特許 7383259 ＳＧＬＴ２阻害薬の感受性の判定方法及びＳＧＬＴ２阻害薬に対する感受性マーカー

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2023-11-10

(45)【発行日】2023-11-20

(54)【発明の名称】ＳＧＬＴ２阻害薬の感受性の判定方法及びＳＧＬＴ２阻害薬に対する感受性マーカー

(51)【国際特許分類】

   G01N 33/50 20060101AFI20231113BHJP

   C12Q 1/28 20060101ALI20231113BHJP

   C12Q 1/26 20060101ALI20231113BHJP

   A61K 45/00 20060101ALN20231113BHJP

   A61P 43/00 20060101ALN20231113BHJP

   A61P 3/10 20060101ALN20231113BHJP

【ＦＩ】

G01N33/50 Z

C12Q1/28

C12Q1/26

A61K45/00

A61P43/00 111

A61P3/10

【請求項の数】 18

(21)【出願番号】P 2020028154

(22)【出願日】2020-02-21

(65)【公開番号】P2020139947

(43)【公開日】2020-09-03

【審査請求日】2022-09-13

(31)【優先権主張番号】P 2019031366

(32)【優先日】2019-02-25

(33)【優先権主張国・地域又は機関】JP

【新規性喪失の例外の表示】特許法第３０条第２項適用 ２０１８年（平成３０年）２月２６日 ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ２．ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎ．ｃｏ．ｊｐ／ｊｃｓ２０１８／ａｂｓｔｒａｃｔｓ／ ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ２．ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎ．ｃｏ．ｊｐ／ｊｃｓ２０１８／ を通じて発表

【新規性喪失の例外の表示】特許法第３０条第２項適用 ２０１８年（平成３０年）３月２５日 第８２回日本循環器学会学術集会ランチョンセミナー５４にて発表

【新規性喪失の例外の表示】特許法第３０条第２項適用 ２０１８年（平成３０年）４月２５日 糖尿病Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｔｈｅ Ｊａｐａｎ Ｄｉａｂｅｔｅｓ Ｓｏｃｉｅｔｙ Ｖｏｌ．６１ Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ １ ２０１８にて発表

【新規性喪失の例外の表示】特許法第３０条第２項適用 ２０１８年（平成３０年）５月２５日 第６１回日本糖尿病学会年次学術集会にて発表

(73)【特許権者】

【識別番号】899000057

【氏名又は名称】学校法人日本大学

(73)【特許権者】

【識別番号】519064894

【氏名又は名称】大崎市

(73)【特許権者】

【識別番号】000004086

【氏名又は名称】日本化薬株式会社

(74)【代理人】

【識別番号】110000109

【氏名又は名称】弁理士法人特許事務所サイクス

(72)【発明者】

【氏名】高山 忠輝

(72)【発明者】

【氏名】薄井 正寛

(72)【発明者】

【氏名】工藤 恵子

【審査官】三木 隆

(56)【参考文献】

【文献】特開２００１－１１６７５６（ＪＰ，Ａ）

【文献】特開２０１９－０３０８２１（ＪＰ，Ａ）

【文献】米国特許出願公開第２０１５／０１０４８８１（ＵＳ，Ａ１）

【文献】Donald E. Kohan，Long-Term Study of Patients with Type 2 Diabetes and Moderate Renal Impairment Shows That Dapagliflozin Reduces Weight and Blood Pressure but Does Not Improve Glycemic Control，Clinical Trial，2014年，Vol.85 No.4，Page.962-971

【文献】A. Kashiwagi，A Randomized, Double-Blind, Placebo-Controlled Study on Long-Term Efficacy and Safety of Ipragliflozin Treatment in Patients with Type 2 Diabetes Mellitus and renal Impairment: Results of the Long-Term ASP1941 Safety Evaluation in Patients with Type 2 Diabetes with Renal Impairment (LANTERN) Study，Diabetes, Obesity and Metabolism，2015年，Vol.17 No.2，Page.152-160

【文献】WON JUN KIM，Serum 1,5-Anhydroglucitol Concentrations Are a Reliable Index of Glycemic Control in Type2Diabetes With Mild or Moderate Renal Dysfunc，DIABETES CARE，2012年，Vol.35，Page.281-286

【文献】Casey M. Rebholz，Serum Level of 1,5-Anhydroglucitol and Risk of Incident End-Stage Renal Disease，American Journal of Epidemiology，2017年05月23日，Vol.186 No.8，Page.952-960

【文献】Dainius A. BALIS，Effect of canagliflozin, a sodium-glucose cotransporter 2 inhibitor, on measurement of serum 1,5-anhydroglucitol，Journal of Diabetes，2014年，Vol.6，Page.378-380

【文献】岡本元純，経口糖尿病治療薬の使い方，日本臨床内科医会会誌，2016年03月10日，Vol.30 No.5，Page.575-581

【文献】Hidekazu Shimizu，Serum concentration and renal handling of 1,5-anhydro-D-glucitol in patients with chronic renal failure，Ann Clin Biochem，1999年，Vol.36，Page.749-754

【文献】TOSHIKAZU YAMANOUCHI，Reduction and Recovery of Plasma 1,5-Anhydro-D-Glucitol Level in Diabetes Mellitus，DIABETES，1987年，Vol.36，Page.709-715

【文献】TOSHIKAZU YAMANOUCHI，Comparison of 1,5-Anhydroglucitol, HbA1c, and Fructosamine for Detection of Diabetes Mellitus，DIABETES，1991年，Vol.40，Page.52-57

