０－７４９１（１９９９）、Ｈｕｅ，Ｓ．ｅｔ ａｌ，’’Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－２３ ｄｒｉｖｅｓ ｉｎｎａｔｅ ａｎｄ Ｔ ｃｅｌｌ－ｍｅｄｉａｔｅｄ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ’’，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，２０３：２４７３－２４８３（２００６）、Ｃｕａ，Ｄ．Ｊ．ｅｔ ａｌ．，’’Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－２３ ｒａｔｈｅｒ ｔｈａｎ ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ－１２ ｉｓ ｔｈｅ ｃｒｉｔｉｃａｌ ｃｙｔｏｋｉｎｅ ｆｏｒ ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｂｒａｉｎ’’，Ｎａｔｕｒｅ，４２１：７４４－７４８（２００３）、Ｍｕｒｐｈｙ，Ｃ．Ａ．ｅｔ ａｌ．，’’Ｄｉｖｅｒｇｅｎｔ ｐｒｏ－ａｎｄ ａｎｔｉ－ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｒｏｌｅｓ ｆｏｒ ＩＬ－２３ ａｎｄ ＩＬ－１２ ｉｎ ｊｏｉｎｔ ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ’’，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ，１９８：１９５１－１９５７（２００３））。
【0013】
サイトカインに対する生物学的応答におけるＴＹＫ２の役割は、Ｉ型インターフェロン（ＩＦＮ）の効果に耐性のある変異ヒト細胞株を使用し、ＴＹＫ２の遺伝的相補性によってＩＦＮα応答性が回復する可能性があることを実証することによって特徴付けられている（Ｖｅｌａｚｑｕｅｚ ｅｔ ａｌ，１９９２．Ｃｅｌｌ ７０，３１３－３２２）。さらなるインビトロでの研究は、先天免疫と適応免疫の両方に関与する他の複数のサイトカインのシグナル伝達経路にＴＹＫ２を関与させてきた。しかしながら、ＴＹＫ２－／－マウスの分析では、予想よりも重度ではない免疫学的欠陥が明らかとなった（Ｋａｒａｇｈｉｏｓｏｆｆ ｅｔ ａｌ，２０００．Ｉｍｍｕｎｉｔｙ １３，５４９－５６０、Ｓｈｉｍｏｄａ ｅｔ ａｌ，２０００．Ｉｍｍｕｎｉｔｙ １３，５６１－６７１）。驚いたことに、ＴＹＫ２欠損マウスは、ＩＦＮα／βに対する応答性の単なる低減を示し、いずれもインビトロでＴＹＫ２を活性化するインターロイキン６（ＩＬ－６）およびインターロイキン１０（ＩＬ－１０）に対して正常にシグナル伝達する。対照的に、ＴＹＫ２は、ＩＬ－１２シグナル伝達に不可欠であり、ＴＹＫ２が存在しないと、ＳＴＡＴ４の活性化に欠陥が生じ、これらのマウスのＴ細胞がＩＦＮｙ産生Ｔｈ１細胞へと分化し損ねることが示された。Ｉ型ＩＦＮおよびＩＬ－１２の生物学的効果を介在することにＴＹＫ２が関与することと一致して、ＴＹＫ２－／－マウスはウイルス感染および細菌感染に対してより感受性が高かった。
【0014】
常染色体劣性ＴＹＫ２欠損症の最初の患者は、Ｍｉｎｅｇｉｓｈｉ ｅｔ ａｌ．２００６．Ｉｍｍｕｎｉｔｙ ２５，７４５－７５５によって説明された。患者のコードＤＮＡにおける４つの塩基対のホモ接合性欠失（ＴＹＫ２遺伝子のヌクレオチド５５０のＧＣＴＴ）およびその結果としてのフレームシフト変異により、未成熟の終止コドンが導入され、結果としてアミノ酸９０のＴＹＫ２タンパク質が切り詰められた。ヒト細胞におけるこの零式変異の表現型は、ＴＹＫ２を欠くマウス細胞での研究によって予測されたよりもはるかに重篤であった。該患者は、再発性皮膚膿瘍、アトピー性皮膚炎、非常に高い血清ＩｇＥレベル、多発性日和見感染への感受性を含む、原発性免疫不全高ＩｇＥ症候群（ＨＩＥＳ）を彷彿とさせる臨床的特色を示した。
【0015】
ＴＹＫ２－／－マウスでの報告とは対照的に、広範な種々のサイトカインによるシグナル伝達が損なわれていることが認められたので、Ｉ型ＩＦＮ、ＩＬ－６、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、およびＩＬ－２３の機能におけるヒトＴＹＫ２の非冗長な役割が強調された。Ｔヘルパー細胞の分化の不均衡も観察され、患者のＴ細胞は、ＩＬ－４産生Ｔｈ２細胞の発達およびＴｈ１分化の障害へと極端な偏りを呈した。実際、これらのサイトカインシグナル伝達の欠陥は、説明されている臨床症状の多く、例えば、アトピー性皮膚炎および高ＩｇＥレベル（Ｔｈ２の増強）、ウイルス感染の発生率の上昇（ＩＦＮ欠陥）、細胞内細菌による感染（ＩＬ－１２／Ｔｈ１欠損）ならびに細胞外細菌（ＩＬ－６およびＩＬ－２３／Ｔｈ１７欠損）の原因である可能性がある。
【0016】
２０１５年８月２４日に公表されたＫｒｅｉｎｓ ｅｔ ａｌ．，ｐａｇｅｓ １－２２，Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅは、５つの家族および４つの異なる民族群から７人のさらなるＴＹＫ２欠損患者を特定した。これらの患者は、５つの零式変異のうち１つについてホモ接合性であった。Ｍｉｎｅｇｉｓｈｉらによって得られたデータを、７人のさらなるＴＹＫ２欠損患者について得られたデータと比較することによって、Ｋｒｅｉｎｓらは、ＴＹＫ２欠損症の中心的な臨床表現型は、ＩＬ－１２およびＩＦＮ－α／βに対する応答障害によって引き起こされるマイコバクテリウム感染および／またはウイルス感染であるが、ＩＬ－６応答障害およびＨＩＥＳは、ヒトにおけるＴＹＫ２欠損症の固有の特色であるとは思われないと結論付けた。
【0017】
ゲノムワイド関連解析から得られる証拠は、ＴＹＫ２遺伝子の一塩基多型（ＳＮＰ）が自己免疫疾患の感受性に有意に影響することを示唆している。
【0018】
効率の低いＴＹＫ２変異体は、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）（ＴＹＫ２ ｒｓ２３０４２５６ ａｎｄ ｒｓｌ２７２０２７０，Ｓｉｇｕｒｄｓｓｏｎ ｅｔ ａｌ，２００５．Ａｍ．Ｊ．Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅｔ．７６，５２８－５３７、Ｇｒａｈａｍ ｅｔ ａｌ，２００７．Ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ ４６，９２７－９３０、Ｈｅｌｌｑｕｉｓｔ ｅｔ ａｌ，２００９．Ｊ．Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ．３６，１６３１－１６３８、Ｊａｒｖｉｎｅｎ ｅｔ ａｌ，２０１０．Ｅｘｐ．Ｄｅｒｍａｔｏｌ．１９，１２３－１３１）および多発性硬化症（ＭＳ）（ｒｓ３４５３６４４３，Ｂａｎ ｅｔ ａｌ，２００９．Ｅｕｒ．Ｊ．Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅｔ．１７，１３０９－１３１３、Ｍｅｒｏ ｅｔ ａｌ，２００９．Ｅｕｒ．Ｊ．Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅｔ．１８，５０２－５０４）に対する保護と関係づけられているのに対し、予測される機能獲得型変異は、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）に対する感受性を高める（ｒｓ２８０５１９およびｒｓ２３０４２５６，Ｓａｔｏ ｅｔ ａｌ，２００９．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２９，８１５－８２５）。
【0019】
ヒトでは、ＴＹＫ２の不活性変異体を発現する個体が多発性硬化症およびおそらく他の自己免疫疾患から保護されており、ゲノムワイド関連解析により、ＴＹＫ２の他の変異体がクローン病、乾癬、全身性エリテマトーデス、および関節リウマチなどの自己免疫疾患と関係していることが示されたことが報告されており（国際公開第２０１４０７４６６１号およびそこに引用されている参考文献を参照されたい）、自己免疫におけるＴＹＫ２の重要性がさらに実証された。
【0020】
免疫病理学的疾患プロセスにおけるＴＹＫ２の関与を支持して、コード化されたＴＹＫ２タンパク質の欠如をもたらすＴＹＫ２の偽キナーゼドメインにおいてミスセンス変異を保有するＢ１０．Ｄ１マウスは、自己免疫性関節炎（ＣＩＡ）および実験的自己免疫性脳脊髄炎（ＥＡＥ）の両方に抵抗性があることが示されてきた（Ｓｈａｗ ｅｔ ａｌ，２００３．ＰＮＡＳ １００，１１５９４－１１５９９、Ｓｐａｃｈ ｅｔ ａｌ，２００９．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１８２，７７７６－７７８３）。さらに、最近の研究では、ＴＹＫ２－／－マウスはＭＯＧ誘発性ＥＡＥに対して完全に抵抗性があることが示された（Ｏｙａｍａｄａ ｅｔ ａｌ，２００９．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１８３，７５３９－７５４６）。これらのマウスでは、抵抗性に付随していたのは、脊髄に浸潤するＣＤ４ Ｔ細胞がないこと、ＩＬ－１２ＲおよびＩＬ－２３Ｒを経たシグナル伝達をし損ねたこと、ならびにこのゆえにＩＦＮｙおよびＩＬ－１７の脳炎惹起性レベルを上方調節できないことであった。
【0021】
ＴＹＫ２キナーゼの過剰発現は、いくつかの疾患状態の発症に関与してきた。例えば、進行性肺型サルコイド症に罹患している患者では、高レベルのＴＹＫ２が認められた（Ｓｃｈｉｓｃｈｍａｎｏｆｆ ｅｔ ａｌ．，Ｓａｒｃｏｉｄｏｓｉｓ Ｖａｓｃ．Ｄｉｆｆｕｓｅ．，２００６，２３（２），１０１－７）。
【0022】
したがって、入手可能な証拠によって、ＴＹＫ２が先天免疫および適応免疫の両方において基本的な役割を担っていることが強く示されている。ＴＹＫ２発現がないことは、複数の炎症誘発性サイトカインのシグナル伝達の減弱およびＴヘルパー細胞分化の極度な不均衡に現れる。さらに、遺伝的関連解析からの証拠は、ＴＹＫ２が共有の自己免疫疾患感受性遺伝子であることを支持している。まとめると、これらの理由は、ＴＹＫ２を炎症性疾患および自己免疫疾患の処置についての標的として示唆している。
【0023】
医学分野において有用である可能性があるいくつかのＪＡＫファミリー阻害剤が文献で報告されている（Ｇｈｏｒｅｓｃｈｉ ｅｔ ａｌ，２００９．Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｒｅｖ，２２８：２７３－２８７）。ＪＡＫ２の阻害は貧血を引き起こす可能性があるので、ＪＡＫ２よりも大きな効力でＴＹＫ２を阻害する選択的ＴＹＫ２阻害剤は、有利な治療特性を有する可能性があることが提案されている（Ｇｈｏｒｅｓｃｈｉ ｅｔ ａｌ，２００９．Ｎａｔｕｒｅ Ｉｍｍｕｎｏｌ．４、３５６－３６０）。
【0024】
Ｐａｐｐら（Ｔｈｅ Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，１２ Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ ２０１８，ＤＯＩ：１０．１０５６／ＮＥＪＭｏａ１８０６３８２）は、乾癬を処置する上で経口選択的ＴＹＫ２阻害剤ＢＭＳ－９８６１６５の第ＩＩ相臨床試験において得られた結果を開示し、該結果が治療上の利点を示したと結論付けた。
【0025】
国際公開第２０１４／０７４６６１号（Ｂｒｉｓｔｏｌ－Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ）は、ＩＬ－１２ ＩＬ－２３および／またはＩＦＮαの調節に有用であるＴＹＫ２阻害剤としてのピリダジンおよびトリアジンアミドのクラスを開示している。該化合物は、さまざまな炎症性疾患および自己免疫疾患の処置において有用となることが示唆されている。
【0026】
国際公開第２０１６／０２７１９５号（Ｐｆｉｚｅｒ）は、ＴＹＫ２キナーゼに対する活性を含む、ＪＡＫキナーゼ阻害活性を有する一連のアミノピリミジニル化合物を開示している。
【0027】
国際公開第２０１２／０００９７０号（Ｃｅｌｌｚｏｍｅ）は、ＴＹＫ２キナーゼ阻害剤として一連のトリアゾロピリジンを開示している。国際公開第２０１１／１１３８０２号（Ｒｏｃｈｅ）は、ＴＹＫ２キナーゼ阻害剤として一連のイミダゾピリジンを開示している。ＪＡＫキナーゼの特性および治療標的としてのＪＡＫキナーゼの関連性はまた、すべてＭｅｒｃｋの名称のもと、国際公開第２００８／１５６７２６号、国際公開第２００９／１５５１５６号、国際公開第２０１０／００５８４１号および国際公開第２０１０／０１１３７５号においても開示されている。
【0028】
国際公開第２０１０／０５５３０４号および欧州特許第２６３４１８５号（両方ともＳａｒｅｕｍの名称のもとにある）は、自己免疫疾患、特に多発性硬化症の予防または処置において使用するための置換オキサゾールカルボキサミドのファミリーを開示している。国際公開第２０１０／０５５３０４号において開示されている化合物は、ＦＬＴ３キナーゼ阻害剤であるとして説明されている。オキサゾールカルボキサミドのキナーゼ阻害効果は、国際特許出願２００８／１３９１６１（Ｓａｒｅｕｍ）においても開示されている。
【0029】
国際公開第２０１５／０３２４２３号（Ｓａｒｅｕｍ）は、ＴＹＫ２キナーゼ阻害剤としてのオキサゾールカルボキサミド化合物の部分セットの使用を開示している。該化合物は、自己免疫疾患などの炎症性障害および免疫学的障害の処置において有用であるとして説明されている。
【0030】
国際公開第２０１８／０７３４３８号（Ｓａｒｅｕｍ）は、癌細胞の生存のためにヤヌスキナーゼＴＹＫ２に依存するＴ細胞リンパ芽球性白血病および癌（造血系の癌など）を処置する上での使用のためのＴＹＫ２キナーゼ阻害活性を有するオキサゾールカルボキサミド化合物の部分セットの使用を開示している。
【0031】
