特許 7393752 良性腫瘍の予防または治療薬

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2023-11-29

(45)【発行日】2023-12-07

(54)【発明の名称】良性腫瘍の予防または治療薬

(51)【国際特許分類】

   A61K 38/08 20190101AFI20231130BHJP

   A61K 38/10 20060101ALI20231130BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20231130BHJP

   A61P 37/04 20060101ALI20231130BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20231130BHJP

   A61K 48/00 20060101ALI20231130BHJP

   A61K 39/00 20060101ALI20231130BHJP

   A61K 39/39 20060101ALI20231130BHJP

   A61K 35/17 20150101ALI20231130BHJP

   A61K 35/15 20150101ALI20231130BHJP

   C12N 5/0783 20100101ALI20231130BHJP

   C12N 5/0784 20100101ALI20231130BHJP

   C07K 14/82 20060101ALN20231130BHJP

   C12N 15/12 20060101ALN20231130BHJP

   C12N 5/10 20060101ALN20231130BHJP

【ＦＩ】

A61K38/08 ZNA

A61K38/10

A61P35/00

A61P37/04

A61P43/00 121

A61P43/00 107

A61K48/00

A61K39/00 H

A61K39/39

A61K35/17

A61K35/15

C12N5/0783

C12N5/0784

C07K14/82

C12N15/12

C12N5/10

【請求項の数】 20

(21)【出願番号】P 2020551127

(86)(22)【出願日】2019-10-04

(86)【国際出願番号】 JP2019039383

(87)【国際公開番号】W WO2020071551

(87)【国際公開日】2020-04-09

【審査請求日】2022-08-31

(31)【優先権主張番号】P 2018190461

(32)【優先日】2018-10-05

(33)【優先権主張国・地域又は機関】JP

【早期審査対象出願】

(73)【特許権者】

【識別番号】505443953

【氏名又は名称】株式会社癌免疫研究所

(73)【特許権者】

【識別番号】000002912

【氏名又は名称】住友ファーマ株式会社

(74)【代理人】

【識別番号】100145403

【弁理士】

【氏名又は名称】山尾 憲人

(74)【代理人】

【識別番号】100106518

【弁理士】

【氏名又は名称】松谷 道子

(74)【代理人】

【識別番号】100138911

【弁理士】

【氏名又は名称】櫻井 陽子

(72)【発明者】

【氏名】杉山 治夫

【審査官】大島 彰公

(56)【参考文献】

【文献】国際公開第２０１６／０９３３２６（ＷＯ，Ａ１）

【文献】特表２０１７－５２３７８４（ＪＰ，Ａ）

【文献】国際公開第２０１８／１８１６４８（ＷＯ，Ａ１）

【文献】国際公開第２０１４／１５７６９２（ＷＯ，Ａ１）

【文献】NAPEKOSKI K.M. et al.，Microvenular hemangioma: a clinicopathologic review of 13 cases.，Journal of Cutaneous Pathology，2014年，Vol.41, No.11，pages 816 to 822，doi:10.1111/cup.12386

【文献】SHIRAKATA T. et al.，WT1 peptide therapy for a patient with chemotherapy-resistant salivary gland cancer.，Anticancer Research，2012年，Vol.32, No.3，pages 1081 to 1085，ISSN:0250-7005

【文献】大内知之ほか，多形腺腫由来癌carcinoma ex pleomorphic adenomaと転移性多形腺腫metastasizing pleomorphic adenoma，北海道医療大学歯学雑誌，2007年，Vol.26, No.2，pages 85 to 86，https://hsuh.repo.nii.ac.jp/?action=pages_view_main&active_action=repository_view_main_item_detail&item_id=10080&item_no=1&page_id=13&block_id=17

【文献】LANGMAN G. et al.，WT1 expression in salivary gland pleomorphic adenomas: a reliable marker of the neoplastic myoepithe，Modern Pathology，2011年，Vol.24, No.2，pages 168 to 174，doi:10.1038/modpathol.2010.190

【文献】WEBER G. et al.，WT1 peptide-specific T cells generated from peripheral blood of healthy donors: possible implication，Leukemia，2009年，Vol.23, No.9，pages 1634 to 1642，doi:10.1038/leu.2009.70

【文献】KOIDO S. et al.，Treatment with chemotherapy and dendritic cells pulsed with multiple Wilms' tumor 1 (WT1)-specific M，Clinical Cancer Research，2014年，Vol.20, No.16，pages 4228 to 4239，doi:10.1158/1078-0432.CCR-14-0314

【文献】AMINI NIK S. et al.，Upregulation of Wilms' tumor gene 1 (WT1) in desmoid tumors.，International Journal of Cancer，2005年，Vol.114, No.2，pages 202 to 208，doi:10.1002/ijc.20717

【文献】野村昌哉ほか，下行結腸カルチノイド根治術後７年目に異時性発生した上行結腸カルチノイドの１例，日本消化器外科学会雑誌，2004年，Vol.37, No.2，pages 217 to 222，https://doi.org/10.5833/jjgs.37.217

【文献】BAUTZ D.J. et al.，Prophylactic vaccination targeting ERBB3 decreases polyp burden in a mouse model of human colorectal，Oncoimmunology，2016年，Vol.6, No.1, Article No. e1255395，pages 1 to 6，doi:10.1080/2162402X.2016.1255395

【文献】ASLAN A. et al.，Investigation of Insulin-Like Growth Factor-1 (IGF-1), P53, and Wilms' Tumor 1 (WT1) Expression Leve，Medical Science Monitor，2019年07月25日，Vol.25，pages 5510 to 5517，doi:10.12659/MSM.915335

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

Ａ６１Ｋ、Ａ６１Ｐ、Ｃ１２Ｎ、Ｃ０７Ｋ

ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）

ＣＡｐｌｕｓ／ＲＥＧＩＳＴＲＹ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＥＭＢＡＳＥ／ＢＩＯＳＩＳ（ＳＴＮ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体を含む、良性腫瘍の予防または治療薬であって、
前記ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体が、
ＲＭＦＰＮＡＰＹＬ （配列番号２）、
ＲＹＦＰＮＡＰＹＬ （配列番号４６）、
ＹＭＦＰＮＡＰＹＬ （配列番号１４）、
ＣＹＴＷＮＱＭＮＬ （配列番号４５）、
ＣＭＴＷＮＱＭＮＬ （配列番号３）、
Ｃ－ＣＹＴＷＮＱＭＮＬ（配列番号４７）（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）、および
Ｃ－ＣＭＴＷＮＱＭＮＬ（配列番号４８）（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）から選択されるいずれかのアミノ酸配列からなるペプチド、もしくはその薬学上許容される塩、
式（２）：

【化1】

（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）
で表される化合物、もしくはその薬学上許容される塩、または
式（３）：

【化2】

（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）
で表される化合物、もしくはその薬学上許容される塩であり、
前記良性腫瘍は、ＷＴ１を発現し、ならびに
家族性大腸腺腫症および非遺伝性の大腸腺腫からなる群より選択される、
良性腫瘍の予防または治療薬。

【請求項2】

前記ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体は、
ＲＭＦＰＮＡＰＹＬ （配列番号２）、
ＲＹＦＰＮＡＰＹＬ （配列番号４６）、
ＹＭＦＰＮＡＰＹＬ （配列番号１４）、
ＣＹＴＷＮＱＭＮＬ （配列番号４５）、
ＣＭＴＷＮＱＭＮＬ （配列番号３）、
Ｃ－ＣＹＴＷＮＱＭＮＬ（配列番号４７）（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）、および
Ｃ－ＣＭＴＷＮＱＭＮＬ（配列番号４８）（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）から選択されるいずれかのアミノ酸配列からなるペプチド、またはその薬学上許容される塩である、
請求項１に記載の予防または治療薬。

【請求項3】

前記ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体が、
式（２）：

【化1】

（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）
で表される化合物、またはその薬学上許容される塩である、
請求項１に記載の予防または治療薬。

【請求項4】

前記ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体が、
式（３）：

【化2】

（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）
で表される化合物、またはその薬学上許容される塩である、
請求項１に記載の予防または治療薬。

【請求項5】

前記ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体が、さらに
以下のアミノ酸配列：
ＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬ （配列番号４）、
ＣＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬ （配列番号５０）および
ＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬＣ （配列番号５１）、
からなる群から選択されるアミノ酸配列からなるペプチドまたはその薬学上許容される塩を一つ以上含む組成物である、請求項１～４のいずれか一項に記載の予防または治療薬。

【請求項6】

前記ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体が、
式（２）：

【化1】

（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）
で表される化合物またはその薬学上許容される塩と、
アミノ酸配列： ＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬ （配列番号４）からなるペプチドまたはその薬学上許容される塩を含む組成物である、
請求項５に記載の予防または治療薬。

【請求項7】

前記ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体が、
式（３）：

【化2】

（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）
で表される化合物またはその薬学上許容される塩と、
アミノ酸配列： ＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬ （配列番号４）からなるペプチドまたはその薬学上許容される塩を含む組成物である、
請求項５に記載の予防または治療薬。

【請求項8】

請求項１～７のいずれか一項に記載のＷＴ１ペプチドまたはその類縁体をコードする核酸分子を含む、良性腫瘍の予防または治療薬、ここで、
前記良性腫瘍は、ＷＴ１を発現し、かつ、家族性大腸腺腫症および非遺伝性の大腸腺腫からなる群より選択される。

【請求項9】

前記核酸分子は、ＲＮＡおよび／またはＤＮＡを含む、請求項８に記載の予防または治療薬。

【請求項10】

アジュバントをさらに含む、請求項１～９のいずれか一項に記載の予防または治療薬。

【請求項11】

前記アジュバントがＭｏｎｔａｎｉｄｅ（登録商標） ＩＳＡ５１アジュバントである、請求項１０に記載の予防または治療薬。

【請求項12】

前記良性腫瘍は、家族性大腸腺腫症である、請求項１～１１のいずれか一項に記載の予防または治療薬。

【請求項13】

１週間に１回投与されることを特徴とする、請求項１～１２のいずれか一項に記載の予防または治療薬。

【請求項14】

良性腫瘍の処置を必要とする被験体由来の末梢血単核球を、請求項１～７のいずれか一項に記載のＷＴ１ペプチドまたはその類縁体の存在下で培養し、あるいは、請求項８または９に記載のＷＴ１ペプチドまたはその類縁体をコードする核酸分子を該末梢血単核球に導入し、該末梢血単核球からＷＴ１特異的細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＴＬｓ）、および／またはＷＴ１特異的ヘルパーＴ細胞をインビトロで誘導する工程を含む、良性腫瘍の予防または治療のために使用するＷＴ１特異的ＣＴＬｓおよび／またはＷＴ１特異的ヘルパーＴ細胞の誘導方法、ここで、
前記良性腫瘍は、ＷＴ１を発現し、かつ、家族性大腸腺腫症および非遺伝性の大腸腺腫からなる群より選択される。

【請求項15】

良性腫瘍の処置を必要とする被験体由来の未熟樹状細胞を、請求項１～７のいずれか一項に記載のＷＴ１ペプチドまたはその類縁体の存在下で培養し、あるいは、請求項８または９に記載のＷＴ１ペプチドまたはその類縁体をコードする核酸分子を該未熟樹状細胞に導入し、ＷＴ１提示樹状細胞をインビトロで誘導する工程を含む、良性腫瘍の予防または治療のために使用するＷＴ１提示樹状細胞の誘導方法、ここで、
前記良性腫瘍は、ＷＴ１を発現し、ならびに
家族性大腸腺腫症および非遺伝性の大腸腺腫からなる群より選択される。

【請求項16】

請求項１～７のいずれか一項に記載のＷＴ１ペプチドまたはその類縁体、または請求項８または９に記載のＷＴ１ペプチドまたはその類縁体をコードする核酸分子を含む、良性腫瘍の予防または治療のために使用する、ＷＴ１特異的ＣＴＬｓ、および／またはＷＴ１特異的ヘルパーＴ細胞を誘導するための組成物、ここで、
前記良性腫瘍は、ＷＴ１を発現し、かつ、家族性大腸腺腫症および非遺伝性の大腸腺腫からなる群より選択される。

【請求項17】

請求項１～７のいずれか一項に記載のＷＴ１ペプチドまたはその類縁体、または請求項８または９に記載のＷＴ１ペプチドまたはその類縁体をコードする核酸分子を含む、良性腫瘍の予防または治療のために使用する、ＷＴ１提示樹状細胞を誘導するための組成物、ここで、
前記良性腫瘍は、ＷＴ１を発現し、かつ、家族性大腸腺腫症および非遺伝性の大腸腺腫からなる群より選択される。

【請求項18】

請求項１～７のいずれか一項に記載のＷＴ１ペプチドまたはその類縁体、または請求項８または９に記載のＷＴ１ペプチドまたはその類縁体をコードする核酸分子により誘導されるＷＴ１特異的ＣＴＬｓ、および／またはＷＴ１特異的ヘルパーＴ細胞を含む、良性腫瘍の予防または治療のための組成物、ここで、
前記良性腫瘍は、ＷＴ１を発現し、かつ、家族性大腸腺腫症および非遺伝性の大腸腺腫からなる群より選択される。

【請求項19】

請求項１～７のいずれか一項に記載のＷＴ１ペプチドまたはその類縁体、または請求項８または９に記載のＷＴ１ペプチドまたはその類縁体をコードする核酸分子により誘導されるＷＴ１提示樹状細胞を含む、良性腫瘍の予防または治療のための組成物、ここで、
前記良性腫瘍は、ＷＴ１を発現し、かつ、家族性大腸腺腫症および非遺伝性の大腸腺腫からなる群より選択される。

【請求項20】

良性腫瘍の予防または治療薬の製造における、請求項１～７のいずれか一項に記載のＷＴ１ペプチドまたはその類縁体の使用、ここで、
前記良性腫瘍は、ＷＴ１を発現し、かつ、家族性大腸腺腫症および非遺伝性の大腸腺腫からなる群より選択される。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本開示は、良性腫瘍の予防または治療のための医薬、方法等に関する。１つの具体的な例では、本開示は、家族性腺腫症の予防または治療薬に関する。

【背景技術】

【0002】

良性腫瘍は、病理学的に悪性所見を有さない腫瘍である。良性腫瘍は、悪性腫瘍とは異なるものと理解されており、転移や浸潤傾向を示さないとされている。良性腫瘍の多くは無症状であるが、腫瘍径が大きなものの場合には他の組織を圧迫すること等によって症状を示したり、悪性化することがあり、治療や予防が必要とされることがある。そのため、治療剤や予防剤はあまり知られていない。

【0003】

家族性大腸腺腫症は、がん抑制遺伝子ＡＰＣヘテロ欠損を有する遺伝性疾患である。２０歳頃から大腸においてＡＰＣヘテロ欠損を有する腺細胞にＡＰＣ遺伝子のホモ欠損が生じ、大腸のいたるところに腺腫が発症し、そして、その腺腫から大腸がんが発症する。治療として、初期は内視鏡による腺腫の切除を行うが、その後、腺腫が密集して切除ができなくなるとともに腺腫からがんが発症するため、多くの場合大腸全摘出が行われている。浸透率は１００％で、保因者全員が２０歳前後に発症する極めて悲惨な疾患である。日本には６，０００人ほどの患者がいる。

【0004】

アスピリンが、家族性大腸腺腫症での腺腫・腺がんの発症予防および／または進展抑制に効果があることが知られているが、効果は弱く、またアスピリンの副作用の消化管出血の危険が伴う。

【0005】

ウィルムス腫瘍遺伝子ＷＴ１は、小児腎腫瘍であるウィルムス腫瘍の腫瘍形成に関与する遺伝子として単離された（非特許文献１参照）。この遺伝子は、細胞増殖および細胞分化の調節機構、並びにアポトーシスおよび組織発達と関連するジンク・フィンガー転写因子をコードする遺伝子である。

【先行技術文献】

【非特許文献】

【0006】

【文献】Ｇｅｓｓｌｅｒ，Ｍ．ら、Ｎａｔｕｒｅ、第３４３巻、７７４－７７８頁、１９９０年

【発明の概要】

【課題を解決するための手段】

【0007】

本発明者らは、鋭意研究した結果、ＷＴ１ペプチドワクチンが、家族性大腸腺腫症等の良性腫瘍での腺腫の発症の抑制および／または遅延や、腺腫からの症状の発症の抑制および／または遅延に有効であることを見出し、全摘手術しか根本的な治療方法がなく、難治性とされる家族性大腸腺腫症等の良性腫瘍の治療および予防に有用であることを見出した。本発明者らは、家族性大腸腺腫症等の良性腫瘍の患者の腺腫がＷＴ１がん抗原を発現していることを見出したため、ＷＴ１がんワクチンが家族性大腸腺腫症等の良性腫瘍での腺腫の発症の抑制および／または遅延や、腺腫からの症状の発症の抑制および／または遅延に有効であるのではないかと発想し、本発明に至った。

【0008】

本開示は、良性腫瘍の腺腫の細胞がＷＴ１タンパク質を発現するとの驚くべき発見に基づくものである。本技術分野において、悪性腫瘍のがんの細胞ではＷＴ１タンパク質が高発現していることは公知であり、悪性腫瘍におけるＷＴ１ペプチドワクチンの有用性は容易に予想され得るものであった。本開示は、良性腫瘍である家族性大腸腺腫症の腺腫の細胞が、ＷＴ１タンパク質を発現することを初めて明らかにし、良性腫瘍一般において治療剤または予防剤を提供することに思い至ったものである。加えて、ＷＴ１ペプチドワクチンの有効性は、ＷＴ１タンパク質の発現様式（発現量等）に左右されるため、仮に腺腫においてＷＴ１タンパク質が発現することを見出した場合であっても、ＷＴ１ペプチドワクチンの有効性を合理的に予測することはできなかった。その点本開示は、ＷＴ１ペプチドワクチンが良性腫瘍に対しても有効であることを初めて実証したものであり、先行技術から予測し得ない効果を見出したものである。

【0009】

したがって、本開示は、以下を提供する。
（項目Ｘ１）
ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体を含む、良性腫瘍の予防または治療薬。
（項目Ｘ２）
前記ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体は、キラー型および／またはヘルパー型を含む、項目Ｘ１に記載の予防または治療薬。
（項目Ｘ３）
前記ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体は、ＷＴ１_１２６キラーペプチドおよび／またはＷＴ１_３５ヘルパーペプチドを含む、項目Ｘ１または項目Ｘ２に記載の予防または治療薬。
（項目Ｘ４）
ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体をコードする核酸分子を含む、項目Ｘ１～項目Ｘ３のいずれか一項に記載の良性腫瘍の予防または治療薬。
（項目Ｘ５）
前記核酸分子は、ＲＮＡおよび／またはＤＮＡを含む、項目Ｘ１～項目Ｘ４のいずれか一項に記載の予防または治療薬。
（項目Ｘ６）
アジュバントをさらに含む、項目Ｘ１～項目Ｘ５のいずれか一項に記載の予防または治療薬。
（項目Ｘ７）
前記アジュバントがＭｏｎｔａｎｉｄｅ（登録商標） ＩＳＡ５１アジュバントである、項目Ｘ１～項目Ｘ６のいずれか一項に記載の予防または治療薬。
（項目Ｘ８）
前記良性腫瘍は、ＷＴ１を発現する、項目Ｘ１～項目Ｘ７のいずれか一項に記載の予防または治療薬。
（項目Ｘ９）
前記良性腫瘍は、家族性大腸腺腫症、非遺伝性の大腸腺腫、膵管内乳頭粘液性腫瘍、脳の髄膜腫、神経鞘腫、各臓器の上皮性の腺腫、乳頭腫、非上皮性の筋腫、脂肪腫、軟骨腫、血管腫からなる群より選択される、項目Ｘ１～項目Ｘ８のいずれか一項に記載の予防または治療薬。
（項目Ｘ１０）
前記良性腫瘍は、家族性大腸腺腫症である、項目Ｘ１～項目Ｘ９のいずれか一項に記載の予防または治療薬。
（項目Ｘ１１）
１週間に１回投与されることを特徴とする、項目Ｘ１～項目Ｘ１０のいずれか一項に記載の予防または治療薬。
（項目Ｘ１２）
良性腫瘍の処置を必要とする被験体由来の末梢血単核球を、上記項目Ｘのいずれか一項に記載のＷＴ１ペプチドまたはその類縁体の存在下で培養し、あるいは、上記項目Ｘのいずれか一項に記載のＷＴ１ペプチドまたはその類縁体をコードする核酸分子を該末梢血単核球に導入し、該末梢血単核球からＷＴ１特異的細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＴＬｓ）、および／またはＷＴ１特異的ヘルパーＴ細胞を誘導する工程を含むことを特徴とする、良性腫瘍の予防または治療のために使用するＷＴ１特異的ＣＴＬｓおよび／またはＷＴ１特異的ヘルパーＴ細胞の誘導方法。
（項目Ｘ１３）
良性腫瘍の処置を必要とする被験体由来の未熟樹状細胞を、上記項目のいずれか一項に記載のＷＴ１ペプチドまたはその類縁体の存在下で培養し、あるいは、上記項目Ｘのいずれか一項に記載のＷＴ１ペプチドまたはその類縁体をコードする核酸分子を該未熟樹状細胞に導入し、ＷＴ１提示樹状細胞を誘導する工程を含むことを特徴とする、良性腫瘍の予防または治療のために使用するＷＴ１提示樹状細胞の誘導方法。
（項目Ｘ１３Ａ）
項目Ｘ１～項目Ｘ１１のいずれか１つまたは複数に記載の１つまたは複数の特徴をさらに含む、項目Ｘ１２または１３に記載の方法。
（項目Ｘ１４）
ＷＴ１ペプチドもしくはその類縁体、またはそれをコードする核酸分子を含む、良性腫瘍の予防または治療のために使用する、ＷＴ１特異的ＣＴＬｓ、および／またはＷＴ１特異的ヘルパーＴ細胞を誘導するための組成物。
（項目Ｘ１５）
ＷＴ１ペプチドもしくはその類縁体、またはそれをコードする核酸分子を含む、良性腫瘍の予防または治療のために使用する、ＷＴ１提示樹状細胞を誘導するための組成物。
（項目Ｘ１５Ａ）
項目Ｘ１～項目Ｘ１３のいずれか１つまたは複数に記載の１つまたは複数の特徴をさらに含む、項目Ｘ１４または項目Ｘ１５に記載の組成物。
（項目Ｘ１６）
ＷＴ１特異的ＣＴＬｓ、および／またはＷＴ１特異的ヘルパーＴ細胞を含む、良性腫瘍の予防または治療のための組成物。
（項目Ｘ１７）
ＷＴ１提示樹状細胞を含む、良性腫瘍の予防または治療のための組成物。
（項目Ｘ１７Ａ）
項目Ｘ１～項目Ｘ１３のいずれか１つまたは複数に記載の１つまたは複数の特徴をさらに含む、項目Ｘ１６または項目Ｘ１７に記載の組成物。

【0010】

本開示はまた、以下を提供する。
（項目１）
ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体を含む、良性腫瘍の予防または治療薬。
（項目２）
前記ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体は、キラー型および／またはヘルパー型を含む、項目１に記載の予防または治療薬。
（項目３）
前記ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体は、ＷＴ１_１２６キラーペプチド、ＷＴ１_２３５キラーペプチドおよび／またはＷＴ１_３５ヘルパーペプチド、またはいずれかのアミノ酸配列において、１個～数個のアミノ酸が、欠失、置換、および／または付加されたアミノ酸配列を含み且つＣＴＬ誘導活性を有するペプチドを含む、項目１または２に記載の予防または治療薬。
（項目４）
前記ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体は、
ＲＭＦＰＮＡＰＹＬ （配列番号２）、
ＲＹＦＰＮＡＰＹＬ （配列番号４６）、
ＹＭＦＰＮＡＰＹＬ （配列番号１４）、
ＣＹＴＷＮＱＭＮＬ （配列番号４５）、
ＣＭＴＷＮＱＭＮＬ （配列番号３）、
Ｃ－ＣＹＴＷＮＱＭＮＬ（配列番号４７）（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）、および
Ｃ－ＣＭＴＷＮＱＭＮＬ（配列番号４８）（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）から選択されるいずれかのアミノ酸配列からなるペプチド、またはその薬学上許容される塩である、
項目１～３のいずれか一項に記載の予防または治療薬。
（項目５）
前記ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体が、
式（２）：

【0011】

【化1】

（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）
で表される化合物、またはその薬学上許容される塩である、
項目１～４のいずれか一項に記載の予防または治療薬。
（項目６）
前記ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体が、
式（３）：

【0012】

【化2】

（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）
で表される化合物、またはその薬学上許容される塩である、
項目１～５のいずれか一項に記載の予防または治療薬。
（項目７）
前記ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体が、さらに
以下のアミノ酸配列：
ＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬ （配列番号４）、
ＣＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬ （配列番号５０）および
ＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬＣ （配列番号５１）、
からなる群から選択されるアミノ酸配列からなるペプチドまたはその薬学上許容される塩を一つ以上含む組成物である、項目１～６のいずれか一項に記載の予防または治療薬。
（項目８）
前記ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体が、
式（２）：

【0013】

【化1】

（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）
で表される化合物またはその薬学上許容される塩と、
アミノ酸配列： ＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬ （配列番号４）からなるペプチドまたはその薬学上許容される塩を含む組成物である、
項目１～７のいずれか一項に記載の予防または治療薬。
（項目９）
前記ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体が、
式（３）：

