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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】特許公報(B2)
(11)【特許番号】
(24)【登録日】2023-11-24
(45)【発行日】2023-12-04
(54)【発明の名称】ピリミジン化合物の結晶
(51)【国際特許分類】
C07D 487/04 20060101AFI20231127BHJP
A61K 31/519 20060101ALI20231127BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20231127BHJP
【ＦＩ】
C07D487/04 140
C07D487/04 CSP
A61K31/519 ZNA
A61P35/00
【請求項の数】
23
(21)【出願番号】P 2022536418
(86)(22)【出願日】2021-07-14
(86)【国際出願番号】 JP2021026460
(87)【国際公開番号】W WO2022014638
(87)【国際公開日】2022-01-20
【審査請求日】2023-01-13
(31)【優先権主張番号】P 2020121520
(32)【優先日】2020-07-15
(33)【優先権主張国・地域又は機関】JP
(73)【特許権者】
【識別番号】000207827
【氏名又は名称】大鵬薬品工業株式会社
(74)【代理人】
【識別番号】100092783
【弁理士】
【氏名又は名称】小林 浩
(74)【代理人】
【識別番号】100120134
【弁理士】
【氏名又は名称】大森 規雄
(74)【代理人】
【識別番号】100194423
【弁理士】
【氏名又は名称】植竹 友紀子
(72)【発明者】
【氏名】中村 浩之
(72)【発明者】
【氏名】山中 博義
(72)【発明者】
【氏名】浅井 隆宏
【審査官】安藤 倫世
(56)【参考文献】
【文献】国際公開第２０１７／０３８８３８（ＷＯ，Ａ１）
【文献】国際公開第２０１３／１１８８１７（ＷＯ，Ａ１）
【文献】国際公開第２０１０／０６５８９８（ＷＯ，Ａ１）
【文献】国際公開第２０２０／１４５３７４（ＷＯ，Ａ１）
【文献】国際公開第２０２２／０１４６３９（ＷＯ，Ａ１）
【文献】国際公開第２０２２／０１４６４０（ＷＯ，Ａ１）
(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)
Ｃ０７Ｄ
Ａ６１Ｋ
ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ）
(57)【特許請求の範囲】
【請求項1】
粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、５．５°，６．８°，９．３°，１３．４°，１５．３°，１６．３°，１８．５°，１９．８°，２２．０°及び２４．５°から選択される３つ以上にピークを有する、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドのフマル酸とのＩＩ型結晶であって、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドとフマル酸のモル比が１：１である、結晶。【請求項2】
粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、５．５°，６．８°，９．３°，１３．４°，１５．３°，１６．３°，１８．５°，１９．８°，２２．０°及び２４．５°にピークを有する、請求項１に記載の結晶。【請求項3】
図１に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有する結晶である、請求項１又は２に記載の結晶。【請求項4】
示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピークが１７８℃付近である、請求項１～３のいずれか１項に記載の結晶。【請求項5】
粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、８．３°，１４．８°，１７．３°，１８．０°，１９．１°，２０．３°，２１．０°，２２．５°，２３．０°及び２６．２°から選択される３つ以上にピークを有する、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドのＩＩ型結晶。【請求項6】
粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、８．３°，１４．８°，１７．３°，１８．０°，１９．１°，２０．３°，２１．０°，２２．５°，２３．０°及び２６．２°にピークを有する、請求項５に記載の結晶。【請求項7】
図３に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有する結晶である、請求項５又は６に記載の結晶。【請求項8】
示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピークが１８２℃付近である、請求項５～７のいずれか１項に記載の結晶。【請求項9】
粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、９．９°，１１．７°，１３．２°，１７．７°，１８．１°，１８．８°及び２０．８°から選択される３つ以上にピークを有する、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドのＩ型結晶。【請求項10】
粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、９．９°，１１．７°，１３．２°，１７．７°，１８．１°，１８．８°及び２０．８°にピークを有する、請求項９に記載の結晶。【請求項11】
図５に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有する結晶である、請求項９又は１０に記載の結晶。【請求項12】
示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピークが１８３℃付近である、請求項９～１１のいずれか１項に記載の結晶。【請求項13】
粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、６．９°，９．４°，１０．２°，１３．７°，２１．１°，２３．６°及び２６．５°から選択される４つ以上にピークを有する、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドのフマル酸とのＶ型結晶であって、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドとフマル酸のモル比が１：１である、結晶。【請求項14】
粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、６．９°，９．４°，１０．２°，１３．７°，２１．１°，２３．６°及び２６．５°にピークを有する、請求項１３に記載の結晶。【請求項15】
図７に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有する結晶である、請求項１３又は１４に記載の結晶。【請求項16】
示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピークが１５１℃付近である、請求項１３～１５のいずれか１項に記載の結晶。【請求項17】
粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、６．４°，１０．３°，１２．８°，１５．０°，２０．７°，２３．４°及び２６．６°から選択される４つ以上にピークを有する、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドのフマル酸とのＩ型結晶であって、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドとフマル酸のモル比が１：１である、結晶。【請求項18】
粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、６．４°，１０．３°，１２．８°，１５．０°，２０．７°，２３．４°及び２６．６°にピークを有する、請求項１７に記載の結晶。【請求項19】
図９に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有する結晶である、請求項１７又は１８に記載の結晶。【請求項20】
示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピークが１５３℃付近である、請求項１７～１９のいずれか１項に記載の結晶。【請求項21】
請求項１～２０のいずれか１項に記載の結晶を含有する、医薬組成物。【請求項22】
請求項１～２０のいずれか１項に記載の結晶を含有する、経口投与用の医薬組成物。【請求項23】
請求項１～２０のいずれか１項に記載の結晶を含有する、抗腫瘍剤。【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、抗腫瘍剤として有用なピリミジン化合物の結晶及び当該結晶を含む医薬組成物に関する。
【背景技術】
【0002】
ＨＥＲ２（ＥｒｂＢ２とも呼ばれる）は、ＥｒｂＢファミリーに属する受容体型チロシンキナーゼである。
ＨＥＲ２は、がん原因遺伝子として考えられ、ＨＥＲ２の遺伝子増幅や過剰発現、変異等が様々ながんで報告されている。非臨床・臨床研究データから、これらＨＥＲ２の遺伝子異常・過剰発現等を伴うがん細胞において、ＨＥＲ２及び下流シグナルの活性化が、がん細胞の生存・増殖等において重要な役割を担っていると考えられている（非特許文献１）。
従って、ＨＥＲ２のキナーゼ活性を制御できる阻害剤は、ＨＥＲ２の遺伝子増幅や過剰発現、変異を有するがん細胞において、ＨＥＲ２及び下流シグナル伝達を阻害することにより抗腫瘍効果を発揮することが想定されるため、がん患者の治療、延命やＱＯＬ向上に有用であると考えられる。
ＨＥＲ２は、がん原因遺伝子として考えられ、ＨＥＲ２の遺伝子増幅や過剰発現、変異等が様々ながんで報告されている。非臨床・臨床研究データから、これらＨＥＲ２の遺伝子異常・過剰発現等を伴うがん細胞において、ＨＥＲ２及び下流シグナルの活性化が、がん細胞の生存・増殖等において重要な役割を担っていると考えられている（非特許文献１）。
従って、ＨＥＲ２のキナーゼ活性を制御できる阻害剤は、ＨＥＲ２の遺伝子増幅や過剰発現、変異を有するがん細胞において、ＨＥＲ２及び下流シグナル伝達を阻害することにより抗腫瘍効果を発揮することが想定されるため、がん患者の治療、延命やＱＯＬ向上に有用であると考えられる。
【0003】
肺癌では約２５－４０％、乳癌では約１５－３０％、その他複数のがんにおいても一定の割合で脳転移を生じるとの報告がある（非特許文献２、３）。実際に、ＨＥＲ２陽性の乳癌では、約２０－３０％が脳転移を生じるとの報告がある（非特許文献４）。
【0004】
ＨＥＲ２阻害活性を有する化合物としては、ラパチニブ（Ｌａｐａｔｉｎｉｂ）、ネラチニブ（Ｎｅｒａｔｉｎｉｂ）などがＨＥＲ２陽性乳癌に対する治療剤として承認されている。しかしながら、いずれもｐ－ｇｐ、Ｂｃｒｐの基質であることから、非臨床試験では脳移行性は限定的であるとの報告がある（非特許文献５）。実際に、ラパチニブやネラチニブの臨床試験において、脳転移がんに対する十分な効果は得られていない（非特許文献６、７、８、９）。
脳転移巣も含めた病態のコントロールという観点から、ＨＥＲ２に対して阻害活性を持ち、かつ、脳移行性も有するＨＥＲ２阻害剤が望まれている。
脳転移巣も含めた病態のコントロールという観点から、ＨＥＲ２に対して阻害活性を持ち、かつ、脳移行性も有するＨＥＲ２阻害剤が望まれている。
【0005】
また、一般的に、医薬品の有効活性成分として化合物が使用されるとき、品質を安定に保持するために及び／又は保管管理を容易にするために、化合物の化学的及び物理学的な安定性が必要である。このため、化学的及び物理学的な安定性を有し、ＨＥＲ２に対して阻害活性を持ち、かつ、脳移行性も有するＨＥＲ２阻害剤が望まれている。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【0006】
【文献】Ｃａｎｃｅｒ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ Ｒｅｖｉｅｗｓ，４０，ｐ．７７０－７８０（２０１４）
【文献】Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，２５，ｐ．Ｓ１０３－Ｓ１１４（２０１８）
【文献】Ｂｒｅａｓｔ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓｅａｃｈ，１８（１），８，ｐ．１－９（２０１６）
【文献】Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，２８，ｐ３２７１－３２７７（２０１０）
【文献】Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，５９，ｐ１００３０－１００６６（２０１６）
【文献】Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２６，ｐ２９９９－３００５（２００８）
【文献】Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，２６，ｐ１９９３－１９９９（２００８）
【文献】Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，２８，ｐ１３０１－１３０７（２０１０）
【文献】Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，３４，ｐ９４５－９５２（２０１６）
【発明の概要】
【0007】
本発明は、化学的及び物理学的な安定性を有し、ＨＥＲ２に対して阻害活性を持ち、かつ、脳移行性も有するＨＥＲ２阻害剤を提供することを目的とする。特に本発明は、安定性に優れ、経口吸収性が良好で、かつ、再現性良く取得可能なＨＥＲ２阻害剤の結晶を提供することを目的とする。
【0008】
本発明者らは、上記の課題を解決すべく鋭意研究を行ったところ、下記式（Ｉ）で表される７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミド（以下、「化合物（Ｉ）」ともいう）が、ＨＥＲ２阻害活性及び脳移行性を有し、ＨＥＲ２を阻害することによりＨＥＲ２が関与する疾患（特に、悪性腫瘍）の治療剤として有用であることを見出した。
【0009】
【化1】
【0010】
そして、本発明者らは、化合物（Ｉ）にはフリー体として２つの結晶形（Ｉ型結晶、ＩＩ型結晶）、及び酸との結晶（塩体の結晶又は共結晶）として、塩酸との結晶（塩酸とのＩ型結晶、塩酸とのＩＩ型結晶、塩酸とのＩＩＩ型結晶）、臭化水素酸との結晶、１当量の酒石酸との結晶、フマル酸との結晶（０．５当量のフマル酸とのＩ型結晶、０．５当量のフマル酸とのＩＩ型結晶、１当量のフマル酸とのＩ型結晶、１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶、１当量のフマル酸とのＩＩＩ型結晶、１当量のフマル酸とのＩＶ型結晶、１当量のフマル酸とのＶ型結晶）、コハク酸との結晶を見出した。
その結晶形のうちフリー体Ｉ型結晶、フリー体ＩＩ型結晶、１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶、１当量のフマル酸とのＶ型結晶それぞれにおいて、非吸湿性で優れた固体安定性があるという医薬品製造において有利な性質を見出し、また経口吸収性に優れること等を見出し、本発明を完成させた。
その結晶形のうちフリー体Ｉ型結晶、フリー体ＩＩ型結晶、１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶、１当量のフマル酸とのＶ型結晶それぞれにおいて、非吸湿性で優れた固体安定性があるという医薬品製造において有利な性質を見出し、また経口吸収性に優れること等を見出し、本発明を完成させた。
【0011】
すなわち、本発明は、下記の実施形態を含む。
〔１〕 粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、５．５°，６．８°，９．３°，１３．４°，１５．３°，１６．３°，１８．５°，１９．８°，２２．０°及び２４．５°から選択される３つ以上にピークを有する、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドのフマル酸とのＩＩ型結晶であって、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドとフマル酸のモル比が１：１である、結晶。
〔２〕 粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、５．５°，６．８°，９．３°，１３．４°，１５．３°，１６．３°，１８．５°，１９．８°，２２．０°及び２４．５°にピークを有する、〔１〕に記載の結晶。
〔３〕 図１に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有する結晶である、〔１〕又は〔２〕に記載の結晶。
〔４〕 示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピークが１７８℃付近である、〔１〕～〔３〕のいずれか１項に記載の結晶。
〔５〕 結晶の純度が９０質量％以上である、〔１〕～〔４〕のいずれかに記載の結晶。
〔６〕 粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、８．３°，１４．８°，１７．３°，１８．０°，１９．１°，２０．３°，２１．０°，２２．５°，２３．０°及び２６．２°から選択される３つ以上にピークを有する、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドのＩＩ型結晶。
〔７〕 粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、８．３°，１４．８°，１７．３°，１８．０°，１９．１°，２０．３°，２１．０°，２２．５°，２３．０°及び２６．２°にピークを有する、〔６〕に記載の結晶。
〔８〕 図３に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有する結晶である、〔６〕又は〔７〕に記載の結晶。
〔９〕 示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピークが１８２℃付近である、〔６〕～〔８〕のいずれかに記載の結晶。
〔１０〕 結晶の純度が９０質量％以上である、〔６〕～〔９〕のいずれかに記載の結晶。
〔１１〕 粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、９．９°，１１．７°，１３．２°，１７．７°，１８．１°，１８．８°及び２０．８°から選択される４つ以上にピークを有する、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドのＩ型結晶。
〔１２〕 粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、９．９°，１１．７°，１３．２°，１７．７°，１８．１°，１８．８°及び２０．８°にピークを有する、〔１１〕に記載の結晶。
〔１３〕 図５に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有する結晶である、〔１１〕又は〔１２〕に記載の結晶。
〔１４〕 示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピークが１８３℃付近である、〔１１〕～〔１３〕のいずれかに記載の結晶。
〔１５〕 結晶の純度が９０質量％以上である〔１１〕～〔１４〕のいずれかに記載の結晶。
〔１６〕 粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、６．９°，９．４°，１０．２°，１３．７°，２１．１°，２３．６°及び２６．５°から選択される４つ以上にピークを有する、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドのフマル酸とのＶ型結晶であって、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドとフマル酸のモル比が１：１である、結晶。
〔１７〕 粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、６．９°，９．４°，１０．２°，１３．７°，２１．１°，２３．６°及び２６．５°にピークを有する、〔１６〕に記載の結晶。
〔１８〕 図７に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有する結晶である、〔１６〕又は〔１７〕に記載の結晶。
〔１９〕 示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピークが１５１℃付近である、〔１６〕～〔１８〕のいずれかに記載の結晶。
〔２０〕 結晶の純度が９０質量％以上である、〔１６〕～〔１９〕のいずれかに記載の結晶。
〔２１〕 粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、６．４°，１０．３°，１２．８°，１５．０°，２０．７°，２３．４°及び２６．６°から選択される４つ以上にピークを有する、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドのフマル酸とのＩ型結晶であって、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドとフマル酸のモル比が１：１である、結晶。
〔２２〕 粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、６．４°，１０．３°，１２．８°，１５．０°，２０．７°，２３．４°及び２６．６°にピークを有する、〔２１〕に記載の結晶。
〔２３〕 図９に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有する結晶である、〔２１〕又は〔２２〕に記載の結晶。
〔２４〕 示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピークが１５３℃付近である、〔２１〕～〔２３〕のいずれかに記載の結晶。
〔２５〕 結晶の純度が９０質量％以上である、〔２１〕～〔２４〕のいずれかに記載の結晶。
〔２６〕 粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、６．４°，７．５°，９．７°，１１．７°，１５．１°，１９．６°及び２３．９°から選択される４つ以上にピークを有する、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドのフマル酸とのＩ型結晶であって、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドとフマル酸のモル比が１：０．５である、結晶。
〔２７〕 粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、６．４°，７．５°，９．７°，１１．７°，１５．１°，１９．６°及び２３．９°にピークを有する、〔２６〕に記載の結晶。
〔２８〕 図１１に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有する結晶である、〔２６〕又は〔２７〕に記載の結晶。
〔２９〕 示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピークが１６１℃付近である、〔２６〕～〔２８〕のいずれかに記載の結晶。
〔３０〕 結晶の純度が９０質量％以上である、〔２６〕～〔２９〕のいずれかに記載の結晶。
〔３１〕 粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、５．４°，６．４°，７．３°，１２．８°，１３．４°，１４．７°及び１５．４°から選択される４つ以上にピークを有する、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドのフマル酸とのＩＩ型結晶であって、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドとフマル酸のモル比が１：０．５である、結晶。
〔３２〕 粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、５．４°，６．４°，７．３°，１２．８°，１３．４°，１４．７°及び１５．４°にピークを有する、〔３１〕に記載の結晶。
〔３３〕 図１３に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有する結晶である、〔３１〕又は〔３２〕に記載の結晶。
〔３４〕 示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピークが１６２℃付近である、〔３１〕～〔３３〕のいずれかに記載の結晶。
〔３５〕 結晶の純度が９０質量％以上である、〔３１〕～〔３４〕のいずれかに記載の結晶。
〔３６〕〔１〕～〔３５〕のいずれかに記載の結晶を含有する医薬組成物。
〔３７〕〔１〕～〔３５〕のいずれかに記載の結晶を含有する経口投与用の医薬組成物。
〔３８〕〔１〕～〔３５〕のいずれかに記載の結晶を含有する抗腫瘍剤。
〔３９〕 医薬として使用するための〔１〕～〔３５〕のいずれかに記載の結晶。
〔４０〕 経口投与用の抗腫瘍剤を製造するための〔１〕～〔３５〕のいずれかに記載の結晶の使用。
〔４１〕 腫瘍の治療に使用するための〔１〕～〔３５〕のいずれかに記載の結晶。
〔４２〕 経口投与して腫瘍の治療に使用するための〔１〕～〔３５〕のいずれかに記載の結晶。
〔４３〕 腫瘍の治療方法であって、それを必要とする対象に、〔１〕～〔３５〕のいずれかに記載の結晶の有効量を投与することを含む、方法。
〔４４〕 医薬組成物を製造するための〔１〕～〔３５〕のいずれかに記載の結晶の使用。
〔４５〕 抗腫瘍剤を製造するための〔１〕～〔３５〕のいずれかに記載の結晶の使用。
〔１〕 粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、５．５°，６．８°，９．３°，１３．４°，１５．３°，１６．３°，１８．５°，１９．８°，２２．０°及び２４．５°から選択される３つ以上にピークを有する、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドのフマル酸とのＩＩ型結晶であって、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドとフマル酸のモル比が１：１である、結晶。
〔２〕 粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、５．５°，６．８°，９．３°，１３．４°，１５．３°，１６．３°，１８．５°，１９．８°，２２．０°及び２４．５°にピークを有する、〔１〕に記載の結晶。
〔３〕 図１に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有する結晶である、〔１〕又は〔２〕に記載の結晶。
〔４〕 示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピークが１７８℃付近である、〔１〕～〔３〕のいずれか１項に記載の結晶。
〔５〕 結晶の純度が９０質量％以上である、〔１〕～〔４〕のいずれかに記載の結晶。
〔６〕 粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、８．３°，１４．８°，１７．３°，１８．０°，１９．１°，２０．３°，２１．０°，２２．５°，２３．０°及び２６．２°から選択される３つ以上にピークを有する、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドのＩＩ型結晶。
〔７〕 粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、８．３°，１４．８°，１７．３°，１８．０°，１９．１°，２０．３°，２１．０°，２２．５°，２３．０°及び２６．２°にピークを有する、〔６〕に記載の結晶。
〔８〕 図３に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有する結晶である、〔６〕又は〔７〕に記載の結晶。
〔９〕 示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピークが１８２℃付近である、〔６〕～〔８〕のいずれかに記載の結晶。
〔１０〕 結晶の純度が９０質量％以上である、〔６〕～〔９〕のいずれかに記載の結晶。
〔１１〕 粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、９．９°，１１．７°，１３．２°，１７．７°，１８．１°，１８．８°及び２０．８°から選択される４つ以上にピークを有する、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドのＩ型結晶。
〔１２〕 粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、９．９°，１１．７°，１３．２°，１７．７°，１８．１°，１８．８°及び２０．８°にピークを有する、〔１１〕に記載の結晶。
〔１３〕 図５に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有する結晶である、〔１１〕又は〔１２〕に記載の結晶。
〔１４〕 示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピークが１８３℃付近である、〔１１〕～〔１３〕のいずれかに記載の結晶。
〔１５〕 結晶の純度が９０質量％以上である〔１１〕～〔１４〕のいずれかに記載の結晶。
〔１６〕 粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、６．９°，９．４°，１０．２°，１３．７°，２１．１°，２３．６°及び２６．５°から選択される４つ以上にピークを有する、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドのフマル酸とのＶ型結晶であって、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドとフマル酸のモル比が１：１である、結晶。
〔１７〕 粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、６．９°，９．４°，１０．２°，１３．７°，２１．１°，２３．６°及び２６．５°にピークを有する、〔１６〕に記載の結晶。
〔１８〕 図７に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有する結晶である、〔１６〕又は〔１７〕に記載の結晶。
〔１９〕 示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピークが１５１℃付近である、〔１６〕～〔１８〕のいずれかに記載の結晶。
〔２０〕 結晶の純度が９０質量％以上である、〔１６〕～〔１９〕のいずれかに記載の結晶。
〔２１〕 粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、６．４°，１０．３°，１２．８°，１５．０°，２０．７°，２３．４°及び２６．６°から選択される４つ以上にピークを有する、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドのフマル酸とのＩ型結晶であって、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドとフマル酸のモル比が１：１である、結晶。