【文献】薄井正寛，1,5AGはSGLT2阻害薬の効果を事前に予測する，糖尿病，2018年04月，Vol.61 Suppl.，Page.S-231

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

Ｇ０１Ｎ ３３／５０

Ｃ１２Ｑ １／２８

Ｃ１２Ｑ １／２６

Ａ６１Ｋ ４５／００

Ａ６１Ｐ ４３／００

Ａ６１Ｐ ３／１０

ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）

ＣＡｐｌｕｓ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

ＳＧＬＴ２阻害薬を服用していない、腎機能が維持されている被験者の血液における１，５－アンヒドログルシトールを測定することを含む、ＳＧＬＴ２阻害薬の糖尿病患者の血糖を低下させる効果の感受性を判定するための指標を提供する方法であって、測定された１，５－アンヒドログルシトール値が５μｇ／ｍＬ以下である場合に、ＳＧＬＴ２阻害薬の感受性が高いという指標が提供される、方法。

【請求項2】

ＳＧＬＴ２阻害薬を服用していない、腎機能が維持されている被験者の血液における１，５－アンヒドログルシトールを測定することを含む、ＳＧＬＴ２阻害薬の糖尿病患者の血糖を低下させる効果の感受性を判定するための指標を提供する方法であって、測定された１，５－アンヒドログルシトール値が７．５μｇ／ｍＬ以上である場合に、ＳＧＬＴ２阻害薬の感受性が低いという指標が提供される、方法。

【請求項3】

前記血液が、他の糖尿病治療薬を処方しているかどうかに関わらずＳＧＬＴ２阻害薬を服用していない、腎機能が維持されている被験者の血液である、請求項１または２に記載の方法。

【請求項4】

ＳＧＬＴ２阻害薬以外の糖尿病治療薬を服用している、腎機能が維持されている被験者の血液における１，５－アンヒドログルシトールを測定することを含む、ＳＧＬＴ２阻害薬の糖尿病患者の血糖を低下させる効果の感受性を判定するための指標を提供する方法であって、測定された１，５－アンヒドログルシトール値が５μｇ／ｍＬ以下である場合に、ＳＧＬＴ２阻害薬の感受性が高いという指標が提供される、方法。

【請求項5】

ＳＧＬＴ２阻害薬以外の糖尿病治療薬を服用している、腎機能が維持されている被験者の血液における１，５－アンヒドログルシトールを測定することを含む、ＳＧＬＴ２阻害薬の糖尿病患者の血糖を低下させる効果の感受性を判定するための指標を提供する方法であって、測定された１，５－アンヒドログルシトール値が７．５μｇ／ｍＬ以上である場合に、ＳＧＬＴ２阻害薬の感受性が低いという指標が提供される、方法。

【請求項6】

ＳＧＬＴ２阻害薬以外の糖尿病治療薬が、スルホニル尿素薬、ＤＰＰ－４阻害薬、チアゾリジン薬またはメトホルミンである、請求項４または５に記載の方法。

【請求項7】

ＳＧＬＴ２阻害薬の服用開始の１週間後またはそれ以降における、腎機能が維持されている被験者の血液における１，５－アンヒドログルシトールを測定することを含む、ＳＧＬＴ２阻害薬の糖尿病患者の血糖を低下させる効果の感受性が低いと判定するための指標を提供する方法であって、ＳＧＬＴ２阻害薬の服用開始の１週間後またはそれ以降における、腎機能が維持されている被験者の血液の１，５－アンヒドログルシトール値が、２μｇ／ｍＬ以上である場合に、ＳＧＬＴ２阻害薬の糖尿病患者の血糖を低下させる効果の感受性が低いという指標が提供される、方法。

【請求項8】

ＳＧＬＴ２阻害薬の服用の開始後における、腎機能が維持されている被験者の血液における１，５－アンヒドログルシトールを測定することを含む、ＳＧＬＴ２阻害薬の糖尿病患者の血糖を低下させる効果が減弱していることを判定するための指標を提供する方法であって、ＳＧＬＴ２阻害薬の服用の開始後における、腎機能が維持されている被験者の血液の１，５－アンヒドログルシトール値が、２μｇ／ｍＬ以上である場合に、ＳＧＬＴ２阻害薬の糖尿病患者の血糖を低下させる効果が減弱しているという指標が提供される、方法。

【請求項9】

１，５－アンヒドログルシトールからなる、ＳＧＬＴ２阻害薬に対する感受性マーカーであって、ＳＧＬＴ２阻害薬を服用していない、腎機能が維持されている被験者の血液において、測定された１，５－アンヒドログルシトール値が５μｇ／ｍＬ以下である場合に、ＳＧＬＴ２阻害薬の糖尿病患者の血糖を低下させる効果の感受性が高いという指標が提供される、マーカー。

【請求項10】

１，５－アンヒドログルシトールからなる、ＳＧＬＴ２阻害薬に対する感受性マーカーであって、ＳＧＬＴ２阻害薬を服用していない被験者の、腎機能が維持されている血液において、測定された１，５－アンヒドログルシトール値が７．５μｇ／ｍＬ以上である場合に、ＳＧＬＴ２阻害薬の糖尿病患者の血糖を低下させる効果の感受性が低いという指標が提供される、マーカー。

【請求項11】

１，５－アンヒドログルシトールからなる、ＳＧＬＴ２阻害薬に対する感受性マーカーであって、ＳＧＬＴ２阻害薬以外の糖尿病治療薬を服用している、腎機能が維持されている被験者の血液において、測定された１，５－アンヒドログルシトール値が５μｇ／ｍＬ以下である場合に、ＳＧＬＴ２阻害薬の糖尿病患者の血糖を低下させる効果の感受性が高いという指標が提供される、マーカー。

