特許 7397562 腰痛改善剤

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】特許公報(B2)

(11)【特許番号】

(24)【登録日】2023-12-05

(45)【発行日】2023-12-13

(54)【発明の名称】腰痛改善剤

(51)【国際特許分類】

   A61K 35/20 20060101AFI20231206BHJP

   A23J 7/00 20060101ALI20231206BHJP

   A23L 33/12 20160101ALI20231206BHJP

   A61K 9/20 20060101ALI20231206BHJP

   A61K 31/685 20060101ALI20231206BHJP

   A61K 31/688 20060101ALI20231206BHJP

   A61P 19/00 20060101ALI20231206BHJP

   A61P 21/00 20060101ALI20231206BHJP

【ＦＩ】

A61K35/20

A23J7/00

A23L33/12

A61K9/20

A61K31/685

A61K31/688

A61P19/00

A61P21/00

【請求項の数】 12

(21)【出願番号】P 2016146127

(22)【出願日】2016-07-26

(65)【公開番号】P2018016556

(43)【公開日】2018-02-01

【審査請求日】2019-06-17

【審判番号】

【審判請求日】2022-04-11

(73)【特許権者】

【識別番号】000000918

【氏名又は名称】花王株式会社

(74)【代理人】

【識別番号】110000084

【氏名又は名称】弁理士法人アルガ特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】峯岸 慶彦

(72)【発明者】

【氏名】曽我 聡子

(72)【発明者】

【氏名】太田 宣康

【合議体】

【審判長】冨永 みどり

【審判官】星 功介

【審判官】齋藤 恵

(56)【参考文献】

【文献】特表２０１４－５１６５６５（ＪＰ，Ａ）

【文献】特開２００１－１５８７３６（ＪＰ，Ａ）

【文献】Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ａｎｄ Ｂｉｏｃｈｅｍｎｉｓｔｒｙ，２０１５，Ｖｏｌ．７９，Ｎｏ．７，ｐ．１１７２－１１７７

【文献】ミルクサイエンス，２００９，Ｖｏｌ．５８，Ｎｏ．３，ｐ．１３５－１４１

(58)【調査した分野】(Int.Cl.，ＤＢ名)

A61K35/

A61K31/

A23L

ＰｕｂＭｅｄ

ＣＡｐｌｕｓ／ＢＩＯＳＩＳ／ＭＥＤＬＩＮＥ／ＷＰＩＤＳ／ＷＰＩＸ（ＳＴＮ）

ＪＳＴＰｌｕｓ／ＪＭＥＤＰｌｕｓ／ＪＳＴ７５８０（ＪＤｒｅａｍＩＩＩ）

ＤＷＰＩ（Ｄｅｒｗｅｎｔ Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎ）

(57)【特許請求の範囲】

【請求項1】

乳脂肪球皮膜を有効成分とする腰痛改善剤（但し、骨形成と骨吸収のアンカップリングに起因する腰痛の改善剤としての使用を除く）であって、健常人において自覚される腰痛の改善剤。

【請求項2】

乳脂肪球皮膜が、リン脂質を５～１００質量％含有する請求項１記載の腰痛改善剤。

【請求項3】

乳脂肪球皮膜が、スフィンゴミエリンを１～５０質量％含有する請求項１記載の腰痛改善剤。

【請求項4】

剤型が経口投与用の固形製剤である請求項１～３のいずれか１項記載の腰痛改善剤。

【請求項5】

固形製剤が錠剤である請求項４記載の腰痛改善剤。

【請求項6】

成人１人あたり１日にスフィンゴミエリンを１０～１５００ｍｇ投与又は摂取するものである請求項１～５のいずれか１項記載の腰痛改善剤。

【請求項7】

乳脂肪球皮膜を有効成分とする腰痛改善用食品（但し、骨形成と骨吸収のアンカップリングに起因する腰痛の改善用食品としての使用を除く）であって、健常人において自覚される腰痛の改善用食品。

【請求項8】

乳脂肪球皮膜が、リン脂質を５～１００質量％含有する請求項７記載の腰痛改善用食品。

【請求項9】

乳脂肪球皮膜が、スフィンゴミエリンを１～５０質量％含有する請求項７記載の腰痛改善用食品。

【請求項10】

剤型が経口投与用の固形製剤である請求項７～９のいずれか１項記載の腰痛改善用食品。

【請求項11】

固形製剤が錠剤である請求項１０記載の腰痛改善用食品。

【請求項12】

成人１人あたり１日にスフィンゴミエリンを１０～１５００ｍｇ投与又は摂取するものである請求項７～１１のいずれか１項記載の腰痛改善用食品。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、腰痛改善剤に関する。