〔２２〕 粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、６．４°，１０．３°，１２．８°，１５．０°，２０．７°，２３．４°及び２６．６°にピークを有する、〔２１〕に記載の結晶。
〔２３〕 図９に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有する結晶である、〔２１〕又は〔２２〕に記載の結晶。
〔２４〕 示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピークが１５３℃付近である、〔２１〕～〔２３〕のいずれかに記載の結晶。
〔２５〕 結晶の純度が９０質量％以上である、〔２１〕～〔２４〕のいずれかに記載の結晶。
〔２６〕 粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、６．４°，７．５°，９．７°，１１．７°，１５．１°，１９．６°及び２３．９°から選択される４つ以上にピークを有する、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドのフマル酸とのＩ型結晶であって、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドとフマル酸のモル比が１：０．５である、結晶。
〔２７〕 粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、６．４°，７．５°，９．７°，１１．７°，１５．１°，１９．６°及び２３．９°にピークを有する、〔２６〕に記載の結晶。
〔２８〕 図１１に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有する結晶である、〔２６〕又は〔２７〕に記載の結晶。
〔２９〕 示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピークが１６１℃付近である、〔２６〕～〔２８〕のいずれかに記載の結晶。
〔３０〕 結晶の純度が９０質量％以上である、〔２６〕～〔２９〕のいずれかに記載の結晶。
〔３１〕 粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、５．４°，６．４°，７．３°，１２．８°，１３．４°，１４．７°及び１５．４°から選択される４つ以上にピークを有する、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドのフマル酸とのＩＩ型結晶であって、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドとフマル酸のモル比が１：０．５である、結晶。
〔３２〕 粉末Ｘ線回折スペクトルにおいて、回折角（２θ±０．２°）が、５．４°，６．４°，７．３°，１２．８°，１３．４°，１４．７°及び１５．４°にピークを有する、〔３１〕に記載の結晶。
〔３３〕 図１３に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有する結晶である、〔３１〕又は〔３２〕に記載の結晶。
〔３４〕 示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピークが１６２℃付近である、〔３１〕～〔３３〕のいずれかに記載の結晶。
〔３５〕 結晶の純度が９０質量％以上である、〔３１〕～〔３４〕のいずれかに記載の結晶。
〔３６〕〔１〕～〔３５〕のいずれかに記載の結晶を含有する医薬組成物。
〔３７〕〔１〕～〔３５〕のいずれかに記載の結晶を含有する経口投与用の医薬組成物。
〔３８〕〔１〕～〔３５〕のいずれかに記載の結晶を含有する抗腫瘍剤。
〔３９〕 医薬として使用するための〔１〕～〔３５〕のいずれかに記載の結晶。
〔４０〕 経口投与用の抗腫瘍剤を製造するための〔１〕～〔３５〕のいずれかに記載の結晶の使用。
〔４１〕 腫瘍の治療に使用するための〔１〕～〔３５〕のいずれかに記載の結晶。
〔４２〕 経口投与して腫瘍の治療に使用するための〔１〕～〔３５〕のいずれかに記載の結晶。
〔４３〕 腫瘍の治療方法であって、それを必要とする対象に、〔１〕～〔３５〕のいずれかに記載の結晶の有効量を投与することを含む、方法。
〔４４〕 医薬組成物を製造するための〔１〕～〔３５〕のいずれかに記載の結晶の使用。
〔４５〕 抗腫瘍剤を製造するための〔１〕～〔３５〕のいずれかに記載の結晶の使用。
【0012】
本発明の化合物（Ｉ） ７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドのフリー体Ｉ型結晶、フリー体ＩＩ型結晶、１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶、１当量のフマル酸とのＶ型結晶は、高い安定性、取り扱い性（より低い吸湿性）、品質管理性等の観点から、他の結晶形と比較して優れている。さらにフリー体ＩＩ型結晶、１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶は、経口吸収性に優れており、該化合物を医薬品用の原薬として使用する際の有用な形態である。また、１当量のフマル酸とのＩ型結晶はアセトン（溶媒）から固体として単離できる形態（単離後、乾燥してＶ型結晶にする）であるため，１当量のフマル酸とのＶ型結晶の製造の中間体としても有用である。
本発明によれば、化合物（Ｉ）の新規な結晶もしくは化合物（Ｉ）と酸との新規な結晶、これを含む医薬組成物、抗腫瘍剤、又は経口投与用の抗腫瘍剤が提供される。
好ましい態様において、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶、フリー体ＩＩ型結晶、フリー体Ｉ型結晶、１当量のフマル酸とのＶ型結晶、０．５当量のフマル酸とのＩ型結晶、０．５当量のフマル酸とのＩＩ型結晶は、非吸湿性、取得再現性、固体安定性、経口吸収性などの医薬品製造において有利な性質の少なくとも一つを備える。
本発明によれば、化合物（Ｉ）の新規な結晶もしくは化合物（Ｉ）と酸との新規な結晶、これを含む医薬組成物、抗腫瘍剤、又は経口投与用の抗腫瘍剤が提供される。
好ましい態様において、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶、フリー体ＩＩ型結晶、フリー体Ｉ型結晶、１当量のフマル酸とのＶ型結晶、０．５当量のフマル酸とのＩ型結晶、０．５当量のフマル酸とのＩＩ型結晶は、非吸湿性、取得再現性、固体安定性、経口吸収性などの医薬品製造において有利な性質の少なくとも一つを備える。
【図面の簡単な説明】
【0013】
【図1】実施例１で得られた化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルを示す（縦軸は強度（ｃｏｕｎｔｓ）、横軸は回折角（２θ）を表す）。
【図2】実施例１で得られた化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶の示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の結果を示す（左縦軸はＴＧ曲線における重量（ｍｇ）、右縦軸はＤＴＡ曲線における熱流束（μＶ）、横軸は温度（℃）を表す）。
【図3】実施例２で得られた化合物（Ｉ）のＩＩ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルを示す（縦軸は強度（ｃｏｕｎｔｓ）、横軸は回折角（２θ）を表す）。
【図4】実施例２で得られた化合物（Ｉ）のＩＩ型結晶の示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の結果を示す（左縦軸はＴＧ曲線における重量（ｍｇ）、右縦軸はＤＴＡ曲線における熱流束（μＶ）、横軸は温度（℃）を表す）。
【図5】実施例３で得られた化合物（Ｉ）のＩ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルを示す（縦軸は強度（ｃｏｕｎｔｓ）、横軸は回折角（２θ）を表す）。
【図6】実施例３で得られた化合物（Ｉ）のＩ型結晶の示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の結果を示す（左縦軸はＴＧ曲線における重量（ｍｇ）、右縦軸はＤＴＡ曲線における熱流束（μＶ）、横軸は温度（℃）を表す）。
【図7】実施例４で得られた化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＶ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルを示す（縦軸は強度（ｃｏｕｎｔｓ）、横軸は回折角（２θ）を表す）。
【図8】実施例４で得られた化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＶ型結晶の示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の結果を示す（左縦軸はＴＧ曲線における重量（ｍｇ）、右縦軸はＤＴＡ曲線における熱流束（μＶ）、横軸は温度（℃）を表す）。
【図9】実施例５で得られた化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルを示す（縦軸は強度（ｃｏｕｎｔｓ）、横軸は回折角（２θ）を表す）。
【図10】実施例５で得られた化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩ型結晶の示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の結果を示す（左縦軸はＴＧ曲線における重量（ｍｇ）、右縦軸はＤＴＡ曲線における熱流束（μＶ）、横軸は温度（℃）を表す）。
【図11】実施例６で得られた化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸とのＩ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルを示す（縦軸は強度（ｃｏｕｎｔｓ）、横軸は回折角（２θ）を表す）。
【図12】実施例６で得られた化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸とのＩ型結晶の示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の結果を示す（左縦軸はＴＧ曲線における重量（ｍｇ）、右縦軸はＤＴＡ曲線における熱流束（μＶ）、横軸は温度（℃）を表す）。
【図13】実施例７で得られた化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸とのＩＩ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルを示す（縦軸は強度（ｃｏｕｎｔｓ）、横軸は回折角（２θ）を表す）。
【図14】実施例７で得られた化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸とのＩＩ型結晶の示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の結果を示す（左縦軸はＴＧ曲線における重量（ｍｇ）、右縦軸はＤＴＡ曲線における熱流束（μＶ）、横軸は温度（℃）を表す）。
【図15】参考例１で得られた化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩＩ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルを示す（縦軸は強度（ｃｏｕｎｔｓ）、横軸は回折角（２θ）を表す）。
【図16】参考例１で得られた化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩＩ型結晶の示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の結果を示す（左縦軸はＴＧ曲線における重量（ｍｇ）、右縦軸はＤＴＡ曲線における熱流束（μＶ）、横軸は温度（℃）を表す）。
【図17】参考例２で得られた化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＶ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルを示す（縦軸は強度（ｃｏｕｎｔｓ）、横軸は回折角（２θ）を表す）。
【図18】参考例２で得られた化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＶ型結晶の示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の結果を示す（左縦軸はＴＧ曲線における重量（ｍｇ）、右縦軸はＤＴＡ曲線における熱流束（μＶ）、横軸は温度（℃）を表す）。
【図19】参考例３で得られた化合物（Ｉ）の塩酸とのＩ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルを示す（縦軸は強度（ｃｏｕｎｔｓ）、横軸は回折角（２θ）を表す）。
【図20】参考例３で得られた化合物（Ｉ）の塩酸とのＩ型結晶の示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の結果を示す（左縦軸はＴＧ曲線における重量（ｍｇ）、右縦軸はＤＴＡ曲線における熱流束（μＶ）、横軸は温度（℃）を表す）。
【図21】参考例４で得られた化合物（Ｉ）の塩酸とのＩＩ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルを示す（縦軸は強度（ｃｏｕｎｔｓ）、横軸は回折角（２θ）を表す）。
【図22】参考例４で得られた化合物（Ｉ）の塩酸とのＩＩ型結晶の示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の結果を示す（左縦軸はＴＧ曲線における重量（ｍｇ）、右縦軸はＤＴＡ曲線における熱流束（μＶ）、横軸は温度（℃）を表す）。
【図23】参考例５で得られた化合物（Ｉ）の塩酸とのＩＩＩ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルを示す（縦軸は強度（ｃｏｕｎｔｓ）、横軸は回折角（２θ）を表す）。
【図24】参考例５で得られた化合物（Ｉ）の塩酸とのＩＩＩ型結晶の示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の結果を示す（左縦軸はＴＧ曲線における重量（ｍｇ）、右縦軸はＤＴＡ曲線における熱流束（μＶ）、横軸は温度（℃）を表す）。
【図25】参考例６で得られた化合物（Ｉ）の臭化水素酸との結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルを示す（縦軸は強度（ｃｏｕｎｔｓ）、横軸は回折角（２θ）を表す）。
【図26】参考例６で得られた化合物（Ｉ）の臭化水素酸との結晶の示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の結果を示す（左縦軸はＴＧ曲線における重量（ｍｇ）、右縦軸はＤＴＡ曲線における熱流束（μＶ）、横軸は温度（℃）を表す）。
【図27】参考例７で得られた化合物（Ｉ）の１当量のＬ－酒石酸との結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルを示す（縦軸は強度（ｃｏｕｎｔｓ）、横軸は回折角（２θ）を表す）。
【図28】参考例７で得られた化合物（Ｉ）の１当量のＬ－酒石酸との結晶の示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の結果を示す（左縦軸はＴＧ曲線における重量（ｍｇ）、右縦軸はＤＴＡ曲線における熱流束（μＶ）、横軸は温度（℃）を表す）。
【図29】参考例８で得られた化合物（Ｉ）のコハク酸との結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルを示す（縦軸は強度（ｃｏｕｎｔｓ）、横軸は回折角（２θ）を表す）。
【図30】参考例８で得られた化合物（Ｉ）のコハク酸との結晶の示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の結果を示す（左縦軸はＴＧ曲線における重量（ｍｇ）、右縦軸はＤＴＡ曲線における熱流束（μＶ）、横軸は温度（℃）を表す）。
【図31】化合物（Ｉ）のＬｕｃｉｆｅｒａｓｅ遺伝子導入ＨＥＲ２発現細胞株（ＮＣＩ－Ｎ８７－ｌｕｃ）の脳直接移植モデルに対する抗腫瘍効果を示す。
【図32】化合物（Ｉ）のＬｕｃｉｆｅｒａｓｅ遺伝子導入ＨＥＲ２発現細胞株（ＮＣＩ－Ｎ８７－ｌｕｃ）の脳直接移植モデルに対する体重増減率を示す。
【発明を実施するための形態】
【0014】
本発明は、下記式（Ｉ）で表される７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドの結晶、及びその酸との結晶（その塩の結晶または共結晶）に関する。
具体的には、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶、フリー体のＩＩ型結晶、フリー体のＩ型結晶、１当量のフマル酸とのＶ型結晶、１当量のフマル酸とのＩ型結晶、０．５当量のフマル酸とのＩ型結晶、０．５当量のフマル酸とのＩＩ型結晶に関する。
なお、本明細書中、Ｉ型、ＩＩ型、ＩＩＩ型、ＩＶ型及びＶ型という記載は、結晶形を区別するための便宜的な名称であり、本発明に係る結晶はこの名称で限定されるものではない。
【化2】
なお、本明細書中、Ｉ型、ＩＩ型、ＩＩＩ型、ＩＶ型及びＶ型という記載は、結晶形を区別するための便宜的な名称であり、本発明に係る結晶はこの名称で限定されるものではない。
【0015】
本明細書において、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミド（化合物（Ｉ））の酸との結晶とは、塩の結晶又は酸との共結晶を示す。
塩の結晶は、化合物（Ｉ）と酸の分子とがイオン結合で結合した結晶であり、共結晶は、化合物（Ｉ）と酸の分子とが非イオン性の相互作用により結合した結晶である。本発明において、化合物（Ｉ）の酸との結晶は、塩の結晶であっても共結晶であってもよく、その両方の意味を包含する。例えば、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドのフマル酸とのＩＩ型結晶であれば、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドのフマル酸塩の結晶又は７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドのフマル酸との共結晶の意を示す。
塩の結晶は、化合物（Ｉ）と酸の分子とがイオン結合で結合した結晶であり、共結晶は、化合物（Ｉ）と酸の分子とが非イオン性の相互作用により結合した結晶である。本発明において、化合物（Ｉ）の酸との結晶は、塩の結晶であっても共結晶であってもよく、その両方の意味を包含する。例えば、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドのフマル酸とのＩＩ型結晶であれば、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドのフマル酸塩の結晶又は７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドのフマル酸との共結晶の意を示す。
【0016】
結晶は、原子や分子が規則的な繰り返し構造を配置している固体を示し、繰り返し構造を持たないアモルファス（非晶質）の固体とは異なる。粉末Ｘ線回折測定（ＸＲＤ測定）、示差走査熱量測定（ＤＳＣ測定）、熱重量－示差熱同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ測定）、単結晶解析などの方法により、結晶、又はアモルファスの固体を調べることができる。結晶多形は、同一分子であって結晶中の原子や分子の配列が異なるものを示し、ＸＲＤ測定で得られるピークが結晶多形によって異なることが知られている。また、それぞれの結晶多形の間で溶解性、経口吸収性、安定性などが異なることが知られている。
【0017】
本明細書中、「結晶」、「非晶質体」なる語は、通常の意味で用いられる。
【0018】
本明細書中で単に「化合物（Ｉ）」と記載した場合は、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミドを意味し、「非晶質体」、「結晶」のいずれをも含む意味で用いられる。
本明細書で「化合物（Ｉ）の結晶」と記載した場合は、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶、及び、化合物（Ｉ）との酸との結晶（化合物（Ｉ）の塩の結晶及び化合物（Ｉ）の共結晶）のいずれをも含む意味で用いられる。
本明細書中で結晶を構成する化合物（Ｉ）以外の分子（塩又は共結晶を構成する他の分子）が特定されていない結晶は、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミド（化合物（Ｉ））のフリー体の結晶を意味する。 本明細書中で当量と書かれていた場合は、モル当量を意味する。
化合物（Ｉ）と酸との結晶（塩体の結晶又は共結晶）において、化合物（Ｉ）に対する酸の当量は、例えばＮＭＲやイオンクロマトグラフィーで分析できる。
本明細書中で結晶は、水和物であっても良い。
本明細書で「化合物（Ｉ）の結晶」と記載した場合は、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶、及び、化合物（Ｉ）との酸との結晶（化合物（Ｉ）の塩の結晶及び化合物（Ｉ）の共結晶）のいずれをも含む意味で用いられる。
本明細書中で結晶を構成する化合物（Ｉ）以外の分子（塩又は共結晶を構成する他の分子）が特定されていない結晶は、７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミド（化合物（Ｉ））のフリー体の結晶を意味する。 本明細書中で当量と書かれていた場合は、モル当量を意味する。
化合物（Ｉ）と酸との結晶（塩体の結晶又は共結晶）において、化合物（Ｉ）に対する酸の当量は、例えばＮＭＲやイオンクロマトグラフィーで分析できる。
本明細書中で結晶は、水和物であっても良い。
【0019】
また、化合物（Ｉ）、又はその塩のラベル体、すなわち、化合物（Ｉ）や化合物（Ｉ）の塩の、１つ以上の原子を放射性同位元素若しくは非放射性同位元素で置換した化合物も、本発明に包含される。
【0020】
結晶は、化合物（Ｉ）の結晶を含むものであればよく、単一結晶であってもそれ以外の化合物（Ｉ）の結晶を含む多形混合物であってもよい。具体的には結晶の純度が５０重量％以上である、すなわち５０重量％以上が単一の結晶であることが好ましく、結晶の純度が７５重量％以上である、すなわち７５重量％以上が単一の結晶であることが好ましく、結晶の純度が９０重量％以上である、すなわち９０重量％以上が単一の結晶であることがより好ましく、結晶の純度が９５重量％以上である、すなわち９５重量％以上が単一の結晶であることがさらに好ましく、結晶の純度が９９重量％以上である、すなわち９９重量％以上が単一の結晶であることが特に好ましい。
【0021】
本明細書において、化学純度とは高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）で測定した際の純度であり、化合物（Ｉ）の化学純度と記載したときには、化合物（Ｉ）を高速液体クロマトグラフィーで測定した際の純度を言う。その際に、純度測定に用いる検出器の波長は適宜設定することができる。具体的には、化合物（Ｉ）の結晶の化学純度は９５％以上が好ましく、９８％以上がより好ましく、９９％以上が特に好ましい。
【0022】
尚、粉末Ｘ線回折パターンは、データの性質上、結晶の同一性を認定する際は、回折角及び全体的なパターンが重要である。粉末Ｘ線回折パターンの相対強度は結晶成長の方向、粒子の大きさ、測定条件によって多少変動し得るものであるから、厳密に解されるべきではない。
【0023】
各種パターンから得られる数値は、その結晶成長の方向、粒子の大きさ、測定条件等によって多少の誤差が生じる場合がある。したがって、本明細書中、粉末Ｘ線回折パターンにおける回折角（２θ）の数値は、±０．２°程度の範囲で測定誤差を有し得る。
【0024】
本明細書において、「室温」は通常約１０℃から約３５℃を示す。
【0025】
また、示差熱熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）曲線における吸熱ピークは、１分あたりの昇温の幅、試料の化学純度等により測定温度が変化することがあり、通常±５．０℃を意味する。よって、本発明に係る結晶を（ＴＧ－ＤＴＡ測定した際には、ピーク（ピークトップ値）の誤差は±５．０℃を考慮する。その際に使用する「付近」という用語は±５．０℃を意味する。
【0026】
本発明の一形態は、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶（Ｉ型結晶、ＩＩ型結晶）、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸との結晶（Ｉ型結晶、ＩＩ型結晶、ＩＩＩ型結晶、ＩＶ型結晶、Ｖ型結晶）、化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸との結晶（Ｉ型結晶、ＩＩ型結晶）に関する。
【0027】
（化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶）
化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶は、図１に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有し、また、図２に示される示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の曲線を有する。
また、本発明の一実施形態において、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶は、粉末Ｘ線回折において表２に示す回折角（２θ）及び強度（ｃｔｓ）を有する。
化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶は、図１に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有し、また、図２に示される示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の曲線を有する。
また、本発明の一実施形態において、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶は、粉末Ｘ線回折において表２に示す回折角（２θ）及び強度（ｃｔｓ）を有する。
【0028】
ここで、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルにおける特徴的なピークは、回折角（２θ±０．２°）として、５．５°，６．８°，９．３°，１３．４°，１５．３°，１６．３°，１８．５°，１９．８°，２２．０°及び２４．５°を挙げることができる。
本発明にかかる化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶は、上記特徴的なピークから選択される３つ以上のピークを有する結晶であり、好ましくは上記特徴的なピークから選択される４つ以上のピークを有する結晶であり、より好ましくは上記特徴的なピークから選択される５つ以上のピークを有する結晶であり、さらに好ましくは上記特徴的なピークから選択される６つ以上のピークを有する結晶であり、さらに好ましくは上記特徴的なピークから選択される７つ以上のピークを有する結晶であり、一層好ましくは上記特徴的なピークから選択される８つ以上のピークを有する結晶であり、より一層好ましくは上記特徴的なピークから選択される９つ以上のピークを有する結晶であり、特に好ましくは上記ピークのいずれもを有する結晶である。
本発明にかかる化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶は、上記特徴的なピークから選択される３つ以上のピークを有する結晶であり、好ましくは上記特徴的なピークから選択される４つ以上のピークを有する結晶であり、より好ましくは上記特徴的なピークから選択される５つ以上のピークを有する結晶であり、さらに好ましくは上記特徴的なピークから選択される６つ以上のピークを有する結晶であり、さらに好ましくは上記特徴的なピークから選択される７つ以上のピークを有する結晶であり、一層好ましくは上記特徴的なピークから選択される８つ以上のピークを有する結晶であり、より一層好ましくは上記特徴的なピークから選択される９つ以上のピークを有する結晶であり、特に好ましくは上記ピークのいずれもを有する結晶である。
【0029】
また、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶の示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピーク（ピークトップ値）は１７３～１８３℃、言い換えると１７８℃付近を挙げることができる。
【0030】
（化合物（Ｉ）のフリー体ＩＩ型結晶）
化合物（Ｉ）のＩＩ型結晶は、図３に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有し、また、図４に示される示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の曲線を有する。
また、本発明の一実施形態において、化合物（Ｉ）のフリー体のＩＩ型結晶は、粉末Ｘ線回折において表３に示す回折角（２θ）及び強度（ｃｔｓ）を有する。
化合物（Ｉ）のＩＩ型結晶は、図３に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有し、また、図４に示される示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の曲線を有する。
また、本発明の一実施形態において、化合物（Ｉ）のフリー体のＩＩ型結晶は、粉末Ｘ線回折において表３に示す回折角（２θ）及び強度（ｃｔｓ）を有する。
【0031】
ここで、化合物（Ｉ）のＩＩ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルにおける特徴的なピークは、回折角（２θ±０．２°）として、８．３°，１４．８°，１７．３°，１８．０°，１９．１°，２０．３°，２１．０°，２２．５°，２３．０°及び２６．２°を挙げることができる。
本発明にかかる化合物（Ｉ）のＩＩ型結晶は、上記特徴的なピークから選択される３つ以上のピークを有する結晶であり、好ましくは上記特徴的なピークから選択される４つ以上のピークを有する結晶であり、より好ましくは上記特徴的なピークから選択される５つ以上のピークを有する結晶であり、さらに好ましくは上記特徴的なピークから選択される６つ以上のピークを有する結晶であり、さらに好ましくは上記特徴的なピークから選択される７つ以上のピークを有する結晶であり、一層好ましくは上記特徴的なピークから選択される８つ以上のピークを有する結晶であり、より一層好ましくは上記特徴的なピークから選択される９つ以上のピークを有する結晶であり、特に好ましくは上記特徴的なピークのいずれもを有する結晶である。
本発明にかかる化合物（Ｉ）のＩＩ型結晶は、上記特徴的なピークから選択される３つ以上のピークを有する結晶であり、好ましくは上記特徴的なピークから選択される４つ以上のピークを有する結晶であり、より好ましくは上記特徴的なピークから選択される５つ以上のピークを有する結晶であり、さらに好ましくは上記特徴的なピークから選択される６つ以上のピークを有する結晶であり、さらに好ましくは上記特徴的なピークから選択される７つ以上のピークを有する結晶であり、一層好ましくは上記特徴的なピークから選択される８つ以上のピークを有する結晶であり、より一層好ましくは上記特徴的なピークから選択される９つ以上のピークを有する結晶であり、特に好ましくは上記特徴的なピークのいずれもを有する結晶である。
【0032】