国際公開第２０１５／０３２４２３号および国際公開第２０１８／０７３４３８号に開示されている詳細な化合物には、２－（２－クロロ－６－フルオロ－フェニル）－５－［４－（モルホリン－４－カルボニル）－フェニルアミノ］－オキサゾール－４－カルボン酸アミド（化合物Ａ）および２－（２，６－ジクロロ－フェニル）－５－［４－（モルホリン－４－カルボニル）－フェニルアミノ］－オキサゾール－４－カルボン酸アミド（化合物Ｂ）が含まれる。
【発明の概要】
【0032】
本発明は、国際公開第２０１５／０３２４２３号ならびに国際公開第２０１８／０７３４３８号に開示された化合物、特に上述の化合物Ａならびに化合物Ｂと比較して、ＴＹＫ２キナーゼに対する改善された活性および選択性ならびに改善された薬物動態特性を有するオキサゾールカルボキサミドの小群に関する。
【発明を実施するための形態】
【0033】
そのため、第１の実施形態（実施形態１．１）において、本発明は、式（１）
を有する化合物またはその塩もしくは互変異性体であって、式中、Ｒ１が水素またはフッ素である、化合物またはその塩もしくは互変異性体を提供する。
【化1】
を有する化合物またはその塩もしくは互変異性体であって、式中、Ｒ１が水素またはフッ素である、化合物またはその塩もしくは互変異性体を提供する。
【0034】
本発明の詳細な化合物は、以下の実施形態１．２～１．９に提示されている。
【0035】
１．２ Ｒ１が水素である、実施形態１．１による化合物であって、式（２）：
を有するまたはその塩もしくは互変異性体である化合物。
【化2】
を有するまたはその塩もしくは互変異性体である化合物。
【0036】
１．３ Ｒ１がフッ素である、実施形態１．１による化合物であって、式（３）：
を有するまたはその塩もしくは互変異性体である化合物。
【化3】
を有するまたはその塩もしくは互変異性体である化合物。
【0037】
式（１）、（２）および（３）の化合物は、オキサゾールおよびアニリンサブユニットを含有しており、これらのいずれもが弱塩基性のみである。それゆえ、該化合物は通常、塩としてよりもむしろ、非塩の形態で提供される。そのため、さらなる実施形態（実施形態１．４）では、本発明は、化合物が非塩形態である、実施形態１．１～１．３のいずれか１つによる該化合物を提供する。
【0038】
ある特定の状況では、酸性塩は、塩酸、硫酸およびリン酸などの強酸を用いて形成されることがあるが、このような塩は通常不安定であるとみなされる。塩を形成することができる場合、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ，ａｎｄ Ｕｓｅ，Ｐ．Ｈｅｉｎｒｉｃｈ Ｓｔａｈｌ（Ｅｄｉｔｏｒ），Ｃａｍｉｌｌｅ Ｇ．Ｗｅｒｍｕｔｈ（Ｅｄｉｔｏｒ），ＩＳＢＮ：３－９０６３９－０２６－８，Ｈａｒｄｃｏｖｅｒ，３８８ｐａｇｅｓ，Ａｕｇｕｓｔ ２００２において説明されている方法など、従来の化学的方法によって親化合物から合成することができる。概して、このような塩は、化合物の遊離塩基形態を、水中もしくは有機溶媒中、またはこれら２つの混合物中で酸と反応させることによって調製することができ、概して、エーテル、酢酸エチル、エタノール、イソプロパノール、またはアセトニトリルなどの非水性媒体が使用される。
【0039】
塩を形成することができる場合、該塩は、医薬として許容され得る塩であり得、医薬として許容され得る塩の例は、Ｂｅｒｇｅ ｅｔ ａｌ．，１９７７，’’Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｌｙ Ａｃｃｅｐｔａｂｌｅ Ｓａｌｔｓ，’’Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．，Ｖｏｌ．６６，ｐｐ．１－１９において論議されている。しかしながら、医薬として許容され得ない塩はまた、中間形態として調製されることができ、該中間形態は次に、医薬として許容され得る塩に変換することができる。例えば、本発明の化合物の精製または分離において有用である可能性があるこのような医薬として許容され得ない塩形態もまた、本発明の一部を形成する。
【0040】
同位体
実施形態１．１～１．４のいずれか１つにおいて定義される本発明による使用のための化合物は、１つ以上の同位体置換を含有してもよく、特定の元素に対する言及は、該言及の範囲内に該元素のすべての同位体を含む。例えば、水素に対する言及は、該言及の範囲内に１Ｈ、２Ｈ（Ｄ）、および３Ｈ（Ｔ）を含む。同様に、炭素および酸素に対する言及は、該言及の範囲内にそれぞれ１２Ｃ、１３Ｃおよび１４Ｃならびに１６Ｏおよび１８Ｏを含む。
実施形態１．１～１．４のいずれか１つにおいて定義される本発明による使用のための化合物は、１つ以上の同位体置換を含有してもよく、特定の元素に対する言及は、該言及の範囲内に該元素のすべての同位体を含む。例えば、水素に対する言及は、該言及の範囲内に１Ｈ、２Ｈ（Ｄ）、および３Ｈ（Ｔ）を含む。同様に、炭素および酸素に対する言及は、該言及の範囲内にそれぞれ１２Ｃ、１３Ｃおよび１４Ｃならびに１６Ｏおよび１８Ｏを含む。
【0041】
同様の様式で、特定の官能基に対する言及はまた、文脈が特に示さない限り、該言及の範囲内に同位体の変化の程度も含む。
【0042】
同位体は、放射性または非放射性であってよい。本発明の一実施形態（実施形態１．５）では、実施形態１．１～１．４のいずれか１つによる化合物は、放射性同位体を含有していない。このような化合物は、治療用途に好ましい。しかしながら、別の実施形態（実施形態１．６）では、実施形態１．１～１．４のいずれか１つの化合物は、１つ以上の放射性同位体を含有することができる。このような放射性同位体を含有する化合物は、診断の脈絡において有用である可能性がある。
【0043】
溶媒和物
実施形態１．１～１．６のいずれか１つにおいて定義される使用のための化合物は、溶媒和物を形成することがある。
実施形態１．１～１．６のいずれか１つにおいて定義される使用のための化合物は、溶媒和物を形成することがある。
【0044】
好ましい溶媒和物は、非毒性の医薬として許容され得る溶媒（以下、溶媒和溶媒と称する）が分子の本発明の化合物の固相構造（例えば、結晶構造）へと組み込まれることによって形成される溶媒和物である。このような溶媒の例としては、水、アルコール（エタノール、イソプロパノールおよびブタノールなど）、およびジメチルスルホキシドが挙げられる。溶媒和物は、本発明の化合物を溶媒または溶媒和溶媒を含有する溶媒の混合物で再結晶化することによって調製することができる。いずれかの所与の場合において溶媒和物が形成されたかどうかは、化合物の結晶を、熱重量分析（ＴＧＥ）、示差走査熱量測定法（ＤＳＣ）、Ｘ線結晶学的技術などの周知の標準的な技術を使用して分析へ供することによって判断することができる。
【0045】
溶媒和物は、化学量論的または非化学量論的な溶媒和物であってもよい。
【0046】
特に好ましい溶媒和物は水和物であり、水和物の例としては、半水和物、一水和物および二水和物が挙げられる。
【0047】
そのため、さらなる実施形態１．７および１．８では、本発明は、以下を提供する。
１．７ 実施形態１．１～１．６のいずれか１つによる化合物であって、溶媒和物の形態である、化合物。
１．８ 溶媒和物が水和物である、実施形態１．７による化合物。
１．７ 実施形態１．１～１．６のいずれか１つによる化合物であって、溶媒和物の形態である、化合物。
１．８ 溶媒和物が水和物である、実施形態１．７による化合物。
【0048】
溶媒和物および該溶媒和物を調製および特徴付けるために使用される方法のより詳細な論議については、ＳＳＣＩ，Ｉｎｃ ｏｆ Ｗｅｓｔ Ｌａｆａｙｅｔｔｅ，ＩＮ，ＵＳＡにより公表されたＢｒｙｎ ｅｔ ａｌ．，Ｓｏｌｉｄ－Ｓｔａｔｅ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｄｒｕｇｓ，Ｓｅｃｏｎｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，１９９９，ＩＳＢＮ ０－９６７－０６７１０－３を参照されたい。
【0049】
あるいは、水和物として存在するよりもむしろ、本発明の化合物は無水物であってもよい。それゆえ、別の実施形態（実施形態１．９）では、実施形態１．１～１．６のいずれか１つにおいて定義される化合物は、無水形態である。
【0050】
生物活性
実施形態１．１～１．９において定義される式（１）、（２）および（３）の化合物は、ＴＹＫ２キナーゼの強力かつ選択的な阻害剤である。該化合物のＴＹＫ２キナーゼ阻害活性は、後の例において説明されているアッセイを使用して決定することができる。
実施形態１．１～１．９において定義される式（１）、（２）および（３）の化合物は、ＴＹＫ２キナーゼの強力かつ選択的な阻害剤である。該化合物のＴＹＫ２キナーゼ阻害活性は、後の例において説明されているアッセイを使用して決定することができる。
【0051】
化合物（２）および（３）について得られた実験データは、本発明の化合物が、国際公開第２０１５／０３２４２３号において構造的に最も類似した化合物（化合物Ｂ）よりも有意な利点を有することを実証している。したがって、化合物（２）および（３）はいずれも、ＴＹＫ２キナーゼ阻害アッセイにおいて最も近い公知の化合物（化合物Ｂ）よりも活性が高く、いずれも、化合物ＢよりもＪＡＫ１、ＪＡＫ２およびＪＡＫ３キナーゼに対してＴＹＫ２についての高い選択性を有する。その上、化合物（２）および（３）は、先行技術の比較化合物Ｂと比較して、ｈＥＲＧリスクが低減している。さらに、肝細胞安定性アッセイでは、化合物（２）および（３）は、クリアランス速度が低減すること、およびその結果、比較化合物Ｂよりも長い半減期を示した。
【0052】
まとめると、本データは、化合物（２）および（３）が、比較化合物Ｂよりも強力かつ選択的なＴＹＫ２キナーゼ阻害剤であるだけでなく、その上、化合物（２）および（３）が化合物Ｂよりも良好な薬物動態特性を有することを示している。
【0053】
該化合物のＴＹＫ２キナーゼ阻害活性は、疾患を処置する種々の方法で使用することができ、該疾患において、ＴＹＫ２は該疾患の発症または進行において一部担っている。該化合物の種々の使用は通常、該化合物をＴＹＫ２キナーゼと接触させることを包含する。ＴＹＫ２キナーゼの阻害は、インビトロまたはインビボのいずれかで生じることができる。
【0054】
そのため、さらなる実施形態では、本発明は以下を提供する。
２．１ ＴＹＫ２キナーゼを阻害する方法であって、実施形態１．１～１．９のいずれか１つにおいて定義される有効なＴＹＫ２キナーゼ阻害量の化合物をＴＹＫ２キナーゼと接触させることを含む、方法。
２．２ 実施形態２．１による方法であって、該ＴＹＫ２キナーゼの阻害がインビトロで生じる、方法。
２．３ 実施形態２．１による方法であって、該ＴＹＫ２キナーゼの阻害がインビボで生じる、方法。
２．４ ＴＹＫ２キナーゼの阻害剤としての使用のための、実施形態１．１～１．９のいずれか１つにおいて定義される化合物。
２．５ 医学における使用のための、実施形態１．１～１．９のいずれか１つにおいて定義される、化合物。
２．１ ＴＹＫ２キナーゼを阻害する方法であって、実施形態１．１～１．９のいずれか１つにおいて定義される有効なＴＹＫ２キナーゼ阻害量の化合物をＴＹＫ２キナーゼと接触させることを含む、方法。
２．２ 実施形態２．１による方法であって、該ＴＹＫ２キナーゼの阻害がインビトロで生じる、方法。
２．３ 実施形態２．１による方法であって、該ＴＹＫ２キナーゼの阻害がインビボで生じる、方法。
２．４ ＴＹＫ２キナーゼの阻害剤としての使用のための、実施形態１．１～１．９のいずれか１つにおいて定義される化合物。
２．５ 医学における使用のための、実施形態１．１～１．９のいずれか１つにおいて定義される、化合物。
【0055】
ＴＹＫ２キナーゼの阻害は、好ましくは、ＴＹＫ２キナーゼが関与している疾患または容態の治療的処置の一部としてインビボで生じる。
【0056】
本発明の化合物は、選択的ＴＹＫ２阻害剤であり、ＪＡＫ２およびＪＡＫ３キナーゼよりもＴＹＫ２に対してかなり活性が高い。該化合物は、他の広範囲のキナーゼ、特に、抗癌療法のための標的として概して認識されているキナーゼに対して比較的に低い活性を有する。したがって、例えば、該化合物は、細胞周期の進行に関与するＣｈｋ１キナーゼ、オーロラキナーゼ、ＰＫＢ（Ａｋｔ）キナーゼ、およびサイクリン依存性キナーゼ（ＣＤＫキナーゼ）に対して比較的に活性がない。通常、抗癌標的であるとみなされるキナーゼに対する活性の欠如は、例えば、炎症性疾患および自己免疫疾患の長期的な処置において使用することができる化合物において有益である。
【0057】
本発明の化合物のＴＹＫ２阻害活性に基づいて、本発明の化合物は、炎症性疾患または炎症性容態、免疫学的疾患または免疫学的容態、自己免疫疾患、アレルギー性疾患またはアレルギー性障害、移植片拒絶反応（同種移植片移植拒絶反応）、移植片対宿主病を含む、後で論議される疾患および障害の少なくともいくつかを処置する上で、敗血症および敗血症性ショックを処置する上で有用であろうことが想定される。
【0058】
本発明の文脈において、自己免疫疾患は、それ自体の構成要素、例えばタンパク質、脂質またはＤＮＡに対する身体の免疫反応によって少なくとも部分的に引き起こされる疾患である。臓器特異的自己免疫障害の例は、膵臓に影響を与えるインスリン依存性糖尿病（Ｉ型）、甲状腺に影響を与える橋本甲状腺炎およびグレーブス病、胃に影響を与える悪性貧血、副腎に影響を与えるクッシング病およびアジソン病、肝臓に影響を与える慢性活動性肝炎；多嚢胞性卵巣症候群（ＰＣＯＳ）、セリアック病、乾癬、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、ループス腎炎（腎臓の炎症）ならびに強直性脊椎炎である。非臓器特異的自己免疫障害の例は、関節リウマチ、多発性硬化症、全身性エリテマトーデス、および重症筋無力症である。Ｉ型糖尿病は、ランゲルハンス島のインスリン分泌性ベータ細胞に対する自己反応性Ｔ細胞の選択的攻撃の結果として発症する。本発明の化合物を用いた処置から利益を得る可能性のある他の炎症性または免疫性の疾患および障害は、放射線曝露による皮膚の炎症；喘息；アレルギー性炎症；慢性炎症；炎症性眼疾患；眼乾燥症候群（ＤＥＳ、乾性角結膜炎または機能不全性涙症候群としても公知）；ぶどう膜炎（例えば、慢性進行性または再発形態の非感染性ぶどう膜炎）；円形脱毛症；原発性胆汁性肝硬変；および全身性硬化症を含み、関節リウマチ（ＲＡ）は、世界の人口のおおよそ１％に影響を与える慢性進行性の衰弱性炎症性疾患である。ＲＡは、対称性の多関節関節炎であり、主に手および足の小さな関節に影響を及ぼす。滑膜、関節表層における炎症に加えて、パンヌスと呼ばれる組織の攻撃的な最前線が局所的な関節構造に侵入および破壊する（Ｆｉｒｅｓｔｅｉｎ ２００３，Ｎａｔｕｒｅ ４２３：３５６－３６１）。