【0014】

【化2】

（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）
で表される化合物またはその薬学上許容される塩と、
アミノ酸配列： ＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬ （配列番号４）からなるペプチドまたはその薬学上許容される塩を含む組成物である、
項目１～８のいずれか一項に記載の予防または治療薬。
（項目１０）
ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体をコードする核酸分子を含む、良性腫瘍の予防または治療薬。
（項目１１）
前記核酸分子は、ＲＮＡおよび／またはＤＮＡを含む、項目１０に記載の予防または治療薬。
（項目１２）
アジュバントをさらに含む、項目１～１１のいずれか一項に記載の予防または治療薬。
（項目１３）
前記アジュバントがＭｏｎｔａｎｉｄｅ（登録商標） ＩＳＡ５１アジュバントである、項目１～１２のいずれか一項に記載の予防または治療薬。
（項目１４）
前記良性腫瘍は、ＷＴ１を発現する、項目１～１３のいずれか一項に記載の予防または治療薬。
（項目１５）
前記良性腫瘍は、家族性大腸腺腫症、非遺伝性の大腸腺腫、膵管内乳頭粘液性腫瘍、脳の髄膜腫、神経鞘腫、各臓器の上皮性の腺腫、乳頭腫、非上皮性の筋腫、脂肪腫、軟骨腫、血管腫からなる群より選択される、項目１～１４のいずれか一項に記載の予防または治療薬。
（項目１６）
前記良性腫瘍は、家族性大腸腺腫症である、項目１～１５のいずれか一項に記載の予防または治療薬。
（項目１７）
１週間に１回投与されることを特徴とする、項目１～１６のいずれか一項に記載の予防または治療薬。
（項目１８）
良性腫瘍の処置を必要とする被験体由来の末梢血単核球を、上記項目のいずれか一項に記載のＷＴ１ペプチドまたはその類縁体の存在下で培養し、あるいは、上記項目のいずれか一項に記載のＷＴ１ペプチドまたはその類縁体をコードする核酸分子を該末梢血単核球に導入し、該末梢血単核球からＷＴ１特異的細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＴＬｓ）、および／またはＷＴ１特異的ヘルパーＴ細胞を誘導する工程を含む、良性腫瘍の予防または治療のために使用するＷＴ１特異的ＣＴＬｓおよび／またはＷＴ１特異的ヘルパーＴ細胞の誘導方法。
（項目１９）
良性腫瘍の処置を必要とする被験体由来の未熟樹状細胞を、上記項目のいずれか一項に記載のＷＴ１ペプチドまたはその類縁体の存在下で培養し、あるいは、上記項目のいずれか一項に記載のＷＴ１ペプチドまたはその類縁体をコードする核酸分子を該未熟樹状細胞に導入し、ＷＴ１提示樹状細胞を誘導する工程を含む、良性腫瘍の予防または治療のために使用するＷＴ１提示樹状細胞の誘導方法。
（項目１９Ａ）
項目１～１７のいずれか１つまたは複数に記載の１つまたは複数の特徴をさらに含む、項目１８または１９に記載の方法。
（項目２０）
ＷＴ１ペプチドもしくはその類縁体、またはそれをコードする核酸分子を含む、良性腫瘍の予防または治療のために使用する、ＷＴ１特異的ＣＴＬｓ、および／またはＷＴ１特異的ヘルパーＴ細胞を誘導するための組成物。
（項目２１）
ＷＴ１ペプチドもしくはその類縁体、またはそれをコードする核酸分子を含む、良性腫瘍の予防または治療のために使用する、ＷＴ１提示樹状細胞を誘導するための組成物。
（項目２１Ａ）
項目１～１９のいずれか１つまたは複数に記載の１つまたは複数の特徴をさらに含む、項目２０または２１に記載の組成物。
（項目２２）
ＷＴ１特異的ＣＴＬｓ、および／またはＷＴ１特異的ヘルパーＴ細胞を含む、良性腫瘍の予防または治療のための組成物。
（項目２３）
ＷＴ１提示樹状細胞を含む、良性腫瘍の予防または治療のための組成物。
（項目２３Ａ）
項目１～１９のいずれか１つまたは複数に記載の１つまたは複数の特徴をさらに含む、項目２２または２３に記載の組成物。
（項目Ａ１）
被験体における良性腫瘍を予防または治療する方法であって、該被験体に、有効量のＷＴ１ペプチドまたはその類縁体を投与する工程を含む、方法。
（項目Ａ２）
前記ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体は、キラー型および／またはヘルパー型を含む、項目Ａ１に記載の方法。
（項目Ａ３）
前記ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体は、ＷＴ１_１２６キラーペプチド、ＷＴ１_２３５キラーペプチドおよび／またはＷＴ１_３５ヘルパーペプチド、またはいずれかのアミノ酸配列において、１個～数個のアミノ酸が、欠失、置換、および／または付加されたアミノ酸配列を含み且つＣＴＬ誘導活性を有するペプチドを含む、項目Ａ１またはＡ２に記載の方法。
（項目Ａ４）
前記ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体が、
ＲＭＦＰＮＡＰＹＬ （配列番号２）、
ＲＹＦＰＮＡＰＹＬ （配列番号４６）、
ＹＭＦＰＮＡＰＹＬ （配列番号１４）、
ＣＹＴＷＮＱＭＮＬ （配列番号４５）、
ＣＭＴＷＮＱＭＮＬ （配列番号３）、
Ｃ－ＣＹＴＷＮＱＭＮＬ（配列番号４７）（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）、および
Ｃ－ＣＭＴＷＮＱＭＮＬ（配列番号４８）（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）から選択されるいずれかのアミノ酸配列からなるペプチド、またはその薬学上許容される塩である、
項目Ａ１～Ａ３のいずれか一項に記載の方法。
（項目Ａ５）
前記ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体が、
式（２）：

【0015】

【化1】

（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）
で表される化合物、またはその薬学上許容される塩である、
項目Ａ１～Ａ４のいずれか一項に記載の方法。
（項目Ａ６）
前記ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体が、
式（３）：

【0016】

【化2】

（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）
で表される化合物、またはその薬学上許容される塩である、
項目Ａ１～Ａ５のいずれか一項に記載の方法。
（項目Ａ７）
前記ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体が、さらに
以下のアミノ酸配列：
ＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬ （配列番号４）、
ＣＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬ （配列番号５０）および
ＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬＣ （配列番号５１）、
からなる群から選択されるアミノ酸配列からなるペプチドまたはその薬学上許容される塩を一つ以上含む組成物である、項目Ａ１～Ａ６のいずれか一項に記載の方法。
（項目Ａ８）
前記ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体が、
式（２）：

【0017】

【化1】

（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）
で表される化合物またはその薬学上許容される塩と、
アミノ酸配列： ＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬ （配列番号４）からなるペプチドまたはその薬学上許容される塩を含む組成物である、
項目Ａ１～Ａ７のいずれか一項に記載の方法。
（項目Ａ９）
前記ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体が、
式（３）：

【0018】

【化2】

（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）
で表される化合物またはその薬学上許容される塩と、
アミノ酸配列： ＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬ （配列番号４）からなるペプチドまたはその薬学上許容される塩を含む組成物である、
項目Ａ１～Ａ８のいずれか一項に記載の方法。
（項目Ａ１０）
被験体における良性腫瘍を予防または治療する方法であって、該被験体に、有効量のＷＴ１ペプチドまたはその類縁体をコードする核酸分子を投与する工程を含む、方法。
（項目Ａ１１）
前記核酸分子は、ＲＮＡおよび／またはＤＮＡを含む、項目Ａ１０に記載の方法。
（項目Ａ１２）
前記ＷＴ１ペプチドもしくはその類縁体、またはそれをコードする核酸分子が、アジュバントと併用される、項目Ａ１～Ａ１１のいずれか一項に記載の方法。
（項目Ａ１３）
前記アジュバントがＭｏｎｔａｎｉｄｅ（登録商標） ＩＳＡ５１アジュバントである、項目Ａ１～Ａ１２のいずれか一項に記載の方法。
（項目Ａ１４）
前記良性腫瘍は、ＷＴ１を発現する、項目Ａ１～Ａ１３のいずれか一項に記載の方法。
（項目Ａ１５）
前記良性腫瘍は、家族性大腸腺腫症、非遺伝性の大腸腺腫、膵管内乳頭粘液性腫瘍、脳の髄膜腫、神経鞘腫、各臓器の上皮性の腺腫、乳頭腫、非上皮性の筋腫、脂肪腫、軟骨腫、血管腫からなる群より選択される、項目Ａ１～Ａ１４のいずれか一項に記載の方法。
（項目Ａ１６）
前記良性腫瘍は、家族性大腸腺腫症である、項目Ａ１～Ａ１５のいずれか一項に記載の方法。
（項目Ａ１７）
前記ＷＴ１ペプチドもしくはその類縁体、またはそれをコードする核酸分子が、１週間に１回投与されることを特徴とする、項目Ａ１～Ａ１６のいずれか一項に記載の方法。
（項目Ａ１８）
被験体における良性腫瘍を予防または治療する方法であって、良性腫瘍の処置を必要とする被験体由来の末梢血単核球を、上記項目のいずれか一項に記載のＷＴ１ペプチドまたはその類縁体の存在下で培養し、あるいは、上記項目のいずれか一項に記載のＷＴ１ペプチドまたはその類縁体をコードする核酸分子を該末梢血単核球に導入し、それにより、該末梢血単核球からＷＴ１特異的細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＴＬｓ）、および／またはＷＴ１特異的ヘルパーＴ細胞を誘導する工程、および生成された該ＷＴ１特異的ＣＴＬｓおよび／またはＷＴ１特異的ヘルパーＴ細胞を、該被験体に投与する工程を含む、方法。
（項目Ａ１９）
被験体における良性腫瘍を予防または治療する方法であって、良性腫瘍の処置を必要とする被験体由来の未熟樹状細胞を、上記項目のいずれか一項に記載のＷＴ１ペプチドまたはその類縁体の存在下で培養し、あるいは、上記項目のいずれか一項に記載のＷＴ１ペプチドまたはその類縁体をコードする核酸分子を該未熟樹状細胞に導入し、それにより、ＷＴ１提示樹状細胞を誘導する工程、および生成された該樹状細胞を、該被験体に投与する工程を含む、方法。
（項目Ａ１９Ａ）
項目Ａ１～Ａ１７のいずれか１つまたは複数に記載の１つまたは複数の特徴をさらに含む、項目Ａ１８またはＡ１９に記載の方法。
（項目Ａ２０）
被験体における良性腫瘍を予防または治療する方法であって、該被験体に、ＷＴ１ペプチドもしくはその類縁体、またはそれをコードする核酸分子により誘導された、ＷＴ１特異的ＣＴＬｓ、および／またはＷＴ１特異的ヘルパーＴ細胞の有効量を投与する工程を含む、方法。
（項目Ａ２１）
被験体における良性腫瘍を予防または治療する方法であって、該被験体に、ＷＴ１ペプチドもしくはその類縁体、またはそれをコードする核酸分子により誘導された、ＷＴ１提示樹状細胞の有効量を投与する工程を含む、方法。
（項目Ａ２１Ａ）
項目Ａ１～Ａ１９のいずれか１つまたは複数に記載の１つまたは複数の特徴をさらに含む、項目Ａ２０またはＡ２１に記載の方法。
（項目Ａ２２）
被験体における良性腫瘍を予防または治療する方法であって、該被験体に、有効量のＷＴ１特異的ＣＴＬｓ、および／またはＷＴ１特異的ヘルパーＴ細胞を投与する工程を含む、方法。
（項目Ａ２３）
被験体における良性腫瘍を予防または治療する方法であって、該被験体に、有効量のＷＴ１提示樹状細胞を投与する工程を含む、方法。
（項目Ａ２３Ａ）
項目Ａ１～Ａ１９のいずれか１つまたは複数に記載の１つまたは複数の特徴をさらに含む、項目Ａ２２またはＡ２３に記載の方法。
（項目Ｂ１）
良性腫瘍を予防または治療するための、ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体。
（項目Ｂ２）
キラー型および／またはヘルパー型を含む、項目Ｂ１に記載のＷＴ１ペプチドまたはその類縁体。
（項目Ｂ３）
ＷＴ１_１２６キラーペプチド、ＷＴ１_２３５キラーペプチドおよび／またはＷＴ１_３５ヘルパーペプチド、またはいずれかのアミノ酸配列において、１個～数個のアミノ酸が、欠失、置換、および／または付加されたアミノ酸配列を含み且つＣＴＬ誘導活性を有するペプチドを含む、項目Ｂ１またはＢ２に記載のＷＴ１ペプチドまたはその類縁体。
（項目Ｂ４）
ＲＭＦＰＮＡＰＹＬ （配列番号２）、
ＲＹＦＰＮＡＰＹＬ （配列番号４６）、
ＹＭＦＰＮＡＰＹＬ （配列番号１４）、
ＣＹＴＷＮＱＭＮＬ （配列番号４５）、
ＣＭＴＷＮＱＭＮＬ （配列番号３）、
Ｃ－ＣＹＴＷＮＱＭＮＬ（配列番号４７）（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）、および
Ｃ－ＣＭＴＷＮＱＭＮＬ（配列番号４８）（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）から選択されるいずれかのアミノ酸配列からなるペプチド、またはその薬学上許容される塩である、
項目Ｂ１～Ｂ３のいずれか一項に記載のＷＴ１ペプチドまたはその類縁体。
（項目Ｂ５）
式（２）：

【0019】

【化1】

（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）
で表される化合物、またはその薬学上許容される塩である、
項目Ｂ１～Ｂ４のいずれか一項に記載のＷＴ１ペプチドまたはその類縁体。
（項目Ｂ６）
式（３）：

【0020】

【化2】

（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）
で表される化合物、またはその薬学上許容される塩である、
項目Ｂ１～Ｂ５のいずれか一項に記載のＷＴ１ペプチドまたはその類縁体。
（項目Ｂ７）
さらに、以下のアミノ酸配列：
ＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬ （配列番号４）、
ＣＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬ （配列番号５０）および
ＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬＣ （配列番号５１）、
からなる群から選択されるアミノ酸配列からなるペプチドまたはその薬学上許容される塩を一つ以上含む組成物である、項目Ｂ１～Ｂ６のいずれか一項に記載のＷＴ１ペプチドまたはその類縁体。
（項目Ｂ８）
式（２）：

【0021】

【化1】

（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）
で表される化合物またはその薬学上許容される塩と、
アミノ酸配列： ＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬ （配列番号４）からなるペプチドまたはその薬学上許容される塩を含む組成物である、
項目Ｂ１～Ｂ７のいずれか一項に記載のＷＴ１ペプチドまたはその類縁体。
（項目Ｂ９）
式（３）：

【0022】

【化2】

（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）
で表される化合物またはその薬学上許容される塩と、
アミノ酸配列： ＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬ （配列番号４）からなるペプチドまたはその薬学上許容される塩を含む組成物である、
項目Ｂ１～Ｂ８のいずれか一項に記載のＷＴ１ペプチドまたはその類縁体。
（項目Ｂ１０）
被験体における良性腫瘍を予防または治療するための、ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体をコードする核酸分子。
（項目Ｂ１１）
ＲＮＡおよび／またはＤＮＡを含む、項目Ｂ１０に記載の核酸分子。
（項目Ｂ１２）
アジュバントと併用される、項目Ｂ１～Ｂ１１のいずれか一項に記載のＷＴ１ペプチドもしくはその類縁体、または核酸分子。
（項目Ｂ１３）
前記アジュバントがＭｏｎｔａｎｉｄｅ（登録商標） ＩＳＡ５１アジュバントである、項目Ｂ１～Ｂ１２のいずれか一項に記載のＷＴ１ペプチドもしくはその類縁体、または核酸分子。
（項目Ｂ１４）
前記良性腫瘍は、ＷＴ１を発現する、項目Ｂ１～Ｂ１３のいずれか一項に記載のＷＴ１ペプチドもしくはその類縁体、または核酸分子。
（項目Ｂ１５）
前記良性腫瘍は、家族性大腸腺腫症、非遺伝性の大腸腺腫、膵管内乳頭粘液性腫瘍、脳の髄膜腫、神経鞘腫、各臓器の上皮性の腺腫、乳頭腫、非上皮性の筋腫、脂肪腫、軟骨腫、血管腫からなる群より選択される、項目Ｂ１～Ｂ１４のいずれか一項に記載のＷＴ１ペプチドもしくはその類縁体、または核酸分子。
（項目Ｂ１６）
前記良性腫瘍は、家族性大腸腺腫症である、項目Ｂ１～Ｂ１５のいずれか一項に記載のＷＴ１ペプチドもしくはその類縁体、または核酸分子。
（項目Ｂ１７）
１週間に１回投与されることを特徴とする、項目Ｂ１～Ｂ１６のいずれか一項に記載のＷＴ１ペプチドもしくはその類縁体、または核酸分子。
（項目Ｂ１８）
良性腫瘍の予防または治療のために使用するＷＴ１特異的細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＴＬｓ）および／またはＷＴ１特異的ヘルパーＴ細胞を誘導するための、上記項目のいずれか一項に記載のＷＴ１ペプチドもしくはその類縁体、または上記項目のいずれか一項に記載の核酸分子であって、該ＷＴ１ペプチドもしくはその類縁体が、良性腫瘍の処置を必要とする被験体由来の末梢血単核球と共に培養され、あるいは、該核酸分子が、該末梢血単核球に導入され、それにより、該ＷＴ１特異的ＣＴＬｓおよび／またはＷＴ１特異的ヘルパーＴ細胞が誘導される、ＷＴ１ペプチドもしくはその類縁体、または核酸分子。
（項目Ｂ１９）
良性腫瘍の予防または治療のために使用するＷＴ１提示樹状細胞を誘導するための、上記項目のいずれか一項に記載のＷＴ１ペプチドまたはその類縁体、または上記項目のいずれか一項に記載の核酸分子であって、該ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体が、良性腫瘍の処置を必要とする被験体由来の未熟樹状細胞と共に培養され、あるいは、該核酸分子が、該未熟樹状細胞に導入され、それにより、該ＷＴ１提示樹状細胞が誘導される、ＷＴ１ペプチドもしくはその類縁体、または核酸分子。
（項目Ｂ１９Ａ）
項目Ｂ１～Ｂ１７のいずれか１つまたは複数に記載の１つまたは複数の特徴をさらに含む、項目Ｂ１８またはＢ１９に記載のＷＴ１ペプチドもしくはその類縁体、または核酸分子。
（項目Ｂ２０）
良性腫瘍の予防または治療のために使用する、ＷＴ１特異的ＣＴＬｓ、および／またはＷＴ１特異的ヘルパーＴ細胞を誘導するための、ＷＴ１ペプチドもしくはその類縁体、またはそれをコードする核酸分子。
（項目Ｂ２１）
良性腫瘍の予防または治療のために使用する、ＷＴ１提示樹状細胞を誘導するための、ＷＴ１ペプチドもしくはその類縁体、またはそれをコードする核酸分子。
（項目Ｂ２１Ａ）
項目Ｂ１～Ｂ１９のいずれか１つまたは複数に記載の１つまたは複数の特徴をさらに含む、項目Ｂ２０またはＢ２１に記載のＷＴ１ペプチドもしくはその類縁体、または核酸分子。
（項目Ｂ２２）
被験体における良性腫瘍を予防または治療するための、ＷＴ１特異的ＣＴＬｓ、および／またはＷＴ１特異的ヘルパーＴ細胞。
（項目Ｂ２３）
被験体における良性腫瘍を予防または治療するための、ＷＴ１提示樹状細胞。
（項目Ｂ２３Ａ）
項目Ｂ１～Ｂ１９のいずれか１つまたは複数に記載の１つまたは複数の特徴をさらに含む、項目Ｂ２２に記載のＷＴ１特異的ＣＴＬｓおよび／またはＷＴ１特異的ヘルパーＴ細胞またはＢ２３に記載のＷＴ１提示樹状細胞。
（項目Ｃ１）
良性腫瘍の予防または治療薬の製造における、ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体の使用。
（項目Ｃ２）
前記ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体は、キラー型および／またはヘルパー型を含む、項目Ｃ１に記載の使用。
（項目Ｃ３）
前記ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体は、ＷＴ１_１２６キラーペプチド、ＷＴ１_２３５キラーペプチドおよび／またはＷＴ１_３５ヘルパーペプチド、またはいずれかのアミノ酸配列において、1個～数個のアミノ酸が、欠失、置換、および／または付加されたアミノ酸配列を含み且つＣＴＬ誘導活性を有するペプチドを含む、項目Ｃ１またはＣ２に記載の使用。
（項目Ｃ４）
前記ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体が、
ＲＭＦＰＮＡＰＹＬ （配列番号２）、
ＲＹＦＰＮＡＰＹＬ （配列番号４６）、
ＹＭＦＰＮＡＰＹＬ （配列番号１４）、
ＣＹＴＷＮＱＭＮＬ （配列番号４５）、
ＣＭＴＷＮＱＭＮＬ （配列番号３）、
Ｃ－ＣＹＴＷＮＱＭＮＬ（配列番号４７）（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）、および
Ｃ－ＣＭＴＷＮＱＭＮＬ（配列番号４８）（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）から選択されるいずれかのアミノ酸配列からなるペプチド、またはその薬学上許容される塩である、
項目Ｃ１～Ｃ３のいずれか一項に記載の使用。
（項目Ｃ５）
前記ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体が、
式（２）：

【0023】

【化1】

（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）
で表される化合物、またはその薬学上許容される塩である、
項目Ｃ１～Ｃ４のいずれか一項に記載の使用。
（項目Ｃ６）
前記ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体が、
式（３）：

【0024】

【化2】

（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）
で表される化合物、またはその薬学上許容される塩である、
項目Ｃ１～Ｃ５のいずれか一項に記載の使用。
（項目Ｃ７）
前記ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体が、さらに
以下のアミノ酸配列：
ＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬ （配列番号４）、
ＣＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬ （配列番号５０）および
ＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬＣ （配列番号５１）、
からなる群から選択されるアミノ酸配列からなるペプチドまたはその薬学上許容される塩を一つ以上含む組成物である、項目Ｃ１～Ｃ６のいずれか一項に記載の使用。
（項目Ｃ８）
前記ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体が、
式（２）：

【0025】

【化1】

（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）
で表される化合物またはその薬学上許容される塩と、
アミノ酸配列： ＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬ （配列番号４）からなるペプチドまたはその薬学上許容される塩を含む組成物である、
項目Ｃ１～Ｃ７のいずれか一項に記載の使用。
（項目Ｃ９）
前記ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体が、
式（３）：

【0026】

【化2】

（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）
で表される化合物またはその薬学上許容される塩と、
アミノ酸配列： ＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬ （配列番号４）からなるペプチドまたはその薬学上許容される塩を含む組成物である、
項目Ｃ１～Ｃ８のいずれか一項に記載の使用。
（項目Ｃ１０）
良性腫瘍の予防または治療薬の製造における、ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体をコードする核酸分子の使用。
（項目Ｃ１１）
前記核酸分子は、ＲＮＡおよび／またはＤＮＡを含む、項目Ｃ１０に記載の使用。
（項目Ｃ１２）
前記ＷＴ１ペプチドもしくはその類縁体、または核酸分子が、アジュバントと併用される、項目Ｃ１～Ｃ１１のいずれか一項に記載の使用。
（項目Ｃ１３）
前記アジュバントがＭｏｎｔａｎｉｄｅ（登録商標） ＩＳＡ５１アジュバントである、項目Ｃ１～Ｃ１２のいずれか一項に記載の使用。
（項目Ｃ１４）
前記良性腫瘍は、ＷＴ１を発現する、項目Ｃ１～Ｃ１３のいずれか一項に記載の使用。
（項目Ｃ１５）
前記良性腫瘍は、家族性大腸腺腫症、非遺伝性の大腸腺腫、膵管内乳頭粘液性腫瘍、脳の髄膜腫、神経鞘腫、各臓器の上皮性の腺腫、乳頭腫、非上皮性の筋腫、脂肪腫、軟骨腫、血管腫からなる群より選択される、項目Ｃ１～Ｃ１４のいずれか一項に記載の使用。
（項目Ｃ１６）
前記良性腫瘍は、家族性大腸腺腫症である、項目Ｃ１～Ｃ１５のいずれか一項に記載の使用。
（項目Ｃ１７）
前記ＷＴ１ペプチドもしくはその類縁体、またはそれをコードする核酸分子が、１週間に１回投与されることを特徴とする、項目Ｃ１～Ｃ１６のいずれか一項に記載の使用。
（項目Ｃ１８）
良性腫瘍の予防または治療のために使用するＷＴ１特異的細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＴＬｓ）、および／またはＷＴ１特異的ヘルパーＴ細胞の製造における、上記項目のいずれか一項に記載のＷＴ１ペプチドもしくはその類縁体、または、上記項目のいずれか一項に記載の核酸分子の使用であって、該ＷＴ１ペプチドもしくはその類縁体が、良性腫瘍の処置を必要とする被験体由来の末梢血単核球と共に培養され、あるいは、該核酸分子が、該末梢血単核球に導入され、それにより、該ＷＴ１特異的ＣＴＬｓおよび／またはＷＴ１特異的ヘルパーＴ細胞が誘導される、使用。
（項目Ｃ１９）
良性腫瘍の予防または治療のために使用するＷＴ１提示樹状細胞の製造における、上記項目のいずれか一項に記載のＷＴ１ペプチドまたはその類縁体、または上記項目のいずれか一項に記載の核酸分子の使用であって、該ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体が、良性腫瘍の処置を必要とする被験体由来の未熟樹状細胞と共に培養され、あるいは、該核酸分子が、該未熟樹状細胞に導入され、それにより、該ＷＴ１提示樹状細胞が誘導される、使用。
（項目Ｃ１９Ａ）
項目Ｃ１～Ｃ１７のいずれか１つまたは複数に記載の１つまたは複数の特徴をさらに含む、項目Ｃ１８またはＣ１９に記載の使用。
（項目Ｃ２０）
良性腫瘍の予防または治療のために使用する、ＷＴ１特異的ＣＴＬｓ、および／またはＷＴ１特異的ヘルパーＴ細胞の製造における、ＷＴ１ペプチドもしくはその類縁体、またはそれをコードする核酸分子の使用。
（項目Ｃ２１）
良性腫瘍の予防または治療のために使用する、ＷＴ１提示樹状細胞の製造における、ＷＴ１ペプチドもしくはその類縁体、またはそれをコードする核酸分子の使用。
（項目Ｃ２１Ａ）
項目Ｃ１～Ｃ１９のいずれか１つまたは複数に記載の１つまたは複数の特徴をさらに含む、項目Ｃ２０またはＣ２１に記載の使用。
（項目Ｃ２２）
良性腫瘍の予防または治療薬の製造における、ＷＴ１特異的ＣＴＬｓ、および／またはＷＴ１特異的ヘルパーＴ細胞の使用。
（項目Ｃ２３）
良性腫瘍の予防または治療薬の製造における、ＷＴ１提示樹状細胞の使用。
（項目Ｃ２３Ａ）
項目Ｃ１～Ｃ１９のいずれか１つまたは複数に記載の１つまたは複数の特徴をさらに含む、項目Ｃ２２またはＣ２３に記載の使用。