また、化合物（Ｉ）のＩＩ型結晶の示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピーク（ピークトップ値）は１７７～１８７℃、言い換えると１８２℃付近を挙げることができる。
【0033】
（化合物（Ｉ）のフリー体Ｉ型結晶）
化合物（Ｉ）のＩ型結晶は、図５に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有し、また、図６に示される示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の曲線を有する。
また、本発明の一実施形態において、化合物（Ｉ）のフリー体のＩ型結晶は、粉末Ｘ線回折において表４に示す回折角（２θ）及び強度（ｃｔｓ）を有する。
化合物（Ｉ）のＩ型結晶は、図５に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有し、また、図６に示される示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の曲線を有する。
また、本発明の一実施形態において、化合物（Ｉ）のフリー体のＩ型結晶は、粉末Ｘ線回折において表４に示す回折角（２θ）及び強度（ｃｔｓ）を有する。
【0034】
ここで、化合物（Ｉ）のＩ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルにおける特徴的なピークは、回折角（２θ±０．２°）として、９．９°，１１．７°，１３．２°，１７．７°，１８．１°，１８．８°及び２０．８°を挙げることができる。
本発明にかかる化合物（Ｉ）のＩ型結晶は、上記特徴的なピークから選択される３つ以上のピークを有する結晶であり、好ましくは上記特徴的なピークから選択される４つ以上のピークを有する結晶であり、より好ましくは上記特徴的なピークから選択される５つ以上のピークを有する結晶であり、さらに好ましくは上記特徴的なピークから選択される６つ以上のピークを有する結晶であり、特に好ましくは上記特徴的なピークのいずれもを有する結晶である。
ここで、化合物（Ｉ）のＩ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルにおける特徴的なピークは、回折角（２θ±０．２°）として、９．９°，１１．７°，１３．２°，１８．８°及び２０．８°を挙げることができる。
本発明にかかる化合物（Ｉ）のＩ型結晶は、上記特徴的なピークから選択される３つ以上のピークを有する結晶であり、好ましくは上記特徴的なピークから選択される４つ以上のピークを有する結晶であり、特に好ましくは上記特徴的なピークのいずれもを有する結晶である。
本発明にかかる化合物（Ｉ）のＩ型結晶は、上記特徴的なピークから選択される３つ以上のピークを有する結晶であり、好ましくは上記特徴的なピークから選択される４つ以上のピークを有する結晶であり、より好ましくは上記特徴的なピークから選択される５つ以上のピークを有する結晶であり、さらに好ましくは上記特徴的なピークから選択される６つ以上のピークを有する結晶であり、特に好ましくは上記特徴的なピークのいずれもを有する結晶である。
ここで、化合物（Ｉ）のＩ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルにおける特徴的なピークは、回折角（２θ±０．２°）として、９．９°，１１．７°，１３．２°，１８．８°及び２０．８°を挙げることができる。
本発明にかかる化合物（Ｉ）のＩ型結晶は、上記特徴的なピークから選択される３つ以上のピークを有する結晶であり、好ましくは上記特徴的なピークから選択される４つ以上のピークを有する結晶であり、特に好ましくは上記特徴的なピークのいずれもを有する結晶である。
【0035】
また、化合物（Ｉ）のＩ型結晶の示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピーク（ピークトップ値）は１７８～１８８℃、言い換えると１８３℃付近を挙げることができる。
【0036】
（化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＶ型結晶）
化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＶ型結晶は、図７に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有し、また、図８に示される示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の曲線を有する。
また、本発明の一実施形態において、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＶ型結晶は、粉末Ｘ線回折において表５に示す回折角（２θ）及び強度（ｃｔｓ）を有する。
化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＶ型結晶は、図７に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有し、また、図８に示される示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の曲線を有する。
また、本発明の一実施形態において、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＶ型結晶は、粉末Ｘ線回折において表５に示す回折角（２θ）及び強度（ｃｔｓ）を有する。
【0037】
ここで、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＶ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルにおける特徴的なピークは、回折角（２θ±０．２°）として６．９°，９．４°，１０．２°，１３．７°，２１．１°，２３．６°及び２６．５°を挙げることができる。
本発明にかかる化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＶ型結晶は、上記特徴的なピークから選択される３つ以上のピークを有する結晶であり、好ましくは上記特徴的なピークから選択される４つ以上のピークを有する結晶であり、より好ましくは上記特徴的なピークから選択される５つ以上のピークを有する結晶であり、さらに好ましくは上記特徴的なピークから選択される６つ以上のピークを有する結晶であり、特に好ましくは上記特徴的なピークのいずれもを有する結晶である。
ここで、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＶ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルにおける特徴的なピークは、回折角（２θ±０．２°）として６．９°，１３．７°，２１．１°，２３．６°及び２６．５°を挙げることができる。
本発明にかかる化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＶ型結晶は、上記特徴的なピークから選択される３つ以上のピークを有する結晶であり、好ましくは上記特徴的なピークから選択される４つ以上のピークを有する結晶であり、特に好ましくは上記特徴的なピークのいずれもを有する結晶である。
本発明にかかる化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＶ型結晶は、上記特徴的なピークから選択される３つ以上のピークを有する結晶であり、好ましくは上記特徴的なピークから選択される４つ以上のピークを有する結晶であり、より好ましくは上記特徴的なピークから選択される５つ以上のピークを有する結晶であり、さらに好ましくは上記特徴的なピークから選択される６つ以上のピークを有する結晶であり、特に好ましくは上記特徴的なピークのいずれもを有する結晶である。
ここで、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＶ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルにおける特徴的なピークは、回折角（２θ±０．２°）として６．９°，１３．７°，２１．１°，２３．６°及び２６．５°を挙げることができる。
本発明にかかる化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＶ型結晶は、上記特徴的なピークから選択される３つ以上のピークを有する結晶であり、好ましくは上記特徴的なピークから選択される４つ以上のピークを有する結晶であり、特に好ましくは上記特徴的なピークのいずれもを有する結晶である。
【0038】
また、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＶ型結晶の示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピーク（ピークトップ値）は１４６～１５６℃、言い換えると１５１℃付近を挙げることができる。
【0039】
（化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩ型結晶）
化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩ型結晶は、図９に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有し、また、図１０に示される示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の曲線を有する。
また、本発明の一実施形態において、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩ型結晶は、粉末Ｘ線回折において表６に示す回折角（２θ）及び強度（ｃｔｓ）を有する。
化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩ型結晶は、図９に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有し、また、図１０に示される示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の曲線を有する。
また、本発明の一実施形態において、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩ型結晶は、粉末Ｘ線回折において表６に示す回折角（２θ）及び強度（ｃｔｓ）を有する。
【0040】
ここで、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルにおける特徴的なピークは、回折角（２θ±０．２°）として、６．４°，１０．３°，１２．８°，１５．０°，２０．７°，２３．４°及び２６．６°を挙げることができる。
本発明にかかる化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩ型結晶は、上記特徴的なピークから選択される３つ以上のピークを有する結晶であり、好ましくは上記特徴的なピークから選択される４つ以上のピークを有する結晶であり、より好ましくは上記特徴的なピークから選択される５つ以上のピークを有する結晶であり、さらに好ましくは上記特徴的なピークから選択される６つ以上のピークを有する結晶であり、特に好ましくは上記特徴的なピークのいずれもを有する結晶である。
また、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩ型結晶の示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピーク（ピークトップ値）は１４８～１５８℃、言い換えると１５３℃付近を挙げることができる。
ここで、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルにおける特徴的なピークは、回折角（２θ±０．２°）として、６．４°，１０．３°，１２．８°，２０．７°，２３．４°及び２６．６°を挙げることができる。
本発明にかかる化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩ型結晶は、上記特徴的なピークから選択される３つ以上のピークを有する結晶であり、好ましくは上記特徴的なピークから選択される４つ以上のピークを有する結晶であり、より好ましくは上記特徴的なピークから選択される５つ以上のピークを有する結晶であり、特に好ましくは上記特徴的なピークのいずれもを有する結晶である。
また、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩ型結晶の示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピーク（ピークトップ値）は１４８～１５８℃、言い換えると１５３℃付近を挙げることができる。
本発明にかかる化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩ型結晶は、上記特徴的なピークから選択される３つ以上のピークを有する結晶であり、好ましくは上記特徴的なピークから選択される４つ以上のピークを有する結晶であり、より好ましくは上記特徴的なピークから選択される５つ以上のピークを有する結晶であり、さらに好ましくは上記特徴的なピークから選択される６つ以上のピークを有する結晶であり、特に好ましくは上記特徴的なピークのいずれもを有する結晶である。
また、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩ型結晶の示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピーク（ピークトップ値）は１４８～１５８℃、言い換えると１５３℃付近を挙げることができる。
ここで、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルにおける特徴的なピークは、回折角（２θ±０．２°）として、６．４°，１０．３°，１２．８°，２０．７°，２３．４°及び２６．６°を挙げることができる。
本発明にかかる化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩ型結晶は、上記特徴的なピークから選択される３つ以上のピークを有する結晶であり、好ましくは上記特徴的なピークから選択される４つ以上のピークを有する結晶であり、より好ましくは上記特徴的なピークから選択される５つ以上のピークを有する結晶であり、特に好ましくは上記特徴的なピークのいずれもを有する結晶である。
また、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩ型結晶の示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピーク（ピークトップ値）は１４８～１５８℃、言い換えると１５３℃付近を挙げることができる。
【0041】
（化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸とのＩ型結晶）
化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸とのＩ型結晶は、図１１に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有し、また、図１２に示される示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の曲線を有する。
化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸とのＩ型結晶は、図１１に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有し、また、図１２に示される示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の曲線を有する。
【0042】
ここで、化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸とのＩ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルにおける特徴的なピークは、回折角（２θ±０．２°）として、６．４°，７．５°，９．７°，１１．７°，１５．１°，１９．６°及び２３．９°を挙げることができる。
本発明にかかる化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸とのＩ型結晶は、上記特徴的なピークから選択される４つ以上のピークを有する結晶であり、好ましくは上記特徴的なピークから選択される５つ以上のピークを有する結晶であり、より好ましくは上記特徴的なピークから選択される６つ以上のピークを有する結晶であり、特に好ましくは上記ピークのいずれもを有する結晶である。
本発明にかかる化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸とのＩ型結晶は、上記特徴的なピークから選択される４つ以上のピークを有する結晶であり、好ましくは上記特徴的なピークから選択される５つ以上のピークを有する結晶であり、より好ましくは上記特徴的なピークから選択される６つ以上のピークを有する結晶であり、特に好ましくは上記ピークのいずれもを有する結晶である。
【0043】
また、化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸とのＩ型結晶の示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピーク（ピークトップ値）は１５６～１６６℃、言い換えると１６１℃付近を挙げることができる。
【0044】
（化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸とのＩＩ型結晶）
化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸とのＩＩ型結晶は、図１３に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有し、また、図１４に示される示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の曲線を有する。
化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸とのＩＩ型結晶は、図１３に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有し、また、図１４に示される示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の曲線を有する。
【0045】
ここで、化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸とのＩＩ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルにおける特徴的なピークは、回折角（２θ±０．２°）として、５．４°，６．４°，７．３°，１２．８°，１３．４°，１４．７°及び１５．４°を挙げることができる。
本発明にかかる化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸とのＩＩ型結晶は、上記特徴的なピークから選択される４つ以上のピークを有する結晶であり、好ましくは上記特徴的なピークから選択される５つ以上のピークを有する結晶であり、より好ましくは上記特徴的なピークから選択される６つ以上のピークを有する結晶であり、特に好ましくは上記ピークのいずれもを有する結晶である。
本発明にかかる化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸とのＩＩ型結晶は、上記特徴的なピークから選択される４つ以上のピークを有する結晶であり、好ましくは上記特徴的なピークから選択される５つ以上のピークを有する結晶であり、より好ましくは上記特徴的なピークから選択される６つ以上のピークを有する結晶であり、特に好ましくは上記ピークのいずれもを有する結晶である。
【0046】
また、化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸とのＩＩ型結晶の示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピーク（ピークトップ値）は１５７～１６７℃、言い換えると１６２℃付近を挙げることができる。
【0047】
（化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩＩ型結晶）
化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩＩ型結晶は、図１５に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有し、また、図１６に示される示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の曲線を有する。
化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩＩ型結晶は、図１５に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有し、また、図１６に示される示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の曲線を有する。
【0048】
ここで、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩＩ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルにおける特徴的なピークは、回折角（２θ±０．２°）として、８．１°，１３．２°，２０．４°，２３．１°，２４．７°及び２６．１°を挙げることができる。
本発明にかかる化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩＩ型結晶は、上記特徴的なピークから選択される３つ以上のピークを有する結晶であり、好ましくは上記特徴的なピークから選択される４つ以上のピークを有する結晶であり、より好ましくは上記特徴的なピークから選択される５つ以上のピークを有する結晶であり、特に好ましくは上記特徴的なピークのいずれもを有する結晶である。
また、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩＩ型結晶示差熱－熱重量同時測定により決定した発熱ピーク（ピークトップ値）は１４８～１５８℃、言い換えると１５３℃付近を挙げることができる。
本発明にかかる化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩＩ型結晶は、上記特徴的なピークから選択される３つ以上のピークを有する結晶であり、好ましくは上記特徴的なピークから選択される４つ以上のピークを有する結晶であり、より好ましくは上記特徴的なピークから選択される５つ以上のピークを有する結晶であり、特に好ましくは上記特徴的なピークのいずれもを有する結晶である。
また、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩＩ型結晶示差熱－熱重量同時測定により決定した発熱ピーク（ピークトップ値）は１４８～１５８℃、言い換えると１５３℃付近を挙げることができる。
【0049】
（化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＶ型結晶）
化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＶ型結晶は、図１７に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有し、また、図１８に示される示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の曲線を有する。
化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＶ型結晶は、図１７に示される粉末Ｘ線回折スペクトルを有し、また、図１８に示される示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の曲線を有する。
【0050】
ここで、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＶ型結晶の粉末Ｘ線回折スペクトルにおける特徴的なピークは、回折角（２θ±０．２°）として、６．０°，１５．７°及び１８．８°を挙げることができる。
本発明にかかる化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＶ型結晶は、上記特徴的なピークのいずれもを有する結晶である。
また、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＶ型結晶の示差熱－熱重量同時測定により決定した発熱ピーク（ピークトップ値）は１２５～１３５℃、言い換えると１３０℃付近を挙げることができる。
本発明にかかる化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＶ型結晶は、上記特徴的なピークのいずれもを有する結晶である。
また、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＶ型結晶の示差熱－熱重量同時測定により決定した発熱ピーク（ピークトップ値）は１２５～１３５℃、言い換えると１３０℃付近を挙げることができる。
【0051】
（１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶の製造方法）
本明細書中における一実施形態として、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶は、例えば以下の２工程を含む方法により得られる。
工程１ 化合物（Ｉ）のＩ型結晶にフマル酸及び下記の溶媒を添加し、任意選択で種結晶を添加する工程。
工程２ 前記工程で得た懸濁液を攪拌し、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸との結晶を得る工程。
その後濾取し、固体を回収する。回収された固体を水で洗浄し、乾燥することが好ましい。
工程１のフマル酸は、化合物（Ｉ）のフリー体１当量に対して、フマル酸を好ましくは１．５～１０当量（より好ましくは２～５当量、最も好ましくは３当量）添加する。
工程１の溶媒は好ましくは５～３５倍量（ｖ／ｗ）（より好ましくは５～３０倍量（ｖ／ｗ）、最も好ましくは１０倍量（ｖ／ｗ））添加する。
工程１で使用する溶媒は、メタノール、エタノール、イソプロパノール、ｔｅｒｔ－ブタノールなどのアルコール類、１，４－ジオキサン、テトラヒドロフランなどのエーテル類、アセトン、メチルエチルケトンなどのケトン類、アセトニトリルなどの非プロトン性極性溶媒等の単一溶媒あるいは混合溶媒が例示できる。
化合物（Ｉ）のＩ型結晶は、「（フリー体Ｉ型の結晶の製造方法）」の項や実施例３で後述する方法にて取得することが可能である。
工程２の反応中の温度は、上記の通り室温以上各溶媒の沸点以下が好ましいが、特に制限されず適宜設定することができ、好ましくは２５～７０℃（より好ましくは４０～６０℃、最も好ましくは５０℃）である。
工程２の反応中の攪拌時間は、懸濁液を好ましくは２４～１２４時間（より好ましくは４８～７２時間、最も好ましくは６０～６５時間）撹拌である。
本明細書中における一実施形態として、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶は、例えば以下の２工程を含む方法により得られる。
工程１ 化合物（Ｉ）のＩ型結晶にフマル酸及び下記の溶媒を添加し、任意選択で種結晶を添加する工程。
工程２ 前記工程で得た懸濁液を攪拌し、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸との結晶を得る工程。
その後濾取し、固体を回収する。回収された固体を水で洗浄し、乾燥することが好ましい。
工程１のフマル酸は、化合物（Ｉ）のフリー体１当量に対して、フマル酸を好ましくは１．５～１０当量（より好ましくは２～５当量、最も好ましくは３当量）添加する。
工程１の溶媒は好ましくは５～３５倍量（ｖ／ｗ）（より好ましくは５～３０倍量（ｖ／ｗ）、最も好ましくは１０倍量（ｖ／ｗ））添加する。
工程１で使用する溶媒は、メタノール、エタノール、イソプロパノール、ｔｅｒｔ－ブタノールなどのアルコール類、１，４－ジオキサン、テトラヒドロフランなどのエーテル類、アセトン、メチルエチルケトンなどのケトン類、アセトニトリルなどの非プロトン性極性溶媒等の単一溶媒あるいは混合溶媒が例示できる。
化合物（Ｉ）のＩ型結晶は、「（フリー体Ｉ型の結晶の製造方法）」の項や実施例３で後述する方法にて取得することが可能である。
工程２の反応中の温度は、上記の通り室温以上各溶媒の沸点以下が好ましいが、特に制限されず適宜設定することができ、好ましくは２５～７０℃（より好ましくは４０～６０℃、最も好ましくは５０℃）である。
工程２の反応中の攪拌時間は、懸濁液を好ましくは２４～１２４時間（より好ましくは４８～７２時間、最も好ましくは６０～６５時間）撹拌である。
【0052】
（フリー体ＩＩ型結晶の製造方法）
（方法Ａ－１）
本明細書中における一実施形態として、化合物（Ｉ）のフリー体ＩＩ型結晶は、例えば以下の２工程を含む方法（方法Ａ－１）により得られる。
工程１ 化合物（Ｉ）にコハク酸、リン酸、及びアジピン酸のいずれかの酸及び富溶媒／貧溶媒の混合溶媒を添加し、任意選択で種結晶を添加する工程。
工程２ 前記工程で得られた懸濁液を攪拌し、固体状の化合物（Ｉ）の結晶を得る工程。
上記懸濁攪拌中には、溶媒の蒸発量に応じて、追加の溶媒（例えば富溶媒としての１－プロパノール）を必要に応じて複数回に分割して添加してもよい。
その後、濾取し、固体を回収し、乾燥する。
工程１の酸は、化合物（Ｉ）１当量に対して好ましくは０．５～２当量（より好ましくは０．７５～１．５当量、特に１当量）添加する。
工程１の富溶媒／貧溶媒の混合溶媒（例えば１－プロパノール／水）を化合物（Ｉ）のフリー体に対して好ましくは５～５０倍量（ｖ／ｗ）（より好ましくは１０～３０倍量（ｖ／ｗ）、特に２０倍量（ｖ／ｗ））添加する。
工程２の反応中の温度は、好ましくは２５～７０℃（より好ましくは４０～６０℃、特に好ましくは５０℃）である。
工程２の反応中の攪拌時間は、好ましくは２～７日間（より好ましくは３～５日間、特に４日間）懸濁撹拌する。
（方法Ａ－１）
本明細書中における一実施形態として、化合物（Ｉ）のフリー体ＩＩ型結晶は、例えば以下の２工程を含む方法（方法Ａ－１）により得られる。
工程１ 化合物（Ｉ）にコハク酸、リン酸、及びアジピン酸のいずれかの酸及び富溶媒／貧溶媒の混合溶媒を添加し、任意選択で種結晶を添加する工程。
工程２ 前記工程で得られた懸濁液を攪拌し、固体状の化合物（Ｉ）の結晶を得る工程。
上記懸濁攪拌中には、溶媒の蒸発量に応じて、追加の溶媒（例えば富溶媒としての１－プロパノール）を必要に応じて複数回に分割して添加してもよい。
その後、濾取し、固体を回収し、乾燥する。
工程１の酸は、化合物（Ｉ）１当量に対して好ましくは０．５～２当量（より好ましくは０．７５～１．５当量、特に１当量）添加する。
工程１の富溶媒／貧溶媒の混合溶媒（例えば１－プロパノール／水）を化合物（Ｉ）のフリー体に対して好ましくは５～５０倍量（ｖ／ｗ）（より好ましくは１０～３０倍量（ｖ／ｗ）、特に２０倍量（ｖ／ｗ））添加する。
工程２の反応中の温度は、好ましくは２５～７０℃（より好ましくは４０～６０℃、特に好ましくは５０℃）である。
工程２の反応中の攪拌時間は、好ましくは２～７日間（より好ましくは３～５日間、特に４日間）懸濁撹拌する。
【0053】
（方法Ａ－２）
また本明細書中における別の実施形態として、化合物（Ｉ）のフリー体ＩＩ型結晶は、例えば以下の２工程を含む方法（方法Ａ－２）により得られる。
工程１ 化合物（Ｉ）に富溶媒／貧溶媒の混合溶媒および種結晶を添加し、任意選択でコハク酸、リン酸、及びアジピン酸のいずれかの酸を添加する工程。