【背景技術】

【0002】

腰痛とは、腰部に痛みや炎症を感じる症状の総称であり、原因は脊椎由来、神経由来、内臓由来、血管由来、心因性の５つに大別されるが、原因の明らかな腰痛の他、原因が明らかではない腰痛（非特異的腰痛）も認められる（非特許文献１）。

【0003】

従来、腰痛を改善又は治療する方法として、安静、マッサージ、薬物療法、温熱療法、理学療法、装具療法、運動療法、神経ブロック注射療法、手術療法等の手法が適用される。腰痛を改善又は治療する薬剤としては、非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤｓ）、ＣＯＸ－２選択的阻害薬、アセトアミノフェン、筋弛緩薬、抗不安薬、抗うつ薬、オピオイド等が用いられる。その他、消炎鎮痛成分等を配合した、湿布、ローション、クリーム、軟膏等の外用薬も用いられる。しかしながら、薬物療法、温熱療法、理学療法、装具療法、運動療法、神経ブロック注射療法又は手術療法を実施するには、医師及びその他の医療関係者の指導が必要であり、誰にでも起こりうる腰痛をより簡便な方法で改善する方法が望まれている。

【0004】

一方、乳由来のホエータンパク質加水分解物やラクトパーオキシダーゼ及び／又はその分解物に骨強化作用があることが報告されている（特許文献１及び２）。また、乳由来のホエイ関連製品、例えばホエータンパク質濃縮物にＳＯＤ作用があることが報告されている（特許文献３）。さらに、セラミド、スフィンゴミエリン、スフィンゴ糖脂質、ガングリオシド等のスフィンゴシン骨格を有する化合物を有効成分とする骨関節疾患の予防及び改善剤が報告されている（特許文献４）。しかし、これら乳由来成分が腰痛改善に有用であるかは明らかにされていない。

【0005】

乳脂肪球皮膜（Ｍｉｌｋ－ｆａｔ Ｇｌｏｂｕｌｅ Ｍｅｍｂｒａｎｅ：ＭＦＧＭ）は、乳腺より分泌される乳脂肪球を被覆している膜成分で、バターミルクやバターセーラム等の乳複合脂質高含有画分に多く含まれることが知られている（非特許文献２）。乳脂肪球皮膜は、脂肪を乳汁中に分散させる機能を有するのみならず、マウスにおける筋量増加作用や運動機能向上作用、内臓脂肪蓄積抑制作用、血中アディポネクチン増加及び減少抑制作用等の生理機能を有することが報告されている（特許文献５～７）。
しかしながら、乳脂肪球皮膜が腰痛へ与える影響については知られていない。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0006】

【文献】特開２０１３－１８４９６１号公報

【文献】特開２００５－６０３２１号公報

【文献】特開２００４－２６２８４８号公報

【文献】特開２００１－１５８７３６号公報

【文献】特開２０１０－５９１５５号公報

【文献】特開２０１３－１００２７５号公報

【文献】特開２００７－３２０９０１号公報

【非特許文献】

【0007】

【文献】日本整形外科学会、日本腰痛学会監修、「腰痛診療ガイドライン２０１２」 南江堂 ２０１２年

【文献】三浦晋、ＦＯＯＤ ＳＴＹＬＥ２１、２００９年

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0008】

本発明は、腰痛の改善に有用な医薬品、医薬部外品又は食品、或いはこれらに配合可能な素材又は製剤を提供することに関する。

【課題を解決するための手段】

【0009】

本発明者等は、鋭意検討したところ、乳脂肪球皮膜が腰痛の改善に有用であることを見出した。

【0010】

すなわち、本発明は、乳脂肪球皮膜を有効成分とする腰痛改善剤を提供するものである。

【発明の効果】

【0011】

本発明の腰痛改善剤は、腰痛を改善する作用を有し、また、安全性に優れることから、腰痛改善効果を発揮し得る医薬品、医薬部外品又は食品として、或いはこれらに配合可能な素材又は製剤として有用である。