【0059】
炎症性腸疾患（ＩＢＤ）は、慢性的な再発性腸炎を特徴とする。ＩＢＤは、クローン病および潰瘍性大腸炎の表現型へと細分される。クローン病は、最も頻繁に末端の回腸および結腸を包含し、経壁性かつ不連続である。対照的に、潰瘍性大腸炎では、炎症は継続的であり、直腸および結腸の粘膜層に限定される。直腸および結腸に限局している症例のおおよそ１０％では、クローン病または潰瘍性大腸炎の明確な分類を行うことができず、「不確定性大腸炎」と呼ばれている。いずれの疾患も、皮膚、眼、または関節の腸管外炎症を含む。好中球誘発性損傷は、好中球遊走阻害剤の使用によって予防することができる（Ａｓａｋｕｒａ ｅｔ ａｌ．，２００７，Ｗｏｒｌｄ Ｊ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ．１３（１５）：２１４５－９）。
【0060】
乾癬は、人口のおおよそ２％に影響を与える慢性炎症性皮膚疾患である。乾癬は普通、頭皮、肘、および膝に認められる赤色のうろこ状の皮膚斑を特徴とし、重度の関節炎と関係している可能性がある。この病変は、異常なケラチノサイト増殖および炎症細胞の真皮および表皮への浸潤によって引き起こされる（Ｓｃｈｏｎ ｅｔ ａｌ，２００５，Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３５２：１８９９－１９１２）。
【0061】
全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）は、Ｔ細胞介在性Ｂ細胞活性化によって生じる慢性炎症性疾患であり、結果として糸球体腎炎および腎不全をもたらす。ヒトＳＬＥは、初期段階では、持続性のある自己反応性ＣＤ４＋記憶細胞の増殖を特徴とする（Ｄ’Ｃｒｕｚ ｅｔ ａｌ，２００７，Ｌａｎｃｅｔ ３６９（９５６１）：５８７－５９６）。
【0062】
移植片拒絶反応（同種移植片移植拒絶反応）には、例えば腎臓、心臓、肝臓、肺、骨髄、皮膚および角膜の移植後の急性および慢性の同種移植片拒絶反応が含まれるが、これらに限定されない。Ｔ細胞は、同種移植片拒絶反応の特定の免疫応答において中心的な役割を担っていることが公知である。超急性、急性および慢性の臓器移植拒絶反応を処置することができる。超急性拒絶反応は、移植後数分以内に生じる。急性拒絶反応は概して、移植後６～１２か月以内に生じる。超急性および急性の拒絶反応は通常、免疫抑制剤を用いて処置した場合、可逆的である。臓器機能の段階的な喪失を特徴とする慢性拒絶反応は、移植後いつでも発生する可能性があるので、移植レシピエントにとって継続的な懸念事項である。
【0063】
移植片対宿主病（ＧＶＤＨ）は、同種骨髄移植（ＢＭＴ）における主要な合併症である。ＧＶＤＨは、組織適合性複合体系におけるレシピエントの違いを認識および反応するドナーＴ細胞によって引き起こされ、結果として、かなり大きな罹病率および死亡率をもたらす。
【0064】
肺サルコイドーシスは、原因不明の比較的まれな炎症性障害であるが、ＴＹＫ２のレベルの上昇と関係していることが示されており、通常２０～５０歳の成人において発症する。肺サルコイドーシスは、肺における小さな集塊または肉芽腫を特徴とし、これらは概して自然に治癒および消失する。しかしながら、治癒しない肉芽腫の場合、組織は炎症を生じたままである可能性があり、瘢痕化または線維化する可能性がある。肺サルコイドーシスは肺線維症へと発達する可能性があり、これは肺の構造を歪めるので、呼吸を妨げる可能性がある。
【0065】
そのため、さらなる実施形態では、本発明は以下を提供する。
２．６ 疾患または容態を処置する必要のある対象において該疾患または容態を処置する方法であって、該疾患または容態が、自己免疫疾患、炎症性疾患もしくは炎症性容態、免疫学的疾患もしくは免疫学的容態、アレルギー性疾患もしくはアレルギー性障害、移植片拒絶反応および移植片対宿主病、または敗血症および敗血症性ショックから選択される疾患もしくは容態から選択され、該疾患または容態がＴＹＫ２阻害を受けやすく、該方法が該対象に、実施形態１．１～１．９のいずれか１つにおいて定義される有効なＴＹＫ２阻害量の化合物を投与することを含む、方法。
２．７ 自己免疫疾患、炎症性疾患もしくは炎症性容態、免疫学的疾患もしくは免疫学的容態、アレルギー性疾患もしくはアレルギー性障害、移植片拒絶反応および移植片対宿主病から選択される疾患もしくは容態の処置における使用のための、または敗血症もしくは敗血症性ショックの処置における使用のための、実施形態１．１～１．９のいずれか１つにおいて定義される化合物であって、該疾患または容態がＴＹＫ２阻害を受けやすい、化合物。
２．８ 自己免疫疾患、炎症性疾患もしくは炎症性容態、免疫学的疾患もしくは免疫学的容態、アレルギー性疾患もしくはアレルギー性障害、移植片拒絶反応および移植片対宿主病から選択される疾患もしくは容態の処置のための、または敗血症もしくは敗血症性ショックの処置における使用のための薬剤の製造のための、実施形態１．１～１．９のいずれか１つにおいて定義される化合物の、使用であって、該疾患または容態がＴＹＫ２疎外に感受性がある、使用。
２．９ 自己免疫疾患を処置することを必要とする対象において、自己免疫疾患を処置する方法であって、該対象においてＴＹＫ２キナーゼを阻害し、それにより該自己免疫疾患と関係する炎症プロセスの程度を遮断または低減させるために、該対象に、実施形態１．１～１．９のいずれか１つにおいて定義される有効なＴＹＫ２阻害量の化合物を投与することを含む、方法。
２．１０ 自己免疫疾患を処置することを必要とする対象において自己免疫疾患を処置する方法における使用のための、実施形態１．１～１．９のいずれか１つにおいて定義される化合物であって、該方法が、該対象においてＴＹＫ２キナーゼを阻害し、それにより該自己免疫疾患と関係する炎症プロセスの程度を遮断または低減させるために、該対象に、有効なＴＹＫ２阻害量の該化合物を投与することを含む、化合物。
２．１１ 自己免疫疾患を処置することを必要とする対象において自己免疫疾患を処置するための薬剤の製造のための、実施形態１．１～１．９のいずれか１つにおいて定義される化合物の使用であって、該対象においてＴＹＫ２キナーゼを阻害し、それにより該自己免疫疾患と関係する炎症プロセスの程度を遮断または低減させるために、該対象に有効なＴＹＫ２阻害量の該化合物を投与することによる、使用。
２．１２ 疾患または容態を処置することを必要とする対象において該疾患または容態を処置する方法であって、該疾患または容態が、ＴＹＫ２キナーゼの過剰発現（発現上昇）を特徴とするかまたはＴＹＫ２キナーゼの過剰発現（発現上昇）によって（少なくとも一部）生じるかまたはＴＹＫ２キナーゼの過剰発現（発現上昇）と関係しているものである方法であって、該対象に実施形態１．１から１．９のいずれか１つの有効なＴＹＫ２阻害量の化合物を投与することを含む、方法。
２．１３ 疾患または容態を処置することを必要とする対象における疾患または容態を処置する上での使用のための、実施形態１．１～１．９のいずれか１つにおいて定義される化合物であって、該疾患が、ＴＹＫ２キナーゼの過剰発現（発現上昇）を特徴とするかまたはＴＹＫ２キナーゼの過剰発現（発現上昇）によって（少なくとも一部）生じるかまたはＴＹＫ２キナーゼの過剰発現（発現上昇）と関係しているものである、化合物。
２．１４ 該疾患または容態が自己免疫疾患である、実施形態２．６～２．１３のいずれか１つによる方法、使用のための化合物、または使用。
２．１５ 該疾患または容態が多発性硬化症以外の自己免疫疾患である、実施形態２．６～２．１３のいずれか１つによる方法、使用のための化合物、または使用。
２．１６ 該疾患または容態が乾癬である、実施形態２．６～２．１３のいずれか１つによる方法、使用のための化合物、または使用。
２．１７ 該疾患または容態が乾癬性関節炎である、実施形態２．６～２．１３のいずれか１つによる方法、使用のための化合物、または使用。
２．１８ 該疾患または容態が多発性硬化症である、実施形態２．６による方法。
２．６ 疾患または容態を処置する必要のある対象において該疾患または容態を処置する方法であって、該疾患または容態が、自己免疫疾患、炎症性疾患もしくは炎症性容態、免疫学的疾患もしくは免疫学的容態、アレルギー性疾患もしくはアレルギー性障害、移植片拒絶反応および移植片対宿主病、または敗血症および敗血症性ショックから選択される疾患もしくは容態から選択され、該疾患または容態がＴＹＫ２阻害を受けやすく、該方法が該対象に、実施形態１．１～１．９のいずれか１つにおいて定義される有効なＴＹＫ２阻害量の化合物を投与することを含む、方法。
２．７ 自己免疫疾患、炎症性疾患もしくは炎症性容態、免疫学的疾患もしくは免疫学的容態、アレルギー性疾患もしくはアレルギー性障害、移植片拒絶反応および移植片対宿主病から選択される疾患もしくは容態の処置における使用のための、または敗血症もしくは敗血症性ショックの処置における使用のための、実施形態１．１～１．９のいずれか１つにおいて定義される化合物であって、該疾患または容態がＴＹＫ２阻害を受けやすい、化合物。
２．８ 自己免疫疾患、炎症性疾患もしくは炎症性容態、免疫学的疾患もしくは免疫学的容態、アレルギー性疾患もしくはアレルギー性障害、移植片拒絶反応および移植片対宿主病から選択される疾患もしくは容態の処置のための、または敗血症もしくは敗血症性ショックの処置における使用のための薬剤の製造のための、実施形態１．１～１．９のいずれか１つにおいて定義される化合物の、使用であって、該疾患または容態がＴＹＫ２疎外に感受性がある、使用。
２．９ 自己免疫疾患を処置することを必要とする対象において、自己免疫疾患を処置する方法であって、該対象においてＴＹＫ２キナーゼを阻害し、それにより該自己免疫疾患と関係する炎症プロセスの程度を遮断または低減させるために、該対象に、実施形態１．１～１．９のいずれか１つにおいて定義される有効なＴＹＫ２阻害量の化合物を投与することを含む、方法。
２．１０ 自己免疫疾患を処置することを必要とする対象において自己免疫疾患を処置する方法における使用のための、実施形態１．１～１．９のいずれか１つにおいて定義される化合物であって、該方法が、該対象においてＴＹＫ２キナーゼを阻害し、それにより該自己免疫疾患と関係する炎症プロセスの程度を遮断または低減させるために、該対象に、有効なＴＹＫ２阻害量の該化合物を投与することを含む、化合物。
２．１１ 自己免疫疾患を処置することを必要とする対象において自己免疫疾患を処置するための薬剤の製造のための、実施形態１．１～１．９のいずれか１つにおいて定義される化合物の使用であって、該対象においてＴＹＫ２キナーゼを阻害し、それにより該自己免疫疾患と関係する炎症プロセスの程度を遮断または低減させるために、該対象に有効なＴＹＫ２阻害量の該化合物を投与することによる、使用。
２．１２ 疾患または容態を処置することを必要とする対象において該疾患または容態を処置する方法であって、該疾患または容態が、ＴＹＫ２キナーゼの過剰発現（発現上昇）を特徴とするかまたはＴＹＫ２キナーゼの過剰発現（発現上昇）によって（少なくとも一部）生じるかまたはＴＹＫ２キナーゼの過剰発現（発現上昇）と関係しているものである方法であって、該対象に実施形態１．１から１．９のいずれか１つの有効なＴＹＫ２阻害量の化合物を投与することを含む、方法。
２．１３ 疾患または容態を処置することを必要とする対象における疾患または容態を処置する上での使用のための、実施形態１．１～１．９のいずれか１つにおいて定義される化合物であって、該疾患が、ＴＹＫ２キナーゼの過剰発現（発現上昇）を特徴とするかまたはＴＹＫ２キナーゼの過剰発現（発現上昇）によって（少なくとも一部）生じるかまたはＴＹＫ２キナーゼの過剰発現（発現上昇）と関係しているものである、化合物。
２．１４ 該疾患または容態が自己免疫疾患である、実施形態２．６～２．１３のいずれか１つによる方法、使用のための化合物、または使用。
２．１５ 該疾患または容態が多発性硬化症以外の自己免疫疾患である、実施形態２．６～２．１３のいずれか１つによる方法、使用のための化合物、または使用。
２．１６ 該疾患または容態が乾癬である、実施形態２．６～２．１３のいずれか１つによる方法、使用のための化合物、または使用。
２．１７ 該疾患または容態が乾癬性関節炎である、実施形態２．６～２．１３のいずれか１つによる方法、使用のための化合物、または使用。
２．１８ 該疾患または容態が多発性硬化症である、実施形態２．６による方法。
【0066】
ＴＹＫ２阻害剤としての本発明の化合物の活性は、後の例において明らかにされるアッセイを使用して測定することができ、所与の化合物によって呈される活性のレベルは、ＩＣ５０値に関して定義することができる。本発明の化合物は、ＴＹＫ２キナーゼに対して５ナノモル濃度未満のＩＣ５０値を有する。したがって、Ｒ１が水素である化合物（化合物（２））は、ＴＹＫ２に対して１．９ナノモル濃度のＩＣ５０を有するのに対し、Ｒ１がフッ素である化合物（化合物（３））は、ＴＹＫ２に対して４．７ナノモル濃度のＩＣ５０を有する。
【0067】
本発明の化合物の利点は、該化合物が、ＪＡＫファミリーの他のキナーゼと比較して、ＴＹＫ２キナーゼに対する選択性を呈することである。
【0068】
例えば、生化学的アッセイにおいて、Ｒ１が水素である化合物（化合物（２））は、ＪＡＫ２と比較してＴＹＫ２に対しておおよそ２５倍の選択性、およびＪＡＫ３と比較してＴＹＫ２に対して１１０倍の選択性を有する。
【0069】
Ｒ１がフッ素である化合物（化合物（３））は、ＪＡＫ２と比較してＴＹＫ２に対しておおよそ３２倍の選択性、およびＪＡＫ３と比較してＴＹＫ２に対して１６４倍の選択性を有する。