【0027】

本開示において、上記１または複数の特徴は、明示された組み合わせに加え、さらに組み合わせて提供されうることが意図される。本開示のなおさらなる実施形態および利点は、必要に応じて以下の詳細な説明を読んで理解すれば、当業者に認識される。

【発明の効果】

【0028】

本発明によれば、良性腫瘍の予防、遅延および治療が達成される。例示的な実施形態では、本発明によって、家族性大腸腺腫症の予防、遅延および治療が達成される。別の局面では、本発明によって、良性腫瘍（例えば、家族性大腸腺腫症）の腺腫から生じた症状の予防、遅延および治療が達成される。

【0029】

さらに、本開示のＷＴ１ペプチドがんワクチンは、投与部位の皮膚の発赤・腫脹以外には重篤な副作用がなく、非常に安全性が高い。よって、ＷＴ１ペプチドがんワクチンは、安全にそして容易にほとんどの良性腫瘍患者および家族性大腸腺腫症患者に投与することができ、患者のＱＯＬの観点からも、内視鏡的切除や手術の回避による医療費軽減の経済的効果の観点からも、従来技術よりも優れているといえる。

【図面の簡単な説明】

【0030】

【図1】図１は、ヒト家族性大腸腺腫症患者の腺腫において、ＷＴ１タンパク質が発現されたことを示す顕微鏡写真である。左の写真は、腺腫組織の写真を示し、右の写真は、正常腺管の写真を示す。両方の写真において、薄い染色はＷＴ１タンパク質を示し、濃く円形に染色された領域は核を示す。

【図2】図２は、ＡＰＣ^{Ｍｉｎ／＋}マウスにおけるＷＴ１タンパク質の発現を示す顕微鏡写真である。上から順に、５倍、１０倍、２０倍の倍率での顕微鏡写真を示す。それぞれの写真の左下にスケールバーを示し、上から順に、５００μｍ、２５０μｍ、１００μｍの長さを示す。それぞれの組織の右下の写真は、組織の全体像において、拡大された領域を示す。いずれの写真においても、濃い染色はＷＴ１タンパク質を示し、円形に染色された領域は核を示す。

【図3】図３は、ＡＰＣ^{Ｍｉｎ／＋}マウスにおけるＷＴ１タンパク質の発現を示す顕微鏡写真である。拡大倍率は４０倍であり、写真の左下に１００μｍの長さを示すスケールバーを示す。濃い染色はＷＴ１タンパク質を示し、円形に染色された領域は核を示す。

【図4】図４は、ＡＰＣ^{Ｍｉｎ／＋}マウスに、ＷＴ１ペプチドワクチンを投与した実験の投与スキームを示す。上の横軸は、ＡＰＣ^{Ｍｉｎ／＋}マウスの週齢、ワクチンの投与時期および安楽死させ解析に供した時期を示す。上の横軸において、下部の数字はマウスの週齢を示し、上部の短い矢印はワクチンを投与した時期を示し、上部の長い矢印は安楽死させ解析に供した時期を示す。横軸の下に、ＷＴ１ワクチンとコントロールワクチンとの組成を示す。

【図5】図５は、ＷＴ１ペプチドワクチンの投与による腺腫の発症の抑制を示すグラフである。グラフの縦軸は小腸あたりの腺腫数を示し、左側の散布図はＷＴ１ペプチドワクチンを投与したＡＰＣ^{Ｍｉｎ／＋}マウスの結果を示し、右側の散布図はコントロールワクチンを投与したＡＰＣ^{Ｍｉｎ／＋}マウスの結果を示す。それぞれの散布図における横線は、平均値を示し、グラフの上部に有意差検定の結果を示す。

【図6】図６は、ＷＴ１ペプチドワクチンの投与によってＷＴ１テトラマー^＋ＣＤ３^＋ＣＤ８^＋Ｔ細胞が増加したことを示すグラフである。グラフの縦軸はＣＤ３^＋ＣＤ８^＋細胞中のＨ－２Ｄ^ｂ ＷＴ１ テトラマー^＋ＣＤ３^＋ＣＤ８^＋Ｔ 細胞の頻度を示し、左側の散布図はＷＴ１ペプチドワクチンを投与したＡＰＣ^{Ｍｉｎ／＋}マウスの結果を示し、右側の散布図はコントロールワクチンを投与したＡＰＣ^{Ｍｉｎ／＋}マウスの結果を示す。それぞれの散布図における横線は、平均値を示し、グラフの上部に有意差検定の結果を示す。

【図7】図７は、ＷＴ１ペプチドワクチン投与群とコントロールワクチン投与群の回帰分析を示すグラフである。グラフの縦軸はＣＤ３^＋ＣＤ８^＋細胞中のＨ－２Ｄ^ｂ ＷＴ１ テトラマー^＋ＣＤ３^＋ＣＤ８^＋Ｔ 細胞の頻度を示し、横軸は小腸あたりの腺腫数を示す。各点は、ＷＴ１ペプチドワクチン投与群とコントロールワクチン投与群の腺腫数とＷＴ１テトラマー^＋ＣＤ３^＋ＣＤ８^＋Ｔ 細胞の頻度をグラフ上にプロットしたものである。グラフ中の直線は回帰直線を示し、右側に上から順に相関係数（Ｒ）、回帰直線の関数の式、決定係数（Ｒ^２）を示す。

【図8】図８は、ＡＰＣ^{Ｍｉｎ／＋}マウスに、ＷＴ１ペプチドワクチンを投与する実験の投与スキームを示す。上の横軸は、ＡＰＣ^{Ｍｉｎ／＋}マウスの週齢、ワクチンの投与時期および安楽死させ解析に供した時期を示す。上の横軸において、下部の数字はマウスの週齢を示し、上部の短い矢印はワクチンを投与する時期を示し、上部の長い矢印は安楽死させ解析に供する時期を示す。横軸の下に、ＷＴ１ワクチンとコントロールワクチンとの組成を示す。

【図9】図９は、ヒト非遺伝性の大腸腺腫症患者の腺腫において、ＷＴ１タンパク質が発現されたことを示す顕微鏡写真である。左から１番目の写真は、正常腺管の写真を示し、右側３枚の写真は、それぞれ３名の非遺伝性の大腸腺腫症患者から得られた腺腫組織の写真を示す。すべての写真において、薄い染色はＷＴ１タンパク質を示し、濃く円形または楕円形に染色された領域は核を示す。各写真の下にＷＴ１タンパク質の発現レベルを示し、（－）は発現レベルが低いことを、（＋）は発現レベルが高いことを示す。

【図10】図１０は、ＡＰＣ^{Ｍｉｎ／＋}マウスに、本明細書において式（３）で示す化合物およびＷＴ１_３５ペプチドを含む混合物を投与した実験の投与スキームを示す。横軸は、ＡＰＣ^{Ｍｉｎ／＋}マウスの週齢、ワクチンの投与時期および安楽死させ解析に供した時期を示す。横軸において、下部の数字はマウスの週齢を示し、上部の矢印はワクチンを投与した時期、および安楽死させ解析に供した時期を示す。

【図11】図１１は、本明細書において式（３）で示す化合物およびＷＴ１_３５ペプチドを含む混合物の投与による腺腫の発症の抑制を示すグラフである。グラフの縦軸は小腸あたりの腺腫数を示し、左側の散布図はＷＴ１ペプチドワクチンを投与したＡＰＣ^{Ｍｉｎ／＋}マウスの結果を示し、右側の散布図はコントロールワクチンを投与したＡＰＣ^{Ｍｉｎ／＋}マウスの結果を示す。それぞれの散布図における横線は、平均値を示し、グラフの上部に有意差検定の結果を示す。

【図12】図１２は、本明細書において式（３）で示す化合物およびＷＴ１_３５ペプチドを含む混合物の投与によってＷＴ１テトラマー^＋ＣＤ３^＋ＣＤ８^＋Ｔ細胞が増加したことを示すグラフである。グラフの縦軸はＣＤ３^＋ＣＤ８^＋細胞中のＨ－２Ｄ^ｂ ＷＴ１ テトラマー^＋ＣＤ３^＋ＣＤ８^＋Ｔ細胞の頻度を示し、左側の散布図は本明細書において式（３）で示す化合物およびＷＴ１_３５ペプチドを含む混合物を投与したＡＰＣ^{Ｍｉｎ／＋}マウスの結果を示し、右側の散布図はコントロールワクチンを投与したＡＰＣ^{Ｍｉｎ／＋}マウスの結果を示す。それぞれの散布図における横線は、平均値を示し、グラフの上部に有意差検定の結果を示す。

【図13】図１３は、本明細書において式（３）で示す化合物およびＷＴ１_３５ペプチドを含む混合物投与群とコントロールワクチン投与群の回帰分析を示すグラフである。グラフの縦軸はＣＤ３^＋ＣＤ８^＋細胞中のＨ－２Ｄ^ｂ ＷＴ１ テトラマー^＋ＣＤ３^＋ＣＤ８^＋Ｔ 細胞の頻度を示し、横軸は小腸あたりの腺腫数を示す。各点は、本明細書において式（３）で示す化合物およびＷＴ１_３５ペプチドを含む混合物投与群とコントロールワクチン投与群の腺腫数とＷＴ１テトラマー^＋ＣＤ３^＋ＣＤ８^＋Ｔ 細胞の頻度をグラフ上にプロットしたものである。グラフ中の直線は回帰直線を示し、右側に上から順に相関係数（Ｒ）、回帰直線の関数の式、決定係数（Ｒ^２）を示す。

【発明を実施するための形態】

【0031】

以下、本発明を最良の形態を示しながら説明する。本明細書の全体にわたり、単数形の表現は、特に言及しない限り、その複数形の概念をも含むことが理解されるべきである。従って、単数形の冠詞（例えば、英語の場合は「ａ」、「ａｎ」、「ｔｈｅ」など）は、特に言及しない限り、その複数形の概念をも含むことが理解されるべきである。また、本明細書において使用される用語は、特に言及しない限り、当該分野で通常用いられる意味で用いられることが理解されるべきである。したがって、他に定義されない限り、本明細書中で使用されるすべての専門用語および科学技術用語は、本発明の属する分野の当業者によって一般的に理解されるのと同じ意味を有する。矛盾する場合、本明細書（定義を含めて）が優先する。

【0032】

以下に本明細書において特に使用される用語の定義および／または基本的技術内容を適宜説明する。

【0033】

（用語の定義）
本明細書において「ＷＴ１（Ｗｉｌｍｓ Ｔｕｍｏｒ Ｇｅｎｅ １）」、「ＷＴ１タンパク質」または「ＷＴ１ペプチド」とは、ウィルムス腫瘍（ＷＴ１）遺伝子産物またはその類縁体の少なくとも一部（全部であってよい）を含むポリペプチドをいう。「ＷＴ１タンパク質」としては、具体的には、代表的には、４４９個のアミノ酸からなるヒトＷＴ１タンパク質（配列番号１）、または、このアミノ酸配列において、１もしくは数個（好ましくは、約２～６個）のアミノ酸が欠失、置換および／もしくは付加されたアミノ酸配列からなるタンパク質が好ましく挙げられる。挿入されるアミノ酸または置換されるアミノ酸は、遺伝子によりコードされる２０種類のアミノ酸以外の非天然アミノ酸であってもよい。「ＷＴ１ペプチド」とは、ＷＴ１タンパク質を構成するアミノ酸配列の一部からなるペプチドをいう。本明細書において、「ＷＴ１」または「ＷＴ１ペプチド」という場合、特に断らない限り、変異型のＷＴ１を包含するものとする。また、本明細書において、ＷＴ１またはＷＴ１ペプチドに言及する場合、特に断らない限り、ヒトのＷＴ１をいう。

【0034】

本開示に用いられるＷＴ１ペプチドの長さは特に限定されないが、約７個～約３０個のアミノ酸からなるものが好ましい。好ましいＷＴ１ペプチドは、ＨＬＡ分子に結合して提示される抗原ペプチドの配列の規則性（モチーフ）を有し、ＨＬＡ分子との結合能を有するものである。ＨＬＡ分子との結合能は、当該技術分野において既知の方法により調べることができる。かかる方法として、例えば、Ｒａｎｋｐｅｐ、ＢＩＭＡＳ、ＳＹＦＰＥＩＴＨＩなどのコンピューターベースの方法、ＨＬＡ分子に対する結合能を有する既知のＷＴ１ペプチドとの競合的結合試験などがある。本開示で用いられ得るＷＴ１ペプチドとしては、本明細書中（ＷＴ１ペプチド）の項に説明され、WO2016/093326においても、説明されており、これらは、参考として援用される。

【0035】

本開示に用いられる好ましいＷＴ１ペプチドは、キラーＴ細胞および／またはヘルパーＴ細胞を活性化するものである。キラーＴ細胞および／またはヘルパーＴ細胞の活性化は、単独のペプチドが担ってもよく、複数のペプチドが担っていても（分業している）よい。また、本開示の医薬組成物に使用するＷＴ１ペプチドは１種類であってもよく、複数種類であってもよい。また、本開示の医薬または医薬組成物に使用するＷＴ１ペプチドはキラーＷＴ１ペプチドであってもよく、あるいはヘルパーＷＴ１ペプチドであってもよく、これらを混合して用いてもよい。本開示のＷＴ１ペプチドは、単独のペプチドであってもよく、複数のペプチドのコンジュゲート、混合物または組合せであってもよい。より好ましいＷＴ１ペプチドとしては、キラーＷＴ１ペプチドとヘルパーＷＴ１ペプチドとの組み合わせを含み得る。例えば、そのような組み合わせの例としては、ＷＯ２０１４／１５７６９２に記載される化合物または組成物などを挙げることができる。

【0036】

本明細書において「良性腫瘍」とは、病理学的に悪性所見を持たない腫瘍であり、悪性腫瘍とは異なるものと理解される。転移や浸潤傾向を示さないとされている。良性腫瘍の診断は必ずしも臨床的な予後が良好であることを意味しない。例えば脳幹部に発生した低異型度髄膜腫は良性腫瘍であるが、治療困難であり、かつ脳幹を圧迫して予後不良であるため臨床悪性であるため、治療や予防が必要とされる場合も多い。良性腫瘍としては、家族性大腸腺腫症、非遺伝性の大腸腺腫、や膵管内乳頭粘液性腫瘍、脳の髄膜腫、神経鞘腫、各臓器の上皮性の腺腫、乳頭腫、非上皮性の筋腫、脂肪腫、軟骨腫、血管腫等をあげることができるがこれらに限定されない。

【0037】

本明細書において、「家族性大腸腺腫症」、「家族性大腸ポリポーシス」、「家族性腺腫性ポリポーシス」または「ＦＡＰ」との用語は、互換的に使用され、がん抑制遺伝子ＡＰＣ(adenoma polyposis coli)の変異を特徴とし、腸管に多数の腺腫が形成される遺伝性疾患をいい、良性腫瘍に分類される。本明細書において、家族性大腸腺腫症には、ガードナー症候群などの、腸管以外の組織における腫瘍が併発した疾患も包含される。代表的な家族性大腸腺腫症のモデル動物としては、ＡＰＣ^{Ｍｉｎ／＋}マウス（Ｊａｃｋｓｏｎ研究所、Ｂａｒ Ｈａｒｂｏｒ、Ｍａｉｎｅ、ＵＳＡ）が挙げられるがこれに限定されない。

【0038】

本明細書において、「キラー型」、「キラーペプチド」などの用語は、細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＴＬ、キラーＴ細胞）を活性化させる能力を有するペプチドを意味する。キラーＴ細胞の活性化とは、キラーＴ細胞の有する細胞傷害活性が増大すること、および／またはキラーＴ細胞の数が増大することをいう。「キラー（型）」であるかどうかは、代表的には、以下の試験により判定する。すなわち、フローサイトメトリーなどの手法によって、ＣＤ８がＴ細胞の表面に発現することによって判定することができる。代替的に、^５１Ｃｒ放出アッセイおよび乳酸脱水素酵素（ＬＤＨ）アッセイ等によって標的細胞傷害活性を測定することによっても判定することができる。好ましい実施形態では、本開示のＷＴ１ペプチドは、このキラー型の活性を有する。

【0039】

ＭＨＣは、ヒトではヒト白血球型抗原（ＨＬＡ）と呼ばれる。ＭＨＣクラスＩ分子に相当するＨＬＡは、ＨＬＡ－Ａ、Ｂ、Ｃｗ、ＦおよびＧなどのサブタイプに分類される。「ＭＨＣクラスＩ拘束性」として、好ましくは、ＨＬＡ－Ａ拘束性、ＨＬＡ－Ｂ拘束性またはＨＬＡ－Ｃｗ拘束性が挙げられる。

【0040】

ＨＬＡの各サブタイプについて、多型（対立遺伝子）が知られている。ＨＬＡ－Ａの多型としては、ＨＬＡ－Ａ１、ＨＬＡ－Ａ０２０１、ＨＬＡ－Ａ２４などの２７種以上が挙げられ、ＨＬＡ－Ｂの多型としては、ＨＬＡ－Ｂ７、ＨＬＡ－Ｂ４０、ＨＬＡ－Ｂ４４０３などの５９種以上が挙げられ、ＨＬＡ－Ｃｗの多型としては、ＨＬＡ－Ｃｗ０３０１、ＨＬＡ－Ｃｗ０４０１、ＨＬＡ－Ｃｗ０６０２などの１０種以上が挙げられる。これら多型の中、好ましくは、ＨＬＡ－Ａ０２０１やＨＬＡ－Ａ２４が挙げられる。

【0041】

本開示における「ＷＴ１ペプチド」とは、配列番号１に記載のヒトのＷＴ１のアミノ酸配列において連続する７～３０残基のアミノ酸からなる部分ペプチドである。

【0042】

本開示における「ＭＨＣクラスＩ拘束性」とは、主要組織適合抗原（Ｍａｊｏｒ Ｈｉｓｔｏｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ Ｃｏｍｐｌｅｘ、ＭＨＣ）のクラスＩであるＭＨＣクラスＩ分子と結合してＣＴＬを誘導する特性を意味する。「ＭＨＣクラスＩ拘束性ＷＴ１ペプチド」は、インビトロおよび／またはインビボで、ＭＨＣクラスＩ抗原に結合し、複合体として提示されるペプチドであり、且つ該複合体が前駆体Ｔ細胞に認識された結果ＣＴＬを誘導するペプチドを意味することから、ＷＴ１キラーペプチドと同義である。「ＭＨＣクラスＩ拘束性ＷＴ１ペプチド」のアミノ酸残基は、７～３０であり、好ましくは７～１５であり、より好ましくは８～１２であり、更に好ましくは８～１１であり、最も好ましくは８または９である。

【0043】

「ＭＨＣクラスＩ拘束性ＷＴ１ペプチド」としては、例えば、配列番号１に示すヒトＷＴ１のアミノ酸配列において、２位、３位、４位、６位、７位、１０位、１７位、１８位、２０位、２３位、２４位、２６位、２９位、３０位、３２位、３３位、３７位、３８位、３９位、４０位、４７位、６３位、６４位、６５位、７０位、７３位、８０位、８１位、８２位、８３位、８４位、８５位、８６位、８８位、９２位、９３位、９６位、９８位、９９位、１００位、１０１位、１０４位、１０７位、１１０位、１１８位、１１９位、１２０位、１２３位、１２５位、１２６位、１２８位、１３０位、１３６位、１３７位、１３８位、１３９位、１４１位、１４３位、１４４位、１４６位、１５２位、１６１位、１６３位、１６５位、１６８位、１６９位、１７４位、１７７位、１７９位、１８０位、１８５位、１８７位、１９１位、１９２位、１９４位、２０２位、２０４位、２０６位、２０７位、２０８位、２０９位、２１０位、２１１位、２１３位、２１７位、２１８位、２１９位、２２１位、２２２位、２２３位、２２５位、２２７位、２２８位、２３０位、２３２位、２３３位、２３５位、２３９位、２４０位、２４２位、２４３位、２４４位、２５０位、２５１位、２５２位、２６０位、２６１位、２６３位、２６９位、２７０位、２７２位、２７３位、２７６位、２７８位、２７９位、２８０位、２８５位、２８６位、２８７位、２８９位、２９２位、２９３位、２９４位、２９５位、２９８位、２９９位、３０１位、３０２位、３０３位、３０６位、３０９位、３１２位、３１３位、３１５位、３１６位、３１７位、３１８位、３１９位、３２４位、３２５位、３２６位、３２７位、３２９位、３３２位、３３４位、３３７位、３４０位、３４３位、３４５位、３４７位、３４９位、３５１位、３５４位、３５６位、３５８位、３６２位、３６３位、３６４位、３６６位、３６８位、３７１位、３７２位、３７３位、３７５位、３７９位、３８３位、３８４位、３８６位、３８７位、３８９位、３９０位、３９１位、３９４位、３９６位、４０１位、４０６位、４０８位、４０９位、４１０位、４１２位、４１５位、４１６位、４１７位、４１８位、４１９位、４２０位、４２３位、４２４位、４２５位、４２６位、４２７位、４２８位、４２９位、４３２位、４３３位、４３４位、４３６位、４３７位、４３９位、４４０位もしくは４４１位から開始される９アミノ酸残基のペプチド、またはその改変体を含むペプチドが挙げられる（国際公開第２０１４／１５７６９２号を参照）。国際公開第２０１４／１５７６９２号は、その全体が、本明細書において、参考として援用される。

【0044】

「ＭＨＣクラスＩ拘束性ＷＴ１ペプチド」として、好ましくは、以下のアミノ酸配列：
ＲＭＦＰＮＡＰＹＬ （配列番号２）、
ＣＭＴＷＮＱＭＮＬ （配列番号３）、
ＡＬＬＰＡＶＰＳＬ （配列番号５２）、
ＳＬＧＥＱＱＹＳＶ （配列番号５３）および
ＲＶＰＧＶＡＰＴＬ （配列番号５４）
の中から選ばれるいずれかのアミノ酸配列を含むペプチド、または配列番号２、３、５２、５３および５４の中から選ばれるいずれかのアミノ酸配列中にアミノ酸残基の改変を含有する改変アミノ酸配列を含み且つＣＴＬ誘導活性を有するペプチドが挙げられる。さらに好ましくは、配列番号２、３、５２、５３および５４の中から選ばれるいずれかのアミノ酸配列からなるペプチドが挙げられる。

【0045】

本開示における「ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体」が、キラーペプチドの場合には、アミノ酸配列中にアミノ酸残基の改変を含有する改変アミノ酸配列を含み且つＣＴＬ誘導活性を有するペプチドを意味する。

【0046】

本開示における「アミノ酸配列中にアミノ酸残基の改変を含有する改変アミノ酸配列を含み且つＣＴＬ誘導活性を有するペプチド」は、「改変キラーペプチド」とも呼ばれる。当該改変キラーペプチドは、アミノ酸配列において、１～３個のアミノ酸が欠失、置換および／または付加されたアミノ酸配列からなり、ＭＨＣクラスＩに結合し、ＣＴＬを誘導するペプチドを意味する。置換されるアミノ酸の置換位置としては、９残基のアミノ酸配列からなるペプチドの場合、１位（Ｎ末端）、２位、３位および９位が挙げられる。付加（挿入も包含される）されるアミノ酸の数は、通常１～数個であり、好ましくは１～３個、より好ましくは１または２個、さらに好ましくは１個である。好ましい付加位置としては、Ｃ末端が挙げられる。欠失されるアミノ酸の数は好ましくは１である。改変において、付加されるアミノ酸または置換されるアミノ酸は、遺伝子によりコードされる２０種類のアミノ酸以外の非天然アミノ酸であってもよい。

【0047】

改変キラーペプチドとしては例えば、次のようなペプチドが挙げられる。
ＲＭＦＰＮＡＰＹＬ （配列番号２）の改変キラーペプチドである
ＲＹＦＰＮＡＰＹＬ （配列番号４６）（国際公開第２００３／１０６６８２号参照）；
ＦＭＦＰＮＡＰＹＬ （配列番号１３）、
ＲＬＦＰＮＡＰＹＬ （配列番号１８）、
ＲＭＭＰＮＡＰＹＬ （配列番号２５）、
ＲＭＦＰＮＡＰＹＶ （配列番号２８）もしくは
ＹＭＦＰＮＡＰＹＬ （配列番号１４）（国際公開第２００９／０７２６１０号参照）；
ＣＭＴＷＮＱＭＮＬ （配列番号３）の改変キラーペプチドである
ＣＹＴＷＮＱＭＮＬ （配列番号４５）（国際公開第２００２／７９２５３号参照）；
Xaa-Met-Thr-Trp-Asn-Gln-Met-Asn-Leu （配列番号５５）（本配列中XaaはSerまたはAlaを表す）もしくは
Xaa-Tyr-Thr-Trp-Asn-Gln-Met-Asn-Leu （配列番号５６）（本配列中XaaはSer、Ala、Abu、Arg、Lys、Orn、Cit、Lue、PheまたはAsnを表す）（国際公開第２００４／０２６８９７号参照）；
ＡＬＬＰＡＶＰＳＬ （配列番号５２）の改変キラーペプチドである
ＡＹＬＰＡＶＰＳＬ （配列番号５７）（国際公開第２００３／１０６６８２号参照）；
ＳＬＧＥＱＱＹＳＶ （配列番号５３）の改変キラーペプチドである
ＦＬＧＥＱＱＹＳＶ （配列番号５８）、
ＳＭＧＥＱＱＹＳＶ （配列番号５９）もしくは
ＳＬＭＥＱＱＹＳＶ （配列番号６０）（国際公開第２００９／０７２６１０号参照）；または
ＲＶＰＧＶＡＰＴＬ （配列番号５４）の改変キラーペプチドである
ＲＹＰＧＶＡＰＴＬ （配列番号６１）（国際公開２００３／１０６６８２号参照）。