工程２ 前記工程で得られた懸濁液を攪拌し、固体状の化合物（Ｉ）の結晶を得る工程。
上記懸濁攪拌中には、溶媒の蒸発量に応じて、追加の溶媒（例えば富溶媒としての１－プロパノール）を必要に応じて複数回に分割して添加してもよい。
その後、濾取し、固体を回収し、乾燥する。
工程１のコハク酸の量は、化合物（Ｉ）１当量に対して好ましくは０．５～２当量（より好ましくは０．７５～１．５当量、特に１当量）添加する。
工程１の富溶媒／貧溶媒の混合溶媒（例えば１－プロパノール／水の混合溶媒）を化合物（Ｉ）のフリー体に対して好ましくは１～１０倍量（ｖ／ｗ）（より好ましくは２～５倍量（ｖ／ｗ）、特に３倍量（ｖ／ｗ））及び種結晶（例えば（ｉ）又は（ｉｉ）のいずれかで得られた種結晶）を添加する。
工程２の反応温度は、好ましくは２５～７０℃（より好ましくは４０～６０℃、特に好ましくは５０℃）である。
工程２の反応時間は好ましくは６～４８時間（より好ましくは１２～２４時間、特に好ましくは１７．５～２４時間）である。
また本明細書中における別の実施形態として、化合物（Ｉ）のフリー体ＩＩ型結晶は、例えば以下の２工程を含む方法（方法Ａ－２）により得られる。
工程１ 化合物（Ｉ）に富溶媒／貧溶媒の混合溶媒および種結晶を添加し、任意選択でコハク酸、リン酸、及びアジピン酸のいずれかの酸を添加する工程。
工程２ 前記工程で得られた懸濁液を攪拌し、固体状の化合物（Ｉ）の結晶を得る工程。
上記懸濁攪拌中には、溶媒の蒸発量に応じて、追加の溶媒（例えば富溶媒としての１－プロパノール）を必要に応じて複数回に分割して添加してもよい。
その後、濾取し、固体を回収し、乾燥する。
工程１のコハク酸の量は、化合物（Ｉ）１当量に対して好ましくは０．５～２当量（より好ましくは０．７５～１．５当量、特に１当量）添加する。
工程１の富溶媒／貧溶媒の混合溶媒（例えば１－プロパノール／水の混合溶媒）を化合物（Ｉ）のフリー体に対して好ましくは１～１０倍量（ｖ／ｗ）（より好ましくは２～５倍量（ｖ／ｗ）、特に３倍量（ｖ／ｗ））及び種結晶（例えば（ｉ）又は（ｉｉ）のいずれかで得られた種結晶）を添加する。
工程２の反応温度は、好ましくは２５～７０℃（より好ましくは４０～６０℃、特に好ましくは５０℃）である。
工程２の反応時間は好ましくは６～４８時間（より好ましくは１２～２４時間、特に好ましくは１７．５～２４時間）である。
【0054】
（方法Ｂ）
また本明細書中における別の実施形態として、化合物（Ｉ）のフリー体ＩＩ型結晶は、例えば以下の２工程を含む方法（方法Ｂ）により得られる。
工程１ 化合物（Ｉ）に貧溶媒を添加し、任意選択で種結晶を添加する工程。
工程２ 前記工程で得られた溶液に、富溶媒を添加し、得られた懸濁液を攪拌し、固体状の化合物（Ｉ）の結晶を得る工程。
工程１の貧溶媒の量は、化合物（Ｉ）に、貧溶媒（例えばジイソプロピルエーテル）を化合物（Ｉ）のフリー体に対して好ましくは２～１０倍量（ｖ／ｗ）（より好ましくは３～７倍量（ｖ／ｗ）、特に５倍量（ｖ／ｗ））を添加する。
工程１の反応時間は、好ましくは２４～９６時間（より好ましくは３６～７２時間、特に４４．５時間）懸濁攪拌する。
工程２の反応温度は、好ましくは２５～７０℃（より好ましくは４０～６０℃、特に好ましくは５０℃）である。
工程２の富溶媒の量は、富溶媒（例えばエタノール）を化合物（Ｉ）のフリー体に対して好ましくは０．５～３倍量（ｖ／ｗ）（より好ましくは０．８～２倍量（ｖ／ｗ）、特に１倍量（ｖ／ｗ））を添加する。
工程２の攪拌時間は好ましくは６～７２時間（より好ましくは１２～４８時間、特に２１時間）懸濁攪拌した後、濾取し、固体を回収し、乾燥する。
上記懸濁攪拌中には、溶媒の蒸発量に応じて、追加の溶媒（例えば貧溶媒としてのジイソプロピルエーテル及び／又は富溶媒としてのエタノール）を必要に応じて複数回に分割して添加してもよい。
また本明細書中における別の実施形態として、化合物（Ｉ）のフリー体ＩＩ型結晶は、例えば以下の２工程を含む方法（方法Ｂ）により得られる。
工程１ 化合物（Ｉ）に貧溶媒を添加し、任意選択で種結晶を添加する工程。
工程２ 前記工程で得られた溶液に、富溶媒を添加し、得られた懸濁液を攪拌し、固体状の化合物（Ｉ）の結晶を得る工程。
工程１の貧溶媒の量は、化合物（Ｉ）に、貧溶媒（例えばジイソプロピルエーテル）を化合物（Ｉ）のフリー体に対して好ましくは２～１０倍量（ｖ／ｗ）（より好ましくは３～７倍量（ｖ／ｗ）、特に５倍量（ｖ／ｗ））を添加する。
工程１の反応時間は、好ましくは２４～９６時間（より好ましくは３６～７２時間、特に４４．５時間）懸濁攪拌する。
工程２の反応温度は、好ましくは２５～７０℃（より好ましくは４０～６０℃、特に好ましくは５０℃）である。
工程２の富溶媒の量は、富溶媒（例えばエタノール）を化合物（Ｉ）のフリー体に対して好ましくは０．５～３倍量（ｖ／ｗ）（より好ましくは０．８～２倍量（ｖ／ｗ）、特に１倍量（ｖ／ｗ））を添加する。
工程２の攪拌時間は好ましくは６～７２時間（より好ましくは１２～４８時間、特に２１時間）懸濁攪拌した後、濾取し、固体を回収し、乾燥する。
上記懸濁攪拌中には、溶媒の蒸発量に応じて、追加の溶媒（例えば貧溶媒としてのジイソプロピルエーテル及び／又は富溶媒としてのエタノール）を必要に応じて複数回に分割して添加してもよい。
【0055】
化合物（Ｉ）のフリー体ＩＩ型結晶の製造に使用される富溶媒と貧溶媒の組み合わせとしては、メタノール（富溶媒）と水（貧溶媒）、メタノール（富溶媒）とジイソプロピルエーテル（ＩＰＥ）（貧溶媒）、メタノール（富溶媒）とヘプタン（貧溶媒）、エタノール（富溶媒）とＩＰＥ（貧溶媒）、エタノール（富溶媒）とヘプタン（貧溶媒）、１－プロパノール（富溶媒）と水（貧溶媒）、１－プロパノール（富溶媒）とＩＰＥ（貧溶媒）、１－プロパノール（富溶媒）とヘプタン（貧溶媒）、２－プロパノール（富溶媒）とヘプタン（貧溶媒）、アセトン（富溶媒）とＩＰＥ（貧溶媒）、アセトン（富溶媒）とヘプタン（貧溶媒）、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）（富溶媒）と水（貧溶媒）、ジメチルアセトアミド（ＤＭＡ）（富溶媒）と水（貧溶媒）、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）（富溶媒）とＩＰＥ（貧溶媒）、又はＴＨＦ（富溶媒）とヘプタン（貧溶媒）等を使用することができる。
中でも、富溶媒と貧溶媒の好ましい組み合わせとしては酢酸エチル（富溶媒）とｎ－ヘプタン（貧溶媒）、エタノール（富溶媒）と水（貧溶媒）、１－プロパノール（富溶媒）と水（貧溶媒）、エタノール（富溶媒）とジイソプロピルエーテル（貧溶媒）との組み合わせである。貧溶媒の量は、富溶媒の１～２０倍量（ｖ／ｖ）が好ましく、１～１０倍量（ｖ／ｖ）がより好ましい。
中でも、富溶媒と貧溶媒の好ましい組み合わせとしては酢酸エチル（富溶媒）とｎ－ヘプタン（貧溶媒）、エタノール（富溶媒）と水（貧溶媒）、１－プロパノール（富溶媒）と水（貧溶媒）、エタノール（富溶媒）とジイソプロピルエーテル（貧溶媒）との組み合わせである。貧溶媒の量は、富溶媒の１～２０倍量（ｖ／ｖ）が好ましく、１～１０倍量（ｖ／ｖ）がより好ましい。
【0056】
上記方法において、種結晶の添加量は、化合物（Ｉ）投入量の好ましくは０．５～３０（ｗ／ｗ）％、より好ましくは１～５（ｗ／ｗ）％とすることができる。
【0057】
（フリー体Ｉ型の結晶の製造方法）
本明細書中における一実施形態として、化合物（Ｉ）のフリー体Ｉ型結晶は、例えば化合物（Ｉ）の粗体を溶媒に懸濁し、任意選択で種結晶を添加し、固体状の化合物（Ｉ）の結晶を得る工程を含む方法により得られる。
種結晶は、フリー体Ｉ型結晶の晶析を促すため、任意選択で添加され、種結晶としては、適当量の化合物（Ｉ）のＩ型結晶又はＩ型結晶を含む混合結晶を加えることができる。種結晶を添加しなくとも上記方法により化合物（Ｉ）のＩ型結晶を得ることができるが、種結晶を添加することにより、上記化合物を取得する時間を短縮することができる。また、晶析時間の短縮と粒子径のコントロールのために攪拌しながら晶析させてもよい。
加える種結晶は、化合物（Ｉ）の投入量の０．５～３０（ｗ／ｗ）％であり、好ましくは１～１０（ｗ／ｗ）％である。
温度は、適宜設定することができるが、５０～６５℃が好ましい。
上記の溶解温度にて化合物（Ｉ）を析出させることができるが、溶解温度で析出しない場合は、２５℃まで冷却することによりフリー体Ｉ型結晶を得ることができる。
本明細書中における一実施形態として、化合物（Ｉ）のフリー体Ｉ型結晶は、例えば化合物（Ｉ）の粗体を溶媒に懸濁し、任意選択で種結晶を添加し、固体状の化合物（Ｉ）の結晶を得る工程を含む方法により得られる。
種結晶は、フリー体Ｉ型結晶の晶析を促すため、任意選択で添加され、種結晶としては、適当量の化合物（Ｉ）のＩ型結晶又はＩ型結晶を含む混合結晶を加えることができる。種結晶を添加しなくとも上記方法により化合物（Ｉ）のＩ型結晶を得ることができるが、種結晶を添加することにより、上記化合物を取得する時間を短縮することができる。また、晶析時間の短縮と粒子径のコントロールのために攪拌しながら晶析させてもよい。
加える種結晶は、化合物（Ｉ）の投入量の０．５～３０（ｗ／ｗ）％であり、好ましくは１～１０（ｗ／ｗ）％である。
温度は、適宜設定することができるが、５０～６５℃が好ましい。
上記の溶解温度にて化合物（Ｉ）を析出させることができるが、溶解温度で析出しない場合は、２５℃まで冷却することによりフリー体Ｉ型結晶を得ることができる。
【0058】
溶媒としては、酢酸エチル、エタノール、アセトニトリル、アセトン、ｔｅｒｔ－ブチルメチルエーテル等を使用することができる。
【0059】
（１当量のフマル酸とのＶ型結晶の製造方法）
本明細書中における一実施形態として、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＶ型結晶は、例えば、以下の２工程からなる方法により得られる。
工程１ 化合物（Ｉ）に、化合物（Ｉ）のフリー体１当量に対して１～２当量のフマル酸及び溶媒としてのアセトンを化合物（Ｉ）のフリー体に対して４０～６０倍量（ｖ／ｗ）添加し、任意選択で種結晶を添加する工程。
工程２ 前記工程で得られた懸濁液を攪拌し、濾取し、固体を回収する工程。
工程３ 前記工程で得た固体を、好ましくは２０～６０℃の減圧条件下（好ましくは、２ｋＰａ以下の圧力）で乾燥し、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸との結晶を得る工程。
工程１のフマル酸は、化合物（Ｉ）のフリー体１当量に対して、より好ましくは２当量添加する。
工程１のアセトンは化合物（Ｉ）のフリー体に対して好ましくは４０～６０倍量（ｖ／ｗ）（より好ましくは５０倍量（ｖ／ｗ））添加する。
工程２の反応温度は、好ましくは１０～３０℃（好ましくは２５℃）の温度である。
工程２の反応時間は、好ましくは１２～９６時間（より好ましくは７１時間）である。
工程３の反応温度は、得られた固体を２０～６０℃（例えば、室温）である。
工程３の減圧時間は、（例えば、２ｋＰａ以下の圧力で、）好ましくは６～２４時間（より好ましくは７．５時間）乾燥する。
本明細書中における一実施形態として、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＶ型結晶は、例えば、以下の２工程からなる方法により得られる。
工程１ 化合物（Ｉ）に、化合物（Ｉ）のフリー体１当量に対して１～２当量のフマル酸及び溶媒としてのアセトンを化合物（Ｉ）のフリー体に対して４０～６０倍量（ｖ／ｗ）添加し、任意選択で種結晶を添加する工程。
工程２ 前記工程で得られた懸濁液を攪拌し、濾取し、固体を回収する工程。
工程３ 前記工程で得た固体を、好ましくは２０～６０℃の減圧条件下（好ましくは、２ｋＰａ以下の圧力）で乾燥し、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸との結晶を得る工程。
工程１のフマル酸は、化合物（Ｉ）のフリー体１当量に対して、より好ましくは２当量添加する。
工程１のアセトンは化合物（Ｉ）のフリー体に対して好ましくは４０～６０倍量（ｖ／ｗ）（より好ましくは５０倍量（ｖ／ｗ））添加する。
工程２の反応温度は、好ましくは１０～３０℃（好ましくは２５℃）の温度である。
工程２の反応時間は、好ましくは１２～９６時間（より好ましくは７１時間）である。
工程３の反応温度は、得られた固体を２０～６０℃（例えば、室温）である。
工程３の減圧時間は、（例えば、２ｋＰａ以下の圧力で、）好ましくは６～２４時間（より好ましくは７．５時間）乾燥する。
【0060】
本明細書中における別の実施形態として、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＶ型結晶は、以下の工程を含む方法により得られる。
工程１ １当量のフマル酸とのＩ型結晶を減圧条件下（好ましくは、２ｋＰａ以下の圧力）で乾燥する。
工程１の反応温度は、２０～６０℃である。
工程１ １当量のフマル酸とのＩ型結晶を減圧条件下（好ましくは、２ｋＰａ以下の圧力）で乾燥する。
工程１の反応温度は、２０～６０℃である。
【0061】
（１当量のフマル酸とのＩ型結晶の製造方法）
本明細書中における一実施形態として、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩ型結晶は、例えば以下の２工程からなる方法により得られる。
工程１ 化合物（Ｉ）に化合物（Ｉ）のフリー体１当量に対して１～２当量のフマル酸及び溶媒としてのアセトンを４０～６０倍量添加し、任意選択で種結晶を添加する工程。
工程２ 前記工程で得られた懸濁液を３０℃以下で攪拌し、化合物（Ｉ）のフマル酸との結晶を得る工程。
その後濾取し、固体を回収する。
工程１のフマル酸の量は、化合物（Ｉ）のフリー体１当量に対して、フマル酸を好ましくは２当量添加する。
工程１のアセトンは化合物（Ｉ）のフリー体に対して好ましくは４０～６０倍量（より好ましくは５０倍量）を添加する。
工程２の反応温度は、好ましくは１０～３０℃（より好ましくは２５℃）である。
工程２の反応時間は、好ましくは１２～２４時間（より好ましくは１９．５時間）である。
本明細書中における一実施形態として、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩ型結晶は、例えば以下の２工程からなる方法により得られる。
工程１ 化合物（Ｉ）に化合物（Ｉ）のフリー体１当量に対して１～２当量のフマル酸及び溶媒としてのアセトンを４０～６０倍量添加し、任意選択で種結晶を添加する工程。
工程２ 前記工程で得られた懸濁液を３０℃以下で攪拌し、化合物（Ｉ）のフマル酸との結晶を得る工程。
その後濾取し、固体を回収する。
工程１のフマル酸の量は、化合物（Ｉ）のフリー体１当量に対して、フマル酸を好ましくは２当量添加する。
工程１のアセトンは化合物（Ｉ）のフリー体に対して好ましくは４０～６０倍量（より好ましくは５０倍量）を添加する。
工程２の反応温度は、好ましくは１０～３０℃（より好ましくは２５℃）である。
工程２の反応時間は、好ましくは１２～２４時間（より好ましくは１９．５時間）である。
【0062】
（１当量のフマル酸とのＩＩＩ型結晶の製造方法）
本明細書中における一実施形態として、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩＩ型結晶は、例えば以下の２工程を含む方法により得られる。
工程１ 化合物（Ｉ）にフマル酸及び溶媒としてアセトニトリルを添加し、任意選択で種結晶を添加する工程。
工程２ 前記工程で得られた懸濁液を１．５時間以下の短時間攪拌し、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸との結晶を得る工程。
その後、濾取し、固体を回収する。
工程１の化合物（Ｉ）のフリー体１当量に対して、フマル酸を好ましくは１～５当量（より好ましくは３当量）加える。
工程１の溶媒（例えばアセトニトリル）を化合物（Ｉ）のフリー体に対して好ましくは２５～３５倍量（ｖ／ｗ）（より好ましくは３０倍量（ｖ／ｗ））を添加する。
工程２の反応温度は、好ましくは４５～５５℃（特に好ましくは５０℃）の温度である。
工程２の反応時間は、好ましくは０．５～１．５時間（より好ましくは１時間）である。
本明細書中における一実施形態として、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩＩ型結晶は、例えば以下の２工程を含む方法により得られる。
工程１ 化合物（Ｉ）にフマル酸及び溶媒としてアセトニトリルを添加し、任意選択で種結晶を添加する工程。
工程２ 前記工程で得られた懸濁液を１．５時間以下の短時間攪拌し、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸との結晶を得る工程。
その後、濾取し、固体を回収する。
工程１の化合物（Ｉ）のフリー体１当量に対して、フマル酸を好ましくは１～５当量（より好ましくは３当量）加える。
工程１の溶媒（例えばアセトニトリル）を化合物（Ｉ）のフリー体に対して好ましくは２５～３５倍量（ｖ／ｗ）（より好ましくは３０倍量（ｖ／ｗ））を添加する。
工程２の反応温度は、好ましくは４５～５５℃（特に好ましくは５０℃）の温度である。
工程２の反応時間は、好ましくは０．５～１．５時間（より好ましくは１時間）である。
【0063】
（１当量のフマル酸とのＩＶ型結晶の製造方法）
本明細書中における一実施形態として、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＶ型結晶は、例えば以下の２工程を含む方法により得られる。
工程１ 化合物（Ｉ）にフマル酸及び溶媒として水を添加し、任意選択で種結晶を添加する工程。
工程２ 前記工程で得られた懸濁液を２時間以下の短時間攪拌し、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸との結晶を得る工程。
その後、濾取し、固体を回収する。
工程１のフマル酸は、化合物（Ｉ）のフリー体１当量に対して、フマル酸を好ましくは１～５当量（より好ましくは３当量）添加する。
工程１の溶媒として水を化合物（Ｉ）のフリー体に対して好ましくは１５～２５倍量（より好ましくは２０倍量）を添加する。
工程２の反応時間は、好ましくは４５～５５℃（特に好ましくは５０℃）である。
工程２の反応温度は、好ましくは１～２時間（より好ましくは１．５時間）である。
本明細書中における一実施形態として、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＶ型結晶は、例えば以下の２工程を含む方法により得られる。
工程１ 化合物（Ｉ）にフマル酸及び溶媒として水を添加し、任意選択で種結晶を添加する工程。
工程２ 前記工程で得られた懸濁液を２時間以下の短時間攪拌し、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸との結晶を得る工程。
その後、濾取し、固体を回収する。
工程１のフマル酸は、化合物（Ｉ）のフリー体１当量に対して、フマル酸を好ましくは１～５当量（より好ましくは３当量）添加する。
工程１の溶媒として水を化合物（Ｉ）のフリー体に対して好ましくは１５～２５倍量（より好ましくは２０倍量）を添加する。
工程２の反応時間は、好ましくは４５～５５℃（特に好ましくは５０℃）である。
工程２の反応温度は、好ましくは１～２時間（より好ましくは１．５時間）である。
【0064】
（０．５当量のフマル酸とのＩ型結晶の製造方法）
本明細書中における一実施形態として、化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸とのＩ型結晶は、例えば以下の２工程を含む方法により得られる。
工程１ 化合物（Ｉ）にフマル酸及び溶媒としての水を添加し、任意選択で種結晶を添加する工程。
工程２ 前記工程で得られた懸濁液を、好ましくは室温以上溶媒の沸点以下の温度で、攪拌し、結晶を得る工程。
その後濾取し、固体を回収し、乾燥する。
工程１のフマル酸は、化合物（Ｉ）のフリー体１当量に対して、フマル酸を好ましくは０．５～１当量（より好ましくは０．５～０．７５当量、最も好ましくは０．５当量）添加する。
工程１の溶媒としての水は化合物（Ｉ）のフリー体に対して好ましくは１０～４０倍量（ｖ／ｗ）（より好ましくは１５～２５倍量（ｖ／ｗ）、最も好ましくは２０倍量（ｖ／ｗ））を添加する。
工程２の反応温度は、好ましくは４０～６０℃（より好ましくは４５～５５℃、最も好ましくは５０℃）である。
工程２の反応時間は、好ましくは４８～１２０時間（より好ましくは７２～９６時間、最も好ましくは９３．５時間）である。
本明細書中における一実施形態として、化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸とのＩ型結晶は、例えば以下の２工程を含む方法により得られる。
工程１ 化合物（Ｉ）にフマル酸及び溶媒としての水を添加し、任意選択で種結晶を添加する工程。
工程２ 前記工程で得られた懸濁液を、好ましくは室温以上溶媒の沸点以下の温度で、攪拌し、結晶を得る工程。
その後濾取し、固体を回収し、乾燥する。
工程１のフマル酸は、化合物（Ｉ）のフリー体１当量に対して、フマル酸を好ましくは０．５～１当量（より好ましくは０．５～０．７５当量、最も好ましくは０．５当量）添加する。
工程１の溶媒としての水は化合物（Ｉ）のフリー体に対して好ましくは１０～４０倍量（ｖ／ｗ）（より好ましくは１５～２５倍量（ｖ／ｗ）、最も好ましくは２０倍量（ｖ／ｗ））を添加する。
工程２の反応温度は、好ましくは４０～６０℃（より好ましくは４５～５５℃、最も好ましくは５０℃）である。
工程２の反応時間は、好ましくは４８～１２０時間（より好ましくは７２～９６時間、最も好ましくは９３．５時間）である。
【0065】
（０．５当量のフマル酸とのＩＩ型結晶の製造方法）
本明細書中における一実施形態として、化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸とのＩＩ型結晶は、例えば以下の２工程を含む方法により得られる。
工程１ 化合物（Ｉ）にフマル酸及びエタノールを添加し、任意選択で種結晶を添加する工程。
工程２ 前記工程で得られた懸濁液を、好ましくは室温以上溶媒の沸点以下の温度で、攪拌し、結晶を得る工程。
その後濾取し、固体を回収し、乾燥する。
工程１のフマル酸の量は、化合物（Ｉ）のフリー体１当量に対して、フマル酸を好ましくは０．５～１当量（好ましくは１当量）添加する。
工程１の溶媒としてのエタノールは、化合物（Ｉ）のフリー体に対して好ましくは１０～４０倍量（ｖ／ｗ）（より好ましくは１５～２５倍量（ｖ／ｗ）、最も好ましくは２０倍量（ｖ／ｗ））を添加する。
工程２の反応温度は、好ましくは４０～６０℃（より好ましくは４５～５５℃、最も好ましくは５０℃）である。
工程２の反応時間は、好ましくは６～４８時間（より好ましくは１２～２４時間、最も好ましくは１９．５時間）である。
本明細書中における一実施形態として、化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸とのＩＩ型結晶は、例えば以下の２工程を含む方法により得られる。
工程１ 化合物（Ｉ）にフマル酸及びエタノールを添加し、任意選択で種結晶を添加する工程。
工程２ 前記工程で得られた懸濁液を、好ましくは室温以上溶媒の沸点以下の温度で、攪拌し、結晶を得る工程。
その後濾取し、固体を回収し、乾燥する。
工程１のフマル酸の量は、化合物（Ｉ）のフリー体１当量に対して、フマル酸を好ましくは０．５～１当量（好ましくは１当量）添加する。
工程１の溶媒としてのエタノールは、化合物（Ｉ）のフリー体に対して好ましくは１０～４０倍量（ｖ／ｗ）（より好ましくは１５～２５倍量（ｖ／ｗ）、最も好ましくは２０倍量（ｖ／ｗ））を添加する。
工程２の反応温度は、好ましくは４０～６０℃（より好ましくは４５～５５℃、最も好ましくは５０℃）である。
工程２の反応時間は、好ましくは６～４８時間（より好ましくは１２～２４時間、最も好ましくは１９．５時間）である。
【0066】
化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶、フリー体ＩＩ型結晶、フリー体Ｉ型結晶、１当量のフマル酸とのＶ型結晶、０．５当量のフマル酸とのＩ型結晶、０．５当量のフマル酸とのＩＩ型結晶は、非吸湿性、取得再現性、固体安定性、経口吸収性などの医薬品製造において有利な性質の少なくとも一つを備える。
中でも、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶、フリー体ＩＩ型結晶、フリー体Ｉ型結晶、１当量のフマル酸とのＶ型結晶は、化合物（Ｉ）の他の結晶形態と比較して非吸湿性、取得再現性、固体安定性、経口吸収性等の医薬品製造において有利な性質を有する。
中でも、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶、フリー体ＩＩ型結晶、フリー体Ｉ型結晶、１当量のフマル酸とのＶ型結晶は、化合物（Ｉ）の他の結晶形態と比較して非吸湿性、取得再現性、固体安定性、経口吸収性等の医薬品製造において有利な性質を有する。
【0067】
化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶は、吸湿性が低く、取得安定性がある。医薬品の開発候補化合物において、吸湿性が低く、安定して取得できることは医薬品の工業的生産の上で重要である。また、固体安定性と溶解性や、経口吸収性に優れるなどの医薬品として取り扱いやすい性質を持つ。したがって、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶は、医薬品又は医薬品原薬として必要とされる優れた性質を有する。
【0068】
化合物（Ｉ）のフリー体ＩＩ型結晶は吸湿性が低い。これは医薬品の開発候補化合物において、安定した品質の医薬品の工業的生産の上で重要である。また、固体安定性と溶解性や、経口吸収性に優れるなどの医薬品として取り扱いやすい性質を持つ。したがって化合物（Ｉ）のフリー体ＩＩ型結晶は、医薬品又は医薬品原薬として必要とされる優れた性質を有する。
【0069】
化合物（Ｉ）のフリー体Ｉ型結晶は、吸湿性が低く、取得安定性に優れる。医薬品の開発候補化合物が低い吸湿性と取得安定性を備えることは、安定した品質の医薬品の工業的生産の上でも重要である。したがって、化合物（Ｉ）のＩ型結晶は、医薬品又は医薬品原薬として必要とされる優れた性質を有する。
【0070】
化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＶ型結晶は、吸湿性が低く、取得安定性に優れる。医薬品の開発候補化合物が低い吸湿性と取得安定性を備えることは、安定した品質の医薬品の工業的生産の上でも重要である。したがって、本発明に係る化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＶ型結晶は、医薬品又は医薬品原薬として必要とされる優れた性質を有する。
【0071】
化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩ型結晶は、取得安定性に優れる。医薬品の開発候補化合物が取得安定性を備えることは、安定した品質の医薬品の工業的生産の上でも重要である。したがって、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩ型結晶は、医薬品又は医薬品原薬として必要とされる優れた性質を有する。
化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩ型結晶は固体として回収可能であるため、１当量のフマル酸とのＶ型結晶の製造のための中間体としても有用である。
化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩ型結晶は固体として回収可能であるため、１当量のフマル酸とのＶ型結晶の製造のための中間体としても有用である。
【0072】
化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩＩ型結晶は、取得安定性に優れる。医薬品の開発候補化合物が取得安定性を備えることは、安定した品質の医薬品の工業的生産の上でも重要である。したがって、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩＩ型結晶は、医薬品又は医薬品原薬として必要とされる優れた性質を有する。
【0073】
化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＶ型結晶は、取得安定性に優れる。医薬品の開発候補化合物が取得安定性を備えることは、安定した品質の医薬品の工業的生産の上でも重要である。したがって、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＶ型結晶は、医薬品又は医薬品原薬として必要とされる優れた性質を有する。
【0074】
化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸とのＩ型結晶は、取得安定性に優れる。医薬品の開発候補化合物が取得安定性を備えることは、安定した品質の医薬品の工業的生産の上でも重要である。したがって、化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸とのＩ型結晶は、医薬品又は医薬品原薬として必要とされる優れた性質を有する。
【0075】
化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸とのＩＩ型結晶は、取得安定性に優れる。医薬品の開発候補化合物が取得安定性を備えることは、安定した品質の医薬品の工業的生産の上でも重要である。したがって、本発明に係る化合物（Ｉ）の０．５当量のフマル酸とのＩＩ型の結晶は、医薬品又は医薬品原薬として必要とされる優れた性質を有する。
【0076】
（その他の酸との結晶）
本発明の他の形態は、化合物（Ｉ）の塩酸との結晶（Ｉ型結晶、ＩＩ型結晶、ＩＩＩ型結晶）、化合物（Ｉ）の臭化水素酸との結晶、化合物（Ｉ）の１当量のＬ－酒石酸との結晶、又は化合物（Ｉ）のコハク酸との結晶に関する。
これらの結晶についての粉末Ｘ線回折スペクトル及び示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の曲線は、図１９～３０に示されている。
これらの結晶についての粉末Ｘ線回折スペクトルにおける特徴的なピークは、参考例３～７に記載されている。これらの結晶は、参考例に記載された特徴的なピークから選択される３つ以上（好ましくは４つ以上、存在する場合にはより好ましくは５つ以上）のピークを有する結晶であり、特に好ましくは特徴的なピークのいずれもを有する結晶である。
また、これらの結晶についての示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピークの温度についても参考例に記載されている。
本発明の他の形態は、化合物（Ｉ）の塩酸との結晶（Ｉ型結晶、ＩＩ型結晶、ＩＩＩ型結晶）、化合物（Ｉ）の臭化水素酸との結晶、化合物（Ｉ）の１当量のＬ－酒石酸との結晶、又は化合物（Ｉ）のコハク酸との結晶に関する。
これらの結晶についての粉末Ｘ線回折スペクトル及び示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ）の曲線は、図１９～３０に示されている。
これらの結晶についての粉末Ｘ線回折スペクトルにおける特徴的なピークは、参考例３～７に記載されている。これらの結晶は、参考例に記載された特徴的なピークから選択される３つ以上（好ましくは４つ以上、存在する場合にはより好ましくは５つ以上）のピークを有する結晶であり、特に好ましくは特徴的なピークのいずれもを有する結晶である。
また、これらの結晶についての示差熱－熱重量同時測定により決定した吸熱ピークの温度についても参考例に記載されている。
【0077】
上述した化合物（Ｉ）のフリー体の結晶、酸との結晶（塩の結晶又は共結晶）に関して、析出した結晶は、例えば、ろ過、水による洗浄、減圧乾燥等の公知の分離精製手段によって、前記結晶の溶解溶液、混合溶液等から単離精製することができる。
【0078】
本発明の化合物（Ｉ）のフリー体の結晶、又は、酸との結晶（塩の結晶又は共結晶）は、優れたＨＥＲ２阻害活性を有する。また、ＨＥＲ２に対する優れた選択性を有している。したがって、本発明の化合物（Ｉ）のフリー体の結晶、又は、酸との結晶（塩の結晶又は共結晶）は、ＨＥＲ２過剰発現、ＨＥＲ２遺伝子増幅、又はＨＥＲ２変異等を有する疾患や悪性腫瘍に対し、抗腫瘍剤として有用であり、副作用が少ないという利点を有する。