【0070】
乾癬を処置する上での使用のための化合物の適合性は、マウスにおけるイミキモド誘発性乾癬様皮膚炎症に及ぼす該化合物の効果を検査することによって決定することができる。例えば、Ｍｏｒｉ ｅｔ ａｌ．，Ｋｏｂｅ Ｊ．Ｍｅｄ．Ｓｃｉ．，Ｖｏｌ．６２，Ｎｏ．４，ｐｐ．Ｅ７９－Ｅ８８，２０１６、ｖａｎ ｄｅｒ Ｆｉｔｓ ｅｔ ａｌ．，Ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，２００９；１８２：５８３６－５８４５、およびＬｉｎ ｅｔ ａｌ．，ＰＬＯＳ ＯＮＥ｜ＤＯＩ：１０．１３７１／ｊｏｕｒｎａｌ．ｐｏｎｅ．０１３７８９０ Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ １０，２０１５を参照されたい。したがって、イミキモドをマウスに（例えば、マウスの耳に）局所的に適用して、乾癬様炎症およびスケーリングを誘発させ、本発明の化合物またはイミキモドを含有していない対照を用いても処置したマウス（またはマウスの身体の複数の領域）における炎症およびスケーリングのレベル間で比較することができる。
【0071】
式（１）の化合物の調製のための方法
本発明の化合物は、次の段落および後の例において説明される方法によって調製することができる。
本発明の化合物は、次の段落および後の例において説明される方法によって調製することができる。
【0072】
式（１）の化合物は、スキーム１に示される一連の反応によって調製することができる。
【化4】
【0073】
反応の流れの第１の工程では、２，６－ジクロロベンゾイルクロリド（１０）をＮ－メチルピロリドン（ＮＭＰ）などの極性非プロトン性溶媒中でアミノマロノニトリル（１１）（例えば、そのｐ－トルエンスルホン酸塩）と反応させて、アミノオキサゾールニトリル（１２）を得る。該反応は通常、高温で、例えば、９０℃～１１５℃の範囲で実施される。
【0074】
アミノオキサゾールニトリル（１２）を、ジブロモメタン中のブロモ－（トリメチル）シランなどのハロゲン供与性化合物の存在下でジアゾ化剤として第三級亜硝酸ブチルを使用する金属非含有Ｓａｎｄｍｅｙｅｒ法によって、相応のブロモ化合物（１３）へと変換する。該反応は通常、約０℃の温度で保護（例えば、窒素）雰囲気下で実施される。
【0075】
ブロモ化合物（１３）を、Ｂｕｃｈｗａｌｄ－Ｈａｒｔｗｉｇパラジウム触媒アミノ化法で置換アニリン（１４）と反応させ、シアノ中間体（１５）を得る。該反応によって、１，１’－フェロセンジイル－ビス（ジフェニル－ホスフィン）（ｄｐｐｆ）または（５－ジフェニル－ホスファニル－９，９－ジメチル－キサンテン－４－イル）－ジフェニル－ホスファンなどの適切なホスフィンリガンド、および炭酸カリウムまたは炭酸セシウムなどの塩基の存在下で、ジオキサンなどの極性非プロトン性溶媒中のビス（ジベンジリデンアセトン）－パラジウム（０）（Ｐｄ（ｄｂａ）２）などのパラジウム（０）触媒が使用される。該反応は通常、マイクロ波加熱を使用して、例えば、密閉したチューブ内で、高温（例えば、９５～１２５℃）で実施される。
【0076】
該シアノ中間体（１５）を弱酸性条件（例えば、約０℃の温度で硫酸を使用すること）の下で加水分解して、式（１）の化合物を得る。
【0077】
式（１）の化合物および鍵となる合成中間体、ならびに新規の合成中間体自体を生成するための方法は、本発明の別の態様を形成する。そのため、さらなる実施形態（実施形態３．１～３．５）では、本発明は以下を提供する。
３．１．式（１５）：
の化合物の、酸性条件（例えば、硫酸を使用すること）の下での加水分解を含む本明細書で定義される式（１）の化合物の調製のための方法であって、式中、Ｒ１が、本明細書で定義される通りである、方法。
３．２ パラジウム（０）触媒（Ｐｄ（ｄｂａ）２など、ホスフィンリガンド（ＤＰＰＦなど）、および塩基（炭酸カリウムなどの存在下での、式（１３）の化合物と式（１４）：
の化合物との反応を含む、本明細書で定義される式（１５）の化合物の調製のための方法。
３．３ 本明細書の式（１５）の新規の合成中間体化合物。
３．４ Ｒ１が水素である、実施形態３．３による新規の合成中間体。
３．５ Ｒ１がフッ素である、実施形態３．３による新規の合成中間体。
３．１．式（１５）：
【化5】
の化合物の、酸性条件（例えば、硫酸を使用すること）の下での加水分解を含む本明細書で定義される式（１）の化合物の調製のための方法であって、式中、Ｒ１が、本明細書で定義される通りである、方法。
３．２ パラジウム（０）触媒（Ｐｄ（ｄｂａ）２など、ホスフィンリガンド（ＤＰＰＦなど）、および塩基（炭酸カリウムなどの存在下での、式（１３）の化合物と式（１４）：
【化6】
の化合物との反応を含む、本明細書で定義される式（１５）の化合物の調製のための方法。
３．３ 本明細書の式（１５）の新規の合成中間体化合物。
３．４ Ｒ１が水素である、実施形態３．３による新規の合成中間体。
３．５ Ｒ１がフッ素である、実施形態３．３による新規の合成中間体。
【0078】
医薬製剤
活性化合物を単独で投与することは可能であるが、本発明の少なくとも１つの活性化合物を、担体、アジュバント、希釈剤、充填剤、緩衝剤、安定剤、防腐剤、潤滑剤、または当業者に周知の他の材料などの１つ以上の医薬として許容され得る賦形剤と、および場合により他の治療薬または予防薬と一緒に含む医薬組成物（例えば、製剤）として提示することが好ましい。
活性化合物を単独で投与することは可能であるが、本発明の少なくとも１つの活性化合物を、担体、アジュバント、希釈剤、充填剤、緩衝剤、安定剤、防腐剤、潤滑剤、または当業者に周知の他の材料などの１つ以上の医薬として許容され得る賦形剤と、および場合により他の治療薬または予防薬と一緒に含む医薬組成物（例えば、製剤）として提示することが好ましい。
【0079】
本明細書で使用される「医薬として許容され得る」という用語は、過剰な毒性、刺激、アレルギー応答、またはその他の問題もしくは合併症なく、合理的な利益／リスク比にふさわしい、正常な医学的判断の範囲内である、対象（例えば、ヒト）の組織と接触させて使用するのに適した化合物、材料、組成物、および／または剤形を指す。各賦形剤はまた、該製剤の他の成分とも和合性があるという意味で「許容され得」なければならない。
【0080】
該医薬組成物は、経口、非経口、局所、鼻腔内、眼、耳、直腸、膣内、または経皮投与に適したいずれかの形態であってよい。該組成物が非経口投与が意図される場合、該組成物は、静脈内、筋肉内、腹腔内、皮下投与のために、または注射、注入または他の送達手段による標的器官または組織への直接的な送達のために製剤することができる。
【0081】
経口投与に適した医薬剤形には、錠剤、カプセル剤、カプレット剤、丸剤、ロゼンジ剤、シロップ剤、溶剤、散剤、顆粒剤、エリキシル剤および懸濁剤、舌下錠剤、オブラート剤、またはパッチ剤および頬側パッチ剤が含まれる。
【0082】
式（１）、（２）および（３）の化合物、またはそれらの医薬として許容され得る塩を含有する医薬組成物は、公知の技術に従って製剤することができ、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ，ＵＳＡを参照されたい。
【0083】
したがって、錠剤組成物は、糖または糖アルコールなどの不活性希釈剤または担体、例えば、乳糖、ショ糖、ソルビトールもしくはマンニトール、および／または炭酸ナトリウム、リン酸カルシウム、炭酸カルシウムなどの非糖由来希釈剤、またはセルロースもしくはメチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースなどのその誘導体、およびコーンスターチなどのデンプンと一緒に単位薬用量の活性化合物を含むことができる。錠剤はまた、ポリビニルピロリドンなどの結合剤および造粒剤、崩壊剤（例えば、架橋カルボキシメチルセルロースなどの膨潤性架橋ポリマー）、潤滑剤（例えば、ステアリン酸塩）、防腐剤（例えば、パラベン）、酸化防止剤（例えば、ＢＨＴ）、緩衝剤（例えば、リン酸緩衝剤またはクエン酸緩衝剤）、およびクエン酸塩／重炭酸塩混合物などの発泡剤などの標準的な成分を含有することもできる。このような賦形剤は周知であり、本明細書で詳細に論議する必要はない。
【0084】
カプセル製剤は、硬質ゼラチンまたは軟質ゼラチンの種類であってよく、固体、半固体、または液体の形態で有効構成要素を含有することができる。ゼラチンカプセル剤は、動物性ゼラチンまたはその合成のもしくは植物由来の同等物から形成することができる。
【0085】
固体剤形（例えば、錠剤、カプセル剤など）は、コーティングされていてもコーティングされていなくてもよいが、通常、コーティング、例えば、保護フィルムコーティング（例えば、蝋またはワニス）または放出制御コーティングを有する。該コーティング（例えば、Ｅｕｄｒａｇｉｔ（商標）タイプのポリマー）は、消化管内の所望の位置で有効構成要素を放出するように設計することができる。したがって、該コーティングは、消化管内である特定のｐＨ条件下で分解するように選択することができ、それにより、胃の中でまたは回腸もしくは十二指腸の中で該化合物を選択的に放出することができる。
【0086】
コーティングの代わりに、またはコーティングに加えて、薬物は、消化管内のさまざまな酸性またはアルカリ性の条件下で該化合物を選択的に放出するように適合することができる放出制御剤、例えば、放出遅延剤を含む固体マトリックスにおいて提示することができる。あるいは、該マトリックス材料または放出遅延コーティングは、剤形が消化管を通過するにつれ実質的に継続的に侵食される侵食性ポリマー（例えば、無水マレイン酸ポリマー）の形態をとることができる。さらなる代替として、活性化合物は、該化合物の放出の浸透圧制御を提供する送達システムで製剤することができる。浸透圧放出および他の遅延放出製剤または持続放出製剤は、当業者に周知の方法に従って調製することができる。
【0087】
局所使用のための組成物には、軟膏、クリーム剤、スプレー剤、パッチ剤、ゲル剤、液滴剤および挿入物（例えば、眼内挿入物）が含まれる。このような組成物は、公知の方法に従って製剤することができる。
【0088】
非経口投与用の組成物は通常、無菌の水性もしくは油性の溶液もしくは細かい懸濁液として提示されるか、または注射用の無菌水で即座に調製するために細かく分割された無菌粉末形態で提供することができる。
【0089】
非経口投与用の組成物は、分離した薬用量単位として投与向けに製剤することができるか、または注入による投与向けに製剤することができる。
【0090】
直腸投与または膣内投与向けの製剤の例としては、例えば、該活性化合物を含有する成形された成形可能物または蝋状材料から形成することができるペッサリーおよび坐剤が挙げられる。
【0091】
吸入による投与向けの組成物は、吸入可能な粉末組成物または液体もしく粉末のスプレーの形態をとることができ、粉末吸入器装置またはエアロゾル分配装置を使用して標準的な形態で投与することができる。このような装置は周知である。吸入による投与のために、粉状製剤は通常、ラクトースなどの不活性固体粉状希釈剤と一緒に活性化合物を含む。
【0092】
本発明の化合物は概して、単位剤形で提示され、このようなものとして通常、所望のレベルの生物学的活性を提供するのに十分な化合物を含有するであろう。例えば、経口投与を意図した製剤は、０．１ミリグラム～２グラム、より通常は１０ミリグラム～１グラム、例えば、５０ミリグラム～５００ミリグラムの有効成分を含有することができる。
【0093】
活性化合物は、それを必要とする患者（例えば、ヒトまたは動物の患者）に、所望の治療効果を達成するのに十分な量で投与されるであろう。
【0094】
処置の方法
実施形態１．１～１．９のいずれか１つで定義される式（１）、（２）および（３）の化合物は、炎症性疾患または炎症性容態、免疫学的疾患または免疫学的容態、アレルギー性疾患またはアレルギー性障害、移植片拒絶反応、および移植片対宿主病において有用であろうことが想定される。このような疾患状態および容態の例は、先に述べられている。
実施形態１．１～１．９のいずれか１つで定義される式（１）、（２）および（３）の化合物は、炎症性疾患または炎症性容態、免疫学的疾患または免疫学的容態、アレルギー性疾患またはアレルギー性障害、移植片拒絶反応、および移植片対宿主病において有用であろうことが想定される。このような疾患状態および容態の例は、先に述べられている。
【0095】
該化合物は通常、治療上または予防上有用でありかつ概して無毒である量で投与されるであろう。しかしながら、ある特定の状況（例えば、生命を脅かす疾患の場合）では、式（１）、（２）、または（３）の化合物を投与する利点は、何らかの毒性効果または副作用の欠点を上回ることがあり、この場合、ある程度の毒性と関係する量で化合物を投与することが望ましいとみなされることがある。
【0096】
該化合物は、有益な治療効果を維持するために長期間にわたって投与されることができるか、または短期間でのみ投与されることができる。あるいは、該化合物は、拍動性のまたは持続的な様式で投与することができる。
【0097】
式（１）、（２）または（３）の化合物は概して、このような投与を必要とする対象、例えば、ヒトの患者に投与されるであろう。
【0098】
該化合物の通常の日用量は、１日あたり最大１０００ｍｇであってよく、例えば、体重１キログラムあたり０．０１ミリグラム～１０ミリグラム、より通常は、体重１キログラムあたり０．０２５ミリグラム～５ミリグラム、例えば、体重１キログラムあたり最大３ミリグラム、より通常は体重１キログラムあたり０．１５ミリグラム～５ミリグラムの範囲であってよいが、必要な場合、より高用量またはより低用量を投与することができる。
【0099】
例として、１２．５ｍｇの初回開始用量を１日２～３回投与することができる。薬用量は、医師が決定するように個体にとって最大耐量および有効量に到達するまで、３～５日ごとに１日１２．５ｍｇずつ増加させることができる。最終的に、投与される化合物の量は、処置される疾患または生理学的容態の性質、および治療上の利点、および所与の薬用量投与計画によって生じる副作用の有無にふさわしいだろうし、医師の裁量によるであろう。