【0048】

配列番号：１に記載のヒトのＷＴ１のアミノ酸配列において連続する８～３５残基のアミノ酸からなる部分ペプチドではないアミノ酸配列としては、例えば次のようなアミノ酸配列が挙げられる（国際公開２００７／０６３９０３号参照）。

【0049】

Ｃ－ＣＹＴＷＮＱＭＮＬ （配列番号４７）（式中、CとCの間の結合はジスルフィド結合を表す。）または
Ｃ－ＣＭＴＷＮＱＭＮＬ （配列番号４８）（式中、CとCの間の結合はジスルフィド結合を表す。）。

【0050】

本開示の改変キラーペプチドには、例えば次のような二量体に多量体ペプチドも含まれる（国際公開第２０１４／１５７６９２号参照）。
式（２）：

【0051】

【化1】

（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）で表される化合物、
式（３）：

【0052】

【化2】

（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）で表される化合物、もしくは、
式（４）

【0053】

【化3】

（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）で表される化合物。

【0054】

本明細書において、「ヘルパー型」、「ヘルパーペプチド」などの用語は、ヘルパーＴ細胞を活性化させる能力を有するペプチドを意味する。ヘルパーＴ細胞の活性化とは、ヘルパーＴ細胞の有する、Ｂ細胞の抗体産生やキラーＴ細胞の活性化などを補助する機能が増大すること、および／またはヘルパーＴ細胞の数が増大することをいう。「ヘルパー（型）」であるかどうかは、代表的には、以下の試験により判定する。すなわち、フローサイトメトリーなどの手法によって、ＣＤ４がＴ細胞の表面に発現することによって判定することができる。代替的に、目的細胞を抗原で刺激し、抗原特異的にＩＦＮ－αおよびＩＦＮ－γ等のサイトカインが産生されたことを、免疫染色法によって解析することによっても判定することができる。

【0055】

本開示における「ＭＨＣクラスＩＩ拘束性」とは、ＭＨＣクラスＩＩ分子と結合してヘルパーＴ細胞を誘導する特性を意味する。

【0056】

ＭＨＣクラスＩＩ分子に相当するＨＬＡは、ＨＬＡ－ＤＲ、ＤＱおよびＤＰなどのサブタイプに分類される。「ＭＨＣクラスＩＩ拘束性」として、好ましくは、ＨＬＡ－ＤＲ拘束性、ＨＬＡ－ＤＱ拘束性またはＨＬＡ－ＤＰ拘束性が挙げられる。

【0057】

よって、本開示における「ＭＨＣクラスＩＩ拘束性ＷＴ１ペプチド」ｔｐは、インビトロおよび／またはインビボで、ＭＨＣクラスＩＩ抗原に結合し、ヘルパーＴ細胞を誘導するペプチドを意味する。「ＭＨＣクラスＩＩ拘束性ＷＴ１ペプチド」のアミノ酸残基数は、７～３０であり、好ましくは１４～３０である。

【0058】

本開示における「ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体」が、ヘルパーペプチドの場合には、アミノ酸配列中にアミノ酸残基の改変を含有する改変アミノ酸配列を含み且つヘルパーＴ細胞誘導活性を有するペプチドを意味する。

【0059】

本開示における「アミノ酸配列中にアミノ酸残基の改変を有する改変アミノ酸配列を含み且つヘルパーＴ細胞誘導活性を有するペプチド」は、「改変ヘルパーペプチド」とも呼ばれる。当該改変ヘルパーペプチドは、アミノ酸配列において、１～３個のアミノ酸が、欠失、置換および／または付加されたアミノ酸配列からなり、ＭＨＣクラスＩＩに結合し、ヘルパーＴ細胞を誘導するペプチドを意味する。付加（挿入も包含される）されるアミノ酸の数は好ましくは１～３である。欠失されるアミノ酸の数は好ましくは１～５である。改変において、付加されるアミノ酸または置換されるアミノ酸は、遺伝子によりコードされる20種類のアミノ酸以外の非天然のアミノ酸であってもよい。

【0060】

改変ヘルパーペプチドとしては例えば、次のようなペプチドが挙げられる。
ＳＧＱＡＲＭＦＰＮＡＰＹＬＰＳＣＬＥＳ （配列番号６９）の改変ヘルパーペプチドである
ＳＧＱＡＹＭＦＰＮＡＰＹＬＰＳＣＬＥＳ （配列番号７０）（国際公開第２００４／０６３２１７号参照）
ＳＧＱＡＲＭＦＰＮＡＰＹＬＰＳＣ （配列番号７１）もしくは
ＳＧＱＡＹＭＦＰＮＡＰＹＬＰＳＣ （配列番号７２）；または
ＰＧＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫ （配列番号４９）、
ＰＧＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫＨ （配列番号６２）、
ＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫ （配列番号６４）、
ＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫＨ （配列番号６５）もしくは
ＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫＨＴＧ （配列番号６６）；または
ＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬ （配列番号４）、
ＣＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬ （配列番号５０）もしくは
ＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬＣ （配列番号５１）。

【0061】

本開示の「ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体」は、キラーペプチドおよびヘルパーペプチドの組成物とすることでキラー型およびヘルパー型の両方の活性をも有する。キラー型およびヘルパー型の両方の活性ものとしては例えば、次のようなものが挙げられる。
式（２）：

【0062】

【化1】

（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）で表される化合物、
式（３）：

【0063】

【化2】

（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）で表される化合物、および
式（４）

【0064】

【化3】

（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）で表される化合物からなる群から選択される化合物、またはその薬学上許容される塩と、
以下のアミノ酸配列：
ＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫ （配列番号６３）、
ＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫＨ （配列番号６４）、
ＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫＨＴＧ （配列番号６５）、
ＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬ （配列番号４）、
ＣＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬ （配列番号５０）および
ＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬＣ （配列番号５１）
からなる群から選択されるアミノ酸配列からなるペプチド、または
その薬学上許容される塩を一つ以上含む組成物；
式（２）：

【0065】

【化1】

（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）
で表される化合物またはその薬学上許容される塩と、
アミノ酸配列： ＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬ （配列番号４）からなるペプチドまたはその薬学上許容される塩を含む組成物；および
式（３）：

【0066】

【化2】

（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）
で表される化合物またはその薬学上許容される塩と、
アミノ酸配列： ＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬ （配列番号４）からなるペプチドまたはその薬学上許容される塩を含む組成物。

【0067】

本明細書において、「アジュバント」とは、主剤（例えば、本開示におけるＷＴ１ペプチド）に対する補助剤を意味する。本開示において、アジュバントは、治療薬または予防薬においてＷＴ１ペプチドが惹起する免疫応答を、増強または改良する物質をいう。本開示において、アジュバントとしては、例えば、水酸化ナトリウム、水酸化アルミニウム、リン酸カルシウム、リン酸アルミニウム、ミョウバン、ペペスまたはカルボキシビニルポリマーなどの沈降性アジュバントであってもよく、または流動パラフィン、ラノリン、フロイント、Ｍｏｎｔａｎｉｄｅ ＩＳＡ７６３ＡＶＧ、Ｍｏｎｔａｎｉｄｅ ＩＳＡ５１、不完全フロイントアジュバントまたは完全フロイントアジュバントなどの油性アジュバントであってもよい。

【0068】

本明細書において、「腺腫」とは、ポリープのうち、がん化の危険性が高いものをいう。「ポリープ」とは、小腸、大腸または直腸などの腸管組織の内壁にできた、きのこ状やイボ状の隆起性病変の総称をいう。腺腫は、腫瘍性ポリープであり、大腸がんなどのがんに変化する危険性が高い。

【0069】

腺腫の中でも、大腸において発症した腺腫は、「大腸腺腫」と総称される。大腸腺腫としては、遺伝性の大腸腺腫（例えば、家族性大腸腺腫症など）、および非遺伝性の大腸腺腫症が存在する。「非遺伝性の大腸腺腫症」とは、ＡＰＣ遺伝子における変異を特徴とせず、生活習慣、食生活、飲酒、喫煙、ストレスなどを要因とし、腸管に多数の腺腫が形成される疾患をいい、良性腫瘍に分類される。

【0070】

本明細書において使用する場合、「治療」するとは、既に発症している本開示の標的とする疾患、障害または症状の進行を止め、好ましくは治癒させることをいう。治療効果の判定については、「固形がんの治療効果判定のための新ガイドライン」（ＲＥＣＩＳＴ）＜http://www.jcog.jp/doctor/tool/C_150_0010.pdfより入手可能＞またはその最新版によって行うことができる。ＷＨＯまたはＲＥＣＩＳＴ基準による裁量効果の定義は以下のようになっている。

【0071】

【表1】

【0072】

本明細書において「治療薬（剤）」とは、広義には、目的の状態（例えば、家族性大腸腺腫症等の疾患など）を治療できるあらゆる薬剤をいう。本開示の一実施形態において「治療薬」は、有効成分と、薬理学的に許容される１つもしくはそれ以上の担体とを含む医薬組成物であってもよい。医薬組成物は、例えば有効成分と上記担体とを混合し、製剤学の技術分野において知られる任意の方法により製造できる。また治療薬は、治療のために用いられる物であれば使用形態は限定されず、有効成分単独であってもよいし、有効成分と任意の成分との混合物であってもよい。また上記担体の形状は特に限定されず、例えば、固体または液体（例えば、緩衝液）であってもよい。

【0073】

本明細書において使用する場合、「予防」するとは、本開示の標的とする疾患、障害または症状が発生する前に、何らかの手段により、その疾患、障害または症状を生じさせないかまたは少なくとも遅延させること、あるいは疾患、障害または症状の原因自体が生じたとしてもそれが原因の障害が生じないような状態にすることをいう。

【0074】

本明細書において「予防薬（剤）」とは、広義には、目的の状態（例えば、家族性大腸腺腫症等の疾患など）を予防できるあらゆる薬剤をいう。

【0075】

本明細書において使用する場合、「改善」するとは、既に発症している本開示の標的とする疾患、障害または症状の進行を、完全または部分的に拘わらず、停止させること、または軽減することをいう。

【0076】

本明細書において「被験体（者）」とは、本開示の予防または治療等の対象となる対象（例えば、ヒト等の生物または生物から取り出した細胞、血液、血清等）をいう。

【0077】

本明細書において、「末梢血単核球」または「ＰＢＭＣ」とは、末梢血から分離された単球やリンパ球を含む単核球または単核細胞をいう。末梢血単核球は、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞、単球および樹状細胞などの多様な血球細胞を含む。末梢血単核球を刺激することにより、細胞傷害性Ｔ細胞やヘルパーＴ細胞等に分化させることができる。

【0078】

本明細書において、例えば、ＷＴ１に対して特異的な細胞傷害性Ｔ細胞およびヘルパーＴ細胞は、それぞれ「ＷＴ１特異的細胞傷害性Ｔ細胞」および「ＷＴ１特異的ヘルパーＴ細胞」という。本開示に記載されているＷＴ１ペプチドもしくはその類縁体、またはそれをコードする核酸分子を用いることで、ＷＴ１特異的細胞傷害性Ｔ細胞、および／またはＷＴ１特異的ヘルパーＴ細胞を誘導することができる。

【0079】

本明細書において、「未熟樹状細胞」とは、ペプチド、細胞などを感作させることによって、そのペプチドまたは細胞などに対する抗原を提示することができる樹状細胞をいう。未熟樹状細胞を刺激することにより、特定ペプチドを提示する樹状細胞等に分化させることができる。

【0080】

本明細書において、例えば、ＷＴ１を提示する樹状細胞は、それぞれ「ＷＴ１提示樹状細胞」という。本明細書に記載されているＷＴ１ペプチドもしくはその類縁体、またはそれをコードする核酸分子を用いることで、ＷＴ１提示樹状細胞を誘導することができる。

【0081】

抗原提示細胞またはキラーＴ細胞またはヘルパーＴ細胞の誘導または活性化方法は当業者に公知である。インビボでは、ＷＴ１ペプチドを対象に投与することにより、これらの細胞を誘導または活性化することができる。インビトロにおいては、例えば、対象由来のリンパ球を含む試料と、ＷＴ１ペプチドとＨＬＡ分子との複合体とを反応させることにより、キラーＴ細胞を得てもよい。また例えば、対象由来の末梢血単核球をＷＴ１ペプチドの存在下で培養し、該末梢血単核球からＷＴ１特異的ＣＴＬを誘導してもよい。また例えば、対象由来の未熟抗原提示細胞をＷＴ１ペプチドの存在下で培養することにより、ＨＬＡ分子を介してＷＴ１ペプチドを提示する抗原提示細胞を誘導してもよい。未熟抗原提示細胞は、成熟して抗原提示細胞となり得る細胞をいい、未熟樹状細胞などが例示される。また例えば、ＷＴ１ペプチドを抗原提示細胞に添加して、ヘルパーＴ細胞を活性化してもよい。本開示の医薬または組成物に使用する抗原提示細胞またはキラーＴ細胞またはヘルパーＴ細胞は、いずれかのＷＴ１ペプチドまたはその誘導体、あるいは核酸分子を用いて誘導または活性化されたものであってもよい。このようにして誘導または活性化された抗原提示細胞またはキラーＴ細胞またはヘルパーＴ細胞を対象に、好ましくはこれらの細胞を得た対象に投与して、良性腫瘍（例えば、家族性大腸腺腫症）の治療および予防を行うことができる。

【0082】

本明細書で使用される（ＷＴ１ペプチド等の）「類縁体」、「誘導体」、「類似体」または「変異体」は、好ましくは、限定を意図するものではないが、対象となるタンパク質（例えば、ＷＴ１ペプチド）に実質的に相同な領域を含む分子を含み、このような分子は、種々の実施形態において、同一サイズのアミノ酸配列にわたり、または当該分野で公知のコンピュータ相同性プログラムによってアラインメントを行ってアラインされる配列と比較した際、少なくとも３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％または９９％同一であるか、あるいはこのような分子をコードする核酸は、（高度に）ストリンジェントな条件、中程度にストリンジェントな条件、またはストリンジェントでない条件下で、構成要素タンパク質をコードする配列にハイブリダイズ可能である。これは、それぞれ、アミノ酸置換、欠失および付加によって、タンパク質を改変した産物であり、その誘導体がなお元のタンパク質の生物学的機能を、必ずしも同じ度合いでなくてもよいが示すタンパク質を意味する。例えば、本明細書において記載されあるいは当該分野で公知の適切で利用可能なｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイによって、このようなタンパク質の生物学的機能を調べることも可能である。本明細書で使用される「機能的に活性な」または「機能的活性を有する」は、本明細書において、本開示のポリペプチド、すなわちフラグメントまたは誘導体が関連する態様に従って、生物学的活性などの、タンパク質の構造的機能、制御機能、または生化学的機能を有することを指す。

【0083】

本開示において、ＷＴ１ペプチドのフラグメントとは、ＷＴ１ペプチドの任意の領域を含むポリペプチドであり、本開示の目的（例えば、ペプチドワクチン）として機能する限り、必ずしも天然のＷＴ１ペプチドの生物学的機能のすべてを有していなくてもよい。

【0084】

本明細書において「タンパク質」、「ポリペプチド」、「オリゴペプチド」および「ペプチド」は、本明細書において同じ意味で使用され、任意の長さのアミノ酸のポリマーをいう。このポリマーは、直鎖であっても分岐していてもよく、環状であってもよい。アミノ酸は、天然のものであっても非天然のものであってもよく、改変されたアミノ酸であってもよい。この用語はまた、複数のポリペプチド鎖の複合体へとアセンブルされたものを包含し得る。この用語はまた、天然または人工的に改変されたアミノ酸ポリマーも包含する。そのような改変としては、例えば、ジスルフィド結合形成、グリコシル化、脂質化、アセチル化、リン酸化または任意の他の操作もしくは改変（例えば、標識成分との結合体化）が包含される。この定義にはまた、例えば、アミノ酸の１または２以上のアナログを含むポリペプチド（例えば、非天然アミノ酸などを含む）、ペプチド様化合物（例えば、ペプトイド）および当該分野において公知の他の改変が包含される。本明細書において、「アミノ酸」は、アミノ基とカルボキシル基を持つ有機化合物の総称である。本開示の実施形態に係るタンパク質または酵素が「特定のアミノ酸配列」を含むとき、そのアミノ酸配列中のいずれかのアミノ酸が化学修飾を受けていてもよい。また、そのアミノ酸配列中のいずれかのアミノ酸が塩、または溶媒和物を形成していてもよい。また、そのアミノ酸配列中のいずれかのアミノ酸がＬ型、またはＤ型であってもよい。それらのような場合でも、本開示の実施形態に係る蛋白質は、上記「特定のアミノ酸配列」を含むといえる。蛋白質に含まれるアミノ酸が生体内で受ける化学修飾としては、例えば、Ｎ末端修飾（例えば、アセチル化、ミリストイル化等）、Ｃ末端修飾（例えば、アミド化、グリコシルホスファチジルイノシトール付加等）、または側鎖修飾（例えば、リン酸化、糖鎖付加等）等が知られている。アミノ酸は、本開示の目的を満たす限り、天然のものでも非天然のものでもよい。

【0085】

本明細書において「ポリヌクレオチド」、「オリゴヌクレオチド」および「核酸」は、本明細書において同じ意味で使用され、任意の長さのヌクレオチドのポリマーをいう。この用語はまた、「オリゴヌクレオチド誘導体」または「ポリヌクレオチド誘導体」を含む。「オリゴヌクレオチド誘導体」または「ポリヌクレオチド誘導体」とは、ヌクレオチドの誘導体を含むか、またはヌクレオチド間の結合が通常とは異なるオリゴヌクレオチドまたはポリヌクレオチドをいい、互換的に使用される。そのようなオリゴヌクレオチドとして具体的には、例えば、２’－Ｏ－メチル－リボヌクレオチド、オリゴヌクレオチド中のリン酸ジエステル結合がホスホロチオエート結合に変換されたオリゴヌクレオチド誘導体、オリゴヌクレオチド中のリン酸ジエステル結合がＮ３’－Ｐ５’ホスホロアミデート結合に変換されたオリゴヌクレオチド誘導体、オリゴヌクレオチド中のリボースとリン酸ジエステル結合とがペプチド核酸結合に変換されたオリゴヌクレオチド誘導体、オリゴヌクレオチド中のウラシルがＣ－５プロピニルウラシルで置換されたオリゴヌクレオチド誘導体、オリゴヌクレオチド中のウラシルがＣ－５チアゾールウラシルで置換されたオリゴヌクレオチド誘導体、オリゴヌクレオチド中のシトシンがＣ－５プロピニルシトシンで置換されたオリゴヌクレオチド誘導体、オリゴヌクレオチド中のシトシンがフェノキサジン修飾シトシン（ｐｈｅｎｏｘａｚｉｎｅ－ｍｏｄｉｆｉｅｄ ｃｙｔｏｓｉｎｅ）で置換されたオリゴヌクレオチド誘導体、ＤＮＡ中のリボースが２’－Ｏ－プロピルリボースで置換されたオリゴヌクレオチド誘導体およびオリゴヌクレオチド中のリボースが２’－メトキシエトキシリボースで置換されたオリゴヌクレオチド誘導体などが例示される。他にそうではないと示されなければ、特定の核酸配列はまた、明示的に示された配列と同様に、その保存的に改変された改変体（例えば、縮重コドン置換体）および相補配列を包含することが企図される。具体的には、縮重コドン置換体は、１またはそれ以上の選択された（または、すべての）コドンの３番目の位置が混合塩基および／またはデオキシイノシン残基で置換された配列を作成することにより達成され得る（Ｂａｔｚｅｒ ｅｔ ａｌ．， Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄ Ｒｅｓ．１９：５０８１（１９９１）；Ｏｈｔｓｕｋａ ｅｔ ａｌ．， Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ． ２６０： ２６０５－２６０８（１９８５）；Ｒｏｓｓｏｌｉｎｉ ｅｔ ａｌ．， Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｐｒｏｂｅｓ ８：９１－９８（１９９４））。本明細書において「核酸」はまた、遺伝子、ｃＤＮＡ、ｍＲＮＡ、オリゴヌクレオチド、およびポリヌクレオチドと互換可能に使用される。本明細書において「ヌクレオチド」は、天然のものでも非天然のものでもよい。

【0086】

本明細書において「遺伝子」とは、遺伝形質を規定する因子をいい、「遺伝子」は、「ポリヌクレオチド」、「オリゴヌクレオチド」および「核酸」をさすことがある。

【0087】

本明細書において遺伝子の「相同性」とは、２以上の遺伝子配列の、互いに対する同一性の程度をいい、一般に「相同性」を有するとは、同一性または類似性の程度が高いことをいう。従って、ある２つの遺伝子の相同性が高いほど、それらの配列の同一性または類似性は高い。２種類の遺伝子が相同性を有するか否かは、配列の直接の比較、または核酸の場合ストリンジェントな条件下でのハイブリダイゼーション法によって調べられ得る。２つの遺伝子配列を直接比較する場合、その遺伝子配列間でＤＮＡ配列が、代表的には少なくとも５０％同一である場合、好ましくは少なくとも７０％同一である場合、より好ましくは少なくとも８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％同一である場合、それらの遺伝子は相同性を有する。従って本明細書において「相同体」または「相同遺伝子産物」は、本明細書にさらに記載する複合体のタンパク質構成要素と同じ生物学的機能を発揮する、別の種、好ましくは哺乳動物、より好ましくはヒトにおけるタンパク質を意味する。こうような相同体はまた、「オルソログ遺伝子産物」とも称されることもある。本開示の目的に合致する限り、このような相同体、相同遺伝子産物、オルソログ遺伝子産物等も用いることができることが理解される。

【0088】

アミノ酸は、その一般に公知の３文字記号か、またはＩＵＰＡＣ－ＩＵＢ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ Ｃｏｍｍｉｓｓｉｏｎにより推奨される１文字記号のいずれかにより、本明細書中で言及され得る。ヌクレオチドも同様に、一般に認知された１文字コードにより言及され得る。本明細書では、アミノ酸配列および塩基配列の類似性、同一性および相同性の比較は、配列分析用ツールであるＢＬＡＳＴを用いてデフォルトパラメータを用いて算出される。同一性の検索は例えば、ＮＣＢＩのＢＬＡＳＴ２．７．１（２０１７．１０．１９発行）を用いて行うことができる。本明細書における「同一性」の値は通常は上記ＢＬＡＳＴを用い、デフォルトの条件でアラインした際の値をいう。ただし、パラメータの変更により、より高い値が出る場合は、最も高い値を同一性の値とする。複数の領域で同一性が評価される場合はそのうちの最も高い値を同一性の値とする。「類似性」は、同一性に加え、類似のアミノ酸についても計算に入れた数値である。

【0089】

本開示の一実施形態において「数個」は、例えば、１０、８、６、５、４、３、または２個であってもよく、それらいずれかの値以下であってもよい。１または数個のアミノ酸残基の欠失、付加、挿入、または他のアミノ酸による置換を受けたポリペプチドが、その生物学的活性を維持することは知られている（Ｍａｒｋ ｅｔ ａｌ．， Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ．１９８４ Ｓｅｐ；８１（１８）： ５６６２－５６６６．、Ｚｏｌｌｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ． １９８２ Ｏｃｔ ２５；１０（２０）：６４８７－６５００．、Ｗａｎｇ ｅｔ ａｌ．， Ｓｃｉｅｎｃｅ． １９８４ Ｊｕｎ ２９；２２４（４６５６）：１４３１－１４３３．）。欠失等がなされたタンパク質は、例えば、部位特異的変異導入法、ランダム変異導入法、またはタンパク質ファージライブラリを用いたバイオパニング等によって作製できる。部位特異的変異導入法としては、例えばＫＯＤ－Ｐｌｕｓ－Ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ Ｋｉｔ （ＴＯＹＯＢＯ ＣＯ．， ＬＴＤ．）を使用できる。欠失等を導入した変異型タンパク質から、野生型と同様の活性のあるタンパク質を選択することは、ＦＡＣＳ解析やＥＬＩＳＡ等の各種キャラクタリゼーションを行うことで可能である。

【0090】

本開示の一実施形態において同一性等の数値である「７０％以上」は、例えば、７０％以上、７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９６％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上、または１００％であってもよく、それら起点となる数値のいずれか２つの値の範囲内であってもよい。上記「同一性」は、２つもしくは複数間のアミノ酸配列において相同なアミノ酸数の割合を、上述したような公知の方法に従って算定される。具体的に説明すると、割合を算定する前には、比較するアミノ酸配列群のアミノ酸配列を整列させ、同一アミノ酸の割合を最大にするために必要である場合はアミノ酸配列の一部に間隙を導入する。整列のための方法、割合の算定方法、比較方法、およびそれらに関連するコンピュータプログラムは、当該分野で従来からよく知られている（例えば、上述したＢＬＡＳＴ等）。本明細書において「同一性」および「類似性」は、特に断りのない限りＮＣＢＩのＢＬＡＳＴによって測定された値で表すことができる。ＢＬＡＳＴでアミノ酸配列を比較するときのアルゴリズムには、Ｂｌａｓｔｐをデフォルト設定で使用できる。測定結果はＰｏｓｉｔｉｖｅｓまたはＩｄｅｎｔｉｔｉｅｓとして数値化される。