【請求項12】

１，５－アンヒドログルシトールからなる、ＳＧＬＴ２阻害薬に対する感受性マーカーであって、ＳＧＬＴ２阻害薬以外の糖尿病治療薬を服用している、腎機能が維持されている被験者の血液において、測定された１，５－アンヒドログルシトール値が７．５μｇ／ｍＬ以上である場合に、ＳＧＬＴ２阻害薬の糖尿病患者の血糖を低下させる効果の感受性が低いという指標が提供される、マーカー。

【請求項13】

１，５－アンヒドログルシトールからなる、ＳＧＬＴ２阻害薬に対する感受性マーカーであって、ＳＧＬＴ２阻害薬の服用開始の１週間後またはそれ以降における、腎機能が維持されている被験者の血液の１，５－アンヒドログルシトール値が、２μｇ／ｍＬ以上である場合に、ＳＧＬＴ２阻害薬の糖尿病患者の血糖を低下させる効果の感受性が低いという指標が提供される、マーカー。

【請求項14】

１，５－アンヒドログルシトールからなる、ＳＧＬＴ２阻害薬に対する感受性マーカーであって、ＳＧＬＴ２阻害薬の服用の開始後における、腎機能が維持されている被験者の血液の１，５－アンヒドログルシトール値が、２μｇ／ｍＬ以上である場合に、ＳＧＬＴ２阻害薬の糖尿病患者の血糖を低下させる効果が減弱しているという指標が提供される、マーカー。

【請求項15】

請求項１から８の何れか一項に記載の方法において使用するための、１，５－アンヒドログルシトールまたはその誘導体を測定するための定量用試薬を含む、ＳＧＬＴ２阻害薬の糖尿病患者の血糖を低下させる効果の感受性判定キット。

【請求項16】

１，５－アンヒドログルシトールまたはその誘導体をピラノースオキシダーゼまたはＬ－ソルボースオキシダーゼまたは１，５－アンヒドログルシトール脱水素酵素または１，５－アンヒドログルシトール－６－リン酸脱水素酵素を用いて定量する１，５－アンヒドログルシトール定量用試薬を含む請求項１５に記載のＳＧＬＴ２阻害薬の糖尿病患者の血糖を低下させる効果の感受性判定キット。

【請求項17】

１，５－アンヒドログルシトールまたはその誘導体をピラノースオキシダーゼ（ＰＲＯＤ）で酸化し、発生する過酸化水素をペルオキシダーゼ（ＰＯＤ）および発色試薬にて検出する定量用試薬を含む、請求項１５に記載のＳＧＬＴ２阻害薬の糖尿病患者の血糖を低下させる効果の感受性判定キット。

【請求項18】

発色試薬が、４－アミノアンチピリン（４－ＡＡＰ）およびＮ－エチル－Ｎ－（２－ヒドロキシ－３－スルホプロピル）－３－メチルアニリンナトリウム二水和物（ＴＯＯＳ）である、請求項１７に記載のＳＧＬＴ２阻害薬の糖尿病患者の血糖を低下させる効果の感受性判定キット。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、被験者の生体試料におけるバイオマーカー値を指標としてＳＧＬＴ２阻害薬の感受性を判定することを含む、ＳＧＬＴ２阻害薬の感受性を判定する方法に関する。本発明はさらに、ＳＧＬＴ２阻害薬に対する感受性マーカーに関する。

【背景技術】

【0002】

ＳＧＬＴ２（ナトリウム－グルコース共輸送タンパク２：ｓｏｄｉｕｍ ｇｌｕｃｏｓｅ ｃｏ－ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ ｔｙｐｅ ２）阻害薬は、糖尿病治療薬として日本で見いだされ、現在では世界的に開発及び販売されている。ＳＧＬＴ２阻害薬は、腎臓にあるＳＧＬＴ２を特異的に阻害することにより、腎臓でのグルコース再吸収を抑制する。血中のグルコースは、腎臓で濾過された後、腎尿細管にあるトランスポーター（ＳＧＬＴ２など）を介して再吸収される。ＳＧＬＴ２阻害薬は、グルコースと拮抗することで、この再吸収を阻害し、グルコースは尿中に排泄されることで血中のグルコース濃度を下げる。

【0003】

一方、糖尿病マーカーとしては、血糖値、ヘモグロビンＡ１ｃ（ＨｂＡ１ｃ）、グリコアルブミン（ｇｌｙｃｏａｌｂｕｍｉｎ：ＧＡ）、フルクトサミン、および１，５－アンヒドログルシトール（以下、１，５－ＡＧと記載することがある）などが知られている。

【0004】

１，５－ＡＧは、天然に存在するポリオールである。１，５－ＡＧは、人体で生合成または代謝されることは少なく、主に食物と共に腸から吸収されて、腎臓から排出されることで、体内濃度はほぼ一定量に保たれている。１，５－ＡＧはグルコースに類似した構造を有することから、その吸収および排泄は、グルコーストランスポーターにより行われている。特に、１，５－ＡＧは、主に腎細尿管上にあるＳＧＬＴ４を介して、尿中より再吸収されると考えられている。糖尿病において、尿中に過剰にグルコースが存在する場合には、１，５－ＡＧの再吸収はグルコースに阻害され、１，５－ＡＧは尿中に排泄される。そのため、尿糖の出現に応じて血中１，５－ＡＧ値が低下することを利用して、１，５－ＡＧは、糖尿病の症状を把握するためのマーカーとして使用されている。１，５－ＡＧは糖尿病マーカーとして、その測定試薬が開発され、体外診断用医薬品として販売されている（ラナ１，５ＡＧオート リキッド、日本化薬製：およびデタミナーＬ １，５－ＡＧ、協和メデックス製）。特許文献１～３には、１，５－アンヒドログルシトール定量用試薬キット、１，５－アンヒドログルシトール測定用キット、および１，５－アンヒドログルシトールの測定方法が記載されている。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0005】