【0100】
式（１）、（２）および（３）の化合物は、唯一の治療薬として投与することができるか、または該化合物は、ステロイド、インターフェロン、アプレミラスト（乾癬用）もしくはメトトレキサート（関節リウマチ用）などの１つ以上の他の化合物との併用療法で投与することができる。
【0101】
診断方法
本発明の化合物の投与に先立って、患者をスクリーニングして、患者が罹患しているかまたは罹患している可能性のある疾患または容態が、ＴＹＫ２に対して活性を有する化合物を用いた処置に対して感受性であるであろうものであるかどうかを決定することができる。
本発明の化合物の投与に先立って、患者をスクリーニングして、患者が罹患しているかまたは罹患している可能性のある疾患または容態が、ＴＹＫ２に対して活性を有する化合物を用いた処置に対して感受性であるであろうものであるかどうかを決定することができる。
【0102】
そのため、さらなる実施形態（４．１～４．３）では、本発明は以下を提供する。
４．１ ＴＹＫ２キナーゼに対する活性を有する化合物を用いた処置に感受性のあるであろう疾患または容態に罹患しているかまたは罹患している危険にあるものとしてスクリーニングおよび決定された患者における疾患状態または容態の処置または予防における使用のための、実施形態１．１～１．９のいずれか１つの化合物。
４．２ ＴＹＫ２キナーゼに対する活性を有する化合物を用いた処置に感受性のあるであろう疾患または容態に罹患しているかまたは罹患している危険にあるものとしてスクリーニングおよび決定された患者における疾患状態または容態の処置または予防のための薬剤の製造のための、実施形態１．１～１．９のいずれか１つの化合物の、使用。
４．３ ＴＹＫ２キナーゼによって介在される疾患状態または容態の診断および処置のための方法であって、（ｉ）患者をスクリーニングして、該患者が罹患しているまたは罹患している可能性のある疾患または容態が、該キナーゼに対する活性を有する化合物を用いた処置に感受性があるであろうものかどうかを決定すること、および（ｉｉ）該患者がこのように感受性である疾患または容態が示された場合、その後、該患者に、有効ＴＹＫ２阻害量の実施形態１．１～１．９のいずれか１つの化合物を投与することを含む、方法。
４．１ ＴＹＫ２キナーゼに対する活性を有する化合物を用いた処置に感受性のあるであろう疾患または容態に罹患しているかまたは罹患している危険にあるものとしてスクリーニングおよび決定された患者における疾患状態または容態の処置または予防における使用のための、実施形態１．１～１．９のいずれか１つの化合物。
４．２ ＴＹＫ２キナーゼに対する活性を有する化合物を用いた処置に感受性のあるであろう疾患または容態に罹患しているかまたは罹患している危険にあるものとしてスクリーニングおよび決定された患者における疾患状態または容態の処置または予防のための薬剤の製造のための、実施形態１．１～１．９のいずれか１つの化合物の、使用。
４．３ ＴＹＫ２キナーゼによって介在される疾患状態または容態の診断および処置のための方法であって、（ｉ）患者をスクリーニングして、該患者が罹患しているまたは罹患している可能性のある疾患または容態が、該キナーゼに対する活性を有する化合物を用いた処置に感受性があるであろうものかどうかを決定すること、および（ｉｉ）該患者がこのように感受性である疾患または容態が示された場合、その後、該患者に、有効ＴＹＫ２阻害量の実施形態１．１～１．９のいずれか１つの化合物を投与することを含む、方法。
【0103】
対象（例えば、患者）は、ＴＹＫ２が関係している疾患もしくは容態の存在を示すマーカー、または該疾患もしくは容態に対する感受性を示すマーカーを検出するための診断検査へ供することができる。例えば、対象は、自己免疫疾患または炎症性疾患を発症する感受性を示す遺伝子マーカーについてスクリーニングされることができる。
【0104】
遺伝子マーカーは、多発性硬化症などの自己免疫疾患（例えば、Ｂａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｈｕｍａｎ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ（２００９），１７，１３０９－１３１３を参照されたい）、またはクローン病などの炎症性腸疾患（Ｓａｔｏ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．（２００９），２９：８１５－８２５を参照されたい）に対する感受性を示す、ＴＹＫ２遺伝子の特定の対立遺伝子または一塩基多型を含むことができる。遺伝子マーカーは、例えば、ＴＹＫ２遺伝子における一塩基多型であってよいか、またはＴＹＫ２遺伝子における一塩基多型と別の遺伝子における一塩基多型とを含むハプロタイプであってよい。
【0105】
診断検査は通常、血液試料、生検試料、便生検、痰、染色体分析、胸水、腹水、または尿から選択された生物学的試料に対して実施される。
【0106】
一塩基多型などの遺伝子マーカーを特定する方法は周知である。このようなマーカーを特定するのに適した方法の例は、先のＢａｎ ｅｔ ａｌ，およびＳａｔｏ ｅｔ ａｌ．において説明されている。
【実施例】
【0107】
例
本発明は次に、以下の例において説明される具体的な実施形態に対する参照によって説明されるが、限定されない。
本発明は次に、以下の例において説明される具体的な実施形態に対する参照によって説明されるが、限定されない。
【0108】
略語
以下の例では、次の略語が使用される。
以下の例では、次の略語が使用される。
【表1】
【0109】
分析条件
ＮＭＲスペクトルを、Ｂｒｕｋｅｒ ４００ＭＨｚ機で記録した。
ＮＭＲスペクトルを、Ｂｒｕｋｅｒ ４００ＭＨｚ機で記録した。
【0110】
ＨＰＬＣ分離は、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ ＬＵＮＡ－Ｃ１８（２）５μ粒径，２×５０ｍｍカラムを使用して実施した。
【0111】
例１
２－（２，６－ジクロロフェニル）－５－［４－（１，１－ジオキソ－１，４－チアジナン－４－カルボニル）アニリノ］－オキサゾール－４－カルボキサミド
２－（２，６－ジクロロフェニル）－５－［４－（１，１－ジオキソ－１，４－チアジナン－４－カルボニル）アニリノ］－オキサゾール－４－カルボキサミド
【化7】
【0112】
１Ａ．５－アミノ－２－（２，６－ジクロロフェニル）－オキサゾール－４－カルボニトリルの調製
２，６－ジクロロベンゾイルクロリド（１０ｇ、４７．７４ｍｍｏｌ）を、ＮＭＰ（５０ｍＬ）中のアミノマロノニトリルｐ－トルエンスルホナート（１３．３ｇ、５２．５１ｍｍｏｌ）の溶液に緩徐に添加した。この反応混合物を１１０℃で１４時間加熱した後、水（１００ｍＬ）でクエンチし、得られた固形物を濾過により回収した。この粗生成物を酢酸エチル（１００ｍＬ）中に溶解し、水（４０ｍＬ×２）を用いて洗浄し、有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させた。溶媒を除去して、表題化合物（１９ｇ、粗製）を白色の固形物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ：７．３７－７．３５（ｍ，２Ｈ），７．２９－７．２６（ｍ，１Ｈ），６．１９（ｓ，２Ｈ）．
【化8】
２，６－ジクロロベンゾイルクロリド（１０ｇ、４７．７４ｍｍｏｌ）を、ＮＭＰ（５０ｍＬ）中のアミノマロノニトリルｐ－トルエンスルホナート（１３．３ｇ、５２．５１ｍｍｏｌ）の溶液に緩徐に添加した。この反応混合物を１１０℃で１４時間加熱した後、水（１００ｍＬ）でクエンチし、得られた固形物を濾過により回収した。この粗生成物を酢酸エチル（１００ｍＬ）中に溶解し、水（４０ｍＬ×２）を用いて洗浄し、有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させた。溶媒を除去して、表題化合物（１９ｇ、粗製）を白色の固形物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ：７．３７－７．３５（ｍ，２Ｈ），７．２９－７．２６（ｍ，１Ｈ），６．１９（ｓ，２Ｈ）．
【0113】
１Ｂ．５－ブロモ－２－（２，６－ジクロロフェニル）－オキサゾール－４－カルボニトリルの調製
ＣＨ２Ｂｒ２（５０ｍＬ）中の５－アミノ－４－シアノ－２－（２，６－ジクロロフェニル）－オキサゾール（９．０ｇ、３５．４２ｍｍｏｌ）の溶液に、ブロモ（トリメチル）シラン（１３．５６ｇ、８８．５５ｍｍｏｌ）を添加した。次に、ｔｅｒｔ－ＢｕＯＮＯ（３６．５３ｇ、３５４．２０ｍｍｏｌ）を、保護Ｎ２雰囲気下、０℃で非常に緩徐に添加し、この混合物を０℃で２．５時間撹拌した。次に、この反応混合物を減圧下で濃縮して、ＣＨ２Ｂｒ２、水（Ｈ２Ｏ １００ｍＬ）を添加し、得られた混合物をＤＣＭ（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、残分を得、これをカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、石油エーテル／酢酸エチル＝５０／１～１０：１）によって精製した。表題化合物（８ｇ、７１．０３％収率）を白色の固形物として得た。
【化9】
ＣＨ２Ｂｒ２（５０ｍＬ）中の５－アミノ－４－シアノ－２－（２，６－ジクロロフェニル）－オキサゾール（９．０ｇ、３５．４２ｍｍｏｌ）の溶液に、ブロモ（トリメチル）シラン（１３．５６ｇ、８８．５５ｍｍｏｌ）を添加した。次に、ｔｅｒｔ－ＢｕＯＮＯ（３６．５３ｇ、３５４．２０ｍｍｏｌ）を、保護Ｎ２雰囲気下、０℃で非常に緩徐に添加し、この混合物を０℃で２．５時間撹拌した。次に、この反応混合物を減圧下で濃縮して、ＣＨ２Ｂｒ２、水（Ｈ２Ｏ １００ｍＬ）を添加し、得られた混合物をＤＣＭ（１００ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、残分を得、これをカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、石油エーテル／酢酸エチル＝５０／１～１０：１）によって精製した。表題化合物（８ｇ、７１．０３％収率）を白色の固形物として得た。
【0114】
１Ｃ．４－（４－ニトロベンゾイル）－１，１－ジオキソ－１，４－チアジナンの調製
ＤＭＦ（５０ｍＬ）中の４－ニトロ安息香酸（５ｇ、２９．９２ｍｍｏｌ）および１，４－チアジナン１，１－ジオキシドヒドロクロリド（５．１ｇ、２９．９２ｍｍｏｌ）の混合物に、ＨＯＢｔ（６．１ｇ、４４．８８ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（８．６ｇ、４４．８８ｍｍｏｌ）、Ｅｔ３Ｎ（６．１ｇ、５９．８４ｍｍｏｌ）を１５℃、Ｎ２下で一度に添加した。この混合物を１５℃で１４時間撹拌した。この反応混合物を飽和Ｎａ２ＣＯ３（３００ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、表題化合物（６．５ｇ、粗製）を白色の固形物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ：８．２７（ｄ，Ｊ＝８．８ Ｈｚ，２Ｈ），７．５５（ｄ，Ｊ＝８．８ Ｈｚ，２Ｈ），４．３３－３．７５（ｍ，４Ｈ），３．２２－２．７５（ｍ，４Ｈ）．
【化10】
ＤＭＦ（５０ｍＬ）中の４－ニトロ安息香酸（５ｇ、２９．９２ｍｍｏｌ）および１，４－チアジナン１，１－ジオキシドヒドロクロリド（５．１ｇ、２９．９２ｍｍｏｌ）の混合物に、ＨＯＢｔ（６．１ｇ、４４．８８ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（８．６ｇ、４４．８８ｍｍｏｌ）、Ｅｔ３Ｎ（６．１ｇ、５９．８４ｍｍｏｌ）を１５℃、Ｎ２下で一度に添加した。この混合物を１５℃で１４時間撹拌した。この反応混合物を飽和Ｎａ２ＣＯ３（３００ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、表題化合物（６．５ｇ、粗製）を白色の固形物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ，ＣＤＣｌ３）：δ：８．２７（ｄ，Ｊ＝８．８ Ｈｚ，２Ｈ），７．５５（ｄ，Ｊ＝８．８ Ｈｚ，２Ｈ），４．３３－３．７５（ｍ，４Ｈ），３．２２－２．７５（ｍ，４Ｈ）．
【0115】
１Ｄ．４－（４－アミノベンゾイル）－１，１－ジオキソ－１，４－チアジナンの調製
ＭｅＯＨ（１００ｍＬ）中の４－（４－ニトロベンゾイル）－１，１－ジオキソ－１，４－チアジナン（５．５ｇ、１９．３５ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ２下でＰｄ／Ｃ（１．０ｇ、１９．３５ｍｍｏｌ）を添加した。この懸濁液を真空下で脱気し、Ｈ２で数回パージした後、Ｈ２（１５ｐｓｉ）下、１５℃で１４時間撹拌した。この反応混合物を濾過し、この濾液を濃縮して、表題化合物（４．５ｇ、９１．４５％収率）を白色の固形物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，（ＣＤＣｌ３）：δ：７．３６－７．２６（ｍ，２Ｈ），６．８０－６．６１（ｍ，２Ｈ），４．２６－４．０８（ｍ，４Ｈ），４．０６－３．８８（ｍ，２Ｈ），３．２１－２．９５（ｍ，４Ｈ）
【化11】
ＭｅＯＨ（１００ｍＬ）中の４－（４－ニトロベンゾイル）－１，１－ジオキソ－１，４－チアジナン（５．５ｇ、１９．３５ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｎ２下でＰｄ／Ｃ（１．０ｇ、１９．３５ｍｍｏｌ）を添加した。この懸濁液を真空下で脱気し、Ｈ２で数回パージした後、Ｈ２（１５ｐｓｉ）下、１５℃で１４時間撹拌した。この反応混合物を濾過し、この濾液を濃縮して、表題化合物（４．５ｇ、９１．４５％収率）を白色の固形物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，（ＣＤＣｌ３）：δ：７．３６－７．２６（ｍ，２Ｈ），６．８０－６．６１（ｍ，２Ｈ），４．２６－４．０８（ｍ，４Ｈ），４．０６－３．８８（ｍ，２Ｈ），３．２１－２．９５（ｍ，４Ｈ）