本明細書において「ＨＥＲ２」とは、ヒト又は非ヒト哺乳動物のＨＥＲ２を含み、好ましくはヒトＨＥＲ２である。また、「ＨＥＲ２」の語にはアイソフォームが含まれる。
本発明の化合物（Ｉ）のフリー体の結晶、又は、酸との結晶（塩の結晶又は共結晶）は、その優れたＨＥＲ２阻害活性により、ＨＥＲ２が関与する疾患の治療のための医薬として有用である。
「ＨＥＲ２が関与する疾患」とは、ＨＥＲ２の機能を欠失、抑制及び／又は阻害することによって、発症率の低下、症状の寛解、緩和、及び／又は完治する疾患が挙げられる。このような疾患として、例えば、悪性腫瘍等が挙げられるがこれに限定はされない。好ましくは、ＨＥＲ２過剰発現、ＨＥＲ２遺伝子増幅、又はＨＥＲ２変異を有する悪性腫瘍である。
本明細書において「ＨＥＲ２」とは、ヒト又は非ヒト哺乳動物のＨＥＲ２を含み、好ましくはヒトＨＥＲ２である。また、「ＨＥＲ２」の語にはアイソフォームが含まれる。
本発明の化合物（Ｉ）のフリー体の結晶、又は、酸との結晶（塩の結晶又は共結晶）は、その優れたＨＥＲ２阻害活性により、ＨＥＲ２が関与する疾患の治療のための医薬として有用である。
「ＨＥＲ２が関与する疾患」とは、ＨＥＲ２の機能を欠失、抑制及び／又は阻害することによって、発症率の低下、症状の寛解、緩和、及び／又は完治する疾患が挙げられる。このような疾患として、例えば、悪性腫瘍等が挙げられるがこれに限定はされない。好ましくは、ＨＥＲ２過剰発現、ＨＥＲ２遺伝子増幅、又はＨＥＲ２変異を有する悪性腫瘍である。
【0079】
本発明の一形態の化合物（Ｉ）のフリー体の結晶、又は、酸との結晶（塩の結晶又は共結晶）は、野生型ＨＥＲ２、及びエクソン２０挿入変異などのＨＥＲ２ドメイン内に１つ以上の挿入変異、点変異、又は欠失変異などを有する変異型ＨＥＲ２を選択的に阻害する。
本発明の一実施形態は、野生型ＨＥＲ２、及びエクソン２０挿入変異の一つであるＹＶＭＡ挿入変異を有するＨＥＲ２などを含む変異型ＨＥＲ２に対する阻害活性を有する化合物（Ｉ）のフリー体の結晶、又は、酸との結晶（塩の結晶又は共結晶）又はこれを含む医薬もしくは医薬組成物を提供する。
本発明の一実施形態は、本発明の化合物（Ｉ）のフリー体の結晶、又は、酸との結晶（その塩の結晶又は共結晶）を含む、野生型ＨＥＲ２、及びＹＶＭＡ挿入変異を有するＨＥＲ２などを含む変異型ＨＥＲ２に対する阻害剤を提供する。
本発明の一実施形態は、野生型ＨＥＲ２、及びエクソン２０挿入変異の一つであるＹＶＭＡ挿入変異を有するＨＥＲ２などを含む変異型ＨＥＲ２に対する阻害活性を有する化合物（Ｉ）のフリー体の結晶、又は、酸との結晶（塩の結晶又は共結晶）又はこれを含む医薬もしくは医薬組成物を提供する。
本発明の一実施形態は、本発明の化合物（Ｉ）のフリー体の結晶、又は、酸との結晶（その塩の結晶又は共結晶）を含む、野生型ＨＥＲ２、及びＹＶＭＡ挿入変異を有するＨＥＲ２などを含む変異型ＨＥＲ２に対する阻害剤を提供する。
【0080】
ヒトＨＥＲ２遺伝子は、例えば配列番号１、配列番号３、又は配列番号５に示されるものであり、野生型ＨＥＲ２タンパク質は、例えば配列番号２、配列番号４、又は配列番号６に示されるアミノ酸配列からなる。ヒトＨＥＲ２遺伝子の塩基配列情報及び野生型ＨＥＲ２タンパク質のアミノ酸配列情報は、例えばアクセッション番号ＮＭ＿００４４４８、又はＮＭ＿００１２８９９３６、又はＮＭ＿００１００５８６２などにより得ることができる。
【0081】
いくつかの実施形態において、本発明の一形態の化合物（Ｉ）のフリー体の結晶、又は、酸との結晶（塩の結晶又は共結晶）は、配列番号２に示されるアミノ酸配列を基準として、Ｇ３０９Ａ、Ｓ３１０Ｆ、Ｒ６７８Ｑ、Ｌ７５５Ｓ、Ｌ７５５＿Ｔ７５９ｄｅｌ、Ｄ７６９Ｈ、Ａ７７５＿Ｇ７７６ｉｎｓＹＶＭＡ、Ｖ７７７Ｌ、Ｖ８４２Ｉ、Ｒ８９６Ｃのうちの１つ以上の変異を含む変異型ＨＥＲ２に対する阻害活性を示す。他の実施形態では、本発明の一形態の化合物（Ｉ）のフリー体の結晶、又は、酸との結晶（塩の結晶又は共結晶）は、配列番号２に示されるアミノ酸配列を基準として、Ａ７７５＿Ｇ７７６ｉｎｓＹＶＭＡを含む変異型ＨＥＲ２に対する阻害活性を示す。
いくつかの実施形態において、本発明の一形態の化合物（Ｉ）のフリー体の結晶、又は、酸との結晶（塩の結晶又は共結晶）は、配列番号４に示されるアミノ酸配列を基準として、Ｇ２９４Ａ、Ｓ２９５Ｆ、Ｒ６６３Ｑ、Ｌ７４０Ｓ、Ｌ７４０＿Ｔ７４４ｄｅｌ、Ｄ７５４Ｈ、Ａ７６０＿Ｇ７６１ｉｎｓＹＶＭＡ、Ｖ７６２Ｌ、Ｖ８２７Ｉ、Ｒ８８１Ｃのうちの１つ以上の変異を含む変異型ＨＥＲ２に対する阻害活性を示す。他の実施形態では、本発明の一形態の化合物（Ｉ）のフリー体の結晶、又は、酸との結晶（塩の結晶又は共結晶）は、配列番号４に示されるアミノ酸配列を基準として、Ａ７６０＿Ｇ７６１ｉｎｓＹＶＭＡを含む変異型ＨＥＲ２に対する阻害活性を示す。
いくつかの実施形態において、本発明の一形態の化合物（Ｉ）、又は、酸との結晶（塩の結晶又は共結晶）は、配列番号６に示されるアミノ酸配列を基準として、Ｇ２７９Ａ、Ｓ２８０Ｆ、Ｒ６４８Ｑ、Ｌ７２５Ｓ、Ｌ７２５＿Ｔ７２９ｄｅｌ、Ｄ７３９Ｈ、Ａ７４５＿Ｇ７４６ｉｎｓＹＶＭＡ、Ｖ７４７Ｌ、Ｖ８１２Ｉ、Ｒ８６６Ｃのうちの１つ以上の変異を含む変異型ＨＥＲ２に対する阻害活性を示す。他の実施形態では、本発明の一形態の化合物（Ｉ）のフリー体の結晶、又は、酸との結晶（塩の結晶又は共結晶）は、配列番号６に示されるアミノ酸配列を基準として、Ａ７４５＿Ｇ７４６ｉｎｓＹＶＭＡを含む変異型ＨＥＲ２に対する阻害活性を示す。
いくつかの実施形態において、本発明の一形態の化合物（Ｉ）のフリー体の結晶、又は、酸との結晶（塩の結晶又は共結晶）は、配列番号４に示されるアミノ酸配列を基準として、Ｇ２９４Ａ、Ｓ２９５Ｆ、Ｒ６６３Ｑ、Ｌ７４０Ｓ、Ｌ７４０＿Ｔ７４４ｄｅｌ、Ｄ７５４Ｈ、Ａ７６０＿Ｇ７６１ｉｎｓＹＶＭＡ、Ｖ７６２Ｌ、Ｖ８２７Ｉ、Ｒ８８１Ｃのうちの１つ以上の変異を含む変異型ＨＥＲ２に対する阻害活性を示す。他の実施形態では、本発明の一形態の化合物（Ｉ）のフリー体の結晶、又は、酸との結晶（塩の結晶又は共結晶）は、配列番号４に示されるアミノ酸配列を基準として、Ａ７６０＿Ｇ７６１ｉｎｓＹＶＭＡを含む変異型ＨＥＲ２に対する阻害活性を示す。
いくつかの実施形態において、本発明の一形態の化合物（Ｉ）、又は、酸との結晶（塩の結晶又は共結晶）は、配列番号６に示されるアミノ酸配列を基準として、Ｇ２７９Ａ、Ｓ２８０Ｆ、Ｒ６４８Ｑ、Ｌ７２５Ｓ、Ｌ７２５＿Ｔ７２９ｄｅｌ、Ｄ７３９Ｈ、Ａ７４５＿Ｇ７４６ｉｎｓＹＶＭＡ、Ｖ７４７Ｌ、Ｖ８１２Ｉ、Ｒ８６６Ｃのうちの１つ以上の変異を含む変異型ＨＥＲ２に対する阻害活性を示す。他の実施形態では、本発明の一形態の化合物（Ｉ）のフリー体の結晶、又は、酸との結晶（塩の結晶又は共結晶）は、配列番号６に示されるアミノ酸配列を基準として、Ａ７４５＿Ｇ７４６ｉｎｓＹＶＭＡを含む変異型ＨＥＲ２に対する阻害活性を示す。
【0082】
また、いくつかの実施形態において、あるＨＥＲ２アイソフォームにおける変異において、アミノ酸の欠失や挿入によって、配列番号２で示されるアミノ酸の位置とは異なる場合であっても配列番号２で示されるアミノ酸の位置に相当する位置の変異と同様であると解される。そのため、例えば、配列番号２で表されるＨＥＲ２における３０９番目のグリシンは、配列番号４で示されるアミノ酸配列からなるＨＥＲ２においては、２９４番目のグリシンに相当する。そのため、例えば、「Ｇ３０９Ａ」は、配列番号２で表されるＨＥＲ２の３０９番目のグリシンがアラニンに変異していることを意味するが、配列番号４で示されるアミノ酸配列からなるＨＥＲ２においては、２９４番目のアミノ酸に相当する位置であるため、配列番号４で示されるアミノ酸配列からなるＨＥＲ２における「Ｇ２９４Ａ」は配列番号２で表されるＨＥＲ２における「Ｇ３０９Ａ」に相当する。なお、あるＨＥＲ２アイソフォームのあるアミノ酸が、配列番号２で示されるアミノ酸のどの位置に相当するアミノ酸であるかどうかは、例えば、ＢＬＡＳＴのＭｕｌｔｉｐｌｅ Ａｌｉｇｎｍｅｎｔにより確認することができる。
【0083】
配列リスト
［表Ａ］
［表Ａ］
【0084】
本発明の一実施形態は、上述した化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））を含む抗腫瘍剤を提供する。また、本発明の一実施形態は、腫瘍の治療方法であって、それを必要とする対象に、上述した化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））の有効量を投与することを含む方法を提供する。本発明の一実施形態は、抗腫瘍剤を製造するための化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））の使用が提供される。また、本発明の一実施形態は、腫瘍の治療に使用するための化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））が提供される。
【0085】
本発明の結晶は、腫瘍を外科的に摘出した後に再発防止のために行われる術後補助化学療法に用いるものであっても、腫瘍を外科的に摘出するために事前行われる術前補助化学療法に用いるものであってもよい。
【0086】
本発明の対象となる腫瘍は特に制限はされないが、例えば、脳腫瘍、頭頚部癌、消化器癌（食道癌、胃癌、十二指腸癌、肝臓癌、胆道癌（胆嚢・胆管癌等）、膵臓癌、結腸直腸癌（結腸癌、直腸癌等）等）、肺癌（非小細胞肺癌、小細胞肺癌、中皮腫等）、乳癌、生殖器癌（卵巣癌、子宮癌（子宮頚癌、子宮体癌等）等）、泌尿器癌（腎癌、膀胱癌、前立腺癌、精巣腫瘍等）、造血器腫瘍（白血病、悪性リンパ腫、多発性骨髄腫等）、骨・軟部腫瘍、皮膚癌等が挙げられ、好ましくは肺癌、乳癌、胃癌、結腸直腸癌、膀胱癌、胆道癌、又は子宮癌であり、より好ましくは肺癌、乳癌、胃癌、膀胱癌、又は胆道癌である。
【0087】
一実施態様において、腫瘍は脳腫瘍である。本発明の化合物は、血液脳関門の通過を必要とする脳の症状の治療に有用であり得る。一実施態様の化合物は、脳への送達のための血液脳関門の好ましい通過性、すなわち優れた脳移行性を有する。化合物の脳への移行性の指標としては、脳内の化合物濃度、Ｋｐ値（脳対血漿中薬物濃度比）がある。
本発明の化合物で治療される脳腫瘍は、転移性脳腫瘍及び原発性脳腫瘍を含む。
脳腫瘍は特に制限はないが、例えば、転移性脳腫瘍（例えば、肺癌、乳癌、胃癌、結腸直腸癌、膀胱癌、胆道癌、子宮癌等（好ましくは肺癌、乳癌又は胃癌）の脳転移）、毛様細胞性星状細胞腫、びまん性星細胞腫、乏突起膠腫・乏突起星細胞腫、退形成性星細胞腫・退形成性乏突起膠腫、退形成性乏突起星細胞腫、膠芽腫、上衣腫、退形成性上衣腫、神経節膠腫、中枢性神経細胞腫、髄芽腫、胚腫（ｇｅｒｍｉｎｏｍａ）、中枢神経系悪性リンパ腫、髄膜腫、神経鞘腫、ＧＨ産生下垂体腺腫、ＰＲＬ産生下垂体腺腫、ＡＣＴＨ産生下垂体腺腫、非機能性下垂体腺腫、頭蓋咽頭腫、脊索腫、血管芽腫、類上皮腫等が挙げられる。
本発明の化合物で治療される脳腫瘍は、転移性脳腫瘍及び原発性脳腫瘍を含む。
脳腫瘍は特に制限はないが、例えば、転移性脳腫瘍（例えば、肺癌、乳癌、胃癌、結腸直腸癌、膀胱癌、胆道癌、子宮癌等（好ましくは肺癌、乳癌又は胃癌）の脳転移）、毛様細胞性星状細胞腫、びまん性星細胞腫、乏突起膠腫・乏突起星細胞腫、退形成性星細胞腫・退形成性乏突起膠腫、退形成性乏突起星細胞腫、膠芽腫、上衣腫、退形成性上衣腫、神経節膠腫、中枢性神経細胞腫、髄芽腫、胚腫（ｇｅｒｍｉｎｏｍａ）、中枢神経系悪性リンパ腫、髄膜腫、神経鞘腫、ＧＨ産生下垂体腺腫、ＰＲＬ産生下垂体腺腫、ＡＣＴＨ産生下垂体腺腫、非機能性下垂体腺腫、頭蓋咽頭腫、脊索腫、血管芽腫、類上皮腫等が挙げられる。
【0088】
本明細書において、化合物の「有効量」という用語は、対象の生物学的又は医学的応答、例えば、酵素やタンパク質活性の減少もしくは阻害を引き起こし、又は症状を改善し、状態を緩和し、疾患の進行を遅くもしくは遅延させる、などの、本発明の化合物の量（治療有効量）を指す。
本明細書において、「対象」という用語は、哺乳動物及び非哺乳動物を包含する。哺乳動物の例としては、限定されないが、ヒト、チンパンジー、類人猿、サル、ウシ、ウマ、ヒツジ、ヤギ、ブタ、ウサギ、イヌ、ネコ、ラット、マウス、モルモット、ハリネズミ、カンガルー、モグラ、イノシシ、クマ、トラ、ライオンなどが挙げられる。非哺乳動物の例としては、限定されないが、鳥類、魚類、は虫類などが挙げられる。一実施形態において、対象はヒトであり、本明細書で開示される症状、状態、又は疾患のための処置を必要とすると診断されたヒトであってもよい。
本明細書において、「対象」という用語は、哺乳動物及び非哺乳動物を包含する。哺乳動物の例としては、限定されないが、ヒト、チンパンジー、類人猿、サル、ウシ、ウマ、ヒツジ、ヤギ、ブタ、ウサギ、イヌ、ネコ、ラット、マウス、モルモット、ハリネズミ、カンガルー、モグラ、イノシシ、クマ、トラ、ライオンなどが挙げられる。非哺乳動物の例としては、限定されないが、鳥類、魚類、は虫類などが挙げられる。一実施形態において、対象はヒトであり、本明細書で開示される症状、状態、又は疾患のための処置を必要とすると診断されたヒトであってもよい。
【0089】
化合物（Ｉ）、その塩の結晶又は共結晶を医薬として用いるにあたっては、当該結晶を粉砕するか又は粉砕することなく、治療目的に応じて各種の投与形態を採用可能であり、該形態としては、例えば、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、細粒剤、散剤、ドライシロップ剤等の経口剤；坐剤、吸入剤、点鼻剤、軟膏剤、貼付剤、注射剤等の非経口剤のいずれでもよい。これらの投与形態に適した医薬組成物は、薬学的に許容される担体を用いて、当業者に公知慣用の製剤方法により製造できる。
【0090】
本発明の一実施形態は、上述した化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））を含む抗腫瘍剤を提供する。また、本発明の一実施形態は、腫瘍の治療方法であって、それを必要とする対象に、上述した化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））の有効量を投与することを含む方法を提供する。また、本発明の一実施形態は、抗腫瘍剤を製造するための、上述した化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））の使用が提供される。また、本発明の一実施形態は、腫瘍の治療に使用するための、上述した化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））が提供される。
本発明の一実施形態は、上述した化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））を含む経口投与用の抗腫瘍剤を提供する。また、本発明の一実施形態は、腫瘍の治療方法であって、それを必要とする対象に、上述した化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））の有効量を経口投与することを含む方法を提供する。また、本発明の一実施形態は、経口投与用の抗腫瘍剤を製造するための、上述した化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））の使用が提供される。また、本発明の一実施形態は、経口投与して腫瘍の治療に使用するための、上述した化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））が提供される。
本発明の一実施形態は、上述した化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））を含む経口投与用の抗腫瘍剤を提供する。また、本発明の一実施形態は、腫瘍の治療方法であって、それを必要とする対象に、上述した化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））の有効量を経口投与することを含む方法を提供する。また、本発明の一実施形態は、経口投与用の抗腫瘍剤を製造するための、上述した化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））の使用が提供される。また、本発明の一実施形態は、経口投与して腫瘍の治療に使用するための、上述した化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））が提供される。
【0091】
本発明の一形態は、上述した化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））を含む医薬組成物が提供される。本発明の一実施形態の医薬組成物は、上述した化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））、及び薬学的に許容される担体を含む。また、本発明の一実施形態は、医薬組成物を製造するための、上述した化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））の使用が提供される。本発明の別の一実施形態は、医薬として使用するための、上述した化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））が提供される。本発明の一実施形態では、（ｉ）上述した化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））を含む医薬組成物と（ｉｉ）該組成物の使用説明書とを含むキットが提供される。
【0092】
薬学的に許容される担体としては、製剤素材として慣用の各種有機或いは無機担体物質が用いられ、固形製剤における賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、コーティング剤、液状製剤における溶剤、溶解補助剤、懸濁化剤、等張化剤、緩衝剤、無痛化剤等として配合される。また、必要に応じて防腐剤、抗酸化剤、着色剤、甘味剤、安定化剤等の製剤添加物を用いることもできる。
【0093】
賦形剤としては、乳糖、白糖、Ｄ－マンニトール、デンプン、結晶セルロース、ケイ酸カルシウム等が挙げられる。
結合剤としては、ヒドロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、ポリビニルピロリドン、アメ粉、ヒプロメロース等が挙げられる。
崩壊剤としては、デンプングリコール酸ナトリウム、カルメロースカルシウム、クロスカルメロースナトリウム、クロスポビドン、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、部分アルファー化デンプン等が挙げられる。
滑沢剤としては、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ショ糖脂肪酸エステル、ステアリン酸、フマル酸ステアリルナトリウム等が挙げられる。
コーティング剤としては、エチルセルロース、アミノアルキルメタクリレートコポリマーＲＳ、ヒプロメロース、白糖等が挙げられる。
溶剤としては、水、プロピレングリコール、生理食塩液が挙げられる。
溶解補助剤としては、ポリエチレングリコール、エタノール、α－シクロデキストリン、マクロゴール４００、ポリソルベート８０等が挙げられる。
懸濁化剤としては、カラギーナン、結晶セルロース・カルメロースナトリウム、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油が挙げられる。
等張化剤としては、塩化ナトリウム、グリセリン、塩化カリウム等が挙げられる。
ｐＨ調節剤・緩衝剤としては、クエン酸ナトリウム、塩酸、乳酸、リン酸、リン酸二水素ナトリウム等が挙げられる。
無痛化剤としては、プロカイン塩酸塩、リドカイン等が挙げられる。
防腐剤としては、パラオキシ安息香酸エチル、クレゾール、ベンザルコニウム塩化物等が挙げられる。
抗酸化剤としては、亜硫酸ナトリウム、アスコルビン酸、天然ビタミンＥ等が挙げられる。
着色剤としては、酸化チタン、三二酸化鉄、食用青色１号、銅クロロフィル等が挙げられる。
矯味・矯臭剤としてはアスパルテーム、サッカリン、スクラロース、ｌ－メントール、ミントフレーバー等が挙げられる。
安定化剤としては、ピロ亜硫酸ナトリウム、エデト酸ナトリウム、エリソルビン酸、酸化マグネシウム、ジブチルヒドロキシトルエン等が挙げられる。
結合剤としては、ヒドロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、ポリビニルピロリドン、アメ粉、ヒプロメロース等が挙げられる。
崩壊剤としては、デンプングリコール酸ナトリウム、カルメロースカルシウム、クロスカルメロースナトリウム、クロスポビドン、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース、部分アルファー化デンプン等が挙げられる。
滑沢剤としては、タルク、ステアリン酸マグネシウム、ショ糖脂肪酸エステル、ステアリン酸、フマル酸ステアリルナトリウム等が挙げられる。
コーティング剤としては、エチルセルロース、アミノアルキルメタクリレートコポリマーＲＳ、ヒプロメロース、白糖等が挙げられる。
溶剤としては、水、プロピレングリコール、生理食塩液が挙げられる。
溶解補助剤としては、ポリエチレングリコール、エタノール、α－シクロデキストリン、マクロゴール４００、ポリソルベート８０等が挙げられる。
懸濁化剤としては、カラギーナン、結晶セルロース・カルメロースナトリウム、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油が挙げられる。
等張化剤としては、塩化ナトリウム、グリセリン、塩化カリウム等が挙げられる。
ｐＨ調節剤・緩衝剤としては、クエン酸ナトリウム、塩酸、乳酸、リン酸、リン酸二水素ナトリウム等が挙げられる。
無痛化剤としては、プロカイン塩酸塩、リドカイン等が挙げられる。
防腐剤としては、パラオキシ安息香酸エチル、クレゾール、ベンザルコニウム塩化物等が挙げられる。
抗酸化剤としては、亜硫酸ナトリウム、アスコルビン酸、天然ビタミンＥ等が挙げられる。
着色剤としては、酸化チタン、三二酸化鉄、食用青色１号、銅クロロフィル等が挙げられる。
矯味・矯臭剤としてはアスパルテーム、サッカリン、スクラロース、ｌ－メントール、ミントフレーバー等が挙げられる。
安定化剤としては、ピロ亜硫酸ナトリウム、エデト酸ナトリウム、エリソルビン酸、酸化マグネシウム、ジブチルヒドロキシトルエン等が挙げられる。
【0094】
経口用固形製剤を調製する場合は、化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））に賦形剤、必要に応じて結合剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味・矯臭剤等を加えた後、常法により錠剤、被覆錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤等を製造することができる。
注射剤を調製する場合は、化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））にｐＨ調整剤・緩衝剤、安定化剤、等張化剤、局所麻酔剤等を添加し、常法により皮下、筋肉内及び静脈内用注射剤を製造することができる。
注射剤を調製する場合は、化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））にｐＨ調整剤・緩衝剤、安定化剤、等張化剤、局所麻酔剤等を添加し、常法により皮下、筋肉内及び静脈内用注射剤を製造することができる。
【0095】
各投与単位形態中に配合されるべき化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））の量は、これを適用すべき患者の症状により、或いはその剤形等により一定ではないが、一般に投与単位形態あたり、化合物（Ｉ）のフリー体換算で、経口剤では約０．０５～１０００ｍｇ、注射剤では約０．１～５００ｍｇ、坐剤又は外用剤では約１～１０００ｍｇとするのが望ましい。
【0096】
また、各投与形態を有する薬剤の化合物（Ｉ）の結晶（すなわち、化合物（Ｉ）のフリー体の結晶又は化合物（Ｉ）の酸との結晶（塩の結晶若しくは共結晶））の１日あたりの投与量は、患者の症状、体重、年齢、性別等によって異なり一概には決定できないが、通常成人（体重５０ｋｇ）１日あたり化合物（Ｉ）のフリー体換算で、約０．０５～５０００ｍｇ、好ましくは０．１～１０００ｍｇとすればよく、これを１日１回又は２～３回程度に分けて投与するのが好ましい。
【実施例】
【0097】
以下、実施例を挙げて本発明を更に具体的に説明するが、本発明はこれらによって何ら限定されるものではない。本発明は実施例により十分に説明されているが、当業者により種々の変更及び／又は修飾が可能であろうことは理解される。したがって、そのような変更及び／又は修飾が本発明の範囲を逸脱するものでない限り、それらは本発明に包含される。
【0098】
以下の化合物の実施例において、％は特記しない限り重量パーセントを示す。
【0099】
実施例で用いた各種試薬は、特に記載の無い限り市販品を使用した。シリカゲルカラムクロマトグラフィーには、モリテックス社製プリフパック（登録商標）ＳＩ、バイオタージ社製ＫＰ－Ｓｉｌ（登録商標）Ｓｉｌｉｃａプレパックドカラム、又はバイオタージ社製ＨＰ－Ｓｉｌ（登録商標）Ｓｉｌｉｃａプレパックドカラムを用いた。塩基性シリカゲルカラムクロマトグラフィーにはモリテックス社製プリフパック（登録商標）ＮＨ又はバイオタージ社製ＫＰ－ＮＨ（登録商標）プレパックドカラムを用いた。分取用薄層クロマトグラフィーにはメルク社製ＫｉｅｓｅｌｇｅｌＴＭ６０Ｆ２５４，Ａｒｔ．５７４４又は和光社ＮＨ２シリカゲル６０Ｆ２５４プレートを用いた。ＮＭＲスペクトルは、ＡＬ４００（４００ＭＨｚ；日本電子（ＪＥＯＬ））、Ｍｅｒｃｕｒｙ４００（４００ＭＨｚ；アジレント・テクノロジー）型スペクトロメータ、又は４００ＭＮＭＲプローブ（Ｐｒｏｔａｓｉｓ）を装備したＩｎｏｖａ４００（４００ＭＨｚ；アジレント・テクノロジー）型スペクトロメータを使用し、重溶媒中にテトラメチルシランを含む場合は内部基準としてテトラメチルシランを用い、それ以外の場合には内部基準としてＮＭＲ溶媒を用いて測定し、全δ値をｐｐｍで示した。
【0100】
ＬＣＭＳスペクトルはＷａｔｅｒｓ社製ＡＣＱＵＩＴＹ ＳＱＤ（四重極型）を用いて下記条件にて測定した。
カラム：Ｗａｔｅｒｓ製 ＡＣＱＵＩＴＹ ＵＰＬＣ（登録商標）ＢＥＨ Ｃ１８，２．１Ｘ５０ｍｍ，１．７μｍ
ＭＳ検出：ＥＳＩ ｐｏｓｉｔｉｖｅ
ＵＶ検出：２５４及び２１０ｎｍ
カラム流速：０．５ｍＬ／ｍｉｎ
移動相Ａ：０．１％ギ酸水溶液
移動相Ｂ：０．１％ギ酸アセトニトリル溶液
インジェクション量：１μＬ
グラディエント（表１）
カラム：Ｗａｔｅｒｓ製 ＡＣＱＵＩＴＹ ＵＰＬＣ（登録商標）ＢＥＨ Ｃ１８，２．１Ｘ５０ｍｍ，１．７μｍ
ＭＳ検出：ＥＳＩ ｐｏｓｉｔｉｖｅ
ＵＶ検出：２５４及び２１０ｎｍ
カラム流速：０．５ｍＬ／ｍｉｎ
移動相Ａ：０．１％ギ酸水溶液
移動相Ｂ：０．１％ギ酸アセトニトリル溶液
インジェクション量：１μＬ
グラディエント（表１）
【0101】
【表1】
【0102】
逆相分取ＨＰＬＣ精製はＷＡＴＥＲＳ社製分取システムを用いて下記条件にて実施した。
カラム：ＹＭＣ社製ＹＭＣ－Ａｃｔｕｓ Ｔｒｉａｒｔ Ｃ１８，２０×５０ｍｍ，５μｍとＹＭＣ社製ＹＭＣ－Ａｃｔｕｓ Ｔｒｉａｒｔ Ｃ１８，２０×１０ｍｍ，５μｍを連結したものを使用した。
ＵＶ検出：２５４ｎｍ
ＭＳ検出：ＥＳＩ ｐｏｓｉｔｉｖｅ
カラム流速：２５ｍＬ／ｍｉｎ
移動相：水／アセトニトリル（０．１％ギ酸）
インジェクション量：０．１－０．５ｍＬ
カラム：ＹＭＣ社製ＹＭＣ－Ａｃｔｕｓ Ｔｒｉａｒｔ Ｃ１８，２０×５０ｍｍ，５μｍとＹＭＣ社製ＹＭＣ－Ａｃｔｕｓ Ｔｒｉａｒｔ Ｃ１８，２０×１０ｍｍ，５μｍを連結したものを使用した。
ＵＶ検出：２５４ｎｍ
ＭＳ検出：ＥＳＩ ｐｏｓｉｔｉｖｅ
カラム流速：２５ｍＬ／ｍｉｎ
移動相：水／アセトニトリル（０．１％ギ酸）
インジェクション量：０．１－０．５ｍＬ
【0103】
略号の意味を以下に示す。
ｓ：シングレット
ｄ：ダブレット
ｔ：トリプレット
ｄｔ：ダブル トリプレット
ｍ：マルチプレット
ＤＭＳＯ－ｄ６：重ジメチルスルホキシド
ＣＤＣｌ３：重クロロホルム
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
ＤＭＡ：Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド
ＮＭＰ：１－メチル－２－ピロリジノン
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド
ｓ：シングレット
ｄ：ダブレット
ｔ：トリプレット
ｄｔ：ダブル トリプレット
ｍ：マルチプレット
ＤＭＳＯ－ｄ６：重ジメチルスルホキシド
ＣＤＣｌ３：重クロロホルム
ＴＨＦ：テトラヒドロフラン
ＤＭＡ：Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド
ＮＭＰ：１－メチル－２－ピロリジノン
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド
【0104】
粉末Ｘ線回折測定
粉末Ｘ線回折は、試験物質適量を必要に応じてメノウ製乳鉢で軽く粉砕した後、次のいずれかの試験条件に従って測定した。
粉末Ｘ線回折は、試験物質適量を必要に応じてメノウ製乳鉢で軽く粉砕した後、次のいずれかの試験条件に従って測定した。
【0105】
装置：ＰＡＮａｌｙｔｉｃａｌ製ＥＭＰＹＲＥＡＮ（Ａ法）
反射法（集中法）
ターゲット：Ｃｕ
Ｘ線菅電流：４０ｍＡ
Ｘ線菅電圧：４５ｋＶ
走査範囲 ：２θ＝５．０～４０．０°
ステップ ：２θ＝０．０１３１°
平均時間／ステップ：８．６７０ｓ
スキャンスピード：０．００１５°／ｓ
発散スリット：１°
散乱スリット：２．０ ｍｍ
受光スリット：８．０ ｍｍ
装置：ＰＡＮａｌｙｔｉｃａｌ製ＥＭＰＹＲＥＡＮ（Ｂ法）
透過法
ターゲット：Ｃｕ
Ｘ線菅電流：４０ｍＡ
Ｘ線菅電圧：４５ｋＶ
走査範囲 ：２θ＝２．０～４０．０°
ステップ ：２θ＝０．００６６°
平均時間／ステップ：８．６７０ｓ
スキャンスピード：０．０００８°／ｓ
発散スリット：１／２°
散乱スリット：２．０ ｍｍ
受光スリット：無し
反射法（集中法）
ターゲット：Ｃｕ
Ｘ線菅電流：４０ｍＡ
Ｘ線菅電圧：４５ｋＶ
走査範囲 ：２θ＝５．０～４０．０°
ステップ ：２θ＝０．０１３１°
平均時間／ステップ：８．６７０ｓ
スキャンスピード：０．００１５°／ｓ
発散スリット：１°
散乱スリット：２．０ ｍｍ
受光スリット：８．０ ｍｍ
装置：ＰＡＮａｌｙｔｉｃａｌ製ＥＭＰＹＲＥＡＮ（Ｂ法）
透過法
ターゲット：Ｃｕ
Ｘ線菅電流：４０ｍＡ
Ｘ線菅電圧：４５ｋＶ
走査範囲 ：２θ＝２．０～４０．０°
ステップ ：２θ＝０．００６６°
平均時間／ステップ：８．６７０ｓ
スキャンスピード：０．０００８°／ｓ
発散スリット：１／２°
散乱スリット：２．０ ｍｍ
受光スリット：無し
【0106】
データ処理を含む装置の取り扱いは、各装置で指示された方法及び手順にしたがった。なお、各種スペクトルから得られる数値は、その結晶成長の方向、粒子の大きさ、測定条件等によって多少変動する場合がある。したがって、それらの数値は厳密に解されるべきではない。
【0107】
示差熱－熱重量同時測定（ＴＧ－ＤＴＡ測定）は、試験物質２～３ｍｇにつき、次の試験条件に従い試験を行った。
装置：ＴＧ／ＤＴＡ７２００
日立ハイテクサイエンス株式会社製
試料容器： アルミニウム製
昇温速度：２５～２９０℃まで１０℃／分で昇温
雰囲気ガス：空気（２００ｍＬ／分）
対照物質：空パン
データ処理を含む装置の取り扱いは、各装置で指示された方法及び手順にしたがった。
装置：ＴＧ／ＤＴＡ７２００
日立ハイテクサイエンス株式会社製
試料容器： アルミニウム製
昇温速度：２５～２９０℃まで１０℃／分で昇温
雰囲気ガス：空気（２００ｍＬ／分）
対照物質：空パン
データ処理を含む装置の取り扱いは、各装置で指示された方法及び手順にしたがった。
【0108】
合成例１ ７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミド（化合物（Ｉ））の合成
合成例１（１） ｔｅｒｔ－ブチル（２Ｓ，４Ｒ）－４－（４－アミノ－５－ヨード－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－７－イル）－２－メチルピロリジン－１－カルボキシラートの合成