【文献】特許第２８１２６７６号公報

【文献】特許第４５４４５９８号公報

【文献】特許第５３０１１５６号公報

【非特許文献】

【0006】

【文献】Ｄ．Ａ．Ｂａｌｉｓら、Ｊ．Ｄｉａｂｅｔｅｓ、２０１４年、ｖｏｌ．６、ｐ．３７８－３８１

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0007】

上記の通り、１，５－ＡＧは、血糖指標として使用されてきたが、ＳＧＬＴ２阻害薬の使用例においては、そのメカニズムにより、血糖値に関わらず、１，５－ＡＧ値が低下することが推測され、糖尿病のコントロールにおける測定意義についての検討は行われていない。例えば、非特許文献１に記載のようにＤ．Ａ．ＢａｌｉｓらはＳＧＬＴ２阻害薬の一つであるカナグリフロジン水和物を投与した患者における血中１，５－ＡＧ値を測定し、その結果を報告している。彼等は、ＳＧＬＴ２阻害薬投与患者の場合、１，５－ＡＧは血糖指標としては不正確な結果を示す可能性があると結論している。また、ＳＧＬＴ２阻害薬は、糖尿病治療薬として使用されているが、ＳＧＬＴ２阻害薬の感受性の判定方法についてはこれまで知られていない。本発明は、臨床で使用可能なＳＧＬＴ２阻害薬の感受性を判定する方法、及びＳＧＬＴ２阻害薬に対する感受性マーカーを提供することを解決すべき課題とした。

【課題を解決するための手段】

【0008】

本発明者らは上記課題を解決するために鋭意検討した結果、被験者の生体試料におけるバイオマーカーを測定し、測定されたバイオマーカー値を指標としてＳＧＬＴ２阻害薬の感受性を判定することができることを見出し、本発明を完成するに至った。

【0009】

即ち、本発明によれば、以下の発明が提供される。
＜１＞ 被験者の生体試料におけるバイオマーカーを測定し、測定されたバイオマーカー値を指標としてＳＧＬＴ２阻害薬の感受性を判定することを含む、ＳＧＬＴ２阻害薬の感受性を判定する方法。
＜２＞ バイオマーカーが、１，５－アンヒドログルシトールである、＜１＞に記載の方法。
＜３＞ 生体試料が血液である、＜１＞または＜２＞に記載の方法。
＜４＞ 生体試料が、他の糖尿病治療薬を処方しているかどうかに関わらずＳＧＬＴ２阻害薬を服用していない被験者のものである、＜１＞から＜３＞の何れか一に記載の方法。
＜５＞ バイオマーカーが、１，５－アンヒドログルシトールであり、生体試料が、ＳＧＬＴ２阻害薬を服用していない被験者の血液であり、測定されたバイオマーカー値が５μ ｇ／ｍＬ以下である場合に、ＳＧＬＴ２阻害薬の感受性が高いと判定する、＜４＞に記載の方法。
＜６＞ バイオマーカーが、１，５－アンヒドログルシトールであり、生体試料が、ＳＧＬＴ２阻害薬を服用していない被験者の血液であり、測定されたバイオマーカー値が７．５～１０μｇ／ｍＬ以上である場合に、ＳＧＬＴ２阻害薬の感受性が低いと判定する、＜４＞に記載の方法。
＜７＞ 生体試料が、ＳＧＬＴ２阻害薬以外の糖尿病治療薬を服用している被験者のものである、＜１＞から＜３＞の何れか一に記載の方法。
＜８＞ バイオマーカーが、１，５－アンヒドログルシトールであり、生体試料が、ＳＧＬＴ２阻害薬以外の糖尿病治療薬を服用している被験者の血液であり、測定されたバイオマーカー値が５μｇ／ｍＬ以下である場合に、ＳＧＬＴ２阻害薬の感受性が高いと判定する、＜７＞に記載の方法。
＜９＞ バイオマーカーが、１，５－アンヒドログルシトールであり、生体試料が、ＳＧＬＴ２阻害薬以外の糖尿病治療薬を服用している被験者の血液であり、測定されたバイオマーカー値が７．５～１０μｇ／ｍＬ以上である場合に、ＳＧＬＴ２阻害薬の感受性が低いと判定する、＜７＞に記載の方法。
＜１０＞ ＳＧＬＴ２阻害薬以外の糖尿病治療薬が、スルホニル尿素薬、ＤＰＰ－４阻害薬、チアゾリジン薬またはメトホルミンである、＜７＞から＜９＞の何れか一に記載の方法。
＜１１＞ ＳＧＬＴ２阻害薬の服用の後におけるバイオマーカー値を指標にしてＳＧＬＴ
２阻害薬の感受性を判定する、＜１＞から＜３＞の何れか一に記載の方法。
＜１２＞ ＳＧＬＴ２阻害薬の服用開始の１週間後またはそれ以降における１，５－アンヒドログルシトール値を指標にしてＳＧＬＴ２阻害薬の感受性を判定する、＜１１＞に記載の方法。
＜１３＞ ＳＧＬＴ２阻害薬の服用開始の１週間後またはそれ以降における１，５－アンヒドログルシトール値が、２μｇ／ｍＬ以上である場合に、ＳＧＬＴ２阻害薬の感受性が低いと判定する、＜１１＞または＜１２＞に記載の方法。
＜１４＞ ＳＧＬＴ２阻害薬の服用の開始後におけるバイオマーカー値の変化を指標にして、ＳＧＬＴ２阻害薬の効果が減弱していることを判定する、＜１＞から＜３＞の何れか一に記載の方法。
＜１５＞ ＳＧＬＴ２阻害薬の服用の開始後における１，５－アンヒドログルシトール値が、２μｇ／ｍＬ以上であることを指標にして、ＳＧＬＴ２阻害薬の効果が減弱していることを判定する、＜１４＞に記載の方法。
＜１６＞ 被験者が、糖尿病患者である、＜１＞から＜１５＞の何れか一に記載の方法。＜１７＞ １，５－アンヒドログルシトールからなる、ＳＧＬＴ２阻害薬に対する感受性マーカー。
＜１８＞ ＜１＞から＜１６＞の何れか一に記載の方法において使用するためのＳＧＬＴ２阻害薬の感受性判定キット。
＜１９＞ １，５－アンヒドログルシトールまたはその誘導体をピラノースオキシダーゼまたはＬ－ソルボースオキシダーゼまたは１，５－アンヒドログルシトール脱水素酵素または１，５－アンヒドログルシトール－６－リン酸脱水素酵素を用いて定量する１，５－アンヒドログルシトール定量用試薬を含む＜１８＞に記載のＳＧＬＴ２阻害薬の感受性判定キット。
＜２０＞ ピラノースオキシダーゼ（ＰＲＯＤ）、ペルオキシダーゼ（ＰＯＤ）および発色試薬を含む、＜１８＞に記載のＳＧＬＴ２阻害薬の感受性判定キット。
＜２１＞ 発色試薬が、４－アミノアンチピリン（４－ＡＡＰ）およびＮ－エチル－Ｎ－（２－ヒドロキシ－３－スルホプロピル）－３－メチルアニリンナトリウム二水和物（ＴＯＯＳ）である、＜２０＞に記載のＳＧＬＴ２阻害薬の感受性判定キット。