【0116】
１Ｅ．２－（２，６－ジクロロフェニル）－５－［４－（１，１－ジオキソ－１，４－チアジナン－４－カルボニル）アニリノ］オキサゾール－４－カルボニトリルの調製
１，４－ジオキサン（１３ｍＬ）を、反応チューブ内の５－ブロモ－４－シアノ－２－（２，６－ジクロロフェニル）－オキサゾール（５００ｍｇ、１．５７ｍｍｏｌ）、４－（４－アミノベンゾイル）－１，１－ジオキソ－１，４－チアジナン（３９９．２５ｍｇ、１．５７ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ｄｂａ）２（９０．２８ｍｇ、１５７μｍｏｌ）、ＤＰＰＦ（１３０．５６ｍｇ、２３５．５μｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（９７６．４５ｍｇ、７．０７ｍｍｏｌ）の混合物に添加し、この反応チューブを密封し、マイクロ波加熱に１２０℃で４時間供した。得られた反応混合物を濾過し、真空下で濃縮し、水（３０ｍＬ）を添加した後、ＤＣＭ（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、残分を得、これをカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１～２／３）によって精製した。表題化合物（１１０ｍｇ、１４．２６％収率）を褐色の固形物として得た。
【化12】
１，４－ジオキサン（１３ｍＬ）を、反応チューブ内の５－ブロモ－４－シアノ－２－（２，６－ジクロロフェニル）－オキサゾール（５００ｍｇ、１．５７ｍｍｏｌ）、４－（４－アミノベンゾイル）－１，１－ジオキソ－１，４－チアジナン（３９９．２５ｍｇ、１．５７ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ｄｂａ）２（９０．２８ｍｇ、１５７μｍｏｌ）、ＤＰＰＦ（１３０．５６ｍｇ、２３５．５μｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（９７６．４５ｍｇ、７．０７ｍｍｏｌ）の混合物に添加し、この反応チューブを密封し、マイクロ波加熱に１２０℃で４時間供した。得られた反応混合物を濾過し、真空下で濃縮し、水（３０ｍＬ）を添加した後、ＤＣＭ（５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機相をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、残分を得、これをカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、石油エーテル／酢酸エチル＝１０／１～２／３）によって精製した。表題化合物（１１０ｍｇ、１４．２６％収率）を褐色の固形物として得た。
【0117】
１Ｆ．（２，６－ジクロロフェニル）－５－［４－（１，１－ジオキソ－１，４－チアジナン－４－カルボニル）アニリノ］オキサゾール－４－カルボキサミドの調製
０℃のＨ２ＳＯ４（１ｍＬ）中の２－（２，６－ジクロロフェニル）－５－［４－（１，１－ジオキソ－１，４－チアジナン－４－カルボニル）アニリノ］オキサゾール－４－カルボニトリル（１００ｍｇ、２０３．５２ｕｍｏｌ）の混合物を、Ｎ２雰囲気下で１５℃で２時間撹拌した。この後のＬＣＭＳ分析は、反応が完了したことを示したので、この反応混合物を０℃の氷でクエンチした後、濾過した。この濾液をＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ：１０ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して残分を得、これを分取ＨＰＬＣ（ＴＦＡ条件）によって精製した。表題化合物、すなわち（２，６－ジクロロフェニル）－５－［４－（１，１－ジオキソ－１，４－チアジナン－４－カルボニル）－アニリノ］オキサゾール－４－カルボキサミド（２５ｍｇ、２４％収率、９９．６１％純度）を黄色の固形物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，（ＣＤＣｌ３）：δ：９．０５（ｓ，１Ｈ），７．５０－７．４８（ｍ，２Ｈ），７．４６－７．４４（ｍ，３Ｈ），７．４１－７．３８（ｍ，２Ｈ），６．５０（ｓ，１Ｈ），５．３８（ｓ，１Ｈ），４．１２（ｓ，４Ｈ），３．０７（ｓ，４Ｈ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）：Ｃ２１ Ｈ１８ Ｃｌ ２Ｎ４Ｏ５Ｓについて計算された質量５０８．０４０８．０４、ｍ／ｚ実測値，５０９．０［Ｍ＋Ｈ］＋。
【化13】
０℃のＨ２ＳＯ４（１ｍＬ）中の２－（２，６－ジクロロフェニル）－５－［４－（１，１－ジオキソ－１，４－チアジナン－４－カルボニル）アニリノ］オキサゾール－４－カルボニトリル（１００ｍｇ、２０３．５２ｕｍｏｌ）の混合物を、Ｎ２雰囲気下で１５℃で２時間撹拌した。この後のＬＣＭＳ分析は、反応が完了したことを示したので、この反応混合物を０℃の氷でクエンチした後、濾過した。この濾液をＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ：１０ｍＬ×３）で抽出し、合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して残分を得、これを分取ＨＰＬＣ（ＴＦＡ条件）によって精製した。表題化合物、すなわち（２，６－ジクロロフェニル）－５－［４－（１，１－ジオキソ－１，４－チアジナン－４－カルボニル）－アニリノ］オキサゾール－４－カルボキサミド（２５ｍｇ、２４％収率、９９．６１％純度）を黄色の固形物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，（ＣＤＣｌ３）：δ：９．０５（ｓ，１Ｈ），７．５０－７．４８（ｍ，２Ｈ），７．４６－７．４４（ｍ，３Ｈ），７．４１－７．３８（ｍ，２Ｈ），６．５０（ｓ，１Ｈ），５．３８（ｓ，１Ｈ），４．１２（ｓ，４Ｈ），３．０７（ｓ，４Ｈ）．
ＭＳ（ＥＳＩ）：Ｃ２１ Ｈ１８ Ｃｌ ２Ｎ４Ｏ５Ｓについて計算された質量５０８．０４０８．０４、ｍ／ｚ実測値，５０９．０［Ｍ＋Ｈ］＋。
【0118】
例２
２－（２，６－ジクロロフェニル）－５－［２－フルオロ－４－（１，１－ジオキソ－１，４－チアジナン－４－カルボニル）アニリノ］－オキサゾール－４－カルボキサミド
２－（２，６－ジクロロフェニル）－５－［２－フルオロ－４－（１，１－ジオキソ－１，４－チアジナン－４－カルボニル）アニリノ］－オキサゾール－４－カルボキサミド
【化14】
【0119】
２Ａ．４－（２－フルオロ－４－ニトロベンゾイル）－１，１－ジオキソ－１，４－チアジナンの調製
ＤＭＦ（５０ｍＬ）中の２－フルオロ－４－ニトロ安息香酸（５ｇ、２７ｍｍｏｌ）および１，４－チアジナン１，１－ジオキシド（５．１ｇ、２９．７ｍｍｏｌ、ＨＣｌ）の混合物に、ＨＯＢｔ（５．４７ｇ、４０．５ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（７．７７ｇ、４０．５ｍｍｏｌ）、およびＥｔ３Ｎ（５．４７ｇ、５４ｍｍｏｌ）を１５℃、Ｎ２下で一度に添加した。得られた混合物を１５℃で１４時間撹拌した後、ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝１：１、Ｒｆ＝０．１）は、カルボン酸出発材料が完全に消費され、１つの新たなスポットが形成されたことを示し、これにより所望の生成物への完全な変換が生じたことを示した。次に、反応混合物を飽和Ｎａ２ＣＯ３（３００ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、表題化合物（７ｇ、粗製）を黄色の固形物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ：４００ ＭＨｚ ＣＤＣｌ３：δ ８．１７（ｄ，Ｊ＝８．０ Ｈｚ，１Ｈ），８．０６（ｄ，Ｊ＝８．４ Ｈｚ，１Ｈ），７．６７－７．６３（ｍ，１Ｈ），４．３２（ｓ，２Ｈ），３．８２（ｓ，２Ｈ），３．２１（ｓ，２Ｈ），３．１１（ｓ，２Ｈ）．
【化15】
ＤＭＦ（５０ｍＬ）中の２－フルオロ－４－ニトロ安息香酸（５ｇ、２７ｍｍｏｌ）および１，４－チアジナン１，１－ジオキシド（５．１ｇ、２９．７ｍｍｏｌ、ＨＣｌ）の混合物に、ＨＯＢｔ（５．４７ｇ、４０．５ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（７．７７ｇ、４０．５ｍｍｏｌ）、およびＥｔ３Ｎ（５．４７ｇ、５４ｍｍｏｌ）を１５℃、Ｎ２下で一度に添加した。得られた混合物を１５℃で１４時間撹拌した後、ＴＬＣ（石油エーテル：酢酸エチル＝１：１、Ｒｆ＝０．１）は、カルボン酸出発材料が完全に消費され、１つの新たなスポットが形成されたことを示し、これにより所望の生成物への完全な変換が生じたことを示した。次に、反応混合物を飽和Ｎａ２ＣＯ３（３００ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して、表題化合物（７ｇ、粗製）を黄色の固形物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ：４００ ＭＨｚ ＣＤＣｌ３：δ ８．１７（ｄ，Ｊ＝８．０ Ｈｚ，１Ｈ），８．０６（ｄ，Ｊ＝８．４ Ｈｚ，１Ｈ），７．６７－７．６３（ｍ，１Ｈ），４．３２（ｓ，２Ｈ），３．８２（ｓ，２Ｈ），３．２１（ｓ，２Ｈ），３．１１（ｓ，２Ｈ）．
【0120】
２Ｂ．４－（２－フルオロ－４－アミノベンゾイル）－１，１－ジオキソ－１，４－チアジナンの調製
ＭｅＯＨ（１００ｍＬ）中の４－（２－フルオロ－４－ニトロベンゾイル）－１，１－ジオキソ－１，４－チアジナン（７ｇ、２３．２ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｐｄ／Ｃ（３ｇ、１０％純度）を添加した。この懸濁液を真空下で脱気し、Ｈ２で数回パージした。次に、この混合物をＨ２（１５ｐｓｉ）下、１５℃で１２時間撹拌し、その後、ＴＬＣ（石油エーテル／酢酸エチル＝１／１、Ｒｆ＝０．３）は、ニトロフェニル出発化合物が完全に消費され、１つの新たな生成物スポットが形成されたことを示した。この反応混合物を濾過し、減圧下で濃縮して、表題化合物（５ｇ、粗製）を黄色の固形物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ：４００ ＭＨｚ ＣＤＣｌ３：δ ７．１６－７．１２（ｍ，１Ｈ），６．４３－６．４１（ｍ，１Ｈ），６．３１－６．２７（ｍ，１Ｈ），４．３５（ｓ，２Ｈ），４．１１－３．８６（ｍ，４Ｈ），３．１０（ｓ，４Ｈ）
【化16】
ＭｅＯＨ（１００ｍＬ）中の４－（２－フルオロ－４－ニトロベンゾイル）－１，１－ジオキソ－１，４－チアジナン（７ｇ、２３．２ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｐｄ／Ｃ（３ｇ、１０％純度）を添加した。この懸濁液を真空下で脱気し、Ｈ２で数回パージした。次に、この混合物をＨ２（１５ｐｓｉ）下、１５℃で１２時間撹拌し、その後、ＴＬＣ（石油エーテル／酢酸エチル＝１／１、Ｒｆ＝０．３）は、ニトロフェニル出発化合物が完全に消費され、１つの新たな生成物スポットが形成されたことを示した。この反応混合物を濾過し、減圧下で濃縮して、表題化合物（５ｇ、粗製）を黄色の固形物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ：４００ ＭＨｚ ＣＤＣｌ３：δ ７．１６－７．１２（ｍ，１Ｈ），６．４３－６．４１（ｍ，１Ｈ），６．３１－６．２７（ｍ，１Ｈ），４．３５（ｓ，２Ｈ），４．１１－３．８６（ｍ，４Ｈ），３．１０（ｓ，４Ｈ）
【0121】
２Ｃ．２－（２，６－ジクロロフェニル）－５－［２－フルオロ－４－（１，１－ジオキソ－１，４－チアジナン－４－カルボニル）アニリノ］オキサゾール－４－カルボニトリルの調製
１，４－ジオキサン（４０ｍＬ）中の５－ブロモ－２－（２，６－ジクロロフェニル）－オキサゾール－４－カルボニトリル（２ｇ、６．２９ｍｍｏｌ）（例１Ａ）の溶液に、４－（２－フルオロ－４－アミノベンゾイル）－１，１－ジオキソ－１，４－チアジナン（１．８８ｇ、６．９２ｍｍｏｌ）、Ｃｓ２ＣＯ３（４．１０ｇ、１２．６ｍｍｏｌ）、および（５－ジフェニル－ホスファニル－９，９－ジメチル－キサンテン－４－イル）－ジフェニル－ホスファン（３６４ｍｇ、６２９μｍｏｌ）を添加した。この懸濁液を真空下で脱気し、Ｎ２で数回パージした。次に、（１Ｅ，４Ｅ）－１，５－ジフェニルペンタ－１，４－ジエン－３－オン：パラジウム（２８８ｍｇ、３１５μｍｏｌ）を添加し、Ｎ２で数回パージした。この反応混合物を１００℃まで加熱し、１２時間撹拌した後、ＴＬＣ（石油エーテル／酢酸エチル＝１／１、Ｒｆ＝０．９）は、ブロモ－シアノ－オキサゾールが完全に消費され、１つの新たな生成物が形成されたことを示し、それにより、該反応が所望の生成物への完全な変換をもたらしたことを示した。この反応混合物を濾過し、過ケークをＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）で洗浄した。次に、この濾液を濃縮して粗生成物を得、これをカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、石油エーテル／酢酸エチル＝２０／１～０：１）によって精製して、表題化合物（１．１ｇ、２．１６ｍｍｏｌ、３４．３％収率）を黄色の固形物として得た。
【化17】