【発明を実施するための形態】

【0012】

本発明で用いられる乳脂肪球皮膜は、乳脂肪球を被覆している膜、及び膜を構成する成分の混合物と定義される。乳脂肪球皮膜は、食経験が豊富で安全性が高い。
乳脂肪球皮膜は、一般的に、乾燥重量の約半分が脂質で構成され、当該脂質としては、トリグリセライドやリン脂質、スフィンゴ糖脂質が含まれることが知られている（三浦晋、ＦＯＯＤ ＳＴＹＬＥ２１、２００９及びＫｅｅｎａｎ ＴＷ、Ａｐｐｌｉｅｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ、１９８３、ｐｐ８９－ｐｐ１３０）。リン脂質としては、スフィンゴミエリン等のスフィンゴリン脂質、ホスファチジルコリンやホスファチジルエタノールアミン等のグリセロリン脂質が含まれることが知られている。
また、脂質以外の成分としては、ミルクムチンと呼ばれる糖タンパク質が含まれることが知られている（Ｍａｔｈｅｒ、Ｂｉｏｃｈｉｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ、１９７８）。

【0013】

本発明で用いられる乳脂肪球皮膜は、生理効果の点から、脂質の含有量が、１０質量％以上、更に２０質量％以上、更に３０質量％以上であるのが好ましく、また、風味・ハンドリングの点から、１００質量％以下、更に９０質量％以下、更に６０質量％以下であるのが好ましい。また、乳脂肪球皮膜中の脂質の含有量は、１０～１００質量％、更に２０～９０質量％、更に３０～６０質量％が好ましい。

【0014】

また、乳脂肪球皮膜は、生理効果の点から、リン脂質の含有量が５質量％以上、更に８質量％以上、更に１０質量％以上、更に１５質量％以上であるのが好ましく、また、風味・ハンドリングの点から、１００質量％以下、更に８５質量％以下、更に７０質量％以下、更に６０質量％以下であるのが好ましい。また、乳脂肪球皮膜中のリン脂質の含有量は、５～１００質量％、更に８～９０質量％、更に１０～７０質量％、更に１５～６０質量％が好ましい。
また、乳脂肪球皮膜は、生理効果の点から、リン脂質としてスフィンゴミエリンを含むのが好ましく、乳脂肪球皮膜中のスフィンゴミエリンの含有量が、１質量％以上、更に２質量％以上、更に３質量％以上であるのが好ましく、また、風味・ハンドリングの点から、５０質量％以下、更に３０質量％以下、更に２５質量％以下、更に２０質量％以下であるのが好ましい。また、乳脂肪球皮膜中のスフィンゴミエリンの含有量は、１～５０質量％、更に２～３０質量％、更に３～２５質量％、更に３～２０質量％が好ましい。
同様の点から、乳脂肪球皮膜の全リン脂質中のスフィンゴミエリン含有量が、３質量％以上、更に５質量％以上、更に１０質量％以上、更に１５質量％以上であるのが好ましく、また、５０質量％以下、更に４０質量％以下、更に３５質量％以下、更に３０質量％以下であるのが好ましい。また、乳脂肪球皮膜の全リン脂質中のスフィンゴミエリン含有量は、３～５０質量％、更に５～４０質量％、更に１０～３５質量％、更に１５～３０質量％が好ましい。
なお、本明細書において、乳脂肪球皮膜中の脂質、リン脂質及びスフィンゴミエリンの含有量、並びに乳脂肪球皮膜の全リン脂質中のスフィンゴミエリン含有量は、乳脂肪球皮膜の乾燥物に対する質量割合とする。

【0015】

乳脂肪球皮膜は、原料乳から遠心分離法や有機溶剤抽出法等の公知の方法により得ることができる。例えば、特開平３－４７１９２号公報に記載の調製方法を用いることができる。また、特許第３１０３２１８号公報、特開２００７－８９５３５号公報に記載の方法等を用いることができる。
さらに、透析、硫安分画、ゲルろ過、等電点沈殿、イオン交換クロマトグラフィー、溶媒分画等の手法により精製することにより純度を高めたものを用いてもよい。
なお、乳脂肪球皮膜の形態は、特に限定されず、室温（１５～２５℃）で液状、半固体状（ペースト等）、固体状（粉末、固形、顆粒等）等のいずれでもよく、これらを単独で又は２種以上組み合わせて用いてもよい。