【発明の効果】

【0010】

本発明によれば、ＳＧＬＴ２阻害薬の感受性を簡便に判定することができる。

【図面の簡単な説明】

【0011】

【図1】図１は、ＳＧＬＴ２阻害薬の投与前と投与後における１，５－ＡＧ値の度数分布を示す図である。

【図2】図２は、ＳＧＬＴ２阻害薬の有効群と無効群における投与前の１，５－ＡＧ値の箱ひげ図である。

【図3】図３は、ＳＧＬＴ２阻害薬投与前の１，５－ＡＧ値、ＧＡ値、ｅＧＦＲ値をＳＧＬＴ２阻害薬有効群の診断に用いた場合のＲＯＣ曲線である。

【図4】図４は、ＳＧＬＴ２阻害薬投与前の１，５-ＡＧ値を１０μｇ／ｍＬ、７．５μｇ／ｍＬ、５μｇ／ｍＬでわけた場合の、ＨｂＡ１ｃ改善率の箱ひげ図である。

【発明を実施するための形態】

【0012】

以下、本発明について更に詳細に説明する。
本発明によるＳＧＬＴ２阻害薬の感受性を判定する方法は、被験者の生体試料におけるバイオマーカーを測定し、測定されたバイオマーカー値を指標としてＳＧＬＴ２阻害薬の感受性を判定することを含む方法である。

【0013】

被験者としては、特に限定されないが、ＳＧＬＴ２阻害薬の感受性を判定することが必要な被験者が好ましい。ＳＧＬＴ２阻害薬は、現在は糖尿病治療薬として使用されていることから、被験者としては糖尿病患者であることが好ましい。

【0014】

生体試料としては、血液や間質液、唾液、涙、汗、尿など、特に限定されないが、血液や尿などが好ましい。血液としては、いかなる組織由来の血液でもよいが、通常は末梢血が好ましい。血液の採取方法としては常法（例えば静脈採血、指先 刺など）により行うことができる。採取した血液はそのまま使用してもよいし、常法（例えば遠心分離、濾過など）により細胞成分（赤血球、白血球、血小板など）と分離した液体成分（血漿）を使用してもよい。血液を凝固させて血小板や凝固因子を分離した液体成分（血清）を使用してもよい。

【0015】

生体試料としては、ＳＧＬＴ２阻害薬を服用していない被験者のものでもよいし、ＳＧＬＴ２阻害薬を服用している被験者のものでもよい。

【0016】

また、生体試料としては、ＳＧＬＴ２阻害薬以外の糖尿病治療薬を服用している被験者のものでもよいし、ＳＧＬＴ２阻害薬以外の糖尿病治療薬を服用していない被験者のものでもよい。

【0017】

ＳＧＬＴ２阻害薬以外の糖尿病治療薬としては、スルホニル尿素薬（例えばグリベンクラミド、グリクラジド、グリメピリドなど）、ＤＰＰ－４阻害薬（例えばシタグリプチンリン酸塩水和物、ビルタグリプチン、アログリプチン安息香酸塩、リナグリプチン、テネリグリプチン臭化水素酸塩水和物、アナグリプチン、サキサグリプチン水和物、トレラグリプチン水和物、オマリグリプチンなど）、チアゾリジン薬（例えばピオグリタゾン塩酸塩など）、ビグアナイド薬（例えばメトホルミン塩酸塩、ブホルミン塩酸塩など）、速効型インスリン分泌促進薬（例えばナテグリニド、ミチグリニドカルシウム水和物、レパグリニド）、α－グルコシダーゼ阻害薬（例えばアカルボース、ボグリボース、ミグリトールなど）など経口薬のほか、インスリン、ＧＬＰ－１受容体作動薬（例えばリラグルチド、エキセナチドなど）などの注射薬も挙げることができる。上記の中でも、ＳＧＬＴ２阻害薬以外の糖尿病治療薬としては、スルホニル尿素薬、ＤＰＰ－４阻害薬、チアゾリジン薬またはメトホルミンが好ましい。