【0091】

本明細書において「ストリンジェント（な）条件でハイブリダイズするポリヌクレオチド」とは、当該分野で慣用される周知の条件をいう。本開示のポリヌクレオチド中から選択されたポリヌクレオチドをプローブとして、コロニー・ハイブリダイゼーション法、プラーク・ハイブリダイゼーション法あるいはサザンブロットハイブリダイゼーション法などを用いることにより、そのようなポリヌクレオチドを得ることができる。具体的には、コロニーあるいはプラーク由来のＤＮＡを固定化したフィルターを用いて、０．７～１．０ＭのＮａＣｌ存在下、６５℃でハイブリダイゼーションを行った後、０．１～２倍濃度のＳＳＣ（ｓａｌｉｎｅ－ｓｏｄｉｕｍｃｉｔｒａｔｅ）溶液（１倍濃度のＳＳＣ溶液の組成は、１５０ｍＭ塩化ナトリウム、１５ｍＭクエン酸ナトリウムである）を用い、６５℃条件下でフィルターを洗浄することにより同定できるポリヌクレオチドを意味する。「ストリンジェントな条件」は、例えば、以下の条件を採用することができる。（１）洗浄のために低イオン強度および高温度を用いる（例えば、５０℃で、０．０１５Ｍの塩化ナトリウム／０．００１５Ｍのクエン酸ナトリウム／０．１％のドデシル硫酸ナトリウム）、（２）ハイブリダイゼーション中にホルムアミド等の変性剤を用いる（例えば、４２℃で、５０％（ｖ／ｖ）ホルムアミドと０．１％ウシ血清アルブミン／０．１％フィコール／０．１％のポリビニルピロリドン／５０ｍＭのｐＨ６．５のリン酸ナトリウムバッファー、および７５０ｍＭの塩化ナトリウム、７５ｍＭクエン酸ナトリウム）、または（３）２０％ホルムアミド、５×ＳＳＣ、５０ｍＭリン酸ナトリウム（ｐＨ７．６）、５×デンハード液、１０％硫酸デキストラン、および２０ｍｇ／ｍｌの変性剪断サケ精子ＤＮＡを含む溶液中で、３７℃で一晩インキュベーションし、次に約３７－５０℃で１×ＳＳＣでフィルターを洗浄する。なお、ホルムアミド濃度は５０％またはそれ以上であってもよい。洗浄時間は、５、１５、３０、６０、もしくは１２０分、またはそれら以上であってもよい。ハイブリダイゼーション反応のストリンジェンシーに影響する要素としては温度、塩濃度など複数の要素が考えられ、詳細はＡｕｓｕｂｅｌ ｅｔ ａｌ．， Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ， Ｗｉｌｅｙ Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，（１９９５）を参照することができる。「高度にストリンジェントな条件」の例は、０．００１５Ｍ塩化ナトリウム、０．００１５Ｍクエン酸ナトリウム、６５～６８℃、または０．０１５Ｍ塩化ナトリウム、０．００１５Ｍクエン酸ナトリウム、および５０％ホルムアミド、４２℃である。ハイブリダイゼーション、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ ２ｎｄ ｅｄ．，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ， Ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ １－３８， ＤＮＡ Ｃｌｏｎｉｎｇ １：Ｃｏｒｅ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ， Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ａｐｐｒｏａｃｈ， Ｓｅｃｏｎｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ， Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ（１９９５）などの実験書に記載されている方法に準じて行うことができる。ここで、ストリンジェントな条件下でハイブリダイズする配列からは、好ましくは、Ａ配列のみまたはＴ配列のみを含む配列が除外される。中程度のストリンジェントな条件は、例えば、ＤＮＡの長さに基づき、当業者によって、容易に決定することができ、Ｓａｍｂｒｏｏｋら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：ＡＬａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、第３番、Ｖｏｌ．１、７．４２－７．４５ Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，２００１に示され、そしてニトロセルロースフィルターに関し、５×ＳＳＣ、０．５％ ＳＤＳ、１．０ｍＭ ＥＤＴＡ（ｐＨ８．０）の前洗浄溶液、約４０－５０℃での、約５０％ホルムアミド、２×ＳＳＣ－６×ＳＳＣ（または約４２℃での約５０％ホルムアミド中の、スターク溶液（Ｓｔａｒｋ’ｓ ｓｏｌｕｔｉｏｎ）などの他の同様のハイブリダイゼーション溶液）のハイブリダイゼーション条件、および約６０℃、０．５×ＳＳＣ、０．１％ ＳＤＳの洗浄条件の使用が含まれる。従って、本開示において使用されるポリペプチドには、本開示で特に記載されたポリペプチドをコードする核酸分子に対して、高度または中程度でストリンジェントな条件下でハイブリダイズする核酸分子によってコードされるポリペプチドも包含される。

【0092】

本開示のＷＴ１ペプチドは、好ましくは「精製された」または「単離された」ものであり得る。本明細書において「精製された」物質または生物学的因子（例えば、核酸またはタンパク質など）とは、その物質または生物学的因子に天然に随伴する因子の少なくとも一部が除去されたものをいう。従って、通常、精製された生物学的因子におけるその生物学的因子の純度は、その生物学的因子が通常存在する状態よりも高い（すなわち濃縮されている）。本明細書中で使用される用語「精製された」は、好ましくは少なくとも７５重量％、より好ましくは少なくとも８５重量％、よりさらに好ましくは少なくとも９５重量％、そして最も好ましくは少なくとも９８重量％の、同型の生物学的因子が存在することを意味する。本開示で用いられる物質または生物学的因子は、好ましくは「精製された」物質である。本明細書で使用される「単離された」物質または生物学的因子（例えば、核酸またはタンパク質など）とは、その物質または生物学的因子に天然に随伴する因子が実質的に除去されたものをいう。本明細書中で使用される用語「単離された」は、その目的に応じて変動するため、必ずしも純度で表示される必要はないが、必要な場合、好ましくは少なくとも７５重量％、より好ましくは少なくとも８５重量％、よりさらに好ましくは少なくとも９５重量％、そして最も好ましくは少なくとも９８重量％の、同型の生物学的因子が存在することを意味する。本開示で用いられる物質は、好ましくは「単離された」物質または生物学的因子である。

【0093】

本明細書において「フラグメント」とは、全長のポリペプチドまたはポリヌクレオチド（長さがｎ）に対して、１～ｎ－１までの配列長さを有するポリペプチドまたはポリヌクレオチドをいう。フラグメントの長さは、その目的に応じて、適宜変更することができ、例えば、その長さの下限としては、ポリペプチドの場合、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、４０、５０およびそれ以上のアミノ酸が挙げられ、ここの具体的に列挙していない整数で表される長さ（例えば、１１など）もまた、下限として適切であり得る。また、ポリヌクレオチドの場合、５、６、７、８、９、１０、１５、２０、２５、３０、４０、５０、７５、１００およびそれ以上のヌクレオチドが挙げられ、ここの具体的に列挙していない整数で表される長さ（例えば、１１など）もまた、下限として適切であり得る。本明細書において、このようなフラグメントは、例えば、全長のものががんワクチンとして機能する場合、そのフラグメント自体もまたがんワクチンとしての機能を有する限り、本開示の範囲内に入ることが理解される。

【0094】

本明細書において「生物学的機能」とは、ある遺伝子またはそれに関する核酸分子もしくはポリペプチドについて言及するとき、その遺伝子、核酸分子またはポリペプチドが生体内または生体外において有し得る特定の機能をいい、これには、例えば、キラーＴ細胞またはヘルパーＴ細胞の活性化等を挙げることができるがそれらに限定されない。本明細書において、生物学的機能は、対応する「生物学的活性」によって発揮され得る。本明細書において「生物学的活性」とは、ある因子（例えば、ポリヌクレオチド、タンパク質など）が、有し得る活性のことをいい、種々の機能（例えば、キラーＴ細胞またはヘルパーＴ細胞の活性化）を発揮する活性が包含される。「生物学的活性」は、生体内で発揮される活性であっても、分泌などによって生体外で発揮される活性であってもよい。例えば、ある因子が酵素である場合、その生物学的活性は、その酵素活性を包含する。そのような生物学的活性は、当該分野において周知の技術によって測定することができる。従って、「活性」は、結合（直接的または間接的のいずれか）を示すかまたは明らかにするか；応答に影響する（すなわち、いくらかの曝露または刺激に応答する測定可能な影響を有する）、種々の測定可能な指標をいい、例えば、本開示のポリペプチドまたはポリヌクレオチドに直接結合する化合物の親和性、または例えば、いくつかの刺激後または事象後の上流または下流のタンパク質の量あるいは他の類似の機能の尺度も含まれ得る。

【0095】

本明細書において遺伝子、ポリヌクレオチド、ポリペプチドなどの「発現」とは、その遺伝子などがインビボで一定の作用を受けて、別の形態になることをいう。好ましくは、遺伝子、ポリヌクレオチドなどが、転写および翻訳されて、ポリペプチドの形態になることをいうが、転写されてｍＲＮＡが作製されることもまた発現の一態様である。したがって、本明細書において「発現産物」とは、このようなポリペプチドもしくはタンパク質、またはｍＲＮＡを含む。より好ましくは、そのようなポリペプチドの形態は、翻訳後プロセシングを受けたものであり得る。例えば、ＷＴ１の発現レベルは、任意の方法によって決定することができる。具体的には、ＷＴ１のｍＲＮＡの量、ＷＴ１タンパク質の量、そしてＷＴ１タンパク質の生物学的な活性を評価することによって、ＷＴ１の発現レベルを知ることができる。ＷＴ１のｍＲＮＡやタンパク質の量は、本明細書の他の箇所に詳述したような方法あるいは他の当該分野において公知の方法によって決定することができる。

【0096】

本明細書において「機能的等価物」とは、対象となるもとの実体に対して、目的となる機能が同じであるが構造が異なる任意のものをいう。従って、本開示の「ＷＴ１ペプチド」の機能的等価物は、配列番号１と同一配列を有するものではないが、その変異体または改変体（例えば、アミノ酸配列改変体等）であって、ＷＴ１ペプチドの持つ生物学的作用を有するもの、ならびに、作用する時点において、そのＷＴ１ペプチドの持つ生物学的作用を持つ変異体もしくは改変体に変化することができるもの（例えば、その変異体もしくは改変体をコードする核酸、およびその核酸を含むベクター、細胞等を含む）が包含されることが理解される。本開示において、ＷＴ１ペプチドの機能的等価物は、格別に言及していなくても、ＷＴ１ペプチドと同様に用いられうることが理解される。機能的等価物は、データベース等を検索することによって、見出すことができる。本明細書において「検索」とは、電子的にまたは生物学的あるいは他の方法により、ある核酸塩基配列を利用して、特定の機能および／または性質を有する他の核酸塩基配列を見出すことをいう。電子的な検索としては、ＢＬＡＳＴ（Ａｌｔｓｃｈｕｌ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５：４０３－４１０（１９９０））、ＦＡＳＴＡ（Ｐｅａｒｓｏｎ ＆ Ｌｉｐｍａｎ， Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，ＵＳＡ ８５：２４４４－２４４８（１９８８））、Ｓｍｉｔｈ ａｎｄ Ｗａｔｅｒｍａｎ法（Ｓｍｉｔｈ ａｎｄ Ｗａｔｅｒｍａｎ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１４７：１９５－１９７（１９８１））、およびＮｅｅｄｌｅｍａｎ ａｎｄ Ｗｕｎｓｃｈ法（Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ ａｎｄ Ｗｕｎｓｃｈ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４８：４４３－４５３（１９７０））などが挙げられるがそれらに限定されない。生物学的な検索としては、ストリンジェントハイブリダイゼーション、ゲノムＤＮＡをナイロンメンブレン等に貼り付けたマクロアレイまたはガラス板に貼り付けたマイクロアレイ（マイクロアレイアッセイ）、ＰＣＲおよびｉｎ ｓｉｔｕハイブリダイゼーションなどが挙げられるがそれらに限定されない。本明細書において、本開示において使用される遺伝子には、このような電子的検索、生物学的検索によって同定された対応遺伝子も含まれるべきであることが意図される。

【0097】

本開示の機能的等価物としては、アミノ酸配列において、１もしくは複数個のアミノ酸の挿入、置換もしくは欠失、またはその一方もしくは両末端への付加されたものを用いることができる。本明細書において、「アミノ酸配列において、１もしくは複数個のアミノ酸の挿入、置換もしくは欠失、またはその一方もしくは両末端への付加」とは、部位特異的突然変異誘発法等の周知の技術的方法により、あるいは天然の変異により、天然に生じ得る程度の複数個の数のアミノ酸の置換等により改変がなされていることを意味する。改変アミノ酸配列は、例えば１～４個、好ましくは１～３個、特に好ましくは１～２個あるいは１個のアミノ酸の挿入、置換、および／もしくは欠失、またはその一方もしくは両末端への付加がなされたものであることができる。改変アミノ酸配列は、好ましくは、そのアミノ酸配列が、配列番号１～５のいずれかアミノ酸配列において１または複数個（好ましくは１もしくは数個または１、２、３、もしくは４個）の保存的置換を有するアミノ酸配列であってもよい。ここで「保存的置換」とは、タンパク質の機能を実質的に改変しないように、１または複数個のアミノ酸残基を、別の化学的に類似したアミノ酸残基で置換えることを意味する。例えば、ある疎水性残基を別の疎水性残基によって置換する場合、ある極性残基を同じ電荷を有する別の極性残基によって置換する場合などが挙げられる。このような置換を行うことができる機能的に類似のアミノ酸は、アミノ酸毎に当該分野において公知である。具体例を挙げると、非極性（疎水性）アミノ酸としては、アラニン、バリン、イソロイシン、ロイシン、プロリン、トリプトファン、フェニルアラニン、メチオニンなどが挙げられる。極性（中性）アミノ酸としては、グリシン、セリン、スレオニン、チロシン、グルタミン、アスパラギン、システインなどが挙げられる。陽電荷をもつ（塩基性）アミノ酸としては、アルギニン、ヒスチジン、リジンなどが挙げられる。また、負電荷をもつ（酸性）アミノ酸としては、アスパラギン酸、グルタミン酸などが挙げられる。

【0098】

（ＷＴ１ペプチド）
本開示において、ＷＴ１ペプチドとしては、細胞傷害性Ｔ細胞またはヘルパーＴ細胞の活性化を誘導する、ＷＴ１タンパク質由来のペプチドが挙げられる。ＷＴ１ペプチドとしては、細胞傷害性Ｔ細胞の活性化を誘導するＷＴ１キラーペプチドと、ヘルパーＴ細胞の活性化を誘導するＷＴ１ヘルパーペプチドとが挙げられる。ＷＴ１キラーペプチドとしては、ＷＴ１タンパク質由来の８～１２個のアミノ酸からなるペプチドが挙げられ、好ましくは８～９個のアミノ酸からなるペプチドが挙げられる。また、特に好ましくは、ＷＴ１_１２６ペプチド：Ａｒｇ Ｍｅｔ Ｐｈｅ Ｐｒｏ Ａｓｎ Ａｌａ Ｐｒｏ Ｔｙｒ Ｌｅｕ（配列番号２）、またはＷＴ１_２３５ペプチド：Ｃｙｓ Ｍｅｔ Ｔｈｒ Ｔｒｐ Ａｓｎ Ｇｌｎ Ｍｅｔ Ａｓｎ Ｌｅｕ（配列番号３）、または式（３）

【0099】

【化2】

（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）
に示される、ＷＴ１_１２６ペプチドとＷＴ１_２３５ｍ ペプチドとのコンジュゲートである。ＷＴ１ヘルパーペプチドとしては、ＷＴ１タンパク質由来の１４～２０個のアミノ酸からなるペプチドが挙げられ、好ましくは１６～１８個のアミノ酸からなるペプチドが挙げられる。また、特に好ましくは、ＷＴ１_３５ペプチド（Ｔｒｐ Ａｌａ Ｐｒｏ Ｖａｌ Ｌｅｕ Ａｓｐ Ｐｈｅ Ａｌａ Ｐｒｏ Ｐｒｏ Ｇｌｙ Ａｌａ Ｓｅｒ Ａｌａ Ｔｙｒ Ｇｌｙ Ｓｅｒ Ｌｅｕ；配列番号４）、またはＷＴ１_３３２ペプチド：Ｌｙｓ Ａｒｇ Ｔｙｒ Ｐｈｅ Ｌｙｓ Ｌｅｕ Ｓｅｒ Ｈｉｓ Ｌｅｕ Ｇｌｎ Ｍｅｔ Ｈｉｓ Ｓｅｒ Ａｒｇ Ｌｙｓ Ｈｉｓ）（配列番号５）である。ＷＴ１ペプチドにおいて１もしくは数個のアミノ酸が欠失、置換もしくは付加された改変ペプチドも、本開示におけるＷＴ１ペプチドとして用いることができる。このような改変ペプチドとしては、ＷＴ１_１２６ペプチドの改変ペプチド、ＷＴ１_２３５ペプチドの改変ペプチド、ＷＴ１_３５ペプチドの改変ペプチド、およびＷＴ１_３３２ペプチドの改変ペプチドが挙げられる。

【0100】

ＷＴ１_１２６ペプチドの改変ペプチドとしては、Ｎ末端から４～８番目のアミノ酸残基がＷＴ１_１２６ペプチドのＮ末端から４～８番目のアミノ酸残基（ＰＮＡＰＹ）と同じであるペプチドが好適である。このようなＷＴ１_１２６ペプチドの改変ペプチドとしては、以下の配列番号６～４４のいずれかに記載のアミノ酸配列からなるペプチドが好ましい。
ＷＴ１_１２６Ｐ１Ｇペプチド（ＧＭＦＰＮＡＰＹＬ；配列番号６）
ＷＴ１_１２６Ｐ１Ａペプチド（ＡＭＦＰＮＡＰＹＬ；配列番号７）
ＷＴ１_１２６Ｐ１Ｖペプチド（ＶＭＦＰＮＡＰＹＬ；配列番号８）
ＷＴ１_１２６Ｐ１Ｌペプチド（ＬＭＦＰＮＡＰＹＬ；配列番号９）
ＷＴ１_１２６Ｐ１Ｉペプチド（ＩＭＦＰＮＡＰＹＬ；配列番号１０）
ＷＴ１_１２６Ｐ１Ｍペプチド（ＭＭＦＰＮＡＰＹＬ；配列番号１１）
ＷＴ１_１２６Ｐ１Ｗペプチド（ＷＭＦＰＮＡＰＹＬ；配列番号１２）
ＷＴ１_１２６Ｐ１Ｆペプチド（ＦＭＦＰＮＡＰＹＬ；配列番号１３）
ＷＴ１_１２６Ｐ１Ｙペプチド（ＹＭＦＰＮＡＰＹＬ；配列番号１４）
ＷＴ１_１２６Ｐ２Ｖペプチド（ＲＶＦＰＮＡＰＹＬ；配列番号１５）
ＷＴ１_１２６Ｐ２Ｑペプチド（ＲＱＦＰＮＡＰＹＬ；配列番号１６）
ＷＴ１_１２６Ｐ２Ａペプチド（ＲＡＦＰＮＡＰＹＬ；配列番号１７）
ＷＴ１_１２６Ｐ２Ｌペプチド（ＲＬＦＰＮＡＰＹＬ；配列番号１８）
ＷＴ１_１２６Ｐ２Ｉペプチド（ＲＩＦＰＮＡＰＹＬ；配列番号１９）
ＷＴ１_１２６Ｐ３Ｉペプチド（ＲＭＩＰＮＡＰＹＬ；配列番号２０）
ＷＴ１_１２６Ｐ３Ｌペプチド（ＲＭＬＰＮＡＰＹＬ；配列番号２１）
ＷＴ１_１２６Ｐ３Ｇペプチド（ＲＭＧＰＮＡＰＹＬ；配列番号２２）
ＷＴ１_１２６Ｐ３Ａペプチド（ＲＭＡＰＮＡＰＹＬ；配列番号２３）
ＷＴ１_１２６Ｐ３Ｖペプチド（ＲＭＶＰＮＡＰＹＬ；配列番号２４）
ＷＴ１_１２６Ｐ３Ｍペプチド（ＲＭＭＰＮＡＰＹＬ；配列番号２５）
ＷＴ１_１２６Ｐ３Ｐペプチド（ＲＭＰＰＮＡＰＹＬ；配列番号２６）
ＷＴ１_１２６Ｐ３Ｗペプチド（ＲＭＷＰＮＡＰＹＬ；配列番号２７）
ＷＴ１_１２６Ｐ９Ｖペプチド（ＲＭＦＰＮＡＰＹＶ；配列番号２８）
ＷＴ１_１２６Ｐ９Ａペプチド（ＲＭＦＰＮＡＰＹＡ；配列番号２９）
ＷＴ１_１２６Ｐ９Ｉペプチド（ＲＭＦＰＮＡＰＹＩ；配列番号３０）
ＷＴ１_１２６Ｐ９Ｍペプチド（ＲＭＦＰＮＡＰＹＭ；配列番号３１）
ＷＴ１_１２６Ｐ１Ｄペプチド（ＤＭＦＰＮＡＰＹＬ；配列番号３２）
ＷＴ１_１２６Ｐ１Ｅペプチド（ＥＭＦＰＮＡＰＹＬ；配列番号３３）
ＷＴ１_１２６Ｐ１Ｈペプチド（ＨＭＦＰＮＡＰＹＬ；配列番号３４）
ＷＴ１_１２６Ｐ１Ｋペプチド（ＫＭＦＰＮＡＰＹＬ；配列番号３５）
ＷＴ１_１２６Ｐ１Ｎペプチド（ＮＭＦＰＮＡＰＹＬ；配列番号３６）
ＷＴ１_１２６Ｐ１Ｐペプチド（ＰＭＦＰＮＡＰＹＬ；配列番号３７）
ＷＴ１_１２６Ｐ１Ｑペプチド（ＱＭＦＰＮＡＰＹＬ；配列番号３８）
ＷＴ１_１２６Ｐ１Ｓペプチド（ＳＭＦＰＮＡＰＹＬ；配列番号３９）
ＷＴ１_１２６Ｐ１Ｔペプチド（ＴＭＦＰＮＡＰＹＬ；配列番号４０）
ＷＴ１_１２６Ｐ２Ｉ＆Ｐ９Ｉペプチド（ＲＩＦＰＮＡＰＹＩ；配列番号４１）
ＷＴ１_１２６Ｐ２Ｉ＆Ｐ９Ｖペプチド（ＲＩＦＰＮＡＰＹＶ；配列番号４２）
ＷＴ１_１２６Ｐ２Ｌ＆Ｐ９Ｉペプチド（ＲＬＦＰＮＡＰＹＩ；配列番号４３）
ＷＴ１_１２６Ｐ２Ｌ＆Ｐ９Ｖペプチド（ＲＬＦＰＮＡＰＹＶ；配列番号４４）
ＷＴ１_２３５ペプチドの改変ペプチドとしては、ＷＴ１_２３５：Ｃｙｓ Ｍｅｔ Ｔｈｒ Ｔｒｐ Ａｓｎ Ｇｌｎ Ｍｅｔ Ａｓｎ Ｌｅｕ（配列番号３）、またはＷＴ１_２３５ｍ：Ｃｙｓ Ｔｙｒ Ｔｈｒ Ｔｒｐ Ａｓｎ Ｇｌｎ Ｍｅｔ Ａｓｎ Ｌｅｕ（配列番号４５）を含む、あるいはからなるペプチド、配列番号３または４５のアミノ酸配列を含む、あるいはからなるペプチドの二量体、配列番号３または４５のアミノ酸配列を含む、あるいはからなるペプチドのシスチン体、および上記アミノ酸配列において１個ないし数個のアミノ酸が置換、欠失または付加されているアミノ酸配列を含む、あるいはからなるペプチドなどが例示されるが、これらに限定されない。ＷＴ１_２３５ペプチドの改変ペプチドの中でも、ＷＴ１_２３５ｍペプチドは、ＨＬＡ－Ａ＊２４：０２（日本人最多のＨＬＡ型）拘束性ＷＴ１ペプチドであり、野生型のＷＴ１_２３５ペプチドよりも治療有効性が高く、水への可溶性に優れることから、特に好ましい。

【0101】

これらの改変ペプチドとしては、例えば次のようなものが挙げられる。
Ｃｙｓ－Ｃｙｓ Ｔｙｒ Ｔｈｒ Ｔｒｐ Ａｓｎ Ｇｌｎ Ｍｅｔ Ａｓｎ Ｌｅｕ（配列番号４７）（式中、CとCの間の結合はジスルフィド結合を表す。）、またはＣｙｓ－Ｃｙｓ Ｍｅｔ Ｔｈｒ Ｔｒｐ Ａｓｎ Ｇｌｎ Ｍｅｔ Ａｓｎ Ｌｅｕ（配列番号４８）（式中、CとCの間の結合はジスルフィド結合を表す。）は、Ｎ末端システイン残基のチオール基を修飾することによって、特に物理化学的性質および安定性に優れる（国際公開第２００７／０６３９０３号参照）。

【0102】

広くＨＬＡサブタイプをカバーする観点から、本実施形態におけるＷＴ１ペプチドの改変ペプチドとしては、それぞれ異なるＨＬＡのサブタイプに対応する複数のペプチドを含むことが好ましい。例えば、ＨＬＡサブタイプＡ２タイプに対応する上記ペプチドまたはその薬学上許容される塩およびＨＬＡサブタイプＡ２４タイプに対応する上記ペプチドまたはその薬学上許容される塩の両方を含むことが好ましい。そのような場合には、例えば、医薬組成物は、式（１）：

【0103】

【化4】

【0104】

[式中、Ｘ^ａおよびＹ^ａは、単結合を表し、腫瘍抗原ペプチドＡは、以下のアミノ酸配列：ＲＭＦＰＮＡＰＹＬ（配列番号２）、ＡＬＬＰＡＶＰＳＬ（配列番号５２）、ＳＬＧＥＱＱＹＳＶ（配列番号５３）、ＲＶＰＧＶＡＰＴＬ（配列番号：７）、ＹＭＦＰＮＡＰＹＬ（配列番号１４）およびＶＬＤＦＡＰＰＧＡ（配列番号６８）の中から選ばれるいずれかのアミノ酸配列からなるペプチドを表し、腫瘍抗原ペプチドＡのＣ末端アミノ酸のカルボニル基が式（１）中の水酸基と結合し、
Ｒ_１は、水素原子または腫瘍抗原ペプチドＢを表し、
腫瘍抗原ペプチドＢは、腫瘍抗原ペプチドＡとは配列が異なり且つ以下のアミノ酸配列：ＣＭＴＷＮＱＭＮＬ（配列番号３）およびＣＹＴＷＮＱＭＮＬ（配列番号４５）の中から選ばれるいずれかのアミノ酸配列からなるペプチドを表し、腫瘍抗原ペプチドＢのシステイン残基のチオエーテル基が式（１）中のチオエーテル基と結合する。]
で表される化合物またはその薬学上許容される塩を含むものであってもよい。