【0016】

乳脂肪球皮膜の原料乳としては、牛乳やヤギ乳等が挙げられる。なかでも、食経験が豊富であり、安価な点から、牛乳が好ましい。また、原料乳には、生乳、全粉乳や加工乳等の乳の他、乳製品も含まれ、乳製品としては、バターミルク、バターオイル、バターセーラム、ホエータンパク質濃縮物（ＷＰＣ）等が挙げられる。
バターミルクは、牛乳等を遠心分離して得られるクリームからバター粒を製造する際に得られ、当該バターミルク中に乳脂肪球皮膜が多く含まれているので、乳脂肪球皮膜としてバターミルクをそのまま使用してもよい。同様に、バターオイルを製造する際に生じるバターセーラム中にも乳脂肪球皮膜が多く含まれているので、乳脂肪球皮膜としてバターセーラムをそのまま使用してもよい。

【0017】

乳脂肪球皮膜は、市販品を用いることもできる。斯かる市販品としては、メグレジャパン（株）「ＢＳＣＰ」、雪印乳業（株）「ミルクセラミドＭＣ－５」、（株）ニュージーランドミルクプロダクツ「Ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐｉｄ Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅ シリーズ（５００，７００）」等が挙げられる。

【0018】

後記実施例に示すように、乳脂肪球皮膜は、腰痛改善作用を有する。従って、乳脂肪球皮膜は、腰痛の改善に有用な腰痛改善剤となり得、また、腰痛改善剤を製造するために使用することができる。すなわち、乳脂肪球皮膜は、腰痛が気になるヒトに適用して、腰痛の改善のために使用することができる。
ここで、「改善」とは、症状又は状態の好転、症状又は状態の悪化の防止又は遅延、あるいは症状の進行の逆転、防止又は遅延をいう。また、「使用」は、ヒトへの投与又は摂取であり得、また治療的使用であっても非治療的使用であってもよい。「非治療的」とは、医療行為を含まない概念、すなわち人間を手術、治療又は診断する方法を含まない概念、より具体的には医師又は医師の指示を受けた者が人間に対して手術、治療又は診断を実施する方法を含まない概念である。

【0019】

本発明の腰痛改善剤は、ヒトを含む動物に摂取又は投与した場合に腰痛改善効果を発揮する医薬品、医薬部外品又は食品となり、また当該腰痛改善剤は、当該医薬品、医薬部外品又は食品に配合して使用される素材又は製剤となり得る。

【0020】

当該食品には、腰痛の改善をコンセプトとし、必要に応じてその旨を表示した食品、機能性食品、病者用食品、特定保健用食品、機能性表示食品、サプリメントが包含される。これらの食品は機能表示が許可された食品であるため、一般の食品と区別することができる。

【0021】

上記医薬品（医薬部外品も含む、以下同じ）の投与形態としては、例えば錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、トローチ剤、シロップ剤等による経口投与が挙げられる。
このような種々の剤型の製剤は、本発明の乳脂肪球皮膜を単独で、又は他の薬学的に許容される担体、例えば、賦形剤、結合剤、増量剤、崩壊剤、界面活性剤、滑沢剤、分散剤、緩衝剤、保存剤、嬌味剤、香料、被膜剤、担体、希釈剤等や、本発明の乳脂肪球皮膜以外の薬効成分を適宜組み合わせて調製することができる。
なかでも、好ましい剤型は経口投与用の固形製剤であり、錠剤が好ましく、チュアブル錠がより好ましい。

【0022】

医薬品中の本発明の乳脂肪球皮膜の含有量（乾燥物換算）は、一般的に０．００１質量％以上、好ましくは０．０１質量％以上、より好ましくは０．１質量％以上、更に好ましくは１質量％以上、更に好ましくは５質量％以上、更に好ましくは１０質量％以上、更に好ましくは２０質量％以上、更に好ましくは３０質量％以上であり、また、好ましくは９０質量％以下、より好ましくは８０質量％以下、更に好ましくは７０質量％以下、更に好ましくは６０質量％以下、更に好ましくは５０質量％以下である。医薬品中の乳脂肪球皮膜の含有量（乾燥物換算）は、好ましくは０．００１～９０質量％、より好ましくは０．０１～８０質量％、更に好ましくは０．１～７０質量％、更に好ましくは１～６０質量％、更に好ましくは１０～５０質量％、更に好ましくは２０～５０質量％、更に好ましくは３０～５０質量％である。