【0018】

本発明において測定するバイオマーカーとしては、その測定値を指標としてＳＧＬＴ２阻害薬の感受性を判定することができるものであれば特に限定されない。本発明の実施例においては、ＳＧＬＴ２阻害薬の感受性を判定することができるマーカーとして、１，５－アンヒドログルシトールが見出された。

【0019】

バイオマーカーの測定は、常法により行うことができる。バイオマーカーとして、１，５－アンヒドログルシトールを使用する場合には、１，５－アンヒドログルシトールの測定方法は特に限定されず文献公知の方法が使用できるが、例えば特許文献１～３に記載された方法に準じて測定することができる。また１，５－アンヒドログルシトールは、ラナ（登録商標）１，５ＡＧオート リキッド（日本化薬製）およびデタミナー（登録商標）Ｌ １，５－ＡＧ（協和メデックス製）などの市販の診断薬を用いて測定することもできる。またＧｃｅｌｌ １，５－ａｎｈｙｄｒｏｇｌｕｃｉｔｏｌ（北京九強生物技術股▲ ふん▼有限公司）、Ｄｉａｚｙｍｅ １，５－ａｎｈｙｄｒｏｇｌｕｃｉｔｏｌ ａｓｓａｙ（Ｄｉａｚｙｍｅ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ Ｉｎｃ．）等、海外で販売されている診断薬を用いて測定することもできる。

【0020】

ＳＧＬＴ２阻害薬としては、イプラグリフロジンＬ－プロリン（スーグラ（登録商標））、ダパグリフロジンプロピレングリコール水和物（フォシーガ（登録商標））、ルセオグリフロジン水和物（ルセフィ（登録商標））、トホグリフロジン水和物（アプルウェイ（登録商標）、デベルザ（登録商標））、カナグリフロジン水和物（カナグル（登録商標））、エンパグリフロジン（ジャディアンス（登録商標））などを挙げることができる。また、これらＳＧＬＴ２阻害薬と他の糖尿病治療薬との配合剤としては、カナグリフロジン／テネリグリプチン配合錠（テネリア（登録商標））、イプラグリフロジン／シタグリプチン配合錠（スージャヌ（登録商標））、エンパフリグロジン／リナグリプチン配合錠（トラディアンス（登録商標））、などを挙げることができる。さらに、ＳＧＬＴ２と同時にＳＧＬＴ１を阻害するものも含め、ＳＧＬＴ２阻害能を有するものであれば、特に限定されない。

【0021】

本発明においては、測定されたバイオマーカー値を指標としてＳＧＬＴ２阻害薬の感受性を判定する。
本発明において、感受性とは、ＳＧＬＴ２阻害薬の薬効が得られることを意味する。例えば、ＳＧＬＴ２阻害薬を投与した場合のＨｂＡ１ｃ値が投与前におけるＨｂＡ１ｃ値と比較して１０％以上改善する場合には、ＳＧＬＴ２阻害薬に感受性を有すると判定することができる。感受性が低い原因としては、尿糖閾値が高く尿糖が出難い等、患者自身の特性に起因することもあり得るが、腎機能の低下による場合、他の糖尿病治療薬により血糖値が十分改善されている場合等も考えられ、特定の要因によるものに限るものではない。

【0022】

本発明の一例においては、バイオマーカーが、１，５－アンヒドログルシトールであり、生体試料が、ＳＧＬＴ２阻害薬を服用していない被験者の血液であり、測定されたバイオマーカー値が５μｇ／ｍＬ以下である場合に、ＳＧＬＴ２阻害薬の感受性が高いと判定することができ、測定されたバイオマーカー値が７．５～１０μｇ／ｍＬ以上である場合に、ＳＧＬＴ２阻害薬の感受性が低いと判定することができる。

【0023】

本発明の別の例においては、バイオマーカーが、１，５－アンヒドログルシトールであり、生体試料が、ＳＧＬＴ２阻害薬を服用せず、ＳＧＬＴ２阻害薬以外の糖尿病治療薬を服用している被験者の血液で、測定されたバイオマーカー値が５μｇ／ｍＬ以下である場合に、ＳＧＬＴ２阻害薬の感受性が高いと判定することができ、測定されたバイオマーカー値が７．５～１０μｇ／ｍＬ以上である場合に、ＳＧＬＴ２阻害薬の感受性が低いと判定することができる。ただし、この指標とするバイオマーカー値は患者の状態または併用する糖尿病治療薬の種類等により、医師が個々に設定してもよい。

【0024】

本発明のさらに別の例においては、ＳＧＬＴ２阻害薬の服用の後におけるバイオマーカー値を指標にしてＳＧＬＴ２阻害薬の感受性を判定することができる。即ち、ＳＧＬＴ２阻害薬の服用開始の１週間後またはそれ以降における１，５－アンヒドログルシトール値を指標にしてＳＧＬＴ２阻害薬の感受性を判定することができる。例えば、ＳＧＬＴ２阻害薬の服用開始の１週間後またはそれ以降における１，５－アンヒドログルシトール値が、２μｇ／ｍＬ以上である場合に、ＳＧＬＴ２阻害薬の感受性が低いと判定することができる。

【0025】

本発明のさらに別の例においては、ＳＧＬＴ２阻害薬の服用の開始後におけるバイオマーカー値の変化を指標にして、被験者におけるＳＧＬＴ２阻害薬の効果が減弱していることを判定することができる。ＳＧＬＴ２阻害薬の服用により、例えば２μｇ／ｍＬ未満であった１，５－アンヒドログルシトール値が、２μｇ／ｍＬ以上に上昇した場合に、ＳＧＬＴ２阻害薬の効果が減弱していることを判定することができる。このバイオマーカー値は、患者の状態等により、医師が個々に設定すればよい。効果の減弱は、尿糖閾値や腎機能等患者の状態変化による場合、他の糖尿病治療薬の影響、薬の服用忘れ等、様々な原因によりもたらされるものであり、その原因は特に限定されるものではない。