【0105】

上記式（１）で表される化合物は、システイン残基がジスルフィド結合を形成していること等により、溶液中での酸化剤などに対する安定性に優れており、医薬品原料として一定の品質を有する。

【0106】

また、本実施形態におけるＷＴ１ペプチドの改変ペプチドが、上記式（１）で表される化合物（ＷＴ１キラーペプチドの結合体）を含む場合、体内でＥＲＡＰ１によるＮ末端のシステイン残基間のジスルフィド結合の還元的開裂により、結合体が分解され、異なるＨＬＡサブタイプに対応する２種類のエピトープが生成される。式（１）で表される結合体のように、異なるＨＬＡサブタイプに対応する複数種類のエピトープが体内において生成される結合体は、対象により異なるＨＬＡサブタイプに広く対応可能であり、大きなＰｏｐｕｌａｔｉｏｎを一つの結合体によりカバーすることができるため、対象において効率的にＣＴＬを誘導することができる（国際公開２０１４／１５７６９２号参照、なお、国際公開２０１４／１５７６９２号は、本明細書においてその全体が参考として援用される。）。
本実施形態における「腫瘍抗原ペプチドＡ」とは、７～３０残基のアミノ酸からなるＭＨＣクラスＩ拘束性ＷＴ１ペプチドである。式（１）において腫瘍抗原ペプチドＡは、Ｎ末端アミノ酸のアミノ基が式（１）中のＹａと結合し、Ｃ末端アミノ酸のカルボニル基が式（１）中の水酸基と結合する。
また、上記式（１）で表される化合物は、式（２）：

【0107】

【化1】

（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）
で表される化合物であってもよく、式（３）：

【0108】

【化2】

（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）
で表される化合物であってもよく、式（４）：

【0109】

【化3】

（式中、ＣとＣの間の結合はジスルフィド結合を表す。）
で表される化合物であってもよい。

【0110】

ＷＴ１_３５ペプチドの改変ペプチドとしては、配列番号４に示されるアミノ酸配列において、１個もしくは数個のアミノ酸が、置換、または欠失もしくは付加されたアミノ酸配列であれば特に限定されない。

【0111】

ＷＴ１_３３２ペプチドの改変ペプチドとしては、配列番号５に示されるアミノ酸配列において、１個もしくは数個のアミノ酸が、置換、または欠失もしくは付加されたアミノ酸配列であれば特に限定されない。好ましい実施形態では、ＷＴ１_３３２ペプチドの改変ペプチドとしては、配列番号５に示されるＷＴ１_３３２ペプチドの第3位、第6位、第8位および／または第11位のアミノ酸残基が、
第3位：フェニルアラニン、トリプトファン、バリン、イソロイシン、ロイシン、メチオニン、
第6位：バリン、イソロイシン、メチオニン、アスパラギン酸、グルタミン酸、
第8位：アスパラギン、セリン、スレオニン、グルタミン、リジン、アスパラギン酸、
第11位：アスパラギン酸、グルタミン酸、グルタミン、
の中から選択されるいずれかのアミノ酸残基に置換されたアミノ酸配列からなるペプチドが好適である。

【0112】

中でも、ＷＴ１_１２６ペプチドの改変ペプチドとしては、ＷＴ１_１２６Ｐ１Ｆペプチド（配列番号１３）、ＷＴ１_１２６Ｐ２Ｌペプチド（配列番号１８）、ＷＴ１_１２６Ｐ３Ｍペプチド（配列番号２５）またはＷＴ１_１２６Ｐ９Ｖペプチド（配列番号２８）が好ましく、ＷＴ１_１２６Ｐ２Ｌペプチド、ＷＴ１_１２６Ｐ３ＭペプチドまたはＷＴ１_１２６Ｐ９Ｖペプチドがより好ましく、ＷＴ１_１２６Ｐ９Ｖペプチドがさらに好ましい。

【0113】

本開示の予防または治療薬におけるＷＴ１ペプチドとしては、ＷＴ１_１２６ペプチド、ＷＴ１_１２６Ｐ１Ｆペプチド、ＷＴ１_１２６Ｐ２Ｌペプチド、ＷＴ１_１２６Ｐ３ＭペプチドまたはＷＴ１_１２６Ｐ９Ｖペプチドが好ましい。より好ましくは、ＷＴ１_１２６ペプチド、ＷＴ１_１２６Ｐ２Ｌペプチド、ＷＴ１_１２６Ｐ３ＭペプチドまたはＷＴ１_１２６Ｐ９Ｖペプチドであり、さらに好ましくはＷＴ１_１２６ペプチド、またはＷＴ１_１２６Ｐ９Ｖペプチドであり、特に好ましくは、ＷＴ１_１２６ペプチドである。

【0114】

また、ＷＴ１ペプチドとして、ＷＴ１ペプチドの誘導体も用いることができる。例えば、ＷＴ１_１２６ペプチド、ＷＴ１_２３５ペプチド、ＷＴ１_３５ペプチドまたはＷＴ１_３３２ペプチドの誘導体としては、上記９、１６または１８個の連続するアミノ酸からなるアミノ酸配列のＮ末端および／またはＣ末端に、種々の物質を結合させたものなどが挙げられる。例えば、アミノ酸、ペプチド、それらのアナログ等を結合させてもよい。理論に拘束されるものではないが、ＷＴ１_１２６ペプチド、ＷＴ１_２３５ペプチド、ＷＴ１_３５ペプチドまたはＷＴ１_３３２ペプチド、またはそれらの改変ペプチドにこのような物質が結合している場合、これらの物質が、例えば、生体内酵素などにより、あるいは細胞内プロセッシングなどの過程により処理され、最終的に上記９、１６または１８個のアミノ酸からなるペプチドを生じ、細胞表面に提示されることにより、ＷＴ１特異的ＣＴＬ反応を引き出すことができる。

【0115】

本実施形態におけるＷＴ１ペプチドまたはその類縁体は、ＷＴ１ヘルパーペプチドをさらに含んでいてもよい。本実施形態におけるＷＴ１ペプチドまたはその類縁体が、ＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫ（配列番号６３）、ＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫＨ（配列番号６４）、ＣＮＫＲＹＦＫＬＳＨＬＱＭＨＳＲＫＨＴＧ（配列番号６５）、ＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬ（配列番号４）、ＣＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬ（配列番号６６）およびＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬＣ（配列番号５１）からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むペプチドを更に含む場合には、上記群から選択される他のアミノ酸配列を含むペプチドおよび／またはそれ以外の他のＷＴ１ヘルパーペプチドをさらに含んでいてもよい。

【0116】

ＷＴ１ペプチドは、当該技術分野において通常用いられる方法によって製造され得る。例えば、Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ， Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ， Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ， １９６６ ； Ｔｈｅ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ， Ｖｏｌ ２， Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ Ｉｎｃ．， Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ， １９７６； ペプチド合成、丸善（株）、１９７５；ペプチド合成の基礎と実験、丸善（株）１９８５；医薬品の開発 続 第１４巻・ペプチド合成、広川書店、１９９１などに記載されているペプチド合成方法によって合成することができる。

【0117】

ＷＴ１ペプチドおよび改変ペプチドのスクリーニング方法としては、例えば、良性腫瘍（例えば、家族性大腸腺腫症）を有する何人かの患者のＰＢＭＣｓ（末梢血単核球）を用いて、１回のペプチドのみの刺激でＩＦＮγアッセイを行い、反応がよいペプチドを選択する方法が、簡便であるため好ましい。

【0118】

本開示においては、上記のＷＴ１タンパク質またはＷＴ１ペプチドをコードするＤＮＡまたはＲＮＡなどのポリヌクレオチドも、予防または治療薬の有効成分として使用することができる。すなわち、ＷＴ１タンパク質またはＷＴ１ペプチドをコードするポリヌクレオチドを、適切なベクター、好ましくは発現ベクターに挿入した後、ヒトを含む動物に投与することにより、生体内でがん免疫を生じさせることができる。ポリヌクレオチドとしては、ＤＮＡ、ＲＮＡなどが挙げられ、ＤＮＡまたはＲＮＡが好ましい。ポリヌクレオチドの塩基配列は、良性腫瘍（例えば、家族性大腸腺腫症）の患者に対して免疫原性を有するＷＴ１タンパク質またはＷＴ１ペプチドのアミノ酸配列に基づき決定することができる。該ポリヌクレオチドは、例えば、公知のＤＮＡまたはＲＮＡ合成法、ＰＣＲ法などにより製造することができる。このような、ＷＴ１タンパク質またはＷＴ１ペプチドをコードするＤＮＡを含有する予防または治療薬も、本開示の１つである。ＷＴ１タンパク質またはＷＴ１ペプチドとしては、ＷＴ１ペプチドが好ましく、ＷＴ１_１２６ペプチド、ＷＴ１_２３５ペプチド、ＷＴ１_３５ペプチドもしくはＷＴ１_３３２ペプチド、もしくはその改変ペプチド、またはその組合せがより好ましく、ＷＴ１_１２６ペプチド、ＷＴ１_２３５ペプチドもしくはＷＴ１_３５ペプチド、もしくはその改変体ペプチド、またはその組合せがさらに好ましく、式（３）に示す化合物（ＷＴ１_１２６ペプチドとＷＴ１_２３５ペプチドとのコンジュゲート）とＷＴ１_３５ペプチドとの組合せが最も好ましい。上記ＤＮＡが挿入される発現ベクターとしては、特に限定されない。なお、ＲＮＡは、ベクターに挿入せずに、そのまま組成物の有効成分として使用できる。

【0119】

本開示の予防または治療薬は、アジュバントを含有することができる。アジュバントとしては、抗原となるＷＴ１タンパク質またはＷＴ１ペプチドを投与する場合、これらと一緒に、またはＷＴ１タンパク質またはＷＴ１ペプチドとは別に投与して、その抗原に対する免疫応答を非特異的に高める物質であれば限定されない。アジュバントとしては、例えば、沈降性アジュバントまたは油性アジュバントが挙げられる。沈降性アジュバントとしては、例えば、水酸化ナトリウム、水酸化アルミニウム、リン酸カルシウム、リン酸アルミニウム、ミョウバン、ペペスまたはカルボキシビニルポリマーなどが挙げられる。油性アジュバントは油が抗原水溶液を包んでミセルをつくることができるものが好ましく、例えば具体的には、流動パラフィン、ラノリン、フロイント、Ｍｏｎｔａｎｉｄｅ ＩＳＡ７６３ＡＶＧ、Ｍｏｎｔａｎｉｄｅ ＩＳＡ５１、不完全フロイントアジュバントまたは完全フロイントアジュバントなどが挙げられる。アジュバントは２種以上を混合して用いることもできる。好ましくは、油性アジュバントである。本開示の予防または治療薬におけるアジュバントの配合量は、抗原に対する免疫応答を非特異的に高める量であれば特に限定されず、アジュバントの種類等により適宜選択すればよい。

【0120】

本開示の予防または治療薬は、経口投与、または非経口投与、例えば腹腔内投与、皮下投与、皮内投与、筋肉内投与、静脈内投与もしくは鼻腔内投与などにより投与することができる。また、非経口投与としては、予防または治療薬を皮膚に塗布したり、貼付剤に予防または治療薬を含有させて皮膚に貼付したりすることにより、有効成分であるＷＴ１タンパク質またはＷＴ１ペプチドを経皮吸収させる投与方法も挙げられる。さらに、本開示の予防または治療薬は、吸引等により投与することもできる。好ましくは、非経口投与により投与する。より好ましくは、皮内投与、または皮下投与により投与する。皮内投与、皮下投与する体の部位は、例えば、上腕等が好ましい。

【0121】

本開示の予防または治療薬は、投与経路に応じて、種々の製剤形態、例えば、固形製剤、液状製剤等をとりうる。例えば、経口投与のための内服用固形剤もしくは内服用液剤、または非経口投与のための注射剤等とすることができる。

【0122】

経口投与のための内服用固形剤としては、錠剤、丸剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤等が挙げられる。

【0123】

内服用固形剤においては、ＷＴ１タンパク質またはＷＴ１ペプチドはそのままか、添加剤と混合または造粒（例えば、攪拌造粒法、流動層造粒法、乾式造粒法、転動攪拌流動層造粒法等）され、常法に従って製造される。例えば、カプセル剤であれば、カプセル充填等によって、錠剤であれば、打錠剤等によって製造することができる。添加剤は、１種または２種以上を適宜配合してもよい。添加剤としては、例えば、ラクトース、マンニトール、グルコース、微結晶セルロース、トウモロコシデンプン等の賦形剤；ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルピロリドン、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム等の結合剤；トウモロコシデンプン等の分散剤；繊維素グリコール酸カルシウム等の崩壊剤；ステアリン酸マグネシウム等の滑沢剤；グルタミン酸、アスパラギン酸等の溶解補助剤；安定剤；ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、メチルセルロース等のセルロース類、ポリエチレングリコール、ポリビニルピロリドン、ポリビニルアルコール等の合成高分子類等の水溶性高分子；白糖、粉糖、ショ糖、果糖、ブドウ糖、乳糖、還元麦芽糖水アメ、粉末還元麦芽糖水アメ、ブドウ糖果糖液糖、果糖ブドウ糖液糖、ハチミツ、ソルビトール、マルチトール、マンニトール、キシリトール、エリスリトール、アスパルテーム、サッカリン、サッカリンナトリウム等の甘味剤等が挙げられる。

【0124】

顆粒剤または錠剤は、必要によりコーティング剤等で被覆されていてもよいし、また該コーティングは２以上の層であってもよい。コーティング剤としては、例えば、白糖、ゼラチン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート等が挙げられる。カプセル剤として製造する場合には、上記賦形剤を適宜選択し、ＷＴ１タンパク質またはＷＴ１ペプチドと均等に混和または粒状、もしくは粒状としたものに適当なコーティング剤で剤皮を施したものをカプセルに充填するか、適当なカプセル基剤（ゼラチン等）にグリセリンまたはソルビトール等を加えて塑性を増したカプセル基剤で被包成形してもよい。これらカプセル基剤には必要に応じて、着色剤または保存剤（二酸化イオウ；パラオキシ安息香酸メチル、パラオキシ安息香酸エチル、パラオキシ安息香酸プロピル等のパラベン類）等を加えることができる。カプセル剤には、ハードカプセルまたはソフトカプセルが含まれる。

【0125】

経口投与のための内服用液剤としては、水剤、懸濁剤・乳剤、シロップ剤、ドライシロップ剤等の用時溶解型製剤、エリキシル剤等が挙げられる。このような内服用液剤においては、ＷＴ１タンパク質またはＷＴ１ペプチドは、内服用液剤で一般的に用いられる希釈剤に溶解、懸濁または乳化される。希釈剤としては、例えば、精製水、エタノールまたはそれらの混液等が挙げられる。さらにこの液剤は、湿潤剤、懸濁化剤、乳化剤、甘味剤、風味剤、芳香剤、保存剤または緩衝剤等を含有していてもよい。また、ドライシロップ剤は、例えばＷＴ１タンパク質またはＷＴ１ペプチドと、例えば、白糖、粉糖、ショ糖、果糖、ブドウ糖または乳糖等とを混合等して製造することができる。また、ドライシロップ剤は、常法に従って顆粒としてもよい。

【0126】

非経口投与のための剤型としては、注射剤、軟膏剤、ゲル剤、クリーム剤、貼付剤、噴霧剤、スプレー剤等が挙げられるが、注射剤が好ましい。例えば、ＷＴ１タンパク質またはＷＴ１ペプチドと慣用の担体と共に注射剤とされることが好ましい。

【0127】

非経口投与のための注射剤としては、水性注射剤または油性注射剤のいずれでもよい。水性注射剤とする場合、公知の方法に従って、例えば、水性溶媒（注射用水、精製水等）に、医薬上許容される添加剤を適宜添加した溶液に、ＷＴ１タンパク質またはＷＴ１ペプチドを混合した後、フィルター等で濾過して滅菌し、次いで無菌的な容器に充填することにより調製することができる。医薬上許容される添加剤としては、例えば、上述したアジュバント；塩化ナトリウム、塩化カリウム、グリセリン、マンニトール、ソルビトール、ホウ酸、ホウ砂、ブドウ糖、プロピレングリコール等の等張化剤；リン酸緩衝液、酢酸緩衝液、ホウ酸緩衝液、炭酸緩衝液、クエン酸緩衝液、トリス緩衝液、グルタミン酸緩衝液、イプシロンアミノカプロン酸緩衝液等の緩衝剤；パラオキシ安息香酸メチル、パラオキシ安息香酸エチル、パラオキシ安息香酸プロピル、パラオキシ安息香酸ブチル、クロロブタノール、ベンジルアルコール、塩化ベンザルコニウム、デヒドロ酢酸ナトリウム、エデト酸ナトリウム、ホウ酸、ホウ砂等の保存剤；ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビニルアルコール、ポリエチレングリコール等の増粘剤；亜硫酸水素ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、エデト酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム、アスコルビン酸、ジブチルヒドロキシトルエン等の安定化剤；塩酸、水酸化ナトリウム、リン酸、酢酸等のｐＨ調整剤等が挙げられる。また注射剤には、適当な溶解補助剤、例えば、エタノール等のアルコール；プロピレングリコール、ポリエチレングリコール等のポリアルコール；ポリソルベート８０、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油５０、リソレシチン、プルロニックポリオール等の非イオン界面活性剤等をさらに配合してもよい。また、例えば、ウシ血清アルブミン、キーホールリンペットヘモシアニン等のタンパク質；アミノデキストラン等のポリサッカリド等を含有してもよい。油性注射剤とする場合、油性溶媒としては、例えば、ゴマ油または大豆油等が用いられ、溶解補助剤として安息香酸ベンジルまたはベンジルアルコール等を配合してもよい。調製された注射液は、通常、適当なアンプルまたはバイアル等に充填される。注射剤等の液状製剤は、凍結保存または凍結乾燥等により水分を除去して保存することもできる。凍結乾燥製剤は、用時に注射用蒸留水等を加え、再溶解して使用される。

【0128】

また、本開示の予防または治療薬の他の形態として、リポソーム中へＷＴ１タンパク質またはＷＴ１ペプチドを混合し、さらに必要に応じて、多糖および／または癌ワクチン組成物中に配合される他の成分を含有させることもできる。

【0129】

本開示の予防または治療薬の投与量は、使用するＷＴ１タンパク質もしくはＷＴ１ペプチド、またはＤＮＡや、患者の年齢体重、対象疾患などによっても異なるが、例えば、ＷＴ１_１２６ペプチド、ＷＴ１_２３５ペプチド、ＷＴ１_３５ペプチドまたはＷＴ１_３３２ペプチド等のＷＴ１ペプチドを含むワクチン組成物の場合、ＷＴ１ペプチド量として、１日に体重あたり当り約０．１μｇ～１ｍｇ／ｋｇが好ましい。また、ＷＴ１ペプチドの投与量は、通常０．０００１ｍｇ～１０００ｍｇ、好ましくは０．０１ｍｇ～１０００ｍｇ、より好ましくは０．１ｍｇ～１０ｍｇであり、この量を数日～数カ月に１回投与するのが好ましい。

【0130】

さらに、本開示の予防または治療薬の投与方法として、良性腫瘍（例えば、家族性大腸腺腫症）の患者の末梢血からＰＢＭＣｓを集め、その中から樹状細胞を取り出し、本開示の予防または治療薬に有効成分として含まれるペプチド、例えば、ＷＴ１_１２６ペプチド、ＷＴ１_２３５ペプチド、ＷＴ１_３５ペプチドもしくはＷＴ１_３３２ペプチド、またはＤＮＡもしくはＲＮＡ等のポリヌクレオチドをパルスして患者に皮下投与などで患者に戻す方法も挙げられる。樹状細胞にＷＴ１ペプチド等をパルスする際の条件としては、本開示の効果を奏する限り特に限定されず、通常の条件を採用することができる。

【0131】

ＷＴ１タンパク質またはＷＴ１ペプチドをコードする核酸分子を予防または治療薬に用いる場合には、該核酸分子が良性腫瘍（例えば、家族性大腸腺腫症）の患者の樹状細胞に導入されるように予防または治療薬を投与することが好ましい。核酸分子を良性腫瘍（例えば、家族性大腸腺腫症）の患者の樹状細胞に導入する方法としては、例えば、上述したように良性腫瘍（例えば、家族性大腸腺腫症）の患者から樹状細胞を採取し、該樹状細胞に、電気パルスにより核酸分子を導入する方法が挙げられる。樹状細胞に導入された核酸分子から発現するＷＴ１タンパク質またはＷＴ１ペプチドは、該樹状細胞表面に提示されるため、核酸分子をパルスされた樹状細胞を良性腫瘍（例えば、家族性大腸腺腫症）の患者の体内に戻すことにより、生体内で速やかにがん免疫を生じさせることができる。このような、ＷＴ１タンパク質またはＷＴ１ペプチドをコードする核酸分子を被験体の樹状細胞に導入する、癌の治療または予防方法は、本開示の好ましい実施形態の１つである。上記の実施形態において、核酸分子としては、ＤＮＡおよびＲＮＡのいずれであってもよく、好ましくはＲＮＡである。

【0132】

本開示の別の態様は、被験体由来の末梢血単核球を、ＷＴ１タンパク質もしくはＷＴ１ペプチドの存在下で培養する、または、それらをコードする核酸分子を該末梢血単核球に導入することによって、該末梢血単核球からＷＴ１特異的ＣＴＬｓおよび／またはＷＴ１特異的ヘルパーＴ細胞を誘導する、ＷＴ１特異的ＣＴＬｓおよび／またはＷＴ１特異的ヘルパーＴ細胞の誘導方法に関する。末梢血単核球が由来する被験体は、特に限定されない。ＷＴ１タンパク質またはＷＴ１ペプチドとしては、ＷＴ１_１２６ペプチド、ＷＴ１_２３５ペプチド、ＷＴ１_３５ペプチドもしくはＷＴ１_３３２ペプチド、またはその改変ペプチドが挙げられ、ＷＴ１_１２６ペプチド、ＷＴ１_２３５ペプチド、ＷＴ１_３５ペプチドまたはＷＴ１_３３２ペプチドが好適である。例えば、被験体由来の末梢血単核球を、ＷＴ１_１２６ペプチドまたはＷＴ１_２３５ペプチドの存在下で培養することにより、末梢血単核球中のＣＴＬｓ前駆細胞からＷＴ１特異的ＣＴＬｓが誘導される。被験体由来の末梢血単核球を、ＷＴ１_３５ペプチドまたはＷＴ１_３３２ペプチドの存在下で培養した場合には、末梢血単核球中のヘルパーＴ細胞前駆細胞からＷＴ１特異的ヘルパーＴ細胞が誘導される。被験体由来の末梢血単核球の培養条件は特に限定されず、通常の条件で培養することができる。このように得られたＣＴＬｓおよびヘルパーＴ細胞は、それぞれＷＴ１_１２６ペプチド、ＷＴ１_２３５ペプチド、ＷＴ１_３５ペプチドおよびＷＴ１_３３２ペプチドを認識する。従って、本開示により誘導されるＷＴ１特異的ＣＴＬｓおよび／またはＷＴ１特異的ヘルパーＴ細胞を用いると、ＷＴ１高発現腫瘍細胞を特異的に傷害することができ、対象である良性腫瘍（例えば、家族性大腸腺腫症）を治療および／または予防することができる。ＷＴ１特異的ＣＴＬｓおよび／またはＷＴ１特異的ヘルパーＴ細胞を被験体に投与する方法としては特に限定されず、例えば、上述した予防または治療薬と同様にして投与することができる。

【0133】

本開示の別の態様は、ＷＴ１タンパク質またはＷＴ１ペプチドを必須構成成分として含む、ＷＴ１特異的ＣＴＬｓおよび／またはＷＴ１特異的ヘルパーＴ細胞を誘導するためのキットに関する。好ましくは、該キットは、上記被験体由来のＷＴ１特異的ＣＴＬｓおよび／またはＷＴ１特異的ヘルパーＴ細胞の誘導方法に用いられる。このようなキットは、ＷＴ１タンパク質またはＷＴ１ペプチドの他に、例えば、末梢血単核球の取得手段、アジュバント、反応容器などを含んでいてもよい。このようなキットを用いると、ＷＴ１_１２６ペプチド、ＷＴ１_２３５ペプチド、ＷＴ１_３５ペプチドまたはＷＴ１_３３２ペプチド等のがん抗原を認識するＷＴ１特異的ＣＴＬｓおよび／またはＷＴ１特異的ヘルパーＴ細胞を効率よく誘導することができる。

【0134】

本開示のさらに別の実施形態では、被験体由来の未熟樹状細胞を、ＷＴ１タンパク質もしくはＷＴ１ペプチドの存在下で培養する、またはそれらをコードする核酸分子を該未熟樹状細胞に導入することによって、該未熟樹状細胞から該ＷＴ１タンパク質またはＷＴ１ペプチドを提示する樹状細胞を誘導する、ＷＴ１タンパク質またはＷＴ１ペプチドを提示する樹状細胞の誘導方法に関する。ＷＴ１タンパク質またはＷＴ１ペプチドとしては、ＷＴ１_１２６ペプチド、ＷＴ１_２３５ペプチド、ＷＴ１_３５ペプチドもしくはＷＴ１_３３２ペプチドまたはその改変ペプチドが挙げられ、ＷＴ１_１２６ペプチド、ＷＴ１_２３５ペプチド、ＷＴ１_３５ペプチドまたはＷＴ１_３３２ペプチドが好適である。ＷＴ１タンパク質またはＷＴ１ペプチドをコードする核酸分子としては、ＷＴ１_１２６ペプチド、ＷＴ１_２３５ペプチド、ＷＴ１_３５ペプチドもしくはＷＴ１_３３２ペプチドまたはその改変ペプチドをコードするものが挙げられ、ＷＴ１_１２６ペプチド、ＷＴ１_２３５ペプチド、ＷＴ１_３５ペプチドまたはＷＴ１_３３２ペプチドをコードするものが好適である。核酸分子としてはＤＮＡおよびＲＮＡのいずれを使用してもよく、ＲＮＡが好適である。未熟樹状細胞が由来する被験体は、特に限定されない。未熟樹状細胞は、例えば、末梢血単核球などに含まれているため、かかる細胞をＷＴ１_１２６ペプチド、ＷＴ１_２３５ペプチド、ＷＴ１_３５ペプチドまたはＷＴ１_３３２ペプチドの存在下で培養してもよい。このように得られる樹状細胞を被験体に投与すると、上記ＷＴ１特異的ＣＴＬｓおよび／またはＷＴ１特異的ヘルパーＴ細胞が効率よく誘導され、それにより被験体の良性腫瘍（例えば、家族性大腸腺腫症）を治療および／または予防することができる。樹状細胞を被験体に投与する方法としては特に限定されず、例えば、上述した予防または治療薬と同様にして投与することができる。