ｔｅｒｔ－ブチル（２Ｓ，４Ｓ）－４－ヒドロキシ－２－メチルピロリジン－１－カルボキシラート（１９．０ｇ）と４－クロロ－５－ヨード－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン（１３．１ｇ）をＴＨＦ（１９０ｍＬ）に溶解して、０℃に冷却後、トリフェニルホスフィン（３７．２ｇ）とジイソプロピルアゾジカルボキシラート（２８．１ｍＬ）を加え、室温に昇温して１時間攪拌した。反応混合物を減圧濃縮した後、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル）にて精製し、対応するカップリング体を得た。得られた化合物はさらに精製することなく次の反応に用いた。
耐圧管中に、得られたカップリング体とＴＨＦ（１１４ｍＬ）とアンモニア水（１１４ｍＬ）を加え、１００℃にて１４時間攪拌した。反応混合物を室温に冷却した後、水（２８５ｍＬ）に注ぎ込み、室温にて５時間撹拌した。析出した固体をろ取し、水で洗浄し、乾燥することで目的物（３４．５ｇ）を得た。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ： ８．２７（ｓ，１Ｈ） ７．１５（ｓ，１Ｈ） ５．５５－５．７３（ｍ，２Ｈ） ５．１２－５．２５（ｍ，１Ｈ） ３．８６－４．１８（ｍ，２Ｈ） ３．４３－３．５７（ｍ，１Ｈ） ２．５９－２．６９（ｍ，１Ｈ） １．９２－２．０３（ｍ，１Ｈ） １．４８（ｓ，９Ｈ） １．３０－１．４０（ｍ，３Ｈ）
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ ４４４（ＭＨ＋）
合成例１（１） ｔｅｒｔ－ブチル（２Ｓ，４Ｒ）－４－（４－アミノ－５－ヨード－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－７－イル）－２－メチルピロリジン－１－カルボキシラートの合成
ｔｅｒｔ－ブチル（２Ｓ，４Ｓ）－４－ヒドロキシ－２－メチルピロリジン－１－カルボキシラート（１９．０ｇ）と４－クロロ－５－ヨード－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン（１３．１ｇ）をＴＨＦ（１９０ｍＬ）に溶解して、０℃に冷却後、トリフェニルホスフィン（３７．２ｇ）とジイソプロピルアゾジカルボキシラート（２８．１ｍＬ）を加え、室温に昇温して１時間攪拌した。反応混合物を減圧濃縮した後、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル）にて精製し、対応するカップリング体を得た。得られた化合物はさらに精製することなく次の反応に用いた。
耐圧管中に、得られたカップリング体とＴＨＦ（１１４ｍＬ）とアンモニア水（１１４ｍＬ）を加え、１００℃にて１４時間攪拌した。反応混合物を室温に冷却した後、水（２８５ｍＬ）に注ぎ込み、室温にて５時間撹拌した。析出した固体をろ取し、水で洗浄し、乾燥することで目的物（３４．５ｇ）を得た。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ： ８．２７（ｓ，１Ｈ） ７．１５（ｓ，１Ｈ） ５．５５－５．７３（ｍ，２Ｈ） ５．１２－５．２５（ｍ，１Ｈ） ３．８６－４．１８（ｍ，２Ｈ） ３．４３－３．５７（ｍ，１Ｈ） ２．５９－２．６９（ｍ，１Ｈ） １．９２－２．０３（ｍ，１Ｈ） １．４８（ｓ，９Ｈ） １．３０－１．４０（ｍ，３Ｈ）
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ ４４４（ＭＨ＋）
【0109】
合成例１（２） ４－アミノ－７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）－５－メチルピロリジン－３－イル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボン酸の合成
耐圧管に、合成例１（１）の化合物（２８．０ｇ）、１０％パラジウム炭素触媒（７２０ｍｇ）、ＮＭＰ（８４ｍＬ）、メタノール（２６ｍＬ）、トリエチルアミン（１７．６ｍＬ）を加えた後、一酸化炭素置換して、１００℃にて２時間攪拌した。反応混合物を室温に冷却し、２Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（７９ｍＬ）を加え、８０℃にて２時間攪拌した。反応混合物を室温に冷却し、セライトろ過し、メタノールで洗浄し、ろ液のメタノールを減圧濃縮した。さらに水を加えた後、水層をｔｅｒｔ－ブチルメチルエーテルで洗浄した。水層に１Ｍ硫酸水素カリウム水溶液を加えｐＨを約３に調整し、析出した固体をろ取し、水で洗浄し、乾燥することで目的物（２３．４ｇ）を得た。
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６）δ： ８．１４（ｓ，１Ｈ） ８．０８
（ｓ，１Ｈ） ５．１６－４．９３（ｍ，１Ｈ） ４．０７－３．７９（ｍ，２Ｈ） ３．６１－３．４５（ｍ，１Ｈ） ２．５３（ｍ，１Ｈ） ２．３３－２．０２（ｍ，１Ｈ） １．４２（ｓ，９Ｈ） １．２９（ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，３Ｈ）
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ ３６２（ＭＨ＋）
耐圧管に、合成例１（１）の化合物（２８．０ｇ）、１０％パラジウム炭素触媒（７２０ｍｇ）、ＮＭＰ（８４ｍＬ）、メタノール（２６ｍＬ）、トリエチルアミン（１７．６ｍＬ）を加えた後、一酸化炭素置換して、１００℃にて２時間攪拌した。反応混合物を室温に冷却し、２Ｍ水酸化ナトリウム水溶液（７９ｍＬ）を加え、８０℃にて２時間攪拌した。反応混合物を室温に冷却し、セライトろ過し、メタノールで洗浄し、ろ液のメタノールを減圧濃縮した。さらに水を加えた後、水層をｔｅｒｔ－ブチルメチルエーテルで洗浄した。水層に１Ｍ硫酸水素カリウム水溶液を加えｐＨを約３に調整し、析出した固体をろ取し、水で洗浄し、乾燥することで目的物（２３．４ｇ）を得た。
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ， ＤＭＳＯ－ｄ６）δ： ８．１４（ｓ，１Ｈ） ８．０８
（ｓ，１Ｈ） ５．１６－４．９３（ｍ，１Ｈ） ４．０７－３．７９（ｍ，２Ｈ） ３．６１－３．４５（ｍ，１Ｈ） ２．５３（ｍ，１Ｈ） ２．３３－２．０２（ｍ，１Ｈ） １．４２（ｓ，９Ｈ） １．２９（ｄ，Ｊ＝６．１Ｈｚ，３Ｈ）
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ ３６２（ＭＨ＋）
【0110】
合成例１（３） ｔｅｒｔ－ブチル （２Ｓ，４Ｒ）－４－（４－アミノ－６－ブロモ－５－（（（Ｒ）－１－フェニルエチル）カルバモイル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－７－イル）－２－メチルピロリジン－１－カルボキシラートの合成
合成例１（２）の化合物（１．００ｇ）、（Ｒ）－（＋）－１－フェニルエチルアミン（０．５０３ｇ）、ジイソプロピルエチルアミン（１．７９ｇ）、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）を加え、続いてＨＡＴＵ（１．５８ｇ）を加えて室温にて終夜攪拌した。反応混合物に酢酸エチル、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出し、合わせた有機層を水、次いで飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン：アセトン）にて精製し、アミド体（１．５３ｇ）を得た。得られた化合物はさらに精製することなく次の反応に用いた。
アミド体（１．５３ｇ）にクロロホルム（１５ｍＬ）を加え、０℃に冷却した後、Ｎ－ブロモスクシンイミド（０．８８ｇ）を加え、０℃にて１時間攪拌した。反応混合物を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル）にて精製し、目的物（１．３９ｇ）を得た。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ： ８．２１（ｓ，１Ｈ） ７．４２－７．２８（ｍ，５Ｈ） ６．９７（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ） ５．３６－５．２９（ｍ，１Ｈ） ５．２０－５．０７（ｍ，１Ｈ） ４．３０（ｔ，Ｊ＝１０．３Ｈｚ，１Ｈ） ４．０４－３．７２（ｍ，２Ｈ） ３．００－２．８６（ｍ，１Ｈ） ２．３８（ｄｔ，Ｊ＝１４．３，６．０Ｈｚ，１Ｈ） １．６３（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ） １．５３－１．４３（ｍ，１２Ｈ）
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ ５４３，５４５（ＭＨ＋）
合成例１（２）の化合物（１．００ｇ）、（Ｒ）－（＋）－１－フェニルエチルアミン（０．５０３ｇ）、ジイソプロピルエチルアミン（１．７９ｇ）、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）を加え、続いてＨＡＴＵ（１．５８ｇ）を加えて室温にて終夜攪拌した。反応混合物に酢酸エチル、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出し、合わせた有機層を水、次いで飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン：アセトン）にて精製し、アミド体（１．５３ｇ）を得た。得られた化合物はさらに精製することなく次の反応に用いた。
アミド体（１．５３ｇ）にクロロホルム（１５ｍＬ）を加え、０℃に冷却した後、Ｎ－ブロモスクシンイミド（０．８８ｇ）を加え、０℃にて１時間攪拌した。反応混合物を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル）にて精製し、目的物（１．３９ｇ）を得た。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ： ８．２１（ｓ，１Ｈ） ７．４２－７．２８（ｍ，５Ｈ） ６．９７（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ） ５．３６－５．２９（ｍ，１Ｈ） ５．２０－５．０７（ｍ，１Ｈ） ４．３０（ｔ，Ｊ＝１０．３Ｈｚ，１Ｈ） ４．０４－３．７２（ｍ，２Ｈ） ３．００－２．８６（ｍ，１Ｈ） ２．３８（ｄｔ，Ｊ＝１４．３，６．０Ｈｚ，１Ｈ） １．６３（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ） １．５３－１．４３（ｍ，１２Ｈ）
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ ５４３，５４５（ＭＨ＋）
【0111】
合成例１（４）７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－ブロモ－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミド
合成例１（３）の化合物（６００ｍｇ）にクロロホルム（３ｍＬ）を加え、０℃に冷却した後、トリフルオロ酢酸（４．４４ｇ）を加え、室温にて１時間攪拌した。反応混合物を減圧濃縮し、残渣にアセトニトリル（５ｍＬ）を加えて再度減圧濃縮し、アミン体を得た。得られた化合物はさらに精製することなく次の反応に用いた。
得られたアミン体にアセトニトリル（３ｍＬ）を加え、０℃に冷却した後、塩化アクリル（９９．９ｍｇ）、ジイソプロピルエチルアミン（７１３ｍｇ）を加え、０℃にて１時間攪拌した。反応混合物を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル：メタノール）にて精製し、目的物（２８１ｍｇ）を得た。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ： ８．２０（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ） ７．４２－７．３６（ｍ，４Ｈ） ７．３２－７．２８（ｍ，１Ｈ） ７．００－６．９４（ｍ，１Ｈ） ６．５７－６．３３（ｍ，２Ｈ） ５．７６－５．６６（ｍ，１Ｈ） ５．３６－５．２９（ｍ，１Ｈ） ５．１４－５．０８（ｍ，１Ｈ） ４，７１（ｔ，Ｊ＝９．９Ｈｚ，０．７Ｈ） ４．４２－４．２３（ｍ，１．６Ｈ） ３．８３（ｔ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，０．７Ｈ） ３．０３－２．９２（ｍ，１Ｈ） ２．６０－２．５７（ｍ，０．３Ｈ） ２．４４－２．４０（ｍ，０．７Ｈ） １．６４（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ） １．５６（ｄｄ，Ｊ＝１１．７，６．２Ｈｚ，３Ｈ）
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ ４９７，４９９（ＭＨ＋）
合成例１（３）の化合物（６００ｍｇ）にクロロホルム（３ｍＬ）を加え、０℃に冷却した後、トリフルオロ酢酸（４．４４ｇ）を加え、室温にて１時間攪拌した。反応混合物を減圧濃縮し、残渣にアセトニトリル（５ｍＬ）を加えて再度減圧濃縮し、アミン体を得た。得られた化合物はさらに精製することなく次の反応に用いた。
得られたアミン体にアセトニトリル（３ｍＬ）を加え、０℃に冷却した後、塩化アクリル（９９．９ｍｇ）、ジイソプロピルエチルアミン（７１３ｍｇ）を加え、０℃にて１時間攪拌した。反応混合物を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（酢酸エチル：メタノール）にて精製し、目的物（２８１ｍｇ）を得た。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ： ８．２０（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ） ７．４２－７．３６（ｍ，４Ｈ） ７．３２－７．２８（ｍ，１Ｈ） ７．００－６．９４（ｍ，１Ｈ） ６．５７－６．３３（ｍ，２Ｈ） ５．７６－５．６６（ｍ，１Ｈ） ５．３６－５．２９（ｍ，１Ｈ） ５．１４－５．０８（ｍ，１Ｈ） ４，７１（ｔ，Ｊ＝９．９Ｈｚ，０．７Ｈ） ４．４２－４．２３（ｍ，１．６Ｈ） ３．８３（ｔ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，０．７Ｈ） ３．０３－２．９２（ｍ，１Ｈ） ２．６０－２．５７（ｍ，０．３Ｈ） ２．４４－２．４０（ｍ，０．７Ｈ） １．６４（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，３Ｈ） １．５６（ｄｄ，Ｊ＝１１．７，６．２Ｈｚ，３Ｈ）
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ ４９７，４９９（ＭＨ＋）
【0112】
合成例１（５） ７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミド（化合物（Ｉ））の合成
合成例１（４）の化合物（６５ｍｇ）、ジクロロビス（トリフェニルホスフィン）ジパラジウム（９．２ｍｇ）、ヨウ化銅（Ｉ）（５．０ｍｇ）、シクロプロピルアセチレン（１３．０ｍｇ）、トリエチルアミン（３９．７ｍｇ）、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１．３ｍＬ）を加え、系内を窒素置換した後、７０℃にて２．５時間攪拌した。反応混合物に酢酸エチル、飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出し、合わせた有機層を水、次いで飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール）にて精製し、目的物（５０ｍｇ）を得た。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ： ８．２２（ｄ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，１Ｈ） ７．８２（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ） ７．４３－７．３５（ｍ，４Ｈ） ７．３０（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ） ６．５８－６．３４（ｍ，２Ｈ） ５．７７－５．６６（ｍ，１Ｈ） ５．３５－５．２０（ｍ，２Ｈ） ４．５４（ｔ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ，０．７Ｈ） ４．３５－４．２５（ｍ，１．６Ｈ） ３．８８（ｔ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，０．７Ｈ） ２．９０－２．７８（ｍ，１Ｈ） ２．６５－２．５６（ｍ，０．３Ｈ） ２．４９－２．４０（ｍ，０．７Ｈ） １．６３（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ） １．５６－１．４５（ｍ，４Ｈ） １．０３－０．９１（ｍ，２Ｈ） ０．８４－０．６９（ｍ，２Ｈ）
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ ４８３（ＭＨ＋）
合成例１（４）の化合物（６５ｍｇ）、ジクロロビス（トリフェニルホスフィン）ジパラジウム（９．２ｍｇ）、ヨウ化銅（Ｉ）（５．０ｍｇ）、シクロプロピルアセチレン（１３．０ｍｇ）、トリエチルアミン（３９．７ｍｇ）、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド（１．３ｍＬ）を加え、系内を窒素置換した後、７０℃にて２．５時間攪拌した。反応混合物に酢酸エチル、飽和塩化アンモニウム水溶液を加え、酢酸エチルで抽出し、合わせた有機層を水、次いで飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノール）にて精製し、目的物（５０ｍｇ）を得た。
１ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ３）δ： ８．２２（ｄ，Ｊ＝５．１Ｈｚ，１Ｈ） ７．８２（ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１Ｈ） ７．４３－７．３５（ｍ，４Ｈ） ７．３０（ｔ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ） ６．５８－６．３４（ｍ，２Ｈ） ５．７７－５．６６（ｍ，１Ｈ） ５．３５－５．２０（ｍ，２Ｈ） ４．５４（ｔ，Ｊ＝１０．１Ｈｚ，０．７Ｈ） ４．３５－４．２５（ｍ，１．６Ｈ） ３．８８（ｔ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，０．７Ｈ） ２．９０－２．７８（ｍ，１Ｈ） ２．６５－２．５６（ｍ，０．３Ｈ） ２．４９－２．４０（ｍ，０．７Ｈ） １．６３（ｄ，Ｊ＝７．０Ｈｚ，３Ｈ） １．５６－１．４５（ｍ，４Ｈ） １．０３－０．９１（ｍ，２Ｈ） ０．８４－０．６９（ｍ，２Ｈ）
ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ ４８３（ＭＨ＋）
【0113】
実施例１ ７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミド（化合物（Ｉ））の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶の製造
以下製造方法１、製造方法２に記載の２つの方法でフマル酸とのＩＩ型結晶を製造した。なお、化合物（Ｉ）のフリー体のＩ型結晶は後述する実施例３と同様の方法にて合成した。
（ｉ）製造方法１
化合物（Ｉ）のフリー体のＩ型結晶３０ｍｇにフマル酸３当量添加し，ｔｅｒｔ－ブタノール０．３ｍＬを添加し、２５℃で懸濁液を約１２４時間撹拌した後、濾取し、固体を回収し、乾燥することで標記結晶を得た。
（ｉｉ）製造方法２
化合物（Ｉ）のフリー体のＩ型結晶 ２．２０ｇにフマル酸１．０６ｇ及びアセトン２２ｍＬを添加し、５０℃で懸濁液を約６２時間撹拌した後、３０分自然冷却し、濾取し、固体を回収した。これを２－プロパノールで洗浄し、濾取し、固体を回収し、乾燥することで標記結晶を２．２７ｇ得た。
以下製造方法１、製造方法２に記載の２つの方法でフマル酸とのＩＩ型結晶を製造した。なお、化合物（Ｉ）のフリー体のＩ型結晶は後述する実施例３と同様の方法にて合成した。
（ｉ）製造方法１
化合物（Ｉ）のフリー体のＩ型結晶３０ｍｇにフマル酸３当量添加し，ｔｅｒｔ－ブタノール０．３ｍＬを添加し、２５℃で懸濁液を約１２４時間撹拌した後、濾取し、固体を回収し、乾燥することで標記結晶を得た。
（ｉｉ）製造方法２
化合物（Ｉ）のフリー体のＩ型結晶 ２．２０ｇにフマル酸１．０６ｇ及びアセトン２２ｍＬを添加し、５０℃で懸濁液を約６２時間撹拌した後、３０分自然冷却し、濾取し、固体を回収した。これを２－プロパノールで洗浄し、濾取し、固体を回収し、乾燥することで標記結晶を２．２７ｇ得た。
【0114】
粉末Ｘ線回折スペクトル（Ａ法）：図１に示した。粉末Ｘ線回折スペクトルデータを表２に示す。
また、特徴的な回折角は以下のとおりである。
特徴的な回折角（２θ±０．２°）：
５．５°，６．８°，９．３°，１３．４°，１５．３°，１６．３°，１８．５°，１９．８°，２２．０°及び２４．５°
示差熱－熱重量同時測定曲線：図２に示した。
示差熱－熱重量同時測定曲線における吸熱ピーク（ピークトップ値）：１７８℃付近
【表2】
また、特徴的な回折角は以下のとおりである。
特徴的な回折角（２θ±０．２°）：
５．５°，６．８°，９．３°，１３．４°，１５．３°，１６．３°，１８．５°，１９．８°，２２．０°及び２４．５°
示差熱－熱重量同時測定曲線：図２に示した。
示差熱－熱重量同時測定曲線における吸熱ピーク（ピークトップ値）：１７８℃付近
【0115】
実施例２ ７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミド（化合物（Ｉ））のフリー体ＩＩ型結晶の製造
以下製造方法１～製造方法４に記載の４つの方法のいずれかでフリー体ＩＩ型結晶を製造した。
（ｉ）製造方法１
合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ） １５ｍｇにコハク酸１当量及び１－プロパノール／水（１：３ ｖ／ｖ）０．３ｍＬを添加し、５０℃で４日間懸濁撹拌した後、濾取し、固体を回収し、乾燥することで標記結晶を得た。
（ｉｉ）製造方法２
合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ） ３００ｍｇにコハク酸１当量及び１－プロパノール／水（１：３ ｖ／ｖ）１．５ｍＬを添加し、（ｉ）で得られた結晶のうち少量を種結晶として添加し、５０℃で５時間懸濁攪拌した後、１－プロパノール０．３ｍＬを添加し、さらに５０℃で２時間懸濁攪拌した後、１－プロパノール０．３ｍＬを添加し、５０℃で１７時間懸濁撹拌した後、濾取し、固体を回収し、乾燥することで標記結晶を８４．５ｍｇ得た。
（ｉｉｉ）製造方法３
合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ） １０００ｍｇにコハク酸１当量及び１－プロパノール／水（１：１ ｖ／ｖ）３ｍＬを添加し、（ｉｉ）で得られた結晶のうち少量を種結晶として添加し、５０℃で１７．５時間懸濁攪拌した後、濾取（ろ過時に水で洗浄）し、固体を回収し、乾燥することで標記結晶を４８７．６ｍｇ得た。
（ｉｖ） 製造方法４
合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ） １０００ｍｇにジイソプロピルエーテル５ｍＬを添加し、（ｉｉｉ）で得られた結晶のうち少量を種結晶として添加し、５０℃で懸濁攪拌した。４２．５時間後、溶媒が蒸発していたため、ジイソプロピルエーテル５ｍＬを添加した。５０℃で２時間懸濁攪拌した後、エタノール０．５ｍＬを添加した。さらに５０℃で２時間懸濁攪拌した後、エタノール０．５ｍＬを添加した。さらに、５０℃で１９時間懸濁攪拌した後、３０分かけて自然冷却し、濾取し、固体を回収し、乾燥することで標記結晶を７９８．８ｍｇ得た。
以下製造方法１～製造方法４に記載の４つの方法のいずれかでフリー体ＩＩ型結晶を製造した。
（ｉ）製造方法１
合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ） １５ｍｇにコハク酸１当量及び１－プロパノール／水（１：３ ｖ／ｖ）０．３ｍＬを添加し、５０℃で４日間懸濁撹拌した後、濾取し、固体を回収し、乾燥することで標記結晶を得た。
（ｉｉ）製造方法２
合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ） ３００ｍｇにコハク酸１当量及び１－プロパノール／水（１：３ ｖ／ｖ）１．５ｍＬを添加し、（ｉ）で得られた結晶のうち少量を種結晶として添加し、５０℃で５時間懸濁攪拌した後、１－プロパノール０．３ｍＬを添加し、さらに５０℃で２時間懸濁攪拌した後、１－プロパノール０．３ｍＬを添加し、５０℃で１７時間懸濁撹拌した後、濾取し、固体を回収し、乾燥することで標記結晶を８４．５ｍｇ得た。
（ｉｉｉ）製造方法３
合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ） １０００ｍｇにコハク酸１当量及び１－プロパノール／水（１：１ ｖ／ｖ）３ｍＬを添加し、（ｉｉ）で得られた結晶のうち少量を種結晶として添加し、５０℃で１７．５時間懸濁攪拌した後、濾取（ろ過時に水で洗浄）し、固体を回収し、乾燥することで標記結晶を４８７．６ｍｇ得た。
（ｉｖ） 製造方法４
合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ） １０００ｍｇにジイソプロピルエーテル５ｍＬを添加し、（ｉｉｉ）で得られた結晶のうち少量を種結晶として添加し、５０℃で懸濁攪拌した。４２．５時間後、溶媒が蒸発していたため、ジイソプロピルエーテル５ｍＬを添加した。５０℃で２時間懸濁攪拌した後、エタノール０．５ｍＬを添加した。さらに５０℃で２時間懸濁攪拌した後、エタノール０．５ｍＬを添加した。さらに、５０℃で１９時間懸濁攪拌した後、３０分かけて自然冷却し、濾取し、固体を回収し、乾燥することで標記結晶を７９８．８ｍｇ得た。
【0116】
【0117】
特徴的な回折角（２θ±０．２°）：
８．３°，１４．８°，１７．３°，１８．０°，１９．１°，２０．３°，２１．０°，２２．５°，２３．０°及び２６．２°
示差熱－熱重量同時測定曲線：図４に示した。
示差熱－熱重量同時測定曲線における吸熱ピーク（ピークトップ値）：１８２℃付近
８．３°，１４．８°，１７．３°，１８．０°，１９．１°，２０．３°，２１．０°，２２．５°，２３．０°及び２６．２°
示差熱－熱重量同時測定曲線：図４に示した。
示差熱－熱重量同時測定曲線における吸熱ピーク（ピークトップ値）：１８２℃付近
【0118】
実施例３ ７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミド（化合物（Ｉ））のフリー体Ｉ型結晶の製造
化合物（Ｉ）の粗体（１００ｍｇ）をエタノール（５００μＬ）に懸濁し、５０℃にて終夜攪拌した。溶液を２５℃まで冷却し、得られた懸濁液をろ取することで、化合物（Ｉ）のフリー体I型結晶（３１ｍｇ）を得た。
化合物（Ｉ）の粗体（１００ｍｇ）をエタノール（５００μＬ）に懸濁し、５０℃にて終夜攪拌した。溶液を２５℃まで冷却し、得られた懸濁液をろ取することで、化合物（Ｉ）のフリー体I型結晶（３１ｍｇ）を得た。
【0119】
粉末Ｘ線回折スペクトル（Ａ法）：図５に示した。粉末Ｘ線回折スペクトルデータを表４に示す。
また、特徴的な回折角は以下のとおりである。
特徴的な回折角（２θ±０．２°）：
９．９°，１１．７°，１３．２°，１７．７°，１８．１°，１８．８°及び２０．８°
示差熱－熱重量同時測定曲線：図６に示した。
示差熱－熱重量同時測定曲線における吸熱ピーク（ピークトップ値）：１８３℃付近
【表4】
特徴的な回折角（２θ±０．２°）：
９．９°，１１．７°，１３．２°，１７．７°，１８．１°，１８．８°及び２０．８°
示差熱－熱重量同時測定曲線：図６に示した。
示差熱－熱重量同時測定曲線における吸熱ピーク（ピークトップ値）：１８３℃付近
【0120】
実施例４ ７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミド（化合物（Ｉ））の１当量のフマル酸とのＶ型結晶の製造
合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ） １０００ｍｇにフマル酸４８１ｍｇ及びアセトン５０ｍＬを添加し、２５℃で７１時間懸濁撹拌した後、濾取し、固体を回収した。これを室温減圧条件で、７．５時間乾燥することで標記結晶を６９５．０ｍｇ得た。
合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ） １０００ｍｇにフマル酸４８１ｍｇ及びアセトン５０ｍＬを添加し、２５℃で７１時間懸濁撹拌した後、濾取し、固体を回収した。これを室温減圧条件で、７．５時間乾燥することで標記結晶を６９５．０ｍｇ得た。
【0121】
粉末Ｘ線回折スペクトル（Ａ法）：図７に示した。粉末Ｘ線回折スペクトルデータを表５に示す。
また、特徴的な回折角は以下のとおりである。
特徴的な回折角（２θ±０．２°）：
６．９°，９．４°，１０．２°，１３．７°，２１．１°，２３．６°及び２６．５°
示差熱－熱重量同時測定曲線：図８に示した。
示差熱－熱重量同時測定曲線における吸熱ピーク（ピークトップ値）：１５１℃付近
【表5】
特徴的な回折角（２θ±０．２°）：
６．９°，９．４°，１０．２°，１３．７°，２１．１°，２３．６°及び２６．５°
示差熱－熱重量同時測定曲線：図８に示した。
示差熱－熱重量同時測定曲線における吸熱ピーク（ピークトップ値）：１５１℃付近
【0122】
実施例５ ７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミド（化合物（Ｉ））の１当量のフマル酸とのＩ型結晶の製造
合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ） １０００ｍｇにフマル酸４８１ｍｇ及びアセトン５０ｍＬを添加し、２５℃で１９．５時間懸濁撹拌した後、濾取し、固体を回収することで標記結晶を８６８．８ｍｇ得た。
合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ） １０００ｍｇにフマル酸４８１ｍｇ及びアセトン５０ｍＬを添加し、２５℃で１９．５時間懸濁撹拌した後、濾取し、固体を回収することで標記結晶を８６８．８ｍｇ得た。
【0123】
粉末Ｘ線回折スペクトル（Ａ法）：図９に示した。粉末Ｘ線回折スペクトルデータを表６に示す。
また、特徴的な回折角は以下のとおりである。
特徴的な回折角（２θ±０．２°）：
６．４°，１０．３°，１２．８°，１５．０°，２０．７°，２３．４°及び２６．６°
示差熱－熱重量同時測定曲線：図１０に示した。
示差熱－熱重量同時測定曲線における吸熱ピーク（ピークトップ値）：１５３℃付近
【表6】
特徴的な回折角（２θ±０．２°）：
６．４°，１０．３°，１２．８°，１５．０°，２０．７°，２３．４°及び２６．６°
示差熱－熱重量同時測定曲線：図１０に示した。
示差熱－熱重量同時測定曲線における吸熱ピーク（ピークトップ値）：１５３℃付近
【0124】
実施例６ ７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミド（化合物（Ｉ））の０．５当量のフマル酸とのＩ型結晶の製造
合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ） １５ｍｇにフマル酸０．５当量及び水０．３ｍＬを添加し、５０℃で９３．５時間懸濁撹拌した後、濾取し、固体を回収し、乾燥することで標記結晶を得た。
合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ） １５ｍｇにフマル酸０．５当量及び水０．３ｍＬを添加し、５０℃で９３．５時間懸濁撹拌した後、濾取し、固体を回収し、乾燥することで標記結晶を得た。