【0023】

上記食品の形態としては、清涼飲料水、茶系飲料、コーヒー飲料、果汁飲料、炭酸飲料、ゼリー、ウエハース、ビスケット、パン、麺、ソーセージ等の飲食品や栄養食等の各種食品組成物の他、さらには、上述した経口投与製剤と同様の形態（錠剤、カプセル剤、トローチ剤等の固形製剤）の栄養補給用組成物が挙げられる。なかでも、錠剤が好ましく、チュアブル錠がより好ましい。

【0024】

種々の形態の食品は、本発明の乳脂肪球皮膜を単独で、又は他の食品材料や、溶剤、軟化剤、油、乳化剤、防腐剤、酸味料、甘味料、苦味料、香科、安定剤、着色剤、酸化防止剤、保湿剤、増粘剤、乳脂肪球皮膜以外の有効成分等を適宜組み合わせて調製することができる。

【0025】

食品中の本発明の乳脂肪球皮膜の含有量（乾燥物換算）は、その使用形態により異なるが、飲料の形態では、好ましくは０．００１質量％以上、より好ましくは０．０１質量％以上、更に好ましくは０．１質量％以上であり、また、好ましくは３質量％以下、より好ましくは２質量％以下、更に好ましくは１質量％以下である。また、食品中の乳脂肪球皮膜の含有量（乾燥物換算）は、飲料の形態では、好ましくは０．００１～３質量％、より好ましくは０．０１～２質量％、更に好ましくは０．１～１質量％である。

【0026】

錠剤や加工食品等の固形食品の形態では、上記脂肪球皮膜の含有量（乾燥物換算）は、好ましくは０．０５質量％以上、より好ましくは０．５質量％以上、更に好ましくは１質量％以上、更に好ましくは５質量％以上、更に好ましくは１０質量％以上、更に好ましくは２０質量％以上、更に好ましくは３０質量％以上であり、また、好ましくは９０質量％以下、より好ましくは８０質量％以下、更に好ましくは７０質量％以下、更に好ましくは６０質量％以下、更に好ましくは５０質量％以下である。また、食品中の乳脂肪球皮膜の含有量（乾燥物換算）は、固形食品の形態では、好ましくは０．０５～９０質量％、より好ましくは０．５～８０質量％、更に好ましくは１～７０質量％、更に好ましくは５～６０質量％、更に好ましくは１０～５０質量％、更に好ましくは２０～５０質量％、更に好ましくは３０～５０質量％である。

【0027】

本発明の腰痛改善剤の投与量又は摂取量は、投与又は摂取対象者の体重、性別、年齢、状態又はその他の要因に従って変動し得る。投与の用量、経路、間隔、及び摂取の量や間隔は、当業者によって適宜決定され得るが、通常、成人１人（６０ｋｇ）に対して１日あたり、本発明の乳脂肪球皮膜（乾燥物換算）として、好ましくは０．１ｇ以上、より好ましくは０．３ｇ以上、更に好ましくは０．６ｇ以上、更に好ましくは１ｇ以上であり、また、好ましくは３０ｇ以下、より好ましくは２０ｇ以下、更に好ましくは１０ｇ以下、更に好ましくは５ｇ以下である。また、本発明の腰痛改善剤の投与量又は摂取量は、成人１人（６０ｋｇ）に対して１日あたり、乳脂肪球皮膜（乾燥物換算）として、好ましくは０．１～３０ｇ、より好ましくは０．３～２０ｇ、更に好ましくは０．６～１０ｇ、更に好ましくは１～５ｇである。本発明では斯かる量を１日に１回～複数回で投与又は摂取するのが好ましい。