【0135】

（好ましい実施形態）
以下に本開示の好ましい実施形態を説明する。以下に提供される実施形態は、本開示のよりよい理解のために提供されるものであり、本開示の範囲は以下の記載に限定されるべきでないことが理解される。従って、当業者は、本明細書中の記載を参酌して、本開示の範囲内で適宜改変を行うことができることは明らかである。また、本開示の以下の実施形態は単独でも使用されあるいはそれらを組み合わせて使用することができることが理解される。

【0136】

また、以下で説明する実施の形態は、いずれも包括的または具体的な例を示すものである。以下の実施の形態で示される数値、形状、材料、構成要素、ステップ、ステップの順序などは一例であり、請求の範囲を限定する主旨ではない。また、以下の実施の形態における構成要素のうち、最上位概念を示す独立請求項に記載されていない構成要素については、任意の構成要素として説明される。

【0137】

（予防または治療薬）
一つの局面において、本開示は、ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体を含む、良性腫瘍の予防または治療薬を提供する。ＷＴ１は、悪性腫瘍のがん細胞において高発現していることは示されていたが、良性腫瘍における発現は未知であった。本開示は、良性腫瘍の細胞においてＷＴ１タンパク質が発現するとの驚くべき発見に基づくものであり、良性腫瘍の新たな治療法を提供するものである。

【0138】

１つの実施形態では、本開示の良性腫瘍は、ＷＴ１を発現する。理論に拘束されるものではないが、本開示のＷＴ１ペプチドは、がん抗原として作用し、ＣＴＬｓの細胞傷害活性および／またはヘルパーＴ細胞の活性を増強させることによって、良性腫瘍の細胞に対する細胞傷害活性を発揮するため、本開示のＷＴ１ペプチドワクチンは、ＷＴ１を発現する良性腫瘍に対して、治療有効性を有する。また、ＷＴ１タンパク質の発現は、特定の良性腫瘍に限定されるものではなく、遺伝性・非遺伝性の種々の良性腫瘍において認められるものである。したがって、遺伝性のみならず、後天的な良性腫瘍であっても、ＷＴ1タンパク質が発現することがあり、そのようなタイプの良性腫瘍については、本開示の技術を用いて治療または予防することができることが理解される。１つの実施形態では、良性腫瘍は、家族性大腸腺腫症、非遺伝性の大腸腺腫、膵管内乳頭粘液性腫瘍、脳の髄膜腫、神経鞘腫、各臓器の上皮性の腺腫、乳頭腫、非上皮性の筋腫、脂肪腫、軟骨腫、および血管腫からなる群より選択される。

【0139】

一つの実施形態において、本開示は、ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体を含む、家族性大腸腺腫症の予防または治療薬を提供する。ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体は、血管新生病の治療に有効であることが示されているが、難治性でありこれまで切除しか事実上治療法がなかった家族性大腸腺腫症の治療または予防に効果があるとは予想し得なかった。本開示は、切除しか事実上治療法がなかった家族性大腸腺腫症に新たな治療法を提供するものであり、切除を必要としない治療または予防であって、Ｑｕａｌｉｔｙ ｏｆ Ｌｉｆｅ（ＱＯＬ）の改善に資するものとして有用である。

【0140】

１つの実施形態では、本開示のＷＴ１ペプチドは、１種類であってもよく、複数種類であってもよい。また、本開示の医薬または組成物に使用するＷＴ１ペプチドはキラーＷＴ１ペプチドであってもよく、あるいはヘルパーＷＴ１ペプチドであってもよく、これらを混合して用いてもよい。より好ましくは、キラー型ＷＴ１ペプチドおよびヘルパー型のＷＴ１ペプチドの両方を含むことが好ましい。本開示ではＷＴ１ペプチドの二量体を用いてもよい。ＷＴ１ペプチドの二量体は、システイン残基を有する２つのＷＴ１ペプチド間にジスルフィド結合を形成させることによって得てもよい。本開示の医薬組成物に使用するＷＴ１ペプチドは１種類であってもよく、あるいは複数種類であってもよい。

【0141】

ＷＴ１ペプチドが対象において治療または予防効果を発揮するかどうかは、ＷＴ１ペプチドが対象のＨＬＡ型に対応するかどうかによる。現在、多くのＷＴ１ペプチドに関して、どのＨＬＡ型に適合するのか知られているので、本開示に用いるＷＴ１ペプチドを、対象のＨＬＡ型に応じて選択することができる。また、本開示の医薬組成物に複数種類のＷＴ１ペプチドを使用して、幅広い対象に対応するようにしてもよい。

【0142】

１つの好ましい実施形態では、本開示において使用されるＷＴ１ペプチドは、ＷＴ１_１２６キラーペプチド、ＷＴ１_２３５キラーペプチド、ＷＴ１_３５ヘルパーペプチドおよび／またはＷＴ１_３３２ヘルパーペプチドである。好ましくは、このＷＴ１ペプチドは、ＷＴ１_１２６ペプチドおよびＷＴ１_２３５ペプチドから選択されるキラーペプチドと、ＷＴ１_３５およびＷＴ１_３３２ペプチドから選択されるヘルパーペプチドとの両方を含む。理論に束縛されることを望まないが、本開示において、ＷＴ１ペプチドは、キラーペプチドおよびヘルパーペプチドを含むと、単独で用いる効果を超える効果があることが分かった。

【0143】

別の局面では、本開示のＷＴ１ペプチドは、式（３）で表される化合物およびＷＴ１_３５ヘルパーペプチドの両方を含む。上記式（３）で表される化合物とＷＴ１_３５ヘルパーペプチドとの組み合わせは、出願人の知る限り、良性腫瘍に対して予防および／または治療有効性を奏することは知られていなかった。

【0144】

別の局面では、本開示は、ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体をコードする核酸分子を含む、良性腫瘍の予防または治療薬を提供する。

【0145】

ある実施形態では、本開示は、ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体をコードする核酸分子を含む、家族性大腸腺腫症の予防または治療薬を提供する。この場合、本開示の医薬組成物中の有効成分は、ＷＴ１ペプチドをコードするポリヌクレオチドであるということができるが、これに限定されない。ポリヌクレオチドの塩基配列は、ＷＴ１ペプチドのアミノ酸配列に基づき決定することができる。ポリヌクレオチドは、例えば、化学合成法などの公知のＤＮＡまたはＲＮＡ合成方法、ＰＣＲ法などにより製造することができる。

【0146】

一つの実施形態では、本開示の予防または治療薬は、上記ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体をコードするＤＮＡを含む。

【0147】

別の実施形態では、本開示の予防または治療薬は、上記ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体をコードするＲＮＡを含む。

【0148】

別の実施形態では、本開示の予防または治療薬は、上記ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体をコードするＲＮＡおよびＤＮＡを含む。

【0149】

１つの実施形態では、本開示の予防または治療薬は、上記に加えてアジュバントを含む。

【0150】

１つの好ましい実施形態では、本開示において使用されるアジュバントは、Ｍｏｎｔａｎｉｄｅ（登録商標） ＩＳＡ５１アジュバントを含む。

【0151】

１つの実施形態では、本開示の予防または治療薬は、１週間に１回投与される。

【0152】

本開示の医薬または組成物を、良性腫瘍（例えば、家族性大腸腺腫症）の治療および予防のいずれかまたは両方に用いられる医薬と併用してもよい。

【0153】

本開示の医薬または組成物の投与経路は特に限定されないが、好ましい投与経路の例として皮内投与、皮下投与、経皮投与、経粘膜投与（例えば、点眼、点鼻、舌下など）が挙げられる。

【0154】

本開示の医薬または組成物の剤形は特に限定されず、例えば注射用液剤、点眼用液剤、点鼻用液剤、ローション剤、クリーム剤、パッチ剤、舌下錠、トローチなどの剤形であってもよい。これらの剤形は当業者によく知られた方法により製造することができ、投与することができる。

【0155】

本開示の医薬または組成物を用いる場合のＷＴ１ペプチドの投与量は、ＷＴ１ペプチドの種類、投与経路、剤形、疾患の種類、疾患の程度、対象の健康状態などを考慮して、適宜変更することができる。一般的には、ＷＴ１ペプチドの投与量は成人１日当たり０．１μｇ／ｋｇ～１ｍｇ／ｋｇである。ＷＴ１ペプチドの種類、投与経路、剤形についても同様に適宜変更することができる。本開示の医薬または組成物は、医薬上許容される担体や賦形剤のほかに、例えば水酸化アルミニウムのごとき適当なアジュバントを含んでいてもよい。あるいは本開示の医薬または組成物は、リポソーム中に封入されたＷＴ１ペプチドを含むものであってもよい。

【0156】

本実施形態においては、例えば、式（２）または式（３）に示す化合物であるＷＴ１ペプチドの投与量は、導入期においては成人１日当たり３．５ｍｇを2週間おきに計１～５回皮内に投与し、維持期においては成人１日当たり３．５ｍｇを1ヶ月または２ヶ月おきに計３～６回皮内に投与することができる。

【0157】

投与量は、成人１日当たり１．０ｍｇ以上、２．５ｍｇ以上、５．０ｍｇ以上、１０ｍｇ以上、１５ｍｇ以上、２０ｍｇ以上もしくは２５ｍｇ以上、または１００ｍｇ以下、５０ｍｇ以下、４０ｍｇ以下、３０ｍｇ以下、２５ｍｇ以下、２０ｍｇ以下、１５ｍｇ以下、１０ｍｇ以下、５．０ｍｇ以下もしくは２．５ｍｇ以下の範囲で投与することができる。具体的な投与量は、例えば成人１日当たり０．５ｍｇ、１．０ｍｇ、１．５ｍｇ、２．０ｍｇ、２．５ｍｇ、３．０ｍｇ、３．５ｍｇ、４．０ｍｇ、４．５ｍｇ、５．０ｍｇ、５．５ｍｇ、６．０ｍｇ、６．５ｍｇ、７．０ｍｇ、７．５ｍｇ、８．０ｍｇ、８．５ｍｇ、９．０ｍｇ、９．５ｍｇまたは１０ｍｇ等であってもよい。

【0158】

投与間隔は、１週間～１年の間で適宜選択することができ、例えば、１日以上、１週間以上、２週間以上、３週間以上、１ヶ月以上、２ヶ月以上、３ヶ月以上、４ヶ月以上、５ヶ月以上もしくは６ヶ月以上、または１年以下、９ヶ月以下、６ヶ月以下、５ヶ月以下、４ヶ月以下、３ヶ月以下、２ヶ月以下、１ヶ月以下、３週間以下、２週間以下もしくは１週間以下の間隔で投与することができる。具体的は投与間隔としては、例えば、１日、３日、５日、１週間、２週間、３週間、１ヶ月、２ヶ月、３ヶ月、４ヶ月、５ヶ月、６ヶ月、９ヶ月または１年等であってもよい。

【0159】

投与回数は、計１～１００回の間で適宜選択することができ、例えば、１回以上、２回以上、３回以上、４回以上、５回以上、６回以上、７回以上、８回以上、９回以上もしくは１０回以上、または１００回以下、５０回以下、４０回以下、３０回以下、２０回以下、１５回以下、１０回以下、９回以下、８回以下、７回以下、６回以下、５回以下、４回以下、３回以下もしくは２回以下の回数で投与することができる。具体的な投与回数としては、例えば１回、２回、３回、４回、５回、６回、７回、８回、９回、１０回、１１回または１２回等であってもよい。

【0160】

別の局面において、本開示は、良性腫瘍（例えば、家族性大腸腺腫症）の治療及び予防のいずれか又は両方のための、ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体、あるいはＷＴ１ペプチドまたはその類縁体をコードする核酸分子を提供する。

【0161】

さらに別の局面において、本開示は、良性腫瘍（例えば、家族性大腸腺腫症）の治療及び予防のいずれかまたは両方のため、あるいは、良性腫瘍（例えば、家族性大腸腺腫症）の治療及び予防のいずれかまたは両方のための医薬組成物の製造のためのＷＴ１ペプチドまたはその類縁体、あるいはＷＴ１ペプチドまたはその類縁体をコードする核酸分子の使用に関する。本開示はさらに、ＷＴ１ペプチドまたはその類縁体、あるいはＷＴ１ペプチドまたはその類縁体をコードする核酸分子の有効量をそれを必要とする被検体に投与する工程を含む、良性腫瘍（例えば、家族性大腸腺腫症）の治療及び予防のいずれかまたは両方のための方法を提供する。さらなる態様において、本開示は、良性腫瘍（例えば、家族性大腸腺腫症）の治療及び予防のいずれかまたは両方のための医薬の製造のためのＷＴ１ペプチドまたはその類縁体、あるいはＷＴ１ペプチドまたはその類縁体をコードする核酸分子の使用に関する。さらに別の局面において、本開示は、良性腫瘍（例えば、家族性大腸腺腫症）の治療および予防のいずれかまたは両方を必要とする対象にＷＴ１ペプチドまたはその類縁体、あるいはＷＴ１ペプチドまたはその類縁体をコードする核酸分子を投与することを特徴とする、良性腫瘍（例えば、家族性大腸腺腫症）の治療及び予防のいずれかまたは両方のための方法も関する。これらの局面においても、本明細書に記載される上記を含むすべての説明があてはまる。

【0162】

（免疫細胞の誘導方法）
別の局面において、本開示は、良性腫瘍（例えば、家族性大腸腺腫症）の処置を必要とする被験体由来の末梢血単核球を、本明細書に記載のいずれかのＷＴ１ペプチドまたはその類縁体の存在下で培養する、または、それらをコードする核酸分子を上記末梢血単核球に導入することによって、上記末梢血単核球からＷＴ１特異的細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＴＬｓ）、および／またはＷＴ１特異的ヘルパーＴ細胞を誘導する工程を含むことを特徴とする、良性腫瘍（例えば、家族性大腸腺腫症）の予防または治療のために使用するＷＴ１特異的ＣＴＬｓおよび／またはＷＴ１特異的ヘルパーＴ細胞の誘導方法を提供する。（予防または治療薬）に記載される任意の説明は、この誘導方法においても当てはまることが当業者に理解される。

【0163】

別の局面において、本開示は、良性腫瘍（例えば、家族性大腸腺腫症）の処置を必要とする被験体由来の未熟樹状細胞を、本明細書に記載のいずれかのＷＴ１ペプチドまたはその類縁体の存在下で培養する、またはそれらをコードする核酸分子を上記未熟樹状細胞に導入することによって、ＷＴ１提示樹状細胞を誘導する工程を含むことを特徴とする、良性腫瘍（例えば、家族性大腸腺腫症）の予防または治療のために使用するＷＴ１提示樹状細胞の誘導方法を提供する。（予防または治療薬）に記載される任意の説明は、この誘導方法においても当てはまることが当業者に理解される。

【0164】

別の局面において、本開示は、ＷＴ１ペプチドもしくはその類縁体、またはそれをコードする核酸分子を含む、良性腫瘍（例えば、家族性大腸腺腫症）の予防または治療のために使用する、ＷＴ１特異的細胞傷害性Ｔ細胞、および／またはＷＴ１特異的ヘルパーＴ細胞を誘導するための組成物を提供する。（予防または治療薬）に記載される任意の説明は、この組成物においても当てはまることが当業者に理解される。

【0165】

さらに別の局面において、本開示は、ＷＴ１ペプチドもしくはその類縁体、またはそれをコードする核酸分子を含む、良性腫瘍（例えば、家族性大腸腺腫症）の予防または治療のために使用する、ＷＴ１提示樹状細胞を誘導するための組成物を提供する。（予防または治療薬）に記載される任意の説明は、この組成物においても当てはまることが当業者に理解される。

【0166】

さらに別の局面において、本開示は、ＷＴ１特異的細胞傷害性Ｔ細胞、および／またはＷＴ１特異的ヘルパーＴ細胞を含む、良性腫瘍（例えば、家族性大腸腺腫症）の予防または治療のための組成物を提供する。（予防または治療薬）に記載される任意の説明は、この組成物においても当てはまることが当業者に理解される。

【0167】

さらに別の局面において、本開示は、ＷＴ１提示樹状細胞を含む、良性腫瘍（例えば、家族性大腸腺腫症）の予防または治療のための組成物を提供する。（予防または治療薬）に記載される任意の説明は、この組成物においても当てはまることが当業者に理解される。

【0168】

（製造方法）
本開示のペプチドまたは誘導体、あるいは核酸分子は、当技術分野において通常用いられる製造法によって製造することができる。これらの製造法は、免疫学的手法、分子生物学的手法、生化学的手法、微生物学的手法に習熟している者の知識に基づき、適宜改良することができる。具体的には、本開示のペプチドまたは誘導体、あるいは核酸分子は、天然のＷＴ１タンパク質のアミノ酸配列（例えば、配列番号１）または核酸配列に基づく設計を行ってもよく、微生物発現系などによって、製造してもよい。製造法における出発原料および中間体は、市販品として購入可能であるか、または公知文献に記載された方法もしくは公知化合物から公知の方法に準じて入手可能である。また、これらの出発原料および中間体は、製造工程に支障をきたさない限り、それらの類縁体を用いてもよい。

【0169】

（一般技術）
本明細書において用いられる免疫学的手法、分子生物学的手法、生化学的手法、微生物学的手法は、当該分野において周知であり慣用されるものであり、Sambrook J. et al.(1989). Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harborおよびその3rd Ed.(2001); Ausubel, F.M.(1987).Current Protocols in Molecular Biology, Greene Pub. Associates and Wiley-Interscience; Ausubel, F.M.(1989). Short Protocols in Molecular Biology: A Compendium of Methods from Current Protocols in Molecular Biology, Greene Pub. Associates and Wiley-Interscience; Innis, M.A.(1990).PCR Protocols: A Guide to Methods and Applications, Academic Press; Ausubel, F.M.(1992).Short Protocols in Molecular Biology: A Compendium of Methods from Current Protocols in Molecular Biology, Greene Pub. Associates; Ausubel, F.M. (1995).Short Protocols in Molecular Biology: A Compendium of Methods from Current Protocols in Molecular Biology, Greene Pub. Associates; Innis, M.A. et al.(1995).PCR Strategies, Academic Press; Ausubel, F.M.(1999).Short Protocols in Molecular Biology: A Compendium of Methods from Current Protocols in Molecular Biology, Wiley, and annual updates; Sninsky, J.J. et al.(1999). PCR Applications: Protocols for Functional Genomics, Academic Press、別冊実験医学「遺伝子導入＆発現解析実験法」羊土社、1997などに記載されており、これらは本明細書において関連する部分（全部であり得る）が参考として援用される。

【0170】

（注記）
本明細書において「または」は、文章中に列挙されている事項の「少なくとも１つ以上」を採用できるときに使用される。「もしくは」も同様である。本明細書において「２つの値の範囲内」と明記した場合、その範囲には２つの値自体も含む。

【0171】

本明細書において引用された、科学文献、特許、特許出願などの参考文献は、その全体が、各々具体的に記載されたのと同じ程度に本明細書において参考として援用される。

【0172】

以上、本開示を、理解の容易のために好ましい実施形態を示して説明してきた。以下に、実施例に基づいて本開示を説明するが、上述の説明および以下の実施例は、例示の目的のみに提供され、本開示を限定する目的で提供したのではない。従って、本開示の範囲は、本明細書に具体的に記載された実施形態にも実施例にも限定されず、特許請求の範囲によってのみ限定される。

【実施例】

【0173】

以下に実施例を記載する。以下の実施例で用いる生物の取り扱いは、必要な場合、大阪大学や監督官庁において規定される基準を遵守した。試薬類は具体的には実施例中に記載した製品を使用したが、他メーカー（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ、富士フイルム和光純薬、ナカライテスク、Ｒ＆ＤＳｙｓｔｅｍｓ、ＵＳＣＮ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ＩＮＣ、Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、関東化学、フナコシ、東京化成、Ｍｅｒｃｋ等）の同等品でも代用可能である。

【0174】

（マウス）
以下の実施例において、マウスは、Ａｐｃ^{Ｍｉｎ／＋}（Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ）マウス（Ｊａｃｋｓｏｎ研究所、Ｂａｒ Ｈａｒｂｏｒ、Ｍａｉｎｅ、ＵＳＡ）を使用した。マウスは、大阪大学動物実験規程を遵守し、大阪大学医学部付属動物実験施設の特定微生物フリー（ＳＰＦ）封じ込め施設にて飼育した。

【0175】

（試薬）
以下の実施例において、ＭＨＣ ｃｌａｓｓ Ｉ（Ｈ－２Ｄ^ｂ）－結合ペプチドであるＷＴ１_{１２６－１３４}（ＲＭＦＰＮＡＰＹＬ、９ａ．ａ）、およびＭＨＣ ｃｌａｓｓ ＩＩ（Ｈ－２Ｉ－Ａ^ｂ）－結合ペプチドであるＷＴ１_{３５－５２}（ＷＡＰＶＬＤＦＡＰＰＧＡＳＡＹＧＳＬ、１８ａ．ａ．）は、ＳＩＧＭＡ Ｇｅｎｏｓｙｓ（石狩、日本）から購入した。式（３）の化合物およびＷＴ１_{３５－５２} ヘルパーペプチドの混合物に用いる各原料は、大日本住友製薬株式会社（大阪、日本）より供与された。ペプチドは、使用まで－２０℃において保存した。ペプチドはリン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ；１３７ｍＭ ＮａＣｌ、２．７ｍＭ ＫＣｌ、８．１ｍＭ Ｎａ_２ＨＰＯ_４、１．４７ｍＭ ＫＨ_２ＰＯ_４）に溶解し、－２０℃で保存した。フロインドの不完全アジュバント（ＩＦＡ）、Ｍｏｎｔａｎｉｄｅ ＩＳＡ ５１は、Ｓｅｐｐｉｃ Ｓ．Ａ．（Ｏｒｓａｙ、Ｆｒａｎｃｅ）より購入した。

【0176】

（実施例１：家族性大腸腺腫症の腺腫におけるＷＴ１タンパク質の発現）
本実施例では、ヒト家族性大腸腺腫症患者の腺腫において、ＷＴ１タンパク質が発現されたことを示す。

【0177】

（実験手法）
家族性大腸腺腫症のヒト患者の小腸および大腸を、ホルマリンにより固定後、パラフィンで包埋し、パラフィンブロックを３μｍの厚さに薄切した。内因性ペルオキシダーゼ反応を軽減させるため、パラフィン切片を３％ Ｈ_２Ｏ_２溶液で処理後、キシレンで脱パラフィンし、エタノールで段階的に再水和した後、１０ｍＭのトリスＥＤＴＡ緩衝液（（１０ｍＭ Ｔｒｉｓ、１ｍＭ ＥＤＴＡ（ｐＨ９．０））中で、オイルバスにおいて７０℃で２５分間、１１０℃で２５分間加熱し、３時間室温で冷まして抗原賦活化した。処理した切片を、ＰＢＳＴ（ＰＢＳ＋０．０５％ Ｔｗｅｅｎ２０（登録商標））で１００倍希釈した抗ＷＴ１ ６ＦＨ２マウス単クローン抗体（Ｄａｋｏ Ｃｙｔｏｍａｔｉｏｎ，Ｉｎｃ．、Ｃａｒｐｉｎｔｅｒｉａ、ＣＡ）により、４℃で一晩反応させた。その後、Ｄａｋｏ ＲＥＡＬ Ｅｎｖｉｓｉｏｎ ＨＲＰ ＲＡＢＢＩＴ／ＭＯＵＳＥ（Ｄａｋｏ Ｃｙｔｏｍａｔｉｏｎ）を３７℃で３０分間反応させた。Ｄａｋｏ ＲＥＡＬ Ｅｎｖｉｓｉｏｎ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ Ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ／ＤＡＢ＋、Ｒａｂｂｉｔ／Ｍｏｕｓｅ（Ｄａｋｏ Ｃｙｔｏｍａｔｉｏｎ）を用い、取扱説明書に従い、ＷＴ１タンパク質を可視化させた。その後切片をヘマトキシリン染色した。

【0178】

（結果）
実施例１の結果を、表２および図１に示す。表２は、各患者由来の標本における、腺腫、正常腺管および線維芽細胞におけるＷＴ１タンパク質の発現量を示す。表２において、腺腫におけるＷＴ１タンパク質の発現量が、正常腺管における発現量よりも顕著に増大していることが示される。図１において、薄い染色はＷＴ１タンパク質を示し、濃く円形に染色された領域は核を示す。腺腫においてはＷＴ１タンパク質の発現が認められたが、正常腺管においては、ＷＴ１タンパク質の発現が認められなかった。

【0179】

【表2】

【0180】

（実施例２：ＡＰＣ^{Ｍｉｎ／＋}マウスにおけるＷＴ１タンパク質の発現）
本実施例では、家族性大腸腺腫症のモデルマウスであるＡＰＣ^{Ｍｉｎ／＋}マウスの小腸腺腫において、ＷＴ１タンパク質が発現したことを示す。