【0125】
粉末Ｘ線回折スペクトル（Ｂ法）：図１１に示した。
特徴的な回折角（２θ±０．２°）：６．４°，７．５°，９．７°，１１．７°，１５．１°，１９．６°及び２３．９°
示差熱－熱重量同時測定曲線：図１２に示した。
示差熱－熱重量同時測定曲線における吸熱ピーク（ピークトップ値）：１６１℃付近
特徴的な回折角（２θ±０．２°）：６．４°，７．５°，９．７°，１１．７°，１５．１°，１９．６°及び２３．９°
示差熱－熱重量同時測定曲線：図１２に示した。
示差熱－熱重量同時測定曲線における吸熱ピーク（ピークトップ値）：１６１℃付近
【0126】
実施例７ ７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミド（化合物（Ｉ））の０．５当量のフマル酸とのＩＩ型結晶の製造
合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ） ３００ｍｇにフマル酸１当量及びエタノール６ｍＬを添加し、５０℃で１９．５時間懸濁撹拌した後、３時間自然冷却し、濾取し、固体を回収した。これを水で洗浄し、濾取し、固体を回収し、乾燥することで標記結晶を２２４．６ｍｇ得た。
合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ） ３００ｍｇにフマル酸１当量及びエタノール６ｍＬを添加し、５０℃で１９．５時間懸濁撹拌した後、３時間自然冷却し、濾取し、固体を回収した。これを水で洗浄し、濾取し、固体を回収し、乾燥することで標記結晶を２２４．６ｍｇ得た。
【0127】
粉末Ｘ線回折スペクトル：図１３に示した。
特徴的な回折角（２θ±０．２°）：５．４°，６．４°，７．３°，１２．８°，１３．４°，１４．７°及び１５．４°
示差熱－熱重量同時測定曲線：図１４に示した。
示差熱－熱重量同時測定曲線における吸熱ピーク（ピークトップ値）：１６２℃付近
特徴的な回折角（２θ±０．２°）：５．４°，６．４°，７．３°，１２．８°，１３．４°，１４．７°及び１５．４°
示差熱－熱重量同時測定曲線：図１４に示した。
示差熱－熱重量同時測定曲線における吸熱ピーク（ピークトップ値）：１６２℃付近
【0128】
実施例８ 化合物(Ｉ)とフマル酸のモル比の分析
化合物(Ｉ)とフマル酸及び化合物(Ｉ)とＬ－酒石酸とのモル比については、１Ｈ－ＮＭＲで確認した。化合物(Ｉ)の1当量のフマル酸とのＩ型結晶、1当量のフマル酸とのＩＩ型結晶、及び1当量のフマル酸とのＶ型結晶のＮＭＲスペクトルの測定結果を以下に示す。また、化合物(Ｉ)のフリー体Ｉ型の結晶、及びフリー体ＩＩ型の結晶のＮＭＲスペクトルの測定結果も以下に示す。
（化合物(Ｉ)のフリー体Ｉ型の結晶）
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ： ８．３２（ｂｒｄ，Ｊ＝７．３８Ｈｚ，１Ｈ） ８．１４（ｓ，１Ｈ） ７．２５－７．５０（ｍ，５Ｈ） ６．５４－６．７２（ｍ，１Ｈ） ６．１３－６．２３（ｍ，１Ｈ） ５．６５－５．７６（ｍ，１Ｈ） ５．１２－５．３９（ｍ，２Ｈ） ４．３３－４．４０（ｍ，１Ｈ） ４．００－４．２２（ｍ，２Ｈ） ２．４４－２．７０（ｍ，２Ｈ） １．７３（ｔｔ，Ｊ＝４．９９，８．２７Ｈｚ，１Ｈ） １．５１（ｄ，Ｊ＝６．８８Ｈｚ，３Ｈ） １．３６－１．４３（ｍ，３Ｈ） ０．７８－１．０３（ｍ，４Ｈ）
（化合物(Ｉ)のフリー体ＩＩ型の結晶）
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ： ８．３２（ｂｒｄ，Ｊ＝７．３８Ｈｚ，１Ｈ） ８．１４（ｓ，１Ｈ） ７．２７－７．４６（ｍ，５Ｈ） ６．５４－６．７２（ｍ，１Ｈ） ６．１３－６．２３（ｍ，１Ｈ） ５．６５－５．７６（ｍ，１Ｈ） ５．１２－５．３９（ｍ，２Ｈ） ４．３２－４．４０（ｍ，１Ｈ） ４．００－４．２２（ｍ，２Ｈ） ２．４４－２．６９（ｍ，２Ｈ） １．７３（ｔｔ，Ｊ＝４．９９，８．２７Ｈｚ，１Ｈ） １．５１（ｄ，Ｊ＝６．８８Ｈｚ，３Ｈ） １．４０－１．４３（ｍ，３Ｈ） ０．７８－１．０３（ｍ，４Ｈ）
（化合物(Ｉ)の１当量のフマル酸とのＩ型結晶）
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ： １３．１３（ｂｒｓ，２Ｈ） ８．３２（ｂｒｄ，Ｊ＝７．３８Ｈｚ，１Ｈ） ８．１４（ｓ，１Ｈ） ７．２４－７．４８（ｍ，５Ｈ） ６．４６－６．７８（ｍ，３Ｈ） ６．０６－６．３０（ｍ，１Ｈ） ５．６３－５．７７（ｍ，１Ｈ） ５．１１－５．３８（ｍ，２Ｈ） ４．２７－４．４４（ｍ，１Ｈ） ３．９８－４．２３（ｍ，２Ｈ） ２．４２－２．７３（ｍ，２Ｈ） １．７３（ｔｔ，Ｊ＝５．０２，８．３０Ｈｚ，１Ｈ） １．５１（ｄ，Ｊ＝６．８８Ｈｚ，３Ｈ） １．３２－１．４５（ｍ，３Ｈ） ０．７７－１．０２（ｍ，４Ｈ）
（化合物(Ｉ)の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶）
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ： １３．１４（ｂｒｓ，２Ｈ） ８．３２（ｂｒｄ，Ｊ＝７．３８Ｈｚ，１Ｈ） ８．１４（ｓ，１Ｈ） ７．２５－７．４９（ｍ，５Ｈ） ６．３９－６．８９（ｍ，３Ｈ） ６．０７－６．２８（ｍ，１Ｈ） ５．６２－５．７７（ｍ，１Ｈ） ５．１２－５．３９（ｍ，２Ｈ） ４．２７－４．４５（ｍ，１Ｈ） ３．９９－４．２４（ｍ，２Ｈ） ２．４２－２．７５（ｍ，２Ｈ） １．７４（ｔｔ，Ｊ＝５．０２，８．３０Ｈｚ，１Ｈ） １．５１（ｄ，Ｊ＝６．８８Ｈｚ，３Ｈ） １．３７－１．４６（ｍ，３Ｈ） ０．７８－１．０３（ｍ，４Ｈ）
（化合物(Ｉ)の１当量のフマル酸とのＶ型結晶）
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ： １３．１３（ｂｒｓ，２Ｈ） ８．３２（ｂｒｄ，Ｊ＝７．３８Ｈｚ，１Ｈ） ８．１４（ｓ，１Ｈ） ７．２１－７．４９（ｍ，５Ｈ） ６．４７－６．８０（ｍ，３Ｈ） ６．０９－６．２６（ｍ，１Ｈ） ５．６３－５．７７（ｍ，１Ｈ） ５．１１－５．３８（ｍ，２Ｈ） ４．２７－４．４４（ｍ，１Ｈ） ３．９８－４．２３（ｍ，２Ｈ） ２．４２－２．７２（ｍ，２Ｈ） １．７３（ｔｔ，Ｊ＝４．９９，８．２７Ｈｚ，１Ｈ） １．５１（ｄ，Ｊ＝６．８８Ｈｚ，３Ｈ） １．３４－１．４６（ｍ，３Ｈ） ０．７７－１．０２（ｍ，４Ｈ）
化合物(Ｉ)とフマル酸及び化合物(Ｉ)とＬ－酒石酸とのモル比については、１Ｈ－ＮＭＲで確認した。化合物(Ｉ)の1当量のフマル酸とのＩ型結晶、1当量のフマル酸とのＩＩ型結晶、及び1当量のフマル酸とのＶ型結晶のＮＭＲスペクトルの測定結果を以下に示す。また、化合物(Ｉ)のフリー体Ｉ型の結晶、及びフリー体ＩＩ型の結晶のＮＭＲスペクトルの測定結果も以下に示す。
（化合物(Ｉ)のフリー体Ｉ型の結晶）
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ： ８．３２（ｂｒｄ，Ｊ＝７．３８Ｈｚ，１Ｈ） ８．１４（ｓ，１Ｈ） ７．２５－７．５０（ｍ，５Ｈ） ６．５４－６．７２（ｍ，１Ｈ） ６．１３－６．２３（ｍ，１Ｈ） ５．６５－５．７６（ｍ，１Ｈ） ５．１２－５．３９（ｍ，２Ｈ） ４．３３－４．４０（ｍ，１Ｈ） ４．００－４．２２（ｍ，２Ｈ） ２．４４－２．７０（ｍ，２Ｈ） １．７３（ｔｔ，Ｊ＝４．９９，８．２７Ｈｚ，１Ｈ） １．５１（ｄ，Ｊ＝６．８８Ｈｚ，３Ｈ） １．３６－１．４３（ｍ，３Ｈ） ０．７８－１．０３（ｍ，４Ｈ）
（化合物(Ｉ)のフリー体ＩＩ型の結晶）
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ： ８．３２（ｂｒｄ，Ｊ＝７．３８Ｈｚ，１Ｈ） ８．１４（ｓ，１Ｈ） ７．２７－７．４６（ｍ，５Ｈ） ６．５４－６．７２（ｍ，１Ｈ） ６．１３－６．２３（ｍ，１Ｈ） ５．６５－５．７６（ｍ，１Ｈ） ５．１２－５．３９（ｍ，２Ｈ） ４．３２－４．４０（ｍ，１Ｈ） ４．００－４．２２（ｍ，２Ｈ） ２．４４－２．６９（ｍ，２Ｈ） １．７３（ｔｔ，Ｊ＝４．９９，８．２７Ｈｚ，１Ｈ） １．５１（ｄ，Ｊ＝６．８８Ｈｚ，３Ｈ） １．４０－１．４３（ｍ，３Ｈ） ０．７８－１．０３（ｍ，４Ｈ）
（化合物(Ｉ)の１当量のフマル酸とのＩ型結晶）
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ： １３．１３（ｂｒｓ，２Ｈ） ８．３２（ｂｒｄ，Ｊ＝７．３８Ｈｚ，１Ｈ） ８．１４（ｓ，１Ｈ） ７．２４－７．４８（ｍ，５Ｈ） ６．４６－６．７８（ｍ，３Ｈ） ６．０６－６．３０（ｍ，１Ｈ） ５．６３－５．７７（ｍ，１Ｈ） ５．１１－５．３８（ｍ，２Ｈ） ４．２７－４．４４（ｍ，１Ｈ） ３．９８－４．２３（ｍ，２Ｈ） ２．４２－２．７３（ｍ，２Ｈ） １．７３（ｔｔ，Ｊ＝５．０２，８．３０Ｈｚ，１Ｈ） １．５１（ｄ，Ｊ＝６．８８Ｈｚ，３Ｈ） １．３２－１．４５（ｍ，３Ｈ） ０．７７－１．０２（ｍ，４Ｈ）
（化合物(Ｉ)の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶）
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ： １３．１４（ｂｒｓ，２Ｈ） ８．３２（ｂｒｄ，Ｊ＝７．３８Ｈｚ，１Ｈ） ８．１４（ｓ，１Ｈ） ７．２５－７．４９（ｍ，５Ｈ） ６．３９－６．８９（ｍ，３Ｈ） ６．０７－６．２８（ｍ，１Ｈ） ５．６２－５．７７（ｍ，１Ｈ） ５．１２－５．３９（ｍ，２Ｈ） ４．２７－４．４５（ｍ，１Ｈ） ３．９９－４．２４（ｍ，２Ｈ） ２．４２－２．７５（ｍ，２Ｈ） １．７４（ｔｔ，Ｊ＝５．０２，８．３０Ｈｚ，１Ｈ） １．５１（ｄ，Ｊ＝６．８８Ｈｚ，３Ｈ） １．３７－１．４６（ｍ，３Ｈ） ０．７８－１．０３（ｍ，４Ｈ）
（化合物(Ｉ)の１当量のフマル酸とのＶ型結晶）
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ： １３．１３（ｂｒｓ，２Ｈ） ８．３２（ｂｒｄ，Ｊ＝７．３８Ｈｚ，１Ｈ） ８．１４（ｓ，１Ｈ） ７．２１－７．４９（ｍ，５Ｈ） ６．４７－６．８０（ｍ，３Ｈ） ６．０９－６．２６（ｍ，１Ｈ） ５．６３－５．７７（ｍ，１Ｈ） ５．１１－５．３８（ｍ，２Ｈ） ４．２７－４．４４（ｍ，１Ｈ） ３．９８－４．２３（ｍ，２Ｈ） ２．４２－２．７２（ｍ，２Ｈ） １．７３（ｔｔ，Ｊ＝４．９９，８．２７Ｈｚ，１Ｈ） １．５１（ｄ，Ｊ＝６．８８Ｈｚ，３Ｈ） １．３４－１．４６（ｍ，３Ｈ） ０．７７－１．０２（ｍ，４Ｈ）
【0129】
参考例１ ７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミド（化合物（Ｉ））の１当量のフマル酸とのＩＩＩ型結晶の製造
合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ） ３００ｍｇにフマル酸３当量及びアセトニトリル９ｍＬを添加し、５０℃で１時間懸濁撹拌した後、自然冷却し、濾取し、固体を回収した。これを乾燥することで標記結晶を３０３．７ｍｇ得た。
合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ） ３００ｍｇにフマル酸３当量及びアセトニトリル９ｍＬを添加し、５０℃で１時間懸濁撹拌した後、自然冷却し、濾取し、固体を回収した。これを乾燥することで標記結晶を３０３．７ｍｇ得た。
【0130】
粉末Ｘ線回折スペクトル（Ｂ法）：図１５に示した。
特徴的な回折角（２θ±０．２°）：８．１°，１３．２°，２０．４°，２３．１°，２４．７°及び２６．１°
示差熱－熱重量同時測定曲線：図１６に示した。
示差熱－熱重量同時測定曲線における発熱ピーク（ピークトップ値）：１５３℃付近
特徴的な回折角（２θ±０．２°）：８．１°，１３．２°，２０．４°，２３．１°，２４．７°及び２６．１°
示差熱－熱重量同時測定曲線：図１６に示した。
示差熱－熱重量同時測定曲線における発熱ピーク（ピークトップ値）：１５３℃付近
【0131】
参考例２ ７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミド（化合物（Ｉ））の１当量のフマル酸とのＩＶ型結晶の製造
合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ） ３００ｍｇにフマル酸３当量及び水６ｍＬを添加し、５０℃で１．５時間懸濁撹拌した後、自然冷却し、濾取し、固体を回収した。これを水で洗浄し、濾取し、固体を回収し、乾燥することで標記結晶を３１１．２ｍｇ得た。
合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ） ３００ｍｇにフマル酸３当量及び水６ｍＬを添加し、５０℃で１．５時間懸濁撹拌した後、自然冷却し、濾取し、固体を回収した。これを水で洗浄し、濾取し、固体を回収し、乾燥することで標記結晶を３１１．２ｍｇ得た。
【0132】
粉末Ｘ線回折スペクトル（Ｂ法）：図１７に示した。
特徴的な回折角（２θ±０．２°）：６．０°，１５．７°及び１８．８°
示差熱－熱重量同時測定曲線：図１８に示した。
示差熱－熱重量同時測定曲線における発熱ピーク（ピークトップ値）：１３０℃付近
特徴的な回折角（２θ±０．２°）：６．０°，１５．７°及び１８．８°
示差熱－熱重量同時測定曲線：図１８に示した。
示差熱－熱重量同時測定曲線における発熱ピーク（ピークトップ値）：１３０℃付近
【0133】
参考例３ ７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミド（化合物（Ｉ））の塩酸とのＩ型結晶の製造
合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ） １５ｍｇに２Ｍ塩酸／エタノール溶液１５μＬ及び２―プロパノール／ヘプタン混液（１：３ ｖ／ｖ）０．３ｍＬを添加し、４日間懸濁撹拌した後、自然冷却し、濾取し、固体を回収した。これを乾燥することで標記結晶を得た。
合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ） １５ｍｇに２Ｍ塩酸／エタノール溶液１５μＬ及び２―プロパノール／ヘプタン混液（１：３ ｖ／ｖ）０．３ｍＬを添加し、４日間懸濁撹拌した後、自然冷却し、濾取し、固体を回収した。これを乾燥することで標記結晶を得た。
【0134】
粉末Ｘ線回折スペクトル（Ｂ法）：図１９に示した。
特徴的な回折角（２θ±０．２°）：７．０°，７．４°，１２．６°，１９．０°及び２５．４°
示差熱－熱重量同時測定曲線：図２０に示した。
示差熱－熱重量同時測定曲線における吸熱ピーク（ピークトップ値）：５１℃及び１７９℃付近
特徴的な回折角（２θ±０．２°）：７．０°，７．４°，１２．６°，１９．０°及び２５．４°
示差熱－熱重量同時測定曲線：図２０に示した。
示差熱－熱重量同時測定曲線における吸熱ピーク（ピークトップ値）：５１℃及び１７９℃付近
【0135】
参考例４ ７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミド（化合物（Ｉ））の塩酸とのＩＩ型結晶の製造
合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ） １５ｍｇに２Ｍ塩酸／エタノール溶液１５μＬ及びアセトン／ヘプタン混液（１：３ ｖ／ｖ）０．３ｍＬを添加し、４日間懸濁撹拌した後、自然冷却し、濾取し、固体を回収した。これを乾燥することで標記結晶を得た。
合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ） １５ｍｇに２Ｍ塩酸／エタノール溶液１５μＬ及びアセトン／ヘプタン混液（１：３ ｖ／ｖ）０．３ｍＬを添加し、４日間懸濁撹拌した後、自然冷却し、濾取し、固体を回収した。これを乾燥することで標記結晶を得た。
【0136】
粉末Ｘ線回折スペクトル（Ｂ法）：図２１に示した。
特徴的な回折角（２θ±０．２°）：６．３°，７．４°，８．０°，１７．６°，２２．０°及び２３．６°
示差熱－熱重量同時測定曲線：図２２に示した。
示差熱－熱重量同時測定曲線における吸熱ピーク（ピークトップ値）：１４７℃付近
特徴的な回折角（２θ±０．２°）：６．３°，７．４°，８．０°，１７．６°，２２．０°及び２３．６°
示差熱－熱重量同時測定曲線：図２２に示した。
示差熱－熱重量同時測定曲線における吸熱ピーク（ピークトップ値）：１４７℃付近
【0137】
参考例５ ７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミド（化合物（Ｉ））の塩酸とのＩＩＩ型結晶の製造
合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ） １５ｍｇに２Ｍ塩酸／エタノール溶液１５μＬ及び酢酸エチル０．３ｍＬを添加し、４日間懸濁撹拌した後、自然冷却し、濾取し、固体を回収した。これを乾燥することで標記結晶を得た。
合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ） １５ｍｇに２Ｍ塩酸／エタノール溶液１５μＬ及び酢酸エチル０．３ｍＬを添加し、４日間懸濁撹拌した後、自然冷却し、濾取し、固体を回収した。これを乾燥することで標記結晶を得た。
【0138】
粉末Ｘ線回折スペクトル（Ｂ法）：図２３に示した。
特徴的な回折角（２θ±０．２°）：５．３°，６．５°，８．１°，１５．３°及び２４．２°
示差熱－熱重量同時測定曲線：図２４に示した。
示差熱－熱重量同時測定曲線における吸熱ピーク（ピークトップ値）：１５６℃付近
特徴的な回折角（２θ±０．２°）：５．３°，６．５°，８．１°，１５．３°及び２４．２°
示差熱－熱重量同時測定曲線：図２４に示した。
示差熱－熱重量同時測定曲線における吸熱ピーク（ピークトップ値）：１５６℃付近
【0139】
参考例６ ７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミド（化合物（Ｉ））の臭化水素酸との結晶の製造
合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ） １５ｍｇに臭化水素酸１当量及び２―プロパノール／ヘプタン混液（１：３ ｖ／ｖ）０．３ｍＬを添加し、５日間懸濁撹拌した後、自然冷却し、濾取し、固体を回収した。これを乾燥することで標記結晶を得た。
合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ） １５ｍｇに臭化水素酸１当量及び２―プロパノール／ヘプタン混液（１：３ ｖ／ｖ）０．３ｍＬを添加し、５日間懸濁撹拌した後、自然冷却し、濾取し、固体を回収した。これを乾燥することで標記結晶を得た。
【0140】
粉末Ｘ線回折スペクトル（Ｂ法）：図２５に示した。
特徴的な回折角（２θ±０．２°）：７．０°，７．４°，１３．４°，１５．６°，１９．２°及び２５．６°
示差熱－熱重量同時測定曲線：図２６に示した。
示差熱－熱重量同時測定曲線における吸熱ピーク（ピークトップ値）：２０４℃付近
特徴的な回折角（２θ±０．２°）：７．０°，７．４°，１３．４°，１５．６°，１９．２°及び２５．６°
示差熱－熱重量同時測定曲線：図２６に示した。
示差熱－熱重量同時測定曲線における吸熱ピーク（ピークトップ値）：２０４℃付近
【0141】
参考例７ ７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミド（化合物（Ｉ））の１当量のＬ－酒石酸との結晶の製造
合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ） ５００ｍｇにＬ－酒石酸４６６ｍｇ及びアセトン１０ｍＬを添加し、５０℃で４０分攪拌し，溶解した。この後、室温で１７時間攪拌し、得られた懸濁液を濾取し、固体を回収した。これを乾燥することで標記結晶を５０６．３ｍｇ得た。
合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ） ５００ｍｇにＬ－酒石酸４６６ｍｇ及びアセトン１０ｍＬを添加し、５０℃で４０分攪拌し，溶解した。この後、室温で１７時間攪拌し、得られた懸濁液を濾取し、固体を回収した。これを乾燥することで標記結晶を５０６．３ｍｇ得た。
【0142】
粉末Ｘ線回折スペクトル（Ａ法）：図２７に示した。
特徴的な回折角（２θ±０．２°）：７．２°，１２．６°，１７．３°及び２３．４°
示差熱－熱重量同時測定曲線：図２８に示した。
示差熱－熱重量同時測定曲線における吸熱ピーク（ピークトップ値）：１２１℃付近
特徴的な回折角（２θ±０．２°）：７．２°，１２．６°，１７．３°及び２３．４°
示差熱－熱重量同時測定曲線：図２８に示した。
示差熱－熱重量同時測定曲線における吸熱ピーク（ピークトップ値）：１２１℃付近
【0143】
参考例８ ７－（（３Ｒ，５Ｓ）－１－アクリロイル－５－メチルピロリジン－３－イル）－４－アミノ－６－（シクロプロピルエチニル）－Ｎ－（（Ｒ）－１－フェニルエチル）－７Ｈ－ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン－５－カルボキサミド（化合物（Ｉ））のコハク酸との結晶の製造
合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ） １５ｍｇにコハク酸３当量及びアセトニトリル０．３ｍＬを添加し、５０℃で３日間懸濁撹拌した後、自然冷却し、濾取し、固体を回収した。これを乾燥することで標記結晶を得た。
合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ） １５ｍｇにコハク酸３当量及びアセトニトリル０．３ｍＬを添加し、５０℃で３日間懸濁撹拌した後、自然冷却し、濾取し、固体を回収した。これを乾燥することで標記結晶を得た。
【0144】
粉末Ｘ線回折スペクトル（Ｂ法）：図２９に示した。
特徴的な回折角（２θ±０．２°）：６．５°，１０．７°，１３．２°，１４．６°，１８．７°及び２３．９°
示差熱－熱重量同時測定曲線：図３０に示した。
示差熱－熱重量同時測定曲線における吸熱ピーク（ピークトップ値）：１４８℃及び１５９℃付近
特徴的な回折角（２θ±０．２°）：６．５°，１０．７°，１３．２°，１４．６°，１８．７°及び２３．９°
示差熱－熱重量同時測定曲線：図３０に示した。
示差熱－熱重量同時測定曲線における吸熱ピーク（ピークトップ値）：１４８℃及び１５９℃付近
【0145】
試験例１ ＨＥＲ２リン酸化活性阻害作用（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）の測定
ＨＥＲ２リン酸化活性に対する化合物のインビトロでの阻害活性測定法の条件設定において、パーキンエルマー社のＰｒｏｆｉｌｅｒＰｒｏ Ｐｅｐｔｉｄｅ ２２と同配列（５－ＦＡＭ－ＥＥＰＬＹＷＳＦＰＡＫＫＫ－ＣＯＮＨ２）のペプチドを基質として用いたＨＥＲ２キナーゼ反応の報告（Ｘｉｅ Ｈ ｅｔ ａｌ．， ＰＬｏＳ Ｏｎｅ．２０１１；６（７）：ｅ２１４８７）に基づき、ＰｒｏｆｉｌｅｒＰｒｏ Ｐｅｐｔｉｄｅ ２２を基質に用いた。試験に用いた精製リコンビナントヒトＨＥＲ２蛋白質はカルナバイオサイエンス社から購入した。化合物の阻害活性測定においては、まず、合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ）をジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）で段階希釈した。次に、キナーゼ反応用緩衝液（１３．５ｍＭ Ｔｒｉｓ（ｐＨ ７．５）、２ｍＭ ジチオトレイトール、０．００９％ Ｔｗｅｅｎ２０）中にＨＥＲ２蛋白質、基質ペプチド（終濃度は１μＭ）、塩化マンガン（終濃度は１０ｍＭ）、ＡＴＰ（終濃度は５μＭ）と化合物（Ｉ）のＤＭＳＯ溶液（ＤＭＳＯの終濃度は５％）を加えて２５℃で３０分間インキュベーションしキナーゼ反応を行った。そこへ終濃度３０ｍＭになるようＥＤＴＡを加えることで反応を停止させた。最後に、ＬａｂＣｈｉｐ（登録商標） ＥＺ Ｒｅａｄｅｒ ＩＩ（パーキンエルマー社）で、リン酸化されなかった基質ペプチド（Ｓ）とリン酸化されたペプチド（Ｐ）をマイクロ流路キャピラリー電気泳動によって分離・検出した。ＳとＰそれぞれのピークの高さからリン酸化反応量を求め、リン酸化反応を５０％抑制することのできる化合物濃度をＩＣ５０値（ｎＭ）と定義し以下の表７に示した。
ＨＥＲ２リン酸化活性に対する化合物のインビトロでの阻害活性測定法の条件設定において、パーキンエルマー社のＰｒｏｆｉｌｅｒＰｒｏ Ｐｅｐｔｉｄｅ ２２と同配列（５－ＦＡＭ－ＥＥＰＬＹＷＳＦＰＡＫＫＫ－ＣＯＮＨ２）のペプチドを基質として用いたＨＥＲ２キナーゼ反応の報告（Ｘｉｅ Ｈ ｅｔ ａｌ．， ＰＬｏＳ Ｏｎｅ．２０１１；６（７）：ｅ２１４８７）に基づき、ＰｒｏｆｉｌｅｒＰｒｏ Ｐｅｐｔｉｄｅ ２２を基質に用いた。試験に用いた精製リコンビナントヒトＨＥＲ２蛋白質はカルナバイオサイエンス社から購入した。化合物の阻害活性測定においては、まず、合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ）をジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）で段階希釈した。次に、キナーゼ反応用緩衝液（１３．５ｍＭ Ｔｒｉｓ（ｐＨ ７．５）、２ｍＭ ジチオトレイトール、０．００９％ Ｔｗｅｅｎ２０）中にＨＥＲ２蛋白質、基質ペプチド（終濃度は１μＭ）、塩化マンガン（終濃度は１０ｍＭ）、ＡＴＰ（終濃度は５μＭ）と化合物（Ｉ）のＤＭＳＯ溶液（ＤＭＳＯの終濃度は５％）を加えて２５℃で３０分間インキュベーションしキナーゼ反応を行った。そこへ終濃度３０ｍＭになるようＥＤＴＡを加えることで反応を停止させた。最後に、ＬａｂＣｈｉｐ（登録商標） ＥＺ Ｒｅａｄｅｒ ＩＩ（パーキンエルマー社）で、リン酸化されなかった基質ペプチド（Ｓ）とリン酸化されたペプチド（Ｐ）をマイクロ流路キャピラリー電気泳動によって分離・検出した。ＳとＰそれぞれのピークの高さからリン酸化反応量を求め、リン酸化反応を５０％抑制することのできる化合物濃度をＩＣ５０値（ｎＭ）と定義し以下の表７に示した。
【0146】
試験例２ エクソン２０挿入変異型ＨＥＲ２（ＨＥＲ２ｅｘ２０ｉｎｓＹＶＭＡ）リン酸化活性阻害作用（ｉｎ ｖｉｔｒｏ）の測定
エクソン２０挿入変異型ＨＥＲ２リン酸化活性に対する化合物のインビトロでの阻害活性測定法の条件設定において、ＨＥＲ２と同様にＰｒｏｆｉｌｅｒＰｒｏ Ｐｅｐｔｉｄｅ ２２を基質に用いた。試験に用いた精製リコンビナントヒトエクソン２０挿入変異型ＨＥＲ２（Ａ７７５＿Ｇ７７６ｉｎｓＹＶＭＡ）蛋白質は、ＳｉｇｎａｌＣｈｅｍ社から購入した。化合物の阻害活性測定においては、まず、合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ）をジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）で段階希釈した。次に、キナーゼ反応用緩衝液（１３．５ｍＭ Ｔｒｉｓ（ｐＨ ７．５）、２ｍＭ ジチオトレイトール、０．００９％ Ｔｗｅｅｎ２０）中にエクソン２０挿入変異型ＨＥＲ２蛋白質と化合物（Ｉ）ＤＭＳＯ溶液（ＤＭＳＯの終濃度は５％）を加えて２５℃で３０分間プレインキュベーションした。その後、基質ペプチド（終濃度は１μＭ）、塩化マンガン（終濃度は２５ｍＭ）、塩化マグネシウム（終濃度は２０ｍＭ）、ＡＴＰ（終濃度は２００μＭ）を加えて２５℃で２２０分間インキュベーションしキナーゼ反応を行った。そこへ終濃度３０ｍＭになるようＥＤＴＡを加えることで反応を停止させた。最後に、ＬａｂＣｈｉｐ（登録商標） ＥＺ Ｒｅａｄｅｒ ＩＩ（パーキンエルマー社）で、リン酸化されなかった基質ペプチド（Ｓ）とリン酸化されたペプチド（Ｐ）をマイクロ流路キャピラリー電気泳動によって分離・検出した。ＳとＰそれぞれのピークの高さからリン酸化反応量を求め、リン酸化反応を５０％抑制することのできる化合物濃度をＩＣ５０値（ｎＭ）と定義し以下の表７に示した。
エクソン２０挿入変異型ＨＥＲ２リン酸化活性に対する化合物のインビトロでの阻害活性測定法の条件設定において、ＨＥＲ２と同様にＰｒｏｆｉｌｅｒＰｒｏ Ｐｅｐｔｉｄｅ ２２を基質に用いた。試験に用いた精製リコンビナントヒトエクソン２０挿入変異型ＨＥＲ２（Ａ７７５＿Ｇ７７６ｉｎｓＹＶＭＡ）蛋白質は、ＳｉｇｎａｌＣｈｅｍ社から購入した。化合物の阻害活性測定においては、まず、合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ）をジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）で段階希釈した。次に、キナーゼ反応用緩衝液（１３．５ｍＭ Ｔｒｉｓ（ｐＨ ７．５）、２ｍＭ ジチオトレイトール、０．００９％ Ｔｗｅｅｎ２０）中にエクソン２０挿入変異型ＨＥＲ２蛋白質と化合物（Ｉ）ＤＭＳＯ溶液（ＤＭＳＯの終濃度は５％）を加えて２５℃で３０分間プレインキュベーションした。その後、基質ペプチド（終濃度は１μＭ）、塩化マンガン（終濃度は２５ｍＭ）、塩化マグネシウム（終濃度は２０ｍＭ）、ＡＴＰ（終濃度は２００μＭ）を加えて２５℃で２２０分間インキュベーションしキナーゼ反応を行った。そこへ終濃度３０ｍＭになるようＥＤＴＡを加えることで反応を停止させた。最後に、ＬａｂＣｈｉｐ（登録商標） ＥＺ Ｒｅａｄｅｒ ＩＩ（パーキンエルマー社）で、リン酸化されなかった基質ペプチド（Ｓ）とリン酸化されたペプチド（Ｐ）をマイクロ流路キャピラリー電気泳動によって分離・検出した。ＳとＰそれぞれのピークの高さからリン酸化反応量を求め、リン酸化反応を５０％抑制することのできる化合物濃度をＩＣ５０値（ｎＭ）と定義し以下の表７に示した。
【0147】
【表7】
【0148】
以上の結果より、化合物（Ｉ）は、ＨＥＲ２リン酸化の優れた阻害活性およびエクソン２０挿入変異型ＨＥＲ２リン酸化に対して、優れた阻害活性を有することが明らかとなった。
【0149】
試験例３ ＨＥＲ２発現細胞株に対する増殖阻害活性の測定
ＨＥＲ２過剰発現ヒト乳癌細胞株であるＳＫ－ＢＲ－３細胞を、１０％ウシ胎児血清を含むＭｃＣｏｙ’ｓ ５ａ培地（ライフテクノロジーズ社製）中に懸濁させた。細胞懸濁液を、３８４ウェル平底マイクロプレートの各ウェルに播種し、５％炭酸ガス含有の培養器中３７℃で１日培養した。合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ）をＤＭＳＯに溶解し、ＤＭＳＯを用いて化合物を終濃度の５００倍の濃度になるように希釈した。化合物のＤＭＳＯ溶液を細胞の懸濁に用いた培地で希釈し、これを細胞の培養プレートの各ウェルにＤＭＳＯの最終濃度が０．２％になるように加え、５％炭酸ガス含有の培養器中３７℃でさらに３日培養した。化合物存在下で３日間培養後の細胞数計測をＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ２．０（プロメガ社製）を用いて行い、以下の式より増殖阻害率を算出した。増殖を５０％阻害することのできる化合物濃度をＩＣ５０（ｎＭ）と定義した。
増殖阻害率（％）＝（Ｃ－Ｔ）／（Ｃ）×１００
Ｔ：被検化合物を添加したウェルの発光強度
Ｃ：被検化合物を添加しなかったウェルの発光強度
結果を以下の表８に示した。
ＨＥＲ２過剰発現ヒト乳癌細胞株であるＳＫ－ＢＲ－３細胞を、１０％ウシ胎児血清を含むＭｃＣｏｙ’ｓ ５ａ培地（ライフテクノロジーズ社製）中に懸濁させた。細胞懸濁液を、３８４ウェル平底マイクロプレートの各ウェルに播種し、５％炭酸ガス含有の培養器中３７℃で１日培養した。合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ）をＤＭＳＯに溶解し、ＤＭＳＯを用いて化合物を終濃度の５００倍の濃度になるように希釈した。化合物のＤＭＳＯ溶液を細胞の懸濁に用いた培地で希釈し、これを細胞の培養プレートの各ウェルにＤＭＳＯの最終濃度が０．２％になるように加え、５％炭酸ガス含有の培養器中３７℃でさらに３日培養した。化合物存在下で３日間培養後の細胞数計測をＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ２．０（プロメガ社製）を用いて行い、以下の式より増殖阻害率を算出した。増殖を５０％阻害することのできる化合物濃度をＩＣ５０（ｎＭ）と定義した。
増殖阻害率（％）＝（Ｃ－Ｔ）／（Ｃ）×１００
Ｔ：被検化合物を添加したウェルの発光強度
Ｃ：被検化合物を添加しなかったウェルの発光強度