【0026】

本発明によれば、測定したバイオマーカー値を指標にすることにより、ＳＧＬＴ２阻害薬の感受性を判定することができる。従って、本発明によれば、ＳＧＬＴ２阻害薬による効果を期待できる被験者を効率的に選別することができる。その結果、ＳＧＬＴ２阻害薬による治療を適切に行うことができる被験者に、ＳＧＬＴ２阻害薬を投与することができる。

【0027】

本発明において、ＳＧＬＴ２阻害薬の感受性を有すると判定された場合には、被験者に対してＳＧＬＴ２阻害薬を投与することが好ましい。

【0028】

本発明において、ＳＧＬＴ２阻害薬の感受性を有さないと判定された場合には、ＳＧＬＴ２阻害薬の効果を期待することができず、効果が期待できないＳＧＬＴ２阻害薬の投与を続けた場合には、副作用の増大が懸念される。本発明によるＳＧＬＴ２阻害薬の感受性の判定方法は、そのようなＳＧＬＴ２阻害薬の投与に伴う副作用の増大を防ぐことにも貢献する。

【0029】

［ＳＧＬＴ２阻害薬の感受性判定キット］
本発明はさらに、上記した本発明によるＳＧＬＴ２阻害薬の感受性を判定する方法において使用するためのＳＧＬＴ２阻害薬の感受性判定キットに関する。該キットとしては、１，５－アンヒドログルシトール定量用試薬を含むキットが挙げられる。該１，５－アンヒドログルシトール定量法としては、例えば酵素比色法、電気化学法などが知られている。即ち、１，５－アンヒドログルシトールまたはその誘導体をピラノースオキシダーゼ（ＰＲＯＤ）またはＬ－ソルボースオキシダーゼまたは１，５－アンヒドログルシトール脱水素酵素または１，５－アンヒドログルシトール－６－リン酸脱水素酵素等を使用して１，５－アンヒドログルシトールを定量する。さらにペルオキシダーゼ（ＰＯＤ）を使用してもよい。また発色試薬を用いてもよく、該発色試薬としては、以下の表に示す酸化カップリング発色型色原体、酸化発色型色原体、還元発色型色原体を使用することができる。酸化カップリング発色型色原体の例としては、表１と表２であり、表１に記載の色素のいずれかと表２に記載の色素のいずれかを組み合わせて使用することができる。または、酸化発色型色原体、還元発色型色原体としては、例として表３、表４に記載の色素を使用することができる。
電気化学法では電子メディエーターを使用してもよく、該電子メディエーターとしては、例えば特開２０１７－１３４０６３に記載のようにフェリシアン系化物、キノン系化合物、オスミウム錯体またはそのポリマー体、フェロセン系化合物、フェノチアジン系化合物、フェノキサジン系化合物、フェナジン系化合物、インドフェノール系化合物、ジフェニルアミン系化合物又はフェノール系化合物が挙げられる。

【0030】

【表1】

【0031】

【表2】

【0032】

【表3】

【0033】

【表4】

【0034】

本発明のＳＧＬＴ２阻害薬の感受性判定キットには、上記の酵素、発色試薬または電子メディエーターが適宜選ばれて含まれていればよい。

【0035】

即ち、１，５－ＡＧの酸化酵素としてＰＲＯＤを用いて１，５－ＡＧの２位の水酸基を酸化し、発生する過酸化水素を、ＰＯＤを用いる比色法で検出する発色試薬を含むキットが好ましい。該発色試薬としては、過酸化水素の検出に使用される公知の試薬が挙げられ、例えば、４－アミノアンチピリン（４－ＡＡＰ）およびＮ－エチル－Ｎ－（２－ヒドロキシ－３－スルホプロピル）－３－メチルアニリンナトリウム二水和物（ＴＯＯＳ）の使用が好ましい。

【0036】

本発明のキットには、必要により上記以外の構成要素が含まれていてもよい。上記以外の構成要素としては、例えば、ポジティブコントロール、ネガティブコントロール、キャリブレーション用標準溶液、本発明のキットを使用して１，５－ＡＧを測定する方法を記載した取扱説明書などが挙げられる。更に、ＳＧＬＴ２阻害薬の感受性の判定方法に関する説明書または添付文書が含まれることが好ましい。

【0037】

本発明によれば、上記のＳＧＬＴ２阻害薬の感受性判定キットを使用して、被験者の生体試料における１，５－アンヒドログルシトールを測定し、測定された１，５－アンヒドログルシトール値を指標としてＳＧＬＴ２阻害薬の感受性を判定することができる。

【0038】

以下の実施例により本発明をさらに具体的に説明するが、本発明は実施例によって限定されるものではない。

【実施例】

【0039】

実施例１：
外来で通院中の２型糖尿病合併の冠動脈疾患患者で、経口血糖降下薬のみでは十分な血糖管理が得られない３０例（男性２８例・女性２例、平均年齢７０．５±８．１歳）を対象とした。投与前の随時尿糖が陽性の患者は対象外とした。ＳＧＬＴ２阻害薬（イプラグリフロジン５０ｍｇ：３０例）を単独あるいは他の経口血糖降下薬に追加して３ヶ月間投与した。追加投与群の併用糖尿病治療薬の内訳は、ＳＵ薬１０例、ＤＰＰ－４阻害薬１９例、チアゾリジン９例、メトホルミン４例であり、平均併用薬数は２．４種類であった。
観察期間中、他の糖尿病治療薬は変更しなかった。