１，４－ジオキサン（４０ｍＬ）中の５－ブロモ－２－（２，６－ジクロロフェニル）－オキサゾール－４－カルボニトリル（２ｇ、６．２９ｍｍｏｌ）（例１Ａ）の溶液に、４－（２－フルオロ－４－アミノベンゾイル）－１，１－ジオキソ－１，４－チアジナン（１．８８ｇ、６．９２ｍｍｏｌ）、Ｃｓ２ＣＯ３（４．１０ｇ、１２．６ｍｍｏｌ）、および（５－ジフェニル－ホスファニル－９，９－ジメチル－キサンテン－４－イル）－ジフェニル－ホスファン（３６４ｍｇ、６２９μｍｏｌ）を添加した。この懸濁液を真空下で脱気し、Ｎ２で数回パージした。次に、（１Ｅ，４Ｅ）－１，５－ジフェニルペンタ－１，４－ジエン－３－オン：パラジウム（２８８ｍｇ、３１５μｍｏｌ）を添加し、Ｎ２で数回パージした。この反応混合物を１００℃まで加熱し、１２時間撹拌した後、ＴＬＣ（石油エーテル／酢酸エチル＝１／１、Ｒｆ＝０．９）は、ブロモ－シアノ－オキサゾールが完全に消費され、１つの新たな生成物が形成されたことを示し、それにより、該反応が所望の生成物への完全な変換をもたらしたことを示した。この反応混合物を濾過し、過ケークをＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）で洗浄した。次に、この濾液を濃縮して粗生成物を得、これをカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ２、石油エーテル／酢酸エチル＝２０／１～０：１）によって精製して、表題化合物（１．１ｇ、２．１６ｍｍｏｌ、３４．３％収率）を黄色の固形物として得た。
【0122】
２Ｄ．（２，６－ジクロロフェニル）－５－［２－フルオロ－４－（１，１－ジオキソ－１，４－チアジナン－４－カルボニル）アニリノ］オキサゾール－４－カルボキサミドの調製
Ｈ２ＳＯ４（２ｍＬ）中の２－（２，６－ジクロロフェニル）－５－［２－フルオロ－４－（１，１－ジオキソ－１，４－チアジナン－４－カルボニル）アニリノ］オキサゾール－４－カルボニトリルの混合物（０．２ｇ、３９３μｍｏｌ）を脱気し、Ｎ２で３回パージし、次いで、この混合物をＮ２雰囲気下で２０℃で１時間撹拌した後、ＨＰＬＣおよびＬＣＭＳ分析は出発材料が完全に消費されたことを示した。この残分を氷Ｈ２Ｏ ５０ｍＬへと注ぎ、ＥｔＯＡｃ ６０ｍＬ（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して残分を得、これを分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ ｌｕｎａ Ｃ１８ ２５０×５０ｍｍ １０μｍ：移動相：［水（０．１％ＴＦＡ－ＡＣＮ］、Ｂ％：２０％～５０％、２０分）によって精製して、粗生成物を得た。この粗生成物をＮａＨＣＯ３（水溶液）で処理し、ＤＣＭ（２０ｍＬ）で抽出し、乾燥させおよび濃縮し、次いでＭｅＣＮ／水中に溶解して凍結乾燥させて、表題化合物（６０．３ｍｇ、１１３ｕｍｏｌ、２８．８％収率、９８．９％純度）を黄色の固形物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ：４００ ＭＨｚ ＣＤＣｌ３：δ ９．１１（ｓ，１Ｈ），７．５１－７．４２（ｍ，４Ｈ），７．１８－７．１４（ｍ，１Ｈ），７．１４－７．１２（ｍ，１Ｈ），６．５４（ｓ，１Ｈ），５．４５（ｓ，１Ｈ），４．２７（ｓ，２Ｈ），３．８７（ｓ，２Ｈ），３．１７－３．０６（ｍ，４Ｈ）．
【化18】
Ｈ２ＳＯ４（２ｍＬ）中の２－（２，６－ジクロロフェニル）－５－［２－フルオロ－４－（１，１－ジオキソ－１，４－チアジナン－４－カルボニル）アニリノ］オキサゾール－４－カルボニトリルの混合物（０．２ｇ、３９３μｍｏｌ）を脱気し、Ｎ２で３回パージし、次いで、この混合物をＮ２雰囲気下で２０℃で１時間撹拌した後、ＨＰＬＣおよびＬＣＭＳ分析は出発材料が完全に消費されたことを示した。この残分を氷Ｈ２Ｏ ５０ｍＬへと注ぎ、ＥｔＯＡｃ ６０ｍＬ（２０ｍＬ×３）で抽出した。合わせた有機層をＮａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、減圧下で濃縮して残分を得、これを分取ＨＰＬＣ（カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ ｌｕｎａ Ｃ１８ ２５０×５０ｍｍ １０μｍ：移動相：［水（０．１％ＴＦＡ－ＡＣＮ］、Ｂ％：２０％～５０％、２０分）によって精製して、粗生成物を得た。この粗生成物をＮａＨＣＯ３（水溶液）で処理し、ＤＣＭ（２０ｍＬ）で抽出し、乾燥させおよび濃縮し、次いでＭｅＣＮ／水中に溶解して凍結乾燥させて、表題化合物（６０．３ｍｇ、１１３ｕｍｏｌ、２８．８％収率、９８．９％純度）を黄色の固形物として得た。
１Ｈ ＮＭＲ：４００ ＭＨｚ ＣＤＣｌ３：δ ９．１１（ｓ，１Ｈ），７．５１－７．４２（ｍ，４Ｈ），７．１８－７．１４（ｍ，１Ｈ），７．１４－７．１２（ｍ，１Ｈ），６．５４（ｓ，１Ｈ），５．４５（ｓ，１Ｈ），４．２７（ｓ，２Ｈ），３．８７（ｓ，２Ｈ），３．１７－３．０６（ｍ，４Ｈ）．
【0123】
例３
生物活性
（ｉ）ＴＹＫ２およびＪＡＫキナーゼ阻害アッセイ
本発明の化合物を、ＴＹＫ２キナーゼおよび他のＪＡＫキナーゼを阻害する能力についてアッセイした。該化合物の活性を、化合物Ａ（２－（２－クロロ－６－フルオロ－フェニル）－５－［４－（モルホリン－４－カルボニル）－フェニルアミノ］－オキサゾール－４－カルボン酸および化合物Ｂ（２－（２，６－ジクロロ－フェニル）－５－［４－（モルホリン－４－カルボニル）－フェニルアミノ］－オキサゾール－４－カルボン酸アミド）の活性と比較した。
これらは、国際公開第２０１５／０３２４２３号および国際公開第２０１８／０７３４３８号の各々においてそれぞれ例２５および例２９の化合物である。
生物活性
（ｉ）ＴＹＫ２およびＪＡＫキナーゼ阻害アッセイ
本発明の化合物を、ＴＹＫ２キナーゼおよび他のＪＡＫキナーゼを阻害する能力についてアッセイした。該化合物の活性を、化合物Ａ（２－（２－クロロ－６－フルオロ－フェニル）－５－［４－（モルホリン－４－カルボニル）－フェニルアミノ］－オキサゾール－４－カルボン酸および化合物Ｂ（２－（２，６－ジクロロ－フェニル）－５－［４－（モルホリン－４－カルボニル）－フェニルアミノ］－オキサゾール－４－カルボン酸アミド）の活性と比較した。
【化19】
これらは、国際公開第２０１５／０３２４２３号および国際公開第２０１８／０７３４３８号の各々においてそれぞれ例２５および例２９の化合物である。
【0124】
該アッセイにおいて使用される基質およびキナーゼは、後の表２において同定されている。
【0125】
キナーゼアッセイを、米国ペンシルベニア州モルバーン地区のＲｅａｃｔｉｏｎ Ｂｉｏｌｏｇｙ Ｃｏｒｐ．で、以下に示す一般的な手順を使用して実施した。本アッセイでは、ＡＴＰ濃度は１００μＭで、最高の化合物濃度は１０μＭとした。
【0126】
国際公開第２０１５／０３２４２３号の６１ページにある表７におけるＴＹＫ２およびＪＡＫキナーゼのデータは、ＡＴＰ濃度が１０μＭであるアッセイを使用して生じたのに対し、先に示したように、以下のプロトコルにおいて説明されているアッセイは、１００μＭのＡＴＰ濃度を使用した。
【0127】
アッセイ：
１）新たに調製した塩基反応緩衝液（２０ｍＭ Ｈｅｐｅｓ ｐＨ７．５、１０ｍＭ ＭｇＣｌ２、１ｍＭ ＥＧＴＡ、０．０２％ Ｂｒｉｊ３５、０．０２ｍｇ／ｍｌ ＢＳＡ、０．１ｍＭ Ｎａ３ＶＯ４、２ｍＭ ＤＴＴ、１％ＤＭＳＯ）中で、指定の基質を調製する。
２）補因子（１．５ｍＭ ＣａＣｌ２、１６ｕｇ／ｍＬカルモジュリン、２ｍＭ ＭｎＣｌ２）を先の基質溶液に供給する
３）指定のキナーゼをこの基質溶液へと供給し、穏やかに混合する
４）ＤＭＳＯ中のさまざまな濃度の検査化合物をこのキナーゼ反応混合物へと供給する
５）３３Ｐ－ＡＴＰ（比放射能０．０１μＣｉ／μＬ最終）をこの反応混合物へと供給して、反応を開始する
６）キナーゼ反応物を室温で１２０分間インキュベートする
７）反応物をＰ８１イオン交換濾紙（Ｗｈａｔｍａｎ ＃３６９８－９１５）上へと斑点状にする。
８）未結合のリン酸塩を、０．７５％リン酸中で濾紙を入念に洗浄することによって除去する。
９）３３Ｐシグナルを、Ｔｙｐｈｏｏｎ ｐｈｏｓｐｈｏｒｉｍａｇｅｒｓ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を用いて測定した。不活性酵素を含有する対照反応物に由来する背景を減算した後、Ｐｒｉｓｍ（Ｇｒａｐｈｐａｄ ｓｏｆｔｗａｒｅ）の非線形回帰関数を使用してＩＣ５０値を求めた。
１）新たに調製した塩基反応緩衝液（２０ｍＭ Ｈｅｐｅｓ ｐＨ７．５、１０ｍＭ ＭｇＣｌ２、１ｍＭ ＥＧＴＡ、０．０２％ Ｂｒｉｊ３５、０．０２ｍｇ／ｍｌ ＢＳＡ、０．１ｍＭ Ｎａ３ＶＯ４、２ｍＭ ＤＴＴ、１％ＤＭＳＯ）中で、指定の基質を調製する。
２）補因子（１．５ｍＭ ＣａＣｌ２、１６ｕｇ／ｍＬカルモジュリン、２ｍＭ ＭｎＣｌ２）を先の基質溶液に供給する
３）指定のキナーゼをこの基質溶液へと供給し、穏やかに混合する
４）ＤＭＳＯ中のさまざまな濃度の検査化合物をこのキナーゼ反応混合物へと供給する
５）３３Ｐ－ＡＴＰ（比放射能０．０１μＣｉ／μＬ最終）をこの反応混合物へと供給して、反応を開始する
６）キナーゼ反応物を室温で１２０分間インキュベートする
７）反応物をＰ８１イオン交換濾紙（Ｗｈａｔｍａｎ ＃３６９８－９１５）上へと斑点状にする。
８）未結合のリン酸塩を、０．７５％リン酸中で濾紙を入念に洗浄することによって除去する。
９）３３Ｐシグナルを、Ｔｙｐｈｏｏｎ ｐｈｏｓｐｈｏｒｉｍａｇｅｒｓ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を用いて測定した。不活性酵素を含有する対照反応物に由来する背景を減算した後、Ｐｒｉｓｍ（Ｇｒａｐｈｐａｄ ｓｏｆｔｗａｒｅ）の非線形回帰関数を使用してＩＣ５０値を求めた。
【表2】
【0128】
基質：
ＡＸＬチド＝［ＫＫＳＲＧＤＹＭＴＭＱＩＧ］
ＪＡＫ３チド＝［Ａｃ－ＧＥＥＥＥＹＦＥＬＶＫＫＫＫ－ＮＨ２］
ｐＥＹ＝ポリＧｌｕ－Ｔｙｒ［Ｇｌｕ：Ｔｙｒ（４：１）、分子量＝５，０００～２０，０００］
ＡＸＬチド＝［ＫＫＳＲＧＤＹＭＴＭＱＩＧ］
ＪＡＫ３チド＝［Ａｃ－ＧＥＥＥＥＹＦＥＬＶＫＫＫＫ－ＮＨ２］
ｐＥＹ＝ポリＧｌｕ－Ｔｙｒ［Ｇｌｕ：Ｔｙｒ（４：１）、分子量＝５，０００～２０，０００］
【0129】
結果を以下の表３に示す。
検査したすべての化合物が良好なＴＹＫ２阻害活性を有することが示されたが、本データは、本発明の化合物（化合物（２）および化合物（３））がＴＹＫ２に関して先行技術の化合物Ａおよび化合物Ｂよりも（特にＪＡＫ２およびＪＡＫ３よりもＴＹＫ２に対して）より強力でありかつより選択的であることを示している。
【表3】
検査したすべての化合物が良好なＴＹＫ２阻害活性を有することが示されたが、本データは、本発明の化合物（化合物（２）および化合物（３））がＴＹＫ２に関して先行技術の化合物Ａおよび化合物Ｂよりも（特にＪＡＫ２およびＪＡＫ３よりもＴＹＫ２に対して）より強力でありかつより選択的であることを示している。
【0130】
（ｉｉ）シトクロムＰ４５０阻害アッセイ
潜在的な薬物間相互作用に対する化合物（２）および化合物（３）の感受性を、さまざまなシトクロムＰ４５０アイソフォームを阻害する能力をアッセイすることによって検査した。先行技術の化合物Ｂ（先の例３を参照されたい）もまた、比較例として検査した。
潜在的な薬物間相互作用に対する化合物（２）および化合物（３）の感受性を、さまざまなシトクロムＰ４５０アイソフォームを阻害する能力をアッセイすることによって検査した。先行技術の化合物Ｂ（先の例３を参照されたい）もまた、比較例として検査した。
【0131】
ＤＭＳＯ中で調製および段階希釈した検査化合物を、各アイソフォームのためのプローブ基質の存在下で、プールしたヒト肝ミクロソームとともに６つの濃度（１％ＤＭＳＯ最終）でインキュベートし、プローブ基質の代謝に及ぼす影響を測定した。インキュベーション（９６ウェルプレート内）を、３７℃で０．１Ｍトリス緩衝液（ｐＨ７．４）中で行い、補因子ＮＡＤＰＨ（１ｍＭ終濃度）の添加によって反応を開始した。
【0132】
指定された時間に、分析内部標準を含有するアセトニトリルで反応を終止させ、試料を遠心分離し、質量分析（ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ）によって上清画分をプローブ基質代謝産物について分析した。機器の応答を内部標準に対して正規化し、適切な溶媒対照と比較して、これらの「阻害されていない」対照と比較してプローブ基質から形成された代謝産物の量を決定した。
【0133】
結果を阻害率として報告し、ＩＣ５０値（プローブ代謝産物形成の５０％低減をもたらす濃度）を、非線形シグモイド用量応答方程式（ＢｉｏＢｏｏｋ）を使用して計算した。
％阻害＝最低値＋（最高値－最低値）／（１＋１０＾（（ＬｏｇＩＣ５０－Ｘ）×ＨｉｌｌＳｌｏｐｅ））
式中、Ｘ＝対数濃度。
％阻害＝最低値＋（最高値－最低値）／（１＋１０＾（（ＬｏｇＩＣ５０－Ｘ）×ＨｉｌｌＳｌｏｐｅ））
式中、Ｘ＝対数濃度。
【0134】
試験したＣＹＰ４５０アイソフォームおよび該アイソフォームのそれぞれのプローブ基質を表４に示す。
【表4】
【0135】
アッセイ結果を表５に示す。
検査したすべての化合物は良好なＣＹＰ阻害特性を示すが、本データは、本発明の化合物（化合物（２）および化合物（３））が、比較化合物Ｂよりも、特にＣＹＰ２Ｃ８およびＣＹＰ２Ｄ６に関して良好なＣＹＰ阻害特性を有する（すなわち、検査したＣＹＰアイソフォームをより低い程度まで阻害する）ことを示している。
【表5】
検査したすべての化合物は良好なＣＹＰ阻害特性を示すが、本データは、本発明の化合物（化合物（２）および化合物（３））が、比較化合物Ｂよりも、特にＣＹＰ２Ｃ８およびＣＹＰ２Ｄ６に関して良好なＣＹＰ阻害特性を有する（すなわち、検査したＣＹＰアイソフォームをより低い程度まで阻害する）ことを示している。
【0136】
（ｉｉｉ）ｈＥＲＧチャネル阻害アッセイ
化合物がｈＥＲＧカリウムチャネルを阻害する能力は、Ｓｏｐｈｉｏｎ Ｑｕｂｅ自動電気生理学プラットフォームで、ｈＥＲＧ－ＨＥＫを安定してトランスフェクトした細胞株を使用して決定した。本アッセイを室温で実施し、個々の細胞からのｈＥＲＧテール電流の記録を単一ホールＱＣｈｉｐを使用して行った。
化合物がｈＥＲＧカリウムチャネルを阻害する能力は、Ｓｏｐｈｉｏｎ Ｑｕｂｅ自動電気生理学プラットフォームで、ｈＥＲＧ－ＨＥＫを安定してトランスフェクトした細胞株を使用して決定した。本アッセイを室温で実施し、個々の細胞からのｈＥＲＧテール電流の記録を単一ホールＱＣｈｉｐを使用して行った。