結果を以下の表８に示した。
【0150】
試験例４ エクソン２０挿入変異型ＨＥＲ２発現細胞株に対する増殖阻害活性の測定
エクソン２０挿入変異型ＨＥＲ２に対する増殖阻害活性は、ヒトエクソン２０挿入変異型ＨＥＲ２遺伝子を導入したマウスＢリンパ球前駆細胞株であるＢａ／Ｆ３細胞を用いて行った。Ｂａ／Ｆ３細胞は１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）、１００Ｕ／ｍＬ ペニシリン、１００μｇ／ｍＬ ストレプトマイシン（サーモフィッシャーサイエンティフィック）及び１ｎｇ／ｍＬ マウスインターロイキン－３（ｍＩＬ－３）（ＣＳＴ）を含むＲＰＭＩ－１６４０培地（サーモフィッシャーサイエンティフィック）にて維持し、ヒトエクソン２０挿入変異型ＨＥＲ２遺伝子（Ａ７７５＿Ｇ７７６ｉｎｓＹＶＭＡ（ＨＥＲ２ｅｘ２０ｉｎｓＹＶＭＡ））、Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｒｉｂｏｓｏｍｅ Ｂｉｎｄｉｎｇ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ（ＩＲＥＳ）およびクサビラオレンジ遺伝子を組み込んだｐＣＤＮＡ３．１－ｈｙｇ（＋）ベクターをＡｍａｘａ（登録商標） Ｃｅｌｌ Ｌｉｎｅ Ｎｕｃｌｅｏｆｅｃｔｏｒ （登録商標） Ｋｉｔ Ｖによる電気穿孔法により導入した。ハイグロマイシンＢ（ナカライテスク）にて選択したエクソン２０挿入変異型ＨＥＲ２を発現したＢａ／Ｆ３細胞（Ｂａ／Ｆ３－ＨＥＲ２ｉｎｓＹＶＭＡ）はｍＩＬ－３非依存的な増殖を示した。
細胞増殖阻害活性の評価に際し、Ｂａ／Ｆ３－ＨＥＲ２ｉｎｓＹＶＭＡ細胞を１０％ ＦＢＳ、１００Ｕ／ｍＬ ペニシリン、１００μｇ／ｍＬ ストレプトマイシンを含むＲＰＭＩ－１６４０培地にて懸濁し、細胞懸濁液を９６ウェル平底マイクロプレートの各ウェルに播種し、５％炭酸ガス含有の培養器中３７℃で１日培養した。合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ）をＤＭＳＯに溶解し、ＤＭＳＯもしくは細胞の懸濁に用いた培地を用いて希釈し、これを細胞の培養プレートの各ウェルにＤＭＳＯの最終濃度が０．２％になるように加え、５％炭酸ガス含有の培養器中３７℃でさらに３日培養した。化合物存在下で３日間培養後の細胞数計測はＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（プロメガ社製）を用い、以下の式より増殖阻害率を算出した。増殖を５０％阻害することのできる化合物濃度をＩＣ５０（ｎＭ）と定義した。
増殖阻害率（％）＝（Ｃ－Ｔ）／（Ｃ）×１００
Ｔ：被検化合物を添加したウェルの発光強度
Ｃ：被検化合物を添加しなかったウェルの発光強度
結果を以下の表８に示した。
エクソン２０挿入変異型ＨＥＲ２に対する増殖阻害活性は、ヒトエクソン２０挿入変異型ＨＥＲ２遺伝子を導入したマウスＢリンパ球前駆細胞株であるＢａ／Ｆ３細胞を用いて行った。Ｂａ／Ｆ３細胞は１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ）、１００Ｕ／ｍＬ ペニシリン、１００μｇ／ｍＬ ストレプトマイシン（サーモフィッシャーサイエンティフィック）及び１ｎｇ／ｍＬ マウスインターロイキン－３（ｍＩＬ－３）（ＣＳＴ）を含むＲＰＭＩ－１６４０培地（サーモフィッシャーサイエンティフィック）にて維持し、ヒトエクソン２０挿入変異型ＨＥＲ２遺伝子（Ａ７７５＿Ｇ７７６ｉｎｓＹＶＭＡ（ＨＥＲ２ｅｘ２０ｉｎｓＹＶＭＡ））、Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｒｉｂｏｓｏｍｅ Ｂｉｎｄｉｎｇ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ（ＩＲＥＳ）およびクサビラオレンジ遺伝子を組み込んだｐＣＤＮＡ３．１－ｈｙｇ（＋）ベクターをＡｍａｘａ（登録商標） Ｃｅｌｌ Ｌｉｎｅ Ｎｕｃｌｅｏｆｅｃｔｏｒ （登録商標） Ｋｉｔ Ｖによる電気穿孔法により導入した。ハイグロマイシンＢ（ナカライテスク）にて選択したエクソン２０挿入変異型ＨＥＲ２を発現したＢａ／Ｆ３細胞（Ｂａ／Ｆ３－ＨＥＲ２ｉｎｓＹＶＭＡ）はｍＩＬ－３非依存的な増殖を示した。
細胞増殖阻害活性の評価に際し、Ｂａ／Ｆ３－ＨＥＲ２ｉｎｓＹＶＭＡ細胞を１０％ ＦＢＳ、１００Ｕ／ｍＬ ペニシリン、１００μｇ／ｍＬ ストレプトマイシンを含むＲＰＭＩ－１６４０培地にて懸濁し、細胞懸濁液を９６ウェル平底マイクロプレートの各ウェルに播種し、５％炭酸ガス含有の培養器中３７℃で１日培養した。合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ）をＤＭＳＯに溶解し、ＤＭＳＯもしくは細胞の懸濁に用いた培地を用いて希釈し、これを細胞の培養プレートの各ウェルにＤＭＳＯの最終濃度が０．２％になるように加え、５％炭酸ガス含有の培養器中３７℃でさらに３日培養した。化合物存在下で３日間培養後の細胞数計測はＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（プロメガ社製）を用い、以下の式より増殖阻害率を算出した。増殖を５０％阻害することのできる化合物濃度をＩＣ５０（ｎＭ）と定義した。
増殖阻害率（％）＝（Ｃ－Ｔ）／（Ｃ）×１００
Ｔ：被検化合物を添加したウェルの発光強度
Ｃ：被検化合物を添加しなかったウェルの発光強度
結果を以下の表８に示した。
【0151】
【表8】
【0152】
以上の結果より、化合物（Ｉ）は、ＨＥＲ２発現細胞株（ＳＫ－ＢＲ－３）およびエクソン２０挿入変異型ＨＥＲ２発現細胞株（Ｂａ／Ｆ３－ＨＥＲ２ｉｎｓＹＶＭＡ）においても優れた細胞増殖抑制活性を有することが明らかとなった。
【0153】
試験例５ ＨＥＲ２発現細胞株（ＮＣＩ－Ｎ８７）に対する増殖阻害活性の測定
ＨＥＲ２過剰発現ヒト胃がん細胞株であるＮＣＩ－Ｎ８７細胞（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ，Ｃａｔ Ｎｏ．ＡＴＣＣ（登録商標） ＣＲＬ－５８２２）を、１０％ウシ胎児血清を含むＲＰＭＩ１６４０培地（和光純薬工業株式会社）中に懸濁させた。次いで、細胞懸濁液を、９６ウェル平底マイクロプレートの各ウェルに播種し、５％炭酸ガス含有の培養器中３７℃で１日培養した。合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ）をＤＭＳＯに溶解し、ＤＭＳＯを用いて被検化合物を終濃度の１０００倍の濃度になるように希釈した。化合物（Ｉ）のＤＭＳＯ溶液を細胞の懸濁に用いた培地で希釈し、これを細胞の培養プレートの各ウェルにＤＭＳＯの最終濃度が０．１％になるように加えた。Ｃｏｎｔｒｏｌ用ウェルには、ＤＭＳＯを細胞の懸濁に用いた培地で希釈し、これを細胞の培養プレートの各ウェルにＤＭＳＯの最終濃度が０．１％になるように加えた。薬液を添加後、５％炭酸ガス含有の培養器中３７℃でさらに３日培養した。化合物存在下で３日間培養後の細胞数計測はＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ２．０（プロメガ社製）を用い、プロメガ社の推奨するプロトコールに準じて行った。以下の式より増殖阻害率を算出し、増殖を５０％阻害することのできる被検化合物の濃度をＩＣ５０値（ｎＭ）と定義した。
増殖阻害率（％）＝（Ｃ－Ｔ）／Ｃ×１００
Ｔ：被検化合物を添加したウェルの発光強度
Ｃ：被検化合物を添加しなかったウェルの発光強度
結果を以下の表９に示した。
ＨＥＲ２過剰発現ヒト胃がん細胞株であるＮＣＩ－Ｎ８７細胞（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ，Ｃａｔ Ｎｏ．ＡＴＣＣ（登録商標） ＣＲＬ－５８２２）を、１０％ウシ胎児血清を含むＲＰＭＩ１６４０培地（和光純薬工業株式会社）中に懸濁させた。次いで、細胞懸濁液を、９６ウェル平底マイクロプレートの各ウェルに播種し、５％炭酸ガス含有の培養器中３７℃で１日培養した。合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ）をＤＭＳＯに溶解し、ＤＭＳＯを用いて被検化合物を終濃度の１０００倍の濃度になるように希釈した。化合物（Ｉ）のＤＭＳＯ溶液を細胞の懸濁に用いた培地で希釈し、これを細胞の培養プレートの各ウェルにＤＭＳＯの最終濃度が０．１％になるように加えた。Ｃｏｎｔｒｏｌ用ウェルには、ＤＭＳＯを細胞の懸濁に用いた培地で希釈し、これを細胞の培養プレートの各ウェルにＤＭＳＯの最終濃度が０．１％になるように加えた。薬液を添加後、５％炭酸ガス含有の培養器中３７℃でさらに３日培養した。化合物存在下で３日間培養後の細胞数計測はＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ２．０（プロメガ社製）を用い、プロメガ社の推奨するプロトコールに準じて行った。以下の式より増殖阻害率を算出し、増殖を５０％阻害することのできる被検化合物の濃度をＩＣ５０値（ｎＭ）と定義した。
増殖阻害率（％）＝（Ｃ－Ｔ）／Ｃ×１００
Ｔ：被検化合物を添加したウェルの発光強度
Ｃ：被検化合物を添加しなかったウェルの発光強度
結果を以下の表９に示した。
【0154】
【表9】
【0155】
以上の結果より、化合物（Ｉ）は、ＨＥＲ２過剰発現細胞株（ＮＣＩ－Ｎ８７）においても優れた細胞増殖抑制活性を有することが明らかとなった。
【0156】
試験例６ 経口吸収性の評価
合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ）を０．５％ＨＰＭＣ水溶液、０．１Ｎ塩酸に懸濁又は溶解し、ＢＡＬＢ／ｃＡマウス（日本クレア株式会社）に５０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙの用量にて経口投与した。経口投与後、０．５、１、２、４及び６時間後に顔面静脈より経時採血し血漿を得た。得られた血漿中の化合物濃度をＬＣ－ＭＳ／ＭＳにより測定し、経口吸収性の評価を行った。
結果を以下の表１０に示した。
合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ）を０．５％ＨＰＭＣ水溶液、０．１Ｎ塩酸に懸濁又は溶解し、ＢＡＬＢ／ｃＡマウス（日本クレア株式会社）に５０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙの用量にて経口投与した。経口投与後、０．５、１、２、４及び６時間後に顔面静脈より経時採血し血漿を得た。得られた血漿中の化合物濃度をＬＣ－ＭＳ／ＭＳにより測定し、経口吸収性の評価を行った。
結果を以下の表１０に示した。
【0157】
【表10】
【0158】
以上の結果より、化合物（Ｉ）は十分な血漿中濃度が観測され、良好な経口吸収性を示した。
【0159】
試験例７ 脳移行性の評価
合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ）を０．５％ＨＰＭＣ水溶液、０．１Ｎ塩酸に懸濁又は溶解し、ＢＡＬＢ／ｃＡマウス日本クレア株式会社）に５０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙの用量にて経口投与した。経口投与後、０．５時間後に顔面静脈より採血後、全脳を摘出し血漿及び脳サンプルを得た。得られた脳サンプルに３倍量の水を添加後、超音波ホモジナイザーを用いてホモジナイズし、脳ホモジネートを得た。得られた血漿中及び脳ホモジネート中の化合物濃度をＬＣ－ＭＳ／ＭＳにより測定し、脳／血漿中化合物濃度から脳移行性を評価した。
結果を以下の表１１に示した。
合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ）を０．５％ＨＰＭＣ水溶液、０．１Ｎ塩酸に懸濁又は溶解し、ＢＡＬＢ／ｃＡマウス日本クレア株式会社）に５０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙの用量にて経口投与した。経口投与後、０．５時間後に顔面静脈より採血後、全脳を摘出し血漿及び脳サンプルを得た。得られた脳サンプルに３倍量の水を添加後、超音波ホモジナイザーを用いてホモジナイズし、脳ホモジネートを得た。得られた血漿中及び脳ホモジネート中の化合物濃度をＬＣ－ＭＳ／ＭＳにより測定し、脳／血漿中化合物濃度から脳移行性を評価した。
結果を以下の表１１に示した。
【0160】
【表11】
【0161】
以上の結果より、化合物（Ｉ）は良好な脳移行性を示した。
【0162】
試験例８ Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ 遺伝子導入ＨＥＲ２発現細胞株（ＮＣＩ－Ｎ８７－ｌｕｃ）の脳直接移植モデルに対する抗腫瘍効果確認試験（ｉｎ ｖｉｖｏ）
脳直接移植モデルによる被検化合物の抗腫瘍効果は、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎから購入したヒト胃癌腫瘍細胞であるＮＣＩ－Ｎ８７にＬｕｃｉｆｅｒａｓｅ 遺伝子を導入した、ＮＣＩ－Ｎ８７－Ｌｕｃを使用した。ＮＣＩ－Ｎ８７－Ｌｕｃは、１０％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）を含むＲＰＭＩ－１６４０ （４．５ｇ／Ｌ グルコース、１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ及び１ｍＭピルビン酸ナトリウム含有）（和光純薬株式会社）培地において、５％ ＣＯ２インキュベーター中において３７℃で細胞株を培養した。
ＮＣＩ－Ｎ８７－Ｌｕｃ細胞をＰＢＳ中に６．２５×１０７ ｃｅｌｌｓ／ｍＬの濃度で再懸濁した。
マウス用イヤーバーを用いて約６～７週齢のヌードマウス（ＢＡＬＢ／ｃＡＪｃｌ－ｎｕ／ｎｕ、日本クレア株式会社）を脳定位固定装置に固定し、 脳上部の皮膚をアルコール綿にて消毒後に、メスにて切開した。
マイクロドリルを用いて、頭蓋骨に穴をあけ、針、マニュピュレーター、シリンジポンプを用いて、細胞懸濁液４μＬを ０．８μＬ／ｍｉｎの条件で脳内に移植した。
脳内腫瘍量の目安として、移植約３週間後に生存例全例について、ＩＶＩＳ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ，Ｉｎｃ．，型式：Ｌｕｍｉｎａ ＩＩ）を用いてＴｏｔａｌ Ｆｌｕｘ（Ｐｈｏｔｏｎ／ｓｅｃ）を測定した。その結果から、ＭｉＳＴＡＴ（Ｖｅｒ．２．００）の群分けプログラムを用いて、各群６匹ずつの動物を割り付けた。
被検化合物は１日１回、群分け翌日から２１日間（Ｄａｙ１－２１）連日経口投与した。
効果の有無の判断には、判定日（Ｄａｙ２２）のＴｏｔａｌ Ｆｌｕｘを対数変換（Ｌｏｇ１０）した値を用いた。被検化合物としては合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ）を用い、２５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙの用量にて投与した。
縦軸に平均Ｔｏｔａｌ Ｆｌｕｘを対数変換（Ｌｏｇ１０）した値、横軸に移植後の日数（Ｄａｙ）を設定したグラフを作成し、薬剤投与期間中のＴｏｔａｌ Ｆｌｕｘの経時的推移を観察した。
コントロール（Ｃｏｎｔｒｏｌ）としては０．１Ｎ ＨＣｌ，０．５％ＨＰＭＣ水溶液を用いた。
脳直接移植モデルによる被検化合物の抗腫瘍効果は、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎから購入したヒト胃癌腫瘍細胞であるＮＣＩ－Ｎ８７にＬｕｃｉｆｅｒａｓｅ 遺伝子を導入した、ＮＣＩ－Ｎ８７－Ｌｕｃを使用した。ＮＣＩ－Ｎ８７－Ｌｕｃは、１０％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）を含むＲＰＭＩ－１６４０ （４．５ｇ／Ｌ グルコース、１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ及び１ｍＭピルビン酸ナトリウム含有）（和光純薬株式会社）培地において、５％ ＣＯ２インキュベーター中において３７℃で細胞株を培養した。
ＮＣＩ－Ｎ８７－Ｌｕｃ細胞をＰＢＳ中に６．２５×１０７ ｃｅｌｌｓ／ｍＬの濃度で再懸濁した。
マウス用イヤーバーを用いて約６～７週齢のヌードマウス（ＢＡＬＢ／ｃＡＪｃｌ－ｎｕ／ｎｕ、日本クレア株式会社）を脳定位固定装置に固定し、 脳上部の皮膚をアルコール綿にて消毒後に、メスにて切開した。
マイクロドリルを用いて、頭蓋骨に穴をあけ、針、マニュピュレーター、シリンジポンプを用いて、細胞懸濁液４μＬを ０．８μＬ／ｍｉｎの条件で脳内に移植した。
脳内腫瘍量の目安として、移植約３週間後に生存例全例について、ＩＶＩＳ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ，Ｉｎｃ．，型式：Ｌｕｍｉｎａ ＩＩ）を用いてＴｏｔａｌ Ｆｌｕｘ（Ｐｈｏｔｏｎ／ｓｅｃ）を測定した。その結果から、ＭｉＳＴＡＴ（Ｖｅｒ．２．００）の群分けプログラムを用いて、各群６匹ずつの動物を割り付けた。
被検化合物は１日１回、群分け翌日から２１日間（Ｄａｙ１－２１）連日経口投与した。
効果の有無の判断には、判定日（Ｄａｙ２２）のＴｏｔａｌ Ｆｌｕｘを対数変換（Ｌｏｇ１０）した値を用いた。被検化合物としては合成例１の方法に従って得られた化合物（Ｉ）を用い、２５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙの用量にて投与した。
縦軸に平均Ｔｏｔａｌ Ｆｌｕｘを対数変換（Ｌｏｇ１０）した値、横軸に移植後の日数（Ｄａｙ）を設定したグラフを作成し、薬剤投与期間中のＴｏｔａｌ Ｆｌｕｘの経時的推移を観察した。
コントロール（Ｃｏｎｔｒｏｌ）としては０．１Ｎ ＨＣｌ，０．５％ＨＰＭＣ水溶液を用いた。
【0163】
結果を以下の図３１および図３２に示した。各群Ｄａｙ２２のＴｏｔａｌ Ｆｌｕｘを対数変換（Ｌｏｇ１０）した値を有意差検定した結果、コントロール群に比して、統計学的に有意（有意水準両側５％）に低いことが示された。また、体重の測定には動物用電子天秤を用いた。ｎ日目の体重（ＢＷｎ）からｎ日目体重変化率（Ｂｏｄｙ ｗｅｉｇｈｔ ｃｈａｎｇｅ；ＢＷＣｎ）を下記の式により算出した。
ＢＷＣｎ（％）＝［（ｎ日目の体重）－（群分け日の体重）］／（群分け日の体重）×１００
この試験結果から、化合物（Ｉ）は、ヌードマウス脳内に移植したＨＥＲ２過剰発現細胞株（ＮＣＩ－Ｎ８７－ｌｕｃ）に対して，優れた抗腫瘍効果を有することが明らかとなった。また、全ての個体で－２０％以上の体重減少は見られなかったため、重篤な副作用はないことが明らかとなった。
ＢＷＣｎ（％）＝［（ｎ日目の体重）－（群分け日の体重）］／（群分け日の体重）×１００
この試験結果から、化合物（Ｉ）は、ヌードマウス脳内に移植したＨＥＲ２過剰発現細胞株（ＮＣＩ－Ｎ８７－ｌｕｃ）に対して，優れた抗腫瘍効果を有することが明らかとなった。また、全ての個体で－２０％以上の体重減少は見られなかったため、重篤な副作用はないことが明らかとなった。
【0164】
試験例９ 固体安定性試験
実施例及び比較例で得られた化合物（Ｉ）のフリー体ＩＩ型結晶，１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶を４週間保存したときの固体安定性を評価した。
保存条件：６０℃（閉鎖系）
保存期間：４週間
保存量：約３０ｍｇ
保存容器：ガラス瓶
結果を以下の表１２に示す。
類縁物質量（化合物（Ｉ）以外に検出された物質の量）の変化は、試料約１ｍｇを秤量し、水・アセトニトリル混液（１：１）約１ｍＬに溶解させ、この液５μＬを正確に測りとって、以下の方法でＨＰＬＣにて分析を行った。
ＨＰＬＣ測定法（安定性試験）
試料溶液中の類縁物質量をＨＰＬＣ分析にて測定した。なお、データ処理を含む装置の取扱いは、各装置で指示された方法及び手順に従った。
カラム：Ｗａｔｅｒｓ製 ＸＳｅｌｅｃｔ ＣＳＨ Ｃ１８ （４．６×１５０ｍｍ，３．５μｍ）
ＵＶ検出：２４６ｎｍ
カラム温度：４０℃
流量：１．０ｍＬ／分
サンプル温度：５℃
サンプル濃度：１ｍｇ／ｍＬ
移動相Ａ：５ ｍｍｏｌ／Ｌ ギ酸アンモニウム緩衝液（ｐＨ６．５）／アセトニトリル（９：１）混液
移動相Ｂ：アセトニトリル
グラディエントを表１３に示す。
その結果、化合物（Ｉ）のフリー体ＩＩ型結晶、１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶ともに粉末Ｘ線回折パターンの変化は認められず、また、類縁物質の増加もほとんど認められず、極めて安定な結晶であることが判明した。
実施例及び比較例で得られた化合物（Ｉ）のフリー体ＩＩ型結晶，１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶を４週間保存したときの固体安定性を評価した。
保存条件：６０℃（閉鎖系）
保存期間：４週間
保存量：約３０ｍｇ
保存容器：ガラス瓶
結果を以下の表１２に示す。
【表12】
ＨＰＬＣ測定法（安定性試験）
試料溶液中の類縁物質量をＨＰＬＣ分析にて測定した。なお、データ処理を含む装置の取扱いは、各装置で指示された方法及び手順に従った。
カラム：Ｗａｔｅｒｓ製 ＸＳｅｌｅｃｔ ＣＳＨ Ｃ１８ （４．６×１５０ｍｍ，３．５μｍ）
ＵＶ検出：２４６ｎｍ
カラム温度：４０℃
流量：１．０ｍＬ／分
サンプル温度：５℃
サンプル濃度：１ｍｇ／ｍＬ
移動相Ａ：５ ｍｍｏｌ／Ｌ ギ酸アンモニウム緩衝液（ｐＨ６．５）／アセトニトリル（９：１）混液
移動相Ｂ：アセトニトリル
グラディエントを表１３に示す。
【表13】
【0165】
試験例１０ 動的水分吸脱着（ＤＶＳ）試験
実施例及び参考例で得られた化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶、フリー体ＩＩ型結晶、フリー体Ｉ型結晶、１当量のフマル酸とのＶ型結晶、及び１当量のＬ－酒石酸との結晶を用いて水分吸脱着試験を行った。
水分吸脱着試験は、次の条件に従って測定した。
試料およそ１０ｍｇを専用の石英製ホルダーに充填し、以下の条件下に試料の各湿度における重量を連続的に測定し記録した。なお、データ処理を含む装置の取扱いは、各装置で指示された方法及び手順にしたがった。
装置：ＶＴＩ ＳＡ＋（ティー・エイ・インスツルメント社製）
乾燥温度：６０℃
昇温速度：１℃／ｍｉｎ
乾燥の平衡：３００分を超えない範囲で、５分間で０．０１ｗｔ％減少しないことを確認
測定温度：２５℃
加湿の平衡：１２０分を超えない範囲で、５分間で０．０１ｗｔ％増加しないことを確認
相対湿度プログラム：５～９５％ＲＨまで５％ＲＨずつ上げ、９５％ＲＨ～５％ＲＨまで５％ＲＨずつ下げる
これらの試験で得られた測定条件範囲における重量変化を表１４～表１８に示す。
実施例及び参考例で得られた化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶、フリー体ＩＩ型結晶、フリー体Ｉ型結晶、１当量のフマル酸とのＶ型結晶、及び１当量のＬ－酒石酸との結晶を用いて水分吸脱着試験を行った。
水分吸脱着試験は、次の条件に従って測定した。
試料およそ１０ｍｇを専用の石英製ホルダーに充填し、以下の条件下に試料の各湿度における重量を連続的に測定し記録した。なお、データ処理を含む装置の取扱いは、各装置で指示された方法及び手順にしたがった。
装置：ＶＴＩ ＳＡ＋（ティー・エイ・インスツルメント社製）
乾燥温度：６０℃
昇温速度：１℃／ｍｉｎ
乾燥の平衡：３００分を超えない範囲で、５分間で０．０１ｗｔ％減少しないことを確認
測定温度：２５℃
加湿の平衡：１２０分を超えない範囲で、５分間で０．０１ｗｔ％増加しないことを確認
相対湿度プログラム：５～９５％ＲＨまで５％ＲＨずつ上げ、９５％ＲＨ～５％ＲＨまで５％ＲＨずつ下げる
これらの試験で得られた測定条件範囲における重量変化を表１４～表１８に示す。
【表14】
【表15】
【表16】
【表17】
【表18】
【0166】
表１４に示すように化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶は水分吸脱着試験において９５％の相対湿度下で０．３８％の重量増加であり、１％に満たないことから、ほとんど吸湿性がないと判断された。同様に化合物（Ｉ）のフリー体ＩＩ型結晶、フリー体Ｉ型結晶、１当量のフマル酸とのＶ型結晶についても水分吸脱着試験において９５％の相対湿度下で質量増加が１％に満たないことから、ほとんど吸湿性がないと判断された（表１５～１７）。一方、化合物（Ｉ）の１当量のＬ－酒石酸との結晶は表１８に示すように、水分吸脱着試験において９５％の相対湿度下で６．４１％もの質量増加が認められ、高い吸湿性を有することが明らかとなった。
したがって、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶、フリー体ＩＩ型結晶、フリー体Ｉ型結晶、１当量のフマル酸とのＶ型結晶は、化合物（Ｉ）の１当量のＬ－酒石酸との結晶と比較して吸湿性が低く、医薬品の開発候補化合物において、安定した品質の医薬品の工業的生産の観点で優れているといえる。化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶、フリー体ＩＩ型結晶、フリー体Ｉ型結晶、１当量のフマル酸とのＶ型結晶は医薬品又は医薬品原薬として、優れた性質を有することが確認された。
したがって、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶、フリー体ＩＩ型結晶、フリー体Ｉ型結晶、１当量のフマル酸とのＶ型結晶は、化合物（Ｉ）の１当量のＬ－酒石酸との結晶と比較して吸湿性が低く、医薬品の開発候補化合物において、安定した品質の医薬品の工業的生産の観点で優れているといえる。化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶、フリー体ＩＩ型結晶、フリー体Ｉ型結晶、１当量のフマル酸とのＶ型結晶は医薬品又は医薬品原薬として、優れた性質を有することが確認された。
【0167】
試験例１１ 血中濃度測定試験
実施例で得られた化合物（Ｉ）のＩ型結晶、化合物（Ｉ）のＩＩ型結晶、及び化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸塩ＩＩ型結晶について、血中濃度測定試験を行った。具体的には、化合物（Ｉ）のＩ型結晶は０．１Ｎ塩酸を含んだ０．５％ＨＰＭＣを用いて、化合物（Ｉ）のＩＩ型結晶、及び化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶は０．５％ＨＰＭＣを用いて、それぞれ化合物（Ｉ）（フリー体）に分子量換算して１００ｍｇ／１０ｍＬ及び３００ｍｇ／１０ｍＬの懸濁液を作製した。これらの投与液を摂食条件下にて飼育していた雌性ラット（Ｃｒｌ：ＣＤ（ＳＤ），日本チャールス・リバー株式会社）に体重１ｋｇあたり１０ｍＬの容量で経口投与用ゾンデを用いて経口投与した。投与後、ラット用ケージに戻し状態を確認した。ケージ内では給水及び給餌は自由に取れる状態とした。投与０．５、１、２、４、６時間後にラットをイソフルランにて麻酔し、ヘパリン処理シリンジと注射針（２５Ｇ）を用いて約８０μＬ頸静脈より採血した。
採血した血液は、氷冷し、遠心操作により血漿を分離した。採血終了後のラットは、ラット用ケージに戻し麻酔覚醒後の状態を確認した。最終採血終了後は、イソフルラン麻酔の深度確認を行った後に、小動物実験固定器で仰向けに四肢を固定し開腹し、腹部大動静脈の切開による放血により安楽死させた。
ＬＣ／ＭＳ／ＭＳを用いて、ＭＲＭ法で測定し検量線から定量した各血漿中の化合物（Ｉ）の濃度から、Ｐｈｏｅｎｉｘ ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ（ｖ６．４．０，Ｃｅｒｔａｒａ ＵＳＡ，Ｉｎｃ．）を用いて、ＡＵＣ０－６ｈｒ（台形法にて算出した投与後０～６時間の血中濃度－時間曲線下面積）、Ｃｍａｘ（最高血中濃度）、Ｔｍａｘ（最高血中濃度到達時間）を算出した。
実施例で得られた化合物（Ｉ）のＩ型結晶、化合物（Ｉ）のＩＩ型結晶、及び化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸塩ＩＩ型結晶について、血中濃度測定試験を行った。具体的には、化合物（Ｉ）のＩ型結晶は０．１Ｎ塩酸を含んだ０．５％ＨＰＭＣを用いて、化合物（Ｉ）のＩＩ型結晶、及び化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶は０．５％ＨＰＭＣを用いて、それぞれ化合物（Ｉ）（フリー体）に分子量換算して１００ｍｇ／１０ｍＬ及び３００ｍｇ／１０ｍＬの懸濁液を作製した。これらの投与液を摂食条件下にて飼育していた雌性ラット（Ｃｒｌ：ＣＤ（ＳＤ），日本チャールス・リバー株式会社）に体重１ｋｇあたり１０ｍＬの容量で経口投与用ゾンデを用いて経口投与した。投与後、ラット用ケージに戻し状態を確認した。ケージ内では給水及び給餌は自由に取れる状態とした。投与０．５、１、２、４、６時間後にラットをイソフルランにて麻酔し、ヘパリン処理シリンジと注射針（２５Ｇ）を用いて約８０μＬ頸静脈より採血した。
採血した血液は、氷冷し、遠心操作により血漿を分離した。採血終了後のラットは、ラット用ケージに戻し麻酔覚醒後の状態を確認した。最終採血終了後は、イソフルラン麻酔の深度確認を行った後に、小動物実験固定器で仰向けに四肢を固定し開腹し、腹部大動静脈の切開による放血により安楽死させた。
ＬＣ／ＭＳ／ＭＳを用いて、ＭＲＭ法で測定し検量線から定量した各血漿中の化合物（Ｉ）の濃度から、Ｐｈｏｅｎｉｘ ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ（ｖ６．４．０，Ｃｅｒｔａｒａ ＵＳＡ，Ｉｎｃ．）を用いて、ＡＵＣ０－６ｈｒ（台形法にて算出した投与後０～６時間の血中濃度－時間曲線下面積）、Ｃｍａｘ（最高血中濃度）、Ｔｍａｘ（最高血中濃度到達時間）を算出した。
【0168】
結果を表１９に示す。投与量を１００ｍｇ／ｋｇから３００ｍｇ／ｋｇに上げた場合、塩酸を添加した化合物（Ｉ）のＩ型結晶及び化合物（Ｉ）のＩＩ型結晶のＣｍａｘがそれぞれ０．８倍及び１．２倍上昇し、ＡＵＣ０－６ｈｒがそれぞれ１．０倍及び１．５倍上昇したのに対し、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶はＣｍａｘ及びＡＵＣ０－６ｈｒがそれぞれ１．９倍上昇した。また、投与量３００ｍｇ／ｋｇにおける、化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶のＣｍａｘは、同用量での酸を添加した化合物（Ｉ）のＩ型結晶及び化合物（Ｉ）のＩＩ型結晶の値と比較して、それぞれ１．７倍及び１．４倍、ＡＵＣ０－６ｈｒはそれぞれ２．４倍高い値を示すことがわかった。したがって、本発明にかかる化合物（Ｉ）の１当量のフマル酸とのＩＩ型結晶はより優れた経口吸収性を示すことが確認された。
【表19】
【0169】
なお、本明細書に記載した全ての文献及び刊行物は、その目的にかかわらず参照によりその全体を本明細書に組み込むものとする。また、本明細書は、本願の優先権主張の基礎となる日本国特許出願である特願2020-121520号(2020年7月15日出願)の特許請求の範囲、明細書、および図面の開示内容を包含する。
本発明のいくつかの実施形態を説明したが、これらの実施形態は、例として提示したものであり、発明の範囲を限定することは意図していない。これら新規な実施形態は、その他の様々な形態で実施されることが可能であり、発明の要旨を逸脱しない範囲で、種々の省略、置き換え、変更を行うことができる。これら実施形態やその変形は、発明の範囲や要旨に含まれるとともに、特許請求の範囲に記載された発明とその均等の範囲に含まれる。
本発明のいくつかの実施形態を説明したが、これらの実施形態は、例として提示したものであり、発明の範囲を限定することは意図していない。これら新規な実施形態は、その他の様々な形態で実施されることが可能であり、発明の要旨を逸脱しない範囲で、種々の省略、置き換え、変更を行うことができる。これら実施形態やその変形は、発明の範囲や要旨に含まれるとともに、特許請求の範囲に記載された発明とその均等の範囲に含まれる。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10】
【図11】
【図12】
【図13】
【図14】
【図15】
【図16】
【図17】
【図18】
【図19】
【図20】
【図21】
【図22】
【図23】
【図24】
【図25】
【図26】
【図27】
【図28】
【図29】
【図30】
【図31】
【図32】
【配列表】