【0040】

ＳＧＬＴ２阻害薬投与前および投与３ヶ月後に、１，５－ＡＧ、ＨｂＡ１ｃ、随時尿糖（Ｕ－Ｓｕｇａｒ）、ＬＤＬコレステロール（ＬＤＬ－Ｃ）、ヘマトクリット（Ｈｔ）、ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰ、ｅＧＦＲ（推算糸球体濾過値）を測定し、各指標の投与前後の変化を検討した。また、ＳＧＬＴ２阻害薬投与前の１，５－ＡＧ値が１３μｇ／ｍＬ未満の症例（男性１９例）について、各指標の投与前後の変化を検討した。

【0041】

１，５－ＡＧは酵素法（前記のラナ１，５ＡＧオート リキッド、日本化薬株式会社製）、ＨｂＡ１ｃはＨＰＬＣ法（東ソー株式会社製）、随時尿糖は試験紙法（栄研化学株式会社製）、ＬＤＬコレステロールは酵素法（積水メディカル株式会社製）、ＮＴ－ｐｒｏＢＮＰはＥＬＣ－ＥＩＡ法（ロシュ・ダイアグノスティックス株式会社製）で測定した。

【0042】

測定の結果を、表５及び表６、図１に示す。
表５及び表６において、結果はｍｅａｎ±ＳＤで示し、統計解析は対応のあるｔ検定を行い、ｐ＜０．０５を統計学的に有意とした。

【0043】

【表5】

【0044】

【表6】

【0045】

上記の結果からＳＧＬＴ２阻害薬の非投与時における１，５－ＡＧの測定意義としては以下を挙げることができる。
（１）薬物治療開始時または変更時の短期間の治療効果の判定
（２）ＨｂＡ１ｃが良好な患者の食後高血糖（食事後に血糖値が異常に上昇すること）の把握
（３）食後高血糖を改善する薬剤の治療効果の判定

【0046】

またＳＧＬＴ２阻害薬の投与時における１，５－ＡＧの測定意義としては以下を挙げることができる。
（１）投与１週間後の１，５－ＡＧ測定による薬効の確認
投与１週間後の１，５－ＡＧ値が１μｇ／ｍＬ付近まで低下していれば、尿糖排泄が行われており、ＳＧＬＴ２阻害薬の効果があると判断できる。
（２）服用中の１，５－ＡＧの上昇
血中１，５－ＡＧ値の上昇は、腎尿細管での再吸収を示すので、ＳＧＬＴ２以外における糖の再吸収亢進など、薬剤効果の減弱の可能性が考えられる。
（３）過食の可能性
１，５－ＡＧ低値が持続しているにも関わらず、ＨｂＡ１ｃが悪化している場合には、過食の可能性も考えられる。

【0047】

実施例２：
単独あるいは他の血糖降下薬に追加してＳＧＬＴ２阻害薬を新規に投与された２型糖尿病患者１４９例（男性８２例・女性６７例、平均年齢５６．７±１３．４歳）を対象とし、投与後３２週間の経過を後ろ向きに観察した。患者背景と併用薬剤は表７及び表８に示した通りであり、平均併用薬数は２．６剤であった。経過中のすべての薬剤投与において、開始・変更・中止は主治医の判断に任されている。

【0048】

投与開始３２週までの間にＨｂＡ１ｃが投与前値と比して１０％以上改善し、薬剤の増量がなかった群を有効群、ＨｂＡ１ｃが投与前値と比して１０％未満の改善にとどまったか、ＳＵ薬やインスリンの増量を必要とした群を無効群とし、２群間の臨床指標の差異を検討した。

【0049】

評価項目として、年齢・性別・体重・ＨｂＡ１ｃ・グリコアルブミン・１，５－ＡＧ・肝機能・脂質・ｅＧＦＲ・尿中アルブミン・糖尿病薬以外の併用薬についてカルテ上から情報を収集した。体重測定・採血・尿検査は外来毎に施行していた。グリコアルブミン、１，５－ＡＧは検査会社（株式会社ビー・エム・エル）で測定し、他の項目は院内で測定した。
結果はｍｅａｎ±ＳＤで示し、２群間の比較についての統計解析は対応のあるｔ検定を行い、ｐ＜０．００１を統計学的に有意とした。

【0050】

【表7】

【0051】

【表8】

【0052】

その結果を表９、及び図２～４に示す。有効群は、無効群と比べて、投与前のグリコアルブミン（ＧＡ）が有意に高く、投与前の１，５－ＡＧが有意に低値であった。年齢やＢＭＩ、ｅＧＦＲとの有意な相関は認められなかった。また、有効群では、ＡＬＴ（アラニンアミノトランスフェラーゼ）、γＧＴＰ（γ－グルタミルトランスペプチダーゼ）も有意な改善を認めていた。ＲＯＣ曲線からは投与前の１，５－ＡＧが、効果判定の最も有意な指標と考えられ、ＧＡをマッチさせても、１，５－ＡＧはＳＧＬＴ２阻害薬投与における効果判定の有意な指標であった。食事療法励行下においても、ＳＧＬＴ２阻害薬投与前に１，５－ＡＧを測定することにより、データ改善が期待できる患者を予測できると考えられる。またＳＧＬＴ２阻害薬服用１年後の１，５－ＡＧ値が２μｇ／ｍＬ以上の患者１７名のＨｂＡ１ｃ値は平均で７．１８であり、投与前７．８２から０．６４の改善であった。同様に１年後の１，５－ＡＧ値が２．５μｇ／ｍＬ以上の患者１０名のＨｂＡ１ｃは、服用前７．４０から７．１５の０．２５の改善に留まった。

【0053】

【表9】

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】