【0028】

また、本発明の腰痛改善剤の投与量又は摂取量は、成人１人（６０ｋｇ）に対して１日あたり、スフィンゴミエリンとして、好ましくは０．１ｍｇ以上、より好ましくは１ｍｇ以上、更に好ましくは２ｍｇ以上、更に好ましくは５ｍｇ以上、更に好ましくは１０ｍｇ以上、更に好ましくは２０ｍｇ以上であり、また、好ましくは１５００ｍｇ以下、より好ましくは１０００ｍｇ以下、更に好ましくは５００ｍｇ以下、更に好ましくは２５０ｍｇ以下、更に好ましくは１００ｍｇ以下、更に好ましくは５０ｍｇ以下である。また、本発明の腰痛改善剤の投与量又は摂取量は、成人１人（６０ｋｇ）に対して１日あたり、スフィンゴミエリンとして、好ましくは０．１～１５００ｍｇ、より好ましくは１～１０００ｍｇ、更に好ましくは２～５００ｍｇ、更に好ましくは５～２５０ｍｇ、更に好ましくは１０～１００ｍｇ、更に好ましくは２０～５０ｍｇである。

【0029】

上記製剤は、任意の計画に従って投与又は摂取され得る。
投与又は摂取期間は特に限定されないが、反復・連続して投与又は摂取することが好ましく、５日間以上連続して投与又は摂取することがより好ましく、１５日間以上連続して投与又は摂取することが更に好ましい。

【0030】

投与又は摂取対象者としては、腰痛の改善を必要とする若しくは希望するヒトであれば特に限定されないが、腰痛の自覚があるヒトにおける投与又は摂取が有効である。

【0031】

上述した実施形態に関し、本発明においては以下の態様が開示される。
＜１＞乳脂肪球皮膜を有効成分とする腰痛改善剤。
＜２＞乳脂肪球皮膜を有効成分とする腰痛改善用食品。
＜３＞腰痛改善剤を製造するための乳脂肪球皮膜の使用。
＜４＞腰痛改善に使用するための乳脂肪球皮膜。
＜５＞乳脂肪球皮膜の有効量を投与又は摂取することによる腰痛改善方法。
＜６＞上記＜４＞において、使用は非治療的使用である。
＜７＞上記＜５＞において、方法は非治療的方法である。
＜８＞上記＜５＞において、投与又は摂取の対象は、腰痛の改善を必要とする若しくは希望するヒトである。
＜９＞上記＜１＞～＜８＞において、乳脂肪球皮膜は、リン脂質を５～１００質量％含有するものである。
＜１０＞上記＜１＞～＜８＞において、乳脂肪球皮膜は、スフィンゴミエリンを１～５０質量％含有するものである。
＜１１＞上記＜１＞の腰痛改善剤又は＜２＞の腰痛改善用食品の剤型が経口投与用の固形製剤である。
＜１２＞上記＜１＞の腰痛改善剤又は＜２＞の腰痛改善用食品の剤型が錠剤である。
＜１３＞上記＜１＞～＜１２＞において、乳脂肪球皮膜は、成人１人あたり１日にスフィンゴミエリンとして１０～１５００ｍｇを投与又は摂取するものである。

【実施例】

【0032】

乳脂肪球皮膜は牛乳から調製したものを使用した。また、乳脂肪球皮膜成分の含水量は２．５質量％であった。
乳脂肪球皮膜の組成は、乾燥物換算で、炭水化物：１３.４％、脂質：２５．２％、タンパク質：５３．４％であった。また、乳脂肪球皮膜中、リン脂質の含有量は乾燥物換算で２０．４％であり、スフィンゴミエリンの含有量は３．７２％であった。

【0033】

上記の乳脂肪球皮膜の分析は次のとおり行った。
（１）タンパク質の分析
タンパク質量はケルダール法を用いて、窒素・タンパク質換算係数６．３８として求めた。

【0034】

（２）脂質の分析
脂質量は酸分解法で求めた。試料を１ｇ量りとり、塩酸を加え分解した後、ジエチルエーテル及び石油エーテルを加え、攪拌混和した。エーテル混合液層を取り出し、水洗した。溶媒を留去させ、乾燥させた後、重量を秤量することで脂質量を求めた。

【0035】

（３）炭水化物の分析
炭水化物量は試料の質量から試料中のタンパク質量、脂質質量、灰分量、及び水分量を除くことにより求めた。なお、灰分量は直接灰化法 (５５０℃で試料を灰化させ重量測定)、水分量は常圧加熱乾燥法 (１０５℃４時間乾燥させ重量測定)により求めた。