【0137】
ｈＥＲＧチャネルを阻害する検査化合物の効力（ＩＣ５０）を、濃度ごとに最大４つの複製物を用いて８つの検査化合物濃度から生成された濃度応答曲線から決定した。
【0138】
外部緩衝液を検査化合物と完全に交換することを確保するために、化合物濃縮物を検査ウェルに２回添加した。合計で、化合物を該ウェルに７分超適用した。
【0139】
結果を以下の表６に示す。
検査した３つの化合物はすべて、比較的低いｈＥＲＧ活性を示すが、この結果は、本発明の化合物（化合物（２）および化合物（３））が先行技術の比較化合物Ｂと比較してさらに低いｈＥＲＧリスクを有することを実証している。
【表6】
検査した３つの化合物はすべて、比較的低いｈＥＲＧ活性を示すが、この結果は、本発明の化合物（化合物（２）および化合物（３））が先行技術の比較化合物Ｂと比較してさらに低いｈＥＲＧリスクを有することを実証している。
【0140】
（ｉｖ）肝細胞安定性アッセイ
本発明の化合物（２）および化合物（３）ならびに先行技術の比較化合物Ｂを、マウス（雄ＣＤ－１）、ラット（雄Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ）、イヌ（雄Ｂｅａｇｌｅ）およびヒト（性別混合）からプールされた肝細胞を使用して実施した肝細胞安定性アッセイにおいて検査した。検査化合物および対照化合物を３７℃で肝細胞とともにインキュベートした。１時間にわたって６つの時点で一定分量を取り出した。試料を遠心分離し、上清画分を親化合物について質量分析（ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ）によって分析した。
本発明の化合物（２）および化合物（３）ならびに先行技術の比較化合物Ｂを、マウス（雄ＣＤ－１）、ラット（雄Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ）、イヌ（雄Ｂｅａｇｌｅ）およびヒト（性別混合）からプールされた肝細胞を使用して実施した肝細胞安定性アッセイにおいて検査した。検査化合物および対照化合物を３７℃で肝細胞とともにインキュベートした。１時間にわたって６つの時点で一定分量を取り出した。試料を遠心分離し、上清画分を親化合物について質量分析（ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ）によって分析した。
【0141】
残存している化合物の量（％として表される）を、Ｔ＝０の試料におけるＭＳ応答と比較した各試料のＭＳ応答から決定し、化合物の半減期および固有クリアランスを決定するために使用した。
【0142】
結果を以下の表７に示す。
比較化合物Ｂは、ヒトにおいて良好な半減期（２時間超）を呈するが、表７のデータは、本発明の化合物（２）および化合物（３）が、先行技術の比較化合物Ｂと比較した４つの肝細胞安定性アッセイすべてにおいて有意に低減したクリアランス速度を有すること、およびその結果、本発明の化合物の半減期（Ｔ１／２）が、４つのアッセイすべてにおいて比較化合物Ｂの半減期よりもさらに長いことを示している。
【表7】
比較化合物Ｂは、ヒトにおいて良好な半減期（２時間超）を呈するが、表７のデータは、本発明の化合物（２）および化合物（３）が、先行技術の比較化合物Ｂと比較した４つの肝細胞安定性アッセイすべてにおいて有意に低減したクリアランス速度を有すること、およびその結果、本発明の化合物の半減期（Ｔ１／２）が、４つのアッセイすべてにおいて比較化合物Ｂの半減期よりもさらに長いことを示している。
【0143】
（ｖ）ｐＳＴＡＴ３阻害
本発明の化合物（２）および化合物（３）ならびに先行技術の比較化合物Ａおよび比較化合物Ｂを、血清飢餓状態にしたＨＴ２９細胞におけるＩＬ－２２刺激に応答したｐＳＴＡＴ３阻害について検査した。
本発明の化合物（２）および化合物（３）ならびに先行技術の比較化合物Ａおよび比較化合物Ｂを、血清飢餓状態にしたＨＴ２９細胞におけるＩＬ－２２刺激に応答したｐＳＴＡＴ３阻害について検査した。
【0144】
ＨＴ２９細胞を一晩血清飢餓状態にした後、４つの検査化合物を希釈して、最高濃度が１０μＭである９点片対数用量希釈液およびビヒクル対照を生成した。ＨＴ２９細胞を検査化合物とともに３７℃で２０分間インキュベートした。ＨＴ２９細胞を１０ｎｇ／ｍｌのヒトＩＬ－２２とともにさらに１５分間インキュベートした後、細胞を４％ＰＦＡで１０分間、および９０％メタノールで３０分間固定した後、ホスホ－ＳＴＡＴ３Ｙ７０５抗体（ＣＳＴ＃９１４５）で標識した。細胞を０．５％ＢＳＡ／ＰＢＳ溶液を用いて３回すすいだ後、Ａｌｅｘａ－４８８抗ウサギ二次抗体とともにインキュベートした。
【0145】
単一細胞におけるホスホ－ＳＴＡＴ３の平均蛍光強度を、Ｉｎｔｅｌｌｉｃｙｔ ｉＱｕｅ機およびＦｌｏｗＪｏソフトウェアを使用したフローサイトメトリーによって分析した。ＩＣ５０を、背景シグナルの除去およびＤＭＳＯ対照への正規化の後で４パラメータ解析を使用して決定した。
【0146】
結果を以下の表８に示す。
比較化合物Ｂおよび化合物（２）のいずれもが、ｐＳＴＡＴ３阻害に対する１００ｎＭ未満のＩＣ５０値を有することが示されたが、化合物（２）についてのＩＣ５０値は、比較化合物Ｂよりも有意に低かった。
【表8】
比較化合物Ｂおよび化合物（２）のいずれもが、ｐＳＴＡＴ３阻害に対する１００ｎＭ未満のＩＣ５０値を有することが示されたが、化合物（２）についてのＩＣ５０値は、比較化合物Ｂよりも有意に低かった。
【0147】
（ｖｉ）ヒト初代ＣＤ４ＣＤ４５ＲＯ＋細胞アッセイ
化合物（２）および化合物（３）ならびに比較化合物ＢによるＩＬ－１７Ｆ産生およびＳＴＡＴ３リン酸化の阻害を、ヒト末梢血ＣＤ４ＣＤ４５ＲＯ＋細胞に由来するＴｈ１７細胞において測定した。
化合物（２）および化合物（３）ならびに比較化合物ＢによるＩＬ－１７Ｆ産生およびＳＴＡＴ３リン酸化の阻害を、ヒト末梢血ＣＤ４ＣＤ４５ＲＯ＋細胞に由来するＴｈ１７細胞において測定した。
【0148】
新鮮なヒト末梢血ＣＤ４ＣＤ４５ＲＯ＋細胞を商業的に購入し（Ｇｅｎｅｒｏｎ，ＵＫ）、実験的複製物のために３人の異なるボランティアから３つの別個のバイアルとした。細胞を、１０ｎｇ／ｍｌの組換えヒトＩＬ－１Ｂ（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）、ＩＬ－２３（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）、ＴＧＦ－Ｂ１（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）、および５０ｎｇ／ｍｌのＩＬ－６（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）を抗ＣＤ３／ＣＤ２８磁気Ｄｙｎａｂｅａｄ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ）と一緒に含有するＴ細胞培地（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ）中で成長させた。これらを１１日間成長させて、Ｔｈ１７細胞の増殖を誘導した。アッセイ向けに播種するのに先立って、細胞をヒト血清（１％）を一晩補充したＴ細胞培地中で一晩成長させた。アッセイの４時間前に、培地を除去し、補充されていないＲＰＭＩと置き換えた。
【0149】
ＩＬ－１７Ｆレベルを測定するために、２００，０００個の細胞を９６ウェルプレート内へと播種し、化合物とともに３０分間プレインキュベートした後、６．２５ｎｇ／ｍｌの組換えＩＬ－２３および０．１ｎｇ／ｍｌの組換えヒトＩＬ－１Ｂを用いて４８時間刺激した。上清を除去し、市販のＥＬＩＳＡキット（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ、ＢＭＳ２０３７－２）を使用してＩＬ－１７Ｆレベルを測定した。
【0150】
ｐＳＴＡＴ３レベルを測定するために、２００，０００個の細胞を９６ウェルプレート内へと播種し、化合物とともに３０分間プレインキュベートした後、１２．５ｎｇ／ｍｌの組換えＩＬ－２３を用いて１５分間刺激した後、細胞溶解緩衝液を用いて溶解した。溶解物中のｐＳＴＡＴ３レベルを、市販のＥＬＩＳＡキット（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ、８５－８６１０２－１１）を用いて測定した。
【0151】
ＥＬＩＳＡを、製造元の説明書により実施し、マイクロプレートリーダー（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ、Ｖａｒｉｏｓｋａｎ）を使用して吸光度を読み取った。データを、式：
対照の％＝（（刺激した試料の濃度－未刺激の試料の濃度）×１００）／（刺激した対照の濃度－未刺激の対照の濃度）
を用いて未処理の試料における応答に対して正規化した。
対照の％＝（（刺激した試料の濃度－未刺激の試料の濃度）×１００）／（刺激した対照の濃度－未刺激の対照の濃度）
を用いて未処理の試料における応答に対して正規化した。
【0152】
Ｇｒａｐｈｐａｄ Ｐｒｉｓｍ ８．１．０を使用して、非線形４パラメータロジスティック回帰モデル（４ＰＬ）を使用してＩＣ５０値を計算した。
【0153】
結果を以下の表９Ａおよび表９Ｂに示す。
検査した化合物はすべて、ＩＬ１７－Ｆ産生およびＳＴＡＴ３リン酸化の阻害を示したが、いずれのアッセイにおいても、化合物（２）は比較化合物Ｂおよび化合物（３）よりも活性が高いことが示された。
【表9A】
【表9B】
検査した化合物はすべて、ＩＬ１７－Ｆ産生およびＳＴＡＴ３リン酸化の阻害を示したが、いずれのアッセイにおいても、化合物（２）は比較化合物Ｂおよび化合物（３）よりも活性が高いことが示された。
【0154】
比較データ－結論
先のアッセイ（ｉ）～（ｖｉ）から得られたデータは、本発明の化合物が、国際公開第２０１５／０３２４２３号において構造上最も類似した化合物（化合物Ｂ）よりも有意な利点を有することを示している。
先のアッセイ（ｉ）～（ｖｉ）から得られたデータは、本発明の化合物が、国際公開第２０１５／０３２４２３号において構造上最も類似した化合物（化合物Ｂ）よりも有意な利点を有することを示している。
【0155】
したがって、化合物（２）および化合物（３）はいずれも、ＴＹＫ２キナーゼ阻害アッセイにおいて化合物Ｂよりも活性が高く、いずれも、化合物ＢよりもＪＡＫ１、ＪＡＫ２およびＪＡＫ３キナーゼよりもＴＹＫ２に対して高い選択性を有する。
【0156】
化合物（２）および化合物（３）は、シトクロムＰ４５０アッセイ、特にＣＹＰ２Ｃ８アッセイおよびＣＹＰ２Ｃ９アッセイにおいて、先行技術の比較化合物Ｂと比較してわずかに有利な特性を有する。
【0157】
化合物（２）および化合物（３）は、先行技術の比較化合物Ｂと比較して、ｈＥＲＧリスクが低減されている。
【0158】
肝細胞安定性アッセイにおいて、化合物（２）および化合物（３）は、クリアランス速度の低減、およびその結果として、比較化合物Ｂよりも長い半減期を示した。
【0159】
加えて、化合物（２）は、比較化合物Ｂと比較して、ＩＬ－２２で刺激されたＨＴ２９細胞およびＴｈ１７細胞におけるＳＴＡＴ３のリン酸化を阻害する上でより強力である。
【0160】
最後に、化合物（２）は、比較化合物Ｂと比較して、Ｔｈ１７細胞におけるＩＬ－１７Ｆ産生のより大きな阻害を示している。
【0161】
まとめると、本データは、化合物（２）および化合物（３）が非常に強力かつ選択的なＴＹＫ２キナーゼ阻害剤であり、優れた薬物動態特性を有することを示している。
【0162】
例４
医薬製剤
（ｉ）錠剤製剤
式（２）もしくは式（３）の化合物またはその医薬として許容され得る塩を含有する錠剤組成物は、公知の様式で錠剤を形成するために、５０ｍｇの化合物を、希釈剤としての１９７ｍｇのラクトース（ＢＰ）および潤滑剤としての３ｍｇのステアリン酸マグネシウムと混合し、圧縮することによって調製される。
医薬製剤
（ｉ）錠剤製剤
式（２）もしくは式（３）の化合物またはその医薬として許容され得る塩を含有する錠剤組成物は、公知の様式で錠剤を形成するために、５０ｍｇの化合物を、希釈剤としての１９７ｍｇのラクトース（ＢＰ）および潤滑剤としての３ｍｇのステアリン酸マグネシウムと混合し、圧縮することによって調製される。
【0163】
（ｉｉ）カプセル製剤
カプセル製剤は、１００ｍｇの式（２）もしくは式（３）の化合物またはその医薬として許容され得る塩を１００ｍｇのラクトースと混合し、得られた混合物を標準的な不透明硬質ゼラチンカプセル内へと充填することによって調製される。
カプセル製剤は、１００ｍｇの式（２）もしくは式（３）の化合物またはその医薬として許容され得る塩を１００ｍｇのラクトースと混合し、得られた混合物を標準的な不透明硬質ゼラチンカプセル内へと充填することによって調製される。
【0164】
（ｉｉｉ）皮下注射製剤
皮下投与向けの組成物は、式（２）または式（３）の化合物を医薬等級のトウモロコシ油と混合して５ｍｇ／ｍＬの濃度にすることによって調製される。該組成物は滅菌され、適切な容器内へと充填される。
皮下投与向けの組成物は、式（２）または式（３）の化合物を医薬等級のトウモロコシ油と混合して５ｍｇ／ｍＬの濃度にすることによって調製される。該組成物は滅菌され、適切な容器内へと充填される。
【0165】
同等物
上述の例は、本発明を説明する目的のために提示されており、本発明の範囲にいかなる制限も課すものとして解釈されないものとする。本発明の根底にある原理から逸脱することなく、先に説明されおよび例に示されている本発明の具体的な実施形態に対して多数の修正および変更を行うことができることは容易に明らかであろう。このような修正および変更はすべて、本出願によって包含されることが意図されている。
上述の例は、本発明を説明する目的のために提示されており、本発明の範囲にいかなる制限も課すものとして解釈されないものとする。本発明の根底にある原理から逸脱することなく、先に説明されおよび例に示されている本発明の具体的な実施形態に対して多数の修正および変更を行うことができることは容易に明らかであろう。このような修正および変更はすべて、本出願によって包含されることが意図されている。