【0181】

（実験手法）
２０週齢のＡｐｃ^{Ｍｉｎ／＋}（Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ）マウスの小腸および大腸を、ホルマリンにより固定後、パラフィンで包埋し、パラフィンブロックを３μｍの厚さに薄切した。パラフィン切片をキシレンで脱パラフィンし、エタノールで段階的に再水和した後、１０ｍＭのクエン酸緩衝液（（１０ｍＭ クエン酸ナトリウム、０．０５％ Ｔｗｅｅｎ２０（ｐＨ６．０））中で、１５分間マイクロ波を照射し、抗原賦活化した。処理した切片を、ヤギ血清含有ＰＢＳで１００倍希釈した抗ＷＴ１ ６ＦＨ２マウス単クローン抗体（Ｄａｋｏ Ｃｙｔｏｍａｔｉｏｎ，Ｉｎｃ．、Ｃａｒｐｉｎｔｅｒｉａ、ＣＡ）により、４℃で一晩反応させた。そして、ヤギ血清含有ＰＢＳで１００倍希釈したビオチン化抗マウスＩｇＧ抗体（Ｖｅｃｔｏｒ Ｌａｂｓ．、Ｂｕｒｌｉｎｇａｍｅ、ＣＡ）を、３７℃で３０分間反応させた。内因性ペルオキシダーゼ反応を軽減させるため、３％ Ｈ_２Ｏ_２溶液で処理後、Ｖｅｃｔａｓｔａｉｎ ＡＢＣ ｋｉｔ（Ｖｅｃｔｏｒ Ｌａｂｓ．）を用い、取扱説明書に従い、ＷＴ１タンパク質を可視化させた。その後切片をヘマトキシリン染色した。

【0182】

（結果）
実施例２の結果を図２および３に示す。図２は、上から順に、５倍、１０倍、２０倍の倍率での顕微鏡写真を示し、図３は、４０倍の倍率での顕微鏡写真を示す。図２および３において、濃い染色はＷＴ１タンパク質を示し、円形に染色された領域は核を示す。家族性大腸腺腫症のモデルマウスであるＡｐｃ^{Ｍｉｎ／＋}マウスの小腸腺腫において、ＷＴ１タンパク質の発現が認められた。

【0183】

（実施例３：家族性大腸腺腫症モデルマウスに対するＷＴ１ペプチドワクチンの投与）
本実施例では、ＡＰＣ^{Ｍｉｎ／＋}マウスに、ＷＴ１ペプチドワクチンを投与した実験の投与スキームを示す。

【0184】

（実験手法）
ＷＴ１ペプチドワクチンの投与スキームを図４に示す。１００μｇのＷＴ１_{１２６－１３４} キラーペプチドと４５μｇのＷＴ１_{３５－５２} ヘルパーペプチドとの混合物、またはＰＢＳを、それぞれＩＦＡ Ｍｏｎｔａｎｉｄｅ ＩＳＡ５１アジュバントでエマルション化し、それぞれＷＴ１ペプチドワクチンまたはコントロールワクチンとした。４～５週齢のＡｐｃ^{Ｍｉｎ／＋}のマウスの脇腹に、ＷＴ１ペプチドワクチンまたはコントロールワクチンを皮内投与した。免疫は、生後５週目から開始し、１週間に１回の頻度で８回行った。最終免疫の１０日後に免疫したマウスを安楽死させ、さらなる解析を行った。なお、ＷＴ１ペプチドワクチンの投与は、以下の表３において示されるとおり、臓器傷害をもたらさないものであった。

【0185】

【表3】

【0186】

（実施例４：ＷＴ１ペプチドワクチンの投与による腺腫の予防および治療）
本実施例では、ＡＰＣ^{Ｍｉｎ／＋}マウスに、ＷＴ１ペプチドワクチンを投与することによって、腺腫の発症が予防され、腺腫を治療したことを示す。

【0187】

（実験手法）
実施例３に記載の投与スキームによって得られたマウスを使用した。最終免疫の１０日後に安楽死させたマウスから全腸を採取した。小腸は８～１０分画に分け、大腸は盲腸と上行結腸とに分けた。各分画は縦方向に切開し、ＰＢＳにて洗浄後、ろ紙に挟んで、４％パラホルムアルデヒド／リン酸緩衝液において、４℃で２４時間以上固定した。固定した腸組織は、１％ メチレンブルー液で染色後、実体顕微鏡下で観察し、腺腫（ポリープ）数を数えた。ＷＴ１ペプチドワクチン投与群とコントロールワクチン投与群との間の腺腫（ポリープ）数の差は、Ｓｔｕｄｅｎｔ’ｓ ｔ ｔｅｓｔにより統計解析した。

【0188】

（結果）
実施例４の結果を図５に示す。グラフの横軸は左側にＷＴ１ワクチンを投与した群を、右側にコントロールワクチンを投与した群を示し、縦軸は小腸あたりの腺腫数を示す。ＷＴ１ペプチドワクチン投与群では小腸あたりの腺腫数の平均値が約２９個であったのに対し、コントロールワクチン投与群では約３４個であり、ＷＴ１ペプチドワクチンの投与によって、腺腫の発症が有意に抑制され、さらに腺腫が治療されたことが示された。

【0189】

（実施例５：ＷＴ１ペプチドワクチンの投与によるＷＴ１テトラマー^＋ＣＤ３^＋ＣＤ８^＋Ｔ細胞の増加）
本実施例では、ＡＰＣ^{Ｍｉｎ／＋}マウスに、ＷＴ１ペプチドワクチンを投与することによって、ＷＴ１テトラマー^＋ＣＤ３^＋ＣＤ８^＋Ｔ細胞が増加したことを示す。

【0190】

（実験手法）
実施例３に記載の投与スキームによって得られたマウスを使用した。最終免疫の１０日後に安楽死させたマウスから脾細胞を採取した。赤血球を溶解後、細胞をＨ－２Ｄ^ｂ ＷＴ１ テトラマー（ＭＢＬ、愛知、日本）で染色し、さらに抗マウスＣＤ３抗体（１７Ａ２、ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ、Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ）および抗マウスＣＤ８抗体（ＫＴ１５、ＭＢＬ、愛知、日本）で染色した。染色した細胞はＦＡＣＳＣａｎｔｏにて解析し、ＣＤ３^＋ＣＤ８^＋Ｔ細胞中のＨ－２Ｄ^ｂ ＷＴ１ テトラマー^＋ＣＤ３^＋ＣＤ８^＋Ｔ細胞の頻度を測定した。ＷＴ１ペプチドワクチン投与群とコントロールワクチン投与群との間のＨ－２Ｄ^ｂ ＷＴ１ テトラマー^＋ＣＤ３^＋ＣＤ８^＋Ｔ細胞の頻度の差は、Ｓｔｕｄｅｎｔ’ｓ ｔ ｔｅｓｔにより統計解析した。

【0191】

（結果）
実施例５の結果を図６に示す。グラフの横軸は左側にＷＴ１ペプチドワクチンを投与した群を、右側にコントロールワクチンを投与した群を示し、縦軸はＣＤ３^＋ＣＤ８^＋細胞中のＨ－２Ｄ^ｂ ＷＴ１ テトラマー頻度を示す。ＷＴ１ワクチン投与群では、ＣＤ３^＋ＣＤ８^＋Ｔ細胞中のＨ－２Ｄ^ｂ ＷＴ１ テトラマー^＋ＣＤ３^＋ＣＤ８^＋Ｔ細胞の頻度の平均値が約０．６％であったのに対し、コントロールワクチン投与群では約０．２％であり、ＷＴ１ワクチンの投与によって、ＷＴ１テトラマー^＋ＣＤ３^＋ＣＤ８^＋Ｔ細胞が増加したことが示された。

【0192】

（実施例６：統計解析）
本実施例では、実施例４における腺腫数と、実施例５におけるＷＴ１テトラマー^＋ＣＤ３^＋ＣＤ８^＋Ｔ細胞に相関が認められたことを示す。

【0193】

（実験手法）
実施例４から得られた小腸あたりの腺腫数と、実施例５から得られたＣＤ３^＋ＣＤ８^＋Ｔ細胞中のＨ－２Ｄ^ｂ ＷＴ１ テトラマー^＋ＣＤ３^＋ＣＤ８^＋Ｔ細胞の頻度とを、Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ Ｅｘｃｅｌ（登録商標）によって散布図にプロットした。さらにこれらの結果について、Ｅｘｃｅｌのピアソン相関係数によって相関関係を統計解析した。

【0194】

（結果）
実施例６の結果から、ＷＴ１ペプチドワクチン投与群とコントロールワクチン投与群の腺腫（ポリープ）数およびＷＴ１テトラマー頻度は、弱いながらも相関関係を示すことが認められた。

【0195】

（実施例７：単剤での実施例）
本実施例では、ＡＰＣ^{Ｍｉｎ／＋}マウスに、キラー型およびヘルパー型の両方のＷＴ１ペプチドワクチンを投与する場合と、キラー型またはヘルパー型のＷＴ１ペプチドワクチンの単剤のみを投与する場合との、腺腫の発症の予防および治療効果における比較を示す。
（実験手法）
ＷＴ１ペプチドワクチンの投与スキームを図８に示す。１００μｇのＷＴ１_{１２６－１３４} キラーペプチドと４５μｇのＷＴ１_{３５－５２} ヘルパーペプチドとの混合物、１００μｇのＷＴ１_{１２６－１３４} キラーペプチド単独、４５μｇのＷＴ１_{３５－５２} ヘルパーペプチド単独またはＰＢＳを、それぞれＩＦＡ Ｍｏｎｔａｎｉｄｅ ＩＳＡ５１アジュバントでエマルション化する。５週齢のＡｐｃ^{Ｍｉｎ／＋}のマウスの脇腹に、キラーペプチドとヘルパーペプチドとの混合物、キラーペプチド単独、ヘルパーペプチド単独、またはＰＢＳのみのコントロールワクチンを皮内投与する。免疫は、生後５週目から開始し、１週間に１回の頻度で８回行う。最終免疫の１０日後に免疫するマウスを安楽死させ、さらなる解析を行う。

【0196】

（実施例８：他の良性腫瘍でのＷＴ１の発現）
本実施例では、非遺伝性の大腸腺腫においても、ＷＴ１が発現することを示す。

【0197】

（実験手法）
非遺伝性の大腸腺腫を発症したヒト患者（３名）から腺腫組織を摘出し、実施例１と同様の手法によって、ＷＴ１タンパク質および核を染色した。

【0198】

（結果）
実施例８の結果を図９に示す。図９において、左から１番目は、正常腺管の顕微鏡画像を示し、右側の３枚の画像は、非遺伝性の大腸腺腫の腺腫組織の顕微鏡画像を示す。図９において、薄い染色はＷＴ１タンパク質を示し、濃く円形または楕円形に染色された領域は核を示す。腺腫においてはＷＴ１タンパク質の発現が認められたが、正常腺管においては、ＷＴ１タンパク質の発現が認められなかった。

【0199】

（実施例９：家族性大腸腺腫症モデルマウスに対する式（３）の化合物およびＷＴ１_{３５－５２} ヘルパーペプチドの混合物の投与）
本実施例では、ＡＰＣ^{Ｍｉｎ／＋}マウスに、ＷＴ１ペプチドワクチンである、式（３）の化合物およびＷＴ１_{３５－５２} ヘルパーペプチドの混合物を投与した実験の投与スキームを示す。

【0200】

（実験手法）
ＷＴ１ペプチドワクチンの投与スキームを図１０に示す。ＷＴ１ペプチドワクチンをＰＢＳで溶解し、ＷＴ１ペプチドワクチンを含む溶解液およびＰＢＳ単独を、ＩＦＡ Ｍｏｎｔａｎｉｄｅ ＩＳＡ５１アジュバントでエマルション化し、それぞれＷＴ１ペプチドワクチンまたはコントロールワクチンとした。４～５週齢のＡｐｃ^{Ｍｉｎ／＋}のマウスの脇腹に、ＷＴ１ペプチドワクチンまたはコントロールワクチンを皮内投与した。免疫は、生後４～５週目から開始し、１週間に１回の頻度で６回行った。最終免疫の７日後に免疫したマウスを安楽死させ、さらなる解析を行った。

【0201】

（実施例１０：式（３）の化合物およびＷＴ１_{３５－５２} ヘルパーペプチドの混合物の投与による腺腫の予防および治療）
本実施例では、ＡＰＣ^{Ｍｉｎ／＋}マウスに、式（３）の化合物およびＷＴ１_{３５－５２} ヘルパーペプチドの混合物を投与することによって、腺腫の発症が予防され、腺腫を治療したことを示す。なお、式（３）の化合物およびＷＴ１_{３５－５２} ヘルパーペプチドの混合物の投与は、以下の表４において示されるとおり、臓器傷害をもたらさないものであった。

【0202】

【表4】

【0203】

（実験手法）
実施例９に記載の投与スキームによって得られたマウスを使用した。最終免疫の７日後に安楽死させたマウスから各臓器を摘出し、その重量を測定した。小腸は８～１０分画に分けた。各分画は縦方向に切開し、ＰＢＳにて洗浄後、ろ紙に挟んで、４％パラホルムアルデヒド／リン酸緩衝液において、４℃で２４時間以上固定した。固定した腸組織は、１％ メチレンブルー液で染色後、実体顕微鏡下で観察し、腺腫（ポリープ）数を数えた。ＷＴ１ペプチドワクチン投与群とコントロールワクチン投与群との間の腺腫（ポリープ）数の差は、Ｓｔｕｄｅｎｔ’ｓ ｔ ｔｅｓｔにより統計解析した。

【0204】

（結果）
実施例１０の結果を図１１に示す。グラフの横軸は左側にＷＴ１ペプチドワクチンを投与した群を、右側にコントロールワクチンを投与した群を示し、縦軸は小腸あたりの腺腫数を示す。ＷＴ１ペプチドワクチン投与群では小腸あたりの腺腫数の平均値が約３７．２個であったのに対し、コントロールワクチン投与群では約４３．７個であった。したがって、ＷＴ１ペプチドワクチンの投与によって、腺腫の発症が抑制され、さらに腺腫が治療される傾向が認められた。

【0205】

（実施例１１：式（３）の化合物およびＷＴ１_{３５－５２} ヘルパーペプチドの混合物の投与によるＷＴ１テトラマー^＋ＣＤ３^＋ＣＤ８^＋Ｔ細胞の増加）
本実施例では、ＡＰＣ^{Ｍｉｎ／＋}マウスに、式（３）の化合物およびＷＴ１_{３５－５２} ヘルパーペプチドの混合物を投与することによって、ＷＴ１テトラマー^＋ＣＤ３^＋ＣＤ８^＋Ｔ細胞が増加したことを示す。

【0206】

（実験手法）
実施例９に記載の投与スキームによって得られたマウスを使用した。最終免疫の７日後に安楽死させたマウスから脾細胞を採取した。赤血球を溶解後、細胞をＨ－２Ｄ^ｂ ＷＴ１ テトラマー（ＭＢＬ、愛知、日本）で染色し、さらに抗マウスＣＤ３抗体（１７Ａ２、ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ、Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ）、抗マウスＣＤ８抗体（ＫＴ１５、ＭＢＬ、愛知、日本）および７－ＡＡＤ Ｖｉａｂｉｌｉｔｙ Ｓｔａｉｎｉｎｇ Ｓｏｌｕｔｉｏｎ（Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ、Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ）で染色した。染色した細胞はＦＡＣＳＣａｎｔｏにて解析し、７－ＡＡＤ^＋の死細胞分画を除去し、ＣＤ３^＋ＣＤ８^＋Ｔ細胞中のＨ－２Ｄ^ｂ ＷＴ１ テトラマー^＋ＣＤ３^＋ＣＤ８^＋Ｔ細胞の頻度を測定した。ＷＴ１ペプチドワクチン投与群とコントロールワクチン投与群との間のＨ－２Ｄ^ｂ ＷＴ１ テトラマー^＋ＣＤ３^＋ＣＤ８^＋Ｔ細胞の頻度の差は、Ｓｔｕｄｅｎｔ’ｓ ｔ ｔｅｓｔにより統計解析した。

【0207】

（結果）
実施例１１の結果を図１２に示す。グラフの横軸は左側にＷＴ１ペプチドワクチンを投与した群を、右側にコントロールワクチンを投与した群を示し、縦軸はＣＤ３^＋ＣＤ８^＋細胞中のＨ－２Ｄ^ｂ ＷＴ１ テトラマー頻度を示す。ＷＴ１ペプチドワクチン投与群では、ＣＤ３^＋ＣＤ８^＋Ｔ細胞中のＨ－２Ｄ^ｂ ＷＴ１ テトラマー^＋ＣＤ３^＋ＣＤ８^＋Ｔ細胞の頻度の平均値が約０．１３％であったのに対し、コントロールワクチン投与群では約０．０４％であり、ＷＴ１ペプチドワクチンの投与によって、ＷＴ１テトラマー^＋ＣＤ３^＋ＣＤ８^＋Ｔ細胞が増加したことが示された。

【0208】

（実施例１２：統計解析）
本実施例では、実施例１０における腺腫数と、実施例１１におけるＷＴ１テトラマー^＋ＣＤ３^＋ＣＤ８^＋Ｔ細胞に相関が認められたことを示す。

【0209】

（実験手法）
実施例１０から得られた小腸あたりの腺腫数と、実施例１１から得られたＣＤ３^＋ＣＤ８^＋Ｔ細胞中のＨ－２Ｄ^ｂ ＷＴ１ テトラマー^＋ＣＤ３^＋ＣＤ８^＋Ｔ細胞の頻度とを、Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ Ｅｘｃｅｌ（登録商標）によって散布図にプロットした。さらにこれらの結果について、Ｅｘｃｅｌのピアソン相関係数によって相関関係を統計解析した。

【0210】

（結果）
実施例１２の結果から、ＷＴ１ペプチドワクチン投与群とコントロールワクチン投与群の腺腫（ポリープ）数およびＷＴ１テトラマー頻度は、高い相関関係を示し、ＷＴ１特異的免疫が腫瘍の抑制に強く作用していることが実証された。

【0211】

（注記）
以上のように、本開示の好ましい実施形態を用いて本開示を例示してきたが、本開示は、特許請求の範囲によってのみその範囲が解釈されるべきであることが理解される。本明細書において引用した特許、特許出願および他の文献は、その内容自体が具体的に本明細書に記載されているのと同様にその内容が本明細書に対する参考として援用されるべきであることが理解される。本願は日本国特許庁に２０１８年１０月５日に提出された特願２０１８－１９０４６１に対して優先権主張を伴うものであり、その内容はすべて本明細書に対する参考として援用されるべきであることが理解される。

【産業上の利用可能性】

【0212】

本開示は、良性腫瘍（例えば、家族性大腸腺腫症）の予防、遅延および治療、ならびに良性腫瘍（例えば、家族性大腸腺腫症）の腺腫から生じた症状の予防、遅延および治療に有用である。本開示のＷＴ１ペプチドワクチンは、内視鏡的切除などの手術を回避し、重篤な副作用がなく、非常に安全性が高い点で有用性を有する。

【配列表フリーテキスト】

【0213】

配列番号１ ヒトＷＴ１タンパク質の全長アミノ酸配列
配列番号２ ヒトＷＴ１_１２６ペプチドのアミノ酸配列
配列番号３ ヒトＷＴ１_２３５ペプチドのアミノ酸配列
配列番号４ ヒトＷＴ１_３５ペプチドのアミノ酸配列
配列番号５ ヒトＷＴ１_３３２ペプチドのアミノ酸配列
配列番号６ ヒトＷＴ１_１２６Ｐ１Ｇペプチドのアミノ酸配列
配列番号７ ヒトＷＴ１_１２６Ｐ１Ａペプチドのアミノ酸配列
配列番号８ ヒトＷＴ１_１２６Ｐ１Ｖペプチドのアミノ酸配列
配列番号９ ヒトＷＴ１_１２６Ｐ１Ｌペプチドのアミノ酸配列
配列番号１０ ヒトＷＴ１_１２６Ｐ１Ｉペプチドのアミノ酸配列
配列番号１１ ヒトＷＴ１_１２６Ｐ１Ｍペプチドのアミノ酸配列
配列番号１２ ヒトＷＴ１_１２６Ｐ１Ｗペプチドのアミノ酸配列
配列番号１３ ヒトＷＴ１_１２６Ｐ１Ｆペプチドのアミノ酸配列
配列番号１４ ヒトＷＴ１_１２６Ｐ１Ｙペプチドのアミノ酸配列
配列番号１５ ヒトＷＴ１_１２６Ｐ２Ｖペプチドのアミノ酸配列
配列番号１６ ヒトＷＴ１_１２６Ｐ２Ｑペプチドのアミノ酸配列
配列番号１７ ヒトＷＴ１_１２６Ｐ２Ａペプチドのアミノ酸配列
配列番号１８ ヒトＷＴ１_１２６Ｐ２Ｌペプチドのアミノ酸配列
配列番号１９ ヒトＷＴ１_１２６Ｐ２Ｉペプチドのアミノ酸配列
配列番号２０ ヒトＷＴ１_１２６Ｐ３Ｉペプチドのアミノ酸配列
配列番号２１ ヒトＷＴ１_１２６Ｐ３Ｌペプチドのアミノ酸配列
配列番号２２ ヒトＷＴ１_１２６Ｐ３Ｇペプチドのアミノ酸配列
配列番号２３ ヒトＷＴ１_１２６Ｐ３Ａペプチドのアミノ酸配列
配列番号２４ ヒトＷＴ１_１２６Ｐ３Ｖペプチドのアミノ酸配列
配列番号２５ ヒトＷＴ１_１２６Ｐ３Ｍペプチドのアミノ酸配列
配列番号２６ ヒトＷＴ１_１２６Ｐ３Ｐペプチドのアミノ酸配列
配列番号２７ ヒトＷＴ１_１２６Ｐ３Ｗペプチドのアミノ酸配列
配列番号２８ ヒトＷＴ１_１２６Ｐ９Ｖペプチドのアミノ酸配列
配列番号２９ ヒトＷＴ１_１２６Ｐ９Ａペプチドのアミノ酸配列
配列番号３０ ヒトＷＴ１_１２６Ｐ９Ｉペプチドのアミノ酸配列
配列番号３１ ヒトＷＴ１_１２６Ｐ９Ｍペプチドのアミノ酸配列
配列番号３２ ヒトＷＴ１_１２６Ｐ１Ｄペプチドのアミノ酸配列
配列番号３３ ヒトＷＴ１_１２６Ｐ１Ｅペプチドのアミノ酸配列
配列番号３４ ヒトＷＴ１_１２６Ｐ１Ｈペプチドのアミノ酸配列
配列番号３５ ヒトＷＴ１_１２６Ｐ１Ｋペプチドのアミノ酸配列
配列番号３６ ヒトＷＴ１_１２６Ｐ１Ｎペプチドのアミノ酸配列
配列番号３７ ヒトＷＴ１_１２６Ｐ１Ｐペプチドのアミノ酸配列
配列番号３８ ヒトＷＴ１_１２６Ｐ１Ｑペプチドのアミノ酸配列
配列番号３９ ヒトＷＴ１_１２６Ｐ１Ｓペプチドのアミノ酸配列
配列番号４０ ヒトＷＴ１_１２６Ｐ１Ｔペプチドのアミノ酸配列
配列番号４１ ヒトＷＴ１_１２６Ｐ２Ｉ＆Ｐ９Ｉペプチドのアミノ酸配列
配列番号４２ ヒトＷＴ１_１２６Ｐ２Ｉ＆Ｐ９Ｖペプチドのアミノ酸配列
配列番号４３ ヒトＷＴ１_１２６Ｐ２Ｌ＆Ｐ９Ｉペプチドのアミノ酸配列
配列番号４４ ヒトＷＴ１_１２６Ｐ２Ｌ＆Ｐ９Ｖペプチドのアミノ酸配列
配列番号４５ ヒトＷＴ１_２３５ｍペプチドのアミノ酸配列
配列番号４６ ヒトＷＴ１_１２６ペプチドの改変体のアミノ酸配列
配列番号４７ ヒトＷＴ１_２３５ペプチドの改変体のアミノ酸配列
配列番号４８ ヒトＷＴ１_２３５ペプチドの改変体のアミノ酸配列
配列番号４９ ヒトＷＴ１_１２２ペプチドの改変体のアミノ酸配列
配列番号５０ ヒトＷＴ１_３５ペプチドの改変体のアミノ酸配列
配列番号５１ ヒトＷＴ１_３５ペプチドの改変体のアミノ酸配列
配列番号５２ ヒトＷＴ１_１０ペプチドのアミノ酸配列
配列番号５３ ヒトＷＴ１_１８７ペプチドのアミノ酸配列
配列番号５４ ヒトＷＴ１_１２６ペプチドの改変体のアミノ酸配列
配列番号５５ ヒトＷＴ１_２３５ペプチドの改変体のアミノ酸配列
配列番号５６ ヒトＷＴ１_２３５ペプチドの改変体のアミノ酸配列
配列番号５７ ヒトＷＴ１_２３５ペプチドの改変体のアミノ酸配列
配列番号５８ ヒトＷＴ１_１０ペプチドの改変体のアミノ酸配列
配列番号５９ ヒトＷＴ１_１８７ペプチドの改変体のアミノ酸配列
配列番号６０ ヒトＷＴ１_１８７ペプチドの改変体のアミノ酸配列
配列番号６１ ヒトＷＴ１_１２６ペプチドの改変体のアミノ酸配列
配列番号６２ ヒトＷＴ１_１２２ペプチドの改変体のアミノ酸配列
配列番号６３ ヒトＷＴ１_３５ペプチドの改変体のアミノ酸配列
配列番号６４ ヒトＷＴ１_３５ペプチドの改変体のアミノ酸配列
配列番号６５ ヒトＷＴ１_３５ペプチドの改変体のアミノ酸配列
配列番号６６ ヒトＷＴ１_３５ペプチドの改変体のアミノ酸配列
配列番号６７ ヒトＷＴ１_３５ペプチドの改変体のアミノ酸配列
配列番号６８ ヒトＷＴ１_３７ペプチドのアミノ酸配列
配列番号６９ ヒトＷＴ１_１２２ペプチドのアミノ酸配列
配列番号７０ ヒトＷＴ１_１２２ペプチドの改変体のアミノ酸配列
配列番号７１ ヒトＷＴ１_１２２ペプチドの改変体のアミノ酸配列
配列番号７２ ヒトＷＴ１_１２２ペプチドの改変体のアミノ酸配列

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】

【配列表】

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