【0036】

（４）リン脂質の分析
試料１ｇを量りとり、クロロホルム及びメタノールの２：１（Ｖ／Ｖ）混液１５０ｍＬ、１００ｍＬ、及び２０ｍＬ中でホモジナイズ後、０．８８質量％（Ｗ／Ｖ）塩化カリウム水溶液９３ｍＬを添加し、一晩室温で放置した。脱水ろ過、溶媒留去後、クロロホルムを添加し総量を５０ｍＬとした。そのうち２ｍＬを分取し、溶媒留去後、５５０℃１６時間加熱処理により灰化した。灰分を６Ｍ塩酸水溶液５ｍＬに溶解後、蒸留水を添加し、総量を５０ｍＬとした。３ｍＬを分取し、モリブデンブルー発色試薬５ｍＬ、５質量％（Ｗ／Ｖ）アスコルビン酸水溶液１ｍＬ及び蒸留水を添加し総量を５０ｍＬとし、７１０ｎｍの吸光度を測定した。リン酸２水素カリウムを用いた検量線からリン量を求め、リン量に２５．４をかけた値をリン脂質量とした。

【0037】

（５）スフィンゴミエリンの分析
試料１ｇを量りとり、クロロホルム及びメタノールの２：１（Ｖ／Ｖ）混液１５０ｍＬ、１００ｍＬ、及び２０ｍＬ中でホモジナイズ後、０．８８質量％（Ｗ／Ｖ）塩化カリウム水溶液９３ｍＬを添加し、一晩室温で放置した。脱水ろ過、溶媒留去後、クロロホルムを添加し総量を５０ｍＬとした。そのうち１０ｍＬを分取し、シリカカートリッジカラムに添加した。カラムをクロロホルム２０ｍＬで洗浄後、メタノール３０ｍＬでリン脂質を溶出し、溶媒留去後クロロホルム１．８８ｍＬに溶解した。シリカゲル薄層プレートに２０μＬを負荷し、１次元展開溶媒としてテトラヒドロフラン：アセトン：メタノール：水＝５０：２０：４０：８（Ｖ／Ｖ）、２次元展開溶媒としてクロロホルム:アセトン：メタノール：酢酸：水＝５０：２０：１０：１５：５（Ｖ／Ｖ）を用いて２次元展開を行った。展開後の薄層プレートにディトマー試薬を噴霧し、スフィンゴミエリンのスポットをかきとり、３質量％（Ｖ／Ｖ）硝酸含有過塩素酸溶液２ｍＬ添加後、１７０℃３時間の加熱処理を行った。蒸留水５ｍＬ添加後モリブデンブルー発色試薬５ｍＬ、５質量％（Ｗ／Ｖ）アスコルビン酸水溶液１ｍＬ及び蒸留水を添加し総量を５０ｍＬとし、７１０ｎｍの吸光度を測定した。リン酸２水素カリウムを用いた検量線からリン量を求め、リン量に２５．４をかけた値をスフィンゴミエリン量とした。

【0038】

試験例１
日本薬局方（製剤総則「錠剤」）に準じて、下記表１に示す組成のタブレット（４５０ｍｇ／錠）を調製した。

【0039】

【表1】

【0040】

腰痛の自覚がある５０～６０歳代の健常男女７名を二つの群に分け、一方の群（ＭＦＧＭ群：４名）には１日あたり１ｇの乳脂肪球皮膜（ＭＦＧＭ）を含むタブレットを、もう一方の群（プラセボ群：３名）には対照としてＭＦＧＭのかわりに全粉乳を含むタブレットを摂取させながら、週２回の定期的な軽運動（１回あたり運動量：トレッドミル歩行１５分間及び自転車漕ぎ運動１５分）を１０週間継続して実施させた。

【0041】

試験終了後、被験者７名（ＭＦＧＭ群：４名、プラセボ群：３名）に、タブレット摂取開始前に感じた腰痛の症状に対して、現在の状態を、「改善」、「やや改善」、「少し改善」、「変化なし」、「悪化」の５段階で自己評価してもらった。結果を表２に示す。

【0042】

【表2】

【0043】

表２より明らかなように、プラセボ群は３人中３人全員が初期症状に対して変化を感じられなかったのに対して、ＭＦＧＭ摂取群は４人中２人が改善、１人が少し改善、１人が変化なしと回答し、４人中３人が何らかの改善を実感していることが分かった。いずれの群も定期的な軽運動を行っていたにも関わらず、ＭＦＧＭ群のみで改善の実感が得られていることから、運動ではなく、ＭＦＧＭの摂取が腰痛症状の改善に寄与していることが示唆された。